ES2581857T3 - Composición para el tratamiento de semillas - Google Patents
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Abstract
Un método para mejorar la germinación de una semilla, comprendiendo dicho método la etapa de poner en contacto la semilla, el medio a ser plantado con la semilla o ambos con natamicina.
Description
DESCRIPCION
Composicion para el tratamiento de semillas Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a composiciones para el tratamiento de semillas, asf como a su produccion y usos.
5 Antecedentes de la invencion
El campo de la agricultura produce cultivos de muchas variedades tales como, entre otros, legumbres, frutas, lechugas, trigo, cebada, mafz y arroz. Muchos de estos cultivos se cultivan a partir de semillas que vanan en su capacidad innata para resistir un dano ffsico debido a las condiciones de almacenamiento o medioambientales desfavorables, todo lo cual afecta a su posterior capacidad de desarrollarse en plantas adultas. Ademas de ello, las 10 semillas son susceptibles al dano por parte de patogenos vegetales, incluyendo hongos, bacterias, virus y nematodos, y son vulnerables a los insectos, aves, roedores y otros organismos que dependen de ellos como fuente de alimentacion. Los hongos son uno de los grupos economicamente mas importantes de patogenos vegetales y son responsables de grandes perdidas anuales de alimentos, fibras y piensos comerciales.
Para reducir las perdidas de rendimiento debido a, por ejemplo, el deterioro por hongos, una fraccion significativa de 15 las semillas es tratada actualmente con uno o mas productos agroqmmicos sinteticos. El uso de productos agroqmmicos sinteticos para reprimir patogenos vegetales, sin embargo, ha aumentado los costos para los agricultores y ha causado efectos perjudiciales sobre el ecosistema. Los consumidores y los reguladores gubernamentales por igual estan cada vez mas preocupados con los riesgos medioambientales asociados con la produccion y el uso de productos agroqmmicos sinteticos para la proteccion de las semillas frente a patogenos.
20 Ademas, la aplicacion de productos agroqmmicos a las semillas propiamente dichas esta plagada de problemas tales como union de los productos agroqmmicos al suelo, la aglomeracion de las semillas debido a la aplicacion de los productos agroqmmicos y el uso de equipos de aplicacion de productos qmmicos caros y complejos. Ademas, las semillas pueden verse afectadas adversamente por los productos agroqmmicos, dado que estos productos qmmicos pueden ser toxicos para las semillas y las plantas que brotan de las semillas. Una toxicidad de este tipo limita la 25 cantidad de estos productos agroqmmicos que con seguridad se pueden aplicar a las semillas. Un efecto indeseable de la toxicidad es la reduccion de la tasa y/o velocidad de germinacion, o incluso la ausencia total de germinacion de las semillas que han sido tratadas. Tfpicamente, la tasa de germinacion y/o la velocidad de las semillas que han sido tratadas con un producto agroqmmico que es toxico disminuyen con el tiempo despues de haber aplicado la sustancia qmmica, limitando con ello la vida util de las semillas tratadas. La toxicidad de los productos agroqmmicos 30 ha sido abordada de varias maneras.
Se utiliza ampliamente la inclusion de productos qmmicos que mejoran los efectos toxicos de los productos agroqmmicos junto con las semillas. Esta solucion, sin embargo, requiere la aplicacion a las semillas de un componente qmmico adicional, a menudo caro.
Otra manera de superar el efecto toxico es encapsular el producto agroqmmico en una matriz que limita su 35 movimiento. Este metodo puede limitar el contacto del producto agroqmmico con las semillas y las plantulas que brotan, permitiendo al mismo tiempo que el producto qmmico este disponible mas tarde durante la germinacion y el crecimiento inicial de la planta a medida que el producto qmmico se libera de la matriz. El funcionamiento correcto de la tecnologfa de encapsulacion depende de una cuidadosa adaptacion de las propiedades ffsicas y qmmicas del producto agroqmmico y la matriz de encapsulacion. Ninguno de los dos, matriz y proceso de encapsulacion, es 40 adecuado para la encapsulacion de todos los productos agroqmmicos ahora en uso para el tratamiento de semillas. Ademas de ello, la matriz de encapsulacion es susceptible al agrietamiento.
Todavfa otra manera de superar el efecto toxico es cubrir la semilla con una capa relativamente gruesa de material inerte sobre la que se aplica el producto agroqmmico de tal manera que no este directamente en contacto con la semilla (vease el documento WO 2004/049778). Sin embargo, una desventaja de este metodo es que es necesaria 45 una dosis alta de producto agroqmmico para que sea eficaz, lo cual conduce todavfa a un posible efecto toxico del producto agroqmmico para las semillas. Ademas, debido a la alta dosis, las propiedades ffsico-qmmicas del
recubrimiento pueden cambiar de manera significativa, produciendo indirectamente un efecto negativo debido a un cambio en el equilibrio de oxfgeno/agua en el recubrimiento.
Una alternativa adicional incluye la siembra simultanea de granulos que contienen semillas y pastillas que contienen productos agroqmmicos tales como pastillas independientes (vease el documento US 2006/0150489). Una 5 desventaja de esta solucion es que deben hacerse dos pastillas independientes, lo cual es engorroso y caro. Ademas, esta solucion puede estimular el uso irregular de los granulos que contienen productos agroqmmicos, ya que no hay o solamente existe un control limitado en el tiempo de aplicacion, velocidad y ubicacion de los granulos.
El documento US 4.344.979 utiliza peroxidos para revestir semillas y mejorar la germinacion.
Por lo tanto, existe una necesidad significativa de composiciones de recubrimiento para el control de patogenos de 10 semillas que, por una parte, posean un menor riesgo de contaminacion y peligros medioambientales que los productos agroqmmicos que se utilizan actualmente y que, por otra parte, no sean toxicos para las semillas.
Sumario de la Invencion
Una gran parte de los danos a las plantas de cultivo que es provocado por microorganismos fitopatogenos se produce tan pronto como cuando las semillas son atacadas durante el almacenamiento y despues de que las 15 semillas se hayan introducido en el suelo, durante e inmediatamente despues de la germinacion de las semillas. Esta fase es particularmente critica, ya que las rafces y los brotes de las plantas en crecimiento son particularmente sensibles e incluso danos menores pueden conducir a la deformacion o la muerte de toda la planta. Por ello, es de particular interes es dejar que las semillas germinen lo mas rapido posible. De acuerdo con la presente invencion, se ha descubierto que natamicina se puede utilizar para mejorar y acelerar la germinacion de las semillas.
20 Descripcion detallada de la Invencion
En un primer aspecto, la presente invencion se refiere a un metodo para mejorar la germinacion de semillas, comprendiendo dicho metodo la etapa de poner en contacto con natamicina la semilla, el medio a ser plantado con la semilla o ambos.
El fungicida de polieno mejora la germinacion de las semillas en un 1 a 15%, preferiblemente 5 a 15% despues de 25 14 a 16 dfas de incubacion de las semillas a 20-30°C. En una realizacion, natamicina mejora la germinacion de la
semilla en al menos un 1%, al menos un 3%, al menos un 5%, al menos un 8%, al menos un 10%, preferiblemente al menos un 15%, mas preferiblemente al menos un 20% y lo mas preferiblemente al menos un 25% despues de 14 a 16 dfas de incubacion de las semillas a 20- 30°C. En detalle, las semillas se incubaron en una habitacion esteril de germinacion profesional con temperaturas y condiciones de luz establecidas. Las semillas se plantaron en un papel 30 en rollo esteril de acuerdo con procedimientos ISTA (International Seed Testing Association) bien conocidos (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capttulo 5, publicado por International Seed Testing Association, Suiza). Las semillas plantadas se sometieron al siguiente ciclo durante 14 a 16 dfas: 12 horas de oscuridad a 20°C, seguido de 12 horas de luz a 30°C; la humedad estaba entre 98 y 100%.
Fungicidas de polieno son natamicina, nistatina, anfotericina B, trienina, etruscomicina, filipina, chainina, 35 dermostatina, linfosarcina, candicidina, aureofungina A, aureofungina B, hamicina A, hamicina B y lucensomicina. En una realizacion, la semilla, el medio a ser plantado con la semilla o ambos tambien puede ser contactados por dos o mas fungicidas de polieno diferentes, siendo uno natamicina. Ha de entenderse que derivados de fungicidas de polieno, tales como natamicina, incluyendo, pero no limitados a sales o solvatos de fungicidas de polieno, tales como natamicina, o formas modificadas de los fungicidas de polieno, tales como natamicina, tambien puede ponerse en 40 contacto con la semilla, medio a ser plantado con la semilla o ambos. Ejemplos de productos comerciales que contienen natamicina son los productos con el nombre de marca Delvocid®. Productos de este tipo son producidos por DSM Food Specialties (Pafses Bajos), y pueden ser solidos que contienen, p. ej., 50% (p/p) de natamicina o ifquidos que comprenden, p. ej., entre 0,5-50% (p/v) de natamicina. Dichos productos comerciales pueden ponerse en contacto con la semilla, el medio a ser plantado con la semilla o ambos.
