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ES3027568T3 - Compositions and methods that modulate bacteria in a companion animal - Google Patents

Compositions and methods that modulate bacteria in a companion animal Download PDF

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ES3027568T3
ES3027568T3 ES17825615T ES17825615T ES3027568T3 ES 3027568 T3 ES3027568 T3 ES 3027568T3 ES 17825615 T ES17825615 T ES 17825615T ES 17825615 T ES17825615 T ES 17825615T ES 3027568 T3 ES3027568 T3 ES 3027568T3
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ES
Spain
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bifidobacterium
lactobacillus
metabolite
metabolites
modulating
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ES17825615T
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English (en)
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Rondo P Middleton
Brian M Zanghi
Serge Andre Dominique Rezzi
Steven S Hannah
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Societe des Produits Nestle SA
Nestle SA
Original Assignee
Societe des Produits Nestle SA
Nestle SA
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Abstract

Una bacteria específica en un animal de compañía puede mejorarse ajustando su dieta para aumentar o disminuir la cantidad de un compuesto que modula positiva o negativamente dicho tipo de bacteria. El tipo específico de bacteria puede ser Bifidobacterium, Lactobacillus o Clostridium perfringens. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Composiciones y métodos que modulan las bacterias en un animal de compañía
Antecedentes
Los probióticos se han utilizado para modular la microbiota en animales, así como para proporcionar diversos beneficios para la salud al animal. Los probióticos se pueden definir como microorganismos vivos que proporcionan un beneficio para la salud al huésped cuando se administran en cantidades adecuadas. Se ha planteado la teoría de que los probióticos pueden impartir sus beneficiosas efectos en la salud ya sea mediante el incremento de la resistencia a la colonización de las superficies mucosas por bacterias patógenas (resistencia a la colonización), ya sea mediante el ejercicio de un efecto directo sobre el tejido linfoide asociado al intestino (TLAI) que promueve la producción de inmunomoduladores.
Los probióticos se han utilizado para modular el curso de una variedad de enfermedades infecciosas en medicina humana. En contraste, se han llevado a cabo pocos estudios en medicina veterinaria. La mayoría de los estudios veterinarios se han realizado en animales grandes, en los que se han utilizado probióticos para intentar alterar la eliminación de patógenos fecales o para mejorar parámetros de producción, tales como la ganancia de peso, la tasa de conversión del alimento y la reducción de la mortalidad. Aunque pueden proporcionarse beneficios, la adición de probióticos puede provocar consecuencias no intencionadas, entre ellas malestar digestivo, sobreestimulación del sistema inmunitario y transferencia de genes.
El documento n.° WO 2011/011472 se refiere a un sistema de alimentación para un animal de compañía que incluye una pluralidad de paquetes de alimento para animal de compañía, en donde la cantidad de alimento de animal de compañía correspondiente a una sola comida para un animal de compañía puede seleccionarse, y en donde la cantidad de alimento para animal de compañía se formula para aliviar o controlar un trastorno en un animal de compañía.
Descripción resumida
La presente exposición se refiere de manera general a composiciones de alimentos para mascotas, a métodos para mejorar el beneficio nutricional de un alimento para mascotas, y a métodos para modular las bacterias de por lo menos uno deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensen un animal de compañía. Específicamente, la presente exposición se refiere a metabolitos para modular por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía.
Los presentes inventores han desarrollado un modelo predictivo deBifidobacterium, Lactobacillus,yClostridium perfringensmediante la identificación de compuestos metabolitos que están correlacionados conBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.Se utilizó un estudio muy controlado para minimizar otros factores externos mediante la utilización de múltiples perros alimentados con la misma dieta. Se desarrolló un modelo de validación mediante la alimentación de diferentes niveles de los compuestos identificados (a través de un cambio dietético) a un grupo de perros y la medición de los cambios en la bacteria correspondiente.
De acuerdo con lo anteriormente expuesto, en una realización general, la presente exposición proporciona una composición para mascotas que comprende: proteínas, carbohidratos, grasas, fibra y por lo menos seis metabolitos diferentes para modular individualmente la cantidad deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía, en donde el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidrocolato, quenodesoxicolato, 3-deshidrocolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos, en donde el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos; en donde el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos. En una realización, la composición de alimento para mascotas puede proporcionar por lo menos un incremento de 5 % o una reducción de 5 % en la cantidad deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringenspresente en el animal de compañía. En un aspecto, la comida para mascotas puede proporcionar un incremento. En otro aspecto, el alimento para mascotas puede comprender una reducción.
La presente exposición proporciona, además, métodos no terapéuticos para modular la cantidad deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensen un animal de compañía; y composiciones de alimento para mascotas para la utilización en un método terapéutico para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensen un animal de compañía.
Una ventaja de uno o más realizaciones proporcionadas por la presente exposición es incrementar o reducirBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía mediante el ajuste de la dieta del animal para incrementar la cantidad de un compuesto que modula positivamente la bacteria específica o para reducir la cantidad de un compuesto que modula negativamente la bacteria específica.
En la presente memoria se describen características y ventajas adicionales, que resultarán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada.
Descripción detallada
Definiciones
Tal como se utiliza en la presente exposición y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una” y “el” o “la” incluyen los referentes plurales, a menos que el contexto indique claramente lo contrario. De esta manera, por ejemplo, la referencia a "un componente" o a "la composición" incluye dos o más composiciones. El término "y/o" utilizado en el contexto de "X y/o Y" debe interpretarse como "X," o "Y," o "X e Y." En donde se utiliza en la presente memoria, los términos "ejemplo" y "tal como," particularmente cuando les sigue una lista de términos, se proporcionan a título meramente de ejemplo y no ilustrativo, y no son exclusivos ni exhaustivos.
Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "aproximadamente" se entiende que se refiere a números en un intervalo de números, por ejemplo, el intervalo de -10 % a 10 % del número de referencia, dentro de -5 % a 5 % del número de referencia, o en un aspecto, dentro de -1 % a 1 % del número de referencia, y en un aspecto específico, dentro de -0,1 % a 0,1 % del número de referencia. Además, todos los intervalos numéricos indicados en la presente memoria debe entenderse que incluyen todos los números, ya sean enteros o fraccionarios, dentro del intervalo. Además, estos intervalos numéricos debe interpretarse que proporcionan respaldo a una reivindicación referida a cualquier número o subconjunto de números en dicho intervalo. Por ejemplo, una exposición de entre 1 y 10 debe interpretarse que cubre un intervalo de entre 1 y 8, de entre 3 y 7, de entre 1 y 9, de entre 3,6 y 4,6, de entre 3,5 y 9,9, etc.
