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ES2576628T3 - Derivados de hidantoína útiles como inhibidores de Kv3 - Google Patents

Derivados de hidantoína útiles como inhibidores de Kv3 Download PDF

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ES2576628T3
ES2576628T3 ES12806092.8T ES12806092T ES2576628T3 ES 2576628 T3 ES2576628 T3 ES 2576628T3 ES 12806092 T ES12806092 T ES 12806092T ES 2576628 T3 ES2576628 T3 ES 2576628T3
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ES
Spain
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benzofuran
compound
disorder
mmol
oxy
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ES12806092.8T
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English (en)
Inventor
Giuseppe Alvaro
Agostino Marasco
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Autifony Therapeutics Ltd
Original Assignee
Autifony Therapeutics Ltd
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Publication date
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Abstract

Un compuesto de fórmula (I):**Fórmula** en donde: W es CRaRb o O; cuando W es CRaRb entonces Z es CH2; cuando W es O entonces Z es CF2; Ra y Rb son CH3 o considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3; en donde, cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb son CH3:**Fórmula** el anillo A es: y el anillo B es:**Fórmula** o el anillo A es: y el anillo B es: en donde, cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3;**Fórmula** el anillo A es: y**Fórmula** el anillo B es: y en donde, cuando W es O y Z es CF2:**Fórmula** el anillo A es: y el anillo B es: ; o una de sus sales y/o solvatos farmacéuticamente aceptables.

Description

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DESCRIPCION
Derivados de hidantoma utiles como inhibidores de Kv3 Campo tecnico
Esta invencion se refiere a nuevos compuestos, composiciones farmaceuticas que los contienen y a su uso en terapia, en particular en la profilaxis o tratamiento de trastornos auditivos, incluyendo la hipoacusia y acufenos, asf como la esquizofrenia.
Antecedentes de la invencion
La familia de canales de potasio regulados por voltaje Kv3 incluye cuatro miembros, Kv3.1, Kv3.2, Kv3.3, y Kv3.4. Los genes para cada uno de estos subtipos pueden generar multiples isoformas por corte y empalme alternativo, produciendo versiones con diferentes dominios C-terminales. Se han identificado 13 isoformas en mairnferos hasta la fecha, pero las corrientes expresadas por estas variantes parecen similares (Rudy y McBain, 2001, Trends in Neurosciences 24, 517-526). Los canales Kv3 son activados por despolarizacion de la membrana plasmatica a voltajes mas positivos que -20 mV; ademas, los canales se desactivan rapidamente tras la repolarizacion de la membrana. Estas propiedades bioffsicas aseguran que los canales se abren hacia el maximo de la fase de despolarizacion del potencial de accion neuronal para iniciar la repolarizacion. La terminacion rapida del potencial de accion mediada por los canales Kv3 permite que la neurona se recupere mas rapidamente para alcanzar los potenciales de membrana por debajo del umbral, a partir de los cuales se pueden producir mas potenciales de accion. Como resultado, la presencia de canales Kv3 en determinadas neuronas contribuye a su capacidad para disparar a altas frecuencias (Rudy y McBain, 2001, Trends in Neurosci. 24, 517-526). Los subtipos Kv3.1-3 son predominantes en el SNC, mientras que los canales Kv3.4 se encuentran predominantemente en el musculo esqueletico y neuronas simpaticas (Weiser et al., 1994, J. Neurosci. 14, 949-972). Los subtipos de canales Kv3.1-3 son expresados de forma diferencial por subclases de interneuronas en las zonas cerebrales cortical y del hipocampo (p. ej., Chow et al., 1999, J.Neurosci. 19, 9332-9345; Martina et al., 1998, J.Neurosci. 18, 8111-8125; McDonald y Mascagni, 2006, Neurosci. 138, 537-547, Chang et al., 2007, J. Comp. Neurol. 502, 953-972), en el talamo (p. ej. Kasten et al., 2007, J. Physiol. 584, 565-582), cerebelo (p. ej. Sacco et al., 2006, Mol. Cell. Neurosci. 33, 170-179), y nucleos auditivos del tronco cerebral (Li et al., 2001, J. Comp. Neurol. 437, 196-218).
La caracterizacion de ratones en los que se ha eliminado uno o mas subtipos de Kv3 muestra que la ausencia de Kv3.1 da lugar a actividad locomotora aumentada, actividad electroencefalografica alterada y un patron de sueno fragmentado (Joho et al., 1999, J. Neurophysiol. 82, 1855-1864). La eliminacion de Kv3.2 conduce a una reduccion en el umbral convulsivo y actividad electroencefalografica cortical alterada (Lau et al., 2000, J.Neurosci. 20, 90719085). La eliminacion de Kv3.3 esta asociada con ataxia leve y deficiencias motoras (McMahon et al., 2004, Eur. J. Neurosci. 19, 3317-3327). Ademas, la reduccion de mutaciones funcionales de canales Kv3.3 en seres humanos se ha asociado con la ataxia espinocerebelosa de tipo 13 (Waters et al., 2006, Nat. Genet. 38, 447-451). La eliminacion doble de Kv3.1 y Kv3.3 da lugar a un fenotipo grave caracterizado por convulsiones espontaneas, ataxia y una mayor sensibilidad a los efectos del etanol (Espinosa et al., 2001, J. Neurosci. 21, 6657-6665; Espinosa et al., 2008, J. Neurosci. 28, 5570-5581).
La farmacologfa conocida de los canales Kv3 es limitada. Se ha mostrado que el tetraetilamonio inhibe los canales en concentraciones milimolares bajas (Rudy y McBain, 2001, Trends in Neurosci. 24, 517-526), y las toxinas sustancias depresoras de la sangre (BDS) de anemonas de mar, Anemonia sulcata (Diochot et al., 1998, J. Biol. Chem. 273, 6744-6749), inhiben selectivamente los canales Kv3 con una alta afinidad (Yeung et al., 2005, J.Neurosci. 25, 8735-8745). Ademas de los compuestos que actuan directamente en los canales Kv3, se ha mostrado que los agonistas de receptores que activan la protema quinasa A (PKA) y protema quinasa C (PKC) modulan las corrientes mediadas por Kv3 en zonas del cerebro espedficas, conduciendo a una reduccion en la capacidad de las neuronas para disparar a alta frecuencia (Atzori et al., 2000, Nat. Neurosci. 3, 791-798; Song et al.,
2005, Nat Neurosci. 8, 1335-1342); estos estudios sugieren que la PKA y PKC pueden fosforilar espedficamente canales Kv3 de una forma espedfica de neurona, produciendo una reduccion en las corrientes mediadas por Kv3.
El trastorno bipolar, esquizofrenia, ansiedad y epilepsia son trastornos graves del sistema nervioso central que se han asociado con la funcion reducida de interneuronas inhibidoras y transmision del acido gamma-aminobutmco (GABA) (Reynolds et al., 2004, Neurotox. Res. 6, 57-61; Benes et al., 2008, PNAS, 105, 20935-20940; Brambilla et al., 2003, Mol. Psychiatry. 8, 721-37, 715; Aroniadou-Anderjaska et al., 2007, Amino Acids 32, 305-315; Ben-Ari,
2006, Crit. Rev. Neurobiol. 18, 135-144). Las celulas en cesta positivas para parvalbumina que expresan canales Kv3 en la corteza cerebral y el hipocampo tienen una funcion en la generacion de retroinhibicion en circuitos locales (Markram et al., 2004, Nat.Rev.Neurosci. 5, 793-807). Dada la dominancia relativa de entrada sinaptica excitatoria frente a entrada inhibidora a las neuronas piramidales glutamatergicas en estos circuitos, el disparo rapido de interneuronas que suministran entrada inhibidora es esencial para asegurar la inhibicion equilibrada. Ademas, es necesaria la sincronizacion exacta de la entrada inhibidora para mantener la sincronizacion de la red, por ejemplo, en la generacion de oscilaciones de los potenciales de campo de frecuencia gamma que se han asociado con la funcion cognitiva (Fisahn et al., 2005, J. Physiol 562, 65-72; Engel et al., 2001, Nat. Rev. Neurosci. 2, 704-716). En particular, se ha observado una reduccion de las oscilaciones gamma en pacientes con esquizofrenia (Spencer et
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al., 2004, PNAS 101, 17288-17293). Por consiguiente, se pude esperar que los moduladores positivos de los canales Kv3 potencien las capacidades de disparo de grupos espedficos de neuronas de disparo rapido en el cerebro. Estos efectos pueden ser beneficiosos en trastornos asociados con la actividad anomala de estos grupos neuronales.
Ademas, se ha mostrado que los canales Kv3.2 son expresados por neuronas del nucleo supraquiasmatico (NSQ) el principal marcapasos circadiano en el SNC (Schulz y Steimer, 2009, CNS Drugs 23 Suppl 2,3-13).
La hipoacusia representa una epidemia que afecta a aproximadamente 16% de la poblacion en Europa y Estados Unidos (Goldman y Holme, 2010, Drug Discovery Today 15, 253-255), con una prevalencia estimada de 250 millones de personas en todo el mundo (B.Shield, 2006, Evaluation of the social and economic costs of hearing impairment. Un artmulo para Hear-It AISBL:
www.hear-it.org/multimedia/Hear_It_Report October_2006.pdf). A medida que la esperanza de vida aumenta, tambien lo hace el numero de personas que padecen trastornos auditivos. Ademas, se cree que el estilo de vida moderno puede exacerbar esta carga a medida que envejece la generacion mas joven. Las afecciones auditivas, incluyendo acufenos, tienen un efecto profundo en la calidad de vida, produciendo aislamiento social, depresion, dificultades en el trabajo y las relaciones, baja autoestima y discriminacion. Los canales ionicos regulados por voltaje de la familia de Kv3 son expresados en niveles altos en los nucleos auditivos del tronco cerebral (Li et al., 2001, J. Comp. Neurol. 437, 196-218) donde permiten el disparo rapido de neuronas que transmiten la informacion auditiva de las regiones coclear a la cerebral superior. Se observa la perdida de la expresion del canal Kv3.1 en ratones con deterioro auditivo (von Hehn et al., 2004, J. Neurosci. 24, 1936-1940), ademas se puede asociar una disminucion de la expresion de Kv3.1 con la hipoacusia en ratones envejecidos (Jung et al. 2005 Neurol. Res. 27, 436-440) y la perdida de funcion del canal Kv3 tambien puede producirse despues de hipoacusia inducida por traumatismo por ruido (Pilati et al., Hear Res. 2012 Jan 283(1-2):98- 106). Ademas, es probable que la plasticidad patologica de las redes del tronco cerebral auditivo contribuya a los smtomas que experimentan muchas personas que padecen hipoacusia de distintos tipos. Estudios recientes han mostrado que la regulacion de la funcion y expresion de los canales Kv3.1 tiene una funcion principal en el control de la excitabilidad neuronal auditiva (Kaczmarek et al., 2005, Hearing Res. 206, 133-145), sugiriendo que este mecanismo podna dar cuenta de algunos de los cambios plasticos que dan lugar a los acufenos. Estos datos respaldan la hipotesis de que la modulacion positiva de los canales Kv3 en los nucleos auditivos del tronco cerebral podnan tener un beneficio terapeutico en pacientes que padecen hipoacusia. Finalmente, el smdrome del cromosoma X fragil y el autismo, a menudo estan asociados con hipersensibilidad a la entrada sensorial, incluyendo estfmulos auditivos. Descubrimientos recientes sugieren que la protema codificada por el gen FMR-I, cuya mutacion o ausencia da lugar al smdrome del cromosoma X fragil, puede regular directamente la expresion de los canales Kv3.1 en los nucleos auditivos del tronco cerebral (Strumbos et al., 2010, J. Neuroscience, pendiente de publicacion), sugiriendo que la mala regulacion de los canales Kv3.1 podna dar lugar a hiperacusia en pacientes que padecen el smdrome del cromosoma X fragil o autismo. Por consiguiente, los autores de la invencion proponen que moleculas pequenas moduladoras de canales Kv3 en nucleos auditivos del tronco cerebral podnan tener un beneficio en el tratamiento de trastornos auditivos, incluyendo acufenos e hiperagudeza auditiva asociados con el smdrome del cromosoma X fragil y el autismo.
La ataxia espinocerebelosa de tipo 13 (SCA13) es una enfermedad autosomica dominante humana causada por mutaciones en el gen KCNC3 que codifica el canal Kv3.3. Se ha mostrado que estas mutaciones producen reduccion en la funcion de los canales (Waters et al., 2006, Nat. Genet. 38, 447-451; Minassian et al., 2012, J Physiol. 590.7, 1599-1614). La coexpresion de Kv3.1 y Kv3.3 en muchas zonas del cerebro, incluyendo el cerebelo, sugiere alguna redundancia o la capacidad de un subtipo para compensar la ausenciadel otro, de hecho el fenotipo del raton con doble inactivacion genica de Kv3.1/Kv3.3 es notablmente mas grave que cualquiera de las dos inactivaciones genicas individuales (p. ej. Espinosa et al., 2008, J.Neurosci. 28, 5570-5581). Ademas, es posible que las protemas Kv3.1 y Kv3.3 se ensamblen para formar canales heterodfmeros en algunas neuronas. La capacidad de Kv3.1 para compensar una perdida de funcion de kv3.3 puede explicar porque algunas mutaciones en este ultimo estan solo asociadas con un inicio de ataxia espinocerebelosa posteriormente en la vida adulta, en lugar de desde el nacimiento (Minassian et al., 2012, J Physiol. 590.7, 1599-1614). Por consiguiente, moduladores moleculas pequenas de Kv3.3 o Kv3.1 pueden ser beneficiosos en el tratamiento de la ataxia espinocerebelosa, en particular de SCA13.
Las solicitudes de patente WO2011/069951 y WO2012/076877 describen compuestos que son moduladores de Kv3.1 y Kv3.2. Ademas, el valor de dichos compuestos se demuestra en modelos animales de convulsiones, hiperactividad, trastornos del sueno, psicosis, deficit cognitivo, trastorno bipolar y trastornos auditivos.
Las solicitudes de patente W02010/072598 y W02011/073114 describen compuestos heterodclicos que se dice que son utiles en el tratamiento de la infeccion por HCV y la inhibicion de la replicacion del HCV.
Sigue siendo necesaria la identificacion de moduladores alternativos de Kv3.1 y Kv3.2, en particular de moduladores de Kv3.1 y Kv3.2 que pueden demostrar mayor potencia in vivo, algunos perfiles de selectividad de canales o parametros farmacocineticos deseables que reducen la dosis requerida para el efecto terapeutico in vivo. Para algunas indicaciones terapeuticas, tambien es necesario identificar compuestos con un efecto modulador diferente en los canales Kv3, por ejemplo, compuestos que alteran la cinetica de la regulacion del canal o inactivacion del canal, y que se pueden comportar in vivo como moduladores negativos de los canales.
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Compendio de la invencion
La presente invencion proporciona un compuesto de formula (I):
imagen1
en donde:
W es CRaRb o O;
cuando W es CRaRb entonces Z es CH2; cuando W es O entonces Z es CF2;
Ra y Rb son CH3 o considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3; en donde cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb son CH3:
El anillo A es:
imagen2
y el anillo B es
imagen3
/
NH
El anillo A es: ' y el anillo B es:
en donde cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3;
A -N,
El anillo A es:
El anillo B es en donde, cuando W es O y Z es CF2:
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El anillo A es:
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el anillo B es:
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Se puede proporcionar un compuesto de formula (I) en forma de una de sus sales y/o solvatos farmaceuticamente aceptables. En una realizacion de la invencion, se proporciona un compuesto de formula (I) en forma de una sal farmaceuticamente aceptable.
Los compuestos de formula (I) se pueden usar como medicamentos, en particular para la profilaxis o tratamiento de trastornos auditivos, incluyendo la hipoacusia y acufenos, y la esquizofrenia. En una realizacion de la descripcion, los compuestos de formula (I) tambien se pueden usar como medicamento para la profilaxis o tratamiento del deterioro cognitivo o ataxia.
Ademas, se describe un metodo para la profilaxis o tratamiento de trastornos auditivos, incluyendo la hipoacusia y acufenos, asf como la esquizofrenia, trastorno bipolar, epilepsia y trastornos del sueno, por administracion a un sujeto un compuesto de formula (I). Tambien se describe un metodo para la profilaxis o tratamiento del deterioro cognitivo o ataxia, por administracion a un sujeto un compuesto de formula (I).
Los compuestos de formula (I) se pueden usar en la fabricacion de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de trastornos auditivos, incluyendo la hipoacusia y acufenos, y la esquizofrenia. En una realizacion de la descripcion, los compuestos de formula (I) tambien se pueden usar en la fabricacion de un medicamento para la profilaxis o tratamiento del deterioro cognitivo o ataxia.
Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas que contienen un compuesto de formula (I) y un vehfculo o excipiente farmaceuticamente aceptable.
Descripcion detallada de la invencion
La presente invencion proporciona compuestos de formula (I):
imagen7
en donde:
W es CRaRb o O;
cuando W es CRaRb entonces Z es CH2; cuando W es O entonces Z es CF2;
Ra y Rb son CH3 o considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3; en donde cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb son CH3:
El anillo A es:
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y el anillo B es:
imagen9
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ElanilloAes: ' y el anillo B es:
en donde cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3;
El anillo A es:
El anillo B es: en donde, cuando W es O y Z es CF2:
imagen12
El anillo A es:
imagen13
y el anillo B es
imagen14
y
o una de sus sales y/o solvatos farmaceuticamente aceptables.
Los compuestos de formula (I), se pueden proporcionar opcionalmente en forma de una sal y/o solvato farmaceuticamente aceptable. En una realizacion de la invencion, se proporciona un compuesto de formula (I) en forma de una sal farmaceuticamente aceptable. En una segunda realizacion de la invencion, se proporciona un compuesto de formula (I) en forma de un solvato farmaceuticamente aceptable. En una tercera realizacion de la invencion, un compuesto de formula (I) no esta en forma de una sal o solvato.
En otra realizacion de la invencion el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:
(5R)-5-etil-5-metil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona;
(5R)-5-etil-5-metil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinil}- 2,4-imidazolidinadiona;
(5R)-3-{2-[(2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-5-etil-5-metil-2,4-imidazolidinadiona;
5,5-dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona;
(5R)-5-etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona;
(5R)-5-etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3- piridil]imidazolidina-2,4-diona;
(5R)-5-etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3-piridinil}-2,4-imidazolidinadiona;
(5R)-5-etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinadiona; (5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona; 5,5-dimetil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona; o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Para evitar dudas, las realizaciones de una cualquiera de las caractensticas de los compuestos de la invencion se
puede combinar con cualquier realizacion de otra caractenstica de los compuestos de la invencion para crear una realizacion adicional.
