ES2474697T3

ES2474697T3 - Macr�lidos para tratar enfermedades mediadas por la inhibición de PDE

Info

Publication number: ES2474697T3
Application number: ES09707590.7T
Authority: ES
Inventors: Johannes Laurenz Kellenberger; J�Rg Dreier; Stefan Bernhard Reinelt
Original assignee: Basilea Pharmaceutica AG
Current assignee: Basilea Pharmaceutica AG
Priority date: 2008-02-08
Filing date: 2009-02-09
Publication date: 2014-07-09
Anticipated expiration: 2029-02-09
Also published as: PT2247294E; US20110021449A1; US8445451B2; KR101589960B1; EP2247294A2; CN103142632A; MX2010008751A; CN101939012B; EP2247294B1; AU2009211333B2; JP5769972B2; CN103142632B; ZA201005515B; WO2009098320A3; JP2011511044A; CA2714389C; PL2247294T3; WO2009098320A2; AU2009211333A1; CA2714389A1

Abstract

Un compuesto macrólido de fórmula (I)**Fórmula** donde R1 es un resto -Y-X-Q; Y es S, SO o SO2; X es un enlace o un grupo lineal que consiste en átomos de hidrógeno y de 1 a 9 átomos seleccionados entre C, N, O y/o S, de los cuales, hasta 2 átomos pueden ser N y un átomo puede ser Q o S, un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO y el átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2 y dos átomos de C adyacentes pueden estar presentes como -CH>=CH- o -C≡uyo grupo X está no sustituido o sustituido por -COO-W o - CONH-W; Q es un resto -V-A1-L-A2-W o, si X no representa un enlace, también puede ser -NR6R7; V es un grupo divalente aromático o heterocíclico, opcionalmente sustituido; W es arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido; A1 y A2 pueden, independientemente entre sí, estar ausentes o ser un grupo alquileno C1-C4; L es-O-, -S-, -SO2-, -NH-, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2)-, -HN(CO)NH-, - O(CO)NH-, -HN(CO)O-, o también pueden estar ausentes si A1 y/o A2 están presentes; 2 es OR2a y R3 es hidrógeno o R2 y R3 tomados junto con el átomo de carbono al que están unidos, representan un grupo C>=O; R2a es hidrógeno, acetilo, -(C>=O)CH2NR2bR2c, o -(C>=O)CH2CH2NR2bR2c; R2b y R2c son, independientemente entre sí, hidrógeno o alquilo C1-C6 que puede estar sustituido o sin sustituir, y en el que hasta dos átomos de carbono pueden ser N, O o S y un átomo de carbono puede aparecer como C>=O o junto con el átomo de nitrógeno al que está unido forman un anillo de 4-7 miembros de los que hasta dos átomos pueden ser N, O o S y un átomo de carbono puede ser C>=O; 4 es hidrógeno o R2 y R4 tomados junto con el enlace entre los átomos de carbono a los que están unidos, forman un enlace doble; 6 y R7 se seleccionan independientemente entre sí entre arilo opcionalmente sustituido; ralquilo; heterociclilo y heterociclilalquilo; y uno de R6 y R7 también puede ser un grupo -L-A2-W; R12 es hidrógeno y R13 es OR14 o R12 y R13, tomados junto con los átomos de carbono a los que están unidos, representan un grupo C>=O; 14 es, independientemente en cada caso en la fórmula I, hidrógeno o un grupo alifático saturado o insaturado con de 1 a 6 átomos de carbono; y * indica un centro quiral que está en forma (R) o (S).

Description

Macr�lidos para tratar enfermedades mediadas por la inhibición de PDE

5 La invención se refiere al tratamiento y/o prevención del cáncer en animales o seres humanos mediante el uso de determinados compuestos macr�lidos y composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos. La invención se refiere adicionalmente a compuestos macr�lidos con actividad antiinflamatoria, antial�rgica y anticancerosa en el sentido anteriormente mencionado mediado por la inhibición de las fosfodiesterasas, en particular, la fosfodiesterasa 4 (PDE4), lo que convierte estos compuestos en útiles para el tratamiento y/o prevención de enfermedad tales como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), asma, artritis reumatoide, dermatitis at�pica o enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedades cancerosas y otras enfermedades.

El monofosfato de adenosina cíclico (AMPc) es un segundo mensajero clave en células. Se sabe que unos niveles

15 aumentados de AMP cíclico suprimen las respuestas celulares en varios tipos de células inflamatorias e inmunes incluyendo linfocitos, monocitos, macr�fagos, neutr�filos, eosin�filos, bas�filos y células epiteliales pulmonares. Las concentraciones intracelulares de AMPc se regulan mediante la adenililo ciclasa y mediante fosfodiesterasas (PDE) de nucleótido cíclicas. Las PDE son una familia de enzimas que inactivan los nucleótidos cíclicos AMPc y GMPc mediante la hidrólisis de AMP y GMP. La enzima PDE4 específica de AMPc es la enzima predominante en células proinflamatorias. Se ha demostrado que PDE4 est� implicada en procesos inflamatorios (por ejemplo, Lipworth B. J., Lancet (2005) 365, p. 167 o Giembycz M. A., Curr. Opin. Pharmacol. (2005), 5, p. 238). Por lo tanto, los inhibidores de PDE4 son útiles en el tratamiento y/o profilaxis de enfermedades inflamatorias y alérgicas tales como asma, bronquitis crónica, enfisema, dermatitis at�pica, urticaria, rinitis alérgica, conjuntivitis alérgica, psoriasis, artritis reumatoide, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), choque séptico, colitis ulcerosa, enfermedad de

25 Crohn, síndrome de estr�s respiratorio en el adulto y esclerosis múltiple. Los inhibidores de PDE4 son también potencialmente útiles para el tratamiento de enfermedades cancerosas, como se indica por ejemplo en D. G. McEwan y col. en "Chemoresistant KM12C Colon Cancer Cells Are Addicted to Low Cyclic AMP Levels in a Phosphodiesterase 4-Regulated Compartment via Effects on Phosphoinositide 3-Kinase", Cancer Res. 2007; 67(11); June 1,2007.

Se han descrito en la bibliografía numerosos inhibidores de PDE4. (véase por ejemplo J. O. Odingo, Expert. Opin. Ther. Patents, 2005,15(7), 773; M. Hendrix, C. Kallus, Methods and Principles in Medicinal Chemistry (2004), Vol. 22 (Chemogenomics in Drug Discovery), 243-288 (Wiley-VCH)). Muchos de los inhibidores conocidos de PDE4 muestran efectos secundarios limitantes de la dosis tales como emesis y dolor de cabeza. Entre los inhibidores más

35 avanzados de PDE4 son roflumilast y cilomilast.

Los derivados de eritromicina que tienen un anillo de lactona de cinco miembros tiosustituido condensado a las posiciones 11,12 del anillo macr�lido se han descrito, por ejemplo, en los documentos WO 02/16380, WO 03/072588, WO2006/084410, US0038915 y US6720308. Los documentos WO 02/16380, WO 03/072588 y US0038915 describen los denominados cet�lidos, que tienen un grupo carbonilo en posición 3 de la estructura de la eritromicina. EL documento US6720308 describe los denominados anhidr�lidos. El documento WO2006/084410 describe compuestos con un resto cladinosa unidos en la posición 3 del macr�lido. Compuestos con un grupo hidroxilo en la posición 3 de la estructura de la eritromicina aparecen como intermedios en la síntesis de los compuestos finales. La formación de los 3-acilderivados se describe por ejemplo en J. Med. Chem. 2003,46,2706.

45 Todos los compuestos macr�lidos descritos en los documentos anteriormente mencionados se han descrito como útiles para el tratamiento de infecciones bacterianas. Por ejemplo, D. Hunziker y col describen en "Novel ketolide antibiotics with a fused five-membered lactone ring - synthesis, physicochemical and antimicrobial properties", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, Vol 12 (1 de julio de 2004), páginas 3503-3519 un gran número de derivados 3-cet�lidos de eritromicina que tienen un anillo de lactona de cinco miembros tiosustituido condensado a las posiciones 11,12 del anillo macr�lido, as� como sus propiedades citot�xicas. También se ha notificado que los macr�lidos derivados de eritromicina poseen actividad antiinflamatoria (por ejemplo, Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 1998,41, Supl. B, 37-46; Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006,16, p5801). Adicionalmente, se sabe que los macr�lidos derivados de eritromicina se acumulan en células inflamatorias.

55 El documento 1439186 A2 describe macr�lidos derivados de eritromicina para el tratamiento del cáncer.

Sorprendentemente, se ha descubierto ahora que determinados compuestos macr�lidos que tienen un anillo de lactona de cinco miembros condensado a la estructura de la eritromicina y que est�n sustituidos con cadenas secundarias específicas inhiben selectivamente PDE4, una actividad nueva descubierta no disponible para el público hasta el momento para este tipo de moléculas. Por tanto, estos macr�lidos son útiles en la prevención y/o el tratamiento de enfermedades inflamatorias, la prevención y/o el tratamiento de enfermedades alérgicas o para la prevención y/o el tratamiento del cáncer en animales o especialmente en seres humanos. Las moléculas descritas en el presente documento son estructuralmente diferentes de los inhibidores de PDE4 actualmente conocidos y por

65 tanto tienen, en particular, el potencial de superar los efectos secundarios anteriormente citados de los inhibidores de PDE4 conocidos.

Algunos de los macr�lidos encontrados son novedosos. En un aspecto, por tanto, la presente invención de acuerdo con ello se refiere a compuestos macr�lidos de fórmula (I)

5 donde

R1 es un resto -Y-X-Q; Y es S, SO o SO2;

10 X es un enlace o un grupo lineal que consiste en átomos de hidrógeno y de 1 a 9 átomos seleccionados entre C, N, O y/o S, de los que hasta 2 átomos pueden ser N y un átomo puede ser O o S, un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO y el átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2 y dos átomos de C adyacentes pueden estar presentes como -CH=CH- o -C:C- y cuyo grupo X est� no sustituido o sustituido por -COO-W o -CONH-W;

15 Q es un resto -V-A1-L-A2-W o, si X no representa un enlace, también puede ser -NR6R7; V es un grupo divalente aromático o heteroc�clico opcionalmente sustituido; W es un arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido; o en un grupo -V-A1-L-A2-W, donde al menos uno

de los grupos A1, L o A2 est� presente, también puede ser un 20 A1 y A2 son, independientemente entre s�, estar ausentes o ser un grupo alquileno C1-C4; L es, -O-, -S-, -SO2-, -NH-, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2)-, -

HN(CO)NH-, -O(CO)NH-, -HN(CO)O-, o también puede estar ausente si A1 y/o A2 est�n presente; R2 es OR2a y R3 es hidrógeno o

25 R2 y R3 tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, representan un grupo C=O; R2a es hidrógeno, acetilo, -(C=O)CH2NR2bR2c, o -(C=O)CH2CH2NR2bR2c; R2b y R2c son, independientemente entre s�, hidrógeno o alquilo C1-C6 que puede estar sustituido o no

sustituido, y en el que hasta dos átomos de carbono pueden ser N, O o S y un átomo de carbono puede aparecer como C=O o junto con el átomo de nitrógeno al que est� unido forman un anillo de 4-7

30 miembros de los que hasta dos átomos pueden ser N, O o S y un átomo de carbono puede ser C=O; R4 es hidrógeno o R2 y R4 junto con el enlace entre los átomos de carbono a los que est�n unidos, forman un enlace doble; R6 y R7 se seleccionan independientemente entre s� entre arilo opcionalmente sustituido; aralquilo;

heterociclilo y heterociclilalquilo; y uno de R6 y R7 también puede ser un grupo -L-A2-W;

35 R12 es hidrógeno y R13 es OR14 o R12 y R13 tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, representan un grupo C=O; R14 es, independientemente en cada caso en la fórmula I, hidrógeno o un grupo alif�tico saturado o

insaturado con de 1 a 6 átomos de carbono; y 40 * indica un centro quiral que est� en forma (R) o (S).

En un aspecto más específico, la presente invención se refiere a macr�lidos de fórmula (I) para su uso en el tratamiento de enfermedades y trastornos en animales o seres humanos que se pueden mejorar o aliviar mediante inhibición de fosfodiesterasas, en particular la fosfodiesterasa 4 (PDE4).

45 Adicionalmente, la presente invención se refiere a compuestos de dicha fórmula (I) para su uso en la prevención y/o el tratamiento del cáncer en animales o seres humanos.

Los compuestos de fórmula (I) son especialmente preferidos para su uso en la prevención y/o el tratamiento del 50 cáncer en animales o seres humanos. Se prefiere el uso para el tratamiento del cáncer.

La invención adicionalmente se refiere a compuestos macr�lidos de fórmula (I-A)

donde

entre C, N, O y/o S, de los que hasta 2 átomos pueden ser N y un átomo puede ser O o S, un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO y el átomo de azufre puede aparecer como un grupo 10 SO2 y dos átomos de C adyacentes pueden estar presentes como -CH=CH- o -C:C- y cuyo grupo X

est� no sustituido o sustituido por -COO-W o -CONH-W; Q es un resto -V-A1-L-A2-W o, si X no representa un enlace, también puede ser -NR6R7; V es un grupo divalente aromático o heteroc�clico opcionalmente sustituido; W es un arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido; o en un grupo -V-A1-L-A2-W, donde al menos uno

15 de los grupos A1; L o A2 est� presente, también puede ser un grupo lineal monovalente sustituido o no sustituido saturado o no saturado con hasta 5 átomos compuesto de C, N, O y/o S de los que un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO un átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2,

A1 y A2 independientemente entre s�, pueden estar bien ausente, o ser un grupo alquileno C1-C4;

20 L es un enlace simple, -O-, -S-, -SO2-, -NH-, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, (CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2)-, -HN(CO)NH-, -O(CO)NH-, -NH(CO)O-, o también puede estar ausente si A1 y/o A2 est�n presente;

R6 y, R7 se seleccionan independientemente entre s� entre arilo; aralquilo; heterociclilo y heterociclilalquilo; y uno de R6 y R7 también pueden ser también un grupo -L-W

25 R12 es hidrógeno y R13 es OR14 o R12 y R13 tomados junto con el átomo de carbono al que est�n unidos, representan un grupo C=O; R14 es, independientemente en cada caso en la fórmula (I-A), hidrógeno o un grupo alif�tico saturado o

insaturado con de 1 a 6 átomos de carbono; y 30 * indica un centro quiral que est� en forma (R) o (S);

especialmente para su uso en la prevención y/o el tratamiento del cáncer en animales o seres humanos. Se prefiere el tratamiento del cáncer.

35 Los compuestos de fórmula (I-A) y su uso en el tratamiento de enfermedades y trastornos en seres humanos que se pueden mejorar o aliviar mediante la inhibición, en particular de la fosfodiesterasa 4 (PDE4), y, basándose en su actividad, su utilidad en la prevención y/o el tratamiento de enfermedades inflamatorias as� como para el tratamiento y/o prevención de enfermedades alérgicas, pero no para el tratamiento y/o prevención de enfermedades asociadas con el crecimiento incontrolado, proliferaci�n y/o supervivencia celular, por ejemplo, el cáncer, en animales o seres

40 humanos, ya se había descrito en la solicitud internacional n� PCT/EP2007/058247 presenta por el presente solicitante en fecha 08.08.2007 y publicada como WO2008/017696.

Para los fines de la presente invención, se entiende que el término "compuesto macr�lido" incluye las formas estereom�ricas independientes de los compuestos, as� como sus mezclas diastereom�ricas.

45 Adicionalmente, para los fines de la presente invención, se entiende que el término "compuesto macr�lido" incluye las sales farmac�uticamente aceptables y los N-óxidos de los compuestos de fórmula (I) o (I-A).

Los compuestos de la invención muestran una actividad inhibidora sustancial relativa a las fosfodiesterasas (PDE),

50 en particular respecto a PDE4, que se ha demostrado que est� implicada en procesos inflamatorios (véase por ejemplo Lipworth B. J., Lancet (2005) 365, p. 167 o Giembycz M. A., Curr. Opin. Pharmacol. (2005), 5, p. 238). Esto se muestra en los ejemplos. El uso de los compuestos de acuerdo con la presente invención para el tratamiento de enfermedades y trastornos en animales y especialmente en seres humanos que se pueden mejorar o aliviar por inhibición de las fosfodiesterasas, en particular la fosfodiesterasa 4 (PDE4) es por tanto uno de los aspectos de la

presente invención. Basándose en esta actividad, los presentes compuestos son especialmente útiles en sujetos seleccionados entre animales, en particular mamíferos, y aún más preferidos los seres humanos, para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades inflamatorias as� como para el tratamiento y/o prevención de enfermedades alérgicas y para el tratamiento del cáncer.

Para los fines de la presente invención, los términos "grupo aromático" y "arilo" se refieren a grupos aromáticos con uno o más, preferentemente núcleos de 6 miembros y que tienen de 6 a 14 átomos de carbono. Los ejemplos son en particular fenilo, naftilo, antrilo y fenantrilo. Estos grupos se pueden sustituir adicionalmente con 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados entre, por ejemplo, alquilo tal como se define a partir de ahora en el presente documento, alcoxi inferior tal como alcoxi C1-C4 como metoxi, etoxi, propiloxi o n-butoxi, cicloalquiloxi C3-C7 o cicloalquil C3-C7alcoxi-C1-C4 tal como ciclopentiloxi, ciclopropilmetiloxi, halógeno tal como se define a partir de ahora en el presente documento, grupos alquilo sustituidos con halógeno tal como difluorometilo o trifluorometilo, tricloroetilo, grupos alcoxi sustituidos con halógeno tal como difluorometoxi, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquiltio, mercapto, hidroxi, carbamo�lo, un grupo carboxilo. En el caso en que más de un sustituyente est� unido al grupo arilo, estos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes entre s�. También se abarcan en el alcance de la presente invención son posibles regiois�meros diferentes (isómeros de constitución) de un grupo específico, por ejemplo "dimetoxifenilo" significa que ambos sustituyentes metoxi pueden estar unidos al anillo fenilo en la posición 2,3, la posición 2,4, la posición 2,5, la posición 2,6, la posición 3,4, la posición 3,5 y la posición 3,6.

Tal como se usa en el presente documento, el término "grupo heteroc�clico" o "heteroc�clico" se refiere a un sistema de anillo heteroc�clico insaturado o saturado sustituido o no sustituido de 5 a 10 miembros (monoc�clico o bic�clico) que contiene al menos un hetero�tomo seleccionado entre el grupo que consiste de azufre, oxígeno, y, preferentemente, nitrógeno. Los sustituyentes heteroc�clicos ilustrativos incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, los siguientes grupos: piperidinilo, morfolinilo, 2, 3- o 4-piridilo, pirrolidinilo, piperazinilo, 1H-pirazol-1-ilo, 1H-imidazol1-ilo, 1H-imidazol-2-ilo, pirazinilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, por ejemplo, 1H-[1,2, 4]-triazol-1-ilo, 1H-tetrazolilo, 2H-tetrazolilo; tienilo, furilo (2-furanilo o 3-furanilo), 1Hazepinilo, tetrahidrotiofenilo, 3H-1,2, 3-oxatiazolilo, 1,2, 3-oxadiazolilo, 1,2, 5-oxaditiolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, 4H1,2, 4-oxadiazinilo, 1,2, 5-oxatiazinilo, 1,2, 3,5-oxatiadiazinilo, 1,3, 4-tiadiazepinilo, 1,2, 5,6-oxatriazepinilo, oxazolidinilo, tetrahidrotienilo, y similares, o sistemas de anillos heteroc�clicos condensados tales como quinolinilo, por ejemplo quinoin-8-ilo, quinolin-5-ilo, quinolin-2-ilo, quinolin-6-ilo, quinolin-3-ilo, isoquinolinilo (6-isoquinolinilo), quinazolinilo, 1H-benztriazolilo, 1H-imidazo[4,5-c]piridinilo, 5H-imidazo[4,5-c]piridinilo, 1H-imidazo[4,5-b]piridin-1-ilo, 3H-imidazo[4,5-b]piridin-3-ilo, 1H-pirazolo[3,4-b]piridinilo, 1,2, 3,4-tetrahidro-quinolinilo, 1,2, 3,4tetrahidroisoquinolinilo, tieno[2,3-b]piridinilo, benzotiazolilo (por ejemplo 2-benzotiazolilo), 1H-benzoimidazolilo, 1Hindolilo, 1,2, 3,4-tetrahidroquinolinilo, purinilo, por ejemplo, 9H-purin-9-ilo, 6-amino-9H-purin-9-ilo, 2,6-diamino-9Hpurin-9-ilo, 1H-purin-6-ilo, 1H-2,3-dihidroindol-1-ilo, 2,1, 3-benzoxadiazol-5-ilo, 2,1, 3-benzoxadiazol-4-ilo, 1,3benzodioxol-5-ilo, 2,3-benzoxazolinilo, 1,2-dihidro-oxazolo[5,4-c]piridinilo, 6-quinoxalinilo, 2-benzo[b]tien-3-ilo, 3,4dihidro-1H-2-oxo-quinolin-6-ilo.

