ES2557891T3 - Procalcitonina para el diagnóstico de infecciones bacterianas y guía de tratamiento antibiótico en pacientes con síntomas inespecíficos - Google Patents
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Abstract
Método para el diagnóstico de una infección bacteriana en un paciente que se presenta en el servicio de urgencias con síntomas inespecíficos (QNE), que comprende las etapas de: (i) determinar el nivel de procalcitonina (PCT) o de un fragmento de la misma de por lo menos 12 aminoácidos de longitud en una muestra de un paciente que se ha presentado con síntomas inespecíficos, y (ii) determinar si dicho paciente presenta una infección bacteriana o no mediante la comparación de dicho nivel determinado de PCT con un nivel umbral predeterminado, en el que el nivel umbral predeterminado es de entre 0,02 ng/ml y 0,25 ng/ml y en el que el paciente no presenta uno de los síntomas siguientes: dolor (torácico, abdominal, cabeza, pierna, articulación, espalda), disnea, tos, debilidad (localizada), síntomas de tipo ictus, extremidad hinchada (pierna, extremidad), diarrea, disuria, GCS<14, confusión, intoxicación, crisis, hemorragia, síncope, ansiedad, síntomas psicóticos, ideas de suicidio, lesión en la piel, reacción alérgica en la piel, fiebre, vértigo, palpitaciones, náusea con vómitos, traumatismo.
Description
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se mide la PCT en las muestras utilizando ambos métodos. Otra posibilidad es determinar, utilizando el ensayo de PCT en cuestión, dado que este ensayo presenta una sensibilidad analítica suficiente, el nivel de la mediana de PT de una población normal representativa, comparar los resultados con los niveles de mediana de PCR tal como se indica en la patente EP 09011073.5 ("Procalcitonin for the prognosis of adverse events in the asymptomatic population") y recalcular la calibración basándose en la diferencia obtenida mediante esta comparación.
La determinación del nivel de la PCT o fragmento o precursor o fragmento del mismo en la presente memoria se lleva a cabo utilizando un método de detección y/o un ensayo diagnóstico.
Tal como se indica en la presente memoria, un "ensayo" o "ensayo diagnóstico" puede ser de cualquier tipo aplicado en el campo del diagnóstico. Dicho ensayo puede estar basado en la unión de un analito que debe detectarse a una
o más sondas de captura con una determinada afinidad. En referencia a la interacción entre las moléculas de captura y las moléculas diana o moléculas de interés, la constante de afinidad preferentemente es superior a 108
M-1 .
En el contexto de la presente invención, las "moléculas de captura" son moléculas que pueden utilizarse para unirse a moléculas diana o a moléculas de interés, es decir, analitos (es decir, en el contexto de la presente invención, el péptido o péptidos cardiovasculares) de una muestra. De esta manera, las moléculas de captura pueden conformarse adecuadamente, tanto espacialmente como en términos de elementos de superficie, tales como la carga superficial, la hidrofobicidad, la hidrofilicidad, la presencia o ausencia de donantes y/o aceptores de Lewis, para unirse específicamente a las moléculas diana o a las moléculas de interés. De esta manera, la unión puede encontrarse mediada, por ejemplo, por interacciones iónicas, de van der Waals, pi-pi, sigma-pi, hidrófobas o de enlace de hidrógeno, o una combinación de dos o más de las interacciones anteriormente indicadas entre las moléculas de captura y las moléculas diana o las moléculas de interés. En el contexto de la presente invención, las moléculas de captura pueden seleccionarse, por ejemplo, de entre el grupo que comprende una molécula de ácido nucleico, una molécula de carbohidrato, una molécula de ARN, una proteína, un anticuerpo, un péptido o una glucoproteína. Preferentemente las moléculas de captura son anticuerpos, incluyendo fragmentos de los mismos, con suficiente afinidad para una diana o molécula de interés, e incluyendo anticuerpos recombinantes o fragmentos de anticuerpo recombinante, así como derivados química y/o bioquímicamente modificados de dichos anticuerpos o fragmentos derivados de la cadena variante con una longitud de por lo menos 12 aminoácidos de la misma.
