ES2552877T3 - Dispositivo de extracción y procedimiento para la extracción de ingredientes de una muestra biológica - Google Patents

Abstract

Un procedimiento de extracción de al menos un ingrediente de una muestra biológica (112), en el que un cargador de líquido (116) de un dispositivo de extracción (110) es puesto en contacto con un primer lado (122) de la muestra (112) y en el que un líquido de extracción (128) se aplica al primer lado (122) de la muestra (112) utilizando el cargador de líquido (116), en el que, además, se utiliza al menos un dispositivo de toma de muestras (118) del dispositivo de extracción (110), en el que el dispositivo de toma de muestras (118) es puesto en contacto con un segundo lado (124) de la muestra (112) y en el que un fluido de muestra (126) que comprende el líquido de extracción (128) y el ingrediente se recoge por medio del dispositivo de toma de muestras (118), en el que el cargador de líquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118) están conectados por al menos un mecanismo de conexión (162), en el que el mecanismo de conexión (162) está adaptado para variar una distancia entre el cargador de líquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118) y en el que el cargador de líquido (116) aplica una fuerza de sujeción a la muestra (112) que se encuentra situada entre el cargador de líquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118), en el que la muestra biológica (112) se toma de una planta y es seleccionada de entre el grupo que consiste en hojas, troncos, tallos, raíces, raíces de almacenamiento, ramas, inflorescencias, flores, infrutescencias, frutos, panochas, mazorcas y semillas, en el que el dispositivo de extracción (110) se sujeta sobre la muestra biológica (112) y la extracción se realiza sin cortar la planta en pedazos.

Description

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DESCRIPCION

Dispositivo de extraccion y procedimiento para la extraccion de ingredientes de una muestra biologica Campo de la invencion

La invencion se refiere a un dispositivo de extraccion y a un procedimiento para extraer al menos un ingrediente de una muestra biologica. La invencion se refiere, ademas, a un sistema de extraccion, que comprende un dispositivo de extraccion y una muestra biologica. Los dispositivos de extraccion, los sistemas de extraccion y los procedimien- tos de acuerdo con la invencion pueden ser utilizados preferiblemente en el campo del desarrollo de las plantas, tales como el desarrollo de lmeas de plantas transgenicas, asf como en el campo del desarrollo de compuestos y procedimientos para el tratamiento de plantas y entidades de plantas, tales como el desarrollo de fertilizantes, pesti- cidas, herbicidas, potenciadores del crecimiento y otros compuestos. La invencion puede ser utilizada, ademas, para la deteccion de efectos potenciales producidos por una o mas influencias externas en ciertas plantas y / o para la deteccion de efectos potenciales en ciertas plantas o partes de plantas, tales como efectos toxicologicos o farmaceu- ticos. Ademas, la invencion puede ser utilizada en el campo de la biotecnologfa de plantas, tal como para el desarrollo de lmeas de plantas transgenicas y en el campo de la reproduccion de plantas.

Tecnica relacionada

En el campo de la biologfa de las plantas, el desarrollo de pesticidas y fertilizantes, asf como en el campo de la toxi- cologfa, la evaluacion de los ingredientes bioqmmicos de las plantas y, espedficamente, las investigaciones del metabolismo de las plantas, ha llegado a ser una herramienta ampliamente utilizada. Por lo tanto, espedficamente en el campo del desarrollo de tratamientos para ciertas plantas y entidades de plantas, el metabolismo de la planta y espedficamente ciertos metabolitos que se utilizan como marcadores pueden proporcionar importantes conocimien- tos sobre la reaccion de la planta a estos tratamientos, ademas, o como alternativa a la simple observacion de las senales exteriores de la planta, tales como el color, el crecimiento de la planta, el volumen de la planta o el volumen de la rafz. De manera similar en el campo del cultivo de plantas o de la caracterizacion y el desarrollo de lmeas de plantas transgenicas para la mejora de cultivos, el metabolismo de la planta puede proporcionar importantes cono- cimientos sobre el desarrollo o el rendimiento potencial de la planta, ademas o alternativamente a la simple observacion del crecimiento, el desarrollo o el fenotipo de la planta incluyendo la cosecha final. Por lo tanto, mediante la evaluacion de ciertos marcadores de metabolitos, puede ser posible incluso predecir el desarrollo de la planta y / o la reaccion mucho antes de que signos exteriores tales como cambios fenotfpicos se encuentren disponibles. Ademas, mediante la comparacion, por ejemplo, de la disminucion o el incremento de ciertos marcadores de metabolitos con la disminucion o el aumento de metabolitos en otros tratamientos conocidos, el efecto, por ejemplo, del desarrollo o del rendimiento de la planta de un tratamiento en cuestion, tal como un tratamiento con un compuesto qmmico de- terminado, se pueden predecir. Al agrupar ciertas reacciones de los metabolitos, los tratamientos pueden ser agru- pados y los nuevos tratamientos que tienen un efecto similar pueden encontrarse simplemente buscando patrones de metabolitos similares.

Para todas estas investigaciones, se requieren dispositivos y procedimientos fiables para la extraccion de metabolitos de las muestras de plantas. Comunmente, se toma una muestra de la planta, tal como una muestra de la hoja de la planta, mediante la diseccion de la muestra del cuerpo de la planta. La muestra se desintegra en un recipiente adecuado, por ejemplo, por molienda, maceracion u otras tecnicas adecuadas para desintegrar la estructura externa de la muestra. Se anaden uno o mas disolventes para disolver los ingredientes de la planta que se van a extraer. Finalmente, los disolventes que contienen uno o mas ingredientes se separan de la muestra, tal como por medio de procedimientos de filtracion y / o de centrifugacion. Estos disolventes, que contiene el uno o mas ingredientes, pueden ser evaluados adicionalmente por procedimientos analfticos tfpicos, tales como por procedimientos espec- troscopicos, analisis qmmico, espectroscopia de masas, cromatograffa de gases, cromatograffa de ffquidos o combi- naciones de los procedimientos que se han citado.

Sin embargo, estos procedimientos conocidos para la extraccion de uno o mas ingredientes de la muestra, son des- ventajosos y perjudiciales para la muestra de varias maneras. Por lo tanto, la preparacion de la muestra es bastante lenta, lo que deja un tiempo suficiente para que se alteren componentes de la muestra, tal como por oxidacion u otras reacciones qmmicas. Ademas, la diseccion de la muestra de la planta restante puede cambiar la misma muestra de la planta, como por ejemplo ejerciendo esfuerzo sobre la planta, y, por tanto, potencialmente pueden falsear los resultados de las reacciones de los metabolitos.

Problema a resolver

Por lo tanto, un objetivo de la presente invencion es proporcionar dispositivos y procedimientos para la extraccion de al menos un ingrediente de una muestra biologica, que evite al menos parcialmente las desventajas de los dispositivos y procedimientos conocidos. Espedficamente, se debe proporcionar una forma rapida y fiable de la extraccion sin que la preparacion de la muestra precise de mucho tiempo, que tenga un impacto irffnimo en la muestra y / o en la misma entidad biologica remanente.

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Divulgacion de la invencion

Este problema se soluciona por medio de un dispositivo y un procedimiento de extraccion para extraer al menos un ingrediente de una muestra biologica, de acuerdo con las reivindicaciones independientes. Las realizaciones preferi- das de la invencion, que pueden ser realizadas solas o en combinacion con una o mas de las otras realizaciones preferidas, se describen en las reivindicaciones dependientes.

En lo que sigue, los terminos "tienen", "contienen" y "comprenden", asf como las variaciones gramaticales de los mismos se utilizan de una manera no exclusiva. Por lo tanto, las expresiones "A tiene B", "A contiene B" y "A com- prende B" pueden implicar el caso en el que A unicamente consiste en B sin tener ninguno de los componentes o constituyentes adicionales y el caso en el que A, ademas de B, contiene uno o mas componentes o constituyentes adicionales.

En un primer aspecto de la presente invencion, se desvela un dispositivo de extraccion para extraer al menos un ingrediente de una muestra biologica. Tal como se utiliza en esta revelacion, un dispositivo de extraccion puede comprender cualquier aparato o una combinacion de aparatos, que son adecuados para extraer el al menos un ingrediente, preferiblemente mediante el uso de uno o mas disolventes lfquidos y / o gaseosos.

El termino "muestra biologica" como se usa en la presente memoria descriptiva puede referirse preferentemente a las muestras que contienen material biologico de todas las fuentes biologicas. Se debe entender que el material biologico comprendera metabolitos.

La muestra biologica puede comprender cualquier muestra que pueda ser tomada de un ser vivo o entidad viviente, preferiblemente una muestra que puede ser tomada de una planta. La muestra biologica puede comprender preferentemente celulas vivas. La muestra puede comprender preferiblemente toda una parte o la totalidad del ser vivo o entidad viviente, tal como una parte auto - soportante del ser vivo o entidad viviente, preferiblemente sin la necesi- dad de proporcionar un elemento de soporte. De este modo, la muestra biologica puede consistir preferentemente unicamente de la parte del ser vivo o entidad viviente. Como una realizacion preferida, la parte del ser vivo o entidad viviente se toma directamente del ser vivo o entidad viviente, como una parte intacta, sin pasos adicionales de acon- dicionamiento o procesamiento. Tal como se utiliza en la presente memoria descriptiva, los terminos "acondiciona- miento" y "procesamiento" se pueden entender espedficamente como unos medios para preservar la muestra bio- logica, por ejemplo, la congelacion o liofilizacion de la muestra biologica antes de la extraccion del o de los ingre- dientes a partir de la muestra biologica usando el dispositivo de extraccion. Por lo tanto, preferiblemente, la muestra biologica se puede tomar de una planta y puede estar sujeta a un proceso de extraccion utilizando el dispositivo de extraccion de acuerdo con la presente invencion y / o el procedimiento de extraccion de acuerdo con la presente invencion, sin ningun paso intermedio de congelacion o liofilizacion de la muestra biologica antes de la extraccion del al menos un ingrediente.

En otra realizacion adicional, la parte del ser vivo o entidad viviente, directamente tomada del ser vivo o entidad viviente, todavfa puede estar sujeta a propagacion por medio de cultivo de tejidos. Preferiblemente, la muestra bio- logica, al menos al comienzo del proceso de extraccion del al menos un ingrediente, todavfa vive o contiene materia viva, tal como celulas vivas. Por lo tanto, preferiblemente, al menos al comienzo del proceso de extraccion del al menos un ingrediente, todavfa puede ser posible reproducir la muestra biologica o partes de la misma, tal como por medio de la reproduccion de los cultivos celulares y / o cultivos de tejidos tomados de la muestra biologica.

La parte del ser vivo puede estar sujeta a manipulaciones adicionales antes de la extraccion del al menos un ingrediente de la muestra biologica por medio del uso del dispositivo de extraccion. Mas preferiblemente, el tamano de la parte del ser vivo puede ser ajustado a las medidas del dispositivo de extraccion previamente a la extraccion. Por lo tanto, espedficamente, el tamano y / o dimensiones de la muestra biologica pueden estar adaptados para el dispositivo de extraccion, tal como a las dimensiones de un espacio de muestras del dispositivo de extraccion entre el car- gador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras. Para adaptar el tamano y / o las dimensiones de la muestra biologica, puede ser utilizado cualquier procedimiento conocido, tal como un proceso de corte.

Las muestras biologicas de acuerdo con la invencion son hojas, troncos, tallos, rafces, rafces de almacenamiento, ramas, inflorescencias, flores, infrutescencias, frutos, panochas, mazorcas, semillas u otras muestras tomadas de una planta pueden ser citadas.

En una realizacion preferida, la muestra biologica puede ser o puede comprender una parte intacta de una planta que crece en un ambiente controlado tal como una camara de crecimiento o un invernadero.

En otra realizacion preferida, la muestra biologica puede ser o puede comprender una parte intacta de una planta que crece en el suelo o en un sistema hidroponico en un ambiente controlado, tal como una camara de crecimiento o un invernadero.

En otra realizacion preferida, la muestra biologica puede ser o puede comprender una parte intacta de una planta que crece en un campo. El campo puede ser un campo de prueba, en el que se cultivan las plantas bajo regfmenes

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de cultivo espedficos, imponiendo una esfuerzo abiotico o biotico a las plantas con el fin de controlar su reaccion o rendimiento, o un campo normal en el que las plantas son cultivadas por los agricultores para cosecharlas mas tar- de.

En otra realizacion preferida, la muestra biologica puede ser o puede comprender una parte intacta de una planta, que pertenece a una poblacion reproductiva.

En otra realizacion preferida, la muestra biologica puede ser o puede comprender una parte intacta de una planta, que pertenece a una planta transgenica.

