ES2553766T3 - Composiciones herbicidas que comprenden jengibre y solidago para el tratamiento de infección por gripe - Google Patents

Abstract

Una composición que contiene una combinación de jengibre y solidago, para su uso en prevención y/o tratamiento de una infección con influenza (gripe).

Description

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DESCRIPCION

Composiciones herbicidas que comprenden jengibre y solidago para el tratamiento de infeccion por gripe Campo de la invencion

La presente invencion esta relacionada con la prevencion y/o tratamiento de las infecciones de gripe. Mas espedficamente, la presente invencion se refiere a una combinacion de jengibre y solidago para su uso en metodos de prevencion y/o tratamiento de infecciones de influenza (gripe) o sus sintomas.

Antedentes de la invencion

Gripe

La gripe es una enfermedad contagiosa causada por el virus influenza. La gripe comun se caracteriza por una infeccion aguda asociada a problemas respiratorios, intenso dolor muscular (mialgia) dolor de cabeza, escalofrios, obstruccion nasal, fiebre, tos, estornudos y dolor de garganta. La mayor parte de la poblacion se recuperara en general de la gripe sin ninguna complicacion. Las personas mayores, los ninos pequenos y la gente con deficiencias en el sistema inmunitario, pueden tener serias complicaciones y pueden incluso morir debido a la gripe.

La bibliografia actual describe la influenza comun humana como una grave enfermedad que causa aproximadamente 36.000 muertes solo en los Estados Unidos (Roxas, 2007). Las epidemias anuales de influenza (gripe) tienen como consecuencia la perdida de dias de trabajo, dias de escuela asi como un numero significativo de dias de hospitalizacion e incluso muertes entre los ancianos, personas mayores que son particularmente vulnerables a las infecciones respiratorias.

La gripe la causa la cepa del virus influenza A o B, pero es la cepa A normalmente la unica responsable de la pandemia de gripe (Klenk, 2008). Hay varios subtipos de cepas A, que se nombran de acuerdo a un numero H (por el tipo de hemoglutinina) y un numero N (por el tipo de neuramidasa). Existen 16 tipos de antigenos H diferentes (Hi a H16) y 9 antigenos N diferentes (N1 a N9). El virus influenza A (N1H1) es un subtipo de virus influenza A y el caso mas frecuente de influenza (gripe) en humanos. Algunos tipos de H1N1 son endemicos en los humanos y causan una parte de todas las enfermedades parecidas a la influenza y una parte de la influenza estacional. El virus pandemico HlNl/09 es un virus de influenza A subtipo H1N1 de origen porcino responsable de la pandemia de gripe de 2009. El tratamiento de la gripe es posible con medicamentos como Oseltamivir (Tamiflu®, Roche) o Zanamivir; ambos inhibidores de la neuraminidasa, una importante enzima de la superficie del virus influenza (Gubareva LV, 2004). Los virus de la familia influenza son conocidos por presentar una alta tasa de mutacion y pueden tener lugar modificaciones en su genoma cada ano, dando lugar a la resistencia de los medicamentos. Por ejemplo, se han observado casos en los que un tipo de virus influenza presento alta resistencia al tratamiento con Tamiflu™ (Centros para el Control de Enfermedades en US (CDC)).

De vez en cuando aparecen por tanto nuevos tipos de influenza que infectan a humanos. Estos tipos frecuentemente tienen su origen en otras especies y se han adaptado a los humanos a traves de mutaciones. El virus de la gripe influenza porcina A H1N1, tambien llamada gripe porcina, se ha reportado alrededor del mundo y fue declarado como un virus pandemico de influenza. La gripe porcina H1N1 inicialmente solo afecto a los cerdos, pero empezo a infectar a humanos en Norte America en 2009. Los humanos que tienen poca o que no tienen inmunidad natural a este virus, puede ser llevado a una enfermedad seria y generalizada.

Las vacunas pueden prevenir la gripe en un 70 a 90% de los casos observados en humanos adultos sanos (Bridges CB, 2000; Herrera GA, 2007). Sin embargo, la vacuna contra la gripe tiene que redisenarse cada ano porque las vacunas de los anos previos probablemente sean inefectivas contra los tipos mutados recientemente. Por tanto la vacuna anual se redisena antes de que comience la temporada basandose en la del ano anterior. Como los cientificos normalmente no pueden predecir con precision que tipo sera el dominante, la vacuna puede no ajustarse totalmente al nuevo tipo. Ademas, la vacuna de la gripe se disena espedficamente contra los virus de influenza tipo A y B, y por tanto no protege contra los virus del resfriado como los tipos rinovirus y coronavirus.

Los sintomas de la gripe pueden aliviarse tanto con los tratamientos previamente mencionados o con, por ejemplo 1) analgesicos sin prescripcion para aliviar el dolor y reducir la fiebre; 2) supresores de la tos para tos seca sin mucosidad; 3) expectorantes para ayudar a limpiar el moco y que pueda ser expulsado por la tos; y/o 4) descongestivos para reducir la congestion nasal.

Weed Susun “Glorioso solidago”, 21 de junio de 2009, paginas 1-4, divulga un te hecho con hojas machacadas y flores de solidago, que cuando se toma caliente con miel puede usarse en el tratamiento entre otros de resfriados y gripe.

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CN1931208 divulga el uso comun de hierba de solidago comun en el tratamiento de la gripe aviar H5N1 y la influenza. CN1451434 divulga un tratamiento para SARS basado en un medicamento que contiene hierba de solidago comun. US2008102140 divulga el uso de extractos de Solidago virgaurea (solidago) en el tratamiento de la influenza. WO2007056811 divulga el uso de jengibre en el tratamiento de los virus del resfriado y la gripe.

Permanece la necesidad de composiciones alternativas para la prevencion y/o tratamiento de las infecciones de gripe. La presente description se refiere a una serie de documentos.

Resumen de la invencion

Los solicitantes han identificado y caracterizado nuevas propiedades de una combination de dos plantas o partes de las mismas (p.ej., sus extractos). La combinacion de la presente invencion posee actividad que incluye

capacidad antiviral in vitro e in vivo.

Los dos principales componentes activos de la combinacion de la presente invencion son: 1) jengibre; y 2) solidago. Tal y como se usan aqui, y a menos que el contexto en el que se usan sugiera de forma implicita o explicita otro significado para esos terminos, los terminos “jengibre” y “solidago” se refieren a la planta completa, partes de la misma, o extractos de la misma. Esas plantas y sus extractos se reconocen como sustancias seguras para los humanos (Comision Alemana E, Blumenthal M, 1998). Los solicitantes han demostrado que esas plantas solas o combinadas son efectivas en la prevencion y/o tratamiento de las infecciones de gripe. Ademas, los solicitantes han descubierto que el solidago y el jengibre actuan juntos y manifiestan una fuerte (mas que aditiva) actividad antiviral, incluyendo la inhibition de la actividad infectiva del virus influenza (tipo A/WS/33, H1N1). Es mas, los solicitantes demuestran aqui que un extracto alcoholico de solidago es mas eficiente inhibiendo la infection viral que otros tipos de extractos como los extractos acuosos. La combinacion de esas dos plantas (o de partes especificas o extractos de las mismas) proporcionan una via alternativa de atenuar/aliviar los sintomas de la gripe y/o disminuir la duration del periodo de infeccion.

Sumado a su capacidad de inhibir la actividad infectiva in vitro del virus influenza (p.ej., la cepa comun H1N1 asi como la gripe porcina tipo H1N1), la combinacion de la presente invencion ha mostrado ser activa en un modelo animal in vivo que reproduce la infeccion del virus influenza (tipo A/WS/33, H1N1).

Composiciones

Por consiguiente la presente invencion presenta una composition que contiene una combinacion de jengibre y solidago para su uso en la prevencion y/o tratamiento de infecciones de gripe (o sus sintomas asociados).

En una realization particular de la composicion de la presente invencion, la composicion ademas contiene una sustancia portadora. En otra realizacion de la composicion de la presente invencion, la composicion contiene extracto de jengibre y/o extracto de solidago. En otra realizacion, la combinacion contiene polvo de jengibre. En otra realizacion, el extracto de jengibre, es un extracto crudo de jengibre. En otra realizacion el extracto de jengibre es jengibre extraido 100% con agua. En otra realizacion, el extracto de jengibre es un extracto de jengibre con CO2. En otra realizacion, el extracto de solidago es un extracto crudo de solidago. En otra realizacion, el extracto de solidago es crudo extraido 100% con agua. En otra realizacion, el extracto de solidago es un extracto alcoholico de solidago. En otra realizacion, el extracto alcoholico de solidago es un extracto hidroalcoholico de solidago. En otra realizacion, el alcohol empleado para la production del extracto hidroalcoholico contiene un alcohol primario. En otra realizacion, el alcohol primario es metanol, etanol, 1-propanol, 1-butanol o cualquier combinacion de estos. En una realizacion preferida, el alcohol primario empleado es etanol. En otra realizacion, el alcohol utilizado para la obtencion del extracto hidroalcoholico, contiene un alcohol secundario En otra realizacion, se emplea una mezcla de al menos dos alcoholes diferentes. En otra realizacion, el extracto alcoholico se prepara usando una solution que contiene aproximadamente entre el 20% y aproximadamente el 85% de alcohol En otra realizacion, el extracto se prepara usando una solucion que contiene el 60% de alcohol. En otra realizacion, el extracto se prepara usando una solucion que contiene aproximadamente el 30% de alcohol. En otra realizacion la combinacion contiene una proportion de entre aproximadamente 1:15 de jengibre: solidago y aproximadamente 10:1 de jengibre: solidago. En otra realizacion, la proporcion es aproximadamente 1:5 de jengibre: solidago. En otra realizacion la proporcion es aproximadamente 5:1 de jengibre: solidago En otra realizacion, la cantidad efectiva contiene entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 4500 mg de jengibre. En otra realizacion, la composicion contiene entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 200 mg de jengibre En otra realizacion, la composicion contiene entre aproximadamente 43.5 mg y aproximadamente 174 mg de jengibre. En otra realizacion, la composicion contiene entre aproximadamente 1000 mg y aproximadamente 4500 mg de jengibre. En otra realizacion, la composicion contiene entre aproximadamente 2000 mg y aproximadamente 4000 mg de jengibre En otra realizacion, la composicion contiene entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de solidago. En

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otra realizacion, la composition contiene entre aproximadamente 400 mg y aproximadamente 800 mg de extracto de solidago.

En una realizacion preferida de la composicion de la presente invention, la composicion contiene polvo de arandano. En otra realizacion el jengibre es Zingiber officinale Roscoe. En otra realizacion, el solidago es Solidago virgaurea. En otra realizacion, el jengibre y el solidago son los unicos ingredientes medicinales para la prevention o el tratamiento de la infection de gripe en la composicion En otra realizacion, la composicion ademas contiene como ingredientes no medicinales celulosa microcristalina, carboximetil celulosa de sodio reticulada, acido estearico, silice coloidal, estearato de magnesio y monohidrogeno fosfato de calcio.

En un aspecto preferido, la presente invencion representa una composicion nutraceutica y/o dietetica (suplemento alimenticio, bebida (p.ej. una dosis inmune de 2-4 onzas) o un alimento) que contiene una combination de jengibre y solidago. En una realizacion, la composicion es una composicion nutraceutica o dietetica o veterinaria. En otra realizacion, la composicion esta contenida en una bebida o un producto alimenticio. En otra realizacion, la composicion esta contenida en una bebida de una dosis de 2 a 6 onzas. En otra realizacion, la composicion esta adaptada para su administration dentro de las 48 h del inicio de los sintomas de gripe. En una realizacion preferida, la composicion esta adaptada para su administracion dentro de las 24 h de inicio de los sintomas de gripe. En una realizacion preferida, la composicion esta adaptada para administrarse dos veces al dia.

En una realizacion preferida de la composicion de la presente invencion, la combinacion previene o trata al menos uno de los siguientes sintomas: la carga viral en la sangre o las celulas del sujeto, moqueo nasal, taponamiento nasal, estornudos, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de cabeza, congestion del pecho, agotamiento, fiebre, dolor muscular, perdida de apetito, dolor de cabeza y escalofrios. En otra realizacion, la combinacion previene o trata al menos dos de esos sintomas. En otra realizacion particular, la combinacion de la presente invencion previene, trata o reduce al menos dos de los sintomas mencionados.

La composicion de la presente invencion, es para utilizarse en la prevencion y/o el tratamiento de la infeccion de gripe. En una realizacion preferida, la combinacion previene y/o trata la infeccion de gripe de forma sinergica. En una realizacion preferida, la composicion es para la prevencion de las infecciones de gripe. En una realizacion preferida, la composicion es para el tratamiento de las infecciones de gripe. En una realizacion preferida, la composicion esta adaptada para usos veterinarios. En una realizacion preferida, la composicion esta adaptada para humanos.

Usos

La presente invencion se refiere al uso de una composicion que contiene una combinacion de jengibre y solidago para la production de la composicion de la presente invencion para prevenir o tratar una infeccion de gripe. En una realizacion, su uso es para la produccion de un medicamento. En otra realizacion, su uso es para la produccion de una composicion nutraceutica o dietetica (p.ej., un suplemento alimenticio o un suplemento dietetico).

La presente invencion se refiere al uso de la composicion como se ha definido anteriormente, para la prevencion y/o tratamiento de una infeccion de gripe o en la preparation de un medicamento, una composicion nutraceutica o una composicion dietetica para la prevencion y/o tratamiento de una infeccion de gripe.

