ES2591110T3 - Usos terapéuticos de compuestos que tienen actividad SERT, 5-HT3 y 5-HT1A combinada - Google Patents

Abstract

Compuesto I que es 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, para usar en el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre deterioro cognitivo leve; demencia vascular; y trastorno cognitivo asociado con el síndrome de Down, mutaciones génicas tph, epilepsia, daño cerebral traumático o síndrome de Asperger.

Description

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DESCRIPCION

Usos terapeuticos de compuestos que tienen actividad SERT, 5-HT3 y 5-HTia combinada Campo de la invencion

La presente invencion se refiere al uso terapeutico de compuestos que tienen una actividad SERT, 5-HT3 y 5- HTia combinada.

Antecedentes de la invencion

Los inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina (SSRI) han recibido durante anos el apoyo de los medicos para el tratamiento de muchas enfermedades del SNC, tales como la depresion y la ansiedad debido a que son eficaces y tienen un perfil de seguridad que es favorable en comparacion con la generacion anterior de farmacos para el SNC, esto es los denominados tricfclicos. Sin embargo, los SSRI tambien han sido obstaculizados por una fraccion significativa de no respondedores, esto es, pacientes que no responden o no responden completamente al tratamiento. Por otra parte, tfpicamente un SSRI no empieza a mostrar efecto hasta despues de semanas de tratamiento. Finalmente, aunque los SSRI tfpicamente dan lugar a menos efectos adversos que los tricfclicos, la administracion de SSRI ocasiona a menudo efectos adversos, tales como efectos secundarios sexuales y problemas de sueno. Para muchos pacientes resulta diffcil vivir con estos efectos adversos que ocasionan abandonos del tratamiento para una fraccion significativa de los pacientes que reciben los SSRI.

Se sabe que una combinacion de la inhibicion del transportador de serotonina (SERT) con una actividad sobre uno o mas receptores de serotonina puede resultar beneficiosa. Se ha informado de que la combinacion de pindolol, que es un agonista parcial de 5-HTia, con un inhibidor de la recaptacion de serotonina da lugar a un rapido comienzo del efecto [Psych. Res., 125,81-86, 2004]. Esto implicarfa un comienzo mas corto del efecto del aumento de los niveles de serotonina en medicina clfnica y un aumento o potenciacion del efecto terapeutico del inhibidor de la recaptacion de serotonina.

Las enfermedades relacionadas con el SNC, tales como p. ej. depresion, ansiedad y esquizofrenia son a menudo co-morbidas con otros trastornos o disfuncionalidades, tales como deficits o deterioros cognitivos [Scand. J. Psych., 43, 239-251, 2002; Am. J. Psych., 158, 1722-1725, 2001].

Se presume que varios neurotransmisores estan implicados en los eventos neuronales que regulan la cognicion. En particular, el sistema colinergico juega un papel prominente en la cognicion, y los compuestos que afectan al sistema colinergico son de ese modo potencialmente utiles para el tratamiento del deterioro cognitivo. Los compuestos que afectan al receptor 5-HT1A y/o al receptor 5-HT3 son conocidos por afectar al sistema colinergico, y como tales pueden ser utiles en el tratamiento del deterioro cognitivo.

Por lo tanto, se esperarfa que un compuesto que ejerciera actividad de receptor 5-HT1A y/o 5-HT3 fuera util en el tratamiento del deterioro cognitivo. Un compuesto que por otra parte tambien ejerciera actividad SERT serfa particularmente util para el tratamiento del deterioro cognitivo en pacientes que tambien padecieran estas enfermedades que se beneficiarfan de un incremento (mas rapido) de los niveles de serotonina.

La solicitud internacional publicada como WO 03/029232 describe una gama de compuestos incluyendo la 1-[2-(2,4- dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina (ejemplo 1e) que tiene actividad inhibidora de la recaptacion de serotonina.

La solicitud internacional WO 2007/144005 que se ha publicado despues de la fecha de prioridad de la presente solicitud describe que la 1-[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)fenil]piperazina tambien es un antagonista de 5-HT3 y un agonista parcial de 5-HT1A.

Am J Psych, 164, 900-909 describe que la duloxetina SNRI proporciona efectos precognitivos en pacientes deprimidos.

La solicitud de patente de EE.UU publicada como US2006/019938 describe que la fluoxetina SSRI se puede usar para tratar la discapacidad cognitiva en pacientes deprimidos con pseudo-demencia.

Br Med J, 331, 321-327, 2005 describe que el inhibidor de acetilcolinaesterasa donepezilo se usa ampliamente como farmaco anti demencia.

Compendio de la invencion

Los autores de la presente invencion han descubierto sorprendentemente que la 1-[2-(2,4-dimetilfenil- sulfanil)fenil]piperazina ejerce una combinacion de inhibicion del SERT, antagonismo de 5-HT3 y agonismo de 5- HT1A. Por lo tanto, la invencion proporciona un metodo para el tratamiento de enfermedades, comprendiendo el metodo la administracion de una cantidad terapeuticamente eficaz de 1-[2-(2,4.dimetilfenilsulfanil)fenil]-piperazina o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo a un paciente que lo necesite.

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En una realizacion, la invencion se refiere al uso de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina o una sal farmaceuticamente aceptable de la misma en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades.

En una realizacion, la invencion proporciona 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina o una sal farmaceuticamente aceptable de la misma para su uso en el tratamiento de enfermedades.

Figuras

Figura 1: XRPD de la base cristalina Figura 2: XRPD de la forma alfa de la sal hidrobromuro Figura 3: XRPD de la forma beta de la sal hidrobromuro Figura 4: XRPD de la forma gamma de la sal hidrobromuro Figura 5: XRPD del hemihidrato de la sal hidrobromuro

Figura 6: Cambio en el apartado 4 de clasificacion HAM-D (Insomnio Temprano) para placebo, 5 mg y 10 mg de compuesto I (sal HBr) a lo largo de 6 semanas. Habfa aproximadamente 100 pacientes en cada grupo

Figura 7: Cambio en el apartado 5 de clasificacion HAM-D (Insomnio Medio) para placebo, 5 mg y 10 mg de compuesto I (sal HBr) a lo largo de 6 semanas. Habfa aproximadamente 100 pacientes en cada grupo

Figura 8: Cambio en el apartado 6 de clasificacion HAM-D (Insomnio Tardfo) para placebo, 5 mg y 10 mg de compuesto I (sal HBr) a lo largo de 6 semanas. Habfa aproximadamente 100 pacientes en cada grupo

Figura 9: Efecto del compuesto I en el ensayo de formalina intradermica. El eje X muestra la cantidad de compuesto administrada; el eje Y muestra la cantidad de tiempo (seg.) empleado en lamer la pata. Figura 9a: Respuesta en el perfodo de 0-5 minutos; Figura 9b: Respuesta en el perfodo de 20-30 minutos.

Figura 10a: Niveles de acetilcolina extracelular en el cortex prefrontal en ratas que se mueven libremente tras la administracion de sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina.

Figura 10b: Niveles de acetilcolina extracelular en el hipocampo ventral en ratas que se mueven libremente tras la administracion de sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina.

Figura 11: Efecto de la sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina en el condicionamiento por miedo contextual en ratas Sprague-Dawley cuando se administra 60 minutos antes de la adquisicion. El comportamiento de paralizacion se puntuo durante un perfodo de habituacion de 58 seg antes de la descarga en la pata ENC (adquisicion pre-descarga) (barras blancas). El comportamiento de paralizacion se midio 24 h despues del adiestramiento (ensayo de retencion) (barras negras).

Figura 12: Efecto de la sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina sobre el condicionamiento de miedo contextual en ratas Sprague-Dawley cuando se administra 1 h antes del ensayo de retencion. El comportamiento de paralizacion se puntuo durante 58 seg, antes de la descarga en la pata ENC (adquisicion) (barras blancas). El comportamiento de paralizacion se midio 24 h despues del adiestramiento (ensayo de retencion) (barras negras).

Figura 13: Efecto de la sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina sobre el condicionamiento de miedo contextual en ratas Sprague-Dawley cuando se administra inmediatamente despues de la adquisicion. El comportamiento de paralizacion se puntuo durante 58 seg, antes de la descarga en la pata ENC (adquisicion pre-descarga) (barras blancas). El comportamiento de paralizacion se midio 24 h despues del adiestramiento (ensayo de retencion) (barras negras).