El termino "planta" como se usa en la presente memoria descriptiva puede referirse a una amplia variedad de plantas monocotiledoneas o dicotiledoneas, preferiblemente plantas tales como mafz, trigo, centeno, avena, triticale, arroz, cebada, sorgo, cana de azucar, soja, cacahuete, algodon, colza y canola, mandioca, pimiento, girasol y tage- tes, remolacha azucarera, plantas solanaceas tales como patata, tabaco, berenjena, y tomate, especies Vicia, gui- sante, alfalfa, plantas arbustivas (cafe, cacao, te), especies Salix, arboles (palma aceitera, coco), hierbas perennes y cultivos forrajeros. Los cultivos forrajeros incluyen, pero no se limitan a agropiro, alpiste, hierba de bromo, hierba de centeno salvaje, pasto azulado, grama, alfalfa, salfoin, loto de los prados, trebol hibrido, trebol rojo y trebol dulce. Mas preferiblemente, la "planta" tal como se utiliza en la presente memoria descriptiva se refiere a arroz, soja, mafz, algodon, canola, trigo, remolacha azucarera y cana de azucar.

El al menos un ingrediente puede comprender cualquier componente que pueda estar presente en la muestra biologica. Preferiblemente, el al menos un ingrediente puede comprender uno o mas metabolitos. Por lo tanto, preferiblemente, el dispositivo de extraccion puede ser utilizado o puede ser adecuado para la extraccion de uno o mas metabolitos de una muestra de planta, preferiblemente de forma selectiva, preferiblemente con una alta selectividad.

El termino "metabolitos" como se utiliza en la presente memoria descriptiva se refiere a compuestos de moleculas pequenas, tales como sustratos para enzimas de vfas metabolicas, intermedios de tales vfas o los productos obteni- dos por una via metabolica. Las vfas metabolicas son bien conocidas en la tecnica y pueden variar entre especies. Preferiblemente, las citadas vfas incluyen por lo menos un ciclo de acido cftrico, cadena respiratoria, fotosmtesis, foto respiracion, glucolisis, gluconeogenesis, via hexosa monofosfato, via de fosfato de pentosa oxidativo, via de fosfato de pentosa reductor, produccion y p-oxidacion de acidos grasos, ciclo de la urea, vfas de biosmtesis de amino acidos, vfas de degradacion de protemas, como la degradacion proteasomal, vfas de degradacion de aminoacido, biosmtesis o degradacion de: lfpidos, policetidos (incluyendo, por ejemplo, flavonoides e isoflavonoides), isoprenoi- des (incluyendo, por ejemplo, terpenos, esteroles, esteroides, carotenoides, xantofilas), hidratos de carbono, fenil- propanoides y derivados, alcaloides, benzenoides, indoles, compuestos de indol - azufre, porfirinas, antocianos, hormonas tales como fitohormonas, vitaminas, cofactores tales como grupos prosteticos o portadores de electrones, lignina, glucosinolatos, purinas, pirimidinas, nucleosidos, nucleotidos y moleculas relacionadas tales como tRNA, microRNA (miRNA) o mRNA. En consecuencia, los metabolitos de compuestos de moleculas pequenas se compo- nen preferiblemente de las siguientes clases de compuestos: alcoholes, alcanos, alquenos, alquinos, compuestos aromaticos, cetonas, aldehfdos, acidos carboxflicos, esteres, aminas, iminas, amidas, cianuros, aminoacidos, pepti- dos, tioles, tioesteres, esteres de fosfato, esteres de sulfato, tioeteres, sulfoxidos, eteres, o combinaciones o derivados de los compuestos que se han mencionado antes. Las moleculas pequenas entre los metabolitos pueden ser metabolitos primarios que se requieren para la funcion celular normal, funcion de los organos o crecimiento, el desa- rrollo o la salud de las plantas. Por otra parte, los metabolitos de moleculas pequenas comprenden, ademas, metabolitos secundarios que tienen la funcion ecologica esencial, por ejemplo, metabolitos que permiten a un organismo adaptarse a su entorno. Ademas, los metabolitos no estan limitados a los citados metabolitos primarios y secundarios y abarcan adicionalmente compuestos de moleculas pequenas artificiales. Los citados compuestos de moleculas pequenas artificiales se derivan de moleculas pequenas proporcionadas de forma exogena que se administran o son tomadas por un organismo pero no son metabolitos primarios o secundarios como se ha definido mas arriba. Por ejemplo, los compuestos de moleculas pequenas artificiales pueden ser productos metabolicos obtenidos a partir de un amplio rango de variedades de compuestos tales como los fertilizantes, pesticidas, herbicidas o poten- ciadores de crecimiento, por vfas metabolicas de la planta. Ademas, los metabolitos incluyen adicionalmente pepti- dos, oligopeptidos, polipeptidos, oligonucleotidos y polinucleotidos, tales como RNA o DNA. Mas preferiblemente, un metabolito tiene un peso molecular de 50 Da (Dalton) a 30.000 Da, mas preferiblemente, menos de 30.000 Da, menos de 20.000 Da, menos de 15.000 Da, menos de 10.000 Da, menos de 8.000 Da, menos de 7.000 Da, menos de 6.000 Da, menos de 5.000 Da, menos de 4.000 Da, menos de 3.000 Da, menos de 2.000 Da, menos de 1.000 Da, menos de 500 Da, menos de 300 Da, menos de 200 Da, menos de 100 Da. Preferiblemente, un metabolito tiene, sin embargo, un peso molecular de al menos 50 Da. Mas preferiblemente, un metabolito de acuerdo con la presente invencion tiene un peso molecular de 50 Da a 1.500 Da.

El dispositivo de extraccion presenta al menos un cargador de lfquido. Tal como se usa en esta invencion, un carga- dor de lfquido puede ser cualquier aparato o combinacion de aparatos que esta adaptado para ser puesto en contac- to con un primer lado de la muestra y que esta adaptado para aplicar un lfquido de extraccion al primer lado de la muestra. El contacto entre el cargador de lfquido y la muestra puede ser directo o indirecto. De cualquier manera, el contacto debe ser tal que el lfquido de extraccion se pueda aplicar a la muestra, preferiblemente a presion, preferi-

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blemente presionando al menos parte del Ifquido de extraccion en el interior de la muestra y, preferiblemente, a traves de la muestra, tal como penetrando una o mas superficies de la muestra, por ejemplo, mediante la penetra- cion de una o mas superficies de una hoja de una planta. Como alternativa a un contacto directo en el que el carga- dor de lfquido o uno o mas orificios del cargador de lfquido, adecuados para suministrar el lfquido de extraccion estan directamente en contacto con una o mas superficies de la muestra, se puede proporcionar un contacto indirec- to, preferiblemente un contacto en el que el lfquido de extraccion suministrado por el cargador de lfquido es guiado hacia una o mas superficies de la muestra, mediante lo cual una extension lateral del lfquido de extraccion en una direccion perpendicular a la direccion de aplicacion se puede evitar, al menos parcialmente. Por lo tanto, un contacto indirecto puede ser proporcionado mediante la interposicion de uno o mas elementos de obturacion entre el cargador de lfquido y la superficie de la muestra, tales como al menos una junta torica u otros elementos de estanqueidad. En cualquier caso, ya sea por contacto directo o indirecto, el cargador de lfquido debe estar adaptado para proporcionar el lfquido de extraccion a la al menos una superficie de la muestra.

El lfquido de extraccion puede ser o puede comprender cualquier medio fluido, es decir, al menos un medio lfquido y / o al menos un medio gaseoso, que pueda ser adecuado para extraer, preferentemente extraer selectivamente, el al menos un ingrediente, que en lo que sigue, puede ser denominado ingrediente objetivo. Ademas de extraer con precision un ingrediente de la muestra, se puede extraer una combinacion de ingredientes, tal como una combinacion de dos o mas metabolitos. Preferiblemente, el lfquido de extraccion comprende al menos un disolvente, tal como una solucion acuosa y / o un disolvente no acuoso. Preferiblemente, el disolvente se puede seleccionar entre: disolventes acuosos, como el agua; o disolventes no acuosos, como un disolvente organico, preferiblemente uno o mas alquil alcoholes con un resto alquilo de 1 a 6 atomos de carbono, por ejemplo, metanol, etanol, 1-propanol, 2- propanol, butanol, pentanol, hexanol o acetona, acetonitrilo, acetato de etilo, dimetilsulfoxido o N, N - dimetilforma- mida, disolventes halogenados, por ejemplo, cloroformo, cloruro de metileno (diclorometano), tetracloruro de carbono, dicloroetano (en particular cloroformo, cloruro de metileno, tetracloruro de carbono) o disolventes alifaticos, por ejemplo, hexano, ciclohexano, pentano, heptano, etc., o disolventes aromaticos, por ejemplo, tolueno, benceno, o eteres, por ejemplo, ter - butil metil eter, eter dietflico, tetrahidrofurano; o un disolvente inorganico, tal como un acido inorganico, seleccionado preferiblemente de entre: HF, HI, HCl, BF3, BCl3, HBr, HCO4, H2S04, H3PO4, especialmente HI, HCl, HBr, HCO4; o un acido organico tal como acido formico, acido acetico, acido trifluoroacetico, acido acetico tricloro; y / o una base, seleccionada preferiblemente de entre hidroxido de sodio, hidroxido de potasio, carbonato de sodio, hidrogenocarbonato de sodio, acetato de amonio, formiato de amonio, hidrogenocarbonato de amonio o car- bonato de amonio. Ademas, una combinacion de los disolventes citados y / u otros puede ser usada.

Como se ha mencionado mas arriba, el lfquido de extraccion puede comprender uno o mas disolventes, en caso de que se utilice mas de un disolvente, los disolventes se pueden utilizar de forma simultanea (por ejemplo, con una relacion de mezcla constante o con una relacion de mezcla variable, por ejemplo, como un gradiente) y / o en dife- rentes momentos o con retardo. En caso de que sea usado mas de un disolvente al mismo tiempo, en concreto, se puede usar una mezcla de dos o mas disolventes. Por lo tanto, en una realizacion preferida, el lfquido de extraccion puede comprender una mezcla de al menos dos disolventes. Las extracciones utilizando una mezcla de disolventes son generalmente conocidas por el documento EP 1 446 209 B1. De esta manera, el dispositivo de extraccion puede estar adaptado para proporcionar un lfquido de extraccion que contenga una mezcla de dos o mas disolventes. El dispositivo de extraccion puede comprender uno o mas recipientes de lfquido para almacenar uno, dos o mas disolventes para ser utilizados como lfquido de extraccion o para ser utilizados como componentes del lfquido de extraccion. Ademas, el dispositivo de extraccion puede comprender una o mas unidades de mezcla para mezclar dos o mas disolventes, preferiblemente en una relacion de mezcla predefinida (por ejemplo, especialmente para el uso en modo de por lotes o para el uso en modo de gradiente).

Preferiblemente, la al menos una mezcla puede comprender al menos un disolvente acuoso y al menos un disolvente no acuoso. En particular, la mezcla puede comprender al menos un disolvente acuoso, tal como el agua, y al menos un disolvente no acuoso, tal como un alcohol alqrnlico. Mas preferiblemente, la mezcla comprende metanol y agua, preferiblemente en una relacion de mezcla de 50% por volumen : 50% por volumen, a 90% por volumen : 10% por volumen, y mas preferiblemente en una relacion de mezcla de 80% por volumen : 20% por volumen. En otra realizacion, el lfquido de extraccion puede comprender una mezcla de al menos dos disolventes, en la que los al menos dos disolventes son disolventes no acuosos, en particular, los disolventes no acuosos se pueden seleccionar de entre el grupo de alcoholes alqrnlicos y disolventes halogenados. Preferiblemente, el lfquido de extraccion puede comprender una mezcla dos disolventes de metanol y diclorometano, preferiblemente en una relacion de mezcla de 20% por volumen : 80% a 60 % por volumen : 40% por volumen y mas preferiblemente en una relacion de mezcla de 40% por volumen : 60% por volumen.

Como se ha indicado mas arriba, los al menos dos disolventes se pueden aplicar al primer lado de la muestra bio- logica de forma simultanea y / o de una manera retardada en el tiempo. Por lo tanto, en una realizacion de la inven- cion, al menos un lfquido de extraccion que contiene dos o mas disolventes se puede aplicar al primer lado de la muestra biologica para extraer al menos un ingrediente de la muestra. Alternativa o adicionalmente, en una realizacion adicional, el dispositivo de extraccion y / o el procedimiento de acuerdo con la presente invencion puede ser adaptado para suministrar posteriormente al menos dos tipos diferentes de lfquidos de extraccion al primer lado, tal

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como al menos un primer Ifquido de extraccion y al menos un segundo Ifquido de extraccion. Preferiblemente, cada Ifquido de extraccion puede comprender uno, dos o mas disolventes, tal como una mezcla de disolventes. La lmea de suministro de lfquido puede estar equipada con al menos dos lfquidos de extraccion diferentes. Preferiblemente, los al menos dos lfquidos de extraccion diferentes se aplican posteriormente al primer lado de la misma muestra. Mas preferiblemente, el primer lfquido de extraccion puede comprender al menos dos disolventes, en el que un di- solvente es un disolvente no acuoso y el otro disolvente es un disolvente acuoso y en el que el segundo lfquido de extraccion puede comprender dos disolventes no acuosos. Mas preferiblemente, el primer lfquido de extraccion es una mezcla de disolventes polares monofasicos y el segundo lfquido de extraccion es una mezcla de disolventes apolares monofasicos. El primer lfquido de extraccion puede comprender metanol y agua, preferiblemente en una relacion de mezcla de 50% por volumen : 50% a 90% por volumen: 10% porvolumen, y mas preferiblemente en una relacion de mezcla de 80% por volumen : 20% por volumen, y el segundo lfquido de extraccion pueden comprender preferiblemente metanol y diclorometano, preferiblemente en una relacion de mezcla de 20% por volumen : 80% por volumen a 60% por volumen : 40% por volumen y mas preferiblemente en una relacion de mezcla de 40% por volumen : 60% por volumen. Por lo tanto, el primer lfquido de extraccion puede comprender metanol y agua en una pro- porcion de mezcla de 80% por volumen : 20% por volumen, y el segundo lfquido de extraccion puede comprender metanol y diclorometano en una proporcion de mezcla de 40% por volumen : 60% por volumen.

