ES2338558T3 - Nuevos derivados de ciclodextrinas, su procedimiento de preparacion y su utilizacion en particular para la solubilizacion de sustancias farmacologicamente activas. - Google Patents
Nuevos derivados de ciclodextrinas, su procedimiento de preparacion y su utilizacion en particular para la solubilizacion de sustancias farmacologicamente activas. Download PDFInfo
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Abstract
Compuesto que responde a la fórmula general siguiente: **(Ver fórmula)** en la que: - n representa un número entero comprendido entre 1 y 6; - m representa un número entero igual a 5, 6 ó 7; - R1 representa un grupo OH o un grupo -S-CH2-(CH2)n,-Z, siendo todos los R1 idénticos; - Z representa: - un grupo NHX, - un grupo amonio cuaternario de forma +NX3, - un grupo **(Ver fórmula)** representando X un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo que comprende de 1 a 6 átomos de carbono, y siendo en particular un grupo metilo, etilo, propilo o butilo, y representando R un átomo de hidrógeno, un sustituyente alquilo de 1 a 12 átomos de carbono lineal o ramificado, o un grupo aromático tal como el grupo fenilo, bencilo o naftilo, o unos derivados de estos grupos que contienen unos sustituyentes sobre el ciclo aromático tales como los sustituyentes metilo, etilo, cloro, bromo, yodo, nitro, hidroxilo, metoxilo o acetamido, o representando R un elemento de biorreconocimiento tal como un derivado de aminoácido, un péptido, un monosacárido, un oligosacárido, un elemento de multiplicación con varias ramificaciones que comprende unos grupos glucídicos que pueden ser idénticos o diferentes, o una sonda de visualización o de detección fluorescente o radioactiva, con la condición de que el compuesto en el que n = 1, m = 6, Z = NH2 y R1 = OH sea excluido.
Description
Nuevos derivados de ciclodextrinas, su
procedimiento de preparación y su utilización en particular para la
solubilización de sustancias farmacológicamente activas.
La presente invención se refiere a nuevos
derivados de ciclodextrinas, así como a su procedimiento de
preparación. La presente invención se refiere asimismo a la
utilización de estos nuevos derivados para la solubilización de
sustancias farmacológicamente activas en un medio acuoso.
Las ciclodextrinas, o ciclomaltooligosacáridos,
son unos oligosacáridos cíclicos que son conocidos por su aptitud
para incluir en su cavidad unas moléculas diversas, de tamaño
adaptado a la de la estructura hospedante. El carácter generalmente
polar de estas asociaciones conduce a incluir preferentemente unas
estructuras moleculares de tipo hidrófobo, permitiendo en
particular la solubilización en el agua y los medios biológicos de
compuestos poco o nada solubles en estos medios, y eventualmente
mejorar su estabilización. Estas propiedades se utilizan actualmente
en particular para el transporte de medicamentos.
La solubilidad relativamente baja en agua de las
ciclodextrinas, y en particular de la más accesible de ellas en el
plano económico, la \beta-ciclodextrina (18 g/l,
es decir 15 mmol/l, a 25ºC) limita sin embargo su utilización con
este objetivo. Por otro lado, como las ciclodextrinas no poseen
ninguna capacidad de reconocimiento frente a receptores biológicos
en el organismo, estas entidades no se pueden utilizar para el
apuntado y la vectorización de principios activos.
Para remediar este hecho establecido, las
ciclodextrinas han sido modificadas químicamente para mejorar su
solubilidad en el agua por un lado y, por otro lado, para incorporar
en su estructura unas señales de reconocimiento celular. De esta
forma, las solicitudes internacionales WO 95/19994, WO 95/21870 y WO
97/33919, y la solicitud de patente europea EP 0 403 366 describen
unos derivados de ciclodextrinas de las cuales una o más funciones
alcohol primario están sustituidas con unos grupos monosacarídicos u
oligosacarídicos a través de un átomo de oxígeno o de azufre, o
bien a través de un grupo tiourea, así como su utilización. Estas
ciclodextrinas ramificadas son en particular susceptibles de servir
de hospedante para el taxol y sus derivados, en particular el
Taxotère®, que son unos agentes antitumorales y antiparasitarios,
tal como se describe por P. Potier en Chem. Soc. Rev., 21, 1992, p.
113-119. Se obtienen así unos complejos de
inclusión, lo que permite solubilizar en el agua estos agentes
antitumorales. A título de ejemplo, la solubilidad en el agua del
Taxotère® que es de 0,004 g/l, puede ser aumentada hasta 6,5 g/l
mediante la adición de
6^{l}-S-\alpha-maltosil-6^{l}-tiociclomaltoheptaosa
a su suspensión acuosa, tal como se describe en el documento WO
95/19994.
El documento
EP-A-0 605 753 describe unos
complejos de inclusión del taxol utilizando unas ciclodextrinas
ramificadas tales como las maltosil-ciclodextrinas,
para aumentar la solubilidad de este compuesto en el agua.
Unos derivados de ciclodextrinas que comprenden
uno o varios sustituyentes glicosilo o maltosilo unidos a la
ciclodextrina mediante un átomo de azufre son descritos asimismo por
V. Lainé et al. en J. Chem. Soc., Perkin Trans., 2, 1995, p.
1479-1487. Estos derivados han sido utilizados para
solubilizar un agente antiinflamatorio tal como la prednisolona.
El documento WO 97/33919 describe los
procedimientos de preparación de las
tioureido-ciclodextrinas mediante el acoplamiento
de las
6^{l}-amino-6^{l}-desoxiciclodextrinas
o también de los derivados peraminados correspondientes con unos
isotiocianatos de alquilo o unos mono- u oligosacáridos.
La incorporación de sustituyentes glucídicos
sobre las ciclodextrinas conduce a unos derivados provistos de una
solubilidad en el agua mucho más elevada si se la compara con la
ciclodextrina de partida. Al mismo tiempo, este enfoque permite
conferir a la ciclodextrina una afinidad particular para ciertos
sitios biológicos, puesto que los sustituyentes glucídicos son bien
conocidos como marcadores de reconocimiento celular. Así, este tipo
de modificación de la ciclodextrina puede permitir el apuntado y la
vectorización de una sustancia activa incluida en la
ciclodextrina.
La afinidad de un marcador glucídico para un
receptor específico de membrana celular (lectina) es por regla
general baja. Para alcanzar unas afinidades útiles para el apuntado
y la vectorización, se debe prever una presentación múltiple y
simultánea del ligando. En el caso de derivados de ciclodextrinas
monosustituidas en posición alcohol primario (es decir, unas
ciclodextrinas en las que uno de los grupos OH de los alcoholes
primarios está sustituido), este problema puede ser parcialmente
resuelto mediante la incorporación de estructuras glicodendríticas,
tal como se describe por I. Baussanne et al. en Chem. Commun,
2000, p. 1489-1490. Sin embargo, el procedimiento de
preparación de dichos compuestos es complicado.
Por otro lado, los resultados recientes
descritos por I. Baussanne et al. en Chem Bio Chem 2001, p.
777-783 muestran que los derivados de la
\beta-ciclodextrina que comprenden unos
sustituyentes de tipo glicosiltioureido, obtenidos a partir de la
per-(C-6)-amina correspondiente, no
muestran una afinidad suficiente frente a unas lectinas
complementarias.
\newpage
En la actualidad, no existe ningún derivado de
ciclodextrinas obtenido mediante un procedimiento simple, que
permita aumentar la solubilización de sustancias farmacológicamente
activas y que presenten asimismo una afinidad suficiente frente a
unas lectinas complementarias.
Uno de los objetivos de la presente invención es
proporcionar nuevos derivados de ciclodextrinas, polisustituidos
pero asimismo monosustituidos, en posición alcohol primario, que
presentan no sólo un interés para la solubilización de las
sustancias activas, en particular de los antitumorales de la familia
del taxol tal como el Taxotère®, sino también una fuerte afinidad
frente a los receptores membranarios específicos, lo que permite
prever por medio de los mismos un transporte eficaz y selectivo de
la sustancia activa hacia unos órganos dianas.
Uno de los objetivos de la invención consiste en
proporcionar un procedimiento de preparación simple de realizar, y
que permite obtener nuevos derivados de ciclodextrinas con un buen
rendimiento, del orden de por lo menos 50%, y preferentemente 70%,
sin tener que efectuar ninguna purificación larga y complicada.
La presente invención se refiere a la
utilización de un procedimiento que comprende una etapa de reacción
de un compuesto selectivo o totalmente halogenado en posición
alcohol primario, de fórmula (VII) siguiente:
representando m un número entero
igual a 5, 6 ó
7,
representando W un grupo OH o un grupo Y, siendo
los grupos W todos idénticos, y
representando Y un átomo de halógeno
seleccionado de entre el grupo constituido por el cloro, por el
bromo, por el yodo, y siendo preferentemente el bromo o el yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
siendo dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
o la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-a)
siguiente:
siendo dicha sal asociada a un
contra-ión halogenuro, preferentemente el ión
cloruro,
representando n un número entero comprendido
entre 1 y 6,
representando X un átomo de hidrógeno o un grupo
alquilo que comprende de 1 a 6 átomos de carbono, y siendo en
particular un grupo metilo, etilo, propilo o butilo, siendo X
preferentemente un átomo de hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
\newpage
con el fin de obtener un compuesto que responde
a las fórmulas siguientes (A-a) o
(A-b):
representando R_{1} un grupo OH o
bien un grupo
-S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
siendo todos los R^{1} idénticos, representando Z un grupo NHX o
un grupo amonio cuaternario de forma
+NX_{3},
siendo m, n y X tal como se han definido
anteriormente,
para la preparación de compuestos de fórmula (I)
siguiente:
en la
que:
- m, n y R_{1} son tal como se han definido
anteriormente, y
- Z representa:
- \bullet
- un grupo NHX,
- \bullet
- un grupo amonio cuaternario de forma ^{+}NX_{3},
- \bullet
- un grupo
siendo X tal como se ha definido
anteriormente,
y
representando R un átomo de hidrógeno, un
sustituyente alquilo de 1 a 12 átomos de carbono lineal o
ramificado, o un grupo aromático tal como el grupo fenilo, bencilo o
naftilo, o unos derivados de estos grupos que contienen unos
sustituyentes sobre el ciclo aromático tales como los sustituyentes
metilo, etilo, cloro, bromo, yodo, nitro, hidroxilo, metoxilo o
acetamido, o
representando R un elemento de
biorreconocimiento tal como un derivado de aminoácido, un péptido,
un monosacárido, un oligosacárido, un elemento de multiplicación de
varias ramificaciones que comprende unos grupos glucídicos que
pueden ser idénticos o diferentes, o una sonda de visualización o de
detección fluorescente o radioactiva.
La presente invención se refiere a un compuesto
que responde a la fórmula general siguiente:
en la
que:
- n representa un número entero comprendido
entre 1 y 6;
- m representa un número entero igual a 5, 6 ó
7;
- R^{1} representa un grupo OH o un grupo
-S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
siendo todos los R^{1} idénticos;
- Z representa:
- \bullet
- un grupo NHX,
- \bullet
- un grupo amonio cuaternario de forma ^{+}NX_{3},
- \bullet
- un grupo
representando X un átomo de
hidrógeno o un grupo alquilo que comprende de 1 a 6 átomos de
carbono, y siendo en particular un grupo metilo, etilo, propilo o
butilo,
y
representando R un átomo de hidrógeno, un
sustituyente alquilo de 1 a 12 átomos de carbono lineal o
ramificado, o un grupo aromático tal como el grupo fenilo, bencilo o
naftilo, o unos derivados de estos grupos que contienen unos
sustituyentes sobre el ciclo aromático tales como los sustituyentes
metilo, etilo, cloro, bromo, yodo, nitro, hidroxilo, metoxilo o
acetamido, o
representando R un elemento de
biorreconocimiento tal como un derivado de aminoácido, un péptido,
un monosacárido, un oligosacáridos, un elemento de multiplicación de
varias ramificaciones que comprende unos grupos glucídicos que
pueden ser idénticos o diferentes, o una sonda de visualización o de
detección fluorescente o radioactiva,
con la condición de que el compuesto en el que n
= 1, m = 6, Z = NH_{2} y R_{1} = OH sea excluido.
\vskip1.000000\baselineskip
La expresión "elemento de
biorreconocimiento" designa una estructura molecular
complementaria de un receptor biológico, susceptible de ser
reconocida por este último y de conducir a una respuesta específica:
inducción y regulación de la biosíntesis de una enzima, inhibición
de la actividad de una enzima por fijación sobre su sitio activo,
inducción de una respuesta inmunitaria a consecuencia de una
afección bacteriana, inhibición de un proceso inflamatorio por
bloqueo del sitio activo de una selectina, etc.
La expresión "elemento de multiplicación con
varias ramificaciones" designa en particular una cadena carbonada
ramificada que comprende un carbono cuaternario tetrasustituido tal
como los derivados de la
tris(2-aminometil)metilamina (TRIS) y
del pentaeritritol.
La expresión "sonda de visualización o de
detección fluorescente o radiactiva" designa una estructura
molecular que permite la detección de un sistema mediante una
técnica fisicoquímica, tal como la fluorescencia o la
radioactividad. Entre las sondas fluorescentes, se pueden citar en
particular los derivados de la fluoresceína, del dansilo
(5-(dimetilamino)-1-naftalensulfonilo)
o de la cumarina. Entre las sondas radioactivas, se pueden citar los
productos marcados por un isótopo radioctivo.