Descripcion detallada de la invencion

La invencion se refiere al uso del compuesto I, esto es 1-[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)fenil]piperazina, cuya estructura es

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y sus sales farmaceuticamente aceptables.

En una realization, dichas sales farmaceuticamente aceptables son sales de adicion de acido de acidos que no son toxicos. Dichas sales incluyen sales elaboradas a partir de acidos organicos, tales como maleico, fumarico, 5 benzoico, ascorbico, succfnico, oxalico, bis-metilensalicflico, metanosulfonico, etanodisulfonico, acetico, propionico, tartarico, salicflico, cftrico, gluconico, lactico, malico, mandelico, cinamico, citraconico, aspartico, estearico, palmftico, itaconico, glicolico, p-aminobenzoico, glutamico, bencenosulfonico, acidos teofilinaceticos, asf como 8-haloteofilinas, por ejemplo 8-bromoteofilina. Dichas sales tambien se pueden elaborar a partir de sales inorganicas, tales como acidos clorhfdrico, bromhfdrico, sulfurico, sulfamico, fosforico y nftrico. Se hace una mention particular de las sales 10 elaboradas a partir de acido metanosulfonico, acido maleico, acido fumarico, acido meso-tartarico, acido (+)- tartarico, acido (-)-tartarico, acido clorhfdrico, acido bromhfdrico, acido sulfurico, acido fosforoso y acido nftrico. Se hace una mencion clara de la sal hidrobromuro.

En una realizacion, la invention se refiere al uso del compuesto I como se ha descrito previamente siempre que dicho compuesto no sea la base libre de 1-[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)fenil]piperazina en una forma no cristalina.

15 Las formas de dosificacion oral, y en particular los comprimidos, son a menudo preferidos por los pacientes y el medico debido a la facilidad de administration y a la consiguiente mejor conformidad. Para los comprimidos, es preferible que los ingredientes activos sean cristalinos. En una realizacion, la invencion se refiere al uso de compuestos que son cristalinos. La cristalinidad de los compuestos utilizados en la presente invencion es evidenciada por las XRDP mostradas en las figuras 1-5. En el documento WO 2007/144005 se describen reflexiones 20 por XRPD de otras sales utilizadas en la presente invencion. La siguiente tabla resume las principales reflexiones de XRDP de algunos compuestos utilizados en la presente invencion.

Posiciones pico de rayos X seleccionadas (°20), Todos los valores +-0,1°

Base cristalina

11,10 16,88 17,42 22,23

-hidrobromuro (a)

5,85 9,30 17,49 18,58

-hidrobromuro (P)

6,89 9,73 13,78 14,62

-hidrobromuro (y)

11,82 16,01 17,22 18,84

-hidrobromuro (hidrato)

10,69 11,66 15,40 17,86

En una realizacion los cristales utilizados en la presente invencion son solvatos, esto es cristales en los que las 25 moleculas de disolvente forman parte de la estructura del cristal. El solvato se puede formar a partir de agua, en cuyo caso los solvatos son referidos a menudo como hidratos. Alternativamente, los solvatos se pueden formar a partir de otros disolventes, tales como p. ej. etanol, acetona, o acetato de etilo. La cantidad exacta de solvato depende a menudo de las condiciones. Por ejemplo, los hidratos tfpicamente perderan agua a medida que aumente la temperatura o a medida que disminuya la humedad relativa.

30 En una realizacion, los compuestos de la presente invencion son cristales no solvatados.

Algunos compuestos son higroscopicos, esto es, absorben agua cuando se exponen a humedad. La higroscopicidad se considera generalmente una propiedad no deseada para los compuestos que van a ser presentados en una formulation farmaceutica, en particular en una formulation seca, tal como comprimidos. En una realizacion, la invencion proporciona cristales con una baja higroscopicidad. Para las formas de dosificacion orales que utilizan 35 ingredientes activos cristalinos tambien resulta beneficioso que dichos cristales esten bien definidos. En el presente

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contexto, el termino "bien definido" en concreto significa que la estequiometrfa esta bien definida, esto es, que la razon entre los iones que forman la sal es la razon entre numeros enteros pequenos, tal como 1:1, 1:2, 2:1, 1:1:1, etc. En una realizacion, los compuestos de la presente invencion son cristales bien definidos.

Los compuestos cristalinos utilizados en la presente invencion pueden existir en mas de una forma, esto es pueden existir en formas polimorficas. Las formas polimorficas existen si un compuesto puede cristalizar en mas de una forma. Se pretende que la presente invencion incluya todas estas formas polimorficas, ya sea como compuestos puras o como mezclas de los mismos.

En una realizacion, la presente invencion utiliza compuestos en una forma purificada. Se pretende que el termino "forma purificada" indique que el compuesto esta esencialmente libre de otros compuestos o de otras formas del mismo compuesto, segun sea el caso.

Como se evidencia p. ej. en las figuras 2-5, los compuestos utilizados en la presente invencion, en su caso la sal hidrobromuro, puede existir en varias formas, esto es ser polimorficos. Las formas polimorficas tienen diferentes propiedades, y se muestran en el ejemplo 2. La forma beta de la sal hidrobromuro es la mas estable como se demuestra por el punto de fusion DSC superior y la solubilidad inferior. Por otra parte, la forma beta tiene una combinacion atractiva de baja higroscopicidad y solubilidad, que hace este compuesto particularmente adecuado para elaborar comprimidos. Por consiguiente, en una realizacion, la invencion proporciona el uso de la sal hidrobromuro de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina con reflexiones de XRDP a aproximadamente 6,89, 9,73, 13,78 y 14,62 (°20), y en particular con una XRPD mostrada en la figura 3.

La solubilidad de un ingrediente activo tambien tiene trascendencia para la eleccion de la forma de dosificacion ya que puede tener un impacto directo sobre la bio-disponibilidad. Para las formas de dosificacion orales, se cree generalmente que una solubilidad superior del ingrediente activo es beneficiosa ya que incrementa la bio- disponibilidad.

Como se muestra en el ejemplo 1, los compuestos utilizados en la presente invencion son potentes inhibidores del transportador de serotonina humano, esto es, inhiben la recaptacion de serotonina. Por otra parte, los compuestos son potentes antagonistas en el receptor 5-HT3 de raton, rata, cobaya y canino. En el receptor 5-HT3 humano, clonado en oocitos, se encontro que los compuestos eran antagonistas a bajas concentraciones (CI50 aprox. 20 nM), mientras a concentraciones superiores los compuestos presentan propiedades agonfsticas (DE50 = 2,1 pM). Una aplicacion posterior de los compuestos de la presente invencion a una concentracion elevada no mostro ninguna respuesta agonfstica, lo que podrfa estar debido a la rapida desensibilizacion o al antagonismo directo in vitro. De este modo, a bajas concentraciones los compuestos de la presente invencion presentan un antagonismo marcado en el receptor 5-HT3 humano como se observa sobre el receptor 5-HT3 de otras especies. Los datos tambien demuestran que los compuestos utilizados en la presente invencion son agonistas en el receptor 5-HT1A con un valor Ki de 15 nM y una actividad intrfnseca (o eficacia) del 96%. En el documento WO 2007/144005 se describen valores ligeramente diferentes. Se cree, sin embargo, que esta diferencia es una cuestion de grado y que no requiere un cambio fundamental en la percepcion del compuesto.

Como se ha mencionado antes, existen razones teoricas por las cuales se espera que los compuestos que son agonistas de 5-HT1A y/o antagonistas de 5-HT3 sean utiles en el tratamiento de los deficits cognitivos, y esto esta apoyado por la evidencia clfnica. T. Sumiyoshi en Am. J. Psych., 158, 1722-1725, 2001 refiere un estudio en el que los pacientes recibieron anti-psicoticos tfpicos, tales como haloperidol, sulprida y pimozida, que carecen de actividad 5-HT1A combinados con placebo o tandospirona, que es un agonista de 5-HT1A. Los pacientes que recibieron tandospirona ademas del anti-psicotico mostraron una mejora en su funcion cognitiva mientras que los pacientes que recibieron placebo no. De un modo similar, los anti-psicoticos atfpicos, tales como clozapina, que tambien son agonistas de 5-HT1A aumentan la cognicion en pacientes esquizofrenicos, mientras los anti-psicoticos tfpicos, tales como el haloperidol que no tiene actividad 5-HT1A, no [Y. Chung, Brain Res., 1023, 54-63, 2004]. En un estudio cruzado doble ciego aleatorizado en sujetos masculinos sanos, las evaluaciones de la memoria verbal y espacial y la atencion mantenida demostraron que el antagonista de 5-HT3, el alosetron atenuaba los deficits inducidos por escopolamina en la memoria verbal y espacial [Preston, Recent Advances in the treatment of Neurodegenerative disorders and cognitive function, 1994, (eds.) Racagni y Langer, Basel Karger, pags. 89-93].