Los grupos heterociclilo pueden estar adicionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes. Dichos sustituyentes incluyen, por ejemplo, grupos alquilo tal como se definen a partir de ahora en el presente documento, alcoxi inferior tal como alcoxi C1-C4 como metoxi, etoxi, propiloxi o n-butoxi, cicloalquiloxi C3-C7 o cicloalquil C3-C7alcoxi-C1-C4 tal como ciclopentiloxi, ciclopropilmetiloxi, halógeno tal como se define a partir de ahora en el presente documento, grupos alquilo sustituidos con halógeno tal como trifluorometilo, tricloroetilo, grupos alcoxi sustituidos con halógeno tal como difluorometoxi, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquiltio, mercapto, hidroxi, carbamo�lo, carboxilo, un grupo oxo. En el caso en que más de un sustituyente est� unido al grupo heterociclilo, estos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes entre s�. También est�n incluidos en el ámbito de la presente definición varios regiois�meros, por ejemplo "dimetilpiridilo" significa que ambos sustituyentes metilo pueden estar unidos al piridilo en todas las posiciones químicamente posibles. Por ejemplo, ambos sustituyentes metilo pueden estar unidos al 2-piridilo en la posición 3,4, la posición 4,5, la posición 5,6, la posición 3,5, la posición 3,6, y la posición 4,6. Ambos sustituyentes metilo pueden estar unidos al 3-piridilo en la posición 2,4, la posición 2,5, la posición 2,6, la posición 4,5, la posición 4,6, y la posición 5,6. Ambos sustituyentes metilo pueden estar unidos al 4-piridilo en la posición 2,3, la posición 2,5, la posición 2,6, y la posición 3,5.

Los sustituyentes especialmente preferidos para los grupos heterociclilo son alquilo, alcoxi, oxo, halógeno, amino, alquilamino o dialquilamino, donde alquilo y alcoxi son como se han definido anteriormente en el presente documento.

Los ejemplos de los anillos heteroc�clico sustituidos preferidos son 1H-pirimidin-2,4-diona, 1H, 3H-pirimidin-2,4diona-5-metilo, 1H-pirimidin-4-amino-2-on, 6-amino-9H-purina, 6-dimetilamino-9H-purina, 2,6-diamino-9H-purina, 6amino-8-[(3-piridinilmetil)amino]-9H-purina, 4-amino-imidazo[4,5-c]piridina, 4-metoxi-imidazo[4,5-c]piridina, 1etilpirazolo[3,4-b]piridina, 4-fenil-1H-pirazol, 3-(piridin-3-il)-1H-pirazol, 3-(piridin-4-il)-1H-pirazol-1-ilo, 3-(piridin-3-il)1H-imidazol-1-ilo, 3-(piridin-4-il)-1H-imidazol-1-ilo, 3-(piridin-3-il)-1H-[1,2, 4]triazol, 3-(piridin-4-il)-1H-[1,2, 4]triazol and 2-oxo-1,2, 3,4-tetrahidro-quinolina.

Tal como se usa en el presente documento, el término "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo saturados de cadena lineal o ramificada que tienen preferentemente de 1 a 6 átomos de carbono. Dichos grupos son por ejemplo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, butilo terciario, pentilo, hexilo, y similares. Dichos grupos alquilo pueden estar adicionalmente sustituidos por uno o más sustituyentes seleccionados entre, por ejemplo, alcoxi inferior tal como alcoxi C1-C4 como metoxi, etoxi, propiloxi o n-butoxi, cicloalquiloxi C3-C7 o cicloalquil C3-C7alcoxi-C1-C4 tal como ciclopentiloxi, ciclopropilmetiloxi, halógeno tal como se define más adelante, grupos alquilo sustituidos con halógeno

5 tal como difluorometilo o trifluorometilo, tricloroetilo, ciano, nitro, amino, alquilamino, dialquilamino, alquiltio, mercapto, hidroxi, carbamo�lo, carboxilo, u oxo. Si est� presente más de un sustituyente, entonces estos sustituyentes pueden ser bien iguales o bien diferentes entre s�.

El término grupo alif�tico se refiere a grupos hidrocarburo saturados de cadena ramificada o preferentemente lineal

10 que tienen preferentemente de 1 a 6 átomos de carbono, que pueden estar saturados o insaturados. Los ejemplos incluyen los mencionados para alquilo, vinilo, n-propenilo, n-propinilo, grupos butenilo, butadienilo, grupos pentenilo, y similares.

El término "halógeno" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo, preferentemente flúor y cloro.

15 En las combinaciones "heterocicloalquilo" y "aralquilo", las partes individuales "heterociclilo", "ar" (= arilo), y "alquilo" tienen los mismos significados que se ha indicado anteriormente.

El término grupo alquileno C1-C4 se refiere por ejemplo, a metileno, etileno, n-propileno, isopropileno o n-butileno.

20 R1 es un resto de fórmula -Y-X-Q.

En esta fórmula, Y puede ser generalmente S, SO o SO2; preferentemente es S y SO2, en particular S.

25 X es bien un enlace; es decir, est� "ausente", o bien es un grupo lineal que consiste en átomos de hidrógeno y hasta 9 átomos seleccionados entre C, N, O y/o S, de los que hasta 2 átomos pueden ser N y un átomo puede ser O o S, un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO y el átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2. Dos átomos de carbono adyacentes también pueden estar presentes como -CH=CH-o -C:C-. El grupo X puede estar no sustituido o est� sustituido con un sustituyente de fórmula -COO-W o -CONH-W, donde W tienen el

30 significado definido en el presente documento. Como ya se ha indicado, el grupo separador X con hasta 9 átomos puede llevar átomos de hidrógeno adicionales para saturar un átomo de C para formar, por ejemplo, un grupo metileno o saturar un átomo de N para formar un grupo amino. Preferentemente, el separador consiste en de 2 a 5 átomos seleccionados entre C, N, O y/o S.

35 Los grupos X preferidos son:

(CH2)n, (CH2)mOCH2, (CH2)2NCH3(CH2)2, CH2CH2NH, (CH2)pCOO, (CH2)pCONH; O(CH2)p o HN(CH2)p, donde n y p son 1,2 o 3 y m es 0 o preferentemente 1, 2 o 3 y que est�n unidos con el grupo Y mediante un átomo de carbono.

40 Los grupos X especialmente preferidos son 1,2-etileno, n-propileno o isopropileno y O(CH2)p o HN(CH2)p, donde p es 2 o 3, preferentemente 2.

Las combinaciones adecuadas de Y y X son por ejemplo las siguientes:

45 Para Y=S, X es 1,2-etileno, 1,2-propileno y 1,3-propileno, CH2CO, CH2COCH2, CH2CONR, CH2CONRCH2, CH2CONRCH2CH2, CH2CH2O, CH2CH2CONR, CH2CH2CONRCH2, CH2CH2NR, CH2CH2NRCO, CH2CH2NRSO2, CH2CH2NRCOO, CH2CH2OCH2, CH2SO2NR, CH2SO2NRCH2. CH2CH2OCONR, CH2CH=CH o CH2C:C; donde R en las expresiones anteriores es hidrógeno o metilo y que est�n enlazados con el grupo Y mediante un átomos

50 de carbono.

Las combinaciones especialmente preferidas de Y y X son SCH2CH2, SCH2CH2NH, SCH2CH2O, SCH2CH2CH2, SCH2CH2CH2NH y SCH2CH2CH2O.

55 En la fórmula I, Q es un resto de fórmula bien -V-A1-L-A2-W. Alternativamente, si X no representa un enlace, Q en la fórmula I puede también ser -NR6R7.

V puede ser un grupo divalente aromático o heteroc�clico, por ejemplo, uno de los grupos específicamente mencionados anteriormente.

60 En otro grupo preferido de compuestos de fórmula (I) o (I-A), el grupo V es un grupo divalente de fórmula donde

es un anillo de fenileno o un anillo heterocicloalif�tico o heteroarom�tico divalente saturado o insaturado de x miembros que contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 4 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre, y preferentemente oxígeno y nitrógeno, R8 y R9 se 10 han seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquiloxi C3-C7; cicloalquil C3-C7-alcoxi C1-C4, halógeno, grupos alquilo C1-C4 sustituidos con halógeno, grupos alcoxi C1-C4 sustituidos con halógeno, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, di-alquilamino (C1-C4), alquiltio C1-C4, mercapto, hidroxi, carbamo�lo, un grupo carboxilo, un grupo oxo; o de arilo o heterociclilo, que puede estar no sustituido o sustituido con uno o más de los sustituyentes anteriormente identificados diferentes de arilo o heterociclilo, o cuando

15 ambos sustituyentes R8 y R9 est�n ubicados en átomos de carbono adyacentes en el anillo estos dos

sustituyentes, tomados junto con dichos átomos de carbono adyacentes, también pueden formar un anillo aromático de 5 o 6 miembros o un anillo heterocicloalif�tico o heteroarom�tico saturado o insaturado de x miembros que contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 4 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre y preferentemente, oxígeno y nitrógeno, y donde V puede tener

20 conjuntamente de uno a cuatro sustituyentes del tipo definido para R8 y R9 y las valencias libres se pueden localizar bien en uno o bien en ambos anillos del grupo V.

Los significados de V especialmente preferidos incluyen:

30 W en la fórmula (I) o (I-A) pueden ser bien arilo o bien, preferentemente, heterociclilo, ambos, como se ha explicado anteriormente.

En una realización preferida de la fórmula (I) o (I-A), el resto W representa un grupo fórmula donde

es un anillo de fenilo o un anillo heteroalif�tico o heteroarom�tico saturado o insaturado de x miembros que contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 4 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre, y preferentemente oxígeno y nitrógeno, R10 y R11 se seleccionan 10 independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquiloxi C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxi C1-C4, halógeno, grupos alquilo C1-C4 sustituidos con halógeno, grupos alcoxi C1-C4 sustituidos con halógeno, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, di-alquilamino (C1-C4), alquiltio C1-C4, mercapto, hidroxi, carbamo�lo, un grupo carboxilo, y un grupo oxo; o cuando ambos sustituyentes R10 y R11 est�n ubicados en átomos

de carbono adyacentes en el anillo estos dos sustituyentes, tomados junto con dichos átomos de carbono

15 adyacentes, también pueden formar un anillo aromático de 5 o 6 miembros o un anillo heteroalif�tico o heteroarom�tico saturado o insaturado de x miembros que contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 3 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre y preferentemente, oxígeno y nitrógeno, donde W puede tener también de uno a cuatro sustituyentes del tipo definido para R10 y R11 y las valencias libres se pueden localizar bien en cualquiera de los anillos del grupo W.

20 Los ejemplos especialmente preferidos de W son los siguientes grupos:

En un grupo -V-A1-L-A2-W los grupos A1 y A2 son, por lo general, independientemente entre s� pueden estar bien ausente, o ser un grupo alquileno C1-C4. L se selecciona generalmente entre un enlace sencillo, -O-, -S-, -SO2-, -NH, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2)-, -HN(CO)NH-, -O(CO)NH- y -NH(CO)O-,

30 preferiblemente de -O-, -S-, -SO2-, -NH-, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2)-, -HN(CO)NH-, -O(CO)NH- y -NH(CO)O-, en dicho grupo, pero también puede estar ausente si A1 y/o A2 est�n presentes.

En ejemplos preferidos de los compuestos macr�lidos de acuerdo con la invención, A1 y A2 independientemente 35 entre s�, pueden estar bien ausente, o representar un grupo alquileno C1-C2; y L se selecciona entre -NH-, -(CO)NH- y -NH(CO)-; o est� ausente.

Son especialmente preferidos los compuestos de fórmula (I) y (I-A) donde A1, A2 independientemente entre s�, pueden estar bien ausente, o ser un grupo alquileno C1-C2; 40 L es -NH-, -(CO)NH- o -NH(CO)-; V es un grupo divalente de fórmula

y W es un grupo de fórmula

Tambi�n se prefieren los compuestos de fórmula (I) o (I-A), por ejemplo, los que se mencionan en el párrafo anterior,

10 donde Y es -S- y X es -CH2-CH2-CH2- o, preferentemente, -CH2-CH2-NH- o -CH2-CH2-O- unido al resto Q mediante el grupo NH o el átomo de O, respectivamente, o -CH2-CH2-, lo más preferiblemente -CH2-CH2-.

15 Si X no representa un enlace en la fórmula (I) o (I-A), entonces Q también puede ser NR6R7. En ese caso, R6, y R7se pueden seleccionar independientemente entre arilo, aralquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo, por ejemplo, como se ha explicado anteriormente, y uno de R6 y R7 también puede ser un grupo -L-A2-W; preferentemente -L-W, donde A2, L y W tienen uno de los significados mencionados anteriormente.

20 Los ejemplos preferidos de los correspondientes compuestos macr�lidos de acuerdo con la invención son compuesto de fórmula I donde Q es un grupo -NR6R7 y tiene una de las siguientes fórmulas

significa un resto metoxi.

Son especialmente preferidos los compuestos de fórmula (I), donde R12 y R13, tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, representan un grupo C=O y R14 es un grupo metilo.

Adicionalmente, se aplican las siguientes preferencias, también combinadas con otras preferencias descritas en el presente documento:

Cuando un grupo R2a est� presente en los compuestos de fórmula (I), este es preferentemente hidrógeno.

5 También se prefieren los compuestos de fórmula (I), donde R2 y R3, tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, representan un grupo C=O.

Tambi�n se prefieren los compuestos de fórmula (I), donde R2 y R4, tomados junto con el enlace entre los átomos 10 de carbono a los que est�n unidos, forman un enlace doble y los compuestos de fórmula (I), donde R4 es hidrógeno.

Otras realizaciones preferidas de los compuestos de fórmula (I) y fórmula (I-A) para su uso en la presente invención incluyen:

15 aquellos compuestos donde R13 es hidroxilo o aliloxilo; aquellos compuestos donde R12 y R13 tomados junto con el átomo de carbono al que est�n unidos, representan un grupo C=O, aquellos compuestos donde R14 representan hidrógeno o, preferentemente, metilo, en particular dichos compuestos donde OR14 en la posición 6 del anillo macr�lido representa metoxi.

20 De nuevo, dichas preferencias se pueden combinar con una o más de otras preferencias descritas en el presente documento.

Los ejemplos específicos de los compuestos para uso de acuerdo con la presente invención incluyen, por ejemplo, 25 un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas: Los siguientes compuestos representan nuevos ejemplos de los compuestos de acuerdo con la presente invención para uso específicamente en la prevención y/o el tratamiento del cáncer en animales o seres humanos:

5 Tal como ya se ha indicado anteriormente, los compuestos macr�lidos de fórmula (I) o fórmula (I-A) pueden, si se desea, estar también presentes y utilizarse como sales de adición de ácido farmac�uticamente aceptables. No se deben tener solo en cuenta las sales con ácidos inorgánicos, también aquellas con ácidos orgánicos. clorhidratos, bromhidratos, sulfatos, nitratos, citratos, acetatos, trifluoroacetatos, maleatos, succinatos, metanosulfonatos, ptoluenosulfonatos y similares son ejemplos de dichas sales.

10 Los compuestos de fórmula (I) y sus sales de adición de ácido farmac�uticamente aceptables o ésteres escindibles in vivo pueden, de acuerdo con la presente invención, por ejemplo, utilizarse en la prevención y/o el tratamiento de enfermedades tales como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), asma, artritis reumatoide, dermatitis at�pica o enfermedad inflamatoria del intestino, o en la prevención y/o tratamiento de enfermedades tales como bronquitis crónica, enfisema, urticaria, rinitis alérgica, conjuntivitis alérgica, psoriasis, choque séptico, síndrome de estr�s respiratorio en el adulto y esclerosis múltiple.

5 Ambos, tanto los compuestos de fórmula (1) como los compuestos de fórmula (I-A) se pueden utilizar adicionalmente en la presente invención para la prevención y/o tratamiento del cáncer.

Los sujetos adecuados para su tratamiento de acuerdo con la invención son, en principio, animales, en particular mamíferos, y seres humanos. Es preferido el uso para seres humanos.

Los compuestos de fórmula (I) y formula (I-A) pueden, de acuerdo con la invención, utilizarse también como medicamento en forma de una composición farmacéutica que comprende uno o más de dichos compuestos junto con un portador farmac�uticamente aceptable. Los compuestos de fórmula (I) y (I-A) tienen buenas propiedades de

15 absorción por vía oral.

Una realización adicional de la presente invención es, por tanto, composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I) o una de sus realizaciones preferidas descritas anteriormente o una de sus sales de adición de ácido farmac�uticamente aceptable o uno de sus N-óxidos y un portador farmac�uticamente aceptable para su uso en un método para la prevención y/o tratamiento de trastornos y/o enfermedades en un sujeto seleccionado entre un animal o un humano, donde dicho método est� basado en una inhibición de las fosfodiesterasas, en particular de la fosfodiesterasa 4 en dicho sujeto;

• para su uso en la prevención y/o el tratamiento del cáncer, en seres humanos; especialmente 25 • para su uso en el tratamiento del cáncer.

Otra realización específica de la presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula (I-A) o una de sus realizaciones preferidas descrita anteriormente o una de sus sales de adición de ácido farmac�uticamente aceptables, o uno de sus N-óxidos y un portador farmac�uticamente aceptable para la prevención y/o el tratamiento del cáncer.

Las composiciones farmacéuticas y los productos de acuerdo con la invención se pueden administrar, por ejemplo, por vía peroral, tal como en forma de comprimidos, comprimidos con revestimiento de película, comprimidos con revestimiento de azúcar, cápsulas duras y blandas, disoluciones, emulsiones o suspensiones, o por vía rectal, tal

35 como en forma de supositorios, o por vía parenteral por ejemplo, mediante inyección, o por vía nasal, o mediante inhalaci�n o por vía transd�rmica, o de forma local, por ejemplo mediante administración típica, preferentemente los compuestos se administran por vía típica o por vía oral.

Las composiciones farmacéuticas que contienen estos productos se pueden preparar usando procedimientos convencionales familiares para los expertos en la materia, tales como combinar los ingredientes en una forma farmacéutica junto con materiales portadores sólidos o líquidos adecuados, no tóxicos, inertes y terapéuticamente compatibles y, si se desea, los adyuvantes farmacéuticos habituales.

Aunque os compuestos de fórmula (I) o fórmula (I-A) pueden, en principio, utilizarse como tales de acuerdo con la

45 invención, se prefiere incorporar los compuestos a composiciones específicas adecuadas para la ruta de administración prevista, es decir, en formas farmacéuticas orales, parenterales o típicas adecuadas conocidos de los expertos en la materia o que se pueden desarrollar con las técnicas habituales. Estas composiciones farmacéuticas pueden contener, como ingredientes opcionales, cualquiera de los diferentes adyuvantes utilizados habitualmente en la producción de preparaciones farmacéuticas.

De esta manera, por ejemplo, para formular las presentes composiciones como formas farmacéuticas orales, se pueden utilizar, como ingredientes opcionales, cargas, tales como celulosa microcristalina, fosfato de calcio o lactosa; agentes desintegrantes, tal como almidón, carboximetilcelulosa sádica reticulada o polivinilpirrolidona reticulada; y agentes lubricantes, tales como talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, y similares. Deber�

55 entenderse en su totalidad, sin embargo, que los ingredientes opcionales citados en el presente documento se proporcionan solamente de forma ilustrativa, y la invención no se restringe al uso de los mismos. Otros de estos adyuvantes, que son bien conocidos en la materia, se pueden utilizar para llevar a cabo la presente invención.

Como materiales portadores no son adecuados solamente los materiales inorgánicos, también lo son los materiales orgánicos. De esta manera, para comprimidos, comprimidos con revestimiento de película, comprimidos con revestimiento de azúcar y cápsulas, se puede utilizar, por ejemplo, lactosa, almidón de maíz o sus derivados, talco, ácido esteárico o sus sales. Los vehículos adecuados para cápsulas blandas son, por ejemplo, aceites vegetales, ceras, grasas y polioles semis�lidos y líquidos (dependiendo de la naturaleza del principio activo). Los materiales portadores adecuados para la preparación de disoluciones y jarabes son, por ejemplo, agua, alcoholes, polioles,

65 sacarosa, invertasa y glucosa. Los materiales portadores adecuados para supositorios son, por ejemplo, aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas y polioles semil�quidos o líquidos.