La fórmula (I) mencionada anteriormente se
refiere al mismo tiempo a los compuestos poli- y monosustituidos
sobre el ciclo ciclodextrina. Los compuestos monosustituidos
corresponden a la fórmula (I) en la que R^{1} representa OH y los
compuestos polisustituidos corresponden a la fórmula (I) en la que
R^{1} representa
-S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z.
En estos nuevos derivados, se ha constatado que
la presencia de un grupo espaciador de tipo cisteaminilo o, más
generalmente, de un grupo espaciador derivado de un
\omega-aminoalcanotiol, entre la posición alcohol
primario de la ciclodextrina y el grupo Z, es interesante, en
particular para aumentar la reactividad de los grupos amina en el
caso de los compuestos que responden a la fórmula (I), representando
Z NHX y, por otro lado, para garantizar la eficacia del fenómeno de
reconocimiento celular en el caso de los derivados que responden a
la fórmula (I), representando Z un grupo tioureado. Por otro lado,
se debe observar que este grupo espaciador se introduce de manera
simple usando la cisteamina comercial o el
\omega-aminoalcanotiol homólogo correspondiente
como reactivo, lo que evita en particular la etapa de reducción
necesaria cuando los grupos amina se preparan a partir de un
precursor de tipo azida tal como es el caso en los ejemplos
descritos en el documento WO 97/33919 mencionado anteriormente.
Se debe observar que el producto de fórmula (I)
en el que m es igual a 6, R_{1} representa OH y Z representa
NH_{2} ha sido preparado anteriormente mediante reacción del
6^{l}-O-tosilciclomaltoheptaosa en
la N,N-dimetilformamida con la cisteamina a temperatura
ambiente con un rendimiento no precisado (Y. Nagata et al.,
Bull Chem. Soc. Jpn. 1994, 67, 495-499) o también
mediante reacción de este mismo tosilato con el clorhidrato de
cisteamina en una mezcla agua-dimetilformamida a
60ºC en presencia de hidrogenocarbonato de sodio con un rendimiento
de 43% (B. Ekberg et al., Carbohydr. Res., 1992, 192,
111-117). En el marco de la presente invención,
este producto ha sido usado como intermediario de síntesis para la
obtención de las tioureidocisteaminil ciclodextrinas
correspondientes. Se ha encontrado ventajoso prepararlo mediante
reacción de un precursor monohalogenado en C-6 de
la \beta-ciclodextrina, preferentemente el
bromuro, con el clorhidrato de cisteamina en
N,N-dimetilformamida en presencia de trietilamina
(rendimiento 85%). Eventualmente, el grupo amina de la cisteamina o
del \omega-aminoalcanotiol puede contener un
sustituyente alquilo tal como un grupo metilo, etilo, propilo o
butilo. Este grupo espaciador prefuncionalizado permite asociar la
ciclodextrina a un motivo hidrófilo y de reconocimiento celular tal
como un derivado glucídico, o también un aminoácido o un péptido,
mediante unas uniones de tipo tiourea, amida y tioéter que son muy
estables y dan lugar a unas estructuras bien definidas. La unión
tiourea se crea en una última etapa y permite acoplar la
ciclodextrina a numerosos sustituyentes, en particular unos
sustituyentes que comprenden un elemento de multiplicación de varias
ramificaciones, conteniendo dichas ramificaciones diversos motivos
glucídicos o incluso una sonda de visualización o de detección
fluorescente o radioactiva.
Las cisteaminil-ciclodextrinas
que responden a la fórmula (I) descrita anteriormente en la que Z
representa un grupo amina de tipo NHX (X = H o sustituyente
alquilo) se pueden aislar en forma de sal de amonio (caso en el que
Z representa ^{+}NX_{3}) o de base libre (caso en el que Z
representa NHX). En el caso de la sal, el
contra-ión es un anión monovalente, en particular un
halogenuro tal como el cloruro, el bromuro o el yoduro. Es en
particular el caso para las
cisteaminil-ciclodextrinas que responden a la
fórmula (I) en la que Z representa un grupo amonio cuaternario
cargado positivamente, de tipo ^{+}NX_{3} (X = sustituyente
alquilo). Los compuestos de fórmula (I), en la que Z representa NHX,
se pueden usar como precursores en la preparación de las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas, en particular
unos derivados hiperramificados. Cuando Z en la fórmula (I)
representa un grupo NH_{2}, las tioureas obtenidas son
N,N'-disustituidas, mientras que cuando Z
representa un grupo NHX, representando X un sustituyente alquilo,
tal como metilo, etilo, propilo o butilo, las tioureas obtenidas son
N,N,N'-trisustituidas.
En el caso de las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas de fórmula (I),
en la que Z representa un grupo tiourea, los sustituyentes R pueden
ser de diversos tipos. Así, R puede representar un átomo de
hidrógeno, un sustituyente alilo de 1 a 12 átomos de carbono lineal
o ramificado, o un grupo aromático tal como fenilo, bencilo, naftilo
o unos derivados de estos grupos que contienen unos sustituyentes
sobre el ciclo aromático, siendo dichos sustituyentes tal como se
han definido anteriormente. R puede asimismo representar, en
particular, unos grupos derivados de aminoácidos, de péptidos, de
monosacáridos o de oligosacáridos eventualmente sustituidos. A
título de ejemplo de grupos derivados de monosacáridos, se pueden
citar los derivados de la glucosa, de la manosa y de la galactosa,
en configuración anomérica \alpha o \beta. En el caso en el que
el grupo derivado del monosacárido está sustituido, uno o más de
los grupos hidroxilo del monosacárido pueden ser sustituidos por
unos grupos alcoxi de 1 a 16 átomos de carbono, unos grupos aciloxi
tal como el grupo acetoxi, unos grupos amina o amida. Los grupos
derivados de oligosacáridos pueden ser los grupos maltosilo,
maltotriosilo, lactosilo o también unos tri- o tetrasacáridos
marcadores de afinidad celular de tipo Lewis X o sialil Lewis X, o
también unos oligosacáridos derivados de la heparina. Asimismo, se
pueden sustituir por unos grupos alcoxi, aciloxi, unos grupos
aminados, sulfatados o fosfatados.
Según la invención, R puede representar asimismo
un grupo que comprende un elemento de multiplicación ramificado,
por ejemplo un grupo derivado de la
tris(2-hidroximetil)metilamina (TRIS)
o del pentaeritritol, que comprende en las ramificaciones unos
grupos derivados de mono- o de oligosacáridos que pueden ser
idénticos o diferentes. A título de ejemplo, se pueden citar los
grupos derivados de mono- u oligosacáridos ya citados en el párrafo
anterior, que pueden comprender asimismo unos sutituyentes
oxigenados o aminados. Estos grupos glucídicos pueden estar unidos
al elemento de multiplicación mediante una unión oxigenada,
sulfurada o aminada. En el caso en el que R comprende un elemento
de ramificación, una de las ramificaciones puede contener asimismo
una sonda de tipo fluorescente, en particular un derivado de la
fluoresceína o también una sonda radioactiva.
\newpage
Según un modo de realización ventajoso, los
compuestos de la invención responden a una de las fórmulas
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
en las que m, n, R^{1}, X y R son
tal como se han definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Un compuesto ventajoso de la presente invención
se caracteriza porque R^{1} representa OH, y responde a la fórmula
general siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que:
- m, n y Z son tal como se han definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos mencionados anteriormente son
unos compuestos monosustituidos sobre el ciclo ciclodextrina.
En este tipo de compuestos, el acceso a la
cavidad de la ciclodextrina es menos voluminoso que en el caso de
los compuestos de la técnica anterior, lo que puede resultar con
mejores propiedades de complejación para ciertas moléculas
invitadas.
Un compuesto ventajoso de la presente invención,
que responde a la fórmula (I-a) se caracteriza
porque Z representa un grupo NHX, siendo X tal como se ha definido
anteriormente, y siendo en particular un átomo de hidrógeno.
Dichos compuestos responden a la fórmula
siguiente:
Los compuestos mencionados anteriormente pueden
servir de intermedio de reacción cuando X representa un átomo de
hidrógeno, con el fin de obtener los compuestos de fórmula
(I-a) en la que Z representa un grupo tiourea.
Un compuesto ventajoso de la presente invención,
que responde a la fórmula (I-a) se caracteriza
porque Z representa un grupo NH_{2} o un grupo NX_{3}+, y
responde a una de las fórmulas
(I-f-bis) o (I-g)
siguientes:
en las que m, n y X son tales como
se han definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, que
responde a la fórmula (I-a) y se caracteriza porque
Z representa un grupo
siendo R tal como se ha definido
anteriormente, y siendo X tal como se ha definido anteriormente, y
siendo en particular un átomo de
hidrógeno.
\newpage
Dichos compuestos responden a la fórmula
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto de fórmula (I) tal como se ha definido
anteriormente, caracterizado porque R^{1} representa un grupo
-S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
y responde a la fórmula general siguiente (I-b):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que m, n y Z son tales como
se han definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos mencionados anteriormente son
unos compuestos polisustituidos sobre el ciclo ciclodextrina.
En dichas estructuras, los elementos de
biorreconocimiento incorporados están multiplicados con relación a
los derivados monosutituidos, lo que, en el caso de los compuestos
de la invención, puede traducirse por mejores afinidades frente a
unos receptores biológicos. Para los derivados hiperramificados, se
pueden prever nuevas propiedades supramoleculares (y por lo tanto de
transporte) debido a la posible extensión de la cavidad de la
ciclodextrina por los sustituyentes en C-6.
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, de
fórmula (I-b), que responde a la fórmula
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
siendo X, n y m tales como se han
definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de fórmula (I-c)
son unos compuestos derivados de la ciclodextrina, denominados
compuestos cisteaminilciclodextrinas, y pueden servir de intermedio
de reacción, cuando X representa un átomo de hidrógeno, con el fin
de obtener los compuestos de fórmula (I-b) en la que
Z representa un grupo tiourea.
\newpage
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, de
fórmula (I-b), caracterizado porque X representa un
átomo de hidrógeno y porque n es igual a 1, y responde a la fórmula
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo m tal como se ha definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, de
fórmula (I-b) que responde a la fórmula
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo X, n y m tales como se han
definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, que
responde a la fórmula siguiente (II):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Siendo X, n, m y R tales como se han definido
anteriormente, y siendo R idéntico para cada grupo
\vskip1.000000\baselineskip
tal como se ha definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de fórmula (II) son unos
compuestos derivados de la ciclodextrina, denominados compuestos
tioureidocisteaminilciclodextrinas.
\newpage
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, de
fórmula (II), caracterizado porque X representa un átomo de
hidrógeno y porque n es igual a 1, y responde a la fórmula
siguiente:
siendo R y m tales como se han
definido
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente,
caracterizado porque uno por lo menos de los grupos NHX tales como
se han definido anteriormente está protonado y asociado a un anión
monovalente seleccionado en particular de entre el ión cloruro,
bromuro o yoduro.
La presente invención se refiere asimismo a un
compuesto tal como se ha definido anteriormente, caracterizado
porque n es igual a 1 y porque el grupo Z representa el grupo amonio
cuaternario ^{+}NX_{3}, y porque se puede asociar a un anión
monovalente seleccionado en particular de entre el ión cloruro,
bromuro yoduro, y que responde a la fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
Estos productos cargados positivamente pueden
presentar unas interacciones electroestáticas favorables con unas
moléculas cargadas negativamente tales como unos polinucleótidos.
Desde este punto de vista, se puede prever una aplicación de estos
derivados como vectores para la transferencia de genes. Por otro
lado, tal como se describe por J. Defaye et al. (J. Incl.
Phen. Mol. Recogn. Chem. 29 (1997) 57-63), se sabe
que la presencia de un grupo cargado positivamente en
C-6 de las ciclodextrinas disminuye el carácter
hemolítico de estas entidades, y por lo tanto su toxicidad.
La presente invención se refiere asimismo a un
compuesto de fórmula (II-a) tal como se ha definido
anteriormente, caracterizado porque el grupo R se selecciona de
entre los siguientes grupos:
- -
- el grupo \alpha-D-manopiranosilo, de fórmula siguiente (III):
\vskip1.000000\baselineskip
- -
- el grupo \beta-lactosilo, de fórmula siguiente (III-a):
\newpage
- -
- el grupo derivado del trisacárido Lewis X o del tetrasacárido sialilo Lewis X, respectivamente de fórmulas siguientes (III-b) y (III-c):
- -
- un oligosacárido derivado de la heparina, de fórmula siguiente (III-d):
\vskip1.000000\baselineskip
Así, la presente invención se refiere a los
compuestos que responden a una de las siguientes fórmulas:
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa el grupo \alpha-D-manopiranosilo de fórmula (III):
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa el grupo \beta-lactosilo de fórmula (III-a):
\newpage
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa el grupo derivado del trisacárido Lewis X de fórmula (III-b):
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa el grupo derivado del tetrasacárido sialilo Lewis X de fórmula (III-c):
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa un oligosacárido derivado de la heparina, de fórmula (III-d):
La presente invención se refiere asimismo a un
compuesto de fórmula (II-a) tal como se ha definido
anteriormente, caracterizado porque:
R comprende un elemento de ramificación derivado
de la tris-(2-hidroximetil)metilamina, o
R representa uno de los siguientes grupos:
- -
- el grupo tris(\alpha-D-manopiranosiloximetil)metilo, de fórmula siguiente (IV):
- -
- el grupo tris(\beta-lactosiloximetil)metilo, de fórmula siguiente (IV-a):
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención se refiere asimismo a los
compuestos que responden a una de las siguientes fórmulas:
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa el grupo tris(\alpha-D-manopiranosiloximetil)metilo, de fórmula (IV):
- -
- compuesto de fórmula (II-a) cuando R representa el grupo tris(\beta-lactosiloximetil)metilo, de fórmula (IV-a):
\vskip1.000000\baselineskip
La presente invención se refiere asimismo a un
compuesto de fórmula (I-a) tal como se ha definido
anteriormente, caracterizado porque R comprende un elemento de
ramificación derivado del pentaeritritol, respondiendo dicho
compuesto a la fórmula siguiente:
en la
que
m, n, R^{1} y X son tales como se han definido
anteriormente, y
R^{2} y R^{3} representan unos derivados
glucídicos que pueden ser diferentes o idénticos o también una sonda
fluorescente o radioactiva.
