ES2628032T3

ES2628032T3 - Preparación de inmunoglobulina enriquecida con anti-LPS para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de un trastorno patológico

Info

Publication number: ES2628032T3
Application number: ES11793860.5T
Authority: ES
Inventors: Tomer Adar; Meir Mizrahi; Gadi Lalazar; Yaron Ilan; Ami Ben-Ya'acov
Original assignee: Immuron Ltd
Current assignee: Immuron Ltd
Priority date: 2010-08-17
Filing date: 2011-08-17
Publication date: 2017-08-01
Anticipated expiration: 2031-08-17
Also published as: EP2605791A2; AU2011290478A1; WO2012023051A2; AU2011290478B2; WO2012023051A3; EP2605791B1; CA2808361A1; US20130224216A1; DK2605791T3; US9943597B2; WO2012023051A9; HK1185016A1

Abstract

Una composición que comprende una preparación de calostro enriquecida con inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el tratamiento de un sujeto con esteatohepatitis no alcohólica (EHNA) que tiene uno o más de: un nivel de ALT por encima de 50 UI/dl, un nivel de AST por encima de 50 UI/dl, una AP mayor que 70 U/l y/o una GGT mayor que 60 U/l, en la que la composición se formula para administración oral y la forma de dosis oral comprende de 200 mg a 2000 mg de IgG, siendo la inmunoglobulina anti-LPS al menos el 7 % en peso seco de la composición de IgG.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6

imagen7

asociada a las mismas se selecciona del grupo que consiste en encefalopatía hepática, peritonitis bacteriana espontánea (PBE), ascitis, varices hemorrágicas, circulación hiperdinámica asociada a cirrosis, síndrome hepatorrenal, síndrome hepatopulmonar, hipertensión portopulmonar, sangrado por varices, insuficiencia adrenal y nivel de conciencia alterado.

En otra realización, el trastorno patológico es un daño hepático.

En otra realización, el trastorno patológico es un trastorno relacionado con el sistema inmunitario seleccionado del grupo que consiste en una enfermedad autoinmunitaria, la esteatohepatitis no alcohólica, el hígado graso, la ateroesclerosis, el síndrome metabólico y cualquier trastorno asociado a los mismos, enfermedades infecciosas y trastorno proliferativo. Como alternativa, el trastorno patológico se selecciona del grupo que consiste en una peritonitis secundaria e infección después de la cirugía, cardiomiopatía hepática e hipotensión, un síndrome hepatoadrenal, carcinoma hepatocelular, la enfermedad de Alzheimer, cualquier tipo de pérdida de memoria, cualquier tipo de demencia, trastornos de déficit de atención (ADHA), cualquier tipo de discapacidad del aprendizaje, el efecto del alcohol o drogas en el cerebro, cualquier tipo de enfermedad mediada por el sistema inmunitario, incluido el asma, y la peritonitis.

En otra realización, la composición comprende adicionalmente una preparación de inmunoglobulina que comprende inmunoglobulinas que reconocen y se unen a al menos un antígeno específico para dicho trastorno patológico. La preparación de inmunoglobulina puede proceder de calostro o de huevos de ave.

En otra realización, la composición modula las células T reguladoras que conducen a la modulación del equilibrio de células Th1/Th2, Trl/Th3 hacia una respuesta inmunitaria Th2, Trl/Th3 antiinflamatoria o una respuesta inmunitaria Th1 proinflamatoria, inhibiendo o activando de este modo una respuesta inmunitaria dirigida específicamente hacia dicho trastorno.

En otra realización, la composición modula el equilibrio de células Th1/Th2, Trl/Th3 hacia una respuesta inmunitaria Th2, Trl/Th3, inhibiendo de este modo una respuesta inmunitaria dirigida específicamente hacia dicho trastorno, y en donde dicha composición es para el tratamiento de cualquiera de una enfermedad autoinmunitaria, la esteatohepatitis no alcohólica, el hígado graso, la ateroesclerosis, el síndrome metabólico y cualquier trastorno asociado a estos, seleccionado de la diabetes de tipo 2, la resistencia a la insulina, la obesidad y el sobrepeso.

En otra realización, el trastorno patológico es un síndrome metabólico o una esteatohepatitis no alcohólica, o ambos.

En otra realización, el trastorno patológico es la diabetes. En otra realización, el trastorno patológico es la tolerancia alterada a la glucosa.

En otra realización, el método disminuye la tolerancia a la glucosa, disminuye los niveles de insulina en suero, disminuye los niveles de triglicéridos hepáticos o disminuye los niveles de colesterol.