45 "Un medio a ser plantado con la semilla", tal como se utiliza en esta memoria, significa cualquier entorno de cultivo adecuado para el cultivo de una planta y/o plantula a partir de una semilla tal como el suelo y otros medios de crecimiento (naturales o artificiales). La natamicina se puede aplicar, por ejemplo, el suelo en el surco, bloques de cultivo, canalones o en bandas en T. La natamicina se puede aplicar al mismo tiempo que se siembran las semillas.
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En una realizacion, la natamicina se puede aplicar a traves del agua de riego a la semilla, el medio a ser plantado con la semilla o de ambos.
"Semilla", tal como se utiliza en esta memoria, significa cualquier fase de reposo de una planta que se separa ffsicamente de la fase vegetativa de una planta. El termino "reposo" se refiere a un estado en el que la planta conserva la viabilidad, dentro de lfmites razonables, a pesar de la ausencia de luz, agua y/o nutrientes esenciales para el estado vegetativo (es decir, no semilla). Las semillas pueden ser almacenadas durante penodos prolongados de tiempo y se pueden utilizar para volver a desarrollar otra planta individual de la misma especie. En particular, el termino "semilla" se refiere a semillas verdaderas, pero no abarca los propagulos de plantas tales como retonos, cormos, bulbos, frutos, tuberculos, granos, esquejes y brotes. En otras palabras, las semillas son un ovulo maduro de gimnospermas y angiospermas que se desarrollan despues de la fertilizacion y que contienen un embrion rodeado por una cubierta protectora. Alternativamente, las semillas artificiales no necesitan fertilizacion. Otros tejidos de almacenamiento de reservas de alimentos tales como, p. ej., el endospermo pueden estar presentes en semillas maduras.
Las semillas de variedades de plantas de todo tipo que se utilizan en agricultura, en invernaderos, en el sector forestal, en la construccion dejardines o en vinedos pueden ponerse en contacto con natamicina. En particular, esto se refiere a las semillas de cereales, mafz, triticale, teff, cacahuete, canola, colza, amapola, aceituna, coco, hierbas, cacao, soja, algodon, remolacha, (p. ej., remolacha azucarera y remolacha forrajera), arroz (se puede utilizar cualquier arroz, pero se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en Oryza sativa sp. japonica, Oryza sativa sp. javanica, Oryza sativa sp. indica, e tnbridos de los mismos), sorgo, mijo, teff, espelta, trigo, trigo duro, cebada, avena, centeno, girasol, cana de azucar, cesped, pasto, alfalfa o tabaco. La natamicina tambien se puede utilizar para el tratamiento de las semillas de las plantas frutales incluyendo, pero no limitado a, frutas rosaceas, por ejemplo manzanas y peras; frutos con hueso, por ejemplo, melocotones, nectarinas, cerezas, ciruelas y albaricoques; frutos dtricos, por ejemplo, naranjas, pomelos, limas, limones, naranjas chinas, mandarinas y satsumas; frutos secos, por ejemplo pistachos, almendras, nueces, cafe, cacao y nueces de pacana; frutas tropicales, por ejemplo, mango, papaya, pina, datiles y platanos; y uvas; y hortalizas, incluyendo, pero no limitado a las verduras de hoja, por ejemplo, endivias, canonigo, rucula, hinojo, globo (lechuga arrepollada) y ensalada de hojas sueltas, acelga, espinaca y achicoria; brasicas, por ejemplo, coliflor, brocoli, col china, col rizada (kale de invierno o berzas), colirrabano, coles de Bruselas, lombarda, repollo blanco y rizada; hortalizas de fruto, por ejemplo, berenjenas, pepinos, pimenton, pimientos (chiles), calabacm, tomates, calabacines, melones, sandfas, calabazas y mafz dulce; hortalizas de rafz, por ejemplo, apio nabos, jicama, zanahorias, nabos suecos, rabanos, rabano picante, remolacha, salsifies, apio; legumbres, por ejemplo, guisantes y habas; y hortalizas de bulbo, por ejemplo, puerros, ajos y cebollas. La natamicina tambien se puede utilizar para el tratamiento de las semillas de ornamentales, por ejemplo, rosas, pensamiento, alegna de la casa, petunias, begonias, Lisianthus, girasol, ageratum, crisantemo y geranio. En una realizacion preferida, la natamicina se utiliza para el tratamiento de semillas de tomates, coles (p. ej., col china, col rizada (kale de invierno o berzas), colirrabanos, coles de Bruselas, lombarda, repollo blanco y col de Milan), cebolla, pimenton, berenjenas, lechuga (p. ej., endivias, canonigo, rucula, hinojo, globo (lechuga arrepollada) y ensalada de hojas sueltas, acelga, espinaca y achicoria), mafz, arroz, soja y cucurbitaceas (p. ej., pepinos, calabazas, sandfas y melones).
Las semillas pueden ser semillas transgenicas, es decir, semillas de una planta transgenica. Tal como se utiliza en esta memoria, "planta transgenica" significa una planta o progenie de la misma derivada de una celula vegetal transformada o de protoplastos, en donde el ADN de la planta contiene una molecula de ADN exogena introducida no presente originalmente en una planta nativa, no transgenica de la misma cepa.
De acuerdo con la presente invencion, para mejorar su germinacion las semillas se tratan mediante la aplicacion de natamicina a las semillas. Aunque el presente metodo se puede aplicar a las semillas en cualquier estado fisiologico, se prefiere que las semillas esten en un estado suficientemente duradero de modo que no se incurra en un dano significativo durante el proceso de tratamiento de las semillas. Por lo general, las semillas son semillas que han sido recogidas del campo; retirado de la planta; y/o separadas del fruto y cualquier mazorca, vaina, tallo, cascara externa, y pulpa circundante u otro material vegetal que no sea semillas. Las semillas son preferiblemente tambien biologicamente estables hasta el punto de que el tratamiento no provocana un dano biologico a las semillas. En una realizacion, por ejemplo, el tratamiento se puede aplicar a las semillas que han sido recolectadas, limpiadas y secadas a un contenido de humedad espedfico. En una realizacion alternativa, las semillas se pueden secar y despues cebar con agua y/u otro material y luego volver a secar antes, durante o despues del tratamiento con el fungicida de polieno.
La natamicina se puede aplicar "pura", es decir, sin ningun diluyente o componentes adicionales presentes. Sin embargo, la natamicina se aplica tfpicamente a las semillas en forma de una composicion y/o revestimiento y/o
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formulacion. Ergo, la composicion y/o el revestimiento y/o la formulacion de acuerdo con la invencion puede ser una mezcla (f^sica) de natamicina y al menos un otro componente. Sin embargo, la composicion y/o el revestimiento y/o la formulacion tambien puede ser cualquier combinacion de natamicina y al menos otro componente, no siendo necesario que natamicina y el al menos otro componente este presente en la misma composicion y/o revestimiento y/o formulacion. Un ejemplo de una composicion y/o revestimiento y/o formulacion de acuerdo con la invencion en la que natamicina y el al menos otro componente no estan presentes juntos en la misma composicion y/o revestimiento y/o formulacion es un kit de partes. En un kit de partes, dos o mas componentes de un kit se envasan por separado, es decir, no estan pre-formulados. Como tal, los kits incluyen uno o mas recipientes separados tales como viales, latas, botellas, bolsos, bolsas o botes, conteniendo cada uno de los recipientes un componente separado para una composicion agroqmmica. Ejemplos de ello son kits de dos componentes, tres componentes o incluso de cuatro componentes. Las semillas se pueden poner en contacto con natamicina utilizando cualquier tratamiento de semillas adecuado y, especialmente, tecnicas de desinfeccion de semillas conocidas en la tecnica tales como revestimiento de semillas (p. ej., granulacion de las semillas, incrustacion, revestimiento de pelfcula), espolvoreo de semillas e imbibicion de las semillas (p. ej., el remojo de semillas, cebado). Aqrn, "tratamiento de las semillas" se refiere a todos los metodos que ponen a las semillas y natamicina en contacto unas con otras, y "desinfeccion de las semillas" se refiere a metodos de tratamiento de semillas que proveen a las semillas de una cantidad de natamicina, es decir, que generan una semilla que comprende la natamicina. En principio, el tratamiento se puede aplicar a las semillas en cualquier momento desde la cosecha de las semillas hasta la siembra de las semillas. Las semillas pueden ser tratadas inmediatamente antes de, o durante la plantacion de la semilla. Sin embargo, el tratamiento tambien puede llevarse a cabo durante varias semanas o meses, por ejemplo hasta 13 meses, antes de plantar la semilla, por ejemplo en forma de un tratamiento de desinfeccion de las semillas. El tratamiento se puede aplicar a las semillas sin sembrar. Tal como se utiliza en esta memoria, la expresion "semillas no sembradas" pretende incluir semillas en cualquier periodo desde la cosecha de las semillas hasta la siembra de las semillas en el suelo con el proposito de la germinacion y el crecimiento de una planta. Las semillas tambien se pueden tratar despues de la siembra, p. ej., mediante la aplicacion de la natamicina al suelo o medio, en lugar de directamente a la semilla. Sin embargo, mediante la aplicacion del tratamiento a las semillas antes de la siembra de las semillas se simplifica la operacion. De esta manera, las semillas se pueden tratar, por ejemplo, en una ubicacion central y luego se pueden dispersar para la plantacion. Esto permite que la persona que planta las semillas evite la manipulacion y uso de la natamicina y simplemente maneje y plante las semillas tratadas de una manera que sea convencional para las semillas no tratadas regulares, lo que reduce la exposicion humana. Las semillas a tratar pueden ser semillas cebadas o no cebadas. El cebado de las semillas se realiza para llevar las semillas al mismo nivel de germinacion en condiciones controladas. Ejemplos de tecnicas de cebado son el osmo-cebado y el cebado en tambor. Estas tecnicas de cebado son conocidas por el experto en la materia.
