FI89716B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva prolinderivat - Google Patents

Description

O Ί 'e' 1 i i ; 6

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten proliinijohdannais-ten valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää yhdisteiden valmis-5 tamiseksi, joita voidaan käyttää hypertoniaa potevien kohteiden hoidossa.

Keksinnön mukaisesti valmistetaan yhdisteitä, jolla on kaava (1)

O

10 Q-C*HCN

I I y R, C*H-^

r2-c=o ID

15 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditio-, alkalimetalli- ja maa-alkalimetallisuoloja, jossa kaavassa Q on Y1-C(0)-C* HfRjJNH-, Y3 ja Y2 ovat toisistaan riippumatta -OH tai -OCH2CH3; rengas G on ” IX “ 2^0 —CH l z joissa G3 on H tai C^Cg-alkoksi; Z on =N-(alk)-M, 25 =N-(alk)-S02M, -(alk)-N(R3)-(alk)-M, -( alk )-N( R3)-(alk)-C(0)-(alk )-M, -(alk )-N( R3 )S02-( alk )-M, - (alk) -N( R3) - (alk) -N( R3) - (alk) -C( O )M, -0-(alk)-C(0)M tai =CH-(alk)-C(0)-(alk)-M, joissa (alk) on kemiallinen sidos tai -CH2-, M on 30 : : -ÄL “

B

f- O 7 ΊΑ 2 -iv joissa A, B ja E ovat toisistaan riippumatta H, -OCHjCOOH, halogeeni, -NH2, -S02NH2 tai furfuryyliamino sillä edellytyksellä, että ainakin toinen ryhmistä A ja B on muu kuin vety; Rx on H tai fenetyyli ja R2 ja R3 ovat toi-5 sistaan riippumatta H tai CH3, sillä edellytyksellä, että kun G on monosyklinen ja 2 on - (alk)-N(R3) -C(0) - » -(alki-NlRji^-ialk)-//-^ ίο -(alk)-N(R3)-(alk)-^~^^B , 15 niin fenyyliryhmä on substituoitu, furfuryyliaminolla, ryhmällä -0CH2C02H tai vähintään kahdella sulfamoyyliryh-mällä, A on edullisesti -S02NH2, B on edullisesti kloori tai -S02NH2 ja E on edullisesti halogeeni tai vety.

20 "Halogeenilla" tarkoitetaan klooria, bromia, jodia ja fluoria.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet voivat sisältää asym-metriakeskuksia hiiliatomien kohdalla, jotka on merkitty C*. Jokaisella näistä hiiliatomeista voi olla (R)- tai (S)-25 konfiguraatio, mieluiten (S). Yksittäisten optisten dias- tereomeerien sekä niiden seosten valmistus katsotaan tämän keksinnön piiriin kuuluvaksi. Kun synteeseissä syntyy di-diastereomeerisiä tuotteita, halutut diastereomeeriset tuotteet voidaan erottaa toisistaan tavanomaisin kromato-30 grafisin tai jakokiteytysmenettelyin.

Kaavan 1 mukaisia yhdisteitä ja niiden suoloja valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että a) yhdiste, jolla on kaava (2) 0

It 35 Q-C*HC0H (2) R2 jossa R2 ja Q merkitsevät samaa kuin edellä, kytketään yh disteeseen, jolla on kaava (3) 3 0 ’ 7 ^ w / » w ™r&)

5 C*H

Y2-C=0 (3) jossa Y2 ja G-renkaan substituentit, Z mukaanlukien, mer-10 kitsevät samaa kuin edellä, peptidin muodostusolosuhteis-sa, tai b) liitetään substituentti Z yhdisteeseen, jolla on kaava 0 15 li o q-c*hcn-n g, il I \· 1 Q-C*HC -N-- i, U - i

I R2 I

Y -c=0 Y2"Ca° 20 2 substituutio- tai kondensointireaktioilla ja c) poistetaan mahdolliset suojaryhmät ja haluttaessa muodostetaan tuotteesta suola.

Kaavan 2 mukainen yhdiste kytketään kaavan 3 mukai-25 seen yhdisteeseen alan ammattimiehen tuntemien peptidin muodostustekniikkojen avulla, esim. kytkemisaineen kuten DCC:n (N,N1-disykloheksyylikarbodi-imidi) tai CDI:n (N,N'~ karbonyylidi-imidatsoli) läsnäollessa. Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan 2 mukaisen yhdisteen ryhmä -C00H ryhmäksi ·. 30 -C(0)C1 ja sitten saattaa muodostunut välituote reagoimaan kaavan 3 mukaisen yhdisteen kanssa. Vahtoehtoisesti kaavan 2 mukainen yhdiste voidaan muuttaa vastaavaksi N-karboksi-anhydriksi (NCA) saattamalla se reagoimaan fosgeenin kanssa, minkä jälkeen muodostunut N-karboksianhydridi saate-35 taan reagoimaan kaavan 3 mukaisen yhdisteen kanssa halu- ° ¢716 4 tuksi tuotteeksi. Ammattimies tietää lisäksi, että typpi-atomi, joka on hiiliatomien välissä, joihin ryhmät R2 ja R2 ovat liittyneet, voidaan suojata suojaryhmällä kuten 2,2,2-trikloorietoksikarbonyylillä tai bentsyylioksikarbo-5 nyylillä. Myöhemmin suojaryhmä poistetaan, edullisesti kaavojen 2 ja 3 mukaisten yhdisteiden yhteenliittämisen jälkeen. Substituenttien aminoryhmissä olevat muut typpi-atomit on samalla tavoin suojattava ja sitten poistettava suojaus. Samoin ennen välituotteiden reaktiota OH-ryhmät Yj 10 ja Y2 muutetaan edullisesti etoksiksi, tert-butoksiksi tai bentsyylioksiksi. Haluttaessa vapaa happo se saadaan myöhemmässä vaiheessa poistamalla esteröivä ryhmä tunnettuun tapaan.

Kaavan 1 mukaisia yhdisteitä, joissa joko Yx tai Y2 15 on -OH ja toinen on etoksi, valmistetaan edullisesti saattamalla kaavojen 2 ja 3 mukaiset yhdisteet reagoimaan edellä kuvatulla tavalla, jolloin lähtöaineissa joko Yj tai Y2 on haluttua lopputuotetta vastaavasti etoksi ja toinen on helposti pilkkoutuva esteriryhmä, esim. tert-butok-20 si. Näin valmistetusta amidivälituotteesta saadaan miedon happohydrolyysin avulla haluttu monoesterimonohappo.

