ES2867300T3 - 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona para tratamiento de enfermedad de hígado graso no alcohólico - Google Patents

Abstract

Compuesto de fórmula (1), o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico **(Ver fórmula)**

Description

DESCRIPCIÓN

5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]1^enil]metM]-1,3-tiazoMdin-2,4-diona para tratamiento de enfermedad de hígado graso no alcohólico

Referencia cruzada a solicitud relacionada

Esta solicitud reivindica prioridad con respecto a la solicitud europea n.° EP16382584.7, presentada el 1 de diciembre de 2016.

Campo de divulgación

La presente divulgación se refiere al uso de 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona y sus sales farmacéuticamente aceptables en el tratamiento o la prevención de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en enfermedad de hígado graso no alcohólico, esteatohepatitis no alcohólica, un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria. Específicamente, la presente invención se refiere al uso de 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona y sus sales farmacéuticamente aceptables en el tratamiento o la prevención de enfermedad de hígado graso no alcohólico, incluyendo esteatohepatitis no alcohólica.

Antecedentes

El síndrome metabólico es un grupo de anomalías metabólicas que identifica a personas en riesgo de diabetes y enfermedad cardiovascular. La glucosa y los triglicéridos se producen en exceso por el hígado en sujetos que tienen síndrome metabólico. Por lo tanto, el hígado es un determinante clave de las anomalías metabólicas. La prevalencia tanto del síndrome metabólico como de la enfermedad de hígado graso no alcohólico (“NAFLD”) aumenta con la obesidad. Otras causas adquiridas para ambos trastornos incluyen la ingesta excesiva de azúcares simples y la inactividad física. Ambos trastornos predicen diabetes tipo 2, enfermedad cardiovascular, esteatohepatitis no alcohólica (“NASH”), y carcinoma hepatocelular. Debido a que el síndrome metabólico puede definirse de muchas maneras diferentes, La NAFLD podría ser un predictor más directo de estas enfermedades. La mitad de las personas con NAFLD portan al menos un alelo variante (G) en rs738409 en el gen PNPLA3, que está asociado con un alto contenido de grasa del hígado. La esteatosis en NAFLD asociada a PNPLA3 no está acompañada por características del síndrome metabólico. Todas las formas de NAFLD aumentan el riesgo de NASH, cirrosis, y carcinoma hepatocelular.

La NAFLD abarca un espectro de enfermedades que van desde la esteatosis hepática aislada hasta la NASH, la forma más agresiva de enfermedad de hígado graso que puede progresar a cirrosis y complicaciones relacionadas con cirrosis, incluyendo carcinoma hepatocelular (“HCC”). La NAFLD y la NASH se caracterizan por una acumulación excesiva de grasa en forma de triglicéridos (esteatosis) en el hígado en pacientes que no abusan del alcohol. La NASH se encuentra en un subconjunto de pacientes con NAFLD que tienen, además del exceso de grasa, evidencia de lesión hepatocelular característica y cambios necroinflamatorios. La NAFLD es una forma importante de enfermedad hepática crónica que no está asociada con un consumo significativo de alcohol. La NAFLD es una afección en la que se acumula una cantidad excesiva de grasa en forma de triglicéridos (esteatosis) en el hígado, y se caracteriza histológicamente por más del 5 % de acumulación de triglicéridos hepáticos, dando como resultado esteatosis e inflamación hepática. La prevalencia de NAFLD, incluyendo NASH, también está aumentando en paralelo con la creciente epidemia de obesidad y diabetes. Sin embargo, las relaciones causales entre obesidad y/o diabetes, y la NASH o la tumorigénesis hepática aún no se han dilucidado claramente. Los investigadores han propuesto que la NAFLD puede resultar como consecuencia de múltiples resultados positivos paralelos, tales como factores derivados del tejido intestinal y adiposo y que la NAFLD es una enfermedad poligénica compleja. Modelos animales de NAFLD/NASH han proporcionado información crucial, no solo para dilucidar la patogénesis de NAFLD/NASH, pero también para examinar los efectos terapéuticos de diversos agentes. Se han usado diferentes dietas para producir esteatosis hepática y NASH en animales experimentales, tal como una dieta rica en grasas o una dieta deficiente en metionina y colina. Varios estudios han mostrado que la carga de la dieta a largo plazo alta en grasas o deficiente en metionina y colina, que puede inducir obesidad y resistencia a la insulina, también puede inducir la NASH y la tumorigénesis hepática en ratones C57BL/6J. (Véase, por ejemplo, Nakamura et al. Int. J. Mol. Sci. 14: 21240-21257 (2013) y Imajo et al. Int. J. Mol. Sci. 14: 21833-21857 (2013)).

La NAFLD está asociada con factores de riesgo cardiometabólicos y síndrome metabólico, y es la enfermedad hepática crónica más común entre los adultos en países desarrollados. Se ha estimado que hasta el 30 % de los adultos en los Estados Unidos y otros países occidentales tienen NAFLD; la prevalencia aumenta a más de dos tercios en sujetos obesos. Por otro lado, NASH puede estar presente en hasta el 3 % de la población general. Además de complicaciones hepáticas, los pacientes con NAFLD tienen un mayor riesgo de enfermedades cardiovasculares. (Véase, por ejemplo, Nakamura et al. Int. J. Mol. Sci. 14: 21240-21257 (2013)).

La NASH es una forma de enfermedad hepática metabólica en la que el cambio graso (esteatosis) está asociado con inflamación lobular, lesión por hepatocitos y/o fibrosis hepática. Comprende un enlace patogénico en la cadena de NAFLD que se extiende desde la esteatosis blanda hasta algunos casos de “cirrosis criptogénica”. La NAFLD y NASH son manifestaciones generalmente hepáticas del síndrome de resistencia a insulina (o metabólico), pero los factores que transforman la esteatosis en NASH siguen sin estar claros. Sin embargo, no existen definiciones estandarizadas, particularmente para la patología que está abarcada por “esteatohepatitis significativa”. La NAFLD/NASH es el tipo más común de enfermedad hepática en abundancia de proteínas. La NASH típicamente no causa síntomas. Los pacientes con NASH típicamente tienen una mayor relación de neutrófilos con respecto a linfocitos (“NLR”) en comparación con pacientes sin NASH. La NLR, por lo tanto, es un marcador para predecir la esteatohepatitis en pacientes con NAFLD. Véase, por ejemplo, Alkhouri et al. Liver Int. 32(2):297-302 (2012). Cuando está presente, características clínicas tales como fatiga, hepatomegalia y la incomodidad hepática por dolor no son específicas. En el 20-25 % de los casos, la NASH puede progresar a etapas avanzadas de fibrosis hepática y cirrosis; la insuficiencia hepática se convierte en la causa más común de muerte, y HCC puede ocurrir ocasionalmente. La corrección de la resistencia a la insulina mediante medidas dietéticas y aumento de la actividad física (intervención de estilo de vida) es un enfoque lógico para prevenir o revertir la NASH temprana, y la modesta reducción de peso puede normalizar las anomalías de la prueba hepática. La terapia farmacológica dirigida a revertir la resistencia a la insulina, corrección de diabetes y trastornos lipídicos, o la proporción de “protección hepatocelular” se ha demostrado que mejora las pruebas hepáticas en estudios a corto plazo, pero se necesitan ensayos controlados aleatorizados más grandes para establecer si alguno de estos enfoques detiene la progresión de la fibrosis hepática y previene complicaciones hepáticas, y en qué etapa las intervenciones son rentables. (Véase, por ejemplo, Farrell et al. Introduction to NASH and Related Disorders: Chapter 1 OverView: an introduction to NASH and related fatty liver disorders (2007)).

No existe una estrategia de tratamiento definitiva y eficaz para NAFLD y NASH. La pioglitazona se ha usado para tratar la NAFLD y la NASH, pero debido a efectos secundarios no deseados, no es un candidato adecuado para el tratamiento (véase, por ejemplo, Kus et al. PLoS ONE 6(11): e27126 (2011) y Belfort et al. The New England Journal o f Medicine 355(22):2297-2307 (2006)). Actualmente no hay cura para nASh, y las terapias actuales tienen como objetivo controlar las condiciones que están asociadas con la NASH: obesidad, diabetes e hiperlipidemia. Hay varios fármacos disponibles para personas con resistencia a la insulina, y se están estudiando para NASH, tal como pioglitazona. Sin embargo, su papel aún no se ha demostrado.

La pioglitazona es un fármaco comercializado para su uso en el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2. La pioglitazona es un potente agonista para el receptor gamma activado por proliferador de peroxisomas (PPAR-y). Pero la pioglitazona se ha asociado con efectos secundarios no deseados, incluyendo el potencial en cuanto a interacciones de fármaco con fármaco, efectos cardiovasculares, retención de fluidos, aumento de peso y cáncer de vejiga (véase, por ejemplo, Kus et al. PLoS ONE 6(11): e27126 (2011)). Por lo tanto, las altas dosis y/o la administración crónica de pioglitazona no son deseables, ya que es probable que una alta exposición sistémica dé como resultado efectos secundarios graves.

La pioglitazona es un fármaco “inespecífico” que se convierte en muchos metabolitos in vivo. La ruta metabólica de la pioglitazona después de la administración oral se ha estudiado en varias especies animales y en seres humanos, y los metabolitos se han descrito en la bibliografía (véase, por ejemplo, Sohda et al. Chem. Pharm. Bull. 43(12):2168-2172 (1995) y Maeshiba et al. Arzneim.-Forsch/Drug Res. 47(I):29-35 (1997). Se han identificado al menos seis metabolitos, denominados M-I a M-VI. Entre estos metabolitos, M-II, M-III y M-IV muestran alguna actividad farmacológica pero son menos activos que la pioglitazona en modelos preclínicos diabéticos. 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona ha demostrado ser eficaz en el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central (véase el documento WO 2015/150476 A1). El documento: KAWAGUCI-SUZUKI MARINA ET AL: “A validated liquid chromatography tandem mass spectrometry method for simultaneous determination of pioglitazone, hydroxypioglitazone, and ketopioglitazone in human plasma and its application to a clinical study”, JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B: BIOMEDICAL SCIENCES & APPLICATIONS, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol. 969, 21 de agosto de 2014 (21-08-2014), páginas 219-223 describe que la pioglitazona tiene efectos beneficiosos en la esteatohepatitis no alcohólica.