Todos los porcentajes expresados en la presente memoria son en peso respecto al peso total de la composición alimentaria, a menos que se exprese otra cosa. En donde se hace referencia al pH, los valores corresponden al pH medido a 25 °C con equipos estándares. Una "cantidad" puede ser la cantidad total del componente referenciado por porción de la composición o por unidad distinta de la composición y/o puede ser el porcentaje en peso del componente referenciado en peso seco. Además, una "cantidad" incluye cero; por ejemplo, la enunciación de una cantidad de un compuesto no significa necesariamente que el compuesto esté presente, a menos que vaya seguida de un intervalo que excluya el cero.
Los términos "alimento", "producto alimentario" y "composición alimentaria" se refieren a un producto o composición destinado a la ingestión de un animal, incluido un ser humano, y que proporciona por lo menos un nutriente al animal. Adicionalmente en este sentido, dichos términos se refieren a que el producto o composición se encuentra en una forma lista para el consumo y no es meramente un elemento intermedio a partir del cual se prepara un producto o composición consumible, aunque pueden añadirse otras composiciones alimentarias en algunas realizaciones. La expresión "alimento para mascotas" se refiere a cualquier composición de alimentos destinada a ser consumida por una mascota. El término "mascota" se refiere a cualquier animal que podría beneficiarse o disfrutar de las composiciones proporcionadas por la presente exposición. Por ejemplo, la mascota puede ser un ave, bovino, canino, equino, felino, caprino, lupino, murino, ovino o porcino, pero la mascota puede ser cualquier animal adecuado.
La expresión "animal de compañía" se refiere a un perro o a un gato. En una realización, las composiciones y métodos dados a conocer en la presente memoria involucran a un perro de edad avanzada o a un gato de edad avanzada. Los perros se consideran de edad avanzada en el último 25 % de sus vidas. La esperanza de vida de un perro depende de su tamaño y/o raza, pero para la presente exposición, un perro de edad avanzada es un perro que tiene por lo menos 5 años de edad (p. ej., por lo menos 6 años de edad, por lo menos 7 años de edad o por lo menos 8 años de edad). La esperanza de vida de un gato depende de su tamaño y/o raza, pero para la presente exposición, un gato de edad avanzada es un gato que tiene por lo menos 7 años de edad (p. ej., por lo menos 8 años de edad, por lo menos 9 años de edad o por lo menos 10 años de edad).
Tal como se utiliza en la presente memoria, la expresión "animal de compañía comparable" se refiere a un animal sano del mismo género, raza y edad que el animal de compañía.
Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "metabolito" se refiere a un compuesto que presenta actividad biológica en un animal de compañía que es un compuesto intermedio o producto del metabolismo, e incluye precursores del mismo. Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "precursor" se refiere a cualquier compuesto que se metaboliza produciendo un metabolito durante el metabolismo en un animal de compañía. Por ejemplo, si el metabolito específico es cisteína, "el metabolito" comprende un precursor de cisteína (p. ej., metionina).
La expresión "cantidad eficaz" se refiere a una cantidad de un compuesto de la presente invención que (i) trata o previene la enfermedad, afección o trastorno particular, (ii) atenúa, mejora o elimina uno o más síntomas de la enfermedad, afección o trastorno particular, o (iii) previene o retrasa la aparición de uno o más síntomas de la enfermedad, afección o trastorno particular indicado en la presente memoria. En una realización, el presente metabolito o combinación de metabolitos puede estar presente en una cantidad eficaz para modular la cantidad deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía.
Las dosis expresadas en la presente memoria son en miligramos por kilogramo de peso corporal al día (mg/kg/día), a menos que se exprese lo contrario.
La expresión "administración a largo plazo" se refiere a períodos de administración o consumo repetido mayores a un mes. Los períodos de más de dos, tres o cuatro meses se pueden utilizar para determinadas realizaciones. Además, se pueden utilizar períodos más largos que incluyan más de 5, 6, 7, 8, 9 o 10 meses. También se pueden utilizar períodos mayores de 11 meses o 1 año. El uso a largo plazo que se extiende durante 1, 2, 3 o más años está incluido en la invención. Para determinados animales mayores, el animal continuará consumiendo de forma regular durante el resto de su vida. Lo anterior también puede denominarse consumo durante períodos "prolongados".
La expresión "base regular" o "administración regular" se refiere a una dosificación por lo menos mensual con las composiciones o de consumo de las composiciones, y en un aspecto, se refiere a una dosificación por lo menos semanal. Se puede realizar una dosificación o consumo más frecuente, tal como dos o tres veces a la semana, en determinadas realizaciones. Sin embargo, en otras realizaciones, se pueden utilizar regímenes que comprendan el consumo por lo menos una vez al día. El experto en la materia apreciará que el nivel en sangre de un compuesto o de determinados metabolitos de ese compuesto, o que resultan después del consumo de ese compuesto, puede ser una herramienta útil para evaluar o determinar la frecuencia de dosificación. Por ejemplo, para determinar las cantidades de alimentación para composiciones de alimentos para mascotas que comprenden un determinado metabolito, la concentración en sangre de ese metabolito puede proporcionar información útil. Una frecuencia, independientemente de si se ejemplifica expresamente en la presente memoria, que permita mantener un nivel en sangre deseado del compuesto medido, tal como un metabolito, dentro de intervalos aceptables puede resultar útil en la presente memoria. El experto en la materia apreciará que las cantidades de alimentación serán una función de la composición que se está consumiendo o administrando, así como del animal que consume el alimento, y algunas composiciones alimentarias pueden requerir una administración más o menos frecuente para mantener un nivel en sangre deseado del compuesto medido (p. ej., de un metabolito).
Los términos relativos "mejorar", "incrementar", "mejorar" y "reducir" se refieren a los efectos de la composición dada a conocer en la presente memoria (una composición que comprende metabolitos) respecto a una composición que presenta una cantidad menor o que carece de tales metabolitos, pero que de otro modo es idéntica.
Una composición "mezclada" simplemente presenta por lo menos dos componentes con por lo menos una característica diferente entre sí. En un aspecto, el contenido de humedad y la actividad acuosa pueden ser diferentes en el contexto de la presente exposición. En este sentido, la descripción de una composición como "mezclada" no implica que la composición mezclada haya sido sometida a un tratamiento en ocasiones denominado "mezcla", es decir, mezclar componentes de manera que sean indistinguibles entre sí, y, en un aspecto, dicho tratamiento se evita al mezclar un componente con otros componentes para formar una composición mezclada (p. ej., mezclar un componente seco con un componente húmedo o semihúmedo). Adicionalmente en este sentido, en una composición mezclada, cada uno de los dos o más componentes que presentan por lo menos una característica diferente entre sí puede retener su identidad y apariencia distintas.