En el caso de que al menos dos lfquidos de extraccion se utilicen posteriormente, tal como al menos un primer lfqui- do de extraccion y al menos un segundo lfquido de extraccion, el dispositivo de extraccion y / o el procedimiento de acuerdo con la presente invencion se pueden adaptar para llevar a cabo al menos una primera fase de un proceso de extraccion, durante la cual se aplica el primer lfquido de extraccion al primer lado de la muestra biologica, y al menos una segunda fase del proceso de extraccion, durante la cual se aplica el segundo lfquido de extraccion al primer lado de la muestra biologica. Estas al menos dos fases pueden ser disyuntivas. Por lo tanto, se puede realizar la primera fase, en la que, despues de que la primera fase este terminada, inmediatamente o despues de realizar al menos un descanso o pausa durante la cual no se aplica lfquido de extraccion al primer lado, el segundo lfquido de extraccion se aplica al primer lado. Sin embargo, otras realizaciones son factibles. Por lo tanto, la primera fase y la segunda fase pueden solaparse incluso durante al menos una fase intermedia. Por lo tanto, la segunda fase puede empezar cuando la primera fase todavfa este continuando. Durante una fase intermedia, tanto el primer lfquido de extraccion como el segundo lfquido de extraccion se pueden aplicar al primer lado de la muestra biologica.

Ademas, los contenidos y / o la composicion del al menos un lfquido de extraccion aplicado al primer lado de la muestra biologica pueden ser constante durante todo el proceso de extraccion. En otra realizacion, los contenidos y / o la composicion del al menos un lfquido de extraccion aplicado al primer lado de la muestra biologica pueden variar durante el proceso de extraccion. En ello, las variaciones escalonadas o continuas de la composicion del al menos un lfquido de extraccion son factibles. Por lo tanto, una variacion de tiempo y / o un gradiente de tiempo del conteni- do de al menos un componente del lfquido de extraccion se pueden realizar. Como ejemplo, el contenido de al menos un disolvente contenido en el lfquido de extraccion puede ser aumentado o disminuido durante un penodo de tiempo, de una manera escalonada o continua.

Como se ha indicado mas arriba, el dispositivo de extraccion y, mas espedficamente, el cargador de lfquido puede comprender al menos un dispositivo de suministro de lfquido, tal como al menos una unidad de suministro de lfquido de extraccion, que esta adaptada para controlar la composicion del al menos un lfquido de extraccion, tal como con- trolando el contenido de uno o mas componentes del lfquido de extraccion, tal como el contenido de uno o mas disolventes. Ademas, el al menos un dispositivo de suministro de lfquido puede estar adaptado para variar la composicion de al menos un lfquido de extraccion con el tiempo, por ejemplo de acuerdo con un programa predefinido de variacion. El dispositivo de suministro de lfquido preferiblemente puede comprender una, dos o mas valvulas para el ajuste de la composicion del lfquido de extraccion, tales como valvulas para la conexion de una lmea de suministro principal a dos o mas recipientes de suministro para el almacenamiento de los disolventes apropiados, permitiendo de ese modo el control de la composicion del lfquido de extraccion mediante el ajuste de las valvulas apropiadas. Las valvulas pueden ser preferentemente controlables electronicamente y / o controladas por ordenador. Preferiblemente, el dispositivo de suministro de lfquido puede comprender una unidad de control, tal como al menos un dispositivo de procesamiento de datos, por ejemplo, un microcontrolador, que puede estar adaptado para controlar la composicion del lfquido de extraccion de acuerdo con un horario o programa predefinido. La unidad de control preferiblemente puede estar adaptada para llevar a cabo al menos un programa controlado por software para el control de la composicion del lfquido de extraccion.

Una fuente de alimentacion de lfquido del al menos un lfquido de extraccion puede ser parte del dispositivo de extraccion. Por lo tanto, el dispositivo de extraccion puede comprender uno o mas orificios, uno o mas conductos de lfquidos, una o mas bombas para suministrar el lfquido de extraccion bajo presion, una fuente de alimentacion, tal como uno o mas depositos que pueden almacenar un suministro del lfquido de extraccion, o una combinacion arbi- traria de los elementos citados y / u otros elementos. Ademas de la posibilidad de suministrar el al menos un lfquido de extraccion en un paso, tal como por ejemplo mediante el suministro de uno o mas lfquidos de extraccion de forma simultanea, varios lfquidos de extraccion de la misma o de diferente clase pueden ser suministrados posteriormente,

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tal como proporcionando un procedimiento que tenga varios pasos, en el que en cada uno de los pasos se suminis- tra un nuevo Ifquido de extraccion.

El dispositivo de extraccion tiene ademas al menos un dispositivo de toma de muestras. Un dispositivo de toma de muestras, como se usa en la presente invencion, puede comprender cualquier aparato y / o combinacion de apara- tos, que esta adaptado para ser puesto en contacto con un segundo lado de la muestra y que esta adaptado para recoger fluido de muestra que comprende el al menos un lfquido de extraccion y el al menos un ingrediente. Por lo tanto, el dispositivo de extraccion puede estar adaptado para recoger al menos parte del lfquido de extraccion despues de pasar por al menos parte de la muestra y despues de recoger, tal como por absorcion y / o disolucion, el al menos un ingrediente objetivo. De esta manera, en lo que sigue, el termino fluido de muestra se utiliza para cualquier tipo de fluido lfquido y / o gaseoso, que comprende el al menos un lfquido de extraccion y el al menos un ingrediente objetivo.

De manera similar al cargador de lfquido, el dispositivo de toma de muestras puede estar adaptado para ser puesto en contacto directo o indirecto con el segundo lado de la muestra. Por lo tanto, el dispositivo de toma de muestras puede comprender uno o mas orificios de toma de muestras adaptados para recoger el fluido de muestra, que puede estar adaptado para ser puesto en contacto directo con el segundo lado. Alternativamente, uno o mas elementos se pueden interponer entre el dispositivo de toma de muestras y el segundo lado, tal como al menos un elemento de sellado y / o un elemento de grna adaptado para guiar el lfquido de muestra al dispositivo de toma de muestras. Una vez mas, se pueden utilizar una o mas juntas toricas para impedir que el fluido de muestra deje la muestra sin ser recogido por el dispositivo de toma de muestras.

El segundo lado, desde el que se recoge el fluido de muestra, puede ser preferiblemente diferente del primer lado. Por lo tanto, el segundo lado puede ser preferiblemente un lado de la muestra opuesto al primer lado. Por lo tanto, en caso de que la muestra sea una hoja o parte de una hoja de una planta, el primer lado puede comprender un lado superior de la hoja, mientras que el segundo lado puede comprender un lado inferior de la hoja o viceversa. Preferiblemente, el primer lado y el segundo lado estan en oposicion uno con el otro, de tal manera que el lfquido de extraccion puede pasar la muestra desde el cargador de lfquido al dispositivo de toma de muestras en una lmea recta. Sin embargo, son posibles otras geometnas y realizaciones.

El cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras estan conectados preferiblemente por al menos un me- canismo de conexion. Preferiblemente, este mecanismo de conexion puede comprender una conexion mecanica. El mecanismo de conexion puede estar adaptado para variar una distancia entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras y para aplicar una fuerza de sujecion a la muestra situada entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras.

Un mecanismo de conexion adaptado para variar una distancia entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras se puede realizar de varias maneras. Por lo tanto, el mecanismo de conexion puede comprender al menos un actuador, que esta adaptado para variar la distancia manual o automaticamente. Por lo tanto, el mecanismo de conexion puede comprender uno o mas elementos de guiado que estan adaptados para cambiar la posicion relativa y / o la orientacion relativa entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras, tal como uno o mas carriles de grna, una o mas barras de grna, uno o mas actuadores lineales, una o mas etapas, tales como eta- pas de desplazamiento, uno o mas elementos pivotantes o combinaciones de los elementos citados y / u otros ele- mentos.

Preferiblemente, el mecanismo de conexion tiene al menos una articulacion, que puede estar interpuesta entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras. Esta al menos una articulacion puede estar adaptada para pivotar el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras uno con respecto al otro alrededor de al menos un eje de pivotamiento.

Alternativa o adicionalmente, el mecanismo de conexion puede tener al menos un elemento de carril que permite un movimiento relativo del cargador de lfquido y del dispositivo de toma de muestras, preferiblemente un movimiento relativo lineal. Tal como se utiliza en la presente memoria descriptiva, el termino movimiento relativo puede referirse a un caso en el que el cargador de lfquido descansa y el dispositivo de toma de muestras se mueve asf como en el caso en el que el cargador de lfquido se mueve y el dispositivo de toma de muestras descansa y en el caso en el que tanto el cargador de lfquido como el dispositivo de toma de muestras se mueven.

Ademas, como se usa en la presente memoria descriptiva, el termino elemento de carril se puede referir a un elemento arbitrario adaptado para guiar el movimiento relativo. Mas preferiblemente, el elemento de carril puede tener al menos una varilla de grna. La al menos una varilla de grna puede ser parte, total o parcialmente, del cargador de lfquido y / o puede ser parte, total o parcialmente, del dispositivo de toma de muestras y / o puede estar formada, total o parcialmente, por un componente independiente o puede ser parte de un componente independiente del dispositivo de extraccion. La varilla de grna puede tener una seccion transversal circular o no circular y puede ser o puede comprender al menos una barra alargada. El dispositivo de toma de muestras y / o el cargador de lfquido pueden contener uno o mas orificios o taladros, tal como uno o mas orificios ciegos u orificios pasantes, que puede

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acomodar la al menos una varilla de grna o al menos una parte de la misma. En ese sentido, la varilla de grna puede fijarse en el interior del al menos un orificio o taladro o puede moverse dentro del al menos un orificio o taladro.

En una realizacion, preferiblemente en conexion con el elemento de carril que se ha mencionado mas arriba, el me- canismo de conexion puede estar disenado de tal manera que el cargador de lfquido y / o el dispositivo de toma de muestras puedan actuar como un sello, ejerciendo una fuerza de estampado sobre la muestra biologica. Por lo tanto, en una realizacion, el dispositivo de toma de muestras puede actuar como un yunque, recibiendo la muestra biologica, y el cargador de lfquido puede actuar como un sello estampando la muestra biologica desde el primer lado, o viceversa. El movimiento de estampado puede estar soportado o guiado por el mecanismo de conexion que se ha mencionado mas arriba, preferiblemente el elemento de carril y mas preferiblemente las una o mas varillas de grna o los otros tipos de grnas.

El mecanismo de conexion adicional puede tener al menos un elemento de resorte. Como se usa en la presente memoria descriptiva, el termino elemento de resorte se refiere a un elemento arbitrario que tiene, por lo menos par- cialmente, propiedades elasticas, tales como un resorte elastico, un resorte helicoidal, una lengueta, un elemento de resorte de elastomero o una combinacion de dos o mas de los elementos de resorte citados. El elemento de resorte puede estar adaptado para aplicar una fuerza de separacion que separa el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras. Por lo tanto, el al menos un elemento de resorte puede estar situado entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras y puede aplicar al menos una fuerza de separacion al cargador de lfquido y / o al dispositivo de toma de muestras, separando o intentando separar con ello el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras, con el fin de abrir un espacio entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras para la insercion de la muestra biologica. Por lo tanto, el al menos un elemento de resorte puede comprender al menos un resorte helicoidal que rodea total o parcialmente el al menos un elemento de carril opcional que se ha mencionado mas arriba, tal como la al menos una varilla de grna.

La variacion de la distancia entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras puede comprender cualquier cambio en una posicion relativa del cargador de lfquido y del dispositivo de toma de muestras, en una o mas dimensiones. Por lo tanto, una variacion de la distancia puede comprender un cambio en una distancia unidimensional o multidimensional entre los elementos citados y / o puede comprender una rotacion del cargador de lfquido y del dispositivo de toma de muestras uno con respecto al otro alrededor de al menos un eje de rotacion. Alternativa o adicionalmente, la variacion de la distancia puede comprender un movimiento relativo lineal del cargador de lfquido y del dispositivo de toma de muestras, en el que tanto el cargador de lfquido como el dispositivo de toma de muestras se pueden mover o en el que ya sea el cargador de lfquido o el dispositivo de toma de muestras se pueden mover.

