ES2567706T3

ES2567706T3 - Tetrapéptidos protectores para cuidado cutáneo

Info

Publication number: ES2567706T3
Application number: ES08844747.9T
Authority: ES
Inventors: Lijuan Zhang; Scott M. Harris; Timothy J. Falla
Original assignee: Helix Biomedix Inc
Current assignee: Helix Biomedix Inc
Priority date: 2007-10-29
Filing date: 2008-10-28
Publication date: 2016-04-26
Anticipated expiration: 2028-10-28
Also published as: HK1146070A1; US8071555B2; CA2701420C; JP5379806B2; CA2701420A1; PL2205623T3; US20090142280A1; KR20100083828A; EP2205623B1; KR101668803B1; CN101855235A; WO2009058244A1; JP2011502121A; CN101855235B; EP2205623A1

Abstract

Un péptido aislado, en el que la secuencia de aminoácidos del péptido consiste en prolina-glutamina-glutamato-X (P-Q-E-X), en la que X es lisina (K) o isoleucina (I).

Description

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posquirúrgico también puede tratarse con los péptidos. Aunque la inflamación ayuda a proteger de infección en sitios de lesión, la provisión de buenas prácticas antisépticas niega cualquier desventaja que pueda asociarse con el bloqueo de la inflamación usando los péptidos de la invención.

Los péptidos de la invención también pueden usarse para evitar o invertir los efectos del envejecimiento en todos los tejidos anteriormente mencionados. De una manera relacionada, los péptidos podrían aplicarse a tejido que se ha dañado por exposición a diversos agentes externos tales como luz del sol. Son ejemplos de debilitamiento de la piel relacionado con el envejecimiento y exposición arrugas cutáneas, sequedad, adelgazamiento, flacidez y mayor susceptibilidad a los hematomas. La invención también puede usarse como un cosmético a este respecto para proporcionar una apariencia más joven y textura a la piel, y para proporcionar una mejor función.

Otros problemas tisulares que se tratan eficazmente usando los péptidos de la presente invención se relacionan con alergia o autoinmunidad, ambos de los cuales tienen un componente inflamatorio. Dichas dolencias incluyen dermatitis, psoriasis, esclerodermia, pénfigo y enfermedad inflamatoria del intestino.

Las composiciones usadas para suministrar a los péptidos en el procedimiento terapéutico anterior pueden estar en forma de un aerosol, emulsión, líquido, loción, crema, pasta, pomada, polvo, espuma u otra formulación farmacéuticamente aceptable. Además, los péptidos pueden suministrarse usando formulaciones menos implicadas tales como agua desionizada/destilada, PBS o soluciones salinas médicas convencionales. En general, una formulación farmacéuticamente aceptable incluiría cualquier vehículo adecuado para su uso en piel humana o superficie mucosa. Dichos vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen etanol, dimetil sulfóxido, glicerol, sílice, aluminio, almidón y vehículos y diluyentes equivalentes. La formulación puede opcionalmente tener atractivo cosmético y/o contener otros agentes tales como retinoides u otros péptidos que pueden actuar como adyuvantes para la acción terapéutica de los péptidos de la invención. También puede añadirse antibióticos a la formulación para proteger contra la infección, permitiendo de este modo que se produzcan procesos de curación máximos. La concentración de péptido en la composición puede ser de aproximadamente 0,1 μg/ml a aproximadamente 50 μg/ml

o de aproximadamente 0,1 μg/ml a aproximadamente 20 μg/ml; sin embargo, la concentración última empleada puede variar fuera de estos intervalos, dependiendo de la naturaleza de la condición tisular/de herida, la bioactividad del péptido de la invención y el uso de cualquier adyuvante o técnica para obtener absorción de composición potenciada. Dichas determinaciones están dentro de la experiencia normal de la técnica.

