ES2887588T3

ES2887588T3 - Composiciones derivadas de pasta de fracción de Cohn y uso de las mismas

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Publication number: ES2887588T3
Application number: ES16834772T
Authority: ES
Inventors: Ayelet Cooper; Nachum Yonah; Liliana Bar
Original assignee: Kamada Ltd
Current assignee: Kamada Ltd
Priority date: 2015-08-13
Filing date: 2016-08-11
Publication date: 2021-12-23
Anticipated expiration: 2036-08-11
Also published as: WO2017025965A1; IL257495B; IL257495A; US20180353543A1; EP3334441A4; EP3334441A1; EP3334441B1; US10722535B2

Abstract

Una composición para su uso en el tratamiento de heridas que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn, en donde la composición está enriquecida con al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina y que tiene un contenido reducido de alfa-1 antitripsina (AAT) en comparación con el contenido de AAT en el material de fracción de Cohn fuente, en donde el contenido de AAT es el 10 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición.

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones derivadas de pasta de fracción de Cohn y uso de las mismas

Campo de la invención

La presente invención se refiere a composiciones de proteínas derivadas de plasma humano de alto valor útiles en terapéutica y cosmética, particularmente a composiciones que comprenden una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o de fracción IV-1 de Cohn útil para tratar heridas y para el cuidado de la piel. Antecedentes de la invención

El plasma sanguíneo humano contiene proteínas que cumplen muchas funciones diferentes, lo que incluye el transporte de lípidos, hormonas, vitaminas y minerales en el sistema circulatorio, la regulación de la actividad acelular y el funcionamiento del sistema inmunitario y funcionan además como enzimas, componentes del complemento, inhibidores de proteasa y más.

El proceso de fraccionamiento de Cohn, desarrollado inicialmente por Edwin Joseph Cohn, es un proceso que incluye una serie de etapas de purificación que se desarrolló originalmente para extraer albúmina del plasma sanguíneo. Posteriormente se modificó el proceso para purificar otras proteínas plasmáticas tales como inmunoglobulinas, factores de coagulación y alfa-1 antitripsina (AAT), también conocida como inhibidor de la alfa-1 proteinasa. Durante la purificación de estas proteínas plasmáticas deseadas se eliminan diversos ingredientes del plasma, que se consideran usualmente subproductos o desechos.

El proceso de fraccionamiento de Cohn incluye la elevación de la concentración de etanol y la disminución del pH desde el pH natural a un pH más ácido (alrededor de 4,8) y la disminución de la temperatura desde la temperatura ambiente hasta aproximadamente (-)5 °C. Se precipitan cinco fracciones principales durante el proceso, donde las fracciones I, II y III precipitan en las etapas iniciales y las fracciones IV, IV-1 y V son cada una un producto final. Con relación a la composición del plasma, la fracción IV y la fracción IV-1 están enriquecidas con proteínas plasmáticas de peso molecular relativamente bajo (<200 kD) lo que incluye proteasas, inhibidores de proteasa y factores de crecimiento.

Existe una necesidad tangible de una gran variedad de productos para el cuidado de la piel para diversos fines cosméticos o médicos. Por ejemplo, el cuidado de la piel puede estar dirigido a evitar o reparar el daño de la piel como resultado de uno o más de diversos factores. Ejemplos comunes de tales factores son la exposición al calor (que puede dar como resultado quemaduras), el frío, la sequía, la radiación, tal como la radiación ultravioleta (por ejemplo, la radiación solar, que puede dar como resultado quemaduras solares), la radiación ionizante (por ejemplo, como resultado de un tratamiento contra el cáncer o la exposición a compuestos nucleares radiactivos), las superficies rugosas (que pueden dar como resultado la abrasión de la piel) y la exposición a sustancias que son dañinas para la piel.

Con fines cosméticos, las composiciones para el cuidado de la piel también pueden estar dirigidas a tratar o retrasar los signos visibles de envejecimiento de la piel, por ejemplo, al ralentizar el envejecimiento de la piel y/o al rejuvenecer la piel, mediante el abordaje de diversos aspectos, lo que incluye, por ejemplo, las arrugas de la piel, flacidez de la piel, pérdida de elasticidad, manchas de la edad, hiperpigmentación y similares. Para lograr un tratamiento eficaz, también debe tenerse en cuenta el tipo de piel (por ejemplo, seca, grasa, sensible (por ejemplo, a la radiación solar o al contacto físico), oscura, clara), cuando se diseña un producto específico para el cuidado de la piel. Además, existe una necesidad creciente de productos para el cuidado de la piel hipoalergénicos o incluso antialergénicos.

Las heridas son provocadas por una alteración en la integridad estructural del tejido biológico. La cicatrización de heridas y la reparación de tejidos es un proceso complejo y dinámico que a menudo es inadecuado o inaceptablemente lento. El proceso de cicatrización de heridas incluye una variedad de eventos bioquímicos que actúan en una cascada orquestada para reparar el daño. El modelo clásico de cicatrización de heridas comprende cuatro fases secuenciales, aunque superpuestas, que comprenden hemostasia, inflamación, proliferación y remodelación. Los eventos de cada fase deben producirse de manera precisa y regulada. La hemostasia detiene el sangrado mediante la generación de coágulos de sangre. Durante la fase de inflamación, la agregación plaquetaria y la coagulación forman una matriz que atrapa las proteínas plasmáticas y las células sanguíneas para inducir el influjo de diversos tipos de células. Durante la fase de proliferación celular, se forman nuevos vasos sanguíneos y tejido conjuntivo o de granulación. Durante la fase de remodelación, el tejido de granulación se reemplaza por una red de fibras de colágeno y elastina que conducen a la formación de tejido cicatricial.

El proceso de cicatrización de heridas puede verse afectado por factores del tipo de herida o de paciente. Esto es especialmente verdadero en ciertas enfermedades crónicas tales como la diabetes en los ancianos y en los pacientes con cáncer. Los tratamientos de tales llagas graves pueden incluir la aplicación de terapias con plasma autólogo. Por ejemplo, el plasma rico en plaquetas se utiliza para tratar heridas agudas y crónicas difíciles de curar (Lacci y otros, 2010. Yale Journal of Biology and Medicine 83:1-9; Cárter y otros, 2011. Eplasty 11:e38). Se encontró que la combinación de una variedad de componentes plasmáticos celulares y acelulares mejora el proceso de cicatrización. Sin embargo, el uso del plasma per se está restringido a un uso autólogo debido a la respuesta inmunológica contra antígenos extraños y virus potencialmente dañinos.

Se demostró que varias proteínas plasmáticas aisladas, tales como colágeno, fibrina, fibronectina, elastina y albúmina, ayudan en el proceso de cicatrización de heridas.

La patente de Estados Unidos núm. 5,641,483 describe formulaciones de gel y crema que comprenden fibronectina plasmática humana para su uso en promover la cicatrización de heridas en seres humanos.

La patente de Estados Unidos núm. 4,427,651 describe una mezcla pulverizable que comprende trombina, un agente estabilizante tal como albúmina, globulina y/o fibrinógeno, y un inhibidor de la fibrinólisis. La mezcla pulverizable se usa para acelerar la hemostasia y optimizar el control bioquímico del cierre de heridas.

La patente de Estados Unidos núm. 4,427,650 describe un derivado de plasma enriquecido para apoyar el cierre y cicatrización de heridas, que contiene fibrinógeno y un inhibidor de la fibrinólisis.

La patente de Estados Unidos núm. 7,691,816 describe composiciones farmacéuticas que comprenden miembros de la superfamilia de TGF-beta y azúcares para tratar heridas y fibrosis.

La patente de Estados Unidos núm. 5,631,011 describe una composición para el tratamiento de tejidos que comprende fibrina o fibrinógeno y un polímero biodegradable y biocompatible.

La patente europea núm. 1257304 describe un apósito de espuma para heridas, que comprende albúmina.

La patente de Estados Unidos núm. 6,638,909 describe el uso de composiciones de alfa-1-antitripsina en el proceso de cicatrización de heridas.

La patente de Estados Unidos núm. 7,399,746 describe composiciones farmacéuticas que contienen fragmentos de inhibidor de alfa-1 proteinasa (API) para el tratamiento de heridas.

La patente de Estados Unidos núm. 8,962,813 describe un proceso para la fabricación de una composición que contiene un factor purificado para apoyar la cicatrización de heridas, típicamente de la sangre, donde el factor se selecciona del grupo que consiste en factor de crecimiento de hepatocitos (HGF), factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento transformante alfa (TGF-a), factor de crecimiento transformante beta (TGF-p), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF-I) y factor de crecimiento de fibroblastos (FGF). El proceso de fabricación comprende etapas de purificación que se realizan en presencia de antitrombina III (AT-III).

El documento US 2014031527 A1 describe un método de refinado de albúmina para eliminar contaminantes que comprende pasar una solución enriquecida con albúmina tal como el sobrenadante IV de Cohn para obtener una composición que comprende IgA, IgG, transferrina, alfa 2-macroglobulina, haptoglobina y una cantidad reducida de AAT a través de una resina cromatográfica de inducción de carga hidrófoba y recuperar la solución de albúmina que pasa a través de la resina.

