ES2625608T3

ES2625608T3 - Aumento de la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

Info

Publication number: ES2625608T3
Application number: ES11772735.4T
Authority: ES
Inventors: Robert Hershberg
Original assignee: VentiRx Pharmaceuticals Inc
Current assignee: VentiRx Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2010-04-21
Filing date: 2011-04-21
Publication date: 2017-07-20
Anticipated expiration: 2031-04-21
Also published as: PL2560658T3; RU2012149452A; US20130236449A1; HUE032774T2; CA2797182A1; CN105640964A; CA2797182C; WO2011133819A3; US20170027954A1; RU2627660C2; HRP20170714T1; US20120003213A1; EP2560658A4; EP2560658B1; JP2013525373A; WO2011133819A2; CN103209696B; US10016440B2; CN103209696A; PT2560658T

Abstract

Un anticuerpo monoclonal terapéutico y un compuesto de fórmula I como una molécula potenciadora de ADCC para uso en un método para aumentar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en un sujeto que recibe tratamiento terapéutico de anticuerpo monoclonal, en el que el compuesto está en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC en el sujeto y el compuesto está representado por la estructura:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde Y es**Fórmula** R1, R3 y R4 son H; R2 es OR6 o NR6R7; R5a, R5b y R5c son H, y R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6 y heteroalquilo C1-C6.

Description

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DESCRIPCION

Aumento de la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos Campo de la divulgacion

La presente divulgacion se refiere a compuestos para aumentar la citotoxicidad de anticuerpos monoclonales terapeuticos para el tratamiento de cancer y otras enfermedades celulares.

Antecedentes de la divulgacion

Los anticuerpos monoclonales (MAb) han demostrado eficacia clmica en una variedad de neoplasias malignas. Los anticuerpos monoclonales se utilizan actualmente comunmente como agentes terapeuticos para el tratamiento y/o la prevencion de canceres, enfermedades autoinmunes, trombosis, inflamacion e infeccion. Sin embargo, hay algunos casos de baja actividad de anticuerpos que contribuyen a efectos terapeuticos insuficientes sobre canceres, enfermedades autoinmunes, inflamacion e infeccion. Dicha accion insuficiente del farmaco puede conducir a un aumento de las dosis y del coste requerido para el tratamiento. Bajo estas circunstancias, el aumento de la actividad terapeutica de los anticuerpos monoclonales es un objetivo importante.

Los anticuerpos monoclonales terapeuticos son preferiblemente capaces de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC), particularmente cuando se usan en el tratamiento de canceres u otras enfermedades celulares. Es decir, los MAb terapeuticos ejercen preferiblemente efectos citotoxicos contra sus celulas diana, tales como celulas cancerosas o linfocitos diana. Dichos anticuerpos se unen a antigenos en la superficie de las celulas diana, a traves de su dominio Fc, a receptores Fc en la superficie de celulas efectoras tales como celulas NK y macrofagos, ejerciendo de este modo dano en las celulas diana. Este mecanismo es la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC). Alternativamente, los anticuerpos danan las celulas activando el complemento a traves del dominio Fc. Esto se llama citotoxicidad dependiente del complemento (CDC). Tales actividades de los anticuerpos ejercidas a traves de dominios Fc se denominan actividades efectoras.

Se han realizado diversos intentos para potenciar la funcion efectora de los anticuerpos con el objetivo de aumentar su actividad terapeutica. Varios tipos de celulas efectoras, tales como monocitos, neutrofilos y celulas asesinas naturales (NK), tienen receptores de superficie que se unen a la porcion Fc de las inmunoglobulinas. Las celulas efectoras para inducir ADCC contra una celula diana incluyen leucocitos humanos, macrofagos, monocitos, neutrofilos activados, y posiblemente celulas asesinas naturales activadas (NK) y eosinofilos. Las celulas efectoras preferidas expresan FcyRI e incluyen, por ejemplo, monocitos y neutrofilos activados. Se ha encontrado que la expresion de FcyRI esta sobrerregulada por el interferon gamma (IFN-y). Esta expresion potenciada aumenta la actividad citotoxica de monocitos y neutrofilos frente a celulas diana.

Un receptor Fc es una protema que se encuentra en la superficie de ciertas celulas-incluyendo celulas asesinas naturales, macrofagos, neutrofilos y mastocitos-que contribuyen a las funciones protectoras del sistema inmune. Los receptores Fc se unen a anticuerpos que se unen a celulas infectadas, patogenos invasores o celulas cancerosas. Su actividad estimula celulas fagodticas o citotoxicas para destruir microbios, celulas infectadas o celulas cancerosas mediante fagocitosis mediada por anticuerpos o ADCc. Algunos virus como los flavivirus usan los receptores Fc para ayudarlos a infectar las celulas, por un mecanismo conocido como aumento de la infeccion dependiente de anticuerpos. Los receptores Fc estan implicados en el proceso de ADCC. Por ejemplo, durante la ADCC los receptores FcyRIII en la superficie de las celulas asesinas naturales (NK) estimulan las celulas NK para liberar moleculas citotoxicas de sus granulos para matar las celulas diana cubiertas con anticuerpos.

Existen varios tipos diferentes de receptores Fc, que se clasifican con base en el tipo de anticuerpo que reconocen. Un grupo de receptores Fc de IgG, los FcyR pertenecen a la superfamilia de inmunoglobulinas y son los receptores Fc mas importantes para inducir fagocitosis de microorganismos opsonizados (recubiertos). Se expresan en leucocitos y se componen de 3 clases distintas: FcyRI, FcyRII (FcYRIla y FcYRIIb), FcyRIII (FcYRIIIa y FcYRIIIb). Los receptores tambien se distinguen por su afinidad por la IgG. FcyRi exhibe una alta afinidad por IgG, mientras que FcyRII y FcyRIII muestran una afinidad mas debil. FcYRIIa y FcYRIIIa son activadores de los FcyR que se expresan en monocitos / macrofagos y monocitos / macrofagos / celulas NK, respectivamente, y pueden desencadenar la citotoxicidad de dianas humanas.

Se han identificado dos polimorfismos funcionales del gen FcyR, FcYR3a-V158F y FcYR2a-H131R, que afectan la union de IgG, modifican la funcion de ADCC y afectan la respuesta clmica del tumor. El polimorfismo FcYR2a-H131R se localiza en el dominio de union al ligando extracelular. O bien tiene un alelo de histidina (H) o arginina (R) en la posicion de aminoacido 131. El genotipo FcYR2a-131H/H tiene una mayor afinidad por IgG2 humana en un ensayo in vitro. El polimorfismo FcYR3a-V158F codifica ya sea una valina (V) o una fenilalanina (F) en la posicion del aminoacido 158. Estudios in vitro han mostrado que el alelo FcYR3a V tiene una mayor afinidad de union a IgG1 humana que el alelo F, indicando celulas efectoras inmunes que portan el alelo FcYR3a V que media la ADCC mas eficazmente (Zhang et al., J. of Clinical Oncology, 25: 3712-3718, 2007).

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El documento US 2010/0029585 A1 describe composiciones farmaceuticas que contienen al agonista del receptor tipo toll (TLR) benzo[b]azepina para uso en el tratamiento de cancer.

Existe una necesidad adicional de mejorar la eficacia terapeutica de los anticuerpos monoclonales. Hay una necesidad de mejorar la funcion efectora de los anticuerpos, por ejemplo, aumentando la funcion de ADCC y/o CDC de los anticuerpos.

Resumen de la divulgacion

La presente divulgacion se refiere a metodos para potenciar la actividad de ADCC de anticuerpos terapeuticos en el tratamiento de enfermedades celulares tales como cancer y enfermedades o trastornos mediados por celulas inmunes. La invencion se define de acuerdo con las reivindicaciones adjuntas. En general, la actividad de ADCC de anticuerpos terapeuticos puede potenciarse mediante la coadministracion del anticuerpo terapeutico con una molecula potenciadora de ADCC, con la formula I:

imagen1

en donde

Y es un anillo arilo sustituido con C(=O)R8, y en el que dicho anillo arilo esta opcionalmente mas sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre F, Cl, CF3, CF3O-, HCF2O-, alquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6 y ArO-;

R1, R3 y R4 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, heteroalquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, cicloalquenilo C3-C6, heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo, en donde un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxfgeno y azufre, arilo y heteroarilo de 5 a 7 miembros, en el que dichos grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo estan opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NR6R7, C(=O)R6, C(=O)OR6, OC(=O)R6, C(=O)NR6R7, (alquil C1-C6)amino, CH3OCH2O-, R6OC(=O)CH=CH-, NR6SO2R7, SR6 y SO2R6;

o R3 y R4 junto con el atomo al que estan unidos forman un anillo carbodclico C3-C6 saturado o parcialmente insaturado, en donde dicho anillo carbodclico esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NR6R7, C(=O)R6, C(=O)OR6, OC(=O)R6, C(=O)NR6R7, (alquil C1-C6)amino, CH3OCH2O-, R6OC(=O)CH=CH-, NR6SO2R7, SR6 y SO2R6;

R2 y R8 se seleccionan independientemente entre H, OR6, NR6R7, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, heteroalquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, cicloalquenilo C3-C6, heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxfgeno y azufre, arilo y heteroarilo de 5 a 7 miembros, en el que dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo estan opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente de un alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NR6R7, C(=O)R6, C(=O)OR6, OC(=O)R6, C(=O)NR6R7, (alquil C1-C6)amino, CH3OCH2O-, R6OC(=O)CH=CH-, NR6SO2R7, SR6 y SO2R6;

R5a, R5b y R5c se seleccionan independientemente entre H, F, Cl, Br, I, OMe, CH3, CH2F, CHF2 y CF3 y

R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, heteroalquilo C1- C6, cicloalquilo C3-C6, cicloalquenilo C3-C6, heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo en el que un atomo se seleccionan entre nitrogeno, oxfgeno y azufre, arilo y heteroarilo de 5 a 7 miembros, en el que dichos grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo estan opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, O-alquilo, NH2, -C(=O)alquilo, C(=O)H, C(=O)OH, C(=O)O-alquilo, OC(=O)H, oC(=O)alquilo, (alquil C1-C6)amino, (alquil C1-C6)2-amino CH3OCH2O-y alquil-oC(=O)CH=CH-,

o R6 y R7 junto con el atomo al que estan unidos forman un anillo heterodclico saturado o parcialmente insaturado con 3 a 8 atomos en el anillo en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxfgeno y azufre, en el que dicho anillo heterodclico esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NH2, -C(=O)-alquilo, C(=O)H, C(=O)OH, C(=O)O- alquilo, OC(=O)H, OC(=O)-alquilo, (alquil C1-C6)amino, (alquil C1-C6)2-amino CH3OCH2O-y alquil-OC(=O)CH=CH-.

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La divulgation se refiere tambien a un metabolito, solvato, tautomero o sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de acuerdo con la formula I.

Por ejemplo, R2 es OR6.

Por ejemplo, R6 es alquilo C1-C6, tal como etilo.

Por ejemplo, la invention se refiere a un compuesto de formula I, en la que R2 es NR6R7.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R2 es NR6R7 y R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6 y heteroalquilo C1-C6 tal como, por ejemplo, R6 y R7 son H, etilo, propilo o CH2CH2OCH3.

Por ejemplo, la divulgacion se refiere a un compuesto de formula I, en la que Y es fenilo.

Por ejemplo, la divulgacion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R8 se selecciona entre OR6, NR6R7 y heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo, en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre.

Por ejemplo, la divulgacion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R8 es heterocicloalquilo con 5 o 6 atomos en el anillo, en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre. Por ejemplo, R8 es pirrolidina.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en el que R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H y alquilo C1-C6.

La invencion se refiere a un compuesto de formula I, en el que Y es

imagen2

En algunos compuestos de la invencion, cada uno de R1, R3, R4, R5a, R5b y R5c es hidrogeno.

La divulgacion se refiere a un compuesto seleccionado de

(1E,4E)-etil-2-amino-8-(4-pirrolidina-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxilato; (1E,4E)-etil-2-amino-8-(4-(metoxicarbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxilato; (1E,4E)-etil-2-amino-8-(4-(metilcarbamoil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxilato; (1E,4E)-2-amino-N,N-dipropil-8-(4-(pirrolidin-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxamida y sus sales farmaceuticamente aceptables.