Como se muestra en el ejemplo 5 los compuestos de la presente invencion dan lugar a un incremento en el nivel extracelular de acetilcolina en el cortex prefrontal y el hipocampo ventral en ratas. Se espera que estos descubrimientos pre-clfnicos se traduzcan en un efecto clfnico en el tratamiento de los deterioros cognitivos, vease el uso de inhibidores de acetilcolinesterasa en el tratamiento de los deterioros cognitivos, p. ej. en la enfermedad de Alzheimer. Se puede encontrar un respaldo adicional a esta posicion en el ejemplo 6, donde los datos demuestran que los compuestos de la presente invencion potencian la memoria contextual en ratas. En conjunto, el perfil farmacologico de los compuestos de la presente invencion combinado con los efectos sobre los niveles de acetilcolina y la memoria en ratas sugieren fuertemente que los compuestos utilizados en la presente invencion son utiles en el tratamiento del deterioro cognitivo o el tratamiento de enfermedades en las que el paciente tambien padece deterioro cognitivo.

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El deterioro cognitivo esta entre los rasgos clasicos de la depresion, tal como p. ej. el trastorno depresivo mayor. Los trastornos cognitivos pueden ser, hasta cierto punto, secundarios a la depresion en el sentido de que una mejora en el estado depresivo tambien conducira a una mejora del deterioro cognitivo. Sin embargo, tambien existe una clara evidencia de que los trastornos cognitivos son, en efecto, independientes de la depresion. Por ejemplo, los estudios han mostrado un deterioro cognitivo persistente despues de la recuperacion de una depresion [J. Nervous Mental Disease, 185, 748-754, 1997]. Por otra parte, el efecto diferencial de los antidepresivos sobre la depresion y los deterioros cognitivos confiere un respaldo adicional a la nocion de que la depresion y el deterioro cognitivo son independientes, si bien a menudo son estados co-morbidos. Mientras los medicamentos de serotonina y noradrenalina proporcionan mejoras comparables en los sfntomas depresivos, varios estudios han demostrado que la modulacion del sistema noradrenergico no mejora las funciones cognitivas tanto como la modulacion de la serotonina [Brain Res. Bull., 58, 345-350, 2002; Hum Psychpharmacol., 8, 41-47, 1993].

Las funciones cognitivas estan deterioradas a menudo en pacientes esquizofrenicos, y pueden formar parte de los denominados sfntomas negativos de la esquizofrenia. Las funciones cognitivas tambien estan deterioradas en pacientes con ADHD.

Los deficits cognitivos o el deterioro cognitivo incluyen una disminucion en las funciones cognitivas o los dominios cognitivos, p. ej. memoria, atencion y vigilancia en el trabajo, aprendizaje y memoria verbal, aprendizaje y memoria visual, razonamiento y resolucion de problemas p. ej. funcion ejecutiva, velocidad de procesamiento y/o cognicion social. En particular, los deficits cognitivos o el deterioro cognitivo pueden indicar deficits de atencion, pensamiento desorganizado, pensamiento lento, dificultad de comprension, escasa concentracion, deterioro de la resolucion de problemas, memoria escasa, dificultades en la expresion de pensamientos y/o dificultades en la integracion de pensamientos, sensaciones y comportamiento, o dificultades en la extincion de pensamientos irrelevantes. Se pretende que los terminos "deficits cognitivos" y "deterioro cognitivo" indiquen lo mismo y se utilizan indistintamente.

Los datos presentados en el ejemplo 4 demuestran que el compuesto I es util para el tratamiento del dolor, y que puede tener incluso un efecto analgesico; estudios adicionales en un modelo animal de dolor neuropatico confirman esta observacion. Por consiguiente, el compuesto I puede ser util en el tratamiento del dolor y de los trastornos afectivos o del estado de animo, tales como la depresion y la ansiedad asociadas con el dolor, y en particular el dolor cronico. El dolor cronico incluye indicaciones tales como el dolor del miembro fantasma, el dolor neuropatico, la neuropatfa diabetica, la neuralgia post-herpetica (PHN), el sfndrome del tunel carpiano (CTS), el sfndrome del tunel tarsiano, la compresion del nervio ulnar, la compresion medular, la neuropatfa por VIH, el sfndrome de dolor regional complejo (CPRS), la neuralgia trigeminal / neuralgia del trigemino / tic doloroso, la intervencion quirurgica (p. ej. analgesicos post-operatorios), la vasculopatfa diabetica, la resistencia capilar o los sfntomas diabeticos asociados con insulitis, dolor asociado con angina, dolor asociado con menstruacion, dolor asociado con cancer, dolor dental, dolor de cabeza, migrana, dolor de cabeza de tipo tension, neuralgia trigeminal, sfndrome de articulacion temporomandibular, lesion muscular con dolor miofascial, sfndrome de fibromialgia, dolor oseo y articular (osteoartritis), artritis reumatoide, artritis reumatoide y edema resultante de trauma asociado con quemaduras, esguinces o fracturas de huesos, dolor debido a osteoartritis, osteoporosis, metastasis en huesos o razones desconocidas, gota, fibrositis, dolor miofascial, sfndromes del operculo toracico, dolor en la parte superior de la espalda o dolor en la parte inferior de la espalda (donde el dolor de espalda resulta de una enfermedad de la medula primaria, regional o sistematica (radiculopatfa), dolor pelvico, dolor de pecho cardfaco, dolor de pecho no cardfaco, dolor asociado con lesion de la medula espinal (SCI), dolor post-ictus central, neuropatfa por cancer, dolor por SIDA, dolor por celulas falcadas, dolor por latigazo cervical y geriatrico.

El compuesto I ha sido sometido a ensayo en pruebas clfnicas utilizando HAM-D (la Escala de Clasificacion de Hamilton para la Depresion) como criterio de valoracion clfnico. La escala HAM-D se puede utilizar para evaluar la gravedad de la depresion en los pacientes por medio de un cuestionario de 24 puntos. Los puntos 4, 5 y 6 de la escala hacen referencia a como duermen los pacientes, esto es si el paciente tiene facilidad para dormir (Insomnio Temprano), el paciente se despierta durante la noche (Insomnio Medio), y si el paciente se despierta por la manana temprano (Insomnio Tardfo). El compuesto se sometio a ensayo a 5 y 10 mg diariamente frente a placebo con aproximadamente 100 pacientes por seccion. Los datos de las Figuras 6-8 demuestran claramente que el compuesto I da lugar a una mejora grande y dependiente de la dosis del patron del sueno que es superior a la proporcionada por el placebo. Es bien sabido que los trastornos del sueno son un efecto adverso general de la mayor parte de los antidepresivos. En particular se ha informado de que los SSRI y los compuestos que inhiben el transportador de noradrenalina dan lugar a problemas en el inicio y el mantenimiento del sueno y con frecuencia se refieren tambien problemas con el insomnio [Int. Clin. Psychpharm., 21 (supl 1), S25-S29, 2006]. Otros han informado de que estos compuestos dan lugar a una supresion del sueno REM, un incremento en la latencia del sueno, un sueno menos eficaz, un incremento en los despertares nocturnos, y una fragmentacion del sueno [ Hum. Psychopharm. Clin. Exp., 20, 533-559, 2005]. Por lo tanto es un resultado sorprendente que la administracion del compuesto I no este asociada con efectos adversos sobre el sueno, sino que de hecho proporcione una mejora del patron del sueno. Por consiguiente, el compuesto utilizado en la presente invencion puede ser util en el tratamiento de los trastornos del sueno, tales como las dificultades para quedarse dormido, los frecuentes despertares nocturnos y los despertares por la manana temprano.

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La prueba clfnica anteriormente mencionada tambien capto los efectos adversos sexuales referidos por los pacientes. La siguiente tabla muestra el numero de pacientes que informaron de tipos especificados de efectos adversos relacionados con la sexualidad.

