ES2529545T3 - Tetrahidrofenantridinonas y tetrahidrociclopentaquinolinonas como inhibidores de la polimerización de tubulina y PARP - Google Patents

Abstract

Compuesto de fórmula (I),**Fórmula** incluyendo una forma estereoquímicamente isomérica del mismo; en la que Y es CH2 o CH2-CH2; R1 es arilo o Het; en el que arilo es fenilo o naftalenilo; en el que Het es tienilo, pirrolilo, pirrolinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, furanilo, piperidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, piperazinilo, pirazinilo, triazinilo, indolizinilo, azaindolizinilo, indolilo, indolinilo, benzotienilo, indazolilo, benzoxazolilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, cromanilo, purinilo, quinolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxazolinilo, naftiridinilo o pteridinilo; dos átomos de carbono en arilo o Het pueden estar unidos por puente (es decir, formar un resto bi o tricíclico) con un radical bivalente seleccionado de -O-CH2-CH2-O- (a-1), -CH2-O-CH2-O- (a-2), -O-CH2-CH2-CH2- (a-3), -O-CH2-CH2-NR8- (a-4), -O-CR8 2-O- (a-5), -O-CH2-CH2- (a-6), -CH2-N-CH2-CH2- (a-7), -(CH2)3- (a-8), o -(CH2)4- (a-9); cada arilo, Het, arilo unido por puente o Het unido por puente puede estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, nitro, hidroxicarbonilo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilamino C3-6, metiletilamino, aminocicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, alquil C1-6-carbonilo, alquiloxi C2-6-carbonilo, alquenil C2-6-carbonilo, oxima, alquil C1-6-oxima, amidoxima, -CC-CH2O-CH3, -CC-CH2N(CH3)2, -CC-Si(CH3)3, hidroxialquilo C1-6, hidroxialquenilo C2-6, hidroxialquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, cianoalquenilo C2-6, aminocarbonilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquenilo C2-6, alquilsulfonil C1-6-alquinilo C2-6, -PO(O-alquilo C1-6)2, -B(OH)2, -S-CH3, SF5, alquilsulfonilo C1-6, -NR8R9, -alquil C1-6-NR8R9, -OR8, alquil C1-6-OR8, -CONR8R9, piperidinilalquilo C1-6, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, piperidinilo, piperazinilo, alquil C1-6- piperazinilo, morfolinilo, fenilo, tienilo, pirazolilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piridinilo, pirimidinilo, oxadiazolilo, imidazolilo, imidazolilalquinilo C2-6, alquil C1-6 imidazolilalquinilo C2-6, cianopiridinilo, fenilalquilo C1-6, fenilalquenilo C2-6, morfolinilalquilo C1-6, alquiloxi C1-6-fenilo, trihaloalquil C1-6-fenilo, metilpirazolilo, halopirimidinilo o dimetilaminopirrolidinilo; o R1 es un radical de fórmula**Fórmula** en la que X1 es CH2, NH o N-CH3; en la que X2 es CH2, C>=O, O, NH o N-CH3; en la que R10 es fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo, en el que cada fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, hidroxilo, ciano, alquilo C1-6, amino, polihaloalquilo C1-6 o alquiloxilo C1-6; o R1 es un radical de fórmula**Fórmula** en la que X3 es CH o N; R2 es metilo, etilo, propilo o cicloalquilo C3-6; cada R3 y R4 se selecciona independientemente de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroxilo, trifluorometilo, metiloxilo; o R3 y R4 se toman junto con el átomo de carbono al que están unidos para formar un anillo de ciclopropilo o un radical de fórmula C(>=O); cada R5 y R6 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquiloxilo C1-6, ciano, alquilo C1-6, -OCH2CH2NR8R9, -CH2OCH2CH2NR8R9, -OCH2CH2CH2NR8R9; R7 es hidrógeno, metilo o flúor; cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, carbonilo, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, dihidroxialquilo C1-6, cianoalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, fenilalquilo C1-6, di(alquil C1-6)aminoalquilo C1-6, alquilsulfonilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, morfolinilcarbonilo, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, piperidinilalquilo C1-6, tiomorfolinilalquilo C1-6, cicloalquilo C3-6-metilo, piridinilo, pirimidinilo, fenilo, halofenilo, oxanilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6 o alquil C1-6 carbonilaminoalquilo C1-6; una forma de N-óxido del mismo, las sales de adición farmacéuticamente aceptables del mismo y los solvatos del mismo.

Description

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DESCRIPCIÓN

Tetrahidrofenantridinonas y tetrahidrociclopentaquinolinonas como inhibidores de la polimerización de tubulina y PARP 5

Campo de invención

La presente invención se refiere a inhibidores de la polimerización de tubulina y PARP y proporciona compuestos y composiciones que contienen los compuestos dados a conocer. Además, la presente invención proporciona métodos de uso de los inhibidores de la polimerización de tubulina y PARP dados a conocer, por ejemplo, como medicamento.

Antecedentes de la invención

15 La enzima nuclear poli(ADP-ribosa) polimerasa-1 (PARP-1) es un miembro de la familia de enzimas PARP. Esta familia creciente de enzimas consiste en PARP tales como, por ejemplo: PARP-1, PARP-2, PARP-3 y Vault-PARP, y tanquirasas (TANK), tales como, por ejemplo: TANK-1 y TANK-2. PARP también se denominada poli(adenosina-5’difosfato-ribosa) polimerasa o PARS (poli(ADP-ribosa) sintetasa).

Se identificaron tanquirasas (TANK) como componentes del complejo telomérico humano. También se ha propuesto que desempeñan papeles en la regulación del huso mitótico y en el tráfico vesicular y pueden servir como armazones para proteínas implicadas en otros diversos procesos celulares. Los telómeros, que son esenciales para el mantenimiento y la estabilidad de los cromosomas, se mantienen por la telomerasa, una transcriptasa inversa especializada. Las TANK son (ADP-ribosa) transferasas con algunas características de proteínas tanto

25 citoesqueléticas como de señalización. Contienen el dominio PARP, que cataliza la poli-ADP-ribosilación de proteínas sustrato, el motivo alfa estéril, que se comparte entre determinadas moléculas de señalización y el dominio ANK, que contiene de 16 a 24 repeticiones de anquirina, también presente en la proteína citoesquelética anquirina. El dominio ANK interacciona con una variedad de proteínas diferentes, incluyendo la proteína telomérica, factor 1 de unión a repeticiones teloméricas (TRF-1). Por tanto, estas proteínas se denominaron (ADP-ribosa) polimerasas relacionadas con anquirina que interaccionan con TRF1 (TANK).

Una función de las TANK es la ADP-ribosilación de TRF-1. La función telomérica humana está regulada por un complejo de proteínas asociadas con telómeros que incluye las dos proteínas de unión a ADN específica de telómeros, TRF-1 y TRF-2. TRF-2 protege los extremos cromosómicos y TRF-1 regula la longitud telomérica. La

35 ADP-ribosilación inhibe la capacidad de TRF-1 para unirse al ADN telomérico. Esta poli-ADP-ribosilación de TRF-1 libera TRF-1 de los telómeros, abriendo de ese modo el complejo telomérico y permitiendo el acceso a la telomerasa. Por tanto, las TANK funcionan como reguladores positivos de la longitud telomérica, permitiendo la elongación de los telómeros por la telomerasa.

Se sugieren otros papeles para TANK por la identidad de las proteínas con las que interacciona, la aminopeptidasa sensible a la insulina, las proteínas Mcl1 (que son miembros de la familia de Bcl-2), el antígeno nuclear 1 de Epstein-Barr, la proteína del aparato nuclear y mitótico y el factor citoplasmático y heterocromático TAB182 y sus diversas localizaciones subcelulares (poros nucleares, aparato de Golgi y centrosomas mitóticos).

45 La tanquirasa-2 (TANK-2) difiere de la tanquirasa-1 (TANK-1) en que carece de un dominio HPS N-terminal (que se compone de repeticiones homopoliméricas de residuos de His, Pro y Ser), que se encuentra en TANK1. Sin embargo, probablemente tiene algunas funciones coincidentes con la tanquirasa-1, dado que ambas proteínas tienen localizaciones subcelulares similares, se asocian la una con la otra y se unen a muchas de las mismas proteínas.

PARP-1 es una proteína nuclear principal de 116 kDa constituida por tres dominios: un dominio de unión a ADN Nterminal que contienen dos dedos de zinc, un dominio de automodificación y un dominio catalítico C-terminal. La enzima sintetiza poli(ADP-ribosa), un polímero ramificado que puede consistir en más de 200 unidades de ADPribosa. Los aceptores proteicos de poli(ADP-ribosa) están implicados directa o indirectamente en el mantenimiento 55 de la integridad del ADN. Incluyen histonas, proteínas HMG, topoisomerasas, ADN y ARN polimerasas, ADN ligasas, endonucleasas dependientes de Ca2+-y Mg2+-y factores de reparación de roturas de una sola hebra y de reparación de escisiones de bases. La proteína PARP se expresa a un alto nivel en muchos tejidos, de la manera más notable en las células de línea germinal, el sistema inmunitario, el corazón y el cerebro. En condiciones fisiológicas normales, existe una mínima actividad PARP. Sin embargo, el daño al ADN provoca una activación inmediata de PARP de hasta 500 veces. La producción de poli(ADP-ribosa) resultante tiene tres consecuencias: en primer lugar, la poli-ADP-ribosilación, inducida por el daño al ADN, de las colas N-y C-terminales de las histonas H1 y H2B o la interacción selectiva de estas proteínas con poli(ADP-ribosa) libre o unida a PARP-1 contribuye a la relajación de la fibra de cromatina de 30 nm y aumenta el acceso a las roturas; en segundo lugar, señaliza la aparición y la magnitud del daño al ADN de manera que la célula puede establecer una respuesta adaptativa según la gravedad de la lesión

65 (reparación del ADN o suicidio celular); en tercer lugar, media en el reclutamiento rápido de los factores de reparación de roturas de una sola hebra y de reparación de escisiones de bases.

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Las roturas de una sola hebra (SSB, single strand breaks) se producen espontáneamente en todas las células. En ausencia de actividad PARP-1, estas SSB pueden convertirse en roturas de doble hebra (DSB, double strand breaks) durante la replicación que pueden conducir al colapso de las horquillas de replicación. Las DSB se

5 identifican por su marca epigenética, la fosforilación de la variante de histona central H2AX (yH2AX). La descondensación local muy rápida de la cromatina, que se produce en DSB de manera independiente de yH2AX, puede atribuirse a la producción de poli(ADP-ribosa) que está mediada localmente por PARP-1.

También claves de desarrollo y ambientales, tales como esteroides o choque térmico, inducen la activación de

10 PARP-1 y la separación de histonas de la cromatina dependiente de poli(ADP-ribosa), favoreciendo de ese modo la apertura de la estructura de la cromatina, lo que puede permitir la activación transcripcional en ausencia de roturas de ADN.

La extensa activación de PARP en células que experimentan un daño masivo al ADN conduce a una reducción

15 intensa de NAD+. La corta semivida de poli(ADP-ribosa) da como resultado una rápida tasa de renovación. Una vez que se forma la poli(ADP-ribosa), se degrada rápidamente por la poli(ADP-ribosa) glicohidrolasa (PARG) activa de manera constitutiva, junto con fosfodiesterasa y (ADP-ribosa) proteína liasa. PARP y PARG forman un ciclo que transforma una gran cantidad de NAD+ en ADP-ribosa. En menos de una hora, la sobreestimulación de PARP puede provocar una disminución de NAD+ y ATP a menos del 20% del nivel normal. Tal situación es especialmente

20 perjudicial durante la isquemia cuando la privación de oxígeno ha comprometido ya de manera drástica la producción de energía celular. Se supone que la producción de radicales libres posterior durante la reperfusión es una causa principal del daño tisular. Parte de la disminución de ATP, que es típica en muchos órganos durante la isquemia y la reperfusión, podría estar vinculada con la reducción de NAD+ debida a la renovación de poli(ADPribosa). Por tanto, se espera que la inhibición de PARP o PARG conserve el nivel de energía celular, potenciando de

25 ese modo la supervivencia de los tejidos isquémicos tras la agresión.

Tal como se indicó anteriormente, la localización subcelular de varias PARP también apunta a una función fisiológica de la poli-ADP-ribosilación en la regulación de la división celular.

30 Parece que se requiere TANK-1 para la polimerización de poli(ADP-ribosa) asociada con el huso mitótico. La actividad de poli-ADP-ribosilación de TANK-1 podría ser crucial para la formación y el mantenimiento precisos de la bipolaridad del huso. Además, se ha demostrado que se requiere la actividad PARP de TANK-1 para la separación telomérica normal antes de la anafase. La interferencia con la actividad PARP de tanquirasa da como resultado una mitosis aberrante, que genera una detención transitoria del ciclo celular, probablemente debido a la activación del

35 punto de control del huso, seguido por muerte celular. Se espera por tanto que la inhibición de tanquirasas tenga un efecto citotóxico sobre células tumorales en proliferación.

PARP-1 y PARP-2 se localizan en centrosomas en los que interaccionan con las proteínas del cinetocoro. La ablación del gen de Parp-2 en ratones provoca una segregación errónea de cromosomas inducida por daño al ADN

40 significativa que se asocia con defectos del cinetocoro, lo que indica que PARP-2 tiene una función de guardián crucial en la integridad de la heterocromatina pericéntrica. Además, PARP-1 se asocia con los centrosomas uniendo la red de vigilancia de daño al ADN con el punto de control de fidelidad mitótico.

El papel fundamental de PARP en la reparación de las roturas de hebras de ADN está bien establecido,

45 especialmente cuando se provoca directamente mediante radiación ionizante o indirectamente tras reparación enzimática de lesiones de ADN inducidas por agentes de metilación, inhibidores de las topoisomerasas I y otros agentes quimioterápicos como cisplatino y bleomicina. Una variedad de estudios que usaron ratones “deficientes”, modelos de inhibición transdominante (sobreexpresión del dominio de unión a ADN), inhibidores antisentido y de peso molecular pequeño han demostrado el papel de PARP en la reparación y la supervivencia celular tras la

50 inducción de daño al ADN. La inhibición de la actividad enzimática de PARP debe conducir a una sensibilidad potenciada de las células tumorales hacia tratamientos que dañan el ADN.

Se ha notificado que los inhibidores de PARP son eficaces en la radiosensibilización (hipóxica) de células tumorales y eficaces para impedir que células tumorales se recuperen del daño del ADN potencialmente letal y subletal tras

55 radioterapia, presumiblemente por sus capacidades para impedir que vuelvan a unirse roturas de hebras de ADN y afectando varias rutas de señalización de daño al ADN.

La patente estadounidense n.º 5.177.075 analiza varias isoquinolinas usadas para potenciar los efectos letales de la radiación ionizante o agentes quimioterápicos sobre células tumorales. Weltin et al., (“Effect of 6(5

60 Phenanthridinone), an Inhibitor of Poly(ADP-ribose) Polymerase, on Cultured Tumor Cells”, Oncol. Res., 6:9, 399403 (1994)), analiza la inhibición de la actividad PARP, la proliferación reducida de células tumorales y un efecto sinérgico marcado cuando se tratan conjuntamente células tumorales con un fármaco de alquilación.

Se han publicado revisiones del estado de la técnica por Li y Zhang en IDrugs 2001, 4(7): 804-812, por Ame et al en 65 Bioassays 2004, 26: 882-883 y por Nguewa et al., en Progress in Biophysic & Molecular Biology 2005, 88: 143-172.

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La pérdida de PARP-1 aumenta la formación de lesiones de ADN que se reparan mediante recombinación homóloga sin regular directamente el propio proceso de recombinación homóloga. El cáncer de mama familiar se asocia comúnmente con defectos hereditarios en uno de los alelos de BRCA1 o BRCA2. BRCA1 y BRCA2 son importantes para la recombinación homóloga. El alelo de BRCA1 o BRCA2 funcional restante puede perderse en algunas

5 células, contribuyendo de ese modo a la tumorigénesis. Por tanto, los tumores que surgen son deficientes en BRCA1 o BRCA2 (por ejemplo, BRCA2 -/-) mientras que las células somáticas conservan proteínas BRCA funcionales (BRCA2 +/-). La inhibición de la actividad PARP en un antecedente defectuoso en BRCA1, o BRCA2, podría dar como resultado la generación de lesiones de ADN reparadas normalmente mediante intercambio de cromátidas hermanas, provocando aberraciones de cromátidas y pérdida de viabilidad. Pueden requerirse sólo niveles relativamente bajos de inhibidores de PARP-1 para producir un efecto terapéutico dada la sensibilidad aguda de las células defectuosas en BRCA. Esto es otro ejemplo de un caso en el que pueden usarse inhibidores de una proteína de reparación del ADN normalmente no esencial como único agente para tratar tumores.

Según una revisión de Horvath y Szabo (Drug News Perspect 20(3), abril de 2007, 171-181) los estudios más

15 recientes demostraron que inhibidores de PARP potencian la muerte de células cancerosas principalmente porque interfieren en la reparación del ADN a diversos niveles. Estudios más recientes también han demostrado que inhibidores de PARP inhiben la angiogénesis, o bien inhibiendo la expresión de factores de crecimiento, o bien inhibiendo respuestas proliferativas celulares inducidas por factores de crecimiento. Estos hallazgos también podrían tener implicaciones en del modo de los efectos anticancerígenos de los inhibidores de PARP in vivo.

También un estudio de Tentori et al. (Eur. J. Cancer, 2007, 43 (14) 2124-2133) muestra que inhibidores de PARP suprimen la migración inducida por VEGF o factores de crecimiento placentarios e impiden la formación de redes similares a los túbulos en sistemas basados en células y alteran la angiogénesis in vivo. El estudio también demuestra que la angiogénesis inducida por factores de crecimiento es deficiente en ratones con PARP-1

25 desactivada. Los resultados del estudio proporcionan evidencias para seleccionar PARP como diana para la antiangiogénesis, añadiendo implicaciones terapéuticas novedosas al uso de inhibidores de PARP en el tratamiento de cáncer.

Los inhibidores de PARP de la presente invención también demuestran actividad anticancerígena vinculada con la perturbación de la polimerización de tubulina.

La tubulina se compone de un heterodímero de dos proteínas relacionadas denominadas tubulina α y β. La tubulina se polimeriza para formar estructuras denominadas microtúbulos. Los microtúbulos son elementos citoesqueléticos altamente dinámicos y desempeñan un papel crítico en muchos procesos en células eucariotas, incluyendo mitosis,

35 movilidad celular, forma celular, transporte intracelular de orgánulos e interacciones intercelulares.

