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ES2666668T3 - Procedimientos de producción de células del EPR - Google Patents

Procedimientos de producción de células del EPR Download PDF

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ES2666668T3
ES2666668T3 ES13844534.1T ES13844534T ES2666668T3 ES 2666668 T3 ES2666668 T3 ES 2666668T3 ES 13844534 T ES13844534 T ES 13844534T ES 2666668 T3 ES2666668 T3 ES 2666668T3
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ES
Spain
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cell culture
culture medium
laminin
acid
stem cells
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ES13844534.1T
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Outi Hovatta
Karl Tryggvason
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Biolamina AB
Original Assignee
Biolamina AB
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Publication date
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Abstract

Procedimiento de obtención de células del epitelio pigmentario de la retina (EPR), que comprende: cultivar una o más células madre en un sustrato que comprende una laminina, en el que la laminina es laminina-521 y/o laminina-511, en el que la laminina es una proteína intacta o un fragmento de proteína que contiene uno, dos o tres dominios funcionales que posee actividad de unión a otra molécula o receptor; exponer las células madre a un primer medio de cultivo celular que contiene un factor de crecimiento, en el que el factor de crecimiento es FGF2 en una cantidad mayor que cero a 3,9 ng/ml, siendo el primer medio de cultivo celular completamente definido químicamente y no xenogénico; después de un primer período de tiempo, eliminar el primer medio de cultivo celular y exponer las células madre a un segundo medio de cultivo celular que no contiene el factor de crecimiento, siendo el segundo medio de cultivo celular completamente definido químicamente y no xenogénico; y cambiar periódicamente el segundo medio de cultivo celular para obtener las células del EPR.

Description

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imagen11
cultivo celular de la presente descripción y las concentraciones mínima y máxima si el ingrediente está presente. Los valores se presentan en notación científica. Por ejemplo, "4,1E-01" debe interpretarse como 4,1 x 10-01 .
Tabla 1.
Ingrediente
masa molar (g/mol) Conc. mín. (mM) Conc. máx. (mM) Conc. mín. (ng/ml) Conc. máx. (ng/ml)
SALES INORGÁNICAS
Cloruro de calcio (anhidro)
110,98 4,1 E-01 1,6 E+00 4,6 E+04 1,8 E+05
HEPES
238,3 5,9 E+00 1,8 E+01 1,4 E+06 4,2 E+06
Cloruro de litio (LiCl)
42,39 4,9 E-01 1,5 E+00 2,1 E+04 6,2 E+04
Cloruro de magnesio (anhidro)
95,21 1,2 E-01 3,6 E-01 1,1 E+04 3,4 E+04
Sulfato de magnesio (MgSO4)
120,37 1,6 E-01 4,8 E-01 1,9 E+04 5,8 E+04