Como adyuvantes farmacéuticos, se contemplan aquí los habituales conservantes, solubilizantes, estabilizantes, agentes humectantes, emulsionantes, edulcorantes, colorantes, agentes aromatizantes, sales para ajustar la presión osm�tica, tampones, agentes de revestimiento y antioxidantes.

5 Los compuestos de fórmula (I) o (I-A) y sus sales de adición de ácido, o N-óxidos también se pueden utilizar para administración parenteral. Con dicho fin, en particular para su preparación para inyección, los compuestos se utilizan en forma de liofilizados o polvos secos para su dilución junto con los agentes habituales, tales como agua o suero salino isot�nico normal.

10 Los compuestos de fórmula (I) o (I-A) y sus sales de adición de ácido, o N-óxidos también se pueden utilizar para administración típica y, con este fin, se utilizan preferentemente en forma de preparaciones típicas como pomadas, cremas o geles.

De acuerdo con ello, el uso de un compuesto de fórmula (I) o sus sales de adición de ácido, o N-óxidos para la

15 fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno o enfermedad que se pueda mejorar mediante la inhibición de las fosfodiesterasas humanas, especialmente la fosfodiesterasa 4 humada y para la fabricación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento del cáncer en un sujeto seleccionado entre un animal y un ser humano, as� como el uso de un compuesto de fórmula (I-A) o sus sales de adición de ácido, o N-óxido para la fabricación de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento del cáncer, en un sujeto seleccionado entre un

20 animal y un ser humano son aspectos adicionales de la presente invención.

Para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades inflamatorias, alérgicas o el cáncer en mamíferos, en particular en seres humanos, una dosificación diaria de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 2000 mg, especialmente de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 1000 mg, es lo habitual, y los expertos en la materia

25 apreciarán que la dosificación depender�, entre otros parámetros conocidos, también de la edad, tipo y peso, y estado de salud del mamífero, y el tipo de enfermedad a prevenir o tratar. La dosis diaria se puede administrar en una dosis única o se puede dividir en dosis múltiples. Una dosis única promedio de aproximadamente 10 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg y 1000 mg se pueden contemplar como adecuados en general.

30 Los compuestos de fórmula (I-A) utilizados de acuerdo con la invención se pueden preparar partiendo de eritromicina A, claritromicina, o cualquier otra 6-O-alquil-eritromicina A, 6-O-alquenil-eritromicina A o 6-O-quinil-eritromicina A. La preparación de los compuestos de fórmula II, III y IV donde Rp1 y Rp2 son H, acetilo, benzoilo o cualquier otro grupo adecuado protector de hidroxilo se puede preparar por métodos bien conocidos en la técnica (Esquema 1).

Esquema 1

Para obtener compuestos de fórmula II donde Rp1 y Rp2 son tal como se han definido anteriormente, los grupos 2’hidroxilo y 4"-hidroxilo del macr�lido de partida se pueden protegen tanto secuencialmente como simultáneamente con un anh�drido de ácido o un cloruro de ácido adecuado como se describe en, por ejemplo, Baker y col., J.Org.

Chem. 1988,53,2340-2345 y en Kashimura y col., J. Antibiotics, 2001,54,664-678. Los compuestos de fórmula II pueden, por ejemplo, transformarse a continuación en los compuestos de fórmula IV de forma similar a la descrita en Baker y col., J.Org. Chem. 1988,53,2340-2345.

5 El grupo hidroxi en la posición 12 de los compuestos de fórmula IV se esterifica por tratamiento con ácido 2cloroac�tico, un agente activante tal como DCC y DMAP o con anh�drido del ácido 2-cloroac�tico, piridina, DMAP en un disolvente clorado tal como cloruro de metileno. El intermedio V se trata a continuación con el nucle�filo adecuado Q-X-SH en acetona en presencia de una base tal como DBU para dar compuestos de fórmula VI donde R1, Rp1, y Rp2 son como se han definido anteriormente. Dependiendo de la naturaleza de R1, los compuestos de

10 fórmula VI también se pueden sintetizar por reacción de un compuesto de fórmula IV con un ácido carbox�lico adecuado (R1CH2COOH), un agente activante tal como DCC y DMAP en un disolvente adecuado tal como cloruro de metileno para dar compuestos de fórmula VI. Los compuestos de fórmula VI se tratan con una base de metal alcalino tal como NaH o terc-but�xido de potasio o LDA en un disolvente apr�tico tal como DMF o THF para dar compuestos de fórmula VII (Esquema 1).

15 Los compuestos de fórmula VII donde R1, Rp1 y Rp2 son como se han definido anteriormente se desprotegen en la posición 2' con metanol a temperaturas comprendidas entre 20�C y 60�C durante 2-5 días para dar compuestos de fórmula VIII (esquema 2). El grupo 4"-hidroxilo se desprotege mediante el tratamiento del compuesto con DBU en metanol a temperatura de reflujo durante de 3 a 12 horas (J. Antibiotics, 2001,54(8), 664) o por tratamiento con

20 guanidinia/nitrato de guanidinio en metano/diclorometano (Tetrahedron Letters 1997,38(9), 1627) o con carbonato de potasio en metanol, o con una mezcla de MeONa en metanol, preferentemente con DBU en metanol a temperatura de reflujo durante de 5 a 7 horas para dar compuestos de fórmula Ia.

Alternativamente, los compuestos de fórmula VII se pueden desproteger simultáneamente en la posición 2' y 4"

25 usando uno de los métodos descritos anteriormente para la desprotecci�n del grupo 4"-hidroxilo para dar los compuestos de fórmula Ia (Esquema 2).

Esquema 2

tamices moleculares en el derivado de disulfuro IX donde Rp1 y Rp2 son como se han definido anteriormente y Rp4 es por ejemplo, 3-nitro-2-piridinilo o metilo, análogamente al método descrito en el documento WO03/072588.

Los compuestos de fórmula IX se tratan con un agente reductor tal como trialquilfosfina, preferentemente

5 tributilfosfina, o triarilfosfina, preferentemente trifenilfosfina, en un disolvente tal como acetona acuosa, dimetil formamida acuosa, dioxano acuoso o tetrahidrofurano acuoso, preferentemente dimetil formamida acuosa, preferentemente de 0�C a 60�C, durante de 1 minuto a 1 hora, para dar el compuesto X. El compuesto X se trata, preferentemente sin aislamiento, directamente en el mismo sistema disolvente con compuestos de fórmula Q-X-Lg, donde Q y X se han definido como antes y Lg es un grupo saliente, por ejemplo, cloruro, bromuro, yoduro,

10 metanosulfoniloxi, p-tosilsulfoniloxi, trifluormetanosulfoniloxi o un grupo vinilo en el caso en que X representa un grupo carbonilo o un grupo sulfonilo para dar los compuestos VII. La reacción se lleva a cabo preferentemente en presencia de una base tal como tal como un carbonato de metal alcalino o un carbonato de hidrógeno, por ejemplo, carbonato de potasio, carbonato de cesio o hidrogenocarbonato de sodio, o una base orgánica, por ejemplo, trietilamina, N-etil N, N-diiso-propilamina, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno o 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno,

15 preferentemente 1,8-diazabiciclo-lo[5.4.0]undec-7-eno a una temperatura entre 0�C y 50�C. Puede ser ventajoso añadir cantidades catalíticas de una sal de yoduro, preferentemente yoduro de sodio, a la mezcla de reacción (Esquema 3).

Alternativamente, los compuestos de fórmula I-A, donde R2 y R3 tomados conjuntamente forman un grupo C=O y R4 tiene el significado anterior y R1 es un resto -Y-X-Q, donde X y Q tienen el mismo significado que se ha descrito 25 anteriormente y Y es S; también se puede preparar mediante

a) conversión de un compuesto macr�lido que tiene la fórmula

de una manera conocida per se en un compuesto de fórmula IV, por ejemplo, como se ha descrito anteriormente

con respecto al Esquema 1

5 donde cada uno de Rp1 y Rp2 son un grupo protector de hidroxilo y R4 es tal como se ha definido anteriormente,

b1) convertir dicho compuesto de fórmula IV en presencia de un derivado de ácido cloroac�tico activado, tal como por ejemplo, anh�drido de di(ácido cloroac�tico), de una manera conocida per se en un compuesto de

10 donde Rp1 y Rp2 y R4 tienen los significados anteriores; b2) hacer reaccionar posteriormente dicho compuesto de fórmula V con un compuesto de fórmula 15 MS-X-Q, donde M representa un átomo de metal alcalino y X y Q tienen el significado descrito anteriormente, para formar un compuesto de un compuesto de fórmula VI

c) reaccionar dicho compuesto de fórmula VI en un disolvente apr�tico con una base de metal alcalino para formar un compuesto de fórmula VII

dondeR1 y Rp1 y Rp2 y R4 tienen los significados anteriores, y

10 eliminando los grupos protectores de hidroxilo Rp1 y Rp2 de manera simultánea o consecutiva para formar el compuesto de fórmula I-A.

Estos compuestos se pueden convertir, si se desea, de una manera conocida por s� misma, por ejemplo, como se

15 indica el Esquema 5 a un compuesto de fórmula I donde R12 es hidrógeno y R13 se selecciona entre hidroxilo u -O(grupo alif�tico), representando dicho grupo alif�tico un grupo alif�tico saturado o insaturado con de 1 a 6 átomos de carbono.

Los compuestos de fórmula Ic pueden por ejemplo, prepararse por tratamiento de compuestos de fórmula Ib

20 (compuesto de fórmula I donde Y=S) con de 2 a 2,5 equivalentes de ácido 3-cloroperoxibenzoico (mCPBA) y de 4 a 5 equivalentes de NaHCO3 en un disolvente tal como cloruro de metileno a temperaturas comprendidas entre 0�C y temperatura ambiente, preferentemente a 0�C durante de 1 hora a 3 horas. El N-óxido que se forma en el grupo dimetilamino del resto azúcar durante la reacción se reduce durante la elaboración por tratamiento de la fase orgánica con una disolución acuosa de pirosulfito sádico a temperatura ambiente durante 5 minutos a 24 horas para

25 obtener los compuestos deseados de fórmula Ic como una mezcla de diastereois�meros. Alternativamente, si es adecuado, el N-óxido se reduce por hidrogenación catalítica según procedimientos normalizados. Los compuestos de fórmula Ic se pueden oxidar adicionalmente como se ha descrito anteriormente pero a temperatura ambiente durante de 1 a 48 horas para dar, después de la reducción del N-óxido, compuestos de fórmula Id. Los compuestos Id también se pueden obtener en una etapa a partir de compuestos de fórmula Ib usando de 3,5 a 10 equivalentes

30 del agente oxidante y de 7 a 20 equivalentes de NaHCO3 a temperaturas comprendidas entre 0�C y temperatura ambiente durante de 5 a 48 horas seguido de procedimiento del procedimiento de elaboración anteriormente descrito (esquema 4).

En el caso en que Q est� adicionalmente sustituido con sustituyentes sensibles a la oxidación tales como grupos

35 amino, estos sustituyentes podrían necesitar protección antes de someter el sulfuro a oxidación. Los grupos protectores adecuados habitualmente conocidos en la técnica se pueden introducir de acuerdo con los procedimientos normalizados descritos en T. W. Green y col., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999. Después de la oxidación, el grupo protector se puede eliminar siguiendo procedimientos normalizados también descritos T. W. Green y col.

Esquema 4 Esquema 5

Los compuestos de fórmula XI por ejemplo, se pueden preparar por tratamiento de los compuestos de fórmula VII

5 con un agente reductor tal como NaBH4 en un disolvente tal como metanol, etanol, isopropanol, THF, THF/agua o dietil éter a temperaturas comprendidas entre 0�C y temperatura ambiente, durante de 1 hora a 24 horas. Los compuestos de fórmula XI se desprotegen a continuación como se ha descrito anteriormente. para obtener compuestos de fórmula Ie. Alternativamente, Los compuestos de fórmula Ie también se pueden preparar partiendo de compuestos de fórmula Ia siguiendo el método descrito para la reducción de los compuestos de fórmula VII. En el

10 caso en que Rp1 sea acetilo, el grupo protector podría eliminarse parcialmente durante la reducción en un disolvente tal como metanol, lo que requiere volver a proteger el grupo 2’-hidroxi antes de alquilar el grupo hidroxi recientemente formado.

El grupo hidroxilo del compuesto de fórmula XI se alquila siguiendo procedimientos convencionales conocidos para la alquilaci�n de grupo hidroxilo para dar compuestos de fórmula XII. En el caso en que Q est� sustituido adicionalmente con sustituyentes que se alquilan en las condiciones utilizadas para la transformación de XI en XII, estos sustituyentes podrían necesitar protección antes de someter el compuesto XI a alquilaci�n. Los grupos

5 protectores adecuados habitualmente conocidos en la técnica se pueden introducir de acuerdo con los procedimientos normalizados descritos en T. W. Green y col., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999. Después de la alquilaci�n, el grupo protector se puede eliminar siguiendo procedimientos normalizados también descritos T. W. Green y col. Los compuestos de fórmula XII se desprotegen siguiendo procedimientos descritos anteriormente. para obtener compuestos de fórmula If.

10 Los compuestos XII-1 (Esquema 6) para su uso en la presente invención pueden, por ejemplo, obtenerse a partir de compuestos XII (véase el Esquema 5) mediante escisión selectiva del resto cladinosa de los compuestos de fórmula VII o XII por métodos conocidos en la materia, por ejemplo, por reacción de dichos compuestos con HCl de 1 a 5% en un disolvente alcohólico tal como metanol o etanol o en agua o en una mezcla de los anteriores durante de 12 a

15 72 horas a temperaturas preferentemente desde menos 15�C a 40�C como se describe por ejemplo, en el documento WO 02/16380.

Esquema 6

La preparación de los compuestos de fórmula (I) donde R2 y R4 tomados juntos forman un doble enlace, R3 es hidrógeno y R1 y R14 son como se han definido anteriormente (compuestos Ig) se lleva a cabo según el Esquema 7.

Esquema 7

Los compuestos de fórmula Ig pueden prepararse, por ejemplo, partiendo de compuestos de fórmula XIII donde Rp1 es acetilo, benzoilo o similares, y Ra es metilo, trifluorometilo o metilfenilo. La preparación del compuesto de fórmula XIII donde Rp1 es acetilo y Ra es metilo se describe, por ejemplo, en J. Med. Chem. 1998,41,1651. El compuesto de fórmula XIII se trata con una base tal como hidruro de sodio o DBU en un disolvente tal como acetona, tolueno, DMF

o THF o una mezcla de los anteriores a entre 0�C y 50�C para obtener el compuesto de fórmula XIV. El compuesto de fórmula XIV se esterifica por tratamiento con ácido 2-cloroac�tico, un agente activante tal como DCC y DMAP o 5 con anh�drido del ácido 2-cloroac�tico, piridina, DMAP en un disolvente tal como diclorometano, cloroformo o tetrahidrofurano, preferentemente diclorometano para obtener un compuesto de fórmula XV. El intermedio XV se trata a continuación con el nucle�filo adecuado Q-X-SH donde Q y X son tal como se ha definido anteriormente en acetona en presencia de una base tal como DBU para dar compuestos de fórmula XVI. Dependiendo de la naturaleza de R1, los compuestos de fórmula XVI también se pueden sintetizar por reacción de un compuesto de 10 fórmula XIV con un ácido carbox�lico adecuado (R1CH2COOH), un agente activante tal como DCC y DMAP en un disolvente adecuado tal como cloruro de metileno para dar compuestos de fórmula XVI. Los compuestos de fórmula XVI se tratan con una base de metal alcalino tal como NaH o terc-but�xido de potasio o LDA en un disolvente apr�tico tal como DMF o THF para dar compuestos de fórmula XVII. Los compuestos de fórmula XVII donde Rp1 es tal como se ha definido anteriormente se desprotegen con metanol a temperaturas comprendidas entre 20�C y 60�C

15 durante 2-5 días o por tratamiento del compuesto con DBU en metanol a temperatura de reflujo durante de 3 a 12 horas (J. Antibiotics, 2001,54(8), 664) o por tratamiento con guanidinia/nitrato de guanidinio en metanol/diclorometano (Tetrahedron Letters 1997,38(9), 1627) o con carbonato de potasio en metanol, o con una mezcla de MeONa en metanol, preferentemente con metanol durante 2-5 días a 20-50�C para obtener compuestos de fórmula Ig.

20 La preparación de los compuestos de fórmula I donde R2 y R3, tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, forman un grupo C=O, R4 es hidrógeno y R1 es tal como se ha definido anteriormente (Compuestos Ih) y de los compuestos de fórmula I donde R2 es -OH y R3 y R4 son hidrógeno y R1 es tal como se ha definido anteriormente (Compuestos Ii) se lleva a cabo según el Esquema 8. La síntesis de los compuestos de la fórmula

25 general XVIII se ha descrito, por ejemplo, en los documentos WO 03/072588 y WO2006/084410. Los compuestos de fórmula XIX se pueden obtener por tratamiento de los compuestos de fórmula XVII con HCl de 1 a 5% en un disolvente alcohólico por ejemplo metanol o etanol, o en agua o una mezcla de los anteriores a una temperatura comprendida entre 0�C y 30�C. Los compuestos de fórmula Ih se obtienen a partir de compuestos de fórmula XIX por los mismos métodos que se han descrito anteriormente para la preparación de compuestos de fórmula Ig a partir

30 de compuestos de fórmula XVII.

Esquema 8

La oxidación de los compuestos XIX se lleva a cabo con EDC*HCl, DMSO y trifluoroacetato de piridinio en un

5 disolvente clorado tal como cloruro de metileno o utilizando 1,1, 1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benciodoxol-3-(1H)-ona (reactivo de Dess-Martin) en un disolvente clorado tal como cloruro de metileno o utilizando N-clorosuccinimida y dimetilsulfuro en un disolvente adecuado tal como cloruro de metileno para obtener compuestos de fórmula XX. Los compuestos de fórmula Ii se obtienen a partir de compuestos de fórmula XX por los mismos métodos que se han descrito anteriormente para la preparación de compuestos de fórmula Ig a partir de compuestos de fórmula XVII.

10 Alternativamente, los compuestos de fórmula Ii se pueden obtener partiendo del compuesto XXIII de acuerdo con los procedimientos descritos en el Esquema 7. La síntesis del compuesto de fórmula XXIII se describe en J. Med. Chem. 1998,41,4080.

Esquema 9

Los compuestos de fórmula Ik se pueden obtener haciendo reaccionar el compuesto XIX con cloruro de 2-acetilo,

5 anh�drido de ácido 2-cloroac�tico o ácido 2-cloroac�tico de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia para esterificar grupos hidroxilo para obtener los compuestos de formula XXIV (Rb = CH2Cl). Este compuesto se hace reaccionar a continuación con un nucle�filo adecuado tal como por ejemplo dimetilamina o morfolina seguido de una desprotecci�n como se ha descrito anteriormente. para obtener compuestos de fórmula Ie (Esquema 9). Los compuestos de fórmula Im se obtienen de manera similar haciendo reaccionar el compuesto XIX con cloruro de

10 acrilo�lo de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia para obtener el compuesto XXIV donde Rb es CH=CH2 seguido por tratamiento con el nucle�filo adecuado.