La administración de los péptidos de la invención y composiciones asociadas puede realizarse a seres humanos y animales, incluyendo todos los mamíferos (por ejemplo, cerdos, vacas, caballos, ovejas, cabras, ratones, ratas, gatos, perros, hurones). La aplicación también puede realizarse en combinación con materiales típicos y/o experimentales tales como injertos tisulares, productos de cultivo tisular, oxígeno y apósitos. En general, la composición puede administrarse por vía tópica, por vía oral, por vía transdérmica, por vía sistémica o por cualquier otro procedimiento conocido por los expertos en la materia que sea útil para suministrar los péptidos de la invención al sitio inflamatorio. Las composiciones también pueden aplicarse de una manera in vitro o ex vivo, bien a células o bien a injertos de pacientes que han crecido en cultivo, por ejemplo.

Debido a su pequeño tamaño, se espera que los péptidos sean capaces de alcanzar por sí mismos algún de nivel de permeabilidad a través de la piel; sin embargo, pueden usarse ciertas técnicas para amplificar este movimiento. Por ejemplo, pueden añadirse grupos lipófilos (no polares) a los péptidos, o los péptidos pueden suministrarse a la piel en un excipiente lipófilo, para potenciar la accesibilidad del péptido al estrato córneo para permitir la translocación a las capas epidérmicas inferiores. De esta manera puede considerarse que dichas modificaciones lipófilas tienen un efecto profarmacológico. Pueden usarse potenciadores de la permeación tales como disolventes y tensioactivos conocidos en el excipiente para permitir una mejor absorción de péptidos. Las técnicas especiales que se anticipa que serán útiles en la potenciación de acceso del péptido al tejido/la lesión diana incluyen iontoforesis, electroforesis y ultrasonidos. Un dispositivo iontoforético consiste en dos electrodos sumergidos en una solución de electrolitos y colocados en la piel. Cuando se aplica una corriente eléctrica a través de los electrodos, se crea un campo eléctrico a través del estrato córneo que conduce el suministro de los péptidos. La electroporación implica la aplicación de pulsos eléctricos de alta tensión para aumentar la permeación a través de bicapas lipídicas. Esto difiere de la iontoforesis en la duración y la intensidad de la aplicación de corriente eléctrica (la iontoforesis usa un campo eléctrico de baja tensión relativamente constante). Se cree que el pulso eléctrico de alta tensión de electroporación induce una formación reversible de poros hidrófilos en las membranas de lamelas lipídicas que puede proporcionar un alto grado de potenciación de la permeación. El ultrasonido aplica ondas sonoras que tienen una frecuencia mayor de 16 kHz a la piel, lo que provoca compresión y expansión del tejido a través del que viajan las ondas de sonido. Las variaciones de presión resultantes provocan varios procesos (por ejemplo, cavitación, mezclado, aumento de la temperatura) que pueden potenciar la permeación de los péptidos.

Se describen características adicionales, modos de producción y uso de péptidos de la invención, por ejemplo, en las patentes de Estados Unidos n.º 6.974.799 y 5.492.894.

Los siguientes ejemplos se incluyen para demostrar ciertas realizaciones preferidas de la invención.

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Ejemplo 6: Realizaciones de la invención que incorporan un inhibidor de proteasa

La presente invención también se dirige a formulaciones de cuidado de la piel que contienen inhibidores de proteasa en combinación con péptidos bioactivos. Se esperaría que dichas composiciones muestren actividad cosmética y terapéutica con respecto a la piel y otras superficies epiteliales (por ejemplo, superficies mucosas). Los inhibidores de serina proteasa son un componente ejemplar de la invención. Otro aspecto de la presente invención son procedimientos para usar composiciones que contienen péptidos bioactivos e inhibidores de proteasa para efectuar cambios terapéuticos y cosméticos en la piel.