\vskip1.000000\baselineskip
Dicho compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, de
fórmula (V), caracterizado porque R^{1} representa OH.
Dicho compuesto responde a la fórmula
siguiente:
Los compuestos mencionados anteriormente
representan unos compuestos monosustituidos en el ciclo
ciclodextrina.
Un compuesto ventajoso según la presente
invención es un compuesto tal como se ha definido anteriormente, de
fórmula (V), caracterizado porque R^{1} representa el grupo de
fórmula:
Dicho compuesto responde a la fórmula
siguiente:
Los compuestos mencionados anteriormente
representan unos compuestos polisustituidos en el ciclo
ciclodextrina.
La presente invención se refiere asimismo a un
compuesto tal como se ha definido anteriormente, de fórmula (V),
caracterizado porque n es igual a 1, porque X representa un átomo de
hidrógeno y porque R^{2} y R_{3} representan uno de los
siguientes grupos:
- -
- el grupo \alpha-D-manopiranosilo, de fórmula (III), tal como se ha definido anteriormente, o
- -
- el grupo \beta-lactosilo, de fórmula (III-a), tal como se ha definido anteriormente, o
- -
- el grupo \beta-D-glucopiranosilo, de fórmula (VI) siguiente:
- pudiendo ser R^{2} y R^{3} idénticos o diferentes.
\vskip1.000000\baselineskip
Dichos compuestos responden a una de las
fórmulas siguientes:
a) compuestos monosustituidos (caso en el que
R_{1} representa OH)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
b) compuestos
polisustituidos
La presente invención se refiere asimismo a un
compuesto tal como se ha definido anteriormente, caracterizado
porque m es igual a 6.
El uso de
cisteaminil-ciclodextrinas de la invención, que
responden a la fórmula (I) en la que Z representa un grupo amina de
tipo NHX (X = H o sustituyente alquilo), como precursores para la
preparación de derivados persustituidos en posición alcohol
primario por unos sustituyentes glucídicos presenta unas ventajas en
comparación con otros métodos descritos anteriormente. En
particular, la formación de una unión tiourea presenta unas
ventajas desde el punto de vista de la simplicidad de realización,
de los rendimientos y de la purificación del producto final que a
menudo no necesita ya ninguna separación cromatográfica. Además, la
presencia del brazo espaciador de tipo cisteaminilo permite
disminuir el volumen estérico y permite la incorporación de un
elemento de multiplicación para acceder a unos derivados
hiperramificados, susceptibles de ser reconocidos mejor por unos
receptores celulares específicos debido a la multiplicación del
motivo de reconocimiento, lo que no es el caso de los
procedimientos de la técnica anterior, en particular de la solicitud
internacional WO 97/33919.
En efecto, en la técnica anterior, debido
probablemente a un volumen estérico, las
per(6-amino-6-desoxi)ciclodextrinas
usadas como material de partida en la preparación de las
tioureido-ciclodextrinas persustituidas en posición
alcohol primario y descritas en el documento WO 97/33919, tienen una
reactividad nucleófila relativamente baja, por lo que la reacción
con unos isotiocianatos para crear la unión tiourea se realiza
correctamente sólo con unos isotiocianatos activados, tales como
los glicosilotiocianatos, lo que implica la reacción e impide la
incorporación de elementos de multiplicación. Por otro lado, el
documento ChemBioChem 2001 ya citado muestra que las
glicosiltioureido-ciclodextrinas resultantes son mal
reconocidas por unas lecitinas específicas complementarias.
La presente invención se refiere asimismo a un
procedimiento de preparación de un compuesto tal como se ha definido
anteriormente, de fórmula (I), caracterizado porque comprende las
siguientes etapas:
- hacer reaccionar un compuesto selectiva o
totalmente halogenado en posición alcohol primario, de fórmula (VII)
siguiente:
siendo m tal como se ha definido
anteriormente,
representando W un grupo OH o un grupo Y, siendo
los grupos W todos idénticos, y
\newpage
representando Y un átomo de halógeno
seleccionado de entre el grupo constituido por el cloro, por el
bromo, por el yodo, y siendo preferentemente el bromo o el yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
siendo dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
o
la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-b)
siguiente:
siendo dicha sal asociada a un
contra-ión halogenuro, preferentemente el ión
cloruro,
siendo n y X tales como se han definido
anteriormente, y siendo X preferentemente un átomo de hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
con el fin de obtener un compuesto tal como se
ha definido anteriormente y que responde a las fórmulas siguientes
(A-a) o (A-b):
y
eventualmente
- hacer reaccionar el compuesto de fórmula
(A-a) tal como el obtenido en la etapa anterior con
un isotiocianato de fórmula (IX) siguiente:
(IX)R-N=C=S
en la que R es tal como se ha
definido
anteriormente,
\newpage
con el fin de obtener un compuesto tal como se
ha definido anteriormente, y que responde a la fórmula
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
Este procedimiento permite obtener unos
compuestos mono- y polisustituidos en el ciclo ciclodextrina.
La primera etapa del procedimiento mencionado
anteriormente se efectúa en dimetilformamida en presencia de
trietilamina (proporción DMF/trietilamina 4:1), y el conjunto se
agita durante 48 horas a temperatura ambiente. El rendimiento de
esta etapa está comprendido entre aproximadamente 80 y 95%.
La segunda etapa de este procedimiento es un
acoplamiento efectuado en una mezcla agua-acetona
(1:1 a 1:2) a pH 8-9 (bicarbonato de sodio) a
temperatura ambiente durante 1 a 6 horas. El rendimiento de esta
etapa está comprendido entre aproximadamente 55 y 95%.
La presente invención se refiere asimismo a un
procedimiento de preparación de un compuesto tal como se ha definido
anteriormente, que responde a la fórmula general
(I-b) siguiente:
estando dicho procedimiento
caracterizado porque comprende las siguientes
etapas:
- hacer reaccionar un compuesto
per(6-desoxi-6-halo)ciclodextrina,
de fórmula (VII-a) siguiente:
siendo m tal como se ha definido
anteriormente, y representando Y un átomo de halógeno seleccionado
de entre el grupo constituido por el cloro, por el bromo, por el
yodo, y siendo preferentemente el bromo o el
yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
siendo dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
\newpage
o la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-b)
siguiente:
siendo dicha sal asociada a un
contra-ión halogenuro, preferentemente el ión
cloruro,
siendo n y X tales como se han definido
anteriormente, y siendo X preferentemente un átomo de hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
con el fin de obtener un compuesto
(I-c), (I-d) o (I-e)
tal como se ha definido anteriormente
y
eventualmente
- hacer reaccionar el compuesto de fórmula
(I-c) tal como el obtenido en la etapa anterior con
un isotiocianato de fórmula (IX) siguiente:
(IX)R-N=C=S
en la que R es tal como se ha
definido
anteriormente,
con el fin de obtener un compuesto (II) o
(II-a), tal como se ha definido anteriormente.
Este procedimiento permite obtener unos
compuestos polisustituidos en el ciclo ciclodextrina.
La primera etapa del procedimiento antes
mencionado se efectúa en la dimetilformamida en presencia de
trietilamina (proporción DMF/trietilamina 4:1), y el conjunto se
agita durante 48 horas a temperatura ambiente. El rendimiento de
esta etapa está comprendido entre aproximadamente 80 y 95%.
La segunda etapa de este procedimiento es un
acoplamiento efectuado en una mezcla agua-acetona
(1:1 a 1:2) a pH 8-9 (bicarbonato de sodio) a
temperatura ambiente durante 1 a 6 horas. El rendimiento de esta
etapa está comprendido entre aproximadamente 55 y 90%.
\newpage
La presente invención se refiere asimismo a un
procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula
(I-f-bis):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en la que m y n son tales como se
han definido anteriormente, siendo preferentemente n igual a 1,
estando dicho procedimiento caracterizado porque comprende la
reacción de un compuesto selectivamente halogenado en posición
alcohol primario, de fórmula (VII)
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
siendo m tal como se ha definido
anteriormente,
y
representando Y un átomo de halógeno
seleccionado de entre el grupo constituido por el cloro, por el
bromo, por el yodo, y siendo preferentemente el bromo o el yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
siendo n tal como se ha definido
anteriormente,
o preferentemente con la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH.
La presente invención se refiere asimismo a un
procedimiento de preparación de compuestos tales como se han
definido anteriormente, que responden a la fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
estando dicho procedimiento
caracterizado porque comprende las etapas
siguientes:
- hacer reaccionar un compuesto selectiva o
totalmente halogenado en posición alcohol primario, de fórmula (VII)
siguiente:
siendo m tal como se ha definido
anteriormente,
y
representando Y un átomo de halógeno
seleccionado de entre el grupo constituido por el cloro, por el
bromo, por el yodo, y siendo preferentemente el bromo o el yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
o la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-b)
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo dicha sal asociada a un
halogenuro tal como un contra-ión, y siendo
preferentemente el ión
cloruro,
siendo n y X tales como se han definido
anteriormente, y siendo X preferentemente un átomo de hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
con el fin de obtener un compuesto de fórmula
(I-f) o (I-g) tal como se ha
definido anteriormente, de fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
en las que m, n y X son tales como
se han definido
anteriormente,
y eventualmente
- hacer reaccionar el compuesto de fórmula
(I-f) tal como el obtenido en la etapa anterior con
un isotiocianato de fórmula (IX) siguiente:
(IX)R-N=C=S
en la que R es tal como se ha
definido
anteriormente,
con el fin de obtener un compuesto tal como se
ha definido anteriormente, de fórmula (I-h):
\vskip1.000000\baselineskip
Este procedimiento permite obtener unos
compuestos en el ciclo ciclodextrina.
La primera etapa del procedimiento antes
mencionado se efectúa en dimetilformamida en presencia de
trietilamina (proporción DMF/trietilamina 4:1), y el conjunto se
agita durante 48 horas a temperatura ambiente. El rendimiento de
esta etapa está comprendido entre aproximadamente 85 y 95%.
La segunda etapa de este procedimiento es un
acoplamiento efectuado en una mezcla agua-acetona
(1:1 a 1:2) a pH 8-9 (bicarbonato de sodio) a
temperatura ambiente durante 1 a 3 horas. El rendimiento de esta
etapa está comprendido entre aproximadamente 80 y 95%.
Los derivados de tipo
cisteaminil-ciclodextrina de la invención que
responden a la fórmula (I), en la que todos los R^{1} son
idénticos y representan
S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
pueden ser preparados mediante un procedimiento que consiste en
hacer reaccionar un derivado de ciclodextrina persustituida en
posición alcohol primario mediante unos grupos halogenados, en
particular las per(6-bromo o
6-yodo-6-desoxi)ciclodextrinas,
con el clorhidrato de cisteamina comercial o, en general, con un
halohidrato de \omega-aminoalcanotiol de 2 a 6
átomos de carbono, eventualmente N-alquilado, en la
N,N-dimetilformamida en presencia de una base tal como una
amina tal como la trietilamina o la N,N-dimetilaminopiridina,
o un hidruro metálico tal como los hidruros de sodio o de litio.
Los derivados de ciclodextrinas persustituidos en posición alcohol
primario por unos grupos halogenados, usados como productos de
partida en este procedimiento, se pueden preparar a partir de la
ciclodextrina comercial en una sola etapa y con un buen rendimiento
por reacción con diversos reactivos de halogenación selectiva. Se
pueden usar para eso los procedimientos descritos por J. Defaye
et al. en los documentos Supramol. Chem, 2000, 12, p.
221-224, Polish J. Chem. 1999, 73, p.
967-971, Tetrahedron Lett. 1997, 38, p.
7365-7368, Carbohydr. Res. 1992, 228, p.
307-314, y Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 1991, 30, p.
78-80.
Los derivados de tipo
cisteaminil-ciclodextrina de la invención que
responden a la fórmula (I) en la que todos los R^{1} son
idénticos y representan OH se pueden preparar mediante un
procedimiento que consiste en hacer reaccionar un derivado de
ciclodextrina monosustituido en posición alcohol primario por un
grupo halogenado, en particular las
mono(6^{l}-bromo o
6^{l}-yodo-6^{l}-desoxi)ciclodextrinas,
con el clorhidrato de cisteamina comercial o, en general, con un
halohidrato de \omega-aminoalcanotiol de 2 a 6
átomos de carbono, eventualmente N-alquilado, siguiendo la
metodología descrita anteriormente para la preparación de los
derivados persustituidos en posición alcohol primario. Los
derivados de ciclodextrinas monosustituidos en posición alcohol
primario por unos grupos halogenados, usados como productos de
partida en este procedimiento, se pueden preparar a partir del
derivado 6^{l}-O-toluensulfonilo de la ciclodextrina en una
sola etapa y con un buen rendimiento mediante desplazamiento
nucleófilo del grupo tosilato por un anión halogenuro en la
N,N-dimetilformamida. Para la preparación de los derivados
de ciclodextrinas que comprenden un grupo
p-toluenosulfonato en una sola posición alcohol
primario, se puede usar el procedimiento descrito por J. Defaye
et al. en el documento WO/9961483 o los procedimientos
descritos en el artículo de revista por L. Jicsinszky et al.
en Comprehensive Supramolecular Chemistry, Vol. 3 (Editores J.