Se observara que para usar en medicina, las sales de los compuestos de formula (I) deben ser farmaceuticamente aceptables. Las sales farmaceuticamente aceptables seran evidentes para los expertos en la tecnica. Las sales 5 farmaceuticamente aceptables incluyen las descritas por Berge, Bighley y Monkhouse J.Pharm.Sci. (1977) 66, pag. 1-19. Dichas sales farmaceuticamente aceptables incluyen sales de adicion de acido formadas con acidos inorganicos, p. ej. acido clorhfdrico, bromhHdrico, sulfurico, mtrico o fosforico y acidos organicos, p. ej., acido succmico, maleico, acetico, fumarico, citrico, tartarico, benzoico, p-toluenosulfonico, metanosulfonico o naftalenosulfonico. Otras sales, p. ej., oxalatos o formiatos, se pueden usar, por ejemplo, para aislar los compuestos 10 de formula (I) y estan incluidos dentro del alcance de la invencion.
Algunos de los compuestos de formula (I) pueden formar sales de adicion de acido con uno o mas equivalentes del acido. La presente invencion incluye en su alcance todas las posibles formas estequiometricas y no estequiometricas.
Los compuestos de formula (I) se pueden preparar en forma cristalina o no cristalina, si es cristalina pueden estar 15 opcionalmente solvatados, p. ej., como el hidrato. Esta invencion incluye en su alcance solvatos estequiometricos (p. ej., hidratos) asf como compuestos que contienen cantidades variables del disolvente (p. ej., agua).
Tambien se describen derivados farmaceuticamente aceptables de los compuestos de formula (I).
Como se usa en la presente memoria "derivado farmaceuticamente aceptable" incluye cualquier ester o sal farmaceuticamente aceptable de dicho ester de un compuesto de formula (I) que, tras la administracion al receptor, 20 es capaz de proporcionar (directa o indirectamente) un compuesto de formula (I) o un metabolito activo o resto del mismo.
Adecuadamente, un profarmaco farmaceuticamente aceptable se forma funcioanlizando el nitrogeno secundario de la hidantoma, por ejemplo, con un grupo “L” como se ilustra a continuacion (en donde R representa dimetilo, metilo y etilo, o etilo, vease la formula (I)):
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En una realizacion de la descripcion, un compuesto de formula (I) se funcionaliza por el nitrogeno secundario de la hidantoma con un grupo L, en donde L se selecciona de:
a) -PO(OH)O- »M+, en donde M+ es un contraion monovalente farmaceuticamente aceptable,
b) -PO(O-)2 »2M+,
30 c) -PO(O-)2 »D2+, en donde D2+ es un contraion divalente farmaceuticamente aceptable,
d) -CH(Rx)-PO(OH)O- »M+, en donde Rx es hidrogeno o alquilo C1-3,
e) -CH(Rx)-PO(O')2 »2M+,
f) -CH(Rx)-PO(O')2 »D2+
g) -SO3»M+,
35 h) -CH(Rx)-SO3»M+, y i) -CO-CH2CH2-CO2»M+.
Debe entenderse que la presente descripcion abarca todos los isomeros de formula (I) y sus derivados farmaceuticamente aceptables, incluyendo todas las formas geometricas, tautomeras y opticas, y mezclas de las mismas (p. ej., mezclas racemicas). Cuanto estan presentes centros quirales adicionales en los compuestos de 40 formula (I), la presente invencion incluye en su alcance todos los posibles diastereoisomeros, incluyendo mezclas de los mismos. Las diferentes formas isomeras se pueden separar o resolver unas de otras por metodos convencionales, o cualquier isomero dado se puede obtener por metodos sinteticos convencionales o por smtesis
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estereoespedfica o asimetrica.
La descripcion tambien incluye compuestos isotopicamente marcados que son identicos a los citados en la formula (I) salvo por el hecho de que uno o mas atomos son sustituidos por un atomo que tiene una masa atomica o numero masico diferente de la masa atomica o numero masico encontrado mas habitualmente en la naturaleza. El experto en la tecnica apreciara que en muchas circunstancias la proporcion de un atomo que tiene una masa atomica o numero masico encontrado menos habitualmente en la naturaleza tambien se puede aumentar (denominado como “enriquecimiento isotopico”). Los ejemplos de isotopos que se pueden incorporar en los compuestos de la invencion incluyen isotopos de hidrogeno, carbono, nitrogeno, oxfgeno, fluor, yodo y cloro como 3H, 11C, 14C, 18F, 123I o 125I. Otro isotopo de interes es el 13C.
Los compuestos de la presente invencion y sales farmaceuticamente aceptables de dichos compuestos que contienen los isotopos mencionados antes y/u otros isotopos de otros atomos estan dentro del alcance de la presente descripcion. Los compuestos marcados con isotopos de la presente invencion, por ejemplo aquellos en los que se han incorporado isotopos radiactivos tales como 3H o 14C, son utiles en ensayos de distribucion tisular de farmaco y/o sustrato. Los isotopos tritiados, es decir, 3H, y de carbono 14, es decir 14C, son particularmente preferidos por su facilidad de preparacion y detectabilidad. Los isotopos de 11C y 18F son particularmente utiles en PET (tomograffa de emision de positrones).
Puesto que los compuestos de formula (I) estan destinados a uso en composiciones farmaceuticas, se entendera facilmente que cada uno se proporciona preferiblemente en forma sustancialmente pura, por ejemplo, al menos 60% puros, mas adecuadamente al menos 75% puros y preferiblemente al menos 85%, en especial al menos 98% puros (los % estan en peso por peso). Las preparaciones impuras de los compuestos se pueden usar para preparar las formas mas puras usadas en las composiciones farmaceuticas.
En general, los compuestos de formula (I) se pueden hacer de acuerdo con tecnicas de smtesis organica conocidas por los expertos en este campo, asf como por metodos representativos expuestos mas adelante, los de los ejemplos y modificaciones de los mismos.
Los compuestos de formula (I), y sales y solvatos de los mismos, se pueden preparar por los metodos generales senalados en el documento w020l2/O76877.
La presente invencion proporciona compuestos de formula (I) o una de sus sales farmaceuticamente aceptables para usar en terapia.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables, se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o trastorno donde se requiere un modulador de los canales Kv3.1 o Kv3.2 o Kv3.1 y Kv3.2. Como se usa en la presente memoria, un modulador de Kv3.1 o Kv3.2 o Kv 3.1 y Kv3.2 es un compuesto que altera las propiedades de estos canales, sea de forma positiva o negativa.
Los compuestos de la invencion se pueden ensayar en el ejemplo biologico 1, para determinar sus propiedades moduladoras.
En algunos trastornos puede ser beneficioso usar un modulador de Kv3.1 o Kv3.2 que demuestre un perfil de selectividad particular entre los dos canales. Por ejemplo, un compuesto puede ser selectivo para la modulacion de los canales Kv3.1 frente a la modulacion de los canales Kv3.2 demostrando, por ejemplo, una actividad de al menos 2 veces, 5 veces o 10 veces mas para los canales Kv3.1 que para los canales Kv3.2. Alternativamente, un compuesto puede ser selectivo para la modulacion de los canales Kv3.2 frente a la modulacion de los canales Kv3.1 demostrando, por ejemplo, una actividad de al menos 2 veces, 5 veces o 10 veces mas para los canales Kv3.2 que para los canales Kv3.1. En otro caso, un compuesto puede demostrar actividad comparable entre la modulacion de los canales Kv3.1 y Kv3.2, por ejemplo, la actividad para cada canal es menos de 2 veces la del otro canal, tal como menos de 1,5 veces o menos de 1,2 veces. La actividad de un compuesto se cuantifica adecuadamente por su potencia como se indica por un valor de CE50.
Las enfermedades o afecciones que se pueden mediar por modulacion de los canales Kv3.1 y/o Kv3.2 se pueden seleccionar de la siguiente lista. Los numeros entre parentesis despues de las enfermedades citadas a continuacion, se refieren al codigo de clasificacion en el Manual diagnostico y estadfstico de los trastornos mentales ("Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders"), 4a edicion, publicado por la Asociacion de psiquiatna americana (American Psychiatric Association) (DSM-IV) y/o la Clasificacion internacional de enfermedades, 10a edicion (ICD- 10).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables, se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos de depresion y del estado de animo, que incluyen episodio de depresion mayor, episodio maniaco, episodio mixto y episodio hipomaniaco; trastornos depresivos que incluyen trastorno depresivo mayor, trastorno distfmico (300.4), trastorno depresivo no especificado (311); trastornos bipolares que incluyen trastorno bipolar I, trastorno bipolar II (episodios depresivos mayores recurrentes con episodios hipomaniacos) (296.89), trastorno ciclotfmico (301.13) y trastorno bipolar no especificado (296.80); otros trastornos del estado de animo incluyendo trastorno del estado de animo debido a una afeccion medica general (293.83) (que incluye los subtipos
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con smtomas depresivos, con episodio similar al depresivo mayor, con smtomas maniacos y con smtomas mixtos), trastorno del estado de animo inducido por sustancias (que incluye los subtipos con smtomas depresivos, con smtomas maniacos y con smtomas mixtos) y trastorno del estado de animo no especificado (296.90); trastorno afectivo estacional.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de la esquizofrenia que incluye los subtipos de tipo paranoide (295.30), de tipo desorganizado (295.10), de tipo catatonico (295.20), de tipo no diferenciado (295.90) y de tipo residual (295.60); trastorno esquizofreniforme
(295.40) ; trastorno esquizoafectivo (295.70) que incluye los subtipos de tipo bipolar y de tipo depresivo; trastorno delirante (297.1) que incluye los subtipos de tipo erotomamaco, de tipo delirio de grandeza, celotipia, de tipo persecutorio, de tipo somatico, de tipo mixto y de tipo no especificado; trastorno psicotico breve (298.8); trastorno psicotico compartido (297.3); trastorno psicotico debido a una afeccion medica generalizada que incluye los subtipos con delirios y con alucinaciones; trastorno psicotico inducido por sustancias, que incluye los subtipos con delirios (293.81) y con alucinaciones (293.82); y trastorno psicotico no especificado (298.9).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos de ansiedad que incluyen crisis de angustia; trastorno de angustia que incluye trastorno de angustia sin agorafobia (300.01) y trastorno de angustia con agorafobia (300.21); agorafobia; agorafobia sin antecedentes de trastorno de angustia (300.22), fobia espedfica (300.29, anteriormente fobia simple) que incluye los subtipos de tipo animal, de tipo ambiental, de tipo sangre-inyecciones-dano, de tipo situacional y otros tipos), fobia social (trastorno de ansiedad social (300.23), trastorno obsesivo-compulsivo (300.3), trastorno por estres postraumatico (309.81), trastorno por estres agudo (308.3), trastorno de ansiedad generalizada (300.02), trastorno de ansiedad debido a afeccion medica general (293.84), trastorno de ansiedad inducido por sustancias, trastorno de ansiedad por separacion (309.21), trastorno de adaptacion con ansiedad (309.24) y trastorno de ansiedad no especificado (300.00).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos relacionados con sustancias tales como dependencia de sustancias, deseo de consumo de sustancias y abuso de sustancias; trastornos inducidos por sustancias tales como intoxicacion por sustancias, abstinencia de sustancias, delirio inducido por sustancias, demencia persistente inducida por sustancias, trastorno amnesico persistente inducido por sustancias, trastorno psicotico inducido por sustancias, trastorno del estado de animo inducido por sustancias, trastorno de ansiedad inducido por sustancias, disfuncion sexual inducida por sustancias, trastorno del sueno inducido por sustancias y trastorno con percepcion alucinogena persistente (escenas retrospectivas); trastornos relacionados con el alcohol tales como dependencia del alcohol (303.90), abuso de alcohol (305.00), intoxicacion por alcohol (303.00), abstinencia del alcohol (291.81), delirio por intoxicacion por alcohol, delirio por abstinencia de alcohol, demencia persistente inducida por el alcohol, trastorno amnesico persistente inducido por alcohol, trastorno psicotico inducido por el alcohol, trastorno del estado de animo inducido por el alcohol, trastorno del estado de ansiedad inducido por el alcohol, disfuncion sexual inducida por el alcohol, trastorno de sueno inducido por el alcohol y trastorno relacionado con el alcohol no especificado (291.9); trastornos relacionados con las anfetaminas (o sustancias similares a anfetaminas) tales como la dependencia de anfetaminas
(304.40) , adiccion a las anfetaminas (305.70), intoxicacion por anfetaminas (292.89), abstinencia de anfetaminas
(292.0) , delirio por intoxicacion de anfetaminas, trastorno psicotico inducido por anfetaminas, trastorno del estado de animo inducido por anfetaminas, trastorno de ansiedad inducido por anfetaminas, disfuncion sexual inducida por anfetaminas, trastorno del sueno inducido por anfetaminas y trastorno no especificado relacionado con las anfetaminas (292.9); trastornos relacionados con la cafema tales como la intoxicacion por cafema (305.90), trastorno de ansiedad inducido por cafema, trastorno del sueno inducido por cafema y trastorno no especificado relacionado con la cafema (292.9); trastornos relacionados con cannabis, tales como la dependencia de cannabis (304.30), abuso de cannabis (305.20), intoxicacion por cannabis (292.89), delirio por intoxicacion por cannabis, trastorno psicotico inducido por cannabis, trastorno de ansiedad inducido por cannabis y trastorno relacionado con cannabis no especificado (292.9); trastornos relacionados con cocama, tales como la dependencia de cocama (304.20), abuso de cocama (305.60), intoxicacion por cocama (292.89), abstinencia de cocama (292.0), delirio por intoxicacion por cocama, trastorno psicotico inducido por cocama, trastorno del estado emocional inducido por cocama, trastorno de ansiedad inducido por cocama, disfuncion sexual inducida por cocama, trastorno del sueno inducido por cocama y trastorno relacionado con la cocama no especificado (292.9); trastornos relacionados con alucinogenos, tales como la dependencia de alucinogenos (304.50), abuso de alucinogenos (305.30), intoxicacion por alucinogenos (292.89), trastorno alucinogeno con percepcion persistente (escenas retrospectivas) (292.89), delirio por intoxicacion con alucinogenos, trastorno psicotico inducido por alucinogenos, trastorno del estado de animo inducido por alucinogenos, trastorno de ansiedad inducido por consumo de alucinogenos y trastorno relacionado con alucinogenos no especificado (292.9); trastornos relacionados con inhalantes tales como la dependencia de inhalantes (304.60), abuso de inhalantes (305.90), intoxicacion por inhalantes (292.89), delirio por intoxicacion por inhalantes, demencia persistente inducida por inhalantes, trastorno psicotico inducido por inhalantes, trastorno del estado de animo inducido por inhalantes, trastorno de ansiedad inducido por inhalantes y trastorno relacionado con inhalantes no especificado (292.9); trastornos relacionados con la nicotina tales como la dependencia de nicotina
(305.1) , abstinencia de nicotina (292.0) y trastorno relacionado con la nicotina no especificado (292.9); trastornos relacionados con opiaceos, tales como la dependencia de opiaceos (304.00), abuso de opiaceos (305.50), intoxicacion por opiaceos (292.89), abstinencia de opiaceos (292.0), delirio por intoxicacion por opiaceos, trastorno
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psicotico inducido por opiaceos, trastorno del estado de animo inducido por opiaceos, disfuncion sexual inducida por opiaceos, trastorno del sueno inducido por opiaceos y trastorno relacionado con opiaceos no especificado (292.9); trastornos relacionados con la fenciclidina (o analogos de fenciclidina) tales como dependencia de fenciclidina (304.60), abuso de fenciclidina (305.90), intoxicacion por fenciclidina (292.89), delirio por intoxicacion por fenciclidina, trastorno psicotico inducido por fenciclidina, trastorno del estado de animo inducido por fenciclidina, trastorno de ansiedad inducido por fenciclidina y trastorno relacionado con fenciclidina no especificado de otra manera (292.9); trastornos relacionados con sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, tales como la dependencia de sedantes, hipnoticos o ansiolfticos (304.10), abuso de sedantes, hipnoticos o ansiolfticos (305.40), intoxicacion por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos (292.89), abstinencia de sedantes, hipnoticos o ansiolfticos (292.0), delirio por intoxicacion por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, delirio por abstinencia de sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, demencia persistente por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, trastorno amnesico persistente por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, trastorno psicotico inducido por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, trastorno del estado de animo inducido por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, trastorno de ansiedad inducido por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, disfuncion sexual inducida por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, trastorno del sueno inducido por sedantes, hipnoticos o ansiolfticos, y trastorno relacionado con sedantes, hipnoticos o ansiolfticos no especificado
(292.9) ; trastorno relacionado con varias sustancias tal como la dependencia de varias sustancias (304.80); y trastornos relacionados con otras sustancias (o desconocidas) tales como esteroides anabolizantes, inhalantes de nitrato y oxido nitroso.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para potenciar la cognicion que incluyen el tratamiento del deterioro cognitivo en otras enfermedades tales como la esquizofrenia, trastorno bipolar, depresion, otros trastornos psiquiatricos y afecciones psicoticas, asociadas con el deterioro cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer. Alternativamente, los compuestos de formula (I) o sus sales y/o solvatos farmaceuticamente aceptables se pueden usar para la profilaxis del deterioro cognitivo, tal como puede estar asociado con otras enfermedades tales como la esquizofrenia, trastorno bipolar, depresion, otros trastornos psiquiatricos y afecciones psicoticas, asociadas con el deterioro cognitivo, p. ej. la enfermedad de Alzheimer.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis trastornos del sueno que incluyen trastornos primarios del sueno tales como disomnias tales como insomnio primario (307.42), hipersomnia primaria (307.44), narcolepsia (347), trastornos del sueno relacionado con la respiracion (780.59), trastorno del ritmo circadiano (307.45) y disomnia no especificada (307.47); trastornos primarios del sueno tales como parasomnias tales como trastorno de pesadillas (307.47), trastorno de terrores nocturnos (307.46), trastorno de sonambulismo (307.46) y parasomnia no especificada (307.47); trastornos del sueno relacionados con otro trastorno mental tal como insomnio relacionado con otro trastorno mental (307.42) e hipersomnia relacionada con otro trastorno mental (307.44); trastornos del sueno debidos a una afeccion medica general, en particular alteraciones del sueno asociadas con trastornos neurologicos, dolor neuropatico, smdrome de piernas inquietas, enfermedades cardiacas y pulmonares; y trastorno del sueno inducido por sustancias que incluye los subtipos de tipo insomnio, tipo hipersomnia, tipo parasomnia y tipo mixto; apnea del sueno y smdrome de jet-lag.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos de la conducta alimentaria tales como la anorexia nerviosa (307.1) que incluye los subtipos de tipo restrictivo y de tipo compulsivo/purgativo; bulimia nerviosa (307.51) que incluye los subtipos de tipo purgativo y de tipo no purgativo; obesidad; trastorno de alimentacion compulsiva; trastorno por atracon; y trastorno de alimentacion no especificado (307.50).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos del espectro del autismo que incluyen el trastorno autista (299.00), trastorno de Asperger (299.80), trastorno de Rett (299.80), trastorno desintegrativo infantil (299.10) y trastorno generalizado del desarrollo no especificado (299.80, que incluye autismo atfpico).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis del trastorno por deficit de atencion con hiperactividad que incluye los subtipos de trastorno por deficit de atencion con hiperactividad de tipo combinado (314.01), trastorno por deficit de atencion con hiperactividad de tipo con predominio del deficit de atencion (314.00), trastorno por deficit de atencion con hiperactividad de tipo con predominio hiperactivo-impulsivo (314.01) y trastorno por deficit de atencion con hiperactividad no especificado
(314.9) ; trastorno hipercinetico; trastornos de comportamiento perturbador tales como trastorno de comportamiento que incluye los subtipos de tipo de inicio en la infancia (321.81), de tipo de inicio en la adolescencia (312.82) y de inicio no especificado (312.89), trastorno negativista desafiante (313.81) y trastorno de comportamiento perturbador no especificado; y trastornos de tics y trastorno de la Tourette (307.23).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos de la personalidad que incluyen los subtipos de trastorno paranoide de la personalidad (301.0), trastorno esquizoide de la personalidad (301.20), trastorno esquizotfpico de la personalidad (301.22), trastorno antisocial de la personalidad (301.7), trastorno ftmite de la personalidad (301.83), trastorno histrionico de la personalidad (301.50), trastorno narcisista de la personalidad (301,81), trastorno de la personalidad por evitacion (301.82), trastorno de la personalidad por dependencia (301.6), trastorno obsesivo-compulsivo de la personalidad (301.4) y trastorno de la personalidad no especificado (301.9).