Se usa una amplia serie de ingredientes peptídicos en la industria cosmética y el cuidado de la piel para suministrar una serie de bioactividades a y dentro de la piel (Tabla 2). Se ha documentado bien que la capa externa de la piel, el estrato córneo (SC), contiene una serie de proteasas capaces de degradar proteínas y péptidos. Las bioactividades de ciertos péptidos cuando se aplican a la piel se ejercen en el SC. Por tanto, las proteasas localizadas en el SC constituyen una barrera para conseguir los beneficios terapéuticos y/o cosméticos completos de aplicaciones cutáneas tópicas que comprenden péptidos bioactivos.

El SC contiene al menos tres familias de proteasas: serina, cisteína y aspartato proteasas. Las serina proteasas (SP) incluyen las proteasas específicas de epidermis calicreína 5 (también conocida como enzima tríptica SC, SCTE) (Brattsand y Egelrud, 1999) y calicreína-7 (también conocida como enzima quimotríptica SC) (Hansson y col., 1994). Se sabe que ambas de estas calicreínas están implicadas en procesos descamantes (es decir, desprendimiento de la piel). Son serina proteasas adicionales que se han aislado en la piel plasmina y uroquinasa (Voegeli y col., 2007). SC tiol proteasa (SCTP) y catepsina D son algunas de las cisteína y aspartato proteasas, respectivamente, presentes en el SC (Bernard y col., 2003; Horikoshi y col., 1998).

La variación estacional en las características biofísicas y biológicas del SC está bien documentada. En particular, se ha mostrado que el invierno afecta más gravemente a las propiedades de la piel expuesta frente a piel cubierta de forma rutinaria. Además, cuando está comprometido, tal como en condiciones de piel seca, se ha mostrado que el SC facial contiene niveles aumentados de citocinas y proteasas proinflamatorias. Voegeli y col., (2007) examinaron la distribución de actividades serina proteasa claves (calicreína-5, calicreína-7, uroquinasa, plasmina y una enzima de tipo triptasa) en diferentes capas de SC de la mejilla y el antebrazo analizando tiras de cinta consecutivas de sujetos caucásicos sanos durante el invierno y el verano. En comparación con los niveles de actividad observados en SC del antebrazo, los niveles de actividad de plasmina, uroquinasa y triptasa en la cara eran aproximadamente de cinco a ocho veces mayores, mientras que los niveles de actividad de calicreínas -5 y -7 en la mejilla eran aproximadamente de dos a cuatro veces mayores. Por lo tanto, las áreas de piel protegidas muestran menos actividad proteasa que las áreas que están expuestas al ambiente, lo que indica posiblemente inflamación subclínica en piel expuesta. La siguiente información también se obtuvo por Voegeli y col., (2007): (i) en piel del antebrazo sana normal, el SC externo muestra mayor actividad serina proteasa que en sus capas más profundas; (ii) en comparación con el antebrazo, las actividades tipo uroquinasa y plasmina están elevadas en tiras de SC de la mejilla, lo que confirma la activación de la cascada de plasminógeno; y (iii) la actividad de tipo triptasa en el SC también está elevada en muestras de la mejilla, lo que indica posiblemente la implicación de mastocitos en piel con barrera comprometida y/o la síntesis de una nueva enzima de tipo triptasa por queratinocitos. Como hay una elevación de la uroquinasa, plasmina, calicreína-5, calicreína-7 y actividades enzimáticas de tipo triptasa observadas en SC derivado de piel de mejillas clínicamente normales, se anticipa que existirán actividades aún mayores de estas enzimas en condiciones cutáneas en las que la barrera epidérmica está alterada.

