ES2883839T3

ES2883839T3 - Hidrogeles de hialuronano coacervados para aplicaciones de relleno dérmico

Info

Publication number: ES2883839T3
Application number: ES16784749T
Authority: ES
Inventors: Futian Liu; Xiaojie Yu; Epps Dennis E Van; Iossif A Strehin
Original assignee: Allergan Inc
Current assignee: Allergan Inc
Priority date: 2016-10-13
Filing date: 2016-10-13
Publication date: 2021-12-09
Anticipated expiration: 2036-10-13
Also published as: CA3038981A1; RU2019112320A3; JP6827108B2; AU2016426150B2; EP3525834A1; AU2016426150A1; RU2019112320A; JP2019531816A; US20230277725A1; EP3895742A1; US20200054786A1; RU2750684C2; CN109890428A; US20250312514A1; CN109890428B; US20240316246A1; EP3525834B1; AU2022204011A1; KR20190070343A; WO2018071033A1

Abstract

Relleno dérmico que comprende un hidrogel, en el que el hidrogel comprende: (a) un ácido hialurónico (HA) aniónico; y (b) un polisacárido catiónico, en el que el hidrogel es un hidrogel coacervado.

Description

DESCRIPCIÓN

Hidrogeles de hialuronano coacervados para aplicaciones de relleno dérmico

Antecedentes

La presente divulgación se refiere, en general, a rellenos dérmicos inyectables. Los rellenos dérmicos son composiciones de hidrogel que comprenden un polisacárido aniónico y un polisacárido catiónico. Más específicamente, el hidrogel comprende un complejo iónico entre un ácido hialurónico y un polisacárido catiónico.

Los rellenos dérmicos inyectables son geles que actúan como voluminizadores en la piel, o agentes que ocupan espacio que rellenan los huecos dentro o debajo de la piel para reducir la aparición de arrugas u otros defectos de la piel. Los rellenos dérmicos también pueden usarse para esculpir rasgos particulares de tejidos blandos, incluyendo rasgos faciales, o para reemplazar tejido dérmico. Los materiales de relleno dérmico son biológicamente inertes y logran su objetivo únicamente mediante la presión mecánica contra el tejido adyacente. Se ha demostrado que los rellenos dérmicos persisten en el cuerpo hasta 18 meses. Con el fin de lograr los resultados deseables para corregir arrugas profundas o defectos de la piel, o para esculpir rasgos faciales particulares, es deseable que estos geles tengan suficiente capacidad de estiramiento, buena moldeabilidad y/o inyectabilidad.

El ácido hialurónico (HA), también conocido como hialuronano, es un glicosaminoglicano no sulfatado que se encuentra en muchos tejidos en todo el cuerpo humano, incluyendo los tejidos conjuntivo, epitelial y neural. E1HA es abundante en las diferentes capas de la piel, donde tiene múltiples funciones, tales como garantizar una buena hidratación, ayudar a la organización de la matriz extracelular, actuar como material de relleno y participar en los mecanismos de reparación tisular. Sin embargo, las cantidades de HA y otros polímeros de matriz presentes en la piel, tales como el colágeno y la elastina, disminuyen con la edad. Por ejemplo, la exposición repetida a la luz ultravioleta del sol u otras fuentes hace que las células dérmicas disminuyan su producción de HA y aumenten la velocidad de su degradación. Esta pérdida de materiales da como resultado diversos estados de la piel tales como arrugas, hundimiento, pérdida de hidratación y otros estados indeseables que contribuyen a la aparición de envejecimiento.

Los rellenos dérmicos inyectables se han usado con éxito en el tratamiento del envejecimiento de la piel y para reducir otros defectos de la piel, tales como cicatrices o defectos de contorno de los tejidos blandos. Los rellenos pueden reemplazar los polímeros de matriz endógenos perdidos o potenciar/facilitar la función de los polímeros de matriz existentes para tratar estos estados de la piel.

Debido a su excelente biocompatibilidad, el HA se ha considerado un candidato ideal para aplicaciones de relleno dérmico. El HA se compone de unidades de repetición de disacáridos que portan grupos carboxilato libres; por tanto, el HA es un polisacárido aniónico a pH fisiológico.

Con el fin de ser eficaz en una duración óptima como relleno dérmico, el HA habitualmente está reticulado químicamente, ya que el HA no reticulado tiene un tiempo de persistencia corto in vivo. Los métodos de reticulación química incluyen adición de Michael, acoplamiento de tiol-eno, polimerización por radicales libres, química de carbodiimida (por ejemplo, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC)) usando una diamina o poliamina como reticulante y química de grupos epoxi usando 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE) como reticulante. Otros reticulantes químicos comúnmente empleados incluyen divinilsulfona (DVS) y 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), y los agentes adicionales divulgados en el presente documento. Estos métodos de reticulación química proporcionan a1HA una estructura unida covalentemente.

Una limitación de los hidrogeles químicamente reticulados convencionales es que a menudo requieren tediosas etapas de purificación. Otra limitación de los hidrogeles de HA químicamente reticulado elaborados usando procedimientos de reticulación convencionales es que generalmente no son inyectables desde el momento en que se reticulan, y deben procesarse adicionalmente para hacerlos inyectables como rellenos dérmicos. Por ejemplo, con el fin de ser inyectables a través de una aguja fina, los geles de HA reticulado se rehidratan normalmente hasta una concentración deseada y luego se procesan adicionalmente o bien dimensionando el gel hidratado a través de un tamiz poroso fino o bien mediante un procedimiento de homogeneización. Aveces se añade un HA no reticulado como una etapa de procesamiento adicional para mejorar la lubricidad y la inyectabilidad del gel. Un inconveniente del procesamiento adicional del hidrogel de HA reticulado es que el gel normalmente pierde su cohesividad durante estas etapas de procesamiento adicionales, especialmente en el caso de un hidrogel con un módulo de almacenamiento (G') alto. Por tanto, la capacidad de estiramiento y la moldeabilidad de los materiales pueden verse comprometidas para su uso en el tratamiento de la piel o el tejido blando, por ejemplo, los materiales pueden verse comprometidos para aplicaciones de esculpido y arrugas profundas.

Otro enfoque para superar las limitaciones de los hidrogeles químicamente reticulados es inyectar HA de baja viscosidad que contiene grupos funcionales reticulables por UV o por compuestos químicos y formar el hidrogel in situ. Los inconvenientes de este enfoque son que los precursores son reactivos, difíciles de preparar, manipular y almacenar, y experimentan una baja utilizabilidad por parte del médico.

El documento EP 1595534 A1 divulga una composición de hidrogel que comprende un dextrano catiónico modificado y un material polimérico aniónico reticulado opcional, por ejemplo, HA y opcionalmente un compuesto activo. El documento US 2011/229574 A1 divulga rellenos inyectables para tejidos blandos que incluyen HA reticulado, uno o más polímeros biocompatibles, por ejemplo, quitosano (véase el párrafo [0031]), y un agente activo (antioxidante...) en un portador fisiológicamente aceptable (PBS).

Sigue existiendo la necesidad de mejores rellenos dérmicos para tratar y mejorar el aspecto de los tejidos blandos, incluyendo la piel.

Sumario

El alcance de la protección está definido por las reivindicaciones. Cualquier referencia en la descripción a métodos de tratamiento se refiere o bien a métodos no terapéuticos o bien a los productos de la presente invención para su uso en un método para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia. Cualquier “realización” o “ejemplo” que se divulgue en la descripción, pero que no esté cubierto por las reivindicaciones, debe considerarse como presentado únicamente con fines ilustrativos.

La presente invención proporciona una composición de relleno dérmico que comprende un hidrogel coacervado que es útil para tratar un tejido blando de un sujeto, tal como la piel. El hidrogel coacervado comprende un complejo no covalente basado en interacciones carga-carga entre un polisacárido de “HA aniónico”, ácido hialurónico, y un polisacárido catiónico. Los complejos surgen a través de interacciones electrostáticas y/o iónicas entre los aniones y cationes de los polisacáridos. Más específicamente, las interacciones se producen entre los iones del polisacárido de HA aniónico y los iones del polisacárido catiónico. Las interacciones surgen a través de interacciones iónicas entre los aniones carboxilato de HA y los cationes de los polisacáridos catiónicos. Por consiguiente, las interacciones de unión entre polisacáridos de los hidrogeles de HA coacervados de la invención son más dinámicas que las interacciones fijas de los hidrogeles de HA reticulado tradicionales, que están unidos por enlaces covalentes. Por ejemplo, las interacciones aniónicas-catiónicas de los presentes hidrogeles de HA coacervados pueden romperse, por ejemplo, bajo cizalladura u otras condiciones, y pueden formarse las mismas o diferentes interacciones aniónicas-catiónicas entre los mismos o diferentes pares de anión-catión. De esta manera, los hidrogeles coacervados son “autorreparables” y, ventajosamente, permanecen cohesivos y moldeables sin la necesidad de numerosas etapas de homogeneización o dimensionamiento antes de su uso. Por tanto, los hidrogeles coacervados a base de hA de la presente invención proporcionan numerosas ventajas sobre los rellenos dérmicos convencionales a base de HA químicamente reticulado. Por ejemplo, muchos de los hidrogeles de la presente invención pueden procesarse como rellenos dérmicos sin la necesidad de algunas de las tediosas etapas de reticulación química y purificación compleja que a veces son necesarias para retirar los residuos químicos de los geles químicamente reticulados, sin la necesidad de procesamiento adicional mediante dimensionamiento, homogeneización, que puede alterar la integridad del gel y dar como resultado la formación de partículas de gel que no conducen a la inyectabilidad, o sin añadir HA no reticulado para potenciar la lubricidad o la inyectabilidad.

Los hidrogeles coacervados a base de HA de la invención tienen propiedades suficientes o mejoradas, incluyendo cohesividad, moldeabilidad, capacidad de estiramiento y/o inyectabilidad suficientes o mejoradas para su aplicación deseada como materiales de relleno dérmico en relación con los hidrogeles a base de HA químicamente reticulado.

Se proporciona un relleno dérmico que generalmente comprende un hidrogel de HA coacervado. El hidrogel comprende un HA aniónico y un polisacárido catiónico. En algunos aspectos, el hidrogel comprende un complejo iónico entre un HA aniónico y un polisacárido catiónico.

En algunos aspectos, el hidrogel comprende un polisacárido de HA aniónico, que es el propio ácido hialurónico (HA). En otros aspectos, el HA aniónico es un “HA modificado”, es decir, un HA que se ha modificado para introducir uno o más grupos aniónicos distintos de carboxilato, y en el que los grupos aniónicos pueden ser iguales o diferentes, tal como se define adicionalmente en el presente documento. En algunos aspectos, el hidrogel comprende un HA aniónico que es homoaniónico. En otros aspectos, el hidrogel comprende un HA aniónico que es heteroaniónico. En algunos aspectos, el hidrogel comprende un HA aniónico seleccionado de un HA aniónico no reticulado, un HA aniónico reticulado y una mezcla de los mismos. En algunos aspectos, el hidrogel comprende HA no reticulado, HA reticulado o una mezcla de los mismos.

El hidrogel coacervado comprende un polisacárido catiónico. En algunos aspectos, el polisacárido catiónico se ha modificado para introducir uno o más grupos catiónicos adicionales y/o grupos catiónicos diferentes, en relación con su forma no modificada. En algunos aspectos, el hidrogel comprende un polisacárido catiónico modificado o no modificado que es homocatiónico. En otros aspectos, el hidrogel comprende un polisacárido catiónico modificado o no modificado que es heterocatiónico. En algunos aspectos, el polisacárido catiónico es quitosano. En otros aspectos, el polisacárido catiónico es trimetilquitosano.

En otros aspectos de la invención, se proporciona un polisacárido catiónico que es un “HA catiónico” y métodos para prepararlo. En aspectos adicionales de la invención, se proporciona un hidrogel coacervado que comprende e1HA catiónico. En aún aspectos adicionales, el HA catiónico se selecciona de un HA catiónico no reticulado, un HA catiónico reticulado y una mezcla de los mismos.

En otro aspecto, se proporcionan composiciones de relleno dérmico que comprenden además agentes cosméticos u otros agentes tales como vitaminas, antioxidantes y/o agentes de aclaramiento de la piel.

En otro aspecto, los hidrogeles de HA coacervados de la invención se proporcionan en un portador fisiológicamente aceptable. En algunos aspectos, el portador fisiológicamente aceptable es solución salina tamponada con fosfato o HA no reticulado.

En otro aspecto, los hidrogeles de HA coacervados de la invención tienen buenas propiedades de moldeabilidad. En algunos aspectos, los hidrogeles de HA coacervados tienen un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 50 Pa a aproximadamente 5.000 Pa. En otros aspectos, los hidrogeles de HA coacervados tienen un módulo de almacenamiento de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 2.000 Pa, o de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 1.500 Pa, o de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 1.000 Pa. En otros aspectos, los hidrogeles de HA coacervados tienen un módulo de almacenamiento de aproximadamente 500 Pa. En otros aspectos, los hidrogeles de HA coacervados tienen un módulo de almacenamiento de aproximadamente 1.450.

En otro aspecto, los hidrogeles de HA coacervados de la invención son inyectables a través de una aguja de al menos calibre 18, más preferiblemente, de al menos calibre 27, o una aguja de calibre incluso mayor. En algunos aspectos, los rellenos dérmicos y las composiciones de hidrogel de HA coacervado son inyectables a través de la aguja sin requerir dimensionamiento y/u homogeneización de la composición antes de la inyección.

También se divulgan métodos generales para preparar rellenos dérmicos que comprenden hidrogeles de HA coacervados. En algunas realizaciones, el método comprende formar un complejo iónico entre un HA aniónico y un polisacárido catiónico. En algunas realizaciones, el método comprende formar un complejo iónico entre el propio HA y un polisacárido catiónico. En otro aspecto, la invención proporciona métodos para preparar hidrogeles de HA coacervados con diferentes perfiles reológicos, que pueden formarse basándose en el/los valor(es) de pKa de los aniones y/o cationes del polisacárido de HA aniónico y del polisacárido catiónico, respectivamente. En algunos aspectos, el método comprende proporcionar un hidrogel de HA coacervado en un portador fisiológicamente aceptable. En algunos aspectos, el método proporciona un hidrogel de HA coacervado que tiene un módulo de almacenamiento (G') que oscila desde aproximadamente 50 Pa hasta aproximadamente 5.000 Pa, por ejemplo, desde aproximadamente 500 Pa hasta aproximadamente 2.000 Pa, de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 1.500 Pa o de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 1.000 Pa, o que tiene un módulo de almacenamiento de aproximadamente 500 Pa o aproximadamente 1.450 Pa. En algunos aspectos del método, el relleno dérmico proporcionado no requiere una etapa de procesamiento adicional, tal como dimensionamiento y/u homogeneización, antes de la inyección a través de una aguja, tal como una aguja fina.

En aún otro aspecto, la presente invención proporciona métodos no terapéuticos para tratar un tejido blando de un sujeto, tal como la piel, así como el relleno dérmico mencionado anteriormente para su uso en un método para tratar un tejido blando de un sujeto. En algunos aspectos, el método de tratamiento comprende aumentar la piel o el tejido blando, mejorar la calidad de la piel o del tejido blando o reducir un defecto de la piel o del tejido blando del sujeto. En algunos aspectos, el método comprende la etapa de administrar (por ejemplo, inyectar) un relleno dérmico de la invención en el tejido blando o la piel de un sujeto. En algunos aspectos, el método comprende la etapa de administrar (por ejemplo, inyectar) un relleno dérmico en una región dérmica o una región hipodérmica del sujeto. En algunos aspectos, el método comprende la etapa de administrar (por ejemplo, inyectar) un relleno dérmico en una región aún más profunda de un tejido blando (por ejemplo, para dar volumen y dar contorno) del sujeto. En algunos aspectos, el tratamiento comprende dar forma, rellenar, dar volumen o esculpir el tejido blando o la piel del sujeto. En otros aspectos, el tratamiento comprende mejorar la homeostasis dérmica, mejorar el grosor de la piel, cicatrizar una herida o reducir una cicatriz del sujeto. En algunos aspectos, el defecto de la piel es una arruga, una cicatriz o una pérdida de tejido dérmico. En algunos aspectos, el tratamiento es eficaz durante un periodo de al menos aproximadamente 3 meses.

Estos y otros aspectos y ventajas de la presente invención pueden entenderse y apreciarse más fácilmente con referencia a los siguientes dibujos y la descripción detallada.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 muestra un esquema de un hidrogel de HA coacervado formado a través de HA no reticulado y un polisacárido catiónico, tal como quitosano. A: un polisacárido aniónico no reticulado, tal como HA, se condensa o compleja y se encapsula en un núcleo a través de interacciones electrostáticas con los grupos catiónicos del polisacárido catiónico, tal como quitosano, mientras que el polisacárido catiónico sirve como una fase continua que encapsula el HA aniónico condensado o complejado. Se inhibe la degradación enzimática de1HA aniónico, ya que está atrapado dentro de la matriz de polisacárido catiónico; por ejemplo, la accesibilidad reducida de la hialuronidasa protege al HA de la degradación por hialuronidasa. B: la razón de carga entre e1HA aniónico y el polisacárido catiónico (por ejemplo, quitosano) está cerca del equilibrio de carga; el HA y el quitosano forman un complejo poliiónico y se distribuyen uniformemente a través de la matriz de gel. C: el polisacárido catiónico (por ejemplo, quitosano) se condensa o compleja o encapsula en un núcleo a través de interacciones electrostáticas con los grupos aniónicos del HA aniónico, mientras que el HA aniónico sirve como una fase continua que encapsula el polisacárido catiónico (quitosano) condensado o complejado. En las figuras 1B y 1C, el HA forma complejos con el polisacárido catiónico, reduciendo la accesibilidad de la hialuronidasa al HA y protegiendo al HA de la degradación por hialuronidasa.

La figura 2 muestra un esquema de un hidrogel de HA coacervado formado a través de HA reticulado y polisacárido(s) catiónico(s). Las partículas de HA reticulado se engloban en una matriz a través de interacciones electrostáticas con los grupos catiónicos del polisacárido catiónico. Debido a que el HA está reticulado en este caso, e1HA ya tiene una determinada resistencia contra la degradación enzimática, que puede aumentarse adicionalmente al incorporarse dentro del hidrogel coacervado. Los polisacáridos catiónicos sirven para mantener juntas las partículas de gel de HA reticulado. El gel tiene cohesividad y moldeabilidad mejoradas como resultado de la naturaleza no específica (es decir, dinámica o “autorreparable”) de la unión iónica.

La figura 3 muestra el aspecto y las propiedades mecánicas de los hidrogeles preparados con HA reticulado y concentraciones variables de quitosano de alta pureza (HPC); véase el ejemplo 4. (A) Los hidrogeles, preparados en jeringas, están delineados con líneas discontinuas. A medida que el contenido de HPC aumentó desde 0,04 eq hasta 0,20 eq, los hidrogeles se volvieron más opacos. (B) El módulo de almacenamiento (G') del hidrogel disminuyó de manera escalonada a medida que aumentaba el contenido de HPC. El módulo de almacenamiento se notifica para una deformación del 1% y una frecuencia de 5 Hz.

La figura 4 muestra los resultados del ensayo de hinchamiento/disociación del gel para los hidrogeles del ejemplo 4. Se inyectó el hidrogel (aproximadamente 250 |il) en un molde cilíndrico y se centrifugó para eliminar las burbujas. A continuación, los hidrogeles se transfirieron a PBS (20 ml) y se incubaron en un agitador orbital a 37°C y 200 rpm. En el plazo de las primeras 24 horas, los hidrogeles alcanzaron el equilibrio de hinchamiento y luego retuvieron la integridad sin disociación o dispersión adicional en PBS. Mientras que el gel sin quitosano añadido se disociaba en el tampón PBS en el plazo de dos días (no mostrado), todas las formulaciones que contenían quitosano permanecieron estables durante al menos 29 días.

Descripción detallada

La presente invención proporciona un relleno dérmico que comprende un hidrogel de HA coacervado. El hidrogel comprende un complejo iónico entre un HA aniónico y un polisacárido catiónico. En algunas realizaciones, e1HA aniónico es ácido hialurónico, que puede estar reticulado o no reticulado.

Tal como se usa en el presente documento, “gel” se refiere a una red polimérica no fluida que se expande en todo su volumen por un fluido.

Tal como se usa en el presente documento, “hidrogel” se refiere a una red polimérica no fluida que se expande en todo su volumen por un fluido acuoso.

Tal como se usa en el presente documento, “hidrogel coacervado” se refiere a un hidrogel en el que la red polimérica no fluida comprende un complejo iónico entre un polisacárido aniónico y un polisacárido catiónico, en el que cada polisacárido aniónico y polisacárido catiónico está reticulado o no reticulado independientemente. El complejo iónico es un complejo no covalente; es decir, el polisacárido aniónico y el polisacárido catiónico no están reticulados covalentemente entre sí.

Puede formarse un hidrogel coacervado de la presente invención mezclando una composición acuosa que comprende el polisacárido aniónico con una composición acuosa que comprende el polisacárido catiónico, proporcionando así una red polimérica no fluida que se expande en todo su volumen por un fluido acuoso.