Habitualmente, se emplea un dispositivo que es adecuado para el tratamiento de semillas, por ejemplo un mezclador de componentes solidos o solidos/liquidos, hasta que la natamicina se distribuya uniformemente sobre las semillas. La natamicina se puede aplicar a las semillas mediante cualquier metodologfa de tratamiento de semillas estandar, incluyendo, pero no limitado a, la mezcladura en un recipiente (p. ej., botella, bolsa, vaso, revestidor giratorio, lecho fluidizado o pulverizador), aplicacion mecanica, volteo, pulverizacion e inmersion. Si es apropiado, esto es seguido por el secado de las semillas. El tratamiento de semillas mediante pulverizacion es un metodo habitualmente utilizado para el tratamiento de un gran volumen de semillas de arroz. Para este fin, una disolucion obtenida por dilucion de una composicion (p. ej., un FS, LS, DS, WS, SS y ES) se pulveriza continuamente sobre las semillas en una camara de pulverizacion y luego se seca a temperatura elevada (p. ej. de 25 a 40°C) en una camara de secado.
En otra realizacion, las semillas pueden ser sometidos a revestimiento o imbibicion (p. ej., remojo)."Revestimiento" designa cualquier proceso que dota a las superficies exteriores de las semillas, parcial o completamente, de una capa o capas de material no vegetal. Revestimiento es el mas comunmente utilizado para los cultivos de grandes hectareas tales como de arroz, mafz y tambien semillas de verduras. De acuerdo con este metodo, las semillas se limpian y despues de ello se revisten con una formulacion diluida utilizando, por ejemplo un mezclador con olla rotativo durante aproximadamente varios minutos y seguido por la rotacion reversible. Despues, se secan las semillas.
"Imbibicion" se refiere a cualquier proceso que resulta en la penetracion de natamicina en las partes germinables de la semilla y/o su envoltura natural, bagazo (interior), grano, cascara, vaina y/o integumento. De acuerdo con el metodo de remojo, las semillas se limpian y se empaquetan en una bolsa que esta sumergida en el volumen equivalente de disolucion qrnmica con el volumen de la semilla, en donde la disolucion qrnmica se obtiene normalmente mediante dilucion de una formulacion tal como FS, LS, DS, WS, SS y ES. Despues, las semillas se secan. El remojo se aplica con mayor frecuencia para las semillas de arroz.
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La invencion tambien se refiere a un tratamiento de semillas que comprende proveer semillas con un revestimiento que comprende una natamicina y a un tratamiento de las semillas que comprende la imbibicion de las semillas con una natamicina. El revestimiento tambien puede comprender la pulverizacion de una natamicina sobre las semillas, al tiempo que se agitan las semillas en una pieza de equipo apropiada, tal como un volteador o una granuladora de bandeja. El revestimiento tambien puede llevarse a cabo humedeciendo la superficie externa de las semillas y aplicando la natamicina a las semillas humedecidas y secando las semillas obtenidas. Las semillas pueden ser humedecidas, por ejemplo, por pulverizacion con agua o una disolucion acuosa. Si las semillas son sensibles a expandirse en agua, pueden ser humedecidas con una disolucion acuosa que contiene un agente anti-expansion.
El revestimiento se puede aplicar a las semillas utilizando tecnicas y maquinas de revestimiento convencionales tales como tecnicas de lecho fluido, el metodo de molino de rodillos, dispositivos de tratamiento de semillas roto- estaticos y revestidores de tambor. Tambien pueden ser utiles otros metodos tales como la tecnica de lecho efervescente. Las semillas pueden ser pre-clasificadas antes del revestimiento. Despues del revestimiento, las semillas se secan tfpicamente y despues se transfieren a una maquina clasificadora para la clasificacion. El secado puede llevarse a cabo mediante ventilacion natural, pero tambien de acuerdo con cualquier tecnica que es en sf misma conocida tal como el paso de una corriente forzada de aire, opcionalmente calentada, sobre las semillas, que se pueden disponer, para este fin, en aparatos tales como tamices.
Cuando se revisten semillas a gran escala (por ejemplo a escala comercial), las semillas pueden ser introducidas en el equipo de tratamiento (tal como un volteador, un tambor, una placa, un mezclador o un granulador de bandeja), ya sea en peso o en caudal. La cantidad de natamicina que se introduce en el equipo de tratamiento puede variar en funcion del peso de la semilla a revestir, de la superficie espedfica de las semillas, de la concentracion de la natamicina, la concentracion deseada de las semillas acabadas, y similares. La natamicina se puede aplicar a las semillas por una diversidad de medios, por ejemplo mediante una boquilla de pulverizacion o un disco giratorio. La cantidad de natamicina se determina tfpicamente por la tasa requerida de fungicida de polieno necesaria para que sea eficaz. A medida que las semillas caen al equipo de tratamiento, las semillas pueden ser tratadas (por ejemplo, por nebulizacion o pulverizacion con la natamicina) y son hechas pasar a traves del equipo de tratamiento bajo movimiento continuo/volteo, en donde se pueden revestir de manera uniforme y secar antes de su almacenamiento o uso. En otra realizacion, un peso conocido de las semillas puede ser introducido en el equipo de tratamiento. Un volumen conocido de natamicina puede ser introducido en el equipo de tratamiento a una velocidad que permita que la natamicina sea aplicada de manera uniforme sobre las semillas. Polvo para la incrustacion se puede anadir de forma manual o mediante un alimentador de polvo automatizado. Durante la aplicacion, las semillas se pueden mezclar, por ejemplo mediante rotacion o volteo. Opcionalmente, las semillas se pueden secar o secar parcialmente durante la operacion de volteo. Tras completarse el revestimiento o la incrustacion, las semillas tratadas se pueden retirar a una zona para su posterior secado o procesamiento adicional, uso o almacenamiento. En aun otra realizacion, las semillas se pueden recubrir en un equipo de tratamiento comercial de tamano laboratorio tal como un volteador, un mezclador o un granulador de bandeja mediante la introduccion de un peso conocido de las semillas en el equipo de tratamiento, anadiendo la cantidad deseada de natamicina, volteando o haciendo rotar las semillas y colocandolas en una bandeja para que se sequen a fondo. En otra realizacion, las semillas tambien se pueden revestir mediante colocando la cantidad conocida de semillas en una botella de cuello estrecho o recipiente con una tapa. Mientras se voltean, se pueden anadir la cantidad deseada de natamicina al receptaculo. Las semillas se voltean hasta que esten revestidas, con incrustaciones o granuladas con la natamicina. Despues del revestimiento, incrustacion o granulacion, las semillas opcionalmente se pueden secar, por ejemplo en una bandeja. Si es necesario, el secado puede realizarse por metodos convencionales. Por ejemplo, se puede emplear un desecante o calor suave (tal como por debajo de aproximadamente 40°C) para producir un revestimiento seco o incrustante.