Para que se produzca una división celular apropiada, es esencial que los microtúbulos puedan polimerizarse y despolimerizarse. Los microtúbulos en el huso mitótico son más dinámicos que aquéllos en células que no están en división, y por tanto pueden seleccionarse como dianas por agentes que afectan a la dinámica de los microtúbulos. Al alterar la polimerización/despolimerización de los microtúbulos, estos agentes afectan a la formación del huso mitótico, detienen las células en división en la fase G2/M del ciclo celular y, en última instancia, conducen a muerte celular apoptótica. Como las células neoplásicas tienen altas tasas de proliferación, pueden seleccionarse como dianas por estos agentes antimitóticos.

45 Se han identificado tres clases principales de fármacos de unión a tubulina, concretamente los análogos de colchicina, los alcaloides de la vinca y los taxanos, presentando cada uno de ellos un sitio de unión específica en las moléculas de β-tubulina. El paclitaxel y los taxanos relacionados representan una clase de fármacos que estabilizan los microtúbulos, un proceso que conduce en última instancia a la congelación de las estructuras de los microtúbulos de manera que no pueden reestructurarse. La detención posterior en la mitosis induce el mecanismo apoptótico para provocar muerte celular. La segunda clase de compuestos, los análogos de colchicina, así como otros varios compuestos, se unen al mismo sitio en la β-tubulina que la colchicina y perturban la polimerización y la formación microtubular. La tercera clase de compuestos, la vinblastina y otros varios fármacos relacionados con la vinca, se unen al sitio de la vinca e impiden la formación de los microtúbulos y desestabilizan los microtúbulos.

55 La tubulina también es una diana para tratar estados patológicos que dependen o resultan de la formación anómala de vasos sanguíneos (neovascularización) tales como tumores cancerosos. En estos casos, el citoesqueleto de las células endoteliales vasculares se perturba a través de despolimerización de los microtúbulos, que resulta de la inhibición de la polimerización de tubulina para formar microtúbulos. La longitud de los microtúbulos depende de la tasa de despolimerización frente a la de polimerización. La despolimerización de los microtúbulos a través de inhibición de la polimerización conduce a un cambio en la morfología de las células endoteliales, lo que provoca entonces un bloqueo o paralización del flujo sanguíneo. En el caso de tumores cancerosos, se para el flujo sanguíneo hasta el tejido enfermo, privando al tumor de oxígeno y nutrientes, lo que conduce a muerte celular necrótica. Los sistemas neovasculares son más sensibles a estos agentes porque dependen más del citoesqueleto de los microtúbulos que las células endoteliales vasculares sanas, normales que también están soportadas por

65 estructuras citoesqueléticas basadas en actina. Para varios inhibidores de la polimerización de tubulina que seleccionan como diana el sitio de unión a colchicina de la tubulina, la modalidad de selección como diana vascular

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puede lograrse a una concentración in vivo menor que para la modalidad antiproliferativa. Por tanto, agentes que seleccionan como diana el dominio de unión a colchicina de la tubulina pueden ser potencialmente agentes de modo dual, es decir, agentes antimitóticos y antivasculares.

5 Todavía existe la necesidad de una terapia anticancerígena eficaz y potente que incluya eficacia frente a tumores que son actualmente intratables o escasamente tratables, eficacia frente a tumores resistentes a múltiples fármacos y con efectos secundarios mínimos. La presente invención proporciona compuestos, composiciones para y métodos de inhibición de la actividad PARP y la unión a tubulina para tratar el cáncer. Los compuestos y las composiciones de la presente invención difieren de la técnica anterior en que tienen un modo de acción dual (inhibición de PARP y unión a tubulina). Además, tienen una alta actividad inhibidora de TANK que da como resultado efectos anticancerígenos potenciados que los hacen útiles en particular para el tratamiento con un único agente. También son útiles en la potenciación de la eficacia de la quimioterapia y la radioterapia en las que un efecto primario del tratamiento con el compuesto es el de desencadenar muerte celular en condiciones de daño al ADN.

15 Antecedentes de la técnica anterior

El documento WO 03/101985, publicado el 11 de diciembre de 2003, da a conocer derivados de 2-oxo-1,3,4trihidroquinazolinilo para el tratamiento de trastornos relacionados con la proliferación celular. El documento EP 1487800, publicado el 2 de octubre de 2005, da a conocer fenantridinona como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento EP 1687277, publicado el 16 de junio de 2005, da a conocer 2-quinolinonas y 2-quinoxalinonas sustituidas con 6-alquenilo y 6-fenilalquilo como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

25 El documento EP 1709011, publicado el 16 de junio de 2005, da a conocer 2-quinolinonas y 2-quinoxalinonas sustituidas con 6-fenilalquilo como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento EP 1709012, publicado el 16 de junio de 2005, da a conocer 2-quinolinonas y 2-quinoxalinonas sustituidas en posición 6 como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento EP 1694653, publicado el 30 de junio de 2005, da a conocer 2-quinolinonas y 2-quinoxalinonas sustituidas con 6-ciclohexilalquilo como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento WO 2005/097750, publicado el 2 de octubre de 2005, da a conocer piridonas sustituidas como 35 inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento WO 2005/117876, publicado el 15 de diciembre de 2005, da a conocer inhibidores de molécula pequeña duales del cáncer y la angiogénesis.

El documento WO 2006/003146, publicado el 12 de enero de 2006, da a conocer derivados de quinazolinonas como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento WO 2006/003147, publicado el 12 de enero de 2006, da a conocer derivados de ftalazina como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

45 El documento WO 2006/003148, publicado el 12 de enero de 2006, da a conocer derivados de quinazolindiona como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento WO 2006/003150, publicado el 12 de enero de 2006, da a conocer derivados de quinazolinona sustituidos con 2-alquilo como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

El documento WO 2007/025009, publicado el 1 de marzo de 2007, da a conocer análogos de indenoisoquinolinona como inhibidores de la poli(ADP-ribosa) polimerasa.

55 El documento WO 2007/095628, publicado el 23 de agosto de 2007, da a conocer pirazoloquinolinonas como potentes inhibidores de PARP.

El documento WO 2008/107478, publicado el 12 de setiembre de 2008, da a conocer derivados de quinolinona como inhibidores de PARP y TANK.

Tentori et al., European Journal of Cancer, vol. 43, n.º 14, 2007, se refiere a la inhibición de la poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP) o la deleción del gen PARP-1 que reduce la angiogénesis.

Descripción de la invención

65 Esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I)

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imagen1

incluyendo las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos; 5 en la que

Y es CH2 o CH2-CH2;

10 R1 es arilo o Het;

en el que arilo es fenilo o naftalenilo;

en el que Het es tienilo, pirrolilo, pirrolinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo,

15 oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, furanilo, piperidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, piperazinilo, pirazinilo, triazinilo, indolizinilo, azaindolizinilo, indolilo, indolinilo, benzotienilo, indazolilo, benzoxazolilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, cromanilo, purinilo, quinolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxazolinilo, naftiridinilo o pteridinilo;

20 dos átomos de carbono en arilo o Het pueden estar unidos por puente (es decir, formar un resto bi o tricíclico) con un radical bivalente seleccionado de

-O-CH2-CH2-O-(a-1),

25 -CH2-O-CH2-O-(a-2),

-O-CH2-CH2-CH2-(a-3),

-O-CH2-CH2-NR8-(a-4), 30 -O-CR82-O-(a-5),

-O-CH2-CH2-(a-6),

35 -CH2-N-CH2-CH2-(a-7),

-(CH2)3-(a-8),

o 40 -(CH2)4-(a-9);

cada arilo, Het, arilo unido por puente o Het unido por puente puede estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, nitro, hidroxicarbonilo, alquilo C1-6, 45 alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilamino C3-6, metiletilamino, aminocicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, alquil C1-6-carbonilo, alquiloxi C2-6-carbonilo, alquenil C2-6-carbonilo, oxima, alquil C1-6-oxima, amidoxima, -C≡C-CH2O-CH3, -C≡C-CH2N(CH3)2, -C≡C-Si(CH3)3, hidroxialquilo C1-6, hidroxialquenilo C2-6, hidroxialquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, cianoalquenilo C2-6, aminocarbonilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-Qalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquenilo C2-6, alquilsulfonil C1-6-alquinilo C2-6, -PO(O-alquilo C1-6)2, -B(OH)2, -S-CH3, SF5, 50 alquilsulfonilo C1-6, -NR8R9, -alquil C1-6-NR8R9, -OR8, alquil C1-6-OR8, -CONR8R9, piperidinilalquilo C1-6, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, piperidinilo, piperazinilo, alquil C1-6piperazinilo, morfolinilo, fenilo, tienilo, pirazolilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piridinilo, pirimidinilo, oxadiazolilo, imidazolilo, imidazolil-alquinilo C2-6, alquil C1-6-imidazolilalquinilo C2-6, cianopiridinilo, fenilalquilo C1-6, fenilalquenilo C2-6, morfolinilalquilo C1-6, alquiloxi C1-6-fenilo, trihaloalquil C1-6-fenilo, metilpirazolilo, halopirimidinilo o

55 dimetilaminopirrolidinilo; o

R1 es un radical de fórmula

imagen2

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en la que X1 es CH2, NH o N-CH3;

5 en la que X2 es CH2, C=O, O, NH o N-CH3;

en la que R10 es fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo, en el que cada fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, hidroxilo, ciano, alquilo C1-6, amino, polihaloalquilo C1-6 o alquiloxilo C1-6; o

10 R1 es un radical de fórmula

imagen3

15 enlaqueX3esCHoN;

R2 es metilo, etilo, propilo o cicloalquilo C3-6;

cada R3 y R4 se selecciona independientemente de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroxilo, trifluorometilo, 20 metiloxilo; o R3 y R4 se toman junto con el átomo de carbono al que están unidos para formar un anillo de ciclopropilo o un radical de fórmula C(=O);

R5 R6

cada y se seleccionan independientemente de hidrógeno, halo, alquiloxilo C1-6, ciano, alquilo C1-6, -OCH2CH2NR8R9, -CH2OCH2CH2NR8R9, -OCH2CH2CH2NR8R9; 25 R7 es hidrógeno, metilo o flúor;

cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, carbonilo, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, dihidroxialquilo C1-6, cianoalquilo

30 C1-6, trihaloalquilo C1-6, fenilalquilo C1-6, di(alquil C1-6)aminoalquilo C1-6, alquilsulfonilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, morfolinilcarbonilo, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, piperidinilalquilo C1-6, tiomorfolinilalquilo C1-6, cicloalquilo C3-6-metilo, piridinilo, pirimidinilo, fenilo, halofenilo, oxanilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6 o alquil C1-6-carbonilaminoalquilo C1-6;

35 las formas de N-óxido de los mismos, las sales de adición farmacéuticamente aceptables de los mismos y los solvatos de los mismos.

Los compuestos de fórmula (I) y los productos intermedios de la invención también pueden existir en sus formas tautoméricas. Aunque tales formas no se indiquen explícitamente en la fórmula anterior, se pretende que estén

40 incluidas dentro del alcance de la presente invención. Las formas tautoméricas de los compuestos de fórmula (I) pretenden comprender aquellos compuestos de fórmula (I) en los que, por ejemplo, un grupo enol se convierte en un grupo ceto (tautomería ceto-enólica).

Siempre que los sistemas de anillos heterocíclicos de R1 contengan un resto -CH2-, -CH= o -NH-, los sustituyentes o 45 la parte restante de la molécula pueden unirse a cada átomo de carbono o nitrógeno, lo que implica que pueden remplazarse uno o ambos átomos de hidrógeno en el mismo carbono.

Varios términos usados en las definiciones anteriores y a continuación en el presente documento se explican en lo que sigue. Estos términos se usan a veces como tales o en términos compuestos.

50 Tal como se usa en las definiciones anteriores y a continuación en el presente documento, halo es genérico para flúor, cloro, bromo y yodo; alquilo C1-6 define radicales hidrocarbonados saturados de de cadena lineal y ramificada que tienen desde 1 hasta 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, 1metiletilo, 2-metilpropilo, 2-metilbutilo, 2-metilpentilo y similares; haloalquilo C1-6 define el alquilo C1-6 que contiene un

55 sustituyente halo, por ejemplo, fluorometilo; trihaloalquilo C1-6 define el alquilo C1-6 que contiene tres sustituyentes halo idénticos o diferentes, por ejemplo, trifluorometilo; polihaloalquilo C1-6 como grupo o parte de un grupo se define como alquilo C1-6 sustituido con uno o más átomos de halógeno, tales como por ejemplo, 2, 3, 4 o 5, por ejemplo metilo sustituido con uno o más átomos de flúor, por ejemplo, difluorometilo o trifluorometilo, 1,1-difluoro-etilo, 1,1difluoro-2,2,2-trifluoroetilo y similares. En caso de que más de un átomo de halógeno se unen a un grupo alquilo C1-6

60 dentro de la definición de polihaloalquilo C1-6, pueden ser iguales o diferentes; alquenilo C2-6 define radicales hidrocarbonados de cadena lineal y ramificada que contienen un doble enlace, en particular un doble enlace, y que

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tienen desde 2 hasta 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, etenilo, 2-propenilo, 3-butenilo, 2-pentenilo, 3pentenilo, 3-metil-2-butenilo, y similares; alquinilo C1-6 define radicales hidrocarbonados de cadena lineal y ramificada que contienen un triple enlace, en particular un triple enlace, y que tienen desde 2 hasta 6 átomos de carbono, tales como, por ejemplo, etinilo, 2-propinilo, 3-butinilo, 2-butinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 3-hexinilo, y

5 similares; cicloalquilo C3-6 incluye grupos hidrocarbonados cíclicos que tienen desde 3 hasta 6 carbonos, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, y similares.

El término “sales de adición farmacéuticamente aceptables” significa sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables. Las sales de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptables tal como se mencionó anteriormente en el presente documento o a continuación en el presente documento pretenden comprender las formas de sales de adición de base no tóxicas y de ácido no tóxicas terapéuticamente activas que puedan formar los compuestos de fórmula (1). Los compuestos de fórmula (I) que tienen propiedades básicas pueden convertirse en sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables tratando dicha forma de base con un ácido apropiado. Los ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como ácidos

15 hidrácidos halogenados, por ejemplo ácido clorhídrico o bromhídrico; sulfúrico; nítrico; fosfórico y ácidos similares; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico, malónico, sucínico (es decir, ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico y ácidos similares.

Los compuestos de fórmula (I) que tienen propiedades ácidas pueden convertirse en sus sales de adición de base farmacéuticamente aceptables tratando dicha forma de ácido con una base orgánica o inorgánica adecuada. Las formas de sales de base apropiadas comprenden, por ejemplo, las sales de amonio, las sales de metales alcalinos y alcalinotérreos, por ejemplo las sales de litio, sodio, potasio, magnesio, calcio y similares, sales con bases orgánicas, por ejemplo las sales de benzatina, N-metil-D-glucamina, hidrabamina y sales con aminoácidos tales

25 como, por ejemplo, arginina, lisina y similares.

Para uso terapéutico, las sales de los compuestos de fórmula (I) son aquéllas en las que el contraión es farmacéuticamente aceptable. Sin embargo, también pueden encontrar uso sales de ácidos y bases que no son farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, en la preparación o purificación de un compuesto farmacéuticamente aceptable. Todas las sales, ya sean farmacéuticamente aceptables o no, están incluidas dentro del ámbito de la presente invención.

Una sal de amonio cuaternario de un compuesto según la fórmula (I) define dicho compuesto que puede formarse mediante una reacción entre un nitrógeno básico de un compuesto según la fórmula (I) y un agente de

35 cuaternización apropiado, tal como, por ejemplo, un haluro de alquilo, haluro de arilo o haluro de arilalquilo opcionalmente sustituidos, en particular yoduro de metilo y yoduro de bencilo. También pueden usarse otros reactivos con buenos grupos salientes, tales como, por ejemplo, trifluorometanosulfonatos de alquilo, metanosulfonatos de alquilo y p-toluensulfonatos de alquilo. Una sal de amonio cuaternario tiene al menos un nitrógeno con carga positiva. Los contraiones farmacéuticamente aceptables incluyen cloro, bromo, yodo, trifluoroacetato e iones acetato. Las sales de amonio cuaternario de los compuestos de fórmula (I) están incluidas dentro del ámbito de la presente invención.

Los términos solvatos comprenden los hidratos y las formas de adición de disolventes que pueden formar los compuestos de fórmula (I) y las sales de adición farmacéuticamente aceptables de los mismos. Son ejemplos de

45 tales formas los hidratos, alcoholatos y similares.

El término formas estereoquímicamente isoméricas de compuestos de fórmula (I), tal como se usó o se usa a continuación en el presente documento, define todos los posibles compuestos que se componen de los mismos átomos unidos mediante la misma secuencia de enlaces pero que tienen estructuras tridimensionales diferentes que no son intercambiables, que pueden presentar los compuestos de fórmula (I). A menos que se mencione o indique lo contrario, la designación química de un compuesto abarca la mezcla de todas las posibles formas estereoquímicamente isoméricas que puede presentar dicho compuesto. Dicha mezcla puede contener todos los diaestereómeros y/o enantiómeros de la estructura molecular básica de dicho compuesto. Todas las formas estereoquímicamente isoméricas de los compuestos de fórmula (I) tanto en forma pura como en mezcla entre sí

55 pretenden estar abarcadas dentro del alcance de la presente invención.

Son de especial interés aquellos compuestos de formula (I) que son estereoquímicamente puros.

Las formas estereoquímicamente puras de los compuestos y productos intermedios tal como se mencionan en el presente documento se definen como isómeros sustancialmente libres de otras formas enantioméricas o diaestereoméricas de la misma estructura molecular básica de dichos compuestos o productos intermedios. En particular, el término “estereoisoméricamente puro” se refiere a compuestos o productos intermedios que tienen un exceso estereoisomérico de al menos el 80% (es decir, como mínimo el 80% de un isómero y como máximo el 20% de los otros posibles isómeros) hasta un exceso estereoisomérico del 100% (es decir, el 100% de un isómero y nada 65 de los otros), más en particular, compuestos o productos intermedios que tienen un exceso estereoisomérico del 90% hasta el 100%, incluso más en particular que tienen un exceso estereoisomérico del 94% hasta el 100% y más

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en particular que tienen un exceso estereoisomérico del 97% hasta el 100%. Los términos “enantioméricamente puro” y “diaestereoméricamente puro” deben entenderse de manera similar, pero entonces teniendo en cuenta el exceso enantiomérico, respectivamente el exceso diastereomérico de la mezcla en cuestión.

5 Si un compuesto lleva un centro quiral y los dos enantiómeros de este compuesto se han separado, un asterisco “∗” en el dibujo indica que no se ha determinado la estereoquímica absoluta del enantiómero.

Las formas de N-óxido de los compuestos de fórmula (1) pretenden comprender aquellos compuestos de fórmula (I) en los que uno o varios átomos de nitrógeno terciarios se oxidan al denominado N-óxido, particularmente aquellos 10 N-óxidos en los que uno o más de los nitrógenos de piperidina o piperazina están N-oxidados.

