ES2894269T3 - Inhibidores macrocíclicos de los virus flaviviridae - Google Patents

Abstract

Un compuesto de la Fórmula I: **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo, en donde: A es CH2; A1 es (C1-C5)alquileno o (C2-C5)alquenileno, en donde un átomo de carbono sp3 de A1 se sustituye opcionalmente por -O-, -S(O)n-, -NH- o -N((C1-C4)alquilo)-, y en donde un átomo de carbono sp3 o sp2 de A1 está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste en halo, (C1- C8)alquilo, (C2-C8)alquenilo, (C2-C8)alquinilo, arilo, heterocicloalquilo, cicloalquilo, arilo(C1-C4)alquilo, ciclo(C1-C4)alquilo, heterociclo(C1-C4)alquilo, arilheterociclo(C1-C4)alquilo, -OR9, -SR9, -S(O)R9, - S(O)2R9 y - N(R9)2; A2 es -CH(R8)-arileno o -CH(R8)-heteroarileno, en donde A2 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -OR9, - SR9, -S(O)R9, -S(O)2R9, -N(R9)2, halo, halo(C1- C4)alquilo, halo(C1-C4)alcoxi, ciano y (C1-C8)alquilo; L1 es -O-C(O); X1 es -NH- o -N(CH3)-; R1 y R2, tomados junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-; R3 es H; R4a y R4b son independientemente H o (C1-C8)alquilo, en donde cada R4a y R4b está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en ciano, -COOH, halo, hidroxilo, amino, (C1-C8)alcoxi, mono(C1-C8)alquilamino, di(C1-C8)amino, arilo y heteroarilo; R5a y R5b son independientemente H o (C1-C8)alquilo, en donde cada R5a y R5b está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -N3, ciano, -COOH, halo, hidroxilo, amino, mono(C1-C8)alquilamino, di(C1-C8)alquilamino, (C1-C8)alcoxi, arilo y heteroarilo, o R5a y R5b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a): **(Ver fórmula)** en donde uno o más átomos de carbono en el anillo de fórmula (a) se sustituye opcionalmente por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y en donde un átomo de anillo de fórmula (a) tiene opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, =N(C1-C4)alcoxi, halo, hidroxilo, -NH2, (C1- C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi, -OC(O)R9, -C(O)2R9, y -S(O)2R9, R6a y R6b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a), en donde uno o más anillos átomos de carbono de la Fórmula (a) se sustituye opcionalmente por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y en donde un átomo de anillo de fórmula (a) opcionalmente tiene una o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, =N(C1-C4)alcoxi, halo, hidroxilo, -NH2, (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi, - OC(O)R9, -C(O)2R9, y -S(O)2R; R8 es H, (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C2-C4)alquinilo, (C2-C4)alquinilo, arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo o cicloalquilo, en donde R8 está opcionalmente sustituido con - OR, -N(R9)2, -CON(R9)2, o ciano; cada R9 es independientemente H, (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C2-C4)alquenilo o (C2-C4)alquinilo; cada n es independientemente 0, 1 o 2; y m es 1, 2, 3, 4 o 5.

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores macrocíclicos de los virus flaviviridae

CAMPO

[0001] La presente solicitud proporciona nuevos compuestos que inhiben los virus, las composiciones que contienen tales compuestos, y el uso de dichos compuestos en terapia. También se describen en el presente documento métodos terapéuticos que comprenden la administración de dichos compuestos.

ANTECEDENTES

[0002] Los virus de ARN que comprenden la familia Flaviviridae incluyen al menos tres géneros distinguibles incluyendo pestivirus, flavivirus, y hepacivirus (Calisher, et al., J. Gen. Virol., 1993, 70, 37-43). Si bien los pestivirus causan muchas enfermedades animales de importancia económica, como el virus de la diarrea viral bovina (BVDV), el virus de la peste porcina clásica (CSFV, cólera porcina) y la enfermedad fronteriza de las ovejas (BDV), su importancia en la enfermedad humana está menos bien caracterizada (Moennig, V., et al., Adv. Vir. Res.

1992, 48, 53-98). Los flavivirus son responsables de importantes enfermedades humanas como el dengue y la fiebre amarilla, mientras que los hepacivirus causan infecciones por el virus de la hepatitis C en los seres humanos. Otras infecciones virales importantes causadas por la familia Flaviviridae incluyen el virus de la encefalitis japonesa (JEV) del virus del Nilo Occidental (VNO), el virus de la encefalitis transmitida por garrapatas, el virus Junjin, la encefalitis del valle de Murray, la enchaplitis de San Luis, el virus de la fiebre hemorrágica de Omsk y el virus del Zika.

[0003] El virus de la hepatitis C (VHC) es la principal causa de enfermedad hepática crónica en todo el mundo (Boyer, N. et al. J Hepatol. 32: 98-112, 2000), por lo que un enfoque significativo de la investigación antiviral actual se dirige hacia el desarrollo de mejores métodos de tratamiento de infecciones crónicas por VHC en humanos (Di Besceglie, A. M. y Bacon, B. R., Scientific American, Oct.: 80-85, (1999); Gordon, CP, et al., J. Med. Chem. 2005, 48, 1-20; Maradpour, D., y col., Nat. Rev. Micro. 2007, 5 (6), 453-463). Dymock et al. en Antiviral Chemistry & Chemotherapy, 11: 2; 79 - 95 (2000). Las curas virológicas de los pacientes con infección crónica por VHC son difíciles de lograr debido a la enorme cantidad de producción diaria de virus en pacientes con infección crónica y la alta mutabilidad espontánea del virus del VHC (Neumann, et al., Science 1998, 282, 103-7; Fukimoto, et al., Hepatology, 1996, 24, 1351-4; Domingo, et al., Gene 1985, 40, 1-8; Martell, et al., J. Virol. 1992, 66, 3225-9.

[0004] Actualmente, existen principalmente dos compuestos antivirales, la ribavirina, un análogo de nucleósido, y el interferón alfa (a) (IFN), que se utilizan para el tratamiento de infecciones crónicas por VHC en humanos. La ribavirina sola no es eficaz para reducir los niveles de ARN viral, tiene una toxicidad significativa y se sabe que induce anemia. Se ha informado que la combinación de IFN y ribavirina es eficaz en el tratamiento de la hepatitis C crónica (Scott, L. J., et al. Drugs 2002, 62, 507-556) pero menos de la mitad de los pacientes que recibieron este tratamiento muestran un beneficio persistente. Por lo tanto, es necesario desarrollar más efectos e terapias anti-VHC.

[0005] El macrociclo sanglifehrin y derivados son inmunomoduladores y se unen ciclofilinas de isomerasa de peptidilprolil cis/trans (PPIasa) de una manera única (documento WO 97/02285; WO 98/07743; J. Am. Chem. Soc 2003, 125, 3849-3859; J. Org. Chem. 2000, 65, 9255-9260; Angew. Chem. Int. Ed. 1999, 38, 2443-2446). Las ciclofilinas son isomerasas de peptidil-prolil cis/trans (PPIasa) que regulan el plegamiento de proteínas in vivo e inhiben el virus de la hepatitis C (Lin et al., WO2006/138507). Sin embargo, ninguno de los sangliferinas o sus derivados está disponible para la terapia antiviral humana. Por lo tanto, existe una necesidad continua de desarrollar sangliferinas macrocíclicas con actividad de virus anti-Flaviviridae y particularmente actividad anti-VHC.

[0006] El documento WO 2012/078915 A1 se refiere a inhibidores macrocíclicos de virus Flaviviridae.

RESUMEN

[0007] En una realización, se proporciona un compuesto representado por la Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo, en donde:

A es CH² ;

A1 es (C¹-C⁵) alquileno o (C²-C⁵) alquenileno en donde un átomo de carbono sp3 de A1 se sustituye opcionalmente por -O-, -S(O)n-, -NH- o -N((C¹-C⁴)alquilo)-, y en donde un átomo de carbono sp3 o sp2 de A1 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, alquilo (C¹-C⁸), (C²-C⁸) alquenilo, (C²-C⁸) alquinilo, arilo, heterocicloalquilo, cicloalquilo, arilo(C¹-C4)alquilo, ciclo(C1-C4)alquilo, heterocicloalquilo (C¹-C⁴ alquilo), arilheterocicloalquilo(C1-C4)alquilo, -OR9, -SR9, -S(O)R9, -S(O)² R9 y -N(R9)² donde tal la sustitución opcional es químicamente factible;

A2 es -CH(R8)-arileno o -CH(R8)-heteroarileno, en donde A2 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -OR9, -SR9, -S(O)R9, -S(O)² R9, -N(R9)² , halo, halo(C¹-C4)alquilo, halo(C1-C4)alcoxi, ciano y (C¹-C⁸)alquilo donde tal sustitución opcional es químicamente factible;

L1 es -O-C(O)-;

X1 es -NH- o -N(CH3)-;

R1 y R2, cuando se toman junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-;

R3 es H;

R4a y R4b son independientemente H o (C¹-C⁸)alquilo, en donde cada R4a y R4b está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en ciano, -COOH, halo, hidroxilo, (C¹-C8)alcoxi, amino, mono(C¹-C⁸)alquilamino, di(C¹-C⁸)alquilamino, arilo y heteroarilo donde tal sustitución opcional es químicamente factible;

R5a y R5b son independientemente H o (C¹-C⁸)alquilo, en donde cada R5a y R5b está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en -N³ , ciano, - COOH, halo, hidroxilo, amino, mono(C¹-C⁸)alquilamino, di(C¹-C⁸)alquilamino, (C¹-C⁸)alcoxi, arilo y heteroarilo, o

R5a y R5b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a):

en donde uno o más átomos de carbono del anillo de Fórmula (a) están opcionalmente reemplazados por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y donde un átomo del anillo de Fórmula (a) opcionalmente tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, =N(C1-C4)alcoxi, halo, hidroxilo, -NH² , (C¹-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi, -OC(O)R9, -C(O)² R9, y -S(O)² R9;

R6a y R6b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a), donde uno o más átomos de carbono del anillo de Fórmula (a) están opcionalmente reemplazados por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y donde un átomo del anillo de Fórmula (a) opcionalmente tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, =N(C1-C4)alcoxi, halo, hidroxilo, -NH² , (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C¹-C⁴)alcoxi, -OC(O)R9, -C(O)² R9, y -S(O)² R9;

R8 es H, (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C2-C4)alquinilo, (C2-C4)alquinilo, arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo o cicloalquilo, en donde R8 está opcionalmente sustituido con -OR, -N(R9)² , -CON(R9)² o ciano;

cada R9 es independientemente H, (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C2-C4)alquenilo o (C2-C4)alquinilo;

cada n es independientemente 0, 1 o 2; y

m es 1, 2, 3, 4 ó 5.

[0008] En otra realización, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo y uno o más vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables. En un aspecto de la realización, la composición farmacéutica comprende además uno o más agentes terapéuticos adicionales.

[0009] En otra realización más, se proporciona un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo para su uso en el tratamiento de una infección viral de Flaviviridae. En un aspecto de la realización, el tratamiento da como resultado la reducción de la carga viral o el aclaramiento del ARN viral en un paciente.

[0010] En otra realización más, se proporciona un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo para su uso en el tratamiento de una infección viral de Coronaviridae. En un aspecto de la realización, el tratamiento da como resultado la reducción de la carga viral o el aclaramiento del ARN viral en un paciente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA

Definiciones

[0011] A menos que se indique lo contrario, se pretende que los siguientes términos y frases como se usan aquí tengan los siguientes significados:

"Alcanoilo" es RC(O)-; "alcanoiloxi" es RC(O)O-; y "alcanoilamino" es RC(O)NR'-; donde R es un grupo alquilo como se define aquí, y R’ es hidrógeno o alquilo.

"Alquenilo" se refiere a un grupo hidrocarbilo lineal o ramificado con al menos un sitio de insaturación, es decir, un carbono-carbono, doble enlace sp2. En algunas realizaciones, alquenilo es un grupo alquenilo C²-C²⁰, un grupo C²-C¹⁰ alquenilo o un grupo C²-C⁶ alquenilo. Los ejemplos de grupo alquenilo incluyen, pero no se limitan a vinilo (-CH=CH²), alilo (-CH²CH=CH²), ciclopentenilo (-C⁵H⁷) y 5-hexenilo (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2).

"Alquenileno" se refiere a un radical hidrocarbonado insaturado, de cadena lineal o ramificada o cíclico que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos átomos de carbono diferentes de un alqueno original. Por ejemplo, un grupo alquenileno puede tener de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono o de 2 a 6 átomos de carbono. Los radicales alquenileno típicos incluyen, pero no se limitan a 1,2-etenileno (-CH=CH-).

"Alcoxi" es RO- donde R es alquilo, como se define en el presente documento. Los ejemplos no limitantes de grupos alcoxi incluyen metoxi, etoxi y propoxi.

"Alquilo" se refiere a un grupo hidrocarbilo de cadena lineal o ramificada. En una realización, el alquilo tiene de 1 a 20 átomos de carbono (es decir, C¹-C²⁰ alquilo). En algunas realizaciones, alquilo es un grupo C¹-C¹⁰ alquilo o un grupo C¹-C⁶ alquilo. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, f-butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo y decilo.

"Alquileno" se refiere a un radical hidrocarburo cíclico o radical saturado, de cadena lineal o ramificada que tiene dos centros radicales monovalentes derivados de la eliminación de dos átomos de hidrógeno del mismo 0 dos átomos de carbono diferentes de un alcano parental. Por ejemplo, un grupo alquileno puede tener de 1 a 20 átomos de carbono, de 1 a 10 átomos de carbono o de 1 a 6 átomos de carbono. Ejemplos de radicales alquileno incluyen, pero no se limitan a metileno (-CH²-), etileno (-CH²CH²-), propileno (-CH²CH²CH²-) y butileno (-CH²CH²CH²CH²-).

"Alquinilo" se refiere a un hidrocarburo que contiene átomos de carbono normales, secundarios o terciarios con al menos un sitio de insaturación, es decir, un triple enlace carbono-carbono sp. Por ejemplo, un grupo alquinilo puede tener de 2 a 20 átomos de carbono (es decir, C²-C^{2 0} g alquinilo), 2 a 12 átomos de carbono (es decir, C²-C¹² alquino) o 2 a 6 átomos de carbono (es decir, C²-C⁶ alquinilo). Los ejemplos de grupos alquinilo incluyen, pero no se limitan a acetilénico (-C=CH) y propargilo (-CH²CECH).

"Amino" se refiere a -NH².

"Alquilamino" se refiere a un grupo amino sustituido con uno o más grupos alquilo. "Mono(alquil)amino" o "(alquil)amino" es RNH-, y "di(alquil)amino" o "(alquil)²amino" es R2N-, donde cada uno de los grupos R es alquilo como se define en este documento y son iguales o diferentes. Los ejemplos de grupos alquilamino incluyen, pero no se limitan a metilamino, etilamino, propilamino, butilamino, dimetilamino, dietilamino y metiletilano.

"Alquinileno" se refiere a un radical hidrocarbonado insaturado, de cadena lineal o ramificada o cíclico que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno del mismo o dos átomos de carbono diferentes de un alquino original. Por ejemplo, un grupo alquinileno puede tener de 2 a 20 átomos de carbono, de 2 a 10 átomos de carbono o de 2 a 6 átomos de carbono. Los radicales alquinileno típicos incluyen, pero no se limitan a acetileno (-C=C-), propargileno (-CH²C=C-) y 4-pentinileno (-CH2CH2CH2C=C-).

"Arilo" se refiere a cualquier anillo de carbono monocíclico o bicíclico de hasta 7 átomos en cada anillo, en donde al menos un anillo es aromático, o un sistema de anillo aromático de 5 a 14 átomos de carbono que incluye un grupo aromático carbocíclico fusionado con un o grupo cicloalquilo de 6 miembros. Los ejemplos de grupos arilo incluyen, pero no se limitan a fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo e indanilo.

"Arilalquilo" se refiere a un alquilo como se define en el presente documento sustituido con un radical arilo. "Arileno" se refiere a un arilo como se definió anteriormente que tiene dos centros de radicales monovalentes derivados de la eliminación de dos átomos de hidrógeno de dos átomos de carbono diferentes de un arilo original. Los radicales arileno típicos incluyen, pero no se limitan a fenileno, p. ej.,

y naftileno, p. ej.,

"arilalquileno" se refiere a un arilalquilo como se definió anteriormente que tiene dos centros de radicales monovalentes derivados de la eliminación de un átomo de hidrógeno del radical arilo y el otro hidrógeno eliminado del radical alquilo del grupo.

"Cicloalquilo" se refiere a un grupo hidrocarbilo que contiene al menos una estructura de anillo saturado o parcialmente insaturado y unido mediante un carbono de anillo. Los grupos cicloalquilo incluyen anillos hidrocarbonados mono, bi y policíclicos, ya sean condensados, con puentes o espiro. En diversas realizaciones, se refiere a un resto cíclico C³-C¹² saturado o parcialmente insaturado, ejemplos del cual incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo y ciclooctilo.

"Cicloalquilalquilo" se refiere a un resto alquilo sustituido con un grupo cicloalquilo. Los ejemplos de grupos cicloalquilalquilo incluyen ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentiletilo y ciclohexilmetilo.

"Cicloalquilalquileno" se refiere a un resto alquileno sustituido con un grupo cicloalquilo. Los ejemplos de grupos cicloalquilalquileno incluyen ciclopropilmetileno, ciclobutilmetileno, ciclopentiletileno y ciclohexilmetileno.

"Cicloalquileno" se refiere a un cicloalquilo, como se define en el presente documento, que tiene dos centros radicales monovalentes derivados de la eliminación de dos átomos de hidrógeno del mismo o dos átomos de carbono diferentes de un cicloalquilo original. Los ejemplos de cicloalquileno incluyen, pero no se limitan a ciclopropileno, ciclobutileno, ciclopentileno y ciclohexileno.

"Dialquilaminoalquilo" se refiere a un resto alquilo sustituido con un grupo dialquilamino, en donde dialquilamino es como se define en el presente documento.

"Éster" significa cualquier éster de un compuesto en donde cualquiera de las funciones -COOH de la molécula se reemplaza por una función -C(O)OR, o en donde cualquiera de las funciones -OH de la molécula se reemplaza por una función de -OC(O)R, en donde el resto R del éster es cualquier grupo que contenga carbono que forme un resto éster estable, que incluye, entre otros, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo y derivados sustituidos de los mismos. "Halo" se refiere a cloro (-Cl), bromo (-Br), flúor (-F) o yodo (-I).

"Haloalcoxi" se refiere a alcoxi, como se define en el presente documento, sustituido con uno o más radicales halo.

"Haloalcoxialquilo" se refiere a un resto alquilo sustituido con un grupo haloalcoxi, como se define en el presente documento.

"Haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo, en donde uno o más átomos de hidrógeno del grupo alquilo están reemplazados por un átomo de halógeno. Los ejemplos de grupos haloalquilo incluyen, pero no se limitan a -CF³ , -CHF² , -CFH² y -CH²CF³.

"Heterocicloalquilo" se refiere a un grupo monocíclico, bicíclico o tricíclico saturado o parcialmente insaturado de 2 a 14 átomos de carbono del anillo y, además de los átomos de carbono del anillo, 1 a 4 heteroátomos seleccionados del grupo que consiste en P, N, O y S. El grupo heterocíclico puede estar unido a través de un átomo de carbono o mediante un heteroátomo, y cuando está sustituido, el sustituyente puede estar unido a un átomo de carbono o un heteroátomo. Los ejemplos de heterociclilo incluyen azetidinilo, benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzofurazanilo, benzopirazolilo, benzotriazolilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, carbazolilo, carbolinilo, cinolinilo, furanilo, imidazolilo, indolinilo, indolzolilo, indolazinilo, indolazinilo, indolazinilo, indolacinilo, indolazinilo oxadiazolilo, oxazolilo, oxazolina, isoxazolina, oxetanilo, piranilo, pirazinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridopiridinilo, piridazinilo, piridilo, pirimidilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolilo, quinoxalinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiranilo triazolilo, azetidinilo, 1,4-dioxanilo, hexahidroazepinilo, piperazinilo, piperidinilo, piridin-2-onilo, pirrolidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, dihidrobenzoimidazolilo, dihidrobenzofuranilo, dihidrozolidrobenzotioxilo rooxadiazolilo, dihidrooxazolilo, dihidropirazinilo, dihidropirazolilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidropirrolilo, dihidroquinolinilo, dihidrotetrazolilo, dihidrotiadiazolilo, dihidrotiazolilo, dihidrotienilo, dihidrotriazolilo, dihidroazetidinilo, metilendioxibenzoílo, tetrahidrofuranilo, y tetrahidrotienilo y N-óxidos de los mismos.

"Arilheterocicloalquilo" se refiere a un grupo heterocicloalquilo, como se define en el presente documento, en donde un átomo de hidrógeno se ha reemplazado por un grupo arilo.

"Arilheterocicloalquilalquilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define aquí, en donde un átomo de hidrógeno se ha reemplazado con un grupo heterocicloalquilo, y un átomo de hidrógeno del grupo heterocicloalquilo se ha reemplazado con un grupo arilo.

"Heterocicloalquilalquilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, en donde un átomo de hidrógeno se ha reemplazado por un grupo heterocicloalquilo.

"Heterocicloalquilalquileno" se refiere a un grupo alquileno, como se define en el presente documento, en donde un átomo de hidrógeno se ha reemplazado por un grupo heterocicloalquilo.

"Heterocicloalquileno" se refiere a un heterocicloalquilo, como se definió anteriormente, que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno del mismo o dos átomos de carbono diferentes de un grupo heterocicloalquilo original.

"Heteroarilo" se refiere a un anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico que tiene hasta 7 átomos en cada anillo, en donde al menos un anillo es aromático y contiene de 1 a 4 heteroátomos en el anillo seleccionado del grupo que consiste en N, O y S. Los ejemplos no limitantes de heteroarilo incluyen piridilo, tienilo, furanilo, pirimidilo, imidazolilo, piranilo, pirazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, pirrolilo, piridazinilo, pirazinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzofuranilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, benzotienilo, indolilo, benzotiazolilo, benzooxazolilo, bencimidazolilo, isoindolilo, benzotriazolilo, purinilo, tianaftenilo y pirazinilo. La unión de heteroarilo puede ocurrir a través de un anillo aromático o, si el heteroarilo es bicíclico o tricíclico y uno de los anillos no es aromático o no contiene heteroátomos, a través de un anillo no aromático o un anillo que no contiene heteroátomos. También se entiende que "heteroarilo " incluye el derivado de N-óxido de cualquier heteroarilo que contiene nitrógeno.

"Heteroarilalquilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define en el presente documento, en donde un átomo de hidrógeno se ha reemplazado por un grupo heteroarilo.

"Heteroarilalquileno" se refiere a un grupo alquileno, como se define en el presente documento, en donde un átomo de hidrógeno se ha reemplazado por un grupo heteroarilo.

"Heteroarileno" se refiere a un heteroarilo, como se definió anteriormente, que tiene dos centros radicales monovalentes derivados de la eliminación de dos átomos de hidrógeno del mismo o dos átomos de carbono diferentes de un grupo heteroarilo original. Ejemplos no limitantes de grupos heteroarileno son:

"Hidroxialcoxi" se refiere a un grupo alcoxi, como se define aquí, sustituido con un grupo hidroxilo (-OH). Un ejemplo de hidroxialcoxi es hidroxietoxi.

"Hidroxialquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con al menos un grupo hidroxilo. Los ejemplos de grupos hidroxialquilo incluyen, pero no se limitan a hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo e hidroxibutilo.

[0012] El término "opcionalmente sustituido" se refiere a un resto en donde todos los sustituyentes son hidrógeno o en donde uno o más de los hidrógenos de la fracción son reemplazados por sustituyentes que no son hidrógeno. También se permiten múltiples sustituciones en el mismo átomo cuando sea químicamente factible (p. ej., una sustitución dioxo para proporcionar -S(O)²-, sustituyentes geminales, anillos de espiro cicloalquilo o heterocicloalquilo, etc.). En algunas realizaciones, "uno o más" sustituyentes es de uno a tres sustituyentes.

[0013] Incluidos en el presente documento, en su caso, son isómeros permisibles, tales como tautómeros, racematos, enantiómeros, diastereómeros, atropisómeros, isómeros configuracionales de dobles enlaces (E- y/o Z-), configuraciones cis y trans en patrones de sustitución del anillo, y variantes isotópicas.

[0014] "Farmacéuticamente aceptable" significa adecuado para su uso en preparaciones farmacéuticas, generalmente considerado como seguro para tal uso, aprobado oficialmente por una agencia reguladora de un gobierno nacional o regional para tal uso, o ser indicado en la Farmacopea de Estados Unidos u otra farmacopea generalmente reconocida para uso en animales, y más particularmente en humanos.

[0015] "Vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un diluyente, adyuvante, excipiente o vehículo, u otro ingrediente que es farmacéuticamente aceptable y con el que se administra un compuesto de la invención.

[0016] "Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que puede mejorar la actividad farmacológica deseada. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición de ácido formadas con ácidos inorgánicos u orgánicos, sales metálicas y sales de amina. Los ejemplos de sales de adición de ácido formadas con ácidos inorgánicos incluyen sales con ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido fosfórico. Ejemplos de sales de adición de ácido formadas con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido heptanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido o-(4-hidroxibenzoil)-benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1,2-etanodisulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido pclorobencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido canforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]oct-2-eno1-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 4,4'-metilenbis(3-hidroxi-2-naftoico), ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetil-acético, ácido butilacético terciario, ácido lauril sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácidos hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico y ácido mucónico. Los ejemplos de sales metálicas incluyen sales con iones de sodio, potasio, calcio, magnesio, aluminio, hierro y zinc. Los ejemplos de sales de amina incluyen sales con amoniaco y bases orgánicas nitrogenadas suficientemente fuertes para formar sales con ácidos carboxílicos.017*

[0017] Se pretende que un compuesto de una fórmula dada (p. ej., el compuesto de Fórmula I, que también incluye la Fórmula I, II, II-a, II-b, II-c y/o III) abarque los compuestos de la divulgación, y las sales, estereoisómeros, mezcla de estereoisómeros o tautómeros farmacéuticamente aceptables de tales compuestos. Además, los compuestos de la divulgación pueden poseer uno o más centros asimétricos y pueden producirse como una mezcla racémica o como enantiómeros o diastereoisómeros individuales. El número de estereoisómeros presentes en cualquier compuesto dado de una fórmula dada depende del número de centros asimétricos presentes (hay 2n estereoisómeros posibles donde n es el número de centros asimétricos). Los estereoisómeros individuales pueden obtenerse resolviendo una mezcla racémica o no racémica de un intermedio en alguna etapa apropiada de la síntesis o mediante la resolución del compuesto por medios convencionales. Los estereoisómeros individuales (incluidos los enantiómeros y diastereoisómeros individuales) así como las mezclas racémicas y no racémicas de estereoisómeros están englobados dentro del alcance de la presente divulgación, todos los cuales pretenden ser representados por las estructuras de esta especificación a menos que se indique específicamente lo contrario.

[0018] "Isómeros" son compuestos diferentes que tienen la misma fórmula molecular. Los isómeros incluyen estereoisómeros, enantiómeros y diastereómeros.

[0019] "Estereoisómeros" son isómeros que difieren solamente en la forma en que los átomos están dispuestos en el espacio. Los estereoisómeros incluyen enantiómeros y diastereómeros.

[0020] "Enantiómeros" son un par de estereoisómeros que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es una mezcla "racémica". El término "(±)" se usa para designar una mezcla racémica cuando sea apropiado.

[0021] Los "diastereoisómeros" son estereoisómeros que tienen al menos dos átomos asimétricos, pero que no son imágenes especulares entre sí.

[0022] La estereoquímica absoluta se especifica según el sistema Cahn Ingold Prelog R S. Cuando el compuesto es un enantiómero puro, la estereoquímica en cada carbono quiral puede especificarse mediante R o S. Los compuestos resueltos cuya configuración absoluta se desconoce se designan (+) o (-) dependiendo de la dirección (dextro- o laevorotaria) en que rotan el plano de la luz polarizada en la longitud de onda de la línea D del sodio.

[0023] Algunos de los compuestos existen como isómeros tautoméricos o "tautómeros". Los isómeros tautoméricos están en equilibrio entre sí. Por ejemplo, los compuestos que contienen amida pueden existir en equilibrio con tautómeros de ácido imídico. Independientemente del tautómero que se muestre, e independientemente de la naturaleza del equilibrio entre los tautómeros, un experto en la técnica entiende que los compuestos comprenden tautómeros tanto de amida como de ácido imídico. Por tanto, se entiende que los compuestos que contienen amidas incluyen sus tautómeros de ácido imídico. Asimismo, se entiende que los compuestos que contienen ácido imídico incluyen sus tautómeros de amida.

[0024] "Cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un sujeto para tratar una enfermedad, es suficiente para realizar el tratamiento para la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente eficaz" puede variar dependiendo del compuesto, la enfermedad y su gravedad, la edad, el peso, etc. del sujeto a tratar.

[0025] El término "tratar", y equivalentes gramaticales del mismo, cuando se utiliza en el contexto de tratar una enfermedad, medios para retardar o detener la progresión de una enfermedad, o mejorar al menos un síntoma de una enfermedad, más preferiblemente mejorar más de un síntoma de una enfermedad. Por ejemplo, el tratamiento de una infección por el virus de la hepatitis C puede incluir reducir la carga viral del VHC en un ser humano infectado por el VHC y/o reducir la gravedad de la ictericia presente en un ser humano infectado por el VHC.

[0026] Cualquier fórmula o estructura dada en el presente documento, incluyendo la fórmula I, II, II-a, II-b, II-c o III, también está destinada a representar formas no marcadas así como formas marcadas isotópicamente de los compuestos. Un "isótopo" puede tener estructuras representadas por las fórmulas dadas en este documento, excepto que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa seleccionados. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en los compuestos de la divulgación incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como, pero sin limitarse a 2H (deuterio, D), 3H (tritio), 11C, 13C, 14C, 15N, 18F, 028 *31P, 32 *P, 35S, 36Cl y 125I. Varios compuestos isotópicamente marcados de la presente divulgación, por ejemplo aquellos en los cuales se incorporan isótopos radiactivos tales como 3H, 13C y 14C. Dichos compuestos marcados isotópicamente pueden ser útiles en estudios metabólicos, estudios cinéticos de reacción, técnicas de detección o de formación de imágenes, como la tomografía por emisión de positrones (PET) o la tomografía computarizada por emisión de fotón único (SPECT) que incluyen ensayos de distribución de tejido de sustrato o fármaco o en el tratamiento radiactivo de pacientes.

[0027] La divulgación también incluye compuestos de Fórmula I, II, II-a, II-b, II-c o III en donde de 1 a n átomos de hidrógeno unidos a un átomo de carbono es/son reemplazado(s) por deuterio, en donde n es el número de hidrógenos en la molécula. Dichos compuestos exhiben una mayor resistencia al metabolismo y, por tanto, son útiles para aumentar la vida media de cualquier compuesto de Fórmula I, II, II-a, II-b, II-c o III cuando se administran a un mamífero. Véase, p. ej., Foster, "Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism", Trends Pharmacol. Sci. 5 (12): 524 - 527 (1984). Dichos compuestos se sintetizan por medios bien conocidos en la técnica, por ejemplo empleando materiales de partida en los que uno o más hidrógenos han sido reemplazados por deuterio.

[0028] Los compuestos terapéuticos sustituidos o marcados con deuterio de la divulgación pueden tener propiedades DMPK (metabolismo y farmacocinética de fármacos) mejoradas, relacionadas con la distribución, el metabolismo y la excreción (ADME). La sustitución con isótopos más pesados, como el deuterio, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de una mayor estabilidad metabólica, p. ej., una vida media aumentada in vivo, requisitos de dosificación reducidos y/o una mejora en el índice terapéutico. Un compuesto marcado con 18F puede ser útil para estudios de PET o SPECT. Los compuestos marcados isotópicamente de esta descripción y los profármacos de los mismos pueden prepararse generalmente llevando a cabo los procedimientos descritos en los esquemas o en los ejemplos y preparaciones descritos a continuación sustituyendo un reactivo no marcado isotópicamente por un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible. Se entiende que el deuterio en este contexto se considera un sustituyente en el compuesto de Fórmula I, II, II-a, II-b, II-c o III.

[0029] La concentración de un isótopo más pesado tal, específicamente deuterio, puede ser definido por un factor de enriquecimiento isotópico. En los compuestos de esta divulgación, cualquier átomo no designado específicamente como un isótopo particular pretende representar cualquier isótopo estable de ese átomo. A menos que se indique lo contrario, cuando una posición se designa específicamente como "H" o "hidrógeno", se entiende que la posición tiene hidrógeno en su composición isotópica de abundancia natural. Por consiguiente, en los compuestos de esta divulgación, cualquier átomo designado específicamente como deuterio (D) pretende representar deuterio.

Compuestos

[0030] La presente solicitud proporciona un compuesto representado por la Fórmula I:

[0031] o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster de profármaco del mismo, en donde L1, A1, A2, X1, R1, R2, R3, R4a, R4b, R5 y R6a, anteriormente.

[0032] En una realización, se proporciona un compuesto de Fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

A es CH²;

A1 es (C1-C5)alquileno o (C2-C5)alquenileno en donde un átomo de carbono sp3 de A1 se sustituye opcionalmente por -O-, -S(O)n-, -NH- o -N((C1-C4)alquilo)-, y en donde un átomo de carbono sp3 o sp2 de A1 está opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de halo, (C¹-C⁸)alquilo, (C²-C⁸)alquenilo,

(C²-C⁸)alquinilo, arilo, heterocicloalquilo, cicloalquilo, arilo(C1-C4)alquilo, ciclo(C1-C4)alquilo, heterociclo(C¹-C4)alquilo, arilheterociclo(C1-C4)alquilo, -OR9, -SR9, -S(O)R9, -S(O)² R9 y -N(R9)² ;

A2 es -CH(R8)-arileno o -CH(R8)-heteroarileno, en donde A2 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de OR9, -SR9, -S(O)R9, - S(O)² R9, -N(R9)² , halo, halo(C1-C4)alquilo, halo(C¹-C4)alcoxi, ciano y (C¹-C⁸)alquilo;

L1 es -O-C(O)-;

X1 -NH- o -N(CH3)-;

R1 y R2, tomados junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-;

R3 es H;

R4a y R4b son independientemente H o (Ci-C8)alquilo, en donde cada uno de R4a y R4b está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre ciano, -COOH, halo, hidroxilo, amino, mono(C¹-C8 alquilamino, di(C¹-C⁸)alquilamino, arilo y heteroarilo;

R5a y R5b son independientemente H o (C¹-C⁸)alquilo, en donde cada R5a y R5b está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de -N³ , ciano, -COOH, halo, hidroxilo, amino, mono(C¹-C8)alquilamino, di(C¹-C⁸)alquilamino, arilo y heteroarilo, o

R5a y R5b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a):

en donde un átomo de carbono del anillo de Fórmula (a) está opcionalmente sustituido con uno o más heteroátomos seleccionados entre SO, SO² , O y N, y en donde un átomo de carbono del anillo de Fórmula (a) tiene opcionalmente uno o más sustituyentes seleccionados entre halo, hidroxilo, -NH², (C1-C4)alquilo y (C1-C4)alcoxi;

R6a y R6b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a);

cada R8 es independientemente H, (C¹-C⁴)alquilo, halo(C¹-C⁴)alquilo, (C²-C⁴)alquinilo, (C²-C⁴)alquinilo, arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo o cicloalquilo, en donde R8 está opcionalmente sustituido con -OR, -N(R9)² , -CON(R9)² , o ciano;

cada R9 es independientemente H, (C1-C4)alquilo, (C2-C4)alquenilo o (C2-C4)alquinilo;

cada n es independientemente 0, 1 o 2; y

m es 1, 2, 3, 4 o 5.

[0033] En un aspecto de la forma de realización, A1 es etenileno, propenileno, butenileno, etileno, propileno, butileno, oxipropileno o oxipropenileno.

[0034] En otro aspecto de la forma de realización, A2 es -CH(R8)-quinolinileno, -CH(R8)-isoquinolinileno, -CH(R8)-naftiridinileno, -CH(R8)-cinnolinileno, -CH(R8)-quinoxalinileno, -CH(R8)-fenileno, -CH(R8)-naftileno o -CH(R8)-halofenileno. En varios aspectos de la realización, A2 se selecciona del grupo que consta de

en donde el enlace izquierdo del enlazador A5 está unido a X1. En ciertas realizaciones, R8 es metilo.

[0035] X1 es -NH- o -N(CH3)-; R1 y R2, cuando se toman junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-; y R3 es H. En algunas realizaciones, X1 es -NH- o -N(CH3)-; R1 y R2, cuando se toman junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-; R3 es H; uno de R4a y R4b es H y el otro es metilo; y uno de R5a y R5b es H y el otro es isopropilo.

[0036] En una realización, X1 es -NH- o -N(CH3)-; R1 y R2, cuando se toman junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-; R3 es H; uno de R4a y R4b es H y el otro es metilo; uno de R5a y R5b es H y el otro es isopropilo; A2 es -CH(R8)-heteroarileno, y R8 es metilo.

[0037] En otra realización, X1 es -NH-; R1 y R2, cuando se toman junto con el carbono al que ambos están unidos, forman -C(=O)-; R3 es H; R4a es H; R4b es metilo; R5 es isopropilo; y R8 es metilo.

[0038] L1 es -O-C(O)-.

[0039] En otra realización, se proporciona un compuesto de Fórmula II:

o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo, en donde:

A1 es

A2 es -CH(R8)-arileno o -CH(R8)-heteroarileno;

X1 es -NH- o -N(CH3)-;

R4a es H, (C1-C4)alcoxi, halo(C1-C4)alcoxi, hidroxilo(C¹-C⁸)alquilo, (C1-C4)alcoxi(C1-C8)alquilo o (C¹-C8)alquilo;

R5 es H, (C1-C4)alquilo, halo(C¹-C⁸)alquilo, hidroxi(C1-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi(C1-C8)alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo;

R6a y R6b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a):

en donde uno o más átomos de carbono del anillo de Fórmula (a) están opcionalmente reemplazados por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y en donde un átomo del anillo de Fórmula (a) opcionalmente tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, =N(C1-C4)alcoxi, halo, hidroxilo, NH² , (Ci-C4)alquilo, halo(Ci-C4)alquilo, (Ci-C4)alcoxi, -OC(O)R9, -C(O)² R9, y -S(O)² R9;

R7a y R7b son independientemente H, -OH, (C1-C4)alcoxi, halo (C1-C4)alcoxi o (C¹-C⁸)alquilo;

R8 es H o (C1-C4)alquilo; y

cada R9 es independientemente H, (C¹-C⁴)alquilo, halo(C¹-C⁴)alquilo, (C²-C⁴)alquenilo o (C²-C⁴)alquinilo.

[0040] En ciertas realizaciones de Fórmula II, A1 es

en donde el enlace izquierda del enlazador A1 se une a A2;

A2 es -CH(R8)-arileno o -CH(R8)-heteroarileno, en donde el enlace izquierdo del enlazador A2 está unido a X1;

X1 es -NH- o -N(CH³)-;

R4a es H o (C¹-C⁸)alquilo;

R5 es H o (C¹-C⁴)alquilo;

R6a y R6b juntos forman

R7a y R7b son ind

i-Csjalquilo; y

R8 es H o (C1-C4)alquilo.

[0041] En ciertas realizaciones de Fórmula II, R4a es metilo; R5 es iso-propilo; R8 es metilo; y A2 es

[0042] En ciertas realizaciones de Fórmula II, R4a es metilo; R5 es iso-propilo; R8 es metilo; y A2 es

[0043] En una realización, R4a es metilo; R5 es isopropilo; R8 es metilo; y A2 es

[0044] También se describe en el presente documento son compuestos según la fórmula (II-a) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

(Continuación)

[0045] Un enlazador A2 de los compuestos anteriores pueden ser sustituidos por diversos isómeros de posición. También se describen en el presente documento compuestos que tienen las siguientes fórmulas:

en donde los compuestos de las fórmulas anteriores tienen la misma combinación o patrón de sustituyentes dados en la tabla para los compuestos a-1 a a-14.

[0046] También se describen en la presente invención compuestos que tienen las siguientes fórmulas:

[0047] Un enlazador A2 de los compuestos anteriores puede ser sustituido por diversos isómeros de posición. También se describen en este documento compuestos que tienen las siguientes fórmulas:

en donde los compuestos de las fórmulas anteriores tienen la misma combinación o patrón de sustituyentes dados en la tabla para los Compuestos a2-1 a a2-14.

[0048] En otro aspecto de la forma de realización, R4a es metilo; R5 es isopropilo; R8 es metilo; y A2 es

También se describen en el presente documento compuestos de fórmula (II-b) y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

(Continuación)

[0049] En otra realización, se proporciona un compuesto de Fórmula II-c:

o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo, en donde:

R6a y R6b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a):

en donde uno o más átomos de carbono del anillo de Fórmula (a) están opcionalmente reemplazados por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y en donde un átomo del anillo de Fórmula (a) opcionalmente tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, =N(C1-C4)alcoxi, halo, hidroxilo, -NH² , (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi, -OC(O)R9, -C(O)² R9, y -S(O)² R9;

cada R9 es independientemente H, (C1-C4)alquilo, halo(C1-C4)alquilo, (C2-C4)alquenilo o (C2-C4)alquinilo.

[0050] En una realización de los compuestos descritos en el presente documento, R6a y R6b forman juntos

[0051] En algunas realizaciones, R6a y R6b forman juntos

o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo.053

[0053] En otra realización, el compuesto es

o una sal, isótopo, estereoisómero, mezcla farmacéuticamente aceptable de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo.

[0054] En aún otra realización, el compuesto es

o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo.

[0055] En una realización, el compuesto es

o una sal, isótopo, estereoisómero, mezcla farmacéuticamente aceptable de estereoisómeros, tautómero o éster del mismo.

[0056] También se describe aquí un compuesto de Fórmula III:

o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero o un éster del mismo, en donde L1 es -O-CH²-, -N(CH3)-C(O)-, -NH-CH²-, -N(CH3)-CH2-, -NH-CH(CF3)-o -NH-S(O)²-;

A1 es

A2 es -CH(R8)-arileno, -CH(R8)-heteroarileno, -CH(R8)-heterocicloalquileno, -CH(R8)-cicloalquileno, arileno o cicloalquileno;

X1 es -O-, -N(CH3)-o -NH-;

R4a es H, (C1-C4)alcoxi, halo (C1-C4)alcoxi o (C¹-C⁸)alquilo;

R5 es H o (C1-C4)alquilo;

R6a y R6b son independientemente H, hidroxilo, -CH2CH2CR9(=N(C1-C4)alcoxi), (C¹-C⁸)alquilo o (C¹-C⁸)alcoxi, opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halo, hidroxilo, (C¹-C4)alcoxi, halo(C1-C4)alcoxi, heterocicloalquilo, (C1-C4)alcanoilo o di(C1-C4)-alquilamino; o

R6a y R6b juntos forman un espirociclo que tiene la Fórmula (a):

en donde uno o más átomos de carbono del anillo de Fórmula (a) están opcionalmente reemplazados por un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, y en donde un átomo del anillo de Fórmula (a) opcionalmente tiene uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en oxo, halo, hidroxilo, -NH² , (C1-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi, -OC(O)R9, -C(O)² R9 y -S(O)² R9;

R7a y R7b son independientemente H, -OH, (C1-C4)alcoxi, halo(C1-C4)alcoxi o (C¹-C⁸)alquilo; y

R8 es H o (C1-C4)alquilo.

[0057] En algunos ejemplos de la Fórmula III, L1 es -O-CH²-, -N(CH3)-C(O)-, -NH-CH²- o -NH-S(O)²-;

A1 es

A2 es -CH(R8)-arileno, -CH(R8)-heteroarileno, -CH(R8)-heterocicloalquileno, -CH(R8)-cicloalquileno, arileno o cicloalquileno;

X1 es -O-, -N(CH3)-o -NH-;

R4a es H, (C1-C4)alcoxi, halo(C1-C4)alcoxi o (C¹-C⁸)alquilo;

R5 es H o (C1-C4)alquilo;

R6a y R6b son independientemente H, -OH, (C1-C4)alcoxi, halo(C1-C4)alcoxi o (C¹-C⁸)alquilo,

o R6a y R6b juntos forman

R7a y R7b son independientemente H, -OH, (Ci-C4)alcoxi, halo(Ci-C4)alcoxi o (Ci-Csjalquilo; y

R8 es H o (C1-C4)alquilo.

[0058] En un ejemplo, L1 es -NH-CH²-; R4a es metilo; R5 es iso-propilo; R8 es metilo; y A2 es

[0059] En un ejemplo, L1 es -NH-S(O)²-; R4a es metilo; R5 es iso-propilo; R8 es metilo; y A2 es

[0060] En diversos ejemplos, A2 se selecciona de entre

[0061] En un ejemplo, L1 es -N(CH3)-C(O)-; R4a es metilo; R5 es iso-propilo; R8 es metilo; y A2 es

[0063] En un ejemplo, L1 es -NH-CH²-; R4a es metilo; R5 es isopropilo; y R8 es metilo. Ejemplos no limitantes de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

[0064] En un ejemplo, L1 es -NH-S(O)²-; R4a es metilo; R5 es isopropilo; y R8 es metilo. Ejemplos no limitativos de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

[0065] En un ejemplo, L1 es -N(CH3)-C(O)-; R4a es metilo; R5 es isopropilo; y R8 es metilo. Los ejemplos no limitantes de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

[0066] En el ejemplo, L1 es -O-CH²-; R4a es metilo; R5 es isopropilo; y R8 es metilo. Los ejemplos no limitantes de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

[0067] Un experto en la técnica reconocerá que los sustituyentes y otros restos de los compuestos de las fórmulas genéricas de este documento deben ser seleccionados con el fin de proporcionar un compuesto que es suficientemente estable para proporcionar un compuesto farmacéuticamente útil que puede formularse en una composición farmacéutica aceptablemente estable. Se contempla que los compuestos que tienen tal estabilidad caen dentro del alcance de la presente invención. Un experto en la técnica debe entender que cualquier combinación de las definiciones y sustituyentes descritos anteriormente no debe dar como resultado una especie o compuesto inoperable.

Preparación de compuestos macrocíclicos

[0068] Se puede preparar un compuesto de la presente invención de acuerdo con los esquemas descritos a continuación, pero se apreciará que también se pueden usar modificaciones del proceso ilustrado u otro proceso. Como se ilustra en el Esquema 1, los compuestos macrocíclicos M se sintetizan a partir de los cinco componentes clave A-E combinándolos juntos en secuencia con el uso apropiado de grupos protectores (PG¹-PG8) por un experto en la técnica. Las líneas con hash numeradas del 1 al 5, denominadas Conexión 1, Conexión 2, etc., respectivamente, son las 5 conexiones para combinar los Componentes A-E. El orden en donde se producen las conexiones específicas puede variar y depende de la elección de los grupos protectores y de la química requerida. Normalmente, las conexiones 3, 4 o 5 se utilizan como paso final de macrociclización.

Esquema 1

PGX = grupo protector según se requiera

X1 y X2 son O, NH, o N-alquilo, etc.

Z y Z1 tomados juntos = COaHm COCI, SO3H, SO2CI, CH2-OH, CH2-halo, C(0 )-alqu¡lo, o C(0 )-H, etc.

Y = alqueno, haluro, O-alquenilo, u Otf.

Q = NH o N-PG* según se requiera

[0069] De manera ilustrativa, las conexiones 1 a 5 se pueden realizar como se describe a continuación:

Las conexiones 1 y 2 son enlaces amida. Las conexiones se realizan entre el ácido y la amina respectivos utilizando agentes de acoplamiento de péptidos estándar (EDC/HOBT, DCC, PyBOP, PyBROP, HATU, HBTU, COMU, etc.) conocidos por un experto en la técnica. Los socios de acoplamiento de ácido y amina se combinan con el agente de acoplamiento en un disolvente orgánico, p. ej., DMF, diclorometano, acetonitrilo, etc., en presencia de una base, p. ej., DIPEA, trietilamina, etc., a temperatura ambiente o temperatura ligeramente elevada. Cuando se elige cualquiera de estos pasos como paso final de macrociclización, se prefieren las condiciones de macrolactamización. Los procedimientos de macrolactamización adecuados incluyen, pero no se limitan a los que se encuentran en la siguiente referencia: Davies, J. S. J. Peptide Sci. 2003, 9, 471-501.

[0070] La Conexión 4 es típicamente un enlace carbono-carbono o un enlace heteroátomo-carbono donde el heteroátomo es O, S o N. Cuando la Conexión 4 es un enlace carbono-carbono, entonces se prefieren los procedimientos estándar de formación de enlaces carbono-carbono que generalmente emplean reacciones de acoplamiento cruzado mediadas por metal. Preferiblemente, el enlace carbono-carbono se forma usando un acoplamiento de tipo Heck entre un grupo haluro sp2 y un alqueno terminal, un acoplamiento Suzuki entre un grupo haluro sp2 y un boronato de vinilo o arilo, o una metátesis de cierre de anillo (RCM) entre dos alquenos. Las reacciones de Stille también se pueden realizar entre un vinil estannano y un arilo o haluro de vinilo como se describe en Journal of American Chemical Society 2000, 122, 3830 Nicolaou et al. En cada uno de los ejemplos anteriores, el grupo haluro de arilo o vinilo también puede ser un triflato de arilo o vinilo.

[0071] Por ejemplo, cuando Y en A es un alqueno, preferiblemente -CH=CH² , y A1 en B contiene un alqueno terminal o MeCH=CH-, a continuación, se realiza una reacción de metátesis cruzada. Los dos componentes se mezclan en disolvente, p. ej., acetonitrilo, tolueno y un catalizador de metátesis, p. ej., Grubbs I, Grubbs II o Hoyveda-Grubbs I, se añade Hoyveda-Grubbs II seguido de calentamiento. Si esta conexión es el procedimiento final para cerrar el anillo macrocíclico, se prefieren las condiciones de RCM (p. ej., condiciones más diluidas para evitar la dimerización). Para conocer las condiciones y ejemplos de RCM relevantes, consulte Journal of American Chemical Society 2003, 125, 3849 Sedrani et al y Journal of American Chemical Society 2000, 122, 3830 Nicolaou et al. Un procedimiento típico de RCM incluye el calentamiento (convencional o por microondas) del precursor acíclico en un disolvente como tolueno o 1,2-dicloroetano, en presencia de un catalizador RCM, p. ej., Grubbs I, Grubbs II o Hoyveda-Grubbs I, Hoyveda-Grubbs II.

[0072] Alternativamente, cuando la Conexión 4 se realiza mediante una reacción de acoplamiento de Heck, el haluro de vinilo o arilo o triflato A y el componente de alqueno B se mezclan en un disolvente polar, p. ej., acetonitrilo o tolueno, en presencia de un catalizador de paladio(II) catalizador, p. ej., paladio(OAc)² , un ligando de fosfina, p. ej., P(o-tolueno)3, P(t-butil)3, etc., y una base, p. ej., trietilamina. La mezcla de reacción se calienta de forma convencional o en un reactor de microondas.

[0073] Alternativamente, cuando la Conexión 4 se realiza mediante una reacción de acoplamiento de Suzuki, el haluro de vinilo o arilo o triflato A y el boronato B de vinilo o arilo se mezclan en un disolvente adecuado, p. ej., ciclopentilo metil éter, tolueno, DMF, DME, etc., en presencia de un catalizador de paladio (p. ej., paladio(II)Cl²(p-NMe² Ph⁾² y K³ PO⁴ o tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y una base, como potasio carbonato). La mezcla de reacción se calienta de forma convencional o en un reactor de microondas. En una reacción de acoplamiento de este tipo también es posible invertir las funcionalidades reactivas de los dos materiales de partida, de modo que A sea un arilo o boronato de vinilo y B contenga un haluro o triflato de vinilo o arilo.

[0074] Alternativamente, la Conexión 4 puede ser un enlace carbono-oxígeno y en este caso, las condiciones de sustitución de alquilación típica o nucleofílicas aromáticas se pueden utilizar entre un grupo hidroxilo y un haluro de alquilo o arilo (o heteroarilo) haluro. El reactivo de hidroxilo se mezcla con el haluro de alquilo o heteroarilo (preferiblemente un yoduro o bromuro), en un disolvente inerte, p. ej., CPME, DMF, THF, etc., en presencia de una base, p. ej., carbonato de cesio, hidróxido de cesio, hidruro de sodio, NaHMDS, etc. y se calienta.

[0075] Alternativamente, la Conexión 4 puede ser un enlace carbono-nitrógeno y en este caso, la alquilación típica, sustitución aromática nucleófila o condiciones de Buchwald se puede utilizar entre un grupo amina y un haluro de alquilo o heteroarilo haluro. Por ejemplo, la amina y el haluro de alquilo o heteroarilo se mezclan y calientan en un disolvente inerte, p. ej., CPME, en presencia de una base, p. ej., carbonato de cesio, hidruro de sodio, etc. Un procedimiento alternativo para la conexión carbono-nitrógeno es realizar una aminación reductora entre una amina y un compuesto de carbonilo. Normalmente, la amina y el aldehído o la cetona se mezclan en un disolvente inerte, p. ej., THF, dioxano y se tratan después de un período de tiempo con acetoxiborohidruro de sodio o un agente reductor alternativo.

[0076] La conexión 5 es típicamente un enlace amida (X¹ es NH o N sustituido) o éster (X¹ es O). Al formar el enlace amida, se pueden utilizar los procedimientos de acoplamiento estándar descritos para la Conexión 1-3. A menudo, este es el paso final para cerrar el macrociclo. Como tal, los tipos de macrolactamización de procedimientos de acoplamiento son más efectivos. Los procedimientos de macrolactamización adecuados incluyen, pero no se limitan a los que se encuentran en la siguiente referencia: Davies, J. S. J. Peptide Sci. 2003, 9, 471 -501.

[0077] Al formar el enlace de éster, reactivos de acoplamiento (p. ej., EDC, DCC, PyBOP, HATU, COMU) se pueden utilizar, o cuando este es el paso final en la formación del macrociclo, procedimientos de macrolactonización se prefieren (p. ej., Shiina, Yamaguchi). Se puede encontrar un método de ejemplo para la etapa de macrolactonización en Journal of American Chemical Society 2002, 124, 4257 Paquette et al o Chemical Reviews 2006, 106(3), 911-939. Normalmente, el ácido y el alcohol se mezclan en un disolvente polar, p. ej., DMF, acetonitrilo, etc. en presencia del agente de acoplamiento y una base, p. ej., DIPEA, DMAP.

[0078] La conexión 5 también puede ser un enlace éter en donde R1 y R2 son ambos grupos de hidrógeno o alquilo. En este ejemplo, los procedimientos de formación de enlaces carbono-oxígeno descritos anteriormente para la Conexión 4 se utilizan para conectar los 2 componentes. La conexión 5 también puede ser un enlace amina donde R1 y R2 son ambos grupos de hidrógeno o alquilo y los procedimientos para la conexión de los componentes de amina y carbonilo también se describen anteriormente con respecto a la Conexión 4.

[0079] La Conexión 3 es un C-N, C-O, o S(O)²-N. Las reacciones de formación de enlaces adecuadas para el Componente C y el Componente B incluyen los siguientes métodos.

[0080] Cuando el enlace formado en la Conexión 3 es L1 es -OC(O)-(es decir, X2 es O en C y Z/Z1 es -CO²H o -CO­ halógeno en B), esto es realizado utilizando procedimientos de formación de éster estándar utilizando reactivos de acoplamiento descritos anteriormente. Cuando este es el paso final en la formación del macrociclo, se prefieren los procedimientos de macrolactonización, como se describió anteriormente.

[0081] Alternativamente, cuando la Conexión 3 es L1 es -N(alquilo)C(O)-(es decir, X2 es N(alquilo) en C y Z/Z1 es CO²H o CO-halógeno en B) este paso se realiza utilizando procedimientos estándar de formación de ésteres utilizando reactivos de acoplamiento descritos anteriormente. Cuando este es el paso final en la formación del macrociclo, se prefieren los procedimientos de macrolactamización como se describió anteriormente.

[0082] Alternativamente, cuando la Conexión 3 es L1 es -NHS(O)²-(es decir, X2 es -NH- en C y Z/Z1 es -S(O)²OH o -S(O)²-halógeno en B), esto se realiza usando procedimientos estándar de formación de amidas utilizando reactivos de acoplamiento descritos anteriormente, o cuando este es el paso final en la formación del macrociclo, se prefieren los procedimientos de macrolactamización como se describió anteriormente.

[0083] Alternativamente, cuando la Conexión 3 es L1 es -NH-CH²-(es decir, X2 es -NH- en C y Z/Z1 es cetona o aldehído en B), esto se realiza usando procedimientos de aminación reductiva estándar como se describió anteriormente.

[0084] Alternativamente, cuando la Conexión 3 es L1 es -O-CH²-(es decir, X2 es O en C y Z/Z1 contiene un grupo saliente tal como un haluro o triflato en B), esto se realiza usando procedimientos estándar de alquilación nucleofílica descritos anteriormente.

[0085] Los siguientes esquemas generales proporcionan ejemplos generales y secuencias para la construcción de los compuestos macrocíclicos M a partir de los precursores comunes A-E.

[0086] Los Compuestos A-E se desprotege primero (PG2-PG8) usando las condiciones descritas en Greene y Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley y Sons, Inc. para proporcionar Compuestos 1a-1f.

[0087] En muchos casos, los grupos protectores óptimos y sus métodos de desprotección son los siguientes. Para el Compuesto E, el grupo protector típico PG1 para el ácido (cuando R1 y R2 son C=O) es un éster metílico o tricloroetílico. Los ésteres de metilo y tricloroetilo se pueden eliminar mediante una base, p. ej., LiOH en un disolvente polar, p. ej., THF acuoso, etc. El éster de tricloroetilo también se puede eliminar mediante tratamiento con zinc y acetato de amonio en un disolvente polar, p. ej., THF. Normalmente, PG2 y PG4 son grupos lábiles a los ácidos, p. ej., BOC y se desprotegen usando HCl en dioxano o TMSOTf en dioxano, diclorometano. Normalmente, PG3 y PG5 son grupos éster, eliminados mediante tratamiento con hidróxido de metal alcalino en THF o dioxano acuoso. Normalmente, PG6 es un grupo lábil a ácidos, p. ej., BOC para amina y se elimina como se describe para PG2; o éter de sililo para un grupo hidroxilo y se eliminó mediante tratamiento con HF.piridina o TBAF en un disolvente orgánico, p. ej., diclorometano. Normalmente, PG8 es un grupo protector de amina, p. ej., BOC y se elimina como se describe para PG2 o un silil éter de un grupo hidroxilo eliminado como se describe para PG6, o un grupo protector de acetato eliminado mediante tratamiento con hidróxido de metal alcalino en THF acuoso o dioxano.

[0088] El compuesto 1f se acopla al ácido 1a usando las condiciones descritas anteriormente para la Conexión 1 para producir el Compuesto 1g. El Compuesto 1g es entonces PG4 desprotegido usando condiciones descritas en Greene y Wuts y acoplados a ácido 1c para proporcionar 1 h usando las condiciones descritas anteriormente para la Conexión 2. Una secuencia alternativa para la generación de 1h, es primero el acoplamiento de amina 1b a ácido 1c usando condiciones como se describe para la Conexión 2 anterior, para formar 1 i; desprotección del grupo protector PG3 en 1i usando las condiciones descritas en Greene y Wuts, y finalmente el acoplamiento con la amina 1f usando las condiciones descritas para la Conexión 1 anterior para formar 1h.

[0089] El compuesto 1 h se desprotege en PG6 usando las condiciones descritas en Greene y Wuts y luego se acopla a B usando las condiciones descritas anteriormente para la Conexión 3 para formar 1j. También se ilustra una ruta alternativa a 1j. El componente B se acopla a 1d usando los métodos descritos anteriormente para la Conexión 3. El grupo protector PG5 se elimina luego usando las condiciones descritas en Greene y Wuts y el producto se acopla con el dipéptido producido a partir de PG4 desprotegido 1g, para proporcionar 1j. El grupo protector PG1 en el Compuesto 1j se elimina luego usando las condiciones descritas en Greene y Wuts, y el ácido luego se acopla a 1e usando las condiciones descritas para la Conexión 5 para formar el intermedio 1 k. Una secuencia alternativa a 1 k del intermedio 1h es primero, la desprotección de PG1 y luego el acoplamiento a 1e como se describe para la Conexión 5; y luego desprotección de PG6 como se describe en Greene y Wuts, seguido de acoplamiento a B usando las condiciones descritas para la Conexión 3 para formar 1k. A continuación, el producto 1k se somete al RCM como se describió anteriormente para la Conexión 4 para formar el compuesto M.

[0090] El Compuesto A se acopla al Compuesto B usando las condiciones descritas anteriormente para que la Conexión 4 genere 2a. Normalmente, en esta secuencia, el Compuesto B estaría protegido, p. ej., un ácido sería un éster, un ácido sulfónico, un éster sulfonato, una cetona o aldehído, un acetal, por ejemplo. Después, el Compuesto 2a se desprotege como se describe en Greene y Wuts para generar el ácido 2b. A continuación, el ácido 2b se acopla al producto desprotegido de 1 h (preparado a partir de 1 h por desprotección de PG6 descrito en Greene y Wuts) para generar el precursor 2c. La desprotección de 2c en tanto PG8 y PG1 se lleva a cabo utilizando condiciones descritas en Greene y Wuts, y después el producto se cicla usando las condiciones descritas anteriormente para macrolactamización o macrolactonización en conexión 5, para proporcionar el Compuesto M.

[0091] El Compuesto 2a se desprotege en PG como se describe en Greene and Wuts para generar 3a que luego se acopla, usando las condiciones descritas anteriormente para la conexión 5, al producto desprotegido de PG1 de 1h, (preparado a partir de 1 h por desprotección de PG1 descrita en Greene and Wuts), para generar el precursor 3b. La desprotección de 3b tanto en PG6 como en Z/Z1, si se requiere, se lleva a cabo usando las condiciones descritas en Greene y Wuts, y luego el producto se cicla usando las condiciones descritas anteriormente para la macrolactamización o macrolactonización en la Conexión 3, para proporcionar el Compuesto M.

[0092] El macrociclo final M de los Esquemas 4-6 a menudo contiene funcionalidades de grupos protectores en cadenas laterales que requieren una mayor eliminación para generar el compuesto final M. Por ejemplo, cuando M contiene un C=C como resultado de RCM, el Compuesto M se mezcla en un disolvente tal como etanol, metanol, etc., en presencia de catalizador de paladio sobre carbono bajo una atmósfera de gas hidrógeno para proporcionar el Compuesto M1 reducido. Los grupos protectores en R4a, R4b, R5, A1, A2 y/o X1 se eliminan usando las condiciones descritas en Greene y Wuts para generar el Compuesto M2. Otra transformación es la química del clic, para producir triazol M3. Esta transformación se realiza tratando el alquino o azida en M, en disolvente (p. ej., DMF) con un alquino o azida según sea apropiado en presencia de Cul para formar M3.

[0093] El compuesto M2 desprotegido se puede transformar adicionalmente después de la desprotección en un macrociclo M adicional, por ejemplo: Tratamiento de M2 que contiene OH con un haluro de alquilo en presencia de una base, p. ej., carbonato de cesio, en disolvente, p. ej., DMF, acetonitrilo forma el producto alquilado M4. M2 que contiene un grupo cetona se trata en disolvente (p. ej., DMF, metanol, etc) con una amina seguido por la adición de acetoxiborohidruro de sodio para formar producto de amina M5.

Esquema 7: Preparación de ácidos, ásteres, cetonas y a ldehidos B

R = OPG7, OH, H, alquilo, etc. R _ 0PG7, OH, H, alquilo, etc.

Z = OH, OPG , H, alquilo, etc. X = variado X = variado

z = c o R1 = H o Me, B(pm)2 r 1 = haluro, (pin)

[0094] Muchos ácidos, ásteres, cetonas, aldehido, ácido sulfónico o haluro componente B con un alqueno terminal, Me-CH=C-, o de boronato de vinilo/arilo, o haluro en A1 están disponibles comercialmente o descritos en la literatura y estos se pueden utilizar directamente en los esquemas anteriores. Además, los siguientes esquemas a continuación son ejemplos de métodos que pueden ser utilizados por un experto en la técnica para generar B adicional.

Esquema 8: Preparación de ácidos, ásteres, cetonas y a ldeh idos B

o

C1 y C2 = alquilo, cicloalquilo, etc.

PG7 = típicamente, t-butilo, metilo, o etilo

Boronoato

o alqueno

C1 y C2 = alquilo, cicloalquilo, etc.

PG7 = típicamente, t-butilo, metilo, o etilo

i.

s

C 1 y CJ = H, alquilo, "

o alquilado o cicloalquilo, etc. p. ej. haloalquilo

C1 = alquilo, o cicloalquilo, etc. Aux = Evans, aCÍOn _ a|qu¡|0> Q cic|0alquilo, etc.

sultamo Opplozer Aux = Evans, sultamo Opplozer

,

C1 = alquilo, o cicloalquilo, etc.

C2 = l il i l l il

i. PG9 = grupo protector o

alquilado p. ej. haloalquilo ^q i¡. retirar Aux

HoA ^

Aux * Evans C3 = alquilo, o cicloalquilo, etc. PG*qA

[0095] En el Esquema 8, parte 1, un ácido protegido se trata con una base fuerte de desprotonación, p. ej., LDA en un disolvente inerte, p. ej., THF a -78°C y HMPA. A continuación, se añade una solución preenfriada de dicloroacteileno (preparada mediante tratamiento de tricloroeteno con hidruro de potasio y MeOH (catalítico) en THF) para generar el producto de cloro acetileno. Luego, este producto se reduce, p. ej., mediante tratamiento con Cu en ácido acético y THF para generar el alquino que luego se reduce aún más al alqueno, p. ej., mediante el tratamiento de una solución alcohólica del alquino con un agente reductor de paladio envenenado (p. ej. Lindlar) en presencia de gas hidrógeno. Alternativamente, el alquino se trata con Cp²ZrHCl en diclorometano, en presencia de pinnacolborano para formar el boronato de vinilo.

[0096] En el Esquema 8, parte 2 un éster de beta-ceto con sustitución alfa se convierte en el triflato de vinilo, por ejemplo por tratamiento de una solución de THF del éster de beta-ceto con una base, p. ej., LDA en THF a -78°C, seguido de la adición de PhN(Tf)². A continuación, el producto triflato se trata con piridina a temperatura elevada para formar el alquino. A continuación, el alquino se trata como se describe anteriormente en el Ejemplo 1 para generar los productos de alqueno o boronato de vinilo.

[0097] En el Esquema 8, parte 3, se utiliza una reacción de aldol quiral. Un grupo acilo se une primero a un auxiliar quiral, p. ej., Evans, sultama Oppolzer (ver JACS 1990, 112, p2767) usando condiciones de formación de enlaces amida estándar descritas para la Conexión 1-3. El producto auxiliar Oppolzer se trata con el aldehido elegido, TBDMSOTf y una base, p. ej., trietilamina en un disolvente anhidro, p. ej., diclorometano. El auxiliar de Evans se trata con una base, p. ej., LDA, KHMDS, DIPEA en un disolvente orgánico, p. ej., THF a -78°C y el aldehido de elección en presencia de un ácido de Lewis, p. ej., TiCl4, SnCl4 o BF3OEt2. La protección del alcohol resultante de la reacción aldólica se realiza como se describe en Greene y Wuts, o alternativamente se realiza la alquilación con un haluro de alquilo o reactivo de Meerwein, es decir, el tratamiento con tetrafluoroborato de trimetiloxonio en un disolvente inerte, p. ej., diclorometano. A continuación, se elimina el auxiliar usando condiciones estándar de eliminación de hidróxido de metal alcalino, p. ej., LiOH en THF o LiOH y peróxido de hidrógeno en THF para proporcionar el producto de ácidos libres.

[0098] En el Esquema 8, parte 4, un auxiliar Evans se aliló con un haluro de alilo como se describe en Synlett 2002, 12, 2039-2040. A continuación, el producto se isomeriza mediante tratamiento con RhCh en etanol y luego el auxiliar se elimina con base y peróxido, p. ej., LiOH y H²O² en THF/agua. Alternativamente, el auxiliar se elimina directamente con LiOH y H²O² en THF/Agua para proporcionar el alqueno terminal.

[0099] En el Esquema 8, parte 5, una reacción Horner Wadsworth Emmons se utiliza en un aldehido (que contiene un terminal alqueno) para generar el éster alfa-beta insaturado que luego se reduce selectivamente en el éster. Por ejemplo, el fosfonato se trata con una base, p. ej., hidruro de sodio en THF a baja temperatura, seguido de la adición del aldehido y el calentamiento para generar el éster insaturado. El producto se reduce mediante tratamiento con magnesio en polvo en metanol.

[0100] En el Esquema 8, parte 6, un ácido insaturado alfa-beta o se convierte en el auxiliar Evans insaturado (ver Organic Letters 2007, 9, p1635) y se trata con un aldehido para generar el producto alqueno correspondiente. A continuación, se protege el grupo hidroxilo usando métodos descritos en Greene y Wuts y luego se elimina el auxiliar mediante tratamiento con base y peróxido, p. ej., LiOH y H²O² en THF/agua. El hidroxilo también se puede alquilar por como se ha descrito anteriormente para aldol Esquema 8, parte 3.

[0101] En el Esquema 8, parte 7 una cetona se transforma a través de la nitroolefina como se describe en Angew. Chem. Int. Ed. 2006, 45 (46), 7736. A continuación, la nitroolefina se trata con bromuro de vinil magnesio en un disolvente inerte, p. ej., THF, en presencia de una sal de cobre (I), p. ej., Cul y cloruro de trimetilsililo. El producto de nitroalquilo después de la adición del grupo vinilo se convierte luego en el ácido mediante tratamiento con nitrito de sodio y ácido acético en un disolvente polar inerte, p. ej., DMSO.

[0102] Para generar los compuestos de cetonas, aldehidos, hidroxi, o haluro, los productos de ácido/éster descrito en el Esquema 8 se pueden transformar usando métodos estándar conocidos para un experto en la técnica. Por ejemplo, la conversión del ácido en la amida de Weinreb con un agente de acoplamiento en un disolvente, p. ej., THF, diclorometano, seguido del tratamiento con un nucleófilo, p. ej., MeMgBr, CFaSiMe y similares, genera cetonas; los grupos hidroxilo se producen mediante el tratamiento de los ésteres con hidruro de litio y aluminio en un disolvente, p. ej., THF, diclorometano, etc. Los hidroxilos se activan a triflatos con tratamiento con anhidrido triflico y una base, p. ej., diisopropiletilamina en disolvente, p. ej., THF. La conversión del hidroxilo en un haluro, p. ej., bromuro, se realiza mediante tratamiento con PPh3 y tetrabromuro de carbono.

[0103] Varios tipos de A (o A1 como se muestra) están disponibles comercialmente o se describen en la literatura donde X¹ es O o NH e Y es un haluro o alqueno. Los esquemas siguientes describen métodos generales adicionales para generar A1.

Esquema 9: Preparación de A

X1 = O, NH, N(alquilo), o N sustituido, etc. A3 = arilo, heteroarilo, o biarilo, etc. Y = halógeno, alqueno, u O-alquileno X1 = O, NH, o NR

Y = halógeno, alqueno, u O-alquileno R8 = H, alquilo más bajo, o haloalquilo 1. Cuando Y = Halógeno en Al

2. Cuando Y = alqueno en Al

5* A3 i- Protección

Y ^{- y}

X1H s. v in i la c ió n

6c 0 6e

= iHalógeno r i n n ir l

^{I. Triflación R}

^rV Y ^{A x}

0 ^Y A1

[0104] En el E

aromático disponible comercialmente, que contiene halógeno Y y un grupo Z que puede transformarse en la cetona 6b. Los grupos Z típicos son haluro, ácido, aldehído, por ejemplo.

[0105] Cuando Z es un ácido, 6a se trata con un agente de acoplamiento, p. ej., HATU, EDC en presencia de una base, p. ej., DIPEA y la amina de Weinreb (Me-NH-OMe) para formar la amida de Weinreb. La amida se trata a continuación con un nucleófilo, p. ej., TMS-CF³ para formar la cetona 6b de CF³ sustituido o con un agente de Grignard, p. ej., MeMgBr en un disolvente, p. ej., THF a -78°C para formar la cetona de metilo 6b.

[0106] Cuando Z es halógeno, entonces la conversión inicial, si es necesario, a un halógeno más reactivo se lleva a cabo por tratamiento con Nal y cloruro de acetilo en un disolvente inerte, p. ej., acetonitrilo. A continuación, el halógeno se transforma en cetona mediante una reacción de Stille con un etoxivinil estannano. El haluro se trata en un disolvente inerte, p. ej., tolueno, con estannano y un catalizador de paladio(II), p. ej., PdCl2(PPh3)2, seguido del tratamiento del producto con 2M HCl para producir la cetona 6b. En algunos casos, la formación de un reactivo de alquil litio a partir del grupo haluro se puede realizar mediante el tratamiento con nBuLi a -78°C en THF y luego la adición de una N-metoxi-N-metil amida para producir la cetona 6b (p. ej., N-metoxi-N-metil-acetamida proporciona el R8 = metilo cetona 6b). Un método final para generar la cetona 6b es a través de un grupo vinilo. 6a se trató con un viniltrifluoroborato en presencia de un catalizador de paladio, p. ej., PdCb(dppf) y después el producto de vinilo es ozonolizado posteriormente en un disolvente polar, p. ej., metanol a baja temperatura para dar un aldehído. A continuación, el aldehído se hace reaccionar con un nucleófilo, p. ej., TSM-CF³ o un reactivo de Grignard, p. ej., MeMgBr para producir un producto de alcohol secundario. A continuación, el alcohol secundario se oxida con periodinano de Dess Martin para dar la cetona 6b deseada o se puede utilizar como el propio A1.

[0107] El alcohol quiral (X1 es O) y la amina (X1 es NH) A1 se generan usando métodos de reducción quiral en la cetona 6b. El alcohol quiral 6c se forma a partir de 6b utilizando uno de los numerosos métodos de reducción quiral disponibles en la bibliografía. Normalmente, el dímero de dicloro(p-cumeno)rutenio(II) y (1R,2R)-(-)-W-p-tosil-1,2-difeniletilendiamina se combinan en agua, y se añaden formiato de sodio y 6b en disolvente miscible en agua como tetrahidrofurano. Después, la reacción se agita a una temperatura entre ambiente y reflujo para producir 6c donde X1 es O. Alternativamente, se puede realizar una reducción de CBS quiral en un disolvente inerte, p. ej., THF a baja temperatura para producir también el alcohol quiral 6c. La protección del OH en 6c se realiza usando métodos descritos en Greene y Wuts, típicamente se usa un grupo acetilo o éter TBS para proporcionar A1 (X1 es O).

[0108] Como alternativa a hacer A1 quiral (X1 es NH), cetona 6b se convierte primero en una imina quiral (R10 es un grupo quiral) y después se redujo usando una variedad de métodos descritos en la literatura. Por ejemplo, se hace reaccionar una sulfinamida quiral con la cetona 6b para producir una sulfinimina 6d quiral, que luego se reduce con un agente reductor adecuado, típicamente NaBH4, o selectrida, o una reducción de tipo Noyori como se describe para el alcohol quiral anteriormente, con dímero de dicloro(p-cumeno)rutenio(II) y (1R,2R)-(-)-W-p-tosil-1,2-difeniletilendiamina. El auxiliar de sulfinamida se elimina luego por tratamiento con ácido mineral, preferiblemente HCl en un disolvente orgánico adecuado tal como metanol, para producir 6e donde X1 = NH. La protección del grupo NH se puede realizar luego como se describe en Greene y Wuts para generar A1 (X1 es NH).

[0109] En la parte 2 del Esquema 9, la síntesis del Compuesto A1 en donde Y es -CH=CH² , se ilustra un precursor para la metátesis y reacciones de acoplamiento cruzado. Los métodos ejemplares son los siguientes.

[0110] El Compuesto 6c o 6e generado en el Esquema 9, parte 1 primero se protege opcionalmente en X1 usando un grupo protector adecuado como se describe en Greene y Wuts, y luego se introduce un grupo vinilo mediante un método de acoplamiento cruzado adecuado en el arilo o haluro sp2. Por ejemplo, un acoplamiento mediado por un metal de transición con un vinil estannano o vinil tetrafluoroborato usando un catalizador de paladio adecuado, p. ej., PdCl²(dppf⁾² o Pd Cl2(PPh3)2 en un disolvente orgánico adecuado, p. ej., acetonitrilo, diclorometano, etc., con calentamiento térmico o por microondas produce el alqueno A1.

[0111] Otro método típico que se puede utilizar para introducir un grupo de vinilo es a partir de la cetona 6b donde Y es OH. Inicialmente, la triflación del alcohol se realiza mediante tratamiento con TF²O en presencia de una base, p. ej., piridina. A continuación, el grupo cetona se reduce con una reducción de Noyori, o como se describió anteriormente a través de la sulfonamida, para proporcionar el alcohol o amina quiral. El alcohol quiral o la amina se protegen luego como se describe en Greene y Wuts, y luego el triflato se hace reaccionar con un reactivo de acoplamiento cruzado de vinilo, p. ej., vinil estannano en un acoplamiento de Stille, o un viniltrifluoroborato como se describió anteriormente para introducir el alqueno. Otro ejemplo de generación de alquenos usando cetona 6b es mediante la introducción de un grupo alilo. Por tanto, 6b donde Y es OH se trata en un disolvente inerte en presencia de una base adecuada, p. ej., carbonato de metal alcalino, preferiblemente carbonato de potasio con bromuro de alilo para formar 6f. El Compuesto 6f es entonces similar a la cetona 6b y, por lo tanto, puede transformarse como se describió anteriormente en la parte 1 en el Compuesto A1 en donde X1 es O o NH con el grupo protector PG8.

Formulaciones farmacéuticas

[0112] Los compuestos de esta invención se formulan con vehículos y excipientes convencionales, que se seleccionarán de acuerdo con la práctica ordinaria. Los comprimidos contendrán excipientes, deslizantes, cargas, aglutinantes y similares. Las formulaciones acuosas se preparan en forma estéril, y cuando se pretenden administrar mediante una administración distinta a la oral, generalmente serán isotónicas.

[0113] Aunque es posible que los ingredientes activos sean administrados solos puede ser preferible presentarlos como formulaciones farmacéuticas. Las formulaciones de la invención, tanto para uso veterinario como humano, comprenden al menos un ingrediente activo, junto con uno o más vehículos aceptables y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos.

[0114] Las formulaciones de la presente invención adecuadas para la administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas, sellos o comprimidos conteniendo cada uno una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como polvo o gránulos; como una solución o suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o una emulsión líquida de agua y aceite. El ingrediente activo también se puede administrar en forma de bolo, electuario o pasta.

[0115] La dosis efectiva de un ingrediente activo depende al menos de la naturaleza de la afección a tratar, la toxicidad, si el compuesto se está utilizando profilácticamente (dosis más bajas) o contra una infección viral activa, el método de entrega, y la formulación farmacéutica, y lo determinará el médico mediante estudios convencionales de aumento de dosis. Se puede esperar que la dosis eficaz sea de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día; típicamente, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal por día; más típicamente, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal por día; más típicamente, de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 0,5 mg/kg de peso corporal por día. Por ejemplo, la dosis diaria candidata para un ser humano adulto de aproximadamente 70 kg de peso corporal variará de 1 mg a 1.000 mg, preferiblemente entre 5 mg y 500 mg, y puede tomar la forma de dosis únicas o múltiples.

Terapia de combinación

[0116] Los compuestos de la presente invención se pueden combinar con uno o más agentes activos. Los ejemplos no limitantes de agentes activos adecuados para combinar incluyen uno o más interferones, ribavirina o sus análogos, inhibidores de proteasa NS3 del VHC, inhibidores de NS5a, inhibidores de alfa-glucosidasa 1, hepatoprotectores, antagonistas de mevalonato descarboxilasa, antagonistas del sistema renina-angiotensina, otros agentes antifibróticos, antagonistas de la endotelina, inhibidores de nucleósidos o nucleótidos de la polimerasa NS5B del VHC, inhibidores no nucleósidos de la polimerasa NS5B del VHC, inhibidores de la NS5A del VHC, agonistas de TLR-7, inhibidores de la ciclofilina, inhibidores del IRES del VHC, potenciadores farmacocinéticos y otros fármacos para el tratamiento de VHC; o mezclas de los mismos.

