ES2941079T3

ES2941079T3 - Inhibición de IDH-1 mutante

Info

Publication number: ES2941079T3
Application number: ES19728271T
Authority: ES
Inventors: Patrick F Kelly; Alan Collis; Jeff Davis; Duncan Walker; Susan Ashwell; Blythe Thomson; Lu Wei
Original assignee: Forma Therapeutics Inc
Current assignee: Forma Therapeutics Inc
Priority date: 2018-05-16
Filing date: 2019-05-16
Publication date: 2023-05-16
Anticipated expiration: 2039-05-16
Also published as: SMT202300073T1; HRP20230168T1; MD3720442T2; LT3720442T; RS64069B1; SI3720442T1; FI3720442T3; EP4215197A1; PL3720442T3; DK3720442T3

Abstract

Se proporcionan métodos para tratar a pacientes diagnosticados con cáncer que albergan una mutación de IDH-1, incluida la administración terapéutica de cierto inhibidor de un IDH-1 mutante como agente único o en combinación con azacitidina (AZA). (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibición de IDH-1 muíante

CAMPO TÉCNICO

La presente divulgación se refiere al tratamiento médico de determinadas formas de cáncer que albergan una mutación en mlDH1 y afecciones médicas relacionadas.

ANTECEDENTES

La enzima metabólica isocitrato deshidrogenasa (IDH1) cataliza la descarboxilación oxidativa de isocitrato a acetoglutarato (a-KG). Tanto en las neoplasias hematológicas como en los tumores sólidos, la IDH1 mutada adquiere la actividad neomórfica de convertir a-KG en 2-hidroxiglutarato (2-HG) y, con ello, conduce a la acumulación aberrante de 2-HG. Se ha propuesto que el 2-HG actúa como un "oncometabolito" que tiene efectos pleotrópicos sobre la tumorigénesis. Se ha demostrado que el exceso de producción de 2-HG inhibe las enzimas dependientes de a-KG implicadas en la regulación epigenética, la síntesis de colágeno y la señalización celular, conduciendo con ello a un bloqueo en la diferenciación normal de las células progenitoras y al posterior desarrollo de cáncer. Por lo tanto, la inhibición de IDH1 mutada en células tumorales y la disminución concomitante en la producción de 2-HG es un enfoque terapéutico para el tratamiento de cánceres con mutación en IDH1.

Las mutaciones de IDH-1 reseñadas en el cáncer pueden aparecer en la posición de aminoácido R132, tales como las mutaciones R132H, R132C, R132S, R132G y R132L. Sigue existiendo la necesidad de compuestos terapéuticos que inhiban selectivamente la producción de 2-HG de células cancerosas que albergan una diversidad de mutaciones R132 de IDH-1.

De hecho, la IDH-1 mutante ("mlDH-1'') es un objetivo terapéutico clave para el tratamiento de una diversidad de cánceres y es objeto de amplios esfuerzos de investigación para desarrollar compuestos terapéuticos útiles para la inhibición de mlDH-1. Se han descrito muchos inhibidores de molécula pequeña diferentes de m-IDH1 en publicaciones (p. ej., WO2016/044789, WO2016/044787, WO2016/044782, WO2016/171755 y WO2016/171756). Entre los otros inhibidores de mlDH-1 que se han desarrollado se encuentran los representados en la Tabla 1, que incluye múltiples compuestos que se han reseñado en ensayos clínicos y determinados otros compuestos que se han descrito como útiles para el tratamiento del cáncer.

Tabla 1

La FDA aprobó recientemente la administración de 500 mg una vez al día de un inhibidor de IDH1 mutante para el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (AML, por sus siglas en inglés) con una mutación susceptible de IDH1 detectada mediante un ensayo aprobado por la FDA en (a) pacientes adultos con AML recién diagnosticada que tienen > 75 años o que tienen comorbilidades que impiden el uso de quimioterapia de inducción intensiva y (b) pacientes adultos con AML recidivante o refractaria. Sin embargo, un panel de Revisión Multi-Disciplinar de la FDA de 2017 señaló que duplicar la dosis del fármaco de este compuesto se traduce en solo un aumento de aproximadamente el 40 % en la exposición, y que un aumento en la eliminación en el estado estacionario puede estar relacionado con la autoinducción. Un modelo de PBPK capturó razonablemente el efecto de autoinducción de la dosis de 500 mg QD de este compuesto en CYP3A4 y describió los perfiles PK en estado estacionario de este compuesto en pacientes a niveles de exposición clínicamente relevantes. El cambio de veces en la biodisponibilidad relativa de este compuesto de dosis única a estado estacionario para este compuesto fue 0,50. Además, después de la administración de una dosis oral única de 50 mg/kg a ratas con una barrera hematoencefálica intacta, este compuesto exhibió una penetración en el cerebro del 4,1% (AUCü-8h [cerebro] / AUCü-8h [plasma]) .

Sigue existiendo una necesidad médica no satisfecha de un método terapéuticamente eficaz para administrar un inhibidor de mlDH-1 que proporcione los siguientes beneficios: 1234

1. i) lograr una suficiente exposición del fármaco al cerebro libre predicha (p. ej., una Relación Ccerebro predicha deseable como se describe en esta memoria) adecuada para tratar tumores sólidos mlDH1 en el sistema nervioso central, incluyendo formas de cáncer cerebral tales como glioma; y

2.

3. ii) lograr y mantener una concentración plasmática de fármaco en estado estacionario deseada dentro de un intervalo adecuado para un paciente a lo largo de un curso de tratamiento deseado (p. ej., al menos seis meses).

4.

Por lo tanto, siguen existiendo desafíos particulares asociados con el tratamiento de formas de cáncer m-IDH1, incluyendo el tratamiento de formas mlDH1 de cáncer de la sangre (p. ej., AML) a lo largo de un ciclo de tratamiento (p. ej., de 15 días a 6 meses), el tratamiento de formas mlDH1 de cáncer a través de la barrera hematoencefálica (p. ej., formas mlDH1 de glioma) y tratamiento de otros tumores sólidos mlDH1. Un estudio abierto de FT-2102 con o sin azacitidina o citarabina en pacientes con AML o MDS con una mutación en IDH1 se describe en la URL https://clinicaltrials.gov/ct2/show/ NCT02719574?term=Forma&cond=Acute+myeloid+leukemia&rank=1.

SUMARIO

La presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende Compuesto 1

para uso en un método para tratar un glioma que alberga una mutación de isocitrato deshidrogenasa-1 (IDH-1) en un paciente humano adulto, en donde el método comprende administrar 150 mg de Compuesto 1 al paciente dos veces al día (BID, por sus siglas en inglés) durante un curso de tratamiento. Cualesquiera referencias en la descripción a métodos de tratamiento se refieren a los compuestos, composiciones farmacéuticas y medicamentos de la presente invención para uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano (o animal) mediante terapia.

La administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 utilizando los métodos de tratamiento proporcionados en esta memoria proporciona un tratamiento para pacientes a los que se ha diagnosticado un cáncer que alberga una mutación en mlDH1, incluyendo el tratamiento de afecciones de este tipo de la sangre (p. ej., AML) y dentro del sistema nervioso central. (p. ej., glioma). Se administra un total de 150 mg de Compuesto 1 dos veces al día sobre una base diaria para proporcionar una concentración en sangre en estado estacionario terapéuticamente eficaz a lo largo de un curso de tratamiento (p. ej., 6 meses o más). Esta dosis de 150 mg BID de Compuesto 1 puede administrarse a un paciente al que se ha diagnosticado un cáncer que alberga una mutación en mlDH1 y puede continuarse cada día durante el curso del tratamiento. Preferiblemente, un curso de tratamiento tiene una duración suficiente para proporcionar una concentración plasmática en estado estacionario terapéuticamente eficaz en el paciente diagnosticado con la mutación en mlDH1 (p. ej., al menos 15 días) y continuar hasta que se logre un resultado de tratamiento favorable. En algunos ejemplos, un curso de tratamiento dura hasta 6 meses (p. ej., de 15 días a 6 meses).

Compuesto 1 se ha administrado en ensayos clínicos en seres humanos como un agente único o en combinación con otros agentes terapéuticos para tratar múltiples formas mlDH1 de cáncer, incluyendo las formas mlDH1 de AML y glioma. En un ejemplo proporcionado en esta memoria, un paciente al que se ha diagnosticado mlDH1 de AML tratado con 150 mg dos veces al día de Compuesto 1 logró una remisión completa después de un curso de tratamiento de 28 días. En otro ejemplo, un paciente al que se ha diagnosticado mlDH1 de AML fue tratado con 150 mg BID de Compuesto 1 en combinación con azacitidina, como se describe en esta memoria, durante un total de ocho ciclos de tratamiento de 28 días y también logró la remisión completa de la AML. En un tercer ejemplo, un paciente al que se ha diagnosticado mlDH1 de glioma fue tratado con 150 mg BID de Compuesto 1 y demostró una respuesta parcial confirmada por MRI (siglas inglesas de imágenes por resonancia magnética), después de dos ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días, según se determinó por los criterios RANO (> 50 % de disminución en el tumor, sin lesiones nuevas, con dosis estables de corticosteroides, sin progresión de la enfermedad mensurable).

Compuesto 1 es un inhibidor de moléculas pequeñas potente, selectivo, biodisponible por vía oral, de IDH1 mutada y es útil como un agente terapéutico contra el cáncer en pacientes con determinadas mutaciones en el gen IDH1 (incluyendo mutaciones R132X).

Formas de cáncer mlDH1 pueden tratarse mediante la administración terapéutica de Compuesto 1 a una dosis diaria total de 300 mg (preferiblemente, 150 mg dos veces al día, o BID) para inhibir selectivamente múltiples mutaciones R132X clínicamente relevantes de IDH-1. Compuesto 1 se puede administrar para lograr una concentración plasmática de fármaco eficaz y duradera durante el curso de un tratamiento deseado (p. ej., al menos seis meses). En esta memoria se proporcionan métodos para administrar Compuesto 1 para el tratamiento de determinados cánceres, incluyendo glioma, cánceres hematológicos tales como AML y tumores sólidos.

La presente divulgación identifica un inhibidor de mlDH-1 particular y, además, el uso de composiciones que comprenden este compuesto en el tratamiento del cáncer (p. ej., AML, glioma y diversos tumores sólidos). En la selección del Compuesto 1 inhibidor de mlDH-1, la presente divulgación proporciona una idea de que determinadas evaluaciones previas de múltiples compuestos inhibidores de mlDH-1 pueden haberse centrado y/o priorizado indebidamente una o más características (p. ej., potencia in vitro medida en ensayos bioquímicos para la producción de 2-HG) que pueden alejar la apreciación de determinadas propiedades inesperadas de Compuesto 1 que conducen al descubrimiento de métodos de tratamiento como se describe en esta memoria.

El descubrimiento del uso de las composiciones de la invención en los métodos de tratamiento proporcionados en esta memoria se basa en parte en la selección de Compuesto 1 entre muchos compuestos que se ha informado que inhiben la producción de 2-HG de células cancerosas mlDH-1. Inicialmente, no se informó que Compuesto 1 tuviera la mayor potencia bioquímica en comparación con los informes de determinados otros inhibidores de moléculas pequeñas de mIDH-1. Se informó inicialmente que compuestos estructuralmente distintos (p. ej., AG-120, AG-881, IDH305, IDH889, GSK321 y Bay1436032) y otros determinados compuestos basados en quinolinona tienen una mayor potencia in vitro en ensayos bioquímicos que miden la actividad contra determinadas isoformas de mlDH-1. Compuesto 1 no solo inhibe la producción de 2-Hg de células que albergan diversas formas R132X de mutaciones de IDH-1; Compuesto 1 se caracteriza por un valor de optimización multiparámetro del SNC ("SNC MPO") que respalda un desarrollo adicional como terapia oral para las formas mlDH-1 de cáncer en el sistema nervioso central.

Compuesto 1 se ha utilizado de acuerdo con los nuevos métodos de tratamiento proporcionados en esta memoria para lograr respuestas tanto completas en el tratamiento de múltiples pacientes a los que se ha diagnosticado AML en un ensayo clínico en seres humanos como una respuesta parcial en un sujeto clínico humano que continúa con la terapia. Por consiguiente, la solicitante ha descubierto métodos significativos y terapéuticamente beneficiosos para tratar el cáncer por mlDH1 que incluyen la selección del Compuesto 1 inhibidor de mlDH1 y el descubrimiento de determinados métodos de administración de Compuesto 1 que pueden proporcionar concentraciones plasmáticas sanguíneas en estado estacionario en un paciente que lo necesite a lo largo de todo el curso de tratamiento, que son adecuados para el tratamiento de múltiples formas de cáncer por mlDH1, incluyendo afecciones de la sangre (p. ej., AML) y del SnC (p. ej., glioma).

Las composiciones para uso en métodos de tratamiento proporcionados en esta memoria se basan en parte en múltiples descubrimientos científicos, que incluyen: (1) la selección de Compuesto 1 por tener suficiente potencia in vitro contra múltiples formas R132X de cáncer por mlDH-1, (2) las propiedades de Compuesto 1 que respalda su uso en cánceres por mlDH1 en el sistema nervioso central (p. ej., niveles predichos de fármaco libre en el cerebro de Compuesto 1 en relación con el nivel efectivo mínimo de Compuesto 1, y la respuesta parcial subsiguiente de un paciente con glioma de mlDH1 humano al tratamiento con Compuesto 1), (3) el descubrimiento de una dosis específica y un régimen de dosis para administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 útil para el tratamiento de múltiples cánceres por mlDH1 (incluyendo el tratamiento de cánceres de la sangre, el cerebro y otros tumores sólidos) después del ensayo comparativo de múltiples dosis e intervalos de dosis, y (4) el descubrimiento de que la concentración deseada en plasma sanguíneo de Compuesto 1 se puede mantener en un paciente a lo largo de un curso de tratamiento de 6 meses o más utilizando los métodos preferidos de administrar Compuesto 1 (p. ej., 300 mg en total por día, preferiblemente administrados como un total de 150 mg de Compuesto 1 BID).

Selectividad IDH-1 de Compuesto 1

Compuesto 1 inhibe selectivamente la producción de 2-HG en células cancerosas mIDH-1 (es decir, células cancerosas que albergan mutaciones R132X de IDH-1) con potencias deseables in vitro en comparación con células IDH-1 de tipo salvaje y células cancerosas mIDH-2. Además de esta selectividad por mIDH-1, Compuesto 1 es activo contra múltiples mutantes R132X en IDH-1 y, por lo tanto, puede utilizarse para tratar pacientes a los que se han diagnosticado cánceres que poseen una diversidad de mutaciones de mlDH1 de este tipo. De estos mutantes R132X de IDH-1, R132H y R132C son las mutaciones detectadas con más frecuencia para los cánceres con mlDH-1 humanos. Con respecto a la inhibición de la producción de 2-HG a partir de las líneas celulares mlDH-1 R132C y R132H, Compuesto 1 muestra una actividad equiparable que está dentro de 5 veces, en comparación con diferencias más dispares en la actividad que varían de aproximadamente 8 veces a 240 veces para los compuestos comparativos.

[véase el Ejemplo 4].

Además de los mutantes R132H y R132C de IDH-1, Compuesto 1 inhibe los mutantes R132L, R132G y R132S en IDH-1. En particular, Compuesto 1 inhibe estos cinco mutantes en IDH-1 (R132L, R132G, R132S, R132H y R132C) con solo un intervalo de potencias de 7 veces. Por lo tanto, los pacientes diagnosticados con cáncer que poseen IDH-1 mutante, p. ej., que tienen una mutación R132X en IDH-1 seleccionada del grupo que consiste en: R132L, R132G y R132S (además de las mutaciones R132H y R132C de IDH-1), pueden ser tratados con el Compuesto 1 (véase el Ejemplo 3).

Permeabilidad de la barrera hematoencefálica de Compuesto 1

Las mutaciones de IDH-1 en los cánceres de cerebro tal como glioma pueden provocar una hipermetilación anormal de histonas y ADN y la supresión de la diferenciación celular normal. Las mutaciones R132H de IDH-1 representan más del 90% de las mutaciones de IDH presentes en pacientes con glioma de bajo grado y glioblastoma multiforme (GBM) secundario. Además, las mutaciones R132C y R132S de IDH-1 también se reseñan en pacientes con glioma. Sin embargo, para poder tratar el glioma, un inhibidor de moléculas pequeñas de mlDH-1 debe ser capaz de cruzar la barrera hematoencefálica ("BBB", por sus siglas en inglés) en una concentración terapéuticamente eficaz a lo largo del tiempo, lo que presenta otro desafío para seleccionar un compuesto adecuado para el tratamiento del glioma.

La capacidad de cruzar la BBB no es de modo alguno una propiedad intrínseca de los inhibidores de mlDH-1. Haciendo referencia a la Tabla 13, muchos inhibidores de mlDH-1 conocidos tienen valores de MPO en el SNC indeseablemente bajos (p. ej., Tabla 13, compuestos GSK321 y Bay1436032). Por lo tanto, incluso entre estos candidatos a fármacos avanzados, no existe una correlación aparente informada entre la actividad inhibidora de mlDH-1 y los valores de MPO en el SNC.

De hecho, seleccionar un compuesto que sea tanto un potente inhibidor de mlDH-1 como que posea un valor de MPO deseablemente alto no es sencillo. Por ejemplo, de los compuestos ejemplificados específicamente en el documento WO/2016044789 ("la publicación '789"), que incluyen Compuesto 1, se informa que varios compuestos tienen mayor potencia in vitro que Compuesto 1 en al menos un ensayo reseñado en la Tabla 6 de la publicación '789 (es decir, compuestos I-20, I-22, I-23, I-25, I-26, I-27 e I-29). Véase la Tabla 13, que reproduce estos datos de la publicación '789. Sin embargo, ninguno de estos compuestos tiene una puntuación de MPO del SNC tan alta como la del Compuesto 1. De hecho, un compuesto (1-26) ni siquiera alcanza el valor umbral de MPO mínimo deseado de 3,8 como predictor de la permeabilidad de la BBB. Por el contrario, de los seis compuestos con puntuaciones de MPO del SNC más altas que Compuesto 1, cinco son menos potentes in vitro que Compuesto 1 en al menos un ensayo bioquímico de inhibición de IDH (es decir, compuestos I-2, I-3, I-5, I -6 e I-11), siendo un compuesto "equipotente" (compuesto I-1).

La falta de correlación entre la inhibición de mlDH-1 y las puntuaciones de MPO del SNC en la Tabla 13 destaca la imprevisibilidad en la selección de un solo compuesto inhibidor de mlDH-1 que inhibe múltiples formas R132X de mlDH-1 con potencias suficientemente similares, y también se caracteriza por una puntuación suficientemente alta de MPO (p. ej., 3,8 o superior), las cuales son deseables en una terapia para tratar un glioma de mlDH1. Es en este contexto que la identificación de Compuesto 1 como un compuesto que tiene una puntuación MPO de 3,8 o superior es inesperada. De hecho, el modelado de roedores mostró un marcado contraste entre Compuesto 1 y otros dos inhibidores de mlDH-1 reseñados, AG-120 y AG-881. Como se describe en el Ejemplo 6, Compuesto 1 se distribuye en el cerebro a un nivel 2 veces superior al estimado para lograr un beneficio terapéutico, mientras que AG-120 y AG-881 se distribuyen en el cerebro a un nivel inferior al estimado para lograr un beneficio terapéutico. Por lo tanto, incluso cuando se compara con otro compuesto que también tiene una puntuación de MPO en el SNC que sugiere una buena permeabilidad de BBB tal como AG-881, estos datos indican que Compuesto 1 posee propiedades inesperadamente superiores al combinar la potencia in vitro comparativa y selectiva deseada y la exposición prevista al fármaco en el cerebro.

Por ejemplo, como se describe en el Ejemplo 6, estudios preclínicos demuestran que Compuesto 1 puede cruzar la BBB en modelos de roedores a niveles deseables. La administración oral de Compuesto 1 mostró una alta biodisponibilidad sistémica en múltiples especies preclínicas. La permeabilidad fue excelente, con poca evidencia de eflujo, y se observó una penetración significativa en el cerebro en ratones (98 % de unión al cerebro en un modelo animal murino). En base a estas evaluaciones en roedores, se cree que Compuesto 1 cruza la barrera hematoencefálica en una medida eficaz para alcanzar niveles de concentración libre en el cerebro consistentes con la actividad farmacológica.

Dosis y Administración de Compuesto 1

Tras identificar las características únicas del Compuesto 1 inhibidor de mDH-1 arriba mencionadas, el siguiente desafío fue determinar una dosis adecuada de Compuesto 1 para administrar a pacientes humanos. Una dosis adecuada debe poseer un índice terapéutico apropiado (p. ej., una eficacia in vivo observada contra múltiples formas de cáncer que albergan mIDH-1, pero sin niveles inaceptables de efectos secundarios tóxicos). Más específicamente, una concentración plasmática de fármaco que proporciona eficacia in vivo ("Ceff") en pacientes con tumores que producen 2-HG se ha definido en la bibliografía como aquella que proporciona > 90 % de inhibición de la producción de 2-HG (Fan et al., 2014). En base a los experimentos de xenoinjerto de ratón descritos en el Ejemplo 7 y la correlación de unión a proteínas plasmáticas en seres humanos, se encontró que Compuesto 1 tenía una Ceff de aproximadamente 1652 ng/mL. Por lo tanto, métodos preferidos de administración de Compuesto 1 para tratar a un paciente que tiene un cáncer que alberga mlDH-1 pueden alcanzar una concentración plasmática de al menos aproximadamente 1.652 ng/mL.

Además, los métodos preferidos de administración de Compuesto 1 evitan concentraciones inaceptablemente altas de Compuesto 1 en el paciente. El descubrimiento de la concentración máxima preferida de Compuesto 1 se basó en parte en los resultados de un estudio de toxicidad oral de 28 días en monos (véase el Ejemplo 9), que encontró que el evento adverso más significativo fue un aumento en la duración media del intervalo QTc, un tipo de evento cardíaco que puede provocar arritmia. La concentración plasmática de Cmáx más baja de Compuesto 1 a la que se observó una duración prolongada del intervalo QTc fue de aproximadamente 7.840 ng/ml. Por consiguiente, Compuesto 1 se dosifica preferiblemente de una manera que logre una concentración plasmática de fármaco no superior a aproximadamente 7.800 ng/ml ("Ctox").

Los métodos preferidos para administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 proporcionan una concentración de Compuesto 1 en el plasma sanguíneo del paciente dentro de un intervalo terapéutico de aproximadamente 1.652-7.840 ng/mL.

El descubrimiento de los métodos proporcionados para administrar Compuesto 1 se basa en la evaluación de múltiples dosis de Compuesto 1 (100 mg, 150 mg y 300 mg) en múltiples intervalos de dosis (una vez al día y dos veces al día), tanto como agente único como en combinación con otro agente terapéutico. En particular, la administración de Compuesto 1 a una dosis diaria total de 300 mg cada día (preferiblemente, 150 mg BID) demostró en última instancia beneficios terapéuticos en el tratamiento de pacientes en múltiples formas de cáncer con mlDH1. Como se describe en el Ejemplo 10, se inició un estudio de Fase 1/2 de Compuesto 1 para evaluar Compuesto 1 solo o en combinación con azacitidina ("AZA") en pacientes con AML/síndrome mielodisplásico (MDS, por sus siglas en inglés) con mlDH-1. La concentración en plasma sanguíneo y otros efectos de la administración de Compuesto 1 se evaluaron en múltiples dosis diferentes de Compuesto 1 en diferentes intervalos de dosis: 100 mg QD (es decir, 100 mg una vez al día), 150 mg QD (es decir, 150 mg una vez al día), 300 mg QD (es decir, 300 mg una vez al día) y 150 mg BID (es decir, 150 mg dos veces al día), con Compuesto 1 administrado como agente único y/o en combinación con AZA. Como se muestra en la Figura 19 y se describe en el Ejemplo 10, como agente único, las concentraciones medianas de Cmin de Compuesto 1 en el estado estacionario estaban por debajo de la Ceff en pacientes que recibieron dosis de 100 mg o 150 mg una vez al día. Cuando se administró a una dosis de 300 mg una vez al día, Compuesto 1 alcanzó una mediana de Cmin por encima de Ceff, y la mayoría de los pacientes alcanzaron una Ceff. Sin embargo, 150 mg administrados dos veces al día lograron la mediana de Cmin más alta y también mostraron una menor variabilidad intercuartil en las concentraciones mínimas en comparación con 150 mg una vez al día.

Compuesto 1 también se administró en combinación con azacitidina (AZA). Como se muestra en la Figura 20, en esta combinación, la dosificación de un total de 150 mg de Compuesto 1 una vez al día muestra una mediana de Cmin inferior a 1000 ng/mL, que está muy por debajo de la Ceff. Por el contrario, la dosificación de un total de 150 mg de Compuesto 1 dos veces al día muestra una mediana de Cmin de más de 3000 ng/mL, que es casi el doble de la Ceff.

Por lo tanto, la presente divulgación establece que se prefiere una dosis diaria total de 300 mg de Compuesto 1, administrada en una dosis diaria dividida de 150 mg BID, en comparación con otras dosis e intervalos de dosis testados. La solicitante seleccionó una dosis diaria total de 300 mg, administrada como una forma de dosificación de 150 mg. Una dosis adecuada puede ser Compuesto 1 administrado en una dosis de 150 mg dos veces al día.

Concentración Duradera en Estado Estacionario de Compuesto 1

A pesar de haber encontrado que una dosis diaria total de 300 mg de Compuesto 1 proporciona la eficacia deseada, no estaba claro si esta dosificación podría proporcionar un beneficio continuo al paciente durante al menos un curso de tratamiento de seis meses (p. ej., seis ciclos de tratamiento de cuatro semanas). Más específicamente, la Solicitante no pudo predecir si Compuesto 1 podría mantener una concentración en sangre en estado estacionario ("Css", medida por Cmin o concentración mínima) sin una disminución sustancial en la concentración a lo largo de seis ciclos de tratamiento de cuatro semanas.

Compuesto 1 proporciona una concentración plasmática de fármaco en estado estacionario inesperadamente duradera a lo largo de un curso de tratamiento deseado. Después de los 15 días iniciales de tratamiento con 150 mg dos veces al día de Compuesto 1, la concentración en sangre mediana de Compuesto 1 en estado estacionario se mantuvo por encima de aproximadamente 2000 ng/mL a lo largo de un curso de tratamiento (p. ej., hasta aproximadamente 36 semanas, incluyendo 12-32 semanas, así como otros intervalos de las mismas, todos medidos desde la administración inicial de Compuesto 1). La mediana de Css también estuvo muy por debajo del umbral previsto para el riesgo de prolongación del intervalo QTc, como se discutió arriba. Como se muestra en la Figura 8A, que muestra datos para Compuesto 1 dosificado como agente único a 150 mg dos veces al día, la mediana de Css alcanzada el día 15 del ciclo 1 (es decir, "C1D15, o el 15° día de tratamiento con Compuesto 1) se mantuvo durante al menos seis ciclos de tratamiento de cuatro semanas y, de hecho, se extendió a más de nueve ciclos de cuatro semanas. Si bien las concentraciones son algo variables entre los pacientes, el nivel la mediana de Css se mantiene y no tiende a disminuir. Buena retención de niveles de Css también se observaron en combinación con AZA como se muestra en la Figura 8B

El descubrimiento de las propiedades únicas y notables de Compuesto 1 como inhibidor selectivo de mlDH-1 en múltiples cánceres con mlDH-1 condujo al desarrollo de un régimen de dosificación de Compuesto 1 que supera los obstáculos terapéuticos encontrados con compuestos inhibidores de mlDH-1 anteriores. A través de la administración de Compuesto 1 a una dosis diaria total de 300 mg, la presente divulgación proporciona la administración sostenida de un inhibidor de mlDH-1 a una concentración plasmática de fármaco deseada para el tratamiento del cáncer en pacientes que albergan mIDH-1.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

La Figura 1A y la Figura 1B son un esquema de la desregulación de los perfiles epigenéticos y de expresión génica asociados con IDH mutante.

La Figura 2 ilustra la unión de Compuesto 1 con mIDH.

La Figura 3A y la Figura 3B son cada una un esquema de los ensayos acoplados con diaforasa utilizados en el Ejemplo 1, que miden la actividad mediante la determinación del nivel de NADPH co-sustrato restante después de que se extingue la reacción enzimática.

La Figura 4A es un gráfico que muestra los resultados de una caracterización biofísica por resonancia de plasmón superficial (SPR, por sus siglas en inglés) de la interacción molecular entre Compuesto 1 inhibidor de mlDH-1 y la proteína IDH-1-R132H recombinante.

La Figura 4B es un gráfico de comparación que muestra la caracterización por SPR de Compuesto 1 en una superficie de control BCL6.

La Figura 5 es un gráfico que muestra la exposición en plasma y cerebro para Compuesto 1 después de una dosis PO de 5 mg/kg en un ratón CD-1.

La Figura 6 es un gráfico que muestra la exposición en plasma y cerebro para Compuesto 1 después de una dosis PO de 100 mg/kg en un ratón CD-1.

La Figura 7A ilustra el resumen de cohortes de un estudio de fase 1 en AML con mlDH1.

La Figura 7B ilustra el uso de Compuesto 1 en un estudio de fase 2 en AML y MDS con mlDH1.

La Figura 7C es un diagrama de flujo de ensayos clínicos en seres humanos de Compuesto 1, como se describe en el Ejemplo 10

La Figura 8A es un gráfico de la concentración en plasma sanguíneo de Compuesto 1 medida en un grupo de pacientes humanos tratados con Compuesto 1 como agente único durante un curso de tratamiento. La línea discontinua marcada como ''Ceff'' es inferior a 1652 ng/mL.

La Figura 8B es un gráfico de la concentración en plasma sanguíneo de Compuesto 1 medida en un grupo de pacientes humanos tratados con Compuesto 1 y azacitidina durante un curso de tratamiento. La línea discontinua marcada como "Ceff" es inferior a 1652 ng/mL.

La Figura 8C es un gráfico de la concentración eficaz en plasma sanguíneo de Compuesto 1 medida en un grupo de pacientes humanos durante un curso de tratamiento.

La Figura 8D es un gráfico de la concentración en plasma sanguíneo de Compuesto 1 medida en un grupo de pacientes humanos tratados con Compuesto 1 y Azacitidina durante un curso de tratamiento. La línea discontinua marcada como "Ceff" es inferior a 1652 ng/mL.

