ES3037264T3

ES3037264T3 - Controlled release system of phytocannabinoids formulations soluble in aqueous media, methods and uses thereof

Info

Publication number: ES3037264T3
Application number: ES21703254T
Authority: ES
Inventors: Carnicero José Alonso; Gonzalez Raúl Perez; Martinez Virginia Saez; Morentin Manuel Munoz
Original assignee: I Med S Coop
Current assignee: I Med S Coop
Priority date: 2020-02-04
Filing date: 2021-02-03
Publication date: 2025-09-30
Anticipated expiration: 2041-02-03
Also published as: US20230081080A1; EP4100001B1; EP3861996A1; CA3166966A1; EP4100001A1; WO2021156291A1; EP4100001C0

Abstract

La presente invención se refiere a un sistema de liberación controlada de una formulación de fitocannabinoides soluble en medio acuoso que comprende fitocannabinoides o sus derivados, un tensioactivo no iónico y un polímero reticulado. El pH de la composición oscila entre 4 y 9, y la relación en peso de cannabinoide/ácido hialurónico es de 50:1 a 1:50, y la relación en peso de cannabinoide/tensioactivo no iónico es de 1:30 a 1:1. La invención también se refiere a métodos para producir el sistema de liberación controlada de una formulación de cannabinoides soluble en medio acuoso y a sus aplicaciones farmacéuticas, cosméticas y nutracéuticas. Los métodos de la presente invención permiten la reticulación de fitocannabinoides encapsulados o vehiculizados que contienen ácido hialurónico a pH neutro, evitando la degradación de los fitocannabinoides y preservando su funcionalidad. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Sistema de liberación controlada de formulaciones de fitocannabinoides solubles en medios acuosos, procedimientos y usos del mismo

Campo de la invención

La presente invención se refiere en general a formulaciones de fitocannabinoides. En particular, la invención se refiere a un sistema de liberación controlada de formulaciones de fitocannabinoides solubles en medios acuosos, al procedimiento de fabricación de este sistema de liberación controlada y a sus usos en aplicaciones farmacéuticas, nutracéuticas y cosméticas.

Antecedentes de la invención

Los fitocannabinoides poseen actividad farmacológica, ya que interactúan con el sistema nervioso central (psicotrópicos). Sin embargo, solo algunos de ellos son psicoactivos y causan alteraciones de la percepción y el estado de ánimo, pudiendo causar adicción.

Los derivados de fitocannabinoides tienen una amplia variedad de aplicaciones terapéuticas que pueden clasificarse según las diferentes afecciones médicas:

- Trastornos neurológicos y psiquiátricos: esclerosis múltiple, espasticidad, epilepsia, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, ansiedad, depresión, estrés, trastorno bipolar.

- Trastornos digestivos y de la alimentación: anorexia, pérdida de apetito, náuseas, diabetes, enfermedad de Crohn. - Dolor e inflamación: cefalea, migraña, fibromialgia, inflamación, artritis, calambres, lesión medular, espasmos musculares, esguinces y lesiones musculares. Tratamiento del dolor de origen periférico, tanto crónico como agudo (contusiones, postoperatorio).

- Afecciones inflamatorias de la piel: acné, psoriasis, dermatitis atópica y tratamiento de heridas conflictivas (úlceras por presión, pie diabético).

- Otros: cáncer, insomnio, lupus, hipertensión, isquemia, distrofia muscular, fatiga, glaucoma, asma.

Los fitocannabinoides se disuelven fácilmente en lípidos, alcoholes y otros disolventes orgánicos no polares, pero presentan baja solubilidad en agua. Esto limita su biodisponibilidad y hace necesaria su encapsulación para optimizar su actividad terapéutica y minimizar sus posibles propiedades adictivas.

Dentro de la familia de los fitocannabinoides, los derivados que han recibido mayor atención son el THC (tetrahidrocannabinol), que causa dependencia, así como el CBD (cannabidiol) y el CBG (cannabigerol), que no son adictivos. En este sentido, la agencia reguladora estadounidense FDA (Administración de Alimentos y Medicamentos) ha aprobado varios medicamentos que contienen derivados de THC y CBD en su composición: Marinol® (dronabinol) y Cesamet® (nabilona), que son análogos sintéticos del tetrahidrocannabinol (THC); Epidiolex®, que es un cannabidiol (CBD) puro extraído de la planta, y Sativex® (nabiximols), un extracto de cannabis con una proporción 1:1 de THC y CBD. De estos medicamentos, solo Sativex ha sido aprobado por la EMA (Agencia Europea de Medicamentos) para su uso en la UE.

El cannabidiol (CBD) es el análogo no psicoactivo del tetrahidrocannabinol (THC). Desde un punto de vista farmacológico, el cannabidiol presenta poca afinidad de unión por los receptores CB1 y CB2, pero es capaz de antagonizarlos en presencia de otros fitocannabinoides tales como THC. El CBD también regula la percepción del dolor al afectar la actividad de un número significativo de dianas, incluyendo receptores acoplados a la proteína G no fitocannabinoide, canales iónicos y receptores activados por el proliferador de peroxisomas. El CBD también presenta beneficios antiinflamatorios y antiespasmódicos. Otro fitocannabinoide que puede contribuir a los efectos analgésicos del CBD es, por ejemplo, el cannabigerol (CBG). De manera similar el CBD, el CBG no muestra afinidades significativas por los receptores fitocannabinoides, pero tiene otros mecanismos de acción.

El ácido hialurónico es un componente principal de la matriz extracelular (ECM) y, de esta manera, el principal componente fisiológico de la matriz del cartílago articular y es particularmente abundante en el líquido sinovial y en la piel.

El ácido hialurónico, en su forma ácida o salina, es un biomaterial ampliamente empleado como material inyectable para aplicaciones en ingeniería tisular, y especialmente para el aumento del tejido cutáneo y de otros tejidos blandos.

El ácido hialurónico es un biopolímero lineal de glicosaminoglicano no sulfatado que consiste en unidades repetidas de ácido D-glucurónico y N-acetil-D-glucosamina (Tammi R., Agren U M., Tuhkanen A L., Tammi M. Hyaluronan metabolism in skin. Progress in Histochemistry & Cytochemistry 29 (2): 1.-81, 1994). A pH fisiológico (7,4), se encuentra en forma de hialuronato de base conjugada.

El ácido hialurónico se sintetiza principalmente en la piel por los fibroblastos dérmicos y los queratinocitos epidérmicos (Tammi R., et al., 1994) y actúa como una bomba de agua para mantener la elasticidad de la piel.

La ECM está compuesta por proteínas estructurales tales como el colágeno y la elastina, y de agua, minerales y proteoglicanos. Esta matriz es una estructura dinámica con una función estructural que proporciona a la piel sus propiedades mecánicas de elasticidad, firmeza y tono.

En cuanto a la piel, se observa que, con la edad, la cantidad de ácido hialurónico y su grado de polimerización disminuyen, lo que provoca una disminución de la cantidad de agua retenida en el tejido conectivo. Mientras tanto, los componentes de la ECM se degradan, principalmente por enzimas de tipo endopeptidasa.

Finalmente, la disminución de las defensas celulares aumenta el daño y los trastornos inducidos por agresiones externas, tales como el estrés oxidativo. La piel se ve sometida entonces a un proceso de envejecimiento que conduce a la aparición de defectos e imperfecciones en las sustancias queratinosas, en particular en la piel.

Los hidrogeles de ácido hialurónico, y específicamente los basados en polímeros reticulados, presentan numerosas aplicaciones, especialmente como materiales de relleno en traumatología, cirugía plástica y estética, oftalmología y como productos para la prevención de adherencias tisulares no deseadas. Las aplicaciones indicadas anteriormente para productos de este tipo, sin que ello suponga ninguna limitación, son familiares para los expertos en la técnica.

En el campo de los rellenos dérmicos, se inyectan geles, compuestos principalmente de ácido hialurónico, por vía intradérmica para rellenar las arrugas de la piel. El ácido hialurónico reticulado permite la reducción de tales arrugas. Sin embargo, se sabe que la inyección de dichos geles suele producir dolor en el paciente (US 2016/01 66554 A1).