La expresión "alimento húmedo" se refiere a un alimento para mascotas que presenta un contenido de humedad de entre aproximadamente 50 % y aproximadamente 90 %, y en un aspecto, entre aproximadamente 70 % y aproximadamente 90 %. La expresión "alimento seco" se refiere a un alimento para mascotas que presenta un contenido de humedad inferior a aproximadamente 20 %, y en un aspecto, inferior a aproximadamente 15 %, y en un aspecto específico, inferior a aproximadamente 10 %. La expresión "alimento semihúmedo" se refiere a un alimento para mascotas que presenta un contenido de humedad de entre aproximadamente 20 % y aproximadamente 50 %, y en un aspecto, entre aproximadamente 25 % y aproximadamente 35 %.
El término "croquetas" se utiliza sinónimamente con "trozos" en la presente memoria y ambos términos se refieren a pedazos de alimento seco o semihúmedo para mascotas, que pueden presentar la forma de gránulo o cualquier otra forma y pueden prepararse mediante el corte de una composición de alimento en trozos separados. Entre los ejemplos no limitativos de croquetas se incluyen particulados, gránulos, trozos de alimento para mascotas, carne deshidratada, análogo cárnico, verduras y combinaciones de los mismos, y tentempiés para mascotas, tales como cecina cárnica o vegetal, cuero en bruto y galletas. Un "análogo de carne" es un producto de emulsión cárnica que se asemeja a trozos de carne natural en apariencia, textura y estructura física.
La expresión "suplemento dietético" se refiere a un producto destinado a ser ingerido además de la dieta normal del animal. Los suplementos dietéticos pueden presentar cualquier forma, p. ej., sólida, líquida, gel, tabletas, cápsulas o en polvo. En un aspecto, se pueden proporcionar en formas de dosificación convenientes. En algunas realizaciones, se pueden proporcionar en envases para el consumidor a granel, tal como polvos a granel, líquidos, geles o aceites. En otras realizaciones, los suplementos pueden proporcionarse en cantidades a granel para ser incluidos en otros artículos alimentarios, tales como tentempiés, golosinas, barras de suplemento o bebidas.
Las composiciones dadas a conocer en la presente memoria pueden carecer de cualquier elemento que no se dé a conocer específicamente en la presente memoria. De esta manera, una exposición de una realización que utiliza la expresión "que comprende" incluye una exposición de las realizaciones "que consisten esencialmente en" y "que consisten en" los componentes identificados. De manera similar, los métodos dados a conocer en la presente memoria pueden carecer de cualquier etapa que no se dé a conocer específicamente en la presente memoria. De esta manera, una exposición de una realización que utiliza la expresión "que comprende" incluye una exposición de las realizaciones "que consisten esencialmente en" y "que consisten en" las etapas identificadas. Cualquier realización dada a conocer en la presente memoria se puede combinar con cualquier otra realización dada a conocer en la presente memoria, a menos que se indique explícita y directamente lo contrario.
La presente discusión de las realizaciones, aspectos, ejemplos, etc. es independiente en el sentido de que puede aplicarse a todos los métodos y composiciones. Por ejemplo, un metabolito utilizado en una composición de alimento para mascotas también puede utilizarse en el método de modulación o en un método de minimización de costos asociados a la preparación de dicho alimento para mascotas, y viceversa.
Realizaciones
En un aspecto de la presente exposición, una composición para mascotas puede comprender proteínas, carbohidratos, grasas, fibra y por lo menos seis metabolitos diferentes para modular individualmente la cantidad deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía, en donde el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidrocolato, quenodesoxicolato, 3-deshidrocolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos, en donde el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos; en donde el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHB<a>), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos. El animal de compañía puede ser un perro de edad avanzada o un gato de edad avanzada. En una realización, la composición de alimento para mascotas puede proporcionar un incremento en la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensen el animal de compañía.
En otro aspecto de la presente exposición, se proporciona un método no terapéutico para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensen un animal de compañía. El método puede comprender la administración a la mascota de una composición de alimento para mascotas que comprende proteínas, carbohidratos, grasas, fibra y por lo menos tres metabolitos distintos para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensen el animal de compañía. En un aspecto, el animal de compañía puede ser un perro de edad avanzada o un gato de edad avanzada. El metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocamitina, 12-deshidrocolato, cenodesoxicolato, 3-deshidrocolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos. El metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos. El metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoílesfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomo-linolenato (20:3n3 o n6), 7-alfahidroxicolesterol, estearato (18:0), palmítico (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos.
En todavía otro aspecto se proporciona una composición de alimento para mascotas para la utilización en un método terapéutico para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen una mascota, en la que la composición de alimento para mascotas comprende proteínas, carbohidratos, grasas, fibra y por lo menos tres metabolitos diferentes para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen el animal de compañía; en donde el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidrocolato, quenodesoxicolato, 3-deshidrocolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos; en donde el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos; y en donde el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 or 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 or 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos; y en donde la modulación proporciona uno de los beneficios para la salud siguientes: alivio del síndrome del intestino irritable, alivio de la enfermedad de Crohn, reducción del sobrecrecimiento bacteriano, incremento del metabolismo de la lactosa, reducción de las infecciones por levaduras o potenciación del sistema inmunitario.
Un método para medir un cambio en la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía puede comprender la obtención de una muestra de suero del animal de compañía, la medición de las concentraciones de por lo menos tres metabolitos diferentes en la muestra de suero que modulan por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens,y la determinación de queBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringensha cambiado si, después de comparar las concentraciones de metabolitos con las concentraciones medias de cada metabolito de animales de compañía comparables, las concentraciones de metabolitos son diferentes a las concentraciones medias de metabolitos.
Se da a conocer, además, un método para minimizar los costes asociados a la producción de un alimento para mascotas que presenta una primera formulación diseñada para el consumo de un animal de compañía, tal como un perro de edad avanzada o un gato de edad avanzada. Se da a conocer, además, un método para potenciar los beneficios nutricionales de un alimento para mascotas que presenta una primera formulación diseñada para el consumo por un animal de compañía, tal como un perro de edad avanzada o un gato de edad avanzada. Estos métodos comprenden el ajuste de la primera formulación del alimento para mascotas para que sea una segunda formulación. Por lo menos una de las primeras y segundas formulaciones comprende un metabolito para modular la cantidad deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía. El ajuste comprender el cambio de una cantidad del metabolito en la primera formulación a una cantidad diferente en la segunda formulación.
"Minimizar" los costes significa que los costes asociados a la preparación de la segunda formulación son menores que los costes asociados a la preparación de la primera formulación, por ejemplo por ración, por peso unitario, por volumen unitario o por energía total. El beneficio nutricional "mejorado" significa que el beneficio nutricional de la segunda formulación es mayor que el beneficio nutricional de la primera formulación.