Cuando R1 es S-Rp3 (Esquema 10) y Rp3 es un grupo protector de azufre por ejemplo, bencilo, 4-metoxibencilo, 3,4dimetoxibencilo o 4-nitro-bencilo, preferentemente 4-metoxibencilo, el intermedio XXVII se transforma en su derivado 15 de disulfuro XXVIII donde R2-R4, R14 y Rp1 son como se han definido anteriormente y Rp4 es por ejemplo, 3-nitro-2piridinilo o metilo de forma análoga al método descrito en el documento WO03/0725888 o en el documento WO2006084410. Los compuestos de fórmula XXVIII se tratan con un agente reductor tal como trialquilfosfina, preferentemente tributilfosfina, o triarilfosfina, preferentemente trifenilfosfina, en un disolvente tal como acetona acuosa, dimetil formamida acuosa, dioxano acuoso o tetrahidrofurano acuoso, preferentemente dimetil formamida 20 acuosa, de 0�C a 60�C, durante de 1 minuto a 1 hora, para obtener el compuesto XXIX. El compuesto XXIX se trata, preferentemente sin aislamiento, directamente en el mismo sistema disolvente con compuestos de fórmula Q-X-Lg, donde Q y X son como se han definido anteriormente y Lg es un grupo saliente, por ejemplo, cloruro, bromuro, yoduro, metanosulfoniloxi, p-tosilsulfoniloxi, trifluormetetanosulfoniloxi para obtener compuestos de fórmula XXX que se pueden desproteger de acuerdo con los métodos descritos anteriormente para obtener compuestos de fórmula I 25 con Y=S. La reacción se lleva a cabo preferentemente en presencia de una base tal como tal como un carbonato de metal alcalino o un carbonato de hidrógeno, por ejemplo, carbonato de potasio, carbonato de cesio o hidrogenocarbonato de sodio, o una base orgánica, por ejemplo, trietilamina, N-etil N, N-diisopropilamina, 1,8diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno o 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno, preferentemente 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7eno a una temperatura entre 0�C y 50�C, preferentemente a 20�C. Puede ser ventajoso añadir cantidades catalíticas 30 de una sal de yoduro, preferentemente yoduro de sodio, a la mezcla de reacción. Si es necesario, los grupos protectores se eliminan de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia tal como se describe, por ejemplo, en

T. W. Green y col., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999.

Para R1 = S-Rp3

Esquema 10

5 Los compuestos de fórmula XXXI pueden por ejemplo, prepararse por tratamiento de compuestos de fórmula XXX (compuesto de fórmula I donde Y=S) con de 2 a 2,5 equivalentes de ácido 3-cloroperoxibenzoico (mCPBA) y de 4 a 5 equivalentes de NaHCO3 en un disolvente tal como cloruro de metileno a temperaturas comprendidas entre 0�C y temperatura ambiente, preferentemente a 0�C durante de 1 hora a 3 horas. El N-óxido que se forma en el grupo dimetilamino del resto azúcar durante la reacción se reduce durante la elaboración por tratamiento de la fase

10 orgánica con una disolución acuosa de pirosulfito sádico a temperatura ambiente durante 5 minutos a 24 horas para obtener los compuestos deseados de fórmula XXXI. Alternativamente, si es adecuado, el N-óxido se reduce por hidrogenación catalítica según procedimientos normalizados. Los compuestos de fórmula XXXI se pueden oxidar adicionalmente como se ha descrito anteriormente pero a temperatura ambiente durante de 1 a 48 horas para dar, después de la reducción del N-óxido, compuestos de fórmula Id. Los compuestos Ir también se pueden obtener en

15 una etapa a partir de compuestos de fórmula XXII usando de 3,5 a 10 equivalentes del agente oxidante y de 7 a 20 equivalentes de NaHCO3 a temperaturas comprendidas entre 0�C y temperatura ambiente durante de 5 a 48 horas seguido de procedimiento del procedimiento de elaboración anteriormente descrito (Esquema 11).

20 amino, estos sustituyentes podrían necesitar protección antes de someter el sulfuro a oxidación. Los grupos protectores adecuados habitualmente conocidos en la técnica se pueden introducir de acuerdo con los procedimientos normalizados descritos en T. W. Green y col., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999. Después de la oxidación, el grupo protector se puede eliminar siguiendo procedimientos normalizados también descritos T. W. Green y col.

25 En determinados casos puede ser necesario proteger grupos funcionales en R1 y/o R14 con grupos protectores. Los grupos protectores adecuados habitualmente conocidos en la técnica se pueden introducir de acuerdo con los

5 procedimientos normalizados descritos en T. W. Green y col., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999. Si los compuestos de fórmula I o fórmula XXI llevan grupos protectores en R1, una etapa de desprotecci�n de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia tal como se describe, por ejemplo, en T. W. Green y col., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1999 ser� necesaria para obtener el compuesto final.

10 Se entiende adicionalmente que R1 en los compuestos de, ejemplo, la fórmula I o I-A, y de compuestos intermedios tales como los mencionados anteriormente, se puede modificar adicionalmente. Por ejemplo, se puede hidrolizar un grupo éster y el ácido resultante se puede acoplar con una amina para formar una amida de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia.

15 Se proporcionan los siguientes ejemplos para ilustrar la invención adicionalmente.

A. Ejemplos

20 Notas generales: Los espectros MS se miden usando (A) un sistema Micromass Waters ZQ con el programa inform�tico Masslynx y (B) usando un instrumento Q-Tof-Ultima (Waters AG) equipado con Waters Cap-LC. Para una determinación precisa de la masa, se utiliza una fuente ESI nano lock mass. Las masas se proporcionan con una precisión de cuatro dígitos. HPLC analítica: Sistema Aa: columna: Inertsil ODS-3V, 5 !m, 250x4 mm; caudal: 1,0 ml/min; detección: 254 nm; fase móvil A: agua; fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 0-5min constante acetonitrilo al

25 5%; 5-25 min lineal con acetonitrilo desde 5% hasta 95%. Sistema Ba: Instrumento: Varian Prostar 210; columna: Inertsil ODS-3V, 5 !m, 250x4 mm; caudal: 1,0 ml/min; detección: 254 nm; temp. columna: 35�C; fase móvil A: agua + HCOOH al 0,1%; fase móvil B: acetonitrilo + HCOOH al 0,1%; gradiente: 0-5min constante B al 5%; 5-20 min lineal con B desde 5% hasta 95%. Sistema Ca: columna: Agilent ZORBAX Eclipse plus C18,5mm, 250x4,6mm; caudal: 1,0 ml/min; detección: 220 nm; fase móvil A: agua/acetonitrilo/TFA 98,9/1/0,1 (v/v/v); fase móvil B: agua/acetonitrilo/TFA

30 1/98,9/0,1 (v/v/v); gradiente: 0-5 min constante B al 0%; 5-45 min lineal con B desde 0% hasta 100%; 45-55 min 100%

B. La purificación mediante HPLC preparativa de los productos finales se lleva a cabo con los siguientes sistemas: Sistema Ap: Columna: YMC ODS-AQ, 120A, 5 !m, 50 x 20mm; precolumna: YMC ODS-AQ, 120A, 5 !m, 10 x 20mm; caudal: 30 ml/min; inyección; 500 ml; detección: ELSD; fase móvil A: agua + HCOOH al 0,1%; fase móvil B: 35 acetonitrilo; gradiente: lineal con acetonitrilo 10 a 95% en 4 min. Sistema Bp: Columna: Purospher STAR RP18e, 5 !m, flujo 125 x 25 mm: 25 ml/min; detección: 254 nm; fase móvil A: agua formiato de amonio 25 mM; fase móvil B: metanol; gradiente: lineal con metanol de 60% 90% en 10 min. Sistema Cp: Columna: Purospher STAR RP18e, 5 !m, flujo 125 x 25 mm: 25 ml/min; detección: 254 nm; fase móvil A: agua formiato de amonio 25 mM; fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: lineal con acetonitrilo de 20% 50% en 10 min. Abreviaturas: HPLC para cromatograf�a líquida

40 de alto rendimiento; DMSO para dimetilsulf�xido; DBU para diazabicicloundecano; DCM para diclorometano; DIPEA para diisopropiletilamina (base de Huenig); DMF para dimetilformamida; THF para tetrahidrofurano; DCC para diciclohexilcarbodiimida; DMAP para 4-dimetilaminopiridina; EDC�HCl para clorhidrato N-(3-dimetilaminopropil)-N’etilcarbodiimida; HOBt para 1-hidroxi-benzotriazol; HATU para 2-(1H-Azabenzotriazol-1-il)-1,1, hexafluorofosfato de 3,3-tetrametiluronio; mCPBA para ácido m-cloroperbenzoico; KOtBu para terc.-butilato de potasio; TBDMSC1 para dimetilsililcloruro de terc-butilo, TBAF para fluoruro de tetrabutilamonio, MS para espectrometr�a de masas; RMN para resonancia magnética nuclear; ESI para ionizaci�n por electropulverizaci�n.

Ejemplo

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Ejemplo 1

5 Preparación de I-1, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[6-Amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de 2-(6-amino-8-bromo-purin-9-il)etanol

10 A una disolución de 10 g de 2-(6-amino-purin-9-il)etanol en 200 ml de tampón AcONa/AcOH 0,5 M pH 4 se añadieron 4 ml de Br2. La mezcla resultante se agit� a temperatura ambiente durante 8 horas. El producto precipitado se aisl�, se lav� con agua y se cristaliz� en etanol para obtener 6,13 g (43%) del compuesto deseado.

B] Preparación de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etinil)-purin-9-il)etanol

15 A una disolución de 258 mg of 2-(6-amino-8-bromo-purin-9-il)etanol en una mezcla de Et3N y DMF se añadieron, bajo atmósfera de argón, 35 mg de Pd(PPh)3Cl2, 19 mg de CuI y 150 mg de 3-etinilpiridina. La mezcla se agit� bajo una atmósfera de argón a 60�C durante 3 horas y durante toda la noche a temperatura ambiente. El precipitado se aisl�, se lav� con agua y etanol caliente y se secó para obtener 150 mg (53%) del producto deseado.

20 C] Preparación de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il)etanol

A una suspensión de 1,1 g de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etinil)-purin-9-il)etanol en 400 ml de metanol se añadieron 2,0 g de níquel Raney y la mezcla se hidrogen� (4 atm, 405 kPa) a 80�C durante 6 horas. Tras completar la

25 reacción, el catalizador se elimin� y el disolvente se evapor�. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en gel de sílice (CHCl3:MeOH 9:1) para obtener 0,45 g (41%) del producto deseado.

D] Preparación de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(2-piridin-3-il-etil)-purina

30 0,45 g de 2-(6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il)etanol se enfriaron a -20�C y se añadieron 6 ml de SOCl2. La temperatura se aument� gradualmente hasta 50�C y la mezcla se agit� a dicha temperatura durante 12 horas. El exceso de SOCl2 se evapor� y el residuo se captur� en diclorometano, se lav� con una disolución acuosa saturada de NaHCO3, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (CHCl3:MeOH 50:1) para obtener 40 mg (8%) del producto deseado.

35 RMN 1H (DMSO-d6): 8,65 (s, 1H); 8,4 (s, 1H); 8,1 (s, 1H); 7,75 (d, 1H); 7,30 (m, 1H); 6,95 (s, 2H, -NH2); 4,45 (t, 2H); 4,0 (t, 2H).

E] Preparación del compuesto de fórmula II donde Rp1 y Rp2 son acetilo y R14 es metilo (II-1)

40 A una disolución de 25 g (33,4 mmol) de claritromicina y 1,63 g (13,4 mmol) de DMAP en 50 ml de DCM se añadieron 11 ml (117 mmol) de anh�drido acético en una porción, y la mezcla se agit� durante 20 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en suficiente cantidad de NaOH 0,2 N para obtener un valor de pH 8-9 y a continuación se extrajo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se sec�n con MgSO4 y se evapor� a presión reducida. El producto bruto se cristaliz� en acetato de etilo caliente para obtener 24,3 g (87%)

45 de cristales incoloros. MS(ESI): 832,5 [MH]+ F] Preparación del compuesto de fórmula III donde Rp1 y Rp2 son acetilo y R14 es metilo (III-1)

24,3 g (29,2 mmol) de 2’, 4"-di-O-acetil-6-O-metileritromicina A (II-1) se disolvieron en 500 ml de THF a -45�C bajo atmósfera de argón y se trat� gota a gota con 29,2 ml de una disolución 1 M de bis(trimetilsilil)amida sádica en

5 tetrahidrofurano (29,2 mmol) durante 15 min. Después de 20 min. a -45�C se añadieron 16,24 g (100,1 mmol) de carbonildiimidazol en tres partes durante 5 min. La mezcla de reacción se agit� a -45�C durante 30 min, y a continuación se calentó a 0�C durante un periodo de 15 min y se mantuvo a 0�C durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se trat� con una disolución acuosa saturada de NaHCO3 y agua (1:1) y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron dos veces con una disolución acuosa de amoniaco al 10 %, con salmuera, se secaron con sulfato de sodio y se evaporaron a presión reducida para conseguir 23,57 g (94%) de un sólido incoloro. MS(ESI): 858,6 [MH]+.

G] Preparación del compuesto de fórmula IV donde Rp1 y Rp2 son acetilo y R14 es metilo (IV-1)

15 23,5 g (27.47 mmol) de compuesto III-1 y 10,25 ml (68,7 mmol) de DBU se disolvieron en 500 ml de tolueno y se calentaron a temperatura de reflujo durante 1,5 h, se enfri� hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una disolución acuosa de NaH2PO4 0,5 M. La capa acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaH2PO4 0,5 M, salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron para dar 18,43 g (86 %) de un sólido incoloro. EM (IEN): 814,5 [MH]+.

H] Preparación del compuesto de fórmula V donde Rp1 y Rp2 son acetilo y R14 es metilo (V-1)

A una disolución de 64,0 g (78,6 mmol) de compuesto IV-1,3,84 g (31,4 mmol) de 4-dimetilaminopiridina y 12,5 g de piridina en 600 ml de diclorometano se a�adi� gota a gota una disolución de 26,9 g de anh�drido de ácido

25 cloroac�tico (157,3 mmol) en 250 ml de diclorometano durante 2 horas bajo atmósfera de nitrógeno. La disolución se agit� a temperatura ambiente durante 3,5 horas. La mezcla de reacción se vertió en NaOH 0,2N para obtener un valor de pH 8-9 y se extrajo dos veces con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se lavaron sucesivamente con agua, dos veces con NaH2PO4 0,5 N, con agua y dos veces con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se evaporaron para obtener el producto bruto. Se a�adi� éter de petróleo al producto bruto, la mezcla se agit� durante 3 horas a temperatura ambiente y se filtr� para obtener el compuesto del título (57,5 g, 82 %) en forma de un sólido de color marrón claro. EM (IEN): 890,3.

I] Preparación del compuesto de fórmula VI donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y Rp1 y Rp2 son acetilo y R14 es metilo (VI-1)

35 10,5 g de compuesto V-1 se disolvieron bajo atmósfera de argón en 180 ml de acetona y 2,42 g de DBU, se añadieron 20 mg de yoduro de sodio y 2,20 g de (4-metoxifenil)metanotiol en una porción. La mezcla de reacción se agit� bajo atmósfera de argón a temperatura ambiente durante 2,5 horas. Se añadieron 250 ml de DCM a la mezcla de reacción. La capa orgánica se lav� tres veces con NaHCO3 al 5%, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío para obtener 11,7 g (98,4%) de una espuma de color marrón claro. MS(ESI): 1008,4.

K] Preparación del compuesto de fórmula VII donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y Rp1 y Rp2 son acetilo y R14 es metilo (VII-1)

45 6,00 g del compuesto VI-1 se disolvieron bajo atmósfera de nitrógeno en 60 ml de DMF y se enfriaron con un baño de hielo. Se añadieron 0,39 de una dispersi�n oleosa de hidruro de sodio (60%) y la mezcla se agit� durante 3 horas a 0-5 �C. Ahora se a�adi� KH2PO4 0,5 N y la mezcla se extrajo con 100 ml de dietil éter. La capa orgánica se lav� tres veces con 60 ml de una disolución acuosa de NaHCO3 al 3% y con 80 ml de salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío para obtener 4,65 g de producto bruto. MS(ESI): 1008,4 [MH]+.

L] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo

21,8 g (21,6 mmol) de compuesto bruto VII-1 se disolvieron en 290 ml de metanol y se añadieron 16,2 ml (108,3

55 mmol) de DBU. La mezcla se calentó a temperatura de reflujo bajo atmósfera de argón durante 5 horas. El disolvente se evapor� a presión reducida y el residuo se captur� en 580 ml de DCM. La capa orgánica se lav� dos veces con agua y con salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se lav� con éter de petróleo/dietil éter 5/1. El residuo se disolvió en 150 ml de metanol y se añadieron 55 ml de agua. La mezcla se agit� durante 2 horas y el producto se aisl� mediante filtración para conseguir 11,1 g (41%) del compuesto del título en forma de sólido. MS(ESI): 924,4.

M] Preparación del compuesto de fórmula VIIa donde Rp3 es (4-metoxifenil)metilo y Rp1 es acetilo, Rp2 es hidrógeno y R14 es metilo (VIIa-1)

65 2,0 g (2,16 mmol) del producto del ejemplo 1 etapa L se disolvieron en 50 ml de DCM y 0,22 ml (2,4 mmol) de anh�drido acético. La mezcla se agit� a temperatura ambiente durante 48 horas. La disolución se lav� con una disolución acuosa de NaHCO3 (5%) y salmuera, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para dar 2,17 g de una espuma de color marrón claro. El producto bruto se us� sin purificación adicional en la siguiente etapa. MS(ESI): 967,3 [MH]+.

5 N] Preparación del compuesto de fórmula IX donde Rp4 es metilo, Rp1 es acetilo, Rp2 es hidrógeno y R14 es metilo (IX-1)

2,17 g (2,25 mmol) de VIIa-1 se disolvieron en 50 ml de DCM y se añadieron tamices moleculares. Se añadieron a la mezcla 880 mg (4,49 mmol) de tetrafluoroborato de dimetil(metiltio)sulfonio y la reacción se agit� durante 5 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtr� y se lav� dos veces con 20 ml de una disolución acuosa de NaHCO3 (5%) y salmuera, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para dar 1,62 g de una espuma de color marrón claro. El producto bruto se us� sin purificación adicional en la siguiente etapa. MS(ESI): 893,1 [MH]+.

O] Preparación del compuesto de fórmula VII donde R1 es [2-[6-amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il]etil]tio, Rp1 es 15 acetilo, Rp2 es hidrógeno y R14 es metilo (VII-1)

A una disolución de 0,120 g (0,13 mmol) del producto del ejemplo 1 etapa N disuelto en 4 ml de DMF y 1 gota de agua, se añadieron 66,4 ml (0,27 mmol) de tributilfosfina y la mezcla se agit� durante 30 min a temperatura ambiente. A continuación, se añadieron a la disolución 44,8 mg (0,15 mmol) de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(2-piridin-3il-etil)-purina y 40,2 ml de DBU (0,27 mmol). La reacción se agit� durante toda la noche a temperatura ambiente y se concentr� a vacío y el residuo se captur� en DCM. La capa orgánica se lav� con una disolución acuosa de NaHCO3 (5%) y salmuera, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para obtener el producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH/NH3 99:1:0,01 - 95:5:0,01) para obtener 57 mg (38%) del producto deseado. MS(ESI): 1112,6 ([MH]+), 577,0 ([MH2]++).

25 P] Preparación del compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[6-Amino-8-(2-piridin-3-il-etil)-purin-9-il]etil]tio, R2 es cladinosilo, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-1)

El producto del ejemplo 1 etapa O (54 mg) se disolvió en 2 ml metanol y se agit� durante 96 horas a temperatura ambiente. A continuación, la mezcla de reacción se concentr� a vacío y el residuo se purificó mediante HPLC para obtener el producto deseado como un sólido de color blanco. MS: masa precisa (ESI): 1069,5792 Da.

Ejemplo 2

35 Preparación de I-2, El compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[6-Amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de 6-amino-8-bromo-9-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etil]-purina

A una disolución de 3,0 g de 2-(6-amino-8-bromo-purin-9-il)etanol (ejemplo 1, etapa A) en 30 ml de DMF se añadieron 2,8 g de TBDMSC1 y 1,1 g de imidazol y la mezcla se agit� durante 24 horas bajo atmósfera de argón a 20�C. El precipitado se elimin� por filtración, se lav� con agua y se secó para obtener 3,6 g (84%) del producto deseado.

45 B] Preparación de 6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-9-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi) etil]-purina

A una disolución de 0,372 g del producto del ejemplo 2, etapa A y 0,23 g de 3-aminopiridina en 10 ml de tolueno se añadieron 0,091 g de Pd2(dba)3, 0,14 g de t-BuONa y 0,087 g de 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (Xantphos). La mezcla se agit� a 100�C bajo atmósfera de argón durante 16 horas. Tras finalizar la reacción, la mezcla se diluyó con agua y se extrajo con DCM. La capa orgánica se concentr� y el producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (CHCl3:MeOH 20:1) para conseguir 0,1 g (26%) del producto deseado.

C] Preparación de 2-(6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il)etanol

55 A una disolución de 0,46 g del producto del ejemplo 2, etapa B en 10 ml de THF se añadieron 0,12 g de TBAF*3H2O y la mezcla se agit� durante 16 horas a 20�C. La mezcla de reacción se concentr� posteriormente y el producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:metanol 20:1) para conseguir 0,19 g (59%) del producto deseado.