La Figura 8E es un gráfico de la concentración en plasma sanguíneo de Compuesto 1 medida en un grupo de pacientes humanos durante un curso de tratamiento.

La Figura 9A es un gráfico del nivel de 2-HG en plasma de un grupo de pacientes humanos después de ciclos de tratamiento consecutivos con Compuesto 1 como agente único.

La Figura 9B es un gráfico del nivel de 2-HG en plasma de un grupo de pacientes humanos después de ciclos de tratamiento consecutivos con Compuesto 1 y azacitidina.

La Figura 9C es un gráfico del nivel de 2-HG en plasma de un grupo de pacientes después de dos ciclos de tratamiento consecutivos.

La Figura 9D es un gráfico que muestra el nivel reducido de 2-HG medido a lo largo del tiempo en un grupo de pacientes humanos tratados con 150 mg de Compuesto 1 BID; la respuesta de PD se mantiene durante todo el tratamiento con 150 mg de Compuesto 1 BID.

La Figura 10A es un gráfico que muestra los niveles de concentración en estado estacionario de Compuesto 1 medida en un grupo de pacientes humanos en el día 15 mínimo (ng/mL) de Compuesto 1 después de la administración a pacientes de 150 mg QD, 300 mg QD y 150 mg BID de Compuesto 1. La Figura 10A también ilustra que se alcanza el estado estacionario en la Semana 2; (t^1/2~ 60 h) y exposiciones en estado estable de 150 mg BID > CI⁹⁰y niveles inferiores se espera que aumenten el potencial QTcF.

La Figura 10B es un gráfico que muestra el nivel de 2-HG medido en plasma (ng/mL) en un grupo de pacientes humanos después de la administración de 150 mg QD, 300 mg QD y 150 mg BID de Compuesto 1.

La Figura 10C es un gráfico que muestra la reducción de 2-HG en plasma observada en una población de pacientes humanos en todas las dosis y programas para el ciclo 2, día 1 de administración de Compuesto 1 y que se observó una respuesta PD preferida con 150 mg BID de Compuesto 1.

La Figura 11A es un gráfico de Css a lo largo del tiempo de pacientes tratados con Compuesto 1 a 150 mg BID. La Figura 11A también ilustra que las exposiciones a plasma de Compuesto 1 son estables a lo largo de la duración del tratamiento en los pacientes. Esto puede servir como base para seleccionar una dosis de 150 mg BID para la expansión de la dosis y una dosis de fase II recomendada.

La Figura 11B es un gráfico que representa la relación de la concentración en sangre en estado estacionario de Compuesto 1 medida en diferentes puntos durante un Curso de Tratamiento en un paciente humano durante la administración de Compuesto 1 (150 mg BID). Los valores del eje Y se normalizan a 1,0 utilizando la concentración medida el día 15 de un Curso de Tratamiento. Los datos de este gráfico se obtuvieron de un solo paciente que recibió 150 mg BID de la forma sólida de Compuesto 1, que se puede obtener del Ejemplo 1 a lo largo de un Curso de Tratamiento de más de 300 días (es decir, más de 6 meses).

La Figura 12A es un gráfico que muestra la correlación entre los niveles plasmáticos de Compuesto 1 y 2-HG en pacientes tratados con Compuesto 1 como agente único en los grupos de tratamiento e independientemente del tiempo de tratamiento.

La Figura 12B es un gráfico que muestra la correlación entre los niveles plasmáticos de Compuesto 1 y 2-HG en pacientes tratados con Compuesto 1 y azacitidina en combinación en los grupos de tratamiento e independientemente del tiempo de tratamiento.

La Figura 13A, Figura 13B y la Figura 13C son un gráfico que muestra el tiempo de tratamiento de pacientes con AML tratados con un solo agente (Compuesto 1).

La Figura 14A y la Figura 14B son un gráfico que muestra el tiempo de tratamiento de pacientes con AML tratados con una combinación de Compuesto 1 y azacitidina.

La Figura 15 es un gráfico que muestra el ciclo 1, la IDH-DS de grado 2 se resuelve con dexametasona e hidroxiurea. C2D1: CRp (1 % de blastos) a SCT en MLFS.

La Figura 16A es un gráfico del % de pacientes que alcanzaron la independencia de transfusiones (días 28 y 56) por categoría (CR/CRh, Non-CR/CRh, no respondedores y en general), que ilustra la independencia de transfusiones por categoría de respuesta para pacientes tratados con Compuesto 1 como agente único.

La Figura 16B es un gráfico que muestra la reducción máxima de blastos desde la referencia inicial (%) basada en la categoría (CR/CRh, CRi, SD y PD), que ilustra la reducción de blastos en la médula para pacientes tratados con Compuesto 1 como agente único.

La Figura 17A es un gráfico del % de pacientes que alcanzaron la independencia de transfusiones (días 28 y 56) por categoría (CR/CRh, no respondedores y en general), que ilustra la independencia de transfusiones por categoría de respuesta para pacientes tratados con Compuesto 1 en combinación con azacitidina.

La Figura 17B es un gráfico que muestra la reducción máxima de blastos desde la referencia inicial (%) basada en la categoría (CR/CRh, CRi, SD y PD), que ilustra la reducción de blastos en la médula para pacientes tratados con Compuesto 1 en combinación con azacitidina.

La Figura 18 consiste en 4 paneles: (a), (b), (c) y (d). El panel (a) ilustra la concentración libre de Compuesto 1 en plasma después de la administración oral de tres dosis (12,5, 25 y 50 mg/kg) con un intervalo de dosificación de 12 h en un modelo de xenoinjerto HCT116-IDH1-R132H/+ de ratón. El panel (b) ilustra la concentración libre de Compuesto 1 en el tumor después de la administración oral de tres dosis (12,5, 25 y 50 mg/kg) con un intervalo de dosificación de 12 h en un modelo de xenoinjerto HCT116-IDH1-R132H/+ de ratón. El panel (c) ilustra el porcentaje de inhibición de 2-HG en tumores en una dosis PO de 12,5 mpk, 25 mpk y 50 mpk en tres momentos diferentes (4h, 12h, 24h). El panel (d) ilustra la actividad in vivo (% de inhibición de 2-HG) de Compuesto 1 frente a la concentración del compuesto libre en el tumor.

La Figura 19 es un gráfico de la concentración mínima en plasma sanguíneo (Cmin) de Compuesto 1 medida en grupos de pacientes humanos que recibieron Compuesto 1 como agente único en diferentes cantidades de dosis e intervalos de dosis: día 15 mínimo (ng/mL) de Compuesto 1 después de administración a pacientes de 100 QD, 150 mg QD, 300 mg QD y 150 mg BID de Compuesto 1 como agente único. La Figura 19 también ilustra que el estado estacionario se alcanza en la semana 2; (t^1/2~ 60 h) y exposiciones en estado estacionario a 150 mg BID y 300 mg QD son > Ceff.

La Figura 20 es un gráfico de la concentración mínima en plasma sanguíneo (Cmin) de Compuesto 1 medida en grupos de pacientes humanos que recibieron Compuesto 1 a diferentes cantidades de dosis e intervalos de dosis, en combinación con azacitidina: día 15 mínimo (ng/mL) de Compuesto 1 después de administración a pacientes de 150 mg QD y 150 mg BID de Compuesto 1 en combinación con azacitidina. La Figura 20 también ilustra que se alcanza el estado estacionario en la Semana 2; (t^1/2~ 60 h) y exposiciones en estado estable de 150 mg BID son > Ceff.

La Figura 21 ilustra un nivel terapéuticamente reducido de 2-HG en el plasma de un paciente después de ciclos de tratamiento consecutivos con Compuesto 1 como agente único.

La Figura 22 ilustra un nivel terapéuticamente reducido de 2-HG en el plasma de un paciente después de ciclos de tratamiento consecutivos con Compuesto 1 y azacitidina.

La Figura 23 es un esquema de reacción sintética para la preparación de Compuesto 1.

La Figura 24 representa un diagrama de isotermas de adsorción dinámica de vapor (DVS, por sus siglas en inglés) de la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A.

La Figura 25 representa un termograma de calorimetría diferencial de barrido (DSC, por sus siglas en inglés) para la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A.

La Figura 26 representa una curva de análisis termogravimétrico (TGA, por sus siglas en inglés) para la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A.

La Figura 27 representa la difracción de rayos X en polvo (XRPD, por sus siglas en inglés) de la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A.

DEFINICIONES

Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión "Curso de Tratamiento" se refiere al período de tiempo en el que se administra un agente a un paciente, incluyendo cualesquiera vacaciones de administración o períodos de recuperación. Un curso de tratamiento puede incluir un único ciclo de tratamiento o múltiples ciclos de tratamiento. Adicionalmente, un curso de tratamiento puede incluir un ciclo de tratamiento parcial. El Curso de Tratamiento puede incluir el período de tiempo total durante el cual un paciente está en un protocolo de tratamiento para una enfermedad, p. ej., AML o MDS, con una terapia que comprende la administración de un compuesto inhibidor de mlDH-1.

''Secuenciación de próxima generación o secuenciación NGS o NG", tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a cualquier método de secuenciación que determina la secuencia de nucleótidos de moléculas de ácido nucleico individuales (p. ej., en la secuenciación de una sola molécula) o proxis clonalmente expandidos para moléculas de ácido nucleico individuales de una manera de alto rendimiento (p. ej., más de 103 o más moléculas se secuencian simultáneamente). Se conocen diversos métodos de secuenciación de próxima generación. En una realización, la abundancia relativa de especies de ácidos nucleicos en la colección se puede estimar contando el número relativo de apariciones de sus secuencias afines en los datos generados por el experimento de secuenciación. Métodos de secuenciación de próxima generación son conocidos en la técnica y se describen, p. ej., en Metzker, M. (2010) Nature Biotechnology Reviews 11:31-46. La secuenciación de próxima generación puede detectar una variante presente en menos del 5 % de los ácidos nucleicos en una muestra.

Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión "mutación(es) R132X de mlDH-1" se refiere a una mutación en la arginina 132 de IDH-1 que da como resultado una actividad inhibidora de Compuesto 1 contra la forma IDH-1 mutada que alberga la mutación R132. Preferiblemente, las mutaciones R132X tienen un valor de CI⁵⁰de 2-HG de menos de 500 nM (lo más preferiblemente menos de 250 nM o menos de 150 nM) utilizando el ensayo in vitro del Ejemplo 2. Por consiguiente, mutaciones R132X preferidas incluyen R132H y R1^{3 2}C, así como R132L, R132G y R1^{3 2}S (u otras mutaciones R132X que tienen valores de CI⁵⁰de 2-HG terapéuticamente relevantes, obtenidos utilizando el ensayo in vitro del Ejemplo ²). Pacientes que tienen mutación(es) R132X de mlDH-1 pueden identificarse utilizando un diagnóstico adecuado tal como un diagnóstico que analiza el tejido del paciente con tecnología de secuenciación de próxima generación que identificó la presencia de la mutación R132X en mlDH-1 en la muestra de tejido del paciente.

Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión "Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X de mIDH-1" se refiere a una terapia administrada a un paciente para inhibir la actividad de R132X de mlDH-1 en el paciente, en donde se sabe que la terapia tiene actividad inhibidora selectiva contra R132X de mlDH-1 sobre IDH-1 de tipo salvaje. Una terapia inhibidora selectiva de R132X de mIDH-a puede ser la administración de Compuesto 1 como se describe en esta memoria.

Tal como se utiliza en esta memoria, "secuenciación" puede ser Secuenciación de Próxima Generación (NGS, por sus siglas en inglés), una tecnología de secuenciación de alto rendimiento que realiza miles o millones de reacciones de secuenciación en paralelo. Aunque las diferentes plataformas de NGS utilizan diferentes químicas de ensayo, preferiblemente generan datos de secuencias a partir de un gran número de reacciones de secuenciación ejecutadas simultáneamente en un gran número de moldes. Los datos de la secuencia se pueden recopilar mediante un escáner y luego ensamblarse y analizar bioinformáticamente. Por lo tanto, las reacciones de secuenciación se realizan, leen, ensamblan y analizan en paralelo.

Los términos "sujeto" y "paciente" se utilizan indistintamente en la presente divulgación.

Mutaciones susceptibles de IDH1 se definen como aquellas que conducen a niveles incrementados de 2-hidroxiglutarato (2-HG) en las células cancerosas mlDH1 especificadas (p. ej., células de leucemia mIDH1 o células de glioma mlDH1) y cuya eficacia se predice mediante 1) remisiones clínicamente significativas con la dosis recomendada de Compuesto 1 y/o 2) inhibición de la actividad enzimática de IDH1 mutante a concentraciones de Compuesto 1 sostenibles a la dosis recomendada de acuerdo con métodos validados. Mutaciones susceptibles incluyen mutaciones de sustitución R132H y R132C de mIDH1.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

Compuesto 1 es un inhibidor de mlDH-1 de moléculas pequeñas útil para el tratamiento de pacientes que albergan mutaciones de IDH-1.. En algunas realizaciones, Compuesto 1 es un inhibidor de mlDH-1 de moléculas pequeñas útil para el tratamiento de tumores sólidos en el SNC (p. ej., glioma), neoplasias hematológicas (p. ej., AML o MDS) u otros tumores sólidos (p. ej., condrosarcoma, hepatobiliar y colangiocarcinoma intrahepático).

Al Compuesto 1 también se le puede aludir como olutasidenib, CAS N°. : 1887014-12-1, (5)-5-((1-(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil)amino)-1 -metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo, 5-{[(1 S)-1 -(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil]amino}-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo, o un compuesto de Fórmula (I).

Compuesto 1 tiene una actividad bioquímica potente y equivalente frente a un cierto número de formas mutadas de arginina 132 (R132) de IDH-1, de las cuales R132H y R132C son las más predominantes observadas para la IDH-1 humana. Compuesto 1 es un inhibidor de mlDH-1 (isocitrato deshidrogenasa 1 mutada) de moléculas pequeñas. Como se muestra en el Ejemplo 3, es un compuesto permeable biodisponible por vía oral, con un excelente perfil preclínico en modelos tanto in vitro como in vivo. Compuesto 1 es un inhibidor potente y altamente selectivo de enzimas IDH1R132 mutadas :

Tabla 2

Compuesto 1 exhibe una reducción robusta (> 90 %) de 2-HG en modelos animales y de neuroesfera PD. Compuesto 1 no muestra inhibición de CYP3A4. Compuesto 1 es un penetrante de la barrera hematoencefálica, que muestra una relación cerebro/plasma total (unida) del 30 % en ratas.

Compuesto 1 se puede administrar en combinación con azacitidina. En algunos ejemplos, los pacientes han sido tratados o ya están siendo tratados con azacitidina. En algunas realizaciones, se puede administrar una terapia de combinación de Compuesto 1 y azacitidina para el tratamiento de pacientes con un cáncer que alberga mutaciones de IDH-1 (p. ej., formas mlDH1 de AML o glioma u otros tumores sólidos). Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, en combinación con azacitidina (administrada a la dosis de 75 mg/m2 durante 7 días IV/SC por cada ciclo de 28 días).

La isocitrato deshidrogenasa (IDH) es una clase de enzimas que catalizan la descarboxilación oxidativa de isocitrato a a-ceto-glutarato (a-KG). Existen tres isoformas en células humanas. IDH-1 reside en el citosol y los peroxisomas, mientras que IDH-2 e IDH-3 son enzimas mitocondriales. IDH-1 es dimérico y utiliza NADP+ como aceptor de electrones. IDH-3 es una enzima tetramérica y, por el contrario, utiliza NAD+ como aceptor de electrones. IDH-3 es la principal enzima IDH que participa en el ciclo de Krebs. La presencia de mutaciones de IDH-1 imparte una actividad neomórfica a la enzima, lo que da como resultado la producción de (R)-2-hidroxiglutarato (2-HG) que ha sido denominado "oncometabolito" y tiene funciones pleotrópicas en la tumorigénesis.

Dado que las mutaciones de IDH-1 solo se encuentran en el tejido tumoral, la presente invención se basa en parte en el descubrimiento de que el inhibidor selectivo mlDH-1 de Compuesto 1 puede desarrollarse como una terapia fijada como objetivo para múltiples formas de cáncer con mlDH-1. Un biomarcador de selección de pacientes para el uso de Compuesto 1 puede ser la existencia de una mutación en IDH-1 en un paciente al que se ha diagnosticado un cáncer que alberga mIDH-1. Estudios en modelos de ratón modificados genéticamente y modelos derivados de muestras de pacientes con cáncer respaldan el descubrimiento de que mIDH produce 2-HG, cuyos efectos posteriores se cree que provocan cambios epigenéticos que, en consecuencia, pueden bloquear la diferenciación adecuada de células progenitoras y provocar cáncer. En particular, mutaciones de IDH-1 pueden conducir a la pérdida de la actividad enzimática de tipo salvaje (conversión de isocitrato en a-KG). En cambio, las enzimas mutadas adquieren la actividad neomórfica de convertir a-KG en 2-HG. En células cancerosas que albergan mlDH-1, la IDH-1 de tipo salvaje y mutante forma un complejo heterodimérico que puede producir niveles muy elevados de 2-HG. Mutaciones de IDH-1 pueden resultar en la formación del enantiómero (R) de 2-HG, que contrasta con la acumulación de enantiómero (S) que se encuentra en los pacientes con aciduria L2HG, que albergan mutaciones homocigóticas de pérdida de función en 2-HG deshidrogenasa. Dada la similitud estructural entre 2-HG y a-KG, se ha demostrado que 2-HG es un inhibidor competitivo de un cierto número de histonas y ADN desmetilasas dependientes de a-KG. 2-Hg puede inhibir varias histonas desmetilasas de la familia KDM in vitro, incluyendo las desmetilasas H3K9/H3K36 KDM4A y KDM4C, y la desmetilasa H3K36 KDM2A. Además, se han observado niveles elevados de metilación de H3K4, H3K9, H3K27 y H3K79 en muestras derivadas de pacientes que contienen mlDH-1, así como en células que expresan mutaciones de IDH o tratadas con un éster de 2-HG permeable a las células. 2-HG también puede inhibir la familia TET de ADN desmetilasas, lo que a su vez puede resultar en la hipermetilación de islas CpG de ADN. Hasta ahora, las mutaciones en IDH-1/2 y TET2 son mutuamente excluyentes, lo que respalda la idea de que 2-HG producido por mIDH puede inhibir TET2 y alterar la diferenciación de células hematopoyéticas. Además, también se ha demostrado que 2-HG bloquea la actividad de PHD, que es crítica para la regulación de los factores inducibles por hipoxia y la hidroxilación y maduración del colágeno. El colágeno hidroxilado es importante para la regulación de la proliferación y diferenciación adecuada de las células hematopoyéticas en la médula ósea. También se informa que IDH mutada bloquea la diferenciación adecuada de los hepatocitos y fomenta el colangiocarcinoma.

Utilizando ensayos de mecanismos celulares in vitro que controlan los niveles del subproducto metabólico tumorigénico 2-Hg producido en exceso de forma errática, la inhibición de mlDH-1 da como resultado una reducción de > 90 % en los niveles medidos de 2-HG, un efecto que también se ha demostrado que se traduce en niveles similares de supresión de 2-HG en estudios PK-PD in vivo en ratones portadores de xenoinjertos HCT116 (IDH-1 R132H) y HCT116 (IDH-1 R132C). En ambos modelos, la concentración libre de Compuesto 1 fue equiparable en tumores de plasma y xenoinjertos, y las exposiciones fueron dependientes de la dosis. A la dosis más alta testada en estos estudios (50 mg/kg), Compuesto 1 inhibió los niveles de 2-HG en el tumor en > 90 % hasta 24 horas después de la última dosis en el modelo de xenoinjerto HCT116 (IDH-1 R132H), y a niveles similares durante al menos 12 horas en el modelo HCT116 (IDH-1 R132C).

Con diferencia, las mutaciones de IDH1 más frecuentes se producen en la posición de aminoácido R132 e incluyen las mutaciones R132H, R132C, R132S, R132G y R132L. Dado que Compuesto 1 es un inhibidor potente de un espectro de diferentes mutaciones R132 de IDH1, pero es inactivo frente a IDH1 de tipo salvaje o IDH2 mutada, los pacientes se seleccionarán en función de la aparición de una mutación en IDH1 en el residuo R132. Por consiguiente, Compuesto 1 es útil en métodos de tratamiento de pacientes a los que se ha diagnosticado un cáncer que alberga una mutación en IDH-1 tal como AML, MDS, glioma, tumores hepatobiliares, condrosarcoma, colangiocarcinoma u otros tumores sólidos que albergan una mutación en IDH1. Por ejemplo, las mutaciones R132 de IDH-1 representan más del 90 % de las mutaciones IDH presentes en pacientes con glioma de bajo grado y GBM secundario. Se cree que la actividad enzimática neomórfica adquirida como resultado de la mutación en IDH-1 conduce a la conversión de a-KG en 2-HG. En consecuencia, pacientes portadores de mutaciones de IDH-1 tienen niveles elevados de 2-HG. La mayoría de las mutaciones de IDH-1 dan como resultado un cambio de un solo aminoácido en el residuo R132, mientras que la mayoría de las mutaciones de IDH-2 se producen en Arginina 140 (R140) o Arginina 172 (R172). El espectro de mutación en IDH varía entre los diferentes tipos de tumores (Tabla 3).

Tabla 3

Por ejemplo, las mutaciones R132 de IDH-1 representan más del 90 % de las mutaciones de IDH presentes en pacientes con glioma de bajo grado y GBM secundario. Se han reseñado mutaciones de IDH-1 en neoplasias hematológicas tales como la leucemia mieloide aguda (AML) y el síndrome mielodisplásico (MDS), así como muchos tipos de tumores sólidos, incluyendo glioma de bajo grado, glioblastoma secundario, colangiocarcinoma intrahepático (IHCC, por sus siglas en inglés), condrosarcoma y melanoma. y carcinoma hepatocelular, específicamente en células que tienen la mutación R132 (p. ej., R132C).

Compuesto 1 es un inhibidor de la isocitrato deshidrogenasa-1 (IDH1) útil para el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (AML) con una mutación susceptible en IDH1 detectada mediante un test aprobado por la FDA. En algunas realizaciones, composiciones farmacéuticas que comprenden Compuesto 1 se pueden administrar a pacientes adultos con AML recién diagnosticada que tienen > 75 años o que tienen comorbilidades que impiden el uso de quimioterapia de inducción intensiva. En algunas realizaciones, composiciones farmacéuticas que comprenden Compuesto 1 se pueden administrar a pacientes adultos con AML recidivante o refractaria.

Los pacientes pueden seleccionarse para el tratamiento de AML con Compuesto 1 en función de la presencia de mutaciones de IDH1 en la sangre o la médula ósea. Pacientes sin mutaciones de IDH1 en el momento del diagnóstico deben volver a someterse al test en caso de recaída, ya que puede surgir una mutación en IDH1 durante el tratamiento y/o en la recaída. La información sobre los tests aprobados por la FDA para la detección de mutaciones de IDH1 en AML está disponible en http://www.fda.gov/CompanionDiagnostics.

Se puede diagnosticar que el paciente tiene una mutación R132 en IDH-1 descrita en esta memoria utilizando métodos de secuenciación tales como métodos de secuenciación de próxima generación o un método basado en la PCR. El método de selección de pacientes de diagnóstico puede ser un ensayo de genotipado tumoral basado en secuenciación de próxima generación (NGS) que analiza una muestra de tejido del paciente tal como una muestra de médula ósea. Técnicas y tecnologías útiles para diagnosticar que un paciente tiene una mutación R132 en IDH-1 pueden incluir, sin limitación, máquinas de secuenciación y/o estrategias bien conocidas en la técnica tales como las desarrolladas por Illumina/Solexa (the Genome Analyzer; Bennett et al. (2005) Pharmacogenomics, 6:373-20 382), por Applied Biosystems, Inc. (el Secuenciador SOLiD; solid.appliedbiosystems.com), por Roche (p. ej., el secuenciador 454 GS FLX; Margulies et al. (2005) Nature, 437:376-380), y por otros.

Los métodos de secuenciación de próxima generación son conocidos en la técnica. "Secuenciación de próxima generación o secuenciación NGS o NG", tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a cualquier método de secuenciación que determina la secuencia de nucleótidos de moléculas de ácido nucleico individuales (p. ej., en la secuenciación de una sola molécula) o proxis clonalmente expandidos para moléculas de ácido nucleico individuales de una manera de alto rendimiento (p. ej., más de 103 o más moléculas se secuencian simultáneamente). En una realización, la abundancia relativa de especies de ácidos nucleicos en la colección se puede estimar contando el número relativo de apariciones de sus secuencias afines en los datos generados por el experimento de secuenciación. Métodos de secuenciación de próxima generación son conocidos en la técnica y se describen, p. ej., en Metzker, M. (2010) Nature Biotechnology Reviews 11:31-46. La secuenciación de próxima generación puede detectar una variante presente en menos del 5 % de los ácidos nucleicos en una muestra.

En algunos ejemplos, los pacientes tratados con Compuesto 1 pueden tener un cáncer con IDH-1 mutante que no tiene una mutación en mIDH-2 detectada con un diagnóstico de mIDH-2 aprobado por la FDA (p. ej., como se proporciona en fda.gov/CompanionDiagnostics).

Se apreciará que en los casos en los que la presente divulgación se refiere al tratamiento de un paciente, dicha divulgación también incluye el tratamiento de una población de pacientes (p. ej., una población de pacientes que tienen un cáncer que alberga m-IDH1.

Composiciones farmacéuticas que comprenden Compuesto 1 se pueden administrar a lo largo de un curso de tratamiento. Un curso de tratamiento comprende preferiblemente la administración de Compuesto 1 a un paciente que lo necesite hasta que la concentración de Compuesto 1 en la sangre del paciente alcance un estado estable (p. ej., 15 días consecutivos), hasta que se obtenga una respuesta terapéutica deseada (p. ej., 6 meses o más) o hasta la progresión de la enfermedad o una toxicidad inaceptable.

En algunas realizaciones, Compuesto 1 se puede formular como un comprimido o cápsula recubierto con una película (p. ej., 150 mg o 50 mg) para la administración oral. Cada uno de los comprimidos o cápsulas puede contener los siguientes ingredientes inactivos: dióxido de silicio coloidal, croscarmelosa de sodio, acetato succinato de hipromelosa, estearato de magnesio, celulosa microcristalina y lauril sulfato de sodio. El recubrimiento del comprimido o de la cápsula puede incluir otros componentes, tales como FD&C azul n°2, hipromelosa, lactosa monohidrato, dióxido de titanio y triacetina.

Compuesto 1 es un Inhibidor Selectivo de mIDHI

Compuesto 1 se seleccionó como un inhibidor de mlDH1 potente y selectivo. La presente divulgación proporciona métodos para tratar el cáncer. En particular, pacientes a los que se ha diagnosticado un cáncer que albergan una célula cancerosa IDH-1 muíante, p. ej., que tienen una mutación R132 en IDH-1 seleccionada del grupo que consiste en: R132L, R132G y R132S (además de las mutaciones R132H y R132C de IDH-1), pueden tratarse con una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1. En algunos ejemplos, los pacientes tratados con Compuesto 1 pueden tener un cáncer con IDH-1 mutante que no tiene una mutación en mIDH-2 detectada con un diagnóstico de mIDH-2 aprobado por la FDA (p. ej., como se proporciona en www.fda.gov/CompanionDiagnostics).

Estudios en modelos de ratón modificados genéticamente y modelos derivados de muestras de pacientes con cáncer respaldan el descubrimiento de que mIDH produce 2-HG, cuyos efectos posteriores se cree que provocan cambios epigenéticos que, en consecuencia, bloquean la diferenciación adecuada de células progenitoras y conducen al cáncer. En particular, mutaciones de IDH-1 pueden conducir a la pérdida de la actividad enzimática de tipo salvaje (conversión de isocitrato en- KG (a-KG)). En cambio, las enzimas mutadas adquieren la actividad neomórfica de convertir a-KG en 2-HG. En células cancerosas que albergan mlDH-1, la IDH-1 de tipo salvaje y mutante forma un complejo heterodimérico que puede producir niveles muy elevados de 2-HG. Todas las mutaciones de IDH-1 pueden resultar en la formación del enantiómero (R) de 2-HG, que contrasta con la acumulación de enantiómero (S) que se encuentra en los pacientes con aciduria L2-HG, que albergan mutaciones homocigóticas de pérdida de función en 2-HG deshidrogenasa. Dada la similitud estructural entre 2-HG y a-KG, se ha demostrado que 2-HG es un inhibidor competitivo de un cierto número de histonas y ADN desmetilasas dependientes de a-KG. 2-HG inhibe varias histonas desmetilasas de la familia KDM in vitro, incluyendo las desmetilasas H3K9/H3K36 KDM4A y KDM4C, y la desmetilasa H3K36 KDM2A. Además, se han observado niveles elevados de metilación de H3K4, H3K9, H3K27 y H3K79 en muestras derivadas de pacientes que contienen mlDH-1, así como en células que expresan mutaciones de IDH o tratadas con un éster de 2-HG permeable a las células .2-HG también inhibe la familia TET de ADN desmetilasas, lo que a su vez resulta en la hipermetilación de islas CpG de ADN. Hasta ahora, las mutaciones en IDH-1/2 y TET2 son mutuamente excluyentes, lo que respalda la idea de que 2-HG producido por mIDH inhibe TET2 y altera la diferenciación de células hematopoyéticas. Además, también se ha demostrado que 2-HG bloquea la actividad de PHD, que es crítica para la regulación de los factores inducibles por hipoxia y la hidroxilación y maduración del colágeno. El colágeno hidroxilado es importante para la regulación de la proliferación y diferenciación adecuada de las células hematopoyéticas en la médula ósea. También se informa que IDH mutada bloquea la diferenciación adecuada de los hepatocitos y fomenta el colangiocarcinoma. Dado que las mutaciones de IDH-1 solo se encuentran en el tejido tumoral, la presente invención se basa en parte en el descubrimiento de que el inhibidor selectivo mlDH-1 de Compuesto 1 puede desarrollarse como una terapia fijada como objetivo contra el cáncer. El biomarcador de selección de pacientes para el uso de Compuesto 1 puede ser la existencia de una mutación en IDH-1 en un paciente al que se ha diagnosticado un cáncer que alberga mIDH-1.