Los compuestos de fórmula (I) pueden convertirse en las formas de N-óxido correspondientes siguiendo procedimientos conocidos en la técnica para convertir un nitrógeno trivalente en su forma de N-óxido. Dicha reacción de N-oxidación puede llevarse a cabo en general reaccionando el material de partida de fórmula (I) con un peróxido 15 orgánico o inorgánico apropiado. Los peróxidos inorgánicos apropiados comprenden, por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peróxidos de metales alcalinos o alcalinotérreos, por ejemplo peróxido de sodio, peróxido de potasio; los peróxidos orgánicos apropiados pueden comprender peroxiácidos tales como, por ejemplo, ácido bencenocarboperoxoico o ácido bencenocarboperoxoico halosustituido, por ejemplo ácido 3clorobencenocarboperoxoico, ácidos peroxoalcanoicos, por ejemplo ácido peroxoacético, hidroperóxidos de alquilo,

20 por ejemplo hidroperóxido de t-butilo. Disolventes adecuados son, por ejemplo, agua, alcoholes inferiores, por ejemplo etanol y similares, hidrocarburos, por ejemplo tolueno, cetonas, por ejemplo 2-butanona, hidrocarburos halogenados, por ejemplo diclorometano, y mezclas de tales disolventes.

La presente invención también pretende incluir cualquier isótopo de los átomos presentes en los compuestos de la 25 invención. Por ejemplo, los isótopos de hidrógeno incluyen tritio y deuterio y los isótopos de carbono incluyen C-13 y C-14.

Siempre que se use a continuación en el presente documento, el término “compuestos de fórmula (I)” también pretende incluir las formas de N-óxido, las sales de adición de base o ácido farmacéuticamente aceptables, los 30 solvatos y todas las formas estereoisoméricas de los mismos.

Un primer grupo de compuestos interesantes consiste en aquellos compuestos de fórmula (I) en los que se aplican una o más de las siguientes restricciones:

35 a) Y es CH2-CH2;

b) arilo es fenilo;

c) Het es piridinilo, pirimidinilo, bencimidazolilo o indazolilo;

40 d) cada arilo o Het puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-carbonilo, (alquil C1-6)-NR8R9 u -OR8;

e) X1 es CH2 o N-CH3; 45 f) X2 es CH2, C=O u O;

g) R10 es fenilo que puede estar sustituido con ciano;

50 h) R2 es metilo;

j) R3 y R4 son hidrógeno;

k) R5 y R6 son hidrógeno; 55 l) R7 es hidrógeno; o

m) cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6 o trihaloalquilo C1-6.

60 Un segundo grupo de compuestos interesantes consiste en aquellos compuestos de fórmula (I) en los que R1 es piridinilo o pirimidinilo.

Un tercer grupo de compuestos interesantes consiste en aquellos compuestos de fórmula (I) o uno de los grupos anteriores de compuestos de fórmula (I) interesantes en los que se aplican una o más de las siguientes 65 restricciones:

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a) Y es CH2-CH2; b) R1 es fenilo, piridilo o pirimidilo;

5 c) cada fenilo, piridilo o pirimidilo puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano o alquiloxilo C1-6; e) Xes CH2;

10 f)X2esO; g) R10 es fenilo sustituido con ciano; d) R2 es metilo;

15 e) R3 y R4 son hidrógeno; h) R5 y R6 son hidrógeno;

20 i) R7 es hidrógeno. Un grupo de compuestos preferidos consiste en aquellos compuestos de fórmula (I) en los que Y es CH2-CH2; arilo es fenilo; Het es piridinilo, pirimidinilo, bencimidazolilo o indazolilo; cada arilo o Het puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-carbonilo,

25 -alquil C1-6-NR8R9u -OR8; X1 es CH2 o N-CH3; X2 es CH2, C=O u O; R10 es fenilo que puede estar sustituido con ciano; R2 es metilo; R3 y R4 son hidrógeno; R5 y R6 son hidrógeno; R7 es hidrógeno; y cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6 o trihaloalquilo C1-6.

Un grupo de compuestos más preferidos consiste en aquellos compuestos de fórmula (I) en los que Y es CH2-CH2; R1

30 es fenilo, piridinilo o pirimidinilo; cada fenilo, piridinilo o pirimidinilo puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano o alquiloxilo C1-6; X1 es CH2; X2 es O; R10 es fenilo sustituido con ciano; R2 es metilo; R3 y R4 son hidrógeno; R5 y R6 son hidrógeno; y R7 es hidrógeno.

Los compuestos más preferidos son el comp. n.º 6, el comp. n.º 5b, el comp. n.º 7, el comp. n.º 4 y el comp. n.º 17. 35

Comp. n.º 6

(Enantiómero B); comp. n.º 5b

Comp. n.º 7

Comp. n.º 4

Comp. n.º 17

y las formas de N-óxido de los mismos, las sales de adición farmacéuticamente aceptables de los mismos y los solvatos de los mismos; en particular y las sales de adición farmacéuticamente aceptables de los mismos y los solvatos de los mismos; más en particular y las sales de adición farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse según los métodos generales descritos a continuación en el presente documento. Los materiales de partida y algunos de los productos intermedios son compuestos conocidos y están disponibles comercialmente o pueden prepararse según procedimientos de reacción convencionales conocidos en general en la técnica.

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Algunos métodos de preparación se describirán con más detalle a continuación en el presente documento. Otros métodos para obtener compuestos finales de fórmula (I) se describen en los ejemplos.

Pueden prepararse compuestos de fórmula (I) hidrolizando productos intermedios de fórmula (II), según métodos conocidos en la técnica, sometiendo los productos intermedios de fórmula (II) a reactivos apropiados, tal como ácido clorhídrico, en presencia de un disolvente inerte para la reacción, tal como dioxano.

imagen4

10 Alternativamente, pueden prepararse compuestos de fórmula (I) añadiendo un exceso de una base, por ejemplo sal de potasio de 2-metil-2-propanol o diisopropilamiduro de litio a productos intermedios de fórmula (III) en presencia de productos intermedios de fórmula (IV), en los que halo es cloro o bromo, en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano, dioxano o dimetilformamida.

15

imagen5

La presente invención también se refiere a los productos intermedios de fórmula (II)

imagen6

20

incluyendo las formas estereoquímicamente isoméricas de los mismos;

en la que 25 Y es CH2 o CH2-CH2;

R1 es arilo o Het;

30 en el que arilo es fenilo o naftalenilo;

en el que Het es tienilo, pirrolilo, pirrolinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, furanilo, piperidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, piperazinilo, pirazinilo, triazinilo, indolizinilo, azaindolizinilo, indolilo, indolinilo, benzotienilo, indazolilo, benzoxazolilo,

35 bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, cromanilo, purinilo, quinolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxazolinilo, naftiridinilo o pteridinilo;

dos átomos de carbono en arilo o Het pueden estar unidos por puente (es decir, formar un resto bi o tricíclico) con un radical bivalente seleccionado de 40 -O-CH2-CH2-O-(a-1),

-CH2-O-CH2-O-(a-2),

45 -O-CH2-CH2-CH2-(a-3),

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-O-CH2-CH2-NR8-(a-4),

-O-CR82-O-(a-5), 5 -O-CH2-CH2-(a-6),

-CH2-N-CH2-CH2-(a-7),

-(CH2)3-(a-8),

o

-(CH2)4-(a-9);

15 cada arilo, Het, arilo unido por puente o Het unido por puente puede estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, nitro, hidroxicarbonilo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilamino C3-6, metiletilamino, aminocicloalquilo C3-6, haloalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, alquil C1-6-carbonilo, alquiloxi C1-6-carbonilo, alquenil C2-6-carbonilo, oxima, alquil C1-6-oxima, amidoxima, -C≡C-CH2O-CH3, -C≡C-CH2N(CH3)2, -C≡C-Si(CH3)3, hidroxialquilo C1-6, hidroxialquenilo C2-6, hidroxialquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, cianoalquenilo C2-6, aminocarbonilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquenilo C2-6, alquilsulfonil C1-6-alquinilo C2-6, -PO(O-alquilo C1-6)2, -B(OH)2, -S-CH3, SF5, alquilsulfonilo C1-6, -NR8R9, -alquil C1-6-NR8R9, -OR8, alquil C1-6-OR8, -CONR8R9, piperidinilalquilo C1-6, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, piperidinilo, piperazinilo, alquil C1-6

25 piperazinilo morfolinilo, fenilo, tienilo, pirazolilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piridinilo, pirimidinilo, oxadiazolilo, imidazolilo, imidazolilalquinilo C2-6, alquil C1-6-imidazolilalquinilo C2-6, cianopiridinilo, fenilalquilo C1-6, fenilalquenilo C2-6, morfolinilalquilo C1-6, alquiloxi C1-6-fenilo, trihaloalquil C1-6-fenilo, metilpirazolilo, halopirimidinilo o dimetilaminopirrolidinilo; o

R1 es un radical de fórmula

imagen7

en el que X1 es CH2, NH o N-CH3; en el que X2 es CH2, C=O, O, NH o N-CH3; en el que R10 es fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo, en el que cada fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo

puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, hidroxilo, ciano, alquilo C1-6, amino, polihaloalquilo C1-6 alquiloxilo C1-6; o R1 es un radical de fórmula

imagen8

45 en elqueX3 es CH o N;

R2 es metilo, etilo, propilo o cicloalquilo C3-6;

cada R3 y R4 se selecciona independientemente de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroxilo, trifluorometilo, metiloxilo; o R3 y R4 se toman junto con el átomo de carbono al que se unen para formar un anillo de ciclopropilo o un radical de fórmula C(=O);

R5 R6

cada y se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquiloxilo C1-6, ciano, alquilo C1-6, 55 -OCH2CH2NR8R9, -CH2OCH2CH2NR8R9, -OCH2CH2CH2NR8R9;

R7 es hidrógeno, metilo o flúor;

cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, carbonilo, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, dihidroxialquilo C1-6, cianoalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, fenilalquilo C1-6, di(alquil C1-6)aminoalquilo C1-6, alquilsulfonilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6,

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morfolinilcarbonilo, piperazinilalquilo C1-6 , alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, piperidinilalquilo C1-6, tiomorfolinilalquilo C1-6, cicloalquilo C3-6-metilo, piridinilo, pirimidinilo, fenilo, halofenilo, oxanilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6 o alquil C1-6 carbonilaminoalquilo C1-6;

5 las formas de N-óxido de los mismos, las sales de adición farmacéuticamente aceptables de los mismos y los solvatos de los mismos.

Pueden definirse grupos de compuestos interesantes, preferidos, más preferidos y los más preferidos para los compuestos de fórmula (II), según los grupos definidos para los compuestos de fórmula (I).

10 Pueden preparase productos intermedios de fórmula (II) añadiendo sal de potasio de 2-metil-2-propanol a productos intermedios de fórmula (V) en presencia de productos intermedios de fórmula (VI), en los que W es un grupo saliente tal como cloro, bromo o mesilato, en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano.

imagen9

Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (III) sometiendo los productos intermedios de fórmula (V) a reactivos apropiados, tales como ácido clorhídrico, en presencia de un disolvente inerte para la reacción, por ejemplo dioxano.

imagen10

Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (V) añadiendo una mezcla de sal de potasio de 2-metil-2propanol e isocianato de tosilmetilo en dimetilsulfóxido a un producto intermedio de fórmula (VIII) en un disolvente 25 adecuado tal como metanol.

imagen11

Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (VIII) tratando un producto intermedio de fórmula (IX), con un

30 reactivo de organolitio tal como, por ejemplo n-butil-litio en un disolvente inerte para la reacción, por ejemplo tetrahidrofurano, y posteriormente haciendo reaccionar dicho producto intermedio con un producto intermedio de fórmula (X).

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imagen12

También pueden prepararse productos intermedios de fórmula (VIII) convirtiendo productos intermedios de fórmula

(XI) en presencia de un oxidante adecuado tal como dióxido de manganeso en un disolvente adecuado tal como dioxano o en presencia de tetróxido de manganeso y potasio y tris[2-(2-metoxietoxi)etil]amina, en un disolvente adecuado tal como diclorometano.

imagen13

10 Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (XI) tratando un producto intermedio de fórmula (IX), con un reactivo de organolitio tal como, por ejemplo n-butil-litio, en un disolvente inerte para la reacción, por ejemplo tetrahidrofurano, y posteriormente haciendo reaccionar dicho producto intermedio con un producto intermedio de fórmula (XII).

imagen14

Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (IX) añadiendo sal de sodio de metanol en metanol, a productos intermedios de fórmula (XIII), en los que halo significa independientemente cloro o bromo, en un disolvente adecuado tal como metanol.

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Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (XIII) reaccionando productos intermedios de fórmula (XIV) con un agente de halogenación adecuado, por ejemplo oxicloruro de fósforo, a una temperatura adecuada, 25 preferentemente a reflujo.

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Pueden prepararse productos intermedios de fórmula (XIV) calentando productos intermedios de fórmula (XV), en un 30 medio ácido, preferentemente en ácido sulfúrico.

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Los compuestos de fórmula (1) o sus productos intermedios también pueden convertirse entre sí mediante reacciones o transformaciones de grupos funcionales conocidas en la técnica. Algunas de tales transformaciones se 5 han descrito ya anteriormente en el presente documento. Otros ejemplos son hidrólisis de ésteres carboxílicos en el ácido carboxílico o alcohol correspondiente; hidrólisis de amidas en los ácidos carboxílicos o las aminas correspondientes; hidrólisis de nitrilos en las amidas correspondientes; pueden remplazarse grupos amino en imidazol o fenilo por un hidrógeno mediante reacciones de diazotación conocidas en la técnica y posterior reemplazo del grupo diazo por hidrógeno; pueden convertirse alcoholes en ésteres y éteres; pueden convertirse aminas 10 primarias en aminas secundarias o terciarias; pueden hidrogenarse dobles enlaces en el enlace sencillo correspondiente; puede convertirse un radical yodo en un grupo fenilo en un grupo éster mediante inserción de monóxido de carbono en presencia de un catalizador de paladio adecuado; puede convertirse un radical yodo, en un grupo fenilo, en un grupo alquinilo C2-6 o un derivado del mismo (por ejemplo, -C≡C-Si(CH3)3 o hidroxialquenilo C2-6) mediante reacción con el compuesto de alquinilo C2-6 adecuado o derivado del mismo en presencia de un catalizador

15 de paladio adecuado; puede convertirse un radical -C≡C-Si(CH3)3, en un grupo fenilo, en -C≡CH en presencia de una base adecuada.

Algunos de los compuestos de fórmula (I) y algunos de los productos intermedios en la presente invención pueden contener un átomo de carbono asimétrico. Las formas estereoquímicamente isoméricas puras de dichos compuestos 20 y dichos productos intermedios pueden obtenerse mediante la aplicación de procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, pueden separarse diastereoisómeros mediante métodos físicos tales como técnicas de cromatografía o cristalización selectiva, por ejemplo distribución contracorriente, cromatografía de líquidos y métodos similares. Pueden obtenerse enantiómeros de mezclas racémicas convirtiendo en primer lugar dichas mezclas racémicas con agentes de resolución adecuados tales como, por ejemplo, ácidos quirales, en mezclas de sales o compuestos 25 diastereoméricos; separando luego físicamente dichas mezclas de sales o compuestos diastereoméricos mediante, por ejemplo, técnicas de cromatografía, cristalización selectiva o cromatografía de fluidos supercríticos, por ejemplo cromatografía de líquidos y métodos similares; y convirtiendo finalmente dichas sales o compuestos diastereoméricos separados en los enantiómeros correspondientes. También pueden obtenerse formas estereoisoméricamente isoméricas puras de las formas estereoquímicamente isoméricas puras de los productos

30 intermedios y materiales de partida apropiados, siempre que las reacciones intermedias se produzcan de manera estereoespecífica.

La presente invención también se refiere a compuesto de fórmula (I) tal como se definió anteriormente para su uso como medicamento; en particular para su uso en el tratamiento de un trastorno mediado por la polimerización de 35 tubulina, un trastorno mediado por PARP o un trastorno mediado por TANK, para su uso para inhibir el crecimiento tumoral, para su uso para inhibir el crecimiento anómalo de células.

Los compuestos de la presente invención tienen propiedades de inhibición de PARP y de inhibición de la polimerización de tubulina tal como puede observarse en la parte experimental a continuación en el presente 40 documento.

El término “PARP” se usa en el presente documento para significar una proteína que tiene actividad de poli-ADPribosilación. Dentro del significado de este término, PARP abarca todas las proteínas codificadas por un gen parp, mutantes de las mismas y proteínas alternativamente con corte y empalme de las mismas. Adicionalmente, tal como

45 se usa en el presente documento, el término “PARP” incluye análogos, homólogos y ortólogos de PARP en otros animales.

El término “PARP”, incluye pero no se limita a PARP-1. Dentro del significado de este término pueden estar abarcadas PARP-2, PARP-3, Vault-PARP (PARP-4), PARP-7 (TiPARP), PARP-8, PARP-9 (Bal), PARP-10, PARP50 11, PARP-12, PARP-13, PARP-14, PARP-15, PARP-16, TANK-1, TANK-2 y TANK-3.

El término “inhibidor de PARP” se usa para identificar un compuesto, que puede interaccionar con una PARP o una TANK e inhibir su actividad, más particularmente su actividad enzimática. Inhibir la actividad enzimática de PARP o TANK significa reducir la capacidad de una PARP o una TANK para producir poli(ADP-ribosa) o para inducir la poli

55 ADP-ribosilación de un sustrato. Preferiblemente, tal inhibición es específica, es decir el inhibidor de PARP reduce la capacidad de una PARP para producir poli(ADP-ribosa) o para inducir la poli-ADP-ribosilación de un sustrato a una concentración menor que la concentración del inhibidor que se requiere para producir algún otro efecto biológico no relacionado.

60 El término “compuesto con propiedades de inhibición de la polimerización de tubulina” o “inhibidor de la

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polimerización de tubulina” se usa para identificar un compuesto que

-estabiliza los microtúbulos, inhibe la despolimerización de los microtúbulos, estabiliza los microtúbulos o congela la estructura microtubular, 5 -perturba la polimerización de los microtúbulos e perturba la formación microtubular, o

-desestabiliza los microtúbulos e impide la formación de los microtúbulos.

Los compuestos de la presente invención son inhibidores de PARP específicos de TANK. El término “inhibidores de PARP específicos de TANK” se usa para identificar compuestos que reducen la actividad enzimática de un miembro de TANK (por ejemplo, TANK-2) a una concentración menor que la concentración del inhibidor que se requiere para producir la inhibición de otra enzima PARP tal como, por ejemplo, PARP-1.

15 La presente invención también contempla el uso de compuestos en la preparación de un medicamento para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades y los trastornos en un animal, particularmente un ser humano, descritos en el presente documento.