Actualmente, para evitar este problema técnico, los principales rellenos a base de ácido hialurónico se comercializan con un anestésico local para garantizar una mayor comodidad del paciente. Este anestésico local es únicamente lidocaína, con una dosificación de aproximadamente 0,3 %.

Sin embargo, se sabe que la lidocaína puede presentar la desventaja, en cuanto a sus propiedades vasodilatadoras, de implicar una absorción demasiado rápida por el organismo del paciente y, en ocasiones, una mayor aparición de hematomas, lo cual, por obvias razones estéticas, debe evitarse en la medida de lo posible. Por otro lado, se sabe que los fitocannabinoides, tales como el cannabidiol, presentan efectos analgésicos, vasoconstrictores y antiinflamatorios. Por lo tanto, pueden utilizarse para neutralizar los efectos secundarios de la lidocaína o para disminuir la inflamación provocada al inyectar el relleno de tejidos blandos.

Las enfermedades articulares son lesiones que afectan las articulaciones humanas. La artritis es la enfermedad articular más conocida. Las enfermedades articulares pueden ser de corta duración o extremadamente crónicas, extremadamente dolorosas o simplemente persistentes e incómodas; pueden limitarse a una articulación o afectar varias partes del esqueleto. Se distinguen dos categorías principales: enfermedades articulares inflamatorias, en las que la inflamación es el principal conjunto de signos o síntomas, y enfermedades articulares no inflamatorias. La artritis es un término genérico para la enfermedad articular inflamatoria. Independientemente de la causa, la inflamación de las articulaciones puede causar dolor, rigidez, hinchazón y algo de enrojecimiento de la piel alrededor de la articulación. El derrame de líquido en la cavidad articular es común, y el examen de este líquido suele ser un procedimiento valioso para determinar la naturaleza de la enfermedad. La inflamación puede ser de tal naturaleza y gravedad que destruya el cartílago articular y el hueso subyacente, y causar deformidades irreparables (WO2017203529A1).

El ácido hialurónico se ha usado ampliamente para la viscosuplementación de articulaciones enfermas o envejecidas. Sin embargo, investigaciones recientes han revelado la actividad antiinflamatoria o el efecto condroprotector del ácido hialurónico, lo que sugiere su posible papel en la atenuación del daño articular (Masuko, 2009 Masuko K, Murata M, Yudoh K, Kato T, Nakamura H, 2009, Anti-inflammatory effects of hyaluronan in arthritis therapy: Not just for viscosity. Int. J. General Medicine 2:77-81). Se ha descubierto que el hialuronano es eficaz en el tratamiento de procesos inflamatorios en áreas médicas tales como la ortopedia, la dermatología y la oftalmología, y además se ha descubierto que es antiinflamatorio y antibacteriano en la terapia de la gingivitis y la periodontitis.

Los fitocannabinoides, y en particular el cannabidiol (CBD), presentan propiedades antiinflamatorias. En este sentido, existe evidencia de que el efecto de los fitocannabinoides podría ser la atenuación del componente inflamatorio, como ocurre, por ejemplo, en la artritis reumatoide (RA). Cada vez hay más evidencia que sugiere que el sistema endocannabinoide, especialmente el receptor cannabinoide 2 (CB2), desempeña un papel importante en la fisiopatología de la artritis reumatoide (RA). Se ha descrito que muchos miembros del sistema endocannabinoide inhiben la inflamación sinovial, la hiperplasia y la destrucción del cartílago en la RA. En particular, la activación específica del CB2 puede aliviar la<r>A al inhibir no solo la producción de autoanticuerpos, citocinas proinflamatorias y metaloproteinasas de matriz (MMP), sino también la erosión ósea y la respuesta inmunitaria mediada por linfocitos T (WO2017203529A1).

La reticulación de los derivados del ácido hialurónico suele realizarse en medios acuosos alcalinos o ácidos, según las necesidades de los agentes de reticulación. En estas condiciones (tanto ácidas como alcalinas), los fitocannabinoides vehiculizados se degradan. A este respecto, la epiclorhidrina, la divinilsulfona, el 1,4-bisglicidoxibutano, el 1,4-butanodiol diglucidil éter (BDDE), el 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y el 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano muestran un anillo de oxirano que requiere condiciones acuosas ácidas (H+) o alcalinas (OH-) para lograr la reticulación (S. Khunmanee, Y. Jeong, H. Park, J. Tissue Eng. 2017, 8, 1-16, doi.org/10.1177/2041731417726464). De manera similar, los aldehídos tales como el formaldehído, el glutaraldehído y el crotonaldehído, tomados solos o en mezcla, requieren condiciones ácidas para reticular el ácido hialurónico (K. Tomihata, Y. Ikada, J Polym Sci A: Polym Chem 1997, 35: 3553-3559). En condiciones acuosas alcalinas, los fitocannabinoides vehiculizados por agua, cannabidiol y cannabigerol, experimentan una reorganización química y se convierten en hidroxiquinonas (R. Mechoulan, Z. Ben-Zvi, Tetrahedron 1968, 24, 5615-5624), mientras que en medios acuosos ácidos, el c Bd se reorganiza a delta-9-tetrahidrocannabinol (THC) (R. Mechoulam, L. Hanus, Chemistry and Physics of Lipids 2002, 121, 35-43) y el CBG cicla la fracción terpenil Nat. Prod. Rep., 2016, 33, 1357-1392). Por lo tanto, la degradación de los fitocannabinoides en condiciones de reticulación ácidas o alcalinas les impide cumplir su función o sus aplicaciones específicas.

Por lo tanto, se requiere un procedimiento para la reticulación de polímeros en presencia de fitocannabinoides vehiculizados, como el cannabidiol y el cannabigerol, que eviten la degradación de los fitocannabinoides.

El procedimiento de la presente invención permite la reticulación de fitocannabinoides encapsulados o vehiculizados con ácido hialurónico a pH neutro, evitando la degradación de los fitocannabinoides.

El esfuerzo de los autores de la presente invención para realizar la reticulación de polímeros en presencia de fitocannabinoides vehiculizados con agua, por ejemplo, el cannabidiol (CBD) o el cannabigerol (CBG), ha dado lugar a la obtención de hidrogeles monofásicos inyectables que permiten la liberación de los fitocannabinoides para llevar a cabo aplicaciones farmacéuticas, cosméticas y nutracéuticas relevantes, tales como el tratamiento de enfermedades inflamatorias articulares y la aplicación de rellenos tisulares, aprovechando el efecto viscosuplementador del ácido hialurónico y las propiedades antiinflamatorias del ácido hialurónico y los fitocannabinoides.

Breve descripción de los dibujos

Figura 1. Curva de liberación controlada de fitocannabinoides. Concentración de CBD (mg/ml) vs. tiempo (h) para la composición del ejemplo 1.

Figura 2. Curva de liberación controlada de fitocannabinoides. Concentración de CBG (mg/ml) vs. tiempo (h) para la composición del ejemplo 1.

Figura 3. Curva de liberación controlada de fitocannabinoides. Concentración de CBG CBD (mg/ml) vs. tiempo (h) para la composición del ejemplo 5.

Figura 4. Curva de liberación controlada de fitocannabinoides. Concentración de CBG CBD (mg/ml) vs. tiempo (h) para la composición del ejemplo 7.

Descripción detallada de la invención

En respuesta a las necesidades del estado de la técnica, los autores de la invención han desarrollado nuevos procedimientos para la reticulación de polímeros en presencia de fitocannabinoides vehiculizados mediante tensioactivos no iónicos. El producto resultante se esteriliza y es adecuado para aplicaciones farmacéuticas, por ejemplo, para el tratamiento de enfermedades inflamatorias articulares y como relleno tisular. El producto no esterilizado es adecuado para aplicaciones cosméticas, tal como geles hidratantes, así como para aplicaciones nutracéuticas, tales como geles comestibles.

El producto obtenido es un sistema multimatriz de liberación controlada de fitocannabinoides basado en una red polimérica reticulada (matriz 1) que contiene fitocannabinoides vehiculizados mediante tensioactivos no iónicos (matriz 2). La fabricación de todo el sistema implica una síntesis química homogénea.