En una realization preferida, la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion es {2-amino-8-[4-(pirrolidinil- carbonil)fenil]-(3H-benzo[f]azepin-4-il)}-N,N-dipropilcarboxamida, con la estructura quimica siguiente:

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La molecula potenciadora de ADCC potencia o mejora la actividad efectora de un anticuerpo. De este modo, independientemente de la actividad de union al antigeno, los metodos de la presente divulgacion pueden aumentar el efecto terapeutico de un anticuerpo aumentando la actividad efectora exhibida por el anticuerpo. La molecula potenciadora de ADCC puede mejorar la ADCC activando celulas NK o celulas CD56+ ya sea directa o indirectamente. Ademas, tener una mayor proporcion de celulas NK activadas puede ayudar a superar la pobre ADCC observada en un subconjunto de pacientes que tienen receptores Fc de baja afinidad.

Se prefieren los MAb terapeuticos capaces de ADCC. Estos incluyen rituximab anti-CD20 (Rituxan®), trastuzumab anti- Her2 (Herceptin®), cetuximab anti-EGFR (Erbitux®) y panitumumab anti-EGFR (Vectibix®).

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para aumentar la ADCC en un sujeto que recibe tratamiento con anticuerpos monoclonales terapeuticos. En algunas divulgaciones, el metodo comprende administrar a un sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC. Alternativamente, el metodo comprende administrar a un sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico, una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC y uno o mas agentes quimioterapeuticos.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para mejorar la muerte de celulas diana sensibles a NK. En algunas divulgaciones, el metodo comprende administrar al sujeto una cantidad terapeuticamente efectiva de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la muerte de celulas diana sensibles a NK.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para potenciar la actividad efectora de celulas NK o celulas CD56+. En algunas divulgaciones, el metodo comprende administrar al sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la actividad efectora de celulas NK o celulas CD56+.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para mejorar la ADCC en celulas de pacientes. En algunas divulgaciones, el metodo comprende administrar al sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC. Los sujetos que de otro modo no senan buenos candidatos terapeuticos para la terapia de MAb porque expresan solo niveles bajos de antfgenos tumorales contra los que esta dirigido el anticuerpo monoclonal o porque tienen polimorfismos de nucleotidos individuales en sus receptores Fc que disminuyen su afinidad por el anticuerpo monoclonal.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para mejorar la eficacia terapeutica de anticuerpos monoclonales. De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para aumentar la eficacia de un anticuerpo monoclonal terapeutico. En algunas divulgaciones, el metodo comprende administrar al sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC. Alternativamente, el metodo comprende administrar a un sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico, una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC y uno o mas agentes quimioterapeuticos.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para aumentar la eficacia clmica de un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-ErbB2 que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico anti-ErbB2 en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. Alternativamente, el metodo comprende administrar a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico anti-ErbB2 en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 es trastuzumab.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar cancer de mama que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-ErbB2 en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. Alternativamente, el metodo de la presente divulgacion comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-ErbB2 en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 es trastuzumab.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para aumentar la eficacia clmica de un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-CD20 que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico anti-CD20 en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal anti-CD20 es rituximab.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar un trastorno de celulas B que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-CD20 en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal anti-CD20 es rituximab. En algunas realizaciones, el trastorno de celulas B es linfoma, leucemia o artritis reumatoide.

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De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para aumentar la eficacia clmica de un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. Los metodos de la presente divulgacion tambien comprenden administrar a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR en combinacion con la molecula potenciadora de ADCc de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal anti-EGFR es panitumumab, cetuximab, necitumumab o zalutumumab.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar el cancer de cabeza y cuello que expresa EGFR, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. La presente divulgacion tambien incluye metodos para tratar el carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR en combinacion con la molecula potenciadora de ADCc de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos. De acuerdo con algunas divulgaciones, tambien se proporcionan metodos para tratar el cancer de cabeza y cuello que expresa EGFR, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal anti- EGFR es panitumumab, cetuximab, necitumumab o zalutumumab.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar el cancer colorrectal mutante KRAS que comprende administrar a un sujeto que lo necesite un anticuerpo monoclonal terapeutico en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. En realizaciones preferidas, el anticuerpo monoclonal terapeutico es panitumumab o cetuximab.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar el cancer que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC. La presente divulgacion incluye tambien metodos de tratamiento de cancer que comprenden administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico, una molecula potenciadora de AdcC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC y uno o mas agentes quimioterapeuticos.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar una neoplasia de celulas B o trastorno de celulas B que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para tratar un trastorno autoinmune que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC. En algunas realizaciones, el trastorno autoinmune es artritis reumatoide.

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para evitar una recafda tumoral en un sujeto que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapeuticamente eficaz de un anticuerpo terapeutico y una molecula potenciadora de AdcC en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC.

En algunas divulgaciones, los anticuerpos terapeuticos tienen una IgG1 de murino, de primate humano o no humano o una porcion Fc de IgG3. En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo quimerico, humano o humanizado o un fragmento del mismo.

En la presente divulgacion, se proporcionan metodos para seleccionar un regimen terapeutico apropiado para un sujeto que lo necesite, que comprende determinar un SNP de FcgR3a en la posicion del aminoacido 158, en el que una valina homocigotica en la posicion del aminoacido 158 de FcgR3a indica que se predice que el sujeto es mas sensible al regimen terapeutico que un sujeto sin la valina homocigotica en la posicion del aminoacido 158 de FcgR3a.

En esta divulgacion, se proporcionan tambien metodos para seleccionar un regimen terapeutico apropiado para un sujeto que lo necesite, que comprende determinar un SNP de FcgR2a en la posicion del aminoacido 131, en el que una histidina homocigotica en la posicion del aminoacido 131 de FcgR2a indica que se predice que el sujeto es mas sensible al regimen terapeutico que un sujeto sin histidina homocigotica en la posicion del aminoacido 131 de FcgR2a.

La presente divulgacion proporciona un paquete o kit farmaceutico que comprende uno o mas recipientes que contienen una molecula potenciadora de ADCC lfquida o liofilizada, opcionalmente un anticuerpo terapeutico, y/o uno o mas agentes quimioterapeuticos.

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Breve descripcion de los dibujos

La Figura 1 es un grafico lineal que muestra la lisis de celulas diana K562. Las celulas diana K562 marcadas con Calcema AM se incubaron con celulas efectoras PBMC que hadan sido previamente estimuladas con el potenciador de ADCC. El porcentaje de lisis espedfica de celulas diana se evaluo en un intervalo de relaciones de celulas efectoras: diana.

La Figura 2 muestra que el potenciador de ADCC mejora la ADCC con Rituxan. Las celulas HS-Sultan marcadas con Calcema AM recubiertas con Rituxan se incubaron con celulas efectoras PBMC que hadan sido previamente estimuladas con el potenciador de ADCC. El porcentaje de lisis espedfica de celulas diana se evaluo en un intervalo de relaciones de celulas efectoras:diana.

La Figura 3 muestra que el potenciador de ADCC mejora la ADCC con Herceptin tanto en la lmea celular SKBR3 que expresa altos niveles del antigeno tumoral Her2neu como en la lmea celular MDA-MB-231 que expresa niveles mas bajos del antigeno tumoral. Se incubaron celulas SKBR3 marcadas con Calcema AM (Panel A) o celulas MDA-MB-231 (Panel C) recubiertas con Herceptin con celulas efectoras PBMC que hadan sido estimuladas previamente con el potenciador de ADCC. El porcentaje espedfico de lisis de celulas diana se evaluo en un intervalo de relaciones celulas efectoras:diana. La expresion de Her2neu se cuantifico por citometria de flujo usando herceptina conjugada con PE (lmea verde) o controles (# 1 y # 2) en lmeas de celulas de cancer de mama SKBR3 (Panel B) y MDA-MB-231 (Panel D).

La Figura 4 muestra que el potenciador de ADCC aumenta la ADCC mediada por Rituxan en celulas de pacientes con receptores Fc de alta afinidad y receptores Fc de baja afinidad. Se muestra el porcentaje espedfico de lisis para las celulas HS-Sultan recubiertas con Rituxan incubadas con celulas efectoras PBMC a una relacion E:T de 50:1. Se evaluaron las PBMC de un paciente con el genotipo de alta afinidad FcgR2a131 H/H y FcgR3a V/V (rectangulos rellenos) o un paciente con el genotipo de menor afinidad FcgR2a131 A/A y FcgR3a V/F (rectangulos sin relleno) para ADCC despues de la estimulacion con regulador de control (lmea de base) o estimulacion con potenciador de ADCC de 500 nM.

La Figura 5 muestra que los pacientes con FcgR3a FF o FcgR3a FV han reducido significativamente la actividad de ADCC mediada por rituximab comparado con los individuos con el fenotipo FcgR3a VV.

Descripcion detallada de la invencion

La invencion se basa en el descubrimiento de que una molecula potenciadora de ADCC aumenta la actividad de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) de los anticuerpos. De acuerdo con ello, la invencion proporciona un anticuerpo monoclonal terapeutico y una molecula potenciadora de ADCC, un compuesto de formula I para uso en metodos de tratamiento de enfermedades celulares tales como cancer y enfermedades o trastornos mediados por celulas inmunitarias como sigue:

imagen4

donde,

Y es un anillo arilo sustituido con C(=O)R8, y en el que dicho anillo arilo esta opcionalmente sustituido adicionalmente con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre F, Cl, CF3, CF3O-, HCF2O-, alquilo C1-C6, heteroalquilo C1-C6 y ArO-;

R1, R3 y R4 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, heteroalquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, cicloalquenilo C3-C6, heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo en donde un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre, arilo y heteroarilo de 5 a 7 miembros, en donde dichos grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo estan opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NR6R7, C(=O)R6, C(=O)OR6, OC(=O)R6, C(=O)NR6R7, (alquil C1-C6)amino, CH3OCH2O-, R6OC(=O)CH=CH-, NR6SO2R7, SR6 y SO2R6;

o R3 y R4 junto con el atomo al que estan unidos forman un anillo carbodclico C3-C6 saturado o parcialmente insaturado, en el que dicho anillo carbodclico esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NR6R7, C(=O)R6,

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C(=O)OR6, OC(=O)R6, C(=O)NR6R7, (alquil C1-C6)amino, CH3OCH2O-, R6OC(=O)CH=CH-, NR6SO2R7, SR6 y SO2R6;

R2 y R8 se seleccionan independientemente entre H, OR6, NR6R7, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, heteroalquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C6, cicloalquenilo C3-C6, heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo en donde un atomo se selecciona entre nitrogeno, o^geno y azufre, arilo y heteroarilo de 5 a 7 miembros, en donde dicho alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo estan opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre un alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NR6R7, C(=O)R6, C(=O)OR6, OC(=O)R6, C(=O)NR6R7, (alquil C1-C6)amino, CH3OCH2O-, R6OC(=O)CH=CH-, NR6SO2R7, SR6 y SO2R6;

R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, heteroalquilo C1- C6, cicloalquilo C3-C6, cicloalquenilo C3-C6, heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo en donde un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre, arilo y heteroarilo de 5 a 7 miembros, en donde dichos grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo estan opcionalmente sustituidos con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, O-alquilo, NH2, -C(=O)-alquilo, C(=O)H, C(=O)OH, C(=O)O-alquilo, OC(=O)H, oC(=O)alquilo, (alquil C1-C6)amino, (alquil C1-C6)2-amino CH3OCH2O-y alquil-oC(=O)CH=CH-,

o R6 y R7 junto con el atomo al que estan unidos forman un anillo heterodclico saturado o parcialmente insaturado con 3 a 8 atomos en el anillo en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre, en el que dicho anillo heterodclico esta opcionalmente sustituido con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente entre alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, F, Cl, Br, I, CN, OR6, NH2, -C(=O)alquilo, C(=O)H, C(=O)OH, C(=O)O- alquilo, OC(=O)H, OC(=O)alquilo, (alquil C1-6)amino, (alquil C1-C6)2-amino CH3OCH2O- y alquil-OC(=O)CH=CH-.

La divulgacion tambien se refiere a un metabolito, solvato, tautomero o sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de acuerdo con la formula I.

Por ejemplo, R2 es OR6.

Por ejemplo, R6 es alquilo C1-C6, tal como etilo.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R2 es NR6R7.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R2 es NR6R7 y R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6 y heteroalquilo C1-C6, tal como, por ejemplo, R6 y R7 son H, etilo, propilo o CH2CH2OCH3.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que Y es fenilo.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R8 se selecciona entre OR6, NR6R7 y heterocicloalquilo con 3 a 8 atomos en el anillo, en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R8 es heterocicloalquilo con 5 o 6 atomos en el anillo, en el que un atomo se selecciona entre nitrogeno, oxigeno y azufre. Por ejemplo, R8 es pirrolidina.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H y alquilo C1-C6.