Alternativamente, el revestimiento tambien puede hacerse mediante la aplicacion de un "agente de pegajosidad" tal como una carga o aglutinante en forma de una pelfcula adhesiva sobre las semillas de modo que la natamicina en forma de un polvo puede ser unido a las semillas para formar un revestimiento, incrustacion o granulo. Por ejemplo, una cantidad de semillas se puede mezclar con un agente de pegajosidad y, opcionalmente, se puede agitar para fomentar un revestimiento uniforme de las semillas con el agente de pegajosidad. En la segunda etapa, la semilla revestida con el agente de pegajosidad se puede mezclar entonces con la mezcla en polvo de natamicina. La formulacion seca de natamicina puede contener otros componentes tal como se comenta a continuacion. La mezcla de semillas y natamicina se puede agitar, por ejemplo mediante volteo, para fomentar el contacto del agente de pegajosidad con el material en polvo, provocando de esta manera que el material en polvo se adhiera a las semillas.
Como ya se ha indicado anteriormente, la natamicina puede estar comprendida en una composicion y/o revestimiento y/o formulacion (todo designado como composicion de aqrn en adelante). La composicion puede comprender uno o mas componentes adicionales. Los componentes incluyen, pero no se limitan a otros plaguicidas (tales como fungicidas, acaricidas, miticidas, insecticidas, repelentes de insectos, repelentes de aves, rodenticidas,
molusquicidas, nematicidas, bactericidas y fumigantes), herbicidas, adyuvantes, humectantes, nutrientes, ceras, agentes anti-oxidacion, coloides protectores activadores de genes, tensioactivos, minerales, agentes de hibridacion qmmicos, pigmentos, auxinas, agentes de pegajosidad, antibioticos y otros farmacos, atrayentes biologicos, colorantes, agentes dispersantes, disolventes, soportes solidos, reguladores del crecimiento, feromonas, agentes 5 espesantes, colorantes, protectores, fertilizantes, agentes anticongelantes, agentes de control biologico (p. ej., bacterias y/u hongos que se producen de forma natural o recombinantes), diluyentes lfquidos, aglutinantes (p. ej., para servir como una matriz para el fungicida de polieno), cargas (p. ej., polvos finos de tipo organico o mineral para la proteccion de las semillas durante condiciones de estres), plastificantes (para mejorar la flexibilidad, adherencia y/o capacidad de dispersion), agentes de secado, solubilizantes, agentes dispersantes, agentes antiespumantes.
10 La composicion que se utiliza para el tratamiento de las semillas en la presente invencion puede estar en forma de un concentrado soluble (SL, LS), un concentrado dispersable (DC), un concentrado emulsionable (EC), una suspension (SC, OD, FS), una emulsion (EW, EO, ES), una suspension de partfculas en un medio acuoso (p. ej., agua), una pasta, un polvo dispersable en agua o soluble en agua (WP, Sp, SS, WS), una pastilla, un granulo dispersable en agua o soluble en el agua (WG, SG), un granulo seco (GR, FG, GG, MG), una formulacion de gel 15 (GF), un polvo para espolvoreo (DP, DS), por nombrar solo unos pocos. Concentrados solubles en agua (LS),
concentrados capaces de fluir (FS), polvos para tratamiento en seco (DS), polvos dispersables en agua para tratamiento en suspension (WS), polvos solubles en agua (SS), emulsiones (ES), concentrados emulsionables (EC ) y geles (GF) se emplean generalmente para los fines de tratamiento de semillas. Estas composiciones se pueden aplicar a semillas, diluidas o sin diluir. En una realizacion preferida, la composicion que comprende natamicina 20 comprende, ademas, una carga, un aglutinante o ambos. En otras palabras, las semillas se pueden poner en contacto con una composicion que comprende natamicina, una carga y/o un aglutinante. Alternativamente, las semillas tambien se pueden poner en contacto con los componentes separados. La puesta en contacto se puede hacer al mismo tiempo o por separado. Por ejemplo, las semillas se pueden poner en contacto con una composicion que comprende una carga y natamicina y, posteriormente, con una composicion que comprende una carga y un 25 aglutinante. Combinaciones alternativas estan dentro del alcance del tecnico experto.
En una realizacion preferida, la carga se selecciona del grupo que consiste en un carbonato, harina de madera, tierra de diatomeas y una combinacion de los mismos. En una realizacion preferida, la carga es un carbonato. Ejemplos de carbonatos son carbonato de calcio, carbonato de magnesio o una combinacion de los mismos. En una realizacion preferida, la carga es carbonato de calcio.
30 En una realizacion preferida, el aglutinante se selecciona del grupo que consiste en lignosulfonato, polivinilpirrolidona y una combinacion de los mismos. La polivinilpirrolidona es un polfmero soluble en agua hecho a partir del monomero N-vinilpirrolidona ((CaHgNO)N). El peso molecular depende del numero de unidades de monomero. El lignosulfonato se puede anadir como lignosulfonato de cobre, lignosulfonato de zinc, lignosulfonato de magnesio, lignosulfonato de manganeso, lignosulfonato de sodio, lignosulfonato de calcio, lignosulfonato de amonio, 35 o una combinacion de los mismos.
En general, la cantidad de natamicina que se aplica a las semillas oscilara entre aproximadamente 10 gramos y aproximadamente 4000 gramos de natamicina por 100 kg de semillas. Preferiblemente, la cantidad de natamicina estara dentro del intervalo de aproximadamente 50 gramos a aproximadamente 3000 gramos fungicida de polieno por 100 kg de semillas, mas preferiblemente dentro del intervalo de aproximadamente 100 gramos a 40 aproximadamente 2000 gramos de natamicina por 100 kg de semillas.
Ergo, la presente invencion tambien se refiere a una composicion de tratamiento de semillas que comprende una carga, un aglutinante y natamicina. En una realizacion adicional, la carga es carbonato de calcio. En otra realizacion, el aglutinante es lignosulfonato, polivinilpirrolidona o una combinacion de los mismos.
En una realizacion, la natamicina esta presente en una cantidad de 0,05% a 50% del peso total de la composicion. 45 Si se formula como una suspension o suspension espesa, la concentracion de natamicina en la composicion es preferiblemente de 0,05% a 25% del peso total de la composicion, preferiblemente de 0,1% a 20% del peso total de la composicion. En general, la proporcion de carga puede variar dentro de lfmites muy amplios. Es generalmente entre 0,1 y 99% del peso total de la composicion y de preferencia entre 0,5% y 99% del peso total de la composicion.
En un aspecto adicional, la invencion se refiere a una semilla que comprende una carga, un aglutinante y 50 natamicina. En una realizacion la semilla comprende una composicion de tratamiento de semillas de acuerdo con la presente invencion. La semilla puede ser manipulada, transportada, almacenada y distribuida en forma de semillas que no comprenden estos compuestos. De igual manera, se pueden sembrar y regar de la misma manera que las
semillas que no comprenden estos compuestos, as^ como utilizando un equipo convencional. ^picamente, la presente invencion es aplicable a semillas de cultivos a ser cultivados en el suelo o macetas de trasplante, aunque puede aplicarse a otras plantas y medios de cultivo sin apartarse del alcance de la invencion. Se ha encontrado que los tratamientos de acuerdo con la presente invencion pueden impartir efectos deseados de larga duracion del 5 fungicida de polieno a las semillas y las plantas resultantes, sin necesidad de repetir el tratamiento.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere a un medio para el cultivo de una planta, que comprende una carga, un aglutinante y natamicina. En una realizacion, el medio para el cultivo de una planta comprende una composicion de tratamiento de semillas de acuerdo con la presente invencion.
En aun otro aspecto, la presente invencion se refiere a un metodo para el cultivo de una planta, comprendiendo 10 dicho metodo las etapas de a) sembrar una semilla de acuerdo con la presente invencion, sembrar una semilla en un medio de acuerdo con la presente invencion o sembrar una semilla de acuerdo con la presente invencion en un medio de acuerdo con la presente invencion, y b) dejar que la planta crezca a partir de la semilla. Las semillas pueden ser sembradas manual o mecanicamente. La planta puede ser cultivada y desarrollada de acuerdo con una manera usual. Obviamente, tiene que anadirse una cantidad suficiente de agua y nutrientes para lograr el 15 crecimiento de la planta.
Un aspecto adicional de la presente invencion se refiere al uso de natamicina para mejorar la germinacion de la semilla.
El uso de natamicina para mejorar el desarrollo de las rafces de las plantulas es otro aspecto de la presente invencion. El termino "rafz", tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a partes de una planta que normalmente, 20 con el fin de cumplir sus funciones fisiologicas, se encuentran debajo de la superficie del suelo. Preferiblemente, el termino designa las partes de una planta que estan por debajo de la semilla y han surgido directamente de esta ultima, o de otras rafces, pero no de brotes o follaje. La rafz crece del meristemo de la rafz que es un grupo de celulas que se encuentran localizadas en el extremo distal de la radfcula y rafces adventicias. El meristemo de la rafz sirve como el sitio de proliferacion de la rafz, la produccion de nuevas celulas que se diferencian en tejidos de la 25 rafz espedficos, es decir, epidermis, corteza, endodermis, periciclo y procambium, y la punta de la rafz, que protege
y lubrica la rafz a medida que crece en el suelo. Los pelos de la rafz se producen a partir de la epidermis despues de la germinacion a traves de la interaccion con la corteza.
