ES2980363T3 - Administración intralesional de inhibidores de PD-1 para el tratamiento del cáncer de piel - Google Patents

Abstract

La divulgación se refiere a métodos para tratar o inhibir el crecimiento de un tumor, en donde los métodos incluyen seleccionar un sujeto con un cáncer de piel y administrar intralesionalmente al tumor del sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de muerte programada 1 (PD-1) (por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo que se une específicamente a PD-1, PD-L1 y/o PD-L2). En ciertas realizaciones, el cáncer de piel es carcinoma de células escamosas cutáneo. En ciertas realizaciones, el inhibidor de PD-1 se administra en múltiples ubicaciones de la lesión tumoral. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Administración intralesional de inhibidores de PD-1 para el tratamiento del cáncer de piel

Campo de la invención

La presente divulgación se refiere a métodos para tratar o inhibir el crecimiento de un tumor que incluye seleccionar un paciente con cáncer de piel y administrar intralesionalmente al tumor del paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de muerte programada 1 (PD-1).

Antecedentes

El cáncer de piel es el cáncer más común en los Estados Unidos (Guyet al.,Am. J. Prev. Med. 48:183-87, 2015). Se estima que 5,4 millones de casos de cáncer de piel no melanoma, incluyendo el carcinoma de células basales y el carcinoma de células escamosas, fueron diagnosticados en los Estados Unidos en 2012 (Rogerset al.,JAMA Dermatol., 151(10):1081-86, 2015). El carcinoma espinocelular (CSCC) es la segunda neoplasia maligna más común en los Estados Unidos, después del carcinoma de células basales (CBC) (Kariaet al.,J. Am. Acad. Dermatol. 68:957-66, 2013). La exposición crónica al sol es el factor de riesgo dominante para los cánceres de piel no melanoma.

El CSCC es una proliferación maligna de queratinocitos epidérmicos con invasión de la dermis y se distingue de lesiones precursoras no invasivas como las queratosis actínicas (Fernándezet al.,Immunol Allergy Clin North Am 37(2):315-27, 2017). La incidencia mundial varía ampliamente, con la incidencia más alta en Australia y la incidencia más baja en partes de África (Lomaset al.,Br J Dermatol, 166(5):1069-80, 2012). Se desconoce la incidencia precisa del CSCC porque no está incluido en la mayoría de los registros de cáncer. Sin embargo, la incidencia de CSCC ha aumentado en las últimas décadas según estimaciones que no incluyen a pacientes con lesiones precursoras no invasivas únicamente (Lomaset al.,Br J Dermatol, 166(5):1069-80, 2012) (Queet al.,J Am Acad Dermatol, 78(2):237-47, 2018) (Rogerset al.,Arch Dermatol, 146(3):283-87, 2010).

Los factores de riesgo del CSCC incluyen la exposición a los rayos UV, edad avanzada e inmunosupresión (Alamet al.,New Engl. J. Med. 344:975-83, 2001; Madan, Lancet 375: 673-85, 2010). Aunque la gran mayoría de las personas diagnosticadas con CSCC o BCC tienen un pronóstico muy favorable, el CSCC tiene una mayor propensión a recidivas de gran malignidad que el BCC. Asimismo, los individuos diagnosticados con CSCC, a diferencia de los diagnosticados con BCC, tienen una mayor mortalidad en comparación con los controles de la misma edad (Reeset al.,Int. J. Cancer 137: 878-84 (2015).

La resección quirúrgica es el eje central del manejo clínico del CSCC o del BCC. El objetivo principal es la resección completa del cáncer y el resultado estético aceptable es un objetivo secundario. Los factores asociados con un mal pronóstico en el CSCC incluyen tamaño del tumor >2 cm, profundidad del tumor > 2 mm, invasión perineural, inmunosupresión del hospedador y lesiones recurrentes. Sin embargo, algunos pacientes que desarrollan CSCC avanzado, que abarca tanto CSCC localmente avanzado como metastásico, no son candidatos para la cirugía. A algunos de estos pacientes se les puede administrar radioterapia o quimioterapia posoperatoria, pero estas pueden no ser opciones atractivas debido a los problemas de seguridad y tolerabilidad.

La cancerización de campo, definida como múltiples lesiones cancerosas en sitios expuestos a los rayos UV, es una característica de muchos pacientes con CSCC. De manera adicional, el CSCC recurrente aumenta el riesgo de recurrencias posteriores. En un estudio retrospectivo de 212 pacientes de una sola institución, los CSCC recurrentes tenían el doble de probabilidades de recurrir nuevamente después de la cirugía escisional en comparación con los CSCC primarios (Harriset al.,Otolaryngol Head Neck Surg, 156(5):863-69, 2017). Con el tiempo, múltiples cirugías pueden desfigurar y provocar fatiga quirúrgica, es decir, debilitamiento físico y emocional como resultado de procedimientos quirúrgicos en serie. Asimismo, el CSCC en subsitios de la cabeza y el cuello, como oreja, sien y labio, se han asociado con peores resultados clínicos (Brantschet al.,Lancet Oncol 9(8):713-20, 2008; Harriset al.,Otolaryngol Head Neck Surg, 156(5):863-69, 2017; Thompsonet al.,JAMA Dermatol 2016; 152(4):419-28, 2016).

El subtipo clínico más común de BCC es el BCC nodular. Los subtipos clínicos menos comunes son el superficial, morfeico (fibrosante) y fibroepitelial. La mayoría de los pacientes se curan mediante cirugía, pero un pequeño porcentaje de pacientes experimenta lesiones recurrentes o desarrolla enfermedad metastásica o localmente avanzada irresecable. El reconocimiento del papel oncogénico del receptor acoplado a proteína G Smoothened (SMO) en el BCC condujo al desarrollo de vismodegib y sonidegib, inhibidores de SMO disponibles por vía oral, generalmente denominados como inhibidores de Hedgehog (HHI). Además de los efectos secundarios adversos de los HHI, se encontró que para los pacientes que progresan en un HHI (vismodegib), el tratamiento posterior con otro HHI (sonidegib) no dio como resultado inhibición del tumor (Danialet al.,Clin. Cancer Res. 22:1325-29, 2016).

Por consiguiente, sigue siendo necesario proporcionar terapias seguras y eficaces para el cáncer de piel, tal como CSCC y BCC, especialmente el cáncer de piel que ha recurrido a pesar de cirugías previas.

Igualmente, se considera que una pequeña fracción de pacientes con CSCC tienen CSCC de alto riesgo, evaluado utilizando una serie de factores, incluida la estadificación del cáncer utilizando el Comité Conjunto Estadounidense sobre el Cáncer, 8a edición (AJCC, 2017), el estado inmunitario, la invasión linfovascular, el grado de afectación ganglionar, la presencia de extensión extracapsular y el historial de tratamiento. Se recomienda la radioterapia posoperatoria en casos de alto riesgo (Bichakjianet al.,J Natl Compr Cancer Netw, 16(6):742-74, 2018) (Stratigos, Eur J Cancer, 51(14):1989-2007, 2015). Sin embargo, los pacientes de alto riesgo pueden recaer con recurrencia locorregional o metástasis a distancia (Porcedduet al.,J Clin Oncol, 36(13):1275-83, 2018). Así, existe una necesidad insatisfecha de reducir el riesgo de recurrencia del CSCC, especialmente en pacientes de alto riesgo.

De manera adicional, se sabe que los receptores de trasplantes tienen mayor riesgo de CSCC que de cualquier otro tipo de tumor (Euvardet al.,New Engl. J. Med., 348(17):1681-91, 2003). El CSCC también tiene un curso clínico más agresivo en pacientes trasplantados en comparación con los pacientes con CSCC inmunocompetentes (Manyamet al.,Cancer, 123(11):2054-60, 2017). La administración sistémica de inhibidores de PD-1 en pacientes trasplantados presenta un alto riesgo de rechazo o lesión del aloinjerto (Lipsonet al.,New Engl. J. Med., 374(9):896-98, 2016; Aguirreet al.,The Oncologist, 24:394-401, Nov. 9, 2018; Starkeet al.,Kidney Int., 78(1):38-47, 2010). Así, existe una necesidad no satisfecha de tratar eficazmente el cáncer de piel, tal como el CSCC, en pacientes trasplantados evitando o reduciendo los riesgos asociados al mismo.

El documento WO 2018/106862 divulga anticuerpos que se unen específicamente a CTLA-4 (p. ej., CTLA-4 humano) y antagonizan la función de CTLA-4. Hooren et al (2016), European Journal of Immunology, 47, 385-393 divulga la inhibición del punto de control local de CTLA-4 como monoterapia o junto con anti-PD1. El documento US 2018/243413 divulga dinitroclorobenceno intralesional y compuestos asociados coadministrados con inhibidores del punto de control para el tratamiento del cáncer. Midgen et al (2018) The New England Journal of Medicine, 379, 341-351 divulga el bloqueo con cemiplimab en el carcinoma espinocelular avanzado.

Sumario

La presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de muerte programada 1 (PD-1) para su uso en un método para tratar o inhibir el crecimiento de un tumor, comprendiendo el método: seleccionar un sujeto con un cáncer de piel; y administrar intralesionalmente al tumor del paciente una o más dosis de la composición farmacéutica, en donde el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 o un fragmento de unión a antígeno del mismo que comprende tres regiones determinantes de la complementariedad (CDR) (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) contenidas dentro de una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 y tres CDR (LCDR1, LCDR2 y LCDR3) contenidas dentro de una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2. En una realización, el cáncer de piel es carcinoma espinocelular (CSCC), carcinoma basocelular (BCC), carcinoma de células de Merkel o melanoma. En otra realización, el cáncer de piel es CSCC. En otra realización, el cáncer de piel es CSCC resecable recurrente. En otra realización, el paciente ha recibido tratamiento previo para el cáncer. En otra realización, el tratamiento previo incluye cirugía, radiación, quimioterapia, tratamiento con un inhibidor de PD-1 y/u otra terapia antitumoral. En otra realización, el paciente tiene riesgo de recurrencia. En otra realización, el paciente tiene antecedentes de recurrencia después de la cirugía. En otra realización, el paciente con cáncer de piel ha recibido previamente un trasplante de órgano o tejido.

En otra realización, cada dosis del inhibidor de PD-1 incluye una o más inyecciones intralesionales de la composición farmacéutica en el tumor. En otra realización, se administran al menos dos inyecciones intralesionales en diferentes ubicaciones del tumor. En otra realización, se administran de dos a cinco inyecciones intralesionales en dos a cinco ubicaciones del tumor. En otra realización, se administra al menos una inyección intralesional en la mitad superior del tumor. En otra realización, se administra al menos una inyección intralesional en la piel que recubre el tumor. En otra realización, se administra al menos una inyección intralesional en una periferia superior del tumor, adyacente a una interfaz con piel de aspecto normal. En otra realización, el tumor tiene un diámetro de superficie de al menos 1 cm. En otra realización, el tumor tiene un diámetro de superficie de aproximadamente 2 cm.

En otra realización, cada dosis se administra una vez al día, una vez cada dos días, una vez cada tres días, una vez cada cuatro días, una vez cada cinco días, una vez cada seis días, una vez por semana o dos veces por semana. En otra realización, cada dosis incluye de 5 mg a 200 mg del inhibidor de PD-1. En otra realización, cada dosis incluye 5 mg, 15 mg o 44 mg del inhibidor de PD-1.

En otra realización, la administración del inhibidor de PD-1 promueve la regresión del tumor, reduce la carga de células tumorales, reduce la carga tumoral y/o previene la recurrencia del tumor en el paciente. En una realización, la administración del inhibidor de PD-1 reduce o elimina la necesidad de cirugía. En otra realización, la administración intralesional del inhibidor de PD-1 promueve al menos aproximadamente un 10 % más de regresión tumoral que la administración intravenosa del inhibidor de PD-1. En otra realización, la administración intralesional del inhibidor de PD-1 conduce a una menor incidencia de acontecimientos adversos, menos intensidad de los acontecimientos adversos y/o menos toxicidad que la administración intravenosa del inhibidor de PD-1.

En otra realización, el método incluye además extirpar quirúrgicamente el tumor después de la etapa (b). En otra realización, el método incluye además administrar un segundo agente terapéutico o terapia seleccionada de cirugía, radiación, quimioterapia, un corticoesteroide, un fármaco antiinflamatorio y/o combinaciones de los mismos. En una realización, el inhibidor de PD-1 se administra antes del segundo agente terapéutico o terapia. En una realización, el inhibidor de PD-1 se administra después del segundo agente terapéutico o terapia.

En otra realización, el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 o un fragmento de unión a antígeno del mismo que incluye una región variable de cadena pesada (HCVR) que incluye la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 y una región variable de cadena ligera (LCVR) que incluye la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2. En otra realización, la HCVR incluye tres regiones determinantes de la complementariedad (CDR) de cadena pesada (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) y la LCVR incluye tres CDR de cadena ligera (LCDR1, LCDR2 y LCDR3), en donde: HCDR1 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3; HCDR2 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4; HCDR3 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 5; LCDR1 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6; LCDR2 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7; y LCDR3 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8. En otra realización, el anticuerpo anti-PD-1 o fragmento de unión a antígeno del mismo incluye un par de secuencias HCVR/LCVR de SEQ ID NO: 1/2. En otra realización, el anticuerpo anti-PD-1 incluye una cadena pesada y una cadena ligera, en donde la cadena pesada tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9. En otra realización, el anticuerpo anti-PD-1 incluye una cadena pesada y una cadena ligera, en donde la cadena ligera tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10. En otra realización, el anticuerpo anti-PD-1 incluye una cadena pesada y una cadena ligera, en donde la cadena pesada tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 y la cadena ligera tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10.