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Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de disfunciones sexuales que incluyen trastornos del deseo sexual tales como trastorno del deseo sexual hipoactivo (302.71), y trastorno por aversion al sexo (302.79); trastornos de la excitacion sexual tales como trastorno de excitacion sexual en la mujer (302.72) y trastorno de la ereccion en el varon (302.72); trastornos orgasmicos tales como trastorno orgasmico femenino (302.73), trastorno orgasmico masculino (302.74) y eyaculacion precoz (302.75); trastorno sexual por dolor tales como dispareunia (302.76) y vaginismo (306.51); disfuncion sexual no especificada (302.70); parafilias tales como exhibicionismo (302.4), fetichismo (302.81), frotteurismo (302.89), pedofilia (302.2), masoquismo sexual (302.83), sadismo sexual (302.84), fetichismo transvestista (302.3), voyeurismo (302.82) y parafilia no especificada (302.9); trastornos de la identidad sexual tales como trastorno de la identidad sexual en ninos (302.6) y trastorno de la identidad sexual en adolescentes o adultos (302.85); y trastorno sexual no especificado (302.9).
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastorno del control de los impulsos: trastorno explosivo intermitente (312.34), cleptomania (312.32), juego patologico (312.31), piromama (312.33), tricotilomama (312.39), trastorno del control de los impulsos no especificado (312.3), atracon, compras compulsivas, comportamiento sexual compulsivo y acumulacion compulsiva.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de trastornos del ofdo que incluyen neuropatfa auditiva, trastorno del procesamiento auditivo, hipoacusia que incluye hipoacusia subita, hipoacusia inducida por ruido, hipoacusia inducida por sustancias, y hipoacusia en adultos mayores de 60 (presbiacusia), u acufenos.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de la enfermedad de Meniere, trastornos del equilibrio y trastornos del ofdo interno.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de la hiperacusia y alteraciones de la percepcion de intensidad sonora, que incluye el smdrome del cromosoma X fragil y autismo.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden usar para el tratamiento o profilaxis de la epilepsia, (que incluye, pero no se limita a epilepsias relacionadas con la localizacion, epilepsias generalizadas, epilepsias con crisis tanto generalizadas como locales), crisis asociadas con el smdrome de Lennox- Gastaut, crisis como complicacion de una enfermedad o afeccion (tales como crisis asociadas con encefalopatfa, fenilcetonuria, enfermedad de Gaucher juvenil, epilepsia mioclonica progresiva de Lundborg, accidente cerebrovascular, traumatismo craneal, estres, cambios hormonales, consumo de drogas o abstinencia, consumo de alcohol o abstinencia, falta de sueno, fiebre, infeccion, y similares), temblor esencial, smdrome de piernas inquietas, crisis parciales y generalizadas (que incluyen crisis tonicas, clonicas, tonico-clonicas, atonicas, mioclonicas, de ausencia), crisis generalizadas secundarias, epilepsia del lobulo temporal, epilepsias de ausencia (que incluyen de la infancia, juvenil, mioclonica, fotoinducida e inducida con patron), encefalopatfas epilepticas graves (que incluyen relacionadas con hipoxia y smdrome de Rasmussen), convulsiones febriles, epilepsia parcial continua, epilepsia mioclonica progresiva (que incluye la enfermedad Unverricht-Lundborg y la enfermedad de Lafora), crisis/epilepsia postraumaticas incluidos los relacionados con lesiones en la cabeza, epilepsias reflejas simples (que incluyen fotosensible, somatosensorial y propioceptiva, audiogenico y vestibular), trastornos metabolicos comunmente asociadas con la epilepsia como la epilepsia dependiente de piridoxina, enfermedad de Menkes del rizado el pelo, enfermedad de Krabbe, epilepsia debida al abuso de alcohol y drogas (p. ej. la cocama), malformaciones corticales asociadas con la epilepsia (p. ej. smdrome de doble corteza o heterotopia subcortical en banda), anomalfas cromosomicas asociadas con crisis o epilepsia tales como monosomfa parcial (15Q)/smdrome de Angelman).
En una realizacion de la invencion, se proporciona un compuesto de formula (I) o una de sus sales farmaceuticamente aceptables para usar en el tratamiento o profilaxis de trastornos auditivos o esquizofrenia.
Tambien se describe un compuesto de formula (I) o una de sus sales farmaceuticamente aceptables para el tratamiento o profilaxis del trastorno bipolar o mama.
En una realizacion de la descripcion, se proporciona un compuesto de formula (I) o una de sus sales y/o solvatos farmaceuticamente aceptables para el tratamiento o profilaxis de la ataxia, tal como ataxia espinocerebelosa.
En una realizacion de la descripcion, se proporciona un compuesto de formula (I) o una de sus sales y/o solvatos farmaceuticamente aceptables para el tratamiento o profilaxis del deterioro cognitivo.
El termino "tratamiento" o "tratar" como se usa en la presente memoria incluye el control, mitigacion, reduccion o modulacion de la enfermedad y sus smtomas.
El termino "profilaxis" se usa en la presente memoria para indicar la prevencion de smtomas de una enfermedad o trastorno en un sujeto o la prevencion de la reaparicion de smtomas de una enfermedad o trastorno en un sujeto aquejado, y no se limita a la prevencion completa de una enfermedad.
Tambien se describe un metodo para tratar o prevenir una enfermedad o trastorno donde se requiere un modulador
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de Kv3, por ejemplo, aquellas enfermedades y trastornos mencionados en lo que antecede, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad eficaz de un compuesto de formula (I) o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Tambien se describe un compuesto de formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, para usar en el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o trastorno donde se requiere un modulador de Kv3, por ejemplo, las enfermedades y trastornos mencionados en lo que antecede.
Tambien se describe el uso de un compuesto de formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento o profilaxis de una enfermedad o trastorno donde se requiere un modulador de Kv3, por ejemplo, las enfermedades y trastornos mencionados en lo que antecede.
Tambien se describe un metodo para tratar la depresion y trastornos del estado de animo, esquizofrenia, trastornos de abuso de sustancias, trastornos del sueno o epilepsia, por ejemplo, para las indicaciones mencionadas en lo que antecede, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite, una cantidad eficaz de un modulador de KV3 o una de sus sales farmaceuticamente aceptables.
Para usar en terapia, los compuestos de la invencion normalmente se administran como una composicion farmaceutica. Tambien se describe una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de formula (I), o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, y un vehnculo farmaceuticamente aceptable.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables se pueden administrar por cualquier metodo conveniente, p. ej., por administracion oral, bucal, sublingual, nasal, rectal o transdermica, y las composiciones farmaceuticas adaptadas en consecuencia. Otras posibles vfas de administracion incluyen la intratimpano e intracoclear.
Los compuestos de formula (I) o sus sales farmaceuticamente aceptables que son activos cuando se administran por via oral, se pueden formular como lfquidos o solidos, p. ej., como jarabes, suspensiones, emulsiones, comprimidos, capsulas o pastillas.
Una formulacion lfquida en general consistira en una suspension o solucion del principio activo en un velticulo o velticulos lfquidos adecuados, p. ej., un disolvente acuoso tal como agua, etanol o glicerina, o un disolvente no acuoso, tal como polietilenglicol o un aceite. La formulacion tambien puede contener un agente de suspension, conservante, saborizante y/o agente colorante.
Una composicion en forma de un comprimido se puede preparar usando cualquier o cualesquiera velticulos farmaceuticos adecuados para preparar formulaciones solidas, tales como estearato magnesico, almidon, lactosa, sacarosa y celulosa.
Una composicion en forma de una capsula se puede preparar usando procedimientos de encapsulacion rutinarios, p. ej., se pueden preparar granulos que contienen el principio activo usando velticulos convencionales y despues llenar la capsula de gelatina dura; alternativamente, se puede preparar una dispersion o suspension usando cualquier velticulo o velticulos farmaceuticos adecuados, p. ej. gomas acuosas, celulosas, silicatos o aceites y despues llenar con la dispersion o suspension una capsula de gelatina blanda.
Las composiciones parenterales tipicas consisten en una solucion o suspension del principio activo en un velticulo acuoso esteril o aceite aceptable por via parenteral, p. ej., polietilenglicol, polivinilpirrolidona, lecitina, aceite de cacahuete o aceite de sesamo. Alternativamente, la solucion se puede liofilizar y despues reconstituir con un disolvente adecuado, justo antes de la administracion.
Las composiciones para administracion nasal se pueden formular convenientemente como aerosoles, gotas, geles y polvos. Las formulaciones en aerosol comprenden tipicamente una solucion o suspension fina del principio activo en un disolvente acuoso o no acuoso, farmaceuticamente aceptable, y normalmente se presentan en cantidades individuales o multiples dosis, en forma esteril en un envase hermeticamente cerrado que puede tener forma de un cartucho o recarga para usar con un dispositivo de atomizacion. Alternativamente, el envase hermeticamente cerrado puede ser un dispositivo de dispensacion desechable tal como un inhalador nasal de una sola dosis, o un dispensador de aerosol provisto de una valvula dosificadora. Cuando la forma farmaceutica comprende un dispensador de aerosol, contendra un propulsor que puede ser un gas comprimido, p. ej., aire, o un propulsor organico tal como fluoroclorohidrocarbono o hidrofluorocarbono. Las formas farmaceuticas de aerosol tambien pueden tener forma de atomizadores de bomba.
Las composiciones adecuadas para la administracion bucal o sublingual incluyen comprimidos, pastillas para chupar y pastillas donde el principio activo esta formulado con un velticulo tal como azucar o goma arabiga, tragacanto o gelatina y glicerina.
Las composiciones para la administracion rectal estan convenientemente en forma de supositorios que contienen una base de supositorio convencional tal como manteca de cacao.
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Las composiciones adecuadas para la administracion transdermica incluyen pomadas, geles y parches.
En una realizacion, la composicion esta en forma de dosis unitaria tal como un comprimido, capsula o ampolla.
La composicion puede contener de 0,1% a 100% en peso, por ejemplo de 10 a 60% en peso, del material activo, dependiendo del metodo de administracion. La composicion puede contener de 0% a 99% en peso, por ejemplo de 40% a 90% en peso, del vehnculo, dependiendo del metodo de administracion. La composicion puede contener de 0,05 mg a 1000 mg, por ejemplo de 1,0 mg a 500 mg, del material activo, dependiendo del metodo de administracion. La composicion puede contener de 50 mg a 1000 mg, por ejemplo de 100 mg a 400 mg, del vehnculo, dependiendo del metodo de administracion. La dosis del compuesto usada en el tratamiento de los trastornos mencionados antes, variara de la forma habitual con la gravedad de los trastornos, el peso del que lo padece y otros factores similares. Sin embargo, como grna general, las dosis unitarias pueden ser de 0,05 a 1000 mg, mas adecuadamente de 1,0 a 500 mg, y dichas dosis se pueden administrar mas de una vez al dfa, por ejemplo dos o tres veces al dfa. Dicho tratamiento se puede prolongar durante una serie de semanas o meses.
En un aspecto adicional se describe una combinacion que comprende un compuesto de formula (I) o uno de sus derivados farmaceuticamente aceptables, junto con un agente o agentes terapeuticos adicionales.
En otro aspecto se describe un compuesto de formula (I), para usar en combinacion con un agente o agentes terapeuticos adicionales.
Cuando los compuestos se usan en combinacion con otros agentes terapeuticos, los compuestos se pueden administrar de forma secuencial o simultanea por cualquier ruta conveniente.
Las combinaciones mencionadas antes se pueden presentar de forma conveniente para usar en la forma de una formulacion farmaceutica y por lo tanto las formulaciones farmaceuticas que comprenden una combinacion como se ha definido antes junto con un vehfculo o excipiente farmaceuticamente aceptable, comprenden un aspecto adicional de la invencion. Los componentes individuales de dichas combinaciones se pueden administrar de forma secuencial o simultanea en formulaciones farmaceuticas separadas o combinadas. Los componentes individuales de las combinaciones tambien se pueden administrar por separado, por la misma o diferentes rutas.
Cuando un compuesto de formula (I) o uno de sus derivados farmaceuticamente aceptables, se usa en combinacion con un segundo agente terapeutico activo contra la misma enfermedad, la dosis de cada compuesto puede diferir de aquella cuando el compuesto se usa solo. Las dosis adecuadas seran facilmente apreciadas por los expertos en la tecnica.
Una composicion farmaceutica, que se puede preparar mediante mezcla, adecuadamente a temperatura ambiente y presion atmosferica, normalmente esta adaptada para la administracion oral, parenteral o rectal y, como tal, puede estar en forma de comprimidos, capsulas, preparaciones lfquidas orales, polvos, granulos, pastillas, polvos reconstituibles, soluciones o suspensiones inyectables o infundibles o supositorios. En general se prefieren las composiciones administrables por via oral.
Ademas, la presente descripcion se refiere a un metodo para la fabricacion de compuestos de formula (I). En un aspecto adicional, la presente invencion se refiere a nuevos compuestos intermedios de uso en la fabricacion de compuestos de formula (I), y a la fabricacion de dichos compuestos intermedios.
Los compuestos intermedios particulares de interes incluyen:
7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13)
imagen16
; y
3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-ol (compuesto intermedio 27)
; y
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2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-ol (compuesto intermedio 37)
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Otros compuestos intermedios de interes son las anilidas:
6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-cidopropan]-4-il)oxipiridin-3-amina (compuesto intermedio 15)
imagen19
2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropan]-4-il)oxipirimidin-5-amina (compuesto intermedio 19)
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; y
6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxil-3-piridinamina (compuesto intermedio 29)
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y
2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxil-5-pirimidinamina (compuesto intermedio 33)
imagen22
La presente invencion se ilustra, solo a modo de ejemplo, con referencia a las siguientes figuras en las que:
Figura 1a
Corrientes de hKv3.2 registradas usando el ensayo descrito en el ejemplo biologico 1. Los datos mostrados son las corrientes individuales a lo largo del periodo del paso de voltaje despolarizante a -15 mV registradas de 4 celulas diferentes en dos concentraciones del compuesto del ejemplo de referencia RE1. Los datos se ajustan por una sola curva exponencial (lmeas negras) usando el procedimiento de ajuste de Prism version 5 (Graphpad Software Inc).
Figura 1b
Corrientes de hKv3.2 registradas usando el ensayo descrito en el ejemplo biologico 1. Los datos mostrados son las corrientes individuales a lo largo del periodo del paso de voltaje despolarizante a -15 mV registradas de 2 celulas diferentes en dos concentraciones del compuesto del ejemplo de referencia RE3. Los datos se ajustan por una sola curva exponencial (lmeas negras) usando el procedimiento de ajuste de Prism version 5 (Graphpad Software Inc).
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Figura 2
Registros hechos a partir de interneuronas de "disparo rapido" identificadas en la corteza somatosensorial del raton. Parte experimental
La invencion se ilustra por los compuestos descritos a continuacion.
Equipamiento analftico
Los materiales de partida, reactivos y disolventes se obtuvieron a partir de proveedores comerciales y se usaron sin purificacion adicional salvo que se exponga otra cosa. Salvo que se exponga otra cosa, todos los compuestos con centros quirales son racemicos. Cuando se describe que las reacciones se han llevado a cabo de una forma similar a reacciones descritas de forma mas completa anteriormente, las condiciones de reaccion generales usadas eran esencialmente las mismas. Las condiciones de tratamiento usadas eran de los tipos convencionales en la tecnica, pero se pueden haber adaptado de una reaccion a otra. El material de partida puede no haberse preparado necesariamente a partir del lote al que se hace referencia. Los compuestos sintetizados, pueden tener diferentes purezas en el intervalo de por ejemplo 85% a 98%. Los calculos del numero de moles y rendimiento en algunos casos se ajustan para esto.