La presente invención también contempla el uso de compuestos de fórmula (I) para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno mediado por la polimerización de tubulina, una PARP o una TANK.

En vista de sus propiedades de unión a PARP, los compuestos de la presente invención pueden usarse como compuestos de referencia o compuestos trazadores, en cuyo caso uno de los átomos de la molécula puede remplazarse, por ejemplo, por un isótopo radiactivo.

25 La presente invención también comprende una composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y como principio activo una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención.

Para preparar la composición farmacéutica de esta invención; se combina una cantidad eficaz de un compuesto particular, en forma de sal de adición de ácido o base, como el principio activo, en mezcla íntima con un portador farmacéuticamente aceptable, vehículo que puede adoptar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseadas para la administración. Estas composiciones farmacéuticas están de manera deseable en forma de dosificación unitaria adecuada, preferiblemente, para administración por vía oral, por vía rectal, por vía 35 percutánea o mediante inyección parenteral. Por ejemplo, en la preparación de las composiciones en forma de dosificación oral, puede emplearse cualquiera de los medios farmacéuticos habituales, tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares en el caso de preparaciones líquidas orales tales como suspensiones, jarabes, elixires y disoluciones; o portadores sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares en el caso de polvos, píldoras, cápsulas y comprimidos. Debido a su facilidad de administración, los comprimidos y las cápsulas representan las formas unitarias de dosificación oral más ventajosas, en cuyo caso se emplean obviamente portadores farmacéuticos sólidos. Para composiciones parenterales, el portador comprenderá habitualmente agua estéril, al menos en gran parte, aunque pueden incluirse otros componentes, por ejemplo para ayudar a la solubilidad. Pueden preparase disoluciones inyectables, por ejemplo, en las que el portador comprende solución salina, disolución de glucosa o una mezcla de solución salina y 45 disolución de glucosa. También pueden prepararse suspensiones inyectables en cuyo caso pueden emplearse portadores líquidos, agentes de suspensión apropiados y similares. En las composiciones adecuadas para la administración percutánea, el portador comprende opcionalmente un agente de potenciación de la penetración y/o un agente humectante adecuado, combinado opcionalmente con aditivos adecuados de cualquier naturaleza en proporciones minoritarias, aditivos que no provocan un efecto perjudicial significativo en la piel. Dichos aditivos pueden facilitar la administración a la piel y/o pueden ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones pueden administrarse de diversas maneras, por ejemplo, como parche transdérmico, como pipeta para la aplicación en la piel (spot-on), como pomada. Resulta especialmente ventajoso formular las composiciones farmacéuticas mencionadas en forma unitaria de dosificación para facilidad de administración y uniformidad de dosificación. La forma unitaria de dosificación tal como se usa en la memoria descriptiva y en las reivindicaciones del

55 presente documento se refiere a unidades físicamente diferenciadas adecuadas como dosificaciones unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de principio activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el portador farmacéutico requerido. Ejemplos de tales formas unitarias de dosificación son comprimidos (incluyendo comprimidos ranurados o recubiertos), cápsulas, píldoras, paquetes de polvo, obleas, disoluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas, cucharadas y similares, y múltiples segregados de los mismos.

Los compuestos de la presente invención pueden tratar o prevenir el daño tisular resultante de daño o muerte celular debidos a necrosis o apoptosis; puede mejorar el daño tisular neural o cardiovascular, incluyendo los que siguen a isquemia focal, infarto del miocardio y lesión por reperfusión; pueden tratar diversas enfermedades y estados 65 provocados o agravados por la actividad PARP; pueden ampliar o aumentar la duración de vida o capacidad proliferativa de las células; pueden alterar la expresión génica de células senescentes; pueden provocar

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radiosensibilización y/o quimiosensibilización de células. En general, la inhibición de la actividad PARP libra a las células de la pérdida de energía, impidiendo, en el caso de las células neurales, la despolarización irreversible de las neuronas, y por tanto, proporciona neuroprotección.

5 Por los motivos anteriores, la presente invención se refiere además a los compuestos identificados anteriormente para su uso en un método de administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de dichos compuestos en una cantidad suficiente para inhibir la actividad PARP, para tratar o prevenir el daño tisular resultante de daño o muerte celular debidos a necrosis o apoptosis, para efectuar una actividad neuronal no mediada por toxicidad de NMDA, para efectuar una actividad neuronal mediada por toxicidad de NMDA, para tratar el daño tisular neural resultante de isquemia y lesión por perfusión, trastornos neurológicos y enfermedades neurodegenerativas; para prevenir o tratar un ictus vascular; para tratar o prevenir trastornos cardiovasculares; para tratar otros estados y/o trastornos tales como degeneración muscular relacionada con la edad, SIDA y otras enfermedades de senescencia inmunitaria, inflamación, gota, artritis, aterosclerosis, caquexia, cáncer, enfermedades degenerativas del musculo esquelético que implican senescencia replicativa, diabetes, traumatismo craneal, trastornos inflamatorios del intestino (tales

15 como colitis y enfermedad de Crohn), distrofia muscular, osteoartritis, osteoporosis, dolor crónico y/o agudo (tal como dolor neuropático), insuficiencia renal, isquemia retiniana, choque séptico (tal como choque endotóxico) y envejecimiento de la piel, para ampliar la duración de vida y la capacidad proliferativa de células; para alterar la expresión génica de células senescentes; provocar la quimiosensibilización y/o radiosensibilización (hipóxica) de células tumorales. La presente invención también se refiere a los compuestos de fórmula (I) para su uso en el tratamiento de enfermedades y estados en un animal, en particular un ser humano, que comprende administrar a dicho animal una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos identificados anteriormente.

En particular, la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) para su uso en un método de tratamiento, prevención o inhibición de un trastorno neurológico en un animal, que comprende administrar a dicho

25 animal, en particular un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos identificados anteriormente. El trastorno neurológico se selecciona del grupo que consiste en neuropatía periférica provocada por lesión física o estado patológico, lesión cerebral traumática, daño físico a la médula espinal, ictus asociado con daño cerebral, isquemia focal, isquemia global, lesión por perfusión, enfermedad desmielinizante y trastorno neurológico relacionado con neurodegeneración.

La presente invención también contempla los compuestos de fórmula (I) para su uso en la inhibición de la actividad PARP, para tratar, prevenir o inhibir el daño tisular resultante de daño o muerte celular debidos a necrosis o apoptosis para tratar, prevenir o inhibir un trastorno neurológico en un animal.

35 El término “prevenir la neurodegeneración” incluye la capacidad de prevenir la neurodegeneración en pacientes a los que se les ha diagnosticado recientemente que tienen una enfermedad neurodegenerativa, o que corren el riesgo de desarrollar una nueva enfermedad degenerativa y para prevenir la neurodegeneración adicional en pacientes que ya padecen o tienen síntomas de una enfermedad neurodegenerativa.

El término “tratamiento” tal como se usa en el presente documento incluye cualquier tratamiento de una enfermedad y/o un estado en un animal, particularmente un ser humano e incluye: (i) prevenir que se produzca una enfermedad y/o un estado en un sujeto que puede estar predispuesto a la enfermedad y/o el estado pero que no se le ha diagnosticado aún que la tiene; (ii) inhibir la enfermedad y/o el estado, es decir, detener su desarrollo; (iii) aliviar la enfermedad y/o el estado, es decir, provocar la regresión de la enfermedad y/o el estado. Preferiblemente, el término

45 “tratamiento” significa (ii) o (iii).

El término “radiosensibilizador”, tal como se usa en el presente documento, se define como una molécula, preferiblemente una molécula de bajo peso molecular, administrada a animales en cantidades terapéuticamente eficaces para aumentar la sensibilidad de las células a la radiación ionizante y/o para promover el tratamiento de enfermedades que pueden tratarse con radiación ionizante. Las enfermedades que pueden tratarse con radiación ionizante incluyen enfermedades neoplásicas, tumores benignos y malignos y células cancerosas. El tratamiento con radiación ionizante de otras enfermedades no indicadas en el presente documento también está contemplado por la presente invención.

55 El término “quimiosensibilizador”, tal como se usa en el presente documento, se define como una molécula, preferiblemente de bajo peso molecular, administrada a animales en cantidades terapéuticamente eficaces para aumentar la sensibilidad de las células a la quimioterapia y/o para promover el tratamiento de enfermedades que pueden tratarse con agentes quimioterápicos. Las enfermedades que pueden tratarse con quimioterapia incluyen enfermedades neoplásicas, tumores benignos y malignos y células cancerosas. El tratamiento quimioterápico de otras enfermedades no indicadas en el presente documento también está contemplado por la presente invención.

Esta invención proporciona los compuestos de fórmula (I) para su uso en un método para inhibir el crecimiento anómalo de células, incluyendo células transformadas, mediante la administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la invención. El crecimiento anómalo de las células se refiere al crecimiento celular independiente del 65 mecanismo regulador normal (por ejemplo, pérdida de inhibición por contacto). Esto incluye la inhibición del crecimiento tumoral tanto directamente provocando detención del crecimiento, diferenciación terminal y/o apoptosis

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de las células cancerosas, como indirectamente, inhibiendo la neovascularización de los tumores.

Los compuestos, las composiciones y los métodos de la presente invención son particularmente útiles para tratar o prevenir el daño tisular resultante de daño o muerte celular debidos a necrosis o apoptosis.

5 Los compuestos de la presente invención pueden ser “agentes anticancerígenos”, término que también abarca “agentes antitumorales del crecimiento celular” y “agentes antineoplásicos”.

Esta invención también proporciona los compuestos de fórmula (I) para su uso en un método para inhibir el crecimiento tumoral mediante la administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la presente invención, a un sujeto, por ejemplo un mamífero (y más particularmente un ser humano) que necesita tal tratamiento.

Por ejemplo, los compuestos de la invención son útiles para tratar cánceres y para la quimiosensibilización y/o radiosensibilización de células tumorales en cánceres.

15 Los ejemplos de tumores, incluyendo tumores malignos de adultos y pediátricos, que pueden inhibirse mediante los compuestos de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, cáncer de pulmón incluyendo cáncer de pulmón de células pequeñas y cáncer de pulmón de células no pequeñas (por ejemplo, adenocarcinoma), cánceres de páncreas (por ejemplo, carcinoma de páncreas tal como, por ejemplo carcinoma de páncreas exocrino), cánceres de colon (por ejemplo, carcinomas colorrectales, tales como, por ejemplo, adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), cáncer de esófago, carcinoma bucal de células escamosas, carcinoma de lengua, carcinoma gástrico, cáncer de hígado, cáncer de nasofaringe, tumores hematopoyéticos de linaje linfoide (por ejemplo, leucemia linfocítica aguda, linfoma de células B, linfoma de Burkitt), linfoma no Hodgkin (por ejemplo, linfoma de células del manto), enfermedad de Hodgkin, leucemias mieloides (por ejemplo, leucemia mielógena aguda (LMA) o leucemia mielógena

25 crónica (LMC)), leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica (LLC), cáncer folicular de tiroides, síndrome mielodisplásico (SMD), tumores de origen mesenquimatoso, sarcomas de tejido blando, liposarcomas, sarcomas del estroma gastrointestinal, tumores malignos de la vaina del nervio periférico (TMVNP), sarcomas de Erwing, leiomiosarcomas, condrosarcomas mesenquimatosos, linfosarcomas, fibrosarcomas, rabdomiosarcomas, melanomas, teratocarcinomas, neuroblastomas, tumores cerebrales, meduloblastoma, gliomas, tumores benignos de la piel (por ejemplo, queratoacantomas), carcinoma de mama (por ejemplo, cáncer de mama avanzado), carcinoma de riñón, nefroblastoma, carcinoma de ovario, carcinoma cervicouterino, carcinoma de endometrio, carcinoma de vejiga, cáncer de próstata incluyendo la enfermedad avanzada y cáncer de próstata que no responde a terapia hormonal, cánceres de testículos, osteosarcoma, cáncer de cabeza y cuello, carcinoma epidermoide, mieloma múltiple (por ejemplo, mieloma múltiple que no responde al tratamiento), mesotelioma. Cánceres

35 particulares que pueden tratarse con los compuestos de la presente invención son cáncer de mama, cáncer colorrectal, cáncer de pulmón de células no pequeñas, leucemia mielógena aguda (LMA).

Como otro aspecto de la presente invención, se prevé una combinación de un inhibidor de PARP o un compuesto de fórmula (I) con propiedades de unión a tubulina con otro agente anticancerígeno, especialmente para su uso como medicamento, más específicamente en el tratamiento de cáncer o enfermedades relacionadas.

Para el tratamiento de los estados anteriores, pueden emplearse de manera ventajosa los compuestos de la invención en combinación con uno o más de otros agentes farmacéuticos, más particularmente, con otros agentes anticancerígenos o adyuvantes en la terapia contra el cáncer. Los ejemplos de agentes anticancerígenos o

45 adyuvantes (agentes de apoyo en la terapia) incluyen pero no se limitan a:

-compuestos de coordinación de platino, por ejemplo, cisplatino combinado opcionalmente con amifostina, carboplatino u oxaliplatino;

-compuestos de taxano, por ejemplo, paclitaxel, partículas de paclitaxel unidas a proteínas (Abraxane™) o docetaxel;

-inhibidores de la topoisomerasa I tales como compuestos de captotecina, por ejemplo, irinotecán, SN-38, topotecán, topotecán HCl;

55 -inhibidores de la topoisomerasa II tales como epipodofilotoxinas antitumorales o derivados de podofilotoxinas, por ejemplo, etopósido, fosfato de etopósido o tenipósido;

-alcaloides de la vinca antitumorales, por ejemplo, vinblastina, vincristina o vinorelbina;

-derivados de nucleósidos antitumorales, por ejemplo, 5-fluorouracilo, leucovorina, gemcitabina, gemcitabina HCl, capecitabina, cladribina, fludarabina, nelarabina,

-agentes de alquilación tales como mostaza de nitrógeno o nitrosourea, por ejemplo, ciclofosfamida, clorambucilo,

65 carmustina, tiotepa, mefalán (melfalán), lomustina, altretamina, busulfano, dacarbazina, estramustina, ifosfamida opcionalmente en combinación con mesna, pipobromano, procarbazina, estreptozocina, telozolomida, uracilo;

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-derivados de antraciclina antitumorales, por ejemplo, daunorubicina, doxorubicina opcionalmente en combinación con dexrazoxano, doxil, idarubicina, mitoxantrona, epirubicina, epirubicina HCl, valrubicina;

5 -moléculas que seleccionan como diana el receptor de IGF-1, por ejemplo, picropodofilina;

-derivados de tetracarcina, por ejemplo, tetrocarcina A;

-glucocorticoides, por ejemplo, prednisona;

10 -anticuerpos, por ejemplo, trastuzumab (anticuerpo contra HER2), rituximab (anticuerpo contra CD20), gemtuzumab, gemtuzumab ozogamicina, cetuximab, pertuzumab, bevacizumab, alemtuzumab, eculizumab, ibritumomab tiuxetán, nofetumomab, panitumumab, tositumomab, CNTO 328;

15 -antagonistas de receptores de estrógenos o moduladores selectivos de receptores de estrógenos o inhibidores de la síntesis de estrógenos, por ejemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, droloxifeno, faslodex, raloxifeno o letrozol;

-inhibidores de la aromatasa tales como exemestano, anastrozol, letrazol, testolactona y vorozol;

20 -agentes de diferenciación tales como retinoides, vitamina D o ácido retinoico y agentes bloqueantes del metabolismo del ácido retinoico (RAMBA), por ejemplo, Accutane;

-inhibidores de la ADN metiltransferasa, por ejemplo, azacitidina o decitabina; 25 -antifolatos, por ejemplo, premetrexed disódico;

-antibióticos, por ejemplo, antinomicina D, bleomicina, mitomicina C, dactinomicina, carminomicina, daunomicina, levamisol, plicamicina, mitramicina;

30 -antimetabolitos, por ejemplo, clofarabina, aminopterina, arabinósido de citocina o metotrexato, azacitidina, citarabina, floxuridina, pentostatina, tioguanina;

-agentes de inducción de apoptosis y agentes antiangiogénicos tales como inhibidores de Bcl-2, por ejemplo, YC 35 137, BH 312, ABT 737, gosipol, HA 14-1, TW 37 o ácido decanoico;

-agentes de unión a tubulina, por ejemplo, combrestatina, colchicinas o nocodazol;

-inhibidores de cinasas (por ejemplo, inhibidores de EGFR (receptor del factor de crecimiento epitelial), MTKI 40 (inhibidores de cinasas de múltiples dianas), inhibidores de mTOR, por ejemplo, flavoperidol, mesilato de imatinib, erlotinib, gefitinib, dasatinib, lapatinib, ditosilato de lapatinib, sorafenib, sunitinib, maleato de sunitinib, temsirolimús;

-inhibidores de la farnesiltransferasa, por ejemplo, tipifarnib;

45 -inhibidores de la histona desacetilasa (HDAC), por ejemplo, butirato de sodio, ácido hidroxámico-suberoilanilida (SAHA), depsipéptido (FR 901228), NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585, tricostatina A, vorinostat;

-inhibidores de la ruta ubiquitina-proteasoma, por ejemplo, PS-341, MLN .41 o bortezomib;

50 -Yondelis;

-inhibidores de la telomerasa, por ejemplo, telomestatina;

-inhibidores de metaloproteinasas de la matriz, por ejemplo, batimastat, marimastat, prinostat o metastat.

55 -interleucinas recombinantes, por ejemplo, aldesleucina, denileucina diftitox, interferón alfa 2a, interferón alfa 2b, peg-interferón alfa 2b

-inhibidores de MAPK 60 -retinoides, por ejemplo, alitretinoína, bexaroteno, tretinoína

-trióxido de arsénico

65 -asparaginasa

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-esteroides, por ejemplo, propionato de dromostanolona, acetato de megestrol, nandrolona (decanoato, fenpropionato), dexametasona

-agonistas o antagonistas de la hormonas liberadora de gonadotropina, por ejemplo, abarelix, acetato de goserelina, 5 acetato de histrelina, acetato de leuprolida

-talidomida, lenalidomida

-mercaptopurina, mitotano, pamidronato, pegademasa, pegaspargasa, rasburicasa

-miméticos de BH3, por ejemplo, ABT-737

-inhibidores de MEK, por ejemplo, PD98059, AZD6244, CI-1040

15 -análogos de factores estimulantes de colonias, por ejemplo, filgrastim, pegfilgrastim, sargramostim; eritropoyetina o análogos de la misma (por ejemplo, darbepoetina alfa); interleucina 11; oprelvecina; zoledronato, ácido zoledrónico; fentanilo; bisfosfonato; palifermina.

