ES2981652T3

ES2981652T3 - Derivados de 1-(6-(metoxi)piridazín-3-il)ciclopropán-1-carboxamida como moduladores de autotaxina (ATX) para eltratamiento de enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias

Info

Publication number: ES2981652T3
Application number: ES20743688T
Authority: ES
Inventors: Christian Kuttruff; Tom Bretschneider; Cédrickx Godbout; Hannes Koolman; Domnic Martyres; Gerald Roth
Original assignee: Boehringer Ingelheim International GmbH
Current assignee: Boehringer Ingelheim International GmbH
Priority date: 2019-07-22
Filing date: 2020-07-21
Publication date: 2024-10-09
Anticipated expiration: 2040-07-21
Also published as: KR20220035952A; HRP20240831T1; AU2020317642B2; CN114206871A; WO2021013832A1; JP2022541308A; FI4003999T3; SI4003999T1; HUE067725T2; CN114206871B; US20210024492A1; JP7617165B2; MX2022000956A; TWI861165B; BR112022001176A2; US11465982B2; RS65579B1; EP4003999B1; CA3146439A1; DK4003999T3

Abstract

La presente invención se refiere a derivados de 1-(6-(metoxi)piridazin-3-il)ciclopropano-1-carboxamida como moduladores de autotaxina (ATX) para el tratamiento de enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias o fibróticas, como por ejemplo la enfermedad pulmonar idiopática (FPI) o la esclerosis sistémica (ES). La presente descripción describe compuestos ejemplares (por ejemplo, páginas 50 a 65; ejemplos 1.1 a 1.31) así como datos biológicos relevantes de los mismos (por ejemplo, páginas 14 a 21, tablas 1 a 9). Un compuesto ejemplar es, por ejemplo, N-(4-(7-acetil-2,7-diazaspiro[3.5]nonan-2-il)bencil)-1-(6-((6-(trifluorometil)piridin-3-il)metoxi)piridazin-3-il)ciclopropano-1-carboxamida (ejemplo 1.1). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de 1-(6-(metoxi)piridazín-3-il)cidopropán-1-carboxamida como moduladores de autotaxina (ATX) para el tratamiento de enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevas piridazinas, a procedimientos para su preparación, a composiciones farmacéuticas que las contienen y a su utilización terapéutica, particularmente en el tratamiento y/o la prevención de enfermedades y trastornos mediados por la autotaxina.

Antecedentes de la invención

La autotaxina (ATX, ENPP2) es un enzima secretado que es responsable de hidrolizar la lisofosfatidilcolina (LPC, por sus siglas en inglés) en el lípido bioactivo ácido lisofosfatídico (LPA, por sus siglas en inglés) mediante su actividad de lisofosfolipasa D. A su vez, el LPA ejerce sus efectos mediante la interacción con seis GPCR (receptores de LPA 1 a 6, LPAR1-6) (Hourben AJ, 2011). La señalización de ATX-LPA se ha implicado en, por ejemplo, la angiogénesis, la inflamación crónica, las enfermedades autoinmunitarias, las enfermedades fibróticas, la progresión del cáncer y las metástasis tumorales. Por ejemplo, el LPA que actúa sobre LPAR1, induce la migración, proliferación y diferenciación de fibroblastos pulmonares; modula la función de barrera epitelial y endotelial, y promueve la apoptosis de células epiteliales pulmonares (Budd, 2013). Se ha mostrado que la inhibición de la ATX, la deleción del gen de LPAR1 y los antagonistas selectivos de LPAR1 resultan eficaces en modelos preclínicos de fibrosis del pulmón y la piel (Tager AM, 2008; Swaney J, 2010, Casetelino FV, 2016).

En los pacientes de fibrosis pulmonar idiopática (FPI), los niveles de LPA en el líquido de lavado broncoalveolar están incrementados (Tager et al., 2008, Nat. Med.) y se han detectado concentraciones incrementadas de ATX en el tejido pulmonar fibrótico en el ser humano (Oikonomou et al., 2012, AJRCMB). Los niveles de LPA están elevados en el condensado de aliento exhalado de sujetos con FPI (Montesi et al., 2014_BMCPM) y la LPC está multiplicada por 2 en suero de pacientes de FPI estables (Rindlisbacher et al., 2018, Resp. Res.).

Por lo tanto, los niveles incrementados de ATX, y/o los niveles incrementados de LPA, la expresión alterada del receptor de LPA y las respuestas alteradas a LPA podrían afectar a varias afecciones fisiopatológicas relacionadas con la señalización de ATX-LPA.

Las enfermedades pulmonares intersticiales (EPI) se caracterizan por inflamación y fibrosis del intersticio, el tejido y el espacio entre los alvéolos pulmonares (du Bois, Nat. Rev. Drug Discov. 9:129-140, 2010). Puede producirse una EPI cuando una lesión en los pulmones induce una respuesta de cicatrización anormal. De esta manera, las EPI también incluyen las enfermedades pulmonares intersticiales fibrosantes progresivas (EPIFP), en las que la respuesta a la lesión pulmonar se vuelve progresiva, autosostenida e independiente de la asociación o desencadenante clínico original. Las EPIFP más destacadas son las fibrosis pulmonares idiopáticas (FPI) y la esclerosis sistémica-EPI (ES-EPI). La FPI es una enfermedad pulmonar fibrótica crónica irreversible y en última instancia mortal caracterizada por una fibrosis progresiva en el intersticio del pulmón. que conduce a un volumen pulmonar decreciente y a insuficiencia pulmonar progresiva. La FPI también se caracteriza por un patrón histopatológico específico conocido como neumonía intersticial habitual (NIH) (Raghu et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 183: 788-824).

La esclerosis sistémica (ES), también denominada escleroderma, es una enfermedad reumática inmunomediada y de etiología compleja. Es una enfermedad heterogénica multiorgánica caracterizada por fibrosis extensiva, vasculopatía y autoanticuerpos contra diversos antígenos celulares, con alta mortalidad. Es un trastorno raro, una enfermedad huérfana con una elevada necesidad médica no satisfecha. Los signos clínicos tempranos de la ES pueden ser variados. El fenómeno de Raynaud y el reflujo gastroesofágico con frecuencia se presentan en estadios tempranos de la enfermedad (Rongioletti F, et al., J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2015; 29: 2399-404). Algunos pacientes se presentan con enfermedad inflamatoria de la piel, dedos hinchados e inflamados, inflamación musculoesquelética o manifestaciones constitucionales, como la fatiga. La deposición excesiva de colágeno en la piel de los pacientes hace que la piel sea gruesa y dura. En algunos pacientes, se observan manifestaciones de tipo orgánico de la enfermedad, como fibrosis pulmonar, hipertensión arterial pulmonar, insuficiencia renal o complicaciones gastrointestinales. Además, una de las manifestaciones más habituales de la afectación inmunitaria es la presencia de niveles anormales de anticuerpos autoinmunitarios en el núcleo de las propias células (anticuerpos antinucleares, AAN) que se observan en prácticamente todos los pacientes de ES (Guiducci S et al., Isr. Med. Assoc. J. 2016; 18: 141-43). La EPI y la hipertensión arterial pulmonar (HAP) son las causas más frecuentes de muerte en pacientes de ES (Tyndall AJ et al. Ann. Rheum. Dis. 2010; 69: 1809-15).