Tal como se comenta en la presente memoria, las composiciones de alimentos para mascotas y los métodos pueden contener un metabolito o múltiples metabolitos para modular las cantidades de diversas bacterias. En diversos aspectos, las composiciones y métodos pueden contener 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o incluso 10 metabolitos para modular la cantidad de cualquiera de las bacterias, o múltiples bacterias, o para cada bacteria. De esta manera, en una realización, la composición puede comprender por lo menos 6 metabolitos, incluyendo metabolitos para modular individualmente la cantidad de cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía. En otra realización, la composición puede comprender por lo menos 9 metabolitos, incluyendo por lo menos 3 metabolitos para modular individualmente la cantidad de cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía. En todavía otra realización, la composición puede comprender por lo menos 12 metabolitos, incluyendo por lo menos 4 metabolitos para modular individualmente la cantidad de cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía. Además, en una realización, la composición puede comprender por lo menos cuatro metabolitos diferentes que modulan las cantidades de por lo menos uno deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringens.Además, en una realización, la composición puede comprender por lo menos cinco metabolitos diferentes que modulan por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.Sin embargo, en otra realización, el método puede modular por lo menos dos bacterias seleccionadas del grupo que consiste enBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensy donde la composición comprende por lo menos seis metabolitos diferentes, tres metabolitos diferentes para modular cada una de las dos o más bacterias. Sin embargo, en otra realización, el método puede modularBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensy donde la composición comprende por lo menos nueve metabolitos diferentes, tres metabolitos distintos para modular cada uno deBifidobacterium, Lactobacillus,yClostridium perfringens.Tal como se ha señalado anteriormente, las relaciones entre metabolitos y bacterias se pueden utilizar tanto para realizaciones de método como de composición.
En algunas realizaciones, el metabolito modula negativamente la bacteria específica, y el cambio en la cantidad del metabolito comprende la reducción de la cantidad del metabolito. En algunas realizaciones, el metabolito modula negativamente la bacteria específica, y el cambio en la cantidad del metabolito comprende el incremento de la cantidad del metabolito. En algunas realizaciones, el metabolito modula positivamente la bacteria específica, y el cambio en la cantidad del metabolito comprende el incremento de la cantidad del metabolito. En otras realizaciones, el metabolito modula positivamente la bacteria específica, y el cambio en la cantidad del metabolito comprende la reducción de la cantidad del metabolito. Estas no son realizaciones mutuamente excluyentes: una realización particular puede comprender la reducción de la cantidad de un metabolito que modula negativamente una primera bacteria específica e incrementa la cantidad de un metabolito que modula positivamente una segunda bacteria específica, y la primera y la segunda bacterias específicas pueden ser las mismas o diferentes (p. ej., una o más deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens).
La reducción de la cantidad del metabolito puede comprender la reducción de la cantidad del metabolito directamente y/o la reducción de la cantidad de un ingrediente que comprende el metabolito. En algunas realizaciones, la reducción de la cantidad del metabolito puede comprender la reducción de la cantidad de un precursor del metabolito directamente y/o la reducción de la cantidad de un ingrediente que comprende un precursor del metabolito. Por ejemplo, la segunda formulación puede contener, respecto a la primera formulación, menos de un ingrediente que presente una cantidad elevada del metabolito o precursor del mismo (p. ej., un ingrediente que presente una cantidad del metabolito o precursor del mismo que sea mayor que en uno o más de los demás ingredientes).
El incremento de la cantidad del metabolito puede comprender el incremento de la cantidad del metabolito directamente y/o la reducción de la cantidad de un ingrediente que comprende el metabolito. En algunas realizaciones, el incremento de la cantidad del metabolito puede comprender el incremento de la cantidad de un precursor del metabolito directamente y/o el incremento de la cantidad de un ingrediente que comprende un precursor del metabolito. Por ejemplo, la segunda formulación puede contener, respecto a la primera formulación, menos de un ingrediente que presenta una cantidad elevada del metabolito o precursor del mismo (p. ej., un ingrediente que presenta una cantidad del metabolito o precursor del mismo que es mayor que en uno o más de los demás ingredientes).
En general, los métodos y composiciones indicados en la presente memoria pueden proporcionar un incremento o una reducción de la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen el animal de compañía. En algunas realizaciones, el incremento o reducción puede ser de por lo menos 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 % o incluso de 50 %. En un aspecto, las composiciones y métodos pueden proporcionar un incremento. En otro aspecto, las composiciones y métodos pueden proporcionar una reducción. De esta manera, la presente modulación, y su consiguiente incremento o reducción, puede proporcionar uno de los siguientes beneficios para la salud: ganancia de peso, mayor tasa de conversión en alimento, menor mortalidad, disminución del malestar digestivo, alivio del síndrome del intestino irritable, alivio de la enfermedad de Crohn, reducción del sobrecrecimiento bacteriano, incremento en la digestión de alimentos, incremento en el metabolismo de la lactosa, disminución de los efectos negativos de los antibióticos, piel saludable, disminución de las infecciones por levaduras, incremento de la absorción de nutrientes o potenciación del sistema inmunitario.
En una realización, el incremento o la reducción puede ser de por lo menos dos deBifidobacterium, Lactobacillus,yClostridium perfringens.En otra realización, el incremento o reducción puede ser deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringens.
Los ingredientes que comprenden el metabolito (p. ej., un precursor del metabolito) y opcionalmente cantidades del metabolito en el ingrediente pueden identificarse mediante el análisis del ingrediente, utilizando, por ejemplo, una técnica de separación, tal como la cromatografía de gases o la cromatografía líquida, seguido de espectrometría de masas.
En cada una de dichas composiciones y métodos, la composición de alimento para mascotas puede ser un alimento húmedo, un alimento semihúmedo o un alimento seco. En una realización, la composición del alimento para mascotas es uno o más componentes de una composición mezclada. En algunas realizaciones, la composición del alimento para mascotas es una croqueta, y en algunas realizaciones, la composición del alimento para mascotas es un análogo cárnico. Adicionalmente, en otra realización, la presente composición para modular una bacteria puede ser un suplemento dietético que comprende los metabolitos indicados en la presente memoria. Además, un método para modular una bacteria puede incluir la administración al animal de compañía del suplemento dietético.
Dichas composiciones de alimento para mascotas pueden administrarse al animal de compañía en cantidades comprendidas entre aproximadamente 3 g de alimento para mascotas por cada libra de peso corporal y aproximadamente 16 g de alimento para mascotas por cada libra de peso corporal del animal de compañía. Además, los metabolitos pueden estar presentes en cantidades de entre aproximadamente 0,01 % en peso y aproximadamente 10 % en peso de la composición de alimento. En un aspecto, los metabolitos pueden estar presentes en concentraciones de entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 1.000 mg/kg de alimento. En otro aspecto, los metabolitos pueden estar presentes en concentraciones de entre aproximadamente 1 UI y aproximadamente 500.000 UI por kilogramo de alimento. En una realización, la composición de alimento para mascotas puede administrarse al animal de compañía en cantidades suficientes para mantener la salud y/o el peso corporal del animal. En un aspecto, la administración puede ser una administración regular.