Por lo tanto, en un primer aspecto, la presente invención se refiere a un sistema multimatriz de liberación controlada de una formulación de fitocannabinoides soluble en medio acuoso que comprende una red polimérica reticulada que contiene fitocannabinoides vehiculizados a través de tensioactivos no iónicos, en la que los fitocannabinoides se seleccionan entre un fitocannabinoide o una mezcla de fitocannabinoides, en la que el polímero se selecciona de entre ácido hialurónico o una sal del mismo, en la que el pH de las composiciones varía entre 6 y 8, y en la que la proporción en peso de fitocannabinoide/polímero es de 50:1 a 1:50, preferentemente de 20:1 a 1:20, y más preferentemente de 10:1 a 1:10, y lo más preferentemente de 2:1 a 1:2, y en la que la proporción en peso de fitocannabinoide/tensioactivo no iónico es de 1:30 a 1:1, preferentemente 1:9 a 1:1

Los fitocannabinoides pueden obtenerse no solo de fuentes naturales, sino también mediante síntesis química, síntesis bioquímica o a partir de microorganismos modificados genéticamente (R. K. Razdan, en The Total Synthesis of Natural Products, ed. J. ApSimon, 1981, vol. 4, pp. 185-262; US9822384B2: Production of cannabinoids in yeast). De acuerdo con lo anterior, los fitocannabinoides usados en la formulación de la presente invención pueden ser naturales o sintéticos.

Los fitocannabinoides se pueden seleccionar, entre otros, de ácido cannabigerólico, ácido cannabigerólico monometiléter, cannabigerol, cannabigerol monometiléter, ácido cannabigerovarínico, cannabigerovarina, ácido cannabicroménico, cannabicromeno, ácido cannabicromevarínico, cannabicromevarina, ácido cannabidiólico, cannabidiol, cannabidiol monometiléter, cannabidiol C4, ácido cannabidivarínico, cannabidivarina, cannabidioreol, ácido D9-(trans)-tetrahidrocannabinólico A, ácido delta9-(trans)-tetrahidrocannabinólico B, D9-(trans)-tetrahidrocannabinol, ácido D9-(trans)-tetrahidrocannabinólico C4, D9-(trans)-tetrahidrocannabinol-C4, ácido D9-(trans)-tetrahidrocannabivánico, D9-(trans)-tetrahidrocannabivarino, ácido D9-(trans)-tetrahidrocannabiocólico, D9(trans)-tetrahidrocannabiorcol, ácido D8-(trans)-tetrahidrocannabinólico, D8-(trans)-tetrahidrocannabinol, ácido cannabiciclólico, cannabiciclol, cannabiciclovarino, ácido cannabielsoico A, ácido cannabielsoico B, cannabielsoína, ácido cannabinólico, cannabinol, metiléter de cannabinol, cannabinol-C4, cannabivarino, cannabiorcol, cannabinodiol, cannabinodivarino, (-)-cannabitriol, (+)-cannabitriol, (±)-9,10-dihidroxi-D®a(10a)-tetrahidrocannabinol, (-)-10-etoxi-9-dihidroxi-D6a(10a)-tetrahidrocannabinol, (±)-8,9-dihidroxi-D®a(10a)-tetrahidrocannabinol, éster tetrahidrocannabitriol del ácido cannabidiólico y mezclas de los mismos.

En una realización particular, los fitocannabinoides se seleccionan entre cannabidiol, cannabigerol o una mezcla de los mismos. En otra realización particular, se puede usar un extracto de cannabis sativa como fuente de fitocannabinoides. El extracto de cannabis sativa proviene de cualquier parte de la planta, incluyendo flores, hojas, tallos y semillas.

Los fitocannabinoides se vehiculizan en un tensioactivo no iónico. Para facilitar la vehiculización de los fitocannabinoides, en una realización particular, se utilizan como tensioactivos copolímeros tribloque no iónicos derivados de poli(etilenglicol)-bloque-poli(propilenglicol)-bloque-poli(etilenglicol). El poli(etilenglicol)-bloquepoli(propilenglicol)-bloque-poli(etilenglicol) se define según la fórmula:

en la que a es un número entero de 10 a 150 y b es un número entero de 15 a 65.

En una realización particular, la formulación puede comprender dos derivados de poli(etilenglicol)a-bloquepoli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a. Cuando la formulación comprende dos derivados de poli(etilenglicol)abloque- poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a, se prefiere que para un derivado a sea 80, b sea 27 y para el otro derivado a sea 141 y b sea 44. Otros derivados conocidos de poli(etilenglicol)-bloque-poli(propilenglicol)-bloquepoli(etilenglicol) útiles en la presente invención son aquellos en los que a es 64, b es 34, a es 12 y b es 20.

En algunas realizaciones particulares, se puede usar la combinación de citrato/lactato/linoleato/oleato de glicerilo y poligliceril-2 oleato en lugar de los copolímeros tribloque no iónicos derivados de poli(etilenglicol)-bloquepoli(propilenglicol)-bloque-poli(etilenglicol).

El polímero usado en las formulaciones de la presente invención es ácido hialurónico o una sal del mismo. Más preferentemente, el polímero que se va a reticular es una sal de ácido hialurónico. En particular, se selecciona entre la sal de sodio, la sal de potasio y mezclas de las mismas.

En una realización preferente, la sal de ácido hialurónico es de bajo peso molecular (M), siendo M < 0,75-10® Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular (M), siendo M < 2,210® Da, o una mezcla de las mismas. Más preferentemente, la sal de ácido hialurónico es de bajo peso molecular, siendo 0,510® Da < M < 0,7510® Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular (M), siendo 1,910® < M < 2,210® Da, o una mezcla de las mismas. Dichas sales de bajo o alto peso molecular son de la misma naturaleza. En una realización preferente, estas sales consisten en hialuronato de sodio.

Los autores de la invención han desarrollado nuevos procedimientos para obtener las formulaciones de la invención mediante la reticulación de polímeros en presencia de fitocannabinoides vehiculizados mediante tensioactivos no iónicos.

Por lo tanto, en un segundo aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento de producción del sistema de liberación controlada de una formulación de fitocannabinoides soluble en medios acuosos, según se divulga en las reivindicaciones adjuntas, que comprende las etapas de:

a) Obtener una solución mezclando el polímero hialurónico, previamente disuelto en una solución acuosa, y un tensioactivo no iónico;

b) Obtener una solución de un fitocannabinoide, o una mezcla de fitocannabinoides, mediante la disolución de dichos fitocannabinoides en un disolvente apropiado;

c) Agregar la solución obtenida en b) a la solución obtenida en a), y

d) Reticular la solución resultante obtenida en c) en presencia de un agente de reticulación.

En una realización particular, en la etapa a), se obtiene una solución que contiene el polímero hialurónico, preferentemente hialuronato de sodio, y un tensioactivo no iónico, preferentemente un derivado de poli(etilenglicol)-bloque-poli(propilenglicol)-bloque-poli(etilenglicol). Tras la adición de fitocannabinoides en la etapa b), el tensioactivo no iónico puede formar partículas coloidales que contienen fitocannabinoides.

La solución de la etapa a) comprende hialuronato de sodio de bajo peso molecular y/o alto peso molecular en una concentración entre 0,1 y 3 % (p/p), y preferentemente en una concentración entre 0,5 % y 2,5 % (p/p) y más preferentemente en una concentración entre 0,75 y 1,5 % (p/p), que es una cantidad suficiente de hialuronato de sodio para garantizar que el ácido hialurónico reticulado que contiene fitocannabinoides tenga una consistencia homogénea.

El medio de solución acuosa usado en la etapa a) se selecciona entre:

- agua,

- un tampón que consiste en NaCl, en una concentración entre 0,2 y 8 %, y Na2HPO4-12H2O, en una concentración entre 0,01 y 10 %, y NaH2PO4-2H2O, en una concentración entre 0,001 y 10 %,

- un tampón que consiste en citrato de sodio deshidratado o un derivado del citrato de sodio, en una concentración entre 0,002 y 2,5 %, y ácido cítrico (hidratado o deshidratado), en una concentración entre 0,002 y 2 %, o - un tampón que consiste en ácido acético, en una concentración entre 0,0005 y 0,1 %, y un derivado de acetato de sodio, en una concentración entre 0,005 y 0,5 %.