Los pacientes de ES se clasifican en dos subgrupos principales de enfermedad: esclerosis sistémica cutánea difusa y esclerosis sistémica cutánea limitada (LeRoy<e>C, et al., J. Rheumatol. 1988; 15:202-5). Tres características clínicas: la fibrosis (cicatrización) excesiva, la vasculopatía y la autoinmunidad, aparentemente subyacen a los procesos que resultan en las diferentes manifestaciones que caracterizan la ES. Actualmente se considera que la ES es una manifestación de la reparación desregulada o disfuncional del tejido conectivo frente a la lesión (Dentón CP et al., Lancet 2017; 390: 1685-99).

Por lo tanto, resulta deseable proporcionar inhibidores potentes de ATX.

Se proporciona una revisión de los inhibidores de ATX de diversas clases estructurales en D. Castagna et al. (J. Med. Chem. 59:5604-5621, 2016). El documento n.° WO2014/139882 da a conocer compuestos que son inhibidores de ATX, que presentan la fórmula estructural eneralizada si uiente:

El ejemplo 2 en dicha referencia se describe adicionalmente en N. Desroy, et al. (J. Med. Chem. 2017, 60, 3580 3590 en el ejemplo 11) como el primer inhibidor en su clase de la ATX sometido a evaluación clínica para el tratamiento de la fibrosis pulmonar idiopática. En C. Kuttruff, et al. (ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8, 1252-1257) se da a conocer el inhibidor de ATX llamado BI-2545 (Ejemplo 19), que reduce significativamente los niveles de LPA in vivo. El documento n.° WO2013/061297 A1 describe derivados de 6-amino-piridazín-3-il-carboxamida como moduladores de autotaxina para el tratamiento de, p. ej., enfermedades fibróticas.

Descripción detallada de la invención

La presente invención proporciona nuevas piridazinas que son inhibidores inesperadamente potentes de la autotaxina (ensayo A), que se caracterizan además por:

- elevada potencia en sangre completa humana (ensayo B), y

- una reducción significativa de los niveles de concentración plasmática de LPA in vivo durante varias horas (ensayo C).

Los compuestos de la presente invención resultan útiles como agentes para el tratamiento o la prevención de enfermedades o afecciones en las que la actividad de ATX y/o la señalización de LPA están implicadas en la etiología o patología de la enfermedad o alternativamente están asociadas con por lo menos un síntoma de la enfermedad. La señalización de ATX-LPA se ha implicado en, por ejemplo, la angiogénesis, la inflamación crónica, las enfermedades autoinmunitarias, las enfermedades fibróticas, la progresión del cáncer y las metástasis tumorales.

Los compuestos de la invención son superiores a los dados a conocer en la técnica anterior en términos de la combinación de los parámetros siguientes:

- potencia como inhibidores de ATX,

- potencia como inhibidores de ATX en sangre completa humana,

- reducción de los niveles de concentración plasmática de LPA in vivo durante varias horas.

La ATX es una proteína plasmática soluble que es activa en sangre completa heparinizada. Su sustrato, la LPC, es muy abundante; su concentración es del orden micromolar. Por lo tanto, un ensayo de sangre completa a concentraciones de sustrato fisiológicas es un ensayo altamente relevante que es predictivo de la eficacia de los inhibidores de ATX in vivo.

La reducción de LPA in vivo se determina mediante la medición de la concentración plasmática de LPA tras la administración oral de los compuestos de la presente invención. El LPA es un líquido bioactivo muy potente, que activa eficientemente las rutas corriente abajo mediante los receptores de LPA 1-6 de una manera dependiente de la concentración. El bloqueo pronunciado y sostenido de la formación de LPA mediante inhibición de ATX se evalúa mediante la medición del grado de reducción de LPA 8 horas después de la administración de compuesto. Una reducción elevada del LPA plasmático a las 8 h es, por lo tanto, altamente indicativa de eficacia y duración sostenida de la acción in vivo, así como de acoplamiento sostenido con la diana de los receptores de LPA.

Los compuestos de la presente invención difieren estructuralmente de los Ejemplos 2 y 12 en el documento n.° WO2014/139882 y en el Ejemplo 19 en ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8, 1252-1257, en el aspecto de que contienen un núcleo central de piridazina con sustituyentes en las posiciones 3 y 6. Esta diferencia estructural conduce inesperadamente a una combinación superior de: (i) inhibición de ATX, (ii) inhibición de ATX en sangre completa humana y (iii) niveles de concentración plasmática reducidos de LPA in vivo durante varias horas.

En consecuencia, los compuestos de la presente invención demuestran un acoplamiento in vivo con la diana elevado y se prevé que presenten una eficacia más alta en el ser humano.

La presente invención proporciona nuevos compuestos según la fórmula (I):

en la que:

A es piridilo sustituido con uno o dos elementos del grupo que consiste en fluoro y F1-7-fluoro-alquilo C1-3;

E se selecciona del grupo que consiste en fenilo y piridilo sustituido opcionalmente con uno o dos elementos del grupo que consiste en fluoro y F1-7-fluoro-alquilo C1-3;

K se selecciona del grupo que consiste en:

R3 se selecciona del grupo que consiste en R4(O)C-, metilo y

R4 es metilo.

Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que A es piridilo sustituido con uno o dos de F1-3-fluoro-alquilo C-i, y los sustituyentes E y K se definen tal como en la realización anterior.

Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que A es piridilo sustituido con uno o dos elementos del grupo que consiste en F2HC y F3C; y los sustituyentes E y K se definen tal como en la realización anterior.

Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que A se selecciona del grupo que consiste en:

y los sustituyentes E y K se definen tal como en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I),

en la que E se selecciona del grupo que consiste en fenilo y piridilo sustituidos opcionalmente con uno o dos elementos del grupo que consiste en F y F3C, y los sustituyentes A y K se definen tal como en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Otra realización de la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), en la que E se selecciona del grupo que consiste en:

y los sustituyentes A y K están definidos tal como en cualquiera de las realizaciones anteriores.

Resulta preferente un compuesto de fórmula (I), según la presente invención, seleccionado del grupo que consiste en:

Una realización adicional se refiere a una composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula I según la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

Una realización adicional se refiere a un compuesto de fórmula (I) según la presente invención, para la utilización como un medicamento.

Términos y definiciones utilizados

Los términos no definidos específicamente en la presente memoria deben recibir los significados que les daría el experto en la materia a la luz de la exposición y el contexto. Sin embargo, tal como se utiliza en la especificación, a menos que se especifique lo contrario, los términos siguientes presentan el significado indicado y se siguen las convenciones siguientes.