En otra realización, el método modula el equilibrio de células Th1/Th2, Trl/Th3 hacia una respuesta inmunitaria Th1/Th2 proinflamatoria, aumentando de este modo una respuesta inmunitaria dirigida específicamente hacia dicho trastorno, y en donde dicha composición es para el tratamiento de enfermedades infecciosas y trastornos proliferativos.

En otra realización, la composición comprende adicionalmente calostro no hiperinmunitario y/o un agente, adyuvante

o vehículo terapéutico.

La composición se puede administrar por vía oral, por inhalación como aerosol, o por administración parenteral, intravaginal, intranasal, mucosa, sublingual, tópica o rectal, o cualquier combinación de las mismas.

En otra realización, la preparación de inmunoglobulina o de cualquiera de sus fracciones reconoce y se une a LPS o a cualquiera de sus fragmentos.

En otra realización, el método reduce o inhibe la translocación microbiana a través de la mucosa. En otra realización, el método reduce o inhibe la translocación microbiana a través de la mucosa y modula así la activación inmunitaria.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para modular la tolerancia inmunitaria en un sujeto que comprende la etapa de administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS de mamífero. Como alternativa, el método puede ser para modular la tolerancia oral.

Un método para inducir células T CD4+ CD25+ en el hígado de un sujeto comprende la etapa de administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS de mamífero. En otra realización, como parte de la divulgación se proporciona un método que puede ser para inducir células T CD4+ CD25+ LAP- en el hígado, células

9

T CD45+ LAP+ en el hígado, inducir células T CD3+ LAP+ en el hígado, inducir células T CD45+ LAP+ en el bazo, inducir células T CD8 + LAP+ en el bazo, inducir células T CD3 + LAP+ en el bazo, inducir células T CD8 + CD25+ en el bazo, inducir células T CD4 + CD25+ en el tejido adiposo, inducir células T CD3 + LAP+ en el tejido adiposo, inducir células T CD4 + CD25+ en las células vasculares estromales, inducir células T CD4 + CD25 + LAP+ en las células vasculares estromales, disminuir las células CD3+ NK1.1+ en el hígado, disminuir las células T CD25+ LAPen el hígado, disminuir las células T CD25 + LAP+ en el hígado, inducir células T CD4+ CD25+ LAP- en el bazo o inducir células T CD4+ CD25+ LAPT- en el tejido adiposo.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición para el tratamiento y la profilaxis de un trastorno patológico. La composición de la invención comprende, como principio activo, una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-lipopolisacárido (anti-LPS) de mamífero y además, opcionalmente, calostro, leche o uno o más componentes de productos lácteos y cualquier adyuvante/s. La preparación de inmunoglobulina o de cualquiera de sus fracciones reconoce y se une a LPS y a cualquiera de sus fragmentos. Según una realización opcional, la composición de la invención puede comprender además la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro que reconoce al menos un antígeno específico para dicho trastorno, activando o inhibiendo así una respuesta inmunitaria dirigida específicamente hacia dicho trastorno. Dicha composición combinada puede comprender opcionalmente además un agente terapéutico adicional o cualquier vehículo y adyuvante.

Por tanto, según una realización específica, la divulgación proporciona una composición que comprende como principio activo una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-lipopolisacárido (LPS) de mamífero. En donde dicha composición es particularmente aplicable para el tratamiento, la prevención y la profilaxis de una enfermedad hepática aguda o crónica, la cirrosis y cualquier enfermedad o complicación asociada a las mismas, comprendiendo opcionalmente dicha composición además un agente terapéutico adicional o cualquier vehículo y adyuvante.

Según otra realización opcional, la divulgación proporciona composiciones combinadas que comprenden una combinación de preparación de inmunoglobulina enriquecida con anti-LPS con al menos una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro o de huevos de ave que comprende inmunoglobulinas que reconocen y se unen a al menos un antígeno específico para dicho trastorno patológico. Opcionalmente, dicha composición combinada puede comprender además un agente terapéutico adicional o cualquier vehículo y adyuvante. Estas composiciones combinadas pueden utilizarse para el tratamiento de cualquiera de una enfermedad autoinmunitaria, la esteatohepatitis no alcohólica, el hígado graso, la ateroesclerosis, el síndrome metabólico y cualquier trastorno asociado los mismos, tal como la diabetes de tipo 2, la resistencia a la insulina, la obesidad y el sobrepeso.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona el uso de una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS de mamífero y, opcionalmente, una preparación de inmunoglobulina procedente de calostro que reconoce a al menos un antígeno específico de un trastorno patológico en la fabricación de una composición para el tratamiento y la profilaxis de un trastorno patológico. Cabe señalar que la preparación de inmunoglobulina o de cualquiera de sus fracciones reconoce y se une a LPS y a cualquiera de sus fragmentos. Según una realización opcional, la divulgación proporciona el uso de la preparación de inmunoglobulina enriquecida con anti-LPS de la divulgación que favorece la combinación con al menos una preparación de inmunoglobulina que comprende inmunoglobulinas que reconocen a al menos un antígeno específico para dicho trastorno. Dicha composición combinada puede utilizarse como una composición inmunomoduladora que activa o inhibe la respuesta inmunitaria dirigida específicamente hacia dicho trastorno.