Cloruro de potasio (KCl)
74,55 1,6 E+00 4,9 E+00 1,2 E+05 3,6 E+05
Bicarbonato de sodio (NaHCO3)
84,01 9,0 E+00 4,4 E+01 7,6 E+05 3,7 E+06
Cloruro de sodio (NaCl)
58,44 4,7 E+01 1,4 E+02 2,8 E+06 8,3 E+06
Fosfato de sodio, dibásico (anhidro)
141,96 2,0 E-01 5,9 E-01 2,8 E+04 8,3 E+04
Fosfato de sodio, monohidrato monobásico (NaH2PO4–H2O)
137,99 1,8 E-01 5,3 E-01 2,4 E+04 7,3 E+04
OLIGOELEMENTOS
Nitrato férrico (Fe(NO3)3–9H2O)
404 4,9 E-05 1,9 E-04 2,0 E+01 7,5 E+01
Sulfato ferroso heptahidrato (FeSO4–7H2O)
278,01 5,9 E-04 1,8 E-03 1,6 E+02 4,9 E+02
Sulfato de cobre pentahidrato(II) (CuSO4–5H2O)
249,69 2,0 E-06 8,0 E-06 5,1 E-01 2,0 E+00
Sulfato de cinc heptahidrato (ZnSO4–7H2O)
287,56 5,9 E-04 1,8 E-03 1,7 E+02 5,1 E+02
Metavanadato de amonio NH4VO3
116,98 5,5 E-06 1,6 E-05 6,4 E-01 1,9 E+00
Sulfato de manganeso monohidrato (MnS04–H2O)
169,02 9,9 E-07 3,0 E-06 1,7 E-01 5,0 E-01
NiSO4–6H2O
262,85 4,9 E-07 1,5 E-06 1,3 E-01 3,8 E-01
Selenio
78,96 8,9 E-05 2,7 E-04 7,0 E+00 2,1 E+01
Metasilicato de sodio Na2SiO3–9H2O
284,2 4,8 E-04 1,4 E-03 1,4 E+02 4,1 E+02
SnCl2
189,62 6,2 E-07 1,9 E-06 1,2 E-01 3,5 E-01
Ácido molíbdico, sal de amonio
1235,86 9,9 E-07 3,0 E-06 1,2 E+00 3,7 E+00
CdCl2
183,32 6,1 E-06 1,8 E-05 1,1 E+00 3,4 E+00
CrCl3
158,36 9,9 E-07 3,0 E-06 1,6 E-01 4,7 E-01
AgNO3
169,87 4,9 E-07 1,5 E-06 8,3 E-02 2,5 E-01
AlCl3–6H2O
241,43 2,4 E-06 7,3 E-06 5,9 E-01 1,8 E+00
Acetato de bario (Ba(C2H3O2)2)
255,42 4,9 E-06 1,5 E-05 1,3 E+00 3,8 E+00
CoCl2 –6H2O
237,93 4,9 E-06 1,5 E-05 1,2 E+00 3,5 E+00
GeO2
104,64 2,5 E-06 7,5 E-06 2,6 E-01 7,8 E-01
KBr
119 4,9 E-07 1,5 E-06 5,9 E-02 1,8 E-01
Kl
166 5,0 E-07 1,5 E-06 8,3 E-02 2,5 E-01
NaF
41,99 4,9 E-05 1,5 E-04 2,1 E+00 6,2 E+00
RbCl
120,92 4,9 E-06 1,5 E-05 5,9 E-01 1,8 E+00
ZrOCl2 –8H2O
178,13 4,9 E-06 1,5 E-05 8,7 E-01 2,6 E+00
13
Ingrediente
masa molar (g/mol) Conc. mín. (mM) Conc. máx. (mM) Conc. mín. (ng/ml) Conc. máx. (ng/ml)
SUSTRATOS ENERGÉTICOS
D-Glucosa
180,16 6,9 E+00 2,1 E+01 1,2 E+06 3,7 E+06
Piruvato de sodio
110,04 2,0 E-01 5,9 E-01 2,2 E+04 6,5 E+04
LÍPIDOS
Ácido linoleico
280,45 9,4 E-05 2,8 E-04 2,6 E+01 7,9 E+01
Ácido lipoico
206,33 2,0 E-04 7,8 E-04 4,1 E+01 1,6 E+02
Ácido araquidónico
304,47 6,5 E-06 1,9 E-05 2,0 E+00 5,9 E+00
Colesterol
386,65 5,6 E-04 1,7 E-03 2,2 E+02 6,5 E+02
DL-alfa tocoferol-acetato
472,74 1,5 E-04 4,4 E-04 6,9 E+01 2,1 E+02
Ácido linolénico
278,43 3,5 E-05 1,0 E-04 9,7 E+00 2,9 E+01
Ácido mirístico
228,37 4,3 E-05 1,3 E-04 9,8 E+00 2,9 E+01
Ácido oleico
282,46 3,5 E-05 1,0 E-04 9,8 E+00 2,9 E+01
Ácido palmítico
256,42 3,8 E-05 1,1 E-04 9,8 E+00 2,9 E+01
Ácido palmitoleico
254,408 3,9 E-05 1,2 E-04 9,8 E+00 2,9 E+01
Ácido esteárico
284,48 3,4 E-05 1,0 E-04 9,8 E+00 2,9 E+01
AMINOÁCIDOS
L-alanina
89,09 2,5 E-02 2,1 E-01 2,2 E+03 1,8 E+04
Clorhidrato de L-Arginina