Los espectros de resonancia magnetica nuclear (RMN) (1H; 13C y 19F) se registraron en instrumentos Varian a 300, 400, 500 o 600 MHz, o en instrumentos Bruker a 400 MHz. Los desplazamientos qmmicos se dan en ppm (6) usando la lmea del disolvente residual como la referencia interna. Los patrones de desdoblamientos se designan como s (singlete), s an. (singlete ancho), d (doblete), t (triplete), q (cuartete), dd (doblete de dobletes), dt (doblete de tripletes) y m (multiplete). Los espectros de RMN se registraron a temperaturas en el intervalo de 25 a 30°C.
Los espectros de masas por infusion directa (MS) se realizaron en un espectrometro de masas, que trabajaba en modo de ionizacion ES (+) y ES (-) acoplado con un instrumento de HPLC Agilent 1100 Series [Los analisis por LC/MS-ESI(+) se realizaron en un Supelcosil ABZ+Plus (33x4,6 mm, 3 pm) (fase movil: de 10% de [CH3CN+TFA al 0,05%] a 90% de [CH3CN+TFA al 0,05%] y 10% [agua] en 2,2 min, en estas condiciones durante 2,8 min. T= 45 °C, flujo = 0,9 ml/min)]. El uso de esta metodologfa se indica por "MS_2 (ESI)" en la caracterizacion analftica de los compuestos descritos.
Control de calidad: LC/MS-ES+ condiciones acidas, se realizo en una columna Zorbax SB C18 (1,8 pm 3 x 50 mm). Fase movil: A: (H2O + TFA al 0.05% en vol.) / B: (CH3CN + TFA al 0.05% en vol). Gradiente: t = 0 min 0% (B), de 0 a 95% (B) en 2,5 min, 95% (B) durante 0,2 min, de 95 a 100% (B) en 0,2 min, 100% (B) durante 0,4 min, de 100% a 0% (B) en 0,1 min. Tiempo de detencion 4 min. T de la columna = 60°C. Caudal: 1,5 ml/min. Intervalo de masas ES+: (100-1000 uma, F=60). Longitudes de onda de deteccion UV: DAD 1A = 220,8, DAD 1B = 254,8. El uso de esta metodologfa se indica por "LC/MS: QC_3_MIN" en la caracterizacion analftica de los compuestos descritos.
Cromatograffa ftquida de ultra-alto rendimiento con un gradiente acido:
Corriente ionica total (TIC) y los barridos cromatograficos de DAD UV junto con los espectros de MS y UV asociados con los picos, se tomaron en un sistema de UPLC/MS AcquityTM equipado con un detector PDA 2996 y acoplado con un espectrometro de masas Waters Micromass ZQTM que trabaja en el modo de ionizacion por electropulverizacion positivo o negativo [LC/MS - ES (+ o -): los analisis se llevaron a cabo usando una columna AcquityTM UPLC BEH C18 (50 x 2,1 mm, tamano de parffculas 1,7 pm). Metodo general: Fase movil: A: (agua+ HCO2H al 0,1%) / B: (CH3CN + HCO2H al 0,06%). Gradiente: t = 0 min 3% (B), t = 0,05 min 6% (B), t = 0,57 min 70% (B), t = 1,06 min 99% (B) permaneciendo durante 0,389 min, t = 1,45 min 3% (B), tiempo de detencion 1,5 min. T de la columna = 40°C. Caudal = 1,0 ml/min. Intervalo de masas: ES (+): 100-1000 uma. ES (-): 100-800 uma. Intervalo de deteccion UV: 210-350 nm. El uso de esta metodologfa se indica por "UPLC" en la caracterizacion analftica de los compuestos descritos.
Cromatograffa ftquida de ultra-alto rendimiento con un gradiente basico
La corriente ionica total (TIC) y las senales cromatograficas de DAD UV junto con los espectros de MS y UV asociados con los picos, se tomaron en un sistema de UPLC/MS AcquityTM equipado con un detector PDA y acoplado con un espectrometro de masas Waters SQD que trabaja en el modo de ionizacion por electropulverizacion alternado positivo y negativo [LC/MS - ES +/-: los analisis se llevaron a cabo usando una columna AcquityTM UPLC BEH C18 (50 x 2,1 mm, tamano de parffculas 1,7 pm). Fase movil: A: (solucion acuosa de NH4HCO3 10 mM (ajustada a pH 10 con amoniaco)) / B: CH3CN. Gradiente: t = 0 min 3% (B), t = 1,06 min 99% (B) permaneciendo durante 0,39 min, t = 1,46 min 3% (B), tiempo de detencion 1,5 min. T de la columna = 40 °C. Caudal = 1,0 ml/min. Intervalo de masas: ES (+): 100-1000 uma. ES (-): 100-1000 uma. Intervalo de deteccion UV: 220-350 nm. El uso de esta metodologfa se indica por "UPLC_B" en la caracterizacion analftica de los compuestos descritos.
En una serie de preparaciones, la purificacion se llevo a cabo usando sistemas de cromatograffa ultrarrapida automatica de Biotage (SP1 y SP4) o Flash Master Personal.
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Las cromatograffas ultrarrapidas se llevaron a cabo en gel de s^lice de n° de malla 230-400 (suministrado por Merck AG Darmstadt, Alemania) o en gel de sflice de n° de malla 300-400 (suministrado por Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.), cartuchos preempaquetados Varian Mega Be-Si, cartuchos de sflice preempaquetados Biotage (p. ej. cartucho SNAP Biotage).
Abreviaturas:
AlBN
BuLi
CDCla
CCl4
D2O
DCM
DIAD
DIPEA
DMAP
DMF
DMSO
DMSO-cfe
Et2O
EtOAc
EtOH
h
H2O2
HATU
HCO2H
HCl
K2CO3
KHDMS
KOH
LiAlH4
MeCN /CH3CN
MeOH
MDAP
MOM
MOM-Cl
NaH
Na2SO4
NBS
azoisobutironitrilo
bultil-litio
cloroformo deuterado tetracloruro de carbono agua deuterada diclorometano
azodicarboxilato de diisopropilo
N,N-diisopropiletilamina
4-dimetilaminopiridina
N,N-dimetilformamida
dimetilsulfoxido
dimetilsulfoxido deuterado
eter dietilico
acetato de etilo
etanol
horas
peroxido de hidrogeno
hexafluorofosfato de (O-7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio) acido formico cloruro de hidrogeno carbonato potasico hexametildisilazida potasica hidroxido potasico hidruro de litio y aluminio acetonitrilo metanol
autopurificacion dirigida por masa metoximetilo
eter de clorometilo y metilo hidruro sodico sulfato sodico N-bromosuccinimida carbonato sodico
NaOH NaOMe NH4OH NH4HCO3H 5 RMN Pd/C PE t.a.
sec-BuLi 10 SCRC T3P TBAF TBME TEA 15 TFA THF
hidroxido sodico metoxido sodico hidroxido amonico bicarbonato amonico resonancia magnetica nuclear paladio sobre carbon eter de petroleo temperatura ambiente sec-butil-litio
Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd
anhftdrido propilfosfonico
fluoruro de tetrabutilamonio
eter de ferc-butilo y metilo
trietilamina
acido trifluoroacetico
tetrahidrofurano
Compuesto intermedio 1 1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}benceno
o
o O
20 A una solucion de 3-(metiloxi)fenol (10,38 g, 84 mmol) en tetrahidrofurano (100 ml, SCRC) se anadio NaH (60% en peso, 1,824 g, 76 mmol, Aldrich) en porciones enfriando con hielo. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y despues se anadio eter de bromometilo y metilo (9,5 g, 76 mmol, SCRC). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y se anadio agua (50 ml). La mezcla de reaccion se extrajo con acetato de etilo (2 veces 50 ml, SCRC) y las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato 25 sodico, se evaporaron. El residuo se purifico por cromatograffa en gel de sflice (EtOAc: PE = 1: 100) para dar el compuesto del tftulo (10,2 g) en forma de un ftquido incoloro.
Compuesto intermedio 2
2-yodo-1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}benceno
imagen23
30 A una solucion de 1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}benceno (compuesto intermedio 1, 10 g, 59,5 mmol) en tetrahidrofurano (100 ml, SCRC) previamente enfriada a -78 °C se anadio gota a gota BuLi (2,5 M en THF, 28,5 ml, 71,3 mmol, SCRC), manteniendo la temperatura interior a menos de -70°C. Despues de completarse la adicion, la mezcla se agito a -70°C durante 2 horas y se anadio gota a gota una solucion de yodo (15,09 g, 59,5 mmol, SCRC) en THF (50 ml, SCRC). La mezcla resultante se agito durante 2 horas a temperatura ambiente y se inactivo con 35 solucion acuosa saturada de cloruro amonico (100 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 veces 300 ml, SCRC) y las capas organicas combinadas se secaron, se evaporaron y se purificaron por cromatograffa en gel de sflice con, como eluyentes, EtOAc:PE (1/100) para dar el compuesto del tftulo (16,2 g) en forma de un ftquido amarillo.
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Compuesto intermedio 3 2-yodo-3-(metiloxi)fenol
imagen24
En una solucion de 2-yodo-1-(metiloxi)-3-{[(metiloxi)metil]oxi}benceno (compuesto intermedio 2, 16,2 g, 55,1 mmol) en diclorometano (100 ml, SCRC) se burbujeo HCl (g) durante 30 min. La TLC mostro que la reaccion se ha^a completado. La mezcla de reaccion se vertio en una solucion acuosa saturada de NaHCO3 (200 ml,) y se extrajo con diclorometano (3 x 200 ml, SCRC). Las capas organicas combinadas se secaron, se evaporaron y se purificaron por cromatograffa en columna en gel de sffice (EtOAc:PE = 1:50) para dar el compuesto del fftulo en forma de un ffquido amarillo (10,3 g).
Compuesto intermedio 4
2-yodo-1-(metiloxi)-3-[(2-metil-2-propen-1-il)oxi]benceno
imagen25
A una solucion de 2-yodo-3-(metiloxi)fenol (compuesto intermedio 3, 10,3 g) en DMF (100 ml, SCRC) se anadio NaH (60% en peso, 1,977 g, 49,4 mmol) en porciones. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y se anadio 3-cloro-2-metil-1-propeno (3,73 g, 41,2 mmol, Aldrich). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y se anadio agua (50 ml). La mezcla de reaccion se extrajo con acetato de etilo (3 veces 200 ml, SCRC) y las capas organicas combinadas se secaron, se evaporaron y se purificaron por cromatograffa en gel de sffice con, como eluyentes, EtOAc/PE (1/30) para dar el compuesto del fftulo en forma de un ffquido amarillo (11,6 g)
RMN 1H (400 MHz, CDCla) 6 ppm: 7,25 (1H, t), 6,52 - 6,47 (2H, m), 5,21 (1H, s), 5,01 (1H, s), 4,49 (2H, s), 3,89 (3H, s), 1,87 (3H, s)
Compuesto intermedio 5
3,3-dimetil-4-(metiloxi)-2,3-dihidro-1-benzofurano
o
\ /\ o-^ '
A una solucion de 2-yodo-1-(metiloxi)-3-[(2-metil-2-propen-1-il)oxi]benceno (compuesto intermedio 4, 6,08 g) en tolueno (50 ml, SCRC) se anadio AIBN (3,61 g, 21,99 mmol, SCRC) y tributilestannano (11,60 g, 40,0 mmol, Aldrich). La mezcla de reaccion se calento a temperatura de reflujo durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Se anadio agua (100 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 veces 200 ml, SCRC). Las capas organicas combinadas se secaron, se evaporaron y se purificaron por cromatograffa en gel de sffice con, como eluyentes, EtOAc/PE (1/50) para dar el compuesto del fftulo en forma de un ffquido amarillo (2,7 g).
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm: 7,05 (1H, t), 6,50 (1H, d), 6,39 (1H, d), 4,14 (2H, s), 3,77 (3H, s), 1,34 (6H, s);
Compuesto intermedio 6
3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ol
imagen26
imagen27
A una solucion de 3,3-dimetil-4-(metiloxi)-2,3-dihidro-1-benzofurano (compuesto intermedio 5, 4,0 g) en diclorometano (100 ml, SCRC) se anadio BBr3 (6,37 ml, 67,3 mmol, SCRC) gota a gota enfriando con hielo. Tras completarse la adicion, la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas a temperatura ambiente y despues se anadio agua (20 ml). La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (3 veces 100 ml, SCRC) y las capas organicas combinadas se secaron, se evaporaron y se purificaron por cromatograffa en gel de sffice con EtOAc/PE (1/20)
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como eluyentes, para dar el compuesto del fitulo (2,8 g)
RMN 1H (400 MHz, CDCls) 5 ppm: 6,98 - 6,94 (1H, t), 6,41 - 6,39 (1H, dd), 6,25 - 6,23 (1H, dd), 4,21 (2H, s), 1,45 (6H, s); MS_2: MS: 163 [M-H]-.
Compuesto intermedio de referencia 7
2,4-bis(metoximetoxi)-1-metil-benceno
imagen28
A una solution de 4-metilbenceno-1,3-diol (4 g, 32,26 mmol) en N,N-Dimetilformamida seca (30 ml) a 0°C se anadio hidruro sodico (dispersion al 60% en aceite mineral) (3,87 g, 96,78 mmol) y la mezcla de reaction se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. Se anadio rapidamente MOM-Cl (7,35 ml, 96,78 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora mientras se dejaba que la temperatura alcanzara la temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con salmuera (40 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3x80 ml). La capa organica se lavo con salmuera helada (2x50 ml), se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 100 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 8:2 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (6,1 g, mmol) en forma de un aceite incoloro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt= 1,811 min; 213 [M+H]+.
Compuesto intermedio de referencia 8
2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]-2-oxo-acetato de etilo
imagen29
A una solucion de 2,4-bis(metoximetoxi)-1-metil-benceno (compuesto intermedio 7, 5,5 g, 25,94 mmol) en tetrahidrofurano seco (50 ml) a temperatura ambiente se anadio BuLi 1,6 M en hexano (19,45 ml, 31,13 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a la misma temperatura. La mezcla se enfrio a -78 °C y se anadio (mediante canula) a una solucion de cloro(oxo)acetato de etilo (4,35 ml, 38,9 mmol) en tetrahidrofurano seco (30 ml) a -78°C. La mezcla de reaccion se agito a -78°C durante 30 minutos. La reaccion se inactivo con agua (20ml), se diluyo con salmuera (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 100 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 8:2 como eluyente dando el compuesto del fitulo (4,65 g) en forma de un aceite amarillo claro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,865 min.
Compuesto intermedio de referencia 9
2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]prop-2-enoato de etilo
imagen30
A una suspension de bromuro de metiltrifenilfosfonio (8,78 g, 24,6 mmol) en tetrahidrofurano seco (50 ml) a 0°C se anadio lentamente una solucion de KHMDS 0,5 M en tolueno (44,22 ml, 22,11 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a 0°C y durante 45 minutos a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se enfrio a 0°C
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y se anadio lentamente a una solucion de 2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]-2-oxo-acetato de etilo (compuesto intermedio 8, 4,6 g, 14,74 mmol) en tetrahidrofurano seco (25 ml) a 0°C y la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas a 0°C. La reaccion se inactivo con agua (50 ml), se diluyo con salmuera (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 100 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 8:2 como eluyentes dando el compuesto del tftulo (3,8 g) en forma de un aceite incoloro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,930 min.
Compuesto intermedio de referencia 10
1-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo
imagen31
A una solucion de yoduro de trimetilsulfoxonio (4,4 g, 20 mmol) en dimetilsulfoxido seco (30 ml) se anadio hidruro sodico (dispersion al 60% en aceite mineral) (0,720 g, 18 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. Se anadio lentamente una solucion de 2-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metilfenil]prop-2-enoato de etilo (compuesto intermedio 9, 3,5 g, 11,29 mmol) en dimetilsulfoxido seco (15 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con solucion acuosa saturada de cloruro amonico (10 ml), se diluyo con agua (40 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x100 ml). La capa organica se lavo con agua (2x50 ml), se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 100 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 8:2 como eluyentes dando el compuesto del tftulo (3,1 g) en forma de un aceite incoloro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,028 min.
Compuesto intermedio de referencia 11 2-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-3-(metoximetoxi)-6-metil-fenol
imagen32
A una solucion de 1-[2,6-bis(metoximetoxi)-3-metil-fenil]ciclopropanocarboxilato de etilo (compuesto intermedio 10, 300 mg, 0,93 mmol) en etanol (10 ml) se anadio HCl 6 N en agua (0,4 ml, 2,4 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante la noche a 50°C. Los disolventes combinados se separaron a presion reducida. El residuo se volvio a suspender en tolueno seco (10 ml) y el disolvente se evaporo. El residuo obtenido se disolvio en tetrahidrofurano seco (10 ml), la mezcla se enfrio a 0°C y se anadio NaH (dispersion al 60% en aceite mineral) (80 mg, 2 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a la misma temperatura. Despues se anadio MOM-Cl (0,083 ml, 1,1 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora a 0°C. Se anadio LiAlH4 (1 M en THF, 1,2 ml, 1,2 mmol) y la mezcla de reaccion se agito mas durante 1 hora a la misma temperatura. La reaccion se inactivo con solucion acuosa saturada de cloruro amonico (10 ml), se diluyo con agua (20 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x50 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron y el residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 25 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 7:3 como eluyentes dando el compuesto del tftulo (70 mg) en forma de un solido blanco.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,690 min; 239 [M+H]+.
4-(metoximetoxi)-7-metil-espiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]
imagen33
A una solution de 2-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-3-(metoximetoxi)-6-metil-fenol (compuesto intermedio 11, 65 mg, 5 0,27 mmol) en tetrahidrofurano seco (5 ml) se anadio trifenilfosfina (84 mg, 0,32 mmol) y la mezcla de reaction se
agito hasta disolucion completa de la misma. Despues se anadio gota a gota DIAD (0,056 ml, 0,285 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. El disolvente se separo a presion reducida y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 8:2 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (40 mg) en 10 forma de un aceite amarillo claro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,024 min; 221 [M+H]+. Compuesto intermedio de referencia 13 7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-ol
imagen34
15 A una solucion de 4-(metoximetoxi)-7-metil-espiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano] (compuesto intermedio 12, 38 mg, 0,17 mmol) en etanol (5 ml), se anadio HCl 6 N en agua (0,1 ml, 0,6 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 4 dias a temperatura ambiente. Los disolventes combinados se separaron a presion reducida y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 7:3 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (24 mg) en forma de un 20 solido naranja claro.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 9,02 (1H, s), 6,65 (1H, d), 6,06 (1H, d), 4,36 (2H, s), 2,02 (3H, s), 1,40-1,44 (2H, m), 0,77-0,82 (2H, m). rOeSY (400 MHz, DMSo-d6): correlation NOE entre el proton a 6,65 ppm y los protones (CH3) a 2,02 ppm, correlacion NOE entre el proton a 9,02 ppm y el proton a 6,06 ppm. LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,647 min; 177 [M+H]+.