En una realización preferente, la solución acuosa es un tampón que consiste en un 1,6 % de NaCl, un 0,12 % de Na2HPO4-12H2O y un 0,01 % de NaH2PO4-2H2O.

En la etapa b), se disuelve un fitocannabinoide o una mezcla de fitocannabinoides en un disolvente apropiado y se agrega a la solución de la etapa a). Preferentemente, los fitocannabinoides se seleccionan entre cannabidiol, cannabigerol o una mezcla de los mismos. En estas condiciones, se forman partículas coloidales que contienen cannabinoides.

En la etapa d), la reticulación de la solución resultante se lleva a cabo en presencia de un agente de reticulación derivado de un derivado de carbodiimida, un derivado de carbonil imidazol, un derivado de carbonil benzotriazol, un derivado de carbonil triazol o mezclas de los mismos.

Opcionalmente, también se puede agregar a la solución una molécula activa formadora de ésteres durante la etapa de reticulación, por ejemplo, N-hidroxisuccinimida (NHS), sulfo-N-hidroxisuccinimida (sulfo-NHS), hidroxibenzotriazol (HOBt), hexafluorofosfato de benzotriazol tetrametil uronio (HBTU) o hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio 3-óxido, también llamado hexafluorofosfato de azabenzotriazol tetrametil uranio (HATU). Preferentemente, se usa sulfo-NHS.

También se puede agregar un derivado de dihidrazida en la etapa de reticulación, por ejemplo, uno seleccionado entre dihidrazida de ácido adípico, dihidrazida de ácido pimélico, dihidrazida de ácido malónico, dihidrazida de ácido etilmalónico, dihidrazida de carbonilo, oxalildihidrazida o dihidrazida succínico.

El polímero que se va a reticular es preferentemente una sal de ácido hialurónico. Se selecciona más preferentemente entre la sal de sodio, la sal de potasio y mezclas de las mismas, y más preferentemente consiste en la sal de sodio (NaHA).

En una realización particular, el procedimiento de reticulación del procedimiento de la invención es un procedimiento para reticular el hialuronato de sodio y los derivados del mismo en una solución que contiene fitocannabinoides vehiculizados en derivados de poli(etilenglicol)-bloque-poli(propilenglicol)-bloque-poli(etilenglicol).

En el contexto de la reticulación de este tipo de polímero (sal(es) de ácido hialurónico) y de fitocannabinoides o mezclas de los mismos, en una realización preferente, la mezcla de reacción de reticulación contiene: una sal de ácido hialurónico de bajo peso molecular M, siendo M < 0,75-10® Da, preferentemente 0,5-10® Da < M < 0,75-10® Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular M, siendo M < 2,210® Da, preferentemente 1,9-10® < M < 2,210® Da, o una mezcla de las mismas. Dichas sales de bajo peso molecular o alto peso molecular son de la misma naturaleza y, muy ventajosamente, consisten en hialuronato de sodio.

En ocasiones, durante el procedimiento de reticulación, el pH de la formulación puede estar fuera de los intervalos deseados (® y 8), y entonces, es necesario ajustar el pH después de la reticulación, en el que:

- Si el pH alcanzado en la reticulación es demasiado ácido, se procede a la etapa de ajuste del pH agregando una solución 0,25 M de hidróxido de sodio (NaOH) hasta alcanzar el pH requerido, o

- Si el pH alcanzado en la etapa d) es básico, se procede a la etapa de ajuste del pH agregando una solución 0,25 M de ácido clorhídrico (HCl) hasta alcanzar el pH requerido.

En una realización particular, el disolvente usado para disolver el fitocannabinoide en cualquiera de los procedimientos de la invención se define mediante la fórmula:

®

en la que R1-R4 se seleccionan independientemente entre H, OH, CH2OH, CH3, CH2CH3, C(O)CH3, C(O)OCH2CH3, CH2C(O)CH2CH3.

El disolvente se selecciona preferentemente del grupo que consiste en metanol, 1-propanol e isómeros de los mismos, etilenglicol, propilenglicol y mezclas de los mismos.

La etapa de reticulación implica la adición de un derivado de carbodiimida. En una realización particular, el derivado de carbodiimida se define por la fórmula:

R1-N=C=N-R2

en la que R1 puede ser igual a R2. R1 y R2 se seleccionan entre ciclohexilo, isopropilo, 3-dimetilaminopropilo, etilo, (2-morfolinoetilo). La carbodiimida puede presentarse tanto en forma de clorhidrato como de metoxi-ptoluenosulfonato.

En lugar de un derivado de carbodiimida, se pueden usar otros agentes de reticulación como 1,1'-carbonildiimidazol, carbonildi-benzimidazol, carbonildi-1,2,4-triazol y carbonildibenzotriazol.

El procedimiento de reticulación podría requerir la adición de una molécula activa formadora de ésteres. Ejemplos de moléculas activas formadoras de ésteres son la N-hidroxisuccinimida (NHS), la sulfo-N-hidroxisuccinimida (sulfo-NHS), el hidroxibenzotriazol (HOBt), el hexafluorofosfato de benzotriazol tetrametil uronio (HBTU) y hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio 3-óxido, también llamado hexafluorofosfato de azabenzotriazol tetrametil uranio (HATU). En una realización preferente, se usa sulfo-N-hidroxisuccinimida (sulfo-NHS).

La reticulación también se realiza mediante la adición de derivados de dihidrazida a la mezcla de reticulación que contiene derivados de carbodiimida, así como moléculas activas formadoras de ésteres. Ejemplos de derivados de dihidrazida son la dihidrazida del ácido adípico, la dihidrazida del ácido pimélico, la dihidrazida del ácido malónico, la dihidrazida del ácido etilmalónico, la carbonildihidrazida, la oxalildihidrazida y la dihidrazida succínica.

Alternativamente, la presente invención contempla otro procedimiento de producción del sistema de liberación controlada de la formulación de fitocannabinoides soluble en agua de la presente invención, como se divulga en las reivindicaciones adjuntas, que comprende las etapas de:

i. Obtener una solución mediante la disolución del polímero hialurónico en una solución acuosa.

ii. Obtener una solución de un fitocannabinoide, o una mezcla de fitocannabinoides, mediante la disolución de dichos fitocannabinoides en una solución que contenga un tensioactivo no iónico y un disolvente apropiado. iii. Agregar la solución obtenida en ii) a la solución obtenida en i), y

iv. Reticular la solución resultante obtenida en iii) en presencia de un agente de reticulación.

La solución de la etapa i) contiene hialuronato de sodio de bajo y/o alto peso molecular en una concentración entre 0,1 % y 3 %, y preferentemente entre 0,5 % y 2,5 % y, más preferentemente, entre 0,75 % y 1,5 %, que es una cantidad suficiente de hialuronato de sodio para garantizar que el ácido hialurónico reticulado que contiene fitocannabinoides tenga una consistencia homogénea.

El medio de solución acuosa usado en la etapa i) se selecciona entre:

- agua,

- un tampón que consiste en NaCl, en una concentración entre 0,2 y 8 %, y Na2HPO4-12H2O, en una concentración entre 0,01 % y 10 %, y NaH2PO4'2H2O, en una concentración entre 0,001 % y 10 %,

- un tampón que consiste en citrato de sodio deshidratado o un derivado del citrato de sodio, en una concentración entre 0,002 y 2,5 %, y ácido cítrico (hidratado o deshidratado), en una concentración entre 0,002 % y 2 %, o - un tampón que consiste en ácido acético, en una concentración entre 0,0005 % y 0,1 %, y un derivado de acetato de sodio, en una concentración entre 0,005 % y 0,5 %.

En una realización preferente, la solución acuosa es un tampón que consiste en un 1,6 % de NaCl, un 0,12 % de Na2HPO4-12H2O y un 0,01 % de NaH2PO4'2H2O.

En una realización particular, en la etapa ii), se disuelve un extracto de cannabis sativa que contiene fitocannabinoides en una solución que contiene una combinación de citrato/lactato/linoleato/oleato de glicerilo y poligliceril-2 oleato, como tensioactivo no iónico, y un disolvente apropiado, preferentemente propilenglicol. En estas condiciones, se forman nanocápsulas que contienen cannabinoides.