Existe una necesidad urgente de nuevos tratamientos para la NAFLD y la NASH.

Sumario

La presente divulgación proporciona un método mejorado para tratar o prevenir la NAFLD, NASH, un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria, y específicamente NAFLD y NASH. Los inventores han encontrado sorprendentemente que los compuestos de fórmula (1), y sales de los mismos, muestran un perfil de seguridad mejorado en comparación con otro compuesto de 2,4-tiazolidinediona, pioglitazona. Específicamente, compuestos de fórmula (1), y sales de los mismos, se ha encontrado que exhibe un menor riesgo de interacciones de fármaco con fármaco y un menor riesgo de cáncer de vejiga que la pioglitazona, y que exhibe una menor variabilidad farmacocinética (PK) en humanos que la pioglitazona.

Por lo tanto, la presente invención proporciona un método para tratar o prevenir la enfermedad de hígado graso no alcohólico (NAFLD), y específicamente esteatohepatitis no alcohólica (NASH), en el que el método comprende administrar a un sujeto que lo necesita un compuesto de fórmula (1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en una cantidad eficaz para tratar o prevenir la enfermedad de hígado graso no alcohólico. En una realización, el compuesto de fórmula (1) es uno o más de los compuestos: (2) (R)-5-[[4-[2-[5-(R)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona; (3) (R)-5-[[4-[2-[5-(S)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona; (4) (S)-5-[[4-[2-[5-(R)-(1-hidroxietil)piridina-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona; o (5) (S)-5-[[4-[2-[5-(S)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. En una realización, no más del 1 % del número total de átomos de hidrógeno por mol del compuesto de fórmula (1) está en forma del isótopo 2H.

En otra realización, el método de tratamiento o prevención comprende administrar una mezcla de dos o más de los compuestos seleccionados del grupo que consiste en (2), (3), (4) y (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en el que la mezcla es ópticamente activa. En una realización, se administran los compuestos (2) y (3). En otra realización, se administran los compuestos (4) y (5). En otra realización, se administran los compuestos (2) y (4). En otra realización, se administran los compuestos (3) y (5).

En un aspecto de la divulgación, la enfermedad de hígado graso no alcohólico es esteatohepatitis no alcohólica. En otra realización, el método comprende además administrar un agente terapéutico adicional. En otra realización, el compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra al sujeto en una forma de dosificación oral, tal como un comprimido, una cápsula, una píldora, una pluralidad de gránulos, una disolución oral o una suspensión oral.

La presente invención también proporciona un compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad del hígado graso alcohólico, y específicamente esteatohepatitis no alcohólica, el compuesto de fórmula (1) que tiene la estructura:

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica, que comprende el compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico, y específicamente esteatohepatitis no alcohólica. Según otro aspecto, la presente divulgación proporciona el uso de un compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico, y específicamente esteatohepatitis no alcohólica.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de fórmula (1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en una cantidad eficaz para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria. Se expondrán realizaciones y ventajas adicionales de la divulgación, en parte, en la descripción a continuación, y se derivará a partir de la descripción, o puede aprenderse mediante la práctica de la divulgación. Las realizaciones y ventajas de la divulgación se realizarán y alcanzarán por medio de los elementos y combinaciones particularmente señalados en las reivindicaciones adjuntas.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 representa una comparación de los efectos antiinflamatorios de MIN-102 en un modelo de inflamación inducida por lipopolisacáridos in vitro.

La figura 2 representa una comparación del nivel de neutrófilos en un modelo experimental de ratón con encefalitis autoinmune después del tratamiento con MIN-102.

La figura 3 representa una comparación de los niveles de adiponectina en ratas Sprague Dawley después del tratamiento con MIN-102.

La figura 4 representa una comparación de la pérdida de peso corporal en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

La figura 5A representa una comparación de los niveles de ALT en plasma en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

La figura 5B representa una comparación de los niveles de AST en plasma en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

La figura 6A representa una comparación de los niveles de colesterol total hepático en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

La figura 6B representa una comparación de los niveles de triglicéridos hepáticos en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

La figura 7 representa una comparación de la puntuación de NAFLD para la esteatosis hepática, inflamación, fibrosis y degeneración vacuolar de hepatocitos en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

La figura 8 representa una comparación de las puntuaciones de NAS medias en el modelo de ratón con NASH con dieta MCD después del tratamiento con MIN-102.

Descripción detallada

La NASH es una enfermedad emergente que pertenece al espectro de NAFLD, y puede progresar a fibrosis y cirrosis del hígado. Actualmente, no hay estrategias de tratamiento definitivas y eficaces identificadas para tratar la NASH. En un aspecto, la presente divulgación se refiere a un método para tratar o prevenir la enfermedad de hígado graso no alcohólico, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en una cantidad eficaz para tratar o prevenir la enfermedad de hígado graso no alcohólico. En una realización, NAFLD es NASH. También es objeto de la presente invención un compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico. En una realización, NAFLD es NASH. También se da a conocer el uso de un compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico. En una realización, NAFLD es NASH.

La presente divulgación también se refiere a un método para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un compuesto de fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en una cantidad eficaz para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria.

La presente divulgación también se refiere a un método para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una forma de dosificación que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (1) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una realización, la enfermedad de la piel es uno o más de vitíligo, psoriasis, prurito, acné o dermatitis. En una realización, la enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria es una o más de enfermedades inflamatorias intestinales, lupus, artritis o asma. En una realización, la enfermedad respiratoria inflamatoria es un trastorno pulmonar obstructivo crónico.

Se ha descubierto inesperadamente que los compuestos de fórmula (1)

que tiene el nombre químico 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona (también denominado 5-(4-(2-(5-(1-hidroxietil)piridin-2-il)etoxi)bencil)tiazolidin-2,4-diona, hidroxipioglitazona, hidroxi pioglitazona, o M-IV), y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, denominados colectivamente en el presente documento “compuestos de la divulgación” (cada uno se denomina individualmente a continuación en el presente documento como un “compuesto de la divulgación”) son útiles en un método de tratamiento o prevención de NAFLD y NASH, proporcionando un método seguro a los pacientes con efectos secundarios mínimos o reducidos. Los inventores han descubierto que los compuestos de la divulgación exhiben un perfil de seguridad general superior, en comparación con pioglitazona. Esto es especialmente útil en el tratamiento de pacientes que requieren tratamiento crónico, tales como los que padecen NAFLD o NASH. Este perfil también es útil en el tratamiento de pacientes que requieren tratamiento para una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria.

La pioglitazona se ha sometido a prueba para el tratamiento de la NASH (véase, por ejemplo, Belfort et al. N. Engl. J. Med. 355(22):2297-2307 (2006); Sanyal et al. N. Engl. J. Med. 362(18):1675-1685 (2010)). Sin embargo, el tratamiento crónico con pioglitazona está asociado con efectos secundarios no deseados, incluyendo el potencia en cuanto a interacciones de fármaco con fármaco, efectos cardiovasculares, retención de fluidos, aumento de peso y cáncer de vejiga. Por lo tanto, la administración crónica y/o dosis altas de pioglitazona no son deseables, ya que es probable que una alta exposición sistémica dé como resultado efectos secundarios graves. Las advertencias sobre el uso de pioglitazona y el riesgo de cáncer de vejiga condujeron a la retirada para el uso futuro del fármaco en Francia y Alemania (véase, por ejemplo, “Update on ongoing European review of pioglitazone-containing medicines”, European Medicines Agency (9 de junio de 2011)).

Además, la pioglitazona tiene una variedad de posibles interacciones de fármaco con fármaco:

• potenciales interacciones con moduladores de 2C8 con fibratos (agonistas de PPAR alfa tales como gemfibrozilo usado como hipolipemiante); anticancerígenos (sorafenib, paclitaxel); estatinas (cerivastatina); antibióticos (rifampin y trimetopima);

• potenciales interacciones con moduladores de 2C9 con leflunomida (artritis reumatoide); teriflunomida (esclerosis múltiple) y nateglinida (diabetes); e

• potenciales interacciones con moduladores de 3A4 con inhibidores de COMT (entacapona); inhibidores de MAO B (selegilina); modafinil; inhibidores de acetilcolinesterasa (galantamina); donepezilo; inmunomoduladores (fluoxetina, tacrolimus, sirolimus).

Se ha mostrado que los compuestos de la divulgación presentan un menor riesgo de interacciones de fármaco con fármaco y un menor riesgo de cáncer de vejiga. Además, se ha mostrado que los compuestos de la divulgación exhiben una menor variabilidad PK en humanos que la pioglitazona. Los compuestos de la divulgación también ofrecen potencialmente una ventaja para aquellos individuos que presentan un polimorfismo en genes que afectan directamente al metabolismo de pioglitazona.

Menor riesgo de hiperplasia de epitelio (cáncer de vejiga): la presencia de hiperplasia de epitelio en ratas después de un tratamiento prolongado ha demostrado ser un buen marcador predictivo del riesgo de cáncer de agonistas de PPAR gamma. El mecanismo de acción de esta hiperplasia de epitelio puede ser independiente del agonismo de PPAR gamma.