En un aspecto adicional, la presente divulgación proporciona un método para el tratamiento y/o la profilaxis de un trastorno patológico. El método de la divulgación comprende la etapa de administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de una preparación de inmunoglobulina enriquecida con anti-LPS procedente de calostro de mamífero o de una composición que comprende la misma. Cabe señalar que la preparación de inmunoglobulina o de cualquiera de sus fracciones reconoce y se une a LPS y a cualquiera de sus fragmentos. Dicho método puede utilizarse para el tratamiento, la prevención y la profilaxis de una enfermedad hepática aguda o crónica, la cirrosis y cualquier enfermedad o complicación asociada a las mismas. Según una realización opcional, la preparación de inmunoglobulina enriquecida con anti-LPS de la divulgación puede combinarse además con al menos una inmunoglobulina que reconozca al menos un antígeno específico para dicho trastorno, activando o inhibiendo de este modo una respuesta inmunitaria específicamente dirigida hacia dicho trastorno. Este método puede ser específicamente aplicable para el tratamiento de trastornos relacionados con el sistema inmunitario. Debe apreciarse particularmente que las composiciones y composiciones combinadas utilizadas por los métodos de la divulgación pueden ser también aplicables para el tratamiento de cualquiera de una esteatohepatitis no alcohólica, el hígado graso, la ateroesclerosis, el síndrome metabólico y cualquier trastorno asociado los mismos, tal como la diabetes de tipo 2, la resistencia a la insulina, la obesidad y el sobrepeso.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para el tratamiento de un sujeto humano con una afección seleccionada del grupo que consiste en hipertensión, un aumento del índice de masa corporal (IMC), un incremento de la circunferencia de la cintura, la dislipidemia, la resistencia a la insulina, niveles elevados de enzimas hepáticas e hígado graso, que comprende administrar al sujeto una cantidad eficaz de una composición que

10

comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de un sujeto humano con una afección seleccionada del grupo que consiste en hipertensión, aumento del índice de masa corporal (IMC), incremento de la circunferencia de la cintura, dislipidemia, resistencia a la insulina, niveles elevados de enzimas hepáticas e hígado graso.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de un sujeto humano con una afección seleccionada del grupo que consiste en hipertensión, un aumento del índice de masa corporal (IMC), un incremento de la circunferencia de la cintura, la dislipidemia, la resistencia a la insulina, niveles elevados de enzimas hepáticas y el hígado graso.

La hipertensión puede caracterizarse por una presión arterial > 120 mmHg/80 mmHg, una presión arterial > 130 mmHg/90 mmHg o por una presión arterial > 140 mmHg/90 mmHg.

El hígado graso puede caracterizarse por una esteatosis macrovesicular, esteatosis macrovesicular y una actividad necroinflamatoria, o por una puntuación NAS de al menos 4.

La preparación de inmunoglobulina anti-LPS puede proceder de calostro o de huevos de ave.

La preparación de inmunoglobulina anti-LPS puede administrarse a una dosis de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25.000 mg diarios, de 10 mg a aproximadamente 20.000 mg diarios, de 25 mg a aproximadamente 15.000 mg diarios, de 100 mg a aproximadamente 2000 mg diarios, o de aproximadamente 1800 mg diarios. En una realización, la preparación de inmunoglobulina anti-LPS no se administra a una dosis de aproximadamente 600 mg diarios.

La preparación de inmunoglobulina anti-LPS puede formularse para su administración a una dosis de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25.000 mg diarios, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente

20.000 mg diarios, de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 15.000 mg diarios, de aproximadamente 100 mg a aproximadamente 2000 mg diarios o de aproximadamente 1800 mg diarios. En una realización, la preparación de inmunoglobulina anti-LPS no está formulada para la administración a una dosis de aproximadamente 600 mg diarios.

La preparación de inmunoglobulina anti-LPS puede prepararse para inmunizar a un mamífero o un ave con LPS de varias cepas de E. coli. El mamífero o el ave puede inmunizarse con LPS seleccionado del grupo que consiste en O6, O8, O15, O25, O27, O63, O78, O114, O115, O128, O148, O153, O159 y otros LPS asociados a E. coli enterotoxigénica.

El mamífero o el ave pueden inmunizarse con LPS seleccionado del grupo que consiste en O78, O6, O8, O129 y O153 LPS. El LPS puede comprender LPS O78.