Por ejemplo, la invencion se refiere a un compuesto de formula I, en la que Y es

imagen5

En algunos compuestos de la invencion, cada uno de R1, R3, R4, R5a, R5b y R5c es hidrogeno. Por ejemplo, la divulgacion proporciona un compuesto seleccionado entre

(1E,4E)-etil-2-amino-8-(4-pirrolidina-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxilato;

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(1E,4E)-etil-2-amino-8-(4-(metoxicarbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxilato de etilo; (1E,4E)-etil-2-amino-8-(4-(metilcarbamoil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxilato de etilo;

(1E,4E)-2-amino-N,N-dipropil-8-(4-(pirrolidina-1-carbonil)fenil)-3H-benzo[b]azepina-4-carboxamida y sus sales farmaceuticamente aceptables. Otros mejoradores de ADCC adecuados se describen en el documento WO2007/ 024612.

En una realizacion preferida, la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion es {2-amino-8-[4- (pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo [f]azepin-4-il)}-N,N-dipropilcarboxamida con la estructura qmmica como sigue:

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La molecula potenciadora de ADCC refuerza o mejora la actividad efectora de un anticuerpo. De este modo, independientemente de la actividad de union al antfgeno, los metodos de la presente invencion pueden aumentar el efecto terapeutico de un anticuerpo mejorando la actividad efectora exhibida por el anticuerpo. Por lo tanto, los metodos de la divulgacion son generalmente utiles para tratar o aliviar un smtoma de cualquier trastorno en el que se desea una actividad efectora mejorada del anticuerpo en un sujeto que lo necesite. La molecula potenciadora de ADCC puede mejorar la ADCC activando celulas NK o celulas CD56+ ya sea directa o indirectamente. Ademas, tener una mayor proporcion de celulas NK activadas puede ayudar a superar la pobre ADCC observada en un subconjunto de pacientes que tienen receptores Fc de baja afinidad.

Un sujeto con necesidad de la misma incluye sujetos con cancer que han sido identificados por tener una mutacion KRAS o un polimorfismo FcyR, o previamente identificados por no responder al tratamiento con anticuerpos terapeuticos o que tienen una funcion de ADCC alterada.

En otra realizacion, la molecula potenciadora de ADCC de la invencion se administra en combinacion con uno o mas anticuerpos terapeuticos. En algunas realizaciones, los anticuerpos tienen usos terapeuticos y/o profilacticos in vivo contra el cancer y otras enfermedades celulares.

En ciertas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se administra antes de, simultaneamente con, o posteriormente a la administracion de uno o mas anticuerpos terapeuticos. En una realizacion, la molecula potenciadora de ADCC se formula con uno o mas anticuerpos terapeuticos. En otra realizacion, se administran uno o mas anticuerpos terapeuticos en una composicion farmaceutica separada. De acuerdo con esta realizacion, se pueden administrar uno o mas anticuerpos terapeuticos a un sujeto por las mismas o diferentes vfas de administracion que las usadas para administrar la molecula potenciadora de AdCc.

En otro aspecto, la divulgacion proporciona un metodo para matar una celula cancerosa que comprende administrar una cantidad de una molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion en combinacion con un anticuerpo monoclonal terapeutico para matar una celula cancerosa. Los tipos de anticuerpos monoclonales terapeuticos incluyen, pero no se limitan a, rituximab, cetuximab, panitumumab y trastuzumab.

Anticuerpos terapeuticos

Dentro del contexto de esta invencion, el termino "anticuerpo o anticuerpos terapeuticos" designa mas espedficamente cualquier anticuerpo que actue para agotar las celulas diana en un paciente. Ejemplos espedficos de tales celulas diana incluyen celulas tumorales, celulas infectadas con virus, celulas alogenicas, celulas inmunocompetentes patologicas (por ejemplo, linfocitos B, linfocitos T, celulas que presentan antfgeno, etc.) implicadas en canceres, alergias, enfermedades autoinmunes, reacciones alogenicas. Las celulas diana mas preferidas dentro del contexto de esta invencion son celulas tumorales y celulas infectadas con virus. Los anticuerpos terapeuticos pueden, por ejemplo, mediar un efecto citotoxico o lisis celular, particularmente por citotoxicidad mediada por celulas dependientes de anticuerpos (ADCC).

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La ADCC requiere receptores de leucocitos para la porcion Fc de IgG (FcyR) cuya funcion es vincular los antigenos sensibilizados con IgG a celulas citotoxicas que contienen FcyR y hacer funcionar la maquinaria de activacion celular. Aunque este mecanismo de accion no se ha evidenciado in vivo en seres humanos, puede explicar la eficacia de tales anticuerpos terapeuticos que agotan las celulas. Por lo tanto, el anticuerpo terapeutico es capaz de formar un complejo inmune. Por ejemplo, un complejo inmune puede ser un objetivo tumoral recubierto por anticuerpos terapeuticos. Los anticuerpos terapeuticos pueden ser policlonales o, preferiblemente, monoclonales. Pueden producirse mediante hibridomas o por celulas recombinantes manipuladas para expresar los dominios variables y constantes deseados. Los anticuerpos pueden ser anticuerpos de cadena sencilla u otros derivados de anticuerpo que retengan la especificidad del antigeno y la region inferior de bisagra o una variante de la misma. Estos pueden ser anticuerpos polifuncionales, anticuerpos recombinantes, anticuerpos humanizados, fragmentos o variantes de los mismos. Dicho fragmento o un derivado del mismo se selecciona preferiblemente entre un fragmento Fab, un fragmento Fab'2, un CDR y un ScFv. Los anticuerpos terapeuticos son espedficos para antfgenos de superficie, por ejemplo, antfgenos de membrana. Los anticuerpos terapeuticos mas preferidos son espedficos para antfgenos tumorales (por ejemplo, moleculas expresadas espedficamente por celulas tumorales), tales como CD20, CD52, ErbB2 (o HER2/Neu), CD33, CD22, CD25, MUC-1, cEa, KDR, aVp33, particularmente antfgenos de linfoma (por ejemplo, CD20). Los anticuerpos terapeuticos tienen preferiblemente una porcion Fc de IgG1 o IgG3Fc de primate humano o no humano, mas preferiblemente IgG1 humana.

Ejemplos tfpicos de anticuerpos terapeuticos de esta invencion son rituximab, cetuximab, panitumumab y trastuzumab. Dichos anticuerpos se pueden usar de acuerdo con protocolos clmicos que han sido autorizados para uso en sujetos humanos. Ejemplos espedficos adicionales de anticuerpos terapeuticos incluyen, por ejemplo, alemtuzumab, epratuzumab, basiliximab, daclizmab, labetuzumab, seviumab, tuvurimab, palivizumab, infliximab, omalizumab, efalizuab, natalizumab y clenoliximab. Un experto en la tecnica reconocena que otros anticuerpos terapeuticos son utiles en los metodos de la invencion.

En algunas realizaciones, la dosis para el anticuerpo terapeutico esta preferiblemente entre 200-600 mg/m2. Esto incluye 200 mg/m2, 250 mg/m2, 300 mg/m2, 350 mg/m2, 400 mg/m2, 450 mg/m2, 500 mg/m2, 600 mg/m2 y puntos intermedios. Preferiblemente, el anticuerpo terapeutico se administra por infusion intravenosa (por ejemplo, como una infusion de 30 min, 45 min, 60 min, 90 min o 120 min). Por ejemplo, la dosis del anticuerpo terapeutico puede ser de 400 mg/m2 administrada como una infusion intravenosa de 120 minutos (por ejemplo, a una velocidad de infusion maxima de 10 mg/min).

En algunas realizaciones, la dosis para el anticuerpo terapeutico esta preferiblemente entre 1-10 mg/kg. Esto incluye 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg y puntos intermedios. Preferiblemente, el

anticuerpo terapeutico se administra por infusion intravenosa (por ejemplo, como una infusion de 30 min, 45 min, 60

min, 90 min o 120 min). Por ejemplo, la dosis del anticuerpo terapeutico puede ser de 6 mg/kg administrada como una infusion intravenosa de 30, 60 o 90 minutos.

ERBITUX® (cetuximab)

En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidermico). En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal humano o

humanizado anti-EGFR. En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-EGFR

quimerico. Preferiblemente, el anticuerpo monoclonal es ERBlTUX® (cetuximab), un anticuerpo monoclonal quimerico (raton/humano) y un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR).

El cetuximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion para el tratamiento de cancer colorrectal metastasico y cancer de cabeza y cuello. El cancer colorrectal incluye la definicion medica bien aceptada que define el cancer colorrectal como una condicion medica caracterizada por el cancer de las celulas del tracto intestinal por debajo del intestino delgado (es decir, el intestino grueso (colon), incluyendo el ciego, el colon ascendente, colon transversal, colon descendente y colon sigmoideo y recto). En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se usa en combinacion con cetuximab para el tratamiento de carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR. En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se usa en combinacion con cetuximab para el tratamiento de carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR en pacientes que son refractarios a la quimioterapia basada en irinotecano.

La seccion de cabeza y cuello es un conjunto de una pluralidad de organos, y los focos primarios de cancer de cabeza y cuello incluyen el seno paranasal, la epifaringe, la orofaringe, la cavidad oral, la hipofaringe, la laringe y las glandulas salivales. El cancer de cabeza y cuello incluye canceres de la region de la cabeza o del cuello del cuerpo. La mayona de los canceres de cabeza y cuello son carcinomas de celulas escamosas, pero algunos pueden ser exofflicos o endofflicos. Ejemplos de canceres de cabeza y cuello incluyen, pero no se limitan a, labio, cavidad oral (boca), lengua, garganta, traquea, cavidad nasal, senos paranasales, faringe, laringe, tiroides, glandulas salivales y ganglios cervicales del cuello y similares.

En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se usa en combinacion con cetuximab para el tratamiento de carcinoma de celulas escamosas local o regionalmente avanzado de la cabeza y el cuello. En algunas realizaciones,

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la molecula potenciadora de ADCC se usa en combinacion con cetuximab para el tratamiento de carcinoma de celulas escamosas recurrente o metastasico de la cabeza y el cuello que progresa despues de terapia basada en platino.

La descripcion proporciona metodos para aumentar la eficacia de cetuximab en el tratamiento de cancer colorrectal metastasico o cancer de cabeza y cuello. Por lo tanto, algunas divulgaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica de cetuximab, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite, cetuximab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion.

La dosis para cetuximab esta preferiblemente entre 200-600 mg/m2 Esta incluye 200 mg/m2, 250 mg/m2, 300 mg/m2, 350 mg/m2, 400 mg/m2, 450 mg/m2, 500 mg/m2, 600 mg/m2 y puntos intermedios. Preferiblemente, el cetuximab se administra por infusion intravenosa (por ejemplo, como una infusion de 30 min, 45 min, 60 min, 90 min o 120 min). Por ejemplo, la dosis de cetuximab puede ser de 400 mg/m2 administrada como una infusion intravenosa de 120 minutos (por ejemplo, a una velocidad de infusion maxima de 10 mg/min).

El cetuximab se puede administrar con una dosis inicial mas alta seguida de dosis posteriores mas bajas. La frecuencia de administracion es preferiblemente una vez por semana. Por ejemplo, despues de una dosis inicial de cetuximab de 400 mg/m2 administrada en infusion intravenosa de 120 minutos (por ejemplo, velocidad maxima de infusion de 10 mg/min), las dosis semanales posteriores pueden ser de 250 mg/m2 infundidas durante 60 minutos (por ejemplo, velocidad maxima de infusion de 10 mg/min) hasta la progresion de la enfermedad o una toxicidad inaceptable.

HERCEPTIN® (trastuzumab)

En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 (HER2/neu). En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 humano o humanizado. En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal quimerico anti-ErbB2.

En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es HERCEPTIN® (trastuzumab), un anticuerpo monoclonal humanizado que interfiere con el receptor 2 del factor de crecimiento epidermico humano (receptor HER2/neu). El receptor HER2/neu es un miembro de la familia de protemas ErbB, mas comunmente conocida como la familia del receptor del factor de crecimiento epidermico. Trastuzumab invierte los efectos de un receptor HER2 hiperactivo.