Los datos actuales sugieren que el tratamiento con un compuesto de la divulgación muestra una menor incidencia de hiperplasia de epitelio en ratas, y, por lo tanto, un menor potencial en cuanto al cáncer de vejiga. El ejemplo 1 muestra que la hiperplasia de epitelio, que es un marcador predictivo de un posible riesgo de cáncer de vejiga, solo se observó en el grupo de pioglitazona.

Menor potencial de interacción fármaco con fármaco: las interacciones de fármaco con fármaco pueden conducir a cambios en la exposición sistémica, dando como resultado variaciones en la respuesta a fármaco de los fármacos administrados de manera conjunta. Además de la administración de manera conjunta de otros fármacos, la ingestión concomitante de suplementos dietéticos, frutos cítricos o zumo de frutas también podría alterar la exposición sistémica de fármacos, lo que conduce a reacciones adversas del fármaco o pérdida de eficacia. Por lo tanto, es importante evaluar potenciales interacciones de fármacos antes de la aprobación del mercado, así como durante el período después de su comercialización.

Como se indica en los ejemplos, las ventajas de los compuestos de la divulgación con respecto a la pioglitazona están relacionadas con las potenciales interacciones de fármaco con fármaco de la pioglitazona con sustratos, inhibidores o inductores de CYp 2c 8, CYP2C9, CYP3A4 y CYP2B6. Como se muestra en los ejemplos, 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona no causa una inhibición notable reversible o dependiente del tiempo hacia las principales enzimas CYP. Además, 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona es más específica que la pioglitazona como un potencial inductor de CYP basándose en datos experimentales con CYP3A4 y CYP2B6.

Menor variabilidad PK en seres humanos: como se indica en el ejemplo 7, la respuesta a pioglitazona en pacientes con NASH depende de la concentración. Véase, Kawaguchi-Suzuki et al. Aliment. Pharmacol. Ther. 46(1):56-61 (2017). Debido a su variabilidad PK, la pioglitazona no se observó eficaz en todos los pacientes con NASH, y se requerirían dosis más altas para garantizar su eficacia en todos los pacientes con NASH tratados. Dosis más altas de pioglitazona aumentarían el riesgo de desarrollar eventos adversos. Los compuestos de la divulgación tienen una variabilidad PK más baja y, por lo tanto, el tratamiento con compuestos de la divulgación es más seguro que el tratamiento con pioglitazona.

El compuesto de fórmula (1), 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona, tiene dos centros quirales. Uno de ellos es el átomo de carbono en la posición 5 del anillo de tiazolidin-diona y el otro átomo asimétrico está en la posición 1 del grupo hidroxietilo como se muestra por las flechas:

Como se usa en el presente documento, el término “compuesto de fórmula (1)” se usa para designar todos los estereoisómeros posibles, incluyendo enantiómeros y diastereoisómeros, y mezclas que incluyen mezclas racémicas de los mismos.

En una realización, el compuesto de fórmula (1) se selecciona del grupo que consiste en:

compuesto (2) (R)-5-[[4-[2-[5-(R)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona

compuesto (3) (R)-5-[[4-[2-[5-(S)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona

compuesto (4) (S)-5-[[4-[2-[5-(R)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona

y

compuesto (5) (S)-5-[[4-[2-[5-(S)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Aunque los compuestos (2) a (5) se han preparado como se describe en el documento WO 2015/150476 A1 y se han aislado, su configuración absoluta (R/S) aún no se ha determinado. El tiempo de retención de cada enantiómero se ha medido por HPLC quiral.

La referencia a los compuestos (1) a (5) en la presente divulgación se pretende que designe compuestos (1) a (5) que tienen átomos de hidrógeno que están predominantemente en forma de su isótopo 1H, es decir, no más del 1 % del número total de átomos de hidrógeno por mol de compuesto está en forma del isótopo 2H (deuterio). En una realización, no más del 0,015 % (que es la abundancia natural de deuterio) del número total de átomos de hidrógeno por mol de compuesto está en forma del isótopo 2H (deuterio).

En una realización, puede administrarse al paciente una mezcla que comprende una cantidad no equimolar de cada compuesto (2), (3), (4) y (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. En otra realización, la mezcla comprende cada uno de los compuestos (2), (3), (4) y (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en una cantidad del 20 % ± 10 % en p/p. En otra realización, la mezcla comprende cada uno de los compuestos (2), (3), (4) y (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en una cantidad del 25 % ± 5 % en p/p.

En otra realización, puede administrarse al paciente una mezcla que comprende cada compuesto (2), (3), (4) y (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la que la mezcla comprende un exceso enantiomérico de uno o más del compuesto (2), (3), (4) y (5). En otra realización, puede administrarse al paciente una mezcla que comprende una cantidad equimolar de cada compuesto (2), (3), (4) y (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, es decir, cada compuesto en una cantidad del 25 % en p/p.

En una realización, puede administrarse al paciente una mezcla de dos o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en el compuesto (2), el compuesto (3), el compuesto (4) y el compuesto (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la que la mezcla es ópticamente activa. En otra realización, la mezcla comprende dos o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en:

(a) el compuesto (2) y el compuesto (3);

(b) el compuesto (4) y el compuesto (5);

(c) el compuesto (2) y el compuesto (4); y

(d) el compuesto (3) y el compuesto (5),

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En otra realización, se administra al paciente la mezcla (c) o la mezcla (d).

En otra realización, se administra al paciente una mezcla que consiste esencialmente en:

(a) el compuesto (2) y el compuesto (3), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, como los agentes activos;

(b) el compuesto (4) y el compuesto (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, como los agentes activos;

(c) el compuesto (2) y el compuesto (4), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, como los agentes activos; y

(d) el compuesto (3) y el compuesto (5), o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, como los agentes activos.

En otra realización de las mezclas (a) a (d) mencionadas anteriormente, los dos compuestos mencionados en cada una de las mezclas están presentes en cantidades equimolares. Dichas mezclas pueden comprender también cantidades menores (por ejemplo, menos del 10 % en peso, menos del 3 % en peso, menos del 1 % en peso y menos del 0,1 % en peso de otro estereoisómero de fórmula (1)). Dichas mezclas también pueden enriquecerse enantioméricamente con respecto a uno o más compuestos (2), (3), (4) y (5).

Otro aspecto de la divulgación, sales farmacéuticamente aceptables adecuadas de compuestos de la divulgación incluyen, por ejemplo, sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la divulgación pueden prepararse a partir de los siguientes ácidos, incluyendo sin limitación, ácidos fórmico, acético, propiónico, benzoico, acético, propiónico, benzoico, succínico, glicólico, glucónico, láctico, maleico, málico, tartárico, cítrico, nítrico, ascórbico, glucurónico, maleico, fumárico, pirúvico, aspártico, glutámico, benzoico, clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, isocítrico, xinafoico, tartárico, trifluoroacético, pamoico, propiónico, antranílico, mesílico, napadisilato, oxalacético, oleico, esteárico, salicílico, p-hidroxibenzoico, nicotínico, fenilacético, mandélico, embónico (pamoico), metanosulfónico, fosfórico, fosfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, pantoténico, toluenosulfónico, 2-hidroxietanosulfónico, sulfanílico, sulfúrico, salicílico, ciclohexilaminosulfónico, algénico, p-hidroxibutírico, galactárico y galacturónico. En una realización, las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales de ácido clorhídrico y ácido bromhídrico. En una realización, la sal farmacéuticamente aceptable incluye la sal del ácido clorhídrico.

Pueden prepararse compuestos de la divulgación por cualquier método adecuado conocido en la técnica, tal como mediante los procesos descritos en el documento WO 2015/150476 A1. 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona también está disponible comercialmente de, por ejemplo, Santa Cruz Biotechnology y Toronto Research Chemicals (Toronto, Ontario, Canadá).

Son posibles diversos ejemplos y realizaciones de la materia objeto inventiva dada a conocer en el presente documento y serán evidentes para un experto en la técnica, dado el beneficio de esta divulgación. En esta divulgación, se hace referencia a “algunas realizaciones”, “determinadas realizaciones”, “determinadas realizaciones a modo de ejemplo”, y frases similares significan que esas realizaciones son ejemplos de la materia objeto inventiva.

Los artículos “un”, “una” y “el/la” se usan en el presente documento para referirse a uno o más de uno (es decir, a al menos uno) del objeto gramatical del artículo. A modo de ejemplo, “un elemento” significa un elemento o más de un elemento.

La palabra “que comprende” se usa de una manera consistente con su significado abierto, es decir, para significar que un producto o proceso dado también puede tener opcionalmente características o elementos adicionales más allá de los expresamente descritos. Se entiende que siempre que se describan realizaciones con la expresión “que comprende”, realizaciones de otra manera análogas descritas en términos de “que consiste en” y/o “que consiste esencialmente en” también se contemplan y están dentro del alcance de esta divulgación.

El término “mejorar” en el contexto de esta presente descripción se entiende que significa cualquier mejora en la situación del paciente tratado.

El término “administración bid” o “BID” significa la administración dos veces al día de un agente terapéutico.

El término “SAD” significa una administración de dosis oral única de un agente terapéutico.

En la presente divulgación, cada uno de los términos “compuesto de fórmula (1)”, “hidroxipioglitazona”, “hidroxipioglitazona (M-IV)”, “hidroxipioglitazona”, y “5-[4-[2-(5-(1-hidroxietil)-2-piridinil)etoxi]bencil]-2,4-tiazolidinediona” se refieren a 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona, que tiene la estructura representada anteriormente, y cualquier estereoisómero de los mismos. El término “MIN-102” se refiere a la sal de clorhidrato de 5-[[4-[2-[5-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona racémico.

Por una cantidad “eficaz” o una “cantidad terapéuticamente eficaz” de un fármaco o agente farmacológicamente activo se entiende una cantidad no tóxica pero suficiente del fármaco o agente para proporcionar el efecto deseado. La cantidad que es “eficaz” variará de un sujeto a otro sujeto, dependiendo de la edad y el estado general del individuo, el agente o agentes activos particulares, y similares. Por lo tanto, no siempre es posible especificar una “cantidad eficaz” exacta. Sin embargo, una cantidad “eficaz” apropiada en cualquier caso individual puede determinarse por un experto en la técnica usando una experimentación rutinaria.