Tal como se usa en el presente documento, “hidrogel de HA coacervado” se refiere a un hidrogel en el que la red polimérica no fluida comprende un complejo iónico entre un polisacárido de HA aniónico y un polisacárido catiónico, en el que cada polisacárido de HA aniónico y polisacárido catiónico está reticulado o no reticulado independientemente. El complejo iónico es un complejo no covalente; es decir, el polisacárido de HA aniónico y el polisacárido catiónico no están reticulados covalentemente entre sí.

Puede formarse un hidrogel de HA coacervado de la invención mezclando una composición acuosa que comprende el polisacárido de HA aniónico con una composición acuosa que comprende el polisacárido catiónico, proporcionando así la red polimérica no fluida que se expande en todo su volumen por un fluido acuoso. La composición acuosa que comprende el polisacárido de HA aniónico puede prepararse a partir del polisacárido de HA aniónico (que puede estar reticulado o no reticulado) y un fluido acuoso, tal como agua, agua con pH ajustado (por ejemplo, agua ácida, neutra o básica) o un tampón para dar la composición acuosa, que puede tomar una variedad de formas, que incluyen, pero no se limitan a, una disolución, una suspensión o un gel. De manera similar, la composición acuosa que comprende el polisacárido catiónico puede prepararse a partir del polisacárido catiónico (que puede estar reticulado o no reticulado) y un fluido acuoso, tal como agua, agua con pH ajustado (por ejemplo, agua ácida, neutra o básica) o un tampón para dar la composición acuosa, que puede tomar una variedad de formas, que incluyen, pero no se limitan a, una disolución, una suspensión o un gel.

Tal como se usa en el presente documento, “polisacárido aniónico” se refiere a un polisacárido que tiene una carga neta negativa en disolución a pH fisiológico. Debe entenderse que la referencia en el presente documento a un polisacárido aniónico no excluye la presencia de uno o más grupos funcionales neutros o catiónicos en el polisacárido aniónico, es decir, el polisacárido aniónico sólo necesita portar una carga total (neta) negativa en disolución a pH fisiológico (o al pH al que se forma o usa el complejo coacervado). Específicamente, polisacárido aniónico se refiere a (a) un polisacárido que no está modificado y comprende un número suficiente de grupos aniónicos de manera que la carga total (neta) del polisacárido sea negativa a pH fisiológico; y (b) un polisacárido que se ha modificado (i) para comprender un número suficiente de grupos aniónicos de manera que, después de la modificación, la carga total (neta) del polisacárido sea negativa a pH fisiológico; (ii) para cambiar la identidad de uno o más de los aniones del polisacárido aniónico no modificado, siempre que la carga neta del polisacárido permanezca negativa; (iii) para cambiar (aumentar o disminuir) el número de aniones en relación con el polisacárido no modificado, siempre que la carga neta del polisacárido permanezca negativa; y (iv) combinaciones de los mismos. Los ejemplos no limitativos de polisacáridos aniónicos incluyen HA, que puede estar sin modificar o puede estar modificado para comprender grupos aniónicos adicionales y/o diferentes, tal como se divulga en el presente documento. Un polisacárido aniónico puede ser homoaniónico o heteroaniónico, y puede estar reticulado o no reticulado.

Tal como se usa en el presente documento, el término “HA aniónico” incluye tanto “HA” como un “HA aniónico modificado”.

Tal como se usa en el presente documento, “HA” se refiere a ácido hialurónico (HA). E1HA es un polisacárido aniónico, específicamente, un glicosaminoglicano. Además, “HA” se refiere a ácido hialurónico y a cualquiera de sus sales de hialuronato, que incluyen, pero no se limitan a, hialuronato de sodio, hialuronato de potasio, hialuronato de magnesio, hialuronato de calcio y combinaciones de los mismos.

Tal como se usa en el presente documento, el término “HA aniónico modificado” se refiere a HA que se ha modificado para reemplazar uno o más aniones carboxilato por uno o más aniones alternativos, tales como sulfonato y/o fosfonato. Un HA aniónico modificado puede ser homoaniónico o heteroaniónico, y puede estar reticulado o no reticulado.

Tal como se usa en el presente documento, “polisacárido catiónico” se refiere a un polisacárido no modificado o modificado que tiene una carga neta positiva en disolución a pH fisiológico (o al pH al que se forma o usa el complejo coacervado). Específicamente, polisacárido catiónico se refiere a (a) un polisacárido que no está modificado y comprende un número suficiente de grupos catiónicos de manera que la carga total (neta) del polisacárido sea positiva a pH fisiológico; o (b) un polisacárido que se ha modificado (i) para comprender un número suficiente de grupos catiónicos de modo que, después de la modificación, la carga total del polisacárido sea positiva a pH fisiológico; (ii) para cambiar la identidad de uno o más de los cationes del polisacárido no modificado, siempre que la carga neta del polisacárido permanezca positiva; (iii) para cambiar (aumentar o disminuir) el número de cationes en relación con el polisacárido no modificado, siempre que la carga neta del polisacárido permanezca positiva; y (iv) combinaciones de los mismos. Un polisacárido catiónico puede ser homocatiónico o heterocatiónico, y puede estar reticulado o no reticulado. Los ejemplos no limitativos de polisacáridos catiónicos incluyen quitosano, trimetilquitosano y HA catiónico.

Tal como se usa en el presente documento, “HA catiónico” se refiere a HA que se ha modificado para comprender un número suficiente de grupos catiónicos de manera que la carga total (neta) del polisacárido resultante sea positiva a pH fisiológico. El HA catiónico es un polisacárido catiónico. Un HA catiónico puede ser homocatiónico o heterocatiónico, y puede estar reticulado o no reticulado.

Los ejemplos no limitativos de grupos funcionales catiónicos incluyen amonio; guanidinio; heterociclilo que tiene uno o más átomos de nitrógeno protonados en el anillo; y heteroarilo que tiene uno o más átomos de nitrógeno protonados en el anillo. Tal como se usa en el presente documento, “amonio” incluye amonio primario, amonio secundario, amonio terciario y amonio cuaternario. Específicamente, el amonio tiene la siguiente estructura:

en la que cada Ra, Rb y Rc se selecciona independientemente de hidrógeno y un grupo alquilo sustituido o no sustituido, cada uno de los cuales puede ser igual o diferente. Por ejemplo, cuando cada uno de Ra, Rb y Rc es hidrógeno, el catión es un catión de amonio primario; cuando cada uno de Ra, Rb y Rc es alquilo, el catión es un catión de amonio cuaternario.

Tal como se usa en el presente documento, “alquilo” significa un grupo hidrocarbonado alifático que puede ser lineal o ramificado y que comprende de aproximadamente 1 a aproximadamente 20 átomos de carbono en la cadena. Los grupos alquilo preferidos contienen de aproximadamente 1 a aproximadamente 12 átomos de carbono en la cadena. Los grupos alquilo más preferidos contienen de aproximadamente 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono en la cadena. Ramificado significa que uno o más grupos alquilo inferior, tales como metilo, etilo o propilo, están unidos a una cadena de alquilo lineal. “Alquilo” puede estar sin sustituir o puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que pueden ser iguales o diferentes, seleccionándose cada sustituyente independientemente del grupo que consiste en halo, alquilo, arilo, heterociclilo, heteroarilo, cicloalquilo, ciano, hidroxilo, alcoxilo, alquiltio, amino, oxima (por ejemplo, =N-OH), -NH(alquilo), -NH(cicloalquilo), -N(alquilo)², -O-C(O)-alquilo, -O-C(O)-arilo, -O-C(O)-cicloalquilo, -SF⁵, carboxilo, -C(O)O-alquilo, -C(O)NH(alquilo) y -C(O)N(alquilo)². Los ejemplos no limitativos de grupos alquilo adecuados incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo y t-butilo.

Tal como se usa en el presente documento, “heterociclilo” significa un sistema de anillo monocíclico o multicíclico saturado no aromático que comprende de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 átomos de anillo, preferiblemente de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 átomos de anillo, en el que uno o más de los átomos en el sistema de anillo es un elemento distinto de carbono, por ejemplo, nitrógeno, oxígeno o azufre, solos o en combinación. No hay átomos de oxígeno y/o azufre adyacentes presentes en el sistema de anillo. Los heterociclilos preferidos contienen de aproximadamente 5 a aproximadamente 6 átomos de anillo. El prefijo aza, oxa o tia antes del nombre de la raíz del heterociclilo significa que al menos un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, respectivamente, está presente como átomo de anillo. Cualquier N en un anillo de heterociclilo puede existir en forma protonada. Cualquier -NH en un anillo de heterociclilo puede existir protegido tal como, por ejemplo, como un grupo -N(Boc), -N(CBz), -N(Tos) y similares; tales protecciones también se consideran parte de esta invención. El heterociclilo puede estar opcionalmente sustituido con uno o más “sustituyentes del sistema de anillo” que pueden ser iguales o diferentes, y son tal como se definen en el presente documento. El átomo de nitrógeno o azufre del heterociclilo puede estar opcionalmente oxidado al correspondiente N-óxido, S-óxido o S,S-dióxido. Los ejemplos no limitativos de anillos de heterociclilo monocíclicos adecuados incluyen piperidilo, pirrolidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tiazolidinilo, lactama y similares. “Heterociclilo” también incluye anillos de heterociclilo tal como se describió anteriormente en los que =O reemplaza dos hidrógenos disponibles en el mismo átomo de carbono del anillo.

Tal como se usa en el presente documento, “heteroarilo” significa un sistema de anillo monocíclico o multicíclico aromático que comprende de aproximadamente 5 a aproximadamente 14 átomos de anillo, preferiblemente de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 átomos de anillo, en el que uno o más de los átomos de anillo es un elemento distinto de carbono, por ejemplo, nitrógeno, oxígeno o azufre, solos o en combinación. Los heteroarilos preferidos contienen de aproximadamente 5 a aproximadamente 6 átomos de anillo. El prefijo aza, oxa o tia antes del nombre de la raíz del heterociclilo significa que al menos un átomo de nitrógeno, oxígeno o azufre, respectivamente, está presente como átomo de anillo. Cualquier N en un anillo de heterociclilo puede existir en forma protonada. El “heteroarilo” puede estar opcionalmente sustituido con uno o más “sustituyentes del sistema de anillo” que pueden ser iguales o diferentes, y son tal como se definen en el presente documento. Un átomo de nitrógeno de un heteroarilo puede estar opcionalmente oxidado al correspondiente N-óxido. Los ejemplos no limitativos de heteroarilos adecuados incluyen piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridona (incluyendo piridonas N-sustituidas), isoxazolilo, isotiazolilo, oxazolilo, tiazolilo, pirazolilo, furazanilo, pirrolilo, pirazolilo, triazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, pirazinilo, piridazinilo, quinoxalinilo, ftalazinilo, oxindolilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, imidazo[2,1-b]tiazolilo, benzofurazanilo, indolilo, azaindolilo, bencimidazolilo, quinolinilo, imidazolilo, tienopiridilo, quinazolinilo, tienopirimidilo, pirrolopiridilo, imidazopiridilo, isoquinolinilo, benzoazaindolilo, 1,2,4-triazinilo, benzotiazolilo y similares. El término “heteroarilo” también se refiere a restos heteroarilo parcialmente saturados tales como, por ejemplo, tetrahidroisoquinolilo, tetrahidroquinolilo y similares.

Tal como se usa en el presente documento, “sustituyente del sistema de anillo” significa un sustituyente unido a un sistema de anillo aromático o no aromático que, por ejemplo, reemplaza un hidrógeno disponible en el sistema de anillo. Los sustituyentes del sistema de anillo pueden ser iguales o diferentes, seleccionándose cada uno independientemente del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, alquilarilo, heteroaralquilo, heteroarilalquenilo, heteroarilalquinilo, alquilheteroarilo, hidroxilo, hidroxialquilo, alcoxilo, ariloxilo, aralcoxilo, acilo, aroílo, halo, nitro, ciano, carboxilo, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, heteroarilsulfonilo, alquiltio, ariltio, heteroariltio, aralquiltio, heteroaralquiltio, cicloalquilo, heterociclilo, -SF⁵, -O-C(O)-alquilo, -O-C(O)-arilo, -O-C(O)-cicloalquilo, -C(=N-CN)-NH², -C(=NH)-NH², -C(=NH)-NH(alquilo), oxima (por ejemplo, =N-OH), -NY¹Y², -alquil-NY-Y -C(O)NY-^,Y², -SO²NY¹Y²y -SO²NY¹Y², en los que Y¹e Y²pueden ser iguales o diferentes y se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, arilo, cicloalquilo y aralquilo.

En algunas realizaciones, se proporciona un grupo funcional catiónico de un polisacárido catiónico incorporando uno o más aminoácidos en el polisacárido, por ejemplo, una cadena lateral de arginina puede proporcionar un ion guanidio; una cadena lateral de lisina u ornitina puede proporcionar un ion amonio; una cadena lateral de histidina puede proporcionar un ion imidazolio; la prolina puede proporcionar un ion pirrolidinio.

En otras realizaciones, el grupo funcional catiónico lo proporciona una o más unidades de repetición de un polisacárido. En algunas realizaciones, los grupos catiónicos los proporciona la D-glucosamina, en los que los grupos amino primarios están protonados para proporcionar iones amonio primario.

En algunas realizaciones, los grupos amino primarios de un polisacárido están alquilados para proporcionar los correspondientes iones amonio secundario, terciario y/o cuaternario.

En algunas realizaciones, el polisacárido catiónico es quitosano. El quitosano, también conocido como poliglusam, desacetilquitina y poli-(D)-glucosamina, es un polisacárido lineal que comprende D-glucosamina (unidad desacetilada) y N-acetil-D-glucosamina (unidad acetilada) unidas por P-(1-4). El quitosano, incluyendo el quitosano producido comercialmente, puede proporcionarse mediante desacetilación de la quitina. En algunas realizaciones, el grado de desacetilación (% de DD) oscila desde aproximadamente el 60 hasta aproximadamente el 100%. En algunas realizaciones, el grupo amino del quitosano tiene un valor de pKa de aproximadamente 6,5, lo que conduce a la protonación (es decir, la formación de iones amonio) en disoluciones ácidas a neutras, incluyendo a pH fisiológico, en donde la densidad de carga depende del pH y del % de DD. En algunas realizaciones, el peso molecular del quitosano está entre aproximadamente 3800 y aproximadamente 20.000 Dalton. En otras realizaciones, el polisacárido catiónico es un alquilaminoquitosano. En una realización de este tipo, el polisacárido catiónico es quitosano cuaternizado, que comprende iones amonio cuaternario. En una realización particular, el polisacárido catiónico es trimetilquitosano.

En algunas realizaciones, se introduce un grupo catiónico en un polisacárido derivatizando un anión del polisacárido con un grupo que porta un catión, reemplazando así el anión por un catión. En algunas realizaciones, el polisacárido es un polisacárido catiónico, y el catión se introduce para incorporar cationes adicionales al polisacárido, por ejemplo, para modular el pKa del polisacárido catiónico y/o para ajustar las propiedades reológicas del hidrogel coacervado que comprende el polisacárido. En otras realizaciones, el polisacárido es un polisacárido aniónico, y el catión se introduce para modular el pKa del polisacárido y/o para ajustar las propiedades reológicas del hidrogel que comprende el polisacárido. En algunas realizaciones, el polisacárido es un polisacárido aniónico, y los grupos catiónicos se introducen para convertir el polisacárido aniónico en un polisacárido catiónico. Por ejemplo, el polisacárido aniónico puede ser Ha , que se convierte en HA catiónico.

Los métodos para introducir grupos funcionales amina (es decir, fuentes de cationes amonio) en un polisacárido que comprende grupos ácido carboxílico pueden lograrse haciendo reaccionar el polisacárido con una diamina o poliamina (véanse las figuras 1a y 1b). En algunas realizaciones, el polisacárido es HA. En una realización a modo de ejemplo, un polisacárido que comprende uno o más grupos ácido carboxílico se acopla con una diamina o una poliamina en presencia de un agente de acoplamiento para formar un enlace amida. El polisacárido puede ser HA. Los ejemplos no limitativos de aminas útiles para introducir cationes en un polisacárido que porta grupos ácido carboxílico incluyen aminoácidos tales como lisina y ornitina, hexametilendiamina (HMDA), espermina, espermidina y derivados o formas protegidas de los anteriores. Por ejemplo, las aminas pueden comprender uno o más ésteres de carboxilato y/o grupos N-Boc, tales como éster metílico de lisina, éster metílico de N^épsilon-Boc-lisina, éster metílico de ornitina y éster metílico de N^delta-Boc-ornitina. Los ejemplos no limitativos de agentes de acoplamiento útiles para formar enlaces peptídicos entre los grupos ácido carboxílico de un polisacárido y las aminas incluyen carbodiimidas, tales como diciclohexilcarbodiimida (DCC), y carbodiimidas solubles en agua, tales como 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC), 1-etil-3-(3-trimetilaminopropil)carbodiimida (ETC), 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimida (CMC) y sales de los mismos y mezclas de los mismos.

Cuando un grupo funcional en un compuesto se denomina “protegido”, esto significa que el grupo está en forma modificada para evitar reacciones secundarias no deseadas en el sitio protegido cuando el compuesto se somete a una reacción. Los grupos protectores adecuados serán reconocidos por los expertos en la técnica, así como por referencia a libros de texto convencionales tales como, por ejemplo, T. W. Greene et al., Protective Groups in Organic Synthesis (1991), Wiley, Nueva York. Por ejemplo, un grupo amino puede protegerse con un grupo -(Boc), -(CBz) o -(Tos) y similares, y posteriormente desprotegerse para proporcionar el grupo amino correspondiente o el ion amonio correspondiente.

Una realización no limitativa del método proporcionado se representa en el esquema 1a, que muestra el acoplamiento de un polisacárido que comprende grupos ácido carboxílico con HMDA en presencia de EDC. En esta realización, uno de los grupos amino de la HMDA forma el enlace amida, mientras que el otro grupo amino proporciona un ion amonio.

Otra realización no limitativa se representa en el esquema 1b, que muestra el acoplamiento de un polisacárido que comprende grupos ácido carboxílico con éster metílico de N^épsilon-Boc-lisina en presencia de EDC, de manera que el grupo alfa-amino de la lisina forma un enlace amida con un grupo ácido carboxílico del polisacárido; el grupo N^épsilon-BOC se desprotege posteriormente para proporcionar un ion amonio usando métodos generalmente conocidos por un experto en la técnica.

En algunas realizaciones, se derivatiza uno o más grupos amino de un polisacárido para introducir iones guanidinio. Los métodos para convertir iones amonio primario en iones guanidinio se divulgan en Hunt et al. TUNABLE, HIGH MODULUS HYDROGELS DRIVEN BY IONIC COACERVATION, Advanced Materials, 2011, 23, 2327-2331.

En una realización, puede hacerse reaccionar un polisacárido que comprende uno o más grupos amino/amonio con 1H-pirazol-1-carboximidamida para proporcionar un catión guanidinio, tal como se muestra en los esquemas 2a y 2b.

Esquema 2b.

Polisacarido que porta ion amonio

Polisacárido que porta ion guanidinio

En algunas realizaciones, todos los grupos amino del polisacárido se convierten en iones guanidinio. En otras realizaciones, sólo algunos de los grupos amino del polisacárido se convierten en grupos guanidinio, y el polisacárido resultante comprende tanto iones amonio primario como iones guanidinio.

En otra realización, todos los grupos amino del polisacárido están alquilados, por ejemplo, para proporcionar un polisacárido que comprende iones amonio secundario, terciario y/o cuaternario. En otras realizaciones, sólo algunos de los grupos amino del polisacárido están alquilados, y el polisacárido resultante comprende iones amonio primario y secundario, terciario y/o cuaternario.

En otra realización, algunos de los grupos amino del polisacárido están alquilados y otros grupos amino se convierten en iones guanidinio, proporcionando así un polisacárido que comprende iones amonio primario, iones amonio secundario, iones amonio terciario, iones amonio cuaternario, iones guanidinio o combinaciones de los mismos.

En algunas realizaciones, se prepara un HA catiónico reticulado a partir de HA reticulado. Los ejemplos no limitativos de métodos para preparar HA reticulado se describen anteriormente. En una realización, e1HA reticulado se modifica para introducir grupos catiónicos, por ejemplo, incorporando iones amonio (por ejemplo, véanse los esquemas 1a y 1b) y, opcionalmente, alquilando los iones amonio y/o introduciendo iones guanidinio (por ejemplo, véanse los esquemas 2a y 2b), proporcionando así HA catiónico reticulado que porta iones amonio primario, amonio secundario, amonio terciario, amonio cuaternario y/o guanidinio.

En algunas realizaciones, se introduce un grupo aniónico en un polisacárido. En algunas realizaciones, el polisacárido es un polisacárido catiónico, y el anión se introduce para incorporar aniones en el polisacárido, por ejemplo, para modular el pKa del polisacárido catiónico y/o para ajustar las propiedades reológicas del hidrogel coacervado que comprende el polisacárido. En otras realizaciones, el polisacárido es HA, y el anión se introduce para modular el pKa del Ha y/o para ajustar las propiedades reológicas del hidrogel que comprende e1HA.