Ha habido varios estudios recientes que ligan las proteasas presentes en el SC a condiciones clínicas de la piel tales como rosácea y psoriasis (Borgono y col., 2007; Yamasaki y col., 2007; Pampalakis y Sotiropoulou, 2007). En estos casos, las proteasas en cuestión son las serina proteasas de tipo tripsina y tipo quimotripsina de la familia de calicreína. El papel de las proteasas en la rosácea puede basarse parcialmente en la degradación del péptido inmunitario innato del huésped LL-37 en fragmentos proinflamatorios (Yamasaki y col., 2007). Con la psoriasis, las proteasas de calicreína responsables de la descamación de células superficiales escapan de la regulación y provocan un aumento en la descamación que conduce a formación de escamas, lo que sucede por el desprendimiento excesivo de piel. Estas condiciones conducen a inflamación y otros síntomas clínicos significativos. En un nivel subclínico estos procesos pueden conducir a piel seca, piel enrojecida, una degradación de la función de barrera (que conduce a una pérdida de humedad cutánea), una degradación de la matriz extracelular y envejecimiento cutáneo prematuro. Por lo tanto, el uso de principios activos capaces de ralentizar este proceso inhibiendo las proteasas de la piel es significativamente valioso.

Se usan principios activos peptídicos en productos cosméticos y de cuidado de la piel para proporcionar bioactividad capaz de mejorar la apariencia, sensación y estética de la piel. Dichos péptidos bioactivos también pueden usarse para fines terapéuticos, tal como en el tratamiento de heridas o quemaduras. Sin embargo, como se ha descrito anteriormente, la piel expresa proteasas capaces de degradar proteínas y péptidos, impidiendo de este modo la capacidad de ciertos péptidos para ejercer sus efectos saludables. Este efecto negativo de proteasas que residen en el SC es además de los efectos negativos de los mismos con respecto a la inflamación y renovación de células cutáneas. Estos problemas se superan por este aspecto de la presente invención, que se refiere en parte a formulaciones que comprenden tanto un péptido bioactivo como un inhibidor de proteasa. Dicha combinación proporciona a formulaciones de cuidado de la piel tres características deseables: (i) el componente peptídico

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COMPAÑÍAb: NOMBRE ACTIVIDAD PRODUCTOS EN PREMEZCLA FUENTE

Atrium: Acetil tetrapéptido-2 Reducción de pérdida de factores tímicos Thymulen®4 Timopoyetina

Atrium: Acetil péptido-1 Aumento de melanina mediante regulación de MSH Melitane® Agonista de MSH

Atrium: Nonapéptido-1 Inhibición de la activación de tirosinasa Melanostatine® Antagonista de MSH

Grant Indust.: Palmitoil hexapéptido-6 Reparación dérmica Matrix Rebuilder™ Inmunidad innata

Grant Indust.: Oligopéptido-10 Protección dérmica InvisaSkin-64™ Inmunidad innata

Lipotec: Tripéptido-1 Inhibe la glucosilación del colágeno Aldenine®, Trylagen™ Suero humano

Lipotec: Tripéptido-10 citrulina Fibrilogénesis del colágeno Decorinyl, Trylagen™ Decorina

Lipotec: Acetil tetrapéptido-5 Reducción de edema por inhibición de ACE Eyeseryl® No desvelada

Lipotec: Pentapéptido-3 Tipo botox mediante encefalinas miméticas Leuphasyl® No desvelada

Lipotec: Acetil hexapéptido-3 (u -8) Tipo botox mediante inhibición de SNARE Argireline® SNAP-25

Lipotec: Acetil octatapéptido-1 Tipo botox mediante inhibición de SNARE SNAP-8 SNAP-25

Lipotec: Hexapéptido-10 Aumenta la proliferación celular y la laminina V Serilesine® Laminina

Pentapharm: Palmitoil Tripéptido-5 Síntesis de colágeno mediante TGF-beta Syn®-coll Trombospondina 1

Pentapharm: Dipéptido diaminobutiroil benzilamida diacetato Tipo botox mediante receptor de acetilcolina Syn®-ake Waglerina 1

Pentapharm: Oligopéptido-20 Inhibidor de MMP mediante TIMP Pepha®-timp TIMP-2

Pentapharm: Pentapéptido-3 Tipo botox mediante receptor de acetilcolina Vialox® No desvelada

Procyte: GHK de cobre / AHK Curación de heridas Ejemplo de marca Neova Suero humano