Kun Q sisältää rikkiä, suositeltavaan synteesitie-hen sisältyy happokloridin käyttö.

Vaihtoehtoisessa menetelmässä (b) kaavan 1 mukaisen 25 yhdisteen valmistamiseksi substituentti Z liitetään kaavan 1 mukaisen yhdisteen muuhun osaan.

Q -CHCON^N

R- HC (4) 3° 1 y 2~c=o käyttäen sopivia reagensseja. Esimerkiksi yhdiste, jolla on kaava (5) 5 c^7'6

' O

Q -CHCON^N

I I q R~ HC—7

2 I

5 VC=0 (5) voidaan kondensoida kaavan HN(R3)N(R3)-(alk)-M tai HN(R3) -(alk)-M olevan hydratsiinin tai amiinin kanssa hydratso-niksi tai vastaavasti imiiniksi ja haluttaessa pelkistää 10 kondensaatiotuote vastaavaksi kaavan 1 mukaiseksi amiini-tai hydratsinyylituotteeksi. Samankaltaisia substituutio-tai kondensointireaktioita voidaan käyttää muiden ryhmien Z liittämiseksi renkaaseen G, kuten alan ammattimiehelle on tunnettua. Näissä substituutio- ja kondensointireakti-15 oissa käytetään tavanomaisia reaktioolosuhteita.

Kaavan 1 mukaiset yhdisteet muodostavat suoloja erilaisten epäorgaanisten ja orgaanisten happojen ja emästen kanssa. Tällaisia suoloja ovat ammoniumsuolat, alkali-metallisuolat kuten natrium- ja kaliumsuolat (jotka ovat 20 suositeltavia), maa-alkalimetallisuolat kuten kalsium- ja magnesiumsuolat, orgaanisten emästen kanssa muodostuvat suolat kuten disykloheksyyllamiinisuolat, N-metyyli-D-glu-kamiini ja aminohappojen kuten arginiinin, lysiinin ja vastaavien kanssa muodostuvat suolat. Suoloja voidaan val-25 mistaa myös orgaanisten ja epäorgaanisten happojen kanssa; sopivia happoja ovat esimerkiksi HC1, HBr H2S=4, H3P04 sekä metaanisulfoni-, tolueenisulfoni-, maleiini-, etikka-, omena-, sitruuna-, fumaari- ja kamferisulfonihappo. Myrkyttömien, fysiologisesti hyväksyttävien happoadditio-, 30 alkalimetalli- ja maa-alkalimetallisuolojen valmistus kuuluu tämän keksinnön piiriin; muita suoloja voidaan käyttää esim. tuotteen puhdistuksessa ja eristämisessä.

Suolat voidaan muodostaa tavalliseen tapaan esim. antamalla tuotteen vapaan hapon tai vapaan emäksen muo-35 dossa reagoida yhden tai useamman ekvivalentin kanssa Ο Γ\ ^ < .· 6 .: V / I ö asianmukaista emästä tai happoa liuottimessa, kuten vedessä, joka sitten poistetaan vakuumissa tai kylmäkuivaamal-la, tai ionivaihtamalla sopivan ioninvaihtohartsin avulla jo saadun suolan kationit muihin kationeihin.

5 Kun reniinientsyymi vaikuttaa angiotensinogeeniin, joka on veriplasman sisältämä pseudoglobuliini, muodostuu dekapeptidi angiotensiini I. Angiotensiini I muuttuu angi-otensiiä muuttavan entsyymin (ACE) vaikutuksesta oktapep-tidiksi angiotensiini II. Jälkimmäinen on aktiivinen pres-10 soriaine, jonka uskotaan synnyttävän vaihtelevan tyyppistä hypertoniaa eräissä nisäkäslajeissa kuten rotassa ja koirassa. Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet, jotka vaikuttavat tapahtumasarjaan, jossa reniini muuttuu angiotensiini I:ksi, joka muuttuu angiotensiini ll:ksi, inhi-15 hoivat angiotensiini I:tä muuttavaa entsyymiä ja siten niitä voidaan käyttää hypertonian vähentämisessä ja lievityksessä.

Lisäksi keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet, joilla on virtsan eritystä edistävä vaikutus, lievittävät 20 hypertoniaa edistämällä virtsan erittymistä ja ovat siten käyttökelpoisia sydämen kongestiivisessa vajaatoiminnassa. Keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä voi samanaikaisesti olla ACE:n estovaikutus ja diureettinen vaikutus, mikä on erityisen odottamatonta siksi, että tällainen 25 samanaikainen vaikutus ei ole ennustettavissa tekniikan tason yhdisteiden perusteella. Niinpä antamalla koostumusta, joka sisältää yhtä kaavan 1 mukaista yhdistettä tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa tai yhdisteiden tai suolojen yhdistelmää, voidaan lievittää nisäkäslajin 30 potemaa hypertoniaa. Verenpaineen alentamiseksi riittää yksi annos tai mieluummin 2-4 jaettua annosta päivässä, jolloin yhden päivän annos sisältää n. 0,1 - 100 mg/kg, mieluummin n. 1-50 mg/kg. Lääkeaine annetaan mieluiten suun kautta, mutta anto voi myös tapahtua parenteraalises-35 ti, esim. ruiskeena ihonalaisesti, lihaksen tai laskimoon, tai intraperitoneaalisti.

V 7 1 h 7 ' ! °

Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet indikoi-tuvat myös käytettäviksi silmänsisäisen paineen alentamiseksi esim. viherkaihin hoidossa. Tämä vaikutus saavutetaan antamalla tällaisen hoidon tarpeessa olevalle koh-5 teelle ilmoitettuja määriä yhdisteitä.

EP-hakemusjulkaisuista 88350, 88341 ja 80822 tunnetaan yhdisteitä, jotka rakenteeltaan ja myös aktiivisuudeltaan jossakin määrin muistuttavat keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä.