En una realizacion particular del uso de la presente invencion, la composicion ademas contiene una sustancia portadora. En otra realizacion, la composicion contiene un extracto de jengibre y/o un extracto de solidago. En otra realizacion, la composicion contiene polvo de jengibre. En otra realizacion, el extracto de jengibre es un extracto crudo de jengibre. En otra realizacion, el extracto de jengibre es jengibre extraido 100% en agua. En una realizacion particular, el extracto de jengibre es un extracto de jengibre con CO2. En otra realizacion, el extracto de solidago es un extracto crudo de solidago. En otra realizacion, el extracto de solidago es solidago crudo extraido 100% en agua. En otra realizacion, el extracto de solidago es un extracto alcoholico de solidago. En otra realizacion, el extracto alcoholico de solidago es un extracto hidroalcoholico de solidago. En otra realizacion, el alcohol empleado para la produccion del extracto hidroalcoholico comprende un alcohol primario. En otra realizacion, el alcohol primario comprende metanol, etanol, 1-propanol, 1-butanol o cualquier combinacion de estos. En otra realizacion, el alcohol primario es etanol. En otra realizacion, el alcohol empleado para la produccion del extracto hidroalcoholico comprende un alcohol secundario. En otra realizacion, se emplea la mezcla de al menos dos alcoholes diferentes para la produccion del extracto alcoholico. En una realizacion particular, el extracto alcoholico se prepara usando una solution que comprende aproximadamente entre el 20% y aproximadamente el 85% de alcohol. En otra realizacion, el extracto alcoholico se prepara usando una solucion que comprende aproximadamente el 60% de alcohol. En otra realizacion, el extracto alcoholico se prepara usando una solucion que comprende aproximadamente el 30% de alcohol. En otra realizacion, la composicion contiene una proportion de entre aproximadamente 1: 15 y aproximadamente 10:1 de jengibre: solidago. En otra realizacion, la proporcion es aproximadamente 1: 5 de jengibre: solidago. En otra realizacion, la proporcion es aproximadamente 5: 1 de jengibre: solidago. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre

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aproximadamente 40 mg y aproximadamente 4500 mg de jengibre. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre aproximadamente 40 mg y 200 mg de jengibre. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre aproximadamente 43.5 mg y aproximadamente 174 mg de jengibre. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre aproximadamente 1000 mg y aproximadamente 4500 mg de jengibre. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre aproximadamente 2000 mg y aproximadamente 4000 mg de jengibre. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de solidago. En otra realizacion, la cantidad efectiva comprende entre aproximadamente 400 mg y aproximadamente 800 mg de extracto de solidago. En otra realizacion, la composition ademas comprende extracto de arandano. En otra realizacion, el jengibre es Zingiber officinale Roscoe. En otra realizacion, el solidago es Solidago virgaurea. En otra realizacion, el jengibre y solidago son los unicos ingredientes medicinales en la composicion para el tratamiento de las infecciones de gripe. En otra realizacion, la composicion ademas comprende como ingredientes no medicinales celulosa microcristalina, carboximetil celulosa de sodio reticulada, carboximetil celulosa, acido estearico, silice coloidal, estearato de magnesio y monohidrogeno fosfato de calcio. En otra realizacion, la composicion es una composicion nutraceutica o dietetica o veterinaria. En otra realizacion, la composicion es un suplemento alimenticio. En otra realizacion, la composicion esta contenida en una bebida o un producto alimenticio. En otra realizacion, la bebida es una bebida de dosis de 2 a 6 onzas. En otra realizacion, la composicion esta adaptada para su administration dentro de las 48 h del inicio de los sintomas de gripe. En otra realizacion, la composicion esta adaptada para su administracion dentro de las 24 h de inicio de los sintomas de gripe. En otra realizacion, la composicion esta adaptada para administrarse dos veces al dia. En otra realizacion, la combination previene y/o trata al menos uno de los siguientes sintomas: la carga viral en la sangre o en las celulas del sujeto, moqueo nasal, taponamiento nasal, estornudos, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de cabeza, congestion del pecho, agotamiento, fiebre, dolor muscular, perdida de apetito, dolor de cabeza y escalofrios. En otra realizacion, la combinacion previene y/o trata al menos dos de los sintomas. En otra realizacion, la combinacion previene y/o trata la infection de gripe de forma sinergica. En otra realizacion del uso, la composicion es para prevenir y/o tratar una infeccion de influenza. En otra realizacion del uso, la composicion es para prevenir y/o tratar una infeccion de rinovirus. En otra realizacion del uso, la composicion es para prevenir infecciones de gripe. En otra realizacion del uso, la composicion es para tratar infecciones de gripe. En otra realizacion del uso, la composicion es para su uso en animales no humanos. En otra realizacion de uso, la composicion es para uso en humanos.

La presente description se refiere al uso de una cantidad efectiva de una combinacion de jengibre y solidago para prevenir y/o tratar una infeccion de gripe en una celula. En otro aspecto, la presente descripcion se refiere al uso de un extracto alcoholico de solidago para prevenir y/o tratar una infeccion de gripe. Esos usos son para la prevention de una infeccion de gripe.

Composiciones y usos

En una realizacion preferida de la invention, la composicion anteriormente mencionada contiene polvo de jengibre (i.e., rizoma de jengibre, molido, secado y liofilizado). En una realizacion, la anteriormente mencionada composicion contiene un extracto de jengibre. En una realizacion, el extracto es un extracto crudo o raiz seca. En una realizacion, el anteriormente mencionado extracto de jengibre es un extracto de jengibre con CO2. En otra realizacion, el extracto de jengibre es un extracto alcoholico. Preferentemente, el extracto de jengibre es un extracto de jengibre con CO2.

En una realizacion preferida de la invencion, la composicion anteriormente mencionada contiene extracto de solidago (i.e., solidago entero o partes del mismo (p.ej., flores y/o hojas) molidas y secadas o liofilizadas). En una realizacion, la composicion anteriormente mencionada contiene una parte aerea del solidago (entero o el extracto del mismo). En una realizacion el extracto de solidago es un extracto de CO2. En otra realizacion preferida, el extracto de solidago anteriormente mencionado es un extracto alcoholico.

En una realizacion preferida de la invencion, el extracto alcoholico anteriormente mencionado es un extracto hidroalcoholico. En una realizacion, el alcohol empleado para la production del extracto hidroalcoholico contiene un alcohol primario. Ejemplos no limitantes de alcoholes primarios que pueden emplearse de acuerdo con la presente invencion incluyen metanol, etanol, 1-propanol, 1-butanol, y combinaciones de los mismos. En una realizacion, el alcohol empleado para la produccion del extracto hidroalcoholico contiene un alcohol secundario. Ejemplos no limitantes de alcoholes secundarios incluyen 2-propanol, 2-butanol, o una combinacion de los mismos. En una realizacion, en alcohol empleado para la produccion del extracto hidroalcoholico contiene un alcohol terciario como el 2- metil-2-propanol. En una realizacion, el alcohol empleado para la produccion del extracto hidroalcoholico comprende un alcohol polihidrico. Ejemplos no limitantes de alcoholes polihidricos incluyen, etilenglicol, propilenglicol, dietilenglicol, dipropilenglicol, 1,3-butilen-glicol o una combinacion de los mismos. En una realizacion particular, el alcohol empleado para la produccion del extracto hidroalcoholico es etanol.

En una realizacion preferida de la invencion, se emplea una mezcla de al menos dos alcoholes diferentes para la produccion de los extractos alcoholicos anteriormente mencionados.

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En una realizacion particular preferida de la invencion, los extractos alcoholicos anteriormente mencionados pueden prepararse usando una solucion que contiene entre aproximadamente el 20% y aproximadamente el 85% de alcohol. En una realizacion, el extracto hidroalcoholico anteriormente mencionado, se prepara empleando una solucion que comprende aproximadamente el 30% de alcohol. En una realizacion particular, el extracto hidroalcoholico se prepara usando una solucion que contiene aproximadamente el 30% de etanol.

En una realizacion preferida de la invencion, la composicion de la presente invencion contiene una combinacion de jengibre y solidago en las cantidades y proporciones que previenen o tratan de forma sinergica la infeccion de gripe (p.ej., que reducen la actividad infectiva del virus de la gripe a niveles que son superiores a la suma de la actividad antiviral de cada compuesto solo, por ejemplo en un ensayo in vitro para la inhibicion de las unidades de formacion de colonias).

En una realizacion preferida de la invencion, la combinacion contiene una proporcion entre aproximadamente 1:10 y 10:1 de jengibre: solidago. En otra realizacion, la proporcion es aproximadamente 1:5 de jengibre: solidago. En una realizacion mas particular, la proporcion es aproximadamente 5:1 de jengibre: solidago. En una realizacion particular, la proporcion entre el polvo de jengibre y el extracto hidroalcoholico de solidago empleado en la combinacion de la presente invencion es aproximadamente 5:1 (polvo de jengibre: extracto de solidago). En otra realizacion particular, la proporcion entre el extracto de jengibre con CO2 y el extracto hidroalcoholico de solidago empleado en la combinacion de la presente invencion es 1:5 (extracto de jengibre: extracto de solidago).

En una realizacion particular y preferida de la invencion, las composiciones anteriormente mencionadas contienen entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 4500 mg (p.ej., 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 3000, 3500, 4000, 4500 mg, etc.) de polvo de jengibre y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg (p.ej., 200, 300, 400, 500, 600, 700 mg) de extracto hidroalcoholico de solidago. En otra realizacion, la composicion anteriormente mencionada contiene entre aproximadamente 2000 mg y aproximadamente 4000 mg de polvo de jengibre y entre aproximadamente 400 mg y aproximadamente 800 mg de extracto alcoholico de solidago. En otra realizacion particular, las composiciones anteriormente mencionadas contienen entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 200 mg (p.ej., 45, 60, 75, 90, 100, 120, 140, 150, 175, mg, etc.) de extracto de jengibre con CO2 y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de extracto hidroalcoholico de solidago. En una realizacion preferida, la composicion anteriormente mencionada contiene entre aproximadamente 43.5 mg y aproximadamente 174 mg de extracto de jengibre con CO2 y aproximadamente entre 200 mg y aproximadamente 800 mg de un extracto hidroalcoholico de solidago.

Aunque en realizaciones particulares y preferidas de la invencion, la composicion de la presente invencion contiene ciertas cantidades de jengibre y solidago como se definen anteriormente, las cantidades terapeuticamente efectivas que deben ser administradas para prevenir o tratar una infeccion de gripe pueden ser diferentes (p.ej., si, por ejemplo, se administra, mas de una capsula o si la composicion se administra mas de una vez al dia). Por consiguiente, en una realizacion, la cantidad efectiva o dosis pata prevenir o tratar una infeccion de gripe contiene entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 200 mg (p.ej., 45, 60, 75, 90, 100, 120, 140, 150, 175 mg, etc.) de extracto de jengibre con CO2 y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg (por ejemplo, 200, 300, 400, 500, 600, 700 mg) de extracto hidroalcoholico de solidago al dia. En otra realizacion, la cantidad efectiva o dosis para prevenir o tratar una infeccion de gripe contiene entre aproximadamente 43.5 mg y aproximadamente 174 mg de extracto de jengibre con CO2 y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de extracto hidroalcoholico de solidago diariamente. En aun otra realizacion, la cantidad efectiva o dosis para prevenir o tratar una infeccion de gripe contiene entre aproximadamente 1000 y aproximadamente 4000 mg (p.ej., 1500, 2000, 3000, 3500, 4000 mg, etc.) de polvo de jengibre y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de extracto hidroalcoholico de solidago al dia. En una realizacion preferida, la cantidad efectiva o dosis para prevenir o tratar una infeccion de gripe contiene entre aproximadamente 2000 y aproximadamente 4000 mg (p.ej., 1500, 2000, 3000, 3500, 4000 mg, etc.) de polvo de jengibre y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de extracto hidroalcoholico de solidago al dia. En aun otra realizacion, la cantidad efectiva o dosis para prevenir o tratar una infeccion de gripe contiene entre aproximadamente 2000 mg y aproximadamente 4000 mg de polvo de jengibre y entre aproximadamente 400 mg y aproximadamente 800 mg de extracto hidroalcoholico de solidago.

Las cantidades efectivas de jengibre y solidago anteriormente mencionadas pueden ser administradas en una o varias dosis. Por ejemplo, composiciones que contienen entre aproximadamente 43.5 mg de extracto de jengibre con CO2 y aproximadamente 200 mg de extracto hidroalcoholico de solidago, pueden ser administradas de 2 a 4 veces al dia. Un medico cualificado sabra como adaptar la dosis de acuerdo con la edad, sexo y peso del sujeto.

En una realizacion particular y preferida de la invencion, la composicion de la presente invencion pude contener productos adicionales o extractos para prevenir o tratar cualquier sintoma de una infeccion de gripe o puede ser usada en combinacion con cualquier medicamento adicional para la gripe. Ejemplos no limitantes de medicamentos

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adicionales para la gripe incluyen Cold Fx™, Tamiflu™, Equinacea, ginseng, amantadina, rimantadina, vitamina C, etc. En una realizacion particular, la composicion de la presente invention ademas contiene polvo de arandano. En otra realization particular, la composicion de la presente invencion contiene como ingredientes medicinales para la prevention o el tratamiento de una infection de gripe una combination de jengibre y solidago. En otra realizacion de la presente invencion, la composicion de la presente invencion contiene extractos de cinco plantas diferentes incluyendo extractos de jengibre y solidago como unicos extractos herbales o solo como unicos ingredientes medicinales. En una realizacion mas particular, la composicion de la presente invencion contiene extractos de cuatro plantas diferentes incluyendo extractos de jengibre y solidago como unicos ingredientes herbales o como o unicos ingredientes medicinales. En una realizacion aun mas particular, la composicion de la presente invencion contiene extractos de tres plantas diferentes, incluyendo extractos de jengibre y solidago como unicos extractos herbales o como unicos ingredientes medicinales. En una realizacion mas particular, la composicion de la presente invencion contiene extractos de jengibre y solidago como unicos extractos herbales.

Ademas de los ingredientes medicinales para la prevencion y el tratamiento de una infeccion de gripe, la composicion de la presente invencion puede contener ingredientes adicionales no medicinales. Por ejemplo, las preparaciones para administration oral pueden contener uno o mas aditivos como edulcorantes, agentes aromatizantes, colorantes, agentes estabilizantes y conservantes (p.ej., agentes antimicrobianos) La composicion de la presente invencion puede mezclarse con vehiculos farmaceuticos o sustancias portadoras a medida, como por ejemplo diluyentes inertes. En una realizacion particular, la composicion de la presente invencion adicionalmente contiene al menos uno (o dos, o tres, o cuatro, etc.) de los siguientes ingredientes no medicinales: celulosa microcristalina, carboximetil celulosa de sodio reticulada, carboximetil celulosa, acido estearico, silice coloidal, estearato de magnesio, monohidrogeno fosfato o de calcio y lecitina.

De acuerdo con la presente invencion puede emplearse cualquier especie de solidago y jengibre. En una realizacion, la especie de solidago es Solidago decurrense, Solidago canadensis, Solidago virgaurea o cualquier combinacion de las mismas. En una realizacion particular, la especie de solidago es Solidago virgaurea y la especie de jengibre es Zingiber officinale Roscoe.

