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ES2305139T3 - Derivados de purina condensados como antagonistas de receptores de adenosina a1. - Google Patents

Derivados de purina condensados como antagonistas de receptores de adenosina a1. Download PDF

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ES2305139T3
ES2305139T3 ES01998550T ES01998550T ES2305139T3 ES 2305139 T3 ES2305139 T3 ES 2305139T3 ES 01998550 T ES01998550 T ES 01998550T ES 01998550 T ES01998550 T ES 01998550T ES 2305139 T3 ES2305139 T3 ES 2305139T3
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ES
Spain
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bicyclo
acid
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propyl
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Ko-Chung Lin
Chi Vu
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Biogen MA Inc
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Biogen Idec Inc
Biogen Idec MA Inc
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Abstract

Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: (Ver tabla)

Description

Derivados de purina condensados como antagonistas de receptores de adenosina A_{1}.
Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud Provisional de Estados Unidos nº 60/250.658, presentada el 1 de diciembre de 2000, que se incorpora aquí por referencia.
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Ámbito técnico de la invención
Esta invención se refiere a química y farmacología medicinales. Más en particular, se refiere a antagonistas de los receptores de adenosina, a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y a métodos de hacer y usar los mismos en el tratamiento de enfermedades.
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Antecedentes de la invención
La adenosina es un mensajero bioquímico ubicuo. La adenosina se une a y activa los receptores acoplados a la proteína G que atraviesan siete veces la transmembrana, provocando una variedad de respuestas fisiológicas. Los receptores de la adenosina se dividen en cuatro subtipos conocidos (es decir, A_{1}, A_{2a}, A_{2b} y A_{3}). Estos subtipos de receptor transmiten efectos diferentes, y a veces opuestos. La activación del receptor A_{1} de la adenosina, por ejemplo, provoca un aumento en la resistencia vascular renal, mientras que la activación del receptor A_{2a} de la adenosina provoca una disminución en la resistencia vascular renal.
En la mayoría de los sistemas orgánicos de mamíferos, periodos de estrés metabólico tienen como resultado aumentos significativos en la concentración de adenosina en el tejido. El corazón, por ejemplo, produce y libera adenosina para transmitir respuestas adaptativas al estrés, tales como reducciones en el ritmo cardiaco y vasodilatación coronaria. Igualmente, concentraciones de adenosina en los riñones aumentan en la respuesta a la hipoxia, estrés metabólico y muchas sustancias nefrotóxicas. Los riñones también producen adenosina constitutivamente. Los riñones ajustan la cantidad de la adenosina producida constitutivamente con el fin de regular la filtración glomerular y la reabsorción de electrolitos. Con respecto al control de la filtración glomerular, la activación de los receptores A_{1} conduce a la constricción de las arteriolas aferentes, mientras que la activación de los receptores A_{2a} conduce a dilatación de las arteriolas eferentes. La activación de los receptores A_{2a} ejerce efectos vasodilatadores sobre la arteriola aferente. En conjunto, el efecto de activación de estos receptores de la adenosina glomerulares es reducir la velocidad de filtración glomerular. Además, los receptores de la adenosina A_{1} se localizan en el túbulo proximal y sitios tubulares distales. La activación de estos receptores simula la reabsorción de sodio a partir de la luz tubular. Por consiguiente, bloquear los efectos de la adenosina sobre estos receptores produce una elevación en la velocidad de filtración glomerular y un aumento en la excreción de sodio.
\vskip1.000000\baselineskip
Sumario de la invención
La invención se basa en el descubrimiento de que compuestos de Fórmula I y II (véanse más adelante) son potentes y selectivos inhibidores de subtipos particulares de receptores de adenosina. Basada en este descubrimiento, la invención presenta antagonistas de la adenosina útiles en la prevención y/o tratamiento de numerosas enfermedades, incluyendo trastornos cardiacos y circulatorios, trastornos degenerativos del sistema nervioso central, trastornos respiratorios y muchas enfermedades para las que es apropiado el tratamiento diurético. En general, la invención presenta antagonistas del receptor A_{1} de la adenosina altamente potentes y selectivos.