En otra realización, el inhibidor de PD-1 es cemiplimab o un bioequivalente del mismo.

Breve descripción de los dibujos

LaFigura 1muestra un diagrama que describe el estudio descrito en el Ejemplo 1.

LaFigura 2Amuestra una fotografía de un primer paciente de ejemplo con CSCC al inicio del estudio; y laFigura 2Bmuestra una fotografía del primer paciente de ejemplo después de la administración intralesional del anticuerpo anti-PD-1 cemiplimab.

LaFigura 3Amuestra una fotografía de un segundo paciente de ejemplo con CSCC al inicio del estudio; y laFigura 3Bmuestra una fotografía del segundo paciente de ejemplo después de la administración intralesional del anticuerpo anti-PD-1 cemiplimab.

Descripción detallada

Debe entenderse que la presente divulgación no se limita a los métodos y condiciones experimentales particulares descritos, ya que dichos métodos y condiciones pueden variar. También debe entenderse que la terminología utilizada en el presente documento tiene el fin de describir realizaciones particulares únicamente, y no tiene por objeto ser limitante, y que el alcance de la presente divulgación estará limitado únicamente por las reivindicaciones adjuntas.

A menos que se definan de otra manera, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que entiende comúnmente un experto en la materia a la que pertenece la invención divulgada. Como se utiliza en el presente documento, el término "aproximadamente", cuando se utiliza en referencia a un valor numérico indicado particular, significa que el valor puede variar con respecto al valor indicado en no más de un 1 %. Por ejemplo, como se utiliza en el presente documento, la expresión "aproximadamente 100" incluye 99 y 101, y todos los valores intermedios (por ejemplo, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4, etc.).

Aunque se puede usar cualquier método y material similar o equivalente a los descritos en el presente documento en la práctica de la presente divulgación, a continuación se describen los métodos y materiales preferidos.

Métodos para tratar o inhibir el crecimiento de un tumor

La presente divulgación incluye métodos para tratar o inhibir el crecimiento del cáncer de piel que comprenden administrar intralesionalmente a una lesión tumoral de cáncer de piel de un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de PD-1 (p. ej., un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo) que se une específicamente a PD-1, PD-L1 y/o PD-L2, o cualquier otro "inhibidor de PD-1" como se describe en el presente documento). En la presente divulgación, se proporcionan referencias a anticuerpos anti-PD-1 en particular para ilustrar un inhibidor de PD-1 representativo y no limitan el alcance de la divulgación. En algunos aspectos, los métodos incluyen administrar intralesionalmente un inhibidor de PD-1 a una lesión tumoral de cáncer de piel de un sujeto que lo necesita, en donde el sujeto puede ser opcionalmente un receptor de trasplante. La presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de PD-1 como se define en las reivindicaciones para su uso en un método para tratar o inhibir el crecimiento de un tumor que comprende seleccionar un paciente con cáncer de piel y administrar por vía intralesional al tumor del paciente una o más dosis de la composición farmacéutica.

La administración intralesional, como se divulga en el presente documento, proporciona varias ventajas en el tratamiento del cáncer de piel. Por ejemplo, la administración intralesional proporciona un tratamiento localizado mejorado que introduce un inhibidor de PD-1 (tal como un anticuerpo anti-PD-1) directamente en una lesión tumoral del sujeto, permitiendo así una administración eficaz del inhibidor a una concentración más alta específicamente en el sitio de administración. Dicho tratamiento localizado proporciona una ventaja adicional al proteger al sujeto tratado de la exposición sistémica a los inhibidores de PD-1 y de cualquier toxicidad o efecto secundario asociado a los mismos. De manera adicional, la administración intralesional de un inhibidor de PD-1 (tal como un anticuerpo anti-PD-1) induce respuestas de memoria inmunitaria que reducen ventajosamente el riesgo de recurrencia de la lesión tumoral en sujetos tratados. Dicho de otro modo, después de administrar un anticuerpo anti-PD-1, dosis posteriores de anticuerpo anti-PD-1 producen respuestas más rápidas y eficaces en el sujeto, proporcionando los beneficios de una inmunidad protectora de larga duración, específica de antígeno, a menudo denominada memoria inmunitaria. Otra ventaja más de la administración intralesional de un inhibidor de PD-1 es la eliminación de la necesidad de cirugía, que suele ser un procedimiento doloroso y desfigurante, particularmente en casos en los que, de lo contrario, serían necesarias cirugías repetidas (que causan una mayor desfiguración).

Igualmente, la administración intralesional de un inhibidor de PD-1 (como un anticuerpo anti-PD-1) proporciona un beneficio adicional para el tratamiento del cáncer de piel en un paciente que también es receptor de un trasplante de órgano o tejido debido a que se evitarían los acontecimientos adversos asociados con la administración sistémica (p. ej., perfusión intravenosa). Esta es una ventaja particularmente significativa porque los receptores de trasplantes de órganos y tejidos tienen un mayor riesgo de sufrir cáncer de piel debido a la continua inmunosupresión después del trasplante de órganos. Por lo tanto, la incidencia de acontecimientos adversos tal como rechazo o lesión del aloinjerto en esta población de pacientes se reduce significativamente mediante la administración intralesional (en lugar de sistémica) de un inhibidor de PD-1, tal como un anticuerpo anti-PD-1.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "administración intralesional" se refiere a la administración directa de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1) por vía percutánea en una lesión tumoral de cáncer de piel y también incluye la administración directa de un inhibidor de PD-1 por vía intradérmica en la piel que recubre la lesión tumoral de cáncer de piel. En muchas realizaciones, las expresiones "administración intralesional" e "inyección intralesional" se usan indistintamente.

Como se utiliza en el presente documento, los términos "tratando", "tratar", o similares, significan aliviar o reducir la intensidad de al menos un síntoma o indicación, eliminar la causa de los síntomas de forma temporal o permanente, retrasar o inhibir el crecimiento tumoral, reducir la carga de células tumorales o la carga tumoral, promover la regresión tumoral, provocar la reducción, necrosis y/o desaparición del tumor, prevenir la recidiva del tumor, prevenir o inhibir la metástasis, inhibir el crecimiento del tumor metastásico, eliminar la necesidad de cirugía y/o aumentar la duración de la supervivencia del sujeto. En muchas realizaciones, los términos "tumor", "lesión", "lesión tumoral", "cáncer", y "neoplasia maligna" se usan indistintamente y se refieren a uno o más crecimientos.

En algunas realizaciones, el cáncer de piel es carcinoma espinocelular (CSCC), carcinoma basocelular (BCC), carcinoma de células de Merkel o melanoma. En algunas realizaciones, el cáncer de piel es un carcinoma epidermoide de cabeza y cuello. En algunas realizaciones, el cáncer de piel es metastásico, resecable, irresecable, recurrente o localmente avanzado. En algunas realizaciones, el cáncer de piel es CSCC, incluyendo, pero sin limitación, CSCC metastásico, CSCC localmente avanzado, CSCC resecable, CSC<c>irresecable o CSCC recurrente. En una realización, el cáncer de piel es CSCC que es resecable y recurrente. En una realización, el cáncer de piel es CSCC avanzado.

Como se utiliza en el presente documento, el término "recurrente" se refiere a un diagnóstico frecuente o repetido de cáncer de piel (por ejemplo, CSCC) en un paciente o una aparición frecuente o repetida de lesión(es) tumoral(es) individual(es), tales como lesiones tumorales primarias y/o lesiones tumorales nuevas que pueden representar una recurrencia de una lesión tumoral previa. En determinadas realizaciones, la administración intralesional del inhibidor de PD-1 inhibe la recurrencia de lesiones tumorales en pacientes con CSCC.

Como se utiliza en el presente documento, el término "recurrencia" se define como la aparición de una o más lesiones nuevas de cáncer de piel (por ejemplo, CSCC) que son locales, regionales o distantes. En muchos casos, las nuevas lesiones en la piel son nuevos tumores primarios debido a la cancerización de campo por daño cutáneo crónico mediado por los rayos UV (Christensen, F1000Res, 7, 2018). Con respecto al CSCC, la recurrencia local o regional (locorregional) se define por cualquiera de los siguientes sitios de recurrencia de la enfermedad: (a) para el CSCC HN (de cabeza y cuello), recurrencia ganglionar o de tejido blando por encima de la clavícula; (b) para el CSCC no HN, recurrencia dentro de la primera cuenca ganglionar de drenaje (o tejido blando asociado dentro de la primera cuenca ganglionar de drenaje) del tumor resecado; (c) metástasis en tránsito, definidas como metástasis cutáneas o subcutáneas que están a > 2 cm de la lesión primaria pero que no superan la cuenca ganglionar regional. La recurrencia a distancia se define por cualquiera de los siguientes sitios de recurrencia de la enfermedad: (a) para el CSCC HN (de cabeza y cuello), recurrencia ganglionar debajo de la clavícula; (d) para el CSCC no HN, recurrencia más allá de la primera cuenca ganglionar de drenaje del lecho tumoral resecado. La recurrencia en 2 cuencas ganglionares se considerará recurrencia a distancia, incluso si son contiguas (es decir, 2 cuencas ganglionares mediastínicas, 2 cuencas ganglionares pélvicas); (e) recurrencia en tejido no ganglionar (incluido, pero no limitado a, pulmón, hígado, hueso, cerebro); (f) metástasis epidermotrópicas, definida como lesión(es) distante(s) en la dermis sin afectación epidérmica.

Como se utiliza en el presente documento, la expresión "un sujeto que lo necesite" significa un mamífero humano o no humano que presenta uno o más síntomas o indicios de cáncer de piel, y/o que ha sido diagnosticado con cáncer de piel, incluido un tumor sólido y que necesita tratamiento para el mismo. En muchas realizaciones, los términos "sujeto" y "paciente" se usan indistintamente. La expresión incluye sujetos con lesiones tumorales primarias, establecidas o recurrentes. En realizaciones específicas, la expresión incluye sujetos humanos que tienen y/o necesitan tratamiento para un tumor sólido. La expresión también incluye sujetos con tumores primarios o metastásicos (neoplasias malignas avanzadas). En determinadas realizaciones, la expresión incluye pacientes con un tumor sólido que es resistente, refractario o no está controlado adecuadamente mediante terapia previa (por ejemplo, cirugía o tratamiento con un agente anticanceroso tal como carboplatino o docetaxel). En determinadas realizaciones, la expresión incluye pacientes con una lesión tumoral que ha sido tratada con una o más líneas de terapia previa (por ejemplo, extirpada quirúrgicamente), pero que posteriormente ha vuelto a ocurrir. En determinadas realizaciones, la expresión incluye sujetos con una lesión tumoral de cáncer de piel que no son candidatos a cirugía curativa o radiación curativa, o para quienes la terapia anticancerosa convencional no es aconsejable, por ejemplo, debido a los efectos secundarios tóxicos. En otras realizaciones, la expresión incluye sujetos con una lesión tumoral de cáncer de piel para la cual se planea la extirpación quirúrgica. En otras realizaciones, la expresión incluye sujetos para quienes el riesgo de recurrencia es alto debido a antecedentes previos de recurrencia después de la cirugía.

En determinadas realizaciones, los métodos se utilizan en un sujeto con un tumor sólido. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "tumor sólido" se refiere a una masa de tejido anómala que habitualmente no contiene quistes o áreas líquidas. Los tumores sólidos pueden ser benignos (no cancerosos) o malignos (cancerosos). Para los fines de la presente divulgación, la expresión "tumor sólido" significa tumores sólidos malignos. La expresión incluye diferentes tipos de tumores sólidos nombrados por los tipos de células que los forman, a saber, sarcomas, carcinomas y linfomas. En determinadas realizaciones, la expresión "tumor sólido" comprende más de una lesión tumoral localizadas separadas entre sí, p. ej., 2 o más, 5 o más, 10 o más, 15 o más, 20 o más, 25 o más lesiones en un sujeto que necesita tratamiento. En determinadas realizaciones, las más de una lesión están ubicadas distalmente una de otra.

En determinadas realizaciones, los métodos incluyen administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 junto con una terapia antitumoral. Tal como se usa en el presente documento, la expresión "junto con" significa que el inhibidor de PD-1 se administra antes, después o simultáneamente con la terapia antitumoral. Las terapias antitumorales incluyen, aunque no de forma limitativa, terapias antitumorales convencionales tales como la quimioterapia, radiación, cirugía, o como se describe en otro lugar en el presente documento. En una realización, la terapia antitumoral comprende cirugía.

En determinadas realizaciones, los métodos comprenden seleccionar un sujeto con una lesión tumoral de cáncer de piel y administrar una o más dosis del anticuerpo anti-PD-1 por vía intralesional en una o más ubicaciones de la lesión. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 se administra por vía intralesional en 2, 3, 4, 5, 6 o 7 ubicaciones en una sola lesión de cáncer de piel. En algunas realizaciones, el inhibidor de PD-1 se puede administrar por vía intralesional en 2 a 5 ubicaciones de la lesión. En algunas realizaciones, al menos una ubicación es la mitad superior (cefálica) de la lesión. En algunas realizaciones, al menos una ubicación está dentro de la porción más densa de la mitad superior de la lesión tumoral. En algunas realizaciones, al menos una ubicación es la piel que recubre la lesión tumoral. En algunas realizaciones, al menos una ubicación es la periferia superior (cefálica) del tumor cerca o adyacente a una interfaz con piel de aspecto normal.