Szejtli y T. Osa), Pergamon, Oxford, 1996, p.
57-198.
La invención se refiere asimismo a unos
derivados de tipo cisteaminil-ciclodextrina que
responden a la fórmula (I) en la que los R^{1} son diferentes y
representan OH o
S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
con diferentes esquemas de sustitución. Se puede acceder a este
tipo de derivados partiendo de los derivados de ciclodextrina
selectivamente sustituidos por unos grupos de tipo sulfonato en
posición alcohol primario siguiendo la secuencia de las reacciones
descrita anteriormente para la preparación de los derivados de tipo
cisteaminil-ciclodextrina monosustituidos en
posición alcohol primario. Para la preparación de los derivados de
ciclodextrina selectivamente polisustituidos en posición alcohol
primario por unos grupos de tipo sulfonato, se pueden usar los
procedimientos descritos en el artículo de revista por L.
Jicsinszky et al. en Comprehensive Supramolecular Chemistry,
Vol. 3 (Editores J. Szejtli y T. Osa), Pergarnon, Oxford, 1996, p.
57-198.
El procedimiento de preparación de las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas de fórmula (II)
de la invención consiste en hacer reaccionar una
cisteaminil-ciclodextrina de fórmula (I) en la que Z
representa un grupo amina de tipo NHX (X = H o sustituyente
alquilo) con un isotiocianato de fórmula R-NCS en la
que R tiene el significado dado anteriormente. Esta reacción puede
llevarse a cabo en un disolvente orgánico tal como la piridina o
también en una mezcla de agua con un disolvente orgánico miscible
tal como la acetona.
Cuando R es un grupo derivado de un monosacárido
o de un oligosacárido, el isotiocianato de fórmula
R-NCS se puede preparar mediante la reacción del
tiofosgeno sobre una aminodesoxiglicosa o una glicosilamina. Para
esta reacción se pueden seguir los procedimientos descritos por J.
M. García Fernández y C. Ortiz Mellet en Adv. Carbohydr. Chem.
Biochem. 1999, 55, p. 35-135.
Cuando R comprende un elemento de multiplicación
ramificado derivado de la
tris(2-hidroximetil)metilamina
(TRIS), se puede preparar el isotiocianato correspondiente mediante
la reacción del tiofosgeno sobre el derivado aminado que contiene
unos sustituyentes glucídicos en las posiciones alcohol primario,
tal como se describe en el documento Chem. Commun., 2000, p.
1489-1490. El glicodendron trivalente aminado
precursor se puede obtener mediante la reacción de glicosilación de
un derivado de TRIS con la función amina convenientemente protegida
en forma de derivado carbobenzoxi, tal como se describe por P. R.
Ashton et al. en J. Org. Chem. 1998, 63, p.
3429-3437.
Cuando R comprende un elemento de multiplicación
ramificado derivado del pentaeritritol, los glicodendrones
convenientemente funcionalizados con un grupo isotiocianato se
pueden preparar a partir de pentaeritritol comercial mediante una
secuencia de reacciones que implica:
- (i)
- una trialilación selectiva mediante tratamiento con bromuro de alilo, lo que deja un solo grupo hidroxilo libre;
- (ii)
- la adición radicalaria de un 1-tioazúcar al doble enlace de los grupos alilo. Esta reacción se puede llevar a cabo, o bien por activación por luz ultravioleta, o bien en presencia de un iniciador de radicales libres tal como azobis (isobutironitrilo) o el ácido p-nitroperbenzoico. A título de ejemplo, se pueden adaptar las condiciones de reacción descritas por D. A. Fulton y J. F. Stoddart en Org. Lett. 2000, 2, p. 1113-1116 o por X.-B. Meng et al. en Carbohydr. Res. 2002, 337, p. 977-981. Se ha descubierto en particular que esta reacción permite la adición secuencial de las diferentes ramificaciones glucídicas. Se puede acceder así a unos glicodendrones homogéneos así como heterógenos en los que los sustituyentes glucídicos responden a las estructuras mencionadas anteriormente. Este enfoque permite asimismo la incorporación a la estructura de un sustituyente diferente de un derivado glucídico, en particular una sonda de tipo fluorescente tal como un derivado de la fluoresceína. Los 1-tioazúcares precursores se pueden preparar, o bien a partir de los halogenuros de glicosilo correspondientes mediante la reacción con tiourea seguida de hidrólisis de la sal de isotiouronio resultante, o bien a partir de glicanos mediante la adición radicalaria del ácido tioacético al doble enlace. Para estas reacciones se pueden seguir los procedimientos descritos en los artículos de revista publicados por J. Defaye y J. Gelas en Studies in Natural Products Chemistry, vol. 8 (editor Atta.ur Rahman), Elsevier, Ámsterdam, 1991, páginas 315-357 y por H. Driguez en Top. Curr. Chem., 1997, páginas 85-116.
- (iii)
- la transformación del grupo alcohol primario que permanece en grupo isotiocianato. Esta transformación se puede realizar por ejemplo mediante la transformación del grupo hidroxilo en un buen grupo de partida tal como el p-toluensulfonato o el trifluorometansulfonato, seguida del desplazamiento nucleófilo por el anión aziduro e isotiocianación de la azida resultante mediante reacción con la trifenilfosfina y el disulfuro de carbono. Para esta transformación, se puede seguir el procedimiento descrito en el documento Chem. Commun., 2000, páginas 1489-1490.
\vskip1.000000\baselineskip
Los procedimientos descritos anteriormente para
la obtención de las cisteaminil- y
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas de la invención
son muy interesantes porque permiten obtener los derivados deseados
en un número reducido de etapas y con unos rendimientos elevados.
Además, estos procedimientos permiten acceder a unos derivados
hiperramificados homogéneos y heterogéneos no accesibles fácilmente
por otras vías. Estos derivados son reconocidos de manera muy
eficaz por unas lectinas membranarias específicas, en función de los
sustituyentes glucídicos incorporados.
La presente invención se refiere asimismo a un
complejo de inclusión de un compuesto tal como se ha definido
anteriormente, con una molécula farmacológicamente activa, siendo la
relación molar entre el compuesto y la molécula farmacológicamente
activa de aproximadamente 50:1 a aproximadamente 1:1.
La expresión "complejo de inclusión"
designa la entidad supramolecular formada por el compuesto según la
invención (molécula hospedante) y la molécula farmacológicamente
activa (molécula invitada), en la que la molécula invitada está
mantenida en la cavidad hidrófoba de la molécula hospedante por
medio de interacciones no covalentes.
La expresión "molécula farmacológicamente
activa" designa un principio activo provisto de actividad
terapéutica, tal como un agente anticoagulante, antidiabético,
antiinflamatorio, antibiótico, antitumoral, etc.
La presente invención se refiere asimismo a un
complejo tal como se ha definido anteriormente, caracterizado porque
la molécula farmacológicamente activa es un agente antitumoral, que
pertenece en particular a la familia del Taxol.
Se pueden citar en particular como agentes
antitumorales, los agentes antitumorales no biológicos aprobados por
la FDA (Food and Drug Administration) tales como:
- -
- unos agentes alquilantes: nitrosoureas tales como: lomustina, carmustina y estreptozocina; aceites de mostaza tales como: mecloretamina, melfalan, uracil mostaza con nitrógeno, clorambucil, ciclofosfamida e ifosfamida; otros agentes de alquilación tales como: cisplatino, carboplatino, mitomicina, tiotepán, decarbazina, procarbazina, hexametilmelamina, trietilenmelamina, bisulfano, pipobromano y mitotano;
- -
- unos antimetabolitos: metotrexato, trimetrexato, pentostatina, citarabina, ara-CMP, fludarabina fosfato, hidroxiurea, fluorouracilo, floxuridina, clorodesoxiadenosina, gemcitabina, tioguanina y 6-mercaptopurina;
- -
- unos agentes de corte del ADN: bleomicina, venenos de la topoisomerasa I tales como: topotecán, irinotecán, sal de sodio de la camptotecina y unos análogos de topotecán e irinotecán; venenos de la topoisomerasa II tales como: daunorubicina, doxorubicina, idarubicina, mitoxantrona, tenipósido y etopósido;
- -
- unos agentes de intercalación del ADN: dactinomicina y mitramicina;
- -
- unos inhibidores de la mitosis: vinblastina, vincristina, navelbina, paclitaxel y docetaxel.
\vskip1.000000\baselineskip
Un agente antitumoral preferido, que pertenece a
la familia del Taxol, es el docetaxel (Taxotère®).
Se ha evaluado la afinidad de las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas de la invención
para unas lectinas membranarias específicas in vitro
siguiendo el protocolo ELLA (del inglés
"Enzime-Linked Lectin Assay"). Se pueden
encontrar numerosos ejemplos de aplicación de este protocolo en el
artículo de revista de J. J. Lundquist y E. J. Toon en Chem. Rev.
2002, 102, p. 555-578. Esta técnica mide la
capacidad de un ligando mono- u oligosacacarídico soluble para
inhibir la asociación entre una lectina complementaria y otro
ligando de referencia fijado en una microplaca de soporte plástico.
Así, las tioureidocisteaminil-ciclodextrinas que
contienen unos sustituyentes
\alpha-D-manopiranosilo son
reconocidas por la concanavalina A o por la lectina específica de la
manosa de los macrófagos, los derivados con unos sustituyentes
\beta-lactosilo son reconocidos por la lectina
específica de la lactosa de Arachys hypogaea o unos
hepatocitos, y los derivados que comprenden el sustituyente
tetrasacarídico sialil-Lewis X son reconocidos por
las selectinas del endotelio implicadas en el proceso de la
inflamación.
Se observa, de manera general, un aumento
importante de la afinidad de los derivados de tipo
tioureidocisteaminil-ciclodextrina frente a unas
lectinas específicas, en comparación con los conjugados de tipo
tioureido-ciclodextrina descritos en el documento
ChemBioChem 2001.
Las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas de la invención
que comprenden unos elementos de reconocimiento celular se pueden
utilizar en particular para ocultar unos receptores de membranas
complementarias. Así, las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas polimanosiladas
permiten bloquear el receptor específico de la manosa de los
macrófagos, los derivados polilactosilados, el receptor específico
de la lactosa de los hepatocitos y los derivados que incorporan unos
sustituyentes derivados del tetrasacárido sialil Lewis X, las
selectinas del endotelio. En este contexto, estos derivados se
pueden utilizar como moléculas activas para la prevención y el
tratamiento de los procesos de infección y de cancerización que
implican unos fenómenos de adhesión y, asimismo, para la prevención
y el tratamiento de las enfermedades relacionadas con el desajuste
del proceso de la inflamación.
Estos compuestos de inclusión se pueden preparar
mediante unos procedimientos habituales, por ejemplo mediante
dispersión de la molécula activa en disolución o en el estado puro
en una disolución del derivado de ciclodextrina, en presencia o no
de un cosolvente, tal como se describe en el documento WO
97/33919.
Estos complejos de inclusión se pueden preparar
por ejemplo añadiendo a una disolución o a una suspensión del
compuesto de la invención de fórmula (I) la molécula
farmacológicamente activa en disolución o en el estado puro. El
complejo de inclusión así formado puede ser aislado mediante
liofilización.
En el caso en el que se añade la molécula
farmacológicamente activa en disolución, por ejemplo un agente
antitumoral de la familia del Taxol, se utiliza una disolución
concentrada de la molécula en un disolvente orgánico miscible en el
agua, por ejemplo la acetona, y se somete la mezcla obtenida a una
agitación y a un burbujeo de gas inerte tal como el nitrógeno, para
eliminar el disolvente orgánico.
En el caso de los compuestos de la familia del
Taxol, tales como el Taxotère®, es posible asimismo dispersar este
producto en el estado puro en una disolución estéril de un compuesto
según la invención.
La presente invención se refiere asimismo a una
composición farmacéutica que comprende un compuesto tal como se ha
definido anteriormente, o un complejo de inclusión tal como se ha
definido anteriormente, con un vehículo farmacológicamente
aceptable.
La presente invención se refiere a una
composición farmacéutica tal como se ha definido anteriormente, en
forma de disolución acuosa.
La presente invención se refiere asimismo a una
composición farmacéutica tal como se ha definido anteriormente,
caracterizada porque contiene por dosis unitaria de aproximadamente
50 mg a aproximadamente 500 mg de uno de los compuestos tales como
los definidos anteriormente, o porque contiene por dosis unitaria de
aproximadamente 100 mg a aproximadamente 750 mg de uno de los
complejos tales como los definidos anteriormente.
Estas composiciones farmacéuticas, que se pueden
administrar por vía oral o parenteral, son por ejemplo unas
disoluciones, unos polvos, unas suspensiones, etc., en particular
unas disoluciones inyectables.
\vskip1.000000\baselineskip
La figura 1 representa la variación de la
inhibición de la asociación entre la lectina ConA y el manano de
levadura en presencia de los compuestos nº 2, nº 3, nº 4, nº 6 y nº
7, así como para el
heptakis(6-desoxi-6-\alpha-D-manopiranosiltioureido)ciclomalto-heptaosa
(derivado de la
per-(C-6)-amina-\beta-ciclodextrina),
en función de la concentración de ligando en \muM.