Utilizando ensayos de mecanismos celulares in vitro que controlan los niveles del subproducto metabólico tumorigénico 2-hidroxi glutarato (2-HG) producido en exceso de forma errática, la inhibición de mlDH-1 da como resultado una reducción de > 90 % en los niveles medidos de 2-HG, un efecto que también se ha demostrado que se traduce en niveles similares de supresión de 2-HG en estudios PK-PD in vivo en ratones portadores de xenoinjertos HCT116 (IDH-1 R132H) y HCT116 (IDH-1 R132C). En ambos modelos, la concentración libre de Compuesto 1 fue equiparable en tumores de plasma y xenoinjertos, y las exposiciones fueron dependientes de la dosis. A la dosis más alta testada en estos estudios (50 mg/kg), Compuesto 1 inhibió los niveles de 2-HG en el tumor en > 90 % hasta 24 horas después de la última dosis en el modelo de xenoinjerto HCT116 (IDH-1 R132H), y a niveles similares durante al menos 12 horas en el modelo HCT116 (IDH-1 R132C).

Por consiguiente, Compuesto 1 es útil en métodos de tratamiento de pacientes a los que se ha diagnosticado un cáncer que alberga una mutación en IDH-1. Se cree que la actividad enzimática neomórfica adquirida como resultado de la mutación en IDH-1 conduce a la conversión de a-cetoglutarato (alfa-KG) en 2-hidroxiglutarato (2-HG). En consecuencia, pacientes portadores de mutaciones de IDH-1 tienen niveles elevados de 2-HG. La mayoría de las mutaciones de IDH-1 dan como resultado un cambio de un solo aminoácido en el residuo R132, mientras que la mayoría de las mutaciones de IDH-2 se producen en Arginina 140 (R140) o Arginina 172 (R172). El espectro de mutación en IDH varía entre los diferentes tipos de tumores (Tabla 3 arriba).

Por ejemplo, las mutaciones R132 de IDH-1 representan más del 90 % de las mutaciones de IDH presentes en pacientes con glioma de bajo grado y GBM secundario. Se han reseñado mutaciones de IDH-1 en neoplasias hematológicas tales como la leucemia mieloide aguda (AML) y el síndrome mielodisplásico (MDS), así como muchos tipos de tumores sólidos, incluyendo glioma de bajo grado, glioblastoma secundario, colangiocarcinoma intrahepático (IHCC), condrosarcoma y melanoma. Con diferencia, las mutaciones de IDH-1 más frecuentes se producen en la posición de aminoácido R132 e incluyen las mutaciones R132H, R132C, R132S, R132G y R132L. Dado que Compuesto 1 es un inhibidor potente de un espectro de diferentes mutaciones R132 de IDH-1, pero es inactivo frente a IDH-1 de tipo salvaje o IDH-2 mutada, los pacientes se seleccionarán en función de la aparición de una mutación en IDH-1 en el residuo R¹32.

Se puede diagnosticar que el paciente tiene una mutación R132 en IDH-1 descrita en esta memoria utilizando métodos de secuenciación tales como métodos de secuenciación de próxima generación. El método de selección de pacientes de diagnóstico puede ser un ensayo de genotipado tumoral basado en secuenciación de próxima generación (NGS) que analiza una muestra de tejido del paciente tal como una muestra de médula ósea. Técnicas y tecnologías útiles para diagnosticar que un paciente tiene una mutación R132 en IDH-1 pueden incluir, sin limitación, máquinas de secuenciación y/o estrategias bien conocidas en la técnica tales como las desarrolladas por Illumina/Solexa (the Genome Analyzer; Bennett et al. (2005) Pharmacogenomics, 6:373-20 382), por Applied Biosystems, Inc. (el Secuenciador SOLiD; solid.appliedbiosystems.com), por Roche (p. ej., el secuenciador 454 GS FLX; Margulies et al. (2005) Nature, 437:376-380), y por otros.

La invención se basa en parte en el descubrimiento de que Compuesto 1 inhibe selectivamente la producción de 2-HG a partir de células cancerosas mlDH-1 que albergan mutaciones R132 que incluyen R132S, R132G y R132L con potencias comparativas clínicamente relevantes, al tiempo que permanece inactivo en células IDH-1 de tipo salvaje. Además, la solicitante ha descubierto que Compuesto 1 es un inhibidor de molécula pequeña selectivo y fijado como objetivo de la producción de 2-HG a partir de células cancerosas mlDH-1 y también es inactivo en células cancerosas mIDH-2 que producen 2-HG (p. ej., Compuesto 1 inhibe selectivamente la producción de 2-HG a partir del cáncer con mlDH-1.

Tumores Sólidos

La invención se basa en parte en el descubrimiento de que Compuesto 1 inhibe selectivamente la producción de 2-HG a partir de células cancerosas mlDH1 que albergan mutaciones R132 que incluyen R132S, R132G y R132L con potencias comparativas clínicamente relevantes, al tiempo que permanece inactivo en células IDH1 de tipo salvaje. Además, la solicitante ha descubierto que Compuesto 1 disminuye la producción de 2-HG en células cancerosas mIDH1 y también es inactivo en células cancerosas mlDH2 que producen 2-HG (p. ej., Compuesto 1 inhibe selectivamente la producción de 2-HG a partir del cáncer con mlDH1).

En algunos ejemplos, se proporcionan métodos para tratar tumores sólidos en el SNC, incluyendo células cancerosas de glioma, que albergan una mutación R132 en IDH1. Por ejemplo, los pacientes a los que se ha diagnosticado glioma que alberga una célula cancerosa IDH1 mutante pueden tratarse con una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1 en combinación con azacitidina.

Lograr Concentraciones Eficaces en Plasma Sanguíneo de Compuesto 1

La presente divulgación proporciona métodos para el tratamiento de AML o MDS, que comprenden una etapa de administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una forma farmacéuticamente aceptable de Compuesto 1. En algunos ejemplos, la forma farmacéuticamente aceptable de Compuesto 1 es una forma de dosificación oral (p. ej., como se proporciona en el Ejemplo 1) administrado al paciente como Terapia de Inhibidor Selectivo con R132X de mlDH-1, que consiste en la administración oral de una forma de dosificación oral de Compuesto 1 administrado como un inhibidor de agente único de mIDH-1 o en combinación con azacitidina o citarabina. Cuando Compuesto 1 se administra en una terapia de combinación de este tipo, el sujeto puede estar recibiendo o haber recibido previamente un tratamiento con azacitidina o citarabina.

Después de la terapia, los niveles plasmáticos de 2-HG inferiores a 180 ng/mL se asocian con una mejor supervivencia general y libre de enfermedades en pacientes con AML con IDH-1 e IDH-2 mutada (JANIN, M. et al., Serum 2-Hydroxyglutarate Production in IDH1- and IDH2-Mutated De Novo Acute Myeloid Leukemia A Study by the Acute Leukemia French Association Group, Journal of Clinical Oncology, 32(4): 297-305 (2014)). La Figura 22 muestra que la dosis de 150 mg una vez al día logró una concentración plasmática mediana de 2-HG por encima de 600 ng/mL. Mientras tanto, 300 mg una vez al día lograron una concentración plasmática mediana de 2-HG ligeramente superior a 200 ng/mL, y 150 mg dos veces al día lograron una concentración plasmática mediana de 2-GH HG de aproximadamente 100 ng/mL. Esto demuestra la capacidad de una dosis de 150 mg dos veces al día de reducir los niveles de 2-HG por debajo de un nivel establecido en la bibliografía en comparación con 150 mg y 300 mg una vez al día.

La invención se basa en parte en el descubrimiento de que la administración oral de Compuesto 1 (en la forma de dosificación oral farmacéuticamente aceptable resultante del método de preparación del Ejemplo 1) a seres humanos que tienen niveles elevados de 2-HG en sangre (es decir, por encima de aproximadamente 180 ng/mL) puede proporcionar concentraciones en sangre en estado estacionario (mínimas) por encima de una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 (p. ej., por encima de la concentración CI⁹⁰para R132H y/o R132C de mIDH-1, y/o concentraciones superiores a aproximadamente 2000 ng/mL o concentraciones superiores a aproximadamente 1652 ng/mL) a lo largo de un curso de tratamiento de 6 meses desde la administración inicial de Compuesto 1, al tiempo que simultáneamente reduce y luego mantiene los niveles de 2-HG por debajo de 200 ng/mL dentro de aproximadamente 15 días tratamiento diario con Compuesto 1. Alternativamente, los niveles de 2-HG se mantienen por debajo de 180 ng/mL dentro de aproximadamente 15 días de tratamiento diario con Compuesto 1. En estas observaciones, Compuesto 1 se administró en una forma de dosificación oral (que se puede obtener a partir del método del Ejemplo 1) dos veces al día (150 mg BID) a pacientes adultos con AML o MDS que albergan una mutación R132X en IDH-1. Después de los 15 días iniciales de tratamiento con 150 mg BID de esta forma de dosificación oral de Compuesto 1, la concentración en sangre en estado estacionario (mínima) de Compuesto 1 (antes de la dosis) se mantuvo por encima de aproximadamente 2000 ng/mL (y muy por debajo del umbral previsto para el riesgo de QTc) a lo largo de un curso de tratamiento (p. ej., hasta aproximadamente 30 semanas, incluyendo 12-30 semanas, y 20 semanas, así como otros intervalos, todos medidos desde la administración inicial de Compuesto 1).

Por consiguiente, la presente divulgación proporciona métodos para tratar pacientes que albergan mutaciones de isocitrato deshidrogenasa 1 (mIDH-1) (que incluyen preferiblemente una o más R132X de mIDH-1) a los que se ha diagnosticado AML o MDS. El método puede comprender administrar al paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de una Terapia de Inhibidor Selectivo R132X de mlDH-1. El inhibidor selectivo de R132X mlDH-1 puede consistir en Compuesto 1 como el único compuesto inhibidor de R132X de mlDH-1 administrado al paciente (p. ej., en una forma de dosificación oral tal como la forma sólida obtenida del Ejemplo 1). Compuesto 1 se puede administrar a un paciente que alberga el R132X de mlDH-1 identificado en una muestra de tejido y/o una concentración elevada de 2-HG en sangre (p. ej., por encima de aproximadamente 180 ng/mL) durante un curso de tratamiento de al menos tres ciclos de tratamiento de 28 días consecutivos de administración para cada uno de los ciclos. El curso del tratamiento puede comenzar con la administración inicial del Compuesto 1 en el primero de los al menos tres o más ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días. La administración de la cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 a lo largo de un curso de tratamiento (p. ej., al menos 15 días consecutivos, preferentemente hasta 30 semanas o más) a un paciente que tiene niveles elevados de 2-HG (p. ej., concentraciones sanguíneas de 2-HG en plasma de 200-10.000 ng/mL) puede resultar en un efecto terapéutico en el paciente evidenciado por una concentración plasmática mínima duradera terapéuticamente efectiva de Compuesto 1 en el paciente a lo largo del curso del tratamiento (p. ej., por encima de la concentración CI⁹⁰para R132H y /o R132C de mIDH-1, y/o concentraciones superiores a aproximadamente 2000 ng/mL e inferiores a aproximadamente 7200 ng/mL, o superiores a la concentración CI⁹⁰para R132H y/o R132C de mIDH-1, y/o concentraciones superiores a aproximadamente 1652 ng/mL e inferiores a aproximadamente 7.840 ng/mL).

Compuesto 1 se administra a una dosis de 150 mg dos veces al día durante el curso del tratamiento. Compuesto 1 se puede administrar con alimentos para mejorar la biodisponibilidad de Compuesto 1. El curso del tratamiento puede ser de al menos 15 días consecutivos comenzando con la dosis inicial de Compuesto 1 y más (p. ej., hasta 30 semanas, 15 días a 30 semanas, 15 días a 12 semanas, al menos 12 semanas, 12-30 semanas, 15 días a 6 meses y otras duraciones intermedias o más largas o intervalos aparentes basados en la presente divulgación).

Algunos métodos comprenden, además, la administración de azacitidina al paciente a lo largo del curso de tratamiento. La azacitidina se puede administrar al paciente por vía subcutánea o intravenosa en un ciclo de tratamiento con azacitidina que consiste en la administración de una dosis total de 75 mg/m2 cada día durante 7 días consecutivos comenzando al inicio de cada ciclo de tratamiento, seguido de 21 días consecutivos sin administración de la azacitidina al paciente. Se permite una interrupción de la dosis de azacitidina de 48 horas durante fines de semana o días festivos. Si no se observa respuesta después de 2 ciclos de tratamiento, se puede administrar azacitidina a una dosis total de 100 mg/m2 cada día. El tratamiento con inhibidor de mIDH-1 y azacitidina mostró efectos sinérgicos en la liberación del bloque de diferenciación en modelos de leucemia con mIDH in vitro.

Los métodos pueden comprender, además, la administración de citarabina al paciente a lo largo del curso de tratamiento. La citarabina se puede administrar al paciente por vía subcutánea o intravenosa en un ciclo de tratamiento con citarabina que consiste en la administración de una dosis total de 20 mg/día cada día durante 7 días consecutivos comenzando al inicio de cada ciclo de tratamiento, seguido de 10 días consecutivos sin administración de la citarabina al paciente. La citarabina también se puede administrar 20 mg BID por vía subcutánea durante 10 días comenzando al principio de cada ciclo de tratamiento. En la terapia de inducción de AML, la dosis de citarabina administrada en combinación con otros fármacos contra el cáncer puede ser de 100 mg/m2/día por infusión IV continua (Días 1 a 7) o 100 mg/m2 IV cada 12 horas (Días 1 a 7). La inyección de citarabina se puede utilizar por vía intratecal en la leucemia aguda en dosis que varían de 5 mg/m2 a 75 mg/m2 de superficie corporal. La frecuencia de administración puede variar desde una vez al día durante 4 días hasta una vez cada 4 días. La dosis puede ser de 30 mg/m2 cada 4 días hasta que los hallazgos del líquido cefalorraquídeo sean normales, seguido de un tratamiento adicional.

Se puede identificar que un paciente tiene una mutación R132X en mlDH-1 utilizando un método de diagnóstico que comprende un análisis de secuenciación (p. ej., secuenciación de próxima generación (NGS)) de médula ósea u otra muestra de tejido obtenida del paciente antes de la administración de Compuesto 1 al paciente La mutación del gen R132X puede determinarse antes de la administración de Compuesto 1 al paciente. Compuesto 1 puede administrarse a pacientes que han recibido terapia anticancerígena previa y/u otros medicamentos concomitantes (no anticancerígenos). En algunos ejemplos, Compuesto 1 se administra a un paciente que no ha recibido una terapia previa con un inhibidor de mlDH-1.

Tal como se proporciona en esta memoria, métodos para la administración de un inhibidor de R132X en IDH-1 mutante (inhibidor de mIDH-1) de Compuesto 1 proporcionan una concentración en sangre en estado estacionario inesperadamente duradera del inhibidor de mlDH-1 a lo largo de un curso de tratamiento deseado. Por ejemplo, los métodos terapéuticos proporcionados en esta memoria pueden proporcionar a los pacientes con AML o MDS que albergan una mutación R132X en mlDH-1 concentraciones sanguíneas duraderas en estado estacionario de Compuesto 1 inhibidor de mlDH-1 a un nivel terapéuticamente eficaz (p. ej., por encima de la concentración CI⁹⁰para una R312X en mIDH-1) sin una disminución sustancial (p. ej., no más de 10 % de reducción) en la concentración en sangre en estado estacionario de Compuesto 1 inhibidor de mlDH-1 inicial (p. ej., concentración en sangre medida aproximadamente 12 horas después de una dosis inicial del inhibidor de mlDH-1) durante un curso de tratamiento de más de aproximadamente 12 semanas consecutivas (p. ej., 3 ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días y preferiblemente al menos aproximadamente 6 meses). Además, Compuesto 1 inhibidor de mlDH-1 se puede administrar a pacientes con AML o MDS que albergan una mutación R132X en mlDH-1 de una manera terapéuticamente eficaz que proporciona la reducción de niveles elevados de 2-HG en el espacio de aproximadamente 15 días de iniciar un curso de tratamiento, preferiblemente alcanzando y manteniendo los niveles de 2-HG en estos pacientes a un nivel de o por debajo de aproximadamente 180 ng/mL, comenzando el día 15 en un curso de tratamiento y continuando durante un curso de tratamiento que dure al menos 12 semanas o más (p. ej., 12-30 semanas).

Haciendo referencia a las Figuras 8A-8E, la administración de Compuesto 1 en la forma de dosificación oral descrita en el Ejemplo 1 a 150 mg BID dio como resultado una concentración en plasma sanguíneo mínima terapéuticamente eficaz sostenida por encima de 2000 ng/mL después del ciclo 3 de un ciclo de tratamiento de 28 días. Simultáneamente, con referencia a las Figuras 9A-9D, la administración de Compuesto 1 en la forma de dosificación oral del Ejemplo 1 a 150 mg BID dio como resultado un nivel sostenido de 2-HG (p. ej., por debajo de 200 ng/mL en plasma después del ciclo 3 el día 1 de un ciclo de tratamiento de 28 días). Este efecto contrasta con otros inhibidores de IDH1 que han avanzado clínicamente. Por consiguiente, la invención también se basa en parte en el descubrimiento de que la administración de Compuesto 1 a 150 mg BID da como resultado una relación sostenida de más de aproximadamente 10 (preferiblemente más de aproximadamente 20) de la concentración en plasma sanguíneo de Compuesto 1 (p. ej., concentraciones mínimas medida previa a la dosis en concentraciones de aproximadamente 2000 ng/mL o mayores) hasta el nivel en sangre de 2-HG (p. ej., concentraciones plasmáticas de aproximadamente 200 ng/mL o inferiores, incluyendo concentraciones de aproximadamente 100 ng/mL) después del ciclo 3 el día 1 ( es decir, después de dosis BID administradas durante los primeros 15 días consecutivos de tratamiento) de un ciclo de tratamiento de 28 días. Se estimó una semivida plasmática de aproximadamente 60 horas para Compuesto 1, y se alcanzó el estado estacionario en la semana 2 del curso del tratamiento. Las concentraciones sanguíneas en estado estacionario de Compuesto 1 medidas en los pacientes estaban por encima del valor CI⁹⁰para la inhibición de 2-HG en células R132X mlDH-1 (descritas en los Ejemplos). Como se muestra en las Figuras 8A-8E, las exposiciones en plasma (concentración en plasma sanguíneo en estado estacionario) de Compuesto 1 fueron duraderas (es decir, sostenidas) a lo largo de las 30 semanas de duración del tratamiento. Como se muestra en las Figuras 9A-9D, las concentraciones de 2-HG en plasma se redujeron al intervalo normal dentro de 1 ciclo (C2D1) y se mantuvieron durante toda la duración del tratamiento. No se observaron toxicidades limitantes de la dosis de Compuesto 1 durante los estudios de aumento de la dosis, y no se alcanzó la dosis máxima tolerada (MTD, por sus siglas en inglés) de Compuesto 1. Las Figuras 8A-8E son gráficos de los datos obtenidos al medir las concentraciones en estado estacionario de pacientes en el ensayo clínico que recibieron una dosis de 150 mg BID de Compuesto 1, ya sea como agente único o en combinación con azacitidina como se describe en el Ejemplo 10. Como se muestra en la Figura 8D, la azacitidina no alteró la farmacocinética de Compuesto 1, observándose concentraciones constantes en plasma del Compuesto 1 durante la duración del tratamiento. La Figura 11A es un gráfico que muestra la concentración en estado estacionario de Compuesto 1 medida en pacientes en diversos puntos durante el Curso de T ratamiento descrito en el ensayo clínico del Ejemplo 10, representando cada punto un número de ciclo y un número de día (cada ciclo es de 28 días consecutivos de administración de 150 mg BID de Compuesto 1). La concentración en estado estacionario de Compuesto 1 permaneció por encima del nivel mínimo deseado (línea discontinua inferior) y el nivel máximo deseado (línea discontinua superior).

Compuesto 1, con una semivida plasmática de ~60 horas, alcanzó la concentración en estado estacionario dentro de las 2 semanas posteriores a la dosificación y se mantuvo constante durante la duración del tratamiento. Con 150 mg BID (RP2D) como agente único, las concentraciones plasmáticas en estado estacionario están por encima de la Ceff preclínica, lo que da como resultado una reducción de > 90 % en el 2-HG plasmático y por debajo de los niveles de Compuesto 1 previstos, en NHP, como un riesgo de prolongación del QTc . Con 150 mg BID como agente único, se logró una reducción significativa (p < 0,0009) en los niveles plasmáticos de 2-HG al final del Ciclo 1 y se mantuvo durante la duración del tratamiento. La terapia de combinación de azacitidina más Compuesto 1, 150 mg BID, logró concentraciones de Compuesto 1 en estado estacionario por encima del Ceff preclínico, lo que resultó en una reducción de > 90 % en el 2-HG plasmático y por debajo de los niveles del Compuesto 1 que se pronosticó como un riesgo de prolongación del QTc. Se observó una reducción significativa (p < 0,0001) en los niveles plasmáticos de 2-HG al final del Ciclo 1 con la combinación de Compuesto 1 (150 mg BID) y azacitidina y se mantuvo durante la duración del tratamiento. Sin embargo, se ha observado una tasa de disminución más lenta en comparación con Compuesto 1 como agente único..

En la Figura 12A se presenta la relación PK/PD de la concentración de Compuesto 1 y 2-HG en plasma de sujetos individuales en los grupos de tratamiento con un agente único e independientemente del tiempo de tratamiento. Las concentraciones de Compuesto 1 < 1000 ng/mL corresponden a evaluaciones de momentos tempranos (C1D0 -C1D15). No se observa una correlación entre la exposición y la reducción de 2-HG hasta que las concentraciones de Compuesto 1 cruzaron la Ceff predicha por los modelos in vivo para dar como resultado una reducción de > 90 % en los niveles plasmáticos de 2-HG. Como se muestra en la Figura 12A, no se observa una correlación de la exposición a la reducción de 2-HG hasta que las concentraciones de Compuesto 1 cruzaron la Ceff predicha por los modelos in vivo para dar como resultado una reducción de > 90 % en los niveles de 2-HG en plasma. La exposición-respuesta máxima y más consistente se observó en la mediana de Css de Compuesto 1 con 150 mg BID (RP2D).

En la Figura 12B se presenta la relación PK/PD de la concentración de Compuesto 1 y 2-HG en plasma de sujetos individuales a través de la combinación de los grupos de tratamiento de Compuesto 1 y azacitidina e independientemente del tiempo de tratamiento. Las concentraciones de Compuesto 1 < 1000 ng/mL corresponden a evaluaciones de momentos tempranos (C1D0 - C1D15). No se observa una correlación entre la exposición y la reducción de 2-HG hasta que las concentraciones de Compuesto 1 cruzaron la Ceff predicha por los modelos in vivo para dar como resultado una reducción de > 90 % en los niveles plasmáticos de 2-HG. La exposición-respuesta máxima y más consistente se observó en la mediana de Css de Compuesto 1 con 150 mg BID (RP2D).

Las Figuras 13A y 13C son gráficos que muestran los resultados del ensayo clínico en el Ejemplo 10, que muestran la administración de 150 mg BID. Compuesto 1 (forma sólida que se puede obtener del Ejemplo 1) se administró como agente único a múltiples pacientes durante un Curso de Tratamiento con tiempos que tienen una mediana de 94 días y un intervalo de 1 a 586 días. Aproximadamente el 32 % de los pacientes siguen en tratamiento.

La Figura 13B representa las respuestas para pacientes con AML recidivante o refractaria (R/R) y muestra que se observó una duración prolongada del tratamiento con Compuesto 1 con una primera respuesta que se produjo dentro de los 2 meses de tratamiento con Compuesto 1. Se observó que las respuestas < CR/CRi se profundizaron con tratamiento continuo que resultó en una tasa de CR/CRh/CRi del 41 % en AML R/R . Se observó un beneficio clínico (SD > 8 semanas) en sujetos sin una respuesta definida IWG. El 10 % de los pacientes (1 AML y 2 MDS) permanecieron en tratamiento. Interrupción del Tratamiento: Enfermedad Progresiva (PD, por sus siglas en inglés) (9), muerte (6), trasplante (4), eventos adversos (AE, por sus siglas en inglés) (3), decisión del investigador (2), retiro del consentimiento (1) y falta de respuesta (3 ).

Sumario de la respuesta para Compuesto 1 como agente único

Tabla 4

La administración de Compuesto 1 a 150 mg BID en el ensayo clínico del Ejemplo 10 redujo los niveles medidos de 2-HG en la sangre de los pacientes como se muestra en las Figuras 9A-9D y las Figuras 10B-10C. Los niveles de 2-HG medidos en la sangre de los pacientes durante este ensayo clínico del Ejemplo 10 se muestran en las Figuras 9A-9D, demostrando la reducción de los niveles de 2-HG en aproximadamente 1-2 ciclos de tratamiento de 28 días (se administran 150 mg de Compuesto 1 BID cada día durante 28 días consecutivos para cada uno de los ciclos de tratamiento tal como se describe en el Ejemplo 10).

Las Figuras 10B-10C son cada una un gráfico que muestra la concentración de 2-HG medida en la sangre de pacientes que reciben una de tres dosis e intervalos de dosis diferentes: 150 mg QD, 300 mg QD o 150 mg BID (que reciben Compuesto 1 como agente único o en combinación con azacitidina como se describe en el ensayo clínico del Ejemplo 10, en cada categoría). Los niveles de 2-HG se miden antes de la administración de Compuesto 1 y luego se miden después de la administración de Compuesto 1 hasta el ciclo 2, el día 1 después de recibir por primera vez Compuesto 1 (como la forma sólida obtenida del Ejemplo 1).

La invención se basa en parte en el descubrimiento de que la administración de Compuesto 1 a 150 mg BID dio como resultado un nivel de exposición en sangre más alto que 150 mg QD o 300 mg BID el día 15. Véase, por ejemplo, la Figura 10A. La administración de Compuesto 1 a 150 mg QD BID resultó en un nivel de exposición en sangre de < 3000 ng/mL el día 15. La administración de Compuesto 1 a 300 mg QD BID no resultó en niveles sanguíneos mejorados el día 15. Por el contrario, la administración de Compuesto 1 a 150 mg BID resulta en un nivel de exposición en sangre de >3000 ng/mL el día 15. Además, la invención se basa en parte en el descubrimiento de que la administración de Compuesto 1 a 150 mg BID resultó en un nivel más bajo de 2-HG en plasma que 150 mg QD o 300 mg BID el día 15. Véase, por ejemplo, la Figura 10B.

La forma de dosificación oral de Compuesto 1 (Ejemplo 1) se administró a pacientes humanos como agente único (150 mg QD, 300 mg QD, 150 mg BID y 100 mg QD hasta la progresión de la enfermedad) en un ensayo clínico con seres humanos que trata AML/MDS en pacientes con cáncer que alberga una mutación mlDH1, como se describe en los Ejemplos que figuran más adelante. La Figura 10A es un gráfico que muestra la concentración de Compuesto 1 medido en la sangre de pacientes después de recibir Compuesto 1 (como la forma sólida obtenida del Ejemplo 1) en una de tres dosis e intervalos de dosis diferentes: 150 mg QD, 300 mg QD o 150 mg BID (que reciben Compuesto 1 como agente único o en combinación con azacitidina como se describe en el ensayo clínico del Ejemplo 10, en cada categoría).

La presente divulgación incluye métodos para tratar la AML o MDS en pacientes que tienen una o más mutaciones R132X en mlDH-1 (p. ej., medidas en una muestra de tejido obtenida del paciente) y/o niveles elevados de 2-HG (p. ej., niveles de 2-HG medidos en una muestra de sangre por encima de aproximadamente 180 ng/mL), que comprende la administración de Compuesto 1 solo (p. ej., como agente único) o en combinación con azacitidina o citarabina. Para los métodos en los que Compuesto 1 se administra como una combinación, el sujeto al que se administra Compuesto 1 puede estar recibiendo o recibió previamente un tratamiento con azacitidina o citarabina.

Los métodos de tratamiento pueden incluir la administración de Compuesto 1 de manera que el día 1 del ciclo 4 de ciclos de tratamiento repetidos de 28 días (o el día 1 de cualquier ciclo posterior), la concentración mínima en plasma sanguíneo de Compuesto 1 no haya disminuido más de aproximadamente 5-25 %, aproximadamente 5-20 %, aproximadamente 5-15 %, aproximadamente 5-10 %, aproximadamente 10-25 %, aproximadamente 10-20 % o aproximadamente 10-15 %, en comparación con la concentración mínima en plasma sanguíneo el día 1 del ciclo 2. Preferiblemente, a los pacientes que albergan una mutación R132X en mlDH-1 se les puede administrar 150 mg de Compuesto 1 dos veces al día (BID) todos los días en días consecutivos (sin vacaciones) durante uno o más ciclos continuos de 28 días.

Compuesto 1 se puede administrar a determinados pacientes en combinación con un agente hipometilante tal como azacitidina. Las mutaciones de IDH1 (p. ej., en pacientes con AML o MDS que albergan una mutación R132X en mlDH-1) pueden resultar en una hipermetilación anormal de histonas y ADN y la supresión de la diferenciación celular normal. La combinación de Compuesto 1 y azacitidina se puede administrar para el tratamiento de pacientes con AML que albergan mutaciones en IDH1. Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, solo o en combinación con azacitidina (administrada a la dosis de 75 mg/m2 durante 7 días IV/SC por cada ciclo de 28 días). Por ejemplo, Compuesto 1 se puede administrar a una dosis de 150 mg BID en combinación con azacitidina (azacitidina administrada según el estándar de atención para un paciente). La Figura 14 es un gráfico que muestra los resultados del ensayo clínico en el Ejemplo 10, que muestra la administración de 150 mg BID de Compuesto 1 (forma sólida que se puede obtener del Ejemplo 1) en combinación con la administración de azacitidina (administrada a la dosis de 75 mg/m2 durante 7 días IV/SC por cada ciclo de 28 días), administrado a múltiples pacientes durante un Curso de Tratamiento con tiempos que tienen una mediana de 87 días y un intervalo de 10 a 351 días. Aproximadamente el 48 % de los pacientes siguen en tratamiento.