Sederma: Dipéptido-2 Drenaje linfático mediante inhibición de ACE Eyeliss™ Colza

Sederma: Palmitoil Oligopéptido Síntesis de colágeno mediante señalización Eyeliss™, Matrixyl™ 3000 Suero humano

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COMPAÑÍAb: NOMBRE ACTIVIDAD PRODUCTOS EN PREMEZCLA FUENTE

Sederma: Palmitoil Tetrapéptido-7 (formalmente -3) Elasticidad mediante reducción de IL6 Matrixyl 3000™, Rigin™ IgG / matriquina

Sederma: Palmitoil pentapéptido-3 Estimulación de colágeno mediante señalización Matrixyl™ Procolágeno

Sederma: Palmitoil Oligopéptido Actividad de tipo ácido retinoico Biopéptido-CL™ Colágeno

Sederma: Palmitoil Oligopéptido Aumenta el colágeno y HA Biopéptido-EL™ Elastina

a Abreviaturas usadas en la Tabla: ACE, enzima conversora de angiotensina 1; ECM, matriz extracelular; HA, ácido hialurónico; HGF, factor de crecimiento de hepatocitos; MMP, metaloproteinasas de matriz; MSH, hormona estimulante de melanocitos; SNARE, receptor de unión a NSF soluble (NSF, factor sensible a N-etilmaleimida); TGFβ, factor de crecimiento transformante-β; TIMP, inhibidor tisular de MMP. b Localización del fabricante: Atrium Biotechnologies (Quebec City, Canadá), Grant Industries (Elmwood, NJ), Lipotec (Barcelona, España), Pentapharm (Basilea, Suiza), Procyte (Photomedix, Montgomeryville, PA), Sederma (Le Perray en Yvelines, Francia).

Objetivo del estudio

El uso de inhibidores de proteinasa en productos cosméticos y de cuidado de la piel terapéuticos en combinación con péptidos bioactivos para generar múltiples beneficios no se ha explorado. Por lo tanto, los presentes inventores pretenden determinar si los inhibidores de proteasa podrían proteger péptidos bioactivos, derivados tanto sintéticamente como de forma innata, de la degradación proteolítica. Dichos inhibidores de proteasa serían candidatos para su uso en formulaciones de cuidad cutáneo que contienen péptidos.

Materiales de ensayo y metodología

Los siguientes inhibidores de proteasa se caracterizaron por la capacidad para bloquear la degradación de péptidos bioactivos en ciertas condiciones proteolíticas: aprotinina (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), ácido tranexámico (Sigma-Aldrich), benzamidina (Sigma-Aldrich), Fmoc-lys(Boc) (Chem-Impex, Chicago, IL), Fmoc-arg (Pmc) (Chem-Impex), benzoil-arg-nitroanilida (Sigma-Aldrich) y benzoil-arg-naftilamida (Sigma-Aldrich).

Los siguientes péptidos se usaron como péptidos de principios bioactivos del cuidado de la piel representativos y péptidos cutáneos innatos: oligopéptido-10 (HB64) (Peptisyntha, Torrence, CA), cuya secuencia es FAKALKALLKALKAL-NH2 (SEQ ID NO: 17) (refiérase a la patente de Estados Unidos n.º 7.381.704); hexapéptido21 (HB168) (Neo-MPS, San Diego, CA), cuya secuencia es FALLKL-NH2 (SEQ ID NO: 18) (refiérase a la patente de Estados Unidos n.º 7.381.704); HB1345 (Peptisyntha), cuya secuencia es decanoil-KFKWPW-NH2 (SEQ ID NO: 19) (refiérase a la patente de Estados Unidos n.º 7.407.940); y LL-37 (LLGDFFRKSKEKIG-KEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES, SEQ ID NO: 20), que se desvela en Johansson y col. (1998). Aunque los péptidos HB64, HB168 y HB1345 tienen un origen sintético, LL-37 se caracterizó originalmente para expresarse de forma innata por células humanas.