El término “compuesto de coordinación de platino” se usa en el presente documento para denotar cualquier compuesto de coordinación de platino que inhibe el crecimiento de células tumorales que proporciona platino en forma de un ion. El compuesto de coordinación de platino se administra ventajosamente en una dosificación de 1 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, por ejemplo de 50 a 400 mg/m2, particularmente para cisplatino en una dosificación de aproximadamente 75 mg/m2 y para carboplatino en aproximadamente 300 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

25 El término “compuestos de taxano” indica una clase de compuestos que tienen el sistema de anillos de taxano y relacionados con o derivados de extractos de determinadas especies de árboles del tejo (Taxus). El compuesto de taxano se administra ventajosamente en una dosificación de 50 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, por ejemplo de 75 a 250 mg/m2, particularmente para paclitaxel en una dosificación de aproximadamente 175 a 250 mg/m2 y para docetaxel en aproximadamente de 75 a 150 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

El término “inhibidores de la topoisomerasa” se usa para indicar enzimas que pueden alterar la topología del ADN en células eucariotas. Son críticas para funciones celulares importantes y la proliferación celular. Existen dos clases de

35 topoisomerasas en las células eucariotas, denominadas tipo I y tipo II. La topoisomerasa I es una enzima monomérica de un peso molecular de aproximadamente 100.000. La enzima se une al ADN e introduce una rotura de una sola hebra transitoria, desenrolla la doble hélice (o le permite desenrollarse) y posteriormente libera la rotura antes de disociarse de la hebra de ADN. La topoisomerasa II tiene un mecanismo de acción similar que implica la inducción de roturas de hebras de ADN o la formación de radicales libres.

El término “compuestos de camptotecina” se usa para indicar compuestos que están relacionados con o se derivan del compuesto de camptotecina original que es un alcaloide insoluble en agua derivado del árbol chino Camptotheca acuminata y del árbol indio Nothapodytes foetida. El compuesto de camptotecina se administra ventajosamente en una dosificación de 0,1 a 400 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, por ejemplo de 1 a

45 300 mg/m2, particularmente para irinotecán en una dosificación de aproximadamente 100 a 350 mg/m2 y para topotecán de aproximadamente 1 a 2 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

El término “compuestos de podofilotoxina" se usa para indicar compuestos que están relacionados con o derivados de de la podofilotoxina original, que se extrae de la planta mandrágora macho. El derivado de podofilotoxina antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 30 a 300 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, por ejemplo de 50 a 250 mg/m2, particularmente para etopósido en una dosificación de aproximadamente 35 a 100 mg/m2 y para tenipósido de aproximadamente 50 a 250 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

El término “alcaloides de la vinca antitumorales" se usa para indicar compuestos que están relacionados con o

55 derivados de extractos de la planta vinca pervinca (Vinca rosea). El alcaloide de la vinca antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 2 a 30 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, particularmente para vinblastina en una dosificación de aproximadamente 3 a 12 mg/m2, para vincristina en una dosificación de aproximadamente 1 a 2 mg/m2 y para vinorelbina en una dosificación de aproximadamente 10 a 30 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

El derivado de nucleósido antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 200 a 2500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, por ejemplo de 700 a 1500 mg/m2, particularmente para 5-FU en una dosificación de 200 a 500 mg/m2, para gemcitabina en una dosificación de aproximadamente 800 a 1200 mg/m2 y para capecitabina de aproximadamente 1000 a 2500 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

65 El término “agentes de alquilación” abarca un grupo diverso de químicos que tienen la característica común de que

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tienen la capacidad de contribuir, en condiciones fisiológicas, con grupos alquilo a macromoléculas biológicamente vitales como el ADN. Con la mayoría de los agentes más importantes tales como las mostazas de nitrógeno y las nitrosoureas, los restos de alquilación activos se generan in vivo tras reacciones degradativas complejas, algunas de las cuales son enzimáticas. Las acciones farmacológicas más importantes de los agentes de alquilación son 5 aquéllas que alteran los mecanismos fundamentales relacionados con la proliferación celular en particular la síntesis de ADN y la división celular. La capacidad de los agentes de alquilación para interferir en la función y la integridad del ADN en tejidos en rápida proliferación proporciona la base para sus aplicaciones terapéuticas y para muchas de sus propiedades tóxicas. Los agentes de alquilación tales como mostaza de nitrógeno o nitrosourea se administran ventajosamente en una dosificación de 100 a 500 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal,

10 por ejemplo de 120 a 200 mg/m2, particularmente para ciclofosfamida en una dosificación de aproximadamente 100 a 500 mg/m2, para clorambucilo en una dosificación de aproximadamente 0,1 a 0,2 mg/kg, para carmustina en una dosificación de aproximadamente 150 a 200 mg/m2 y para lomustina en una dosificación de aproximadamente 100 a 150 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

15 El término “derivados de antraciclina antitumorales” comprende antibióticos obtenidos del hongo Strep. peuticus var. caesius y sus derivados, caracterizados por tener una estructura de anillo de tetraciclina con un azúcar inusual, daunosamina, unido mediante un enlace glicosídico. El derivado de antraciclina antitumoral se administra ventajosamente en una dosificación de 10 a 75 mg por metro cuadrado (mg/m2) de área de superficie corporal, por ejemplo de 15 a 60 mg/m2, particularmente para doxorubicina en una dosificación de aproximadamente 40 a

20 75 mg/m2, para daunorubicina en una dosificación de aproximadamente 25 a 45 mg/m2 y para idarubicina en una dosificación de aproximadamente 10 a 15 mg/m2 por ciclo de tratamiento.

Se ha mostrado que la amplificación de la proteína receptora 2 del factor de crecimiento epidérmico humano (HER 2) en carcinomas de mama primarios se correlaciona con un pronóstico clínico malo para determinadas pacientes.

25 Trastuzumab es un anticuerpo de IgG1 kappa monoclonal humanizado derivado de ADN recombinante altamente purificado que se une con alta afinidad y especificidad al dominio extracelular del receptor HER2.

Muchos cánceres de mama tienen receptores de estrógenos y el crecimiento de estos tumores puede estimularse por estrógenos. Los términos “antagonistas de receptores de estrógenos” y “moduladores selectivos receptores de

30 estrógenos” se usan para indicar inhibidores competitivos de estradiol que se unen al receptor de estrógenos (ER). Los moduladores selectivos de receptor de estrógenos, cuando se unen a ER, inducen un cambio en la forma tridimensional del receptor, modulando su unión al elemento de respuesta a estrógenos (ERE) en el ADN.

En mujeres postmenopáusicas, la fuente principal de estrógenos circulantes procede de la transformación de

35 andrógenos suprarrenales y ováricos (androstenodiona y testosterona) a estrógenos (estrona y estradiol) por la enzima aromatasa en tejidos periféricos. La privación de estrógenos a través de la inhibición o inactivación de la aromatasa o es un tratamiento eficaz y selectivo para algunas pacientes postmenopáusicas con cáncer de mama hormonodependiente.

40 El término “agentes de diferenciación" abarca compuestos que pueden, de diversas maneras, inhibir la proliferación celular e inducir la diferenciación. Se sabe que la vitamina D y los retinoides desempeñan un papel importante en la regulación del crecimiento y la diferenciación de una amplia variedad de tipos de células malignas y normales. Los agentes bloqueantes del metabolismo del ácido retinoico (RAMBA) aumentan los niveles de ácidos retinoicos endógenos inhibiendo el catabolismo de ácidos retinoicos mediado por el citocromo P450.

45 Los cambios de metilación del ADN están entre las anomalías más comunes en la neoplasia humana. La hipermetilación dentro de los promotores de genes seleccionados se asocia habitualmente con la inactivación de los genes implicados. El término “inhibidores de la ADN metiltransferasa” se usa para indicar compuestos que actúan a través de la inhibición farmacológica de la ADN metiltransferasa y la reactivación de la expresión de genes

50 supresores de tumores.

El término “inhibidores de cinasas” comprende potentes inhibidores de cinasas que están implicados en la progresión del ciclo celular y la muerte celular programada (apoptosis).

55 El término “inhibidores de la farnesiltransferasa” se usa para indicar compuestos que se diseñaron para impedir la farnesilación de Ras y otras proteínas intracelulares. Se ha mostrado que tienen efecto sobre la proliferación y la supervivencia de células malignas.

El término “inhibidor de histona desacetilasa” se usa para identificar un compuesto, que puede interaccionar con una

60 histona desacetilasa e inhibir su actividad, más particularmente su actividad enzimática. La inhibición de la actividad enzimática de histona desacetilasa significa reducir la capacidad de una histona desacetilasa para eliminar un grupo acetilo de una histona.

El término “otros inhibidores de la ruta ubiquitina-proteasoma” se usa para identificar compuestos que inhiben la 65 destrucción dirigida de proteínas celulares en el proteasoma, incluyendo proteínas reguladoras del ciclo celular.

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El término “inhibidor de la telomerasa” se refiere a compuestos que reconocen, disminuyen o inhiben la actividad de la telomerasa, especialmente compuestos que inhiben el receptor de la telomerasa.

El término “inhibidor de metaloproteinasas de la matriz” incluye pero no se limita a, inhibidores peptidomiméticos y 5 no peptidomiméticos de colágeno.

Los compuestos de la presente invención puede usarse as “radiosensibilizador” y/o “quimiosensibilizador”.

Se sabe que los radiosensibilizadores aumentan la sensibilidad de las células cancerosas a los efectos tóxicos de la radiación ionizante. Se han sugerido en la bibliografía varios mecanismos para el modo de acción de los radiosensibilizadores incluyendo: radiosensibilizadores celulares hipóxicos (por ejemplo, compuestos de 2nitroimidazol y compuestos de dióxido de benzotriazina) que imitan al oxígeno o se comportan alternativamente como agentes biorreductores en hipoxia; los radiosensibilizadores celulares no hipóxicos (por ejemplo, pirimidinas halogenadas) pueden ser análogos de bases de ADN e incorporarse preferentemente en el ADN de células

15 cancerosas y de ese modo promover la rotura de las moléculas de ADN inducida por radiación y/o impedir los mecanismos de reparación de ADN normales; y se han planteado como hipótesis otros diversos mecanismos de acción potenciales para radiosensibilizadores en el tratamiento de enfermedad.

Muchos protocolos de tratamiento de cáncer emplean actualmente radiosensibilizadores junto con radiación de rayos x. Los ejemplos de radiosensibilizadores activados por rayos X incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: metronidazol, misonidazol, desmetilmisonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomicina C, RSU 1069, SR 4233, EO9, RB 6145, nicotinamida, 5-bromodesoxiuridina (BUdR), 5-yododesoxiuridina (IUdR), bromodesoxicitidina, fluorodesoxiuridina (FudR), hidroxiurea, cisplatino y análogos terapéuticamente eficaces y derivados de los mismos.

25 La terapia fotodinámica (PDT) de cánceres emplea luz visible como activador de radiación del agente de sensibilización. Los ejemplos de radiosensibilizadores fotodinámicos incluyen los siguientes, pero no se limitan a: derivados de hematoporfirina, Photofrin, derivados de benzoporfirina, etioporfirina de estaño, feoborbida-a, bacterioclorofila-a, naftalocianinas, ftalocianinas, ftalocianina de zinc y análogos terapéuticamente eficaces y derivados de los mismos.

Pueden administrarse radiosensibilizadores junto con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de otros compuestos, incluyendo pero sin limitarse a: compuestos que promueven la incorporación de radiosensibilizadores en las células diana; compuestos que controlan el flujo de agentes terapéuticos, nutrientes y/u oxígeno a las células diana; agentes quimioterápicos que actúan sobre el tumor con o sin radiación adicional; u otros compuestos

35 terapéuticamente eficaces para tratar el cáncer u otra enfermedad. Los ejemplos de agentes terapéuticos adicionales que pueden usarse junto con radiosensibilizadores incluyen, pero no se limitan a: 5-fluorouracilo, leucovorina, 5’-amino-5’-desoxitimidina, oxígeno, carbógeno, transfusiones de glóbulos rojos, perfluorocarbonos (por ejemplo, Fluosol 10 DA), 2,3-DPG, BW12C, bloqueantes de los canales de calcio, pentoxifilina, compuestos antiangiogénicos, hidralazina y LBSO. Los ejemplos de agentes quimioterápicos que pueden usarse junto con radiosensibilizadores incluyen, pero no se limitan a: adriamicina, camptotecina, carboplatino, cisplatino, daunorubicina, docetaxel, doxorubicina, interferón (alfa, beta, gamma), interleucina 2, irinotecán, paclitaxel, topotecán y análogos terapéuticamente eficaces y derivados de los mismos.

Pueden administrarse quimiosensibilizadores junto con una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más

45 compuestos, incluyendo pero sin limitarse a: compuestos que promueven la incorporación de quimiosensibilizadores en las células diana; compuestos que controlan el flujo de agentes terapéuticos, nutrientes y/u oxígeno a las células diana; agentes quimioterápicos que actúan sobre el tumor u otros compuestos terapéuticamente eficaces para tratar el cáncer u otra enfermedad.

Los compuestos de fórmula (I) también pueden usarse para detectar o identificar la PARP, y más en particular el receptor de PARP-1 o el receptor de tanquirasa. Para ese fin, pueden marcarse los compuestos de fórmula (I) . Dicho marcador puede seleccionarse del grupo que consiste en un radioisótopo, marcador de espín, marcador antigénico, marcador enzimático, grupo fluorescente o un grupo quimioluminiscente.

55 La presente invención también se refiere a una combinación según la invención para su uso en terapia médica, por ejemplo, para inhibir el crecimiento de células tumorales.

La presente invención también se refiere a una combinación según la invención para inhibir el crecimiento de células tumorales.

La presente invención también se refiere a los compuestos de fórmula (I) para su uso en un método de inhibición del crecimiento de células tumorales en un sujeto humano que comprende administrar al sujeto una cantidad eficaz de una combinación según la invención.

65 Esta invención proporciona además los compuestos de fórmula (I) para su uso en un método para inhibir el crecimiento anómalo de células, incluyendo células transformadas, mediante la administración de una cantidad

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eficaz de una combinación según la invención.

El otro agente farmacéutico y el inhibidor de PARP con propiedades de unión a tubulina pueden administrarse de manera simultánea (por ejemplo, en composiciones separadas o unitarias) o de manera secuencial en cualquier

5 orden. En este último caso, los dos compuestos se administrarán en un periodo y en una cantidad y manera suficientes para asegurar que se logra un efecto sinérgico o ventajoso. Se apreciará que el método y el orden de administración preferidos y las cantidades de dosificación y los regímenes respectivos para cada componente de la combinación dependerán del otro agente farmacéutico y del inhibidor de PARP particulares que estén administrándose, sus vías de administración, el tumor particular que esté tratándose y el huésped particular que esté tratándose. El método y orden de administración y las cantidades y el régimen de dosificación óptimos pueden determinarse fácilmente por los expertos en la técnica usando métodos convencionales y en vista de la información expuesta en el presente documento.

Los expertos en la técnica podrían determinar fácilmente la cantidad eficaz a partir de los resultados de prueba

15 presentados a continuación en el presente documento. En general, se contempla que una cantidad eficaz sería de desde 0,001 mg/kg hasta 100 mg/kg de peso corporal, y en particular de desde 0,005 mg/kg hasta 10 mg/kg de peso corporal. Puede ser apropiado administrar la dosis requerida como dos, tres, cuatro o más subdosis en intervalos apropiados durante todo el día. Dichas subdosis pueden formularse como formas de dosificación unitarias, por ejemplo, que contienen de 0,05 a 500 mg, y en particular de 0,1 mg a 200 mg de principio activo por forma de dosificación unitaria.

La dosificación y la frecuencia de administración exactas dependen del compuesto particular de fórmula (I) usado, el estado particular que esté tratándose, la gravedad del estado que esté tratándose, la edad, el peso, el sexo, la extensión del trastorno y el estado físico general del paciente particular así como otra medicación que pueda estar

25 tomando el individuo, como bien saben los expertos en la técnica. Además, resulta evidente que dicha cantidad diaria eficaz pude disminuirse o aumentarse dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescribe los compuestos de la presente invención.

Dependiendo del modo de administración, la composición farmacéutica comprenderá preferiblemente desde el 0,05 hasta el 99% en peso, más preferiblemente desde el 0,1 hasta el 70% en peso, incluso más preferiblemente desde el 0,1 hasta el 50% en peso del principio activo, y desde el 1 hasta el 99,95% en peso, más preferiblemente desde el 30 hasta el 99,9% en peso, incluso más preferiblemente desde el 50 hasta el 99,9% en peso de un portador farmacéuticamente aceptable, basándose todos los porcentajes en el peso total de la composición.

35 Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención.

Parte experimental

A continuación en el presente documento, “DMF” se define como N,N-dimetilformamida, “DCM” se define como diclorometano, “DIPE” se define como diisopropil éter, “DMSO” se define como dimetilsulfóxido, “EtOAc” se define como acetato de etilo, “MeOH” se define como metanol, “THF” se define como tetrahidrofurano.

De algunos compuestos que tenían 1 centro quiral, no se determinó experimentalmente la configuración estereoquímica absoluta del átomo de carbono estereogénico. En esos casos, la forma estereoquímicamente

45 isomérica que se aisló en primer lugar se designó como “enantiómero A” y la segunda como “enantiómero B”, sin referencia adicional a la configuración estereoquímica real. Sin embargo, dicha configuración estereoquímica real de las formas “enantiómero A” y “enantiómero B” pueden caracterizarse inequívocamente por un experto en la técnica, usando métodos conocidos en la técnica tales como, por ejemplo, difracción de rayos X. El método de aislamiento se describe en detalle a continuación.

A. PREPARACIÓN DE LOS PRODUCTOS INTERMEDIOS

Ejemplo A1

55 a) Preparación del producto intermedio 1

imagen18

Se añadió gota a gota una disolución de 4-ciclohex-1-enil-morfolina (0,0265 mol) en DCM (25 ml) a temperatura ambiente a una disolución de 1-bromo-3-isocianatobenceno (0,0252 mol) en DCM (30 ml). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 15 horas y se evaporó hasta sequedad, produciendo 11 g (91%) del producto intermedio 1, que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

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b) Preparación del producto intermedio 2

imagen19

5 Se agitó una disolución del producto intermedio 1 (0,0252 mol) en ácido sulfúrico concentrado (40 ml) a 100ºC durante 30 minutos, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió en agua con hielo y se agitó de nuevo a temperatura ambiente durante 1 hora y 30 minutos. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, con dietil éter y se secó, produciendo 8,4 g del producto intermedio 2.