[0117] Más específicamente, uno o más compuestos a ser combinados se seleccionan del grupo que consiste en:

1) interferones, p. ej., rIFN-alfa 2b pegilado (PEG-Intron), rIFN-alfa 2a pegilado (Pegasys), rIFN-alfa 2b (Intron A), rIFN-alfa 2a (Roferon-A), interferón alfa (MOR-22, OPC-18, Alfaferona, Alfanative, Multiferon, subalin), interferón alfacon-1 (Infergen), interferón alfa-n1 (Wellferon), interferón alfa-n3 (Alferon), interferón beta (Avonex, DL-8234), interferón omega (omega DUROS, Biomed 510), albinterferón alfa-2b (Albuferon), IFN alfa XL, BLX-883 (Locteron), DA-3021, interferón alfa-2b glicosilado (Av I-005), PEG-Infergen, interferón lambda PEGilado (IL-29 PEGilado) y belerofon;

2) ribavirina y sus análogos, p. ej., ribavirina (Rebetol, Copegus) y taribavirina (Viramidina);

3) Inhibidores de la proteasa NS3 del VHC, p. ej., boceprevir (SCH-503034, SCH-7), telaprevir (VX-950), VX-813, TMC-435 (TMC435350), ABT-450, BI-201335, BI-1230, MK-7009, SCH-900518, VBY-376, VX-500, GS-9256, GS-9451, BMS-790052, BMS-605339, PHX-1766, AS-101, YH-5258, YH5530, YH5531 e ITMN-191 (R-7227);

4) inhibidores de la alfa-glucosidasa 1, p. ej., celgosivir (MX-3253), Miglitol y UT-231B;

5) hepatoprotectores, p. ej., emericasan (IDN-6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilina y MitoQ;

6) inhibidores de nucleósidos o nucleótidos de la polimerasa NS5B del VHC, p. ej., R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, PSI-7851, BCX-4678, valopicitabina (NM-283), GS-6620 y MK-0608;

7) inhibidores no nucleósidos de la polimerasa NS5B del VHC, p. ej., filibuvir (PF-868554), ABT-333, ABT-072, BI-207127, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK-3281, VBY- 708, VCH-222, A848837, ANA-598, GL60667, GL59728, A-63890, A-48773, A-48547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XTL-2125 y GS-9190;

8) inhibidores de VHC NS5A, p. ej., AZD-2836 (A-831), AZD-7295 (A-689) y BMS-790052;

9) agonistas de TLR-7, p. ej., imiquimod, 852A, GS-9524, ANA-773, ANA-975, AZD-8848 (DSP-3025), PF-04878691 y SM-360320;

10) inhibidores de ciclofilina, p. ej., DEBIO-025, SCY-635 y NIM811;

11) inhibidores de IRES de VHC, p. ej., MCI-067;

12) potenciadores farmacocinéticos, p. ej., BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585 y roxitromicina; 13

13) otros fármacos para tratar el VHC, p. ej., timosina alfa 1 (Zadaxin), nitazoxanida (Alinea, NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilon (CPG-10101), GS-9525, KRN-7000, civacir, GI-5005, XTL-6865, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033i, ANA 971, NOc-205, tarvacina, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, BMS-650032, BMS-791325, Bavituximab, MDX-1106 (ONO-4538), Oglufanida, FK-788 y VX-497 (merimepodib);

14) antagonistas de la mevalonato descarboxilasa, p. ej., estatinas, inhibidores de la HMGCoA sintasa (p. ej., himeglusina), inhibidores de la síntesis de escualeno (p. ej., ácido zaragózico);

15) antagonistas del receptor de angiotensina II, p. ej., losartán, irbesartán, olmesartán, candesartán, valsartán, telmisartán, eprosartán;

16) inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, p. ej., captopril, zofenopril, enalapril, ramipril, quinapril, perindopril, lisinopril, benazepril, fosinopril;

17) otros agentes antifibróticos, p. ej., amilorida; y

18) antagonistas de endotelina, p. ej., bosentan y ambrisentan.

[0118] En otra realización más, la presente solicitud proporciona una terapia de combinación que comprende una composición de la presente invención y una segunda composición farmacéutica que comprende al menos un agente terapéutico adicional seleccionado del grupo que consiste de compuestos inhibidores de proteasa de VIH, inhibidores de VIH no nucleosídicos de transcriptasa inversa, inhibidores de nucleósidos de VIH de transcriptasa inversa, inhibidores de nucleótidos de VIH de transcriptasa inversa, inhibidores de integrasa de VIH, inhibidores de gp41, inhibidores de CXCR4, inhibidores de gp120, inhibidores de CCR5, interferones, análogos de ribavirina, inhibidores de proteasa NS3, inhibidores de NS5a, inhibidores de alfa-glucosidasa 1, inhibidores de ciclofilina, hepatoprotectores, inhibidores no nucleósidos del VHC y otros fármacos para tratar el VHC y combinaciones de los mismos.

[0119] Más específicamente, uno o más compuestos de la presente invención pueden combinarse con uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en 1) VIH inhibidores de la proteasa, p. ej., amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, lopinavir ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), AG1859, DG35, L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC- 681, DPC-684 y GW640385X, DG17, Pp L-100, 2) un inhibidor no nucleósido del VIH de la transcriptasa inversa, p. ej., capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, Mb-150 y TMC-120, TMC-278 (rilpivirina), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453,061, RDEA806, 3) un inhibidor de nucleósidos del VIH del reverso transcriptasa, p. ej., zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, Mb-210, racivir (6- FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, tidoxil fozivudina, tidoxil fosalvudina, apricitibina (AVX754), amdoxovir, KP-1461, abacavir lamivudina, abacavir lamivudina zidovudina, zidovudina lamivudina, 4) un inhibidor de nucleótidos del VIH de la transcriptasa inversa, p. ej., tenofovir, tenofovir fumarato de disoproxilo emtricitabina, fumarato de disoproxilo de tenofovir emtricitabina efavirenz y adefovir, 5) un inhibidor de la integrasa del VIH, p. ej., curcumina, derivados de la curcumina, ácido chicórico, derivados del ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquínico, ácido aurintricarboxílico, derivados del ácido aurintricarboxílico, éster fenetílico del ácido cafeico, derivados del éster fenetílico del ácido cafeico, tirfostina, derivados de la tirfostina, quercetina, derivados de la quercetina, S-1360, zintevir (AR-177), L-870812 y L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-707035, MK-2048, BA-011, BMS- 538158, GSK364735C, 6) un inhibidor de gp41, p. ej., enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, TRI-1144, SPC3, DES6, Locus gp 41, CovX y REP 9, 7) un inhibidor de CXCR4, p. ej., AMD-070, 8) un inhibidor de entrada, p. ej., SP01A, TNX-355, 9) un inhibidor de gp120, p. ej., BMS-488043 y BlockAide/CR, 10) un inhibidor de G6PD y NAd H-oxidasa, p. ej., inmunitina, 10) un inhibidor de CCR5, p. ej., aplaviroc, vicriviroc, INCB9471, PRO-140, INCB15050, PF-232798, CCR5mAb004 y maraviroc, 11) un interferón, p. ej., rIFN-alfa 2b pegilado, rIFN-alfa 2a pegilado, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, IFN de consenso alfa, infergen, rebif, locteron, a V i-005, PEG-infergen, IFN-beta pegilado, interferón alfa oral, ferón, reaferón, intermax alfa, r-IFN-beta, infergen actimmune, IFN-omega con DUROS y albuferón, 12) análogos de ribavirina, p. ej., rebetol, copegus, VX-497 y viramidina (taribavirina) 13) inhibidores de NS5a, p. ej., A-831, A-689 y BMS-790052, 14) inhibidores de la polimerasa NS5b, p. ej., NM-283, valopicitabina, R1626, PSI-6130 (R1656), IDX184, PSI-7851, HCc -796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433 y XTL-2125, 15) inhibidores de la proteasa NS3, p. ej., SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191 y BILN-2065, 16) inhibidores de la alfa-glucosidasa 1, p. ej., MX-3253 (celgosivir) y Ut -231b , 17) hepatoprotectores, p. ej., IDN-6556, ME 3738, MitoQ y LB-84451, 18) inhibidores no nucleósidos del VHC, p. ej., derivados de benzimidazol, derivados de benzo-1,2,4-tiadiazina y derivados de fenilalanina, 19) otros medicamentos para tratar el VHC, p. ej., zadaxina, nitazoxanida (alinea), BIVN-401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituximab, oglufanida, PYN-17, KPE02003002, actilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA-975, XTL-6865, ANA 971, NOc-205, tarvacina, EHC-18 y NIM811, 19) potenciadores farmacocinéticos, p. ej., BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585 y roxitromicina, 20) inhibidores de ARNasa H, p. ej., ODN-93 y ODN-112, 21) otros agentes anti-VIH, p. ej., VGc-1, PA-457 (bevirimat), ampligen, HRG214, citolina, polimun, VGX-410, KD247, AMZ 0026, CYT 99007, A-221 HIV, BAY 50-4798, MDX010 (iplimumab), PBS119, ALG889 y PA-1050040.

[0120] En un aspecto específico de esta realización, el agente terapéutico adicional se selecciona de ribavirina, telaprevir, boceprevir y sofosbuvir (GS-7977 (anteriormente PSI-7977)).

[0121] Una terapia de combinación descrita en este documento se puede administrar como un régimen simultáneo o secuencial. Cuando se administra secuencialmente, la combinación se puede administrar en dos o más administraciones.

[0122] La coadministración de un compuesto de la invención con uno o más de otros agentes activos generalmente se refiere a la administración simultánea o secuencial de un compuesto de la invención y uno o más de otros agentes activos, de manera que cantidades terapéuticamente eficaces del compuesto de la invención y uno o más de otros agentes activos están presentes en el cuerpo del paciente.

[0123] Uno o más compuestos de la descripción se administran por cualquier vía apropiada para la afección a ser tratada. Las rutas adecuadas incluyen oral, rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal y epidural) y similares. Se apreciará que la ruta preferida puede variar, p. ej., con la condición del receptor. Una ventaja de los compuestos de esta divulgación es que están biodisponibles por vía oral y pueden dosificarse por vía oral.

Método para el tratamiento de la infección viral

[0124] La presente solicitud proporciona compuestos o sales farmacéuticamente aceptables, isótopos, estereoisómeros, mezclas de estereoisómeros, tautómeros o ésteres de los mismos para su uso en el tratamiento de una infección viral de Flaviviridae.

[0125] También se proporcionan compuestos o sales farmacéuticamente aceptables, isótopos, estereoisómeros, mezclas de estereoisómeros, tautómeros o ésteres de los mismos para su uso en el tratamiento de una infección viral de Coronaviridae.

[0126] Inhibir o tratar una enfermedad que comprende administrar a un animal una composición que comprende una cantidad eficaz de uno o más compuestos de la invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición a administrar puede contener además un agente terapéutico secundario como se describió anteriormente.

[0127] La composición es particularmente adecuada para su uso con seres humanos, pero se puede usar con otros animales, particularmente mamíferos, tales como, p. ej., primates no humanos, animales de compañía, animales de granja, animales de laboratorio, y animales silvestres y de zoológico.

[0128] Los compuestos de la presente solicitud son particularmente útiles para tratar las enfermedades causadas directa o indirectamente por virus de Flaviviridae ya que los compuestos de la presente invención tienen actividad inhibidora frente a los virus. En algunas realizaciones, por lo tanto, los compuestos de la presente invención se usan para inhibir o tratar enfermedades causadas por un virus de la hepatitis C. En algunas realizaciones, por lo tanto, los compuestos de la presente invención se usan para inhibir o tratar enfermedades causadas por un virus de la hepatitis B. En un aspecto, tales compuestos se aplican a un paciente con una enfermedad causada por la infección viral como el dengue, fiebre amarilla, hepatitis C, encefalitis japonesa, enfermedad del bosque de Kyasanur, encefalitis del valle de Murray, encefalitis de St. Louis, encefalitis transmitida por garrapatas o encefalitis del Nilo Occidental.

[0129] En algunas realizaciones, se consigue una respuesta virológica sostenida en aproximadamente 12 semanas, en aproximadamente 10 semanas, en aproximadamente 8 semanas, en aproximadamente 6 semanas, o en aproximadamente 4 semanas, o en aproximadamente 4 meses, o en aproximadamente 5 meses, o en aproximadamente 6 meses, o en aproximadamente 1 año, o en aproximadamente 2 años.

[0130] Los compuestos de la presente solicitud también son particularmente útiles para tratar las enfermedades causadas directa o indirectamente por virus de Coronaviridae ya que los compuestos de la presente invención tienen actividad inhibidora contra esos virus. En algunas realizaciones, por lo tanto, los compuestos de la presente invención se usan para inhibir o tratar enfermedades causadas por un coronavirus del SARS. En un aspecto, tal método se aplica a un paciente con una enfermedad causada por la infección viral tal como síndrome respiratorio agudo severo (SARS), cáncer, inflamación, obesidad, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) o cirrosis.

[0131] Los compuestos descritos en este documento pueden usarse para tratar cáncer. En otro aspecto más, los compuestos descritos en este documento pueden usarse para inmunomodulación. En algunas realizaciones, por lo tanto, los compuestos de la presente invención pueden usarse para ajustar una respuesta inmune a un nivel deseado, como en inmunopotenciación, inmunosupresión o inducción de tolerancia inmunológica.

[0132] En algunas realizaciones, el compuesto se administra durante aproximadamente 12 semanas. En realizaciones adicionales, el compuesto se administra durante aproximadamente 12 semanas o menos, durante aproximadamente 10 semanas o menos, durante aproximadamente 8 semanas o menos, durante aproximadamente 6 semanas o menos, o durante aproximadamente 4 semanas o menos. El compuesto se puede administrar una vez al día, dos veces al día, una vez cada dos días, dos veces a la semana, tres veces a la semana, cuatro veces a la semana o cinco veces a la semana.

EJEMPLOS

[0133] Los siguientes ejemplos son meramente ilustrativos, y no limitan esta descripción de ningún modo

Lista de abreviaturas y acrónimos

[0134]

Abreviatura Significado

°C Grado Celsius

di-tBuXPhos 2-Di-terc-butilfosfino-3,4,5,6-tetrametil-2’,4’,6'-triisopropil-1,1 '-bifenil

2,6-lut. 2,6-lutidina

MNBA Anhídrido 2-Metil-6-nitrobenzoico

4AMS Tamices moleculares 4 Angstrom

Ac Acetilo

ap Aparente

ac Acuoso

atm atmósfera

BINAP (2,2'-bis (difenilfosfino)-1, 1 '-binaftil)

Bn Bencilo

Boc terc-Butoxicarbonilo

BOP Benzotriazol-1 -il-oxi-tris-(dimetilamino)-hexafluorofosfato de fosfonio

br amplio

Bu Butilo

cat Catalítico

cm Centímetro

cod ciclooctadieno

COMU (1-ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilamino-morfolino-hexafluorofosfato de carbenio

CP/Cp Ciclopentilo

CPME Éter metílico de ciclopentilo

CSA Ácido canforsulfónico

Cy/cHex Ciclohexilo

d Doblete

DAST Dietilaminosulfuro trifluoruro

dba dibencilidenoacetona

DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno

DCC N,N’-diciclohexilcarbodiimida

DCE Dicloroetano

DCM Diclorometano

dd Doblete de dobletes

DIPEA N,N-Diisopropiletilamina

DMAP 4-Dimetilaminopiridina

DMF Dimetilformamida

DMSO Dimetilsulfóxido

dq Cuarteto doble

EDC 1-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida

equiv Equivalentes

ESI Ionización por pulverización de electrones

Et Etilo

g Gramos

HATU (Dimetilamino)-N,N-dimetil(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-iloxi)hexafluorofosfato de metaniminio

HDMS Hexametildisilazano

HOBT Hidroxibenzotriazol

HPLC Cromatografía líquida de alta resolución

horas/h Horas

Hz Hercios

CI⁵⁰ La concentración inhibitoria medio máxima

(Continuación)

Abreviatura Significado

i-Pr/iPr Isopropilo

J Constante de acoplamiento

Kg Kilogramo

EMCL Espectrometría de masas de cromatografía líquida

LDA Diisopropilamida de litio

M Molar

m Multiplete

m/z Relación masa a carga

M+ Pico de masa

m-CPBA Ácido meta-cloroperoxibenzoico

Me Metilo

mg Miligramo

MHz Megahercio

min Minuto

mL Mililitro

mM Milimolar

mm Milímetro

mmol Milimol

mol Mol

Ms Metanosulfonilo

MW Microonda

nM Nanomolar

RMN Resonancia magnética nuclear

o-Tol o-Tolilo

Ph Fenilo

Pin Pinacolato

Piv Pivaloílo

ppm partes de por millón

pTSA Piridina

py Ácido p-toluenosulfónico

c Cuarteto

cuant. Cuantitativo

rac Racémica

Rf factor de retención

RT/rt/rt temperatura ambiente

s Singlete o segundos

sat. Saturado

SEMCI Cloruro de 2-trimetilsililetioximetilo

t Triplete

TBAF Fluoruro de tetra-n-butilamonio

TBDMS/TBS terc-Butildimetilsililo

td Triplete de dobletes

TEA Trietilamina

Tf Trifluorometanosulfonilo

TFA Ácido trifluoroacético

THF Tetrahidrofurano

TLC Cromatografía de capa fina

TMS Trimetilsililo

Tr/tr Tiempo de retención

Ts Tosilo

UV Ultravioleta

5 Desplazamiento químico

ml Microlitro

gM Micromolar

MMol Micromol

[0135] Para los Ejemplos 1 a 58, y Ejemplos 93 a 107, a menos que se indique lo contrario, HPLC preparativa se realizó en un sistema Gilson HPLC, utilizando un Agilent Eclipse XDB/C18 7 micrómetros, 250 x 21,2 mm de columna semi-preparativa y una fase móvil acetonitrilo/agua a un caudal de 20 mL/min.

[0136] Para los Ejemplos 59 a 92, y Ejemplos 108 a 112, a menos que se indique lo contrario, se realizó HPLC preparativa en un sistema Shimadzu HPLC, utilizando un 21,2 x 250 mm 10 micrómetros C18 Fenomenex Gemini columna semi-preparativa y acetonitrilo/fase móvil de agua a un caudal de 20 mL/min.

REFERENCIA EJEMPLO 1: Ácido (E)-(2R,3R)-7-(3-{(R)-1-[((S)-Hexah¡dro-p¡r¡daz¡na-3-carbonil)-am¡no]-et¡l}-fen¡l)-3-metox¡-2-met¡l-hept-6-eno¡co (S)-2-met¡l-1-((S)-1-met¡l-2-oxo-et¡lcarbamo¡l)-prop¡lo éster - Compuesto 1

[0137]

[0138] Síntesis del Compuesto 1a: una solución de 1 -((1R, 5S)-10,10-dimetil-3,3-dioxo-3lambda*6*-tia-4-azatriciclo[5.2.1.0*1,5*]dec-4-il)-propan-1-ona (3,95 g, 14,55 mmol) en tolueno (50 mL) se preparó, luego se evaporó hasta sequedad. Este proceso se repitió y el sólido blanco resultante se disolvió en diclorometano anhidro (16 mL). Se añadió una pequeña cantidad de hidruro de calcio antes de añadir trifluorometanosulfonato de terc-butildimetilsililo (3,83 ml, 14,5 mmol) y trietilamina anhidra (2,33 ml, 16,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente (TA) bajo una atmósfera de nitrógeno durante 15 horas ("h"). La solución resultante se evaporó para producir una pasta espesa, que se volvió a disolver en diclorometano anhidro (15 mL) y se añadió gota a gota a una solución agitada de 4-pentenal (2,69 g, 32,0 mmol) y tetracloruro de titanio (1 M en diclorometano, 32 mL, 32 mmol) en diclorometano anhidro (20 mL) a -78°C, bajo una atmósfera de nitrógeno. La reacción se agitó a -78°C durante 30 min antes de diluir con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (100 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con más diclorometano (2 x 50 mL). El extracto combinado se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar una goma marrón. Este se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 4:1 para dar el Compuesto del título (3,09 g, 60%) como una goma incolora.

[0139] Síntesis del Compuesto 1b: Se preparó una solución de 1a (250 mg, 0,703 mmol) en diclorometano anhidro (7 mL) y se añadió tetrafluoroborato de trimetiloxonio (208 mg, 1,406 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La mezcla de reacción se trató con metanol (1 mL), luego con ácido clorhídrico 2 M (20 mL) y salmuera saturada (20 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 mL) y el extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar una goma amarilla. La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 4:1 para dar el Compuesto del título (223 mg, 86%) como una goma incolora.

[0140] Síntesis del Compuesto 1c: Una solución de 2 M de hidróxido de litio en agua (5 mL) se añadió a una solución agitada de 1b (223 mg, 0,60 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL). La mezcla agitada se calentó a 60°C durante 15 h. La mezcla de reacción se evaporó parcialmente antes de añadir ácido clorhídrico 2 M (20 mL). La solución se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar una goma amarilla (209 mg). La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 3:1 para producir el Compuesto del título (68 mg, 66%) como una goma amarilla.

[0141] Síntesis del Compuesto 1d: Una solución de ácido (S)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiónico (3,28 g, 17,32 mmol) en acetonitrilo (160 mL) se enfrió a 0°C antes de la adición de N,N-diisopropiletilamina (12 ml, 69,3 mmol) luego hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (6,57 g, 17,32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 20 min y una solución de sal del ácido trifluoroacético del éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-hexahidropiridazin-3-carboxílico (preparación descrita en Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1999, 38, 2443, 6,49 g, 17,3 mmol) en acetonitrilo (80 mL) se añadió. Se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante 15 h. La mezcla de reacción se evaporó y luego se redisolvió en acetato de etilo (150 mL). La solución se lavó con salmuera (150 mL). La salmuera se extrajo de nuevo con acetato de etilo (50 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar un aceite oscuro. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 1:1 para producir el Compuesto del título (6,88 g, 92%) como una goma incolora.

[0142] Síntesis del Compuesto 1e: Para 1d (1,5 g, 3,5 mmol) en diclorometano anhidro (30 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (941 pL, 5,2 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 h antes de añadir N,N-diisopropiletilamina (2,2 ml, 13,9 mmol) y luego se concentró al vacío para producir 2,2,2- tricloroetil éster del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico. El residuo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (20 mL) y se enfrió a 0°C antes de añadir ácido (S)-2-hidroxi-3-metil-butírico (413 mg, 3,5 mmol), hidroxibenzotriazol monohidrato (796 mg, 5,2 mmol), 1 -etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (1,02 g, 5,2 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,7 ml, 10,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 90 min, se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 72 h y se concentró al vacío. Se añadió acetato de etilo al residuo, que luego se lavó con cloruro de amonio saturado y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetona 2:1 para dar el Compuesto del título (1,1 g, 73% en 2 pasos) como un blanco sólido.

[0143] Síntesis del Compuesto 1f: Una solución agitada de 1e (830 mg, 1,92 mmol) en diclorometano (20 mL) se preparó y 1c (34 mg, 2,00 mmol), N,N'-diciclohexilcarbodiimida (594 mg, 2,88 mmol) y se añadieron N,N-dimetilaminopiridina (23 mg, 0,192 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se añadió una cantidad adicional de 1c (34 mg, 2,00 mmol), N,N'-diciclohexilcarbodiimida (594 mg, 2,88 mmol) y N,N-dimetilaminopiridina (23 mg, 0,192 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante otras 22 h. La mezcla de reacción se lavó con agua y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 15 mL) y acetato de etilo (2 x 15 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar una goma marrón. La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /so-hexano/acetato de etilo 1:1 después acetato de etilo para dar el Compuesto del título (656 mg, 58%) como un sólido blanco.

[0144] Síntes/s del Compuesto 1g: Una solución de 1f (656 mg, 1,12 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) se preparó y polvo de zinc (732 mg, 11,2 mmol) y la solución de acetato de amonio acuoso (1 M, 8 ml, 8 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla se filtró a través de hyflo-supercel, luego se acidificó con cloruro de amonio y luego con ácido clorhídrico 2 M hasta pH 1. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar un sólido que se destiló azeotrópicamente con tolueno (40 mL) para dar el producto del título (343 mg, 67%) como un sólido incoloro.

[0145] Síntes/s del Compuesto 1h: Una solución de (R)-bromo-a-metilbencilamina (1,023 g, 5,112 mmol) en diclorometano (20 mL) se trató a continuación con trietilamina (720 pL, 5,112 mmol) y dicarbonato de di-terc-butilo (1,784 g, 8,179 mmol). Después de agitar durante la noche a temperatura ambiente, los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /so-hexano/éter dietílico 1:0 a 4:1 para producir el compuesto del título (1,552 g, 100%) como un sólido blanco.

[0146] Síntes/s del Compuesto 1/: Una solución de 1h (10,26 g, 0,0342 mol) y tributil(vinil)estannano (32,5 g, 30 ml, 0,103 mol) en tolueno (175 mL) se purgó con nitrógeno durante 30 minutos antes de adición de dicloruro de bis(trifenilfosfina paladio(II) (2,38 g, 0,0034 mol). La mezcla agitada se calentó a 60°C durante 16 h antes de enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de hyflo-supercel y luego se evaporó para dar un aceite de color oscuro. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /so-hexano/acetato de etilo 19:1 para dar el Compuesto del título (6,95 g, 82%) como un aceite de color amarillo.

[0147] Síntesis del Compuesto 1j: Se preparo una solución de 1i (6,95 g, 28,1 mmol.) en 1,4-dioxano (30 mL) y se añadió una solución de cloruro de hidrógeno en 1,4 dioxano (4 M, 60 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h luego se evaporó a sequedad. El sólido resultante se redisolvió en tolueno y se evaporó. El sólido se trituró con éter dietílico, que se retiró por decantación. Después, el sólido se secó al vacío para dar el Compuesto del título (4,96 g, 96%) en forma de un sólido blanquecino.

[0148] Síntesis del Compuesto 1k: Se preparó una solución de 1g (343 mg, 0,752 mmol), 1j (138 mg, 0,752 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (0,52 ml, 3,00 mmol) en acetonitrilo (25 mL) y se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,40 g, 1,05 mmol). La mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se evaporó y luego se redisolvió en acetato de etilo (25 mL) y agua (25 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con más acetato de etilo (2 x 20 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar una goma marrón. La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 1:3 para dar el compuesto del título (217 mg, 49%) como un sólido incoloro.

[0149] Síntesis del Compuesto del título: Una solución de 1k (217 mg, 0,37 mmol) se agitó en 1,2-dicloroetano (125 mL) se preparó y Hoveyda-Grubbs catalizador de 2a generación (23 mg, 0,037 mmol) se añadió. La solución agitada se calentó a reflujo durante 3 h. Se añadió más catalizador de 2a generación Hoveyda-Grubbs (46 mg, 0,074 mmol) y la reacción se calentó a 85°C durante 2 h más. La mezcla de reacción enfriada se trató con gel de sílice. La mezcla se evaporó y luego se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar un sólido blanquecino (177 mg). Este se volvió a purificar mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de 5 g y acetato de etilo para dar el Compuesto del título (67 mg, 32%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, d6-acetona) 0,93 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,95 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,43 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,47-1,69 (m, 3H), 1,70-1,91 (m, 3H), 1,92-2,17 (m, 3H), 2,32 -2,48 (m, 1H), 3,02-3,13 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,40­ 3,65 (m, 3H), 4,27-4,43 (m, 2H), 4,80 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,00-5,15 (m, 1H), 5,32-5,44 (m, 1H), 6,20-6,33 (m, 1H), 6,42 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 7,10-7,32 (m, 3H)), 7,34 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,0 Hz, 1H). CLEM (m/z) 557,3 [M+H], Tr = 2,59 min.

REFERENCIA EJEMPLO 2: Compuesto 2

[0150]

[0151] Síntesis del Compuesto 2A: Una solución de 1-((1R,5S)-10,10-dimetil-3,3-dioxo-3lambda*6*-tia-4-azatriciclo[5.2.1.0*1,5*]dec-4-il)-propan-1-ona (6,0 g, 22,1 mmol) en diclorometano anhidro (24 mL) se preparó y trifluorometanosulfonato de terc-butildimetilsililo (5,0 ml, 22,1 mmol), seguido de trietilamina anhidra (3,54 ml, 25,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno durante 15 h. Esto dio una solución oscura que se evaporó para dar un aceite. El aceite se disolvió en diclorometano anhidro (22 mL) y la solución se añadió gota a gota a una solución de crotonaldehído (3,66 ml, 44,2 mmol) y tetracloruro de titanio (1 M en diclorometano, 44,2 ml, 44,2 mmol) en diclorometano (22 mL) a -782C bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 1 h, antes de la adición de una solución de cloruro de amonio (30 mL). La mezcla agitada se dejó calentar a temperatura ambiente antes de separar las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 25 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar un aceite marrón. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 4:1 para dar el Compuesto del título (6,7 g, 89%) como un sólido incoloro.

[0152] Síntesis del Compuesto 2b: Una solución de 2a (4,15 g, 12,1 mmol) en diclorometano anhidro (80 mL) se preparó y 1,8-bis(dimetilamino)naftaleno (7,78 g, 36,3 mmol) seguido por tetrafluoroborato de trimetiloxonio (3,6 g, 24,2 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se trató con metanol (3 mL) y se agitó durante 5 min antes de añadir ácido clorhídrico (2 M, 200 mL) y acetato de etilo (250 mL). La mezcla se filtró para eliminar un sólido insoluble y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mL). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar el compuesto del título (4,80 g, 100%) como un sólido de color marrón pálido.

[0153] Síntesis del Compuesto 2c: Una solución de hidróxido de litio en agua (2 M, 50 ml, 100 mmol) se añadió a una solución agitada de 2b (4,80 g, 12,1 mmol) en tetrahidrofurano (130 mL). La mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 15 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, antes de evaporar parcialmente y agregar ácido clorhídrico (2 M, 150 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar un aceite marrón (3,5 g). El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/dietil éter 1:1 para dar el Compuesto del título (1,132 g, 59%) como un aceite incoloro.

[0154] Síntesis del Compuesto 2d: Compuesto 2d se preparó de la misma m

1c con 2c (148 mg, 0,94 mmol) para proporcionar el compuesto del título (340 mg, 76%) como un sólido blanco.

[0155] Síntesis del Compuesto 2e: Una solución de 6-bromo-3-cloro-isoquinolina (Frontier Scientific, Logan, Utah, EE.UU.) (8,0 g, 33 mmol) y tributil-(1-etoxi-vinil)-estannano (14,88 g, 14 mL, 41,2 mmol) en tolueno (100 mL) se desgasificó con nitrógeno durante 30 min. Se añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (1,16 g, 1,65 mmol, 5% en moles) y la mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 20 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 20:1 a 10:1 para proporcionar el compuesto del título (7,1 g, 92%) como un sólido amarillo pálido.

[0156] Síntesis del Compuesto 2f: Una solución de 2e (7,1 g, 30 mmol) en 1,4-dioxano (60 mL) y ácido clorhídrico 2 M (30 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mayor parte del disolvente se evaporó y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo se trituró con éter al 5% en iso-hexano y el sólido resultante se recogió y se secó para proporcionar el compuesto del título (rendimiento de 6,0 g) como un sólido blanco.

[0157] Síntesis del Compuesto 2g: Una solución de 2f (1,72 g, 8,3 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se agitó bajo nitrógeno. Se añadió etóxido de titanio (IV) (3,8 g, 3,45 ml, 16,6 mmol, grado técnico) seguido de (R)-(+)-2-metilpropanosulfinimida (1,11 g, 9,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 60°C. C bajo nitrógeno durante 18 h. Se añadió más (R)-(+)-2-metilpropanosulfinimida (190 mg, 0,2 equiv.) y la mezcla de reacción se agitó a 65°C durante 2 h más. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron acetato de etilo y salmuera. La suspensión se filtró a través de celite y la almohadilla del filtro se lavó con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 7:3 a 3:7 para dar el compuesto del título (2,2 g, 86%).

[0158] Síntesis del Compuesto 2h: Una mezcla de (1S, 2R)-(-)-cis-1-amino-2-indanol (60 mg, 0,4 mmol), [ Ru(pcimen)Cl^2]2 (122 mg, 0,2 mmol) y 4 A tamices moleculares pulverizados (2 g) se suspendieron en 2-propanol anhidro (9 mL) y se agitaron bajo nitrógeno. La suspensión se calentó a 90°C durante 20 min. La mezcla de reacción se enfrió a 40°C y se añadió una solución de 2 g (1,23 g, 4 mmol) en 2-propanol (28 mL) seguido de una solución de terc-butóxido de potasio (122 mg, 1,1 mmol) en 2-propanol (10 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a 40°C y luego se dejó enfriar. La mezcla se vertió directamente sobre un cartucho de gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo para dar, después de la evaporación, el compuesto del título como una goma marrón (1,19 g, 96%).

[0159] Síntesis del Compuesto 2i: Una mezcla de 2h (1,66 g, 2,11 mmol), tributil(vinil)estaño (1,85 ml, 6,35 mmol) y tetraquis(trifenilfosfina)paladio (488 mg, 0,42 mmol en 1,4-dioxano (10,5 mL) se tapó en un vial de microondas. La mezcla de reacción se calentó y se agitó a 160°C durante 40 min en un reactor de microondas. una segunda reacción se realizó bajo escala y condiciones idénticas y las reacciones se combinaron y evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo del 25 al 100% en iso-hexanos para producir el compuesto del título como una goma marrón (1 g).

[0160] Síntesis del Compuesto 2j: 2i se suspendió en 4 M HCl en 1,4-dioxano (17 mL, 68 mmol) y metanol se añadió (34 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 90 min y luego se evaporó para dar el compuesto del título como la sal di-HCl. El residuo se pasó a través de un cartucho SCX eluyendo con metanol y luego con amoniaco metanólico. La fracción básica se recogió y se evaporó para dar el Compuesto del título. y como un sólido beige (530 mg, 63% en 2 pasos).

[0161] Síntesis del Compuesto 2k: El Compuesto 2K se preparó de la misma manera que el Compuesto 1k, por primera sustitución de 1g con éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-(2R,3R)-3-metoxi-2-metil-hex-4-enoiloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (340 mg, 0,59 mmol) y después de la síntesis para el Compuesto 1g y luego reemplazando el clorhidrato de (R)-1-(3-vinil-fenil)-etilamina con diclorhidrato 2j (160 mg, 0,59 mmol) en la síntesis del Compuesto 1k para dar el compuesto del título (240 mg, 66%, 2 pasos) como un aceite viscoso de color marrón claro.

[0162] Síntesis del compuesto del título: Una solución de 2k (300 mg, 0,48 mmol) en tolueno (161 mL) se desgasificó con nitrógeno durante 10 min antes de añadir Hoveyda Grubbs catalizador de 2a generación (61 mg, 0,1 mmol). La solución agitada se calentó a 125°C durante 2 h antes de añadir una cantidad adicional de catalizador de 2a generación Hoveyda Grubbs (61 mg, 0,1 mmol) y se continuó calentando durante 4 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/acetona 1/0 y luego 3/1 seguido de TLC preparativa usando acetato de etilo/acetona 8/1 para producir el compuesto del título (4 mg, 1%) como un sólido blanquecino. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 0,80-1,11 (m, 6H), 1,20-1,38 (m, 3H), 1,42-1,70 (m, 6H), 1,67-1,88 (m, 2H), 1,89-2,25 (m, 3H), 2,60-2,75 (m, 2H), 2,98-3,18 (m, 1H), 3,48 (s, 3H), 3,58-3,77 (m, 1H), 4,36-4,67 (m, 2H), 4,91 (s, 1H), 5,18-5,43 (m, 1H), 5,61-5,76 (m, 1H), 6,40-6,65 (m, 1H), 6,82-7,10 (m, 3H), 7,36-7,50 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,85 - 8,01 (m, 1H), 8,18 (s, 1H), 9,16 (s, 1H). CLEM (m/z) = 580,3 [M+H], Tr = 1,50 min.

REFERENCIA EJEMPLO 3: Compuesto 3

[0163]

[0164] Síntesis del compuesto 3a: El Compuesto 3a se preparó de la misma manera que el Compuesto 1f mediante la sustitución de 1c con ácido 3-butenoico para proporcionar el compuesto del título (397 mg, 66%) como un sólido blanco.

[0165] Síntesis del Compuesto 3b: A una solución de 3a (390 mg, 0,78 mmol) en tetrahidrofurano (17 mL) y agua (9 mL) se añadió zinc en polvo (1,11 g, 17,1 mmol) seguido de acetato de amonio (899 mg, 11,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La reacción se filtró a través de Celite, el filtrado se acidificó a pH² con ácido clorhídrico concentrado y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas se secaron a través de una frita hidrófoba y se concentraron al vacío, seguido de la coevaporación en tolueno (2 x). El residuo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (15 mL) y se añadió 2j (211 mg, 0,78 mmol) seguido de hidroxibenzotriazol monohidrato (119 mg, 0,78 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (210 mg), 1,1 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Se añadió gel de sílice a la mezcla de reacción y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando isohexano/acetato de etilo 1/1 y después acetato de etilo para dar el compuesto del título (276 mg, 57%, 2 pasos) como un sólido blanco.

[0166] Síntesis del compuesto del título: A una solución a reflujo de Hoveyda Grubbs catalizador de 2a generación (85 mg, se añadió 0,14 mmol) y 2, 6-dichlorobenzoquinona (8 mg, 0,05 mmol) en tolueno anhidro (150 mL) una solución de 3b (250 mg, 0,45 mmol) en tolueno/dicloroetano (1:1, 9 mL) durante 1 h. Después de 1 h a reflujo, se añadió una cantidad adicional de catalizador de 2a generación Hoveyda Grubbs (42 mg, 0,07 mmol) y se continuó calentando durante 3 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se evaporó hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo y luego acetato de etilo/acetona 3/1 para producir una espuma marrón. Este se purificó adicionalmente mediante TLC preparativa usando acetato de etilo/acetona 8/1 (2 x) para producir el compuesto del título (2 mg, 1%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 0,73-1,20 (m, 9H), 1,40-2,08 (m, 5H), 2,15-2,61 (m, 4H), 3,14-4,15 (m, 6H), 4,78-5,63 (m, 3H), 6,67-7,03 (m, 2H), 7,38-7,58 (m, 2H), 7,83-8,04 (m, 2H), 9,17 (s, 1H). CLEM (m/z) = 522,2 [M+H], Tr = 1,33 min.

REFERENCIA EJEMPLO 4 - Compuesto 4

[0167]

[0168] Síntesis del Compuesto 4a: A una solución de (S)-4-bencil-2-oxazolidinona (3,85 g, 21,7 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a -78°C, se añadió butil-litio 2,5 M en hexanos (10 ml, 25 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 min. Se añadió después anhídrido valérico (5,15 ml, 26,1 mmol) y la solución se agitó a -78°C durante 50 min antes de la adición de salmuera (10 mL). Después, la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente cuando se añadió más salmuera (20 mL). Los extractos orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (2 x 50 mL) y el extracto combinado se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar un aceite crudo. Este se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 9:1 para dar el compuesto del título (5,24 g, 92%).

[0169] Síntesis del Compuesto 4b: Una solución de 4a (5,24 g, 20,0 mmol) en tetrahidrofurano (50 mL) se enfrió a -78°C. 1 M hexametildisilazano de sodio se añadió gota a gota en tetrahidrofurano (32,1 ml, 32 mmol) y la temperatura interna mantenida por debajo de -70°C. Después de la adición completa, se continuó agitando a -78°C durante 1 h. Después de este tiempo de alilo bromuro (6,98 ml, 80,2 mmol) se añadió gota a gota y la temperatura interna se mantiene entre -55°C a -40°C. Tras la agitación de la adición completa se continuó entre -55°C y -40°C durante 3 h, después de lo cual se añadió cloruro de amonio saturado (20 mL) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente. Los extractos orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (2 x 100 mL), se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron para dar un aceite amarillo crudo. Este se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /'so-hexano/acetato de etilo 1:0 a continuación 95:5 luego 9:1 para producir el compuesto del título (2,95 g, 49%).

[0170] Síntes/s del Compuesto 4c: Una solución de 4b (2,95 g, 9,79 mmol) en tetrahidrofurano (72 mL) y agua (36 mL) se enfrió a 0°C. Peróxido de hidrógeno acuoso al 30% (4,72 ml, 48,9 mmol) seguido de una solución de hidróxido de litio (470 mg, 19,6 mmol) en agua (7,2 mL). La mezcla se agitó a 0°C y después de 3,42 h se añadió una solución de sodio sulfito (11,3 g, 90 mmol) en agua (36 mL) se añadió y la solución se agitó a 0°C durante 15 min. La solución se trató con hidrogenocarbonato de sodio saturado hasta pH=9-10, luego la fase acuosa se lavó con acetato de etilo (3 x 100 mL) luego se acidificó a pH=1-2 con ácido sulfúrico 1 M y se extrajo con éter dietílico (3 x 100 mL). Los extractos de éter dietílico se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar el compuesto del título (649 mg, 47%) como un aceite incoloro.

[0171] Síntes/s del Compuesto 4d: A una solución de 1e (790 mg, 1,82 mmol) en diclorometano (9 mL) a temperatura ambiente, se añadió 4c (388 mg, 2,19 mmol), W,W'-diciclohexilcarbodiimida (564 mg, 2,74 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (223 mg, 1,82 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (50 mL) y se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio. La fase acuosa se volvió a extraer con diclorometano (2 x 50 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron para dar un residuo blanco. Este se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /so-hexano/acetato de etilo 1:0 a 1:1 para producir el compuesto del título (916 mg, 90%).

[0172] Síntes/s del Compuesto 4e: Una solución de 4d (916 mg, 1,65 mmol) en tetrahidrofurano (41 mL) se preparó y se añadió zinc en polvo (2,37 g, 36,2 mmol) seguido de una solución de acetato de amonio (1,90 g, 24,7 mmol) en agua (10,2 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La reacción se filtró a través de hyflosupercel lavando con acetato de etilo e hidrogenosulfato de potasio acuoso saturado. La mezcla se trató con ácido clorhídrico (1 M, 5 mL) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar una goma incolora. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 100 mL) para dar el compuesto del título (675 mg, 89%) como un sólido blanco.

[0173] Síntesis del Compuesto 4f: 4e (368 mg, 0,87 mmol) se disolvió en acetonitrilo (5 mL) y 2j (180 mg, 0,77 mmol) seguido por W,W-diisopropiletilamina (535 gL, 3,07 mmol) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (409 mg, 1,08 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. A la mezcla de reacción se le añadió ácido clorhídrico 2 M (15 mL) y la mezcla se concentró ai vacío. El residuo se repartió entre agua (100 mL) y acetato de etilo (100 mL). La capa acuosa se separó y se volvió a extraer con acetato de etilo (100 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar un residuo crudo. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el compuesto del título (440 mg, 95%) como un sólido blanquecino.

[0174] Síntesis del compuesto del título: Una solución de 4f (440 mg, 0,73 mmol) en tolueno (242 mL) se desgasificó con nitrógeno durante 15 min y después se añadió Hoveyda-Grubbs catalizador de 2a generación (91 mg, 0,15 mmol) y la reacción de mezcla se calentó a 100-110°C durante 2,5 h. Después de este tiempo, más Hoveyda-Grubbs catalizador de 2a generación (91 mg, 0,15 mmol) se añadió y la mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 1 h y se dejó enfriar a temperatura ambiente. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano/acetato de etilo 1:1 a acetato de etilo puro. El producto impuro (160 mg) se purificó adicionalmente mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de diclorometano/acetona de 99:1 a 4:1. Se obtuvo producto puro (4,4 mg) junto con fracciones impuras que se purificaron adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa en donde se recogió producto puro (22,6 mg). Después de la purificación, se recogió el compuesto del título (27 mg en total, 6%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 0,93-1,11 (m, 11H), 1,24-1,47 (m, 6H), 1,63-1,82 (m, 3H), 1,84-2,01 (m, 3H), 2,41 -2,72 (m, 2H), 2,82 (td, J = 13,1, 3,1 Hz, 1H), 3,59-3,70 (m, 1H), 4,46 (dd, J = 9,8, 3,3 Hz, 1H), 4,70-4,79 (m, 2H)), 5,17 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,83-5,96 (m, 1H), 6,70 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,85-6,99 (m, 1H), 7,59 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,54 (ancho, J = 8,9 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H). CLEM (m/z) 578,3 [M+H], Tr = 1,67 min.

REFERENCIA EJEMPLO 5 - Compuesto 5

[0175]

[0176] Síntesis del Compuesto 5A: A (S)-4-bencil-3-((R)-2-metil-pent-4-enoil)-oxazolidin-2-ona (Preparado como en JACS 1990, 112 (8) 2998-3017, 2,5 g, 9,16 mmol) en etanol (13 mL) y agua (1,5 mL) a temperatura ambiente, se añadió tricloruro de rodio hidratado (48 mg, 0,23 mmol). La reacción se calentó a 80°C durante 8 h, se enfrió y se concentró a vacío. Al residuo resultante se le añadió agua y se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío para producir el compuesto del título (2,2 g, 88%) como un aceite marrón.

[0177] Síntesis del Compuesto 5b: A 5a (2,2 g, 8,1 mmol) en tetrahidrofurano (60 mL) y agua (20 mL) a 0°C se añadió hidróxido de litio (16 ml, 2,0 M solución en agua, 32,2 mmol) y peróxido de hidrógeno (6,6 ml, solución acuosa al 30%, 64,5 mmol). La reacción se agitó a 0°C durante 16 h y después se inactivó por adición cuidadosa de tiosulfato de sodio acuoso. La mezcla de reacción se concentró para eliminar el tetrahidrofurano y luego se lavó dos veces con diclorometano. La capa acuosa se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico 2 M y se extrajo dos veces con éter dietílico. Las capas orgánicas combinadas se secaron a través de una frita hidrófoba y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 5/1 para dar el compuesto del título (530 mg, 57%) como un aceite claro.

[0178] Síntesis del Compuesto 5c: El Compuesto 5c se preparó de la misma manera que 1f con sustitución de 1c con 5b (250 mg, 2,2 mmol), para proporcionar el compuesto del título (750 mg, 77%) como una espuma blanca.

[0179] Síntesis del Compuesto 5d: A una solución de 5c (750 mg, 1,42 mmol) en tetrahidrofurano (35 mL) y agua (20 mL) se añadió zinc en polvo (2,03 g, 31,2 mmol) seguido de acetato de amonio (1,64 g, 21,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La reacción se filtró a través de Celite, el filtrado se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico concentrado y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas se secaron a través de una frita hidrófoba y se concentraron al vacío, seguido de la coevaporación en tolueno (2 x). El residuo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (15 mL) y se añadió 2j (385 mg, 1,4 mmol) seguido de N,N-diisopropiletilamina (743 ml, 4,3 mmol) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (755 mg, 2,0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Se añadió gel de sílice a la mezcla de reacción y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el compuesto del título (580 mg, 71%, 2 pasos) como un aceite viscoso transparente.

[0180] Síntesis del compuesto del título: Una solución de 5d (250 mg, 0,43 mmol) en tolueno (144 mL) se desgasificó con nitrógeno durante 30 min antes de calentar a 70°C y la adición de Hoveyda Grubbs catalizador de 2a generación (54 mg 0,09 mmol). La solución agitada se calentó a 125°C durante 45 min. Se añadió una cantidad adicional de Hoveyda Grubbs catalizador de 2a generación (50 mg, 0,08 mmol) y se continuó calentando durante 2 h. Se añadió otra porción de Hoveyda Grubbs catalizador de 2a generación (27 mg, 0,04 mmol) y se continuó calentando durante 3 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió isocianoacetato de potasio (120 mg) en metanol (2 mL). Después de agitar durante 1 h, la mezcla de reacción se concentró hasta aproximadamente la mitad de su volumen original, se trató con gel de sílice y luego se evaporó hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/acetona 1/0 y luego 5/1 para producir un sólido blanco. Este se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa para producir el compuesto del título (2 mg, 1%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, d4-MeOH, mezcla diastereomérica 2:1, picos de diastereoisómeros principales citados) 0,99 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,47 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,56-1,64 (m, 6H), 1,65-1,79 (m, 1H), 1,83-2,00 (m, 3H), 2,09­ 2,25 (m, 1H), 2,73-2,87 (m, 1H), 3,41 - 3,52 (m, 1H), 3,63-3,71 (m, 1H), 4,38-4,48 (m, 1H), 5,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,18 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,47 (dd, J = 16,0, 6,3 Hz, 1H), 6,67 (dd, J = 16,0, 1,0 Hz, 1H), 7,60­ 7,67 (m, 2H), 7,75 (s, 1H), 8,06 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 9,14 (s, 1H). CLEM (m/z) = 536,2 [M+H], Tr = 1,30 min.

REFERENCIA EJEMPLO 6 - Compuesto 6

[0181]

[0182] Síntesis del Compuesto 6A: Una solución de bromo-(R)-a-metilbencilamina (2,0 g, 10 mmol) en diclorometano (20 mL) se trató con una solución de di-dicarbonato de terc-butilo (2,4 g, 11 mmol) en diclorometano (20 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La solución se lavó con ácido clorhídrico 2 M, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano/acetato de etilo 20:1 a 6:1 para proporcionar el compuesto del título (2,51 g, 84%) como un sólido blanco.

[0183] Síntesis del Compuesto 6b: Una mezcla de 6a (900 mg, 3 mmol), ácido 4-(2-metoxicarboniletil)fenilborónico (624 mg, 3 mmol) en 1,2-dimetoxietano (10 mL) y carbonato de potasio (828 mg, 6 mmol) en agua (2 mL), se agitó a temperatura ambiente. Se añadió tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (172 mg, 0,15 mmol) y la reacción mezcla se calentó a 100°C en un reactor de microondas durante 1 hora. Se separó la capa orgánica. La capa orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo de 20:1 a 5:1 para producir el compuesto del título (958 mg, 83%) como un sólido blanco.

[0184] Síntesis del Compuesto 6c: Una solución de 6B (958 mg, 2,5 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) se agitó a 52C. Una solución de hidróxido de litio hidrato (300 mg, 5 mmol) en agua (5 mL) se añadió y la mezcla de reacción se agitó a 5°C durante 1 hora y luego a temperatura ambiente durante 1 hora. Se evaporó la mayor parte del disolvente y se añadió agua y se añadió ácido clorhídrico 2 M para ajustar el pH de la solución a pH 2. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. La capa orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título (883 mg, 96%) como un sólido blanco.

[0185] Síntesis del Compuesto 6d: Una solución de 6c (1,6 g, 4,3 mmol), 1e (1,86 g, 4,3 mmol) en diclorometano (60 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (1,25 g, 6,5 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (525 mg, 4,3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y la solución se lavó con una solución acuosa de ácido cítrico (pH 2-3), agua y salmuera. La capa orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 6:4, seguido de cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 6:4 para proporcionar el compuesto del título (2,0 g, 60%) como una espuma blanca.

[0186] Síntesis del Compuesto 6e: Una solución de 6d (1,96 g, 2,5 mmol) en tetrahidrofurano (50 mL) se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno. Se añadió polvo de zinc (3,58 g, 55 mmol) seguido de una solución de acetato de amonio (2,9 g, 37,5 mmol) en agua (25 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 24 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla del filtro se lavó con acetato de etilo y ácido clorhídrico 2 M. El filtrado se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico 2 M y se añadió cloruro de sodio para saturar la capa acuosa. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro y se evaporó el disolvente. El residuo se co-evaporó con acetato de etilo (3 x), tolueno (4 x) y se secó para producir el compuesto del título (1,56 g, 95%) como un sólido blanco.

[0187] Síntesis del compuesto del título: Una mezcla de 6e (850 mg, 1,3 mmol) en 4 M HCl en 1,4-dioxano (12 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 1 h. Se evaporó el disolvente y se trituró el residuo con éter dietílico (3 x). El sólido resultante se recogió, se lavó con éter dietílico y se secó para producir clorhidrato de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{3-[3’-((R)-1-aminoetil)-bifenil-4-il]-propioniloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (1,3 mmol). Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{3-[3’-((R)-1-aminoetil)-bifenil-4-il]-propioniloxi}-3-metil-butirilamino)propionil]hexahidro-piridazina-3-carboxílico (1,3 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (671 mg, 0,9 ml, 5,2 mmol) en diclorometano (1300 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (988 mg, 2,6 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetona 7:3 a 1:1 seguido de sílice cromatografía de gel utilizando acetato de etilo. El sólido resultante se trituró con éter y el sólido se recogió y se secó para producir el compuesto del título (395 mg, 57%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,94 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,31 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,85-2,20 (m, 5 H), 2,65-3,10 (m, 5 H), 3,53-3,59 (m, 1H), 4,38-4,25 (m, 1H), 4,64 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 5,05 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,24 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 4,82-4,90 (m, 2H), 7,23-7,30 (m, 3H), 7,37-7,55 (m, 5H). CLEM (m/z) 535,2 [M+H], Tr = 5,11 min.

REFERENCIA EJEMPLO 7: (E)-(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-H¡drox¡-14-¡sopropil-2,11,17-tr¡met¡l-15-oxa-3,9,12,28-tetraaza-tr¡c¡clo[21,3,1,1*5,9*]octacosa-1 (26),21,23(27),24-tetraeno 4,10,13,16-tetraona - Compuesto 7

[0188]

[0189] Síntesis del Compuesto 7a: Una solución 1a (12,0 g, 0,034 mol) en diclorometano anhidro (520 mL) se enfrió a 0°C antes de la adición de piridina (5,5 ml, 0,068 mol), luego éster terc-butildimetilsilílico del ácido trifluorometanosulfónico (9 ml, 0,039 mol). La reacción se agitó a 0°C durante 15 min y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla de reacción se inactivó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (400 mL). La capa acuosa se volvió a extraer con diclorometano (200 mL). Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con salmuera (200 mL) y luego con ácido clorhídrico 2 M (200 mL). La solución se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar el producto del título (15,29 g, 96%) como un sólido blanco.

[0190] Síntesis del Compuesto 7b: Una solución de 7a (15,29 g, 0,0325 mol) en tetrahidrofurano (300 mL) se preparó y se añadió una solución acuosa de hidróxido de litio (2 M, 120 mL). La mezcla agitada se calentó a 60°C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego se trató con ácido clorhídrico 2 M (250 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar un sólido blanquecino. El sólido se purificó por cromatografía en gel de sílice usando éter dietílico/iso-hexano 3:7 para dar el producto del título (7,18 g, 81%) como una goma incolora.

[0191] Síntesis del Compuesto 7c: A 1e (510 mg, 1,2 mmol) en diclorometano anhidro (4 mL) a temperatura ambiente y bajo una atmósfera de nitrógeno se añadió 7b (385 mg, 1,41 mmol), diciclohexilcarbodiimida (364 mg, 1,8 mmol) y 4-W,W-dimetilaminopiridina (142 mg, 1,2 mmol). La suspensión blanca se agitó a temperatura ambiente durante 20 h antes de añadir gel de sílice y concentrar al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 2/1 para dar el compuesto del título (700 mg, 86%) como un líquido viscoso, aceite claro.

[0192] Síntesis del Compuesto 7d: A una solución de 7c (700 mg, 1,02 mmol) en tetrahidrofurano (22 mL) y agua (13 zinc mL) se añadió en polvo (1,46 g, 22,4 mmol) seguido de acetato de amonio (1,2 g, 15,3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró al vacío para eliminar el tetrahidrofurano. La solución resultante se acidificó a pH 1-2 con ácido clorhídrico concentrado y se extrajo con diclorometano (2 x). Las capas orgánicas se secaron a través de una frita hidrófoba y se concentraron al vacío, seguido de la coevaporación en tolueno (2 x). El aceite viscoso incoloro resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (8 mL) y se añadió 1j (187 mg, 1,0 mmol) seguido de W,W-diisopropiletilamina (900 ml, 5,1 mmol) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (542 mg, 1,4 mmol) La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. Se añadió gel de sílice a la mezcla de reacción y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 1/1 para dar el compuesto del título (450 mg, 64%) como un sólido de color blanquecino.

[0193] Síntesis del compuesto del título: Una solución de 7d (450 mg, 0,66 mmol) en 1,2-dicloroetano (219 mL) se desgasificó con nitrógeno durante 15 min antes de añadir Hoveyda Grubbs catalizador de 2a generación (41 mg, 0,07 mmol). La solución agitada se calentó a 80°C durante 2 h. La reacción se enfrió, se concentró hasta aproximadamente 20 ml, se trató con gel de sílice y luego se evaporó hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando isohexano/acetato de etilo 1/1 y luego 1/3 para producir (E)-(2R,5S,11 S,14S,17R,18R)-18-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-14-isopropil-2,11,17-trimetil-15-oxa-3,9,12,28-tetraazatriciclo[21,3,1,1*5,9*]octacosa-1(26),21,23(27),24-tetraeno-4,10,13,16-tetraona (138 mg) como una espuma marrón. La espuma (80 mg, 0,12 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (6,5 mL) y se transfirió a un vial de polipropileno.

A temperatura ambiente, se añadió fluoruro de hidrógeno^piridina (102 pl, 1,2 mmol) a la mezcla de reacción seguido de agitación durante 1 h. Se añadió una cantidad adicional de fluoruro de hidrógeno^piridina (600 pl, 7,1 mmol), seguido de agitación durante 1 h. Se añadió más fluoruro de hidrógeno^piridina (700 ml, 8,2 mmol) y después de 1 h la reacción se inactivó mediante la adición lenta de la mezcla de reacción a una solución agitada de acetato de etilo/cloruro de amonio acuoso saturado. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con acetato de etilo (2 x). Las capas orgánicas combinadas se secaron a través de una frita hidrófoba y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/acetona 8/1 para producir el compuesto del título (33 mg, 16%, 2 pasos) como un sólido blanco. 1H RMN (500 MHz, CD³CN) 0,92 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,31 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,41 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,43-1,63 (m, 4H), 1,78-1,89 (m, 2H), 2,03-2,09 (m, 1H), 2,40- 2,49 (m, 2H), 2,50-2,56 (m, 1H), 2,65-2,72 (m, 1H), 3,32 (td, J = 11,0, 2,4 Hz, 1H), 3,49-3,61 (m, 1H), 4,07 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,97-5,04 (m, 1H), 5,18-5,25 (m, 1H), 6,27-6,34 (m, 1H), 6,38 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 6,96-7,31 (m, 6H). CLEM (m/z) = 543,2 [M+H], Tr = 2,27 min.

REFERENCIA EJEMPLO 8: (E)-(2R,5S,11S,14S)-14-Isopropil-2,11-d¡met¡l-15-oxa-3,9,12,28-tetraazatriciclo[21,3,1,1*5, 9*]octacosa-1(27), 21,23,25-tetraeno-4,10,13,16-tetraona - Compuesto 8

[0194]

[0195] Síntesis del Compuesto 8a: A una solución de 1e (791 mg, 1,83 mmol) en diclorometano (9 mL) a temperatura ambiente, se añadió ácido hept-6-enoico (0,296 ml, 2,19 mmol), W,W'-diciclohexilcarbodiimida (564 mg, 2,74 mmol) y 4- W,W-dimetilaminopiridina (223 mg, 1,82 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (50 mL) y se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La fase acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 50 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron para dar un residuo blanco. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano/acetato de etilo 1:1 a acetato de etilo puro para dar el compuesto del título (774 mg, 81%).

[0196] Síntesis del Compuesto 8b: Una solución de 8a (650 mg, 1,20 mmol) en tetrahidrofurano (29 mL) se preparó y se añadió zinc en polvo (1,72 g, 26,3 mmol) seguido de una solución de acetato de amonio (1,38 g, 18,0 mmol) en agua (7,0 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. La reacción se filtró a través de hyflosupercel lavando con acetato de etilo e hidrogenosulfato de potasio acuoso saturado. La mezcla se trató con ácido clorhídrico (1 M, 3 mL) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se filtraron y se evaporaron para dar una goma incolora. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 100 mL) para dar el compuesto del título (492 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.

[0197] Síntesis del Compuesto 8c: 1j se añadió a 8b (257 mg, 0,63 mmol) disuelto en acetonitrilo (2 mL) (122 mg, 0,83 mmol) seguido de W,W-diisopropiletilamina (435 gL, 2,5 mmol) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (333 mg, 0,88 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. La mezcla se evaporó a sequedad durante 48 horas, por lo que este residuo se repartió entre agua (100 mL) y acetato de etilo (100 mL). La capa acuosa se separó y se volvió a extraer con acetato de etilo (100 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se evaporaron para dar un residuo crudo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-

[0198] Síntesis del compuesto del título: Una solución de 8c (194 mg, 0,36 mmol) en 1,2-dicloroetano se desgasificó con nitrógeno y se añadió entonces Hoveyda-Grubbs de catalizador de 2a generación (23 mg, 0,04 mmol) 15 min y la mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 2,3 h. Después de este tiempo se dejó que la mezcla de reacción se enfriara a temperatura ambiente y se concentró a vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de isohexano/acetato de etilo 1:9 hasta acetato de etilo puro. Se obtuvo un producto impuro (74 mg) que se purificó adicionalmente mediante HPLC preparatoria de fase inversa en donde se recogió el compuesto del título (28 mg, 15%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD). 0,96 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,99 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,41-1,51 (m, 8H), 1,59-1,82 (m, 4H), 1,85-1,96 (m, 2H), 2,02-2,26 (m, 3H), 2,32-2,57 (m, 2H), 2,80 (td, J = 12,9, 2,2 Hz, 1H), 3,50 (dd, J = 11,0, 2,5 Hz, 1H), 4,39 (ancho, J = 13,2 Hz, 1H), 4,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,99 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,46 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,19 (m, 1H), 6,40 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 7,11-7,17 (m, 1H), 7,20-7,30 (m, 3 H). CLEM (m/z) 513,2 [M+H], Tr = 2,58 min.

REFERENCIA EJEMPLO 9 - Compuesto 9

[0199]

[0200] A una solución del Compuesto 4 (16,6 mg, 0,0287 mmol) en acetato de etilo (10 mL) se añadió 10% de paladio sobre carbono (5 mg) y se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 1,5 h. Luego se añadió más paladio al 10% sobre carbono (5 mg) y se continuó agitando bajo una atmósfera de hidrógeno durante 24 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite para eliminar el catalizador y se evaporó y luego se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa preparativa para producir el compuesto del título (5,3 mg, 32%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 0,89-1,05 (m, 9H), 1,29-1,46 (m, 2H), 1,59 (dd, J = 7,1, 1,6 Hz, 6H), 1,65-1,99 (m, 7H), 2,09-2,18 (m, 1H), 2,43-2,58 (m, 1H), 2,74-3,06 (m, 3H), 3,57-3,68 (m, 1H), 4,43 (dd, J = 13,4, 2,7 Hz, 1H), 4,59 (ancho s, 3H), 4,66 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,15 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,66-5,78 (m, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,40 (ancho d, J = 8,7 Hz, 1H), 9,08 (s, 1H). CLEM (m/z) 580,3 [M+H], Tr = 1,53 min.

REFERENCIA EJEMPLO 10: (2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-H¡drox¡-14-¡soprop¡l-2,11,17-trimet¡l-15-oxa-3,9,12,28-tetraaza-triciclo[21,3,1,1*5,9*]octacosa-1(26),23(27), 24-tr¡eno-4,10,13,16-tetraona - Compuesto 10

[0201]

[0202] A (E)-(2R,5S,11 S,14S,17R,18R)-18-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-14-isopropil-2,11, 17-trimetil-15-oxa-3,9,12,28-tetraaza-tricicio[21,3,1,1*5,9*]octacosa-1(26),21,23(27),24-tetraeno-4,10,13,16-tetraona (50 mg, 0,08 mmol) en acetato de etilo (10 mL) a temperatura ambiente se añadió paladio al 10% sobre carbono (50 mg). El sistema se purgó con gas hidrógeno y se agitó vigorosamente durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el lecho del filtro se lavó con metanol. El filtrado se concentró al vacío. El residuo resultante se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (5 mL) y se transfirió a un vial de polipropileno. A temperatura ambiente, se añadió fluoruro de hidrógeno^piridina (1,3 ml, 15,2 mmol) a la mezcla de reacción seguido de agitación durante 3 h. La reacción se diluyó con acetato de etilo y se inactivó mediante la adición cuidadosa de cloruro de amonio acuoso saturado. La capa orgánica se separó, se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/acetona 5/1 para producir el compuesto del título como un sólido blanco. Este se purificó adicionalmente triturando con éter dietílico, filtrando y secando el sólido al vacío (20 mg, 48%, 2 pasos). 1H RMN (300 MHz, CDaCN) 0,90-1,00 (m, 6H), 1,24-1,30 (m, 6H), 1,43 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,32-2,08 (m, 11H), 2,45-2,81 (m, 4H), 3,23-3,36 (m, 1H), 3,47-3,59 (m, 1H), 3,67 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,02 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,29 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,95-5,08 (m, 1H), 5,16-5,29 (m, 1H), 7,03-7,29 (m, 6H). CLEM (m/z) = 545,3 [M+H], Tr = 2,15 min.

REFERENCIA EJEMPLO 11 - Compuesto 11

[0203]

[0204] Síntesis del Compuesto 11a: Una solución enfriada (0°C) de (E)-pent-3-en-2-ol (1,024 g, 11,887 mmol) en diclorometano (30 mL) posteriormente se trató con piridina (1,222 g, 1,3 mL, 15,452 mmol) y cloruro de propionilo (1,430 g, 1,3 mL, 15,452 mmol). Después de agitar durante 1,5 h a 0°C, la reacción se interrumpió con bicarbonato de sodio saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano y luego los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel ^{de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de isohexano/Et} 2^{Ü 1:0 a 9:1 para} producir el compuesto del título (787 mg, 46%) como un aceite incoloro.

[0205] Síntesis del Compuesto 11b: Una solución enfriada (0°C) W,W-diisopropilamina (672,0 mg, 930 pL, 6,641 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) se trató con n-butil litio (2,5 M en hexanos, 2,4 ml, 6,088 mmol). Después de agitar a 0°C durante 20 min, esta solución se enfrió a -78°C y posteriormente se trató con clorotrimetilsilano (841,7 mg, 990 ml, 7,748 mmol) y una solución de 11a (787,0 mg, 5,534 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL). La mezcla de reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente. Después de 16 h, la reacción se inactivo con ácido clorhídrico 1 M (40 mL) y el pH se ajustó a 2 con ácido clorhídrico 2 M. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 mL), los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexano/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para proporcionar el compuesto del título (375 mg, 48%) como un aceite incoloro.

[0206] Síntes/s del Compuesto 11c: el Compuesto 11c se preparó de la misma manera que el Compuesto 1f usando 11b y clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida en lugar de 1c y W,W-diciclohexil carbodiimida con un rendimiento del 60%.

[0207] Síntes/s del Compuesto 11d: El Compuesto 11d se preparó de la misma manera que el Compuesto 1k, usando primero 11c en lugar de 1f en la preparación de 1g y, a continuación, usando diclorhidrato de (R)-1 -(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etilamina en lugar de clorhidrato de (R)-1-(3-vinil-fenil)-etilamina siguiendo el procedimiento descrito para la síntesis de 1k a partir de 1g, con un rendimiento del 81%.

[0208] Síntes/s del compuesto del título: El Compuesto 11 se preparó de la misma manera que el Compuesto 1 usando 11d en lugar de 1k y utilizando tolueno en lugar de dicloroetano en un rendimiento del 8%. 1H RMN (300 MHz, CDaOD) 50,97-1,07 (m, 7 H), 1,25 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,31 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,55-1,63 (m, 6H), 1,65-1,78 (m, 1H), 1,83-2,00 (m, 3H), 2,14 (ap sexteto, J = 6,7 Hz, 1H), 2,69-2,79 (m, 1H), 2,80-2,90 (m, 1H), 3,65 (ap t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,45 (ancho d, J = 13,6 Hz, 1H), 4,78 (dd, J = 6,0, 19,6 Hz, 2H), 5,15 (ap penteto, J = 6,2 Hz, 1H), 5,83 (dq, J = 7,1, 19,9 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 6,7, 17,2 Hz, 1H), 6,79-6,93 (m, 1H), 7,53-7,61 (m, 1H), 7,71 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H). CLEM (m/z) 564,1 [M+H], 596,1 [M+Na], Tr = 3,73 min.

REFERENCIA EJEMPLO 12 - Compuesto 12

[0209]

[0210] Síntesis del Compuesto 12a: Una solución de ácido 2,2-dimetil-4-pentenoico (202 mg, 1,58 mmol) en diclorometano (5 mL) se preparó y se añadió cloruro de oxalilo (411 gL, 4,74 mmol) seguido de dimetilformamida (5 gL). La mezcla efervesó vigorosamente y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h antes de evaporarse para dar un sólido (241 mg). El sólido se disolvió en tolueno (10 mL) y se añadió 1e (433 mg, 1,0 mmol) seguido de cianuro de plata (310 mg, 2,25 mmol). El matraz se cubrió con papel de aluminio para excluir la luz, antes de calentar a 80°C durante 10 min. Se dejó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se calentó a 80°C durante 4,5 h más y luego se dejó enfriar. Se filtró y se evaporó para dar una goma de color amarillo pálido. La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo//so-hexano 1:3 luego acetato de etilo//so-hexano 1:1 para

[0211] Síntesis del Compuesto 12b: Se preparó una solución de 12a (100 mg, 0,184 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) y se añadió polvo de zinc (360 mg, 5,52 mmol), seguido de tampón de fosfato de pH 6 (1 M, 2 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y se añadió más polvo de zinc (120 mg, 1,84 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 48 h más. La mezcla de reacción se filtró para eliminar un sólido suspendido. El sólido se lavó con tetrahidrofurano (15 mL) y tampón de pH 6 (5 mL) y esto se añadió al filtrado. La solución se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía C18 usando un gradiente de acetonitrilo/agua de 0:1 a 1:3 a 1:1. Esto produjo el producto del título (69 mg, 91%) como un aceite incoloro.

[0212] Síntesis del Compuesto 12c: Una solución de 12b (94 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo anhidro (5 mL) se preparó (54 mg, 0,23 mmol) y se enfrió a 0°C antes de añadir 2j, W,W-diisopropiletilamina (160 ml, 0,92 mmol) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7 azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (122 mg, 0,32 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se evaporó sobre gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el producto del título (119 mg, 87%) como un sólido incoloro.

[0213] Síntesis del compuesto del título: Una solución de 12c (119 mg, 0,20 mmol) en tolueno (65 mL) se preparó y se añadió catalizador de 2a generación Hoveyda-Grubbs (12,5 mg, 0,02 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110°C bajo una atmósfera de nitrógeno durante 2 h. Se añadió una cantidad adicional de catalizador de 2a generación Hoveyda-Grubbs (6 mg, 0,01 mmol) y la reacción se agitó a 110°C durante 1 h más. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego se filtró, antes de adsorberse sobre gel de sílice. El material se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo/acetona de 1:0 a 9:1. La goma resultante se trituró con éter dietílico y se secó al vacío para producir un sólido blanco (29 mg). Este sólido se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa de fase inversa preparatoria para producir el producto del título (17 mg, 15%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 1,08 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,38 (s, 3H), 1,59 (d, J = 3,3 Hz, 3H), 1,61 (d, J = 3,1 Hz, 3H), 1,83-2,00 (m, 3H), 2,32-2,43 (m, 1H), 2,75-2,82 (m, 2H), 3,60-3,70 (m, 1H), 4,40-4,50 (m, 1H), 5,15 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H). CLEM (m/z) 564,1 [M+H], Tr = 3,57 min.

REFERENCIA EJEMPLO 13 - Compuesto 13

[0214]

[0215] Síntesis del Compuesto 13a: Una solución enfriada (0°C) de (S)-4-bencil-3-{(R)-2-[2-(2-metil-[1,3]dioxolan-2-il)-etil]-pent-4-enoil}-oxazolidin-2-ona (939,7 mg, 2,516 mmol) como se prepara en el documento WO 2001/024797 en tetrahidrofurano/agua (45 ml, 2:1) se trató posteriormente con peróxido de hidrógeno (30% en agua, 1,3 ml, 12,580 mmol) e hidróxido de litio (211,1 mg, 5,032 mmol). Después de 2,5 h a 0°C, la reacción se interrumpió con hidrogenosulfito de sodio (1,4 g). Después de 0,5 h, los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se diluyó con agua. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x) después se acidificó a pH ~ 2 y se extrajo con diclorometano (3 x). Estos últimos orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (538 mg, cuant.) como un aceite incoloro.

[0216] Síntesis del Compuesto 13b: El Compuesto 13b se preparó de la misma manera que el Compuesto 1f usando 13a y clorhidrato de W-(3-dimetilaminopropil)-A/'-etilcarbodiimida en lugar de 1c y W,W'-diciclohexil carbodiimida en un rendimiento del 58%.

[0217] Síntesis del Compuesto 13c: El Compuesto 13c se preparó de la misma manera que el Compuesto 1 k, usando primero 13b en lugar de 1f en la síntesis de 1g, y a continuación, utilizando diclorhidrato de (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etilamina en lugar de clorhidrato de (R)-1-(3-vinil-fenil)-etilamina siguiendo el procedimiento descrito para la

[0218] Síntesis del compuesto del título: El compuesto 13 se preparó de la misma manera que el Compuesto 1 usando 13c en lugar de 1k y utilizando tolueno en lugar de dicloroetano en un rendimiento del 32%. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,88-1,00 (m, 1H), 1,06 (2d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,22-1,42 (m, 4H), 1,52-1,63 (m, 7 H), 1,65-1,81 (m, 3H), 1,84­ 1,99 (m, 3H), 2,16 (ap penteto, J = 6,9 Hz, 1H), 2,38-2,50 (m, 1H), 2,51-2,61 (m, 1H), 2,62-2,74 (m, 1H), 2,83 (dt, J = 2,7, 13,8 Hz, 1H), 3,59-3,72 (m, 1H), 4,46 (ancho dd, J = 3,3, 13,6 Hz, 1H), 4,69-4,79 (m, 4H), 5,16 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,89 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,84-6,98 (m, 1H), 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H). CLEM (m/z) 651,2 [M+H], Tr = 3,68 min.

REFERENCIA EJEMPLO 14 - Compuesto 14

[0219]

[0220] Una solución de 13 (183,7 mg, 0,282 mmol) en acetona (10 mL) se trató con ácido sulfónico de paratolueno (27 mg, 0,141 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2,5 h, la reacción se inactivó con una solución saturada de bicarbonato de sodio y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexano/acetona 1:0 a 2:3 y después se trituró con iso-hexano/acetona para proporcionar el compuesto del título (49,3 mg, 28%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 1,04 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,05 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,53­ 1,62 (m, 7 H), 1,64-1,79 (m, 1H), 1,84-2,03 (m, 5H), 2,10-2,23 (m, 4H), 2,39-2,53 (m, 1H), 2,54-2,73 (m, 4H), 2,82 (dt, J = 2,9, 13,1 Hz, 1H), 3,59-3,70 (m, 1H), 4,46 (ancho dd, J = 4,0, 12,7 Hz, 1H), 5,17 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,91 (, J = 7,1 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,86-7,00 (m, 1H), 7,59 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H). CLEM (m/z) 606,1 [M+H], Tr = 3,26 min.

REFERENCIA EJEMPLO 15 - Compuesto 15

[0221]

[0222] Una solución madre de 0-(2-morfolin-4-¡l-et¡l)-hidrox¡lam¡na (18 mg, 0,125 mmol) y ácido acético (una gota) en 2 ml de isopropanol era preparado. Al Compuesto 14 sólido (16,4 mg, 0,027 mmol) se le añadió 1 ml de la solución madre y, después de agitar a temperatura ambiente durante 18 h, el Compuesto se purificó mediante HPLC de fase inversa para proporcionar una mezcla de isómeros geométricos de la oxima (1:1, 13,3 mg, 67%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 1,00-1,10 (m, 6H), 1,54-1,64 (m, 5H), 1,65-1,78 (m, 1H), 1,81-2,04 (m, 8H), 2,09­ 2,22 (m, 1H), 2,23-2,33 (m, 1H), 2,34-2,90 (m, 12H), 3,53-3,76 (m, 6H), 4,18 (dt, J = 5,8, 8,5 Hz, 2H), 4,41-4,51 (m, 1H), 4,68-4,82 (m, 2H), 5,16 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 5,82-5,96 (m, 1H), 6,71 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 6,84- 7,00 (m, 1H), 7,59 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,98 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,53 (ancho d, J = 3,1,9,4 Hz, 1H), 9,10 (s, 1H). CLEM (m/z) 734,7 [M+H], Tr = 1,08 min.

REFERENCIA EJEMPLO 16 - Compuesto 16

[0223]

[0224] Una solución de triacetoxiborohidruro de sodio (203,5 mg, 0,96 mmol) en metanol (1 mL) y ácido acético (100 pL) se trató posteriormente con una solución 2 M de dimetilamina en metanol (480 ml, 0,96 mmol) y Compuesto 14 (5,8 mg, 0,0096 mmol). Después de agitar durante un mes a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se cargó directamente en la HPLC preparativa de fase inversa que se eluyó con un gradiente de agua/CH3CN 95:5 a 0:100. Esto proporcionó el compuesto del título (1,1 mg, 18%) como un sólido blanco y como una mezcla 1:1 de diastereómeros. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,87-0,97 (m, 1H), 1,01-1,09 (m, 6H), 1,24 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,55­ 1,63 (m, 6H), 1,64-1,80 (m, 2H), 1,84-2.02 (m, 4H), 2,10-2,24 (m, 1H), 2,41-2,72 (m, 7H), 2,73-2,90 (m, 3H), 3,60-3,69 (m, 1H), 4,41 -4,51 (m, 1H), 5,17 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,85-5,95 (m, 1H), 6,71 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6,85-6,99 (m, 1H), 7,56-7,63 (m, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 8,04 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 9,06-9,13 (m, 1H). CLEM (m/z) 635,0 [M+H], Tr = 0,94 min.

REFERENCIA

Ejemplo 17: (E)-(2R,5S,11S,14S)-14-Isopropil-2,11,15-trimetil-3,9,12,15,28-pentaazatriciclo[21,3,1,1*5,9*]octacosa-1(27), 21,23,25-tetraeno-4,10,13,16-tetraona - Compuesto 17

[0225]

[0226] Síntesis del Compuesto 17a: Una solución de 1d (1,08 g, 2,5 mmol) en diclorometano (35 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (682 mg, 0,55 ml, 3,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 45 minutos. Se añadió W,W-diisopropiletilamina (1,29 g, 1,73 ml, 10 mmol) y el disolvente se evaporó para producir ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo éster de ácido 2,2,2-tricloroetílico (2,5 mmol), que se utilizó en el siguiente paso. Una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo (2,5 mmol) en acetonitrilo (30 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió ácido (S)-2-(terc-butoxicarbonil-metil-amino)-3-metil-butírico (635 mg, 2,75 mmol) y W,W-disopropiletilamina (1,29 g, 1,7 ml, 10 mmol) seguido de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (1,33 g, 3,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se evaporó el disolvente y se disolvió el residuo en acetato de etilo. La solución se lavó con agua, ácido clorhídrico 2 M, agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera, y luego se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano/acetato de etilo 1:1 a acetato de etilo puro para proporcionar el compuesto del título (950 mg, 70%) como un sólido blanco.

[0227] Síntesis del Compuesto 17b: Una solución de 17a (950 mg, 1,74 mmol) en diclorometano (25 mL) se agitó a 0°C en atmósfera de nitrógeno. Se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (577 mg, 0,47 ml, 2,6 mmol) y la reacción mezcla se agitó a 0°C durante 1 h. Se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo adicional (0,2 ml, 1,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 2 h. Se añadió W,W-diisopropiletilamina (903 mg, 1,2 ml, 7 mmol) y el disolvente se evaporó y el residuo se secó para producir éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-3-metil-2-metilamino-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (1,74 mmol), que se utilizó en el siguiente paso. Una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-3-metil-2-metilamino-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo (1,74 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se agitó a 0°C en atmósfera de nitrógeno. Se añadieron ácido hept-6-enoico (268 mg, 0,3 ml, 2,1 mmol) y W,W-disopropiletilamina (903 mg, 1,2 ml, 7 mmol). Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (912 mg, 2,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El disolvente se evaporó y el residuo se diluyó con acetato de etilo. La solución se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua, ácido clorhídrico 2 M, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano/acetato de etilo 3:1 a 1:1 para proporcionar el título del Compuesto (710 mg, 74%) como un sólido blanco.

[0228] Síntesis del Compuesto 17c: Una solución de 17b (710 mg, 1,3 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió polvo de zinc (1,86 g, 28,6 mmol) seguido de una solución de acetato de amonio (1,50 g, 19,5 mmol) en agua (20 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La reacción mezcla se filtró a través de Celite y la almohadilla del filtro se lavó con acetato de etilo y solución de sulfato de hidrógeno de potasio (pH ~2). El filtrado se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico 2 M y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se co-evaporó con tolueno y se secó para producir ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-2-(hept-6-enoil-metilamino)-3-metil-butirilamino]-propionilo}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (468 mg, 85%) en forma de goma. Una solución de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(hept-6-enoil-metil-amino)-3-metil-butirilamino]propionil}-hexahidropiridazina-3-carboxílico (468 mg, 1,1 mmol) en acetonitrilo (25 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió 1j (200 mg, 1,1 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (710 mg, 1,0 ml, 5,5 mmol) seguido de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (585 mg, 1,54 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. Se evaporó el disolvente y se disolvió el residuo en acetato de etilo. La solución se lavó con ácido clorhídrico 2 M, agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexano/acetato de etilo 1:1 a acetato

[0229] Síntes/s del compuesto del título: Una solución de 17c (276 mg, 0,5 mmol) en 1,2-dicloroetano (150 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió catalizador Hoveyda-Grubbs de 2a generación (32 mg, 0,05 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80°C bajo nitrógeno durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se añadió gel de sílice y la mezcla de reacción se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo a acetato de etilo/acetona 7:3. El residuo se trituró con éter y el sólido resultante se recogió, se lavó con éter y se secó para producir el compuesto del título (112 mg, 43%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³CN) 50,82 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,90 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,34 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,39 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,40-1,90 (m, 10 H), 2,60-2,75 (m, 2H), 2,86-2,92 (m, 4H), 3,28-3,36 (m, 1H), 3,93 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,33-4,38 (m, 1H), 4,58 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,85-4,99 (m, 2H), 6,16-6,51 (m, 3H), 7,12-7,30 (m, 6H). CLEM (m/z) 526,3 [M+H], Tr = 2,16 min.