El documento WO 2014055552 A1 inter alia se refiere a un método de purificación de haptoglobina y hemopexina a partir del mismo material de partida, entre otros a partir del precipitado de la fracción iV-4 de Cohn. También se describen composiciones que comprenden IgG, IgG, AAT, transferrina, ceruloplasmina y haptoglobina.

Con el fin de obtener componentes terapéuticos a partir del plasma sanguíneo, se combina un gran número de unidades de plasma fresco o congelado de diversos donantes. Las proteínas plasmáticas humanas para uso terapéutico se han fabricado a partir de grandes reservas de plasma durante más de 50 años. Sin embargo, una de las preocupaciones importantes del plasma de un solo donante o combinado es la seguridad viral. Aunque a cada donante que contribuye a la reserva de plasma se le hace una prueba individual para virus, lo que incluye HIV, HBV, HCV, etc., antes de la donación de sangre o plasma, existe un pequeño riesgo de infección con virus debido a las "donaciones en el período de ventana", que son donaciones realizadas entre la adquisición inicial de la infección y la detección de un resultado positivo de la prueba con los productos diagnósticos existentes debido a limitaciones técnicas inherentes. Incluso un solo donante infectado con un patógeno, que permaneció sin ser detectado después del tamizaje, puede contaminar potencialmente una reserva completa de plasma e infectar a muchos o todos los receptores expuestos a la reserva. Por lo tanto, existe la necesidad de abordar la seguridad viral del plasma combinado o las proteínas terapéuticas derivadas del mismo.

Aunque se conoce que varias proteínas derivadas del plasma tienen un efecto de cicatrización de heridas, existe la necesidad de composiciones para la cicatrización de heridas hipoalergénicas, estandarizadas, alogénicas adicionales que proporcionen suficiente eficacia junto con seguridad viral y alta tolerancia del paciente.

Adicionalmente, existe la necesidad de composiciones innovadoras eficaces en el cuidado de la piel que proporcionen protección a la piel y mejoren su apariencia.

Resumen de la invención

La presente invención proporciona composiciones de proteínas derivadas de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn de las que se ha eliminado la mayor parte de la AAT, lo que da como resultado composiciones de proteínas enriquecidas con, entre otras, transferrina, inmunoglobulinas y haptoglobina y tienen un contenido reducido de AAT en comparación con la fracción IV y/o la fracción IV-1 de Cohn fuente. El contenido de AAT es el 10 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición. Las composiciones de la invención son útiles en el cuidado de la piel, lo que incluye para uso terapéutico para promover la cicatrización de heridas y para uso cosmético para mejorar la salud y apariencia de la piel. Las composiciones de proteínas de la presente invención son un subproducto de la industria de sustancias activas derivadas de plasma que utilizan la fracción IV y/o VI-1 de Cohn y, por tanto, las composiciones cosméticas y terapéuticas producidas no solo son eficaces, sino que tienen un alto valor económico. La presente invención se basa en parte en el descubrimiento inesperado de que las fracciones de proteínas obtenidas a partir de pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn después de eliminar la AAT para su procesamiento posterior muestran un efecto espectacular sobre la cicatrización de heridas. Además, los inventores de la presente invención muestran, sorprendentemente, que la combinación de proteínas de la composición de la presente invención fue más eficaz para mejorar la cicatrización de heridas en comparación con una composición que comprende AAT altamente purificada.

Sin desear limitarse por ninguna teoría o mecanismo de acción en particular, la actividad de cicatrización de heridas y la mejora de la salud y apariencia de la piel pueden atribuirse a la combinación única de proteínas plasmáticas y otros compuestos que son el resultado del proceso de eliminación de la AAT. Además, la pequeña cantidad de AAT presente en la composición puede desplazar el equilibrio de la actividad proteasa/antiproteasa a favor de las proteasas, lo que permite la eliminación de proteínas perjudiciales y contribuye al proceso de cicatrización de heridas y previene la formación en exceso de tejido cicatricial.

En general, las enseñanzas de la presente invención son ventajosas sobre las composiciones previamente conocidas en que las presentes composiciones muestran un efecto sinérgico, son seguras para su uso y se fabrican mediante el uso de subproductos que de otro modo se desechan, a un coste relativamente bajo. En las últimas décadas, la industria del cuidado de la piel presentó al mercado una variedad de proteínas sintéticas, principalmente para productos antienvejecimiento. Sin embargo, las proteínas de origen humano brindan un nuevo nivel de oportunidad y la premisa de ser innatas al cuerpo con funciones y medidas de seguridad conocidas.

De acuerdo con un aspecto, la presente invención proporciona una composición que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn, en donde la composición se enriquece con al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina y comprende un contenido reducido de alfa-1 antitripsina (AAT), en donde el contenido de AAT es el 10 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, el porcentaje de la al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina del contenido total de proteínas de dicha composición es elevado en comparación con el porcentaje de dichas proteínas del contenido total de proteínas de la pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de AAT es el 5 % o menos, típicamente, el 4 % o menos de AAT del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, el contenido de AAT está entre aproximadamente el 0,5 % y aproximadamente el 5,0 % del contenido total de proteínas.

De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición comprende además al menos una proteína adicional seleccionada de albúmina y ceruloplasmina. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención.

De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de transferrina es al menos el 5 %, al menos el 10 %, al menos el 15 %, al menos el 20 %, al menos el 25 %, al menos el 30 %, al menos el 35 %, al menos el 40 %, al menos el 45 % o al menos el 50 % del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de transferrina está entre el 5 % y el 50 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de transferrina está entre el 10 % y el 40 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de transferrina es aproximadamente el 35 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, la inmunoglobulina comprende IgA, IgG o una combinación de las mismas. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención.

De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de IgA es al menos el 5 %, al menos el 7 %, al menos el 9 %, al menos el 11 %, al menos el 13 % o al menos el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de IgA está entre el 5 % y el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de IgA está entre el 10 % y el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con ciertas otras modalidades, el contenido de IgA está entre el 5 % y el 10 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de IgG es al menos el 5 %, al menos el 7 %, al menos el 9 %, al menos el 11 %, al menos el 13 % o al menos el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de IgG está entre el 5 % y el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de IgG está entre el 10 % y el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas otras modalidades, el contenido de IgG está entre el 5 % y el 10 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de alfa 2-macroglobulina es al menos el 5 %, al menos el 7 %, al menos el 9 %, al menos el 11 %, al menos el 13 % o al menos el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de alfa 2-macroglobulina está entre el 5 % y el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de alfa 2-macroglobulina está entre el 7 % y el 13 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de haptoglobina es al menos el 1 %, al menos el 3 %, al menos el 5 %, al menos el 7 %, al menos el 9 %, al menos el 11 %, al menos el 13 % o al menos el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de haptoglobina está entre el 1 % y el 15 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de haptoglobina está entre el 5 % y el 10 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de ceruloplasmina es al menos el 1 %, al menos el 3 %, al menos el 5 %, al menos el 7 %, al menos el 9 % o al menos el 10 % del contenido total de proteínas de la composición. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de ceruloplasmina está entre el 1 % y el 10 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de ceruloplasmina está entre el 3 % y el 7 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con algunas modalidades, la composición comprende además albúmina. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de albúmina está entre el 1 % y el 10 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con algunas modalidades, el contenido de albúmina está entre el 1 % y el 5 % del contenido total de proteínas de la composición. De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de albúmina es aproximadamente el 2 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición de la presente invención comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn que comprende, del contenido total de proteínas de la composición, 5 %-50 % de transferrina, 5 %-20 % de IgA, 5 %-20 % de IgG, 5 %-15 % de alfa 2-macroglobulina, 5 %-15 % de haptoglobina, 1 %-10 % de ceruloplasmina y menos de 10 % de AAT. De acuerdo con algunas modalidades, las composiciones de la invención se proporcionan en una forma adecuada para la aplicación tópica sobre la piel. De acuerdo con ciertas modalidades, las composiciones de la invención comprenden un medio (vehículo, diluyentes o portador) que es compatible con la piel humana. Estas composiciones pueden estar, en particular, en forma de soluciones acuosas, alcohólicas o hidroalcohólicas, ungüentos, lociones, geles, emulsiones agua en aceite o aceite en agua con apariencia de crema o gel, microemulsiones o aerosoles, crema, espuma, loción, mousse, bálsamo, lechada, pulverización, pasta, suspensión y apósito para heridas o alternativamente en forma de dispersiones vesiculares que contienen lípidos iónicos y/o no iónicos. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con ciertas modalidades, la composición es una composición farmacéutica que comprende además un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.

De acuerdo con modalidades adicionales, la composición es una composición cosmética que comprende además un diluyente o portador cosméticamente aceptable.

De acuerdo con otras modalidades adicionales, la composición es una composición dermatológica que comprende además un diluyente o portador dermatológicamente aceptable.