El término “tratamiento” o “tratar” en el contexto de esta memoria descriptiva significa mejorar o eliminar la enfermedad o uno o más síntomas asociados con dicha enfermedad. “Tratamiento” también abarca mejorar o eliminar las secuelas fisiológicas de la enfermedad.

El término “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a sales preparadas a partir de ácidos inorgánicos y orgánicos farmacéuticamente aceptables.

El término “prevención” o “prevenir” se refiere a la reducción en el riesgo de adquirir o desarrollar una enfermedad o trastorno dado, o la reducción o inhibición de la recurrencia o una enfermedad o trastorno.

Como se usa en el presente documento, la expresión “variabilidad de PK” o “variabilidad farmacocinética” se refiere a variaciones interindividuales de parámetros farmacocinéticos de fármacos, dando como resultado diferentes perfiles de concentración plasmática-tiempo después de la administración de la misma dosis a diferentes pacientes.

Como se usa en el presente documento, el término “estereoisómeros” es un término general para todos los isómeros de moléculas individuales que difieren solo en la orientación de sus átomos en el espacio. Este incluye enantiómeros e isómeros de compuestos con más de un centro quiral que no son imágenes especulares entre sí (diastereoisómeros). El término “centro quiral” o “átomo de carbono asimétrico” se refiere a un átomo de carbono al que están unidos cuatro grupos diferentes.

Los términos “enantiómero” y “enantiomérico” se refieren a una molécula que no puede superponerse a su imagen especular y, por lo tanto, es ópticamente activa en la que el enantiómero rota el plano de luz polarizada en una dirección y su compuesto de imagen especular rota el plano de luz polarizada en la dirección opuesta.

El término “racémico” se refiere a una mezcla de partes iguales de enantiómeros y mezcla que es ópticamente inactiva. El término “configuración absoluta” se refiere a la disposición espacial de los átomos de una entidad molecular quiral (o grupo) y su descripción estereoquímica, por ejemplo, R o S.

Los términos y convenciones estereoquímicos usados en la memoria descriptiva están destinados a ser consistentes con los descritos en Pure & Amp; Appl. Chem 68:2193 (1996), a menos que se indique de otro modo.

El término “exceso enantiomérico” o “ee” se refiere a una medida de cuánto de un enantiómero está presente en comparación con el otro. Para una mezcla de enantiómeros R y S, el porcentaje de exceso enantiomérico se define como \R - S | * 100, donde R y S son las fracciones molares o en peso respectivas de enantiómeros en una mezcla de manera que R S =1. Con conocimiento de la rotación óptica de una sustancia quiral, el porcentaje de exceso enantiomérico se define como ([^a ]^obs/[^a ]^máx)*100, donde [^a ]^obs es la rotación óptica de la mezcla de enantiómeros y [^a ]^máx es la rotación óptica del enantiómero puro. La determinación del exceso enantiomérico es posible usando una variedad de técnicas analíticas, incluyendo espectroscopía de RMN, cromatografía en columna quiral o polarimetría óptica.

Los términos “enantioméricamente puro” o “enantiopuro” se refieren a una muestra de una sustancia quiral, todas de cuyas moléculas (dentro de los límites de detección) tienen el mismo sentido de quiralidad.

Los términos “enantioméricamente enriquecido” o “enantioenriquecido” se refieren a una muestra de una sustancia quiral cuya relación enantiomérica es mayor que 50:50. Compuestos enantioméricamente enriquecidos pueden ser enantioméricamente puros.

Métodos de tratam iento o prevención

Para su uso en el tratamiento de NAFLD, NASH y las otras enfermedades y trastornos descritos en el presente documento, las actividades de los compuestos de la divulgación pueden determinarse mediante el uso de los ensayos in vitro e in vivo apropiados.

La utilidad del compuesto de fórmula (1) en el presente método, incluyendo los estereoisómeros (2) a (5), mezclas (a) a (d), y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden demostrarse en ensayos in vitro o in vivo apropiados.

Según un modelo de NASH en ratones (véase Verdelho Machado et al. PlosOne May 27:10(5):e0127991 (2015)), ratones endogámicos C57BL/6 macho, de 8 semanas de edad, se obtuvieron de Charles River, Francia. Durante la fase de aclimatación, dieta estándar (alimentación de control) (RM1 (E) 801492, SDS) y agua corriente se proporcionó según se desee. Luego se alimentó a los ratones con una dieta deficiente en metionina y colina (m Cd ) (n.° de referencia A02082002B de Research Diets, EE. UU.) suplementada sin o con el artículo de prueba, proporcionado según se desee. Todos los procedimientos se realizaron según el documento Guide for the Care and Use o f Laboratory Animals (revisado en 1996 y 2011, 2010/63/EU) y leyes francesas.. Se alojaron 20 animales en jaulas de alojamiento ventiladas y enriquecidas (310 x 125 x 127 mm³) durante toda la fase experimental. Las camadas de las jaulas de los animales se cambiaron al menos una vez a la semana. Se alojaron en grupos de 10 animales durante todo el estudio, en un ciclo de luz normal de 12 horas (a las 08:00 p.m. se apagan las luces), 22±2 °C y 50±10 % de humedad relativa.

Después del período de aclimatación, los ratones (n = 20) se pesaron y se aleatorizaron en 2 grupos de tratamiento homogéneos basándose en el peso corporal (n = 10/grupo), puestos en una dieta MCD, y se trató BID por vía oral con vehículo o MIN-102 durante 7 semanas. El peso corporal se midió 3 veces/semana hasta el final de la fase experimental. A las 7 semanas de dieta/tratamiento, los ratones se pesaron y se trataron a ~08:00 a.m. por la mañana, después se sangraron (volumen máximo/EDTA) a las ~1:00 p.m.. Entonces se aisló inmediatamente plasma y se almacenó a -80 °C antes del ensayo de ALT y AST en plasma. El volumen de plasma restante se almacenó a -80 °C para análisis adicional eventual.

Después de la recogida de sangre, los ratones se sacrificaron por dislocación cervical bajo anestesia con isoflurano y se desangraron con disolución salina estéril. Se recogió el hígado y se pesó. Se diseccionó una muestra de hígado de ~20 mg (peso registrado) para determinar los niveles de colesterol y triglicéridos totales hepáticos. A Una muestra de hígado de 0,5 cm³ se congeló en isopentano para la tinción con aceite rojo O. Una muestra de hígado de 0,5 cm³ se almacenó en formol durante 24 horas, después en etanol a 70° a 4°C para hematoxilina/eosina, tinción con rojo Sirius.

Un sistema de puntuación de NAFLD (NAS) adaptado de Kleiner et al. (Hepatology. 41(6):1313-1321 (2005)). Se calculó una puntuación total de NAS de ratón individual para cada animal sumando la puntuación para (1) esteatosis hepatocelular, (2) inflamación de hígado, (3) fibrosis lobular, y (4) degeneración vacuolar de hepatocitos. El hígado sobrante se mantuvo almacenado a -80 °C para análisis adicional eventual.

Los datos se expresan como media ± EEM. El análisis estadístico se realizó usando una prueba de Mann-Whitney o una prueba a posteriori de ANOVA de 2 vías Bonferroni para comparar ambos grupos. Un valor de p<0,05 se consideró significativo.

Según otro modelo de NASH en ratones (véase Hsiao et al. BMC Mol. Biol. 2008, 26 de septiembre; 9:92), ratones endogámicos C57BL/6 macho, de 8 semanas de edad, se obtienen de BioLASCO Technology (Charles River Taiwan Ltd). Todos los ratones reciben el cuidado animal estándar bajo la supervisión de nuestro Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales. Los ratones se enjaulan en una instalación para animales con aire acondicionado a 23 °C con una ciclo de luz:oscuridad de 12 horas y se mantienen con libre acceso a agua y alimentos. Todos los ratones se alimentan con dieta de alimentación estándar (Basal dietTM 5755, PMI Nutrition International, St. Louis, MO, EE. UU.) durante una semana. La composición de esta dieta de alimentación basal es un 60,6% (peso/peso) de carbohidratos (43,6 % de almidón y 16,9 % de sacarosa), 10 % de grasa, 19 % de proteína, 4,3 % de fibra, 5 % de mezcla mineral y 0,2 % de mezcla de vitaminas. Luego se dividen en tres grupos: (1) dieta de alimentación (n = 5); (2) dieta rica en grasas (30 %) (n=5) (n° de catálogo 7166, PMI Nutrition International, Saint Louis, MO, EE. UU.); (3) dieta rica en grasas con MIN-102 (3 dosis). La dieta rica en grasas, basada en la dieta basal 5755 (contenido de 40,6 % de carbohidratos (23,6 % de dextrina y 15 % de sacarosa), 15 % de aceite de maíz, 15 % de manteca, 19 % de proteína, 4,3 % de fibra, 5 % de mezcla mineral y 0,2 % mezcla de vitaminas) proporcionó 53,1 % de calorías del aceite de maíz y manteca.