Las siguientes proteasas se emplearon en la reducción de la presente invención a la práctica: quimotripsina (Sigma-Aldrich), que escinde cadenas de aminoácidos en el lado carboxilo de tirosina, triptófano y fenilalanina; tripsina (Sigma-Aldrich), que escinde cadenas de aminoácidos en el lado carboxilo de lisina y arginina, excepto cuando una se sigue de prolina; elastasa (Sigma-Aldrich), que es una serina proteasa que escinde cadenas de aminoácidos en el lado carboxilo de aminoácidos pequeños, hidrófobos, tales como glicinas, alanina, y valina; calicreína (Sigma-Aldrich), que es una serina proteasa; plasmina (Sigma-Aldrich), que es una serina proteasa; y uroquinasa, que es una serina proteasa.

Procedimientos para medir la degradación peptídica

Se usaron péptidos de origen sintético y LL-37 en los experimentos de procesamiento de proteasa a una concentración de 1-2 mg/ml en concentración de tampón final de MOPS 0,5 M pH 8,5/NaCl 0,5 M. Se usaron proteasas a una concentración de 0,020-0,050 mg/ml.

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Se repitió el experimento anterior con LL-37 y plasmina, pero esta vez incluyendo el inhibidor de proteasa ácido tranexámico en la reacción. Se obtuvo una traza de TIC de esta reacción después de un periodo de incubación de 1 hora. Se tomó un espectro de masas en el tiempo de retención de aproximadamente 16,5 minutos. Como resultó evidente tanto en la traza de TIC como en el espectro de masas, se produjeron productos de degradación de LL-37; 5 de forma importante sin embargo, el péptido parental, intacto, completo, aún era detectable a niveles apreciables como tres picos espectrales de masas, con diferencias de carga proporcionadas. Este resultado es coherente con los resultados del análisis anterior usando un conjunto de inhibidor/proteasa/péptido diferente. Por lo tanto, se esperaría que este aspecto de la presente invención fuera aplicable a diversas combinaciones de péptidos bioactivos e inhibidores de proteasa; esta expectativa se corrobora adicionalmente con las pruebas presentadas a

10 continuación en la Tabla 3.

En otro experimento, la degradación de oligopéptido-10 (HB64) después de una exposición de 4 horas a plasmina se supervisó con trazas de TIC y XIC. A partir de este análisis, fue evidente que la plasmina se dirige a y degrada HB64. La traza de XIC (a 799,5 uma) mostró que, aunque la mayoría del péptido HB64 estaba degradado, algo del péptido parental aún podría detectarse. Cuando esta reacción incluía ácido tranexámico, fue evidente a partir de las

15 trazas de TIC y XIC que el péptido HB64 estaba protegido de proteólisis mediada por plasmina. De hecho, la cantidad de péptido parental en la reacción como se determina por una traza de XIC fue cinco veces mayor en comparación con cuando el péptido se incubó con plasmina solamente.

Se realizó una serie de experimentos empleando la metodología anteriormente descrita para determinar la utilidad de la invención con respecto a una serie más amplia de proteasas, péptidos e inhibidores de proteasa. Los datos de

20 este trabajo se resumen en la Tabla 3. Si, en cualquier punto temporal específico, no hubo ningún péptido parental detectable (es decir, la ausencia de péptido no degradado), entonces ese punto temporal estaba documentado como el tiempo requerido para degradación peptídica.

Tabla 3: Los efectos protectores de diversos inhibidores de proteasa frente a diversos péptidos bioactivos.

Proteasa: Conc. μg/ml Péptidoa PM Inhibidor de proteasa Conc. mg/ml Supervivencia N.º de Expt.