10 Julkaisussa EP-A-88341 esitetään oktahydroindo- liniyhdiste, jolla on kaava

CH- 0 COOH

f=\_ * I 3I 1 U /)—CH2-CH2-CH-NH-CH-C-N^^ 15 '—' cooc2h5*

Kun siis keksinnön mukaisesti valmistetuissa yhdisteissä on joko pyrrolidiinirengas tai rengasrakenne, jossa pyrro-20 lidini on fuusioutunut bentseenirengas, mainitussa julkaisussa esitetään yksi ainoa yhdiste, jossa on pyrrolidiinirengas fuusioituneena sykloheksaaniin. Alan ammattimiehelle on hyvin tunnettua, että bentseeni- ja syklohek-saanirenkaat ovat rakenteellisesti aivan erilaiset. Kek-25 sinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet eroavat siten rakenteeltaan olanaisesti mainitussa julkaisussa kuvatusta yhdisteestä.

Lisäksi keksinnön mukaisesti valmistetuissa yhdisteissä on pyrrolidiinirenkaaseen liittyneenä rakenteitaan 30 kompleksinen substituentti Z, jota ei ole kuvattu julkaisussa EP-A-88341. Julkaisu ei siis mitenkään johda alan ammattimiestä valmistamaan keksinnön mukaisesti valmstet-tuja yhdisteitä.

Julkaisussa Mencel, J.J. et ai., J. Med. Chem. 22 35 (1990) s. 1607 - 1615 on esitetty farmakologisia koetulok- 8 r. r; - - ‘ '> i ! 0 siä keksinnön mukaisesti valmistetuille yhdisteille. Kun tässä julkaisussa ja julkaisussa EP-A-88341 esitettyjä farmakologisia in vitro kokeiden tuloksia verrataan toisiinsa, havaitaan että keksinnön mukaisesti valmistetut 5 yhdisteet ovat ominaisuuksiltaan ylivoimaisesti parempia kuin EP-julkaisussa esitetty yhdiste. Mencel et ai.:n artikkelissa mainitut yhdisteet Ib, le, Id ja lf vastaavat esillä olevan hakemuksen esimerkkien 9, 12, 3 ja 10 yhdisteitä. Kuten Mencel et al.:n artikkelin taulukossa II on 10 esitetty, yhdisteiden Ib, le, Id ja If in vitro IC50-arvot ovat alueella 0,0065 - 0,029 μΜ, kun sen sijaan julkaisussa EP-A-88341 esitetyt IC50-arvot siinä kuvatulle yhdistel-le ovat alueella 0,24 - 0,072 μΜ eli yli kaksinkertaiset keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden arvoihin 15 verrattuna. Koska pienempi IC50-arvo merkitsee suurempaa ACE-inhibointitehoa, keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat yllättävästi tehokkaampia kuin mainitussa julkaisussa kuvattu yhdiste.

Julkaisussa EP-A-88350 kuvataan yhdisteitä, joilla 20 on kaava OH ^ «s C° R, (Γ)

Ri—GH2C—NH—CH—C—N—C—COOH 21 II I

25 Ri ° ^2 jossa rengas A on substituoitu pyrrolidiini- tai piperi-diinirengas, johon voi olla fuusioituneena tyydyttynyt tai aromaattinen rengas. Renkaaseen A liittynyt substituentti 30 on ryhmä, jolla on kaava Z-(CH2)0.6, jossa Z voi olla jokin seuraavista: R'2

Rt1HNS02 CO—N R^HNSOj S02—N —

XX XX

R. | R7 Ri [ R, R. , R.

9 7 1 6 R„HNS02v CH2—NR12- O, \^Y r„hnso2

, Ä AC

B, H

""'""v'r'8'"- '"“Vy-V

AVC». -Ayv joissa R8 on Cl tai CF3, R6 on vety tai halogeeni ja R7 on vety, halogeeni, karboksi, hydroksi tai amino. Keksinnön 15 mukaisesti valmistetuissa yhdisteissä sen sijaan ryhmän Z ollessa - (alk) -N(R3) -C- (O) -fenyyli, - (alk) -N(R3) -S02~ (alk) -fenyyli, -(alk)-N(R3) - (alk)-fenyyli tai -O-(alk)-fenyyli, fenyyli on substituoitu furfuryyliaminolla, ryhmällä -0CH2C02H tai vähintään kahdella sulfamoyyliryhmällä. Nämä 20 ryhmät eroavat rakenteeltaan olennaisesti julkaisussa EP-A-88350 esitetyistä. Julkaisussa ei myöskään kuvata yhdisteitä, joissa ryhmässä Z on esillä olevassa hakemuksessa mainittu M-ryhmä, jolla on kaava

2 5 A

V^v/N=CH

i - -£X i so^55^ /^^so2nh

B

30 joka on liittynyt molekyylin muuhun osaan osoitetusta kohdasta.

Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet eroavat siten rakenteeltaan julkaisussa EP-A-88350 kuvatuista niin merkittävästi, ettei niiden arvokkaita ominaisuuksia voida 35 pitää julkaisun perusteella odotettuina.

10 ,- ~ rη s.

: / ! ΰ

Julkaisussa ΕΡ-Α-80822 kuvataan yhdisteitä joilla on kaava R, OCH2R4 5 1 Γ~Λ ' R,-CHNHCHOON \ 1 r ioR, jossa R4 on fenyyli, joka mahdollisesti substituoitu halo-10 geenillä, C^-alkoksilla, trifluorimetyyIillä tai C^j-al-kyylillä. Kuten edellä todettiin, keksinnön mukaisesti valmistetuissa yhdisteissä sen sijaan ryhmän Z ollessa - (alk) —N (Rj) —C (O) -fenyyli, -(alk) -N(R3) -SOz-(alk) -fenyyli, - (alk)-N (R3) - (alk)-fenyyli tai -O- (alk)-fenyyli, fenyyli on 15 substituoitu furfuryyliaminolla, ryhmällä -0CH2C02H tai vähintään kahdella sulfamoyyliryhmällä. Nämä substituoidut fenyyliryhmät eroavat siten rakenteeltaan olennaisesti julkaisussa EP-A-80822 esitetyistä.