En otro modelo de NASH en ratones (véase Kus et al. PLoS ONE 6(11): e27126 (2011)), ratones C57BL/6N macho (Charles River Laboratories, Sulzfeld, Alemania) se mantienen a 22 °C en un ciclo de luz-oscuridad de 12 h (luz desde las 6:00 a.m.) con libre acceso a agua y alimentación (contenido de lípidos, 3,4 % en p/p; dieta Ssniff R/M-H extruida; Ssniff Spezialdieten GmbH, Soest, Alemania). Excepto por la evaluación de la sensibilidad a la insulina en obesidad dietética, se aleatorizaron ratones de tres meses de edad (n = 8; 2 animales por jaula) a la dieta cHF (contenido de lípidos, 35 % en p/p, principalmente aceite de maíz; o a los siguientes 'tratamientos' por (i) cHF+MIN-102 (1 dosis); cHF+MIN-102 (3 dosis); y cHF+MIN-102 (3 dosis). Durante el tratamiento que duró 8, la ración nueva de alimentos se distribuye diariamente y el consumo de alimentos y los pesos corporales se registran una vez a la semana. Para analizar todos los animales en condiciones nutricionales idénticas, los ratones se someten a ayuno durante el día (entre las 8:00 a.m. y las 6:00 p.m.), y luego se permitió el libre acceso a alimentación durante la noche y por la mañana hasta el momento de matar a los animales bajo anestesia pentobarbital (entre las 9:00 a.m. y las 11:00 a.m.). El músculo gastrocnemio y el hígado se diseccionan y el plasma-EDTA se aísla y se almacena para análisis adicionales. Para caracterizar el efecto del tratamiento sobre la sensibilidad a la insulina en ratones obesos, se realiza un experimento separado, en el que todos los animales se alimentan con dieta cHF entre los 3 y 7 meses de edad, y luego los animales enjaulados individualmente se aleatorizan (n=8) a la dieta cHF, o se tratan con una dieta de dosis de cHF+MIN-102 durante 2 semanas, es decir, el momento en el que se realiza la prueba de tolerancia a la insulina. Los experimentos con animales están aprobados específicamente por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Academia de Fisiología de Ciencias de la República Checa v.v.i. (número de aprobación: 172/2009) y se llevaron a cabo según las directrices.

La prueba de tolerancia a la insulina se realiza en ratones sometidos a ayuno durante la noche (los alimentos se retiran entre las 5:30 p.m. y las 8:30 a.m., es decir, el momento del inicio de la prueba mediante la inyección de D-glucosa (1 g/kg de peso corporal), en el que la glucemia se evalúa usando extracción de sangre en la cola justo antes de la inyección (glucosa en ayunas en los valores de referencia), y durante 180 min después de la inyección usando glucómetros (LifeScan, Ee. UU.). Los niveles de insulina también se determinan en los valores de referencia y 30 minutos después de la inyección de glucosa. El índice de HOMA se calculó mediante la siguiente fórmula: insulina plasmática en ayunas (mU/l) x glucosa plasmática en ayunas (mmol/l) / 22,5. La prueba de tolerancia a la insulina se realiza en ratones sometidos a ayuno durante 4 horas (los alimentos se retiran entre las 7 a.m. y las 11 a.m.). A los 0, 15, 30 y 90 min después de inyección intraperitoneal de insulina (0,75 U/kg; Actrapid, Novo Nordisk, Dinamarca), se monitorizan los niveles de glucosa en la sangre de la cola.

Como se muestra en el ejemplo 3, el potencial antiinflamatorio de MIN-102 se estudió en un modelo de inflamación inducida por lipopolisacáridos (“LPS”). La línea celular de leucemia monocítica humana THP-1 se elige para este estudio porque es una línea celular monocítica altamente diferenciada con propiedades fagocíticas. Las células THP-1 pueden producir citocinas proinflamatorias (IL-1, IL-6, IL-8 y TNF) y quimiocinas (MCP-1) en respuesta a la estimulación por lipopolisacáridos (“LPS”) (O26:B6, Sigma).

En la prueba de inflamación LPS, las células se cultivan en matraces de 162 cm2 en RPMI suplementado con suero bovino fetal a una concentración máxima de 0,8x106 células/ml. Se siembran en placas células en crecimiento exponencial en placas de cultivo tisular de 24 pocillos (0,8x106 células/pocillo) en medio sin suero a 37 °C en CO2 al 5 % y se preincuban con dosis crecientes de MIN-102 (de 1 |iM a 100 |iM) durante 1 h. Después de eso, se añaden 50 ng/ml de LPS y se incuban durante 4 horas. El tiempo, la lectura y la concentración de LPS se seleccionan basándose en publicaciones anteriores (Singh et al. Clinical Chemistry 51(12):2252-2256 (2005)). Los sobrenadantes se recogen después de 4 horas y se almacenan congelados a -20 °C hasta el análisis. Se cuantifica TNF-alfa en todos los sobrenadantes mediante ELISA (ELISA Ready-SET-Go para TNF alfa humana, eBioscience).

Como se muestra en la figura 1, LPS indujo la secreción de TNF alfa en comparación con el grupo de control. MIN-102 inhibió la secreción de esta citocina a las concentraciones probadas más altas (100 y 50 |iM) y demostró efectos menores a las concentraciones probadas más bajas (10, 5 y 1 |iM). Por consiguiente, MIN-102 muestra efectos antiinflamatorios.

Como se muestra en el ejemplo 4, el potencial antiinflamatorio de MIN-102 se estudió usando un modelo de ratón de encefalitis autoinmunitaria experimental (“EAE”). Este modelo para neuroinflamación es un modelo de esclerosis múltiple altamente reproducible y establecido desde hace mucho tiempo. El modelo se basa en la inducción de una reacción autoinmune tras la exposición de los animales a antígenos de mielina. Varios días después de la inoculación, por ejemplo, 9-12 días, el ratón desarrolla un desarrollo de enfermedad recidivante-remitente o crónico. Como se muestra en la figura 2, la inducción de los síntomas de EAE aumentó los niveles de neutrófilos, pero el tratamiento con MIN-102 redujo los niveles de neutrófilos a valores similares al grupo sin tratamiento previo. Como se muestra en la tabla 2, la relación de neutrófilos con respecto a linfocitos (“NLR”) aumentó en el modelo de EAE y disminuyó tras el tratamiento con MIN-102. Debido a que la NLR aumenta tanto en el modelo de EAE como en pacientes con NASH, puede concluirse en base a los datos que la NLR para pacientes con NASH puede reducirse tras el tratamiento con MIN-102.

La adiponectina es una citocina que antagoniza el exceso de almacenamiento de lípidos en el hígado y protege de la inflamación y la fibrosis (véase, por ejemplo, Buechler et al. World J. Am. Gastroenterol. 17(23):2801-2811 (2011)). En pacientes con NASH, los receptores de adiponectina hepáticos están disminuidos (véase, por ejemplo, Kaser et al. Gut 54(1):117-121 (2005)). Además, Los ratones inactivados con respecto a adiponectina desarrollan una fibrosis hepática más extensa en comparación con los animales de tipo silvestre, mientras que la sobreexpresión mediada por adenovirus de adiponectina mejora el daño hepático en ratones de tipo silvestre (véase, por ejemplo, Kamada et al. Gastroenterology 125(6):1796-1807 (2003)). Como se muestra en el ejemplo 5 y la figura 3, el tratamiento con MIN-102 aumentó significativamente los niveles de adiponectina. Por consiguiente, puede concluirse a partir de los datos que debido a que el tratamiento con MIN-102 aumenta significativamente los niveles de adiponectina, MIN-102 también podría corregir la deficiencia de adiponectina observada en pacientes con NASH.

Como se muestra en el ejemplo 6, el efecto preventivo de MIN-102 se evaluó en un modelo de ratón con NASH con dieta deficiente en metionina y colina (MCD). Los resultados de este estudio demuestran una fuerte reducción en la esteatosis hepática y la inflamación en ratones con MCD tratados con MIN-102. Como se muestra en la figura 4, los ratones tratados con MIN-102 mostraron una disminución menos grave en la pérdida de peso corporal. Las figuras 5A y 5B muestran que el tratamiento con MIN-102 redujo sustancialmente tanto los niveles de a Lt como de ALS en plasma. Las figuras 6A y 6B muestran que MIN-102 no cambió los niveles de colesterol hepático, pero mostró una reducción considerable en los triglicéridos hepáticos. Las figuras 7 y 8 muestran una fuerte reducción en la puntuación de NAFLD y la puntuación de NAS, respectivamente, para ratones tratados con MIN-102.

Como se comenta en el ejemplo 7, en humanos, MIN-102 tiene menos variabilidad en la exposición que la pioglitazona y, por lo tanto, se implican menos riesgos para los pacientes con el tratamiento con MIN-102.

Basándose en su actividad antiinflamatoria, los compuestos de la divulgación también pueden ser útiles para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en enfermedades de la piel, enfermedades autoinmunitarias e inflamatorias, y enfermedades respiratorias inflamatorias. Véase, por ejemplo, Ellis et al. Arch. Dermatol. 736:609-616 (2000); Pershadsingh, Expert Opin. Investig. Drugs 13(3):215-228 (2004); y Belvisi et al. European Journal o f Pharmacology 533:101-109 (2006).

Los compuestos de la divulgación tienen actividad como agonistas de PPAR-y. Se ha informado que los agonistas de PPAR-y son útiles en el tratamiento y/o la prevención de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis e hipertensión. Véase, por ejemplo, Migliavacca et al. J. Allergy Clin. Immunol. 137:1913-1915 (2016); Du et al. Adv. Ther. 29(9):763-774 (2012); Martelli et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. 87(10):4728-4735 (2002); Grommes et al. The Lancet Oncology 5:419-429 (2004); Heaney et al. J. Clin. Invest.111(9):1381-1388 (2003); Hsueh et al. Arteriorscler. Thromb. Vasc. Biol. 21:1891-1895 (2001); Yamashita et al. Metabolism 51(4):403-408 (2002); y Ferrari et al. PPAR Research 2015:1-8 (2015).