Una fuerza de sujecion puede comprender cualquier fuerza que es aplicada a la muestra por el cargador de lfquido y / o por el dispositivo de toma de muestras, una vez que la muestra esta sujeta entre estos elementos. Preferiblemente, el mecanismo de conexion esta adaptado para permitir la aplicacion de presion homogeneamente a la muestra, con independencia del grosor de la muestra. El termino homogeneamente puede comprender cualquier situacion en la que la fuerza de sujecion y / o presion aplicadas por el dispositivo de extraccion de la muestra es la misma o al menos similar en cualquier area en la que se aplica la fuerza de sujecion. Las variaciones de presion de hasta 20%, preferiblemente de no mas del 10% y de la manera mas preferible de no mas de 5% pueden ser aceptables y todav- fa se pueden resumir bajo el termino homogeneo, tal como se utiliza en la presente invencion. La realizacion citada de la independencia de la presion aplicada del grosor de la muestra se puede lograr de varias maneras. En primer lugar, esta independencia se puede aplicar dentro de un cierto rango de aceptacion de grosores de muestra, tal como un rango de aceptacion de 0 a 30 mm de grosor de la muestra (es decir, mas de 0 mm y menos o igual que 30 mm), preferiblemente de 0 a 20 mm de grosor de la muestra (es decir, mas de 0 mm y menos o igual que 20 mm), preferiblemente de 0 a 10 mm de grosor de la muestra (es decir, mas de 0 mm y menos o igual a 10 mm) y lo mas preferiblemente de 0 a 5 mm de grosor de la muestra (es decir, mas de 0 mm y menos o igual a 5 mm). La aplicacion homogenea de la presion, con independencia del grosor de la muestra, se puede conseguir, por ejemplo, pro- porcionando elementos de grna adecuados para adaptar la distancia entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras, tales como uno o mas de los elementos de grna que se han mencionados mas arriba. Por lo tanto, se pueden proporcionar una o mas etapas lineales para variar la distancia, y / o el dispositivo de toma de muestras y el cargador de lfquido pueden estar conectados uno con el otro de manera que los brazos o mandfbulas de una tenaza para tubos estan conectados los unos a los otros, lo que permite una adaptacion simultanea de una distancia lineal y un angulo entre el cargador de lfquido y el elemento de toma de muestras. Otros mecanismos de conexion, que estan adaptados para proporcionar una aplicacion homogenea de la presion pueden ser posible.

Generalmente, el area de toma de muestras, que es el area de la muestra en la que se puede aplicar el lfquido de extraccion por medio del uso del dispositivo de extraccion, tal como un area de la muestra biologica perpendicular a la direccion de suministro del lfquido de extraccion, puede variar en un amplio rango. Por lo tanto, el area de toma de muestras puede estar en el rango de 1 mm2 a 50 cm2, preferiblemente de 5 mm2 a 10 cm2. Sin embargo, otras areas de toma de muestras pueden ser realizadas.

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Como se ha indicado mas arriba, el cargador de Kquido y el dispositivo de toma de muestras se pueden conectar de varias maneras. Mas preferiblemente, el dispositivo de extraccion comprende uno o mas dispositivo de agarre. Por lo tanto, el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras, tornados solos o en combinacion con uno o mas de otros elementos, pueden formar un dispositivo de agarre o pinza para agarrar la muestra. Un dispositivo de agarre o pinza, tal como se utiliza en la presente invencion, puede comprender cualquier elemento que este adaptado para sujetar la muestra y aplicar una fuerza de sujecion a la muestra, entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras. Por lo tanto, un dispositivo de agarre o pinza puede comprender una o mas de las siguientes formas: un dispositivo de agarre, una pinza, unas tenazas, unos alicates, un forceps, una mordaza, una tenaza de tubena, una abrazadera, preferiblemente una abrazadera de tornillo y / o una barra de agarre; unas tenacillas. Otras realizaciones son posibles. El al menos un dispositivo de agarre puede estar integrado en el cargador de lfquido y / o en el dispositivo de toma de muestras y puede ser una parte de uno o ambos de estos elementos o uno o ambos de los elementos puede ser parte de el al menos un dispositivo de agarre. Alternativa o adicionalmente, el al menos un dispositivo de agarre puede ser un elemento separado que puede actuar sobre el cargador de lfquido y / o sobre el dispositivo de toma de muestras. Por lo tanto, el dispositivo de agarre puede ejercer una fuerza de sujecion adapta- da para presionar el cargador de lfquido contra el dispositivo de toma de muestras o viceversa y / o para presionar el cargador de lfquido y / o el dispositivo de toma de muestras contra la muestra biologica.

El dispositivo de extraccion puede ser preferiblemente un dispositivo de mano. Dentro de la presente invencion, el termino dispositivo de mano puede comprender cualquier dispositivo que este adaptado para ser mantenido y / o llevado por una sola persona, de preferencia en una mano. En caso de que el dispositivo de extraccion comprenda otros elementos ademas del cargador de lfquido y del dispositivo de toma de muestras, al menos la parte que comprende el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras, preferiblemente el dispositivo de agarre o pinza, debe ser disenada para que sea un dispositivo de mano. Otras partes del dispositivo de extraccion, tales como una fuente de alimentacion de lfquido, una bomba u otras partes, como alternativa o adicionalmente a estar integradas al menos parcialmente en el dispositivo de mano, pueden ser disenadas para ser componentes estacionarios, tales como componentes estacionarios de laboratorio. El dispositivo de mano puede tener un volumen que preferiblemente no exceda de 5 x 106 mm3 y preferiblemente no excede de 1 x 106 mm3, de la manera mas preferible de 0,5 x 106 mm3.

Como se ha indicado mas arriba, cada uno de los lados primero y segundo de la muestra, es decir el lado al que se aplica el lfquido de extraccion y el lado desde el que se recoge el fluido de muestra, puede comprender una o mas posiciones sobre una superficie de la muestra. Preferiblemente, los lados primero y segundo son lados opuestos de la muestra. Esto significa que el lfquido de extraccion puede pasar desde el cargador de lfquido al dispositivo de toma de muestras preferiblemente en una lmea recta. Esta lmea recta puede ser preferiblemente esencialmente perpendicular a la superficie de la muestra en el primer lado y / o en el segundo lado, que comprende desviaciones de una orientacion perpendicular preferiblemente no superiores a 20°, preferiblemente no mas de 10°. La superficie de la muestra puede ser una superficie simple, plana. Alternativa o adicionalmente, la superficie de la muestra puede comprender una superficie aspera o incluso indefinida, tal como en muestras machacadas o trituradas. De la manera mas preferible, la muestra es una parte intacta de una planta en buen orden, tal como una hoja y / o una parte de una hoja de una planta.

Como se ha senalado mas arriba, el cargador de lfquido y el dispositivo de extraccion se pueden poner en contacto directo o indirecto con el primer lado o con el segundo lado, respectivamente. Por lo tanto, el cargador de lfquido puede comprender al menos un primer elemento de sellado, que esta adaptado para ser presionado contra el primer lado de la muestra. El elemento de sellado puede comprender cualquier elemento adaptado para guiar el lfquido de extraccion desde el cargador de lfquido, tal como desde al menos un orificio del cargador de lfquido adaptado para suministrar el lfquido de extraccion, al primer lado. Preferiblemente, el al menos un primer elemento de sellado puede comprender al menos una junta torica.

El cargador de lfquido puede comprender al menos una lmea de suministro de lfquido y al menos un orificio. La lmea de suministro de lfquido puede estar adaptada para proporcionar el al menos un lfquido de extraccion a el al menos un orificio. La lmea de suministro de lfquido puede comprender un deposito que puede mantener un suministro de el al menos un lfquido de extraccion. Alternativa o adicionalmente, la lmea de suministro puede estar adaptada para ser conectada directa o indirectamente a la al menos una fuente de alimentacion de lfquido para suministrar el lfqui- do de extraccion. El al menos un orificio puede comprender cualquier tipo de abertura en al menos una superficie del cargador de lfquido, que preferiblemente puede estar orientado al primer lado de la muestra. Esta al menos una abertura puede tener una forma geometrica arbitraria, tal como la forma de un orificio simple, una boquilla, una lmea de orificios, una rejilla de orificios, una matriz de orificios o cualquier otra forma. Por lo tanto, el al menos un orificio puede comprender al menos una placa perforada que tiene una o mas perforaciones a traves de las cuales puede pasar el lfquido de extraccion. El al menos un orificio puede estar preferiblemente completamente rodeado por el al menos un primer elemento de sellado opcional, tal como por la al menos una junta torica. El al menos un elemento de sellado puede ser preferiblemente al menos parcialmente flexible y / o deformable. Por lo tanto, el al menos un primer elemento de sellado puede comprender un material elastomero, tal como un caucho. Esta propiedad flexible y / o deformable puede ayudar a adaptar la forma de la superficie de la muestra a la forma del cargador de lfquido.

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El dispositivo de extraccion, como se ha descrito mas arriba, puede comprender, ademas, al menos un segundo elemento de sellado, que esta adaptado para ser presionado contra el segundo lado de la muestra, espedficamente al menos una junta torica. El al menos un segundo elemento de sellado se puede realizar de la misma manera que el al menos un primer elemento de sellado. Por lo tanto, las propiedades opcionales que se han mencionado mas arriba del primer elemento de sellado se pueden aplicar a el al menos un segundo elemento de sellado.

El dispositivo de extraccion tiene preferiblemente al menos una abertura de muestras adaptada para recoger el fluido de muestra. Esta recogida de fluido de muestra puede comprender cualquier aceptacion del fluido de muestra, que puede ser de una manera direccional o no direccional. Similar a el al menos un orificio del cargador de lfquido, la abertura de muestras puede tener una forma y / o geometna arbitrarias. Preferiblemente, la al menos una abertura de muestras puede tener un diametro mas grande o un diametro equivalente al del orificio del cargador de lfquido. De manera similar al orificio, la abertura puede tener cualquier forma geometrica, tal como una forma redonda, una forma poligonal o cualquier otra forma. La al menos una abertura puede comprender una unica abertura o una plura- lidad de aberturas, tales como una lmea y / o la rejilla y / o agrupacion de aberturas. Esto se aplica a una realizacion, en la que se utiliza un segundo elemento de sellado, asf como a realizaciones en las que ningun segundo elemento de sellado esta presente. La al menos una abertura puede comprender una abertura que tiene un diametro constan- te o, preferiblemente, puede comprender una abertura que tiene una forma variable en la direccion de un flujo del fluido de muestra, tal como la forma de un cono y / o un embudo, para soportar la recogida del fluido de muestras desde el segundo lado.

El cargador de lfquido puede tener preferiblemente un primer elemento de sellado en forma de anillo, adaptado para ser presionado contra el primer lado de la muestra. El dispositivo de toma de muestras puede tener un segundo elemento de sellado en forma de anillo adaptado para ser presionado contra el segundo lado de la muestra. Cada uno de los elementos de sellado primero y segundo puede estar conectado y / o ser parte del cargador de lfquido o del dispositivo de toma de muestras, respectivamente, o pueden ser elementos separados, que pueden ser maneja- dos independientemente del cargador de lfquido y / o del dispositivo de toma de muestras. Los elementos de sellado primero y segundo pueden estar dispuestos preferentemente de tal manera que esten adaptados para ser presionado uno contra el otro en lados opuestos de la muestra, estando la muestra en el medio, creando de este modo una region de extraccion dentro de la muestra. Sin embargo, son posibles otras realizaciones.

El dispositivo de toma de muestras puede tener preferentemente al menos un recipiente de toma de muestras, y el dispositivo de toma de muestras puede estar adaptado para guiar al menos parcialmente el fluido de muestras al interior del recipiente de toma de muestras. Este recipiente de toma de muestras puede comprender uno o mas recipientes de toma de muestras y puede ser una parte permanente del dispositivo de toma de muestras o puede estar adaptado para ser reemplazable. Preferiblemente, el recipiente de toma de muestras esta dispuesto en el dispositivo de toma de muestras de una manera reemplazable. Por lo tanto, el dispositivo de extraccion y, preferiblemente, el dispositivo de toma de muestras puede comprender uno o mas elementos de conexion y / o receptaculos, que pueden estar adaptados para conectarse con el al menos un recipiente de toma de muestras, preferiblemente por un ajuste de forma y / o una conexion de ajuste forzado, preferiblemente de una manera reversible.

Para guiar al menos parcialmente el fluido de muestra dentro del recipiente de toma de muestras, el dispositivo de toma de muestras puede comprender una o mas grnas, tales como una lmea de fluido de muestra que conduce al fluido de muestra directamente y / o indirectamente al interior del recipiente de toma de muestras. Por lo tanto, el recipiente de toma de muestras puede estar conectado a la al menos una abertura de muestra opcional. Como se ha indicado mas arriba, preferiblemente, el al menos un elemento de grna puede comprender al menos un embudo.