Otros objetos, ventajas y caracteristicas de la presente invencion seran mas claros despues de la lectura de la description de las siguientes realizaciones especificas no limitantes de la misma, dados en forma de ejemplo solo con referencia a las figuras que los acompanan.

Breve descripcion de las figuras

En Las figuras del Apendice:

La Figura 1 muestra el efecto inhibitorio (antiviral) del extracto de jengibre con CO2, el extracto de solidago (ETOH) y la combinacion de los mismos en la capacidad de infeccion del virus influenza (unidades formadoras de colonias) y la monocapa de celulas MDCK;

La Figura 2 muestra el efecto inhibitorio (antiviral) del polvo de jengibre, el extracto de solidago (ETOH) y la combinacion de los mismos, en la capacidad de infectar del virus influenza (unidades formadoras de colonias) y la monocapa de celulas MDCK;

La Figura 3 muestra el dia promedio de muerte (MDD) de los ratones despues de su infeccion con el tipo A/WS/33 del virus influenza. El tratamiento preventivo (negro) fue administrado cada dia empezando 5 dias antes de la infeccion y el tratamiento Curativo (gris) que comenzo a administrarse el dia de la infeccion;

La Figura 4 muestra el porcentaje de perdida de peso para cada grupo experimental de ratones despues de la infeccion con el virus influenza tipo A/WS/33;

La Figura 5 muestra el efecto de inhibition (antiviral) del extracto de jengibre con CO2, extracto (ETOH) de solidago (Solidago virgaurea) y la combinacion de los mismos en la capacidad de infectar del virus rinovirus (inhibicion de las unidades formadoras de colonias), una monocapa de celulas HELA;

La Figura 6 muestra el efecto de inhibicion (antiviral) del extracto de solidago (ETOH y agua) de varias especies (Solidago decurense Lour, Solidago virgaurea and Solidago canadensis) en la capacidad de infectar del virus influenza A/WS/33 N H1N1 (inhibicion de PFU) una monocapa de celulas MDCK; y

La Figura 7 muestra el efecto de inhibicion (antiviral) del extracto de jengibre con CO2 (A), extracto de solidago (ETOH) (B) y una combinacion de extracto jengibre con CO2/extracto de solidago (C) en la capacidad para infectar del virus A/CA/04/09 (H1N1) (PFU: unidades formadoras de colonias) y una monocapa de celulas MDCK.

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Descripcion de las realizaciones demostrativas

Los solicitantes sorprendentemente han descubierto que una combination de jengibre y solidago actua de forma sinergica para reducir la actividad de infection de los virus de la gripe, reduciendo la progresion de la infection, la carga viral y los sintomas asociados. Por lo tanto, la presente invention se refiere a una combinacion de jengibre y solidago que actuan conjuntamente para prevenir o tratar una infeccion de gripe.

Tal y como se emplean aqui, los terminos tratar/tratando/tratamiento y prevenir/previniendo/prevencion, se refieren a la election de la respuesta biologica deseada, i.e., el efecto terapeutico y profilactico, respectivamente. De acuerdo con el asunto de la invencion, el efecto terapeutico comprende la disminucion/reduccion en el progreso de la infeccion o en la severidad o numero de sintomas asociados o la cura completa de la infeccion y/o de los sintomas asociados. De acuerdo con la invencion, el efecto profilactico puede contener un retardo o disminucion/reduccion en el inicio, o la progresion de la infeccion, o la gravedad o el numero de sintomas asociados (p.ej., la carga viral en la sangre o las celulas del sujeto, moqueo nasal, taponamiento nasal, estornudos, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de cabeza, congestion del pecho, agotamiento, fiebre, dolor muscular, perdida de apetito, dolor de cabeza y escalofrios) tras la administration de la combinacion/composicion de la presente invencion. En una realization, la composition de la presente invencion, que comprende una combinacion de solidago y jengibre, previene completamente al sujeto de contraer una infeccion de gripe. Los metodos, composiciones, formulaciones y usos descritos aqui son adecuados tanto para humanos como animales (incluidos los pajaros), preferentemente mamiferos.

Los animales pueden beneficiarse de la presente invencion. Por ejemplo, la gripe porcina y la gripe aviar don dos problemas importantes en las industrias porcinas, aviar, y de ganado. Recientemente dos tipos de influenza H1N1 pandemicos (gripe porcina) y gripe aviar (H5N5) afectaron a esta industria resultando en perdidas significativas para los productores. Las terapias preventivas disponibles, como las vacunas son muy caras para su uso extensivo. Un tratamiento natural antibiotico libre como la fitorremediacion, permitiria un mejor control sobre la infeccion de los rinovirus e influenza, e incremental las ganancias de la industria ganadera. Otros animales (p.ej. rebanos, incluyendo caballos, ovejas, cabras, etc. mascotas como perros, gatos, etc.) tambien son propensos a las gripes y podrian beneficiarse de un tratamiento preventivo o un tratamiento temprano.

Por consiguiente, tal y como se emplean aqui, el termino “sujeto” en el contexto de aplicacion veterinario de la presente invencion se refiere a cualquier mamifero incluyendo, cerdo, cordero, cabra, vaca (p.ej., res, ternera), pajaro (p.ej. pollo, pato, ganso), raton, rata, mono, gato, perro y caballo. En otra realizacion particular, se refiere a humanos. Un “sujeto que lo necesite” o un “paciente” en el contexto de la presente invencion, incluye cualquier sujeto que se beneficiara o que se espera que se beneficie de la combinacion de jengibre y solidago de la presente invencion. En una realizacion, el sujeto que lo necesite es un sujeto diagnosticado con gripe. En otra realizacion, un sujeto que lo necesite es un sujeto que se espera que coja la gripe o para el que la infeccion de gripe se espera que tenga consecuencias en la salud importantes (p.ej., ninos pequenos, ancianos o sujetos con deficiencias inmunes, miembros del rebano en los que al menos un animal muestra sintomas de infeccion, etc.) La probabilidad de contraer la gripe puede determinarse por ejemplo con la prevalencia de la enfermedad en el ambiente de los sujetos incluyendo miembros cercanos de la familia (hermanas, hermanos, padres, abuelos, primos y tios, conyuge, colegas, amigos, etc.), miembros del rebano. En una realizacion, el sujeto que lo necesite es un sujeto que sufre de gripe o de cualquier sintoma asociado.

Tal y como se emplea aqui, el termino “sinergicamente” significa que dos o mas sustancias trabajan juntas de una forma cooperativa por lo que el efecto total de la combinacion es superior que el de la suma de cada una de las sustancias de forma individual. Por consiguiente, la expresion “sinergicamente previene o trata” una infeccion de gripe o los sintomas asociados significa que la combinacion de la presente invencion es mas efectiva en reducir la actividad infectiva de la gripe, o en aliviar los sintomas asociados, que la suma de los efectos del solidago y el jengibre actuando individualmente. Esto incluye disminuir el tiempo para recuperarse o aumentar la velocidad a la que los sintomas se alivian o reducen. Un efecto sinergico se presenta si, por ejemplo, la inhibition de la actividad/capacidad infectiva del virus (p.ej., reduction en el numero de unidades formadoras de colonias (PFU) en el cultivo de celulas infectadas) siguiendo el tratamiento con una combinacion de solidago y jengibre es el 80%, mientras que la inhibicion de la capacidad/actividad infectiva del virus siguiendo el tratamiento con solidago solo es del 25% y la del jengibre solo es del 30% (siendo 80% superior que 25%+30%).

Tal y como se emplea aqui, el termino “resfriado” se refiere a una enfermedad viral contagiosa de las vias respiratorias superiores principalmente causada por picornavirus (incluyendo rinovirus) o coronavirus. Esto tambien incluye infecciones por virus parainfluenza, virus sincitial respiratorio humano, adenovirus y enterovirus. Los sintomas comunes del resfriado incluyen dolor de garganta, moqueo nasal, congestion nasal, tos y estornudos.

Tal y como se emplea aqui, el termino “gripe” se refiere a una enfermedad infecciosa causada por virus RNA de la familia Orthomixoviridae (virus influenza). Este afecta a pajaros y a mamiferos. Los sintomas comunes de la gripe incluyen escalofrios, fiebre, moqueo nasal, picor de garganta, dolor muscular, dolor de cabeza, congestion del pecho,

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cogestion de la cabeza, tos, debilidad, agotamiento, perdida del apetito y malestar general.

Los articulos “un”, “uno” y “el”, se emplean aqu para referirse a uno o mas de uno (i.e., a al menos uno) de los objetos gramaticales del articulo.

Los terminos “incluyendo” y “conteniendo” se emplean aqui con un significado, y se intercambian con, las frases “incluyendo pero sin limitarse a” y “conteniendo pero sin limitarse a “.

El termino “as^ como” se emplea aqu con un significado, y se intercambia con “asi como pero sin limitarse a”.

Extractos

Los dos principales componentes activos/medicinales de la combination de la presente invention son el jengibre y el solidago, partes de los mismos o extractos de los mismos. De acuerdo con la presente invencion, la raiz entera de jengibre (rizoma) o el solidago entero reducido a polvo (p.ej., molido y secado o liofilizado) puede emplearse en la combinacion de la presente invencion. Alternativamente, pueden usarse el extracto de la raiz de jengibre molido o el extracto de solidago. El extracto puede ser de la planta entera o de una parte de la misma (p.ej., la parte aerea del solidago) En una realization, el extracto de jengibre y/o el extracto de solidago es un extracto crudo (p.ej., crudo extraido con100% de agua).

Tal y como se usa aqui, el termino “crudo” en la expresion “extracto crudo” se refiere a un extracto en agua sin fraccionar (p.ej., del jengibre o solidago). Un extracto crudo puede ser una mezcla con agua o infusion de cualquier tipo donde la raiz de jengibre o solidago se cortan en trozos y/o muelen, opcionalmente se liofilizan y mezclan con agua para obtener un extracto acuoso, que opcionalmente puede filtrarse antes de su uso.

Alternativamente, de acuerdo con la presente invencion puede emplearse un extracto alcoholico o un extracto supercritico con CO2. Los extractos de solidago y jengibre empleados, de acuerdo con la presente invencion, pueden hacerse de forma casera o en el laboratorio o pueden ser extractos que estan disponibles comercialmente como los extractos de jengibre y solidago de Martin Bauer (Italia), Flavex (Alemania) o Finzelberg (Alemania). En una realizacion particular, el extracto de jengibre es un extracto de CO2 obtenido a partir de la raiz de Zingiber officinale, y el extracto de solidago es un extracto hidroalcoholico obtenido a partir de la parte aerea de Solidago virgaurea.

Se pueden emplear un numero de tecnicas de extraction estandar conocidas en el estado del arte para preparar los extractos de plantas de la presente invencion. En general, el proceso de extraccion implica poner en contacto el material solido de la planta con un solvente, mezclarlo durante un periodo de tiempo suficiente para asegurar la exposition adecuada del material solido de la planta al solvente de forma que la actividad terapeutica (componentes bioactivos) presentes en el material de la planta puedan ser traspasados al solvente.

Como se ha indicado anteriormente, el material de la planta se deriva de una o una combinacion de especies de jengibre y solidago. Ejemplos no limitantes de especies de solidago que pueden emplearse de acuerdo con la presente invencion incluyen Solidago albopilosa, Solidago altiplanities, Solidago arguta, Solidago auriculata, Solidago bicolor, Solidago brachyphylla, Solidago buckleyi, Solidago caesia, Solidago calcicola, Solidago californica, Solidago canadensis, Solidago cutleri, Solidago deamii, Solidago decurrense, Solidago discoidea, Solidago fistulosa, Solidago flaccidifolia, Solidago flexicaulis, Solidago gattingeri, Solidago gigantea, Solidago glomerata, Solidago gracillima, Solidago guiradonis, Solidago hispida, Solidago juliae, Solidago juncea, Solidago latissimifolia, Solidago leavenworthii, Solidago ludoviciana, Solidago macrophylla, Solidago missouriensis, Solidago mollis, Solidago multiradiata, Solidago nana, Solidago nemoralis, Solidago odora, Solidago ouachitensis, Solidago patula, Solidago petiolaris, Solidago pinetorum, Solidago plumosa, Solidago porteri, Solidago puberula, Solidago pulchra, Solidago radula, Solidago roanensis, Solidago rugosa, Solidago rupestris, Solidago sciaphila, Solidago sempervirens, Solidago shortii, Solidago simplex, Solidago simulans, Solidago speciosa, Solidago spectabilis, Solidago spathulata, Solidago sphacelata, Solidago spithamaea, Solidago squarrosa, Solidago stricta, Solidago tortifolia, Solidago tenuifolia, Solidago uliginosa, Solidago ulmifolia, Solidago velutina, Solidago verna, Solidago virgaurea and Solidago wrightii. Preferentemente, la especie de solidago es Solidago decurense, Solidago canadensis, Solidago virgaurea o una mezcla de los mismos. En una realizacion particular, la especie de solidago es Solidago virgaurea.

El material de la planta empleado en el proceso de extraccion puede ser la planta entera o puede ser uno o mas tejidos diferentes de la planta o plantas, por ejemplo, hojas, raices, partes aereas como las flores o tallos, etc. Si se desea, el material de la planta puede tratarse de forma que se facilite el proceso de extraccion. Tipicamente esos tratamientos resultan en el material de la planta fragmentado lo que significa que se expone una mayor area de superfine al solvente. Por ejemplo, el material de la planta puede ser machacado o cortado mecanicamente, usando un molinillo u otro instrumento para fragmentar las partes de la planta en partes pequenas o particulas, o el material de la planta puede ser congelado en nitrogeno liquido y despues machacado o fragmentado en piezas mas pequenas.

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Los procesos de extraction con solvente empleados en la preparation relativa a la invention emplean tipicamente como solvente un solvente acuoso (como el agua o un tampon), un compuesto liquido organico, o una combination de estos. Por supuesto, todos los reactivos que se emplean para el proceso de extraccion deben ser aceptables para su uso en humanos y otros animales o sino, el proceso de purification debe asegurar que el extracto purificado esta libre de impurezas toxicas antes del consumo humano. Ejemplos de compuestos Kquidos organicos que pueden emplearse como solventes en el proceso de preparar los extractos, incluyen, pero sin limitarse a, solventes organicos, que incluyen alcoholes primarios como el alcohol metilico (metanol), alcohol etilico (etanol), 1-propanol y 1-butanol; alcoholes secundarios como el 2-propanol y 2-butanol; alcoholes terciarios como el 2-metil-2-propanol, y alcoholes polihidricos liquidos como la glicerina y los glicoles. Los glicoles adecuados incluyen, por ejemplo, etilenglicol, propilenglicol, dietilenglicol, dipropilenglicol y 1,3- butilenglicol. Otros solventes organicos conocidos para la extraccion de plantas incluyen acetona, tetrahidrofurano, acetonitrilo, 1,4-dioxano, piridina, dimetilsulfoxido, N,N-dimetil formamida, acido acetico, dietil eter y acetato de etilo.