En otra realización, la composición comprende adicionalmente una preparación de inmunoglobulina anti-insulina.

La preparación de inmunoglobulina anti-insulina se administra a una dosis de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25.000 mg diarios, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 20.000 mg diarios, de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 15.000 mg diarios, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente

10.000 mg diarios, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 4000 mg diarios, de aproximadamente 500 mg a aproximadamente 3000 mg diarios, de aproximadamente 1000 mg a aproximadamente 1400 mg diarios, o de aproximadamente 1200 mg diarios.

La preparación de inmunoglobulina anti-insulina puede formularse para su administración a una dosis de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25.000 mg diarios, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente

20.000 mg diarios, de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 15.000 mg diarios, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 10.000 mg diarios, de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 4000 mg diarios, de aproximadamente 500 mg a aproximadamente 3000 mg diarios, de aproximadamente 1000 mg a aproximadamente 1400 mg diarios o de aproximadamente 1200 mg diarios.

La preparación de inmunoglobulina anti-insulina puede prepararse para inmunizar a un mamífero o un ave con insulina conjugada con hemocianina de lapa californiana (KLH, keyhole limpet hemocyanin).

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para reducir los niveles de glucosa en ayunas en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para aumentar el pico inicial de secreción de

11

insulina en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir la tolerancia oral a la glucosa en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz una composición que comprende una preparación de inmunoglobulinas anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para aumentar la secreción de insulina en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de HBA1C en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de triglicéridos en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de colesterol total en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de colesterol LDL en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de ALT en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de AST en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de ALP en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir los niveles de GGT en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para aumentar los niveles de GLP-1 en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para aumentar los niveles de adiponectina en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para aumentar la proporción de adiponectina/IL-6 en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para aumentar las células T reguladoras CD25+ en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir el peso corporal en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para disminuir la circunferencia de la cintura o la circunferencia del brazo en un paciente humano que lo necesite, que comprende administrar a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

12

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la reducción de niveles de glucosa en ayunas en un paciente humano que lo necesite

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el aumento del pico inicial de secreción de insulina en un paciente humano que lo necesite

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de la tolerancia oral a la glucosa en un paciente humano que lo necesite

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el aumento de la secreción de insulina en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de HBA1C en un paciente humano que lo necesite

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de triglicéridos en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de colesterol total en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de colesterol LDL en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de ALT en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de AST en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de ALP en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de los niveles de GGT en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el aumento de los niveles de GLP-1 en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el aumento de los niveles de adiponectina en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el aumento de la proporción de adiponectina/IL-6 en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el aumento de las células T reguladoras CD25+ en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de

13

inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de peso corporal en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en la disminución de la circunferencia de la cintura o la circunferencia del brazo en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para reducir los niveles de glucosa en ayunas en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para aumentar el pico inicial de secreción de insulina en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir la tolerancia oral a la glucosa en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para aumentar la secreción de insulina en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de HBA1C en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de triglicéridos en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de colesterol total en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de colesterol LDL en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de ALT en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de AST en un paciente humano que lo necesite

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de ALP en un paciente humano que lo necesite

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir los niveles de GGT en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para aumentar los niveles de GLP-1 en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para aumentar los niveles de adiponectina en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para aumentar la proporción de adiponectina/IL-6 en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para aumentar las células T reguladoras CD25+ en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir el peso corporal en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para disminuir la circunferencia de la cintura o la circunferencia del brazo en un paciente humano que lo necesite.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método para tratar a un ser humano que padece una

14

enfermedad mediada por células T que comprende administrar al ser humano una cantidad eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el tratamiento de un ser humano que padece una enfermedad mediada por células T.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de un sujeto humano que padece una enfermedad mediada por células T

La enfermedad mediada por células T puede ser la resistencia a la insulina, la tolerancia alterada a la glucosa, la diabetes, el síndrome metabólico, o una enfermedad asociada a las mismas, o esteatohepatitis no alcohólica (EHNA).

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un método de tratamiento de un ser humano que padece una enfermedad seleccionada de la resistencia a la insulina o trastornos asociados que comprende administrar una cantidad eficaz de una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición que comprende una preparación de inmunoglobulina anti-LPS para su uso en el tratamiento de un ser humano que padece una enfermedad seleccionada de resistencia a la insulina o trastornos asociados.

En otro aspecto, la presente divulgación proporciona un uso de una preparación de inmunoglobulina anti-LPS en la fabricación de un tratamiento de medicamento para el tratamiento de un ser humano que padece una enfermedad seleccionada de la resistencia a la insulina o trastornos asociados.

La resistencia a la insulina o un trastorno asociado puede ser la diabetes, el síndrome metabólico o la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA).