El recipiente de toma de muestras tiene preferiblemente al menos un material inerte. Estas propiedades inertes se refieren preferiblemente al fluido de muestra, y de la manera mas preferible al lfquido de extraccion, tal como al menos un disolvente comprendido en el lfquido de extraccion. Por lo tanto, preferentemente, se elige el material inerte de tal manera que el fluido de muestra y, preferiblemente, el lfquido de extraccion, no modifique la composicion qrn- mica del material inerte y / o extraiga uno o mas componentes del material inerte. Mas preferiblemente, el al menos un material inerte se selecciona de entre un vidrio, un cuarzo, un material de ceramica, un material plastico fluorado, espedficamente PTFE. Sin embargo, una combinacion de los materiales citados y / u otros materiales es posible, asf como la eleccion de un material diferente.

El dispositivo de toma de muestras puede comprender, ademas, al menos un elemento de ajuste de presion que esta adaptado para ajustar una presion de gas en el interior del recipiente de toma de muestras. Por lo tanto, el al menos un elemento de ajuste de presion puede estar adaptado para ajustar la presion del gas en el interior del recipiente de toma de muestras a una presion espedfica, predefinida, tal como la presion ambiente. Por lo tanto, se puede conseguir un equilibrio de presion, preferiblemente un equilibrio de presion entre el interior del recipiente de toma de muestras y la atmosfera circundante. Preferiblemente, el al menos un elemento de ajuste de presion puede comprender al menos una valvula y / o abertura de liberacion.

El dispositivo de toma de muestras puede tener ademas al menos una entrada de gas, que esta adaptada para ex- poner al menos un espacio interior del recipiente de toma de muestras con gas, espedficamente con un gas inerte.

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Por lo tanto, el recipiente de toma de muestras puede ser inundado parcial o totalmente con uno o mas gases prede- finidos, preferiblemente para la proteccion del fluido de muestra contra reacciones no deseadas, tales como la oxi- dacion. Por lo tanto, el al menos un gas inerte puede comprender gases inertes tales como nitrogeno y / o argon. La al menos una entrada de gas puede ser al menos parcialmente parte del dispositivo de toma de muestras, de mane- ra que proporcione al menos un orificio y / o boquilla en una o mas de las paredes del dispositivo de toma de muestras. Adicional o alternativamente, la al menos una entrada de gas del dispositivo de toma de muestras puede comprender una entrada de gas, que es parte de otras partes del dispositivo de extraccion, tales como del dispositivo de toma de muestras, tal como proporcionando un extremo de un tubo de gas, el cual se extiende en un espacio interior del recipiente de toma de muestras. La entrada de gas puede estar conectada a una o mas tubenas de gas para proporcionar el gas, tal como a una tubena de suministro que es parte de un edificio y / o a un cilindro de gas. Otros elementos pueden ser proporcionados, tales como valvulas reductoras de presion y / o otros elementos.

El dispositivo de toma de muestras puede estar adaptado ademas para evitar que la luz ambiente entre en el recipiente de toma de muestras. Esto se puede lograr por propiedades correspondientes del recipiente de toma de muestras y / o de otras partes del dispositivo de toma de muestras. Por lo tanto, el recipiente de toma de muestras, puede estar hecho al menos parcialmente de un material no transparente u opaco, que filtra al menos una parte de la luz ambiental, tal como la luz ultravioleta. Adicional o alternativamente, el recipiente de toma de muestras puede estar alojado en un receptaculo dentro del dispositivo de toma de muestras, con lo cual esta protegido, al menos parcialmente, de la luz ambiente, y / o puede estar protegido por el dispositivo de toma de muestras de la luz ambiente en cualquier otra forma, tal como por medio del uso de al menos un elemento de proteccion. Esta proteccion de la luz ambiental puede evitar adicionalmente reacciones no deseadas dentro del fluido de muestra, tal como la foto - oxidacion o reacciones fotoqmmicas.

El recipiente de toma de muestras puede ser preferiblemente un recipiente que se puede cerrar, tal como una botella y / o vial, que puede ser cerrado por al menos un elemento de cierre. Preferiblemente, el al menos un elemento de cierre puede comprender una tapa y / o un tapon. De esta manera, el al menos un recipiente de toma de muestras puede comprender una botella con tapon de rosca y / o una botella de tapa a presion. Son posibles otros tipos de recipientes de toma de muestras.

Preferiblemente, el dispositivo de toma de muestras tiene al menos un elemento de atemperado de la muestra, en el que el atemperado de la muestra esta adaptado para atemperar, espedficamente para enfriar, el fluido de muestra. Como se usa en la presente memoria descriptiva, un elemento de atemperado puede comprender cualquier aparato o combinacion de aparatos adaptados para controlar, preferiblemente con regulacion, una temperatura del fluido de muestra, preferiblemente al menos una temperatura predeterminada, que puede ser fija o que puede tener carac- tensticas temporales predeterminadas. La al menos una temperatura predeterminada puede ser inferior a la temperatura ambiente, por encima de la temperatura ambiente o puede ser la temperatura ambiente. Preferiblemente, como se ha indicado mas arriba, el elemento de atemperado de la muestra esta adaptado para enfriar el fluido de muestra. El enfriamiento del fluido de muestra puede prevenir aun mas el fluido de muestra de reacciones qrnmicas no deseadas. El enfriamiento puede estar adaptado de tal manera que el fluido de muestra todavfa este en un esta- do gaseoso y / o lfquido. Alternativamente, el enfriamiento puede ser tal que el fluido de muestra se congele.

Como se ha indicado mas arriba, el dispositivo de toma de muestras puede comprender uno o mas elementos de grna, que pueden estar adaptados para guiar el fluido de muestra que sale de la muestra. Preferiblemente, el dispositivo de toma de muestras tiene al menos un embudo para recibir el fluido de muestra. Este embudo puede estar adaptado para recoger fluido de muestra de un area mas grande en el segundo lado y guiar el fluido de muestra desde area mas grande dentro de un canal de lfquido mas pequeno y / o recipiente de toma de muestras.

El dispositivo de extraccion puede tener, ademas, al menos un elemento de filtro para filtrar el fluido de muestra. Este elemento de filtro puede estar adaptado para retener uno o mas componentes del fluido de muestra, tales como componentes solidos. Por lo tanto, los componentes del esqueleto de la muestra pueden ser retenidos, como partes solidas de una hoja, tronco, tallo, rafz, rafz de almacenamiento, rama, inflorescencia, flor, infrutescencia, fruta, pano- cha, mazorca, semillas o cualquier otra parte de una planta, mientras que a los componentes lfquidos contenidos en el fluido de muestra se les puede permitir pasar. Preferiblemente, el al menos un elemento de filtro puede comprender al menos un elemento de filtro de frita o de ceramica. Sin embargo, otros elementos de filtro son posibles. El elemento de filtro puede estar situado sobre o dentro del dispositivo de extraccion de una manera arbitraria. Por lo tanto, el elemento de filtro puede ser parte de o estar conectado con la al menos una abertura de muestra opcional, con el al menos un embudo opcional, con al menos un canal que conduce desde la abertura de la al menos una muestra a el al menos un recipiente de toma de muestras y / o con el al menos un recipiente de toma de muestras. Preferiblemente, el al menos un elemento de filtro se puede seleccionar de entre el grupo que consiste en: una ma- lla; una pantalla; un tamiz; una parrilla; una placa perforada que tiene una o mas perforaciones.

Ademas, el dispositivo de extraccion puede tener al menos un material absorbente adaptado para absorber el o los ingredientes y, preferiblemente, para el enriquecimiento y / o agotamiento del o de los ingredientes. Este material absorbente puede estar adaptado preferiblemente para absorber uno o mas ingredientes del fluido de muestra, co

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mo por ejemplo mediante la localizacion del material absorbente en una trayectoria de fluido del fluido de muestra y / o en un recipiente de toma de muestras adaptado para recoger el fluido de toma de muestras o partes del mismo.

Como se ha indicado mas arriba, el cargador de lfquido puede tener al menos un elemento de presurizacion. Este elemento de presurizacion puede estar adaptado para proporcionar el lfquido de extraccion a presion, es decir, bajo una presion que es superior a la presion normal. Por lo tanto, la presion del lfquido de extraccion puede estar prefe- riblemente en el rango de 1 bar a 20 bar, preferiblemente en el rango de 2 bar a 8 bar. El elemento de presurizacion puede estar integrado en el dispositivo de extraccion y preferiblemente en el cargador de lfquido. Alternativamente o adicionalmente, el al menos un elemento de presurizacion puede comprender uno o mas elementos externos, tales como una fuente de presion externa. Preferiblemente, el elemento de presurizacion puede comprender una o mas bombas y / o elementos de suministro presurizado, para suministrar el lfquido de extraccion bajo presion.

El dispositivo de extraccion y de la manera mas preferible, el cargador de lfquido pueden comprender, ademas, una o mas valvulas, preferiblemente una o mas valvulas adaptadas para controlar una presion y / o un flujo del lfquido de extraccion. Por lo tanto, se puede proporcionar al menos una valvula en una lmea de suministro para suministrar el lfquido de extraccion. La al menos una valvula puede estar adaptada para conectar o desconectar un flujo del lfquido de extraccion. Alternativamente o adicionalmente, la al menos una valvula puede estar adaptada para ajustar un flujo y / o una presion del lfquido de extraccion de una manera no escalonada o en dos o mas escalones. Una vez mas, alternativa o adicionalmente, la al menos una valvula puede evitar un reflujo del lfquido de extraccion desde el cargador de lfquido para que no retorne a la lmea de suministro. Por lo tanto, preferiblemente, la al menos una valvula puede comprender al menos una valvula de contrapresion.

El dispositivo de extraccion y, preferiblemente, el cargador de lfquido puede tener, ademas, al menos un elemento de atemperado del lfquido de extraccion, que esta adaptado para atemperar el lfquido de extraccion. Con respecto al termino atemperado, se aplica el mismo que se ha descrito mas arriba con respecto a atemperar el fluido de muestra. Por lo tanto, el atemperado puede ser por encima, por debajo o a la temperatura ambiente. Por lo tanto, el elemento de atemperado puede comprender un elemento de calentamiento y / o un elemento de refrigeracion. Como es el caso para el elemento de atemperado de la muestra, el elemento de atemperado del lfquido de extraccion puede comprender, por lo tanto, una o mas tubena de calefaccion y / o de refrigeracion, y / o serpentines, uno o mas calen- tadores resistivos, uno o mas elementos Peltier y / u otros elementos para el atemperado. Por lo tanto, el elemento de atemperado del lfquido de extraccion puede estar adaptado para controlar una temperatura del lfquido de extraccion al menos en una temperatura predeterminada o rango de temperaturas.

El dispositivo de toma de muestras, preferiblemente el recipiente de toma de muestras y / u otra parte del dispositivo de toma de muestras, tal como un elemento de filtro opcional, puede estar adaptado ademas para acondicionar al menos parcialmente el fluido de muestra. Por lo tanto, el dispositivo de toma de muestras puede tener al menos un material absorbente adaptado para absorber el o los ingredientes y, preferiblemente, para el enriquecimiento y / o agotamiento del o de los ingredientes. Sin embargo, son posibles otros tipos de acondicionamiento de la muestra y / o de enriquecimiento de la muestra y / o de agotamiento de la muestra. El material absorbente puede ser, por ejemplo, parte del recipiente de toma de muestras y / o el elemento de filtro y / o puede estar situado en cualquier otro lugar del dispositivo de toma de muestras, tal como en una localizacion entre el elemento de filtro y el recipiente de toma de muestras, tal como en una localizacion bajo el elemento de filtro.

El acondicionamiento del fluido de muestra puede comprender preferentemente un enriquecimiento y / o agotamiento mediante el uso de uno o mas materiales absorbentes por los que pasa el fluido de muestra. Por lo tanto, el dispositivo de toma de muestras puede estar adaptado de tal manera que el fluido de muestra es presionado a traves del material absorbente situado en el elemento de filtro y / o el recipiente de toma de muestras o situado en cualquier otra forma. De una manera similar a una extraccion en fase solida (SPE), uno o mas tipos de moleculas pueden adherirse al material absorbente, tal como los lfpidos. Otros tipos de moleculas pueden pasar por el material absorbente y pueden alcanzar el recipiente de toma de muestras. Por lo tanto, mediante el uso de uno o mas materiales absorbentes, el dispositivo de toma de muestras puede estar adaptado para separar dos o mas fracciones del fluido de muestra. Una o mas de estas fracciones pueden ser de interes para su uso posterior. Por lo tanto, la fraccion del fluido de muestra que pasa por el material absorbente y alcanza el recipiente de toma de muestras puede ser utiliza- da y / o la fraccion de la fluido de muestra absorbido por el material absorbente puede ser utilizada, tal como para su posterior analisis. Por lo tanto, el material absorbente que comprende la fraccion absorbida se puede tratar con uno o mas disolventes, con el fin de separar la fraccion de material absorbente para su uso posterior, tal como para el analisis de lfpidos absorbidos por el material absorbente.