10 c) Preparación del producto intermedio 3

imagen20

Se agitó una disolución del producto intermedio 2 (0,0017 mol) en ácido sulfúrico al 96% (2 ml) a 100ºC durante 15

15 minutos, luego se vertió en agua con hielo con precaución, se filtró, se lavó dos veces con agua y se secó, produciendo 0,441 g (93%) del producto intermedio 3 que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

d) Preparación del producto intermedio 4a 20

imagen21

Se agitó una disolución del producto intermedio 3 (0,023 mol) en oxicloruro de fósforo (100 ml) y se sometió a reflujo hasta disolución completa, se dejó diez minutos, se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió en agua a 25 temperatura ambiente muy lentamente (a lo largo de una hora) con agitación vigorosa. Se retiró el sólido por filtración y se secó, produciendo 5,07 g (74%) del producto intermedio 4a, punto de fusión: 84ºC.

e) Preparación del producto intermedio 4

imagen22

30

Se añadió una disolución de metóxido de sodio (0,101 mol) a una disolución del producto intermedio 4a (0,0253 mol) en metanol (100 ml) a temperatura ambiente. Se agitó la mezcla resultante y se sometió a reflujo durante 15 horas, se enfrió hasta temperatura ambiente y se vertió en agua. Se extrajo la mezcla con DCM, se separó la fase orgánica,

35 se lavó con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 6,1 g (83%) del producto intermedio 4.

f) Preparación del producto intermedio 5

imagen23

40

Se añadieron tributil(1-etoxivinil)estaño (0,018 mol) luego diclorobis(trifenilfosfina)-paladio (II) (0,0008 mol) a una disolución del producto intermedio 4 (0,016 mol) en tolueno anhidro (29 ml) bajo atmósfera inerte. Se agitó la mezcla y se calentó a 80ºC durante 18 horas, se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró sobre celita. Se lavó la fase

45 orgánica con HCl 2 M, luego con salmuera hasta que se ajustó el pH a 7, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: ciclohexano/EtOAc desde 95/5 hasta 80/20). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 1,3 g (31%) del producto intermedio 5.

50 g) Preparación del producto intermedio 6

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imagen24

Se añadieron en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,023 mol) luego MeOH (2,4 ml) a 10ºC a una

5 disolución de isocianuro de p-toluenosulfonilmetilo (0,012 mol) en DMSO (12 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a 10ºC durante 15 minutos. Se añadió una disolución del producto intermedio 5 (0,0051 mol) en DMSO (1,3 ml). Se agitó la mezcla a 10ºC durante 1 hora y 15 minutos y se extrajo con DCM y EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc desde 90/10 hasta 50/50). Se recogieron las

10 fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,923 g (38%) del producto intermedio 6 (aceite).

h) Preparación del producto intermedio 7

imagen25

15 Se añadió lentamente hidruro de sodio (dispersión al 60% en aceite) (0,0005 mol) a 0ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,0003 mol) en DMF (1,4 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla durante 5 minutos. Se añadió bromometil-benceno (0,0005 mol). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadió de nuevo hidruro de sodio (0,0005 mol). Se agitó la mezcla durante 3 horas, se extinguió con cloruro de amonio

20 saturado y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc desde 95/5 hasta 90/10). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,159 g (99%) del producto intermedio 7.

25 i) Preparación de los productos intermedios 7a y 7b

imagen26

Se separó el producto intermedio 7 (0,28 g, 0,0008 mol) en sus enantiómeros mediante cromatografía de fluidos

30 supercríticos sobre gel de sílice quiral (columna Chiralpak®, eluyente: CO2/EtOH/iPrOH/isopropilamina: 70/15/15/0,3). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente dando 0,115 g (29%) del producto intermedio 7a (enantiómero A) y 0,120 g (30%) del producto intermedio 7b (enantiómero B).

Ejemplo A2

35 Preparación del producto intermedio 8

imagen27

40 Se añadió en porciones hidruro de sodio (dispersión al 60% en aceite) (0,0006 mol) a 0ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,0004 mol) en DMF (1,7 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla durante 5 minutos. Se añadió 3-bromometil-benzonitrilo (0,0006 mol). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadió de nuevo hidruro de sodio (0,0006 mol). Se agitó la mezcla durante 3 horas, se extinguió con cloruro de amonio saturado y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se

45 evaporó el disolvente a presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: ciclohexano/EtOAc 80/20). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente,

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produciendo 0,0963 g (52%) del producto intermedio 8 (aceite). Ejemplo A3 Preparación del producto intermedio 9

imagen28

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0011 mol) a 5ºC a una disolución del producto

10 intermedio 6 (0,0006 mol) y 1-bromometil-3-fluorobenceno (0,0008 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: ciclohexano/EtOAc 95/5). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,33 g (78%) del producto intermedio 9.

15 Ejemplo A4

Preparación del producto intermedio 10

20

imagen29

Se agitó una mezcla del producto intermedio 6 (0,0009 mol) en HCl 3 N (2 ml) y 1,4-dioxano (2 ml) a 80ºC durante 4 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se basificó con K2CO3 al 10%. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, luego con dietil éter y se secó, produciendo 0,08 g (35%) del producto intermedio 10.

25 Ejemplo A5

Preparación del producto intermedio 11

30

imagen30

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0015 mol) a 5ºC a una mezcla del producto intermedio 6 (0,0007 mol) y 6-bromometilpiridin-2-carbonitrilo (0,0011 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase

35 orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente, produciendo 0,25 g del producto intermedio 11 que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

Ejemplo A6

40 Preparación del producto intermedio 12

imagen31

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,001 mol) a 10ºC a una disolución del producto

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intermedio 6 (0,00056 mol) y 1-bromometil-3-trifluorometoxi-benceno (0,0008 mol) en THF (10 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,245 g (99%) del producto intermedio 12.

Ejemplo A7

Preparación del producto intermedio 13

imagen32

10

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0011 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,0006 mol) y 1-bromometil-3-metoxi-benceno (0,0008 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la

15 fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,215 g (99%) del producto intermedio 13.

Ejemplo A8

20 Preparación del producto intermedio 14

imagen33

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0011 mol) a 10ºC de una disolución del producto

25 intermedio 6 (0,0006 mol) y 3-clorometil-1-metil-1H-indazol (0,0008 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el residuo en dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,15 g (65%) del producto intermedio 14.

30 Ejemplo A9

Preparación del producto intermedio 15

imagen34

35 Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0017 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,0006 mol) y 2-clorometil-1-metil-1H-bencimidazol (0,0008 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo

40 mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: DCM 100 luego DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0,2; 35 µm). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,114 g (49%) del producto intermedio 15.

Ejemplo A10 45 Preparación del producto intermedio 16

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imagen35

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0049 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,0024 mol) y éster metílico del ácido 3-bromometil-benzoico (0,0036 mol) en THF (20 ml) bajo flujo de

5 N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: ciclohexano/EtOAc 80/20; 15-40 µm). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,392 g (39%) del producto intermedio 16.

10 Ejemplo A11

Preparación del producto intermedio 17

imagen36

15 Se añadió una disolución del producto intermedio 16 (0,0009 mol) en THF anhidro (3 ml) a 5ºC a una disolución de hidruro de litio y aluminio (0,0009 mol) en THF anhidro (4 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a 5ºC durante 1 hora. Se añadieron lentamente EtOAc y luego agua. Se retiró el precipitado mediante filtración a través de una capa de celita. Se extrajo el filtrado con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó

20 el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,29 g (66%) del producto intermedio 17.

Ejemplo A12

a) Preparación del producto intermedio 18 25

imagen37

Se añadió gota a gota cloruro de tionilo (0,09 ml) a 5ºC a una disolución del producto intermedio 17 (0,0006 mol) en DCM (3 ml). Se agitó la mezcla a 5ºC durante 1 hora, luego se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas y se 30 evaporó hasta sequedad, produciendo 0,22 g (95%) del producto intermedio 18, que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

b) Preparación del producto intermedio 19

imagen38

Se agitó una mezcla del producto intermedio 18 (0,0005 mol), isoindol-1,3-diona (0,0011 mol) y K2CO3 (0,0011 mol) en DMF (3 ml) a 100ºC durante 4 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió en agua y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad,

40 produciendo 0,32 g del producto intermedio 19, que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

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c) Preparación del producto intermedio 20

imagen39

5 Se añadió gota a gota monohidrato de hidrazina (0,0019 mol) a una disolución del producto intermedio 19 (0,0006 mol) en etanol (4 ml). Se agitó la mezcla a 80ºC durante 4 horas, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (eluyente:

10 DCM/MeOH/NH4OH desde 98/2/0,2 hasta 88/12:1,2; 3-5 µm). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se llevó el residuo (0,034 g) a DCM y dietil éter, produciendo 0,03 g (13%) del producto intermedio 20, punto de fusión: 80ºC.

Ejemplo A13 15 Preparación del producto intermedio 21

imagen40

20 Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0011 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,0006 mol) y 4-(2-bromo-etoxi)-benzonitrilo (0,0008 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: DCM/ciclohexano 80/20; 3-5 µm). Se recogieron las

25 fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,12 g (52%) del producto intermedio 21.

Ejemplo A14

a) Preparación del producto intermedio 22 30

imagen41

Se añadió gota a gota una disolución del producto intermedio 6 (0,0019 mol) en 1,2-dimetoxi-etano (1 ml) a 10ºC a una disolución de 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0022 mol) en 1,2-dimetoxi-etano (3 ml) bajo flujo de N2. Se

35 agitó la disolución a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió dibromometano (0,0028 mol). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 horas, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,5 g (74%) del producto intermedio 22, que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

40 b) Preparación del producto intermedio 23

imagen42

Se agitó una mezcla del producto intermedio 22 (0,0014 mol) y derivada de potasio de ftalimida (0,0017 mol) en

45 DMF (10 ml) a 140ºC durante la noche, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,44 g (74%) del producto intermedio 23, que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa de reacción.

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c) Preparación del producto intermedio 24

imagen43

5 Se agitó una mezcla del producto intermedio 23 (0,001 mol) y monohidrato de hidrazina (0,01 mol) en etanol (10 ml) a 80ºC durante 3 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,3 g (98%) del producto intermedio 24 (aceite).

10 d) Preparación del producto intermedio 25

imagen44

15 Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (0,0011 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 24 (0,001 mol) en THF (14 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua fría y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: DCM 100 luego DCM/MeOH/NH4OH 99/1/0,1; 3,4 µm). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente hasta

20 sequedad, produciendo 0,197 g (47%) del producto intermedio 25 (aceite).

e) Preparación del producto intermedio 26

imagen45

25 Se añadió hidruro de sodio (0,0006 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 25 (0,0005 mol) en DMF (3 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se añadió yodometano (0,0005 mol). Se agitó la disolución a temperatura ambiente durante 4 horas, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad,

30 produciendo 0,14 g (71%) del producto intermedio 26 (aceite).

f) Preparación del producto intermedio 27

imagen46

35 Se añadió ácido trifluoroacético (0,0168 mol) a temperatura ambiente a una disolución del producto intermedio 26 (0,0003 mol) en DCM (8 ml). Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 4 horas, se vertió en agua fría, se basificó con NH4OH y se extrajo con DCM. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice

40 (eluyente: desde DCM 100 hasta DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0,1). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,07 g (71%) del producto intermedio 27 (aceite).

g) Preparación del producto intermedio 28

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imagen47

Se añadió cloruro de benzoílo (0,0002 mol) a 10ºC a una disolución de trietilamina (0,0002 mol) y producto intermedio 27 (0,0001 mol) en DCM (1,5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a 10ºC durante 3 horas, se vertió en 5 agua fría y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,074 g del producto intermedio 28.

Ejemplo A15

10 Preparación del producto intermedio 29

imagen48

Se añadió 4-bromometil-benzonitrilo (0,0002 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 27 (0,0001 mol) y

15 trietilamina (0,0002 mol) en DCM (2 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a 10ºC durante 3 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió en agua fría y se extrajo con DCM. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,026 g (42%) del producto intermedio 29 (aceite).

20 Ejemplo A16

Preparación del producto intermedio 30

imagen49

25 Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0011 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 6 (0,00056 mol) y 1-bromometil-3-clorobenceno (0,0008 mol) en THF (10 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 5 horas, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad, produciendo 0,245 g (99%) del

30 producto intermedio 30.

B. PREPARACIÓN DE COMPUESTOS

Ejemplo B1 35 a) Preparación del compuesto 1

imagen50

40 Se añadió HCl 3 N (620 µl) a una disolución del producto intermedio 7 (0,0003 mol) en 1,4-dioxano (2,5 ml). Se agitó la mezcla a 80ºC durante 18 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se extinguió con NaOH (0,1 M) y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc 50/50). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,0238 g (22%)

45 del compuesto 1.

b) Preparación de los compuestos 2 y 3

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imagen51

(enantiómero A)/compuesto 2 (enantiómero B)/compuesto 2

Se agitó la disolución del producto intermedio 7b (0,0004 mol) en HCl 3 N (3 ml) y 1,4-dioxano (3 ml) a 80ºC durante 5 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, luego con dietil éter y 5 se secó a vacío, produciendo 0,09 g (78%) del compuesto 3, punto de fusión: 250ºC; [α]D20 =+89,87 (DMF; c=0,375).

Se agitó una disolución del producto intermedio 7a (0,0003 mol) en HCl 3 N (3 ml) y 1,4-dioxano (3 ml) a 80ºC durante 5 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, luego con dietil éter y se secó a vacío, produciendo 0,083 g (75%) del compuesto 2, punto de fusión: 245ºC; [α]D20 = -94,78

10 (DMF; c=0,35).

Ejemplo B2

Preparación del compuesto 4 15

imagen52

Se añadió HCl 3 N (620 µl) a una disolución del producto intermedio 8 (0,0002 mol) en 1,4-dioxano (2,5 ml). Se agitó la mezcla a 80ºC durante 18 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se extinguió con NaOH (0,1 M) y se

20 extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente a presión reducida. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: ciclohexano/EtOAc 25/75). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,01 g (14%) del compuesto 4.

25 Ejemplo B3

a) Preparación del compuesto 5

imagen53

30 Se agitó una mezcla del producto intermedio 9 (0,0006 mol) en HCl 3 N (2 ml) y 1,4-dioxano (4 ml) a 80ºC durante 5 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró, se lavó con agua, luego con dietil éter y se secó a vacío. Se mezclaron juntos el residuo y el filtrado y se llevaron a EtOAc y K2CO3 al 10%. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el residuo en dietil éter. Se retiró el

35 precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,049 g del compuesto 5, punto de fusión: 217ºC.

b) Preparación de los compuestos 5a y 5b

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(enantiómero A)/compuesto 5a (enantiómero B)/compuesto 5a

Se agitó una disolución del producto intermedio 9 (0,0009 mol) en HCl 3 N (6 ml) y 1,4-dioxano (6 ml) a 80ºC durante 4 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se filtró el precipitado, se lavó con agua y dietil éter y se secó. Se separó el residuo en sus enantiómeros mediante cromatografía en columna (eluyente: MeOH 100). Se recogieron

5 dos fracciones y se evaporó el disolvente. Se cristalizó el enantiómero A en dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,102 g (32%) del compuesto 5a, punto de fusión 226ºC; [α]D20 =+90,7 (DMF; c=0,34). Se cristalizó el enantiómero B en dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,098 g (31%) del compuesto 5b, punto de fusión 222ºC; [α]D20 = -82,09 (DMF; c=0,335).

10 Ejemplo B4

Preparación del compuesto 6

imagen56

15 Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0008 mol) a 10ºC a una disolución del producto intermedio 10 (0,0003 mol) y 2-(clorometil)-4,6-dimetoxipirimidina (0,0008 mol) en THF (5 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el

20 residuo en DIPE. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,056 g (43%) del compuesto 6, punto de fusión: 193ºC.

Ejemplo B5

25 Preparación del compuesto 7

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Se agitó una disolución del producto intermedio 11 (0,0006 mol) en HCl 3 N (3 ml) y 1,4-dioxano (3 ml) a 80ºC

30 durante 4 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se basificó con K2CO3 al 10% y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el residuo en DIPE. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,16 g (66%) del compuesto 7, punto de fusión de 210ºC.

35 Ejemplo B6

Preparación del compuesto 8

imagen58

Se agitó una disolución del producto intermedio 30 (0,0005 mol) en HCl 3 N (3 ml) y 1,4-dioxano (1,3 ml) a 80ºC durante 4 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se filtró el precipitado, se lavó con agua y dietil éter y

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se secó a vacío, produciendo 0,11 g (52%) del compuesto 8, punto de fusión: 235ºC. Ejemplo B7 Preparación del compuesto 9

imagen59

Se añadió en porciones 2-metil-propan-2-olato de potasio (0,0016 mol) a 10ºC a una disolución del producto

10 intermedio 10 (0,0008 mol) y 2,6-dicloro-4-clorometil-piridina (0,001 mol) en THF (15 ml) bajo flujo de N2. Se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante la noche, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: DCM/MeOH 98/2; 15-40 µm). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente, produciendo 0,07 g (21%) del compuesto 9, punto de fusión: 212ºC.

15 Ejemplo B8

Preparación del compuesto 10

20

imagen60

Se agitó una disolución del producto intermedio 12 (0,0005 mol) en HCl 3 N (5 ml) y 1,4-dioxano (5 ml) a 80ºC durante la noche, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se vertió en agua con hielo y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica; se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el

25 residuo en dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,077 g (32%) del compuesto 10, punto de fusión: 186ºC.

Ejemplo B9

30 Preparación del compuesto 11

imagen61

Se agitó una disolución del producto intermedio 13 (0,0005 mol) en HCl 3 N (5 ml) y 1,4-dioxano (5 ml) a 80ºC 35 durante la noche, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, luego con dietil éter y se secó a vacío, produciendo 0,127 g (61%) del compuesto 11, punto de fusión: 209ºC.

Ejemplo B10

40 Preparación del compuesto 12

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Se agitó una disolución del producto intermedio 14 (0,0003 mol) en HCl 3 N (2 ml) y 1,4-dioxano (2 ml) a 80ºC

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durante 5 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, luego con dietil éter y se secó a vacío, produciendo 0,057 g (53%) del compuesto 12, punto de fusión: 256ºC. Ejemplo B11 Preparación del compuesto 13

imagen63

10 Se agitó una disolución del producto intermedio 15 (0,0003 mol) en HCl 3 N (3 ml) y 1,4-dioxano (3 ml) a 80ºC durante 5 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se basificó con K2CO3 al 10% y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el residuo en dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó a vacío, produciendo 0,065 g (61%) del compuesto 13, punto de fusión: 260ºC.

15 Ejemplo B12

Preparación del compuesto 14

imagen64

20

Se agitó una disolución del producto intermedio 16 (0,00007 mol) en HCl 3 N (0,51 ml) y 1,4-dioxano (0,51 ml) a 80ºC durante 4 horas, luego se vertió en agua fría, se basificó con K2CO3 al 10% y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se llevó el residuo a

25 DCM y dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,016 g (56%) del compuesto 14, punto de fusión: 126ºC.

Ejemplo B13

30 Preparación del compuesto 15

imagen65

Se agitó una disolución del producto intermedio 17 (0,00007 mol) en HCl 3 N (0,51 ml) y 1,4-dioxano (0,51 ml) a

35 80ºC durante 3 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se basificó con K2CO3 al 10% y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el residuo en DIPE. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,0025 g (9%) del compuesto 15, punto de fusión: 131ºC.