REFERENCIA EJEMPLO 18 - Compuesto 18

[0230]

[0231] Síntes/s del Compuesto 18a: A una suspensión agitada de 7-bromo-2-cloro-quinolina (Fluorochem, 8,10 g, 33,4 mmol) y yoduro de sodio (50,0 g, 334 mmol) en acetonitrilo (27 mL) se añadió lentamente cloruro de acetilo (3,56 ml, 50,0 mmol). Se tapó el matraz, se selló y se calentó a 80°C durante 3 h antes de dejarse enfriar. La mezcla se trató secuencialmente con una solución acuosa de carbonato de potasio al 10% p/p (80 mL), una solución acuosa de sulfito de sodio al 5% p/p (80 mL) y una solución acuosa saturada de tosulfato de sodio (80 mL) y la mezcla se extrajo con diclorometano (2 x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar una 7-bromo-2-yodoquinolina bruta. A la quinolina se le añadió tributil(1 -etoxivinil)estannano (13,6 ml, 40,1 mmol), 1,4-dioxano (67 mL) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (2,37 g, 3,34 mmol) y la mezcla de reacción calentada a 100°C durante 5 h antes de dejarse enfriar. Se añadió ácido clorhídrico acuoso 2 M (67 mL) y la reacción se agitó durante 1 h. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con acetato de etilo y el filtrado se evaporó para eliminar los orgánicos. El residuo se extrajo con acetato de etilo (3 x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El producto se purificó sobre gel de sílice dopado con carbonato de potasio al 10% p/p, eluyendo con un gradiente de acetato de etilo del 0 al 6% en /so-hexanos para producir el compuesto del título (5,5 g, 66%) como un sólido blanco.

[0232] Síntesis del Compuesto 18b: A una solución de 18a (1,42 g, 5,68 mmol) en tetrahidrofurano (28 mL) se añadió de titanio (IV) etóxido (2,6 g, 2,35 ml, 11,4 mmol) seguido de (R)-(+)-2-metilpropanosulfinimida (825 mg, 6,82 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 60°C bajo nitrógeno durante 6 h y se dejó enfriar. Se añadió salmuera seguida de acetato de etilo y la suspensión se filtró a través de celite y la almohadilla del filtro se lavó con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se separó, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 10-25% en iso-hexanos para producir el

[0233] Síntesis del Compuesto 18c: Una mezcla de (1S,2R)-(-)-cis -1-amino-2-indanol (19 mg, 0,13 mmol), [Ru(pcimen)Cl^2]2 (39 mg, 0,064 mmol) y 4 A tamices moleculares pulverizados (0,7 g) se suspendieron en 2-propanol anhidro (3 mL) y se agitaron bajo nitrógeno. La suspensión se calentó a 90°C durante 30 min. La mezcla de reacción se enfrió a 40°C y se añadió una solución de 18b (448 mg, 1,27 mmol) en 2-propanol (9 mL) seguido de una solución de terc-butóxido de potasio (36 mg, 0,32 mmol) en 2-propanol (3 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a 40°C y luego se dejó enfriar. La mezcla se vertió directamente sobre un cartucho de gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo. Después de la concentración, el residuo se purificó adicionalmente sobre sílice eluyendo con acetato de etilo en iso-hexanos (1:1 a 1:0) para producir el compuesto del título (287 mg, 64%).

[0234] Síntesis del Compuesto 18d: Una mezcla de 18c (207 mg, 0,583 mmol), éster metílico del ácido (E)-2,2-Dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-but-3-enoico (170 mg, 0,670 mmol), cloruro de bis[(diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina]paladio(II) (24 mg, 0,029 mmol) y fosfato de potasio tribásico (371 mg, 1,75 mmol) se suspendió en ciclopentilmetiléter (3 mL) y agua (1,5 mL) y la mezcla se agitó y calentó a 80°C bajo nitrógeno durante 5 h. Se dejó enfriar la mezcla de reacción y se diluyó con acetato de etilo y agua. La capa acuosa se separó y se lavó con más acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo en /'so-hexanos (1:1 a 3:1) para producir el compuesto del título como un aceite amarillo (201 mg, 86%).

[0235] Síntesis de Compuesto 18e: 18d (193 mg, 0,48 mmol) se suspendió en 4 M HCl en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol) y se añadió metanol (10 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h y luego se evaporó. El residuo se trituró con éter para dar el compuesto del título como un sólido amarillo (166 mg).

[0236] Síntesis de Compuesto 18f: Ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-

-3-carboxílico (166 mg, 0,48 mmol), 18e (190 mg, 0,48 mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N, N',N'-tetrametiluronio hexafluorofosfato (256 mg, 0,67 mmol) y 4Á tamices moleculares en polvo se suspendieron en acetonitrilo (9,6 mL) bajo nitrógeno. A la mezcla agitada se le añadió N,N-diisopropiletilamina (186 mg, 250 ml, 1,44 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 20 h. La mezcla se filtró a través de un separador de fases y el filtrado se evaporó, se disolvió en diclorometano y se lavó sucesivamente con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y solución saturada de cloruro de amonio, y luego se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo en /so-hexanos (1:1 a 1:0) para producir el compuesto del título como una goma amarilla (77 mg, 28% en 2 pasos).

[0237] Síntesis de Compuesto 18g:A 18f (117 mg, 0,201 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) se añadió, con agitación, agua (0,8 mL) e hidróxido de litio monohidrato (9,2 mg, 0,221 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora y luego se añadió más hidróxido de litio monohidrato (36 mg, 0,857 mmol) y la mezcla se agitó durante 19,5 horas más. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa usando un gradiente de acetonitrilo en agua del 20 al 100% para dar 18 g como un sólido blanco (60 mg, 53%).

[0238] Síntesis del compuesto del[ título: Una suspensión de 2-metil-6-anhídrido nitrobenzoico (177 mg, 0,500 mmol), DMAP (92 mg, 0,750 mmol) y 4Á tamices moleculares en polvo (1 g) en 1,2-dicloroetano (33 mL) se agitó bajo nitrógeno a 50°C. Se disolvieron 18 g (57 mg, 0,100 mmol) en N,N-dimetilformamida (5 mL) y la solución se añadió a la suspensión durante 5 h mediante una bomba de jeringa. Una vez completada la adición, el matraz original que contenía el ácido se lavó con más N,N-dimetilformamida (1 mL) y los lavados se transfirieron al recipiente de reacción durante 30 min. La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante una hora más y luego se dejó enfriar. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa usando un gradiente de acetonitrilo en agua del 5 al 100% para dar el compuesto del título como un sólido blanco (24,5 mg, 45%). 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,59 (d, J = 7,6 Hz, 3H), 1,64 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,96 (m, 1H), 2,17 (m, 1H), 2,28 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 5,10 (m, 1H), 5,24 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,46 (ABq, A5^ab = 0,18, J AB = 16,3 Hz, 2H), 7,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 9,41 (ancho d, J = 5,6 Hz, 1H). CLEM (m/z) 550,2 [M+H], Tr 2,05 min.

REFERENCIA EJEMPLO 19 - Compuesto 19

[0239]

[0240] Síntesis del Compuesto 19a: 1e (1,08 g, 2,50 mmol), 2-metil-6-anhídrido nitrobenzoico (1,46 g, 4,25 mmol), 4-dimetilaminopiridina (122 mg, 1,00 mmol) y 4Á tamices moleculares en polvo se suspendieron en diclorometano seco (11 mL) y la mezcla se agitó bajo nitrógeno. Se añadieron trietilamina (633 mg, 871 ml, 6,25 mmol) y una solución de ácido 2,2-dimetil-but-3-enoico (390 mg, 3,43 mmol) en diclorometano seco (1,5 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 17 h. La suspensión se pasó a través de un cartucho separador de fases y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo en iso-hexanos (1:4 a 2:3) para producir el compuesto del título como una goma marrón (735 mg, 56%).

[0241] Síntesis del Compuesto 19b: 19a (124 mg, 0,235 mmol), (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etanol (65 mg, 0,258 mmol), acetato de paladio (8 mg, 0,035 mmol), tri (o-tolil)fosfina (22 mg, 0,071 mmol) y trietilamina (48 mg, 66 gl, 0,47 mmol) se suspendieron en acetonitrilo (2,35 mL). La mezcla de reacción se calentó y se agitó a 120°C durante 2 h en un reactor de microondas. El residuo se evaporó y suspendió en acetato de etilo y una solución saturada de cloruro de amonio. La capa orgánica se separó y se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio, luego con agua y los lavados acuosos combinados se volvieron a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo en iso-hexanos (1:1 a 3:1) para producir el compuesto del título como una goma amarilla (38 mg, 23%).

[0242] Síntesis de Compuesto 19c: A una solución de 19b (58 mg, 0,083 mg) en tetrahidrofurano (5 mL) se añadió zinc (218 mg, 3,33 mmol) y tampón fosfato pH 6 (1 mL). La mezcla de reacción se agitó rápidamente durante 18 h. Se añadió zinc (218 mg, 3,33 mol) y la reacción se calentó a 40°C durante 1 hora y se dejó enfriar. La mezcla se filtró a través de un separador de fases lavando con tetrahidrofurano y tampón fosfato pH 6. El filtrado se diluyó con acetato de etilo y agua y la fase acuosa se extrajo con más acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. La fase acuosa se evaporó a aprox. la mitad del volumen y se extrajo con acetato de etilo (5 x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron

[0243] Síntesis del compuesto del título: Una suspensión de 2-metil-6-anhídrido nitrobenzoico (143 mg, 0,415 mmol), 4-dimetilaminopiridina (76 mg, 0,623 mmol) y polvo de 4Á tamices moleculares (1 g) en 1,2-dicloroetano (27 mL) se agitó bajo nitrógeno a 50°C. Se disolvió 19c (51 mg, 0,083 mmol) en N,N-dimetilformamida (3 mL) y se añadió la solución a la suspensión durante 3,5 h mediante una bomba de jeringa. Una vez completada la adición, el matraz original que contenía el ácido se lavó con más N,N-dimetilformamida (1 mL) y los lavados se transfirieron al recipiente de reacción durante 10 min. La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante una hora más y luego se dejó enfriar. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa usando un gradiente de acetonitrilo en agua del 10% al 100%. El residuo se purificó adicionalmente mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 50% a 60% de acetato de etilo en iso-hexanos (1:1 a 3:2) para dar el compuesto del título como una goma incolora (1,7 mg, 4% sobre 2 pasos). 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,94 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 0,99 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,41 (s, 3H), 1,52 (s, 3H), 1,65 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,68 (m, 2H), 1,73 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,89 - 2,03 (m, 2H), 2,15 (m, 1H), 2,76 (m, 1H), 3,82 (m, 1H), 4,39 (ancho d, J = 13,4 Hz, 1H), 5,08 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,93 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 6,34 (ABq, A5^ab = 0,11, J AB = 16,6 Hz, 2H), 7,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,75 (dd, J = 8,7, 1,3 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 551,2 [M+H], Tr 2,22 min.

REFERENCIA EJEMPLO 20 - Compuesto 20

[0244]

[0245] Síntesis del Compuesto 20A: Dicloro(p-cumeno)rutenio(II) dímero (3 mg, 0,005 mmol) y (1 R,2R)-(-)-N-p-tosilo-1,2-difeniletilendiamina (4,4 mg, 0,012 mmol) se suspendieron en agua desgasificada (2 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 15 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno durante 90 min. La solución amarilla resultante se enfrió a temperatura ambiente. Se añadieron 2f (206 mg, 1 mmol), formiato de sodio (340 mg, 5 mmol) y tetrahidrofurano desgasificado (1 mL) y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno durante 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C durante 2,5 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 a 2:1 para producir el compuesto del título (193 mg, 92%) como un sólido blanco.

[0246] Síntesis de Compuesto 20b: 1,4-dioxano (5 mL) se desgasificó con nitrógeno, 20a (208 mg, 1 mmol), tributil(vinilo)estaño (951 mg, 0,9 ml, 3 mmol) y bis(trifenilfosfina)paladio(II) dicloruro (70 mg, 0,1 mmol) se añadieron y la mezcla de reacción se calentó a 150°C en un reactor de microondas durante 1 h. Se añadieron más tributil(vinil)estaño (0,3 ml, 1 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (70 mg, 0,1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 150°C en un reactor de microondas durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y la mezcla se filtró a través de un coadyuvante de filtración y la almohadilla del filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 a 2:1, seguido de cromatografía de gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 para proporcionar el compuesto del título (100 mg, 50%) como un sólido blanco.

[0247] Síntesis de Compuesto 20c: Una solución de 1d (6,88 g, 15,9 mmol) en diclorometano (200 mL) se preparó y se añadió ácido trifluoroacético (50 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La TLC mostró que la reacción se había completado. La solución se evaporó para dar un aceite pardo. Este se destiló azeotrópicamente con tolueno (50 mL) y el aceite resultante se secó al vacío para dar sal de ácido trifluoroacético del éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (7,8 g) como una goma marrón. Una solución de éster terc-butílico del ácido ((S)-1-carbamoil-2-metilpropil)-carbámico en acetonitrilo (300 mL) se enfrió a 0°C antes de añadir W,W-diisopropiletilamina (13,8 ml, 79,7 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (6,33 g, 16,7 mmol). La reacción se agitó a 0°C durante 15 min antes de añadir una solución de sal de ácido trifluoroacético de éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1 -((S)-2-amino-propionil)-hexahidropiridazin-3-carboxílico (aprox. 15,9 mmol) en acetonitrilo (85 mL). La reacción se agitó a 0°C durante 20 min más y luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 15 h. La mezcla de reacción se evaporó y luego se redisolvió en acetato de etilo (250 mL). La solución se lavó con agua (150 mL), luego se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar un aceite rojo. Este se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 7:3 luego iso-hexano/acetato de etilo 1:1 para producir el compuesto del título (8,2 g, 92%) como un naranja pálido sólido amorfo.

[0248] Síntesis del Compuesto 20d: A una solución de 20c (530 mg, 1,00 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL) y agua (2 mL) se añadió hidróxido de litio (26 mg, 1,1 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón atmósfera. Después de 19 h, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna flash sobre gel de sílice (12 g de columna Combiflash HP Gold, gradiente de 0-20% de metanol/diclorometano) para producir el compuesto del título (339 mg, 92%) como un sólido incoloro.

[0249] Síntesis de Compuesto 20e: A una solución de 20d (339 mg, 0,920 mmol) y 20bl (183 mg, 0,920 mmol) en diclorometano (4,6 mL) se añadieron W-(3-dimetilaminopropil)-W'-etilcarbodiimida (211 mg, 1,10 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (56,2 mg, 0,46 mmol) a 23°C en una atmósfera de argón. Después de 21 h, la mezcla de reacción se purificó directamente mediante cromatografía de columna flash de gel de sílice (24 g Combiflash HP Gold Column, gradiente de acetato de etilo/hexanos 0-100%) para producir el compuesto del título (224 mg, 42%) como un sólido bronceado claro.

[0250] Síntesis de Compuesto 20f: A una solución de 20e (224 mg, 0,390 mmol) en diclorometano (2,0 mL) se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (128 mg, 0,58 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 2 h, la reacción mezcla se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (188 mg, 99%) como un aceite de color amarillo claro, que se usó sin purificación adicional.

[0251] Síntesis del compuesto 20g: A una solución de 20f (94 mg, 0,195 mmol) en dimetilformamida (1,00 mL) se añadieron hidróxido de cesio monohidratado (98,5 mg, 0,585 mmol) y 4Á tamices moleculares activados (53 mg) a 23°C en atmósfera de argón. Después de 10 min, se añadió 5-bromopent-1-eno (29 mg, 0,195 mmol). Después de 4 d, la mezcla de reacción se diluyó con salmuera (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron a presión reducida. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna flash sobre gel de sílice (columna de oro Combiflash HP de 12 g, gradiente de 0-20% de metanol/diclorometano) para producir el compuesto del título (5,7 mg, 5%) en forma de un sólido amarillo claro.

[0252] Síntesis del compuesto del título: A una solución de 20 g (5,7 mg, 11 |uMol) en tolueno (3,7 mL) se añadió el catalizador de 2a generación Hoveyda-Grubbs (1,0 mg, 1,7 |uMol) a 23°C bajo una atmósfera de argón y la mezcla resultante se calentó a 110°C. Después de 1,25 h, se dejó enfriar la mezcla de reacción a 23°C y se concentró a presión reducida. El residuo crudo se purificó por HPLC preparativa (columna Gemini 5u C18 11 üA, 5-100% de MeCN/H²Ü, 0,1% modificador de ácido trifluoroacético) para dar el compuesto del título (3,7 mg, 56%) como una sal de ácido trifluoroacético de sólido blanco. 1H RMN (CD³OD, 400 MHz): 59,21 (s, 1H), 8,09 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,60 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 6,57 - 6,45 (m, 1H), 5,99 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,30 (q, J = 7,0 Hz, 1H), 4,31 (br-d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,69 - 3,61 (m, 2H), 2,91 (br-t, J = 8,1 Hz, 2H), 2,68 (td, J = 12,8, 3,2 Hz, 1H), 2,55 - 2,44 (m, 1H), 2,42 - 2,31 (m, 1H), 2,15-2,03 (m, 1H), 1,99 - 1,78 (m, 4H), 1,74 - 1,59 (m, 2H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,56 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,99 (d, J = 6,9 Hz, 3 H). HPLC n (min), 4,169, pureza %: 99%. (Fenomenex Kinetex 2,6u C18 100 Á, 100 x 4,60 mm 2,6 columna micras, 8,5 min, 1,5 mL/min, 2-98% de MeCN/H²O, 0,1% gradiente modificador de ácido trifluoroacético). CLEM (ESI) m/z 522,2 [M+H] , Tr = 1,68 min. (Gemini 5u C18 110A, 50 x 4,60 mm de columna de 5 micrómetros, 3,5 min, 2 mL/min, 5-100% de MeCN/H²O, 0,1% gradiente modificador de ácido acético).

REFERENCIA EJEMPLO 21 - Compuesto 21

[0253]

puesto 21a

[0254] Síntesis del Compuesto 21A : A una solución de 20c (500 mg, 0,945 mmol) en diclorometano (4,7 mL) se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (314 mg, 0,1,41 mmol) a 0°C en atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con diclorometano (4,7 mL) y se añadieron secuencialmente W,W-diisopropiletilamina (657 pl, 3,78 mmol) y cloruro de prop-2-eno-1-sulfonilo (140 mg, 0,992 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 17 h, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (50 mL) y la mezcla resultante se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró a presión reducida. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna flash sobre gel de sílice (columna Combiflash HP Gold de 24 g, gradiente de acetato de etilo al 0-100%/hexanos) para producir el compuesto del título (256,4 mg, 51%) como un aceite naranja.

[0255] Síntesis del Compuesto 21b : A una solución de 21a (256 mg, 0,478 mmol) en tetrahidrofurano (8,0 mL) se añadieron polvo de zinc (625 mg, 9,57 mmol) seguido de una solución de acetato de amonio (552 mg, 7,17 mmol) en agua (5,31 mL) a 23°C en atmósfera de argón. Después de 17 h, la mezcla de reacción se calentó a 45°C. Después de 7 h, la mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se filtró a través de un lecho de celite lavando con agua (10 mL). El filtrado se concentró a presión reducida para eliminar el tetrahidrofurano y el residuo se repartió entre agua (25 mL) y acetato de etilo (25 mL). Las capas se dividieron y la capa acuosa se acidificó a pH=2 con una solución acuosa de cloruro de hidrógeno 12 N. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 50 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron a presión reducida. El ácido acético residual se eliminó azeotrópicamente mediante la adición de tolueno (5 mL) seguido de concentración a presión reducida (3 x) para producir el compuesto del título (156 mg, 80%) como un sólido blanco.

[0256] Síntesis de Compuesto 21c : A una solución de 21b (156 mg, 0,390 mmol) y 20b (92,3 mg, 0,464 mmol) en diclorometano (1,95 mL) se añadieron W-(3-dimetilaminopropil)-W'-etilcarbodiimida (105 mg, 0,546 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (23,8 mg, 195 pMol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 21 h, la mezcla de reacción se purificó directamente mediante cromatografía de columna flash de gel de sílice (24 g Combiflash HP Gold Column, gradiente de acetato de etilo/hexanos 0-100%) para producir el compuesto del título (155 mg, 70%) como un aceite incoloro.

[0257] Síntesis del compuesto del título: A una solución de 21c (150 mg, 256 pmol) en tolueno (51 mL) se añadió el catalizador de 2a generación Hoveyda-Grubbs (16 mg, 25 pmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón y la mezcla resultante se calentó a 110°C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se inactivó con etil vinil éter (500 pL) y la mezcla resultante se dejó enfriar a 23°C. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en columna flash de gel de sílice (12 g de columna Combiflash HP Gold, gradiente de acetato de etilo/hexanos 0-100%) para producir el compuesto del título (18,6 mg, 13%). como un sólido bronceado.

1H RMN (CD³OD, 400 MHz): 59,37 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,77 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 6,75 - 6,64 (m, 1H), 6,22 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,62 - 5,52 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 13,3, 3,3 Hz, 1H), 4,21 (dd, J = 14,8, 5,8 Hz, 1H), 4,10 (dd, J = 13,4, 7,5 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 11,5, 2,5 Hz, 1H), 2,79 (td, J = 12,8, 3,2 Hz, 1H), 2,19 (ap-sexteto, J = 7,0 Hz, 1H), 2,04 - 1,88 (m, 2H), 1,87-1,66 (m, 2H), 1,72 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,46 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,05 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,92 (d, J = 6,8 Hz, 3 H). HPLC rr (min), 2,882, pureza%: 98%. (Synergi 4u hidro-RP, 50 x 4,60 mm 4 columna micras, 7 min, 2 mL/min, 5-100% de M eCN/^O, 0,05% trifluorogradiente modificador de ácido acético). CLEM (ESI) m/z 558,44 [M+H] , Tr = 1,88 min. (Gemini 5u C18 110A, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 3,5 min, 2 mL/min, 5-100% de MeCN/H²O, 0,1% gradiente modificador de ácido acético). Rf = 0,25 (acetato de etilo) UV.

REFERENCIA EJEMPLO 22 - Compuesto 22

[0258]

[0259] Síntesis del Compuesto 22a : Una solución de 1d (865 mg, 2 mmol) en DCM (20 mL) se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (667 mg, 3 mmol) a 0°C bajo argón y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo seco (25 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, sal de diciclohexilamina del ácido (S)-2-(terc-butoxicarbonil(metil)amino)-3-metilbutanoico (908 mg, 2,2 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,034 g, 8 mmol)) seguido de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (1,065 g, 2,8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. El disolvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y la solución se lavó dos veces con una solución acuosa al 20% de ácido cítrico (100 mL), agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre magnesio. sulfato, filtrado y evaporado. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en hexano) para producir el compuesto del título como un sólido blanco después de la evaporación (617 mg, 56%).

[0260] Síntesis de Compuesto 22b: En atmósfera de argón, una solución de diisopropilamina (2,51 g, 24,8 mmol) en tetrahidrofurano (150 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. Se añadió gota a gota una solución de n-butil-litio en hexanos (2,5 M, 9,7 ml, 24 mmol) durante 2 min y la solución resultante se agitó durante 10 min más. La solución se enfrió luego a -78°C en un CO² : baño de acetona, y se añadió 2,2-dimetil-3-oxobutanoato (3,2 g, 22 mmol) gota a gota durante 30 seg. La solución se agitó durante 15 min más y se añadió N -fenil-bis(trifluorometanosulfonimida) (8,4 g, 23,5 mmol) como una solución en tetrahidrofurano (20 mL) mediante una cánula durante 5 min, lavando con una porción adicional de tetrahidrofurano (10 mL). La solución resultante se agitó durante 10 min y se retiró del baño frío. Después de agitar durante 1 hora más, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se diluyó con éter dietílico (150 mL). La fase orgánica se lavó con hidróxido de sodio acuoso 1 M (1 x 100 ml, 1 x 30 mL), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (6,2 g, 100%) como un líquido ámbar que se utilizado sin más purificación.

[0261] Síntesis del Compuesto 22c: Una solución de 22b (6,2 g, 22 mmol) en piridina anhidra (11 ml, 140 mmol) se calentó a 70°C. Después de 18,5 h, la temperatura se aumentó a 90°C. Después con agitación durante un total de 72 h, la mezcla de reacción se repartió entre una mezcla agitada de éter dietílico (100 mL) y HCl acuoso 3 M (100 mL). Las fases se separaron y la capa orgánica se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (75 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (2,7 g, 97%) como un líquido ligeramente marrón que se usó sin más purificación.

^, Com pu esto 22d

[0262] Síntesis del Compuesto 22d: En atmósfera de argón, bis(ciclopentadienil) circonio cloruro hidruro (290 mg, 1,1 mmol) se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió mediante una cánula una solución de 22c (1,4 g, 11,1 mmol) y pinacolborano (2,4 ml, 16,5 mmol) en diclorometano (3 mL), lavando con una porción adicional de diclorometano (2 mL). La mezcla resultante se retiró del baño frío y se agitó durante 72 h a temperatura ambiente. Después, la reacción se diluyó con acetato de etilo (50 mL), se inactivó con agua gota a gota (5 mL) y se diluyó adicionalmente con agua (50 mL). Se separaron las fases orgánica y acuosa y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (30 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para producir un residuo crudo que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo del 5% al 15% en hexanos) para producir el compuesto del título (1,6 g, 57%). como un aceite incoloro que cristalizó en reposo a -15°C.

[0263] Síntesis del Compuesto 22e : Bajo argón, 20a (880 mg, 4,23 mmol), 22d (1,24 g, 4,88 mmol), PdCl²(PCy²(p-NMe² Ph))² (173 mg, 0,21 mmol) y K³ PO⁴ (2,64 g, 12,4 mmol) se disolvieron en ciclopentil metil éter (11,9 mL) y agua (5,1 mL). La mezcla bifásica resultante se agitó vigorosamente en un baño de aceite a 90°C durante 3,5 h, momento en el cual la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y agua (40 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se concentró para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (25 a 60% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (1.07 g, 85%).

[0264] Síntesis de Compuesto 22f: A una solución de 22e (600 mg, 2 mmol) en tetrahidrofurano (8 mL) se añadió metanol (4 mL), agua (4 mL) e hidróxido de litio (96 mg, 4 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 h y se inactivó con 1 M HCl (4,2 ml, 4,2 mmol). La solución resultante se concentró hasta un residuo crudo que se co-destiló dos veces con tetrahidrofurano (20 mL), dos veces con acetonitrilo seco (20 mL) y dos veces con tolueno seco (20 mL). El sólido blanco resultante se secó a alto vacío durante la noche y se usó sin purificación adicional (735 mg, rendimiento cuantitativo).

Com puesto 22g

[0265] Síntesis de 22g del compuesto: Una solución de 17a (230 mg, 0,42 mmol) en diclorometano (10 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (128 mg, 0,575 mmol) a 0°C bajo argón y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo seco (20 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, se añadieron 22f (128 mg, 0,38 mmol) y W,W-disopropiletilamina (198 mg, 1,53 mmol) seguido de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1, 1,3,3-tetrametiluronio (218 mg, 0,58 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 5 días. El disolvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (50 mL) y la solución se lavó dos veces con una solución acuosa al 20% de ácido cítrico (50 mL), agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre magnesio. sulfato, filtrado y evaporado. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40%+metanol (4/1) en hexano) para producir después de la evaporación el compuesto del título como un sólido blanco (88 mg, 32%).

[0266] Síntesis del compuesto del título: A una solución de 22g (45 mg, 0,06 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) se añadió metanol (1 mL), agua (1 mL) e hidróxido de litio (2,9 mg, 0,12 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h a temperatura ambiente y se inactivó con 1 M HCl acuoso (0,14 ml, 0,14 mmol). La solución resultante se concentró hasta un residuo crudo que se co-destiló dos veces con tetrahidrofurano (5 mL), dos veces con acetonitrilo seco (5 mL) y dos veces con tolueno seco (5 mL). El sólido blanco resultante se secó a alto vacío durante la noche y se usó sin purificación adicional (40 mg, rendimiento cuantitativo). En un matraz purgado con argón y secado en horno se colocaron anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (83 mg, 0,24 mmol), 4-dimetilformamida (88 mg, 0,72 mmol) y 1,2-dicloroetano seco (100 mL). La solución resultante se calentó a 70°C y el producto crudo de la etapa anterior se añadió gota a gota mediante una jeringa como una solución en W,W-dimetilformamida seca (5 mL) durante 12 h. Se utilizó una porción adicional de W,W-dimetilformamida seca (2 x 1 mL) para completar la transferencia cuantitativa. Después de agitar durante 8 h más a 70°C, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con agua (se añadieron 100 ml, 5 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se lavó con agua (100 mL, se agregaron 5 mL de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (se añadieron 100 ml, se añadieron 5 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa resultante se extrajo con acetato de etilo (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en hexano) para producir después de la evaporación el compuesto del título (6 mg, 18%) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CD³OD): 59,05 (s, 1H), 7,95 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,20 (s, 1H), 6,76 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,93 (m, 1H), 5,27 - 5,22 (m, 1H), 5,14 (m 1H), 4,82 (m 1H), 4,29 (m 1H), 3,70 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 2,77 (s, 3H), 2,63 (m, 1H), 2.09 (m, 2H), 1,93 (m, 2H), 1,86 (m, 1H), 1,79 (m, 2H), 1,59 (t, J = 7,4 Hz, 6H), 1,45 (m, 2H), 0,85 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,76 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CL/EM (m/z) 564 (100%) [M+H]+; T^r = 3,14 min.; pureza >95% (Fenomenex Gemini 5 micras C18, 30 x 4,6 mm, acetonitilo del 5 al 100% en agua durante 6 min, 2 mL/min, modificador de ácido fórmico al 0,05%). TLC Rf = 0,43, metanol al 5% en diclorometano.

REFERENCIA EJEMPLO 23 - Compuesto 23

[0267]

[0268] Síntesis del Compuesto 23a: Bajo argón, 2-hidroxi-3-metilbutanoato de (S)-metilo (578 mg, 4,37 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (3,7 mL) y N,N-dimetilformamida (2,5 mL). La solución se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió bis(trimetilsilil)amida de sodio como una solución 1,0 M en tetrahidrofurano (3,7 ml, 3,7 mmol) gota a gota durante 1,5 min. Después de 3,5 min más, se añadió 5-bromopent-1-eno en una porción. La reacción se agitó durante 2 min y se retiró del baño frío. Después de 2 h, la reacción se detuvo con cloruro de amonio acuoso saturado (10 mL) y se diluyó con acetato de etilo (20 mL), agua (10 mL) y 0,1 N HCl (5 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (20 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para producir un residuo crudo que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo del 0 al 10% en hexanos) para producir el compuesto del título (290 mg, 33%) como un líquido incoloro.

[0269] Síntesis de Compuesto 23b: A una solución de 23a (155 mg, 0,774 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL) se añadió agua (1 mL) e hidróxido de litio monohidrato (165 mg, 3,93 mmol). La reacción se agitó durante 18 h, momento en donde se añadió metanol (1 mL). La reacción se agitó durante 24 h más y luego se concentró al 50% al vacío y se diluyó con agua (20 mL), acetato de etilo (20 mL) y 3 N acuoso HCl (15 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para producir ácido (S)-3-metil-2-pent-4-eniloxi-butírico (115 mg, 80%) que se usó sin purificación adicional. En argón, se disolvió 1d (240 mg, 0,55 mmol) en diclorometano (10 mL). La solución se enfrió en un baño de agua helada y se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (209 mg, 0,94 mmol). La reacción se agitó durante 1 hora y se inactivó mediante la adición de N,N-diisopropiletilamina (296 mg, 2,3 mmol). La mezcla se concentró al vacío y se disolvió en metanol. Después de agitar durante 10 min, la solución se concentró al vacío y se disolvió dos veces y se concentró en tolueno (porciones de 10 mL). El residuo crudo resultante se utilizó sin purificación adicional. Ácido (S)-3-metil-2-pent-4-eniloxi-butírico (0,62 mmol) y éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (aproximadamente 0,55 mmol) se disolvieron en N,N-dimetilformamida (5 mL). Se añadió N,N-diisopropiletilamina (192 mg, 1,5 mmol) y la solución se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió hexafluorofosfato de (1-ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilamino-morfolino-carbenio (320 mg, 0,75 mmol) en una porción y la reacción se agitó durante 15 min. Después, la reacción se retiró del baño frío y se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de agitar durante la noche, la reacción se diluyó con acetato de etilo (30 mL) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (30 mL). Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con una mezcla de HCl acuoso 0,2 N (30 mL) y salmuera (5 mL) seguido de salmuera semisaturada (30 mL) y salmuera (30 mL). La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para producir un residuo crudo que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo del 30% al 60% en hexanos) para producir el compuesto del título (157 mg, 57%) como un residuo amorfo.

[0270] Síntesis de Compuesto 23c: A una solución de 23b (157 mg, 0,31 mmol) en tetrahidrofurano (5,3 mL) se añadió agua (2,6 mL), acetato de amonio (365 mg, 4,7 mmol) y polvo de zinc (460 mg, 7,0 mmol). La mezcla resultante se agitó vigorosamente a temperatura ambiente durante 24 h, y se calentó entonces la reacción a 502C. Después de una 3,5 h adicional, se añadió polvo de zinc adicional (240 mg, 3,7 mmol). La reacción se agitó a 50°C durante 2 h y luego se enfrió a 35°C y se agitó durante 18,5 h adicionales. La mezcla se filtró a través de Celite con acetato de etilo (50 mL) y se lavó con una mezcla de 2 N acuoso HCl (30 mL) y salmuera (15 mL). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. El residuo crudo resultante se recogió dos veces y se concentró en tolueno (10 mL), y el ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-3-metil-2-pent-4-eniloxi-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico crudo se usó sin purificación adicional. Ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-3-Metil-2-pent-4-eniloxi-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (74 mg, 0,37 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (45,5 mg, 0,37 mmol) se disolvieron en diclorometano (5 mL). Se añadió clorhidrato de W-(3-dimetilaminopropil)-W'-etilcarbodiimida (78 mg, 0,41 mmol) en una porción. La reacción se agitó 44 h a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (50 mL), agua (25 mL), bicarbonato de sodio acuoso saturado (25 mL) y salmuera (25 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL). La fase orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para producir un residuo crudo que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (50 a 80 a 100% de acetato de etilo

[0271] Síntesis del compuesto del título: 23c (53 mg, 0,096 mmol) se disolvió en tolueno (30 mL) en atmósfera de argón. La solución se roció con argón con agitación durante 10 min. A continuación, se añadió catalizador de metátesis de segunda generación de Grubbs-Hoveyda (9,0 mg, 0,014) como una solución en tolueno burbujeado con argón (2,0 mL). La reacción se calentó a 100°C en un baño de aceite precalentado y se agitó durante 35 min. La reacción se concentró al vacío hasta un volumen final de -6,5 ml y se cargó directamente en una columna de gel de sílice. La elución con acetato de etilo del 60% al 85% al 100% en hexanos proporcionó 30 mg de material impuro que se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (C18, acetonitrilo en agua del 15% al 100%, ácido trifluoroacético al 0,1%) para proporcionar la compuesto del título (17,8 mg, 35%) como su sal de ácido trifluoroacético como un sólido amorfo.

1H RMN (400 MHz, CD³OD) 59,56 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,39 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,60 - 7,45 (m, 1H), 6,73 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 6,21 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,93 - 5,79 (m, 1H), 4,49 - 4,36 (m, 1H), 3,84 -3,73 (m, 1H), 3,61 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 3,59 - 3,45 (m, 2H), 2,86 - 2,70 (m, 2H), 2,44 - 2,31 (m, 1H), 2,18 - 1,89 (m, 4H), 1,88 - 1,61 (m, 7 H), 1,59 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,04 - 0,95 (m, 6H) ppm. CLEM (m/z) 523,3 [M H], T^r 2,72 min.

REFERENCIA EJEMPLO 24 - Compuesto 24

[0272]

[0273] La sal de ácido trifluoroacético del Compuesto 23 (7,9 mg, 0,012 mmol) se disolvió en acetato de etilo (0,80 mL). Se añadió paladio al 10% sobre carbono (5,6 mg) en una porción y el recipiente de reacción se lavó abundantemente con hidrógeno. La mezcla de reacción se agitó durante 2,5 h bajo 1 atm de hidrógeno gaseoso y luego se filtró a través de un lecho de Celite con acetato de etilo. El filtrado se concentró y el residuo crudo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa (C18, 15% a 100% de acetonitrilo en agua, 0,1% de ácido trifluoroacético) para proporcionar el compuesto del título (4,2 mg, 60%) como su sal de ácido trifluoroacético como un sólido amorfo después de la liofilización. 1H RMN (400 MHz, CD³OD) 59,63 (s, 1H), 8,42 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,91 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,16 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 5,79 - 5,68 (m, 1H), 3,91 - 3,83 (m, 1H), 3,46 - 3,40 (m, 1H), 3,40 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 3,26 - 3,09 (m, 4H), 2,06 - 1,89 (m, 6H), 1,84 (m, 1H), 1,73 - 1,59 (m, 7 H), 1,52 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,52 (m, 1H), 0,93 (s, 3H), 0,91 (s, 3 H) ppm. CLEM (m/z) 525,4 [M+H], T^r 2,51 min.

REFERENCIA EJEMPLO 25. Compuesto 25.

[0274]

Compuesto 25a. 2,2-Dimetil-but-3-en-1-ol

[0275]

[0276] Una solución de ácido 2,2-dimetil-3-but-enoico (570 mg, 5 mmol) y trietilamina (505 mg, 0,7 mL, 5 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) se agitó a -5°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de cloroformiato de metilo (473 mg, 0,4 ml, 5 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -5°C durante 30 min. Se filtró la mezcla de reacción, se lavó el residuo con tetrahidrofurano y se evaporó el filtrado. El residuo se disolvió en tetrahidrofurano (5 mL), se añadió agua (5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C. Se añadió en porciones borohidruro de sodio (190 mg, 5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 15 min y luego a temperatura ambiente durante 30 min. Se añadió una solución saturada de cloruro de amonio (25 mL) y la mezcla se extrajo con éter dietílico. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/éter dietílico 10:1 a 5:1 para proporcionar el compuesto del título (569 mg, 95%) como un aceite. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,05 (s, 6H), 1,33 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 3,36 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 5,09 (dd, J = 17,4, 1,3 Hz, 1H), 5,12 (dd, J = 10,9, 1,3 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H).

Compuesto 25b: 1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etanona

[0277]

[0278] A una suspensión agitada de 7-bromo-2-cloro-quinolina (obtenido de AstaTech, Inc.), (8,10 g, 33,4 mmol) y yoduro de sodio (50,0 g, 334 mmol) en acetonitrilo (27 mL) se añadió lentamente cloruro de acetilo (3,56 ml, 50,0 mmol). El matraz se tapó y selló y se calentó a 80°C durante 3 h antes de dejarse enfriar. La mezcla se trató secuencialmente con una solución acuosa de carbonato de potasio al 10% p/p (80 mL), una solución acuosa de sulfito de sodio al 5% p/p (80 mL) y una solución acuosa saturada de tiosulfato de sodio (80 mL) y la mezcla se extrajo con diclorometano (2 x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron para dar una 7-bromo-2-yodo-quinolina bruta. A la quinolina se le añadió tributil(1-etoxivinil)estaño (13,6 ml, 40,1 mmol), 1,4-dioxano (67 mL) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (2,37 g, 3,34 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 5 h antes de dejarse enfriar. Se añadió ácido clorhídrico acuoso 2 M (67 mL) y la reacción se agitó durante 1 h. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con acetato de etilo y el filtrado se evaporó para eliminar los orgánicos. El residuo se extrajo con acetato de etilo (3 x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se evaporaron. El producto se purificó sobre gel de sílice dopado con carbonato de potasio al 10% p/p eluyendo con un gradiente de acetato de etilo del 0% al 6% en i'so-hexanos para producir el compuesto del título (5,5 g, 66%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 52,86 (s, 3H), 7,727,80 (m, 2H), 8,21 (ABq, A5^ab = 0,11, J^ab = 8,5 Hz, 2H), 8,42 (s, 1H). CLEM (m/z) 250,1/252,1 [M+H], Tr = 2,90 min.

Compuesto 25c: (R)-1-(7-Bromo-quinolin-2-il)-etanol.

[0279]

[0280] El dímero de dicloro (p-cimeno) rutenio(II) (61 mg, 0,100 mmol) y (1R,2R)-(-)-A/-p-tosil-1,2-difeniletilendiamina (88 mg, 0,012 mmol) se suspendió en agua desgasificada (40 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 5 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno durante 90 min. La mezcla de color naranja turbio resultante se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se añadió 1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etanona (5,00 g, 20 mmol) en tetrahidrofurano desgasificado (40 mL) seguido de formiato de sodio (6,8 g, 100 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno durante 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C durante 4 h y se dejó enfriar. Luego se diluyó con acetato de etilo y agua y la capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo del 0% al 30% en /'so-hexanos para producir el compuesto del título (4,96 g, 98%) en forma de un sólido blanquecino. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 1,59 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 4,85 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 5,04 -5,07 (m, 1H), 7,40 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,7, 1,6 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 1,6 Hz, 1H). CLEM (m/z) 252,1/254,1 [M+H], Tr = 1,74 min.

Compuesto 25d: Éster (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etílico de ácido acético

[0281]

[0282] A una solución de 25c (1,00 g, 3,97 mmol) y trietilamina (1,65 ml, 11,9 mmol) en diclorometano anhidro a 0°C, se añadió anhídrido acético (0,75 ml, 7,93 mmol) y 4-(dimetilamino)piridina (24 mg, 0,197 mmol). La mezcla de reacción se agitó y se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 1,5 h, se añadió agua (100 mL) y se separaron las capas. La fase acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 100 mL) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío para dar un residuo crudo. Este se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /so-hexanos (66 mL), después /so-hexanos/acetato de etilo 95:5 (300 mL), luego /so-hexanos/acetato de etilo 9:1 (1.066 mL) para dar 25d (1,16 g, 99%) como aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,65 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 2,16 (s, 3H), 5,98 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,72 (dd, J = 8,7, 1,8 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 293,9/296,0 [M+H], Tr = 2,58 min.

Compuesto 25e. Éster (R)-1-[7-((E)-4-hidroxi-3,3-dimetil-but-1-enil)-quinolin-2-il]-etílico de ácido acético

[0283]

[0284] Una solución de 2,2-dimetil-but-3-en-1 -ol (40 mg, 0,4 mmol) y 25d (118 mg, 0,4 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadieron acetato de paladio(II) (18 mg, 0,08 mmol) y tri(o-tolil)fosfina (24 mg, 0,08 mmol) seguido de una solución de W,W-diciclohexilmetilamina (125 mg, 0,14 ml, 0,64 mmol) en 1,4-dioxano (1 mL) y la mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 90 min. Se añadió más acetato de paladio(II) (9 mg, 0,04 mmol), tri(o-tolil)fosfina (12 mg, 0,04 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió acetato de etilo y la mezcla se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /'so-hexanos/acetato de etilo 3:1 a 1:1 para proporcionar 25e (85 mg, 68%) como una goma. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 1,20 (s, 6H), 1,43 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 2,18 (s, 3H), 3,50 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 6,06 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,52 (ABq, Aó^ab = 0,18, J^ab = 16,0 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,03 (ancho s, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 314,1 [M+H], Tr = 2,21 min.

Compuesto 25f. Éster (R)-1-[7-((E)-3,3-dimetil-4-oxo-but-1-enil)-quinolin-2-il]-etílico del ácido acético

[0285]

[0286] Una solución de 25e (78 mg, 0,25 mmol) en diclorometano (5 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió periodinano de Dess-Martin (106 mg, 0,25 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 60 min. Se añadió más periodinano de DessMartin (22 mg, 0,05 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 min y luego a temperatura ambiente durante 15 min. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y la mezcla se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /so-hexanos/acetato de etilo 4:1 a 1:1 para proporcionar 25f (85 mg, 68%) como una goma. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,37 (s, 6H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 2,18 (s, 3H), 6,06 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,40 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,2 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,04 (ancho s, 1H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 9,52 (s, 1H). CLEM (m/z) 312,1 [M+H], Tr = 2,65 min.

Compuesto 25g. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0287]

[0288] Una solución de 20c (133 mg, 0,25 mmol) en diclorometano (5 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (111 mg, 0,09 ml, 0,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 h. Se añadió una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (10 mL) y la mezcla se agitó a 0°C durante 15 min. Se añadió diclorometano y la capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se evaporó para proporcionar éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,25 mmol) que se utilizó sin purificación adicional. Una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,25 mmol) y 25f (66 mg, 0,21 mmol) en diclorometano (5 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. Se añadieron triacetoxiborohidruro de sodio (55 mg, 0,26 mmol) y ácido acético (1 gota) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadió más triacetoxiborohidruro de sodio (13 mg, 0,25 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y la solución se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando /so-hexanos/acetato de etilo 1:1 a 0:1 para proporcionar 25 g (84 mg, 46%) como una goma. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,86 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,96 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,29 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,31 (s, 3H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,70-2,15 (m, 6H), 2,18 (s, 3H), 2,52-2,63 (m, 2H), 2,82- 2,86 (m, 2H), 3,66-3,73 (m, 1H), 3,83 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,45-4,50 (m, 1H), 4,74 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,28-5,38 (m, 1H), 6,06 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,52 (ABq, Aó^ab = 0,14, J^ab = 16,0 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 726,1/728,1 [M+H], Tr = 2,08 min.

Compuesto 25.

[0289]

[0290] Una solución de 25 g (80 mg, 0,11 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Una solución de hidróxido de litio monohidrato (18,5 mg, 0,44 mmol) en agua (1 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 4 h. Se añadió ácido clorhídrico (1 M, 0,45 mL) y se evaporó el disolvente. El residuo se coevaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1,4 x) y el residuo se trituró con éter dietílico (2 x) y se secó para producir ácido (S)-1 -[(S)-2- ((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1 -hidroxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,11 mmol) como un sólido blanco que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 554,2 [M+H], Tr = 1,03 min.

[0291] Una mezcla de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-hidroxi-etil)-quinolina-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enilamino}-3- metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo (0,11 mol), W,W-diisopropiletilamina (84 mg, 0,65 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (5 mg, 0,04 mmol) en tetrahidrofurano (130 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (133 mg, 0,35 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h. El disolvente se evaporó y el residuo se repartió entre acetato de etilo y una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La solución orgánica se separó y se lavó con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo. El residuo se trituró con éter dietílico y el sólido resultante se secó para producir el Compuesto 25 (21 mg, 30%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDaOD) 5 h 0,80 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,11 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,62 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,67-1,71 (m, 3H), 1,74 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,88-2,05 (m, 2H), 2,64 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,70­ 2,80 (m, 3H), 3,80-3,85 (m, 1H), 4,35-4,40 (m, 1H), 5,89-5,99 (m, 2H), 6,42 (ABq, Aó^ab = 0,15, J^ab = 16,5 Hz, 2H), 7,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,01 (brs, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 536,2 [M+H], Tr = 1,47 min.

REFERENCIA EJEMPLO 26: Compuesto 26.

[0292]

Compuesto 26a. Éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-3-metilbutirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0293]

[0294] Una solución de 1d (1,08 g, 2,5 mmol) en diclorometano (35 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (682 mg, 0,55 ml, 3,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 45 min. Se añadió N,N-diisopropiletilamina (1,29 g, 1,73 ml, 10 mmol) y el disolvente se evaporó para producir éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo. (2,5 mmol), que se utilizó en el siguiente paso. Se agitó una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidropiridazin-3-carboxílico crudo (2,5 mmol) en acetonitrilo (30 mL) a 0°C bajo nitrógeno. Ácido (S)-2-(tercbutoxicarbonilmetil-amino)-3-metil-butírico (635 mg, 2,75 mmol, obtenido de Sigma-Aldrich Inc.) y N,N-diisopropiletilamina (1,29 g, 1,7 ml, 10 mmol) seguido de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (1,33 g, 3,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se evaporó el disolvente y se disolvió el residuo en acetato de etilo. La solución se lavó con agua, ácido clorhídrico (2 M), agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 a 0:1 para proporcionar el compuesto del título (756 mg, 55%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,88 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,28 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,49-1,54 (m, 9H), 1,65-2,30 (m, 5H), 2,82 (s, 3H), 2,82-2,94 (m, 1H), 3,62-4,18 (m, 3H), 4,30-4,45 (m, 1H), 4,73 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,29-5,39 (m, 1H), 6,62-6,77 (m, 1H). CLEM (m/z) 545,2/547,1 [M+H], Tr = 3,02 min.

Compuesto 26b. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-({(E)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enil}-metil-amino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0295]

[0296] El Compuesto 26b se preparó de la misma manera que el Compuesto 25g usando 26a en lugar de 20c con un rendimiento del 42%. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,90 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,05 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,33 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,70-2,15 (m, 5 H), 2,17 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,57-2,62 (m, 3H), 2,82-2,89 (m, 1H), 3,66-3,73 (m, 1H), 3,83 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,43-4,48 (m, 1H), 4,72 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,94 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 5,27-5,37 (m, 1H), 6,06 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 6,50 (ABq, A5^ab = 0,04, J^ab = 16,5 Hz, 2H), 6,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,6 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,95 (ancho s, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H). CLEM (m/z) 740,2/742,3 [M+H], Tr = 2,44 min.

Compuesto 26.

[0297]

[0298] El Compuesto 26 se preparó de la misma manera que el Compuesto 25 usando 26b en lugar de 25g con un rendimiento del 11% como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 h 0,86 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 0,96 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,14 (s, 3H), 1,23 (s, 3H), 1,44 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,67-1,72 (m, 2H), 1,75 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,81-2,25 (m, 3H), 2,51 (s, 3H), 2,79-2,91 (m, 4H), 3,69-3,73 (m, 1H), 4,25-4,30 (m, 1H), 5,47 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,97 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,54 (ABq, A5^ab = 0.06, J^ab = 16,0 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,95 (ancho s, 1H), 8,21 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 550,3 [M+H], Tr = 1,50 min.

EJEMPLOS DE REFERENCIA 27 y 28, el Compuesto 27 y 28

[0299]

Compuesto 27a. Éster 2-metil-but-3-enilo de ácido trifluoro-metanosulfónico

[0300]

[0301] Una solución de 2-metil-but-3-en-1-ol (840 mg, 10 mmol) y 2,6-lutidina (1,5 g, 1,6 ml, 14 mmol) en diclorometano (40 mL) se agitó a -78°C bajo nitrógeno. Se añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (3,38 g, 2,0 ml, 12 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 1 h. Se añadió agua y la mezcla de reacción se calentó a 0°C. Se añadió agua adicional y la capa orgánica se separó, se lavó con ácido clorhídrico 1 M frío, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se evaporó para producir el producto crudo (14 mmol) como un aceite amarillo pálido, que se oscureció. al estar de pie. El producto crudo se utilizó inmediatamente en el siguiente paso. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,16 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 2,66-2,76 (m, 1H), 4,33-4,55 (m, 2H), 5,20 (dd, J = 10,5, 0,9 Hz, 1H), 5,21 (dd, J = 16,3, 0,9 Hz, 1H), 5,66-5,81 (m, 1H).

Compuesto 27b. Éster metílico del ácido (S)-3-metil-2-(2-metil-but-3-eniloxi)-butírico

[0302]

[0303] Una solución de éster metñilico del ácido (S)-2-hidrox¡-3-met¡l-butír¡co (1,32 g, 10 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) se agitó a -10°C bajo nitrógeno. Se añadió gota a gota bis(trimetilsilil)amida de sodio (6 ml, 12 mmol, 2 M en tetrahidrofurano) y la mezcla de reacción se agitó a -10°C durante 10 min. Se añadió éster 2-metil-but-3-enílico del ácido trifluorometanosulfónico (2,18 g, 10 mmol) en una porción y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió una solución saturada de cloruro de amonio y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/éter dietílico 20:1 a 10:1 para proporcionar el compuesto del título (429 mg, 21% en 2 pasos) como un aceite, tal como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. 1H r Mn (300 MHz, CDCb) 50,96-0,99 (m, 6H), 1,05 (d, J = 6,9 Hz, 1,5H), 1,08 (d, J = 6,6 Hz, 1,5H), 2,01-2,12 (m, 1H), 2,45-2,56 (m, 1H), 3,06-3,21 (m, 1H), 3,44-3,60 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 5,00-5,11 (m, 2H), 5,74-5,88 (m, 1H).

Compuesto 27c. Ácido (S)-3-metil-2-(2-metil-but-3-eniloxi)-butírico

[0304]

[0305] Una solución de 27b (429 mg, 2,1 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (265 mg, 6,3 mmol) en agua (5 mL) seguido de metanol (2 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadieron más hidróxido de litio monohidrato (90 mg, 2,1 mmol) y metanol (3 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. El disolvente orgánico se evaporó y la solución se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico 2 M y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título (200 mg, 54%) como un aceite incoloro y como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,97-1,11 (m, 9H), 2,14-2,23 (m, 1H), 2,48-2,59 (m, 1H), 3,37-3,50 (m, 2H), 3,70-3,72 (m, 1H), 5,11-5,19 (m, 2H), 5,70-5,88 (m, 1H), 8,50-9,50 (ancho s, 1H). CLEM (m/z) 185,3 [M-H], Tr = 2,33 min.

Compuesto 27d. Ácido (S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1 -acetoxi-etil)-quinolin-7-il]-2-metil-but-3-eniloxi}-3-metil-butírico

[0306]

[0307] Una solución de 27c (200 mg, 1,07 mmol) y 25d (314 mg, 1,07 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno. Se añadió acetato de paladio(II) (48 mg, 0,2 mmol), tri(o-tolil)fosfina (61 mg, 0,2 mmol) seguido de W,W-diciclohexilmetilamina (418 mg, 0,46 ml, 2,14 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 120°C en un reactor de microondas durante 40 minutos. Se añadió más acetato de paladio(II) (48 mg, 0,2 mmol), tri(-tolil)fosfina (61 mg, 0,2 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 130°C en un reactor de microondas durante 30 minutos. El disolvente se evaporó y el residuo se repartió entre acetato de etilo y ácido clorhídrico 1 M. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para proporcionar el producto crudo (1,07 mmol) como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros que se usó en el siguiente paso sin purificación adicional. CLEM (m/z) 400,2 [M+H], Tr = 2,75 min.

Compuesto 27e. Éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolin-7-il]-2-metil-but-3-eniloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0308]

[0309] Una solución de 1d (433 mg, 1,0 mmol) en diclorometano (30 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (444 mg, 0,35 ml, 2,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 45 minutos. Se añadió W,W-diisopropiletilamina (516 mg, 0,7 ml, 4,0 mmol) y el disolvente se evaporó y el residuo se secó para producir éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (1,0 mmol), que se utilizó en el siguiente paso. Se agitó una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1 -((S)-2-amino-propionil)-hexahidropiridazin-3-carboxílico crudo (1,0 mmol) en acetonitrilo (30 mL) a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió 27d (1,0 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (516 mg, 0,7 ml, 4,0 mmol) seguido de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (530 mg, 1,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego a temperatura ambiente durante 2 h. Se evaporó el disolvente y se disolvió el residuo en acetato de etilo. La solución se lavó con ácido clorhídrico 1 M frío, agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 a 1:2 para proporcionar el compuesto del título (420 mg, 58% en 2 pasos) como un sólido blanco, como una mezcla 1:1 mezcla de dos diastereoisómeros. CLEM (m/z) 713,3/715,3 [M+H], Tr = 3,48 min.

Compuesto 27 y 28

[0310]

[0311] Una solución de 27e (143 mg, 0,2 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (42 mg, 1,0 mmol) en agua (2 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 3 h y luego a 10°C durante 3 h. Se añadió ácido clorhídrico 1 M (1 ml, 1,0 mmol) y se evaporó el disolvente. El residuo se co-evaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1,3 x) y el residuo se trituró con éter dietílico (2 x) y se secó para producir ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1 -hidroxi-etil)-quinolin-7-il]-2-metil-but-3-eniloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,2 mmol) como un sólido amarillo pálido, como una mezcla de dos diastereoisómeros que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 541,2 [M+H], Tr = 1,77 min. Una suspensión de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-hidroxi-etil)-quinolin-7-il]-2-metil-but-3-eniloxi}-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,2 mmol) se agitó en tetrahidrofurano (200 mL) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. Se añadieron N,N-diisopropiletilamina (129 mg, 0,18 ml, 1,0 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (8 mg, 0,06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (107 mg, 0,28 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió más hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (30 mg, 0,08 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se evaporó el disolvente y se suspendió el residuo en acetato de etilo. Se añadió ácido clorhídrico 1 M frío y la capa orgánica se separó, se lavó con agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:4 a 0:1 para proporcionar una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. La mezcla se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con acetonitrilo (que contenía ácido fórmico al 0,1%)/agua (que contenía ácido fórmico al 0,1%) 45:55. Las fracciones que contenían los diastereoisómeros puros se combinaron y evaporaron. Los residuos se repartieron entre una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir dos diastereoisómeros.

[0312] Ejemplo 27 Compuesto 27 (que eluye primero) Diastereoisómero 1: (12 mg, 12%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, cfe-DMSO) 50,70 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,55-1,62 (m, 2H), 1,63 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,73-1,95 (m, 3H), 2,72-2,78 (m, 1H), 3,25-3,30 (m, 1H), 3,45­ 3,52 (m, 1H), 3,65-3,72 (m, 2H), 4,18-4,22 (m, 1H), 4,87 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 5,65- 5,73 (m, 1H), 5,96 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,34 (dd, J = 16,5, 5,5 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,47 (d, J = 8,3 Hz, 1H). CLEM (m/z) 523,3 [M+H], Tr = 2,30 min.

[0313] Ejemplo 28, el Compuesto 28 (que eluye segundo) Diastereoisómero 2: (12 mg, 12%) como un sólido blanco.

1H RMN (300 MHz, afe-DMSO) 50,73 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,49 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,55-1,62 (m, 2H), 1,65 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,75-1,95 (m, 3H), 2,56-2,62 (m, 1H), 2,72-2,82 (m, 1H), 3,64­ 3,73 (m, 3H), 4,18-4,32 (m, 1H), 4,84 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 5,65-5,73 (m, 1H), 5,98 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,34 (dd, J = 16,5, 5,2 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H). CLEM (m/z) 523,3 [M+H], Tr = 2,34 min.

REFERENCIA EJEMPLO 29: Compuesto 29

[0314]

Compuesto 29a. Ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)propionil]hexahidro-piridazina-3-carboxílico

[0315]

[0316] A éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico 1e (502 mg, 1,16 mmol) suspendido en tetrahidrofurano (15 mL) y agua (3 mL) se añadió hidróxido de litio monohidrato (69 mg, 1,65 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos y luego se añadió ácido clorhídrico (2 M, 0,75 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 5 minutos y luego se evaporó. El residuo crudo se usó directamente en el siguiente paso sin purificación adicional.

Compuesto 29b. Amida de (R)-1-(7-bromoquinolina-2-il)-etilo de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0317]

[0318] 18c (533 mg, 1,50 mmol) se disolvió en ácido clorhídrico en 1,4-dioxano (4 M, 7,5 mL) y metanol (7,5 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h y luego se evaporó. El residuo se pasó a través de un cartucho SCX eluyendo con metanol y luego con amoniaco 1 M en metanol. La fracción básica se recogió y se evaporó. El residuo se disolvió en diclorometano (30 mL) y se añadieron 23 ml de esta solución a 29a recién preparado (350 mg, 1,16 mmol). El recipiente de reacción se enfrió a 0°C y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (616 mg, 1,62 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (450 mg, 606 gL, 3,48 mmol) se añadieron. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 15 h. La mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó sucesivamente con una solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y una solución saturada de cloruro de amonio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó sobre sílice eluyendo con acetato de etilo/metanol 1:0 a 19:1 para producir el compuesto del título (205 mg, 33%) como una espuma blanca.

1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,85 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,41 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,58 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,60-1,81 (m, 2H), 2,04-2,16 (m, 1H), 2,20-2,29 (m, 1H), 3,69-3,79 (m, 1H), 3,26 (ancho s, 1H), 3,43-3,54 (m, 1H), 3,72 (hepteto, J = 6,4 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 3,98 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,47- 4,56 (m, 1H), 5,27 (ap penteto, J = 6,9 Hz, 1H), 5,46 (dq, J = 8,0, 6,9 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,43 (s, 1H). CLEM (m/z) 536,0 [M+H], Tr = 2,21 min.

Compuesto 29c. (R)-4-Isopropil-3-((E)-2-metil-but-2-enoil)-oxazolidin-2-ona

[0319]

[0320] Una solución enfriada (-20°C) de ácido tiglico (2,005 g, 20,031 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (50 mL) se trató secuencialmente con trietilamina (6,1 ml, 44,068 mmol) y cloruro de pivaloilo gota a gota (2,7 ml, 22,034 mmol). Después de agitar a -20°C durante 30 min, se añadieron cloruro de litio (1,019 g, 24,037 mmol) y (R)-(+)-4-isopropil-2-oxazolidinona (2,587 g, 20,031 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente, se agitó durante 3 días y luego se inactivó con cloruro de amonio saturado. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para producir el compuesto del título (3,307 g, 78%) como un sólido incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,92 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,94 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,83 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,93 (s, 3H), 2,38 (d de hepteto, J = 6,9, 4,2 Hz, 1H), 4,19 (dd, J = 8,9, 4,6 Hz, 1H), 4,33 (ap t, J = 8,9 Hz, 1H), 4,49-4,58 (m, 1H), 6,23 (q, J = 7,1 Hz, 1H).

Compuesto 29d. (R)-4-Isopropil-3-[(R)-2-metil-2-(2-trimetilsilanil-etoximetil)-but-3-enoil]-oxazolidin-2-ona

[0321]

[0322] Humedad residual en 29c (458,9 mg, 2,172 mmol) se eliminó mediante azeotrópico con tolueno anhidro. Se trató gota a gota una solución enfriada (-78°C) de 29c seco en tolueno anhidro (10 mL) con una solución de bis(trimetilsilil)amida sódica en tolueno (0,6 M, 5,4 ml, 3,258 mmol). Después de agitar la solución amarilla a -78°C durante 35 min, se añadió cloruro de 2-(trimetilsililetoximetilo (1,1 ml, 6,516 mmol). Después de agitar a 0°C durante 3,5 h, la reacción se interrumpió con cloruro de amonio saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 9:1 para producir el compuesto del título (543,3 mg, 73%) como un aceite incoloro y como una mezcla 5:1 de diastereoisómeros. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,01 (s, 9H), 0,77-0,99 (m, 8H), 1,49 (s, 3H), 2,36 (d de hepteto, J = 6,9, 3,8 Hz, 1H), 3,42-3,60 (m, 3H), 4,15-4,31 (m, 3H), 4,49-4,57 (m, 1H), 5,00 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,10 (d, J = 10,7, 1H), 6,19 (dd, J = 17,8, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 364,1 [M+Na], Tr = 3,32 min.

Compuesto 29e. (R)-3-((R)-2-Hidroximetil-2-metil-but-3-enoil)-4-isopropil-oxazolidin-2-ona.

[0323]

[0324] A una solución agitada de 29d (2,93 g, 8,58 mmol) en una mezcla de acetonitrilo (86 mL) y agua (1,72 mL) se añadió tetrafluoroborato de litio (1 M en acetonitrilo, 42,9 ml, 42,9 mmol). La mezcla se calentó a reflujo bajo nitrógeno durante 5 h y se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se añadió más tetrafluoroborato de litio (1 M en acetonitrilo, 8,6 ml, 8,6 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 75 minutos más y se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con agua/éter dietílico (2:3, 100 mL) y la capa orgánica se separó y se lavó con agua. Los lavados acuosos combinados se volvieron a extraer con éter dietílico y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron para dar el compuesto del título (1,89 g, 91%) en forma de un aceite amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,89 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,95 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,35 (s, 3H), 2,36-2,47 (m, 1H), 2,56-2,70 (ancho s, 1H), 3,47-3,54 (m, 1H), 3,91 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,22-4,31 (m, 2H), 4,47­ 4,53 (m, 1H), 4,97 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 6,09 (dd, J = 17,8, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 242,2 [M+H], Tr = 1,82 min.

Compuesto 29f. (R)-3-[(R)-2-(ferc-Butil-dimetil-silaniloximetil)-2-metil-but-3-enoil]-4-isopropil-oxazolidin-2-ona

[0325]

[0326] A una solución agitada de 29e (660 mg, 2,74 mmol) y cloruro de ferc-butildimetilsililo (533 mg, 3,56 mmol) en W,W-dimetilformamida (10 mL) a 0°C bajo nitrógeno se añadió en una porción de imidazol (821 mg, 12,1 mmol). La reacción se agitó a 0°C durante 15 minutos y luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 5 h. La mezcla se concentró y luego se repartió entre una solución saturada de cloruro de amonio y éter. La capa orgánica se separó y se lavó con agua (3 x), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 19:1 para producir el compuesto del título (316 mg, 32%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,05 (s, 3H), 0,06 (s, 3H), 0,86-0,94 (m, 6H), 0,89 (s, 9H), 1,45 (s, 3H), 2,27- 2,40 (m, 1H), 3,71 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,10-4,30 (m, 2H), 4,43 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,49-4,55 (m, 1H), 4,99 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 5,10 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,17 (dd, J = 17,8, 10,9 Hz, 1H). CLEM (m/z) 356,2 [M+H], Tr = 4,02 min

Compuesto 29 g. Ácido (R)-2-(ferc-Butil-dimetil-silaniloximetil)-2-metil-but-3-enoico

[0327]

[0328] A una mezcla agitada de 29f (310 mg, 0,872 mmol) en tetrahidrofurano (4,4 mL) y agua (2,2 mL) a 0°C se añadió una solución de peróxido de hidrógeno (30%, 494 mg, 449 ml, 4,36 mmol) seguido de hidróxido de litio monohidrato (73 mg, 1,74 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 5 minutos, luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. Se añadió más tetrahidrofurano (1 mL) y la mezcla se enfrió a 0°C y se añadió hidróxido de litio monohidrato (37 mg, 0,87 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 40 minutos, luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 7 h. Después, la reacción se inactivó con metabisulfito de sodio y se agitó durante 30 minutos. La mezcla se acidificó a pH <3 con ácido clorhídrico (2 M) y se extrajo con diclorometano (3 x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó en cromatografía en gel de sílice eluyendo con /so-hexanos/acetato de etilo 9:1 para proporcionar el compuesto del título (144 mg, 68%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,12 (s, 6H), 0,93 (s, 9H), 1,31 (s, 3H), 3,65 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,78 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 5,96 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H).

Compuesto 29h. Amida de (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilo de ácido (S)-1-1(S)-2-[(S)-3-metil-2-((R)-2-metil-2-fercbutil-dimetil-silaniloximetil-but-3-enoilamino)-butirilamino]propionil}hexahidro-piridazina-3-carboxílico

[0329]

[0330] A una solución agitada 29b (504 mg, 0,944 mmol), anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (649 mg, 1,89 mmol), 4-(dimetilamino)piridina (46 mg, 0,378 mmol), trietilamina (238 mg, 328 gl, 2,36 mmol) y 4 Á tamices moleculares en polvo (~ 1 g) en diclorometano (10 mL) se añadió una solución de 29 g (346 mg, 1,42 mmol) en diclorometano (4 mL). La reacción se agitó bajo nitrógeno durante 91 h y luego más anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (325 mg, 0,90 mmol), 4-(dimetilamino)piridina (23 mg, 0,189 mmol) y una solución de 29 g (173 mg, 0,71 mmol) en diclorometano (2 mL) se añadió y la mezcla de reacción se agitó durante 23 h más. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se enfrió a 0°C y se añadió agua helada. La capa orgánica se separó y se lavó secuencialmente con una solución saturada enfriada con hielo una solución de cloruro de amonio, solución saturada de bicarbonato sódico enfriada con hielo y salmuera saturada, se secó sobre anhidro sulfato de sodio, se filtró y se evaporó y purificó en cromatografía en gel de sílice eluyendo con /so-hexanos/acetato de acetato 1:1 a 0:1 para producir el compuesto del título (244 mg, 34%) como un aceite beige. 1H RMN (300 MHz, CDCI³) 50,05 (s, 3H), 0,06 (s, 3H), 0,88 (s, 9H), 0,93 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,94 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,37 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,42 (s, 3H), 1,61 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,54-1,71 (m, 2H), 1,91 -2,01 (m, 1H), 2,23-2,35 (m, 2H), 2,57-2,68 (m, 1H), 3,39-3,50 (m, 1H), 3,65 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,73 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,89 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,51-4,60 (m, 1H), 5,02 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,21-5,43 (m, 4H), 6,04 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 -7,71 (m, 2H), 8,02 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H). CLEM (m/z) 760,3, 762,3 [M+H], Tr = 4,16 min.

Compuesto 29i.

[0331]

[0332] A paladio(II) acetato sólido (14 mg, 0,060 mmol) y tri(o-tolil)fosfina (20 mg, 0,060 mmol) se añadió una solución de 29h (49 mg, 0,060 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (18,4 mL), seguido de W,W-diciclohexilmetilamina (25 mg, 27 ml, 0,128 mmol) y acetonitrilo anhidro (0,2 mL). La mezcla se calentó a 120°C en un reactor de microondas durante 25 minutos. Se hicieron reaccionar cinco lotes de una cantidad equivalente y se combinaron y diluyeron con acetato de etilo, se lavaron con una solución saturada de cloruro de amonio (2 x), salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó en cromatografía en gel de sílice eluyendo con iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 a 1:3 para proporcionar el compuesto del título (81 mg, 37%) como una goma amarilla. CLEM (m/z) 680,3 [M+H], Tr = 3,75 min

Compuesto 29.

[0333]

[0334] El Compuesto 29i (40 mg, 0,059 mmol) se disolvió en acetonitrilo (20 mL) y ácido fluorhídrico (48% en agua, 117 mg, 102 gl, 5,88 mmol) se añadió. La mezcla de reacción se agitó durante 4 h y se añadió más ácido fluorhídrico (48% en agua, 117 mg, 102 gl, 5,88 mmol) y se continuó agitando durante 3,5 h más. Se añadió bicarbonato de sodio sólido y la mezcla se agitó durante 5 minutos, se filtró a través de una frita hidrófoba y se evaporó el filtrado. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:4 a 7:3 para producir el compuesto del título (10,0 mg, 30%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,48-1,78 (m, 2H), 1,56 (s, 3 H), 1,60 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,66 (d, J = 7,4 H, 3H), 1,91-2,00 (m, 1H), 2,10-2,19 (m, 2H), 2,63-2,75 (m, 1H), 3,62 (dd, J = 11,4, 2,7 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,95 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,38-4,47 (m, 1H), 5,08 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,80 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 566,3 [M+H], Tr = 1,79 min.

REF ERENCIA EJEMPLO 30. Compuesto 30.

[0335]

[0336] A una solución agitada del Compuesto 29 (40 mg, 0,059 mmol) en acetato de etilo (6 mL) se añadió 10% de paladio sobre carbono (12,5 mg, 0,012 mmol). La mezcla se hizo reaccionar en una atmósfera de hidrógeno durante 1 hora y luego se filtró el catalizador. Se añadió paladio sobre carbono al 10% fresco (12,5 mg, 0,012 mmol) al filtrado y la mezcla agitada reaccionó en una atmósfera de hidrógeno durante 1 h. La mezcla se filtró a través de Celite y luego se evaporó. El residuo se disolvió en acetato de etilo (6 mL) y se añadió paladio sobre carbono al 10% fresco (12,5 mg, 0,012 mmol) y la mezcla agitada reaccionó en una atmósfera de hidrógeno durante 2 h. La mezcla se filtró a través de Celite y se evaporó. El residuo se disolvió en acetonitrilo (20 mL) y se añadió fluoruro de hidrógeno (48% en agua, 117 mg, 102 ml, 2,82 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h y se añadió más fluoruro de hidrógeno (48% en agua, 117 mg, 102 pl, 2,82 mmol) y se agitó durante 2 h más. Se añadió hidrogenocarbonato de sodio sólido y la mezcla se agitó durante 5 min y luego se filtró a través de una frita hidrófoba. La mezcla se evaporó y se disolvió en acetato de etilo (6 mL) y se añadió paladio sobre carbono al 10% (12,5 mg, 0,012 mmol). La mezcla agitada se hizo reaccionar bajo una atmósfera de hidrógeno durante 7 horas y luego se filtró a través de Celite y se evaporó. El residuo se purificó mediante dos HPLC preparativas de fase inversa consecutivas usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:4 a 3:7 y luego acetonitrilo/agua 1:4 a 1:1 modificado con ácido fórmico al 0,1% para producir el compuesto del título (3,1 mg, 9%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,04 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,41 (s, 3H), 1,48-1,75 (m, 2H), 1,58 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,60 (d, J = 7,1 H, 3H), 1,80-1,99 (m, 3H), 2,12-2,25 (m, 1H), 2,26-2,36 (m, 1H), 2,61-2,73 (m, 1H), 2,74-2,90 (m, 1H), 2,96-3,11 (m, 1H), 3,52 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 11,2, 2,3 Hz, 1H), 3,80 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,24-4,42 (m, 1H), 4,81 -4,94 (m, 1H), 5,10 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,94 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 8,3, 1,6 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 568,2 [M+H], Tr = 1,94 min.

REFERENCIA EJEMPLO 31, Compuesto 31.

[0337]

Compuesto 31a: Éster metílico de ácido (S)-3-metil-2-[2,2,2-trifluoro-etilidenamino]-butírico

[0338]

[0339] Una solución de hidrocloruro de éster metílico del ácido (S)-2-amino-3-metil-butírico (6,72 g, 40 mmol) en agua (50 mL) se repartió entre una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y diclorometano. La capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se evaporó para proporcionar éster metílico del ácido (S)-2-amino-3-metil-butírico (40 mmol). Una solución de éster metílico del ácido (S)-2-amino-3-metil-butírico (40 mmol), 2,2,2-trifluoro-1-metoxi-etanol (5,2 g, 3,8 ml, 40 mmol) y se calentó ácido 4-toluenosulfónico hidratado (100 mg) en tolueno (125 mL) a reflujo usando un aparato Dean-Stark durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se evaporó el disolvente. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 10:1 a 5:1 para proporcionar el compuesto del título (4,79 g, 56%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCI³) 50,94 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 2,32-2,44 (m, 1H), 3,73-3,77 (m, 4H), 7,67 (q, J = 3,3 Hz, 1H).

Compuesto 31b: Éster metílico del ácido (S)-2-((S)-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico

[0340]

[0341] Una solución de 31a (4,2 g, 20 mmol) y bromuro de 3,3-dimetilalilo (2,98 g, 2,3 ml, 20 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadieron gránulos de zinc (2,6 g, 40 mmol) y clorotrimetilsilano (10 gotas) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos y luego se calentó a reflujo durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió una solución saturada de cloruro de amonio y la mezcla se extrajo con éter dietílico. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 50:1 a 40:1 para proporcionar el compuesto del título (1,41 g, 25%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,16 (s, 6H), 1,52-1,55 (m, 1H), 1,81-1,92 (m, 1H), 2,76-2,85 (m, 1H), 3,20 (dd, J = 9,8, 7,1 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 5,09 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,90 (dd, J = 17,4, 10,8 Hz, 1H). CLEM (m/z) 282,1 [M+H], Tr = 3,51 min.

Compuesto 31c: Ácido (S)-2-((S)-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico

[0342]

[0343] Una solución de 31b (1,12 g, 4,0 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (504 mg, 12,0 mmol) en agua (8 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 h y luego a temperatura ambiente durante 1 h. Se añadió metanol (5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 22 h. Se añadió más hidróxido de litio monohidrato (336 mg, 8,0 mmol) en agua (2 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. El disolvente orgánico se evaporó y la solución se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico 2 M y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título (770 mg, 72%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,20 (s, 6H), 1,95-2,04 (m, 1H), 2,87 (q, J = 7,8 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 5,90 (dd, J = 17,2, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 268,2 [M+H], Tr = 2,88 min.

Compuesto 31d: Ácido (S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino}-3-metil-butírico

[0345] Una solución de 31c (267 mg, 1,0 mmol) y 25d (294 mg, 1,0 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agito a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadieron acetato de paladio(II) (45 mg, 0,2 mmol), tri(o-tolil)fosfina (61 mg, 0,2 mmol) seguido de W,A/-diciclohexilmetilamina (390 mg, 0,43 ml, 2,0 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 120°C en un reactor de microondas durante 30 minutos. El disolvente se evaporó y el residuo se repartió entre acetato de etilo y ácido clorhídrico 1 M. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para proporcionar el producto crudo (640 mg, 1,0 mmol) como un sólido ceroso amarillo que se usó en el siguiente paso sin purificación adicional. CLEM (m/z) 481,1 [M+H], Tr = 3,26 min.

Compuesto 31e: Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolina-7-il]-2,2-dimetil-1 -trifluorometil- but-3-enilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0346]

[0347] Una solución de 1d (433 mg, 1,0 mmol) en diclorometano (30 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (444 mg, 0,35 ml, 2,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 45 minutos. Se añadió W,W-diisopropiletilamina (516 mg, 0,7 ml, 4,0 mmol), el disolvente se evaporó y el residuo se secó proporcionando ester 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazina-3-carboxílico crudo (1,0 mmol), que se utilizó en el siguiente paso. Una mezcla de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazina-3-carboxílico crudo (1,0 mmol), W,W-diisopropiletilamina (516 mg, 0,7 ml, 4,0 mmol) y 31d crudo (1,0 mmol) en acetonitrilo (30 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (530 mg, 1,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se evaporó y el residuo se disolvió en acetato de etilo y la solución se lavó con ácido clorhídrico 1 M frío, agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 3:1 a 0:1 para proporcionar el compuesto del título (292 mg, 37% en 2 pasos) como una espuma blanca. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,95 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,30 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,38 (s, 6H), 1,62-1,68 (m, 3H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,90-1,96 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,18-2,21 (m, 1H), 2,84-3,23 (m, 3H), 3,68-3,72 (m, 1H), 3,79 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,37-4,42 (m, 1H), 4,72 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,96 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 5,31 -5,40 (m, 1H), 6,06 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,59 (ABq, A5^ab = 0.07, J^ab = 16,2 Hz, 2H), 7,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 8,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 794,2/796,2 [M+H], Tr = 3,48 min.

Compuesto 31.

[0348]

[0349] Una solución de 31e (200 mg, 0,25 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (53 mg, 1,25 mmol) en agua (2 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 5 h. Se añadió ácido clorhídrico 1 M (1,25 ml, 1,25 mmol) y se evaporó el disolvente. El residuo se co-evaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1, 3 x) y el residuo se trituró con éter dietílico (2 x) y el sólido resultante se secó para producir ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-hidroxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-1-trifluorometilo-but-3-enilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,25 mmol) como un sólido blanco que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 622,3 [M+H], Tr = 1,97 min. Una suspensión de ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1 -hidroxi-etilo)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-1 -trifluorometil-but-3-enilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo (0,25 mmol) en tetrahidrofurano (250 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadieron W,W-diisopropiletilamina (161 mg, 0,22 ml, 1,25 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (20 mg) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 5 minutos. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (133 mg, 0,35 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego a temperatura ambiente durante 3 h. Se añadió más hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (95 mg, 0,25 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se evaporó el disolvente y se suspendió el residuo en acetato de etilo. Se añadió ácido clorhídrico 1 M frío y la capa orgánica se separó, se lavó con agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 4:1 a 2:1 para proporcionar el compuesto del título (50 mg, 33% en 2 pasos) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,74 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,29 (s, 3H), 1,35 (s, 3H), 1,55-1,70 (m, 3H), 1,71 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,72 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,87-1,97 (m, 2H), 2,66-2,74 (m, 1H), 2,90 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 3,13 (q, J = 7,8 Hz, 1H), 3,70-3,79 (m, 1H), 4,28-4,37 (m, 2H), 5,84 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,91 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,33 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 8,3, 1,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,20-8,23 (m, 2 H). CLEM (m/z) 604,3 [M+H], Tr = 3,25 min.

REFERENCIA EJEMPLO 32, Compuesto 32.

[0350]

Compuesto 32a: Éster metílico de ácido (R)-3-metil-2-[2,2,2-trifluoro-etilidenamino]-butírico

[0351]

[0352] El Compuesto 32a se preparó de la misma manera que el Compuesto 31 a usando hidrocloruro de éster metílico del ácido (R)-2-amino-3-metil-butírico en lugar de hidrocloruro del éster metílico del ácido (S)-2-amino-3-met¡l-butírico con un rendimiento del 64%. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,94 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 2,32-2,44 (m, 1H), 3,73-3,77 (m, 4H), 7,67 (q, J = 3,3 Hz, 1H).

Compuesto 32b: Éster metílico de ácido (R)-2-((R)-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico

[0353]

[0354] Se preparó el Compuesto 32b de la misma manera que el Compuesto 31 b usando 32a en lugar de 31 a con un rendimiento del 30%. 1H RMN (300 MHz, CDCls) 50,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,16 (s, 6H), 1,52­ 1,55 (m, 1H), 1,81-1,92 (m, 1H), 2,76-2,85 (m, 1H), 3,20 (dd, J = 9,8, 7,1 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 5,09 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,90 (dd, J = 17,4, 10,8 Hz, 1H). CLEM (m/z) 282,1 [M+H], Tr = 3,51 min.