Los ejemplos no limitativos de grupos funcionales aniónicos incluyen carboxilato, fosfonato y sulfonato. En algunas realizaciones, los aniones fosfonato y/o sulfonato se proporcionan haciendo reaccionar uno o más grupos carboxilato de un polisacárido, tal como HA, con ácido aminofosfónico para proporcionar un polisacárido que comprende iones fosfonato y/o con ácido aminosulfámico para proporcionar un polisacárido que comprende iones sulfonato, respectivamente. En algunas realizaciones, el grupo funcional aniónico se proporciona incorporando un aminoácido en el polisacárido, por ejemplo, una cadena lateral de ácido aspartático o ácido glutamático que puede proporcionar un ion carboxilato.

Debe entenderse que, mientras que el pKa de un grupo particular puede ser inferior a 7, el grupo particular (por ejemplo, imidazol o amino N-terminal) puede servir como catión y, por tanto, usarse para formar y/o usar el gel coacervado en condiciones de pH en las que el grupo está protonado. A la inversa, debe entenderse que, mientras que el pKa de un grupo particular puede ser superior a 7, el grupo particular puede servir como anión y usarse para formar y/o usar el gel coacervado en condiciones de pH en las que el grupo está desprotonado.

En algunas realizaciones, se proporcionan hidrogeles de HA coacervados con diferentes perfiles reológicos, que pueden formarse basándose en el/los valor(es) de pKa de los aniones y/o cationes de cada uno de los polisacáridos aniónicos y catiónicos, respectivamente. Por ejemplo, la fuerza de las interacciones carga-carga depende de las identidades de los aniones y/o cationes, afectando así a las propiedades del gel resultante. Por tanto, las propiedades reológicas de los hidrogeles pueden ajustarse seleccionando grupos iónicos particulares con pKa particulares y/o ajustando el número relativo de cada grupo iónico. En algunas realizaciones, puede ser necesario un complejo homoaniónico/homocatiónico, un complejo homoaniónico/heterocatiónico, un complejo heteroaniónico/homocatiónico o un complejo heteroaniónico/heterocatióni

En una realización, el relleno dérmico de la invención comprende un hidrogel a base de HA, comprendiendo el hidrogel un HA aniónico y un polisacárido catiónico. En algunas realizaciones, el HA aniónico no está reticulado. En otras realizaciones, el HA aniónico está reticulado. En algunas realizaciones, el polisacárido catiónico no está reticulado. En otras realizaciones, el polisacárido catiónico está reticulado.

En algunas realizaciones, el relleno dérmico de la invención comprende un hidrogel a base de HA, comprendiendo el hidrogel HA y un polisacárido catiónico. En algunas realizaciones, el HA no está reticulado. En otras realizaciones, el HA está reticulado. En algunas realizaciones, el polisacárido catiónico no está reticulado. En otras realizaciones, el polisacárido catiónico está reticulado.

En una realización, se proporciona un hidrogel coacervado que comprende un HA aniónico no reticulado. En este ejemplo, el HA aniónico no reticulado se condensa (es decir, forma un complejo con el polisacárido catiónico) y se encapsula en un núcleo a través de interacciones con grupos catiónicos del polisacárido catiónico, mientras que el polisacárido catiónico sirve como una fase continua en la que se dispersa e1HA aniónico no reticulado condensado (véase la figura 1A).

En otra realización, se proporciona un hidrogel coacervado que comprende un HA no reticulado y un polisacárido catiónico no reticulado, tal como quitosano, en el que la razón de carga entre e1HA aniónico y el quitosano catiónico es cercana al equilibrio de carga, el HA y el quitosano forman un complejo poliiónico y se distribuyen uniformemente a través de la matriz de gel (véase la figura 1B).

En otra realización, se proporciona un hidrogel coacervado que comprende HA no reticulado y un polisacárido catiónico no reticulado, tal como quitosano, en el que el polisacárido catiónico no reticulado se condensa (es decir, forma un complejo con un HA aniónico) y se encapsula en un núcleo a través de interacciones con grupos aniónicos de1HA aniónico, mientras que el HA aniónico sirve como una fase continua en la que se dispersa el polisacárido catiónico no reticulado condensado (véase la figura 1C).

En otra realización, se proporciona un hidrogel coacervado que comprende un HA aniónico reticulado. En este ejemplo, los polisacáridos de hA aniónico reticulado forman un complejo con el polisacárido catiónico, y el polisacárido catiónico sirve como una fase continua en la que se dispersan las partículas de HA aniónico reticulado (véase la figura 2). En algunas realizaciones, los polisacáridos catiónicos actúan como “pegamentos” cohesivos para mantener o encapsular las partículas de hidrogel de HA aniónico reticulado.

En otra realización, los hidrogeles comprenden complejos iónicos entre HA aniónico no reticulado y HA catiónico reticulado. El HA sirve como una fase continua en la que se dispersan las partículas de HA catiónico reticulado. En algunas realizaciones, los polisacáridos de HA aniónico actúan como “pegamentos” cohesivos para mantener o encapsular las partículas de hidrogel de HA catiónico reticulado.

En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados comprenden un polisacárido de HA homoaniónico, en el que cada anión tiene la misma identidad. Por ejemplo, el polisacárido homoaniónico puede ser HA, en el que cada anión es un anión carboxilato.

En algunas realizaciones, los hidrogeles comprenden un HA heteroaniónico modificado (es decir, HA que se ha modificado para introducir uno o más aniones en lugar de carboxilato), en el que los aniones tienen identidades diferentes (por ejemplo, carboxilato, fosfonato y/o sulfonato), cada uno de los cuales puede tener valores de pKa iguales o diferentes. Por ejemplo, puede hacerse reaccionar HA con ácido aminofosfónico en condiciones que proporcionen HA homoaniónico que tiene aniones fosfonato. En otro ejemplo, puede hacerse reaccionar HA con ácido aminosulfámico en condiciones que proporcionen HA homoaniónico que tiene aniones sulfonato. En otro ejemplo, puede hacerse reaccionar HA con ácido aminofosfónico en condiciones que proporcionen HA heteroaniónico que tiene aniones carboxilato y fosfonato. En otro ejemplo, puede hacerse reaccionar HA con ácido aminosulfámico en condiciones que proporcionen HA heteroaniónico que tiene aniones carboxilato y sulfonato. En otro ejemplo, e1HA puede hacerse reaccionar simultánea o secuencialmente con ácido aminofosfónico y ácido aminosulfámico en condiciones que proporcionen un HA heteroaniónico que tiene grupos carboxilato, fosfonato y sulfonato.

En algunas realizaciones, los hidrogeles de HA coacervados comprenden un polisacárido homocatiónico, en el que cada catión tiene la misma identidad, por ejemplo, en el que cada catión es un ion amonio primario. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es quitosano.

En otras realizaciones, los hidrogeles de HA coacervados comprenden un polisacárido heterocatiónico, en el que dos o más cationes tienen identidades diferentes (por ejemplo, amonio primario, amonio cuaternario, guanidinio y/o imidazolio), cada uno de los cuales puede tener valores de pKa iguales o diferentes.

En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados comprenden un HA homoaniónico y un polisacárido homocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA y el polisacárido homocatiónico es quitosano. En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados comprenden un HA homoaniónico y un polisacárido heterocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA.

En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados comprenden un HA heteroaniónico y un polisacárido homocatiónico. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es un HAcatiónico. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es quitosano.

En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados comprenden un HA heteroaniónico y un polisacárido heterocatiónico.

En algunas realizaciones, los hidrogeles comprenden un complejo iónico entre un HA homoaniónico y un polisacárido homocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es un HA catiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA y el polisacárido homocatiónico es un HA catiónico o quitosano.

En algunas realizaciones, los hidrogeles comprenden un complejo iónico entre un HA homoaniónico y un polisacárido heterocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA.

En algunas realizaciones, los hidrogeles comprenden un complejo iónico entre un HA heteroaniónico y un polisacárido homocatiónico. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es un HA catiónico o quitosano.

En algunas realizaciones, los hidrogeles comprenden un complejo iónico entre un HA heteroaniónico y un polisacárido heterocatiónico.

Las realizaciones no limitativas de la invención incluyen hidrogeles que comprenden un complejo iónico entre un polisacárido aniónico y un polisacárido catiónico, en los que el polisacárido aniónico se selecciona de las realizaciones de polisacárido aniónico de la tabla 1 y el polisacárido catiónico se selecciona de las realizaciones de polisacárido catiónico de la tabla 1, sin limitación con respecto a las posibles combinaciones de polisacáridos aniónicos y catiónicos. Tabla 1.

En realizaciones adicionales, se proporcionan hidrogeles de HA coacervados tal como se describen en la tabla 1, comprendiendo además el hidrogel un agente cosmético, una vitamina, un antioxidante, un agente de aclaramiento de la piel o una combinación de los mismos.

En realizaciones adicionales, los hidrogeles de HA coacervados tal como se describen en la tabla 1 y en el párrafo anterior se proporcionan en un portador fisiológicamente aceptable, tal como, por ejemplo, solución salina tamponada con fosfato (PBS) o HA no reticulado.

En algunas realizaciones, los hidrogeles de HA de la invención tienen moldeabilidad, capacidad de estiramiento y/o inyectabilidad suficientes o mejoradas para su aplicación prevista como rellenos dérmicos, con mejoras con respecto a los rellenos dérmicos a base de HA químicamente reticulado convencionales.

En algunas realizaciones, los geles tienen un módulo de almacenamiento (G') que oscila desde aproximadamente 50 Pa hasta aproximadamente 5.000 Pa, por ejemplo, desde aproximadamente 500 Pa hasta aproximadamente 2.000 Pa, desde aproximadamente 500 Pa hasta aproximadamente 1.500 Pa o desde aproximadamente 500 Pa hasta aproximadamente 1.000 Pa, o tienen un módulo de almacenamiento de aproximadamente 500 Pa o aproximadamente 1.450 Pa. En algunos aspectos, pueden obtenerse geles con alto G' variando las concentraciones de1HA aniónico y del polisacárido catiónico, las razones relativas del HA aniónico y del polisacárido catiónico y/o ajustando las interacciones aniónicas-catiónicas usando diferentes aniones y cationes para formar el complejo; por ejemplo, los pares anión-catión pueden comprender interacciones aniónicas-catiónicas fuertes, tales como interacciones iónicas entre sulfonato y guanidinio.

En algunas realizaciones de la invención, los hidrogeles de HA coacervados bloquean la accesibilidad a las enzimas hidrolíticas, lo que conduce a una mejor integridad, duración o ambas del hidrogel en el tejido blando, tal como la piel. En una realización, se bloquea la accesibilidad a la hialuronidasa. En otra realización, se bloquean las enzimas que hidrolizan los polisacáridos catiónicos. En otra realización, se bloquean las esterasas.

En algunas realizaciones, el relleno dérmico de la invención dura al menos aproximadamente 3 meses, al menos aproximadamente 4 meses, al menos aproximadamente 5 meses o al menos aproximadamente 6 meses después de introducirse en la piel u otro tejido blando. En algunas realizaciones, el relleno dérmico de la invención dura hasta aproximadamente un año después de introducirse en la piel u otro tejido blando. En otras realizaciones, los rellenos dérmicos de la invención duran hasta aproximadamente 18 meses después de introducirse en la piel u otro tejido blando. En realizaciones particulares, el relleno dérmico dura entre aproximadamente 3 meses y aproximadamente 18 meses después de introducirse en la piel u otro tejido blando.

En algunas realizaciones, los hidrogeles de HA coacervados comprenden un HA aniónico no reticulado (tal como HA no reticulado), que tiene un peso molecular que oscila desde aproximadamente 50 K hasta aproximadamente 3 millones de Dalton, desde aproximadamente 100 K hasta aproximadamente 3 millones de Dalton, desde aproximadamente 500 K hasta aproximadamente 3 millones de Dalton, o desde aproximadamente 50 K hasta aproximadamente 2 millones de Dalton, desde aproximadamente 100 K hasta aproximadamente 2 millones de Dalton o desde aproximadamente 500 K hasta aproximadamente 2 millones de Dalton.

En algunas realizaciones, el componente de HA del hidrogel es un polisacárido de HA aniónico reticulado, tal como HA reticulado. Tal como se usa en el presente documento, el término “reticulado” se refiere a los enlaces intermoleculares que unen las moléculas de polímero individuales, o cadenas de monómeros, en una estructura más estable como un gel. Como tal, un polisacárido de HA aniónico reticulado tiene al menos un enlace intermolecular que une al menos una molécula de polisacárido individual con otra.

Normalmente, la reticulación de polisacáridos de glicosaminoglicano, tales como e1HA, da como resultado la formación de un hidrogel. Tales hidrogeles tienen alta viscosidad y requieren una fuerza considerable para su extrusión a través de una aguja fina. En general, los polisacáridos de glicosaminoglicano, incluyendo e1HA, pueden reticularse usando dialdehídos y disulfuros como agentes de reticulación que incluyen, sin limitación, agentes de reticulación multifuncionales a base de PEG, divinilsulfonas, diglicidil éteres y bis-epóxidos, biscarbodiimida. Los ejemplos no limitativos de agentes de reticulación de HA incluyen agentes de reticulación multifuncionales a base de PEG como pentaeritritol tetraglicidil éter (PETGE), divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), (fenilenbis-(etil)-carbodiimida y 1,6-hexametilenbis(etilcarbodiimida), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano o combinaciones de los mismos. Otros agentes de reticulación útiles se divulgan en Stroumpoulis y Tezel, Tunably Crosslinked Polysaccharide Compositions, publicación de patente estadounidense US 2011/0077737. Ejemplos no limitativos de métodos de reticulación de polisacáridos de glicosaminoglicano se describen en, por ejemplo, Piron y Tholin, Polysaccharide Crosslinking, Hydrogel Preparation, Resulting Polysaccharides(s) and Hydrogel(s), uses Thereof, publicación de patente estadounidense 2003/0148995; Lebreton, Cross-Linking of Low and High Molecular Weight Polysacchrides, Preparation of Injectable Monophase Hydrogels, Polysaccharides and Hydrogels Obtained, publicación de patente estadounidense 2010/0226988; Lebreton, Viscoelastic Solutions Containing Sodium Hyaluronate and Hydroxypropyl Methyl Cellulose, Preparation and Uses, publicación de patente estadounidense 2008/0089918; Lebreton, Hyaluronic Acid-Based Gels Including Lidocaine, publicación de patente estadounidense 2010/0028438; y Polysaccharides and Hydrogels thus Obtained, publicación de patente estadounidense 2006/0194758; y Di Napoli, Composition and Method for Intradermal Soft Tissue Augmentation, publicación de patente internacional WO 2004/073759; Njikang et al., Dermal Filler Compositions, publicación de patente estadounidense 2013/0096081.

En algunas realizaciones, los polisacáridos de HA aniónico modificado reticulado se preparan a partir de HA reticulado. Los ejemplos no limitativos de métodos para preparar HA reticulado se describen anteriormente. En una realización, un hA reticulado se modifica para introducir grupos aniónicos además de o en lugar de carboxilato. Por ejemplo, el HA reticulado puede hacerse reaccionar con ácido aminofosfónico para proporcionar HA homoaniónico reticulado que tiene aniones fosfonato. En otro ejemplo, el HA reticulado puede hacerse reaccionar con ácido aminosulfámico para proporcionar HA homoaniónico reticulado que tiene aniones sulfonato. En otro ejemplo, e1HA reticulado puede hacerse reaccionar con ácido aminofosfónico para proporcionar HA heteroaniónico reticulado que tiene aniones carboxilato y fosfonato. En otro ejemplo, el HA reticulado puede hacerse reaccionar con ácido aminosulfámico para proporcionar HA heteroaniónico reticulado que tiene aniones carboxilato y sulfonato. En otro ejemplo, e1 HA reticulado puede hacerse reaccionar simultánea o secuencialmente con ácido aminofosfónico y ácido aminosulfámico para proporcionar un HA heteroaniónico reticulado que tiene grupos carboxilato, fosfonato y sulfonato.

Según la presente memoria descriptiva, “%” en una formulación se define como porcentaje en peso (es decir, p/p). Por ejemplo: 1% (p/p) significa una concentración de 10 mg/g.

En una realización, una composición de hidrogel comprende un polisacárido de HA aniónico (tal como HA) que está presente en una cantidad suficiente para tratar un estado de los tejidos blandos o de la piel tal como se divulga en el presente documento. En otros aspectos de esta realización, una composición comprende un HA aniónico (tal como HA) que representa, por ejemplo, aproximadamente el 1% en peso, aproximadamente el 2% en peso, aproximadamente el 3% en peso, aproximadamente el 4% en peso, aproximadamente el 5% en peso, aproximadamente el 6% en peso, aproximadamente el 7% en peso, aproximadamente el 8% en peso, o aproximadamente el 9%, o aproximadamente el 10% en peso, de la composición total. En aún otros aspectos de esta realización, una composición comprende un HA aniónico (tal como HA) que representa, por ejemplo, como máximo el 1% en peso, como máximo el 2% en peso, como máximo el 3% en peso, como máximo el 4% en peso, como máximo el 5% en peso, como máximo el 6% en peso, como máximo el 7% en peso, como máximo el 8% en peso, como máximo el 9% en peso, o como máximo el 10% en peso, de la composición total. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición comprende un HA aniónico (tal como HA) que representa, por ejemplo, de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 20% en peso, de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 17% en peso, de aproximadamente el 3% a aproximadamente el 15% en peso o de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 10% en peso, por ejemplo, aproximadamente el 11% en peso, aproximadamente el 15% en peso o aproximadamente el 17% en peso, de la composición total.

En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel comprende un HA aniónico (tal como HA) que está presente en una concentración de, por ejemplo, aproximadamente 2 mg/g, aproximadamente 3 mg/g, aproximadamente 4 mg/g, aproximadamente 5 mg/g, aproximadamente 6 mg/g, aproximadamente 7 mg/g, aproximadamente 8 mg/g, aproximadamente 9 mg/g, aproximadamente 10 mg/g, aproximadamente 11 mg/g, aproximadamente 12 mg/g, aproximadamente 13 mg/g, aproximadamente 13,5 mg/g, aproximadamente 14 mg/g, aproximadamente 15 mg/g, aproximadamente 16 mg/g, aproximadamente 17 mg/g, aproximadamente 18 mg/g, aproximadamente 19 mg/g o aproximadamente 20 mg/g. En otros aspectos de esta realización, una composición comprende un HA aniónico (tal como HA) que está presente en una concentración de, por ejemplo, al menos 1 mg/g, al menos 2 mg/g, al menos 3 mg/g, al menos 4 mg/g, al menos 5 mg/g, al menos 10 mg/g, al menos 15 mg/g, al menos 20 mg/g o al menos 25 mg/g, o aproximadamente 40 mg/g. En aún otros aspectos de esta realización, una composición comprende un HA aniónico (tal como HA) que está presente en una concentración de, por ejemplo, como máximo 1 mg/g, como máximo 2 mg/g, como máximo 3 mg/g, como máximo 4 mg/g, como máximo 5 mg/g, como máximo 10 mg/g, como máximo 15 mg/g, como máximo 20 mg/g, como máximo 25 mg/g o como máximo 40 mg/g. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición comprende un HA aniónico (tal como HA) que está presente en una concentración de, por ejemplo, de aproximadamente 7,5 mg/g a aproximadamente 19,5 mg/g, de aproximadamente 8,5 mg/g a aproximadamente 18,5 mg/g, de aproximadamente 9,5 mg/g a aproximadamente 17,5 mg/g, de aproximadamente 10,5 mg/g a aproximadamente 16,5 mg/g, de aproximadamente 11,5 mg/g a aproximadamente 15,5 mg/g o de aproximadamente 12,5 mg/g a aproximadamente 14,5 mg/g, o hasta aproximadamente 40 mg/g.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel que comprende un polisacárido de HA aniónico reticulado que tiene un grado de reticulación. Tal como se usa en el presente documento, el término “grado de reticulación” se refiere al porcentaje de unidades monoméricas de polisacárido de HA aniónico, tales como, por ejemplo, las unidades de monómero de disacárido de1HA, que están unidas a un agente de reticulación. El grado de reticulación se expresa como la razón en porcentaje en peso del agente de reticulación con respecto al HA aniónico. En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados de la invención comprenden un HA aniónico reticulado que tiene un grado de reticulación de desde aproximadamente el 1% en peso hasta aproximadamente el 15% en peso, desde aproximadamente el 1% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso, desde aproximadamente el 2% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso, desde aproximadamente el 3% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso o desde aproximadamente el 5% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso. En otras realizaciones, los hidrogeles coacervados de la invención comprenden un HA aniónico reticulado que tiene un grado de reticulación de menos de aproximadamente el 10%.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel que comprende un polisacárido de HA aniónico no reticulado. Tal como se usa en el presente documento, el término “no reticulado” se refiere a la falta de enlaces intermoleculares que unen las moléculas de polisacárido aniónico individuales, o cadenas de monómeros. Como tal, un polisacárido de HA aniónico no reticulado (incluyendo HA no reticulado) no está unido a ningún otro polisacárido de hA aniónico mediante un enlace intermolecular covalente. En aspectos de esta realización, una composición de relleno dérmico comprende un polisacárido de HA aniónico no reticulado, tal como HA no reticulado. En otros aspectos, el relleno dérmico comprende un hidrogel de HA coacervado, en el que el complejo coacervado comprende el polisacárido de HA aniónico no reticulado, tal como HA no reticulado.