Uno o mas materiales qmmicos pueden estar comprendidos en el dispositivo de toma de muestras, tal como en el recipiente de toma de muestras y / o en el material absorbente y / o en el elemento de filtro y / o en cualquier otra localizacion del dispositivo de toma de muestras tal como entre el elemento de filtro y el recipiente de toma de muestras, por ejemplo, para llevar a cabo una o mas reacciones analfticas y / o de acondicionamiento de la muestra. Por lo tanto, pueden estar comprendidos uno o mas productos qmmicos tampon. Por lo tanto, el dispositivo de toma de muestras y preferiblemente el recipiente de toma de muestras pueden tener al menos un reactivo adaptado para reaccionar con el fluido de muestra y / o con el ingrediente, preferiblemente para estabilizar el ingrediente.

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En un aspecto adicional de la presente invencion, se desvela un procedimiento para extraer al menos un ingrediente de una muestra biologica. El procedimiento puede llevarse a cabo preferiblemente usando el dispositivo de extraccion de acuerdo con una o mas de las realizaciones que se han descrito mas arriba. En consecuencia, con respecto a realizaciones preferidas del procedimiento, se puede hacer referencia al dispositivo de extraccion que se ha men- cionado mas arriba. Sin embargo, es posible el uso de otros tipos de dispositivos de extraccion y / o otros dispositi- vos.

El procedimiento puede ser utilizado preferentemente para la extraccion de uno o mas metabolitos de un especimen de planta. Sin embargo, otros usos del procedimiento de acuerdo con la presente invencion, es decir, la extraccion de otros tipos de ingredientes objetivo, son posibles, asf como el uso de muestras que no sean espedmenes de plantas, tales como otros tipos de muestras biologicas (por ejemplo algas).

El procedimiento comprende el paso de poner al menos un cargador de lfquido en contacto con un primer lado de la muestra. Al menos un lfquido de extraccion, espedficamente al menos un disolvente, es aplicado al primer lado de la muestra utilizando el cargador de lfquido. En un paso de procedimiento adicional, se utiliza al menos un dispositivo de toma de muestras que es puesto en contacto con un segundo lado de la muestra. El fluido de muestra que comprende el lfquido de extraccion y el ingrediente se recoge usando el dispositivo de toma de muestras. La muestra puede estar sujeta preferentemente entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras.

En un aspecto adicional de la presente invencion, se desvela un procedimiento para extraer por lo menos un meta- bolito de una muestra biologica, espedficamente de un especimen de la planta. En este procedimiento, se utiliza un dispositivo de extraccion de acuerdo con una o mas de las realizaciones que se han descrito mas arriba. Por lo tan- to, con respecto a realizaciones preferidas de este procedimiento, se puede hacer referencia al dispositivo de extraccion como se ha desvelado mas arriba.

En resumen, los siguientes puntos son preferidos espedficamente dentro de la presente invencion:

Punto 1: un dispositivo de extraccion para extraer al menos un ingrediente de una muestra biologica, espedficamente para la extraccion de metabolitos de un especimen de plantas, teniendo el dispositivo de extraccion al menos un cargador de lfquido, en el que el cargador de lfquido esta adaptado para ser puesto en contacto con un primer lado de la muestra y en el que el cargador de lfquido esta adaptado para aplicar un lfquido de extraccion, espedficamente al menos un disolvente, al primer lado de la muestra, teniendo el dispositivo de extraccion, ademas, al menos un dispositivo de toma de muestras, en el que el dispositivo de toma de muestras esta adaptado para ser puesto en contacto con un segundo lado de la muestra y en el que el dispositivo de toma de muestras esta adaptado para recoger lfquido de muestra que comprende el lfquido de extraccion y el ingrediente.

Punto 2: El dispositivo de extraccion de acuerdo con el punto precedente, en el que el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras estan conectados por al menos un mecanismo de conexion, en el que el mecanismo de conexion esta adaptado para variar una distancia entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras y aplicar una fuerza de sujecion a la muestra situada entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras.

Punto 3: El dispositivo de extraccion de acuerdo con el punto precedente, en el que el mecanismo de conexion tiene al menos una articulacion.

Punto 4: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los dos puntos precedentes, en el que el mecanismo de conexion tiene al menos un elemento de carril que permite un movimiento relativo del cargador de lfquido y del dispositivo de toma de muestras, preferiblemente un movimiento relativo lineal.

Punto 5: El dispositivo de extraccion de acuerdo con el punto precedente, en el que el elemento de carril tiene al menos una varilla de grna.

Punto 6: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los cuatro puntos precedentes, en el que el mecanismo de conexion tiene al menos un elemento de resorte, en el que el elemento de resorte esta adaptado para aplicar una fuerza de separacion que separa el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras.

Punto 7: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de extraccion es un dispositivo de mano.

Punto 8: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el cargador de lfquido tiene al menos un primer elemento de sellado que esta adaptado para ser presionado contra el primer lado de la muestra, espedficamente al menos una junta torica.

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Punto 9: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de extraccion tiene al menos un segundo elemento de sellado que esta adaptada para ser presionado contra el segundo lado de la muestra, espedficamente al menos una junta torica.

Punto 10: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras tiene al menos un recipiente de toma de muestras, en el que el dispositivo de toma de muestras esta adaptado para guiar al menos parcialmente el fluido de muestra al interior del recipiente de toma de muestras.

Punto 11: El dispositivo de extraccion de acuerdo con el punto precedente, en el que el recipiente de toma de muestras esta dispuesto en el dispositivo de toma de muestras de una manera reemplazable.

Punto 12: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los dos puntos precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras tiene al menos un elemento de ajuste de presion adaptado para ajustar una presion de gas en el interior del recipiente de toma de muestras.

Punto 13: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los tres puntos precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras tiene al menos una entrada de gas adaptada para exponer al menos un espa- cio interior del recipiente de toma de muestras con gas, espedficamente con un gas inerte.

Punto14: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras tiene al menos un elemento de atemperado de la muestra, en el que el elemento de atemperado de la muestra esta adaptado para atemperarel fluido de muestra.

Punto15: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositi- vo de toma de muestras tiene al menos un embudo para recibir el fluido de muestra.

Punto16: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de extraccion tiene por lo menos un elemento de filtro para filtrar el fluido de muestra.

Punto 17: El dispositivo de extraccion de acuerdo con el punto precedente, en el que el elemento de filtro se selecciona de entre el grupo que consiste en: una malla; una pantalla; un tamiz; una parrilla; una placa per- forada que tiene una o mas perforaciones.

Punto 18: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el cargador de lfquido tiene al menos un elemento de presurizacion, en el que el elemento de presurizacion esta adaptado para proporcionar el lfquido de extraccion en una manera presurizada.

Punto 19: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de extraccion, preferiblemente el cargador de lfquido, tiene al menos una valvula, preferiblemente una valvula de contrapresion.

Punto 20: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el cargador de lfquido tiene al menos un elemento de atemperado del lfquido de extraccion, en el que el elemento de atemperado del lfquido de extraccion esta adaptada para atemperar el lfquido de extraccion.

Punto 21: El dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras tiene al menos un material absorbente adaptado para absorber el ingrediente y, preferentemente, para el enriquecimiento y / o agotamiento del ingrediente.

Punto 22: Un sistema de extraccion, que comprende al menos un dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, comprendiendo ademas el sistema de extraccion al menos una muestra biologica, preferiblemente al menos un especimen de la planta, en el que la muestra biologica esta sujeta entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras.

Punto 23: El sistema de extraccion de acuerdo con el punto precedente, en el que la muestra biologica comprende una muestra tomada de un ser vivo o entidad viviente, preferiblemente como una parte intacta, preferiblemente una planta o una parte de planta.

Punto 24: El sistema de extraccion de acuerdo con uno de los dos puntos precedentes, en el que la muestra biologica comprende celulas vivas.

Punto 25: Un procedimiento para la extraccion de al menos un ingrediente de una muestra biologica, espedficamente para la extraccion de por lo menos un metabolito de un especimen de planta, utilizando preferiblemente el dispositivo de extraccion de acuerdo con uno de los puntos precedentes, en el que un cargador de lfquido es puesto en contacto con un primer lado de la muestra y en el que un lfquido de extrac- cion, espedficamente al menos un disolvente, es aplicado al primer lado de la muestra utilizando el carga-

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dor de Kquido, en el que, ademas, se usa al menos un dispositivo de toma de muestras, en el que el dispo- sitivo de toma de muestras es puesto en contacto con un segundo lado de la muestra y en el que un fluido de muestra que comprende el lfquido de extraccion y el ingrediente se recoge mediante el dispositivo de toma de muestras.

5 El dispositivo de extraccion y los procedimientos de acuerdo con la presente invencion proporcionan un gran numero de ventajas sobre los dispositivos y procedimientos conocidos. Preferiblemente, el dispositivo de extraccion puede ser utilizado directamente en las plantas cultivadas en un campo, en un invernadero o en una camara de crecimien- to. Por lo tanto, la extraccion del al menos un ingrediente de la muestra biologica puede tener lugar sin esfuerzo o con uno reducido de manera significativa con respecto a la preparacion de la muestra. Por lo tanto, la extraccion 10 puede tener lugar incluso sin separar la muestra de la entidad biologica restante, tal como sin quitar la hoja, tronco, tallo, rafz, rafz de almacenamiento, rama, inflorescencia, flor, infrutescencia, fruta, panocha, mazorca o semilla de la planta restante. En concreto, el dispositivo de extraccion es simplemente sujeto a la hoja, tronco, tallo, rafz, rafz de almacenamiento, rama, inflorescencia, flor, infrutescencia, fruta, panocha, mazorca o semilla, y la extraccion puede tener lugar, sin necesidad de cortar la planta en pedazos. Por lo tanto, ademas de reducir significativamente el es- 15 fuerzo de preparacion de la muestra y reducir, por tanto, el consumo de tiempo para la preparacion de la muestra, el esfuerzo ejercido sobre la muestra, tal como sobre la planta, por la preparacion de la muestra puede ser reducido de manera significativa. Esto puede ayudar a prevenir que la muestra sufra reacciones no deseadas inducidas por el esfuerzo.

Ademas, cuando se prueba un gran numero de muestras, tal como tipicamente se realiza al probar nuevos agentes 20 activos, el tiempo de contacto o tiempo de respuesta de cada extraccion se pueden reducir de manera significativa. Por lo tanto, un cribado en masa de un gran numero de agentes activos o componentes puede ser posible, mediante la aplicacion de estos agentes activos a una entidad biologica, tal como una planta, y extrayendo rapidamente uno o mas metabolitos de esta entidad, para una investigacion y / o analisis posterior. En consecuencia, una base de datos que comprenda un gran numero de perfiles de metabolitos de los tratamientos de diversos tipos se puede realizar 25 mediante el uso de los procedimientos y dispositivos de acuerdo con la presente invencion.

Descripcion de los dibujos

Para una comprension mas completa de la presente invencion, se hace referencia a la descripcion que sigue de realizaciones preferidas, hecha en relacion con los dibujos adjuntos. La invencion, sin embargo, no esta limitada a estas realizaciones. Los numeros de referencia identicos en los dibujos se refieren a elementos identicos y / o fun- 30 cionalmente equivalentes en las realizaciones.

En los dibujos:

la figura 1 muestra una primera realizacion de un dispositivo de extraccion de acuerdo con la presente in- vencion en una vista en seccion transversal;

la figura 2 muestra una vista parcial de una segunda realizacion de un dispositivo de extraccion de acuerdo 35 con la presente invencion; y

la figura 3 muestra una vista en seccion transversal de una tercera realizacion de un dispositivo de extraccion de acuerdo con la presente invencion.

Realizaciones preferidas

En la figura 1, se muestra una vista en seccion transversal de una primera realizacion de un dispositivo de extraccion 40 preferido110 de acuerdo con la presente invencion. El dispositivo de extraccion 110 se utiliza para la extraccion de al menos un ingrediente de una muestra biologica 112, tal como una hoja de una planta u otra muestra. En esta realizacion y en la siguiente, el dispositivo de extraccion 110 y la muestra biologica 112 en combinacion pueden formar un sistema de extraccion o partes de un sistema de extraccion, que no es indicado por separado por un numero de referencia en las figuras. Ademas, en la presente memoria descriptiva, los terminos muestra biologica y muestra se 45 utilizan como sinonimos. Sin embargo, se debe entender que se pueden utilizar otros tipos de muestras.

El dispositivo de extraccion 110 en la presente realizacion esta disenado como una tenaza 114, comprendiendo un cargador de lfquido 116 y un dispositivo de toma de muestras 118 como mandfbulas de la tenaza, que estan conec- tados por una articulacion 120, permitiendo de este modo sujetar la muestra 112 entre el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras118. El cargador de lfquido 116 esta adaptado para ser puesto en contacto con un 50 primer lado 122 de la muestra 112, mientras que, en la presente realizacion, el dispositivo de toma de muestras 118 esta adaptado para ser puesto en contacto con un segundo lado 124, que esta opuesto al primer lado 122, permitiendo de este modo que un fluido de muestra 126 y / o un lfquido de extraccion 128 pasen a traves de la muestra 112, de preferencia en una lmea recta.