En algunas realizaciones, el trastuzumab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion para el tratamiento del cancer de mama. En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se usa en combinacion con cetuximab para el tratamiento de pacientes con cancer de mama metastasico cuyos tumores sobreexpresan la protema HER2.

La descripcion proporciona metodos para aumentar la efectividad del trastuzumab en el tratamiento del cancer de mama. Por lo tanto, algunas divulgaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica de trastuzumab que comprende administrar trastuzumab a un sujeto que lo necesite en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion.

La dosis para trastuzumab esta preferiblemente entre 1-10 mg/kg. Esto incluye 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg y puntos intermedios. Preferiblemente, el trastuzumab se administra por infusion intravenosa (por ejemplo, como una infusion de 30 min, 45 min, 60 min, 90 min o 120 min). Por ejemplo, la dosis de trastuzumab puede ser de 6 mg/kg administrada como infusion intravenosa de 30, 60 o 90 minutos.

Trastuzumab puede administrarse con una dosis inicial mas alta seguida por dosis posteriores mas bajas o dosis de mantenimiento. La frecuencia de administracion es preferiblemente una vez por semana. Por ejemplo, despues de una dosis inicial de trastuzumab a 4 mg/kg administrada como una infusion intravenosa de 90 minutos, las dosis semanales posteriores pueden ser de 2 mg/kg infundidas durante 30 minutos hasta la progresion de la enfermedad o toxicidad inaceptable.

RITUXAN® (Rituximab)

En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-CD20. En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal humano o humanizado anti-CD20. En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal quimerico anti-CD20.

Preferiblemente, el anticuerpo monoclonal contra la protema CD20 es RITUXAN® (Rituximab). Por lo tanto, algunas realizaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica del trastuzumab que comprende administrar a un sujeto que lo necesite trastuzumab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCc de la presente invencion.

El rituximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion para el tratamiento de trastornos de celulas B, tales como linfomas, leucemias y algunos trastornos autoinmunes (por ejemplo, artritis reumatoide).

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El rituximab destruye tanto celulas B normales como malignas que tienen CD20 en sus superficies. El rituximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion para tratar enfermedades que se caracterizan por tener demasiadas celulas B, celulas B hiperactivas o celulas B disfuncionales. De acuerdo con algunas realizaciones, la invencion proporciona metodos para aumentar la eficacia de rituximab en el tratamiento de trastornos de celulas B, tales como linfomas, leucemias y algunos trastornos autoinmunes (por ejemplo, artritis reumatoide). Por lo tanto, algunas realizaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica de rituximab que comprende administrar a un sujeto que lo necesite rituximab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion.

En algunas realizaciones, puede usarse rituximab en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion para tratar neoplasmas hematologicos tales como leucemias y linfomas.

El rituximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion para tratar enfermedades autoinmunes, incluyendo, pero sin limitacion, anemia hemolftica autoinmune idiopatica, aplasia pura de globulos rojos, purpura trombocitopenica idiopatica (ITP), smdrome de Evans, vasculitis (por ejemplo, granulomatosis de Wegener), trastornos de piel bullosa (por ejemplo, penfigo, penfigoide), diabetes mellitus tipo 1, smdrome de Sjogren y enfermedad de Devic.

De acuerdo con algunas realizaciones, el rituximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion para tratar neoplasias malignas hematologicas. Tales neoplasias malignas hematologicas incluyen, por ejemplo, linfoma de celulas B, leucemia mielogena aguda y leucemia linfocftica cronica. Dicho tratamiento da como resultado, por ejemplo, una regresion del tumor en un modelo animal o en un humano. La regresion tumoral puede incluir, por ejemplo, la muerte de una celula cancerosa.

En consecuencia, en un aspecto la divulgacion proporciona un metodo para matar una celula cancerosa que comprende administrar una cantidad de rituximab y el potenciador de ADCC de la presente invencion en cantidades eficaces para matar una celula cancerosa de un cancer hematopoyetico. Los tipos de cancer hematopoyetico incluyen, pero no se limitan a, linfoma de celulas B, leucemia linfocftica cronica y leucemia mielogena aguda.

En algunas realizaciones, rituximab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion para el tratamiento de pacientes con linfoma no Hodgkin, de celulas B, positivos para CD20, de bajo grado o folicular, con recafda o refractarios.

En algunas realizaciones, se administra rituximab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion para el tratamiento de primera lrnea de linfoma no Hodgkin de celulas B folicular, CD20-positivo, en combinacion con quimioterapia CVP.

En algunas realizaciones, rituximab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion para el tratamiento de la artritis reumatoide. El metotrexato puede anadirse adicionalmente a la combinacion. De acuerdo con esto, en algunas realizaciones, rituximab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y con metotrexato para reducir signos y smtomas en pacientes adultos con artritis reumatoide moderadamente a severamente activa. En algunas realizaciones, se administra rituximab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y con metotrexato para reducir signos y smtomas en pacientes adultos con artritis reumatoide moderadamente a severamente activa que han tenido una respuesta inadecuada a una o mas terapias antagonistas de TNF.

La dosis para rituximab esta preferiblemente entre 200 y 1200 mg/m2. Esto incluye 200 mg/m2, 250 mg/m2, 300 mg/m2, 350 mg/m2, 375 mg/m2, 400 mg/m2, 450 mg/m2, 500 mg/m2, 600 mg/m2, 700 mg/m2, 800 mg/m2, 900 mg/m2, 1.000 mg/m2, 1.100 mg/m2, 1.200 mg/m2 y puntos intermedios. Preferiblemente, el rituximab se administra por infusion intravenosa (por ejemplo, como una infusion de 30 minutos, 45 minutos, 60 minutos, 90 minutos o 120 minutos). Por ejemplo, la dosis de rituximab puede ser de 375 mg/m2 administrada como infusion intravenosa de 120 minutos, preferiblemente en 4 horas.

La frecuencia de administracion de rituximab es preferiblemente una vez semanal o mensual y puede continuar hasta la progresion de la enfermedad o una toxicidad inaceptable. En algunas realizaciones, se administran 2-16 dosis de rituximab (por ejemplo, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16 dosis). En algunas realizaciones, rituximab se administra en una infusion intravenosa de 375 mg/m2 una vez por semana en 4 u 8 dosis. En algunas realizaciones, la administracion de rituximab es de 4 dosis cada 6 meses en hasta 16 dosis. En algunas realizaciones, rituximab se administra como dos infusiones intravenosas de 1.000 mg separadas por 2 semanas.

VECTIBIX® (panitumumab)

En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es Vectibix® (panitumumab). Vectibix® (panitumumab) es un anticuerpo monoclonal kappa IgG2 humano recombinante que se une espedficamente al receptor del factor de crecimiento epidermico humano (EGFR). Vectibix® esta indicado como un unico agente para el tratamiento de

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carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR con progresion de la enfermedad en o siguiendo reg^enes de quimioterapia que contienen fluoropirimidina, oxaliplatino e irinotecano.

La descripcion proporciona metodos para incrementar la efectividad del panitumumab en el tratamiento del carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR. Por lo tanto, algunas divulgaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica del panitumumab que comprende administrar a un sujeto que lo necesite panitumumab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. Otras descripciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica del panitumumab en el tratamiento de carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR que comprende administrar a un sujeto que lo necesite panitumumab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion.

En algunas realizaciones, el panitumumab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion para el tratamiento del carcinoma colorrectal metastasico. En algunas realizaciones, el panitumumab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion para el tratamiento del carcinoma colorrectal metastasico con progresion de la enfermedad en o despues de los regfmenes de quimioterapia con fluoropirimidina, oxaliplatino e irinotecano.

La dosis para panitumumab esta preferiblemente entre 1-10 mg/kg. Esto incluye 1 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg, 6 mg/kg, 7 mg/kg, 8 mg/kg, 10 mg/kg y puntos intermedios. Preferiblemente, el panitumumab se administra por infusion intravenosa (por ejemplo, como una infusion de 30 min, 45 min, 60 min, 90 min o 120 min). Por ejemplo, la dosis de panitumumab puede ser de 4 mg/kg administrada como una infusion intravenosa de 30, 60 o 90 minutos. Las dosis superiores a 1.000 mg deben administrarse durante 90 minutos. La frecuencia de administracion puede ser una vez cada 7 a 21 dfas (por ejemplo, una vez cada 10, 14, 18, etc. dfas). La frecuencia de administracion es preferiblemente una vez cada 14 dfas.

El panitumumab se puede administrar con una dosis inicial mas alta seguida por dosis posteriores mas bajas o dosis de mantenimiento. Por ejemplo, despues de una dosis inicial de panitumumab de 6 mg/kg, administrada como una infusion intravenosa de 90 minutos, las dosis semanales posteriores pueden ser de 2-4 mg/kg infundidas durante 30 minutos hasta la progresion de la enfermedad o toxicidad inaceptable.

Combinacion con anticuerpos terapeuticos y agentes quimioterapeuticos

En ciertas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC de la invencion se administra en combinacion con uno o mas anticuerpos terapeuticos y uno o mas agentes quimioterapeuticos. Un "agente quimioterapeutico" es un compuesto qmmico util en el tratamiento del cancer, independientemente del mecanismo de accion. Los agentes quimioterapeuticos incluyen, pero no se limitan a, los siguientes grupos de compuestos: antibioticos citotoxicos, antimetabolitos, agentes antimitoticos, agentes alquilantes, compuestos que contienen platino, compuestos de arsenico, inhibidores de topoisomerasa de ADN, taxanos, analogos de nucleosidos, alcaloides de plantas y toxinas, y sus derivados sinteticos. Los siguientes son ejemplos no limitativos de compuestos particulares dentro de estos grupos. Los agentes alquilantes incluyen mostazas de nitrogeno tales como ciclofosfamida, ifosfamida, trofosfamida y clorambucilo; nitrosoureas tales como carmustina (BCNU) y lomustina (CCNU); sulfonatos de alquilo tales como busulfan y treosulfano; y triazenos tales como dacarbazina. Los compuestos que contienen platino incluyen cisplatino, carboplatino, aroplatino y oxaliplatino. Los alcaloides vegetales incluyen los alcaloides de la vinca tales como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorrelbina; y taxoides tales como paclitaxel y docetaxel. Los inhibidores de ADN topoisomerasa incluyen epipodofilinas tales como etoposido, teniposido, topotecano, 9-aminocamptotecina, camptotecina y crisnatol; y mitomicinas tales como mitomicina C. Los antifolatos incluyen inhibidores de DHFR tales como metotrexato y trimetrexato; inhibidores de IMP deshidrogenasa tales como acido micofenolico, tiazofurina, ribavirina, hidroxiurea y EICAR; e inhibidores de ribonucleotido reductasa tales como deferoxamina. Los analogos de pirimidina incluyen analogos de uracilo tales como 5-fluorouracilo, floxuridina, doxifluridina y raltitrexed; y analogos de citosina tales como citarabina (ara C), arabinosido citosina y fludarabina. Los analogos de la purina incluyen mercaptopurina y tioguanina. Los antimetabolitos de ADN incluyen 3-HP, 2'-desoxi-5-fluorouridina, 5-HP, alfa-TGDR, glicinato de afidicolina, ara-C, 5-aza-2'-desoxicitidina, beta- TGDR, ciclocitdina, guanazol, glicodialdehndo de inosina, macebecina II, y pirazoloimidazol. Los agentes antimitoticos incluyen alocolchicina, halicondrina B, colchicina, derivado de colquicina, dolstatina 10, maitansina, rizoxina, tiocolchicina y tritil cistema.

Otros ejemplos de agentes quimioterapeuticos para usar con la molecula potenciadora de ADCC de la invencion incluyen inhibidores de isoprenilacion; neurotoxinas dopaminergicas tales como el ion 1 -metil-4-fenilpiridinio; inhibidores del ciclo celular tales como estaurosporina; actinomicinas tales como actinomicina D y dactinomicina; bleomicinas tales como bleomicina A2, bleomicina B2 y peplomicina; antraciclinas tales como daunorrubicina, doxorrubicina (adriamicina), idarrubicina, epirubicina, pirarrubicina, zorrubicina y mitoxantrona; inhibidores de MDR tales como verapamilo; y los inhibidores de Ca2+ ATPasa tales como la tapsigargina.