Los polisacáridos de HA no reticulado son solubles en agua y generalmente conservan una naturaleza fluida. Como tal, los polisacáridos de HA no reticulado pueden mezclarse con un hidrogel a base de polisacárido de HA coacervado como lubricante para facilitar el procedimiento de extrusión de la composición a través de una aguja fina.

Los aspectos de la presente invención proporcionan, en parte, una composición de hidrogel que comprende polisacáridos de HA aniónico de bajo peso molecular, polisacáridos de HA aniónico de alto peso molecular o polisacáridos de HA aniónico de bajo y alto peso molecular. Tal como se usa en el presente documento, el término “alto peso molecular”, cuando se refiere a “HA aniónico”, se refiere a polisacáridos de HA aniónico (incluyendo HA) que tienen un peso molecular medio de 1.000.000 Da o superior. Ejemplos no limitativos de polisacáridos de HA aniónico (incluyendo HA) de alto peso molecular son los de aproximadamente 1.500.000 Da, aproximadamente 2.000. 000 Da, aproximadamente 2.500.000 Da, aproximadamente 3.000.000 Da, aproximadamente 3.500.000 Da, aproximadamente 4.000.000 Da, aproximadamente 4.500.000 Da o aproximadamente 5.000.000 Da. Tal como se usa en el presente documento, el término “bajo peso molecular”, cuando se refiere a “HA aniónico”, se refiere a polisacáridos de HA aniónico (incluyendo HA) que tienen un peso molecular medio inferior a 1.000.000 Da. Ejemplos no limitativos de polisacáridos de Ha aniónico (tal como HA) de bajo peso molecular son los de aproximadamente 100.000 Da, aproximadamente 200.000 Da, aproximadamente 300.000 Da, aproximadamente 400.000 Da, aproximadamente 500.000 Da, aproximadamente 600.000 Da, aproximadamente 700.000 Da, aproximadamente 800.000 Da o aproximadamente 900.000 Da.

En una realización, una composición de relleno dérmico comprende polisacáridos de HA aniónico no reticulado de bajo peso molecular, o comprende polisacáridos de HA aniónico reticulado preparados a partir de HA aniónico no reticulado de bajo peso molecular, en los que el HA aniónico no reticulado de bajo peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, aproximadamente 100.000 Da, aproximadamente 200.000 Da, aproximadamente 300.000 Da, aproximadamente 400.000 Da, aproximadamente 500.000 Da, aproximadamente 600.000 Da, aproximadamente 700.000 Da, aproximadamente 800.000 Da o aproximadamente 900.000 Da. En aún otros aspectos de esta realización, el HA aniónico no reticulado de bajo peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, como máximo 100.000 Da, como máximo 200.000 Da, como máximo 300.000 Da, como máximo 400.000 Da, como máximo 500.000 Da, como máximo 600.000 Da, como máximo 700.000 Da, como máximo 800.000 Da, como máximo 900.000 Da o como máximo 950.000. En todavía otros aspectos de esta realización, e1HA no reticulado de bajo peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, de aproximadamente 100.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 200.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 400.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 500.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 600.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 700.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 800.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 600.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 700.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 800.000 Da o de aproximadamente 400.000 Da a aproximadamente 700.000 Da.

En otra realización, una composición comprende polisacáridos de HA aniónico no reticulado (tal como HA no reticulado) de alto peso molecular, o comprende polisacáridos de HA aniónico reticulado preparados a partir de HA no reticulado de alto peso molecular, en los que el HA aniónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, aproximadamente 1.000.000 Da, aproximadamente 1.500.000 Da, aproximadamente 2.000.000 Da, aproximadamente 2.500.000 Da, aproximadamente 3.000.000 Da, aproximadamente 3.500.000 Da, aproximadamente 4.000.000 Da, aproximadamente 4.500.000 Da o aproximadamente 5.000.000 Da. En otros aspectos de esta realización, el HA aniónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, al menos 1.000.000 Da, al menos 1.500.000 Da, al menos 2.000.000 Da, al menos 2.500.000 Da, al menos 3.000.000 Da, al menos 3.500.000 Da, al menos 4.000.000 Da, al menos 4.500.000 Da o al menos 5.000. 000 Da. En otros aspectos de esta realización, el HA aniónico no reticulado de alto peso moleculartiene un peso molecular medio de, por ejemplo, de aproximadamente 1.000.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 1.500.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 2.000.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 2.500.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 2.000.000 Da a aproximadamente 3.000.000 Da, de aproximadamente 2.500.000 Da a aproximadamente 3.500.000 Da o de aproximadamente 2.000.000 Da a aproximadamente 4.000.000 Da. En todavía otros aspectos, el HA aniónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 3.000.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 3.500.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 4.000.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 4.500.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 5.000.000 Da.

En otra realización, un relleno dérmico comprende una combinación de polisacáridos de HA aniónico de alto peso molecular y polisacáridos de HA aniónico de bajo peso molecular, en diversas razones; por ejemplo, la razón de HA aniónico de alto peso molecular con respecto a hA aniónico de bajo peso molecular puede ser de aproximadamente 20:1, aproximadamente 15:1, aproximadamente 10:1, aproximadamente 5:1, aproximadamente 1:1, aproximadamente 1:5 aproximadamente 1:10, aproximadamente 1:15 o aproximadamente 1:20. En algunas realizaciones, el polisacárido de HA aniónico de alto peso molecular está reticulado con el polisacárido de HA aniónico de bajo peso molecular en las razones anteriores.

En algunas realizaciones, el polisacárido catiónico del hidrogel coacervado está presente en una cantidad suficiente para tratar un estado de la piel tal como se describe en el presente documento. En otros aspectos de esta realización, una composición comprende un polisacárido catiónico que representa, por ejemplo, aproximadamente el 1% en peso, aproximadamente el 2% en peso, aproximadamente el 3% en peso, aproximadamente el 4% en peso, aproximadamente el 5% en peso, aproximadamente el 6% en peso, aproximadamente el 7% en peso, aproximadamente el 8% en peso, o aproximadamente el 9%, o aproximadamente el 10% en peso, de la composición total. En aún otros aspectos de esta realización, una composición comprende un polisacárido catiónico que representa, por ejemplo, como máximo el 1% en peso, como máximo el 2% en peso, como máximo el 3% en peso, como máximo el 4% en peso, como máximo el 5% en peso, como máximo el 6% en peso, como máximo el 7% en peso, como máximo el 8% en peso, como máximo el 9% en peso, o como máximo el 10% en peso, de la composición total. En otros aspectos de esta realización, una composición comprende un polisacárido catiónico que representa, por ejemplo, de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 20% en peso, de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 17% en peso, de aproximadamente el 3% a aproximadamente el 15% en peso o de aproximadamente el 5% a aproximadamente el 10% en peso, por ejemplo, aproximadamente el 11% en peso, aproximadamente el 15% en peso o aproximadamente el 17% en peso, de la composición total.

En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel comprende un polisacárido catiónico que está presente en una concentración de, por ejemplo, aproximadamente 2 mg/g, aproximadamente 3 mg/g, aproximadamente 4 mg/g, aproximadamente 5 mg/g, aproximadamente 6 mg/g, aproximadamente 7 mg/g, aproximadamente 8 mg/g, aproximadamente 9 mg/g, aproximadamente 10 mg/g, aproximadamente 11 mg/g, aproximadamente 12 mg/g, aproximadamente 13 mg/g, aproximadamente 13,5 mg/g, aproximadamente 14 mg/g, aproximadamente 15 mg/g, aproximadamente 16 mg/g, aproximadamente 17 mg/g, aproximadamente 18 mg/g, aproximadamente 19 mg/g o aproximadamente 20 mg/g. En otros aspectos de esta realización, una composición comprende un polisacárido catiónico que está presente en una concentración de, por ejemplo, al menos 1 mg/g, al menos 2 mg/g, al menos 3 mg/g, al menos 4 mg/g, al menos 5 mg/g, al menos 10 mg/g, al menos 15 mg/g, al menos 20 mg/g o al menos 25 mg/g, o aproximadamente 40 mg/g. En aún otros aspectos de esta realización, una composición comprende un polisacárido catiónico que está presente en una concentración de, por ejemplo, como máximo 1 mg/g, como máximo 2 mg/g, como máximo 3 mg/g, como máximo 4 mg/g. g, como máximo 5 mg/g, como máximo 10 mg/g, como máximo 15 mg/g, como máximo 20 mg/g, como máximo 25 mg/g o como máximo 40 mg/g. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición comprende un polisacárido catiónico que está presente en una concentración de, por ejemplo, de aproximadamente 7,5 mg/g a aproximadamente 19,5 mg/g, de aproximadamente 8,5 mg/g a aproximadamente 18,5 mg/g, de aproximadamente 9,5 mg/g a aproximadamente 17,5 mg/g, de aproximadamente 10,5 mg/g a aproximadamente 16,5 mg/g, de aproximadamente 11,5 mg/g a aproximadamente 15,5 mg/g o de aproximadamente 12,5 mg/g a aproximadamente 14,5 mg/g, o hasta aproximadamente 40 mg/g.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel que comprende un polisacárido catiónico reticulado que tiene un grado de reticulación. Tal como se usa en el presente documento, el término “grado de reticulación” se refiere al porcentaje de unidades monoméricas de polisacárido catiónico, tales como, por ejemplo, las unidades de monómero de disacárido del polisacárido catiónico que están unidas a un agente de reticulación. El grado de reticulación se expresa como la razón en porcentaje en peso del agente de reticulación con respecto al HA catiónico. En algunas realizaciones, los hidrogeles coacervados de la invención comprenden un polisacárido catiónico reticulado que tiene un grado de reticulación de desde aproximadamente el 1% en peso hasta aproximadamente el 15% en peso, desde aproximadamente el 1% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso, desde aproximadamente el 2% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso, desde aproximadamente el 3% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso o desde aproximadamente el 5% en peso hasta aproximadamente el 10% en peso. En otras realizaciones, los hidrogeles coacervados de la invención comprenden un polisacárido catiónico reticulado que tiene un grado de reticulación de menos de aproximadamente el 10%.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel que comprende un polisacárido catiónico no reticulado. Tal como se usa en el presente documento, el término “no reticulado” se refiere a la falta de enlaces intermoleculares que unen las moléculas de polisacárido catiónico individuales, o cadenas de monómeros. Como tal, un polisacárido catiónico no reticulado no está unido a ningún otro polisacárido catiónico mediante un enlace intermolecular covalente. En aspectos de esta realización, una composición de relleno dérmico comprende un polisacárido catiónico no reticulado. En otros aspectos, el relleno dérmico comprende un hidrogel de HA coacervado, en el que el complejo coacervado comprende el polisacárido catiónico no reticulado.

Los aspectos de la presente invención proporcionan, en parte, una composición de hidrogel que comprende polisacáridos catiónicos de bajo peso molecular, de alto peso molecular o de bajo y alto peso molecular. Tal como se usa en el presente documento, el término “alto peso molecular”, cuando se refiere a “polisacáridos catiónicos”, se refiere a aquellos que tienen un peso molecular medio de 1.000.000 Da o superior. Los ejemplos no limitativos de polisacáridos catiónicos de alto peso molecular incluyen los de aproximadamente 1.500.000 Da, aproximadamente 2.000. 000 Da, aproximadamente 2.500.000 Da, aproximadamente 3.000.000 Da, aproximadamente 3.500.000 Da, aproximadamente 4.000.000 Da, aproximadamente 4.500.000 Da y aproximadamente 5.000.000 Da. Tal como se usa en el presente documento, el término “bajo peso molecular”, cuando se refiere a “polisacáridos catiónicos”, se refiere a aquellos que tienen un peso molecular medio inferior a 1.000.000 Da. Los ejemplos no limitativos de polisacáridos catiónicos de bajo peso molecular incluyen los de aproximadamente 100.000 Da, aproximadamente 200.000 Da, aproximadamente 300.000 Da, aproximadamente 400.000 Da, aproximadamente 500.000 Da, aproximadamente 600.000 Da, aproximadamente 700.000 Da, aproximadamente 800.000 Da y aproximadamente 900.000 Da.

En una realización, una composición de relleno dérmico comprende polisacáridos catiónicos no reticulados de bajo peso molecular, o polisacáridos catiónicos reticulados preparados a partir de polisacáridos catiónicos no reticulados de bajo peso molecular, en los que el polisacárido catiónico no reticulado de bajo peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, aproximadamente 100.000 Da, aproximadamente 200.000 Da, aproximadamente 300.000 Da, aproximadamente 400.000 Da, aproximadamente 500.000 Da, aproximadamente 600.000 Da, aproximadamente 700.000 Da, aproximadamente 800.000 Da o aproximadamente 900.000 Da. En aún otros aspectos de esta realización, el polisacárido catiónico no reticulado de bajo peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, como máximo 100.000 Da, como máximo 200.000 Da, como máximo 300.000 Da, como máximo 400.000 Da, como máximo 500.000 Da, como máximo 600.000 Da, como máximo 700.000 Da, como máximo 800.000 Da, como máximo 900.000 Da o como máximo 950.000. En todavía otros aspectos de esta realización, el polisacárido catiónico no reticulado de bajo peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, de aproximadamente 100.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 200.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 400.000 Da a aproximadamente 500.000 Da, de aproximadamente 500.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 600.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 700.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 800.000 Da a aproximadamente 950.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 600.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 700.000 Da, de aproximadamente 300.000 Da a aproximadamente 800.000 Da o de aproximadamente 400.000 Da a aproximadamente 700.000 Da.

En otra realización, una composición comprende polisacáridos catiónicos no reticulados de alto peso molecular, o polisacáridos catiónicos reticulados preparados a partir de polisacáridos catiónicos no reticulados de alto peso molecular, en los que el polisacárido catiónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, aproximadamente 1.000.000 Da, aproximadamente 1.500.000 Da, aproximadamente 2.000.000 Da, aproximadamente 2.500.000 Da, aproximadamente 3.000.000 Da, aproximadamente 3.500.000 Da, aproximadamente 4.000. 000 Da, aproximadamente 4.500.000 Da o aproximadamente 5.000.000 Da. En otros aspectos de esta realización, el polisacárido catiónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, al menos 1.000.000 Da, al menos 1.500.000 Da, al menos 2.000.000 Da, al menos 2.500.000 Da, al menos 3.000. 000 Da, al menos 3.500.000 Da, al menos 4.000.000 Da, al menos 4.500.000 Da o al menos 5.000.000 Da. En aún otros aspectos de esta realización, el polisacárido catiónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, de aproximadamente 1.000.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 1.500.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 2.000.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 2.500.000 Da a aproximadamente 5.000.000 Da, de aproximadamente 2.000.000 Da a aproximadamente 3.000.000 Da, de aproximadamente 2.500.000 Da a aproximadamente 3.500.000 Da o de aproximadamente 2.000.000 Da a aproximadamente 4.000.000 Da. En todavía otros aspectos, el polisacárido catiónico no reticulado de alto peso molecular tiene un peso molecular medio de, por ejemplo, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 3.000.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 3.500.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 4.000.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 4.500.000 Da, más de 2.000.000 Da y menos de aproximadamente 5.000.000 Da.

En otra realización, un relleno dérmico comprende una combinación de polisacáridos catiónicos de alto peso molecular y polisacáridos catiónicos de bajo peso molecular, en diversas razones. En aspectos de esta realización, un relleno dérmico comprende una combinación de polisacáridos catiónicos de alto peso molecular y de bajo peso molecular en una razón de aproximadamente 20:1, aproximadamente 15:1, aproximadamente 10:1, aproximadamente 5:1, aproximadamente 1:1, aproximadamente 1:5, aproximadamente 1:10, aproximadamente 1:15 o aproximadamente 1:20. En algunas realizaciones, el polisacárido catiónico de alto peso molecular está reticulado con el polisacárido catiónico de bajo peso molecular en las razones anteriores.

Una composición de relleno dérmico o un hidrogel de HA coacervado divulgados en el presente documento puede comprender además otro agente o una combinación de agentes que proporcionen un efecto beneficioso cuando la composición se administra a un individuo. Tales agentes beneficiosos incluyen, sin limitación, agentes cosméticos u otros componentes. Los ejemplos no limitativos de tales agentes beneficiosos incluyen un antioxidante, un agente antipruriginoso, un agente anticelulítico, un agente anticicatrices, un agente antiinflamatorio, un agente anestésico, un agente antiirritante, un agente de descamación, un agente tensor, un agente antiacné, un agente de aclaramiento de la piel, un agente de pigmentación, un agente antipigmentación, un agente hidratante o una vitamina. En algunas realizaciones, el agente se añade y se atrapa dentro del coacervado sin modificación del agente, proporcionando así medios para liberar lentamente y administrar el agente. Una ventaja significativa de este enfoque es que incorpora los

agentes beneficiosos sin reticularlos con el complejo de gel de HA coacervado, de modo que los componentes pueden

capturarse en su estado nativo con una tasa de liberación ajustada controlada por la densidad, la tasa de difusión, la

tasa de degradación y/o las propiedades reológicas del gel coacervado de HA. En algunas realizaciones, el agente

forma interacciones iónicas o electrostáticas con uno o más polisacáridos del hidrogel de HA coacervado. En algunas

realizaciones, la liberación del agente está controlada por las interacciones iónicas o electrostáticas entre el agente y

uno o más de los polisacáridos de HA coacervados. En una realización adicional, el complejo de HA coacervado se

ajusta para una liberación más rápida o más lenta del agente; por ejemplo, el número, la identidad y/o los valores de

pKa de los polisacáridos del complejo de HA coacervado pueden ajustarse para una liberación más rápida o más lenta

del agente. El perfil de liberación puede ser de días, semanas, meses o incluso más prolongado para lograr los

beneficios deseables.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de relleno dérmico que

puede comprender opcionalmente un agente anestésico o una sal del mismo. Un agente anestésico es preferiblemente

un agente anestésico local, es decir, un agente anestésico que provoca una anestesia local reversible y una pérdida

de nocicepción, tal como, por ejemplo, anestésicos locales de aminoamida y anestésicos locales de aminoéster. La

cantidad de un agente anestésico incluido en una composición divulgada en el presente documento es una cantidad

eficaz para mitigar el dolor experimentado por un individuo tras la administración de la composición de relleno dérmico.

Como tal, la cantidad de un agente anestésico incluido en una composición de relleno dérmico divulgada en la presente

memoria descriptiva está entre aproximadamente el 0,1% y aproximadamente el 5% en peso de la composición total.

Los ejemplos no limitativos de agentes anestésicos incluyen lidocaína, ambucaína, amolanona, amilocaína,

benoxinato, benzocaína, betoxicaína, bifenamina, bupivacaína, butacaína, butambén, butanilicaína, butetamina,

butoxicaína, carticaína, clroprocaína, cocaetileno, cocaína, ciclometicaína, dibucaína, dimetisoquina, dimetocaína,

diperodón, diciclonina, ecgonidina, ecgonina, cloruro de etilo, etidocaína, beta-eucaína, euprocina, fenalcomina,

formocaína, hexilcaína, hidroxitetracaína, p-aminobenzoato de isobutilo, mesilato de leucinocaína, levoxadrol,

lidocaína, mepivacaína, meprilcaína, metabutoxicaína, cloruro de metilo, mirtecaína, naepaína, octacaína, ortocaína,

oxetazaína, paretoxicaína, fenacaína, fenol, piperocaína, piridocaína, polidocanol, pramoxina, prilocaína, procaína,

propanocaína, proparacaína, propipocaína, propoxicaína, pseudocaína, pirrocaína, ropivacaína, alcohol salicílico,

tetracaína, tolicaína, trimecaína, zolamina, combinaciones de los mismos y sales de los mismos. Los ejemplos no

limitativos de anestésicos locales de aminoéster incluyen procaína, cloroprocaína, cocaína, ciclometicaína,

cimetocaína (larocaína), propoxicaína, procaína (novocaína), proparacaína, tetracaína (ametocaína). Los ejemplos no

limitativos de anestésicos locales de aminoamida incluyen articaína, bupivacaína, cincocaína (dibucaína), etidocaína,

levobupivacaína, lidocaína (lignocaína), mepivacaína, piperocaína, prilocaína, ropivacaína y trimecaína. Una

composición divulgada en el presente documento puede comprender un único agente anestésico o una pluralidad de

agentes anestésicos. Un ejemplo no limitativo de un anestésico local de combinación es lidocaína/prilocaína (EMLA).