D] Preparación de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(piridin-3-ilamino)-purina

0,11 g de 2-(6-amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il)etanol se enfriaron a -20�C y se añadieron 2 ml de SOCl2. La temperatura se aument� gradualmente hasta 50�C y la mezcla se agit� a dicha temperatura durante 12 horas. El 65 exceso de SOCl2 se evapor� y se a�adi� al residuo una disolución de amoniaco acuoso. La mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separ� y se evapor�. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a

instant�nea en gel de sílice (acetato de etilo:MeOH 20:1) para obtener 30 mg (27%) del producto deseado. RMN 1H (DMSO-d6): 9,10 (s, 1H); 9,0 (s, 1H); 8,35 (d, 1H); 8,20 (d, 1H); 8,05 (s, 1H); 7,30 (m, 1H); 6,65 (s, 2H, -NH2); 4,55 (t, 2H); 4,0 (t, 2H).

5 E] Preparación de compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[6-Amino-8-(piridin-3-ilamino)-purin-9-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-2)

El compuesto del título I-2 se prepar� partiendo de 6-amino-9-(2-cloroetil)-8-(piridin-3-ilamino)-purina y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P. MS: masa precisa (ESI): 1056,5548 Da.

Ejemplo 3

Preparaci�n de I-3, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(3ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-il-carbonil)amino]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

15 A] Preparación de N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-isonicotinamida

7,0 g (33,8 mmol) de 3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenilamina (Garcia y col., JOC, 2005,70, p 1050) se disolvieron en 150 ml de DCM. La disolución se enfri� a 0�C y se añadieron a la disolución 5,74 g (40,5 mmol) de cloruro de isonicotinoilo en 50 ml de DCM. Se forma un precipitado. Se agit� la mezcla de reacción posteriormente a temperatura ambiente durante dos horas. Se añadieron 2,7 g de NaOH en 100 ml de agua para enrojecer la mezcla de reacción. Se separ� la capa orgánica, se secó con Na2SO4 y se evapor�. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 2:1) para conseguir 7,2 g (62%) del producto deseado. EM (IEN): 313,1.

25 B] Preparación de N-(2-cloroetil)-N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-isonicotinamida

3,0 g (9,6 mmol) del producto del ejemplo 3 etapa A se disolvieron en 50 ml de 1-bromo-2-cloroetano y se añadieron a la disolución 5,33 g (95 mmol) de hidróxido de potasio. La mezcla de reacción se agit� a temperatura ambiente durante toda la noche y a continuación se calentó a 60�C durante cuatro horas. La mezcla de reacción se enfri� hasta la temperatura ambiente y se añadieron 50 ml de agua. La mezcla se extrajo con 50 de DCM. La capa orgánica se lav� con agua y salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor�. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:1) para conseguir 1,3 g (43%) del producto deseado como un aceite de color amarillo. RMN 1H (DMSO-d6): 8,45 (d, 2H); 7,21 (d, 2H); 6,8 (m, 3H); 4,63 (m, 1H);

35 4,13 (t, 2H); 3,76 (t, 2H); 3,66 (s, 3H); 1,4-1,8 (m, 8H).

C] Preparación del compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(3ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-(piridin-4-il-carbon-il)amino]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R24 es metilo (I-3)

El compuesto del título I-3 se prepar� partiendo de N-(2-cloroetil)-N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-ison-icotinamida y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P.

MS: masa precisa (ESI): 1141,6073 Da.

45 Ejemplo 4

Preparaci�n de I-4, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-ilmetil)amino]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de (3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-ilmetil)-amina

0,5 g (1,6 mmol) del producto del ejemplo 3 etapa A se disolvieron bajo atmósfera de nitrógeno en 20 ml de THF seco y se añadieron 0,24 g (6,4 mmol) de hidruro de aluminio y litio a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agit� durante dos horas a temperatura ambiente y a continuación se enfri� hasta 0�C y se añadieron 2 ml de

55 agua. La mezcla se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron con Na2SO4 y se evaporaron a vacío para obtener el producto bruto como un aceite. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:1) para conseguir 0,4 g (84%) del producto deseado como un aceite. EM (IEN): 299,2 ([MH]+).

B] Preparación de (2-cloro-etil)-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-ilmetil)-amina

3,85 g (12.9 mmol) del producto del ejemplo 4 etapa A se disolvieron en 50 ml de metanol a 25�C y se añadieron 5,1 ml de una disolución de cloroacetaldehido (40% en agua; 77,4 mmol, 6 equiv.), 4,86 g (77,4 mmol, 6. eq) de cianoborohidruro sádico y 0,74 ml (12,9 mmol) de ácido acético. La mezcla se agit� a 25�C durante 16 horas. A 65 continuación, el disolvente se elimin� a presión reducida y el residuo se captur� en 100 ml de diclorometano. La mezcla se lav� con 3 x 50 ml de salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó

mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:4) para conseguir 1,66 g (35%) del producto deseado como un aceite. EM (IEN): 361,2,363,1 ([MH]+). RMN 1H (CDCl3): 8,52 (d, 2H); 7,17 (d, 2H); 6,75 (d, 1H); 6,18-6,24 (m, 2H); 4,6 (m, 1H); 4,52 (s, 2H); 3,75 (s, 3H); 3,64-3,73 (m, 4H); 1,5-1,9 (m, a, 8H).

C] Preparación del compuesto de fórmula IX donde Rp4 es metilo, Rp1 y Rp2 son hidrógeno y R14 es metilo (IX-4)

3,1 g (3,35 mmol) del producto del ejemplo 1 etapa L se disolvieron en 80 ml de DCM y se añadieron tamices moleculares. Se añadieron a la mezcla 1,0 g (4,94 mmol) de tetrafluoroborato de dimetil(metiltio)sulfonio y la reacción se agit� durante 20 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se lav� dos veces con 80 ml de una disolución acuosa de NaHCO3 (5%), 80 ml de agua y 80 ml de salmuera, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para dar 3,04 g de una espuma de color marrón claro. El producto bruto se us� sin purificación adicional en la siguiente etapa. MS(ESI): 850,2 [MH]4.

D] Preparación del compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-4-ilmetil)amino]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo. (I-4)

A una disolución de 0,136 g (0,16 mmol) del producto del ejemplo 4 etapa C disuelto en 7,5 ml de DMF y 35 ml de agua, se añadieron 80 ml (0,32 mmol) de tributilfosfina y la mezcla se agit� a temperatura ambiente hasta que no qued� material de partida (3 horas). A continuación, se añadieron a la disolución 45 mg (0,24 mmol) del producto del ejemplo 4 etapa B y 36 ml de DBU (0,24 mmol). La reacción se agit� durante 13 horas a temperatura ambiente y a continuación se añadieron 15 ml de agua y la mezcla se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se concentraron, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para obtener el producto bruto como un aceite de color amarillo. Se realizó una purificación inicial del producto mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo/hexano 5/1). El compuesto se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (columna: Xterra C18(5 mm) 100 mm x 10 mm; fase móvil A: agua + NH4OH al 0,02%, fase móvil B: MeOH; caudal: 10ml/min; detección: 254 nm; gradiente: 0 min/90% A/10% B, 10 min/40% A/60% B, 10,1 min/0% A/100% B. MS: masa precisa (ESI): 1128,6423 Da. Tiempo de ret.: 10,8 min. (columna: Prontosil 120-3-C18 SH 3 mm, 75x4,6 mm; caudal: 1,0 ml/min; detección: 254 nm; temp. columna: t.a; fase móvil A: agua + TFA al 0,1%; fase móvil B: metanol; gradiente: 0-5min constante B al 30%; 5-25 min lineal con B desde 30% hasta 95%).

Ejemplo 5

Preparaci�n de I-5, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-3-ilmetil)amino]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-nicotinamida

3,2 g (14,3 mmol) de 3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenilamina (Garcia y col., JOC, 2005,70, p 1050) se disolvieron en 120 ml de DCM. La disolución se enfri� a 0�C y se añadieron a la mezcla de reacción 15 ml (107,6 mmol, 7,5 eq.) de trietilamina y 3,7 g (26,1 mmol, 1,8 eq.) de cloruro de nicotinoilo en 50 ml de DCM. La mezcla de reacción se agit� durante 2 h y a continuación se a�adi� a la mezcla una disolución de 1,3 g de NaOH en 50 ml de agua. La fase orgánica se separ� y se lav� con agua y salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:1) para conseguir 4 g (85%) del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 313,0 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 10,24 (s, 1H); 9,07 (s, 1H); 8,73 (d, 1H); 8,25 (d, 1H); 7,54 (dd, 1H); 7,42 (s, 1H); 7,29 (d, 1H); 6,91 (d, 1H); 4,70 (m, 1H); 3,71 (s, 3H); 1,56-1,90 (m, 8H).

B] Preparación de (3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-3-ilmetil)-amina

0,5 g (1,6 mmol) del producto del ejemplo 5 etapa A se disolvieron bajo atmósfera de nitrógeno en 20 ml de THF seco y se añadieron 0,24 g (6,4 mmol) de hidruro de aluminio y litio a 0�C. La mezcla de reacción se agit� durante dos horas a 15�C y a continuación se enfri� hasta 0�C y se añadieron 2 ml de agua. La mezcla se extrajo con 3 x 20 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron con Na2SO4 y se evaporaron a vacío para obtener el producto bruto como un aceite. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:1) para conseguir 180 mg (38%) del producto deseado como un aceite de color amarillo claro. EM (IEN): 299,1 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 8,54 (s, 1H); 8,41 (d, 1H); 7,72 (d, 1H); 7,32 (dd, 1H); 6,64 (d, 1H); 6,22 (d, 1H); 6,02 (dd, 1H); 4,60 (m, 1H); 4,21 (s, 2H); 3,56 (s, 3H); 1,50-1,76 (m, 8H).

C] Preparación de (2-cloro-etil)-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-3-ilmetil)-amina

150 mg (0.51 mmol) del producto del ejemplo 5 etapa B se disolvieron en 10 ml de metanol a 25�C y se añadieron 0,5 ml de una disolución de cloroacetaldehido (40% en agua; 7,74 mmol, 15 equiv.), 0,25 g (3,98 mmol, 7,8. eq) de cianoborohidruro sádico y 0,05 ml (0,87 mmol) de ácido acético. La mezcla se agit� a 15�C durante 4 horas. A

continuaci�n, el disolvente se elimin� a presión reducida y el residuo se captur� en 100 ml de diclorometano. La mezcla se lav� con 3 x 50 ml de salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:4) para conseguir 140 mg (35%) del producto deseado como un aceite de color amarillo claro. EM (IEN): 361,2,363,1 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 8,45 (s, 1H); 8,39 (d, 1H); 7,58 (d, 1H); 7,29 (dd, 1H); 6,72(d, 1H); 6,25 (s, 1H); 6,20 (d, 1H); 4,62 (m, 1H); 4,60 (s, 2H); 3,74 (t, 2H); 3,71 (t, 2H); 3,58 (s, 3H); 1,46-1,67 (m, 8H).

D] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(piridin-3-ilmetil)amino]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-5).

El compuesto del título I-5 se prepar� partiendo de (2-cloroetil)-N-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-piridin-3-ilmetilamina (ejemplo 5, etapa C) y IX-4 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 4 etapa D. El producto se purificó en primer lugar mediante HPLC preparativa con el sistema Bp. El producto aislado se disolvió en DCM y se lav� con disolución acuosa diluida de NaOH. La capa orgánica se secó y se evapor�. Este producto se purificó adicionalmente mediante HPLC (sistema Ap). MS: masa precisa (ESI): 1128,6434 Da. Tiempo ret. (sistema Aa): 16,7 min.

Ejemplo 6

Preparaci�n de I-6, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(5-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)-1-etil-1Hpirazolo[3,4-b]piridin-4-ilamino]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación del éster etílico del ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carbox�lico

2,54 g (10 mmol) del éster etílico del ácido 4-cloro-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carbox�lico (J. Med. Chem. 2001,44,1025) y 1,28 g (11 mmol) de clorhidrato de 2-cloroetilamina se añadieron a 40 ml de etanol anhidro. A continuación se añadieron 7 ml (50 mmol) de trietilamina. La mezcla se calentó a temperatura de reflujo hasta que la reacción se complet� (4 horas). La mezcla de reacción se concentr� a presión reducida y se añadieron 20 ml de una disolución acuosa saturada de carbonato de sodio. La mezcla se extrajo con 3x20 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con 15 ml de agua y 15 ml de salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto (2,88 g) se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (éter de petróleo:acetato de etilo 5:1) y a continuación se cristaliz� en 20 ml de hexano/acetato de etilo = 1/1 para conseguir 1,24 g (42%) del producto deseado como un sólido cristalino de color blanco. EM (IEN): 297,1 ([M+H]+). RMN 1H (CDCl3): 9,70 (amplio, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 4,54 (c, 2H), 4,36 (q, 2H), 4,03 (t, 2H), 3,87 (t, 2H), 1,50 (t, 3H), 1,40 (t, 3H).

B] Preparación del ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carbox�lico

Una disolución de 1,17 g (4,0 mmol) del producto del ejemplo 6 etapa A en 15 ml de etanol se a�adi� a una disolución de 0,64 g (16,0 mmol) de NaOH en 2 ml de agua. La mezcla resultante se calentó a temperatura de reflujo durante 3 horas. El etanol se elimin� a presión reducida y se añadieron 10 ml de agua al residuo. La disolución se acidific� hasta pH 5 con HCl 2 N lo que produjo la precipitación del producto. El precipitado se aisl� por filtración y se secó para conseguir 0,5 g (44%) del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 269,1 ([M+H]+). RMN 1NMR (CDCl3): 12,75 (b, 1H), 9,54 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 4,36 (q, 2H), 4,05 (t, 2H), 3,93 (t, 2H); 1,34 (t, 3H).

C] Preparación de la (3,5-dicloro-piridin-4-il)-amida del ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1-etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5carbox�lico

0,8 g (3,0 mmol) del producto del ejemplo 6 etapa B, 0,8 g (6 mmol) de HOBt y 1,14 g (6 mmol) de EDC�HCl se suspendieron en 25 ml de THF y se añadieron 2,1 g (21 mmol) de trietilamina. La mezcla se agit� a 15�C hasta que desapareció todo el material de partida (24 horas). El disolvente se elimin� a presión reducida y el producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna (éter de petróleo:acetato de etilo 4:1) para conseguir 0,64 g de un sólido de color blanco. 131 mg de NaH (60%, 5,7 mmol) se suspendieron en 15 ml de THF y se a�adi� gota a gota a la suspensión una disolución de 3,5-dicloro-4-aminopiridina en 5 ml de THF a 15�C. Después de 1 hora, se a�adi� una disolución de 570 mg (1,42 mmol) del sólido de color blanco anteriormente mencionado en 5 ml de THF lentamente a esta mezcla y se agit� durante 30 minutos más. Se a�adi� 0,1 ml de agua a la mezcla de reacción y el disolvente se evapor�. El residuo se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (éter de petróleo:acetato de etilo 4:1) para obtener 92 mg del producto deseado. Este producto se recristaliz� en acetona/hexano 1/2 para obtener 68 mg (11,6%) del producto deseado como un sólido de color amarillo claro. EM (IEN): 413,0 ([M+H]+). RMN 1H (CDCl3): 9,68 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,56 (s, 2H), 8,06 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 4,53 (q, 2H), 4,03 (t, 2H), 3,82 (t, 2H), 1,52 (t, 3H).

D] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[(5-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)-1-etil-1Hpirazolo[3,4-b]piridin-4-ilamino]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-6)

El compuesto del título I-6 se prepar� partiendo de la (3,5-dicloro-piridin-4-il)-amida del ácido 4-(2-cloro-etilamino)-1etil-1H-pirazolo[3,4-b]piridina-5-carbox�lico (ejemplo 6, etapa C) y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P. El producto se purificó mediante HPLC (sistema Ap) MS: masa precisa (ESI): 1180,5134 Da.

Ejemplo 7

Preparaci�n de I-7, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [3-[2,3-dimetoxi-6-(piridin-4-il-amino-carbonil) fenil]propil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de 1-(3-benziloxi-propil)-2,3-dimetoxi-benceno

2,50 g (62,5 mmol) de NaH (60% en aceite) se suspendieron bajo atmósfera de nitrógeno en 70 ml de THF seco, y se a�adi� una disolución de 7,1 g (36,2 mmol) de 3-(2,3-dimetoxi-fenil)-propan-1-ol (J. Org. Chem., 1987,52,1072) en 50 ml de THF, gota a gota a 18�C. La mezcla resultante se agit� durante 30 minutos y a continuación se a�adi� gota a gota a la mezcla una disolución de 6,81 g (39,8 mmol) de bromuro de bencilo en 30 ml de THF, y la mezcla se agit� durante toda la noche a 18�C. La reacción se desactiv� con 10 ml de agua y el disolvente orgánico se evapor� a presión reducida. El residuo se disolvió en 200 ml de acetato de etilo y la capa orgánica se lav� con agua y salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:40) para conseguir 8 g (77%) del producto deseado como un aceite incoloro. RMN 1H (CDCl3): 7,36-7,27 (m, 5H); 6,99-6,95(m, 1H); 6,78-6,76 (m, 2H); 4,52 (s, 2H); 3,86 (s, 3H, ); 3,81 (s, 3H); 3,52 (t, 2H); 2,73 (t, 2H); 1,93 (m, 2H).

B] Preparación de 1-(3-benziloxi-propil)-6-bromo-2,3-dimetoxi-benceno

8,0 g (27,9 mmol) del producto del ejemplo 7 etapa A se disolvieron bajo atmósfera de nitrógeno en 120 ml de DCM y se añadieron 5,47 g (30,7 mmol) de N-bromo succinimida y 0,48 g (2,8 mmol). La mezcla se agit� durante toda la noche a 18�C. La mezcla de reacción se concentr� a vacío y el producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (acetato de etilo:n-hexano 1:40) para obtener 9,7 g (95%) del producto deseado como un aceite incoloro. RMN 1H (CDCl3): 7,38-7,27 (m, 5H); 7,24 (d, 1H); 6,67 (d, 1H); 4,54 (s, 2H); 3,84 (s, 3H); 3,81 (s, 3H); 3,58 (t, 2H); 2,86 (t, 2H); 1,875 (m, 2H).

C] Preparación del ácido 2-(3-benciloxi-propil)-3,4-dimetoxi-benzoico

9,7 g (26,7 mmol) del producto del ejemplo 7 etapa B se disolvieron bajo atmósfera de nitrógeno en 40 ml de THF seco. La disolución se enfri� hasta -78�C y se añadieron 18 ml de una disolución de butil-litio (2,2 M en n-hexano. Después de 30 minutos se añadieron 400 g de CO2 sólido y la mezcla de reacción se dej� calentar lentamente a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió sobre de agua, y la mezcla se extrajo con hexano. Se añadieron 20 ml de una disolución acuosa de HCl 3 M a la capa acuosa, que se extrajo con 2 x 100 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se evaporaron a vacío para obtener 9 g de producto bruto como un sólido de color blanco. RMN 1H (CDCl3): 7,86 (d, 1H); 7,37-7,24 (m, 5H); 6,82 (d, 1H); 4,53 (s, 2H); 3,92 (s, 3H); 3,82 (s, 3H); 3,59 (t, 2H); 3,13 (t, 2H); 1,92 (m, 2H).

D] Preparación de 2-(3-benziloxi-propil)-N-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-3,4-dimetoxibenzamida

10,8 g (52,4 mmol) de DCC y 5,0 g (37 mmol) de HOBt se añadieron a una disolución de 8,7 g (26,3 mmol) del producto del ejemplo 7 etapa C en 150 ml de DCM bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agit� a 40�C durante 2 horas. La suspensión se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío. El producto resultante se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (hexano:acetato de etilo 8/1) para obtener 8,5 g de un sólido de color blanco. Una disolución de 4 g (8,9 mmol) de este sólido de color blanco en 40 ml de THF seco se añadieron gota a gota a una suspensión de 1,6 g (9,8 mmol) de 4-amino-3,5-dicloro-piridina y 822 mg (35,8 mmol) de NaH (60% en aceite) en THF, que se había agitado a temperatura ambiente durante 1,5 horas. La mezcla resultante se agit� a 30�C durante 2 horas y a continuación se inactiv� con agua. La mezcla se extrajo con 2 x 100 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice para conseguir 4,1 g (96%) del producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 8,47 (s, 2H); 8,39 (s, 1H); 7,43 (d, 1H); 7,267,17 (m, 5H); 6,88 (d, 1H, ); 4,38 (s, 2H); 3,92 (s, 3H); 3,84 (s, 3H); 3,54 (t, 2H); 3,08 (t, 2H); 2,09 (q, 2H).