En determinadas realizaciones, se administran intralesionalmente una o más dosis de un inhibidor de PD-1 en una lesión tumoral que tiene un diámetro de superficie de al menos 1 cm. En ciertas realizaciones, la lesión tiene un diámetro de superficie de no más de 2 cm. En una realización, la lesión tumoral tiene un diámetro de superficie de 1,0 cm a 2,0 cm. En otras realizaciones, la lesión tumoral mide al menos 1 cm en cada uno de los diámetros de superficie perpendiculares más largos de la lesión. En otras realizaciones, la lesión tumoral no mide más de 2 cm en cada uno de los diámetros de superficie perpendiculares más largos de la lesión. En otra realización, la lesión tumoral mide de 1,0 cm a 2,0 cm en cada uno de los diámetros de superficie perpendiculares más largos de la lesión.

En algunas realizaciones, los métodos inducen respuestas de memoria inmunitaria que reducen el riesgo de recurrencia de la lesión tumoral en el sujeto. En una realización, la administración intralesional a un sujeto que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de PD-1 da como resultado la regresión del tumor y elimina la necesidad de cirugía.

En determinadas realizaciones, los métodos comprenden administrar intralesionalmente una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 como se define en las reivindicaciones a un sujeto con un tumor sólido avanzado, tal como CSCC. En determinadas realizaciones, el tumor sólido avanzado es de escasa malignidad o de gran malignidad. En determinadas realizaciones, el sujeto no responde o ha recaído (por ejemplo, ha experimentado una lesión recurrente) después de, terapia o cirugía previa.

Los métodos, de acuerdo con determinadas realizaciones, pueden incluir administrar intralesionalmente a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo anti-PD-1 junto con un agente terapéutico o régimen o procedimiento terapéutico adicional. El agente terapéutico o régimen o procedimiento terapéutico adicional puede administrarse para aumentar la eficacia antitumoral, para reducir los efectos tóxicos de una o más terapias y/o para reducir la dosis de una o más terapias. En diversas realizaciones, el agente terapéutico o régimen o procedimiento terapéutico adicional puede incluir uno o más de: quimioterapia, ciclofosfamida, cirugía, una vacuna contra el cáncer, un inhibidor del ligando de muerte programada 1 (PD-L1) (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-L1), un inhibidor del gen de activación de linfocitos 3 (LAG3) (por ejemplo, un anticuerpo anti-LAG3), un inhibidor de la proteína 4 citotóxica asociada a linfocitos T (CTLA-4) (por ejemplo, ipilimumab), un agonista del receptor del factor de necrosis tumoral inducido por glucocorticoides (GITR) (por ejemplo, un anticuerpo anti-GITR), un inhibidor de la inmunoglobulina de linfocitos T y que contiene mucina 3 (TIM3), un inhibidor del atenuador de linfocitos T de banda (BTLA), un inhibidor del inmunorreceptor de linfocitos T con dominios Ig e ITIM (TIGIT), un inhibidor de CD47, un inhibidor de la indolamina-2,3-dioxigenasa (IDO), un antagonista del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), un inhibidor de la angiopoyetina-2 (Ang2), un inhibidor del factor de crecimiento transformante beta (TGFp), un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), un anticuerpo contra un antígeno específico de tumores (por ejemplo, CA9, CA125, antígeno 3 asociado a melanoma (MAGE3), antígeno carcinoembrionario (CEA), vimentina, tumor-M2-PK, antígeno específico de la próstata (AEP), mucina-1, MART-1 y CA19-9], un anticuerpo biespecífico anti-CD3/anti-CD20, una vacuna (por ejemplo, bacilo de Calmette-Guerin), factor estimulador de colonia de granulocitos y macrófagos, una citotoxina, un agente quimioterapéutico, un inhibidor de la IL-6R, un inhibidor de la IL-4R, un inhibidor de la IL-10, una citocina tal como IL-2, lL-7, IL-21 y IL-15, un medicamento antiinflamatorio tal como un corticosteroide, un fármaco antiinflamatorio no esteroideo (AINE) y un suplemento dietético tal como un antioxidante. En determinadas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse junto con terapia que incluye un agente quimioterápico y/o cirugía.

En determinadas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto con una lesión de cáncer de piel y que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 conduce a una mayor inhibición del crecimiento tumoral, por ejemplo, mayor regresión tumoral en el sujeto tratado. En determinadas realizaciones, la administración intralesional de un inhibidor de PD-1 promueve al menos aproximadamente un 10 %, aproximadamente un 20 %, aproximadamente un 30 %, aproximadamente un 40 %, aproximadamente un 50 %, aproximadamente un 60 %, aproximadamente un 70 % o aproximadamente un 80 % más de regresión tumoral en el sujeto tratado en comparación con un sujeto no tratado o un sujeto tratado con un inhibidor de PD-1 por una vía de administración distinta a la intralesional (p. ej., una vía de administración sistémica tal como perfusión intravenosa).

En determinadas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto con una lesión de cáncer de piel y que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 conduce a una mayor regresión del tumor, reducción y/o desaparición del tumor. En una realización, la administración intralesional conduce a la regresión del tumor o a la reducción del tumor de manera que se reduce o elimina la necesidad de cirugía.

En determinadas realizaciones, la administración intralesional de un inhibidor de PD-1 provoca un retraso en el crecimiento y desarrollo del tumor, p. ej., el crecimiento del tumor puede retrasarse aproximadamente 3 días, más de 3 días, aproximadamente 7 días, más de 7 días, más de 15 días, más de 1 mes, más de 3 meses, más de 6 meses, más de 1 año, más de 2 años, o más de 3 años en el sujeto tratado en comparación con un sujeto no tratado o un sujeto tratado con un inhibidor de PD-1 por una vía de administración distinta de la intralesional (p. ej., una vía de administración sistémica tal como perfusión intravenosa).

En determinadas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto con una lesión de cáncer de piel y que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 conduce a una incidencia reducida de acontecimientos adversos, intensidad reducida de los acontecimientos adversos y/o toxicidad reducida en el sujeto tratado en comparación con un sujeto no tratado o un sujeto tratado con un inhibidor de PD-1 por una vía de administración distinta de la intralesional (p. ej., una vía de administración sistémica tal como perfusión intravenosa).

En determinadas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto con una lesión de cáncer de piel y que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 previene la recurrencia del tumor y/o aumenta la duración de la supervivencia del sujeto, p. ej., aumenta la duración de la supervivencia en más de 15 días, más de 1 mes, más de 3 meses, más de 6 meses, más de 12 meses, más de 18 meses, más de 24 meses, más de 36 meses, o más de 48 meses en comparación con un sujeto no tratado o un sujeto tratado con un anticuerpo anti-PD-1 mediante una vía de administración distinta de la intralesional (por ejemplo, mediante perfusión intravenosa).

En determinadas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto con una lesión de cáncer de piel y que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-PD-1 conduce a la desaparición completa de toda evidencia de células tumorales ("respuesta completa"), conduce a una disminución de al menos un 30 % o más en las células tumorales o el tamaño del tumor ("respuesta parcial"), o conduce a la desaparición completa o parcial de las células/lesiones tumorales, incluidas nuevas lesiones mensurables. La reducción del tumor se puede medir mediante cualquiera de los métodos conocidos en la técnica, p. ej., los rayos X, tomografía de emisión de positrones (TEP), tomografía computarizada (TC), la formación de imágenes mediante resonancia magnética (RM), citología, histología o análisis genéticos moleculares.

En determinadas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto con una lesión de cáncer de piel y que lo necesita de una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo anti-PD-1 conduce a una mayor supervivencia global (SG) o supervivencia sin progresión (SSP) del sujeto en comparación con un sujeto al que se le administra un "tratamiento de referencia" (SOC) (p. ej., quimioterapia, cirugía o radiación). En determinadas realizaciones, la SSP aumenta al menos un mes, al menos 2 meses, al menos 3 meses, al menos 4 meses, al menos 5 meses, al menos 6 meses, al menos 7 meses, al menos 8 meses, al menos 9 meses, al menos 10 meses, al menos 11 meses, al menos 1 año, al menos 2 años o al menos 3 años en comparación con un sujeto al que se le administra una o más terapias SOC. En determinadas realizaciones, la SG aumenta al menos un mes, al menos 2 meses, al menos 3 meses, al menos 4 meses, al menos 5 meses, al menos 6 meses, al menos 7 meses, al menos 8 meses, al menos 9 meses, al menos 10 meses, al menos 11 meses, al menos 1 año, al menos 2 años o al menos 3 años en comparación con un sujeto al que se le administra una o más terapias SOC.

En determinadas realizaciones, la administración intralesional de una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo anti-PD-1 a un sujeto con cáncer de piel en donde el sujeto ha recibido un trasplante, tal como un trasplante de órgano sólido o tejido, evita ventajosamente los acontecimientos adversos asociados con la administración sistémica de un inhibidor de PD-1 a un receptor de trasplante. En dichas realizaciones, la administración intralesional a un sujeto receptor de trasplante conduce a al menos aproximadamente un 10 %, aproximadamente un 20 %, aproximadamente un 30 %, aproximadamente un 40 %, aproximadamente un 50 %, aproximadamente un 60 %, aproximadamente un 70 %, aproximadamente un 80 %, o aproximadamente un 90 % menos de incidencia de acontecimientos adversos en comparación con un sujeto receptor de trasplante que recibe el inhibidor de PD-1 a través de otra vía, por ejemplo, una vía de administración sistémica tal como perfusión intravenosa. Ejemplos no limitativos de acontecimientos adversos que pueden evitarse en esta población de pacientes incluyen el rechazo y la lesión del aloinjerto.

Inhibidores de PD-1

Los métodos divulgados en el presente documento incluyen la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de PD-1. Como se utiliza en el presente documento, un "inhibidor de PD-1" se refiere a cualquier molécula capaz de inhibir, bloquear, anular o interferir con la actividad o expresión de PD-1. En algunos aspectos de la divulgación, el inhibidor de PD-1 puede ser un anticuerpo, un compuesto de molécula pequeña, un ácido nucleico, un polipéptido, o un fragmento funcional o variante del mismo. Los ejemplos no limitativos de anticuerpos inhibidores de PD-1 adecuados incluyen anticuerpos anti-PD-1 y fragmentos de unión a antígeno de los mismos, anticuerpos anti-PD-L1 y fragmentos de unión a antígeno de los mismos, y anticuerpos anti-PD-L2 y fragmentos de unión a antígeno de los mismos. Otros ejemplos no limitativos de inhibidores de PD-1 adecuados incluyen moléculas de ARNi tales como moléculas de ARNi anti-PD-1, ARNi anti-PD-L1 y ARNi anti-PD-L2, moléculas antisentido tales como el ARN antisentido anti-PD-1, ARN antisentido anti-PD-L1 y<a>R<n>antisentido anti-PD-L2, y proteínas negativas dominantes tales como una proteína PD-1 negativa dominante, una proteína PD-L1 negativa dominante y una proteína PD-L2 negativa dominante. Algunos ejemplos de los inhibidores de PD-1 anteriores se describen, por ejemplo, en los documentos US 9308236, US 10011656 y US 20170290808. En la invención, el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo como se define en las reivindicaciones.

Como se utiliza en el presente documento, el término "anticuerpo" se refiere a moléculas de inmunoglobulina típicas que comprenden cuatro cadenas polipeptídicas, dos cadenas pesadas (H) y dos cadenas ligeras (L) interconectadas por enlaces disulfuro, así como multímeros de las mismas (por ejemplo, IgM). En un anticuerpo normal, cada cadena pesada comprende una región variable de cadena pesada (abreviada en el presente documento como HCVR o V<h>) y una región constante de cadena pesada. La región constante de cadena pesada comprende tres dominios, C<h>1, C<h>2 y C<h>3. Cada cadena ligera comprende una región variable de cadena ligera (abreviada en el presente documento como LCVR o V<l>) y una región constante de cadena ligera. La región constante de cadena ligera comprende un dominio (C<l>1). Las regiones V<h>y V<l>pueden subdividirse además en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones marco (FR). Cada V<h>y V<l>comprende tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el extremo amino hasta el extremo carboxilo en el siguiente orden: FR1, CDR1,<f>R2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. En distintas realizaciones de la invención, las FR del anticuerpo anti-PD-1 (o parte de unión a antígeno del mismo) pueden ser idénticas a las secuencias de la línea germinal humana o pueden estar modificadas de forma natural o artificial. Una secuencia de aminoácidos consenso puede definirse basándose en un análisis en paralelo de dos o más CDR. El término "anticuerpo", como se utiliza en el presente documento, también incluye fragmentos de unión a antígeno de moléculas de anticuerpo completas.

Como se utiliza en el presente documento, las expresiones "parte de unión a antígeno" de un anticuerpo, "fragmento de unión a antígeno" de un anticuerpo y similares, incluyen cualquier polipéptido o glucoproteína de origen natural, obtenible enzimáticamente, sintético o modificado por ingeniería genética que se une específicamente a un antígeno para formar un complejo. Pueden obtenerse fragmentos de unión a antígeno de un anticuerpo, p. ej., de moléculas de anticuerpo completas, mediante cualquier técnica convencional adecuada tal como digestión proteolítica o técnicas recombinantes de ingeniería genética que implican la manipulación y expresión de ADN que codifica los dominios variables y, opcionalmente, los constantes, de un anticuerpo. Dicho ADN se conoce y/o se puede adquirir fácilmente de, p. ej., fuentes comerciales, bibliotecas de ADN (incluyendo, p. ej., fagotecas de anticuerpos) o puede sintetizarse. El ADN puede secuenciarse y manipularse químicamente o mediante técnicas de biología molecular, por ejemplo, para disponer uno o más dominios variables y/o constantes en una configuración adecuada, o para introducir codones, crear restos de cisteína, modificar, añadir o eliminar aminoácidos, etc.