Un aspecto adicional de la presente invencion se refiere a un metodo para aumentar la masa total de rafces de las plantulas que proceden de semillas, comprendiendo dicho metodo la etapa de poner en contacto las semillas, el 30 medio a ser plantado con las semillas o ambos con natamicina. En una realizacion, las semillas son semillas con incrustaciones de natamicina.
Un aspecto adicional de la presente invencion se refiere a un metodo para aumentar la masa total de las plantulas procedentes de semillas, comprendiendo dicho metodo la etapa de poner en contacto las semillas, el medio a ser plantado con las semillas o ambos con natamicina. En una realizacion, las semillas son semillas con incrustaciones 35 de natamicina.
Un aspecto adicional de la presente invencion se refiere a un metodo para aumentar la masa seca promedio de plantulas individuales procedentes de semillas, comprendiendo dicho metodo la etapa de poner en contacto las semillas, el medio a ser plantado con las semillas o ambos con natamicina. En una realizacion, las semillas son semillas con incrustaciones de natamicina.
40 Formas de realizacion y caractensticas descritas en esta memoria para un aspecto de la invencion tambien se refieren a los otros aspectos de la invencion.
Ejemplos
Ejemplo 1
Incrustacion de semillas de arroz
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En este ejemplo, semillas de arroz fueron provistas de incrustaciones con las composiciones de revestimiento tal como se muestra en la Tabla 1. Las semillas de arroz fueron provistas de incrustaciones utilizando el siguiente metodo. Cincuenta gramos de carbonato de calcio y 2,5 6 9 gramos de producto natamicina se mezclaron para hacer una mezcla de natamicina. El producto de natamicina utilizado era Delvocid®, un producto que comprende 50% (p/p) de natamicina. A continuaci6n, un kilogramo de semillas se coloc6 en una bandeja y se humedeci6 a traves de un disco giratorio dentro de un dispositivo de revestimiento giratorio. Despues de humedecer y poco antes de que las semillas de arroz comenzaran a pegarse unas a otras, se anadi6 la mezcla de natamicina a las semillas. Despues de que las semillas hubieran absorbido la mezcla de polvo y tuvieran una apariencia seca, las semillas se humedecieron de nuevo y se anadi6 una mezcla que comprendfa 950 gramos de carbonato de calcio y 400 gramos de una suspensi6n lignosulfonato (que comprende 133 gramos de lignosulfonato y 267 gramos de agua) o una mezcla que comprende 950 gramos de carbonato de calcio y 200 gramos de una disolucion de polivinilpirrolidona (que comprende 10 gramos de polivinilpirrolidona y 190 gramos de agua). Despues de que las semillas hubieran absorbido la mezcla de polvo, las mismas se mantuvieron en la bandeja y se hicieron rodar durante 5-10 minutos. Despues de ello, se retiraron de la bandeja y se colocaron en un secador durante 60 minutos a una temperatura de 25 a 35°C. Despues del secado, las semillas se hicieron pasar a traves de una criba separadora para eliminar el polvo, los elementos en blanco (es decir, incrustaciones sin semilla como el centro) y dobles (es decir, incrustaciones con dos o mas semillas como el centro). Tras la criba separadora, las semillas con incrustaciones se pesaron y se utilizaron en los siguientes experimentos.
Ejemplo 2
Germinacion de semillas de arroz con incrustaciones
En este ejemplo, semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones, preparadas como se describe en el Ejemplo 1 y semillas de arroz sin tratar se sometieron a germinaci6n de la siguiente manera. Semillas con incrustaciones y semillas no tratadas se dispusieron en un rollo de papel esteril. En total, se pusieron 100 semillas en el rollo de papel esteril. El experimento se realiz6 por cuadruplicado (es decir, 400 semillas por tratamiento). El proceso de germinaci6n se realiz6 de acuerdo con el proceso bien conocido de la ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edici6n 2011, Capftulo 5, paginas 5-41, publicado por International Seed Testing Association, Suiza). Cada uno de los papeles esteriles se coloc6 en 100 ml de agua y se incub6 a 20- 30°C en un armario de germinaci6n esteril durante 14 dfas. Las semillas plantadas fueron sometidas al ciclo siguiente durante estos 14 dfas: 12 horas en la oscuridad a 20°C, seguido de 12 horas de luz a 30°C; la humedad estaba entre 98 y 100%. Despues de 14 dfas, el porcentaje de germinaci6n se estableci6 como sigue. Los rollos de papel esteriles con las semillas en su interior fueron extrafdos del armario de germinaci6n esteril, los rollos fueron abiertos y se realiz6 la clasificaci6n de las plantulas de acuerdo con las normas ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edici6n 2011, Capftulo 5, paginas 5-41, publicado por International Seed Testing Association, Suiza).
Los resultados se dan en la Tabla 2. Muestran claramente que germina un porcentaje sustancialmente mayor de semillas de arroz, cuando estas estan con incrustaciones con natamicina. El incremento en la germinaci6n se ve en diversas concentraciones de natamicina (p. ej., 2,5 gramos de producto de natamicina por kg de semillas, asf como 9,0 gramo de producto de natamicina por kg de semillas).
Ademas, el aumento en la germinaci6n se observa en composiciones de revestimiento que comprenden diferentes constituyentes, p. ej., una composici6n de revestimiento que comprende carbonato de calcio y lignosulfonato de calcio y una composici6n de revestimiento que comprende carbonato de calcio y polivinilpirrolidona.
De lo anterior se puede concluir que se puede utilizar natamicina para aumentar la germinaci6n de las semillas.
Eiemplo 3
Germinacion de semillas de arroz con incrustaciones despues del almacenamiento
En este ejemplo semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones, preparadas como se describe en el Ejemplo 1 y semillas de arroz sin tratar se almacenaron durante dos meses. Despues del almacenamiento, se sometieron a germinaci6n de la siguiente manera. Semillas con incrustaciones y semillas no tratadas se colocaron en un rollo de papel esteril. En total, 100 semillas se colocaron en el rollo de papel esteril. El experimento se realiz6 por cuadruplicado (es decir, 400 semillas por tratamiento). El proceso de germinaci6n se realiz6 de acuerdo con el
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proceso bien conocido de la ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capftulo 5, paginas 5-41, publicado por International Seed Testing Association, Suiza). El papel esteril se coloco en 100 ml de agua y se incubo a 20-30°C en un armario de germinacion esteril durante 16 dfas. Las semillas plantadas fueron sometidas al ciclo siguiente durante estos 16 dfas: 12 horas en la oscuridad a 20°C, seguido de 12 horas de luz a 30°C; la humedad estaba entre 98 y 100%. Despues de 16 dfas, el porcentaje de germinacion se establecio como sigue. Los rollos de papel esteriles con las semillas en su interior fueron extrafdos del armario de germinacion esteril, los rollos fueron abiertos y se realizo la clasificacion de las plantulas de acuerdo con las normas ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capftulo 5, paginas 541, publicado por International Seed Testing Association, Suiza).
Los resultados se dan en la Tabla 3. Muestran claramente que germina un porcentaje sustancialmente mayor de semillas de arroz, cuando estas estan con incrustaciones con natamicina. El incremento en la germinacion se ve en diversas concentraciones de natamicina (p. ej., 2,5 gramos de producto de natamicina por kg de semillas, asf como 9,0 gramo de producto de natamicina por kg de semillas), proporcionando 9,0 gramos de producto de natamicina por kg de semillas el incremento mas alto.
Ademas, el aumento en la germinacion se observa en composiciones de revestimiento que comprenden diferentes constituyentes, p. ej., aglutinantes. Sin embargo, el mayor incremento en la germinacion se observa cuando las semillas estan provistas de incrustaciones con carbonato de calcio, polivinilpirrolidona y natamicina.
De lo anterior se puede concluir que la natamicina se puede utilizar para aumentar la germinacion de las semillas despues de que estas hayan sido almacenadas. Ademas, se puede concluir que se prefiere el revestimiento con carbonato de calcio, polivinilpirrolidona y natamicina.
Ejemplo 4
Desarrollo de las races de semillas de arroz con incrustaciones
En este ejemplo semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones, preparadas como se describe en el Ejemplo 1 y semillas de arroz sin tratar se sometieron a germinacion, esencialmente como se describe en el Ejemplo 2. Despues de 16 dfas, se determino el peso de las rafces de las plantulas obtenidas. El pesaje se realizo como sigue. En primer lugar, las rafces mojadas se cortaron con un bisturf en el punto de union con los cotiledones. A continuacion, se pesaron las rafces mojadas. El peso de las rafces se define en esta memoria como masa total (masa seca y contenido de agua).
