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ES2979288T3 - Composición antimicotoxinas - Google Patents

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ES2979288T3
ES2979288T3 ES18804417T ES18804417T ES2979288T3 ES 2979288 T3 ES2979288 T3 ES 2979288T3 ES 18804417 T ES18804417 T ES 18804417T ES 18804417 T ES18804417 T ES 18804417T ES 2979288 T3 ES2979288 T3 ES 2979288T3
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ES
Spain
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strain
bacillus subtilis
cncm
nol01
mycotoxins
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ES18804417T
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English (en)
Inventor
Michel Layus
Alexandre Brame
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Original Assignee
Mixscience SAS
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Abstract

La invención se refiere al uso de una composición que comprende al menos una cepa de Bacillus subtilis, para la degradación de micotoxinas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Composición antimicotoxinas
La invención se refiere a una composición antimicotoxinas.
Las micotoxinas son toxinas elaboradas por diversas especies de hongos microscópicos tales como los mohos(Aspergillus sp., Fusarium sp., Stachybotrys sp., Penicillium sp.,etc.). Son moléculas de bajo peso molecular (<1000 dalton), lo más habitualmente termoestables en medio no acuoso. Al ser difícilmente degradables, pueden persistir en los productos alimentarios incluso después de la eliminación de los mohos.
Se considera que las micotoxinas son una de las principales amenazas para el sector de la alimentación y de la ganadería en todo el mundo, conllevando pérdidas de productividad animal que se encuentran entre el 2 y el 5 %.
La prevención de la contaminación de las materias primas por micotoxinas puede consistir en el uso de fungicidas que inhiben el crecimiento de los mohos, o la selección genética de plantas resistentes a la invasión. A esto se le añaden cuidados aportados durante el almacenamiento (secado, control de la temperatura, de la humedad y de la oxigenación en los silos):
- los métodos físicos: lavado, secado, trituración, clasificaciones manuales o mecanizadas de las vainas o de las semillas, separación mecánica de la cáscara y de la piel que son el lugar esencial de contaminación, tratamiento mediante choque térmico, torrefacción,...
- los métodos químicos: tratamiento con amoniaco de las tortas de cacahuetes. La destoxificación mediante amoniaco a presión se presta fácilmente al tratamiento de las tortas de cacahuetes o de otros productos oleaginosos que llegan por barco;
- los métodos biológicos tales como la adición de inhibidor de mohos (propionato) o como la dilución (amalgama o mezcla) de granos contaminados con granos no contaminados para la alimentación animal (prohibido en determinados países).
Pero, en el estado actual de los conocimientos científicos y técnicos, y a pesar de las mejoras aportadas a las técnicas de producción y de almacenamiento, no es posible impedir completamente el desarrollo de los mohos. Es probable que esto no sea posible sin emplear medios que tengan más efectos secundarios negativos, concretamente desde el punto de vista ecológico, pero también desde el punto de vista de la salud. Como consecuencia, la presencia de micotoxinas en los productos alimentarios no puede eliminarse totalmente. Por productos alimentarios, se entiende en este caso el conjunto de los productos que incluyen las materias primas, los alimentos destinados al ser humano y los alimentos destinados a los animales. Por otro lado, esta presencia depende en gran medida de las condiciones climáticas y, por tanto, es variable según los años.
Por otro lado, en la actualidad no es posible eliminar las micotoxinas a nivel de la preparación de los productos alimentarios sin alterar el valor nutritivo de los productos.
Por tanto, la única prevención posible es separar de la cadena alimentaria los alimentos “demasiado” contaminados. Fijando el “demasiado” a un nivel adecuado, lo cual no resulta en absoluto evidente entre las reacciones de los productores (que consideran las normas, como siempre, demasiado duras) y las exigencias de seguridad (normas siempre demasiado tolerantes). Sabiendo que cuanto más alto es el nivel de exigencia, más aumentan los costes (pruebas, aislamiento, eliminación o reciclaje mediante ramas no alimentarias,...) y menos sensible es el beneficio sanitario (con respecto al nivel de exigencia más bajo pero ya eficaz).
En la Unión Europea, las normas referentes a las micotoxinas más habituales están fijadas por el reglamento 1881/2006 que se refiere a la fijación de contenidos máximos para determinados contaminantes en los productos alimentarios y la directiva 2002/32/CE sobre las sustancias indeseables en los alimentos para animales.
En paralelo, se considera cada vez más que el sector de la ganadería y, concretamente, la industria de los alimentos para animales tienen un papel que desempeñar para garantizar el uso responsable de los agentes antimicrobianos en la producción animal. Los encargados de toma de decisiones demandan a los productores de alimentos para animales, a los agricultores, a los veterinarios y a los organismos de reglamentación que trabajen juntos para determinar las mejores prácticas de ganadería y de higiene y alternativas viables, con el fin de reducir el uso de antibióticos en los animales de ganadería y mejorar el bienestar animal. Por tanto, la lucha contra las micotoxinas participa en este proyecto de sector luchando contra las patologías relacionadas con las micotoxinas y, por tanto, indirectamente a la bajada de los volúmenes de agentes antimicrobianos usados para tratar estas patologías.
Por tanto, existe una verdadera necesidad de proporcionar un medio para eliminar las micotoxinas.
En la ganadería, las prácticas actuales de atenuación del riesgo de micotoxinas son múltiples, y hay varias soluciones disponibles en el mercado, tales como los aglutinantes(“binders").
Algunos son demasiado poco selectivos y, por tanto, pueden saturarse rápidamente mediante las matrices alimentarias en las que se aplican. Asimismo, pueden interaccionar con nutrientes o compuestos distintos de las micotoxinas diana, en particular vitaminas o minerales. En este caso, se reduce la biodisponibilidad de estos nutrientes.