La curva en trazo continuo con los círculos
negros corresponde al derivado heptavalente de la
per-(C-6)-amina-\beta-ciclodextrina;
la curva en trazo discontinuo con las cruces corresponde al
compuesto nº 2; la curva en trazo continuo con las cruces
corresponde al compuesto nº 3; la curva en trazo continuo con los
triángulos blancos corresponde al compuesto nº 4; la curva en trazo
continuo con los rombos blancos corresponde al compuesto nº 6 y la
curva en trazo discontinuo con los cuadros negros corresponde al
compuesto nº 7.
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto responde a la fórmula (I)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, en la que todos los
R^{1} son idénticos y representan
S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
representando Z un grupo NH_{2}, y que se aisló en forma de su
heptaclorhidrato.
A una disolución de clorhidrato de
2-aminoetanotiol (999 mg, 8,8 mmoles) en DMF
destilado (10 ml), con argón, se añade la trietilamina (2,5 ml)
usando una jeringa. Se observa que la suspensión se vuelve violeta.
A esta suspensión, se añade gota a gota una disolución de
heptakis[6-bromo-6-desoxi]ciclomaltoheptaosa
(1 g) en DMF (5 ml). La mezcla de reacción se agita durante 48 h a
temperatura ambiente. Se observa entonces la aparición de un
precipitado blanco. El sólido se filtra y se solubiliza en agua (20
ml), el pH de la disolución se ajusta a 4 mediante adición de ácido
clorhídrico diluido y finalmente la disolución se liofiliza. El
residuo sólido se suspende en etanol a 96% y la suspensión se agita
durante 30 min., y después se filtra y se seca. Se obtiene así el
compuesto nº 1 (976 mg, 86%) que tiene las siguientes
características:
\newpage
- -
- [\alpha]_{D} + 81,4º (c 1,0; agua)
- -
- espectro de masas (electrospray): m/z 1549 (100%, [M + Na]^{+})
- -
- solubilidad en agua: 500 g.l^{-1} (323 mmol.l^{-1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, D_{2}O): \delta 5,03 (7 H, d, J_{1,2} 3,5 Hz, H-1), 3,93 (7 H, td, J_{4,5} 9,2 Hz, J_{5,6b} 7,0 Hz, J_{5,6a} 2,0 Hz, H-5), 3,82 (7 H, t, J_{2,3} = J_{3,4} 9,4 Hz, H-3), 3,56 (7 H, dd, H-2), 3,55 (7 H, t, H-4), 3,17 (14 H, t, ^{3}J_{H,H} 6,8 Hz, CH_{2}N), 3,08 (7 H, dd, J_{6a,6b} 13,5 Hz, H-6a), 2,91 (14 H, t, ^{3}J_{H,H} 6,8 Hz, CH_{2}S), 2,90 (7 H, dd, H-6b)
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz, D_{2}O): \delta 101,6 (C-1); 83,6 (C-4); 72,7 (C-3); 72,0 (C-2); 71,6 (C-5); 38,6 (CH_{2}N); 32,7 (C-6); 30,0 (CH_{2}S).
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto responde a la fórmula (II)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, representando X un
átomo de hidrógeno y respondiendo R a la fórmula
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (véase el ejemplo 1) con el isotiocianato de
2,3,4,6-tetra-O-acetil-\alpha-D-manopiranosilo
seguida de una hidrólisis alcalina del grupo protector acetilo.
Una disolución del compuesto nº 1 (25 mg, 14
\mumoles) en agua (2 ml) se adiciona con hidrogenocarbonato de
sodio sólido hasta que el pH alcance unos valores entre 8 y 9.
Después de 20 min., se añade una disolución de isotiocianato de
2,3,4,6-tetra-O-acetil-\alpha-D-manopiranosilo
(42 mg, 0,11 mmoles, 1,1 equiv.) en acetona (3 ml), y la mezcla de
reacción se agita a temperatura ambiente durante 1 h. Se evapora la
acetona en el "rotavapor" y la disolución acuosa resultante se
liofiliza. El residuo se recoge en metanol, se filtra y se
concentra. El sólido resultante se disuelve en metanol (6 ml), se
adiciona con una disolución 1N de metilato de sodio en metanol (196
\mul, 0,5 equiv.) y la disolución se agita a 0ºC durante 5 min. Se
observa la precipitación de un sólido blanco que se vuelve a
disolver en agua (8 ml). La disolución acuosa se agita a 0ºC durante
15 min., se neutraliza y se desmineraliza mediante tratamiento,
sucesivamente, con la resina intercambiadora de iones Amberlite
IR-120 (H^{+}) y la resina mixta Duolite
MB-6331 (H^{+}, OH^{-}), se filtra y se
liofiliza. Después de la purificación mediante cromatografía de
filtración sobre gel (Sephadex G-25), se obtiene el
compuesto nº 2 (30 mg, 71%) que tiene las características
siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 50,3º (c 1,0, agua)
- -
- espectro de masas (MALDITOF): m/z 3103,9 [M + H]^{+}
- -
- solubilidad en agua: 780 g.L^{-1} (251 mmoles.L^{1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, 333 K, D_{2}O): \delta 5,85 (7 H, bs, H-1'); 5,43 (7 H, bs, H-1); 4,34 (7 H, m, H-2'); 4,30 (7 H, m, H-6a'); 4,28 (7 H, m, H-5); 4,22 (7 H, m, H-3); 4,15 (7 H, d, J_{6a',6b'} 12,0 Hz, H-6b'); 4,01 (7 H, m, H-3'); 3,96 (7 H, m, H-2); 3,92 (7 H, t, J_{3',4'} = J_{4'5'} 9,0 Hz, H-4'); 3,88 (7 H, m, H-4); 3,80 (14 H, m, CH_{2}S); 3,75 (7 H, m, H-5'); 3,72 (14 H, m, CH_{2}N); 3,55 (714, m, H-6a); 3,53 (7 H, m, H-6b)
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz, 333 K, D_{2}O): \delta 181,7 (CS); 101,7 (C-1); 82,5 (C-1'); 84,1 (C-4); 73,5 (C-5'); 73,0 (C-3); 72,0 (C-2, C-5); 70,5 (C-3'); 69,5 (C-2'); 66,6 (C-4'); 60,7 (C-6'); 44,2 (CH_{2}N); 33,2 (C-6); 31,6 (CH_{2}S).
\newpage
Este compuesto responde a la fórmula (II)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, representando X un
átomo de hidrógeno y respondiendo R a la fórmula;
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (véase el ejemplo 1) con el
tris(2,3,4,6-tetra-O-acetil-\alpha-D-manopiranosiloximetil)metilisotiocianato
seguida de una hidrólisis alcalina del grupo protector acetilo.
A una disolución del compuesto nº 1 (10 mg, 5,5
\mumoles), en agua (1 ml), se añade el hidrogenocarbonato de
sodio sólido hasta que el pH alcance unos valores entre 8 y 9.
Después de 20 min., se añade una disolución de
tris(2,3,4,6-tetra-O-acetil-\alpha-D-manopiranosiloximetil)metilisotiocianato
(45 mg; 40 \mumoles; 1,04 equiv.) en acetona (1 ml), y la mezcla
de reacción se agita a temperatura ambiente durante 4 h. Se evapora
la acetona en el "rotavapor" y la disolución acuosa resultante
se extrae mediante diclorometano (3 x 5 ml). El disolvente orgánico
se evapora, el residuo se disuelve en metanol (3 ml) y se adiciona
con una disolución 1N de metilato de sodio en metanol hasta pH
8-9, y la disolución se agita a temperatura ambiente
durante 5 min. Se observa la precipitación de un sólido blanco que
se vuelve a disolver mediante adición de agua (1 ml). La disolución
acuosa se agita a temperatura ambiente durante 15 min., se
neutraliza y se desmineraliza mediante tratamiento, sucesivamente,
con la resina intercambiadors de iones Amberlite
IR-120 (H^{+}) y la resina mixta Duolite
MB-6331 (H^{+}, OH^{-}), se filtra y se
liofiliza. Después de la purificación mediante cromatografía de
filtración sobre gel (Sephadex G-25), se obtiene el
compuesto nº 3 (15 mg, 45%) que tiene las características
siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 130,0º (c 0,5, agua)
- -
- espectro de masas (MALDITOF); m/z 6108,53 ([M + H]^{+}
- -
- solubilidad en agua: 800 g.L^{-1} (131 mmoles.L^{-1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, 343 K, D_{2}O): \delta 5,53 (7 H, bs, H-1); 5,31 (21 H, s, H-1'); 4,49 (21 H, d, ^{2}JH,H 10,5 Hz, OCH_{2}a); 4,41 (3 H, s, H-2'); 4,40 (7 H, m, H-5); 4,36 (21 H, d, OCH_{2}b); 4,32 (7 H, m, H-3); 4,29 (21 H, d, J_{6a'6b'} 12,0 Hz, H-6a'); 4,21 (14 H, m, CH_{2}N); 4,20 (21 H, dd, J_{2,3'} 4,0 Hz, J_{3',4'} 10,0 Hz, H-3'); 4,18 (21 H, m, H- 6b'); 4,12 (21 H, t, J_{4},_{5},10,0 Hz, H-4'); 4,09 (7 H, m, H-2); 4,02 (7 H, m, H-5'); 3,78 (7 H, m, H-4); 3,26 (7 H, m, H-6a); 3,47 (7 H, m, J_{5,66} 8,5 Hz, H-6b); 3,22 (2 H, m, CH_{2}S).
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz, 323 K, D_{2}O): \delta 181,0 (CS); 102,6 (C-1); 100,9 (C-1'); 84,3 (C-4); 73,7 (C-5'); 73,5 (C-3); 72,6 (C-2, C-5); 71,3 (C-3'); 70,5 (C-2'); 67,3 (C-4', OCH_{2}); 61,4 (C-6'); 44,8 (Cq, CH_{2}N); 34,2 (C-6); 32,8 (CH_{2}S).
\vskip1.000000\baselineskip
Los ejemplos siguientes se refieren a unas
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas hiperramificadas
que comprenden un elemento multiplicador derivado del pentaeritritol
que responde a la fórmula siguiente:
El precursor universal de los glicodendrones
usados por la síntesis de estos derivados es el
2,2,2-tris(2-oxapent-4-enil)etanol(tri-O-alilpentaeritritol),
obtenido a partir del pentaeritritol comercial.
Una suspensión de pentaeritritol (1,36 g, 10
mmoles) en hidróxido de sodio a 40% acuoso se agita vigorosamente a
70-75ºC durante 15 min. Se añade gota a gota el
bromuro de alilo (3,2 ml, 40 mmoles, 4 equiv.) y se sigue la
agitación durante 1 h. La mezcla de reacción se extrae mediante
diclorometano (3 x 20 ml) y la fase orgánica se lava con agua, se
seca (sulfato de sodio anhidro) y se concentra. El residuo se
purifica mediante cromatografía sobre columna de gel de sílice con
el acetato de etil-éter de petróleo 1:4. Se obtienen así 1,28 g
(rendimiento 50%) de un aceite incoloro, que presenta las siguientes
características:
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 257 (100%, [M+H]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto responde a la fórmula (V)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, en la que todos los
R^{1} son idénticos y representan
CH_{2}-C[(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{2})_{2}(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{3})],
X representa un átomo de hidrógeno, respondiendo R_{2} y R_{3}
a la fórmula III (véase el ejemplo nº 2).