Como se muestra en la Figura 13B, tras una mayor duración del tratamiento, las respuestas clínicas observadas en AML y MDS R/R o TN: citopenias asociadas con azacitidina pueden influir en la profundidad de la respuesta de IWG. Se observó una ORR del 46 % para la combinación de Compuesto 1 con azacitidina en AML R/R y una ORR del 78 % en AML TN (RC/CRi del 66 %). La interrupción del tratamiento fue provocada por: PD (6), trasplante (6), decisión del investigador (5), muerte (4), AE (2), y otros: fracaso del tratamiento, hospicio, otro tratamiento (1 cada uno). El 37 % de los pacientes (AML y MDS) permanecieron en tratamiento.

Tabla 5- Sumario de la Respuesta para Compuesto 1 como agente único

En algunos métodos, Compuesto 1 se puede administrar con citarabina. Se puede administrar citarabina en dosis bajas (LDAC, por sus siglas en inglés) a determinados pacientes con AML (p. ej., pacientes con AML de aproximadamente 60 años de edad o más que no son candidatos para terapia intensiva y que albergan una mutación R132X en mlDH-1). La combinación terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 con LDAC se puede administrar a pacientes con AML que albergan la mutación en IDH1. Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, solo o en combinación con LDAC (administrado a la dosis de 20 mg BID SC durante 10 días cada ciclo de 28 días) hasta la interrupción del tratamiento.

Los sujetos que son tratados de acuerdo con los métodos proporcionados y las terapias combinadas pueden tener AML o MDS en recaída o refractarios, o MDS de "alto riesgo", y pueden haber sido tratados previamente con un inhibidor de mlDH1. Dicha AML o MDS refractario (i) puede no haber recibido terapia previa con hipometilación y terapia con inhibidores de IDH1 y/o (ii) puede haber mostrado una respuesta inadecuada o haber progresado inmediatamente antes de la terapia con hipometilación. Los métodos proporcionados y las terapias de combinación se pueden utilizar para tratar sujetos con mutaciones residuales de IDH-R132. Los métodos proporcionados y las terapias de combinación también se pueden utilizar para tratar sujetos con AML o MDS en remisión morfológica completa o remisión completa con recuperación incompleta del hemograma (CR/CRi) después de la terapia de inducción que contiene citotóxicos.

Los métodos de tratamiento se basan en parte en un estudio clínico en seres humanos de la administración de Compuesto 1 en 3 fases: una fase de escalada de dosis de fase 1, una fase de expansión de dosis de fase 1 y una fase de fase 2, como se describe más detalladamente en los Ejemplos. El aumento de la dosis de Compuesto 1 como agente único se administró en dosis una vez al día (QD) de 150 y 300 mg, una dosis dos veces al día (BID) de 150 mg o una dosis una vez al día de 100 y 150 mg con alimentos para mejorar potencialmente la biodisponibilidad. Durante el curso del aumento de la dosis del agente único, se puede iniciar un brazo de aumento paralelo para Compuesto 1 en combinación con azacitidina. Esta combinación se puede iniciar una vez que se completa la primera cohorte de nivel de dosis de Compuesto 1 en el programa de agente único (150 mg QD). Una vez que se identifica la dosis máxima tolerada o la dosis máxima evaluada para las cohortes de agente único y de combinación, se pueden inscribir poblaciones seleccionadas de pacientes en cohortes de expansión de dosis de fase 1 en las dosis seleccionadas de agente único o combinación, para caracterizar adicionalmente el perfil de seguridad y confirmar la dosis de fase 2 recomendada. Después de seleccionar la dosis de fase 2 recomendada en combinación con azacitidina, se trata una cohorte de 6 pacientes con Compuesto 1, a esa dosis, en combinación con una dosis baja de citarabina. En la parte de la Fase 2, se inscriben poblaciones específicas de pacientes con AML/MDS que albergan mutaciones IDH1-R132 para recibir Compuesto 1 ya sea como agente único o en combinación con azacitidina en las dosis recomendadas de la fase 2.

Como se esboza en los Ejemplos 10 y 12, Compuesto 1 demuestra actividad clínica como agente único en una población de Fase 1 de alto riesgo de pacientes con AML/MDS con mutación en IDH1. Se observó un 41 % de CR/CRh/CRi en AML R/R (35 % en todos los AML/MDS) en pacientes tratados con Compuesto 1 como agente único. Se observó independencia transfusional tanto en respondedores como en no respondedores del IWG. Se observó control duradero de la enfermedad o enfermedad estable de 4 a 12 meses o más en AML R/R. Una reducción observada en los blastos de la médula ósea respalda el beneficio clínico para los pacientes. Compuesto 1 fue bien tolerado por los pacientes que mantuvieron el tratamiento durante una mediana de 5,6 meses, lo que probablemente contribuyó a la tasa y profundidad (CR/CRh) de la respuesta. La exposición a Compuesto 1 en plasma se correlaciona con la respuesta de 2-HG. La reducción en Css de 2-HG de Compuesto 1 admite 150 mg B ⁱD como la dosis y el programa seleccionado para la evaluación en el ensayo global de Fase 2 descrito en la Figura 7B.

Como se esboza en los Ejemplos 10 y 12, la combinación de Compuesto 1 y azacitidina demuestra actividad clínica en una población de Fase 1 de alto riesgo de pacientes con AML/MDS con mutación en IDH1. Los pacientes mantuvieron el tratamiento durante una mediana de 5 meses. Se observó un control duradero de la enfermedad (> 6 meses) en ausencia de respuesta IWG. Se observó 46 % de ORR y 35 % de CR/CRh/CRi en AML R/R, 78 % de ORR en AML TN. Compuesto 1 se tolera bien en combinación con azacitidina y posee un bajo riesgo de prolongación del intervalo QT (se informaron 2 AEs). La combinación de azacitidina aumentó moderadamente los eventos adversos emergentes del tratamiento metabólico y gastrointestinal (TEAEs, por sus siglas en inglés). Se observaron tasas más altas de neutropenia en comparación con el tratamiento con SA (Grado 3/4 17 % frente a 6 %), lo que puede estar afectando la respuesta de profundidad (CR/CRh). La exposición a Compuesto 1 en plasma demostró que se correlaciona con la respuesta de 2-HG. La reducción en Css de Compuesto 1 de 2-HG apoya la selección de 150 mg BID como RP2D.

En algunas realizaciones, la presente divulgación proporciona adicionalmente métodos para tratar AML o MDS en un paciente que alberga mutaciones en isocitrato deshidrogenasa 1 (mIDH1), que pueden comprender administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 cada día durante al menos tres ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días consecutivos cada uno. La administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 puede dar como resultado que el paciente tenga una concentración mínima duradera y terapéuticamente eficaz en el plasma sanguíneo de Compuesto 1 en el paciente a lo largo del curso del tratamiento.

En algunas realizaciones, la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 puede dar como resultado que el nivel de 2-HG en el plasma del paciente se mantenga en o por debajo de aproximadamente 200 ng/mL al comienzo del tercer ciclo de tratamiento consecutivo (p. ej., antes de la dosificación el día 15 o Ciclo 3, Día 1), y la concentración de plasma sanguíneo en estado estacionario de Compuesto 1 en el paciente se mantiene en o por encima de aproximadamente 2000 ng/mL y por debajo de aproximadamente 7500 ng/mL (preferiblemente, por debajo de aproximadamente 7200 ng/mL).a lo largo del curso de tratamiento. En algunas realizaciones, la concentración de plasma sanguíneo en estado estacionario de Compuesto 1 en el paciente se mantiene en o por encima de aproximadamente 1652 ng/mL y por debajo de aproximadamente 7840 ng/mL a lo largo del curso de tratamiento.

Mantenimiento de Concentraciones de Plasma Sanguíneo Terapéuticamente Eficaces de Compuesto 1 a lo Largo de un Curso de Tratamiento

La invención se basa en parte en el descubrimiento de que la administración oral de Compuesto 1 (en la forma de dosificación oral farmacéuticamente aceptable resultante del método de preparación del Ejemplo 1) a seres humanos puede proporcionar concentraciones en sangre en estado estacionario (mínimas) por encima de una cantidad terapéuticamente eficaz (p. ej., por encima de la concentración CI⁹⁰para R132H y/o R132C de mIDH-1, y/o concentraciones superiores a aproximadamente 2000 ng/mL a lo largo de un curso de tratamiento de hasta al menos 30 semanas y más partiendo de la administración inicial de Compuesto 1. Compuesto 1 se puede administrar a pacientes que tienen niveles elevados de 2-HG en sangre (es decir, por encima de aproximadamente 180 ng/mL), lo que conduce a una reducción de los niveles de 2-HG en sangre dentro de los15 días consecutivos a partir del primer día de la administración de Compuesto 1, seguido por el mantenimiento de los niveles de 2-HG por debajo de 200 ng/mL a lo largo del curso de tratamiento subsiguiente. Alternativamente, Compuesto 1 se puede administrar a pacientes que tienen niveles elevados de 2-HG en sangre (es decir, por encima de aproximadamente 180 ng/mL), lo que conduce a una reducción de los niveles de 2-HG en sangre dentro de los15 días consecutivos a partir del primer día de la administración de Compuesto 1, seguido por el mantenimiento de los niveles de 2-HG por debajo de 180 ng/mL a lo largo del curso de tratamiento consiguiente. Compuesto 1 se administró en una forma de dosificación oral (que se puede obtener a partir del método del Ejemplo 1) dos veces al día (150 mg BID). Después de los 15 días iniciales de tratamiento con 150 mg BID de esta forma de dosificación oral de Compuesto 1, la concentración en sangre en estado estacionario (mínima) de Compuesto 1 (antes de la dosis) se mantuvo por encima de aproximadamente 2000 ng/mL y muy por debajo del umbral predicho para el riesgo de QTc (p. ej., por debajo de aproximadamente 7200 ng/mL) a lo largo de un curso de tratamiento (p. ej., al menos hasta aproximadamente 30 semanas o más, incluyendo 12-30 semanas o hasta 6 meses o más, desde la administración inicial de Compuesto 1). Alternativamente, después de los 15 días iniciales de tratamiento con 150 mg BID de esta forma de dosificación oral de Compuesto 1, la concentración en sangre en estado estacionario (mínima) de Compuesto 1 (antes de la dosis) se mantuvo por encima de aproximadamente 1652 ng/mL y muy por debajo del umbral predicho para el riesgo de QTc (p. ej., por debajo de aproximadamente 7840 ng/mL) a lo largo de un curso de tratamiento (p. ej., al menos hasta aproximadamente 30 semanas o más, incluyendo 12-30 semanas o hasta 6 meses o más, desde la administración inicial de Compuesto 1). En algunas realizaciones de los métodos de tratamiento descritos en esta memoria, la concentración en sangre en estado estacionario de Compuesto 1 después del día 15 se mantiene en más de aproximadamente 10 veces las concentraciones en sangre medidas de 2-HG en el paciente (p. ej., en o por debajo de aproximadamente 200 ng/mL). Una Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1 proporciona administrar a un paciente que lo necesite una dosis total de 150 mg BID de una forma farmacéuticamente aceptable de Compuesto 1 proporcionada en el Ejemplo 1 en una forma de dosificación oral, en días consecutivos a lo largo de un Curso de Tratamiento. Compuesto 1 es preferiblemente el único inhibidor de IDH-1 mutante (mIDH-1) que tiene una o más mutaciones R132X en mlDH-1 administradas al paciente a lo largo del Curso de Tratamiento de la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mlDH-1. A menos que se indique lo contrario, el inhibidor selectivo de mlDH-1 (p. ej., Compuesto 1) se puede administrar como agente único como Terapia de Inhibidor Selectiva de R132X en mlDH-1, o en combinación con otros agentes terapéuticos que no son inhibidores de mlDH-1 como una combinación para la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mlDH-1.

Compuesto 1 es un inhibidor de moléculas pequeñas potente y selectivo de determinadas formas mutadas de la enzima isocitrato deshidrogenasa 1 (IDH-1). Compuesto 1 inhibe selectivamente las enzimas IDH-1 mutantes en comparación con la enzima IDH-1 de tipo salvaje, fijando como objetivo las variantes de IDH-1 mutantes definidas en esta memoria como Mutación(es) R132X en mlDH-1. El Ejemplo 2 proporciona datos in vitro que demuestran la inhibición de diversas mutaciones R132X de la enzima mlDH-1. Por ejemplo, Compuesto 1 fija como objetivo las variantes R132H, R132C, R132L, R132G y R132S de IDH-1 mutante utilizando los ensayos descritos en el Ejemplo 2 con concentraciones de CI⁵⁰que son aproximadamente al menos 180 veces más bajas que la enzima IDH-1 de tipo salvaje. in vitro. Además, Compuesto 1 fija como objetivo las mutaciones R132H y R132C de IDH-1 a concentraciones de CI⁵⁰que demuestran selectividad sobre la enzima IDH-1 de tipo salvaje in vitro (basado en mediciones de CI⁵⁰según se determina en el Ejemplo 2 basado en promedio /- SEM, nM). Por consiguiente, mutaciones R132X preferidas incluyen R132H y R¹32^c, así como R132L, R132G y R132S (u otras mutaciones R132X que tienen valores de C⁵⁰de 2-HG terapéuticamente relevantes, obtenidos utilizando el ensayo in vitro del Ejemplo 2). Además, Compuesto 1 inhibe selectivamente la IDH-1 mutante en comparación con las formas IDH-2 mutantes. La selectividad de Compuesto 1 frente a otras isoenzimas IDH se testó utilizando ensayos acoplados a diaforasa que empleaban IDH-1 de tipo salvaje o una de las 2 formas mutadas alternativas de IDH-2 (R140Q y R172K). El compuesto 1 tenía una actividad muy débil contra IDH-1 de tipo salvaje o mutación R172K en IDH-2 (con mediciones enzimáticas de CI⁵⁰obtenidas de acuerdo con el Ejemplo 2 de aproximadamente 20-25 micromolar, en comparación con valores de CI⁵⁰de menos de aproximadamente 150 nanomolar obtenidos para las Mutaciones R132X en m-IDH-1). Además, Compuesto 1 no mostró inhibición alguna de R140Q en IDH-2 hasta una concentración de 100 micromolar. Estos datos de selectividad demuestran que Compuesto 1 es un inhibidor potente y selectivo de enzimas que albergan Mutaciones R132X en mlDH-1.

La Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en m IDH-1 (agente único o combinación) se puede administrar a pacientes adultos con una mutación en IDH-1 detectada mediante un test médico adecuada (p. ej., aprobado por la FDA) para mutaciones en mlDH-1. Preferiblemente, el test es un diagnóstico que identifica una o más Mutaciones R132X en mlDH-1 en el paciente antes de la administración de Compuesto 1. Preferiblemente, se identifica que el paciente alberga una o más Mutaciones R132X en mlDH-1 basado en la detección de la Secuenciación de Próxima Generación (NGS) en una muestra de tejido obtenida del paciente antes de la administración de Compuesto 1 y/o la administración de cualquier Terapia de Inhibidor selectivo de R132X en mIDH-1.

Un paciente que necesita Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1 puede tener un nivel elevado de 2-HG medido en el paciente (p. ej., en el plasma sanguíneo del paciente) antes de iniciar cualquier Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1. Preferiblemente, el nivel de 2-HG medido en la sangre del paciente disminuye durante las primeras 2 semanas del Curso de Tratamiento de una Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1. Por ejemplo, un paciente puede tener un nivel de concentración en sangre medido de 2-HG superior a aproximadamente 200 ng/mL de 2-HG antes de la administración de Compuesto 1 de conformidad con la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1 para el paciente que lo necesite, y un nivel de concentración en sangre medido de 2-HG de menos de aproximadamente 200 ng/mL durante un Curso de Tratamiento de una Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1. Por ejemplo, en el ensayo clínico en seres humanos descrito en el Ejemplo 3, todos los pacientes IDH-1m+ tenían niveles elevados de 2-HG, que se redujeron con el tratamiento con Compuesto 1 el día 15 del Curso de Tratamiento, y aproximadamente el 30 % demostró una respuesta al administración de Compuesto 1 en algún momento durante el Curso de Tratamiento. En esta población de pacientes, el 2-HG normal medido en la sangre del paciente en CRL fue de aproximadamente 70 ± 17 ng/mL; el más alto observado fue de aproximadamente 91 ng/mL y el más bajo fue de aproximadamente 43 ng/mL. Preferiblemente, la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1 consiste en la administración del Compuesto 1 (es decir, Compuesto 1 es el único inhibidor de mlDH-1 administrado al paciente a lo largo del Curso de Tratamiento).

Compuesto 1 se administra durante un Curso de Tratamiento terapéuticamente eficaz, que preferiblemente es lo suficientemente largo como para proporcionar y mantener un efecto terapéutico pretendido. Por ejemplo, el Curso de Tratamiento puede ser lo suficientemente largo como para reducir terapéuticamente los niveles elevados de 2-HG en un paciente (p. ej., reducir los niveles de 2-HG medidos en el plasma sanguíneo del paciente por debajo de aproximadamente 200 ng/mL), con administración continua de Compuesto 1 al paciente de una manera que proporcione niveles de concentración en plasma sanguíneo en estado estacionario terapéuticamente eficaces de Compuesto 1 (p. ej., concentraciones mínimas en plasma sanguíneo mayores que el valor de la concentración CI⁹⁰para la producción de 2HG medido para una mutación R132X en IDH-1 identificada en células obtenidas del paciente). Cuando se tratan pacientes con niveles elevados de 2-HG medidos en la sangre del paciente antes de la administración de Compuesto 1, el Curso de Tratamiento puede ser de al menos un cierto número de días consecutivos a partir de la administración inicial de Compuesto 1 al paciente con niveles elevados de 2-HG. y continuar con la administración diaria de Compuesto 1 (p. ej., 150 mg BID) durante al menos un cierto número de días eficaz para reducir los niveles de 2-HG medidos en la sangre del paciente a menos de aproximadamente 200 ng/mL (preferiblemente menos de 180 ng/mL) y/o un nivel considerado médicamente apropiado para el paciente (p. ej., a un rintervalo determinado como médicamente normal para ese paciente en el paradigma de tratamiento). Preferiblemente, el Curso de Tratamiento es de al menos 15 días consecutivos a partir del día de la administración inicial de Compuesto 1 al paciente y comprende 150 mg de la forma de dosificación oral sólida del Compuesto 1 (p. ej., Ejemplo 1) administrados al paciente dos veces al día (p. ej., cada 12 horas) todos los días durante al menos 15 días. El Curso de Tratamiento puede ser uno o más ciclos de tratamiento de 28 días de administración diaria BID de 150 mg de Compuesto 1 en la forma de dosificación oral sólida obtenida del Ejemplo 1. El Curso de Tratamiento puede continuar a lo largo de un número médicamente apropiado de días para un paciente. Por ejemplo, el Curso de Tratamiento puede durar cualquier número médicamente apropiado de ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días, incluyendo un Curso de Tratamiento que dura 1,2, 3, 4, 5, 6 ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días cada uno, y/o un Curso de Tratamiento de 20 semanas, y/o un Curso de Tratamiento de 6 meses o más. En algunos métodos, el Curso de Tratamiento es de al menos 6 meses, o entre al menos 15 días consecutivos y 6 meses de días consecutivos de tratamiento que comprende la administración de 150 mg BID de Compuesto 1 en una forma farmacéutica obtenida del Ejemplo 1.

La Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mlDH-1 (p. ej., la administración oral de 150 mg BID de Compuesto 1 a lo largo de un Curso de Tratamiento) proporcionó niveles de concentración en sangre inesperadamente duraderos a lo largo del Curso de Tratamiento superior a 6 meses. El nivel de concentración en sangre en estado estacionario durante el Curso de Tratamiento fue duradero, lo que significa que la concentración en sangre en estado estacionario de Compuesto 1 no disminuyó en más del 10 % a lo largo de un Curso de Tratamiento con la administración continua del Compuesto 1 a una dosis de 150 mg. BID cada día, mientras permanece dentro de una ventana de concentración terapéutica definida por una concentración mínima por encima de la CI⁹⁰determinada in vitro para la producción de 2-HG de una mutación R132X en mlDH-1 albergada por el paciente (p. ej., por encima de aproximadamente 2000 ng/mL 0 por encima de aproximadamente 1652 ng/mL) y un valor de concentración máxima por debajo de la concentración asociada con un riesgo médicamente inaceptable de prolongación del intervalo QTc (p. ej., aproximadamente 7200 ng/mL o aproximadamente 7840 ng/mL).

Además, la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-lpuede reducir los niveles de 2-HG en la sangre del paciente, aunque esta reducción no se correlacionó con la respuesta de la enfermedad en los pacientes durante el Curso del Tratamiento. Como se muestra en las Figuras 9A-9D, la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mlDH-1 proporcionó una reducción sostenida en los niveles de 2HG, lo que significa que niveles elevados de concentración sanguínea de 2-HG en el plasma sanguíneo del paciente se redujeron en relación con los niveles previos a la dosis durante la parte inicial de un Curso de Tratamiento (p. ej., dentro de los primeros 15 días) y luego se mantiene en o por debajo de aproximadamente el nivel previo a la dosis durante el resto del Curso de Tratamiento (p. ej., en o por debajo de aproximadamente 200 ng/mL durante 6 ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días o en o por debajo de aproximadamente 180 ng/mL durante 6 ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días).

Las Figuras 8A-8E son un gráfico que muestra la concentración en sangre en estado estacionario (mínima) medida en pacientes después de la administración de 150 mg de Compuesto 1 BID, como se describe en el ensayo clínico con seres humanos del Ejemplo 10. Las Figuras 8A-8E son gráficos diferentes, cada uno de los cuales muestra la concentración en sangre en estado estacionario de Compuesto 1 medida en la sangre del paciente para una colección de pacientes en el ensayo clínico con seres humanos descrito en el Ejemplo 10. Las Figuras 8A-8E son gráficos que muestran las concentraciones en sangre en estado estacionario medidas en cada uno de los pacientes individuales incluidos en la población, en los momentos indicados, en el ensayo clínico con seres humanos del Ejemplo 10. En particular, la concentración sanguínea en estado estacionario de Compuesto 1 se mantuvo por encima de un valor mínimo terapéutico (p. ej., el valor CI⁹⁰para la producción de 2-HG por al menos uno de los mutación(es) R132X identificada(s) en el tejido del paciente antes de la administración de Compuesto 1) a lo largo del Curso de Tratamiento (p. ej., 30 semanas). En particular, la administración de Compuesto 1 en la forma de dosificación oral descrita en el Ejemplo 1 a 150 mg BID dio como resultado una concentración plasmática mínima terapéuticamente eficaz sostenida por encima de 2000 ng/mL a lo largo de un Curso de Tratamiento de 30 semanas, como se muestra en las Figuras 8A- 8E (p. ej., incluso después del ciclo 3 de un ciclo de tratamiento de 28 días, después de la semana 20 y continuando hasta la semana 30). Las mediciones de la concentración mínima de Compuesto 1 en la sangre del paciente no descendieron por debajo de un nivel terapéuticamente eficaz en cada punto medido durante el Curso de Tratamiento. Haciendo referencia a las Figuras 9A-9D, la administración de Compuesto 1 en la forma de dosificación oral del Ejemplo 1 a 150 mg BID en el ensayo clínico con seres humanos del Ejemplo 10 dio como resultado un nivel sostenido de 2-HG por debajo de 200 ng/mL en plasma durante todo el Curso. de Tratamiento que van desde el ciclo 2, día 1 hasta el ciclo 8, día 1 (cada uno de los ciclos representa 28 días consecutivos de administración oral de 150 mg BID de la forma sólida de Compuesto 1 que se puede obtener del método de producción del Ejemplo 1).

La invención se basa en parte en el descubrimiento de que una Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mlDH-1, en que Compuesto 1 es el único inhibidor de mIDH-1 administrado (administración de Compuesto 1 a 150 mg BID) dio como resultado inesperadamente una concentración sanguínea en estado estacionario que era duradera (p. ej., la concentración en estado estacionario de Compuesto 1 en el plasma sanguíneo se mantiene dentro del 20 % (o no disminuye en más del 20 %) y preferiblemente permanece dentro del 10 % (o no disminuye en más del 10 %) de la concentración medido el día después del ciclo inicial de 28 días en un Curso de Tratamiento). Además, la administración de Compuesto 1 como se describe en el Ejemplo 10 redujo las concentraciones elevadas de 2-HG en la sangre de los pacientes en aproximadamente 15 días y luego mantuvo las concentraciones de 2-HG en la sangre del paciente a menos de aproximadamente 200 ng/mL después de aproximadamente 15 días de un Curso de Tratamiento.

La Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mlDH-1 puede proporcionar una relación sostenida de más de aproximadamente 10 (preferiblemente más de aproximadamente 20) de la concentración en plasma sanguíneo de Compuesto 1 (p. ej., concentraciones mínimas medidas antes de la dosis a concentraciones de aproximadamente 2000 ng/mL o mayor) al nivel sanguíneo de 2-HG (p. ej., concentraciones plasmáticas de aproximadamente 200 ng/mL o menos, incluyendo concentraciones aproximadamente de 100 ng/mL) después del ciclo 3 día 1 (es decir, después de las dosis BID administradas durante los 15 primeros días consecutivos de tratamiento) de un ciclo de tratamiento de 28 días. Se estimó una semivida plasmática de aproximadamente 60 horas para Compuesto 1, y se alcanzó el estado estacionario en la semana 2 del curso del tratamiento. Las concentraciones sanguíneas en estado estacionario de Compuesto 1 medidas en los pacientes estaban por encima del valor CI⁹⁰para la inhibición de 2-HG en células R132X mlDH-1 (descritas en los Ejemplos). Como se muestra en las Figuras 8A-8E, las exposiciones en plasma (concentración en plasma sanguíneo en estado estacionario) de Compuesto 1 fueron duraderas (es decir, sostenidas) a lo largo de las 30 semanas de duración del tratamiento. Como se muestra en las Figuras 9A-9D, las concentraciones de 2-HG en plasma se redujeron al intervalo normal dentro de 1 ciclo (C2D1) y se mantuvieron durante toda la duración del tratamiento. No se observaron toxicidades limitantes de la dosis de Compuesto 1 durante los estudios de aumento de la dosis, y no se alcanzó la dosis máxima tolerada (MTD, por sus siglas en inglés) de Compuesto 1. Preferiblemente, la Terapia de Inhibidor Selectivo de R132X en mIDH-1 puede administrarse a un paciente que no haya recibido cualquier otro compuesto inhibidor de R132X en mIDH-1.

Como se describe en el Ejemplo 10, la Figura 11A muestra la relación de la concentración en sangre en estado estacionario de Compuesto 1, normalizada a 1,0 utilizando la concentración medida el día 15 de un Curso de Tratamiento, para un único paciente que recibió 150 mg BID de la forma sólida de Compuesto 1 obtenible del Ejemplo 1 a lo largo de un Curso de Tratamiento de más de 300 días (es decir, más de 6 meses). La exposición (concentración) en sangre en estado estacionario de Compuesto 1 varió de aproximadamente el 90-133 % de la concentración de Compuesto 1 medida en el paciente en el ciclo 1, día 15, durante el resto posterior de este Curso de T ratamiento.

Opcionalmente, también se puede administrar al paciente un agente hipometilante y/o un inhibidor de la síntesis de ácidos nucleicos durante el Curso de Tratamiento. Agentes adecuados que también se pueden administrar durante el Curso de Tratamiento incluyen azacitabina y/o decitabina .

En algunas realizaciones, se puede administrar una terapia de combinación de Compuesto 1 y azacitidina para el tratamiento de pacientes con determinadas formas de cáncer (p. ej., glioma) que albergan mutaciones de IDH-1. Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, en combinación con azacitidina (administrada a la dosis de 75 mg/m2 durante 7 días IV/SC por cada ciclo de 28 días). Se cree que la azacitidina (también, AZA en esta memoria) ejerce sus efectos antineoplásicos provocando hipometilación del a Dn y citotoxicidad directa sobre células hematopoyéticas anormales en la médula ósea. La azacitidina se puede administrar durante un Curso de Tratamiento a una dosis subcutánea de 75 mg/m2 diarios durante 7 días cada 4 semanas. La dosis de azacitidina se puede aumentar a 100 mg/m2 si no se observa efecto beneficioso alguno después de 2 ciclos de tratamiento. La dosis de azacitidina se puede disminuir y/o retrasar en base a la respuesta hematológica o evidencia de toxicidad renal. La azacitidina está indicada para el tratamiento de pacientes con los siguientes subtipos de síndrome mielodisplásico: anemia refractaria o anemia refractaria con sideroblastos en anillo (si va acompañada de neutropenia o trombocitopenia o requieren transfusiones), anemia refractaria con exceso de blastos, anemia refractaria con exceso de blastos en transformación y leucemia crónica mielomonocítica. En algunas realizaciones, un método de tratamiento comprende (a) la administración (p. ej., oral) de un total de 150 mg de Compuesto 1 BID a un paciente a lo largo de un Curso de Tratamiento; y (b) administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de azacitidina al paciente (p. ej., administrar azacitidina a una dosis de 75 mg/m2 diarios durante 7 días cada 4 semanas, en donde la dosis de azacitidina se puede aumentar a 100 mg/m2 si no se observó efecto beneficioso alguno después de 2 ciclos de tratamiento y la dosis de azacitidina se puede disminuir y/o retrasar según la respuesta hematológica o la evidencia de toxicidad renal).

La decacitabina (5-aza-2'-desoxicitidina) es un inhibidor metabólico de nucleósidos indicado para el tratamiento de pacientes con síndromes mielodisplásicos (MDS), incluyendo MDS previamente tratados y no tratados, MDS de novo y secundarios de todos los subtipos franco-estadounidense-británico (anemia refractaria, anemia refractaria con sideroblastos anillados, anemia refractaria con exceso de blastos, anemia refractaria con exceso de blastos en transformación y leucemia mielomonocítica crónica) y grupos del Sistema Internacional de Puntuación de Pronóstico de riesgo intermedio-1, intermedio-2 y alto. En algunas realizaciones, un método de tratamiento comprende la administración (p. ej., oral) de un total de 150 mg de Compuesto 1 BID a un paciente a lo largo de un Curso de Tratamiento; y (b) administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de decacitabina al paciente (p. ej., administrar decacitabina a una dosis de 15 mg/m2 mediante infusión intravenosa continua a lo largo de 3 horas repetida cada 8 horas durante 3 días y repetir este ciclo cada 6 semanas; o administrar la decacitabina a una dosis de 20 mg/m2 por infusión intravenosa continua a lo largo de 1 hora repetida diariamente durante 5 días. (Repetir el ciclo cada 4 semanas).