147,2 2,7 E-01 1,5 E+00 4,0 E+04 2,2 E+05
L–Asparagina–H2O
150,13 5,0 E-02 2,1 E-01 7,5 E+03 3,1 E+04
Ácido L-Aspártico
133,1 2,5 E-02 2,1 E-01 3,3 E+03 2,7 E+04
L-Cisteína-HCl-H2O
175,63 3,9 E-02 1,2 E-01 6,9 E+03 2,1 E+04
Diclorhidrato de L-Cistina
313,22 3,9 E-02 1,2 E-01 1,2 E+04 3,7 E+04
Ácido L-glutámico
147,13 2,5 E-02 2,1 E-01 3,7 E+03 3,0 E+04
L-Glutamina
146,15 1,5 E+00 4,4 E+00 2,1 E+05 6,4 E+05
Glicina
75,07 1,5 E-01 4,4 E-01 1,1 E+04 3,3 E+04
Monoclorhidrato de L-Histidina monohidrato
209,63 5,9 E-02 1,8 E-01 1,2 E+04 3,7 E+04
L-Isoleucina
131,17 1,6 E-01 4,9 E-01 2,1 E+04 6,4 E+04
L-Leucina
131,17 1,8 E-01 5,3 E-01 2,3 E+04 7,0 E+04
Clorhidrato de L-Lisina
182,65 2,0 E-01 5,9 E-01 3,6 E+04 1,1 E+05
L-Metionina
149,21 4,5 E-02 1,4 E-01 6,8 E+03 2,0 E+04
L-Fenilalanina
165,19 8,5 E-02 2,5 E-01 1,4 E+04 4,2 E+04
L-Prolina
115,13 1,1 E-01 3,2 E-01 1,2 E+04 3,7 E+04
L-Serina
105,09 1,5 E-01 4,4 E-01 1,5 E+04 4,6 E+04
L-Treonina
119,12 1,8 E-01 5,3 E-01 2,1 E+04 6,3 E+04
L-Triptófano
204,23 1,7 E-02 5,2 E-02 3,5 E+03 1,1 E+04
Sal disódica de L-Tirosina hidrato
225,15 8,4 E-02 3,7 E-01 1,9 E+04 8,4 E+04
L-Valina
117,15 1,8 E-01 5,3 E-01 2,1 E+04 6,2 E+04
VITAMINAS
Ácido ascórbico
176,12 1,3 E-01 3,8 E-01 2,2 E+04 6,7 E+04
Biotina
244,31 5,6 E-06 1,7 E-05 1,4 E+00 4,1 E+00
14
Ingrediente
masa molar (g/mol) Conc. mín. (mM) Conc. máx. (mM) Conc. mín. (ng/ml) Conc. máx. (ng/ml)
VITAMINAS
B12
1355,37 2,0 E-04 5,9 E-04 2,7 E+02 8,0 E+02
Cloruro de colina
139,62 2,5 E-02 7,5 E-02 3,5 E+03 1,1 E+04
Pantotenato de D-calcio
238,27 1,8 E-03 1,4 E-02 4,4 E+02 3,4 E+03
Ácido fólico
441,4 2,4 E-03 7,1 E-03 1,0 E+03 3,1 E+03
i-Inositol
180,16 2,7 E-02 1,1 E-01 4,9 E+03 1,9 E+04
Niacinamida
122,12 6,5 E-03 2,0 E-02 7,9 E+02 2,4 E+03
Clorhidrato de piridoxina
205,64 3,8 E-03 1,1 E-02 7,8 E+02 2,4 E+03
Riboflavina
376,36 2,3 E-04 6,8 E-04 8,6 E+01 2,6 E+02
Clorhidrato de tiamina
337,27 3,3 E-03 3,6 E-02 1,1 E+03 1,2 E+04
FACTORES DE CRECIMIENTO/PROTEÍNAS
GABA
103,12 0 1,5 E+00 0 1,5 E+05
Ácido pipecólico
129 0 1,5 E-03 0 1,9 E+02
bFGF
18000 0 2,17 E-07 0 3,9 E+00
TGF beta 1
25000 0 3,5 E-08 0 8,8 E-01
Insulina humana
5808 0 5,9 E-03 0 3,4 E+04
Holo-transferrina humana
78500 0 2,1 E-04 0 1,6 E+04
Seroalbúmina humana
67000 0 2,9 E-01 0 2,0 E+07
Glutatión (reducido)
307,32 0 9,6 E-03 0 2,9 E+03
OTROS COMPONENTES
Hipoxantina Na
136,11 5,9 E-03 2,6 E-02 8,0 E+02 3,6 E+03
Rojo fenol
354,38 8,5 E-03 2,5 E-02 3,0 E+03 9,0 E+03
Putrescina-2HCl
161,07 2,0 E-04 5,9 E-04 3,2 E+01 9,5 E+01
Timidina
242,229 5,9 E-04 1,8 E-03 1,4 E+02 4,3 E+02
2-Mercaptoetanol
78,13 4,9 E-02 1,5 E-01 3,8 E+03 1,1 E+04
Pluronic F-68
8400 1,2 E-02 3,5 E-02 9,8 E+04 2,9 E+05
Tween 80
1310 1,6 E-04 4,9 E-04 2,2 E+02 6,5 E+02
La fase líquida del medio de cultivo celular puede ser agua, suero o albúmina.