De acuerdo con ciertas modalidades, las composiciones de la invención contienen además adyuvantes y aditivos que son comunes en los campos correspondientes, tales como agentes gelificantes hidrófilos o lipófilos, conservantes, antioxidantes, solventes, fragancias, rellenos, agentes bloqueadores de rayos UV y tintes y colorantes. De acuerdo con modalidades adicionales, las composiciones comprenden además agentes activos hidrófilos o lipófilos.

De acuerdo con ciertas modalidades, las composiciones de la presente invención comprenden además proteínas plasmáticas añadidas distintas de la proteína derivada de la fracción IV y/o IV-1 de Cohn, lo que incluye colágeno, fibrina, fibronectina, elastina y trombina.

La composición farmacéutica y/o cosmética puede, de acuerdo con algunas modalidades de la invención, comprender además al menos un agente antibiótico. De acuerdo con ciertas modalidades, el agente antibiótico se selecciona del grupo que consiste en antibióticos de amplio espectro, clorohexidina, iodopovidona, acetato de mafenida, neosporina, metronidazol, sulfato de polimixina B. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con algunas modalidades, la composición cosmética y/o farmacéutica comprende además al menos un agente antiséptico. De acuerdo con ciertas modalidades, el agente antiséptico se selecciona del grupo que consiste en composiciones de sulfadiazina de plata e iones de plata. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con las modalidades en donde la composición es una composición farmacéutica, el diluyente o portador farmacéuticamente aceptable puede seleccionarse del grupo que consiste en agua, solvente orgánico, solvente inorgánico, agente tampón, agente acidificante, agente alcalinizante y cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con otras modalidades, el diluyente o portador farmacéutica o cosméticamente aceptable es un ingrediente seleccionado del grupo que consiste en bases de ungüento, conservante antimicrobiano, antioxidante, plastificante, agente endurecedor y cualquier combinación de los mismos. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con algunas modalidades, la composición farmacéutica comprende además al menos un agente analgésico. De acuerdo con ciertas modalidades, el agente analgésico se selecciona del grupo que consiste en prilocaína, lidocaína, tetracaína, procaína, mepivacaína, benzocaína, bupivacaína y etidocaína. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con ciertas modalidades de la invención, la composición farmacéutica o dermatológica de la invención se usa para promover la cicatrización de heridas. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición farmacéutica o dermatológica es para reducir la formación de cicatrices y/o mejorar la apariencia de las cicatrices. De acuerdo con otro aspecto, la presente invención proporciona un método para promover la cicatrización de heridas, donde el método comprende administrar tópicamente a la piel de un sujeto que lo necesite una composición farmacéutica o dermatológica de acuerdo con la presente invención, lo que promueve de esta manera la cicatrización de heridas.

De acuerdo con ciertas modalidades, la piel del sujeto comprende al menos una herida. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición se aplica sobre o dentro de la herida.

De acuerdo con ciertas modalidades, promover la cicatrización de heridas comprende reducir la formación de cicatrices y/o mejorar la apariencia de las cicatrices.

De acuerdo con modalidades adicionales, promover la cicatrización de heridas comprende al menos un resultado seleccionado del grupo que consiste en reducción de la infección, eliminación de la infección y epitelización del área de la herida. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención.

De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, promover la cicatrización de heridas comprende la promoción de la epitelización a una velocidad mayor en comparación con un área de herida no tratada con la composición.

De acuerdo con algunas modalidades, el sujeto es un ser humano.

De acuerdo con algunas modalidades, la composición para la administración tópica está en la forma seleccionada del grupo que consiste en soluciones, emulsiones, espumas, lociones, aerosoles, vendajes, materiales para apósitos, apósitos de alginato y otros apósitos para heridas. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con algunas modalidades, la herida se selecciona del grupo que consiste en úlcera de estasis venosa, úlcera arterial, úlcera diabética, úlcera por presión, úlcera traumática y herida posquirúrgica. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con algunas modalidades, la herida se selecciona del grupo que consiste en laceración, abrasión, contusión y avulsión. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con algunas modalidades, la herida es una herida penetrante. De acuerdo con ciertas modalidades, la herida penetrante se selecciona de punzada, corte de piel y corte quirúrgico. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la invención.

De acuerdo con algunas modalidades, la herida se cubre además con medios de cobertura estériles. De acuerdo con ciertas modalidades, los medios de cobertura son oclusivos. De acuerdo con ciertas modalidades, los medios de cobertura son impermeables al agua, capaces de retener una solución o suspensión acuosa. De acuerdo con ciertas modalidades, los medios de cobertura son elásticos o flexibles.

De acuerdo con ciertas modalidades, la mejora de dicha apariencia de la piel se selecciona del grupo que consiste en: (a) tratamiento, reducción y/o prevención de líneas finas o arrugas; (b) reducción del tamaño de los poros de la piel; (c) mejora en el grosor, turgencia y/o tersura de la piel; (d) mejora en la lisura, flexibilidad y/o suavidad de la piel; (e) mejora en el tono, luminosidad y/o claridad de la piel; (f) mejora en la textura y/o promoción de la retexturización de la piel; (g) mejora en la reparación de la barrera cutánea y/o función de barrera cutánea; (h) mejora en la apariencia de los contornos de la piel; (i) restauración del lustre y/o brillo de la piel; (j) reposición de nutrientes y/o componentes esenciales en la piel; (k) mejora en la hidratación de la piel; (l) aumento en la elasticidad y/o resiliencia de la piel; (m) tratamiento, reducción y/o prevención de la flacidez de la piel; (n) mejora en la firmeza de la piel; (o) mejora en la apariencia de las cicatrices o marcas de acné; (p) mejora de la apariencia de las estrías; (q) reducción del aumento de la piel y/o (r) mejora en la apariencia de la celulitis. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención.

De acuerdo con ciertas modalidades, la composición cosmética está en una forma seleccionada del grupo que consiste en solución, ungüento, loción, gel, emulsión, aerosol, crema, espuma, loción, mousse, bálsamo, lechada, pulverización, pasta y suspensión. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. Otros objetos, características y ventajas de la presente invención resultarán evidentes a partir de la siguiente descripción y de los dibujos.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1 representa la progresión de la cicatrización de heridas en ratones, medida por el ancho de la herida en los días indicados después de la incisión.

La Figura 2 es una presentación esquemática de la herida cutánea de grosor completo formada en cada animal de prueba.

La Figura 3 muestra ejemplos de biopsias recolectadas teñidas con hematoxilina y eosina (HE) (Figura 3A) y con tinción tricrómica de Masson (MT) (Figura 3B).

La Figura 4 demuestra una medición ilustrativa de la intensidad del colágeno y la densidad del colágeno.

La Figura 5 muestra el grado (porcentaje) de epitelización de la herida de los sitios de heridas de cerdos tratados con la composición de la invención o no tratados, 16 días después de la incisión.

La Figura 6 demuestra el grado de infección de sitios de heridas tratados y no tratados de los cerdos hasta 15 días después de la incisión.

Descripción detallada de la invención

La presente invención proporciona composiciones derivadas de fracción IV y/o IV-1 de Cohn del plasma humano, que están enriquecidas con varias proteínas a la vez que están agotadas de otras, particularmente, que comprenden cantidades significativamente reducidas de AAT en comparación con el contenido de AAT que es el material de fracción de Cohn fuente, donde el contenido de AAT es el 10 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición. Las composiciones de la invención son muy eficaces para promover la cicatrización de heridas, particularmente en la prevención de la formación de cicatrices o la reducción de la formación en exceso de tejido cicatricial y la formación de estructuras no deseadas. Una ventaja significativa de la composición de la presente invención es que las proteínas son de origen humano y, por tanto, no son inmunogénicas. Las composiciones de la invención también pueden usarse en cosméticos, y son eficaces para promover la salud y/o la apariencia estética de la piel. Ventajosamente para el uso en cosméticos, las composiciones comprenden principalmente compuestos que tienen un peso molecular relativamente alto que no es probable que penetren a través de la piel sana intacta y, por tanto, son aceptables para uso cosmético.

Las composiciones de la invención contienen cantidades significativas de las proteínas transferrina, inmunoglobulina (IgA e IgG), haptoglobina y alfa-2-macroglobulina que pueden ser prometedoras en productos terapéuticos para la cicatrización de heridas, así como también en productos avanzados para el cuidado de la piel tales como antienvejecimiento, prebióticos o en la inhibición del estrés oxidativo y la inflamación. El proceso de purificación de proteínas optimiza y estandariza una composición que es segura, libre de virus, estable y puede formularse en productos para el cuidado de la piel a base de agua.

Definiciones

Como se usa en la presente descripción, el término "promover la cicatrización de heridas" se refiere a mejorar, aumentar o inducir el cierre, la cicatrización o la reparación de una herida. Se considera que la cicatrización de heridas se promueve, por ejemplo, si el tiempo de cicatrización de una herida tratada con la composición farmacéutica de la invención en comparación con una herida equivalente no tratada con la composición farmacéutica de la invención disminuye en aproximadamente un 10 %, o disminuye en aproximadamente un 20 %, 25 %, 30 %, 40 % o disminuye en aproximadamente un 50 %, o disminuye en aproximadamente un 75 %. Adicional o alternativamente, promover la cicatrización de heridas se refiere a una disminución en la formación de tejido cicatricial.