La extraccion supercritica tambien puede emplearse para la preparacion del extracto de la presente invencion. Esta usa CO2 como solvente de extraccion. Bajo presion y a una temperatura inferior a 40°C el CO2 se encuentra en su estado supercritico, i.e. liquido. Ganando la naturaleza de un solvente con la fluidez de un gas. Generalmente el equipo de extraccion con CO2 se compone de un tanque de trabajo lleno de CO2 liquido a temperatura ambiente, una bomba para incrementar la presion y conducir la circulation, un extractor que contiene el material bruto en forma de polvo, una valvula de expansion y un separador para recoger el extracto. Ademas, existen diferentes intercambiadores de calor para ajustar las condiciones de temperatura del gas circulante. Bajo las condiciones supercriticas establecidas en el reactor, el CO2 tiene unas propiedades como solvente para los ingredientes lipofilicos (p.ej., gingeroles y shogaoles en el jengibre) donde el CO2 esta en fase gaseosa sin energia de solvente bajo las condiciones del separador (p.ej. 60 bares, 30°C). Por tanto, el extracto se precipita y el gas se regenera. El CO2 se licua despues mediante refrigeration y se retorna al tanque de trabajo completando el ciclo de CO2.

Se pueden emplear una variedad de condiciones en el proceso de extraccion. Tipicamente, los procesos de extraccion se llevan a cabo durante un periodo de tiempo entre 10 minutos y aproximadamente 72 horas a temperatura entre aproximadamente 4°C y aproximadamente 50°C. Sin embargo, pueden emplearse temperaturas entre aproximadamente 4°C y aproximadamente 90-100°C, por ejemplo entre aproximadamente 4°C y aproximadamente 70°C. De forma similar, el tiempo de extraccion puede variar dependiendo de otras condiciones de extraccion., como por ejemplo el solvente y la temperatura empleados; por ejemplo, el tiempo de extraccion puede variar de varios minutos a varios dias. La determination de las temperaturas y tiempos apropiados de extraccion estan dentro de las habilidades ordinarias de un trabajador en la materia.

El contacto adecuado entre el solvente y el material de la planta debe facilitarse mediante agitation de la suspension. Alternativamente, puede usarse un aparato de extraccion equipado con, por ejemplo un agitador, que puede mejorar la eficiencia de extraccion. La extraccion puede llevarse a cabo bajo condiciones de presion atmosferica, bajo presion (i.e., por encima de la presion atmosferica) o a presion reducida (por debajo de la presion atmosferica), estableciendo, por ejemplo aspiration (bomba). Las condiciones de extraccion apropiadas pueden ser facilmente seleccionadas por un experto en la materia tomando en consideration las condiciones de production asi como las instalaciones de produccion y los rendimientos.

La presente invencion contempla que los procesos de extraccion puedan ser llevados a cabo en varias escalas, incluyendo metodos conocidos para preparar los extractos a gran escala, media y pequena escala.

Siguiendo los procesos de extraccion, la fraction liquida (el extracto) puede separarse de la materia solida (insoluble). La separation de las fracciones liquida y solida puede lograrse mediante uno o mas procesos de separation estandar conocidos por aquellos expertos en la materia, como varios procesos de centrifugation o filtration. En una realization de la invencion, el extracto se separa de la materia solida despues de la extraccion con uno o mas pasos de filtracion. En otra realizacion, el extracto se separa de la materia solida despues de la extraccion por series de pasos de filtracion.

En una realizacion, el extracto de jengibre con CO2, es un aceite esencial obtenido mediante extraccion con CO2 (tambien conocido como extraccion supercritica o extraccion supercritica con CO2) usando jengibre organico (rizoma o la parte enterrada del Zingiber officinale Roscoe). En una realizacion particular, el extracto de jengibre con CO2 contenido en la combinacion de la presente invencion, se obtiene de material de plantas bien documentadas y se estandariza por su huella quimica general incluyendo la identification de compuestos marcadores especificos (gingeroles y shogaoles). En una realizacion, el tipo de extracto de jengibre contenido en la combinacion de la presente invencion esta concentrado 20-25 veces en compuestos fuertemente olorosos (shogaoles y gingeroles) comparandolo con el material original de la planta. Un ejemplo de dichos extractos se obtiene de Flavex (Alemania).

En una realizacion, el extracto de solidago es un extracto seco concentrado y obtenido mediante extraccion con una mezcla de agua y alcohol entre aproximadamente el 20% y aproximadamente el 85% (p.ej., 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55,

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60, 65, 70, 75, 80, 85%) alcohol: agua. En una realizacion, el extracto de solidago es un extracto seco concentrado 57:1 obtenido mediante extraccion con una mezcla del 70% agua y 30% alcohol. En una realizacion particular, el alcohol es etanol. En una realizacion, contiene el 90% del extracto nativo y un 10% de silice precipitada DAB (Deutze Arneibuch). En una realizacion particular, el extracto de solidago contenido en la combinacion de la presente invencion es un extracto comercial obtenido a partir de material de plantas bien documentadas y se estandariza por su huella quimica incluyendo la identification de compuestos marcadores espetificos (flavonoides, disponible por ejemplo de Finzelberg (Alemania)).

La Tabla I resume las principales caracteristicas de los extractos de CO2 e hidroalcoholicos utilizados en realizaciones particulares de la presente invencion.

TABLA I. Caracteristicas de dos extractos activos basados en jengibre o solidago como ejemplo de la presente

invencion

Agente activo

Origen de la planta Tipo de extracto Forma del extracto Compuestos quimicos marcadores

Extracto de jengibre con CO2 (p.ej., de Flavex, Germany)

Zingiber officinale (rizoma seco) Extracto supercritico con CO2 Liquido Gingeroles y shogaoles

Extracto de solidago (p.ej., de Finzelberg, Alemania)

Solidago virgaurea L. (parte aerea seca) Extracto crudo hidroalcoholico (30:70, etanol:H2O) Seco Flavonoides

Formulaciones

Las composiciones para uso de la presente invencion contienen una combinacion de jengibre, solidago, partes de los mismos o extractos de los mismos que pueden ser formuladas de diferentes formas de acuerdo con la forma de administration. Las composiciones de la presente invencion pueden ser administradas de cualquier forma adecuada incluyendo por ejemplo topicamente (efecto local, la sustancia se aplica directamente en el lugar que se desea la action, p.ej. nasalmente) u oralmente (p.ej., sublingual). La administracion se lleva a cabo de forma personalizada, preferentemente oral.

La via de administracion puede depender de variedad de factores, como las metas ambientales o terapeuticas y las particularidades del sujeto. Por lo tanto, la composition de la presente invencion puede formularse de la forma deseada, p.ej., en o como un pienso, una comida (p.ej. especia, pienso animal, etc.), un liquido (p.ej., un jarabe o una dosis inmune unica en forma de dosis de 2-4 onzas), una crema, un aerosol, un espray, una tableta, polvo seco, planta seca, una capsula, un gel, una nanosuspension, un microgel o un supositorio. La via preferida de administracion es oral, en forma de capsula, tableta o como una formulation liquida como una bebida (p.ej., dosis inmune de 2-4 onzas que comprende extractos de jengibre y solidago). La composicion de la presente invencion puede tambien ser suministrada como una mezcla de extractos de solidago y jengibre en forma de polvo que pueden mezclarse posteriormente con agua o cualquier otra bebida liquida o alimento adecuado.

De acuerdo con la presente invencion, el jengibre y solidago o sus extractos pueden mezclarse con sustancias portadoras farmaceuticas habituales, diluyentes o vehiculos y, si es apropiado, con otras moleculas auxiliares.

Como se indica anteriormente, la composicion puede contener ademas una sustancia portadora farmaceuticamente/nutraceuticamente aceptable o excipiente. Tal y como se usa aqui, “sustancia portadora farmaceuticamente aceptable” o “excipiente” incluye cualquier solvente, tampon, medio de dispersion, recubrimiento, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes isotonicos y agentes retardantes de la absorcion, que sean fisiologicamente compatibles. La sustancia portadora se selecciona para la administracion en funcion de la via de administracion elegida. El uso de dichos medios y agentes/excipientes/sustancias portadoras/ingredientes no medicinales para sustancias farmaceuticamente activas es bien conocido en el estado del arte (Rowe et al., Handbook of pharmaceutical excipients, 2003, 4th edition, Pharmaceutical Press, London, UK). Excepto, en el caso de que algun medio convencional o agente sea incompatible con el compuesto activo, su uso se contempla en las composiciones farmaceuticas/nutraceuticas/dieteticas de la invencion.

Sin limitarse, materiales farmaceuticos adecuados que pueden incorporarse en las preparaciones farmaceuticas/nutraceuticas/dieteticas de la presente invencion incluyen agentes conservantes, solubilizantes/ agentes

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diluyentes/solventes, antioxidantes, recubrimientos entericos, mejoradores de la absorcion, agentes para ajustar el pH y tampones, agentes dispersantes, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifungicos, agentes retardantes de la absorcion (liberacion controlada), ajustadores de la osmolaridad, agentes isotonicos, agentes conservantes, estabilizantes, surfactantes, agentes espesantes, solventes, emolientes, agentes colorantes, agentes humectantes, as^ como colorantes y aromas. Los metodos para preparar las formulaciones adecuadas son bien conocidas en el estado del arte (ver p.ej., Hendrickson, 2005).

La expresion “agente conservante” tal y como se emplea aqui se refiere principalmente a cualquier ingrediente capaz de retardar o prevenir el deterioro quimico o microbiano y proteger frente a la decoloracion. Sin ser limitante, incluyen cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, alcohol bendlico, butilparabeno, clorobutanol, clorocresol, etilparabeno, metilparabeno, coluro mistirico gamma picolinio, fenol, fenoxietanol, acetato de fenilmercurio, nitrato de fenilmercurio, propilparabeno y timerosal (ver Nema, 1997).

El termino “solvente” tal y como se emplea aqui se refiere principalmente a ingredientes capaces de facilitar la solubilizacion del ingrediente activo dentro de la formulacion. Sin ser limitante, incluyen agua, soluciones agua-alcohol, emulsiones o suspensiones, incluyendo vehiculos de soluciones salinas y tamponadas parenterales incluyendo la solucion de cloruro sodico, la solucion de dextrosa de Ringer, solucion de dextrosa mas cloruro sodico, la solucion de Ringer conteniendo lactosa o aceites fijos. Los vehiculos intravenosos pueden incluir algun fluido y reposicion de nutrientes, reposicion de electrolitos como los basados en la dextrosa de Ringer, y similares.

La formulacion oral puede administrarse en forma granulada, polvo, capsulas, pastillas, tabletas, tabletas recubiertas con una pelicula, tabletas recubiertas de azucar, jarabes, emulsiones, suspensiones, dispersiones, aerosoles, soluciones, pildoras y/o liquidos. En una realizacion, la composicion de la presente invencion esta formulada en forma de capsula. Tambien puede administrarse en forma de supositorios, supositorios vaginales y/o parenteralmente, p.ej., en forma de soluciones, emulsiones, cremas o suspensiones. Puede ser administrada en una preparacion para liberacion retardada, o protegida de los acidos gastricos por un recubrimiento para ser liberada en una parte del intestino.

Las capsulas pueden contener la composicion como un constituyente solo o mezclado con un diluyente solido como el carbonato de calcio, el fosfato de calcio o el caolin.

La composicion de acuerdo con la invencion puede formularse como liquida, pastosa o una preparacion solida, por ejemplo soluciones acuosas o alcoholicas, o emulsiones.

Las soluciones acuosas adecuadas para uso oral se preparan disolviendo el compuesto(s)/composicion(es) en agua y anadiendo los s colorantes, aromas, estabilizantes, y agentes espesantes adecuados como se desee. Las suspensiones acuosas adecuadas para su uso oral pueden hacerse dispersando el componente activo finamente dividido en agua con el material viscoso, como gomas naturales o sinteticas, resinas, metilcelulosa, carboximetil celulosa de sodio, y otros agentes suspendidos bien conocidos. Ejemplos de solventes no acuosos son el alcohol, bencil benzoato, alcohol butilico, polietilenglicol, propilenglicol, N,N-dimetilacetamida, etil oleato, oleil oleato, trioleato de glicerina, dioleato de glicerina monooleato de glicerina, alcohol cetilico, alcohol estearico, acido cuprico, acido undecilenico, acido laurico, gliceridos sinteticos de acidos grasos saturados con 8 a 12 atomos de carbono, polioxietilen derivados del glicerol, cera de abeja, glicerina, aceite mineral, aceite vegetal como, pero sin limitarse a, aceite de maiz, aceite de semilla de algodon, aceite de cacahuete, aceite de canola, aceite de sesamo, aceite de girasol, aceite de soja, aceite de arachis, aceite de castor, aceite de lino, aceite de semilla de soja, aceite de semilla de girasol, aceite de oliva, aceite de higado de pescado, y cualquier combination de los mismos (ver Nema, 1997).

Las tabletas pueden incluir una o mas de lactosa, sacarosa, manitol, sorbitol, fosfato de calcio, almidon de maiz, almidon de patata, celulosa microcristalina, carboximetil celulosa de sodio reticulada, silice coloidal, gelatina, dioxido de silice coloidal, talco, monohidrogeno fosfato de calcio, estearato de magnesio, acido estearico y otros excipientes, colorantes, rellenos, ligantes, agentes tampon, agentes humectantes, conservantes, agentes aromatizantes, tintes, agentes desintegradores y sustancias portadoras compatibles farmaceuticamente. Las pildoras pueden contener el ingrediente activo en un aroma, p.ej., sacarosa, asi como pastillas que contienen el ingrediente activo en una base inerte, como gelatina y glicerina o sacarosa y emulsiones de acacia, geles, y similares, conteniendo ademas del ingrediente activo, sustancias portadoras conocidas en el estado del arte.