Breve descripción de los dibujos

En las figuras, se denomina de diversas maneras, como Imm124-E, Travelan, anti-LPS, T-IgG (producida por la vacunación con cepas múltiples) y CBHI (producida por la vacunación con una cepa única), la preparación de calostro enriquecida con inmunoglobulina anti-LPS que se utiliza en algunas realizaciones de los métodos descritos en el presente documento.

Figura 1: La administración oral de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye las enzimas hepáticas. Los valores son medias ± DT. AST; aspártico transaminasa y ALT; alanina aminotransferasa.

Figura 2A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD4+CD25+ en el hígado. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual procedente de análisis FACS.

Figura 3A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD25+CD4+LAP-, CD45+LAP+ y CD3+LAP+ en el hígado. Los valores son medias. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. B; transferencia puntual procedente de análisis FACS.

Figura 4A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de las células T reguladoras CD45+LAP+ y CD8+LAP+ en el bazo. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. B; Una transferencia puntual procedente de análisis FACS de los marcadores de los linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 5: El calostro con IgG-T oral disminuye la insulina en suero en ratones Ob/Ob. Los valores son medias ± DT.

Figura 6: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye la tolerancia a la glucosa en ratones Ob/Ob.

Figura 7: La administración oral de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye la lesión hepática en ratones Ob/Ob. Los valores son medias ± DT. AST; aspártico transaminasa y ALT; alanina aminotransferasa.

15

Figura 8: La administración oral de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye los triglicéridos (TG) hepáticos en ratones Ob/Ob. Los valores son medias ± DT.

Figura 9A-B: La administración oral de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD3+LAP+ en el bazo. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 10: La administración oral de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD8+CD25+ en el bazo. Los valores son medias ± DT.

Figura 11: La administración oral de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD8+CD25+ en el bazo. Se muestra una transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 12A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD4+CD25+ en el tejido adiposo. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 13A-B. La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD3+LAP+ en el tejido adiposo. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 14A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de células T reguladoras CD4+CD25+ en células vasculares estromales (que contienen preadipocitos). A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 15A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta la expresión de linfocitos CD4+CD25+LAP+ en células vasculares estromales (que contienen preadipocitos). A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 16: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta las enzimas hepáticas en ratones Ob/Ob. Los valores son medias ± DT. AST; aspártico transaminasa y ALT; alanina aminotransferasa.

Figura 17: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye el colesterol total en ratones Ob/Ob. Los valores son medias ± DT.

Figura 18: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye los TG hepáticos en ratones Ob/Ob. La administración oral de calostros de preparaciones de inmunoglobulina con T-IgG y anti-LPS (indicada como CBHI) disminuye los TG hepáticos en ratones Ob/Ob. Los valores son medias ± DT. La disminución fue significativa para el grupo A en comparación con los grupos D, E, F (* p<0,05).

Figura 19A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuyó las células CD3+NK1.1+ en los hígados de ratones Ob/Ob. A. La administración oral de 1 ug, 1mg, 3 mg de T-IgG, junto con 100 ug de CBHI, disminuyó las células CD3+NK1.1+ en los hígados de ratones Ob/Ob. Expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B: La administración oral de 1 ug y 100 ug de T-IgG disminuyó las células CD3+NK1.1+ en los hígados de ratones Ob/Ob. Transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 20A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumentó las células CD4+CD25+LAP-/LAP+ en el hígado de ratones Ob/Ob. A; expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B; transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 21: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS induce cambios en linfocitos CD25+LAP- hepáticos. La administración oral de calostros de T-IgG y de CBHI induce cambios en los linfocitos CD25+LAP- hepáticos. Transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 22A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS disminuye los linfocitos CD25+LAP+ esplénicos. A. La administración oral de calostros de T-IgG y de CBHI

16

disminuye los linfocitos CD25+LAP+ esplénicos. Expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B: transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 23: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta los linfocitos CD4+CD25+LAP- esplénicos. La administración oral de 1 y 3 mg de calostros de T-IgG y de 100 mg de CBHI aumenta los linfocitos CD4+CD25+LAP- esplénicos.

Figura 24: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta CD4+CD25+ en el tejido adiposo. A. La administración oral de calostro de T-IgG aumenta CD4+CD25+ en el tejido adiposo. Expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT.

Figura 25A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta CD4+CD25+ en adipocitos. A. La administración oral de 100 mg de calostro de T-IgG aumenta CD4+CD25+ en adipocitos. Expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B. La administración oral de 1 ug, 100 mg y 1 mg de calostro de T-IgG aumenta CD4+CD25+ en adipocitos. Transferencia puntual procedente de análisis FACS.

