ES2673873T3 - Derivados de hidroxiestatina para el tratamiento de la artrosis - Google Patents

Abstract

Compuestos de la fórmula I**Fórmula** en la que I1, I2, I3, I4, I5 son independientemente entre sí N o CR', T es un fenilo, bifenilo o naftilo no sustituido o sustituido una, dos, tres o cuatro veces con R, o un heterociclo de uno o dos ciclos saturado, insaturado o aromático con 1 hasta 4 átomos de N, O y/o S que puede estar sustituido una, dos o tres veces con R, >=S, >=NR' y/o >=O, 10 R1 es iso-propilo, 2-butilo o iso-butilo, R2 es n-propilo, iso-propilo, 2-butilo o iso-butilo, A1 es leucina o un enlace sencillo, A2 es valina, , n es 0, Y es OH u O-bencilo, m es 1, L1 es -(C>=O)-, X es un alquilo lineal o ramificado con 1-10 átomos de C no sustituido o sustituido una o dos veces con T, o un alquilo cíclico con 3-10 átomos de C en el que uno, dos o tres grupos CH2, independientemente entre sí, pueden estar sustituidos por O, L2 es un enlace sencillo, R,R' son independientemente entre sí H, un alquilo lineal o ramificado con 1-10 átomos de C no sustituido o sustituido una, dos o tres veces con >=S, >=NR, >=O, Hal, OH, NH2, SO2CH3, SO2NH2, CN, CONH2, NHCOCH3 y/o NHCONH2 en el que uno, dos o tres grupos CH2 independientemente entre sí pueden estar sustituidos por O, S, SO, SO2, NH, NCH3, -OCO-, -NHCONH-, -NHCO-, - NRSO2A-, -COO-, -CONH-, -NCH3CO-, -CONCH3-, -C≡C- y/o grupos -CH>=CH y/o también de 1 a 20 átomos de H pueden estar sustituidos por F y/o Cl, o un alquilo cíclico con 3-7 átomos de C no sustituido o sustituido una, dos o tres veces con >=S, >=NR, >=O, OH, NH2, SO2CH3, SO2NH2, CN, CONH2, NHCOCH3, y/o NHCONH2 en el que uno, dos o tres grupos CH2 independientemente entre sí pueden estar sustituidos por O, S, SO, SO2, NH, NCH3, -OCO-, -NHCONH-, -NHCO-, - NRSO2A-, -COO-, -CONH-, -NCH3CO-, -CONCH3- y/o por grupos -CH>=CH y/o también de 1 a 11 átomos de H pueden estar sustituidos por F y/o Cl, Hal es F, Cl, Br o I, así como sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.

Description

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

DESCRIPCIÓN

Derivados de hidroxiestatina para el tratamiento de la artrosis

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula I y, en particular, a medicamentos que contienen al menos un compuesto de fórmula I para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos en cuyo desencadenamiento interviene la catepsina D, en particular, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de artrosis, lesiones condrales traumáticas artritis, dolor, alodinia o hiperalgesia.

Antecedentes de la invención

La artrosis es la enfermedad articular más extendida a nivel mundial y se encuentran indicios radiológicos de artrosis en la mayoría de personas de más de 65 años. A pesar de esta importancia fundamental para el sistema sanitario, hasta este momento las causas de la artrosis todavía no se han aclarado y las medidas preventivas eficaces todavía continúan siendo un objetivo lejano. La reducción de la cavidad articular (debido a la destrucción del cartílago articular) junto con alteraciones de los huesos subcondrales y la formación de osteofitos son las características radiológicas de la enfermedad. Para los pacientes, no obstante, la prioridad son los dolores (dolores en reposo nocturnos y relacionados con cargas) con la subsiguiente limitación funcional. Esto es también lo que lleva a los pacientes al aislamiento social con las correspondientes deuteropatías.

El concepto artrosis se refiere, según una definición no oficial en Alemania, a un «desgaste articular» que sobrepasa los niveles habituales de la edad. Se considera que las causas son un exceso de carga (peso corporal algo elevado), causas congénitas o traumáticas, como alineación incorrecta de las articulaciones, o también deformaciones óseas debidas a osteopatías como la osteoporosis. Asimismo, la artrosis puede originarse como consecuencia de otras enfermedades (artrosis secundaria), por ejemplo de una inflamación articular (artritis), o ir acompañada del desarrollo de derrames debido a sobrecargas (reacción inflamatoria secundaria) (artrosis activada). La literatura especializada angloamericana distingue entre la osteoartrosis (osteoarthritis [OA] en inglés), en la que la destrucción de las superficies articulares probablemente se debe fundamentalmente a efectos de carga, y la artritis (arthritis, rheumatoid arthritis [RA] en inglés), en la que tiene prioridad la degeneración articular debido a un componente inflamatorio.

Fundamentalmente, las artrosis se diferencian según su causa. La artrosis alcaptonúrica se basa en un aumento de los depósitos de ácido homogentísico en las articulaciones en caso de la susodicha alcaptonuria. En la artrosis hemofílica se presentan con regularidad hemorragias intraarticulares en caso de hemofilia (hemartrosis). La artrosis úrica se produce por el efecto mecánico de cristales de urato (ácido úrico) en el cartílago sano (W. Pschyrembel y col.: Klinisches Worterbuch mit klinischen Syndromen und einem Anhang Nomina Anatomica. Editorial Walter de Gruyter & Co, 253a edición, 1977).

La displasia de las articulaciones representa la causa clásica de una artrosis. En el ejemplo de la cadera está claro que la zona más cargada mecánicamente en una posición fisiológica de cadera presenta una superficie claramente más grande que en el caso de una cadera displásica. Sin embargo, las cargas debidas a las fuerzas que actúan sobre la articulación son en su mayor parte independientes de la forma de la articulación. Se reparten fundamentalmente sobre la(s) zona(s) de carga principal(es). De esta manera, se produce una mayor carga por presión en una zona pequeña que en una zona más grande. Por lo tanto, en una cadera displásica la carga biomecánica por presión del cartílago articular es mayor que en una posición fisiológica de cadera. En general, se considera que este principio es la causa de la aparición frecuente de alteraciones artrósicas en las articulaciones de soporte que difieren de la forma anatómica ideal.

Si las consecuencias de una lesión son las responsables de un desgaste prematuro, se habla de una artrosis postraumática. Como otras causas de una artrosis secundaria se habla de razones mecánicas, inflamatorias, metabólicas, químicas (quinolonas), tróficas, hormonales, neurológicas y genéticas. En la mayoría de casos, sin embargo, se declara como diagnóstico una artrosis idiopática en la que el médico expresa la aparente falta de una enfermedad causal (H. I. Roach y S. Tilley, Bone and Osteoarthritis F. Bronner y M. C. Farach-Carson (editores), editorial Springer, volumen 4, 2007).

Las causas medicamentosas de una artrosis pueden ser, por ejemplo, antibióticos del tipo inhibidores de girasa (fluoroquinolonas, como ciprofloxacino, levofloxacino). En tejidos con una mala vascularización (cartílago articular hialino, tejidos de tendón), estos medicamentos provocan una complejación de iones de magnesio, lo cual tiene como consecuencia que se producen lesiones irreversibles en el tejido conjuntivo. Normalmente estas lesiones son más marcadas en niños y jóvenes en fase de crecimiento. Las tendopatías y artropatías son efectos secundarios conocidos de esta clase de medicamentos. En adultos, según informaciones de farmacólogos y reumatólogos independientes, estos antibióticos provocan una desintegración fisiológica acelerada del cartílago articular hialino (M. Menschik y col., Antimicrob. Agents Chemother. 41, 1997, págs. 2562-2565; M. Egerbacher y col., Arch. Toxicol. 73, 2000, págs. 557-563; H. Chang y col., Scand. J. Infect. Dis. 28, 1996, págs. 641-643; A. Chaslerie y

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

col.,Therapie 47, 1992, pág. 80). También un tratamiento prolongado con fenprocumón puede favorecer una artrosis a causa de la reducción del grosor del hueso en caso de cargas de la estructura interna de la articulación.

Además de la edad, se conocen como factores de riesgo de la osteoartrosis las sobrecargas mecánicas, (micro)traumatismos, desestabilizaciones de la articulación provocadas por la pérdida de mecanismos de seguridad, así como factores genéticos. Sin embargo, no se han aclarado completamente ni el origen ni las posibilidades de intervención (H. I. Roach y S. Tilley, Bone and Osteoarthritis F. Bronner y M. C. Farach-Carson (editores), editorial Springer, volumen 4, 2007).

En una articulación afectada por artrosis el contenido de monóxido de nitrógeno aumenta temporalmente. De un modo similar, pudo observarse a causa de una irritación mecánica elevada del tejido condral (P. Das y col., Journal of Orthopaedic Research 15, 1997, págs. 87-93. A. J. Farrell y col. Annals of the Rheumatic Diseases 51, 1992, págs. 1219-1222; B. Fermor y col., Journal of Orthopaedic Research 19, 2001, págs. 729-737), mientras que una estimulación mecánica moderada repercute de una forma más bien positiva. Con ello, los efectos de fuerza mecánica intervienen como causa en el avance de la osteoartrosis (X. Liu y col., Biorheology 43, 2006, págs. 183190).

Fundamentalmente, la terapia de la artrosis persigue dos objetivos. Por un lado, la ausencia de dolor bajo una carga habitual y, por otro lado, impedir las limitaciones mecánicas o las alteraciones de una articulación. Estos objetivos no se pueden conseguir a largo plazo mediante un tratamiento del dolor como único método terapéutico sintomático, ya que con este tratamiento no se puede impedir el avance de la enfermedad. Si se quiere conseguir esto último, se debe detener la destrucción del cartílago. Puesto que en pacientes adultos el cartílago articular no se puede regenerar, es de suma importancia, además, la eliminación de factores patogenéticos como displasias articulares o alineaciones incorrectas que provocan un aumento de cargas de presión puntuales del cartílago articular.

Finalmente, con la ayuda de medicamentos se intenta impedir o detener los procesos degenerativos en los tejidos condrales.

La matriz extracelular, que está compuesta en primer lugar de colágeno, proteoglucanos y agua, es fundamental para el estado funcional del cartílago articular y, con ello, para su capacidad de resistencia frente a cargas. Entre las enzimas que intervienen en la degradación de la matriz extracelular se encuentran, en particular, las metaloproteinasas, las agrecanasas y las enzimas catepsinas. Pero también otras enzimas pueden descomponer principalmente la matriz condral, como por ejemplo la plasmina, la calicreína, la elastasa de neutrófilos, la triptasa y la quimasa.

Las catepsinas pertenecen a la superfamilia papaína de las proteasas lisosomales. Las catepsinas participan en la proteólisis normal y en la transformación de proteínas diana y tejidos, así como en la iniciación de cascadas proteolíticas y activaciones de proenzimas. Además, participan en la expresión del CMH clase II (Baldwin (1993) Proc. Natl. Acad. Sci., 90: 6796-6800; Mixuochi (1994) Immunol. Lett., 43:189-193). En realidad, una expresión anómala de la catepsina puede provocar enfermedades graves. Así, se pudo comprobar una expresión aumentada de catepsina en células cancerosas, por ejemplo en cáncer de mama, de pulmón, de próstata, de glioblastoma y de cabeza y cuello, y se pudo demostrar que la catepsina está asociada con un éxito terapéutico insuficiente en cáncer de mama, de pulmón, de cabeza y cuello, así como en tumores cerebrales (Kos y col. (1998) Oncol. Rep., 5:1349- 1361; Yan y col. (1998) Biol. Chem., 379:113-123; Mort y col. ; (1997) Int. J. Biochem. Cell Biol., 29: 715-720; Friedrick y col. (1999) Eur. J Cancer, 35:138-144). Además, al parecer una expresión anómala de la catepsina está implicada en el desarrollo de enfermedades inflamatorias y no inflamatorias, como por ejemplo la artritis reumatoide y la osteoartrosis (Keyszer (1995) Arthritis Rheum., 38:976-984).

El mecanismo molecular de la actividad de la catepsina no se ha esclarecido completamente. Por un lado, se ha descubierto que, por ejemplo, una expresión inducida de catepsina en células B cuyo suero se ha extraído protege de la apoptosis y que un tratamiento de las células con oligonucleótidos antisentido de la catepsina B induce una apoptosis (Shibata y col. (1998) Biochem. Biophys. Res. Commun., 251: 199-20; Isahara y col. (1999) Neuroscience, 91:233-249). Estos estudios sugieren un papel antiapoptótico de las catepsinas. Sin embargo, se encuentran en oposición total respecto a estudios previos que describen las catepsinas como mediadoras de la apoptosis (Roberts y col (1997) Gastroenterology, 113: 1714-1726; Jones y col. (1998) Am. J. Physiol., 275: G723- 730).

Las catepsinas se sintetizan como zimógenos inactivos en los ribosomas y se transfieren al sistema lisosomal. Tras la disociación proteolítica del propéptido N terminal aumenta la concentración de catepsina en el medio ácido de los lisosomas hasta 1 mM y los lisosomas liberan las catepsinas hacia el medio extracelular.

Entre las catepsinas se distinguen las cisteína catepsinas B, C, H, F, K, L, O, S, V y W, las aspartil catepsinas D y E y la serina catepsina G.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Ejemplos de inhibidores de catepsina en el desarrollo clínico son inhibidores de catepsina K para el tratamiento de la artrosis e inhibidores de catepsina S para el tratamiento de la artritis, del dolor neuropático y la psoriasis.

Entre las aspartil proteasas también se encuentran, además de la catepsina D, la aspartil proteasa VIH (proteasa VIH-1), la renina, la pepsina A y C, BACE (Asp2, memapsina), la plasmepsina y las aspartil hemoglobinasas (Takahashi, T. y col., Ed. Aspartic Proteinases Structure, Function, Biology and Biomedical Implications (Plenum Press, Nueva York, 1995), Adams, J. y col., Ann. Rep. Med. Chem. 31,279-288, 1996; Edmunds J. y col., Ann. Rep. Med. Chem. 31,51-60, 1996; Miller, D. K. y col., Ann. Rep. Med. Chem 31,249-268, 1996). La catepsina D participa normalmente en la degradación de proteínas intracelulares o fagocitadas y por ello desempeña un papel importante en el metabolismo proteico (Helseth, y col., Proc. Natl. Acad. Sci. EE. UU. 81, 3302-3306, 1984), en el catabolismo proteico (Kay, y col., Intracellular Protein Catabolism (eds. Katunuma, y col., 155-162, 1989) y en el procesamiento de antígenos (Guagliardi, y col., Nature, 343, 133-139, 1990; Van Noort, y col., J. Biol. Chem., 264, 14159-14164, 1989).

Los niveles elevados de catepsina D se relacionan con una serie de enfermedades. Así, los niveles elevados de catepsina D están en correlación con pronósticos malos en caso de cáncer de mama y con invasión celular elevada y riesgo elevado de metástasis, así como un tiempo de supervivencia menor sin recidivas tras la terapia y una tasa de supervivencia más reducida en conjunto (Westley B. R. y col., Eur. J. Cancer 32, 15-24, 1996; Rochefort, H., Semin. Cancer Biol. 1:153, 1990; Tandon, A. K. y col., N. Engl. J. Med. 322, 297, 1990). La tasa de secreción de catepsina D en caso de cáncer de mama se obtiene a través de una sobreexpresión del gen y a través de un procesamiento modificado de la proteína. Unos niveles elevados de catepsina D y de otras proteasas, como por ejemplo colagenasa, fabricada en las inmediaciones de un tumor en crecimiento, podrían incluso degradar la matriz extracelular alrededor del tumor y por ello provocar el desprendimiento de células tumorales y la invasión de nuevos tejidos a través del sistema linfático y sanguíneo (Liotta L. A., Scientific American Feb:54, 1992; Liotta L. A. y Stetler-Stevenson W. G., Cancer Biol. 1:99, 1990; Liaudet E., Cell Growth Differ. 6:1045-1052, 1995; Ross J. S., Am. J. Clin. Pathol. 104:36-41, 1995; Dickinson A. J., J. Urol. 154:237-241, 1995).

Además, la catepsina D está relacionada con alteraciones degenerativas del cerebro, como por ejemplo la enfermedad de Alzheimer. Así, la catepsina D está asociada con la descomposición del precursor de la proteína p- amiloide o de un precursor mutante que aumenta la expresión de la proteína amiloide en las células transfectadas (Cataldo, A. M. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. 87:3861, 1990; Ladror, U. S. y col., J. Biol. Chem. 269:18422, 1994, Evin G., Biochemistry 34:14185-14192, 1995). La proteína p-amiloide, que resulta de la proteólisis del precursor de la proteína p-amiloide, provoca la formación de placas en el cerebro y parece ser la responsable del desarrollo de la enfermedad de Alzheimer. También se han encontrado niveles elevados de catepsina D en el líquido cefalorraquídeo de pacientes de alzhéimer y pudo demostrarse una elevada actividad proteolítica de la catepsina D frente al precursor mutante de la proteína p-amiloide (Schwager, A. L., y col. J. Neurochem. 64:443, 1995). Además, se mide un aumento significativo de la actividad de la catepsina D en biopsias de pacientes con la enfermedad de Huntington (Mantle D., J. Neurol. Sci. 131:65-70, 1995).

En la manifestación de una artrosis, la catepsina D probablemente desempeña un papel fundamental en varios niveles. Así, se miden niveles más elevados de ARNm de catepsina D en perros con artrosis espontánea en comparación con perros sanos en el cartílago articular del cóndilo de cadera (Clements D. N. y col., Arthritis Res. Ther. 2006; 8(6):R158; Ritchlin C. y col., Scand. J. Immunnol. 40:292-298, 1994). También Devauchelle V. y col. (Genes Immun. 2004, 5(8):597-608) muestran tasas de expresión diferentes de catepsina D en pacientes humanos en caso de artrosis en comparación con la artritis reumatoide (véase también Keyszer G. M., Arthritis Rheum. 38:976-984, 1995). La catepsina D también parece estar implicada en el caso de mucolipidosis (Kopitz J., Biochem. J. 295, 2:577-580, 1993).

La endopeptidasa lisosomal catepsina D es la proteinasa más extendida en los condrocitos (Ruiz-Romero C. y col., Proteomics. 2005, 5(12):3048-59). La actividad proteolítica de la catepsina D se ha demostrado además en líquidos sinoviales cultivados de pacientes con osteoartrosis (Bo G. P. y col., Clin. Rheumatol. 2009, 28(2):191 -9) y también en tejidos de sinovectomía de pacientes con artritis reumatoide se encuentra una elevada actividad proteolítica (Taubert H. y col., Autoimmunity. 2002, 35(3):221-4). Lorenz y col. (Proteomics. 2003, 3(6):991-1002) también escriben que no se ha estudiado con detalle ni la aspartil proteasa catepsina D lisosomal y secretada en contraste con las catepsinas B y L ni con respecto a la artritis y artrosis, sin embargo, Lorenz y col. han encontrado niveles proteicos más elevados de catepsina D en tejidos sinoviales de pacientes con artrosis en comparación con pacientes con artritis reumatoide.

Gedikoglu y col. (Ann. Rheum. Dis. 1986, 45(4):289-92) han podido demostrar igualmente una actividad proteolítica elevada de catepsina D en tejidos sinoviales y Byliss y Ali (Biochem. J. 1978, 171(1):149-54) en el cartílago de pacientes con artrosis.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

En la artrosis se produce una reducción del valor de pH local en las zonas del cartílago. Esta reducción del valor de pH tiene una importancia crucial para entender los procesos catabólicos del cartílago.

En la artrosis también se encuentra una correlación directa del valor de pH reducido en el tejido articular y la gravedad y la evolución de la enfermedad. A un valor de pH de 5,5 se produce una autodigestión del cartílago. Esto se puede inhibir casi completamente en cultivos de explantes (por ejemplo, de ratón, bóvido o humano) mediante pepstatina o ritonavir. Esto sugiere un papel fundamental, si no incluso un papel clave, de la catepsina D en la artrosis, ya que la pepstatina inhibe las aspartil proteasas con una excepción - BACE1 - y hasta ahora solo se han identificado estas dos aspartil proteasas en los tejidos condrales. Así, Bo G. P. y col. (Clin. Rheumatol. 2009, 28(2):191 -9) también describen el importante papel de la catepsina D en las alteraciones patológicas de las articulaciones.

El inhibidor de aspartil proteasas más conocido es la pepstatina, un péptido que se aisló originalmente de un cultivo de Streptomyces. La pepstatina es eficaz frente a pepsina, catepsina y renina. Por eso, muchos inhibidores de aspartil proteasas se han basado en el modelo de la estructura de la pepstatina (patente de EE. UU. núm. 4.746.648; Umezawa, H, y col., J Antibiot (Tokio) 23:259-62, 1970; Morishima, H., y col., J. Antibiot. (Tokio) 23:263- 5, 1970; Lin, Ty y Williams, H R., J. Biol. Chem. 254: 11875-83, 1979; Jupp, R A, y col., Biochem. J. 265:871-8, 1990; Agarwal, N S y Rich, D H, J. Med. Chem. 29:2519-24, 1986; Baldwin, E T, y col., Proc. Natl. Acad. Sci., EE. UU. 90: 6796-800, 1993; Francis, S E y col., EMBO J 13: 306-17, 1994).

Las aspartil proteasas o la catepsina D se describen con frecuencia como proteínas diana de principios activos para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, trastornos cognitivos, demencia, alzhéimer, cáncer, malaria, infección por VIH y enfermedades del sistema cardiocirculatorio y vascular y se revelan inhibidores de aspartil proteasas o catepsina D para el tratamiento de estas enfermedades, por ejemplo, en los documentos WO 2009013293, EP 1987834, EP 1872780, EP 1867329, EP 1745778, EP 1745777, EP 1745776, WO 1999002153, WO 1999055687, US 6150416, WO 2003106405, WO 2005087751, WO 2005087215, WO 2005016876, US 2006281729, WO 2008119772, WO 2006074950, WO 2007077004, WO 2005049585, US 6251928 y US 6150416.

Se conocen inhibidores peptídicos de aspartil proteasa, en particular inhibidores de renina o moduladores del sistema renina-angiotensina, por ejemplo, a partir de las patentes europeas EP 77028, EP 161588, EP 337334 y EP 198271.

Se conocen inhibidores peptídicos de catepsina D para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, artritis, en particular artritis reumatoide, a partir de la patente de EE. UU. 3971736. Se conocen inhibidores peptídicos de catepsina D y plasmepsina para el tratamiento de malaria y alzhéimer y para evitar la invasión y metastatización de células cancerosas a partir, por ejemplo, de la patente de EE. UU. 5849691.

Los inhibidores de catepsina D conocidos y los dos compuestos modelo pepstatina y ritonavir inhiben con eficacia la actividad de la catepsina D, sin embargo presentan una selectividad muy reducida frente a otras aspartil proteasas. El papel del sistema renina-angiotensina (RAS, por sus siglas en inglés) en la regulación de la tensión arterial y del contenido de líquido y electrolitos (Oparil, S. y col., N. Engl. J. Med. 1974; 291:381-401/446-57) y la eficacia de los inhibidores de renina y pepsina en enfermedades del sistema cardiocirculatorio y vascular es suficientemente conocido y, por tanto, en particular en la aplicación oral o sistémica de estos inhibidores poco selectivos de catepsina D se debe contar con numerosos efectos secundarios y también en la aplicación local se debe contar con complicaciones sistémicas debido a la difusión de los compuestos. Además, precisamente los compuestos peptídicos presentan una estabilidad baja y por eso no entran en consideración para una administración oral o sistémica.

La invención tenía como tarea encontrar nuevos compuestos con valiosas propiedades, especialmente aquellos que pudieran ser empleados para la fabricación de medicamentos.

La tarea de la presente invención era, en particular, encontrar nuevos principios activos y, de forma especialmente preferente, nuevos inhibidores de catepsina D que pudieran emplearse para la prevención y el tratamiento de la artrosis y, en particular, que presentaran una elevada selectividad frente a la catepsina D en comparación con la renina y la pepsina. Además, se debían descubrir nuevos inhibidores de catepsina D que al menos fueran suficientemente estables para su aplicación local o intraarticular.

Resumen de la invención

Sorprendentemente se ha descubierto que los derivados de hidroxiestatina según la invención inhiben la catepsina D con una elevada eficacia y, por lo tanto, presentan una elevada selectividad para la catepsina D en comparación con la renina y la pepsina y, con ello, se debe contar con unos efectos secundarios mínimos en su aplicación para el tratamiento de la artrosis. Además, los compuestos según la invención presentan una estabilidad suficientemente buena en el líquido sinovial, de modo que son adecuados para la aplicación intraarticular y, con ello, para el

5

10

15

20

25

30

tratamiento de la artrosis. De una forma igualmente sorprendente se ha demostrado que los derivados de hidroxiestatina según la invención pueden reducir, en función de la dosis, una hiperalgesia térmica debida a una inflamación.