Algunos ejemplos no limitativos de fragmentos de unión a antígeno incluyen: (i) fragmentos Fab; (ii) fragmentos F(ab')2; (iii) fragmentos Fd; (iv) fragmentos Fv; (v) moléculas de Fv monocatenario (scFv); (vi) fragmentos dAb; y (vii) unidades de reconocimiento mínimo que consisten en los restos de aminoácidos que imitan la región hipervariable de un anticuerpo (por ejemplo, una región determinante de complementariedad (CDR) aislada, tal como un péptido CDR3) o un péptido FR3-CDR3-FR4 restringido. Otras moléculas modificadas por ingeniería genética, tales como anticuerpos específicos de dominio, anticuerpos de un solo dominio, anticuerpos con dominio eliminado, anticuerpos quiméricos, anticuerpos injertados con CDR, diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos, minicuerpos, nanocuerpos (p. ej., nanocuerpos monovalentes, nanocuerpos bivalentes, etc.), agentes inmunofarmacéuticos modulares pequeños (SMIP) y dominios IgNAR variables de tiburón, también se incluyen dentro de la expresión "fragmento de unión a antígeno", como se usa en el presente documento.

Un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo normalmente comprenderá al menos un dominio variable. El dominio variable puede ser de cualquier tamaño o composición de aminoácidos y generalmente comprenderá al menos una CDR que está adyacente a o en marco con una o más secuencias marco. En fragmentos de unión a antígeno que tienen un dominio V<h>asociado con un dominio V<l>, los dominios V<h>y V<l>pueden situarse uno con respecto al otro en cualquier disposición adecuada. Por ejemplo, la región variable puede ser dimérica y contener los dímeros V<h>-V<h>, V<h>-V<l>o V<l>-V<l>. Como alternativa, el fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo puede contener un dominio V<h>o V<l>monomérico.

En determinados aspectos, un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo puede contener al menos un dominio variable unido covalentemente a al menos un dominio constante. Configuraciones no limitantes, ilustrativas, de dominios variables y constantes que pueden encontrarse dentro de un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de la presente divulgación incluyen: (i) V<h>-C<h>1; (ii) V<h>-C<h>2; (iii) V<h>-C<h>3; (iv) V<h>-C<h>1-C<h>2; (v) V<h>-C<h>1-C<h>2-C<h>3; (vi) V<h>-C<h>2-C<h>3; (vii) V<h>-C<l>; (viii) V<l>-C<h>1; (ix) V<l>-C<h>2; (x) V<l>-C<h>3; (xi) V<l>-C<h>1-C<h>2; (xii) V<l>-C<h>1-C<h>2-C<h>3; (xiii) V<l>-C<h>2-C<h>3; y (xiv) V<l>-C<l>. En cualquier configuración de dominios variables y constantes, que incluye cualquiera de las configuraciones ilustrativas enumeradas anteriormente, los dominios variables y constantes pueden estar unidos directamente entre sí o pueden estar unidos mediante una región bisagra o enlazadora completa o parcial. Una región bisagra puede consistir en al menos 2 (por ejemplo, 5, 10, 15, 20, 40, 60 o más) aminoácidos que producen una unión flexible o semiflexible entre dominios variables y/o constantes adyacentes en una única molécula polipeptídica. Por otra parte, un fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de la presente divulgación puede comprender un homodímero o heterodímero (u otro multímero) de cualquiera de las configuraciones de dominio variable y constante enumeradas anteriormente en asociación no covalente entre sí y/o con uno o más dominios V<h>o V<l>monoméricos (por ejemplo, mediante enlace/s disulfuro).

Los anticuerpos utilizados en los métodos divulgados en el presente documento pueden ser anticuerpos humanos. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "anticuerpo humano" se refiere a anticuerpos que tienen regiones variables y constantes procedentes de secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana. Los anticuerpos humanos de la presente divulgación pueden incluir, no obstante, restos de aminoácidos no codificados por secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana (por ejemplo, mutaciones introducidas por mutagénesis aleatoria o específica de sitioin vitroo mediante mutación somáticain vivo),por ejemplo, en las CDR y, en particular, la CDR3. Sin embargo, la expresión "anticuerpo humano", como se utiliza en el presente documento, no pretende incluir anticuerpos en los que secuencias de CDR procedentes de la línea germinal de otra especie de mamífero, tal como un ratón, se han injertado en secuencias marco humanas.

Los anticuerpos utilizados en los métodos divulgados en el presente documento pueden ser anticuerpos humanos recombinantes. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "anticuerpo humano recombinante" incluye todos los anticuerpos humanos preparados, expresados, creados o aislados por medios recombinantes, tales como los anticuerpos expresados usando un vector de expresión recombinante transfectado en una célula hospedadora (que se describe con más detalle más adelante), anticuerpos aislados de una biblioteca de anticuerpos humanos combinatorios recombinantes (que se describe en más detalle posteriormente), anticuerpos aislados de un animal (por ejemplo, un ratón) que es transgénico para los genes de inmunoglobulina humana [véase, por ejemplo, Tayloret al.(1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295] o anticuerpos preparados, expresados, creados o aislados mediante cualquier otro medio que implique el corte y empalme de secuencias génicas de inmunoglobulina humana con otras secuencias de ADN. Dichos anticuerpos humanos recombinantes tienen regiones variables y constantes procedentes de secuencias de inmunoglobulina de la línea germinal humana. En determinadas realizaciones, sin embargo, tales anticuerpos humanos recombinantes se someten a mutagénesisin vitro(o, cuando se utiliza un animal transgénico para secuencias de Ig humana, mutagénesis somáticain vivo)y, por tanto, las secuencias de aminoácidos de las regiones V<h>y V<l>de los anticuerpos recombinantes son secuencias que, aunque proceden y están relacionadas con las secuencias de V<h>y V<l>de la línea germinal humana, no pueden existir de forma natural dentro del repertorio de la estirpe germinal de anticuerpos humanosin vivo.

Anticuerpos anti PD-1 y fragmentos de unión a antígeno de los mismos

Los inhibidores de PD-1 usados en la invención son anticuerpos o fragmentos de unión a antígeno de los mismos que se unen específicamente a PD-1. La expresión "se une de manera específica", o similares, significa que un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo forma un complejo con un antígeno que es relativamente estable en condiciones fisiológicas. Se conocen bien en la materia métodos para determinar si un anticuerpo se une de manera específica a un antígeno e incluyen, por ejemplo, diálisis en equilibrio, resonancia de plasmón superficial y similares. Por ejemplo, un anticuerpo que "se une de manera específica a" PD-1, como se usa en el contexto de la presente divulgación, incluye anticuerpos que se unen a PD-1 o parte del mismo con una K<d>inferior a aproximadamente 500 nM, inferior a aproximadamente 300 nM, inferior a aproximadamente 200 nM, inferior a aproximadamente 100 nM, inferior a aproximadamente 90 nM, inferior a aproximadamente 80 nM, inferior a aproximadamente 70 nM, inferior a aproximadamente 60 nM, inferior a aproximadamente 50 nM, inferior a aproximadamente 40 nM, inferior a aproximadamente 30 nM, inferior a aproximadamente 20 nM, inferior a aproximadamente 10 nM, inferior a aproximadamente 5 nM, inferior a aproximadamente 4 nM, inferior a aproximadamente 3 nM, inferior a aproximadamente 2 nM, inferior a aproximadamente 1 nM o inferior a aproximadamente 0,5 nM, medida en un ensayo con resonancia de plasmón superficial. Un anticuerpo aislado que se une de manera específica a PD-1 humano puede, sin embargo, tener reactividad cruzada con otros antígenos, tales como moléculas de PD-1 de otras especies (no humanas).

De acuerdo con determinados aspectos ilustrativos de la divulgación, el anticuerpo anti-PD-1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende una región variable de cadena pesada (HCVR), una región variable de cadena ligera (LCVR) y/o regiones determinantes de la complementariedad (CDR) que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de los anticuerpos anti- PD-1 como se establece en la patente de EE. UU. n.° 9987500. El anticuerpo anti-PD-1 o fragmento de unión a antígeno del mismo usado en el contexto de la presente invención comprende las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena pesada (HCDR) de una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 y las regiones determinantes de la complementariedad de la cadena ligera (LCDR) de una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2. De acuerdo con determinadas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende tres HCDR (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) y tres LCDR (LCDR1, LCDR2 y LCDR3), en donde la HCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3; la HCDR2 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4; la HCDR3 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 5; la LCDR1 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6; la LCDR2 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7; y la LCDR3 comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8. Aún en otras realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende una HCVR que comprende la SEQ ID NO: 1 y una LCVR que comprende la SEQ ID NO: 2. En determinadas realizaciones, los métodos de la presente divulgación comprenden el uso de un anticuerpo anti-PD-1, en donde el anticuerpo comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9. En algunas realizaciones, el anticuerpo anti-PD-1 comprende una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10. Un anticuerpo ilustrativo que comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10 es el anticuerpo anti-PD-1 completamente humano conocido como cemiplimab (también conocido como REGN2810).

De acuerdo con determinadas realizaciones ilustrativas, los métodos comprenden el uso de REGN2810 o un bioequivalente del mismo. Como se utiliza en el presente documento, el término "bioequivalente" se refiere a anticuerpos anti-PD-1 o a proteínas de unión a PD-1 o a fragmentos de los mismos que son equivalentes farmacéuticos o alternativas farmacéuticas cuya velocidad y/o grado de absorción no muestran una diferencia significativa con el anticuerpo de referencia (por ejemplo, REGN2810) cuando se administran a la misma dosis molar en condiciones experimentales similares, bien en una sola dosis o en múltiples dosis. En el contexto de la presente divulgación, el término "bioequivalente" incluye proteínas de unión a antígeno que se unen a PD-1 y no tienen diferencias clínicamente significativas con REGN2810 con respecto a la seguridad, pureza y/o potencia.

De acuerdo con determinadas realizaciones, el anti-PD-1 humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una HCVR que tiene un 90 %, un 95 %, un 98 % o un 99 % de identidad de secuencia) con la SEQ ID NO: 1.

De acuerdo con determinadas realizaciones, el anti-PD-1 humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una LCVR que tiene un 90 %, un 95 %, un 98 % o un 99 % de identidad de secuencia) con la SEQ ID NO: 2.

De acuerdo con determinadas realizaciones, el anti-PD-1 humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una HCVR que comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 que no tiene más de 5 sustituciones de aminoácidos. De acuerdo con determinadas realizaciones, el anti-PD-1 humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una LCVR que comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 que no tiene más de 2 sustituciones de aminoácidos.

La identidad de secuencia puede medirse mediante cualquier método conocido en la técnica (por ejemplo, GAP, BESTFIT y BLAST).

La presente divulgación también incluye el uso de anticuerpos anti-PD-1 en métodos para tratar el cáncer de piel, en donde los anticuerpos anti-PD-1 comprenden variantes de cualquiera de las secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR y/o CDR divulgadas en el presente documento que tienen una o más sustituciones conservativas. Por ejemplo, la presente divulgación incluye el uso de anticuerpos anti-PD-1 que tienen secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR, y/o CDR con, p. ej., 10 o menos, 8 o menos, 6 o menos, 4 o menos, etc., sustituciones conservativas de aminoácidos respecto a cualquiera de las secuencias de aminoácidos de la HCVR, LCVR, y/o CDR divulgadas en el presente documento.

Otros anticuerpos anti-PD-1 que se pueden utilizar en el contexto de los métodos de la presente divulgación incluyen, p. ej., los anticuerpos denominados y conocidos en la técnica como nivolumab, pembrolizumab, MEDI0608, pidilizumab, BI 754091, espartalizumab (también conocido como PDR001), camrelizumab (también conocido como SHR-1210), JNJ-63723283, MCLA-134, o cualquiera de los anticuerpos anti-PD-1 establecidos en las patentes de Estados Unidos números 6808710, 7488802, 8008449, 8168757, 8354509, 8609089, 8686119, 8779105, 8900587 y 9987500, y en las publicaciones de patente WO2006/121168, WO2009/114335.

Los anticuerpos anti-IL-PD-1 utilizados en el contexto de los métodos de la presente divulgación pueden tener características de unión dependientes del pH. Por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1 para su uso en los métodos la presente divulgación puede presentar una unión reducida a PD-1 a pH ácido en comparación con el pH neutro. Como alternativa, un anticuerpo anti-IL-PD-1 de la invención puede presentar una unión mejorada a su antígeno a pH ácido en comparación con el pH neutro. La expresión "pH ácido" incluye valores de pH inferiores a aproximadamente 6,2, p. ej., aproximadamente 6,0, 5,95, 5,9, 5,85, 5,8, 5,75, 5,7, 5,65, 5,6, 5,55, 5,5, 5,45, 5,4, 5,35, 5,3, 5,25, 5,2, 5,15, 5,1, 5.05, 5,0 o menor. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "pH neutro" significa un pH de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,4. La expresión "pH neutro" incluye valores de pH de aproximadamente 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35 y 7,4.