Los recubrimientos entericos pueden usarse ademas en las capsulas de la presente invencion para resistir el contacto prolongado con los fuertes acidos gastricos, pero disolverse en un medio medianamente acidificado o neutral del intestino. Sin limitarse demasiado, pueden usarse como recubrimientos entericos de la composicion de la presente invencion ftalato acetato de celulosa, Eudragit™, y ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa (NHPMCP). Las concentraciones de ftalato acetato de celulosa que se emplean generalmente son del 0.5-9.0% del peso base. La adicion de plastificantes mejora la resistencia al agua del material de recubrimiento, y las formulaciones que contienen

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estos plastificantes son mas efectivas que cuando se usa el ftalato acetato de celulosa solo. El ftalato acetato de celulosa es compatible con varios plastificantes incluyendo, monogliceridos acetilados, butil ftalil butil glicolato, dibutil tartrato, dietil ftalato, dimetil ftalato, etil ftalil etil glicolato, glicerina, propilenglicol, triacetin, citrato de triacetm y tripropionina. Este es tambien empleado en combinacion con otros agentes de recubrimiento como la etil celulosa, en medicamentos de liberation retardada y en las preparaciones relacionadas.

En una realization, las composiciones que contienen las combinaciones de jengibre y solidago de la presente invention pueden ser formuladas para su administracion como alimentos o suplementos dieteticos usando uno o mas sustancias portadoras consumibles. Una “sustancia portadora consumible” se define aqui como cualquier alimento, ingrediente alimentario, o aditivo alimentario, o cualquier excipiente utilizado para hacer las tabletas, encapsular, u otras formulaciones del ingrediente activo para administration oral, tanto para uso humano o uso animal/veterinario. Para los suplementos dieteticos, la combinacion de la presente invencion puede mezclarse de acuerdo con metodos rutinarios del estado del arte. Los suplementos dieteticos pueden prepararse en una variedad de formas incluyendo, pero sin limitarse a liquido, polvo o pastillas en forma solida. El extracto o la composition de la presente invencion puede ser administrada tanto solo como en combinacion con otros compuestos o extractos incluyendo combinar compuestos o extractos que anadan un efecto aditivo o sinergico. El extracto y/o la composicion de la presente invencion puede tambien ser anadida directamente a alimentos y ser ingerido como parte de una comida normal. Varios metodos son conocidos para todos aquellos expertos en el estado del arte para la adicion o incorporacion de dichos agentes en las comidas.

Dosificacion

Las composiciones y formulaciones de uso de la presente invencion se administran en cantidades y a frecuencias suficientes para prevenir y/o tratar infecciones de gripe y/o aminorar cualquier sintoma asociado con la gripe.

Puede administrarse cualquier cantidad de la composicion de la presente invencion a un sujeto, siempre que no este asociada con ningun efecto adverso importante y que no sea una dosis toxica. Las dosis pueden depender de varios factores que incluyen la forma de administracion, la edad y el sexo del sujeto. Otros factores como la salud general y el estado del sujeto pueden modificar la dosis de la composicion de la presente invencion. Tipicamente, la cantidad de solidago y jengibre (o sus extractos) que contiene una dosis simple, sera una cantidad que previene o trata de forma efectiva una infection de gripe y uno o mas de los sintomas asociados sin producir una toxicidad significativa, i.e. la composicion mejora o reduce uno o mas de: la carga viral en la sangre o las celulas del sujeto, moqueo nasal, taponamiento nasal, estornudos, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de cabeza, congestion del pecho, agotamiento, fiebre, dolor muscular, perdida de apetito, dolor de cabeza y escalofrios . Generalmente la dosis efectiva no excedera la farmacopea CA, US y EP para cada producto individual.

Por consiguiente, en un aspecto de la presente invencion, la composicion (suplemento alimenticio o sustancia alimenticia) que contiene jengibre o solidago o extractos de los mismos se administra antes del inicio de los sintomas de gripe como una medida preventiva. En otro aspecto de la presente invencion, la composicion farmaceutica o nutraceutica o dietetica de la presente invencion se administra en combinacion con un medicamento o medicamentos utilizados para tratar los sintomas de la gripe. En otro aspecto, la composicion de la presente invencion se administra una vez que el sujeto ha sido diagnosticado con una infeccion de gripe o despues del inicio de los sintomas de gripe. En otra realizacion, la composicion de la presente invencion se administra en combinacion con uno o mas de otros medicamentos utilizados para la prevention y/o tratamiento de las infecciones de gripe como Cold Fx™, Tamiflu™, Equinacea, ginseng, amantadina, rimantadina, Vitamina C, etc.

Tal y como se usa aqui, la expresion “cantidad efectiva” o “cantidad terapeuticamente efectiva” significa que se refiere a una cantidad efectiva para obtener el efecto terapeutico deseado como una mejora en el estado del paciente, mientras que se evitan los efectos secundarios adversos. Una cantidad efectiva puede administrarse en una o mas dosis. Para los propositos de esta invencion una cantidad efectiva de la composicion de la presente invencion es una cantidad que induce una respuesta terapeutica o profilactica contra las infecciones de gripe. Dicha cantidad puede variar de acuerdo con la naturaleza de la infeccion (el tipo especifico de infeccion viral) la severidad de la infeccion, el modo de administracion, la edad, peso y sexo del sujeto afectado, etc. Un experto en la materia puede determinar facilmente y sin dificultad dicha cantidad efectiva. Generalmente la cantidad efectiva estara entre aproximadamente 40 mg y aproximadamente 4500 mg de jengibre (p.ej., extracto de jengibre con CO2) y aproximadamente 200 mg y 800 mg de solidago (por ejemplo extracto hidroalcoholico). En una realizacion, la cantidad efectiva esta entre aproximadamente 43.5 mg y aproximadamente 174 mg de extracto de jengibre con CO2 y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 400 mg de extracto hidroalcoholico de solidago. En otra realizacion, la cantidad efectiva de la composicion anteriormente mencionada, comprende entre aproximadamente 1000 mg y aproximadamente 4500 mg de polvo de jengibre y entre aproximadamente 200 mg y aproximadamente 800 mg de extracto hidroalcoholico de solidago. En una realizacion, la anteriormente citada composicion contiene entre aproximadamente 2000 mg y aproximadamente 4000 mg de polvo de jengibre y entre aproximadamente 400 mg y aproximadamente 800 mg de

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extracto alcoholico de solidago.

En un aspecto relacionado con la presente invention, la proportion de jengibre y solidago se ajusta hasta obtener un efecto sinergico antiviral (i.e., el efecto de inhibition de la infection viral que es superior a la suma de los efectos que se observa cuando se administran solos el jengibre y el solidago) .La proporcion sera adaptada dependiendo del tipo de extracto que se emplee. En una realization, la proporcion entre el polvo de jengibre y el extracto alcoholico de solidago esta entre aproximadamente 10:1 y aproximadamente 5:3 (p.ej. 8:1, 7:1, 6:1, 5:1, 5:2, etc.) de polvo de jengibre: extracto alcoholico de solidago. Preferiblemente, la proporcion es aproximadamente 5:1 de polvo de jengibre: extracto alcoholico de solidago. En otra realizacion, la proporcion entre el extracto de jengibre con CO2 y el extracto alcoholico de solidago esta entre aproximadamente 1:15 y aproximadamente 3:5 (p.ej., 1:10, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 2:5, etc.) extracto de jengibre con CO2: extracto alcoholico de solidago. Preferiblemente la proporcion es aproximadamente 1:5 de extracto de jengibre con CO2: extracto alcoholico de solidago.

La cantidad efectiva debe administrarse diariamente en una unica o varias dosis (p.ej. una dosis unica dos veces al dia, tres veces al dia o cuatro veces al dia).Tambien puede darse cada 2 dias, cada 3 dias, o una vez a la semana, como se prescriba. Preferiblemente, la cantidad efectiva se administra dos veces al dia.

La cantidad efectiva debe administrarse a un sujeto calculada a partir de estudios en animales. La dosis debe ser calculada y escalada a la dosis humana equivalente (HED) para empezar los ensayos clinicos se usan tablas de conversion publicadas que proporcionan un factor de conversion de los ratones a los humanos.

Estas son guias basicas ya que la dosis actual debe ser cuidadosamente seleccionada y valorada por el medico que atienda, basandose en factores clinicos unicos para cada paciente. La dosis optima diaria sera determinada por metodos conocidos en el estado del arte y estara influenciada por factores como la edad del paciente como se indica anteriormente y otros factores clinicos relevantes.

La presente invencion se ilustra con mas detalles en los siguientes ejemplos no limitantes Ejemplo 1

Actividad sinergica in vitro de una combination que contiene extractos de jengibre y solidago contra una infeccion de influenza.

Los solicitantes han demostrado que los extractos de jengibre y solidago solos, asi como sus combinaciones, muestran una actividad antiviral en un modelo celular reconocido como una forma estandar de analizar la actividad antiviral de productos terapeuticos (Hayden F, 1980). Este modelo usa una linea celular monocapa MDCK (celulas de rinon canino Madin Darby) que se infecta con el virus influenza (influenza A/WS/33, H1N1), lo que resulta en la lisis de las colonias (area celular infectada) que luego se cuentan. En este modelo analitico, en presencia de agentes antivirales, el numero de colonias lisadas disminuye proporcionalmente con el poder antiviral de los agentes que se testan.

Las monocapas de celulas MDCK (ATCC# CCL-34) se crecieron en placas de cultivo de 6 pocillos hasta que confluir. Antes de la infeccion o inoculation, se elimina el medio y se lavan las celulas delicadamente dos veces con DMEM pre- calentado sin aditivos. 200 |jl de producto (solidago (Solidago virgaurea) extracto hidroalcoholico de Finzelberg, producto N° 0193305 y/o extracto de jengibre (Zingiber officinale) con CO2 de Flavex codigo de producto 0.14.013) se anadieron en la dilution adecuada en DMEM con TPCK 2 jg/ml (tripsina tratada con L-1-Tosylamido-2-feniletil clorometil cetona para reducir la actividad de la quimiotripsina sin afectar a la actividad de la tripsina). Las celulas fueron infectadas con el virus de influenza humana A/WS/33 (ATCC #VR-1520), H1N1 diluido en DMEM con 200jL de TPCK sin suero. Las placas fueron incubadas durante una hora a temperatura ambiente. Despues de la adsorcion, las celulas se re-suspenden con 3 ml de agarosa al 0.6% en un medio pre-definido que contiene el producto y 2 jg/ml de TPCK. Se usa el vehiculo como control. Todos los ensayos se realizan por duplicado. Una vez cubiertas, las placas se incuban a 37° C, 5% de CO2 en atmosfera humidificada durante 48-72 horas.

Despues de la incubation, las placas se tinen con rojo neutro. Todos los pocillos fueron fotografiados digitalmente y se contaron las colonias, y fue calculada la inhibicion en cada placa para cada dilucion.

La inhibicion se reporta como el porcentaje (%) de inhibicion de la infeccion cuando se compara con la infeccion en ausencia del producto. El porcentaje de inhibicion se calculo de acuerdo a la formula:

Porcentaje (%) de inhibicion= [CA-CB/CA]x100

donde CA es el numero de colonias en ausencia de un producto o extracto de planta y CB es el conteo de colonias en presencia del extracto.

El extracto de solidago mostro una inhibicion del 50% de la infeccion a una concentration de 0.04 mg/ml de acuerdo

con la curva obtenida de datos (no se muestran). El jengibre ext^do con CO2 mostro inhibicion de la infeccion viral a concentraciones superiores a 0.05 mg/ml de acuerdo con la curva obtenida de datos (no se muestran), y la mezcla 5/1 (Solidago/ jengibre CO2) mostro inhibir la infeccion viral un 68% a una concentration 0.013/0.003 mg/ml. Esos resultados muestran claramente el efecto sinergico de los extractos de jengibre y extracto de solidago con CO2 cuando 5 se mezclan juntos en una proportion 5/1 (solidago: jengibre, ver tambien la Figura 1).

Resultados similares fueron obtenidos usando polvo de jengibre (de raiz completa de jengibre secado y molido) en vez de jengibre extraido con CO2 (Figura 2). La proporcion de solidago: polvo de jengibre fue 1:5 para los experimentos presentados en la Figura 2. Los resultados fueron comparados con Tamiflu™ y Cold-FX™ (no se muestran los datos). A una concentracion de 1 mg/ml de Cold FX™ no se observo inhibicion mientras que 0.05 mg/ml de Tamiflu™ 10 inhibieron la formation de lisis de colonias el 52%. Ambos productos fueron aun asi menos eficientes en la reduction de la infeccion viral que la combination de extractos de solidago y jengibre de la presente invention.

Ejemplo2

Actividad in vivo del extracto de solidago y polvo de jengibre contra la infeccion del virus influenza

Un modelo animal ha permitido a los solicitantes demostrar que cuando se combina el polvo de jengibre y el extracto de 15 solidago tambien tienen el potencial in vivo de interferir con la capacidad de infeccion de influenza. En el modelo animal empleado, el extracto de la planta de jengibre (polvo de la raiz entera de jengibre) y el extracto seco hidroalcoholico de solidago (de Finzelberg, Alemania) fue combinado para demostrar una actividad mas significativa.

Dosis no toxicas para animales de polvo de jengibre, extracto de solidago y la combinacion de los mismos han sido previamente aprobada por los solicitantes a traves de ensayos de toxicidad in vivo (los datos no se muestran).

20 [108] El jengibre, el solidago y combinaciones de los mismos fueros analizados en un modelo animal reconocido

relativo a la prevention y el tratamiento del virus influenza (Cottey R, 2001). En este estudio, el jengibre analizado como una planta seca (rizoma) extraido con CO2. Sin embargo, la cantidad relativa de planta seca de jengibre empleada fue equivalente al jengibre extraido con CO2 empleado en el Ejemplo 1 (equivalente al material de partida seco). La combinacion de jengibre/solidago que se uso tambien contenia polvo seco de arandanos. Esta formulation se 25 llama formulacion Nutracan™ y se describe en la Tabla II debajo.