La invención se refiere a derivados de la hidroxiestatina de la fórmula I

x+LíkA-N

R1

imagen1

O

imagen2

OH O

R2

imagen3

-A2+LÍY I

O

en la que

I1, I2, I3, I4, I5 son independientemente entre sí N o CR’,

T es un fenilo, bifenilo o naftilo no sustituido o sustituido una, dos, tres o cuatro veces con R, o un

heterociclo de uno o dos ciclos saturado, insaturado o aromático con 1 hasta 4 átomos de N, O y/o S que puede estar sustituido una, dos o tres veces con R, =S, =NR’ y/o =O,

R1 es iso-propilo, 2-butilo o iso-butilo,

R2 es n-propilo, iso-propilo, 2-butilo o iso-butilo,

Ai es leucina o un enlace sencillo,

A2 es valina,

n es 0,

Y es OH u O-bencilo,

m es 1,

Li es -(C=O)-,

X es un alquilo lineal o ramificado con 1-10 átomos de C no sustituido o sustituido una o dos veces con

T o alquilo cíclico con 3-10 átomos de C en el que uno, dos o tres grupos CH2, independientemente entre sí, pueden estar sustituidos por O,

L2 es un enlace sencillo,

R,R’ son independientemente entre sí H, un alquilo lineal o ramificado con 1-10 átomos de C no sustituido o

sustituido una, dos o tres veces con =S, =NR, =O, Hal, OH, NH2, SO2CH3, SO2NH2, CN, CONH2, NHCOCH3 y/o NHCONH2 en el que uno, dos o tres grupos CH2 independientemente entre sí pueden estar sustituidos por O, S, SO, SO2, NH, NCH3, grupos -OCO-, -NHCONH-, -NHCO-, - NRSO2A-, -COO-, -CONH-, -NCH3CO-, -CONCH3-, -CeC- y/o grupos -CH=CH y/o también de 1 a 20 átomos de H pueden estar sustituidos por F y/o Cl, o un alquilo cíclico con 3-7 átomos de C no sustituido o sustituido una, dos o tres veces con =S, =NR, =O, OH, NH2, SO2CH3, SO2NH2, CN, CONH2, NHCOCH3 y/o NHCONH2 en el que uno, dos o tres grupos CH2 independientemente entre sí pueden estar sustituidos por O, S, SO, SO2, NH, NCH3, -OCO-, -NHCONH-, -NHCO-, - NRSO2A-, -COO-, -CONH-, -NCH3CO-, -CONCH3- y/o por grupos -CH=CH y/o también de 1 a 11 átomos de H pueden estar sustituidos por F y/o Cl,

Hal es F, Cl, Br o I,

5

10

15

20

25

30

35

40

así como sus sales, derivados y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.

Compuestos contemplados en la reivindicación 1 en los que

R1 es iso-propilo con una configuración S del centro quiral al que está enlazado el grupo iso-propilo,

R2 es n-propilo, iso-propilo o 2-butilo con una configuración S del centro quiral al que está enlazado el grupo n- propilo, iso-propilo o 2-butilo

A1 es S-leucina o un enlace sencillo y

A2 es S-valina

así como sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.

Todos los significados preferidos, especialmente preferidos y totalmente preferidos mencionados de los susodichos restos de los compuestos de fórmula I se deben entender de modo que estos significados o formas de realización preferidos, especialmente preferidos y totalmente preferidos se pueden combinar unos con otros en cualquier combinación posible para los compuestos de fórmula I y, por ello, tales compuestos de fórmula I preferidos se revelan igualmente de forma explícita.

Se prefieren totalmente los siguientes compuestos de fórmula I:

a) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(3-fenil-propionilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

b) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(4-fenil-butirilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoilamino}-3- metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

c) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-iloxi)-propionilamino]-butirilamino}-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

d) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(3-fenil-propionilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

e) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(4-fenil-butirilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

f) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-iloxi)-propionilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

g) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(naftalen-2-iloxi)-acetilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

h) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]- butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

i) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(R)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]- butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

j) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

k) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(4-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

l) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil- amino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

5

10

15

20

25

30

35

40

m) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(3-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

n) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

o) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(4-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

p) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-2-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

q) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

r) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-5-trifluorometoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

s) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-acetilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

t) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(3-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

u) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-1-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

v) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

w) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[(bifenil-3-carbonil)-amino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil- amino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

x) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-5-trifluorometoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil- butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

y) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-2-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

z) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-4-[(S)-2-(3-terc-butoxi-benzoilamino)-3-metil-butirilamino]-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

aa) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-acetilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

bb) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

cc) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-dimetil-fenoxi)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

dd) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-1-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

ee) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[(bifenil-3-carbonil)-amino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil-

pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

ff) (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-difenilacetilamino-3-metil-butirilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3- metil-pentanoilamino}-3-metil-butirato de bencilo

gg) ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-difenilacetilamino-3-metil-butirilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil- amino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico

5

10

15

20

25

30

35

hh) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-1-(S)-oxo-pentilamino}-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

ii) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

jj) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-metil-1-(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-oxo-pentilamino}-

5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

kk) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

ll) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-4-[(S)-2-(2,2-dietil-butirilamino)-3-metil-butirilamino]-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil-

amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

mm) ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-terc-butoxicarbonilamino-etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-metil-1- (S)-oxo-pentilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico

nn) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(2S,3S)-3-metil-2-[2-(3-propoxi-fenil)-acetilamino]-pentanoilamino}- 5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

oo) ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-amino-etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-metil-1-(S)-oxo-pentilamino)- 3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico

pp) (2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de [(1 S,2S)-1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida

qq) (2S,5S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoilamino)-1-oxo-butilamino]-5-fenil- pentanoato de [(1 S,2S)-1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida

rr) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

ss) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

tt) (2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de ((1 S,2S)-1 -ciclopentilcarbamoil-2-metil-butil)-amida

uu) (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de [(S)-1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2-metil-propil]-amida

vv) (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de [(S)-1-(1-etil-propilcarbamoil)-butil]-amida

ww) (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de [(1 S,2S)-1 -(3-hidroxi-1,1-dimetil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida

así como sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las

proporciones.

Los restos de aminoácidos que se presentan anterior y posteriormente tiene la siguiente estructura básica común y

únicamente se diferencian en el resto R3.

R3

N

H

imagen4

O

En los restos de aminoácidos que se presentan anterior y posteriormente R3 representa los restos de los siguientes aminoácidos:

- Aminoácidos naturales: alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, glutamina, ácido glutámico, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, ornitina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptófano,

5 tirosina y valina

- Aminoácidos no naturales como, por ejemplo, ciclopropilglicina, ciclobutilglicina, ciclopentilglicina, ciclo- hexilglicina, 3-oxetanilglicina, 3-oxetanilglicina, tetrahidro-furan-3-ilglicina, tetrahidro-furan-2-ilglicina, etilsulfanilmetilglicina, 2-metilsulfaniletilglicina, 1-metilsulfaniletilglicina, norvalina, ácido aminobutírico, terc- leucina, norleucina, naftilalanina, O-metil-serina, O-etil-serina y similares

10 En la medida que los aminoácidos antes mencionados puedan aparecer en varias formas enantioméricas, anteriormente y a continuación se incluyen todas estas formas y también sus mezclas (por ejemplo, las formas DL).

Asimismo, las siguientes abreviaturas tienen el siguiente significado:

Boc

terc-butoxicarbonilo

CBZ

benciloxicarbonilo

15 DNP

2,4-dinitrofenilo

FMOC

9-fluorenilmetoxicarbonilo

imi-DNP

2,4-dinitrofenilo en la posición 1 del anillo de imidazol

OMe

éster metílico

POA

fenoxiacetilo

20 DCCI

diciclohexilcarbodiimida

HOBt

1 -hidroxibenzotriazol

Hal representa flúor, cloro, bromo o yodo, en particular flúor o cloro.

O

-(C=O)- significa oxígeno de carbonilo o representa

Alquilo o A es una cadena de hidrocarburo no ramificada (lineal) o ramificada y tiene 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 25 átomos de C-. A representa preferentemente metilo, además de etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo o terc-butilo, también pentilo, 1-, 2- o 3-metilbutilo, 1,1- , 1,2- o 2,2-dimetilpropilo, 1 -etilpropilo, hexilo, 1- , 2- , 3- o 4- metilpentilo, 1,1- , 1,2- , 1,3- , 2,2- , 2,3- o 3,3-dimetilbutilo, 1 - o 2-etilbutilo, 1 -etil-1 -metilpropilo, 1 -etil-2-metilpropilo, 1,1,2- o 1,2,2-trimetilpropilo, heptilo, octilo, nonilo o decilo lineales o ramificados, más preferentemente, por ejemplo, trifluorometilo

30 Alquilo cíclico o cicloalquilo es una cadena de hidrocarburo cíclica y tiene 3- 10, preferentemente 3-7, átomos de C- y significa preferentemente ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo.

Heterociclo de uno o dos anillos saturado, insaturado o aromático representa preferentemente 2- o 3-furilo, 2- o 3- tienilo, 1-, 2- o 3-pirrolilo, 1-, 2, 4- o 5-imidazolilo, 1-, 3-, 4- o 5-pirazolilo, 2-, 4- o 5-oxazolilo, 3-, 4- o 5-isoxazolilo, 2, 4- o 5-tiazolilo, 3-, 4- o 5-isotiazolilo, 2-, 3- o 4-piridilo, 2-, 4-, 5- o 6-pirimidinilo, más preferentemente 1,2,3-triazol- 35 1-, -4- o -5-ilo, 1,2,4-triazol-1-, -3- o 5-ilo, 1- o 5-tetrazolilo, 1,2,3-oxadiazol-4- o -5-ilo, 1,2,4-oxadiazol-3- o -5-ilo,

1,3,4-tiadiazol-2- o -5-ilo, 1,2,4-tiadiazol-3- o -5-ilo, 1,2,3-tiadiazol-4- o -5-ilo, 3- o 4-piridazinilo, pirazinilo, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-indolilo, 4- o 5-isoindolilo, 1-, 2-, 4- o 5-bencimidazolilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- o 7-benzopirazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzoxazolilo, 3-, 4-, 5-, 6- o 7- bencisoxazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-benzotiazolilo, 2-, 4-, 5-, 6- o 7-bencisotiazolilo, 4-, 5-, 6- o 7-benz-2,1,3-oxadiazolilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinolilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-isoquinolilo, 3-, 4-, 5-, 40 6-, 7- u 8-cinnolinilo, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- u 8-quinazolinilo, 5- o 6-quinoxalinilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8-2H-

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

benzo[1,4]oxazinilo, más preferentemente 1,3-benzodioxol-5-ilo, 1,4-benzodioxan-6-ilo, 2,1,3-benzotiadiazol-4- o -5- ilo o 2,1,3-benzoxadiazol-5-ilo no sustituidos o sustituidos una, dos o tres veces.

Los restos heterocíclicos también pueden estar parcial o totalmente hidrogenados y representan también 2,3- dihidro-2-, -3-, -4- o -5-furilo, 2,5-dihidro-2-, -3-, -4- o 5-furilo, tetrahidro-2- o -3-furilo, 1,3-dioxolan-4-ilo, tetrahidro-2- o -3-tienilo, 2,3-dihidro-1-, -2-, -3-, -4- o -5-pirrolilo, 2,5-dihidro-1-, -2-, -3-, -4- o -5-pirrolilo, 1-, 2- o 3-pirrolidinilo, tetrahidro-1-, -2- o -4-imidazolilo, 2,3-dihidro-1-, -2-, -3-, -4- o -5-pirazolilo, tetrahidro-1-, -3- o -4-pirazolilo, 1,4- dihidro-1-, -2-, -3- o -4-piridilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-, -2-, -3-, -4-, -5- o -6-piridilo, 1-, 2-, 3- o 4-piperidinilo, 2-, 3- o 4- morfolinilo, tetrahidro-2-, -3- o -4-piranilo, 1,4-dioxanilo, 1,3-dioxan-2-, -4- o -5-ilo, hexahidro-1-, -3- o -4-piridazinilo, hexahidro-1-, -2-, -4- o -5-pirimidinilo, 1-, 2- o 3-piperazinilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- u -8- quinolilo, 1,2,3,4-tetrahidro-1-,-2-,-3-, -4-, -5-, -6-, -7- u -8-isoquinolilo, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- u 8- 3,4-dihidro-2H-benzo[1,4]- oxazinilo, más preferentemente 2,3-metilendioxifenilo, 3,4-metilendioxifenilo, 2,3-etilendioxifenilo, 3,4-etilen- dioxifenilo, 3,4-(difluorometilendioxi)fenilo, 2,3-dihidrobenzofuran-5- o 6-ilo, 2,3-(2-oxo-metilendioxi)-fenilo o también 3,4-dihidro-2H-1,5-benzodioxepin-6- o -7-ilo, más preferentemente 2,3-dihidrobenzofuranilo o 2,3-dihidro-2-oxo- furanilo.

Heterociclo representa además, por ejemplo, 2-oxo-piperidin-1-ilo, 2-oxo-pirrolidin-1-ilo, 2-oxo-1H-piridin-1-ilo, 3- oxo-morfolin-4-ilo, 4-oxo-1 H-piridin-1-ilo, 2,6-dioxo-piperidin1-ilo, 2-oxo-piperazin-1-ilo, 2,6-dioxo-piperazin-1-ilo, 2,5- dioxo-pirrolidin-1-ilo, 2-oxo-1,3-oxazolidin-3-ilo, 3-oxo-2H-piridazin-2-ilo, 2-caprolactam-1-ilo (= 2-oxo-azepan-1-ilo), 2-hidroxi-6-oxo-piperazin-1 -ilo, 2-metoxi-6-oxo-piperazin-1 -ilo o 2-aza-biciclo[2.2.2]-octan-3-on-2-ilo.

De acuerdo con la invención son también todas las sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles de estos compuestos, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.

El objeto de la invención está constituido también por las formas ópticamente activas (estereoisómeros), por los enantiómeros, por los racematos, por los diastereómeros así como por los hidratos y por los solvatos de estos compuestos.

Los compuestos según la invención de fórmula I pueden ser quirales debido a su estructura molecular y, por consiguiente, pueden presentarse en distintas formas enantioméricas. Pueden, por lo tanto, presentarse en forma racémica o en una forma ópticamente activa. Puesto que la eficacia farmacéutica de los racematos o de los estereoisómeros de los compuestos según la invención puede ser distinta, puede ser conveniente utilizar los enantiómeros. En estos casos, el producto final o también ya los productos intermedios pueden separarse en compuestos enantioméricos, mediante los métodos químicos o físicos conocidos por el especialista, o utilizarse ya como tales en la síntesis.

Se entenderá por derivados farmacéutica o fisiológicamente compatibles, por ejemplo, las sales de los compuestos según la invención, así como los compuestos llamados profármacos. Se entenderá por compuestos profármacos compuestos de la fórmula I modificados, por ejemplo, con grupos alquilo o acilo (véanse también los grupos protectores de amino e hidroxi a continuación), azúcares u oligopéptidos, los cuales en el organismo se disocian o se liberan rápidamente para dar los compuestos eficaces según la invención. Entre estos se encuentran también los derivados poliméricos biodegradables de los compuestos según la invención, como se describe, por ejemplo, en Int. J. Pharm. 115 (1995), 61-67.

Como sales de adición de ácido entran en consideración las sales inorgánicas u orgánicas de todos los ácidos fisiológica y farmacológicamente compatibles, por ejemplo halogenuros, en particular hidrocloruro o hidrobromuro, lactatos, sulfatos, citratos, tartratos, maleatos, fumaratos, oxalatos, acetatos, fosfatos, metilsulfonatos o p- toluensulfonatos.

Se entenderá por solvatos de los compuestos de la fórmula I, los compuestos de adición de moléculas inertes de disolventes sobre los compuestos de fórmula I que se formen debido a su fuerza de atracción mutua. Los solvatos son, por ejemplo, hidratos, como monohidratos o dihidratos o alcoholatos, es decir, compuestos de adición con alcoholes como, por ejemplo, metanol o etanol.

También está previsto que un compuesto de fórmula I abarque formas marcadas isotópicamente del mismo. Una forma marcada isotópicamente de un compuesto de fórmula I es idéntica a este compuesto excepto en el hecho de que se han sustituido uno o varios átomos del compuesto por un átomo o átomos con una masa atómica o un número másico distinto a la masa atómica o al número másico del átomo que existe generalmente de forma natural. Entre los isótopos que se encuentran en el mercado fácilmente y que pueden incorporarse en un compuesto de fórmula I conforme a procedimientos bien conocidos se encuentran, por ejemplo, los isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, por ejemplo, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F o 36CI. Un compuesto de fórmula I, uno de sus profármacos o cada una de las sales farmacéuticamente aceptables del mismo que contiene uno o varios de los isótopos mencionados arriba y/u otros isótopos de otros átomos, se incluirá como elemento de la presente invención. Un compuesto de fórmula I marcado isotópicamente puede

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

utilizarse de diversas formas útiles. Por ejemplo, un compuesto de fórmula I marcado isotópicamente en el que, por ejemplo, se ha incorporado un radioisótopo como 3H o 14C es adecuado para ensayos de distribución del producto farmacéutico y/o del tejido sustrato. Estos radioisótopos, es decir, el tritio (3H) y el carbono-14 (14C), se prefieren en especial debido a su fácil elaboración y a que se pueden detectar de un modo excelente. La incorporación de isótopos pesados, por ejemplo deuterio (2H), en un compuesto de fórmula I presenta ventajas terapéuticas debido a la estabilidad más elevada de este compuesto marcado isotópicamente en el metabolismo. Estabilidad más elevada en el metabolismo significa directamente una semivida mayor in vivo o dosificaciones más bajas, lo cual, bajo la mayor parte de circunstancias, representaría una forma de realización preferida de la presente invención. Por lo general, un compuesto de fórmula I marcado isotópicamente puede prepararse mediante la realización de los procedimientos revelados en el esquema de síntesis y en la descripción relacionada con el mismo, en la parte de ejemplos y en la parte de preparación del presente texto sustituyendo un reactante no marcado isotópicamente por un reactante marcado isotópicamente fácilmente disponible.

Para la manipulación del metabolismo oxidativo del compuesto a través del efecto isotópico cinético primario también puede incorporarse deuterio (2H) a un compuesto de fórmula I. El efecto isotópico cinético primario se trata de una modificación de la velocidad de una reacción química debido al intercambio de núcleos isotópicos, lo cual, a su vez, se produce a través de la modificación de las energías del estado fundamental necesarias para la formación de enlaces covalentes en relación a este intercambio isotópico. Por lo general, el intercambio de un isótopo pesado provoca una reducción de la energía del estado fundamental para un enlace químico y produce así una disminución de la velocidad en el caso de una ruptura de enlace limitante de la velocidad. Si la ruptura de enlace se produce en o cerca de una región de punto de silla a lo largo de la coordenada de una reacción con varios productos, se pueden modificar considerablemente las proporciones de distribución de productos. A modo de explicación: si se enlaza deuterio a un átomo de carbono en una posición no intercambiable, las diferencias de velocidad de kM/kD = 2-7 son típicas. Si esta diferencia de velocidad se aplica con éxito a un compuesto de fórmula I sensible a la oxidación, con ello se puede modificar drásticamente el perfil de este compuesto in vivo y conseguir propiedades farmacocinéticas mejoradas.

En el descubrimiento y desarrollo de agentes terapéuticos, el especialista intenta optimizar los parámetros farmacocinéticos y, al mismo tiempo, conservar las propiedades in vitro deseables. Es razonable suponer que muchos compuestos con malos perfiles farmacocinéticos son sensibles frente al metabolismo oxidativo. A partir de ensayos in vitro con microsomas hepáticos disponibles actualmente se obtiene información valiosa sobre el desarrollo de este metabolismo oxidativo, a causa de lo cual, a su vez, pueden diseñarse de un modo racional compuestos de fórmula I deuterados con una estabilidad mejorada a través de la resistencia frente a un metabolismo oxidativo de este tipo. Así, se logran mejoras significativas de los perfiles farmacocinéticos de los compuestos de fórmula I que pueden expresarse cuantitativamente en forma de un aumento de la semivida in vivo (T/2), de la concentración a eficacia terapéutica máxima (Cmax), del área bajo la curva dosis-eficacia (AUC, por sus siglas en inglés) así como de la F y en forma de una disminución de la depuración, de la dosis y de los costes de material.

Lo siguiente sirve a modo de explicación de lo anterior: se prepara un compuesto de fórmula I con múltiples puntos de ataque potenciales para el metabolismo oxidativo, por ejemplo átomos de hidrógeno en un resto bencilo y átomos de hidrógeno enlazados a un átomo de nitrógeno, como serie de análogos en los que se sustituyen distintas combinaciones de átomos de hidrógeno por átomos de deuterio de modo que algunos, la mayoría o todos estos átomos de hidrógeno estén sustituidos por átomos de deuterio. Mediante la determinación de la semivida se logra una determinación conveniente y exacta de cómo ha mejorado la mejora de la resistencia frente a metabolismos oxidativos. De esta forma se determina que, a causa de este tipo de intercambio de hidrógeno por deuterio, la semivida del compuesto de partida puede prolongarse hasta un 100 %.

El intercambio de hidrógeno por deuterio en un compuesto de fórmula I también puede utilizarse para conseguir una modificación conveniente del espectro de productos metabólicos del compuesto de partida con el fin de reducir o excluir productos metabólicos tóxicos no deseados. Si, por ejemplo, se origina un producto metabólico tóxico a causa de la descomposición de un enlace carbono-hidrógeno (C-H) oxidativo, puede ser razonable suponer que el análogo deuterado reduzca considerablemente o excluya la producción del producto metabólico no deseado, incluso si la oxidación correspondiente no es un paso determinante de la velocidad. Se puede encontrar más información sobre el estado de la técnica en relación al intercambio de hidrógeno por deuterio en, por ejemplo, Hanzlik y col., J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990, Reider y col., J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987, Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985, Gillette y col., Biochemistry 33(10), 2927-2937, 1994, y Jarman y col., Carcinogenesis 16(4), 683-688, 1993.

También son objeto de la invención mezclas de los compuestos de fórmula I según la invención, por ejemplo mezclas de dos diastereómeros, por ejemplo en proporción 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 o 1:1000. De manera especialmente preferente se trata de mezclas de dos compuestos estereoisoméricos. Sin embargo, también se prefieren mezclas de dos o varios compuestos de fórmula I.

También es objeto de la invención un procedimiento para la elaboración de los compuestos de la fórmula I caracterizado por que

a) un compuesto de fórmula II, en el que I1, I2, I3, I4 e I5 tienen los significados indicados previamente y Q representa un grupo protector de amino, reacciona con un compuesto de fórmula III, en el que Y, L2, n, A2 y R2 5 tienen los significados indicados previamente, con la formación de un enlace peptídico entre el grupo carboxilo del compuesto de fórmula II y el grupo amino del compuesto de fórmula III para obtener un compuesto de fórmula IV y en un segundo paso el compuesto de fórmula IV se transforma en un compuesto de fórmula V mediante la disociación del grupo protector Q,

2^1

Q-N H

imagen5

OH O

-L

R2

K

OH + H2N'

_A2HrLríñY

2^l I r

^-'4 R2

5

imagen6

Q_H ^ ll-N 'Tr“A2+L¿“íñY

OH O O

imagen7

IV

U I

^•'4 R2

■c I

Q- N H

imagen8

|/'^I

‘i 3

A2+L24ñY

H2N

imagen9

A2+L24ñY

OH O

O

OH O

O

O

II

III

10 IV

V

b) y un compuesto de fórmula VI, en el que X, L1, m, A1 y R1 tienen los significados indicados previamente y el resto X está protegido, dado el caso, por un grupo protector, reacciona con un compuesto de fórmula V, en el que el resto Y está protegido, dado el caso, por un grupo protector, con la formación de un enlace peptídico entre el grupo carboxilo del compuesto de fórmula VI y el grupo amino del compuesto de fórmula V y mediante 15 disociación de los grupos protectores presentes, dado el caso, en los restos X e Y para obtener un compuesto de fórmula I, en el que I1, I2, I3, I4, I5, X, Y, L1, L2, R1, R2, A1, A2, m y n tienen los significados indicados previamente,

o

'i ^'3

1 |3

^'4 R2

H2N

imagen10

R1

A^Ld"ñY +

OH O

O

^Li4mArH YOH

O

imagen11

VI

'/K

^hLrímArN

imagen12

V

I

c) la base de un compuesto de fórmula I se convierte en una de sus sales mediante el tratamiento con un ácido, o 20 d) un ácido de un compuesto de fórmula I se convierte en una de sus sales mediante el tratamiento con una base.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

También es posible llevar a cabo las reacciones cada una paso a paso y modificar el orden de conexión de los componentes adaptando la idea de grupos protectores.