Los resultados se dan en la Tabla 4. Muestran claramente que el desarrollo de las rafces en las plantulas que proceden de semillas con incrustaciones de natamicina es mejor que el desarrollo de rafces en las plantulas que proceden de semillas no tratadas o semillas que han sido provistas de incrustaciones sin natamicina.
Ejemplo 5
Desarrollo de plantulas procedentes de semillas de arroz con incrustaciones o no tratadas
En este ejemplo semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones, preparadas como se describe en el Ejemplo 1 y semillas de arroz no tratadas se sometieron a germinacion tal como se describe en el Ejemplo 2. Despues de 16 dfas, las plantulas se recogieron y se determino el peso total de las plantulas recolectadas. El peso de las plantulas es el peso total de los brotes y las rafces. El pesaje se realizo como sigue. En primer lugar, las rafces mojadas y los brotes se cortaron con un bisturf en el punto de union con los cotiledones. A continuacion, se pesaron las rafces mojadas y los brotes. El peso de las rafces y de los brotes se define en esta memoria como masa total (masa seca y contenido de agua).
Los resultados se dan en la Tabla 5. Muestran claramente que el peso de las plantulas que proceden de semillas con incrustaciones de natamicina es mayor que el peso de las plantulas de semillero que proceden de semillas no tratadas o de semillas que han sido provistas de incrustaciones sin natamicina.
Ejemplo 6
Desarrollo de la masa en seco de semillas de arroz con incrustaciones
En este ejemplo semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones, preparadas como se describe en el Ejemplo 1 y semillas de arroz no tratadas se sometieron a germinacion tal como se describe en el Ejemplo 2. Despues de 16 dfas, las rafces mojadas y los brotes se cortaron con un bisturi en el punto de union con cada una de las plantulas 5 obtenidas. Se determino el peso de las rafces y los brotes por plantula, y despues de ello las rafces y los brotes se secaron en un horno durante 30 minutos a 130°C. Despues del secado, se sacaron del horno las rafces y los brotes secos, se enfriaron en un desecador y se determino de nuevo el peso de las rafces y los brotes por plantulas individual. A la diferencia entre el peso antes y el peso despues del secado se la alude como el contenido de agua de las rafces. El peso despues del secado se define como masa seca.
10 Los resultados se dan en la Tabla 6. Muestran claramente que la masa seca media de las rafces y los brotes por plantula individual que procede de semillas de arroz con incrustaciones de natamicina es mayor que la masa seca media de las rafces y brotes por plantula individual que se origina a partir de semillas de arroz no tratadas o de semillas de arroz que han sido provistas de incrustaciones sin natamicina.
Por lo tanto, se produce mas masa seca por plantula individual despues de la aplicacion de natamicina. La 15 produccion de masa seca se puede correlacionar con la estimulacion del crecimiento, dado que masa seca se produce durante el crecimiento de la plantula o planta.
Ejemplo 7
Germinacion de semillas de arroz con incrustaciones de natamicina o peroxido de calcio
Semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones se prepararon tal como se describe en el Ejemplo 1, excepto por 20 el hecho de que se utilizaron para la incrustacion las siguientes composiciones de revestimiento:
- Control (sin tratamiento),
- Composicion A: identica a la composicion 4 en la Tabla 1, aplicada en 1 kg de semilla tal como se describe en el Ejemplo 1,
- Composicion B: mezcla total de 1 kg de carbonato de calcio, 0,2 kg disolucion de polivinilpirrolidona (que
25 comprende 10 gramos de polivinilpirrolidona y 190 gramos de agua) y peroxido de calcio al 30% (p/p) se
anadio por completo a 1 kg de semilla.
Las semillas de arroz con incrustaciones y no tratadas se sometieron al proceso de germinacion descrito en el Ejemplo 2. Despues de 14 dfas, se determino el porcentaje de germinacion tal como se describe en el Ejemplo 2.
Los resultados (vease la Tabla 7) revelan que el porcentaje de semillas germinadas era claramente superior a las 30 semillas con incrustaciones de natamicina. Ademas de ello, el porcentaje de germinacion de las semillas con incrustaciones de natamicina excede del porcentaje de germinacion de las semillas con incrustaciones de peroxido de calcio. Por lo tanto, la natamicina supera al peroxido de calcio como un estimulante del crecimiento.
Ejemplo 8
Desarrollo de la masa en seco de semillas de arroz con incrustaciones de natamicina o peroxido de calcio
35 Semillas de arroz (Oryza sativa) con incrustaciones se prepararon tal como se describe en el Ejemplo 1, excepto por el hecho de que se utilizaron para la incrustacion las siguientes composiciones de revestimiento:
- Control (sin tratamiento),
- Composicion A: identica a la composicion 6 en la Tabla 1, aplicada en 1 kg de semilla como se describe en el Ejemplo 1,
40 - Composicion B: mezcla total de 1 kg de carbonato de calcio, 0,2 kg de disolucion de polivinilpirrolidona (que
comprende 10 gramos de polivinilpirrolidona y 190 gramos de agua) y peroxido de calcio al 10% (p/p) se anadio por completo a 1 kg de semilla,
- Composicion C: mezcla total de 1 kg de carbonato de calcio, 0,2 kg de disolucion de polivinilpirrolidona (que comprende 10 gramos de polivinilpirrolidona y 190 gramos de agua) y peroxido de calcio al 30% (p/p) se
45 anadio por completo a 1 kg de semilla,
- Composicion D: identica a la composicion 3 en la Tabla 1, aplicada en 1 kg de semilla como se describe en el Ejemplo 1,
- Composicion E: mezcla total de 1 kg de carbonato de calcio, 0,4 kg de disolucion de lignosulfonato (que comprende 133 gramos de lignosulfonato y 267 gramos de agua) y peroxido de calcio al 10% (p/p) se anadio por completo a 1 kg de semilla,
- Composicion F: mezcla total de 1 kg de carbonato de calcio, 0,4 kg de disolucion de lignosulfonato (que
5 comprende 133 gramos de lignosulfonato y 267 gramos de agua) y peroxido de calcio al 30% (p/p) se
anadio por completo a 1 kg de semilla.
Las semillas de arroz con incrustaciones y no tratadas se sometieron al proceso de germinacion descrito en el Ejemplo 2. Despues de 14 dfas, el peso seco total de las rafces y los brotes por plantula se determino de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 6.
10 Los resultados (vease la Tabla 8) demuestran claramente que la masa seca media de las rafces y los brotes por plantula individual que procedfan de semillas de arroz con incrustaciones de natamicina era mayor que la masa seca media de las rafces y los brotes por plantula individual que procedfan de semillas de arroz no tratadas o semillas de arroz que habfan sido provistas de incrustaciones con peroxido de calcio. Ademas de ello, el uso de peroxido de calcio al 30% dio realmente como resultado una disminucion de la masa seca media de las rafces y los brotes por 15 plantula en comparacion con semillas no tratadas. Se observo esta masa seca mas alta de las plantulas de las semillas con incrustaciones de natamicina cuando se utilizo polivinilpirrolidona o lignosulfonato como aglutinante individual en la composicion de revestimiento.
Por lo tanto, se produce mas masa seca por plantula individual despues de la aplicacion de natamicina, lo que demuestra que la natamicina es el estimulante del crecimiento preferido en comparacion con peroxido de calcio.
20 Ejemplo 9
Desarrollo de las races de semillas de ma^z con incrustaciones
En este ejemplo se prepararon semillas de mafz (Zea mays) con incrustaciones, esencialmente como se describe en el Ejemplo 1, con la condicion de que se utilizaron las siguientes composiciones de revestimiento para incrustar 1 kg de semillas de mafz.
25 - Composicion A: 0,6 kg de carbonato de calcio, 0,5 kg de disolucion de polivinilpirrolidona (que comprende
25 gramos de polivinilpirrolidona y 475 gramos de agua),
- Composicion B: 0,6 kg de carbonato de calcio, 0,5 kg de disolucion de polivinilpirrolidona (que comprende 25 gramos de polivinilpirrolidona y 475 gramos de agua), 18 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un producto que comprende natamicina al 50% (p/p)).