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (véase el ejemplo 1) con el isotiocianato de
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilo
seguida de una hidrólisis alcalina del grupo protector acetilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se prepara efectuando las etapas
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
Una disolución de
tri-O-alilpentaeritritol (0,32g; 1,3 mmoles) y de
2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosa
(2,12 g; 5,85 mmoles; 1,5 equiv.) en metanol anhidro libre de gases
y con argón se irradia mediante luz ultravioleta a temperatura
ambiente durante 6 h. El disolvente se evapora y el residuo se
purifica mediante cromatografía sobre columna de gel de sílice con
el acetato de etil-éter de petróleo 1:2. Se obtienen así 0,81 g
(rendimiento 46%) de un sólido blanco, que presenta las
características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 84,6º (c 1,0; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1371 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etanol
(1,15 g; 0,85 mmoles) en diclorometano (5,5 ml) se añade piridina
(402 \mul) y anhídrido trifluorometansulfónico (177 \mul). La
mezcla de reacción se agita durante 20 min. a -25ºC, se lava
mediante una disolución saturada fría de hidrogenocarbonato de
sodio, se seca mediante el sulfato de magnesio anhidro y se
concentra. El residuo se recoge mediante la
N,N-dimetilfomamida y se adiciona con aziduro de sodio (166
mg; 2,55 mmoles; 3 equiv.). La suspensión se agita a temperatura
ambiente durante 3 horas y se concentra. El residuo se recoge
mediante diclorometano, se lava con agua, se seca mediante el
sulfato de magnesio anhidro, se concentra y se purifica mediante
cromatografía sobre columna de gel de sílice con el acetato de
etil-éter de petróleo 1:2. Se obtiene así 1,0 g de un sólido blanco
(rendimiento 86%) que tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 83,2º (c 0,7; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1396 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
A una disolución de
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilazida
(0,15 g; 0,11 mmoles) en dioxano (10 ml), se añade la
trifenilfosfina (32 mg; 0,12 mmoles; 1,1 equiv.) y el disulfuro de
carbono (0,1 ml; 1,1 mmoles, 10 equiv.) y la mezcla de reacción se
agita a temperatura ambiente durante 24 h. El disolvente se evapora
entonces y el residuo se purifica mediante cromatografía sobre
columna de gel de sílice con el acetato de etil-éter de petróleo
1:1. Se obtienen así 0,13 g (rendimiento 85%) de un sólido blanco
que tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+61,9º (c 0,4; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1412 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (20 mg, 11,1 \mumoles) con el
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
(160 mg, 115 \mumoles, 1,5 equiv.) en
agua-acetona (1:2, 3 ml) a pH 8-9
(hidrogenocarbonato de sodio sólido) tal como se ha descrito
anteriormente para la preparación del compuesto nº 3. La mezcla de
reacción se agita durante 48 h a temperatura ambiente, la acetona
se evapora y la fase acuosa se extrae mediante acetato de etilo (3
x 5 ml). La fase orgánica se seca entonces mediante el sulfato de
magnesio anhidro y se concentra. El residuo se purifica mediante
cromatografía sobre columna de gel de sílice con un gradiente
acetonitrilo-agua 20:1 a 10:1. El producto
resultante se desacetila y se desmineraliza tal como se ha descrito
anteriormente para la preparación del compuesto nº 3. Después de la
liofilización, se obtiene el compuesto nº 4 (50 mg, 60%) que tiene
las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 104,0º (c 1,0; agua)
- -
- espectro de masas (MALDITOF): m/z 7751,88 ([M + H]^{+})
- -
- solubilidad en agua: 800 g.L^{-1} (103 mmoles.L^{-1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, 353 K, D_{2}O): \delta 5,82 (21 H, s, H-1'); 5,61 (7 H, bs, H-1); 4,57 (21 H, m, H-2'); 4,46 (7 H, m, H-5); 4,43 (28 H, m, H-3, H-5'); 4,36 (63 H, m, H-3', H-6'', H-6b'); 4,29 (21 H, m, H-4'); 4,23 (14 H, m, CH_{2}N_{cist}); 4,19 (7 H, m, H-2); 4,09 (49 H, m, H-4, H-3_{pent}); 3,96 (56 H, m, CH_{2}N_{ramificado}, H-1_{Pent}); 3,82 (7 H, m, H-6a); 3,50 (7 H, m, H-6b); 3,47 (14 H, m, CH_{2}S_{cist}); 3,26 (42 H, bt, J_{5a,5b} 11,5 Hz, H-5_{Pent}; 2,46 (42 H, m, H-4_{pent})
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz, 343 K, D_{2}O): \delta 181,9 (CS); 102,7 (C-1); 85,3 (C-1'); 85,1 (C-4); 73,9 (C-5'); 73,4 (C-3); 72,9 (C-2, C-5); 72,6 (C-2'); 72,1 (C-3'); 71,1 (C-1_{pent}; 70,9 (C-3_{pent}); 67,7 (C-4'); 61,6 (C-6'); 46,6 (CH_{2}N_{cist}, CH_{2}N_{ramificado}); 45,0 (Cq); 34,1 (C-6); 33,2 (CH_{2}S_{cist}); 29,8 (C-4_{pent}); 28,5 (C-5_{pent})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto responde a la fórmula (V)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, en la que todos los
R^{1} son idénticos y representan
CH_{2}-C[(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{2})_{2}(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{2})],
X representa un átomo de hidrógeno, y respondiendo R_{2} y R_{3}
a la fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (véase el ejemplo 1) con
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
seguida de una hidrólisis alcalina del grupo protector acetilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se prepara mediante las etapas
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene a partir del
tri-O-alilpentaeritritol (0,32g; 1,3 mmoles) y de la
2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosa
(2,12 g; 5,85 mmoles; 1,5 equiv.) mediante irradiación con luz
ultravioleta (250 nm) tal como se ha descrito anteriormente para la
preparación del
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil)etanol.
Se obtienen así 1,23 g (rendimiento 70%) de un sólido blanco, que
presenta las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}-22,8º (c 0,8; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1371 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene a partir del
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etanol
(1,15 g; 0,85 mmoles) mediante reacción con el anhídrido
trifluorometansulfónico seguida de un tratamiento mediante aziduro
de sodio tal como se ha descrito anteriormente para la preparación
de la
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilazida.
Se obtienen así 0,73 g de un sólido blanco (rendimiento 60%) que
tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 78,9º(c 0,9; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1396 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante
isotiocianación de la
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilazida
(0,32 g; 0,23 mmoles) mediante un tratamiento con la
trifenilfosfina (67,1 mg; 0,26 mmoles; 1,1 equiv.) y el disulfuro
de carbono (0,15 ml; 2,33 mmoles; 10 equiv.) en dioxano (10 ml), tal
como se ha descrito anteriormente para la preparación del
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato.
Se obtienen así 0,26 g (rendimiento 80%) de un sólido blanco que
tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 61,9º (c 0,4; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1412 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (20 mg; 11,1 \mumoles) y del
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
(160 mg; 115 moles; 1,5 equiv.) en agua-acetona
(1:2, 3 ml) a pH 8-9 (hidrogenocarbonato de sodio
sólido) seguida de desacetilación tal como se ha descrito
anteriormente para la preparación del compuesto nº 4. Después de la
liofilización, se obtiene el compuesto nº 5 (56 mg, 68%) que tiene
las características siguientes:
- -
- [\alpha] -16,2º (c 1,0; agua)
- -
- espectro de masas (MALDITOF): m/z 7751,88 ([M + H]^{+})
- -
- solubilidad en agua: 670 g.L^{-1}(87 mmoles.L^{-1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, 343 K, D_{2}O): \delta 5,46 (7 H, bd, J_{1,2} 3,0 Hz, H-1); 4,86 (21 H, d, V_{1,2} 9,5 Hz, H-1'); 4,29 (7 H, m, H-5); 4,28 (7 H, m, H-3); 4,27 (21 H, d, J_{6a'6b}, 12,0 Hz, H-6a'); 4,13 (21 H, d, H-6b'); 4,09 (14 H, m, CH_{2}N_{cist}); 4,07 (7 H, m, H-2); 3,98 (42 H, t, ^{3}J_{H,H} 6,5 Hz, H-3_{pent);} 3,97 (7 H, m, H-4); 3,89 (21 H, t, J_{2',3} = J_{3',4'} 9,3 Hz, H-3'); 3,84 (98 H, m, H-4', H-5', CH_{2}N_{ramificado}, H-1_{pent}); 3,73 (21 H, t, H-2'); 3,65 (7 H, m, H-6a); 3,38 (7 H, m, H-6b); 3,32 (14 H, bt, ^{3}J_{H,H} = 6,5 Hz, CH_{2}S_{cist}); 3,22; 3,18 (42 H, 2 dt, J_{5a,5b} 13,0 Hz, J_{4,5} 5,5 Hz, H-5_{pent}); 2,33 (42 H, m, H-4_{pent})
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz; 343 K; D_{2}O): \delta 181,4 (CS), 102,6 (C-1); 86,3 (C-1'); 85,1 (C-4); 80,5 (C-5'); 78,0 (C-3'); 73,4 (C-3); 73,2 (C-2'); 72,8 (C-2, C-5); 71,2 (C-1_{pent}); 70,4 (C-3_{pent}); 70,3 (C-4'); 61,8 (C-6'); 46,5 (CH_{2}N_{cist}, CH_{2}N_{ramificado}); 45,0 (C_{q}); 34,2 (C-6); 33,1 (CH_{2}S_{cist}); 30,0 (C-4_{pent}); 27,4 (C-5_{pent})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto responde a la fórmula (V)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, en la que todos los
R_{1} son idénticos y representan
CH_{2}-C[(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{2})_{2}(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{3})],
X representa un átomo de hidrógeno, respondiendo R_{2} y R_{3} a
las fórmulas (VI) y (III), respectivamente.
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (véase el ejemplo 1) con
2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
seguida de una hidrólisis básica del grupo protector acetilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se prepara efectuando las etapas
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
Una disolución de
tri-O-alilpentaeritritol (0,20 g; 0,78 mmoles) y de
2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosa
(0,85 g; 2,34 mmoles; 1 equiv.), en metanol anhidro (15 ml)
desgasificado y con argón, se irradia mediante luz ultravioleta
(250 nm) a temperatura ambiente durante 6 h. El disolvente se
evapora y el residuo se purifica mediante cromatografía sobre
columna de gel de sílice con el acetato de etil-éter de petróleo
3:2. Se obtienen así 0,58 g (rendimiento 76%) de un sólido blanco,
que presenta las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} - 26,6º (c 0,8; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1007 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Una disolución de
2-(2-oxapent-4-enil)-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etanol
(0,53 g; 0,54 mmoles) y de
2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosa
(0,29 g; 0,81 mmoles; 1,5 equiv.), en metanol anhidro (35 ml)
desgasificado y con argón, se irradia mediante luz ultravioleta (250
nm) a temperatura ambiente durante 6 h. El disolvente se evapora y
el residuo se purifica mediante cromatografía sobre columna de gel
de sílice con el acetato de etil-éter de petróleo 3:1. Se obtienen
así 0,55 g (rendimiento 76%) de un sólido blanco, que presenta las
características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} +15,5º (c 1,0; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1371 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene a partir de
2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etanol
(0,43 g; 0,32 mmoles) mediante reacción con el anhídrido
trifluorometansulfónico seguida de un tratamiento mediante aziduro
de sodio tal como se ha descrito anteriormente para la preparación
de la
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilazida.
Se obtienen así 0,33 g de un sólido blanco (rendimiento 75%) que
tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 8,2º (c 1,0; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1396 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante
isotiocianación de la
2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxa-pentil]-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilazida
(0,25 g; 0,18 mmoles) mediante un tratamiento con la trifenilfosfina
(52 mg; 0,20 mmoles; 1,1 equiv.) y el disulfuro de carbono (0,11 ml;
1,80 mmoles; 10 equiv.) en dioxano (8 ml), tal como se ha descrito
anteriormente para la preparación del
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato.
Se obtienen así 0,20 g (rendimiento 80%) de un sólido blanco que
tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 9,7º (c 1,0; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1412 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (20 mg; 11,1 \mumoles) con
2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-p-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
(160 mg; 115 \mumoles; 1,5 equiv.) en agua-acetona
(1:2, 3 ml) a pH 8-9 (hidrogenocarbonato de sodio
sólido) seguida de desacetilación tal como se ha descrito
anteriormente para la preparación del compuesto nº 4. Después de la
liofilización, se obtiene el compuesto nº 6 (48 mg, 60%) que tiene
las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 25,0º (c 1,0; agua)
- -
- espectro de masas (MALDTTO): m/z 7751,88 ([M + H]^{+})
- -
- solubilidad en agua: 700 g.L^{-1} (91 mmoles.L^{-1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, 353 K, D_{2}O): \delta 5,87 (7 H, s, H-1'_{man}); 5,60 (7 H, bd, J_{1,2} 3,5 Hz, H-1); 5,00 (14 H, d, J_{1'},_{2}, 10,0 Hz, H-1'_{Glc}); 4,57 (7 H, m, H-2'_{man}); 4,42 (7 H, m, H-5'_{Man}); 4,41 (7 H, m, H-5); 4,39 (14 H, d, J_{6a',6b'} 12,0 Hz, H-6a'_{Glc}); 4,38 (7 H, m, H-3); 4,36 (21 H, m, H^{-}3'_{Man}, H^{-6}a'_{Man}, H-6b'_{Man}); 4,29 (7 H, m, H-4'_{man}); 4,25 (14 H, dd, J_{5',6b'} 4,5 Hz, H-6b'_{Glc}); 4,22 (14 H, m, CH_{2}N_{cist}); 4,17 (7 H, d, H-2); 4,09 (42 H, t, J_{3,4} 5,5 Hz, H-3_{pent}); 4,08 (7 H, m, H-4); 4,02 (14 H, t, J_{2,3'} = J_{3',4'}. 9,4 Hz, H-3'_{Glc)} 3,96 (84 H, m, H-4'_{Glc}, H-5'_{Glc}, CH_{2}NH_{ramificado}, H-1_{Pent}) 3,85 (14 H, J_{1',2}, 9,4 Hz, H-2'_{Glc}); 3,78 (7 H, m, H-6a); 3,51 (7 H, m, H-6b); 3,46 (14 H, bt, ^{3}J_{H,H} 6,5 Hz, CH_{2}S_{cist}); 3,34; 3,32 (42 H, 2 dt, J_{5a,5b} 13,0 Hz, J_{4,5} 6,0 Hz, H-5_{pent}); 2,45 (42 H, m, H-4_{Pent})
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz; 353 K; D_{2}O): \delta 181,9 (CS); 102,8 (C-1); 86,3 (C-1'_{Glc}); 86,0 (C-1'_{Man}); 85,3 (C-4); 80,7 (C-5'_{Glc}); 78,3 (C-3'_{Glc}); 74,1 (C-5'_{Man}); 73,6 (C-3); 73,4 (C-2'_{Glc}); 73,0 (C-2, C-5); 72,8 (C-2'_{Man}); 72,3 (C-3'_{Man}); 71,4 (C-1_{Pent}); 71,0 (C-3_{pent}); 70,6 (C-4'_{Glc}); 67,9 (C-4'_{Man}); 62,0 (C-6'_{Glc}); 61,7 (C-6'_{Man}); 45,1 (Cq); 45,0 (CH_{2}N_{cist}, CH_{2}N_{ramificado}); 34,5 (C-6); 33,3 (CH_{2}S_{cist}; 30,4; 30,0 (C-4_{pent}); 28,7; 27,6 (C-5_{pent})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto responde a la fórmula (V)
indicada anteriormente, siendo n = 1, m = 6, en la que todos los
R_{1} son idénticos y representan
CH_{2}-C[(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{2})_{2}(CH_{2}OCH_{2}CH_{2}CH_{2}R_{3})],
X representa un átomo de hidrógeno, respondiendo R_{2} y R_{3}
a las fórmulas (III) y (VI), respectivamente.