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El cargador de Ifquido 116 comprende una lmea de suministro de Kquido 130 adaptada para proporcionar un Kquido de extraccion al primer lado 122 de la muestra. La lmea de suministro de Kquido 130 conduce al menos a un orificio 132 que esta orientado hacia la muestra 112, el cual, como se representa en la figura 1, puede comprender opcio- nalmente un ensanchamiento, tal como un embudo, orientado hacia la muestra 112. Entre el orificio 132 y el primer lado 122 de la muestra 112, un primer elemento de sellado 134, tal como una junta torica, puede estar provista. Preferiblemente, este primer elemento de sellado 134 proporciona un efecto de sellado alrededor del orificio 132. La lmea de suministro de lfquido 130 puede estar conectada a un deposito de lfquido de extraccion, y el lfquido de extraccion puede ser proporcionado bajo presion.

En el segundo lado 124, el dispositivo de toma de muestras 118 comprende al menos un recipiente de toma de muestras 136, que tiene una abertura 138 hacia el segundo lado 124 de la muestra 112. Entre esta abertura 138 y el segundo lado 124 de la muestra 112, puede estar dispuesto un segundo elemento de sellado 140, que, de nuevo, puede proporcionar un efecto de obturacion todo alrededor de la abertura 138. De nuevo, se pueden utilizar una o mas juntas toricas, tal como una o mas juntas toricas situadas en la parte superior de un reborde del recipiente de toma de muestras 136 que esta orientado al segundo lado 124 de la muestra 112.

El recipiente de toma de muestras 136 esta adaptado para recibir el lfquido de extraccion 128 y / o el fluido de muestra 126 recogido desde el segundo lado 124 de la muestra 112. El recipiente de toma de muestras 136 puede estar hecho de cualquier material o combinaciones de materiales adecuados. Preferiblemente, el recipiente de toma de muestras 136 esta hecho de un material inerte, tal como vidrio y / o teflon. Sin embargo, son posibles otros tipos de materiales. El receptaculo 142 puede comprender al menos un elemento de atemperado 144 de la muestra, que se representa simbolicamente en la figura 1 y que puede estar adaptado para atemperar el lfquido de extraccion 128 y / o el fluido de muestra 126 recogido dentro de un recipiente de toma de muestras 136. Del mismo modo, el lfquido de extraccion 128 se puede proporcionar en forma atemperada, tal como por medio del uso de un elemento de atemperado 146 del lfquido de extraccion, que se representa simbolicamente en la figura 1. Sin embargo, otros tipos de elementos de atemperado 144, 146 son posibles, asf como otras localizaciones de estos elementos de atemperado 144, 146 distintas de las posiciones representadas en la figura 1. Ademas, el dispositivo de extraccion 110 puede comprender al menos un elemento de presurizacion 148, que se representa simbolicamente en la figura 1, que puede estar adaptado para proporcionar el lfquido de extraccion 128 de una manera presurizada.

El recipiente de toma de muestras 136 puede comprender, ademas, al menos un elemento de ajuste de presion adaptado para ajustar una presion de gas dentro de un espacio interior 152 del recipiente de toma de muestras 136. Alternativamente o adicionalmente, el recipiente de toma de muestras puede comprender al menos una entrada de gas 154 para la aplicacion de al menos un gas dentro del espacio interior 152 del recipiente de toma de muestras 136, que puede estar separado del elemento de ajuste de presion 150 o, como en la figura 1, que puede ser identico al menos parcialmente al elemento de ajuste de presion 150. Por medio de esta entrada de gas 154, se puede sumi- nistrar un gas inerte o gas de proteccion al espacio interior 152, con el fin de evitar reacciones no deseadas.

El dispositivo de extraccion 110 y, preferiblemente, el dispositivo de toma de muestras 118 y / o cualquier otra locali- zacion del dispositivo de extraccion 110 pueden comprender, ademas, uno o mas elementos de filtro 156. En la realizacion preferida representada en la figura 1, este elemento de filtro 156 puede comprender, por ejemplo una o mas fritas, tales como una frita situada dentro de una junta torica del segundo elemento de sellado 140.

Ademas, el dispositivo de extraccion 110 puede comprender, ademas, uno o mas materiales de absorcion 158 y / o reactivos 160, como simbolicamente se representa en la figura 1. Por lo tanto, se pueden utilizar materiales absor- bentes 158, que estan adaptados para el enriquecimiento y / o agotamiento de uno o mas de los metabolitos especf- ficos. Los materiales absorbentes 158 y / o reactivos 160 pueden estar situados en varias formas, tales como siendo parte del elemento de filtro 156 y / o siendo parte del recipiente de toma de muestras 136 y / o estar comprendidos en el recipiente de toma de muestras 136 y / o estar situados entre el elemento de filtro 156 y el recipiente de toma de muestras 136. Sin embargo, son posibles otras realizaciones.

Para utilizar el dispositivo de extraccion 110 de acuerdo con la figura 1, la muestra 112, tal como una hoja, por ejemplo, una hoja de una planta de mafz, se puede fijar entre el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118. De esta manera, el cargador de lfquido 116 se puede aplicar al primer lado 122, y el dispositivo de toma de muestras 118 puede ser suministrado al segundo lado 124 o viceversa. El lfquido de extraccion 128 es suministrado por medio de la lmea de suministro de lfquido 130 al orificio 134, preferiblemente bajo presion. El lfqui- do de extraccion 128 puede comprender preferiblemente uno o mas disolventes, preferiblemente a una temperatura espedfica, predeterminado. Esta temperatura puede ser controlable a una temperatura predeterminado del rango de temperaturas fnas a un rango de temperaturas calientes. El lfquido de extraccion 128 puede ser presionado a traves de la muestra 112 mediante la aplicacion de una presion suficiente, tal como en un procedimiento tfpico de vacuna- cion mediante el uso de una pistola de vacunacion. El fluido de muestra 126, que comprende el lfquido de extraccion 128 y uno o mas ingredientes objetivo, se recoge en el interior del recipiente de toma de muestras 136.

Por medio del elemento de ajuste de presion 150, se puede proporcionar un ajuste de la presion en el espacio interior 152 del recipiente de toma de muestras 136. Este ajuste de la presion se puede realizar con estandares predefi-

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nidos, tales como estandares internos y / o estandares externos, tanto cualitativa como cuantitativamente. El ele- mento de ajuste de presion 150 puede comprender preferentemente una valvula activa y / o una valvula pasiva y / o un capilar, tal como un capilar de restriccion.

El recipiente de toma de muestras 136 puede ser preferiblemente refrigerable y estar protegido contra la admision de luz y / u otra radiacion, con el fin de evitar reacciones de oxidacion. Ademas, el recipiente de toma de muestras 136 puede ser de cierre hermetico antes y despues de la extraccion, tal como por medio del uso de un tapon de rosca y / o un recipiente de tapa a presion. Ademas, durante el procedimiento de extraccion en sf, los elementos de sellado primero y segundo 134, l4o pueden proporcionar un sellado hermetico contra la muestra 112, lo cual puede propor- cionar simultaneamente un sellado del recipiente de toma de muestras 136.

La articulacion 120 o cualquier otro mecanismo de conexion 162 adaptado para conectar el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118 puede ser disenada preferiblemente de tal manera que la presion en los elementos de sellado primero y segundo 134, 140 sea homogenea e igual, con independencia del grosor de la muestra 112, tal como el grosor de una hoja.

El elemento de filtro 156 puede estar adaptado preferiblemente para evitar que restos de tejido de la muestra 112 entren en el recipiente de toma de muestras 136. En el interior del recipiente de toma de muestras 136, se pueden proporcionar uno o mas reactivos adicionales 160, preferiblemente reactivos 160 adaptado para la estabilizacion del fluido de muestra 126, preferiblemente uno o mas de los ingredientes extrafdos de la muestra 112. Por lo tanto, butilhidroxi tolueno (BHT) y / o tierra de diatomeas y / u otros reactivos 160 pueden estar comprendidos en el recipiente de toma de muestras 136.

En la figura 2, se representa una segunda realizacion de un dispositivo de extraccion 110 de acuerdo con la presente invencion en una vista similar a la que se muestra en la figura 1. Solo se muestra una region de extraccion entre el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118. Para otros componentes del dispositivo de extraccion 110, se puede hacer referencia a la realizacion que se ha mencionado mas arriba.

El dispositivo de extraccion 110 en la figura 2 comprende un cargador de lfquido 116, que puede ser disenado de una manera similar a la de realizacion que se ha mencionado mas arriba de acuerdo con la figura 1. Por lo tanto, se hace referencia a la descripcion que se ha mencionado mas arriba. Sin embargo, contrariamente a la realizacion de la figura 1, el dispositivo de toma de muestras 118 en esta realizacion comprende un embudo 164 de recogida de fluido de muestra 126 de las areas mas grandes del segundo lado 124 de la muestra 112. Este embudo 164 puede estar separado del recipiente de toma de muestras 136 o puede ser parte del recipiente de toma de muestras 136 o de otras partes del dispositivo de toma de muestras 118, que puede comprender partes adicionales a las partes representadas en la figura 2. En su extremo superior, el embudo 164 puede comprender, de nuevo, al menos un segundo elemento de sellado 140, asf como al menos un elemento de filtro 156, similar a la realizacion que se muestra en la figura 1. El embudo 164 puede comprender uno o mas adaptadores y / o los puertos de conexion 166 adaptados para guiar el fluido de muestra 126 al interior del recipiente de toma de muestras 136. Otras realizaciones adicionales preferidas de un dispositivo que se muestra en la figura 1 pueden aplicarse a la realizacion que se muestra en la figura 2, tal como el elemento de atemperado 144 de la muestra, el elemento de atemperado del lfquido de extraccion 146, el elemento de presurizacion 148, el elemento de ajuste de presion 150, la entrada de gas 154, el material absorbente 158 o el reactivo 160. Se puede hacer referencia a la realizacion de la figura 1 como se ha des- crito mas arriba.

En la figura 3, se representa una vista en seccion transversal de una tercera realizacion de un dispositivo de extraccion 110 de acuerdo con la presente invencion. En gran medida, se puede hacer referencia a las realizaciones que se han mencionado mas arriba.

Una vez mas, el dispositivo de extraccion 110 comprende un cargador de lfquido 116 adaptado para ser puesto en contacto con un primer lado de una muestra biologica 112 y que esta adaptado para aplicar un lfquido de extraccion al primer lado 122. Ademas, el dispositivo de extraccion en esta tercera realizacion comprende de nuevo un dispositivo de toma de muestras 118 adaptado para ser puesto en contacto con un segundo lado 124 de la muestra biologi- ca 112 y adaptado para recoger el fluido de muestra 126 que sale de la muestra biologica 112.

Una vez mas, el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118 estan conectados por un mecanismo de conexion 162 que esta adaptado para variar un elemento de distancia 116 y 118 y que esta adaptado para aplicar una fuerza de sujecion a la muestra 112 situada entre el cargador de lfquido y el dispositivo de toma de muestras 118. Sin embargo, en la realizacion que se muestra en la figura 3, el mecanismo de conexion comprende uno o mas elementos de carril 168, como una alternativa a, o ademas de, una articulacion. Los elementos de carril 168 estan adaptados para permitir un movimiento relativo del cargador de lfquido 116 y del dispositivo de toma de muestras. En esta realizacion, esta habilitado un movimiento lineal.

En la figura 3, se muestra una vista en seccion transversal de un elemento de carril 168. Como se puede ver en esta realizacion, los elementos de carril 186 comprenden una o mas varillas de gma 170. Asf, como ejemplo, se pueden

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proporcionar dos, tres, cuatro o mas elementos de carril 168, preferentemente varillas de gma 170. En esta realizacion, las varillas de gma 170 estan fijamente incrustadas en un primer orificio 172 en el dispositivo de toma de mues- tras 118, tal como en un orificio ciego en una placa de base 174 del dispositivo de toma de muestras. Del mismo modo, el cargador de lfquido 116 puede comprender una placa de base 176 que tiene un segundo orificio 178, tal como un orificio pasante en la placa de base 176, en el que la varilla de gma 170 esta alojada de forma movil, de tal manera que la placa de base 176 se puede deslizar sobre la varilla de gma 170. Como se puede ver en la figura 3, la varilla de gma 170 puede extenderse todo el recorrido a traves de la placa de base 176. En un lado opuesto del dispositivo de toma de muestras 118, el cargador de lfquido 116 puede comprender una placa de cubierta 180, y la varilla de gma 170 puede ser mantenida por una tuerca 182 u otro tipo de elemento de fijacion, de tal manera que el movimiento relativo de la placa de base 176 a lo largo de la varilla de gma 170 esta limitado. La placa de cubierta 180 puede estar bloqueada a la placa de base 176 por uno o mas elementos de fijacion, tal como uno o mas tornillos 184.