Por el contrario, otros son demasiado selectivos, y sólo aportan una solución para una micotoxina. Por tanto, hace falta emplear estrategias que combinen varias soluciones para eliminar varias micotoxinas presentes en un mismo alimento.
En la actualidad hay pocos datos disponibles sobre la eficacia de las soluciones del mercado sobre alimentos contaminados por debajo de los niveles reglamentarios de micotoxinas.
Los aglutinantes tienen concretamente el inconveniente conocido de que las micotoxinas permanecen siempre presentes en el alimento y, por tanto, en el tubo digestivo del animal, aunque estén unidas, y, por tanto, pueden desorberse con la solución propuesta. Los aglutinantes también pueden liberar compuestos acumulados tales como metales pesados, dioxinas,...
Finalmente, en presencia de una contaminación importante con micotoxinas, el crecimiento de determinados microorganismos puede verse alterado e incluso inhibido, prolongando de ese modo el tiempo necesario para alcanzar un nivel de descontaminación satisfactorio.
Por tanto, las estrategias actuales de lucha contra las micotoxinas necesitan acumular un panel de soluciones para eliminar las micotoxinas y aliviar estos inconvenientes.
A partir del estado de la técnica, se conoce la solicitud de patente US2015306154, que enseña el uso de bacterias del géneroBacilluspara luchar contra los efectos de las micotoxinas. No obstante, este documento enseña la biotransformación de determinadas micotoxinas sometidas a prueba y no parece proporcionar resultados satisfactorios sobre todas las micotoxinas.
También se conoce a partir de la técnica anterior la solicitud WO2013/178947 que describe las cepas NOL01, NOL02, NOL03, NOL04, NOL11 y NOL12 para el tratamiento de las colibacilosis, concretamente en aves de corral.
Se conocen además las enseñanzas de Xin Gaoet al.,European Food Research and Technology, vol. 232, n.° 6, 2 de abril de 2011, páginas 957-962, que describen una cepa deBacillus subtilis,la cepa ANSB060, que puede destoxificar los medios contaminados por las aflatoxinas B1, M1 y G1.
Por tanto, la necesidad de proporcionar un nuevo método permanece íntegra.
Uno de los objetivos de la invención es aliviar estos inconvenientes.
Otro objetivo de la invención es proponer una nueva composición que pueda desprenderse definitivamente de las micotoxinas contenidas en los productos alimentarios y de ese modo mejorar la salud animal.
Por tanto, se propone el uso, concretamentein vitrooex vivo,de una composición que comprende o que consiste esencialmente en
- NOL01, NOL02 y NOL03, y estando dichas cepas depositadas en la CNCM con los números respectivos CNCM I -4606, CNCM I - 5043, CNCM I - 4607 y CNCM I - 4608, para la degradación de al menos una micotoxina.
La invención se basa en la constatación sorprendente realizada por los inventores de que cepas específicas de bacterias del géneroBacillus subtilispueden degradar varios tipos de micotoxinas producidas por los hongos en el medio, sin producir no obstante residuos tóxicos procedentes de esta degradación Los inventores también han observado que esta descontaminación es eficaz a lo largo de un gran intervalo de pH, temperatura, concentración de micotoxinas y tanto en condición aerobia como anaerobia. Por tanto, en la invención se usan las cepas NOL01, NOL02 y NOL03.
Por cepa de bacterias, se entiende en la invención el conjunto de individuos (bacterias) procedentes de trasplantes sucesivos de una colonia bacteriana.
Dicho de otro modo, una cepa es una parte de una especie bacteriana diferente de las demás bacterias de la misma especie por una diferencia menor pero identificable. Una cepa también se define como una población de bacterias que descienden de un único organismo o del cultivo aislado puro. Las cepas de una misma especie pueden diferir ligeramente de otra con respecto a muchos aspectos.
La composición anteriormente mencionada comprende la cepa NOL03, depositada en la CNCM con el número CNCM I - 4607, y las siguientes cepas:
- la cepa NOL01 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 4606, y
- la cepa NOL02 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 5043.
Esto significa que la invención cubre el uso de las siguientes combinaciones de cepas:
- NOL01, NOL02, NOL03 y NOL04, estando la cepa NOL04 depositada en la CNCM con el número CNCM I -4608.
Todas estas cepas se han depositado en la colección nacional de microorganismos (CNCM) en el Instituto Pasteur de Paris, según el tratado de Budapest.
Por degradación, se entiende la invención la destrucción de las micotoxinas, es decir su desestructuración mediante ruptura de enlaces covalentes entre la totalidad o parte de los átomos que las constituyen de manera que el producto final de la degradación es una o varias otras moléculas que ya no presentan, o no presentan sustancialmente, las propiedades tóxicas para los animales de las micotoxinas de las que proceden.
La ventaja de la composición según la invención es que puede, por un lado, degradar y no captar las micotoxinas, pero también puede degradar varias micotoxinas de naturaleza diferente, es decir que tienen una estructura o una fórmula química diferente.
En la invención, porin vitro y ex vivose entiende un uso que no tiene lugar en el interior de un organismo animal superior (tal como las aves, los mamíferos o los peces) o ser humano, pero no excluye la posibilidad de un uso sobre microorganismos, vegetales u hongos.
Ventajosamente, la invención se refiere al uso anteriormente mencionado, para la degradación de al menos dos micotoxinas de estructuras diferentes.
El objetivo de la composición según la invención es permitir, en un único uso, poder eliminar un entorno determinado no una única micotoxina, sino dos, incluso 3, 4, 5, 6, 7, 8 o 9 o 10 o más, micotoxinas de estructuras o de fórmulas químicas diferentes.