Lisäksi edellä mainitussa Mencel et ai.:n artikke-20 lissa esitetyt koetulokset osoittavat, että keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat tehokkaampia ACE-inhi-biittoreita kuin julkaisussa EP-A-80822 kuvatut yhdisteet. Mencel et al.:n artikkelin taulukosta II ilmenee, että yhdisteet Ib, le, Id ja lf inhiboivat jopa 96 % ACE-aktii-25 visuudesta in vivo. Paras julkaisussa EP-A-80822 esitetty ACE-inhibitioarvo sitä vastoin on vain 82-%:inen inhibi-tio. Lisäksi yhdiste lf alensi verenpainetta hypertensii-visessä rotissa 41 - 42 % (Mencel et ai., sivu 1607, Abstract ja s. 1612, taulukko IV). Suurin julkaisussa EP-A-30 80822 kuvatuille yhdisteille esitetty verenpaineen alenema on vain 23 % (EP-A-80822 s. 27). Keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat näin ollen yllättävästi tehokkaampia kuin tästä julkaisusta tunnetut yhdisteet.

Mainitussa Mencel et ai: n artikkelissa esitetyt 35 tulokset osoittavat myös keksinnön mukaisesti valmistettu- '·. r-r s 11 ·“‘; i ΰ jen yhdisteiden diureettisen aktiivisuuden. Esimerkiksi taulukossa III yhdisteille le, Id ja lf ilmoitetuista tuloksista käy ilmi, että keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet aiheuttavat muutoksen virtsan erityksen tilavuu-5 dessa ja kaliumin ja natriumin erityksessä. Minkäänlaisia mainintoja yhdisteiden diureettisesta aktiivisuudesta ei ole EP-hakemusjulkaisuissa 88341, 88350 ja 80822.

Keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan käyttää siten, että yksi tai useampi yhdiste formu-10 loidaan koostumuksiksi, esim. tableteiksi, kapseleiksi tai eliksiireiksi, annettaviksi suun kautta tai steriileiksi liuoksiksi tai suspensioiksi parenteraaliantoon. Noin 10 -500 mg kaavan 1 mukaista yhdistettä tai yhdisteiden seosta tai yhdisteiden fysiologisesti hyväksyttävää suolaa (suo-15 loja) sekoitetaan fysiologisesti hyväksyttävään välitysai-netta, kantajaan, täyteaineeseen, sideaineeseen, säilöntäaineeseen, stabilointiaineeseen, aromiaineeseen jne. an-nosyksikkömuodoksi farmaseuttisesti hyväksyttävän käytännön mukaisesti. Näissä koostumuksissa tai valmisteissa on 20 sellainen määrä tehoainetta, että annostusmäärä on kuvatulla alueella.

Tabletteihin, kapseleihin ja vastaaviin lisättäviä tyypillisiä apuaineita ovat sideaine kuten traganttikumi, arabikumi, maissitärkkelys tai gelatiini; täyteaine kuten 25 dikalsiumfosfaatti; hajotusaine kuten maissitärkkelys, pe- ;; runatärkkelys, algiinihappo ja vastaavat; liukastusaine kuten magnesiumstearaatti; makeutusaine kuten sakkaroosi, laktoosi tai Sakariini; aromiaine kuten piparminttu, gaul-teriöljy tai kirsikka. Kun annosyksikkömuotona on kapseli, 30 se voi yllä mainittujen ainetyyppien lisäksi sisältää nestemäistä kantajaa, kuten rasvaöljyä. Erilaisia muita materiaaleja voi olla mukana pinnoitteina tai muuten modifioimassa fysikaalista muotoa. Esim. tabletit voidaan päällystää sellakalla, sokerilla tai molemmilla. Siirappi tai 35 eliksiiri voi sisältää tehoyhdistettä, sakkaroosia makeu- 12 P 9 716 tusaineena, metyyli- ja propyyliparabeenia säilöntäaineena, väriainetta sekä kirsikka- tai appelsiinimakuainetta.

Steriilit ruiskekoostumukset voidaan formuloida tavanomaisen farmaseuttisen käytännön mukaisesti liuotta-5 maila tai suspendoimalla tehoaine välitysaineeseen kuten ruiskekelpoiseen veteen, luonnonkasviöljyyn, kuten seesa-miöljyyn, kookosöljyyn, maapähkinäöljyyn, pellavaöljyyn jne., tai synteettiseen rasvavälitysaineeseen kuten etyy-lioleaattiin tai vastaaviin. Tarpeen mukaan voidaan lisä-10 tä puskureita, säilöntäaineita, hapettumisen estoaineita ja vastaavia.

Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksinnön erityisiä toteutusmuotoja.

Esimerkki 1 15 N-[N-[(IS)-l-(hydroksikarbonyyli)-3-fenyylipropyy- li]-L-alanyyli]-4-(2,4-disulfamoyyli-5-kloorianilino) -pro-liini

Seosta, jossa oli 2 mmol N-[N-[(IS)-1-(etoksikarbo-nyyli) -3-fenyylipropyyli ]-N- (2,2,2-trikloorietoksikarbo-20 nyyli)-L-alanyyli]-L-prolin-4-onietyyliesteriä, 3 mmol 4-amino-6-kloori-N,N'-bis[dimetyyliamino)metyleeni]-1,3-bentseenidisulfonamidia, 5 mmol natriumsyanoboorihydridiä ja molekyyliseulaa absoluuttisessa etanolissa, sekoitettiin huoneenlämpötilassa useita vuorokausia, suodatettiin 25 ja haihtuvat aineet poistetiin vakuumissa. Jäännös puhdistettiin HPLC:llä. 2,2,2 trikloorietoksikarbonyylisuojaryh-mä poistettiin sinkillä ja etikkahapolla ja esterit hydrolysoitiin ja sulfonamidisuojaryhmät poistettiin antamalla reagoida emäksen kanssa ja saatiin tuote.

30 Esimerkki 2 N-[N-[ (IS) -l-(hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyy-li) L-alanyyli ]-4- (2,4-disulfamoyyli-5-kloorifenyyli-imi-no)-proliini

Seokseen, jossa oli 20 mmol H-[N-[(IS)-1-(etoksi-35 karbonyyli) -3-fenyylipropyyli ] -N- (2,2,2-trikloorietoksi- ' ,'-' f"? /· " ’ ! ! b 13 karbonyyli)-L-alanyyli]-L-prolin-4-onietyyliesteriä, 35 mmol 4-amino-6-kloori-N,N'-bis[(dimetyyliamino)metylee-ni]1,3-bentseenidisulfonamidia ja molekyyliseulaa abso-luutti-sessa etanolissa, lisättiin vedetöntä HCl:ää. Seos-5 ta kuumennettiin palautuslämpötilassa 24 tuntia, jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, suodatettiin ja haihtuvat aineet poistettiin vakuumissa. Jäännös puhdistettiin HPLC: llä. Välituotetta käsiteltiin sinkillä ja etikkahapolla etyyliasetaatissa2,2,2-trikloorietoksikarbonyylisuojaryh-10 män poistamiseksi sekä emäksellä sulfonamidisuojaryhmien poistamiseksi ja esterien hydrolysoimiseksi, jolloin saatiin tuote.