En otros aspectos de esta realización, una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento

comprende un agente anestésico en una cantidad de, por ejemplo, aproximadamente el 0,1%, aproximadamente el

0,2%, aproximadamente el 0,3%, aproximadamente el 0,4%, aproximadamente el 0,5%, aproximadamente el 0,6%,

aproximadamente el 0,7%, aproximadamente el 0,8% aproximadamente el 0,9%, aproximadamente el 1,0%,

aproximadamente el 2,0%, aproximadamente el 3,0%, aproximadamente el 4,0%, aproximadamente el 5,0%,

aproximadamente el 6,0%, aproximadamente el 7,0%, aproximadamente el 8,0%, aproximadamente el 9,0% o

aproximadamente el 10% en peso de la composición total. En aún otros aspectos, una composición divulgada en el

presente documento comprende un agente anestésico en una cantidad de, por ejemplo, al menos el 0,1%, al menos

el 0,2%, al menos el 0,3%, al menos el 0,4%, al menos el 0,5%, al menos el 0,6%, al menos el 0,7%, al menos el

0,8%, al menos el 0,9%, al menos el 1,0%, al menos el 2,0%, al menos el 3,0%, al menos el 4,0%, al menos el 5,0%,

al menos el 6,0%, al menos el 7,0%, al menos al menos el 8,0%, al menos el 9,0% o al menos el 10% en peso de la

composición total. En aún otros aspectos, una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento

comprende un agente anestésico en una cantidad de, por ejemplo, como máximo el 0,1%, como máximo el 0,2%,

como máximo el 0,3%, como máximo el 0,4%, como máximo el 0,5%, como máximo el 0,6 %, máximo el 0,7%, como

máximo el 0,8%, como máximo el 0,9%, como máximo el 1,0%, como máximo el 2,0%, como máximo el 3,0%, como

máximo el 4,0%, como máximo el 5,0%, como máximo el 6,0%, como máximo el 7,0%, como máximo el 8,0%, como

máximo el 9,0% o como máximo el 10% en peso de la composición total. En aspectos adicionales, una composición

de relleno dérmico divulgada en el presente documento comprende un agente anestésico en una cantidad de, por

ejemplo, de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 0,5%, de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente

el 1,0%, de aproximadamente el 0,1% a aproximadamente el 2,0%, de aproximadamente el 0,1% a aproximada el 3,0%, de aproximadamente el 0,1%

aproximadamente el 4,0%, de aproximadamente el 0,1% a aproximada el 5,0%, de aproximadamente el 0,2%

aproximadamente el 0,9%, de aproximadamente el 0,2% a aproximada el 1,0%, de aproximadamente el 0,2% a aproximadamente el 2,0%, de aproximadamente el 0,5% a aproximada el 1,0% o de aproximadamente el 0,5% a aproximadamente el 2,0% en peso de la composición total.

En otra realización, un relleno dérmico divulgado en el presente documento no comprende ningún agente anestésico.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel de HA

coacervado que presenta un módulo complejo, un módulo elástico, un módulo viscoso y/o una tan ⁸. Las

composiciones tal como se divulgan en el presente documento son viscoelásticas en el sentido de que la composición

tiene un componente elástico (de tipo sólido tal como, por ejemplo, polisacáridos de HA aniónico o catiónico reticulado) y un componente viscoso (de tipo líquido tal como, por ejemplo, polisacáridos de HA no reticulado o una fase portadora) cuando se aplica una fuerza (tensión, deformación). El atributo reológico que describe esta propiedad es el módulo complejo (G*), que define la resistencia total a la deformación de una composición. El módulo complejo es un número complejo con una parte real e imaginaria: G* = G'+ iG”. El valor absoluto de G* es Abs(G*) = raíz cuadrada de (G'2 G”2). El módulo complejo puede definirse como la suma del módulo elástico (G') y el módulo viscoso (G”). Falcone, et al., Temporary Polysaccharide Dermal Fillers: A Model for Persistence Based on Physical Properties, Dermatol Surg.

35(8): 1238-1243 (2009), que se incorpora en el presente documento como referencia en su totalidad.

El módulo elástico, o módulo de elasticidad, se refiere a la capacidad de un material de hidrogel para resistir a la deformación o, a la inversa, la tendencia de un objeto a deformarse de manera no permanente cuando se le aplica una fuerza. El módulo elástico caracteriza la firmeza de una composición y también se conoce como módulo de almacenamiento porque describe el almacenamiento de energía del movimiento de la composición. El módulo elástico describe la interacción entre la elasticidad y la resistencia (G'= tensión/deformación) y, como tal, proporciona una medida cuantitativa de la dureza o blandura de una composición. El módulo elástico de un objeto se define como la pendiente de su curva de tensión-deformación en la región de deformación elástica: X = tensión/deformación, en la que X es el módulo elástico en Pascales; la tensión es la fuerza que provoca la deformación dividida entre el área a la que se aplica la fuerza; y la deformación es la razón del cambio provocado por la tensión con respecto estado original del objeto. Aunque dependiendo de la velocidad a la que se aplique la fuerza, una composición más rígida tendrá un módulo elástico más alto y requerirá una fuerza mayor para deformar el material a una distancia determinada, tal como, por ejemplo, una inyección. Especificar cómo se medirán las tensiones, incluyendo las direcciones, permite definir muchos tipos de módulos elásticos. Los tres módulos elásticos primarios son el módulo de tracción, el módulo de cizalladura y el módulo de compresibilidad.

El módulo viscoso también se conoce como módulo de pérdida porque describe la energía que se pierde como disipación viscosa. Tan 8 es la razón del módulo viscoso con respecto al módulo elástico, tan 8 = G”/G'. Falcone, anteriormente, 2009. Para los valores de tan 8 divulgados en la presente memoria descriptiva, se obtiene una tan 8 a partir del módulo dinámico a una frecuencia de 1 Hz. Una tan 8 más baja corresponde a una composición más rígida, más dura o más elástica.

En otra realización, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento presenta un módulo elástico de, por ejemplo, aproximadamente 25 Pa, aproximadamente 50 Pa, aproximadamente 75 Pa, aproximadamente 100 Pa, aproximadamente 125 Pa, aproximadamente 150 Pa, aproximadamente 175 Pa, aproximadamente 200 Pa, aproximadamente 250 Pa, aproximadamente 300 Pa, aproximadamente 350 Pa, aproximadamente 400 Pa, aproximadamente 450 Pa, aproximadamente 500 Pa, aproximadamente 550 Pa, aproximadamente 600 Pa, aproximadamente 650 Pa, aproximadamente 700 Pa, aproximadamente 750 Pa, aproximadamente 800 Pa, aproximadamente 850 Pa, aproximadamente 900 Pa, aproximadamente 950 Pa, aproximadamente 1.000 Pa, aproximadamente 1.200 Pa, aproximadamente 1.300 Pa, aproximadamente 1.400 Pa, aproximadamente 1.450 Pa, aproximadamente 1.500 Pa, aproximadamente 1.600 Pa, aproximadamente 1.700 Pa, aproximadamente 1.800 Pa, aproximadamente 1.900 Pa, aproximadamente 2.000 Pa, aproximadamente 2.100 Pa, aproximadamente 2.200 Pa, aproximadamente 2.300 Pa, aproximadamente 2.400 Pa, aproximadamente 2.500 Pa, aproximadamente 3.000 Pa, aproximadamente 4.000 Pa, aproximadamente 5.000 Pa, aproximadamente 6.000 Pa, aproximadamente 7.000 Pa, aproximadamente 8.000 Pa, aproximadamente 9.000 Pa o aproximadamente 10.000 Pa. En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta un módulo elástico de, por ejemplo, al menos 25 Pa, al menos 50 Pa, al menos 75 Pa, al menos 100 Pa, al menos 125 Pa, al menos 150 Pa, al menos 175 Pa, al menos 200 Pa, al menos 250 Pa, al menos 300 Pa, al menos 350 Pa, al menos 400 Pa, al menos 450 Pa, al menos 500 Pa, al menos 550 Pa, al menos 600 Pa, al menos 650 Pa, al menos 700 Pa, al menos 750 Pa, al menos 800 Pa, al menos 850 Pa, al menos 900 Pa, al menos 950 Pa, al menos 1.000 Pa, al menos 1.200 Pa, al menos 1.300 Pa, al menos 1.400 Pa, al menos 1.500 Pa, al menos 1.600 Pa, al menos 1.700 Pa, al menos 1.800 Pa, al menos 1.900 Pa, al menos 2.000 Pa, al menos 2.100 Pa, al menos 2.200 Pa, al menos 2.300 Pa, al menos 2.400 Pa o al menos 2.500 Pa. En aún otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta un módulo elástico de, por ejemplo, como máximo 25 Pa, como máximo 50 Pa, como máximo 75 Pa, como máximo 100 Pa, como máximo 125 Pa, como máximo 150 Pa, como máximo 175 Pa, como máximo 200 Pa, como máximo 250 Pa, como máximo 300 Pa, como máximo 350 Pa, como máximo 400 Pa, como máximo 450 Pa, como máximo 500 Pa, como máximo 550 Pa, como máximo 600 Pa, como máximo 650 Pa, como máximo 700 Pa, como máximo 750 Pa, como máximo 800 Pa, como máximo 850 Pa, como máximo 900 Pa, como máximo 950 Pa, como máximo 1.000 Pa, como máximo 1.200 Pa, como máximo 1.300 Pa, como máximo 1.400 Pa, como máximo 1.500 Pa o como máximo 1.600 Pa. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta un módulo elástico de, por ejemplo, de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 150 Pa, de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 300 Pa, de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 500 Pa, de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 800 Pa, de aproximadamente 125 Pa a aproximadamente 300 Pa, de aproximadamente 125 Pa a aproximadamente 500 Pa, de aproximadamente 125 Pa a aproximadamente 800 Pa, de aproximadamente 400 a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 600 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 700 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 800 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 900 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 1.000 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 1.100 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 1.200 Pa a

aproximadamente 1.600 Pa, de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 2.500 Pa, de aproximadamente 1.000

Pa a aproximadamente 2.500 Pa, de aproximadamente 1.500 Pa a aproximadamente 2.500 Pa, de aproximadamente

2.000 Pa a aproximadamente 2.500 Pa, de aproximadamente 1.300 Pa a aproximadamente 1.600 Pa, de

aproximadamente 1.400 Pa a aproximadamente 1.700 Pa, de aproximadamente 1.500 Pa a aproximadamente 1.800

Pa, de aproximadamente 1.600 Pa a aproximadamente 1.900 Pa, de aproximadamente 1.700 Pa a aproximadamente

2.000 Pa, de aproximadamente 1.800 Pa a aproximadamente 2.100 Pa, de aproximadamente 1.900 Pa a

aproximadamente 2.200 Pa, de aproximadamente 2.000 Pa a aproximadamente 2.300 Pa, de aproximadamente 2.100

Pa a aproximadamente 2.400 Pa o de aproximadamente 2.200 Pa a aproximadamente 2.500 Pa. En todavía otros

aspectos, se proporciona una composición de hidrogel que presenta un módulo elástico de, por ejemplo, de

aproximadamente 50 Pa a aproximadamente 5.000 Pa, de aproximadamente 100 Pa a aproximadamente 5.000 Pa,

de aproximadamente 100 a aproximadamente 4.000 Pa, de aproximadamente 100 a aproximadamente 3.000 Pa, de

aproximadamente 100 a aproximadamente 2.000 Pa o de aproximadamente 100 a aproximadamente 1.000 Pa, o de

aproximadamente 500 Pa. En todavía otros aspectos, se proporciona una composición de hidrogel que presenta un

módulo elástico de, por ejemplo, de aproximadamente 20 Pa a aproximadamente 3.000 Pa, de aproximadamente

20 Pa a aproximadamente 2.000 Pa, de aproximadamente 20 a aproximadamente 1.000 Pa, de aproximadamente 50

a aproximadamente 3.000 Pa, de aproximadamente 50 a aproximadamente 2.000 Pa o de aproximadamente 50 a

aproximadamente 1.000 Pa.

En una realización adicional, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento presenta un alto

módulo elástico (alto módulo de almacenamiento (G')) de, por ejemplo, al menos aproximadamente 500 Pa.

En otra realización, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento presenta un

módulo viscoso. En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta un módulo viscoso de, por

ejemplo, aproximadamente 10 Pa, aproximadamente 20 Pa, aproximadamente 30 Pa, aproximadamente 40 Pa,

aproximadamente 50 Pa, aproximadamente 60 Pa, aproximadamente 70 Pa, aproximadamente 80 Pa,

aproximadamente 90 Pa, aproximadamente 100 Pa, aproximadamente 150 Pa, aproximadamente 200 Pa,

aproximadamente 250 Pa, aproximadamente 300 Pa, aproximadamente 350 Pa, aproximadamente 400 Pa,

aproximadamente 450 Pa, aproximadamente 500 Pa, aproximadamente 550 Pa, aproximadamente 600 Pa,

aproximadamente 650 Pa o aproximadamente 700 Pa. En otros aspectos de esta realización, una composición de

hidrogel presenta un módulo viscoso de, por ejemplo, como máximo 10 Pa, como máximo 20 Pa, como máximo 30 Pa,

como máximo 40 Pa, como máximo 50 Pa, como máximo como máximo 60 Pa, como máximo 70 Pa, como máximo

80 Pa, como máximo 90 Pa, como máximo 100 Pa, como máximo 150 Pa, como máximo 200 Pa, como máximo 250

Pa, como máximo 300 Pa, como máximo 350 Pa, como máximo como máximo 400 Pa, como máximo 450 Pa, como

máximo 500 Pa, como máximo 550 Pa, como máximo 600 Pa, como máximo 650 Pa o como máximo 700 Pa. En aún

otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta un módulo viscoso de, por ejemplo, de

aproximadamente 10 Pa a aproximadamente 30 Pa, de aproximadamente 10 Pa a aproximadamente 50 Pa, de

aproximadamente 10 Pa a aproximadamente 100 Pa, de aproximadamente 10 Pa a aproxim

aproximadamente 70 Pa a aproximadamente 100 Pa, de aproximadamente 50 Pa a aproxim

aproximadamente 150 Pa a aproximadamente 450 Pa, de aproximadamente 250 Pa a aproxim

aproximadamente 350 Pa a aproximadamente 700 Pa, de aproximadamente 50 Pa a aproxim

aproximadamente 100 Pa a aproximadamente 200 Pa, de aproximadamente 150 ente 250 Pa, d aproximadamente 200 Pa a aproximadamente 300 Pa, de aproximadamente 250 ente 350 Pa, d aproximadamente 300 Pa a aproximadamente 400 Pa, de aproximadamente 350 ente 450 Pa, d aproximadamente 400 Pa a aproximadamente 500 Pa, de aproximadamente 450

ente 550 Pa, d aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 600 Pa, de aproximadamente 550 Pa a aproxima

aproximadamente 600 Pa a aproximadamente 700 Pa.

En otra realización, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento muestra una

tan ⁸. En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una tan ⁸de, por ejemplo,

aproximadamente 0,1, aproximadamente 0,2, aproximadamente 0,3, aproximadamente 0,4, aproximadamente 0,5,

aproximadamente 0,6, aproximadamente 0,7, aproximadamente 0,8, aproximadamente 0,9, aproximadamente 1,0,

aproximadamente 1,1, aproximadamente 1,2, aproximadamente 1,3, aproximadamente 1,4, aproximadamente 1,5,

aproximadamente 1,6, aproximadamente 1,7, aproximadamente 1,8, aproximadamente 1,9, aproximadamente 2,0,

aproximadamente 2,1, aproximadamente 2,2, aproximadamente 2,3, aproximadamente 2,4 o aproximadamente 2,5.

En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una tan ⁸de, por ejemplo, como máximo

0,1, como máximo 0,2, como máximo 0,3, como máximo 0,4, como máximo 0,5, como máximo 0,6, como máximo 0,7,

como máximo 0,8, como máximo 0,9, como máximo 1,0, como máximo 1,1, como máximo 1,2, como máximo 1,3,

como máximo 1,4, como máximo 1,5, como máximo 1,6, como máximo 1,7, como máximo 1,8, como máximo 1,9,

como máximo 2,0, como máximo 2,1, como máximo 2,2, como máximo 2,3, como máximo 2,4 o como máximo 2,5. En

aún otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una tan ⁸de, por ejemplo, de

aproximadamente 0,1 a aproximadamente 0,3, de aproximadamente 0,3 a aproximadamente 0,5, de

aproximadamente 0,5 a aproximadamente 0,8, de aproximadamente 1,1 a aproximadamente 1,4, de

aproximadamente 1,4 a aproximadamente 1,7, de aproximadamente 0,3 a aproximadamente 0,6, de

aproximadamente 0,1 a aproximadamente 0,5, de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 0,9, de

aproximadamente 0,1 a aproximadamente 0,6, de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 1,0, de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 1,5, de aproximadamente 1,0 a aproximadamente 2,0 o de aproximadamente 1,5 a aproximadamente 2,5.

Una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento puede procesarse adicionalmente pulverizando el hidrogel en partículas y, opcionalmente, mezclarse con una fase portadora, tal como un portador farmacéuticamente aceptable tal como, por ejemplo, agua, una solución salina (incluyendo PBS), glicerol y/o HA no reticulado, para formar una sustancia inyectable o tópica como una disolución, un aceite, una loción, un gel, una pomada, una crema, una suspensión, un bálsamo o una pasta. Como tal, las composiciones de hidrogel de HA coacervado divulgadas pueden ser composiciones monofásicas o multifásicas. Un hidrogel de HA coacevado puede triturarse hasta un tamaño de partícula de desde aproximadamente 10 |im hasta aproximadamente 1.000 |im de diámetro, tal como de aproximadamente 15 |im a aproximadamente 30 |im, de aproximadamente 50 |im a aproximadamente 75 |im, de aproximadamente 100 |im a aproximadamente 150 |im, de aproximadamente 200 |im a aproximadamente 300 |im, de aproximadamente 450 |im a aproximadamente 550 |im, de aproximadamente 600 |im a aproximadamente 700 |im, de aproximadamente 750 |im a aproximadamente 850 |im o de aproximadamente 900 |im a aproximadamente 1.000 |im. Las partículas pueden procesarse adicionalmente mediante homogeneización o dimensionamiento a través de un tamiz poroso fino.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición divulgada en el presente documento que es inyectable. Tal como se usa en el presente documento, el término “ inyectable” se refiere a un material que tiene las propiedades necesarias para administrar la composición en la piel u otro tejido blando de un individuo usando un dispositivo de inyección con una aguja, tal como una aguja fina. Tal como se usa en el presente documento, el término “aguja fina” se refiere a una aguja de calibre 27 o superior (en la que un calibre superior indica un diámetro exterior más pequeño). La inyectabilidad de una composición divulgada en el presente documento puede lograrse dimensionando las partículas de hidrogel tal como se comentó anteriormente. En algunas realizaciones, la inyectabilidad de una composición divulgada en el presente documento puede lograrse sin procesamiento adicional del hidrogel mediante homogeneización o dimensionamiento a través de un tamiz poroso fino.

En un aspecto de esta realización, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento es inyectable a través de una aguja fina. En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento es inyectable a través de una aguja de, por ejemplo, calibre 18, calibre 19, calibre 20, calibre 21, calibre 22, calibre 23, calibre 24, calibre 25, calibre 26, calibre 27, calibre 28, calibre 29, calibre 30, calibre 31 o calibre 32. En aún otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento es inyectable a través de una aguja de, por ejemplo, al menos calibre 21, al menos calibre 25, al menos calibre 27, al menos calibre 30 o al menos calibre 32. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento es inyectable a través de una aguja de, por ejemplo, de calibre 18 a calibre 35, de calibre 18 a calibre 25, de calibre 21 a calibre 35, de calibre 21 a calibre 34, de calibre 21 a 33 calibre, de calibre 21 a calibre 32, de calibre 21 a calibre 27 o de calibre 27 a calibre 32.

En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento puede inyectarse con una fuerza de extrusión de aproximadamente 60 N, aproximadamente 55 N, aproximadamente 50 N, aproximadamente 45 N, aproximadamente 40 N, aproximadamente 35 N, aproximadamente 30 N, aproximadamente 25 N, aproximadamente 20 N o aproximadamente 15 N a velocidades de 100 mm/min. En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede inyectarse a través de una aguja de calibre 27 con una fuerza de extrusión de aproximadamente 60 N o menos, aproximadamente 55 N o menos, aproximadamente 50 N o menos, aproximadamente 45 N o menos, aproximadamente 40 N o menos, aproximadamente 35 N o menos, aproximadamente 30 N o menos, aproximadamente 25 N o menos, aproximadamente 20 N o menos, aproximadamente 15 N o menos, aproximadamente 10 N o menos o aproximadamente 5 N o menos. En aún otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede inyectarse a través de una aguja de calibre 30 con una fuerza de extrusión de aproximadamente 60 N o menos, aproximadamente 55 N o menos, aproximadamente 50 N o menos, aproximadamente 45 N o menos, aproximadamente 40 N o menos, aproximadamente 35 N o menos, aproximadamente 30 N o menos, aproximadamente 25 N o menos, aproximadamente 20 N o menos, aproximadamente 15 N o menos, aproximadamente 10 N o menos o aproximadamente 5 N o menos. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede inyectarse a través de una aguja de calibre 32 con una fuerza de extrusión de aproximadamente 60 N o menos, aproximadamente 55 N o menos, aproximadamente 50 N o menos, aproximadamente 45 N o menos, aproximadamente 40 N o menos, aproximadamente 35 N o menos, aproximadamente 30 N o menos, aproximadamente 25 N o menos, aproximadamente 20 N o menos, aproximadamente 15 N o menos, aproximadamente 10 N o menos o aproximadamente 5 N o menos.