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (véase el ejemplo 1) con
2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
seguida de una hidrólisis alcalina del grupo protector acetilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se prepara mediante las etapas
siguientes:
\vskip1.000000\baselineskip
Una disolución de
tri-O-alilpentaeritritol (0,20 g, 0,78 mmoles) y
2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosa
(0,85 g; 2,34 mmoles; 1 equiv.) en metanol anhidro (15 ml),
desgasificado y con argón, se irradia mediante luz ultravioleta (250
nm) a temperatura ambiente durante 6 h. El disolvente se evapora y
el residuo se purifica mediante cromatografía sobre columna de gel
de sílice con el acetato de etil-éter de petróleo 1:1. Se obtienen
así 0,55 g (rendimiento 72%) de un sólido blanco, que presenta las
características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 20,2º (c 0,8; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1007 (100%, [M + Na]^{+})
\newpage
Una disolución de
2-(2-oxapent-4-enil)-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]
etanol (0,49 g; 0,49 mmoles) y de 2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosa (0,27 g; 0,66 mmoles; 1,5 equiv.), en metanol anhidro (25 ml) desgasificado y con argón, se irradia mediante luz ultravioleta (250 nm) a temperatura ambiente durante 6 h. El disolvente se evapora y el residuo se purifica mediante cromatografía sobre columna de gel de sílice con el acetato de etil-éter de petróleo 3:1. Se obtienen así 0,42 g (rendimiento 64%) de un sólido blanco, que presenta las características siguientes:
etanol (0,49 g; 0,49 mmoles) y de 2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosa (0,27 g; 0,66 mmoles; 1,5 equiv.), en metanol anhidro (25 ml) desgasificado y con argón, se irradia mediante luz ultravioleta (250 nm) a temperatura ambiente durante 6 h. El disolvente se evapora y el residuo se purifica mediante cromatografía sobre columna de gel de sílice con el acetato de etil-éter de petróleo 3:1. Se obtienen así 0,42 g (rendimiento 64%) de un sólido blanco, que presenta las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 29,4º (c 0,6; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1371 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene a partir del
2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etanol
(0,688 g; 0,51 mmoles), mediante reacción con el anhídrido
trifluorometansulfónico seguida de un tratamiento mediante aziduro
de sodio tal como se ha descrito anteriormente para la preparación
de la
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilazida.
Se obtienen así 0,554 g de un sólido blanco (rendimiento 79%) que
tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D}+ 45,3º (c 1,0; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1396 (100%, [M + Na]^{+})
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante
isotiocianación del
2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilazida
(131 mg; 0,095 moles) mediante un tratamiento con la
trifenilfosfina (28 mg; 0,10 mmoles; 1,1 equiv.) y el disulfuro de
carbono (60 \mul; 0,95 mmoles; 10 equiv.) en dioxano (5 ml), tal
como se ha descrito anteriormente para la preparación del
2,2,2-tris[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-manopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato.
Se obtienen así 95 mg (rendimiento 72%) de un sólido blanco que
tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 40,8º (c 1,0; diclorometano)
- -
- espectro de masas (FAB^{+}): m/z 1412 (100%, [M + Na]^{+}
\vskip1.000000\baselineskip
Este compuesto se obtiene mediante condensación
del compuesto nº 1 (20 mg; 11,1 \mumoles) en
agua-acetona (1:2; 3 ml) con el
2,2-bis[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\alpha-D-manopiranosil)-2-oxapentil]-2-[5-(2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-tio-\beta-D-glucopiranosil)-2-oxapentil]etilisotiocianato
(160 mg; 115 \mumoles; 1,5 equiv.), en
agua-acetona (1:2, 3 ml) a pH 8-9
(hidrogenocarbonato de sodio sólido), seguida de desacetilación tal
como se ha descrito anteriormente para la preparación del compuesto
nº 4. Después de la liofilización, se obtiene el compuesto nº 7 (40
mg, 52%) que tiene las características siguientes:
- -
- [\alpha]_{D} + 66,0º (c 1,0; agua)
- -
- espectro de masas (MALDITOF): m/z 7751,88 ([M + H]^{+})
- -
- solubilidad en agua: 800 g.L^{-1} (103 mmoles.L^{-1})
- -
- datos de RMN ^{1}H (500 MHz, 353 K, D_{2}O): \delta 5,67 (14 H, s, H-1'_{Man}); 5,47 (7 H, bs, H-1); 4,86 (7 H, d, J_{1},_{2} 10,0 Hz, H-1'_{Glc}); 4,43 (14 H, m, H-2'_{Man}); 4,29 (21 H, m, H-5'_{Man}, H-5); 4,26 (7 H, m, H-3); 4,25 (7 H, d, J_{6a'6b'} 12,0 Hz, H-6a'_{Glc}); 4,14 (42 H, m, H-3'_{Man}, H-6a'_{Man}, H-6b'_{Man}); 4,14 (14 H, m, H-4'_{Man}); 4,09 (7 H, d, H-6b'_{Glc}); 4,08 (14 H, m, CH_{2}N_{cist}); 4,04 (7 H, d, H-2); 3,95 (49 H, m, H-3_{pent}, H-4); 3,85 (7 H, t, J_{2'3'} = J_{3',4'} 8,9 Hz, H-3'_{Glc}); 3,80 (70 H, m, H-4'_{Glc}, H-5'_{Glc}, CH_{2}NH_{ramificado,} H-1_{pent}); 3,71 (7 H, t, H-2'_{Glc}); 3,61 (7 H, m, H-6a); 3,37 (7 H, m, H-6b); 3,32 (14 H, m, CH_{2}S_{cist}); 3,17; 3,12 (42 H, 2 dt, J_{5a,5b} 13,5 Hz, J_{4,5} 6,5 Hz, H-5_{pent}); 2,30 (42 H, t, J_{3,4} 6,5 Hz, H-4_{pent})
\newpage
- -
- datos de RMN ^{13}C (125,7 MHz, 353 K, D_{2}O): \delta 182,0 (CS); 102,7 (C-1); 86,1 (C-1'_{Glc}); 85,7 (C-1'_{Man}) 85,2 (C-4) 80,9 (C-5'_{Glc}) 78,0 (C-3'_{Glc}); 73,9 (C-5'_{Man}); 73,1 (C-3); 73,0 (C-2'_{Glc}); 72,8 (C-2, C-5); 72,6 (C-2'_{Man}); 72,0 (C-3'_{Man}); 71,1 (C-1_{pent}); 70,8 (C-3_{pent}) 70,3 (C-4'_{Glc}); 67,7 (C-4'_{Man}); 61,8 (C-6'_{Glc}); 61,5 (C-6'_{Man}); 45,1 (CH_{2}N_{cist}, CH_{2}N_{ramificado}) ; 45,0 (C_{q}); 34,2 (C-6); 33,1 (CH_{2}S); 30,2; 29,3 (C-4_{pent}); 28,5; 27,5 (C-5_{pent})
\vskip1.000000\baselineskip
Se ha evaluado la afinidad de los compuestos nº
2 a 7 para la lectina específica de la manosa concanavalina A
(ConA) siguiendo el protocolo de ensayo ELISA. Se obtiene así la
concentración de los compuestos nº 2 a 7 necesaria para inhibir al
50% la asociación de la ConA con un ligando de referencia (el manano
de levadura en este caso) fijado sobre la célula de una placa de
microtitulación (IC_{50}). Los valores de IC_{50} son
inversamente proporcionales a las afinidades respectivas.
Las células de una placa de microtitulación
(Nunc-Immuno^{TM} plates MaxiSorp^{TM}) se
cargan con 100 \mul de una disolución madre de manano de levadura
(Sigma, 10 \mug/l^{-1}) en una disolución tampón fosfato salino
(PBS; pH 7,3 que contiene Ca^{2+} 0,1 mM, y Mn^{2+} 0,1 mM)
durante una noche a temperatura ambiente. Las células se lavan (3 X
300 \mul) mediante una disolución tampón que contiene 0,05% (v/v)
de Tween 20 (PTBS). Este protocolo de lavado se repite después de
cada incubación durante el ensayo. Las células se adicionan
entonces con una disolución de albúmina de suero bovino (BSA, 1%) en
PBS (150 \mug/célula) seguida de una incubación durante 1 h a
37ºC, y después se lavan.
Para determinar la concentración de lectina
óptima para los estudios de inhibición, se añaden en las células
cargadas con el manano y tratadas como se ha indicado anteriormente
100 \mul de una serie de disoluciones de concanavalina A marcada
con la peroxidasa de rábano de 10^{-1} a 10^{-5} mg.ml^{-1} en
PBS. Después de la incubación a 37ºC durante 1 hora, las placas se
lavan (PBST) y se adicionan con una disolución (50 \mul) de la
sal de diamonio del ácido
2,2'-azinobis-(3-etilbenzotiazolina-5-sulfónico)
(ABTS, 1 mg en 4 ml) en tampón citrato (0,2 M; pH 4,0 con 0,015% de
agua oxigenada). La reacción se interrumpe después de 20 minutos
mediante la adición de 50 \mul/célula de ácido sulfúrico 1M, y se
miden las absorbancias a 415 nm utilizando un lector ELISA. Las
células de control contenían el tampón
citrato-fosfato. La concentración de lectina marcada
con la peroxidasa que proporciona un valor de absorbancia entre 0,8
y 1,0 (típicamente entre 10^{-2} y 10^{-3} mg/ml^{-1}) se
utilizó en los ensayos de inhibición.
Para los ensayos de inhibición, se han utilizado
unas disoluciones madre de los compuestos nº 2 a 7 a una
concentración de 5 a 7 mg/ml^{-1} en PBS. En una serie de
experimentos, las disoluciones de cada compuesto (60 \mul/célula)
en PBS, diluidas secuencialmente dos veces, son adicionadas con ConA
marcada con peroxidasa de rábano de concentración apropiada tal
como se ha indicado anteriormente (60 \mul/célula) en una placa
de microtitulación Nunclon^{TM} (Delta) que se incuba a 37ºC
durante 1 hora. Las disoluciones (100 \mul/célula) se transfieren
entonces a una placa de microtitulación cargada con el manano y
tratada tal como se ha indicado anteriormente, la cual se incuba a
continuación a 37ºC durante 1 hora. Las células se lavan (PBST) y se
adicionan con la disolución de ABTS (50 \mul/célula). Después de
20 minutos, la reacción se interrumpe (ácido sulfúrico) y se miden
las absorbancias. El porcentaje de inhibición se calcula mediante
la fórmula:
En la tabla 1 siguiente, se proporcionan los
valores de IC_{50} para los compuestos nº 2 a 7 (media de tres
experimentos independientes) en comparación con el valor
correspondiente para el
metil-\alpha-D-glucopiranósido,
utilizado como ligando monovalente de referencia. Se observa un
aumento importante de la afinidad para la lectina en el caso de los
derivados hiperramificados que comprenden unos sustituyentes
manopiranosilo.
La figura 1 representa la variación de la
inhibición de la asociación entre la lectina ConA y el manano de
levadura por los compuestos nº 2, nº 3, nº 4, nº 6 y nº 7, del tipo
tioureidocisteaminil-ciclodextrina, así como para
heptakis(6-desoxi-6-\alpha-D-manopiranosiltioureido)ciclomaltoheptaosa,
un derivado heptavalente de tipo
tioureido-ciclodextrina descrito en el documento
ChemBioChem 2001, en función de la concentración del ligando
manosilado. Una comparación de las curvas para el compuesto nº 2 y
para el derivado de la
per-(C-6)-amina muestra un aumento
importante de la afinidad para la lectina debido a la introducción
del espaciador cisteaminilo. Se observa, por otro lado, un aumento
mucho más importante de la afinidad cuando los ligandos
manopiranosilo están incorporados en una estructura del tipo
hiperramificado (véanse las curvas para los compuestos nº 3, nº 4,
nº 6 y nº 7).
Así, la concentración del compuesto nº 2
necesaria para inhibir 50% de la asociación entre la concanavalina
A y el manano de levadura fijada sobre la microplaca (IC_{50}), es
de 175 \muM, mientras que para
heptakis(6-desoxi-6-\alpha-D-manopiranosiltioureido)ciclomaltoheptaosa,
un derivado heptavalente del tipo
tioureido-ciclodextrina, la inhibición a la misma
concentración alcanza sólo 8% del valor anterior. La eficacia del
fenómeno de reconocimiento es todavía mucho más elevada para las
tioureidocisteaminil-ciclodextrinas
hiperramificadas. Así, los valores de IC_{50} para los compuestos
nº 3, nº 4, nº 6 y nº 7 están comprendidos entre 5 y 21 \muM, es
decir, entre uno y dos órdenes de magnitud más baja que el valor
encontrado para el compuesto nº 2. Al mismo tiempo, la selectividad
en el reconocimiento entre el marcador glucídico dispuesto sobre la
ciclodextrina y la lectina específica sigue intacta. Así, el
compuesto nº 6 que comprende sólo unos sustituyentes
\beta-D-glucopiranosilo, no está
reconocido por la ConA, una lectina específica del ligando
\alpha-D-manopiranosilo. No se
observa ningún fenómeno de reconocimiento no específico imputable a
la presencia de la ciclodextrina.