E] Preparación de 2-(3-hidroxi-propil)-3,4-dimetoxi-N-piridin-4-il-benzamida

1,0 g (2,1 mmol) del producto del ejemplo 7 etapa D se disolvió en 200 ml de etanol y se añadieron 230 mg de Pd/C (10%). La mezcla se agit� durante 36 horas a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno gaseoso (40

psi, 276 kPa). El catalizador se elimin� mediante filtración, y el filtrado se concentr� a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice para conseguir 280 mg del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 317,1 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 11,58 (s, 1H); 8,71 (d, 2H); 8,18 (d, 2H); 7,37 (d, 1H); 7,04 (d, 1H); 3,86 (s, 3H); 3,74 (s, 3H); 3,36 (t, 2H); 2,75 (t, 2H); 1,61 (q, 2H).

F] Preparación de 2-(3-cloro-propil)-3,4-dimetoxi-N-piridin-4-il-benzamida

200 mg (0,63 mmol) del producto del ejemplo 7 etapa E y 163 mg (0,76 mmol) de PCl5 se disolvieron en 4 ml de DCM y la mezcla resultante se agit� a 20�C durante 30 minutos. La mezcla se concentr� y el producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (DCM:MeOH 10:1) para conseguir 160 mg (75%) del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 335,1 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 11,54 (s, 1H); 8,69 (d, 2H); 8,15 (d, 2H); 7,391 (d, 1H); 7,09 (d, 1H); 3,87 (s, 3H); 3,76 (s, 3H); 3,61 (t, 2H); 2,84 (t, 2H); 1,934 (q, 2H).

G] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [3-[2,3-dimetoxi-6-(piridin-4-il-amino-carbonil) fenil]propil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-7)

El compuesto del título I-7 se prepar� partiendo de 2-(3-cloro-propil)-3,4-dimetoxi-N-piridin-4-il-benzamida (ejemplo 7, etapa C) y IX-4 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 4 etapa D. Este producto se purificó mediante HPLC preparativa (sistema Ap) para dar un sólido de color blanco. MS: masa precisa (ESI): 1102,5927 Da.

Ejemplo 8

Preparaci�n de I-8, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [3-[4-Amino-7-(piridin-4-il- amino-carbonil)-imidazo[4,5c]piridin-1-il]-propil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación del éster etílico del ácido 4,6-dihidroxinicot�nico

Una mezcla de 5,0 g (24,73 mmol) de 1,3-acetonadicarboxilato de dietilo, 5,05 g (49,45 mmol) de anh�drido acético y 3,7 g (24,73 mmol) de ortoformiato de etilo se calentó a 120�C durante 2 horas. Los componentes volátiles se eliminaron a presión reducida y la mezcla remanente se trat� con 10 ml de disolución acuosa de amoniaco (25%). La mezcla se agit� durante 30 minutos a temperatura ambiente. Posteriormente, el pH de la mezcla se ajust� a pH 2 con disolución acuosa de HCl (2 N). El sólido se elimin� por filtración, se lav� con agua fría y se secó. Se añadieron 8 ml de tolueno al producto bruto, la mezcla se agit� a 0�C durante 30 minutos y a continuación se secó para obtener 2,26 g (50%) de un sólido de color rojo. RMN 1H (DMSO-d6): 11,77 (s, a, 1H); 10,74 (s, a, 1H); 8,01 (s, 1H); 5,60 (s, 1H); 4,26 (q, 2H); 1,28 (t, 3H).

B] Preparación del éster etílico del ácido 4,6-dihidroxi-5-nitro-nicot�nico

A una disolución de 2,34 g (12,78 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa A en 9 ml de ácido acético se a�adi� gota a gota a 60�C 1,24 g de ácido nítrico (65%; 12,78 mmol). La mezcla se agit� a 90�C durante 20 horas. La mezcla de reacción se enfri� hasta 0�C, se filtr�, y la torta del filtro se lav� con agua fría. El sólido se secó para obtener 2,2 g (75%) del producto deseado como cristales de color amarillo claro. EM (IEN): 229,0 ([MH]+).

C] Preparación del éster etílico del ácido 4,6-dicloro-5-nitro-nicot�nico

2,0 g (8,77 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa B en 8,0 ml (86 mmol) de oxicloruro de fósforo se agitaron a 80�C durante 74 horas. A continuación se elimin� aproximadamente la mitad del oxicloruro de fósforo a vacío, y la mezcla resultante se vertió sobre hielo. La mezcla se extrajo con 3 x 30 ml de acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con 30 ml de disolución acuosa de carbonato de sodio (10%), 2 x 30 ml de agua y 30 ml de salmuera, se secaron con Na2SO4 y se evaporaron a vacío para obtener el producto crudo como un aceite de color marrón que se purificó mediante cromatograf�a en columna de gel de sílice (acetato de etilo/hexano 1:20) para obtener 1,67 g (72%) del producto deseado como un sólido de color amarillo claro. RMN 1H (DMSO-d6): 9,08 (s, 1H); 4,40 (q, 2H); 1,35 (t, 3H).

D] Preparación de 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propilamina

Una disolución de 7,4 g (98 mmol) de 3-aminopropanol en 10 ml de THF se a�adi� a temperatura ambiente a una suspensión de 4,12 de hidruro de sodio (60%; 103,2 mmol) en 140 ml de THF. La mezcla se agit� durante 1 hora, y a continuación se añadieron 16,28 g (108 mmol) de cloruro de terc-butil-dimetilsililo y la agitaci�n vigorosa continu� durante 1 hora. La mezcla se diluyó con 300 ml de dietil éter y se lav� sucesivamente con 100 ml de disolución acuosa de K2CO3 (10%), 100 ml de agua y 100 ml de salmuera, se secó con MgSO4 y se evapor� para obtener 17 g de producto bruto de color amarillo claro. Este producto se disolvió en acetato de etilo/hexano 1/10 y se filtr� a través de una almohadilla de gel de sílice. El filtrado se concentr� a vacío para obtener 13 g (70%) del producto deseado como un aceite incoloro. RMN 1H (CDCl3): 3,67 (t, 2H); 2,78 (t, 2H); 1,83 (s, a, 2H); 1,64 (m, 2H); 0,87 (s, 9H); 0,33 (s, 6H).

5 E] Preparación del éster etílico del ácido 4-[3-(terc-butyl-dimetil-silaniloxi)-propilamino]-6-cloro-5-nitro-nicot�nico

Una disolución de 6,0 g (22,6 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa C y 2,3 g (22,6 mmol) de trietilamina en 75 ml de etanol se calentó a temperatura de reflujo. 4,0 g (22,6 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa D se a�adi� a esta disolución y la mezcla se agit� a temperatura de reflujo durante una hora más. El disolvente se elimin� a presión

10 reducida y el residuo resultante se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (hexano:acetato de etilo 80:1) para conseguir 9 g (95%) del producto deseado como un aceite de color amarillo. RMN 1H (DMSO-d6): 8,96 (t, 1H); 8,70 (s, 1H); 4,36 (q, 2H); 3,70 (t, 2H); 3,22 (td, 2H); 1,84 (m, 2H); 1,39 (t, 3H); 0,88 (s, 9H); 0,02 (s, 6H).

15 F] Preparación del éster etílico del ácido 5-amino-4-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propilamino]-6-cloro-nicot�nico

8,5 g (26,5 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa E se disolvieron en 100 ml de etanol y se añadieron 2,5 g de níquel Raney. La mezcla de reacción se agit� durante 16 horas bajo una atmósfera de hidrógeno gaseoso (1 psi, 276 kPa) a temperatura ambiente. El catalizador se elimin� mediante filtración a través de una almohadilla de gel de

20 sílice, y el filtrado se concentr� a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (hexano:acetato de etilo: 20:1) para conseguir 5,6 g (58%) del producto deseado como un aceite de color marrón. EM (IEN): 388,1; 390,1 ([MH]+).

G] Preparación del éster etílico del ácido 1-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-4-cloro-1H-imidazo[4,5-c]piridina-725 carbox�lico

5,6 g (15,5 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa F se disolvieron en 45 ml de ortoformiato de trietilo y la mezcla se calentó a temperatura de reflujo durante 44 horas. La mezcla se concentr� a presión reducida, y se añadieron 45 ml más de ortoformiato de trietilo y la mezcla se calentó a temperatura de reflujo durante 24 horas más. La mezcla se

30 concentr� a presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatograf�a en columna de gel de sílice eluyendo con hexano/acetato de etilo (20/1 - 5/1) para conseguir 2,7 g (40%; pureza ~62%) del compuesto deseado como un sólido de color amarillo claro. RMN 1H (CDCl3): 8,27 (t, 1H); 7,90 (s, 1H); 4,25 (q, 2H); 3,60(t, 2H); 3,40 (td, 2H); 1,65 (m, 2H); 1,30 (t, 3H); 0,80 (s, 9H); 0,01 (s, 6H).

35 H] Preparación del éster etílico del ácido 4-amino-1-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7carbox�lico

Aproximadamente 20 g de amoniaco gaseoso se disolvieron en 40 ml de etanol en un autoclave de 100 ml y se

40 añadieron 2,7 g (6,28 mmol; pureza ~62%) del producto del ejemplo 8 etapa G. La mezcla se agit� a 100�C durante 20 horas. La reacción se enfri� y el disolvente orgánico se evapor� a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (DCM:MeOH, 100:1 a continuación 50:1) para obtener 1,5 g (83%) de un sólido de color marrón oscuro.

45 I] Preparación del éster etílico del ácido 4-amino-1-[3-hidroxy-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico

1,5 g (3,4 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa H se disolvieron en 30 ml de THF seco y se añadieron 1,17 g (~4,5 mmol) de fluoruro de tetrabutilamonio H2O. La mezcla se agit� a temperatura ambiente durante 1 hora. El disolvente se elimin� a presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatograf�a en columna de gel de sílice

50 (acetato de etilo, a continuación acetato de etilo/MeOH 50:1 a continuación acetato de etilo/MeOH 20:1) para obtener750 mg (69%) del producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 8,31 (s, 1H); 8,08 (s, 1H); 7,00 (s, 2H); 4,59(t, 2H); 4,26 (q, 2H); 3,22 (t, 2H); 1,72 (m, 2H); 1,29 (t, 3H).

K] Preparación del éster etílico del ácido 4-amino-1-[3-cloro-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico

55 Una suspensión de 750 mg (2,36 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa I en 22 ml de cloruro de tionilo se agit� a 50�C durante 0,5 horas. Se añadieron 0,275 ml de trietilamina y la agitaci�n continu� durante 11 horas a 50�C. Tras finalizar la reacción, se añadieron 30 ml de dietil éter a la mezcla de reacción enfriada, lo que ocasion� la formación de un precipitado. El sólido se aisl� mediante filtración para obtener 640 mg (91%) del producto deseado como un

60 polvo de color amarillo claro. EM (IEN): 283,0 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 9,00 (s, a, 2H); 8,52 (s, 1H); 8,30 (s, 1H); 4,68 (t, 2H); 4,35 (q, 2H); 3,40 (t, 2H); 2,15 (m, 2H); 1,32 (t, 3H).

L] Preparación del ácido 4-amino-1-[3-cloro-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico 65 A una mezcla de 100 mg (0,35 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa K y 0,7 ml de una disolución acuosa de LiOH 2 M se añadieron 2 ml de THF y 4 ml de MeOH. La mezcla se agit� durante toda la noche a temperatura ambiente y a continuación se añadieron 0,7 ml más de una disolución acuosa de LiOH 2 M y la mezcla se agit� durante toda la noche a 45�C. El pH de la mezcla se ajust� a pH=7 con una disolución acuosa de HCl 2 N, y el disolvente se

5 evapor� a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna: Purospher STAR RP18e, 5 !m, flujo 125 x 25 mm: 25 ml/min; detección: 254 nm; fase móvil A: agua + ácido f�rmico al 0,1 %; fase móvil B: acetonitrilo; gradiente lineal desde 20% a 60% de acetonitrilo en 10 min) para obtener 30 mg (33%) del producto deseado como un sólido de color blanco.

M] Preparación de la piridin-4-il amida del ácido 4-amino-1-[3-cloro-propil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico

Una suspensión de 60 mg (0,24 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa L, 108 mg (0,28 mmol) de HATU, 72 mg (0,77 mmol) de 4-amino-piridina y 0,048 ml (0,28 mmol) de DIPEA en 4,5 ml de DMF se agitaron durante 3 horas a 30�C. La mezcla de reacción se volvió transparente. Se añadieron 90 mg (0,24 mmol) de HATU, 22 mg (0,24 mmol)

15 de 4-amino-piridina y 0,040 ml (0,24 mmol) de DIPEA más, y la agitaci�n continu� durante 21 horas más. La mezcla se concentr�, y el producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa para obtener el producto deseado (que contenía algo de formiato) como un sólido de color blanco. EM (IEN): 331,1; 333,1 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 10,76 (s, 1H); 8,44 (d, 2H); 8,15 (s, 1H); 8,13 (s, 1H); 7,21 (d, 2H); 6,93 (s, 2H); 4,51 (t, 2H); 3,42 (t, 2H); 2,03 (m, 2H).

N] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [3-[4-Amino-7-(piridin-4-il-amino-carbonil)-imidazo[4,5c]piridin-1-il]-propil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo. (I-8)

25 El compuesto del título I-8 se prepar� a partir de piridin-4-il amida del ácido 4-amino-1-[3-cloro-propil]-1Himidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico (producto del ejemplo 8, etapa M) y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P. El producto I-8 se purificó mediante HPLC (sistema Ap). RMN 1H (CDCl3): (sólo señales de diagnóstico) 8,97 (s, a, 1H); 8,56 (d, 2H); 8,27 (s, 1H); 8,15 (s, 1H); 7,72 (d, a, 2H); 5,82 (s, a, 2H); 5,40 (dd, 1H); 4,91 (d, 1H); 4,60-4,77 (m, 2H); 4,51 (d, 1H); 4,18 (s, 1H); 3,98-4,05 (m, 1H); 3,79 (d, 1H); 3,69 (d, 1H); 3,5-3,6 (m, 1H); 3,35 (s, 3H); 3,08 (s, 3H); 1,42 (s, 3H); 1,37 (s, 3H); 1,15 (d, 3H); 1,08 (d, 3H); 1,01 (d, 3H); 0,85 (t, 3H).

Ejemplo 9

35 Preparación de I-9, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [3-[4-amino-7-([metoxicarbonilmetil]-amino-carbonil)imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-propil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación del éster met�lico del ácido {[4-amino-1-(3-cloro-propil)-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbonil]-amino}acético

Una mezcla de 60 mg (0,24 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa L, 54 mg (0,28 mmol) de EDC, 38 mg (0,28 mmol) de HOBt y 89 mg (0,71 mmol) de sal HCl del éster de metil glicina en 6 ml de DMF se agitaron durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se concentr�, y el producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa para obtener 72 mg del producto deseado como un sólido de color blanco.

45 RMN 1H (DMSO-d6): 9,32 (m, 1H); 8,66 (s, a, 2H); 8,47 (s, 1H); 7,89 (s, 1H); 4,52 (t, 2H); 4,04 (d, 2H); 3,67 (s, 3H); 3,52 (t, 2H); 2,11 (m, 2H).

B] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [3-[4-amino-7-([metoxicarbonilmetil]-amino-carbonil)-imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-propil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-9).

El compuesto del título I-9 se prepar� a partir de éster met�lico del ácido {[4-amino-1-(3-cloro-propil)-1H-imidazo[4,5c]piridina-7-carbonil]-amino}-acético (producto del ejemplo 9 etapa A) y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P. El producto I-8 se purificó mediante HPLC (sistema Ap) para obtener el producto deseado como un sólido de color blanco. MS: masa precisa (ESI): 1093,5698 Da.

55 Ejemplo 10

Preparaci�n de I-10, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[4-amino-7-(piridin-4-il-amino-carbonil)-imida-zo[4,5c]piridin-1-il]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación del éster etílico del ácido 4-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etilamino]-6-cloro-5-nitro-nicot�nico

Una disolución de 362 mg (1,37 mmol) del producto del ejemplo 8 etapa C y 138 mg (1,37 mmol) de trietilamina en 4 ml de etanol se calentó a temperatura de reflujo. 240 mg (1,37 mmol) de 2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-etilamina se

65 añadieron a esta disolución gota a gota y la mezcla se agit� a temperatura de reflujo durante una hora más. El disolvente se elimin� a presión reducida y el residuo resultante se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel

de sílice (hexano:acetato de etilo 80:1) para conseguir 430 mg (79%) del producto deseado como un aceite de color amarillo. RMN 1H (DMSO-d6): 9,05 (m, 1H); 8,66 (s, 1H); 4,33 (q, 2H); 3,75 (t, 2H); 3,11 (t, 2H); 1,32 (t, 3H); 0,84 (s, 9H); 0,04 (s, 6H).

5 B] Preparación del éster etílico del ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico

El éster etílico del ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico se prepar� partiendo del producto del ejemplo 10 etapa A siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 8 etapas F a K. El producto deseado se aisl� como un polvo de color amarillo claro. RMN 1H (DMSO-d6): 9,00 (s, a, 2H); 8,53 (s, 1H); 8,31 (s, 1H); 4,96 (t, 2H); 4,33 (q, 2H); 4,00 (t, 2H); 1,32 (t, 3H).

C] Preparación del ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico

15 A una mezcla de 50 mg (0,19 mmol) del éster etílico del ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7carbox�lico (ejemplo 10, etapa B) y 1,1 ml de una disolución acuosa de NaOH 2 M se añadieron 0,3 ml de THF y 0,8 ml de MeOH. La mezcla se agit� durante 2,5 horas a temperatura ambiente. MeOH y THF se evaporaron a presión reducida y el pH de la mezcla remanente se ajust� a pH=2 con una disolución acuosa de HCl 2 N. El producto precipit� y se aisl� mediante filtración. Se a�adi� tolueno al producto y el disolvente se evapor�. Este procedimiento se repitió tres veces. Finalmente, se aislaron 24 mg (53%) del producto deseado como un sólido de color gris claro. EM (IEN): 241,0 ([MH]+). RMN 1H (DMSO-d6): 8,35 (s, 1H); 8,14 (s, 1H); 7,06 (s, a, 2H); 4,93 (m, 2H); 3,89 (m, 1H).

D] Preparación de la piridin-4-il amida del ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina-7-carbox�lico

25 Una mezcla de 48 mg (0,20 mmol) del producto del ejemplo 10 etapa C, 114 mg (0,30 mmol) de HATU, 61 mg (0,65 mmol) de 4-amino-piridina y 0,051 ml (0,30 mmol) de DIPEA en 15 ml de DMF se agitaron durante toda la noche a 30�C. El producto se purificó directamente mediante HPLC preparativa para conseguir 47 mg (74%) del producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 10,79 (s, 1H); 8,43 (d, 2H); 8,29 (s, 1H); 8,17 (s, 1H); 7,69 (d, 2H); 6,94 (s, 2H); 4,77 (t, 2H); 3,86 (t, 2H).

E] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es[2-[4-amino-7-(piridin-4-il-amino-carbonil)-imidazo[4,5c]piridin-1-il]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-10).

35 El compuesto del título I-10 se prepar� a partir de piridin-4-il amida del ácido 4-amino-1-[2-cloro-etil]-1H-imidazo[4,5c]piridina-7-carbox�lico (ejemplo 10, etapa D) y IX-4 siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 4 etapa D. Este producto se purificó mediante HPLC preparativa (sistema Cp) para dar un sólido de color blanco. MS: masa precisa (ESI): 1084,5637 Da.

Ejemplo 11

Preparaci�n de I-11, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[4-amino-7-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbo-nil)imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

45 A] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[4-amino-7-etoxicarbonil-imidazo[4,5-c]piridin-1-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo

A una disolución de 1,6 g (1,9 mmol) del producto del ejemplo 4 etapa C (IX-4) y 0,5 ml de agua en 40 ml de DMF se añadieron 765 mg (3,8 mmol) de tributilfosfina y la mezcla se agit� a temperatura ambiente durante 3 horas. 400 mg (1,39 mmol) del producto del ejemplo 10 etapa B y se añadieron 290 mg (1,9 mmol) de DBU y la mezcla se agit� a 20�C durante 20 horas. A continuación se añadieron 60 ml de agua a la reacción, y la mezcla se extrajo con 3 x 80 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secó con Na2SO4 y el disolvente se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (DCM/MeOH 40/1,20/1,10/1) para obtener 895 mg (46%) del producto deseado como un polvo de color amarillo claro. EM (IEN):

55 518,8 ([M+2H]++/2)

B] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[4-amino-7-carboxyl-imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo

Una mezcla de 300 mg (0,3mmol) del producto del ejemplo 11 etapa A, 3 ml de una disolución acuosa de LiOH (2 N), 8 ml de THF y 6 ml de MeOH se agitaron a a18�C durante 20 horas. La mezcla de reacción se concentr� a presión reducida y el residuo se captur� en 3 x 50 ml de DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secó con Na2SO4 y el disolvente se evapor� a vacío para obtener 0,172 g de producto bruto. El producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa (columna: Purospher Star RP-18e, 5 !m, flujo 125 x 25 mm:

65 25 ml/min; detección: 254 nm; fase móvil A: agua + ácido f�rmico al 0,1 %; fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: lineal del 10 % al 40 % de acetonitrilo en 8 min; después 100 % de acetonitrilo) para dar un sólido de color blanco. EM (IEN): 504,8 ([M+2H]++/2) Tiempo de Ret. (sistema Ba): 12,9 min.

C] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[4-amino-7-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)5 imida-zo[4,5-c]piridin-1-il]-etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-11).

153 mg (4,46 mmol) de NaH (60% en aceite) se suspendieron en 1 ml de DMF y se a�adi� una disolución de 873 mg (5,3 mmol) de 4-amino-3,5-dicloropiridina en 2 ml de DMF. La suspensión se agit� a 25�C durante 3 horas. En paralelo, una disolución de 260 mg (0,26 mmol) del producto del ejemplo 11, etapa B, 153 mg (0,8 mmol) de EDC y 10 78 mg (0,58 mmol) de HOBt en 5 ml de DMF se agitaron durante 1 horas a 25�C. Esta disolución se a�adi� a continuación a -5 a 0�C a la disolución de 4-amino-3,5-dicloropiridina preparada anteriormente. La mezcla se agit� a esta temperatura durante 10 minutos y la reacción se detuvo con 1 ml de agua, y el pH de la mezcla se ajust� a pH 7-8 con una disolución acuosa de HCl 2 N. La mezcla se concentr� y el residuo se prepar� por HPLC preparativa (Columna: Purospher Star RP-18e, 5 !m, flujo 125 x 25 mm: 25 ml/min; detección: 254 nm; fase móvil A: agua + 15 ácido f�rmico al 0,01%; fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: lineal del 20% al 60% de acetonitrilo en 10 min; 5 min con acetonitrilo al 60 %) para dar 210 mg (70%) del producto deseado en forma de un sólido de color blanco. RMN1H (DMSO-d6): 10,68 (s, 1H); 8,70 (t, 2H); 8,31 (s, 1H); 8,24 (s, 1H); 6,97(t, 2H); 5,15 (m, 1H); 4,85 (m, 1H); 4,72 (m, 1H); 4,62 (m, 1H); 4,40 (m, 3H); 4,00 (m, 1H); 3,66 (m, 1H); 3,58 (t, 2H); 2,40 (s, 6H); 1,80 (m, 2H); 1,65 (m, 2H); 1,51 (m, 3H); 1,40 (s, 3H); 1,29 (s, 3H); 1,05-1,20 (m, 16H); 1,00 (d, 3H); 0,93 (d, 3H); 0,73 (t, 3H). MS: masa precisa

20 (ESI): 1152,4906 Da.

Ejemplo 12

Preparaci�n de I-12, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[6-amino-2-[[(3-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, 25 R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de 9-(2-cloroetil)-2,6-diamino-purina

10 g (66.6 mmol) 2,6-diaminopurina se suspendieron bajo atmósfera de argón en 300 ml de DMF y se añadieron

30 21,6 g (156,5 mmol) de carbonato de potasio y 24 ml de 1-bromo-2-cloroetano. La mezcla se agit� durante 64 horas a temperatura ambiente. La suspensión de color amarillo claro se filtr�, y los sólidos se lavaron con 30 ml de DMF y posteriormente se trituraron con 100 ml de agua durante 30 minutos. La mezcla se filtr� y los sólidos se lavaron con 50 ml de agua y se secaron a vacío para obtener 10,15 g (72%) del producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 7,72 (s, 1H); 6,67 (s, a, 2H); 5,81 (s, a, 2H); 4,30 (t, 2H); 3,99 (t, 2H).

35 B] Preparación de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(3-piridilmetil)amino]-purina

100 mg (0,47 mmol) de 9-(2-cloroetil)-2,6-diamino-purina (ejemplo 12, etapa A) se disolvieron en 10 ml de MeOH y se añadieron 3 g de tamices moleculares (4A), 0,044 ml (0,47 mmol) de 3-piridinacarboxaldehido y 0,135 ml (2,35 40 mmol) de ácido acético. La mezcla se agit� durante 2 horas a temperatura ambiente. Se añadieron 23,6 mg (0,38 mmol) de cianoborohidruro sádico y la agitaci�n continu� durante 4 horas. Se añadieron 0,044 ml (0,47 mmol) más de 3-piridinacarboxaldehido, y se añadieron 72 mg de cianoborohidruro sádico en tres porciones a lo largo de tres días a temperatura ambiente. El disolvente se evapor� y el residuo se captur� en 50 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con una disolución acuosa saturada de carbonato de sodio y salmuera, se secó con Na2SO4 y el

45 disolvente se evapor� a vacío para obtener 0,254 g de producto bruto como un aceite de color amarillo. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH 99,5/0,5 - 80:20) para obtener 88 mg del producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 8,57 (s, 1H); 8,40 (m, 1H); 7,74 (s, a, 1H); 7,73 (s, 1H); 7,30 (m, 1H); 6,99 (m, 1H); 6,75 (s, a, 2H); 4,45 (d, 2H); 4,30 (t, 2H); 3,95 (t, 2H).

50 C] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[6-amino-2-[[(3-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-12)

El compuesto del título I-12 se prepar� partiendo de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(3-piridilmetil)amino]-purina (producto

55 del ejemplo 12, etapa B) y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P. El producto crudo se purificó mediante HPLC (sistema Ap) para obtener el producto deseado como un sólido de color blanco. MS: masa precisa (ESI): 1071,5826 Da.

Ejemplo 13

60 Preparación de I-13, compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[6-amino-2-[[(4-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R4 es metilo.

A] Preparación de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(4-piridilmetil)amino]-purina 65 6-Amino-9-(2-cloroetil)-2-[(4-piridilmetil)amino]-purina se prepar� a partir de 4-piridinacarboxaldehido y 9-(2-cloroetil)2,6-diamino-purina de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 12 etapa B. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea (DCM/MeOH 99,5/0,5 - 80:20) para obtener el producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 8,44 (d, 2H); 7,73 (s, 1H); 7,31 (d, 2H); 7,01 (t, 1H); 6,75 (s, a, 2H); 4,46

5 (d, 2H); 4,27 (t, 2H); 3,91 (t, 2H).

B] Preparación de compuesto de fórmula I-A donde R1 es [2-[6-amino-2-[[(4-piridil)metil]amino]-purin-9-il]etil]tio, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-13)

El compuesto del título I-12 se prepar� partiendo de 6-amino-9-(2-cloroetil)-2-[(4-piridilmetil)amino]-purina (producto del ejemplo 13, etapa A) y IX-1 siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 1 etapas O-P. El producto crudo se purificó mediante HPLC (sistema Ap) para obtener el producto deseado como un sólido de color blanco. MS: masa precisa (ESI): 1071,5826 Da.

15 Ejemplo 14

Preparaci�n de I-14, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[4-amino-7-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbo-nil)imidazo[4,5-c]piridin-1-il]-etil]tio, R2 es hidroxilo, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

60 mg del compuesto I-11 se disolvieron en 5 ml de una disolución acuosa de HCl (1 N) bajo atmósfera de nitrógeno y la disolución se agit� a 28�C durante 5 horas. La mezcla de reacción se enfri� hasta 0�C y se trat� con una disolución acuosa de Na2CO3 (10%) para ajustar la disolución a pH 7-8. La mezcla se extrajo tres veces con 30 ml de DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secó con Na2SO4 y el disolvente se evapor�

25 a vacío para obtener el producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a en columna en gel de sílice (DCM/MeOH 10:1) para obtener 20 mg (38%) del producto deseado como un sólido de color crema. RMN 1H (DMSO-d6) (únicamente señales de diagnóstico): 10,64 (s, 1H); 8,70 (t, 2H); 8,31 (s, 1H); 8,15 (s, 1H); 6,93 (s, 2H); 5,18-5,28 (m, 2H); 4,83 (m, 1H); 4,63 (m, 1H); 4,52 (d, 1H); 4,44 (s, 1H); 3,66 (s, 1H); 1,79-1,91 (m, 2H); 1,61-1,72 (m, 2H); 1,40 (s, 3H); 1,18 (s, 3H); 0,95 (d, 3H); 0,93 (d, 3H); 0,71 (t, 3H).

Ejemplo 15

Preparaci�n de I-I5, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(3,5-dicloro-piridin-4-ilmetil)-amino]etil]tio, R2 y R3 tomados juntos forman un grupo C=O, R4 es hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos

35 forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de (3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(3,5-dicloropiridin-4-il-metil)-amina

1,408 g (6,48 mmol) de 3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenilamina (Garcia y col., JOC, 2005,70, p 1050) se disolvieron en 20 ml de tolueno y se añadieron 1,197 g (6,6 mmol) de 3,5-dicloro-4-piridinacarboxaldehido, 3.6 ml (25,9 mmol) de trietilamina y 1,85 ml (32,4 mmol) de ácido acético. La mezcla se agit� a 25�C durante 2 horas y a continuación se añadieron 1,629 g (25,9 mmol) NaBH3CN y la mezcla se agit� durante una hora a 25�C. El disolvente se evapor� y el producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (petróleo:acetato de etilo: 15:1) para obtener 1,98 g (82%) del producto deseado como un aceite de color amarillo claro.

45 RMN 1H (DMSO-d6): 8,61 (s, 2H); 6,70 (d, 1H); 6,30 (d, 1H); 6,15 (dd, 1H); 5,55 (t, 1H); 4,65 (m, 1H); 4,36 (d, 2H); 3,59 (s, 3H); 1,77-1,81 (m, 2H); 1,64-1,67 (m, 4H); 1,53-1,56 (m, 2H).

B] Preparación de (2-cloroetil)-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(3,5-dicloropiridin-4-il-metil)-amina

1,9 g (4.96 mmol) del compuesto de la etapa A se disolvieron en 20 ml de metanol y se añadieron 5,8 g de una disolución de cloroacetaldehido (40% en agua; 29,7 mmol, 6 equiv.), 1,87 g (77,4 mmol, 6. eq) de NaBH3CN y 0,44 ml (7,69 mmol) de ácido acético. La mezcla se agit� a 28�C durante 5 horas. A continuación, el disolvente se elimin� a presión reducida y el residuo se disolvió en 20 ml de agua y 40 ml de diclorometano. La mezcla se separ� y la fase acuosa se extrajo con 30 ml de DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con 30 ml de agua y 30 ml de

55 salmuera, se secó con Na2SO4 y se evapor� a vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo 15:1 y 10:1) para conseguir 1,6 g (72%) del producto deseado como un sólido de color amarillo claro. RMN 1H (DMSO-d6): 8,59 (s, 2H); 6,77 (d, 1H); 6,40 (s, 1H); 6,38 (d, 1H); 4,66 (m, 1H); 4,65 (s, 2H); 3,62 (s, 3H); 3,60 (t, 2H); 3,55 (t, 2H); 1,51-1,65 (m, 8H).

C] Preparación de a compuesto de fórmula XX donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(3,5-dicloropiridin-4-ilmetil)-amino]etil]tio, R2 y R3 tomados juntos forman un grupo C=O, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo y Rp1 es acetilo.

89 mg (0,12 mmol) de un compuesto de fórmula XVIII donde R2 y R3 tomados juntos forman un enlace C=O, R4 es

65 hidrógeno, R14 es metilo, Rp1 es acetilo y Rp4 es metilo (sintetizado de acuerdo con los procedimientos descritos en el documento WO03/072588) se disolvió bajo atmósfera de nitrógeno en 5 ml de DMF y se añadieron 1 gota de

agua y 0,06 ml (0,24 mmol) de tributilfosfina, y la mezcla se agit� a temperatura ambiente hasta que no qued� material de partida (2h). A continuación, se añadieron a la disolución 57,5 mg (0,13 mmol) de (2-cloroetil)-(3ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(3,5-dicloropiridin-4-il-metil)-amina y 0,018 ml de DBU. La reacción se agit� durante 20 horas a temperatura ambiente y se concentr� a vacío y el residuo se captur� en 5 ml de DCM. La capa orgánica se lav� dos veces con 2 ml de una disolución acuosa de NaHCO3 (5%) y con 2 ml de salmuera, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para obtener el producto bruto como un aceite de color amarillo. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH/NH3 99,5:0,5:0,01 - 97:3:0,01) para obtener 44 mg del producto deseado como un aceite de color amarillo. EM (IEN): 1079,6 ([MH]+). 550,9 ([M+2H]++/2)

D] Preparación de a compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)-(3,5-dicloropiridin-4-ilmetil)-amino]etil]tio, R2 y R3 tomados juntos forman un grupo C=O, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

El producto del ejemplo 15 etapa C (42 mg) se disolvió en 2 ml metanol y se agit� durante toda la noche a temperatura ambiente. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH 99,5:0.5 - 95:5) para obtener 0,013 mg del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 1036,6 ([MH]+). 518,9 ([M+2H]++/2)

Ejemplo 16

Preparaci�n de I-16, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[(5-(3,5-dicloro-piridin-4-il-amino-carbonil)-1-etil-1Hpirazolo[3,4-b]piridin-4-ilamino]-etil]tio, R2 es -OH, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

27 mg del compuesto I-6 (ejemplo 6) se suspendieron en 1 ml de etanol y se añadieron gota a gota a la mezcla 2 ml de agua y 0,15 ml de HCl 3 N. La mezcla se agit� a temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla se neutralizó con NaOH 2 N y la mezcla se extrajo dos veces con 5 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una disolución acuosa de NaHCO3 (5%) y salmuera, se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para obtener el producto bruto como un sólido de color crema. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH/NH3 99:1:0,01 - 85:15:0,01) para obtener 20 mg del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 1022.7,1024.6 ([MH]+), 512,9 ([M+2H]++)

Ejemplo 17

Preparaci�n de I-17, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[5-[(3,5-dicloro-piridin-4-ilmetil)-amino]-2-metoxifenoxi]etil]tio, R2 y R3 tomados juntos forman un grupo C=O, R4 es hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de 2-(2-cloro-etoxi)-1-metoxi-4-nitrobenceno

Una mezcla de 40 g (0,236 mol) de 2-metoxi-5-nitrofenol, 135 g (0,946 mol) de 1-bromo-2-cloroetano y 130,7 g (0,946 mol) de carbonato de potasio en 500 ml de acetona se calentó a temperatura de reflujo hasta que no qued� material de partida (8 h).. La mezcla se filtr� y el filtrado se evapor�. El residuo se captur� en acetato de etilo y se filtr� a través de dicalita. El filtrado se evapor� a presión reducida y el residuo se cristaliz� en acetato de etilo para obtener 39,6 g del producto deseado como un sólido amarillo. RMN 1H (DMSO-d6): 7,95 (m, 1H); 7,79 (d, 1H); 7,21 (d, 1H); 4,39 (t, 3H); 3,98 (t, 3H); 3,93 (s, 3H).

B] Preparación de 3-(2-cloro-etoxi)-4-metoxi-fenilamamina

25,9 g (0,112 mol) de 2-(2-cloro-etoxi)-1-metoxi-4-nitrobenceno (ejemplo 17, etapa A) se disolvieron en 250 ml de tetrahidrofurano y la disolución se desgasific�. A continuación se añadieron 2,16 g de paladio en carbón activo (10%) y la mezcla se agit� bajo una atmósfera de hidrógeno gaseoso (1 atm, 101 kPa) hasta que no qued� material de partida. La mezcla se filtr� a través de dicalita y el filtrado se evapor�. El compuesto se us� sin purificación adicional en la siguiente etapa.

C] Preparación de [3-(2-cloro-etoxi)-4-metoxi-fenil]-(3,5-dicloro-piridin-4-ilmetil)-amina

20 g (99 mmol) de 3-(2-cloro-etoxi)-4-metoxi-fenilamina (ejemplo 17, etapa B) se disolvieron en 200 ml de metanol y se añadieron 17,8 g (101 mol) de 3,5-dicloro-4-piridinacarboxaldehido y 26,5 ml (436 mmol) de ácido acético. Se forma un precipitado. La mezcla se agit� a temperatura ambiente durante 30 minutos y a continuación se añadieron 23,3 g (370 mmol) de cianoborohidruro de sodio. El precipitado desapareció, y la mezcla se agit� a temperatura ambiente hasta que no qued� material de partida (-30 min). El disolvente se evapor� a presión reducida y el residuo se captur� en acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera y se secó con Na2SO4, se filtr� y se concentr� a vacío para obtener el producto bruto como un sólido. El producto bruto se cristaliz� en acetato de etilo/n-hexano para obtener 17,4 g de un sólido de color crema. RMN 1H (DMSO-d6): 8,63 (s, 2H); 6,76 (d, 1H), 6,39 (d, 1H); 6,23 (dd, 1H); 5,60 (t, 1H); 4,37 (d, 2H); 4,15 (t, 2H); 3,90 (t, 2H); 3,65 (s, 3H).

D] Preparación de compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[5-[(3,5-dicloro-piridin-4-ilmetil)-amino]-2-metoxifenoxi]etil]tio, R2 y R3 tomados juntos forman un grupo C=O, R4 es hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-17).

El compuesto del título se prepar� a partir de [3-(2-cloro-etoxi)-4-metoxi-fenil]-(3,5-dicloro-piridin-4-ilmetil)-amina (ejemplo 17, etapa C) y el compuesto de fórmula XVIII donde R2 y R3 tomados juntos forman un enlace C=O, R4 es hidrógeno, R14 es metilo, Rp1 es acetilo y Rp4 es metilo (sintetizado de acuerdo con los procedimientos descritos en el documento WO 03/072588) siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 15, etapas C y D. MS (ESI): 968,5 ([MH]+), 485,0 ([M+2H]++)

Ejemplo 18

Preparaci�n de I-18, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[5-(3,5-dicloropiridina-4-il-aminocarbonil)-2-metoxifenoxi]etil]tio, R2 es 2-(4-morfolinil)acetoxi, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación del ácido 3-(2-cloro-etoxi)4-metoxi-benzoico

500 mg (2,97 mmol) de ácido isovain�llico se disolvieron en 5 ml de DMF y se añadieron 1,07 g (7,74 mmol) de carbonato de potasio y 0,7 ml (8,49 mmol) de 1-bromo-2-cloroetano. La mezcla se calentó a 50�C durante 6 horas y a 70�C durante una hora. A continuación, se evapor� el DMF y se añadieron 20 ml de agua al residuo. La capa acuosa se extrajo dos veces con 50 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y el disolvente se evapor� a presión reducida. El residuo se disolvió en 20 ml de THF y se añadieron 20 ml de metanol y 20 ml de una disolución acuosa de NaOH 4 N. La mezcla de reacción se agit� durante 2 horas a temperatura ambiente y los disolventes orgánicos se evaporaron. La fase acuosa se ajust� a pH=7 con una disolución acuosa concentrada de HCl que conduce a la precipitación del producto que se aisl� mediante filtración y se lav� con agua para obtener 347 mg del producto deseado como un sólido de color gris.