Más ventajosamente, la invención se refiere al uso anteriormente mencionado, en el que dicha composición comprende de 104 a 1011 colonias bacterianas, siendo las colonias bacterianas por ml o g de composición.
Dicho de otro modo, en esta realización ventajosa, si la composición según la invención está en forma líquida, dicha composición comprenderá de 104 a 1011 colonias bacterianas deBacilluspor ml de composición, y esto para cada una las cepas cuando la composición comprende al menos dos cepas.
En la invención, de 104 a 1011 colonias bacterianas significa: aproximadamente 104, aproximadamente 5 x 104, aproximadamente 105, aproximadamente 5 x 105, aproximadamente 106, aproximadamente 5 x 106, aproximadamente 107, aproximadamente 5 x 107, aproximadamente 108, aproximadamente 5 x 108, aproximadamente 109, aproximadamente 5 x 109, aproximadamente 1010, aproximadamente 5 x 1010 o aproximadamente 1011 colonias bacterianas.
El experto en la técnica sabe fácilmente cómo determinar este número de bacterias, concretamente mediante recuento o bien manual (usando un portaobjetos de Malassez) o bien usando un contador de células automático, o mediante dilución y después siembra en agar-agar y recuento de las colonias.
Aún más ventajosamente, la invención se refiere al uso tal como se definió anteriormente, en el que las cepas deBacillus subtilisestán en forma esporulada y/o en forma vegetativa.
Esto significa que, si la composición comprende una única cepa, esta cepa puede estar en forma esporulada o en forma vegetativa o una mezcla de forma esporulada y de forma vegetativa. Por el contrario, si la composición comprende al menos dos cepas, estas cepas pueden estar las dos en forma esporuladas o en forma vegetativa, o una de ellas está en forma vegetativa y la otra está en forma esporulada, o las dos están presentes en las dos formas vegetativa y esporulada. Lo mismo sucede cuando la composición comprende 3 o 4 cepas anteriormente mencionadas.
Dicha micotoxina se produce por un hongo perteneciente al grupo constituido por los hongos de los génerosAlternaria, Aspergillus, Byssochkamys, Claviceps, Fusarium, Gibberella, Halosarpheia, Penicillium, Phoma, PyriculariayVerticillium,y se elige de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol (o nivalenol), zearalenona y fumonisina B1.
Los hongos anteriormente mencionados, sin ser limitativos, pueden producir micotoxinas que pueden degradarse por la composición según la invención, es decir las al menos cuatro cepas distintas deBacillus subtilis.Una de las ventajas de la composición según la invención con respecto a la técnica anterior es que la composición no se limita a una micotoxina, sino que puede degradar prácticamente todas o todas las micotoxinas.
Las aflatoxinas constituyen un grupo de 18 compuestos estructuralmente similares (un ensamblaje de una cumarina y de 3 furanos). Se producen porAspergillus flavus, Aspergillus parasiticusyAspergillus nomius.Entre las más habituales, se encuentran AFB1, AFB2, AFM1, AFG1 y AFG2.
Los DON (desoxinivalenol) se producen por diferentes contaminantes fúngicos del géneroFusarium (F. graminearum, F. culmorum, F. roseum,...) que contaminan los granos de trigo, de cebada, de avena o de maíz e incluso arroz durante la floración.
La zearalenona es una micotoxina producida por determinadas especies de hongos del suelo, losFusarium,que pueden colonizar determinados vegetales (concretamente las gramíneas) produciendo una enfermedad en los mismos, la fusariosis.
La fumonisina es una familia de micotoxinas emitidas por determinadas especies de hongos del suelo, losFusarium,(principalmente F.verticillioidesyF. proliferatum)que pueden colonizar determinados vegetales (concretamente gramíneas) produciendo en los mismos una enfermedad denominada fusariosis. Se conocen varias variantes, entre ellas fumonisina B, muy tóxica, encontrada principalmente en el maíz. Las fumonisinas de tipo B pueden inducir un edema pulmonar en cerdos, la leucoencefalomalacia mortal en caballos y una hipótesis es que también puede ser una de las causas de cáncer del esófago en seres humanos.
La invención se refiere ventajosamente a un método de degradación de las micotoxinas elegidas de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol (o nivalenol), zearalenona y fumonisina B1, contenidas en un alimento destinado al consumo animal, que comprende una etapa de puesta en contacto con una composición que comprende o que consiste esencialmente en las cepas NOL01, NOL02 y NOL03, estando dichas cepas depositadas en la CNCM con los números respectivos CNCM I - 4606, CNCM I-5043 y CNCM I - 4607, y eventualmente una etapa de inactivación tras la incubación, de dichas cepas deBacilllus subtilis,concretamente mediante calor.
La invención se refiere además a un método de descontaminación de alimentos, de materia prima o de pienso contaminado por al menos una micotoxina, elegida de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol (o nivalenol), zearalenona y fumonisina B1, comprendiendo dicho método una etapa de puesta en contacto de dicho producto alimentario o de dicho pienso con una composición que comprende o que consiste esencialmente en las cepas NOL01, NOL02 y NOL03, estando dichas cepas depositadas en la CNCM con los números respectivos CNCM I - 4606, CNCM I-5043 y CNCM I - 4607.
Este método permite descontaminar productos alimentarios, concretamente exponiendo, en condiciones apropiadas, alimentos, materias primas o piensos contaminados por una o varias micotoxinas con la composición anteriormente mencionada.