En los grupos, radicales o fracciones definidos posteriormente, el número de átomos de carbono con frecuencia se especifica precediendo al grupo, por ejemplo, «alquilo C<1 -6>» significa un grupo o radical alquilo que presenta entre 1 y 6 átomos de carbono. En general, en grupos como HO, H<2>N, (O)S, (O)<2>S, NC (ciano), HOOC, F<3>C o similares, el experto en la materia puede conocer los puntos de unión de radical a la molécula a partir de las valencias libres del grupo mismo. Para grupos combinados que comprenden dos o más subgrupos, el último subgrupo nombrado es el punto de unión de radical, por ejemplo, el sustituyente "aril-alquilo C<1 -3>" significa un grupo arilo que está unido a un grupo alquilo C<1 -3>, estando este último unido al núcleo o al grupo al que está unido el sustituyente. En el caso de que se ilustre un compuesto de la presente invención en forma de un nombre químico y como una fórmula, en el caso de cualquier discrepancia, prevalecerá la fórmula. Puede utilizarse un asterisco en las subfórmulas para indicar el enlace que está conectado a la molécula central según está definida. La numeración de los átomos de un sustituyente se inician con el átomo que está más próximo al centro o al grupo al que está unido el sustituyente.

Por ejemplo, la expresión «grupo 3-carboxipropilo» representa el sustituyente siguiente:

en el que el grupo carboxi está unido al tercer átomo de carbono del grupo propilo. Los términos «1-metilpropilo-», 2,2-dimetilpropilo-» o «ciclopropilmetilo-» representan los grupos siguientes:

El asterisco puede utilizarse en subfórmulas para indicar el enlace que está conectado a la molécula central según se ha definido.

El término «sustituido» tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a que uno o más hidrógenos en el átomo designado se sustituyen por una selección del grupo indicado, con la condición de que no se exceda la valencia normal del átomo designado y de que la sustitución resulte en un compuesto estable.

El término "alquilo C<1-n>", en el que n es un número entero seleccionado de 2, 3, 4, 5 o 6, preferentemente 4 o 6, solo o en combinación con otro radical, denota un radical hidrocarburo acíclico, saturado, ramificado o lineal con 1 a n átomos de C. Por ejemplo, el término «alquilo C<1 -5>» comprende los radicales H<3>C-, H<3>C-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH(CH<3>)-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-CH(CH<3>)-, H<3>C-CH(CH<3>)-CH<2>-, H<3>C-C(CH<3>)<2>-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-CH<2>-CH(CH<3>)-, H<3>C-CH<2>-CH(CH<3>)-CH<2>-, H<3>C-CH(CH<3>)-CH<2>-CH<2>-, H<3>C-CH<2>-C(CH<3>)<2>-, H<3>C-C(CH<3>)<2>-CH<2>-, H<3>C-CH(CH<3>)-CH(CH<3>)- y H<3>C-CH<2>-CH(CH<2>CH<3>)-.

El término "halógeno" denota cloro, bromo, yodo y flúor. El término «halo» añadido a un grupo «alquilo», «alquileno» o «cicloalquilo» (saturado o insaturado» es un grupo alquilo o cicloalquilo en el que uno o más átomos de hidrógeno se han sustituido por un átomo de halógeno seleccionado de entre flúor, cloro y bromo, preferentemente flúor y cloro; resulta particularmente preferente el flúor. Entre los ejemplos se incluyen: H<2>FC-, HF<2>C- y F<3>C-.

El término «fenilo» se refiere al radical del anillo siguiente:

íT i^

El término «piridinilo» se refiere al radical del anillo siguiente:

El término «piridazina» se refiere al anillo siguiente:

A menos que se indique específicamente, en toda la especificación y en las reivindicaciones adjuntas, una fórmula o nombre químico dado comprenderá tautómeros y todos los estereoisómeros, isómeros ópticos y geométricos (p. ej., enantiómeros, diastereómeros, isómeros E/Z, etc.) y racematos de los mismos, así como mezclas en diferentes proporciones de los enantiómeros separados, mezclas de diastereómeros, o mezclas de cualquiera de las formas anteriormente indicadas en donde existan dichos isómeros y enantiómeros, así como sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y solvatos de los mismos, tales como, por ejemplo, hidratos, incluyendo solvatos de los compuestos libres o solvatos de una sal del compuesto.

En general, pueden obtenerse estereoisómeros sustancialmente puros de acuerdo con principios sintéticos conocidos por el experto en la materia, p. ej., mediante separación de mezclas correspondientes, mediante la utilización de materiales de partida estereoquímicamente puros y/o mediante síntesis estereoselectiva. Es bien conocido de la técnica cómo preparar formas ópticamente activas, tal como mediante resolución de formas racémicas o mediante la síntesis, p. ej., a partir de materiales de partida ópticamente activos, y/o mediante la utilización de reactivos quirales.

Los compuestos enantioméricamente puros de la presente invención o intermediarios pueden prepararse mediante síntesis asimétrica, por ejemplo mediante preparación y posterior separación de compuestos diastereoméricos apropiados o intermediarios, los cuales pueden separarse mediante métodos conocidos (p. ej., mediante separación cromatográfica o cristalización) y/o mediante la utilización de reactivos quirales, tal como materiales de partida quirales, catalizadores quirales o auxiliares quirales.

Además, es conocido por el experto en la materia cómo preparar compuestos enantioméricamente puros a partir de las mezclas racémicas correspondientes, tal como mediante separación cromatográfica de las mezclas racémicas correspondientes en fases estacionarias quirales, o mediante resolución de una mezcla racémica utilizando un agente de resolución apropiado, p. ej., mediante la formación de sal diastereomérica del compuesto racémico con ácidos o bases ópticamente activos, la posterior resolución de las sales y la liberación del compuesto deseado a partir de la sal; o mediante derivatización de los compuestos racémicos correspondientes con reactivos auxiliares quirales ópticamente activos, la posterior separación de diastereómero y la eliminación del grupo auxiliar quiral; o mediante resolución cinética de un racemato (p. ej., mediante resolución enzimática); mediante cristalización enantioselectiva a partir de un conglomerado de cristales enantiomorfos bajo condiciones adecuadas, o mediante cristalización (fraccionada) a partir de un solvente adecuado en la presencia de un auxiliar quiral ópticamente activo.

La expresión «farmacéuticamente aceptable» se utiliza en la presente memoria para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de administración que resultan, dentro del alcance del criterio médico razonable, adecuadas para la utilización sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acorde con una relación beneficio/riesgo razonable.

Tal como se utiliza en la presente memoria, la expresión «sal farmacéuticamente aceptable» se refiere a derivados de los compuestos dados a conocer, en los que el compuesto parental forma una sal o un complejo con un ácido o una base. Entre los ejemplos de ácidos que forman una sal farmacéuticamente aceptable con un compuesto parental que contiene una fracción básica se incluyen ácidos minerales u orgánicos, tales como ácido bencenosulfónico, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido etanosulfónico, ácido fumárico, ácido gentísico, ácido bromhídrico, ácido clorhídrico, ácido maleico, ácido málico, ácido malónico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido 4-metil-bencenosulfónico, ácido fosfórico, ácido salicíclico, ácido succínico, ácido sulfúrico y ácido tartárico.

Entre los ejemplos de cationes y bases que forman una sal farmacéuticamente aceptable con un compuesto parental que contiene una fracción ácida se incluyen Na<+>, K<+>, Ca<2+>, Mg<2>, NH<4+>, L-arginina, 2,2'-iminobisetanol, L-lisina, N-metil-D-glucamina o tris(hidroximetil)-aminometano.

Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto parental que contiene una fracción básica o ácida, mediante métodos químicos convencionales. Generalmente, dichas sales pueden prepararse mediante la reacción de las formas ácida o básica libre de dichos compuestos con una cantidad suficiente de la base o ácido apropiado en agua o en un diluyente orgánico, como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo, o una mezcla de los mismos.

Las sales de ácidos aparte de los mencionados anteriormente que resultan útiles, por ejemplo, para purificar o aislar los compuestos de la presente invención (p. ej., sales trifluoroacetato) también forman una parte de la presente invención.

Ensayos biológicos

Se determinó la actividad biológica de los compuestos mediante los métodos siguientes:

Ensayo A: Ensayo bioquímico de ATX

Se suplementó ATX recombinante 5 nM (Cayman Chemicals) con tampón Tris 50 mM (pH 8,0) que contenía KCl 3 mM, CaCl21 mM, MgCh 1 mM, NaCl 0,14 mM y albúmina de suero bovino al 0,1 %. Los compuestos de ensayo se disolvieron en DMSO y se sometieron a ensayo en el intervalo de entre 0,1 nM y 10 pM. Se inició la reacción enzimática (22,5 pl) mediante la adición de 2,5 pl de LPC 18:1 10 pM (Avanti Lipids, Alabaster, AL, EE. UU.). Tras una incubación de 2 h a temperatura ambiente, la reacción se detuvo mediante la adición de 20 pl de agua que contenía LPA 20:4 500 nM como patrón interno y 100 pl de 1-butano para extraer el LPA. Seguidamente, se centrifugaron las placas a 4000 rpm, a 4 °C durante 2 min. La fase de butanol superior resultante se utilizó directamente para la inyección en un sistema RapidFire (Agilent).

El automuestreador RapidFire se acopló a una bomba binaria (Agilent 1290) y un Triple Quad 6500 (ABSiex, Toronto, Canadá). Este sistema se dotó de un bucle de 10 pl, un cartucho HILIC d E 5-pL Waters Atlantis (Waters, Elstree, Reino Unido), acetonitrilo al 90 % que contenía acetato amónico 10 mM como eluyente A y acetonitrilo al 40 % que contenía acetato amónico 10 mM como eluyente B. Para más información ver (Bretschneider et al., SLAS Discovery, 2017). 1 La EM se operó en modo negativo con una temperatura de la fuente de 550 °C, gas de cortina=35, gas 1=65 y gas 2=80. Se determinaron las transiciones y parámetros de EM siguientes (PD: potencial de desagrupación y EC: energía de colisión) para los LPA respectivos:

LPA 18:1 en 435,2/152,8, PD=-40, EC=-28 y LPA 20:4 en 457,2/152,8, PD=-100, EC=-27).

Se realizó un seguimiento de la formación de LPA 18:1 y se evaluó como proporción respecto a LPA 20:4.

Tabla 1: Datos biológicos para compuestos para la invención tal como se obtienen en el Ensayo A.

(continuación)

Tabla 2: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (Ejemplos 2 y 12 en el documento n.° WO2014/139882) tal como se obtienen en el Ensayo A.

Tabla 3: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (Ejemplo 19 en ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8,

1252-1257) tal como se ha obtenido en el Ensayo A.

Ensayo B: Ensayo de ATXen sangre completa

Se suplementaron 45 pl de sangre completa humana con 5 pl del compuesto de ensayo, se disolvieron en solución salina tamponada con fosfato (intervalo de concentraciones: 0,12 nM a 100 pM). Dicha mezcla se incubó durante 1 h a 37 °C y se detuvo mediante la adición de 100 pl de tampón de hidrogenofosfato disódico 40 mM que contenía ácido cítrico 30 mM (pH 4) y LPA 17:0 1 pM (patrón interno). Se extrajo el LPA mediante la adición de 500 pl de 1-butanol, seguido de una centrifugación de 10 min a 4000 rpm, a 4 °C. A partir del sobrenadante orgánico resultante se transfirió una alícuota de 200 pl a una placa de 96 pocillos profundos y se transfirió a la medición de EM/EM basada en RapidFire

El automuestreador RapidFire se acopló a una bomba binaria (Agilent 1290) y un Triple Quad 6500 (ABSiex, Toronto, Canadá). Este sistema se dotó de un bucle de 10 pl, un cartucho HILIC de 5 pl Waters Atlantis (Waters, Elstree, Reino Unido), acetonitrilo al 90 % que contenía acetato amónico 10 mM como eluyente A y acetonitrilo al 40 % que contenía acetato amónico 10 mM como eluyente B. Para más información ver (Bretschneider et al., SLAS Discovery, 2017). La EM se operó en modo negativo con una temperatura de la fuente de 550 °C, gas de cortina=35, gas 1=65 y gas 2=80. Se determinaron las transiciones y parámetros de EM siguientes (PD: potencial de desagrupación y EC: energía de colisión) para los LPA respectivos: LPA 18:2 en 433,2/152,8, PD=-150, EC=-27 y LPA 17:0 en 423,5/152,8, PD=-100.

Se realizó un seguimiento de la formación de LPA 18:2 y se evaluó como proporción respecto a LPA 17:0.

Tabla 4: Datos biológicos para compuestos para la invención obtenidos en el Ensayo B.

(continuación)

Tabla 5: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (Ejemplos 2 y 12 en el documento n.°

WO2014/139882) tal como se obtienen en el Ensayo B.

Tabla 6: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (Ejemplo 19 en ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8,

1252-1257) tal como se ha obtenido en el Ensayo B.

Ensayo C: in vivo

La sustancia de ensayo se solubilizó en Natrosol al 0,5 % suplementado con Tween-80 al 0,015 % para la aplicación oral en ratas a una dosis de 5 mg/kg. Se recogieron muestras de sangre antes de la administración de compuesto y 8 horas después de la aplicación sobre hielo utilizando EDTA como agente de coagulación. Posteriormente, se preparó plasma mediante centrifugación y se almacenó hasta el análisis a -20 °C.

Los LPA de muestras de plasma se extrajeron mediante la utilización del procedimiento descrito por Scherer et al. (Clinical Chemistry 2009, 55, 1218-22). Se mezclaron 35 pl de plasma heparinizada con 200 pl de tampón de hidrogenofosfato disódico 40 mM que contenía ácido cítrico 30 mM (pH 4) y LPA 17:0 1 pM (patrón interno). Posteriormente, se añadieron 500 pl de butanol y se sometieron a agitación vigorosa durante 10 min. Se centrifugaron muestras posteriormente a 4000 rpm, a 4 °C durante 10 min. Se transfirieron 500 pl de la fase orgánica superior a una placa de 96 pocillos profundos nueva y se evaporaron con un flujo de nitrógeno suave de 15 psi durante 45 min. El residuo resultante se disolvió en 100 pl de etanol antes del análisis de CL-EM.