B] Preparación de 3-(2-cloro-etoxi)-N-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-4-metoxi-benzamida

31 mg (0.74 mmol) de hidruro de sodio se disolvieron en 2 ml de DMF y se añadieron 134 mg (0,82 mmol) de 4amino-3,5-dicloropiridina. La mezcla se agit� durante 3 horas a 28�C para obtener la "disolución A". 50 mg (0.22 mmol) del compuesto 14-A, 99 mg (0,26 mmol) de HATU y 45 ml (0,26 mmol) de etildiisopropilamina se disolvieron en 20 ml de DMF y la disolución resultante se agit� a 29�C durante 45 minutos. La disolución A (véase anteriormente) se a�adi� gota a gota a 0-10�C y la mezcla se agit� a esta temperatura durante 15 minutos. El pH de la mezcla se ajust� a 6 con una disolución acuosa de HCl, y el DMF se evapor� a presión reducida. El residuo se disolvió en 70 ml de acetato de etilo y la capa orgánica se lav� dos veces con 50 ml de una disolución acuosa de HCl 0,5 N, con 50 ml de agua y dos veces con 50 ml de salmuera, se secó con Na2SO4 y se concentr� a vacío para obtener 120 mg de producto bruto como un sólido de color marrón. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (acetato de etilo:éter de petróleo 1:2) para conseguir 60 mg del producto deseado como un sólido de color blanco. RMN 1H (DMSO-d6): 3,86 (s, 3H), 3,96 (t, 2H), 4,30 (t, 2H), 7,14 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 7,70 (dd, 1H), 8,73 (s, 2H), 10,45 (s, 1 H)

C] Preparación de compuesto de fórmula XIX donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y Rp1 es acetilo y R14 es metilo

300 mg del compuesto VII-1 (ejemplo 1, producto de la etapa K) se suspendieron en 30 ml de HCl 1 N y la mezcla se agit� a 40�C durante 13 horas. Se añadieron 2 ml de acetonitrilo y la agitaci�n continu� durante 17 horas más. La mezcla de reacción se ajust� a pH 7 con disolución acuosa de NaOH 2 N y la mezcla se extrajo dos veces con 30 ml de DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron a vacío para obtener el producto bruto como una espuma de color marrón claro. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH 40:1) para obtener 130 mg del producto deseado como un sólido de color crema. EM (IEN): 808,3 ([MH]+)

D] Preparación de compuesto de fórmula XXIV donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y Rb es CH2Cl, Rp1 es acetilo y R14 es metilo

60 mg (0,07 mmol) del compuesto del ejemplo 18 etapa C se disolvieron en 5 ml de DCM y se añadieron 28 mg (0,16 mmol) de anh�drido de ácido 2-cloroac�tico, 18 mg (0,15 mmol) de DMAP y 15 mg de piridina. La mezcla se agit� a 15�C durante 1 hora y a continuación se vertió sobre 50 ml de agua. La fase acuosa se extrajo dos veces con 20 ml de DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una disolución acuosa de HCl al 5%, agua, disolución acuosa saturada de NaHCO3 y salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron a vacío para obtener el producto bruto como un sólido de color crema. El producto se us� sin purificación adicional en la siguiente etapa. EM (IEN): 884,4 ([MH]+) E] Preparación de compuesto de fórmula XXV donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y R2b y R2c tomados juntos forman un anillo de morfolina (que incluye el átomo de nitrógeno al que est�n unidos), Rp1 es acetilo y R14 es metilo

600 mg (0,68 mmol) del compuesto del ejemplo 18 etapa C se disolvieron en 30 ml de etanol y se añadieron 280 mg

5 (3 eq) de carbonato de potasio, 150 mg de morfolina (1,7 mmol) y 20 mg de NaI. La mezcla de reacción se agit� a 20�C durante 20 horas y a 50�C durante 12 horas. El disolvente se evapor� y se a�adi� agua al residuo. La capa acuosa se extrajo tres veces con 30 ml de DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron con Na2SO4 y se concentraron a vacío para obtener el producto bruto. El producto bruto se purificó mediante cromatograf�a instantánea en gel de sílice (DCM/MeOH 80:1) para obtener 220 mg del producto deseado como un sólido de color blanco. EM (IEN): 935,3 ([MH]+), 468,2 ([M+2H]++)

F] Preparación de compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[5-(3,5-dicloropiridina-4-il-aminocarbonil)-2-metoxifenoxi]etil]tio, R2 es 2-(4-morfolinil)acetoxi, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-18).

15 El compuesto del título se prepar� a partir de la 3-(2-cloro-etoxi)-N-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-4-metoxi-benzamida (ejemplo 18, etapa B) y el compuesto del ejemplo 18, etapa E siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 15, etapas C y D. EM (IEN): 1111,3 ([MH]+), 556,4 ([M+2H]++) Tiempo ret. (sistema Ca): 28,0 min

Ejemplo 19

Preparaci�n de I-19, compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[5-(3,5-dicloropiridina-4-il-aminocarbonil)-2-metoxi

25 fenoxi]etil]tio, R2 es 3-(4-morfolinil)-1-oxopropoxi, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo.

A] Preparación de compuesto de fórmula XXIV donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y Rb es -CH=CH2, Rp1 es acetilo y R14 es metilo

30 mg (0,04 mmol) del compuesto del ejemplo 18 etapa C se disolvieron en 10 ml de DCM y se añadieron 6,7 mg (2 eq) de cloruro de acrilo�lo y 11,3 mg de trietilamina. La mezcla de reacción se agit� a temperatura ambiente durante toda la noche y a continuación se añadieron 3,35 mg más de cloruro de acrilo�lo. La mezcla de reacción se agit� a temperatura ambiente hasta que no qued� material de partida (1,5 h). La mezcla se lav� con 10 ml de salmuera, se

35 secó con MgSO4 y se evapor� a presión reducida para obtener el producto bruto (44 mg) que se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional. EM (IEN): 862,2 ([MH]+)

B] Preparación de compuesto de fórmula XXVI donde R1 es [(4-metoxifenil)metil]tio y R2b y R2c tomados juntos forman un anillo de morfolina (que incluye el átomo de nitrógeno al que est�n unidos), Rp1 es acetilo y R14 es metilo

54 mg (0,06 mmol) del compuesto del ejemplo 19, etapa A se disolvieron en 4 ml de acetonitrilo y se añadieron 54,6 mg (0,63 mmol) de morfolina. La mezcla de reacción se agit� a temperatura ambiente durante 24 horas. El disolvente se evapor� a presión reducida y se secó a vacío. El producto bruto se us� sin purificación adicional en la siguiente etapa. EM (IEN): 949,3 ([MH]+), 475,2 ([M+2H]++)

45 C] Preparación de compuesto de fórmula I donde R1 es [2-[5-(3,5-dicloropiridina-4-il-aminocarbonil)-2-metoxifenoxi]etil]tio, R2 es 3-(4-morfolinil)-1-oxopropoxi, R3 y R4 son hidrógeno, R12 y R13 tomados juntos forman un grupo C=O y R14 es metilo (I-19).

El compuesto del título se prepar� a partir de la 3-(2-cloro-etoxi)-N-(3,5-dicloro-piridin-4-il)-4-metoxi-benzamida (ejemplo 18, etapa B) y el compuesto del ejemplo 19, etapa B siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 15, etapas C y D. EM (IEN): 1125,5 ([MH]+), 563,5 ([M+2H]++) Tiempo ret. (sistema Ca): 28,0 min

B. Actividad biológica

Los compuestos de la invención muestran una actividad inhibidora sustancial relativa a las fosfodiesterasas (PDE) humanas, en particular respecto a PDE4. Se ha utilizado el siguiente ensayo para determinar la actividad inhibidora de los compuestos.

Ensayo

PDE4 hidroliza específicamente el AMPc y libera el AMP producido. La potencia de la inhibición de PDE mediante

65 dichos agentes se determina con un ensayo enzim�tico in vitro. El ensayo est� disponible comercialmente (ensayo IMAP™ FP Molecular Devices Corp.(MDS)) y est� optimizado para su uso con la PDE4 humana El AMPc marcado de forma fluorescente se hidroliza mediante PDE4 y, en una segunda etapa, la unión del producto marcado a un ligando de unión más grande permite la detección del producto por medición de la polarización fluorescente (PF).

PDE4 se purifica de forma parcial a partir de células monoc�ticas humanas no diferenciadas (U-937) de acuerdo con

5 Thorpy y col. 1992 (J. Pharmacol. Exp. Ther. 263: 1195). Las preparaciones finales son específicas de AMPc y no hidrolizan el GMPc por encima del límite de detección del ensayo. Además, Las preparaciones de PDE4 se validan mediante estudios de inhibición con inhibidores de PDE específicos y no específicos de PDE4.

Se preparan disoluciones madre de los compuestos de ensayo en DMSO y se diluyeron en tampón de ensayo buffer

10 (Tris-HCl 10 mM, MgCl2, 10 mM, BSA al 0,1 %, NaN3 al 0,05 %, pH 7,2) hasta las concentraciones deseadas. Las disoluciones utilizadas en los compuestos de ensayo incluidos en el ensayo junto con el tampón de ensayo con DMSO al 2 %.

10 ml de sustrato (a una concentración recomendada por el fabricante) se mezclaron con 5 ml del PDE

15 adecuadamente diluido y 5 ml de la disolución de compuesto de ensayo. Se utilizaron 5 ml de tampón de reacción con DMSO al 2 % para las reacciones de control. La concentración final de DMSO en el ensayo es 0,5 %, que no altera significativamente la actividad de PDE. Tras incubar durante 90 minutos a temperatura ambiente, se añadieron 60 ml del reactivo de unión tal como especifica el fabricante. Se deja que la unión transcurra durante 30 minutos y se mide la polarización fluorescente. La dependencia de la dosis en la inhibición de PDE se mide ensayando series de

20 dilución de los compuestos de ensayo por duplicado. Los valores de CI50 se determinaron a partir de las actividades medidas según el ajuste de la curva.

Resultados

Ejemplo: CI50 (PDE4) [mM]

1: 13,4

2: 3,9

3: 3,4

4: 0,28

5: 0,85

6: 0,37

7: 7,6

8: 4,7

9: 24,2

10: 1,0

11: 0,008

12: 3,8

13: 2,6

14: 0,0049

15: 0,48

16: 0,11

La actividad inhibidora de PDE4 descubierta para los compuestos de la presente invención tal como se muestra en los ejemplos es especialmente sorprendente porque el macr�lido base de los compuestos ilustrados, que tiene la siguiente fórmula:

no muestra ninguna actividad inhibidora de PDE4 hasta una concentración de 50 mM en el ensayo utilizado en los ejemplos y, incluso aunque el sustituyente unido a dicho macr�lido básico en uno de los compuestos de la presente invención cuando se utiliza en forma libre muestra cierta actividad inhibidora de PDE4 en dicho ensayo tal como, por ejemplo, el siguiente compuesto

que tiene un valor de CI50(PDE4) de 3,6 mM, la actividad inhibidora de PDE4 del correspondiente compuesto de acuerdo con la presente invención donde exactamente los mismos compuestos est�n unidos entre s� para formar

10 una molécula de fórmula (I-A), muestra por lo general una actividad inhibidora de PDE4 que se ve fuertemente mejorada comparada con la correspondiente actividad de sus componentes parciales, as� como comparada con la actividad que se esperaría razonablemente de una mezcla de dichos componentes parciales. En este caso, por ejemplo, se ha encontrado un valor de CI50(PDE4) de 0,008 mM para el compuesto del ejemplo 11 que tiene la fórmula:

que es solo aproximadamente quinientas veces el valor de CI50(PDE4) del sustituyente del macr�lido en forma libre.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto macr�lido de fórmula (I)

donde

R1 es un resto -Y-X-Q;

10 Y es S, SO o SO2; X es un enlace o un grupo lineal que consiste en átomos de hidrógeno y de 1 a 9 átomos seleccionados entre C, N, O y/o S, de los cuales, hasta 2 átomos pueden ser N y un átomo puede ser Q o S, un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO y el átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2 y dos átomos de C adyacentes

15 pueden estar presentes como -CH=CH- o -C:C- y cuyo grupo X est� no sustituido o sustituido por -COO-W o -CONH-W; Q es un resto -V-A1-L-A2-W o, si X no representa un enlace, también puede ser -NR6R7; V es un grupo divalente aromático o heteroc�clico, opcionalmente sustituido; W es arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido; A1 y A2 pueden, independientemente entre s�, estar ausentes o ser un grupo alquileno C1-C4;

20 L es-O-, -S-, -SO2-, -NH-, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2)-, -HN(CO)NH-, -O(CO)NH-, -HN(CO)O-, o también pueden estar ausentes si A1 y/o A2 est�n presentes; R2 es OR2a y R3 es hidrógeno o R2 y R3 tomados junto con el átomo de carbono al que est�n unidos, representan un grupo C=O; R2a es hidrógeno, acetilo, -(C=O)CH2NR2bR2c, o -(C=O)CH2CH2NR2bR2c;

25 R2b y R2c son, independientemente entre s�, hidrógeno o alquilo C1-C6 que puede estar sustituido o sin sustituir, y en el que hasta dos átomos de carbono pueden ser N, O o S y un átomo de carbono puede aparecer como C=O o junto con el átomo de nitrógeno al que est� unido forman un anillo de 4-7 miembros de los que hasta dos átomos pueden ser N, O o S y un átomo de carbono puede ser C=O; R4 es hidrógeno o R2 y R4 tomados junto con el enlace entre los átomos de carbono a los que est�n unidos, forman un enlace

30 doble; R6 y R7 se seleccionan independientemente entre s� entre arilo opcionalmente sustituido; aralquilo; heterociclilo y heterociclilalquilo; y uno de R6 y R7 también puede ser un grupo -L-A2-W; R12 es hidrógeno y R13 es OR14 o R12 y R13, tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, representan un grupo C=O; R14 es, independientemente en cada caso en la fórmula I, hidrógeno o un grupo alif�tico saturado o insaturado con

35 de 1 a 6 átomos de carbono; y * indica un centro quiral que est� en forma (R) o (S).
2. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en la prevención y/o el tratamiento del cáncer en animales o seres humanos.

40 3. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en el tratamiento del cáncer en animales o seres humanos.
4. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 o un compuesto para su uso de acuerdo con una

cualquiera de las reivindicaciones 2-3 donde R2a y/o R4 son hidrógeno. 45
5. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 o un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 donde R2 y R3, tomados junto con los átomos de carbono a los que est�n unidos, representan un grupo C=O.

50 6. Un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 o un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 donde R2 y R4, tomados junto con el enlace entre los átomos de carbono a los que est�n unidos, forman un enlace doble.
7. Un compuesto macr�lido de fórmula (I-A) 55

donde

5 R1 es un resto -Y-X-Q; Y es S, SO o SO2; X es un enlace o un grupo lineal que consiste en átomos de hidrógeno y hasta 9 átomos seleccionados entre C, N, O y/o S, de los que hasta 2 átomos pueden ser N y un átomo puede ser O o S, un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO y el átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2 y dos átomos de C

10 adyacentes pueden estar presentes como -CH=CH- o -C:C- y cuyo grupo X est� no sustituido o sustituido por -COO-W o -CONH-W; Q es un resto -V-A1-L-A2-W o, si X no representa un enlace, también puede ser -NR6R7; V es un grupo divalente aromático o heteroc�clico opcionalmente sustituido; W es un arilo o heterociclilo opcionalmente sustituido; o en un grupo -V-A1-L-A2-W, donde al menos uno de los grupos A1; L o A2 est� presente,

15 también puede ser un grupo lineal monovalente sustituido o no sustituido saturado o no saturado con hasta 5 átomos compuesto de C, N, O y/o S de los que un átomo de carbono puede aparecer como un grupo CO un átomo de azufre puede aparecer como un grupo SO2,

20 A1 y A2 independientemente entre s�, pueden estar bien ausente, o ser un grupo alquileno C1-C4; L es un enlace simple, -O-, -S-, -SO2-, -NH-, -CO-, -(CO)O-, -O(OC)-, -(CO)NH-, -NH(CO)-, -(SO2)NH-, -HN(SO2), -HN(CO)NH-, -O(CO)NH-, -NH(CO)O-, o también puede estar ausente si A1 y/o A2 est�n presente; R6, R7 se selecciona independientemente entre s� entre arilo; aralquilo; heterociclilo y heterociclilalquilo; y uno

25 de R6 y R7 también pueden ser también un grupo -L-W R12 es hidrógeno y R13 es OR 14 o R12 y R13 tomados junto con el átomo de carbono al que est�n unidos, representan un grupo C=O; R14 es, independientemente en cada caso en la fórmula (I-A), son hidrógeno o un grupo alif�tico saturado o

30 insaturado con de 1 a 6 átomos de carbono; y

* indica un centro quiral que est� en forma (R) o (S);

para su uso en la prevención y/o el tratamiento del cáncer en animales o seres humanos. 35
8. Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde R13 es hidroxilo o aliloxi.

40 9. Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde R12 y R13 tomados junto con el átomo de carbono al que est�n unidos, representan un grupo C=O.
10. Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-9, o un compuesto de

45 acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde R14 representa hidrógeno o, preferentemente, metilo.
11. Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-9, o un compuesto de

acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde R14 representa hidrógeno, o bien, preferentemente, 50 metilo y donde OR14 en la posición 6 del anillo macr�lido representa metoxi.
12.

Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-11, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde Y es SO2 o, preferentemente, S.
13.

Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-12, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde Q es un resto -V-A1-L-A2-W.
14.

Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-13, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde V es un grupo divalente de fórmula

10 donde

es un anillo de fenileno o un anillo heterocicloalif�tico o heteroarom�tico divalente saturado o insaturado de x

15 miembros que contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 4 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre, y preferentemente oxígeno y nitrógeno, R8 y R9 se han seleccionado independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquiloxi C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxi C1-C4, halógeno, grupos alquilo C1-C4 sustituidos con halógeno, grupos alcoxi C1-C4 sustituidos con halógeno, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, dialquilamino C1-C4, alquiltio C1-C4, mercapto,

20 hidroxi, carbamo�lo, un grupo carboxilo, un grupo oxo; o arilo o heterociclilo, que puede estar no sustituido o sustituido con uno o más de los sustituyentes anteriormente identificados diferentes de arilo o heterociclilo, o cuando

ambos sustituyentes R8 y R9 est�n ubicados en átomos de carbono adyacentes en el anillo estos dos

sustituyentes, tomados junto con dichos átomos de carbono adyacentes, también pueden formar un anillo aromático de 5 o 6 miembros o un anillo heterocicloalif�tico o heteroarom�tico saturado o insaturado de x miembros que

25 contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 4 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre y preferentemente, oxígeno y nitrógeno, y donde V puede tener también conjuntamente de uno a cuatro sustituyentes del tipo definido para R8 y R9 y las valencias libres se pueden localizar bien en uno o bien en ambos anillos del grupo V.

30 15. Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-13, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde V es un grupo divalente de fórmula
16.

Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde W es heterociclilo.
17.

Un compuesto para usar de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4,6 donde W es un grupo de fórmula

donde

es un anillo de fenilo o un anillo heterocicloalif�tico o heteroarom�tico saturado o insaturado de x miembros que

15 contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 4 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre, y preferentemente oxígeno y nitrógeno, R10 y R11 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C1-C4, alcoxi C1-C4, cicloalquiloxi C3-C7, cicloalquil C3-C7-alcoxi C1-C4, halógeno, grupos alquilo C1-C4 sustituidos con halógeno, grupos alcoxi C1-C4 sustituidos con halógeno, ciano, nitro, amino, alquilamino C1-C4, di-alquilamino (C1-C4), alquiltio C1-C4, mercapto, hidroxi,

20 carbamo�lo, un grupo carboxilo, y un grupo oxo; o cuando ambos sustituyentes R10 y R11 est�n ubicados en átomos

de carbono adyacentes en el anillo estos dos sustituyentes, tomados junto con dichos átomos de carbono

adyacentes, también pueden formar un anillo aromático de 5 o 6 miembros o un anillo heterocicloalif�tico o heteroarom�tico saturado o insaturado de x miembros que contiene de 2 a (x-1) átomos de carbono siendo x de 5 a 8, preferentemente 5 o 6, y de 1 a 3 hetero�tomos seleccionados del grupo que consiste en azufre y

25 preferentemente, oxígeno y nitrógeno, donde W puede tener conjuntamente de uno a cuatro sustituyentes del tipo definido para R10 y R11 y las valencias libres se pueden localizar bien en cualquiera de los anillos del grupo W.
18. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15 o un compuesto de

acuerdo con la reivindicación 1,4-6 donde W es un grupo de una de las fórmulas 30
19. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15 o un compuesto de

35 acuerdo con la reivindicación 1,4-6 donde Q es -NR6R7, si X no es un enlace.
20.

Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15 o un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1,4-6 donde

A1, A2 independientemente entre s�, pueden estar bien ausente, o ser un grupo alquileno C1-C2; y L es -NH-, -(CO)NH- o -NH(CO)- o est� ausente.
21.

Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15 o un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1,4-6 donde A1, A2 independientemente entre s�, pueden estar bien ausente, o ser un grupo alquileno C1-C2; L es -NH-, -(CO)NH- o -NH(CO)-; V es un grupo divalente de fórmula

10 y W es un grupo de fórmula

15 22. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15 o un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1,4-6 donde Y es -S- y X es -CH2-CH2-NH- o -CH2-CH2-O- que est�n unidos al resto Q mediante el grupo NH o el átomo de oxígeno, respectivamente, o preferentemente -CH2-CH2-.
23. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-3 y 7-15 o un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1,4-6 donde Q es -NR6R7 y -NR6R7 es un grupo de una de las siguientes fórmulas

donde

30

significa un resto metoxi.

35

24. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 donde dicho compuesto tiene una de las siguientes fórmulas:
25.

Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 7 donde dicho compuesto tiene la siguiente fórmula:
26.

Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 7 y donde dicho compuesto tiene las siguientes fórmulas:
27.

Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 6 y un portador farmac�uticamente aceptable. 5
28. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 y un portador farmac�uticamente aceptable para la prevención o el tratamiento del cáncer en seres humanos.

10 29. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 y un portador farmac�uticamente aceptable para el tratamiento del cáncer en seres humanos.