Muchos de los ingredientes o componentes enumerados anteriormente en la tabla 1 no son necesarios o pueden 5 utilizarse en concentraciones más bajas.
Se contempla que el medio de cultivo celular puede contener insulina o un sustituto de insulina. De forma similar, el medio de cultivo celular puede contener transferrina o un sustituto de transferrina.
10 En realizaciones más específicas, se contempla que el medio de cultivo celular puede no contener (1) albúmina, (2) insulina o sustituto de insulina, (3) transferrina o sustituto de transferrina o cualquier combinación de estos tres componentes.
Debe observarse que otros medios de cultivo celular pueden contener factores de crecimiento, tales como 15 interleucina-1 beta (IL-1β o catabolina), interleucina-6 (IL6) o factor derivado del epitelio pigmentario (PEDF). Dichos factores de crecimiento no están presentes en el medio de cultivo celular de la presente descripción.
Una fórmula específica para un medio de cultivo celular se da a conocer en la tabla 2:
15
imagen12
Ingredientes DMEM/F12
Concentración (ng/ml)
L-Treonina
534,5
L-Triptófano
90,2
Sal disódica de L-Tirosina dihidrato
557,9
L-Valina
528,5
Biotina
0,035
Cloruro de colina
89,8
Pantotenato de D-calcio
22,4
Ácido fólico
26,5
Niacinamida
20,2
Clorhidrato de piridoxina
20
Riboflavina
2,19
Clorhidrato de tiamina
21,7
Vitamina B12
6,8
i-inositol
126
Cloruro de calcio (CaCl2) (anhid.)
1166
Sulfato cúprico (CuSO4–5H2O)
0,013
Nitrato férrico (Fe(NO3)3–9H2O)
0,5
Sulfato férrico (FeSO4–7H2O)
4,17
Cloruro de magnesio (anhidro)
286,4
Sulfato de magnesio (MgSO4) (anhid.)
488,4
Cloruro de potasio (KCl)
3118
Bicarbonato de sodio (NaHCO3)
24380
Cloruro de sodio (NaCl)
69955
Fosfato de sodio dibásico (Na2HPO4) anhidro
710,2
Fosfato de sodio monobásico (NaH2PO4–H2O)
625
Sulfato de cinc (ZnSO4–7H2O)
4,32
D-glucosa (dextrosa)
31510
Hipoxantina Na
23,9
Ácido linoleico
0,42
Ácido lipoico
1,05
Rojo fenol
81
Putrescina 2HCl
0,81
Piruvato de sodio
550
Timidina
3,65
La combinación del sustrato de laminina con el medio de cultivo celular de la presente divulgación da como resultado un sistema de cultivo celular que puede ser más barato, aunque da a conocer una mayor eficacia en el mantenimiento de células madre pluripotenciales. En esencia, todo lo que se requiere es una laminina y una 5 cantidad mínima de nutrición. Se contempla particularmente que la laminina utilizada en combinación con este medio de cultivo celular sea LN-511 o LN-521.
Los siguientes ejemplos son para fines ilustrativos adicionales la presente descripción. Los ejemplos son meramente ilustrativos y no están destinados a limitar dispositivos fabricados de acuerdo con la presente divulgación a los 10 materiales, condiciones o parámetros de proceso establecidos en los mismos.
17
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seroalbúmina bovina adicional, se obtuvieron tres nuevas líneas de células hES que no son parte de la presente invención a partir de seis blastocitos cultivados. Cuatro días después de la siembra en placas, las masas internas de células produjeron excrecencias similares a células madre. La figura 24 muestra una derivación en una etapa temprana de una nueva línea celular del tronco embrionario humano HS841 que no es parte de la presente
5 invención sobre la matriz de laminina-521/E-cadherina. Se muestran células madre embrionarias humanas de morfología típica que crecen a partir de la masa celular interna de un blastocisto del día seis cuatro días después del aislamiento mecánico de la masa celular interna y de la siembra en placas sobre la matriz de laminina-521/E-cadherina.
10 Inesperadamente, el sistema y el procedimiento de cultivo celular dieron líneas celulares hES estables en 3 de 6 embriones (50%), una tasa de derivación más alta que la de los procedimientos estándar.