30 Semillas con incrustaciones y no tratadas se colocaron en un rollo de papel esteril. En total, se colocaron 25 semillas en el rollo de papel esteril. El experimento se realizo ocho veces (es decir, 200 semillas por tratamiento). El proceso de germinacion se realizo de acuerdo con el proceso bien conocido de la ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capftulo 5, paginas 5-46, publicado por International Seed Testing Association, Suiza). Cada uno de los papeles esteriles se coloco en 75 ml de agua y se incubo a 2035 30°C en un armario de germinacion esteril durante 14 dfas. Las semillas plantadas fueron sometidas al ciclo
siguiente durante estos 14 dfas: 12 horas en la oscuridad a 20°C, seguido de 12 horas de luz a 30°C; la humedad estaba entre 98 y 100%. Despues de 14 dfas, los rollos de papel esteriles con las semillas en su interior fueron extrafdos del armario de germinacion, los rollos se abrieron y se determino la masa seca media de las rafces por plantula individual de la siguiente manera. Las rafces mojadas se cortaron con un bisturf en el punto de union con 40 cada una de las plantulas obtenidas. Se determino el peso de las rafces por plantula y posteriormente las rafces se secaron en un horno durante 30 minutos a 130°C. Despues del secado, se retiraron rafces secas del horno, se enfriaron en un desecador y se determino de nuevo el peso de las rafces por plantula individual. A la diferencia entre el peso antes y el peso despues del secado se la alude como el contenido de agua de las rafces. El peso despues del secado se define como masa seca.
45 Los resultados se dan en la Tabla 9. Demuestran claramente que la masa seca media de las rafces por plantula individual que procede de semillas de mafz con incrustaciones de natamicina es mayor que la masa seca media de las rafces por plantula individual que procede de semillas de mafz que han sido provistas de incrustaciones sin natamicina.
El ejemplo se repitio con composiciones en las que en lugar de carbonato de calcio se utilizo el polvo de granulacion Y5 (que comprenden aproximadamente 3% (p/p) de sulfatos, aproximadamente 30% (p/p) de calcio, aproximadamente 30% (p/p) de carbonatos y aproximadamente 35% (p/p ) de silice). Los resultados eran equiparables a los resultados con carbonato de calcio, debido a que la masa seca media de las rafces por plantula 5 individual que procede de semillas de mafz con incrustaciones de natamicina es mayor que la masa seca media de las rafces por plantula individual que procede de semillas de mafz que han sido provistas de incrustaciones sin natamicina.
Por lo tanto, se produce mas masa seca por plantula individual despues de la aplicacion de natamicina. La produccion de masa seca se puede correlacionar con la estimulacion del crecimiento, dado que masa seca se 10 produce durante el crecimiento de la plantula o planta.
Ejemplo 10
Germinacion de semillas de cebolla revestidas
En este ejemplo, semillas de cebolla (Allium cepa) se dejaron sin tratar o se revistieron con una de las siguientes composiciones.
15 Composicion A: 1,5 gramos de polivinilpirrolidona, 3 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un producto que comprende natamicina al 50% (p/p)),
Composicion B: 1,5 gramos de polivinilpirrolidona, 6 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un producto que comprende natamicina al 50% (p/p)),
Composicion C: 1,5 gramos de polivinilpirrolidona, 9 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un 20 producto que comprende natamicina al 50% (p/p)),
Composicion D: 1,5 gramos de polivinilpirrolidona, 15 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un producto que comprende natamicina al 50% (p/p))
El revestimiento se realizo de acuerdo con el siguiente metodo. Las composiciones anteriormente mencionadas se disolvieron en 30 ml de agua para preparar disoluciones acuosas. A continuacion, un kilogramo de semillas se 25 coloco en un dispositivo de revestimiento rotatorio y las respectivas disoluciones se aplicaron a las semillas. Las semillas se hicieron girar durante 45 segundos con las disoluciones respectivas. Las disoluciones se dispersaron uniformemente sobre las semillas a traves del disco giratorio del dispositivo de revestimiento rotatorio. A continuacion, las semillas se retiraron del dispositivo de revestimiento rotatorio y se dispusieron en un secador durante 15 minutos a una temperatura de 25-40°C.
30 A continuacion, las semillas de cebolla revestidas y las semillas de cebolla no tratadas fueron sometidas a germinacion. Para ello, semillas revestidas y semillas no tratadas se colocaron en un rollo de papel esteril. En total, 100 semillas se colocaron en el rollo de papel esteril. El experimento se realizo por cuadruplicado (es decir, 400 semillas por tratamiento). El proceso de germinacion se realizo de acuerdo con el proceso bien conocido de la ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capftulo 5, paginas 5-32, 35 publicado por International Seed Testing Association, Suiza). Cada uno de los papeles esteriles se coloco en 50 ml de agua y se incubo a 15-20°C en un armario de germinacion esteril durante 12 dfas. Las semillas plantadas fueron sometidas al ciclo siguiente durante estos 12 dfas: 16 horas en la oscuridad a 20°C, seguido de 8 horas de luz a 20°C; alternativamente, 16 horas en la oscuridad a 15°C, seguido de 8 horas de luz a 20°C; la humedad estaba entre 98 y 100%. Despues de 12 dfas, el porcentaje de germinacion se establecio como sigue. Los rollos de papel 40 esteriles con las semillas en su interior fueron extrafdos del armario de germinacion, los rollos se abrieron y la clasificacion de las plantulas se realizo de acuerdo con las normas ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capftulo 5, paginas 5-32, publicado por International Seed Testing Association, Suiza).
Los resultados se dan en la Tabla 10. Demuestran claramente que un porcentaje sustancialmente mayor de semillas 45 de cebolla germina cuando estas se revisten con natamicina. El incremento en la germinacion se observa en diversas concentraciones de natamicina.
De lo anterior se puede concluir que la natamicina se puede utilizar para mejorar la germinacion de las semillas. Ejemplo 11
5
10
15
20
25
30
35
40
Germinacion de semillas de sand^a revestidas
Semillas de sandfa (Citrullus lanatus) se dejaron sin tratar o se revistieron con una composicion que comprende 1,5 gramos de polivinilpirrolidona y 9 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un producto que comprende natamicina al 50% (p/p)) por kg de semilla. Esta composicion se aplico como se describe en el Ejemplo 10.
Posteriormente, las semillas fueron germinadas en bandejas de esteril, turba de coco tamponada (es decir, con nitrato de calcio a pH de 6,7), que es un medio de crecimiento estable comunmente utilizado y aceptado para, p. ej., simular la germinacion de semillas en la industria hortfcola. Las 50 semillas plantadas por tratamiento fueron sometidas a una temperatura ambiente de mmimamente 1,4°C durante la noche y como maximo 26,9°C durante el tiempo del dfa (temperatura media 13,6°C) durante 19 dfas y fueron regadas de forma continua a la capacidad del campo. La humedad relativa media durante el ensayo fue del 72%. Durante el ensayo, las bandejas con turba de coco se regaron 3 a 5 veces al dfa. Las bandejas se perforaron en la parte inferior, conduciendo a la separacion directa del exceso de agua. De esta manera, la turba de coco podna mantenerse a la capacidad del campo. Despues de 15, 17 y 19 dfas, el porcentaje de germinacion se determino de acuerdo con las normas ISTA (vease el Manual de Normas Internacionales para el Analisis de Semillas, Edicion 2011, Capftulo 5, paginas 5-32, publicado por International Seed Testing Association, Suiza).
Los resultados de la Tabla 11 muestran que un porcentaje significativamente mayor de semillas de sandfa germino cuando estaban revestidas con natamicina. Despues de 15, 17 y 19 dfas de incubacion, el porcentaje de germinacion de las semillas revestidas con natamicina excedfa del porcentaje de germinacion de las semillas no tratadas con 18, 34 y 38%, respectivamente.
Por lo tanto, la aplicacion de natamicina en semillas de sandfa estimula claramente la germinacion de estas semillas. Ejemplo 12
Germinacion de semillas de tomate con incrustaciones, cebadas en tambor
Semillas de tomate (Solanum lycopersicum) fueron cebadas (es decir, llevadas al mismo nivel de germinacion) utilizando cebado en tambor. Posteriormente, las semillas de tomate cebadas fueron no tratadas o bien provistas de incrustaciones con la composicion 6 de la Tabla 1 de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 1. Posteriormente, 100 semillas por tratamiento se sometieron al proceso de germinacion tal como se describe en el Ejemplo 11. Despues de 10 y 19 dfas, el porcentaje de germinacion se determino utilizando el metodo ISTA descrito en el Ejemplo 11.
Los resultados en la Tabla 12 demuestran que un porcentaje significativamente mayor de semillas de tomate cebadas germinaba con incrustaciones de natamicina. Despues de 10 y 19 dfas de incubacion, el porcentaje de germinacion de las semillas de tomate cebadas con incrustaciones de natamicina excedfa el porcentaje de germinacion de las semillas de control en un 10%.