25 Compuesto intermedio de referencia 14
2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-5-nitro-piridina
imagen35
A una solucion de 7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13, 176 mg, 1 mmol) en DMF seca (4 ml) se anadieron carbonato potasico (207 mg, 1,5 mmol) y despues 2-cloro-5-nitropiridina (158 mg, 30 1 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas a 80°C. Despues de enfriar, la mezcla de reaccion se
inactivo con agua (2 ml), se diluyo con salmuera (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x20 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo dando el compuesto del fitulo (270 mg) en forma de un solido naranja que se uso en la siguiente etapa como material bruto sin mas purification.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,138 min; 299 [M+H]+.
35
6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3-amina
imagen36
A una solucion de 2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-cidopropano]-4-il)oxi-5-nitro-piridina (compuesto intermedio 5 14, 265 mg) en tetrahidrofurano (5 ml)/agua (2,5 ml) se anadieron hierro (245 mg, 4,45 mmol) y despues cloruro
amonico (238 mg, 4,45 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante la noche a temperatura ambiente. El catalizador se separo por filtracion y el residuo se diluyo con solucion acuosa saturada de NaHCO3 (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3x10 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 8:2 a ciclohexano/acetato de etilo 1:1 como eluyentes dando el compuesto del
fitulo (203 mg) en forma de un solido amarillo claro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,740 min; 269 [M+H]+.
Compuesto intermedio de referencia 16
N-[(1R)-1-[[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]carbamoil]propil]carbamato de terc- 15 butilo
imagen37
A una solucion de acido (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)butanoico (36 mg, 0,18 mmol) en DMF seca (1 ml) se anadieron DIPEA (52 pl, 0,3 mmol) y despues HATU (65 mg, 0,17 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a t.a. Despues se anadio 6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3- 20 amina (compuesto intermedio 15, 40 mg, 0,15 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 4 horas a temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con agua (2 ml), se diluyo con salmuera (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x10 ml). La capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 90:10 a ciclohexano/acetato de etilo 60:40 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (57 mg) en forma de un 25 solido blanco.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,190 min; 454 [M+H]+.
Compuesto intermedio 17
(2R)-2-amino-N-[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]butanamida
imagen38
30 A una solucion de N-[(1R)-1-[[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3- piridil]carbamoil]propil]carbamato de terc-butilo (compuesto intermedio 16, 55 mg) en DCM seco (3 ml) a 0°C, se anadio lentamente TFA (1 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 3 horas a la misma temperatura. El disolvente y el exceso de TFA se separaron a presion reducida y el resiudo se diluyo con DCM (10 ml) y se anadio una solucion acuosa saturada de NaHCO3 mientras se dejaba que el pH llegara a ~8. Se separaron dos fases y la 35 capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo dando el compuesto del fitulo (41 mg) en forma de un solido blanco.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,792 min; 354 [M+H]+.
2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-5-nitro-pirimidina
imagen39
A una solution de 7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13, 176 mg, 1 mmol) 5 en acetonitrilo seco (4 ml) se anadieron carbonato potasico (207 mg, 1,5 mmol) y despues 2-cloro-5-nitropirimidina (159 mg, 1 mmol) y la mezcla de reaction se agito durante 24 horas a 80°C. Despues de enfriar, la mezcla de reaction se inactivo con agua (2 ml), se diluyo con salmuera (10 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x20 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo dando el compuesto del fitulo (258 mg) en forma de un solido naranja que se uso en la siguiente etapa como material bruto sin mas purification.
10 LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,007 min; 300 [M+H]+.
Compuesto intermedio 19
2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-amina
imagen40
A una solucion de 2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-5-nitro-pirimidina (compuesto 15 intermedio 18, 255 mg) en tetrahidrofurano (5 ml)/agua (2,5 ml) se anadieron hierro (234 mg, 4,25 mmol) y despues cloruro amonico (227 mg, 4,25 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 48 horas a temperatura ambiente. El catalizador se separo por filtration y el residuo se diluyo con solucion acuosa saturada de NaHCO3 (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3x10 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 20 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 8:2 a ciclohexano/acetato de etilo 4:6 como eluyentes dando el compuesto del
fitulo (52 mg) en forma de un solido naranja claro.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,746 min; 270 [M+H]+.
Compuesto intermedio 20
N-[(1R)-1-[[2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]carbamoil]propil]carbamato de 25 terc-butilo
imagen41
A una solucion de acido (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)butanoico (45 mg, 0,222 mmol) en DMF seca (1 ml) se anadieron DIPEA (87 pl, 0,5 mmol) y despues HATU (80 mg, 0,21 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a t.a. Despues se anadio 2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5- 30 amina (compuesto intermedio 19, 50 mg, 0,185 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 6 horas a temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con agua (2 ml), se diluyo con salmuera (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x10 ml). La capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 90:10 a ciclohexano/acetato de etilo 60:40 como eluyentes dando el compuesto del 35 fitulo (45 mg) en forma de un solido blanco.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,109 min; 455 [M+H]+.
(2R)-2-amino-N-[2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]butanamida
imagen42
A una solucion de N-[(1R)-1-[[2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5- 5 il]carbamoil]propil]carbamato de terc-butilo (compuesto intermedio 20, 42 mg) en DCM seco (3 ml) a 0°C, se anadio lentamente TfA (1 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 3 horas a la misma temperatura. El disolvente y el exceso de TFA se separaron a presion reducida y el residuo se diluyo con DCM (10 ml) y se anadio una solucion acuosa saturada de NaHCO3 mientras se dejaba que el pH llegara a ~8. Se separaron dos fases y la capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo dando el compuesto del trtulo (25 mg) en forma de una goma amarillo claro.
10 LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,688 min; 355 [M+H]+.
Compuesto intermedio 22
(5R)-3-(2-cloropirimidin-5-il)-5-etil-5-metil-imidazolidina-2,4-diona
imagen43
A una solucion de trifosgeno (1,38 g, 4,65 mmol) en acetato de etilo (20 ml) a 0°C se anadio lentamente (20 minutos) 15 una solucion de 2-cloro-5-aminopirimidina (1 g, 7,75 mmol)/DIPEA (8 ml, 4,65 mmol) en acetato de etilo (40 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. Manteniendo la mezcla de reaccion a 0°C, se aplico vado (10 minutos) para separar el exceso de fosgeno. Se anadio una solucion de DMAP (0,945 g, 7,75 mmol) en acetato de etilo/diclorometano 1:1 (8 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 5 minutos a la misma temperatura. Se anadio lentamente una solucion de hidrocloruro de (R)-2-amino-2-metil-butirato de metilo (2,59 g, 20 15,5 mmol) en acetato de etilo (30 ml) (15 minutos) a 0°C y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a la
misma temperatura. La reaccion se inactivo con tampon acuoso (pH 3) mientras se dejaba que el pH llegara a ~5-6 y se separaron dos fases. La capa organica se lavo con tampon acuoso (pH 3) (2x20 ml) y despues salmuera (20 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo dando la urea intermedia en forma de una espuma naranja.
La urea se disolvio en MeOH (20 ml), se anadio NaOMe (0,41 g, 7,75 mmol) y la mezcla de reaccion se agito 25 durante 15 minutos a t.a. La mezcla se inactivo con una solucion acuosa saturada de cloruro amonico (25 ml) y se diluyo con acetato de etilo (50 ml). Se separaron dos fases y la capa organica se lavo con salmuera (2x20 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo. El residuo se trituro con Et2O (10 ml) y se recogio el solido dando el compuesto del trtulo (1,22 g) en forma de un solido de color beige.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,341 min; 255 [M+H]+.
30 Compuesto intermedio 23
3-(2-cloropirimidin-5-il)-5,5-dimetil-imidazolidina-2,4-diona
imagen44
A una solucion de trifosgeno (1,38 g, 4,65 mmol) en acetato de etilo (20 ml) a 0°C se anadio lentamente (20 minutos) una solucion de 2-cloro-5-aminopirimidina (1 g, 7,75 mmol)/DIPEA (8 ml, 4,65 mmol) en acetato de etilo (40 ml) y la 35 mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. Manteniendo la mezcla de reaccion a 0°C, se aplico vado (10 minutos) para separar el exceso de fosgeno. Se anadio una solucion de DMAP (0,945 g, 7,75 mmol) en acetato de etilo/diclorometano 1:1 (8 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 5 minutos a la misma temperatura. Se anadio lentamente (15 minutos) el hidrocloruro del ester metflico de la 2,2-dimetilglicina (2,37 g, 15,5 mmol) en acetato de etilo (30 ml) a 0°C y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a la misma 40 temperatura. La reaccion se inactivo con tampon acuoso (pH 3) mientras se dejaba que el pH llegara a ~5-6 y se separaron dos fases. La capa organica se lavo con tampon acuoso (pH 3) (2x20 ml) y despues salmuera (20 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo dando la urea intermedia en forma de una espuma naranja.
La urea se disolvio en MeOH (20 ml), se anadio NaOMe (0,41 g, 7,75 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a t.a. La mezcla se inactivo con una solucion acuosa saturada de cloruro amonico (25 ml) y se diluyo con acetato de etilo (50 ml). Se separaron dos fases y la capa organica se lavo con salmuera (2x20 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo. El residuo se trituro con Et2O (10 ml) y se recogio el solido dando el 5 compuesto del tftulo (1,08 g) en forma de un solido naranja.
LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,062 min; 241 [M+H]+.
Compuesto intermedio 24
[(3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi][tris(1-metiletil)]silano
imagen45
10 Se disolvio 3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ol (compuesto intermedio 6, 3,6 g, 21,91 mmol) en THF anhidro (20,0 ml) y la solucion incolora se enfrio a 0°C agitando en atmosfera de nitrogeno. Se anadio una solucion de n- BuLi 2 M en ciclohexano (13,2 ml, 26,4 mmol) y la solucion amarilla resultante se agito a 0°C durante 10 min. Se anadio gota a gota triflato de triisopropilsililo (7,7 ml, 28,5 mmol): la solucion se decoloro casi completamente. Esta se dejo calentar a temperatura ambiente y se agito durante la noche. Se le anadio agua (1,0 ml) y los compuestos 15 volatiles se evaporaron a presion reducida. El residuo se disolvio en acetato de etilo y se lavo con salmuera tres veces. La capa organica se seco sobre Na2SO4 anhidro y se evaporo hasta sequedad para dar un aceite amarillo que se volvio a disolver en TBME y se lavo dos veces con agua. La solucion organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad para dar el compuesto del tftulo (7,4 g) en forma de un aceite amarillo.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 6,94 (1H, t), 6,31-6,36 (1H, m), 6,29 (1H, d), 4,14 (2H, s), 1,28-1,40 (9H, m), 20 1,09 (18 H, d).
Compuesto intermedio 25
[(7-bromo-3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi][tris(1-metiletil)]silano
imagen46
Bf
Se disolvio [(3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi][tris(1-metiletil)]silano (compuesto intermedio 24, 7,4g, 25 23,19 mmol) en THF (70,0 ml). Se anadio N-bromosuccinimida (4,2 g, 23,88 mmol) disolviendo en unos minutos.
Esta mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 h. Se anadio mas NBS (0,64 g, 3,48 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante una hora mas. Se anadio CCl4 (50 ml) a la mezcla de reaccion y la solucion se evaporo hasta sequedad. El residuo se volvio a suspender en CCU y se agito a temperatura ambiente durante 15 min. El solido blanco se separo por filtracion y la torta humeda se lavo con mas CCU. El CCU se 30 intercambio por acetato de etilo y la solucion organica se lavo tres veces con solucion acuosa de 2NaHCO3 al 2,5% en p/p y finalmente con agua. La solucion organica se seco sobre Na2SO4 anhidro y se evaporo hasta sequedad para dar el compuesto del tftulo (8,6 g) en forma de un aceite marron.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 7,14 (1 H, d), 6,29 (1H, d), 4,24 (2H, s), 1,27-1,41 (9H, m), 1,08 (18H, d). Compuesto intermedio 26
35 tris(1-metiletil)[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]silano
imagen47
El [(7-bromo-3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi][tris(1-metiletil)]silano (compuesto intermedio 25, 7,1 g,
10
15
20
25
30
35
17,72 mmol) se disolvio en THF anhidro (72 ml) y se enfrio a 0°C. Se anadio tetrametiletilendiamina (8,0 ml, 53,16 mmol) y la solucion amarilla se agito a 0°C durante 10 min. Se anadio gota a gota una solucion de butil-litio 1,6 M en hexano (22,5 ml, 35,4 mmol) a lo largo de 10 minutos y despues se agito a 0°C durante 15 min. Se anadio gota a gota yoduro de metilo (11 ml, 177,2 mmol) a lo largo de 6 min. El solido blanco se separo por filtracion y la torta humeda se lavo con tHf. Las capas organicas combinadas se evaporaron hasta sequedad. El residuo se disolvio en acetato de etilo y se lavo dos veces con solucion acuosa de NaHCO3 y una vez con agua. La solucion organica se seco sobre Na2SO4 anhidro y se evaporo hasta sequedad para dar un aceite marron. El residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida en gel de sflice usando de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 1:1 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (3,6 g) en forma de un aceite marron.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 6,76 (1H, d), 6,20 (1H, d), 4,14 (2H, s), 2,02 (3H, s), 1,28-1,39 (9H, m), 1,09 (18H, d).
Compuesto intermedio 27 3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ol
o
imagen48
Se disolvio tris(1-metiletil)[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]silano (compuesto intermedio 26, 3,6 g, 10,84 mmol) en THF (36 ml) para obtener una solucion amarillo oscuro. Se anadio TBAF (8,5 g, 32,5 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante la noche a temperatura ambiente. El disolvente se elimino a presion reducida. El residuo se disolvio en acetato de etilo y se lavo con solucion acuosa de HCl, despues solucion acuosa de NaHCO3 y finalmente salmuera. La solucion organica se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida en gel de sflice usando de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 95:5 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (1,69 g) en forma de un aceite incoloro.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,06 (1H, s), 6,65-6,69 (1H, m), 6,19 (1H, d), 4,11 (2H, s), 1,99 (3H, s), 1,33 (6H, s).
Compuesto intermedio 28
5-nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]piridina
imagen49
Se disolvio 3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ol (compuesto intermedio 184, 0,9g, 5,0mmol) en CH3CN (5 ml) en presencia de 2-cloro-5-nitropiridina (790 mg, 5,0 mmol) y K2CO3 (1,72 g, 12,5 mmol) y la suspension resultante se calento a 60°C durante 1,5 h. La mezcla despues se enfrio a temperatura ambiente y se diluyo con agua y acetato de etilo. Se separaron dos fases y la capa organica se lavo con salmuera, despues se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad, el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida en gel de sflice usando de ciclohexano a ciclohexano/acetato de etilo 90:10 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (0,92 g) en forma de un solido amarillento.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 9,04 (1H, d), 8,61 (1H, dd), 7,24 (1H, d), 7,02 (1H, d), 6,54 (1H, d), 4,21 (2H, s), 2,14 (3H, s), 1,21 (6H, s). RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 166,6, 158,7, 147,2, 144,8, 140,4, 135,8, 130,2, 126,1, 116,7, 114,5, 111,0, 83,6, 42,2, 26,0, 14,4.
Compuesto intermedio 29
6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-3-piridinamina
imagen50
Se disolvio 5-nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]piridina (compuesto intermedio 28, 920 mg, 3,0 mmol) en EtOH (13,5 ml) y se agito en atmosfera de hidrogeno (2 bar) en presencia de Pd/C al 10% en p/p (46 mg, 5% p/p) a temperatura ambiente durante 30 minutos. El catalizador se separo por filtracion, se lavo con THF y la
5
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solution resultante se evaporo hasta sequedad para dar un solido naranja. El producto bruto se cristalizo en MeOH para dar el compuesto del fitulo (565 mg) en forma de un solido de color beige.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 7,51 (1H, d), 7,05 (1H, dd), 6,85 (1H, d), 6,69 (1H, d), 6,21 (1H, d), 5,04 (2H, s ancho), 4,19 (2H, s), 2,08 (3H, s), 1,30 (6H, s). RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 158,3, 154,2, 150,7, 141,5,
132,2, 129,6, 125,3, 124,7, 113,9, 112,2, 111,8, 83,7, 42,2, 26,0, 14,4.
Compuesto intermedio 30
{(1R)-1-[({6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-3-piridinil}amino)carbonil]propil}carbamato de 1,1- dimetiletilo
imagen51
Se suspendio 6-{[3,3,7-trimetil-6-(trifluorometoxi)-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il]oxi}piridin-3-amina (compuesto intermedio 29, 405 mg, 1,27 mmol) en acetato de etilo (4 ml). Se anadio trietilamina (0,44 ml, 3,175 mmol) seguido de la adicion de acido (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)butanoico (258 mg, 1,27 mmol). La suspension resultante se enfrio a 0°C y se anadio gota a gota solucion de T3P al 50% en p/p en acetato de etilo (1,4 mmol). La mezcla de reaction se agito a 0°C durante 1 hora y despues se calento a temperatura ambiente y se agito durante una hora mas. Se anadio una solucion acuosa saturada de Na2CO3 y la mezcla se agito durante 10 min. Se separaron dos fases y la capa organica se lavo con agua y salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad. El residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida en gel de sflice usando de ciclohexano/acetato de etilo 80:20 a ciclohexano/acetato de etilo 70:30 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (0,50 g) en forma de una espuma blanca.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 10,08 y 10,03 (1H, s ancho), 8,30 (1H, d), 8,03 (1H, dd), 7,00 (1H, d), 6,956,90 (2H, m), 6,36 (1H, d), 4,17 (2H, s), 3,98-3,92 (1H, m), 2,10 (3H, s), 1,73-1,52 (2H, m), 1,36 and 1,29 (9H, s ancho), 1,23 (6H, s), 0,88 (3H, t). RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 171,4, 159,0, 158,5, 155,5, 148,9, 138,1, 131,4, 129,8, 125,8, 115,1, 113,9, 110,7, 83,6, 78,0, 56,3, 42,2, 28,9, 26,0, 25,0, 20,7, 14,4, 14,1, 10,5.