Tabla II. Formulacion Nutracan™

Ingrediente medicinal

Cantidad relativa (%) p/p

Polvo de jengibre (de Martin Bauer, Italia, producto numero 3-992)

41

Extracto de solidago (de Finzelberg, producto N° 0193305)

8

Polvo de arandano (de Fruit d'or)

20

Ingredientes no medicinales

lecitina en polvo Alcolec FF-100 (de AMERICAN LECITHIN COMPANY)

31

En este modelo, se inocularon intranasalmente ratones CD1 (10 hembras por grupo) con el virus influenza tipo A/WS/33 (H1N1) a 1X101 * 3 PFU como se determino en un estudio preliminar (no se muestran los datos). Los 30 grupos se trataron o bien 5 dias antes de la infeccion (proposito preventivo) o bien el dia de la infeccion

(proposito terapeutico/curativo) con polvo de jengibre (125 mg/kg), extracto de solidago (25 mg/kg) o una combinacion de los mismos (350 mg/kg de Nutracan™). El polvo de jengibre, extracto de solidago y una combinacion de los mismos fueron comparados con Tamiflu™ (Oseltamivir fosfato, de Roche, a 10 mg/kg, para tratamiento terapeutico/curativo) y con Cold-Fx® (CVT-E002, una fraction derivada del ginseng enriquecida, 35 vendida en Canada como NHP para la prevencion/atenuacion de los sintomas de refriado de CV Technologies, a 20 mg/kg, para el proposito preventivo). Todos los productos fueron administrados oralmente.

1) siete grupos de ratones CD1 fueron distribuidos al azar basandose en su peso (n=10). Ver la Tabla III debajo

para la descripcion de cada grupo, el regimen de dosificacion y la duracion del tratamiento para cada uno, 2) Los ratones en los grupos de proposito preventivo fueron forzados a alimentarse oralmente con una dosis unica diaria 40 de 100 |jl del producto durante 5 dias antes de la infeccion, 3) en el dia de la infeccion (dia 0), todos los ratones

fueron forzados a alimentarse 4 horas antes de la infeccion. Todos los ratones fueron despues inoculados

intranasalmente con el virus influenza tipo A/WS/33, 103 PFU contenidos en 30 Ml de PBS. 4) se dio una dosis unica diaria a los siete grupos (4 preventivas, 2 tratamientos y uno control) hasta el final del estudio, p.ej. durante 8 dias, y 5) cada d^a se anotan los sintomas aparentes y el peso. Los ratones fueron sacrificados cuando su estado general (incluyendo un comportamiento anormal, determinado por un veterinario) estaba deteriorado o 5 cuando habian perdido mas del 20% de su peso.

Tabla III. Descripcion de los grupos de ratones ensayados en el modelo de infeccion de influenza

Grupo

Producto administrado Dosis diaria Primer dia de dosis

1

Vehiculo (PBS) 100 Ml 5

2

Tamiflu® 10 mg/kg 0

3

Cold-Fx® 20 mg/kg -5

4

Polvo de jengibre + extracto de solidago (formulacion Nutracan™) 350 mg/kg -5

5

Polvo de jengibre + extracto de solidago (Nutracan™ formulacion) 350 mg/kg 0

6

Extracto de solidago 25 mg/kg -5

7

Polvo de jengibre 125 mg/kg -5

Los datos presentados en la Figura 3 muestran que el grupo (#4) de los ratones infectados, tratados preventivamente con la combinacion que contiene jengibre y solidago presenta un dia medio de muerte (MDD) de 7.8 que es comparable 10 con el efecto del tratamiento curativo con Tamiflu™ (MDD=7.6) Todos los grupos presentan un incremento en MDD cuando se comparan con el grupo control (MDD=5.7) En el proposito preventivo del estudio, la combinacion de solidago y jengibre (formulacion Nutracan™) fue el grupo con mayor incremento en MDD. Cold-Fx®, y NHP para la prevencion y alivio de los sintomas del resfriado y la gripe, fue el mas bajo, aunque con una significativa diferencia. .En el proposito curativo Tamiflu® fue el mas efectivo, pero la diferencia entre el grupo vehiculo y la combinacion (formulacion 15 Nutracan™) fue estadisticamente significativa. Debe notarse que hubo diferencia estadistica entre cada grupo (preventivo o curativo) y el grupo control (p<0.002 o menos). No sobrevivieron ratones del grupo control despues de 6 dias de experimento, mientras que los grupos con tratamiento tuvieron diferentes tasas de supervivencia.

La Tabla IV debajo, resume el valor MDD y proporciona valores estadisticos para cada grupo en el estudio. Todos los grupos tuvieron un valor significativo comparados con el grupo control sin tratamiento.

20 Tabla IV. P-valor de MDD para todos los grupos experimentales comparados con el grupo control.

Grupo

Tratamiento (dia de inicio) MDD p-valor

1

Vehiculo (-5) 5.7

2

Tamiflu™ 10 mg/kg (0) 7.6 < 0.0001

3

Cold-FX™ 20 mg/kg (-5) 6.9 0.0026

4

Nutracan™ 350 mg/kg (-5) 7.8 < 0.0001

5

Nutracan™ 350 mg/kg (0) 6.9 0.0026

6

Extracto de solidago 25 mg/kg (-5) 7.2 < 0.0001

7

Jengibre 125 mg/kg (-5) 7.5 < 0.0001

El efecto de los extractos en la cantidad de perdida de peso siguiendo la infeccion tambien fue analizado. El porcentaje de perdida de peso se representa en la Figura 4.Los 5 dias previos a la infeccion no estan en la grafica ya que no hubo diferencia significativa de peso entre los grupos. Es importante hacer notar que la diferencia es menor en el final ya que 25 los ratones restantes fueron los que sobrevivieron al experimento.

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Ejemplo 3. (Ejemplo de referencia)

Actividad antiviral de extractos de solidago y jengibre contra infecciones de resfriado

la actividad antiviral del jengibre (extracto de CO2, de Flavex, producto no. 0.14.013) y el solidago (Solidago virgaurea, extracto hidroalcoholico, Finzelberg producto n°. 0193305) fue probado contra infecciones humanas de resfriado. Como se muestra en la Tabla V debajo y la Figura 5, ambos extractos solidago y jengibre (solos o en combination) inhiben la infection por rinovirus, aunque el solidago parece que es mas eficiente que el jengibre a las concentraciones testadas.

La actividad antiviral fue determinada usando un modelo celular reconocido como una forma estandar de analizar la formation de colonias por rinovirus (Fiala M, 1968). Este modelo usa una monocapa de linea celular HeLa que se infecta con rinovirus humanos, resultando en la lisis de las colonias (area celular infectada) que despues se cuentan. En este modelo analitico, en presencia de agentes virales, el numero de colonias lisadas disminuye proporcionalmente al poder antiviral de los agentes testados.

La monocapa de celulas HeLa (ATCC#CCL-2) fueron crecidas en placas de 6 pocillos hasta confluir. Antes de la infeccion o inoculation, el medio fue eliminado y las celulas fueron lavadas delicadamente una vez con DMEM pre- calentado y suplementadas con 30mM de MgCh y 2% de suero fetal bobino. 200 |jl del producto testado (extracto de jengibre y/o solidago) fueron anadidos a la adecuada dilution en DMEM con 30 mM de MgCh y 2% de suero fetal bobino. Las celulas fueron entonces infectadas con el rinovirus humano 1A (ATCC#VR-1559), diluido en 200jl del mismo medio que los extractos testados. Las placas fueron incubadas durante una hora a 33°C, 5% de CO2. Despues de la adsorcion, el producto y la solution de virus fue eliminada y las celulas fueron cubiertas con 3 ml de solution que contenia 1% de agarosa en un medio pre definido que contenia el producto. El vehiculo fue usado como control. Todos los ensayos fueron hechos por duplicado. Una vez cubiertas, las placas fueron incubadas a 33°C, 5% de CO2 en atmosfera humidificada durante 2 dias.

Despues de la incubation, las placas fueron tenidas con Cristal Violeta 0.1%. Todos los pocillos fueron fotografiados digitalmente y las colonias fueron contadas y calculada la inhibition en la formacion de colonias para cada dilucion de producto.

La inhibicion se reporta como porcentaje (%) de inhibicion de la infeccion comparada con la infeccion en ausencia de producto. El porcentaje de inhibicion fue calculado de acuerdo a la formula:

Porcentaje (%) inhibicion = [Ca-CB/CA]x100

donde CA es el numero de colonias en ausencia de producto o extracto de planta y CB es el conteo de colonias en presencia del extracto o su combinacion.

TABLA V: Actividad antiviral de extractos de jengibre y solidago solos o en combinacion contra infecciones de rinovirus 1A humano (HRV-1A )

ID

Concentracion (mg/ml) Inhibicion de PFU (%)

0.05 100

PL208 50002 (extracto hidroalcoholico de solidago)

0.025 92

0.0125 81

0.01 38

PL202 50001 (extracto de jengibre con CO2)

0.005 17

0.0025 0

PL208 50002

0.05/0.01 100

+

0.025/0.005 87

PL202 50001

0.0125/0.006 57

Ejemplo 4

Actividad antiviral de extractos acuosos y alcoholicos de solidago

La actividad antiviral del extracto acuoso y un extracto alcoholico de varias especies de solidago contra el virus influenza A/WS/33 H1N1 fue evaluado como se describe en el Ejemplo 1 en celulas monocapa MDCK. La extraccion con agua se 5 hizo como sigue: 7.5 g de solidago molido se extrajeron con agitacion en 50 ml de agua durante 24 horas a temperatura ambiente, se dejo sin agitacion durante otras 24 horas y luego fue centrifugado durante 7 minutos a 1500 rpm. El sobrenadante fue sometido a multiples filtraciones, 40 |jm, 1.2 |jm, 0.45 |jm y finalmente 0.2 |jm.

La extraccion alcoholica se realizo como sigue: 15 g de solidago molido se maceraron en 100 ml de metanol con un reflujo de 10 minutos. El extracto generado fue sometido a multiples filtraciones, 40 jim, 1.2 jim, 0.45 jim y finalmente 0.2 10 jm.

Los resultados que se presentan en la Tabla VI debajo y en la Figura 6 muestran que para el Solidago decurense, y Solidago canadensis, el extracto alcoholico es mucho mas eficiente inhibiendo la infeccion viral que el extracto acuoso. Resultados similares pueden observarse para el Solidago virgaurea, aunque en menor medida. Esta diferencia es debida probablemente a las concentraciones testadas (que probablemente son demasiado altas para mostrar una diferencia 15 para estas especies particulares). Ademas, como se observa para la extraccion acuosa, entre las especies testadas, el Solidago virgaurea parece ser el mas eficiente inhibiendo la infeccion viral, seguido de cerca por el Solidago canadienses y finalmente el Solidago decurense.

TABLA VI: Actividad antiviral de extractos acuosos y alcoholicos de varias especies de solidago

Planta

Concentracion (mg/ml) Inhibicion de PFU (%) extraccion acuosa Inhibicion de PFU (%) extraccion alcoholica

Solidago decurense

0.1 39 100

0.05

26 95

Solidago virgaurea

0.1 100 100

0.05

88 100

Solidago canadensis

0.1 81 100

0.05

72 100

20 Ejemplo 5

Actividad antiviral de extractos de solidago y jengibre en el virus pandemico humano influenza H1N1/09 (virus gripe porcina)

Fue testada la actividad antiviral de extractos de solidago (Solidago virgaurea) y de jengibre (solos o en combination) contra la gripe porcina y comparados con Ribavarin y Oseltamivir.

25 Los ensayos antivirales y de toxicidad han sido validados (Noah et al., Antiviral Res. 2007 Jan; 73(1):50-9).

MATERIAL Y METODOS

CellTiter-Glo® Ensayo de Deteccion de viabilidad Celular

La medida de la CPE inducida por influenza se basa en la cuantificacion de ATP, un indicador de las celulas metabolicamente activas. El ensayo de CPE emplea el Kit de viabilidad celular luminiscente CellTiter-Glo® disponible 30 comercialmente (Promega, Madison, WI) y es un metodo fiable para determinar la citotoxicidad y la proliferation de celulas en un cultivo. El procedimiento incluye anadir un reactivo solo (reactivo CellTiter-Glo®) directamente a las celulas previamente cultivadas por debajo de la confluencia en el medio. Esto induce la lisis celular y la production de una senal bioluminiscente (con una vida media mayor de 5 horas, dependiendo del tipo de celulas) que es proporcional a la cantidad de ATP presente (que es un biomarcador para la viabilidad).

35 Materiales

Celulas de rinon canino Madin Darby (MDCK), ATCC Cat # CCL-34; Virus influenza humano A/CA/04/09 H1N1;- Tinte celular-GLO - Promega; Sustrato - Cat # G755B; Tampon - Cat # G756B; Medicamento control -Ribavirin - MP Biomedicals, Inc., Cat # 196066 - Oseltamivir carboxilato (Southern research); y compuestos testados: (jengibre ex^do con CO2 y extracto hidroalcoholico de solidago). Se requieren un minimo de un (1) miligramo de cada compuesto (2 mg 5 en total) para realizar el experimento

Metodos

imagen1

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Pruebas de H1N1/09

En el dia 1, las celulas MDCK fueron crecidas hasta el 90% de confluencia, despues tripsinizadas, reconstituidas, centrifugadas y lavadas dos veces en PBS para eliminar el suero residual. Despues de esto, las celulas fueron diluidas en BSA- conteniendo DMEM, alicuotadas en placas de 96 pocillos, y permitiendo que se agarren a la placa durante 18 horas a 37°C.

En el dia 2, la observation visual confirmo la viabilidad celular. Los compuestos testados (extracto alcoholico de jengibre con CO2, y 5:1 solidago/ jengibre CO2) fueron diluidos a las concentraciones apropiadas para testar en un medio que contiene BSA y fueron anadidos al virus 2 horas antes de la inoculation en 3 replicas. Despues de 2 horas, el compuesto con la solution de virus fue anadido a cada CPE y los compuestos sin virus fueron anadidos a los pocillos de test de toxicidad. Las placas fueron preparadas como sigue: 1) sin tratar (el medio, control negativo); 2) Tratadas con una concentration final de 0.01, 0.04, 0.12, 0.37, 1.1, 3.3, 10, 30 |jg de jengibre extraido con CO2 (serie de dilution 1:3, 3.3 rango log, 8 dosis); o 3) tratados con concentraciones finales de 0.07, 0.214, 0.62, 1.85, 5.56, 16.67, 50, 150 |jg de extracto de solidago; o 4) tratados con concentraciones finales de 0.014/0.07, 0.04/0.214, 0.12/0.62, 0.37/1.85, 1.1/5.56, 3.3/16.67, 10/50, 30/150 jg de CO2 jengibre /extracto de solidago 1/5; 5; 5) tratadas con concentraciones finales de 0.016, 0.033, 0.10, 0.33, 1.04, 3.3, 10.4, 33 jM de Oseltamivir; o tratadas con concentraciones finales de 0.046, 0.14, 0.4, 1.2, 3.7, 11.1, 33.3, 100 jM ribavirin en <1% DMSO. El volumen final del pocillo fue 100 jl (50 jl celulas + 25 jl medicamento 4X (o el medio) + 25 jl virus 4X (o medio)). El virus control fue tambien incubado durante 2 horas en el medio antes de la inoculacion.