En ocasiones, durante el procedimiento de reticulación, el pH de la formulación puede estar fuera de los intervalos deseados (6 y 8), y entonces, es necesario ajustar el pH después de la reticulación, en el que.

- Si el pH alcanzado en la reticulación es demasiado ácido, se procede a la etapa de ajuste del pH mediante la adición de una solución 0,25 M de hidróxido de sodio (NaOH) hasta alcanzar el pH requerido, o

- Si el pH alcanzado en la etapa d) es básico, se procede a la etapa de ajuste del pH mediante la adición de una solución 0,25 M de ácido clorhídrico (HCl) hasta alcanzar el pH requerido.

La etapa de reticulación implica la adición de un derivado de carbodiimida. En una realización particular, el derivado de carbodiimida se define mediante la fórmula:

R1-N=C=N-R2

en la que R1 puede ser igual a R2. R1 y R2 se seleccionan entre ciclohexilo, isopropilo, 3-dimetilaminopropilo, etilo, (2-morfolinoetilo). La carbodiimida puede presentarse en forma de hidrocloruro o de metoxi-p-toluenosulfonato.

En lugar de un derivado de carbodiimida, se pueden usar otros agentes de reticulación tales como 1,1'-carbonildiimidazol, carbonildi-benzimidazol, carbonildi-1,2,4-triazol y carbonildibenzotriazol.

El procedimiento de reticulación podría requerir la adición de una molécula activa formadora de ésteres. Ejemplos de moléculas activas formadoras de ésteres son N-hidroxisuccinimida (NHS), sulfo-N-hidroxisuccinimida (sulfo-NHS), hidroxibenzotriazol (HOBt), hexafluorofosfato de benzotriazol tetrametiluronio (HBTU) y hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio 3-óxido, también llamado hexafluorofosfato de azabenzotriazol tetrametiluranio (HATU). En una realización preferente, se usa sulfo-N-hidroxisuccinimida (sulfo-NHS).

La reticulación también se realiza mediante la adición de derivados de dihidrazida a la mezcla de reticulación, que contiene derivados de carbodiimida, así como moléculas activas formadoras de ésteres. Ejemplos de derivados de dihidrazida son la dihidrazida del ácido adípico, la dihidrazida del ácido pimélico, la dihidrazida del ácido malónico, la dihidrazida del ácido etilmalónico, la dihidrazida de carbonilo, la oxalildihidrazida y la dihidrazida succínica.

La formulación resultante, según los procedimientos de la invención, presenta una concentración de ácido hialurónico entre 0,1 y 3 % (p/p), y preferentemente entre 0,5 % y 2,5 % (p/p) y, lo más preferentemente, entre 0,75 y 1,5 % (p/p), y de reactivos de reticulación en una concentración entre 0,000025 M y 0,5 M, y preferentemente entre 0,05 M y 0,3 M y, lo más preferentemente, entre 0,1 y 0,2 M. En una realización particular, para el clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida, las concentraciones en peso están entre 0,0004 % y 8 % (p/p), y preferentemente entre 0,8 % y 5 % (p/p), y, lo más preferentemente, entre 1,6 y 3,2 % (p/p) con un pH entre 4.5 y 8, que son compatibles con un uso inyectable.

Tras la etapa de reticulación, la formulación resultante puede esterilizarse opcionalmente, como en el caso de las formulaciones inyectables. El procedimiento de esterilización puede realizarse mediante esterilización por vapor en un autoclave a una temperatura que varía de 120 °C a 140 °C. En particular, la esterilización puede realizarse a 121 °C durante 15 a 20 minutos, preferentemente 15 min, para obtener un F0 > 15 (valor de esterilización). También se usa calor seco para lograr la esterilización.

La esterilización puede realizarse por otros medios, tales como la esterilización por radiación, incluyendo UV, rayos X, rayos gamma y partículas beta (electrones).

La esterilización también puede realizarse por medios químicos, incluyendo óxido de etileno, dióxido de carbono, gas ozono, peróxido de hidrógeno, dióxido de nitrógeno, soluciones de glutaraldehído y formaldehído, ftalaldehído y ácido peracético.

Los procedimientos de la presente invención permiten escalabilidad, de modo que el procedimiento de fabricación puede realizarse a nivel industrial (fabricación). El procedimiento proporciona una red que incluye partículas coloides o nanocápsulas distribuidas homogéneamente y proporciona un sistema de liberación controlada que puede optimizarse mediante:

- Ácido hialurónico con diferente peso molecular,

- Proporción de moléculas de ácido hialurónico con diferente peso molecular,

- Proporción de ácido hialurónico/agua,

- Grado de reticulación indicado por el porcentaje de reticulación,

- Agente de reticulación,

- % de partículas coloides y nanocápsulas,

- % de fitocannabinoides,

- Carga de partículas coloides con diferente concentración (%) de fitocannabinoides,

- Tipo de fitocannabinoide y combinación de los mismos,

- Modulación de las curvas de liberación controlada de fitocannabinoides, y

- Esterilización terminal.

Las composiciones de la invención son adecuadas para aplicaciones farmacéuticas, cosméticas y nutracéuticas.

Por lo tanto, en otro aspecto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende las formulaciones de fitocannabinoides de la presente invención y a sus usos en diferentes aplicaciones farmacéuticas o médicas. En particular, la presente invención se refiere a esta composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias articulares, aprovechando el efecto viscosuplementador del ácido hialurónico y las propiedades antiinflamatorias del ácido hialurónico y de los cannabinoides, especialmente el cannabidiol.

La invención también se refiere a una composición farmacéutica que comprende las formulaciones de fitocannabinoides de la presente invención para su uso en aplicaciones de relleno tisular. Específicamente, la composición farmacéutica de la invención proporciona composiciones estériles de relleno de tejidos blandos para el aumento y/o la reparación de tejidos blandos y materiales queratínicos, como la piel.

Estas composiciones también pueden contener anestésicos locales, tales como la lidocaína.

La presente invención también se refiere a una composición cosmética que comprende el sistema de liberación controlada de la presente invención y a su uso no terapéutico en aplicaciones cosméticas. Específicamente, la composición cosmética de la invención proporciona composiciones con efectos relajantes, calmantes e hidratantes para la piel. Finalmente, la composición de la invención también se refiere a una composición nutracéutica que comprende el sistema de liberación controlada de la presente invención y a su uso en aplicaciones nutracéuticas. Específicamente, las composiciones nutracéuticas de la invención son útiles para la relajación, la calma y la hidratación de la piel, y para mejorar el bienestar del cuerpo humano.

Las composiciones de la invención pueden administrarse por vía tópica. Las composiciones tópicas adecuadas pueden ser geles, ungüentos, cremas, lociones, gotas, etc. Las composiciones tópicas obtenidas mediante los procedimientos de la invención no requieren una etapa de esterilización tras la etapa de reticulación.

La composición de la invención también puede administrarse por vía sistémica. Esto incluye la administración de la composición de fitocannabinoides mediante inyección, en la que la inyección es intravenosa, intraarticular, intramuscular, intradérmica, intraespinal, intraperitoneal, subcutánea, en bolo o una administración continua.

La composición de la invención también puede administrarse por vía oral, como geles comestibles en el caso de composiciones nutracéuticas.

Las composiciones de la invención pueden administrarse, incluso en un dispositivo médico. En un ejemplo, la composición puede extraerse con una jeringa para un medio de inyección a base de agua.

Ejemplos

Técnicas Analíticas:

Reometría

La consistencia del gel se caracterizó a 25 °C mediante la medición reológica de los módulos de elasticidad (G') y la viscosidad (G") en función de la frecuencia (desde 10 Hz a 0,01 Hz) usando una deformación controlada (1 %) en un reómetro RA 550 (TA Instruments), una geometría de cono y placa de 40 mm de diámetro y un truncamiento (brecha) de 115 |jm.

Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)

Esta técnica se utilizó para determinar el contenido total de fitocannabinoides (CBG/CBD) en las formulaciones y la cantidad de CBG/CBD encapsulada en las partículas coloidales.

El análisis de la cantidad total de CBG/CBD en el sistema se realizó mediante dilución directa de las muestras en metanol, seguida de filtración a través de filtros de PVDF de 0,22 pm desechables y posterior inyección en el equipo de cromatografía.