En una realizacion, la molecula potenciadora de ADCC se administra en combinacion con uno o mas de los siguientes: IFNa, IL-2, Dacarbazina (Bayer), Temozolomida (Schering), Tamoxifeno (AZ), Carmustina (BMS), Melfalan (GS), Procarbazina (Sigma-Tau), Vinblastina, carboplatino, cisplatino, taxol, ciclofosfamida, doxorrubina, Rituxan (Genentech /

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Roche), Herceptin (Genentech / Roche), Gleevec, Iressa (AZ), Avastina (Genentech / Roche), Erbitux (Im-Clon / Merck KGaA), o Tarceva (Genentech / Roche).

En otra realizacion, la molecula potenciadora de ADCC de la invencion se administra en combinacion con uno o mas de los siguientes: una enediina tal como calicheamicina y esperamicina; duocarmicina, metotrexato, doxorrubicina, melfalan, clorambucilo, Ara-C, vindesina, mitomicina C, cis-platino, etoposido, bleomicina y 5-fluorouracilo.

Las toxinas y agentes quimioterapeuticos adecuados que pueden usarse en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de esta invencion se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, 19 Ed. (Mack Publishing Co. 1995), y en Goodman y Gilman's Pharmacological Basis of Therapeutics, 7a Ed. (MacMillan Publishing Co., 1985). Otras toxinas y/o agentes quimioterapeuticos adecuados son conocidos por los expertos en la tecnica.

En ciertas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se administra antes, simultaneamente con, o posteriormente a la administracion de uno o mas agentes quimioterapeuticos. En una realizacion, la molecula potenciadora de ADCC se formula con uno o mas agentes quimioterapeuticos. En otra realizacion, se administran uno o mas agentes quimioterapeuticos en una composicion farmaceutica separada. De acuerdo con esta realizacion, se pueden administrar uno o mas agentes quimioterapeuticos a un sujeto por la misma o diferentes vfas de administracion que las usadas para administrar la molecula potenciadora de ADCC.

ERBITUX® (cetuximab)

Cancer de cabeza y cuello

En alguna realizacion, la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion se utiliza antes, simultaneamente con, o posteriormente a la administracion de uno o mas agentes quimioterapeuticos y un anticuerpo terapeutico. El anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-EGFR (receptor del factor de crecimiento epidermico). En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal humano o humanizado anti-EGFR. En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal quimerico anti-EGFR. Preferiblemente, el anticuerpo monoclonal es ERBITUX® (cetuximab), un anticuerpo monoclonal quimerico (raton / humano) y un inhibidor del receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR).

El Cetuximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos para el tratamiento del cancer de cabeza y cuello. En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se utiliza antes, simultaneamente o despues de la administracion de uno o mas agentes quimioterapeuticos y cetuximab para el tratamiento de carcinoma de celulas escamosas local o regionalmente avanzado de la cabeza y el cuello. En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se utiliza antes, simultaneamente con, o posteriormente a la administracion de uno o mas agentes quimioterapeuticos y cetuximab para el tratamiento de carcinoma de celulas escamosas, recurrente o metastasico, de la cabeza y el cuello que progresa despues de la terapia con base en platino.

La descripcion proporciona metodos para aumentar la eficacia de cetuximab en el tratamiento del cancer de cabeza y cuello. Por lo tanto, algunas divulgaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica de cetuximab que comprende administrar a un sujeto que lo necesite cetuximab en combinacion con uno o mas agentes quimioterapeuticos y la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion.

Cancer colorrectal

El Cetuximab puede usarse en combinacion con el potenciador de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos para el tratamiento del cancer colorrectal metastasico. El cancer colorrectal incluye la definicion medica bien aceptada que define el cancer colorrectal como una condicion medica caracterizada por el cancer de las celulas del tracto intestinal por debajo del intestino delgado (es decir, el intestino grueso, incluyendo el ciego, el colon ascendente, el colon transversal, el colon descendente y el colon sigmoideo y el recto). En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se usa antes, simultaneamente con, o posteriormente a la administracion de cetuximab y uno o mas agentes quimioterapeuticos para el tratamiento de carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR. En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se usa antes, simultaneamente o despues de la administracion de cetuximab y uno o mas agentes quimioterapeuticos para el tratamiento del carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR en pacientes que son refractarios a la quimioterapia basada en irinotecano.

La descripcion tambien proporciona metodos para aumentar la efectividad del cetuximab en el tratamiento del cancer colorrectal metastasico. Por lo tanto, algunas divulgaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica de cetuximab que comprende administrar a un sujeto que lo necesite cetuximab en combinacion con uno o mas agentes quimioterapeuticos y la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion.

HERCEPTIN® (trastuzumab)

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El trastuzumab puede usarse con el potenciador de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos. En alguna realizacion, la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion se utiliza antes, simultaneamente con, o posteriormente a la administracion de uno o mas agentes quimioterapeuticos y un anticuerpo terapeutico. El anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 (HER2/neu). En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 humano o humanizado. En alguna realizacion, el anticuerpo terapeutico es un anticuerpo monoclonal quimerico anti-ErbB2.

En algunas realizaciones, el anticuerpo terapeutico es HERCEPTIN® (trastuzumab), un anticuerpo monoclonal humanizado que interfiere con el receptor 2 del factor de crecimiento epidermico humano (receptor HER2/neu). El receptor HER2/neu es un miembro de la familia de protemas ErbB, mas comunmente conocida como la familia de receptores del factor de crecimiento epidermico. Trastuzumab invierte los efectos de un receptor HER2 hiperactivo.

En algunas realizaciones, el trastuzumab se administra en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos para el tratamiento del cancer de mama. En algunas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC se utiliza antes, simultaneamente con o posterior a la administracion de cetuximab y uno o mas agentes quimioterapeuticos para el tratamiento de pacientes con cancer de mama metastasico cuyos tumores sobreexpresan la protema HER2.

La divulgacion proporciona metodos para aumentar la efectividad del trastuzumab en el tratamiento del cancer de mama. Por lo tanto, algunas divulgaciones proporcionan un metodo para aumentar la eficacia clmica del trastuzumab que comprende administrar a un sujeto que lo necesite trastuzumab en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion y uno o mas agentes quimioterapeuticos.

Tumores solidos

De acuerdo con algunas divulgaciones, se proporcionan metodos para controlar el crecimiento de tumores solidos (por ejemplo, mama, prostata, melanoma, renal, colon, crecimiento de tumor cervical) y/o metastasis que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion a un sujeto que lo necesite. En algunas realizaciones, el sujeto es un mairnfero. En algunas realizaciones, el mamffero es humano.

El termino "tumor" se usa para denotar un crecimiento neoplasico que puede ser benigno (por ejemplo, un tumor que no forma metastasis y destruye el tejido normal adyacente) o maligno / cancer (por ejemplo, un tumor que invade los tejidos circundantes y es normalmente capaz de producir metastasis, puede reaparecer despues de la retirada intencionada, y es probable que cause la muerte del huesped a menos que se trate adecuadamente). Tal como se usa en la presente memoria, los terminos tumor, crecimiento tumoral o tejido tumoral pueden usarse indistintamente y se refieren a un crecimiento anormal de tejido que resulta de una multiplicacion progresiva no controlada de celulas y que no cumple ninguna funcion fisiologica.

Canceres hematologicos

Los canceres hematologicos son el tipo de cancer que afecta a la sangre, la medula osea o los ganglios linfaticos. Como los tres estan mtimamente conectados a traves del sistema inmunologico, una enfermedad que afecta a uno de los tres a menudo afectara a los demas tambien. Los canceres hematologicos pueden derivarse de cualquiera de los dos linajes de celulas sangumeas principales: las lmeas celulares mieloides y linfoides. La lmea celular mieloide produce normalmente granulocitos, eritrocitos, trombocitos, macrofagos y mastocitos; la lmea celular linfoide produce celulas B, T, NK y de plasma. Los linfomas, las leucemias linfocticas y el mieloma son de la lmea linfoide, mientras que la leucemia mielogena aguda y cronica, los smdromes mielodisplasicos y las enfermedades mieloproliferativas son de origen mieloide.

Los canceres hematologicos que pueden tratarse o mejorarse usando composiciones de la presente invencion incluyen, pero no se limitan a, linfoma no Hodgkin (por ejemplo, linfoma linfodtico pequeno, linfoma de celulas centrales foliculares, linfoma linfoplasmocitoide, linfoma de zona marginal, linfoma de celulas de manto, linfoma inmunoblastico, linfoma de Burkitt, linfoma linfoblastico, linfoma de celulas T perifericas, linfoma de celulas grandes anaplasicas y linfoma de celulas T intestinal), leucemia, leucemia linfodtica aguda, leucemia linfodtica cronica y neoplasmas de celulas plasmaticas, incluyendo mieloma multiple.

La presente descripcion proporciona procedimientos para tratar o mejorar los canceres hematologicos que comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invencion a un sujeto que lo necesite.

Canceres mutantes KRAS

El protooncogen KRAS codifica la protema G de K-ras. Este protooncogen es un homologo del oncogen de Kirsten ras de la familia del gen ras de marnffero. Una sola sustitucion de aminoacidos, y en particular una sola sustitucion de nucleotidos, es responsable de una mutacion activadora. La protema KRAS mutante esta implicada en diversas neoplasias, incluyendo adenocarcinoma de pulmon, adenoma mucinoso, carcinoma ductal del pancreas y carcinoma colorrectal. Se ha encontrado que varias mutaciones de la lmea germinal KRAS estan asociadas con el smdrome de

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Noonan y el smdrome cardio-facio-cutaneo. Las mutaciones somaticas de KRAS se encuentran en altos niveles en leucemias, cancer de colon, cancer de pancreas y cancer de pulmon. Los pacientes con mutacion KRAS son predictivos de una respuesta muy pobre a algunos anticuerpos terapeuticos en el tratamiento de canceres, como el cancer colorrectal y el cancer de pulmon.

La descripcion tambien proporciona metodos para aumentar la eficacia clmica de un anticuerpo monoclonal terapeutico en el tratamiento del cancer mutante KRAS que comprende administrar a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico, en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. El anticuerpo terapeutico es, por ejemplo, panitumumab o cetuximab. Un sujeto que lo necesita incluye sujetos con cancer que han sido identificados por tener una mutacion KRAS o previamente identificados porque que no responden al tratamiento con anticuerpos terapeuticos. Los sujetos que tienen mutacion KRAS se identifican mediante metodos conocidos en la tecnica tales como la secuenciacion de nucleotidos, genotipificacion, ribonucleasa, electroforesis en gel de gradiente desnaturalizante, carbodiimida, escision qmmica, polimorfismo de conformacion de una sola hebra, heteroduplex y metodos de secuenciacion (Ogino et al. Journal of Molecular Diagnostics, 7: 413 - 421,2005).

Cancer colorrectal mutante KRAS

El protooncogen KRAS codifica la protema G de K-ras, que desempena un papel clave cntico en la ruta de senalizacion de protema quinasa activada por Ras/mitogeno (MAPK) situada secuencia abajo de muchos receptores del factor de crecimiento incluyendo EGFR y que esta implicada en la carcinogenesis de cancer colorrectal (CRC). El reclutamiento de K-ras por el EGFR activado es responsable de la activacion de una cascada de serina-treonina quinasas desde la superficie celular hasta el nucleo. Las mutaciones KRAS (en el exon 2, codones 12 y 13) estan presentes en mas de un tercio de los pacientes con CRC y conducen a la activacion de uno de las rutas mas importantes para la proliferacion celular, la ruta Ras/MAPK, mediante la induccion de la smtesis de ciclina D1. Por consiguiente, en presencia de una mutacion KRAS, esta activacion de la ruta no puede ser inhibida significativamente por un moAb anti-EGFR (cetuximab o panitumumab) que actua secuencia arriba de la protema K-ras. La mutacion KRAS tambien esta implicada en otras neoplasias, incluyendo adenocarcinoma de pulmon, adenoma mucinoso y carcinoma ductal del pancreas.

Cancer de pulmon mutante KRAS

El cancer de pulmon sigue siendo la principal causa de muerte por cancer en los Estados Unidos y se espera que cause 162.000 muertes en los Estados Unidos en 2006. El receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR), un receptor tirosina quinasa, se expresa en la mayona de los canceres de pulmon de celulas no pequenas (NSCLC). Se ha reportado que la mutacion KRAS, que ocurre en el 20 al 30% de los NSCLC, principalmente en adenocarcinomas (30%) y fumadores, esta asociada con una respuesta deficiente a los inhibidores de tirosina quinasa espedficos de EGFR. Los pacientes con NSCLC mutante KRAS mostraron resultados clmicos mas pobres cuando se trataron con erlotinib (Tarceva, OSI-774, OSI Pharmaceuticals), inhibidores de moleculas pequenas que se dirigen al dominio de tirosina quinasa del EGFR y quimioterapia.