Tal como se ha señalado anteriormente y se detalla posteriormente en la presente solicitud, los presentes inventores han identificado compuestos metabolitos que se correlacionan conBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.De esta manera, el metabolito en la composición del alimento para mascotas puede ser uno de estos compuestos. Sin embargo, el metabolito puede ser cualquier metabolito para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía, incluso si el metabolito no se da a conocer explícitamente en la presente memoria. Por ejemplo, el metabolito puede ser un compuesto identificado utilizando los métodos dados a conocer en la presente memoria, pero no se da a conocer explícitamente en la presente memoria. Además, el metabolito puede ser un compuesto identificado mediante un método no dado a conocer en la presente memoria si el compuesto está correlacionado fiablemente con por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.
A modo de ejemplo no limitativo, el metabolito puede modularBifidobacteriumy puede seleccionarse del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidroxicolato, quenodesoxicolato, 3-deshidroxicolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos. En una realización, el metabolito puede modularBifidobacteriumy puede seleccionarse del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidroxicolato, quenodesoxicolato, 3-deshidroxicolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos.
A título de otro ejemplo no limitativo, el metabolito puede modularLactobacillusy puede seleccionarse del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos. En una realización, el metabolito puede modularLactobacillusy puede seleccionarse del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos.
A título de otro ejemplo no limitativo, el metabolito puede modularClostridium perfringensy puede seleccionarse del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoílesfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomo-linolenato (20:3n3 o n6), 7-alfahidroxicolesterol, estearato (18:0), palmítico (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos. En una realización, el metabolito puede modularClostridium perfringensy puede seleccionarse del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomo-linolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos.
En todavía otro aspecto de la presente exposición, un método mejora el beneficio nutricional de un alimento para mascotas que presenta una primera formulación diseñada para el consumo de animales de compañía, y el método comprende la administración del alimento para mascotas que presenta la primera formulación a un primer animal de compañía. El método comprende, además, la medición en una muestra de líquido corporal del animal de compañía (p. ej., plasma) de una cantidad de un marcador sustitutivo que comprende un metabolito que modula por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.El método comprende, además, el ajuste de la primera formulación del alimento para mascotas para que sea una segunda formulación que presenta una diferencia con respecto a la primera formulación seleccionada del grupo que consiste en (i) un ingrediente presente en la segunda formulación y ausente en la primera formulación, (ii) un ingrediente ausente en la segunda formulación y presente en la primera formulación, (iii) un ingrediente presente en la primera y segunda formulaciones pero en una cantidad diferente, y (iv) combinaciones de los mismos. El ajuste se basa por lo menos parcialmente en la cantidad del marcador sustitutivo medido en la etapa anterior.
El ajuste puede comprender la reducción directa de la cantidad de un metabolito que modula negativamente una bacteria específica y/o la reducción de la cantidad de un ingrediente que comprende un metabolito que modula negativamente una bacteria específica. En algunas realizaciones, la reducción de la cantidad del metabolito puede comprender la reducción de la cantidad de un precursor del metabolito directamente y/o la reducción de la cantidad de un ingrediente que comprende un precursor del metabolito. Por ejemplo, la segunda formulación puede contener, respecto a la primera formulación, menos de un ingrediente que presente una cantidad elevada del metabolito o precursor del mismo (p. ej., un ingrediente que presente una cantidad del metabolito o precursor del mismo que sea mayor que en uno o más de los demás ingredientes).
El ajuste puede comprender el incremento de la cantidad del metabolito, puede comprender el incremento directo de la cantidad de un metabolito que modula positivamente una bacteria específica y/o el incremento de la cantidad de un ingrediente que comprende un metabolito que modula positivamente una bacteria específica. En algunas realizaciones, el incremento de la cantidad del metabolito puede comprender el incremento de la cantidad de un precursor del metabolito directamente y/o el incremento de la cantidad de un ingrediente que comprende un precursor del metabolito. Por ejemplo, la segunda formulación puede contener, respecto a la primera formulación, menos de un ingrediente que presenta una cantidad elevada del metabolito o precursor del mismo (p. ej., un ingrediente que presenta una cantidad del metabolito o precursor del mismo que es mayor que en uno o más de los demás ingredientes).
Tal como se ha señalado anteriormente, los ingredientes que comprenden el metabolito (p. ej., un precursor del metabolito) y opcionalmente cantidades del metabolito en el ingrediente, pueden identificarse mediante el análisis del ingrediente, por ejemplo utilizando una técnica de separación, tal como la cromatografía de gases o la cromatografía líquida, seguido de espectrometría de masas.
El método comprende, además, producir el alimento para mascotas en la segunda formulación. En una realización, el método comprende administrar el alimento para mascotas que presenta la segunda formulación a un segundo animal de compañía.
Este método puede utilizarse para proporcionar nutrición personalizada a un animal de compañía específico. Por ejemplo, el primer y segundo animal de compañía pueden ser el mismo animal de compañía específico de tal manera que el animal al que se administra el alimento para mascotas que presenta la primera formulación presente una o más de sus bacterias específicas moduladas por la primera formulación evaluada. Entonces, este mismo animal recibe la segunda formulación resultante, de modo que este animal modulará más eficazmente la bacteria específica. En consecuencia, un propietario de una mascota puede compensar los cambios en su mascota en uno o más deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.
Alternativa o adicionalmente, este método puede utilizarse para proporcionar nutrición personalizada para animales de compañías que comparten uno o más de un género, una edad aproximada, un tamaño aproximado (p. ej., peso corporal, altura y/o longitud) o una raza. Por ejemplo, el segundo animal de compañía puede ser un animal específico diferente al primer animal de compañía, pero presenta una característica seleccionada del grupo que consiste en (i) aproximadamente la misma edad que la primera mascota, (ii) aproximadamente el mismo tamaño que el primer animal de compañía, (iii) la misma raza que el primer animal de compañía, (iv) el mismo género que el primer animal de compañía, y (iv) combinaciones de los mismos. Preferentemente, el segundo animal de compañía es uno de una pluralidad de animales de compañía cada uno de los cuales comparte la característica con el primer animal de compañía. El método puede comprender la administración del alimento para mascotas que presenta la segunda formulación a la pluralidad de animales de compañía. En una realización, por lo menos una parte de la pluralidad de animales de compañía se encuentra situada de manera remota en relación con el primer animal de compañía.
Las composiciones de alimentos para mascotas dadas a conocer en la presente memoria pueden ser cualquier alimento formulado para el consumo de una mascota, tal como un animal de compañía. En una realización, la composición de alimento para mascotas proporciona una nutrición completa según lo definido por la Asociación de funcionarios de control de alimentos de América (AAFCO, por sus siglas en inglés) y que depende del tipo de animal para el que está destinada la composición (p. ej., perro o gato).