Compuesto intermedio 31
(2R)-2-amino-N-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-3-piridinil}butanamida
imagen52
Se disolvio el {(1R)-1-[({6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-3-piridinil}amino)carbonil]propil}- carbamato de 1,1-dimetiletilo (compuesto intermedio 30, 480 mg, 1,05 mmol) en acetato de /sopropilo (5 ml) y se anadio HCl 5-6 N en isopropanol (1 ml, 5,25 mmol). La solucion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y despues se calento a ~ 50-55°C hasta conversion completa. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se trato con solucion acuosa saturada de NaHCO3. Se separaron dos fases y la capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad. El residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida en gel de sflice usando diclorometano/metanol 95:5 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (0,31 g) en forma de una espuma amarillenta.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 8,36 (1H, d), 8,11 (1H, dd), 6,96-6,92 (2H, m), 6,38 (1H, d), 4,19 (2H, s), 3,23 (1H, dd), 2,11 (3H, s), 1,72-1,61 (1H, m), 1,53-1,43 (1H, m), 1,25 (6H, s), 0,90 (3H, t). RMN 13C (200 MHz, DMSO- d6): 5 ppm 174,5, 159,0, 158,5, 148,9, 138,2, 131,5, 131,4, 129,8, 125,7, 115,1, 113,9, 110,6, 83,6, 56,7, 42,2, 28,0, 26,0, 14,4, 10,2.
Compuesto intermedio 32
5-nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]pirimidina
imagen53
Se disolvio 3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ol (compuesto intermedio 27, 178 mg, 1,0 mmol) y 2-cloro-5- nitropirimidina (191,5 mg, 1,2 mmol) en CH3CN (3,0 ml) y se anadio K2CO3 (345,5 mg, 2,5 mmol). La solution resultante se calento a 40°C y se agito durante 1 hora. La mezcla de reaction despues se diluyo con agua (50 ml) y acetato de etilo (50 ml), la fase organica se recogio, se lavo con salmuera (50 ml) y se seco sobre Na2SO4. El 5 residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando ciclohexano/acetato de etilo 97:3 como eluyentes dando el compuesto del tftulo (243 mg).
Compuesto intermedio 33
2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-5-pirimidinamina
imagen54
10 Se disolvio 5-nitro-2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]pirimidina (compuesto intermedio 32, 243 mg, 0,81 mmol) en THF (4 ml) y se anadio paladio sobre carbon (5% en moles, 85 mg). La mezcla de reaccion se agito en atmosfera de hidrogeno (3 bar) durante 1 hora a temperatura ambiente. El catalizador se filtro sobre una almohadilla de Celite, se lavo con tHf y la solucion resultante se concentro a vacfo. El residuo se diluyo con acetato de etilo y agua, se recogio la fase organica, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo para dar el compuesto del tftulo 15 (220 mg) en forma de un aceite incoloro. El producto bruto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
MS_2 (ESI): 272 [M+H]+
Compuesto intermedio 34
{(1R)-1-[({2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-5-pirimidinil}amino)carbonil]propil}carbamato de 1,1- dimetiletilo
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imagen55
Se disolvio 2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-5-pirimidinamina (compuesto intermedio 33, 220 mg, 0,81 mmol) en acetato de etilo (10 ml) y se anadio acido (2R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)butanoico (181,1 mg, 0,89 mmol) seguido de la adicion de Et3N (0,35 ml, 2,02 mmol). La solucion resultante se enfrio a 5°C y se anadio gota a gota una solucion de T3P al 50% en p/p en acetato de etilo (0,53 ml, 0,89 mmol) en 15 min. La mezcla 25 de reaccion se agito durante 30 min a 5°C. La reaccion se inactivo con agua (50 ml) y acetato de etilo (50 ml), se separaron dos fases y la capa organica se seco sobre Na2SO4 y se concentro a vacfo. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando ciclohexano/acetato de etilo 60:40 como eluyente dando el compuesto del tftulo (213 mg).
MS_2 (ESI): 457 [M+H]+.
30 Compuesto intermedio de referencia 35
acido (2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-4-il)boronico
imagen56
Se disolvio 2,2-difluoro-1,3-benzodioxol (960 mg, 6,1 mmol) en THF (8 ml) y ciclohexano (4 ml) y la solucion resultante se enfrio a -78°C. Se anadio gota a gota solucion de sec-BuLi 1,4 M en ciclohexano (4,3 ml, 6,1 mmol) y la
35 mezcla de reaccion se agito durante 1,5 horas a -78°C. Se anadio trimetilborato (694 mg, 6,75 mmol) y la mezcla se dejo calentar lentamente a -30°C. La mezcla de reaccion se inactivo con una solucion de HCl 2 N y se diluyo con acetato de etilo. Se separaron dos fases y la capa organica se lavo dos veces con salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad dando el compuesto del tftulo en forma de un aceite amarillo que se uso en la siguiente etapa sin mas purificacion.
40 RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6 + D2O): 5 ppm 7,39 (1H, dd), 7,34 (1H, dd), 7,14 (t, 1H, J=7,90 Hz). RMN 19F (376 MHz, DMSO-d6 + D2O): 5 ppm -48,92. RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6 + D2O): 5 ppm 147,3, 142,8, 131,6 (t, J=250,7
5
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35
Hz), 130,1, 124,3, 112,0 Compuesto intermedio 36
acido (2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)boronico
imagen57
Se disolvio acido (2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-4-il)boronico (compuesto intermedio 35, material bruto) en THF (20 ml) y la solucion resultante se enfrio a -78°C. Se anadio gota a gota solucion de sec-BuLi 1,4 M en ciclohexano (17,4 ml, 24,36 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 1,5 horas a -78°C. Despues se anadio yoduro de metilo (4,6 ml, 73 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas mientras se dejaba que la temperatura alcanzara la temperatura ambiente. La reaccion se inactivo por adicion de una solucion acuosa de HCl 2N y se diluyo con acetato de etilo. Se recogio la capa organica y despues se lavo dos veces con salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad. La cristalizacion en n-heptano dio el compuesto del tftulo (150 mg) en forma de solido blanco.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-da + D2O): 6 ppm 7,30 (1H, d), 6,68 (1H, d), 2,25 (s, 3H). RMN 19F (376 MHz, DMSO-da + D2O): 6 ppm -48,55. RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6 + D2O): 6 ppm 152,5, 147,1, 141,5, 131,6 (t, J=250,0 Hz), 129,9, 125,8, 122,7, 110,1, 14,6.
Compuesto intermedio 37
2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-ol
imagen58
Se disolvio acido (2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)boronico (compuesto intermedio 36, 150 mg, 1,28 mmol) en THF (1,5 ml) y se anadieron una solucion acuosa de H2O2 al 30% en p/p (2,56 mmol) y NaOH (51 mg, 1,28 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 2 dfas a temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con una solucion acuosa de HCl 2 N y se diluyo con acetato de etilo. Se separaron dos fases y la capa organica se lavo dos veces con salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad, dando el compuesto del tftulo (140 mg) como aceite amarillo.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 6 ppm 10,31 (1H, s), 6,83 (1H, d), 6,63 (1H, d), 2,17 (3H, s). RMN 19F (376 MHz, DMSO-d6): 6 ppm -48,68. RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6): 6 ppm 142,3, 139,1, 131,4 (t, J=251,9 Hz), 129,9, 125,6, 112,8, 110,0, 13,2.
Compuesto intermedio 38
Acetato de 2-bromo-3-hidroxifenilo
imagen59
A una solucion de 2-bromo-1,3-bencenodiol (3,028 g, 16,02 mmol) en diclorometano (70 ml), se anadieron TEA (3,35 ml, 24,03 mmol) y anhfdrido acetico (1,512 ml, 16,02 mmol) con agitacion. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante la noche. La reaccion se inactivo con solucion saturada de cloruro amonico (100 ml), y se extrajo con acetato de etilo (3 veces 70 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron para dar el compuesto del tftulo en forma de un aceite negro que se uso directamente en la siguiente etapa. (3,028 g)
UPLC_B: 0,41 min, 229 [M-H]-
5
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Compuesto intermedio 39
Acetato de 2-bromo-3-[(2-metil-2-propen-1-il)oxi]fenilo
o
imagen60
A una solucion de acetato de 2-bromo-3-hidroxifenilo (compuesto intermedio 38, 3028 mg) en acetonitrilo (60 ml) se anadieron carbonato potasico (3623 mg, 26,2 mmol) y 3-bromo-2-metil-1-propeno (2123 mg, 15,73 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se lavo con agua (3 veces 60 ml). La fase organica se separo, se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando una columna SNAP de 100 g, y ciclohexano/acetato de etilo de 100/0 a 80/20 como eluyente, para dar el compuesto del tftulo en forma de un aceite incoloro (2,324 g).
RMN 1H (400 MHz, CDCls): 6 ppm 7,27 (1H, t), 6,68 (1H, dd), 5,19 (1H, s), 5,04 (1H, s), 4,53 (2H, s), 2,38 (3H, s), 1,88 (3H, s); UPLC: 0,81 min, 285 [M+H]+
Compuesto intermedio 40
Acetato de 3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ilo
o,
''X
/
o
■\ X
O—/
A una solucion de acetato de 2-bromo-3-[(2-metil-2-propen-1-il)oxi]fenilo (compuesto intermedio 39, 2,324 g) en tolueno (20 ml) se anadieron AIBN (1,606 g, 9,78 mmol) y tributilestannano (4,73 g, 16,30 mmol). La mezcla de reaccion se agito y se calento a 100°C durante 2 horas, y despues se dejo a temperatura ambiente durante 4 horas. La reaccion se inactivo con agua (60 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 veces 50 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando una columna SNAP de 100 g y ciclohexano/acetato de etilo de 100/0 a 70/30 como eluyente, para dar el compuesto del tftulo en forma de un aceite incoloro (1,290 g).
RMN 1H (400 MHz, CDCla): 6 ppm 7,13 (1H, t), 6,68 (1H, d), 6,59 (1H, d), 4,22 (2H, s), 2,33 (3H, s), 1,39 (6H, s). UPLC: 0,72 min, 207 [M+H]+
Compuesto intermedio 6
3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-ol
imagen61
imagen62
Esta es una ruta sintetica alternativa a la descrita previamente para el compuesto intermedio 6.
A una solucion de acetato de 3,3-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il (compuesto intermedio 40, 1,290 g) en metanol (50 ml) se anadio una solucion de hidroxido sodico (0,375 g, 9,38 mmol) en agua (25,00 ml). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla despues se acidifico con HCl al 5% hasta pH=5 y se extrajo con acetato de etilo (3 veces 50 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre sulfato sodico, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando una columna SNAP de 25 g y ciclohexano/acetato de etilo de 100/0 a 80/20 como eluyente, para dar el compuesto del tftulo en forma de un solido blanco (855 mg).
UPLC-MS: 0,65 min, 165 [M+H]+
imagen63
A una solucion de 7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13, 18 mg, 0,1 mmol) 5 en DMF seca (1 ml) se anadieron carbonato potasico (27,6 mg, 0,2 mmol) y despues (5R)-3-(2-cloropirimidin-5-il)-5- etil-5-metil-imidazolidina-2,4-diona (compuesto intermedio 22, 20 mg, 0,08 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas a 80°C. Despues de enfriar, la mezcla de reaccion se inactivo con agua (1 ml), se diluyo con salmuera (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x10 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una 10 columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 7:3 a ciclohexano/acetato de etilo 3:7 como eluyentes dando el compuesto del fitulo (21 mg) en forma de un solido blanco.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,69-8,74 (3H, m), 6,94 (1H, d), 6,52 (1H, d), 4,44 (2H, s), 2,15 (3H, s), 1,731,83 (1H, m), 1,63-1,73 (1H, m), 1,40 (3H, s), 1,02-1,06 (2H, m), 0,85-0,92 (5H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,007 min; 395 [M+H]+.
15 Los siguientes compuestos se prepararon usando la metodologia anterior, sustituyendo el 7-metilespiro[2H- benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13) por el fenol adecuado. Los productos finales se purificaron por cromatografia ultrarrapida (cartucho de sflice; ciclohexano/EtOAc u otro sistema de disolventes adecuado).
Ej.
Estructura Nombre Fenol RMN 'H LCMS
2
U . /-=\ K. - \\ //— \jp- LM ■J rx y ■ 1 (5R)-5-etil-5-metil-3- {2-[(3,3,7-trimetil-2,3- dihidro-1-benzofurano- 4-il)oxi]-5-pirimidinil}- 2,4-imidazolidinadiona 3,3,7-trimetil-2,3- dihidro-1- benzofurano-4-ol (compuesto intermedio 27) RMN 'H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,70 (1H, s ancho), 8,69 (2H, s), 6,98 (1H, d), 6,55 (1H, d), 4,19 (2H, s), 2,12 (3H, s), 1,90-1,50 (1H, m), 1,38 (3H, s), 1,21 (6H, s), 0,86 (3H, t). UPLC: 1,06 min, 397 [M+H]+
3
>' >/ :Jk) 1 rV>: 1 ■ (5R)-3-{2-[(2,2- difluoro-7-metil-1,3- benzodioxol-4-il)oxi]-5- pirimidinil}-5-etil-5- metil-2,4- imidazolidinadiona 2,2-difluoro-7- metil-1,3- benzodioxol-4-ol (compuesto intermedio 37) RMN ’H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 8,78 (2H, s), 8,74 (1H, s ancho), 7,18-7,13 (2H, m), 2,33 (3H, s), 1,84-1,75 (1H, m), 1,71-1,62 (1H, m), 1,40 (3H, s), 0,88 (3H, t. UPLC: 1,11 min, 407 [M+H]+,
20 Ejemplo 4
5,5-dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona
imagen64
A una solucion de 7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13, 18 mg, 0,1 mmol) en DMF seca (1 ml) se anadieron carbonato potasico (27,6 mg, 0,2 mmol) y despues 3-(2-cloropirimidin-5-il)-5,5- 25 dimetil-imidazolidina-2,4-diona (compuesto intermedio 23, 20 mg, 0,083 mmol) y la mezcla de reaccion se agito
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durante 2 horas a 80°C. Despues de enfriar, la mezcla de reaccion se inactivo con agua (1 ml), se diluyo con salmuera (5 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2x10 ml). La capa organica se seco sobre sulfato sodico, se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 7:3 a ciclohexano/acetato de etilo 3:7 como eluyentes dando el compuesto del trtulo (18 mg) en forma de un solido beige claro.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,74 (1H, s), 8,70 (2H, s), 6,94 (1H, d), 6,52 (1H, d), 4,44 (2H, s), 2,14 (3H, s), 1,42 (6H, s), 1,01-1,06 (2H, m), 0,87-0,92 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 1,946 min; 380 [M+H]+.
Ejemplo 5
(5R)-5-etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona
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A una solucion de (2R)-2-amino-N-[2-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,T-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-
il]butanamida (compuesto intermedio 21, 24 mg, 0,068 mmol) en DCM seco (3 ml) se anadio TEA (0,028 ml, 0,2 mmol) y la mezcla de reaccion se enfrio a 0°C. Se anadio lentamente una solucion de trifosgeno (15 mg, 0,05 mmol) en DCM seco (1,5 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. La reaccion se inactivo con agua (10 ml) y se separaron dos fases. La capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 75:25 a ciclohexano/acetato de etilo 25:75 como eluyentes dando el compuesto del trtulo (11 mg) en forma de un solido blanco.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,75 (1H, s), 8,68 (2H, s), 6,94 (1H, d), 6,52 (1H, d), 4,44 (2H, s), 4,20-4,25 (1H, m), 2,15 (3H, s), 1,77-1,88 (1H, m), 1,66-1,76 (1H, m), 1,02-1,06 (2H, m), 0,96 (3H, t), 0,87-0,92 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt 1,955 min; 381 [M+H]+.
Ejemplo 6
(5R)-5-etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona
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A una solucion de (2R)-2-amino-N-[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]butanamida (compuesto intermedio 17, 40 mg, 0,11 mmol) en DCM seco (5 ml) se anadio TEA (0,042 ml, 0,3 mmol) y la mezcla de reaccion se enfrio a 0°C. Se anadio lentamente una solucion de trifosgeno (23,7 mg, 0,08 mmol) en DCM seco (3 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. La reaccion se inactivo con agua (10 ml) y se separaron dos fases. La capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 75:25 a ciclohexano/acetato de etilo 25:75 como eluyentes dando el compuesto del trtulo (22 mg) en forma de un solido blanco.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm: 8,63 (1H, s), 8,13 (1H, d), 7,84 (1H, dd), 7,07 (1H, d), 6,94 (1H, d), 6,44 (1H, d), 4,46 (2H, s), 4,19-4,24 (1H, m), 2,15 (3H, s), 1,77-1,88 (1H, m), 1,65-1,75 (1H, m), 1,10-1,14 (2H, m), 0,96 (3H, t), 0,87-0,92 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,025 min; 380 [M+H]+.
Ejemplo 7
(5R)-5-etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-3-piridinil}-2,4-imidazolidinadiona
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Se disolvio (2R)-2-amino-W-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-3-piridinil}butanamida (compuesto
intermedio 31, 300 mg, 0,84 mmol) en acetato de etilo (6 ml). Se anadio trietilamina (0,47 ml, 3,36 mmol) y la mezcla de reaccion se enfrio a 0°C. Se anadio lentamente una solucion de trifosgeno (100 mg, 0,34 mmol) en acetato de etilo (6 ml). Al final de la adicion la mezcla se trato con una solucion acuosa saturada de NaHCO3 y se separaron dos fases. La capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se evaporo hasta sequedad para 5 obtener un solido cereo. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando de ciclohexano/acetato de etilo 70:30 a ciclohexano/acetato de etilo 50:50 como eluyentes dando el compuesto del trtulo (166 mg) en forma de una espuma blanca.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 8,61 (1H, s ancho), 8,12 (1H, d), 7,82 (1H, dd), 7,10 (1H, d), 6,98 (1H, d), 6,47 (1H, d) 4,21 (2H, s), 4,18 (1H, s ancho), 2,13 (3H, s), 1,86-176 (1H, m), 1,75-1,64 (1H, m), 1,25 (6H, s), 0,95 (3H, t). 10 RMN 13C (200 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 173,2, 162,5, 158,6, 155,4, 148,2, 145,2, 138,5, 130,0, 126,1, 124,3, 115,7, 114,4, 110,6, 83,6, 57,5, 42,2, 26,0, 24,4, 14,4, 8,8.