Método de CL-EM para el análisis de muestras in vivo

Un Triple Quad 6500 (ABSciex, Toronto, Canadá) se dotó de un sistema de CL Agilent 1290 (Agilent, Santa Clara, CA), un automuestreador CTC y una columna de CL Atlantis 50x2,1 mm HILIC de 3 pm (Waters, Elstree, Reino Unido). El eluyente A contenía ácido fórmico al 0,2 % y formato amónico 50 mM en agua, mientras que el eluyente B consistía en ácido fórmico al 0,2 % en acetonitrilo. El gradiente de CL partía de 95 % de solvente B y se reducía en 1,5 min a 75 % y en 0,2 min a 50 % de solvente B, con un incremento adicional del caudal de 500 a 700 pl-min-1. A los 1,8 min, el solvente B se restableció a 95 % y se mantuvo constante durante 0,7 min para el reequilibrado de la columna. Se realizó un seguimiento de las especies de LPA siguientes (PD: potencial de desagrupación y EC: energía de colisión): LPA 16:0 en 409,2/152,8, PD=-150, EC=-28; LPA 18:0 en 437,3/152,8, PD=-60, EC=-28; LPA 18:1 en 435,2/152,8, PD=-40, EC=-28; LPA 18:2 en 433,2/152,8, PD=-150, EC=-28; LPA 20:4 en 457,2/152,8, PD=-100, EC=-29 y LPA 17:0 en 423,5/152,8, PD=-100, EC=-36. Se calculó el agotamiento de LPA en porcentaje basándose en los niveles basales de LPA antes de la aplicación de compuesto de ensayo. La suma de LPA se refiere a las especies 16:0; 18:0; 18:1; 18:2 y 20:4

Tabla 7: Datos biológicos para compuestos para la invención obtenidos en el Ensayo C.

Tabla 8: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (Ejemplos 2 y 12 en el documento n.° WO2014/139882) tal como se obtienen en el Ensayo C.

Tabla 9: Datos biológicos para compuestos de la técnica anterior (Ejemplo 19 en ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8,

1252-1257) tal como se ha obtenido en el Ensayo C.

Método de tratamiento

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula general (I) que resultan útiles en la prevención y/o el tratamiento de una enfermedad y/o afección asociada o modulada por ATX y/o la actividad biológica de LPA, incluyendo, aunque sin limitación, el tratamiento y/o la prevención de afecciones inflamatorias, enfermedades fibróticas, afecciones del sistema respiratorio, afecciones renales, afecciones hepáticas, afecciones vasculares y cardiovasculares, cáncer, afecciones oculares, afecciones metabólicas, colestasis y otras formas de prurito crónico, y rechazo agudo y crónico del trasplante de órgano y afecciones del sistema nervioso. Los compuestos de fórmula general (I) resultan útiles para la prevención y/o el tratamiento de afecciones inflamatorias, incluyendo, aunque sin limitación, síndrome de Sjogren, artritis, osteoartritis, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias, tales como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y el asma crónico; enfermedades fibróticas, incluyendo aunque sin limitación, enfermedades pulmonares intersticiales (EPI), incluyendo las enfermedades pulmonares intersticiales fibrosantes progresivas (EpIFP), tales como la fibrosis pulmonar idiopática (FPI) y ES-EPI, fibrosis miocárdica y vascular de la enfermedad pulmonar intersticial familiar, fibrosis renal, fibrosis hepática, fibrosis pulmonar, fibrosis de la piel, enfermedad vascular del colágeno, incluyendo la esclerosis sistémica (ES) y la peritonitis encapsulante; afecciones del sistema respiratorio, incluyendo, aunque sin limitación, enfermedades pulmonares parenquimatosas difusas de diferente etiología, incluyendo la fibrosis inducida farmacológicamente iatrogénica, fibrosis inducida ocupacional y/o medioambiental, enfermedades sistémicas y vasculitis, enfermedades granulomatosas (sarcoidosis, neumonía por hipersensibilidad); afecciones renales, incluyendo, aunque sin limitación, lesión renal aguda y enfermedad renal crónica con y sin proteinuria, incluyendo la enfermedad renal de estadio terminal (ERET), esclerosis glomerular segmentaria focal, nefropatía de IgA, vasculitis/enfermedades sistémicas, así como rechazo del trasplante renal agudo y crónico; condiciones hepáticas, incluyendo, aunque sin limitación, cirrosis hepática, congestión hepática, enfermedad hepática colestásica, incluyendo prurito, colangitis biliar primaria, esteatohepatitis no alcohólica y rechazo del trasplante hepático agudo y crónico; afecciones vasculares, incluyendo, aunque sin limitación, ateroesclerosis, enfermedad vascular trombótica, así como microangiopatías trombóticas, arteriopatía proliferativa (tal como células mioíntimas hinchadas circundada por matriz extracelular mucinosa y engrosamiento nodular), disfunción endotelial; afecciones cardiovasculares, incluyendo, aunque sin limitación, síndrome coronario agudo, enfermedad cardíaca coronaria, infarto de miocardio, hipertensión arterial y pulmonar, arritmia cardíaca, tal como fibrilación auricular, ictus y otros daños vasculares; cáncer y metástasis del cáncer, incluyendo, aunque sin limitación, retinopatía proliferativa y no proliferativa (diabética), degeneración macular asociada a la edad (DMAE) seca y húmeda, edema macular, oclusión arterial/venosa central, lesión traumática, glaucomas; afecciones metabólicas, incluyendo, aunque sin limitación, obesidad, dislipemia y diabetes; afecciones del sistema nervioso, incluyendo, aunque sin limitación, dolor neuropático, enfermedad de Alzheimer, esquizofrenia, neuroinflamación (por ejemplo, astrogliosis), neuropatías periféricas y autonómicas (diabéticas).

De acuerdo con lo anterior, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I) para la utilización como medicamento.

Además, la presente invención se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula general (I) para el tratamiento y/o la prevención de una enfermedad y/o afección asociada o modulada por ATX y/o la actividad biológica de LPA.

Además, la presente invención se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula general (I) para el tratamiento y/o la prevención de una enfermedad y/o afección asociada o modulada por ATX y/o la actividad biológica de LPA, incluyendo, aunque sin limitación, afecciones inflamatorias, enfermedades fibróticas, afecciones del sistema respiratorio, afecciones renales, afecciones hepáticas, afecciones vasculares y cardiovasculares, cáncer, afecciones oculares, afecciones metabólicas, colestasis y otras formas de prurito crónico y rechazo del trasplante de órgano agudo y crónico y afecciones del sistema nervioso.