Entonces, las toxinas, al final de esta descontaminación, se degradarán, haciendo que dichos alimentos, materias primas y piensos sean aptos para el consumo sin riesgos.
Ventajosamente, la invención se refiere al método anteriormente mencionado en el que dicho alimento, dicha materia prima o dicho pienso está contaminado por al menos dos micotoxinas de estructuras diferentes.
En otro aspecto, la invención se refiere a una composición que comprende o que consiste esencialmente en las cepas NOL01, NOL02 y NOL03, estando dichas cepas depositadas en la CNCM con los números respectivos CNCM I - 4606, CNCM I-5043 y CNCM I -4607, para su uso en el contexto del tratamiento de los animales que padecen una patología relacionada con la ingestión de al menos una micotoxina, o la prevención de dichas patologías, eligiéndose dicha micotoxina de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol (o nivalenol), zearalenona y fumonisina B1.
Debido a la capacidad de degradación de las micotoxinas, la composición anteriormente mencionada puede usarse a título preventivo contra las enfermedades o síntomas desarrollados tras la ingestión de micotoxinas. Del mismo modo, la composición según la invención puede administrarse a título curativo en animales intoxicados por dicha micotoxina.
Los efectos que son susceptibles de desarrollarse tras la ingestión de micotoxinas son múltiples y son, por ejemplo, efectos hepatotóxicos, neurotóxicos, mutágenos, teratógenos, cancerígenos, inmunodepresores y/o perturbaciones endocrinas.
La o las bacterias contenidas en la composición según la invención pueden estar en forma esporulada y/o vegetativa. En esta forma, pueden administrarse por vía oral(per os)directamente a través del alimento, el agua para beber o incluso inserción (incorporación directamente en la boca de los animales mediante una jeringa).
Más ventajosamente, la invención se refiere a la composición para su uso anteriormente mencionada, en la que dicha composición comprende de 104 a 1011 colonias bacterianas por ml o por gramo de composición.
Ventajosamente, la invención se refiere a la composición anteriormente mencionada para su uso anteriormente mencionada en la que dichas patologías están relacionadas con la ingestión de al menos dos micotoxinas de estructuras diferentes.
La invención se comprenderá mejor tras la lectura del ejemplo y de las figuras que siguen.
Breve descripción de los dibujos
Figura 1
La figura 1 representa un gráfico del crecimiento de NOL01 en función de diferentes concentraciones de ZEA en el medio (0, 0,1, 0,5, 1 y 10 ppm). Las abscisas representan el tiempo en horas y las ordenadas la absorbancia de la disolución correlacionada con el crecimiento de las bacterias.
Figura 2
La figura 2 representa un gráfico del crecimiento de NOL02 en función de diferentes concentraciones de ZEA en el medio (0, 0,1, 0,5, 1, 5 y 10 ppm). Las abscisas representan el tiempo en horas y las ordenadas la absorbancia de la disolución correlacionada con el crecimiento de las bacterias.
Figura 3
La figura 3 representa un gráfico del crecimiento de NOL03 en función de diferentes concentraciones de ZEA en el medio (0, 0,1, 0,5, 1, 5 y 10 ppm). Las abscisas representan el tiempo en horas y las ordenadas la absorbancia de la disolución correlacionada con el crecimiento de las bacterias.
Figura 4
La figura 4 representa el porcentaje de degradación de la ZEA por las cepas NOL01 (negro), NOL02 (blanco) y NOL03 (gris) en función de la temperatura en grados Celsius.
Figura 5
La figura 5 representa el porcentaje de degradación de la ZEA por las cepas NOL01 (negro), NOL02 (blanco) y NOL03 (gris) en función del pH del medio.
Figura 6
La figura 6 representa un histograma que muestra el número de bacterias (log de UFC/ml) en función del tiempo (0, 16 y 72 h) de bacterias NOL01 (barra negra), NOL02 (barra gris oscuro), NOL03 (barra gris claro) y NOL04 (barra blanca) cultivadas sin toxina ZEA, y de bacterias NOL01 (barra con rayas diagonales), NOL02 (barra con rayas horizontales), NOL03 (barra con rayas verticales) y NOL04 (barra con puntos) cultivadas con 1 pg/ml de toxina ZEA. Figura 7
La figura 7 es un gráfico que muestra el porcentaje de reducción de toxina ZEA a lo largo del tiempo (en horas) para las cepas NOL01 (rombos), NOL02 (cuadrados), NOL03 (triángulos) y NOL04 (cruces).
Figura 8
La figura 8 representa un gráfico del crecimiento de las bacterias según la invención NOL01 (gris oscuro), NOL02 (gris claro) y NOL03 (negro) en presencia de ZEA y en función del medio: medio rico TSB (punto cuadrado), medio mínimo MM (punto redondo). Las abscisas representan el tiempo en horas y las ordenadas la absorbancia de la disolución correlacionada con el crecimiento de las bacterias (DO600nm).
Ejemplos
Ejemplo 1 - Pruebasin vitro
Los inventores sometieron a prueba las propiedades de reducción de la concentración de micotoxina de las cepas bacterianas NOL01, NOL02 y NOL03 y NOL04 sobre la ZEA (zearalenona).
1- Efecto de la presencia de toxinas sobre el crecimiento de las células
Las toxinas ZEA usadas para este ensayo las proporcionó Sigma-Aldrich (Milán, Italia) cuya pureza es superior al 99 %. Las toxinas se disuelven en acetonitrilo a 1 mg/ml y después se filtran en un tubo de filtración con membrana de celulosa (RC/G) de 0,2 pm (LABOCHEM Science S.r.l., ITALIA). Se añade un volumen apropiado de disolución convencional de ZEA a medio TBS para obtener la concentración final deseada (1 pg/ml). Se cultivaron las diferentes cepas bacterianas en un medio de cultivo de TSB en presencia o no de 1 pg/ml de ZEA a 30°C, con una agitación a 150 rpm, en condiciones aerobias.