El mecanismo de conexion 162 puede comprender, ademas, uno o mas elementos de resorte 186 adaptados para aplicar una fuerza de separacion que separa el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118. En la realizacion que se muestra en la figura 3, el elemento de resorte 186 puede comprender uno o mas resortes heli- coidales que rodean la varilla de guiado 170, alojados en un espacio anular de los orificios 172, 178 y que descan- san sobre los rebordes 188, 190 de los orificios 172, 178. El cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118 pueden comprimirse utilizando una tenaza 114 que comprime estos elementos, por lo que un movimiento relativo de estos elementos 116, 118 definido por el elemento de carril 168 esta preformado y mediante el cual se aplica una fuerza de sujecion a la muestra biologica 112. Cuando se reduce la fuerza de sujecion ejercida por la tenaza 114, el elemento de resorte 186 proporciona una fuerza opuesta a la fuerza de sujecion, abriendo de este modo el espacio entre el cargador de lfquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118, con el fin de retirar y / o reemplazar la muestra biologica 112.

La figura 3 muestra, ademas, detalles opcionales de una realizacion de un sistema de suministro para suministrar el lfquido de extraccion 128 a la muestra biologica 112. En esta realizacion, se muestra un sistema de suministro de lfquido 192, que tiene una conexion 194 a una lmea de suministro de lfquido 130, como en las realizaciones prece- dentes. Ademas, el sistema de suministro de lfquido 192 puede comprender un alojamiento 196 de la valvula inser- tado en un receptaculo 198 de la valvula en la placa de base 176. El alojamiento 196 de la valvula puede comprender un resalto 200 que puede ser sujetado hacia abajo por un resorte 202 y la placa de cubierta 180. Sin embargo, son posibles otros mecanismos de cierre del alojamiento 196 de la valvula. Ademas, el alojamiento 196 de la valvula en esta realizacion comprende una o mas valvulas, tal como una valvula de contrapresion 204. En esta realizacion, la valvula de contrapresion 204 comprende una bola 206 y un resorte 208 y esta adaptada para impedir un flujo de retorno del lfquido de extraccion 128 en la tubena de alimentacion 130.

En un extremo inferior que esta orientado a la primera superficie 122 de la muestra biologica 112, el cargador de lfquido 116, en esta realizacion preferentemente el alojamiento 196 de la valvula, puede comprender una placa per- forada 210 que tiene una o mas perforaciones que proporcionan los orificios 132 a traves de los cuales el lfquido de extraccion puede ser suministrado a la primera superficie 122 de la muestra biologica 112. La placa perforada 210 puede ser bloqueada al receptaculo 198 de la valvula por medio de una conexion por tornillo o por cualquier otro mecanismo de conexion.

La realizacion que se muestra en la figura 3 muestra, ademas, una modificacion potencial del dispositivo de toma de muestras 116. En esta realizacion, se proporciona un embudo 164 en la placa de base 174 del dispositivo de toma de muestras 118. En un extremo orientado hacia la segunda superficie 124 de la muestra biologica 112, el dispositivo de toma de muestras 118 de nuevo puede tener uno o mas elementos de filtro 156. En la realizacion que se muestra en la figura 3, el elemento de filtro 156 puede tener una placa perforada adicional 212, que, de nuevo, puede comprender una o mas perforaciones y que preferiblemente puede ser atornillada en la placa de base 118. Ademas, entre la placa perforada 212 y la segunda superficie 124 de la muestra biologica 112, puede descansar una malla o tamiz 214, proporcionando un elemento de filtro adicional 156. Otras realizaciones son posibles.

La realizacion en la figura 3 muestra, ademas, una modificacion de un alojamiento del recipiente de toma de muestras 136. Por lo tanto, en la realizacion que se muestra en la figura 3, el dispositivo de toma de muestras 118 puede comprender una placa de sujecion 216 o cualquier otro elemento de sujecion para el recipiente de toma de muestras 136. En esta realizacion, la placa de sujecion 216 esta situada en el lado inferior de la placa de base 174, es decir, en el lado alejado de la muestra biologica 112. La placa de sujecion 216 puede estar fijada a la placa de base 174 o puede estar sujeta a la placa de base 174 por la tenaza 114. La placa de sujecion 216 puede comprender un resalto 218 en el que un reborde 220 del recipiente de toma de muestras 136 puede descansar. Son posibles otros tipos de receptaculos que sujetan el recipiente de toma de muestras 136.

Ejemplo de una extraccion:

Con el fin de probar un proceso de extraccion con el dispositivo de extraccion 110 de acuerdo con la realizacion representada en la figura 3, se realizo el siguiente experimento.

En primer lugar, una hoja de ir^z se sujeto entre el cargador de Ifquido 116 y el dispositivo de toma de muestras 118 de la configuracion se muestra en la figura 3. Con el fin de aplicar una fuerza de apriete, uno de los dispositivo de agarre 114 se aplico tal como se representa en la figura 3, en el que se utilizaron tenazas de soldadura.

En un paso adicional, se aplico etanol a presion como lfquido de extraccion 128. Con el fin de presurizar el etanol, se 5 utilizo un elemento de presurizacion 148 (no representado en la figura 3). En este caso, una pistola de engrasar fue utilizada como un elemento de presurizacion 148.

Como se ha descrito previamente, el fluido de muestra 126 se recogio en el recipiente de toma de muestras 136. A pesar de que no se realizo un analisis detallado del fluido de muestra 126, el fluido de muestra 126 se inspecciono visualmente. Una coloracion verde del fluido de muestra 126 fue facilmente detectable a simple vista, sin ningun 10 analisis adicional, en comparacion con el etanol incoloro usado como lfquido de extraccion 128. Esta coloracion del fluido de muestra 126 mostro claramente que al menos un ingrediente de la hoja de mafz se extrajo, siendo clorofila de la manera mas probable, y, potencialmente, uno o mas otros ingredientes.

Numeros de referencia

110

dispositivo de extraccion 176 placa de base

112

muestra biologica 178 segundo orificio

114

tenazas 180 Placa de cubierta

116

cargador de lfquido 182 tuerca

118

dispositivo de toma de muestras 184 tornillo

120

articulacion 186 elemento de resorte

122

primer lado 188 resalto

124

segundo lado 190 resalto

126

fluido de muestra 192 sistema de suministro de lfquido

128

lfquido de extraccion 194 conexion

130

lmea de suministro de lfquido 196 alojamiento de la valvula

132

orificio 198 receptaculo de valvula

134

primer elemento de sellado 200 reborde

136

recipiente de toma de muestras 202 resorte

138

abertura 204 valvula de contrapresion

140

segundo elemento de sellado 206 bola

142

receptaculo 208 resorte

144

elemento de atemperado de muestra 210 placa perforada

146

Elemento de atemperado del lfquido de extraccion 212 placa perforada

148

elemento de presurizacion 214 malla

150

152

154

156

158

160

162

164

166

168

170

172

174

elemento de ajuste de presion

216 placa de sujecion

espacio interior

218 resalto

entrada de gas

220 reborde

elemento de filtro materiales absorbentes reactivo

mecanismo de conexion embudo

puerto de conexion elemento de carril varilla de guiado primer orificio placa de base

Claims (15)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   50

   REIVINDICACIONES

   1. Un procedimiento de extraccion de al menos un ingrediente de una muestra biologica (112), en el que un carga- dor de lfquido (116) de un dispositivo de extraccion (110) es puesto en contacto con un primer lado (122) de la muestra (112) y en el que un lfquido de extraccion (128) se aplica al primer lado (122) de la muestra (112) utili- zando el cargador de lfquido (116), en el que, ademas, se utiliza al menos un dispositivo de toma de muestras (118) del dispositivo de extraccion (110), en el que el dispositivo de toma de muestras (118) es puesto en contacto con un segundo lado (124) de la muestra (112) y en el que un fluido de muestra (126) que comprende el lfquido de extraccion (128) y el ingrediente se recoge por medio del dispositivo de toma de muestras (118), en el que el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118) estan conectados por al menos un mecanismo de conexion (162), en el que el mecanismo de conexion (162) esta adaptado para variar una distan- cia entre el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118) y en el que el cargador de lfqui- do (116) aplica una fuerza de sujecion a la muestra (112) que se encuentra situada entre el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118), en el que la muestra biologica (112) se toma de una planta y es seleccionada de entre el grupo que consiste en hojas, troncos, tallos, rafces, rafces de almacenamiento, ra- mas, inflorescencias, flores, infrutescencias, frutos, panochas, mazorcas y semillas, en el que el dispositivo de extraccion (110) se sujeta sobre la muestra biologica (112) y la extraccion se realiza sin cortar la planta en pe- dazos.
2. 2. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion precedente, en el que el procedimiento se realiza directamen- te en las plantas que crecen en un campo, en un invernadero o en una camara de crecimiento.
3. 3. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que la muestra biologica (112) es una parte intacta de una planta seleccionada de entre el grupo que consiste en: una planta que crece en un ambiente controlado como una camara de crecimiento o un invernadero; una planta que crece en el suelo o en un sistema hidroponico en un ambiente controlado como una camara de crecimiento o un invernadero; una planta que crece en un campo; una planta que pertenece a una poblacion reproductiva; una planta transgenica.
4. 4. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el procedimiento se lleva a cabo sin separar la muestra de la entidad biologica remanente.
5. 5. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el mecanismo de conexion (162) tiene al menos una articulacion (120).
6. 6. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el mecanismo de conexion (162) tiene al menos un elemento de carril (168) que permite un movimiento relativo del cargador de lfquido (116) y del dispositivo de toma de muestras (118), preferiblemente un movimiento relativo lineal.
7. 7. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el cargador de lfquido (116) tiene al menos un primer elemento de sellado (134) que esta adaptado para ser presionado contra el primer lado (122) de la muestra (112).
8. 8. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el dispositivo de extraccion (110) tiene al menos un segundo elemento de sellado (140) que esta adaptado para ser presionado contra el segundo lado (124) de la muestra (112).
9. 9. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras (118) tiene al menos un recipiente de toma de muestras (136), en el que el dispositivo de toma de muestras (118) esta adaptado para guiar al menos parcialmente el fluido de muestra (126) al interior del recipiente de toma de muestras (136).
10. 10. El procedimiento de acuerdo con la reivindicacion precedente, en el que el dispositivo de toma de muestras (118) tiene al menos una entrada de gas (154) adaptada para exponer al menos un espacio interior (152) del recipiente de toma de muestras (136) con gas.
11. 11. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras (118) tiene al menos un elemento de atemperado (144) de la muestra, en el que el elemento de atem- perado (144) de la muestra esta adaptado para atemperar el fluido de muestra (126).
12. 12. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el dispositivo de extraccion (110) tiene al menos un elemento de filtro (156) para filtrar el fluido de muestra (126).
13. 13. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el cargador de lfquido (116) tiene al menos un elemento de atemperado (146) del lfquido de extraccion (128), en el que el elemento de atemperado (146) del lfquido de extraccion (128) esta adaptado para atemperar el lfquido de extraccion (128).

    10

    15

    20
14. 14. El procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones precedentes, en el que el dispositivo de toma de muestras (118) tiene al menos un material absorbente (158) adaptado para absorber el ingrediente y, preferen- temente, para el enriquecimiento y / o agotamiento del ingrediente.
15. 15. Un sistema de extraccion, que comprende al menos un dispositivo de extraccion (110) para la extraccion de al menos un ingrediente de una muestra biologica (112), teniendo el dispositivo de extraccion (110) al menos un cargador de lfquido (116), en el que el cargador de lfquido (116) esta adaptado para ser puesto en contacto con un primer lado (122) de la muestra (112) y en el que el cargador de lfquido (116) esta adaptado para aplicar un lfquido de extraccion (128) al primer lado (122) de la muestra (112 ), teniendo ademas el dispositivo de extraccion (110) al menos un dispositivo de toma de muestras (118), en el que el dispositivo de toma de muestras (118) esta adaptado para ser puesto en contacto con un segundo lado (124) de la muestra (112) y en el que el dispositivo de toma de muestras (118) esta adaptado para recoger el fluido de muestra (126) que comprende el lfquido de extraccion (128) y el ingrediente, comprendiendo ademas el sistema de extraccion al menos una muestra biologica (112), en el que la muestra biologica (112) esta sujeta entre el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118), en el que el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118) estan conectados por al menos un mecanismo de conexion (162), en el que el mecanismo de co- nexion (162) esta adaptado para variar la distancia entre el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118) y en el que el cargador de lfquido (116) aplica una fuerza de sujecion a la muestra (112) que se encuentra situada entre el cargador de lfquido (116) y el dispositivo de toma de muestras (118), en el que la muestra biologica (112) se toma de una planta y se selecciona de entre el grupo que consiste en hojas, troncos, tallos, rafces, rafces de almacenamiento, ramas, inflorescencias, flores, infrutescencias, frutos, panochas, ma- zorcas y semillas, en el que el dispositivo de extraccion (110) se sujeta sobre la muestra biologica (112) para llevar a cabo la extraccion sin cortar la planta en pedazos.