Figura 26A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta CD3+LAP+ en adipocitos. A. La administración oral de calostro de T-IgG aumenta CD3+LAP+ en adipocitos. Expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B: transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 27A-B: La preparación oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS aumenta CD4+CD25+ en adipocitos. A. La administración oral de calostro de T-IgG aumenta CD3+LAP+ en adipocitos. Expresión de superficie promedio de marcadores en linfocitos. Los valores son medias ± DT. B: transferencia puntual representativa procedente de análisis FACS.

Figura 28A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) disminuye la ALT; 54,5 frente a 43,16, u/l, (p<0,04).

Figura 29A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) disminuye la AST - 50,58 frente a 45,5 u/l, (p<0,05).

Figura 30A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) disminuye la fosfatasa alcalina (AP/ALP): 82,1 frente a 72,4 u/l, (p<0,001).

Figura 31A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) disminuye la GGT 84,3 frente a 58,6 u/l, (p<0,05).

Figura 32A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye los niveles de glucosa en ayunas en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) disminuye los niveles de glucosa (suero) en ayunas (6,9 frente a 6,05 mmol/l, p<0,03).

Figura 33A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS aumenta el pico inicial de secreción de insulina en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce una elevación en el pico inicial de secreción de insulina tras la administración de glucosa (278 frente a 470 pmol/l, p<0,03).

Figura 34A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS mejora la tolerancia oral a la glucosa en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce un OGTT mejorado (área bajo la curva (ABC) de 2492 frente a 2252, p<0,05).

Figura 35A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS aumenta la mejora de los niveles de HB1Ac en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de HBA1C mejorados (7,19 frente a 6,20, p<0,001).

Figura 36A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS mejora las puntuaciones HOMA en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce puntuaciones HOMA mejoradas (6,71 frente a 4,82, p<0,06).

Figura 37A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS aumenta los niveles GLP-1 en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de GLP-1

17

aumentados en el 60 % de los pacientes tratados, (58,816 frente a 62,828 pM, p<0,04).

Figura 38A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS aumenta los niveles de adiponectina 1 en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de adiponectina aumentados en el 80 % de los pacientes tratados, (6181 frente a 7068, ng/ml, p<0,01).

Figura 39A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye los niveles de colesterol total en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de colesterol total disminuidos (5,28 frente a 4,44 µmol/l, p<0,04).

Figura 40A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye los niveles de colesterol LDL en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de colesterol LDL disminuidos (3,7 frente a 2,49 µmol/l, p<0,05).

Figura 41A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS disminuye los niveles de triglicéridos en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de triglicéridos disminuidos (1,88 frente a 1,32 µmol/l, p<0,05).

Figura 42A-D: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS aumenta los niveles de células T reguladoras CD4+CD25+ en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles aumentados de Tregs CD25+ (5,24 % frente a 7,12 %), como se muestra en 42A-B. Se observa un aumento significativo (p=0,002) en células HLA-DR CD4+CD25+ en la figura 42C. La figura 42D muestra un aumento en células CD4+ CD62+.

Figura 43A-B: La preparación oral de inmunoglobulina anti-LPS aumenta los niveles de células T reguladoras CD4+CD25+ en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) produce niveles de Tregs CD4+CD25+Foxp3+ aumentados (2 % frente a 2,26 %, respectivamente, p<0,002).

Figura 44: La inmunoglobulina oral anti-insulina disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) disminuye los niveles de ALT en suero en el 90 % de los pacientes (67 frente a 48 u/l, (p<0,01)).

Figura 45: La inmunoglobulina oral anti-insulina disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-LPS (CBHI) disminuye los niveles de AST en suero en el 80 % de los pacientes (59 frente a 48 u/l, (p<0,05)).

Figura 46: La inmunoglobulina oral anti-insulina disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) disminuye los niveles de AP en suero en el 70 % de los pacientes (101 frente a 91 u/l, (p<0,004)).

Figura 47: La inmunoglobulina oral anti-insulina disminuye la lesión hepática en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) disminuye los niveles de GGT en suero en el 80 % de los pacientes (70 frente a 58 u/l, (p<0,004)).

Figura 48: La inmunoglobulina oral anti-insulina disminuye los niveles de glucosa en ayunas en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) disminuye los niveles de glucosa (suero) en ayunas en el 80 % de los pacientes (6,01 frente a 5,55 u/l, (p<0,008)).

Figura 49: La preparación oral de inmunoglobulina anti-insulina aumenta el pico inicial de secreción de insulina en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina ((CBHI) produce una elevación en el pico inicial de secreción de insulina después de la administración de glucosa en el 70 % de los pacientes (541 frente a 679 pmol/l, p<0,02).

Figura 50: La preparación oral de inmunoglobulina anti-insulina mejora la tolerancia oral a la glucosa en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) produce un OGTT mejorado (área bajo la curva (ABC)) en el 80 % de los pacientes de 1515 frente a 1420, p<0,02).