Los métodos de detección preferentes comprenden inmunoensayos en diversos formatos, tales como, por ejemplo, el radioinmunoensayo (RIA), los inmunoensayos de quimioluminiscencia y fluorescencia, los inmunoensayos ligados a enzima (ELISA), las matrices de perlas basadas en Luminex, los ensayos de micromatrices de proteínas y los formatos de ensayo rápido, tales como, por ejemplo, las tiras de ensayo inmunocromatográficas.
Los ensayos pueden ser ensayos homogéneos o heterogéneos, y ensayos competitivos y no competitivos. En una forma de realización particularmente preferida, el ensayo se encuentra en forma de un ensayo de tipo sándwich, que es un inmunoensayo no competitivo, en el que la molécula que debe detectarse y/o cuantificarse se une a un primer anticuerpo y a un segundo anticuerpo. El primer anticuerpo puede unirse a una fase sólida, por ejemplo una perla, una superficie de un pocillo u otro recipiente, un chip o una tira, y el segundo anticuerpo es un anticuerpo que se marca con, por ejemplo, un pigmento, un isótopo radioactivo o una fracción reactiva o catalíticamente activa. La cantidad de anticuerpo marcado unido al analito seguidamente se mide mediante un método apropiado. La composición y procedimientos generales implicados en los "ensayos de tipo sándwich" se encuentran bien establecidos y son conocidos por el experto en la materia (The Immunoassay Handbook, ed. David Wild, Elsevier LTD, Oxford, 3a ed. (mayo de 2005), ISBN-13: 978-0080445267; Hultschig C. et al., Curr. Opin. Chem. Biol. 10(1)_410, feb. de 2006; PMID: 16376134, incorporada como referencia en la presente memoria).
En una forma de realización particularmente preferida, el ensayo comprende dos moléculas de captura, preferentemente anticuerpos, ambas presentes como dispersiones en una mezcla de reacción líquida, en la que un primer componente de marcaje se une a la primera molécula de captura, en la que dicho primer componente de marcaje es parte de un sistema de marcaje basado en la inhibición o la amplificación de la fluorescencia o la quimioluminiscencia, y un segundo componente de marcaje de dicho sistema de marcaje se une a la segunda molécula de captura, de manera que al unirse ambas moléculas de captura al analito, se genera una señal medible que permite la detección de los complejos de tipo sándwich formados en la solución que comprende la muestra. Todavía más preferido, dicho sistema de marcaje comprende criptatos de tierra rara o quelatos de tierra rara en combinación con un pigmento fluorescente o pigmento quimioluminiscente, en particular un pigmento de tipo cianina.
En el contexto de la presente invención, los ensayos basados en fluorescencia comprenden la utilización de pigmentos que pueden, por ejemplo, seleccionarse de entre el grupo que comprende FAM (5-o 6carboxifluoresceína), VIC, NED, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína (FITC), IRD-700/800, pigmentos cianina, tales como CY3, CY5, CY3.5, CY5.5, Cy7, xanteno, 6-carboxi-2',4',7',4,7-hexacluorofluoresceína (HEX), TET, 6carboxi-4',5'-dicloro-2',7'-dimetoxi-fluoresceína (JOE), N,N,N',N'-tetrametil-6-carboxirodamina (TAMRA), 6-carboxi-Xrodamina (ROX), 5-carboxirodamina-6G (R6G5), 6-carboxirodamina-6G (RG6), rodamina, verde rodamina, rojo rodamina, rodamina 110, pigmentos BODIPY, tales como BODIPY TMR, verde Oregon, coumarinas tales como umbeliferona, bencimidas tales como Hoechst 33258, fenantridinas tales como rojo Texas, amarillo Yakima, Alexa
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