La composición de alimento para mascotas puede comprender carne, tal como carne emulsionada. Entre los ejemplos de carne adecuada se incluyen carne de ave de corral, vaca, cerdo, cordero y pescado, especialmente aquellos tipos de carnes adecuados para mascotas. La carne puede incluir cualesquiera partes adicionales de un animal, incluyendo las vísceras. Parte o la totalidad de la carne puede proporcionarse como una o más comidas de carne, es decir, carne que ha sido secada y molida para formar partículas de tamaño sustancialmente uniforme y tal como define la AAFCO. Adicional o alternativamente, puede utilizarse proteína vegetal, tal como proteína de guisante, proteína de maíz (p. ej., maíz molido o gluten de maíz), proteína de trigo (p. ej., trigo molido o gluten de trigo), proteína de soja (p. ej., harina de soja, concentrado de soja o aislado de soja) y proteína de arroz (p. ej., arroz molido o gluten de arroz).
Las composiciones de alimento para mascotas dadas a conocer en la presente memoria pueden comprender aceite vegetal, un saborizante, un colorante y agua. Entre los aceites vegetales adecuados se incluyen aceite de soja, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, aceite de girasol, aceite de canola, aceite de cacahuete y aceite de cártamo. Entre los ejemplos de saborizantes adecuados se incluyen levadura, sebo, harinas animales procesadas (p. ej., aves, carne de vaca, cordero y cerdo), extractos o mezclas de sabor (p. ej., carne de vaca a la parrilla) y digeridos animales. Entre los colorantes adecuados se incluyen los colores FD&C, tales como el azul n.° 1, azul n.° 2, verde n.° 3, rojo n.° 3, rojo n.° 40, amarillo n.° 5, amarillo n.° 6; colores naturales, tales como colorante caramelo, annato, clorofilina, cochinilla, betanina, cúrcuma, azafrán, pimentón, licopeno, zumo de saúco, pandan, guisante mariposa y similares; dióxido de titanio, y cualquier colorante alimentario adecuado conocido por el experto en la materia.
Las composiciones de alimentos para mascotas dadas a conocer en la presente memoria pueden incluir opcionalmente ingredientes adicionales, tales como otros cereales y/o otros almidones adicional o alternativamente a la harina, aminoácidos, fibras, azúcares, aceites animales, aromas, otros aceites adicional o alternativamente al aceite vegetal, humectantes, conservantes, polioles, sales, ingredientes para el cuidado bucal, antioxidantes, vitaminas, minerales, microorganismos probióticos, moléculas bioactivas o combinaciones de los mismos.
Entre los almidones adecuados se incluyen un cereal, tal como maíz, arroz, trigo, cebada, avena, soja y mezclas de estos cereales, y pueden incluirse por lo menos en parte en cualquier harina. Entre los humectantes adecuados se incluyen sal, azúcares, propilenglicol y gliceroles polihídricos tales como la glicerina y el sorbitol. Entre los ingredientes para el cuidado oral adecuados se incluyen concentrado de nutrientes de alfalfa que contiene clorofila, bicarbonato sódico, fosfatos (p. ej., fosfato tricálcico, pirofosfatos ácidos, pirofosfato tetrasódico, metafosfatos y ortofosfatos), menta piperita, clavo, perejil y jengibre. Entre los ejemplos de antioxidantes adecuados se incluyen el hidroxianisol butilado ("BHA", por sus siglas en inglés) y el hidroxitolueno butilado ("BHT", por sus siglas en inglés) y vitamina E (tocoferoles).
Entre los ejemplos no limitativos de vitaminas que se pueden utilizar se incluyen las vitaminas A, el complejo B (tal como B-1, B-2, B-6 y B-12), C, D, E y K, niacina y vitaminas ácidas tales como el ácido pantoténico, el ácido fólico y la biotina. Entre los ejemplos no limitativos de minerales adecuados se incluyen calcio, hierro, zinc, magnesio, yodo, cobre, fósforo, manganeso, potasio, cromo, molibdeno, selenio, níquel, estaño, silicio, vanadio y boro.
Entre los ejemplos no limitativos de conservantes adecuados se incluyen sorbato potásico, ácido sórbico, parahidroxibenzoato de metilo sódico, propionato cálcico, ácido propiónico, y combinaciones de los mismos.
Las cantidades específicas para cada ingrediente adicional en las composiciones alimentarias para mascotas dadas a conocer en la presente memoria dependerán de una variedad de factores, tales como el ingrediente incluido en el primer material comestible y cualquier segundo material comestible; la especie del animal, la edad del animal, el peso corporal, el estado general de salud, sexo y dieta; la tasa de consumo del animal; y el propósito para el que se administra el producto alimentario al animal. Por lo tanto, los componentes y sus cantidades pueden variar ampliamente.
Por ejemplo, la cantidad de cualquiera de los ingredientes mencionados anteriormente se puede reducir o incrementar según el efecto estimado sobre la cantidad de uno o más deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringens(p. ej., un efecto identificado por uno de los métodos dados a conocer en la presente memoria). En una realización, la cantidad de uno o más de los ingredientes mencionados anteriormente puede incrementarse en el caso de que dichos ingredientes comprendan un metabolito que module positivamente uno o más deBifidobacterium, Lactobacillus,oClostridium perfringens.Adicional o alternativamente, la cantidad de uno o más de los ingredientes mencionados anteriormente puede reducirse si tales ingredientes comprenden un metabolito que modula negativamente uno o más deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens
Tal como se ha señalado anteriormente, los ingredientes que comprenden el metabolito (p. ej., un precursor del metabolito) y opcionalmente cantidades del metabolito en el ingrediente, pueden identificarse mediante el análisis del ingrediente, por ejemplo utilizando una técnica de separación, tal como la cromatografía de gases o la cromatografía líquida, seguido de espectrometría de masas.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos no limitativos son ilustrativos de realizaciones de la presente exposición.
Métodos
Cada uno de los ejemplos se derivó del estudio siguiente.
Se alimentaron 83 perros con la dieta A durante 5 semanas, seguidos de un periodo de transición de 1 semana y después 15 fueron alimentados con la dieta B durante 5 semanas, tal como se muestra en la Tabla 1, a continuación. Se extrajeron muestras de plasma después de un ayuno nocturno utilizando tubos Vacutainer con EDTA durante la quinta semana de alimentación de cada dieta. Después de la centrifugación, el plasma se dividió en alícuotas en viales criogénicos y se congelaron a -80 °C. Se utilizaron muestras fecales para determinar los niveles de las bacterias. Se determinaron los niveles deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensbasándose en secuencias de 16S publicadas, mediante PCR cuantitativa.