Además, la presente invención se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula general (I) para el tratamiento y/o la prevención de afecciones inflamatorias, incluyendo, aunque sin limitación, síndrome de Sjogren, artritis, osteoartritis, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias, tales como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) y el asma crónico; enfermedades fibróticas, incluyendo aunque sin limitación, enfermedades pulmonares intersticiales (EPI), incluyendo las enfermedades pulmonares intersticiales fibrosantes progresivas (EPIFP), tales como la fibrosis pulmonar idiopática (FPI) y ES-EPI, fibrosis miocárdica y vascular de la enfermedad pulmonar intersticial familiar, fibrosis renal, fibrosis hepática, fibrosis pulmonar, fibrosis de la piel, enfermedad vascular del colágeno, incluyendo la esclerosis sistémica (ES) y la peritonitis encapsulante; afecciones del sistema respiratorio, incluyendo, aunque sin limitación, enfermedades pulmonares parenquimatosas difusas de diferente etiología, incluyendo la fibrosis inducida farmacológicamente iatrogénica, fibrosis inducida ocupacional y/o medioambiental, enfermedades sistémicas y vasculitis, enfermedades granulomatosas (sarcoidosis, neumonía por hipersensibilidad); afecciones renales, incluyendo, aunque sin limitación, lesión renal aguda y enfermedad renal crónica con y sin proteinuria, incluyendo la enfermedad renal de estadio terminal (ERET), esclerosis glomerular segmentaria focal, nefropatía de IgA, vasculitis/enfermedades sistémicas, así como rechazo del trasplante renal agudo y crónico; condiciones hepáticas, incluyendo, aunque sin limitación, cirrosis hepática, congestión hepática, enfermedad hepática colestásica, incluyendo prurito, colangitis biliar primaria, esteatohepatitis no alcohólica y rechazo del trasplante hepático agudo y crónico; afecciones vasculares, incluyendo, aunque sin limitación, ateroesclerosis, enfermedad vascular trombótica, así como microangiopatías trombóticas, arteriopatía proliferativa (tal como células mioíntimas hinchadas circundada por matriz extracelular mucinosa y engrosamiento nodular), disfunción endotelial; afecciones cardiovasculares, incluyendo, aunque sin limitación, síndrome coronario agudo, enfermedad cardíaca coronaria, infarto de miocardio, hipertensión arterial y pulmonar, arritmia cardíaca, tal como fibrilación auricular, ictus y otros daños vasculares; cáncer y metástasis del cáncer, incluyendo, aunque sin limitación, retinopatía proliferativa y no proliferativa (diabética), degeneración macular asociada a la edad (DMAE) seca y húmeda, edema macular, oclusión arterial/venosa central, lesión traumática, glaucomas; afecciones metabólicas, incluyendo, aunque sin limitación, obesidad, dislipemia y diabetes; afecciones del sistema nervioso, incluyendo, aunque sin limitación, dolor neuropático, enfermedad de Alzheimer, esquizofrenia, neuroinflamación (por ejemplo, astrogliosis), neuropatías periféricas y autonómicas (diabéticas).

En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula general (I) para la utilización en el tratamiento y/o la prevención de enfermedades y afecciones anteriormente mencionadas.

En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula general (I) para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento y/o prevención de las enfermedades y afecciones anteriormente mencionados.

En un aspecto adicional de la presente invención, la presente invención se refiere a métodos para el tratamiento o la prevención de las enfermedades y afecciones anteriormente mencionados, en el que el método comprende la administración de una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula general (I) en un ser humano.

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS

Las preparaciones adecuadas para administrar los compuestos de fórmula (I) resultarán evidentes para el experto ordinario en la materia y entre ellas se incluyen, por ejemplo, comprimidos, píldoras, cápsulas, supositorios, pastillas, trociscos, soluciones, jarabes, elixires, sobres, inyectables, inhalables y polvos, etc.

Pueden obtenerse comprimidos adecuados, por ejemplo, mediante la mezcla de uno o más compuestos según la fórmula I con excipientes conocidos, por ejemplo, diluyentes inertes, portadores, desintegrantes, adyuvantes, surfactantes, ligantes y/o lubricantes.

TERAPIA DE COMBINACIÓN

Los compuestos según la presente invención pueden combinarse con otras opciones de tratamiento que es conocido que se utilizan en la técnica, de manera que por lo menos dos compuestos activos en cantidades eficaces se utilizan para tratar una indicación para la que la presente invención resulta útil simultáneamente. Aunque la terapia de combinación preferentemente incluye la administración de dos compuestos activos en el paciente simultáneamente, no resulta necesario que los compuestos se administren en el paciente simultáneamente, aunque estarán presentes en el paciente simultáneamente cantidades eficaces de los compuestos individuales. Los compuestos según la presente invención pueden administrarse con una o más parejas de combinación, tal como se indica de otro modo en la presente memoria.

De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona compuestos de fórmula (I) según cualquiera de las realizaciones anteriores, caracterizados porque el compuesto de fórmula (I) se administra además del tratamiento con una o más moléculas antiinflamatorias de la lista que consiste en moduladores de IL6, moduladores anti-IL6R y moduladores de JAKi de IL13-IL-4.

Según otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las realizaciones anteriores, caracterizado porque el compuesto de fórmula (I) se administra además del tratamiento con una o más moléculas antifibróticas de la lista que consiste en agonistas de CB2, moduladores de TGF, moduladores de FGFR, inhibidores de VEGFR, inhibidores de PDGFR, moduladores de FGF, moduladores de integrina avp6, anticuerpos anti-CTGF, inhibidores de ROCK2, rhPTX-2 (pentraxina-2), inhibidores de JNK1, inhibidores de LOXL2, inhibidores de galectina-3, inhibidores de MK2, inhibidores de la ruta de Wnt, inhibidores de TGFR, moduladores de PDE4, inhibidores de TRPA1 y moduladores de microARN.

Según otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las realizaciones anteriores, caracterizado porque el compuesto de fórmula (I) se administra además de nintedanib.

Según otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las realizaciones anteriores, caracterizado porque el compuesto de fórmula (I) se administra además de pirfenidona.

Preparación

Los compuestos según la presente invención pueden obtenerse utilizando métodos de síntesis que son conocidos por el experto en la materia y se describen en la literatura de la síntesis orgánica. Preferentemente, los compuestos se obtienen análogamente a los métodos de preparación explicados más completamente después en la presente memoria, en particular tal como se describe en la sección experimental.

Los procedimientos generales para preparar los compuestos según la invención resultarán evidentes para el experto en la materia estudiando los esquemas siguientes. Pueden prepararse materiales de partida mediante métodos que se describen en la literatura o en la presente memoria, o pueden prepararse de una manera análoga o similar. Cualesquiera grupos funcionales en los materiales de partida o compuestos intermedios pueden protegerse utilizando grupos protectores convencionales. Dichos grupos protectores pueden cortarse nuevamente en una etapa adecuada dentro de la secuencia de reacción utilizando métodos que resultarán familiares al experto en la materia.

Los compuestos de fórmula general (I) pueden prepararse mediante acoplamiento de amidas de una amina (VII) con ácido (VI).

Los ácidos (VII) se obtienen mediante saponificación de ésteres (VI) ( en donde R es un grupo protector de ácido adecuado, tal como metilo o etilo). Se preparan ésteres (VI) mediante acoplamiento de alcoholes bencílicos (V) a haluros (IV) utilizando una base en la que X es un halógeno, tal como Cl, Br o I. Pueden sintetizarse ésteres (IV) mediante alquilación de halopiridazinas (II) con haluros de alquilo (III), en donde Y es un halógeno, tal como Cl, Br o yodo.

Ejemplos

Parte experimental

Los Ejemplos a continuación pretenden ser ilustrativos de la presente invención sin ser restrictivos de la misma. Las expresiones «temperatura ambiente» y «temperatura ambiental» se utilizan intercambiablemente y designan una temperatura de aproximadamente 20 °C.