Por regla general, los productos de partida o los compuestos de partida son conocidos. Si son nuevos, se pueden elaborar según métodos ya conocidos.

Si así se desea, los productos de partida también pueden elaborarse in situ de forma que no sea necesario aislarlos de la mezcla de la reacción, sino que puedan transformarse inmediatamente para obtener los compuestos de la fórmula I.

Preferentemente los compuestos de fórmula I se obtienen liberándolos de sus derivados funcionales mediante solvólisis, en particular, mediante hidrólisis o mediante hidrogenólisis. Los productos de partida preferidos para la solvólisis o la hidrogenólisis son aquellos que, en lugar de uno o varios grupos libres amino, carboxilo y/o hidroxilo, contienen los correspondientes grupos protectores de amino, carboxilo y/o hidroxilo, preferentemente aquellos que en lugar de un átomo de H que está unido a un átomo de N llevan un grupo protector de amino. Además, se prefieren productos de partida que, en lugar del átomo de H de un grupo hidroxilo, llevan un grupo protector de hidroxilo. Además, se prefieren productos de partida que, en lugar de un grupo carboxilo libre, llevan un grupo protector de carboxilo. También pueden estar presentes en la molécula del producto de partida varios grupos protectores de amino, carboxilo y/o hidroxilo iguales o distintos. En caso de que los grupos protectores presentes sean distintos entre sí, en muchos casos se pueden disociar selectivamente.

El término «grupo protector de amino» es ampliamente conocido y se refiere a los grupos capaces de proteger (bloquear) un grupo amino frente a transformaciones químicas pero que pueden eliminarse fácilmente una vez realizada la reacción química deseada en otras partes de la molécula. Son grupos típicos, en particular, grupos acilo no sustituidos o sustituidos, además de grupos arilo sustituidos o no sustituidos (p. ej. 2,4-dinitofenilo) o grupos aralquilo (p. ej. bencilo, 4-nitrobencilo, trifenilmetilo). Puesto que los grupos protectores de amino se eliminan tras la reacción o serie de reacciones deseadas, por lo demás su tipo y tamaño no son críticos, si bien se prefieren aquellos con 1 a 20 átomos de C, en particular aquellos con 1 a 8 átomos de C. El término «grupo acilo» debe comprenderse en el sentido más amplio posible en relación con el presente procedimiento. Comprende grupos acilo derivados de ácidos carboxílicos o ácidos sulfónicos alifáticos, aralifáticos, aromáticos o heterocíclicos, así como en particular grupos alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo y, sobre todo, aralcoxicarbonilo. Son ejemplos de este tipo de grupos acilo el alcanoilo como acetilo, propionilo, buturilo, aralcanoilo como fenilacetilo, aroilo como benzoilo o toluilo, arioxialcanoilo como fenoxiacetilo, alquioxicarbonilo como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, 2,2,2- tricloroetoxicarbonilo, BOC, 2-yodoetoxicaronilo, aralquiloxicarbonilo como CBZ, 4-metoxibenciloxicarbonilo o FMOC. Son grupos acilo preferidos CBZ, FMOC, bencilo y acetilo.

El término «grupo protector de ácido» o «grupo protector de carboxilo» también es ampliamente conocido y se refiere a grupos capaces de proteger un grupo COOH frente a transformaciones químicas pero que pueden eliminarse fácilmente una vez realizada la reacción química deseada en otras partes de la molécula. Es típico el uso de ésteres en lugar de los ácidos libres, por ejemplo de ésteres de alquilo sustituidos y no sustituidos (como metilo, etilo, terc-butilo y sus derivados sustituidos), de ésteres de bencilo o ésteres de sililo sustituidos o no sustituidos. El tipo y tamaño de los grupos protectores de ácido no es crítico, si bien se prefieren aquellos con 1 a 20, en particular con 1 a 10 átomos de C.

El término «grupo protector de hidroxilo» también es ampliamente conocido y se refiere a grupos capaces de proteger un grupo hidroxilo frente a transformaciones químicas pero que pueden eliminarse fácilmente una vez realizada la reacción química deseada en otras partes de la molécula. Son grupos típicos los grupos arilo, aralquilo o acilo, además de grupos alquilo, no sustituidos o sustituidos mencionados previamente. El tipo y tamaño de los grupos protectores de hidroxilo no es crítico, si bien se prefieren aquellos con 1 a 20, en particular con 1 a 10 átomos de C. Son ejemplos de grupos protectores de hirdoxilo, entre otros, bencilo, p-nitrobenzoilo, p- toluensulfonilo y acetilo, prefiriéndose bencilo y acetilo.

Otros ejemplos típicos de grupos protectores de amino, de ácido y de hidroxilo se encuentran, por ejemplo, en «Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis», cuarta edición, Wiley-Interscience, 2007

Los derivados funcionales de los compuestos de fórmula I que se utilizan como productos de partida pueden prepararse según métodos conocidos de la síntesis de aminoácidos y péptidos como se describen, por ejemplo, en las obras de referencia y las solicitudes de patente mencionadas.

La liberación de los compuestos de fórmula I a partir de sus derivados funcionales se consigue, según el grupo protector utilizado, por ejemplo con ayuda de ácidos fuertes, convenientemente con ácido trifluoroacético o ácido perclórico, pero también con otros ácidos inorgánicos fuertes como ácido clorhídrico o ácido sulfúrico, ácidos orgánicos fuertes como ácido tricloroacético o ácidos sulfónicos como ácido benzoilsulfónico o ácido p-

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

toluensulfónico. La presencia de un disolvente inerte adicional y/o de un catalizador es posible, pero no siempre resulta necesaria.

Dependiendo de la ruta sintética correspondiente, en caso necesario los productos de partida pueden hacerse reaccionar en presencia de un disolvente inerte.

Como disolventes inertes son adecuados, por ejemplo, heptano, hexano, éter de petróleo, DMSO, benceno, tolueno, xileno, tricloroetilen-, 1,2-dicloroetanotetra-cloruro de carbono, cloroformo o diclorometano; alcoholes como metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, n-butanol o terc-butanol; éteres como dietiléter, diisopropiléter (preferido para la sustitución en el nitrógeno del indol), tetrahidrofurano (THF) o dioxano; glicoléteres como etilenglicolmonometil- o monoetiléter (metilglicol o etilglicol), etilenglicoldimetiléter (diglima); cetonas como acetona o butanona; amidas como acetamida, dimetilacetamida, N-metilpirrolidona (NMP) o dimetilformamida (DMF); nitrilos como acetonitrilo; ésteres como acetato de etilo, ácidos carboxílicos o anhídridos de ácido como, por ejemplo, ácido fórmico o anhídrido acético, compuestos nitrogenados como nitrometano o nitrobenceno, dado el caso también mezclas de los disolventes citados entre sí o mezclas con agua.

La cantidad de disolvente no es crítica, preferentemente se pueden añadir de 10 g a 500 g de disolvente por gramo de compuesto de fórmula I que se debe transformar.

Puede ser ventajoso añadir un agente neutralizante de ácido, por ejemplo un hidróxido, carbonato o bicarbonato de metal alcalino o de metal alcalinotérreo u otras sales de metal alcalino o alcalinotérreo de ácidos débiles, preferentemente una sal de potasio, sodio o calcio, o añadir una base orgánica como, por ejemplo, trietilamina, dimetilamina, piridina o quinolina, o un exceso del componente amino.

Los compuestos según la invención obtenidos pueden separarse (p. ej. mediante centrifugación y lavados) de la solución correspondiente en la que se preparan y tras la separación pueden conservarse en otra composición, o pueden permanecer directamente en la solución de preparación. Los compuestos según la invención obtenidos también pueden recogerse en el disolvente deseado para la aplicación correspondiente.

Las temperaturas de reacción adecuadas son temperaturas desde 0 hasta 40 °C, preferentemente desde 5 hasta 25 °C.

La duración de la transformación depende de las condiciones de reacción escogidas. Normalmente la duración de la reacción es desde 0,5 horas hasta 10 días, preferentemente desde 1 hasta 24 horas. Cuando se utilizan microondas el tiempo de reacción puede reducirse a valores de 1 hasta 60 minutos.

Los compuestos de fórmula I y también los productos de partida para su obtención se preparan según métodos conocidos, como los que han sido descritos en la literatura (por ejemplo en manuales tales como Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart), y, concretamente, bajo aquellas condiciones de reacción que sean conocidas y adecuadas para las transformaciones citadas. En este caso pueden emplearse también variantes en sí conocidas, que no han sido descritas con mayor detalle aquí.

Mediante etapas de tratamiento tradicionales, como por ejemplo adición de agua a la mezcla de reacción y extracción, se pueden obtener los compuestos después de la eliminación del disolvente. Puede ser ventajoso añadir una destilación o cristalización o realizar una purificación cromatográfica para una mejor purificación del producto.

Un ácido de fórmula I con una base puede convertirse en la sal de adición correspondiente, por ejemplo, transformando cantidades equivalentes del ácido y de la base en un disolvente inerte, como etanol, y mediante la posterior evaporación. Para esta transformación se utilizan en particular bases que proporcionan sales fisiológicamente compatibles. Así, el ácido de fórmula I puede transformarse utilizando una base (por ejemplo, hidróxido o carbonato de sodio o potasio) en la correspondiente sal metálica, en particular sal de metal alcalino o alcalinotérreo o bien en la correspondiente sal de amonio. Para esta transformación se utilizan también bases orgánicas que proporcionan sales fisiológicamente compatibles, como por ejemplo etanolamina.

Por otro lado, una base de la fórmula I con un ácido puede convertirse en la sal de adición ácida correspondiente, por ejemplo, transformando cantidades equivalentes de la base y del ácido en un disolvente inerte, como etanol, y mediante la posterior evaporación. Para esta transformación se utilizan sobre todo ácidos que proporcionan sales fisiológicamente compatibles. Así, pueden utilizarse ácidos inorgánicos como, por ejemplo, ácido sulfúrico, ácido nítrico, hidrácidos halogenados como ácido clorhídrico o ácido bromhídrico, ácidos fosfóricos como ácido ortofosfórico, ácido sulfámico, así como ácidos orgánicos, en particular ácidos carboxílicos, sulfónicos o sulfúricos alifáticos, alicíclicos, aralifáticos, aromáticos o heterocíclicos mono o polibásicos como, por ejemplo, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido piválico, ácido dietilacético, ácido malónico, ácido succínico, ácido pimélico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido málico, ácido cítrico, ácido glucónico, ácido ascórbico, ácido nicotínico, ácido isonicotínico, ácido metanosulfónico o ácido etanosulfónico, ácido

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

etanodisulfónico, ácido 2-hidroxisulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácidos naftalenmonosulfónicos y naftalendisulfónicos o ácido laurilsulfúrico. Las sales de ácidos fisiológicamente no compatibles, como por ejemplo los picratos, pueden utilizarse para aislar y/o purificar los compuestos de fórmula I.

Se ha descubierto que los compuestos de fórmula I se toleran bien y poseen propiedades farmacológicas valiosas ya que inhiben selectivamente las aspartil proteasas y, en particular, la catepsina D.

Por lo tanto, los compuestos de la invención pueden utilizarse para la elaboración de un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades que se originan, en las que participa y/o que se propagan mediante catepsina D y/o mediante transducción de señal mediada por catepsina D.

Por consiguiente, también es objeto de la invención, en particular, un medicamento que contiene al menos un compuesto según la invención y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos.

Especialmente se prefieren, en particular, estados fisiológicos y/o patofisiológicos que están relacionados con la catepsina D.

Como estados fisiológicos y/o patofisiológicos se entienden estados fisiológicos y/o patofisiológicos que son médicamente relevantes como, por ejemplo, enfermedades o afecciones, disfunciones, dolencias, síntomas o complicaciones médicos y similares, en particular enfermedades.

Es otro objeto de la invención un medicamento que contiene al menos un compuesto según la invención y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las

proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por artrosis, lesiones condrales traumáticas y artritis, en particular, artritis reumatoide.

Otro objeto de la invención es un medicamento que contiene al menos un compuesto según la invención y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las

proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, mucolipidosis, cáncer, en particular cáncer de mama, dermatitis de contacto, reacción de hipersensibilidad retardada,

inflamaciones, endometriosis, cicatrización, hiperplasia benigna de próstata, osteosarcoma, raquitismo,

enfermedades cutáneas como, por ejemplo, psoriasis, enfermedades inmunológicas, enfermedades autoinmunitarias e inmunodeficiencias.

En este contexto deben considerarse como enfermedades de tipo canceroso el cáncer de cerebro, el cáncer de pulmón, el cáncer del epitelio plano, el cáncer de vejiga, el cáncer de estómago, el cáncer de páncreas, el cáncer hepático, el cáncer renal, el cáncer colorrectal, el cáncer de mama, el cáncer de cabeza, el cáncer de cuello, el cáncer de esófago, el cáncer ginecológico, el cáncer de la glándula tiroides, los linfomas, la leucemia crónica y la leucemia aguda, las cuales son consideradas usualmente en conjunto como enfermedades hiperproliferativas.

El dolor es una percepción sensorial compleja que como fenómeno agudo muestra el carácter de una señal de alarma y orientación, pero como dolor crónico ha perdido este carácter y en este caso (como síndrome del dolor crónico) hoy en día debe considerarse y debe tratarse como un cuadro clínico independiente. En medicina, se denomina hiperalgesia a una sensibilidad y reacción excesivas al dolor en relación a un estímulo generalmente doloroso. Los estímulos que pueden provocar los dolores son, por ejemplo, la presión, el calor, el frío o las inflamaciones. La hiperalgesia es una forma de hiperestesia, término genérico para una sensibilidad excesiva en relación a un estímulo. En medicina, se denomina alodinia a una sensación de dolor producida por un estímulo que generalmente no provoca dolor.

Es otro objeto de la invención, por lo tanto, un medicamento que contiene al menos un compuesto según la invención y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por dolor, alodinia e hiperalgesia.

Por consiguiente, es un objeto de la invención especialmente preferido un medicamento que contiene al menos un compuesto según la invención y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por artrosis, lesiones condrales traumáticas, artritis, dolor, alodinia e hiperalgesia.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Se tiene la intención de que con los medicamentos revelados anteriormente se incluya un uso correspondiente de los compuestos según la invención para la elaboración de un medicamento para el tratamiento y/o la profilaxis de los estados fisiológicos y/o patofisiológicos citados anteriormente.

Además, se tiene la intención de que con los medicamentos revelados anteriormente se incluya un procedimiento correspondiente para el tratamiento y/o la profilaxis de los estados fisiológicos y/o patofisiológicos citados anteriormente en el que se administre al menos un compuesto según la invención a un paciente que necesite un tratamiento de este tipo.

Los compuestos según la invención presentan preferentemente una actividad biológica ventajosa que puede demostrarse fácilmente en ensayos enzimáticos y experimentos con animales, como se describe en los ejemplos. En este tipo de ensayos basados en enzimas, los anticuerpos según la invención muestran y provocan preferentemente un efecto inhibidor que se documenta usualmente por medio de los valores CI50- en un intervalo adecuado, preferentemente en el intervalo micromolar y más preferentemente en el intervalo nanomolar.

Los compuestos según la invención pueden administrarse a humanos o animales, en particular mamíferos tales como monos, perros, gatos, ratas o ratones, y se pueden utilizar en el tratamiento terapéutico del cuerpo humano o del cuerpo animal, así como en la lucha contra las enfermedades citadas anteriormente. También pueden utilizarse como agentes de diagnóstico o como reactivos.

Además, los compuestos según la invención pueden emplearse para el aislamiento y para el estudio de la actividad o de la expresión de la catepsina D. Asimismo, son adecuados en particular para el empleo en procedimientos de diagnóstico dirigidos a enfermedades que están relacionadas con una actividad alterada de la catepsina D. Por lo tanto, otro objeto de la invención es el uso de los compuestos según la invención para el aislamiento y para el estudio de la actividad o de la expresión de la catepsina D o como ligantes e inhibidores de la catepsina D.

Para fines diagnósticos, los compuestos según la invención pueden marcarse radiactivamente. Son ejemplos de marcados radiactivos 3H, 14C, 231I y 125I. Un método de marcación preferido es el método del iodogén (Fraker y col., 1978). Además, los compuestos según la invención pueden marcarse mediante enzimas, fluorocromos y agentes quimioluminiscentes. Son ejemplos de enzimas la fosfatasa alcalina, la p-galactosidasa y la glucosaoxidasa, es un ejemplo de fluoróforo la fluoresceína, es un ejemplo de agente quimioluminiscente el luminol y se describen sistemas de detección automatizados, por ejemplo, para las coloraciones fluorescentes, por ejemplo, en las patentes de EE. UU. 4.125.828 y 4.207.554.

Los compuestos de fórmula I pueden utilizarse para la elaboración de preparaciones farmacéuticas, en particular de un modo no químico. Para ello, se mezclan con al menos un vehículo o excipiente sólido, líquido y/o semilíquido y, dado el caso, se combinan con uno o varios principio(s) activo(s) adicional(es) en una forma de dosificación adecuada.

Por lo tanto, son otro objeto de la invención las preparaciones farmacéuticas que contienen al menos un compuesto según la invención de fórmula I y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones. También son objeto de la invención, en particular, aquellas preparaciones farmacéuticas que contienen otros vehículos y/o excipientes, así como aquellas preparaciones farmacéuticas que contienen al menos un principio activo farmacéutico adicional.

También es objeto de la invención, en particular, un procedimiento para la elaboración de una preparación farmacéutica caracterizado por que un compuesto de fórmula I y/o una de sus sales, derivados, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, se mezcla con un vehículo y/o excipiente sólido, líquido o semilíquido y, dado el caso, con un principio activo farmacéutico adicional en una forma de dosificación adecuada.

Las preparaciones farmacéuticas según la invención pueden utilizarse en forma de medicamentos en medicina humana o veterinaria. El paciente o receptor puede pertenecer a cualquier especie de mamífero, por ejemplo, una especie de primate, en especial humanos; roedores, incluidos ratones, ratas y hámsteres; conejos; caballos, bóvidos, perros, gatos, etc. Los modelos animales son de interés para estudios experimentales al ofrecer un modelo para el tratamiento de una enfermedad humana.

Como vehículos pueden utilizarse sustancias orgánicas o inorgánicas adecuadas para la administración enteral (por ejemplo, oral), parenteral o tópica y que no reaccionen con los nuevos compuestos, como por ejemplo, agua, aceites vegetales (como aceite de girasol o aceite de hígado de bacalao), alcoholes bencílicos, polietilenglicoles, gelatina, hidratos de carbono como la lactosa o el almidón, estearato de magnesio, talco, lanolina o vaselina. Los excipientes adecuados para la formulación farmacéutica deseada son conocidos por el especialista gracias a sus conocimientos especializados. Además de disolventes como agua, solución salina fisiológica o alcoholes como, por ejemplo, etanol, propanol o glicerina, soluciones de azúcares como glucosa o soluciones de manitol o una mezcla

de los disolventes mencionados, formadores de gel, excipientes para comprimidos y otros vehículos para el principio activo, pueden utilizarse, por ejemplo, lubricantes, estabilizadores y/o agentes reticulantes, emulsionantes, sales para modificar la presión osmótica, antioxidantes, dispersantes, antiespumantes, tampones, saborizantes y/o aromatizantes o correctores de sabor, conservantes, solubilizantes o colorantes. Si se desea, las preparaciones o 5 medicamentos según la invención pueden contener uno o varios principios activos adicionales, por ejemplo, una o varias vitaminas.

Si se desea, las preparaciones o medicamentos según la invención pueden contener uno o varios principios activos adicionales y/o uno o varios adyuvantes.

Los términos «formulación farmacéutica» y «preparación farmacéutica» se utilizan como sinónimos en el marco de 10 la presente invención.

En el presente documento «farmacéuticamente compatible» se refiere a medicamentos, reactivos de precipitación, vehículos, excipientes, estabilizantes, disolventes y otros agentes que permiten la administración de las preparaciones farmacéuticas que los contienen sin efectos secundarios fisiológicos no deseados como, por ejemplo, náuseas, vértigo, problemas digestivos u otros en mamíferos.

15 En el caso de preparaciones farmacéuticas para la administración parenteral se exige que sean isotónicas y euhídricas, así como que la formulación, los excipientes utilizados y el material de envasado primario sean tolerables y seguros (baja toxicidad). Sorprendentemente, los compuestos según la invención tienen preferentemente la ventaja de que es posible un uso directo y de que antes del uso de los compuestos según la invención en formulaciones farmacéuticas no es necesaria ninguna otra etapa de purificación para eliminar agentes 20 peligrosos desde un punto de vista toxicológico como, por ejemplo, elevadas concentraciones de disolvente orgánico u otros excipientes peligrosos desde un punto de vista toxicológico.

Un objeto especialmente preferido de la invención son también preparaciones farmacéuticas que contienen al menos un compuesto según la invención en forma precipitada no cristalina, precipitada cristalina o en disolución o en suspensión, así como, dado el caso, vehículos y/o excipientes y/o principios activos farmacéuticos adicionales.

25 Preferentemente, los compuestos según la invención permiten elaborar formulaciones con concentraciones elevadas sin que se produzcan agregaciones desfavorables no deseadas de los compuestos según la invención. Así, se pueden elaborar soluciones listas para su aplicación con una elevada proporción de principio activo con ayuda de compuestos según la invención con disolventes acuosos o en medios acuosos.

Los compuestos y/o sus sales y solvatos fisiológicamente compatibles también pueden liofilizarse y los liofilizados 30 obtenidos pueden utilizarse, por ejemplo, para la elaboración de preparados para inyección.

Se pueden elaborar preparaciones acuosas disolviendo o suspendiendo los compuestos según la invención en una solución acuosa y, dado el caso, añadiendo excipientes. Para ello, resulta apropiado añadir a una solución o suspensión con una concentración definida de compuestos según la invención volúmenes definidos de solución madre que contiene los excipientes adicionales mencionados en una concentración definida y, dado el caso, diluirla 35 con agua hasta la concentración previamente calculada. Como alternativa, se pueden añadir los excipientes en forma sólida. A continuación, a la solución o suspensión acuosa obtenida se pueden añadir las cantidades necesarias correspondientes de solución madre y/o agua. También resulta apropiado poder disolver o suspender los compuestos según la invención directamente en una solución que contiene todos los demás excipientes.

De un modo ventajoso, las soluciones o suspensiones que contienen los compuestos según la invención se 40 elaboran con un valor de pH de 4 a 10, preferentemente con un valor de pH de 5 a 9, y una osmolalidad de 250 a 350 mOsmol/kg. Por consiguiente, la preparación farmacéutica puede administrarse mayoritariamente sin dolor directamente por vía intravenosa, intraarterial, intraarticular, subcutánea o percutánea. Además, la preparación también puede añadirse a soluciones de infusión como, por ejemplo, solución de glucosa, solución salina isotónica o solución de Ringer que pueden contener principios activos adicionales de modo que se pueden aplicar mayores 45 cantidades de principio activo.

De acuerdo con la invención, las preparaciones farmacéuticas también pueden contener mezclas de varios compuestos según la invención.

Las preparaciones según la invención se toleran bien fisiológicamente, son fáciles de elaborar, se pueden dosificar con exactitud y, preferentemente, son estables en cuanto al contenido, los productos de descomposición y los 50 agregados a lo largo del almacenamiento y del transporte y en caso de múltiples procesos de congelación y descongelación. Se pueden conservar de forma estable preferentemente a lo largo de un periodo de al menos tres meses hasta dos años a temperatura de frigorífico (2-8 °C) y a temperatura ambiente (23-27 °C) y con una humedad relativa (HR) del 60 %.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

A modo de ejemplo, los compuestos según la invención pueden conservarse de forma estable mediante secado y cuando se necesitan, transferirse a una preparación farmacéutica lista para usar mediante disolución o suspensión. Son métodos posibles para el secado, por ejemplo, sin quedar limitados a estos ejemplos, el secado con nitrógeno gas, el secado en un horno de vacío, la liofilización, el lavado con disolvente orgánico y el posterior secado al aire, el secado en lecho fluido, el secado en lecho fluidizado, el secado por atomización, el secado en tambor, el secado a capas; El secado al aire a temperatura ambiente y otros métodos.