Como se usa en la presente descripción, el término "cantidad eficaz" se refiere a una cantidad de una composición que comprende proteínas derivadas de pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn de acuerdo con las enseñanzas de la presente invención, que es eficaz para promover la cicatrización de heridas o para mejorar la salud y/o la apariencia de la piel humana como se definió anteriormente. De acuerdo con ciertas modalidades, la composición está enriquecida con al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina, a-2 macroglobulina o cualquier combinación de las mismas y tiene un contenido reducido de AAT en comparación con el material de fracción IV o IV-1 de Cohn fuente.

Se pretende que el término "composición farmacéutica" se use en la presente descripción en su sentido más amplio para incluir preparaciones que contienen la composición de acuerdo con la presente invención usada con fines terapéuticos. La composición farmacéutica destinada al uso terapéutico debe contener una cantidad terapéutica de una composición de acuerdo con la presente invención, es decir, la cantidad necesaria para ayudar a la cicatrización de heridas y/o reducir la formación de cicatrices.

Se pretende que el término "composición dermatológica" se use en la presente descripción en su sentido más amplio para incluir preparaciones que contienen la composición de acuerdo con la presente invención usada para promover la cicatrización de heridas planas y/o superficiales. La composición dermatológica destinada al uso dermatológico debe contener una cantidad suficiente de una composición de acuerdo con la presente invención, es decir, la cantidad necesaria para ayudar a la cicatrización de heridas y/o reducir la formación de cicatrices.

Se pretende que el término "composición cosmética" se use en la presente descripción en su sentido más amplio para incluir preparaciones que contienen la composición de acuerdo con la presente invención usada con fines cosméticos. La composición cosmética destinada al uso cosmético debe contener una cantidad de una composición de acuerdo con la presente invención que sea eficaz para mejorar la salud y/o la apariencia de la piel humana. De acuerdo con un aspecto, la presente invención proporciona una composición que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn, en donde la composición está enriquecida con al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina y comprende un contenido reducido de alfa-1 antitripsina (AAT) en comparación con la cantidad de la(s) proteína(s) en la fracción IV y/o IV-1 de Cohn.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de transferrina dentro de la composición es de aproximadamente un 5 % a aproximadamente un 50 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de IgA dentro de la composición es de aproximadamente un 5 % a aproximadamente un 15 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de IgG dentro de la composición es de aproximadamente un 5 % a aproximadamente un 15 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de a2-macroglobulina dentro de la composición es de aproximadamente un 5 % a aproximadamente un 15 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de haptoglobina dentro de la composición es de aproximadamente un 1 % a aproximadamente un 15 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, el contenido de ceruloplasmina dentro de la composición es de aproximadamente un 1 % a aproximadamente un 10 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, la composición comprende además albúmina. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, el contenido de albúmina dentro de la composición es de aproximadamente un 1 % a aproximadamente un 10 % del contenido total de proteínas de la composición.

De acuerdo con ciertas modalidades, la composición comprende además ceruloplasmina. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, el contenido de ceruloplasmina dentro de la composición es de aproximadamente un 1 % a aproximadamente un 10 % del contenido total de proteínas de la composición.

La pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn se produce a partir de plasma sanguíneo. La fuente de la composición de la presente invención puede ser plasma sanguíneo o cualquier fracción de Cohn como conoce un experto en la técnica.

De acuerdo con ciertas modalidades, la composición de proteínas de la presente invención se purifica a partir de pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn mediante un proceso que comprende las etapas de (a) suspender la pasta de fracción IV y/o IV-1 de Cohn para formar una suspensión (b) precipitar las proteínas para formar un precipitado ("torta agotada de AAT"); (c) recolectar el precipitado; (d) extraer las proteínas del precipitado para obtener la solución de proteínas extraída; (e) filtrar la solución de proteínas extraída para obtener un filtrado; y (f) recolectar el filtrado para obtener una composición de proteínas.

De acuerdo con ciertas modalidades, la etapa de precipitación de la proteína comprende añadir a la suspensión formada en la etapa (a) polialquilenglicol. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, el polialquilenglicol es polietilenglicol. De acuerdo con modalidades ilustrativas adicionales, el polietilenglicol se añade a una concentración de aproximadamente un 11 % a aproximadamente un 15 %.

De acuerdo con ciertas modalidades, el proceso comprende además al menos una de diafiltración, inactivación de virus, eliminación de virus, formulación, liofilización y cualquier combinación de las mismas. La implementación de la etapa de inactivación y/o eliminación de virus tiene una contribución significativa a la seguridad de las composiciones de la invención tanto en el uso terapéutico como en el cosmético.

Las composiciones de proteínas de la invención son inodoras. Típicamente, las composiciones son composiciones liofilizadas que tienen la apariencia de un polvo blanco, que es soluble en agua y adecuado para productos farmacéuticos y cosméticos a base de agua (tales como emulsiones, lociones, geles y polvos).

De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición de la presente invención comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn que comprende, del contenido total de proteínas de la composición, 5 %-50 % de transferrina, 5 %-20 % de IgA, 5 %-20 % de IgG, 5 %-15 % de alfa 2-macroglobulina, 5 %-15 % de haptoglobina, 1 %-10 % de ceruloplasmina y menos de 10 % de AAT. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición de la presente invención consiste en una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn que comprende, del contenido total de proteínas de la composición, 5 %-50 % de transferrina, 5 %-20 % de IgA, 5 %-20 % de IgG, 5 %-15 % de alfa 2-macroglobulina, 5 %-15 % de haptoglobina, 1 %-10 % de ceruloplasmina y menos del 10 % de AAT. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, las proteínas más abundantes dentro de la composición de la invención incluyen, pero no se limitan a, transferrina, inmunoglobulinas (en particular IgA e IgG); a2-macroglobulina y haptoglobina.

La transferrina es una glicoproteína del plasma sanguíneo que se une al hierro que controla el nivel de hierro libre en los fluidos biológicos lo que crea un ambiente bajo en hierro libre que impide la supervivencia bacteriana en un proceso llamado retención de hierro. Sin desear limitarse por ninguna teoría o mecanismo de acción específico, la presencia de transferrina en la composición puede contribuir a la actividad antiséptica de la composición, al controlar la microbiota de la piel y/o de la herida.

La alfa 2-macroglobulina (a2-macroglobulina; A2M) es un inhibidor de la serpina proteasa que tiene propiedades antiinflamatorias y las inmunoglobulinas son factores importantes que neutralizan los patógenos que controlan la microbiota de la herida y/o la piel intacta.

La haptoglobina es una proteína de fase aguda que puede unirse a la hemoglobina libre, actuar como antioxidante, tiene actividad antibacteriana y desempeña un papel en la modulación de muchos aspectos de la respuesta de fase aguda. Por tanto, es muy valiosa en la composición de la invención. Para aplicaciones cosméticas, sus propiedades antioxidantes son de gran importancia.

De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición comprende además albúmina.

La albúmina es portadora de moléculas cargadas positivamente y puede unir agua con el estrato córneo y los anexos de la piel. Su actividad potencial en el cuidado de la piel incluye el efecto antienvejecimiento por su sensación de endurecimiento que parece suavizar las arrugas.

Sin desear limitarse por ninguna teoría o mecanismo de acción específico, la promoción de la cicatrización de heridas y/o la mejora de la salud y/o apariencia de la piel humana puede atribuirse a la combinación específica y relaciones de la proteína derivada del plasma dentro de la composición de la invención. La característica natural de las proteínas también puede contribuir a su actividad eficaz.

Las composiciones farmacéuticas y cosméticas de acuerdo con la presente invención son particularmente adecuadas para la administración a la piel, ya sea a piel herida o intacta.

La herida puede ser una herida externa que se encuentra en cualquier ubicación de un mamífero. Una herida es un tipo de trauma físico en donde la integridad de la piel o el tejido se altera como resultado de, por ejemplo, una fuerza externa, un estado de salud deficiente, el envejecimiento y la exposición a la luz solar, el calor o una reacción química. Si la capa exterior de un tejido está dañada, la herida se considera una herida abierta.

Las heridas abiertas incluyen, por ejemplo, incisiones (es decir, heridas en las que la piel se rompe con, por ejemplo, un instrumento cortante (por ejemplo, cuchillo, navaja, etc.)), laceraciones (es decir, heridas en las que la piel se rompe típicamente por un instrumento romo o desafilado), abrasiones (por ejemplo, generalmente una herida superficial en la que se raspan las capas más externas de la piel), heridas punzantes (provocadas típicamente por un objeto que perfora la piel, tal como una uña o una aguja), heridas penetrantes (por ejemplo, provocadas por un objeto tal como un cuchillo) y heridas de bala.

Las heridas cerradas son típicamente heridas en las que la piel no está rota. Las heridas cerradas incluyen, por ejemplo, contusiones (o moretones) provocadas por un traumatismo contuso que daña el tejido debajo de la piel, hematomas provocados por daño a un vaso sanguíneo que a su vez provoca que la sangre se acumule debajo de la piel, lesiones por aplastamiento provocadas por una cantidad grande o extrema de fuerza aplicada durante un largo período de tiempo, heridas agudas y crónicas.