Glioma

La presente divulgación proporciona métodos para tratar tumores sólidos en el SNC, incluyendo un tumor de cáncer cerebral, que alberga una mutación R132 en IDH-1. Por ejemplo, pacientes a los que se ha diagnosticado cáncer cerebral que albergan una célula cancerosa IDH-1 mutante pueden tratarse con una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 en combinación con azacitidina.

Compuesto 1 es un inhibidor de moléculas pequeñas de formas mutadas de la enzima isocitrato deshidrogenasa 1 (I DH-1), y es útil para el tratamiento de pacientes adultos a los que se ha diagnosticado cáncer que tienen una mutación en IDH-1 detectada por un test aprobado por la FDA. El compuesto 1 puede administrarse a pacientes que lo necesiten en una cantidad terapéuticamente eficaz (p. ej., 150 mg por vía oral dos veces al día hasta la progresión de la enfermedad o una toxicidad inaceptable). Pacientes para el tratamiento del cáncer con Compuesto 1 pueden seleccionarse basándose en la presencia de mutaciones de IDH-1 en la sangre o la médula ósea. En una realización, la dosis inicial recomendada de Compuesto 1 es de 150 mg por vía oral dos veces al día con o sin alimentos hasta la progresión de la enfermedad o una toxicidad inaceptable. Para pacientes sin progresión de la enfermedad o una toxicidad inaceptable, el paciente puede recibir la cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 durante un mínimo de 6 meses para dar tiempo a la respuesta clínica.

La invención se basa en parte en estudios preclínicos que demuestran que Compuesto 1 puede atravesar la barrera hematoencefálica (BBB) en modelos de ratón. La administración oral de Compuesto 1 mostró una alta biodisponibilidad sistémica en múltiples especies preclínicas. La permeabilidad fue excelente, con poca evidencia de eflujo, y se observó una penetración significativa en el cerebro en ratones (98 % de unión al cerebro en un modelo animal murino).

Preferiblemente, los pacientes a los que se ha diagnosticado glioma que albergan una mutación R132 en IDH-1 pueden tratarse con una combinación terapéuticamente eficaz de una composición farmacéutica de Compuesto 1 (p. ej., una forma de dosificación oral que proporciona 150 mg de Compuesto 1 administrado dos veces al día en días consecutivos durante un curso de tratamiento que comprende múltiples ciclos de tratamiento que totalizan al menos 6 meses) y azacitidina. La azacitidina se puede administrar al paciente por vía subcutánea o intravenosa en un ciclo de tratamiento con azacitidina que consiste en la administración de una dosis total de 75 mg/m2 cada día durante 7 días consecutivos comenzando al inicio de cada ciclo de tratamiento, seguido de 21 días consecutivos sin administración de la azacitidina al paciente. Se permite una interrupción de la dosis de azacitidina de 48 horas durante fines de semana o días festivos. Si no se observa respuesta después de 2 ciclos de tratamiento, se puede administrar azacitidina a una dosis total de 100 mg/m2 cada día.

Compuesto 1 se administra preferiblemente en días consecutivos a lo largo de un Curso de Tratamiento. Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión "Curso de Tratamiento" se refiere al período de tiempo en el que se administra Compuesto 1 a un paciente (p. ej., como agente único o en combinación con otro agente terapéutico), incluyendo vacaciones de administración o períodos de recuperación. Un curso de tratamiento puede incluir un único ciclo de tratamiento o múltiples ciclos de tratamiento. Por ejemplo, un Curso de Tratamiento puede comprender uno o más ciclos de tratamiento de 28 días. Adicionalmente, un curso de tratamiento puede incluir un ciclo de tratamiento parcial. El Curso de Tratamiento puede incluir el período de tiempo total durante el cual un paciente está en un protocolo de tratamiento para una terapia que comprende la administración de un compuesto inhibidor de mlDH-1. Preferiblemente, el Curso de Tratamiento es de al menos 15 días consecutivos, al menos aproximadamente un ciclo de tratamiento de 28 días consecutivos, o al menos cuatro, cinco, seis o más ciclos de tratamiento consecutivos de 28 días y más preferiblemente, al menos 4 meses o más (p. ej., 6 meses o más). Preferiblemente, Compuesto 1 se administra dos veces al día (p. ej., aproximadamente cada 12 horas) todos los días a lo largo de un Curso de Tratamiento.

En algunas realizaciones, los pacientes pueden ser tratados con Compuesto 1 en combinación con un agente hipometilante tal como azacitidina o decitabina. La dosis inicial recomendada de azacitidina en el primer ciclo de tratamiento, para todos los pacientes, independientemente de los valores de laboratorio de hematología de referencia, es de 75 mg/m2 de superficie corporal, inyectados por vía subcutánea, diariamente durante 7 días, seguidos de un período de descanso de 21 días (ciclo de tratamiento de 28 días). Se recomienda que los pacientes sean tratados durante un mínimo de 6 ciclos. El tratamiento debe continuarse mientras que el paciente continúe beneficiándose o hasta la progresión de la enfermedad. En algunos métodos, se administra azacitidina al paciente que lo necesita a una dosis de 75 mg/m2, SC, d1-7, cada 4 semanas durante un curso de tratamiento, mientras recibe Compuesto 1 a una dosis de 150 mg BID. En otros métodos, se administra azacitidina al paciente que lo necesite a una dosis de 20 mg/m2, IV, d1 -5, cada 4 semanas durante un curso de tratamiento, mientras recibe Compuesto 1 a una dosis de 150 mg BID.

En una realización, los pacientes a los que se ha diagnosticado glioma que albergan una mIDH1 pueden tratarse con una Terapia de Inhibidor de mIDH1 que consiste en Compuesto 1 y azacitidina. El tratamiento con el agente hipometilante azacitidina puede provocar la inhibición del crecimiento del tumor en un modelo de glioma con IDH1 mutada derivado de un paciente al reducir la metilación del ADN e inducir la diferenciación glial. Mutaciones R132H en IDH1 representan más del 90% de las mutaciones de IDH presentes en pacientes con glioma de bajo grado y GBM secundario. Las mutaciones R132C y R132S en IDH1 también se reseñan en pacientes con glioma. Al menos en las células cancerosas que albergan mIDH1, la IDH1 de tipo salvaje y mutante forman un complejo heterodimérico que puede producir niveles muy altos de 2-HG (hasta 3-35 mM en células de glioma). Por ejemplo, pacientes portadores de mutaciones en IDH1 tienen niveles elevados de 2-HG, que en algunos casos alcanzan concentraciones tumorales >10 mM (glioma).

En otra realización, pacientes a los que se ha diagnosticado condrosarcoma que alberga una célula cancerosa IDH1 mutante pueden tratarse con una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 solo o en combinación con azacitidina. En algunas realizaciones, se puede administrar una terapia de combinación que comprende Compuesto 1 y azacitidina para el tratamiento de pacientes con condrosarcoma que alberga mutaciones en IDH1. Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, en combinación con azacitidina (administrada a la dosis diaria de 75 mg/m2 durante 7 días IV/SC por cada ciclo de 28 días).

Preferiblemente, los pacientes tratados con una combinación de Compuesto 1 y azacitidina reciben una cantidad terapéuticamente eficaz de una Terapia de Inhibidor de mIDH1 seleccionada de un nivel de dosis indicado en la Tabla 6 que figura a continuación.

Tabla 6 - Niveles de Dosis Preferidos para la Terapia de Inhibidor de mIDHI con Azacitidina

Pacientes a los que se ha diagnosticado carcinoma hepatobiliar (HBC, por sus siglas en inglés) que albergan una célula cancerosa IDH1 mutante pueden tratarse con una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 solo o en combinación con un inhibidor de PD-1 (p. ej., Pembrolizumab (Keytruda) o Nivolumab (Opdivo)). En algunas realizaciones, se puede administrar una terapia de combinación de Compuesto 1 y el inhibidor de PD-1 para el tratamiento de pacientes con un cáncer HBC que alberga mutaciones en IDH1. Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, en combinación con Pembrolizumab (p. ej., administrado a la dosis de 200 mg cada 3 semanas). Por ejemplo, a los pacientes se les puede administrar Compuesto 1 diariamente (BID) en ciclos continuos de 28 días, en combinación con Nivolumab (p. ej., administrado a la dosis de 240 mg cada 2 semanas o 480 mg cada 4 semanas). Preferiblemente, los pacientes tratados con una combinación que comprende Compuesto 1 y Nivolumab reciben una cantidad terapéuticamente eficaz de una Terapia de Inhibidor de mIDH1 seleccionada de un nivel de dosis indicado en la Tabla 7 que figura a continuación.

Tabla 7 - Niveles de Dosis Preferidos para la Terapia de Inhibidor de mIDH1 con Nivolumab

Pacientes a los que se ha diagnosticado IHCC que alberga una célula cancerosa IDH1 mutante pueden tratarse con una cantidad terapéuticamente eficaz de Compuesto 1 solo o en combinación con una quimioterapia (p. ej., gemcitabina y cisplatino). Preferiblemente, pacientes tratados con una combinación de Compuesto 1 y gemcitabina y cisplatino reciben una cantidad terapéuticamente eficaz de una Terapia de Inhibidor de mIDH1 seleccionada de un nivel de dosis indicado en la Tabla 8 que figura a continuación.

Tabla 8 - Niveles de Dosis Preferidos para la Terapia de Inhibidor de mIDH1 con Gemcitabina/Cisplatino

Ejemplos

Ejemplo 1 - Síntesis de (S)-5-((1-(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo (Compuesto 1)

Compuesto 1 se puede preparar en una síntesis convergente a partir de Compuesto Intermedio A y Compuesto Intermedio B como se muestra en la Figura 23 vía la reacción de desplazamiento nucleofílico bajo condiciones de carácter básico de (S)-3-(1-aminoetil)-6-cloroquinolin-2(1H)-ona (Compuesto Intermedio A) y la fluoropiridona Compuesto (Intermedio B). Los datos de 1H, 13C RMN y de espectro de masas son consistentes con la estructura asignada. La síntesis asimétrica de Compuesto Intermedio A comenzó con la condensación del aldehído de quinolina comercialmente disponible (1) con (R)-ferc.-butanosulfinamida (2) para formar la (R)-W-terc.-butanosulfinimina quiral (3), seguida de la adición de bromuro de metil magnesio en diclorometano para producir el producto deseado (4) en forma del diastereoisómero principal (dr: 98:2) La escisión del auxiliar quiral y la hidrólisis simultánea del resto 2-cloroquinolina en condiciones ligeramente ácidas utilizando HCl 1 N en dioxano dio el Compuesto Intermedio A con un rendimiento cuantitativo. La estructura de Compuesto Intermedio A se confirmó mediante RMN y espectroscopia de masas, y la pureza enantiomérica se determinó mediante análisis SFC quiral. La estereoquímica (S) se confirmó mediante estructuras co-cristalinas de rayos X de varios inhibidores análogos preparados a partir del mismo compuesto intermedio de amina quiral unido a R132H en mIDH-1. . Compuesto intermedio (B) se preparó a partir de 5-fluoropicolinonitrilo comercialmente disponible en cuatro etapas. La N-oxidación de 5-fluoropicolinonitrilo seguida de reflujo del N-óxido en anhídrido acético dio el acetato, después del tratamiento y la purificación. La solvólisis del grupo acetato seguida de N-metilación en condiciones estándares dio una mezcla de productos N-metilados y O-metilados (4:1). El producto minoritario O-metilado se eliminó mediante cromatografía en columna. Los datos de RMN y de espectro de masas son consistentes con la estructura de Compuesto Intermedio (B). Compuesto 1 (5-{[(1S)-1-(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil]amino}-1 -metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo) tiene un peso molecular de 355 con una temperatura de inicio del punto de fusión de 251,3 °C (DSC) y un pico máximo de 254,1 °C

Compuesto Intermedio 1: Hidrocloruro de (S)-3-(1-aminoetil)-6-cloroquinolin-2(1H)-ona

A una mezcla de 2,6-dicloroquinolina-3-carbaldehido (15,0 g, 66,37 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (8,85 g, 73,14 mmol) en 1,2-dicloroetano (150 mL) se añadió CuSO4 (16,0 g, 100,25 mmol). La mezcla resultante se calentó a 55 °C y se agitó a 55 °C durante la noche. Después de que la TLC y la MS mostraran la desaparición completa de los materiales de partida, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de una almohadilla de Celite®. A continuación , la almohadilla de Celite® se enjuagó con CH²Cl². El filtrado se evaporó a sequedad in vacuo y se purificó mediante cromatografía en columna de SiO²(0 a 25 % de hexanos/EtOAc) para proporcionar el compuesto del título, (R,£)-N-((2,6-dicloroquinolin-3-il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfinamida, en forma de un sólido amarillo (17,7 g, 81 % de rendimiento).

Etapa 2: (R)-W-((S)-1-(2,6-dicloroquinolin-3-il)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida.

A una solución de (R,£)-N-((2,6-dicloroquinolin-3-il)metileno)-2-metilpropano-2-sulfinamida (8,85 g, 26,88 mmol) en CH²Cl²anhidro (200 mL ) a -60 °C se añadió gota a gota MeMgBr (solución 3 M en dietil éter, 13,5 mL, 40,54 mmol). La mezcla de reacción resultante se agitó a aproximadamente -60 a -50 °C durante 3 horas y luego se agitó a -20 °C durante la noche bajo una atmósfera de N². Después de que la TLC y la MS mostraran la desaparición completa de los materiales de partida, se añadió NH4Cl saturado (163 mL) a -20 °C y la mezcla resultante se agitó durante 10 minutos. La fase acuosa se extrajo con CH²G ²(100 mL x 3), se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna en un sistema de cromatografía ISCO® (SiO²: columna de oro; gradiente; hexanos hasta 100 % de EtOAc) para proporcionar el compuesto del título (R)-N-((S)-1-(2,6-dicloroquinolin-3-il)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida. En forma de un sólido amarillo (5,8 g, 63 % de rendimiento).

Etapa 3: Hidrocloruro de (S)-3-(1-am¡noetil)-6-cloroqu¡nol¡n-2(1H)-ona (A).

Una mezcla de (R)-W-((S)-1-(2,6-dicloroquinolin-3-il)etil)-2-metilpropano-2-sulfinamida (6,6 g, 19,13 mmol) en 1,4-dioxano (41 mL) y HCI 1N (41 mL) se calentó a reflujo durante la noche. Los disolventes se evaporaron in vacuo y el residuo resultante se disolvió en agua caliente y se liofilizó. El producto bruto se trituró con dietil éter para proporcionar el compuesto del título A en forma de un sólido amarillo (9,0 g, ee: 98,4%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-cfe ): 5 ppm 12,4 (s a, 1 H), 8,32 (s a, 2 H), 8,07 (s, 1 H), 7,85 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,63 (dd, J1 = 8,8 Hz, J2 = 2,5 Hz, 1 H), 7,40 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 4,40-4,45 (m, 1 H), 1,53(d, J = 8,5 Hz, 3 H). LCMS (Método 2): Rt 3,42 min, m/z 223,1 [M+H]+.

Compuesto Intermedio 2: 5-fluoro-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo

Una solución de 5-fluoropicolinonitrilo (7,27 g, 59,5 mmol) en CHCta (60 mL) se añadió gota a gota mediante un embudo de adición a una solución de m-CPBA (<77 %, 22,00 g, 98 mmol) en CHCta 160 mL). La solución se agitó a reflujo durante 4 días, momento en el cual la LCMS mostró una conversión de ~ 85%. La muestra se dejó enfriar, luego se añadió sulfito de sodio (12,4 g, 98 mmol) y la muestra se agitó a temperatura ambiente durante tres horas, tiempo durante el cual la solución se volvió espesa con un precipitado blanco. La muestra se diluyó con DCM (300 mL) y se filtró en un embudo Buchner, y la torta del filtro se lavó con DCM (~400 mL). Precipitó un material blanco en el filtrado. La mezcla de filtrado se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (400 mL), durante lo cual los sólidos se disolvieron. La capa orgánica se lavó con agua (300 mL), luego se secó (MgSO4) y se filtró. Se añadió gel de sílice y la mezcla se evaporó a presión reducida. El material se cromatografió mediante Biotage MPLC (columna de gel de sílice de 340 g) con 0 a 100 % de EtOAc en hexanos, con elución isocrática cuando los picos desaparecieron para proporcionar 2-ciano-5-fluoropiridina 1 -óxido (4,28 g, 31,0 mmol, 52 % de rendimiento) en forma de un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, DMSO-ds): 5 ppm 8,85 - 8,93 (m, 1 H), 8,23 (dd, J=9,09, 6,74 Hz, 1 H), 7,53 - 7,64 (m, 1 H). LCMS (Método 1): Rt 0,57 min., m/z 138,9 [M+H]+.

Etapa 2: Acetato de 6-ciano-3-fluoropiridin -2-ilo

Una solución de 2-ciano-5-fluoropiridina 1 -óxido (4,28 g, 31,0 mmol) en anhídrido acético (40 ml, 424 mmol) se calentó a reflujo (baño de 150 °C) durante tres días, durante los cuales la solución clara se volvió oscura. La muestra se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (30 mL) y se agitó durante 1 hora. Se añadió gel de sílice y el disolvente se evaporó a presión reducida. El material se cromatografió mediante Biotage MPLC (columna de gel de sílice de 100 g) con 0 a 23 % de EtOAc en hexanos para proporcionar acetato de 6-ciano-3-fluoropiridin-2ilo (3,32 g, 18,43 mmol, 60 % de rendimiento) en forma de un líquido transparente que solidificó al enfriarse. 1H RMN (300 MHz, CLOROFORMO-d): 5 ppm 7,65 - 7,75 (m, 2 H), 2,42 (s, 3 H). LCMS (Método 1): Rt 1,54 min., m/z 138,8 (pérdida de acetato).

Etapa 3: 5-fluoro-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo

Una solución de acetato de 6-ciano-3-fluoropiridin-2-ilo (3,32 g, 18,43 mmol) en MeOH (40 ml) se trató con carbonato de potasio (5,10 g, 36,9 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante cuatro horas. La LCMS a las 2 horas mostró que la reacción se había completado. El disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo se disolvió en agua (100 mL) y se acidificó a pH <1 con HCl 1M. La solución se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Los extractos orgánicos reunidos se secaron (Na2SO4) , filtraron y evaporaron a presión reducida para proporcionar 5-fluoro-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-carbonitrilo (2,34 g, 16,94 mmol, 92 % de rendimiento) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, DMSO-afe): 5 ppm 12,92 (s a, 1 H), 7,73 (s a, 1 H), 7,43 (s a, 1 H). LCMS (Método 1): Rt 0,70 min., m/z 138,9 [M+H]+.

Etapa 4: 5-fluoro-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo (B)

Una mezcla de 5-fluoro-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-carbonitrilo (2,31 g, 16,73 mmol) y carbonato de potasio (4,86 g, 35,2 mmol) en un matraz de fondo redondo de 200 mL se trató con DMF (46 mL) y se agitó durante 15 minutos. Se añadió Mel (1,2 mL, 19,19 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. El disolvente se evaporó a presión reducida. El residuo se mezcló con agua (150 mL) y se extrajo con DCM (2x150 mL). Los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgSO4), se filtraron, se trataron con gel de sílice y se evaporaron a presión reducida, luego se evaporaron adicionalmente a 60 °C bajo alto vacío. El material se cromatografió mediante Biotage MPLC con 0 a 35 % de EtOAc en hexanos, con elución isocrática a 16 % de EtOAc y 35 % de EtOAc al tiempo que aparecían picos. El pico que apareció con 16 % de EtOAc era material O-metilado y se descartó. El pico que apareció con35 % de EtOAc proporcionó el compuesto del título B (1,70 g, 11,17 mmol, 67 % de rendimiento) en forma de un sólido. 1H RMN (300 MHz, DMSO-afe): 5 ppm 7,53 (dd, J=9,38, 7,62 Hz, 1 H), 7,18 (dd, J=7,77, 4,84 Hz, 1 H), 3,60 (s, 3 H). LCMS (Método 1): Rt 0,94 min., m/z 152,9 [M+H]+.

Etapa 5: (S)-5-((1-(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo (Compuesto 1)

Una mezcla de 5-fluoro-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-carbonitrilo B (1,23 g, 8,09 mmol), hidrocloruro de (S)-3-(1-aminoetil)-6-cloroquinolin-2(1H)-ona A (1,91 g, 7,37 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (3,8 mL, 21,8 mmol) en dimetilsulfóxido anhidro (57 mL) bajo N²se calentó a 110 °C y se agitó durante 6 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se repartió entre EtOAc/H²O (750 mL/750 mL). La capa orgánica se separó, se secó (Na2SO4) y se concentró al vacío. El residuo se purificó en ISCO dos veces (columna de gel de sílice de 40 g, 0~100 % de EtOAc/hexanos; columna de gel de sílice de 80 g, 0~5 % de MeOH/diclorometano). Las fracciones incoloras se combinaron y el diclorometano se eliminó a presión reducida en el rotavapor hasta que precipitó una gran cantidad de sólido blanco. El sólido blanco se recogió por filtración y se lavó con MeOH frío. Luego se mezcló con MeCN/H²O (10 mL/25 mL) y se liofilizó para proporcionar el Compuesto 1 del título en forma de un sólido blanco (790 mg). p.f.

262-264 °C. 1H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5: 12,07 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,73 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 8,6, 2,3 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 5,95 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,68 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 1,50 (d, J = 6,6 Hz, 3H). LCMS (Método 2): 100 % puro a 254 nm, Rt 10,78 min, m/z 355, 357 [M+H]+. El filtrado y las fracciones coloreadas (puras por TLC) del segundo ISCO se reunieron y se trataron con carbón vegetal activado y se filtraron (hasta que el filtrado se volvió incoloro). A continuación, el filtrado se concentró a presión reducida en el rotavapor para eliminar el diclorometano hasta que precipitó una gran cantidad de sólido blanco. El sólido blanco se recogió por filtración y se lavó con MeOH frío. Luego se mezcló con MeCN/hhO (10 mL/25 mL) y se liofilizó para proporcionar el Compuesto 1 del título en forma de un sólido blanco (970 mg). p.f. 262-264 °C. 1H RMN (300 MHz, DMSO-afe) 5: 12,06 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,73 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 8,6, 2,3 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,95 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,68 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 1,50 (d, J = 6,9 Hz, 3H). LCMS (Método 2): 100 % puro a 254 nm, m/z 355, 357 [M+H]+. El rendimiento total de dos lotes combinados es del 67 %.

Etapa 6: Forma sólida de (S)-5-((1-(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo

A menos que se indique lo contrario, el ensayo clínico de los Ejemplos 10-13 se realizó utilizando una forma sólida farmacéuticamente aceptable en una forma de dosificación oral de Compuesto 1 que puede obtenerse mediante el método de la Etapa 6 del Ejemplo 1. Todos los volúmenes son con respecto a la cantidad de Compuesto 1 (v/p). El compuesto 1 se disuelve en 18 volúmenes de diclorometano. A continuación, la solución resultante se concentra a presión reducida hasta aproximadamente 5 volúmenes. A la mezcla se añaden 5 volúmenes de acetato de etilo. La mezcla se concentra a presión reducida hasta 5 volúmenes. A la mezcla se añaden 5 volúmenes adicionales de acetato de etilo y la mezcla se concentra de nuevo a presión reducida hasta 5 volúmenes. La mezcla se diluye a 10 volúmenes con acetato de etilo y la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 18 horas y luego se enfría a 0 °C. La mezcla se agita a 0 °C durante 3 horas y luego se filtra. Los sólidos se enjuagan con acetato de etilo y se secan al vacío (contrarrestado con nitrógeno) a temperatura ambiente.

Se determinó que el sólido cristalino era la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A. La isoterma DVS de Compuesto 1 Tipo A se muestra en la Figura 24. DVS muestra una absorción máxima de agua de 0,25 % p/p a 25 °C/90 % HR, lo que indica que Compuesto 1 Tipo A no es higroscópico. El comportamiento térmico de Compuesto 1 Tipo A se evaluó utilizando DSC. Se observó un evento endotérmico a 256,6 °C (pico máximo). La temperatura de inicio y el calor de fusión fueron 255,0 °C y 108,7 J/g respectivamente (Figura 25). Los datos de TGA (Figura 26) no muestran una liberación significativa de humedad o volátiles residuales no acuosos de Compuesto 1 Tipo A.

El patrón de difracción de rayos X del polvo del Compuesto 1 cristalino Tipo A se representa en la Figura 27, y los datos correspondientes se resumen en la Tabla 9 que figura a continuación.

Tabla 9

Preferiblemente, la forma de dosificación oral de Compuesto 1 es una forma sólida denominada Tipo A que se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X en polvo (XRPD) que comprende picos característicos a 6,3, 12,8, 13,8, 23,6 y 27,8 grados ±0,2 °20. Se realizaron experimentos de difracción de rayos X en polvo de alta resolución con Panalytical X' Pert3 Powder XRPD en un soporte de fondo cero de Si. La posición 2 theta se calibró frente al patrón de polvo Panalytical 640 Si. Los detalles del método XRPD se enumeran a continuación, con los picos de XRPD reseñados como ángulos de difracción en 2 theta, con el espaciado d medido en angstroms.

Parámetros para Modo de Reflexión

Longitud de onda rayos X Cu, ka, Ka1 (A): 1,540598, Ka2 (A): 1,544426

relación de intensidad Ka2/Ka1: 0,50

Ajuste tubo de rayos X 45 kV, 40 mA

Rendija de divergencia Automática

Modo de escaneo Continuo

Intervalo de escaneo (°2TH) 3o -40°

Tamaño de paso (°2TH) 0,0131

Velocidad de escaneo (°/s) 0,033

Compuesto 1 se administra preferiblemente en una forma de dosificación unitaria oral que comprende una composición farmacéutica que incluye la siguiente formulación: (a) Forma sólida de tipo A de Compuesto 1 (p. ej., en un peso relativo de aproximadamente 33), (b) una celulosa microcristalina (p. ej., en un peso relativo de aproximadamente 61), (c) una croscamellosa sódica (p. ej., en un peso relativo de aproximadamente 5) y un estearato de magnesio (p. ej., en un peso relativo de aproximadamente 1). La composición farmacéutica para administración oral puede comprender Compuesto 1 (p. ej., en una forma sólida de Tipo A) con excipientes farmacéuticamente aceptables en una cápsula o comprimido. Por ejemplo, una cápsula puede contener un total de 50 mg o 150 mg de Compuesto 1 en una forma de dosificación unitaria. La cápsula puede encapsular la composición farmacéutica que comprende Compuesto 1 en un peso relativo de aproximadamente 30-50 % en peso con respecto al peso de la composición farmacéutica. En otra realización, un lote de fabricación GMP puede comprender Compuesto 1, proporcionado opcionalmente en la forma sólida Tipo A.

En particular, la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A se puede caracterizar por una difracción de rayos X en polvo (XRPD), que tiene difracciones en ángulos (2 theta ± 0,2) de 6,3, 12,8, 13,8, 23,6 y 27,8. En algunas realizaciones, un nuevo Compuesto 1 Tipo A se caracteriza por una difracción de rayos X en polvo (XRPD), que tiene difracciones en ángulos (2 theta ± 0,2) de 6,3, 12,8, 13,8, 23,6 y 27,8, correspondientes al espaciado d (angstroms ± 0,2) de 14,0, 6,9, 6,4, 3,8 y 3,2, respectivamente. En algunas realizaciones, Compuesto 1 Tipo A puede identificarse mediante difracción de rayos X en polvo (XRPD), que tiene difracciones características en ángulos (2 theta ± 0,2) de 5,7, 6,3, 8,5, 10,6, 12,8, 13,8, 17,3, 22,0, 22,8,23,6 y 27,8. En algunas realizaciones, Compuesto 1 Tipo A puede identificarse mediante difracción de rayos X en polvo (XRPD), que tiene difracciones características en ángulos (2 theta ± 0,2) de 5,7, 6,3, 8,5, 10,6, 12,8, 13,8, 17,3, 22,0, 22,8 , 23,6 y 27,8, correspondientes al espaciado d (angstroms ± 0,2) de 15,4, 14,0, 8,4, 6,9, 6,4, 5,1,4,0, 3,9, 3,8 y 3,2, respectivamente.

En algunas realizaciones, la forma sólida de Compuesto 1 Tipo A se caracteriza por una endotermia de calorimetría diferencial de barrido (DSC) que tiene un mínimo de aproximadamente 256,64 °C. Se realizaron experimentos de calorimetría diferencial de barrido (DSC) en TA Q2000 DSC de TA Instruments. Las muestras se calentaron a 10 °C/min desde aproximadamente 20 °C hasta aproximadamente de 300 °C utilizando nitrógeno seco para purgar el sistema. Los detalles del método se proporcionan más adelante:

Parámetros DSC

Tipo de Bandeja Bandeja de aluminio, cerrada

Temperatura TA-250 °C

Velocidad de rampa 10 °C/min

Gas de purga ⁿ2

Etapa 7: Forma de dosificación sólida oral de (S)-5-((1-(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil)amino)-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo

La forma de dosificación oral de Compuesto 1 es una forma sólida farmacéuticamente aceptable del compuesto (S)-5-((1 -(6-cloro-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-3-il)etil)amino)-1 -metil-6-oxo-1,6-dihidropiridina-2-carbonitrilo que se puede obtener utilizando el método del Ejemplo 1, Etapa 6. La forma de dosificación oral no contiene disolvente asociado ni un contraión. En particular, la forma de dosificación oral de Compuesto 1 puede ser una cápsula que comprende la sustancia farmacológica (Compuesto 1) mezclada con excipientes para mejorar el flujo del polvo y encapsulada en una cápsula de gelatina dura Coni-Snap® adecuada para la dosificación oral en seres humanos .

Ejemplo 2 - Compuesto 1 inhibió de forma potente y selectiva la producción de 2-HG en las enzimas mutantes IDH1 R132H e IDH1 R132C en ensayos bioquímicos, en comparación con la enzima IDH1 de tipo salvaje y las enzimas IDH2 mutantes.

Las potencias bioquímicas de Compuesto 1 contra los mutantes IDH1 R132H e IDH1 R132C se determinaron en ensayos acoplados con diaforasa, que miden la actividad mediante la determinación del nivel de NADPH co-sustrato restante después de que se extinga la reacción enzimática. En estos ensayos se utilizaron enzimas mutantes IDH1 R132H o IDH1 R132C homodiméricas recombinantes.