El concepto «cantidad activa» significa la cantidad de un medicamento o de un principio activo farmacéutico que provoca una respuesta biológica o medicinal en un tejido, en un sistema, en un animal o en un ser humano, que sea buscada o pretendida, por ejemplo, por el investigador o por el médico.

Por otra parte, el concepto de «cantidad terapéuticamente activa» significa una cantidad que, en comparación con la de un sujeto correspondiente que no haya recibido esta cantidad, tenga como consecuencia lo siguiente: un tratamiento curativo mejorado, la curación, la prevención o la eliminación de una enfermedad, de un cuadro patológico, de un estado patológico, de una dolencia, de un trastorno o el impedimento de efectos secundarios o incluso la disminución del avance de una enfermedad, de una dolencia o de un trastorno. El concepto de «cantidad terapéuticamente activa» abarca también aquellas cantidades que son eficaces para aumentar la función fisiológica normal.

En el uso de preparaciones o medicamentos según la invención, los compuestos según la invención y/o sus sales y solvatos fisiológicamente compatibles se utilizan generalmente de forma análoga a preparaciones o preparados conocidos y comerciales, preferentemente a una dosificación de entre 0,1 y 500 mg, en particular entre 5 y 300 mg por unidad de aplicación. La dosificación diaria se encuentra preferentemente entre 0,001 y 250 mg/kg, en particular entre 0,01 y 100 mg/kg de peso corporal. La preparación puede administrarse una o varias veces al día, por ejemplo, dos, tres o cuatro veces al día. Sin embargo, la dosificación individual para un paciente depende de un gran número de factores individuales como, por ejemplo, la eficacia del correspondiente compuesto utilizado, la edad, el peso corporal, el estado de salud general, el sexo, la alimentación, el momento y vía de administración, de la velocidad de excreción, de la combinación con otros medicamentos y de la gravedad y duración de la correspondiente enfermedad.

Una medida de la absorción de un principio activo farmacéutico en un organismo es su biodisponibilidad. Si el principio activo farmacéutico se suministra por vía intravenosa al organismo en forma de una solución para inyección, su biodisponibilidad absoluta, es decir, la proporción del fármaco que llega inalterado a la sangre sistémica, es decir, al sistema circulatorio, es del 100 %.

En la administración oral de un principio activo terapéutico, generalmente el principio activo se encuentra en la formulación en forma de sólido y, por lo tanto, primero debe disolverse para poder superar las barreras de entrada, por ejemplo en el tracto gastrointestinal, la mucosa bucal, las membranas nasales o la piel, en particular el estrato córneo, o poder ser reabsorbido por el cuerpo. Se pueden obtener datos respecto a la farmacocinética, es decir respecto a la biodisponibilidad, de forma análoga al método de J. Shaffer y col., J. Pharm. Sciences, 88 (1999), 313318.

De igual modo, pueden prepararse tales medicamentos con un procedimiento conocido en general en el sector farmacéutico.

Los medicamentos pueden adaptarse para la administración a través de cualquier vía adecuada, por ejemplo por vía oral (incluida la vía bucal o bien la vía sublingual), la vía rectal, la vía pumonal, la vía nasal, la vía tópica (incluida la vía bucal, la vía sublingual o la vía transdérmica), la vía vaginal o la vía parenteral (incluida la vía subcutánea, la vía intramuscular, la vía intravenosa, la vía intradérmica y, en particular, la vía intraarticular). Tales medicamentos pueden prepararse según todos los procedimientos conocidos en el sector farmacéutico, combinándose, por ejemplo, el principio activo con el o con los vehículos o con el o con los excipientes.

Para la administración del medicamento según la invención es adecuada preferentemente la aplicación parenteral. En el caso de la aplicación parenteral, se prefiere en especial la aplicación intraarticular.

Así, también es un objeto preferido de la invención el uso de una preparación farmacéutica según la invención para la aplicación intraarticular en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por artrosis, lesiones condrales traumáticas, artritis, dolor, alodinia o hiperalgesia.

La aplicación intraarticular tiene la ventaja de que el compuesto según la invención se aplica directamente cerca del cartílago articular en el líquido sinovial y desde ahí también puede difundirse hacia el tejido condral. Por lo tanto, las preparaciones farmacéuticas según la invención también pueden inyectarse directamente en la cavidad articular y así desarrollan su efecto directamente en el sitio objetivo previsto. Los compuestos según la invención también son

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

adecuados para la elaboración de medicamentos para la aplicación parenteral con liberación del principio activo controlada, sostenida y/o retardada (slow-release, sustained-release, controlled release). Por lo tanto, son también adecuados para la elaboración de formulaciones depot, que son ventajosas para los pacientes, ya que es necesaria una aplicación solo con grandes intervalos de tiempo.

A los medicamentos adaptados para la administración parenteral pertenecen las soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que contengan antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos mediante los cuales la formulación se vuelve isotónica con la sangre o el líquido sinovial del receptor que debe ser tratado; así como las suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden contener agentes de suspensión y espesantes. Las formulaciones pueden suministrarse en recipientes que contengan una dosis individual o que contengan dosis múltiples, por ejemplo, ampollas y viales sellados, y pueden conservarse en estado secado por congelación (liofilizado) de tal manera que únicamente se requiera la adición de líquidos vehículos estériles, por ejemplo agua para inyectables, justo antes de su utilización. Pueden prepararse las soluciones para inyección y las suspensiones, preparadas de acuerdo con una receta, a partir de polvos estériles, de granulados y de comprimidos.

Los compuestos según la invención pueden administrarse también en forma de sistemas de aporte en liposomas tales como, por ejemplo, vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Los liposomas pueden formarse a partir de diversos fosfolípidos tales como, por ejemplo, la colesterina, la estearilamina o las fosfatidilcolinas.

Los compuestos según la invención pueden acoplarse también con polímeros solubles a título de vehículos medicinales orientados a su objetivo. Tales polímeros pueden comprender la polivinilpirrolidona, los copolímeros de pirano, el polihidroxipropilmetacrilamidofenol, el polihidroxietilaspartoamidofenol o el óxido de polietileno-polilisina substituido con restos de palmitoilo. Además, los compuestos según la invención pueden estar acoplados a una clase de polímeros biodegradables que sean adecuados para conseguir una liberación controlada de un medicamento, por ejemplo, ácido poliláctico, poliepsilon-caprolactona, ácido polihidroxibutírico, poliortoéster, poliacetales, polidihidroxipiranos, policianoacrilatos, ácido polilacticocoglicólico, polímeros como conjugados entre dextrano y metacrilato, polifosfoéster, distintos polisacáridos y poliaminas tales como poli-e-caprolactona, albúmina, quitosano, colágeno o gelatina modificada y copolímeros de bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles.

Para la aplicación enteral (oral o rectal) sirven, en particular, comprimidos, grageas, cápsulas, jarabes, zumos, gotas o supositorios, para el uso tópico ungüentos, cremas, pastas, lociones, geles, esprays, espumas, aerosoles, soluciones (p. ej. soluciones en alcoholes como etanol o isopropanol, acetonitrilo, DMF, dimetilacetamida, 1,2- propanodiol o sus mezclas entre sí y/o con agua) o polvos. En particular para el uso tópico, entran en consideración también las preparaciones liposomales.

Cuando se realiza la formulación para formar un ungüento, el principio activo puede emplearse con una base para cremas parafínica o con una base para cremas miscible con el agua. De manera alternativa, el principio activo puede formularse para dar una crema con una base para cremas de aceite-en-agua o con una base de agua-enaceite.

Los medicamentos adaptados para la administración transdérmica pueden suministrarse en forma de emplasto independiente para un contacto íntimo y prolongado con la epidermis del receptor. De este modo, el principio activo puede aportarse desde el emplaste, por ejemplo, por medio de iontoforesis, como se ha descrito en general en la publicación Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

Se entiende que el medicamento según la invención puede contener, además de los componentes mencionados en especial anteriormente, otros agentes habituales en el campo en relación al correspondiente tipo de la formulación farmacéutica.

El objeto de la invención está constituido también por un estuche (Kit) compuesto por envases independientes de

a) una cantidad activa de un compuesto de fórmula I y/o de sus sales, sus derivados, sus solvatos, sus profármacos y sus estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones y

b) una cantidad activa de otro principio activo farmacéutico.

El estuche contiene recipientes adecuados tales como cajitas o envases de cartón, viales individuales, bolsas o ampollas. El estuche puede contener, por ejemplo, ampollas independientes en las cuales estén presentes respectivamente una cantidad activa de un compuesto de fórmula I y/o de sus sales, derivados, solvatos, profármacos y estereoisómeros farmacéuticamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, y una cantidad activa de otro principio activo farmacéutico presente en forma disuelta o liofilizada.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Asimismo, los medicamentos según la invención pueden emplearse para preparar efectos aditivos o sinérgicos en el caso de ciertas terapias conocidas, y/o además podrían emplearse para restablecer la eficacia de ciertas terapias existentes.

Las preparaciones farmacéuticas según la invención pueden contener, además de los compuestos según la invención, otros principios activos farmacéuticos adicionales, por ejemplo para el uso en el tratamiento de artrosis, otros inhibidores de catepsina D, AINE, inhibidores de Cox-2, glucocorticoides, ácido hialurónico, azatioprina, metotrexato, anticuerpos anti-CAM, como por ejemplo anticuerpos anti-ICAM-1, FGF-18. Para el tratamiento de las otras enfermedades mencionadas, las preparaciones farmacéuticas según la invención pueden contener, además de los compuestos según la invención, otros principios activos farmacéuticos conocidos por el especialista para su tratamiento.

El tratamiento del cáncer revelado en el presente documento puede efectuarse como terapia con un compuesto de la presente invención o en combinación con una intervención quirúrgica, radiación o quimioterapia. Una quimioterapia de este tipo puede incluir el uso de uno o varios principios activos de las siguientes categorías de principios activos antitumorales:

(i) principios activos antiproliferativos/antineoplásicos/que dañan el ADN y combinaciones de los mismos como se utilizan en oncología médica tales como los principios activos alquilantes (p. ej. cisplatino, parboplatino, ciclofosfamida, mostaza nitrogenada, melfalán, clorambucilo, busulfano y nitrosoureas); antimetabolitos (p. ej. antifolatos como fluoropirimidina como 5-fluorouracilo y tegafur, raltitrexed, metotrexato, citarabina, hidroxiurea y gemcitabina); antibióticos antitumorales (p. ej. antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); principios activos antimitóticos (p. ej. alcaloides de la vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorelbina, y taxoides como taxol y taxotere); inhibidores de las topoisomerasas (p. ej. epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán, irinotecán y camptotecina) y principios activos diferenciadores de células (p. ej. ácido holo-trans-retinoico, ácido 13- cis-retinoico y fenretinida);

(ii) principios activos citostáticos como antiestrógenos (p. ej. tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno y yodoxifeno), reguladores del receptor de estrógenos (p. ej. fulvestrant), antiandrógenos (p. ej. bicalutamida, flutamida, nilutamida y acetato de ciproterona), antagonistas de la LHRH o agonistas de la LHRH (p. ej. goserelina, leuprorelina y buserelina), progesteronas (p. ej. acetato de megestrol), inhibidores de las aromatasas (p. ej. anastrozol, letrozol, vorazol y exemestano) e inhibidores de la 5a-reductasa como finasterida;

(iii) principios activos que inhiben la invasión cancerosa (p. ej. inhibidores de las metaloproteinasas como marimastat, e inhibidores de la función del receptor del activador del plasminógeno tipo urocinasa);

(iv) inhibidores de la función del factor de crecimiento, p. ej. anticuerpos del factor de crecimiento, anticuerpos del receptor del factor de crecimiento, p. ej. el anticuerpo anti-erbb2 trastuzumab [Herceptin™] y el anticuerpo anti-erbbl cetuximab [C225]), inhibidores de la farnesil transferasa, inhibidores de la tirosina cinasa e inhibidores de la serina/treonina cinasa, p. ej. inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (p. ej. inhibidores de tirosina cinasas de la familia EGFR como N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6- (3-morfolinopropoxi) quinazolin-4- amina (gefitinib, AZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis (2-metoxietoxi)quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) y 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (CI 1033), p. ej. inhibidores de la familia del factor de crecimiento derivado de plaquetas y p. ej. inhibidores de la familia del factor de crecimiento de hepatocitos;

(v) principios activos antiangiogénicos como aquellos que inhiben los efectos de los factores de crecimiento del endotelio vascular (p. ej. el anticuerpo del factor de crecimiento celular anti-endotelio vascular bevacizumab [AvastinTM], compuestos que se han publicado en las solicitudes internacionales de patente WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 y WO 98/13354) y compuestos que son eficaces a través de otros mecanismos (p. ej. Linomide, inhibidores de la función de la integrina avp3 y angiostatina);

(vi) agentes que destruyen los vasos como combretastatina A4 y compuestos que se han publicado en las solicitudes internacionales de patente WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 y WO 02/08213;

(vii) terapias antisentido, por ejemplo aquellas dirigidas a las dianas mencionadas previamente como ISIS 2503, un antisentido anti-Ras;

(viii) estrategias de terapia genética, incluidas, por ejemplo, estrategias para la sustitución de genes modificados anómalos como p53 anómalo o BRCA1 o BRCA2 anómalos, estrategias GDEPT (gene-directed enzyme pro-drug therapy) como aquellas que utilizan citosina-desaminasas, timidina-cinasas o una enzima nitroreductasa bacteriana,

y estrategias que aumentan la tolerancia de un paciente a la quimioterapia o radioterapia como la terapia de la resistencia multifarmacológica y

(ix) estrategias de inmunoterapia, incluidas, por ejemplo, estrategias ex-vivo e in-vivo para el aumento de la inmunogenicidad de células tumorales de un paciente como transfección con citoquinas como interleucina 2, 5 interleucina 4 o factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos, estrategias para la disminución de la anergia de las células T, estrategias para el uso de células inmunitarias transfectadas como células dendríticas transfectadas con citoquina, estrategias para el uso de células tumorales transfectadas con citoquina y estrategias para el uso de anticuerpos antiidiotípicos.

Los medicamentos de la Tabla 1 pueden combinarse preferentemente, aunque no exclusivamente, con los 10 compuestos de fórmula 1.

Tabla 1

Principios activos alquilantes

Ciclofosfamida Lomustina Busulfano Procarbazina Ifosfamida Altretamina Melfalán Estramustina fosfato Hexametilmelamina Mecloretamina Tiotepa Estreptozocina Clorambucilo Temozolomida Dacarbazina Semustina Carmustina

Principios activos de platino

Cisplatino Carboplatino Oxaliplatino ZD-0473 (AnorMED) Espiroplatino Lobaplatino (Aetema) Carboxiftalatoplatino Satraplatino (Johnson Matthey) Tetraplatino BBR-3464 (Hoffrnann-La Roche) Ormiplatino SM-11355 (Sumitomo) Iproplatino AP-5280 (Access)

Antimetabolitos

Azacitidina Tomudex Gemcitabina Trimetrexato Capecitabina Desoxicoformicina 5- Fluorouracilo Fludarabina Floxuridina Pentostatina 2-Clorodesoxiadenosina Raltitrexed 6- Mercaptopurina Hidroxiurea 6-Tioguanina Decitabina (SuperGen) Citarabina Clofarabina (Bioenvision) 2-Fluorodesoxicitidina Irofulveno (MGI Pharrna) Metotrexato DMDC (Hoffmann-La Roche) Idatrexato Etinilcitidina (Taiho)

Inhibidores de la topoisomerasa

Amsacrina Rubitecán (SuperGen) Epirubicina Exatecán mesilato (Daiichi) Etopósido Quinamed (ChemGenex) Tenipósido o mitoxantrona Gimatecán (Sigma- Tau) Irinotecán (CPT-11) Diflomotecán (Beaufour-Ipsen) 7-Etil-10-hidroxicamptotecina TAS-103 (Taiho) Topotecán Elsamitrucina (Spectrum) Dexrazoxanet (TopoTarget) J-107088 (Merck & Co) Pixantrona (Novuspharrna) BNP-1350 (BioNumerik) Análogo de la rebecamicina CKD-602 (Chong Kun Dang) (Exelixis) KW-2170 (Kyowa Hakko) BBR-3576 (Novuspharrna)

Antibióticos antitumorales

Dactinomicina (actinomicina D) Amonafida Doxorubicina (adriamicina) Azonafida Desoxirubicina Antrapirazol Valrubicina Oxantrazol Daunorubicina (daunomicina) Losoxantrona Epirubicina Bleomicina sulfato (Blenoxan)

Terarubicina Bleomicina ácido Idarubicina Bleomicina A Rubidazona Bleomicina B Plicamicina Mitomicina C Porfiromicina MEN-10755 (Menarini) Cianomorfolinodoxorubicina GPX-100 (Gem Pharmaceuticals) Mitoxantrona (Novantron)

Principios activos antimitóticos

Paclitaxel SB 408075 (GlaxoSmithKline) Docetaxel E7010 (Abbott) Colchicina PG-TXL (Cell Therapeutics) Vinblastina IDN 5109 (Bayer) Vincristina A 105972 (Abbott) Vinorelbina A 204197 (Abbott) Vindesina LU 223651 (BASF) Dolastatina 10 (NCI) D 24851 (ASTA Medica) Rizoxina (Fujisawa) ER-86526 (Eisai) Mivobulina (Warner-Lambert) Combretastatina A4 (BMS) Cemadotina (BASF) Isohomohalicondrina-B RPR 109881A (Aventis) (PharmaMar) TXD 258 (Aventis) ZD 6126 (AstraZeneca) Epotilona B (Novartis) PEG-Paclitaxel (Enzon) T 900607 (Tularik) AZ10992 (Asahi) T 138067 (Tularik) IDN-5109 (Indena) Criptoficina 52 (Eli Lilly) AVLB (Prescient NeuroPharma) Vinflunina (Fabre) Azaepotilona B (BMS) Auristatina PE (Teikoku Hormone) BNP- 7787 (BioNumerik) BMS 247550 (BMS) Profármaco CA-4 (OXiGENE) BMS 184476 (BMS) Dolastatina-10 (NrH) BMS 188797 (BMS) CA-4 (OXiGENE) Taxoprexina (Protarga)

Inhibidores de la aromatasa

Aminoglutetimida Exemestano Letrozol Atamestano (BioMedicines) Anastrazol YM-511 (Yamanouchi) Formestano

Inhibidores de la timidilato sintasa

Pemetrexed (Eli Lilly) Nolatrexed (Eximias) ZD-9331 (BTG) CoFactor™ (BioKeys)

Antagonistas del ADN

Trabectedina (PharmaMar) Mafosfamida (Baxter International) Glufosfamida (Baxter International) Apaziquona (Spectrum Albúmina + 32P (Isotop Losungen) Pharmaceuticals) Timectacina (NewBiotics) O6-Bencilguanina (Paligent) Edotreotida (Novartis)

Inhibidores de la farnesil transferasa

Arglabina (NuOncology Labs) Tipifarnib (Johnson & Johnson) Lonafarnib (Schering-Plough) Alcohol perilílico (DOR BioPharma) BAY-43-9006 (Bayer)

Inhibidores de bombas

CBT-1 (CBA Pharma) Zosuquidar triclorhidrato (Eli Lilly) Tariquidar (Xenova) Biricodar dicitrato (Vertex) MS-209 (Schering AG)

Inhibidores de la histona acetiltransferasa

Tacedinalina (Pfizer) Pivaloiloximetilbutirato (Titan) SAHA (Aton Pharma) Depsipéptido (Fujisawa) MS-275 (Schering AG)

Inhibidores de las metaloproteinasas, inhibidores de la ribonucleósido reductasa

Neovastat (Aeterna Laboratories) CMT -3 (CollaGenex) Marimastat (British Biotech) BMS-275291 (Celltech) Maltolato de galio (Titan) Tezacitabina (Aventis) Triapin (Vion) Didox (Molecules for Health)

Agonistas/

Virulizin (Lorus Therapeutics) Revimid (Celgene)

antagonistas del TNF-alfa

CDC-394 (Celgene)

Antagonistas del receptor de la endotelina A

Atrasentán (Abbot) YM-598 (Yamanouchi) ZD-4054 (AstraZeneca)

Agonistas del receptor de ácido retinoico

Fenretinida (Johnson & Johnson) Alitretinoína (Ligand) LGD-1550 (Ligand)

Inmunomoduladores

Interferón Tratamiento de dexosomas Oncophage (Antigenics) (Anosys) GMK (Progenics) Pentrix (Australian Cancer Vacuna del adenocarcinoma Technology) (Biomira) JSF-154 (Tragen) CtP-37 (AVI BioPharma) Vacuna del cáncer (Intercell) JRX-2 (Immuno-Rx) Norelin (Biostar) PEP-005 (Peplin Biotech) BLP-25 (Biomira) Vacuna Synchrovax (CTL Immuno) MGV (Progenics) Vacuna del melanoma (CTL p-Aletina (Dovetail) Immuno) CLL-Thera (Vasogen) Vacuna de la p21-RAS (GemVax)

Principios activos hormonales y antihormonales

Estrógenos Prednisona Estrógenos conjugados Metilprednisolona Etinilestradiol Prednisolona Clorotrianiseno Aminoglutetimida Idenestrol Leuprolida Hidroxiprogesterona Goserelina Caproato Leuporelina Medroxiprogesterona Bicalutamida Testosterona Flutamida Testosterona propionato Octreotida Fluoximesterona Nilutamida Metiltestosterona Mitotano Dietilestilbestrol P-04 (Novogen) Megestrol 2-Metoxiestradiol (EntreMed) Tamoxifeno Arzoxifeno (Eli Lilly) Toremofina Dexametasona

Principios activos fotodinámicos

Talaporfina (Light Sciences) Pd-bacteriofeoforbida (Yeda) Theralux (Theratechnologies) Texafirina de lutecio Motexafina gadolinio (Pharmacyclics) (Pharmacyclics) Hipericina

Inhibidores de la tirosina cinasa

Imatinib (Novartis) Kahalid F (PharmaMar) Leflunomida (Sugen/Pharmacia) CEP- 701 (Cephalon) ZDl839 (AstraZeneca) CEP-751 (Cephalon) Erlotinib (Oncogene Science) MLN518 (Millenium) Canertjnib (Pfizer) PKC412 (Novartis) Escualamina (Genaera) Fenoxodiol O SU5416 (Pharmacia) Trastuzumab (Genentech) SU6668 (Pharmacia) C225 (ImClone) ZD4190 (AstraZeneca) rhu-Mab (Genentech) ZD6474 (AstraZeneca) MDX-H210 (Medarex) Vatalanib (Novartis) 2C4 (Genentech) PKI166 (Novartis) MDX-447 (Medarex) GW2016 (GlaxoSmithKline) ABX-EGF (Abgenix) EKB-509 (Wyeth) IMC-1C11 (ImClone) EKB-569 (Wyeth)

Otros principios activos distintos

SR-27897 (inhibidor de la CCK-A, BCX-1777 (inhibidor de PNP, Sanofi-Synthelabo) BioCryst) Tocladesina (agonista del AMP Ranpirnasa (estimulante de la cíclico, Ribapharm) ribonucleasa, Alfacell)

Alvocidib (inhibidor de CDK, Aventis)

CV-247 (inhibidor de la COX-2, Ivy Medical)

P54 (inhibidor de la COX-2, Phytopharm)

CapCell™ (estimulante de la CYP450, Bavarian Nordic)

GCS-IOO (antagonista del gal3, GlycoGenesys)

G17DT immunogen (inhibidor de la gastrina, Aphton)

Efaproxiral (oxigenador, AlIos Therapeutics)

PI-88 (inhibidor de la heparanasa, Progen)

Tesmilifeno (antagonista de la histamina, YM BioSciences) Histamina (agonista del receptor H2 de la histamina, Maxim)

Tiazofurin (inhibidor de la IMPDH, Ribapharm)

Cilengitida (antagonista de la integrina, Merck KGaA)

SR-31747 (antagonista de la IL-1, Sanofi-Synthelabo)

CCI-779 (inhibidor de la cinasa mTOR, Wyeth)

Exisulind (inhibidor de la PDE-V, Cell Pathways)

CP-461 (inhibidor de la PDE-V, Cell Pathways)

AG-2037 (inhibidor de GART, Pfizer)

WX-UK1 (inhibidor del activador del plasminógeno, Wilex)

PBI-1402 (estimulante de PMN, ProMetic LifeSciences)

Bortezomib (inhibidor del proteasoma, Millennium)

SRL-172 (estimulante de células T, SR Pharma)

TLK-286 (inhibidor de la glutatión S- transferasa, Telik)

PT-100 (agonista del factor de crecimiento, Point Therapeutics) Midostaurina (inhibidor de la PKC, Novartis)

Briostatina-1 (estimulante de la PKC, GPC Biotech)

CDA-II (potenciador de la apoptosis, Everlife)

SDX-101 (potenciador de la apoptosis, Salmedix)

Ceflatonina (potenciador de la apoptosis, ChemGenex)___________

Galarubicina (inhibidor de la síntesis de ARN, Dong-A) Tirapazamina (agente reductor, SRI International)

N-Acetilcisteína (agente reductor, Zambon)

R-Flurbiprofeno (inhibidor del NF- kappaB, Encore)

3cPa (inhibidor del NF-kappaB, Active Biotech)

Seocalcitol (agonista del receptor de la vitamina D, Leo)

131-I-TM-601 (antagonista del ADN, TransMolecular)

Eflornitina (inhibidor de la ODC, ILEX Oncology)

Ácido minodrónico (inhibidor de osteoclastos, Yamanouchi)

Indisulam (estimulante de la p53, Eisai)

Aplidina (inhibidor de la PPT, PharmaMar)

Rituximab (anticuerpos de CD20, Genentech)

Gemtuzumab (anticuerpos de CD33, Wyeth Ayerst)

PG2 (potenciador de la hematopoyesis, Pharmagenesis) Immunol™ (enjuague bucal de triclosán, Endo)

Triacetiluridina (profármaco de uridina, WelIstat)

SN-4071 (agente de sarcoma, Signature BioScience) TransMID-107™ (inmunotoxina, KS Biomedix)

PCK-3145 (potenciador de la

apoptosis, Procyon)

Doranidazol (potenciador de la apoptosis, Pola)

CHS-828 (agente citotóxico, Leo) Ácido trans-retinoico ( diferenciador, NIH)

MX6 (potenciador de la apoptosis, MAXIA)

Apomina (potenciador de la

apoptosis, ILEX Oncology)

Urocidina (potenciador de la

apoptosis, Bioniche)

Ro-31-7453 (potenciador de la apoptosis, La Roche)

Brostalicina (potenciador de la apoptosis, Pharmacia)

Por eso, incluso sin otras formas de realización, se asume que un especialista puede utilizar la descripción anterior en el alcance más amplio. Por eso, las formas de realización preferibles se deben interpretar solamente como una revelación descriptiva, en ningún caso limitante, de cualquiera de las maneras.