En ciertos casos, "unión reducida a PD-1 a pH ácido en comparación con pH neutro" se expresa en términos de una proporción del valor de K<d>del anticuerpo que se une a PD-1 a pH ácido con respecto al valor de K<d>del anticuerpo que se une a PD-1 a pH neutro (o viceversa). Por ejemplo, puede considerarse que un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo presenta "unión reducida a PD-1 a pH ácido en comparación con pH neutro" para fines de la presente divulgación si el anticuerpo o fragmento de unión a antígeno del mismo presenta una proporción de K<d>ácido/neutro de aproximadamente 3,0 o mayor. En determinadas realizaciones ilustrativas, la proporción de K<d>ácida/neutra para un anticuerpo o fragmento de unión al antígeno de la presente divulgación puede ser de aproximadamente 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 5,5, 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0, 8,5, 9,0, 9,5, 10,0, 10,5, 11,0, 11,5, 12,0, 12,5, 13,0, 13.5, 14,0, 14,5, 15,0, 20,0, 25,0, 30,0, 40,0, 50,0, 60,0, 70,0, 100,0 o superior.

Se pueden obtener anticuerpos con características de unión dependientes del pH, p. ej., mediante la selección de una población de anticuerpos para la unión reducida (o mejorada) a un antígeno particular a pH ácido en comparación con pH neutro. De manera adicional, las modificaciones del dominio de unión a antígeno a nivel de aminoácidos pueden producir anticuerpos con características dependientes del pH. Por ejemplo, mediante la sustitución de uno o más aminoácidos de un dominio de unión a antígeno (por ejemplo, dentro de una CDR) con un resto de histidina, puede obtenerse un anticuerpo con unión a antígeno reducida a pH ácido en relación con el pH neutro. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "pH ácido" significa un pH de 6,0 o inferior.