Los datos de cultivo se representan en la figura 6. Estos resultados muestran que las cepas NOL01, NOL02, NOL03 y NOL04 se desarrollan igual de bien, incluso más rápidamente, en presencia de ZEA a una concentración de 1 pg/ml de medio.
A continuación, se sometieron a prueba diferentes concentraciones de ZEA en el medio y los resultados mostraron que las cepas NOL01, NOL02 y NOL03 se desarrollaron de manera equivalente en todas las concentraciones de ZEA sometidas a prueba, tal como se muestra en las figuras 1 a 3.
Finalmente, también se sometieron a prueba diferentes condiciones de pH y de temperatura. Los resultados obtenidos muestran que NOL01, NOL02 y NOL03 tienen una actividad de reducción de la Ze a a 10, 20 y 30°C (figura 4) así como a pH 5, 7 y 8 (figura 5).
Estos resultados muestran que las cepas deBacillus subtilisde la invención tienen la capacidad de desarrollarse en presencia de fuertes concentraciones de micotoxinas y que su propiedad de reducción de la concentración de micotoxina se conserva en numerosas condiciones concretamente de pH y temperatura.
2- Medición de la cantidad de toxinas tras el cultivo
Tras los diferentes cultivos anteriormente mencionados, los inventores sometieron a prueba la presencia de toxinas. Con el fin de medir la cantidad de toxina, los inventores usaron los kits de absorción DonTest™ y ZearalaTest™ (VICAM/Waters Corporation, Milford, MA, EE.UU.).
Se mezclaron 0,5 ml de sobrenadante de cada cultivo con 1,5 ml de tampón fosfato (PBS) y se aplicaron sobre las columnas correspondientes para adsorción de la toxina, a la velocidad de una gota por segundo. A continuación se lavaron las columnas con 5 ml de agua destilada a la misma velocidad.
A continuación se eluyeron las toxinas con 2 ml de metanol y se secaron los eluatos a 50°C. A continuación se llevaron los productos secos a una mezcla de 250 pl de H2O:MeOH 85:15, antes del análisis mediante espectrometría de masas con CL.
Para la detección de la toxina ZEA, los inventores usaron el dispositivo de sistema de HPLC Agilent 1100. Las condiciones son las siguientes:
- columna analítica: Phenomenex® PFP, (100 mm * 4,6 mm, 2,6 pm), 40°C;
- fase móvil: agua+metanol+acetonitrilo 50+25+25 (v/v/v) isocrático;
- caudal: 0,800 ml/min;
-tiempo de retención: 6,7 min;
- fluorescencia a 274 nm A(ex) y 440 nm A(em).
Los resultados obtenidos para la toxina ZEA se representan en la siguiente tabla y en la figura 3:
[Tabla 3]
tiempo (h)Porcentaje de reducción de ZEA*
NOL01 NOL02 NOL03 NOL04
6 8,7±4,6 6,0±0,0 33,5±1,9 2,2±0,1
16 95,5±1,5 57,0±3,1 96,1±4,2 93,2±1,7
24 97,7±0,6 53,6±3,0 96,6±1,9 94,4±4,9
72 96,9±0,6 64,8±2,1 99,4±1,1 95,5±1,0
* media de los % obtenidos en 3 estudios independientes y desviación estándar
Estos resultados muestran una reducción de la ZEA casi total (más del 94 %) al cabo de 24 h con NOL01, NOL03 y NOL04 y a más del 50 % para NOL02.
Para confirmar estos resultados, los inventores repitieron los experimentos para la toxina ZEA. Los resultados se indican en la siguiente tabla:
[Tabla 4]
tiempo (h)Porcentaje de reducción de ZEA*
NOL01 NOL02 NOL03 NOL04
24* 97,7±0,6 53,6±3,0 96,6±1,9 94,4±4,9
24** 95,7±2,5 56,5±2,5 91,3±1,4 91,8±0,8
Valor de P 0,238 0,264 0,415 0,090
* media de los % obtenidos en 3 estudios independientes y desviación estándar En la medida en que el valor de P es superior a 0,05, se considera que los resultados son repetibles. *: primera serie de pruebas, **: segunda serie de pruebas.
3- Prueba de adsorción sobre las bacterias
A continuación, los inventores sometieron a prueba si las toxinas se adsorben sobre las bacterias.
Para ello, se trataron los cultivos de bacterias después de 24 h en presencia de ZEA de la siguiente manera:
Se llevaron los residuos bacterianos a 1 ml de una mezcla de acetonitrilo:agua (90:10; v/v) y se agitaron las mezclas vigorosamente con la ayuda de un vórtex y finalmente se centrifugaron durante 20 min a 14000g. A continuación se secaron los sobrenadantes obtenidos a 50°C y se llevaron los residuos secos a 1 ml de una mezcla de agua:metanol 85:15 v/v para un análisis mediante espectrometría tal como se detalló anteriormente.
Los resultados de desorción de ZEA se indican en la siguiente tabla:
[Tabla 5]
Cepa Porcentaje de ZEA desorbida*
(NOL01) 3,2
(NOL02) 11,9
(NOL03) 4,0
(NOL04) 4,4
* media de los % obtenidos en 3 estudios independientes y desviación estándar Estos resultados sugieren, a la vista de la baja cantidad de ZEA desorbida, que la toxina o bien se internaliza en las bacterias o bien se degrada por dichas bacterias.