Las composiciones de la invención contienen una combinación estandarizada de proteínas a una cierta relación. Algunas de estas proteínas funcionan como proteasas y factores de crecimiento que pueden ayudar a mejorar la salud y la apariencia de la piel. Por tanto, de acuerdo con ciertas modalidades, las composiciones de la invención se usan como composiciones cosméticas útiles para mejorar la salud y/o la apariencia de la piel humana, particularmente la piel de al menos una de la cara, cuello, manos y piernas. De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición cosmética de la invención es para administrar a la piel de la cara.

Generalmente, la mejora en la condición y/o apariencia estética se selecciona del grupo que consiste en: reducir los signos dermatológicos de envejecimiento cronológico, fotoenvejecimiento, envejecimiento hormonal y/o envejecimiento actínico; prevenir y/o reducir la aparición de líneas y/o arrugas; reducir la perceptibilidad de líneas y arrugas faciales, arrugas faciales en las mejillas, frente, arrugas perpendiculares entre los ojos, arrugas horizontales sobre los ojos y alrededor de la boca, comisuras bucales y, particularmente, arrugas o pliegues profundos; prevenir, reducir y/o disminuir la apariencia y/o profundidad de líneas y/o arrugas; mejorar la apariencia de las líneas suborbitarias y/o periorbitales; reducir la apariencia de patas de gallo; rejuvenecer y/o revitalizar la piel, particularmente la piel envejecida; reducir la fragilidad de la piel; prevenir y/o revertir la pérdida de glicosaminoglicanos y/o colágeno; mejorar los efectos del desequilibrio de estrógenos; prevenir la atrofia de la piel; prevenir, reducir y/o tratar la hiperpigmentación; minimizar la decoloración de la piel; mejorar el tono, la luminosidad, la claridad y/o la tersura de la piel; prevenir, reducir y/o mejorar la flacidez de la piel; mejorar la firmeza, turgencia, flexibilidad y/o suavidad de la piel; mejorar la producción de procolágeno y/o colágeno; mejorar la textura de la piel y/o promover la retexturización; mejorar la reparación y/o función de la barrera cutánea; mejorar la apariencia de los contornos de la piel; restaurar el lustre y/o el brillo de la piel; minimizar los signos dermatológicos de fatiga y/o estrés; resistir el estrés ambiental; reponer los ingredientes en la piel disminuidos por el envejecimiento y/o la menopausia; mejorar la comunicación entre las células de la piel; aumentar la proliferación y/o multiplicación celular; aumentar el metabolismo de las células de la piel; retardar el envejecimiento celular; mejorar la hidratación de la piel; potenciar el grosor de la piel; aumentar la elasticidad y/o resiliencia de la piel; potenciar la exfoliación; mejorar la microcirculación; disminuir y/o prevenir la formación de celulitis; y cualquier combinación de los mismos.

De acuerdo con ciertas modalidades, las composiciones de la invención, ya sea para uso farmacéutico para promover la cicatrización de heridas o para uso cosmético, comprenden además al menos un agente antibiótico. De acuerdo con otras modalidades, la composición comprende además al menos un agente antiséptico.

De acuerdo con otra modalidad más, el agente antiséptico tiene al menos una de las siguientes actividades antimicrobianas: antifúngico, antibacteriano, antiviral y antiprotozoario.

De acuerdo con otra modalidad más, el al menos un compuesto antiséptico se selecciona del grupo que consiste en composiciones de sulfadiazina de plata e iones de plata.

La composición antiséptica puede comprender además agentes antiinflamatorios esteroideos (por ejemplo, corticosteroides y análogos sintéticos de los mismos) y agentes antifúngicos tales como nistatina y nitrato de econazol.

El término "antiséptico", como se usa en la presente descripción, está de acuerdo con el significado que se le asigna normalmente en la técnica y que se describe adicionalmente en la presente descripción. Un agente o composición antiséptica que tiene una actividad antimicrobiana comprende una o más de las siguientes actividades: actividad antifúngica, actividad antibacteriana, actividad antiviral y/o actividad antiprotozoaria.

Los agentes antisépticos y antibióticos particulares de la composición antiséptica de acuerdo con la presente invención se seleccionan entre los comúnmente conocidos y disponibles en las industrias médica y cosmética, que usualmente comprenden iones de metales pesados.

Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden comprender además otros agentes, tales como anestésicos.

La composición de acuerdo con la presente invención, típicamente una composición farmacéutica, pero también las composiciones cosméticas, pueden comprender además agentes antivirales seleccionados de una amplia variedad de fármacos solubles en agua e insolubles en agua y sus sales metálicas o de adición de ácido. Pueden usarse sales tanto orgánicas como inorgánicas siempre y cuando el agente antiviral mantenga su valor medicinal. Los agentes antivirales pueden seleccionarse de una amplia gama de agentes terapéuticos y mezclas de agentes terapéuticos que pueden administrarse en forma de liberación sostenida o acción prolongada. Las categorías ilustrativas de tales agentes antivirales incluyen inhibidores de la síntesis de ARN, inhibidores de la síntesis de proteínas, agentes inmunoestimulantes, inhibidores de proteasa y citocinas. Los ejemplos específicos ilustrativos de tales agentes antivirales incluyen los siguientes medicamentos.

(i) La ribavirina (1-p-D-ribofuranosiM,2,4-triazol-3-carboxamida, nombre comercial-Virazole™) es un fármaco antiviral proporcionado como un polvo liofilizado estéril. La fórmula empírica es C8H12N4O5 y el peso molecular es 244,2 daltons. La ribavirina tiene actividad inhibidora antiviral in vitro contra el virus sincitial respiratorio, el virus de la influenza y el virus del herpes simple. La ribavirina también es activa contra el virus sincitial respiratorio (RSV) en ratas algodoneras infectadas experimentalmente. En cultivos celulares, la actividad inhibidora de la ribavirina para el RSV es selectiva.

(ii) La vidarabina (arabinósido de adenina, Ara-A, monohidrato de 9-p-D-arabinofuranosiladenina, nombre comercial ViraA™) es un fármaco antiviral. La vidarabina es un nucleósido de purina obtenido a partir de cultivos de fermentación de Streptomyces con la fórmula empírica C10H13N5O4 H2O. La vidarabina posee actividad antiviral in vitro e in vivo contra el virus del herpes simple tipos 1 y 2 (HSV-1 y HSV-2), y actividad in vitro contra el virus varicela-zoster (VZV). La vidarabina se convierte en nucleótidos que inhiben la ADN polimerasa viral. (iii) El fenol (ácido carbólico, CaHaO) es un fármaco antiviral, anestésico, antiséptico y antipruriginoso tópico. (iv) El clorhidrato de amantadina (clorhidrato de 1-adamantanamina, nombre comercial Symmetrel™) tiene acciones farmacológicas tanto como fármaco antiparkinsoniano como antiviral. La actividad antiviral del clorhidrato de amantadina contra la influenza A parece ser la prevención de la liberación de ácido nucleico viral infeccioso en la célula huésped.

De acuerdo con otra modalidad más, el agente antibiótico se selecciona del grupo que consiste en antibióticos de amplio espectro, clorohexidina, iodopovidona, acetato de mafenida, neosporina, metronidazol, dióxido de cloro (CO2) y sulfato de polimixina B. Cada posibilidad representa una modalidad separada de la presente invención. Los agentes conocidos que afectan la reparación de heridas también pueden incluirse en la composición farmacéutica para aumentar el proceso de cicatrización de heridas. Dichos agentes incluyen miembros de la familia de factores de crecimiento, lo que incluye el factor de crecimiento similar a la insulina (IGF-1), el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), el factor de crecimiento epidérmico (EGF), el factor de crecimiento transformante beta (TGF-beta), el factor de crecimiento básico de fibroblastos (bFGF), timosina-alfa1 (T-alfa1) y factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF).

De acuerdo con ciertas modalidades, la herida se cubre además con medios de cobertura estériles. De acuerdo con otra modalidad, el medio de cobertura es oclusivo. De acuerdo con una modalidad alternativa, el medio de cobertura es impermeable al agua y puede retener una solución o suspensión acuosa. De acuerdo con ciertas modalidades, la cobertura es elástica o flexible.

Los términos "oclusivo" o "apósito oclusivo" se usan indistintamente en la presente descripción para describir un apósito que rodea o cubre un área dañada y también puede rodear o cubrir tejido sano en la periferia del área dañada. Este apósito no permite la fuga de material desde (tal como exudado) o fuera del área rodeada o cubierta por el apósito.

Los medios de cobertura pueden adoptar la forma de redes fibrosas, redes fibrosas anudadas, gasas, coberturas no tejidas, esponjas o almohadillas absorbentes de panal de abejas, apósitos absorbentes de película perforada, tal como Melolin™ (Smith & Nephew Healthcare Ltd.), Telfa™ (The Kendall Company Ltd.) o cualquier otra forma aceptable y pueden hacerse de material natural o sintético, estable o degradable o biodegradable, como los descritos en "Remington's Pharmaceutical Sciences", Mack Publishing Company, 1990, páginas 1895-1900 u otros manuscritos de fuentes similares.