Cada condition fue anadida a los pocillos 1) virus (por triplicado)- para el analisis de la eficacia antiviral (CPE); y 2) sin virus (por duplicado)- para analisis de toxicidad. Los virus se anadieron a 100 TCID50 (100 veces la dosis de cultivo infeccioso que causa el 50% de letalidad en 72h, la concentracion final en los pocillos es 1X)).

En el Dia 5 (72 horas despues de la adicion del virus), la viabilidad celular fue medida mediante analisis de luminiscencia usando el kit Promega CellTiter-Glo®.

Reporte de datos

Los datos brutos fueron despues analizados y compilados para proporcionar 1) Datos brutos y curvas dosis respuesta para cada tratamiento y tipo de virus; 2) Concentracion de inhibition IC50, IC90; 3) Datos brutos y perfil de toxicidad para cada tratamiento y tipo de virus; 4) concentracion toxica; TC50 y TC90; y 5) indices terapeuticos para cada tratamiento y tipo de virus (ver la Tabla VIII abajo).

TABLA VIII: Eficacia antiviral contra la influenza H1N1 cepa A/CA/04/09

Compuesto

IC50 (ig/ml) IC90 (ig/ml) TC50 (ig/ml) TC90 (ig/ml) SI50 (ig/ml) SI90 (ig/ml)

PL202 500001 (extracto de jengibre con CO2)

1.029 0.17 >30 >30 1038 76

PL208 500002 (extracto solidago)

0.0843 0.1753 >150 >150 1779 855

BDI-630 (PL202:PL208) (solidago/ jengibre CO2)

0.04 :0.07 ND 8 :42 10 :50 750 ND

TamifluIM (Oseltamivir)

0.1 ND >10.3 >10.3 0.1 ND

Ribavirin

5.26 ND >24.4 >24.4 5.26 ND

Siguiendo el protocolo de abajo, el extracto de solidago (PL208 50002) muestra que inhibio infection viral de la gripe porcina un 50% a una concentracion inferior a 0.07 jg/ml. El extracto de jengibre con CO2 muestra que inhibio la misma infeccion viral a una concentracion de 0.02 jg/ml, y la mezcla (solidago/ CO2 jengibre) mostro que inhibio la infeccion viral un 50% a una concentracion de 0.04:0.07 jg/ml. Esos resultados demuestran el fuerte efecto de los extractos de solidago y CO2 jengibre tomados individualmente o mezclados en una proportion 5/1 (solidago:jengibre, Figura 7A-C). Los resultados fueron comparables con Tamiflu™ y Ribavarin™. Ambos productos fueron menos eficientes en la reduction de la infeccion de la gripe porcina que la combination de extractos de jengibre y solidago y los extractos individuales de la presente invention.

La alta viabilidad celular observada cuando los compuestos fueron testados individualmente es del 99% a 0.21 jg/ml para PL208 y 101% a 0.37 jg/ml para PL202. La combinacion de los dos compuestos a esas concentraciones resulto en una viabilidad celular del 120%, sugiriendo que los compuestos no tienen citotoxicidad a esas concentraciones y son

5

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15

20

25

capaces de promover el crecimiento celular y prevenir la muerte celular inducida por los virus. Mientras que la sinergia no pudo ser determinada de forma precisa debido a que los valores de viabilidad celular para los medicamentos usados individualmente a esas concentraciones fueron del 100% o superiores, lo que sugiere el mismo efecto sinergico.

Ejemplo 6

La administracion de extractos de jengibre y solidago, en las 48 horas siguientes del inicio de los sintomas mejora el tratamiento de las infecciones de resfriado y gripe.

Los solicitantes han observado en casos anecdoticos de sujetos humanos que recibieron extractos de jengibre y solidago, que la administracion de la formulacion Nutracan™ (que contiene jengibre (polvo) y extracto de Solidago virgaurea (hidroalcoholico)- ver la Tabla 2 abajo) dentro de las 48 horas siguientes al inicio de los sintomas de resfriado o gripe aumenta enormemente el exito del tratamiento. La composicion de la presente invention puede por lo tanto ser administrada ventajosamente dentro de las 48 horas siguientes al inicio de los sintomas o como un tratamiento preventivo (i.e. antes del inicio de los sintomas). Este ejemplo no es parte de la invencion ya que es concerniente al tratamiento de las infecciones de resfriado.

Ejemplo 7

Ejemplo de formulacion oral que contiene extracto hidroalcoholico de solidago y extracto de jengibre con CO2

La siguiente capsula oral fue preparada para la demostracion de la eficacia clinica de la combination de la presente invencion. La formulacion fue una capsula de 450 mg para administracion oral. La formulacion del producto se describe en la Tabla IX debajo y se designa BDI-630.

Tabla IX ejemplo de formulacion oral preparada para estudio clinico.

Componentes mg / capsula

Ingredientes medicinales

Jengibre extraido con CO2 (de Flavex , codigo producto 0.14.013) 43.5

Extracto hidroalcoholico de Solidago (de Finzelberg, producto n°. 0193305) 200.0

Ingredientes no-medicinales:

Celulosa microcristalina 113.5

Carboximetil celulosa de sodio reticulada 6.0

Acido estearico 12.5

Silice coloidal 4.5

Estearato de Magnesio 3.5

Monohidrogeno fosfato de Calcio 66.5

Total: 450.0

Ejemplo 8

Actividad antiviral in vitro de una formulacion liquida de una dosis de una combinacion que contiene polvo de jengibre y extracto de solidago contra las infecciones virales de influenza y rinovirus

Los solicitantes han demostrado que el jengibre y solidago en una formulacion liquida de «una-dosis», muestra actividad antiviral en los modelos celulares descritos en los Ejemplos 1-3 anteriores.

Estos experimentos evaluan las propiedades organolepticas, pH, y sabor (en zumo de frutas) de diferentes combinaciones de polvo de jengibre (rizoma/raiz completa) y extracto de solidago.

TABLA X. Identificacion de diferentes combinaciones y calidad de los componentes para una formulacion

liquida.

Mezcla

Polvo de jengibre (g) Extracto de Solidago (g) 60 ml de liquido

B

1 0.4 H2O

C

0.5 0.4 H2O

G

1 0.2 H2O

H

0.5 0.2 H2O

Concentraciones superiores a 1 g de jengibre no fueron adecuadas en sabor y no se siguieron.

5 Cada una de las formulaciones B a H, fueron testadas por su actividad antiviral contra influenza y rinovirus tipo 1A y tipo 2, y los resultados fueron reportados en las Tablas XI a XIII, respectivamente.

TABLA XI: Eficacia antiviral contra influenza tipo A/WS/33 en celulas MDCK

Mezcla

IC50 (|jg/ml) TC50 (|jg/ml) SI50 TC50/IC50

B

14/5.6* >250/100 >19.2

C

3/2.4 >125/100 >41.6

G

78/15.6 >250/50 >3.2

H

21/8.4 >125/50 >6

Polvo de Jengibre

ND >250 ND

Extracto de Solidago

>0.78 >100 >128

*Los resultados se presentan en mg de polvo de gengibre / mg de extracto de solidago/ml

TABLA XII: Eficacia antiviral contra Rinovirus tipo 1A en celulas Hela

Mezcla

IC50 (|jg/ml) TC50 (|jg/ml) SI50 TC50/IC50

B

14/5.6* >250/100 >19.2

C

3/2.4 >125/100 >41.6

G

78/15.6 >250/50 >3.2

H

21/8.4 >125/50 >6

Polvo de jengibre

ND >250 ND

Extracto de solidago

>0.78 >100 >128

TABLA XIII: Eficacia antiviral contra Rinovirus tipo 2 en celulas Hela

Mezcla

IC50 (|jg/ml) TC50 (|jg/ml) SI50

B

>250/100 >250/100 ND

5

10

15

20

25

30

35

(continuation)

Mezcla

IC50 (Mg/ml) TC50 (Mg/ml) SI50

C

58/46 >125/100 >2.2

G

8/1.56 >250/50 >31.25

H

46/18.4 >125/50 >2.7

Polvo de Jengibre

ND ND ND

Extracto de Solidago

41 >100 >2.4

La formulation liquida (una-dosis) es efectiva in vitro contra las infecciones de influenza y rinovirus. Se observa una sinergia entre el polvo de jengibre y el extracto de solidago en el ensayo contra el rinovirus tipo 1A. En una realization especifica, la formulacion puede estar en un volumen de aproximadamente 60 ml de zumo aromatizado. En una realizacion aun mas espetifica., 60 ml de zumo aromatizado contienen una proportion de 0.5 g de polvo de jengibre con

0.3 g de extracto de solidago.

Ejemplo 9

Estudio clinico

El proposito del estudio clmico (N° BDI-URS-09-002): un estudio doble ciego usando capsulas de Equinacea como producto de referencia) es evaluar la seguridad y la eficacia clinica preliminar de la combination de la presente invention (nombrada BDI-630 en el protocolo de estudio clinico) en reducir la severidad y duration de los sintomas asociados al resfriado. La aproximacion general para ser seguido durante el ensayo doble ciego es comparar el efecto del bien reconocido NHP para la atenuacion de los sintomas de resfriado, Equinacea (Echinamide™, equinacea purpura extracto de planta: proporcion del extracto 2.4:1), con la combinacion de la presente invencion en adultos de una comunidad (entre 21 y 60 anos).

A continuacion esta un resumen del protocolo clinico que sera usado.

Objetivos del ensayo

El objetivo de este ensayo clinico piloto/exploratorio es para evaluar los efectos de una formulacion especifica que contiene extracto de CO2 supercritico obtenido de jengibre (Zingiber officinale) y un extracto hidroalcoholico obtenido de solidago (Solidago virgaurea L.) como se describe en el Ejemplo 7 (Tabla IX) versus Echinamide® (Equinacea purpurea) en el manejo (atenuacion) de los sintomas del resfriado en adultos de una comunidad (entre 18 y 60 anos).

Diseno del estudio y duracion

El estudio BDI-URS-09-002 sera un estudio exploratorio, doble ciego, aleatorio y controlado, llevado a cabo en centros en Quebec, Canada durante la estacion invernal. Pacientes que han desarrollado sintomas de resfriado (dentro de las ultimas 36 horas) y han firmado un formulario de consentimiento (ICF) seran monitorizados para la evaluation de su elegibilidad de acuerdo con los criterios de inclusion y exclusion.

Aproximadamente 80 pacientes con sintomas confirmados de resfriado (definidos abajo) evaluados por un medico, seran aleatorizados para obtener un minimo de 72 pacientes evaluables siguiendo el tratamiento de 10 Dias (i.e. una exclusion aproximadamente del 10% es esperable). Los pacientes seran distribuidos aleatoriamente BDI-630 o Echinamide®. Los pacientes aleatorios comenzaran a tomar el producto a investigar en el Dia 1 (visita de revision y aleatoriedad) y continuaran durante un total de 10 Dias. Las visitas de evaluacion tendran lugar en el Dia 7 y Dia 14. Los pacientes seran monitorizados para su seguridad y valoracion para la evaluacion de los sintomas de resfriado por mas de 14 dias. Durante el estudio de 14 dias.

El resfriado clinicamente confirmado en este estudio se define como sigue: el paciente reporta al menos 2 de los siguientes sintomas (dentro de las ultimas 36 horas), moqueo nasal, congestion/taponamiento nasal, estornudo, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de pecho y sentirse cansado/agotado.

La duracion del tratamiento con BDI-630 o Echinamide® para cada paciente es 10 dias.

La duracion total del estudio para cada paciente es 14 dias. Las visitas de los pacientes son como siguen: Dia 1(revision

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

y aleatoriedad), Dia 7 (evaluation del tratamiento) y Dia 14 (seguimiento post-tratamiento.

Tamano de la muestra

Se espera que al menos 120 pacientes sean revisados para elegir aleatoriamente 80 pacientes (40 pacientes con BDI- 630 y 40 pacientes con Echinamide®) y que aproximadamente 72 completaran el estudio de 14 dias, se estima que el 10% podria salirse durante el estudio.

Los pacientes deben cubrir todos los siguientes requisitos en el Dia 1 del estudio para ser elegibles de aleatorizacion en el estudio: 1. Haber firmado un formulario de consentimiento informado (ICF); 2. Ser capaces de entender y cumplir con los procedimientos planeados en el estudio; 3. Tener edades entre 18 y 60 anos; 4. Tener sintomas tempranos de resfriado clinicamente probados como se evaluan por el investigador, usando el cuestionario WURSS-21; i.e. pacientes que reporten al menos dos de los siguientes sintomas (durante no mas de 36 horas): moqueo nasal, nariz taponada, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de pecho y sentirse cansado; 5. Para mujeres potencialmente embarazadas, un test negativo de embarazo y un acuerdo para evitar quedarse embarazadas (usar un metodo efectivo anticonceptivo o abstinencia) desde el dia de aleatorizacion y hasta 2 semanas despues del fin del tratamiento sera mandatorio; 6. Ser capaz de acudir a todas las visitas programadas y cumplir con todos los procedimientos del ensayo; y 7. Estar en buen estado general de salud, como se determina por el historial medico, signos vitales (latido cardiaco, presion sanguinea, temperatura oral) y el examen fisico de los siguientes sistemas corporales: oido, nariz y garganta, torax, pulmones, abdomen, cardiovascular, neurologico, musculoesqueletico, extremidades, piel/dermatologia, sistema vascular periferico; y otras exploraciones que se consideren necesarias por el investigador.