4- Prueba de degradación por las bacterias
Con el fin de someter a prueba la hipótesis de la degradación de las bacterias, los inventores sometieron a prueba la presencia de toxina directamente en las bacterias.
Para ello, a partir de bacterias cultivadas durante 24 h con 1 pg/ml de ZEA, se llevaron los residuos bacterianos a 1 ml de una mezcla de acetonitrilo:agua (90:10; v/v) y se sometieron a lisis mediante sonicación. Las condiciones de sonicación son las siguientes: diámetro de la sonda: 3,175 mm, frecuencia: 20 kHz, amplitud: 50 %, sonicación: 15 s y después parada durante 15 s (6 veces), duración de sonicación de 90 s en total (sin los tiempos de pausa), temperatura de 4°C.
Tras la sonicación, se centrifugan las muestras durante 20 min a 14000g. A continuación se secan los sobrenadantes obtenidos a 50°C y se llevan los residuos secos a 1 ml de una mezcla de agua:metanol 85:15 v/v para un análisis mediante espectrometría tal como se detalla a continuación. Dispositivo: Aquity UPLC® BEH C18 (100 mm * 2,1 mm, 1,7 pm) - 50°C; absorbancia UV a 220 nm; fluorescencia: 274 nm A(ex) y 440 nm A(em). El tiempo de retención de la ZEA era de 11,5 min.
Los resultados de ZEA extraída de los diferentes residuos son los siguientes:
[Tabla 6]
Cepa Porcentaje de extracción de ZEA*
(NOL01) 2,7
(NOL02) 0,1
(NOL03) 0,0
(NOL04) 1,4
* media de los % obtenidos en 3 estudios independientes y desviación estándar
Estos resultados muestran que la ZEA no es detectable, ni siquiera cuando se someten las bacterias a lisis, lo que significa que la micotoxina se degrada por las bacterias.
5- Cultivo en condiciones anaerobias
Los inventores también sometieron a prueba las condiciones de crecimiento bacterianas según el punto 1- pero en ausencia de oxígeno.
A continuación midieron la degradación de la micotoxina ZEA en estas condiciones, según los protocolos descritos anteriormente.
Los resultados se agrupan en la siguiente tabla:
[Tabla 7]
Tipo de incubación Porcentaje de reducción de ZEA
NOL01 NOL02 NOL03 NOL04
aerobia*97,7±0,6 53,6±3,0 96,6±1,9 94,4±4,9anaerobia*92,9±1,4 44,5±5,0 92,6±2,8 90,3±0,5
Valor de P 0,259 0,080 0,530 0,121
* las pruebas se realizaron después de 24 h de cultivo en presencia de 1 pg/ml de micotoxina.
** media de los % obtenidos con 3 muestras y desviación estándar
Estos resultados muestran que, independientemente de la condición de cultivo (presencia o ausencia de oxígeno), las bacterias pueden degradar las micotoxinas.
6- Cultivo en medios mínimos
Los inventores también sometieron a prueba las condiciones de crecimiento bacterianas según el punto 1- pero en un medio mínimo, es decir, un medio empobrecido, no enriquecido (MM), sin aporte de carbono aparte del aportado por las micotoxinas, cuya composición es la siguiente para 1 l de medio de cultivo:
[Tabla 8]
MnChX 4H2O 15 mg
FeCl3 X 6H2O 2,16 mg
MgChX 6H2O 25 mg
NH4Cl1 g
Extracto de levadura 0,05 %
Agua csp
Estos resultados muestran que las cepas deBacillus subtilisde la invención tienen la capacidad de desarrollarse en un medio mínimo MM, aunque el nivel de crecimiento sea menor que en un medio rico TSB.
Tras los diferentes cultivos anteriormente mencionados y cultivos suplementarios realizados según el punto 1- pero en presencia de 20 pg/ml de ZEA en medio MM, en presencia de 1 pg/ml de ZEA en condición anaerobia en un medio MM, en un medio mínimo enriquecido de nuevo con NO3 (MMN) y en un medio mínimo enriquecido de nuevo con NO3 y con glucosa (MMNG), los inventores sometieron a prueba la presencia de toxinas según el punto 2- at=72 h.
Los resultados obtenidos para la toxina ZEA se representan en la siguiente tabla:
[Tabla 9]
Condición Medio ZEA Porcentaje de reducción de ZEA*
NOL01 NOL02 NOL03
Aerobia TSB 1 pg/ml 96,9 64,8 99,4
MM 1 pg/ml 100 100 100
20 pg/ml 99,7 48,9 99
Anaerobia TSB 1 pg/ml 92,9 44,5 92,3
MM 1 pg/ml 32,5 24,1 32,5
MMN 1 pg/ml 23 20,4 80,1
MMNG 1 pg/ml 98,4 80,3 96,4
* media de los % obtenidos con 3 muestras
Estos resultados muestran, en condición aerobia, una reducción de la ZEA en medio mínimo MM comparable a la observada en medio rico TSB, independientemente de la concentración de ZEA de partida.
En condición anaerobia, se alcanza un mismo nivel de degradación de las micotoxinas que en medio rico TSB por las tres cepas según la invención, sometidas a prueba en medio mínimo enriquecido de nuevo con NO3 y con glucosa (MMNG). La misma conclusión para NOL03 en medio mínimo enriquecido de nuevo con NO3 (MMN).
Estos resultados muestran que, independientemente del medio de cultivo (rico, mínimo o mínimo enriquecido de nuevo), las bacterias según la invención pueden degradar las micotoxinas, con más eficacia en los medios ricos y mínimos enriquecidos de nuevo.