Esimerkki 3

Cl , c ,_, o N_^ /T\_ 11 _/Λ - 1 I \ J \=/ * HOOC CH3^ \ COOH S02NH2 20 N-[N-[(IS)-1-(hydroksikarbonyyli)-3-fenyylipropyy-lij-L-alanyyli]-4-(2-kloori-4-amino-5-sulfamoyyli-fenyylisulfonyyli-imino)proliini

Seokseen, jossa oli 25 mmol N-[N-[(IS)-1-(etoksi-25 karbonyyli)-3-fenyylipropyyli ]-N-(2,2,2-trikloorietoksi-karbonyyli)-L-alanyyli]-L-prolin-4-onietyyliesteriä, 55 mmol 1-(N-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)amino)-3-kloo-ri-4,6-bentseenidisulfonamidia ja molekyyliseulaa absoluuttisessa etanolissa, lisättiin vedetöntä HCl:ää. Seosta 30 kuumennettiin palautuslämpötilassa yli yön, jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, suodatettiin ja haihtuvat aineet poistettiin vakuumissa. Jäännös puhdistettiin HPLC:llä. 2,2,2-trikloorietoksikarbonyylisuojaryhmät poistettiin sinkillä ja etikkahapolla etyyliasetaatissa, esterit hydrolysoitiin 35 emäksellä ja saatiin tuote.

14 ^9716

Esimerkki 4 N-[N-[(IS)-1-(hydroksikarbonyyli)-3-fenyylipropyy-li]-L-alanyyli)-3-(2,4-disulfamoyyli-5-kloorianili-no)-2,3-dihydroindoli-2-karboksyylihappo 5 Liuokseen, jossa oli 5 mmol N—[(IS)-1—(etoksikarbo- nyyli) -3-fenyylipropyyli) -N- (2,2,2-trikloorietoksikarbo-nyyli) -L-alaniinia metyleenikloridissa 0 °C:ssa, lisättiin 5,5 mmol 1,1,-karbonyylidi-imidatsolia. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja lisättiin 6 mmol 3-(2,4-disulfamoyy-10 li-5-kloorianilino)-2,3-dihydroindoli-2-karboksyylihappo- etyyliesteriä. Seos lämmitettiin huoneenlämpötilaan, sekoitettiin yli yön ja haihtuvat aineet poistettiin vakuu-missa. Puhdistamalla jäännös HPLCrllä saatiin amidiväli-tuote. 2,2,2-trikloorietoksikarbonyylisuojaryhmä poistet-15 tiin sinkillä ja etikkahapolla, esterit hydrolysoitiin emäksellä ja saatiin tuote.

Esimerkki 5 A. (4S)-l-((2S)-2-(N-((IS)-l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli)-N-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyy-20 li) amino)propionyyli)-4-(4-kloori-2-(furfuryyliami- no)-5-sulfonamidobentsoyyli)aminoproliinietyylies-teri

Sekoitettua liuosta, jossa oli 11,3 g (0,025 mol) N- ((IS)-l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli)-N-(2,2,2-25 trikloorietoksikarbonyyli)-alaniinia 200 ml:ssa CH2Cl2:ta, käsiteltiin viidellä tipalla DMF:ää ja sitten lisättiin tiputtaen liuos, jossa oli 10 ml (0,12 mol) oksalyyliklo-ridia 50 ml:ssa CH2Cl2:ta. Muodostunutta liuosta sekoitettiin tunti kaasunkehityksen päättymisen jälkeen ja konsen-30 troitiin sitten vakuumissa. Jäännös liuotettiin uudelleen 100 ml:aan CCl4:ää, pieni määrä punaista öljyä poistettiin dekantoiroalla ja konsentroitiin uudelleen vakuumissa.

Liuosta, jossa oli 9,4 g (0,020 mol) (4S)-4-(4-kloori-2- (f urf uryyliamino) -5-sulf oniamidobentsoyyli) amino-35 proliinietyyliesteriä ja 2,5 g (0,025 mol) trietyyliamii-

f: A S

15 /'O

nia 200 mlrssa CH2Cl2:ta, sekoitettiin jäähauteessa ja samalla lisättiin tiputtaen liuos, jossa oli yllä mainittua happokloridia 100 ml:ssa CH2Cl2:ta. Seoksen annettiin lämmetä huoneenlämpötilaan yli yön, sitten se pestiin laime-5 alla hapolla ja kuivattiin. Liuos konsentroitiin vakuumis-sa, kromatografoitiin silikageelillä ja saatiin haluttu amidi.

B. (4S)-1-((2S)-2-(N—((IS)-l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli) amino) propionyyli) -4- (4-kloori-2- 10 furfuryyliamino)-5-sulfonamidobentsoyyli)aminopro- liinietyyliesteri

Liuokseen, jossa oli 9,4 g (10,5 mmol) yllä mainittua asyyliproliinijohdannaista seoksessa, jossa oli 100 ml EtOHita ja 50 ml HOAc:tä, lisättiin 6,5 g (0,10 mol) 15 sinkkipölyä. Muodostunutta suspensiota sekoitettiin huo neenlämpötilassa siksi, kunnes TLC osoitti lähtöaineksen hävinneen täysin. Sinkkisuolat ja reagoimatta jäänyt metalli poistettiin suodattamalla ja suodos konsentroitiin vakuumissa. Kromatografoimalla nopeasti silikageelillä 20 saatiin puhdas amiini.