Efecto adverso referido

Placebo 5 mg 10 mg

Anorgasmia

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Retraso en la Eyaculacion

0 0 0

Disfuncion erectil

0 0 0

Disminucion de la libido

0 1 1

Orgasmo anormal

2 0 0

Perdida de la libido

0 1 0

Disminucion de la sensacion orgasmica

0 0 0

Es bien sabido que el tratamiento con anti-depresivos en general y con SSRI en particular puede estar asociado con disfuncion sexual y que frecuentemente conduce a una interrupcion del tratamiento. Tanto como 30-70 % de los pacientes con SSRI refieren deficits en la funcion sexual [J. Clin. Psych., 66, 844-848, 2005], cuyos deficitis incluyen disminucion de la libido, orgasmos retrasados, reducidos o ausentes, disminucion de la excitacion, y disfuncion erectil. Los resultados anteriores que demuestran que el efecto adverso sexual del compuesto I es similar al del placebo es por lo tanto mucho mejor que el que cabria esperar normalmente de un antidepresivo, y en particular de un SSRI. Los compuestos utilizados en la presente invencion pueden ser utiles en el tratamiento de las disfunciones sexuales, tales como la anorgasmia, el retraso de la eyaculacion, la disfuncion erectil, la disminucion de la libido, el orgasmo anormal, la perdida de la libido o la disminucion de la sensacion orgasmica.

Los efectos adversos que interrumpen el sueno y la actividad sexual pueden ser muy diffciles de aceptar para los pacientes y en particular para los pacientes a largo plazo, por no mencionar el tratamiento cronico, y pueden ocasionar abandonos del tratamiento. La ausencia de estos efectos adversos en los tratamientos que comprenden la administracion del compuesto I hacen que el compuesto I sea particularmente util en las intervenciones terapeuticas a lo largo de un perfodo de tiempo prolongado, tal como p. ej. la prevencion de la recafda en una depresion.

Los efectos beneficiosos sobre el patron del sueno ocasionados por el compuesto I hacen particularmente atractivo el uso del compuesto I como se describe en la presente memoria en el tratamiento de pacientes que ya han tenido problemas con el sueno o que padecen un trastorno del sueno o en pacientes con trastornos relacionados con la sexualidad.

Los compuestos utilizados en la presente invencion tambien pueden ser utiles como tratamiento de segunda lfnea para pacientes que no pueden utilizar otros farmacos, tales como otros anti-depresivos, tales como inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina (SSRI), inhibidores selectivos de la recaptacion de noradrenalina (NRI), inhibidores de la recaptacion de noradrenalina/serotonina (SNRI) o tri-cfclicos (TCA) debido a eventos adversos relacionados con el sueno o la sexualidad. En esta realizacion, el paciente que se va a tratar ha recibido otra medicacion (o todavfa la esta recibiendo), cuya medicacion ha cesado o se ha reducido (o tiene que ser cesada o reducida) debido a eventos adversos relacionados con el sueno o la sexualidad. Tfpicamente, el paciente esta padeciendo trastornos del estado de animo, tales como depresion y ansiedad, abuso de drogas (alcohol, narcoticos etc) o trastornos con dolor cronico.

El perfil farmacologico unico del compuesto I combinado con un perfil de seguridad favorable inesperado hace que el compuesto I sea util en el tramiento de por ejemplo trastorno del ritmo circadiano, trastornos del sueno, trastornos respiratorios durante el sueno, sfndorme de hipopnea, dolor abdominal, depresion, en particular depresion severa, trastorno distfmico, ciclotimia, depresion exhaustiva, depresion atfpica, trastorno del caracter asociado con un trastorno medico generalizado, trastorno del caracter inducido por sustancias, depresion recurrente, depresion en un solo episodio, depresion pediatrica, depresion posterior a un accidente cerebrovascular, trastorno disforico peri-, pre-

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o post-menopausico; trastorno afectivo estacional (SAD); agresion y agitacion en demencia, tal como Alzheimer; trastornos compulsivos y del espectro de la atencion en ADHD, autismo y smdrome de Asperger; leucariosis, enfermedad de los vasos sangumeos pequenos, depresion asociada con abuso de drogas, irritabilidad, hostilidad, trastornos del sueno, fatiga, enfermedad de Huntington, esclerosis multiple, ansiedad (depresion ansiosa) y dolor, en particular dolor en el tracto gastrointestinal, tal como, p. ej, smdrome del intestino irritable (IBS), trastorno de ansiedad general asociada al dolor, enfermedad de control de impulsos, trastorno explosivo intermitente, cleptomania, piromama, juego patologico, tricotilomama, smtomas negativos de esquizofrenia, deterioro cognitivo leve, demencia vascular, deterioro cognitivo asociado con el smdrome de Down, mutaciones genicas tph, ADHD, epilepsia, dano cerebral traumatico o smdrome de Asperger, trastorno compulsivo y del espectro de atencion en ADHD, smdrome de Asperger y autismo, agresion y agitacion en demencia y enfermedad de Alzheimer, smdrome de fatiga cronica, trastorno relacionado con estres, estres agudo, estres, burn-out; resistencia a la insulina asociada con hiperactividad del eje HPA; trastorno alimenticio, tal como obesidad, trastorno por atracon, anorexia y bulimia nerviosa, trastorno de la conducta, trastornos del comportamiento, trastornos del comportamiento asociados con demencia, miedo a volar, miedo a los ascensores, claustrofobia y ambliopfa. El tratamiento de estas enfermedades por la administracion del compuesto I es particularmente util y beneficioso ya que se espera que sea sin efectos adversos relacionados con el sueno y el sexo, y porque se espera tambien un efecto en el deterioro cognitivo, que esta asociado con muchas de las enfermedades mencionadas anteriormente.

En este contexto “depresion severa” es depresion en la que el paciente tiene en la escala MADRS una puntuacion superior a 30, tal como por encima de 32 o por encima de 35.

Una “cantidad terapeuticamente eficaz" de un compuesto como se usa en la presente memoria significa una cantidad suficiente para curar, aliviar o deterner parcialmente las manifestaciones clmicas de una enfermedad dada y sus complicaciones en una intervencion terapeutica que comprende la administracion de dicho compuesto. Una cantidad adecuados para llevar esto a cabo se define como “una cantidad terapeuticamente eficaz”. Las cantidades eficaces para cada proposito dependeran de la severidad de la enfermedad o el dano, asf como del peso y del estado general del sujeto. Se entendera que la determinacion de una dosis apropiada se puede conseguir usando experimentacion rutinaria, construyendo una matriz de valores y ensayando diferentes puntos en la matriz, lo cual cae todo dentro de las competencias ordinarias de un medico entrenado.

El termino "tratamiento" y "tratar" como se utiliza en la presente memoria representa el manejo y el cuidado de un paciente con el fin de combatir una afeccion, tal como una enfermedad o un trastorno. Se pretende que el termino incluya todo el espectro de tratamientos para una afeccion dada que padece el paciente, tal como la administracion del compuesto activo para aliviar los smtomas o complicaciones, para retrasar el progreso de la enfermedad, el trastorno o la afeccion, para aliviar o mitigar los smtomas y complicaciones, y/o para curar o eliminar la enfermedad, el trastorno o afeccion asf como para prevenir la afeccion, donde se debe entender la prevencion como el manejo y el cuidado de un paciente con el proposito de combatir la enfermedad, la afeccion, o el trastorno e incluye la administracion de los compuestos activos para evitar el comienzo de los smtomas o complicaciones. Sin embargo, el tratamiento profilactico (preventivo) y terapeutico (curativo) son dos aspectos separados de la invencion. El paciente que se va a tratar es preferiblemente un mairnfero, en particular un ser humano.

Por lo general, el tratamiento descrito en la presente invencion implicara la administracion diaria de los compuestos de la presente invencion. Esto puede implicar la administracion una vez al dfa, o la administracion dos veces al dfa o incluso mas frecuentemente.