Anticuerpos anti PD-L1 y fragmentos de unión a antígeno de los mismos

En algunos aspectos de la divulgación, los inhibidores de PD-1 utilizados en los métodos divulgados en el presente documento son anticuerpos o fragmentos de unión a antígeno de los mismos que se unen específicamente a PD-L1. Por ejemplo, un anticuerpo que "se une de manera específica a" PD-L1, como se usa en el contexto de la presente divulgación, incluye anticuerpos que se unen a PD-L1 o una porción del mismo con una K<d>de aproximadamente 1*10' 8 M o menos (p. ej., una K<d>menor denota una unión más estrecha). Un anticuerpo anti-PD-L1 de "alta afinidad" se refiere a aquellos mAb que tienen afinidad de unión a PD-L1, expresada como K<d>de al menos 10‘8 M, preferentemente de 10‘9 M, más preferentemente de 10‘10 M, incluso más preferentemente de 10’11 M, incluso más preferentemente de 10‘12 M, medida por resonancia de plasmón superficial, p. ej., BIACORE™ o ELISA de afinidad en solución. Un anticuerpo aislado que se une de manera específica a PD-L1 humano puede, sin embargo, tener reactividad cruzada con otros antígenos, tales como moléculas de PD-L1 de otras especies (no humanas). ;;De acuerdo con determinados aspectos ilustrativos de la divulgación, el anticuerpo anti-PD-L1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende una región variable de cadena pesada (HCVR), una región variable de cadena ligera (LCVR) y/o regiones determinantes de la complementariedad (CDR) que comprenden las secuencias de aminoácidos de cualquiera de los anticuerpos anti- PD-L1 como se establece en la patente de EE. UU. n.° 9938345. En determinados aspectos ilustrativos, un anticuerpo anti-PD-L1 o fragmento de unión a antígeno del mismo que se puede usar en el contexto de la presente divulgación comprende las regiones determinantes de la complementariedad de cadena pesada (HCDR) de una región variable de la cadena pesada (HCVR) y las regiones determinantes de la complementariedad de cadena ligera (LCDR) de una región variable de la cadena ligera (LCVR), en donde la HCVR y LCVR comprenden las secuencias de aminoácidos del anticuerpo anti-PD-L1 designado como H2M8314N en la patente de EE.UU. n.° 9.938.345. De acuerdo con determinados aspectos, el anticuerpo anti-PD-L1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende tres HCDR (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) y tres LCDR (LCDR1, LCDR2 y LCDR3), en donde HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 y LCDR3 comprenden las secuencias de aminoácidos del anticuerpo anti-PD-LI denominado H2M8314N en la patente de EE. UU. n.° 9.938.345. En otros aspectos más, el anticuerpo anti-PD-L1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende una HCVR y una LCVR que comprenden las secuencias de aminoácidos del anticuerpo anti-PD-LI designado como H2M8314N en la patente de EE. UU. n.° 9.938.345. ;;En determinados aspectos, los métodos de la presente divulgación comprenden el uso de un anticuerpo anti-PD-LI, en donde el anticuerpo comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada del anticuerpo anti-pD-L1 designado como H2M8314N en la patente de EE.UU. n.° 9.938.345. En algunos aspectos, el anticuerpo anti-PD-1 comprende una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera del anticuerpo anti-PD-Ll designado como H2M8314N en la patente de EE.UU. n.° 9.938.345. ;;De acuerdo con determinados aspectos de la presente divulgación, el anti-PD-LI humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una LCVR que tiene un 90 %, un 95 %, un 98 % o un 99 % de identidad de secuencia con la secuencia de aminoácidos de la LCVR del anticuerpo anti-PD-LI designado como H2M8314N en la patente de EE. UU. n.° 9.938.345. ;;De acuerdo con determinados aspectos de la presente divulgación, el anti-PD-LI humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una HCVR que comprende una secuencia de aminoácidos del anticuerpo anti-PD-LI designado como H2M8314N en la patente de EE. UU. n.° 9.938.345 que tiene no más de 5 sustituciones de aminoácidos. De acuerdo con determinados aspectos de la presente divulgación, el anti-PD-LI humano, o fragmento de unión a antígeno del mismo, comprende una LCVR que comprende una secuencia de aminoácidos del anticuerpo anti-PD-LI designado como H2M8314N en la patente de EE. UU. n.° 9.938.345 que tiene no más de 2 sustituciones de aminoácidos. ;;La identidad de secuencia puede medirse mediante cualquier método conocido en la técnica (por ejemplo, GAP, BESTFIT y BLAST). ;;La presente divulgación también incluye el uso de anticuerpos anti-PD-LI en métodos para tratar el cáncer de piel, en donde los anticuerpos anti-PD-LI comprenden variantes de cualquiera de las secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR y/o CDR divulgadas en el presente documento que tienen una o más sustituciones conservativas. Por ejemplo, la presente divulgación incluye el uso de anticuerpos anti-PD-LI que tienen secuencias de aminoácidos de HCVR, LCVR, y/o CDR con, p. ej., 10 o menos, 8 o menos, 6 o menos, 4 o menos, etc., sustituciones conservativas de aminoácidos respecto a cualquiera de las secuencias de aminoácidos de la HCVR, LCVR, y/o CDR divulgadas en el presente documento. ;;Otros anticuerpos anti-PD-LI que se pueden utilizar en el contexto de los métodos de la presente divulgación incluyen, p. ej., los anticuerpos denominados y conocidos en la técnica como MDX-1105, atezolizumab (TECENTRIQ™), durvalumab (IMFINZI™), avelumab (BAVENCIO™), LY3300054, FAZ053, STI-1014, CX-072, KN035 (Zhanget al.,Cell Discovery, 3, 170004 (Marzo de 20l7)), CK-301 (Goreliket al.,American Association for Cancer Research Annual Meeting (AACR), 2016-04-04 Resumen 4606), o cualquiera de los otros anticuerpos anti-PD-LI establecidos en las publicaciones de patente US7943743, US8217149, US9402899, US9624298, US 9938345, WO 2007/005874, WO 2010/077634, WO 2013/181452, WO 2013/181634, WO 2016/149201, WO 2017/034916 o EP3177649. ;;Composiciones farmacéuticas y administración;;Los inhibidores de PD-1 divulgados en el presente documento pueden incluirse dentro de una composición farmacéutica, que puede formularse con vehículos, excipientes, tampones adecuados y otros agentes adecuados que proporcionen una transferencia, administración, tolerancia y similares. Se puede encontrar una multitud de formulaciones adecuadas en el formulario conocido por todos los químicos farmacéuticos: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Estas formulaciones incluyen, por ejemplo, polvos, pastas, pomadas, gelatinas, ceras, aceites, lípidos, vesículas que contienen lípidos (catiónicos o aniónicos) (tales como LIPOFECTIN™), conjugados de ADN, pastas de absorción anhidras, emulsiones de aceite en agua y agua en aceite, emulsiones de Carbowax (polietilenglicoles de diversos pesos moleculares), geles semisólidos y mezclas semisólidas que contienen Carbowax. VéasetambiénPowellet al.,"Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA, J Pharm Sci Technol 52:238-311 (1998). ;;Se conocen diversos sistemas de administración y pueden utilizarse para administrar la composición farmacéutica de la invención, p. ej., encapsulación en liposomas, micropartículas, microcápsulas, células recombinantes capaces de expresar los virus mutantes, endocitosis mediada por receptor. Véase, p. ej., Wuet al.,J. Biol. Chem. 262: 4429-32 (1987). ;;Una composición farmacéutica que comprende un inhibidor de PD-1 divulgada en el presente documento es adecuada para administración intralesional, que incluye la administración directamente en una lesión de cáncer de piel y la administración en la piel que recubre la lesión de cáncer de piel. La composición farmacéutica se puede administrar mediante inyección subcutánea con una aguja y jeringa estándar. ;Las formulaciones inyectables de la composición farmacéutica se pueden preparar mediante métodos conocidos. Por ejemplo, la formulación inyectable puede prepararse, p. ej., mediante disolución, suspensión o emulsión del anticuerpo o su sal descrita anteriormente en un medio acuoso estéril o un medio oleoso utilizado convencionalmente para inyecciones. Como medio acuoso para inyecciones, existen, por ejemplo, solución salina fisiológica, una solución isotónica que contiene glucosa y otros agentes auxiliares, etc., que puede utilizarse junto con un agente de solubilización apropiado, tal como un alcohol (p. ej., etanol), un polialcohol (p. ej., propilenglicol, polietilenglicol), un tensioactivo no iónico [p. ej., polisorbato 80, HCO-50 (aducto de polioxietileno (50 mol) de aceite de ricino hidrogenado)], etc. Como medio oleoso, se emplean, p. ej., aceite de sésamo, aceite de soja, etc., que puede usarse junto con un agente solubilizante, tal como benzoato de bencilo, alcohol bencílico, etc. La formulación inyectable así preparada se carga preferentemente en una ampolla apropiada. En algunas realizaciones, una formulación inyectable puede estar en forma de una solución de inyección intralesional que incluye una concentración de inhibidor de PD-1 y uno o más disolventes (p. ej., agua destilada, solución salina, etc.). ;;En determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona una composición o formulación farmacéutica que comprende una cantidad terapéutica del anticuerpo anti-PD-1 y un vehículo farmacéutico aceptable. En determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona el anticuerpo anti-PD-1 formulado en una composición farmacéutica para administración mediante inyección intralesional. ;;Se divulgan composiciones farmacéuticas ilustrativas que comprenden un anticuerpo anti-PD-1 que se puede usar en el contexto de la presente invención, p. ej., en el documento US 2019/0040137. ;;Pautas posológicas;;En determinadas realizaciones, los métodos incluyen administrar intralesionalmente al tumor de un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo anti-PD-1 en múltiples dosis, p. ej., como parte de una pauta posológica terapéutica específica. Por ejemplo, la pauta posológica terapéutica anteriormente mencionada puede comprender administrar una o más dosis de un anticuerpo anti-PD-1 al sujeto con una frecuencia de aproximadamente una vez al día, una vez cada dos días, una vez cada tres días, una vez cada cuatro días, una vez cada cinco días, una vez cada seis días, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas, una vez cada cinco semanas, una vez cada seis semanas, una vez cada ocho semanas, una vez cada doce semanas, una vez al mes, una vez cada dos meses, una vez cada tres meses, una vez cada cuatro meses, dos veces al día, dos veces cada dos días, dos veces cada tres días, dos veces cada cuatro días, dos veces cada cinco días, dos veces cada seis días, dos veces a la semana, dos veces cada dos semanas, dos veces cada tres semanas, dos veces cada cuatro semanas, dos veces cada cinco semanas, dos veces cada seis semanas, dos veces cada ocho semanas, dos veces cada doce semanas, dos veces al mes, dos veces cada dos meses, dos veces cada tres meses, dos veces cada cuatro meses, tres veces al día, tres veces cada dos días, tres veces cada tres días, tres veces cada cuatro días, tres veces cada cinco días, tres veces cada seis días, tres veces a la semana, tres veces cada dos semanas, tres veces cada tres semanas, tres veces cada cuatro semanas, tres veces cada cinco semanas, tres veces cada seis semanas, tres veces cada ocho semanas, tres veces cada doce semanas, tres veces al mes, tres veces cada dos meses, tres veces cada tres meses, tres veces cada cuatro meses o con menos frecuencia o según sea necesario siempre que se logre una respuesta terapéutica. En una realización, se administran una o más dosis de un anticuerpo anti-PD-1 una vez a la semana. ;;En determinadas realizaciones, la una o más dosis se administran en al menos un ciclo de tratamiento. Los métodos, de acuerdo con este aspecto, comprenden administrar a un sujeto que lo necesita al menos un ciclo de tratamiento que comprende la administración de 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más dosis del anticuerpo anti-PD-1. En una realización, un ciclo de tratamiento comprende 3 dosis de un inhibidor de PD-1. En una realización, un ciclo de tratamiento comprende 12 dosis de un inhibidor de PD-1. En una realización, un ciclo de tratamiento comprende 24 dosis de un inhibidor de PD-1. En una realización, un ciclo de tratamiento comprende 3 dosis de un inhibidor de PD-1, cada dosis se administra dos semanas después de la dosis inmediatamente anterior. En una realización, un ciclo de tratamiento comprende 10 dosis del inhibidor de PD-1, cada dosis se administra una semana después de la dosis inmediatamente anterior. En una realización, un ciclo de tratamiento comprende 12 dosis del inhibidor de PD-1, cada dosis se administra una semana después de la dosis inmediatamente anterior. ;;En una realización, todas las dosis administradas en un ciclo de tratamiento comprenden la misma cantidad del inhibidor de PD-1. En otra realización, un ciclo de tratamiento comprende la administración de al menos dos dosis que comprenden diferentes cantidades del inhibidor de PD-1. En una realización, la primera dosis del ciclo de tratamiento comprende una cantidad mayor del inhibidor de PD-1 que las dosis posteriores del ciclo de tratamiento. En una realización, la primera dosis del ciclo de tratamiento comprende una cantidad menor del inhibidor de PD-1 que las dosis posteriores del ciclo de tratamiento. ;;En una realización, se repite el ciclo de tratamiento. En algunas realizaciones, el ciclo de tratamiento se repite 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 o más veces. ;;En determinadas realizaciones, se administra una dosis de un inhibidor de PD-1 a un sujeto en una única sesión o visita al paciente. En determinadas realizaciones, la administración de una dosis incluye la administración intralesional de una o más inyecciones del anticuerpo anti-PD-1 en una o más ubicaciones de la lesión tumoral. Algunas o todas las ubicaciones de la lesión tumoral pueden ser iguales o diferentes entre sí. En una realización, la administración de una dosis incluye administrar 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más inyecciones del anticuerpo anti-PD-1 en 1, 2, 3, 4, 5, 6, 0 7 ubicaciones de una lesión tumoral. En una realización, se administran de 2 a 5 inyecciones del anticuerpo anti-PD-1 en 2 a 5 ubicaciones de la lesión tumoral del sujeto. En algunas realizaciones, la ubicación de la lesión tumoral incluye, pero no se limita a, la mitad superior (cefálica) de la lesión, la porción más densa de la mitad superior de la lesión, la piel que recubre la lesión tumoral y/o la periferia superior (cefálica) del tumor cerca o adyacente a una interfaz con piel de aspecto normal. ;;En algunas realizaciones, la administración de una dosis que comprende la administración intralesional de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más inyecciones del anticuerpo anti-PD-1 se completa en menos de 10 minutos, tal como de 1 a 6 minutos, de 2 a 5 minutos o de 2 a 3 minutos, medido desde el inicio de la primera inyección administrada comprendida en la dosis hasta el final de la última inyección administrada comprendida en la dosis. Por ejemplo, en una realización ilustrativa no limitante, el tiempo total para administrar intralesionalmente el inhibidor de PD-1 (tal como un anticuerpo anti-PD-1), medido desde el inicio de la primera administración hasta el final de la última administración, es de 2 a 5 minutos. En determinadas realizaciones, se administran intralesionalmente una o más inyecciones del anticuerpo anti-PD-1 a un sujeto que lo necesita durante un período de tiempo de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 minutos. ;Como se utiliza en el presente documento, los términos "iniciador", "secundario", "terciario", y así sucesivamente se refieren a la secuencia temporal de la administración. Así, una "dosis inicial" es una dosis que se administra al inicio de la pauta posológica (también denominada "dosis de referencia"); una "dosis secundaria" es una dosis administrada después de la dosis inicial; y una "dosis terciaria" es una dosis administrada después de la dosis secundaria. Las dosis inicial, secundaria y terciaria pueden contener la misma cantidad del inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1). En determinadas realizaciones, sin embargo, la cantidad contenida en las dosis inicial, secundaria y/o terciaria varían entre sí (p. ej., ajustadas hacia arriba o hacia abajo según corresponda) durante el inicio del tratamiento. En determinadas realizaciones, una o más (por ejemplo, 1, 2, 3, 4 o 5) dosis se administran al comienzo del régimen de tratamiento como "dosis de carga" seguidas de dosis posteriores que se administran con menos frecuencia (por ejemplo, "dosis de mantenimiento"). Por ejemplo, se puede administrar un anticuerpo anti-PD-1 a un paciente con cáncer a una dosis de carga de aproximadamente 1 mg/kg a 3 mg/kg seguida de una o más dosis de mantenimiento de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg del peso corporal del paciente. ;;En una realización de ejemplo, cada dosis secundaria y/o terciaria se administra de a 4 semanas o más (por ejemplo, ^ , 1, 1^, 2, 21^ , 3, 31^ , 4 o más semanas) después de la dosis inmediatamente anterior. La expresión "la dosis inmediatamente anterior", como se utiliza en el presente documento, significa, en una secuencia de administraciones múltiples, la dosis de anticuerpo anti-PD-1 administrada a un sujeto antes de la administración de la siguiente dosis en la secuencia sin dosis intermedias. ;;De forma similar, un "ciclo de tratamiento inicial" es un ciclo de tratamiento que se administra al comienzo del régimen de tratamiento; un "ciclo de tratamiento secundario" es un ciclo de tratamiento administrado después del ciclo de tratamiento inicial; y un "ciclo de tratamiento terciario" es un ciclo de tratamiento administrado después del ciclo de tratamiento secundario. En el contexto de la presente divulgación, los ciclos de tratamiento pueden ser iguales o diferentes entre sí. ;;Posología;;En determinadas realizaciones, cada dosis del inhibidor de PD-1 comprende 0,1, 1, 0,3, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 mg/kg del peso corporal del paciente. En determinadas realizaciones, cada dosis comprende de 5 - 500 mg del inhibidor de PD-1, por ejemplo 5, 10, 15, 20, 25, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100 mg o más del inhibidor de PD-1. En una realización,<el inhibidor de>P<d>-1<es REGN2810 (cemiplimab).>;;La cantidad de inhibidor de PD-1 administrada intralesionalmente a un sujeto de acuerdo con los métodos descritos en el presente documento es, por lo general, una cantidad terapéuticamente eficaz. Como se utiliza en el presente documento, la expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" significa una cantidad de un inhibidor de PD-1 que tiene como resultado uno o más de: (a) una reducción en la intensidad o duración de un síntoma o un indicio de cáncer de piel, p. ej., una lesión tumoral; (b) inhibición del crecimiento tumoral o aumento de la necrosis tumoral, reducción tumoral y/o desaparición del tumor; (c) retraso en el crecimiento y desarrollo del tumor; (d) inhibición de la metástasis tumoral; (e) prevención de la recidiva del crecimiento tumoral; (f) aumento de la supervivencia de un sujeto con cáncer; y/o (g) una reducción en el uso o la necesidad de terapia anticancerosa convencional (por ejemplo, eliminación de la necesidad de cirugía o uso reducido o eliminado de agentes quimioterapéuticos o citotóxicos) en comparación con un sujeto no tratado o un sujeto tratado con un inhibidor de PD-1 por una vía de administración distinta a la intralesional (p. ej., mediante perfusión intravenosa). ;;En el caso de un inhibidor de PD-1 (por ejemplo, un anticuerpo anti-PD-1), una cantidad terapéuticamente eficaz puede ser de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 500 mg, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 450 mg, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 400 mg, de aproximadamente 75 mg a aproximadamente 350 mg, o de aproximadamente 100 mg a aproximadamente 300 mg del anticuerpo. Por ejemplo, en diversas realizaciones, la cantidad del inhibidor de PD-1 es aproximadamente 5 mg, aproximadamente 10 mg, aproximadamente 15 mg, aproximadamente 20 mg, aproximadamente 30 mg, aproximadamente 40 mg, aproximadamente 50 mg aproximadamente 60 mg, aproximadamente 70 mg, aproximadamente 80 mg, aproximadamente 90 mg aproximadamente 100 mg, aproximadamente 110 mg, aproximadamente 120 mg, aproximadamente 130 mg aproximadamente 140 mg, aproximadamente 150 mg, aproximadamente 160 mg, aproximadamente 170 mg aproximadamente 180 mg, aproximadamente 190 mg, aproximadamente 200 mg, aproximadamente 210 mg aproximadamente 220 mg, aproximadamente 230 mg, aproximadamente 240 mg, aproximadamente 250 mg aproximadamente 260 mg, aproximadamente 270 mg, aproximadamente 280 mg, aproximadamente 290 mg aproximadamente 300 mg, aproximadamente 310 mg, aproximadamente 320 mg, aproximadamente 330 mg aproximadamente 340 mg, aproximadamente 350 mg, aproximadamente 360 mg, aproximadamente 370 mg aproximadamente 380 mg, aproximadamente 390 mg, aproximadamente 400 mg, aproximadamente 410 mg aproximadamente 420 mg, aproximadamente 430 mg, aproximadamente 440 mg, aproximadamente 450 mg aproximadamente 460 mg, aproximadamente 470 mg, aproximadamente 480 mg, aproximadamente 490 mg aproximadamente 500 mg, aproximadamente 510 mg, aproximadamente 520 mg, aproximadamente 530 mg aproximadamente 540 mg, aproximadamente 550 mg, aproximadamente 560 mg, aproximadamente 570 mg aproximadamente 580 mg, aproximadamente 590 mg, o aproximadamente 600 mg, del inhibidor de PD-1. ;;En una realización, se administra intralesionalmente una cantidad terapéuticamente eficaz de 5 mg de un inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1) de acuerdo con los métodos divulgados en el presente documento. En otra realización, se administra intralesionalmente una cantidad terapéuticamente eficaz de 15 mg de un inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1) de acuerdo con los métodos divulgados en el presente documento. En otra realización, se administra intralesionalmente una cantidad terapéuticamente eficaz de 44 mg de un inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1) de acuerdo con los métodos divulgados en el presente documento. ;;La cantidad de inhibidor de PD-1 contenida dentro de una dosis individual puede expresarse en términos de miligramos de anticuerpo por kilogramo del peso corporal del sujeto (es decir, mg/kg). En determinadas realizaciones, el inhibidor de PD-1 usado en los métodos divulgados en el presente documento se puede administrar a un sujeto en una dosis de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal del sujeto. En determinadas realizaciones, un anticuerpo anti-PD-1 puede administrarse a una dosis de aproximadamente 0,1 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg del peso corporal de un paciente. En determinadas realizaciones, los métodos comprenden la administración de un inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1) a una dosis de aproximadamente 1 mg/kg, 3 mg/kg, 5 mg/kg o 10 mg/kg del peso corporal de un paciente. ;;En determinadas realizaciones, una cantidad de dosis individual de un inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1) administrada intralesionalmente a un paciente puede ser menor que una cantidad terapéuticamente eficaz, es decir, una dosis subterapéutica. Por ejemplo, si la cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de PD-1 comprende 3 mg/kg, una dosis subterapéutica comprende una cantidad inferior a 3 mg/kg, p. ej., 2 mg/kg, 1,5 mg/kg, 1 mg/kg, 0,5 mg/kg o 0,3 mg/kg. Como se define en el presente documento, una "dosis subterapéutica" se refiere a una cantidad del inhibidor de PD-1 que no conduce a un efecto terapéutico por sí mismo. Sin embargo, en determinadas realizaciones, se administran múltiples dosis subterapéuticas de un inhibidor de PD-1 para lograr colectivamente un efecto terapéutico en el sujeto. ;;En determinadas realizaciones, cada dosis comprende 0,1 - 10 mg/kg (p. ej., 0,3 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg o 10 mg/kg) del peso corporal del sujeto. En determinadas realizaciones diferentes, cada dosis comprende de 5 a 600 mg del inhibidor de PD-1 (anticuerpo anti-PD-1), por ejemplo, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg o 500 mg del inhibidor de PD-1. ;;Ejemplos;;La tecnología divulgada se describe a continuación mediante los siguientes ejemplos. El uso de estos y otros ejemplos en cualquier sitio en la memoria descriptiva es solo ilustrativo y no limita de ninguna manera el alcance y el significado de la invención o de cualquier término ilustrado. Del mismo modo, la invención no se limita a cualquier realización preferida concreta descrita en el presente documento. De hecho, modificaciones y variaciones de la invención pueden ser evidentes para los expertos en la materia al leer esta memoria descriptiva. Por lo tanto, la invención debe estar limitada únicamente por los términos de las reivindicaciones, junto con el ámbito completo de equivalentes a los que califican dichas reivindicaciones. Asimismo, aunque se ha hecho todo lo posible por garantizar la exactitud con respecto a los números utilizados (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), deben tenerse en cuenta algunos errores y desviaciones experimentales. A menos que se indique otra cosa, las partes son partes en peso, el peso molecular es el peso molecular promedio, la temperatura está en grados centígrados y la presión es atmosférica o cercana a la atmosférica. ;;Ejemplo 1: Ensayo clínico del anticuerpo anti-PD-1 administrado por vía intralesional en pacientes con carcinoma espinocelular (CSCC) recurrente;;Este estudio es un estudio fase 1, con un solo grupo, sin enmascaramiento, de aumento de dosis (con expansiones de cohortes) para evaluar la seguridad, tolerabilidad, farmacocinética (FC) y eficacia antitumoral de las inyecciones intralesionales semanales de un anticuerpo anti-PD-1 en pacientes con CSCC resecable, un tipo de tumor altamente sensible al sistema inmunitario. ;;El anticuerpo anti-PD-1 ilustrativo utilizado en este estudio es REGN2810 (también conocido como cemiplimab o H4H7798N como se divulga en el documento US9987500), que es un anticuerpo anti-PD-1 monoclonal completamente humano que comprende una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 y una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10; un par de secuencias de aminoácidos HCVR/LCVR que comprende las SEQ ID NO: 1/2; y secuencias CDR de cadena pesada y ligera que comprenden las SEQ ID NO: 3 a 8. ;;Objetivos del estudio;;Un objetivo principal del estudio es caracterizar la seguridad y tolerabilidad de REGN2810 inyectado intralesionalmente en pacientes con CSCC recurrente. ;;Los objetivos secundarios del estudio incluyen: (1) describir la tasa de respuesta objetiva (TRO) en lesiones de referencia del CSCC después de inyecciones intralesionales de REGN2810; (2) describir la tasa de respuesta patológica completa (RC) en lesiones de referencia del CSCC después de inyecciones intralesionales de REGN2810; (3) describir la tasa de respuesta patológica principal en lesiones de referencia del CSCC después de inyecciones intralesionales de REGN2810; (4) evaluar la exposición sistémica de REGN2810 después de inyecciones intralesionales de REGN2810; (5) evaluar la inmunogenicidad de REGN2810; y (6) evaluar la dosis de REGN2810. ;;Duración del estudio;;La duración del estudio para cada paciente es de aproximadamente 7 meses, incluyendo la selección (28 días), el período de tratamiento (12 semanas), la resección quirúrgica al final de la visita de tratamiento (semana 13) y un período de seguimiento posterior al tratamiento de 90 días. (Véase la Figura 1). El estudio contiene una opción para un tratamiento prolongado (hasta 12 semanas adicionales) para cada paciente individual cuando el tratamiento más allá de 12 semanas es clínicamente apropiado. El final del estudio se define como la última visita del último paciente. ;En este estudio, se espera que después de la administración intralesional, las concentraciones máximas de REGN2810 en suero aparezcan más de 24 horas después de la dosis intralesional, lo que requiere la recogida de muestras más allá del día 1 para obtener un perfil farmacocinético completo. Se recogerán muestras para el análisis de la concentración del fármaco de todos los pacientes antes de la dosis y en varios momentos después de la primera dosis. Este programa de recogida de muestras facilitará la determinación del perfil de concentración-tiempo después de la última dosis durante todo el período de seguimiento (para describir la eliminación de REGN2810). ;;Población del estudio;;Este estudio evalúa REGN2810 intralesional en pacientes con CSCC para los cuales está planificada la extirpación quirúrgica, pero para quienes el riesgo de recurrencia es alto debido a antecedentes de recurrencia después de la cirugía. Uno de los beneficios del REGN2810 intralesional es la reducción del riesgo de recurrencias posteriores debido a la capacidad de la inhibición de PD-1 para inducir memoria inmunitaria contra CSCC. ;;La población de estudio incluye pacientes masculinos y femeninos de 18 años o más en el momento del consentimiento que tienen CSCC recurrente y tienen al menos 1 lesión resecable de > 1,0 cm y < 2,0 cm. La lesión a la que se inyecta REGN2810 se denomina "lesión de referencia". ;;Criterios de inclusión: Un paciente debe cumplir los siguientes criterios para ser elegible para su inclusión en el estudio: (1) antecedentes de CSCC resecable recurrente que satisface cualquiera de las siguientes condiciones: (a) al menos 1 CSCC previo en la cabeza y el cuello que fue extirpado quirúrgicamente dentro de los 3 años anteriores a la fecha del consentimiento, actualmente con un CSCC recurrente en el área de la cabeza y cuello que será la lesión de referencia para el estudio y que mide > 1,0 cm y < 2,0 cm (diámetro más largo); (b) al menos 2 CSCC anteriores de tronco o extremidad que fueron extirpados quirúrgicamente dentro de los 3 años anteriores a la fecha del consentimiento, actualmente con un CSCC recurrente de tronco o extremidad que será la lesión de referencia para el estudio (cualquier ubicación anatómica) y mide > 1,0 cm y < 2,0 cm (diámetro más largo); (2) enfermedad mensurable (es decir, al menos 1 lesión que mide al menos 1 cm en ambos diámetros perpendiculares más largos) en la lesión de referencia; (3) Rendimiento funcional según el Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) < 1 (Okenet al.,Am J Clin Oncol 1982; 5(6):649-55); (4) > 18 años de edad; (5) Función hepática: (a) bilirrubina total <1,5 veces el límite superior de la normalidad, (b) alanina aminotransferasa (ALT) < 3 x LSN, (c) aspartato aminotransferasa (AST) < 3 x LSN, (c) fosfatasa alcalina (ALP) < 2,5 veces x LSN; (6) Función renal: creatinina sérica < 1,5 x LSN o aclaramiento de creatinina estimado (CrCI) > 30 ml/min; (7) Función de la médula ósea: (a) hemoglobina > 9,0 g/dl, (b) recuento absoluto de neutrófilos (ANC) > 1,5 * 109/l, (c) recuento de plaquetas > 75 x 109/l; (8) estar dispuesto y ser capaz de cumplir con las visitas a la clínica y los procedimientos relacionados con el estudio; (9) proporcionar consentimiento informado firmado y fechado por el paciente del estudio.