Composiciones farmacéuticas y uso como medicamento

Composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la divulgación pueden administrarse por cualquier vía de administración adecuada. Por ejemplo, cualquiera de vías de administración oral, intraoral, tópica, epicutánea, subcutánea, transdérmica, intramuscular, parenteral, ocular, rectal, vaginal, inhalación, bucal, sublingual e intranasal pueden ser adecuadas. La presente divulgación también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de NAFLD. En una realización, NAFLD es NASH. En otra realización, la presente divulgación se refiere al uso de un compuesto de fórmula (1), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en un trastorno granulomatoso crónico, un síndrome de ovario poliquístico, un carcinoma de tiroides, un trastorno tiroideo autoinmunitario, un adenoma hipofisario, aterosclerosis, hipertensión, una enfermedad de la piel, una enfermedad autoinmunitaria e inflamatoria, y una enfermedad respiratoria inflamatoria.

En una realización, los compuestos de la divulgación pueden administrarse por vía oral. Formas orales de composiciones farmacéuticas pueden ser sólidas o líquidas. Formas de dosificación oral adecuadas incluyen comprimidos, cápsulas, píldoras, gránulos, suspensiones, emulsiones, jarabes o disoluciones. Las composiciones farmacéuticas pueden ser una forma sólida seleccionada de, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, píldoras o gránulos. En una realización, la forma oral es un comprimido. En otra realización, la forma oral es una disolución o suspensión oral. Estas son ventajosas cuando el paciente tiene dificultades para tragar, por ejemplo, como resultado de la enfermedad o para uso geriátrico y pediátrico. También son ventajosas preparaciones sublinguales.

La cantidad que es “eficaz” variará de un sujeto a otro sujeto, dependiendo de la edad y el estado general del individuo, el agente o agentes activos particulares, y similares. Por lo tanto, no siempre es posible especificar una “cantidad eficaz” exacta. Sin embargo, una cantidad “eficaz” apropiada en cualquier caso individual puede determinarse por un experto en la técnica usando experimentación rutinaria. Por lo tanto, la dosis del agente activo dependerá de la naturaleza y el grado de la afección, la edad y el estado del paciente, y otros factores conocidos por los expertos en la técnica. Una dosificación diaria típica es de 0,1 a 200 mg, tal como de 20 a 200 mg, por ejemplo, para un adulto 10­ 100 mg administrados como una dosis única sin dosificación adicional o en dosis múltiples, por ejemplo, de una a tres veces al día. Los compuestos descritos en el presente documento también pueden administrarse en dosis diarias de 80 a 600 mg.

Las composiciones farmacéuticas pueden contener excipientes convencionales conocidos en la técnica y pueden prepararse por métodos convencionales. Puede seleccionarse un compuesto específico o una mezcla de compuestos para una ruta de administración particular. Algunos compuestos o mezclas de compuestos también pueden ser adecuados basándose en su uso para tratar la NAFLD y la NASH.

Pueden prepararse formas de dosificación oral combinando uno o más compuestos de la divulgación en una mezcla íntima con al menos un excipiente según técnicas convencionales de formulación magistral farmacéutica. Los excipientes pueden tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de la composición deseada para la administración. Por ejemplo, excipientes adecuados para su uso en formas de dosificación líquidas o en aerosol orales incluyen, pero no se limitan a, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes aromatizantes, conservantes y agentes colorantes. Ejemplos de excipientes adecuados para su uso en formas de dosificación oral sólidas (por ejemplo, polvos, comprimidos, cápsulas y pastillas) incluyen, pero no se limitan a, almidones, azúcares, celulosa microcristalina, caolín, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, estabilizadores y agentes disgregantes.

Debido a su facilidad de administración, comprimidos, pastillas y cápsulas (tales como gelatina dura, HPMC o cápsulas de almidón) representan una realización de las formas unitarias de dosificación orales sólidas, en cuyo caso se usan excipientes farmacéuticos sólidos. Si se desea, los comprimidos o pastillas pueden recubrirse mediante técnicas acuosas o no acuosas estándar. Estas formas de dosificación pueden prepararse por cualquiera de los métodos de farmacia. En general, se preparan composiciones farmacéuticas y formas de dosificación mezclando de manera uniforme e íntima uno o más compuestos de la divulgación con portadores líquidos, portadores sólidos finamente divididos, o ambos, y luego conformando el producto para dar la presentación deseada si es necesario.

Por ejemplo, un comprimido puede prepararse por compresión o moldeo. Pueden prepararse comprimidos por compresión en una máquina adecuada de uno o más compuestos de la divulgación en una forma de flujo libre, tal como un polvo o gránulos, opcionalmente mezclados con uno o más excipientes. Pueden prepararse comprimidos moldeados por moldeo en una máquina adecuada de una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte.

Las composiciones farmacéuticas pueden comprender además uno o más agentes terapéuticos diferentes. Tratamientos combinados pueden administrarse simultáneamente, secuencialmente o por separado, por las mismas o por diferentes rutas, o antes, durante, y después de procedimientos quirúrgicos o de intervención.

Pueden usarse compuestos de la divulgación según la divulgación cuando el paciente también se administra o en combinación con uno o más de otro agente terapéutico seleccionado de agentes antiinflamatorios y analgésicos, antidiabéticos (por ejemplo, metformina), agonistas de dopamina (por ejemplo, levodopa), inhibidores de MAO-B, inhibidores de la catecol O-metiltransferasa (COMT), anticolinérgicos, otros antiparkinsonianos (por ejemplo, amantadina), receptores anti-NMDA (por ejemplo, memantina), inhibidores de colinesterasa, inhibidores de la ECA, antagonista de glutamato (por ejemplo, riluzol), antioxidantes, inmunomoduladores (por ejemplo, fingolimod, anticuerpos monoclonales anti CD52, CD25 y CD20, interferón-p-1a, natalizumab, laquinimod, dimetilfumarato) quimioterapéuticos, agentes de terapia de reemplazo enzimático, agentes de terapia de reducción de sustrato, corticosteroides, antiproliferativos (por ejemplo, metotrexato), medicamentos anticonvulsivos, anticoagulantes, antihipertensivos y neuroprotectores. Los compuestos de la divulgación también pueden usarse cuando el paciente está sometiéndose a terapia génica, trasplante de médula ósea, estimulación cerebral profunda o radioterapia.

El uno o más agentes terapéuticos incluyen una sulfonilurea (por ejemplo, glimepirida, glipizida, gliburida), una glinidina (también conocida como meglitinidas), una tiazolidinediona (por ejemplo, pioglitazona, rosiglitazona, lobeglitazona), un inhibidor de dipeptidil peptidasa 4 (DPP4) (por ejemplo, sitagliptina, vildagliptina, saxagliptina, linagliptina, gemigliptina, anagliptina, teneligliptina, alogliptina, trelagliptina, dutogliptina, omarigliptina), un inhibidor del cotransportador de sodio/glucosa de tipo 2 (SGLT2) (por ejemplo, canagliflozina, dapagliflozina), un agonista de receptor de péptido similar al glucagón 1 (GLP1) (por ejemplo, exenatida, liraglutida, lixisenatida, albiglutida, dulaglutida, taspoglutida, semaglutida), péptido similar al glucagón 1 (GLP-1), e insulina (por ejemplo, preparaciones de insulina animal extraídas del páncreas de ganado vacuno o cerdos; preparaciones de insulina humana sintetizadas por ingeniería genética usando Escherichia coli o levadura; insulina zinc; insulina protamina zinc; fragmentos o derivados de insulina (por ejemplo, INS-1), y preparaciones orales de insulina.

Ejemplos

Los métodos de tratamiento o prevención y usos descritos en el presente documento se detallan ahora adicionalmente con referencia a los siguientes ejemplos. Estos ejemplos se proporcionan con fines ilustrativos.

Ejemplo 1

Evaluación de hiperplasia de epitelio de vejiga en tejido de rata

Muestras de tejido de ratas tratadas con o bien pioglitazona (dos dosis de 14,5 y 145 mg/kg/día) o bien MIN-102 (25, 100 y 150 mg/kg/día) se procesaron rutinariamente, se fijaron en formol tamponado al 10 %, se embebieron en parafina y se tiñeron con hematoxilina y eosina.

Secciones de urotelio de vejiga tisular de ratas tratadas con MIN-102, pioglitazona, o placebo se observaron en cuanto a hiperplasia, citotoxicidad y necrosis con microscopía óptica por un patólogo experto y se clasificaron como sin hiperplasia, hiperplasia ligera, hiperplasia leve e hiperplasia grave.

Solo se observó hiperplasia epitelial, que es un marcador predictivo de un posible riesgo de cáncer de vejiga, en el grupo de pioglitazona (véase Suzuki et al. Toxicological Sciences 113(2):349-357 (2010)).

Ejemplo 2

Inhibición de CYP e inducción de MIN-102

Como se muestra en la tabla 1, se investigó la inhibición reversible y dependiente del tiempo (TDI) de MIN-102 hacia las principales enzimas de citocromo P450 (CYP) metabolizadoras de fármacos para evaluar potenciales interacciones fármaco-fármaco de MIN-102.

Se examinó la inhibición usando una incubación en cóctel con sustratos específicos de CYP para ocho enzimas de CYP metabolizadoras de fármacos principales (CYP 1A2, 2A6, 2B6, 2C8, 2c 9, 2C19, 2D6 y 3a 4) en incubaciones con un conjunto de microsomas de hígado humanos. En la inhibición reversible, se incubó MIN-102 con tampón, microsomas, cofactor NADPH y mezcla de cóctel de sustratos específicos de CYP durante 15 min. En el estudio TDI, se preincubaron tampón y microsomas con MIN-102 en presencia y ausencia de cofactor NADPH durante 0 o 30 minutos para dilucidar la posible dependencia temporal de la inhibición. Se realizó incubación secundaria con mezcla de cóctel de sustratos específicos de CYP durante 30 min. Se usó MIN-102 a concentraciones finales de 0,01, 0,1, 1, 10 y 100 |iM en ambos ensayos.

Tabla 1

MIN-102 no provocó una inhibición notable reversible o dependiente del tiempo hacia las principales enzimas de CYP a concentraciones in vitro de 100 |ⁱ M o inferiores.