C. (4S)—1—((2S)-2-(N-((IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli)-amino) propionyyli) -4-(4-kloori-2-(furfuryyliamino-5-sulfonamidobentsoyyli)aminopro-liini 25 Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 3,5 g (4,79 mmol) yllä mainittua diesteriä 50 ml:ssa EtOH:ta, lisättiin tiputtaen 25 ml IN NaOH-liuosta. Haude poistettiin ja liuosta sekoitettiin siksi, kunnes TLC osoitti esterin hydrolyysin päättyneen. Liuos neutraloitiin varo-30 vasti IN HCl:llä, konsentroitiin sitten vakuumissa, kromatografoitiin silikageelillä ja saatiin haluttu tuote. Esimerkki 6 A. (4S)-1-((2S)-2-(N-((IS)-l-etoksikarbonyyli-3fe-nyylipropyyli)-N-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)-35 amino)propionyyli)-4-(4-amino-2-kloori-5-sulfon / - τ-r a * 16 -·: / I Ö amidobentseenisulfonyyli)aminoproliinietyyliesteri. Epäpuhdas happokloridi valmistettiin esimerkissä 5A kuvatulla tavalla 5,22 g:sta (11,5 mmol) N-((IS)-1-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyli) -N- (2,2,2-trikloorietoksikar-5 bonyyli)alaniinia. Tämä liuotettiin 25 ml:aan CH2Cl2:ta ja liuos lisättiin tiputtaen jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 4,3 g (10,1 mmol) (4S)-4-(4-amino-2-kloori-5-sulfonamidobentseenisulfonyyli)aminoproliinietyyliesteriä ja 1,5 g (14,8 mmol) trietyyliamiinia 150 ml:ssa CH2C12:-10 ta. Reaktioseosta sekoitettiin yli yön huoneenlämpötilassa, jatkokäsiteltiin sitten kuten esimerkissä 5A, kromato-grafoitiin ja saatiin otsikkoamidi.

B. (4S)-1-((2S)-2-(N-((IS)-1-etoksikarbonyyli-lfe-nyylipropyyli)amino)propionyyli)-4-(4-amino-2-kloo- 15 ri-5-sulfonamidobentseenisulfonyyli)aminoproliini- etyyliesteri

Liuosta, jossa oli 4,3 g (5,0 mmol) tuotetta 6A 50 ml:ssa EtOH:ta, käsiteltiin peräkkäin 25 ml:11a HOAc:tä ja 4,2 g:11a (66 mmol) sinkkipölyä. Reaktioseosta sekoitet-20 tiin huoneenlämpö!lassa reaktion päättymiseen saakka, mikä osoitettiin TLC:llä, jatkokäsiteltiin sitten esimerkissä 5B kuvatulla tavalla ja saatiin haluttu tuote.

C. (4S)-i-((2S)-2-(N-((lS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli)amino)propionyyli)-4-(4-amino-2- 25 kloori-5-sulfonamidobentseenisulf onyyli) aminopro- liini

Liuos, jossa oli 2,5 g (3,6 mmol) tuotetta 6B 35 ml:ssa EtOH:ta, hydrolysoitiin 15 ml:11a IN NaOH-liuosta esimerkissä 5C kuvatulla tavalla. Neutraloimalla ja kroma-30 tografoimalla epäpuhdas tuote saatiin puhdas dihappo. Esimerkki 7 A.1-((2S)-2-(N-((IS)-l-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyli)amino)propionyyli)-4-(2,3-dikloori-4 ((e-toks ikarbonyyli)metoksi)bentsoyyli)metyleenipro-35 liinietyyliesteri 17 716 N-((IS)-l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli)-N-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)alaniinin happokloridi (esimerkki 5A) liuotettiin CH2Cl2:een ja liuos lisättiin tiputtaen liuokseen, jossa oli 4-(2,3-dikloori-4-(etoksi-5 karbonyyli)metoksi) bentsoyyli)metyleeniproliinietyylieste- riä ja trietyyliamiinia CH2Cl2:ssa. Antamalla reagoida edelleen ja puhdistamalla kuten esimerkissä 5A saatiin haluttu amidi.

Tämä liuotettiin EtOH:hon ja käsiteltiin HOAc:llä 10 ja sinkkipölyllä. Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämpö- tilassa siksi, kunnes lähtöaines oli kulunut (TLC), ja sitten jatkokäsiteltiin kuten esimerkissä 5B on kuvattu. Kromatografoimalla huolellisesti silikageelillä saatiin puhdas amiini.

15 B.1-( (2S)-2-(N-((IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyy lipropyyli) amino)propionyyli)-4-(2,3-dikloori-4-(hydroksikarbonyylimetoksi)bentsoyyli)metyleeni-proliini

Liuos, jossa oli yllä kuvattu triesteri (7A) EtOH:-20 ssa, jäähdytettiin jäissä ja käsiteltiin 10 %:isella NaOH-liuoksella. Seosta sekoitettiin siksi, kunnes TLC osoitti täydellisen muuttumisen trihapoksi, sitten jatkokäsiteltiin ja puhdistettiin kuten esimerkissä 5C ja saatiin haluttu tuote.

25 Esimerkki 8 1-((2S)-2-(N-((IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyli)amino)propionyyli-4-etoksi-4-(5-kloori- 2,4-disulfonamidofenyyli)aminoproliini 4-etoksi-4-(5-kloori-2,4-disulfonamidofenyyli)-30 aminoproliinietyyliesteriä käsiteltiin N-((IS)-1-etoksi- karbonyyli-3-fenyylipropyyli)-N-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli) alaniinin happokloridilla kuten esimerkissä 5A. Tämän jälkeen suojattiin (esimerkki 5B) ja hydrolysoitiin (esimerkki 5C) kuten yllä on kuvattu ja saatiin haluttu 35 tuote.

is -» 71 6

Esimerkki 9 A. N-[N-(2, 2,2-trikloorietoksikarbonyyli)-N-[(IS)-1- (etoksikarbonyyli) -3-fenyylipropyyli]-L-alanyy-li]-4-[2-(3-sulfamoyyli-4-klooribentsoyyli)-hydrat- 5 sin-l-yyli]-L-proliinietyyliesteri