A partir de estos resultados se puede concluir que la aplicacion de la natamicina a semillas de tomate conduce a la germinacion de semillas mejorada.
Ejemplo 13
Germinacion de semillas de berenjena revestidas, osmo-cebadas
Semillas de berenjena (Solanum melongena) fueron cebadas (es decir, llevados al mismo nivel de germinacion) utilizando osmo-cebado. Posteriormente, las semillas de berenjena cebadas fueron no tratadas adicionalmente o fueron revestidas con una composicion que comprende 1,5 gramos de polivinilpirrolidona y 9 gramos de producto natamicina (es decir, Delvocid®, un producto que comprende natamicina al 50% (p/p)) por kg de semilla. Esta composicion se aplico como se describe en el Ejemplo 10. Las semillas cebadas no revestidas y revestidas germinaron utilizando el proceso de germinacion ISTa descrito en el Ejemplo 10, excepto por el hecho de que cada uno de los tratamientos consistfa en cuatro replicas de 50 semillas cada una (es decir, un total de 200 semillas por tratamiento). Ademas, las semillas plantadas se sometieron al siguiente ciclo de 14 dfas: 16 horas en la oscuridad a
20°C, seguido de 8 horas de luz a 30°C; la humedad estaba entre 98 y 100%. Despues de 14 dfas, el porcentaje de germinacion se evaluo tal como se describe en el Ejemplo 10.
Los resultados de la Tabla 13 demuestran claramente que germinaba un mayor porcentaje de la semilla de berenjena osmo-cebadas cuando se revisten con natamicina. Por lo tanto, la aplicacion de natamicina a semillas de 5 berenjena estimula su germinacion.
Tabla 1: Composiciones de revestimiento para incrustar 1 kg de semillas de arroz.
- Composicion
- Carbonato de calcio (kg) Lignosulfonato (kg) Polivinilpirrolidona (kg) Producto natamicina (g/kg de semillas)
- 1
- 1
- 0,133 0 0
- 2
- 1 0 0,01 0
- 3
- 1 0,133 0 2,5
- 4
- 1 0 0,01 2,5
- 5
- 1 0,133 0 9
- 6
- 1 0 0,01 9
Tabla 2: Porcentaje de germinacion despues de 14 dfas de incubacion de semillas de arroz con incrustaciones y no tratadas.
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%)
- Control (no tratadas)
- 82
- 1
- 89
- 2
- 86
- 3
- 94
- 4
- 94
- 5
- 94
- 6
- 95
10
Tabla 3: Porcentaje de germinacion despues de 16 dfas de incubacion de semillas de arroz almacenadas con incrustaciones y no tratadas.
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%)
- Control (no tratadas)
- 64
- 1
- 72
- 2
- 78
- 3
- 71
- 4
- 84
- 5
- 80
- 6
- 91
Tabla 4: Masa total (masa seca y contenido de agua) de las rafces de plantulas procedentes de semillas de arroz con incrustaciones y no tratadas.
- Composicion
- Masa total de rafces (en gramos)
- Control (no tratadas)
- 2,16
- 1
- 2,63
- 2
- 3,06
- 5
- 3,21
- 6
- 3,29
Tabla 5: Masa total (masa seca y contenido de agua) de plantulas procedentes de semillas de arroz con 5 incrustaciones y no tratadas.
- Composicion
- Masa total de plantulas (en gramos)
- Control (no tratadas)
- 14,19
- 1
- 17,65
- 2
- 19,10
- 5
- 20,18
- 6
- 20,37
Tabla 6: Masa seca media de plantulas individuales procedentes de semillas de arroz con incrustaciones y no tratadas.
- Composicion
- Peso medio de masa seca por plantula (en gramos) Incremento de porcentaje en la masa seca media comparado con semillas no tratadas (%)
- Control (no tratadas)
- 0,0065 -
- 1
- 0,0084 28
- 2
- 0,0089 36
- 3
- 0,0093 42
- 4
- 0,0098 50
Tabla 7: Porcentaje de germinacion despues de 14 dfas de incubacion de las semillas de arroz con incrustaciones 10 de natamicina o peroxido de calcio.
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%)
- Control (no tratadas)
- 70
- A (natamicina)
- 76
- B (peroxido de calcio)
- 72
Tabla 8: Masa seca media de plantulas individuales procedentes de semillas de arroz con incrustaciones de natamicina o peroxido de calcio.
5
- Composicion
- Peso medio de masa seca por plantula (en gramos) Incremento de porcentaje en la masa seca media comparado con semillas no tratadas (%)
- Control (no tratadas)
- 0,0041 -
- A (natamicina)
- 0.0054 33
- B (peroxido de calcio)
- 0,0043 7
- C (peroxido de calcio)
- 0,0033 -19
- D (natamicina)
- 0,0048 18
- E (peroxido de calcio)
- 0,0042 3
- F (peroxido de calcio)
- 0,0024 -40
Tabla 9: Masa seca media de las rafces por plantula individual procedente de semillas de mafz con incrustaciones y no tratadas.
- Composicion
- Incremento de porcentaje en masa seca media comparado con semillas no tratadas (%)
- Control (no tratadas)
- -
- A
- 4
- B
- 17
10 Tabla 10: Porcentaje de germinacion despues de 12 dfas de incubacion de semillas de cebolla revestidas y no tratadas.
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%)
- Control (no tratadas)
- 73
- A
- 79
- B
- 80
- C
- 85
- D
- 85
Tabla 11: Porcentaje de germinacion despues de 15, 17 y 19 dfas de incubacion de semillas de sand^a revestidas y no tratadas.
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%) durante la incubacion (dfas)
- 15 dfas
- 17 dfas 19 dfas
- Control (no tratadas)
- 12 16 22
- Revestidas con natamicina
- 30 50 60
Tabla 12: Porcentaje de germinacion despues de 10 y 19 dfas de incubacion de semillas de tomate con (sin) 5 incrustaciones, cebadas en tambor.
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%) durante la incubacion (dfas)
- 10 dfas
- 19 dfas
- Control (cebadas en tambor)
- 70 75
- Cebadas en tambor + revestidas con natamicina
- 80 85
Tabla 13: Porcentaje de germinacion despues de 14 dfas de incubacion de semillas de berenjena revestidas (no revestidas).
- Composicion
- Porcentaje de germinacion (%)
- Control (osmo-cebadas)
- 41
- Osmo-cebadas + revestidas con natamicina
- 45
Claims (15)
- 51015202530REIVINDICACIONES1. Un metodo para mejorar la germinacion de una semilla, comprendiendo dicho metodo la etapa de poner en contacto la semilla, el medio a ser plantado con la semilla o ambos con natamicina.
- 2. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 1, caracterizado por que natamicina esta comprendida en una composicion.
- 3. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 2, caracterizado por que la composicion comprende, ademas, una carga, un aglutinante o ambos.
- 4. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 3, caracterizado por que la carga se selecciona del grupo que consiste en un carbonato, harina de madera, tierra de diatomeas y una combinacion de los mismos.
- 5. Un metodo de acuerdo con la reivindicacion 3 o 4, caracterizado por que el aglutinante es lignosulfonato, polivinilpirrolidona o una combinacion de los mismos.
- 6. Un metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por que natamicina esta presente en una cantidad de 10 gramos a 4000 gramos de natamicina por 100 kg de semillas.
- 7. Una composicion de tratamiento de semillas que comprende una carga, un aglutinante y natamicina, caracterizada por que la carga se selecciona del grupo que consiste en un carbonato, harina de madera, tierra de diatomeas y una combinacion de los mismos.
- 8. Una composicion de tratamiento de semillas de acuerdo con la reivindicacion 7, caracterizada por que el aglutinante es lignosulfonato, polivinilpirrolidona o una combinacion de los mismos.
- 9. Una composicion de tratamiento de semillas de acuerdo con la reivindicacion 7 u 8, caracterizada por que natamicina esta presente en una cantidad de 0,05 a 50% del peso total de la composicion.
- 10. Una semilla que comprende una carga, un aglutinante y natamicina.
- 11. Una semilla que comprende una composicion de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9.
- 12. Un medio para cultivar una planta, que comprende una composicion de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9.
- 13. Un metodo para el cultivo de una planta, comprendiendo dicho metodo las etapas de:a) sembrar una semilla de acuerdo con la reivindicacion 10 u 11, sembrar una semilla en un medio de acuerdo con la reivindicacion 12 o sembrar una semilla de acuerdo con la reivindicacion 10 u 11 en un medio de acuerdo con la con la reivindicacion 12, yb) dejar que la planta crezca a partir de la semilla.
- 14. Uso de natamicina para mejorar la germinacion de semillas.
- 15. Uso de natamicina para mejorar el desarrollo de rafces a partir de plantulas.
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