Polimorfismos del gen FcyR

La descripcion tambien proporciona metodos para aumentar la eficacia clmica de un anticuerpo monoclonal terapeutico en sujetos con una funcion ADCC alterada, tales como sujetos con sujetos con polimorfismos FcyR administrando a un sujeto que lo necesite el anticuerpo monoclonal terapeutico, en combinacion con la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion. Un sujeto que lo necesita incluye sujetos que han sido identificados porque tienen un polimorfismo FcyR tal como FcYR3a-V158F y FcYR2a-H131R, o identificados previamente porque no responden al tratamiento con anticuerpos terapeuticos. Los sujetos que tienen un polimorfismo FcyR se identifican mediante metodos conocidos en la tecnica tales como hibridacion espedfica del alelo dinamico (DASH), electroforesis en gel diagonal de matriz de microplaca (MADGE), pirosecuenciacion, ligacion espedfica de oligonucleotido, el sistema TaqMan, asf como diversas tecnologfas de "chip" de ADN tales como los chips SNP de Affymetrix. Estos metodos requieren la amplificacion de la region genetica diana, tfpicamente por PCR. Todavfa otros metodos recientemente desarrollados, basados en la generacion de pequenas moleculas de senal por escision invasiva seguida de espectrometna de masas o sondas de candado inmovilizadas y amplificacion en drculo rodante, podnan eliminar la necesidad de PCR.

FcYR3a-V158F

rs396991 es un SNP en el fragmento Fc del gen FcYR3a receptor (CD16a), IIIa de baja afinidad, de IgG. rs396991 (T) codifica el alelo de fenilalanina (F), con el alelo (G) que codifica la variante valina (V). En esta invencion, se proporcionan metodos para seleccionar un regimen terapeutico apropiado para un sujeto que lo necesite, que comprende determinar un SNP de FcYR3a en la posicion del aminoacido 158, en el que una valina homocigotica en la posicion del aminoacido 158 de FcYR3a indica que el sujeto es mas sensible al regimen terapeutico que un sujeto sin la valina homocigotica en la posicion del aminoacido 158 de FcYR3a.

FcYR2a-H131R

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rs1801274 es un SNP en el fragmento Fc del gen FcYR2a del receptor IIa de IgG (CD32). El SNP (rs1801274) 131G>A (o H131R) en la posicion 131 del exon 4 del gen FcYRlIa que conduce a la sustitucion de una arginina por una histidina. En esta descripcion, se proporcionan metodos para seleccionar un regimen terapeutico apropiado para un sujeto que lo necesite, que comprende determinar un SNP de FcYR2a en la posicion del aminoacido l3l, en el que una histidina homocigotica en la posicion del aminoacido 131 de FcYR2a indica que el sujeto es mas sensible al regimen terapeutico que un sujeto sin histidina homocigotica en la posicion del aminoacido 131 de FcYR2a.

Administracion de la molecula potenciadora de ADCC

La molecula potenciadora de ADCC de la invencion se formula preferiblemente para inyeccion, lo mas preferiblemente mediante inyeccion subcutanea. En ciertas realizaciones, la molecula potenciadora de ADCC de la invencion se formula para administracion por via intradermica, transdermica, subcutanea o intramuscular. En una realizacion, la molecula potenciadora de ADCc se formula para administracion intravenosa. Sin embargo, la molecula potenciadora de ADCC puede formularse para cualquier via de administracion adecuada, incluyendo, a modo de ejemplo, una administracion topica nasal (por ejemplo, a traves de un aerosol), bucal (por ejemplo, sublingual), topica (es decir, administracion ya sea a traves de las superficies de la piel y/o mucosas, incluyendo superficies de las vfas respiratorias), intratecal, intraarticular, intrapleural, intracerebral, intraarterial, intraperitoneal, oral, intralinfatica, intranasal, rectal o vaginal, por perfusion a traves de un cateter regional o por inyeccion intralesional directa.

Las formulaciones de la presente invencion contienen una cantidad de una molecula potenciadora de ADCC que es eficaz para el uso pretendido. Las dosis particulares tambien se seleccionan con base en una serie de otros factores que incluyen la edad, sexo, especie y/o estado del paciente. Las cantidades efectivas tambien se pueden extrapolar a partir de curvas de dosis-respuesta derivadas de sistemas de ensayo in vitro o de modelos animales.

En ciertas realizaciones, la dosis de la molecula potenciadora de ADCC se mide en unidades de mg/kg de peso corporal. En otras realizaciones, la dosis se mide en unidades de mg/kg de peso corporal magro (es decir, peso corporal menos contenido de grasa corporal). En otras realizaciones, la dosis se mide en unidades de mg/m2 de superficie corporal. En otras realizaciones, la dosis se mide en unidades de mg por dosis administrada a un paciente. Cualquier medicion de la dosis puede usarse conjuntamente con las composiciones y metodos de la invencion y las unidades de dosificacion pueden convertirse mediante medios estandar en la tecnica.

En algunas realizaciones, la dosis para la molecula potenciadora de ADCC esta entre 0,1-10 mg/m2 (por ejemplo, 0,13,9 mg/m2, 0,1-1 mg/m2, 0,1-2 mg/m2, 0,1-4 mg/m2, 2-4 mg/m2, 2-6 mg/m2, 2-8 mg/m2). Esta incluye 0,003 mg/m2, 0,1 mg/m2, 1 mg/m2, 2 mg/m2, 3 mg/m2, 4 mg/m2, 5 mg/m2, 6 mg/m2, 7 mg/m2, 8 mg/m2 y puntos intermedios. La frecuencia

de administracion es preferiblemente una vez cada 7 a 21 dfas (por ejemplo, una vez cada 7, 10, 14, 18, 21 dfas).

En algunas realizaciones, la frecuencia de administracion es preferiblemente 1, 2 o 3 veces cada 7 a 21 dfas (por ejemplo, una vez cada 7, 10, 14, 18, 21 dfas). La molecula potenciadora de ADCC puede administrarse hasta la progresion de la enfermedad o una toxicidad inaceptable. En algunas realizaciones, se administran 2-20 dosis (por ejemplo, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 dosis). La via de administracion preferida es subcutanea.

Ejemplos de regfmenes de dosificacion que pueden usarse en los metodos de la invencion incluyen, pero no se limitan a, diariamente, tres veces por semana (intermitente), semanal o cada 14 dfas. En ciertas realizaciones, los regfmenes de dosificacion incluyen, pero no se limitan a, dosificacion mensual o dosificacion cada 6-8 semanas. En una realizacion preferida, una formulacion de molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion se administra por inyeccion subcutanea semanal o quincenal en combinacion con una modalidad de tratamiento adecuada para el tratamiento de cancer o enfermedad infecciosa en un sujeto, preferiblemente un sujeto humano.

Los ejemplos de dosis de una molecula potenciadora de ADCC incluyen cantidades de miligramos por kilogramo del sujeto. En una realizacion, la dosis es de aproximadamente 0,02 a 10 mg/kg de peso corporal o de aproximadamente 0,04 a 5 mg/kg de peso corporal. En una realizacion espedfica, la dosificacion es de aproximadamente 0,05 mg/kg, aproximadamente 0,1 mg/kg, aproximadamente 0,5 mg/kg, aproximadamente 1 mg/kg, aproximadamente 5 mg/kg, o aproximadamente 10 mg/kg del peso corporal del sujeto.

En ciertas divulgaciones de los metodos para tratar cancer o enfermedad infecciosa, la molecula potenciadora de ADCC se administra al sujeto en una dosis de aproximadamente 0,02 a 10 mg/kg de peso corporal o de aproximadamente 0,04 a 5 mg/kg de peso corporal del sujeto. En realizaciones particulares, la molecula potenciadora de ADCC se administra en una dosis de aproximadamente 0,05 mg/kg, aproximadamente 0,1 mg/kg, aproximadamente 0,5 mg/kg, aproximadamente 1 mg/kg, aproximadamente 5 mg/kg o aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal del sujeto. En ciertas realizaciones adicionales, la formulacion de la molecula potenciadora de ADCC se administra al sujeto cada semana o cada dos semanas. En realizaciones espedficas, una dosis diaria es de al menos 0,05 mg, 0,50 mg, 1,0 mg, 5,0 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 30 mg o al menos 50 mg.

Las dosificaciones recomendadas para la administracion intradermica, intramuscular, intraperitoneal, subcutanea, epidural o intravenosa estan en el intervalo de aproximadamente 0,02 a 10 mg/kg de peso corporal por dfa. Las dosis adecuadas para la administracion topica estan en el intervalo de aproximadamente 0,001 miligramos a

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aproximadamente 50 miligramos por kilogramo de peso corporal al dfa, dependiendo del area de administracion. Los expertos en la tecnica apreciaran que las dosificaciones son generalmente mas altas y/o frecuentes de administracion mayor para el tratamiento inicial en comparacion con los regfmenes de mantenimiento.

Kits

La presente invencion proporciona un paquete o kit farmaceutico que comprende uno o mas recipientes llenos con una molecula potenciadora de ADCC lfquida o liofilizada. En realizaciones preferidas, la formulacion lfquida o liofilizada es esteril. En una realizacion, el kit comprende una formulacion lfquida o liofilizada de la molecula potenciadora de ADCC, en uno o mas recipientes, y uno o mas agentes profilacticos o terapeuticos utiles para el tratamiento de trastornos de cancer o de celulas B. Los uno o mas de otros agentes profilacticos o terapeuticos pueden estar en el mismo recipiente que la molecula potenciadora de ADCC o en uno o mas recipientes. Preferiblemente, la molecula potenciadora de ADCC se formula a una concentracion de aproximadamente 0,5 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml, de aproximadamente 1 mg/ml a aproximadamente 40 mg/ml o de aproximadamente 2 mg/ml a aproximadamente 15 mg/ml, y la formulacion es adecuada para administracion por via intradermica, transdermica, subcutanea o intramuscular. Alternativamente, la molecula potenciadora de ADCC se formula para administracion intravenosa. La molecula potenciadora de ADCC puede formularse tambien para cualquier via de administracion adecuada, incluyendo, a modo de ejemplo, una administracion nasal (por ejemplo, a traves de un aerosol), bucal (por ejemplo, sublingual), topica (es decir, administracion a traves de superficies mucosas, incluyendo superficies de las vfas respiratorias), intratecal, intraarticular, intrapleural, intracerebral, intraarterial, intraperitoneal, oral, intralinfatica, intranasal, rectal o vaginal, por perfusion a traves de un cateter regional o por inyeccion intralesional directa. Preferiblemente, el kit contiene la molecula potenciadora de ADCC en forma de dosificacion unitaria. Mas preferiblemente, la forma de dosificacion unitaria esta en una forma adecuada para proporcionar una dosis unitaria de aproximadamente 0,02 a 10 mg/kg o aproximadamente 0,04 a 5 mg/kg de peso corporal del sujeto a tratar.

En ciertas realizaciones, el kit comprende ademas uno o mas anticuerpos monoclonales terapeuticos, por ejemplo, pero sin limitacion, rituximab, cetuximab, panitumumab, trastuzumab, alemtuzumab, epratuzumab, basiliximab, daclizmab, labetuzumab, seviumab, tuvurimab, palivizumab, Infliximab, omalizumab, efalizuab, natalizumab y clenoliximab. El kit tambien puede comprender uno o mas agentes quimioterapeuticos. El kit de la presente invencion comprende ademas instrucciones para uso en el tratamiento de cancer (por ejemplo, usando las formulaciones lfquidas de la invencion solas o en combinacion con otro agente profilactico o terapeutico), asf como efectos secundarios e informacion de dosificacion para uno o mas rutas de administracion. Opcionalmente asociado con dicho contenedor o contenedores es un aviso en la forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricacion, uso o venta de productos farmaceuticos o biologicos, que refleja la aprobacion por la agencia para la fabricacion, uso o venta para administracion humana.