Estos datos diferían de los de pioglitazona. La pioglitazona (véanse las tablas de Sahi et al. Drug Metabolism and Disposition 31(4):439-446 (2003)) presenta una CI⁵⁰ para 2C8 de 9,38 |ⁱ M con una Kⁱ de 1,69 |ⁱ M; y para 3A4 de 12,3 |ⁱ M y con una Kⁱ de 11,8.

La pioglitazona parece ser un inhibidor de estos CYP, así como ser metabolizada ampliamente por CYP2C8 a MIN-102. Sin embargo, MIN-102 no muestra una potente inhibición de CYP2C8 o CYP3A4.

Los datos generados no indicaron MIN-102 como un fuerte inductor de CYP1A2, CYP2B6 o CYP3A4 a las concentraciones sometidas a prueba. Sin embargo, una señal de inducción menor a la concentración de MIN-102 más alta sometida a prueba (50 |iM) sugirió que no puede descartarse la inducción a concentraciones más altas. MIN-102 es más específico que pioglitazona como potencial inductor de CYP.

La potencia de inducción de MIN-102 a cinco concentraciones que oscilan de 0,1 a 50 |iM hacia las enzimas de CYP humanas 1A2, 2B6 y 3A4 en ARNm y se estudió el nivel de actividad enzimática en hepatocitos crioconservados de 3 donantes humanos. La estabilidad de MIN-102 en el medio de incubación se analizó en paralelo a la concentración de prueba más alta (50 |iM) y se cuantificó en medio de incubación.

Un menor aumento, menos del 20 % de la inducción de control positivo respectiva, en el ARNm de CYP3A4 y se observó la actividad de reacciones de sonda de CYP1A2, CYP2B6 y CYP3A4, a la concentración más alta de MIN-102 (50 |iM). Por lo tanto, los datos generados no indican que MIN-102 sea un fuerte inductor de CYP1A2, CYP2B6 o CYP3A4 a las concentraciones sometidas a prueba.

Basándose en experimentos de estabilidad, MIN-102 a una concentración de 50 |iM permaneció estable durante incubación de 24 horas, lo que sugiere que no hay evidencia de que la descomposición de MIN-102 durante las incubaciones hubiera sesgado la evaluación del potencial de inducción de MIN-102.

Por el contrario, la pioglitazona en un ensayo similar indujo 4,79 veces de aumento a 10 |iM en CYP3A4 y 2,35 veces de aumento a 50 |iM en CYPB6, que son un >20 % de la inducción de controles positivos.

Ejemplo 3

MIN-102 muestra efectos antiinflamatorios en un modelo de inflamación inducida por lipopolisacáridos in vitro

Se obtuvieron células THP-1 de leucemia monocítica humana de la American Type Culture Collection. Las células se mantuvieron en medio RPMI-1640 con 11,1 mmol/l de glucosa, 0,05 mmol/l de mercaptoetanol, 100 ml/l o suero bovino fetal al 10 % y 2 mmol/l de glutamina.

La línea celular de leucemia monocítica humana THP-1 se eligió para este estudio porque es una línea celular monocítica altamente diferenciada con propiedades fagocíticas. La línea celular THP-1 se usó en este modelo in vitro, en lugar de monocitos humanos, para minimizar la variabilidad.

Las células se cultivaron en matraces de 162 cm2 en RPMI suplementado con suero bovino fetal a una concentración máxima de 0,8x106 células/ml. Se sembraron células en crecimiento exponencial en placas de cultivo tisular de 24 pocillos (0,8x106 células/pocillo) en medio sin suero a 37 °C en CO2 al 5 % y se preincubaron con dosis crecientes de MIN-102 (de 1 |iM a 100 |iM) durante 1 h. Después de eso, se añadieron 50 ng/ml de LPS y se incubaron durante 4 horas. El tiempo, la lectura y la concentración de LPS se seleccionaron basándose en publicaciones anteriores (Singh et al. Clinical Chemistry 51(12):2252-2256 (2005)). Los sobrenadantes se recogieron después de 4 horas y se almacenaron congelados a -20 °C hasta el análisis. Se cuantificó TNF-alfa en todos los sobrenadantes mediante ELISA (ELISA Ready-SET-Go para TNF alfa humana, eBioscience). El intervalo de calibradores de TNF-alfa fue de 0­ 500 ng/l. Los datos se presentan como media error estándar de la media de tres pocillos replicados por tratamiento. Los datos se analizaron estadísticamente mediante ANOVA de una vía seguido de la prueba a posteriori de Bonferroni frente a control tratamiento con LPS (*,p < 0,05; ***, p < 0,001).

Como se muestra en la figura 1, LPS indujo la secreción de TNF alfa en comparación con el grupo de control. MIN-102 inhibió la secreción de esta citocina a las concentraciones sometidas a prueba más altas (100 y 50 |iM) y demostró efectos menores a las concentraciones sometidas a prueba más bajas (10, 5 y 1 |iM). Por consiguiente, MIN-102 muestra efectos antiinflamatorios.

Ejemplo 4

MIN-102 muestra propiedades antiinflamatorias en modelo de ratón con encefalitis autoinmunitaria experimental (“ EAE”).

El potencial antiinflamatorio de MIN-102 se estudió usando un modelo de ratón con EAE, por ejemplo, como se describe en Linker y Lee, Experimental & Translational Stroke Medicine 1:5 (2009). Este modelo para neuroinflamación es un modelo de esclerosis múltiple altamente reproducible y establecido desde hace mucho tiempo. El modelo se basa en la inducción de una reacción autoinmune tras la exposición de los animales a antígenos de mielina. Varios días después de la inoculación, por ejemplo, 9-12 días, el ratón desarrolla un desarrollo de enfermedad recidivante remitente o crónico.

En el estudio, los ratones C57B1/6 hembra se sensibilizaron mediante una inyección subcutánea de fragmento de péptido glicoproteico de oligodendrocitos de mielina 35-55 (MOG^35-55) en adyuvante completo de Freund (CFA) en la base de cola. A partir de los cinco días posteriores a la inducción de la enfermedad, los animales se trataron a tres dosis orales diferentes de MIN-102, 17, 50 y 125 mg/kg/día, usando administración bid. Desde el día cinco, los animales se pesaron y se puntuaron en cuanto a la aparición de síntomas de enfermedad. Los niveles de neutrófilos se midieron en ratones con respecto a los ratones sin tratamiento previo, el vehículo, y la dosis más alta de MIN-102. Se analizaron datos mediante ANOVA de una vía seguido de la prueba a posteriori de Dunnett frente al grupo de vehículo (*, p < 0,05). Los resultados se presentan como media error estándar de la media de n=10, excepto n=9 para la dosis más alta de MIN-102, y n = 4 para el grupo sin tratamiento previo.

Tabla 2

Como se muestra en la figura 2, después de la inducción de los síntomas de EAE, los niveles de neutrófilos aumentaron, pero el tratamiento con MIN-102 redujo los números a valores similares al grupo sin tratamiento previo. Como se muestra en la tabla 2, la relación de neutrófilos con respecto a linfocitos (NLR) aumentó en el modelo de EAE y disminuyó tras el tratamiento con MIN-102.

Debido a que la NLR aumenta tanto en el modelo de EAE como en pacientes con NASH (véase, por ejemplo, Alkhouri et al. Liver Int. 32(2):297-302 (2012)), puede concluirse basándose en los datos que la NLR para pacientes con NASH también puede reducirse tras el tratamiento con MIN-102. Por consiguiente, se espera que MIN-102 pueda tratar eficazmente la NASH reduciendo la NRL.

Ejemplo 5

MIN-102 aumenta significativamente los niveles de adiponectina en plasma

Se hacen disminuir receptores de adiponectina hepáticos en pacientes con NASH y ratones inactivados con respecto a adiponectina desarrollan una fibrosis hepática más extensa en comparación con animales de tipo silvestre, mientras que la sobreexpresión mediada por adenovirus de adiponectina mejora el daño hepático en ratones de tipo silvestre. (Véase, por ejemplo, Kamada et al. Gastroenterology 125:1796-1807 (2003)).

El acoplamiento de PPAR en el sistema nervioso central se realizó en ratas Sprague Dawley de tipo silvestre. Las ratas se trataron durante 7 días con dosis crecientes de MIN-102 a 54 mg/kg/día. Se obtuvo plasma a 1 h después de la última administración de MIN-102. Se midieron los niveles de adiponectina mediante ELISA. Los resultados se representaron como media error estándar de la media de n = 8. Se analizaron los datos por Kruskal-Wallis seguido por la prueba a posteriori de Dunn frente al grupo de vehículo (****, p < 0,0001).

Como se muestra en la figura 3, el tratamiento con MIN-102 aumentó significativamente los niveles de adiponectina. Por consiguiente, puede concluirse basándose en estos datos que debido a que el tratamiento con MIN-102 aumenta significativamente los niveles de adiponectina, MIN-102 también podría corregir la deficiencia de adiponectina observada en pacientes con NASH.

Ejemplo 6

Efectos de MIN-102 en los ratones alimentados con dieta deficiente en metionina y colina

Los efectos preventivos de MIN-102 se evaluaron en un modelo de ratón con NASH con dieta deficiente en metionina y colina (MCD) de 7 semanas (Verdelho Machado et al.). Después del período de aclimatación, se pesaron ratones macho C57BL6/J (n=20) y se aleatorizaron en 2 grupos de tratamiento homogéneos basándose en el peso corporal (n=10/grupo), se pusieron en una dieta MCD, y se trataron por vía oral BID con vehículo o MIN-102 durante 7 semanas.

Se dosificó MIN-10262,5 mg/kg BID por vía oral mediante alimentación forzada.