7- Reducción de micotoxinas distintas de ZEA
Los inventores también realizaron cultivos de bacterias según la invención según el punto 1- pero en presencia de micotoxinas distintas de ZEA, después midieron la cantidad de toxina tras el cultivo según el punto 2- con kits de absorción apropiados para cada una de las micotoxinas sometidas a prueba, a t=72 h.
[Tabla 10]
Porcentaje de reducción*
NOL01 NOL02 NOL03
ZEA 96,9 64,8 99,4
FB1 4,7 18,7 8,8
OTA 7,3 10,0 15,9
T-2 7,2 1,0 4,2
* media de los % obtenidos con 3 muestras
Estos resultados muestran, en condición aerobia, una capacidad de reducción de NOL01 sobre ZEA, OTA y T-2, siendo no obstante el efecto observado sobre estas dos últimas micotoxinas más débil. Asimismo, muestran una capacidad de reducción de NOL02 y de NOL03 sobre ZEA, FB1 y OTA, siendo no obstante el efecto observado sobre estas dos últimas micotoxinas más débil.
8- Prueba de eficacia de las bacterias NOL01, NOL02 y NOL03 puestas en asociación
Los inventores también realizaron cultivos de bacterias según la invención según el punto 1- en presencia de ZEA, AFB1 y FB1, en medio rico (TSB) o mínimo enriquecido de nuevo con NO3 y con glucosa (MMNG), pero con un inóculo que contenía 1 pg/ml de una asociación de las tres bacterias según la invención NOL01, NOL02, NOL03 puestas en práctica en la misma proporción.
[Tabla 11]
Aerobia TSB ZEA 96,9 64,8 99,4 100
Anaerobia MMNG ZEA 98,4 80,3 96,4 No sometido a prueba
AFB1 1,6 0,5 0,7 11,7
FB1 3,0 4,4 2,0 18,1
* media de los % obtenidos con 3 muestras
Estos resultados demuestran una capacidad de reducción de la presencia de micotoxinas ZEA por las bacterias NOL01, NOL02 y NOL03 puestas en asociación independientemente de la condición aerobia en medio rico (TSB), o en condición anaerobia en medio mínimo enriquecido de nuevo con NO3 y con glucosa (MMNG). También se constata una capacidad de reducción de la presencia de AFB1 y FB1 de esta combinación en condición anaerobia y medio MMNG, aunque más reducida.
9- Medición de la eficacia contra los metabolitos de ZEA
Los inventores verificaron la capacidad de reducción de las micotoxinas de las cepas NOL01, NOL02 y NOL03 según la invención, según el punto 1- pero sobre los metabolitos de la ZEA, en condición aerobia en medio mínimo (MM) y en condición anaerobia en medio mínimo enriquecido de nuevo con NO3 y con glucosa (MMNG).
[Tabla 12]
Porcentaje de reducción* a t=72 h
Aerobia Anaerobia
MM MMNG
NOL01 NOL02 NOL0 NOL01 NOL02 NOL03
ZEA 100 98,9 99,0 100 96,3 96,3
a-ZOL 100 98,4 99,0 100 56,6 100
P-ZOL 100 96,6 99,0 100 47,0 100
a-ZAL 99,0 85,3 96,0 100 32,7 79,4
P-ZAL 98,9 80,0 93,0 100 44,5 87
ZAL 99,0 90,8 85,7 100 20,2 68,6
* media de los % obtenidos en 3 estudios independientes y desviación estándar
Estos resultados confirman que, independientemente de las condiciones de cultivo (presencia o ausencia de oxígeno, medio rico, mínimo o mínimo enriquecido de nuevo), las bacterias según la invención pueden degradar ZEA así como sus metabolitos.
Ejemplo 2 - Pruebain vivoen cerdos
Los inventores también sometieron a prueba las bacterias según la invención en condicionesin vivo,en cerdos, con el fin de demostrar su eficacia en el animal.
1- Protocolo
Los inventores realizaron un ensayo de alimentación de 21 días en estación experimental con 64 lechones destetados distribuidos en 2 pruebas, una con ZEA, la otra con DON (es decir, 32 lechones por prueba).
Se aplicaron los siguientes regímenes para cada una de estas pruebas (es decir, 8 lechones por régimen):
(1) alimento no contaminado sin aditivo
(2) alimento no contaminado aditivo
(3) alimento contaminado sin aditivo
(4) alimento contaminado aditivo
Para los regímenes (3) y (4), el alimento distribuido al animal se contaminó artificialmente a un nivel de 0,1 mg de ZEA/kg de alimento completo al 12 % de humedad, es decir, el contenido máximo recomendado por la reglamentación europea según la Recomendación de la Comisión europea n.° 2006/576/CE.
Para la prueba con DON, se aplicaron los mismos 4 regímenes, con una contaminación artificial del alimento distribuido a un nivel de 0,9 mg de DON/kg de alimento completo al 12 % de humedad para los regímenes (3) y (4).
Se analizó la cantidad de micotoxinas al comienzo del ensayo y se confirmó una buena homogeneidad de la contaminación del alimento distribuido.
El aditivo tal como se añadió correspondía a la asociación de las 3 cepas según la invención NOL01, NOL2 y NOL3 puestas en práctica en la misma proporción. Este aditivo, en forma de polvo, se añadió al alimento distribuido tras contaminación artificial con micotoxinas y antes de la distribución a los animales y en cantidad suficiente para alcanzar 109 colonias bacterianas por kg de alimento.
Se distribuyeron aproximadamente 1,5 kg de alimento al día por lechón.
Se distribuyeron los animales en 1 animal por jaula metabólica para la prueba con ZEA, y 1 animal por recinto para la prueba con DON.