En una realizacion, la invencion se refiere al compuesto I para su uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre deterioro cognitivo leve, demencia vascular o deterioro cognitivo asociado con el smdrome de Down, mutaciones genicas tph, epilepsia, dano cerebral traumatico o smdrome de Asperger. En una realizacion, el compuesto I es para usar en un paciente que ha recibido previamente (o todavfa esta recibiendo) otra medicacion, tal como otro anti-depresivo, tal como p. ej. inhibidores selectivos de la recaptacion de serotonina (SSRI), inhibidores selectivos de la recaptacion de noradrenalina (NRI), inhibidores de la recaptacion de noradrenalina/serotonina (SNRI) o tri-dclicos (TCA) para el tratamiento de dicha enfermedad, cuya medicacion fue interrumpida o reducida (o tiene que ser interrumpida o reducida) debido a eventos adversos relacionados con el sueno o la sexualidad.

El compuesto I se presenta convenientemente en una composicion farmaceutica que se puede preparar mediante metodos convencionales en la tecnica. Se hace una mencion especial de los comprimidos, que se pueden preparar mezclando el ingrediente activo con coadyuvantes y/o diluyentes corrientes y comprimiendo con posterioridad la mezcla en una maquina para formar comprimidos convencional. Los ejemplos de los coadyuvantes o diluyentes comprenden: hidrogenofosfato de calcio anhidro, PVP, copohmeros de PVP-VA, celulosa microcristalina, sal de sodio de glicolato de almidon, almidon de mafz, manitol, almidon de patata, talco, estearato de magnesio, gelatina, lactosa, gomas, y similares. Se puede utilizar cualquier otro coadyuvante o aditivo normalmente empleado para tales fines tales como colorantes, aromatizantes, conservantes etc. siempre que sean compatibles con los ingredientes activos.

Se pueden preparar soluciones para inyectables disolviendo el ingrediente activo y posibles aditivos en una parte del disolvente para inyectables, preferiblemente agua esteril, ajustando la solucion al volumen deseado, esterilizando

la solucion y cargandola en ampollas o viales adecuados. Se pueden anadir aditivos cualesquiera convencionalmente utilizados en la tecnica, tales como agentes de tonicidad, conservantes, antioxidantes, etc.

Las composiciones farmaceuticas fabricadas para usar de acuerdo con esta invencion se pueden administrar mediante cualquier ruta adecuada, por ejemplo oralmente en forma de comprimidos, capsulas, polvos, jarabes, etc., 5 o parenteralmente en forma de soluciones para inyectables. Para preparar tales composiciones, se pueden utilizar metodos bien conocidos en la tecnica, y se pueden emplear portadores, diluyentes, excipientes u otros aditivos farmaceuticamente aceptables normalmente utilizados en la tecnica.

Convenientemente, el compuesto I se administra en una forma de dosificacion unitaria que contiene dicho compuesto en una cantidad de alrededor de 1 a 50 mg. Se cree que un lfmite superior esta fijado por la dependencia 10 que tiene la actividad de 5-HT3 de la concentracion. La dosis diaria total se encuentra normalmente en el intervalo de alrededor de 1 - 20 mg, tal como alrededor de 1 a 10 mg, alrededor de 5-10 mg, alrededor de 10-20 mg, o alrededor de 10-15 mg del compuesto de la invencion. Se hace una mencion particular de dosis diarias de 2,5, 5, 10, 15 o 20 mg.

Los comprimidos que comprenden un compuesto I se pueden preparar convenientemente mediante granulacion en 15 mojado. Utilizando este metodo, los solidos secos (ingredientes activos, cargas, aglutinantes etc.) se combinan y se humedecen con agua u otro agente humectante (p. ej. un alcohol) y se forman aglomerados o granulos de los solidos humedecidos. El amasado en humedo continua hasta que se ha alcanzado un tamano de partfcula homogeneo deseado despues de lo cual el producto granulado se seca. El compuesto I se mezcla tfpicamente con monohidrato de lactosa, almidon de mafz y copovidona en una mezcladora de alta cizalla junto con agua. Despues 20 de la formacion de productos granulados, estos productos granulados se pueden tamizar en un tamiz con un tamano de tamiz adecuado, y secar. Los productos granulados secos resultantes se mezclan despues con celulosa microcristalina, sal de sodio de croscarmelosa y estearato de magnesio, despues de lo cual se prensan los comprimidos. De manera alternativa, se puede lograr la granulacion en humedo de los compuestos de la presente invencion utilizando manitol, almidon de mafz y copovidona, cuyos productos granulados se mezclan con celulosa 25 microcristalina, sal de sodio de glicolato de almidon y estearato de magnesio antes de prensar los comprimidos. Alternativamente, se puede lograr la granulacion en humedo del compuesto I utilizando hidrogenofosfato de calcio anhidro, almidon de mafz y copovidona, cuyos productos granulados se mezclan con celulosa microcristalina, sal de sodio de glicolato de almidon (tipo A), talco y estearato de magnesio antes de prensar los comprimidos. La copovidona es un copolfmero de PVP-VA.

30 En una realizacion, el compuesto I es la sal del acido bromhfdrico, p. ej. en la forma beta, y los comprimidos adecuados se pueden componer como sigue - los porcentajes indicados son % p/p

35

40

Sal HBr

3-8%

Hidrogenofosfato de calcio anhidro

35-45%

Almidon de mafz

15-25%

Copovidona

2-6%

Celulosa microcristalina

20-30%

Sal de sodio de glicolato de almidon

1-3%

Talco

2-6%

Estearato de magnesio

0,5-2%

En particular, los comprimidos se pueden componer como sigue

Sal HBr

aproximadamente 5%

Hidrogenofosfato de calcio anhidro

aproximadamente 39%

Almidon de mafz

aproximadamente 20%

Copovidona

aproximadamente 3%

Celulosa microcristalina

aproximadamente 25%

Sal de sodio de glicolato de almidon

aproximadamente 3%

Talco

aproximadamente 4%

9

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Los comprimidos con diferentes cantidades de compuesto activo, tales como los correspondientes p. ej. a 2,5, 5, 10, 20, 25, 30, 40, 50, 60 u 80 mg de la base libre se pueden obtener eligiendo la cantidad adecuada del compuesto I combinada con un comprimido de un tamano apropiado.

El compuesto I se puede administrar solo o combinado con otro compuesto terapeuticamente activo, donde los dos compuestos se pueden administrar simultaneamente o sucesivamente. Los ejemplos de los compuestos terapeuticamente activos que se pueden combinar ventajosamente con el compuesto I incluyen sedantes o hipnoticos, tales como benzodiazepinas; anticonvulsivos, tales como lamotrigina, acido valproico, topiramato, gabapentina, carbamazepina; estabilizadores del estado de animo tales como litio; farmacos dopaminergicos, tales como agonistas de dopamina y L-Dopa; farmacos para tratar el ADHD, tales como atomoxetina; psicoestimulantes, tales como modafinilo, cetamina, metilfenidato y anfetamina; otros antidepresivos, tales como mirtazapina, mianserina y buproprion; hormonas, tales como T3, estrogeno, DHEA y testosterona; antipsicoticos atfpicos, tales como olanzapina y aripiprazol; antipsicoticos tfpicos, tales como haloperidol; farmacos para tratar la enfermedad de Alzheimer, tales como los inhibidores de colinesterasa y memantina, folato; S-Adenosil-Metionina; inmunmoduladores, tales como interferones; opiaceos, tales como buprenorfinas; antagonistas del receptor 1 de angiotensina II (antagonistas AT1); inhibidores de ACE; estatinas; y antagonistas adrenergicos alfa 1, tales como prazosina.

La base libre del compuesto I se puede preparar como se describe en los documentos WO 2003/029232 o WO 2007/144005. Las sales utilizadas en la presente invencion se pueden preparar disolviendo la base libre en un disolvente apropiado, anadiendo el acido relevante, seguido de precipitacion. La precipitacion se puede lograr mediante la adicion de un segundo disolvente, y/o evaporacion, y/o refrigeracion. Alternativamente, la base libre utilizada en la presente invencion se puede sintetizar en una reaccion catalizada con paladio como se describe en los ejemplos.

Se considera que el uso de los terminos "un", "una", "el" y "la" y referentes similares en el contexto de la descripcion de la invencion abarca tanto el singular como el plural, a menos que se indique de otro modo en la presente memoria o este claramente contraindicado por el contexto. Por ejemplo, se debe entender que la expresion "compuesto" hace referencia a los diferentes compuestos de la invencion o del aspecto concreto descrito, a menos que se indique de otro modo.