Criterios de exclusion

Los pacientes que cumplan alguno de los siguientes criterios en el dia 1 del estudio no son elegibles para ser aleatorizados en el estudio: 1. Pacientes con sospecha de gripe (influenza), infection por estreptococos, asma, neumonia, gripe aviar o gripe porcina (H1N1), como se determine por el investigador o el clinico; 2. Participation en investigation de vacunas, dispositivos medicos, o procedimientos medicos en las 4 semanas anteriores a la aleatorizacion (vacunacion previa, que no incluya ensayos clinicos son permitidos); 3. Planes de participar en otro estudio de ensayo clinico (no especificado en le parrafo anterior) durante el periodo del presente estudio; 4. Deficiencia/alteracion conocida o sospechada de la funcion inmune, por ejemplo como resultado de: (a) el uso de corticoides sistemicos de larga duration (i.e., cortisona sistemica, dexametasona y/o otras medicaciones inmunosupresoras, p.ej. Imuran) dentro de los 3 ultimos meses o corticoides nasales dentro de los ultimos 15 dias o tener intention de recibir dicha medication durante el estudio. (B) Historia de infeccion con el virus de inmunodeficiencia humana (HIV), Hepatitis B o Hepatitis C, tuberculosis, artritis reumatoide, lupus sistemico, enfermedades del colageno vascular, esclerosis multiple; (c)Historia de inmunodeficiencia congenita o adquirida; terapia inmunosupresora como quimioterapia anti-cancerigena io terapia de radiation dentro de los 6 meses precedentes; (d) reception preparation parenteral de inmunoglobulina, productos sanguineos y/o derivados de plasma dentro de los 3 meses pasados o tener intencion de recibir dicha medicacion durante el estudio; o (e) uso de otros inmunomoduladores (i.e. interleuquinas, interferon); 5. Uso actual o planeado de anticoagulantes (p.ej., warfarin, heparina, Aspirina®, Clopidogrel®), anti- inflamatorios, antivirales, descongestionantes nasales que contengan cortico esteroides o antihistaminicos, expectorantes, pildoras, zinc, antihistaminicos orales, antibioticos, jarabe para la tos, medicacion para dormir (p.ej. pastillas para dormir, pastillas de cafeina) suplementos herbales previstos para el tratamiento de resfriados (incluyendo tes herbales), Cold Fx®, Airborn®, Echinilin®, ginseng, y vitamina C (multivitaminicos que contengan < 100 mg de vitamina C estan permitidos); 6. Hipersensibilidad al jengibre o a la hierba de solidago o Equinacea conocida; 7. Reacciones alergicas conocidas a la familia Asteraceae/Compositeae (p.ej. ambrosia, crisantemo, calendula y margaritas); 8. Desordenes sanguineos conocidos; 9. Enfermedades renales conocidas; 10. Piedras vesiculares conocidas; 11. Pacientes con angina inestable, o que hayan sufrido un infarto de miocardio en los ultimos 3 meses, o que tengan tension sanguinea tipo II (sistolica > 160 mmHg y/o diastolica >100 mmHg); 12. Abuso del alcohol actual, fumar marihuana activamente o adiccion a las drogas (ya que puede interferir con la capacidad de los pacientes de cumplir con los procedimientos del ensayo); 13. Cirugia planificada durante el estudio o 30 dias despues del fin del estudio; o 14. Cualquier condition que en la opinion del investigador pueda interferir con la evaluacion de los objetivos del estudio o pudiesen resultar en una no complacencia con el protocolo.

Formulacion del medicamento

BDI-630 es una combination de dos ingredientes medicinales: jengibre (Zingiber Officinale) extracto de raiz con CO2 y solidago (solidago virgaurea) extracto hidroalcoholico de la parte aerea. Cada capsula de bDI-630 contiene 450 mg de la mezcla + excipientes (ver el Ejemplo 7 para la formulacion detallada).

Echinamide® producto comercial que contiene 250 mg de Echinacea purpurea por capsula. Las capsulas de

Echinamide® se insertaron en capsulas blancas opacas identicas y se empaquetaron en las mismas botellas de plastico usadas para el BDI-630 para asegurar la ceguera.

Regimen de dosificacion

Del D^a 1 al 7: A) BDI-630: 4 capsulas/dia (2 capsulas, dos veces al d^a); 1.800 mg de dosis diaria total; o B) 5 Echinamide® : 4 capsulas/dia (2 capsulas, dos veces al dia); 1.000 mg de dosis diaria total.

Los suministros seran enviados el sitio de la investigacion en proporciones iguales y las etiquetas tendran un numero (asociado con el codigo ciego de aleatorizacion) pero el personal del lugar no conocera el codigo. Los productos de tratamiento (BDI-630 o Echinamide®) seran suministrados en botes, cada uno conteniendo un suministro de 10 dias. Los botes seran suministrados a los pacientes el Dia 1 y el contenido vacio sera retornado el Dia 14 para determinar el 10 cumplimiento y realizacion del acuerdo de suministro.

Despues de la confirmation de los sintomas y la aleatorizacion, BDI-630 o Echinamide® deben tomarse diariamente durante 10 dias. Las visitas de evaluation seran como se describen en la Tabla XIV debajo:

TABLA XIV: Tratamiento/Visitas de evaluacion

Procedimiento

Dia 1 Seleccion1 Dia 1 I nicio del tratamiento Dia 7 Evaluacion del tratamiento Dia 14 Evaluacion de seguimiento Visita sin programar2

Aleatorizacion

X

Clinica de laboratorio (Hematologia3, Quimica clinica 3, Analisis de orina3, Test de coagulacion3, suero sanguineo4)

X X X X

Reparto dosis de prevention (suministro de producto para 10 dias)7

Fin de la agenda del paciente5

X X X X

Medicaciones simultaneas (post- aleatorizacion)

X X X X

AEs o SAEs

X X X X

Physical examinations (postrandomization)

X X X

WURSS-21 Cuestionario para valorar la severidad de los sintomas respiratorios y QOL6

X X X

Devolution de botes/blister, valoracion de cumplimiento

X

15 Selection y Dia 1 se combinaran en una visita. Los fracasos de selection seran excluidos antes del Dia 1 del tratamiento

y procedimientos.; 2 Una visita sin programar solo sera llevada a cabo para una evaluacion SAE urgente, si no puede hacerse en el dia 7 o 14; 3 Los test clinicos de laboratorio en el dia 1 (para determinar la linea base) deben hacerse despues de la seleccion aleatoria pero antes de la primera dosis de tratamiento.; 4 suero sanguineo sera obtenida para futuras dosis de citoquinas (factor de necrosis de tumor e interleucina -6). Deben mantenerse congeladas (a -70 grados 20 Celsius) hasta que los test sean realizados; 5 Los pacientes deben guardar un diario desde el Dia 1 y guardar datos diariamente durante 14 dias. Ellos llevaran el diario a las visitas del Dia 7 y Dia 14; 6 Tel primer cuestionario WURSS-21 sera completado por los pacientes durante la visita del Dia 1, antes del examen medico y la entrevista con el investigador. El cuestionario WURSS-21 debe ser completado diariamente por los pacientes y podria ser completado antes de o durante las visitas de los Dias 7 y Dia 14; 7 La primera dosis debe ser administrada en el lugar de 25 investigacion y los pacientes deben quedar bajo observation durante 30 minutos (para asegurar el tratamiento adecuado

5

10

15

20

25

30

35

40

45

en caso de reaccion alergica).

Medicacion simultanea Medicacion/terapias prohibidas:

Tratamiento con otros medicamentos experimentales; o (2) el uso de los siguientes medicamentos a traves del estudio entero: inmunomoduladores (i.e. interleuquinas, interferon); corticoesteroides sistemicos (i.e. cortisona sistemica, dexametasona y/u otros medicamentos inmunosupresores i.e. Imuran); anticoagulantes (p.ej. warfarin, heparina, Aspirina®, Clopidogrel®), anti-inflamatorios, antivirales, descongestionantes nasales que contengan corticoesteroides o antihistaminicos, expectorantes, pildoras, zinc, antihistaminicos orales, antibioticos, jarabe para la tos, medicacion para dormir (p.ej. pastillas para dormir, pastillas de cafeina) suplementos herbales previstos para el tratamiento de resfriados (incluyendo tes herbales), Cold Fx®, Airborn®, Echinilin®, gingsen, y vitamina C (multivitaminicos que contengan < 100 mg de vitamina C estan permitidos).

Medicaciones simultaneas permitidas

Antipireticos (para pacientes con fiebre), i.e. acetaminofeno (Tyrenol®) e ibuprofeno (Motrin® o Advil®); y esprais nasales salinos.

Retirada prematura/ Criterios de discontinuacion

En cualquier momento un paciente podra retirarse del estudio a su propio requerimiento o en base al criterio del investigador clinico. Sin embargo, los pacientes que soliciten ser retirados seran fuertemente alentados a completar los examenes apropiados para evaluar validamente su caso para su incorporation en el analisis. Un paciente que no haya sido aleatorizado sera considerado como “error de selection”.

Un paciente que experimente una reaccion inmediata de hipersensibilizacion (atribuida al producto del tratamiento) sera retirado del estudio. Dicha reaccion es definida como una reaccion sistemica alergica de inicio inmediato (dentro de la hora siguiente post-dosis) asociada con hipotension o sincope; o que incluya dos o mas sistemas organicos.

El investigador debe tambien proporcionar en el formulario de reporte de casos (CRF) y fuentes de documentation un pequeno comentario acerca de las razones y circunstancias para retirarse especialmente si la interruption del tratamiento no fue relacionada con la “falta de eficacia” o “falta de tolerancia”.

Un paciente que haya sido retirado con o debido a efectos adversos y que no se hayan resuelto en el momento de la retirada, debe ser seguido como se indique medicamente.

Variables de eficacia y analisis

Los siguientes puntos finales de eficacia seran evaluados: (a) El cambio en la severidad de los sintomas comunes del resfriado en la puntuacion de severidad total (i.e. moqueo nasal, nariz taponada, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de pecho y sentirse cansado) como se recoge en los cuestionarios WURSS-21 entre los dias 1 y 14; (b) El area bajo la curva (AUC) de la puntuacion de severidad total (i.e. moqueo nasal, nariz taponada, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de pecho y sentirse cansado) basado en los datos recogidos en el cuestionario WURSS-21 durante los dias 1 a 14; (c) El numero de dias con al menos un sintoma WURSS-21 con una puntuacion de 5 (moderada) o mas (i.e. moqueo nasal, nariz taponada, dolor de garganta, picor de garganta, tos, ronquera, congestion de pecho y sentirse cansado) entre los Dias 1 y 14; (d) La calidad de vida relativa a la salud medida por las preguntas calidad de vida (QOL) (i.e. pensar con claridad; dormir bien; respirar con facilidad; andar; subir escaleras; ejercitarse; cumplir con las actividades diarias; trabajar fuera de casa; trabajar dentro de casa; interactuar con otros; vivir la vida personal) en el cuestionario WURSS-21 compilado entre los Dias 1 y 14; (e) frecuencia, tipo e intensidad de las terapias y medicacion usadas contra el resfriado comun desde los Dias 1 y 14; y (f) el nivel de citoquinas en suero sanguineo.

Variables seguras y analisis

La seguridad sera evaluada en base al tratamiento efectos adversos emergentes, medidas de laboratorio (quimica clinica, niveles de citoquinas, hematologia y analisis de orina) y medicaciones simultaneas. Sera evaluado el numero y porcentaje de pacientes que experimentan AEs y SAEs por el tipo, frecuencia e intensidad.

Analisis estadistico

Las siguientes poblaciones seran analizadas en este estudio: (A) Pacientes elegibles para el analisis habran recibido una dosis minima del producto investigado; y (B) Poblacion que se intenta tratar: Pacientes elegibles para el analisis son

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25

30

pacientes que han recibido un mmimo de una dosis del producto a investigar y que fueron aleatorizados, y clasificados para los cuales los pacientes son aleatorizados.

Para investigar la hipotesis en tablas de variables de contingencia, el test exacto de Fisher para las proporciones fue usado. Se llevaran a cabo multiples comparaciones de datos repetidos en el tiempo mediante analisis medidos repetidos de varianza (ANOVA). Ademas, se usaran metodos graficos estadistica descriptiva para caracterizar los datos.

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Claims (15)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   REIVINDICACIONES

   1. Una composition que contiene una combination de jengibre y solidago, para su uso en prevention y/o tratamiento de una infection con influenza (gripe).
2. 2. La composicion de uso de la reivindicacion 1, que ademas contiene uno o mas ingredientes no medicinales seleccionados del grupo que consiste en celulosa microcristalina, carboximetil celulosa de sodio reticulada, acido estearico, s^lice coloidal, estearato de magnesio y monohidrogeno fosfato de calcio.
3. 3. La composicion de uso de la reivindicacion 1 o 2, en la que la composicion contiene (i) un extracto de jengibre seleccionado del grupo que consiste en jengibre crudo extraido 100% en agua, un extracto alcoholico de jengibre y un extracto de jengibre en CO2 y/o (ii) extracto de solidago seleccionado del grupo que consiste en solidago crudo extraido 100% en agua y un extracto alcoholico de solidago.
4. 4. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la combinacion contiene polvo de jengibre.
5. 5. La composicion de uso de la reivindicacion 3, en la que el alcohol empleado para la production de extracto alcoholico contiene (i) un alcohol primario seleccionado del grupo que consiste en metanol, etanol, 1-propanol, 1-butanol y cualquier combinacion de los mismos , o (ii) un alcohol secundario.
6. 6. La composicion de uso de la reivindicacion 3 o 5, en la que se usa la mezcla de al menos dos alcoholes diferentes.
7. 7. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 3, 5 o 6, en la que el extracto alcoholico se prepara utilizando una solution que contiene entre el 20% y el 85% de alcohol.
8. 8. La composicion para uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7. En la que la combinacion contiene una proportion entre 1:15 y 10:1 de jengibre: solidago.
9. 9. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que la cantidad efectiva contiene entre 40 mg y 4500 mg de jengibre.
10. 10. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 que comprende entre 200 mg y 800 mg de solidago.
11. 11. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que contiene ademas polvo de arandano.
12. 12. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que el jengibre y el solidago son los unicos ingredientes medicinales para la prevencion o el tratamiento de infeccion de gripe en la composicion.
13. 13. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en la que la composicion es una composicion nutraceutica, dietetica o veterinaria.
14. 14. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en la que la composicion esta contenida en (i) una bebida; (ii) un producto alimenticio; o (iii) un suplemento alimenticio.
15. 15. La composicion de uso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, adaptada para su administration dentro de las 24 h o 48 h del inicio de los sintomas de gripe.