Se respetó un periodo de adaptación de 3 semanas antes del inicio de los regímenes de pruebas con el fin de evitar un estrés de los animales durante el paso tras el destete y de aclimatar a los que estaban en jaulas metabólicas para la prueba con ZEA.
Al final de este periodo de adaptación de 3 semanas, comenzaron las pruebas y duraron 3 semanas (21 días). 2- Análisis y parámetros zootécnicos
Se recogieron las siguientes muestras a lo largo de todo el ensayo:
- Extracción de sangre a 0, 7, 14 y 21 días en todos los animales,
- Recogida de heces y de orina entre el 17° y el 21° días para la prueba con ZEA,
- Recogida de heces a los 21 días, en el sacrificio para la prueba con DON,
- Toma de muestras de tejidos a los 21 d: hígados, riñones, músculos, órganos reproductores, tractos intestinales. Con las muestras recogidas, de manera prioritaria las muestras recogidas al final del ensayo, se realizaron los siguientes análisis:
- Detección de ZEA y sus metabolitos a-zearalenol y p-zearalenol en el plasma, la orina y las heces recogidas de los animales de la prueba con ZEA,
- Detección de DON y sus metabolitos en el suero recogido de los animales de la prueba con DON.
Para las 2 pruebas, se midieron los siguientes parámetros zootécnicos: peso corporal, consumo alimentario diario medio, mortalidad, morbididad. Para la prueba con ZEA, también se midieron los siguientes parámetros: tamaño de la vulva y/o grado de inflamación de la vulva, peso de los órganos reproductores.

Claims (7)

REIVINDICACIONES
1. Usoin vitrooex vivode una composición que comprende o que consiste esencialmente al menos en la cepa deBacillus subtilisNOL03, la cepa deBacillus subtilisNOL01 y la cepa deBacillus subtilisNOL02, - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL03 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 4607, - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL01 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 4606, y - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL02 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 5043, para la degradación de al menos una micotoxina,
eligiéndose dicha al menos una micotoxina de zearalenona, las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol o nivalenol, y fumonisina B1.
2. Uso según la reivindicación 1, para la degradación de al menos dos micotoxinas de estructuras diferentes.
3. Uso según las reivindicaciones 1 o 2, en el que dicha composición comprende de 104 a 1011 colonias bacterianas, siendo las colonias bacterianas por ml o g de composición.
4. Método de descontaminación de alimentos, de materia prima o de pienso contaminado por al menos una micotoxina, comprendiendo dicho método una etapa de puesta en contacto de dicho producto alimentario o de dicho pienso con una composición que comprende o que consiste esencialmente en la cepa deBacillus subtilisNOL03, la cepa deBacillus subtilisNOL01 y la cepa deBacillus subtilisNOL02,
- estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL03 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 4607, - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL01 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 4606, y - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL02 depositada en la CNCM con el número CNCM I - 5043, dicha al menos una micotoxina se elige de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol o nivalenol, zearalenona y fumonisina B1.
5. Método según la reivindicación 4, en el que dicho alimento, dicha materia prima o dicho pienso está contaminado por al menos dos micotoxinas de estructuras diferentes.
6. Composición que comprende o que consiste esencialmente en la cepa deBacillus subtilisNOL03, la cepa deBacillus subtilisNOL01 y la cepa deBacillus subtilisNOL02,
- estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL03 depositada en la CNCM con nú eml ero CNCM I - 4607, - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL01 depositada en la CNCM con nú eml ero CNCM I - 4606, y - estando dicha cepa deBacillus subtilisNOL02 depositada en la CNCM con nú eml ero CNCM I - 5043, para su uso en el contexto del tratamiento de los animales que padecen una patología relacionada con la ingestión de al menos una micotoxina, o la prevención de dichas patologías,
dicha al menos una micotoxina se elige de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2, desoxinivalenol o nivalenol, zearalenona y fumonisina B1.
7. Composición para su uso según la reivindicación 6, en la que dichas patologías están relacionadas con la ingestión de al menos dos micotoxinas de estructuras diferentes.
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3072861B1 (fr) * 2017-10-31 2020-03-20 Nolivade Composition antimycotoxine
FR3110344B1 (fr) * 2020-05-20 2023-12-15 Nolivade Procédé de décontamination
CN117757698B (zh) * 2024-01-25 2024-06-11 浙江大学 一株枯草芽孢杆菌dyf4-3及其在降解多种霉菌毒素中的应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101412976A (zh) * 2008-07-02 2009-04-22 南昌大学 枯草芽孢杆菌在降解真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇中的应用
CN102178128A (zh) * 2011-03-24 2011-09-14 南昌大学 枯草芽孢杆菌zdy1982在降解真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇中的应用
WO2013026033A2 (en) 2011-08-18 2013-02-21 Dupont Nutrition Biosciences Aps Strains and methods useful for mycotoxins
FR2991182B1 (fr) * 2012-05-30 2014-05-30 Nolivade Composition bacterienne destinee au traitement de la colibacillose dans les elevages en particulier les elevages aviaires ainsi qu'eau de boisson renfermant une telle composition bacterienne
CN103284023A (zh) * 2013-05-20 2013-09-11 江南大学 食品级微生物在降解玉米赤霉烯酮中的应用
CN107201322B (zh) * 2017-02-13 2019-06-28 河南农业大学 用于降解黄曲霉毒素b1的枯草芽孢杆菌及其应用
FR3072861B1 (fr) * 2017-10-31 2020-03-20 Nolivade Composition antimycotoxine
FR3073140B1 (fr) * 2017-11-08 2021-04-30 Nolivade Composition pour ameliorer la sante des animaux d'elevage

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