Ejemplo 8
(5R)-5-etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinadiona
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15 Se disolvio {(1R)-1 -[({2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofurano-4-il)oxi]-5-pirimidinil}amino)carbonil]propil}- carbamato de 1,1 -dimetiletilo (compuesto intermedio 34, 213 mg, 0,47 mmol) en HCl 5-6 N en isopropanol (1 ml) y la solucion resultante se calento a 35°C durante 30 minutos. La mezcla de reaccion despues se concentro a vado, el residuo se diluyo con acetato de etilo (50 ml) y una solucion acuosa de K2CO3 al 5% (30 ml). Se separaron dos fases y la capa organica se lavo con una solucion acuosa saturada de cloruro amonico (30 ml), se seco sobre 20 Na2SO4 y se concentro a vado. El producto bruto resultante se disolvio en acetato de etilo (10 ml) y se anadio
trietilamina (0,23 ml, 1,64 mmol). La mezcla de reaccion se enfrio a 0-5°C y se anadio gota a gota una solucion de trifosgeno (55 mg, 0,185 mmol) en acetato de etilo (5 ml) en 10 minutos. La reaccion se inactivo con agua (50 ml) y se extrajo con acetato de etilo (50 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre Na2SO4 y se concentro a vado. El residuo se purifico por cromatograffa ultrarrapida en gel de sflice usando ciclohexano/acetato de etilo 25 50:50 como eluyente dando el compuesto del trtulo (161 mg) en forma de un solido blanco.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,72 (1H, s), 8,66 (2H, s), 7,03-6,93 (1H, m), 6,55 (1H, d), 4,18 (2H, s), 2,12 (3H, s), 1,87-1,61 (2H, m), 1,2 (6H, s), 1,15 (1H, t), 0,94 (3H, t). MS_2 (ESI): 383 [M+H].
Ejemplo 9
(5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona
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A una solucion de trifosgeno (30 mg, 0,1 mmol) en DCM seco (1 ml) a 0°C, en atmosfera de nitrogeno, se anadio DIPEA (0,175 ml, 1,0 mmol) seguido de la adicion (adicion lenta) de una solucion de 6-(7-metilespiro[2H- benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3-amina (compuesto intermedio 15, 27 mg, 0,1 mmol) en DCM seco (2ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. Despues de esto, se anadio una 35 solucion de hidrocloruro del (R)-2-amino-2-metil-butirato de metilo (33 mg, 0,2 mmol) en DCM seco (2 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a 0°C. La reaccion se inactivo con una solucion acuosa de HCl 1 M (5 ml), se diluyo con DCM (10 ml) y se separaron dos fases. La capa organica se lavo con salmuera (10 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo dando la urea intermedia en forma de una espuma amarilla.
La urea se disolvio en MeOH (5 ml), se anadio NaOMe (10 mg) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos 40 a temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con una solucion acuosa saturada de cloruro amonico (20 ml) y se diluyo con acetato de etilo (40 ml). Se separaron dos fases y la capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 75:25 a ciclohexano/acetato de etilo 25:75 como eluyentes, dando el compuesto del trtulo (29 mg) en forma de un solido blanco.
45 RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,60 (1H, s), 8,15 (1H, d), 7,85 (1H, dd), 7,06 (1H, d), 6,94 (1H, d), 6,44 (1H, d), 4,46 (2H, s), 2,15 (3H, s), 1,73-1,83 (1H, m), 1,62-1,72 (1H, m), 1,40 (3H, s), 1,10-1,14 (2H, m), 0,84-0,92 (5H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,076 min; 394 [M+H]+.
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A una solucion de trifosgeno (30 mg, 0,1 mmol) en DCM seco (1 ml) a 0°C, en atmosfera de nitrogeno, se anadio DIPEA (0,175 ml, 1,0 mmol) seguido de la adicion (adicion lenta) de una solucion de 6-(7-metilespiro[2H- benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipiridin-3-amina (compuesto intermedio 15, 27 mg, 0,1 mmol) en DCM seco (2 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a la misma temperatura. Despues de esto, se anadio una solucion de hidrocloruro de 2-amino-2-metilpropanoato de metilo (30 mg, 0,2 mmol) en DCM seco (2ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 30 minutos a 0°C. La reaccion se inactivo con una solucion acuosa de HCl 1 M (5 ml), se diluyo con DCM (10 ml) y se separaron dos fases. La capa organica se lavo con salmuera (10 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo dando la urea intermedia en forma de una espuma amarilla.
La urea se disolvio en MeOH (5 ml), se anadio NaOMe (10 mg, 0,19 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 15 minutos a temperatura ambiente. La reaccion se inactivo con una solucion acuosa saturada de cloruro amonico (20 ml) y se diluyo con acetato de etilo (40 ml). Se separaron dos fases y la capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se evaporo y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida (sistema Biotage) en gel de sflice usando una columna SNAP de 10 g y de ciclohexano/acetato de etilo 75:25 a ciclohexano/acetato de etilo 25:75 como eluyentes, dando el compuesto del trtulo (23 mg) en forma de un solido blanco.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,62 (1H, s), 8,14 (1H, d), 7,86 (1H, dd), 7,05 (1H, d), 6,92 (1H, d), 6,43 (1H, d), 4,44 (2H, s), 2,14 (3H, s), 1,40 (6H, s), 1,08-1,13 (2H, m), 0,96 (3H, t), 0,85-0,90 (2H, m). LC/MS: QC_3_MIN: Rt = 2,016 min; 380 [M+H]+.
Los siguientes ejemplos de referencia se prepararon como se describe en el documento WO2012/076877:
Ejemplo de referencia RE1
(5R)-5-etil-3-(6-{[4-metil-3-(metiloxi)fenil]oxi}-3-piridinil)-2,4-imidazolidinadiona
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Ejemplo de referencia RE2
(5R)-5-etil-5-metil-3-(6-{[4-metil-3-(metiloxi)fenil]oxi}-3-piridinil)-2,4-imidazolidinadiona
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Ejemplo de referencia RE3
3-(1,1-dimetiletil)-4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)benzo-nitrilo
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4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-(1-metiletil)benzonitrilo
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Ejemplo de referencia RE5
3-ddopropil-4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)benzomtrilo
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Ejemplo de referencia RE6
4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-(1-metiletil)benzonitrilo
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Ejemplo de referencia RE7
4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-[(trifluorometil)oxi]benzonitrilo
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Ejemplo de referencia RE8
4-({5-[(4R)-4-etil-2,5-dioxo-1-imidazolidinil]-2-piridinil}oxi)-2-[(1-metiletil)oxi]benzonitrilo
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Ejemplo de referencia RE9
(5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(espiro[1-benzofurano-3,1'-ddopropan]-4-iloxi)-3-piridinil]-2,4-imidazolidinadiona
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Ejemplo biologico 1
La capacidad de los compuestos de la invencion para modular los subtipos de canales de potasio regulados por voltaje Kv3.2/3.1, se puede determinar usando el siguiente ensayo. Se pueden usar metodos analogos paa investigar la capacidad de los compuestos de la invencion para modular otros subtipos de canales, incluyendo Kv3.3 y Kv3.4.
Biolog'ia de la celula
Para evaluar los efectos de los compuestos en los canales Kv3.2 humanos (hKv3.2), se creo una lmea celular estable que expresaba hKv3.2 mediante transfection de celulas de ovario de hamster chino (CHO)-K1 con un vector pCIH5-hKv3.2. Las celulas se cultivaron en medio DMEM/F12 complementado por suero bovino fetal al 10%, 1X aminoacidos no esenciales (Invitrogen) y 500 ug/ml de higromicina B (Invitrogen). Las celulas se cultivaron y mantuvieron a 37°C en un entorno humidificado que contema 5% de CO2 en aire.
Para evaluar los efectos de los compuestos en los canales Kv3.1 (hKv3.1), celulas CHO/Gam/E1A-clone22 alias CGE22 se transdujeron usando un reactivo de hKv3.1 de BacMam. Esta lmea celular se diseno para ser un hospedante basado en CHO-K1 mejorado, para la expresion de protemas recombinantes potenciada comparada con la CHO-K1 sin modification genetica. La lmea celular se genera despues de transduction de celulas CHO-K1 con un virus BacMam que expresaba la protema Gam1 de adenovirus y selection con Geneticina-G418, para generar una lmea celular estable, CHO/Gam-A3. Las celulas CHO/Gam-A3 se transfectaron con pCDNA3-E1A-Hygro, seguido de seleccion con higromicina B y separation por FACS para obtener clones de celulas individuales. Despues se usaron virus BacMam-Luciferasa y BacMam-GFP en estudios de transduccion transitorios para seleccionar el clon basado en la mayor transduccion de BacMam y expresion de protemas recombinantes. Se cultivaron celulas CGE22 en el mismo medio usado para la lmea celular estable CHO-Kl hKv3.2 con la adicion de higromicina B 300 ug/ml y G418 300 ug/ml. Todas las demas condiciones eran identicas a las de las celulas CHO-K1 hKv3.2. El dia antes de un experimento, se sembraron 10 millones de celulas CGE22 en un matraz de cultivo T175 y se anadio el reactivo BacMam hKv3.1 (pFBM/Kv3.1 humano) (MDI de 50). Las celulas transducidas se usaron 24 horas mas tarde.
Preparation de celulas para experimentos en el sistema lonWorks Quattro™
El dia del experimento se retiraron las celulas del incubador y se separo el medio de cultivo. Las celulas se lavaron con 5 ml de PBS de Dulbecco (DPBS) exento de calcio y magnesio y se desprendieron por la adicion de 3 ml de Versene (Invitrogen, Italia) seguido de una breve incubation a 37°C durante 5 minutos. El matraz se golpeo ligeramente para soltar las celulas y se anadieron 10 ml de DPBS que contema calcio y magnesio para preparar una suspension celular. La suspension de celulas despues se puso en un tubo de centrifuga de 15 ml y se centrifugo durante 2 min a 1200 rpm. Despues de centrifugar, el liquido sobrenadante se separo y el sedimento celular se volvio a suspender en 4 ml de DPBS que contema calcio y magnesio usando una pipeta de 5 ml para romper el sedimento. El volumen de suspension de celulas despues se corrigio para dar una concentration de celulas para el ensayo de aproximadamente 3 millones de celulas por ml.
Todas las soluciones anadidas a las celulas se calentaron previamente a 37°C.
Eectrofisiolog'ia
Los experimentos se llevaron a cabo a temperatura ambiente usando la tecnologia de electrofisiologia de matrices planas IonWorks Quattro™ (Molecular Devices Corp.) con PatchPlate™ PPC. Los protocolos de estimulacion y la adquisicion de datos se llevaron a cabo usando un microordenador (Dell Pentium 4). Las resistencias de huecos de electrodos planos (Rp) se determinaron aplicando un paso de voltaje 10 mV a lo largo de cada pocillo. Estas mediciones se llevaron a cabo antes de la adicion de las celulas. Despues de la adicion de las celulas y formation de sello, se llevo a cabo un ensayo de sello aplicando un paso de voltaje de -80 mV a -70 mV durante 160 ms. Despues de esto, se anadio solution de anfotericina B a la cara intracelular del electrodo para lograr el acceso intracelular. Las celulas se mantuvieron a -70 mV. La sustraccion de fugas se llevo a cabo en todos los experimentos aplicando prepulsos de hiperpolarizacion de 50 ms (10 mV) para producir corrientes de fuga seguido de un periodo de 20 ms en el potencial de mantenimiento antes de los pulsos de ensayo. Desde el potencial de mantenimiento de -70 mV, se aplico un primer pulso a -15 mV durante 100 ms y despues de otros 100 ms a -70 mV, se aplico un
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segundo pulso a 40 mV durante 50 ms. Despues las celulas se mantuvieron durante otros 100 ms a -100 mV y despues se aplico una rampa de voltaje de -100 mV a 40 mV a lo largo de 200 ms. El protocolo de pulsos de ensayo se puede llevar a cabo en ausencia (lectura previa) y presencia (lectura posterior) del compuesto de ensayo. Las lecturas previas y posteriores estaban separadas por la adicion de compuesto seguido de una incubacion de 3 minutos.
Soluciones y farmacos
La solucion intracelular contenia lo siguiente (en mM): gluconato K 100, KCI 54, MgCh 3,2, HEPES 5, ajustado a pH 7,3 con KOH. La solucion de anfotericina B se preparo como solucion madre de 50 mg/ml en DMSO y se diluyo hasta una concentration de trabajo final de 0,1 mg/ml en la solucion intracelular. La solucion externa era solucion salina tamponada con fosfato Dulbecco (DPBS) y contenia lo siguiente (en mM): CaCh 0,90, KCI 2,67, KH2PO41,47, MgCl.6H2O 0,493, NaCl 136,9, NasPO4 8,06, con pH de 7,4.
Los compuestos de la invention (o compuestos de referencia tales como N-ciclohexil-N-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2- dihidro-3-quinolinil)metil]-N'-fenilurea se disolvieron en dimetilsulfoxido (DMSO) en una concentracion de solucion madre 10 mM. Estas soluciones se diluyeron mas con DMSO usando un Biomek FX (Beckman Coulter) en una placa de 384 compuestos. Cada dilution (1 ^l) se transfirio a otra placa de compuestos y se anadio solucion externa que contenia acido pluronico al 0,05% (66 ^l). Se anadieron 3,5 ^l de cada placa que contema un compuesto de la invencion, y se incubaron con las celulas durante el experimento de lonWorks Quattro™. La dilucion de ensayo final era 200 y las concentraciones de compuestos finales estaban en el intervalo de 50 ^M a 50 nM.
Analisis de datos
Los registros se analizaron y filtraron usando tanto la resistencia de sello (>20 MQ) como la amplitud de la corriente maxima (>500 pA en el paso de voltaje de 40 mV) en ausencia de compuestos para eliminar las celulas no adecuadas del posterior analisis. Se usaron comparaciones pareadas entre las adiciones antes y despues de farmaco medidas para la etapa de voltaje de -15 mV para determinar el efecto de modulation positiva de cada compuesto. Se midieron las corrientes de salida mediadas por el canal Kv3 determinadas por la amplitud media de la corriente a lo largo de los 10 ms finales del pulso de voltaje de -15 mV menos la corriente base media a -70 mV a lo largo de un periodo de 10 ms justo antes del paso de -15 mV. Estas corrientes del canal Kv3 despues de la adicion del compuesto de ensayo se compararon entonces con las corrientes registradas antes de la adicion de compuesto. Los datos se normalizaron respecto al efecto maximo del compuesto de referencia (50 microM de N- ciclohexil-N-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-dihidro-3-quinolinil)metil]-N'-fenilurea) y respecto al efecto de un control de vehiculo (DMSO al 0,5%). Los datos normalizados se analizaron usando el programa ActivityBase o Excel. La concentracion de compuesto necesaria para aumentar las corrientes en 50% del aumento maximo producido por el compuesto de referencia (pCE50) se determinaron mediante el ajuste de los datos de concentracion-respuesta usando una funcion logistica de 4 parametros, con el programa ActivityBase o Excel.
La W-ciclohexil-W-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-dihidro-3-quinolinil)metil]-W-fenilurea se obtuvo en ASINEX (numero de registro: 552311-06-5).
Todos los compuestos de ejemplo se ensayaron en el ensayo anterior midiendo la potenciacion de Kv3.1 o Kv3.2 o Kv3.1 y Kv3.2 (en lo sucesivo "Kv3.1 y/o Kv3.2"). Los moduladores positivos de Kv3.1 y/o Kv3.2 producen en el ensayo anterior un aumento de las corrientes de celula entera de, como media, al menos 20% de la observada con W-ciclohexil-W-[(7,8-dimetil-2-oxo-1,2-dihidro-3-quinolinil)metil]-W-fenilurea 50 microM. Por lo tanto, en los ensayos de celulas recombinantes del ejemplo biologico 1, todos los compuestos de ejemplo actuan como moduladores positivos de los canales Kv3.1 y Kv3.2. Como se usa en la presente memoria, un modulador positivo de Kv3.1 y/o Kv3.2 es un compuesto que se ha mostrado que produce al menos 20% de potenciacion de las corrientes de celula entera mediadas por canales Kv3.1 humanos y/o Kv3.2 humanos expresados de forma recombinante en celulas de mamifero, determinado usando los ensayos descritos en el ejemplo biologico 1 (ensayos biologicos).
Un analisis secundario de los datos de los ensayos descritos en el ejemplo biologico 1, se puede usar para investigar el efecto de los compuestos en la velocidad de elevacion de la corriente desde el inicio de los pulsos de voltaje despolarizantes. La magnitud del efecto de un compuesto se puede determinar a partir de la constante de tiempo (Tauact) obtenida a partir de un ajuste no lineal, usando la ecuacion dada a continuation, de la elevation en las corrientes de Kv3.1 o Kv3.2 despues del inicio del pulso de voltaje despolarizante de -15 mV.
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donde:
Y0 es el valor de la corriente al inicio del pulso de voltaje despolarizante;
Ymax es la corriente meseta;
K es la constante de velocidad, y Tauact es la constante de tiempo de activation, que es el redproco de K.
Igualmente, tambien se puede investigar el efecto de los compuestos sobre el tiempo que tardan las corrientes de Kv3.1 y Kv3.2 en decaer hasta el cierre de los canales al final de los pulsos de voltaje despolarizantes de -15 mV. En este ultimo caso, la magnitud del efecto de un compuesto en el cierre de los canales se puede determinar a partir de la constante de tiempo (Taudesact) de un ajuste no lineal del decaimiento de la corriente ("corriente de cola") 5 inmediatamente despues del final del pulso de voltaje despolarizante.
Se ha determinado la constante de tiempo para la activacion (Tauact) para todos los compuestos de los ejemplos. La figura 1 muestra los datos para dos compuestos. La tabla 1 proporciona los datos de Tauact para todos los ejemplos analizados de esta forma.