Compuesto 32c: Ácido (S)-2-((R)-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico

[0355]

[0356] Una solución de 32b (1,30 g, 4,6 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió ferc-butóxido de potasio (1,55 g, 13,8 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C y se calentó a temperatura ambiente durante la noche. Se evaporaron los volátiles, se añadió ácido clorhídrico 2 M y se extrajo la mezcla con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir una mezcla que contenía éster ferc-butílico de ácido (R)-2-((R)-2,2-dimetil-1-trifluorometilbut-3-enilamino)-3-metil-butírico, éster ferc-butílico del ácido (S)-2-((R)-2,2-dimetil-1 -trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico y ácido (R)-2-((R)-2,2-dimetil-1 -trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico y ácido (S)-2-((R)-2,2-dimetil-1-trifluorometilo-but-3-enilamino)-3-metil-butírico (4,6 mmol) que se usó crudo en el siguiente paso. Una solución de la mezcla de éster ferc-butílico del ácido (R)-2-((R)-2,2-dimetil-1- trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico, éster ferc-butílico del ácido (S)-2-((R)-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico, ácido (R)-2-((R)-2,2-dimetilo-1 -trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metil-butírico y ácido (S)-2- ((R)-2,2-dimetil-1 -trifluorometil-but-3-enilamino)-3-metilo-butírico (4,6 mmol) en diclorometano (10 mL) se agitó a 5°C bajo nitrógeno. Se añadió ácido trifluoroacético (5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. Se añadió más ácido trifluoroacético (5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. El disolvente se evaporó y el residuo se co-evaporó con tolueno (3 x). El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. Los orgánicos se filtraron a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 10:1 a 5:1 para proporcionar ácido (R)-2-((R)-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3- enilamino)-3-metilbutírico (152 mg, 12%) como un aceite incoloro y el compuesto del título (321 mg, 26%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,99 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,23 (s, 6H), 2,09-2,19 (m, 1H), 2,85 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 3,27 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,91 (dd, J = 17,3, 10,8 Hz, 1H). CLEM (m/z) 268,1 [M+H], Tr = 2,95 min.

Compuesto 32d: Ácido (S)-2-{(E)-(R)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-1-trifluorometil-but-3-enilamino}-3-metil-butírico

[0357]

[0358] El Compuesto 32d se preparó de la misma manera que el Compuesto 31d utilizando 32c en lugar de 31c y crudo utilizado en el siguiente paso. CLEM (m/z) 481,1 [M+H], Tr = 3,15 min.

Compuesto 32e: Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(R)-4-[2-((R)-1-acetoxi-etil)-quinolina-7-il]-2,2-dimetil-1 -trifluorometil- but-3-enilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [0359]

[0360] El Compuesto 32e se preparó de la misma manera que el Compuesto 31e usando 32d en lugar de 32c con un rendimiento del 58%. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,90 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,92 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,31 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,38 (s, 6H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,69-1,79 (m, 3H), 1,89-2,02 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,18-2,21 (m, 1H), 2,83-3,12 (m, 3H), 3,66-3,73 (m, 1H), 3,83 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,42-4,48 (m, 1H), 4,72 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 5,27-5,34 (m, 1H), 6,06 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,56 (ABq, A5^ab = 0,13, J^ab = 16,3 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 794,2/796,1 [M+H], Tr = 3,65 min.

Compuesto 32.

[0361]

[0362] El Compuesto 32 se preparó de la misma manera que el Compuesto 31 usando 32e en lugar de 31e en 35% como un blanco sólido. 1H Rm N (300 MHz, CD³CN) 50,94 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,19 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,69 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,70-1,90 (m, 4H), 2,18-2,22 (m, 2H), 3,39-3,60 (m, 3H), 3,81-3,96 (m, 2H), 4,73-4,81 (m, 1H), 6.03-6,16 (m, 2H), 6,78 (ABq, A5^ab = 0,10, J^ab = 16,3 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,98-8,05 (ancho s, 1H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,34 (s, 1H). CLEM (m/z) 604,3 [M+H], Tr = 2,78 min.

REFERENCIA EJEMPLO 33. - Compuesto 33

[0363]

Compuesto 33a. Éster ferc-butílico de ácido (7-Bromo-quinolin-2-ilmetil)-metil-carbámico

[0364]

[0365] A una suspensión agitada de 7-bromo-quinolina-2-carbaldehido (236 mg, 1,00 mmol, preparado como en el EP 239746) en metanol (5 mL) se añadió metilamina en metanol (2 M, 2,5 ml, 5,00 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 20 h y luego se evaporó. El residuo se suspendió en metanol (5 mL) y se añadió en porciones borohidruro de sodio (57 mg, 1,50 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora y luego se repartió entre diclorometano y una solución saturada de cloruro de amonio. La capa orgánica se separó y se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio y los extractos acuosos se extrajeron con diclorometano y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se disolvió en diclorometano (8 mL) y a la solución agitada resultante se le añadió una solución de dicarbonato de di-ferc-butilo (327 mg, 1,50 mmol) en diclorometano (2 mL). Después de agitar durante 3 h, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio (2 x) y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos combinados se pasaron a través de una frita hidrófoba y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para proporcionar el compuesto del título (206 mg, 59%) como un aceite naranja y como una mezcla de rotámeros. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,42-1,61 (m, 9H), 2,92 (s, 1,5H), 3,00 (s, 1,5H), 4,71 (s, 1H), 4,75 (s, 1H), 7,34-7,46 (m, 1H), 7,64 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 8,26 (s, 1H). CLEM (m/z) 351,1,353,1 [m H], Tr = 3,13 min.

Compuesto 33b. Éster metílico del ácido (E)-4-12-[(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-metil]quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0366]

[0367] 33a (206 mg, 0,586 mmol), 22d (171 mg, 0,674 mmol), cloruro de bis[(diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina]paladio(II) (24 mg, 0,029 mmol) y fosfato de potasio tribásico (373 mg, 1,76 mmol) se suspendieron en ciclopentilmetiléter (2 mL) y agua (1 mL). La mezcla de reacción se agitó y se calentó a 80°C durante 2 h bajo nitrógeno. Se añadió más cloruro de bis[ (diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina]paladio(M) (12 mg, 0,015 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 90°C durante 90 minutos. Se dejó enfriar la reacción y se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (2 x). Las capas acuosas se extrajeron con acetato de etilo y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 7:3 para proporcionar el título del Compuesto (178 mg, 76%) como una goma de color amarillo y como una mezcla de rotámeros. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,43-1,57 (m, 15H), 2,91 (s, 1,5H), 2,99 (s, 1,5H), 3,74 (s, 3H), 4,71 (s, ¹ H), 4,74 (s, 1H), 6,64 (ap s, 2H), 7,27-7,39 (m, 1H), 7,63 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 8,10 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 399,1 [M+H], Tr = 3,02 min.

Compuesto 33c. Éster metílico del ácido (E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-metil-amino)-metil]quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0368]

[0369] 33b (134 mg, 0,336 mmol) se suspendió en hidrógeno cloruro en 1,4-dioxano (4 M, 3,4 ml, 13,6 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2,5 h y luego se evaporó. Al residuo se le añadió una solución de 29a (106 mg, 0,353 mmol) en W,W-dimetilformamida (7 mL) seguido de W,W-diisopropiletilamina (87 mg, 117 ml, 0,672 mmol), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (63 mg, 0,470 mmol) e hidrocloruro de N-(3dimetilaminopropil)-W'-etilcarbodiimida (90 mg, 0,470 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó sucesivamente con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua, solución saturada de cloruro de amonio, agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/metanol 1:0 a 19:1 para producir el compuesto del título (128 mg, 65%) como una goma incolora. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,80-1,06 (m, 6H), 1,21­ 1,38 (m, 3H), 1,47 (s, 6H), 1,52-2,18 (m, 5H), 2,63-2,78 (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,88-3,97 (m, 2H), 4.08­ 4,26 (m, 2H), 4,41 -4,61 (m, 1H), 4,75-4,99 (m, 2H), 5,20-5,40 (m, 1H), 6,63 (ap d, J = 2,0 Hz, 2H), 7,22-7,34 (m, 1H), 7,59-7,69 (m, 1H), 7,72-7,78 (m, 1H), 7,90-7,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,08-8,20 (m, 1H). CLEM (m/z) 582,3 [M+H], Tr = 2,35 min.

Compuesto 33.

[0370]

[0371] Una mezcla agitada de 33c (64 mg, 0,110 mmol) y 1 M NaOH (0,88 ml, 0,88 mmol) en 1,4-dioxano (5,5 mL) se calentó a reflujo durante 2,5 horas y después se deja enfriar. La mezcla de reacción se neutralizó a pH 7 con ácido clorhídrico 2 M y se evaporó. El residuo se destiló azeotrópicamente con ferc-butanol/acetonitrilo/tolueno y luego acetonitrilo/tolueno para dar el ácido crudo.

[0372] A una suspensión agitada de ácido 2-metil-6-nitrobenzoico (189 mg, 0,550 mmol), 4-(dimetilamino)piridina (101 mg, 0,825 mmol) y 4Á tamices moleculares en polvo (~2 g) en 1,2-dicloroetano (37 mL) bajo nitrógeno a 50°C se añadió a una solución del ácido crudo en N,N-dimetilformamida (5 mL) durante 3 horas mediante una bomba de jeringa. El matraz que contenía el ácido original se lavó con más N,N-dimetilformamida (1 mL) y esta se añadió a la mezcla de reacción durante 10 minutos. La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 2,5 horas más y luego se dejó enfriar. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se lavó sucesivamente con una solución saturada de cloruro de amonio enfriada con hielo, una solución de bicarbonato de sodio saturada enfriada con hielo y salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:4 a 7:3 para producir el compuesto del título (3,9 mg, 6,5%) en forma de un sólido blanco. CLEM (m/z) 550,3 [M+H], Tr = 2,35 min.

EJEMPLOS DE REFERENCIA 34 y 35. Los compuestos 34 y 35.

[0373]

Compuesto 34a. Éster 2,2,2-tricloro-etílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-(2-metil-but-3-eniloxi)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazina-3-carboxílico

[0374]

[0375] El Compuesto 34a se preparó de la misma manera que el Compuesto 27e usando ácido (S)-3-metil-2-(2-metilbut-3-eniloxi)-butírico en lugar de 27d con un rendimiento del 72% y aislado como una mezcla 1:1 de diastereosiómeros. CLEM (m/z) 502,1/504,1 [M+H], Tr = 3,32 min.

Compuesto 34b. Éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-2-metil-4-{2-[(R)-1-(2(R))-metilpropano-2-sulfinilamino)-etil]-quinolin-7-il}-but-3-eniloxi)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [0376]

[0377] Una solución de 34a (642,0 mg, 1,282 mmol), 18c (455,4 mg, 1,282 mmol), N,N-diciclohexilmetilamina (0,83 ml, 3,846 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) se calentó a 100°C durante 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, los volátiles se eliminaron a vacío y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 0:1 para proporcionar el título de Compuesto (500,1 mg, 50%) como una goma naranja y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 774,3/776,2 [M+H], Tr = 3,31 min.

Compuesto 34c. Éster metílico del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-2-metil-4-{2-[(R)-1-((R)-2-metilpropano-2-sulfinilamino)-etil]-quinolin-7-il}-but-3-eniloxi)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0378]

[0379] Se trató una solución enfriada (0°C) de 34b (500,1 mg, 0,645 mmol) en tetrahidrofurano/agua (30 ml, 5:1) con hidróxido de litio monohidrato (100,4 mg, 2,393 mmol). Después de agitar a 0°C durante 45 minutos, la reacción se inactivó con una solución de cloruro de hidrógeno (2 M, 1,2 mL) y los volátiles se eliminaron al vacío. El tricloroetanol residual se separó azeotrópicamente con tolueno, tolueno/metanol (2 x), tolueno y luego se secó a alto vacío. El sólido blanco se trituró con éter dietílico (2 x) para proporcionar ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-2-metil-4-{2-[(R)-1 -((R)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)-etil]-quinolin-7-il}-but-3-eniloxi)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazina-3-carboxílico (CLEM (m/z) 644,4 [M+H], Tr = 2,44 min) que se utilizó sin purificación adicional. Una solución enfriada (0°C) de ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-2-metil-4-{2-[(R)-1 -((R)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)-etil]-quinolin-7-il}-but-3-eniloxi)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazina-3-carboxílico (0,645 mmol), N,N-diisopropiletilamina (0,56 ml, 3,225 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (7,9 mg, 0,064 mmol) en tetrahidrofurano seco (210 mL) se trató con hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (294,3 mg, 0,774 mmol). Se dejó que la reacción se calentara lentamente a temperatura ambiente. Después de 16 h, la reacción se inactivó con metanol anhidro (5 mL). Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de diclorometano/metanol 1:0 a 9:1 para producir el compuesto del título (482,0 mg) como una goma naranja. y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 658,3 [M+H], Tr = 2,68 min.

Compuesto 34d: Ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-2-metil-4-{2-[(R)-1-((R)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)-etil]-quinolin-7-il}-but-3-eniloxi)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0380]

[0381] Una solución de 34c crudo (480 mg, 0,73 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (92 mg, 2,2 mmol) en agua (3 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 h. Se añadió ácido clorhídrico 1 M (2,2 ml, 2,2 mmol) y se evaporaron los volátiles. El residuo se co-evaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1,3 x) y luego se trituró con éter dietílico (2 x) y se secó para producir el compuesto del título (0,73 mmol) como una goma de color amarillo pálido y como una goma de 1:1. mezcla de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 644,4 [M+H], Tr = 2,44 min.

Compuestos 34 y 35.

[0382]

[0383] Una solución de 34d crudo (500 mg, 0,5 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió una solución de cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (1 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Los volátiles se evaporaron y el residuo se co-evaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1,3 x) y luego se trituró con éter dietílico (2 x). El residuo se secó para producir clorhidrato del ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1 -amino-etil)-quinolin-7-il]-2-metil-but-3-eniloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como una goma de color amarillo oscuro (0,5 mmol) y como una 1:1 mezcla de diastereoisómeros que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 540,2 [M+H], Tr = 1,57 min. Una suspensión de clorhidrato de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-amino-etil)-quinolin-7-ilo]-2-metil-but-3-eniloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,5 mmol) en diclorometano (500 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadieron W,W-diisopropiletilamina (387 mg, 0,52 ml, 3,0 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (20 mg, 0,18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 5 minutos. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (380 mg, 1,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 2 h y luego a temperatura ambiente durante 72 h. Se evaporaron los volátiles. Se añadió acetato de etilo y la mezcla se lavó con ácido clorhídrico 1 M frío, agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:3 a acetato de etilo y después acetato de etilo a acetato de etilo/metanol 1:10. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con acetonitrilo (que contenía ácido fórmico al 0,1%)/agua (que contenía ácido fórmico al 0,1%) 35:65. Las fracciones que contenían los diastereoisómeros puros se combinaron y evaporaron. Los residuos se repartieron entre una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y acetato de etilo. Las capas orgánicas se separaron, se lavaron con agua y salmuera. Las soluciones orgánicas se filtraron a través de una frita hidrófoba y el filtrado se secó para producir dos diastereoisómeros.

[0384] El Compuesto 34 (que eluye primero) Diastereómero 1: (3 mg, 1%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,97 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,25 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,59 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,60­ 1,65 (m, 2H), 1,66 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,94-2,07 (m, 2H), 2,28-2,33 (m, 1H), 2,60 -2,76 (m, 2H), 3,49 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,55-3,71 (m, 2H), 3,92 (dd, J = 9,5, 4,4 Hz, 1H), 4,41-4,46 (m, 1H), 5,10 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,51 (dd, J = 16,1,5,8 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 522,2 [M+H], Tr = 2,41 min.

[0385] El Compuesto 35 (que eluye segundo) Diastereómero 2: (3 mg, 1%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,93 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,51- 1,55 (m, 1H), 1,59 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,68 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,69-1,73 (m, 1H), 1,94-1,99 (m, 2H), 2,29-2,34 (m, 1H), 2,65-2,75 (m, 2H), 3,38­ 3,43 (m, 2H), 3,57-3,62 (m, 1H), 3,96 (dd, J = 9,0, 3,2 Hz, 1H), 4,40-4,46 (m, 1H), 5,10 (q, J = 6,4 Hz, 1H), 5,84-5,89 (m, 1H), 6,38 (dd, J = 16,1, 6,3 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,05 (ancho s, 1H), 8,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 522,2 [M+H], Tr = 2,38 min.

REFERENCIA EJEMPLO 36. Compuesto 36.

[0386]

Compuesto 36a. Ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida

[0387]

[0388] Polvo de zinc (1,3 g, 20,3 mmol) se añadió a una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (400 mg, 0,92 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL). Esta suspensión se trató con una solución de acetato de amonio (1,1 g, 13,9 mmol) en agua (7 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 16 h, los residuos de zinc se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre acetato de etilo y una solución saturada de hidrogenosulfato de potasio, la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x), las capas orgánicas se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El ácido acético residual se separó azeotrópicamente con tolueno (3 x 10 mL) para dar ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carboxílico crudo (280 mg, 99%) la mitad del cual (140 mg, 0,46 mmol) se combinó con clorhidrato de (R)-1 -(7-bromo-quinolin-2-il)-etilamina (obtenido de ASIBA Pharmatech, Inc.), (194 mg, 0,60 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (0,400 ml, 2,3 mmol) en acetonitrilo anhidro (10 mL). A continuación, esta solución se trató con hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (227 mg, 0,60 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 3 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y posteriormente se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio y una solución de bicarbonato de sodio. Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Biotage de 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetona 1:0 a 1:1 para proporcionar el compuesto del título (136 mg, 55%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,83 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,38 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,60 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,65-1,75 (m, 3H), 1,87-1,96 (m, 1H), 2,02-2,12 (m, 2H), 2,87-3,00 (m, 1H), 3,55-3,62 (m, 1H), 3,81 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 4,24-4,34 (m, 1H), 5,18-5,28 (m, 1H), 5,31-5,40 (m, 1H), 7,57 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,7, 1,8 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 8,33 (d, J = 8,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 534,1, 536,1 [M+H], Tr = 2,27 min.

Compuesto 36b. Ácido (R)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoico

[0389]

[0390] El Compuesto 36b se preparó de la misma manera que el Compuesto 29d usando el compuesto (R)-4-isopropil-3-((R)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoil)-oxazolidin-2-ona (el enantiómero de 58a, preparado como se describe en Tet. Lett. 2000, 41 (33), 6429-6433) en lugar de 29c con un rendimiento del 99%. 1H r Mn (300 MHz, CDCh) 5 1,36 (s, 3H), 3,41 (s, 3H), 3,43 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,20 -5,30 (m, 2H), 6,00 (dd, J = 17,6, 10,7 Hz, 1H).

Compuesto 36.

[0391]

[0392] Una solución de 36a (123 mg, 0,23 mmol), 36b (40 mg, 0,27 mmol), acetato de paladio(II) (11 mg, 0,046 mmol), tris-(o-tolil)fosfina (21 mg, 0,068 mmol) en acetonitrilo anhidro (3 mL) se trató con trietilamina (81 ml, 0,57 mmol). Después de agitar a 100°C bajo irradiación de microondas durante 20 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre diclorometano y una solución saturada de hidrogenosulfato de potasio. Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 10 mL) para dar ácido (E)-(R)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-1-oxo-propil]-hexahidropiridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2-metoximetil-2-metilo-but-3-enoico crudo que se disolvió en W,W-dimetilformamida (5 mL) y se añadió mediante una bomba de jeringa durante 6 horas a una suspensión agitada de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (161 mg, 0,47 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (86 mg, 0,70 mmol) en 1,2- dicloroetano (35 mL) a 50°C bajo nitrógeno. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y posteriormente se lavó con una solución de ácido cítrico al 5% y una solución de bicarbonato de sodio. Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa para producir el compuesto del título (8 mg, 15%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,56 (s, 3H), 1,60 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,68 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,69-1,75 (m, 1H), 1,91 -1,99 (m, 1H), 2,10 a 2,30 (m, 2H), 3,36 (s, 2H), 3,41 (s, 3H), 3,49 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 3,58-3,68 (m, 1H), 3,80 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,38-4,48 (m, 1H), 5,03-5,13 (m, 1H), 5,19 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,74-5,85 (m, 1H), 6,41 (ABq, A5^{a b} = 0,34, J^{a b} = 16,4 Hz, 2H), 7,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 580,2 [m h ], Tr = 2,38 min.

REFERENCIA EJEMPLO 37. Compuesto 37.

[0393]

Compuesto 37a. (7-Bromo-quinolin-2-ilmetil)-(2,4-dimetoxi-bencil)-amina

[0394]

[0395] 7-Bromo-quinolin-2-carbaldehído (354 mg, 1,50 mmol, preparado como se describe en EP 239746) se disolvió en 1,2-dicloroetano (15 mL) y se añadió 2,4-dimetoxibencilamina (251 mg, 225 pL, 1,50 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5 minutos antes de que el triacetoxiborohidruro de sodio (477 mg, 2,25 mmol) se añadió. Después de 3,5 h de agitación, la mezcla de reacción se inactivó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y se añadió acetato de etilo. La capa orgánica se separó y se lavó con hidrogenocarbonato de sodio y las capas acuosas combinadas se extrajeron con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron para dar el compuesto del título crudo como una goma amarilla (571 mg) que se usó sin purificación adicional. CLEM (m/z) 387,0, 389,0 [M+H], Tr = 1,57 min.

Compuesto 37b. Éster ferc-butílico del ácido (7-bromo-quinolin-2-ilmetil)-carbámico

[0396]

[0397] Se disolvió 37a (290 mg, 0,75 mmol) en diclorometano (8 mL) y trietilsilano (1,6 mL) y ácido trifluoroacético (8 mL). La mezcla de reacción se calentó a reflujo y se agitó durante 20 h y luego se dejó enfriar. La mezcla se evaporó y se purificó mediante un cartucho SCX eluyendo con metanol y luego con amoniaco metanólico y la fracción básica se recogió y evaporó. El residuo se disolvió en diclorometano (8 mL) y se añadió dicarbonato de di-ferc-butilo (245 mg, 1,13 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 17 h. Se diluyó con diclorometano y se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio (2 x), la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano y los extractos orgánicos combinados se pasaron a través de una frita hidrófoba y se evaporaron. El residuo se purificó por sílice cromatografía en gel usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para proporcionar el compuesto del título (150 mg, 59%) como un sólido amarillo pálido. 1H RMN (300 MHz, CDCI³) 5 1,52 (s, 9H), 4,65 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 5,90 (brs, 1H), 7,39 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,63 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 2H), 7,72 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,28 (s, 1H). CLEM (m/z) 337,0, 339,0 [M+H], Tr = 2,79 min.

Compuesto 37c. Éster metílico de ácido (E)-4-[2-(ferc-butoxicarbonilamino-metil)quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0398]

[0399] 37b (296 mg, 0,878 mmol), 22d (256 mg, 1,01 mmol), cloruro de bis[ (diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina]paladio(II) (36 mg, 0,044 mmol) y fosfato tribásico de potasio (558 mg, 2,63 mmol) se suspendieron en ciclopentil metil éter (3 mL) y agua (1,5 mL). La mezcla de reacción se agitó y se calentó a 80°C durante 3 h bajo nitrógeno. La reacción se dejó enfriar y se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (2 x) y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 7:3 para proporcionar el compuesto del título (257 mg, 76%) como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCls) 5 1,49 (s, 6H), 1,52 (s, 9H), 3,75 (s, 3H), 4,63 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 5,96 (ancho s, 1H), 6,64 (s, 2H), 7,32 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 385,1 [M+H], Tr = 2,64 min.

Compuesto 37d. Éster metílico del ácido (E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-metil]quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0400]

[0401] 37C (128 mg, 0,333 mmol) se suspendió en cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (3,3 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 2,5 h y luego se evaporó. Al residuo se le añadió una solución de 29a (105 mg, 0,350 mmol) en N,N-dimetilformamida (7 mL) seguido de N,N-diisopropiletilamina (86 mg, 116 pL, 0,666 mmol). A la solución agitada se le añadió hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (63 mg, 0,466 mmol) y clorhidrato de N-(3dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (89 mg, 0,466 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó sucesivamente con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua, solución saturada de cloruro de amonio, agua y luego salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo/metanol 1:0 a 19:1 para producir el compuesto del título (95 mg, 50%) como un sólido blanquecino. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,84 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,42 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,48 (s, 6H), 1,65-1,76 (m, 2H), 1,88-1,98 (m, 1H), 2,06-2,14 (m, 1H), 2,19-2,29 (m, 1H), 2,73-2,83 (m, 1H), 3,45 -3,56 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,95 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 3,99 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,42-4,52 (m, 1H), 4,69-4,76 (m, 2H), 5,41 -5,51 (m, 1H), 6,61 -6,66 (m, 1H), 6,74 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,24-7,31 (m, 1H), 7,62-7,69 (m, 1H), 7,71-7,78 (m, 1H), 7,95-8,10 (m, 2H). CLEM (m/z) 568,3 [M+H], Tr = 2,10 min.

Compuesto 37e. Ácido (E)-4-{2-[({(S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-metil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0403] Una mezcla agitada de 37d (95 mg, 0,167 mmol) y NaOH (1 M, 1,34 ml, 1,34 mmol) en 1,4-dioxano (8 mL) se calentó a reflujo durante 70 minutos y luego se dejó enfriar. La mezcla de reacción se acidificó a pH 4 con ácido clorhídrico (2 M) y se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:19 a 7:3 para producir el compuesto del título (43 mg, 47%) como un sólido blanco.

1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,82 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,93-1,00 (m, 3H), 1,38 (d, J = 8,2 Hz, 3H), 1,49 (s, 6H), 1,58­ 1,76 (m, 2H), 1,81 -1,94 (m, 1H), 1,99-2,12 (m, 1H), 2,16-2,25 (m, 1H), 2,67-2,79 (m, 1H), 3,41 -3,51 (m, 1H), 3,92-4,00 (m, 1H), 4,01-4,08 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,40-4,54 (m, 1H), 4,74 (d, J = 4,5 Hz, 2H), 5,41 - 5,52 (m, 1H), 6,63-6,76 (m, 2H), 7,26-7,32 (m, 1H), 7,33-7,39 (m, 1H), 7,55-7,64 (m, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,04-8,14 (m, 2H). CLEM (m/z) 554,2 [M+H], Tr = 1,77 min.

Compuesto 37.

[0404]

[0405] A una suspensión agitadâ de ácido 2-metil-6-nitrobenzoico (134 mg, 0,388 mmol), 4-(dimetilamino)piridina (71 mg, 0,583 mmol) y polvo de 4 Á tamices moleculares (~ 1 g) en 1,2-dicloroetano (26 mL) bajo nitrógeno a 50°C se añadió una solución de 37e (43 mg, 0,078 mmol) en W,W-dimetilformamida (3 mL) durante 4 h mediante una bomba de jeringa. El matraz que contenía el ácido original se lavó con más W,W-dimetilformamida (1 mL) y esta se añadió a la mezcla de reacción durante 10 minutos. Una vez finalizada la adición, la mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 3 h y luego se dejó enfriar. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se lavó sucesivamente con una solución saturada de cloruro de amonio enfriada con hielo, una solución de bicarbonato de sodio saturada enfriada con hielo y salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:4 a 4:1 modificado con ácido fórmico al 0,1% y el producto se trituró con éter para producir el compuesto del título (6,4 mg, 15%) como un sólido de color blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,46 (s, 3H), 1,48 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,55-1,79 (m, 2H), 1,94-2,04 (m, 1H), 2,16-2,30 (m, 1H), 2,30-2,40 (m, 1H), 2,71 - 2,83 (m, 1H), 3,53-3,60 (m, 1H), 4,42-4,51 (m, 1H), 4,67, 4,75 (ABq, J^{a b} = 18,4 Hz, 2H), 5,20 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 5,89 (q, J = 7,2, 1H), 6,44 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 536,2 [M+H], Tr = 2,47 min.

REFERENCIA EJEMPLO 38. Compuesto 38.

[0406]

Compuesto 38a Ácido (R)-2-Metil-propano-2-sulfínico [1 -(7-bromo-quinolin-2-il)-et-(E)-ilideno]-amida

[0407]

[0408] A una solución de 18a (1,42 g, 5,68 mmol) en THF (28 mL) se añadió titanio (IV) etóxido (2,6 g, 2,35 ml, 11,4 mmol, grado tec.) seguido de (R)-(+)-2-metilpropanosulfinimida (825 mg, 6,82 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 60°C bajo nitrógeno durante ⁶ horas y se dejó enfriar. Se añadió salmuera seguida de acetato de etilo y la suspensión se filtró a través de celite y la almohadilla del filtro se lavó con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se separó, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de isohexano/acetato de etilo de 9:1 a 3:1 para dar el compuesto del título (448 mg, 22%) como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,38 (s, 9H), 2,99 (s, 3H), 7,71 (m, 2H), 8,16 (d, J = ^{8 , 6} Hz, 1H), 8,24 (d, J = ^{8 , 6} Hz, 1H), 8,37 (s, 1H). CLEM (m/z) 352,9/354,9 [M+H], Tr 3,14 minutos.

Compuesto 38b (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida del ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico.

[0409]

[^{0 4 1 0} ] Una mezcla de (1S,2R)-(-)-c/'s-1-amino-2-indanol (19 mg, 0,13 mmol), [Ru(p-cimen)Cl²]² (39 mg, 0,064 mmol) y 4 Á tamices moleculares en polvo (0,7 g) se suspendieron en 2-propanol anhidro (3 mL) y se agitaron bajo nitrógeno. La suspensión se calentó a 90°C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a 40°C y se añadió una solución 38a (448 mg, 1,27 mmol) en 2-propanol (9 mL) seguido de una solución de ferc-butóxido de potasio (36 mg, 0,32 mmol) en 2-propanol (3 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 40°C y luego se dejó enfriar. La mezcla se vertió directamente sobre un cartucho de gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo. Después de la concentración el residuo se purificó adicionalmente por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexano/acetato de etilo 1:1 a 0:1 para dar el compuesto del título (287 mg, 64%) como una goma marrón. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,33 (s, 9H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 4,80 (m, 1H), 5,42 (br d, J = 4,2 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,2 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H). CLEM (m/z) 354,9/356,8 [M+H], Tr 2,49 min

Compuesto 38c. Ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (R)-[(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-metil-amida

[0411]

[0412] Una solución enfriada (-202C) de 38b (100 mg, 0,28 mmol, igual que 18c) en W,W-dimetilformamida (5 mL) se trató con bis(trimetilsilil)amida de litio (0,28 ml, 0,28 mmol, 1 M en hexano). Después de agitar a esta temperatura durante 1 h, se añadió yodometano (0,035 ml, 0,56 mmol) y la temperatura se elevó a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 h, la reacción se detuvo mediante la adición de agua (10 mL). La mezcla se extrajo con éter dietílico (3 x 20 mL). Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage de 10 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 1:1 para producir el compuesto del título (149 mg, 62%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCta) 5 1,25 (s, 9H), 1,74 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 2,53 (s, 3H), 4,81 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 7,55 -7,70 (m, 3H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H). CLEM (m/z) 369,0, 371,0 [M+H], Tr = 2,91 min.

Compuesto 38d. Ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-metil-amida

[0413]

[0414] Una solución de 38c (450 mg, 1,22 mmol) en metanol (10 mL) se trató con ácido clorhídrico en 1,4-dioxano (4 M, 5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El disolvente residual se separó azeotrópicamente con tolueno (3 x 10 mL) para dar clorhidrato de [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-metil-amina cruda.

[0415] Polvo de zinc (1,30 g, 20,32 mmol) se añadió a una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (400 mg, 0,92 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL). Esta suspensión se trató con una solución de acetato de amonio (1,10 g, 13,9 mmol) en agua (7 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 16 h, se filtraron los residuos de zinc y se eliminaron los volátiles al vacío. El residuo se repartió entre acetato de etilo y una solución saturada de hidrogenosulfato de potasio, la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x), las capas orgánicas se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El ácido acético residual se separó azeotrópicamente con tolueno (3 x 10 mL) para dar ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico crudo que se combinó con clorhidrato de [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-metil-amina en acetonitrilo anhidro (15 mL) y W,W-diisopropiletilamina (0,801 ml, 4,60 mmol). A continuación, esta solución se trató con hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (464 mg, 1,22 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y posteriormente se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio y una solución de bicarbonato de sodio. Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Biotage de 25 g se eluyó con un gradiente continuo de /so-hexanos/acetona 1:0 a 0:1 para proporcionar el compuesto del título (318 mg, 58%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDaOD) 50,85 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,33 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,69 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,72-2,15 (m, 6H), 2,98 (s, 3H), 2,85-2,95 (m, 1H), 3,80-3,90 (m, 1H), 4,30-4,40 (m, 1H), 5,25-5,35 (m, 1H), 5,95-6,10 (m, 1H), 7,45-7,78 (m, 1H), 7,65-7,72 (m, 1H), 7,80-7,90 (m, 1H), 8,18­ 8-38 (m, 2H). CLEM (m/z) 548,1,550,1 [M+H], Tr = 2,60 min.

Compuesto 38.

[0416]

[0417] El Compuesto 38 se preparó de la misma manera que el Compuesto 36 usando 38d en lugar de (36a (123 mg, 0,23 mmol) en 4% de rendimiento. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,52-1,59 (m, 6H), 1,73 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,76-1,88 (m, 2H), 1,89-1,99 (m, 2H), 2,09-2,21 (m, 1H), 2,71 -2,84 (m, 1H), 3,29 (s, 3H), 3,40 (s, 3H), 3,44 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,13-4,22 (m, 1H), 4,39-4,47 (m, 1H), 5,05 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,83 -5,97 (m, 2H), 6,38 (ABq, A5^{a b} = 0,24, J^{a b} = 16,5 Hz, 2H), 7,45 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,64-7,73 (m, 2H), 7,79 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 594,2 [M+H], Tr = 2,48 min.

EJEMPLOS DE REFERENCIA 39 y 40, Compuestos 39 y 40

[0418]

Compuesto 39a. Éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-Bromo-quinolin-2-il)-etil]-carbámico

[0419]

[0420] A una solución de clorhidrato de (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilamina (obtenido de ASIBA Pharmatech Inc.), (3,5 g, 12,2 mmol) en dicloro anhidro metano a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno se añadió trietilamina (5,1 ml, 36,5 mmol), 4-dimetilaminopiridina (297 mg, 2,4 mmol) y dicarbonato de di-ferc-butilo (4,0 g, 18,3 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 h. La reacción se enfrió a 0°C y se inactivó con ácido clorhídrico (1 M). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El producto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /'so-hexanos/acetato de etilo 6:1 para proporcionar el compuesto del título (3 g, 70%) como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 1,49 (s, 9H), 1,55 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 4,93-5,10 (m, 1H), 6,01 -6,20 (m, 1H), 7,38 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,7, 1,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,29 (s, 1H). CLEM (m/z) 353,0 [m H], Tr = 3,02 min.

Compuesto 39b. Éster metílico del ácido (E)-4-[2-((R)-1-terc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0421]

[0422] A una solución 39a (1 g, 2,86 mmol) en ciclopentilmetil éter (14 mL) y agua (7 mL), a temperatura ambiente, se añadió 22d (840 mg, 3,43 mmol), fosfato de potasio tribásico (1,8 g, 8,57 mmol) y cloruro de bis[ (diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina]paladio(lI) (116 mg, 0,14 mmol). La reacción se calentó a 80°C durante 2 h. La reacción se enfrió, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con salmuera (2 x). La capa orgánica se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El producto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 2:1 para proporcionar el compuesto del título (1,1 g, 96%) como un aceite viscoso. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 1,43-1,52 (m, 15H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 3,75 (s, 3H), 4,92-5,09 (m, 1H), 6,16- 6,32 (m, 1H), 6,64 (s, 2H), 7,30 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 399,3 [M+H], Tr = 2,75 min.

Compuesto 39c. Ácido (E)-4-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0423]

[0424]

A una solución de 39b (1,1 g, 2,76 mmol) en tetrahidrofurano (24 mL) y agua (5 mL) se añadió hidróxido de litio monohidrato (580 mg, 13,8 mmol). La reacción se calentó a 40°C durante 20 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se acidificó a pH 5 con ácido clorhídrico acuoso (2 M). La mezcla se evaporó a sequedad y se añadieron diclorometano y acetonitrilo. Esta suspensión se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se concentró al vacío para producir el compuesto del título (800 mg, 76%) en forma de un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,46 (s, 9H), 1,51 (s, 6H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 4,91-5,14 (m, 1H), 6,35-6,52 (m, 1H), 6,66, 6,72 (ABq, J = 16,2 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,99-8,17 (m, 2H). CLEM (m/z) 385,3 [M+H], Tr = 2,21 min.

Compuesto 39d: Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-(2-terc-butoxicarbonilamino-3-metoxi-propionil)-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0425]

[0426] Se preparó el Compuesto 39d (partiendo del éster bis-W-Boc TCE preparado como se describe en Angew. Chem. Intl. Ed. English, 1999, 38, 2443.) de la misma manera que el intermedio 1d usando W-a-Boc-O-metilserina (1 g, 4,56 mmol) en lugar de L-W-Boc-alanina para producir el compuesto del título como un aceite viscoso transparente (1,5 g, 71%) y como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. CLEM (m/z) 462,7 [M+H], Tr = 2,71 min.

Compuesto 39e. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[2-((S)-2-Hidroxi-3-metil-butirilamino)-3-metoxi-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0427]

[0428] A una solución de 39d (1,0 g, 2,16 mmol) en diclorometano anhidro (7 mL) a temperatura ambiente y bajo una atmósfera de nitrógeno se le añadió ácido trifluoroacético (1,7 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas y se concentró al vacío. El residuo resultante se co-evaporó en tolueno (3 x) para producir un aceite viscoso de color pardo claro. Este se disolvió en acetonitrilo anhidro (22 mL) y se enfrió a 0°C antes de agregar ácido (S)-2-hidroxi-3-metil-butírico (255 mg, 2,2 mmol), hidroxibenzotriazol monohidrato (497 mg, 3,3 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (623 mg, 3,3 mmol) y W,W-diisopropiletilamina (1,9 ml, 10,8 mmol). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 72 h. La reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con ácido clorhídrico (1 M), bicarbonato de sodio saturado y salmuera. La capa orgánica se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /so-hexanos/acetona 3:2 para dar el compuesto del título (750 mg, 75% en 2 pasos) como un aceite viscoso transparente y como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. CLEM (m/z) 462,0 [M+H], Tr = 2,24 min.

Compuesto 39f. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[2-((S)-2-((E)-4-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoiloxi}-3-metil-butirilamino)-3-metoxi-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0429]

[0430] A una solución de 39b (300 mg, 0,78 mmol) en diclorometano anhidro (5 mL) a temperatura ambiente y bajo una atmósfera de nitrógeno se añadió W,W-diisopropiletilamina (0,28 ml, 1,56 mmol), 4-dimetilaminopiridina (200 mg, 1,64 mmol) y anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (323 mg, 0,94 mmol) seguido de una solución de 39e (433 mg, 0,94 mmol) en diclorometano anhidro (2,5 mL). La reacción se agitó durante 2 h, después de lo cual se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando /so-hexanos/acetato de etilo 1:2 para dar el compuesto del título (211 mg, 33%) como un aceite viscoso transparente y como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. Cl Em (m/z) 828,3 [m H], Tr = 3,48 min.

Los compuestos 39 y 40.

[0431]

[0432] A una solución de 39f (200 mg, 0,24 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (3 mL) a 0°C se añadió una solución acuosa 0,4 M de hidróxido de sodio (0,7 ml, 0,29 mmol). La reacción se agitó a 0°C durante 1 h antes de acidificarse a pH 5 con ácido clorhídrico (2 M) y se concentró al vacío. El residuo resultante se repartió entre diclorometano y agua y la capa orgánica se separó, se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano anhidro (1 mL) y se añadió a temperatura ambiente una solución 4 M de ácido clorhídrico en dioxano (0,3 ml, 1,2 mmol). La reacción se agitó durante 1,5 h, se concentró al vacío y el sólido resultante se trituró con éter dietílico para producir un sólido de color amarillo claro. El sólido se disolvió en N,N-dimetilformamida anhidra (3 mL) y N,N-diisopropiletilamina (0,21 ml, 1,2 mmol) y esta solución se añadió a una solución previamente agitada de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (137 mg, 0,4 mmol) en diclorometano anhidro (80 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno. Después de la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h antes de concentrarse al vacío. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo y se lavó con ácido clorhídrico (0,5 M), bicarbonato de sodio saturado y salmuera. La capa orgánica se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparatoria de fase inversa para producir dos diastereoisómeros como sólidos blancos.

[0433] Compuesto 39. (Eluye segundo) Diastereoisómero 1 (7 mg, 5%). 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,59 (s, 3H), 1,51-1,65 (m, 1H), 1,69-2,11 (m, 4H), 2,19-2,37 (m, 1H), 2,72-2,86 (m, 1H), 2,91 (s, 3H), 3,40-3,58 (m, 3H), 3,80-3,90 (m, 1H), 4,33-4,45 (m, 1H), 5,11 -5,22 (m, 3H), 5,57-5,63 (m, 1H), 6,54, 6,71 (ABq, J = 15,9 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 580,2 [M+H], Tr = 2,58 min.

[0434] Compuesto 40 (Eluye primero) Diastereómero 2. (3 mg, 2%); 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,05 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,53-1,75 (m, 1H), 1,91 -2,02 (m, 1H), 2,12-2,24 (m, 1H), 2,25-2,36 (m, 1H), 2,64- 2,76 (m, 1H), 3,46 (s, 3H), 3,59-3,70 (m, 1H), 3,87 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 4,41 -4,50 (m, 1H), 5,12 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,18 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,09 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 6,41, 6,61 (ABq, J = 16,3 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 580,2 [M+H], Tr = 2,62 min.

REFERENCIA Ejemplo 41: Compuesto 41

[0435]

Compuesto 41a. Éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-metil-carbámico

[0437] A una solución 39a (500 mg, 1,4 mmmol) en W,W-dimetilformamida anhidra se añadió gota a gota bis(trimetilsilil)amida de litio (1,0 M en THF, 1,7 ml, 1,71 mmol) a -20°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, (5 mL) durante 10 minutos. Después de la adición, la reacción se agitó a -20°C durante 45 minutos y luego se añadió yodometano (0,18 ml, 2,85 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 h antes de inactivar con cloruro de amonio acuoso saturado y se extrajo con éter dietílico (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución acuosa de cloruro de litio al 5%, se secaron a través de una frita hidrófoba y se concentraron al vacío. El producto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /'so-hexanos/acetato de etilo 6:1 para proporcionar el compuesto del título (500 mg, 96%) como un aceite viscoso. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 1,50 (s, 9H), 1,68 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 2,72 (br s, 3H), 5,34-5,92 (m, 1H), 7,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,29 (d, J = 1,6 Hz, 1H). CLEM (m/z) 367,0 [M+H], Tr = 3,61 min.

Compuesto 41b. Éster metílico del ácido (E)-4-(2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0438]

[0439] El Compuesto 41b se preparó de la misma manera que el Compuesto 39b usando 41 a en lugar de 39a con un rendimiento del 80%. 1H RMN (300 MHz, CDCls) 5 1,50 (s, 9H), 1,56 (s, 6H), 1,69 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 2,72 (br s, 3H), 3,74 (s, 3H), 5,28-6,01 (m, 1H), 6,64 (s, 2H), 7,33 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,7, 1,6 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,01 -8,08 (m, 2H). CLEM (m/z) 413,2 [M+H], Tr = 3,42 min.

Compuesto 41c. Ácido (E)-4-{2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)etil]quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0440]

[0441] El Compuesto 41c se preparó de la misma manera que el Compuesto 39c usando 41b en vez de éster metílico del ácido (E)-4-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico con un rendimiento del 99%. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,49 (s, 9H), 1,52 (s, 6H), 1,69 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 2,73 (brs, 3H), 5,29-5,84 (m, 1H), 6,66, 6,70 (ABq, J = 16,3 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,59-7,66 (m, 1H), 7,74 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,00-8,09 (m, 2H). CLEM (m/z) 399,1 [M+H], Tr = 2,75 min.

Compuesto 41d. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-ferc-butoxicarbonilamino-3-(ferc-butil-difenilsilaniloxi)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0442]

[0443] A éster 1,2-di-ferc-butílico de ácido (S)-tetrahidro-piridazina-1,2,3-tricarboxílico éster 3-(2,2,2-tricloro-etil) (preparado de acuerdo al procedimiento descrito en Angew. Chem. Int. Ed. English 1999, 38, 2443.), (5,0 g, 10,8 mmol) en diclorometano anhidro (33 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno se añadió ácido trifluoroacético (33 ml, 432 mmol). La solución se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La reacción se concentró al vacío y el residuo se co-evaporó en tolueno (3 x). El aceite viscoso marrón resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (5 mL) y se añadió a una solución de ácido (S)-2-ferc-butoxicarbonilamino-3-(ferc-butil-difenilsilaniloxi)-propiónico (2,39 g, 5,4 mmol, preparado como en la Solicitud Internacional PCT 2006, WO 2006004880 A2), W,W-diisopropiletilamina (3,76 mL, 21,6 mmol) y 0-(benzotriazol-1-il)-W,A/,A/',A/'-hexafluorofosfato de tetrametiluronio (2,05 g, 5,4 mmol) en acetonitrilo anhidro (25 mL) que se había agitado previamente a 0°C durante 20 minutos. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 16 h antes de concentrarse al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando /so-hexanos/acetato de etilo 4:1 para dar el compuesto del título (1,8 g, 49%) como un aceite viscoso transparente. 1H RMN (300 MHz, CDCta) 5 1,08 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,53-1,67 (m, 1H), 1,80-2,01 (m, 2H), 2,82-2,96 (m, 1H), 3,19-3,32 (m, 1H), 3,62 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,80­ 3,97 (m, 3H), 4,23-4,34 (m, 1H), 4,61 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,90 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,18-5,27 (m, 1H), 5,51-5,63 (m, 1H), 7,35-7,49 (m, 6H), 7,58-7,70 (m, 4H). CLEM (m/z) 686,2 [M+H], Tr = 4,32 min.

Compuesto 41e. Éster 2,2,2-tricloro-etílico del ácido (S)-1-[(S)-3-(ferc-butil-difenil-silaniloxi)-2-((S)-2-hidroxi-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carboxílico

[0444]

[0445] El Compuesto 41e se preparó de la misma manera que el Compuesto 39e usando éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-ferc-butoxicarbonilamino-3-(ferc-butil-difenil-silaniloxi)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en lugar de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-ferc-butoxicarbonilamino-3-metoxi-propionil)-hexahidropiridazin-3-carboxílico con un rendimiento del 50%. 1H RMN (300 MHz, CDCI³) 50,90 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,07-1,09 (m, 12H), 1,42-1,71 (m, 2H), 1,80-1,91 (m, 1H), 1,93-2,02 (m, 1H), 2,07-2,15 (m, 1H), 2,72 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 2,86­ 3,02 (m, 1H), 3,17-3,28 (m, 1H), 3,60 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 3,90-3,99 (m, 3H), 4,18-4,29 (m, 1H), 4,62, 4,91 (ABq, J = 11,9 Hz, 2H), 5,42-5,50 (m, 1H), 7,35-7,51 (m, 7H) 7,58-7,71 (m, 4H). CLEM (m/z) 686,2 [M+H], Tr = 3,93 min.

Compuesto 41f.

[0446]

[0447] El Compuesto 41f se preparó de la misma manera que el Compuesto 39f, usando ácido (E)-4-{2-[(R)-1-(fercbutoxicarbonilmetil-amino)etil]quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico y éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-3-(ferc-butil-difenil-silaniloxi)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en lugar de ácido (E)-4-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico y éster 2,2,2-tricloroetil de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-3-metoxi-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico con 32% de rendimiento. 1H RMN (300 MHz, CDCls) 50,98-1,05 (m, 6H), 1,07 (s, 9H), 1,50 (s, 9H), 1,52-1,60 (m, 2H), I , 57 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,68 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,72-1,93 (m, 2H), 2,31 -2,46 (m, 1H), 2,63-3,01 (m, 5H), 3,47 (d, J = I I , 2 Hz, 1H), 3,87 (dd, J = 10,3, 2,7 Hz, 1H), 4,04 (dd, J = 10,3, 3,4 Hz, 1H), 4,11 -4,23 (m, 1H), 4,60, 4,88 (ABq, J = 12,0 Hz, 2H), 5,21 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 5,38-5,44 (m, 1H), 6,72, 6,76 (ABq, J = 16,3 Hz, 2H), 7,31-7,49 (m, 8H), 7,56­ 7,62 (m, 2H), 7,64-7,71 (m, 4H), 7,99-8,06 (m, 2H). CLEM (m/z) 1066,5 [M+H], Tr = 4,94 min.

Compuesto 41g.

[0448]

[0449] El Compuesto 41g se preparó de la misma manera que el Compuesto 39 usando 41f en lugar de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoiloxi}-3-metil-butirilamino)-3-metoxi-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico con un rendimiento del 77%. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,95-1,04 (m, 6H), 1,46 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,54-1,61 (m, 12H), 1,65-2,01 (m, 4H), 2,19­ 2,37 (m, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,65-2,78 (m, 1H), 3,57-3,76 (m, 2H), 3,79 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,03-4,10 (m, 1H), 4,52­ 4,63 (m, 1H), 4,89 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,93 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,98-6,07 (m, 1H), 6,28, 6,47 (ABq, J = 16,4 Hz, 2H), 6,56-6,63 (m, 1H), 7,21 -7,54 (m, 7H), 7,61 -7,75 (m, 7H), 8.02 (d, J = 8,3 Hz, 1H). CLEM (m/z) 818,4 [M+H], Tr = 4,22 min.

Compuesto 41.

[0450]

[0451] A una solución del Compuesto 41 g (190 mg, 0,23 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (1 mL), a temperatura ambiente y bajo una atmósfera de nitrógeno, se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (1 M en THF, 1,2 ml, 1,2 mmol). La reacción se agitó durante 45 minutos antes de diluirse con acetato de etilo y se lavó con cloruro de amonio acuoso saturado. La capa orgánica se secó a través de una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El producto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando /'so-hexanos/acetona 1:1 para dar el compuesto del título (35 mg, 27%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,98 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,42 (s, 3H), 1,52 (s, 3H), 1,72 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,72-1,97 (m, 4H), 2,09-2,25 (m, 1H), 2,71 -2,86 (m, 1H), 3,30 (s, 3H), 3,96 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 4,18-4,30 (m, 1H), 4,42-4,53 (m, 2H), 5,08 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,88 (q, J = 7,4 Hz, 1H), 6,06 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 6,40, 6,49 (ABq, J = 16,5 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 8,19 (d, J = 8,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 580,2 [M+H], Tr = 2,14 min.

Ejemplo 42. Compuesto 42.

[0452]

Compuesto 42a. Ácido 4-oxo-1-vinil-ciclohexanocarboxílico

[0453]

[0454] Una solución del éster etílico del ácido 4-oxo-1-vinil-ciclohexanocarboxílico comercialmente disponible (proporcionado por Small Molecules Inc.), (1,20 g, 6,11 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) se trató con una solución de hidróxido de litio monohidrato (734 mg, 30,6 mmol) en agua (10 mL). Después de agitar a 50°C durante 2 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre agua y éter dietílico. La capa acuosa se acidificó a pH 1 mediante la adición de una solución saturada de hidrogenosulfato de potasio y se extrajo con acetato de etilo (3 x). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y los volátiles se eliminaron al vacío para producir el compuesto del título (1,00 g, 97%) como una goma transparente. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 1,92-2,08 (m, 2H), 2,36-2,59 (m, 6H), 5,34 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 5,97 (dd, J = 17,5, 10,5 Hz, 1H), 11,30 (ancho s, 1H).

Compuesto 42b. Ácido 1 -((E)-2-{2-[(R)-1 -(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-4-oxociclohexanocarboxílico

[0455]

[0456] Una solución de éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-metil-carbámico (200 mg, 0,55 mmol), ácido 4-oxo-1-vinilciclohexanocarboxílico (138 mg, 0,82 mmol), acetato de paladio(II) (25 mg, 0,11 mmol), tri-(otolil)fosfina (50 mg, 0,16 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (2 mL) se trató con trietilamina (267 pL, 1,91 mmol). Después de agitar a 100°C bajo irradiación de microondas durante 30 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre acetato de etilo y una solución de ácido cítrico al 5%, la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x), los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Biotage de 25 g se eluyó con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 1:1 para proporcionar el compuesto del título (235 mg, 94%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,48 (s, 9H), 1,68 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 2,07-2,22 (m, 2H), 2,44­ 2,70 (m, 6H), 2,75 (ancho s, 3H), 5,61 (ancho s, 1H), 6,68 (ABq, A5^{a b} = 0,31, J^{a b} = 16,3 Hz, 2H), 7,36 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,05-8,12 (m, 2H). CLEM (m/z) 453,1 [M+H], Tr = 2,48 min.

Compuesto 42c. Ácido 1 -((E)-2-{2-[(R)-1 -(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-4-c/shidroxiciclohexanocarboxílico

[0457]

[0458] Una solución enfriada (-50°C) de ácido 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-4-oxo-ciclohexanocarboxílico (235 mg, 0,52 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (15 mL) se trató con el potasio trisec-butilborohidruro (1,56 ml, 1,56 mmol, 1 M en tetrahidrofurano). La temperatura se elevó a -30°C. Después de agitar durante 20 minutos, la reacción se interrumpió mediante la adición de una solución saturada de cloruro de amonio (10 mL). La temperatura se elevó a temperatura ambiente, el pH se ajustó a pH 2 mediante la adición de ácido cítrico y luego se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por sílice cromatografía de gel utilizando un cartucho de Biotage de 25 g se eluyó con un gradiente continuo de /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 0:1 para proporcionar el compuesto del título (185 mg, 78%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCl^a) 5 1,48 (s, 9H), 1,52-1,62 (m, 4H), 1,67 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,95-2,05 (m, 2H), 2,42- 2,55 (m, 2H), 2,73 (ancho s, 3H), 3,73 (ancho s, 1H), 5,57 (ancho s, 1H), 6,58 (ABq, A5^{a b} = 0,29, J^{a b} = 16,3 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,01-8,10 (m, 2H). CLEM (m/z) 455,1 [M+H], Tr = 2,31 min.

Compuesto 42d. Ácido 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)etil]quinolin-7-il}-vinil)-4-c/s-('ferc-butildimetil-silaniloxi)-ciclohexanocarboxílico

[0459]

[0460] Una solución de ácido 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]quinolin-7-il}-vinil)-4-c/shidroxiciclohexanocarboxílico (185 mg, 0,41 mmol) e imidazol (138 mg, 2,03 mmol) en anhidro en N,N-dimetilformamida (5 mL) se trató con cloruro de ferc-butildimetilsililo (153 mg, 1,02 mmol). Después de agitar durante 16 h, la reacción se interrumpió mediante la adición de una solución de carbonato de potasio (10 mL). Después de agitar durante 3 h, el pH se ajustó a pH 3 mediante la adición de una solución de hidrogenosulfato de potasio y luego se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Biotage de 25 g se eluyó con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 7:3 para proporcionar el compuesto del título (142 mg, 61%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,08 (s, 6H), 0,91 (s, 9H), 1,49 (s, 9H), 1,53-1,64 (m, 4H), 1,67 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,80-1,92 (m, 2H), 2,38-2,51 (m, 2H), 2,72 (ancho s, 3H), 3,70 (ancho s, 1H), 5,59 (ancho s, 1H), 6,58 (ABq, A5^{a b} = 0,30, J^{a b} = 16,3 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,00-8,06 (m, 2H). CLEM (m/z) 569,2 [M+H], Tr = 4,37 min.

Compuesto 42e. Éster 2,2,2-tricloro-etílico de ácido (S)-1-((S)-2-{(S)-2-[1-((E)-2-{7-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metilamino)-etil]-quinolin-2-il}-vinil)-4-c/s-('ferc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclohexanocarboniloxi]-3-metil-butirilamino}-propionil)-hexahidro-piridazina-3-carboxílico

[0461]

[0462] Una solución de ácido 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]quinolin-7-il}-vinil)-4-c/s-('fercbutildimetil-silaniloxi)-ciclohexanocarboxílico (142 mg, 0,25 mmol), éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (108 mg, 0,25 mmol), trietilamina (0,087 ml, 0,62 mmol) y se trató 4-dimetilaminopiridina (15 mg, 0,12 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) con anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (146 mg, 0,42 mmol). Después de agitar durante 60 h, la reacción se inactivó mediante la adición de una solución de bicarbonato de sodio (10 mL), la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x), los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Biotage de 25 g se eluyó con un gradiente continuo de /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 1:1 para proporcionar el título del Compuesto (105 mg, 43%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,10 (s, 6H), 0,93 (s, 9H), 1,01 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,27 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,40-1,50 (m, 9H), 1,68 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,72-1,81 (m, 4H), 1,82-1,94 (m, 4H), 1,95-2,10 (m, 2H), 2,25-2,32 (m, 2H), 2,37-2,44 (m, 1H), 2,46-2,57 (m, 2H), 2,80 (ancho s, 3H), 3,52-3,70 (m, 1H), 3,74-3,85 (m, 2H), 4,73-4,80 (m, 1H), 5,01 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 5,30-5,45 (m, 2H), 6,70 (ABq, A5^{a b} = 0,28, J^{a b} = 16,3 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,73-7,85 (m, 2H), 7,97 (s, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H).

Compuesto 42.

[0463]

[0464] Una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-((S)-2-{(S)-2-[1-((E)-2-{7-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonilmetil-amino)-etil]-quinolin-2-il}-vinil)-4-c/s-('ferc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclohexanocarboniloxi]-3-metil-butirilamino}-propionilo)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (105 mg, 0,11 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se trató con una solución de carbonato de potasio (221 mg, 1,60 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 3 h, el pH se ajustó a pH 3 mediante la adición de ácido clorhídrico diluido y luego se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (10 mL) y se trató con ácido clorhídrico en 1,4-dioxano (4 M, 5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El disolvente residual se separó azeotrópicamente con tolueno (3 x 15 mL) para dar ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-2-(4-c/'s-hidroxi-1 -{(E)-2-[7-((R)-1 -metilamino-etil)-quinolin-2-il]-vinil}-ciclohexanocarboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo. Este residuo se disolvió en N,N-dimetilformamida (4 mL) y N,N-diisopropiletilamina (0,093 ml, 0,53 mmol) y se añadió mediante una bomba de jeringa durante 1 hora a una solución agitada de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (61 mg, 0,16 mmol) en diclorometano (50 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La reacción se detuvo mediante la adición de una solución de bicarbonato de sodio (10 mL), la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa para producir el compuesto del título (13 mg, 19%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDaOD) 5 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,27-1,48 (m, 3H), 1,54 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,72 (d, J = 7,6 Hz, 3H), 1,78-2,05 (m, 5 H), 2,11 -2,25 (m, 1H), 2,28-2,40 (m, 1H), 2,50-2,62 (m, 1H), 2,71 -2,84 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,52-3,80 (m, 3H), 4,11-4,24 (m, 1H), 4,38-4,51 (m, 1H), 5,16 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,86-5,98 (m, 2H), 6,36 (ABq, A5^{a b} = 0,17, J^{a b} = 16,5 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,64 -7,72 (m, 2H), 7,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 620,5 [M+H], Tr = 2,09 min.

Ejemplos 43 y 44, Compuestos 43 y 44

[0465]

Compuesto 43a. Éster metílico del ácido [1,4]dioxano-2-carboxílico

[0466]

[0467] Una solución de ácido [1,4]dioxano-2-carboxílico (suministrado por Enamine Ltd.), (2,90 g, 22,0 mmol) en N,N-dimetilformamida (15 mL) se agitó a temperatura ambiente. Se añadió carbonato de potasio (6,07 g, 44,0 mmol) y la suspensión se agitó a 5°C. Se añadió gota a gota yodometano (6,25 g, 2,75 ml, 44,0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadieron agua y salmuera y la mezcla se extrajo con éter dietílico. La capa acuosa se saturó con cloruro de sodio y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 4:1 a 1:1 para producir el compuesto del título (3,06 g, 95%) como un aceite amarillo pálido volátil. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 53,68­ 3,78 (m, 4H), 3,81 (s, 3H), 3,97-4,05 (m, 2H), 4,29 (dd, J = 8,5, 3,1 Hz, 1H). CLEM (m/z) 169,2 [M+Na], Tr = 0,69 min.

C o m p u e s to 43 b . É s te r m e tílico de l á c ido 2 -(1 -h id ro x i-e til) - [1 ,4 ]d io x a n o -2 -c a rb o x ílic o

[0468]

[0469] Una solución de W,W-diisopropilamina (1,67 g, 2,3 ml, 16,5 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL) se agitó a -78°C bajo nitrógeno. Se añadió gota a gota n-butil-litio (6,6 ml, 16,5 mmol, solución 2,5 M en hexano) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster metílico del ácido [1,4]dioxano-2-carboxílico (1,61 g, 11 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 minutos. Se añadió acetaldehído (1,45 g, 1,8 ml, 33 mmol) en una porción. Se retiró el baño de enfriamiento y se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a 5°C y se añadió ácido clorhídrico 1 M enfriado con hielo para acidificar la mezcla de reacción a pH 2. Se añadió cloruro de sodio para saturar la solución y la mezcla se extrajo con éter dietílico (4 x). Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico 1:1 a 0:1 para producir el compuesto del título (1,49 g, 71%), como un aceite y como una mezcla 3:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 213,2 [M+H], Tr = 0,62 min.

Compuesto 43c. Éster metílico del ácido 2-[1 -(tolueno-4-sulfoniloxi)-etil]-[1,4]dioxano-2-carboxílico

[0470]

[0471] Una solución de éster metílico del ácido 2-(1-hidroxi-etilo)-[1,4]dioxano-2-carboxílico (1,49 g, 7,8 mmol) en piridina (8 mL) se agitó a temperatura ambiente. Se añadió cloruro de 4-toluenosulfonilo (1,50 g, 7,8 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se evaporó la mayor parte de la piridina, se añadió ácido clorhídrico 1 M para acidificar la mezcla a pH 2 y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 3:1 a 0:1 para producir el compuesto del título (1,70 g, 63%) como una goma amarilla y como una mezcla 3:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 367,0 [M+Na], Tr = 2,44 min.

Compuesto 43d. Éster metílico del ácido 2-vinil-[1,4]dioxano-2-carboxílico

[0472]

[0473] Se calentó una solución de éster metílico de ácido 2-[1-(tolueno-4-sulfoniloxi)-etil]-[1,4]dioxano-2-carboxílico (1,68 g, 4,9 mmol) en 1,8-diazabicicloundec-7-eno (3 mL) en un tubo sellado a 130°C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron ácido clorhídrico 2 M y éter dietílico. La mezcla se extrajo con éter dietílico y los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 3:1 a 1:1 para producir el compuesto del título (308 mg, 36%) como un aceite incoloro volátil. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 53,47 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,62-3,78 (m, 2H), 3,81-3,86 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,99- 4,07 (m, 1H), 4,33 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 5,34 (dd, J = 10,7, 1,1 Hz, 1H), 5,52 (dd, J = 17,4, 1,1 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 17,4, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 195,1 [M+Na], Tr = 1,23 min.

Compuesto 43e. Éster metílico de ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboxílico

[0474]

[0475] Una solución de éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-carbámico (316 mg, 0,9 mmol), éster metílico del ácido 2-vinil-[1,4]dioxano-2-carboxílico (154 mg, 0,9 mmol), acetato de paladio(II) (41 mg, 0,18 mmol), tri(otolil)fosfina (54 mg, 0,18 mmol) y W,W-diciclohexilmetilamina (351 mg, 0,38 ml, 1,8 mmol) en acetonitrilo (8 mL) se calentó a 120°C en un reactor de microondas durante 30 minutos. Se filtró la mezcla de reacción y se evaporó el disolvente. El residuo se disolvió en diclorometano; se añadieron salmuera y ácido clorhídrico 1 M enfriado con hielo para acidificar la mezcla a pH 2. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo de 7:3 a 6:4 para producir el compuesto del título (157 mg, 40%) como una goma amarilla y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 443,1 [M+H], Tr = 2,34 min.

Compuesto 43f. Ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboxílico

[0476]

[0477] Se agitó una solución de éster metílico de ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboxílico (157 mg, 0,35 mmol) en tetrahidrofurano (6 mL) a 5°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de litio hidróxido de monohidrato (30 mg, 0,71 mmol) en agua (1,5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se evaporó la mayor parte del disolvente orgánico. La solución se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico 2 M y la mezcla se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos se combinaron y se lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título (149 mg, 100%) como una espuma de color amarillo pálido y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 429,1 [M+H], Tr = 1,87 min.

Compuesto 43g. Éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilaminoetil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0478]

[0479] Una solución de ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboxílico (50 mg, 0,1 mmol), éster 2,2,2-tricloroetílico de ácid [(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionilo]-hexahidro-piridazina-3-carboxílico (44 mg, 0,1 mmol), W,W-diisopropiletilamina (32 mg, 0,043 ml, 0,25 mmol), 4-dimetilaminopiridina (6 mg, 0,05 mmol) y se agitó anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (58 mg, 0,17 mmol) en diclorometano (5 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y la solución se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio enfriada con hielo, una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio enfriada con hielo y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:1 a 1:3 para producir el compuesto del título (47 mg, 55%) como un sólido blanco y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros. c Le M (m/z) 842,2/844,0 [M+H], Tr = 3,25 y 3,31 min.

Compuestos 43 y 44

[0480]

[0481] Se agitó una solución de éster 2,2,2-tricloro-etílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-fercbutoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico (69 mg, 0,081 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución acuosa enfriada con hielo de hidróxido de sodio (0,1 M, 0,82 ml, 0,082 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 20 minutos. Se añadió ácido clorhídrico 1 M frío para acidificar la mezcla a pH 2 y se evaporó el disolvente. El residuo se co-evaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1, 3 x) y el residuo se trituró con éter dietílico (2 x) y el sólido resultante se secó para producir ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilaminoetil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,081 mmol) como un sólido amarillo y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 712,3 [M+H], Tr = 2,46 min.

[0482] Una mezcla de (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1.4] dioxano-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico crudo (0,081 mmol) en cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (2 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El disolvente se evaporó y el residuo se co-evaporó con éter dietílico (2 x) y el sólido resultante se secó para producir clorhidrato del ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1 -amino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1,4]dioxano-2-carboniloxi)-3-metilbutirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,081 mmol) como un sólido blanquecino y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 612,1 [M+H], Tr = 1,38 min.

[0483] Una suspensión de clorhidrato de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-amino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-[1.4] dioxano-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,081 mmol) en diclorometano (75 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de W,W-diisopropiletilamina (42 mg, 0,324 mmol) en diclorometano (6 mL) y la solución resultante se agitó a 0°C. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (62 mg, 0,162 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego a temperatura ambiente durante 1 h. La mayor parte del disolvente se evaporó y la solución (~20 mL) se lavó con ácido clorhídrico 1 M enfriado con hielo y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/acetato de etilo 1:4 a 0:1 para proporcionar una mezcla 1:1 de diastereoisómeros.

La mezcla se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con acetonitrilo/agua 3:7 para producir los dos diastereoisómeros separados.

[0484] El Compuesto 43 (que eluye primero) Diastereoisómero 1: (4,0 mg, 8%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,12 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,56-1,60 (m, 7 H), 1,68-1,73 (m, 1H), 1,95-2,00 (m, 1H), 2,20-2,35 (m, 2H), 2,69-2,78 (m, 1H), 3,55-3,85 (m, 5H), 4,03-4,12 (m, 1H), 4,43 -4,48 (m, 1H), 4,57 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 5,12 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,39 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,83 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,86-7,90 (m, 2H), 8,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 594,2 [M+H], Tr = 2,14 min.

[0485] El Compuesto 44 (que eluye segundo) Diastereoisómero 2: (4,6 mg, 10%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,08 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,49-1,54 (m, 1H), 1,59 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,64 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,66-1,71 (m, 1H), 1,90-1,96 (m, 1H), 2,20-2,28 (m, 2H), 2,63-2,71 (m, 1H), 3,55-3,93 (m, 6H), 4,40-4,47 (m, 2H), 4,98 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,09 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,79 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,85-7,88 (m, 2H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 594,2 [M+H], Tr = 2,17 min.

Ejemplos 45 y 46, Compuestos 45 y 46.

[0486]

Compuesto 45a. Éster 4-ferc-butílico de ácido morfolin-2,4-dicarboxílico éster 2-metílico.

[0487]

[0488] Se utilizó una solución de éster 4-ferc-butílico del ácido morfolin-2,4-dicarboxilico (suministrado por NeoMPS, Inc.), (5,78 g, 25,0 mmol) en W,W-dimetilformamida (30 mL) posteriormente se trató con carbonato de potasio (4,14 g, 30,0 mmol) y yodometano (7,10 g, 3,1 mL, 50,0 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 18 h, la mezcla de reacción se diluyó con agua y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua (4 x) y salmuera, luego se filtraron a través de una frita hidrófoba y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo de 3:1 a 1:3 para producir el compuesto del título (4,83 g, 79%) en forma de un sólido blanco.

1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,49 (s, 9H), 3,06-3,15 (m, 2H), 3,56-3,64 (m, 1H), 3,75-3,79 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 4,00­ 4,14 (m, 3 H). CLEM (m/z) 268,1 [M+Na], Tr = 1,94 min.

C o m p u e s to 45 b . É ste r 4 -fe rc -b u tílic o de á c ido 2-(1 -h id ro x i-e til) -m o rfo lin -2 ,4 -d ic a rb o x ílic o é s te r 2 -m e tílico .

[0489]

[0490] Una solución enfriada (-782C) de W,W-diisopropilamina (1,3 ml, 9,092 mmol, se secó sobre hidruro de calcio) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL) se trató con una solución de n-butil-litio en hexanos (3,4 ml, 8,524 mmol, 2,5 M). Después de agitar a -78°C durante 30 minutos, la mezcla se trató con una solución de éster 4-terc-butílico de ácido morfolin-2,4-dicarboxílico éster 2-metílico (1,394 g, 5,683 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL). Después de agitar a -78°C durante 20 minutos, la mezcla se trató con acetaldehído (0,96 ml, 17,05 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1 h, la reacción se inactivó a 0°C con ácido clorhídrico (1 M, 40 mL). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 3:2 para proporcionar el compuesto del título (1,476 g, 90%) como un aceite amarillo y como una mezcla 2:1 de diastereoisómeros.

Compuesto 45c. Éster 2-metílico de ácido 2-(1-trifluorometanosulfoniloxi-etil)-morfolin-2,4-dicarboxílico éster 4-terc-butílico

[0491]

[0492] Una suspensión enfriada (-78°C) de hidruro de sodio (262 mg, 6,542 mmol, 60% en aceite mineral) en anhidro tetrahidrofurano (10 mL) se trató con una solución de éster 4-terc-butílico de ácido 2-(1-hidroxi-etil)-morfolina-2,4-dicarboxílico éster 2-metílico (1,262 g, 4,361 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL). La suspensión de color amarillo claro se agitó a -78°C durante 15 minutos y luego se trató con una solución de W-(5-cloro-2-piridil)bis(trifluorometanosulfonimida) (3,425 g, 8,722 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1,5 h, la reacción se detuvo con una solución saturada de cloruro de amonio. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para proporcionar el compuesto del título (1,384 g, 75%) como un aceite de color amarillo claro y como una mezcla 2:1 de diastereoisómeros.

C o m p u e s to 45 d . É ste r 4 -te rc -b u tílic o de á c ido 2 -v in il-m o rfo lin a -2 ,4 -d ic a rb o x ílic o é s te r 2 -m e tílico

[0493]

[0494] Una solución tibia (352C) de éster 4-ferc-butílico del ácido 2-(1-trifluorometanosulfoniloxi-etil)-morfolina-2,4-dicarboxílico éster 2-metílico (1,384 g, 3,284 mmol) en diclorometano (40 mL) se trató con 1,8-diazabiciclo[5,4.0]undec-7-eno (2,5 mL), 16,422 mmol). Después de agitar a 35°C durante 2 h, la reacción se enfrió a 0°C y se inactivó con ácido clorhídrico (1 M, 50 mL). La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un aceite naranja que se usó sin purificación adicional en el siguiente paso. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,49 (s, 9H), 3,13 a 3,29 (m, 2H), 3,60-3,73 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,83-3,92 (m, 2H), 4,24 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 5,37 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 5,55 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,84 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H).

Compuesto 45e. Ácido 2-vinil-morfolina-2,4-dicarboxílico éster 4-ferc-butílico

[0495]

[0496] Una solución de éster 4-ferc-butílico de ácido 2-vinil-morfolina-2,4-dicarboxílico éster 2-metílico (3,284 mmol) en tetrahidrofurano/metanol/agua (50 ml, 2:2:1) se trató con hidróxido de litio monohidrato (413,3 mg, 9,852 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se enfrió a 0°C y se inactivó con ácido clorhídrico (1 M). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos combinados se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (761,4 mg, 90% en 2 pasos) como agujas incoloras. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,48 (s, 9H), 3,31-3,42 (m, 1H), 3,45-3,61 (m, 2H), 3,87-3,94 (m, 2H), 4,02 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 5,44 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 5,60 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,85 (dd, J = 17,4, 10,7 Hz, 1H).

Compuesto 45f. Éster 4-ferc-butílico del ácido 2-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-morfolin-2,4-dicarboxílico

[0497]

[0498] Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida (95 mg, 0,178 mmol), éster 4-terc-butílico del ácido 2-vinilmorfolina-2,4-dicarboxílico (45,7 mg, 0,178 mmol), tri(o-tolil)fosfina (11 mg, 0,036 mmol) y trietilamina (0,08 ml, 0,534 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) se desgasificaron burbujeando nitrógeno durante 5 minutos, luego se calentó a 50°C y se trató con tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (16,3 mg, 0,018 mmol). Después de agitar a 100°C durante 50 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de un lecho corto de Celite, que se aclaró con acetato de etilo. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo como una espuma naranja que se usó sin purificación adicional. CLEM (m/z) 711,3 [M+H], Tr = 2,14 min.

Compuesto 45 y 46.

[0499]

[0500] Una solución de éster 4-terc-butílico de ácido 2-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-morfolina-2,4-dicarboxílico crudo (0,178 mmol), 4-dimetilaminopiridina (21,7 mg, 0,178 mmol) y trietilamina (0,08 ml, 0,534 mmol) en diclorometano seco (150 mL) se trató con anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (122,6 mg, 0,356 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1,5 h, se añadió más anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (122,6 mg, 0,356 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 16 h, se añadieron más trietilamina (0,2 mL) y 4-dimetilaminopiridina (217 mg, 1,780 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 4 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre diclorometano y una solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 25 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 0:1 luego por HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con un gradiente continuo de agua/acetonitrilo 95:5 a 0:1 para producir el compuesto del título como dos isómeros separados.

[0501] Compuesto 45 (que eluye segundo) Diastereómero 1 (1,9 mg, 1,5%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 1,47-1,54 (m, 10 H), 1,55-1,77 (m, 8H), 1,90-2,00 (m, 1H), 2,16-2,31 (m, 2H), 2,62-2,74 (m, 1H), 3,04-3,18 (m, 2H), 3,54-3,62 (m, 1H), 3,68-3,80 (m, 1H), 3,83-3,93 (m, 1H), 3,94-4,03 (m, 1H), 4,38­ 4,47 (m, 1H), 4,57-4,67 (m, 1H), 5,03 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,10 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,80 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 8,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 693,3 [M+h ], Tr = 2,68 min.

[0502] Compuesto 46 (que eluye primero) Diastereómero 2 (0,8 mg, 1%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,97-1,06 (m, 6H), 1,40 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,43-1,58 (m, 13 H), 1,65-1,74 (m, 1H), 1,97-2,07 (m, 1H), 2,18­ 2,37 (m, 2H), 3,42-3,49 (m, 1H), 3,74-4,03 (m, 4H), 5,16 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,27-5,33 (m, 1H), 5,35 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,74-7,81 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 8,06 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 693,5 [M+H], Tr = 3,39 min.

REFERENCIA Ejemplo 47. Compuesto 47.

[0503]

Compuesto 47a. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-4-{2-[(R)-1-(ferc-butoxicarbonil-metilamino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoiloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico

[0504]

[0505] Una solución de éster metílico del ácido (E)-4-{2-[(R)-1 -(terc-butoxicarbonil-metil-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enóico (193 mg, 0,47 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) se trató con una solución de hidróxido de litio monohidrato (112 mg, 4,7 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a 50°C durante 1 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre agua y éter dietílico. La capa acuosa se acidificó a pH 2 mediante la adición de ácido clorhídrico y luego se extrajo con acetato de etilo (3 x). Los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (10 mL) y se trató con 4-dimetilaminopiridina (57 mg, 0,47 mmol), anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (275 mg, 0,80 mmol) y trietilamina (0,197 ml, 1,41 mmol). Después de agitar durante 30 min. Se añadió éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (203 mg, 0,47 mmol). Después de agitar durante 16 h, la reacción se interrumpió mediante la adición de una solución de bicarbonato de sodio (10 mL), la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x), los orgánicos se combinaron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Biotage de 25 g se eluyó con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetona 1:0 a 3:1 para proporcionar el compuesto del título (260 mg, 68%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,97­ 1,05 (m, 6H), 1,29 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,44 (ancho s, 9H), 1,55 (s, 3H), 1,57 (s, 3H), 1,68 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,71 -2,00 (m, 4H), 2,02-2,30 (m, 3H), 2,80 (ancho s, 3H), 3,56 (ancho s, 1H), 3,78-3,83 (m, 1H), 4,75-4,82 (m, 1H), 4,93-5,01 (m, 2H), 5,35-5,45 (m, 1H), 6,65-6,82 (m, 2H), 7,36 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,72-7,83 (m, 2H), 7,98 (s, 1H), 8,21 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 814,1 [M+H], Tr = 3,97 min.

Compuesto 47.

[0506]

[0507] Se preparó una solución de éster 2,2,2-tricloro-etílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-4-{2-[(R)-1-(fercbutoxicarbonil-metil-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoiloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico (260 mg, 0,32 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) y se añadió una solución de carbonato de potasio (663 mg, 4,80 mmol) en agua (15 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla de reacción se acidificó a pH 3 con ácido clorhídrico (1 M) y luego se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se secó al vacío durante 1 h antes de disolverlo en diclorometano (30 mL) y tratar con cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4 M, 15 mL). Se agitó durante 1 h a temperatura ambiente y luego se evaporó. El agua residual se separó azeotrópicamente con tolueno (2 x 20 mL) para producir un sólido blanco (251 mg). El sólido blanco se disolvió en N,N-dimetilformamida anhidra (10 mL) y se añadió N,N-diisopropiletilamina (279 ml, 1,6 mmol). A continuación, esta solución se añadió mediante una bomba de jeringa a una solución agitada de hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (183 mg, 0,48 mmol) en diclorometano anhidro (150 mL) durante 1 h. La mezcla de reacción se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio (30 mL), se filtró a través de un separador de fases y se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa para producir el producto del título (54 mg, 30%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 50,97 (s, 3H), 0,99 (s, 3H), 1,44 (s, 3H), 1,50-1,55 (m, 6H), 1,56-2,03 (m, 4H), 1,68 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 2,20-2,34 (m, 1H), 2,64-2,79 (m, 1H), 3,14 (s, 3H), 3,90-4,01 (m, 1H), 4,50-4,61 (m, 1H), 4,85 (d, J = 8,5 Hz, 3H), 5,88-6,15 (m, 1H), 6,30 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,61 -6,87 (m, 1H), 7,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 564,2 [M+H], Tr = 2,54 min.

Ejemplo 48, Compuesto 48.

[0508]

Compuesto 48a. 2,2-bis(hidroximetil)-3-oxobutanoato de etilo.

[0509]

[0510] A una solución agitada de acetoacetato de etilo (150 g, 1,2 mol) en formaldehído (210 ml, 2,8 mol, 40% ac.) y se añadió dioxano (550 mL) gota a gota trietilamina (1,0 M en tetrahidrofurano, 57 ml, 0,06 mol) a 0°C. La temperatura se elevó hasta 35-40°C y la mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con agua (400 mL) y los productos secundarios se extrajeron con tolueno (3 x 600 mL). La fase acuosa se evaporó a 35°C hasta un cuarto del volumen inicial y se extrajo con acetato de etilo (3 x 900 mL). Los extractos se secaron sobre sulfato de sodio y se evaporaron para obtener el producto crudo (75 g) en forma de aceite amarillo, que se utilizó directamente en el siguiente paso sin purificación.

Compuesto 48b. 5-Acetil-1,3-dioxano-5-carboxilato de etilo.

[0511]

[0512] Una solución de acetato de 2,2-bis(hidroximetil)-3-oxobutanoato (75 g, 0,39 mol) y 40% de formaldehído (360 mL) en ácido clorhídrico concentrado (360 mL) se calentó a 50°C durante 17 h. La solución de dos fases se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron para dar un residuo, que se purificó mediante cromatografía en columna flash eluyendo con un gradiente continuo de éter de petróleo/acetato de etilo 15:1 a 9:1 para producir el compuesto de título (33 g, 14%, 2 pasos) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCta) 5 1,25 (m, 3H), 2,31 (s, 3H), 4,25- 4,19 (m, 4H), 4,35 (d, J = 12,0 Hz, 2H), 4,77 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 6,0 Hz, 1H).