40 Ejemplo B14

Preparación del compuesto 16

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Se añadió gota a gota monohidrato de hidrazina (0,0019 mol) a una disolución del producto intermedio 19 (0,0006 mol) en etanol (4 ml). Se agitó la mezcla a 80ºC durante 4 horas, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente:

5 DCM/MeOH/NH4OH desde 98/2/0,2 hasta 88/12/1,2; 3,4 µm). Se recogieron las fracciones puras y se evaporó el disolvente. Se llevó el residuo a DCM y dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,0173 g (7%) del compuesto 16, punto de fusión: 80ºC.

Ejemplo B15

10 Preparación del compuesto 17

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15 Se agitó una disolución del producto intermedio 21 (0,0003 mol) en HCl 3 N (4 ml) y 1,4-dioxano (4 ml) a 80ºC durante 4 horas, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se basificó con K2CO3 al 10%. Se filtró el precipitado, se lavó con agua, luego con dietil éter y se secó, produciendo 0,069 g (59%) del compuesto 17, punto de fusión: 169ºC.

20 Ejemplo B16

Preparación del compuesto 18

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25 Se agitó una disolución del producto intermedio 28 (0,0002 mol) en HCl 3 N (1,7 ml) y 1,4-dioxano (1,7 ml) a 80ºC durante 4 horas, se vertió en agua fría y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se cristalizó el residuo en DIPE. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,032 g (44%) del compuesto 18, punto de fusión: 248ºC.

30 Ejemplo B17

Preparación del compuesto 19

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35

Se agitó una disolución del producto intermedio 29 (0,00007 mol) en HCl 3 N (1 ml) y 1,4-dioxano (1 ml) a 80ºC durante 4 horas, se vertió en agua fría, se basificó con K2CO3 al 10% y se extrajo con EtOAc. Se lavó la fase orgánica con agua, se secó (MgSO4), se filtró y se evaporó el disolvente hasta sequedad. Se llevó el residuo a DCM

40 y dietil éter. Se retiró el precipitado por filtración y se secó, produciendo 0,025 g (87%) del compuesto 19, punto de fusión: 254ºC.

La tabla F-1 enumera los compuestos que se prepararon según uno de los ejemplos anteriores.

45 Tabla F-1

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04-02-2015 E09725177

(enantiómero B); comp. n.º 1; ej. [B1]; p.f. de 250ºC

comp. n.º 4; ej. [B2]

comp. n.º 5; ej. [B3a]; p.f. de 217ºC

(enantiómero A); comp. n.º 5a; ej. [B3]; p.f. de 226ºC

(enantiómero B); comp. n.º 5b; ej. [B3]; p.f. de 222ºC

comp. n.º 6; ej. [B4]; p.f. de 193ºC

comp. n.º 7; ej. [B5]; p.f. de 210ºC

comp. n.º 8; ej. [B6]; p.f. de 235ºC

comp. n.º 9; ej. [B7]; p.f. de 212ºC

comp. n.º 10; ej. [B8]; p.f. de 186ºC

comp. n.º 11; ej. [B9]; p.f. de 209ºC

comp. n.º 12; ej. [B10]; p.f. de 256ºC

comp. n.º 13; ej. [B11]; p.f. de 260ºC

comp. n.º 14; ej. [B12]; p.f. de 126ºC

comp. n.º 15; ej. [B13]; p.f. de 131ºC

comp. n.º 16; ej. [B14]; p.f. de 80ºC

comp. n.º 17; ej. [B15]; p.f. de 169ºC

comp. n.º 18; ej. [B16]; p.f. de 248ºC

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imagen71

Parte analítica

CL-EM 5 Procedimiento general de CL-EM

Se realizó la medición de HPLC usando una bomba 1512 de Waters con un detector de red de diodos (DAD) de Waters con un inyector automático 215 de Gilson y una columna como se especifica en los métodos respectivos a

10 continuación. Se fraccionó el flujo procedente de la columna a un espectrómetro EM. La ionización fue o bien mediante electropulverización o bien mediante APCI (ionización química a presión atmosférica) dependiendo del tipo de compuesto.

Las condiciones de electropulverización típicas usan un voltaje de aguja capilar de 3,5 kV y un voltaje de cono de

15 25 V. Se mantuvo la temperatura de la fuente a una temperatura de entre 120-150ºC (se determinó la temperatura exacta compuesto por compuesto). Las condiciones de APCI típicas usan una corriente de descarga corona de 17 µA, un voltaje de cono de 25 V, una temperatura de desolvatación de 350ºC y se mantuvo la temperatura de la fuente a una temperatura de entre 140-160ºC (se determinó la temperatura exacta compuesto por compuesto).

20 Se adquirieron los espectros de masa mediante barrido desde 100 hasta 650 ó 1000 cuando se requirió, por ejemplo en 1 segundo usando un tiempo de permanencia de 0,1 s. Se usó nitrógeno como gas nebulizador.

CL-EM -Procedimiento

25 Además del procedimiento general: se llevó a cabo una HPLC de fase inversa en una columna Xterra MS 5µ C18 de Waters (4,6 x 100 mm; más precartucho) con una velocidad de flujo de 2 ml/min. Se emplearon dos fases móviles (fase móvil A: agua con bicarbonato de amonio 10 mM en agua ultrapura; fase móvil B: acetonitrilo) para ejecutar una condición de gradiente de desde el 95% de A hasta el 95% de B con una velocidad de flujo de 2 ml/min en 3,5 minutos y retención durante 2 minutos. Normalmente, se usaron volúmenes de inyección de entre 2 µly7 µl,

30 inclusive.

Tabla 2: Datos analíticos – Tiempo de retención (Tr en minutos), pico (MH)+ .

N.º de compuesto

Tr [M+H]+

1

3,65 343

4

3,44 368

35 C. EJEMPLOS FARMACOLÓGICOS

C.1. Ensayo de proximidad de centelleo (SPA, scintillation proximity assay) in vitro para determinar la actividad inhibitoria de PARP-1

40 Se sometieron a prueba compuestos de la presente invención en un ensayo in vitro basado en la tecnología SPA (registrada por GE healthcare).

En principio, el ensayo se basa en la tecnología SPA bien establecida para la detección de poli-ADP-ribosilación de proteínas diana biotiniladas, es decir histonas. Esta ribosilación se induce usando enzima PARP-1 activada por ADN 45 mellado y [3H]-nicotinamida adenina dinucleótido ([3H]-NAD+) como donador de ADP-ribosilo.

Se biotinilaron histonas (tipo II-A, proveedor: Sigma) usando el kit de biotinilación de Amersham y se almacenaron n alícuotas a -20ºC. Se preparó una disolución madre de perlas de poli(vinil tolueno) (PVT) para SPA 100 mg/ml (proveedor: Amersham) en PBS. Se preparó una disolución madre de [3H]-NAD+ 61,6 nM añadiendo [3H]-NAD+ 50 (0,1 mCi/ml, proveedor: Perkin Elmer) a tampón de incubación (Tris/HCl 50 mM, pH 8; DTT 0,2 mM; MgCl2 4 mM). Se preparó una disolución de NAD+ 4 mM (proveedor: Sigma). Se obtuvo la enzima PARP-1 humana de Trevigen. Se mezclaron las histonas biotiniladas y las perlas de PVT para SPA y se preincubaron durante 30 minutos a temperatura ambiente. Se mezcló enzima PARP-1 (la concentración dependía del lote) con el ADN mellado y se preincubó la mezcla durante 30 minutos a 4ºC. Se mezclaron partes iguales de esta disolución de histonas/perlas de 55 PVT para SPA y de la disolución de enzima PARP-1/ADN y se añadieron 75 µl de esta mezcla junto con 1 µl del

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compuesto en DMSO y 25 µl de [3H]-NAD+ por pocillo en una placa de microtitulación de 96 pocillos. Las concentraciones finales en la mezcla de incubación fueron de 2 µg/ml para las histonas biotiniladas, 2 mg/ml para las perlas de PVT para SPA, 0,25 µg/ml para el ADN mellado y de entre 0,1-0,2 µg/ml para la enzima PARP-1. Tras la incubación de la mezcla durante 20 minutos a temperatura ambiente, se terminó la reacción añadiendo 100 µl de 5 NAD+ 4 mM en agua (concentración final de 2 mM) y se mezclaron las placas. Se sedimentaron las perlas mediante centrifugación (10 min, 800 rpm) y se transfirieron las placas a un contador TopCountNXT™ (Packard) para el recuento por centelleo, se expresaron los valores como cuentas por minuto (cpm). Para cada experimento, se ejecutaron en paralelo controles (que contenían enzima PARP-1 y DMSO sin compuesto), una incubación de blanco (que contenía DMSO pero sin enzima PARP-1, ni ADN ni compuesto) y muestras (que contenían enzima PARP-1, 10 ADN y compuesto disuelto en DMSO). Se disolvieron todos los compuestos sometidos a prueba y eventualmente se diluyeron adicionalmente con DMSO. Se produjo una curva de dosis-respuesta en la que se sometieron a prueba los compuestos a concentraciones de entre 10-5 M y 3 x 10-9 M. En cada prueba, se restó el valor del blanco de los valores tanto de control como de muestra. La muestra control representaba la actividad máxima de la enzima PARP

1. Para cada muestra, se expresó la cantidad de cpm como porcentaje del valor de cpm medio de los controles.

15 Cuando fue apropiado, se calcularon los valores de CI50 (concentración del medicamento necesaria para reducir la actividad de la enzima PARP-1 hasta el 50% del control) usando interpolación lineal entre los puntos experimentales justo por encima y por debajo del nivel del 50%. En este caso, se expresan los efectos de los compuestos de prueba como pCI50 (el valor del log negativo del valor CI50). Se incluyó como compuesto de referencia, 4-amino-1,8naftalimida para validar el ensayo SPA. Los compuestos sometidos a prueba mostraron actividad inhibitoria a

20 diversas concentraciones (véase la tabla 2).

C.2. Ensayo de proximidad de centelleo (SPA) in vitro para determinar la actividad inhibitoria de TANK-2

Se sometieron a prueba compuestos de la presente invención en un ensayo in vitro basado en la tecnología SPA 25 con placas Ni Flash (de 96 ó 384 pocillos).

En principio, el ensayo se basa en la tecnología SPA para la detección de poli-ADP-ribosilación de la proteína TANK-2 usando [3H]-nicotinamida adenina dinucleótido ([3H]-NAD+) como donador de ADP-ribosilo.

30 Se preparó una disolución madre de [3H]-NAD+ 100 nM/NAD (0,1 mCi/ml, proveedor: Perkin Elmer) y NAD 25 µM (Sigma) en tampón de ensayo (Tris/HCl 60 mM, pH 7,4; DTT 0,9 mM; MgCl2 6 mM). Se produjo la enzima TANK-2 tal como se describe en el documento EP1238063, se añadieron 60 µl de tampón de ensayo, junto con 1 µl del compuesto en DMSO, 20 µl de [3H]-NAD+/NAD y 20 µl de enzima TANK-2 (concentración final de 8 µg/ml) por pocillo en una placa Flash recubierta con Ni (Perkin Elmer). Tras incubación de la mezcla durante 120 minutos a

35 temperatura ambiente, se terminó la reacción añadiendo 60 µl de disolución de parada (42,6 mg de NAD en 6 ml de H2O). Se cubrieron las placas con un sellante de placas y se colocaron en un contador TopCountNXT™ (Packard) para el recuento por centelleo. Se expresaron los valores como cuentas por minuto (cpm). Para cada experimento, se ejecutaron en paralelo controles (que contenían enzima TANK-2 y DMSO sin compuesto), una incubación de blanco (que contenía DMSO pero sin enzima TANK-2 ni compuesto) y muestras (que contenían enzima TANK-2 y

40 compuesto disuelto en DMSO). Se disolvieron todos los compuestos sometidos a prueba y eventualmente se diluyeron adicionalmente con DMSO. En primera instancia, se sometieron a prueba los compuestos a una concentración de 10-5 M. Cuando los compuestos mostraron actividad a 10-5 M, se produjo una curva de dosisrespuesta en la que se sometieron a prueba los compuestos a concentraciones de entre 10-5 M y 3 x 10-8 M. En cada prueba, se restó el valor del blanco de los valores tanto de control como de muestra. La muestra control

45 representaba la actividad máxima de la enzima TANK-2. Para cada muestra, se expresó la cantidad de cpm como porcentaje del valor de cpm medio de los controles. Cuando fue apropiado, se calcularon los valores de CI50 (concentración del medicamento necesaria para reducir la actividad de la enzima TANK-2 hasta el 50% del control) usando interpolación lineal entre los puntos experimentales justo por encima y por debajo del nivel del 50%. En el este caso, se expresan los efectos de los compuestos de prueba como pCI50 (el valor del log negativo del valor CI50).

50 Se incluyeron como compuestos de referencia, 3-aminobenzamida y 4-amino-1,8-naftalimida para validar el ensayo SPA. En este caso, se describió el ensayo que usó placas de 96 pocillos. En el ensayo que usó placas de 384 pocillos, se usaron las mismas concentraciones finales y se adaptaron los volúmenes. Si estaban disponibles los resultados de las placas de 96 pocillos, se incorporaron estos resultados en la tabla 2, si no se mostraron los resultados del ensayo con placas de 384 pocillos.

55 Ejemplo C.4 Detección de la actividad antiproliferativa

Se cultivaron células de carcinoma de colon humano HCT116 obtenidas de la ATCC en medio 5A de McCoy complementado con L-glutamina 2 mM, gentamicina 50 µg/ml y suero de ternero fetal inactivado por calor al 10%.

60 Se cultivaron células de cáncer de próstata humano PC-3 obtenidas de la ATCC en medio F12 de HAM complementado con piruvato de sodio 1 mM, bicarbonato de sodio 1,5 g/l, gentamicina 50 µg/ml, aminoácidos no esenciales y suero de ternero fetal al 10%.

65 Reactivos usados en el ensayo Alamar Blue

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Se adquirió resazurina de Aldrich (n.º de prod. 199303). Se adquirieron ferrocianuro de potasio, ferricianuro de potasio, KH2PO4 y K2HPO4 de Sigma (n.os de prod. P9387, P8131, P5655 y P8281, respectivamente).

5 Se preparó tampón fosfato de potasio 0,1 M (PPB) de la siguiente manera: se disolvieron 2,72 gramos de KH2PO4 y 13,86 gramos de K2HPO4 en 500 ml de H2O milli-Q, se ajustó el pH a pH 7,4 y se enrasó a 1 litro con H2O milli-Q; se esterilizó el tampón por filtración y se almacenó a temperatura ambiente. Se preparó una nueva disolución madre de resazurina (PPB-A) disolviendo 45 mg de resazurina en 15 ml de PBS. Se preparó ferricianuro de potasio 30 mM (PPB-B) disolviendo 0,987 gramos de ferricianuro de potasio en 100 ml de PPB. Se preparó ferrocianuro de potasio 30 mM (PPB-C) disolviendo 1,266 gramos de ferrocianuro de potasio en 100 ml de PPB.

Se preparó una mezcla de PPB-A, PPB-B y PPB-C mezclando volúmenes iguales de las disoluciones respectivas. Se preparó disolución de trabajo de resazurina (denominada en el presente documento disolución de “Alamar Blue”) diluyendo dicha mezcla 20 veces (vol/vol) con PPB y esterilizando por filtración; pudo guardarse a 4ºC la disolución

15 de Alamar Blue durante un máximo de 2 semanas.

Procedimiento del ensayo Alamar Blue

Para experimentos en placas de 384 pocillos, se sembraron las células a una densidad de 4,5 x 103 células/ml en placas de cultivo Falcon de 384 pocillos (Life Technologies, Merelbeke, Bélgica), de color negro con fondo transparente, en 45 µl de medio de cultivo. Se permitió que se adhiriesen las células al plástico durante 24 horas. Se diluyó previamente el compuesto sometido a prueba (1/50 con medio de cultivo) y se añadieron 5 µl del compuesto diluido previamente a los pocillos. Tras una incubación durante 4 días, se añadieron 10 µl de la disolución de Alamar Blue a cada pocillo y se incubaron las células adicionalmente durante 4 horas (HCT116) o 24 horas (PC-3) a 37ºC.

25 Se midió la intensidad de fluorescencia por cada pocillo en un lector de placas de fluorescencia (Fluorskan, Labsystems, excitación a 540 nm y emisión a 590 nm).

Se calculó la actividad antiproliferativa como porcentaje de células viables restantes en las condiciones de tratamiento frente a control (células no tratadas). En un experimento, el resultado de cada condición experimental es la media de pocillos por triplicado. Cuando fue apropiado, se repitieron los experimentos para establecer curvas completas de concentración-respuesta. Cuando fue apropiado, se calcularon los valores de CI50 (concentración del medicamento necesaria para reducir el crecimiento celular hasta el 50% del control) usando análisis Probit para datos clasificados (Finney, D.J., Probit Analyses, 2ª ed. Capítulo 10, Graded Responses, Cambridge University Press, Cambridge 1962). En este caso, se expresan los efectos de los compuestos sometidos a prueba como pCI50

35 (el valor del log negativo del valor de CI50) (véase la tabla 3).

Ejemplo C.5 Ensayo de polimerización

El ensayo de polimerización de tubulina es una adaptación de un ensayo descrito originariamente por Bonne, D. et al. (J. Biol. Chem., 1985, 260:2819-25). Se adquirió el kit de ensayo de Cytoskeleton, Inc. (número de catálogo BK011) y se realizó el ensayo tal como se describe por el proveedor con las siguientes modificaciones. Se ejecutó el ensayo en una placa Proxiplate de color negro de 384 pocillos (Perkin Elmer) y se adaptaron los volúmenes en consecuencia. Se llevaron a cabo las reacciones en un volumen final de 10 µl. Se añadieron los compuestos a 25 µl de la mezcla de reacción en placas PP de 96 pocillos (Coming) sobre hielo y se dispensaron 10 µl de esta mezcla en

45 duplicados de placas Proxiplate de 384 pocillos precalentadas hasta 37ºC, en un lector de placas Fluoroskan Ascent (Thermo Scientific). Se tomaron medidas de fluorescencia cada minuto durante una hora. Se determinó la máxima pendiente de cada pocillo (regresión lineal a través de 4 puntos consecutivos) y se calculó la polimerización como porcentaje de la polimerización observada en ausencia de compuesto. Se midieron en primer lugar los compuestos a una concentración de 20 µM y luego a 5 µM para aquéllos que mostraron una inhibición de más del 50% a 20 µM en comparación con la polimerización observada en ausencia de compuesto. En la tabla F-2, se notifican los resultados como puntuaciones definidas como: se notifica un compuesto que muestra una inhibición del 0 al 50% a 20 µM como puntuación 1; se notifica un compuesto que muestra una inhibición de más del 50% a 5 µM como puntuación 3. Se definen los compuestos con puntuación 2 como un compuesto que muestra una inhibición de más del 50% a 20 µM y una inhibición de menos del 50% a 5 µM.