La figura 1a muestra corrientes de hKv3.2 registradas usando el ensayo descrito en el ejemplo biologico 1. Los datos 10 mostrados son las corrientes individuales a lo largo del periodo del paso de voltaje despolarizante a -15 mV registradas de 4 celulas diferentes en dos concentraciones del compuesto (ejemplo de referencia RE1). Los datos se ajustan por una sola curva exponencial (lmeas negras) usando el procedimiento de ajuste de Prism version 5 (Graphpad Software Inc).
La figura 1b muestra corrientes de hKv3.2 registradas usando el ensayo descrito en el ejemplo biologico 1. Los datos 15 mostrados son las corrientes individuales a lo largo del periodo del paso de voltaje despolarizante a -15 mV registradas de 2 celulas diferentes en dos concentraciones del compuesto del ejemplo de referencia RE3. Los datos se ajustan por una sola curva exponencial (lmeas negras) usando el procedimiento de ajuste de Prism version 5 (Graphpad Software Inc).
Tabla 1: Resumen de los datos de hKv3.2 del analisis del tiempo de activacion (Tauact). Para permitir la comparacion 20 entre compuestos, la concentracion de compuesto elegida era la que produda una corriente similar (~0,3 nA) al final del pulso de voltaje, con la excepcion del vehmulo, donde las corrientes maximas eran <0,1 nA.
Ejemplo
Concentracion (|jM) Tauact medio (ms) Desviacion estandar Numero de experimentos
Vehmulo
- 7,1 1,7 6 (celulas)
RE1
6,25 9,9 2,2 5
RE2
12,5 7,3 1,8 4
RE3
0,2 23,0 6,2 4
RE4
0,8 9,2 2,3 2
RE5
3,1 13,0 2,3 2
RE6
3,1 8,2 2,0 2
RE7
3,1 10,4 2,8 2
RE8
3,1 9,7 1,0 2
RE9
0,2 50,1 7,5 5
RE10
0,4 19,3 1,0 4
Ejemplo 9
0,8 24,0 3,6 2
Ejemplo 6
0,4 34,8 4,9 2
Ejemplo 5
0,8 31,5 4,0 2
Ejemplo 1
1,6 21,3 0,1 2
Ejemplo 2
1,6 14,8 1,9 2
Ejemplo 7
0,4 28,0 0,4 2
Ejemplo 8
1,6 25,0 2,1 2
Ejemplo 4
1,6 13,1 0,7 4
Ejemplo 3
25,0 8,9 1,0 2
Ejemplo 10
1,6 17,3 0,7 2
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Como puede verse en la tabla 1, en ausencia de compuesto y en presencia de vetnculo el Tauact era 7,1±1,7 ms. Se observo un intervalo de valores de Tauact (7,3 - 50,1 ms) en presencia de los compuestos de ensayo cuando se ensayo cada uno en una concentracion que aumentaba la corriente de Kv3.2 en un nivel similar (~ 0,3 nA).
Los canales Kv3.1 y Kv3.2 deben activarse y desactivarse muy rapidamente con el fin de permitir que las neuronas disparen potenciales de accion a frecuencia alta (Rudy y McBain, 2001, Trends in Neurosciences 24, 517-526). Es probable que la ralentizacion de la activacion retrase el inicio de la repolarizacion del potencial de accion; la ralentizacion de la desactivacion podna conducir a corrientes de hiperpolarizacion que reducen la excitabilidad de la neurona y retrasan el tiempo antes de que la neurona pueda disparar otro potencial de accion. Juntos estos efectos de ralentizacion en la activacion y desactivacion de canales es probable que conduzcan a una reduccion mas que a una facilitacion de la capacidad de las neuronas para disparar a frecuencias altas. Por lo tanto, los compuestos que tienen este efecto de ralentizacion en los canales de Kv3.1 y/o Kv3.2 pueden ralentizar el disparo neuronal. Esta ralentizacion del disparo neuronal por un compuesto, tal como el ejemplo de referencia 9 que aumenta notablemente el Tauact a 50,1 ± 7,5 msec (tabla 1), se puede observar de registros hechos a partir de interneuronas de "disparo rapido" en la corteza cerebral de rata, usando tecnicas electrofisiologicas in vitro. Como puede observarse en la figura 2, la adicion del compuesto del ejemplo de referencia 9 reduce la capacidad de las neuronas para el disparo en respuesta a trenes de pulsos despolarizantes a 300 Hz.
La figura 2 muestra registros hechos de interneuronas identificadas de "disparo rapido" en la corteza somatosensorial del raton. Las neuronas son inducidas a disparar a altas frecuencias por trenes de pulsos de corrientes despolarizantes de alta frecuencia a 100, 200 y 300Hz. Se determina la capacidad de la neurona para descargar un potencial de accion en cada pulso. Una probabilidad de espiga de 1 en el eje y de la grafica indica que es generado un potencial de accion por la neurona en cada uno de los pulsos de corriente despolarizante. En ausencia de farmaco (drculos negros, n=9) las neuronas manteman una probabilidad de espiga de 1 hasta 300 Hz. Sin embargo, en presencia del compuesto del ejemplo de referencia 9 (1 microM; drculos blancos, n=6), las neuronas no eran capaces de seguir trenes a la frecuencia mas alta. * p < 0,05, ANOVA para mediciones repetidas.
Por lo tanto, aunque todos los compuestos de los ejemplos de la presente invencion identificados actuan como moduladores positivos en el ensayo de celulas recombinantes del ejemplo biologico 1, aquellos compuestos que aumentan notablemente el valor del Tauact, pueden reducir la capacidad de las neuronas en los tejidos naturales para disparar a frecuencia alta.
Ejemplo Biologico 2
Hiperactividad inducida por psicoestimulantes en ratones Preparacion experimental
Los ratones macho CD-1 (25-35 g) fueron proporcionadas por Charles River, Italia. Los animales se albergaron en grupo con acceso libre a alimento (alimento para roedores estandar) y agua con un ciclo de luz/oscuridad de 12 h (las luces se encienden a las 06:00 h). En todos los casos se dejo un periodo de al menos 5 dfas entre la llegada y el estudio.
Protocolo Experimental
Se administro a los animales un compuesto de ensayo con la dosis, por la via y tiempo de pretratamiento adecuados, y despues se devolvieron a sus jaulas. El ensayo se hizo en una sala separada de la usada para albergarlos. Los ratones se trataron con el compuesto de ensayo y se pusieron individualmente en una caja de Perspex (longitud 20,5 cm, anchura 20,5 cm, altura 34 cm) cubierta con una tapa perforada. Se colocaron sensores de seguimiento por infrarrojos alrededor de las paredes del penmetro (sensores horizontales). Se colocaron dos sensores adicionales 2,5 cm por encima del suelo en lados opuestos (sensores verticales). Los datos se recogieron y analizaron usando un sistema VersaMax System (Accuscan Instruments Inc., Columbus, OH) que a su vez transfena la informacion a un ordenador. Despues de 30 min de habituacion a el campo de ensayo, los ratones se trataron con anfetamina (2 mg/kg) administrada por via intraperitoneal (i.p.) a 10 ml/kg, y posteriormente se evaluo la actividad locomotora en el campo de ensayo a lo largo de otros 60 minutos. La actividad locomotora en el plano horizontal se determino como el numero de interrupciones de los sensores horizontales por cada raton en el campo de ensayo en el periodo de ensayo de 60 minutos.
Farmacos y materiales
Todas las dosis se calcularon como base. La clozapina se disolvio en agua destilada y se administraron 3 mg/kg via intraperitoneal (i.p.) a 10 ml/kg. El compuesto del ejemplo 4 (3, 10 o 30 mg/kg) o vetnculo (Captisol al 20% + Tween80 al 0,1% y HPMV al 0,5% en agua esteril) se administro por via i.p. con 10 ml/kg. Tanto la clozapina como el compuesto del ejemplo 4 se administraron inmediatamente antes poniendo el animal en el campo de ensayo (30 minutos antes de la administracion de anfetamina).
5
10
15
20
25
30
35
Analisis de los niveles en la sangre del compuesto del ejemplo 4
Se recogieron muestras de sangre de un subconjunto de ratones del estudio (n=3) al final de la medicion del comportamiento (90 minutos despues de la dosis del farmaco de ensayo), y se llevo a cabo el ensayo usando un metodo basado en la precipitacion de la protema con acetonitrilo seguido de analisis por HPLC-MS/MS con un metodo analftico optimizado. Puesto que la estabilidad del analito en la sangre y el cerebro era desconocida, se prepararon patrones de calibracion (CS) y muestras de control de la calidad (QC) el dfa de la administracion y se almacenaron junto con las muestras del estudio. Las muestras del estudio, CS, QC y muestras de blanco se enriquecieron con rolipram como referencia interna (IS). Las muestras del estudio se analizaron en lotes discretos junto con las muestras CS, QC y blanco.
Resultados
La anfetamina sola produda un aumento grande y significativo de la actividad locomotora total. Una dosis de 10 mg/kg i.p. del compuesto del ejemplo 4 reduda significativamente el aumento de la actividad locomotora total producido por la anfetamina. Una dosis mayor, de 30 mg/kg i.p. del compuesto del ejemplo 4, reduda mas el aumento de la actividad locomotora inducido por la anfetamina de una forma similar al control positivo, la clozapina (3 mg/kg i.p.). Los datos se resumen en la tabla 1.
Tabla 1: Efectos del compuesto del ejemplo 4 en la hiperlocomocion inducida por anfetamina en el raton. El compuesto del ejemplo 4 se administro i.p. 30 minutos antes de la anfetamina (2 mg/kg i.p.). La clozapina se administro i.p. 30 minutos antes de la anfetamina (2 mg/kg i.p.). La actividad locomotora se evaluo a lo largo de 60 minutos empezando inmediatamente despues de la administracion de anfetamina. Los datos se expresan como media ± eem. Los datos se sometieron a un analisis de varianza de una via (ANOVA) seguido de prueba de Dunnett (*** = p<0,001, *p<0,05 frente a tratamiento con afentamina). Las concentracioens en la sangre se determinaron a partir de un subconjunto de 3 ratones al final del experimento, 90 minutos despues de la administracion del farmaco de ensayo. Los datos mostrados son las concentraciones medias en la sangre y el intervalo (n.d.=no determinado).
Vedculo
Actividad locomotora (cruces de haces) Concentracion en la sangre del farmaco de ensayo (ng/ml)
Vedculo
5116 ± 1040*** n.d.
Anfetamina (AMPH) 2,0 mg/kg
16190 ± 2394 n.d.
AMPH 2 mg/kg + compuesto del ejemplo 4 3 mg/kg
10263 ± 2443 93 [34 - 168]
AMPH 2 mg/kg + compuesto del ejemplo 4 10 mg/kg
9015±1413* 244 [215 -300]
AMPH 2 mg/kg + compuesto del ejemplo 4 30 mg/kg
4555 ± 922*** 2140 [1790 -2380]
AMPH 2 mg/kg + Clozapina mg/kg
1546 ± 420*** n.d.
Conclusiones
Estos resultados muestran que el compuesto del ejemplo 4, es capaz de prevenir la hiperactividad inducida por el psicoestimulante anfetamina. Por lo tanto, el compuesto del ejemplo 4 y otros compuestos que modulan positivamente los canales Kv3.1 y/o Kv3.2, en ausencia de efectos en las cineticas reguladoras de los canales, como puede observarse en el ensayo descrito en el ejemplo biologico 1, pueden ser utiles en el tratamiento de trastornos asociados con la hiperactividad, tales como mama bipolar, o alteracion del sistema de dopamina, tal como puede ocurrir en la dependencia de drogas, trastorno de hiperactividad con deficit de atencion (THDA) o esquizofrenia.
Se proporcionan ilustraciones adicionales de la potencial utilidad de los compuestos de la presente invencion, por ejemplo, en el documento WO2012/076877 que asocia el uso de los moduladores de canales Kv3.1 y/o Kv3.2 con una serie de trastornos.

Claims (17)

  1. 5
    10
    15
    REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de formula (I):
    imagen1
    en donde:
    W es CRaRb o O;
    cuando W es CRaRb entonces Z es CH2; cuando W es O entonces Z es CF2;
    Ra y Rb son CH3 o considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3; en donde, cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb son CH3:
    o
    el anillo A es:
    imagen2
    N — '
    NH
    o' r*cH
    A
    u
    . A
    I NH I N
    y el anillo B es:
    imagen3
    /
    NH
    el anillo A es: J y el anillo B es:
    en donde, cuando W es CRaRb, Z es CH2 y Ra y Rb considerados juntos forman un espirocicloalquilo C3;
    A/N. A. -N.
    el anillo A es:
    imagen4
    *V(
    y
    imagen5
    NH
    CHj
    ch3
    I NH I NH
    el anillo B es: en donde, cuando W es O y Z es CF2:
    NH
    CHj O _
    o /
    o
    y
    5
    10
    imagen6
    '■nA
    I Nh
    NH
    O' ?^CH3
    elanilloAes: ' y el anillo B es: ^ ;
    o una de sus sales y/o solvatos farmaceuticamente aceptables.
  2. 2. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-5-metil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-cidopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona
    imagen7
  3. 3. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-5-metil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1 -benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinil}- 2,4-imidazolidinadiona
    imagen8
  4. 4. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-3-{2-[(2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-5-etil-5-metil-2,4-imidazolidinadiona
    imagen9
  5. 5. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    5,5-dimetil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona
    imagen10
    15 6. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-3-[2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxipirimidin-5-il]imidazolidina-2,4-diona
    5
    10
    15
    imagen11
  6. 7. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona
    imagen12
  7. 8. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-3-{6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-3-piridinil}-2,4-imidazolidinadiona
    imagen13
  8. 9. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-3-{2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxi]-5-pirimidinil}-2,4-imidazolidinadiona
    imagen14
  9. 10. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    (5R)-5-etil-5-metil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona
    imagen15
  10. 11. El compuesto segun la reivindicacion 1, que es:
    5,5-dimetil-3-[6-(7-metilespiro[2H-benzofurano-3,1'-ciclopropano]-4-il)oxi-3-piridil]imidazolidina-2,4-diona
    5
    10
    15
    20
    imagen16
  11. 12. El compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, para usar como un medicamento.
  12. 13. El compuesto para usar segun la reivindicacion 12, para la profilaxis o tratamiento de trastornos auditivos.
  13. 14. El compuesto para usar segun la reivindicacion 13, en donde el trastorno auditivo es la hipoacusia en adultos mayores de 60 (presbiacusia) o acufenos.
  14. 15. El compuesto para usar segun la reivindicacion 12, para la profilaxis o tratamiento de la esquizofrenia.
  15. 16. El compuesto para usar segun la reivindicacion 12, para la profilaxis o tratamiento del smdrome del cromosoma X fragil.
  16. 17. Un compuesto seleccionado de:
    7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1’-ciclopropano]-4-ol (compuesto intermedio 13)
    imagen17
    ; y
    3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-ol (compuesto intermedio 27)
    imagen18
    ; y
    2,2-difluoro-7-metil-1,3-benzodioxol-4-ol (compuesto intermedio 37)
    imagen19
    o una de sus sales.
  17. 18. Un compuesto seleccionado de:
    6-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1’-ciclopropan]-4-il)oxipiridin-3-amina (compuesto intermedio 15)
    imagen20
    2-(7-metilespiro[2H-benzofuran-3,1’-ciclopropan]-4-il)oxipirimidin-5-amina (compuesto intermedio 19)
    imagen21
    6-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxil-3-piridinamina (compuesto intermedio 29)
    imagen22
    5
    2-[(3,3,7-trimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-4-il)oxil-5-pirimidinamina (compuesto intermedio 33)
    imagen23
    o una de sus sales.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2718285B1 (en) 2011-06-07 2016-03-16 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin derivatives as kv3 inhibitors
CN104334547B (zh) 2012-05-22 2017-06-06 奥蒂福尼疗法有限公司 作为kv3抑制剂的三唑类
BR112014028718A2 (pt) 2012-05-22 2017-06-27 Autifony Therapeutics Ltd derivados de hidantoína como inibidores de kv3
WO2013182851A1 (en) * 2012-06-06 2013-12-12 Autifony Therapeutics Limited Prophylaxis or treatment of diseases where a modulator of kv3.3 channels is required
GB201521751D0 (en) * 2015-12-10 2016-01-27 Autifony Therapeutics Ltd Novel uses
GB201613163D0 (en) 2016-07-29 2016-09-14 Autifony Therapeutics Ltd Novel compounds
WO2018220762A1 (ja) 2017-05-31 2018-12-06 大塚製薬株式会社 ピリミジン化合物
CA3110251A1 (en) * 2018-09-21 2019-11-28 Bionomics Limited Substituted-pyridinyl compounds and uses thereof
US12358901B2 (en) 2018-10-16 2025-07-15 Autifony Therapeutics Limited KV3 modulators
FI3867247T3 (fi) * 2018-10-16 2024-10-30 Autifony Therapeutics Ltd Uusia yhdisteitä
SG11202104374WA (en) * 2018-11-30 2021-05-28 Otsuka Pharma Co Ltd Heterocyclic compounds for the treatment of epilepsy
BR112022013339A2 (pt) * 2020-02-06 2022-09-13 Autifony Therapeutics Ltd Moduladores de kv3
WO2023017263A1 (en) 2021-08-10 2023-02-16 Autifony Therapeutics Limited Potassium channel modulators
EP4630117A1 (en) 2022-12-06 2025-10-15 Autifony Therapeutics Limited Compounds for the treatment of centra nervous system disorders
CN117448440B (zh) * 2023-10-23 2024-11-01 中国人民解放军空军军医大学 Kv3在制备诊断或治疗创伤后应激障碍异常恐惧记忆消退产品中的应用

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4675403A (en) * 1985-10-16 1987-06-23 American Home Products Corporation 3-Aminoalkyl derivatives of 5,5-disubstituted hydantoins with psychotropic activity
DK123493D0 (da) * 1993-11-01 1993-11-01 Lundbeck & Co As H Compounds
SG172778A1 (en) * 2008-12-22 2011-08-29 Hoffmann La Roche Heterocyclic antiviral compounds
BR112012015868A2 (pt) * 2009-12-11 2017-06-20 Autifony Therapeutics Ltd derivados de imidazolidinadiona
WO2011073114A1 (en) * 2009-12-14 2011-06-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
WO2012076877A1 (en) * 2010-12-06 2012-06-14 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin derivatives useful as kv3 inhibitors
EP2718285B1 (en) * 2011-06-07 2016-03-16 Autifony Therapeutics Limited Hydantoin derivatives as kv3 inhibitors

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