Liuokseen, jossa oli 3,90 g (6,57 mmol) N-[N-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli)-N-[(IS)-1-(etoksikarbonyyli) -3-fenyylipropyyli]-L-alanyyli]-L-prolin-4-onietyy-liesteriä 40 ml:ssa absoluuttista etanolia 0 - 5 °C lisät-10 tiin 1,63 g (6,67 mmol) 3-sulfamoyyli-4-klooribentsoyyli-hydratsiinia. Seosta sekoitettiin 3 tuntia 0-5 °C:ssa ja lisättiin annoksittain 0,744 g (19,7 mmol) natriumtetra-hydridoboraattia. Seosta sekoitettiin 45 minuuttia 0 - 5°-C:ssa ja lisättiin vettä ja etyyliasetaattia. Orgaaninen 15 kerros pestiin keittosuolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihtuvat aineet poistettiin vakuumis-sa. Puhdistamalla jäännös HPLC:llä eluoiden seoksella, jossa oli 25 % heksaaneja etyyliasetaatissa, saatiin 2,82 g kiintotuotetta (9A), N-[N-(2,2,2-trikloorietoksikarbo-20 nyyli)-N-[(IS)-1-(etoksikarbonyyli)-3-fenyylipropyyli]-L-alanyyli ] -4- [ 2- (3-sulfamoyyli-4-klooribentsoyyli) hydrat-siini]-L-proliinietyyliesteriä.

B. N-[N-(IS)-1-(hydroksikarbonyyli)-3-fenyylipro-pyyli]-L-alanyyli]-4-[2-(3-sulfamoyyli-4-kloori- 25 bentsoyyli) -hydratsin-l-yyli]-L-proliinihydroklo- ridi

Liuokseen, jossa oli 2,70 g (325 mmol) yhdistettä (9A) 20 ml:ssa absoluuttista etanolia ja 10 ml:ssa etik-kahappoa, lisättiin 2,12 g (32,6 mmol) sinkkipölyä. Seosta 30 sekoitettiin kolme tuntia, suodatettiin Celiten läpi, laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin vedellä ja keitto-suolaliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Poistamalla haihtuvat aineet vakuumissa saatiin jäännös, joka puhdistettiin HPLC:llä eluoiden etyyliasetaatilla. Väli-35 tuotediesteriin 5 ml:ssa etanolia 0-5 °C:ssa lisättiin , '' r-t s

)< - f | #S

19 ·' natriumhydroksidin vesiliuosta (10 mooliekvivalenttia nat-riumhydroksidia). Seos lämmitettiin hitaasti huoneenlämpö-tilaan ja sekoitettiin yli yön. Seos jäähdytettiin jäähau-teessa, tehtiin happamaksi pH-arvoon 1 väkevällä kloori-5 vetyhapolla ja uutettiin etyyliasetaatin ja etanolin seoksella 95:5. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin, pestiin keittosuolaliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatin päällä. Poistamalla haihtuvat aineet vakuumissa saatiin jäännös, joka puhdistettiin hiertämällä asetonitriilissä 10 ja saatiin N-[N-(lS)-l-(hydroksikarbonyyli)-3-fenyylipro-pyyli]-L-alanyyli]-4-[2-(3-sulfamoyyli-4-klooribentsoyy-li)hydratsin-l-yyli]-L-proliinihydrokloridi, sp 188 °C (hajoaa). Tämä yhdiste on angiotensiiniä muuttavan entsyymin tehokas inhibiittori.

15 Esimerkki 10 A. (4RS)-N-(N-((IS)-l-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyli) -L-alanyyli-4- (N-metyyli-N- ((6-kloori-7-sulfamoyyli-3,4-dihydro-2H-l,2,4-bentsotiadiatsin-1, l-dioksidi-3-yyli)metyyli) amino) proliinietyyli-20 esteri (10A)

Liuokseen, jossa oli 3,7 g (8,2 mmol) N-(N-((1S)-1-etoksikarbonyy1i-3-fenyy1ipropyy1i)-L-alanyy1i)-L - p r o -Iin- 4-onietyyliesterihydrokloridia ja 3,6 g (9,5 mmol) 3 —(metyyliamino)metyyli—6—kloori-7—sulfamoyyli—3,4-dihyd-2 5 ro-2H-l, 2,4-bentsotiadiatsiini-l, 1-dioksidihydrokloridia 25 ml:ssa DMF:ää, lisättiin 4 g MgS04:ää. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia huoneenlämpötilassa ja sitten sitä käsiteltiin liuoksella, jossa oli 0,6 g (0,01 mol) natrium-syanoboorihydridiä 5 ml:ssa DMF:ää. Kun oli sekoitettu yli 30 yön, seoksen annettiin jakaantua veteen ja EtOAc:hen, ve-sifaasi pestiin EtOAc:llä ja sitten CH2Cl2:lla ja yhdistetyt orgaaniset nesteet pestiin vedellä ja keittosuola-liuoksella.

Yhdistettyjä orgaanisia uutteita ja 2,3 g oksaali-35 happoa sekoitettiin yli yön ja muodostunut tahna huuhdel- 20 r-, . - " ' / ! b tiin kuivalla EtOAcrllä. Sakka liuotettiin uudelleen veteen, neutraloitiin ylimäärällä kaliumkarbonaattia ja uutettiin kahdella annoksella EtOAcrtä. Uutteet konsentroitiin vakuumissa ja saatiin 1,7 g (28 %) tuotetta (10A) 5 diastereomeerien seoksena, sp 79 - 85 °C.

B. (4RS)-N-(N-(IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli)-4-((N-metyyli-N-(6-kloori-7-sulfamoyyli-3,4-dihydro-2H-l,2,4-bentsotiadiatsin- 1,l-dioksidi-3-yyli)metyyli)amino)proliini (10B) 10 Sekoitettiin 1,7 g (2,3 mmol) diesteriä (10A) 10 ml:ssa 50-%:ista EtOHrta ja käsiteltiin 10 ml:11a 5-%:ista NaOH-liuosta. Kahden tunnin kuluttua TLC osoitti hydrolyy-sin päättyneen. Seos tehtiin happamaksi 8 ml:11a 2N HCl:-ää. Muodostunut sakka pestiin vedellä, liuotettiin uudel-15 leen 35 ml:aan 0,5N HCl:ää, pestiin 10 ml:11a EtOAc:tä ja kylmäkuivattiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä ja saatiin 1,1 g (72 %) yhdistettä (13B), sp 193 - 197 °C. Tämä yhdiste on angiotensiiniä muuttavan entsyymin tehokas inhibiittori.