Figura 51: La preparación oral de inmunoglobulina anti-insulina disminuye los niveles de colesterol total en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) produce una disminución de los niveles de colesterol total en suero en el 70 % de los pacientes tratados (4,9 frente a 4,47, p<0,03).

Figura 52: La preparación oral de inmunoglobulina anti-insulina aumenta los niveles de células T reguladoras CD4+CD25+ en seres humanos. La administración oral de la preparación de inmunoglobulina anti-insulina (CBHI) produce un aumento de Tregs CD4+CD25+ en el 60 % de los pacientes (2,95 % frente a 4,27 %, p<0,003).

18

imagen8

imagen9

imagen10

imagen11

imagen12

imagen13

imagen14

imagen15

imagen16

imagen17

imagen18

imagen19

imagen20

imagen21

imagen22

imagen23

imagen24

imagen25

imagen26

imagen27

imagen28

imagen29

imagen30

imagen31

imagen32

imagen33

imagen34

imagen35

imagen36

imagen37

imagen38

imagen39

imagen40

imagen41

imagen42

imagen43

imagen44

imagen45

imagen46

imagen47

imagen48

imagen49

imagen50

imagen51

imagen52

células vasculares estromales que contienen preadipocitos aislados según el método indicado anteriormente.

Las Figuras 14A y 14B muestran la expresión de superficie promedio de los marcadores (CD4+CD25+) en linfocitos del tejido adiposo, medida por citometría de flujo el día 25 (día del sacrificio) en todos los ratones Ob/Ob.

5 La Figura 14 demuestra que la administración oral de T-IgG aumenta un subconjunto de células T reguladoras CD4+CD25+ en células vasculares estromales que contienen preadipocitos.

Para investigar adicionalmente esta población de células, se realizó un análisis FACS en linfocitos aislados de 10 células vasculares estromales para examinar la expresión de marcadores (CD4+CD25+LAP+) (el día 25 (día del sacrificio) en todos los ratones ob/ob)

Las Figuras 15A y 15B muestran la expresión superficial promedio de los marcadores (CD4+CD25+LAP+) en los linfocitos del tejido adiposo medidos mediante citometría de flujo el día 25 (día de sacrificio) en los ratones Ob/Ob.

15 La Figura 15 demuestra que la administración oral de T-IgG aumenta un subconjunto de células T reguladoras CD4+CD25+ en las células vasculares estromales que contienen preadipocitos.

Ejemplo 18: Estudios de dosificación de la preparación de inmunoglobulina procedente de calostro 20 enriquecida con anti-LPS en ratones Ob/Ob

Tabla 3: Diseño Experimental

Grupo: PBS T-IgG T-IgG T-IgG T-IgG CBHI

A N=5: 30 ul - - - - -

B N=5: - 1 ug - - - -

C N=5: - - 100 ug - - -

D N=5: - - - 1 mg - -

E N=5: - - - - 3 mg

F N=5: - - - - - 100 ug

25 Grupos experimentales. Se estudiaron seis grupos de ratones (Tabla 3). Se alimentaron (PO) ratones Ob/Ob (5 por grupo) diariamente durante 25 días (5 días a la semana) con 30 ul de PBS (control, grupo A) o con 30 ul (=1 ug) de calostro de T-IgG (grupo B) o con 30 ul (=100 ug) de calostro de T-IgG (grupo C) o con 30 ul (=1 mg) de calostro de T-IgG (Grupo D) o con 30 ul (=3mg) de calostro de T-IgG (Grupo E) o con 30 ul (=100 ug) de calostro CBHI (Grupo F). Ambas preparaciones de calostro se disolvieron en agua.

30 Después de 4 semanas, los ratones se sacrificaron. El día del sacrificio, se extrajo sangre cardiaca por técnicas estándar y después se obtuvo suero para fines futuros.

Animales. Para el modelo Ob/Ob, se utilizaron ratones macho C57BL/6 Ob/Ob jóvenes (de 6 a 7 semanas de vida)

35 que se adquirieron en Harlan Laboratories (EE. UU.). Todos los ratones se mantuvieron en el Centro para Animales de la Facultad de medicina de la Universidad Hebrea de Hadassah. A los ratones se les administró pienso de laboratorio estándar y agua a voluntad, y se mantuvieron en un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas. Los experimentos con animales se llevaron a cabo según las directrices del Comité de asuntos institucionales de la Universidad Hebrea de Hadassah para el cuidado y uso de animales de laboratorio y con la aprobación del Comité.