Tripsina: 25 HB64 1598 ninguno <1 h 4

Tripsina: 25 HB64 1598 aprotinina 0,02 >24 h 5

Tripsina: 25 HB168 702 ninguno <1 h 6

Tripsina: 25 HB168 702 aprotinina 0,02 >24 h 7

Tripsina: 25 HB1345 1044 ninguno <1 h 8

Tripsina: 25 HB1345 1044 aprotinina 0,02 >24 h 9

Tripsina: 25 HB64 1598 ninguno <1 h 10

Tripsina: 25 HB64 1598 ácido ursólico 0,02 <1 h 11

Tripsina: 25 HB64 1598 ninguno <1 h 12

Tripsina: 25 HB64 1598 ácido tranexámico 0,02 <1 h 13

Tripsina: 25 HB64 1598 Fmoc-Lys(Boc) 0,02 <1 h 14

Tripsina: 25 HB64 1598 Fmoc-Arg(Pmc) 0,02 <1 h 15

Tripsina: 25 HB64 1598 benzamidina 0,02 <1 h 16

Tripsina: 25 HB64 1598 benzamidina 0,80 >24 h 17

Tripsina: 25 HB64 1598 ácido tranexámico 0,80 <1 h 18

Tripsina: 25 HB64 1598 benzoil-Arg-nitroanilida 0,80 <1 h 19

Tripsina: 25 HB64 1598 benzoil-Arg-naftilamida 0,80 >24 h 20

Tripsina: 25 HB64 1598 ácido ursólico 0,80 <24 h 21

Elastasa: 25 HB64 1598 ninguno <1 h 22

(continuación)

Elastasa: 25 HB64 1598 aprotinina 0,02 <1 h 23

Elastasa: 25 HB64 1598 ácido tranexámico 0,80 <1 h 24

Plasmina: 25 HB64 1598 ninguno <4 h 25

Plasmina: 25 HB64 1598 ácido tranexámico 0,80 <24 h 26

Calicreína: 25 HB64 1598 ninguno <24 h 27

Calicreína: 25 HB64 1598 ácido tranexámico 0,80 <24 h 28

Plasmina: 25 HB64 1598 ácido tranexámico 0,80 <6 h 29

Plasmina: 25 HB64 1598 ninguno <6 h 30

Plasmina: 50 HB64 1598 ácido tranexámico 10 <6 h 31

Plasmina: 46 HB64 1598 ninguno <4 h 32

Tripsina: 22 HB64 1598 ácido tranexámico 10 <1 h 33

Quimotripsina: 25 HB64 1598 ninguno <1 h 34

Quimotripsina: 25 HB64 1598 aprotinina 0,02 <24 h 35

Plasmina: 22 LL-37 4493 ácido tranexámico 9 <4 h 36

Plasmina: 22 LL-37 4493 ninguno <1 h 37

Plasmina: 22 LL-37 4493 ninguno <45 min 38

Quimotripsina: 22 LL-37 4493 ninguno <1 h 39

Quimotripsina: 22 LL-37 4493 ácido tranexámico 9 <1 h 40

Calicreína: 22 LL-37 4493 ninguno <4 h 41

Calicreína: 22 LL-37 4493 ácido tranexámico 9 <4 h 42

Plasmina: 20 HB64 1598 ninguno ND 43

Plasmina: 20 HB64 1598 ácido tranexámico 40 ND 44

Plasmina: 20 HB64 1598 ninguno <4 h 45

Plasmina: 22 HB64 1598 ácido tranexámico 40 <24 h 46

Calicreína: 22 LL-37 4493 ninguno <4 h 47

Calicreína: 22 LL-37 4493 aprotinina 0,02 <24 h 48

Calicreína: 22 LL-37 4493 ninguno <1 h 49

Calicreína: 22 LL-37 4493 ácido tranexámico 40 <2 h 50

Uroquinasa: 22 LL-37 4493 ninguno <24 h 51

Uroquinasa: 22 LL-37 4493 aprotinina 0,02 >24 h 52

Uroquinasa: 22 LL-37 4493 ninguno <24 h 53

Uroquinasa: 22 LL-37 4493 ácido tranexámico 40 >24 h 54

Claims

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