Compuesto 48c. 5-(1-hidroxietil)-1,3-dioxano-5-carboxilato de etilo.

[0513]

[0514] 5-Acetil-1,3-dioxano-5-carboxilato de etilo (2) (22,3 g, 0,11 mol) se disolvió en etanol (100 mL) y sodio borohidruro (2,08 g, 0,055 mol) se añadió a 0°C en porciones. La mezcla se agitó a la misma temperatura durante 1 hora. El exceso de borohidruro de sodio se destruyó con acetona y la solución se extrajo con acetato de etilo (3 x 600 mL). Los extractos orgánicos combinados se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (18,9 g, 84%) como un aceite incoloro.

Compuesto 48d. 5-(1-(tosiloxi)etil)-1,3-dioxano-5-carboxilato de etilo.

[0515]

[0516] A una mezcla de 5-(1 -hidroxietil)-1,3-dioxano-5-carboxilato de etilo (16,8 g, 83 mmol) en piridina seca (40 mL) a 0°C se añadió cloruro de 4-toluenosulfonilo (19,1 g, 99 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 16 h. Se añadió agua (40 mL) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 400 mL). La capa orgánica se lavó con salmuera (3x). Después de concentrar al vacío, el producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/acetato de etilo 25:1 a 5:1 para proporcionar el compuesto del título (22,7 g, 76%) como un aceite incoloro.

1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 1,26 (m, 3H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,45 (s, 3H), 3,80 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,87 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,02 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,20-4,17 (m, 2H), 5,03-4,98 (m, 1H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,79 (d, J = 8,8 Hz, 2H).

Compuesto 48e. Éster etílico del ácido 5-vinil-[1,3]dioxano-5-carboxílico.

[0517]

[0518] Una mezcla de 5-(1-(tosiloxi)etil)-1,3-dioxano-5-carboxilato de etilo (20,7 g, 58 mmol) y DBU (25 mL) se calentó a 140°C durante 3 h. Después de enfriarse a ta, la mezcla de reacción se vertió en éter (300 mL) y la capa orgánica se lavó con salmuera (3x). La capa de éter se secó sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/éter de 30:1 a 20:1 para dar un producto crudo, que se destiló a presión reducida (45-49°C/0,3 mbar) para producir el compuesto del título (3,6 g, 33%) como aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 1,29 (t, J = 11,0 Hz, 3H), 3,70 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 4,25 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 4,44 (t, J = 11,2 Hz, 2H), 4,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,24 (m, 1H), 5,27 (m, 1H), 5,65 (m, 1H). Estos datos espectrales de 1H están de acuerdo con los informados para la síntesis del compuesto del título, que se describe en Borremans, F. et al. Toro. Soc. Chim. Belg. 1976, 85, 681-696.

Compuesto 48f. Ácido 5-vinil-[1,3]dioxano-5-carboxílico.

[0519]

[0520] Una solución de éster etílico del ácido 5-vinil-[1,3]d¡oxano-5-carboxíl¡co (397,7 mg, 2,136 mmol) en tetrahidrofurano/metanol/agua (15 ml, 2:2:1) era tratado con hidróxido de litio monohidrato (269 mg, 6,408 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 1,5 h, los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se enfrió a 0°C y se inactivó con ácido clorhídrico (1 M). La capa acuosa se saturó con cloruro de sodio y se extrajo con diclorometano (3 x). Los orgánicos combinados se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (320,3 mg, 95%) como un sólido incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 53,72 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 4,50 (d, J = 11,4 Hz, 2H), 4,73 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 5,02 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,27-5,39 (m, 2H), 5,69 (dd, J = 17,6, 10,9 Hz, 1H).

Compuesto 48g. Ácido 5-((E)-2-{2-[(R)-1 -({(S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-[1,3]dioxano-5-carboxílico.

[0521]

[0522] Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida (398,4 mg, 0,745 mmol), ácido 5-vinil-[1,3]dioxano-5-carboxílico (117,9 mg, 0,745 mmol), se desgasificó tri(o-tolil)fosfina (45,3 mg, 0,149 mmol) y trietilamina (0,32 ml, 2,235 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) burbujeando nitrógeno durante 5 minutos, luego se calentó a 50°C y se trató con tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (68,2 mg, 0,074 mmol). Después de agitar a 100°C durante 40 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de un lecho corto de Celite, que se aclaró con acetato de etilo. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo como una espuma naranja que se usó sin purificación adicional. CLEM (m/z) 612,2 [M+H], Tr = 1,70 min.

Compuesto 48.

[0523]

[0524] Se añadió una solución de ácido 5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S))-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-[1,3]dioxano-5-carboxílico crudo (0,745 mmol) en diclorometano seco (18 mL) mediante una bomba de jeringa a una solución de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (385,0 mg, 1,117 mmol), 4-dimetilaminopiridina (273,0 mg, 2,235 mmol) en diclorometano seco (230 mL) que contiene 4 Á tamices moleculares durante 3 h. Una vez finalizada la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos, luego se filtró y los volátiles se eliminaron parcialmente al vacío. Los orgánicos se lavaron con tampón de citrato de pH 4, una solución saturada de bicarbonato de sodio y se filtraron en un separador de fases. Los volátiles se eliminaron a vacío y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 25 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetona 1:0 a 1:1 para proporcionar el compuesto del título en 90% de pureza (133,8 mg, 30% de rendimiento). Un tercio de este material se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con un gradiente continuo de agua/acetonitrilo 95:5 a 0:1 para producir el compuesto del título (8,1 mg) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,11 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,47-1,80 (m, 8H), 2,12-2,31 (m, 2H), 2,65-2,77 (m, 1H), 3,59-3,66 (m, 1H), 3,85 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,92 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,39-4,53 (m, 2H), 4,63-4,71 (m, 1H), 4,98 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 5,08 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 6,15 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,86 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 594,1 [M+H], Tr = 2,60 min.

Ejemplo 49. Compuesto 49.

[0525]

Compuesto 49a. Éster metílico del ácido 2-(1-hidroxi-etil)-tetrahidro-piran-2-carboxílico

[0526]

[0527] Una solución de W,W-diisopropilamina (909 mg, 1,25 ml, 9 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) se agitó a -78°C bajo nitrógeno. Se añadió gota a gota n-butil-litio (3,6 ml, 9 mmol, solución 2,5 M en hexano) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 minutos. Se añadió una solución de éster metílico del ácido tetrahidropiran-2-carboxílico (864 mg, 6 mmol) en tetrahidrofurano (8 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 20 minutos. Se añadió acetaldehído (792 mg, 1,0 ml, 18 mmol) en una porción. Se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y se añadió ácido clorhídrico (2 M) enfriado con hielo para acidificar la mezcla de reacción a pH 2. Se añadió cloruro de sodio para saturar la fase acuosa y la mezcla se extrajo con éter dietílico. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 1:1 a 0:1 para producir el compuesto del título (1,28 g) como un aceite y como una mezcla 2:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 189,3 [M+H], Tr = 1,23 min.

Compuesto 49b. Éster metílico del ácido 2-vinil-tetrahidro-piran-2-carboxílico

[0528]

[0529] Una suspensión de hidruro de sodio (200 mg, 5 mmol, 60% dispersión en aceite) en tetrahidrofurano (6 mL) se agitó a -78°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de éster metílico del ácido 2-(1-hidroxi-etil)-tetrahidro-piran-2-carboxílico (620 mg, 3,3 mmol) en tetrahidrofurano 3 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 15 minutos. minutos. Se añadió una solución de W-('5-cloro-2-piridil)bis(trifluorometanosulfonimida) (2,60 g, 6,6 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y luego se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a 5°C y se añadió cuidadosamente una solución saturada de cloruro de amonio. La mezcla de reacción se extrajo con éter dietílico. Los orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 10:1 a 5:1 para producir éster metílico del ácido 2-(1-trifluorometanosulfoniloxi-etil)-tetrahidropiran-2-carboxílico (2,12 g, 3,3 mmol) como un aceite y como una mezcla 2:1 de diastereoisómeros que se usó inmediatamente en el siguiente paso. CLEM (m/z) 321,0 [M+H], Tr = 2,88 min.

[0530] Una solución de éster metílico de ácido 2-(1-trifluorometanosulfoniloxi-etil)-tetrahidro-piran-2-carboxílico (2,12 g, 3,3 mmol) en diclorometano (5 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió 1,8-diazabicicloundec-7-eno (2,0 g, 2 ml, 13,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico enfriado con hielo (2 M). La mezcla se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 10:1 a 5:1 para producir el compuesto del título (466 mg, 75% en dos pasos) como un aceite. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 1,55-1,80 (m, 5H), 2,21-2,29 (m, 1H), 2,68-2,77 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,91-3,98 (m, 1H), 5,26 (dd, J = 10,7, 0,9 Hz, 1H), 5,41 (dd, J = 17,4, 1,1 Hz, 1H), 5,87 (dd, J = 17,4, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 193,2 [M+H], Tr = 2,01 min.

Compuesto 49c. Éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidropiran-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0531]

[0532] Una solución de éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-carbámico (320 mg, 0,9 mmol), éster metílico del ácido 2-viniltetrahidro-piran-2-carboxílico (330 mg, 0,9 mmol), tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (82 mg, 0,09 mmol), tri(o-tolil)fosfina (54 mg, 0,18 mmol) y W,W-diciclohexilmetilamina (526 mg, 0,58 ml, 2,7 mmol) en acetonitrilo (4 mL) se calentó a 120°C en un reactor de microondas durante 30 minutos. Se filtró la mezcla de reacción y se evaporó el disolvente. El residuo se disolvió en acetato de etilo y la solución se lavó con ácido clorhídrico enfriado con hielo (1 M). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir éster metílico del ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinilo}-tetrahidro-piran-2-carboxílico (130 mg, 21%) como un aceite Cl Em (m/z) 441,1 [M+H], Tr = 2,75 min.

[0533] Se agitó una solución de éster metílico de ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidro-piran-2-carboxílico (130 mg, 0,3 mmol) en tetrahidrofurano (6 mL) a 5°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (25 mg, 0,6 mmol) en agua (1,5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Se evaporó la mayor parte del disolvente orgánico. La solución se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico enfriado con hielo (2 M) y la mezcla se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos se combinaron y se lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinilo}-tetrahidro-piran-2-carboxílico (135 mg, 0,3 mmol) como una goma amarilla que se utilizó crudo en el siguiente paso. CLEM (m/z) 427,1 [M+H], Tr = 2,17 min.

[0534] Una solución de ácido 2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidro-piran-2-carboxílico (135 mg, 0,3 mmol), W,W-diisopropiletilamina (96 mg, 0,133 mL, 0,75 mmol), 4-dimetilaminopiridina (80 mg, 0,66 mmol) y anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (193 mg, 0,56 mmol) en diclorometano (5 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (142 mg, 0,33 mmol) en diclorometano (2 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y la solución se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio enfriada con hielo, agua, ácido clorhídrico enfriado con hielo (1 M), agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo de 3:1 a 1:3 para producir el compuesto del título (44 mg, 17%) como un sólido blanco y como una mezcla 1:1 de dos diastereoisómeros. CLEM (m/z) 840,2, 842,0 [M+H], Tr = 3,75 min.

Compuesto 49.

[0535]

[0536] Se agitó una solución de éster 2,2,2-tricloroetílico de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-fercbutoxicarbonilamino-etil)quinolin-7-il]-vinil}-tetrahydro-piran-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]propionil}-hexahidropiridazina-3-carboxílico (42 mg, 0,05 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución acuosa enfriada con hielo de hidróxido de sodio (0,1 M, 0,5 ml, 0,05 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos. Se añadió más solución de hidróxido de sodio (0,1 M, 1,0 ml, 0,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 h. Se añadió más solución de hidróxido de sodio (0,1 M, 1,0 ml, 0,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 90 minutos. Se añadió ácido clorhídrico frío (1 M) para acidificar la mezcla a pH 2 y se evaporó el disolvente. El residuo se co-evaporó con tetrahidrofurano/tolueno (1:1, 3 x) y el residuo se trituró con éter dietílico (2 x) y el sólido resultante se secó para producir ácido (S)-1 -{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidropiran-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,05 mmol) como un sólido amarillo y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 710,3 [M+H], Tr = 2,80 min.

[0537] Una mezcla de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidro-piran-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0,05 mmol) en ácido clorhídrico (4 M en 1,4-dioxano, 2 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El disolvente se evaporó y el residuo se co-evaporó con éter dietílico (2 x) y el sólido resultante se secó para producir hidrocloruro de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-amino-etil)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidro-piran-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidropiridazin-3-carboxílico (0,05 mmol) como un sólido blanquecino y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros que se usó crudo en la siguiente reacción. CLEM (m/z) 610,1 [M+H], Tr = 1,60 min.

[0538] Una suspensión de clorhidrato de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-amino-etilo)-quinolin-7-il]-vinil}-tetrahidropiran-2-carboniloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo (0,05 mmol) en diclorometano (45 mL). a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de W,W-diisopropiletilamina (26 mg, 0,2 mmol) en diclorometano (5 mL) y la solución resultante se agitó a 0°C. Se añadió hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (38 mg, 0,1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos y luego a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y la solución se lavó con ácido clorhídrico enfriado con hielo (1 M) y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se trituró con éter dietílico y el residuo se secó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/acetona 2:1. El residuo se trituró con /so-hexanos/éter dietílico 1:1 y el sólido resultante se secó para proporcionar el compuesto del título (6,0 mg, 21%) como un sólido blanco y como una mezcla 1:1 de diastereoisómeros. CLEM (m/z) 592,2 [M+H], Tr = 2,51 min y (m/z) 592,2 [M+H], Tr = 2,61 min.

Ejemplos 50 y 51, Compuestos 50 y 51.

[0539]

Compuesto 50a. Éster bencílico del ácido tetrahidro-piran-3-carboxílico.

[0540]

[0541] Una solución enfriada (0°C) de ácido tetrahidro-piran-3-carboxílico (2,831 g, 21,752 mmol) en diclorometano (60 mL) y W,W-dimetilformamida (5 gotas) se trató con cloruro de oxalilo (2,0 ml, 23,927 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió alcohol bencílico (2,5 ml, 23,927 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h y reposo durante la noche, los volátiles se eliminaron a vacío y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para producir el compuesto del título (4,587 g, 96%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,58-1,88 (m, 3H), 2,03-2,13 (m, 1H), 2,62-2,72 (m, 1H), 3,47 (ddd, J = 11,4, 9,6, 3,4 Hz, 1H), 3,63 (dd, J = 11,4, 9,1 Hz, 1H), 3,85 (ap dt, J = 11,1,3,8 Hz, 1H), 4,06 (ddd, J = 11,4, 4,0, 1,6 Hz, 1H), 5,12, 5,17 (ABq, J^{a b} = 12,5 Hz, 2H), 7,31-7,46 (m, 5H).

Compuesto 50b. Éster bencílico de ácido 3-(1-hidroxi-etil)-tetrahidro-piran-3-carboxilato

[0542]

[0543] Una solución enfriada (-78°C) de W,W-diisopropilamina (4,7 ml, 33,316 mmol, se secó sobre hidruro de calcio) en tetrahidrofurano anhidro (60 mL) se trató con una solución de n-butil-litio en hexanos (12,5 ml, 31,234 mmol, 2,5 M). Después de agitar a -78°C durante 25 minutos, la mezcla se trató con una solución de éster bencílico del ácido tetrahidropiran-3-carboxílico (4,587 g, 20,823 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (20 mL). Después de agitar a -78°C durante 15 minutos, la mezcla se trató con acetaldehído (3,5 ml, 62,469 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 45 minutos, la reacción se inactivó a 0°C con ácido clorhídrico (2 M, 50 mL). La capa acuosa se saturó con cloruro de sodio y se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 100 g se eluyó con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 3:2 para proporcionar el compuesto del título (2,212 g, 40%) como un aceite amarillo y como una mezcla 3:1 de diastereoisómeros. c Le M (m/z) 287,0 [M+Na], Tr = 2,00 min.

Compuesto 50c. Éster bencílico del ácido 3-(1-trifluorometanosulfoniloxi-etil)-tetrahidro-piran-3-carboxílico [0544]

[0545] Una suspensión enfriada (-78°C) de hidruro de sodio (502,1 mg, 12,552 mmol, 60% en aceite mineral) en tetrahidrofurano anhidro (20 mL) se trató lentamente con una solución de éster bencílico del ácido 3-(1 -hidroxi-etil) tetrahidro-piran-3-carboxílico (2,212 g, 8,368 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (20 mL). La suspensión de color amarillo claro se agitó a -78°C durante 15 minutos y luego se trató con una solución de W-(5-cloro-2-piridil)bis(trifluorometanosulfonimida) (6,572 g, 16,736 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (20 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 3 h, se añadió más hidruro de sodio (502,1 mg, 12,552 mmol, 60% en aceite mineral). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió más hidruro de sodio (502,1 mg, 12,552 mmol, 60% en aceite mineral). Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la reacción se inactivó a -20°C con ácido clorhídrico (2 M, 50 mL). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron a vacío para proporcionar el compuesto del título en una mezcla que se usó sin purificación adicional. CLEM (m/z) 397,0 [M+H], Tr = 2,48 min.

Compuesto 50d. Éster bencílico del ácido 3-vinil-tetrahidro-piran-3-carboxílico

[0546]

[0547] Una solución de éster bencílico del ácido 3-(1-trifluorometanosulfoniloxi-etil)-tetrahidro-piran-3-carboxílico (8,368 mmol) en diclorometano (100 mL) se trató con 1,8-diazabiciclo[5,4.0]undec-7-eno (5,0 ml, 33,472 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2,5 h, los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un cartucho Isolute de 100 g eluido con un gradiente continuo de /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 4:1 para proporcionar el compuesto del título (809,5 mg, 39% en dos pasos) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,58-1,80 (m, 3H), 2,29-2,40 (m, 1H), 3,42-3,54 (m, 2H), 3,81 (ap dt, J = 10,5, 4,2 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 11,4, 1,8 Hz, 1H), 5,13 a 5,27 (m, 4H), 5,77 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H), 7,31­ 7,42 (m, 5H).

Compuesto 50e. Ácido 3-vinil-tetrahidro-piran-3-carboxílico

[0548]

[0549] Una solución de éster bencílico del ácido 3-vinil-tetrahidro-piran-3-carboxílico (809,5 mg, 3,286 mmol) en tetrahidrofurano/metanol/agua (25 mL, 2:2:1) con hidróxido de litio monohidrato (413,6 mg, 9,859 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió más hidróxido de litio monohidrato (413,6 mg 9,859 mmol). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se enfrió a 0°C y se inactivó con ácido clorhídrico (1 M). La capa acuosa se saturó con cloruro de sodio y se extrajo con diclorometano (3 x). Los orgánicos combinados se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 25 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 1:1 para proporcionar el compuesto del título crudo que se disolvió en éter dietílico. Los orgánicos se extrajeron con una solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa se acidificó con ácido clorhídrico (2 M) a pH ~2, saturada con cloruro de sodio y se extrajo con diclorometano (2 x) para proporcionar el compuesto del título (377,1 mg, 73%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 1,59-1,90 (m, 3H), 2,27-2,38 (m, 1H), 3,39-3,55 (m, 2H), 3,87 (ap dt, J = 11,2, 4,0 Hz, 1H), 4,26 (dd, J = 11,4, 2,0 Hz, 1H), 5,22­ 5,32 (m, 2H), 5,79 (dd, J = 17,8, 10,7 Hz, 1H).

Compuesto 50f. Ácido 3-((E)-2-{2-[(R)-1 -({(S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-tetrahidro-piran-3-carboxílico

[0550]

[0551] Una solución de (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-ilo)-etil]-amida (600 mg, 1,122 mmol), ácido 3-vinil-tetrahidro-piran-3-carboxílico (175,3 mg, 1,122 mmol), tri(o-tolil)fosfina (68,3 mg, 0,224 mmol) y trietilamina (0,47 ml, 3,366 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) se desgasificó burbujeando nitrógeno durante 5 minutos, luego se calentó a 50°C y se trató con tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (102,7 mg, 0,112 mmol). Después de agitar a 100°C durante 45 minutos, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de un lecho corto de Celite, que se aclaró con acetato de etilo. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo como una espuma naranja que se usó sin purificación adicional. CLEM (m/z) 610,2 [M+H], Tr = 1,97 min.

Compuestos 50 y 51.

[0552]

[0553] Se añadió una solución de ácido 3-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-tetrahidro-piran-3-carboxílico crudo (1,122 mmol) en diclorometano seco (20 mL) mediante una bomba de jeringa a una solución de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (772,6 mg, 2,244 mmol), 4-dimetilaminopiridina (548,2 mg, 4,488 mmol) en diclorometano seco (350 mL) que contiene 4 Á tamices moleculares durante 4 h. Una vez finalizada la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días, luego se filtró y los volátiles se eliminaron parcialmente al vacío. Los orgánicos se lavaron con tampón de citrato de pH 4, una solución saturada de bicarbonato de sodio y se filtraron en un separador de fases. Los volátiles se eliminaron a vacío y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetona 1:0 a 2:3 para proporcionar dos fracciones que se purificó adicionalmente por preparativa inversa HPLC eluyendo con agua/acetonitrilo 95:5 a 0:1 para proporcionar dos isómeros separados, individuales 1 y 2.

[0554] El Compuesto 50 (que eluye primero) Diastereómero 1 (50,1 mg, 7,5%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,0 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,47-1,72 (m, 9H), 1,73-1,88 (m, 2H), 1,91 -2,02 (m, 1H), 2,11 -2,32 (m, 2H), 2,35-2,45 (m, 1H), 2,65-2,78 (m, 1H), 3,46-3,67 (m, 3H), 3,84 -3,94 (m, 1H), 4,39-4,54 (m, 2H), 5,03-5,16 (m, 2H), 5,34 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 6,23 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,5, 1,3 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 592,2 [M+H], Tr = 2,31 min.

[0555] El Compuesto 51 (que eluye segundo) Diastereómero 2 (28,8 mg, 4,3%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,65 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,68-1,79 (m, 3H), 1,88-2,00 (m, 2H), 2,12-2,29 (m, 2H), 2,55-2,76 (m, 2H), 3,49-3,67 (m, 3H), 3,84-3,93 (m, 1H), 4,29 (dd, J = 11,2, 1,6 Hz, 1H), 4,39-4,48 (m, 1H), 5,08 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,20 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 592,1 [M+H], Tr = 2,27 min.

R EFER EN C IA E je m p lo 52, C o m p u e s to 52.

[0556]

Compuesto 52a. Ácido (S)-ciclobutil-hidroxi-acético

[0557]

[0558] Una solución enfriada (0°C) de ciclobutil-L-glicina (572,8 mg, 4,435 mmol) en ácido sulfúrico acuoso (0,5 M, 18 mL) se trató con una solución de nitrito de sodio (1,836 g, 26,610 mmol) en agua (10 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 19 h, la solución se saturó con cloruro de sodio y se extrajo con tetrahidrofurano (3 x). Los orgánicos se filtraron a través de una frita hidrófoba y los volátiles se eliminaron al vacío. A continuación, el residuo sólido se extrajo con acetato de etilo, los orgánicos se filtraron a través de una frita hidrófoba y los volátiles se eliminaron al vacío para producir el compuesto del título (235,9 mg, 41%) como una goma naranja que se usó sin purificación adicional. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,76-2,23 (m, 6H), 2,66-2,82 (m, 1H), 4,18 (d, J = 5,8 Hz, 1H).

Compuesto 52b. Ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-ciclobutil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida

[0559]

[0560] Una solución enfriada (0°C) de éster ferc-butílico del ácido (S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilcarbamoil]-tetrahidro-piridazin-1-il}-1-metil-2-oxo-etil)-carbámico 53a (1,065 g, 1,994 mmol) en diclorometano (15 mL) se trató con una solución de cloruro de hidrógeno (3 ml, 11,964 mmol, 4 M en 1,4-dioxano). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, una solución de cloruro de hidrógeno (3 ml, 11,964 mmol, 4 M en 1,4-dioxano) se añadió. Después de agitar durante 2 h, los volátiles se eliminaron al vacío. El agua residual se eliminó azeotrópicamente con tolueno para proporcionar ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico hidrocloruro de [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida como un sólido blanco que luego se combinó con ácido (S)-ciclobutil-hidroxi-acético (235,9 mg, 1,812 mmol) y diclorometano seco (20 mL). Esta suspensión se enfrió a 0°C y posteriormente se trató con W,W-diisopropiletilamina (0,95 ml, 5,436 mmol) y hexafluorofosfato de (benzotriazol-1 -iloxi) tris(dimetilamino)fosfonio (961,7 mg, 2,174 mmol). La reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente. Después de agitar durante 17 h, la reacción se inactivó a 0°C con ácido clorhídrico (2 M). La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se lavaron con una solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa básica se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separador de fases y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice utilizando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetona 1:0 a 1:1 para proporcionar el compuesto del título (427,5 mg, 39%) como una espuma naranja. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 1,40 (d, J = 8,0 Hz, 3H), 1,59 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,63-2,10 (m, 10H), 2,21-2,32 (m, 1H), 2,58-2,78 (m, 2H), 3,41-3,54 (m, 1H), 4,01 (ap t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 5,28 (ap penteto, J = 6,9 Hz, 1H), 5,41 (ap penteto, J = 8,0 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1 h ), 7,40 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H). CLEM (m/z) 547,0, 549,0 [M+H], Tr = 2,39 min.

Compuesto 52c. Ácido (E)-4-{2-[(R)-1 -({(S)-1 -[(S)-2-((S)-2-Ciclobutil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0561]

[0562] Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-ciclobutil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida (427,5 mg, 0,782 mmol), ácido 2,2-dimetil-but-3-enoico (89,3 mg, 0,782 mmol), tri(o-tolil)fosfina (47,6 mg, 0,156 mmol) y trietilamina (0,33 mL, 2,346 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) se desgasificó burbujeando nitrógeno a través durante 5 minutos, luego se calentó a 50°C y se trató con tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (71,6 mg, 0,078 mmol). Después de agitar a 100°C durante 1,5 h, se añadieron tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (71,6 mg, 0,078 mmol) y tri(o-tolil)fosfina (47,6 mg, 0,156 mmol). Después de agitar durante 40 minutos a 100°C, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de un lecho corto de Celite, que se aclaró con acetato de etilo. Los volátiles se eliminaron al vacío para proporcionar el compuesto del título crudo como una espuma naranja que se usó sin purificación adicional. CLEM (m/z) 580,2 [M+H], Tr = 2,01 min.

Compuesto 52.

[0563]

[0564] Una solución de ácido (E)-4-{2-[(R)-1 -({(S)-1 -[(S)-2-((S)-2-ciclobutil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidropiridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico crudo (0,782 mmol) en diclorometano seco (20 mL) mediante una bomba de jeringa a una solución de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (538,4 mg, 1,564 mmol), 4-dimetilaminopiridina (382,1 mg, 3,128 mmol) en diclorometano seco (280 mL) que contiene 4 Á tamices moleculares durante 4 h. Una vez finalizada la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se filtró y los volátiles se eliminaron parcialmente al vacío. Los orgánicos se lavaron con tampón de citrato de pH 4, una solución saturada de bicarbonato de sodio y se filtraron en un separador de fases. Los volátiles se eliminaron a vacío y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 50 g eluido con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetona 1:0 a 1:1 y luego por HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con un continuo gradiente de agua/acetonitrilo 95:5 a 0:1 para producir el compuesto del título (48,6 mg, 11%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,43 (s, 3H), 1,47-1,75 (m, 12H), 1,89-2,12 (m, 6H), 2,24-2,33 (m, 1H), 2,69 (ap dt, J = 12,9, 3,1 Hz, 1H), 2,84 (ap. sexteto, J = 8,0 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 4,38-4,47 (m, 1H), 5,10 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,81 -7,87 (m, 2H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 562,1 [M+H], Tr = 2,68 min.

R EFER EN C IA E je m p lo 53, C o m p u e s to 53.

[0565]

Compuesto 53a. Éster ferc-butílico de ácido ((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilcarbamoil]-tetrahidropiridazin-1 -il}-1 -metil-2-oxo-etil)-carbámico

[0566]

[0567] Se trató una solución enfriada (0°C) de éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-((S)-2-fercbutoxicarbonilamino-propionil)-hexahidropiridazina-3-carboxílico (3,007 g, 6,948 mmol) en tetrahidrofurano/agua (60 ml, 5:1) con hidróxido de litio monohidrato (874,4 mg, 20,844 mmol). Después de agitar a 0°C durante 40 minutos, la reacción se inactivó con ácido clorhídrico (1 M, 50 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío. El tricloretanol residual se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x) para proporcionar ácido (S)-1 -((S)-2-fercbutoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazina-3-carboxílico como un sólido blanco que después se combina con clorhidrato de (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilamina (1,998 g, 6,948 mmol) y se suspende en acetonitrilo anhidro (60 mL) y tetrahidrofurano (10 mL). La suspensión se enfrió a 0°C y posteriormente se trató con W,W-diisopropiletilamina (6 ml, 34,740 mmol) y clorhidrato de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]hexafluorofosfato de 3-óxido de piridinio (3,699 g, 9,727 mmol). Después de calentar lentamente a temperatura ambiente y agitar durante 16 h, la reacción se inactivó a 0°C con ácido clorhídrico (1 M, 70 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se lavaron con una solución saturada de bicarbonato de sodio, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Isolute de 100 g se eluyó con un gradiente continuo de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 1:4 para dar el compuesto del título (3,702 g, 99%) como una espuma blanca. 1H RMN (300 MHz, CDCh) 5 1,38 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,47-1,55 (m, 2H), 1,58 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,60-1,78 (m, 2H), 2,22-2,31 (m, 1H), 2,65-2,78 (m, 1H), 3,39-3,52 (m, 1H), 4,55 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 5,18-5,34 (m, 2H), 5,36-5,45 (m, 1H), 7,37 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H). CLEM (m/z) 536,1,537,1 [M+H], Tr = 2,58 min.

Compuesto 53b. Ácido (S)-1 -[(S)-2-(2-ciclopropil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida

[0568]

[0569] Éster ferc-butílico del ácido ((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilcarbamoílo]-tetrahidro-piridazin-1-il} 1-metil-2-oxoetil)-carbámico (1,07 g, 2,00 mmol) se suspendió en diclorometano (20 mL) y la mezcla se enfrió a 0°C con agitación. Se añadió cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (11 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 90 minutos y luego se evaporó. El agua residual se separó azeotrópicamente con tolueno y el residuo se suspendió en diclorometano (20 mL) y se añadió ácido ciclopropilhidroxiacético (255 mg, 2,20 mmol). La mezcla se enfrió a 0°C con agitación y W,W-diisopropiletilamina (775 mg, 1,05 ml, 6,00 mmol) seguido por (benzotriazol-1-iloxi) tris(dimetilamino)fosfonio (1,06 g, 2,40 mmol). Se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante 18 h. Se añadió ácido clorhídrico 1 M y la capa orgánica se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio, se pasó a través de una frita hidrófoba y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/metanol 1:0 a 9:1 para producir el compuesto del título (328 mg) como una espuma blanca. Los extractos acuosos originales se volvieron a extraer con diclorometano/metanol (9:1,2 x) y los extractos orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/metanol 1:0 a 17:3 para producir el compuesto del título (378 mg) como una espuma blanca. Se combinaron las dos espumas (706 mg, 66%).

1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,46-0,73 (m, 4H), 1,04-1,18 (m, 1H), 1,49-1,59 (m, 6H), 1,53-1,78 (m, 2H), 1,95-2,04 (m, 1H), 2,25-2,34 (m, 1H), 2,64-2,82 (m, 1H), 3,44-3,55 (m, 2H), 3,60-3,84 (m, 1H), 4,50-4,60 (m, 1H), 5,23-5,33 (m, 1H), 5,48-5,55 (m, 1H), 7,36-7,41 (m, 1H), 7,62-7,73 (m, 2H), 8,13-8,19 (m, 2H), 8,47-8,51 (m, 1H). CLEM (m/z) [M+H] 532,0, 534,0 Tr = 2,07 min. CLEM (m/z) 532,0, 533,9 [M+H], Tr = 2,12 min.

Compuesto 53.

[0570]

[0571] Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-(2-ciclopropil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida (592 mg, 1,11 mmol), ácido 5-vinil[ 1,3]dioxano-5-carboxílico (176 mg, 1,11 mmol), trietilamina (343 mg, 472 ml, 3,39 mmol) y tri(o-tolil)fosfina (67 mg, 0,22 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos y luego se calentó a 50°C bajo nitrógeno con agitación. Se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (101 mg, 0,11 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 20 minutos y luego se dejó enfriar a temperatura ambiente. La suspensión se filtró a través de Celite y el filtrado se evaporó para dar ácido 5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-(2-ciclopropil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-[1,3]dioxano-5-carboxílico.

[0572] A una mezcla agitada de 4Á tamices moleculares en polvo, anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (764 mg, 2,22 mmol) y 4-(dimetilamino)piridina (542 mg, 4,44 mmol) en diclorometano (375 mL) se añadió una solución de 5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-(2-ciclopropil-2-hidroxi-acetilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-[1,3]dioxano-5-carboxílico crudo en diclorometano (20 mL) durante 5 h mediante bomba de jeringa. El matraz que originalmente contenía el ácido crudo se lavó con más diclorometano (5 mL) y esto se añadió a la mezcla de reacción durante aprox. 5 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 16 h y después se filtró a través de Celite y se evaporó a -100 ml, se lavó sucesivamente con solución saturada de cloruro amónico, solución de bicarbonato de sodio saturada enfriada con hielo, salmuera saturada y después se filtró a través de una frita hidrófoba. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de /'so-hexanos/acetona 1:0 a 1:1 y luego mediante HPLC preparativa de fase inversa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:9 a 3:2 modificado con 0,1% ácido fórmico para dar el compuesto del título (39 mg, 6%) como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 50,52-0,76 (m, 4H), 1,30-1,40 (m, 1H), 1,49-1,76 (m, 2H), 1,60 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,64 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,93-2,02 (m, 1H), 2,21-2,30 (m, 1H), 2,66-2,77 (m, 1H), 3,59-3,66 (m, 1H), 3,85, 3,96 (ABq, J^{a b} = 11,4 Hz, 2H), 4,41-4,51 (m, 2H), 4,63-4,70 (m, 1H), 4,82 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 4,98 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,04-5,13 (m, 2H), 5,83­ 5,91 (m, 1H), 6,17 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,86 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 592,2 [M+H], Tr = 2,04 min.

R EFER EN C IA E je m p lo 54, C o m p u e s to 54.

[0573]

Compuesto 54a. Ácido (2S, 3S)-2-hidroxi-3-metoxi-butírico

[0574]

[0575] Se preparó una solución de L-a/o-treonina metílico (900 mg, 6,75 mmol) en ácido sulfúrico 1 M (10 mL) y se enfrió a 0°C, antes de agregar una solución de nitrito de sodio (693 mg, 10 mmol) en agua (2,25 mL) gota a gota durante 10 minutos. La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 15 h. Se añadió cloruro de amonio sólido para saturar la solución, que luego se extrajo con éter dietílico (3 x 25 mL). Los extractos se combinaron y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron para dar el producto del título (193 mg, 21%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,29 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 3,48 (s, 3H), 3,71-3,81 (m, 1H), 4,35 (d, J = 4,7 Hz, 1H).

Compuesto 54b. Ácido (S)-1 -[(S)-2-((2S,3S)-2-hidroxi-3-metoxi-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [(R)-1 -(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida

[0576]

[0577] Una solución de éster ferc-butílico del ácido ((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilcarbamoil]-tetrahidro-piridazin-1-il}-1-metil-2-oxo-etil)-carbámico (838 mg, 1,44 mmol) en diclorometano (20 mL) se trató con cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4 M, 1,44 ml, 5,76 mmol) y se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La solución se evaporó hasta sequedad. El residuo se disolvió en diclorometano (20 mL) y se añadió ácido (2S,3S)-2-hidroxi-3-metoxi-butírico (193 mg, 1,44 mmol) seguido de W,W-diisopropiletilamina (1,0 ml, 5,76 mmol). y hexafluorofosfato de 0-(benzotriazol-1-il)-W,W,W',W'-tetrametiluronio (819 mg, 2,16 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas y luego se evaporó hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetona/acetato de etilo 1:9 a 1:1 para producir el compuesto del título (243 mg, 31%) como una goma blanca. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 5 1,14 (d, J = 6,2 Hz, 3H), 1,33-1,50 (m, 6H), 1,58 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 2,20-2,30 (m, 1H), 2,66-2,79 (m, 1H), 3,26-3,63 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 3,90 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 4,46-4,56 (m, 1H), 5,20-5,31 (m, 1H), 5,36-5,49 (m, 1H), 7,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 -7,70 (m, 2H), 8,15 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,41 (s, 1H). CLEM (m/z) 550,0, 552,0 [M+H], Tr = 2,05 min. Compuesto 54c. Ácido (E)-4-{2-[(R)-1 -({(S)-1 -[(S)-2-((2S,3S)-2-hidroxi-3-metoxi-butirilamino)-propionilo]-hexahidropiridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico

[0578]

[0579] Una solución de (S)-1-[(S)-2-((2S,3S)-2-hidroxi-3-metoxi-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico [(R)-1 -(7-bromoquinolina)-2-il)-etil]-amida (243 mg, 0,44 mmol) y ácido 2,2-dimetilbut-3-enoico (50 mg, 0,44 mmol) en 1,4-dioxano y se preparó trietilamina (183 pl, 1,32 mmol) se añadió. La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno durante 5 minutos y luego se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (40 mg, 0,044 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100°C bajo una atmósfera de nitrógeno durante 1,5 h. La reacción se filtró a través de hyflo supercel, lavando con acetato de etilo. El filtrado se evaporó al vacío para producir el compuesto del título crudo como una goma amarilla. CLEM (m/z) 584,2 [M+H], Tr = 1,77 min.

Compuesto 54.

[0580]

[0581] Se preparó una solución de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (389 mg, 1,13 mmol) en diclorometano anhidro (160 mL) y 4 Á tamices moleculares y 4-(dimetilamino)piridina (275 mg, 2,25 mmol). Una solución de ácido (E)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((2S,3S)-2-hidroxi-3-metoxi-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2,2-dimetil-but-3-enoico crudo (aprox. 0,44 mmol) en diclorometano (11 mL) durante 5,5 h mediante una bomba de jeringa. Una vez finalizada la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos más a temperatura ambiente. La solución se filtró y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (70 mL). Los orgánicos se filtraron a través de un cartucho separador de fases y se evaporaron para dar una goma amarilla (0,97 g) que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/acetona 1:0 a 4:1 para producir una goma incolora (133 mg) que se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo acetonitrilo/agua 9:11 para producir el producto del título (15,5 mg, 6%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,23 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,44 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,58 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,61 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,34­ 1,84 (m, 2H), 1,91-2,01 (m, 2H), 2,25-2,36 (m, 1H), 2,63-2,77 (m, 1H), 3,43 (s, 3H), 2,54-3,67 (m, 1H), 2,73-3,83 (m, 1H), 4,40-4,50 (m, 1H), 4.07-5,16 (m, 1H), 5,56 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 5,86 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,45, 6,60 (ABq, J^{a b} = 16,1 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,59 (m, 1H), 7,84 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 566,1 [M+H], Tr = 2,32 min.

REF ERENCIA Ejemplo 55, el Compuesto 55.

[0582]

Compuesto 55a. Éster metílico del ácido (R)-2-hidroximet¡l-2-met¡l-but-3-eno¡co

[0583]

[0584] Una solución de ácido (R)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoico (600 mg, 4,2 mmol) en diclorometano (40 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Se añadió tribromuro de boro (1 M en diclorometano, 16,8 ml, 16,8 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 90 minutos. Se añadió cuidadosamente metanol (20 mL) y la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 3:1 a 1:1 para producir el compuesto del título (540 mg, 90%) como un aceite transparente.

1H RMN (300 MHz, CDCla) 51,35 (s, 3H), 2,33 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,75-3,80 (m, 1H), 5,21 (dd, J = 17,4, 0,5 Hz, 1H), 5,24 (dd, J = 10,7, 0,5 Hz, 1H), 5,98 (dd, J = 17,4, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 145,1 [M+H], Tr = 1,16 min.

Compuesto 55b. Éster metílico del ácido (R)-2-difluorometoximetil-2-metil-but-3-enoico

[0585]

[0586] Una solución de éster metílico del ácido (R)-2-hidroximetil-2-metil-but-3-enoico (288 mg, 2,0 mmol) en acetonitrilo (8 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadió yoduro de cobre (I) (80 mg, 0,4 mmol) seguido de ácido difluorofluorosulfonilacético (356 mg, 0,2 ml, 2,0 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 10:1 a 5:1 para producir el compuesto del título (195 mg, 50%) como un aceite transparente. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,40 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,86 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,24 (dd, J = 10,9 Hz, 1H), 5,95 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H), 6,22 (t, J = 74,3 Hz, 1H).

Compuesto 55c. Ácido (R)-2-difluorometoximetil-2-metil-but-3-enoico

[0587]

[0588] Una solución de éster metílico del ácido (R)-2-difluorometoximetil-2-metil-but-3-enoico (159 mg, 0,8 mmol) en tetrahidrofurano (6 mL) se agitó a 5°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (100 mg, 2,4 mmol) en agua (1,5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 5°C durante 1 h y luego a temperatura ambiente durante 20 h. Se añadió agua y la mezcla se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico (2 M) y la mezcla se extrajo con éter dietílico. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título (133 mg, 92%) como un aceite transparente. 1H RMN (300 MHz, afó-DMSO) 5 1,24 (s, 3H), 3,80 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,02 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 5,19 (dd, J = 10,6 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,91 (dd, J = 17,6, 10,6 Hz, 1H), 6,68 (t, J = 75,6 Hz, 1H), 12,5-13,0 (ancho s, 1H). CLEM (m/z) 179,1 [M-H], Tr = 1,79 min.

Compuesto 55.

[0589]

[0590] Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida (160 mg, 0,3 mmol), ácido (R)-2-difluorometoximetil-2-metil-but-3-enoico (54 mg, 0,3 mmol), tri(o-tolil)fosfina (18 mg, 0,06 mmol) y trietilamina (91 mg, 0,125 ml, 0,9 mmol) en 1,4-dioxano (6 mL) se agitó a 50°C bajo nitrógeno. Se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (27 mg, 0,03 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 40 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y la mezcla se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir ácido (E)-(R)-2-difluorometoximetil-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2-metil-but-3-enoico (0,3 mmol) que se utilizó en el siguiente paso. CLEM (m/z) 634,2 [M+H], Tr = 2,04 min.

[0591] Se preparó una mezcla de 4 Á tamices moleculares en polvo (200 mg), 4-dimetilaminopiridina (146 mg, 1,2 mmol) y anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (206 mg, 0,6 mmol) en diclorometano (200 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Una solución de ácido (E)-(R)-2-difluorometoximetil-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2-metil-but-3-enoico (0,3 mmol) en diclorometano (4 mL) mediante una bomba de jeringa durante 4 h y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se evaporó hasta un volumen de aproximadamente 50 ml. La solución se lavó con solución saturada de cloruro amónico enfriada con hielo, saturado enfriado con hielo una solución de carbonato de hidrógeno de sodio y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:20:1 y después por HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua 1:4 a 1:0 para proporcionar el compuesto de título (21 mg, 11 %) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDaOD) 5 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,66 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,66-1,70 (m, 2H), 1,93-1,98 (m, 1H), 2,13-2,26 (m, 2H), 2,64-2,73 (m, 1H), 3,55-3,67 (m, 1H), 3,94 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,26 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,40-4,45 (m, 1H), 5,04 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,08 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,45 (t, J = 75,4 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,66 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,80 (ancho s, 1H), 7,86 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 616,2 [M+H], Tr = 2,58 min.

REFERENCIA Ejemplo 56, Compuesto 56.

[0592]

Compuesto 56a. Ácido (R)-2-metil-2-trifluorometoximetil-but-3-enoico

[0593]

[0594] Bis(trifluorometilsulfonil)imida de zinc (750 mg, 1,2 mmol) y (1-(trifluorometil)-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona (758 mg, 2,4 mmol) a una solución agitada de éster metílico del ácido (R)-2-hidroximetil-2-metil-but-3-enoico (288 mg, 2,0 mmol) en deuterocloroformo seco (4 mL) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno en un matraz sellado durante 5 días. La suspensión resultante se diluyó con diclorometano y el sobrenadante se separó y evaporó. Se añadió diclorometano (5 mL) al residuo y la solución sobrenadante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 10:1 a 5:1 para producir éster metílico del ácido (R)-2-metil-2-trifluorometoximetil-but-3-enoico crudo (98 mg) como un aceite transparente que se usó en el siguiente paso.

[0595] Una solución de (R)-2-metil-2-trifluorometoximetilo-but-3-enoico crudo (98 mg) en tetrahidrofurano (4 mL) se agitó a 5°C bajo nitrógeno. Se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (63 mg, 1,5 mmol) en agua (1 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 5°C durante 1 h y luego a temperatura ambiente durante 3 días. Se añadió agua y la mezcla se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico (2 M) y la mezcla se extrajo con éter dietílico. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título crudo (95 mg) como un aceite transparente que se usó en el siguiente paso. CLEM (m/z) 197,1 [M-H], Tr = 2,16 min.

Compuesto 56.

[0596]

[0597] Una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-amida (212 mg, 0,4 mmol), ácido (R)-2-metil-2-trifluorometoximetil-but-3-enoico crudo (95 mg), tri(o-tolil)fosfina (24 mg, 0,08 mmol) y trietilamina (121 mg, 0,17 ml, 1,2 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) se agitó a 50°C bajo nitrógeno. Se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (36 mg, 0,04 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 40 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y la mezcla se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir ácido (E)-(R)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2-metil-2-trifluorometoximetil-but-3-enoico crudo que se utilizó en el siguiente paso. CLEM (m/z) 652,1 [M+H], Tr = 2,17 min.

[0598] Se preparó una mezcla de 4 Á tamices moleculares en polvo (200 mg), 4-dimetilaminopiridina (195 mg, 1,6 mmol) y anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (275 mg, 0,8 mmol) en diclorometano (200 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Una solución de ácido (E)-(R)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-2-metil-2-trifluorometoximetil-but-3-enoico en diclorometano (5 mL) se añadió mediante una bomba de jeringa durante 4 h y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se evaporó hasta un volumen de aproximadamente 50 ml. La solución se lavó con una solución saturada de cloruro de amonio enfriada con hielo, una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio enfriada con hielo y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:2 a 0:1 y luego mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con un gradiente de acetonitrilo/agua 1:4 a 1:0 para proporcionar el título. Compuesto (4,3 mg, 0,3% en 4 etapas) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,63 (s, 3H), 1,66 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,66-1,70 (m, 2H), 1,93-1,97 (m, 1H), 2,14-2,27 (m, 2H), 2,64-2,73 (m, 1H), 3,58-3,67 (m, 1H), 4,10 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,37-4,42 (m, 1H), 4,45 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,03 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,09 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,23 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,82 (ancho s, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 634,1 [M+H], Tr = 2,85 min.

Ejemplo 57. Compuesto 57.

[0599]

Compuesto 57a. 6-Nitrometil-[1,4]dioxepan-6-ol

[0600]

[0601] A sulfato de magnesio (2,05 g, 17,0 mmol) bajo nitrógeno se añadió nitrometano (4 mL) y la mezcla se agitó vigorosamente. Se añadió una solución de [ 1,4]ioxepan-6-ona (899 mg, 7,74 mmol, preparada como se describe en la Solicitud Internacional PCT 2010139717) en nitrometano (2 mL) se añadió y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Una solución de 2,8,9-triisopropil-2,5,8,9-tetraaza-1 -fosfabiciclo[3,3,3]undecano (231 mg, 250 pl, 0,77 mmol) en nitrometano (2 mL) se añadió y la mezcla se calentó a 40°C durante 19 h. La mezcla de reacción enfriada se cargó directamente sobre sílice y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 1:1 a 1:3 para dar el compuesto del título (798 mg, 58%) en forma de un aceite amarillo.

1H RMN (300 MHz, CDCla) 53,27 (s, 1H), 3,77-3,93 (m, 4H), 3,85 (s, 4H), 4,58 (s, 2H).

Compuesto 57b. 6-Nitrometileno-[1,4]dioxepano

[0602]

[0603] Una mezcla agitada de 6-nitrometil-[1,4]dioxepan-6-ol (0,74 g, 4,18 mmol) y trietilamina (1,86 g, 2,56 ml, 18,4 mmol) en diclorometano (20 mL), bajo nitrógeno, se enfrió a -78°C y se añadió gota a gota cloruro de metanosulfonilo (1,43 g, 970 pl, 12,5 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos y luego se inactivó con una solución saturada de cloruro de amonio. La mezcla se retiró del baño de enfriamiento y se dejó calentar a temperatura ambiente. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de pentano/éter dietílico de 3:1 a 1:1 para dar el compuesto del título (512 mg, 77%) como un aceite amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 53,81-3,90 (m, 4H), 4,36 (d, J = 0,5 Hz, 2H), 5,04 (d, J = 2,5 Hz, 2H), 7,02 (t, J = 2,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 182,1,0 [M+Na], Tr = 1,04 min.

Compuesto 57c. 6-nitrometil-6-vinil-[1,4]dioxepano

[0604]

[0605] Una mezcla de tolueno (13 mL) y agua (3,25 mL) se desoxigenó burbujeando nitrógeno a través durante 20 minutos. Luego se añadió a 6-nitrometileno-[1,4]dioxepano (512 mg, 3,22 mmol). Se añadieron 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftaleno (218 mg, 0,35 mmol) y viniltrifluoroborato de potasio (1,73 g, 12,9 mmol) y la mezcla se desoxigenó burbujeando nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió bis(1,5-ciclooctadieno)rodio(l) tetrafluoroborato (131 mg, 0,32 mmol) y la mezcla de reacción se agitó y calentó a reflujo bajo nitrógeno durante 4,5 h. Se dejó enfriar la mezcla y se repartió entre éter dietílico y agua. La capa acuosa se separó y se extrajo con éter dietílico y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/éter dietílico de 3:1 a 13:7 para dar el compuesto del título (155 mg, 26%) en forma de un aceite marrón pálido. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 53,77-3,93 (m, 8H), 4,64 (s, 2H), 5,22 (d, J = 17,9 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 17,8, 11,2 Hz, 1H). CLEM (m/z) 210,1 [M+Na], Tr = 1,51 min.

Compuesto 57d. Ácido 6-vinil-[1,4]dioxepano-6-carboxílico

[0606]

o o

[0607] A una solución agitada de 6-nitrometil-6-vinil-[1,4]dioxepano (214 mg, 1,14 mmol) en N,N-dimetilformamida (5 mL) bajo nitrógeno, se añadió ácido acético (684 mg, 652 ml, 11,4 mmol) y nitrito de sodio (237 mg, 3,43 mmol). La mezcla se calentó a 40°C durante 23 h y se dejó enfriar. La mezcla se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico (2 M) y la capa acuosa se extrajo con éter dietílico (3 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se evaporaron. La N,N-dimetilformamida residual se separó azeotrópicamente con tolueno para dar el compuesto del título (79 mg, 40%) como una goma amarilla. La capa acuosa original se saturó con cloruro de sodio y se extrajo con éter dietílico (3 x) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se evaporaron. La N,N-dimetilformamida residual se separó azeotrópicamente con tolueno para dar el compuesto del título (22 mg, 11%) como una goma amarilla. Los dos gomas finalmente se combinaron (101 mg, 51%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 53,76­ 3,93 (m, 4H), 3,88 (d, J = 12,5 Hz, 2H), 4,35 (d, J = 12,7 Hz, 2H), 5,26 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 5,79 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H). CLEM (m/z) 195,2 [M+Na], Tr = 0,96 min.

Compuesto 57e. Ácido 6-((E)-2-{2-[(R)-1 -({(S)-1 -[(S)-2-((S)-2-Hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-[1,4]dioxepano-6-carboxílico

[0608]

[0609] Una mezcla de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico [(R)-1-(7-bromoquinolin-2-il)-etil]-amida (68 mg, 0,128 mmol), ácido 6-vinil-[1,4]dioxepano-6-carboxílico (22 mg, 0,128 mmol), trietilamina (39 mg, 54 ml, 0,384 mmol) y tri(o-tolil)fosfina (8 mg, 0,026 mmol) en 1,4-dioxano (2 mL) se desoxigenó burbujeando nitrógeno durante 5 minutos y luego se calentó a 50°C bajo nitrógeno con agitación. Se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (12 mg, 0,013 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 40 minutos y luego se dejó enfriar. La suspensión se filtró y el filtrado se evaporó para dar el compuesto del título crudo que se usó directamente en el siguiente paso. CLEM (m/z) 626,2 [M+H], Tr = 1,67 min.

Compuesto 57.

[0610]

[0611] A una mezcla agitada de 4 Á tamices moleculares en polvo (~ 1 g), 2-metil-6-anhídrido nitrobenzoico (88 mg, 0,256 mmol) y 4-(dimetilamino)-piridina (63 mg, 0,512 mmol) en diclorometano (38 mL), bajo nitrógeno, se agregó una solución de ácido 6-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S))-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-[1,4]dioxepano-6-carboxílico (0,128 mmol) en diclorometano (5 mL) durante 2,5 h mediante una bomba de jeringa. El matraz que originalmente contenía el ácido crudo se lavó con diclorometano (1 mL) y se añadió a la mezcla de reacción durante aprox. 10 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora y luego se filtró a través de Celite y se lavó sucesivamente con una solución saturada de cloruro de amonio enfriada con hielo, una solución saturada de bicarbonato de sodio enfriada con hielo, salmuera saturada y luego se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 1:9 a 7:3 que contenía ácido fórmico al 0,1%, para dar, después de la trituración con éter dietílico, el compuesto del título (6,5 mg, 8% en 2 pasos) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDaOD) 5 1,04 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,08 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,53-1,73 (m, 2H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,66 (d, J = 7,4 Hz, 3H), 1,90-2,00 (m, 1H), 2,10-2,28 (m, 2H), 2,63-2,75 (m, 1H), 3,57-3,65 (m, 1H), 3,76-3,91 (m, 5 H), 4,13 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 4,38-4,46 (m, 1H), 4,53 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 5,07 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,76-5,86 (m, 1H), 6,30 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,68-7,73 (m, 2H), 7,85 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,19 (ancho s, 1H), 8,25 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 608,2 [M+H], Tr = 2,12 min.

REFERENCIA Ejemplo 58, Compuesto 58.

[0612]

Compuesto 58a. (S)-4-Isopropil-3-((S)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoil)-oxazolidin-2-ona

[0613]

[0614] A una solución de (S)-4-isopropil-3-((E)-2-metil-but-2-enoil)-oxazolidin-2-ona (preparada de acuerdo con el método informado en el Ejemplo 29c pero usando el enantiómero opuesto de la oxazolidinona), (4,44 g, 21 mmol), en tolueno anhidro (40 mL) bajo nitrógeno a -78°C se añadió gota a gota una solución de bis(trimetilsilil)amida de sodio en tolueno (0,6 M, 54 ml, 32 mmol). Cuando se completó la adición, la mezcla de reacción se dejó agitar a -78°C durante otros 30 minutos. Se añadió lentamente clorometilmetiléter (3,38 g, 42 mmol). Se mantuvo la agitación a -60°C durante 30 minutos y luego durante 1 h mientras se dejaba que la temperatura subiera a 0°C. Se añadió una solución saturada de cloruro de amonio (230 mL) y la mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 10 minutos. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se filtraron. Se evaporó el filtrado. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage KP-Sil de 100 g eluyendo con un gradiente de /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 9:1 para dar el producto del título (2,55 g, 48%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 50,80-1,00 (m, 6H), 1,50 (s, 3H), 2,25-2,45 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,46 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,16-4,23 (m, 2H), 4,28 (apt, J = 8,2 Hz, 1H), 4,45-4,60 (m, 1H), 5,01 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 6,19 (dd, J = 17,6, 10,7 Hz, 1H). CLEM (m/z) 255,3 [M+H], Tr = 2,58 min.

Compuesto 58b. Ácido (S)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoico

[0615]

[0616] A una solución agitada de (S)-4-isopropil-3-((R)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoil)-oxazolidin-2-ona (1,5 g, 5,87 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) y agua (15 mL) a 0°C, se le añadió peróxido de hidrógeno (solución al 30%, 3 ml, 29,35 mmol) e hidróxido de litio monohidrato (0,59 g, 11,75 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 3 h, luego se trató con metabisulfito de sodio saturado y el pH de la solución se ajustó a 1 con la adición gota a gota de ácido clorhídrico (10 M). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se filtraron. Se evaporó el filtrado. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage KP-Sil de 50 g, eluyendo con un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 3:1 para dar el producto del título (0,546 g, 65%) como un aceite incoloro. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,36 (s, 3H), 3,42 (s, 3H), 3,45 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,20­ 5,30 (m, 2H), 6,01 (dd, J = 17,6, 10,7 Hz, 1H), 9,80-11,80 (ancho s, 1H).

Compuesto 58c. Ácido (E)-(S)-4-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoico

[0617]

[0618] A un vial cargado con éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-carbámico (706 mg, 2 mmol), ácido (S)-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoico (290 mg, 2 mmol), tri-(o-tolil)fosfina (610 mg, 2 mmol) y N,N-diciclohexil-metil-amina (0,85 ml, 4 mmol), se añadió acetonitrilo (2 mL) y 1,4-dioxano (6 mL). El vial se purgó con nitrógeno. Se añadió acetato de paladio(Il) (450 mg, 2 mmol). El vial se selló y se irradió mediante microondas a 130°C durante 1 h. A continuación, la mezcla se trató con una solución saturada de hidrogenosulfato de potasio. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se filtraron. Se evaporó el filtrado. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage KP-Sil de 100 g eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/metanol 1:0 a 41:9 para dar el producto del título (0,176 g, 21%) como un aceite ámbar. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,45 (s, 9H), 1,54 (s, 3H), 1,57 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 3,47 (s, 3H), 3,62 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,90-5,10 (m, 1H), 6,60-6,85 (m, 2H), 7,34 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,06-8,17 (m, 2H). CLEM (m/z) 415,3 [M+H], Tr = 2,11 min.

Compuesto 58d. Éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-ferc-butoxicarbonilaminoetil)-quinolina-7-il]-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoiloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico

[0619]

[0620] A una solución de ácido (E)-(S)-4-[2-((R)-1 -ferc-butoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2-metoximetil-2-metilbut-3-enoico (176 mg, 0,34 mmol) en diclorometano (2 mL) se añadió éster 2,2,2-tricloroetílico del ácido (S)-1 -[(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico (205 mg, 0,47 mmol), 4-dimetilaminopiridina (116 mg, 0,95 mmol), N,N-diisopropiletilamina (123 mg, 0,95 mmol) y anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (164 mg, 0,47 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h, luego se trató con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, se extrajo con diclorometano (2 x) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se filtraron. Se evaporó el filtrado. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage KP-Sil de 50 g eluyendo con un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 a 0:1 para dar el producto del título (0,22 g, 78%) como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 50,85-1,10 (m, 6H), 1,20-1,70 (m, 23H), 2,05-2,20 (m, 1H), 2,30-2,45 (m, 1H), 3,44 (s, 3H), 3,60-3,95 (m, 4H), 4,15-4,32 (m, 1H), 4,68-4,70 (m, 1H), 4,90-5,05 (m, 2H), 5,20-5,45 (m, 1H), 6,10-6,28 (m, 1H), 6,60-6,85 (m, 2H), 7,10-7,20 (m, 1H), 7,28 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,66-7,74 (m, 2H), 8,00 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,4 Hz, 1H). CLEM (m/z) 828,5 [M+H], Tr = 3,48 min.

Compuesto 58.

[0621]

[0622] A una solución de éster 2,2,2-tricloroetilico del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-fercbutoxicarbonilamino-etil)-quinolin-7-il]-2-metoximetil-2-metil-but-3-enoiloxi}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidropiridazin-3-carboxílico (0,22 g, 0,265 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL), se añadió polvo de zinc (190 mg, 2,92 mmol) y una solución de acetato de amonio (153 mg, 1,99 mmol) en agua (1,5 mL). La mezcla resultante se agitó durante 24 h. La mezcla se filtró a través de un lecho corto de Celite y el filtrado se lavó con hidrogenosulfato de potasio saturado. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se filtraron. El filtrado se evaporó y luego se co-evaporó con tolueno para dar un aceite ámbar que se trató con cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4 M, 4 mL).Después de agitar durante 1 h, se evaporaron los volátiles para dar un sólido crudo que se disuelto en diclorometano anhidro (20 mL) y N,N-dimetilformamida anhidra (1 mL). Se añadieron N,N-diisopropiletilamina (66 mg, 0,515 mmol) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (59 mg, 0,155 mmol). La mezcla se agitó durante luego agua 1,5 h se añadió y la capa orgánica se filtró a través de una frita de separador de fases. El filtrado orgánico se evaporó y luego se co-evaporó con tolueno para dar un aceite ámbar. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un Biotage KP-Sil 10 g de cartucho de elución con un gradiente de i'so-hexanos/acetato de etilo 9:1 a 0:1 luego por fase inversa HPLC preparativa eluyendo con un gradiente de agua/acetonitrilo 13:7 a 13:12 durante 30 minutos para dar el compuesto del título.

[0623] Compuesto 58 (2,83 mg, 4,8%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CD³OD) 5 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,08 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,50-1,80 (m, 7H), 1,91 -2,03 (m, 1H), 2,11 -2,22 (m, 1H), 2,24-2,34 (m, 1H), 2,65­ 2,78 (m, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,54-3,67 (m, 1H), 3,99 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,40-4,50 (m, 1H), 5,02­ 5,20 (m, 2H), 5,30 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 6,31 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H). CLEM (m/z) 580,2 [M+H], Tr = 2,45 min.

REFERENCIA Ejemplo 59, Compuesto 59.

[0624]

Compuesto 59a:

[0625]

[0626] A una solución de L-valina-d^s (Número CAS: 35045-72-8; C/D/N Isotopes Inc.) (1 g, 8 mmol) en ácido sulfúrico 1 M (16 ml, solución acuosa 1M), se enfrió a 0°C, se añadió una solución de nitrito sódico (1,1 g, 16 mmol) en agua (8 mL). La temperatura se mantuvo por debajo de 5°C durante la adición, y la mezcla se agitó a tales durante la noche. Después, la solución se saturó con sulfato de amonio, se extrajo con éter dietílico (3 x 25 mL), se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó a presión reducida dando el compuesto del título (0,68 g, 67%) como un aceite incoloro que cristalizó en reposo. 1H RMN (400 MHz, CD³OD): 5 sin señal. CLEM (m/z) 125,0 [M-H], Tr = 0,65 min.

Compuesto 59b:

[0627]

[0628] Una solución de 1d (866 mg, 2 mmol) en diclorometano (30 mL) se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (667 mg, 3 mmol) a 0°C bajo argón y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y el residuo crudo resultante (CLEM (m/z) 332,2/334,3 [M+H], Tr = 2,06 min) se disolvió en diclorometano anhidro (20 mL) y se enfrió a 0°C. A esto se le añadió 59a (252 mg, 2,2 mmol), W,W-diisopropiletilamina (0,86 ml, 5 mmol) y hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (1062 mg, 2,4 mmol). Se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante 8 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se lavó con ácido cítrico al 10% (100 mL), saturada de NaHCO3 (100 mL), y salmuera (100 mL). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se añadió un equivalente en volumen de hexano y esta solución se filtró a través de una capa de 5 cm de gel de sílice, la capa de gel de sílice se lavó con 50 ml de una mezcla de acetato de etilo/hexano (1/1). El producto deseado se lavó con acetato de etilo (100 mL), se concentró a presión reducida y se destiló conjuntamente con diclorometano. Se aisló 59b (878 mg, rendimiento cuantitativo) después de secar a alto vacío durante un día. 1H RMN (400 MHz, CD^aOD) 55,50-5,42 (m, 1H), 5,03 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,85 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,16-4,10 (m, 1H), 3,88-3,85 (m, 1H), 3,75-3,41 (m, 2H), 2,16-2,07 (m, 1H), 2,00-1,83 (m, 2H), 1,81-1,69 (m, 1H), 1,32 (d, J = 6,8 Hz, 3H). CLEM (m/z) 440,1/442,1 [M+H], Tr = 2,32 min.

Compuesto 59c:

[0629]

[0630] En un matraz purgado con argón secado al horno se colocaron anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (344 mg, 1 mmol), 4-dimetilaminopiridina (128 mg, 1,05 mmol), ácido carboxílico de quinolina protegido por Boc (192 mg, 0,50 mmol) y diclorometano anhidro (20 mL). A la solución resultante se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,26 ml, 1,50 mmol) y esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió gota a gota 59b (331 mg, 0,75 mmol) mediante una jeringa como una solución en diclorometano anhidro (10 mL). Después de agitar durante 12 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con agua (se añadieron 20 ml, 10 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 59c (391 mg, 97%) como un sólido blanco después de la evaporación. 1H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,87 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,90-6,71 (m, 2H), 5,49-5,34 (m, 2H), 5,50-4,98 (m, 2H), 4,87-4,79 (m, 2H), 4,17-4,10 (m, 1H), 4,90-4,80 (m, 2H), 2,15-2,06 (m, 1H), 1,99-1,85 (m, 2H), 1,82-1,72 (m, 1H), 1,72- 1,62 (m, 1H), 1,58 (d, J = 5,8 Hz, 3H), 1,52 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,32 (dd, J = 13,9, 6,9 Hz, 6H). CLEM (m/z) 806,2/808,1 [M+H], Tr = 2,82 min.

Compuesto 59.

[0631]

[0632] A 59c (390 mg, 0,48 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (13 mg, 0,53 mmol) en agua (10 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,55 ml de solución 1 M en agua, 0,55 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (10 ml, 40 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en W,W-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (276 mg, 0,73 mmol), W,W-diisopropiletilamina (312 mg, 2,42 mmol) y diclorometano (200 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-40% de acetato de etilo metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 59 (137 mg, 51%) como un sólido blanco después de la evaporación. 1H RMN (400 MHz, CD³OD) 58,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,64 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,38 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 5,11 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 13,0, 3,5 Hz, 1H), 3,62 (dd, J = 11,8, 2,8 Hz, 1H), 2,72 (td, J = 13,0, 3,3 Hz, 1H), 2,40-2,65 (m, 1H), 2,02-1,94 (m, 1H), 1,77-1,68 (m, 2H), 1,65 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,44 (s, 3H). CLEM (m/z) 558,4 [M+H], Tr = 2,41.

REFERENCIA Ejemplo 60, Compuesto 60.

[0633]

C o m p u e s to 60 a :

[0634]

[0635] A una solución de ácido (2S,3Rj-2-amino-3-metoxibutanoico (Número CAS: 4144-02-9; Ark Pharm, Inc.) (1 g, 7,5 mmol) en ácido sulfúrico 1M (15 ml, solución acuosa 1M), se enfrió a 0°C, se añadió una solución de nitrito de sodio (1,0 g, 15 mmol) en agua (8 mL). La temperatura se mantuvo por debajo de 5°C durante la adición, y la mezcla se agitó a tales durante la noche. Después, la solución se saturó con sulfato de amonio, se extrajo con éter dietílico (5 x 25 mL), se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó a presión reducida dando 60a (0,27 g, 67%) como un aceite incoloro que cristalizó en reposo. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 54,14 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,81 (qd, J = 6,4, 3,6 Hz, 1H), 3,41 (s, 3H), 1,25 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 132,9 [M-H], Tr = 0,39 min.

Compuesto 60b:

[0636]

[0637] Una solución de 1d (517 mg, 1,19 mmol) en diclorometano (20 mL) se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (398 mg, 1,79 mmol) a 0°C bajo argón y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y el residuo crudo resultante (CLEM (m/z) 332,2/334,3 [M+H], Tr = 2,06 min) se disolvió en diclorometano anhidro (20 mL) y se enfrió a 0°C. A esto se le añadió 60a (192 mg, 1,43 mmol), W,W-diisopropiletilamina (0,51 ml, 2,98 mmol) y hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (633 mg, 1,43 mmol). Se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante 8 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se lavó con ácido cítrico al 10% (100 mL), saturada de NaHCÜ3 (100 mL) y salmuera (100 mL). La capa orgánica se secó sobre MgSCL, se añadió un equivalente en volumen de hexano y esta solución se filtró a través de una capa de 5 cm de gel de sílice, la capa de gel de sílice se lavó con 50 ml de una mezcla de acetato de etilo/hexano (1/1). El producto deseado se lavó con acetato de etilo (100 mL), se concentró a presión reducida y se codestilló con diclorometano. El 60b (537 mg, rendimiento cuantitativo) se aisló después de secar a alto vacío durante un día. 1H RMN (400 MHz, CD³OD): 55,53 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,10 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,94 (dd, J = 7,1,4,7 Hz, 1H), 3,86 (qd, J = 6,4, 2,5 Hz, 1H), 3,81 -3,60 (m, 2H), 3,42 (s, 3H), 2,34-2,14 (m, 1H), 2,09-1,90 (m, 2H), 1,87-1,76 (m, 1H), 1,41 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,32 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 448,1/450,0 [M+H], Tr = 2,11 min.

Compuesto 60c:

[0638]

[0639] En un matraz purgado con argón secado al horno se colocaron anhídrido 2-metil-6-nitrobenzo¡co (172 mg, 0,5 mmol), 4-dimetilaminopiridina (64 mg, 0,50 mmol), ácido (R, E)-4-(2-(1-(terc-butoxicarbonilamino)etil)quinolin-7-il)-2,2 dimetilbut-3-enoico protegido con W-Boc (96 mg, 0,25 mmol) y diclorometano anhidro (10 mL). A la solución resultante se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,13 ml, 0,75 mmol) y esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió gota a gota 60b (168 mg, 0,38 mmol) mediante una jeringa como una solución en diclorometano anhidro (10 mL). Después de agitar durante 12 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con agua (se añadieron 20 ml, 10 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 60c (149 mg, 73%) como un sólido blanco después de la evaporación. 1H RMN (400 MHz, CD³OD): 58,35 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,07-8,01 (m, 1H), 7,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,98-6,77 (m, 2H), 5,48 (q, J = 6,5, 6,1 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,25-4,15 (m, 1H), 3,99-3,85 (m, 2H), 3,80-3,55 (m, 2H), 3,46 (s, 3H), 2,20-2,09 (m, 1H), 2.07-1,94 (m, 1H), 1,92-1,80 (m, 1H), 1,80-1,71 (m, 1H), 1,68 -1,64 (m, 6H), 1,59 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,54 (s, 9H), 1,37 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,29 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 814,1/816,1 [M+H], Tr = 2,64 min.

Compuesto 60

[0640]

[0641] A 60c (139 mg, 0,17 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (4,5 mg, 0,19 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,20 ml de solución 1 M en agua, 0,20 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en W,W-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (98 mg, 0,26 mmol), W,W-diisopropiletilamina (110 mg, 0,86 mmol) y diclorometano (100 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-60% acetato de etilo metanol (4/1) en iso-hexanos) para dar 60 (32 mg, 33%) como un sólido blanco después de la evaporación. 1H RMN (400 MHz, CD³OD): 58,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,61 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,78 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,08 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 13,5, 3,4 Hz, 1H), 3,77-3,63 (m, 1H), 3,59 (dd, J = 11,8, 2,9 Hz, 1H), 3,41 (s, 3H), 2,68 (td, J = 12,9, 3,1 Hz, 1H), 2,31 -2,24 (m, 1H), 1,99-1,91 (m, 1H), 1,72-1,64 (m, 2H), 1,61 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,42 (s, 3H), 1,26 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 566,3 [M+H], Tr = 2,42 min.

REFERENCIA Ejemplo 61, Compuesto 61

[0642]

Compuesto 61a

[0643]

[0644] A 1d (500,3 mg, 1,16 mmol) se añadió una solución de HCl (1,2 ml, 4 M en dioxano, 1 M). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para proporcionar el dipétido libre como un sólido amorfo de color amarillo pálido.

[0645] A ácido L-(+)-láctico (252,3 mg, 2,80 mmol) en DMF (10 ml, 0,3 M) se añadió TMSCl (0,35 ml, 2,77 mmol), seguido de /-Pr²NEt (1,0 ml, 5,74 mmol). Después de 3 horas, se añadió HATU (1,08 g, 2,84 mmol). Después de 10 minutos, se añadió el dipéptido libre en DMF (11,5 ml, 1 M). Después de 60 minutos, la reacción se concentró al vacío hasta 5 ml, se diluyó con EtOAc (10 mL) y se lavó con agua (10 mL). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución acuosa al 5%. LiCl (5 x 20 mL) y salmuera (20 mL), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío. El compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (0-100% EtOAc/hexano) para producir 61a (346,6 g, 74%) como una espuma blanca. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 57,22 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,36 (p, J = 6,9 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,23 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,16 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 1,94 (m, 1H), 1,72 (m, 2H), 1,49 (dd, J = 7,1,3,4 Hz, 2H), 1,43 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 3H). CLEM (m/z) 477,85 [M+H].

Compuesto 61b

[0646]

[0647] Al ácido N-Boc (R,E)-4-(2-(1-(terc-butoxicarbonilamino)etil)quinolin-7-il)-2,2 dimetilbut-3-enoico (150,9 mg, 0,390 mmol), 61a (191,6 mg, 0,468 mmol) y DMAP (115,3 mg, 0,936 mmol) en DCM (2,2 ml, 0,1 M) a 0°C bajo Ar se añadió /-Pr²NEt (0,16 mL, 0,936 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (278,6 mg, 0,780 mmol). La reacción se calentó a ta y, después de 60 minutos, se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con una solución sat. NH4Cl (acuoso) (15 mL). La fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 15 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con H²O (50 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentraron a vacío. El compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (0-75% de EtOAc/hexano) para producir 61b (214,8 mg, 71%) en forma de un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 58,11 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,04 (m, 2H), 7,72 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 20,5, 10,7 Hz, 4H), 5,22 (m, 2H), 4,94 (dd, J = 11,8, 8,2 Hz, 3H), 4,71 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 4,32 (m, 1H), 3,68 (m, 2H), 2,82 (m, 3H), 2,16 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,68 (m, 2H), 1,54 (s, 6H), 1,51 (d, J = 7,5 Hz, 6H), 1,47 (s, 9H), 1,42 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,29 (m, 3H). CLEM (m/z) 770,17 [M+H].

Compuesto 61

[0648]

[0649] A 61b (214,8 mg, 0,279 mmol) en THF (2,8 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M NaOH^(ac) (0,93 ml, 0,249 mmol). Después de 40 minutos, la reacción se inactivó con 1 M HCl^(ac) (0,29 mL) a ~ pH 4. La mezcla se diluyó luego con EtOAc (15 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró a vacío para dar una espuma de color amarillo (190,1 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió una solución de HCl (3 mL, 4 M en dioxano). Después de 18 horas, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido amarillo (175,3 mg). El material crudo en DMF (5 mL) se diluyó con DCM (750 ml, 0,0003 M) y se añadió /-Pr² NEt (0,30 ml, 1,62 mmol), seguido de HATU (151,9 mg, 0,400 mmol). Después de 20 minutos, la mezcla se lavó con LiCl (acuoso) al 5% (2 x 500 mL) y salmuera (500 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío para dar un residuo naranja. Las impurezas se trituraron con DCM/f de BME para producir 61 (68,0 mg, 47%) como un residuo amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCl^a): 58,98 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,74 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 7,45 (s, 2H), 6,69 (d, J = 15,4 Hz, 2H), 6,43 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 5,80 (m, 1H), 5,41 (m, 1H), 4,57 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 4,15 (s, 1H), 3,77 (m, 1H), 3,66 (m, 4H), 3,55 (m, 2H), 3,08 (m, 2H), 2,58 (m, 1H), 1,97 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 1,56 (m, 6H), 1,44 (m, 6H). CLEM (m/z) 522,23 [M+H]. Tr = 4,75 min.

REFERENCIA Ejemplo 62, Compuesto 62

[0650]

Compuesto 62a

[0651]

(MeO)2CMe2, p-TsOH, 's)L-o o

ta, 18 h * V ^ A > h

[0652] A ácido L-(-)- málico (10 g, 74,6 mol) y monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (172,5 mg, 7,46 mmol) se añadió 2,2-dimetoxipropano (75 ml, 1 M). Después de 18 horas, agua (50 mL) y NaHCO3 se añadieron (72,3 mg), y la mezcla se extrajo con DCM (3 x 100 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío hasta un aceite amarillo. El material se purificó mediante cristalización con Et²O/hexano para producir 62a (11,2 g, 88%) en forma de un sólido blanco. 1H r Mn (400 MHz, CDCl3): 54,72 (dd, J = 6,6, 3,9 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 17,3, 3,9 Hz, 1H), 2,86 (dd, J = 17,3, 6,6 Hz, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,57 (s, 3H).

Compuesto 62b

[0653]

[0654] A 62a (385,9 g, 2,21 mmol) en DCM (22 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió cloruro de oxalilo (0,23 ml, 2,66 mmol) seguido de una gota de DMF. La reacción se calentó a ta y se agitó durante 60 minutos. Después, la reacción se concentró al vacío para producir agujas de color amarillo pálido. El crudo se disolvió en tolueno (22 ml, 0,1 M) y se añadió Pd/BaSO⁴ (111,9 mg). La mezcla se purgó con H² y calentó a reflujo durante 3 horas. Después, la reacción se enfrió a ta, se filtró a través de celite, se enjuagó con EtoAc y se concentró al vacío para producir 62b (160 mg, 47%) en forma de un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 59,78 (s, 1H), 4,79 (dd, J = 7,0, 3,5 Hz, 1 h ), 3,09 (dd, J = 18,3, 3,5 Hz, 1H), 2,92 (dd, J = 18,3, 7,0 Hz, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,58 (s, 3H).

Compuesto 62c

[0655]

[0656] DAST se añadió a 62b (1 g, 5,55 mmol) en DCM (11 ml, 0,5 M) a -15°C (0,88 ml, 6,66 mmol) y se dejó que la reacción se calentara a ta despacio. Después de 14 horas, la reacción se inactivó lentamente con una solución sat. NaHCO³ (ac.) (10 mL), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 15 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío para producir 62c (956,2 mg, 92%) en forma de un aceite de color amarillo anaranjado. 1H RMN (400 MHz, CDCL): 56,01 (tdd, J = 56,1, 5,4, 4,1 Hz, 1h ), 4,53 (ddd, J = 8,4, 4,0, 0,8 Hz, 1H), 2,52 - 2,36 (m, 1H), 2,32 - 2,15 (m, 1H), 1,65 - 1,60 (m, 3H), 1,56 - 1,53 (m, 3H).

19F RMN (376 MHz, CDCh) 5 -117,10 - -119,71 (m).

Compuesto 62d

[0657]

[0658] Se añadió a 62c (956,2 mg, 5,31 mmol) en THF (5 ml, 1 M) 1 M HCl^(ac) (5 ml, 1 M). Después de 18 horas, la reacción se saturó con NaCl y se extrajo con Et²O (2 x 20 mL) y THF (15 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a vacío para proporcionar ^{6 2} d (654,8 mg, 88%) como un aceite claro. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 56,06 (tdd, J = 56,4, 5,5, 4,2 Hz, 1H), 4,48 - 4,39 (m, 1H), 2,51 - 2,33 (m, 1H), 2,33 - 2,12 (m, 1H). 19F RMN (376 MHz, CDC^h ) 5 -117,40 - -120,28 (m).

Compuesto 62e

[0659]

[0660] A 1d (2,75 g, 6,37 mmol) en dioxano (2 mL) se añadió una solución de HCl (6,5 ml, 25,5 mmol, 4 M en dioxano). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para proporcionar el dipétido libre como un sólido amorfo de color amarillo pálido.

[0661] A 62d (654,8 mg, 4,67 mmol) en DMF (16 ml, 0,3 M) se añadió TMSCl (0,59 ml, 4,67 mmol), seguido de i-Pr² NEt (2,0 ml, 11,7 mmol). Después de 2 horas, se añadió el dipétido libre en DMF (6 ml, 1 M) seguido de i-Pr² NEt (4,0 ml, 23,4 mmol) y HATU (2,66 g, 7,01 mmol). Después de 45 minutos, la reacción se concentró al vacío hasta 5 ml, se diluyó con una solución sat. NaHCO3^(ac) (50 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con LiCl^(ac) al 5% (4 x 50 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío. El compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (50-100% de EtOAc/hexano) para producir 62e (1,24 g, 59%) en forma de una espuma de color tostado. 1H RMN (400 MHz, CDC^h ): 56,06 (m, 1H), 5,36 (p, J = 7,2 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 2,94 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 2,16 (m, 2H), 1,94 (m, 1H), 1,74 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 3H). 19F RMN (376 MHz, CDCl^a) 5 -117,56 (dt, J = 56,4, 16,5 Hz). CLEM (m/z) 456,03 [M+H].