Con el fin de evaluar la potencia celular de Compuesto 1 para otras mutaciones IDH1R132que se han identificado en cánceres humanos, se expresaron IDH1R132L, IDH1R132G e IDH1R132S en células de glioblastoma humano U87MG. También se prepararon líneas emparejadas IDH1R132H e IDH1R132C para permitir comparaciones directas en el mismo fondo celular, así como para comparar los efectos observados de la misma mutación en diferentes líneas celulares. En cuanto a las líneas celulares HT1080 y HCT-116 arriba descritas, las células U87MG que expresan mIDH1 modificadas produjeron concentraciones más altas de 2-HG, pero exhibieron una tasa de crecimiento similar en comparación con células U87MG parentales. La inhibición de la producción de 2-HG por parte de Compuesto 1 en las líneas IDH1R132H e IDH1R132C U87 dio valores de CI⁵⁰de 9,0 y 39,0 nM, respectivamente, que concuerdan estrechamente con los observados en HT1080 y HCT-116 (Tabla 1). Además, Compuesto 1 inhibió potentemente la producción de 2-HG en células que expresan IDH1R132G, IDH1R132S e IDH1R132L con valores de CI⁵⁰de 5,6, 9,2 y 41,7 nM, respectivamente, lo que sugiere que Compuesto 1 es un potente inhibidor contra un amplio espectro de mutantes IDH1R132. De acuerdo con los estudios de líneas celulares previas, se encontró que Compuesto 1 tiene efectos mínimos sobre la proliferación de células U87MG que expresan mIDH1 a 10 pM.

En la Tabla 10 se muestran resultados adicionales, en relación con el valor de CI⁵⁰obtenido para la enzima R132H IDH1 mutada. Con referencia a los datos de la Tabla 10, se encontró que Compuesto 1 inhibía selectivamente la actividad enzimática de las mutaciones R132H en IDH1 y R132C en IDH1 con un valor de CI⁵⁰dentro de un factor de aproximadamente 5 (es decir, el valor de CI⁵⁰medido para la enzima mutante IDH1 R132C era aproximadamente 5 veces mayor que el CI⁵⁰medido en la enzima mutada IDH1 R132H). La selectividad de Compuesto 1 frente a otras isoenzimas IDH también se testó utilizando ensayos acoplados con diaforasa empleando IDH1 de tipo salvaje o una de las 2 formas mutadas alternativas de IDH2, a saber, lDH2 R172K e IDH2 R140Q.

Tabla 10

Compuesto 1 tenía una actividad comparativamente muy débil contra IDH1 de tipo salvaje (valor de CI⁵⁰de aproximadamente 922 veces mayor que el valor de CI⁵⁰medido para R132H en IDH1 ). Compuesto 1 también demostró una actividad muy débil contra R172K en IDH2 que fue más de 1000 veces mayor que el valor de CI⁵⁰medido para IDH1 R132H. Compuesto 1 no mostró inhibición alguna de R140Q en IDH2 hasta una concentración de 100 pM. Estos datos de selectividad indican que Compuesto 1 es un inhibidor potente y selectivo de mutaciones R132 enIDH1.

Ejemplo 3 - Actividad in vitro de Compuesto 1 como un Inhibidor de R132X en mIDH-1

En ensayos bioquímicos in vitro, Compuesto 1 inhibió significativamente las proteínas IDH1-R132H e IDH1-R132C mutadas. Por el contrario, Compuesto 1 mostró poca o ninguna actividad inhibitoria en ensayos bioquímicos de proteína IDH1 de tipo salvaje o diversas proteínas IDH2 mutadas encontradas en cánceres humanos. Compuesto 1 suprimió la producción de 2-HG en líneas celulares naturales y genéticamente modificadas que expresaban cinco proteínas IDH1 mutadas diferentes (R132H, R132C, R132G, R132L y R132S) con valores de CI⁵⁰por debajo de aproximadamente 0,5 micromolar. Además, Compuesto 1 ha mostrado niveles relevantes de actividad contra múltiples formas mutadas clínicamente relevantes de IDH1, de las cuales IDH1-R132H e IDH1-R132C son las más prevalentes en neoplasias hematológicas y tumores sólidos. Sin embargo, Compuesto 1 no mostró actividad apreciable contra IDH1 de tipo salvaje o IDH2 mutada.

La potencia celular de Compuesto 1 para suprimir niveles intracelulares de 2-HG se determinó en líneas celulares que expresan cinco proteínas IDH1 mutadas diferentes encontradas en cánceres humanos (R132H, R132C, R132G, R132L, R132S). La línea celular de fibrosarcoma humano HT-1080 alberga una mutación heterocigota IDH1-R132C que se produce de forma natural. La línea celular de carcinoma colorrectal humano HCT 116 es de tipo salvaje para IDH1, pero se introdujeron mutaciones heterocigóticas que codifican IDH1-R132H o -R132C por incorporación en el locus del gen IDH1 endógeno. Finalmente, la línea celular de astrocitoma humano U-87 MG también es de tipo salvaje para IDH1, pero la expresión de cinco proteínas IDH1 mutadas diferentes se logró mediante transfección estable.

La línea parental HCT116 (colon) no produce altos niveles de 2-HG, pero las variantes utilizadas en esta memoria (líneas X-MAN HCT-116 obtenidas de Horizon Discovery Ltd.) están diseñadas para incorporar una mutación heterocigota de IDH1 R132H o IDH1 R132C. Esto recapitula el contexto celular en las células cancerosas mIDH1 en donde existen subunidades de IDH1 de tipo salvaje y mutante que juntas forman un heterodímero que es responsable de la producción de niveles elevados de 2-HG. Estas líneas modificadas se pueden utilizar como modelos de enfermedad mutante IDH1.

Cada una de estas líneas celulares se trató con Compuesto 1 durante 24 h y se determinaron los niveles intracelulares de 2-HG mediante espectroscopia de masas. Compuesto 1 suprimió la producción de 2-HG en cada una de las líneas celulares, con valores de CI⁵⁰que variaban de <10 a <150 nM. La Tabla 11 que figura a continuación indica los valores de CI⁵⁰para 2-HG, por debajo de 150 nM ("+"), por debajo de 100 nM ("++"), por debajo de 50 nM ("+++") y por debajo de 10 nM ("++++ ").

Tabla 11

Compuesto 1 es, por lo tanto, un potente inhibidor de una diversidad de mutaciones de IDH1 clínicamente relevantes en un contexto celular.

Con el fin de optimizar el programa de dosificación de Compuesto 1 para lograr una inhibición sostenida de 2-HG >90 % en mIDH1 in vivo,, ratones portadores de xenoinjertos HCT116-IDH1R132H y HCT116-IDH1R132C se trataron con Compuesto 1 a 25 y 50 mg/kg. BID (3 dosis). La concentración de fármaco libre de Compuesto 1 a las 12 horas después de la dosis final está por encima de la CI⁹⁰ in vivo para todas las dosis, y en cada caso se logró una reducción superior al 90 % de los niveles de 2-HG en el tumor. La concentración de fármaco libre disminuyó a 3-10X la CI⁵⁰ in vivoa las 24 horas después de la dosis final, y el compuesto mostró una inhibición del 80-90 %. Hubo menos de 20 nM de concentración de fármaco libre en el tumor a las 48 y 72 horas después de la dosis final, y en ese momento hubo menos del 50 % de inhibición de 2-HG en las muestras de tumor, en consonancia con el nivel reducido de Compuesto 1.

En ambos modelos de IDH1 mutada, la concentración libre de Compuesto 1 fue equiparable en plasma y tumores de xenoinjertos, y las exposiciones fueron dependientes de la dosis. En comparación con el grupo tratado con vehículo, Compuesto 1 mostró una inhibición dependiente del tiempo y de la dosis de los niveles intratumorales de 2-HG. A la dosis más alta testada en estos estudios (50 mg/kg), el tratamiento con Compuesto 1 inhibió los niveles de 2-HG en el tumor en > 90 % hasta 24 horas después de la última dosis en el modelo de xenoinjerto HCT116-IDH1 R132H), y a niveles similares durante al menos 12 horas en el modelo HCT116-IDH1 R132C). Los cálculos basados en el porcentaje de supresión de la concentración de 2-HG en el tumor frente a la concentración de fármaco libre en el tumor dieron valores de CI⁵⁰ in vivo inferiores a 50 nM en los dos modelos HCT116-IDH1R132H o HCT116-IDH1R132C .

Ejemplo 4 - Los compuestos comparativos demostraron una mayor disparidad entre la inhibición de 2-HG en células R132C y R132H IDH-1, en comparación con Compuesto 1.

La actividad comparativa de cada una de unas series de compuestos inhibidores de mIDH-1, incluyendo Compuesto 1, se midió utilizando el ensayo basado en células del Ejemplo 3. La relación de los valores de CI⁵⁰obtenidos de células mutantes IDH-1 R132H HCT116 (CI⁵⁰pM g media) / CI⁵⁰obtenidos de células IDH-1 R132H HCT116 mutantes (CI⁵⁰pM g media) se proporcionan en la Tabla 4. Compuesto 1 tuvo la relación más baja entre los compuestos testados, lo que indica una actividad casi equipotente de Compuesto 1 medida con el ensayo de células mutantes R132C y R132H IDH-1 del Ejemplo 3 (utilizando las células HCT 116 descritas en el Ejemplo 3). Compuesto 1 mostró una actividad comparativa que inhibía la producción de 2-HG de las líneas celulares mIDH-1 R132C y R132H (utilizando el ensayo del Ejemplo 3) que estaba dentro de 5 veces, en comparación con diferencias más dispares en la actividad que variaban de aproximadamente 8 veces a más de 200 (240) en los compuestos comparativos A-H en la Tabla 12.

Tabla 12

Ejemplo 5 - Determinación de la optimización multiparamétrica del sistema nervioso central (MPO SNC) La optimización multiparámetro del sistema nervioso central (MPO SNC) se puede utilizar para priorizar compuestos en función de su probabilidad de penetración en el cerebro. La función de puntuación utiliza seis propiedades fisico químicas clave (puntuando cada uno de los parámetros en una escala de cero a uno) para llegar a una puntuación compuesta que va de 0-6. Las puntuaciones más altas de MPO SNC se correlacionan con una mayor probabilidad de que un compuesto penetre en el cerebro. Las puntuaciones de MPO SNC reseñadas se calcularon siguiendo el método reseñado en: Wager, T. T., Hou, X., Verhoest, P. R. y Villalobos, A. (2010) Moving beyond rules: The development of a central nervous system multiparameter optimization (CNS MPO) approach to enable alignment of druglike properties. ACS Chem. Neurosci. 1,435-449.

En la Tabla 13 se puede encontrar un resumen de las puntuaciones de MPO para varios inhibidores de IDHm: Tabla 13

Para el Compuesto 1 y los Compuestos I-1 a 1 -29,el documento WO/2016044789 define los valores de CI⁵⁰para IDH1 R132H como "++++": < 0,01 pM; "+++": entre 0,01 pM y 0,1 pM; "++": de 0,1 pM a 1 pM; y valores de CI⁵⁰para IDH1 R132C como "++++": < 0,1 pM; "+++": entre 0,1 pM y 1 pM; "++": de 1 pM a 10 pM; y "+": > 10 pM

a. Puntuación MPO SNC calculada en base al método descrito en T. Wager, ACS Chem. Neurosci. (2010), 1, 435-449.

b. Datos reseñados en la bibliografía

c. BBB+:predicha puntuación MPO SNC > 3,8

d. el documento WO/2016044789también reseña que Compuesto 1 (como I-13) tiene actividad en células HCT116 mutantes IDH1 R132H y R132C como ++ y ++, respectivamente.

e. el documento WO/2016044789también reseña que Compuesto 1- 25 tiene actividad en células HCT116 mutantes IDH1 R132H y R132C como +++ y ++, respectivamente.

1. Popovici-Muller, J., et al. Discovery of AG-120 (Ivosidenib): A First-in-Class Mutant IDH1 Inhibitor for the Treatment of IDH1 Mutant Cancers. ACS Med. Chem. Lett., 2018, 9(4), 300-305.

2. Yen, K. , et al. Abstract B126: AG-881, a brain penetrant, potent, pan-mutant IDH (mIDH) inhibitor for use in mIDH solid and hematologic malignancies, AACR-NCI-EORTC Conferencia lnternacional: Molecular Targets and Cancer Therapeutics; 26-30 de octubre, 2017; Philadelphia, PA.

3. Cho, Y. S., et al. Discovery and evaluation of clinical candidate IDH305, a brain penetrant mutant IDH1 Inhibitor. ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8, 1116-1121.

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Ejemplo 6 - Determinación de la Relación Ccerebro Predicha de Inhibidores de IDHm

La distribución de Compuesto 1, AG-120 o AG-881 en el cerebro se midió ex vivo, individualmente, en ratas Sprague Dawley (n = 4/molécula) después de una infusión intravenosa de 6 horas de una dosis de 7,5 mg/kg. Se recogieron muestras de plasma y tejido cerebral al final del tiempo de infusión y se procesaron para bioanálisis mediante análisis de espectrometría de masas-HPLC en tándem (LCMS) para determinar la cantidad total de compuesto presente. Paralelamente, las muestras de cerebro y plasma se sometieron a diálisis de equilibrio como se describe por by N.J. Waters et.al (J.Pharm Sci (2008) 97(10):4586-95) para determinar la fracción no unida (Tabla x). A continuación, se calculó la distribución en el cerebro o el coeficiente de reparto (Kpuu) como la relación de la concentración de fármaco no unido en el cerebro (Fu, cerebro) a la concentración de fármaco no unido en plasma (Fu, plasma). De manera similar, todos los cálculos de las concentraciones plasmáticas efectivas en roedores o seres humanos se realizaron utilizando la fracción no unida/libre medida para cada una de las moléculas en cada especie utilizando diálisis de equilibrio convencional como describe por Waters.

Para determinar la concentración libre eficaz proyectada en seres humanos, se midieron las concentraciones plasmáticas en ratones portadores de tumores utilizando una inhibición del 90 % en tumores (CI⁹⁰) del biomarcador 2-HG, como la concentración mínima eficaz para proporcionar un beneficio terapéutico. En estudios con ratones portadores de tumores, se determinó que la concentración plasmática libre en CI⁹⁰era de 90,7 ng/mL (Tabla 14). En ensayos clínicos en seres humanos, una dosis de 150 mg BID para Compuesto 1 mostró una concentración plasmática media (Clibre, media) de 171 ng/mL, que cuando se corrigió por el reparto en el cerebro esperada (Kpuu = 0,42) y la fracción libre en el cerebro (Fu , cerebro = 0,05) proporciona una estimación de 3,6 ng/mL de concentración no unida en el cerebro. La concentración eficaz objetivo en el cerebro humano basada en modelos de ratón (para lograr una CI⁹⁰) es de 1,91 ng/mL. Por lo tanto, Compuesto 1 se reparte en el cerebro 2 veces más que los niveles proyectados requeridos para lograr un beneficio terapéutico.

Tabla 14

Ejemplo 7 - Ensayo de Compuesto 1 en modelos de xenoinjerto de ratón utilizando células HCT 116 con mutaciones R132C y R132H.

Con el fin de evaluar la actividad in vivo de Compuesto 1, se utilizaron experimentos PK-PD en ratones que portaban xenoinjertos HCT-116 (derivados de líneas celulares isogénicas Horizon Discovery que albergan mutaciones incorporadas IDH1-R132H e IDH1-R132C) para determinar el grado de exposición requerido para suprimir los niveles de 2-HG. Compuesto 1 se administró a ratones inmunológicamente deficientes BALB/c hembra que portaban el xenoinjerto HCT116-IDH1-R132H/+ en tres dosis orales (12,5, 25 y 50 mg/kg) en intervalos de 12 horas. Se recogieron muestras de plasma y tumor de xenoinjerto a las 4, 12 y 24 horas después de la última dosis para determinar la exposición de Compuesto 1 en el plasma y el tumor, así como para medir la inhibición de la actividad mutante de IDH1 en el tumor en función de la reducción en los niveles de 2-HG. En modelos de xenoinjerto IDH1-R132H(+, la concentración libre de Compuesto 1 fue equiparable en plasma y tumores de xenoinjerto, y las exposiciones fueron dependientes de la dosis. En comparación con el grupo tratado con vehículo, Compuesto 1 mostró una inhibición dependiente del tiempo y de la dosis de los niveles de 2-HG en plasma y en el tumor. A la dosis más alta testada en estos estudios (50 mg/kg), el tratamiento con Compuesto 1 inhibió niveles de 2-HG en el tumor en > 90 % hasta 24 horas después de la última dosis en el modelo de xenoinjerto HCT116-IDH1-R132H/+ (Figura 4c), y a niveles similares durante al menos 12 horas en el modelo HCT116-IDH1-R132C/+. Los cálculos basados en el porcentaje de supresión de la concentración de 2-HG en el tumor frente a la concentración de fármaco libre en el tumor dieron valores de CI⁵⁰in vivo de 26 nM y 36 nM en los modelos HCT116-IDH1-R132H o HCT116-IDH1-R132C, respectivamente. Cuando se corrige para los niveles no unidos de Compuesto 1, existe una excelente correlación en la potencia entre el ensayo bioquímico, el ensayo celular y los estudios in vivo.

Tabla 15

Con el fin de optimizar el programa de dosificación de Compuesto 1 para lograr una inhibición sostenida de 2-HG > 90 % en mIDH1 in vivo,, ratones portadores de xenoinjertos HCT116-IDH1R132H y HCT116-IDH1R132C se trataron con Compuesto 1 a 25 y 50 mg/kg. BID (3 dosis). La concentración de fármaco libre de Compuesto 1 a las 12 horas después de la dosis final está por encima de la CIgüin vivo para todas las dosis, y en cada caso se logró una reducción superior al 90 % de los niveles de 2-HG en el tumor. La concentración de fármaco libre disminuyó a 3-10X la CI⁵⁰in vivo a las 24 horas después de la dosis final, y Compuesto 1 mostró una inhibición del 80-90 % (o mayor). Hubo menos de 20 nM de concentración de fármaco libre en el tumor a las 48 y 72 horas después de la dosis final, y en ese momento hubo menos del 50 % de inhibición de 2-HG en las muestras de tumor, en consonancia con el nivel reducido de Compuesto 1.

Brevemente, 5x106 células HCT-116 IDH1-R132H/+ (Horizon Discovery) en PBS se inocularon por vía subcutánea en el flanco derecho de ratones inmunológicamente deficientes BALB/c hembra de 6 semanas de edad. Cuando el tamaño del tumor alcanzó los 360-400 mm3, los ratones se aleatorizaron por volumen del tumor en nueve ratones por grupo. Los ratones portadores de tumores se trataron con vehículo (9:1 PEG400 :Etanol ) o Compuesto 1 durante tres dosis con un intervalo de dosificación de 12 h. El volumen de dosificación fue de 10 pL/g . Las muestras de plasma y las muestras de tumor se recogieron a las 4, 12 y 24 h después de la dosis final (N = 3 ratones por punto de tiempo) para la posterior medición del nivel del compuesto en muestras de plasma y tumor y del nivel de 2-HG en las muestras de tumor por sistema UPLC-MS-MS.

En un ejemplo de dosificación separado, 5x106 células HCT-116 IDH1-R132C/+ (Horizon Discovery) en PBS se inocularon por vía subcutánea en el flanco derecho de ratones inmunológicamente deficientes BALB/c hembra de 6-8 semanas de edad. Cuando el tamaño del tumor alcanzó los~ 250 mm3, los ratones se aleatorizaron por volumen del tumor en nueve ratones por grupo. Los ratones portadores de tumores se trataron con vehículo (9:1 PEG400 :Etanol) o Compuesto 1 durante seis dosis con un intervalo de dosificación de 12 h. El volumen de dosificación fue de 10 pL/g . Las muestras de plasma y las muestras de tumor se recogieron a las 4, 8 y 12 h después de la dosis final (N = 4 ratones por punto de tiempo) para la posterior medición del nivel del compuesto en muestras de plasma y tumor y del nivel de 2-HG en las muestras de tumor por sistema UPLC-MS-MS.

Para cada ensayo, la concentración total de Compuesto 1 se determinó en pM y la concentración de Compuesto 1 libre se calculó multiplicando la concentración total de Compuesto 1 por 0,043, dado que Compuesto 1 se une a proteínas en un 95,7 % en plasma de ratón. El porcentaje de inhibición de 2-HG en la muestra de tumor individual en los grupos tratados se normalizó al promedio de concentración de 2-HG en el grupo del vehículo en el tiempo de muestreo correspondiente utilizando el siguiente cálculo: % inhibición de 2-HG = 100* (A-B)/A, en que A es el promedio de la concentración de 2-HG en el tiempo de muestreo correspondiente, B es la concentración de 2-HG en el tumor tratado con la dosis dada de Compuesto 1 y removido en el tiempo de muestreo dado. La potencia in vivo de Compuesto 1 para suprimir 2-HG en el tumor se calcula trazando el porcentaje de inhibición de 2-HG frente a la correspondiente concentración de Compuesto 1 libre en el tumor y ajustando los datos con una ecuación logística de cuatro parámetros.

Mutación IDH1-R132H

La mutación IDH1-R132H resultó en una elevación del nivel de 2-HG en cánceres hematológicos y sólidos. Se utilizó el tumor de xenoinjerto HCT-116 IDH1-R132H/+ para evaluar la potencia in vivo de Compuesto 1 para suprimir 2-HG en lisados tumorales. Los ratones portadores de tumores se aleatorizaron por tamaño de tumor en doce ratones por grupo. Los ratones se trataron con Compuesto 1 a 6,25, 12,5, 25 o 50 mg/kg durante seis dosis con un intervalo de dosis de 12 h. Las muestras de plasma y tumor se recogieron a las 4, 8 y 12 horas después de la última dosis con cuatro ratones por punto de tiempo. La concentración de Compuesto 1 en muestras de plasma y tumor se analizó mediante el método LC-MS. El nivel de 2-HG en muestras de tumores se analizó mediante el método LC-MS. El porcentaje de supresión de 2-HG en el lisado tumoral a la dosis dada de Compuesto 1 se normalizó luego al nivel de 2-HG en el grupo de control con vehículo. En este estudio se observó la inhibición de 2-HG dependiente de la dosis y el tiempo por parte de Compuesto 1. El grado de inhibición de 2-HG en los lisados tumorales se correlacionó con la concentración de fármaco libre en el lisado tumoral correspondiente. La potencia in vivo calculada de Compuesto 1 para suprimir 2-HG en el tumor fue de 26,0 nM.

Al corregir la concentración de Compuesto 1 no unido, hubo una buena correlación entre las potencias enzimática, celular de 2-HG y 2-HG in vivo de Compuesto 1 para el mutante IDH1-R132H.

Mutación IDH1-R132C

La mutación IDH1-R132C resultó en una elevación del nivel de 2-HG en cánceres hematológicos y sólidos. Se utilizó el tumor de xenoinjerto HCT-116 IDH1-R132C/+ para evaluar la potencia in vivo de Compuesto 1 para suprimir 2-HG en lisados tumorales. Los ratones portadores de tumores se aleatorizaron por tamaño de tumor en nueve ratones por grupo. Los ratones se trataron con Compuesto 1 a 12,5, 25 o 50 mg/kg durante tres dosis con un intervalo de dosis de 12 h. Las muestras de plasma y tumor se recogieron a las 4, 12 y 24 h después de la última dosis con tres ratones por punto de tiempo. La concentración de Compuesto 1 en muestras de plasma y tumor se analizó mediante el método LC-MS. El nivel de 2-HG en muestras de tumores se analizó mediante el método LC-MS. El porcentaje de supresión de 2-HG en el lisado tumoral a la dosis dada de Compuesto 1 se normalizó luego al nivel de 2-HG en el grupo de control con vehículo. En este estudio se observó la inhibición de 2-HG dependiente de la dosis y el tiempo por parte de Compuesto 1. El grado de inhibición de 2-HG en los lisados tumorales se correlacionó con la concentración de fármaco libre en el lisado tumoral correspondiente. La potencia in vivo calculada de Compuesto 1 para suprimir 2-HG en el tumor fue de 36,0 nM.

Al corregir la concentración de Compuesto 1 no unido, hubo una buena correlación entre las potencias enzimática, celular de 2-HG y 2-HG in vivo de Compuesto 1 para el mutante IDH1-R132C.

Resultados

Dado el papel de 2-HG en suprimir la diferenciación normal de células mt-IDH1 (Figueria etal., 2010; Saha etal., 2014), se plantea la hipótesis de que para revertir y mantener este efecto, es necesario lograr un grado muy alto de inhibición del objetivo sobre una base continua. Por lo tanto, para optimizar el programa de dosificación de Compuesto 1, es necesario lograr una inhibición sostenida de 2-HG > 90% en mt-IDH1 in vivo. Para el ensayo de xenoinjerto HCT116-IDH1R132H, los puntos de tiempo de 12 y 24 horas se eligieron para reflejar el nivel del compuesto y la inhibición de 2-HG correspondiente en la Cmínima de los programas de dosificación BID y QD. Se seleccionaron los puntos de tiempo de 48 y 72 horas para investigar si Compuesto 1 tenía efectos duraderos sobre la inhibición de 2-HG. La concentración de fármaco libre de Compuesto 1 a las 12 horas después de la dosis final está por encima de la CI⁹⁰ in vivo para todas las dosis, y en cada caso se logró una reducción superior al 90 % de los niveles de 2-HG en el tumor. La concentración de fármaco libre disminuyó a 3-10X la CI⁵⁰ in vivo a las 24 horas después de la dosis final, y el compuesto mostró una inhibición del 80-90 %. Hubo menos de 20 nM de concentración de fármaco libre en el tumor a las 48 y 72 horas después de la dosis final, y en ese momento hubo menos del 50 % de inhibición de 2-HG en las muestras de tumor, en consonancia con el nivel reducido de Compuesto 1. Estos datos respaldan la premisa de que se requiere una cobertura constante del objetivo por un margen significativo para lograr una inhibición sostenida de 2-HG. Este experimento también sugiere que un programa BID es el régimen de dosificación preferido para Compuesto 1 para lograr continuamente una inhibición de 2-HG > 90%. Este nivel de inhibición se ha correlacionado recientemente con la eficacia clínica con AG-221 en pacientes con AML que albergan mt-IDH2 (Fan et al., 2014)).

La presente divulgación contempla, entre otras cosas, el reconocimiento de que la concentración total (Ceff) de Compuesto 1 debe estar por encima de 1652 ng/mL en pacientes humanos con el fin de lograr una inhibición del 90% de 2-HG y por encima de 2000 ng/mL para lograr más del 90% de inhibición de 2-HG. Ceff se determinó utilizando los ensayos esbozados en el Ejemplo 7. En dos experimentos con ratones separados, se utilizaron xenoinjertos HCT-116 IDH1-R132H/+ y xenoinjertos tumorales HCT-116 IDH1-R132C/+ para evaluar la potencia in vivo de Compuesto 1 para suprimir 2-HG en lisados tumorales. Se midió la concentración de Compuesto 1 en muestras de plasma y tumor y el nivel de 2-HG en muestras de tumor. El grado de inhibición de 2-HG en los lisados tumorales se correlacionó con la concentración de fármaco libre en el lisado tumoral correspondiente (véase la Figura 18D). Dado el papel de 2-HG en suprimir la diferenciación normal de células mt-IDH1 (Figueria et al., 2010; Saha et al., 2014), la presente divulgación plantea la hipótesis de que para revertir y mantener este efecto, es necesario lograr un grado muy alto de inhibición del objetivo con Compuesto 1 sobre una base continua. Anteriormente se propuso que > 90 % de inhibición de 2-HG se correlaciona con la eficacia clínica en pacientes con AML que albergan mt-IDH2 (FAN, B. et al., Evaluation of the pharmacokinetic/pharmocodynamic (PK/PD) relationships of an oral, selective, first-in-class, potent IDH1 inhibitor, AG-221, from a phase 1 trial in patients with advanced IDH2 mutant positive hematologic malignancies, Blood, 124: 3737, 6 páginas (2014)). Utilizando la curva de la Figura 18D, se determinó que el nivel de concentración de fármaco libre de Compuesto 1 era de 0,256 pM con el fin de lograr una inhibición del 90 % de 2-HG.

Utilizando un enfoque de diálisis de equilibrio rápido, se determinó que la unión a proteínas plasmáticas para un paciente humano era del 94,5 %. (Waters, N.J., et al. (2008)). Validación de un enfoque de diálisis de equilibrio rápido para la medición de la unión a proteínas plasmáticas. J Pharm Sci 97(10): 4586-95.) Por consiguiente, puede determinarse la concentración total (Ceff): 0,256/((100-94.5)/100) = 4,65 pM=1652 ng/mL.

Ejemplo 8 - Compuesto 1 penetra en la barrera hematoencefálica en modelos murinos

Se investigó la penetración de la barrera hematoencefálica y la exposición cerebral libre de Compuesto 1 en el ratón macho CD-1 (Figura 5). Se evaluó la exposición al cerebro de Compuesto 1 después de la dosificación oral (5 mg/kg). Después de una dosis oral de 5 mg/kg en ratones CD1, se encontró que la relación de cerebro a plasma de Compuesto 1 era de 0,24, lo que sugiere que el compuesto tiene características razonables de penetración en el cerebro y que, en dosis más altas, Compuesto 1 tendría el potencial de lograr niveles terapéuticos en el cerebro.

Esto se confirmó mediante la dosificación de 100 mg/kg (Figura 6), en que se determinó que la relación cerebro a plasma era de 0,38. Es importante destacar que, después de una dosis única de 100 mg/kg por vía oral, la concentración de Cmax libre de Compuesto 1 fue de aproximadamente 200 nM (aproximadamente diez veces la CI⁵⁰), cayendo a aproximadamente 130 nM (aproximadamente seis veces la CI⁵⁰) en el punto de tiempo de 7 horas. lo cual es consistente con las exposiciones que produjeron > 90 % de supresión de 2-HG en los estudios PK-PD de xenoinjerto HCT116 (IDH-1 R132H) y HCT116 (I^dH-1 R132C). Basándose en la evaluación en el ratón, Compuesto 1 cruza la barrera hematoencefálica para alcanzar niveles de concentración libres en el cerebro consistentes con la actividad farmacológica. Una dosis oral de 100 mg/kg proporciona una Cmax libre en el cerebro de 200 nM, cayendo a aproximadamente 130 nM en el punto de tiempo de 7 horas.