Criterios de exclusión: Un paciente que cumpla cualquiera de los siguientes criterios será excluido del estudio: (1) evidencia actual o reciente (en los últimos 5 años) de enfermedad autoinmunitaria significativa que requirió tratamiento con tratamientos inmunosupresores sistémicos, lo que puede sugerir riesgo de acontecimientos adversos inmunitarios AAinm (no excluyente: vitíligo, asma infantil que se ha resuelto, diabetes de tipo 1, hipotiroidismo residual que solo requirió reemplazo hormonal, o psoriasis que no requiere tratamiento sistémico); (2) tratamiento previo con un agente que bloquea la vía PD-1/PD-L1; (3) tratamiento previo con otro agente modulador inmunitario sistémico: (a) dentro de menos de 4 semanas (28 días) de la fecha de inclusión, (b) asociado con AAinm que fueron > grado 1 dentro de los 90 días anteriores a la inclusión, o (c) asociado con toxicidad que tuvo como resultado la interrupción del agente inmunomodulador; (4) antecedentes conocidos de metástasis cerebrales del CSCC; (5) dosis de corticosteroides inmunosupresores (> 10 mg de prednisona al día o equivalente) en las 4 semanas anteriores a la primera dosis de REGN2810 (no excluidos: pacientes que requieren un ciclo breve de esteroides); (6) antecedentes de neumonitis no infecciosa en los últimos 5 años; (7) cualquier tratamiento contra el cáncer, en investigación o tratamiento de referencia, dentro de los 30 días posteriores a la administración inicial de REGN2810 o planificada durante el período del estudio (no excluidos: pacientes que reciben bifosfonatos o denosumab; cirugía dentro de los 30 días posteriores al tratamiento inicial planificado de REGN2810); (8) antecedentes de reacciones alérgicas documentadas o reacción de hipersensibilidad aguda atribuidas a tratamientos con anticuerpos; (9) infección no controlada por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) (carga viral detectable o recuento de CD4 inferior a 350, independientemente del tratamiento antiviral), hepatitis B (HBsAg , que tienen el virus de la hepatitis B en suero detectable mediante la reacción en cadena de la polimerasa del ADN [PCR], independientemente de la terapia antiviral para la hepatitis B), o infección por hepatitis C (anticuerpos del virus de la hepatitis C positivos [HCV Ab ] que tienen ARN del VHC detectable mediante PCR); u otra infección no controlada; (10) neoplasia maligna concomitante distinta del CSCC y/o antecedentes de neoplasia maligna distinta del CSCC dentro de los 3 años posteriores a la fecha de la primera dosis planificada de REGN2810, excepto tumores con riesgo insignificante de metástasis o muerte, tal como BCC de la piel adecuadamente tratado, carcinoma in situ de cuello uterino, o carcinoma ductal in situ de mama, o adenocarcinoma de próstata en etapa temprana de bajo riesgo (T1-T2aN0M0 y puntuación de Gleason < 6 y PSA < 10 ng/ml) para los cuales el plan de manejo es vigilancia activa, o adenocarcinoma de próstata con recurrencia sólo bioquímica con tiempo de duplicación del PSA documentado de > 12 meses para el cual el plan de manejo es vigilancia activa (D'Amicoet al.,JAMA 2005; 294(4):440-7) (Phamet al.,J Urol 2016; 196(2):392-8); (11) problemas psiquiátricos agudos o crónicos que hacen que el paciente no sea elegible para participar; (12) pacientes con antecedentes de trasplante de órganos sólidos; (13) comorbilidad médica, hallazgo en la exploración física, disfunción metabólica o valor anómalo en la analítica que hace que el paciente no sea apto para participar en un ensayo clínico debido a altos riesgos de seguridad y/o potencial para afectar la interpretación de los resultados del estudio; (14) M1 o N1, N2 (a, b, o c), o N3 CSCC. Los pacientes con antecedentes de CSCC metastásico (a distancia o ganglionar), están excluidos a menos que el intervalo libre de enfermedad sea de al menos 3 años; (15) paciente excluido si la lesión de referencia estuviera en la zona del labio rojo seco (bermellón), cavidad bucal, mucosa nasal o área anogenital; (16) Pacientes que toman Coumadin (warfarina), debido al posible aumento del riesgo de hemorragia asociado con la cirugía en pacientes que toman Coumadin; (17) paciente con una lesión de referencia o una lesión no de referencia mayor de 2,0 cm de diámetro que no se puede extirpar quirúrgicamente durante el período de selección; (18) mujeres embarazadas o en periodo de lactancia; (19) hombres o mujeres sexualmente activos en edad fértil que no están dispuestos a practicar métodos anticonceptivos altamente eficaces antes de la dosis inicial/comienzo del primer tratamiento, durante el estudio y durante al menos 6 meses después de la última dosis.

Variables del estudio

Los criterios de valoración para este estudio incluyen: la incidencia, naturaleza e intensidad de las toxicidades limitantes de dosis (TLD), si los hubiera, y acontecimientos adversos surgidos durante el tratamiento (AAST), clasificados de acuerdo con los Criterios terminológicos comunes para acontecimientos adversos del Instituto Nacional del Cáncer (NCI CTCAE) v5, desde la primera dosis hasta el día 28; la incidencia e intensidad de los AAST, clasificados de acuerdo con los NCI CTCAE v5, durante el período de tratamiento y hasta 90 días después de la última dosis; y la incidencia e intensidad de las reacciones en el sitio de inyección (RSI) desde la primera dosis hasta 90 días después de la última dosis.

Los criterios de valoración secundarios para este estudio incluyen: TRO, determinada utilizando los criterios modificados de la OMS (descritos a continuación) al final del tratamiento (día 85 para pacientes que completan el ciclo de tratamiento planificado de 12 semanas); tasa de respuesta patológica completa en el momento de la cirugía; tasa de respuesta patológica importante en el momento de la cirugía (o biopsias al final del tratamiento, para pacientes que rechazan la cirugía); concentración de REGN2810 en suero a lo largo del tiempo desde la primera dosis hasta 90 días después de la última dosis; incidencia de títulos de anticuerpos antifármaco (Aa F) para REGN2810; y selección de la dosis recomendada de REGN2810 para estudios adicionales basados en observaciones clínicas y FC.

Los criterios de valoración adicionales para este estudio incluyen: TRO, en lesiones no de referencia determinada utilizando los criterios modificados de la OMS al final del tratamiento (día 85 para pacientes que completan el ciclo de tratamiento planificado de 12 semanas).

Las variables de eficacia para este estudio incluyen: RC patológica, evaluada mediante extirpación quirúrgica del área tratada al final del tratamiento y definida como la confirmación histológica de que no hay neoplasia maligna residual en el tejido de la resección quirúrgica; respuesta patológica importante, definida como confirmación histológica de no más del 10 % de células tumorales viables procedentes de la resección (o ausencia de malignidad residual en biopsias por punción o pacientes que no se someten a cirugía); y TRO, definida como el porcentaje de participantes con respuesta parcial (RP) o respuesta completa (RC) basada en mediciones bidimensionales de la lesión en fotografías médicas digitales de acuerdo con los criterios modificados de la OMS.

Las variables FC para este estudio incluyen las concentraciones de REGN2810 en suero a lo largo del tiempo. Las variables de AAF para este estudio incluyen el estado de AAF, título y momento/visita.

Diseño del estudio

En este estudio, cada paciente recibe una vez a la semana (QW) inyecciones intralesionales de 250 pl de REGN2810 al nivel de dosis asignado durante 12 semanas antes de la cirugía programada. Las cohortes de tres dosis siguen un diseño de aumento de dosis de 3 3. La Figura 1 proporciona un diagrama de flujo general del estudio. Aproximadamente 36 pacientes se incluirán en el estudio, incluidos 6 pacientes por nivel de dosis por diseño de 3 3.

Las tres cohortes de dosis de REGN2810 se administran intralesionalmente QW a los siguientes niveles de dosis: el nivel de dosis planificado 1 (dosis inicial) es de 5 mg a la semana; el nivel de dosis planificado 2 es de 15 mg a la semana; y el nivel de dosis planificado 3 es de aproximadamente 44 mg (43,75 mg) a la semana. El volumen de inyección de 250 pl es constante en cada nivel de dosis. Los niveles de dosis se logran diluyendo REGN2810 (proporcionado como líquido en viales estériles de un solo uso a una concentración de 175 mg/ml) en tampón.Procedimientos y evaluaciones

Los procedimientos de detección incluyen: consentimiento informado, inclusión/exclusión, historial médico, datos demográficos, serología vírica, coagulación, análisis de orina, confirmación patológica local de CSCC, ECOG, radiografía de tórax, asignación de tratamiento.