Abreviaturas:

(continuación)

Preparación de compuestos de partida

Ejemplo I

Ejemplo 1.1

4-(4-Acetilpiperazín-1-il)-3-fluorobenzonitrilo

A una solución de 0,40 g (1,95 mmoles) de 3-fluoro-4-piperazín-1-il-benzonitrilo (CAS n.° 182181-38-0) y 0,60 ml (4,30 mmoles) de trietilamina en 7 ml de DCM se añadieron 0,14 ml (1,95 mmoles) de cloruro de acetilo y la mezcla se sometió a agitación a TA durante la noche. La mezcla de reacción se trató con 0,09 ml (1,25 mmoles) de trietilamina y se sometió a agitación a TA durante 2 h. La capa orgánica se lavó con agua, se secó con PTK y el solvente se evaporó bajo presión reducida, proporcionando 500 mg del producto en bruto.

C13H14FN3O (M=247,3 g/mol)

EM-IEP: 248 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,82 min (método B)

Se prepararon los compuestos siguientes de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo 1.1) descrito anteriormente:

Ejemplo II

Ejemplo II. 1

1-{4-[4-(aminometil)-2-fluorofenil]piperazín-1-il}etán-1-ona

Una mezcla de 550 mg (2,22 mmoles) de 4-(4-acetilpiperazín-1-il)-3-fluorobenzonitrio (Ejemplo I.1), 55,0 mg de níquel de Raney y 15 ml de amoníaco 7 N en MeOH se sometió a agitación bajo una atmósfera de hidrógeno (50 psi) a 50 °C durante la noche, se filtró y se redujo al vacío, proporcionando 510 mg del producto.

C13H18FN3O (M=251,3 g/mol)

EM-IEP: 252 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,68 min (método A)

Se prepararon los compuestos siguientes de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo II. 1) descrito anteriormente:

Ejemplo III

Ejemplo III. 1

4-(4-Acetilpiperazín-1-il)-2-fluorobenzonitrilo

Una mezcla de 0,50 g (2,50 mmoles) de 4-bromo-2-fluorobenzonitrilo (CAS n.° 105942-08-3), 0,32 g (2,50 mmoles) de 1-(piperazín-1-il)etán-1-ona (CAS n.° 13889-98-0), 1,63 g (5,00 mmoles) de carbonato de cesio y 0,05 g (0,06 mmoles) de XPhos Pd<g>3 (CAS n.° 1445085-55-1) en 2 ml de 1,4-dioxano se sometió a agitación a 80 °C durante la noche. Se diluyó con agua. El sólido restante se filtró, se lavó con agua y se secó bajo una atmósfera de aire, proporcionando 570 mg del producto.

C<13>H<14>FN<3>O (M=247,3 g/mol)

EM-IEP: 248 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,79 min (método A)

Se preparó el compuesto siguiente de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo III.1) descrito anteriormente:

Ejemplo IV

Ejemplo IV. 1

4-{6-Metil-7-oxo-2,6-diazaspiro[3.4]octán-2-il}benzonitrilo

Se trataron 222 mg (1,81 mmoles) de 4-fluorobenzonitrilo (CAS n.° 1194-02-1) y 320 mg (1,81 mmoles) de hidrocloruro de 6-metil-2,6-diazaspiro[3.4]octán-7-ona (CAS n.° 2097951-61-4) diluidos con 1,6 ml de DMSO, con 790 mg (5,62 mmoles) de K2CO3y se sometieron a agitación a 120 °C durante 3 h y a TA durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió y se diluyó con agua. Se filtró el precipitado, se lavó con agua y se secó al vacío a 50 °C, rindiendo 340 mg del producto.

C14H15N3O (M=241,3 g/mol)

EM-IEP: 242 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,79 min (método B)

Se prepararon los compuestos siguientes de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo IX.1) descrito anteriormente:

��

Ejemplo V

Ejemplo V.1

4-{2,7-Diazaspiro[3.5]nonán-2-il}benzonitrilo; ácido trifluoroacético

Se diluyeron 255 mg (0,780 mmoles) de 2-(4-cianofenil)-2,7-diazaspiro[3.5]nonán-7-carboxilato de terc-butilo (Ejemplo IV.2) con 5 ml de DCM y se añadieron 300 |jl (3,89 mmoles) de TFA. La mezcla de reacción se sometió a agitación a TA durante 2 h y se concentró bajo presión reducida, proporcionando 260 mg del producto.

C<i 4>H<i 7>N<a>*C<2>HF<a>O<2>(M=341,3 g/mol)

EM-IEP: 228 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,69 min (método B)

Se prepararon los compuestos siguientes de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo V.1) descrito anteriormente:

Ejemplo VI

4-{2,6-Diazaspiro[3.3]heptán-2-il}benzonitrilo

Una solución de 0,90 g (3,01 mmoles) de 6-(4-cianofenil)-2,6-diazaspiro[3.3]heptán-2-carboxilato de terc-butilo (Ejemplo V.3) en 8 ml de ACN se trató con 1,14 g (6,01 mmoles) de monohidrato de ácido p-toluenosulfónico y se sometió a agitación a TA durante 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se extrajo con solución sat. de NaHCO3. Las capas orgánicas agrupadas se secaron con MgSO4y se concentraron bajo presión reducida, proporcionando 600 mg del producto.

C12H13N3 (M=199,3 g/mol)

EM-IEP: 200 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,62 min (método B)

Ejemplo VII

1-(6-doropiridazín-3-il)-5-cidopropán-1-carboxilato de etilo

Una solución de 13,8 g (68,8 mmoles) de 2-(6-doropiridazín-3-il)acetato de etilo (CAS n.° 1023817-10-8) en 100 ml de DMSO se enfrió en un baño de hielo y se trató con 8,25 g (206,4 mmoles) de hidruro sódico (dispersión al 60 %). La mezcla de reacción se sometió a agitación durante 20 min. Se añadieron 8,89 ml (103,2 mmoles) de dibromoetano a la mezcla de reacción y se sometió a agitación bajo control de la temperatura (máxima: 38 °C) durante 45 min. La mezcla de reacción se enfrió con hielo y se diluyó con solución de NH4CL La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas agrupadas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna (gel de sílice, eluyente: Cy/EtOAc=90/10 a 65/35), proporcionando 11,4 g del producto.

C10HnClN2O2 (M=226,7 g/mol)

EM-IEP: 227 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,86 min (método B)

Ejemplo VIII

Ejemplo VIII. 1

Ácido 1-(6-{[6-(difluorometil)piridín-3-il]metoxi}piridazín-3-il)ciclopropán-1-carboxílico

Se enfriaron 843 mg (5,29 mmoles) de [6-(difluorometil)piridín-3-il]metanol (CAS n.° 946578-33-2) en 8 ml de DMF en un baño de hielo y se añadieron 385 mg (8,82 mmoles) de hidruro sódico (pureza: 55 %). La mezcla se sometió a agitación a TA durante 10 min. Se añadió 1,00 g (4,41 mmoles) de 1-(6-cloropiridazín-3-il)ciclopropán-1-carboxilato de etilo (Ejemplo VII) en 5 ml. Se añadió DMF a la mezcla de reacción y se sometió a agitación a TA durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con una solución fría de NH<4>Cl y se extrajo con EtOAc en tres ocasiones. Se secó la fase orgánica con MgSO<4>y se concentró al vacío, proporcionando el intermediario éster de etilo.