5 Los siguientes ejemplos ilustran la invención sin limitarla. Si no se indica lo contrario, los datos de porcentaje son porcentajes en peso. Todas las temperaturas se indican en grados Celsius. «Tratamiento habitual»: en caso necesario se añade agua, en caso necesario se ajusta el valor de pH entre 2 y 10 según la constitución del producto final, se extrae con acetato de etilo o con diclorometano, se separa, se seca la fase orgánica sobre sulfato

de sodio, se filtra, se concentra por evaporación y se purifica mediante cromatografía sobre gel de sílice y/o mediante cristalización.

Valores Rf en gel de sílice; Espectrometría de masas: EI (ionización por impacto electrónico, por sus siglas en inglés): M+, FAB (Fast Atom Bombardment): (M+H)+, ThF (tetrahidrofurano), NMP (N-metilpirrolidona), DMSO 5 (dimetilsulfóxido), Ae (acetato de etilo), MeOH (metanol), CCF (cromatografía en capa fina)

Se han sintetizado y caracterizado las siguientes sustancias. El especialista también puede llevar a cabo, no obstante, la elaboración y caracterización de las sustancias por otras vías.

Ejemplo 1: Compuestos de ejemplo de la fórmula I

Tabla 2

N.°

Compuesto Peso molecu lar M+H TR [min] Selecti vidad frente a renina CI50 v. Eje mplo 6 Estabili dad en líquido sinovial v. Ejempl o 5 Ensayo CatD CI50- (M) v. Ejem plo 3 (mol/l) Ensay o GAG CI50- (M) v. Eje mplo 4 (mol/l)

1

-|J—■ (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3- metil-2-(3-fenil-propionilamino)-butirilamino]-5- fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3- metil-butirato de bencilo 743,0 744,0 2,71 >30 m M 7,90E- 08

2

o 0 c - 0 0 : (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3- metil-2-(4-fenil-butirilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3- metil-butirato de bencilo 757,0 758,0 2,78 7,10E- 08

3

0 0 0 0 0 0 (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3- metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-iloxi)-propionil- amino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3- metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 823,0 824,0 3,01 >30 m M 2,30E- 07

4

Q ^ T 1 ' V I . - )] rm t rsr ir 0 0 CM 0 I) 0 ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)- 3-metil-2-(3-fenil-propionilamino)-butirilamino]-5- fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3- metil-butírico 652,8 653,8 2,27 estable 3,00E- 08 6,06E- 08

5

Y rO k Y — - -jj-y'” ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)- 3-metil-2-(4-fenil-butirilamino)-butirilamino]-5- fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3- metil-butírico 666,9 667,9 2,36 >20 m M estable O co 00 ± m 9,89E- 07

6

axx x r° V x, V"H i^'11 « V'T C OH 0 C C ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 3-metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-iloxi)-propionil- amino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3- metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico 732,9 733,9 2,61 o ro ^ co o m

7

Ofl Y jC^ L"" X - X) 0 0 C.< - 0 0 0 ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 3-metil-2-[2-(naftalen-2-iloxi)-acetilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 795,0 796,0 2,83 o co ^ en o m

8

X y X!y XVHXrH lYr^rnf ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)- pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoil- amino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico 717,9 718,9 2,27 o co 00 o o m 2,76E- 09

9

"V ^ Y* V Y j Y——NH^X|—Y^'|—NH = 'J—NH^Y ácido “(S)-2-[”(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hid“roxi-4-{(R)- 3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)- pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoil- amino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico 717,9 718,9 2,3 7,51 E- 08 O co 00 ^ ro m

10

. Jl_ c (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4- dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}- 3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 789,0 790,0 2,54 UJ o 00 <M O

11

r r í r : i i O O - O i i (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2- (4-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 759,0 760,0 2,62 O CO 00 O O m

12

. ri i . x rx x - v Tí Or"' ir" T ir"11— ir v (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etox¡- fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi- 5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]- 3-metil-butirato de bencilo 773,0 774,0 2,72 o ro 00 OI o m

13

i x lx 'X - jo Xr r rrVr " (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2- (3-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 759,0 760,0 2,64 o ro 00 OI o m

14

n i T XX í XX- x i J rH ruH t r^rH i ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4- dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}- 3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 698,9 699,9 2,08 1,50E- 07

15

n i rTV,xr,crXx á’fcidX(S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4"s)-3-hídrox¡-4"-{(S)- 2-[2-(4-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 668,8 669,8 2,18 >30 m M 3,90E- 08

16

' X 't t, d jpj r1" irH r irM4ir^H y lY.......................... (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3- metil-2-(2-naftalen-2-il-acetilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo 779,0 780,0 2,78 1,50E- 07

17

ácido "”(S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3- etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3- hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 682,9 683,9 2,28 1,55E- 08

18

f) 1 . Y ( ^ \ '""Y" j^jj r_)j r (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2- (2-metoxi-5-trifluorometoxi-fenil)-acetilamino]-3- metil-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3- metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 842,9 843,9 2,82 O co o m

19

/l L J | J „ _,Xx_J I 0 0 - 0 0 I Ci n (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3- metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-acetilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 821,0 822,0 2,86 O 00 o o m

20

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 2-[2-(3-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 668,8 669,8 2,19 estable 1,20E- 08 O 00 Vj CD m

21

. o i ^ (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-h idroxi-4-[(S)-3- metil-2-(2-naftalen-1-il-acetilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo 779,0 780,0 2,78 1,20E- 06

22

i" X j5 .JO ' " 'H " (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2- (2-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 759,0 760,0 2,67 2,10E- 07

23

- , Pv Y (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[(bifenil-3- carbonil)-amino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi- 5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]- 3-metil-butirato de bencilo 791,0 792,0 2,87 1,20E- 05

24

X JJ L y jy 1J rHV1" F-_ ,C J--F F ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 2-[2-(2-metoxi-5-trifluorometoxi-fenil)-acetil- amino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil-pentanoil- amino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico 752,8 753,8 2,41 1,10E- 08

25

. 'í X V Y , / Xj—NH ^j|—INH Y N|l—KHh^---’NH %fX 0 0 OH 0 c 0 u ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)- 3-metil-2-(2-naftalen-2-il-acetilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butírico 688,9 689,9 2,35 O 00 CO o m

26

I X V Y XX = ™ - H; = ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-4-[(S)-2-(3-terc- butoxi-benzoilamino)-3-metil-butirilamino]-3- hidroxi-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butírico 696,9 697,9 2,41 1,20E- 07

27

. . r¡ i .. =y y y Y - nj ■' Y1 '-X - 'V Ouó ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 3-metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-acetilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 730,9 731,9 2,46 1,20E- 08

28

Y Y f1^ V Y' f^S^Y"1'YN1' YYn 'fr-" t " 0 D OH 5 0 0 ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)- 2-[2-(2-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 668,8 669,8 2,21 >30 m M 1,60E- 07

29

n ¿Y""—1Y ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4- dimetil-fenoxi)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}- 3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 682,9 683,9 2,42 1,00E- 07

30

Y JO L- y Y —WH —NH Y —Hl- H= ----NH Y 0 0 Ól- 0 o 0 XJ ácidcT (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)- 3-metil-2-(2-naftalen-1-il-acetilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butírico 688,9 689,9 2,36 O 00 00 OI o m

31

ácido^^[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[(bifenil- 3-carbonil)-amino]-3-metil-butirilamino}-3- hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butírico 700,9 701,9 2,47 1,60E- 07

32

CJ) y £) .j. y.. ^ : - -. - : - (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-difenilacetil- amino-3-metil-butirilamino)-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3- metil-butirato de bencilo 805,0 806,0 2,87 O co ^ N> O m

33

0 y JO k - Y n Y rNi i irH¿ i—*" ii H. ^ C 0 OH 0 U c ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2- difenilacetilamino-3-metil-butirilamino)-3-hidroxi- 5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}- 3-metil-butírico 714,9 715,9 2,44 1,60E- 08

34

l!.. fjr) o ■;■ o- o c o (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi- fenil)-acetilamino]-3-metil-1-(S)-oxo-pentil- amino}-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil- pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo 787,0 788,0 2,8 2,70E- 07

35

AA .i Y n i;‘Y,.xO (j ir" r-1, r" r~1 ~ - (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-h idroxi-4-[(S)-2-((S)- 2-hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-metil-butiril- amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo 744,9 745,9 2,56 5,80E- 07

36

V IXJ V Y • ,,h ¡rrHVHYH ácido (S>2-[(2S,3S)”-2-((3s"4Sj-3-hidroxi-4-{(S)- metil-1-(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3- oxo-pentilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3- metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico 696,9 697,9 2,35 O 00 CO O m

37

- y- fO U Y rYW„ tIi hH.: ii "h Y \ ^ C 0 01 0 0 0 ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)- 2-((S)-2-hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-metil- butirilamino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil- pentanoilamino)-3-metil-butírico 654,8 655,8 2,13 3,10E- 07

38

-/-y Y S Y ■■'Y A A. ^ A A ,oh / —HH 'u---’IH V 1|—NHÍ ||----NH 'U' 0 o ÓH 0 0 0 ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-4-[(S)-2-(2,2- dietil-butirilamino)-3-metil-butirilamino]-3-hidroxi- 5-fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)- 3-metil-butírico 646,9 647,9 2,45 7,00E- 06

39

a Y P V Y ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3- (2-terc-butoxicarbonilamino-etoxi)-fenil]-acetil- amino}-3-metil-1-(S)-oxo-pentilamino)-3-hidroxi- 5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}- 3-metil-butírico 812,0 813,0 2,4 3,90E- 08

40

1 0' XX ' : -- - : ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hid roxi-4- {(2S,3S)-3-metil-2-[2-(3-propoxi-fenil)-acetil- amino]-pentanoilamino}-5-fenil-pentanoilamino)- 3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico 710,9 711,9 2,46 1,70E- 08

41

- r° V Y - h-m^'’'TYTnh¡¡Thh Y~'rNHM"NH V ácido (Sj-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3- (2-amino-etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-metil-1-(S)- oxo-pentilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil- amino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico 711,9 712,9 1,7 4,80E- 07

42

v \ X c O O O OH O O ^ (2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2- (3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoato de [(1S,2S)-1-(1-etil- propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida 687,9 689,0 2,57 1,3E-09

43

r r ^ ¿X íl'x < NH NH NH NH H NH O O O Oh o o 1 (2S,5S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2- fenilacetilamino-pentanoilamino)-1-oxo- butilamino]-5-fenil-pentanoato de [(1S,2S)-1-(1- etil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida 721,98 723,0 2,57 3,5E-09

44

NH —nH^^^H 0 O O 0 OH 0 0 0 (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3- metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoil- amino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoilamino}-3- metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo 842,08 843,1 2,76 2,1E-09

45

NH NH NH O O O OH O O O ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)- 3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino- pentanoilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico 751,96 753,0 2,33 3,5E-10

46

NH NH^YN 0 0 0 OH 0 0 (2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2- (3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoato de ((1S,2S)-1- ciclopentilcarbamoil-2-metil-butil)-amida 685,94 686,9 2,5 1,8E-09

47

y rr y j \—NH^-h—NH^tt—NH^^^Yj—NH^j—NH o o o Oh o o \ (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2- (3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoato de [(S)-1 -(1 -etil- propilcarbamoil)-2-metil-propil]-amida 673,93 674,9 2,46 6,5E-10

48

—nH^A O O O 0H 0 0 (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2- (3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoato de [(S)-1 -(1 -etil- propilcarbamoil)-butil]-amida 673,93 674,9 2,47 2,6E-10

49

vx"Y Y iYLYL^oh / ^—N^ Yl—N^ Y---NH —NH H >T---NH o o o Oh o 0 (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2- (3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoato de [(1S,2S)-1-(3- hidroxi-1,1-dimetil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]- amida 703,96 705,0 2,26 2,1 E-10

Para evitar posibles dudas, dondequiera que no coincida la denominación química del compuesto y la representación de la estructura química del compuesto respecto a un compuesto según la invención, el compuesto según la invención se define de forma inequívoca mediante la representación de la estructura química.

5 Las señales de masa se determinaron en un aparato Agilent 1200:

Chromolith Speed Rod RP 18e 50-4,6 mm LCMS; Polar.m, 2,4 ml/min, 220 nm, tampón A HCOOH/H2O 0,05 %, tampón B HCOOH/ACN 0,04 %, 0,0-2,8 min tampón B 4 %-100 %; 2,8-3,3 min tampón B 100 % 3,3-3,4 min tampón B 100 %-4 %

Los tiempos de retención se determinaron en un aparato Merck-Hitachi LaChrom:

10 Chromolith Speed Rod RP18e-100-4,6 HPLC;5 min 4 ml 215 nm; 4 ml/min, 215 nm, tampón A AFTA/H2O 0,05%, tampón B AFTAA/ACN 0,04 %, 0,0-0,2 min tampón B 5 %; 0,2-5,0 min tampón B 5 %-100 %; 5,0-5,5 min tampón B 99 %-5 %

Datos de RMN

Tabla 3

N.2

Compuesto Datos de RMN

1

(S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3- hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(3- fenil-propionilamino)-butiril- amino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoil- amino)-3-metil-butirato de bencilo RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,16 (d, J=7,7, 1H), 7,77 (d, J=8,7, 1H), 7,70 (d, J=8,8, 1H), 7,60 (d, J=8,8, 1H), 7,40 - 7,28 (m, 5H), 7,28 - 7,10 (m, 10H), 5,10 (s, 2H), 5,06 (d, J=5,3, 1H), 4,32 - 4,25 (m, 1H), 4,21 - 4,14 (m, 1H), 4,12 - 4,04 (m, 1H), 3,98 - 3,89 (m, 1H), 3,89 - 3,81 (m, 1H), 2,89 - 2,73 (m, 3H), 2,64 - 2,56 (m, 1H), 2,49 - 2,35 (m, 2H), 2,30 - 2,21 (m, 1H), 2,17 - 1,99 (m, 2H), 1,92 - 1,81 (m, 1H), 1,72 - 1,62 (m, 1H), 1,47 - 1,38 (m, 1H), 1,11 - 0,98 (m, 1H), 0,90 - 0,82 (m, 6H), 0,81 - 0,70 (m, 12H).

3

4

5

6

7

8

(S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-

hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(4-

fenil-butirilamino)-butiril-

amino]-5-fenil-pentanoil-

amino}-3-metil-pentanoil-

amino)-3-metil-butirato de

bencilo

(S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-

hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-

metil-2-(naftalen-2-iloxi)-

propionilamino]-butirilamino}-

5-fenil-pentanoilamino)-3-

metil-pentanoilamino]-3-

metil-butirato de bencilo

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-

metil-2-(3-fenil-propionil-

amino)-butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-

metil-2-(4-fenil-butirilamino)-

butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico___________________

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-

metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-

iloxi)-propionilamino]-butiril-

amino}-5-fenil-pentanoil-

amino)-3-metil-pentanoil-

amino]-3-metil-butírico

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-

metil-2-[2-(naftalen-2-iloxi)-

acetilamino]-butirilamino}-5-

fenil-pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butírico

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-

metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-

metil-butirilamino)-pentanoil-

amino]-butirilamino}-5-fenil-

pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butírico___________________

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-

[2-(4-metoxi-fenil)-acetil-

amino]-3-metil-butirilamino}-

5-fenil-pentanoilamino)-3-

metil-pentanoilamino]-3-

metil-butírico

RMN 1H (400 MHz, DMSO) ppm = 8,17 (d, J=7,8, 1H), 7,75 (d, J=8,8, 1H), 7,71 (d, J=8,8, 1H), 7,60 (d, J=8,8, 1H), 7,41

- 7,23 (m, 7H), 7,23 - 7,05 (m, 8H), 5,10 (s, 2H), 5,06 (d, J=5,4, 1H), 4,33 - 4,24 (m, 1H), 4,21 - 4,13 (m, 1H), 4,08 (dd, J=8,8, 7,2, 1H), 3,99 - 3,80 (m, 2H), 2,89 - 2,78 (m, 1H),

2.65 - 2,49 (m, 3H), 2,30 - 1,98 (m, 5H), 1,96 - 1,61 (m, 4H), 1,48 - 1,35 (m, 1H), 1,12 - 0,96 (m, 1H), 0,89 - 0,71 (m,

18H).__________________________________________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,15 (d, J=7,8, 1H), 7,85 - 7,67 (m, 6H), 7,47 - 7,28 (m, 7H), 7,26 (d, J=2,4, 1H), 7,24 - 7,08 (m, 6H), 5,13 (d, J=4,7, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,32 - 4,25 (m, 1H), 4,21 - 4,08 (m, 2H), 4,03 - 3,94 (m, 1H), 3,91 - 3,83

(m, 1H), 2,88 - 2,80 (m, 1H), 2,65 - 2,56 (m, 1H), 2,27 - 2,18

(m, 1H), 2,17 - 2,09 (m, 1H), 2,09 - 1,99 (m, 1H), 1,96 - 1,86

(m, 1H), 1,73 - 1,61 (m, 1H), 1,51 (s, 3H), 1,47 (s, 4H), 1,10

- 0,97 (m, 1H), 0,88 - 0,72 (m, 12H), 0,65 (d, J=6,7, 6H).

RMN 1H (400 MHz, DMSO) ppm = 12,49 (s, 1H), 7,92 (d, J=8,1, 1H), 7,79 (d, J=8,8, 1H), 7,71 (d, J=8,8, 1H), 7,64 (d, J=8,8, 1H), 7,29 - 7,10 (m, 10H), 5,09 (d, J=5,4, 1H), 4,32 - 4,23 (m, 1H), 4,13 - 4,04 (m, 2H), 3,99 - 3,82 (m, 2H), 2,91 -

2,72 (m, 3H), 2,66 - 2,55 (m, 1 H), 2,50 - 2,34 (m, 2H), 2,31 -

2,20 (m, 1H), 2,18 - 1,96 (m, 2H), 1,93 - 1,80 (m, 1H), 1,76 -

1.65 (m, 1H), 1,50 - 1,33 (m, 1H), 1,09 - 1,00 (m, 1H), 0,92 -

0,70 (m, 18H).___________________________________________

RMN 1H (400 MHz, DMSO) ppm = 12,48 (s, 1H), 7,91 (d, J=8,2, 1H), 7,79 - 7,67 (m, 2H), 7,62 (d, J=8,7, 1H), 7,31 - 7,05 (m, 10H), 5,07 (s, 1H), 4,31 - 4,22 (m, 1H), 4,13 - 4,03

(m, 2H), 3,99 - 3,82 (m, 2H), 2,93 - 2,81 (m, 1H), 2,66 - 2,50

(m, 3H), 2,30 - 2,09 (m, 4H), 2,09 - 1,97 (m, 1H), 1,97 - 1,64

(m, 4H), 1,51 - 1,37 (m, 1H), 1,09 - 1,01 (m, 1H), 0,91 - 0,74

(m, 18H).____________________'___________________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,49 (s, 1H), 7,91 - 7,67 (m, 6H), 7,47 - 7,34 (m, 2H), 7,26 (d, J=2,4, 1H), 7,24 - 7,09 (m, 7H), 5,17 (s, 1H), 4,30 - 4,23 (m, 1H), 4,15 - 4,04 (m, 2H), 4,02 - 3,94 (m, 1H), 3,89 (d, J=8,3, 1H), 2,90 - 2,82 (m, 1H), 2,65 - 2,57 (m, 1H), 2,27 - 2,18 (m, 1H), 2,18 - 2,11 (m, 1H), 2,08 - 1,97 (m, 1H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 1,75 - 1,65 (m, 1H), 1,51 (s, 3H), 1,49 - 1,32 (m, 4H), 1,09 - 1,00 (m, 1H),

0,89 - 0,75 (m, 12H), 0,65 (d, J=6,7, 6H).__________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,15 (d, J=7,7, 1H), 7,88 - 7,81 (m, 4H), 7,77 - 7,70 (m, 2H), 7,48 - 7,41 (m, 1H), 7,40 - 7,15 (m, 12H), 7,15 - 7,07 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 5,05 (d, J=5,3, 1H), 4,73 - 4,61 (m, 2H), 4,33 - 4,21 (m, 2H), 4,21 - 4,14 (m, 1H), 4,02 - 3,93 (m, 1H), 3,87 (t, J=6,6, 1H), 2,85 (dd, J=13,7, 5,4, 1H), 2,64 - 2,56 (m, 1H), 2,31 - 2,22 (m, 1H), 2,18 - 2,11 (m, 1H), 2,10 - 1,92 (m, 2H), 1,71 - 1,62 (m, 1H), 1,46 - 1,38 (m, 1H), 1,09 - 0,97 (m, 1H), 0,88 - 0,81 (m,

6H), 0,81 - 0,72 (m, 12H).________________________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,51 (s, 1H), 8,01 - 7,92 (m, 2H), 7,73 (d, J=8,8, 1H), 7,69 - 7,61 (m, 2H), 7,28 - 7,11 (m, 5H), 5,08 (d, J=5,1, 1H), 4,36 - 4,25 (m, 2H), 4,11 - 4,02 (m, 2H), 3,99 - 3,88 (m, 1H), 3,88 - 3,81 (m, 1H), 2,90 - 2,83 (m, 1H), 2,60 (dd, J=13,8, 8,8, 1H), 2,28 - 2,19 (m, 1H), 2,16

- 2,09 (m, 1H), 2,09 - 1,81 (m, 5H), 1,75 - 1,63 (m, 1H), 1,63

- 1,50 (m, 1H), 1,50 - 1,34 (m, 3H), 1,12 - 0,96 (m, 1H), 0,90

- 0,70 (m, 30H)._________________________________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,51 (s, 1H), 7,97 - 7,89 (m, 2H), 7,78 - 7,69 (m, 2H), 7,24 - 7,10 (m, 7H), 6,86 - 6,79 (m, 2H), 5,08 (d, J=5,6, 1H), 4,33 - 4,24 (m, 1H), 4,15 - 4,04 (m, 2H), 3,98 - 3,82 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,49 - 3,41 (m, 1H), 3,35 (s, 1H), 2,91 - 2,81 (m, 1H), 2,62 - 2,52 (m, 1H), 2,29 - 2,18 (m, 1H), 2,13 (dd, J=14,3, 3,4, 1H), 2,08 - 1,96 (m, 1H), 1,95 - 1,83 (m, 1H), 1,75 - 1,64 (m, 1H), 1,50 - 1,38 (m, 1H), 1,12 - 0,99 (m, 1H), 0,90 - 0,72 (m, 18H).