Los aspectos de la presente invención proporcionan, en parte, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento que presenta cohesividad. La cohesividad, también denominada atracción cohesiva, fuerza cohesiva o fuerza de compresión, es una propiedad física de un material provocada por la atracción intermolecular entre moléculas similares dentro del material que actúa para unir las moléculas. La cohesividad se expresa en cuanto a gramos-fuerza (gmf). La cohesividad se ve afectada, entre otros factores, por la razón de peso molecular del polisacárido de HA libre inicial, el grado de reticulación de los polisacáridos de HA, la cantidad de polisacáridos de HA libres residuales después de la reticulación y el pH de la composición de hidrogel. Una composición debe ser lo suficientemente cohesiva como para permanecer localizada en un sitio de administración. Además, en determinadas aplicaciones, una cohesividad suficiente es importante para que una composición conserve su forma y, por tanto, su funcionalidad, en caso de ciclos de carga mecánica. Como tal, en una realización, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento muestra cohesividad, a la par del agua. En aún otra realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento presenta suficiente cohesividad como para permanecer localizada en un sitio de administración. En todavía otra realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento presenta suficiente cohesividad como para conservar su forma. En una realización adicional, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento presenta suficiente cohesividad como para conservar su forma y funcionalidad.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento que presenta una osmolaridad fisiológicamente aceptable. Tal como se usa en el presente documento, el término “osmolaridad” se refiere a la concentración de solutos osmóticamente activos en disolución. Tal como se usa en el presente documento, el término “una osmolaridad fisiológicamente aceptable” se refiere a una osmolaridad según, o característica de, el funcionamiento normal de un organismo vivo. Como tal, la administración de una composición de hidrogel tal como se divulga en el presente documento presenta una osmolaridad que sustancialmente no tiene ningún efecto perjudicial permanente o a largo plazo cuando se administra a un mamífero. La osmolaridad se expresa en cuanto a osmoles de soluto osmóticamente activo por litro de disolvente (Osmol/l u Osm/l). La osmolaridad es distinta de la molaridad porque mide moles de partículas de soluto osmóticamente activo en lugar de moles de soluto. La distinción surge porque algunos compuestos pueden disociarse en disolución, mientras que otros no. La osmolaridad de una disolución puede calcularse a partir de la siguiente expresión: Osmol/l = ^i Ci, en la que 9 es el coeficiente osmótico, que representa el grado de no idealidad de la solución; ^ es el número de partículas (por ejemplo, iones) en las que se disocia una molécula; y C es la concentración molar del soluto; e i es el índice que representa la identidad de un soluto particular. La osmolaridad de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede medirse usando un método convencional que mide disoluciones.

En una realización, una composición de hidrogel de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento presenta una osmolaridad fisiológicamente aceptable. En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una osmolaridad de, por ejemplo, aproximadamente 100 mOsm/l, aproximadamente 150 mOsm/l, aproximadamente 200 mOsm/l, aproximadamente 250 mOsm/l, aproximadamente 300 mOsm/l, aproximadamente 350 mOsm/l, aproximadamente 400 mOsm/l, aproximadamente 450 mOsm/l o aproximadamente 500 mOsm/l. En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una osmolaridad de, por ejemplo, al menos 100 mOsm/l, al menos 150 mOsm/l, al menos 200 mOsm/l, al menos 250 mOsm/l, al menos 300 mOsm/l, al menos 350 mOsm/l, al menos 400 mOsm/l, al menos 450 mOsm/l o al menos 500 mOsm/l. En aún otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una osmolaridad de, por ejemplo, como máximo 100 mOsm/l, como máximo 150 mOsm/l, como máximo 200 mOsm/l, como máximo 250 mOsm/l, como máximo 300 mOsm/l, como máximo 350 mOsm/l, como máximo 400 mOsm/l, como máximo 450 mOsm/l o como máximo 500 mOsm/l. En todavía otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel presenta una osmolaridad de, por ejemplo, de aproximadamente 100 mOsm/l a aproximadamente 500 mOsm/l, de aproximadamente 200 mOsm/l a aproximadamente 500 mOsm/l, de aproximadamente 200 mOsm/l a aproximadamente 400 mOsm/l, de aproximadamente 300 mOsm/l a aproximadamente 400 mOsm/l, de aproximadamente 270 mOsm/l a aproximadamente 390 mOsm/l, de aproximadamente 225 mOsm/l a aproximadamente 350 mOsm/l, de aproximadamente 250 mOsm/l a aproximadamente 325 mOsm/l, de aproximadamente 275 mOsm/l a aproximadamente 300 mOsm/l o de aproximadamente 285 mOsm/l a aproximadamente 290 mOsm/l.

Los aspectos de la presente invención proporcionan, en parte, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento que presenta una estabilidad sustancial. Tal como se usa en el presente documento, el término “estabilidad” o “estable”, cuando se refiere a una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, se refiere a una composición que no es propensa a degradarse, descomponerse o romperse en ningún grado sustancial o significativo mientras se almacena antes de la administración a un individuo. Tal como se usa en el presente documento, el término “estabilidad térmica sustancial”, “sustancialmente estable al calor”, “estable a la esterilización en autoclave” o “estable a la esterilización por vapor” se refiere a una composición de hidrogel divulgada en el presente documento que es sustancialmente estable cuando se somete a un tratamiento térmico tal como se divulga en el presente documento.

La estabilidad de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento (incluyendo las composiciones de hidrogel que comprenden además cualquier agente o aditivo divulgado en el presente documento) puede determinarse sometiendo una composición de hidrogel a un tratamiento térmico tal como, por ejemplo, esterilización por vapor a presión normal o a presión (por ejemplo, esterilización en autoclave). Preferiblemente, el tratamiento térmico se lleva a cabo a una temperatura de al menos aproximadamente 100°C durante entre aproximadamente un minuto y aproximadamente 10 minutos. La estabilidad sustancial de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede evaluarse 1) determinando el cambio en la fuerza de extrusión (^AF) de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento después de la esterilización, donde el cambio en la fuerza de extrusión de menos de 2 N es indicativo de una composición de hidrogel sustancialmente estable tal como se mide por (la fuerza de extrusión de una composición de hidrogel con los agentes y/o aditivos especificados) menos (la fuerza de extrusión de una composición de hidrogel sin los agentes y/o aditivos añadidos); y/o 2) determinando el cambio en las propiedades reológicas de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento después de la esterilización, donde el cambio en tan ⁸1 Hz de menos de 0,1 es indicativo de una composición de hidrogel sustancialmente estable tal como se mide por (tan ⁸1 Hz de la formulación de gel con agentes y/o aditivos) menos (tan ⁸1 Hz de la formulación de gel sin agentes y/o aditivos). Como tal, una composición de hidrogel sustancialmente estable divulgada en el presente documento conserva una o más de las siguientes características después de la esterilización: homogeneidad, fuerza de extrusión, cohesividad, concentración de HA aniónico, concentración de polisacárido catiónico, concentración de agente o aditivo, osmolaridad, pH u otras características reológicas deseadas por el hidrogel antes del tratamiento térmico.

En una realización, un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento se procesa usando un tratamiento térmico que mantiene las propiedades de hidrogel deseadas divulgadas en el presente documento. En aspectos de esta realización, un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento se procesa usando un tratamiento térmico de, por ejemplo, aproximadamente 100°C, aproximadamente 105°C, aproximadamente 110°C, aproximadamente 115°C, aproximadamente 120°C, aproximadamente 125°C o aproximadamente 130°C. En otros aspectos de esta realización, un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento se procesa usando un tratamiento térmico de, por ejemplo, al menos 100°C, al menos 105°C, al menos 110°C, al menos 115°C, al menos 120°C, al menos 125°C o al menos 130°C. En aún otros aspectos de esta realización, un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento se procesa usando un tratamiento térmico de, por ejemplo, de aproximadamente aproximadamente 120°C, de aproximadamente 100°C a aproximadamente 125°C, de aproximadamente aproximadamente 130°C, de aproximadamente 100°C a aproximadamente 135°C, de aproximadamente aproximadamente 120°C, de aproximadamente 110°C a aproximadamente 125°C, de aproximadamente aproximadamente 130°C, de aproximadamente 110°C a aproximadamente 135°C, de aproximadamente

aproximadamente 125°C, de aproximadamente 120°C a aproximadamente 130°C, de aproximadamente

120°C a aproximadamente 135°C, de aproximadamente 125°C a aproximadamente 130°C o de aproximadamente 125°C a aproximadamente 135°C.

La estabilidad a largo plazo de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede determinarse sometiendo un hidrogel de HA coacervado a un tratamiento térmico tal como, por ejemplo, almacenamiento en un entorno a aproximadamente 45°C durante aproximadamente 60 días. La estabilidad a largo plazo de un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento puede evaluarse 1) evaluando la transparencia y el color de una composición de hidrogel después del tratamiento térmico a 45°C, siendo una composición de hidrogel transparente e incolora indicativa de una composición de hidrogel sustancialmente estable; 2) determinando el cambio en la fuerza de extrusión (^AF) de un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento después del tratamiento térmico a 45°C, donde el cambio en la fuerza de extrusión de menos 2 N es indicativo de una composición de hidrogel de HA coacervado sustancialmente estable tal como se mide por (la fuerza de extrusión de una composición de hidrogel antes del tratamiento térmico a 45°C) menos (la fuerza de extrusión de una composición de hidrogel después del tratamiento térmico a 45°C); y/o 3) determinando el cambio en las propiedades reológicas de un hidrogel de HA coacervado divulgado en el presente documento después de la esterilización, donde el cambio en tan ⁸1 Hz de menos de 0,1 es indicativo de una composición de hidrogel de HA coacervado sustancialmente estable tal como se mide por (tan ⁸1 Hz de la formulación de gel antes del tratamiento térmico a 45°C) menos (tan ⁸1 Hz de la formulación de gel después del tratamiento térmico a 45°C). Como tal, la estabilidad a largo plazo de una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento se evalúa mediante la retención de una o más de las siguientes características después del tratamiento térmico a 45°C: transparencia (claridad y translucidez), homogeneidad y cohesividad.

En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel de HA coacervado es sustancialmente estable a temperatura ambiente durante, por ejemplo, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 6 meses, aproximadamente 9 meses, aproximadamente 12 meses, aproximadamente 15 meses, aproximadamente 18 meses, aproximadamente 21 meses, aproximadamente 24 meses, aproximadamente 27 meses, aproximadamente 30 meses, aproximadamente 33 meses o aproximadamente 36 meses. En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel de HA coacervado es sustancialmente estable a temperatura ambiente durante, por ejemplo, al menos 3 meses, al menos 6 meses, al menos 9 meses, al menos 12 meses, al menos 15 meses, al menos 18 meses, al menos 21 meses, al menos 24 meses, al menos 27 meses, al menos 30 meses, al menos 33 meses o al menos 36 meses. En otros aspectos de esta realización, una composición de hidrogel de HA coacervado es sustancialmente estable a temperatura ambiente durante, por ejemplo, de aproximadamente 3 meses a aproximadamente 12 meses, de aproximadamente 3 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 3 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 3 meses a aproximadamente 30 meses, de aproximadamente 3 meses a aproximadamente 36 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 12 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 30 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 36 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 12 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 30 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 36 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 30 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 36 meses, de aproximadamente 18 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 18 meses a aproximadamente 30 meses o de aproximadamente 18 meses a aproximadamente 36 meses.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento que es una composición farmacéuticamente aceptable. Tal como se usa en el presente documento, el término “farmacéuticamente aceptable” significa cualquier composición o entidad molecular que no produce una reacción adversa, alérgica u otra reacción perjudicial o no deseada cuando se administra a un individuo. Una composición de hidrogel de HA coacervado farmacéuticamente aceptable es útil para aplicaciones médicas y veterinarias. Una composición de hidrogel de HA coacervado farmacéuticamente aceptable puede administrarse a un individuo sola o en combinación con otros principios activos, agentes, fármacos u hormonas complementarios. Tal como se usa en el presente documento, “farmacéuticamente aceptable” y “fisiológicamente aceptable” pueden usarse de manera intercambiable.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una composición de hidrogel de HA coacervado tal como se divulga en el presente documento que comprende un excipiente farmacológicamente aceptable. Tal como se usa en el presente documento, el término “excipiente farmacológicamente aceptable” es sinónimo de “excipiente farmacológico” o “excipiente” y se refiere a cualquier excipiente que no tiene sustancialmente un efecto perjudicial permanente o a largo plazo cuando se administra a un mamífero, y abarca compuestos tales como, por ejemplo, un agente estabilizante, un agente de carga, un crioprotector, un lioprotector, un aditivo, un vehículo, un portador, un diluyente o un agente auxiliar. En general, un excipiente se mezcla con un principio activo, o se permite que diluya o encierre el principio activo, y puede ser un agente sólido, semisólido o líquido. También se prevé que una composición farmacéutica tal como se divulga en el presente documento pueda incluir uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables que faciliten el procesamiento de un principio activo para dar composiciones farmacéuticamente aceptables. En la medida en que cualquier excipiente farmacológicamente aceptable no sea incompatible con el principio activo, se contempla su uso en composiciones farmacéuticamente aceptables. Pueden encontrarse ejemplos no limitativos de excipientes farmacológicamente aceptables (incluyendo portadores) en, por ejemplo, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (Howard C. Ansel et al., Eds., Lippincott Williams & Wilkins Publishers, 7a ed. 1999); Remington: The Science and Practice of Pharmacy (Alfonso R. Gennaro ed., Lippincott, Williams & Wilkins, 20a ed. 2000); Goodman & Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics (Joel G. Hardman et al., Eds., McGraw-Hill Professional, 10a ed. 2001); y Handbook of Pharmaceutical Excipients (Raymond C. Rowe et al., APhA Publications, 4a edición 2003).

Tal como se usa en el presente documento, “portador” y “portador aceptable” pueden usarse de manera intercambiable y se refieren a un portador que puede combinarse con el hidrogel divulgado en el presente documento para proporcionar una composición deseada. Los expertos en la técnica reconocerán varios portadores que son bien conocidos para preparar composiciones cosméticas específicas. Los portadores fisiológica y/o farmacéuticamente aceptables incluyen, sin limitación, soluciones salinas, tales como solución salina tamponada con fosfato (PBS), glicerol y HA no reticulado.

Se prevé además que una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento puede incluir opcionalmente, sin limitación, otros componentes farmacéuticamente aceptables, incluyendo, sin limitación, tampones, portadores, conservantes, reguladores de la tonicidad, sales, antioxidantes, agentes de ajuste de la osmolalidad, agentes emulsionantes, agentes humectantes y similares.

Un tampón farmacéuticamente aceptable es un tampón que puede usarse para preparar una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, siempre que la preparación resultante sea farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos no limitativos de tampones farmacéuticamente aceptables incluyen tampones acetato, tampones borato, tampones citrato, soluciones salinas tamponadas neutras, tampones fosfato y soluciones salinas tamponadas fosfato. Los ejemplos no limitativos de concentraciones de tampones fisiológicamente aceptables se encuentran dentro del intervalo de aproximadamente 0,1 mM a aproximadamente 900 mM. El pH de los tampones farmacéuticamente aceptables puede ajustarse, siempre que la preparación resultante sea farmacéuticamente aceptable. Se entiende que pueden usarse ácidos o bases para ajustar el pH de una composición farmacéutica según sea necesario. Los ejemplos no limitativos de pH fisiológicamente aceptable se encuentran dentro del intervalo de aproximadamente pH 5,0 a aproximadamente pH 8,5. Por ejemplo, el pH de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede ser de aproximadamente 5,0 a aproximadamente 8,0, o de aproximadamente 6,5 a aproximadamente 7,5, de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,4 o de aproximadamente 7,1 a aproximadamente 7,3.

Los conservantes farmacéuticamente aceptables incluyen, sin limitación, metabisulfito de sodio, tiosulfato de sodio, acetilcisteína, hidroxianisol butilado e hidroxitolueno butilado. Los conservantes farmacéuticamente aceptables incluyen, sin limitación, cloruro de benzalconio, clorobutanol, timerosal, acetato fenilmercúrico, nitrato fenilmercúrico, una composición de oxicloro estabilizado, tal como, por ejemplo, PURITE® (Allergan, Inc. Irvine, CA) y quelantes, tales como, por ejemplo, DTPA o DTPA-bisamida, DTPA de calcio y CaNaDTPA-bisamida.

Los reguladores de la tonicidad farmacéuticamente aceptables útiles en una composición de hidrogel de HA coacervado divulgada en el presente documento incluyen, sin limitación, sales tales como, por ejemplo, cloruro de sodio y cloruro de potasio; y glicerina. La composición puede proporcionarse como una sal y puede formarse con muchos ácidos, incluyendo, pero sin limitarse a, clorhídrico, sulfúrico, acético, láctico, tartárico, málico, succínico, etc. Las sales tienden a ser más solubles en disolventes acuosos o protónicos que son las correspondientes formas de base libre. Se entiende que estas y otras sustancias conocidas en la técnica de la farmacología pueden incluirse en una composición farmacéutica divulgada en el presente documento. Pueden encontrarse otros ejemplos no limitativos de componentes farmacológicamente aceptables en, por ejemplo, Ansel, anteriormente, (1999); Gennaro, anteriormente, (2000); Hardman, anteriormente, (2001); y Rowe, anteriormente, (2003).

La invención proporciona además métodos generales para preparar hidrogeles de HA coacervados. En algunas realizaciones, los métodos comprenden formar un complejo que comprende interacciones de enlace iónico entre iones de HA aniónico e iones de polisacárido catiónico.

La invención también proporciona métodos para preparar hidrogeles de HA coacervados con diferentes perfiles reológicos, que pueden formarse basándose en el número, la identidad y/o el/los valor(es) de pKa de los aniones y/o cationes de cada uno del HA aniónico y los polisacáridos catiónicos, respectivamente.

En algunas realizaciones, los hidrogeles se forman a través de interacciones iónicas entre HA aniónico no reticulado y polisacáridos catiónicos, teniendo el HA aniónico aniones que incluyen, pero no se limitan a, carboxilato, sulfonato y/o fosfonato; teniendo los polisacáridos catiónicos cationes que incluyen, pero no se limitan a, amonio primario, amonio cuaternario y/o guanidinio.

En otras realizaciones, los hidrogeles se forman a través de interacciones iónicas entre HA aniónico reticulado y polisacáridos catiónicos, teniendo el HA aniónico aniones que incluyen, pero no se limitan a, carboxilato, sulfonato y/o fosfonato; teniendo los polisacáridos catiónicos cationes que incluyen, pero no se limitan a, amonio primario, amonio cuaternario y/o guanidinio. En algunas realizaciones, el polisacárido catiónico sirve como agente cohesivo para mejorar la cohesividad del gel de HA aniónico reticulado.

En algunas realizaciones, los hidrogeles se preparan formando un complejo iónico entre un HA homoaniónico y un polisacárido homocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es un HA catiónico. En algunas realizaciones, el polisacárido homocatiónico es quitosano. En realizaciones adicionales, el polisacárido homocatiónico es trimetilquitosano.

En algunas realizaciones, los hidrogeles se preparan formando un complejo iónico entre un HA homoaniónico y un polisacárido heterocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homoaniónico es HA.

En algunas realizaciones, los hidrogeles se preparan formando un complejo iónico entre un HA heteroaniónico y un polisacárido homocatiónico. En algunas realizaciones, el HA homocatiónico es un HA catiónico. En otras realizaciones, el polisacárido homocatiónico es quitosano. En realizaciones adicionales, el polisacárido homocatiónico es trimetilquitosano.

En algunas realizaciones, los hidrogeles se preparan formando un complejo iónico entre un HA heteroaniónico y un polisacárido heterocatiónico.

Las realizaciones no limitativas del método para formar hidrogeles de la invención incluyen la formación de un complejo iónico entre un polisacárido aniónico y un polisacárido catiónico, en el que el polisacárido aniónico se selecciona de las realizaciones de polisacárido aniónico de la tabla 1 y el polisacárido catiónico se selecciona de las realizaciones de polisacárido catiónico de la tabla 1, sin limitación con respecto a la(s) combinación/combinaciones de polisacáridos aniónicos y catiónicos.

En una realización, se proporciona un método para preparar un hidrogel que comprende HA no reticulado y HA catiónico no reticulado, en el que el método comprende hidratar por separado cada polisacárido, por ejemplo, disolviendo cada uno en solución salina tamponada con fosfato; seguido de la mezcla de1HA hidratado con e1HA catiónico hidratado a una razón de carga variable, por ejemplo, desde aproximadamente 1:20 hasta aproximadamente 20:1, hasta que se consigue un gel coacervado. Opcionalmente, se aplica centrifugación para retirar el exceso de agua.

En otra realización, se proporciona un método para preparar un hidrogel que comprende HA reticulado y polisacárido catiónico no reticulado, tal como HA catiónico no reticulado que contiene grupos catiónicos de guanidinio, comprendiendo el método mezclar el HA reticulado con HA catiónico no reticulado que contiene grupos catiónicos de guanidinio al 1% en peso en un tampón (por ejemplo, tampón PBS de pH 7,5) con una razón de carga variable (-COOH/guanidinio) de aproximadamente 1:10 a aproximadamente 50:1 hasta que se consigue el gel coacervado.