Se desarrolló un procedimiento analítico HPLC-DAD, según latabla 1, para cuantificar la concentración de CBG y CBD en las formulaciones. Dicho procedimiento es común tanto para CBG como para CBD.

Tabla 1. Procedimiento cromatográfico para la cuantificación de CBG y CBD.

Sistema HPLC (serie 1260, Agilent Technologies)

Columna Zorbax Eclipse XCB-C18 (150 * 4,6 mm, partículas de 5 pm, Agilent)

Fase móvil Canal A: Formiato de amonio 10 mM (pH 3,6, con ácido fórmico).

Canal B: Acetonitrilo.

Gradiente 0-4 min: 52-80 % de B; 4-9,5 min: 80 % de B a 1 ml/min (después del análisis = 2 min) Detector DAD (210, 228 y 270 nm)

En este procedimiento se preparó una solución madre de 1000 mg/l de CBG/CBD en etanol, a partir de la cual se realizaron diluciones estándar de 1, 2, 3, 4, 5 y 6 mg/l de CBG/CBD en etanol.

Dispersión Dinámica de Luz (DLS)

Las mediciones de DLS se realizaron diluyendo 70 pL de las muestras en 900 pL de agua, seguido de un análisis en el equipo de DLS con un ángulo de medición de 173°. El valor del atenuador, la posición de medición y el número de conteo se emplearon como indicadores de calidad de la medición (tabla 2).

Tabla 2: Parámetros del procedimiento de análisis de DLS para la caracterización de CBG vehiculizado.

Dispersante Agua

Temperatura

Viscosidad 0,8872 cP

RI 1,330

Constante dieléctrica 78,5

Modelo de ajuste Smoluchowski

Tiempo de equilibrio 120 s

Tiempo de celda Celda capilar DTS1070

Ángulo de medición 173°

Número de mediciones por muestra 3

Ejemplo 1.

Se disolvió 1 g de ácido hialurónico de bajo peso molecular (PM 0,5-0,75 MDa) en 99 ml de tampón de solución salina de fosfato (pH 7,4) durante 12 horas. Se agregaron 0,270 g de poli(etilenglicol)a-poli(propilenglicol)b-bloquepoli(etilenglicol)a siendo a = 80, b = 27 y 0,270 g de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloquepoli(etilenglicol)a siendo a = 141, b = 44 con una espátula a 5,40 g de solución de ácido hialurónico. La solución resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la solución completa de los polímeros. A continuación, se agregó una solución de fitocannabinoide (64 mg de CBD, 64 mg de CBG o una mezcla de 32 mg de CBG 32 mg de CBD) en 100 pl de un disolvente orgánico (metanol, isopropanol o propilenglicol) a la solución de ácido hialurónico/poli(etilenglicol)a-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a. La solución resultante se agitó mecánicamente durante 48 horas. A esta solución se le agregaron 230 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 65 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la disolución completa de los reactivos.

Ejemplo 2.

Se repitió el experimento del ejemplo 1 agregando un nuevo componente: dihidrazida adípica, a la etapa de reticulación. El protocolo se modificó de la siguiente manera:

Se agregaron 230 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 65 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente durante 1 hora. Posteriormente, se agregaron 262 mg de dihidrazida adípica y se agitó la mezcla resultante hasta alcanzar la disolución completa de la dihidrazida. La mezcla resultante se dejó reticular durante 24 h.

Ejemplo 3

Se modificó el experimento del ejemplo 1 para usar la mitad de EDC*HCl y de sulfo-NHS en la etapa de reticulación. El protocolo se adaptó de la siguiente manera:

Se agregaron 115 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 33 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la disolución completa de los reactivos.

Ejemplo 4

Se disolvieron 0,9 g de ácido hialurónico de bajo peso molecular (PM 0,5 - 0,75 ■ 106 Da) y 0,1 g de ácido hialurónico de alto peso molecular (PM 1,9 - 2,2 ■ 106 Da) en 99 ml de tampón de solución salina de fosfato (pH 7,4) durante 12 horas. Se agregaron 0,270 g poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a, siendo a = 80, b = 27, y 0,270 g de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a, siendo a = 141 b = 44, con una espátula, a 5,40 g de solución de ácido hialurónico. La solución resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la solución completa de los polímeros. A continuación, se agregó una solución de fitocannabinoide (96 mg de CBD, 96 mg de CBG o una mezcla de 48 mg de CBG 48 mg de CBD) en 150 pl de disolvente orgánico (metanol, isopropanol o propilenglicol) a la solución de ácido hialurónico/poli(etilenglicol)a-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a. La solución resultante se agitó mecánicamente durante 48 horas. A esta solución se le agregaron 230 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 65 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la disolución completa de los reactivos.

Ejemplo 5

El experimento del ejemplo 4 se modificó para usar la mitad de EDC*HCl y de sulfo-NHS en la etapa de reticulación. El protocolo se adaptó de la siguiente manera:

Ejemplo 6

Se disolvieron 0,5 g de ácido hialurónico de bajo peso molecular (PM 0,5 - 0,75 ■ 106 Da) y 0,5 g de ácido hialurónico de alto peso molecular (PM 1,9 - 2,2 ■ 106 Da) en 99 ml de tampón de solución salina de fosfato (pH 7,4) durante 12 horas. Se agregaron 0,270 g de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a siendo a = 80, b = 27 y 0,270 g de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a siendo a = 141, b = 44 a 5,40 g de solución de ácido hialurónico. La solución resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la solución completa de los polímeros. A continuación, se agregó una solución de fitocannabinoide (96 mg de CBD, 96 mg de CBG o una mezcla de 48 mg de CBG 48 mg de CBD) en 150 pl de disolvente orgánico (metanol, isopropanol o propilenglicol) a la solución de ácido hialurónico/poli(etilenglicol)a-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a. La solución resultante se agitó mecánicamente durante 48 horas. A esta solución se le agregaron 230 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 65 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la disolución completa de los reactivos.

Ejemplo 7

El experimento del ejemplo 6 se modificó para usar la mitad de EDC*HCl y de sulfo-NHS en la etapa de reticulación. El protocolo se adaptó de la siguiente manera:

Ejemplo 8

Se disolvió 1 g de ácido hialurónico de alto peso molecular (PM 1,9 - 2,2 ■ 106 Da) en 99 ml de tampón de solución salina de fosfato (pH 7,4) durante 12 horas. Se agregaron 0,270 g de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)bbloque-poli(etilenglicol)a, siendo a = 80, b = 27, y 0,270 g de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloquepoli(etilenglicol)a, siendo a = 141 b = 44, con una espátula, a 5,40 g de solución de ácido hialurónico. La solución resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la solución completa de los polímeros. A continuación, se agregó una solución de fitocannabinoide (64 mg de CBD, 64 mg de CBG o una mezcla de 32 mg de CBG 32 mg de CBD) en 100 |jl de disolvente orgánico (metanol, isopropanol o propilenglicol) a la solución de ácido hialurónico/poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a. La solución resultante se agitó mecánicamente durante 48 horas. A esta solución se le agregaron 230 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 65 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la disolución completa de los reactivos.

Ejemplo 9.

Se disolvió 1 g de ácido hialurónico de bajo peso molecular (PM 0,5-0,75 MDa) en 10 ml de tampón de solución salina de fosfato (pH 7,4) durante 12 horas. A continuación, se agregaron 0,60 gramos de cápsulas Mc Beauty Science Nano CBD (5 %)a 5,4 g de la solución de ácido hialurónico. La solución resultante se agitó mecánicamente durante 48 horas. A esta solución se le agregaron 230 mg de clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (EDC*HCl) y 65 mg de sal sódica de N-hidroxisulfosuccinimida (sulfo-NHS) con una espátula. La mezcla resultante se agitó mecánicamente hasta alcanzar la disolución completa de los reactivos. La mezcla resultante se dejó reticular durante 24 horas.