Compuesto 62f

[0662]

[0663] A ácido N-Boc (R,E)-4-(2-(1-(terc-butoxicarbonilamino)etil)quinolin-7-il)-2,2 dimetilbut-3-enoico (98,7 mg, 0,220 mmol), 62e (115,3 mg, ^{0 , 2 6 4} mmol) y DMAP (66,1 mg, 0,528 mmol) en DCM (2,2 ml, 0,1 M) bajo Ar se añadió i-Pr² NEt (0,10 ml, 0,528 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (115,9 mg, 0,330 mmol). Después de 60 minutos, la reacción se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con una solución sat. NH4Cl^(ac) (10 mL). La fase acuosa se extrajo con DCM (10 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con H²O (15 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentraron en vacío. El compuesto se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc al 20-100%/hexano) para producir 62f (159,0 mg, 89%) en forma de una espuma de color amarillo pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 58,02 (d, J = 15,5 Hz, 1H), 7,78 - 7,60 (m, 3H), 7,18 (s, 1H), 6,71 (m, 2H), 5,93 (tt, J = 55,9, 4,4 Hz, 1H), 5,37 (dd, J = 7,5, 4.3 Hz, 1H), 5,23 (m, 1H), 4,91 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,69 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,76 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,64 (m, 1H), 2,84 (m 1 H), 2,48 (m, 1H), 2,15 (m, 2H), 1,88 (dt, J = 3,8, 2,8 Hz, 2H), 1,67 (dq, J = 12,4, 6.4 Hz, 6H), 1,55 (d, J = 7,0 Hz, 9H), 1,44 (s, 12H). 19F RMN (376 MHz, cdcl^a) 5 -115,88 (ddt, J = 55,4, 33,0, 17,6 Hz). CLEM (m/z) 822,19 [M+H].

Compuesto 62

[0664]

[0665] A 62f (158,0 mg, 0,194 mmol) en THF (2,0 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M NaOH^(ac) (0,65 ml, 0,194 mmol). Después de 20 minutos, la reacción se inactivó con 1 M HCl^(ac) (0,2 mL) a ~pH 4. La mezcla se diluyó luego con EtOAc (20 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío para producir un residuo amarillo (153,9 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió una solución de HCl (1 ml, 4 M en dioxano). Después de 2 horas, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido amarillo (202,5 mg). El material crudo en DMF (2 ml, 0,1 M) se diluyó con DCM (650 ml, 0,0003 M) y se añadió /-Pr² NEt (0,17 ml, 0,982 mmol), seguido de HATU (89,9 mg, 0,232 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con LiCl al 5% (2 x 300 mL), solución sat. NaHCO3 (300 mL) y salmuera (300 mL), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío. El material crudo se purificó por HPLC preparativa (Gemini, 30-90% de MeCN/H²O) para dar 62 (39,2 mg, 36%) como un sólido de color blanquecino. 1H r Mn (400 MHz, CDCh): 59,02 (s, 1H), 8,09 (d, J = 18,2 Hz, 2H), 7,76 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 6,70 (d, J = 16,0 Hz, 2H), 6,43 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 5,99 (d, J = 55,2 Hz, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,48 (s, 1H), 5,23 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,56 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,55 (m, 2H), 2,58 (t, J = 11,7 Hz, 2H), 2,40 (m, 4H), 1,67 (m, 6H), 1,58 (m, 5H), 1,49 (m, 9H). 19F RMN (376 MHz, CDCl^a) 5 -117,00 (ddt, J = 61,8, 56,0, 14,9 Hz). CLEM (m/z) 690,33 [M+H]. Tr = 5,178 min.

REFERENCIA Ejemplo 63, Compuesto 63

[0666]

Compuesto 63a

[0667]

[0668] A ácido (S)-2-amino-2-ciclopentilacético (1 g, 6,98 mmol) en 1 M H²SO⁴ (14 ml, 0,5 M) a 0°C se añadió 2 M NaNO^2(ac) (11,5 ml, 10,5 mmol) lentamente y la reacción se calentó a ta. Después de 48 horas, la reacción se enfrió de nuevo a 0°C, más 2 M NaNO² (10 ml, 9,11 mmol) y la reacción se calentó a ta. Después de 3 días, la reacción se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para producir 63a (925 mg, 83%) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, d^s -DMSO): 53,79 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 2,18-2,04 (m, 1H), 1,63-1,33 (m, 8H).

Compuesto 63b

[0669]

[0670] A 1d (4 g, 9,24 mmol) en dioxano (5 mL) se añadió una solución de HCl (34 ml, 0,25 M, 4 M en dioxano). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para proporcionar el dipéptido libre (3,69 g) en forma de un sólido amarillo pálido amorfo. A 63a (501,5 mg, 3,48 mmol), se añadió dipéptido (1,28 g, 3,48 mmol) e /-Pr²NEt (0,61 ml, 3,48 mmol) en DCM (35 ml, 0,05 M) a 0°C (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (1,25 g, 4,17 mmol) y la reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 24 horas, la reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con EtOAc (200 mL), se lavó con ácido cítrico al 10% (2 x 100 mL), solución sat. NaHCÜ3 (2 x 100 mL) y salmuera (200 mL), se secaron sobre Na2SÜ4 y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna equipada con un ELSD (0-100% EtOAc/hexano) proporcionó 63b (458,3 mg, 20%) como un aceite naranja dorado. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 56,95 (s, 1H), 5,35 (p, J = 6,8 Hz, 1H), 4,94 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,69 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,07 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 3,69 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,72 (m, 3H), 1,55 (m, 8H), 1,32 (d, J = 6,8 Hz, 3H). CLEM (m/z) 458,20 [M+H].

Compuesto 63c

[0671]

[0672] A 39a (636 mg, 1,81 mmol) y 48f (286 mg, 1,81 mmol) en dioxano (14,5 ml, 0,125 M) se añadió paladio (II) acetato de etilo (61,5 mg, 0,272 mmol), tris(2-metilfenil)fosfina (168 mg, 0,543 mmol), trietilamina (0,71 ml, 5,43 mmol). La mezcla se calentó en un reactor de microondas a 100°C durante 60 minutos. La reacción se filtró a través de celite, se aclaró con acetato de etilo y se concentró al vacío. El material crudo se suspendió en Et²O (15 mL) y se extrajo con una solución sat. NaHCO3 (acuoso) (9 x 30 mL). La fase acuosa combinada se acidificó a ~ pH 4 usando 1 M HCl^(ac), se extrajo con EtOAc (3 x 500 mL), se secó sobre MgSO4, y se concentró a vacío para proporcionar el compuesto del título (457 mg, 59%) como una espuma amarilla. 1H RMN (400 MHz, CDC^h ) 58,16 (m, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 6,90 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 6,38 (m, 2H), 5,01 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,85 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 4,58 (m, 2H), 3,95 (m, 2H), 1,58 (s, 3H), 1,43 (s, 9H). CLEM (m/z) 429,00 [M+H].

Compuesto 63d

[0673]

[0674] A ácido 1,3-dioxano carboxílico protegido por N-Boc 63c (149,7 mg, 0,35 mmol), Compuesto 63b (189,3 mg, 0,42 mmol) y d Ma P (104,5 mg, 0,84 mmol) en DCM (3,5 ml, 0,1 M) bajo Ar se añadió /-Pr²NEt (0,15 ml, 0,84 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (181,6 mg, 0,525 mmol). Después de 18 horas, la reacción se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con agua (3 x 10 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío hasta una espuma amarilla que se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc al 0-100%)/hexano) para producir 63d (192,0 mg, 51%) como una espuma blanquecina. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 58,04 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,29 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 6,74 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 6,17 (d, J = 16,2 Hz, 2H), 5,35 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,97 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,68 (m, 3H), 4,31 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,73 (m, 5H), 2,85 (m, 2H), 2,13 (m, 1H), 1,76 (m, 4H), 1,58 (m, 12H)), 1,45 (s, 9H), 1,27 (d, J = 6,9 Hz, 3H). CLEM (m/z) 868,15 [M+H].

Compuesto 63

[0675]

[0676] A 63c (192,0 mg, 0,219 mmol) en THF (2,2 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M NaOH^(ac) (0,55 ml, 0,6,56 mmol). La reacción se controló por CLEM cada hora, con adiciones de 0,3 M NaOH^(ac). Se demostró que la reacción se había completado después de 3 horas y se inactivó con 1 M HCl^(ac) (0,34 mL) a ~pH 4. Después, la mezcla se diluyó con EtOAc (15 mL) y se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró a vacío para dar una espuma de color amarillo (171,4 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió una solución de HCl (3 mL, 4 M en dioxano). Después de 60 min, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido amarillo (193,1 mg). El material crudo en DMF (1 mL) se diluyó con DCM (100 mL) y se añadió /'-Pr² NEt (0,22 ml, 1,23 mmol), seguido de HATU (113,8 mg, 0,295 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con LiCl al 5% (3 x 100 mL), solución sat. NaHCO3 (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío para dar un residuo naranja. El material crudo se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc/hexano al 25-100%) para producir 63 (46,0 mg, 26%) como un residuo blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CDCL): 59,04 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,16 a 8,3 (m, 4H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,48 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,24 (s, 1H), 6,76 (d, J = 16,4 Hz, 2H), 6,48 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,14 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 5,90 - 5,79 (m, 1H), 5,15 (m, 2H), 5,00 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,81 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,57 (m, 4H), 3,91 (dd, J = 44,8, 11,5 Hz, 3H), 3,56 (m, 2H), 2,57 (m, 2H), 2,43 (m, 2H),. 1,62 (m, 8H). CLEM (m/z) 620,48 [M+H]. Tr = 2,60 min.

REFERENCIA Ejemplo 64: Compuesto 64, Ejemplo 64

[0677]

Compuesto 64a

[0678]

[0679] A ácido 2-amino-2-ciclobutilacético (1 g, 6,04 mmol) en 1 M H2SO4^(ac) (12 ml, 0,5 M) a 0°C se añadió 2 M NaNO^2(ac) (15 ml, 30,19 mmol) lentamente y la reacción se dejó calentar a ta lentamente. Después de 3 días, 1H RMN mostró ningún material de partida y la reacción se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron al vacío para producir 64a (495,0 g, 44%) en forma de un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, cfe-DMSO): 53,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,62 (m, 1H), 1,94 (m, 4H).

Compuesto 64b

[0680]

[0681] A ácido quinolinil 1,3-dioxano carboxílico protegido por N-Boc 63c (105,3 mg, 0,245 mmol), y un tripéptido (preparado usando 64a del método descrito para 1e) (129,9 mg, 0,294 mmol), y DMAP (73,5 mg, 0,588 mmol) en Dc M se añadió (3 ml, 0,1 M) en atmósfera de argón /-Pr²NEt (0,10 ml, 0,588 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (127,0 mg, 0,268 mmol). Después de 18 horas, la reacción se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío hasta una espuma marrón que se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc al 0-100%)/hexano) para producir 64b (201,3 mg, 85%) como una espuma blanquecina. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 58,06 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,76 (m, 1H), 6,18 (m, 1H), 5,32 (m, 2H), 5,17 (dd, J = 17,5, 5,9 Hz, 1H), 4,90 (m, 2H), 4,74 (m, 4H), 4,38 (m, 1H), 3,79 (m, 5H), 3,00 (m, 1H), 2,86 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,14 (m, 2H), 1,88 (m, 8H), 1,62 (m, 4H), 1,53 (s, 3H), 1,46 (s, 9H). CLEM (m/z) 856,16 [M+H].

Compuesto 64

[0682]

[0683] A 64b (201,3 mg, 0,235 mmol) en THF (2,5 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M NaOH^(ac) (0,58 ml, 0,177 mmol). La reacción se controló por CLEM cada hora, con adiciones de 0,3 M NaOH^(ac). Se demostró que la reacción se había completado después de 90 minutos y se inactivó con 1 M HCl^(ac) (0,26 mL) a ~pH 4. Después, la mezcla se diluyó con EtOAc (15 mL) y se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío para producir una espuma blanca. El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió una solución de HCl (3 mL, 4 M en dioxano). Después de 60 min, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido amarillo. El material crudo en DMF (0,5 mL) se diluyó con DCM (100 mL) y se añadió /-Pr² NEt (0,22 ml, 1,26 mmol) seguido de HATU (119,6 mg, 0,302 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con LiCl^(ac) al 5% (3 x 100 mL), solución sat. NaHCO3 (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron al vacío. El material crudo se purificó por HPLC preparativa (Synergi Polar-RP, 40-55% de MeCN/H²O) para proporcionar 64 (3,5 mg, 2%) como un residuo blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CDCl^a): 59,48 (s, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,96 (s, 2H), 7,66 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 6,20 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,53 (m, 1H), 5,30 (m, 1H), 4,94 (dd, J = 7,2, 3,2 Hz, 2H), 4,87 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,48 (m, J = 9,8 Hz, 3H), 4,06 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,76 (m, 2H), 2,68 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 1,92 (m, 13 H), 1,64 (m, 6H). CLEM (m/z) 606,46 [M+h ]. Tr = 3,57 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 10 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, modificador de TFA al 0,1%).

Ejemplo 65, Compuesto 65

[0684]

Compuesto 65a

[0685]

[0686] A L-isoleucina (2 g, 15,2 mmol) en 1 M H²SO⁴M (30 ml, 0,5 M) a 0°C se añadió 2 M NaNO²(ac) (11,5 ml, 22,9 mmol) lentamente y la reacción se dejó calentar a ta lentamente. Después de 7 días, la reacción se saturó con (NH4)2SO4, se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL), se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío para proporcionar 65a (1,25 g, 57%) como un blanco sólido. 1H RMN (400 MHz, afe-DMSO): 53,77 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 1,66 (m, 1H), 1,40 (m, 1H), 1,15 (1H), 0,84 (dd, J = 15,0, 7,2 Hz, 6H).

Compuesto 65b

[0687]

[0688] A 1d (5,88 g, 13,6 mmol) se añadió una solución de HCl (13,6 ml, 1 M, 4 M en dioxano). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para producir el dipéptido libre como un sólido amorfo de color amarillo pálido. A 65a (492,4 mg, 3,78 mmol), dipéptido (1,39 g, 3,78 mmol) e /-Pr² NEt (0,66 ml, 3,787 mmol) en DCM (40 ml, 0,1 M) a 0°C se le añadió hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (1,38 g, 4,54 mmol) y la reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente. Después de 18 horas, la reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con EtOAc (200 mL), se lavó con ácido cítrico al 10% (200 mL), solución sat. NaHCO3 (200 mL) y salmuera (200 mL), se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna equipada con un ELSD (0-100% EtOAc/hexano) proporcionó 65b (856,8 mg, 51%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCl^a): 57,18 (s, 1H), 5,39 (m, 1H), 4,95 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,00 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 3,70 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,18 (m 1 H), 1,89 (m, 1H), 1,73 (t, J = 9,7 Hz, 2H), 1,42 (m, 1H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,24 (t, J = 8,7, 5,6 Hz, 3H), 1,19 (m, 1H), 1,00 (d, J = 6,9 Hz, 3H). CLEM (m/z) 46,00 [M+H].

Compuesto 65c

[0689]

[0690] Al ácido quinolinil 1,3-dioxano carboxílico protegido por N-Boc 63c (74,9 mg, 0,175 mmol), 65b (96,2 mg, 0,175 mmol) y DMAP (52,7 mg, 0,420 mmol) en DCM (1,8 ml, 0,1 M) bajo Ar se añadió /-Pr² NEt (0,07 ml, 0,420 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (93,1 mg, 0,263 mmol). Después de 18 horas, la reacción se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío para proporcionar 65c en forma de una espuma amarilla (^{1 8 5 , 8} mg, 99%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 58,22 (s, 1H), 8,06 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,73 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 16,7 Hz, 1H), 6,55 (s, 2H), 6,18 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,34 (m, 2H), 4,98 (m, 2H), 4,73 (m, 4H), 4,33 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 27,7, 11,0 Hz, 2H), 2,18 (dt, J = 15,3, 8,4 Hz, 1H), 1,53 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,29 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,92 (t, J = 7,6 Hz, 3H). CLEM (m/z) 856,51 [M+H].

Compuesto 65

[0691]

[0692] A 65c (150 mg, 0,175 mmol) en THF (1,8 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M NaOH^(ac) (0,44 ml, 0,131 mmol). La reacción se controló mediante CLEM cada 30 minutos, con adiciones de 0,3 M NaOH^(ac). Se demostró que la reacción se había completado después de 2 horas y se inactivó con 1 M HCl^(ac) (0,40 mL) a ~pH 4. Después, la mezcla se diluyó con EtOAc (15 mL) y se lavó con agua (3 x 5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre MgSO⁴ y se concentró al vacío para producir una espuma amarilla (116,8 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió una solución de HCl (3 mL, 4 M en dioxano). Después de 60 min, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido naranja. El material crudo en DMF (1 mL) se diluyó con DCM (100 mL) y se añadió /-Pr² NEt (0,22 ml, 1,26 mmol), seguido de HATU (305,2 mg, 0,803 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con LiCl^(ac) al 5% (3 x 100 mL), solución sat. NaHCO^3(ac) (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO⁴ y se concentraron al vacío para dar un residuo naranja. El material crudo se purificó por columna de cromatografía (20-100% MeCN/H² O). El residuo se disolvió en EtOAc (20 mL) y se lavó con LiCl al 5% (10 x 10 mL) para producir 65 (24,2 mg, 13%) como un residuo blanquecino. ¹ H RMN (400 MHz, CDCl^s ): 59,09 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,3 (s, 1H), 6,73 (d, J = 16,5 Hz, 2H), 6,33 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,14 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,11 (s, 2H), 5,02 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,80 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,95 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,56 (m, 1H), 2,56 (m, 1H), 1,96 (m, 1H), 1,61 (m, 10 H), 1,26 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 5,8 Hz, 3H). CLEM (m/z) 608,47 [M+H]. Tr = 3,67 min.

REFERENCIA Ejemplo 66, Compuesto 66

[0693]

Compuesto 66a

[0694]

[0695] A 1d (, 9,24 mmol 4 g) se añadió en dioxano (5 mL) una solución de HCl (34 ml, 0,25 M, 4 M en dioxano). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para producir el dipéptido libre (3,69 g) como un sólido amorfo de color amarillo pálido. A ácido a-hidroxiciclopropil acético (obtenido de ArkPharm, Inc.), (493,5 mg, 4,09 mmol), dipéptido (1000 mg, 2,72 mmol) e /-Pr² NEt (0,48 ml, 2,72 mmol) en DCM (45 ml, 0,05 M) a 0°C, se añadió hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (981,1 mg, 3,27 mmol) y la reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente. Después de 24 horas, la reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con EtOAc (100 mL), se lavó con ácido cítrico al 10% (5 x 50 mL), solución sat. NaHCO^3(ac) (2 x 50 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna equipada con un ELSD (0-100% EtOAc/hexano) proporcionó 66a (425,8 mg, 36%) como una espuma blanca.

¹ H RMN (400 MHz, CDCl^a): 57,14 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 4,95 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,72 (dd, J = 12,0, 2,8 Hz, 1H), 4,33 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,48 (dd, J = 12,0, 8,2 Hz, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,86 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,94 (m, 1H), 1,73 (m, 2H), 1,35 (m, 3H), 1,09 (m, 1H), 0,67 (m, 1H), 0,54 (m, 3H). CLEM (m/z) 430,12 [M+H].

Compuesto 66b

[0696]

[0697] Al carboxilato de quinolinilo N-Boc 74c (242,1 mg, 0,451 mmol), 66a (238,4 mg, 0,451 mmol) y DMAP (132,3 mg, 1,08 mmol) indicado en DCM (4,6 ml, 0,1 M) en Ar se añadió /-Pr²NEt (0,19 ml, 1,08 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (235,6 mg, 0,676 mmol). Después de 18 horas, la reacción se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con agua (3 x 10 mL), se secó sobre MgSO4, y se concentró a vacío hasta una espuma amarilla que se purificó a través de cromatografía en columna (EtOAc al 0-100%/hexano) para producir 66b (313,7 mg, 66%) como un aceite dorado pálido. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 58,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,08 (m, 1H), 6,76 (d, J = 16,6 Hz, 1H), 6,43 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,19 (m, 1H), 5,25 (m, J = 15,1 Hz, 1H), 4,92 (m, 2H), 4,81 (dd, J = 14,1, 6,4 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 12,7, 10,3 Hz, 1H), 4,29 (m, 1H), 3,66 (m, 3H), 2,49 (m, 1H), 2,09 (m, 2H), 1,80 (m, 2H), 1,68 (m, 4H), 1,52 (d, J = 6,2 Hz, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,29 (m, 3H), 1,12 (s, 1H), 0,57 (m, 4H). CLEM (m/z) 968,24 [M+H].

Compuesto 66

[0698]

[0699] A 66b (313,7 mg, 0,324 mmol) en THF (3,2 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M NaOH (0,81 ml, 0,243 mmol). La reacción se controló mediante CLEM cada 30 minutos, con adiciones de 0,3 M NaOH. Se demostró que la reacción se había completado después de 60 minutos y se inactivó con 1 M HCl (0,36 mL) a ~pH 4. La mezcla se diluyó luego con EtOAc (15 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO⁴ y se concentró al vacío para producir una espuma de color amarillo pálido (283,7 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió una solución de HCl (3 mL, 4 M en dioxano). Después de 60 min, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido de color amarillo pálido (275,5 mg). El material crudo en DMF (1,5 mL) se diluyó con DCM (100 mL) y se añadió /-Pr² NEt (0,30 ml, 1,69 mmol), seguido de HATU (157,2 mg, 0,405 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con LiCl^(ac) al 5% (3 x 100 mL), solución sat. NaHCO³ (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO⁴ y se concentraron al vacío. El material crudo se purificó por HPLC preparativa (Synergi Polar-RP, 35% de MeCN/H² O) y se liofilizó, proporcionando 66 (3,4 mg, 1%) como un sólido blanco. ¹ H RMN (400 MHz, CDCl³): 58,54 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,73 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,43 (s, 1H), 6,72 (dd, J = 19,3, 8,7 Hz, 1H), 6,48 (dd, J = 24,9, 16,4 Hz, 1H), 5,89 (m, 1H), 5,17 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,72 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 3,70 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 2,54 (m, 6H), 2,02 (m, 3H), 1,62 (m, 10H), 1,30 (m, 3H), 0,88 (m, 1H), 0,60 (m, 4H). CLEM (m/z) 604,60 [M+H]. Tr = 2,23 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 5 min, 2 mL/min, acetonitrilo al 5-100%/agua, modificador de TFA al 0,1%).

REFERENCIA Ejemplo 67: Compuesto 67

[0700]

Compuesto 67a

[0701]

[0702] A (S)-2-amino-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetico (obtenido de AstaTech, Inc.), (1,01 g, 6,35 mmol) en 1 M H2SÜ4(ac) (12,5 ml, 0,5 M) a 0°C, se añadió 2 M NaNܲ(ac) (9,5 ml, 19,0 mmol) lentamente y se dejó que la reacción se calentara a ta lentamente. Después de 24 horas, 1H RMN no mostró material de partida y la reacción se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SÜ4 y se concentraron al vacío para producir 67a (868,8 g, 85%) en forma de un sólido blanquecino. 1H RMN (400 MHz, cfe-DMSO): 53,84 (m, 2H), 3,76 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,24 (m, 2H), 1,81 (m, 1H), 1,39 (m, 4H).

Compuesto 67b

[0703]

[0704] A 1d (5 g, 11,6 mmol) en dioxano (5 mL) se añadió una solución de HCl (45 ml, 0,25 M, 4 M en dioxano). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para producir el dipéptido libre (4,71 g) como un sólido amorfo de color amarillo pálido.

[0705] A 67a (300,9 mg, 1,87 mmol), dipéptido (447,9 mg, 1,25 mmol), y /-Pr² NET (0,27 ml, 1,56 mmol) en DCM se añadió (16 ml, 0,1 M) a 0°C hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-(benciloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (827,9 mg, 1,87 mmol) y la reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente. Después de 18 horas, la reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con EtOAc (100 mL), se lavó con ácido cítrico al 10% (3 x 100 mL), NaHCO³ (acuoso) saturado (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre Na²SO⁴ y se concentró al vacío. Purificación por cromatografía de columna equipada con un ELSD (0-100% EtOAc/hexano) proporcionó 67b (171,3 mg, 23%) como una espuma blanquecina. ¹ H RMN (400 MHz, CDCl^a): 57,15 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,38 (p, J = 6,8 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 3,99 (m, 3H), 3,94 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,39 (m, 2H), 2,94 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,98 (m, 2H), 1,75 (dd, J = 19,3, 10,0 Hz, 2H), 1,64 (ddd, J = 24. 9, 12,7, 4,6 Hz, 2H), 1,55 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 1,39 (m, 1H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 3H). CLEM (m/z) 474,26 [M+H].

Compuesto 67c

[0706]

[0707] A ácido (R,E)-4-(2-(1-(terc-butoxicarbonilamino)etil)quinolin-7-il)-2,2dimetilbut-3-enoico (136,9 mg, 0,361 mmol), 67b (171,3 mg, 0,361 mmol) y DMAP (106,1 mg, 866 mmol) en DCM (3,5 ml, 0,1 M) bajo Ar se añadió /-Pr²NEt (0,15 ml, 866 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (189,2 mg, 0,541 mmol). Después de 2,5 horas, se añadió más anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (50,8). Después de otra hora, la reacción se diluyó con DCM (10 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO4, y se concentró a vacío para proporcionar 67c como una espuma de color blanco (324,4 mg, 90%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 58,22 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 8,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,12 (s, 1H), 6,70 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 6,22 (s, 1H), 5,14 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 4,94 (m, 2H), 4,70 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,96 (s, 2H), 3,73 (m, 1H), 3,37 (t, J = 12,1 Hz, 2H), 2,29 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 1,57 (d, J = 6,1 Hz, 6H), 1,52 (m, 6H), 1,48 (m, 15 H), 1,28 (d, J = 6,7 Hz, 3H). CLEM (m/z) 840,67 [M+H].

Compuesto 67

[0708]

[0709] A 67c (273,5 mg, 0,325 mmol) en THF (3,4 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M ac. NaOH (8,2 ml, 0,244 mmol). La reacción se controló por CLEM cada hora, con adiciones de 0,3 M ac. NaOH. Se demostró que la reacción se completó después de 2 horas y se inactivó con 1 M ac. HCl (0,77 mL) a ~pH 4. A continuación, la mezcla se diluyó con EtOAc (15 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre MgSO⁴ y se concentró al vacío para producir una espuma amarilla (251,0 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1 mL) y se añadió HCl (3 mL, 4 M en dioxano). Después de 60 min, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido amarillo (266,8 mg). El material crudo en DMF (1 mL) se diluyó con Dc M (100 mL) y se añadió /'-Pr² NEt (0,28 ml, 1,63 mmol), seguido de Ha TU (148,9 g, 0,325 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con solución acuosa al 5%. LiCl (3 x 100 mL), sat. NaHCO^3(ac) (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO⁴ y se concentraron al vacío para dar un residuo naranja. El material crudo se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc/hexano al 25-100%) para producir 67 (38,4 mg, 18%) como un residuo de color amarillo pálido. ¹ H RMN (400 MHz, CDCl³): 59,07 (s, 1H), 8,13 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,74 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,65 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,43 -6,26 (m, 1H), 5,79 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 5,11 (m, 1H), 4,99 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,54 (dd, J = 13,5, 2,5 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 3,84 (dd, J = 33,2, 14,1 Hz, 1H), 3,64 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,51 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 3,33 (m, 3H), 2,57 (td, J = 13,1,2,5 Hz, 1H), 2,43 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 2,33 (m, 1H), 2,21 (m, 1H), 1,96 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 1,70 (m, 4H), 1,63 (s, 6H), 1,60 (m, 6H), 1,53 (s, 3H), 1,48 (s, 2H), 1,44 (s, 3H). CLEM (m/z) 592,37 [M+H]. Tr = 2,45 min.

REFERENCIA Ejemplo 68: Compuesto 68

[0710]

Compuesto 68a

[0711]

[0712] A ácido 2-amino-3-fluorobutanoico (obtenido de Fluorochem, Ltd.), (509,4 mg, 4,13 mmol) en 1 M H² SO^{4 M} (8,5 ml, 0,5 M) a 0°C se añadió 2 M NaNO^{2 (ac.)} (6,0 ml, 12,4 mmol) lentamente y la reacción se dejó calentar a ta lentamente. Después de 24 horas, ¹ H RMN mostró material de rastro de partida y la reacción se extrajo con EtOAc (3 x 25 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na²SO⁴ y se concentraron al vacío para producir 68a (437,2 g, 87%) en forma de un sólido blanco. ¹ H RMN (400 MHz, d⁶-DMSO): 55,07-4,65 (m, 1H), 4,07 (ddd, J = 33,7, 23,1,3,1 Hz, 1H), 1,28 (ddd, J = 24,7, 18,4, 6,4 Hz, 3H). ¹⁹ F RMN (376 MHz, DMSO): 5 -180,63 (dqd, J = 48,5, 24,3, 14,9 Hz), -186,54 (ddq, J = 48,3, 31,5, 24,1 Hz).

Compuesto 68b

[0713]

[0714] A 1d (5 g, 11,6 mmol) en dioxano (5 mL) se añadió una solución de HCl (45 ml, 0,25 M, 4 M en dioxano). Después de agitar durante 18 horas, la reacción se concentró al vacío para producir el dipéptido libre (4,71 g) como un sólido amorfo de color amarillo pálido. A 68a (225,3 mg, 1,84 mmol), se añadió dipéptido (671,2 mg, 1,84 mmol) e /-Pr²NEt (0,32 ml, 1,84 mmol) en DCM (20 ml, 0,1 M) a 0°C hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (1,2130 g, 2,76 mmol) y la reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente. Después de 18 horas, la reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con EtOAc (100 mL), se lavó con ácido cítrico al 10% (3 x 100 mL), solución sat. NaHCO3(ac) (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron al vacío. La purificación mediante cromatografía en columna equipada con un ELSD (0-100% EtOAc/hexano) proporcionó 68b (318,9 mg, 32%) como una espuma blanca. 1H Rm N (400 MHz, CDCl3): 55,39 (m, 1H), 5,07 (m, 1H), 4,95 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 11,9, 4,2 Hz, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,10 (ddd, J = 13,9, 10,0, 5,5 Hz, 1H), 3,70 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,87 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,72 (m, 1H), 1,36 (m, 8H). 19F RMN (376 MHz, CDCh): 5 - 181,98--182,68 (m), -186,38--187,09 (m), -187,09 --187,99 (m). CLEM (m/z) 437,82 [M+H].

Compuesto 68c

[0715]

[0716] Al carboxilato de N-Boc-quinolinilo indicado (211,3 mg, 0,538 mmol), 68b (235,0 mg, 0,538 mmol) y DMAP (156,9 mg, 1,29 mmol) en DCM (5,4 ml, 0,1 M) bajo Ar se añadió /-Pr²NEt (0,23 ml, 1,29 mmol) seguido de anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (279,5 mg, 0,807 mmol). Después de 18 horas, la reacción se diluyó con DCM (15 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL), se secó sobre MgSO4, y se concentró a vacío para proporcionar 68c como una espuma amarilla (455,7 mg, pálido 90%). 1H RMN (400 MHz, CDCh): 58,10 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,03 (m, 1H), 7,68 (d, J = 21,0 Hz, 2H), 7,27 (s, 1H), 6,74 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 6,21 (m, 1H), 5,27 (d, J = 15,8 Hz, 2H), 5,12 (m, 1H), 4,93 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,70 (dd, J = 11,9, 2,9 Hz, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 2,86 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 2,16 (M, 1H), 1,89 (M, 1H), 1,63 (s, 2H), 1,61 (d, J = 3,7 Hz, 3H), 1,54 (d, J = 10,1 Hz, 9H), 1,47 (s, 10 H), 1,29 (m, 8H).

Compuesto 68

[0717]

[0718] A 68c (455,7 mg, 0,567 mmol) en THF (5,4 ml, 0,1 M) a 0°C se añadió 0,3 M ac. NaOH (1,3 ml, 0,426 mmol). La reacción se controló por CLEM cada hora, con adiciones de 0,3 M ac. NaOH. Se demostró que la reacción se había completado después de 3 horas y se inactivó con 1 M ac. HCl (0,75 mL) a ~pH 4. Después, la mezcla se diluyó con EtOAc (15 mL), se lavó con agua (3 x 5 mL) y salmuera (2 x 5 mL), se secó sobre MgSO⁴ y se concentró al vacío para proporcionar una espuma de color amarillo pálido (388,7 mg). El material crudo se disolvió en dioxano (1,5 mL) y se añadió una solución de HCl (3 ml, 4 M en dioxano). Después de 60 min, la suspensión se concentró al vacío hasta un sólido amarillo (464,1 mg). El material crudo en DMF (1,5 mL) se diluyó con DCM (100 mL) y se añadió /-Pr² NEt (0,51 ml, 2,90 mmol), seguido de HATU (265,6 mg, 0,695 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla se lavó con LiCl^(ac) al 5% (3 x 100 mL), solución sat. NaHCO^3(ac) (100 mL) y salmuera (100 mL), se secaron sobre MgSO⁴ y se concentraron al vacío para dar un residuo naranja. El material crudo se purificó por HPLC preparativa (Synergi Polar-RP, 50% de MeCN/H² O) y se liofilizó para dar 68 (25,3 mg, 7%) como un blanco sólido. ¹ H r Mn (400 MHz, CDCl^a): 59,01 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,74 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,97 (m, 1H), 6,70 (m, 2H), 6,48 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 5,86 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,18 (m, 1H), 4,55 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,68 (d, J = 22,6 Hz, 6H), 1,59 (s, 61 H), 1,55 (s, 2H), 1,48 (s, 6H), 1,43 - 1,21 (m, 3H). ¹⁹ F RMN (376 MHz, CDCl^a) 5 -184,47 - -185,27 (m), -187,78 - -188,41 (m).CLEM (m/z) 554,42 [M+H]. Tr = 2,49.

REFERENCIA Ejemplo 69, el compuesto 69

[0719]

Compuesto 69a:

[0720]

[0721] A partir de 18e (192 mg, 0,50 mmol), protección de amina N-Boc y posterior hidrólisis del éster con NaOH/THF/agua dio, después de la acidificación con 1N HCl y concentración hasta un residuo crudo, el ácido carboxílico intermedio con rendimiento cuantitativo. El material resultante se trasladó directamente a la formación de amida donde anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (344 mg, 1 mmol), 4-dimetilaminopiridina (128 mg, 1,05 mmol) y el ácido isoquinolinílico protegido con N-Boc se agitaron en diclorometano anhidro (20 mL). A la solución resultante se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,26 ml, 1,50 mmol) y esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Siguiendo el procedimiento descrito para el Ejemplo 58, se añadió gota a gota 1e (331 mg, 0,75 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL). Después de agitar durante 12 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con agua (se añadieron 20 ml, 10 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 69a (391 mg, 97%) como un sólido blanco después de la evaporación. CLEM (m/z) 798,1 [M+H], Tr = 2,82 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 3,5 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, ácido acético al 0,1% gradiente modificador).

Compuesto 69

[0722]

[0723] A 69a (390 mg, 0,48 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (13 mg, 0,53 mmol) en agua (10 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,55 ml de solución 1 M en agua, 0,55 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (10 ml, 40 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en N,N-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (276 mg, 0,73 mmol), N,N-diisopropiletilamina (312 mg, 2,42 mmol) y diclorometano (200 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 69 (4 mg, 3%) como un sólido blanco después de la evaporación. 1H RMN (400 MHz, CDaCN): 59,12 (s, 1H), 7,93 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,60, (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,27 (m, 1H), 7,03 (d, J = 12 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 12, 1H), 5,65 (d, J = 3 Hz, 1H), 4,96 (m, 2H), 4,30 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,21 (m, 1H), 2,91 (bm, 1H), 2,32 (m, 1H), 1,94-1,75 (cm, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,62-1,48 (m, 4H), 1,46-1,35 (m, 2H), 1,01 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H). CLEM (m/z) 550,4 [M+H], Tr = 1,81 min.

REFERENCIA Ejemplo 70, Compuesto 70

[0724]

C o m p u e s to 70a:

[0725]

o nh2 h2so4 o oh

H o ' V N aagNua0> ' H o ' V '

0*C

[0726] A una solución de ácido 3,3-dimetil butanoico (1 g, 7,5 mmol) en ácido sulfúrico 1M (15 ml, solución acuosa 1M), se enfrió a 0°C, se añadió una solución de nitrito de sodio (1,0 g, 15 mmol) en agua (8 mL). La temperatura se mantuvo por debajo de 5°C durante la adición, y la mezcla se agitó a tales durante la noche. Después, la solución se saturó con sulfato de amonio, se extrajo con éter dietílico (5 x 25 mL), se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó a presión reducida dando el compuesto del título (0,27 g, 67%) como un aceite incoloro que cristalizó en reposo. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 53,41 (s, 1H), 1,25 (s, 9H). CLEM (m/z) 133,2 [M+H], Tr = 0,39 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 3,5 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, ácido acético al 0,1% gradiente modificador).

Compuesto 70b:

[0727]

[0728] Una solución de 1d (517 mg, 1,19 mmol) en diclorometano (20 mL) se enfrió en un baño de agua helada. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (398 mg, 1,79 mmol) a 0°C bajo argón y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y el residuo crudo resultante (CLEM (m/z) 332,2/334,3 [M+H], Tr = 2,06 min) se disolvió en diclorometano anhidro (20 mL) y se enfrió a 0°C. A esto se le añadió 70a (192 mg, 1,43 mmol), W,W-diisopropiletilamina (0,51 ml, 2,98 mmol) y hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (633 mg, 1,43 mmol). Se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante 8 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se lavó con ácido cítrico al 10% (100 mL), saturada de NaHCܳ (100 mL) y salmuera (100 mL). La capa orgánica se secó sobre MgSÜ⁴, se añadió un equivalente en volumen de hexano y esta solución se filtró a través de una capa de 5 cm de gel de sílice, la capa de gel de sílice se lavó con 50 ml de una mezcla de acetato de etilo/hexano (1/1). El producto deseado se lavó con acetato de etilo (100 mL), se concentró a presión reducida y se codestilló con diclorometano. El compuesto 70b (537 mg, rendimiento cuantitativo) se aisló después de secar a alto vacío durante un día. ¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 55,52 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,11 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,91 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,84 (dd, J = 7,1,4,7 Hz, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,80-3,58 (m, 2H), 3,41 (s, 3H), 2,33- 2,13 (m, 1H), 2,09-1,92 (m, 2H), 1,86-1,75 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,32 (s, 9H). CLEM (m/z) 446,0 [M+H], Tr = 2,11 min.

Compuesto 70c

[0729]

[0730] En un matraz purgado con argón secado al horno se colocaron anhídrido 2-metil-6-nitrobenzo¡co (172 mg, 0,5 mmol), 4-dimetilaminopiridina (64 mg, 0,50 mmol), el carboxilato de N-boc-quinolinilo indicado (96 mg, 0,25 mmol) y diclorometano anhidro (10 mL). A la solución resultante se le añadió N,N-diisopropiletilamina (0,13 ml, 0,75 mmol) y esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió gota a gota 70b (168 mg, 0,38 mmol) mediante una jeringa como una solución en diclorometano anhidro (10 mL). Después de agitar durante 12 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con agua (se añadieron 20 ml, 10 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 70c (149 mg, 73%) como un sólido blanco después de la evaporación. ¹ H RMN (400 MHz, CD³OD): 58,35 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,07-8,01 (m, 1H), 7,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,98-6,77 (m, 2H), 5,48 (q, J = 6,5, 6,1 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,25-4,15 (m, 1H), 3,99-3,85 (m, 2H), 3,80-3,55 (m, 2H), 3,46 (s, 3H), 2,20-2,09 (m, 1H), 2,07-1,94 (m, 1H), 1,92-1,80 (m, 1H), 1,80-1,71 (m, 1H), 1,68-1,64 (m, 6H), 1,59 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,54 (s, 9H), 1,37 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,29 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 812,3 [M+H], Tr = 2,64 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 3,5 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, ácido acético al 0,1% gradiente modificador).

Compuesto 70

[0731]

[0732] A 70c (139 mg, 0,17 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (4,5 mg, 0,19 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,20 ml de solución 1 M en agua, 0,20 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en N,N-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (98 mg, 0,26 mmol), N,N-diisopropiletilamina (110 mg, 0,86 mmol) y diclorometano (100 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC para producir el compuesto 70 (20 mg, 21%) como un sólido blanco después de la liofilización. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 59,05 (s, 1H), 8,05 (sa, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,61 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 6,33 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 6,14 (m, 1H), 5,86 (bs, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,53 (s, 1H), 4,12 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 3,57-3,49 (m, 2H), 2,02-1,92 (bm, 2H), 1,68 (m, 1H), 1,72-1,45 (cm, 8H), 1,07 (s, 9H), 0,91 (m, 3H). CLEM (m/z) 564,3 [M+H], Tr = 2,42 min.

REFERENCIA Ejemplo 71: Compuesto 71

[0733]

[0734] Siguiendo la secuencia sintética descrita en el Ejemplo 70, se preparó seco-ácido de quinolinil protegido con N-Boc indicado con un rendimiento del 5% comenzando con 1 gramo disponible comercialmente 4,4,4 trifluoro-DL-valina obtenido de Apollo Scientific, Inc.

[0735] A este Compuesto (139 mg, 0,17 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (4,5 mg, 0,19 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,20 ml de solución 1 M en agua, 0,20 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en W,W-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (98 mg, 0,26 mmol), W,W-diisopropiletilamina (110 mg, 0,86 mmol) y diclorometano (100 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC en columna C18 con eluyente acetonitrilo/agua para proporcionar 71 como elución más reciente de tres isómeros (7 mg, 8%) como un sólido blanco después de la evaporación. ¹ H RMN (400 MHz, CD³ CN): 57,86 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,61 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,31 (m, 1H), 6,50 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 5,60 (m, 2H), 5,08 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,18 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,59 (m, 1H), 1,94-1,48 (cm, 10 H), 1,42 (s, 3H), 1,38 (cm, 5H). CLEM (m/z) 604,3 [M+H], Tr = 2,42 min.

Ejemplo 72: Compuesto 72

[0736]

o c

[0737] A una solución de ácido 2-amino-3-fluoro-3-metilbutanoico obtenida de Sigma-Aldrich Inc. (1 g, 7,5 mmol) en ácido sulfúrico 1M (15 ml, 1 M solución acuosa), se enfrió a 0°C, se añadió una solución de nitrito de sodio (1,0 g, 15 mmol) en agua (8 mL). La temperatura se mantuvo por debajo de 5°C durante la adición, y la mezcla se agitó a tales durante la noche. Después, la solución se saturó con sulfato de amonio, se extrajo con éter dietílico (5 x 25 mL), se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó a presión reducida dando el compuesto del título (0,4 g, 37%) como un aceite incoloro que cristalizó en reposo. 1H RMN (400 MHz, CDCh): 54,34 (d, 1H), 1,35 (d, 6H). CLEM (m/z) 137,4 [M+H], Tr = 0,79 min.

Compuesto 72b

[0738]

[0739] Se enfrió una solución de 1d (517 mg, 1,19 mmol) en diclorometano (20 mL) en un baño de agua helada. Se añadió gota a gota trifluorometanosulfonato de trimetilsililo (398 mg, 1,79 mmol) a 0°C bajo argón y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y el residuo crudo resultante (CLEM (m/z) 332,2/334,3 [M+H], Tr = 2,06 min) se disolvió en diclorometano anhidro (20 mL) y se enfrió a 0°C. A esto se le añadió 72a (192 mg, 1,43 mmol), W,W-diisopropiletilamina (0,51 ml, 2,98 mmol) y hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (633 mg, 1,43 mmol). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente.

[0740] Y se agitó durante 8 horas. La mezcla se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se lavó con ácido cítrico al 10% (100 mL), saturada de NaHCÜ3 (100 mL), y salmuera (100 mL). La capa orgánica se secó sobre MgSÜ4, se añadió un equivalente en volumen de hexano y esta solución se filtró a través de una capa de 5 cm de gel de sílice, la capa de gel de sílice se lavó con 50 ml de una mezcla de acetato de etilo/hexano (1/1). El producto deseado se lavó con acetato de etilo (100 mL), se concentró a presión reducida y se co-destiló con diclorometano. Se aisló 72b (400 mg, 80%) después de secar a alto vacío durante un día. ¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 55,53 (q, J = 6,9 Hz, 1H), 5,10 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,92 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,94 (dd, J = 7,1,4,7 Hz, 1H), 3,86 (qd, J = 6,4, 2,5 Hz, 1H), 3,81-3,60 (m, 2H), 3,42 (s, 3H), 2,34-2,14 (m, 1H), 2,09­ 1,90 (m, 2H), 1,87-1,76 (m, 1H), 1,41 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,32 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 450,1 [M+H], Tr = 2,11 min.

Compuesto 72c

[0741]

[0742] Siguiendo el procedimiento descrito en el Ejemplo 70, en un matraz purgado con argón secado al horno se colocaron anhídrido 2-metil-6-nitrobenzoico (172 mg, 0,5 mmol), 4-dimetilaminopiridina (64 mg, 0,50 mmol), el ácido quinolina 1,3-dioxano carboxílico protegido por W-Boc 63c (96 mg, 0,25 mmol) y diclorometano anhidro (10 mL). A la solución resultante se le añadió W,W-diisopropiletilamina (0,13 ml, 0,75 mmol) y esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió el compuesto 72b (168 mg, 0,38 mmol) mediante una jeringa como una solución en diclorometano anhidro (10 mL). Después de agitar durante 2 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación y lavó con agua (20 ml, se añadió 10 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir el 72c (149 mg, 73%) como un sólido blanco después de la evaporación.

¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 58,35 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,07-8,01 (m, 1H), 7,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,98-6,77 (m, 2H), 5,48 (q, J = 6,5, 6,1 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 4,25-4,15 (m, 1H), 3,99-3,85 (m, 2H), 3,80-3,55 (m, 2H), 3,46 (s, 3H), 2,20-2,09 (m, 1H), 2,07-1,94 (m, 1H), 1,92-1,80 (m, 1H), 1,80-1,71 (m, 1H), 1,68-1,64 (m, 6H), 1,59 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,54 (s, 9H), 1,37 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,29 (d, J = 6,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 860,1/862,5 [M+H], Tr = 2,64 min.

Compuesto 72

[0743]

[0744] A 72c (139 mg, 0,17 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (4,5 mg, 0,19 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,20 ml de solución 1 M en agua, 0,20 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en W,W-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (98 mg, 0,26 mmol), W,W-diisopropiletilamina (110 mg, 0,86 mmol) y diclorometano (100 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-60% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir el compuesto del título (32 mg, 33%) como un sólido blanco después de la evaporación.

¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 58,26 (s, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,51 (m, 2H), 6,71 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 6,19 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 5,86 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,48 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,08 (m, 2H), 4,41 (m, 1H), 3,77-3,62 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,31-2,24 (m, 1H), 1,99-1,91 (m, 1H), 1,72-1,54 (cm, 8H), 1,42 (s, 3H), CLEM (m/z) 612,1 [M+H], Tr = 2,22 min.

Ejemplo 73, Compuesto 73

[0745]

[0746] Siguiendo la secuencia sintética descrita en el Ejemplo 43, en su lugar utilizando 1,5 g de metil-oxolano-3-carboxilato (CAS n° 53662-85-4) suministrado por Enamine, Ltd, el seco-ácido protegido por bis indicado arriba se preparó en una cantidad de 110 mg (rendimiento del 1,2%). A continuación, este intermedio se llevó a través de la secuencia sintética de múltiples pasos estándar indicada en el Ejemplo 70 para producir el compuesto 73, en donde se obtuvieron 4 mg después de la purificación final por HPLC como una mezcla de diastereómeros. ¹ H RMN (400 MHz, CD³ CN): 58,81 (m, 1H), 8,15 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,06 (m, 1H), 6,48-6,33 (m, 2H), 5,62 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,30 (m, 2H)), 4,08 (m, 2H), 3,90-3,69 (cm, 4H), 3,56 (m, 2H), 3,39 (m, 2H), 2,68 (cm, 3H), 2,31-2,24 (m, 2H), 1,55- 1,35 (cm, 7 H), 0,92-0,82 (cm, 7H). CLEM (m/z) 578,2 [M+H], Tr = 2,11 min.

Ejemplos 74, 75, 76 y 77 - Compuestos 74, 75, 76 y 77

[0747]

Intermedio 74a

[0748]

[0749] A una mezcla del bromuro 39a (556 mg, 1,583 mmol), etil-4-oxo-1-vinilciclohexanocarboxilato (obtenido de Small Molecules, Inc.), (559 mg, 2,849 mmol), Pd(OAc)² (70 mg, 0,312 mmol) y (o-Tol)^a P (100 mg, 0,329 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) se añadió NEt³ (0,72 ml, 5,166 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 100°C durante 30 min en un reactor de microondas. La mezcla se concentró y se trató con agua y acetato de etilo (~ 50 ml cada uno). Después de filtrar la mezcla a través de un lecho de celite, se separaron las dos fracciones del filtrado. Después de que la fracción acuosa se extrajo con acetato de etilo (x 1), se lavaron dos fracciones orgánicas con agua (x 1), se combinaron, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos -acetato de etilo como eluyentes para obtener 479 mg (65%) del producto 74a. ¹ H RMN (400 MHz, cloroformo- d): 58,07 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 6,47 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,27 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,76 - 2,56 (m, 2H), 2,57 - 2,38 (m, 4H), 2,18 - 2,00 (m, 2H), 1,47 (s, 9H), 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H). CLEM (m/z) 467,0 [M+H], Tr = 2,33 min.

Compuesto 74b

[0750]

[0751] Una solución de 74a (237 mg, 0,508 mmol) en THF (5 mL) se agitó en un baño a -60°C como 1,0 M K-selectrida en THF - se añadió (0,61 mL). Después de que la mezcla de reacción se calentara lentamente a 0°C durante 30 min, la mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 192 mg (81%) de 74b como una mezcla ~4:1. CLEM (m/z) 469,0 [M+H], Tr = 2,20 min.

Compuesto 74c

[0752]

[0753] Una mezcla de 74b (192 mg, 0,410 mmol) y LiOH (87,7 mg, 2,090 mmol) en THF (2 mL), MeOH (2 mL) y agua (2 mL) se agitó a Baño a 50°C durante 3 h. La mezcla se concentró a ~1/3 del volumen, se diluyó con agua, se neutralizó con 1N HCl (2,2 mL) y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Los extractos se lavaron con agua (x 1), se combinaron, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron. Una solución del residuo, imidazol (115 mg, 1,689 mmol) y TBSCI (79 mg, 0,524 mmol) en DMF se agitó en un baño de 35°C durante 1,5 h antes de la adición de imidazol adicional (102 mg, 1,498 mmol), y se añadió TBSCI (77 mg, 0,511 mmol). La mezcla resultante se agitó a 35°C durante 17 h, se concentró y se diluyó con acetato de etilo antes de lavarse con una solución de LiCl al 5% (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron. El residuo se disolvió en THF (2 mL), MeOH (2 mL) y agua (2 mL) y se agitó con K² CO³ (226 mg, 1,635 mmol) a ta durante 30 min. La solución se concentró a ~ 1/2 de volumen, se diluyó con agua, y se acidificó con 1N HCl (~ 3,5 mL) antes de la extracción con acetato de etilo (x 2). Los extractos se lavaron con agua (x 1), se combinaron, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 193 mg (85%) del producto 74c como una mezcla aparente de isómeros ~4:1. CLEM (m/z) 555,1 [M+H], Tr = 2,60 min.

Compuesto 74d

[0754]

[0755] Una mezcla del ácido 74c (131 mg, 0,236 mmol), el compuesto 1e (125 mg, 0,289 mmol), reactivo Shiina (98 mg, 0,285 mmol), y DMAP (72 mg, 0,589 mmol) se disolvió en CH²Cl² (3 mL) a ta. Después de 3 min, se añadió DIPEA (0,1 ml, 0,574 mmol) y la mezcla resultante se agitó a ta durante 16,5 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 90 mg (39%) de 74d como una mezcla. CLEM (m/z) 968,2 [M+H], Tr = 3,04 min.

Los compuestos 74, 75, 76, y 77

[0756]

[0757] Se añadió una mezcla de 74d (90 mg, 0,093 mmol) en THF (1 mL), MeOH (1 mL), y agua (1 mL) K² CO³ (89 mg, 0,644 mmol) a 0°C. La mezcla se agitó a 0°C durante 2,5 h, 64 h en el congelador, a ta durante 3 h y a 30°C durante 1,5 h. La mezcla se diluyó con una solución saturada de NaCl y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO⁴), se concentraron y se secaron al vacío. El residuo se disolvió en 4 N HCl en dioxano (3 mL) y se agitó a ta durante 45 min antes de concentrarlo y secarlo al vacío durante 2 h para obtener el hidroxiaminoácido crudo. Se agitó una suspensión de HATU (177 mg, 0,466 mmol) en CH² Cl² (100 mL) a ta como una solución del hidroxilaminoácido crudo y DIPEA (0,13 ml, 0,746 mmol) en DMF (7,5 mL) añadido durante 5 min. Después de 1,5 h a ta, la mezcla se concentró y el residuo se diluyó con acetato de etilo antes de lavar con una solución de LiCl al 5% (x 2), 0,1 N HCl (x 1) y agua (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO⁴ ) y se concentraron. El residuo se separó mediante HPLC preparativa usando una columna semipreparativa C18 Fenomenex Gemini de 21,2 x 250 mm y 10 micras y acetonitrilo/agua (que contenía un modificador de TFA al 0,1%) como fase móvil a un caudal de 20 mL/min con un gradiente de 50 minutos que constaba de 0 min - 5 min: acetonitrilo al 20%; 5 min - 48 min: acetonitrilo al 20% a acetonitrilo al 80%; 48 min - 50 min: acetonitrilo al 80% para obtener cuatro fracciones de producto separadas. Después, cada fracción se concentró por separado para eliminar el MeCN, se neutralizó con una solución de NaHCO³ , se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Los extractos separados se concentraron para obtener 4,6 mg (8%) de 74, 1,1 mg (2%) de 75, 10,5 mg (19%) de 76 y 2,3 mg (4%) de 77.

Los compuestos 74-77 representan estereoisómeros del compuesto:

[0758]

Estereoisómeros contemplados incluyen:

[0759]

[0760] Compuesto 74: Primer isómero de elución. 1H RMN (400 MHz, metanol-a4): 58,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,4, 1,7 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,79 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,06 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 13,2, 4,3 Hz, 1H), 3,88 (s, 1H), 3,57 (dd, J = 11,7, 2,8 Hz, 1H), 2,68 (td, J = 13,0, 3,3 Hz, 1H), 2,25 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,21 - 2,06 (m, 3H), 2,00 - 1,88 (m, 3H), 1,84 - 1,63 (m, 5H), 1,60 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,61 - 1,47 (m, 1H), 1,28 (s, 1H), 1,05 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,00 (d, J = 6,7 Hz, 3H). CLEM (m/z) 606,3 [M+H], Tr = 2,03 min.

[0761] Compuesto 75: Segundo isómero de elución. 1H RMN (400 MHz, metanol-dt): 58,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,25 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,80 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,06 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 3,60 (m, 2H), 2,76 - 2,62 (m, 1H), 2,57 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 2,33 (dd, J = 13,0, 3,9 Hz, 1H), 2,29 - 2,10 (m, 2H), 1,94 (m, 3H), 1,78 - 1,38 (m, 3H), 1,61 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,28 (s, 4H), 1,07 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,04 d, J = 6,8 Hz, 3H). CLEM (m/z) 606,3 [M+H], Tr = 2,02 min.

[0762] Compuesto 76: Tercer isómero de elución. 1H RMN (400 MHz, metanol-a4): 59,43 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 8,24 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,02 - 7,94 (m, 1H), 7,84 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,33 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,85 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 5,15 (m, 1H), 4,49 - 4,38 (m, 1H), 3,83 (s, 1H), 3,41 (dd, J = 11,8, 2,8 Hz, 1H), 2,79 (td, J = 12,8, 3,2 Hz, 1H), 2,39 (dd, J = 13,2, 3,4 Hz, 1H), 2,21 (m, 1H), 2,18 - 2,06 (m, 3H), 2,06 - 1,91 (m, 2H), 1,76 (m, 2H), 1,68 (m, 2H), 1,44 - 1,61 (m, 1H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,28 (s, 1H), 1,22 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,04 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H). CLEM (m/z) 606,3 [M+H], Tr = 2,10 min.

[0763] Compuesto 77: Cuarto isómero de elución. 1H RMN (400 MHz, metanol-d4): 59,45 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,88 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,45 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,17 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,51 - 4,39 (m, 1H), 3,71 - 3,54 (m, 1H), 3,51 - 3,38 (m, 1H), 2,85 - 2,72 (m, 1H), 2,63 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,43 (m, 2H), 2,24 (m, 1H), 1,98 (m, 3H), 1,77 - 1,59 (m, 2H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,54 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 1,41 (q, J = 13,0 Hz, 1H), 1,35 - 1,26 (m, 2H), 1,26 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,8 Hz, 3H). CLEM (m/z) 606,3 [M+H], Tr = 2,11 min.

REFERENCIA Ejemplos 78 y Ejemplo 79 - Compuestos 78 y 79

[0764]

Compuesto 78a

[0765]

[0766] Una solución de glioxalato de etilo al 50% en tolueno (5,15 ml, 26 mmol) en THF (50 mL) se agitó a -20 - un baño a -30°C como bromuro de ciclopropilmagnesio 0,5 M en THF (50 mL) se añadió durante 10 min. Después de 2 h a un baño de -30°C, la mezcla de reacción se inactivó con agua (250 mL) y se extrajo con acetato de etilo (x 3). Los extractos se lavaron con agua (x 1), se combinaron, se secaron (MgSÜ4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 882 mg (17%) de 78a con 72% de pureza. 1H RMN (400 MHz, cloroformo-d): 54,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,77 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 1,56 (s, 1H), 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,15 - 1,03 (m, 1H), 0,59 - 0,46 (m, 3H), 0,46 - 0,38 (m, 1H).

Compuesto 78b

[0767]

[0768] Una solución del ácido indicado (100 mg, 0,260 mmol), el alcohol (75 mg, 0,375 mmol, 72% de pureza) y DMAP (79 mg, 0,647 mmol) en CH²Cl² (5 mL) se añadieron reactivo Shiina (180 mg, 0,523 mmol) y DIEA (0,24 ml, 1,378 mmol) a ta. Después de 16,5 h a ta, la mezcla se concentró y el residuo se disolvió en acetato de etilo antes de lavarse con una solución diluida de ácido cítrico (x 1) y una solución de NaHCܳ (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSÜ4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 76 mg (57%) del producto 78b como una mezcla de diastereómeros. 1H RMN (400 MHz, cloroformo- d): 58,05 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,22 (s, 1H), 5,09 - 4,87 (m, 1H), 4,49 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,21 (p, J = 7,0 Hz, 2H), 1,53 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,30 (m, 1H), 1,26 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 0,72 - 0,52 (m, 3H), 0,51 - 0,41 (m, 1H). CLEM (m/z) 511,0 [M+H], Tr = 2,49 min.

Compuesto 78c

[0769]

[0770] A una solución de reactivo de éster etílico 78b (76 mg, 0,149 mmol) en THF (2 mL), MeOH (2 mL), y agua (2 mL) se añadió K² CO³ (104 mg, 0,752 mmol) a 0°C. Después de agitar a 0°C durante 1,5 h y a ta durante 10,5 h, la mezcla se acidificó usando 1N HCl (1,6 mL), se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO⁴ ) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 49 mg (68%) del producto intermedio con ~ 15% de impureza. CLEM (m/z) 483,0 [M+H]. Se agitó una solución del dipéptido (48 mg, 0,111 mmol) en 4 N HCl en dioxano (2 mL) a ta durante 1 h. Después de que la mezcla se concentró y el residuo se co-evaporó con tolueno, una solución del residuo, el ácido obtenido previamente (49 mg) y HATU (80 mg, 0,210 mmol) en CH² Cl² (3 mL) y DMF. (1 mL) se agitó a ta mientras se añadió DIEA (0,1 ml, 0,574 mmol). Después de 30 min a ta, la mezcla se diluye con EA y se lavó con solución de LiCl al 5% (x 2), solución de ácido cítrico (x 1), solución saturada de NaHCO³ , (x 1), y se saturó una solución de NaCl (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO⁴ ) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos -acetato de etilo como eluyentes para obtener 64 mg (79%) del producto 78c como una mezcla de diastereómeros. ¹ H RMN (400 MHz, cloroformo-dj: 58,05 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,67 - 7,60 (m, 1H), 7,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,03 (dd, J = 16,5, 7,6 Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 16,2, 3,8 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,21 (s, 1H), 5,37 - 5,20 (m, 1H), 4,97 (s, 1H), 4,92 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,77 (dd, J = 7,8, 3,2 Hz, 1H), 4,69 (dd, J = 11,9, 3,7 Hz, 1H), 4,36 - 4,18 (m, 1H), 3,81 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 3,65 (m, 1H), 2,84 (ancho, 1H), 2,14 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,77 - 1,59 (m, 2H), 1,55 (S, 3H), 1,53 (S, 3H), 1,51 (d, J = 8,2 Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,24 (m, 4H), 0,65 (m, 1H), 0,50 (m, 3H). CLEM (m/z) 796,0 [M+H], Tr = 2,50 min.

Compuesto 78 y Compuesto 79

[0771]

[0772] Se agitó una mezcla del reactivo (64 mg, 0,080 mmol) en THF (1 mL) y agua (1 mL) a 0°C mientras se añadió 1N KOH (0,09 mL). Después de agitar a 0°C durante 1,25 h, la mezcla se acidificó usando 1N HCl (0,1 mL), se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se disolvió en 4 N HCl en dioxano (2 mL) y se agitó a ta durante 1 h. Después de que la mezcla se concentró y el residuo se co­ evaporó con tolueno, se agitó una solución del residuo y HATU (155 mg, 0,408 mmol) en DMF (2,5 mL) y CH²Cl² (25 mL) a 0°C cuando se añadió DIEA (0,12 ml, 0,689 mmol). Después de 30 min, la solución se concentró, se diluyó con acetato de etilo antes de lavar con una solución de LiCl al 5% (x 2), una solución de ácido cítrico (x 1) y una solución saturada de NaHCO3 (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se separó mediante HPLC preparativa para obtener 2 fracciones. Cada fracción se concentró por separado para eliminar el MeCN, se neutralizó con una solución de NaHCO3, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Los extractos se combinaron, se secaron (MgSO4) y se concentraron para obtener 11,9 mg (23%) de 78 y 11,0 mg (22%) de 79.

[0773] Compuesto 78: 1H RMN (400 MHz, Metanol-dt): 58,63 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 5,87 - 5,72 (m, 1H), 5,14 - 5,01 (m, 1H), 4,89 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 13,8, 4,4 Hz, 1H), 3,57 (dd, J = 11,8, 2,9 Hz, 1H), 2,69 (td, J = 13,0, 3,3 Hz, 1H), 2,34 - 2,21 (m, 1H), 1,94 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 1,76 -1,61 (m, 1H), 1,59 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,30 (m, 2H), 0,69 - 0,57 (m, 3H)), 0,56 - 0,42 (m, 1H). CLEM (m/z) 548,3 [M+H], Tr = 2,25 min.

[0774] Compuesto 79: 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4): 59,27 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,21 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 16,1 Hz, 1H), 5,91 - 5,76 (m, 1H), 5,13 (m, 1H), 4,73 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,43 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 1H), 3,55 (dd, J = 11,9, 2,9 Hz, 1H), 2,69 (td, J = 13,1, 3,3 Hz, 1H), 2,32 (dd, J = 13,4; 3,4 Hz, 1H), 1,93 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 1,68 (cuarto de galón, J = 13,4, 4,4 Hz, 1H), 1,57 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,56 (d, J = 6,9, Hz, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,53 - 1,45 (m, 1H), 1,42 (s, 3H), 1,28 (s, 1H), 0,78 - 0,59 (m, 3H), 0,50 (m, 1H). CLEM (m/z) 548,3 [M+H], Tr = 2,33 min.

Ejemplo 80, Compuesto 80

[0775]

Compuesto 80

[0776]

[0777] A una solución de 74 (7,13 mg, 0,012 mmol) en piridina (0,15 mL) se le añadió cloruro de isobutirilo (0,05 mL) a ta. Después de 1 h a ta, la mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con una solución de ácido cítrico (x 1) y una solución saturada de NaHCÜ3 (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con AE (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSÜ4) y se concentraron. El residuo se purificó por CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 6,4 mg (80%) del producto 80. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4): 58,83 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,64 (dd, J = 8,4, 1,7 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,30 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,80 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,07 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,96 (s, 1H), 4,41 (dd, J = 13,5, 4,1 Hz, 1H), 3,62 - 3,54 (m, 1H), 2,68 (td, J = 13,2, 3,4 Hz, 1H), 2,60 (p, J = 7,0 Hz, 1H), 2,33 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,25 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,21 - 2,09 (m, 2H), 2,05 - 1,76 (m, 7H), 1,76 - 1,63 (m, 1H), 1,60 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,56 - 1,46 (m, 1H), 1,20 (d, J = 7,0 Hz, 6H), 1,06 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,7 Hz, 3H). CLEM (m/z) 676,3 [M+h ], Tr = 1,35 min.

Ejemplo 81, Compuesto 81

[0778]

Compuesto 81

[0779]

[0780] A una solución de 75 (6,6 mg, 0,011 mmol) en piridina (0,15 mL) se añadió cloruro de isobutirilo (0,05 mL) a ta. Después de 1 h a ta, la mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con una solución de ácido cítrico (x 1) y una solución saturada de NaHCO3 (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 5,1 mg (69%) del producto. 1H RMN (400 MHz, metanol-dt): 58,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,81 (p, J = 7,4 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,08 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 4,77 (m, 1H), 4,42 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 11,6, 3,2 Hz, 1H), 2,68 (td, J = 12,8, 3,2 Hz, 1H), 2,56 (m, 1H), 2,52 (hept, J = 7,0 Hz, 1H), 2,35 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 2,30 - 2,11 (m, 2H), 2,10 - 1,88 (m, 3H), 1,75 (td, J = 13,6, 2,8 Hz, 1H), 1,71 - 1,40 (m, 5H), 1,61 (d, J = 7,5 Hz, 3H), 1,59 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 7,0, Hz, 6H), 1,08 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,7 Hz, 3H). CLEM (m/z) 676,5 [M+H], Tr = 1,20 min.

Ejemplo 82, Compuesto 82

[0781]

Compuesto 82

[0782]

[0783] A una solución del 75 (7,0 mg, 0,012 mmol) en piridina (0,15 mL) se le añadió cloruro de n-butirilo (0,05 mL) a ta. Después de 1 h a ta, la mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con una solución de ácido cítrico al 10% (x 1) y una solución saturada de NaHCO3 (x 1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó por Combiflash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 5,7 mg (73%) del producto 82. 1H RMN (400 MHz, Metanol-a4): 58,23 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,61 (dd, J = 8,4, 1,7 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,26 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,80 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,06 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 4,77 (m, 1H), 4,47 - 4,34 (m, 1H), 3,58 (dd, J = 12,8, 2,8 Hz, 1H), 2,68 (td, J = 12,8, 3,2 Hz, 1H), 2,58 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 2,41 - 2,31 (m, 1H), 2,28 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,24 - 2,11 (m, 1H), 2,10 - 1,88 (m, 3H), 1,80 - 1,38 (m, 9H), 1,61 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,07 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,94 (t, J = 7,4 Hz, 3H). CLEM (m/z) 676,4 [M+H], Tr = 1,19 min.

Ejemplo 83, Compuesto 83

[0784]

Compuesto 83a

[0785]

[0786] A una mezcla de éster terc-butílico de ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-carbámico 39a (1160 mg, 3,303 mmol), el ácido vinílico (833 mg, 4,953 mmol), Pd(OAc)² (149 mg, 0,664 mmol) y (o-Tol)^a P (203 mg, 0,667 mmol) en dioxano (18 mL) se le añadió NEt³ (1,65 ml, 11,838 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 100°C durante 30 min en un reactor de microondas. La mezcla se filtró a través de un lecho de celite y el filtrado se diluyó con acetato de etilo antes de lavar con agua (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se lavaron dos fracciones orgánicas con agua (x 1), se combinaron, se secaron (MgSO⁴) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 1033 mg (71%) del producto 83a. ¹ H RMN (400 MHz, cloroformo-dj: 58,23 (s, 1H), 8,14 (ancho d, 1H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,39 (ancho, 1H), 6,87 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,49 (s, 1H), 5,04 (s, 1H), 2,81 - 2,58 (m, 4H), 2,49 (m, 2H), 2,13 (m, 2H), 1,55 (ancho, 3H), 1,40 (s, 9H). CLEM (m/z) 439,0 [M+H], Tr = 0,87 min.

C o m p u e s to 83b

[0787]

[0788] Una solución de 83a (150 mg, 0,342 mmol) en MeOH (2 mL) y agua (2 mL) se agitó a ta como hidrocloruro de metoxilamina (70 mg, 0,838 mmol) y 1 N KOH (0,7 mL) se añadieron. Después de 1 h a ta, la mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con ácido cítrico al 10% (x 1) y agua (x1). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se lavaron dos fracciones orgánicas con agua (x 1), se combinaron, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - AE como eluyentes para obtener 144 mg (90%) del producto 83b. CLEM (m/z) 468,0 [M+H], Tr = 0,98 min.

Compuesto 83c

[0789]

[0790] Una mezcla del ácido 83b (144 mg, 0,308 mmol), 1e (162 mg, 0,374 mmol), reactivo de Shiina (276 mg, 0,802 mmol) y DMAP (107 mg, 0,876 mmol) se disolvió en CH²Cl² (5 mL) a ta. Después de 3 min, se añadió DIEA (0,15 ml, 0,861 mmol) y la mezcla resultante se agitó a ta durante 16 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes para obtener 161 mg (59%) del producto 83c como una mezcla de isómeros. CLEM (m/z) 881,3 [M+H], Tr = 1,37 min.

Compuesto 83

[0791]

[0792] Una mezcla del 83c (161 mg, 0,182 mmol) en THF (2 mL) y agua (2 mL) se agitó a 0°C como 1 N KOH (0,19 mL) se añadió. Después de agitar a 0°C durante 1 h, la mezcla se acidificó usando 1N HCl (0,20 mL), se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se agitó en CH²Cl² (2 mL) y 4 N HCl en dioxano (2 mL) a ta durante 1 h. Después de que la mezcla se concentró y el residuo se co­ evaporó con tolueno (x 2), se agitó una solución del residuo y HATU (150 mg, 0,394 mmol) en DMF (2,5 mL) y CH²Cl² (50 mL) a 0°C como se añadió DIEA (0,2 ml, 1,148 mmol). Después de 1,5 h a 0°C, la solución se concentró, se diluyó con acetato de etilo antes de lavarse con una solución de LiCl al 5% (x 2). Después de que las fracciones acuosas se extrajeron con acetato de etilo (x 1), se combinaron dos fracciones orgánicas, se secaron (MgSO4) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CombiFlash usando hexanos - acetato de etilo como eluyentes. El producto parcialmente purificado se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa para obtener 17,2 mg (23%) del compuesto 83 como un isómero. 1H RMN (400 MHz, metanol-a4): 59,40 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 8,87 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,29 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,81 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,12 - 5,01 (m, 1H), 4,40 (dd, J = 13,8, 4,2 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,56 (dd, J = 11,6, 2,9 Hz, 1H), 3,18 (dt, J = 15,0, 4,3 Hz, 1H), 2,68 (td, J = 13,0, 3,2 Hz, 1H), 2,61 - 2,50 (m, 1H), 2,48 - 2,11 (m, 5H), 2,06 - 1,86 (m, 2H), 1,83 - 1,62 (m, 3H)), 1,60 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,51 (dd, J = 13,3, 9,6 Hz, 1H), 1,06 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,01 (d, J = 6,6 Hz, 3H). CLEM (m/z) 633,5 [M+H], Tr = 1,05 min.

Ejemplo 84, Compuesto 84

[0793]

Compuesto 84a

[0794]

[0795] 4-etil 4-vinilpiperidina-1,4-dicarboxilato de 1 -terc-butilo 84a se preparó según el método descrito por arilación de enolato reportados por Bercot, E. A. et al. en Organic Letters, 2008, 10, p. 5251-5254 usando 4-etilpiperidin-1,4-dicarboxilato de 1 -terc-butilo con un rendimiento del 12%.

[0796] 1H RMN (400 MHz, cloroformo-d): 55,76 (dd, J = 17,5, 10,7 Hz, 1H), 5,19 - 5,02 (m, 2H), 4,14 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,80 - 3,59 (m, 2H), 3,02 (ddd, J = 13,8, 10,2, 3,3 Hz, 2H), 2,10 (ttt, J = 13,6, 3,2, 1,6 Hz, 2H), 1,56 (ddd, J = 13,7, 10,1,4,1 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H), 1,22 (t, J = 7,1 Hz, 3H). CLEM [M+H] = 184,05 (-Boc). Tr = 2,43 min

Compuesto 84

[0797]

[0798] Se hidrolizó 4-etil piperidin-1,4-dicarboxilato de 1 -terc-butilo (282 mg) a su ácido, y esto fue seguido por la reacción de Heck y la posterior reacción de Shiina para formar 84 (129 mg) siguiendo el método descrito en el Ejemplo 36. 1H RMN (400 MHz, Metanol-dt): 59,41 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 8,28-8,18 (m, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,86 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 5,44 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,15 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 4,43 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,96 - 3,80 (m, 2H), 2,79 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 2,47 - 2,15 (m, 4H), 1,95 (m, 1H), 1,80 (m, 2H), 1,55 (d, J = 6,7 Hz, 4H), 1,46 (s, 9H), 1,32 - 1,16 (m, 10H), 1,04 (dd, J = 8,3, 6,7 Hz, 6H). CLEM [M+H]+ = 691,30; Tr = 2,02 min.

Ejemplo 85, Compuesto 85

[0799]

Compuesto 85a

[0800]

[0801] Siguiendo el procedimiento expuesto en el Ejemplo 84, el grupo N-Boc de 4-etil 4-vinilpiperidina-1,4-dicarboxilato de 1-terc-butilo 84a (450 mg) mediante tratamiento con 4 N HCl en dioxano/DCM a TA durante 1 h para dar 4-vinilpiperidin-4-carboxilato de etilo. El 4-vinilpiperidin-4-carboxilato de etilo reaccionó con MsCl con TEA en DCM a TA durante 18 h para dar 1-(metilsulfonil)-4-vinilpiperidin-4-carboxilato de etilo 85a (409 mg, 98% de rendimiento). CLEM [M+H]+ = 249,90 (-Boc); Tr = 1,96 min.

Compuesto 85

[0802]

[0803] El Compuesto 85a (409 mg) se hidrolizó hasta su ácido, y el material presentó acoplamiento de Heck, y la reacción de lactonización mediada por Shiina se utilizó para formar 85 (34 mg) de una manera como la descrita en el Ejemplo 84. 1H RMN (400 MHz, metanol-dt): 58,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,85 - 7,74 (m, 2H), 7,70 - 7,58 (m, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,45 (dd, J = 132,8, 16,3 Hz, 2H), 5,79 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,05 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,70 (dd, J = 18,6, 5,4 Hz, 1H), 3,64 (s, 2H), 3,60 - 3,51 (m, 1H), 3,04 - 2,84 (m, 2H), 2,73 - 2,60 (m, 1H), 2,53 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 2,34 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 2,30 - 2,09 (m, 2H), 2,04 - 1,82 (m, 3H), 1,64 (dd, J = 10,8, 6,5 Hz, 1H), 1,57 (dd, J = 10,6, 7,0 Hz, 6H), 1,49 (dd, J = 9,7, 5,2 Hz, 1H), 1,45 - 1,18 (m, 2H), 1,02 (dd, J = 17,8, 6,7 Hz, 6H). CLEM [M+H]+ = 669,49; Tr = 0,95 min.

REFERENCIA Ejemplo 86 y Ejemplo 87 - Compuestos 86 y 87

[0804]

Compuesto 86a

[0805]

[0806] El reactivo de t-butil-L-treonina (suministrado por Sigma-Aldrich, Inc.) (1 g, 5,7 mmol) en la solución de agua (7 mL)/acetona (14 mL)/ácido sulfúrico (7,2 mL) se enfrió a 0°C. Se añadió gota a gota una solución de nitrito de sodio (1,18 g, 17,1 mmol) en agua (5 mL). La mezcla se agitó y se calentó a ta durante la noche. Después de eliminar la acetona mediante evaporación rotatoria, el residuo se extrajo con EtOAc dos veces y se lavó con salmuera. La capa orgánica se secó a través (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó mediante CombiFlash en columna de gel de sílice usando MeOH/DCM. Dio 674 mg (67% de rendimiento) de ácido (2S,3R)-3-terc-butoxi-2-hidroxibutanoico 86a.

1H RMN (400 MHz, cloroformo-d): 54,18 - 4,02 (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 1,32 - 1,25 (m, 12H).

Compuesto 86b

[0807]

[0808] Se hizo reaccionar ácido (2S,3R)-3-terc-butoxi-2-hidroxibutanoico 86a (337 mg, 1,9 mmol) con el dipéptido indicado que resulta de la eliminación de W-Boc desde 1d como se describe en el síntesis de 1e (1,2 eq) con DIPEA (2 mL), BOP (924 mg, 2,09 mmol) en DMF a 0°C durante 30 min, y luego a TA durante 30 min. Se inactivó con solución acuosa de LiCl al 3%. La solución se extrajo con EtOAc dos veces y se lavó con salmuera. La capa orgánica se secó a través (MgSO4) y se concentró. El residuo se purificó mediante CombiFlash en columna de gel de sílice usando MeOH/DCM. Para obtener 599 mg (rendimiento del 64%) el tripéptido 86b deseado. CLEM [M+H]+ = 489,88 (100%), Tr = 1,05 min.

Compuesto 86

[0809]

[0810] 313 mg de tripéptido 86b se convirtió en el compuesto final 86 usando una secuencia sintética idéntica a la descrita en el Ejemplo 84, obteniéndose 7 mg 86. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4): 58,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,80 (m, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,57-6,35 (dd, J = 132,8, 16,3 Hz, 2H), 5,79 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,05 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,60 (dd, J = 18,6, 5,4 Hz, 1H), 2,78 (s, 9H), 2,70 - 2,63 (m, 1H), 2,27 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 1,90 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 1,68-1,63 (m, 1H), 1,57 (dd, J = 10,6, 7,0 Hz, 6H), 1,50 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,23 (m, 12H). CLEM [M+H]+ = 608,25; Tr = 1,17 min.

C o m p u e s to 87

[0811]

[0812] 17 mg de 87 fue el obtenido como subproducto durante la síntesis de 86 informado anteriormente. 1H RMN (400 MHz, metanol-a4): 58,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,81-7,77 (m, 2H), 7,58 (m, 1H), 7,40 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,54-6,31 (dd, J = 132,8, 16,3 Hz, 2H), 5,76 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 5,33 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,05 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,60 (dd, J = 18,6, 5,4 Hz, 1H), 2,70 - 2,63 (m, 1H), 2,27 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 1,90 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 1,68-1,63 (m, 1H), 1,57 (dd, J = 10,6, 7,0 Hz, 6H), 1,50 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,23 (m, 12H). CLEM [M+H]+ = 552,31; Tr = 0,90 min.

Ejemplo 88, Compuesto 88

[0813]

Compuesto 88a: 1,2-Dicloro-etino

[0814]

[0815] En un horno secado, purgado con argón matraz se colocaron hidruro de potasio libre de aceite (de 1.740 mg de aprox. 30% dispersión en aceite mineral, aprox. 13 mmol), tetrahidrofurano anhidro (10 mL) y hexano (1 mL). El matraz se volvió a purgar con argón y se añadió tricloroetileno (900 pL, 1,32 g, 10 mmol) seguido de metanol seco (10 pL, 7,9 mg, 0,25 mmol). Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante dos horas. Pasado este tiempo, se añadió hexano (10 mL) y la solución resultante se utilizó inmediatamente en el paso siguiente.

Compuesto 88b: Éster metílico de ácido 4-cloroetinil-tetrahidro-piran-4-carboxílico

[0816]

[0817] En un matraz purgado con argón secado al horno, se añadió tetrahidrofurano (50 mL) y la solución se enfrió con un baño de hielo. Se añadió una solución 1,8 M de diisopropilamida de litio (7,2 ml, 13 mmol) en tetrahidrofurano/heptano/etilbenceno. La solución resultante se enfrió a -78°C y se trató gota a gota con tetrahidro-2H-piran-4-carboxilato de metilo (Sigma-Aldrich) (1,20 ml, 1,30 g, 9 mmol) seguido de hexametilfosforamida (1,56 ml, 1,61 g, 9 mmol). La solución resultante se calentó a 0°C, se agitó durante 20 min, se enfrió a -78°C y se trató gota a gota con una solución preenfriada (0°C) de 1,2-dicloroetino (aproximadamente 10 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min y luego se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 4 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se vertió en hielo triturado y se extrajo con éter dietílico (200 mL) (se añadieron 5 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase orgánica se separó y se lavó con agua (200 mL). Esta fase acuosa se extrajo con éter dietílico (100 mL). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron a través de una capa de 2 cm de gel de sílice (la capa de gel de sílice se lavó con 50 ml de acetato de etilo) y luego se concentraron a presión reducida. El producto crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-15% en /so-hexanos) para producir el compuesto del título (1,22 g, 67%) como un aceite incoloro. Rf = 0,48, 30% acetato de etilo en /so-hexanos, fosfomolíbdico ácido en etanol. CLEM (m/z) 203,2/205,3 [M+H], Tr = 3,12 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm Columna de 5 micras, 3,5 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, 0,1% gradiente modificador de ácido acético). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 53,79-3,65 (m, 4H), 3,72 (s, 3H), 1,97 (m, 2H), 1,78 (m, 2H).