En otra realización, se proporciona un método para preparar un hidrogel que comprende HA reticulado y quitosano, comprendiendo el método proporcionar HA reticulado hidratado (es decir, un gel de HA, tal como JUP), proporcionar quitosano de alta pureza (HPC), disolver el HPC en disolución acuosa ácida, opcionalmente esterilizar por vapor el HPC en la disolución acuosa ácida, diluir la disolución resultante con agua (por ejemplo, para lograr una concentración de HPC que oscila desde 0,4 mg/ml hasta 1,9 mg/ml) y mezclar la disolución de h Pc diluida con HA reticulado hidratado para conseguir el hidrogel coacervado que comprende HA reticulado y quitosano.

En otros aspectos, un hidrogel de la presente invención se prepara combinando de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 1 equivalente molar de polisacárido catiónico con aproximadamente 1 equivalente molar del polisacárido aniónico. En aspectos adicionales, se combinan de aproximadamente 0,02 a aproximadamente 0,5 equivalentes molares de polisacárido catiónico con 1 equivalente molar del polisacárido aniónico. En aún aspectos adicionales, se combinan de aproximadamente 0,04 a aproximadamente 0,2 equivalentes molares de polisacárido catiónico con aproximadamente 1 equivalente molar del polisacárido aniónico. Preferiblemente, el polisacárido aniónico es HA. Más preferiblemente, el polisacárido aniónico es HA reticulado y el polisacárido catiónico es quitosano.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, un método para tratar un estado de los tejidos blandos de un individuo mediante la administración de una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento.

Tal como se usa en el presente documento, “tejidos blandos” se refiere a tejidos que rodean, sostienen o conectan otras estructuras u órganos del cuerpo. Los ejemplos no limitativos de tejidos blandos incluyen tejidos conjuntivos, tales como piel, tejidos fibrosos, grasa, fascia, tendones, ligamentos y membranas sinoviales. Los tejidos blandos también pueden incluir tejidos no conjuntivos, tales como nervios, músculos y vasos sanguíneos.

Tal como se usa en el presente documento, el término “tratar” se refiere a aumentar un tejido blando, mejorar la calidad del tejido blando o reducir un defecto del tejido blando; o reducir o eliminar en un individuo un síntoma cosmético de un estado de los tejidos blandos caracterizado por una imperfección y/o un defecto de los tejidos blandos; o retrasar 0 prevenir en un individuo la aparición de un síntoma cosmético de un estado caracterizado por una imperfección y/o un defecto de los tejidos blandos. Por ejemplo, el término “tratar” puede significar la reducción de un síntoma de un estado caracterizado por un defecto de los tejidos blandos en, por ejemplo, al menos el 20%, al menos el 30%, al menos el 40%, al menos el 50%, al menos el 60%, al menos el 70%, al menos el 80%, al menos el 90% o al menos el 100%. La eficacia de una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento para tratar un estado caracterizado por una calidad y/o un defecto de los tejidos blandos puede determinarse observando uno o más indicadores cosméticos y/o fisiológicos asociados con el estado. La eficacia de un aumento de los tejidos blandos o la mejora en el trastorno por calidad y/o defecto de los tejidos blandos también pueden estar indicadas por una necesidad reducida de una terapia concurrente. Los expertos en la técnica conocerán los síntomas o indicadores apropiados asociados con el defecto específico de los tejidos blandos y sabrán cómo determinar si un individuo es candidato para el tratamiento con una composición divulgada en el presente documento.

En determinados aspectos, el método comprende administrar un relleno dérmico de la invención que comprende un hidrogel de HA coacervado en un tejido blando o la piel del sujeto a una profundidad no mayor de aproximadamente 1 mm. En algunas realizaciones, la composición se inyecta superficialmente, es decir, a una profundidad de una profundidad no mayor de aproximadamente 0,8 mm, no mayor de aproximadamente 0,6 mm o no mayor de aproximadamente 0,4 mm.

En otro aspecto, la presente invención proporciona métodos para mejorar el aspecto estético de un sujeto, incluyendo el rostro de un sujeto. Los presentes métodos comprenden generalmente las etapas de administrar un relleno dérmico que comprende un hidrogel de HA coacervado en un tejido blando o la piel del sujeto, tal como el rostro del sujeto. En determinados aspectos, el método comprende generalmente administrar un relleno dérmico de la invención que comprende un hidrogel de HA coacervado en una región de la piel, tal como una región dérmica, del sujeto, tal como el rostro del sujeto, a una profundidad no mayor de aproximadamente 1 mm. En algunas realizaciones, la composición se inyecta superficialmente, es decir, a una profundidad de una profundidad no mayor de aproximadamente 0,8 mm, no mayor de aproximadamente 0,6 mm o no mayor de aproximadamente 0,4 mm.

Una composición de hidrogel se administra a un individuo. Un individuo, también denominado sujeto o paciente en el presente documento, es normalmente un ser humano de cualquier edad, sexo o raza. Normalmente, cualquier individuo que sea candidato para un procedimiento convencional para tratar un estado de los tejidos blandos es candidato para un método divulgado en el presente documento. Aunque un sujeto que experimenta los signos de envejecimiento de la piel es un adulto, los sujetos que experimentan envejecimiento prematuro u otros estados de la piel adecuados para el tratamiento (por ejemplo, una cicatriz) también pueden tratarse con una composición de hidrogel divulgada en el presente documento. Además, las composiciones de hidrogel y los métodos divulgados en el presente documento pueden aplicarse a individuos que buscan un agrandamiento pequeño/moderado, un cambio de forma o una alteración del contorno de una parte o región del cuerpo, lo que puede no ser técnicamente posible o estéticamente aceptable con la tecnología de implantes de tejidos blandos existente. La evaluación preoperatoria incluye generalmente una anamnesis y un examen físico de rutina, además de un consentimiento informado completo que indica todos los riesgos y beneficios relevantes del procedimiento.

La composición de hidrogel y los métodos divulgados en el presente documento son útiles para tratar un estado de los tejidos blandos. Un estado de los tejidos blandos incluye, sin limitación, una imperfección y/o un defecto de los tejidos blandos. Los ejemplos no limitativos de un estado de los tejidos blandos incluyen una imperfección y/o un defecto facial, tal como, por ejemplo, un aumento facial, una reconstrucción facial, una mesoterapia, síndrome de Parry-Romberg, lupus eritematoso profundo, hendiduras dérmicas, cicatrices, mejillas hundidas., labios finos, imperfecciones o defectos nasales, imperfecciones o defectos retroorbitales, un pliegue, una línea y/o arruga facial tal como una línea glabelar, una línea nasolabial, una línea perioral y/o una línea de expresión, y/u otras deformidades del contorno o imperfecciones del rostro; una imperfección y/o un defecto del cuello; una imperfección y/o un defecto de la piel; otras imperfecciones y/u otros defectos de los tejidos blandos tales como, por ejemplo, un aumento o una reconstrucción de la parte superior del brazo, la parte inferior del brazo, la mano, el hombro, la espalda, el torso incluyendo el abdomen, las nalgas, la parte superior de la pierna, la parte inferior de la pierna incluyendo las pantorrillas, el pie incluyendo la almohadilla de grasa plantar, el ojo, los genitales u otra parte, región o área del cuerpo. Tal como se usa en el presente documento, el término “mesoterapia” se refiere a una técnica de tratamiento cosmético no quirúrgica de la piel que implica la inyección intraepidérmica, intradérmica y/o subcutánea de un agente administrado como pequeñas gotas múltiples en la epidermis, la unión dermoepidérmica y/o la dermis.

La cantidad de una composición de hidrogel usada con cualquiera de los métodos descritos en el presente documento se determinará normalmente basándose en la alteración y/o mejora deseada, la reducción y/o eliminación de un síntoma del estado de los tejidos blandos deseado, el efecto deseado por el individuo y/o médico y la parte o región del cuerpo que está tratándose. La eficacia de la administración de la composición puede manifestarse mediante una o más de las siguientes mediciones: forma de tejido blando alterada y/o mejorada, tamaño de tejido blando alterado y/o mejorado, contorno de tejido blando alterado y/o mejorado, función tisular alterada y/o mejorada, satisfacción y/o calidad de vida del paciente mejoradas y uso disminuido de material extraño implantable.

Como otro ejemplo, la eficacia de las composiciones y los métodos para tratar un tejido blando facial puede manifestarse mediante una o más de las siguientes mediciones: tamaño, forma y/o contorno aumentados del rasgo facial como tamaño, forma y/o contorno aumentados de la región de los labios, las mejillas o los ojos; tamaño, forma y/o contorno alterados del rasgo facial como tamaño, forma y/o contorno alterados de la forma de la región de los labios, las mejillas o los ojos; reducción o eliminación de una arruga, un pliegue o una línea de la piel; resistencia a una arruga, un pliegue o una línea en la piel; rehidratación de la piel; elasticidad de la piel aumentada; reducción o eliminación de la rugosidad de la piel; tersura de la piel aumentada y/o mejorada; reducción o eliminación de estrías o marcas; tono, brillo, luminosidad y/o resplandor de la piel aumentados y/o mejorados; color de la piel mejorado y/o aumentado, reducción o eliminación de la palidez de la piel; satisfacción y/o calidad de vida del paciente mejoradas.

En aspectos de esta realización, la cantidad de una composición de hidrogel administrada es, por ejemplo, de aproximadamente 0,01 g, aproximadamente 0,05 g, aproximadamente 0,1 g, aproximadamente 0,5 g, aproximadamente 1 g, aproximadamente 5 g, aproximadamente 10 g, aproximadamente 20 g, aproximadamente 30 g, aproximadamente 40 g, aproximadamente 50 g, aproximadamente 60 g, aproximadamente 70 g, aproximadamente 80 g, aproximadamente 90 g, aproximadamente 100 g, aproximadamente 150 g o aproximadamente 200 g. En otros aspectos de esta realización, la cantidad de una composición de hidrogel administrada es, por ejemplo, de aproximadamente 0,01 g a aproximadamente 0,1 g, de aproximadamente 0,1 g a aproximadamente 1 g, de aproximadamente 1 g a aproximadamente 10 g, de aproximadamente 10 g a aproximadamente 100 g o de aproximadamente 50 g a aproximadamente 200 g. En aún otros aspectos de esta realización, la cantidad de una composición de hidrogel administrada es, por ejemplo, de aproximadamente 0,01 ml, aproximadamente 0,05 ml, aproximadamente 0,1 ml, aproximadamente 0,5 ml, aproximadamente 1 ml, aproximadamente 5 ml, aproximadamente 10 ml, aproximadamente 15 ml, aproximadamente 20 ml, aproximadamente 30 ml, aproximadamente 40 ml, aproximadamente 50 ml, aproximadamente 60 ml, aproximadamente 70 g, aproximadamente 80 ml, aproximadamente 90 ml, aproximadamente 100 ml, aproximadamente 150 ml o aproximadamente 200 ml. En otros aspectos de esta realización, la cantidad de una composición de hidrogel administrada es, por ejemplo, de aproximadamente 0,01 ml a aproximadamente 0,1 ml, de aproximadamente 0,1 ml a aproximadamente 1 ml, de aproximadamente 1 ml a aproximadamente 10 ml, de aproximadamente 1 ml a aproximadamente 20 ml, de aproximadamente 10 ml a aproximadamente 100 ml o de aproximadamente 50 ml a aproximadamente 200 ml.

La duración del tratamiento se determinará normalmente basándose en el efecto deseado por el individuo y/o médico y la parte o región del cuerpo que está tratándose. En aspectos de esta realización, la administración de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede tratar un estado de los tejidos blandos durante, por ejemplo, aproximadamente 6 meses, aproximadamente 7 meses, aproximadamente 8 meses, aproximadamente 9 meses, aproximadamente 10 meses, aproximadamente 11 meses, aproximadamente 12 meses, aproximadamente 13 meses, aproximadamente 14 meses, aproximadamente 15 meses, aproximadamente 18 meses o aproximadamente 24 meses. En otros aspectos de esta realización, la administración de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede tratar un estado de los tejidos blandos durante, por ejemplo, al menos 6 meses, al menos 7 meses, al menos 8 meses, al menos 9 meses, al menos 10 meses, al menos al menos 11 meses, al menos 12 meses, al menos 13 meses, al menos 14 meses, al menos 15 meses, al menos 18 meses o al menos 24 meses. En otros aspectos de esta realización, la administración de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede tratar un estado de los tejidos blandos durante, por ejemplo, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 12 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 15 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 21 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 12 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 15 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 9 meses a aproximadamente 21 meses, de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 15 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 21 meses, de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 15 meses a aproximadamente 18 meses, de aproximadamente 15 meses a aproximadamente 21 meses, de aproximadamente 15 meses a aproximadamente 24 meses, de aproximadamente 18 meses a aproximadamente 21 meses, de aproximadamente 18 meses a aproximadamente 24 meses o de aproximadamente 21 meses a aproximadamente 24 meses.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, la administración de una composición de hidrogel divulgada en el presente documento. Tal como se usa en el presente documento, el término “administrar” significa cualquier mecanismo de administración que proporciona una composición divulgada en el presente documento a un individuo que potencialmente da como resultado un resultado beneficioso. El mecanismo de administración real usado para administrar una composición a un individuo puede determinarlo un experto en la técnica teniendo en cuenta factores que incluyen, sin limitación, el tipo de estado, la ubicación del estado, la causa del estado, la gravedad del estado, el grado de beneficio deseado, la duración del beneficio deseado, la composición particular usada, la tasa de biodegradación de la composición particular usada, la naturaleza de los otros agentes incluidos en la composición particular usada, la vía de administración particular, las características particulares, la anamnesis y los factores de riesgo del individuo tales como, por ejemplo, edad, peso, salud general y similares, o cualquier combinación de los mismos. En un aspecto de esta realización, una composición divulgada en el presente documento se administra al tejido blando o a la piel de un individuo mediante inyección.

La vía de administración de una composición de hidrogel a un paciente individual se determinará normalmente basándose en el efecto cosmético deseado por el individuo y/o médico y la parte o región del cuerpo que está tratándose. Una composición divulgada en el presente documento puede administrarse por cualquier medio conocido para los expertos en la técnica, incluyendo, sin limitación, una jeringa con aguja, una pistola (por ejemplo, una pistola de compresión hidroneumática) o mediante implantación quirúrgica directa. La composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede administrarse en un tejido blando o la piel, tal como, por ejemplo, una región dérmica, una región hipodérmica o una región incluso más profunda. Por ejemplo, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento puede inyectarse usando agujas o cánulas con un diámetro de aproximadamente 0,26 mm a aproximadamente 0,4 mm y una longitud que oscila desde aproximadamente 4 mm hasta aproximadamente 14 mm. Alternativamente, las agujas o cánulas pueden ser de calibre 21 a 32 y tener una longitud de aproximadamente 4 mm a aproximadamente 70 mm. En el presente documento se describen otros calibres de aguja adecuados. Preferiblemente, la aguja es una aguja de un solo uso. La aguja puede combinarse con una jeringa, un catéter y/o una pistola. Las cánulas pueden ser de diferentes tamaños e incluir versiones rígidas o flexibles.

Además, una composición divulgada en el presente documento puede administrarse una vez o a lo largo de una pluralidad de veces. En última instancia, el tiempo usado seguirá las normas asistenciales de calidad. Por ejemplo, una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento puede administrarse una vez o a lo largo de varias sesiones, estando las sesiones espaciadas unos pocos días o semanas. Por ejemplo, se puede administrar una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento a un individuo cada 1, 2, 3, 4, 5, 6 ó 7 días o cada 1, 2, 3 ó 4 semanas. La administración de una composición de relleno dérmico divulgada en el presente documento a un individuo puede ser mensual o bimestral, o administrarse cada 3, 6, 9 ó 12 meses.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva se refieren, en parte, a la piel. La piel se compone de tres capas primarias: la epidermis, que proporciona impermeabilización y sirve como barrera contra las infecciones; la dermis, que sirve como ubicación para los apéndices de la piel; y la hipodermis (capa adiposa subcutánea). La epidermis no contiene vasos sanguíneos y se nutre por difusión desde la dermis. El principal tipo de células que forman la epidermis son los queratinocitos, los melanocitos, las células de Langerhans y las células de Merkel. La piel incluye la “región dérmica”.

Los aspectos de la presente memoria descriptiva proporcionan, en parte, una región dérmica. Tal como se usa en el presente documento, el término “región dérmica” se refiere a la región de la piel que comprende la unión epidérmicadérmica y la dermis. La unión epidérmica proporciona adherencia epidérmica-dérmica, soporte mecánico para la epidermis y una barrera para el intercambio de células y algunas moléculas grandes a través de la unión. La dermis incluye la dermis superficial (región papilar) y la dermis profunda (región reticular).

La dermis es la capa de piel debajo de la epidermis que consiste en tejido conjuntivo y protege al cuerpo del estrés y la deformación. La dermis está estrechamente conectada a la epidermis por una membrana basal. También alberga muchas terminaciones nerviosas/mecanorreceptoras que proporcionan el sentido del tacto y el calor. Contiene folículos pilosos, glándulas sudoríparas, glándulas sebáceas, glándulas apocrinas, vasos linfáticos y vasos sanguíneos. Los vasos sanguíneos de la dermis proporcionan nutrición y eliminación de desechos de sus propias células, así como del estrato basal de la epidermis. La dermis se divide estructuralmente en dos áreas: un área superficial adyacente a la epidermis, denominada región papilar, y un área profunda más gruesa conocida como región reticular.

La región papilar se compone de tejido conjuntivo areolar laxo. Se llama así por sus proyecciones en forma de dedos denominadas papilas que se extienden hacia la epidermis. Las papilas proporcionan a la dermis una superficie “irregular” que se encaja con la epidermis, fortaleciendo la conexión entre las dos capas de piel. La región reticular se encuentra profundamente en la región papilar y es habitualmente mucho más gruesa. Se compone de tejido conjuntivo denso e irregular y recibe su nombre de la densa concentración de fibras colágenas, elásticas y reticulares que se tejen a lo largo de la misma. Estas fibras proteicas dan a la dermis sus propiedades de resistencia, extensibilidad y elasticidad. También se encuentran dentro de la región reticular las raíces del cabello, las glándulas sebáceas, las glándulas sudoríparas, los receptores, las uñas y los vasos sanguíneos. La tinta del tatuaje se mantiene en la dermis. Las estrías del embarazo también se encuentran en la dermis.

La hipodermis se encuentra debajo de la dermis. Su propósito es unir la región dérmica de la piel a los huesos y músculos subyacentes, además de suministrarle vasos sanguíneos y nervios. Consiste en tejido conjuntivo laxo y elastina. Los principales tipos de células son los fibroblastos, los macrófagos y los adipocitos (la hipodermis contiene el 50% de la grasa corporal). La grasa sirve como relleno y aislamiento para el cuerpo.

En un aspecto de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento se administra a la piel de un individuo mediante inyección en una región dérmica o hipodérmica. En aspectos de esta realización, una composición de hidrogel divulgada en el presente documento se administra a una región dérmica de un individuo mediante inyección en, por ejemplo, una región de unión epidérmica-dérmica, una región papilar, una región reticular o cualquier combinación de las mismas.

Otros aspectos de la presente memoria descriptiva describen, en parte, un método para tratar un estado de la piel que comprende la etapa de administrar a un individuo que lo necesita una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición mejora el estado de la piel, tratando así el estado de la piel. En un aspecto de esta realización, un estado de la piel es un método para tratar la deshidratación de la piel que comprende la etapa de administrar a un individuo que padece deshidratación de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición rehidrata la piel, tratando así la deshidratación de la piel. En otro aspecto de esta realización, un método para tratar la falta de elasticidad de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo que padece falta de elasticidad de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición aumenta la elasticidad de la piel, tratando así la falta de elasticidad de la piel. En aún otro aspecto de esta realización, un método para tratar la rugosidad de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo que padece rugosidad de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición disminuye la rugosidad de la piel, tratando así la rugosidad de la piel. En todavía otro aspecto de esta realización, un método para tratar la falta de tersura de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo que padece falta de tersura de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición hace que la piel sea más tensa, tratando así la falta de tersura de la piel.

En un aspecto adicional de esta realización, un método para tratar una estría o marca de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo que padece una estría o marca de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición reduce o elimina la estría o marca de la piel, tratando así una estría o marca de la piel. En otro aspecto de esta realización, un método para tratar la palidez de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo que padece palidez de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición aumenta el tono o la luminosidad de la piel, tratando así la palidez de la piel. En otro aspecto de esta realización, un método para tratar las arrugas de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo que padece arrugas de la piel una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición reduce o elimina las arrugas de la piel, tratando así las arrugas de la piel. En otro aspecto más de esta realización, un método para tratar las arrugas de la piel comprende la etapa de administrar a un individuo una composición de hidrogel divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición hace que la piel sea resistente a las arrugas de la piel, tratando así las arrugas de la piel. La presente invención también proporciona métodos para tratar un estado, comprendiendo el método administrar un hidrogel de HA coacervado de la invención. En una realización, se proporciona un método para reducir la aparición de arrugas. En otra realización, se proporciona un método para esculpir rasgos de tejidos blandos, incluyendo rasgos faciales de tejidos blandos. En otra realización, se proporciona un método para aplicar presión mecánica contra un tejido adyacente al hidrogel. En otras realizaciones, se proporciona un método para proporcionar capacidad de estiramiento a los tejidos adyacentes al hidrogel administrado.