Nombre INCI: Agua (y) Extracto de flor/hoja/tallo de Cannabis Sativa (y) Propilenglicol (y) Citrato/Lactato/Linoleato/Oleato de Glicerilo (y) Poligliceril-2-Oleato

No. CAS: 7732-18-5, 57-55-6, 9174-23-9, 9007-48-1

Composición (según la FDA):

A: > 50 % de agua

C: 10-25 % de extracto de flor/hoja/tallo de Cannabis Sativa C: 10-25 % de propilenglicol

4,8-5,2 % de cannabidiol

E: 1-5 % de citrato/lactato/linoleato/oleato de glicerilo

E: 1-5 % de poligliceril-2 oleato

Ejemplo 10

Se repitió el experimento del ejemplo 9 agregando un nuevo componente: dihidrazida adípica, a la etapa de reticulación. El protocolo se modificó de la siguiente manera:

Ejemplo 11. Esterilización por vapor.

Se cargaron manualmente 1,2 g del material de los ejemplos 1-9 en el cuerpo de inyección con tapa de goma de una jeringa de vidrio de 1,5 ml. El vástago del émbolo se insertó en el cuerpo de inyección cargado y la jeringa resultante se sometió a esterilización por vapor a 121 °C durante 15 minutos.

Ejemplo 12. Experimento de liberación controlada.

Se introdujeron 2,59 gramos del material con CBD del ejemplo 1 en una membrana que permite el paso del cannabinoide vehiculizado. La membrana cargada se puso en contacto con 29,91 g de solución salina tamponada con fosfato. La solución resultante se denominó solución de liberación controlada. En diferentes momentos, se extrajo 1 ml de solución de la solución de liberación controlada y el contenido se analizó mediante HPLC. Por cada 1 ml de solución de liberación controlada extraída para el análisis por HPLC, se agregó otro 1 ml de solución salina tamponada con fosfato a la solución de liberación controlada para mantener el volumen constante (Fig. 1). La figura 1 muestra la liberación controlada de partículas coloidales que contienen CBD en un medio tampón de fosfato. La concentración de CBD analizada es acumulativa, lo que significa que la concentración se refiere a la concentración real de CBD en la solución de liberación controlada, y alcanza un valor máximo de 847 mg/l tras 120 h del experimento de liberación. El 95 % de la liberación de CBD se produce en las primeras 24 h del experimento.

Ejemplo 13. Experimento de liberación controlada.

Se introdujeron 2,45 gramos del material con CBG del ejemplo 1 en una membrana que permite el paso del cannabinoide vehiculizado. La membrana cargada se puso en contacto con 29,98 g de solución salina tamponada con fosfato. La solución resultante se denominó solución de liberación controlada. En diferentes momentos, se extrajo 1 ml de la solución de liberación controlada y el contenido se analizó mediante HPLC. Por cada 1 ml de solución de liberación controlada extraído para el análisis por HPLC, se agregó otro 1 ml de solución salina tamponada con fosfato a la solución de liberación controlada para mantener el volumen constante (Fig. 2). La figura 2 muestra la liberación controlada de partículas coloidales que contienen CBG en un medio tampón de fosfato. La concentración de CBG analizada es acumulativa, lo que significa que la concentración se refiere a la concentración real de CBG en la solución de liberación controlada y alcanza un valor máximo de 680 mg/l tras 120 h del experimento de liberación. El 96 % de la liberación de CBD se produce en las primeras 24 h del experimento.

Ejemplo 14. Experimento de liberación controlada.

Se introdujeron 2,43 gramos del material con CBD y CBG del ejemplo 5 en una membrana que permite el paso del cannabinoide vehiculizado. La membrana cargada se puso en contacto con 28,82 g de solución salina tamponada con fosfato. La solución resultante se denominó solución de liberación controlada. En diferentes momentos, se extrajo 1 ml de solución de la solución de liberación controlada y el contenido se analizó mediante HPLC. Por cada 1 ml de solución de liberación controlada extraída para el análisis por HPLC, se agregó otro 1 ml de solución salina tamponada con fosfato a la solución de liberación controlada para mantener el volumen constante (Fig. 3). La figura 3 muestra la liberación controlada de partículas coloidales que contienen una mezcla de CBG CBD en un medio tampón de fosfato. La concentración de cannabinoides analizada es acumulativa, lo que significa que la concentración se refiere a la concentración real de cannabinoides en la solución de liberación controlada y alcanza un valor máximo de 235 mg/l tras 6 h del experimento de liberación. El 98 % de la liberación máxima de CBD se produce tras 2 h del experimento.

Ejemplo 15. Experimento de liberación controlada.

Se introdujeron 2,68 gramos del material con CBD y CBG del ejemplo 7 en una membrana que permite el paso del cannabinoide vehiculizado. La membrana cargada se puso en contacto con 29,33 g de solución salina tamponada con fosfato. La solución resultante se denominó solución de liberación controlada. En diferentes momentos, se extrajo 1 ml de solución de la solución de liberación controlada y el contenido se analizó mediante HPLC. Por cada 1 ml de solución de liberación controlada extraído para el análisis por HPLC, se agregó otro 1 ml de solución salina tamponada con fosfato a la solución de liberación controlada para mantener el volumen constante (Fig. 4). La figura 4 muestra la liberación controlada de partículas coloidales que contienen una mezcla de CBG+CBD en un medio tampón de fosfato. La concentración de cannabinoides analizada es acumulativa, lo que significa que la concentración se refiere a la concentración real de cannabinoides en la solución de liberación controlada, y alcanza un valor máximo de 255 mg/l tras 24 h del experimento de liberación. El 79 % de la liberación máxima de CBD se produce tras 6 h del experimento de liberación.

Ejemplo 16. Caracterización fisicoquímica y reológica de formulaciones esterilizadas

(continuación)

- Los datos del ejemplo 16 muestran que: Los cannabinoides o las mezclas de los mismos se incorporan en partículas coloidales basadas en tensioactivos no iónicos. Tales partículas están incrustadas en una matriz de derivados reticulados de ácido hialurónico.

- El tamaño de las partículas coloidales está bien definido y presenta índices de polidispersidad (PDI) de hasta 0,285.

Estos valores de PDI son típicos de poblaciones de partículas de tamaño homogéneo.

- Los datos del potencial zeta con valores absolutos de hasta 47 mV indican que las partículas coloidales que contienen cannabinoides son muy estables y presentan baja tendencia a la agregación.

- G' (módulo elástico) es mayor que G" (módulo viscoso), lo que indica que el comportamiento elástico de la composición predomina sobre el viscoso y demuestra que los derivados del ácido hialurónico están químicamente reticulados (Stefano Santoro, Luisa Russo, Vincenzo Argenzio, Assunta Borzacchiello. Rheological properties of cross-linked hyaluronic acid dermal fillers. J. Appl Biomater Biomech 2011; Vol. 9 no. 2, 127-136).

- El uso de menores cantidades de agentes de reticulación da como resultado una formulación con valores de G' y G" más altos (ejemplo 3 vs. ejemplo 1; ejemplo 5 vs. ejemplo 4; ejemplo 7 vs. ejemplo 6).

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un sistema multimatriz de liberación controlada de formulaciones de fitocannabinoides solubles en medio acuoso, que comprende una red polimérica reticulada que contiene fitocannabinoides vehiculizados mediante tensioactivos no iónicos. en el que los fitocannabinoides se seleccionan entre un fitocannabinoide o una mezcla de fitocannabinoides, en el que el polímero se selecciona entre ácido hialurónico o una sal del mismo, en el que el pH de las composiciones varía entre 6 y 8, y en el que la proporción en peso de fitocannabinoide/polímero es de 50:1 a 1:50, preferentemente de 20:1 a 1:20, y más preferentemente de 10:1 a 1:10, y lo más preferentemente de 2:1 a 1:2, y en el que la proporción en peso de fitocannabinoide/tensioactivo no iónico es de 1:30 a 1:1, preferentemente de 1:9 a 1:1.
2. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 1, en el que los fitocannabinoides se seleccionan entre cannabidiol, cannabigerol o una mezcla de los mismos.
3. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 1 o 2, en el que el tensioactivo no iónico es al menos un derivado de poli(etilenglicol)-bloque-poli(propilenglicol)-bloque-poli(etilenglicol), definido según la fórmula:

en la que a es un número entero de 10 a 150 y b es un número entero de 15 a 65.
4. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 3, en el que el tensioactivo no iónico comprende dos derivados de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol).
5. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 4, en el que, para un derivado, a es 80 y b es 27, y, para el otro derivado, a es 141 y b es 44.
6. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 4, en el que, para un derivado, a es 64 y b es 34, y, para el otro derivado, a es 12 y b es 20.
7. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 1, en el que el fitocannabinoide es un extracto de cannabis sativa.
8. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 7, en el que el tensioactivo no iónico es una combinación de citrato/lactato/linoleato/oleato de glicerilo y poligliceril-2 oleato.
9. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 1, en el que el polímero es una sal de ácido hialurónico.
10. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 9, en el que la sal de ácido hialurónico es de bajo peso molecular (M), siendo M < 0,75106 Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular (M), siendo M < 2 ,2106 Da, o una mezcla de las mismas.
11. Un sistema multimatriz de liberación controlada según la reivindicación 10, en el que la sal de ácido hialurónico es de bajo peso molecular, siendo 0,5106 Da < M < 0,75106 Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular (M), siendo 1,9106 < M < 2,2106 Da, o una mezcla de las mismas.
12. Un sistema multimatriz de liberación controlada según cualquiera de las reivindicaciones 9-11, en el que la sal de ácido hialurónico es hialuronato de sodio.
13. Un procedimiento de producción de un sistema multimatriz de liberación controlada de formulaciones de fitocannabinoides solubles en medio acuoso, según la reivindicación 1, que comprende las etapas de: a) Obtener una solución mezclando ácido hialurónico, o una sal del mismo, previamente disuelto en una solución acuosa, y un tensioactivo no iónico. b) Obtener una solución de un fitocannabinoide, o una mezcla de fitocannabinoides, mediante la disolución de dichos fitocannabinoides en un disolvente apropiado. c) Agregar la solución obtenida en b) a la solución obtenida en a), y d) Reticular la solución resultante obtenida en c) en presencia de un agente de reticulación.
14. El procedimiento según la reivindicación 13, en el que los fitocannabinoides usados en la etapa b) se seleccionan entre cannabidiol, cannabigerol o una mezcla de los mismos.
15. Un procedimiento, según la reivindicación 13 o 14, en el que el tensioactivo no iónico usado en la etapa a) es al menos un derivado de poli(etilenglicol)-bloque-poli(propMenglicol)-bloque-poli(etilenglicol), definido según la fórmula:

en la que a es un número entero de 10 a 150 y b es un número entero de 15 a 65.
16. El procedimiento según la reivindicación 15, en el que el tensioactivo no iónico comprende dos derivados de poli(etilenglicol)a-bloque-poli(propilenglicol)b-bloque-poli(etilenglicol)a.
17. El procedimiento según la reivindicación 16, en el que para un derivado, a es 80 y b es 27, y para el otro derivado, a es 141 y b es 44.
18. El procedimiento según la reivindicación 16, en el que para un derivado, a es 64 y b es 34, y para el otro derivado, a es 12 y b es 20.
19. Un procedimiento de producción de un sistema multimatriz de liberación controlada de formulaciones de fitocannabinoides solubles en medio acuoso, según la reivindicación 1, que comprende las etapas de: i. Obtener una solución mediante la disolución de ácido hialurónico, o una sal del mismo, en una solución acuosa. ii. Obtener una solución de un fitocannabinoide, o una mezcla de fitocannabinoides, mediante la disolución de dichos fitocannabinoides en una solución que contiene un tensioactivo no iónico y un disolvente apropiado. iii. Agregar la solución obtenida en ii) a la solución obtenida en i), y iv. Reticular la solución resultante obtenida en iii) en presencia de un agente de reticulación.
20. El procedimiento según la reivindicación 19, en el que en la etapa i) se usa un extracto de cannabis sativa que contiene fitocannabinoides.
21. El procedimiento según la reivindicación 20, en el que el tensioactivo no iónico usado en la etapa ii) es citrato/lactato/linoleato/oleato de glicerilo y poligliceril-2 oleato.
22. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 13-21, que comprende además una etapa de ajuste del pH después de la etapa de reticulación, en el que: - cuando el pH alcanzado después de la etapa de reticulación es ácido, se procede a la etapa de ajuste del pH mediante la adición de una solución 0,25 M de hidróxido de sodio (NaOH) hasta alcanzar el pH requerido, o - cuando el pH alcanzado en la etapa d) es básico, se procede a la etapa de ajuste del pH mediante la adición de una solución 0,25 M de ácido clorhídrico (HCl) hasta alcanzar el pH requerido.
23. Procedimiento según las reivindicaciones 13-22, en el que el polímero es una sal de ácido hialurónico de bajo peso molecular (M), siendo M < 0,75106 Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular (M), siendo M < 2,2-106 Da, o una mezcla de las mismas.
24. Procedimiento según la reivindicación 23, en el que el polímero es una sal de ácido hialurónico de bajo peso molecular, siendo 0,5106 Da < M < 0,75106 Da, o una sal de ácido hialurónico de alto peso molecular (M), siendo 1,9106 < M < 2,2106 Da, o una mezcla de las mismas.
25. Procedimiento según las reivindicaciones 23 o 24, en el que la sal de ácido hialurónico es hialuronato de sodio.
26. Procedimiento según la reivindicación 25, en el que la solución de polímero comprende hialuronato de sodio de bajo peso molecular y/o de alto peso molecular en una concentración entre 0,1 y 3 % (p/p), y preferentemente en una concentración entre 0,5 % y 2,5 % (p/p), y más preferentemente en una concentración entre 0,75 y 1,5 % (p/p).
27. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 13-26, en el que el medio de solución acuosa usado en las etapas a) o i) se selecciona entre: - agua, - un tampón que consiste en NaCl, en una concentración entre 0,2 y 8 %, y Na2HPO4'12H2O, en una concentración entre 0,01 % y 10 %, y NaH2PO4'2H2O, en una concentración entre 0,001 % y 10 %, o - un tampón que consiste en citrato de sodio deshidratado o un derivado del citrato de sodio, en una concentración entre 0,002 y 2,5 %, y ácido cítrico (hidratado o deshidratado), en una concentración entre 0,002 % y 2 %, y - un tampón que consiste en ácido acético, en una concentración entre 0,0005%y 0,1 %, y un derivado de acetato de sodio, en una concentración entre 0,005 % y 0,5 %.
28. El procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1-27, en el que el disolvente usado para disolver el cannabinoide se define por la fórmula:

en la que R1-R4 se seleccionan independientemente entre H, OH, CH2OH, CH3, CH2CH3, C(O)CH3, C(O)OCH2CH3, CH2C(O)CH2CH3.
29. El procedimiento según la reivindicación 28, en el que el disolvente se selecciona del grupo que consiste en metanol, 1-propanol e isómeros de los mismos, etilenglicol, propilenglicol y mezclas de los mismos.
30. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 13-29, en el que el agente de reticulación se selecciona de entre un derivado de carbodiimida, un derivado de carbonil imidazol, un derivado de carbonil benzotriazol, un derivado de carbonil triazol o mezclas de los mismos.
31. El procedimiento según la reivindicación 30, en el que en la etapa de reticulación también está presente una molécula activa formadora de ésteres, preferentemente sulfo hidroxisuccinimida (sulfo-NHS).
32. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 30-31, en el que en la etapa de reticulación d) también está presente un derivado de dihidrazida.
33. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 13-32, en el que, tras la etapa de reticulación, se lleva a cabo una etapa de esterilización.
34. Procedimiento, según la reivindicación 33, en el que el procedimiento de esterilización se realiza mediante esterilización por vapor en un autoclave a una temperatura que varía de 120 °C a 140 °C, preferentemente a 121 °C, durante 15-20 minutos.
35. Una composición farmacéutica, cosmética o nutracéutica que comprende la formulación del sistema multimatriz de liberación controlada de cannabinoides, según una cualquiera de las reivindicaciones 1-12.
36. Una composición farmacéutica, según la reivindicación 35, para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias articulares.
37. Una composición farmacéutica según la reivindicación 35, para uso terapéutico en el aumento y/o reparación de tejidos blandos y materiales queratínicos.
38. Un uso no terapéutico de la composición cosmética o nutracéutica según la reivindicación 35 para la relajación, la calma y la hidratación de la piel, y para la mejora del bienestar del cuerpo humano.