17

19

20

22

24

25

(S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-

hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-

naftalen-2-il-acetilamino)-

butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butirato de bencilo

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-

fenil)-acetilamino]-3-metil-

butirilamino}-3-hidroxi-5-

fenil-pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butírico

(S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-

hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(3-

fenoxi-fenil)-acetilamino]-

butirilamino}-5-fenil-

pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butirato de bencilo

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-

[2-(3-metoxi-fenil)-acetil-

amino]-3-metil-butirilamino}-

5-fenil-pentanoilamino)-3-

metil-pentanoilamino]-3-

metil-butírico

(S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-

hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-

fenil)-acetilamino]-3-metil-

butirilamino}-5-fenil-

pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butirato de bencilo

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-

[2-(2-metoxi-5-

trifluorometoxi-fenil)-acetil-

amino]-3-metil-butirilamino}-

5-fenil-pentanoilamino)-3-

metil-pentanoilamino]-3-

metil-butírico

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-

metil-2-(2-naftalen-2-il-acetil-

amino)-butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,19 (d, J=7,7, 1H), 8,09 (d, J=9,0, 1H), 7,90 - 7,79 (m, 3H), 7,77 - 7,71 (m, 3H), 7,52

- 7,40 (m, 3H), 7,40 - 7,27 (m, 5H), 7,23 - 7,01 (m, 5H), 5,10

(s, 3H), 4,33 - 4,25 (m, 1H), 4,20 - 4,08 (m, 2H), 3,99 - 3,81

(m, 2H), 3,75 - 3,68 (m, 1H), 3,64 - 3,57 (m, 1H), 2,89 - 2,79

(m, 1H), 2,63 - 2,52 (m, 1H), 2,31 - 2,17 (m, 1H), 2,17 - 1,98

(m, 2H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 1,73 - 1,60 (m, 1H), 1,47 - 1,34

(m, 1H), 1,09 - 0,95 (m, 1H), 0,88 - 0,70 (m, 18H).__________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,54 (s, 1H), 8,03 (d, J=8,8, 1H), 7,84 (s, 2H), 7,75 (d, J=8,5, 1H), 7,24 - 7,10 (m, 6H), 6,86 - 6,70 (m, 3H), 5,16 (s, 1H), 4,28 - 4,21 (m, 1H), 4,15 - 4,08 (m, 1H), 4,03 (s, 1H), 3,99 - 3,92 (m, 2H), 3,92 - 3,83 (m, 2H), 3,54 - 3,46 (m, 1H), 3,42 - 3,35 (m, 1H), 2,91 -

2.81 (m, 1H), 2,63 - 2,54 (m, 1H), 2,29 - 2,19 (m, 1H), 2,13 (d, J=13,9, 1H), 2,09 - 1,96 (m, 1H), 1,96 - 1,84 (m, 1H), 1,76 - 1,64 (m, 1H), 1,47 - 1,37 (m, 1H), 1,34 - 1,22 (m, 3H),

1,12 - 0,99 (m, 1H), 0,90 - 0,74 (m, 18H).__________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,19 (d, J=7,7, 1H), 8,01 (d, J=8,9, 1H), 7,77 - 7,71 (m, 2H), 7,41 - 7,22 (m, 8H), 7,22

- 7,08 (m, 6H), 7,06 - 7,00 (m, 1H), 7,00 - 6,91 (m, 3H), 6,89

- 6,79 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 5,06 (d, J=5,4, 1H), 4,33 - 4,25 (m, 1H), 4,21 - 4,07 (m, 2H), 3,97 - 3,81 (m, 2H), 3,54 (d, J=13,8, 1H), 3,39 (d, J=13,7, 1H), 2,91 - 2,79 (m, 1H), 2,61 -

2.53 (m, 1H), 2,31 - 2,16 (m, 1H), 2,15 - 1,98 (m, 2H), 1,95 -

1.82 (m, 1H), 1,72 - 1,60 (m, 1H), 1,48 - 1,30 (m, 1H), 1,10 - 0,95 (m, 1H), 0,90 - 0,80 (m, 6H), 0,80 - 0,70 (m, 12H).

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,50 (s, 1H), 8,02 - 7,93 (m, 2H), 7,76 - 7,70 (m, 2H), 7,25 - 7,09 (m, 6H), 6,87 - 6,72

(m, 3H), 5,06 (d, J=5,4, 1H), 4,33 - 4,25 (m, 1H), 4,17 - 4,05

(m, 2H), 3,98 - 3,82 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,54 - 3,47 (m, 1H), 3,39 (d, J=13,7, 1H), 2,91 - 2,80 (m, 1H), 2,64 - 2,52 (m, 1H), 2,30 - 2,21 (m, 1H), 2,16 - 2,09 (m, 1H), 2,09 - 1,96

(m, 1H), 1,96 - 1,84 (m, 1H), 1,75 - 1,64 (m, 1H), 1,50 - 1,38

(m, 1H), 1,12 - 0,99 (m, 1H), 0,90 - 0,73 (m, 18H).__________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,19 (d, J=7,7, 1H), 7,78 -

7.67 (m, 2H), 7,62 (d, J=8,9, 1H), 7,40 - 7,28 (m, 5H), 7,27 -

7.10 (m, 7H), 6,96 - 6,91 (m, 1H), 6,89 - 6,82 (m, 1H), 5,12 -

5,04 (m, 3H), 4,32 - 4,25 (m, 1H), 4,20 - 4,08 (m, 2H), 3,99 -

3.82 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,53 - 3,46 (m, 1H), 3,42 - 3,34

(m, 1H), 2,89 - 2,80 (m, 1H), 2,63 - 2,55 (m, 1H), 2,29 - 2,20

(m, 1H), 2,15 - 1,98 (m, 2H), 1,97 - 1,84 (m, 1H), 1,72 - 1,60

(m, 1H), 1,47 - 1,32 (m, 1H), 1,09 - 0,96 (m, 1H), 0,88 - 0,81

(m, 6H), 0,81 - 0,72 (m, 12H). ___________________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 13,09 - 12,05 (m, 1H), 7,94 - 7,85 (m, 2H), 7,82 - 7,72 (m, 2H), 7,27 - 7,10 (m, 7H), 7,01 (d, J=8,6, 1H), 5,12 (s, 1H), 4,29 - 4,22 (m, 1H), 4,19 -

4.10 (m, 1H), 4,09 - 4,03 (m, 1H), 3,96 - 3,90 (m, 1H), 3,90 -

3.82 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,57 - 3,50 (m, 1H), 3,48 - 3,39

(m, 1H), 2,92 - 2,82 (m, 1H), 2,64 - 2,56 (m, 1H), 2,29 - 2,21

(m, 1H), 2,17 - 2,09 (m, 1H), 2,08 - 1,97 (m, 1H), 1,97 - 1,85

(m, 1H), 1,75 - 1,63 (m, 1H), 1,48 - 1,37 (m, 1H), 1,11 - 0,97

(m, 1H), 0,89 - 0,75 (m, 18H). ___________________________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,51 (s, 1H), 8,10 (d, J=8,9, 1H), 7,94 (d, J=8,1, 1H), 7,90 - 7,71 (m, 6H), 7,52 - 7,40 (m, 3H), 7,24 - 7,01 (m, 5H), 5,09 (d, J=5,5, 1H), 4,32 - 4,24 (m, 1H), 4,18 - 4,04 (m, 2H), 3,99 - 3,83 (m, 2H), 3,75 -

3.68 (m, 1H), 3,64 - 3,55 (m, 1 H), 2,91 - 2,82 (m, 1H), 2,63 -

2.54 (m, 1H), 2,30 - 2,21 (m, 1H), 2,18 - 2,10 (m, 1H), 2,09 -

1,85 (m, 2H), 1,75 - 1,63 (m, 1H), 1,49 - 1,37 (m, 1H), 1,11 -

0,97 (m, 1H), 0,90 - 0,74 (m, 18H).

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-4-[(S)-2-(3-terc-

butoxi-benzoilamino)-3-metil-

butirilamino]-3-hidroxi-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, J=8,7, 1H), 7,95 (d 7,55 (m, 1H), 7,44 - 7,10 (m, 3H), 7,10 - 4,24 (m, 1H), 4,18 4,00 - 3,92 (m, 1H), 2,65 - 2,59 (m, 1H), 2,08 - 1,99 (m, 2H), 1,32 (s, 9H), 1,11 -

DMSO) ppm = 12,48 (s, 1H), 8,24 (d, J=8,0, 1H), 7,76 - 7,65 (m, 2H), 7,60 -

■ 7,34 (m, 2H), 7,23 - 7,18 (m, 2H), 7,17 -

■ 7,03 (m, 1H), 5,11 (d, J=5,8, 1H), 4,30 - (t, J=8,6, 1H), 4,08 (dd, J=8,2, 5,9, 1H), 3,91 - 3,85 (m, 1H), 2,88 - 2,81 (m, 1H),

2,29 - 2,21 (m, 1H), 2,19 - 2,12 (m, 1H),

1,75 - 1,66 (m, 1H), 1,48 - 1,40 (m, 1H),

1,03 (m, 1H), 0,90 - 0,75 (m, 18H).

27

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-

metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-

acetilamino]-butirilamino}-5-

fenil-pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,46 (s, 1H), 7,98 (d, J=8,9, 1H), 7,89 (d, J=8,3, 1H), 7,71 (d, J=8,7, 2H), 7,41 - 7,32 (m, 2H), 7,32 - 7,24 (m, 1H), 7,23 - 7,08 (m, 6H), 7,03 (d, J=7,6, 1H), 7,00 - 6,92 (m, 3H), 6,88 - 6,80 (m, 1H), 5,06 (s, 1H), 4,31 - 4,24 (m, 1H), 4,15 - 4,04 (m, 2H), 3,97 - 3,89 (m, 1H), 3,89 - 3,81 (m, 1H), 3,54 (d, J=13,8, 1H), 3,44 - 3,35 (m, 1H), 2,91 - 2,80 (m, 1H), 2,63 - 2,54 (m, 1H), 2,29 -

2,18 (m, 1H), 2,18 - 2,07 (m, 1H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,96 -

1,82 (m, 1H), 1,76 - 1,64 (m, 1H), 1,50 - 1,38 (m, 1H), 1,12 -

0,99 (m, 1H), 0,91 - 0,68 (m, 18H).

28

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-

[2-(2-metoxi-fenil)-acetil-

amino]-3-metil-butirilamino}-

5-fenil-pentanoilamino)-3-

metil-pentanoilamino]-3-

metil-butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,70 - 12,22 (m, 1H), 7,88 (d, J=8,2, 1H), 7,77 - 7,66 (m, 2H), 7,59 (d, J=8,8, 1H), 7,26 - 7,11 (m, 7H), 6,96 - 6,91 (m, 1H), 6,89 - 6,82 (m, 1H), 5,10 (s, 1H), 4,31 - 4,22 (m, 1H), 4,18 - 4,10 (m, 1H), 4,10 - 4,03 (m, 1H), 3,99 - 3,90 (m, 1H), 3,89 - 3,82 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,53 - 3,46 (m, 1H), 3,43 - 3,36 (m, 1H), 2,91 - 2,83

(m, 1H), 2,65 - 2,57 (m, 1H), 2,29 - 2,20 (m, 1H), 2,17 - 2,09

(m, 1H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 1,91 (h, J=6,8, 1H), 1,75 - 1,65

(m, 1H), 1,48 - 1,38 (m, 1H), 1,10 - 0,99 (m, 1H), 0,90 - 0,71

(m, 18H).____________________'___________________________

29

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-

dimetil-fenoxi)-acetilamino]-

3-metil-butirilamino}-3-

hidroxi-5-fenil-pentanoil-

amino)-3-metil-pentanoil-

amino]-3-metil-butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,47 (s, 1H), 7,94 - 7,81 (m, 2H), 7,72 (d, J=8,8, 1H), 7,65 (d, J=9,0, 1H), 7,21 (d, J=4,4, 4H), 7,16 - 7,10 (m, 1H), 7,01 (d, J=8,3, 1H), 6,74 (d, J=2,7, 1H), 6,64 (dd, J=8,2, 2,7, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,52 -

4,40 (m, 2H), 4,31 - 4,18 (m, 2H), 4,11 - 4,05 (m, 1H), 4,01 -

3,92 (m, 1H), 3,90 - 3,83 (m, 1 H), 2,91 - 2,81 (m, 1H), 2,65 -

2,57 (m, 1H), 2,29 - 2,21 (m, 1H), 2,14 (d, J=19,8, 6H), 2,06

- 1,90 (m, 2H), 1,76 - 1,66 (m, 1H), 1,49 - 1,39 (m, 1H), 1,31 1,20 (m, 1H), 1,11 - 1,01 (m, 1H), 0,90 - 0,70 (m, 18H).

30

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-

metil-2-(2-naftalen-1 -il-acetil-

amino)-butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,47 (s, 1H), 8,14 - 8,04 (m, 2H), 7,94 - 7,84 (m, 2H), 7,82 - 7,77 (m, 1H), 7,77 - 7,67 (m, 2H), 7,51 - 7,46 (m, 2H), 7,45 - 7,39 (m, 2H), 7,21 (d, J=4,4, 4H), 7,18 - 7,12 (m, 1H), 5,08 (s, 1H), 4,32 - 4,24 (m, 4,12 (m, 1H), 4,11 - 4,01 (m, 2H), 3,99 - 3,83 (m,

1H), 3H)

1H),

1H),

18H)

4.17 2,90

2.17 1,47

2,83 (m, 1H), 2,63 - 2,56 (m, 1H), 2,28 - 2,20 (m,

2,08 (m, 1H), 2,07 - 1,89 (m, 2H), 1,74 - 1,65 (m,

1,37 (m, 1H), 1,09 - 0,98 (m, 1H), 0,89 - 0,73 (m,

33

ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-

[(3S,4S)-4-((S)-2-

difenilacetilamino-3-metil-

butirilamino)-3-hidroxi-5-

fenil-pentanoilamino]-3-metil-

pentanoilamino}-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,45 (s, 1H), 8,20 (d, J=8,9, 1H), 7,91 - 7,77 (m, 2H), 7,72 (d, J=8,9, 1H), 7,31 - 7,07 (m, 15H), 5,17 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,30 - 4,23 (m,

1H), 4,21 2H), 2,89 2H), 2,07 1H), 1,48 18H).

4,14 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 1,98 (m, 1H), 1,38 (m, 1H),

4.10 - 4,03 (m, 1H), 2,61 - 2,54 (m, 1H), 1,95 - 1,85 (m, 1H),

1.10 - 1,00 (m, 1H),

3,94 - 3,82 (m, 2,28 - 2,10 (m, 1,75 - 1,66 (m, 0,89 - 0,70 (m,

35

(S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-

hidroxi-4-[(S)-2-((S)-2-

hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-

metil-butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butirato de bencilo

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,16 (d, J=7,8, (d, J=8,7, 1H), 7,75 (d, J=8,8, 1H), 7,67 (d, J=9,2 - 7,29 (m, 9H), 7,28 - 7,12 (m, 6H), 6,36 (d, J=4,7

(s, 2H), (m, 1H),

5,07 (d, J=5,1, 1H), 4,90 (d, J=4,7, 1H)

(m,

(m,

(m,

(m,

1H), 1H), 1H), 1H),

4,23 - 2,91 - 2,19 - 1,72 - 0,90

4,14 (m, 2H), 2,83 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,61 (m, 1H), 0,82 (m, 6H),

4,02 - 2,63 - 2,09 - 1,47 - 0,82

1H), 7,91 , 1H), 7,41 , 1H), 5,11 4,33 - 4,26 3,92 - 3,84 2,30 - 2,22 1,99 - 1,88 1,09 - 0,99 0,74 (m, 6H), 0,69 (dd,

3,92 (m 2,56 (m 2,00 (m 1,37 (m

1H), 1H), 1H), 1H),

J=11,0, 6,7, 6H).

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-

metil-1 -(S)-2-[2-(3-etoxi-

fenil)-acetilamino]-3-oxo-

pentilamino}-5-fenil-

pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) J=8,9, 1H), 7,88 (d, J=8,2, 7,10 (m, 6H), 6,85 - 6,81 (m 1H), 5,08 (s, 1H),

6,71 (m (m, 1H), (m, 1H), (m, 1H), (m, 1H), (m, 4H),

4,10 3,50 2,30 1,77 1,14 ■

4,03 (m, 1H) 3,36 (m, 2H) 2,18 (m, 1H) 1,62 (m, 2H) 0,94 (m, 2H).

ppm = 12,49 (s, 1H), 7,99 (d,

1H), 7,76 - 7,64 (m, 2H), 7,23 - 1H), 6,79 (d, J=7,5, 1H), 6,77 - 4,33 - 4,23 (m, 1H), 4,17 - 4,10 4,01 - 3,88 (m, 3H), 3,88 - 3,81 2,91 - 2,80 (m, 1H), 2,65 - 2,55 2,18 - 2,10 (m, 1H), 2,10 - 1,96 1,50 - 1,39 (m, 1H), 1,39 - 1,24 0,92 - 0,66 (m, 18H).__________

37

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-2-

((S)-2-hidroxi-2-fenil-acetil-

amino)-3-metil-butirilamino]-

5-fenil-pentanoilamino}-3-

metil-pentanoilamino)-3-

metil-butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,48 (s, 1H), 7,92 (d, J=8,4, 2H), 7,80 - 7,63 (m, 2H), 7,39 (d, J=7,5, 2H), 7,36 -

7,10 (m, 8H), 6,37 (s, 1H), 5,08 (d, J=5,3, 1H),

4,34

4,02

2,64

2,10

1,13

6H).

4,25 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 2,56 (m, 1H), 1,88 (m, 2H), 0,99 (m, 1H),

4,24 - 4,16 (m, 1H), 4,15 3,93 - 3,83 (m, 1H), 2,92 2,31 - 2,21 (m, 1H), 2,21 1,78 - 1,63 (m, 1H), 1,52

4,91 (s, 1H), 4,05 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,38 (m, 1H),

0,92 - 0,77 (m, 12H), 0,73 - 0,64 (m,

38

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-4-[(S)-2-(2,2-dietil-

butirilamino)-3-metil-butiril-

amino]-3-hidroxi-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,45 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,73 (d, J=8,8, 2H), 7,21 (d, J=4,4, 4H), 7,17 - 7,08 (m, 1H), 7,03 (s, 1H), 5,14 (s, 1H), 4,31 - 4,19 (m, 1H), 4,07 (t, J=8,1, 2H), 3,98 - 3,88 (m, 1H), 3,86 - 3,80 (m, 1H), 2,94 -

2,82 (m, 1H), 2,67 - 2,59 (m, 1H), 2,28 - 2,18 (m, 1H), 2,18 -

2,10 (m, 1H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 1,98 - 1,88 (m, 1H), 1,77 -

1,66 (m, 1H), 1,52 - 1,39 (m, 7H), 1,13 - 1,00 (m, 1H), 0,92 -

0,70 (m, 18H), 0,70 - 0,59 (m, 9H).

39

ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-

[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-

terc-butoxicarbonilamino-

etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-

metil-1 -(S)-oxo-pentilamino)-

3-hidroxi-5-fenil-pentanoil-

amino]-3-metil-pentanoil-

amino}-3-metil-butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,51 (s, 1H), 7,98 (d, J=9,0, 1H), 7,90 (d, J=8,3, 1H), 7,76 - 7,64 (m, 2H), 7,27 -

7,09 (m, 6H), 7,00 - 6,90 (m, 1H), 6,86 - 6,70 (m, 3H),

(s, 1H), 4,28 (t, J=8,0, 1H), 4,17 - (m, 4H), 3,55 - 3,43 (m, 2H), 3,20 (m, 1H), 2,63 - 2,55 (m, 1H), 2,30 (m, 1H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 1,76 (m, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,33 2H), 0,90 - 0,67 (m, 18H).

4,03 (m, 2H),

- 3,13 (m, 2H),

- 2,20 (m, 1H),

- 1,58 (m, 2H),

3,98

2,90

2,20

1,47

5,08

3,79

2,82

2,11

1,41

1,25 (m, 1H), 1,11 - 0,95 (m,

40

ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-

((3S,4S)-3-hidroxi-4-

{(2S,3S)-3-metil-2-[2-(3-

propoxi-fenil)-acetilamino]-

pentanoilamino}-5-fenil-

pentanoilamino)-3-metil-

pentanoilamino]-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm

(m, 2H), (m, 3H), (m, 1H), (m, 3H),

7,68 (d, J=8,8, 2H), 5,04 (d, J=5,5, 1H),

(m,

(m,

(m,

(m,

1H)

1H)

1H) 18H)

4,17

3,52

2,29

1,76

1,11

4,06 (m, 2H), 3,44 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,62 (m, 4H), 0,98 (m, 2H),

7,23

3,41

3,98

2,91

2,19

1,49

0,98

12,47 (s, 1H),

- 7,09 (m, 6H),

- 3,34 (m, 1H),

- 3,90 (m, 1H),

- 2,79 (m, 1H),

- 2,10 (m, 1H),

- 1,39 (m, 1H),

- 0,92 (m, 3H),

8,03

6,86

4,32

3,90

2,63

2,08

1,38 ■

0,90

7,86

6,72

4,25

3,81

2,55

1,97

1,28

0,71

41

ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-

[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-

amino-etoxi)-fenil]-acetil-

amino}-3-metil-1 -(S)-oxo-

pentilamino)-3-hidroxi-5-

fenil-pentanoilamino]-3-metil-

pentanoilamino}-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,48 (s, 1H), 8,14 - 8,00 (m, 4H), 7,93 (d, J=8,2, 1H), 7,78 - 7,66 (m, 2H), 7,27 - 7,18 (m, 4H), 7,18 - 7,09 (m, 1H), 6,92 - 6,85 (m, 2H), 6,85 - 6,78 (m, 1H), 5,07 (s, 1H), 4,32 - 4,26 (m, 1H), 4,16 - 4,06 (m, 4H), 3,98 - 3,91 (m, 1H), 3,88 - 3,81 (m, 1H), 3,54 - 3,48 (m,

1H), 3,43 - 3,38 (m, 1H), 3,23 - 3,15 (m, 2H), 2,90 - 2,82 (m,

1H), 2,65 - 2,56 (m, 1H), 2,30 - 2,21 (m, 1H), 2,19 - 2,11 (m,

1H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 1,76 - 1,62 (m, 2H), 1,49 - 1,39 (m,

1H), 1,35 - 1,28 (m, 1H), 1,10 - 0,95 (m, 2H), 0,91 - 0,66 (m,

18H).

42

(2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-

metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-

metil-butirilamino)-pentanoil-

amino]-butirilamino}-5-fenil-

pentanoato de [(1S,2S)-1-(1-

etil-propilcarbamoil)-2-metil-

butil]-amida

RMN 1H (500 MHz, (d, J=8,2, 1H), 7,66

- 4,28 (m, 1H), 4,16

- 3,89 (m, 1H), 3,89

- 2,82 (m, 1H), 2,66

- 2,10 (m, 1H), 2,03

- 1,52 (m, 1H), 1,49

- 1,00 (m, 1H), 0,94

DMSO) ppm = 8,70 -

- 7,55 (m, 3H), 7,27 -

- 4,09 (m, 1H), 4,09 ■

- 3,82 (m, 1H), 3,56 ■

- 2,58 (m, 1H), 2,29 ■

- 1,84 (m, 4H), 1,74 ■

- 1,36 (m, 5H), 1,36 ■

- 0,65 (m, 30H).

8,68 (m, 1H), 7,97 7,09 (m, 5H), 4,37 4,01 (m, 1H), 3,98 3,46 (m, 1H), 2,91 2,19 (m, 1H), 2,18 1,64 (m, 1H), 1,64 1,23 (m, 2H), 1,13

(2S,5S)-3-hidroxi-4-[(S)-3- metil-2-((S)-4-metil-2- fenilacetilamino-pentanoil- amino)-1 -oxo-butilamino]-5- fenil-pentanoato de [(1S,2S)- 1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2- metil-butil]-amida

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,26 (d, J=8,2, 1H), 7,73 (d, J=8,8, 1H), 7,67 - 7,54 (m, 3H), 7,29 - 7,09 (m, 10H),

5.30 - 4,83 (m, 1H), 4,37 - 4,29 (m, 1H), 4,18 - 4,09 (m, 1H),

4,08 - 4,01 (m, 1H), 4,01 - 3,90 (m, 1H), 3,90 - 3,82 (m, 1H),

3,57 - 3,36 (m, 3H), 2,90 - 2,82 (m, 1H), 2,66 - 2,57 (m, 1H),

2.31 - 2,19 (m, 1H), 2,18 - 2,11 (m, 1H), 1,94 - 1,80 (m,

J=6,8, 1H), 1,75 - 1,63 (m, 1H), 1,62 - 1,49 (m, 1H), 1,49 - 1,23 (m, 7H), 1,13 - 1,00 (m, 1H), 0,88 - 0,65 (m, 24H).