Esta invención también proporciona usos de hidrogeles de HA coacervados. Los usos no limitativos de los hidrogeles de HA coacervados de la invención incluyen el uso como voluminizadores en la piel, o agentes que ocupan espacio que rellenan los huecos dentro o debajo de la piel para reducir la aparición de arrugas, o para esculpir rasgos de tejidos blandos particulares, tales como rasgos faciales de tejidos blandos. En algunas realizaciones, los hidrogeles de HA coacervados de la invención se usan para aplicar presión mecánica contra un tejido adyacente al hidrogel. En otras realizaciones, los hidrogeles de HA coacervados de la invención proporcionan capacidad de estiramiento a los tejidos adyacentes al hidrogel administrado. En otras realizaciones, los hidrogeles de HA coacervados se usan para administrar agentes cosméticos u otros agentes a un tejido de un sujeto. Los ejemplos no limitativos de un agente administrado con el hidrogel de HA coacervado incluyen un antioxidante, un agente antipruriginoso, un agente anticelulítico, un agente anticicatrices, un agente antiinflamatorio, un agente anestésico, un agente antiirritante, un agente de descamación, un agente tensor, un agente antiacné, un agente de aclaramiento de la piel, un agente de pigmentación, un agente antipigmentación, un agente hidratante y/o una vitamina.

Ejemplos

Ejemplo 1. Materiales para hacer que los presentes hidrogeles sean útiles como rellenos dérmicos

A. HA no reticulado. Se adquirió HA no reticulado con un peso molecular de aproximadamente 50 K a aproximadamente 3 millones de Dalton de HTL Biotechnology (Francia).

B. HA reticulado. Las fuentes de HA reticulado incluyen hidrogeles de HA disponibles comercialmente, tales como relleno dérmico de la marca Juvederm®, (Allergan, Inc.), por ejemplo, relleno dérmico Juvederm® Ultra Plus o relleno dérmico Juvederm® Voluma. También puede usarse un HA reticulado de calidad para investigación que tiene un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 500 a aproximadamente 1.000 Pa. Se describen métodos para preparar HA reticulado por Lebreton (documentos US 2010/0226988, US 2008/0089918, US 2010/0028438 y US 2006/0194758; anteriormente) y Njikang et al. (documento US 2013/0096081; anteriormente).

C. HA catiónico. Puede elaborarse HA catiónico según los procedimientos descritos en el presente documento, por ejemplo, tal como se describe a continuación.

Esquema 3. Introducción de cationes amonio en HA. Se acopla el HA con HMDA en presencia de EDC para proporcionar un HA catiónico que tiene iones amonio primario.

HA HA con grupos amino

HA cationico con iones amonio primario

Esquema 4. Introducción de cationes amonio en HA. Se acopla el HA con éster metílico de N^épsilon-BOC-lisina en presencia de EDC, con la posterior retirada del grupo protector BOC para proporcionar un HA catiónico que tiene iones amonio primario.

HA catiomco con iones amonio primario

Esquema 5. Introducción de cationes guanidinio en HA. Se hace reaccional e1HA catiónico preparado según el esquema 3 con 1H-pirazol-1-carboxamidina para proporcionar un HA catiónico que tiene iones guanidinio.

Esquema 6. Introducción de cationes guanidinio en HA. Se hace reaccional e1HA catiónico preparado según el esquema 4 con 1H-pirazol-1-carboxamidina para proporcionar un HA catiónico que tiene iones guanidinio.

(i) HA catiónico no reticulado que comprende iones amonio primario. En resumen, en una jeringa de 15 ml, se disolverán aproximadamente 50 mg de Ha no reticulado (PM: 300 ~ 800 K Dalton) y 14,4 mg de hexametilendiamina (HMDA) en tampón MES pH 5,0. Luego, a una jeringa de 15 ml independiente que contiene 5 ml de tampón MES pH 5,0, se le añadirán 23,9 mg de clorhidrato de 1-etil-3-[3-dimetilaminopropil]carbodiimida (EDC) y 14,3 mg de N-hidroxisuccinimida (NHS). Las dos jeringas se conectarán entre sí a través de un conector y se mezclarán 20 veces mediante inserción/retracción repetitiva de los émbolos de la jeringa. La mezcla resultante se transferirá a un vial y se dejará reposar durante aproximadamente 6 horas antes de purificarse adicionalmente mediante diálisis frente a PBS usando un tubo de diálisis con un valor de corte de peso molecular de 20.000 Dalton. La disolución final se liofilizará hasta obtener un polvo seco. El HA no reticulado resultante (HA-HMDA) tendrá grupos funcionales amina primaria, es decir, el HA-HMDA no reticulado comprende grupos amonio primario a pH fisiológico.

(ii) HA catiónico no reticulado que comprende iones guanidinio. Se hará reaccionar HA-HMDA no reticulado (tal como se preparó anteriormente) con clorhidrato de 1H-pirazol-1-carboxamidina en tampón PBS pH 10. En resumen, se disolverán 10 mg de HA-HMDA no reticulado en 5 ml de tampón PBS pH 10, luego se añadirán 20 mg de clorhidrato de 1H-pirazol-1-carboxamidina. Se dejará reposar la reacción durante aproximadamente 5 horas. La disolución resultante se dializará frente a tampón PBS pH 7 usando un tubo de diálisis con un valor de corte de peso molecular de 20.000 Dalton. La disolución final se liofilizará hasta obtener un polvo seco. E1HA catiónico no reticulado resultante portará grupos guanidinio.

(iii) HA reticulado que comprende iones amonio primario. Se disolverán aproximadamente 50 mg de HA reticulado (proporcionado como en el ejemplo 1B) y 14,4 mg de HMDA en tampón MES pH 5,0. Luego, a una jeringa de 15 ml independiente que contiene 5 ml de tampón MES pH 5,0, se le añadirán 23,9 mg de EDC y 14,3 mg de NHS. Las dos jeringas se conectarán entre sí a través de un conector y se mezclarán 20 veces mediante inserción/retracción repetitiva de los émbolos de la jeringa. La mezcla resultante se transferirá a un vial y se dejará reposar durante aproximadamente 6 horas antes de purificarse adicionalmente mediante diálisis usando un tubo de diálisis con un valor de corte de peso molecular de 20.000 Dalton. La disolución final se liofilizará hasta obtener un polvo seco. El HA-HMDA reticulado resultante tendrá grupos funcionales amina primaria, es decir, e1HA-HMDA reticulado portará grupos amonio primario a pH fisiológico.

(iv) HA reticulado que comprende iones guanidinio. Se hará reaccionar HA-HMDA reticulado (tal como se preparó anteriormente) con clorhidrato de 1H-pirazol-1-carboxamidina en tampón PBS pH 10. En resumen, se disolverán 10 mg de HA-HMDA reticulado en 5 ml de tampón PBS pH 10, luego se añadirán 20 mg de clorhidrato de 1H-pirazol-1-carboxamidina. Se dejará reposar la reacción durante aproximadamente 5 horas. La disolución resultante se dializará frente a tampón PBS pH 7. La disolución final se liofilizará hasta obtener un polvo seco. E1HA catiónico reticulado resultante portará grupos guanidinio.

D. HA aniónico modificado.

(i) HA no reticulado modificado con grupos funcionales ácido fosfónico. El material se preparará haciendo reaccionar HA no reticulado con ácido aminofosfónico usando química de EDC. En resumen, en una jeringa de 15 ml, se disolverán aproximadamente 50 mg de HA no reticulado (PM: 300 ~ 800 Dalton) y 27,8 mg de ácido aminometilfosfónico en tampón MES pH 5,0. Luego, a una jeringa de 15 ml independiente que contiene 5 ml de tampón MES pH 5,0, se le añadirán 23,9 mg de EDC y 14,3 mg de NHS. Las dos jeringas se conectarán entre sí a través de un conector y se mezclarán unas 20 veces mediante inserción/retracción repetitiva de los émbolos de la jeringa. La mezcla resultante se transferirá a un vial y se dejará reposar durante aproximadamente 6 horas antes de purificarse adicionalmente mediante diálisis usando un tubo de diálisis con un valor de corte de peso molecular de 20.000 Dalton. La disolución final se liofilizará hasta obtener un polvo seco para proporcionar HA aniónico no reticulado que comprende grupos fosfonato.

(ii) HA no reticulado modificado con grupos funcionales ácido sulfónico. El material se preparará usando un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 1D (i), usando ácido aminosulfámico en lugar de ácido aminofosfónico para funcionalizar el HA, proporcionando hA aniónico no reticulado que comprende grupos sulfonato.

(iii) HA reticulado modificado con grupos funcionales ácido fosfónico. El HA reticulado (proporcionado como en el ejemplo B) se modifica con grupos funcionales ácido fosfónico en condiciones esencialmente tal como se describieron en el ejemplo 1D (i), para proporcionar HA reticulado que comprende grupos ácido fosfónico. Alternativamente, e1HA no reticulado modificado con grupos ácido fosfónico, tal como se describió en el ejemplo D (i), se reticula usando procedimientos de reticulación de HA tal como describieron Lebreton (documentos US 2010/0226988, US 2008/0089918, US 2010/0028438 y US 2006/0194758; anteriormente) y Njikang et al. (anteriormente), para proporcionar HA reticulado que comprende grupos ácido fosfónico.

(iv) HA reticulado modificado con grupos funcionales ácido sulfónico. El HA reticulado (proporcionado como en el ejemplo 1B) se modifica con grupos funcionales ácido sulfónico en las condiciones esencialmente tal como se describieron en el ejemplo 1D (ii), para proporcionar HA reticulado que comprende grupos ácido sulfónico. Alternativamente, el HA no reticulado modificado con grupos ácido sulfónico, tal como se describió en el ejemplo D (ii), se reticula usando procedimientos de reticulación de HA tal como describieron Lebreton (documentos US 2010/0226988, US 2008/0089918, US 2010/0028438 y US 2006/0194758; anteriormente) y Njikang et al. (anteriormente), para proporcionar HA reticulado que comprende grupos ácido sulfónico.

E. Quitosanos.

(i) Se adquirió quitosano de alta pureza (HPC) con Pm de 60.000-120.000 de Sigma-Aldrich. Se obtiene HPC con un peso molecular de aproximadamente 10.000 Da a aproximadamente 1.000.000 Da de fuentes comerciales.

(ii) El trimetilquitosano está disponible de fuentes comerciales, o puede prepararse mediante métodos establecidos de alquilación de quitosano (tal como HPC).

Ejemplo 2. Preparación de hidrogel usando HA no reticulado y HA catiónico

En una jeringa de 10 ml, se hidratan aproximadamente 25 mg de HA no reticulado con un peso molecular de aproximadamente 1 millón a aproximadamente 3 millones de Dalton con 5 ml de 1x PBS. Se disuelve e1HA catiónico no reticulado (ejemplo 1C) por separado en 1x PBS a una concentración de aproximadamente el 1% en peso. Se mezcla el HA hidratado con el HA catiónico no reticulado a una razón de carga variable (-COOH/guanidinio) de 1:20 a 20:1 hasta que se consigue un gel coacervado. Puede aplicarse centrifugación adicional para retirar el exceso de agua.

Ejemplo 3. Preparación de hidrogel usando HA reticulado de alto G' y HA catiónico

En una jeringa de 10 ml, se mezclan aproximadamente 2 ml de HA reticulado con un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 500 Pa a aproximadamente 1.000 Pa con HA catiónico no reticulado que contiene grupos catiónicos de guanidinio al 1% en peso (preparado tal como se describió en el ejemplo 1C (ii)) en tampón PBS pH 7,5 a una razón de carga variable (-COOH/guanidinio) de 1:10 a 50:1 hasta que se consigue un gel coacervado.

Ejemplo 4. Preparación de hidrogel usando Juvederm® Ultra Plus y quitosano

Preparación de la disolución de quitosano: se disolvió quitosano de alta pureza (HPC; véase el ejemplo 1E; Pm de 85 kDa, grado de acetilación del 24,4% en moles) en agua ácida (4,904 ml de agua milliQ con 96 microlitros de HCl concentrado) hasta una concentración final de 38,76 mg/ml, después de lo cual se esterilizó por vapor la disolución (128°C, 5 min). Después, se diluyó adicionalmente la disolución de HPC resultante hasta diversas concentraciones que oscilaban desde 0,4 mg/ml hasta 1,9 mg/ml usando agua milliQ, y se usaron las disoluciones diluidas para preparar las diferentes formulaciones de hidrogel.

Preparación del hidrogel: se mezcló Juvederm® Ultra Plus (JUP; 1 cc) con 50 microlitros de cada disolución acuosa de HPC diluida (de 0,4 mg/ml a 1,9 mg/ml) para producir mezclas de gel con una razón equivalente de HPC con respecto a JUP que oscilaba desde 0,04:1 hasta 0,2:1. Los geles se sometieron a ensayos de reología y ensayos de hinchamiento/disociación.

Propiedades mecánicas de las formulaciones de hidrogel: tras el mezclado, se observaron cambios en la apariencia física y los módulos de los hidrogeles (figura 3). Con concentraciones progresivamente crecientes de HPC, el material de hidrogel parecía más opaco.

Determinación de las propiedades reológicas del gel: se usó un reómetro oscilatorio de placas paralelas (Anton Paar, Physica MCR 302) para medir las propiedades reológicas de los geles. El diámetro de la placa usada fue de 25 mm. El espacio entre las placas se fijó en 1 mm. Para cada medición, se ejecutó en primer lugar un barrido de frecuencia a una deformación constante, antes del barrido de deformación a una frecuencia fija. El G' (módulo de almacenamiento) de los hidrogeles se obtuvo a partir de la curva de barrido de deformación a una deformación del 1% y una tasa de deformación de 5 Hz. El módulo de almacenamiento (G') se redujo de manera escalonada con el aumento de la concentración de HPC (figura 3B). En el intervalo sometido a ensayo, el módulo disminuyó aproximadamente un 9,5% para la concentración más alta de quitosano.

Ensayo de hinchamiento/disociación del gel: se inyectó cada hidrogel (aproximadamente 250 |il) en un molde cilíndrico y se centrifugó para eliminar las burbujas. A continuación, se transfirieron los hidrogeles a PBS (20 ml) y se incubaron en un agitador orbital a 37°C y 200 rpm. En el plazo de las primeras 24 horas, los hidrogeles alcanzaron el equilibrio de hinchamiento y luego conservaron la integridad sin disociación o dispersión adicional en PBS. Mientras que el gel sin quitosano añadido se disoció y se dispersó en el tampón PBS en el plazo de dos días (datos no mostrados), todas las formulaciones que contenían quitosano permanecieron estables durante al menos 29 días (figura 4).

Ejemplo 5. Ensayo de cohesividad del gel en condiciones diluidas

Los hidrogeles preparados en el ejemplo 4 se empaparon en abundante disolución de PBS. La mezcla se sometió a una condición de agitación de 200 rpm. La retención de la integridad del gel se determinó mediante observación visual.

Ejemplo 6. Ensayo de moldeabilidad del gel

Los hidrogeles elaborados en los ejemplos anteriores se evalúan para determinar la capacidad de estiramiento y la moldeabilidad del gel.

Para un análisis cuantitativo de la capacidad de estiramiento del gel, se realiza el ensayo de compresión lineal para evaluar la capacidad de estiramiento usando un reómetro oscilatorio de placas paralelas (Anton Paar, MCR302). En este ensayo, se coloca una masa conocida de relleno entre las placas y se baja la placa superior a una velocidad constante mientras se mide la fuerza normal (opuesta a la deformación); un valor más alto de la fuerza normal representa una mayor resistencia a la deformación.

La moldeabilidad del gel se evalúa midiendo la susceptibilidad de un relleno inyectado a deformarse cuando se somete a una fuerza externa definida. La fuerza aplicada, 319 gramos, se elige para simular la fuerza del pulgar sobre un inyector usado para manipular el relleno. La moldeabilidad del relleno se medirá a lo largo de un periodo de nueve días en un modelo de rata Sprague Dawley usando obtención de imágenes tridimensionales Canfield.

Se determina que los geles tienen una buena capacidad de estiramiento y moldeabilidad.

Las realizaciones específicas divulgadas en el presente documento pueden estar limitadas adicionalmente en las reivindicaciones usando el lenguaje que consiste en o que consiste esencialmente en. Cuando se usa en las reivindicaciones, ya sea como presentado o añadido por enmienda, el término de transición “que consiste en” excluye cualquier elemento, etapa o componente no especificado en las reivindicaciones. El término de transición “que consiste esencialmente en” limita el alcance de una reivindicación a los materiales o las etapas especificados y aquellos que no afectan materialmente a la(s) característica(s) básica(s) y nueva(s). Las realizaciones de la invención así reivindicadas se describen y habilitan inherente o expresamente en el presente documento.

Claims

REIVINDICACIONES

i . Relleno dérmico que comprende un hidrogel, en el que el hidrogel comprende:

(a) un ácido hialurónico (HA) aniónico; y

(b) un polisacárido catiónico,

en el que el hidrogel es un hidrogel coacervado.
2. Relleno dérmico según la reivindicación 1, en el que el hidrogel comprende un complejo iónico entre e1HA aniónico y el polisacárido catiónico.
3. Relleno dérmico según la reivindicación 1 o reivindicación 2, en el que e1HA aniónico se selecciona de HA no reticulado, HA reticulado y una mezcla de los mismos.
4. Relleno dérmico según cualquier reivindicación anterior, en el que el polisacárido catiónico no está reticulado o en el que el polisacárido catiónico se selecciona de un HA catiónico, quitosano no reticulado y trimetilquitosano no reticulado, en el que preferiblemente el polisacárido catiónico es quitosano no reticulado.
5. Relleno dérmico según la reivindicación 1, que comprende una razón de equivalentes molares de1HA aniónico con respecto al polisacárido catiónico de aproximadamente 1:0,01 a aproximadamente 1:1; preferiblemente, de aproximadamente 1:0,04 a aproximadamente 1:0,20.
6. Relleno dérmico según cualquier reivindicación anterior, que comprende además (i) un agente cosmético o (ii) un agente seleccionado de un antioxidante, un agente antipruriginoso, un agente anticelulítico, un agente anticicatrices, un agente anestésico, un agente antiirritante, un agente de descamación, un agente tensor, un agente antiacné, un agente de aclaramiento de la piel, un agente de pigmentación, un agente antipigmentación, un agente hidratante, una vitamina y cualquier combinación de uno o más de los anteriores, en el que preferiblemente el agente se libera en el tejido blando que rodea al sitio de administración durante al menos aproximadamente 3 semanas después de administrar el relleno dérmico al tejido blando.
7. Relleno dérmico según cualquier reivindicación anterior, que comprende además un portador fisiológicamente aceptable, en el que preferiblemente el portador es solución salina tamponada con fosfato o HA no reticulado.
8. Relleno dérmico según cualquier reivindicación anterior, en el que el hidrogel tiene un módulo de almacenamiento (G') de desde aproximadamente 50 Pa hasta aproximadamente 500 Pa.
9. Relleno dérmico según cualquier reivindicación anterior, que es inyectable a través de una aguja, en el que el calibre de la aguja es de al menos calibre 27, y preferiblemente es inyectable a través de la aguja sin dimensionar u homogeneizar el relleno dérmico antes de la inyección.
10. Método no terapéutico para tratar un tejido blando de un sujeto, comprendiendo el método inyectar un relleno dérmico según cualquier reivindicación anterior en el tejido blando del sujeto.
11. Método según la reivindicación 10, en el que el tejido blando es piel, comprendiendo el método inyectar el relleno dérmico en una región dérmica del sujeto.
12. Método según la reivindicación 10 o reivindicación 11, en el que el tratamiento comprende aumentar el tejido blando, mejorar la calidad del tejido blando o reducir un defecto del tejido blando del sujeto, en el que el defecto puede ser una arruga, una cicatriz o una pérdida de tejido dérmico.
13. Método según cualquiera de las reivindicaciones 10-12, en el que el tratamiento comprende dar forma, rellenar, dar volumen o esculpir el tejido blando del sujeto.
14. Relleno dérmico según cualquiera de las reivindicaciones 1-9, para su uso en un método para tratar un tejido blando de un sujeto, comprendiendo el tratamiento mejorar la homeostasis dérmica, mejorar el grosor de la piel, cicatrizar una herida o reducir una cicatriz del sujeto, y comprendiendo el método inyectar el relleno dérmico en el tejido blando del sujeto.
15. Método según cualquiera de las reivindicaciones 10-13, o relleno dérmico para su uso según la reivindicación 14, en el que el relleno dérmico persiste en el tejido blando del sujeto durante al menos aproximadamente: 3 meses, 4 meses, 5 meses o 6 meses después de inyectar el relleno dérmico en el tejido blando del sujeto.