Tabla 1
Se llevó a cabo un análisis metabolómico utilizando los siguientes métodos de Metabolon Inc. Las muestras fueron extraídas y divididas en partes iguales para el análisis en plataformas de cromatografía de gases/espectrometría de masas (CG/EM) y cromatografía líquida/EM/EM (CL/EM/e M). Se utilizó software propietario para asociar los iones con una biblioteca interna de patrones para la identificación de los metabolitos y para la cuantificación de los metabolitos mediante la integración de la superficie de los picos por Metabolon Inc. Se proporcionan las masas e índices de retención en las tablas siguientes, de modo que puede identificarse de forma única y distinguirse individualmente cada metabolito.
En el momento del análisis, se descongelaron las muestras y se prepararon extractos para eliminar las proteínas, desprender las moléculas pequeñas unidas a proteínas o atrapadas físicamente en la matriz de proteínas precipitadas, y recuperar una amplia gama de metabolitos químicamente diversos. Se extrajo una alícuota separada de cada muestra de plasma experimental y después se agrupó para la creación de muestras de "Client Matrix" (CMTRX). Dichas muestras de CMTRX se inyectaron a lo largo de la ejecución de la plataforma y sirvieron como réplicas técnicas, permitiendo determinar la variabilidad en la cuantificación de todos los compuestos bioquímicos detectados de manera consistente y monitorizar la variabilidad del procedimiento en general y el rendimiento de la plataforma. Los extractos de todas las muestras experimentales y de CMTRX se dividieron para su análisis en las plataformas de CG/EM y CL/EM/EM.
Las muestras réplicas técnicas de CMTRX se trataron de manera independiente a lo largo de todo el procedimiento como si fueran muestras de estudio del cliente. Todas las muestras del procedimiento (mezclas de ensayo CMTRX y Grob de componentes orgánicos utilizadas para evaluar el rendimiento de la columna de CG, blancos del procedimiento, etc.) se espaciaron uniformemente entre las inyecciones de cada día y todas las muestras de cliente se distribuyeron aleatoriamente a lo largo de la ejecución diaria. Los datos se recopilaron durante múltiples días de ejecución en la plataforma y, por lo tanto, se "normalizaron según bloque" mediante el cálculo de los valores de mediana para cada bloque de día de ejecución para cada compuesto individual. Dicha normalización minimiza cualquier ganancia o deriva del instrumento entre días, pero no interfiere con la variabilidad de la muestra dentro de cada día. Se asumió que los valores faltantes (si los hubiera) estaban por debajo del nivel de detección para ese compuesto bioquímico con la instrumentación utilizada y se imputaron con el valor mínimo observado para dicho compuesto bioquímico en particular.
Se añadieron varios patrones internos a cada muestra patrón experimental y de procedimiento inmediatamente antes de la inyección en los espectrómetros de masas. Se determinó una medida de la variabilidad de la plataforma (7 %) mediante el cálculo de la mediana de desviación estándar relativa (DER) para estos patrones internos. Debido a que estos patrones se añaden a las muestras inmediatamente antes de la inyección en el instrumento, este valor refleja la variación del instrumento. Además, la mediana de desviación estándar relativa (DER) para los compuestos bioquímicos que se midieron de manera consistente en el CMTRX representa la variabilidad total dentro del procedimiento para las muestras experimentales reales y la variabilidad en la cuantificación de los metabolitos endógenos dentro de estas muestras (12 %). Los resultados para el CMTRX y los patrones internos indicaron que la plataforma produjo datos que cumplían con las especificaciones del procedimiento.
Se detectó un total de 589 metabolitos en el plasma. Este total corresponde a muchos compuestos bioquímicos (401) que coincidieron con una estructura nombrada en la biblioteca de referencia (compuestos nombrados). Los compuestos biocompuestos restantes (188) representan entidades químicas distintas (es decir, representan una única molécula con una fórmula molecular y estructura discretas), pero actualmente no coinciden con un compuesto bioquímico nombrado en la biblioteca de referencia (compuestos sin nombre/desconocidos).
Ejemplo 1(Clostridium perfringens)
Las correlaciones de metabolitos conClostridium perfringensse determinaron basándose en la metabolómica plasmática (Tabla 2). Lo anterior proporcionó un modelo predictivo de compuestos que pueden influir enClostridium perfringensya sea de manera positiva o negativa. La alimentación con diferentes niveles de estos compuestos (dieta B vs dieta A; Tabla 3), y la observación de cambios enClostridium perfringens(Tabla 4), sirvió como modelo de validación. Se determinaron las composiciones de metabolitos de las dos dietas diferentes para identificar los niveles relativos de compuestos específicos. Los validados por el modelo se muestran en la Tabla 5.
Tabla 2. Correlaciones de metabolitos conClostridium perfringens.Se informan las correlaciones con un valor de
P<0,01.
(continuación)
Tabla 3. Niveles compuestos presentes en las dietas A y B. Los valores representan valores imputados escalados (los datos están escalados de tal manera que el valor de la mediana medido en todas las muestras estaba establecido en 1,0 y los valores faltantes (si lo hubiera) fueron imputados con el mínimo observado para ese compuesto en particular).
(continuación)
Tabla 4.Clostridium perfringensen respuesta a dieta A y dieta B
Tabla 5. Compuestos validados por cambios dietéticos
Ejemplo 2(Lactobacillus)
Las correlaciones de metabolitos conLactobacillusse determinaron en función de la metabolómica plasmática (Tabla 6). Lo anterior proporcionó un modelo predictivo de compuestos que pueden influir enLactobacillusya sea de manera positiva, ya sea negativa. La alimentación con diferentes niveles de estos compuestos (dieta B vs dieta A; Tabla 7), y la observación de cambios enLactobacillus(Tabla 8), sirvió como modelo de validación. Se determinaron las composiciones de metabolitos de las dos dietas diferentes para identificar los niveles relativos de compuestos específicos. Aquellos compuestos validados por el modelo se muestran en la Tabla 9.
Tabla 6. Correlaciones de metabolitos conLactobacillus.Se informan las correlaciones con un valor de P<0,01.
Tabla 7. Niveles de compuestos presentes en las dietas A y B. Los valores representan valores imputados escalados (los datos están escalados de tal manera que el valor de la mediana medido en todas las muestras estaba establecido en 1,0 y los valores faltantes (si los hubiera) fueron imputados con el mínimo observado para ese compuesto en particular).
(continuación)
Tabla 8.Lactobacillusen respuesta a dieta A y dieta B
Tabla 9. Compuestos validados por cambios dietéticos
Ejemplo 3(Bifidobacterium)
Se determinaron las correlaciones de metabolitos conBifidobacteriumbasándose en la metabolómica del plasma (Tabla 10). Lo anterior proporcionó un modelo predictivo de los compuestos que pueden influir sobreBifidobacteriumtanto positiva como negativamente. La alimentación con diferentes niveles de estos compuestos (dieta B vs dieta A; Tabla 11), y registrando los cambios enBifidobacterium(Tabla 12), sirvió como modelo de validación. Se determinaron las composiciones de metabolitos de las dos dietas diferentes con el fin de identificar los niveles relativos de compuestos específicos. Aquellos compuestos validados por el modelo se muestran en la Tabla 13.