44

(S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-

hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-

4-metil-2-fenilacetilamino-

pentanoilamino)-butiril-

amino]-5-fenil-pentanoil-

amino}-3-metil-pentanoil-

amino)-3-metil-butirato de

bencilo

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 8,24 (d, J=8,2, 1H), 8,15 (d, J=7,7, 1H), 7,74 - 7,68 (m, 2H), 7,59 (d, J=8,8, 1H), 7,40 - 7,09 (m, 15H), 5,10 (s, 3H), 4,37 - 4,26 (m, 2H), 4,20 - 4,14 (m, 1H), 4,11 - 4,02 (m, 1H), 4,00 - 3,91 (m, 1H), 3,88 - 3,81 (m, 1H), 3,51 - 3,39 (m, 2H), 2,89 - 2,81 (m, 1H), 2,60 (dd, J=13,8, 8,8, 1H), 2,28 - 2,19 (m, 1H), 2,16 - 1,98 (m, 2H), 1,86 (h, J=6,8, 1H), 1,73 - 1,61 (m, 1H), 1,61 - 1,48 (m, 1H), 1,48 - 1,36 (m, 3H), 1,10 - 0,94 (m, 1H), 0,91 - 0,67 (m, 24H).

45

ácido (S)-2-((2S,3S)-2-

{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-

metil-2-((S)-4-metil-2-

fenilacetilamino-pentanoil-

amino)-butirilamino]-5-fenil-

pentanoilamino}-3-metil-

pentanoilamino)-3-metil-

butírico

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 12,49 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,78 - 7,74 (m, 4H), 7,29 - 7,09 (m, 10H), 5,19 (s, 1H), 4,34 - 4,19 (m, 2H),

3,51 - 3,36 (m, 2H),

2,30 - 2,21 (m, 1H),

1,94 - 1,83 (m, 1H),

1,49 - 1,39 (m, 3H),

0,73 (d, 'J=6,8, 6H).

4,12 - 4,00 (m, 2H), 2,95 - 2,87 (m, 1H), 2,21 - 2,13 (m, 1H), 1,77 - 1,67 (m, 1H), 1,10 - 1,03 (m, 1H),

3,93 - 3,82 (m, 2H), 2,66 - 2,58 (m, 1H), 2,09 - 1,98 (m, 1H), 1,62 - 1,49 (m, 1H), 0,91 - 0,75 (m, 18H),

46

(2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3- metil-2-[(S)-4-metil-2-(3- metil-butirilamino)-pentanoil- amino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de ((1S,2S)-1- ciclopentilcarbamoil-2-metil- butil)-amida

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 7,96 (d, J=8,2, 1H), 7,85

(d, J=7,3, 1H),

- 4,90 (m, 1H),

- 3,90 (m, 2H),

- 2,58 (m, 1H),

- 1,84 (m, 4H), 0,95 (m, 1H),

7,68 - 7,55 (m, 4,37 - 4,29 (m, 3,88 - 3,81 (m, 2,28 - 2,19 (m, 1,80 - 1,53 (m,

3H), 1H), 1H), 1H), 6H),

0,92 - 0,65 (m, 24H).

7,28 - 7,11 (m, 4,13 - 4,02 (m, 2,91 - 2,82 (m, 2,17 - 2,09 (m, 1,53 - 1,28 (m,

5H), 2H), 1H), 1H), 7H),

5,20

4,01

2,66

2,05

1,11

47

(3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3- metil-2-[(S)-4-metil-2-(3- metil-butirilamino)-pentanoil- amino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de [(S)-1 -(1 -etil- propilcarbamoil)-2-metil- propill-amida

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 7,96 (d, J=8,1, 1H), 7,65

(d, J=8,7, 1H), 7,62 - 7,53 (m, 3H), 7,28 - 7,09 (m, 5H), 5,05

(d, J=4,6, 1H), 4,38 - 4,29 (m, 1H), 4,13 - 4,01 (m, 2H), 4,01

- 3,83 (m, 2H), 3,58 - 3,46 (m, 1H), 2,91 - 2,82 (m, 1H), 2,62

(dd, J=13,9, 8,8, 1H), 2,33 - 2,20 (m, 1H), 2,19 - 2,10 (m, 1H), 2,05 - 1,83 (m, 5H), 1,64 - 1,50 (m, 1H), 1,50 - 1,23 (m, 6H), 0,95 - 0,63 (m, 30H).

48

(3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-

metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-

metil-butirilamino)-pentanoil-

amino]-butirilamino}-5-fenil-

pentanoato de [(S)-1 -(1 -etil-

propilcarbamoil)-butil]-amida

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 7,97 (d, J=8,2, 1H), 7,74 - 7,63 (m, 2H), 7,56 - 7,48 (m, 2H), 7,28 - 7,11 (m, 5H), 5,25 -

4,84 (m, 1H), 4,38 - 4,30 (m, 1H), 4,23 - 4,14 (m, 1H), 4,09 -

4,02 (m, 1H), 3,99 - 3,84 (m, 2H), 3,56 - 3,45 (m, 1H), 2,89 -

2,81 (m, 1H), 2,68 - 2,57 (m, 1H), 2,27 - 2,17 (m, 1H), 2,16 -

2,08 (m, 1H), 2,05 - 1,84 (m, 4H), 1,65 - 1,53 (m, 2H), 1,53 -

1,19 (m, 9H), 0,92 - 0,68 (m, 27H).

49

(3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3- metil-2-[(S)-4-metil-2-(3- metil-butirilamino)-pentanoil- amino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoato de [(1S,2S)-1-(3- hidroxi-1,1 -dimetil- propilcarbamoil)-2-metil- butil]-amida ____________

RMN 1H (500 MHz, DMSO) ppm = 7,95 (d, J=8,2, 1H), 7,66 - 7,55 (m, 3H), 7,43 (s, 1H), 7,28 - 7,11 (m, 5H), 5,06 (d, J=5,1, 1H), 4,37 - 4,27 (m, 2H), 4,14 - 4,01 (m, 2H), 3,98 - 3,88 (m, 1H), 3,88 - 3,81 (m, 1H), 3,47 - 3,40 (m, 2H), 2,91 -

2,81 (m, 1H), 2,65 - 2,57 (m, 1H), 2,28 - 2,19 (m, 1H), 2,16 -

2,09 (m, 1H), 2,03 - 1,70 (m, 6H), 1,70 - 1,51 (m, 2H), 1,50 -

1,36 (m, 3H), 1,22 (s, 6H), 1,10 - 0,95 (m, 1H), 0,91 - 0,71

(m, 24H).___________________'____________________________

Ejemplo 2: Elaboración de los compuestos según la invención

Los compuestos según la invención se pueden representar, por ejemplo, de acuerdo con los métodos conocidos por el especialista mediante las siguientes secuencias sintéticas. Los ejemplos dados describen la síntesis sin 5 limitarla a los ejemplos.

5

10

15

20

25

Secuencia sintética:

k2^i

'i. |3

imagen13

OH

O OH O Acoplamiento con DAPECI

A

I^'2^I

Ii

imagen14

A^L^fñY HCI, dioxano

OH O

|/'2^|

11 |3

R1

HCI

h2n

imagen15

X+LrhñArH

imagen16

11 |3

OH

R1

O

OH O

A2+L2-jñY - x^Li-jmArN^VH

Acoplamiento con HATU o

imagen17

imagen18

A2+L2_lñY'

OH O

X' o Y' representan grneos X o Y proteg idos, dado el caso, mediante u n grppe protector

Disociación de los grupos protectores

" X_HrLArH

R1

O

K"I^I

I1 |3

imagen19

OH O

A2+L2"lñY

A partir del componente de didroxiestatina protegido A se realiza la formación del nuevo enlace peptídico con aminas, derivados de aminoácido, dipéptidos, tripéptidos o tetrapéptidos (generalmente protegidos en el C terminal) correspondientes con ayuda de los métodos de acoplamiento amídico conocidos por el especialista como, por ejemplo, un acoplamiento con DAPECI.

En el segundo paso, el grupo protector BOC se disocia Oajo condiciones adecuadas (p. ej. mediante HCl/dioxano o AFTA/DCM) y el componente obtenido se acopla con un ácido, derivados de aminoácido, dipéptidos, tripéptidos o tetrapéptidos (generalmente protegidos en el C terminal) correspondientes. En este paso, se prefieren en especial reactivos de acoplamiento que sean adecuados para suprimir una racemieación como, por ejemplo, HATU o reactivos similares. En otros pasos se puede seguir con la disociación de otros grupos protectores, por ejemplo, la didrogenólisis de grupos protectores Z o de ésteres bencílicos para obtener el ácido libre en presencia de Pd/C.

De forma análoga al procedimiento de elaboración descrito previamente, se pueden elaborar, por ejemplo, los siguientes compuestos sin limitar la aplicabilidad a estos componentes.

Ejemplo 3: elaboración de (A8): ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metiI-2-[(S)-4-metiI-2-(3-

metiI-butiriIamino)-pentanoiIamino]-butiriIamino}-5-feniI-pentanoiIamino)-3-metiI-pentanoiIamino]-3-metiI-

butírico

Paso 1:

imagen20

puiral

imagen21

imagen22

quiral

+

OH

O

OH O

OH O

O

En un matrae se disuelven en un baño de hielo 5,000 g de ácido (3S,4S)-4-terc-OutoxicarOonilamino-3-didroxi-5- fenil-pentanoico, 6,364 g de (S)-2-((2S,3S)-2-amino-3-metil-pentanoií-amino)-3-metil-butirato de bencilo (en forma de didrocloruro), 1,092 g de hidrato de 1-didroxibeneotriaeol, 3,664 ml de 4-metilmorfolina y 3,099 g de didrocloruro

10

de N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (DAPECI) en aproximadamente 50 ml de DMF y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se vierte sobre una solución saturada de bicarbonato sódico y se agita 15 min. El precipitado formado se separa por aspiración, se disuelve en DCM y primero se lava varias veces con una solución de bicarbonato y luego con una solución de ácido fórmico diluida y agua. Se elimina el disolvente, se recoge el residuo en DMF, la solución se vierte en un tampón de ácido cítrico y el residuo formado se separa por aspiración. Tras dos ciclos de reprecipitación y secado se obtienen 7,380 g de (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-terc- butoxicarbonilamino-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo en forma de sólido blanco. (Rendimiento 74,6 %, pureza 99 %). MS-FAB (M + H+ - BOC) = 512,7 Rf (método polar): 2,66 min. Paso 2:

VN

imagen23

HCI en dioxano

imagen24

-N = n—N

H H II H

O O

HN

O

2

O

O

OH O

HCl

O

OH

En un matraz se disuelven 7,380 g de (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-terc-butoxicarbonilamino-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo en 15 ml de una solución de HCl en dioxano (4 M) en un baño de hielo y se agita 5 h a TA. El HCl excedente se elimina en una bomba de vacío tipo Venturi, el 15 disolvente se elimina al vacío y el residuo se liofiliza durante la noche.

Para eliminar los restos de dioxano, el residuo se lava con heptano, se separa por aspiración y se seca varias veces. Se obtienen 6,420 g de (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-amino-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoil- amino]-3-metil-butirato de bencilo en forma de sólido blanco. (Rendimiento 97%, pureza 99 %). MS-FAB (M+H+) = 512,3 Rf (método polar): 1,76 min.

20 Paso 3:

imagen25

quiral

-n =

- H H

OH O O

imagen26

imagen27

quiral

-N ppN O O O

-N =>1—N

H II

O O O O

HATU

O

NH

O

O

O

O

Cl

En un matraz en un baño de hielo se disuelven 3,500 g de (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-amino-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo (en forma de hidrocloruro), 2,199 g de ácido (S)- 25 3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butírico y 2,162 ml de etildiisopropilamina en aproximadamente 30 ml de DMF, se mezcla con 2,659 g de HATU (C10H15N6O*PF6) y se agita a Ta durante la noche. La mezcla de reacción amarilla se vierte sobre una solución saturada de bicarbonato sódico y se agita 15 min. El precipitado formado se separa por aspiración, se mezcla con agua y ácido fórmico diluido, se vuelve a separar por aspiración, se lava con agua y se seca. El residuo se trata con metanol en un baño de ultrasonidos y se 30 separa por aspiración. Este proceso se vuelve a repetir dos veces. Se obtienen 3,400 g de (S)-2-[(2S,3S)-2- ((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoil- amino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo en forma de sólido blanco. (Rendimiento 65 %). MS-FAB (M + H+) = 809,0 Rf (método polar): 2,71 min.

De forma análoga a este paso se pueden preparar, por ejemplo, los compuestos n.° 1 -3, 7, 10-13, 16, 18, 19, 21 -23, 35 32, 34, 35 de la Tabla 2 (sin limitar el método a estos compuestos).

Paso 4:

imagen28

quiral

H2/Pd/C

O

O

O

O O

O

O

imagen29

OO

O

N

imagen30

OO

imagen31

quiral

O

O

En un recipiente adecuado se hidrogenan 3,400 g de (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4- 40 metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil- butirato de bencilo en presencia de 1,300 g de Pd/C (5 % Pd, húmedo) en 70 ml de tHf a TA a presión normal hasta que el reactante se haya transformado completamente (durante la noche). La mezcla de reacción se diluye con agua y THF y se separa por aspiración para eliminar el catalizador. El filtrado se concentra al vacío y se liofiliza para eliminar completamente el agua. El residuo se trata con heptano en un baño de ultrasonidos, se separa por 45 aspiración y se seca. Se realizan tratamientos análogos con dioxano y luego con MTBE. Se obtienen 2,45 g de ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butiril-

5

10

15

20

25

30

amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico en forma de sólido blanco (rendimiento 82 %). MS-FAB (M + H+) = 718,9 Rf (método polar): 2,27 min.

De forma análoga a este paso se pueden preparar los compuestos n.° 4-6, 8, 9, 14, 15, 17, 20, 24-31, 33, 36-40 de la Tabla 2.

Ejemplo 4: Elaboración de (A41): ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-

metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-

butírico

imagen32

imagen33

OH O

O

O

imagen34

En un matraz se disuelven 300 mg de ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-terc-butoxicarbonilamino- etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-metil-1-(S)-oxo-pentilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3- metil-butírico en 5 ml de una solución de HCl en dioxano (4 M) en un baño de hielo y se agita 5 h a TA. El HCl excedente se elimina en una bomba de vacío tipo Venturi, el disolvente se elimina al vacío y el residuo se liofiliza durante la noche. Rendimiento del hidrocloruro: cuantitativo.

Para obtener la base libre, una pequeña porción del residuo se disuelve en DMF y esta solución se añade a una solución de bicarbonato sódico al 10 %. El precipitado resultante se separa por aspiración, se lava con agua y se seca. Se obtiene ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-amino-etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-metil-1-(S)-oxo- pentilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico en forma de sólido blanco.

MS-FAB (M+H+) = 712,9 Rf (método polar): 1,70 min.

Si hay presentes varios grupos protectores ortogonales, también se puede invertir el orden de disociación de los grupos protectores.

Método (HPLC-MS):

Chromolith Speed Rod RP 18e 50-4,6 mm LCMS; Polar.m, 2,4 ml/min, 220 nm, tampón A HCOOH/H2O 0,05 %, tampón B HCOOH/ACN 0,04 %, 0,0-2,8 min tampón B 4 %-100 %; 2,8-3,3 min tampón B 100 % 3,3-3,4 min tampón B 100 %-4 %

Abreviaturas:

DCM = diclorometano

DMA = dimetilacetamida

DMF = dimetilformamida

AE = acetato de etilo

MTBE = metil-ferc-butiléter

EP = éter de petróleo

TA = temperatura ambiente

AFTA = ácido trifluoroacético

Ejemplo 4: Ensayo de fluorescencia in-vitro para la identificación de inhibidores de catepsina D

Para la identificación de moduladores de la actividad de la catepsina D se llevó a cabo una prueba enzimática continua con un péptido sintético que presenta un grupo fluorescente (MCA=(7-metoxicoumarin-4-il)acetilo) que se extingue mediante transferencia de energía de un grupo Dpn (2,4-dinitrofenilo) de la misma molécula en placas de 5 microtitulación nb de 384 pocillos de Greiner. La disociación del sustrato peptídico mediante catepsina D provoca

un aumento de la intensidad de fluorescencia. Para determinar la eficacia de las sustancias se comparó el aumento de intensidad de fluorescencia en función del tiempo en presencia de la sustancia con el incremento de fluorescencia en función del tiempo en ausencia de las sustancias. Como sustancia de referencia se empleó pepstatina A (Sigma-Aldrich). Como sustrato se utilizó MCA-GKPILFFRLK(Dnp)d-R-NH2 (Enzo Life Sciences, 10 Lorrach, Alemania). Como enzima se empleó catepsina D aislada de hígado humano (Sigma-Aldrich) en una concentración final de 1,4 nM. La prueba se realizó en tampón sodio-acetato 100 mM, DMSO al 1,25 % (v/v), Chaps al 0,25 % (p/v), pH 5,5. Por cada 4 pl de solución de catepsina D se añadieron 2 pl de solución de la sustancia con concentraciones de sustancia diluidas en serie y se incubó 10 min a temperatura ambiente. La reacción se inició mediante la adición de 2 pl de solución de sustrato (concentración final 5 pM). Tras realizar una medición de 15 fluorescencia inicial (longitud de onda de excitación 340 nm/longitud de onda de emisión 450 nm) con un lector

Envision Multilabel (Perkin Elmer) se incubó la reacción 60 min a temperatura ambiente. A continuación se midió la cantidad de fragmento peptídico disociado durante el tiempo de reacción mediante la determinación del aumento de intensidad de fluorescencia a 450 nm (longitud de onda de excitación 340 nm).

Todos los compuestos de la Tabla 2 del Ejemplo 1 presentan un valor CI50 inferior a 100 nM (véase Tabla 2, 20 Ejemplo 1, penúltima columna).

Ejemplo 5: Ensayo con explante de cartílago

Para estudiar el efecto de potenciales inhibidores de catepsina D sobre la degradación condral se utiliza un modelo inducido por pH que se basa en explantes bovinos. Así, el valor de pH del medio en el que se cultivan los explantes se ajusta al valor de pH patofisiológico de una rodilla artrótica. Este valor de pH es de pH 5,5. A continuación, en 25 este modelo ex vivo se estudian potenciales inhibidores de catepsina D respecto a su eficacia en cuanto a un bloqueo del proceso de debilitamiento condral. Si el cartílago se destruye, se liberan glucosaminoglucanos (GAG) en el sobrenadante del cultivo celular. La cantidad de GAG liberados puede determinarse cuantitativamente con ayuda de DMMB (hidrocloruro de azul de dimetilmetileno). En la comprobación de GAG sulfatados con hidrocloruro de azul de dimetilmetileno se aprovecha la reducción de la absorción a 633 nm. Puesto que también se puede 30 trabajar a concentraciones muy bajas de GAG, no precipita ningún complejo colorante/GAG ni tras una larga incubación de DMMB con GAG, como sucede en otros métodos de medición en ocasiones solo al cabo de poco tiempo. Para determinar la concentración se realiza simultáneamente una gráfica de referencia con sulfato de condroitina. Mediante los valores de GAG se pueden calcular los valores CI50, es decir una concentración a la que una sustancia muestra un 50 % de su eficacia.

35 Soluciones:

Medio de incubación, pH 7,4:

DMEM sin FBS, adición de Pen/Strep al 1 % y 30 pg/ml de ácido ascórbico, el medio no se conserva.

Medio de incubación, pH 5,5:

DMEM sin FBS, el valor de pH se ajusta mediante la adición de MES y se controla con un pH-metro, adición de 40 Pen/Strep al 1 % y 30 pg/ml de ácido ascórbico.

Soluciones para la medición de GAG:

Solución colorante con DMMB (V = 500 ml):

Disolver 8 mg de DMMB (azul de dimetilmetileno) en 2,5 ml de etanol + 1 g de formiato sódico+ 1 ml de ácido fórmico, enrasar a 500 ml con agua bidest.

45 Medio de incubación: FBS (medio sin FBS)

Soluciones de sulfato de condroitina (curva de referencia)

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Lote de soluciones estándar con las siguientes concentraciones: 50 gg/ml; 25 gg/ml; 12,5 gg/ml; 6,25 gg/ml; 3,125 gg/ml; 1,56 gg/ml; 0,78 gg/ml así como un blanco del medio. El lote de la solución estándar se realiza en el medio en el que también se ha llevado a cabo el estudio.

1. ) Ejecución: degradación condral inducida por pH de explantes bovinos

Primero se preparan los explantes bovinos. La inducción de la degradación condral se realiza en placas de 96 pocillos. Para ello, se cultiva un explante por pocillo. Se realiza la adición en cada uno de 200 gl de DMEM (medio de incubación pH 5,5) sin FBS + 30 gg/ml de ácido ascórbico. Como control negativo se incuban explantes (n= 4) a pH 7,4 (sin FBS). Este control no entra en el cálculo de los datos, sino que asegura que la modificación del valor de pH tiene el efecto deseado en la liberación de GAG. En este punto se realiza la adición de las sustancias de estudio. No se realiza ninguna incubación previa de los explantes. Los explantes se cultivan con las sustancias correspondientes 3 días en una incubadora a 37 °C y 7,5 % de CO2.

2. ) Desarrollo de la incubación

Para estudiar el efecto de los inhibidores de catepsina D en la liberación de GAG (glucosaminoglucano), se utilizan las sustancias en las concentraciones deseadas y se cultivan durante 3 días. Para ello, los compuestos de estudio se ensayan en un primer experimento a una concentración de 1 gM y DMSO al 1 %. Las sustancias que tienen un efecto de >50 % en la liberación de GAG (que corresponde a <50 % del control en el Assay Explorer), se ensayan en un experimento posterior a 100 nM y DMSO al 1 %. Las sustancias que en estas condiciones tienen un efecto de >50 % en la liberación de GAG (que corresponde a <50 % del control en el Assay Explorer), se ensayan en una relación entre concentración y eficacia. Para ello se estudian los compuestos en las siguientes concentraciones: 30 gM, 10 gM, 3 gM, 1 gM, 0,3 gM, 0,1 gM, 0,03 gM, 0,01 gM.

Como control positivo se utiliza pepstatina A con una concentración de 0,01 gM. La ventana de eficacia (assay window) se define mediante el control (pH 5,5), definido como un 0 % de efecto, y el control pH 5,5 + 0,01 gM de pepstatina A, definido como un 100 % de efecto. Tras 3 días de incubación, se recogen los sobrenadantes del cultivo celular y se conservan a -20 °C o se miden directamente. Para ello se mide fotométricamente la cantidad de GAG liberado.

Se expresan para concentraciones de 1 gM y 100 nM del efecto (valor 1) de la sustancia correspondiente en % referido al control positivo (pH 5,5 + 0,01 gM de pepstatina A) y el control negativo (pH 5,5). El valor representa el valor medio de 4 replicados. Para determinar una relación entre concentración y efecto se expresa un valor CI50 en el banco de datos (Assay Explorer).

4. ) Medición

Los sobrenadantes del cultivo celular (200 gl) se miden directamente o bien se conservan a -20 °C. Para garantizar una determinación exacta de la concentración (gg/ml de GAG en el sobrenadante) de GAG, los valores medidos deben encontrarse en la zona lineal de la curva de referencia. Para garantizar esto, se añaden rutinariamente distintas diluciones (1/5, 1/10, 1/20, 1/40). Las diluciones se preparan con medio y se añaden (15 gl) de modo automatizado (Hamilton) en una placa de 384 pocillos. De un modo igualmente automatizado (o con pipetas multicanal) se añaden 60 gl de solución de DMMB. Se produce una reacción de coloración rápida que seguidamente se mide a 633 nm con un lector de placas (p. ej. Envision).

Según la cantidad de muestra disponible, se lleva a cabo al menos una determinación doble.

Los datos se obtienen del lector MTP en forma de archivos csv o xls y en base a este formato (xls) se guardan como datos primarios o se preparan para calcular el efecto porcentual del compuesto correspondiente.

5. ) Controles de calidad

Como control para la inducción de la degradación condral inducida por el pH se incuban 4 explantes a pH 7,4. Este valor corresponde al valor de pH fisiológico del cartílago y, por lo tanto, en este caso no se debe esperar ningún efecto en la liberación de GAG. Estos valores de GAG (gg/ml de sobrenadante) siempre son, por lo tanto, significativamente más bajos que los valores de GAG en una incubación con pH 5,5.