La utilización de una matriz de laminina-521/E-cadherina y medio TeSR2 con rHSA adicional, un entorno completamente definido químicamente no xenogénico, produjo resultados similares en la derivación de nuevas
15 líneas celulares hES que no son parte de la presente invención.
La tabla 5 a continuación da a conocer la formulación para el medio mTeSR1 utilizado en este ejemplo. Las cantidades de cada ingrediente pueden variar hasta en un 20%.
20 En realizaciones particulares, la cantidad de seroalbúmina humana (HSA) se puede variar desde una concentración de 0,195 mM a 1 mM, incluyendo de 0,3 mM a 1 mM o de 0,3 mM a aproximadamente 0,4 mM. La cantidad de bFGF también se puede variar de 0 a aproximadamente 105 ng/ml o de 0 a 3,9 ng/ml o de 0,5 ng/ml a 3,5 ng/ml. Estas dos variaciones en la cantidad de HSA y bFGF pueden producirse de forma independiente o juntas.
25 Tabla 5. Formulación de mTeSR1
Ingrediente mTeSR1
masa molar (g/mol) Concentración (ng/ml) Concentración (mM)
SALES INORGÁNICAS
Cloruro de calcio (anhidro)
110,98 9,14 E+04 8,24 E-01
HEPES
238,3 2,81 E+06 1,18 E+01
Cloruro de litio (LiCl)
42,39 4,15 E+04 9,80 E-01
Cloruro de magnesio (anhidro)
95,21 2,26 E+04 2,37 E-01
Sulfato de magnesio (MgSO4)
120,37 3,84 E+04 3,19 E-01
Cloruro de potasio (KCI)
74,55 2,43 E+05 3,26 E+00
Bicarbonato de sodio (NaHCO3)
84,01 1,51 E+06 1,80 E+01
Cloruro de sodio (NaCl)
58,44 5,53 E+06 9,46 E+01
Fosfato de sodio, dibásico (anhidro)
141,96 5,56 E+04 3,92 E-01
Fosfato sódico monobásico monohidrato (NaH2PO4–H2O)
137,99 4,90 E+04 3,55 E-01
OLIGOELEMENTOS
Nitrato férrico (Fe(NO3)3–9H2O)
404 3,92 E+01 9,71 E-05
Sulfato ferroso heptahidrato (FeSO4–7H2O)
278,01 3,28 E+02 1,18 E-03
Sulfato de cobre (II) pentahidrato (CuSO4–5H2O)
249,69 1,02 E+00 4,08 E-06
Sulfato de cinc heptahidrato (ZnSO4–7H2O)
287,56 3,39 E+02 1,18 E-03
Metavanadato de amonio NH4VO3
116,98 1,28 E+00 1,09 E-05
Sulfato de manganeso monohidrato (MnSO4–H2O)
169,02 3,33 E-01 1,97 E-06
NiSO4–6H2O
262,85 2,55 E-01 9,70 E-07
Selenio
78,96 1,40 E+01 1,77 E-04
Metasilicato de sodio Na2SiO3–9H2O
284,2 2,75 E+02 9,66 E-04
SnCl2
189,62 2,35 E-01 1,24 E-06
Ácido molíbdico, sal de amonio
1235,86 2,43 E+00 1,97 E-06
28
Ingrediente mTeSR1
masa molar (g/mol) Concentración (ng/ml) Concentración (mM)
CdCl2
183,32 2,24 E+00 1,22 E-05
CrCl3
158,36 3,14 E-01 1,98 E-06
AgNO3
169,87 1,67 E-01 9,81 E-07
AlCl3 6H2O
241,43 1,18 E+00 4,87 E-06
Acetato de bario (Ba(C2H3O2)2)
255,42 2,50 E+00 9,79 E-06
CoCl2 –6H2O
237,93 2,33 E+00 9,81 E-06
GeO2
104,64 5,20 E-01 4,97 E-06
KBr
119 1,18 E-01 9,89 E-07
Kl
166 1,66 E-01 1,00 E-06
NaF
41,99 4,13 E+00 9,83 E-05
RbCl
120,92 1,19 E+00 9,81 E-06
ZrOCl2 –8H2O
178,13 1,75 E+00 9,80 E-06
SUSTRATOS ENERGÉTICOS
D-Glucosa
180,16 2,47 E+06 1,37 E+01
Piruvato de sodio