Tabla 10. Correlaciones de metabolitos conBifidobacterium.Se informan las correlaciones con un valor de P<0,01.
Tabla 11. Niveles compuestos presentes en las dietas A y B. Los valores representan valores imputados escalados (los datos están escalados de tal manera que el valor de la mediana medido en todas las muestras se fija en 1,0 y los valores perdidos (si los hay) se imputan con el mínimo observado para ese compuesto en particular).
(continuación)
Tabla 12.Bifidobacteriumen respuesta a dieta A y dieta B
Tabla 13. Compuestos validados por cambios dietéticos
(continuación)

Claims (16)

  1. REIVINDICACIONES
    i.Composición de alimento para mascotas, que comprende:
    proteínas, carbohidratos, grasas, fibra, y
    por lo menos 6 metabolitos distintos para modular individualmente la cantidad deBifidobacterium, Lactobacillus y Clostridium perfringensen un animal de compañía,
    en la que el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidroxicolato, quenodesoxicolato, 3-deshidroxicolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos,
    en la que el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos,
    en la que el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinamida), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos.
  2. 2. Composición de alimento para mascotas según la reivindicación 1, en la que la composición comprende por lo menos 9 metabolitos distintos, incluyendo por lo menos 3 metabolitos distintos para modular cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía.
  3. 3. Composición de alimento para mascotas según la reivindicación 1, en la que la composición comprende por lo menos 12 metabolitos distintos, incluyendo por lo menos 4 metabolitos distintos para modular cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensen un animal de compañía.
  4. 4. Composición de alimento para mascotas según la reivindicación 1, en la que el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidrocolato y mezclas de los mismos.
  5. 5. Composición de alimento para mascotas según la reivindicación 1, en la que el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol y mezclas de los mismos.
  6. 6. Composición de alimento para mascotas según la reivindicación 1, en la que el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinamida), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6) y mezclas de los mismos.
  7. 7. Método no terapéutico para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía, que comprende:
    administrar al animal de compañía una composición de alimento para mascotas que comprende proteínas, carbohidratos, grasas, fibra y por lo menos tres metabolitos distintos para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen el animal de compañía, en el que el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidrocolato, quenodesoxicolato, 3-deshidrocolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos,
    en el que el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos, y
    en el que el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinamida), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos.
  8. 8.Método no terapéutico según la reivindicación 7, en el que la composición comprende por lo menos cuatro metabolitos distintos para modular por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens,preferentemente por lo menos cinco metabolitos distintos para modular por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.
  9. 9. Método no terapéutico según la reivindicación 7, en el que el método modula por lo menos dos bacterias seleccionadas del grupo que consiste enBifidobacterium, Lactobacillus y Clostridium perfringensy en el que la composición comprende por lo menos seis metabolitos distintos, tres metabolitos distintos para modular cada una de las dos o más bacterias.
  10. 10. Método no terapéutico según la reivindicación 7, en el que el método modulaBifidobacterium, Lactobacillus y Clostridium perfringensy en el que la composición comprende por lo menos nueve metabolitos distintos, tres metabolitos distintos para modular cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringens.
  11. 11. Método no terapéutico según la reivindicación 7, en el que la composición se administra al animal de compañía por lo menos una vez a la semana, preferentemente dos o tres veces a la semana o por lo menos una vez al día.
  12. 12. Composición de alimento para mascotas para la utilización en un método terapéutico de modulación de la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen un animal de compañía,
    en donde la composición de alimento para mascotas comprende proteínas, carbohidratos, grasas, fibra y por lo menos tres metabolitos distintos para modular la cantidad de por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringensen el animal de compañía,
    en la que el metabolito que modulaBifidobacteriumse selecciona del grupo que consiste en campesterol, 7-cetodesoxicolato, 3-(4-hidroxifenil)propionato, 3-deshidrocarnitina, 12-deshidrocolato, quenodesoxicolato, 3-deshidrocolato, colato, 15-metilpalmitato (isóbaro con 2-metilpalmitato) y mezclas de los mismos,
    en el que el metabolito que modulaLactobacillusse selecciona del grupo que consiste en 3-fenilpropionato (hidrocinamato), 3-(4-hidroxifenil)propionato, manitol, campesterol, indolacetato, 3-deshidrocarnitina y mezclas de los mismos,
    en el que el metabolito que modulaClostridium perfringensse selecciona del grupo que consiste en dihomolinoleato (20:2n6), araquidonato (20:4n6), adrenato (22:4n6), manosa, 3-hidroxibutirato (BHBA), trigonelina (N'-metilnicotinato), eicosenoato (20:1n9 o 11), docosapentaenoato (n3 DPA; 22:5n3), palmitoíl-esfingomielina, glicerato, linolenato [alfa o gamma; (18:3n3 o 6)], dihomolinolenato (20:3n3 o n6), 7-alfa-hidroxicolesterol, estearato (18:0), palmitato (16:0), glicolato (hidroxiacetato), estaquidrina, campesterol, pantotenato, linoleato (18:2n6), docosapentaenoato (n6 DPA; 22:5n6), fenilalanina y mezclas de los mismos, y
    en la que la modulación proporciona uno de los siguientes beneficios para la salud: alivio del síndrome del intestino irritable, alivio de la enfermedad de Crohn, reducción del sobrecrecimiento bacteriano, incremento en el metabolismo de la lactosa, disminución de infecciones por levaduras o potenciación del sistema inmunitario.
  13. 13. Composición para la utilización según la reivindicación 12, en la que la composición comprende por lo menos cuatro metabolitos distintos para modular por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens,preferentemente por lo menos cinco metabolitos distintos para modular por lo menos uno deBifidobacterium, LactobacillusoClostridium perfringens.
  14. 14. Composición para la utilización según la reivindicación 12, en la que el método modula por lo menos dos bacterias seleccionadas del grupo que consiste enBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensy en la que la composición comprende por lo menos seis metabolitos distintos, tres metabolitos distintos para modular cada una de las dos o más bacterias.
  15. 15. Composición para la utilización según la reivindicación 12, en la que el método modulaBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringensy en donde la composición comprende por lo menos nueve metabolitos distintos, tres metabolitos distintos para modular cada uno deBifidobacterium, LactobacillusyClostridium perfringens.
  16. 16. Composición para la utilización según la reivindicación 12, en donde la composición se administra al animal de compañía por lo menos una vez a la semana, preferentemente dos o tres veces a la semana o por lo menos una vez al día.
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