Ejemplo 9 - Ensayo de Compuesto 1 en modelos de monos cynomolgus.

Adquisición y Aclimatación de Animales

Un total de 22 machos y 22 hembras de monos cynomolgus experimentalmente inexpertos, de aproximadamente 2 años y 7 meses a 3 años y 11 meses de edad en el momento de la transferencia, fueron transferidos de la colonia madre. Los animales se recibieron originalmente de Worldwide Primates Inc.

Los animales fueron puestos en cuarentena a su llegada y se realizaron actividades de cuarentena, incluyendo los tests cutáneos de tuberculina intrapalpebral. Los animales se consideraron aptos antes de ser liberados de la cuarentena. Durante la aclimatación como parte de la colonia madre, los monos fueron examinados por un veterinario del personal, pesados y observados diariamente con respecto a la salud general y cualquier signo de enfermedad.

Aleatorización, Asignación al Estudio y Mantenimiento

Utilizando un procedimiento estándar de aleatorización de valores medidos por peso, se asignaron 20 animales machos y 20 hembras (con un peso de 2,50 a 3,15 kg y de 2,35 a 3,20 kg, respectivamente, en el momento de la aleatorización) a los grupos de control y 3 de tratamiento. Los animales asignados al estudio tenían pesos corporales dentro del ±20 % del peso corporal medio para cada sexo. Animales adicionales obtenidos para el estudio, pero que no se colocaron en el estudio, se transfirieron a la colonia de reserva. A cada uno de los animales se le asignó un número de animal para ser utilizado en el sistema de recopilación de datos y se le implantó un microchip con un número de identificación único. Cada uno de los animales también fue identificado por un tatuaje permanente con el número de animal del vendedor. El número de animal individual, el número de implante, el número de tatuaje y el número de estudio comprendían una identificación única para cada uno de los animales. Cada una de las jaulas se identificó por el número de animal, número de estudio, número de grupo y sexo.

Administración

Monos cynomolgus machos y hembras fueron asignados a cuatro grupos. Los animales se asignaron al estudio como se indica a continuación en la Tabla A. A seis animales por sexo en el Grupo 1 se les administró únicamente el artículo de control del vehículo. A cuatro animales por sexo en los Grupos 2 y 3, y a 6 animales por sexo en el Grupo 4 se les administró el artículo de ensayo. Los animales de los Grupos 2 a 4 recibieron dosis durante 28 días. Se asignaron 2 animales/sexo en los Grupos 1 y 4 para la evaluación de recuperación de 28 días. Los animales recibieron dosis por sonda oral dos veces al día, cada 12 horas, a un volumen de 10 mL/kg/dosis (20 mL/kg/día). A los animales de los Grupos dos a cuatro se les administró 30, 100/50 o 300/200/100 mg/kg/día (15, 50/25 o 150/100/50 mg/kg/dosis) respectivamente. Los niveles de dosis se redujeron para los animales del Grupo 3 y del Grupo 4 según las observaciones clínicas durante la fase de dosificación. El artículo de control del vehículo era Kolliphor EL :Tween 80 (70:30, v/v). Los animales designados para el sacrificio de recuperación (2 animales/sexo en los Grupos 1 y 4) se sometieron a 4 semanas de evaluación de la recuperación.

La evaluación de la toxicidad se basó en la mortalidad, las observaciones clínicas, el peso corporal, el consumo de alimentos, las observaciones oftálmicas, las mediciones electrocardiográficas (ECG) y la patología clínica y anatómica. Se recogieron muestras de sangre para evaluaciones toxicocinéticas.

Evaluación Electrocardiográfica

Con la excepción de un animal en el grupo de dosis alta, no hubo efecto de Compuesto 1 sobre los parámetros cualitativos del ECG. Se observaron complejos ventriculares prematuros frecuentes (Día 1, 3-4 horas después de la dosis) y taquicardia ventricular (Día 28 antes de la dosis y 3-4 horas después de la dosis) en un animal después de la administración de una dosis de 300/200/100 mg/kg/día. Como estas arritmias ventriculares no se consideran variantes normales y se observaron después de la dosis alta, estos hallazgos pueden estar relacionados con el artículo de ensayo. Los efectos notables sobre los parámetros cuantitativos del ECG se limitaron a la duración del intervalo QTc. Cuando se evaluó estadísticamente por sexo, la duración media del intervalo QTc fue más larga (frente al valor de control del vehículo concurrente) en machos de 300/200/100 mg/kg/día en el intervalo posterior a la dosis del Día 1 y en el Día 28 en intervalos antes de la dosis y después de la dosis y en hembras de 100/50 mg/kg/día en los intervalos previos al ensayo y el Día 28. La diferencia en 100/50 mg/kg/día de hembras no se consideró relacionada con el artículo de ensayo, ya que estaba presente antes del inicio de la administración del artículo de ensayo. En los machos de 300/200/100 mg/kg/día, el aumento en la duración media del intervalo QTc puede haber estado relacionado con el artículo de ensayo, ya que se observó en el nivel de dosis más alto y mostró un aumento progresivo con la dosificación continua. La magnitud del cambio con respecto a los valores previos al ensayo fue de leve a moderada (Día 1 después de la dosis: 7,14 %; Día 28 antes de la dosis: 7,73 %; Día 28 después de la dosis: 10,6 %). En comparación con los valores previos al ensayo, la magnitud del aumento en la duración del intervalo QTc en los machos en el intervalo posterior a la dosis del Día 28 fue de 10,61 %, lo que se aproxima al cambio del 10 % observado en los estudios japoneses QT PRODACT (Ando, K., Hombo, T., Kanno, A., Ikeda, H., et al. QT PRODACT: in vivo QT assay with a conscious monkey for assessment of the potential for drug induced QT interval prolongation. J Pharmacol Sci. 2005; 99(5):487-500) of drugs known to cause QT prolongation in people. El efecto sobre la duración del intervalo QTc fue reversible, no estando presente en el intervalo de recuperación. La concentración plasmática umbral de Cmáxen un mono que experimentó una prolongación media del intervalo QTc grupal del 10,6 % fue de 7840 ng/mL.

Conclusión

Los monos Cynomolgus toleraron dosis orales de Compuesto 1 dos veces al día a 15 mg/kg/dosis (30 mg/kg/día) y una vez al día a 50 mg/kg/día. Los hallazgos post-mortem relacionados con Compuesto 1 al final del período de tratamiento incluyeron hallazgos macroscópicos de coloración negra en el hígado de 3/4 machos y 2/4 hembras a 300/200/100 mg/kg/día, que se correlacionó con células multinucleadas en los sinusoides. Se observaron pesos inferiores del timo, que se correlacionaron con una mayor incidencia y/o gravedad del agotamiento linfoide, en animales tratados con Compuesto 1 y se consideraron secundarios al estrés y la mala salud. Microscópicamente, Compuesto 1 se asoció con células multinucleadas en los sinusoides del hígado y atrofia de la mucosa del tracto intestinal en machos y hembras a 100/50 y/o 300/200/100 mg/kg/día. Los cambios histológicos en el hígado se consideraron adversos y se correlacionaron con un cierto número de cambios en la química sérica. En el intervalo de recuperación, no hubo cambios intestinales, lo que sugiere reversibilidad, y las células multinucleadas en los sinusoides del hígado disminuyeron en gravedad, lo que indica una recuperación parcial. Se observó un aumento relacionado con el artículo de ensayo en el nivel medio de QTc en el nivel de dosis más alto de 300/200/100 mg/kg/día en los monos macho. La concentración plasmática umbral de Cmáxen un mono que experimentó una prolongación media del intervalo QTc grupal del 10,6 % fue de 7840 ng/mL.

Se consideró que el nivel sin efecto adverso observado (NOAEL, por sus siglas en inglés) para Compuesto 1 era de 30 mg/kg/día (15 mg/kg/dosis BID). La exposición sistémica (Cmax y AUCTúltima; sexo combinado) en el NOAEL el Día 28 fue de 2490 ng/mL y 23600 ng^h/mL, respectivamente. Basándose en la reversibilidad esperada de los hallazgos hepáticos adversos, 50 mg/kg/día se consideró la dosis más alta sin toxicidad grave (HNSTD, por sus siglas en inglés). La exposición sistémica (Cmax y AUCTúltima; sexo combinado) en el HNSTD el Día 28 fue de 4350 ng/mL y 53900 ng^h/mL, respectivamente.

Ejemplo 10 - Un estudio de aumento de dosis de Fase 1 del inhibidor de mIDH-1, Compuesto 1, en pacientes con AML o síndrome mielodisplásico MDS

Mutaciones de Isocitrato deshidrogenase 1 (m IDH-1) se producen en el 7-14 % de los pacientes con AML (''pts'') y en el 3 % de los pts con MDS. Compuesto 1 es un inhibidor de moléculas pequeñas selectivo y muy potente de mIDH-1 sin responsabilidades anticipadas de CYP o QTc en la dosis de fase 2 recomendada. Compuesto 1 se testó en un estudio de Fase 1/2 para evaluar la seguridad, eficacia, PK y PD de Compuesto 1 como agente único o en combinación con azacitidina o citarabina.

La Figura 13A ilustra el resumen de cohortes de un estudio de fase 1 en AML y MDS con IDHlm, descrito en este ejemplo. El estudio de Fase 1/2 de Compuesto 1 se inició para evaluar la seguridad, PK/PD y la actividad clínica de Compuesto 1 solo o en combinación con azacitidina (AZA) o citarabina en pts de AML/MDS con mIDH-1. En la parte de la fase 1 del estudio, se aumentó la dosis de Compuesto 1 en un diseño 3+3 para definir las dosis máximas toleradas (MTDs) o las dosis máximas evaluadas (MEDs) como agente único (SA, por sus siglas en inglés) y en combinación con azacitidina (CO) seguido de cohortes de expansión. Las dosis evaluadas fueron 150 mg QD (SA, CO), 300 mg QD (SA) y 150 mg BID (SA, CO). La seguridad se evaluó por la incidencia y la gravedad de los AEs emergentes del tratamiento (TEAEs) para todos los pts y la eficacia se derivó de los criterios del IWG (2003 AML y 2006 MDS) basado en la evaluación del investigador para los pts evaluables.

La Figura 15 ilustra el ciclo 1, la IDH-DS de grado 2 se resuelve con dexametasona e hidroxiurea. C2D1: CRp (1 % de blastos) a SCT en MLFS, durante el ensayo clínico del Ejemplo 10.

Criterios de Inclusión de Sujetos pueden incluir:

1. AML patológicamente probada o MDS de riesgo intermedio, alto o muy alto según lo definido por los criterios de la Organización Mundial de la Salud (OMS) o el Sistema de Puntuación de Pronóstico Internacional Revisado (IPSS-R) que es recidivante o refractario (R/R) a terapia estándar y/o para los cuales la terapia estándar está contraindicada o que no ha respondido adecuadamente a la terapia estándar, p. ej., Compuesto 1 como agente único: el paciente no ha recibido inhibidor de IDH1 o Compuesto 1 en combinación con Aza: los pacientes no han recibido tratamiento previo y elegibles para Aza, los pacientes pueden haber recibido un inhibidor de IDHlm o HMA.

2. Los pacientes deben tener enfermedad mutada en el gen IDH1-R132 documentada según lo evaluado por el centro.

3. Buen estado funcional.

4. Buena función renal y hepática.

5. QTcF de referencia < 450 ms.

6. Sin exclusiones para medicamentos concomitantes.

Criterio de Exclusión:

1. Pacientes con metástasis sintomáticas en el sistema nervioso central (SNC) u otra localización del tumor (tal como compresión de la médula espinal, otra masa compresiva, lesión dolorosa no controlada, fractura ósea, etc.) que requieran una intervención terapéutica urgente, cuidados paliativos, cirugía o radioterapia.

2. insuficiencia cardíaca congestiva (Clase III o IV de la New York Heart Association) o angina de pecho inestable. Antecedentes de infarto de miocardio en el año anterior al ingreso en el estudio, hipertensión no controlada o arritmias no controladas

3. Enfermedad pulmonar (p. ej., COPD, asma, etc.) que no se controla (síntomas moderados a graves) con la medicación actual.

4. Infecciones bacterianas, víricas o fúngicas activas y no controladas que requieran tratamiento sistémico.

Plan de Tratamiento/Intervención

Compuesto 1 se administró como agente único o en combinación con azacitidina o citarabina. Compuesto 1 se suministró en cápsulas de 50 mg o 150 mg y se administró según la frecuencia y el nivel de dosis definidos en el protocolo. La azacitidina se administró según el estándar de atención del centro. La citarabina se administrará según el estándar de atención del centro.

La fase de Fase 1 del estudio se dividió en 2 partes distintas: una parte de aumento de las dosis, que utilizará un diseño de etiqueta abierta de Compuesto 1 (agente único), o Compuesto 1 azacitidina (agente de combinación), o Compuesto 1 citarabina (agente de combinación) administrado a través de uno o más programas de dosificación intermitente seguidos de una parte de expansión de la dosis. La parte de expansión de la dosis inscribirá a los pacientes en hasta 5 cohortes de expansión, explorando la actividad de Compuesto 1 como agente único, así como la actividad de combinación con azacitidina o citarabina. Los pacientes pueden recibir solo una dosis única del fármaco del estudio (brazo de agente único y brazo de combinación) el Ciclo 1 Día 1. Después de completar las cohortes de Fase 1 relevantes, comienza la Fase 2 de inscripción. Los pacientes se inscriben en 6 cohortes diferentes, examinando el efecto de Compuesto 1 (como agente único) y Compuesto 1 con azacitidina (combinación) en diversos estados de enfermedad AML/MDS. Las condiciones examinadas incluyen la leucemia mieloide aguda (también conocida como leucemia mielógena aguda) y el síndrome mielodisplásico.

Tabla 16 - Brazos e Intervenciones del Ensayo de Fase 1.

Después de completar la Fase 1, comenzó la inscripción en la Fase 2. : Los pacientes se inscribieron en 6 cohortes diferentes, examinando el efecto de Compuesto 1 (como agente único) y Compuesto 1 azacitidina (combinación) en diversos estados de enfermedad AML/MDS. Las cohortes de la Fase 2 se resumen en la Tabla 17 que figura a continuación

Tabla 17

Medidas de Resultado Primarias

El resultado del estudio se puede evaluar utilizando los siguientes criterios:

1. Dosis Máximas Toleradas (MTDs) o Dosis Máximas Evaluadas (MEDs) [Fase 1]. Marco de Tiempo: Dentro de las primeras 4 semanas de tratamiento.

2. Número de Participantes con Toxicidad Limitante de la Dosis (DLT) [Fase 1]. Marco de Tiempo: Dentro de las primeras 4 semanas de tratamiento. Los criterios DLT pueden incluir:

■ Toxicidad no hematológica > Gr 3 o hallazgo de laboratorio

■ Toxicidad hematológica de Gr 4 el Día 42 en ausencia de enfermedad

■ Incapacidad para tolerar al menos el 75 % del tratamiento del Ciclo 1

3. Dosis recomendadas para futuros estudios [Fase 1]. Marco de Tiempo: Dentro de las primeras 4 semanas de tratamiento.

4. Tasa de respuesta completa (CR, CRi, MLFS, CR Médula) de Compuesto 1 como agente único o en combinación con Azacitidina en pacientes con AML/MDS [Fase 2]. Marco de Tiempo: Según las pautas de evaluación de respuesta de IWG para AML y MDS basadas en la evaluación del investigador hasta la compleción del estudio, p. ej., IWG AML 2003/M^dS 2006 modificado.

Medidas de Resultado Secundarias

El resultado del estudio se puede evaluar también utilizando los siguientes criterios:

1. Área bajo la curva de concentración plasmática (AUC) frente al tiempo [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

2. Concentración Plasmática Pico (Cmax) [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

3. Tiempo de concentración plasmática pico (Tmax) [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

4. Tiempo para que la mitad del fármaco esté ausente en el torrente sanguíneo después de la dosis (T 1/2) [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

5. Velocidad a la que se elimina el fármaco del torrente sanguíneo (CL/F) [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

6. Velocidad de distribución del fármaco centro del torrente sanguíneo (Vd/F) [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

7. Reducción de los niveles de 2-HG en plasma [Fase 1 y Fase 2]. Marco de Tiempo: Muestras de sangre para análisis PK/PD recogidas en múltiples visitas durante los primeros 60 días de tratamiento y el día 1 de todos los ciclos posteriores a los primeros 30 días.

8. Evidencia de actividad antileucémica o antimielodisplásica de Compuesto 1 determinada por respuesta completa (CR), CRi (remisión completa con recuperación hematológica incompleta), estado libre de leucemia morfológica (MLFS), médula CR, remisión parcial (PR) y enfermedad estable (SD) como agente único o en combinación con azacitidina o citarabina [Fase 1]. Marco de Tiempo: Según las Pautas de Evaluación de Respuesta de IWG para AML y MDS basadas en la evaluación del investigador hasta la compleción del estudio.

9. Incidencia y gravedad de eventos adversos, anomalías de laboratorio clínico y cambios en los parámetros del ECG evaluados por CTCAE v4.0 como agente único o en combinación con azacitidina [Fase 2]. Marco de Tiempo: La seguridad se evaluará desde el momento de la primera dosis hasta 28 días después de la última dosis.

10. Medidas adicionales de actividad antileucémica o antimielodisplásica determinadas por CRh, Respuesta General (OR) y Enfermedad Estable de Compuesto 1 solo o en combinación con azacitidina [Fase 2]. Marco de Tiempo: Según las Pautas de Evaluación de Respuesta de IWG para AML y MDS basadas en la evaluación del investigador hasta la compleción del estudio.

11. Tiempo de respuesta (TTR) [Fase 2]. Marco de Tiempo: desde la primera dosis del fármaco del estudio hasta el momento de la primera respuesta por recuento de recuperación de sangre.

12. Duración de la Respuesta (DOR) [Fase 2]. Marco de Tiempo: desde el momento de la primera respuesta por recuento de recuperación de sangre hasta la recaída.

13. Supervivencia Libre de Eventos (EFS) [Fase 2]. Marco de Tiempo: desde el momento de ingreso al estudio hasta la progresión.

14. Supervivencia Global (OS) [Fase 2]. Marco de Tiempo: desde el momento de la entrada en el estudio hasta la muerte o la última fecha conocida con vida al final del seguimiento

Antecedentes de la Enfermedad y Características de Referencia de Participantes Ejemplares

Un resumen de los antecedentes de la enfermedad y las características de referencia de los participantes ejemplares se muestra en la Tabla 18.

Tabla 18

Resultados

En el ensayo clínico en seres humanos descrito en el Ejemplo 10, cuando Compuesto 1 se administró como agente único, proporcionó una tasa de respuesta global (ORR) del 41 % y una CR/CRh del 27 % en AML R/R. . La combinación de Compuesto 1 con azacitidina proporcionó una ORR del 46 % y una CR/CRh del 16 % en AML R/R.

En el corte de datos, 35 pts con una mediana de 2 regímenes previos (intervalo 1-9) habían recibido Compuesto 1 en aumento de dosis, incluyendo 31 pts de agente único (SA) y 41 pts de combinación con azacitidina (CO). La exposición en estado estacionario que superó la CI⁹⁰objetivo para mIDH-1 se logró con 150 mg BID, lo que resultó en una reducción de 2-HG a niveles normales en la mayoría de los pts. Además, la administración de Compuesto 1, tanto como SA como en CO a 150 mg BID, permitió que todos los pacientes alcanzaran la Css objetivo que excedía de la CI⁹⁰para mIDH-1 mientras permanecían por debajo de las exposiciones proyectadas a partir de los estudios de toxicología en monos que podrían ser asociados con la prolongación del intervalo QT. Los datos de farmacocinética estaban disponibles hasta el Ciclo 10; los niveles de fármaco en plasma en estado estacionario se mantuvieron en la Css objetivo a lo largo del período evaluado. Se observó una reducción de 2-HG en todos los niveles de dosis, y los pacientes que recibieron 150 mg BID tuvieron una mediana dentro de los límites normales de 2-HG.

Como se muestra en la Figura 16A, se observó independencia de la transfusión (plaquetas y/o glóbulos rojos) en todas las categorías de respuesta en pacientes con AML tratados con Compuesto 1 como agente único que dependían de la transfusión al inicio del estudio. Como se muestra en la Figura 16B, se observó una reducción significativa en el contenido de blastos en la médula ósea en pacientes con una respuesta CR/CRi según los criterios de respuesta IWG. También se observaron reducciones en el contenido de blastos en la médula ósea en pacientes en ausencia de respuesta IWG (enfermedad estable), incluido 1 sujeto (indicado con f en la Figura 16B) con recuento de blastos en la médula ósea < 5 % pero con blastos presentes en la sangre periférica.

Las respuestas por evaluación del investigador por IWG modificado se resumen en la Tabla 19:

Tabla 19- Respuesta al Compuesto 1 como agente único.

Como se muestra en la Figura 17A, se observó independencia de la transfusión (plaquetas y/o glóbulos rojos) en todas las categorías de respuesta en pacientes con AML tratados con Compuesto 1 y azacitidina que dependían de la transfusión al inicio del estudio. Como se muestra en la Figura 17B, se observó una reducción en el contenido de blastos en la médula ósea en pacientes con una respuesta CR/CRi según los criterios de respuesta IWG. También se observaron reducciones en el contenido de blastos en la médula ósea en pacientes en ausencia de respuesta IWG (enfermedad estable), incluido 1 sujeto (indicado con f en la Figura 17B) con recuento de blastos en la médula ósea < 5 % pero con blastos presentes en la sangre periférica. La reducción de blastos en la médula > 50% en pacientes con SD indica actividad clínica en ausencia de respuesta IWG.

Las respuestas por evaluación del investigador por IWG modificado se resumen en la Tabla 20.

Tabla 20- Respuesta al Compuesto 1 azacitidina

Disposición Ejemplar del Paciente

En la Tabla 21 se muestra un resumen de la disposición del paciente.

Tabla 21

Eventos Adversos Emergentes del Tratamiento (TEAE) > 15 % Todos los Grados Se puede encontrar un resumen de los TEAEs en las Tablas 22A y 22B.

Tabla 22a

Tabla 22B

Eventos Adversos (AE) de Interés y Muertes

Los AEs se evaluaron según los Criterios de Terminología Común para Eventos Adversos (NCI CTCAE) del Instituto Nacional del Cáncer, versión 4.03.

No se observaron DLTs en el aumento de la dosis.

Compuesto 1 como Agente Único

4 (13%) pacientes que recibieron Compuesto 1 como agente único exhibieron IDH-DS; todos se resolvieron con la interrupción del tratamiento, dexametasona, hidroxiurea y atención de apoyo y luego se reanudó el tratamiento con Compuesto 1.

El cambio máximo de QTcF desde el inicio para los pacientes tratados con Compuesto 1 como agente único se reseña en la Tabla 23.

Tabla 23

2 pacientes con BBB ( f en la Tabla 23) inscritos con lecturas de QTc por encima de lo normal al inicio permanecieron estables dentro del mismo intervalo de QTc durante el tratamiento. Un paciente (* en la Tabla 23) tuvo un aumento de > 60 ms, pero permaneció dentro de los límites normales (< 450 ms).

9 pacientes que recibieron Compuesto 1 como agente único murieron en el espacio de los 30 días posteriores a la última dosis debido a eventos adversos no relacionados con el tratamiento con Compuesto 1. Los AEs no relacionados con el tratamiento con Compuesto 1 que resultaron en la muerte se resumen a continuación:

• Enfermedad Progresiva (PD) (n=3)

• Eventos del Sistema Nervioso Central (SNC) (n=2)

• Sepsis (n=1)

• Paro cardíaco (n=1)

• Fallo multiorgánico (n=1)

• Toxicidad al régimen HSCT (n=1)

Compuesto 1 en Combinación con Azacitidina

El cambio máximo de QTcF desde el inicio (BL) para los pacientes tratados con Compuesto 1 y azacitidina en combinación se reseña en la Tabla 24.

Tabla 24

Con referencia a la Tabla 24, 4 pacientes con > 60 ms que aumentaron desde BL incluyeron a los 2 pacientes con medicamentos concomitantes sospechosos, 1 paciente desarrolló prolongación de G1 y 1 paciente permaneció dentro de los límites normales. Entre los pacientes con QTcF < 480 ms en BL, 2 tenían valores de 480-500 ms y 2 tenían valores > 500 ms. 1 de cada grupo (incluido 1 con marcapasos) tenía QTcF prolongado antes del inicio del tratamiento. Los otros 2 tuvieron una prolongación transitoria que se normalizó una vez que los medicamentos concomitantes sospechosos suspendieron 2 AEs de prolongación del intervalo QTcF reseñados en el estudio (G2 y G3). Estos fueron transitorios y los pacientes reanudaron el tratamiento una vez que se interrumpió la medicación concomitante sospechosa.

7 pacientes que recibieron Compuesto 1 y azacitidina murieron en el espacio de los 30 días posteriores a la última dosis debido a AEs no relacionados con el tratamiento con Compuesto 1. Los AEs no relacionados con el tratamiento con Compuesto 1 que resultaron en la muerte se resumen a continuación:

• Enfermedad Progresiva (PD) (n=3)

• Eventos del Sistema Nervioso Central (SNC) (n=2)

• Neumonía (n=1)

• Fístula gastrointestinal (n=1)

•

La presente divulgación incluye, entre otras cosas, la comprensión novedosa de que la administración de 300 mg de Compuesto 1 (p. ej., 150 mg BID o 300 mg QD) a un paciente o población de pacientes da como resultado una concentración plasmática mínima terapéuticamente eficaz sostenida (Css). Una Css de Compuesto 1 de este tipo dio como resultado una reducción duradera en el nivel plasmático de 2-HG a lo largo del transcurso de al menos 6 ciclos de tratamiento.

Como se describe en el Ejemplo 10, la concentración plasmática total de Compuesto 1 y la concentración plasmática de 2-HG se midieron en la sangre de pacientes que recibieron una de tres dosis e intervalos de dosis diferentes: 150 mg QD, 300 mg QD o 150 mg BID (que reciben Compuesto 1 como agente único o en combinación con azacitidina como se describe en el ensayo clínico del Ejemplo 10, en cada categoría). Los niveles de 2-HG se midieron antes de la administración de Compuesto 1 y luego se midieron después de la administración de Compuesto 1 hasta el ciclo 2, día 1 después de recibir por primera vez Compuesto 1 (como la forma sólida obtenida del Ejemplo 1).

Como se muestra en las Figuras 19-20, la administración de Compuesto 1 a 150 mg BID dio como resultado una concentración mínima en plasma sanguíneo superior a 1652 ng/mL después del ciclo 2 de un ciclo de tratamiento de 28 días tanto como agente único como en combinación con azacitidina. Además, como se muestra en las Figuras 21 -22, se observó una reducción del nivel de 2-HG. La disminución en la concentración de 2-HG observada en pacientes que recibieron Compuesto 1 a 150 mg BID o 300 mg QD es inesperadamente mejor que aquellos que recibieron Compuesto 1 a 150 mg QD, tanto en términos de magnitud como de variabilidad del efecto.

Como se muestra en las Figuras 8A-8E, las exposiciones en plasma (concentración en plasma sanguíneo en estado estacionario) de Compuesto 1 fueron duraderas (es decir, sostenidas) a lo largo de al menos una duración de 6 ciclos de tratamiento. Como se muestra en las Figuras 9A-9C, las concentraciones de 2-HG en plasma se redujeron dentro de 1 ciclo (C2D1) y se mantuvieron durante toda la duración del tratamiento.

Ejemplo 11 - Farmacocinética y Farmacodinámica de Pruebas de Ensayos Clínicos en Seres humanos

Antes de los ensayos de Fase 1, la evaluación de Compuesto 1 en rata in vivo y tejido humano in vitro indicó que el metabolismo hepático por las enzimas CYP (CPY3A4, 2C9, 1A1) era la ruta principal de excreción. Los estudios de toxicología en animales predijeron que el umbral para el riesgo de prolongación del intervalo QTc se producía con exposiciones > 6 veces la Ceff in vivo observada en estudios preclínicos, lo que resultó en una reducción de > 90 % en el 2-HG plasmático.

En las pruebas clínicas en seres humanos arriba descritas en el Ejemplo 10, las concentraciones plasmáticas de Compuesto 1 se determinaron mediante un método bioanalítico validado y sensible. Compuesto 1 se administró a pacientes QD (una vez al día) y BID (dos veces al día) como agente único o en combinación con azacitidina. El primer día de dosificación (Ciclo 1 Día 1), se administró a los pacientes una dosis única de Compuesto 1 y se recogió el plasma para el análisis farmacocinético durante 24 horas. Basado en números limitados de pacientes evaluables (n=5), se estimó una semivida plasmática de aproximadamente 60 horas para Compuesto 1 (estado estacionario en la semana 2) para la administración de 150 mg BID del Compuesto 1, con una Cmax de aproximadamente 570 ng/mL (muy por debajo de los niveles esperados para aumentar el potencial QTcF (intervalo QT corregido) y un Área Bajo la Curva (0-24 horas) de aproximadamente 10000 a 10050 h ng/mL.

Se observó una falta de respuesta proporcional a la dosis en la Cmax y el AUC después de una dosis única de Compuesto 1. De manera similar, los valores mínimos en estado estacionario no aumentaron con la dosis de 150 mg QD a 300 mg QD (véase la Figura 10A). Se cree que la falta de aumento de la Cmax y de los valores mínimos constantes se debe a una absorción limitada por disolución, lo que condujo a la exploración de la partición de la dosis. Como se demuestra en la Figura 10A, dividir la dosis de 300 mg QD en una dosis de 150 mg BID mejoró la exposición en estado estacionario de Compuesto 1, como agente único y en combinación con azacitidina. En particular, las concentraciones observadas en la dosis de 150 mg BID como agente único o en combinación con azacitidina abarcan los valores CI⁹⁰para la inhibición de todas las mutaciones R132X.