Los medios de cobertura pueden ser impermeables al agua, lo que los hace de esta manera capaces de retener una solución o suspensión acuosa. Adicionalmente, la cobertura puede ser elástica o flexible para adaptarse a los contornos del órgano que incluye el tejido dañado.

La selección del apósito de cobertura se rige por el estado de la herida. Si se prevén cantidades significativas de exudado, puede usarse una almohadilla absorbente simple, mantenida en su posición con cinta o un vendaje, según sea apropiado. En heridas que exudan ligeramente, puede ser necesario un apósito secundario menos permeable, tal como un apósito absorbente de película perforada (Melolin o Telfa, por ejemplo). Si la herida está muy seca, puede usarse una cobertura más oclusiva para reducir la pérdida de vapor de agua y evitar que el apósito se seque; un apósito de película tal como Opsite Flexigrid es adecuado para este propósito. En el tratamiento de heridas difíciles tales como en la mano o el pie, el apósito puede quedar retenido sobre la herida en una bolsa de plástico de forma adecuada, lo que forma un simple guante o bota.

Puede ser necesario repetir la aplicación o administración de compuestos y/o composiciones eficaces en la cicatrización de heridas. Pueden aplicarse de 1 a 20 tratamientos, típicamente pueden necesitarse de 5 a 10 tratamientos para promover la cicatrización de heridas.

La composición farmacéutica puede aplicarse a la herida aproximadamente cada 6 a aproximadamente cada 72 horas.

Para uso cosmético, la cantidad de la composición de proteínas dentro de la preparación cosmética depende de la vía de administración, el fenómeno a tratar y de parámetros relacionados con el usuario, lo que incluye la edad, el sexo y el régimen de aplicación.

De acuerdo con ciertas modalidades ilustrativas, la composición cosmética comprende el 1 % de la composición de proteínas de la invención. De acuerdo con estas modalidades, la composición cosmética se aplica dos veces al día. De acuerdo con ciertas modalidades, la composición se aplica sobre piel intacta. De acuerdo con modalidades ilustrativas adicionales, la composición cosmética se aplica sobre la piel de la cara.

Los siguientes ejemplos se presentan para ilustrar más completamente algunas modalidades de la invención. Un experto en la técnica puede idear fácilmente muchas variaciones y modificaciones de los principios descritos en la presente descripción sin apartarse del alcance de la invención.

Ejemplo 1: Preparación de la composición de proteínas

A. Preparación de la composición que comprende proteínas a partir de la fracción IV de Cohn

Se usó como material de partida la fracción IV de Cohn, núm. lote 87AB03612 fabricada con el auxiliar de filtración Harbolite 900 de Biotest. Se añadió pasta de fracción IV (85,3 g) a 432 ml de agua seguido de ajuste del pH a 9,4±0,1 con NaOH 0,5 M. Se añadió aerosil (49-56 g/kg de pasta de fracción IV) a la suspensión con mezcla. El pH de la solución se reajustó a 9,3-9,5 con NaOH 0,5 M. La temperatura de la suspensión se elevó a 34±1 (°C) durante 85-95 minutos. Subsecuentemente, la suspensión se enfrió hasta 25 °C y el pH se ajustó a 6,0-6,2. Se añadió PEG a una concentración final de 0,114-0,120 kg de PEG/kg de suspensión. Después de la incubación con PEG, el pH de la suspensión se ajustó a 5,7 con ácido acético al 2 %. La conductividad de la suspensión se ajustó a 2,9-3,4 mS/cm con NaCl sólido. Se espera que el pH final de la suspensión esté en el intervalo de 5,0-6,0. El auxiliar de filtración y los residuos se eliminaron mediante el uso de un embudo Buchner. El material filtrado se recirculó hasta que se volvió transparente. La torta acumulada se lavó con tampón acetato que contenía PEG (concentración como se describió anteriormente), etanol y NaCl. Esta etapa se terminó con una etapa de lavado adicional con el mismo tampón. La torta en esta etapa contiene cantidades menores de AAT.

La torta se resuspendió con 100 ml de tampón fosfato, se filtró a través de un embudo Buchner y se lavó con 100 ml adicionales de tampón fosfato. El material filtrado (denominado fracción A) contiene una gran cantidad de proteínas y mostró una reducción significativa en el contenido de AAT. El contenido de proteínas de las principales proteínas de la fracción A se presenta en la Tabla 1.

Tabla 1: Contenido de las principales proteínas en la composición del producto

B. Preparación de la composición que comprende proteínas a partir de fracción IV-1 de Cohn

Se usó como material de partida la fracción IV-I de Cohn, un lote típico fabricado con el auxiliar de filtración Celpure C300 de Baxter. Se añadió pasta de fracción IV-I (285-315 kg) a 1700 litros de agua seguido de un ajuste del pH a 9,2±0,1 con NaOH 0,5 M. Se añadió aerosil (28-32 g/kg de fracción IV-I) a la suspensión con mezcla. El pH de la solución se reajustó a 8,6-9,0 con NaOH 0,5 M. La temperatura de la suspensión se elevó a 38±1 (°C) durante 85-95 minutos. Subsecuentemente, la suspensión se enfrió hasta 25 °C y el pH se ajustó a 5,8-6,0. Se añadió PEG a una concentración final de 0,13 kg de PEG/kg de suspensión. Después de la incubación con PEG, el pH de la suspensión se ajustó a 5,9 con ácido acético al 2 %. La conductividad de la suspensión se ajustó a 2,9-3,4 mS/cm con NaCl sólido. El auxiliar de filtración y los residuos se eliminaron mediante el uso de un filtro prensa. El material filtrado se recirculó hasta que se volvió transparente (denominado fracción A1). La torta acumulada se lavó con tampón acetato, pH 5,9, que contenía PEG (concentración como se describió anteriormente), etanol y NaCl (conductividad 3,0-3,4 mS/cm).

Se separaron 50 g de los precipitados del filtro prensa y se resuspendieron en 100 ml de tampón acetato de sodio con NaCl (sin PEG), pH 5,7 y conductividad de 16 mS/cm (tampón A), se filtraron a través de un embudo Buchner y se lavaron con 100 ml adicionales de tampón A. A continuación, el filtrado que contenía proteínas se filtró adicionalmente a través de un "filtro de fibra de vidrio extra grueso" y por un filtro de 1,2 pm. Finalmente, la composición de proteínas se filtró a través de un filtro estéril de 0,2 pm para obtener la composición de proteínas del producto.

La Tabla 2 resume el contenido de las principales proteínas de la composición preparada a partir de la fracción IV-I de Cohn en comparación con su contenido en la fracción IV-1 de Cohn fuente como se conoce en la técnica (porcentaje de proteína total).

Tabla 2: Contenido de las principales proteínas en la composición del producto en comparación con la fracción IV-I de Cohn

Como se demuestra claramente en la Tabla 2, la relación entre el contenido de proteínas de la composición del producto y el contenido de proteínas de la fracción IV-1 de Cohn de varias proteínas es superior a 1,0, lo que representa el enriquecimiento de estas proteínas en la composición de la invención. Las composiciones de la presente son, por tanto, significativamente diferentes de la fracción IV-1 de Cohn en la composición de proteínas, cantidades y relación entre las proteínas. Por otro lado, las relaciones de AAT y albúmina están por debajo de 1,0 y representan el agotamiento de estas proteínas de la composición de la invención en comparación con la fracción IV-1 de Cohn.

Cromatografía DEAE Sefarosa:

Opcionalmente, se añadió una etapa para eliminar el PEG 4000 y una mayor eliminación de AAT. Se usó una columna DEAE Sefarosa de 1,6 cm de diámetro (2,0 cm2 de área). La columna se empaquetó a una altura de 15 cm. La fracción A1 se cargó en la columna. La columna se lavó con 1,5 volúmenes de columna (cv) con tampón acetato de sodio con pH 6 y conductividad de 1 mSxcm-1 (tampón de lavado A) y aproximadamente 6 cv de tampón acetato de sodio con pH 6 y conductividad de 2 mSxcm -1 (tampón de lavado B). Se recolectaron las fracciones lavadas (= fracciones lavadas).

Se eluyó la AAT (que se adsorbió en la columna) con tampones apropiados y se guardó para otros fines. Las fracciones de proteínas restantes adsorbidas a la columna se eluyeron posteriormente de la columna (fracción eluida). La fracción eluida se combinó con la fracción lavada, se dializó contra tampón fosfato, se esterilizó por filtración y se guardó en viales de 1 ml.

Ejemplo 2: Efecto de la composición de proteínas sobre la cicatrización de heridas en ratones

Se examinó el efecto de la composición de proteínas de la invención producida como se describió en el Ejemplo 1B (lo que incluye la cromatografía DEAE Sefarosa) sobre la cicatrización de heridas. El modelo usado fue heridas cutáneas de grosor completo inducidas en ratones.