55 Ejemplo C.6 Ensayo cometa de Eb1 (perturbación de microtúbulos)

El ensayo cometa de Eb1 se basa en la detección de la proteína Eb1 en el extremo positivo de microtúbulos en polimerización (Mimori-Kiyosue, 2000) usando inmunofluorescencia indirecta. La perturbación de la dinámica de los microtúbulos a través de despolimerización o estabilización da como resultado la deslocalización de Eb1 desde los extremos de los microtúbulos en crecimiento y esto se visualiza mediante la desaparición de focos citoplasmáticos que contienen Eb1.

En resumen, se hicieron crecer células de cáncer de próstata humano PC3 obtenidas de la Colección Americana de 65 Cultivos Tipo en placas de 96 pocillos (Greiner, n.º de cat. 655090) en medio de F12 HAM tal como recomienda el

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proveedor (ATCC). Se trataron las células durante 1 hora a 37ºC con compuestos disueltos en DMSO (concentración en DMSO final del 0,6%). Luego se retiró el medio de cultivo mediante aspiración y se fijaron las células con metanol frío (-20ºC). Tras una incubación durante 15 minutos a -20ºC, se lavaron las células dos veces con DPBS (Gibco) que contenía Triton X-100 al 0,5%. Se añadió anticuerpo contra Eb1 de ratón (BD Transduction 5 Laboratories, n.º de cat. 610534) a las células (dilución 1/250 con DPBS que contenía BSA al 1%) y se incubaron durante la noche a temperatura ambiente. Posteriormente se retiró el anticuerpo y se lavaron las células dos veces con DPBS, Triton X-100 al 0,5%. Se añadió anticuerpo secundario de cabra anti-ratón conjugado con el colorante fluorescente Alexa 488 (Molecular Probes) a una dilución 1/500 con DPBS, BSA al 1% y se incubó durante 1 hora a 37ºC. Se lavaron las células dos veces con DPBS, Triton X-100 al 0,5% y luego con DPBS que contenía Triton X10 100 al 0,5% y se añadió Hoechst 33342 (Molecular Probes) 1/5000. Se llevó a cabo la visualización de focos de Eb1 basada en microscopía usando un analizador celular IN Cell Analyser 1000 (Amersham Biosciences) usando un objetivo 20X. Se determinó visualmente la perturbación de los microtúbulos dependiente de compuesto mediante la desaparición de los focos de Eb1. Se determinó la menor concentración activa (LAC, lowest active concentration) como la concentración en la que los focos de Eb1 estaban ausentes en al menos el 50% de las células tratadas. En 15 este caso, se expresan los efectos de los compuestos sometidos a prueba como pLAC (el valor del log negativo del

valor de LAC) (véase la tabla 3).

Tabla 3

N.º comp.

pCI50 de PARP1 del ensayo SPA in vitro pCI50 de TANK2 del ensayo SPA in vitro Puntuación de polimerización de tubulina del ensayo pLAC de Eb1 del ensayo celular pCI50 de HCT116 del ensayo celular

1

7,44 7,85 2 6,45

2

7,33 7,43 <5

3

7,26 7,48 6,80

4

9,03 7,76 2 6,83

5

9,01 7,71 2 7 6,55

5a

7,80 7,40 <5

5b

7,44 7,47 7,01

6

7,27 7,72 3 8 7,24

7

8,38 8,02 3 7,5 7,23

8

7,08 7,28 2 6,81

9

7,20 6,35 6,80

10

6,66 7,23 6,73

11

7,06 7,45 6,81

12

7,34 7,37 6,75

13

7,38 7,37 6,57

14

7,01 7,20 6,98

15

7,48 7,39 6,64

16

6,10 7,42 6,38

17

7,35 7,28 2 6,69

18

<5

19

7,19 6,23

20

D. EJEMPLO DE COMPOSICIÓN: COMPRIMIDOS RECUBIERTOS

Preparación de núcleo del comprimido

25 Se mezcla bien una mezcla de 100 g de un compuesto de fórmula (1), 570 g de lactosa y 200 g de almidón y después se humidifica con una disolución de 5 g de dodecilsulfato de sodio y 10 g de polivinilpirrolidona en aproximadamente 200 ml de agua. Se tamiza la mezcla en polvo húmeda, se seca y se tamiza de nuevo. Luego se añaden 100 g de celulosa microcristalina y 15 g de aceite vegetal hidrogenado. Se mezcla bien el conjunto y se somete a compresión para dar comprimidos, proporcionando 10.000 comprimidos, que comprende cada uno 10 mg

30 de un compuesto de fórmula (I).

Recubrimiento

A una disolución de 10 g de metilcelulosa en 75 ml de etanol desnaturalizado, se le añade una disolución de 5 g de

35 etilcelulosa en 150 ml de diclorometano. Luego se añaden 75 ml de diclorometano y 2,5 ml de 1,2,3-propanotriol, se funden 10 g de polietilenglicol y se disuelven en 75 ml de diclorometano. Se añade esta última disolución a la primera y luego se añaden 2,5 g de octadecanoato de magnesio, 5 g de polivinilpirrolidona y 30 ml de una suspensión coloreada concentrada y se homogeneíza el conjunto. Por tanto se recubren los núcleos de comprimido con la mezcla así obtenida en un aparato de recubrimiento.

Claims (11)

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   REIVINDICACIONES

   1. Compuesto de fórmula (I),

   imagen1

   5

   incluyendo una forma estereoquímicamente isomérica del mismo;

   en la que 10 Y es CH2 o CH2-CH2;

   R1 es arilo o Het;

   15 en el que arilo es fenilo o naftalenilo;

   en el que Het es tienilo, pirrolilo, pirrolinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, furanilo, piperidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, piperazinilo, pirazinilo, triazinilo, indolizinilo, azaindolizinilo, indolilo, indolinilo, benzotienilo, indazolilo, benzoxazolilo,

   20 bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, cromanilo, purinilo, quinolinilo, cinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxazolinilo, naftiridinilo o pteridinilo;

   dos átomos de carbono en arilo o Het pueden estar unidos por puente (es decir, formar un resto bi o tricíclico) con un radical bivalente seleccionado de 25

   -O-CH2-CH2-O-(a-1),

   -CH2-O-CH2-O-(a-2), 30 -O-CH2-CH2-CH2-(a-3),

   -O-CH2-CH2-NR8-(a-4),

   35 -O-CR82-O-(a-5),

   -O-CH2-CH2-(a-6),

   -CH2-N-CH2-CH2-(a-7), 40 -(CH2)3-(a-8),

   o

   45 -(CH2)4-(a-9);

   cada arilo, Het, arilo unido por puente o Het unido por puente puede estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, nitro, hidroxicarbonilo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilamino C3-6, metiletilamino, aminocicloalquilo C3-6, haloalquilo 50 C1-6, trihaloalquilo C1-6, alquil C1-6-carbonilo, alquiloxi C2-6-carbonilo, alquenil C2-6-carbonilo, oxima, alquil C1-6-oxima, amidoxima, -C≡C-CH2O-CH3, -C≡C-CH2N(CH3)2, -C≡C-Si(CH3)3, hidroxialquilo C1-6, hidroxialquenilo C2-6, hidroxialquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, cianoalquenilo C2-6, aminocarbonilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquenilo C2-6, alquilsulfonil C1-6-alquinilo C2-6, -PO(O-alquilo C1-6)2, -B(OH)2, -S-CH3, SF5, alquilsulfonilo C1-6, -NR8R9, -alquil C1-6-NR8R9, -OR8, alquil C1-6-OR8, -CONR8R9, piperidinilalquilo C1-6,

   55 piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, piperidinilo, piperazinilo, alquil C1-6piperazinilo, morfolinilo, fenilo, tienilo, pirazolilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piridinilo, pirimidinilo, oxadiazolilo, imidazolilo, imidazolilalquinilo C2-6, alquil C1-6 imidazolilalquinilo C2-6, cianopiridinilo, fenilalquilo C1-6, fenilalquenilo C2-6, morfolinilalquilo C1-6, alquiloxi C1-6-fenilo, trihaloalquil C1-6-fenilo, metilpirazolilo, halopirimidinilo o dimetilaminopirrolidinilo; o

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   R1 es un radical de fórmula

   imagen2

   5 en la que X1 es CH2, NH o N-CH3; en la que X2 es CH2, C=O, O, NH o N-CH3; en la que R10 es fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo, en el que cada fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo

   10 puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, hidroxilo,

   ciano, alquilo C1-6, amino, polihaloalquilo C1-6 o alquiloxilo C1-6; o

   R1 es un radical de fórmula

   imagen3

   15

   en laqueX3 es CH o N;

   R2 es metilo, etilo, propilo o cicloalquilo C3-6;

   20 cada R3 y R4 se selecciona independientemente de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroxilo, trifluorometilo, metiloxilo; o R3 y R4 se toman junto con el átomo de carbono al que están unidos para formar un anillo de ciclopropilo o un radical de fórmula C(=O);

   R5 R6

   25 cada y se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquiloxilo C1-6, ciano, alquilo C1-6, -OCH2CH2NR8R9, -CH2OCH2CH2NR8R9, -OCH2CH2CH2NR8R9;

   R7 es hidrógeno, metilo o flúor;

   30 cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, carbonilo, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, dihidroxialquilo C1-6, cianoalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, fenilalquilo C1-6, di(alquil C1-6)aminoalquilo C1-6, alquilsulfonilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, morfolinilcarbonilo, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, piperidinilalquilo C1-6, tiomorfolinilalquilo C1-6, cicloalquilo C3-6-metilo, piridinilo, pirimidinilo, fenilo, halofenilo, oxanilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6 o

   35 alquil C1-6 carbonilaminoalquilo C1-6;

   una forma de N-óxido del mismo, las sales de adición farmacéuticamente aceptables del mismo y los solvatos del mismo.

   40 2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que

   Y es CH2-CH2; arilo es fenilo; Het es piridinilo, pirimidinilo, bencimidazolilo o indazolilo; cada arilo o Het puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-carbonilo, -alquil C1-6-NR8R9 u -OR8; X1 es CH2 o N-CH3; X2 es CH2, C=O u O; R10 es fenilo que puede

   45 estar sustituido con ciano; R2 es metilo; R3 y R4 son hidrógeno; R5 y R6 son hidrógeno; R7 es hidrógeno; y cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6 o trihaloalquilo C1-6.
2. 3. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, en el que

   50 Y es CH2-CH2; R1 es fenilo, piridinilo o pirimidinilo; cada fenilo, piridinilo o pirimidinilo puede estar sustituido con uno

   o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano o alquiloxilo C1-6; X1 es CH2; X2 es O; R10 es fenilo sustituido con ciano; R2 es metilo; R3 y R4 son hidrógeno; R5 y R6 son hidrógeno; y R7 es hidrógeno.
3. 4. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el compuesto se selecciona de los 55 siguientes compuestos:

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   (Enantiómero B)

   una sal de adición farmacéuticamente aceptable de los mismos o un solvato de los mismos.
4. 5. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para su uso como medicamento. 5

5. 6.

   Composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y como principio activo una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

6. 7.

   Proceso de preparación de una composición farmacéutica según la reivindicación 6, en el que el vehículo

   10 farmacéuticamente aceptable y un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 están íntimamente mezclados.
7. 8. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para la fabricación de un medicamento

   para el tratamiento de un trastorno mediado por la polimerización de una tubulina o una PARP. 15

8. 9.

   Combinación de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, con otro agente anticancerígeno.

9. 10.

   Proceso para preparar un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado por

   20 a) hacer reaccionar un producto intermedio de fórmula (II) con un reactivo apropiado en un disolvente inerte para la reacción con la formación de un compuesto de fórmula (I)

   imagen4

   con las variables tal como se definen en la reivindicación 1;

   b) añadir un exceso de una base a un producto intermedio de fórmula (III) en presencia de un producto intermedio de fórmula (IV), en el que Halo es cloro o bromo, en un disolvente adecuado

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   imagen5

   con las variables tal como se definen en la reivindicación 1;

   5 o, si se desea, convertir compuestos de fórmula (I) entre sí siguiendo transformaciones conocidas en la técnica, y además, si se desea, convertir los compuestos de fórmula (I), en una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable mediante tratamiento con un ácido, o en una sal de adición de base farmacéuticamente aceptable mediante tratamiento con una base, o a la inversa, convertir la forma de sal de adición de ácido en la base libre mediante tratamiento con álcali, o convertir la sal de adición de base en el ácido libre mediante tratamiento con

   10 ácido; y, si se desea, preparar formas estereoquímicamente isoméricas o formas de N-óxido de los mismos.
10. 11. Compuesto de fórmula (II)

    imagen6

    15 incluyendo una forma estereoquímicamente isomérica del mismo; en la que 20 Y es CH2 o CH2-CH2; R1 es arilo o Het; en el que arilo es fenilo o naftalenilo;

    25 en el que Het es tienilo, pirrolilo, pirrolinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, furanilo, piperidinilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, piperazinilo, pirazinilo, triazinilo, indolizinilo, azaindolizinilo, indolilo, indolinilo, benzotienilo, indazolilo, benzoxazolilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, cromanilo, purinilo, quinolinilo, cinolinilo, ftalazinilo,

    30 quinazolinilo, quinoxazolinilo, naftiridinilo o pteridinilo; dos átomos de carbono en arilo o Het pueden estar unidos por puente (es decir, formar un resto bi o tricíclico) con un radical bivalente seleccionado de

    35 -O-CH2-CH2-O-(a-1), -CH2-O-CH2-O-(a-2), -O-CH2-CH2-CH2-(a-3),

    40 -O-CH2-CH2-NR8-(a-4), -O-CR82-O-(a-5), 45 -O-CH2-CH2-(a-6), -CH2-N-CH2-CH2-(a-7), -(CH2)3-(a-8), 50 o -(CH2)4-(a-9);

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    cada arilo, Het, arilo unido por puente o Het unido por puente puede estar sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, ciano, nitro, hidroxicarbonilo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cicloalquilo C3-6, cicloalquilamino C3-6, metiletilamino, aminocicloalquilo C3-6, haloalquilo 5 C1-6, trihaloalquilo C1-6, alquil C1-6-carbonilo, alquiloxi C2-6-carbonilo, alquenil C2-6-carbonilo, oxima, alquil C1-6-oxima, amidoxima, -C≡C-CH2O-CH3, -C≡C-CH2N(CH3)2, -C≡C-Si(CH3)3, hidroxialquilo C1-6, hidroxialquenilo C2-6, hidroxialquinilo C2-6, cianoalquilo C1-6, cianoalquenilo C2-6, aminocarbonilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquenilo C2-6, alquilsulfonil C1-6-alquinilo C2-6, -PO(O-alquilo C1-6)2, -B(OH)2, -S-CH3, SF5, alquilsulfonilo C1-6, -NR8R9, -alquil C1-6-NR8R9, -OR8, alquil C1-6-OR8, -CONR8R9, piperidinilalquilo C1-6,

    10 piperazinilalquilo C1-6 , alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, piperidinilo, piperazinilo, alquil C1-6piperazinilo, morfolinilo, fenilo, tienilo, pirazolilo, pirrolilo, pirrolidinilo, piridinilo, pirimidinilo, oxadiazolilo, imidazolilo, imidazolilalquinilo C2-6, alquil C1-6 imidazolilalquinilo C2-6, cianopiridinilo, fenilalquilo C1-6, fenilalquenilo C2-6, morfolinilalquilo C1-6, alquiloxi C1-6-fenilo, trihaloalquil C1-6-fenilo, metilpirazolilo, halopirimidinilo o dimetilaminopirrolidinilo; o

    15 R1 es un radical de fórmula

    imagen7

    20 en la que X1 es CH2, NH o N-CH3;

    en la que X2 es CH2, C=O, O, NH o N-CH3;

    en la que R10 es fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo, en el que cada fenilo, piridinilo, piridazinilo o pirimidinilo

    25 puede estar sustituido con uno o dos sustituyentes cada uno seleccionado independientemente de halo, hidroxilo,

    ciano, alquilo C1-6, amino, polihaloalquilo C1-6 o alquiloxilo C1-6; o

    R1 es un radical de fórmula

    imagen8

    30

    en laqueX3 es CH o N;

    R2 es metilo, etilo, propilo o cicloalquilo C3-6;

    35 cada R3 y R4 se selecciona independientemente de hidrógeno, metilo, etilo, propilo, hidroxilo, trifluorometilo, metiloxilo; o R3 y R4 se toman junto con el átomo de carbono al que están unidos para formar un anillo de ciclopropilo o un radical de fórmula C(=O);

    R5 R6

    40 cada y se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquiloxilo C1-6, ciano, alquilo C1-6, OCH2CH2NR8R9, -CH2OCH2CH2NR8R9, -OCH2CH2CH2NR8R9;

    R7 es hidrógeno, metilo o flúor;

    45 cada R8 y R9 se selecciona independientemente de hidrógeno, halo, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, carbonilo, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6, alquiloxi C1-6-alquilo C1-6, hidroxialquilo C1-6, dihidroxialquilo C1-6, cianoalquilo C1-6, trihaloalquilo C1-6, fenilalquilo C1-6, di(alquil C1-6)aminoalquilo C1-6, alquilsulfonilo C1-6, morfolinilalquilo C1-6, morfolinilcarbonilo, piperazinilalquilo C1-6, alquil C1-6-piperazinilalquilo C1-6, piperidinilalquilo C1-6, tiomorfolinilalquilo C1-6, cicloalquilo C3-6-metilo, piridinilo, pirimidinilo, fenilo, halofenilo, oxanilalquilo C1-6, alquilsulfonil C1-6-alquilo C1-6 o

    50 alquil C1-6-carbonilaminoalquilo C1-6;

    una forma de N-óxido del mismo, las sales de adición farmacéuticamente aceptables del mismo y los solvatos del mismo.

    55 12. Proceso para preparar un compuesto según la reivindicación 11, caracterizado por añadir sal de potasio de 2metil-2-propanol a un producto intermedio de fórmula (V) en presencia de un producto intermedio de fórmula (VI), en el que W es un grupo saliente, en un disolvente adecuado,

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    imagen9

    con las variables tal como se definen en la reivindicación 1.
11. 14. Compuesto según la reivindicación 13, para su uso como medicamento para el tratamiento de cáncer de pulmón. 10 15. Compuesto según la reivindicación 13, para su uso como medicamento para el tratamiento de cáncer de mama.