Composiciones

Tambien se incluyen en la invencion composiciones que contienen una molecula potenciadora de ADCC y un anticuerpo terapeutico. El anticuerpo terapeutico es, por ejemplo, pero no limitado a, rituximab, cetuximab, panitumumab, trastuzumab, alemtuzumab, epratuzumab, basiliximab, daclizmab, labetuzumab, seviumab, tuvurimab, palivizumab, infliximab, omalizumab, efalizuab, natalizumab o clenoliximab.

Definiciones

A menos que se defina lo contrario, todos los terminos tecnicos y cientfficos usados en el presente documento tienen el mismo significado que comunmente entiende un experto en la tecnica al que pertenece esta invencion. Aunque se pueden usar metodos y materiales similares o equivalentes a los descritos aqrn en la practica o ensayo de la presente invencion, se describen a continuacion metodos y materiales adecuados. En el caso de conflicto, la presente especificacion, incluyendo las definiciones, dominara. Ademas, los materiales, los metodos y los ejemplos son ilustrativos y no pretenden ser limitativos. Otras caractensticas y ventajas de la invencion seran evidentes a partir de la siguiente descripcion detallada y las reivindicaciones.

El termino "administracion", "que administra", "coadministracion" o "que coadministra" se refiere tanto a la administracion simultanea como secuencial de los agentes activos.

Un "sujeto" o "paciente" en el contexto de la presente invencion es preferiblemente un mairnfero. El mairnfero puede ser un primate humano, no humano, raton, rata, perro, gato, caballo o vaca, pero no se limitan a estos ejemplos. Un sujeto puede ser macho o hembra.

"Actividad de ADCC" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a una actividad para danar una celula diana (por ejemplo, celula tumoral) mediante la activacion de una celula efectora a traves de la union de la region Fc de un anticuerpo a un receptor Fc existente en la superficie de una celula efectora tal como una celula asesina, una celula asesina natural, un macrofago activado o similar. Una actividad de anticuerpos de la presente invencion incluye actividad de ADCC. Las mediciones de la actividad de ADCC y los experimentos antitumorales pueden llevarse a cabo de acuerdo con cualquier ensayo conocido en la tecnica.

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El termino "mejora la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos", "mejora la ADCC" (por ejemplo, referente a celulas) o "aumento de ADCC" pretende incluir cualquier aumento mensurable en la lisis celular cuando se pone en contacto con un anticuerpo terapeutico y la molecula potenciadora de ADCC en comparacion con la muerte celular de la misma celula en contacto con el anticuerpo terapeutico solo. Por ejemplo, un aumento en la lisis celular puede ser de al menos aproximadamente 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 150%, 200% 250%, 300%, 325%, 400%, o 500%.

El termino "anticuerpo monoclonal" o "composicion de anticuerpo monoclonal" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a una preparacion de moleculas de anticuerpo de composicion molecular unica. Una composicion de anticuerpo monoclonal muestra una unica especificidad de union y afinidad por un epftopo particular.

El termino "anticuerpo humano", tal como se utiliza en la presente memoria, se pretende que se refiera a anticuerpos que tienen regiones variables en las que tanto las regiones marco como CDR se derivan de secuencias de inmunoglobulina de lmea germinal humana. Ademas, si el anticuerpo contiene una region constante, la region constante tambien se deriva de secuencias de inmunoglobulina de lmea germinal humana. Los anticuerpos humanos de la invencion pueden incluir residuos de aminoacidos no codificados por secuencias de inmunoglobulina de lmea germinal humana (por ejemplo, mutaciones introducidas por mutagenesis aleatoria o espedfica del sitio in vitro o por mutacion somatica in vivo).

El termino "anticuerpo monoclonal humano" se refiere a anticuerpos que muestran una unica especificidad de union que tienen regiones variables en las que tanto las regiones marco como CDR se derivan de secuencias de inmunoglobulina de lmea germinal humana. En una realizacion, los anticuerpos monoclonales humanos son producidos por un hibridoma que incluye una celula B obtenida de un animal transgenico no humano, por ejemplo, un raton transgenico, que tiene un genoma que comprende un transgen de cadena pesada humana y un transgen de cadena ligera fusionados a una celula inmortalizada. El termino "anticuerpo monoclonal humano", tal como se utiliza aqrn, tambien incluye todos los anticuerpos humanos que se preparan, expresan, crean o afslan por medios recombinantes, tales como (a) anticuerpos aislados de un animal (por ejemplo, un raton) que es transgenico o (b) anticuerpos aislados a partir de una celula huesped transformada para expresar el anticuerpo humano, por ejemplo, a partir de un transfectoma, (c) anticuerpos aislados de una biblioteca de anticuerpos humanos recombinantes combinatorios, recombinantes, y (d) anticuerpos preparados, expresados, creados o aislados por cualquier otro medio que implique el empalme de secuencias genicas de inmunoglobulina humana a otras secuencias de ADN. Dichos anticuerpos humanos recombinantes tienen regiones variables en las que las regiones marco y CDR se derivan de secuencias de inmunoglobulina de lmea germinal humana. Sin embargo, en ciertas realizaciones, tales anticuerpos humanos recombinantes pueden someterse a mutagenesis in vitro (o, cuando se usa un animal transgenico para secuencias de Ig humanas, mutagenesis somatica in vivo) y por tanto las secuencias de aminoacidos de las regiones Vh y Vl de los anticuerpos recombinantes son secuencias que, aunque derivadas de y relacionadas con las secuencias Vh y Vl de lmea germinal humana, no pueden existir naturalmente dentro del repertorio de la lmea germinal del anticuerpo humano in vivo.

El termino "anticuerpo humanizado" pretende referirse a anticuerpos en los que se han injertado secuencias de CDR derivadas de la lmea germinal de otras especies de mairnferos, tales como raton, en secuencias marco humanas. Pueden realizarse modificaciones adicionales de la region marco dentro de las secuencias marco humanas.

El termino "anticuerpo quimerico" pretende referirse a anticuerpos en los que las secuencias de regiones variables se derivan de una especie y las secuencias de regiones constantes se derivan de otra especie, tal como un anticuerpo en el que las secuencias de region variable se derivan de un anticuerpo de raton y las secuencias de region constante se derivan de un anticuerpo humano.

Un "gen mutado" o "mutacion" o "mutacion funcional" o "mutante" se refiere a una forma alelica de un gen, que es capaz de alterar el fenotipo de un sujeto que tiene el gen mutado con respecto a un sujeto que no tiene el gen mutado. El fenotipo alterado causado por una mutacion puede ser corregido o compensado por ciertos agentes. Si un sujeto debe ser homocigotico para que esta mutacion tenga un fenotipo alterado, se dice que la mutacion es recesiva. Si una copia del gen mutado es suficiente para alterar el fenotipo del sujeto, se dice que la mutacion es dominante. Si un sujeto tiene una copia del gen mutado y tiene un fenotipo que es intermedio entre el de un homocigoto y el de un sujeto heterocigotico (para ese gen), se dice que la mutacion es codominante.

El termino "polimorfismo" se refiere a la coexistencia de mas de una forma de un gen o porcion (por ejemplo, una variante alelica). Una porcion de un gen de la que hay al menos dos formas diferentes, es decir, dos secuencias de nucleotidos diferentes, se denomina una "region polimorfica de un gen". Una secuencia genetica espedfica en una region polimorfica de un gen es un alelo. Una region polimorfica puede ser un solo nucleotido, cuya identidad difiere en diferentes alelos. Una region polimorfica tambien puede tener varios nucleotidos de longitud.

El termino "alelo de tipo silvestre" se refiere a un alelo de un gen que, cuando esta presente en dos copias en un sujeto, da como resultado un fenotipo de tipo silvestre. Puede haber varios alelos de tipo silvestre diferentes de un gen espedfico, ya que ciertos cambios de nucleotidos en un gen pueden no afectar el fenotipo de un sujeto que tiene dos copias del gen con los cambios de nucleotidos.

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Tal como se utiliza a lo largo de esta descripcion, las formas singulares "un", "uno, una" y "el, la" incluyen referencias plurales a menos que el contexto indique claramente lo contrario. As^ por ejemplo, una referencia a "una composicion" incluye una pluralidad de tales composiciones, as^ como una composicion unica, y una referencia a "un agente terapeutico" es una referencia a uno o mas agentes terapeuticos y/o farmaceuticos y equivalentes de los mismos conocidos por los expertos en la tecnica, y as^ sucesivamente. Por lo tanto, por ejemplo, una referencia a "una celula huesped" incluye una pluralidad de tales celulas huesped, y una referencia a "un anticuerpo" es una referencia a uno o mas anticuerpos y equivalentes de los mismos conocidos por los expertos en la tecnica, etc. Ademas, el uso de la palabra "un" o "uno, una" cuando se usa junto con el termino "que comprende" en las reivindicaciones y/o la especificacion puede significar "uno", pero tambien es consistente con el significado de "uno o mas", "al menos uno" y "uno o mas de uno".

A lo largo de esta solicitud, el termino "aproximadamente" se utiliza para indicar que un valor incluye la desviacion estandar de error para el dispositivo o metodo que se emplea para determinar el valor.

El uso del termino "o" en las reivindicaciones se utiliza para significar "y/o" a menos que se indique explicitamente que se refieren solo a alternativas o las alternativas son mutuamente excluyentes, aunque la descripcion apoya una definicion que se refiere solo a alternativas e "y/o".

Tal como se utiliza en esta memoria descriptiva y en la reivindicacion o reivindicaciones, las palabras "que comprende" (y cualquier forma de, que comprende, tal como "comprende"), "que tiene" (y cualquier forma de, que tiene, tal como "tiene"), "que incluye" (y cualquier forma de, que incluye, tal como "incluye") o "que contiene" (y cualquier forma de, que contiene, tal como "contiene") son inclusivas o abiertas y no excluyen elementos adicionales, no mencionados o etapas del metodo.

El termino "cantidad eficaz" se refiere a una cantidad suficiente para proporcionar el efecto anticancerigeno deseado, efecto antitumoral o efecto contra la enfermedad en un animal, preferiblemente un ser humano, que sufre de cancer o una enfermedad celular. Los efectos antitumorales deseados incluyen, sin limitacion, la modulacion del crecimiento tumoral (por ejemplo, el retraso del crecimiento tumoral), el tamano del tumor o la metastasis, la reduccion de la toxicidad y los efectos secundarios asociados con un agente anticancerigeno particular, la mejora o minimization del deterioro clmico o smtomas de cancer, extendiendo la supervivencia del sujeto mas alla de lo que de otro modo se esperaria en ausencia de tal tratamiento, y la prevention del crecimiento tumoral en un animal que carece de cualquier formation de tumor antes de la administration, es decir, administration profilactica.

Ejemplos

Se entiende que tambien se proporcionan modificaciones que no afectan sustancialmente a la actividad de las diversas realizaciones de esta invention dentro de la definicion de la invention proporcionada aqrn. Por consiguiente, los siguientes ejemplos pretenden ilustrar, pero no limitar, la presente invencion. Aunque la invencion reivindicada ha sido descrita en detalle y con referencia a realizaciones espedficas de la misma, sera evidente para un experto en la tecnica que se pueden hacer diversos cambios y modificaciones a la invencion. Asi, por ejemplo, los expertos en la tecnica reconoceran, o seran capaces de determinar, utilizando no mas que la experimentation rutinaria, numerosos equivalentes para las sustancias y procedimientos espedficos descritos en la presente memoria.

Ejemplo 1. Aumento de la eficacia terapeutica de la terapia con anticuerpos monoclonales potenciando la actividad de NK y ADCC incluyendo ADCC en poblaciones geneticamente resistentes.

Para los experimentos se uso una formulation subcutanea que comprende el potenciador de ADCC {2-amino-8-[4- (pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3Hbenzo[f]azepin-4-il)}-N,N-dipropilcarboxamida. La estructura para la {2-amino-8-[4- (pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo [f] azepin-4-il)}-N,N-dipropilcarboxamida es la siguiente:

imagen7

Estimulacion de las PBMC: Se aislaron celulas mononucleares de sangre periferica humana (PBMC) mediante centrifugation con gradiente de densidad de FicollMR y se resuspendieron en RPMI que contema FBS inactivado por

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calor al 2%. Se incubaron las PBMC a una concentracion de 1 a 3 millones de celulas por mL con potenciador de ADCC de 10-500 nM en una incubadora de CO2 humidificada durante 18-72 horas. Las PBMC activadas se utilizaron entonces como celulas efectoras en ensayos NK y ADCC.