Compuesto 88c: Éster metílico del ácido 4-etinil-tetrahidro-piran-4-carboxílico

[0818]

[0819] Éster metílico del ácido 4-cloroetinil-tetrahidro-piran-4-carboxílico (1,01 g, 5 mmol) y polvo de cobre (1,6 g, 25 mmol) se suspendieron en tetrahidrofurano (100 mL). Se añadió ácido acético (15 mL) y la mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 3 horas. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se vertió en agua (el polvo de cobre se separó por filtración con el uso del papel de filtración) y se extrajo con éter dietílico (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con una solución saturada de cloruro de amonio (3 x 50 mL), con una solución saturada de bicarbonato de sodio (2 x 50 mL) y con agua (50 mL). Esta fase acuosa se extrajo con éter dietílico (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron a través de una capa de 2 cm de gel de sílice (la capa de gel de sílice se lavó con 50 ml de acetato de etilo) y se concentraron a presión reducida. Después de secar a alto vacío durante un día, se aisló el compuesto del título (0,84 g, rendimiento cuantitativo) como un aceite incoloro. R^f = 0,37, 30% de acetato de etilo en /so-hexanos, ácido fosfomolíbdico en etanol. CLEM (m/z) 169,0 [M+H], Tr = 2,43 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 micras, 3,5 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, ácido acético al 0,1% gradiente modificador). ¹ H RMN (400 MHz, CDCl^a): 53,80-3,67 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 2,34 (s, 1H), 1,98 (m, 2H), 1,80 (m, 2H).

Compuesto 88d

[0820]

[0821] A una mezcla de 4-viniltetrahidro-2H-piran-4-carboxilato de metilo (preparada después de la hidrogenación de 88c con catalizador de Lindlar), (0,726 g, 4,27 mmol), trietilamina (1,29 g, 12,81 mmol) y el éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etil]-carbámico 39a (1,5 g, 4,27 mmol) en dioxano anhidro (30 mL) se añadió paladio acetato (0,19 g, 0,85 mmol) y tri-o-tolifosfina (0,26 g, 0,85 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 2 horas y se diluyó con EtoAc (100 mL). El crudo se lavó con agua y se secó sobre Na2SÜ4. Después de la concentración, el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 0:1 para proporcionar 88a (1,1 g, 59%). CLEM (m/z) 441,2 [M+H]. Tr = 2,21 min.

C o m p u e s to 88e

[0822]

[0823] A una solución de 88d (1,0 g, 2,27 mmol) en THF (10 mL) y MeOH (5 mL) se le añadió 1 N KOH en agua (11,4 mL). La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 2 horas y se acidificó añadiendo 1N HCl en agua (11,4 mL). Después de extraer con EtOAc (2 x 100 mL), secar sobre Na2SO4 y concentrar, el ácido crudo se usó sin purificación adicional. El ácido crudo anterior (0,328 g, 0,77 mmol), 1e (0,398, 0,92 mmol), 4-DMAP (0,225 g, 1,85 mmol), DIPEA (0,239 g, 1,85 mmol) y el reactivo Shiina (0,632 g, 1,84 mmol) fueron disuelto en Dc M (10 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después de la concentración, el crudo se diluyó con EtOAc (100 mL), se lavó con una solución sat. NH4Cl y se secó sobre Na2SO4. Después de la concentración, el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo de 1:0 a 0:1 para producir 88e (0,55 g, 85%). CLEM (m/z) 841,2 [M+H]. Tr = 2,56 min.

Compuesto 88

[0824]

[0825] A una solución de 88e (0,70 g, 0,83 mmol) en THF (10 mL) se añadió 1 N KOH en agua (0,83 mL). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a temperatura ambiente durante 20 minutos y se acidificó añadiendo 1N HCl en agua (0,83 mL). Después de la concentración, el crudo se disolvió en 4 N HCl/dioxano (2 mL) y se agitó durante 1 hora. Después de concentrar y co-evaporar con tolueno (3x), el crudo anterior se disolvió en DCM (800 mL). N,N-diisopropiletilamina (0,54 g, 4,2 mmol), DMAP (cantidad catalítica) y hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (0,63 g, 1,66 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de la concentración, el crudo se purificó mediante prep-HPLC para obtener 88 (0,22 g, 45%) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, metanol-dt): 58,81 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 8,54 - 8,30 (m, 1H), 8,11 - 7,78 (m, 2H), 7,68 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,78 (m, 1H), 5,21 (dd, J = 8,1, 1,0 Hz, 1H), 5,09 (q, J = 6,7 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,92 (ddq, J = 19,0, 12,0, 4,0, 3,4 Hz, 2H), 3,71 - 3,40 (m, 3H), 2,69 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 2,17 (m, 3H), 2,08 - 1,74 (m, 4H), 1,76 - 1,44 (m, 7H), 1,00 (dd, J = 24,1,6,7 Hz, 6H). CLEM (m/z) 592,3 [M+H]. Tr = 2,15 min.

Ejemplo 89, Compuesto 89

[0826]

Compuesto 89a

[0827]

[0828] A una mezcla de éster ferc-butílico del ácido [(R)-1-(7-bromo-quinol¡n-2-il)-et¡l]-carbám¡co 39a, (0,50 g, 1,42 mmol), trietilamina (0,43 g 4,26 mmol) y el éster etoxi ciclohexanona vinílico obtenido de Small Molecules, Inc. (0,279 g, 1,42 mmol) en dioxano anhidro (15 mL) se añadieron acetato de paladio (0,063 g, 0,28 mmol) y tri-o-tolifosfina (0,085 g, 0,28 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 3 horas y se diluyó con EtOAc (50 mL). La mezcla bruta se lavó con agua y se secó sobre Na2SO4. Después de la concentración, el residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 0:1 para proporcionar 89a (0,30 g, 45%). CLEM (m/z) 467,2 [M+H]. Tr = 2,39 min.

Compuesto 89b

[0829]

[0830] A una solución de 89a (0,3 g, 0,64 mmol) en THF anhidro (5 mL), enfriada a -78°C, se le añadió bromuro de metilmagnesio (solución 3,0 M en éter, 0,43 mL) gota a gota. La mezcla se agitó a -78°C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (30 mL) y se inactivó con una solución sat. NH4Cl (2 mL). Después de la separación de las capas, la capa orgánica se secó sobre Na²SO⁴ y se concentró. el residuo crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando /so-hexanos/acetato de etilo 1:0 a 1:1 para dar el compuesto 89b (0,17 g, 56%) como una mezcla de mezcla cis/trans 1:1. CLEM (m/z) 483,3 [M+H]. Tr = 2,36 min.

Compuesto 89c

[0831]

[0832] ^{A u n a s o l u c i ó n d e 89 b ( 0 , 17 g , 0 , 3 5 3 m m o l) e n T H F ( 2 m L ) y m e t a n o l ( 1 m L ) s e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e 1 N} K O H e n a g u a ( 1, 76 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h o r a . S e a ñ a d i ó 1 N H C l ( 1, 76 m L ) a la m e z c l a d e r e a c c i ó n . D e s p u é s d e la c o n c e n t r a c i ó n , e l c r u d o e s t u v o b a jo a lt o v a c í o d u r a n t e la n o c h e . E l c r u d o a n t e r io r y la 2 , 6 - l u t i d i n a ( 0 , 227 g , 2 , 12 m m o l) s e d i s o l v i e r o n e n D C M ( 5 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C , s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a T B S O T f ( 0 , 280 g , 1, 06 m m o l) a la m e z c l a d e r e a c c i ó n . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h o r a y s e c o n c e n t r ó , e l p r o d u c t o c r u d o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o iso-h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 1 : 0 a 1 : 1 p a r a d a r e l 89 c ( 0 , 150 g , 5 8 % ) . C L E M ( m / z ) 74 1, 4 [ M H ] . T r = 3 , 56 m in .

C o m p u e s t o 89 d

[0833]

Ejemplos 90 y 91, Compuesto 90 y Compuesto 91

l0837]

Compuesto 90a

[0838]

[0839] A una solución de 1-(7-bromoquinolin-2-il)etilcarbamato de (R)-terc-butilo de 39a (740 mg, 2,1 mmol) en acetonitrilo anhidro (25 mL) se añadió acetato de paladio(II) (95 mg, 0,42 mmol), el éster etoxicarboxílico de dimetilpirano olefínico indicado (670 mg, 3,16 mmol), 2-di-terc-butilfosfino-3,4,5,6-tetrametil-2’,4’,6'-triisopropil-1,1'-bifenilo (202 mg, 0,42 mmol) y trietilamina (630 mg, 6,3 mmol) y luego la mezcla se calentó en el microondas a 150°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla del filtro se lavó con tetrahidrofurano (20 mL). El filtrado se evaporó, luego se añadió agua (50 mL) y los extractos orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (2 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida para dar un residuo crudo. Este se sometió a cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-70% en /so-hexanos) para producir 90a (170 mg, 17%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 58,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,20-6,10 (m, 1H), 5,01-4,89 (m, 1H), 4,25-4,09 (m, 2H), 3,91 -3,69 (m, 2H), 2,41-2,14 (m, 2H), 1,80-1,61 (m, 2H), 1,56 (s, 3H)), 1,45 (s, 9H), 1,32-1,21 (m, 6H), 1,15 (s, 3H). CLEM (m/z) 483,2 [M+H], Tr = 4,28 min.

Compuesto 90b:

[0840]

[0841] Una solución de 90a (160 mg, 0,33 mmol) en tetrahidrofurano/agua/metanol (10 ml, 4:1:1) se trató con hidróxido de litio (12 mg, 0,50 mmol). Después de agitar a 60°C durante 6 horas, la reacción se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en agua (20 mL), se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,5 ml, 0,5 mmol) y la mezcla se extrajo rápidamente con diclorometano (2 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio y se filtraron. El filtrado se evaporó para producir 90b (110 mg, 73%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCla): 58,03 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,35 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 6,17-6,15 (m, 1H), 5,21-4,94 (m, 1H), 3,92 3,72 (m, 2H), 2,43-2,15 (m, 2H), 1,82-1,63 (m, 2H), 1,61 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,24 (s, 3H), 1,15 (s, 3H). CLEM (m/z) 455,2 [M+H], Tr = 3,35 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 mieras, 6 min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, ácido acético al 0,1% gradiente modificador).

Compuesto 90c

[0842]

[0843] En un matraz purgado con argón secado al horno se colocaron anhídrido 2-metil-6-n¡trobenzoico (125 mg, 0,36 mmol), 4-dimetilaminopiridina (62 mg, 0,51 mmol), 90b (110 mg, 0,24 mmol) y diclorometano anhidro (10 mL). A la solución resultante se le añadió W,W-diisopropiletilamina (66 mg, 0,51 mmol) y esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió gota a gota 1e (157 mg, 0,36 mmol) mediante una jeringa como una solución en diclorometano anhidro (5 mL). Después de agitar durante 12 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de decantación y se lavó con agua (se añadieron 20 ml, 10 ml de salmuera para apoyar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% metanol (4/1) en /so-hexanos) para producir 90c (201 mg, 96%) como un sólido blanco después de la evaporación. ¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 58,28 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,88 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,93-6,81 (m, 1H), 6,67-6,51 (m, 1H), 5,51 -5,34 (m, 2H), 5,03 (d, J = 12,1 Hz, 2H), 4,86 (d, J = 12,1 Hz, 2H), 4,13 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 3,91 -3,83 (m, 3H), 2,49-2,33 (m, 2H), 2,30 - 2,20 (m, 1H), 2,17­ 2,07 (m, 3H), 2,02-1,85 (m, 2H), 1,83-1,65 (m, 2H), 1,53 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,04 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 0,88 (d, J = 6,8 Hz, 6H). CLEM (m/z) 868,2/870,2 [M+H], Tr = 3,22 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm Columna de 5 micras, 3,5 min, 2ml/min, 5-100% acetonitrilo/agua, 0,1% gradiente modificador de ácido acético).

Compuestos 90 y 91

[0844]

[0845] A 90c (195 mg, 0,22 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se añadió una solución de hidróxido de litio (6 mg, 0,53 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, se añadió ácido clorhídrico 1 M (0,25 ml de solución 1 M en agua, 0,25 mmol) y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica se recogió, se concentró a presión reducida y se secó a alto vacío durante un día. El residuo se trató con cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol) a temperatura ambiente bajo argón durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Este residuo se disolvió en W,W-dimetilformamida (5 mL) y la solución obtenida se añadió a un matraz purgado con argón que contenía hexafluorofosfato de metanaminio 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (128 mg, 0,34 mmol), W,W-diisopropiletilamina (144 mg, 1,12 mmol) y diclorometano (100 mL). La mezcla de reacción se volvió a purgar con argón y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción obtenida se lavó con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo al 0-40% en /so-hexanos) para dar primero el compuesto 90 (27 mg, 19%) y luego el compuesto 91 (17 mg, 12%) sólidos blancos después de la evaporación.

[0846] Compuesto 90: ¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 59,08 (d, J = ^{8 , 6} Hz, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,27 (d, J = ^{8 , 6} Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,97 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 6,91-6,69 (m, 2H), 5,92-5,73 (m, 1H), 5,36-5,22 (m, 1H), 4,42- 4,26 (m, 1H), 4,01-3,83 (m, 2H), 3,83-3,73 (m, 1H), 3,71-3,62 (m, 1H), 3,55-3,42 (m, 1H), 2,53-2,41 (m, 1H), 2,33-2,26 (m, 1H), 2,13-2,05 (m, 1H), 2,00-1,87 (m, 2H), 1,81 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,79-1,61 (m, 4H), 1,44-1,38 (m, 2H), 1,33 (s, 3H), 1,30­ 1,24 (m, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,11-1,02 (m, 3H), 0,99 (d, J = ^{6 , 8} Hz, 3H). CLEM (m/z) 620,4 [M+H], Tr = 3,45 min

[0847] Compuesto 91: ¹ H RMN (400 MHz, CD³ OD): 58,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,64 (dd, J = 8,4, 1,7 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 6,24 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 5,82 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,16-5,05 (m, 1H), 4,53-4,40 (m, 1H), 3,91 -3,82 (m, 2H), 3,67-3,57 (m, 1H), 2,72 (td, J = 12,9, 3,3 Hz, 1H), 2,54-2,44 (m, 1H), 2,40 (dd, J = 13,8, 1,9 Hz, 1H), 2,34-2,16 (m, 2H), 2,02-1,92 (m, 1H), 1,90-1,79 (m, 1H), 1,78-1,70 (m, 2H), 1,68-1,52 (m, 2H), 1,64 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,61 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,31 (s, 3H), 1,20 (s, ³ H), 1,12 (d, J = ^{6 , 8} Hz, 3H), 1,08 (d, J = ^{6 , 6} Hz, 3H). CLEM (m/z) 620,4 [M+H], Tr = 3,47 min (Gemini 5u C18 110Á, 50 x 4,60 mm columna de 5 mieras, ⁶ min, 2 mL/min, acetonitrilo/agua al 5-100%, ácido acético al 0,1% gradiente modificador).

Ejemplo 92 - Compuesto 92

[0848]

Compuesto 92a

[0849]

[0850] El etil-4-oxo-1-vinilciclohexanocarboxilato suministrado comercialmente (proporcionado por Small Molecules, Inc.), (3,0 g, 15,29 mmol) en MeOH (80 mL) en un matraz equipado con un embudo de goteo se añadió gota a gota una solución de MeOH ^{( 8 0} mL) de NaBH 4 (697 mg, 18,35 mmol) a 0°C. Se agitó a 0°C durante 10 min y a TA durante 48 h. Después de inactivarse con una solución saturada de NH⁴Cl, se extrajo con EtOAc y se lavó con salmuera una vez. La capa orgánica se secó a través (Na²SO⁴) y se concentró. Los isómeros cis y trans se separaron mediante CombiFlash en columna de gel de sílice usando EtOAC/Hexano como eluyentes. En TLC con EA/HEX = 1/3, Rf de trans = 0,5, Rf de cis = 0,4. Rendimiento: isómero trans 92a fue de 425 mg, el isómero cis fue de 864 mg, la mezcla de cis/trans fue de 468 mg. El rendimiento total de (cis trans) fue 1,76 g, 59%.

[0851] Para el isómero trans 92a: 1H RMN (400 MHz, cloroformo-aj: 55,84 - 5,71 (m, 1H), 5,23 - 5,11 (m, 2H), 4,11 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 3,79 (tq, J = ⁶ ,⁸ , 3,6 Hz, 1H), 1,90 (ddd, J = 11,7, 8,2, 4,2 Hz, 4H), 1,71 (ddt, J = 11,9, 7,8, 3,7 Hz, 2H), 1,61 - 1,50 (m, 2H), 1,22 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0852] Para el isómero cis: 1H RMN (400 MHz, cloroformo-aj: 55,78 (dd, J = 17,5, 10,6 Hz, 1H), 5,13 - 5,00 (m, 2H), 4,15 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,61 (dt, J = 13,2, 6,4 Hz, 1H), 2,38 - 2,22 (m, 2H), 1,89 (dt, J = 10,7, 5,2 Hz, 2H), 1,47-1,29 (m, 4H), 1,24 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

Compuesto 92b

[0854] ^{E l r e a c t iv o 9 2 a ( 1 R , 4 R ) - e t i l 4 - h i d r o x i - 1 - v i n i l c i c l o h e x a n o c a r b o x i l a t o ( 4 25 m g , 2 , 13 m m o l) e n D C M ( 10 m L ) s e} a ñ a d i ó c o n C H ³ O B F ⁴ ( 1, 66 g , 10 , 7 m m o l) y E s p o n j a d e P r o t o n e s ( 2 , 3 g , 10 , 7 m m o l) y s e a g it ó a T A d u r a n t e 24 h . D e s p u é s d e f i l t r a r a t r a v é s d e u n a p i l a d e C e l i t e , e l f i l t r a d o s e la v ó c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N a H C O 3. L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó a t r a v é s d e ( N a 2 S O 4 ) y s e c o n c e n t r ó y p u r i f ic ó m e d ia n t e C o m b i F l a s h e n c o l u m n a d e g e l d e s í l i c e u s a n d o E t O A C / H e x a n o c o m o e l u y e n t e s . D io 223 m g ( 4 9 % d e r e n d im ie n t o ) d e ( 1 R , 4 R ) - e t i l 4 - m e t o x i - 1 - v i n i l -c i c l o h e x a n o c a r b o x i l a t o 92 b . 1 H R M N ( 400 M H z , c l o r o f o r m o - d j : 5 5 , 87 - 5 , 68 ( m , 1 H ) , 5 , 20 - 4 , 99 ( m , 2 H ) , 4 , 23 - 3 , 95 ( m , 2 H ) , 3 , 36 - 3 , 19 ( m , 4 H ) , 1, 87 ( p d , J = 13 , 5 , 5 , 6 H z , 4 H ) , 1, 75 - 1, 54 ( m , 4 H ) , 1, 29 - 1, 14 ( m , 3 H ) .

C o m p u e s t o 92 c

[0855]

[0856] ^{P a r t ie n d o d e 2 2 3 m g ( 1 , 0 5 m m o l) 92 b , la r e a c c i ó n d e H e c k p a r a f o r m a r ( 1 R , 4 R ) - e t i l 1 - ( ( E ) - 2 - ( 7 - ( ( R ) - 1 - ( t e r c -}b u t o x i c a r b o n i l a m i n o ) e t i l ) n a f t a l e n - 2 - i l ) v i n i l ) - 4 - m e t o x i c i c l o h e x a n o c a r b o x i l a t o s e h iz o d e la m i s m a m a n e r a q u e e n e l E j e m p l o 74 , e n l u g a r d e u s a r 4 - o x o - 1 - v i n i l c i c l o h e x a n o c a r b o x i l a t o d e e t i lo , p a r a d a r 424 m g ( 89 % d e r e n d im ie n t o ) d e l c o m p u e s t o in t e r m e d io . 92 c . C L E M [ M H ] = 4 55 , 10

C o m p u e s t o 92

[0857]

[0858] ^{E l c o m p u e s t o 9 2 s e p r e p a r ó u s a n d o u n a s í n t e s i s d e v a r i o s p a s o s c o m e n z a n d o d e s d e 4 2 4 m g ( 0 , 9 2 m m o l) 9 2 c} d o n d e la e s t e r i f i c a c i ó n c o n 1 e , la h i d r ó l i s i s s e l e c t i v a y l u e g o la e l i m i n a c i ó n d e W - B o c p r o p o r c io n a r o n u n in t e r m e d io q u e m a c r o c i c l o a m u e b l a d o 92 ( 36 m g ) e n 6 , 2 % d e r e n d im ie n t o g l o b a l d e s p u é s d e l t r a t a m ie n t o c o n H A T U / D I P E A e n D C M / D M F u t i l i z a n d o e l m é t o d o d e la c t o n i z a c i ó n y p u r i f ic a c ió n f in a l d e s c r i t o e n e l E j e m p l o 90. 1 H R M N ( 400 M H z , M e t a n o l - d t ) : 5 8 , 21 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 80 ( d , J = 8 , 4 H z , 1 H ) , 7 , 75 ( d , J = 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 59 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 41 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 6 , 40 ( d d , J = 124 , 5 , 16 , 3 H z , 2 H ) , 5 , 78 (q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 23 (d , J = 8 , 6 H z , 1 H ) , 5 , 09 - 4 , 99 ( m , 1 H ) , 4 , 45 - 4 , 34 ( m , 1 H ) , 3 , 60 - 3 , 51 ( m , 1 H ) , 3 , 44 ( s , 1 H ) , 3 , 33 ( s , 3 H ) , 2 , 66 (td , J = 13 , 0 , 3 , 3 H z , 1 H ) , 2 , 29 - 2 , 09 ( m , 3 H ) , 2 , 05 - 1, 78 ( m , 6 H ) , 1, 74 - 1, 62 ( m , 2 H ) , 1, 6 2 - 1, 39 ( m , 8 H ) , 1, 26 ( m , 3 H ) , 1, 0 2 ( d d , J = 19 , 3 , 6 , 7 H z , 6 H ) . C L E M [ M H ] = 620 , 63.

REFERENCIA Ejemplo 93, Compuesto 93.

[0859]

C o m p u e s t o 93 a . ( S ) - 4 - B e n c i l - 3 -( 2 - c i c l o p r o p i l - a c e t i l ) - o x a z o l i d i n - 2 - o n a

[0860]

C o m p u e s t o 93 b . ( S ) - 4 - B e n c i l - 3 -( ( S ) - 2 - c i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i - a c e t i l ) - o x a z o l i d i n - 2 - o n a

[0862]

[0863] ^{U n a s o l u c i ó n e n f r i a d a ( - 7 8 ° C ) d e s o d io b i s ( t r im e t i l s i l i l ) a m id a ( 0 , 6 M e n t o l u e n o , 6 5 m l, 3 8 , 9 18 m m o l) s e} d i l u y ó c o n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 100 m L ) y s e t r a t ó c o n u n a s o l u c i ó n d e ( S ) - 4 - b e n c i l - 3 -( 2 - c i c l o p r o p i l - a c e t i l ) -o x a z o l i d i n - 2 - o n a ( 9 , 174 g , 35 , 380 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 50 m L ) . D e s p u é s d e a g i t a r a - 78 ° C d u r a n t e 45 m in , la m e z c l a s e t r a t ó c o n u n a s o l u c i ó n d e 2 - b e n c e n o s u l f o n i l - 3 - f e n i l - o x a z i r i d i n a ( 11, 06 4 g , 42 , 456 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 50 m L ) . D e s p u é s d e a g i t a r a - 78 ° C d u r a n t e 55 m in , l a r e a c c i ó n s e in a c t iv ó c o n á c id o a c é t ic o ( 10 , 1 m l, 176 , 9 m m o l) y s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e . L a m e z c l a s e in a c t iv ó c o n u n a s o l u c i ó n d e b i c a r b o n a t o d e s o d io ( 300 m L ) y s e v e r t ió s o b r e d ic l o r o m e t a n o / / s o - h e x a n o s ( 3 : 1, 4 0 0 m L ) . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o y lo s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n , s e la v a r o n c o n t io s u l f a t o d e s o d io s a t u r a d o , á c id o c l o r h í d r i c o ( 1 M , 300 m L ) , a g u a y s e f i l t r a r o n a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s . L o s v o l á t i l e s s e e l i m i n a r o n a vacío y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o l u t e d e 100 g s e e l u y ó c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e / s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 1 : 0 a 7 : 3 , s e g u i d o d e c r o m a t o g r a f í a d e g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o l u t e d e 100 g e l u id o c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e / s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 1 :0 a 4 : 1 p a r a p r o d u c i r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 7 , 922 g , 8 1 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l 3 ) 5 0 , 42 - 0 , 65 ( m , 4 H ) , 1, 25 - 1, 38 ( m , 1 H ) , 2 , 88 ( d d , J = 13 , 4 , 9 , 6 H z , 1 H ) , 3 , 35 ( d d , J = 13 , 4 , 3 , 4 H z , 1 H ) , 3 , 44 ( d , J = 8 , 2 H z , 1 H ) , 4 , 25 - 4 , 37 ( m , 2 H ) , 4 , 67 - 4 , 72 ( m , 1 H ) , 4 , 80 ( d d , J = 8 , 0 , 6 , 0 H z , 1 H ) , 7 , 21 - 7 , 4 1 ( m , 5 H ) . C L E M ( m / z ) 298 , 1 [ M N a ] , T r = 2 , 27 m in .

C o m p u e s t o 93 c . ( S ) - 4 - B e n c i l - 3 -( ( S ) - 2 - c i d o p r o p i l - 2 - t r i i s o p r o p i l s i l a n i l o x i - a c e t i l ) - o x a z o l i d i n - 2 - o n a

[0864]

[0865] ^{U n a s o l u c ió n e n f r i a d a ( 0 ° C ) d e ( S ) - 4 - b e n c i l - 3 - ( ( S ) - 2 - c i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i - a c e t i l ) - o x a z o l i d i n - 2 - o n a ( 4 , 13 7} g , 15 , 026 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 60 m L ) s e t r a t ó p o s t e r io r m e n t e c o n 2 , 6 - l u t i d i n a ( 3 , 5 m l, 30 , 052 m m o l) y t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n a t o d e t r i i s o p r o p i l s i l i l o ( 6 , 1 m l, 22 , 539 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h , la r e a c c i ó n s e in a c t iv ó c o n t a m p ó n d e p H 4 ( f t a la t o ) . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n , s e f i l t r a r o n a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s y lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n al vacío. E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o l u t e d e 100 g s e e l u y ó c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e / s o - h e x a n o s / é t e r d ie t í l i c o 1 :0 a 9 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 5 , 28 g , 8 1 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o .

1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 0 , 40 - 0 , 49 ( m , 2 H ) , 0 , 53 - 0 , 62 ( m , 1 H ) , 0 , 63 - 0 , 71 ( m , 1 H ) , 1, 0 2 - 1, 18 ( m , 21 H ) , 1, 20 - 1, 34 ( m , 1 H ) , 2 , 66 ( d d , J = 13 , 1, 10 , 5 H z , 1 H ) , 3 , 49 ( d d , J = 13 , 1, 3 , 4 H z , 1 H ) , 4 , 17 - 4 , 27 ( m , 2 H ) , 4 , 63 - 4 , 73 ( m , 1 H ) , 5 , 58 (d , J = 5 , 1 H z , 1 H ) , 7 , 24 - 7 , 40 ( m , 5 H ) .

C o m p u e s t o 93 d . Á c i d o ( S ) - c i c l o p r o p i l - h i d r o x i - a c é t i c o

[0866]

C o m p u e s t o 93 e . É s t e r f e r c - b u t í l i c o d e l á c i d o ( ( S ) - 2 - { ( S ) - 3 -[ ( R ) - 1 -( 7 - B r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l c a r b a m o i l ] - t e t r a h i d r o -p i r i d a z i n - 1 - i l } - 1 - m e t i l - 2 - o x o - e t i l ) - c a r b á m i c o

[0868]

C o m p u e s t o 93 f . Á c i d o ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - c i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i - a c e t i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a

[0870]

C o m p u e s t o 93 g . Á c i d o 6 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - C i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i - a c e t i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - h e x a h i d r o -p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) - e t i l ] - q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) -[ 1, 4 ] d i o x e p a n o - 6 - c a r b o x í l i c o

[0872]

[0873] ^{U n a s o l u c i ó n d e á c id o ( S ) - 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - c i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i - a c e t i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 -}c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 244 m g , 0 , 459 m m o l) , á c i d o 6 - v i n i l -[ 1, 4 ] d i o x e p a n o - 6 -c a r b o x í l i c o 57 d ( 79 m g , 0 , 459 m m o l) , t r i e t i l a m in a ( 140 m g , 192 p L , 1, 38 m m o l) y t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 28 m g , 0 , 092 m m o l) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 9 m L ) s e d e s g a s i f i c a r o n c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 5 m in y l u e g o s e c a l e n t ó a 50 ° C b a jo n it r ó g e n o c o n a g i t a c ió n . S e a ñ a d i ó t r i s ( d i b e n c i l i d e n o a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 42 m g , 0 , 046 m m o l) y la m e z c l a s e c a l e n t ó a 80 ° C d u r a n t e 45 m in y l u e g o s e d e jó e n f r ia r . L a s u s p e n s i ó n s e f ilt r ó y s e e v a p o r ó p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo c r u d o q u e s e u s ó e n e l s i g u i e n t e p a s o s i n p u r i f ic a c ió n a d i c i o n a l . C L E M ( m / z ) 624 , 2 [ M H ] , T r = 1, 58 m in .

C o m p u e s t o 93.

[0874]

[0875] ^{A u n a m e z c l a a g i t a d a d e p o lv o d e 4 Á t a m i c e s m o l e c u l a r e s ( ~ 1 g ) , a n h í d r i d o 2 - m e t i l - 6 - n i t r o b e n z o i c o ( 3 16} m g , 0 , 918 m m o l) y 4 -( d i m e t i l a m i n o ) p i r i d i n a ( 224 m g , 1, 84 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 138 m L ) , b a jo n it r ó g e n o , s e a ñ a d ió u n a s o l u c i ó n d e 93 g e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) d u r a n t e 3 h m e d ia n t e u n a b o m b a d e j e r i n g a . E l m a t r a z q u e o r ig i n a l m e n t e c o n t e n í a e l á c id o c r u d o s e la v ó c o n d ic l o r o m e t a n o (1 m L ) y e s t o s e a ñ a d i ó a la m e z c l a d e r e a c c i ó n d u r a n t e aprox. 20 m in u t o s . U n a v e z f i n a l i z a d a la a d i c i ó n , la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó d u r a n t e 1, 5 h , s e f ilt r ó a t r a v é s d e C e l i t e y s e la v ó s u c e s i v a m e n t e c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n i o e n f r i a d a c o n h ie lo , u n a s o l u c ió n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io e n f r i a d a c o n h ie lo , s a l m u e r a s a t u r a d a y s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e / ' s o - h e x a n o s / a c e t o n a 1 :1 a 1 :3 s e g u i d o d e H P L C p r e p a r a t i v a d e f a s e i n v e r s a u s a n d o u n g r a d ie n t e d e a c e t o n i t r i l o / a g u a 1 : 9 a 7 : 3 p a r a d a r , d e s p u é s d e t r i t u r a c ió n c o n é t e r d ie t í l i c o , e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 21 m g , 8 % e n 2 p a s o s ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) 5 0 , 49 - 0 , 74 ( m , 4 H ) , 1, 27 - 1, 4 1 ( m , 1 H ) , 1, 4 8 - 1, 78 ( m , 2 H ) , 1, 60 ( d , J = 6 , 9 H z , 3 H ) , 1, 65 (d , J = 7 , 3 H z , 3 H ) , 1, 91 - 2 , 01 ( m , 1 H ) , 2 , 20 - 2 , 29 ( m , 2 H ) , 2 , 65 - 2 , 76 ( m , 1 H ) , 3 , 57 - 3 , 94 ( m , 5 H ) , 4 , 17 (d , J = 12 , 7 H z , 1 H ) , 4 , 36 ( d , J = 12 , 7 H z , 1 H ) , 4 , 39 - 4 , 48 ( m , 1 H ) , 4 , 53 (d , J = 12 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 0 3 - 5 , 12 ( m , 3 H ) , 5 , 84 ( q , J = 7 , 1 H z , 1 H ) , 6 , 33 (d , J = 16 , 5 H z , 1 H ) , 6 , 52 ( d , J = 16 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 47 (d , J = 8,5 H z , 1 H ) , 7 , 70 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 6 H z , 1 H ) , 7 , 78 (ancho s , 1 H ) , 7 , 86 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 26 ( d , J = 8,5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 606 , 2 [ M H ] , T r = 2 , 08 m in .

Ejemplo 94. Compuesto 94.

[0876]

C o m p u e s t o 94 a . Á c i d o 3 - m e t i l - t e t r a h i d r o - p i r i d a z i n a - 1, 2 , 3 - t r i c a r b o x í l i c o 1, 2 - d i - f e r c - b u t i l é s t e r 3 - m e t i l é s t e r

[0877]

[0878] ^{A u n a s o l u c ió n d e á c id o ( S ) - t e t r a h i d r o - p i r i d a z i n a - 1 , 2 , 3 - t r i c a r b o x í l i c o 1 , 2 - d i - f e r c - b u t i l é s t e r 3 - ( 2 , 2 , 2 - t r i c l o r o -}e t i l) é s t e r ( 5 , 0 g , 10 , 8 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o / m e t a n o l ( 50 m l, 1 : 1 ) q u e c o n t ie n e 3 Á t a m i c e s m o l e c u l a r e s a 0 ° C s e a ñ a d i ó f lu o r u r o d e t e t r a n - b u t i l a m o n io ( 22 m l, 22 m m o l, 1 M e n t e t r a h id r o f u r a n o ) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 24 h , la m e z c l a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a c a p a d e C e l i t e y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e r e p a r t ió e n t r e é t e r d ie t í l i c o y u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e h id r o g e n o c a r b o n a t o d e s o d io . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n é t e r d ie t í l i c o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y la s o l u c i ó n s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e e l u y e n d o c o n / ' s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 20 : 1 a 3 : 2 , p a r a o b t e n e r á c i d o ( S ) - t e t r a h i d r o - p i r i d a z i n a - 1, 2 , 3 - t r i c a r b o x í l i c o 1, 2 - d i - f e r c - b u t i l é s t e r 3 - m e t i l é s t e r ( 3 , 0 g , 8 2 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o y c o m o u n a m e z c l a d e r o t á m e r o s . C L E M ( m / z ) 345 , 1 [ M H ] , T r = 2 , 78 m in . U n a s o l u c ió n d e ( S ) -t e t r a h i d r o - p i r i d a z i n a - 1, 2 , 3 - t r i c a r b o x í l i c o é s t e r 1 , 2 - d i - f e r c - b u t í l i c o é s t e r 3 - m e t í l i c o ( 3 , 0 g , 8 , 72 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 20 m L ) a - 78 ° C s e t r a t ó c o n b i s ( t r im e t i l s i l i l ) a m id a d e lit io ( 13 m l, 13 , 0 m m o l, 1 M e n t e t r a h id r o f u r a n o ) . D e s p u é s d e a g i t a r a - 78 ° C d u r a n t e 1 h , la m e z c l a s e t r a t ó c o n y o d o m e t a n o ( 1, 4 m l, 22 , 5 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 1 h , l u e g o a 0 ° C d u r a n t e 1 h y a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e v o l v ió a e n f r ia r a 0 ° C y s e in a c t iv ó c o n a g u a . L a f a s e a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 2 x ) y la s o l u c i ó n o r g á n i c a s e p a s ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e e l u y e n d o c o n u n g r a d ie n t e d e / s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 4 : 1 a 0 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 1, 62 g , 5 2 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 1, 4 1 - 1, 5 2 ( m , 18 H ) , 1, 5 3 - 1, 6 7 ( m , 4 H ) , 1, 7 1 - 1, 9 9 ( m , 3 H ) , 3 , 17 - 3 , 5 1 ( m , 1 H ) , 3 , 70 - 3 , 81 ( m , 3 H ) , 3 , 90 - 4 , 21 ( m , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 359 , 0 [ M H ] , T r = 2 , 90 m in .

C o m p u e s t o 94 b . É s t e r d i - f e r c - b u t í l i c o d e l á c id o 3 -[ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l c a r b a m o i l ] - 3 - m e t i l - t e t r a h i d r o -p i r i d a z i n - 1, 2 - d i c a r b o x í l i c o

[0879]

C o m p u e s t o 94 c . É s t e r t e r c - b u t í l i c o d e á c i d o ( ( S ) - 2 - { 3 -[ ( R ) - 1 -( 7 - B r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l c a r b a m o i l ] - 3 - m e t i l - t e t r a h i d r o -p i r i d a z i n - 1 - i l } - 1 - m e t i l - 2 - o x o - e t i l ) - c a r b á m i c o

[0881]

[0882] ^{A u n a s o l u c i ó n d e é s t e r d i - f e r c - b u t i l i c o d e l á c id o 3 - [ ( R ) - 1 - ( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l c a r b a m o i l ] - 3 - m e t i l -}t e t r a h ¡ d r o - p ¡ r ¡ d a z ¡ n - 1, 2 - d i c a r b o x í l ¡ c o ( 925 m g , 1, 6 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) a 0 ° C s e a ñ a d i ó á c id o t r i f l u o r o a c é t i c o ( 3 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 36 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c o n c e n t r ó a p r e s ió n r e d u c i d a y e l r e s i d u o s e c o - e v a p o r ó c o n t o l u e n o ( 3 x ) p a r a d a r á c i d o 3 - m e t i l - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o s a l b i s - t r i f lu o r o a c e t a t o d e [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l o ) - e t i l ] - a m i d a ( 1, 6 m m o l) c o m o u n a e s p u m a d e c o l o r m a r r ó n c l a r o . C L E M ( m / z ) 377 , 3 , 379 , 2 [ M H ] , T r = 1, 18 m in . A u n a s o l u c ió n d e á c i d o ( S ) - 2 - f e r c - b u t o x i c a r b o n i l a m i n o - p r o p i ó n i c o ( 303 m g , 1, 6 m m o l) e n a c e t o n it r i lo a n h id r o ( 12 m L ) a 0 ° C s e le a ñ a d i ó h e x a f lu o r o f o s f a t o d e 0 -( b e n z o t r i a z o l - 1 - i l ) - N , N , N ' , N ' - t e t r a m e t i l u r o n i o ( 915 m g , 2 , 41 m m o l) y N,N-d i i s o p r o p i l e t i l a m i n a ( 1, 5 m l, 8 , 42 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 15 m in y l u e g o s e t r a t ó c o n u n a s o l u c i ó n d e s a l b is t r i f l u o r o a c e t a t o d e [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 1, 6 m m o l) e n a n h id r o a c e t o n it r i lo (8 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y s e a g it ó d u r a n t e 16 h . E l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e r e p a r t ió e n t r e d ic l o r o m e t a n o y a g u a . L a c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó y la c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e p a s a r o n a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l d is o l v e n t e . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a d e g e l d e s í l i c e e l u y e n d o c o n u n g r a d ie n t e d e / s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 20 : 1 a 0 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 857 m g , 4 0 % e n 2 p a s o s ) c o m o u n a c e i t e m a r r ó n y c o m o u n a m e z c l a d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 548 , 0 , 550 , 0 [ M H ] , T r = 2 , 68 m in .

C o m p u e s t o 94 d . Á c i d o 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - H i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - 3 - m e t i l - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a

[0883]

[0884] ^{A u n a s o l u c i ó n d e é s t e r f e r c - b u t í l i c o d e l á c i d o ( ( S ) - 2 - { 3 - [ ( R ) - 1 - ( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l o ) - t i l c a r b a m o i l ] - 3 - m e t i l -}t e t r a h i d r o - p i r i d a z i n - 1 - i l } - 1 - m e t i l - 2 - o x o - e t i l ) - c a r b á m i c o ( 1, 92 g , 3 , 5 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 15 m L ) a 0 ° C . S e a ñ a d i ó á c i d o t r i f l u o r o a c é t i c o ( 3 m L ) a ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y l u e g o s e a g it ó d u r a n t e 4 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c o n c e n t r ó y e l r e s i d u o s e c o e v a p o r ó c o n t o l u e n o ( 3 x ) p a r a d a r á c i d o 1 -( ( S ) - 2 - a m i n o - p r o p i o n i l ) - 3 - m e t i l - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o s a l t r i f l u o r o a c e t a t o d e [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) -e t i l ] - a m i d a ( 3 , 5 m m o l) c o m o u n a c e i t e m a r r ó n . C L E M ( m / z ) 448 , 0 , 450 , 0 [ M H ] , T r = 1, 22 m in . s a l t r i f l u o r o a c e t a t o d e l á c i d o 1 -( ( S ) - 2 - a m i n o - p r o p i o n i l ) - 3 - m e t i l - h e x a h i d r o p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 3 , 5 m m o l) s e d i s o l v i ó e n d ic l o r o m e t a n o ( 20 m L ) y l a s o l u c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C . Á c i d o ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t í r i c o ( 458 m g , 3 , 8 m m o l) , N , N - d i i s o p r o p i l e t i l a m i n a ( 5 m l, 28 , 0 m m o l) y h e x a f lu o r o f o s f a t o d e ( b e n z o t r i a z o l - 1 -i l o x i ) t r i s ( d im e t i l a m in o ) f o s f o n io ( 1, 86 g , 4 , 2 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y s e a g it ó d u r a n t e 16 h . S e e v a p o r ó e l d i s o l v e n t e y s e d i s o l v i ó e l r e s i d u o e n a c e t a t o d e e t i lo . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e la v ó c o n á c id o c í t r ic o ( 10 % ) , s o l u c ió n s a t u r a d a d e h id r o g e n o c a r b o n a t o d e s o d io y s a l m u e r a , s e s e c ó s o b r e s u l f a t o d e m a g n e s i o a n h id r o y s e e v a p o r ó e l d is o l v e n t e . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e e l u y e n d o c o n u n g r a d ie n t e d e a c e t a t o d e e t i lo / m e t a n o l 1 :0 a 20 : 1 p a r a p r o d u c i r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 745 m g , 3 9 % e n 2 p a s o s ) c o m o u n a e s p u m a b l a n c a y c o m o u n a m e z c l a 1 :4. d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 548 , 0 , 550 , 0 [ M H ] , T r = 2 , 21 m in .

C o m p u e s t o 94 e .

[0885]

[0886] ^{U n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e á c i d o 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - 3 - m e t i l - h e x a h i d r o -}p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 164 m g , 0 , 3 m m o l) , á c id o 4 - o x o - 1 - v i n i l -c i c l o h e x a n o c a r b o x í l i c o ( 50 m g , 0 , 3 m m o l) , t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 18 m g , 0 , 06 m m o l) y t r ie t i l a m in a ( 91 m g , 0 , 13 m l, 0 , 9 m m o l) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 10 m L ) s e d e s g a s i f i c a r o n c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 15 m in . L a s o l u c i ó n s e c a l e n t ó a 50 ° C y s e a ñ a d ió t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 28 m g , 0 , 03 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 80 ° C d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y l a m e z c l a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o d u c i r á c i d o 1 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - 3 - m e t i l -h e x a h i d r o p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) - e t i l ] - q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 4 - o x o - c i c l o h e x a n o c a r b o x í l i c o ( 0 , 3 m m o l) c o m o u n a g o m a a m a r i l l a y c o m o u n a m e z c l a d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 636 , 2 [ M H ] , T r = 1, 65 m in . S e a g it ó u n a s o l u c i ó n d e a n h í d r i d o 2 - m e t i l - 6 - n i t r o b e n z o ic o ( 206 m g , 0 , 6 m m o l) y 4 -( d i m e t i l a m i n o ) - p i r i d i n a ( 146 m g , 1, 2 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 200 m L ) q u e c o n t e n í a 4 Á t a m i c e s m o l e c u l a r e s ( 200 m g ) a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n it r ó g e n o . U n a s o l u c i ó n d e á c i d o 1 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - 3 - m e t i l - h e x a h i d r o -p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) - e t i l ] - q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 4 - o x o - c i c l o h e x a n o c a r b o x í l i c o c r u d o ( 0 , 3 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 5 m L ) s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a d u r a n t e 4 h y l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 18 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f ilt r ó a t r a v é s d e C e l i t e y la s o l u c i ó n s e e v a p o r ó p a r c i a l m e n t e h a s t a u n v o l u m e n d e - 30 m l. L a s o l u c i ó n s e la v ó c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io e n f r i a d a c o n h ie lo , u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io e n f r i a d a c o n h ie lo y s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e e l u y e n d o c o n u n g r a d ie n t e d e iso-h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 1 :1 a 0 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 77 m g , 4 1 % ) c o m o u n s ó l id o d e c o l o r b l a n c o y c o m o u n a m e z c l a d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 618 , 2 [ M H ] , T r = 2 , 38 m in .

C o m p u e s t o 94.

[0887]

[0888] ^{S e a g it ó u n a s o l u c i ó n d e l c o m p u e s t o 9 4 e ( 41 m g , 0 , 06 6 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o (4 m L ) a - 7 8 ° C b a jo} n it r ó g e n o . S e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e b o r o h id r u r o d e lit io ( 2 M e n t e t r a h id r o f u r a n o , 0 , 15 m l, 0 , 23 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 30 m in . S e a ñ a d i e r o n á c i d o c l o r h íd r ic o ( 2 M ) y a c e t a t o d e e t i lo y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e . L a c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó y la c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c ió n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o n a r a n j a s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C p r e p a r a t i v a d e f a s e in v e r s a e l u y e n d o c o n a c e t o n it r i lo ( m o d if i c a d o c o n á c i d o f ó r m i c o a l 0 , 1 % ) / a g u a ( m o d if i c a d o c o n á c i d o f ó r m i c o a l 0 , 1 % ) 3 : 7. L a s f r a c c i o n e s q u e c o n t e n í a n e l p r o d u c t o s e c o m b i n a r o n y s e e v a p o r a r o n . E l r e s i d u o s e d is o l v ió e n a c e t a t o d e e t i lo y la s o l u c i ó n s e la v ó c o n u n p e q u e ñ o v o l u m e n d e s o l u c ió n s a t u r a d a d e h id r o g e n o c a r b o n a t o d e s o d io y s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o d u c i r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 12 m g , 29 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o y c o m o u n a m e z c l a 9 : 1 d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) ( p ic o s p a r a e l d i a s t e r e o i s ó m e r o p r in c ip a l ) 5 1, 04 (d , J = 6 , 5 H z , 3 H ) , 1, 10 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 20 - 1, 4 0 ( m , 3 H ) , 1, 48 ( s , 3 H ) , 1, 58 (d , J = 7 , 1 H z , 3 H ) , 1, 59 (d , J = 7 , 3 H z , 3 H ) , 1, 65 - 1, 80 ( m , 3 H ) , 1, 9 5 - 2 , 25 ( m , 4 H ) , 2 , 34 - 2 , 38 ( m , 1 H ) , 2 , 56 - 2 , 71 ( m , 2 H ) , 3 , 35 - 3 , 40 ( m , 1 H ) , 3 , 60 - 3 , 67 ( m , 1 H ) , 4 , 42 - 4 , 50 ( m , 1 H ) , 5 , 14 ( q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 27 (d , J = 7 , 4 H z , 1 H ) , 5 , 74 ( q , J = 7 , 1 H z , 1 H ) , 6 , 34 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 60 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 46 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 58 (d , J = 8 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 84 (d , J = 8 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 93 (ancho s , 1 H ) , 8 , 26 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 620 , 2 [ M H ] , T r = 2 , 17 m in .

REFERENCIA Ejemplo 95: Compuesto 95

[0889]

C o m p u e s t o 95 a . É s t e r e t í l i c o d e l á c i d o h i d r o x i - o x e t a n - 3 - i l - a c é t i c o

[0890]

[0891] ^{A u n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o o x e t a n - 3 - i l - a c é t i c o ( o b t e n id o d e A c t iv a t e S c i e n t i f i c G m b H ) ,} ( 1, 04 g , 7 , 21 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 72 m L ) a - 78 ° C b a jo n i t r ó g e n o s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a h e x a m e t i l d i s i l a z i d a s ó d i c a ( 0 , 6 M e n t o l u e n o , 14 , 4 m l, 8 , 66 m m o l) p a r a d a r u n a s o l u c i ó n d e c o l o r a m a r i l l o a n a r a n j a d o . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 30 m in y l u e g o s e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e 2 -( f e n i l s u l f o n i l ) - 3 - f e n i l -o x a z i r i d i n a ( 2 , 83 g , 10 , 8 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 7 m L ) d u r a n t e 2 m in . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 90 m in y l u e g o s e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io ( 10 m L ) m e d ia n t e u n a j e r i n g a . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y d e s p u é s d e 5 m in s e a ñ a d i ó m á s s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io ( 10 m L ) y l u e g o s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e n e u t r a l iz ó a p H 7 c o n á c id o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) y l a m e z c l a s e d i l u y ó c o n a g u a y s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo (4 x ) . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e la v a r o n c o n s a l m u e r a , s e s e c a r o n s o b r e s u l f a t o d e m a g n e s i o a n h id r o , s e f i l t r a r o n y s e e v a p o r a r o n p a r c i a l m e n t e h a s t a a p r o x i m a d a m e n t e - 10 m l. L a m e z c l a s e d i l u y ó c o n d ic l o r o m e t a n o y lo s s ó l i d o s s e s e p a r a r o n p o r f i l t r a c ió n , e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e iso-h e x a n o s / é t e r d ie t í l i c o 1 : 0 a 1 : 3 p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 688 m g , 6 0 % ) c o m o u n a g o m a b l a n c a . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 1, 30 (t, J = 7 , 2 H z , 3 H ) , 2 , 95 (d , J = 5 , 1 H z , 1 H ) , 3 , 26 - 3 , 38 ( m , 1 H ) , 4 , 26 ( q , J = 7 , 1 H z , 2 H ) , 4 , 42 ( d d , J = 7 , 4 , 5 , 1 H z , 1 H ) , 4 , 67 - 4 , 81 ( m , 4 H ) . C L E M ( m / z ) 16 1, 2 [ M H ] T r = 0 , 72 m in

C o m p u e s t o 95 b . É s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o e t o x i c a r b o n i l - o x e t a n - 3 - i l - m e t i l o

[0892]

[0893] ^{A u n a s o l u c ió n a g i t a d a d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o h i d r o x i - o x e t a n - 3 - i l - a c é t i c o ( 33 0 m g , 2 , 0 6 m m o l) , a n h í d r i d o 2 -}m e t i l - 6 - n i t r o b e n z o ic o ( 1, 42 g , 4 , 12 m m o l) y 4 - d i m e t i l a m i n o p i r id in a ( 100 m g , 0 , 82 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o (4 m L ) s e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o ( 294 m g , 2 , 58 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 4 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó d u r a n t e 4 h y l u e g o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o i ' s o - h e x a n o s / é t e r d ie t í l i c o 4 : 1 p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 383 m g , 7 3 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 1, 27 (t, J = 7 , 1 H z , 3 H ) , 1, 39 ( s , 3 H ) , 1, 41 ( s , 3 H ) , 3 , 48 - 3 , 61 ( m , 1 H ) , 4 , 20 (q , J = 7 , 1 H z , 2 H ) , 4 , 62 - 4 , 68 ( m , 2 H ) , 4 , 72 - 4 , 85 ( m , 2 H ) , 5 , 12 - 5 , 24 ( m , 3 H ) , 6 , 09 ( d d , J = 17 , 5 , 10 , 6 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 257 , 1 [ M H ] , T r = 2 , 31 m in

C o m p u e s t o 95 c . C a r b o x i - o x e t a n - 3 - i l - m e t i l é s t e r d e l á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o

[0894]

[0895] ^{A u n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e e t o x i c a r b o n i l - o x e t a n - 3 - i l - m e t i l é s t e r d e l á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o ( 20 7 m g ,} 0 , 808 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 81 m L ) s e a ñ a d i ó a u n a s o l u c i ó n d e c a r b o n a t o d e p o t a s io ( 123 m g , 0 , 888 m m o l) e n a g u a ( 20 , 25 m L ) s e g u i d o d e m e t a n o l ( 4 , 05 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a r e f lu jo d u r a n t e 7 h o r a s y l u e g o s e d e jó e n f r ia r . S e a ñ a d i ó á c i d o c l o r h í d r i c o ( 2 M , 400 m L ) ( p H 7 ) y s e e v a p o r a r o n lo s d i s o l v e n t e s . E l r e s i d u o s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 2 x ) y lo s l a v a d o s s e d e s c a r t a r o n . L a f a s e a c u o s a s e a c id i f ic ó c o n á c i d o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) a p H 5 , s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 2 x ) y lo s e x t r a c t o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e p a s a r o n a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r a r o n . A la c a p a a c u o s a s e le a ñ a d i ó á c i d o c l o r h í d r i c o ( a p r o x i m a d a m e n t e 5 g o t a s ) y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 2 x ) y lo s e x t r a c t o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e p a s a r o n a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a , s e e v a p o r a r o n y s e c o m b in a r o n c o n e l m a t e r ia l a n t e r io r p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 123 m g , 6 7 % ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o / v e r d e .

1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 1, 39 ( s , 3 H ) , 1, 40 ( s , 3 H ) , 3 , 54 - 3 , 67 ( m , 1 H ) , 4 , 67 - 4 , 75 ( m , 2 H ) , 4 , 81 - 4 , 92 ( m , 2 H ) , 5 , 14 (d , J = 10 , 9 H z , 1 H ) , 5 , 15 - 5 , 3 2 ( m , 2 H ) , 6 , 08 ( d d , J = 17 , 5 , 10 , 5 H z , 1 H ) , 9 , 30 (ancho s , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 229 , 1 [ M H ] T r = 1, 67 m in .

C o m p u e s t o 95 d . Á c i d o ( S ) - 1 -( ( S ) - 2 - a m i n o - p r o p i o n i l ) - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) -e t i l ] - a m i d a

[0896]

[0897] ^{A u n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e á c i d o ( S ) - 1 - ( ( S ) - 2 - a m i n o - p r o p i o n i l ) - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x i l i c o [ ( R ) - 1 - ( 7 -}b r o m o q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 330 m g , 0 , 618 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) a 0 ° C , s e a ñ a d i ó á c id o t r i f l u o r o a c é t i c o ( 3 , 3 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó d u r a n t e 1 h o r a y l u e g o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e d i s o l v i ó e n d ic l o r o m e t a n o y s e la v ó c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o ( 2 x ) , lo s e x t r a c t o s a c u o s o s s e la v a r o n c o n d ic l o r o m e t a n o y lo s e x t r a c t o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e p a s a r o n a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r a r o n p a r a d a r u n a e s p u m a a m a r i l l a ( 232 m g ) q u e s e l l e v ó a l a s i g u i e n t e p a s o d i r e c t a m e n t e .

C o m p u e s t o 95 e . Á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o ( ( S ) - 2 - { ( S ) - 3 -[ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l c a r b a m o i l ] -t e t r a h i d r o p i r i d a z i n - 1 - i l } - 1 - m e t i l - 2 - o x o - e t i l c a r b a m o i l ) - o x e t a n - 3 - i l - m e t i l é s t e r

[0898]

[0899] ^{U n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e á c i d o ( S ) - 1 - ( ( S ) - 2 - a m i n o - p r o p i o n i l ) - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 - ( 7 - b r o m o -}q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 141 m g , 0 , 618 m m o l) y á c id o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o é s t e r c a r b o x i - o x e t a n - 3 - i l - m e t í l i c o ( 315 m g , 0 , 725 m m o l) e n W , W - d im e t i l f o r m a m id a a n h i d r a ( 10 m L ) s e e n f r ió a 0 ° C b a jo n it r ó g e n o . S e a ñ a d i ó 2 , 2 , 6 , 6 t e t r a m e t i l p ip e r id i n a ( 261 m g , 3 13 m l, 1, 85 m m o l) , s e g u i d a r á p id a m e n t e d e h e x a f lu o r o f o s f a t o d e ( 1 - c i a n o - 2 - e t o x i - 2 -o x o e t i l i d e n a m i n o o x i ) d i m e t i l a m i n o - m o r f o l i n o c a r b e n i o ( 371 m g , 0 , 865 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y s e a g it ó d u r a n t e 15 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i l u y ó c o n d ic l o r o m e t a n o y s e la v ó c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io ( 2 x ) , u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e b i c a r b o n a t o d e s o d io ( 2 x ) , la c a p a o r g á n i c a s e f i lt r ó a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s y s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e / ' s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 1 : 0 a 0 : 1 p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 167 m g , 4 2 % ) c o m o u n a e s p u m a d e c o l o r a m a r i l l o / m a r r ó n y e n u n a r e l a c ió n a p r o x i m a d a 1 :1 m e z c l a d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 644 , 2 , 6 46 , 1 [ M H ] , T r = 2 , 63 m in .

C o m p u e s t o 95.

[0900]

[0901] ^{U n a s o l u c i ó n d e á c id o 2 , 2 - d i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o ( ( S ) - 2 - { ( S ) - 3 - [ ( R ) - 1 - ( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l c a r b a m o i l ] -}t e t r a h i d r o - p i r i d a z i n - 1 - i l } - 1 - m e t i l - 2 - o x o - e t i l c a r b a m o i l ) - o x e t a n - 3 - i l - m e t i l é s t e r ( 167 m g , 0 , 259 m m o l) , t r ie t i l a m in a ( 79 m g , 108 m l, 0 , 777 m m o l) y t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 16 m g , 0 , 052 m m o l) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 86 m L ) s e d e s g a s i f i c ó c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 10 m in y l u e g o s e c a l e n t ó a 50 ° C b a jo n it r ó g e n o c o n a g i t a c i ó n . S e a ñ a d i ó t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 24 m g , 0 , 026 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 80 ° C d u r a n t e 90 m in y l u e g o m á s t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 32 m g , 0 , 104 m m o l) y t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 48 m g , 0 , 052 m m o l) s e a ñ a d i e r o n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 8 0 ° C d u r a n t e 2 h , y s e a ñ a d i e r o n m á s t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 16 m g , 0 , 52 m m o l) y t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 24 m g , 0 , 026 m m o l) . D e s p u é s d e c a l e n t a r a 80 ° C d u r a n t e 1, 5 h , s e a ñ a d i e r o n m á s t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 16 m g , 0 , 52 m m o l) y t r i s ( d i b e n c i l i d e n o a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 24 m g , 0 , 026 m m o l) . D e s p u é s d e c a l e n t a r a 80 ° C d u r a n t e 30 m in , la m e z c l a s e e n f r ió y s e f ilt r ó s o b r e C e l i t e y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C p r e p a r a t i v a d e f a s e i n v e r s a u s a n d o u n g r a d ie n t e d e a c e t o n i t r i l o / a g u a 1 : 9 a 7 : 3 p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 15 , 6 m g , 11 % ) c o m o u n s ó l id o a m a r i l l o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) 5 1, 46 ( s , 3 H ) , 1 , 50 ­ 1 , 73 ( m , 1 H ) , 1, 56 ( s , 3 H ) , 1, 59 ( d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 64 ( d , J = 7 , 2 H z , 3 H ) , 1, 90 - 2 , 01 ( m , 1 H ) , 2 , 23 - 2 , 3 2 ( m , 1 H ) , 2 , 63 ­ 2 , 74 ( m , 1 H ) , 3 , 47 - 3 , 62 ( m , 2 H ) , 4 , 37 - 4 , 45 ( m , 1 H ) , 4 , 64 (t, J = 6 , 5 H z , 1 H ) , 4 , 72 - 4 , 82 ( m , 4 H ) , 5 , 09 (q , J = 6 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 75 ( q , J = 7 , 4 H z , 1 H ) , 5 , 82 (d , J = 6 , 9 H z , 1 H ) , 6 , 38 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 60 ( d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 45 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 61 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 6 H z , 1 H ) , 7 , 81 (ancho s , 1 H ) , 7 , 85 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 26 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 564 , 2 [ M H ] , T r = 2 , 16 m in .

Ejemplo 96. Compuesto 96.

[0902]

[0903] ^{u n a s o l u c i ó n e n f r i a d a ( 0 ° C ) d e l c o m p u e s t o 4 5 ( 63 , 0 m g , 0 , 0 9 1 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) s e t r a t ó c o n u n a} s o l u c i ó n d e c l o r u r o d e h id r ó g e n o (4 M ) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 0 , 12 m l, 0 , 455 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 6 d í a s , s e a ñ a d i e r o n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) y c l o r u r o d e h id r ó g e n o (4 M ) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 0 , 12 m l, 0 , 455 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r d u r a n t e 4 h a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e , lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n al vacío y e l a g u a r e s i d u a l s e s e p a r ó a z e o t r ó p i c a m e n t e c o n t o l u e n o p a r a p r o p o r c io n a r u n s ó l id o b l a n c o q u e s e s u s p e n d i ó e n d ic l o r o m e t a n o ( 5 m L ) y la m e z c l a s e t r a t ó p o s t e r io r m e n t e c o n t r ie t i l a m in a ( 0 , 02 m l, 0 , 136 m m o l) y a c e t a l d e h í d o ( 0 , 01 m l, 0 , 182 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 30 m in , la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e t r a t ó c o n t r ia c e t o x ib o r o h i d r u r o d e s o d io ( 38 , 6 m g , 0 , 182 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r d u r a n t e 1 h a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e , la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e in a c t iv ó c o n u n a s p o c a s g o t a s d e b ic a r b o n a t o d e s o d io s a t u r a d o y s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s . L o s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n al vacío y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C p r e p a r a t i v a d e f a s e i n v e r s a u s a n d o u n g r a d ie n t e d e a c e t o n i t r i l o / a g u a d e 5 : 95 a 3 : 7 m o d if ic a d o c o n á c i d o f ó r m i c o a l 0 , 1 % . D e s p u é s d e la e v a p o r a c i ó n d e lo s v o l á t i l e s , e l s ó l id o b l a n c o s e r e p a r t ió e n t r e a c e t a t o d e e t i lo y u n a s o l u c ió n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io . L o s o r g á n i c o s s e f i l t r a r o n a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s y lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n al vacío p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 8 , 3 m g , 1 5 % e n 2 p a s o s ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) : 5 1, 0 2 - 1, 18 ( m , 9 H ) , 1, 22 - 1, 3 3 ( m , 1 H ) , 1, 5 1 - 1, 7 3 ( m , 7 H ) , 1, 89 - 2 , 00 ( m , 1 H ) , 2 , 11 ( d , J = 11, 6 H z , 1 H ) , 2 , 16 ­ 2 , 36 ( m , 3 H ) , 2 , 39 - 2 , 57 ( m , 2 H ) , 2 , 61 - 2 , 73 ( m , 1 H ) , 2 , 74 - 2 , 82 ( m , 1 H ) , 3 , 54 - 3 , 67 ( m , 2 H ) , 3 , 87 - 4 , 02 ( m , 2 H ) , 4 , 38 - 4 , 47 ( m , 1 H ) , 4 , 99 (d , J = 12 , 0 H z , 1 H ) , 5 , 0 5 - 5 , 14 ( m , 2 H ) , 5 , 79 (q , J = 7 , 4 H z , 1 H ) , 6 , 13 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 92 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 46 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 60 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 6 H z , 1 H ) , 7 , 86 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 91 ( s , 1 H ) , 8 , 26 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 621, 3 [ M H ] , T r = 1, 20 m in .

Ejemplo 97. Compuesto 97.

[0904]

[0905] ^{U n a s o l u c ió n e n f r i a d a ( 0 ° C ) d e l c o m p u e s t o 4 5 ( 8 5 , 3 m g , 0 , 12 3 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) s e t r a t ó c o n u n a} s o l u c i ó n d e c l o r u r o d e h id r ó g e n o ( 4 M ) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 0 , 31 m l, 1, 231 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 2 d í a s , s e a ñ a d i ó m á s c l o r u r o d e h id r ó g e n o (4 M ) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 0 , 3 m l, 1, 2 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r d u r a n t e 1, 5 h a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e , lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n al vacío y e l a g u a r e s i d u a l s e s e p a r ó a z e o t r ó p i c a m e n t e c o n t o l u e n o p a r a p r o p o r c io n a r u n s ó l id o b l a n c o q u e s e s u s p e n d i ó e n d ic l o r o m e t a n o ( 5 m L ) y la m e z c l a s e t r a t ó p o s t e r io r m e n t e c o n t r ie t i l a m in a ( 0 , 04 m L , 0 , 246 m m o l) y c l o r u r o d e m e t a n o s u l f o n i l o ( 0 , 01 m l, 0 , 148 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 30 m in , la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e t r a t ó c o n t r ia c e t o x ib o r o h i d r u r o d e s o d io ( 38 , 6 m g , 0 , 182 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r d u r a n t e 1 h a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e , la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e in a c t iv ó c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y f i l t r a r o n a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s . L o s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n al vacío y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C p r e p a r a t i v a d e f a s e i n v e r s a u s a n d o u n g r a d ie n t e d e a c e t o n i t r i l o / a g u a d e 5 : 95 a 1 :0 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 14 , 7 m g , 18 % e n 2 p a s o s ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) 5 1.0 5 - 1, 12 ( m , 6 H ) , 1, 5 2 - 1, 7 3 ( m , 8 H ) , 1, 9 1 - 2 , 00 ( m , 1 H ) , 2 , 17 - 2 , 3 0 ( m , 2 H ) , 2 , 62 - 2 , 74 ( m , 1 H ) , 2 , 93 ( s , 3 H ) , 3 , 01 ( d , J = 11, 8 H z , 1 H ) , 3 , 05 - 3 , 13 ( m , 1 H ) , 3 , 51 - 3 , 6 8 ( m , 2 H ) , 3 , 83 - 3 , 94 ( m , 1 H ) , 4 , 0 7 - 4 , 15 ( m , 1 H ) , 4 , 24 - 4 , 31 ( m , 1 H ) , 4 , 39 - 4 , 47 ( m , 1 H ) , 5 , 02 ( d , J = 11 , 8 H z , 1 H ) , 5 , 10 ( q , J = 6 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 19 ( d , J = 8 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 81 (q , J = 7 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 19 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 99 ( d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 48 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 62 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 6 H z , 1 H ) , 7 , 87 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 93 ( s , 1 H ) , 8 , 27 (d , J = 8 , 2 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 6 71, 3 [ M H ] , T r = 2 , 07 m in .

Ejemplo 98. Compuesto 98.

[0906]

C o m p u e s t o 98 a . É s t e r f e r c - b u t í l i c o d e á c i d o 2,2-bis - h i d r o x i m e t i l - 3 - o x o - b u t í r i c o

[0907]

[0908] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r f e r c - b u t í l i c o á c i d o 3 - o x o - b u t í r i c o ( 15 , 8 g , 10 0 m m o l) y f o r m a l d e h í d o a c u o s o ( 3 7 % d e} s o l u c i ó n e n a g u a , 18 m l, 230 m m o l) e n 1 , 4 - d i o x a n o ( 50 m L ) s e a g it ó a 0 ° C b a jo n i t r ó g e n o . S e a ñ a d i ó g o t a a g o t a u n a s o l u c i ó n d e t r i e t i l a m in a ( 505 m g , 0 , 7 m l, 5 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 5 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 40 ° C durante 1 h y luego a temperatura ambiente durante 20 h. Se evaporó la mayor parte del disolvente, se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /'so-hexanos/acetato de etilo 7:3 a 1:1 para proporcionar éster ferc-butílico de 2,2-bis-hidroximetil-3-oxo-butírico (8,67 g, 40%) como aceite transparente. 1H RMN (300 MHz, cfe-DMSO) 5 1,38 (s, 9H), 2,07 (s, 3H), 3,81 -3,86 (m, 4H), 4,77 (t, J = 5,1 Hz, 2H). CLEM (m/z) 217,0 [M-H], Tr = 1,45 min.

Compuesto 98b. Éster ferc-butílico de ácido 5-acetil-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carboxílico

[0909]

[0910] Una mezcla de éster ferc-butílico de ácido 2,2-b/s-hidroximetil-3-oxo-butírico (8,67 g, 40 mmol), acetona (30 ml, 400 mmol), 2,2-dimetoxipropano (41,6 g, 50 ml, 400 mmol) y hidrato de ácido 4-toluensulfónico (152 mg, 0,8 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El disolvente se evaporó parcialmente hasta un volumen de ~20 ml. Se añadió una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. La capa orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/acetato de etilo de 9:1 a 4:1 para producir el compuesto del título (7,82 g, 75%) como un aceite transparente. ¹ H RMN (300 MHz, CDCl^a) 5 1,39 (s, 3H), 1,44 (s, 3H), 1,48 (s, 9H), 2,32 (s, 3H), 6,36 (ABq, A5^{a ,b} = 0,05, J^{a b} = 11,8 Hz, 4H). CLEM (m/z) 281,2 [M+Na], Tr = 2,44 min.

Compuesto 98c. Éster ferc-butílico del ácido 2,2-dimetil-5-vinil-[1,3]dioxano-5-carboxílico

[0911]

[0912] Una solución de W,W-diisopropilamina (1,51 g, 2,1 ml, 15 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (30 mL) se agitó a -78°C bajo nitrógeno. Se añadió gota a gota n-butil litio (2,5 M en hexanos, 5,6 ml, 14 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Se añadió una solución de éster ferc-butílico del ácido 5-acetil-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carboxílico (2,58 g, 10 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 15 min. Se añadió una solución de n-fenil-(b/s -trifluorometanosulfonamida) (3,93 g, 11 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 15 min. Se retiró el baño de enfriamiento y se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 30 min. Se evaporó el disolvente y se añadió éter dietílico (50 mL). La solución se enfrió a 5°C y se lavó con solución de hidróxido de sodio fría (1 M, 3 x 30 mL) y salmuera. La solución orgánica se separó, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y el disolvente se evaporó para proporcionar éster ferc-butílico del ácido 2,2-dimetil-5-(1- trifluorometanosulfoniloxi-vinil)-[1,3]dioxano-5-carboxílico (3,84 g, 10 mmol) como un aceite amarillo. Una solución de éster ferc-butílico del ácido 2,2-dimetil-5-(1-trifluorometanosulfoniloxi-vinil)-[1,3]dioxano-5-carboxílico (3,84 g, 10 mmol) y tri-n-butilamina (5,55 g, 7 mL, 30 mmol) en W,W-dimetilformamida (20 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se añadieron dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (350 mg, 0,5 mmol) y ácido fórmico (920 mg, 0,77 ml, 20 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 90 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos se lavaron con agua (5 x) y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por sílice cromatografía en gel usando /sohexanos/acetato de etilo 9:1 seguido de cromatografía de gel de sílice usando un gradiente de /so-hexanos/acetato de etilo 19:1 a 9:1 para proporcionar el compuesto del título (1,09 g, 45%) como un aceite transparente. 1H RMN (300 MHz, CDCla) 5 1,41 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,50 (s, 9H), 3,82 (d, J = 11,8 Hz, 2H), 4,25 (d, J = 11,8 Hz, 2H), 5,25 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 5,73 (dd, J = 17,2, 11,7 Hz, 1H).

Compuesto 98d. Éster ferc-butílico del ácido 2,2-b/s-hidroximetil-but-3-enoico

[0913]

[0914] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r f e r c - b u t í l i c o d e á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - 5 - v i n i l - [ 1 , 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o ( 969 m g , 4 m m o l) y} á c i d o 4 - t o l u e n s u l f ó n i c o h id r a t a d o ( 76 m g , 0 , 4 m m o l) e n m e t a n o l ( 10 m L ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 30 m in . E l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e iso-h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 4 : 1 a 1 :1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 660 m g , 8 2 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , a f e - D M S O ) : 5 1, 38 ( s , 9 H ) , 3 , 54 - 3 , 68 ( m , 4 H ) , 4 , 56 (t, J = 5 , 4 H z , 2 H ) , 5 , 12 (d , J = 10 , 5 H z , 1 H ) , 5 , 14 (d , J = 18 , 3 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( d d , J = 18 , 3 , 10 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 225 , 2 [ M N a ] , T r = 1, 4 7 m in .

C o m p u e s t o 98 e . É s t e r f e r c - b u t í l i c o d e á c i d o 2 - o x o - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o

C o m p u e s t o 98 f . Á c i d o 2 - o x o - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o

[0917]

[0918] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r f e r c - b u t í l i c o d e á c id o 2 - o x o - 5 - v i n i l - [ 1 , 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x i l i c o ( 20 0 m g , 0 , 88 m m o l) e n} d ic l o r o m e t a n o (4 m L ) s e a g it ó a 0 ° C . S e a ñ a d i ó á c i d o t r i f l u o r o a c é t i c o ( 2 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 3 h . E l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e t r it u r ó c o n é t e r d i e t í l i c o / i s o - h e x a n o s ( 1 : 1 ) p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 135 m g , 9 0 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , d s - D M S O ) 5 4 , 51 (d , J = 10 , 5 H z , 2 H ) , 4 , 67 (d , J = 10 , 5 H z , 2 H ) , 5 , 38 (d , J = 17 , 6 H z , 1 H ) , 5 , 43 (d , J = 10 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 83 ( d d , J = 17 , 6 , 10 , 7 H z , 1 H ) , 13 , 5 - 14 , 0 (ancho s , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 173 , 2 [ M H ] , T r = 0 , 62 m in .

C o m p u e s t o 98.

[0919]

[0920] ^{U n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e á c i d o ( S ) - 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - h e x a h i d r o - p i r i d a z i n a - 3 -}c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 164 m g , 0 , 3 m m o l) , s e d e s g a s i f i c ó á c i d o 2 - o x o - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o ( 57 m g , 0 , 33 m m o l) , t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 18 m g , 0 , 06 m m o l) y t r ie t i l a m in a ( 91 m g , 0 , 13 m l, 0 ,9 m m o l) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 10 m L ) c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 15 m in . L a s o l u c i ó n s e c a l e n t ó a 50 ° C y s e a ñ a d i ó t r i s ( d i b e n c i l i d e n o a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 28 m g , 0 , 03 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 80 ° C d u r a n t e 45 m in . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y l a m e z c l a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o d u c i r á c i d o 5 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] -h e x a h i d r o p i r i d a z i n - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) - e t i l ] - q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l o ) - 2 - o x o -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o ( 0 , 3 m m o l) c o m o u n a g o m a a m a r i l l a . C L E M ( m / z ) 626 , 2 [ M H ] , T r = 1, 67 m in . S e a g it ó u n a s o l u c i ó n d e a n h í d r i d o 2 - m e t i l - 6 - n i t r o b e n z o i c o (206 mg, 0,6 mmol) y 4-(dimetilamino)-piridina (146 mg, 1,2 mmol) en diclorometano (200 mL) que contenía 4 Á tamices moleculares (200 mg) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Una solución de ácido 5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1- [(S)-2-((S)-2-hidroxi-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazina-3-carbonil}-amino)-etil]-quinolin-7-il}-vinil)-2- oxo-[1,3]dioxano-5-carboxílico (0,3 mmol) en diclorometano (5 mL) gota a gota durante 4 h y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la solución se evaporó parcialmente hasta un volumen de ~ 50 ml. La solución se lavó con solución saturada de cloruro de amonio enfriada con hielo, solución saturada de bicarbonato de sodio enfriada con hielo y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/metanol 1:0 a 5:1 y luego mediante HPLC preparativa de fase inversa eluyendo con acetonitrilo/agua 7:13. Se combinaron las fracciones que contenían el producto y se evaporó la mayor parte del disolvente orgánico. La solución acuosa resultante se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos se combinaron, se filtraron a través de una frita hidrófoba y el filtrado se evaporó para producir el compuesto del título (3,1 mg, 2%) en forma de un sólido blanco. ¹ H RMN (300 MHz, CD³ CN): 50,96 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,04 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,41-1,49 (m, 2H), 1,54 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,55 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,59-1,64 (m, 1H), 1,88-1,93 (m, 1H), 2,19-2,24 (m, 1H), 2,56-2,64 (m, 1H), 3,48-3,57 (m, 1H), 4,19 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,38-4,43 (m, 1H), 4,59 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,85-4,91 (m, 2H), 5,06-5,10 (m, 1H), 5,23 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,73­ 5,79 (m, 1H), 6,26 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,5, 1,6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,99 (ancho s, 1H), 8,28 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,85 (ancho d, J = 5,0 Hz, 1H). CLEM (m/z) 608,2 [M+H], Tr = 2,01 min.

REFERENCIA Ejemplo 99, Compuesto 99.

[0921]

Compuesto 99a. Éster etílico del ácido 5-acetil-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carboxílico

[0922]

[0923] El Compuesto 99a se preparó de la misma manera que éster ferc-butílico de ácido 5-acetil-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carboxílico usando acetoacetato de etilo en lugar de éster terc-butílico del ácido 3-oxo-butírico en un rendimiento del 31% en 2 pasos. 1H RMN (300 MHz, CDCta) 5 1,29 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,40 (s, 3H), 1,44 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 4,23 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 4,30 (ABq, A5^{a ,b} = 0,04, J^{a b} = 11,9 Hz, 4H).

Compuesto 99b. Éster etílico del ácido 2,2-dimetil-5-vinil-[1,3]dioxano-5-carboxílico

[0924]

[0925] 99b Se preparó el compuesto de la misma manera como éster ferc-butílico del ácido 2,2-dimetil-5-vinil[1,3]dioxano-5-carboxílico utilizando éster etílico del ácido 5-acetil-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carboxílico en lugar de éster ferc-butílico del ácido 5-acetil-2,2-dimetil-[1,3]dioxano-5-carboxílico con un rendimiento del 50% en 2 pasos.

¹ H RMN (300 MHz, CDCl^a) 5 1,31 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,41 (s, 3H), 1,46 (s, 3H), 4,10 (ABq, A5^{a ,b} = 0,44, J^{a b} = 11,9 Hz, 4H), 4,26 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 5,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 5,24 (dd, J = 17,4, 10,9 Hz, 1H). CLEM (m/z) 237,0 [M+Na], Tr = 2,14 min.

C o m p u e s t o 99 c . É s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - ¿ > / ' s - h id r o x i m e t i l - b u t - 3 - e n o ic o

[0926]

[0927] ^{E l C o m p u e s t o 9 9 c s e p r e p a r ó d e la m i s m a m a n e r a q u e é s t e r f e r c - b u t í l i c o d e á c id o 2 , 2 - ¿ > / ' s - h id r o x i m e t i l - b u t - 3 -}e n o i c o u t i l i z a n d o é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o e n l u g a r d e é s t e r f e r c - b u t í l i c o d e á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o c o n u n r e n d im ie n t o d e l 78 % . 1 H R M N ( 300 M H z , c f e - D M S O ) 5 1, 17 (t, J = 7 , 0 H z , 3 H ) , 3 , 59 - 3 , 71 ( m , 4 H ) , 4 , 06 (q , J = 7 , 0 H z , 2 H ) , 4 , 65 (t, J = 5 , 6 H z , 2 H ) , 5 , 13 ( d , J = 18 , 5 H z , 1 H ) , 5 , 15 ( d , J = 10 , 5 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( d d , J = 18 , 5 , 10 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 197 , 1 [ M N a ] , T r = 0 , 96 m in .

C o m p u e s t o 99 d . Á c i d o 2 , 2 - ¿ > / ' s - f l u o r o m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o

[0928]

[0929] ^{A u n a s o l u c ió n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - ¿ > / ' s - h id r o x i m e t i l - b u t - 3 - e n o ic o ( 3 38 m g , 1 , 9 m m o l) y 2 , 6 - l u t i d i n a} ( 813 m g , 0 , 88 m l, 7 , 6 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) a - 78 ° C b a jo n i t r ó g e n o s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a a n h í d r i d o t r i f l u o r o m e t a n o s u l f ó n ic o ( 1, 07 g , 0 , 66 m l, 3 , 8 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 30 m in . L a s o l u c i ó n s e la v ó c o n á c i d o c l o r h í d r i c o e n f r ia d o c o n h ie lo ( 1 M ) y s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o d u c i r é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - b i s - t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n i l o x i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o c r u d o ( 1, 9 m m o l) c o m o u n a c e i t e n a r a n j a q u e s e u s ó i n m e d ia t a m e n t e e n e l s i g u i e n t e p a s o . S e a g it ó u n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - b i s -t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n i l o x i m e t i l - b u t - 3 - e n o ic o ( 1, 9 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 5 m L ) a 0 ° C b a jo n it r ó g e n o . S e a ñ a d i ó f lu o r u r o d e t e t r a - n - b u t i l a m o n i o ( 1 M e n t e t r a h id r o f u r a n o , 4 , 75 m l, 4 , 75 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 2 h . S e e v a p o r ó e l d i s o l v e n t e . E l r e s i d u o s e d is o l v ió e n d ic l o r o m e t a n o y la s o l u c i ó n s e la v ó c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e h id r o g e n o c a r b o n a t o d e s o d io , a g u a y s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e p e n t a n o / é t e r d ie t í l i c o d e 19 : 1 a 4 : 1 p a r a p r o d u c i r é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - ¿ > / ' s - f l u o r o m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o ( 1, 9 m m o l) c o n t a m i n a d o c o n d i s o l v e n t e c o m o u n a c e i t e c l a r o . S e a g it ó u n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c id o 2 , 2 - ¿ > / ' s - f l u o r o m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o c r u d o ( 1, 9 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 10 m L ) a 0 ° C b a jo n it r ó g e n o . S e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e h id r ó x id o d e lit io m o n o h id r a t o ( 240 m g , 5 , 7 m m o l) e n a g u a ( 2 , 5 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 1 h y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 24 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a c id i f ic ó a p H 2 c o n á c i d o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) . S e a ñ a d i ó a g u a y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n é t e r d ie t í l i c o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n y s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o d u c i r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 400 m g ) c o m o u n a c e i t e t r a n s p a r e n t e . 1 H R M N ( 300 M H z , c f e - D M S O ) 5 4 , 54 - 4 , 83 ( m , 4 H ) , 5 , 33 (d , J = 17 , 8 H z , 1 H ) , 5 , 36 ( d , J = 10 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 81 ( d d , J = 17 , 8 , 10 , 7 H z , 1 H ) , 13 , 0 - 13 , 5 (ancho s, 1H). C ^{l e} M ( m / z ) 149 , 2 [ M -H ] , T r = 1, 45 m in .