El residuo se trató con MeOH y se añadieron 200 mg (8,35 mmoles) de hidróxido de litio y 3 ml de agua. La mezcla de reacción se sometió a agitación a TA durante la noche y se trató con 2 ml (8,00 mmoles) de solución de hidróxido sódico 4 N. Se sometió a agitación a 45 °C durante 1 h y simultáneamente se evaporó el THF bajo presión reducida. Se añadió DIPE lentamente a la mezcla de reacción y se separó. La fase acuosa se diluyó con solución de NH<4>Cl, se acidificó mediante adición de ácido cítrico y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó con MgSO<4>, se filtró a través de gel de sílice y se redujo a sequedad al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna (gel de sílice, eluyente: DCM/MeOH=100/0 a 85/15), proporcionando 845 mg del producto.

C<15>H<13>F<2>N<3>O<3>(M=321,3 g/mol)

EM-IEP: 322 [M+H]<+>

Rt (HPLC): 0,81 min (método B)

Se preparó el compuesto siguiente de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo VIII. 1) descrito anteriormente:

6-(4-Acetilpiperazín-1 -il)piridín-3-carbonitrilo

Una mezcla de 250 mg (2,05 mmoles) de 6-fluoropiridm-3-carbonitrilo, 315 mg (2,46 mmoles) de 1-acetilpiperazina y 705 ^l (4,10 mmoles) de DIPEA en 3 ml de DMSO se sometió a agitación a 80 °C durante 45 min y se desactivó con solución semiconc. de NaCl. La fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas agrupadas se secaron mediante PTK y se concentraron al vacío, proporcionando 420 mg del producto.

C12H14N4O (M=230,3 g/mol)

EM-IEP: 231 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,72 min (método A)

Ejemplo X

Ejemplo X.1

4-(4-Acetil-3,3-dimetilpiperazín-1-il)benzonitrilo

Se disolvieron 800 mg (1,21 mimóles) de ácido 4-(3,3-dimetilpiperazín-1-il)benzonitrilo-trifluoroacético (Ejemplo VI.6) en 3 ml de piridina y se añadieron 2,00 ml (21,2 mmoles) de anhídrido acético. La mezcla de reacción se sometió a reflujo durante la noche y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se introdujo en sol. sat. de NaHCO3 y se extrajo con EtOAc. Se secó la capa orgánica, se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía de columna (gel de sílice; eluyente: DCM/MeOH=98/2 a 9/1), proporcionando 80 mg del producto.

C15H19N3O (M=257,3 g/mol)

EM-IEP: 258 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,85 min (método A)

Se preparó el compuesto siguiente de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo X.1) descrito anteriormente:

Ejemplo XI

4-(2,2-Dimetilpiperazín-1-il)benzonitrilo

Una solución de 56,5 mg (0,47 mimóles) de 4-fluorobenzonitrilo (CAS n.° 1194-02-1) y 100 mg (0,47 mimóles) de 3,3-dimetilpiperazín-1-carboxilato de terc-butilo (CAS n.° 259808-67-8) en 3 ml de NMP se trató con 120 j l (0,71 mimóles) de DIPEA y se sometió a agitación a 190 °C durante 7 h bajo irradiación de microondas. La mezcla de reacción se diluyó con agua y EtOAc, la capa orgánica se separó y se lavó con solución sat. de NaHCO3. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró bajo presión reducida, proporcionando 120 mg del producto.

C13H17N3 (M=215,29 g/mol)

EM-IEP: 216 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,84 min (método A)

Preparación de compuestos finales

Ejemplo 1.1

N-(4-(7-acetil-2,7-diazaspiro[3.5]nonán-2-il)bencil)-1-(6-((6-(trifluorometil)piridín-3-il)metoxi)piridazín-3-il)ciclopropán-1 -carboxamida

Se diluyeron 300 mg (0,88 mmoles) de ácido 1 -(6-((6-(trifluorometil)piridín-3-il)metoxi)piridazín-3-M)ciclopropán-1-carboxílico (Ejemplo VIN.2) y 0,45 ml (2,65 mmoles) de DIPEA con 3 ml de DMF y se añadieron 370 mg (0,97 mmoles) de HATU. La mezcla se sometió a agitación a TA durante 5 min; después, se añadieron 242 mg (0,88 mmoles) de 1-(2-(4-(aminometil)fenil)-2,7-diazaspiro[3.5]nonán-7-il)etán-1-ona (Ejemplo II.4). La mezcla de reacción se sometió a agitación durante 30 min a TA, se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC, rindiendo el producto.

C31H33F3N6O3 (M=594,6 g/mol)

EM-IEP: 595 [M+H]+

Rt (HPLC): 0,96 min (método A)

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 58,90 (d, J=1,39 Hz, 1H), 8,20 (dd, J=1,46, 8,05 Hz, 1H), 7,91-7,99 (m, 2H), 7,61 (d, J=9,13 Hz, 1H), 7,27 (d, J=9,13 Hz, 1H), 7,02 (d, J=8,49 Hz, 2H), 6,35 (d, J=8,49 Hz, 2H), 5,67 (s, 2H), 4,13 (d, J=5,83 Hz, 2H), 3,54 (d, J=1,77 Hz, 4H), 3,40 (td, J=5,61, 14,38 Hz, 4H), 1,99 (s, 3H), 1,61-1,78 (m, 4H), 1,22-1,46 (m, 4H) Se prepararon los compuestos siguientes de acuerdo con el procedimiento general (Ejemplo 1.1) descrito anteriormente:

j<(continuación)>

^

(continuación)

Métodos de HPLC analíticos

Método A

Método B

Método C

Método D

Método E

Método F

Método G

Método H

Método I

Claims

REIVINDICACIONES Compuesto según la fórmula (I):
en la que: A es piridilo sustituido con uno o dos elementos del grupo que consiste en fluoro y F<1 -7>-fluoro-alquilo C<1 -3>; E se selecciona del grupo que consiste en fenilo y piridilo sustituido opcionalmente con uno o dos elementos del grupo que consiste en fluoro y F<w>-fluoro-alquilo C<1 -3>; K se selecciona del grupo que consiste en:
R3 se selecciona del grupo que consiste en R4(O)C-, metilo y
R4 es metilo. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, en el que A es piridilo sustituido con uno o dos de F<1 -3>-fluoro-alquilo C<1>. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, en el que A se selecciona del grupo que consiste en:
Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que E se selecciona del grupo que consiste en fenilo y piridilo sustituidos opcionalmente con uno o dos elementos del grupo que consiste en F y F3C. 5. Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que E se selecciona del grupo
6. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste en:
7. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
8. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
9. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
10. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
11. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
12. Compuesto de fórmula I se ún la reivindicación 1, con la estructura:
13. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
14. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
15. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
16. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1, con la estructura:
17. Sal, particularmente una sal farmacéuticamente aceptable, de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 16.
18. Composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula I según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
19. Compuesto de fórmula (I) según una o más de las reivindicaciones 1 a 17, para la utilización como medicamento.
20. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la utilización en el tratamiento o prevención de enfermedades inflamatorias o fibróticas de las vías respiratorias.
21. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la utilización en el tratamiento o prevención de la enfermedad pulmonar idiopática (EPI) o la esclerosis sistémica (ES).