El procedimiento de tratamiento es la administración intralesional de REGN2810.

Los procedimientos de eficacia incluyen: fotografía médica digital y resección quirúrgica.

Los procedimientos de seguridad incluyen: evaluación de las constantes vitales, exploración física, electrocardiograma (ECG), control de acontecimientos adversos (AA), medicaciones y procedimientos concomitantes.

Los procedimientos de pruebas de laboratorio incluyen: hematología, análisis bioquímico de la sangre, prueba de embarazo (solo mujeres), pruebas de la función tiroidea.

Concentraciones FC/fármaco: se recogerán muestras FC para evaluar las concentraciones de REGN2810 en suero. AAF: Se recogerán muestras de suero para las evaluaciones de inmunogenicidad de REGN2810.

Medicamentos y procedimientos concomitantes

Medicamentos y procedimientos prohibidos: Mientras participa en el estudio, un paciente puede no recibir ninguno de los siguientes desde el momento del consentimiento informado hasta el final del período de seguimiento, a menos que se especifique lo contrario a continuación: (a) Agente convencional o en investigación para el tratamiento de un tumor distinto del REGN2810, con la excepción de las medicaciones permitidas que se enumeran a continuación, (b) Agentes que bloquean las vías PD-1/PD-L1, (c) Procedimientos quirúrgicos no relacionados con el estudio, a menos que sea de urgencia o a menos que se otorgue la aprobación, (d) Radioterapia.

Medicaciones y procedimientos permitidos: se permiten las siguientes medicaciones y procedimientos, en las siguientes condiciones: (a) cualquier medicamento necesario para tratar un AA y/o un AAinm, incluyendo corticosteroides sistémicos, (b) corticosteroides sistémicos para reemplazo fisiológico (incluso si >10 mg/día equivalentes de prednisona), (c) un ciclo breve de corticosteroides para la profilaxis o el tratamiento de enfermedades no autoinmunitarias, (d) bifosfonatos y denosumab, (e) dosis de reemplazo fisiológico de corticosteroides sistémicos, incluso si >10 mg/día equivalentes de prednisona, (f) anticonceptivos orales, se puede continuar con la terapia de reemplazo hormonal u otra terapia de mantenimiento, (g) paracetamol en dosis < 2 g/día, (h) resección quirúrgica de lesiones no de referencia, si está clínicamente indicado, (i) se pueden permitir otros medicamentos y procedimientos de forma individual.

Administración intralesional de REGN2810

La lesión de referencia (lesión seleccionada para inyección) tendrá un diámetro de superficie de al menos 1 cm sobre la superficie de la piel (diámetro máximo, 2,0 cm). La administración intralesional de REGN2810 se realiza bajo visualización directa. No se utiliza guía radiológica (es decir, ultrasonido). Los siguientes tipos de lesiones no se seleccionan para inyección: lesiones friables o necróticas, lesiones que son hemorrágicas, lesiones a una distancia de 2,0 cm del ojo o lesiones anogenitales. La lesión de referencia debe limpiarse con alcohol o betadine. Al menos 5 minutos (pero no más de 30 minutos) antes de la inyección de REGN2810 planificada, se puede aplicar una pomada tópica de lidocaína a la lesión de referencia. El tratamiento de 250 pl de REGN2810 se puede administrar con una jeringa de < 1 ml, preferentemente con una aguja de calibre 30.

REGN2810 se inyecta tangencialmente en la mitad superior (cefálica) de la lesión de referencia en 2 a 5 ubicaciones. La mitad inferior de la lesión de referencia no se inyecta para minimizar la pérdida de producto farmacológico de la lesión debido a la fuga desde la porción inferior del tumor. Se debe administrar al menos 1 inyección por vía intradérmica en la piel que recubre el tumor (o dentro de la porción más densa de la mitad superior del tumor), y se debe administrar al menos 1 inyección en la periferia superior (cefálica) del tumor cerca de la interfaz. con piel de aspecto normal. El tiempo total de inyección para todas las inyecciones debe ser de 2 a 3 minutos. La inyección debe administrarse muy lentamente para evitar la fuga del fármaco del estudio del tejido inyectado. No se deben inyectar áreas de tumor sueltas o friables debido a una posible fuga del fármaco del estudio.

30 ± 10 minutos después de la inyección, la lesión se inspecciona para detectar cualquier signo de RSI. Las constantes vitales se registran 30 ± 10 minutos después de la inyección y la lesión de referencia se cubre con un vendaje no oclusivo.

Manejo de reacciones de hipersensibilidad sistémica (RHS)

Las RHS se definen de la siguiente manera: los síntomas típicos pueden incluir fiebre, escalofríos, rigores, enrojecimiento de la piel, disnea, dolor de espalda, dolor abdominal y náuseas; la reacción suele ocurrir durante la inyección o en cualquier momento hasta el final del día siguiente (en ausencia de una explicación alternativa); las constantes vitales pueden ser notables por hipotensión y/o taquicardia.

Para los pacientes que experimentan RHS de Grado 1 o 2 (véase la Tabla 1), se recomiendan las siguientes medicaciones profilácticas al menos 30 minutos antes de las inyecciones posteriores de REGN2810: difenhidramina 50 mg (o equivalente) y/o acetaminofeno/paracetamol 325 mg a 1000 mg. Para pacientes que experimentan RHS de grado 2, se pueden utilizar corticosteroides (hasta 25 mg de hidrocortisona o equivalente).

Tabla 1: Sistema de clasificación de AA ue no fi uran en NCI-CTCAE

Manejo de las reacciones en el sitio de inyección (RSI)

Las RSI se definen como inflamación o daño al tejido que rodea el lugar donde se inyectó el fármaco del estudio.

Para los pacientes que experimentan RSI de Grado 1 o 2 (véase la Tabla 2), se recomiendan las siguientes medicaciones profilácticas al menos 30 minutos antes de las inyecciones posteriores de REGN2810: difenhidramina 50 mg (o equivalente) y/o acetaminofeno/paracetamol 325 mg a 1000 mg.

Criterios modificados de la OMS

El componente visible externamente de la lesión o lesiones diana se medirá utilizando los criterios bidimensionales de la OMS como la suma de los productos (de las lesiones diana individuales) en la dimensión más larga y la segunda dimensión perpendicular más larga, en cada evaluación de tumor y se documentará utilizando la fotografía digital estandarizada. En ausencia de cambios sustanciales en la geometría de la lesión, las mediciones de visitas posteriores deben realizarse en los mismos ejes y las fotografías anotadas de la visita anterior deben usarse como punto de partida para identificar el eje de medición al realizar evaluaciones posteriores.

Los criterios de respuesta clínica para tumores visibles externamente requieren mediciones bidimensionales de acuerdo con los criterios de la OMS y son los siguientes: (a) Respuesta completa de la enfermedad visible externamente (RCv): todas las lesiones diana ya no son visibles, mantenido durante al menos 4 semanas, (b) Respuesta parcial de la enfermedad visible externamente (RPv): disminución del 50 % (criterios de la OMS) o más en la suma de los productos de las dimensiones perpendiculares más largas de la lesión o lesiones diana, mantenido durante al menos 4 semanas, (c) Enfermedad estable visible externamente (EEv): no cumple con los criterios para RCv, RPv o enfermedad progresiva, (d) Progresión de la enfermedad visible (PEv): aumento de >25 % (criterios de la OMS) en la suma de los productos de las dimensiones perpendiculares más largas de la lesión o lesiones diana.

Lesiones nuevas: Una nueva lesión cutánea compatible con CSCC se considerará progresión clínica de la enfermedad (PEc) si la lesión mide > 10 mm en ambos diámetros perpendiculares máximos y no estaba presente previamente, a menos que se confirme mediante biopsia que no es compatible con CSCC.

Resultados

Se espera que la administración intralesional de REGN2810 conduzca a una mejor regresión del tumor, así como a una mayor seguridad en pacientes con CSCC. Se espera que los pacientes con CSCC tratados con administración intralesional de REGN2810 presenten una incidencia significativamente reducida o nula de acontecimientos adversos y/o toxicidad debido al uso de un tratamiento localizado en lugar de una exposición sistémica a REGN2810. También se espera que la administración intralesional de REGN2810 induzca memoria inmunitaria y, por lo tanto, reduzca o elimine la recurrencia de lesiones tumorales en pacientes tratados. De manera adicional, se espera que la administración intralesional de REGN2810 elimine la necesidad de cirugía en los pacientes tratados con CSCC.

Hasta la fecha, los pacientes se han incluido en el primer nivel de dosis (5 mg de REGN2810 por semana). Todos los pacientes completaron el período de control de TLD sin ninguna TLD. Los resultados muestran regresión tumoral en pacientes con CSCC a los que se les administró 5 mg de cemiplimab por vía intralesional. Las Figuras 2 y 3 muestran fotografías de dos pacientes de ejemplo que mostraron una reducción del tumor tras la administración intralesional de cemiplimab. La inclusión en otros niveles de dosis está en curso.

Claims (12)

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de muerte programada 1 (PD-1) para usar en un método para tratar o inhibir el crecimiento de un tumor, que comprende:

(a) seleccionar un paciente con un cáncer de piel; y

(b) administrar intralesionalmente al tumor del paciente una o más dosis de la composición farmacéutica; en donde el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 o un fragmento de unión a antígeno del mismo que comprende tres regiones determinantes de la complementariedad (CDR) (HCDR1, HCDR2 y HCDR3) contenidas dentro de una región variable de cadena pesada (HCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 y tres CDR (LCDR1, LCDR2 y LCd R3) contenidas dentro de una región variable de cadena ligera (LCVR) que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2.

2. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde:

(a) el cáncer de piel es carcinoma espinocelular (CSCC), carcinoma basocelular (BCC), carcinoma de células de Merkel o melanoma;

(b) el cáncer de piel es CSCC; o

(c) el cáncer de piel es CSCC resecable recurrente.

3. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde:

(a) el paciente ha recibido tratamiento previo para el cáncer; opcionalmente en donde el tratamiento previo comprende cirugía, radiación, quimioterapia, tratamiento con un inhibidor de PD-1 y/u otra terapia antitumoral; (b) el paciente tiene riesgo de recurrencia;

(c) el paciente tiene antecedentes de recurrencia después de la cirugía; y/o

d) el paciente ha recibido previamente un trasplante de órgano o tejido.

4. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde cada dosis del inhibidor de PD-1 comprende una o más inyecciones intralesionales de la composición farmacéutica en el tumor; opcionalmente en donde:

(a) se administran al menos dos inyecciones intralesionales en diferentes ubicaciones del tumor;

(b) se administran de dos a cinco inyecciones intralesionales en dos a cinco ubicaciones del tumor;

(c) se administra al menos una inyección intralesional en la mitad superior del tumor;

(d) se administra al menos una inyección intralesional en la piel que recubre el tumor; y/o

(e) se administra al menos una inyección intralesional en una periferia superior del tumor, adyacente a una interfaz con piel de aspecto normal.

5. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde: (a) el tumor tiene un diámetro de superficie de al menos 1 cm; y/o

(b) el tumor tiene un diámetro de superficie de no más de 2 cm.

6. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde cada dosis se administra una vez al día, una vez cada dos días, una vez cada tres días, una vez cada cuatro días, una vez cada cinco días, una vez cada seis días, una vez por semana o dos veces por semana.

7. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde: (a) cada dosis comprende de 5 mg a 200 mg del inhibidor de PD-1; y/o

(b) cada dosis comprende 5 mg, 15 mg o 44 mg del inhibidor de PD-1.

8. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde: (a) la administración del inhibidor de PD-1 promueve la regresión del tumor, reduce la carga de células tumorales, reduce la carga tumoral y/o previene la recurrencia del tumor en el paciente;

(b) la administración del inhibidor de PD-1 promueve al menos aproximadamente un 10 % más de regresión tumoral que la administración intravenosa del inhibidor de PD-1; y/o

(c) la administración del inhibidor de PD-1 conduce a una menor incidencia de acontecimientos adversos, menos intensidad de los acontecimientos adversos y/o menos toxicidad que la administración intravenosa del inhibidor de PD-1.

9. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, que comprende además:

(a) extirpar quirúrgicamente el tumor después de la etapa (b); y/o

(b) administrar un segundo agente terapéutico o terapia seleccionada de cirugía, radiación, quimioterapia, un corticoesteroide, un fármaco antiinflamatorio y/o combinaciones de los mismos; opcionalmente en donde se administra el inhibidor de PD-1:

(i) antes del segundo agente terapéutico o terapia; o

(ii) después del segundo agente terapéutico o terapia.

10. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde:

(a) HCDR1 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3; HCDR2 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4; HCDR3 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 5; LCDR1 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6; LCDR2 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7; en donde LCDR3 tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 8; y/o

(b) el anticuerpo anti-PD-1 o fragmento de unión a antígeno del mismo comprende un par de secuencias HCVR/LCVR de SEQ ID NOs: 1/2.

11. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde el anticuerpo anti-PD-1 comprende una cadena pesada y una cadena ligera, en donde:

(a) la cadena pesada tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9;

(b) la cadena ligera tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10; o

(c) la cadena pesada tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 9 y la cadena ligera tiene una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 10.

12. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en donde el inhibidor de PD-1 es cemiplimab o un bioequivalente del mismo.