Se midieron los cambios en los niveles séricos de 2-HG recogidos antes de la dosis y en varios momentos a través de C2D1 (ciclo 2, día 1) para evaluar el efecto farmacodinámico de Compuesto 1 (Véase el Ejemplo 10). Se observó una reducción en 2-HG en todas las cohortes de dosificación con la normalización de los niveles de 2-HG observados con el programa de dosificación BID de Compuesto 1. La Figura 10B muestra el nadir de los niveles de 2-HG en el Ciclo 1 de dosificación de Compuesto 1 observado en pacientes que recibieron Compuesto 1 como agente único Dosificación QD o BID. El nivel mediano para el pretratamiento, QD (150 mg o 300 mg) y BID (150 mg) es de aproximadamente 700, 200 y 70 ng/mL, respectivamente. Por consiguiente, los niveles medianos de 2-HG se redujeron aproximadamente 10 veces en la dosis de 150 mg BID de Compuesto 1 en comparación con la dosis de 150 mg QD de Compuesto 1.

Ejemplo 12 - Estudio de Caso de Prueba de Ensayo Clínico en Seres Humanos de Compuesto 1

La paciente X es una mujer de 66 años, diagnosticada de AML que recibió inicialmente un tratamiento de inducción con citarabina a altas dosis al que la paciente era refractaria. Posteriormente, la paciente se inscribió en un estudio de ensayo clínico, donde fue tratada con Compuesto 1 como agente único (SA) 150 mg BID y logró una remisión completa (CR) después de un ciclo de tratamiento (28 días). El paciente continuó el tratamiento mientras estaba en CR durante 7 ciclos adicionales. Luego, el paciente recayó y suspendió el tratamiento del estudio.

El paciente Y es un hombre de 62 años, diagnosticado con AML secundaria FLT3 positiva (secundaria a MDS). El paciente recibió quimioterapia de inducción intensiva con citarabina y daunorrubicina en combinación con midostaurina (inhibidor de FLT3), pero desgraciadamente fue refractario. Se inscribió en un estudio de ensayo clínico, donde fue tratado con Compuesto 1150 mg BID en combinación con azacitidina durante un total de 8 ciclos (1 ciclo = 28 días). Logró la remisión completa con eliminación de la mutación IDH1 (CRm) en el ciclo 6 y suspendió el tratamiento del estudio después del ciclo 8 para someterse a un trasplante de médula ósea (HSCT).

El paciente Z es un hombre de 50 años diagnosticado con glioma IDHlm de grado III (astrocitoma anaplásico) tratado previamente con quimioterapia y radiación de acuerdo con el estándar de atención aplicable. Este paciente se inscribió posteriormente en el estudio clínico tratado con Compuesto 1 a 150 mg dos veces al día (BID) cada día. Después del tratamiento con Compuesto 1 durante 2 ciclos (cada ciclo = 28 días consecutivos recibiendo 150 mg de Compuesto 1 BID), mediante resonancia magnética, el investigador determinó que el paciente había experimentado una respuesta parcial según los criterios RANO (> 50 % de disminución en el tumor, sin lesiones nuevas, con dosis estables de corticosteroides, sin progresión de la enfermedad mensurable). Después de recibir 2 ciclos de Compuesto 1 (150 mg BID), el paciente continúa en tratamiento con 150 mg BID de Compuesto 1 por protocolo.

3 pacientes recibieron un Compuesto 1 a 100 mg una vez al día (QD) cada día. Se recogieron muestras de sangre cada 28 días para medir las concentraciones plasmáticas de Compuesto (agente único). Se recogió sangre en los siguientes momentos en relación con la administración de Compuesto 1:

• Ciclo 1 Día 1: pre-dosis y post-dosis a los 30 minutos, 1,2, 4 y 8 horas

• Ciclo 1 Días 2, 8, 15 y 22: predosis

• Ciclo 2 Día 1: pre-dosis y post-dosis a los 30 minutos, 1,2, 4 y 8 horas

• Ciclo 2 Día 2: 24 horas después de la dosificación de C2D1 (± 2 horas) para pacientes en expansión de dosis

• Ciclo 2 Día 4: predosis [72 horas después de la dosificación de C2D1 (± 4 horas)] para pacientes en expansión de dosis solamente

• Ciclo 2 Día 15: predosis

• Ciclo 3 y Posteriores: Predosis el Da 1 de cada ciclo

La Cmin observada asociada con este estudio de caso se puede encontrar en la Figura 19.

Ejemplo 13 - Un Estudio de Fase 1b/2 de Compuesto 1 en Pacientes con Tumores del SNC y Sólidos Avanzados con una Mutación IDH1.

Los pacientes que tienen cualquiera de los siguientes tumores sólidos que albergan una mutación IDH1 reciben Compuesto 1 (a menos que se indique lo contrario, a una dosis de 150 mg de la forma sólida proporcionada en el Ejemplo 1, administrada por vía oral BID) como agente único o en combinación con terapias adicionales:

• Compuesto 1 se administra a pacientes diagnosticados con glioma o condrosarcoma como agente único o en combinación con 5-azacitidina (a la que también se alude en esta memoria como "5-azacitidina'' o "azacitidina");

• Compuesto 1 se administra a pacientes diagnosticados con cánceres hepatobiliares como agente único o en combinación con un inhibidor de PD-1 (preferiblemente, nivolumab);

•

• Compuesto 1 se administra a pacientes diagnosticados con colangiocarcinoma intrahepático como agente único o en combinación con gemcitabina y cisplatino ("GemCis"); y

• Compuesto 1 se administra a pacientes diagnosticados con otros tumores sólidos no del SNC como agente único.

•

Cada uno de los pacientes tiene un tumor sólido avanzado con mutación del gen IDH1 R132X confirmado histológica o citológicamente antes de recibir Compuesto 1. En particular, algunos pacientes que reciben Compuesto 1 pueden tener un glioma avanzado con mutación del gen IDH1 R132X confirmado histológica o citológicamente que ha recidivado o progresó después de la terapia estándar. Los pacientes que reciben Compuesto 1 pueden tener glioma en recaída o refractario (según los criterios de la OMS de 2016) con mutación IDH1 confirmada. Otros pacientes que reciben Compuesto 1 pueden tener tumores hepatobiliares en recaída o refractarios con mutación IDH1 confirmada tratados previamente con una terapia aprobada para HBC. Otros pacientes que reciben Compuesto 1 pueden tener condrosarcoma recurrente, refractario o localmente avanzado o metastásico con mutación IDH1 confirmada que no es susceptible de extirpación quirúrgica completa. Otros pacientes que reciben Compuesto 1 pueden tener un colangiocarcinoma intrahepático avanzado, no resecable o metastásico con mutación IDH1 confirmada que no es elegible para resección curativa o trasplante. Se puede evaluar la farmacocinética (PK) de los pacientes (p. ej., mediante la recogida de una muestra de sangre) a intervalos regulares durante el curso de tratamiento. En particular, la evaluación farmacocinética previa a la dosis se realiza al menos los días 1, 2, 8, 15 y 22 del curso de tratamiento para pacientes que tienen un curso de tratamiento que comprende uno o más ciclos de tratamiento de 28 días. (Se puede realizar una evaluación post-dosis adicional en el ciclo 1 día 1 y en el ciclo 2 día 1). Además, evaluaciones PK pre-dosis se recogen los días 1,2 y 15 del ciclo 2 de un ciclo de tratamiento de 28 días durante el curso de tratamiento. Se realiza una evaluación PK pre-dosis adicional el día 1 del Ciclo 3 y posteriores ciclos de tratamiento de 28 días durante el curso de tratamiento. Algunos pacientes que reciben Compuesto 1 pueden tener otros tumores sólidos en recaída o refractarios con mutación IDH1 confirmada.

Además, los métodos de tratamiento pueden comprender la administración de Compuesto 1 a pacientes que cumplen los siguientes criterios de inclusión: > 18 años de edad; Esperanza de vida de > 4 meses; Neoplasia maligna mutada en el gen IDH1 documentada según la evaluación de la prueba local; Capaz de proporcionar muestra de tejido tumoral (archivo); y diagnóstico de cáncer como se detalla a continuación. Preferiblemente, los métodos comprenden administrar Compuesto 1 a un paciente que también cumple uno o más de los siguientes criterios de inclusión adicionales:

• Recuperado a < Grado 2 o toxicidad inicial (excepto alopecia) de la terapia previa (según CTCAE v 4.03);

• Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo del Este (ECOG) 0-2;

•

• Función adecuada de la médula ósea (p. ej., recuento absoluto de neutrófilos (ANC) > 1,5 x 109/L sin factor de crecimiento alguno en los 7 días anteriores y Hemoglobina > 8,0 g/dL (con o sin soporte de transfusión); recuento de plaquetas > 75 x 109/L (con o sin soporte transfusional), Cohorte 4b (combinación GemCis) y recuento de plaquetas > 100 x 109/L (con o sin soporte transfusional));

•

• Child-Pugh Clase A (solo HBC)

•

• Función hepática adecuada (p. ej., aspartato aminotransferasa (AST) (transaminasa glutámica oxaloacética sérica [SGOT]) / alanina aminotransferasa (ALT) (transaminasa glutámica piruvato sérica [SGPT]) < 2,5 x límite superior institucional de la normalidad (ULN). Para pacientes con elevaciones relacionadas con sospecha de tumores malignos, < 5 x ULN, y bilirrubina Total < 1,5 x ULN Para pacientes con sospecha de elevación relacionada con tumores malignos < 3 x límite superior institucional de la normalidad); y

•

• Función renal adecuada (p. ej., aclaramiento de Creatinina según la ecuación de Cockcroft-Gault de > 60 mL/min).

•

En algunas realizaciones, Compuesto 1 no se administra a pacientes que cumplen uno o más de los siguientes criterios de exclusión:

• Trasplante previo de órgano sólido o de células hematopoyéticas

•

• Tratamiento previo contra el cáncer (p. ej., sin tratamiento previo con moléculas pequeñas, anticuerpos u otro tratamiento contra el cáncer dentro de los 21 días (o 5 semividas), lo que sea más corto que la primera dosis del tratamiento del estudio (6 semanas para nitrosoureas o mitomicina C); Sin tratamiento previo con un inhibidor de IDH1; sin radioterapia previa (incluida la ablación por radiofrecuencia) dentro de las 4 semanas previas al inicio del tratamiento del estudio; sin radioterapia estereotáctica corporal (SBRT) previa dentro de las 2 semanas previas al inicio del tratamiento del estudio; y sin quimioembolización o radioembolización dentro de las 4 semanas)

•

• Insuficiencia cardíaca congestiva (Clase III o IV de la New York Heart Association) o angina de pecho inestable; antecedentes de infarto de miocardio dentro del año anterior al ingreso al estudio, hipertensión no controlada o arritmias no controladas

•

• Antecedentes de prolongación del intervalo QT o intervalo QT basal corregido con el método de Fridericia (QTcF) > 450 ms (promedio de lecturas por triplicado) (NOTA: el criterio no se aplica a pacientes con bloqueo de rama derecha o izquierda)

•

• Medicamentos concomitantes asociados con la prolongación del intervalo QTc o Torsades de Pointes (TdP) iniciados menos de la duración requerida para alcanzar la concentración plasmática en estado estacionario (aproximadamente cinco semividas) antes de la primera dosis del fármaco del estudio (medicamentos utilizados según sea necesario [PRN ] (p. ej., Zofran) están exentos).

•

• Mujeres embarazadas o lactantes o mujeres en edad fértil que no utilicen métodos anticonceptivos adecuados;

pacientes masculinos que no utilizan métodos anticonceptivos adecuados

•

• Otras neoplasias malignas en los últimos 5 años, excepto cáncer de piel no melanoma tratado adecuadamente, cáncer de cuello uterino in situ tratado curativamente, carcinoma ductal in situ (DCIS), estadio 1, carcinoma endometrial grado 1 u otros tumores sólidos, incluyendo linfomas (sin afectación de la médula ósea) tratado curativamente sin evidencia de enfermedad durante > 5 años

•

• Cirugía mayor dentro de las 4 semanas posteriores al inicio del tratamiento del estudio o que no se recuperó de los efectos de una cirugía mayor anterior (la colocación de una vía central sin complicaciones o el aspirado con aguja fina no se consideran cirugía mayor);

•

• Pacientes que reciben > 6 mg/día de dexametasona o equivalente

• Pacientes con trastornos gastrointestinales que probablemente interfieran con la absorción del medicamento del estudio

• Antecedentes conocidos de seropositividad al VIH.

• Infección activa por el virus de la hepatitis B o C (carga viral de la hepatitis B o C >100 unidades internacionales/mililitro o equivalente institucional local)

•

• Condición médica inestable o grave no controlada (p. ej., función cardíaca inestable, condición pulmonar inestable que incluye neumonitis y/o enfermedad pulmonar intersticial, diabetes no controlada) o cualquier enfermedad médica o psiquiátrica importante o resultado de laboratorio anormal que, a juicio del investigador, aumentaría el riesgo al paciente asociado con su participación en el estudio y

•

• Combinación PD-1 únicamente: Pacientes con enfermedad autoinmune activa (Nota: los pacientes con diabetes bien controlada o hipotiroidismo son elegibles).

•

Cada uno de los pacientes recibe Compuesto 1 a lo largo de un curso de tratamiento médicamente apropiado. En general, los pacientes reciben Compuesto 1 (ya sea Compuesto 1 como agente único o la terapia de combinación como se indicó arriba) hasta la progresión de la enfermedad o toxicidad inaceptable. Al comienzo del curso de tratamiento, cada uno de los pacientes recibe Compuesto 1 como la forma sólida que se puede obtener por el método del Ejemplo 1 a una dosis de 150 mg BID administrada continuamente en uno o más ciclos de tratamiento de 28 días.

El Conjunto de Análisis Evaluable por DLT se define como todos los pacientes en los períodos preliminares de seguridad (Compuesto 1 como agente único, Compuesto 1 en combinación 5-azacitidina, Compuesto 1 en combinación GemCis y Compuesto 1 en combinación inhibidor de PD-1 como nivolumab) que experimentaron una DLT durante el Ciclo 1 o completaron al menos el 75 % de la dosis prescrita del Ciclo 1. Estos conjuntos de análisis se utilizarán para evaluar la tolerabilidad de Compuesto 1.

El Conjunto de Análisis de Seguridad se define como todos los pacientes que recibieron cualquier cantidad de fármaco(s) del estudio (Compuesto 1 y agentes combinados, si corresponde).

Este conjunto de análisis será el conjunto de análisis principal para todos los criterios de valoración de seguridad, excepto la evaluación DLT. El análisis de seguridad será por cohorte y por tratamiento dentro de la cohorte si se inicia más de 1 dosis o combinación de dosificación para una determinada cohorte de indicación.

El Conjunto de Análisis de Respuesta Evaluable se define como todos los pacientes con enfermedad mensurable al inicio del estudio que recibieron los medicamentos del estudio específicos para la parte de su cohorte particular (ya sea monoterapia con Compuesto 1 o Compuesto 1 en combinación), y tuvieron al menos 1 post -evaluación de la respuesta inicial o interrupción de la fase de tratamiento provocada por la progresión de la enfermedad (incluida la muerte provocada por la progresión de la enfermedad) dentro de las 8 semanas (+ ventana de 2 semanas) de la primera dosis del tratamiento del estudio. Este conjunto de análisis será el conjunto de análisis principal para los criterios de valoración de la eficacia tales como ORR. Todas las evaluaciones de respuesta serán por cohorte y por tratamiento dentro de la cohorte si se inician más de 1 dosis o combinaciones de dosificación para una determinada cohorte de indicación.

Las mediciones de seguridad del paciente y las mediciones de laboratorio clínico se realizan a lo largo del curso del tratamiento para cada cohorte. Las mediciones de seguridad incluyen la evaluación de los medicamentos concomitantes del paciente y los procedimientos, la evaluación de AE/SAE, el examen físico dirigido por los síntomas y el estado funcional de ECOG. La evaluación de las mediciones de laboratorio clínico incluye química sanguínea y hematología y otras mediciones específicas para cohortes individuales.

Para los pacientes que reciben Compuesto 1 como agente único, o en combinación con 5-azacitidina (glioma, condrosarcoma) o en combinación con un inhibidor de PD-1 (HBC), Compuesto 1 se administra en un ciclo de tratamiento de 28 días (28 días consecutivos, a una dosis de 150 mg BID) y se obtienen mediciones de seguridad del paciente y química sanguínea clínica y hematología en los siguientes días durante el curso de tratamiento para pacientes en el primer ciclo de tratamiento de 28 días durante el ensayo clínico: día 1, día 8 (+/-2), día 15 (+/-2), día 22 (+/-2). En el ciclo de tratamiento 2 y posteriores, estas evaluaciones se obtienen el día 1 (+/-2) y el día 15 (+/-2).

Para los pacientes que reciben Compuesto 1 en combinación con quimioterapia (p. ej., GemCis para el colangiocarcinoma), Compuesto 1 se administra en un ciclo de tratamiento de 28 días (28 días consecutivos, a una dosis de 150 mg BID) y la medición de la seguridad del paciente y la química sanguínea clínica y hematología se obtienen en los siguientes días durante el curso de tratamiento para pacientes en los primeros seis ciclos de tratamiento de 28 días durante el ensayo clínico: día 1, día 8 (+/-2), día 15 (+/-2), día 22 (+/-2). La combinación se administra para un total de seis ciclos de tratamiento. En el ciclo de tratamiento 7 y posteriores, estas evaluaciones se obtienen el día 1 (+/-2) y el día 15 (+/-2). El paciente puede continuar con el tratamiento con Compuesto 1 como agente único sin el agente de combinación según lo indique el médico tratante.

Período de Inicio de Seguridad

El estudio incluye un Período de Inicio de Seguridad en el que se administra un agente único de 150 mg de Compuesto 1 BID durante 28 días (1 ciclo). El Período de Inicio de Seguridad emplea un diseño tradicional 3+3, mediante el cual 3 pacientes con tumores sólidos y 3 pacientes con gliomas son tratados con Compuesto 1150 mg BID y controlados para toxicidades limitantes de dosis (DLT) durante el primer ciclo de tratamiento del estudio.

• Si no se producen DLTs en los 3 primeros pacientes de ninguno de los grupos (tumores sólidos o glioma), y los datos farmacocinéticos (PK)/farmacodinámicos (PD) disponibles respaldan la dosis, la inscripción continúa en las 4 cohortes específicas de la enfermedad que se describen más adelante.

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• Si ocurre una DLT en los primeros 3 pacientes en cualquier grupo, 3 pacientes adicionales son tratados con ese nivel de dosis en el grupo relevante. Si no se producen DLTs en estos 3 primeros pacientes adicionales (es decir, < 2 DLT por cada 6 pacientes) y los datos PK/PD disponibles respaldan la dosis, la inscripción continúa en las 4 cohortes específicas de la enfermedad que se describen más adelante.

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• Si hay > 2 DLTs en la dosis inicial, se pueden considerar dosis más bajas o un programa de dosificación alterado de Compuesto 1. Del mismo modo, se pueden evaluar dosis más altas en función de los datos de seguridad, PK y PD según lo determine el SRC.

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Cohorte 1: Glioma (n= 16- 31)

Compuesto 1 se utiliza para tratar pacientes a los que se ha diagnosticado un diagnóstico de cáncer de glioma. En particular, Compuesto 1 se administra a pacientes que cumplen los criterios de inclusión anteriores y uno o más de los siguientes criterios de inclusión relacionados con la enfermedad: glioma avanzado con mutación del gen IDH1 confirmado histológica o citológicamente, y un diagnóstico de glioblastoma multiforme con enfermedad confirmada con mutación del gen IDH1 con primera o segunda recurrencia. La cohorte 1 incluye pacientes con glioma que albergan una mutación IDH1 que es recidivante o refractario. Los pacientes con glioma se tratan con el Compuesto 1 como agente único (Cohorte 1a). La Cohorte 1a emplea un diseño de 2 etapas de Simon, en el que se trata a 8 pacientes con Compuesto 1 como agente único durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad (Etapa 1). Si se observa > 1 respuesta clínica en la Etapa 1, entonces se inicia la Etapa 2 (n=15) con Compuesto 1 como agente único. Si no se observan respuestas clínicas en la Etapa 1 con Compuesto 1 como agente único, entonces se examina la terapia de combinación (Compuesto 1+ 5-azacitidina) (Cohorte 1b). La Cohorte 1b emplea un diseño de 2 etapas de Simon, mediante el cual 8 pacientes son tratados en la Etapa 1 con terapia de combinación durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad. Si se observa > 1 respuesta clínica en la Etapa 1 de la Cohorte 1 b, entonces se inicia en la Etapa 2 (n=15) con terapia de combinación. Durante la Etapa 1, los datos de seguridad agregados son controlados por el SRC. Si se observa una toxicidad inaceptable en la Etapa 1, el SRC puede modificar la dosis y el programa. (Nota: cualquier paciente con glioma inscrito en el Período de Inicio de seguridad se considera parte de la inscripción en la Etapa 1).

Cohorte 2: Carcinoma Hepatobiliar (HBC) (n = 21-63)

Compuesto 1 se utiliza para tratar pacientes a los que se ha diagnosticado un diagnóstico de cáncer de carcinoma hepatobiliar (HBC).. En particular, Compuesto 1 se administra a pacientes que cumplen los criterios de inclusión anteriores y uno o más de los siguientes criterios de inclusión relacionados con la enfermedad: Recaído/refractario o intolerante a la terapia estándar de atención aprobada (incluido: carcinoma hepatocelular, carcinoma biliar u otros carcinomas hepatobiliares); Mutación del gen IDH1 confirmada histológica o citológicamente con enfermedad mensurable según los criterios RECIST 1.1; y Child-Pugh Clase A.

La Cohorte 2 incluye pacientes con HBC recidivante/refractario que albergan una mutación IDH1. Los pacientes de HBC se tratan inicialmente con Compuesto 1 como agente único (Cohorte 2a). Se permite la exposición previa a nivolumab para los pacientes de la Cohorte 2a. La Cohorte 2a emplea un diseño de 2 etapas de Simon, en el que se trata a 8 pacientes con Compuesto 1 como agente único durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad (Etapa 1). Si se observa > 1 respuesta clínica en la Etapa 1, entonces se inicia la Etapa 2 (n=15) con Compuesto 1 como agente único. Si no se observan respuestas clínicas en la Etapa 1 con Compuesto 1 como agente único, entonces se puede examinar la terapia de combinación (Compuesto 1+ inhibidor de PD1) (Cohorte 2b). La Cohorte 2b emplea un diseño de 2 etapas de Simon, mediante el cual 13 pacientes son tratados en la Etapa 1 con terapia de combinación durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad. Si se observa > 4 respuesta clínica en la Etapa 1 de la Cohorte 2b, entonces se inicia en la Etapa 2 (n=42) con terapia de combinación. No se permite la exposición previa a nivolumab para los pacientes de la Cohorte 2b. Durante la Etapa 1, los datos de seguridad agregados son controlados por el SRC. Si se observa una toxicidad inaceptable en la Etapa 1, el SRC puede modificar la dosis y el programa. (Nota: cualquier paciente con HBC inscrito en el Período de Inicio de Seguridad se considera parte de la inscripción en la Etapa 1).

Cohorte 3: Condrosarcoma (n= 16- 31)

Compuesto 1 se utiliza para tratar pacientes a los que se ha diagnosticado un diagnóstico de cáncer de condrosarcoma. En particular, Compuesto 1 se administra a pacientes que cumplen los criterios de inclusión anteriores y uno o más de los siguientes criterios de inclusión relacionados con la enfermedad: recidivantes o refractarios y localmente avanzados o metastásicos y no susceptibles de escisión quirúrgica completa; y mutación del gen IDH1 confirmada histológica o citológicamente con enfermedad mensurable según los criterios RECIST 1.1. La Cohorte 3 incluye pacientes con condrosarcoma en recaída/refractario, localmente avanzado o metastásico que albergan una mutación IDH1. Los pacientes con condrosarcoma se tratan con Compuesto 1 como agente único (Cohorte 3a). La Cohorte 3a empleará un diseño de 2 etapas de Simon, en el que se trata a 8 pacientes con Compuesto 1 como agente único durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad (Etapa 1). Si se observa > 1 respuesta clínica en la Etapa 1, entonces se inicia la Etapa 2 (n=15) con Compuesto 1 como agente único. Si no se observan respuestas clínicas en la Etapa 1 con Compuesto 1 como agente único, entonces se examina la terapia de combinación (Compuesto 1+ 5-azacitidina) (Cohorte 3b). La Cohorte 3b emplea un diseño de 2 etapas de Simon, mediante el cual 8 pacientes son tratados en la Etapa 1 con terapia de combinación durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad. Si se observa > 1 respuesta clínica en la Etapa 1 de la Cohorte 3b, entonces se inicia en la Etapa 2 (n=15) con terapia de combinación. Durante la Etapa 1, los datos de seguridad agregados son controlados por el SRC. Si se observa una toxicidad inaceptable en la Etapa 1, el SRC puede modificar la dosis y el programa. (Nota: cualquier paciente con condrosarcoma inscrito en el Período de Inicio de Seguridad se considera parte de la inscripción en la Etapa 1).

Cohorte 4: Colangiocarcinoma intrahepático (n= 21- 63)

Compuesto 1 se utiliza para tratar pacientes a los que se ha diagnosticado un diagnóstico de cáncer de colangiocarcinoma intrahepático (IHCC). En particular, Compuesto 1 se administra a pacientes que cumplen los criterios de inclusión anteriores y uno o más de los siguientes criterios de inclusión relacionados con la enfermedad: IHCC avanzado no resecable o metastásico no elegible para resección curativa o trasplante; Fase 1 b/Inicio de Seguridad de la Fase 2: enfermedad recidivante o refractaria; y mutación del gen IDH1 confirmada histológica o citológicamente con enfermedad mensurable según los criterios RECIST 1.1. La Cohorte 4 incluye pacientes con IHCC avanzado que albergan una mutación IDH1. Los pacientes con IHCC se tratan con Compuesto 1 como agente único (Cohorte 4a). Los pacientes de la cohorte 4a no deben ser elegibles para las terapias estándares. La Cohorte 4a emplea un diseño de 2 etapas de Simon, en el que se trata a 8 pacientes con Compuesto 1 como agente único durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 28 días) y se evalúa su eficacia y seguridad (Etapa 1). Si se observan > 2 respuestas clínicas en la Etapa 1, entonces se inicia la Etapa 2 (n=15) con Compuesto 1 como agente único. Si se observan < 2 respuestas clínicas en la Etapa 1 con Compuesto 1 como agente único, entonces se examina la terapia de combinación (Compuesto 1+ GemCis) (Cohorte 4b). Los pacientes de la Cohorte 4b no han recibido más de un ciclo de terapia Gem/Cis. La Cohorte 4b emplea un diseño de 2 etapas de Simon, mediante el cual 13 pacientes son tratados en la Etapa 1 con terapia de combinación durante un mínimo de 4 ciclos (ciclo = 21 días) y se evalúa su eficacia y seguridad. Si se observa > 4 respuestas clínicas en la Etapa 1 de la Cohorte 4b, entonces se inicia la Etapa 2 (n=42) con terapia de combinación. Durante la Etapa 1, los datos de seguridad agregados son controlados por el SRC. Si se observa una toxicidad inaceptable en la Etapa 1, el SRC puede modificar la dosis y el programa. (Nota: cualquier paciente con IHCC inscrito en el Período de Inicio de Seguridad se considera parte de la inscripción en la Etapa 1).

En algunos ejemplos, los pacientes a los que se ha diagnosticado IHCC recidivante/refractario reciben Compuesto 1 como agente único, mientras que los pacientes recién diagnosticados y sin tratamiento previo con IHCC reciben Compuesto 1 en combinación con quimioterapia GemCis.

Cohorte 5: Otros tumores sólidos no del SNC con mutaciones IDH1 (n=12)

Compuesto 1 se utiliza para tratar pacientes a los que se han diagnosticado tumores sólidos no del SNC con mutaciones IDH1 (preferiblemente 2-HG detectable en plasma). La Cohorte 5 incluye pacientes con tumores sólidos no del SNC en recaída o refractarios que albergan una mutación IDH1. En particular, Compuesto 1 se administra a pacientes que cumplen los criterios de inclusión anteriores y uno o más de los siguientes criterios de inclusión relacionados con la enfermedad: en recaída o refractarios a la terapia estándar sin otras opciones terapéuticas disponibles; y mutación del gen IDH1 confirmada histológica o citológicamente con enfermedad mensurable según los criterios de respuesta apropiados de la enfermedad. Esta cohorte incluye el tratamiento con Compuesto 1 como agente único. Debido a la diversidad de la población, esta es una cohorte exploratoria sin determinaciones predefinidas de eficacia/inutilidad. Los datos de seguridad agregados son controlados por el SRC y si se observa una toxicidad inaceptable en > 2 pacientes, la cohorte puede cerrarse para una inscripción adicional.

Tabla 25 Programa de Evaluación de la Eficacia por Cohorte

Para las Cohortes 1-5 anteriores, las evaluaciones de eficacia obtenidas incluyen las que se enumeran en la siguiente tabla. (MRS = espectroscopia de resonancia magnética 1H; MRI = formación de imágenes por resonancia magnética).

Tabla 25

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica que comprende Compuesto 1:

para uso en un método para tratar un glioma que alberga una mutación de isocitrato deshidrogenasa-1 (IDH-1) en un paciente humano adulto, en donde el método comprende administrar 150 mg de Compuesto 1 al paciente dos veces al día (BID, por sus siglas en inglés) durante un curso de tratamiento.

2. La composición farmacéutica para uso según la reivindicación 1, en donde el glioma es un glioma avanzado que recidivó o progresó antes de la administración de Compuesto 1

3. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en donde, antes de la administración de Compuesto 1, al paciente se le diagnostica un glioma avanzado con mutación del gen IDH-1 confirmado histológica o citológicamente o un glioblastoma multiforme con enfermedad mutada con del gen IDH-1 confirmada con primera o segunda recurrencia.

4. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde al paciente se le diagnostica un glioma de bajo grado o un glioblastoma multiforme secundario (GBM).

5. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la mutación IDH-1 es una mutación R132X.

6. La composición farmacéutica para uso según la reivindicación 5, en donde la mutación R132X se selecciona de R132L, R132G y R132S.

7. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición farmacéutica que comprende Compuesto 1 se administra por vía oral al paciente.

8. La composición farmacéutica para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Compuesto 1 se administra como agente único para el tratamiento del glioma que alberga la mutación IDH-1.

9. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el curso de tratamiento es de al menos 15 días consecutivos.

10. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el curso de tratamiento es de entre 15 días consecutivos y 6 meses.

11. La composición farmacéutica para uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde el curso de tratamiento es de al menos 6 meses.