40

Ejemplo 19: La administración oral de inmunoglobulina procedente de calostro enriquecida con anti-LPS

64

imagen53

imagen54

imagen55

imagen56

imagen57

imagen58

imagen59

imagen60

imagen61

Examen físico: X X X X

Constantes vitales: X X X X X X X

ÍMC (ÍNDICE DE MASA CORPORAL): X X X X X X X

SMA1: X X X X X X X

CRP: X X X

CBC/diferencial: X X X X X X X

ESR: X X

HbA1C: X X X X

Insulina: X X X X

Embarazo (beta HCG): X

FACS2: X X X

ELISA: X X X

Prueba de translocación bacteriana: X X X

Puntuación HOMA: X X X X

Prueba de tolerancia a la glucosa: X X

Asignación al azar: X

Toma de la medicación del estudio: X X X X X

1 SMA incluye: proteínas totales, albúmina, ALT, AST, ALP, GGTP, LDH, colesterol, LDL, HDL, TG, ácido úrico, creatinina, urea (BUN), Na, K, glucosa, bilirrubina total 2 Análisis FACS incluye, pero no de forma limitativa: Anti CD3, anti CD4, anti CD8, anti CD25+, FoxP3+, anti CD56,

5 CD62L+HLA-DR 3 ELISA: IL6, TNF, adiponectina, GLP-1

* Las visitas 2 a 6 se pueden hacer en una ventana de tiempo de 3 días de la fecha fijada.

Ejemplo 34. El alivio del daño hepático y de la resistencia a la insulina por la administración oral de la

10 preparación de calostro enriquecida con inmunoglobulina anti-LPS está mediado por el aumento de las células Treg y asociado al aumento de GLP-1 y adiponectina en suero: resultados de un ensayo clínico de fase I/II en EHNA.

En un ensayo clínico sin ocultación, diez pacientes con EHNA y resistencia a insulina, confirmado por biopsia, se

15 trataron por vía oral durante 30 días con una preparación de calostro enriquecida con inmunoglobulina anti-LPS (Immuron, Australia) preparada como se describe en el presente documento en el Ejemplo 47. Los pacientes se supervisaron para comprobar la seguridad, la resistencia a la insulina, las células T reguladoras (Tregs), la IL-6, adiponectina y GLP-1 en suero. El efecto clínico se determinó mediante la prueba de hemoglobina glicosilada A1c (HbA1c), prueba de tolerancia a la glucosa oral (OGTT), puntuación HOMA, enzimas hepáticas y perfil lipídico. La

20 comparación se hizo entre el día 1 y 30 en cada paciente.

Criterios de inclusión. Se inscribieron diez pacientes en un ensayo sin ocultación. Los participantes (hombres y mujeres de entre 18 y 60 años) se evaluaron para determinar su elegibilidad después de firmar un formulario de consentimiento informado escrito. El diagnóstico de EHNA se basó en una puntuación de una biopsia de hígado de 4 25 o superior y por un metabolismo de glucosa alterado, incluyendo diabetes (no tratada o tratada con hasta dos fármacos, sin ningún cambio en la medicación dos meses antes de la inscripción), glucosa alterada en ayunas o tolerancia alterada a la glucosa y HbA1C entre 5,5 y 14 %. La glucosa alterada en ayunas se definió como > 100 mg/dl. La tolerancia alterada a la glucosa se definió como el nivel de azúcar en sangre > 140 mg/dl dos horas después de una carga de glucosa y una HBA1C entre 5,5 y 8 %. No había pruebas de que hubiese otra enfermedad

30 hepática vírica o mediada por el sistema inmunitario.

Criterios de exclusión. Se excluyeron los pacientes que cumplían algunos de los siguientes criterios: infección simultánea activa con virus de hepatitis A, B o C; la presencia de infección por virus de inmunodeficiencia humana (VIH), carcinoma hepatocelular, insuficiencia hepática fulminante, funciones hepáticas sintéticas con grave deterioro 35 o una enfermedad infecciosa clínicamente significativa, neoplásica o mediada por el sistema inmunitario; antecedentes de tratamiento con fármacos inmunomoduladores, incluyendo esteroides y AINE, en cualquier momento dentro de las cuatro últimas semanas; antecedentes de coagulopatía; mujeres con posibilidad de embarazo a menos que sean quirúrgicamente estériles o utilicen medios anticonceptivos adecuados (es decir, DIU, anticonceptivo oral o Depo-Provera o barrera y espermicida); anemia (Hb < 10,5 g/dl), trombocitopenia (plaquetas <

40 100 k/µl) o linfopenia (recuento absoluto de linfocitos < 0,7) o alergia a la leche de vaca o intolerancia a la lactosa.

74

imagen62

imagen63

imagen64

imagen65

imagen66

imagen67

imagen68

imagen69

imagen70

imagen71

imagen72

Claims

imagen1