A menos que se indique de otro modo, todos los valores exactos proporcionados en la presente memoria son representativos de los correspondientes valores aproximados (p. ej., se puede considerar que todos los valores ilustrativos exactos proporcionados con respecto a un factor o medida concretos tambien proporcionan una medida aproximada correspondiente, modificada por "alrededor", cuando sea apropiado).

Se pretende que la descripcion en la presente memoria de cualquier aspecto o aspecto de la invencion que utiliza los terminos "que comprende", "que tiene", "que incluye" o "que contiene" con referencia a un elemento o elementos proporcione apoyo para un aspecto similar o aspecto de la invencion que "consiste en", "consiste esencialmente en", o "comprende sustancialmente" que un elemento o elementos particulares, a menos que se establezca de otro modo o se contraindique claramente por el contexto (p. ej., se debe entender que una composicion descrita en la presente memoria que comprende un elemento concreto tambien describe una composicion que consiste en ese elemento, a menos que se establezca de otro modo o se contraindique por el contexto).

Ejemplos

Metodos analfticos

Los espectros de RMN-H1 se registran a 500,13 MHz en un aparato Bruker Avance DRX500. Se utiliza dimetilsulfoxido (99,8%D) como disolvente, y se utiliza tetrametilsilano (TMS) como patron interno de referencia.

Los puntos de fusion se miden utilizando la Calorimetrfa de Barrido Diferencial (DSC). El equipo es un TA- Instruments DSC-Q1000 calibrado a 5°/min para dar el punto de fusion como valor de comienzo. Se calientan alrededor de 2 mg de muestra 5°/min en una cubeta cerrada sin apretar con un flujo de nitrogeno.

El analisis termogravimetrico (TGA) utilizado para la estimacion del contenido de disolvente/agua de los materiales secos se realiza utilizando un aparato TA TGA-Q500. Se calientan 1-10 mg de muestra 10°/min en una cubeta abierta con flujo de nitrogeno.

Los difractogramas de polvo de rayos X se midieron en un Difractometro de Rayos X PANalytical X'Pert PRO utilizando radiacion CuKai. Las muestras se midieron en modo de reflexion en el intervalo 20-5-40° utilizando un detector X'celerator. Los valores de reflexion proporcionados son ± 0,1 (°20).

Ejemplo 1 Farmacologfa de receptor in vitro

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Transportador de serotonina: CI50 5,3 nM (bloqueo de la captacion de 5-HT)

Transportador de serotonina humano: CI50 5,4 nM (bloqueo de la captacion de 5-HT)

Receptor 5-HTia humano: Ki 15 nM que suscita agonismo (eficacia o actividad intrfnseca 96%)

Receptor 5-HT3 de rata: CI50 0,2 nM (suscita antagonismo en analisis funcional)

Receptor 5-HT3A humano: CI50 de alrededor de 20 nM (suscita antagonismo en analisis funcional). A una concentracion mayor, el compuesto muestra actividad agonfstica con una DE50 de 2,1 pM. El compuesto de la invencion tambien mostro una elevada afinidad hacia el receptor 5HT3 humano en un analisis de union in vitro (Ki 4,5 nM).

Ejemplo 2a Preparacion de la base libre del compuesto I

Se trataron 10 gramos de hidrobromuro de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina con una mezcla agitada de 100 ml de NaOH 3 M y 100 ml de acetato de etilo durante 10 minutos. La fase organica se separo, se lavo con 100 ml de NaCl (ac.) al 15% en peso, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a vacfo produciendo 7,7 gramos (98 %) de la base del compuesto I en forma de un aceite incoloro claro.

El RMN obedece a la estructura.

Ejemplo 2b Preparacion de base cristalina del compuesto I

Se trataron 3,0 gramos de aceite incoloro de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina con 70 ml de acetonitrilo y se calentaron a reflujo. La solucion casi clara se filtro y el producto filtrado claro se enfrio espontaneamente despues de lo cual la precipitacion comenzo inmediatamente despues de la filtracion. La mezcla se agito a la temperatura ambiente (22 °C) durante 2 horas y el producto se aislo mediante filtracion y se seco a vacfo (40 °C) durante la noche. La base cristalina se aislo en forma de un solido de color blanco en 2,7 gramos (90 %). El RMN obedece a la estructura. Analisis elemental: 72,40%C, 9,28%N, 7,58%H (teorico: 72,26%C, 9,36%N, 7,42%H)

Ejemplo 2c Caracterizacion de la base cristalina del compuesto I

La base, preparada en el ejemplo 2b, es cristalina (XRPD) - vease la Figura 1. Tiene un punto de fusion de ~117°C. No es higroscopica y tiene una solubilidad de 0,1 mg/ml en agua.

Ejemplo 2d Preparacion de la forma alfa de la sal hidrobromuro del compuesto I

Se disolvieron 2,0 gramos de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina en 30 ml de acetato de etilo caliente y se anadieron 0,73 ml de HBr (ac.) al 48 % en peso. Esta adicion causo la formacion de una suspension espesa y se anadieron 10 ml mas de acetato de etilo con el fin de lograr una agitacion apropiada. La suspension se agito a la temperatura ambiente durante una hora. La filtracion y el secado a vacfo (20 °C) a lo largo de la noche produjeron 2,0 gramos del producto en forma de un solido de color blanco (80 %). El RMN obedece a la estructura. Analisis elemental: 57,05%C, 7,18%N, 6,16%H (Teorico para sal 1:1: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H)

Ejemplo 2e Caracterizacion de la forma alfa del hidrobromuro del compuesto I

La forma alfa del hidrobromuro, preparada en el ejemplo 2d, es cristalina (XRPD) - vease la Figura 2. Tiene un punto de fusion de ~226°C. Absorbe alrededor de 0,3% de agua cuando se expone a una humedad relativa elevada y tiene una solubilidad de 2 mg/ml en agua.

Ejemplo 2f Preparacion de la forma beta de la sal hidrobromuro del compuesto I

Se disolvieron 49,5 gramos de aceite incoloro de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina en 500 ml de acetato de etilo y se anadieron 18,5 ml de HBr (ac.) al 48 % en peso. Esta adicion ocasiono la formacion de una suspension espesa que se agito durante la noche a la temperatura ambiente. La filtracion y el secado a vacfo (50 °C) a lo largo de la noche proporcionaron 29,6 gramos del producto en forma de un solido de color blanco (47 %).

El RMN obedece a la estructura. Analisis elemental: 56,86%C, 7,35%N, 6,24%H

(Teorico para la sal 1:1: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H)

Ejemplo 2g Caracterizacion de la forma beta del hidrobromuro, sal del compuesto I

La forma beta del hidrobromuro, preparado en el ejemplo 2f, es cristalina (XRPD) vease la Figura 3. Tiene un punto de fusion de ~231°C. Absorbe alrededor de 0,6% de agua cuando se expone a una humedad relativa elevada y tiene una solubilidad de 1,2 mg/ml en agua.

Ejemplo 2h Preparacion de la forma gamma de la sal hidrobromuro del compuesto I

Se anadio 1 g de hidrobromuro de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina preparado en el ejemplo 2d a 20 ml de agua y se calentaron a 85°C. La solucion fue casi clara. La adicion de 1 gota de HBr la volvio clara. Se anadio HBr hasta que se observo un punto de enturbiamiento. La solucion se enfrio a la temperatura ambiente y se seco. El RMN obedece a la estructura. Analisis elemental: 56,63%C, 7,18%N, 6,21%H (Teorico para la sal 1:1: 56,99%C, 5 7,39%N, 6,11%H)

Ejemplo 2i Caracterizacion de la forma gamma del hidrobromuro del compuesto I

El hidrobromuro, preparado en el ejemplo 2h es cristalino (XRPD) - vease la Figura 4. La curva DSC muestra algunos eventos termicos a alrededor de 100°C; probablemente cambios en la forma cristalina. Despues se funde a alrededor de 220°C. Absorbe alrededor de 4,5% de agua cuando se expone a una humedad relativa elevada y a una 10 HR del 30% a la temperatura ambiente alrededor del 2% del agua es absorbida.

Ejemplo 2j Preparacion del hidrato del hidrobromuro del compuesto I

Se anadieron 1,4 gramos de aceite de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina a 20 ml de agua, y se calentaron a 60°C. El pH se ajusto a 1 utilizando HBr al 48%. La solucion se enfrio a la temperatura ambiente y se seco. El RMN obedece a la estructura. Analisis elemental: 55,21%C, 7,16%N, 6,34%H (Teorico para la sal hemihidrato 1:1: 15 55,68%C, 7,21%N, 6,23%H)

Ejemplo 2k Caracterizacion del hemihidrato del hidrobromuro del compuesto I

El hidrato preparado en el Ejemplo 2j es cristalino (XRPD) - vease la figura 5.