Diseño y condiciones del estudio

Después de la anestesia, se realizó una herida por incisión de piel completa de 2 cm a lo largo de la columna en la parte superior del lomo de todos los animales. El cierre de la incisión se monitoreó periódicamente mediante la medición del ancho de la herida sin costra (no cubierta por epidermis recién formada) en el área más ancha (centro de la herida), mediante el uso de un calibre, en los días de estudio 1, 4, 7, 9, 12, 14, 16, 20, 25 y 30.

Los pesos corporales individuales se determinaron poco antes de la incisión de la herida el día 0 del estudio. Estos pesos se usaron como mediciones del valor inicial. Posteriormente, se midió el peso en los días 1, 4, 7, 9, 12, 14, 16, 20, 25 y 30 después de la incisión de la herida. El estudio terminó el día 30.

Se sacrificaron tres animales (Grupos 2-3) o cuatro animales (Grupos 4-5) en cada punto temporal en los días de estudio 2, 5, 10 y 30 para la evaluación histológica. Se recolectó toda el área de la herida y se almacenó en formalina al 4 % para tinción con hematoxilina y eosina (H-E) y análisis histológico.

Diseño del estudio

Los compuestos de prueba se administraron a ciegas (*) como se describe en la Tabla 3 más abajo.

Tabla 3: diseño del estudio-ratones

Los resultados se presentan en la Figura 1. Los datos se presentan como medias ± desv. est. Para determinar la diferencia con significación estadística, el grupo de tratamiento se compara con el grupo no tratado mediante el uso de ANOVA unidireccional seguido de la prueba de comparaciones múltiples de Tukey (GraphPad).

Se considera que un valor de p < 0,05 representa una diferencia significativa.

Se midieron los pesos corporales, se promediaron por tratamiento y día de tratamiento después de la incisión de la herida y se determinaron los porcentajes de peso promedio y se analizaron estadísticamente para determinar las diferencias. No se determinaron diferencias entre los tratamientos (datos no mostrados).

Los animales no tratados (Grupo 1) exhibieron un cierre completo de la herida 14 días después de la incisión. Estos resultados están de acuerdo con los datos presentados por Braiman-Wiksman y otros, (2007. Toxicologic Pathology.

35:767-779).

No se observó ningún efecto sobre el cierre de la herida después del tratamiento tópico con PBS (Grupo 2). El tratamiento tópico diario con la composición de proteínas de la invención (Grupo 3) dio como resultado una reducción significativa en el ancho de la herida (sin costra) el día 7 del estudio, lo que sugiere un proceso de cierre de la herida más rápido: 2,90 ± 0,33 mm frente a 5,60 ± 0,13 mm para el grupo vehículo (p<0,05) (Figura 1).

El efecto beneficioso de la composición de proteínas de la invención ya no se observó en la fase tardía de la cicatrización de la herida. En este experimento mediante el uso de ratones como el animal modelo, dado que la composición de prueba se derivó de una fuente humana, podría inducir una respuesta inmunogénica después de la aplicación diaria, lo que daría como resultado la inhibición y el empeoramiento del proceso de cicatrización de la herida.

En vista de los hallazgos obtenidos en las condiciones de este estudio, puede concluirse que la composición de proteínas de la invención tiene actividad para aumentar la cicatrización de heridas al menos en la fase inicial del proceso de cicatrización de heridas.

Ejemplo 3: Efecto de la composición agotada de AAT sobre la cicatrización de heridas en cerdos

Se examinó el efecto de la composición de proteínas de la invención producida como se describió en el Ejemplo 1B anterior sobre la cicatrización de heridas. El modelo usado fue heridas cutáneas de grosor completo inducidas en cerdos domésticos.

Diseño y condiciones del estudio

Después de la sedación y anestesia adecuadas, se crearon en 2 animales un total de 12 heridas cutáneas de grosor completo, de 2 x 2 cm, localizadas bilateralmente a lo largo de la línea media dorsal del animal (presentada esquemáticamente en la Figura 2). Cada animal se sometió a un material de prueba diferente que se aplicó tópicamente dos veces al día durante 14 días después de la herida. Después del sacrificio, se extirparon todos los sitios de prueba para la evaluación histopatológica. El diseño del estudio se muestra en la Tabla 4 a continuación.

Tabla 4: Diseño del estudio-cerdos

Materiales y métodos

Recolección de biopsias:

Los animales se sometieron a sedación y eutanasia de acuerdo con los procedimientos operativos estándar de la instalación de prueba. Los sitios de la herida se extirparon por completo mediante escisión quirúrgica con una hoja de bisturí. Las heridas se extirparon de modo que se incluyera la piel sana que rodeaba la herida en todos los lados. Se tuvo cuidado de extirpar el grosor completo de la piel.

Inmediatamente después de su escisión, las muestras de biopsia individuales se fijaron inmediatamente y se conservaron en viales marcados de forma única que contenían formalina tamponada neutra al 10 % (aproximadamente solución de formaldehído al 4 %).

Preparación de las láminas portaobjetos y exámenes histopatológicos:

Las biopsias recolectadas de cada animal se transfirieron a Patho-Lab Diagnostics Ltd. para la preparación de las láminas portaobjetos. Cada vial, que contenía los tejidos recolectados, se identificó por el número de animal y el número de sitio de prueba.

Los tejidos se recortaron en la mitad del ancho del sitio de prueba, con extensión desde el tejido sano que rodea el sitio hasta al menos la mitad de la longitud del sitio, se incluyeron en parafina, se seccionaron a aproximadamente 5 |jm y se tiñeron con hematoxilina y eosina (H-E).

Una vez completada la preparación de las láminas portaobjetos, las láminas portaobjetos estaban listas para la evaluación histopatológica.

Evaluación morfométrica:

Sistema de obtención de imágenes usado: microscopio Olympus BX51 equipado con platina automática XYZ controlada por computadora y cámara "Retiga-2000R" (1600 x 1200 píxeles y filtro giratorio RGB). Software: "Image Pro Plus" Ver 7,0 AMD (MediaCY, EE. UU.), Programa de análisis de imágenes y "Stage Pro" para la platina XY del microscopio y el control del enfoque Z.

Cada lámina portaobjetos se escaneó mediante el uso de un objetivo X10, lo que permite por tanto una muy buena resolución para cada campo. Se usó un método de agrupamiento de 2 píxeles en la captura de cada imagen para obtener una mejor sensibilidad, una mejor relación señal/ruido y un volumen de imagen final más pequeño.

La mayor parte del área relevante de la lámina portaobjetos se escaneó microscópicamente mediante la adición de varios campos para incluir toda el área de la lesión los bordes de la lesión. La imagen final se construyó a partir de un total de aproximadamente 100 a 200 campos que cubrían todas las áreas de interés en el tejido, lo que crea por tanto una imagen escaneada muy grande y de alta resolución.

Las mediciones de la longitud de la lesión se realizaron mediante el uso de la herramienta manual de longitud, donde el área correcta de la lesión se decidió al correlacionar cada dos imágenes de resolución completa del tejido teñido relevante, (hematoxilina eosina: H-E y tricrómica de Masson: MT) (Figura 3).

La densidad de granulación se midió siempre dentro del área de interés rectangular (AOI) del mismo tamaño, que se ubicó en cada área de lesión relevante y en los bordes de la lesión (Figura 4). En cada ubicación se midieron dos parámetros, la intensidad relativa de la mancha azul (Den./Inten. (azul) = intensidad de colágeno, es decir, los niveles de tinción azul expresados en unidades entre 0 y 255, 0 = máxima mancha azul/más oscura, 255 = sin mancha azul/más clara la desviación estándar de estas intensidades (DE). (Un número más pequeño de cada Den./Inten significa una mancha azul más oscura). La densidad del colágeno es igual a la fracción de área ocupada por la mancha azul (colágeno), dividida por el área rectangular constante (por área). Este parámetro se expresa en un número entre 0 y 1.

Evaluación de los datos

La evaluación histopatológica de la herida se realizó a ciegas, por lo que el patólogo veterinario no conocía la identidad del tratamiento de los diferentes animales en el momento de la evaluación.

El grado de curación se evaluó de acuerdo con el esquema de puntuación presentado en la Tabla 5.

Tabla 5: Esquema de puntuación

Todos los parámetros adicionales considerados relevantes por el patólogo veterinario se evaluaron y registraron además de los parámetros detallados anteriormente. El patólogo tomó micrografías representativas.

Resultados

Se realizaron análisis de morfogénesis sobre los datos obtenidos de sitios de heridas donde no se observaron complicaciones no relacionadas de infección y/o inflamación de la herida.

El examen de los efectos de los materiales de prueba en heridas cutáneas de grosor completo inducidas en cerdos domésticos, sugiere que el compuesto de prueba (tratamiento 1, formulación núm. 1) mostró una tendencia de efecto positivo en la aceleración del cierre de la herida epitelial inducida (incisión), en comparación con el grupo no tratado. El animal tratado con la composición de proteínas tenía 0/9 sitios con epitelización mínima o nula, mientras que los animales tratados con vehículo tenían 2/6 sitios con epitelización mínima. Por otro lado, el animal tratado con la composición de proteínas tenía 1/9 sitios con epitelización completa mientras que el animal tratado con vehículo tenía 0/6 (Figura 5; puntuaciones de epitelización como se presentan en la Tabla 5).