\vskip1.000000\baselineskip
Se parte del Taxotère en el estado puro y se
dispersan 2,1 mg (2,47 \mumoles) de este producto en 1 ml de una
disolución que contiene 50 mmoles\cdotl^{-1} del compuesto nº 1
en agua estéril, y después se agita la suspensión obtenida a 70ºC
hasta la obtención de una disolución clara que indica la
complejación del Taxotère. Una vez formado, el complejo permanece
en disolución a temperatura ambiente. Se obtiene así un aumento de
la solubilidad del Taxotère (2,1 g.l^{-1}) del orden de 525 veces
con relación a la del Taxotère en ausencia de ciclodextrina (0,004
g.l^{-1}).
\vskip1.000000\baselineskip
Se parte del Taxotère en el estado puro y se
dispersan 0,2 mg (235 \mumoles) de este producto en 1 ml de una
disolución que contiende 50 mmoles/l^{-1} del compuesto nº 4 en
agua estéril, y después se agita la suspensión obtenida a 70ºC
hasta la obtención de una disolución clara que indica la
encapsulación del Taxotère. Una vez formado, el complejo permanece
en disolución a temperatura ambiente. Se obtiene así un aumento de
la solubilidad del Taxotère (2,0 g\cdotl^{-1}) del orden de 500
veces con relación a la del Taxotère en ausencia de
ciclodextrina.
Claims (28)
1. Compuesto que responde a la fórmula general
siguiente:
en la
que:
- n representa un número entero comprendido
entre 1 y 6;
- m representa un número entero igual a 5, 6 ó
7;
- R^{1} representa un grupo OH o un grupo
-S-CH_{2}-(CH_{2})_{n},-Z, siendo todos
los R^{1} idénticos;
- Z representa:
- \bullet
- un grupo NHX,
- \bullet
- un grupo amonio cuaternario de forma ^{+}NX_{3},
- \bullet
- un grupo
representando X un átomo de
hidrógeno o un grupo alquilo que comprende de 1 a 6 átomos de
carbono, y siendo en particular un grupo metilo, etilo, propilo o
butilo,
y
representando R un átomo de hidrógeno, un
sustituyente alquilo de 1 a 12 átomos de carbono lineal o
ramificado, o un grupo aromático tal como el grupo fenilo, bencilo o
naftilo, o unos derivados de estos grupos que contienen unos
sustituyentes sobre el ciclo aromático tales como los sustituyentes
metilo, etilo, cloro, bromo, yodo, nitro, hidroxilo, metoxilo o
acetamido, o
representando R un elemento de
biorreconocimiento tal como un derivado de aminoácido, un péptido,
un monosacárido, un oligosacárido, un elemento de multiplicación con
varias ramificaciones que comprende unos grupos glucídicos que
pueden ser idénticos o diferentes, o una sonda de visualización o de
detección fluorescente o radioactiva,
con la condición de que el compuesto en el que n
= 1, m = 6, Z = NH_{2} y R_{1} = OH sea excluido.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Compuesto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R^{1} represente OH y responde a la
fórmula general siguiente:
en la
que:
- m, n y Z son tal como se definen en la
reivindicación 1.
\vskip1.000000\baselineskip
3. Compuesto según la reivindicación 2, que
responde a la fórmula (I-a), y caracterizado
porque Z representa un grupo NHX, siendo X tal como se define en la
reivindicación 1, y siendo en particular un átomo de hidrógeno.
4. Compuesto según la reivindicación 2, que
responde a la fórmula (I-a), y caracterizado
porque Z representa un grupo
siendo R tal como se define en la
reivindicación 1, y siendo X tal como se define en la reivindicación
1, y siendo en particular un átomo de
hidrógeno.
\vskip1.000000\baselineskip
5. Compuesto según la reivindicación 1,
caracterizado porque R^{1} representa un grupo
-S-CH_{2}-(CH_{2})_{n}-Z,
y responde a la fórmula general siguiente:
en la que m, n y Z son tal como se
definen en la reivindicación
1.
\vskip1.000000\baselineskip
6. Compuesto según la reivindicación 5, que
responde a la fórmula siguiente:
siendo X, n y m tal como se definen
en la reivindicación
1.
\vskip1.000000\baselineskip
7. Compuesto según la reivindicación 6,
caracterizado porque X representa un átomo de hidrógeno y
porque n es igual a 1, y responde a la fórmula:
siendo m tal como se define en la
reivindicación
1.
\newpage
8. Compuesto según la reivindicación 6, que
responde a la fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
siendo X, n y m tal como se definen
en la reivindicación
1.
\vskip1.000000\baselineskip
9. Compuesto según la reivindicación 6, que
responde a la fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo X, n, m y R tal como se
definen en la reivindicación 1, y siendo R idéntico para cada
grupo
\vskip1.000000\baselineskip
tal como se define en la
reivindicación
1.
\vskip1.000000\baselineskip
10. Compuesto según la reivindicación 9,
caracterizado porque X representa un átomo de hidrógeno y
porque n es igual a 1, y responde a la fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo R y m tal como se definen en
la reivindicación
1.
\vskip1.000000\baselineskip
11. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque uno por lo
menos de los grupos NHX tal como se han definido anteriormente está
protonado y asociado a un anión monovalente seleccionado en
particular de entre el ión cloruro, bromuro o yoduro.
\newpage
12. Compuesto según la reivindicación 6,
caracterizado porque n es igual a 1 y porque el grupo Z
representa el grupo amonio cuaternario ^{+}NX_{3}, y porque se
puede asociar a un anión monovalente seleccionado en particular de
entre el ión cloruro, bromuro o yoduro, y que responde a la fórmula
siguiente:
13. Compuesto según la reivindicación 10,
caracterizado porque el grupo R se selecciona de entre los
siguientes grupos:
- -
- el grupo \alpha-D-manopiranosilo, de fórmula siguiente (III):
- -
- el grupo \beta-lactosilo, de fórmula siguiente (III-a):
- -
- el grupo derivado del trisacárido Lewis X o del tetrasacárido sialilo Lewis X, respectivamente de fórmulas siguientes (III-b) y (III-c):
- -
- un oligosacárido derivado de la heparina, de fórmula siguiente (III-d):
14. Compuesto según la reivindicación 10,
caracterizado porque
R comprende un elemento de ramificación derivado
de la tris-(2-hidroximetil)metilamina, o
R representa uno de los siguientes grupos:
- -
- el grupo tris(\alpha-D-manopiranosiloximetil)metilo, de fórmula siguiente (IV):
- -
- el grupo tris(\beta-lactosiloximetil)metilo, de fórmula siguiente (IV-a):
15. Compuesto según la reivindicación 4,
caracterizado porque R comprende un elemento de ramificación
derivado del pentaeritritol, respondiendo dicho compuesto a la
fórmula
en la
que
m, n, R^{1} y X son tal como se definen en la
reivindicación 1, y
R^{2} y R^{3} representan unos derivados
glucídicos que pueden ser diferentes o idénticos o también una sonda
fluorescente o radioactiva.
\vskip1.000000\baselineskip
16. Compuesto según la reivindicación 15,
caracterizado porque R^{1} representa OH.
17. Compuesto según la reivindicación 15,
caracterizado porque R^{1} representa el grupo de
fórmula:
18. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 15 a 17, caracterizado porque n es igual a
1, porque X representa un átomo de hidrógeno y porque R^{2} y
R^{3} representan uno de los grupos siguientes:
- -
- el grupo \alpha-D-manopiranosilo, de fórmula (III), tal como se define en la reivindicación 12, o
- -
- el grupo \beta-lactosilo, de fórmula (III-a), tal como se define en la reivindicación 13, o
- -
- el grupo \beta-D-glucopiranosilo, de fórmula (VI) siguiente:
- pudiendo ser R^{2} y R^{3} idénticos o diferentes.
\vskip1.000000\baselineskip
19. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 18, caracterizado porque m es igual a
6.
20. Complejo de inclusión de un compuesto según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, con una molécula
farmacológicamente activa, siendo la relación molar entre el
compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 19 y la molécula
farmacológicamente activa ventajosamente de aproximadamente 50:1 a
aproximadamente 1:1.
21. Complejo según la reivindicación 20,
caracterizado porque la molécula farmacológicamente activa es
un agente antitumoral que pertenece en particular a la familia del
Taxol.
22. Composición farmacéutica que comprende un
compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, o un
complejo de inclusión según la reivindicación 20 ó 21, con un
vehículo farmacológicamente aceptable.
23. Composición farmacéutica según la
reivindicación 22, en forma de disolución acuosa.
24. Composición farmacéutica según cualquiera de
las reivindicaciones 22 ó 23, caracterizada porque contiene
por dosis unitaria de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 500 mg
de uno de los compuestos según cualquiera de las reivindicaciones 1
a 19, o porque contiene por dosis unitaria de aproximadamente 100 mg
a aproximadamente 750 mg de uno de los complejos según una de las
reivindicaciones 20 ó 21.
25. Procedimiento de preparación de un compuesto
de fórmula (I) según la reivindicación 1, que comprende las etapas
siguientes:
- hacer reaccionar un compuesto selectiva o
totalmente halogenado en posición alcohol primario, de fórmula (VII)
siguiente:
siendo m tal como se define en la
reivindicación 1 en la fórmula
(I),
representando W un grupo OH o un grupo Y, siendo
todos los grupos W idénticos, y
representando Y un átomo de halógeno
seleccionado de entre el grupo constituido por el cloro, por el
bromo, por el yodo, y siendo preferentemente el bromo o el yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
estando dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
o la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-b)
siguiente:
siendo dicha sal asociada a un
contra-ión halogenuro, preferentemente el ión
cloruro,
siendo n y X tal como se han definido
anteriormente, y siendo X preferentemente un átomo de hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
con el fin de obtener un compuesto de fórmula
(I) tal como se define en la reivindicación 1 y que responde a las
fórmulas siguientes (A-a) o
(A-b):
y
eventualmente
- la reacción del compuesto de fórmula
(A-a) tal como el obtenido en la etapa anterior con
un isotiocianato de fórmula (IX) siguiente:
(IX)R-N=C=S
en la que R es tal como se define
en la reivindicación
1,
\newpage
con el fin de obtener un compuesto de fórmula
(I) tal como se ha definido anteriormente, y que responde a la
fórmula siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
26. Procedimiento de preparación según la
reivindicación 25, de un compuesto que responde a la fórmula general
(I-b) siguiente:
estando dicho procedimiento
caracterizado porque comprende las siguientes
etapas:
- la reacción de un compuesto
per(6-desoxi-6-halo)ciclodextrina,
de fórmula (VII-a) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
siendo m e Y tal como se definen en
la reivindicación
25,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
estando dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
o la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-b)
siguiente:
siendo dicha sal asociada a un
contra-ión halogenuro, preferentemente el ión
cloruro,
siendo n y X tal como se definen en la
reivindicación 1, y siendo X preferentemente un átomo de
hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
con el fin de obtener un compuesto de fórmulas
(I-c), (I-d) o (I-e)
siguientes
y
eventualmente
- la reacción del compuesto de fórmula
(I-c) tal como el obtenido en la etapa anterior con
un isotiocianato de fórmula (IX) siguiente:
(IX)R-N=C=S
en la que R es tal como se define
en la reivindicación
1,
con el fin de obtener un compuesto (II) o
(II-a) siguiente
\vskip1.000000\baselineskip
27. Procedimiento de preparación según la
reivindicación 25, de compuestos que responden a la fórmula
siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
estando dicho procedimiento
caracterizado porque comprende las etapas
siguientes:
- la reacción de un compuesto selectivamente
halogenado en posición alcohol primario, de fórmula (VII)
siguiente:
siendo m e Y tal como se definen en
la reivindicación
25,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula (VIII) siguiente:
estando dicho
\omega-aminoalcanotiol eventualmente
N-alquilado,
o la sal correspondiente de fórmula
(VIII-a) siguiente:
o una sal de tetraalquilamonio de
fórmula (VIII-b)
siguiente:
siendo dicha sal asociada a un
halogenuro tal como un contra-ión, y siendo
preferentemente el ión
cloruro,
siendo n y X tal como se definen en la
reivindicación 1, y siendo X preferentemente un átomo de
hidrógeno,
siendo el compuesto de fórmula (VIII)
preferentemente la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH,
con el fin de obtener un compuesto de fórmula
(I-f) o (I-g) de fórmula
siguiente:
en las que m, n y X son tal como se
definen en la reivindicación 1, y
eventualmente
- la reacción del compuesto de fórmula
(I-f) tal como el obtenido en la etapa anterior con
un isotiocianato de fórmula (IX) siguiente:
(IX)R-N=C=S
en la que R es tal como se define
en la reivindicación
1,
con el fin de obtener un compuesto de fórmula
(I-h):
28. Procedimiento de preparación de un compuesto
de fórmula (I-f-bis)
en la que m y n son tal como se
definen en la reivindicación 1, siendo preferentemente n igual a
1,
estando dicho procedimiento caracterizado
porque comprende la reacción de un compuesto selectivamente
halogenado en posición alcohol primario, de fórmula (VII)
siguiente:
siendo m tal como se ha definido
anteriormente,
y
representando Y un átomo de halógeno
seleccionado de entre el grupo constituido por el cloro, por el
bromo, por el yodo, y siendo preferentemente el bromo o el yodo,
con un \omega-aminoalcanotiol
de fórmula siguiente:
siendo n tal como se ha definido
anteriormente,
o preferentemente con la cisteamina de fórmula
H_{2}N-CH_{2}-CH_{2}-SH.
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