Ensayos de NK y ADCC: Se ensayaron las PBMC activadas con el potenciador de ADCC para determinar la capacidad para mejorar la muerte de la lmea de celulas diana K562 sensible a NK o diversas celulas tumorales recubiertas con anticuerpos monoclonales. Las celulas diana se marcaron con el colorante fluorescente Calcema AM durante 1 hora a 37°C en una incubadora de CO2 humidificada oscura. Los blancos marcados (2 x 105 celulas/ml) se incubaron a continuacion con anticuerpos monoclonales tales como Herceptin, Rituxan y Erbitux a una concentracion de 5 microgramos/mL durante 30 minutos a 4°C, despues de lo cual se elimino por lavado cualquier anticuerpo no unido. Las celulas efectoras activadas y las celulas diana marcadas se incubaron en placas de cultivo de tejidos de 96 pozos durante 4 horas a 37°C en una incubadora de CO2 humidificada oscura en un regulador de ensayo que contema HBSS + Ca/Mg + FBS al 5%. La relacion de celulas efectoras a celulas diana (relacion E:T) se vario, por ejemplo, de 1:3 a 1:100. Al final de la incubacion se sedimentaron las celulas por centrifugacion y se transfirieron 100 microlitros de sobrenadante a placas negras de 96 pozos de fondo plano (Microfluor 1 Black Flat Bottom Microtiter Plates - Thermo / Fisher # 7605). La fluorescencia se cuantifico con un lector de placas de microtitulacion de fluorescencia. El % de lisis especifica se calculo como (fluorescencia de la muestra - fluorescencia espontanea) * 100/(100% de fluorescencia - espontanea). Se determino la fluorescencia al 100% a partir de pozos que conteman celulas diana marcadas y detergentes tales como Tween-20 o Triton X-100 al 0,1%. La fluorescencia espontanea se determino a partir de pozos que conteman regulador de ensayo y celulas diana, pero no celulas efectoras.

Resultados

Para determinar si se aumento la funcion lttica de las celulas NK por el potenciador de ADCC, se llevo a cabo una serie de estudios de citotoxicidad. Se estimularon celulas mononucleares de sangre periferica humana (PBMC) con el potenciador de ADCC y luego se ensayo la capacidad de lisar las celulas diana K562 sensibles a NK. Como se muestra en la Figura 1, el potenciador de ADCc aumento la lisis de las celulas diana K562 de una forma dependiente de la dosis. Las celulas efectoras PBMC que se incubaron con control de regulador lisaron menos del 20% de las celulas diana mientras que las PBMC que habfan sido estimuladas con potenciador de ADCC de 167 nM mataron hasta 45% de las celulas diana y las PBMC que habfan sido estimuladas con potenciador de ADCC 500 nM lisaron mas del 90% de las celulas diana.

Ademas de la lisis directa de dianas sensibles a NK, las PBMC estimuladas con el potenciador de ADCC aumentaron la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo. Como se muestra en la Figura 2, el potenciador de ADCC aumento la ADCC mediada por Rituxan de la lmea celular de linfoma de celulas B HS-Sultan. Cuando las celulas HS-Sultan recubiertas con Rituxan se incubaron con PBMC no estimuladas, la muerte celular vario de 9% hasta aproximadamente 40% en un intervalo de relaciones de celulas efectoras:diana (relacion E:T). Por el contrario, la muerte celular fue tan alta como del 80 y 90% cuando las celulas diana recubiertas con Rituxan se incubaron con PBMC que habfan sido activadas por el potenciador ADCC. El aumento de ADCC fue dependiente de la dosis y aumento a medida que aumentaba la relacion E:T.

Para algunos pacientes que expresan solo niveles bajos de antfgenos tumorales, ADCC es menos eficiente. Como se muestra en la Figura 3, el potenciador de ADCC aumento la lisis de las celulas diana recubiertas de Herceptin tanto de la lmea celular de cancer de mama SKBR3 que expresa altos niveles del antfgeno tumoral Her2neu como de la lmea celular MDA-MB-231 de cancer de mama que expresa niveles mas bajos del antfgeno tumoral. Cuando las celulas recubiertas con Herceptin se incubaron con PBMC no estimuladas, la muerte celular fue tan alta como del 40% en la lmea celular SKBR3, pero solo menos del 15% en la lmea celular MDA-MB-231. La activacion de las PBMC con el potenciador de ADCC aumento el ADCC mediado por Herceptin en ambas lmeas celulares, matando mas del 80% de las celulas diana SKBR3 y aproximadamente del 40-60% de las celulas diana MDA-MB-231. Las respuestas dependfan de la concentracion del potenciador de ADCC utilizado para estimular las celulas efectoras y de la relacion de celulas efectoras con respecto a las celulas diana.

Ejemplo 2. Polimorfismos de FcyR y tratamiento del cancer

La ADCC es mediada a traves de celulas efectoras inmunes incluidas celulas NK que se acoplan a la porcion Fc del anticuerpo monoclonal a traves de receptores espedficos. Los pacientes con polimorfismos de nucleotido unico en estos receptores tales como la posicion 158 de FcRgamma3a y la posicion 131 de FcRgamma2a tienen un pronostico clmico mas pobre presumiblemente a partir de una ADCC pobre debido a una menor afinidad del receptor por el anticuerpo monoclonal. Estudios anteriores han encontrado que un polimorfismo en la molecula FcyR3A (158F/V) que altera la afinidad de la molecula para IgG1 es un factor importante que determina la eficacia clmica observada con algunos anticuerpos monoclonales (mAb) utilizados en el tratamiento del cancer. Para determinar si este polimorfismo comun afecta a la respuesta basal de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) y/o a la respuesta a la molecula potenciadora de ADCC de la presente invencion (compuesto VTX-2337), se genotipificaron las PBMC de donantes para los dos alelos que codifican las isoformas F y V, respectivamente, y se ensayaron in vitro. Se analizo la ADCC mediada por rituximab utilizando PBMC no estimuladas o PBMC estimuladas con VTX-2337 de 15 donantes, incluyendo 10 donantes con fenotipo FF o FV y 5 donantes con fenotipo VV.

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Se recogio sangre de donantes sanos y se aislaron las PBMC usando un gradiente de Ficoll. Las PBMC se activaron cultivandolas en presencia de VTX-2337 500 nM a 37°C en una incubadora de CO2 al 5% humidificada durante 48 horas. Las PBMC activadas se incubaron a continuacion con celulas HS-Sultan recubiertas con rituximab cargadas en una relacion de 100:1 durante 4 horas. La lisis se determino midiendo la liberacion del colorante fluorescente Calcema AM de las celulas HS-Sultan.

Como se muestra en la Figura 4, el ADCC basal en las celulas de un paciente con un genotipo de alta afinidad fue de aproximadamente 30%, mientras que el ADCC basal en las celulas de un paciente con un genotipo de afinidad mas bajo fue del 10%. La estimulacion de las PBMC con el potenciador de ADCC mejoro la ADCC en ambos pacientes. En el paciente con genotipo de baja afinidad, ADCC aumento de 10% a 30%. Por lo tanto, el potenciador de ADCC "rescato" el genotipo pobre y aumento la ADCC hasta los niveles basales del genotipo de tipo silvestre.

La Figura 5 muestra que los donantes FF o FV tienen una actividad de ADCC mediada por rituximab significativamente mas reducida que los individuos con el fenotipo VV (20,5 + 2,5% de lisis espedfica para FF / FV frente a 31,7 + 2,9% de lisis espedfica para VV, p = 0,017). Cuando se estimularon PBMC con VTX-2337 antes de mezclar con celulas tumorales diana, los niveles de ADCC resultantes aumentaron significativamente, tanto en el grupo FF / FV como en el grupo VV. La ADCC aumento de 20,5 + 2,5% a 40,0 + 4,1% en el grupo FF / FV de baja afinidad (p = 0,0007) y de 31,7 + 2,9% a 55,5 + 2,6 en el grupo VV de alta afinidad (p = 0,0003). No hay diferencia significativa entre las PBMC estimuladas de donantes FF / FV y PBMC no estimuladas de donantes VV, lo que indica que la presencia de VTX-2337 puede potenciar la ADCC a partir de donantes con SNP de baja afinidad hasta un nivel normalmente alcanzado unicamente por PBMC de donantes de alta afinidad.

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Reivindicaciones

1. Un anticuerpo monoclonal terapeutico y un compuesto de formula I como una molecula potenciadora de ADCC para uso en un metodo para aumentar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en un sujeto que recibe tratamiento terapeutico de anticuerpo monoclonal, en el que el compuesto esta en una cantidad suficiente para aumentar la AdCc en el sujeto y el compuesto esta representado por la estructura:

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donde Y es

imagen2

R1, R3 y R4 son H;

R2 es OR6 o NR6R7;

R5a, R5b y R5c son H, y

R6 y R7 se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C6 y heteroalquilo C1-C6.
2. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde el anticuerpo monoclonal terapeutico es un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-CD20, un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-Her2 o un anticuerpo monoclonal terapeutico anti-EGFR.
3. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde el anticuerpo monoclonal terapeutico es rituximab, trastuzumab, cetuximab o panitumumab.
4. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde

i) el sujeto tiene un polimorfismo FcyR o una mutacion KRAS, o en el que

ii) se ha identificado previamente que el sujeto no responde al tratamiento con anticuerpos terapeuticos, o en donde

iii) el sujeto tiene una funcion de ADCC deteriorada.
5. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde la molecula potenciadora de ADCC se administra antes, simultaneamente con, despues de la administracion del anticuerpo terapeutico.
6. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde

(i) dicho anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 cuando el sujeto tiene cancer de mama;

(ii) dicho anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-CD20 cuando el sujeto tiene un trastorno de celulas B; o

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(iii) dicho anticuerpo monoclonal es un anticuerpo monoclonal anti-EGFR cuando el sujeto tiene carcinoma colorrectal metastasico que expresa EGFR, cancer de cabeza y cuello que expresa EGFR o cancer mutante KRAS.
7. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en donde el anticuerpo monoclonal anti-ErbB2 es trastuzumab.
8. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en donde el anticuerpo monoclonal anti-CD20 es rituximab.
9. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en donde el trastorno de celulas B es linfoma, leucemia o artritis reumatoide.
10. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en donde el anticuerpo monoclonal anti-EGFR es cetuximab o panitumumab.
11. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en donde el cancer mutante KRAS es cancer colorrectal.
12. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el compuesto es {2-amino-8-[4-(pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo[f]azepin-4- il)}-N,N-dipropilcarboxamida.
13. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el anticuerpo monoclonal es cetuximab o panitumumab, y en donde el compuesto de formula I es {2-amino-8-[4-(pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo[f]azepin-4-il)}-N,N dipropilcarboxamida.
14. El anticuerpo monoclonal terapeutico y el compuesto de formula I para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende ademas administrar al sujeto una cantidad terapeuticamente eficaz de uno o mas agentes quimioterapeuticos.
15. Una combinacion que comprende {2-amino-8-[4-(pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo[f]azepin-4-il)}-N,N- dipropilcarboxamida y un anticuerpo terapeutico seleccionado de cetuximab y panitumumab para uso en un metodo para aumentar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en un sujeto que recibe tratamiento con anticuerpos monoclonales terapeuticos, en donde la {2-amino-8-[4-(pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo[f]azepina-4-il)}- N,N-dipropilcarboxamida esta en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC en el sujeto.
16. La combinacion para uso de acuerdo con la reivindicacion 15, que comprende ademas uno o mas agentes quimioterapeuticos.
17. Un kit que comprende {2-amino-8-[4-(pirrolidinilcarbonil)fenil]-(3H-benzo[f]azepin-4-il)}-N,N-dipropilcarboxamida y uno o mas anticuerpos monoclonales terapeuticos seleccionados del grupo que consiste en cetuximab y panitumumab para su uso en un metodo para aumentar la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) en un sujeto que recibe tratamiento con anticuerpos monoclonales terapeuticos, en donde la {2-amino-8-[4-(pirrolidinilcarbonil)fenil]3H- benzo[f]azepin-4-il)}-N,N-dipropilcarboxamida esta en una cantidad suficiente para aumentar la ADCC en el sujeto.
18. El kit para uso de acuerdo con la reivindicacion 17, que comprende ademas uno o mas agentes quimioterapeuticos.
19. El kit para uso de acuerdo con la reivindicacion 18, que comprende ademas instrucciones de uso en el tratamiento del cancer.