El contenido de agua depende fuertemente de la humedad relativa. A la temperatura ambiente y con una HR del 95% el contenido de agua es de alrededor del 3,7%. La deshidratacion se produce calentando a alrededor de 100°C.

20 Ejemplo 3 Preparacion del compuesto I

imagen2

Se agitaron 815 g de NaOBut (8,48 moles), 844 g de Piperazina (9,8 moles), 6,6 g de Pd(dba)2 (11,48 mmoles) y 13,6 g de rac-BINAP (21,84 mmoles) con 4 L de tolueno durante 50 minutos. Despues se anadieron 840 g de 2- bromo-yodobenzeno (2,97 moles) junto con 1,5 L de Tolueno y se continuo agitando durante 30 min. Finalmente se 25 anadieron 390,8 g de 2,4-dimetiltiofenol (2,83 moles) con 1,5 L de tolueno. La suspension se calento a reflujo y el reflujo continuo durante 5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio durante la noche. Se anaden 2 L de agua y se agita durante 1 hora antes de filtrar la mezcla por medio de un coadyuvante de filtracion. El producto filtrado se lavo despues con 3x 1L de salmuera. Las fases acuosas combinadas se extrajeron despues con 600 ml de tolueno. Las fases de tolueno combinadas se calentaron despues a 70°C seguido de la adicion de 329,2 ml de HBr (ac.) al 48% 30 en peso y 164,6 ml de agua. La mezcla se enfrio a la temperatura ambiente durante la noche. El producto final (hidrobromuro de 1-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina) se recogio por filtracion y se seco a vacfo (60 °C) produciendo 895 g (rendimiento 84 %).

Ejemplo de referencia 4 Efectos sobre el Dolor en el ensayo de formalina intradermica en raton

En este modelo, los ratones recibieron una inyeccion de formalina (4,5%, 20 pl) en la almohadilla trasera izquierda. 35 La irritacion causada por la inyeccion de formalina logra una respuesta de comportamiento bifasico caracterfstica, cuantificada por la cantidad de tiempo empleado en lamer la almohadilla lesionada. La primera fase (~0-10 minutos) representa irritacion qufmica directa y nocicepcion, mientras se piensa que la segunda fase (~20-30 minutos) representa dolor de origen neuropatico. Las dos fases estan separadas por un perfodo quiescente en el cual el comportamiento vuelve a la normalidad. La eficacia de los compuestos de ensayo para reducir los estfmulos 40 dolorosos se evalua contando la cantidad de tiempo empleado en lamer la almohadilla lesionada en las dos fases.

El compuesto I mostro una reduccion significativa en las puntuaciones de dolor de la segunda fase (Figura 9a), indicando la eficacia contra el dolor de origen neuropatico. Ademas, los compuestos de la presente invencion mostraron una reduccion significativa en las puntuaciones de la primera fase (Figura 9b), indicando una accion mas analgesica a la dosis mas elevada. En resumen, estos resultados indican que es probable que los compuestos de la 45 presente invencion sean eficaces en el tratamiento de los trastornos con dolor.

Ejemplo 5 Efectos sobre los niveles extracelulares de acetilcolina en el cerebro de ratas que se mueven libremente

Se administro a los animales sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina.

Animates

5 Se utilizaron ratas Sprague-Dawley macho, que pesaban inicialmente 275-300 g. Los animales se alojaron en un ciclo de luz/oscuridad de 12-hr en condiciones controladas para regular la temperatura interior (21±2°C) y la humedad (55±5%) con disponibilidad de alimento y agua corriente ad libitum.

Cirugfa y experimentos de microdialisis

Se anestesiaron las ratas con Hypnorm/Dormicum (2 ml/kg) y se implantaron estereotaxicamente canulas gufa 10 intracerebrales (CMA/12) en el cerebro, pretendiendo el posicionamiento de la punta de la sonda de dialisis en el hipocampo ventral (coordenadas: 5,6 mm posterior al bregma, lateral-5,0 mm, 7,0 mm ventral a la dura) o en el cortex prefontral (coordenadas: 3,2 mm anterior al bregma; lateral, 0,8 mm; 4,0 mm ventral a la dura). Se utilizaron tornillos de anclaje y cemento acrflico para la fijacion de las canulas gufa. La temperatura corporal de los animales se controlo mediante una sonda rectal y se mantuvo a 37°C. Se permitio que las ratas se recuperaran de la 15 operacion durante 2 dfas, alojadas en jaulas individuales. El dfa del experimento se inserto una sonda de microdialisis (CMA/12, 0,5 mm de diametro, 3 mm de longitud) a traves de la canula gufa.

Las sondas se conectaron a traves de una unidad de libre movimiento de dos canales a una bomba de microinyeccion. La perfusion de la sonda de microdialisis con solucion de Ringer filtrada (145 mm NaCl, KCl 3 mM, MgCl2 1 mM, CaCl2 1,2 mM que contenfa neostigmina 0,5 pM) comenzo poco antes de la insercion de la sonda en el 20 cerebro y continuo mientras duro el experimento a una velocidad de flujo constante de 1 pl/min. Despues de 180 min de estabilizacion, se iniciaron los experimentos. Los productos dializados se recogieron cada 20 min. Despues de los experimentos los animales se sacrificaron, se recogieron los cerebros, se congelaron y se hicieron rebanadas para la verificacion del emplazamiento de la sonda.

El compuesto se disolvio en HPbetaCD al 10 % y se inyecto subcutaneamente (2,5 - 10 mg/kg). Las dosis se 25 expresan como mg de sal/kg de peso corporal. El compuesto se administro a un volumen de 2,5 ml/kg.

Analisis de acetilcolina del producto dializado

Se analizo la concentracion de acetilcolina (ACh) en los productos dializados por medio de HPLC con deteccion electroqufmica utilizando una fase movil que consistfa en hidrogenofosfato de disodio 100 mM, acido octanosulfonico 2,0 mM, cloruro de tetrametilamonio 0,5 mM y MB 0,005% (ESA), pH 8,0. Un reactor con enzima pre-columna (ESA) 30 que contenfa colina oxidasa inmovilizada elimino la colina de la muestra inyectada (10 pl) antes de la separacion de la ACh en la columna analftica (ESA ACH-250); velocidad de flujo 0,35 ml/min, temperatura: 35°C. Despues de la columna analftica la muestra se hizo pasar a traves de un reactor en fase solida post-columna (ESA) que contenfa acetilcolinesterasa y colina oxidasa inmovilizadas. El ultimo reactor convirtio la ACh en colina y con posterioridad la colina en betafna y H2O2. Lo ultimo se detecto electroqufmicamente utilizando un electrodo de platino (Celula 35 analftica: ESA, modelo 5040).

Presentacion de datos

En los experimentos de una sola inyeccion el valor medio de 3 muestras de ACh consecutivas inmediatamente precedentes a la administracion del compuesto sirvieron como nivel basal para cada experimento y los datos se convirtieron en el porcentaje del basal (valores pre-inyeccion basal medios normalizados al 100%).

40 Resultados

El compuesto aumento significativamente los niveles extracelulares de ACh en el cortex prefrontal y el hipocampo ventral de rata - veanse las figuras 10a y 10b.

Ejemplo 6 Condicionamiento de miedo contextual en ratas

El compuesto administrado en el presente experimento fue sal HBr de 1-[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)fenil]-piperazina.

45 Los autores de la presente invencion han estudiado el efecto del compuesto sobre la adquisicion, consolidacion y memoria del condicionamiento de miedo contextual en ratas. En el paradigma de condicionamiento de miedo los animales aprenden a asociar un entorno neutro (contexto, la camara de adiestramiento, CS) con una experiencia aversiva (una descarga electrica en la pata, ENC). Durante la re-exposicion a la camara de adiestramiento, los animales expresan un comportamiento de paralizacion, que se toma como una medida directa de la memoria 50 relacionada con el miedo [Pavlov J. Biol Sci., 15, 177-182, 1980]. La neuroanatomfa del condicionamiento de miedo contextual se ha investigado concienzudamente y varios estudios han demostrado que el hipocampo y la amfgdala

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

son necesarios para la formacion de esta memoria [Hippocampus, 11, 8-17, 2001; J. Neurosci., 19, 1106-1114, 1999; Behav. Neurosci., 106, 274-285, 1992].