Otro control que sirve para comprobar el experimento y también es importante para la definición de la ventana de eficacia, es el control con pepstatina (pH 5,5 + 0,01 gM de pepstatina A). Esta sustancia bloquea de forma no específica la actividad de la mayoría de proteasas y, por lo tanto, establece el efecto máximo posible de un compuesto.

(1) Klompmakers, A. & Hendriks, T. (1986) Anal. Biochem. 153, 80-84, Spectrophotometric microassay for sulfated glycosaminoglycans using a laser densitometer.

(2) Groves, P.J. y col. (1997) Anal. Biochem. 245, 247-248

Use of Polyvinyl Alcohol to Stabilize Binding of Sulfated Glycosaminoglycans to Dimethylmethylene Blue.

5 6.) Resultados

Con esta prueba se determinaron los valores CI50 de algunos compuestos de la Tabla 2 del Ejemplo 1, estos se presentan en la Tabla 2 del Ejemplo 1 en la última columna.

Ejemplo 6: Estudio del efecto antihiperalgésico en animales

Para inducir una reacción inflamatoria se inyectó intraarticularmente por un lado una solución de carragenano (CAR, 10 1 %, 50 pl) en una articulación de rata. El lado no inyectado se consultó para fines de control. Se utilizaron seis

animales por grupo. La hinchazón se determinó mediante un micrómetro (medial-lateral en la articulación de la rodilla) y la hiperalgesia térmica se determinó mediante una fuente de luz de infrarrojos dirigida de acuerdo con el método de Hargreaves (Hargreaves y col. 1988) en la parte inferior del pie. Puesto que el lugar de la inflamación (articulación de la rodilla) difiere del lugar de la medición (parte inferior de la pata), en este caso se habla de 15 hiperalgesia térmica secundaria, cuyos mecanismos son importantes para encontrar analgésicos eficaces.

Descripción del experimento de hiperalgesia térmica (prueba de Hargreaves): El animal de experimentación se coloca en una cámara de plástico sobre un cristal de cuarzo. Antes del experimento, primero se le dan al animal de experimentación aproximadamente entre 5 y 15 minutos de tiempo para que se acostumbre al entorno. En cuanto el animal de experimentación, tras la fase de exploración, ya no se mueve tan a menudo (fin de la fase de 20 exploración), se coloca la fuente de luz de infrarrojos, cuyo foco se encuentra en el nivel del suelo de cristal, directamente debajo de la pata trasera que debe estimularse. En este momento se inicia una ejecución del experimento pulsando un botón: a través de los infrarrojos se produce el aumento de temperatura de la piel de la pata trasera. El experimento se termina o bien porque el animal de experimentación levanta la pata trasera (como expresión de haber alcanzado el umbral de dolor) o bien porque se alcanza una temperatura máxima fijada 25 mediante el apagado automático de la fuente de luz de infrarrojos. Mientras el animal de experimentación está sentado quieto, se registra la luz que se refleja de la pata. Si retira la pata, se interrumpe esta reflexión, con lo cual se apaga la fuente de luz de infrarrojos y se registra el tiempo desde el encendido hasta el apagado. El aparato está calibrado de modo que la fuente de luz de infrarrojos aumenta la temperatura de la piel hasta aproximadamente 45 grados Celsius en 10 s (Hargreaves y col. 1988). Para el experimento se utiliza un aparato de la empresa Ugo 30 Basile fabricado para esta finalidad.

El CAR se compró a Sigma-Aldrich. La aplicación del inhibidor de catepsina D específico, el compuesto n.° 23 (del Ejemplo 1, Tabla 2, ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-amino-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)- pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico) se realizó intraarticularmente 30 minutos antes del CAR. Como control positivo se utilizó 10 pg/articulación de triamcinolona 35 (TAC) y como control negativo se utilizó el disolvente (vehículo). La hiperalgesia se indica como la diferencia de los tiempos de retirada entre la pata inflamada y la no inflamada.

Resultado: El TAC está en situación de reducir la hinchazón inducida por CAR, pero no el inhibidor de catepsina D específico. A diferencia de esto, el inhibidor de catepsina D específico pudo reducir la magnitud de la hiperalgesia térmica según la dosis (véase Figura 2).

40 Valoración: Se ha podido demostrar que el compuesto n.° 23 ejerce un efecto antihiperalgésico. Esto puede postularse porque el compuesto n.° 23 no ha demostrado ningún efecto en la hinchazón inflamatoria y, por lo tanto, en el desencadenante de la hiperalgesia. Por consiguiente, puede aceptarse que el compuesto n.° 23 muestra un efecto reductor del dolor en humanos.

Ejemplo 7: Estabilidad de los compuestos según la invención en líquido sinovial bovino

45 1.) Obtención de líquido sinovial bovino

Para la preparación de explantes bovinos (para la cámara de difusión u otras pruebas) se utilizan o bien pezuñas de vacuno (articulaciones metacarpianas) o bien rodillas de vacuno. El líquido sinovial se puede obtener de las dos articulaciones. Para ello, en el orificio de la articulación se retira con cuidado el líquido sinovial de la articulación con una jeringa de 10 ml y una cánula y se vierte en recipientes Eppendorf de 2 ml ya listos. Los recipientes Eppendorf 50 se rotulan según el animal (identificación del vacuno disponible). Para ello se debe prestar atención a que en la

preparación de la articulación no entre sangre en la cavidad articular. Si es así, el líquido sinovial se tiñe de rojo y, por lo tanto, debe desecharse. El líquido sinovial en principio es muy viscoso y tiene un color de transparente a amarillento. Se documenta la extracción junto con un análisis macroscópico del líquido sinovial.

2. ) Planteamiento del análisis de estabilidad de las sustancias en LS

5 Para estudiar la estabilidad de los compuestos individuales se mezcla un conjunto de 4 líquidos sinoviales bovinos distintos. Para ello se utiliza aproximadamente 1 ml de cada LS. La mezcla se coloca directamente en un recipiente de cristal de 5 ml. Los LS se mezclan concienzuda pero cuidadosamente. Con ello, no deben formarse burbujas de aire ni espuma. Para ello se utiliza un aparato tipo vórtex al nivel mínimo. Los compuestos de estudio se analizan en una concentración inicial de 1 pM (si no se requiere de otro modo). Tras la adición de la sustancia, se vuelve a 10 realizar una mezcla concienzuda y cuidadosa del lote. Para el control óptico se fotografían todos los lotes de LS y las fotografías se guardan en la carpeta eLabBio del experimento correspondiente. La Figura 1 muestra a modo de ejemplo una documentación fotográfica de este tipo. Los lotes se incuban durante 48 h a 37 °C y CO2 al 7,5 % en una incubadora.

3. ) Toma de muestras

15 La toma de muestras se realiza de acuerdo con los tiempos previamente consensuados (si no se requiere de otro modo, véase abajo). Para ello, se toman en cada momento 200 pl del LS de la mezcla y se transfieren directamente a un recipiente Eppendorf "Low-binding" de 0,5 ml. Se utilizan recipientes Eppendorf "Low-binding" para minimizar una interacción de las sustancias con el plástico de los recipientes. En el recipiente Eppendorf ya se habían añadido 200 pl de acetonitrilo, de modo que luego se obtiene una mezcla 1 + 1 del LS. Esto facilita el posterior 20 análisis, pero justo tras la adición del LS puede producirse la precipitación de la proteína. Esto debe anotarse en el protocolo. Justo tras la adición de la sustancia se toma la muestra 0 h. Esto corresponde al valor 100 % del cálculo de la estabilidad. Lo ideal sería que aquí se volviera a encontrar la concentración utilizada. Las muestras pueden congelarse a -20 °C.

• 0 h

25 • 6 h

• 24 h

• 48 h

Como control negativo se utiliza LS sin sustancia. Como control positivo se utiliza LS con 1 pM de sustancia. Esto corresponde al valor 0 h y, por lo tanto, a una estabilidad del 100 %.

30 La conservación de las muestras se lleva a cabo en recipientes Eppendorf "Low-binding" a -20 °C. A continuación las muestras se analizan cuantitativamente.

4. ) Procesamientos de los datos

Las concentraciones medidas (ng/ml) se representan en una gráfica (GraphPad Prism®) en función del tiempo. Con esto se determina la estabilidad porcentual de la sustancia. Como valor 100 % se utiliza el valor de partida en el LS 35 en el momento 0 h. Los datos se guardan bajo el correspondiente número de experimento en eLabBio y se comunican al banco de datos MSR (en forma de estabilidad porcentual de acuerdo con los correspondientes tiempos de incubación).

5. ) Resultados

Todos los compuestos analizados permanecen estables. (Véase la Tabla 2 del Ejemplo 1).

40 Ejemplo 8: Ensayo de fluorescencia in vitro para la identificación de actividad inhibidora de renina

Para la identificación de moduladores de la actividad de renina se llevó a cabo una prueba enzimática continua con un péptido sintético que presenta un grupo fluorescente Edans (=(5-(aminoetil)aminonaftalen sulfonato) que se extingue mediante transferencia de energía de un grupo dabcilo (4’-dimetilaminoazo-benceno-4-carboxilato) de la misma molécula en placas de microtitulación de 384 pocillos de Greiner. La disociación del sustrato peptídico 45 mediante renina provoca un aumento de la intensidad de fluorescencia. Para determinar la eficacia de las sustancias se comparó el aumento de intensidad de fluorescencia en función del tiempo en presencia de la sustancia con el incremento de fluorescencia en función del tiempo en ausencia de las sustancias. Como sustancia

5

10

15

20

25

30

de referencia se empleó el inhibidor de renina 2 (Z-Arg-Arg-Pro-Phe-His-Sta-Ile-His N-Boc-Lys metil éster Z) (Sigma-Aldrich). Como sustrato se utilizó el sustrato I FRET renina (DABCYL - g - Abu - Ile - His - Pro - Phe - His - Leu - Val - Ile - His - Thr - EDANS) (Anaspec, Fremont CA, EE. UU.). Como enzima se utilizó renina humana recombinante (Proteos, Kalamazoo, MI, EE. UU.) en una concentración final de 10 nM. La prueba se realizó en tampón Mops 50 mM, DMSO al 1,5 % (v/v), Igepal® al 0,1 % (p/v), pH 7,2, BSA al 0,5 % (p/v). Por cada 4 gl de solución de renina se añadieron 2 gl de solución de la sustancia con concentraciones de sustancia diluidas en serie y se incubó 15 min a temperatura ambiente. La reacción se inició mediante la adición de 4 gl de solución de sustrato (concentración final 5 gM). Tras realizar una medición de fluorescencia de partida (longitud de onda de excitación 340 nm/longitud de onda de emisión 495 nm) con un lector Envision Multilabel (Perkin Elmer) se incubó la reacción 60 min a 37 °C. A continuación se midió la cantidad de fragmento peptídico disociado durante el tiempo de reacción mediante la determinación del aumento de intensidad de fluorescencia a 495 nm (longitud de onda de excitación 340 nm).

Resultado: Todos los compuestos medidos tienen una CI50 de la selectividad de renina >30 gM (véase la Tabla 2 del Ejemplo 1)

Ejemplo 9: Viales para inyección

Una solución de 100 g de un compuesto de fórmula I y 5 g de hidrogenofosfato disódico en 3 l de agua bidestilada se ajusta a un valor de pH de 6,5 con ácido clorhídrico 2 n, se filtra de forma estéril, se envasa en viales para inyección, se liofiliza bajo condiciones estériles y se cierra de forma estéril. Cada frasco para inyección contiene 5 mg de un compuesto de fórmula I.

Ejemplo 10: Disolución

Se prepara una solución de 1 g de un compuesto de fórmula I, 9,38 g de NaH2PO4 2 H2O, 28,48 g de Na2HPO4- 12 H2O y 0,1 g de cloruro de benzalconio en 940 ml de agua bidestilada. Se ajusta a pH 6,8, se enrasa a 1 litro y se esteriliza mediante irradiación. Esta solución se puede emplear en forma de colirio.

Ejemplo 11: Ungüento

Se mezclan 500 mg de un compuesto de fórmula I con 99,5 g de vaselina bajo condiciones asépticas.

Ejemplo 12: Ampollas

Se filtra de manera estéril una solución de 1 kg de un compuesto de fórmula I en 60 litros de agua bidestilada, se envasa en ampollas, se liofiliza bajo condiciones estériles y se cierra de manera estéril. Cada ampolla contiene 10 mg de un compuesto de fórmula I.

Claims (12)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   REIVINDICACIONES

   1. Compuestos de la fórmula I

   R1

   x+L^mA-N

   imagen1

   imagen2

   R2

   O

   OH O

   imagen3

   A^LÍY

   O

   I

   en la que

   Ii, I2, I3, I4, I5 son independientemente entre sí N o CR’,

   T es un fenilo, bifenilo o naftilo no sustituido o sustituido una, dos, tres o cuatro veces con R, o un

   heterociclo de uno o dos ciclos saturado, insaturado o aromático con 1 hasta 4 átomos de N, O y/o S que puede estar sustituido una, dos o tres veces con R, =S, =NR’ y/o =O,

   R1 es iso-propilo, 2-butilo o iso-butilo,

   R2 es n-propilo, iso-propilo, 2-butilo o iso-butilo,

   Ai es leucina o un enlace sencillo,

   A2 es valina, ,

   n es 0,

   Y es OH u O-bencilo,

   m es 1,

   Li es -(C=O)-,

   X es un alquilo lineal o ramificado con 1-10 átomos de C no sustituido o sustituido una o dos veces

   con T, o un alquilo cíclico con 3-10 átomos de C en el que uno, dos o tres grupos CH2, independientemente entre sí, pueden estar sustituidos por O,

   L2 es un enlace sencillo,

   R,R’ son independientemente entre sí H, un alquilo lineal o ramificado con 1-10 átomos de C no

   sustituido o sustituido una, dos o tres veces con =S, =NR, =O, Hal, OH, NH2, SO2CH3, SO2NH2, CN, CONH2, NHCOCH3 y/o NHCONH2 en el que uno, dos o tres grupos CH2 independientemente entre sí pueden estar sustituidos por O, S, SO, SO2, NH, NCH3, -OCO-, -NHCONH-, -NHCO-, - NRSO2A-, -COO-, -CONH-, -NCH3CO-, -CONCH3-, -C=C- y/o grupos -CH=CH y/o también de 1 a 20 átomos de H pueden estar sustituidos por F y/o Cl, o un alquilo cíclico con 3-7 átomos de C no sustituido o sustituido una, dos o tres veces con =S, =NR, =O, OH, NH2, SO2CH3, SO2NH2, CN, CONH2, NHCOCH3, y/o NHCONH2 en el que uno, dos o tres grupos CH2 independientemente entre sí pueden estar sustituidos por O, S, SO, SO2, NH, NCH3, -OCO-, -NHCONH-, -NHCO-, - NRSO2A-, -COO-, -CONH-, -NCH3CO-, -CONCH3- y/o por grupos -CH=CH y/o también de 1 a 11 átomos de H pueden estar sustituidos por F y/o Cl,

   Hal es F, Cl, Br o I,

   así como sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40
2. 2. Compuestos contemplados en la reivindicación 1 en los que

   R1 es iso-propilo con una configuración S del centro quiral al que está enlazado el grupo iso-propilo,

   R2 es n-propilo, iso-propilo o 2-butilo con una configuración S del centro quiral al que está enlazado el grupo

   n-propilo, iso-propilo o 2-butilo,

   A1 es S-leucina o un enlace sencillo y

   A2 es S-valina

   así como sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas

   las proporciones.
3. 3. Compuestos de acuerdo con la reivindicación 1 o 2

   a) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(3-fenil-propionilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

   b) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(4-fenil-butirilamino)-butirilamino]-5-fenil-pentanoil- amino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

   c) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-iloxi)-propionilamino]-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   d) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(3-fenil-propionilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   e) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(4-fenil-butirilamino)-butirilamino]-5-fenil-

   pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   f) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-metil-2-(naftalen-2-iloxi)-propionilamino]- butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   g) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(naftalen-2-iloxi)-acetilamino]-butirilamino}-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   h) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoil- amino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   i) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(R)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoil- amino]-butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   j) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   k) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(4-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   l) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   m) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(3-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   n) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi- 5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   o) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(4-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   p) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-2-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

   q) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   r) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-5-trifluorometoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butiril- amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   s) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-acetilamino]-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   t) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(3-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5- fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   u) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-1-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

   v) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   w) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[(bifenil-3-carbonil)-amino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   x) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-5-trifluorometoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil- butirilamino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   y) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-2-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   z) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-4-[(S)-2-(3-terc-butoxi-benzoilamino)-3-metil-butirilamino]-3-hidroxi-5-fenil- pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   aa) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[2-(3-fenoxi-fenil)-acetilamino]-butirilamino}-5-

   fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   bb) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-2-[2-(2-metoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-5-

   fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   cc) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3,4-dimetil-fenoxi)-acetilamino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-

   5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   dd) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-(2-naftalen-1-il-acetilamino)-butirilamino]-5-fenil-

   pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   ee) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[(bifenil-3-carbonil)-amino]-3-metil-butirilamino}-3-hidroxi-5-fenil-

   pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   ff) (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-difenilacetilamino-3-metil-butirilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil-

   amino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butirato de bencilo

   gg) ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-difenilacetilamino-3-metil-butirilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoil-

   amino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico

   hh) (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-4-{(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-metil-1-(S)-oxo-pentilamino}-3-hidroxi-5-

   fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butirato de bencilo

   ii) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-5-fenil-

   pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

   jj) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-metil-1-(S)-2-[2-(3-etoxi-fenil)-acetilamino]-3-oxo-pentil-

   amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   kk) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-2-((S)-2-hidroxi-2-fenil-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-5- fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   ll) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-4-[(S)-2-(2,2-dietil-butirilamino)-3-metil-butirilamino]-3-hidroxi-5-fenil-

   pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   mm) ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-terc-butoxicarbonilamino-etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-

   metil-1-(S)-oxo-pentilamino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico

   nn) ácido (S)-2-[(2S,3S)-2-((3S,4S)-3-hidroxi-4-{(2S,3S)-3-metil-2-[2-(3-propoxi-fenil)-acetilamino]-pentanoil-

   amino}-5-fenil-pentanoilamino)-3-metil-pentanoilamino]-3-metil-butírico

   oo) ácido (S)-2-{(2S,3S)-2-[(3S,4S)-4-((S)-2-{2-[3-(2-amino-etoxi)-fenil]-acetilamino}-3-metil-1-(S)-oxo-pentil-

   amino)-3-hidroxi-5-fenil-pentanoilamino]-3-metil-pentanoilamino}-3-metil-butírico

   pp) (2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-

   pentanoato de [(1 S,2S)-1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida

   qq) (2S,5S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoilamino)-1-oxo-butilamino]-5-fenil-

   pentanoato de [(1 S,2S)-1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida

   rr) (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoilamino)-butiril-

   amino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butirato de bencilo

   ss) ácido (S)-2-((2S,3S)-2-{(3S,4S)-3-hidroxi-4-[(S)-3-metil-2-((S)-4-metil-2-fenilacetilamino-pentanoilamino)-

   butirilamino]-5-fenil-pentanoilamino}-3-metil-pentanoilamino)-3-metil-butírico

   tt) (2S,5S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-

   pentanoato de ((1 S,2S)-1 -ciclopentilcarbamoil-2-metil-butil)-amida

   uu) (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-

   pentanoato de [(S)-1 -(1 -etil-propilcarbamoil)-2-metil-propil]-amida

   vv) (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-

   pentanoato de [(S)-1-(1-etil-propilcarbamoil)-butil]-amida

   ww) (3S,4S)-3-hidroxi-4-{(S)-3-metil-2-[(S)-4-metil-2-(3-metil-butirilamino)-pentanoilamino]-butirilamino}-5-fenil-

   pentanoato de [(1 S,2S)-1 -(3-hidroxi-1,1-dimetil-propilcarbamoil)-2-metil-butil]-amida

   así como sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas

   las proporciones.
4. 4. Procedimiento para la elaboración de compuestos de fórmula I, caracterizado por que

   a) un compuesto de fórmula II, en el que h, I2, I3, I4 e I5 tienen los significados indicados en la reivindicación 1 y Q representa un grupo protector de amino, reacciona con un compuesto de fórmula III, en el que Y, L2, n, A2 y R2 tienen los significados indicados en la reivindicación 1, con la formación de un enlace peptídico entre el grupo carboxilo del compuesto de fórmula II y el grupo amino del compuesto de fórmula III para obtener un compuesto de fórmula IV y en un segundo paso el compuesto de fórmula IV se transforma en un compuesto de fórmula V mediante la disociación del grupo protector Q,

   Q-N H

   imagen4

   OH

   OH O

   imagen5

   Q-N H

   imagen6

   OH O

   R2

   imagen7

   A2+LríñY

   II

   III

   IV

   i^S

   1 I

   R2

   imagen8

   Q- N >1— N

   H = II H OH O

   AYLr}nY

   O

   h2n

   imagen9

   AYLr}ñY

   OH O

   O

   5

   IV

   V

   b) y un compuesto de fórmula VI, en el que X, Li, m, Ai y R1 tienen los significados indicados en la reivindicación 1 y el resto X está protegido, dado el caso, por un grupo protector, reacciona con un compuesto de fórmula V, en el que el resto Y está protegido, dado el caso, por un grupo protector, con la formación de un enlace peptídico entre el grupo carboxilo del compuesto de fórmula Vi y el grupo amino del compuesto de fórmula V y mediante disociación de los grupos protectores presentes, dado el caso, en los restos X e Y para obtener un compuesto de fórmula I, en el que Ii, I2, I3, I4, I5, X, Y, Li, L2, R1, R2, Ai, A2, m y n tienen los significados indicados en la reivindicación i, o

   k2^i

   'i.

   h2n

   imagen10

   OH O

   I3

   ^4 R2

   imagen11

   R1

   A2+L24ñY +

   O

   X+L-JmArH YOH

   O

   imagen12

   VI

   R

   ■I i3

   ^'4 R2

   imagen13

   x+kiñA-N' "ríT Y "ríT 11

   O OH O O

   imagen14

   A2~^L24ñY

   V

   I

   10 c) la base de un compuesto de fórmula I se convierte en una de sus sales mediante el tratamiento con un

   ácido o

   d) un ácido de un compuesto de fórmula I se convierte en una de sus sales mediante el tratamiento con una base.
5. 5. Compuestos de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la i a la 3 así como sus sales, solvatos y

   15 estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, como

   inhibidores de la catepsina D en medicina.
6. 6. Preparación farmacéutica que contiene al menos un compuesto de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la i a la 3 y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones.

   20 7. Preparación farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6 que contiene otros vehículos y/o excipientes.
7. 8. Preparación farmacéutica que contiene al menos un compuesto de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la i a la 3 y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, así como al menos un principio activo farmacéutico adicional.
8. 9. Procedimiento para la elaboración de una preparación farmacéutica caracterizado por que un compuesto de

   25 acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la i a la 3 y/o una de sus sales, derivados, solvatos,

   10

   15

   20

   profármacos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, se mezcla con un vehículo o excipiente sólido, líquido o semilíquido en una forma de dosificación adecuada.
9. 10. Medicamento que contiene al menos un compuesto de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la 1

   a la 3 y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o

   patofisiológicos.
10. 11. Medicamento que contiene al menos un compuesto de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la 1

    a la 3 y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o

    patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por artrosis, lesiones condrales traumáticas, artritis, dolor, alodinia e hiperalgesia.
11. 12. Medicamento que contiene al menos un compuesto de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la 1

    a la 3 y/o una de sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, para su uso en el tratamiento y/o la profilaxis de estados fisiológicos y/o

    patofisiológicos seleccionados del grupo compuesto por enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, mucolipidosis, cáncer, en particular cáncer de mama, dermatitis de contacto, reacción de hipersensibilidad retardada, inflamaciones, endometriosis, cicatrización, hiperplasia benigna de próstata, osteosarcoma,

    raquitismo, enfermedades cutáneas como, por ejemplo, psoriasis, enfermedades inmunológicas, enfermedades autoinmunitarias e inmunodeficiencias. .
12. 13. Estuche (kit) compuesto por envases independientes de

    a) una cantidad activa de un compuesto de acuerdo con una o varias de las reivindicaciones de la 1 a la 3 y/o sus sales, solvatos y estereoisómeros fisiológicamente compatibles, incluidas sus mezclas en todas las proporciones, y

    b) una cantidad activa de otro principio activo farmacéutico.