110,04 4,31 E+04 3,92 E-01
LÍPIDOS
Ácido linoleico
280,45 5,27 E+01 1,88 E-04
Ácido lipoico
206,33 8,25 E+01 4,00 E-04
Ácido araquidónico
304,47 3,93 E+00 1,29 E-05
Colesterol
386,65 4,33 E+02 1,12 E-03
DL-alfa tocoferol-acetato
472,74 1,37 E+02 2,90 E-04
Ácido linolénico
278,43 1,95 E+01 6,99 E-05
Ácido mirístico
228,37 1,96 E+01 8,59 E-05
Ácido oleico
282,46 1,96 E+01 6,94 E-05
Ácido palmítico
256,42 1,96 E+01 7,65 E-05
Ácido palmitoleico
254,408 1,96 E+01 7,71 E-05
Ácido esteárico
284,48 1,96 E+01 6,89 E-05
AMINOÁCIDOS
L-Alanina
89,09 1,22 E+04 1,37 E-01
Clorhidrato de L-Arginina
147,2 8,07 E+04 5,48 E-01
L–Asparagina–H2O
150,13 2,06 E+04 1,37 E-01
Ácido L-aspártico
133,1 1,82 E+04 1,37 E-01
L-Cisteína-HCl-H2O
175,63 1,38 E+04 7,83 E-02
Diclorhidrato de L-cistina
313,22 2,45 E+04 7,83 E-02
Ácido L-glutámico
147,13 2,02 E+04 1,37 E-01
L-Glutamina
146,15 4,30 E+05 2,94 E+00
Glicina
75,07 2,21 E+04 2,94 E-01
Monoclorhidrato de L-Histidina monohidrato
209,63 2,47 E+04 1,18 E-01
L-Isoleucina
131,17 4,28 E+04 3,26 E-01
29
Ingrediente mTeSR1
masa molar (g/mol) Concentración (ng/ml) Concentración (mM)
L-Leucina
131,17 4,64 E+04 3,54 E-01
Clorhidrato de L-Lisina
182,65 7,14 E+04 3,91 E-01
L-Metionina
149,21 1,35 E+04 9,06 E-02
L-Fenilalanina
165,19 2,79 E+04 1,69 E-01
L-Prolina
115,13 2,49 E+04 2,16 E-01
L-Serina
105,09 3,09 E+04 2,94 E-01
L-Treonina
119,12 4,19 E+04 3,52 E-01
L-Triptófano
204,23 7,07 E+03 3,46 E-02
Sal disódica de L-tirosina hidrato
225,15 3,78 E+04 1,68 E-01
L-Valina
117,15 4,16 E+04 3,55 E-01
VITAMINAS
Ácido ascórbico
176,12 4,46 E+04 2,53 E-01
Biotina
244,31 2,74 E+00 1,12 E-05
B12
1355,37 5,34 E+02 3,94 E-04
Cloruro de colina
139,62 7,02 E+03 5,03 E-02
Pantotenato de D-calcio
238,27 8,79 E+02 3,69 E-03
Ácido fólico
441,4 2,08 E+03 4,71 E-03
i-inositol
180,16 9,89 E+03 5,49 E-02
Niacinamida
122,12 1,59 E+03 1,30 E-02
Clorhidrato de piridoxina
205,64 1,57 E+03 7,62 E-03
Riboflavina
376,36 1,72 E+02 4,56 E-04
Clorhidrato de tiamina
337,27 8,16 E+03 2,42 E-02
FACTORES DE CRECIMIENTO/PROTEÍNAS
GABA
103,12 1,01 E+05 9,79 E-01
Ácido pipecólico
129 1,27 E+02 9,84 E-04
bFGF
18000 1,04 E+02 5,77 E-06
TGF beta 1
25000 5,88 E-01 2,35 E-08
Insulina humana
5808 2,28 E+04 3,92 E-03
Holo-transferrina humana
78500 1,08 E+04 1,37 E-04
Seroalbúmina humana
67000 1,31 E+07 1,95 E-01
Glutatión (reducido)
307,32 1,96 E+03 6,38 E-03
OTROS COMPONENTES
Hipoxantina Na
136,11 1,61 E+03 1,18 E-02
Rojo fenol
354,38 5,99 E+03 1,69 E-02
Putrescina-2HCl
161,07 6,36 E+01 3,95 E-04
Timidina
242,22 9 2,86 E+02 1,18 E-03
2-Mercaptoetanol
78,13 7,66 E+03 9,80 E-02
Pluronic F-68
8400 1,96 E+05 2,33 E-02
Tween 80
1310 4,31 E+02 3,29 E-04
30
imagen23

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  1. imagen1
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