Cuando los ratones C57BL6/J se alimentan con una dieta MCD, desarrollan rápidamente esteatosis hepática, inflamación y fibrosis con aumento concomitante en los niveles de alanina transaminasa (ALT)/aspartato aminotransferasa (AST) en plasma.

Material y métodos

Después del período de aclimatación, se pesaron ratones macho C57BL6/J (n=20) y se aleatorizaron en 2 grupos de tratamiento homogéneos basándose en el peso corporal (n=10/grupo), se pusieron en una dieta MCD, y se trataron por vía oral BID con un vehículo o MIN-102 (125 mg/kg/día) durante 7 semanas. El peso corporal se midió 3 veces/semana hasta el final de la fase experimental.

A las 7 semanas de dieta/tratamiento, los ratones se pesaron y se trataron a las ~08:00 a.m. por la mañana, después se sangraron (volumen máximo/EDTA) a las ~1:00 p.m.. Después, se aisló plasma inmediatamente y se almacenó a -80 °C antes del ensayo de ALT y AST en plasma. El volumen de plasma restante se almacenó a -80 °C para análisis adicional eventual.

Después de la recogida de sangre, los ratones se sacrificaron por dislocación cervical bajo anestesia con isoflurano y se desangraron con disolución salina estéril.

Un sistema de puntuación de NAFLD (NAS) adaptado de Kleiner et al. (Hepatology. 41(6): 1313-1321 (2005)) usando los criterios descritos en la tabla 3 a continuación:

Tabla 3

Varias observaciones histopatológicas distintas descritas en casos clínicos humanos y originalmente informadas en el sistema de puntuación de NAS publicado por Kleiner et al. no se observaron en este estudio en animales, tales como lipogranuloma, cuerpos de acidófilos, megamitocondria y macrófagos pigmentados. Por lo tanto, se eligió no incluirlos en el sistema de puntuación descrito anteriormente. Se calculó una puntuación total de NAS de ratón individual para cada animal sumando la puntuación para (1) esteatosis hepatocelular, (2) inflamación del hígado, (3) fibrosis lobular y (4) degeneración vacuolar de hepatocitos.

Resultados

Como se esperaba, los ratones con dieta MCD mostraron una pérdida sustancial de peso corporal. Sin embargo, como se muestra en la figura 4, los ratones tratados con MIN-102 mostraron una disminución menos grave en la pérdida de peso corporal, desde el día 14 hasta el día 50, lo que conduce a diferencias significativas entre el día 30 y el día 50. Como también se esperaba, la dieta de MCD dio como resultado niveles de ALT y AST en plasma muy altos (valores medios de 480 U/l y 455 U/l, respectivamente) al final del tratamiento. Las figuras 5a y 5B muestran que el tratamiento con MIN-102 redujo sustancialmente los niveles tanto de ALT como de AST en plasma en un 78% y 55%, respectivamente (ambas p<0,01 frente a vehículo).

Como se muestra en las figuras 6A y 6B, los ratones tratados con MIN-102 no mostraron un cambio en los niveles de colesterol hepático, pero mostraron una reducción considerable en niveles de triglicéridos hepáticos en un 92 % (p<0,001 frente a vehículo).

Se realizó un análisis histológico (tinción con rojo Sirius, H&E y aceite rojo O) para el sistema de puntuación de NAFLD (NAS) para la esteatosis hepática, inflamación, fibrosis y degeneración vacuolar de hepatocitos mostrado en la figura 7.

Las puntuaciones medias de grupo NAS fueron 3,40±0,3 y 0,44±01 en vehículo y MIN-102, respectivamente (p<0,001 frente a vehículo) (figura 8). La fuerte reducción en la puntuación de NAS estaba relacionada con una puntuación de esteatosis mitigada (p<0,001 frente a vehículo), que se confirmó mediante un % de tinción con aceite rojo O extremadamente bajo en comparación con el vehículo (p<0,001), y una desaparición total de inflamación.

En conclusión, el presente estudio demuestra una fuerte reducción en esteatosis hepática e inflamación en ratones con MCD tratados con MIN-102.

Ejemplo 7

Comparación de la variabilidad ( % CV) en datos de ABC (área bajo la curva, exposición) farmacocinética ng.h/ml entre el tratamiento con pioglitazona y MIN-102 en voluntarios sanos

Según una publicación reciente, la pioglitazona es una opción segura y eficaz para gestionar pacientes con diabetes tipo 2 y esteatohepatitis no alcohólica (NASH) (Kawaguchi-Suzuki et al. Aliment. Pharmacol. Ther. 46(1):56-61 (2017)). Sin embargo, como se indica en esta publicación, hay una marcada variabilidad en la respuesta al tratamiento. Kawaguchi-Suzuki et al. describen que la respuesta a pioglitazona en pacientes con NASH era dependiente de la concentración como se evidencia por la relación significativa tanto entre la concentración de pioglitazona como el índice de exposición a pioglitazona con cambios en NAS (r =0,48, P= 0,0002 y r=0,51, P<0,0001, respectivamente), esteatosis (r=0,41, P=0,002 y r=0,46, P=0,0005), e inflamación (r=0,44, P=0,0009 y r=0,40, P=0,0003).

El índice de exposición a pioglitazona también se asoció con un cambio en la degeneración vacuolar (P=0,04). El índice de exposición a pioglitazona fue mayor en pacientes con resolución de NASH (2,85_1,38 frente a 1,78_1,48, P=0,018). Los autores desarrollaron un modelo predictivo para el resultado primario que incorporó un índice de exposición a pioglitazona y NAS de referencia (ABC (área bajo la curva) = 0,77). Debido a su variabilidad PK, la pioglitazona no fue eficaz en todos los pacientes con NASH, y se requerirían dosis más altas para garantizar su eficacia en todos los pacientes con NASH tratados. Dosis más altas de pioglitazona aumentarían el riesgo de desarrollar sucesos adversos.

Eckland et al. y Christensen et al. informan que la variabilidad ( % CV; coeficiente de variación) en la eliminación de pioglitazona es típicamente de aproximadamente un 40 %-50 % (tabla 4), dando un intervalo de exposición (ABC) que es de hasta 10 veces de aumento (Eckland et al. Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes 108 (Supl. 2):S234-S242 (2000); Christensen et al. J. Clin. Pharmacol. 45:1137-1144 (2005)).

Tabla 4

Por el contrario, la variabilidad después de la administración de MIN-102 en condiciones comparables en voluntarios sanos muestra mucha menos variabilidad con un % CV entre un 10-20 % (tabla 5). Por lo tanto, el tratamiento con MIN-102 podría ser más previsible que alcance dosis efectivas que necesitan menos ajustes que un tratamiento con pioglitazona y, por consiguiente, implicaría menos riesgos en potenciales problemas de seguridad debido a dosis altas.

Tabla 5

Después de la administración de MIN-102, el valor de ABCq.~ a las diversas dosis de MIN-102 sometidas a prueba es sustancialmente mayor que cuando se administra una dosis comparable de pioglitazona. Algunas dosis pueden proporcionar un ABCq.» dentro del intervalo de aproximadamente 20.000-400.000 ng.h/ml.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES

   i. Compuesto de fórmula (1), o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico

   

   2. Compuesto para su uso según la reivindicación 1, en el que la enfermedad de hígado graso no alcohólico es esteatohepatitis no alcohólica.

   3. Compuesto para su uso según la reivindicación 1 o 2, en el que el compuesto de fórmula (1) es:
2. (2) (R)-5-[[4-[2-[5-(R)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona;
3. (3) (R)-5-[[4-[2-[5-(S)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona;

   (4) (S)-5-[[4-[2-[5-(R)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona; o

   (5) (S)-5-[[4-[2-[5-(S)-(1-hidroxietil)piridin-2-il]etoxi]fenil]metil]-1,3-tiazolidin-2,4-diona;

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
4. 4. Compuesto para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que no más del 1 % del número total de átomos de hidrógeno por mol del compuesto de fórmula (1) están en forma del isótopo 2H.
5. 5. Mezcla de dos o más compuestos seleccionados del grupo que consiste en el compuesto (2), el compuesto (3), el compuesto (4), y el compuesto (5) tal como se define en la reivindicación 3 o la reivindicación 4, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de hígado graso no alcohólico, en la que la mezcla es ópticamente activa.
6. 6. Mezcla para su uso según la reivindicación 5, en la que dicha mezcla comprende:

   (a) el compuesto (2) y el compuesto (3);

   (b) el compuesto (4) y el compuesto (5);

   (c) el compuesto (2) y el compuesto (4); o

   (d) el compuesto (3) y el compuesto (5),

   o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
7. 7. Mezcla de un compuesto (2), un compuesto (3), un compuesto (4) y un compuesto (5) tal como se define en la reivindicación 3 o 4, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, para su uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad de hígado graso no alcohólico, en la que la mezcla comprende cada compuesto en una cantidad de 25 % ± 5 % en p/p.
8. 8. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que también se administra otro agente terapéutico al paciente.
9. 9. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según la reivindicación 8, en el que el compuesto o la mezcla de compuestos y dicho otro agente terapéutico se proporcionan en combinación.
10. 10. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en el que dicho compuesto o mezcla de compuestos se proporciona en una forma de dosificación oral, intraoral, tópica, epicutánea, subcutánea, transdérmica, intramuscular, parenteral, ocular, rectal, vaginal, inhalación, bucal, sublingual o intranasal.
11. 11. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según la reivindicación 10, en el que la forma de dosificación es una forma de dosificación oral.
12. 12. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según la reivindicación 11, en el que la forma de dosificación oral es sólida.
13. 13. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según la reivindicación 12, en el que la forma de dosificación sólida oral es un comprimido, una cápsula, una píldora o una pluralidad de gránulos.
14. 14. Compuesto o mezcla de compuestos para su uso según la reivindicación 11, en el que la forma de dosificación oral es una disolución oral o una suspensión oral.