Animates y farmacos

Se utilizaron ratas Sprague-Dawley macho adultas (que pesaban 250-300 g en el momento del adiestramiento) de Charles River Laboratories, alojadas dos por jaula en un ciclo de luz/oscuridad de 12h. El alimento y el agua se encontraban disponibles ad libitum. Se utilizaron las ratas 1 semana despues de su llegada. El compuesto se disolvio en HPbetaCD al 10% y se inyecto subcutaneamente. El farmaco se administro a un volumen de 2,5 ml/kg.

Aparato

El adiestramiento y el ensayo se llevaron a cabo en una camara a prueba de sonidos (30 x 20 x 40 cm) alojada en una habitacion aislada y conectada a un sistema de ventilacion. Se proporciono iluminacion por medio de una luz blanca (60 Watios). El suelo de la camara consistfa en una rejilla metalica anclada a un generador de descargas electricas. Antes del adiestramiento y el ensayo, se limpio la camara con una solucion de etanol del 70%. Una camara de video permitio las observaciones del comportamiento y el registro de la sesion de adiestramiento para su posterior analisis.

Ensayo de adquisicion y retencion

Durante la adquisicion se permitio que los animales exploraran libremente el nuevo entorno durante un periodo de habituacion de 1 min, que termino simultaneamente con una descarga en la pata ineludible (estimulo no condicionado, ENC) a traves del suelo de rejilla electrificable. La descarga en la pata tuvo una duracion de 2 s y una intensidad de 0,75 mA. Los animales permanecieron en la camara de aclimatacion durante otros 60 s despues del ENC. Se puntuo el comportamiento de paralizacion durante los primeros 58 s (adquisicion pre-descarga; experimentador ciego para los grupos) para determinar las respuestas de paralizacion en el inicio al contexto. Al final del periodo de adquisicion los animales se retiraron suavemente y se colocaron en sus jaulas de alojamiento. Despues de 24 horas se volvieron a introducir los mismos animales en el contexto de adiestramiento (camara de condicionamiento de miedo) y se llevo a cabo un ensayo de retencion de 2 min. Durante este periodo no se aplicaron descargas en la pata. Se puntuo el comportamiento de paralizacion durante todo el periodo de ensayo con el experimentador ciego para los grupos y se presento como porcentaje del periodo de ensayo total.

Resultados y Discusion

Se estudio el efecto del compuesto sobre el condicionamiento de miedo contextual en ratas (i) en la adquisicion (farmaco aplicado antes de la adquisicion, Figura 11), (ii) en la recuperacion de la memoria (farmaco aplicado antes del ensayo, Figura 12) y (iii) en la consolidacion (farmaco aplicado inmediatamente despues de la adquisicion, Figura 13). En el primer grupo de experimentos, el compuesto (1, 5 y 10 mg/kg) se administro 1 h antes de la sesion de adquisicion. La Figura 11 representa la adquisicion del comportamiento de paralizacion durante el adiestramiento (58 s antes de la descarga en la pata) y el ensayo de retencion 24 despues. Se observaron los siguientes descubrimientos:

• El compuesto no afecta al comportamiento de paralizacion en el inicio antes de la presentacion de la descarga en la pata a cualquier dosis sometida a ensayo.

• El compuesto a 5 mg/kg tiene una tendencia a incrementar el tiempo empleado en la paralizacion durante el ensayo de retencion, 24 h despues de la adquisicion (39,24 ± 13,76 %, n= 6, versus 24,30 ± 4,40 %, n= 16, en los animales tratados con vehfculo).

• el compuesto a 10 mg/kg aumenta significativamente el tiempo empleado en la paralizacion durante el ensayo de retencion, 24 h despues de la adquisicion (52,15 ± 5,68 %, n= 10, versus 24,30 ± 4,40 %, n= 16, en los animales tratados con vehfculo, p< 0,01).

El modelo de condicionamiento del miedo, como se describe en la Figura 11, es un procedimiento convencional descrito en la literatura para la investigacion del aprendizaje y la memoria. Con el fin de esclarecer los efectos agudos de este farmaco en la recuperacion de la memoria, el compuesto (5, 10 y 20 mg/kg) se aplico 1 h antes del ensayo de retencion. Se observo que el compuesto inhibe la expresion del comportamiento paralizante a 5 mg/kg durante el ensayo de memoria (12,86 ± 3,57 %, n= 9, versus 33,61 ± 4,29 %, n= 13, en los animales tratados con vehfculo, p<0,05) (Figura 13).

Como se ha descrito anteriormente, el propio compuesto no afecta al comportamiento de paralizacion en el inicio antes del comienzo del ENC (Figura 11), de este modo la hipotesis mas plausible es que el efecto observado en la Figura 12 sea debido a un efecto ansiolftico. La memoria condicionada se evalua por medio del comportamiento de paralizacion, una respuesta que es reducida por los compuestos con efectos ansiolfticos potenciales. Este experimento demuestra que el compuesto administrado adecuadamente antes de la recuperacion de la memoria

tiene eficacia ansiolftica, por lo tanto es poco probable que el aumento de paralizacion mostrado en la Figura 11 se deba a un efecto ansiogenico del compuesto.

Con el fin de consolidar que el compuesto no es ansiogenico pero tiene potencial pro-cognitivo, se administro el compuesto a 5, 10 y 20 mg/kg despues de la sesion de adquisicion. Por consiguiente, en esta serie de 5 experimented, el compuesto no se incorporo ni durante la adquisicion ni en todo el ensayo de retencion. Aquf, se observo que el compuesto a 5 mg/kg aumenta significativamente el tiempo empleado en la paralizacion durante el ensayo de retencion, 24 h despues de la sesion de adquisicion (45,58 ± 4,50 %, n= 8, versus 25,26 ± 3,57 %, n= 19, en los animales tratados con vehfculo, p< 0,05). El porcentaje de tiempo empleado en la paralizacion durante el contexto de re-exposicion se ha descrito como una medida de la memoria relacionada con el miedo [Pavlov J. Biol.

10 Sci, 15, 177-182, 1980], que es intensificada en las ratas tratadas con el compuesto cuando se compara con los animales tratados con vehfculo (Figura 11 y 12). Tomados juntos, los datos demuestran que el compuesto aumenta la memoria contextual.

Claims (9)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   REIVINDICACIONES

   1. Compuesto I que es 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina y las sales farmaceuticamente aceptables del mismo, para usar en el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre deterioro cognitivo leve; demencia vascular; y trastorno cognitivo asociado con el sfndrome de Down, mutaciones genicas tph, epilepsia, dano cerebral traumatico o sfndrome de Asperger.
2. 2. El compuesto para usar segun la reivindicacion 1, que es la sal del acido bromhfdrico de 1-[2-(2,4- dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina.
3. 3. El compuesto para usar segun la reivindicacion 2, en el que dicha sal es cristalina.
4. 4. El compuesto para usar segun la reivindicacion 3, en el que dicha sal se caracteriza por tener picos principales XRDP en 6,89, 9,73, 13,78 y 14,62 (°20), todos ± 0,1 (°2 0).
5. 5. El compuesto para usar segun la reivindicacion 4, en el que dicha sal esta caracterizada por un XRDP como se describe en la figura 3.
6. 6. El compuesto para usar segun cualquiera de las reivindicaciones 1-5 en una dosis unitaria para la administracion oral de aproximadamente 1-50 mg de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina y las sales farmaceuticamente aceptables del mismo.
7. 7. El compuesto para usar segun la reivindicacion 6, en la que dicha dosis unitaria comprende entre aproximadamente 1 y 20 mg de la sal del acido bromhfdrico de 1 -[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina.
8. 8. El compuesto para usar segun cualquiera de las reivindicaciones 1-7 con la condicion de que no es la base libre de 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina en una forma no cristalina.
9. 9. El compuesto para usar segun cualquiera de las reivindicaciones 1-8 para usar en el tratamiento de un paciente que ha recibido previamente medicacion para el tratamiento de dicha enfermedad cuya medicacion se habfa interrumpido o reducido debido a eventos adversos relacionados con el sueno o la sexualidad.