Además, la composición de proteínas inhibió la tendencia de la herida a infectarse: el día tres el animal tratado con la composición de proteínas tenía 3/12 sitios infectados mientras que el tratado con vehículo tenía 6/12 sitios de herida infectados (Figura 6).

El análisis de los datos obtenidos de la evaluación morfométrica de la densidad del colágeno (es decir, aplicada en secciones teñidas con tricrómica de Masson), tanto en las áreas cubiertas (es decir, área curada) como no cubiertas por epitelio recién formado, indicó que la composición de proteínas de la invención indujo una reducción estadísticamente significativa en la densidad del colágeno presente en el tejido cicatricial (es decir, tejido de granulación), en comparación con los sitios que no se trataron con el compuesto de prueba (Tabla 6). Estos hallazgos sugieren que el uso de la composición de proteínas de la invención en heridas cutáneas de grosor completo inducidas en cerdos domésticos puede mejorar la calidad de la cicatrización de las heridas y reducir la cicatrización patológica.

Tabla 6: Densidad e intensidad del colágeno - análisis estadístico

La descripción anterior de las modalidades específicas revelará tan completamente la naturaleza general de la invención que otros pueden, al aplicar los conocimientos actuales, modificar y/o adaptar fácilmente para diversas aplicaciones tales modalidades específicas sin experimentación indebida y sin apartarse del concepto genérico y, por lo tanto, tales adaptaciones y modificaciones deben y están destinadas a estar comprendidas dentro del significado e intervalo de equivalentes de las modalidades descritas. Debe entenderse que la fraseología o terminología empleada en la presente descripción tiene el propósito de descripción y no de limitación. Los medios, materiales y etapas para llevar a cabo las diversas funciones descritas pueden adoptar una variedad de formas alternativas sin apartarse de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición para su uso en el tratamiento de heridas que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción iV-1 de Cohn, en donde la composición está enriquecida con al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina y que tiene un contenido reducido de alfa-1 antitripsina (AAT) en comparación con el contenido de AAT en el material de fracción de Cohn fuente, en donde el contenido de AAT es el 10 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición.

2. Uso de una composición para promover la apariencia estética de la piel humana que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn, en donde la composición está enriquecida con al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina y que tiene un contenido reducido de alfa-1 antitripsina (AAT) en comparación con el contenido de AAT en el material de fracción de Cohn fuente, en donde el contenido de AAT es el 10 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición.

3. La composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o el uso de la reivindicación 2, en donde el porcentaje de la al menos una de transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina del contenido total de proteínas de dicha composición es elevado en comparación con el porcentaje de dicha transferrina, inmunoglobulina, haptoglobina y alfa-2-macroglobulina del contenido total de proteínas de la pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn.

4. La composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 3 o el uso de la reivindicación 2-3, en donde el contenido de AAT es 5 % o menos, preferentemente, 4 % o menos del contenido total de proteínas de dicha composición.

5. La composición para el uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 3-4 o el uso de las reivindicaciones 2-4, dicha composición comprende además al menos una proteína adicional seleccionada de albúmina y ceruloplasmina.

6. La composición para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 3-5 o el uso de las reivindicaciones 2-5, dicha composición comprende

transferrina en un contenido de entre el 5 % y el 50 % del contenido total de proteínas de dicha composición;

o/preferentemente,

IgA en un contenido de entre el 5 % y el 20 % del contenido total de proteínas de dicha composición; o/preferentemente,

IgG en un contenido de entre el 5 % y el 20 % del contenido total de proteínas de dicha composición.

7. La composición para su uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 o 3-6 o el uso de las reivindicaciones 2-6, dicha composición comprende

alfa 2-macroglobulina en un contenido de entre el 5 % y el 15 % del contenido total de proteínas de dicha composición o haptoglobina en un contenido de entre el 1 % y el 15 % del contenido total de proteínas de dicha composición;

o/preferentemente,

ceruloplasmina en un contenido de entre el 1 % y el 10 % del contenido total de proteínas de dicha composición;

o/preferentemente,

albúmina en un contenido de entre el 1 % y el 10 % del contenido total de proteínas de dicha composición.

8. Una composición para su uso en el tratamiento de heridas que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn, en donde la composición comprende, del contenido total de proteínas de la composición, 5 %-50 % de transferrina, 5 %-20 % de IgA, 5 %-20 % de IgG, 5 %-15 % de alfa 2-macroglobulina, 5 %-15 % de haptoglobina, 1 %-10 % de ceruloplasmina y menos del 10 % de AAT.

9. Uso de una composición para promover la apariencia estética de la piel humana que comprende una combinación de proteínas derivadas de pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn, en donde la composición comprende, del contenido total de proteínas de la composición, 5 %-50 % de transferrina, 5 %-20 % de IgA, 5 %-20 % de IgG, 5 %-15 % de alfa 2-macroglobulina, 5 %-15 % de haptoglobina, 1 %-10 % de ceruloplasmina y menos del 10 % de AAT.

10. La composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 3-8 o el uso de cualquiera de las reivindicaciones 2-7 o 9, dicha composición está en una forma adecuada para la aplicación tópica sobre la piel, preferentemente, dicha composición se formula en una forma seleccionada del grupo que consiste en una solución, gel, crema, emulsión, espuma, loción, mousse, bálsamo, lechada, pulverización, pasta, suspensión, ungüento y apósito para heridas.

11. La composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1, 3-8 o 10 o el uso de cualquiera de las reivindicaciones 2-7 o 9-10,

dicha composición es una composición farmacéutica que comprende además un diluyente o portador farmacéuticamente aceptable; o

dicha composición es una composición cosmética que comprende además un diluyente o portador cosméticamente aceptable; preferentemente, en donde la composición cosmética está en una forma seleccionada del grupo que consiste en solución, ungüento, loción, gel, emulsión, aerosol, crema, espuma, loción, mousse, bálsamo, lechada, pulverización, pasta y suspensión; o

dicha composición es una composición dermatológica que comprende además un diluyente o portador dermatológicamente aceptable.

12. La composición para el uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1, 3-8 o 10-11 o el uso de cualquiera de las reivindicaciones 2-7 o 9-11,

dicha composición comprende además al menos un agente antibiótico,

o/preferentemente,

dicha composición comprende además al menos un agente antiséptico,

o/preferentemente,

dicha composición comprende además al menos un agente analgésico,

o/preferentemente,

dicha composición comprende además al menos una proteína añadida, dicha proteína añadida se selecciona del grupo que consiste en colágeno, fibrina, fibronectina, elastina y trombina.

13. La composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1, 3-8 o 10-12 o el uso de cualquiera de las reivindicaciones 2-7 o 9-12, dicha composición se purifica a partir de la fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn mediante un proceso que comprende las etapas de (a) suspender la pasta de fracción IV de Cohn y/o fracción IV-1 de Cohn en un medio acuoso para formar una suspensión; (b) precipitar las proteínas de la suspensión para formar un precipitado; (c) recolectar el precipitado; (d) extraer las proteínas del precipitado para obtener la solución de proteínas extraída; (e) filtrar la solución de proteínas extraída para obtener un filtrado; y (f) recolectar el filtrado.

14. La composición para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1, 3-8 o 10-13 o el uso de cualquiera de las reivindicaciones 2-7 o 9-13,

en donde precipitar las proteínas comprende la adición de polialquilenglicol, preferentemente, en donde el polialquilenglicol es polietilenglicol;

o/preferentemente,

en donde el proceso comprende además al menos una de diafiltración, filtración estéril, inactivación de virus, eliminación de virus, formulación, liofilización y cualquier combinación de las mismas.

15. El uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-7 o 9-14, en donde dicha promoción de la apariencia estética de la apariencia de la piel se selecciona del grupo que consiste en:

(a) tratamiento, reducción y/o prevención de líneas finas o arrugas;

(b) reducción del tamaño de los poros de la piel;

(c) mejora en el grosor, turgencia y/o tersura de la piel;

(d) mejora en la lisura, flexibilidad y/o suavidad de la piel;

(e) mejora en el tono, luminosidad y/o claridad de la piel;

(f) mejora en la textura y/o promoción de la retexturización de la piel;

(g) mejora en la reparación de la barrera cutánea y/o la función de la barrera cutánea;

(h) mejora en la apariencia de los contornos de la piel;

(i) restauración del lustre y/o brillo de la piel;

(j) reposición de nutrientes y/o componentes esenciales en la piel;

(k) mejora en la hidratación de la piel;

(l) aumento en la elasticidad y/o resiliencia de la piel;

(m) tratamiento, reducción y/o prevención de la flacidez de la piel;

(n) mejora en la firmeza de la piel;

(o) mejora en la apariencia de las cicatrices o marcas de acné;

(p) mejora de la apariencia de las estrías;

(q) reducción del aumento de la piel y/o

(r) mejora en la apariencia de la celulitis.

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