C o m p u e s t o 99 e . É s t e r 2 , 2 , 2 - t r i c l o r o e t í l i c o d e l á c id o ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - { ( E ) - 4 -[ 2 -( ( R ) - 1 - f e r c - b u t o x i c a r b o n i l a m i n o - e t i l ) -q u i n o l i n - 7 - i l ] - 2 , 2 - ¿ > / s - f l u o r o m e t i l b u t - 3 - e n o i l o x i } - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] - h e x a h i d r o p i r i d a z i n - 3 - c a r b o x í l i c o [0930]

[ M H ] , T r = 2 , 48 m in .

E j e m p l o s 100 y 10 1. C o m p u e s t o s 100 y 10 1.

[0934]

C o m p u e s t o 100 a . É s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 - a l i l o x i - 2 - m e t i l - p r o p i ó n i c o

[0935]

[0936] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 - h i d r o x i - 2 - m e t i l - p r o p i ó n i c o ( 2 , 6 4 g , 2 , 7 m l, 20 m m o l) e n} N,N-d im e t i l f o r m a m id a ( 20 m L ) s e a g it ó a 0 ° C b a jo n i t r ó g e n o . S e a ñ a d i ó h id r u r o s ó d i c o ( d i s p e r s ió n a l 6 0 % e n a c e i t e , 880 m g , 22 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 5 m in . S e a ñ a d i ó b r o m u r o d e a l i lo ( 2 , 18 g , 1, 6 m l, 18 m m o l) y la r e a c c i ó n m e z c l a s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 18 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io s e a ñ a d i ó c u i d a d o s a m e n t e p a r a in t e r r u m p ir la r e a c c i ó n . S e a ñ a d i ó é t e r d ie t í l i c o y la c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó , s e la v ó c o n a g u a ( 3 x ) y s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e p e n t a n o / é t e r d ie t í l i c o 12 : 1 a 4 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 2 , 33 g , 6 7 % ) c o m o u n a c e i t e c l a r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 1, 3 1 (t, J = 7 , 1 H z , 3 H ) , 1, 4 7 ( s , 6 H ) , 3 , 95 - 3 , 98 ( m , 2 H ) , 4 , 21 ( q , J = 7 , 1 H z , 2 H ) , 5 , 15 - 5 , 20 ( m , 1 H ) , 5 , 27 - 5 , 39 ( m , 1 H ) , 5 , 90 - 6 , 03 ( m , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 195 , 2 [ M N a ] , T r = 2 , 24 m in .

C o m p u e s t o 100 b . ( 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n - 2 - i l ) - m e t a n o l

[0937]

[0938] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 - a l i l o x i - 2 - m e t i l - p r o p i ó n i c o ( 1 , 7 2 g , 10 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o} ( 40 m L ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n it r ó g e n o . B o r o h id r u r o d e lit io ( 44 m g , 20 m m o l) s e a ñ a d i ó e n p o r c i o n e s y l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 20 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y s e s a t u r ó u n a s o l u c ió n d e c l o r u r o d e a m o n io f u e c a u t e l o s a m e n t e a ñ a d i d o s e g u i d o d e á c i d o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) p a r a a c i d i f i c a r l a m e z c l a d e r e a c c i ó n a p H 2. L a m e z c l a s e e x t r a jo c o n é t e r d ie t í l i c o y lo s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a d a r 2 - a l i l o x i - 2 -m e t i l p r o p a n - 1 - o l ( 10 m m o l) q u e s e u s ó c r u d o e n e l s i g u i e n t e p a s o . C L E M ( m / z ) 15 3 , 2 [ M N a ] , T r = 1, 16 m in . U n a s u s p e n s i ó n d e 2 - a l i l o x i - 2 - m e t i l - p r o p a n - 1 - o l ( 10 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 40 m L ) s e a g it ó a 0 ° C . Á c i d o meta-c l o r o p e r b e n z o i c o ( 7 0 % q u e c o n t ie n e 2 0 % d e a g u a p u r a y 10 % d e á c i d o m e t a - c l o r o b e n z o i c o , 2 , 9 g , 12 m m o l) s e a ñ a d i ó y la r e a c c i ó n m e z c l a s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 24 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y s o l u c i ó n s a t u r a d a d e h id r ó g e n o c a r b o n a t o d e s o d io y s o l u c i ó n d e t io s u l f a t o d e s o d io s e a ñ a d i e r o n y la m e z c l a s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 15 m in . L a c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó y la c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o (4 x ) . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n h id r ó f o b o d e f r it a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a d a r 2 - m e t i l - 2 - o x i r a n i l m e t o x i - p r o p a n - 1 - o l ( 10 m m o l) , q u e f u e u s a d o c r u d o e n e l s i g u i e n t e p a s o . C L E M ( m / z ) 169 , 2 [ M N a ] , T r = 0 , 72 m in . U n a s o l u c i ó n d e 2 - m e t i l - 2 -o x i r a n i l m e t o x i - p r o p a n - 1 - o l ( 10 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 50 m L ) y á c i d o a l c a n f o r - 10 - s u l f ó n i c o r a c é m i c o ( 765 m g , 3 , 3 m m o l) s e a g it ó e n l a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 18 h . S e a ñ a d i ó s o l u c i ó n d e h id r ó g e n o c a r b o n a t o d e s o d io s a t u r a d o y la c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o y lo s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n , s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e p e n t a n o / é t e r d ie t í l i c o 2 : 3 a 1 :4 p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 826 m g , 5 7 % e n 3 e t a p a s ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o . 1 H R M N ( 300 M H z , a f e - D M S O ) : 5 1, 0 2 ( s , 3 H ) , 1, 20 ( s , 3 H ) , 3 , 23 (d , J = 11, 1 H z , 1 H ) , 3 , 30 ­ 3 , 50 ( m , 6 H ) , 4 , 68 (t, J = 5 , 4 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 169 , 2 [ M N a ] , T r = 0 , 72 m in .

C o m p u e s t o 100 c . É s t e r b e n c í l i c o d e l á c id o 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o

[0939]

[0940] ^{U n a s o l u c i ó n d e ( 5 , 5 - d i m e t i l - [ 1 , 4 ] d i o x a n - 2 - i l ) - m e t a n o l ( 6 5 7 m g , 4 , 5 m m o l) e n s o l u c i ó n d e h id r ó x id o d e p o t a s io} 1 M ( 6 , 7 m l, 6 , 7 m m o l) s e a g it ó a 5 ° C . S e a ñ a d i ó u n a s o l u c ió n d e p e r m a n g a n a t o d e p o t a s io ( 1, 4 2 g , 9 m m o l) e n a g u a ( 10 m L ) g o t a a g o t a m a n t e n ie n d o l a t e m p e r a t u r a in t e r n a p o r d e b a j o d e 10 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 5 ° C d u r a n t e 1 h y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 18 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f ilt r ó a t r a v é s d e C e l i t e y la a l m o h a d i l l a d e l f ilt r o s e la v ó c o n a g u a y m e t a n o l y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e a c id i f ic ó a p H 2 c o n á c id o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo y c l o r o f o r m o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e la v a r o n c o n u n p e q u e ñ o v o l u m e n d e s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i lt r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c io n a r e l á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o c r u d o ( 694 m g , 4 , 5 m m o l) c o m o u n s ó l id o c e r o s o . C L E m ( m / z ) 159 , 1 [ M -H ] , T r = 0 , 88 m in . U n a s o l u c ió n d e á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o ( 750 m g , 4 , 7 m m o l) , c l o r u r o d e o x a l i l o ( 600 m g , 0 , 4 m l, 4 , 7 m m o l) y W , W - d im e t i l f o r m a m id a ( 2 g o t a s ) e n d ic l o r o m e t a n o ( 15 m L ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n it r ó g e n o d u r a n t e 2 h . S e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e a l c o h o l b e n c í l i c o ( 508 m g , 0 , 5 m l, 4 , 7 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 2 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 20 h . S e a ñ a d i ó a l c o h o l b e n c í l i c o a d i c i o n a l ( 0 , 5 m l, 4 , 7 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 18 h . E l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e iso-h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 9 : 1 a 1 :1 p a r a p r o p o r c io n a r e l t ít u lo d e l c o m p u e s t o ( 870 m g , 74 % ) c o m o u n a c e i t e . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) 5 1, 19 ( s , 3 H ) , 1, 32 ( s , 3 H ) , 3 , 43 (d , J = 11, 4 H z , 1 H ) , 3 , 72 (d , J = 11, 4 H z , 1 H ) , 3 , 88 - 3 , 92 ( m , 2 H ) , 4 , 21 ( d d , J = 8 , 2 , 4 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 24 ( s , 2 H ) , 7 , 34 - 7 , 39 ( m , 5 H ) . C L E M ( m / z ) 273 , 1 [ M N a ] , T r = 2 , 41 m in .

C o m p u e s t o 1 00 d . É s t e r b e n c í l i c o d e l á c i d o 2 -( 1 - h i d r o x i - e t i l ) - 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o

[0941]

[0942] ^{U n a s o l u c i ó n d e W , W - d i i s o p r o p i la m i n a ( 5 30 m g , 0 , 7 3 m l, 5 , 2 5 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o (4 m L ) s e a g it ó} a - 78 ° C b a jo n it r ó g e n o . n - B u t i l l it io ( 2 , 1 m l, 5 , 25 m m o l, s o l u c i ó n 2 , 5 M e n h e x a n o ) s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 30 m in . U n a s o l u c ió n d e é s t e r b e n c í l i c o d e l á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 -c a r b o x í l i c o ( 870 m g , 3 , 5 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o (8 m L ) s e a ñ a d i ó y l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 20 m in . S e a ñ a d i ó a c e t a l d e h í d o ( 462 m g , 0 , 6 m l, 10 , 5 m m o l) e n u n a p o r c i ó n . E l b a ñ o d e r e f r ig e r a c i ó n s e r e t ir ó y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y á c id o c l o r h í d r i c o e n f r ia d o c o n h ie lo s e a ñ a d i ó ( 2 M ) p a r a a c i d i f i c a r la m e z c l a d e r e a c c i ó n a p H 2. S e a ñ a d i ó c l o r u r o s ó d i c o p a r a s a t u r a r la f a s e a c u o s a y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n d ie t i l é t e r . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a d e g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e i s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 6 : 1 a 0 : 1 s e g u i d o d e c r o m a t o g r a f í a d e g e l d e s í l i c e u s a n d o i ' s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 3 : 1 a 0 : 1 p a r a e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 400 m g , 4 0 % ) c o m o u n a c e i t e y c o m o u n a m e z c l a 2 : 1 d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 295 , 1 [ M H ] , T r = 2 , 11 m in .

C o m p u e s t o 1 00 e . É s t e r b e n c í l i c o d e l á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l - 2 - v i n i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o

[0943]

[0944] ^{U n a s u s p e n s i ó n d e h id r u r o d e s o d io ( 80 m g , 2 m m o l, 6 0 % d e d i s p e r s i ó n e n a c e i t e m in e r a l ) e n t e t r a h id r o f u r a n o} a n h id r o ( 3 m L ) s e a g it ó a - 78 ° C b a jo n i t r ó g e n o . U n a s o l u c ió n d e é s t e r b e n c í l i c o d e á c i d o 2 -( 1 - h i d r o x i - e t i l ) - 5 , 5 - d i m e t i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o ( 400 m g , 1, 36 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 3 m L ) s e a ñ a d i ó y l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 2C d u r a n t e 15 m in . U n a s o l u c i ó n d e W -( 5 - c l o r o - 2 - p i r id i l ) b i s ( t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n im id a ) ( 1, 06 g , 2 , 7 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 5 m L ) s e a ñ a d i ó y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 30 m in . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a l a h a b it a c ió n d e t e m p e r a t u r a y d e s p u é s s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 5 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 5 ° C , d e a m o n io s a t u r a d o s e a ñ a d i ó c u i d a d o s a m e n t e u n a s o l u c i ó n d e c l o r u r o y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n y s e la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y f u e e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e / ' s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 9 : 1 a 4 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l é s t e r b e n c í l i c o d e l á c id o d e 5 , 5 - d i m e t i l - 2 -( 1 - t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n i l o x i - e t i l ) -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o c r u d o ( 833 m g , 1, 3 m m o l) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o q u e s e o s c u r e c i ó a l p o n e r s e d e p ie , y c o m o u n a m e z c l a 2 : 1 d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s q u e s e u s ó i n m e d ia t a m e n t e e n e l s i g u i e n t e p a s o . C L E M ( m / z ) 449 , 0 [ M H ] , T r = 3 , 29 m in . U n a s o l u c i ó n d e é s t e r b e n c í l i c o d e l á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l - 2 -( 1 -t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n i l o x i - e t i l ) -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o ( 833 m g , 1, 3 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 5 m L ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n i t r ó g e n o . S e a ñ a d i ó 1, 8 - d i a z a b i c i c l o u n d e c - 7 - e n o ( 790 m g , 0 , 8 m l, 5 , 2 m m o l) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 72 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y s e a c i d i f i c ó a p H 2 c o n á c i d o c l o r h í d r i c o e n f r ia d o c o n h ie lo ( 2 M ) . L a m e z c l a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e / s o - h e x a n o s / é t e r d ie t í l i c o 9 : 1 a 3 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 189 m g , 5 2 % e n d o s p a s o s ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) : 5 1, 13 ( s , 3 H ) , 1, 32 ( s , 3 H ) , 3 , 53 (d , J = 11, 8 H z , 1 H ) , 3 , 66 ( d , J = 11, 8 H z , 1 H ) , 3 , 72 (d , J = 12 , 1 H z , 1 H ) , 4 , 24 ( d , J = 12 , 1 H z , 1 H ) , 5 , 19 - 5 , 35 ( m , 3 H ) , 5 , 51 ( d d , J = 17 , 4 , 0 , 9 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( d d , J = 17 , 4 , 10 , 7 H z , 1 H ) , 7 , 35 ­ 7 , 40 ( m , 5 H ) . C L E M ( m / z ) 277 , 1 [ M H ] , T r = 2 , 81 m in .

C o m p u e s t o 100 F . Á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l - 2 - v i n i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o

[0945]

[0946] ^{A u n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e é s t e r b e n c í l i c o d e l á c i d o 5 , 5 - d i m e t i l - 2 - v i n i l - [ 1 , 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o ( 18 9 m g , 0 , 68 4} m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 7 m L ) a 0 ° C s e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e h id r ó x id o d e lit io h id r a t o ( 34 m g , 0 , 821 m m o l) e n a g u a ( 1, 6 m L ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in y s e d e jó c a l e n t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y s e a g it ó d u r a n t e 19 h . L a m e z c l a s e d i l u y ó c o n a g u a y s e la v ó c o n a c e t a t o d e e t i lo ( 2 x ) . L a c a p a a c u o s a s e a c id i f ic ó a p H 5 c o n á c i d o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) y s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo ( 2 x ) . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e s e c a r o n s o b r e m a g n e s i o a n h id r o s u lf a t o , s e f i l t r a r o n y s e e v a p o r a r o n p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 69 m g , 5 4 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) : 5 1, 19 ( s , 3 H ) , 1, 3 2 ( s , 3 H ) , 3 , 58 (d , J = 11, 8 H z , 1 H ) , 3 , 72 (d , J = 11, 8 H z , 1 H ) , 3 , 75 (d , J = 12 , 3 H z , 1 H ) , 4 , 21 (d , J = 12 , 3 H z , 1 H ) , 5 , 39 ( d d , J = 10 , 7 , 0 , 9 H z , 1 H ) , 5 , 60 ( d d , J = 17 , 4 , 0 , 9 H z , 1 H ) , 5 , 84 ( d d , J = 17 , 4 , 10 , 7 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 185 , 2 [ M -H ] , T r = 1, 3 2 m in .

C o m p u e s t o 1 00 g . Á c i d o 2 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] h e x a h i d r o -p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) e t i l ] q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 5 , 5 - d i m e t i l [ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 - c a r b o x í l i c o

[0947]

[0948] ^{U n a m e z c l a d e á c i d o ( S ) - 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t m l a m i n o ) p r o p i o m l ] - h e x a h i d r o p i r i d a z m a - 3 -}c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 198 m g , 0 , 371 m m o l) , á c id o 5 , 5 - d i m e t i l - 2 - v i n i l -[ 1, 4 ] d i o x a n o - 2 -c a r b o x í l i c o ( 69 m g , 0 , 371 m m o l) , t r ie t i l a m in a ( 112 m g , 155 g L , 1, 11 m m o l) y t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 23 m g , 0 , 074 m m o l) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 7 , 5 m L ) s e d e s g a s i f i c ó c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 5 m in y d e s p u é s s e c a l e n t ó a 50 ° C e n a t m ó s f e r a d e n it r ó g e n o c o n a g i t a c ió n . S e a ñ a d i ó t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 34 m g , 0 , 037 m m o l) y l a m e z c l a s e c a l e n t ó a 8 0 ° C d u r a n t e 40 m in y d e s p u é s s e d e jó e n f r i a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e . L a s u s p e n s i ó n s e f ilt r ó y s e e v a p o r ó p a r a d a r c o m p u e s t o d e t ít u lo c r u d o ( 0 , 371 m m o l) q u e s e u s ó d i r e c t a m e n t e e n e l s i g u i e n t e p a s o . C L E M ( m / z ) 640 , 3 [ M H ] , T r = 1, 94 m in .

C o m p u e s t o s 100 y 10 1.

[0949]

[0955] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 3 - h i d r o x i - c i c l o p e n t a n o c a r b o x í l i c o ( p r e p a r a d o c o m o s e d e s c r i b e e n S o l .}

In t . P C T 2008131946 , 3 , 180 g , 20 , 1 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 100 m L ) s e t r a t ó p o s t e r io r m e n t e c o n 2 , 6 - l u t i d i n a ( 4 , 7 m l, 40 , 2 m m o l) y t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n a t o d e t r i i s o p r o p i l s i l i l o ( 8 , 1 m l, 30 , 15 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r d u r a n t e 3 , 5 h , la r e a c c i ó n s e in a c t iv ó c o n t a m p ó n d e p H 4. L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n , s e f i l t r a r o n a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s y lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n a vacío. E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o l u t e d e 100 g s e e l u y ó c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e iso-h e x a n o s / é t e r d ie t í l i c o 1 : 0 a 9 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l t ít u lo d e l c o m p u e s t o ( 6 , 15 g , 9 7 % ) c o m o u n a c e i t e d e c o l o r a m a r i l l o c l a r o y c o m o 3 , 5 : 1 m e z c l a d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C Í ³ ) : 5 1, 04 - 1, 08 ( m , 27 H ) , 1, 27 (t, J = 7 , 1 H z , 4 H ) , 1, 70 - 2 , 00 ( m , 5 , 2 h ) , 2 , 0 4 - 2 , 21 ( m , 2 , 6 H ) , 2 , 66 - 2 , 79 ( m , 1 H ) , 2 , 97 - 3 , 10 ( m , 0 , 3 H ) , 4 , 14 (q , J = 7 , 1 H z , 2 , 6 H ) , 4 , 29 ­ 4 , 39 ( m , 1 H ) , 4 , 43 - 4 , 50 ( m , 0 , 3 H ) .

C o m p u e s t o 102 b . É s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 1 -( 1 - h i d r o x i - e t i l ) - 3 - t r i i s o p r o p i l s i l a n i l o x i - c i c l o p e n t a n o c a r b o x í l i c o

[0956]

C o m p u e s t o 102 c . Á c id o 3 - t r i i s o p r o p i l s i l a n i l o x i - 1 - v i n i l - c i c l o p e n t a n o c a r b o x í l i c o

[0958]

[0959] ^{U n a s o l u c ió n e n f r i a d a ( - 7 8 ° C ) d e s u s p e n s i ó n d e h id r u r o d e s o d io ( 1 , 4 7 4 g , 36 , 8 6 8 m m o l, 6 0 % d i s p e r s a d o e n} a c e i t e m in e r a l ) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 60 m L ) s e t r a t ó c o n u n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 1 -( 1 - h id r o x i e t i l ) -3 - t r i i s o p r o p i l s i l a n i l o x i - c i c l o p e n t a n o c a r b o x í l i c o ( 6 , 61 g , 18 , 434 m m o l) . D e s p u é s d e a g i t a r a - 78 ° C d u r a n t e 10 m in , la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e t r a t ó c o n u n a s o l u c i ó n d e W -( ' 5 - c lo r o - 2 - p i r id i l ) b is ( t r i f l u o r o m e t a n o s u lf o n im i d a ) ( 13 , 2 g , 33 , 615 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 20 m L ) . E l b a ñ o d e r e f r ig e r a c i ó n s e r e t ir ó y la r e a c c i ó n s e d e jó e n a g i t a c ió n a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 24 h . S e a ñ a d i ó m á s h id r u r o d e s o d io ( 1, 474 g , 36 , 868 m m o l, 6 0 % d i s p e r s a d o e n a c e i t e m in e r a l ) . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 5 h , m á s h id r u r o d e s o d io ( 1, 474 g , 36 , 868 m m o l, 6 0 % d i s p e r s a d o e n a c e i t e m in e r a l ) s e a ñ a d i ó . D e s p u é s d e a g i t a r a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e p a r a 17 , 5 h , la r e a c c i ó n s e in a c t iv ó a 0 ° C c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io ( 100 m L ) . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 2 x ) . L a c a p a a c u o s a s e a c id i f ic ó a p H 2 c o n á c id o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) y s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n , s e f i l t r a r o n a t r a v é s d e u n s e p a r a d o r d e f a s e s y lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n a vacío. E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o l u t e d e 100 g s e e l u y ó c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e isohexanos/acetato d e e t i lo 1 :0 a 4 : 1 s e g u i d o d e c r o m a t o g r a f í a d e g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o l u t e d e 100 g s e e l u y ó c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e i s o - h e x a n o s / é t e r d ie t í l i c o 1 :0 a 4 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 876 , 9 m g , 15 % ) c o m o u n a c e i t e d e c o l o r a m a r i l l o c l a r o y c o m o u n a m e z c l a 3 : 1 d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 3 11, 2 [ M -H ] , T r = 4 , 05 m in .

C o m p u e s t o 1 02 d . Á c i d o 1 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - c i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i - a c e t i l a m i n o ) - p r o p i o n i l ] h e x a h i d r o -p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) e t i l ] q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 3 - t r i i s o p r o p i l s i l a n i l o x i - c i c l o p e n t a n o c a r b o x í l i c o

[0960]

[0963] ^{U n a s o l u c ió n d e á c id o 1 - ( ( E ) - 2 - { 2 - [ ( R ) - 1 - ( { ( S ) - 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - c i c l o p r o p i l - 2 - h i d r o x i -}a c e t i l a m i n o ) p r o p i o n i l ] h e x a h i d r o - p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) e t i l ] q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 3 - t r i i s o p r o p i l s i l a n i l o x i -c i c l o p e n t a n o c a r b o x í l i c o c r u d o ( 1, 493 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o s e c o ( 20 m L ) s e a ñ a d i ó a t r a v é s d e u n a b o m b a d e j e r i n g a a u n a s o l u c ió n d e a n h í d r i d o 2 - m e t i l - 6 - n i t r o b e n z o i c o ( 771, 0 m g , 2 , 239 m m o l) , 4 - d i m e t i l a m i n o p i r i d i n a ( 547 , 1 m g , 4 , 479 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o s e c o ( 500 m L ) q u e c o n t ie n e 4 Á t a m i c e s m o l e c u l a r e s d u r a n t e 4 , 5 h . D e s p u é s d e l f in a l d e la a d i c i ó n , la r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 2 h y d e s p u é s s e f ilt r ó y lo s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n p a r c i a l m e n t e a vacío. L o s o r g á n i c o s s e la v a r o n c o n á c id o c l o r h í d r i c o ( 0 , 5 M , 40 m L ) . L a c a p a a c u o s a á c i d a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e la v a r o n c o n u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io . L a c a p a a c u o s a b á s i c a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e f i l t r a r o n e n u n s e p a r a d o r d e f a s e s . L o s v o l á t i l e s s e e l im i n a r o n a vacío y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n c a r t u c h o I s o lu t e d e 50 g e l u id o c o n u n g r a d ie n t e c o n t in u o d e / ' s o - h e x a n o s / a c e t o n a 1 :0 a 3 : 2 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 459 , 6 m g , 4 1 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o y c o m o u n a m e z c l a c o m p l e j a d e d i a s t e r e o i s ó m e r o s . C L E M ( m / z ) 746 , 5 [ M H ] , T r = 4 , 35 m in .

C o m p u e s t o s 102 , 103 , 104 y 105.

[0964]

[0966] ^{C o m p u e s t o 10 2 ( 4 1 , 2 m g , 9 , 5 % ) c o m o u n s ó l id o a m a r i l l o c l a r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D 3 O D ) : 5 0 , 4 6 - 0 , 5 6 ( m ,} 1 H ) , 58 - 0 , 72 ( m , 3 H ) , 1, 23 - 1, 3 6 ( m , 1 H ) , 1, 56 - 1, 6 7 ( m , 7 H ) , 1, 69 - 1, 8 5 ( m , 3 H ) , 1, 90 - 2 , 00 ( m , 1 H ) , 2 , 0 1 - 2 , 12 ( m , 1 H ) , 2 , 13 - 2 , 24 ( m , 2 H ) , 2 , 46 - 2 , 54 ( m , 1 H ) , 2 , 62 - 2 , 79 ( m , 2 H ) , 3 , 58 - 3 , 66 ( m , 1 H ) , 4 , 37 - 4 , 4 7 ( m , 2 H ) , 4 , 94 ( d , J = 8 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 12 ( q , J = 6 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 78 - 5 , 91 ( m , 1 H ) , 6 , 50 (ap d , J = 3 , 1 H z , 2 H ) , 7 , 57 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 73 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 89 ( s , 1 H ) , 7 , 93 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 43 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 66 ( d , J = 7 , 1 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 590 , 2 [ M H ] , T r = 1, 97 m in .

[0967] ^{C o m p u e s t o 10 3 ( 3 1 , 2 m g , 7 , 2 % ) c o m o u n a g o m a d e c o l o r a m a r i l l o c l a r o . 1 H R M N ( 30 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 0 , 4 7 ­} 0 , 57 ( m , 1 H ) , 0 , 60 - 0 , 74 ( m , 3 H ) , 1, 25 - 1, 38 ( m , 1 H ) , 1, 5 4 - 1, 79 ( m , 9 H ) , 1, 91 - 2 , 25 ( m , 5 H ) , 2 , 48 - 2 , 90 ( m , 3 H ) , 3 , 58 - 3 , 66 ( m , 1 H ) , 4 , 37 - 4 , 47 ( m , 2 H ) , 5 , 13 ( q , J = 6 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 78 - 5 , 91 ( m , 1 H ) , 6 , 48 , 6 , 55 ( A B q , J ^{a b} = 16 , 3 H z , 2 H ) , 7 , 57 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 73 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 83 - 7 , 96 ( m , 2 H ) , 8 , 43 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 66 (d , J = 7 , 8 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 590 , 2 [ M H ] , T r = 1, 88 m in .

[0968] ^{C o m p u e s t o 10 4 ( 13 , 5 m g , 3 , 1 % ) c o m o u n s ó l id o a m a r i l l o c l a r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D 3 O D ) : 5 0 , 4 4 - 0 , 5 7 ( m ,} 1 H ) , 0 , 61 - 0 , 71 ( m , 3 H ) , 1, 28 - 1, 4 0 ( m , 1 H ) , 1, 5 4 - 1, 8 1 ( m , 9 H ) , 1, 91 - 2 , 13 ( m , 4 H ) , 2 , 17 - 2 , 29 ( m , 1 H ) , 2 , 43 - 2 , 59 ( m , 1 H ) , 2 , 66 - 2 , 78 ( m , 2 H ) , 3 , 58 - 3 , 66 ( m , 1 H ) , 4 , 30 - 4 , 38 ( m , 1 H ) , 4 , 40 - 4 , 48 ( m , 1 H ) , 5 , 05 - 5 , 15 ( m , 1 H ) , 5 , 78 - 5 , 91 ( m , 1 H ) , 6 , 47 , 6 , 54 ( A B q , J ^{a b} = 15 , 8 H z , 2 H ) , 7 , 50 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 63 - 7 , 74 ( m , 1 H ) , 7 , 80 ( s , 1 H ) , 7 , 88 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 32 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 69 - 8 , 76 ( m , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 590 , 2 [ ^m + H ] , T r = 1, 93 m in .

[0969] ^{C o m p u e s t o 10 5 ( 6 ,0 m g , 1 , 4 % ) c o m o u n a g o m a d e c o l o r a m a r i l l o c l a r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D 3 O D ) : 5 0 , 4 5 ­} 0 , 55 ( m , 1 H ) , 0 , 59 a 0 , 72 ( m , 3 H ) , 1, 27 - 1, 4 4 ( m , 1 H ) , 1, 54 - 1, 84 ( m , 9 H ) , 1, 90 - 2 , 00 ( m , 2 H ) , 2 , 01 - 2 , 27 ( m , 4 H ) , 2 , 45 ­ 2 , 54 ( m , 1 H ) , 2 , 62 - 2 , 81 ( m , 2 H ) , 3 , 57 - 3 , 66 ( m , 1 H ) , 4 , 37 - 4 , 47 ( m , 2 H ) , 4 , 96 (d , J = 8 , 9 H z , 1 H ) , 5 , 11 ( q , J = 6 , 9 H z , 1 H ) , 5 , 78 - 5 , 90 ( m , 1 H ) , 6 , 39 - 6 , 62 ( m , 2 H ) , 7 , 52 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 70 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 80 - 7 , 92 ( m , 2 H ) , 8 , 35 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 66 - 8 , 74 ( m , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 590 , 2 [ M H ] , T r = 1, 97 m in .

Ejemplo 106. Compuesto 106.

[0970]

C o m p u e s t o 106 a . É s t e r m e t í l i c o d e l á c i d o 4 -( 1 - h i d r o x i - e t i l ) - t e t r a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o

[0971]

[0972] ^{U n a s o l u c ió n d e W , W - d i i s o p r o p i la m i n a ( 1 , 5 1 g , 2 , 1 m l , 1 5 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o a n h id r o ( 10 m L ) s e a g it ó a} - 78 ° C b a jo n it r ó g e n o . n - B u t i l l it io (6 m l, 15 m m o l, s o l u c i ó n 2 , 5 M e n h e x a n o ) s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 30 m in . U n a s o l u c i ó n d e é s t e r m e t í l i c o d e l á c id o t e t r a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o ( 1, 60 g , 10 s e a ñ a d i ó m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o (4 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a - 78 ° C d u r a n t e 20 m in . E l a c e t a l d e h í d o d e s p u é s s e a ñ a d i ó ( 1, 32 g , 1, 7 m l, 30 m m o l) e n u n a p o r c i ó n . E l b a ñ o d e r e f r ig e r a c i ó n s e r e t ir ó y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y s e a ñ a d i ó á c id o c l o r h í d r i c o e n f r ia d o c o n h ie lo ( 2 M ) p a r a a c i d i f i c a r l a m e z c l a d e r e a c c i ó n a p H 2. S e a ñ a d i ó c l o r u r o s ó d i c o p a r a s a t u r a r l a f a s e a c u o s a y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n d ie t i l é t e r . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e p e n t a n o / é t e r d ie t í l i c o 3 : 1 a 1 :3 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 1, 77 g , 8 7 % ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o . 1 H ^r M ⁿ ( 300 M H z , a f e - D M S O ) : 5 0 , 96 (d , J = 6 , 5 H z , 3 H ) , 1, 4 6 - 1, 73 ( m , 2 H ) , 2 , 12 - 2 , 28 ( m , 2 H ) , 2 , 4 3 - 2 , 57 ( m , 4 H ) , 3 , 50 - 3 , 58 ( m , 1 H ) , 3 , 63 ( s , 3 H ) , 4 , 85 ( d , J = 5 , 8 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 227 , 1 [ M N a ] , T r = 1, 53 m in .

C o m p u e s t o 1 06 b . É s t e r m e t í l i c o d e á c i d o 4 -( 1 - h i d r o x i - e t i l ) - 1, 1 - d i o x o - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o

[0973]

[0974] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r m e t í l i c o d e l á c i d o 4 - ( 1 - h i d r o x ¡ - e t ¡ l ) - t e t r a h ¡ d r o - t ¡ o p i r a n - 4 - c a r b o x í l ¡ c o ( 4 08 m g , 2 m m o l) e n} d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) s e a g it ó a 02C . Á c i d o M e f a - c l o r o p e r b e n z o i c o ( 7 0 % q u e c o n t ie n e 2 0 % d e a g u a p u r a y 10 % á c id o m e f a - c l o r o b e n z o i c o , 830 m g , 4 , 8 m m o l) s e a ñ a d i ó y l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 3 h . S e a ñ a d i ó á c id o m e f a - c l o r o p e r b e n z o i c o a d i c i o n a l ( 7 0 % q u e c o n t i e n e 2 0 % d e a g u a p u r a y 10 % d e á c i d o m e f a - c l o r o b e n z o i c o , 830 m g , 4 , 8 m m o l) s e a ñ a d i ó y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 3 h . S e a ñ a d i e r o n la s o l u c i ó n d e t io s u l f a t o d e s o d io y s o l u c i ó n d e c a r b o n a t o d e h id r ó g e n o d e s o d io s a t u r a d a y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e / ' s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 1 :1 a 0 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 281 m g , 6 0 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , c f e - D M S O ) 5 0 , 99 (d , J = 6 , 5 H z , 3 H ) , 1, 90 - 2 , 30 ( m , 4 H ) , 2 , 9 2 - 3 , 11 ( m , 4 H ) , 3 , 64 - 3 , 71 ( m , 4 H ) , 5 , 12 ( d , J = 5 , 8 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 237 , 1 [ M H ] , T r = 0 , 76 m in .

C o m p u e s t o 106 c . É s t e r m e t í l i c o d e l á c i d o 1, 1 - d i o x o - 4 - v i n i l - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o

[0975]

[0976] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r m e t í l i c o d e l á c id o 4 - ( 1 - h i d r o x i - e t i l ) - 1 , 1 - d i o x o - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o ( 28 1 m g ,} 1, 2 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 10 m L ) s e a g it ó a 0 ° C b a jo n it r ó g e n o . S e a ñ a d i ó p i r id in a ( 284 m g , 0 , 3 m l, 3 , 6 m m o l) y d e s p u é s s e a ñ a d i ó a n h í d r i d o t r i f l u o r o m e t a n o s u l f ó n ic o ( 677 m g , 0 , 4 m l, 2 , 4 m m o l) g o t a a g o t a y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 0 ° C d u r a n t e 30 m in . S e a ñ a d i ó s o l u c i ó n d e h id r ó g e n o c a r b o n a t o d e s o d io s a t u r a d o y la c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó y s e la v ó c o n s a l m u e r a y s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a . E l f i l t r a d o s e e v a p o r ó a u n v o l u m e n d e - 5 m l y la s o l u c i ó n d e é s t e r m e t í l i c o d e á c id o 1, 1 - d i o x o - 4 -( 1 - t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n i l o x i - e t i l ) - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 -c a r b o x í l i c o c r u d o ( 1, 2 m m o l) s e u s ó i n m e d ia t a m e n t e e n e l s i g u i e n t e p a s o . C L E M ( m / z ) 368 , 9 [ M H ] , T r = 2 , 27 m in . U n a s o l u c i ó n d e é s t e r m e t í l i c o d e á c i d o 1, 1 - d i o x o - 4 -( 1 - t r i f l u o r o m e t a n o s u l f o n i l o x i - e t i l ) - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o c r u d o ( 1, 2 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 5 m L ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n i t r ó g e n o . 1, 8 - D i a z a b i c i c l o u n d e c - 7 -e n o ( 0 , 6 m l, 3 , 6 m m o l) s e a ñ a d i ó y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 45 m in . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y s e a c i d i f i c ó a p H 2 c o n á c i d o c l o r h í d r i c o e n f r ia d o c o n h ie lo ( 2 M ) . L a m e z c l a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n , s e l a v a r o n c o n a g u a y s a l m u e r a . L a s o l u c ió n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n h id r ó f o b o d e f r it a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o u n g r a d ie n t e d e / s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 4 : 1 a 1 : 1 p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 182 m g , 7 0 % e n d o s p a s o s ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , c D c I3) 5 2 , 25 - 2 , 34 ( m , 2 H ) , 2 , 59 - 2 , 66 ( m , 2 H ) , 3 , 05 - 3 , 13 ( m , 4 H ) , 3 , 79 ( s , 3 H ) , 5 , 23 ( d , J = 17 , 6 H z , 1 H ) , 5 , 31 (d , J = 10 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 82 ( d d , J = 17 , 6 , 10 , 7 H z , 1 H ) . C L E M ( m /z ) 219 , 1 [ M H ] , T r = 1, 33 m in .

C o m p u e s t o 106 d . Á c i d o 1, 1 - d i o x o - 4 - v i n i l - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o

[0977]

[0978] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r m e t í l i c o d e á c i d o 1 , 1 - d i o x o - 4 - v i n i l - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o ( 17 4 m g , 0 , 8 m m o l)} e n t e t r a h id r o f u r a n o ( 4 m L ) y m e t a n o l ( 0 , 5 m L ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n i t r ó g e n o . S e a ñ a d i ó u n a s o l u c ió n d e h id r ó x id o d e lit io m o n o h id r a t o ( 134 m g , 3 , 2 m m o l) e n a g u a ( 1 m L ) y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a 0 ° C y s e a c id i f ic ó a p H 2 c o n á c id o c l o r h í d r i c o ( 2 M ) . E l c l o r u r o d e s o d io s e a ñ a d i ó y la m e z c l a s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b in a r o n y s e la v a r o n c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 163 m g , 10 0 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , c f e - D M S O ) | | n 2 , 0 3 - 2 , 12 ( m , 2 H ) , 2 , 33 - 2 , 4 2 ( m , 2 H ) , 2 , 96 - 3 , 13 ( m , 4 H ) , 5 , 23 ( d , J = 17 , 6 H z , 1 H ) , 5 , 25 (d , J = 10 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 87 ( d d , J = 17 , 6 , 10 , 7 H z , 1 H ) , 12 , 9 - 13 , 1 (ancho s , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 227 , 1 [ M N a ] , T r = 0 , 96 m in .

C o m p u e s t o 106.

[0979]

[0980] ^{U n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e á c i d o 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) p r o p i o n i l ] h e x a h i d r o - p i r i d a z i n a - 3 -}c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 187 m g , 0 , 35 m m o l) , á c i d o 1, 1 - d i o x o - 4 - v i n i l - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 -c a r b o x í l i c o ( 79 m g , 0 , 38 m m o l) , t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 21 m g , 0 , 07 m m o l) y t r i e t i l a m in a ( 106 m g , 0 , 15 m l, 1, 05 m m o l) e n 1, 4 - d i o x a n o ( 10 m L ) s e d e s g a s i f i c ó c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 15 m in . L a s o l u c i ó n s e c a l e n t ó a 50 ° C y s e a ñ a d ió t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 32 m g , 0 , 035 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 80 ° C d u r a n t e 30 m in . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e e n f r ió a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y la m e z c l a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c io n a r e l á c i d o 4 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) p r o p i o n i l ] -h e x a h i d r o p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } - a m i n o ) e t i l ] q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 1, 1 - d i o x o - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o c r u d o ( 0 , 35 m m o l) c o m o u n a c e i t e n a r a n j a . C L E M ( m / z ) 658 , 2 [ M H ] , T r = 1, 5 7 m in . U n a s o l u c i ó n d e a n h í d r i d o 2 - m e t i l - 6 -n it r o b e n z o ip o ( 241 m g , 0 , 7 m m o l) y 4 -( d i m e t i l a m i n o ) - p i r i d i n a ( 170 m g , 1, 4 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 200 m L ) q u e c o n t ie n e 4 Á t a m i c e s m o l e c u l a r e s ( 200 m g ) s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e b a jo n i t r ó g e n o . U n a s o l u c i ó n d e á c i d o 4 -( ( E ) - 2 - { 2 -[ ( R ) - 1 -( { ( S ) - 1 -[ ( S ) - 2 -( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) p r o p i o n i l ] h e x a h i d r o - p i r i d a z i n a - 3 - c a r b o n i l } -a m i n o ) e t i l ] q u i n o l i n - 7 - i l } - v i n i l ) - 1, 1 - d i o x o - h e x a h i d r o - t i o p i r a n - 4 - c a r b o x í l i c o ( 0 , 35 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 5 m L ) s e a ñ a d i ó g o t a a g o t a d u r a n t e 4 h y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 4 h . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f ilt r ó a t r a v é s d e C e l i t e y la s o l u c i ó n s e e v a p o r ó p a r a d a r u n v o l u m e n d e ~ 30 m l. L a s o l u c i ó n s e la v ó c o n s o l u c i ó n s a t u r a d a d e c l o r u r o d e a m o n io f r ía , s o l u c ió n s a t u r a d a d e b ic a r b o n a t o s ó d i c o f r í a y s a l m u e r a . L a s o l u c ió n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó e l f i l t r a d o . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e e l u y e n d o c o n u n g r a d ie n t e d e / ' s o - h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo / m e t a n o l 1 : 1 : 0 a 0 : 1 : 0 a 0 : 9 : 1 s e g u i d o d e f a s e i n v e r s a H P L C p r e p a r a t i v a e l u y e n d o c o n u n g r a d ie n t e d e a c e t o n it r i lo ( q u e c o n t ie n e 0 , 1 % d e á c i d o t r i f l u o r o a c é t i c o ) / a g u a ( q u e c o n t ie n e 0 , 1 % d e á c i d o t r i f l u o r o a c é t i c o ) 9 : 1 a 1 : 1. L a s f r a c c i o n e s q u e c o n t e n í a n e l p r o d u c t o s e c o m b in a r o n y s e e v a p o r a r o n . E l r e s i d u o s e r e p a r t ió e n t r e d ic l o r o m e t a n o y s o l u c i ó n d e h id r ó g e n o c a r b o n a t o d e s o d io s a t u r a d o . L a c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó y s e la v ó c o n s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 14 m g , 7 % e n d o s p a s o s ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) : 5 1, 05 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 09 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 59 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 62 (d , J = 7 , 1 H z , 3 H ) , 1, 6 3 - 1, 71 ( m , 2 H ) , 1, 9 2 - 1, 9 7 ( m , 1 H ) , 2 , 17 a 3 , 25 ( m , 1 1 H ) , 3 , 55 - 3 , 65 ( m , 1 H ) , 4 , 40 - 4 , 46 ( m , 1 H ) , 5 , 09 (q , J = 6 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 33 (d , J = 8 , 3 H z , 1 H ) , 5 , 85 ( q , J = 7 , 1 H z , 1 H ) , 6 , 36 ( d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 73 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 7 , 47 ( d , J = 8,5 H z , 1 H ) , 7 , 68 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 6 H z , 1 H ) , 7 , 85 (br s , 1 H ) , 7 , 87 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 28 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 640 , 2 [ M H ] , T r = 2 , 09 m in .

Ejemplo 107. Compuesto 107.

[0981]

C o m p u e s t o 107 a . É s t e r e t í l i c o d e á c id o 2 , 2 - b / s - f l u o r o m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o

[0982]

[0983] ^{U n v i a l s e c a r g ó c o n é s t e r e t í l i c o d e á c id o 2 , 2 - ¿ > / s - h i d r o x i m e t i l - b u t - 3 - e n o i c o ( 0 , 88 g , 5 , 0 5 m m o l) , 1 , 3 -}d i f l u o r o a c e t o n a ( 0 , 95 g , 10 , 1 m m o l) y m o n o h id r a t o d e á c id o p a r a - t o l u e n o - 4 - s u l f ó n i c o ( 0 , 96 g , 5 , 05 m m o l) . E l v i a l s e s e l l ó y s e c a l e n t ó e n u n r e a c t o r d e m i c r o o n d a s a 10 0 ° C d u r a n t e 15 m in . E l a c e i t e m a r r ó n r e s u lt a n t e s e r e p a r t ió e n t r e d ic l o r o m e t a n o y s o l u c ió n a c u o s a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io . L a c a p a o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó p a r a d a r u n a c e i t e m a r r ó n ( 0 , 98 g ) . E l a c e i t e s e p u r i f ic ó p o r c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e u s a n d o /so-h e x a n o s / a c e t a t o d e e t i lo 3 : 1 p a r a d a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 0 , 619 g , 74 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l a ) : 5 1, 31 (t, J = 7 , 1 H z , 3 H ) , 3 , 96 (d , J = 12 , 0 H z , 2 H ) , 4 , 27 ( q , J = 7 , 1 H z , 2 H ) , 4 , 34 - 4 , 69 ( m , 6 H ) , 5 , 22 ­ 5 , 35 ( m , 2 H ) , 5 , 67 - 5 , 79 ( m , 1 H ) .

C o m p u e s t o 107 b . Á c i d o 2 , 2 - B i s - f l u o r o m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o

[0984]

[0985] ^{S e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n d e h id r ó x id o d e lit io m o n o h id r a t o ( 3 11 m g , 7 , 4 2 m m o l) e n a g u a (8 m L ) a u n a s o l u c ió n} a g i t a d a d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - ¿ > / s - f l u o r o m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o ( 619 m g , 2 , 47 m m o l) e n t e t r a h id r o f u r a n o / m e t a n o l ( 12 m l, 4 : 1 ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 1 h y d e s p u é s s e e n f r ió a 0 ° C a n t e s d e a c i d i f i c a r a p H 4 c o n á c i d o c l o r h í d r i c o ( 1 M ) . L a m e z c l a s e s a t u r ó c o n c l o r u r o s ó d i c o y d e s p u é s s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 3 x 10 m L ) . E l e x t r a c t o s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó p a r a d a r e l p r o d u c t o d e l t ít u lo ( 390 m g , 7 1 % ) c o m o u n a g o m a in c o l o r a . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C l 3 ) 5 4 , 00 (d , J = 12 , 0 H z , 2 H ) , 4 , 35 - 4 , 73 ( m , 6 H ) , 5 , 30 - 5 , 43 ( m , 2 H ) , 5 , 68 - 5 , 81 ( m , 1 H ) .

Ejemplo 107. Compuesto 107.

[0986]

Ejemplo 108. Compuesto 108.

[0988]

[0989] ^{A u n a s o l u c i ó n d e l r e a c t iv o 74 ( 7 , 5 m g , 0 , 0 12 m m o l) e n p i r id in a ( 3 g o t a s ) s e a ñ a d i ó c l o r u r o d e n - b u t ir i l o ( 1 g o t a )} a t a . D e s p u é s d e 1 h a t a , la m e z c l a s e d i l u y ó c o n a c e t a t o d e e t i lo , s e la v ó c o n s o l u c i ó n d e á c id o c í t r ic o a l 10 % (x 1 ) y s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N a H C O 3 ( x 1 ) . D e s p u é s d e e x t r a e r s e l a s f r a c c i o n e s a c u o s a s c o n a c e t a t o d e e t i lo ( x 1 ) , d o s f r a c c i o n e s o r g á n i c a s s e c o m b i n a r o n , s e s e c a r o n ( M g S O 4 ) y s e c o n c e n t r a r o n . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r C o m b i f l a s h u s a n d o h e x a n o s - a c e t a t o d e e t i lo c o m o e l u y e n t e s p a r a o b t e n e r 4 , 6 m g ( 55 % ) d e l c o m p u e s t o d e l p r o d u c t o 108 . 1 H R M N ( 400 M H z , M e t a n o l - o 4 ) : 5 8 , 23 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 83 ( d , J = 8 , 4 H z , 1 H ) , 7 , 78 ( s , 1 H ) , 7 , 63 ( d d , J = 8 , 7 , 1, 6 H z , 1 H ) , 7 , 43 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 6 , 60 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 29 (d , J = 16 , 4 H z , 1 H ) , 5 , 80 (q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 25 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 5 , 07 (q , J = 6 , 6 H z , 1 H ) , 4 , 99 ( s , 1 H ) , 4 , 41 (d , J = 13 , 2 H z , 1 H ) , 3 , 57 ( m , 1 H ) , 2 , 75 - 2 , 59 ( m , 1 H ) , 2 , 34 (t, J = 7 , 3 H z , 2 H ) , 2 , 31 - 2 , 06 ( m , 3 H ) , 2 , 0 5 - 1, 75 ( m , 6 H ) , 1, 75 - 1, 6 2 ( m , 3 H ) , 1, 60 (d , J = 7 , 0 H z , 3 H ) , 1, 57 (d , J = 7 , 0 H z , 3 H ) , 1, 28 ( s , 3 H ) , 1, 06 (d , J = 6 , 8 H z , 3 H ) , 1, 01 (d , J = 6 , 8 H z , 3 H ) , 0 , 98 (t, J = 6 , 8 H z , 3 H ) .

[0990] ^{C L E M ( m / z ) 6 76 , 4 [M H ] , T r 1 , 7 7 m in ( 3 m in d e e j e c u c i ó n ) .}

[0992] ^{A u n a s o l u c i ó n d e la 74 ( 7 , 3 m g , 0 , 0 12 m m o l) e n p i r id in a ( 3 g o t a s ) s e a ñ a d i ó c l o r u r o d e p r o p io n i l o ( 2 g o t a s ) a} t a . D e s p u é s d e 5 m in , s e a ñ a d i ó a c e t a t o d e e t i lo ( ~ 1 m L ) y s e s o n i c ó p a r a q u e f u e r a u n a s u s p e n s i ó n . D e s p u é s d e 20 m in , l a m e z c l a s e d i l u y ó c o n a c e t a t o d e e t i lo , s e la v ó c o n s o l u c i ó n d e á c i d o c í t r ic o a l 10 % ( x 1 ) y s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N a H C O 3 (x 1 ) . D e s p u é s d e e x t r a e r s e l a s f r a c c i o n e s a c u o s a s c o n a c e t a t o d e e t i lo ( x 1 ) , d o s f r a c c i o n e s o r g á n i c a s s e c o m b i n a r o n , s e s e c a r o n ( M g S O 4 ) , y s e c o n c e n t r a r o n . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r C o m b i f l a s h u s a n d o h e x a n o s - a c e t a t o d e e t i lo c o m o e l u y e n t e s p a r a o b t e n e r 6 , 0 m g ( 75 % ) d e l p r o d u c t o C o m p u e s t o 109. 1 H R M N ( 400 M H z , M e t a n o l -^q 4 ): 5 8 , 46 (d , J = 5 , 6 H z , 1 H ) , 8 , 23 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 83 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 78 ( s , 1 H ) , 7 , 63 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 43 ( d , J = 8 , 4 H z , 1 H ) , 6 , 60 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 29 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 25 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 5 , 07 ( q , J = 6 , 5 H z , 1 H ) , 4 , 98 ( s , 1 H ) , 4 , 47 - 4 , 34 ( m , 1 H ) , 3 , 57 ( d d , J = 11, 8 , 3 , 0 H z , 1 H ) , 2 , 68 (td , J = 13 , 0 , 3 , 1 H z , 1 H ) , 2 , 38 (q , J = 7 , 6 H z , 2 H ) , 2 , 28 ( d d , J = 24 , 6 , 13 , 3 H z , 1 H ) , 2 , 20 a 2 , 7 ( m , 1 H ) , 2 , 0 5 - 1, 74 ( m , 5 H ) , 1, 74 - 1, 6 3 ( m , 1 H ) , 1, 60 (d , J = 7 , 3 H z , 3 H ) , 1, 57 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 3 7 - 1, 19 ( m , 3 H ) , 1, 15 (t, J = 7 , 6 H z , 3 H ) , 1, 06 (d , J = 6 , 8 H z , 3 H ) , 1, 01 (d , J = 6 , 6 H z , 3 H ) , 0 , 94 - 0 , 67 ( m , 2 H ) .

[0993] ^{C L E M ( m / z ) 6 6 2 , 4 [ M H ] , T r 1 , 6 5 m in ( 3 m in d e e j e c u c i ó n ) .}

Ejemplo 110. Compuesto 110.

[0994]

[0995] ^{A u n a s o l u c ió n d e l r e a c t iv o 74 ( 7 , 1 m g , 0 , 0 12 m m o l) e n p i r id in a ( 3 g o t a s ) s e a ñ a d i ó a n h í d r i d o a c é t i c o ( 2 g o t a s )} a t a . D e s p u é s d e 21 h , la m e z c l a s e d i l u y ó c o n a c e t a t o d e e t i lo , s e la v ó c o n s o l u c i ó n d e á c i d o c í t r ic o a l 10 % (x 1 ) y s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N a H C Ü 3 ( x 1 ) . D e s p u é s d e e x t r a e r s e l a s f r a c c i o n e s a c u o s a s c o n a c e t a t o d e e t i lo ( x 1 ) , d o s f r a c c i o n e s o r g á n i c a s s e c o m b i n a r o n , s e s e c a r o n ( M g S Ü 4 ) y s e c o n c e n t r a r o n . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r C o m b i f l a s h u s a n d o h e x a n o s - a c e t a t o d e e t i lo c o m o e l u y e n t e s p a r a o b t e n e r 6 , 6 m g ( 87 % ) d e l c o m p u e s t o d e l p r o d u c t o 110 . 1 H R M N ( 400 M H z , M e t a n o l- c f c ) : 5 8 , 23 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 83 (d , J = 8 , 4 H z , 1 H ) , 7 , 78 ( s , 1 H ) , 7 , 62 ( d d , J = 8 , 4 , 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 43 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 6 , 61 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 29 ( d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 25 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 5 , 07 ( q , J = 6 , 6 H z , 1 H ) , 4 , 96 ( s , 1 H ) , 4 , 41 ( d d , J = 13 , 5 , 4 , 3 H z , 1 H ) , 3 , 57 ( d d , J = 11, 8 , 2 , 9 H z , 1 H ) , 2 , 68 (td , J = 13 , 0 , 3 , 2 H z , 1 H ) , 2 , 39 - 2 , 20 ( m , 2 H ) , 2 , 20 - 2 , 09 ( m , 1 H ) , 2 , 07 ( s , 3 H ) , 2 , 05 - 1, 7 5 ( m , 6 H ) , 1, 75 -1, 6 2 ( m , 2 H ) , 1, 60 (d , J = 7 , 3 H z , 3 H ) , 1, 57 ( d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 06 ( d , J = 6 , 8 H z , 3 H ) , 1, 01 (d , J = 6 , 6 H z , 3 H ) , 0 , 98 - 0 , 69 ( m , 2 H ) .

[0996] ^{C L E M ( m / z ) 6 4 8 , 5 [ M H ] , T r 1 , 5 4 m in ( 3 m in d e e j e c u c i ó n ) .}

Ejemplo 111. Compuesto 111.

[0997]

[0998] ^{A u n a s o l u c ió n d e l r e a c t iv o 7 5 ( 7 , 1 m g , 0 , 0 12 m m o l) e n p i r id in a ( 3 g o t a s ) s e a ñ a d i ó c l o r u r o d e p r o p io n i l o} ( 2 g o t a s ) a t a . D e s p u é s d e 5 m in , s e a ñ a d i ó a c e t a t o d e e t i lo ( ~ 1 m L ) y s e s o n i c ó p a r a q u e f u e r a u n a s u s p e n s i ó n . D e s p u é s d e 20 m in , l a m e z c l a s e d i l u y ó c o n a c e t a t o d e e t i lo , s e la v ó c o n s o l u c i ó n d e á c i d o c í t r ic o a l 10 % (x 1 ) y s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N a H C Ü 3 (x 1 ) . D e s p u é s d e e x t r a e r s e l a s f r a c c i o n e s a c u o s a s c o n a c e t a t o d e e t i lo ( x 1 ) , d o s f r a c c i o n e s o r g á n i c a s s e c o m b in a r o n , s e s e c a r o n ( M g S Ü 4 ) , y s e c o n c e n t r a r o n . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r C o m b i f l a s h u s a n d o h e x a n o s - a c e t a t o d e e t i lo c o m o e l u y e n t e s p a r a o b t e n e r 7 , 3 m g ( 94 % ) d e l c o m p u e s t o d e l p r o d u c t o 111 . 1 H R M N ( 400 M H z , M e t a n o l - d t ) : 5 8 , 23 ( d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 82 (d , J = 8 , 4 H z , 1 H ) , 7 , 77 ( d , J = 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 61 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 43 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 6 , 55 (d , J = 16 , 4 H z , 1 H ) , 6 , 26 (d , J = 16 , 4 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 28 (d , J = 8 , 6 H z , 1 H ) , 5 , 06 (q , J = 6 , 4 H z , 1 H ) , 4 , 78 (d t , J = 10 , 8 , 6 , 2 H z , 1 H ) , 4 , 41 ( d , J = 13 , 3 H z , 1 H ) , 3 , 58 ( d d , J = 11, 7 , 3 , 1 H z , 1 H ) , 2 , 68 (td , J = 12 , 9 , 3 , 2 H z , 1 H ) , 2 , 58 ( d , J = 14 , 1 H z , 1 H ) , 2 , 42 - 2 , 11 ( m , 4 H ) , 2 , 10 - 1, 8 7 ( m , 3 H ) , 1, 8 0 - 1, 63 ( m , 3 H ) , 1, 61 (d , J = 7 , 2 H z , 3 H ) , 1, 57 (d , J = 6 , 8 H z , 3 H ) , 1, 5 3 - 1, 3 7 ( m , 2 H ) , 1, 17 - 1, 0 6 ( m , 6 H ) , 1, 03 (d , J = 6 , 6 H z , 3 H ) , 0 , 96 - 0 , 69 ( m , 2 H ) .

[0999] ^{C L E M ( m / z ) 6 6 2 , 5 [ M H ] , T r 1 , 6 6 m in ( 3 m in d e e j e c u c i ó n ) .}

Ejemplo 112. Compuesto 112.

[1000]

[1001] ^{A u n a s o l u c i ó n d e 7 5 ( 7 , 3 m g , 0 , 0 12 m m o l) e n p i r id in a ( 3 g o t a s ) s e a ñ a d i ó a n h í d r i d o a c é t i c o ( 2 g o t a s ) a t a .} D e s p u é s d e 18 h , la m e z c l a s e d i l u y ó c o n a c e t a t o d e e t i lo , s e l a v ó c o n s o l u c i ó n d e á c i d o c í t r ic o a l 10 % ( x 1 ) y s o l u c ió n s a t u r a d a d e N a H C O 3 ( x 1 ) . D e s p u é s d e e x t r a e r s e l a s f r a c c i o n e s a c u o s a s c o n a c e t a t o d e e t i lo (x 1 ) , d o s f r a c c i o n e s o r g á n i c a s s e c o m b in a r o n , s e s e c a r o n ( M g S O 4 ) y s e c o n c e n t r a r o n . E l r e s i d u o s e p u r i f ic ó p o r C o m b i f l a s h u s a n d o h e x a n o s - a c e t a t o d e e t i lo c o m o e l u y e n t e s p a r a o b t e n e r 5 , 76 m g ( 73 % ) d e l c o m p u e s t o d e l p r o d u c t o 112 . 1 H R M N ( 400 M H z , M e t a n o l - d t ) : 5 8 , 23 (d , J = 7 , 6 H z , 1 H ) , 7 , 82 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 76 ( s , 1 H ) , 7 , 61 ( d d , J = 8 , 5 , 1, 7 H z , 1 H ) , 7 , 43 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 6 , 55 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 26 (d , J = 16 , 3 H z , 1 H ) , 5 , 80 ( q , J = 7 , 2 H z , 1 H ) , 5 , 28 (d , J = 8 , 6 H z , 1 H ) , 5 , 06 ( m , 1 H ) , 4 , 77 (d t , J = 10 , 6 , 6 , 1 H z , 1 H ) , 4 , 48 - 4 , 34 ( m , 1 H ) , 3 , 64 - 3 , 51 ( m , 1 H ) , 2 , 68 (td , J = 13 , 0 , 3 , 3 H z , 1 H ) , 2 , 58 (d , J = 14 , 6 H z , 1 H ) , 2 , 35 (d , J = 12 , 8 H z , 1 H ) , 2 , 29 - 2 , 21 ( m , 1 H ) , 2 , 17 ( d d d , J = 13 , 0 , 7 , 9 , 6 , 4 H z , 1 H ) , 2 , 02 ( s , 3 H ) , 2 , 10 - 1, 9 0 ( m , 2 H ) , 1, 80 - 1, 6 3 ( m , 3 H ) , 1, 61 ( d , J = 7 , 2 H z , 3 H ) , 1, 57 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 54 - 1, 39 ( m , 2 H ) , 1, 07 (d , J = 6 , 8 H z , 3 H ) , 1, 03 (d , J = 6 , 6 H z , 3 H ) , 0 , 89 ( m , 2 H ) .

[1002] ^{C L E M ( m / z ) 6 4 8 , 4 [ M H ] , T r 1 , 5 3 m in ( 3 m in d e e j e c u c i ó n ) .}

E j e m p l o 113 . C o m p u e s t o 113 .

[1003]

C o m p u e s t o 113 a . Á c i d o 2 , 2 - D i m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o

[1004]

[1005] ^{U n a s o l u c i ó n d e é s t e r e t í l i c o d e l á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - 5 - v i n i l - [ 1 , 3 ] d i o x a n o - 5 - c a r b o x í l i c o ( 15 0 m g , 0 , 7 m m o l) e n} t e t r a h id r o f u r a n o ( 3 m L ) s e a g it ó a 5 ° C e n a t m ó s f e r a d e n it r ó g e n o . U n a s o l u c i ó n d e h id r ó x id o d e lit io m o n o h id r a t o ( 59 m g , 1, 4 m m o l) e n a g u a s e a ñ a d i ó ( 1 m L ) y l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a 5 ° C d u r a n t e 30 m in u t o s y d e s p u é s a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 5 h o r a s . S e a ñ a d i ó m e t a n o l ( 0 , 5 m L ) p a r a d a r u n a s o l u c i ó n t r a n s p a r e n t e y la m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 22 h o r a s . E l d i s o l v e n t e s e e v a p o r ó . S e a ñ a d i ó a g u a ( 2 m L ) a l r e s i d u o y l a s o l u c i ó n s e a c i d i f i c ó a p H 2 c o n á c i d o c l o r h í d r i c o 2 M . S e a ñ a d i ó s a l m u e r a y l a m e z c l a s e e x t r a jo c o n a c e t a t o d e e t i lo . L o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s s e c o m b i n a r o n , s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a . E l e x t r a c t o o r g á n i c o s e s e p a r ó , s e la v ó c o n a g u a (x 5 ) , y s a l m u e r a . L a s o l u c i ó n o r g á n i c a s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y e l f i l t r a d o s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c io n a r e l c o m p u e s t o d e l t ít u lo ( 117 m g , 9 0 % ) c o m o u n a c e i t e in c o l o r o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D C t a ) 5 1, 44 ( s , 3 H ) , 1, 49 ( s , 3 H ) , 3 , 91 (d , J = 12 , 0 H z , 2 H ) , 4 , 32 (d , J = 12 , 0 H z , 2 H ) , 5 , 30 ( d , J = 17 , 8 H z , 1 H ) , 5 , 35 (d , J = 10 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 76 ( d d , J = 17 , 8 , 10 , 7 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 185 , 1 [ M -H ] , T r = 1, 26 m in .

C o m p u e s t o 113 .

[1006]

[1007] ^{U n a s o l u c ió n d e á c i d o ( S ) - 1 - [ ( S ) - 2 - ( ( S ) - 2 - h i d r o x i - 3 - m e t i l - b u t i r i l a m i n o ) p r o p i o n i l ] - h e x a h i d r o p i r i d a z i n a - 3 -}c a r b o x í l i c o [ ( R ) - 1 -( 7 - b r o m o - q u i n o l i n - 2 - i l ) - e t i l ] - a m i d a ( 228 m g , 0 , 426 m m o l) , á c i d o 2 , 2 - d i m e t i l - 5 - v i n i l -[ 1, 3 ] d i o x a n o - 5 -c a r b o x í l i c o ( 79 m g , 0 , 426 m m o l) , t r ie t i l a m in a ( 178 p L , 1, 28 m m o l) y t r i ( o - t o l i l ) f o s f in a ( 26 m g , 0 , 085 m m o l) e n 1, 4 -( o -t o l i l ) d io x a n o (9 m L ) s e p u r g ó c o n n it r ó g e n o d u r a n t e 10 m in u t o s a n t e s d e la a d i c i ó n d e t r i s ( d i b e n c i l i d e n a c e t o n a ) d i p a l a d i o ( 0 ) ( 39 m g , 0 , 042 m m o l) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n a g i t a d a s e c a l e n t ó a 60 ° C d u r a n t e 1 h . L a m e z c l a s e f ilt r ó y s e e v a p o r ó p a r a d a r u n s ó l id o n a r a n j a . E l s ó l id o s e d i s o l v i ó e n d ic l o r o m e t a n o (8 m L ) y s e a ñ a d i ó l a s o l u c i ó n r e s u lt a n t e d u r a n t e 4 , 25 h , u s a n d o u n a b o m b a d e je r i n g a , a u n a s o l u c i ó n d e a n h í d r i d o 2 - m e t i l - 6 -n i t r o - b e n z o ic o ( 366 m g , 1, 07 m m o l) y 4 -( d i m e t i l a m i n o ) p i r i d i n a ( 266 m g , 2 , 13 m m o l) e n d ic l o r o m e t a n o ( 156 m L ) q u e c o n t ie n e e n p o lv o d e 4 Á t a m i c e s . D e s p u é s d e l f in a l d e la a d i c i ó n , l a m e z c l a s e a g it ó d u r a n t e 30 m in u t o s , s e f ilt r ó d e s p u é s s e la v ó c o n s o l u c i ó n d e b ic a r b o n a t o d e s o d io a c u o s o ( 75 m L ) , s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó p a r a d a r u n a g o m a a m a r i l l a . L a g o m a s e p u r i f ic ó m e d ia n t e p r e p a r a t i v a d e f a s e i n v e r s a d e e l u c i ó n H P L C c o n a g u a / a c e t o n it r i l o 3 : 2 p a r a p r o p o r c io n a r 113 ( 53 m g , 20 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o . 1 H R M N ( 300 M H z , C D ³ O D ) 5 1, 06 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 11 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 35 ( s , 3 H ) , 1, 5 5 ( s , 3 H ) , 1, 5 8 - 1, 77 ( m , 2 H ) , 1, 60 ( d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 64 (d , J = 7 , 4 H z , 3 H ) , 1, 90 - 2 , 00 ( m , 1 H ) , 2 , 14 - 2 , 29 ( m , 2 H ) , 2 , 65 - 2 , 80 ( m , 1 H ) , 3 , 56 - 3 , 64 ( m , 1 H ) , 4 , 03 ­ 4 , 16 ( m , 2 H ) , 4 , 29 - 4 , 37 ( m , 1 H ) , 4 , 39 - 4 , 51 ( m , 2 H ) , 5 , 0 1 - 5 , 12 ( m , 1 H ) , 5 , 38 (d , J = 9 , 1 H z , 1 H ) , 5 , 75 - 5 , 87 ( m , 1 H ) , 6 , 17 ( d , J = 16 , 7 H z , 1 H ) , 6 , 64 (d , J = 16 , 7 H z , 1 H ) , 7 , 46 (d , J = 8 , 7 H z , 1 H ) , 7 , 66 - 7 , 74 ( m , 2 H ) , 7 , 84 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 24 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 622 , 3 [ M H ] , T r = 2 , 38 m in .

R E F E R E N C I A E j e m p l o 114 . C o m p u e s t o 114 .

[1008]

[1009] ^{U n a s o l u c i ó n d e l c o m p u e s t o 1 1 3 ( 20 m g , 0 , 0 3 2 m m o l) e n m e t a n o l ( 1 m L ) s e p r e p a r ó y á c i d o c l o r h í d r i c o ( 1 M ,} 3 m L ) s e a ñ a d i ó . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g it ó d u r a n t e 1 h a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e y l u e g o s e n e u t r a l iz ó p o r a d i c i ó n d e s o l u c i ó n d e b ic a r b o n a t o d e s o d io s a t u r a d o . S e a ñ a d i ó c l o r u r o s ó d i c o p a r a s a t u r a r l a s o l u c i ó n . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o , s e f ilt r ó a t r a v é s d e u n a f r it a h id r ó f o b a y s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c io n a r 114 ( 14 m g , 7 5 % ) c o m o u n b l a n c o s ó l id o . 1 H R ^m N ( 300 M H z , C D ³ O D ) 5 1, 01 ( d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1, 04 (d , J = 6 , 7 H z , 3 H ) , 1 , 49 ­ 1, 77 ( m , 2 H ) , 1, 60 (d , J = 6 , 9 H z , 3 H ) , 1, 65 (d , J = 7 , 4 H z , 3 H ) , 1, 8 4 - 1, 96 ( m , 1 H ) , 2 , 08 - 2 , 28 ( m , 2 H ) , 2 , 6 4 - 2 , 77 ( m , 1 H ) , 3 , 56 - 3 , 64 ( m , 1 H ) , 3 , 93 - 4 , 16 ( m , 4 H ) , 4 , 37 - 4 , 46 ( m , 1 H ) , 5 , 06 (q , J = 6 , 7 H z , 1 H ) , 5 , 32 (d , J = 9 , 1 H z , 1 H ) , 5 , 81 ( q , J = 7 , 3 H z , 1 H ) , 6 , 31 (d , J = 16 , 7 H z , 1 H ) , 6 , 63 ( d , J = 16 , 7 H z , 1 H ) , 7 , 45 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 7 , 65 - 7 , 74 ( m , 2 H ) , 7 , 84 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) , 8 , 24 (d , J = 8 , 5 H z , 1 H ) . C L E M ( m / z ) 582 , 5 [ M H ] , T r = 1, 60 m in .

Ejemplos biológicos:

Inhibición de actividad de isomerasa de peptidil-prolilo (PPlasa)

[1010] ^{E l e n s a y o d e P P l a s a s e b a s ó e n e l p r o c e d im i e n t o p r e s e n t a d o p o r J a n o w s k i e t a l . ( A n a l . B io c h e m . 19 9 7 , 2 5 2 ,} 299 ) . E l t a m p ó n d e E n s a y o ( 1980 L d e u n a s o l u c ió n q u e c o n t ie n e 35 m M H E P E S p H 7 , 8 , 50 M d e D T T , y 0 , 0 1 % N p 40 ) f u e p r e - e q u i l i b r a d o a 1 0 ° C e n u n a c u b e t a d e c u a r z o e q u i p a d o c o n u n a g i t a d o r s u p e r io r . S e a ñ a d i ó a e s t a s o l u c i ó n 1 0 L d e c o m p u e s t o e n D M S O ( c o n c e n t r a c ió n f in a l : 0 , 5 % d e D M S O ) , s e g u i d o p o r 5 L d e u n a s o l u c i ó n m a d r e 2 M d e c i c l o f i l i n a ( C o n t i n u a c i ó n )

( C o n t i n u a c i ó n )

[1018] ^{L a s r e s p u e s t a s f a r m a c o l ó g i c a s y b i o q u í m i c a s e s p e c í f i c a s o b s e r v a d a s p u e d e n v a r i a r d e a c u e r d o c o n e l} c o m p u e s t o a c t iv o p a r t i c u l a r s e l e c c i o n a d o o s i e s t á n p r e s e n t e s v e h í c u l o s f a r m a c é u t i c o s , a s í c o m o d e l t ip o d e f o r m u l a c ió n y m o d o d e a d m i n i s t r a c i ó n e m p l e a d o , y t a l e s v a r i a c i o n e s o d i f e r e n c i a s e s p e r a d a s e n lo s r e s u l t a d o s s e c o n t e m p l a n d e a c u e r d o c o n la p r á c t i c a d e l a p r e s e n t e i n v e n c i ó n .

Claims (12)

REIVINDICACIONES

1. U n c o m p u e s t o d e la F ó r m u l a I:

A e s C H ² ;

A 1 e s ( C 1 - C 5 ) a l q u i l e n o o ( C 2 - C 5 ) a l q u e n i l e n o , e n d o n d e u n á t o m o d e c a r b o n o s p 3 d e A 1 s e s u s t i t u y e o p c i o n a l m e n t e p o r - O - , - S ( O ) n - , - N H - o - N ( ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o ) - , y e n d o n d e u n á t o m o d e c a r b o n o s p 3 o s p 2 d e A 1 e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s g r u p o s s e l e c c i o n a d o s d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n h a lo , ( C ¹ -C 8 ) a l q u i lo , ( C ² - C ⁸ ) a l q u e n i l o , ( C ² - C ⁸ ) a l q u in i lo , a r i lo , h e t e r o c ic l o a l q u i l o , c i c l o a l q u i l o , a r i l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , c i c l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , h e t e r o c i c l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , a r i l h e t e r o c i c l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , - O R 9, - S R 9, - S ( O ) R 9, - S ( O ) ² R 9 y -N ( R 9)2 ;

A 2 e s - C H ( R 8) - a r i l e n o o - C H ( R 8) - h e t e r o a r i l e n o , e n d o n d e A 2 e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s s e l e c c i o n a d o s d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n - O R 9, - S R 9, - S ( O ) R 9, - S ( O ) ² R 9, - N ( R 9) ² , h a lo , h a l o ( C ¹ -C 4 ) a l q u i lo , h a l o ( C 1 - C 4 ) a l c o x i , c i a n o y ( C ¹ - C ⁸ ) a l q u i lo ;

L 1 e s - O - C ( O ) ;

X 1 e s - N H - o - N ( C H 3 ) - ;

R 1 y R 2 , t o m a d o s ju n t o c o n e l c a r b o n o a l q u e a m b o s e s t á n u n id o s , f o r m a n - C ( = O ) - ;

R 3 e s H ;

R 4a y R 4b s o n i n d e p e n d ie n t e m e n t e H o ( C ¹ - C ⁸ ) a l q u i lo , e n d o n d e c a d a R 4a y R 4b e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t it u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s s e l e c c i o n a d o s d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n c i a n o , - C O O H , h a lo , h id r o x i l o , a m in o , ( C ¹ - C ⁸ ) a l c o x i , m o n o ( C ¹ - C ⁸ ) a l q u i l a m in o , d i ( C ¹ - C ⁸ ) a m in o , a r i lo y h e t e r o a r i l o ;

R 5a y R 5b s o n i n d e p e n d ie n t e m e n t e H o ( C ¹ - C ⁸ ) a l q u i lo , e n d o n d e c a d a R 5a y R 5b e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t it u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s s e l e c c i o n a d o s d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n - N ³ , c i a n o , - C O O H , h a lo , h id r o x i lo , a m in o , m o n o ( C ¹ - C ⁸ ) a l q u i l a m in o , d i ( C ¹ - C ⁸ ) a l q u i l a m in o , ( C ¹ - C ⁸ ) a l c o x i , a r i lo y h e t e r o a r i l o , o

R 5a y R 5b ju n t o s f o r m a n u n e s p i r o c i c l o q u e t ie n e la F ó r m u l a ( a ) :

e n d o n d e u n o o m á s á t o m o s d e c a r b o n o e n e l a n i l l o d e f ó r m u l a ( a ) s e s u s t i t u y e o p c i o n a l m e n t e p o r u n á t o m o d e n it r ó g e n o , o x í g e n o o a z u f r e , y e n d o n d e u n á t o m o d e a n i l l o d e f ó r m u l a ( a ) t ie n e o p c i o n a l m e n t e u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s s e l e c c i o n a d o s d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n o x o , = N ( C 1 - C 4 ) a l c o x i , h a lo , h id r o x i lo , - N H ² , ( C ¹ -C 4 ) a l q u i lo , h a l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , ( C 1 - C 4 ) a l c o x i , - O C ( O ) R 9 , - C ( O ) ² R 9, y - S ( O ) ² R 9,

R 6a y R 6b ju n t o s f o r m a n u n e s p i r o c i c l o q u e t ie n e la F ó r m u l a ( a ) , e n d o n d e u n o o m á s a n i l l o s á t o m o s d e c a r b o n o d e la F ó r m u l a ( a ) s e s u s t i t u y e o p c i o n a l m e n t e p o r u n á t o m o d e n i t r ó g e n o , o x í g e n o o a z u f r e , y e n d o n d e u n á t o m o d e a n i l l o d e f ó r m u l a ( a ) o p c i o n a l m e n t e t ie n e u n a o m á s s u s t i t u y e n t e s s e l e c c i o n a d o s d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n o x o , = N ( C 1 - C 4 ) a l c o x i , h a lo , h id r o x i l o , - N H ² , ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , h a l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , ( C 1 - C 4 ) a l c o x i , -O C ( O ) R 9, - C ( O ) ² R 9, y - S ( O ) ² R ;

R 8 e s H , ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , h a l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , ( C 2 - C 4 ) a l q u i n i l o , ( C 2 - C 4 ) a l q u i n i l o , a r i lo , h e t e r o a r i l o , h e t e r o c ic l o a l q u i l o o c i c l o a l q u i l o , e n d o n d e R 8 e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n - O R , - N ( R 9) ² , - C O N ( R 9)² , o c i a n o ;

c a d a R 9 e s in d e p e n d ie n t e m e n t e H , ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , h a l o ( C 1 - C 4 ) a l q u i l o , ( C 2 - C 4 ) a l q u e n i l o o ( C 2 - C 4 ) a l q u i n i l o ; c a d a n e s in d e p e n d ie n t e m e n t e 0 , 1 o 2 ; y

m e s 1, 2 , 3 , 4 o 5.

2. U n c o m p u e s t o s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 1, e n d o n d e R 8 e s m e t i lo .

3. U n c o m p u e s t o s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 1, e n d o n d e u n o d e R 4a y R 4b e s H y e l o t r o e s m e t i lo ; y u n o d e R 5a y R 5b e s H y e l o t r o e s is o p r o p i lo .

4. U n c o m p u e s t o s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 1, e n d o n d e u n o d e R 4a y R 4b e s H y e l o t r o e s m e t i lo ; u n o d e R 5a y R 5b e s H y e l o t r o e s i s o p r o p i lo ; A 2 e s

y R 8 e s m e t i lo .

5. U n c o m p u e s t o s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 1, e n d o n d e R 6a y R 6b ju n t o s f o r m a n

6. U n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a q u e c o m p r e n d e u n a c a n t i d a d t e r a p é u t i c a m e n t e e f i c a z d e u n c o m p u e s t o s e g ú n u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 5 o u n a s a l , i s ó t o p o , e s t e r e o i s ó m e r o , m e z c l a f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e r e o i s ó m e r o s , t a u t ó m e r o o é s t e r d e l m is m o y u n e x c ip ie n t e f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e .

7. U n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 6 , q u e c o m p r e n d e a d e m á s a l m e n o s u n a g e n t e t e r a p é u t ic o a d i c i o n a l s e l e c c i o n a d o d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n i n t e r f e r o n e s , r ib a v i r in a , in h i b i d o r e s d e la p r o t e a s a N S 3 d e l V H C , in h i b i d o r e s d e la N S 5 A d e l V H C , in h i b i d o r e s d e n u c l e ó s i d o o n u c l e ó t id o d e p o l i m e r a s a N S 5 B d e l V H C , i n h ib id o r e s n o n u c l e ó s i d o s d e p o l i m e r a s a N S 5 B d e l V H C , y a g o n i s t a s T L R - 7 ; o u n a m e z c l a d e lo s m is m o s .

8. U n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 7 , e n d o n d e e l a l m e n o s u n a g e n t e t e r a p é u t ic o a d i c i o n a l e s r i b a v i r in a , t e l a p r e v i r , b o c e p r e v i r o s o f o s b u v i r .

9. U n c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 5 o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e , is ó t o p o , e s t e r e o i s ó m e r o , m e z c l a d e e s t e r e o i s ó m e r o s , t a u t ó m e r o o é s t e r d e l m is m o p a r a u s o e n t e r a p ia .

10 . U n c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 5 o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e , is ó t o p o , e s t e r e o i s ó m e r o , m e z c l a d e e s t e r e o i s ó m e r o s , t a u t ó m e r o o é s t e r d e l m is m o p a r a u s o e n e l t r a t a m ie n t o d e u n a e n f e r m e d a d s e l e c c i o n a d a d e e n t r e e l g r u p o q u e c o n s t a d e la f ie b r e d e l d e n g u e , la f ie b r e a m a r i l l a , la h e p a t it i s C , la e n c e f a l i t i s j a p o n e s a , e n f e r m e d a d d e la s e l v a d e K y a s a n u r , e n c e f a l i t i s d e v a l l e d e M u r r a y , e n c e f a l i t i s d e S a n L u i s , e n c e f a l i t i s t r a n s m i t i d a p o r g a r r a p a t a s o e n c e f a l i t i s d e l N i lo O c c i d e n t a l .

11 . U n c o m p u e s t o p a r a s u u s o s e g ú n la r e i v i n d i c a c i ó n 10 , e n d o n d e la e n f e r m e d a d e s h e p a t it i s C .

12 . U n c o m p u e s t o d e a c u e r d o c o n u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 5 o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e , is ó t o p o , e s t e r e o i s ó m e r o , m e z c l a d e e s t e r e o i s ó m e r o s , t a u t ó m e r o o é s t e r d e l m is m o p a r a u t i l i z a r e n la p r e s t a c ió n d e in m u n o m o d u l a c ió n .

Ċ