20 Esimerkki 11 (4R) -4- [ (5-sulfamoyyli) -4-kloori-2- [ (2-furyylime-tyyli) amino]bentsoyylioksi] -N-[N-[ (IS) -1-(hydroksi-karbonyyli) -3-fenyylipropyyli ] -L-alanyyl i ] -L-pro-liini 25 Seosta, jossa oli 2,9 g (8,8 mmol) furosemidia ja 1,57 g (9,7 mmol) 1,1'-karbonyylidi-imidatsolia 30 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraania (THF), sekoitettiin tunti 25 °C:ssa. Lisättiin liuos, jossa oli 3,7 g (8,8 mmol) (4R) —N-[N-[ (IS) -l-(etoksikarbonyyli) -3-fenyylipropyyli ] -30 L-alanyyli]-4-hydroksi-L-proliinietyyliesteriä 40 ml:ssa THF:ää. Liuosta kuumennettiin palautuslämpötilassa 20 tuntia, jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja haihtuvat aineet poistettiin vakuumissa. Jäännös laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin vedellä, HCl-vesiliuoksella ja keitto-35 suolaliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Pois- 21 ’ g 7' o tamalla haihtuvat aineet vakuumissa ja puhdistamalla jäännös HPLC:llä eluoiden seoksella, jossa oli 50 % etyyliasetaattia heksaaneissa, saatiin kiintotuote. Etyylieste-rit voidaan hydrolysoida emäksellä ja tuote puhdistaa 5 käänteisfaasikromatografiällä silikageelillä eluoiden ve sipitoisella asetonitriilillä.

Sulamispiste: 195 - 200 °C.

Valmistettiin myös seuraavat tämän keksinnön piiriin kuuluvat yhdisteet tässä kuvattujen menetelmien avul-10 la. Havaittiin, että ne olivat angiotensiiniä muuttavan entsyymin tehokkaita inhibiittoreita.

Esimerkki 12 N- [N-[(IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli]-L-alanyyli] -4-[ ((6-kloori-2H-l, 2,4-bentsotiadiat-15 sin-1,l-dioksidi-7-yyli)sulfonyyli)amino]-L-prolii- ni

Sulamispiste: 177 °C (hajoaa)

Esimerkki 13 N- [N-[(IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli]-20 L-alanyyli]-4-[2-(6-kloori-7-sulfamoyyli-3 ’ , 4-di- hydro-2H-l,2,4-bentsotiatsin-l,l-dioksidi-3-yyli)-etoksi]-proliini

Claims (2)

22 *$Ί 16

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava (1) 5 0 II Q-C*HCN—^ I I ή r2 c*h' 10 Y2-C»0 (1) jossa Q on Y^CiOJ-C^HiR^NH-; Yi ja Y2 ovat toisistaan riippumatta -OH tai -OCH2CH3; 15 rengas G on IX “ 20 z joissa G: on H tai Cj-C^-alkoksi; Z on =N-(alk)-M, =N- (alk) -S02M, -( alk)-N(R3)-(alk)-M, - (alk)-N( R3)-(alk)-C(0)-(alk)-M, -(alk)-N(R3)S02-(alk)-M, 25 -(alk)-N(R3)-(alk)-N(R3)-(alk)-C(O)M, -0-( alk)-C(0)M tai =CH-(alk)-C(0)-(alk)-M, joissa (alk) on kemiallinen sidos tai -CH2-, M on a;- ixi - Oö··· joissa A, B ja E ovat toisistaan riippumatta H, ρ 9 7 ί >ς 23 ^ -OCHjCOOH, halogeeni, -NH2, -S02NH2 tai furfuryyliamino sillä edellytyksellä, että ainakin toinen ryhmistä A ja B on muu kuin vety; Rj on H tai fenetyyli ja R2 ja R3 ovat toisistaan riippumatta H tai CH3, sillä edellytyksellä, että 5 kun G on monosyklinen ja Z on -(alk)-N(R3)-0(0)-(^^^, -(alk)-N(R3)-S02-(alk)-^~^p 10 tai A -(alk)-N(R3)-(alk)-^/ , niin fenyyliryhmä on substituoitu furfuryyliaminolla, ryh-15 mällä -0CH2C02H tai vähintään kahdella sulfamoyyliryhmällä, sekä sen farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditio-, alkalimetalli- ja maa-alkalimetallisuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jolla on kaava (2)

20 O II Q-C*HC0H (2) R2 jossa R2 ja Q merkitsevät samaa kuin edellä, kytketään yh-25 disteeseen, jolla on kaava (3) Tg) c*k | (3) : 30 Y2-O0 jossa Y2 ja G-renkaan substituentit, Z mukaanlukien merkitsevät samaa kuin edellä, peptidin muodostusolosuhteis-sa, tai 35 b) liitetään substituentti Z yhdisteeseen, jolla on kaava 24 p o 71 6 ? O °'f*HCr>Gl Q-C*HC-tf-^ > i, P - ! ÖJ i 2 I v L Y--c-o *2"C"0 2 substituutio- tai kondensointireaktioilla ja 10 c) poistetaan mahdolliset suojaryhmät ja haluttaes sa muodostetaan tuotteesta suola.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan ( 4R)-4-[5-(sulfamoyyli)-4-kloori-2-[(2-furyylimetyyli)-15 amino]bentsoyyli]-N-[N-[(lS)-l-(hydroksikarbonyyli)-3-fe- nyylipropyyli]-L-alanyyli]-L-proliini tai N-[N-[(IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli]-L-alanyyli] -4- [ ((6-kloori-2H-l, 2,4-bentsotiadiatsin-l, 1-dioksi-di-7-yyli)sulfonyyli)amino]-L-proliini tai 20 N-[N-[(IS)-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli]-L-ala nyyli] -4- [2- (3-sulfamoyyli-4-klooribentsoyyli Jhydratsin- 1-yyli]-L-proliini tai N- [N— (IS )-l-hydroksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli] -L-ala-nyyli-4-( (N-metyyli-N-(6-kloori-7-sulfamoyyli-3,4-dihydro-25 2H-1,2,4-bentsotiadiatsin-l, l-dioksidi-3-yyli Jmetyyli )ami- no)proliini tai näiden farmaseuttisesti hyväksyttävä happo-, alkalimetalli- tai maa-alkalimetallisuola. r, ry a ,- 25 ν ·· / ! 6