La invención, por lo tanto, crea un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
1
2
3
4 
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Más generalmente descritos en esta memoria descriptiva, no obstante, pero no en su totalidad parte de la invención como se reivindica, son los compuestos de Fórmula I o II:
\vskip1.000000\baselineskip
5 
\vskip1.000000\baselineskip
6
en las que R_{1} y R_{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en:
a) hidrógeno;
b) alquilo, alquenilo o alquinilo, en los que dicho alquilo, alquenilo o alquinilo está o no sustituido o funcionalizado con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, heterociclilo, acilamino, alquilsulfonilamino y heterociclilcarbonilamino; y
c) arilo o arilo sustituido;
\vskip1.000000\baselineskip
R_{3} se selecciona del grupo que consiste en:
(a) un grupo biciclilo, triciclilo o pentaciclilo seleccionado del grupo que consiste en:
7
en los que el grupo biciclilo, triciclilo o pentaciclilo está o no sustituido o funcionalizado con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en:
(i)
alquilo, alquenilo y alquinilo; en los que cada grupo alquilo, alquenilo o alquinilo está o no sustituido o funcionalizado con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en (alcoxicarbonil)-aralquilcarbamoilo, (amino)(R_{5})acilhidrazinil-carbonilo, (amino)(R_{5})aciloxicarboxi, (hidroxi)-(carboalcoxi)alquilcarbamoilo, acilaminoalquilamino, aciloxi, aldehído, alquenoxi, alquenilamino, alquenilsulfonilamino, alcoxi, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquilamino, alcoxicarbonilamino, alcoxicarbonilaminoaciloxi, alcoxicarbonilaminoalquilamino, alquilamino, alquilaminoalquilamino, alquilcarbamoilo, alquilfosfono, alquilsulfonilamino, alquilsulfoniloxi, amino, aminoaciloxi, aminoalquilaralquilcarbamoilo, aminoalquilcarbamoilo, aminoalquilheterociclilalquilcarbamoilo, aminocicloalquilalquilcicloalquil-carbamoilo, aminocicloalquilcarbamoilo, aralcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilamino, arilheterociclilo, ariloxi, arilsulfonilamino, arilsulfoniloxi, carbamoilo, carbonilo, ciano, cianoalquilcarbamoilo, cicloalquilamino, dialquilamino, dialquilaminoalquil-amino, dialquilaminoalquilcarbamoilo, dialquilfosfono, haloalquilsulfonilamino, halógeno, heterociclilo, heterociclilalquilamino, heterociclilcarbamoilo, hidroxi, hidroxialquilsulfonilamino, oximino, fosfato, fosfono, -R_{5}, R_{5}-alcoxi, R_{5}-alquil(alquil)amino, R_{5}-alquilalquilcarbamoilo, R_{5}-alquilamino, R_{5}-alquil-carbamoilo, R_{5}-alquilsulfonilo, R_{5}-alquilsulfonil-amino, R_{5}-alquiltio, R_{5}-heterociclilcarbonilo, aralquilamino sustituido, arilcarboxialcoxicarbonilo sustituido, arilsulfonilaminoalquilamino sustituido, heteroarilsulfonilamino sustituido, heterociclilo sustituido, heterociclilaminoalquilamino sustituido, heterociclilsulfonilamino sustituido, sulfoxiacilamino, tiocarbamoilo, trifluormetilo; y
(ii)
(alcoxicarbonil)aralquilcarbamoilo, (amino)(R_{5})-acilhidrazinilcarbonilo, (amino)(R_{5})aciloxicarboxi, (hi- droxi)(carboalcoxi)alquilcarbamoilo, acilaminoalquilamino, aciloxi, aldehído, alquenoxi, alquenilamino, alquenilsulfonilamino, alcoxi, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquilamino, alcoxicarbonilamino, alcoxicarbonilaminoaciloxi, alcoxicarbonilaminoalquil-amino, alquilamino, alquilaminoalquilamino, alquilcarba- moilo, alquilfosfono, alquilsulfonilamino, alquilsulfoniloxi, amino, aminoaciloxi, aminoalquil-aralquilcarbamoilo, aminoalquilcarbamoilo, amino-alquilheterociclilalquilcarbamoilo, aminocicloalquil-alquilcicloalquilcarbamoilo, aminocicloalquilcarbamoilo, aralcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilamino, arilheterociclilo, ariloxi, arilsulfonilamino, arilsulfoniloxi, carbamoilo, carbonilo, ciano, cianoalquilcarbamoilo, cicloalquilamino, dialquilamino, dialquilaminoalquilamino, dialquilaminoalquilcarbamoilo, dialquilfosfono, haloalquilsulfonilamino, halógeno, heterociclilo, heterociclilalquilamino, heterociclilcarbamoilo, hidroxi, hidroxialquilsulfonilamino, oximino, fosfato, fosfono, -R_{5}, R_{5}-alcoxi, R_{5}-alquil(alquil)amino, R_{5}-alquilalquilcarbamoilo, R_{5}-alquilamino, R_{5}-alquilcarbamoilo, R_{5}-alquil-sulfonilo, R_{5}-alquilsulfonilamino, R_{5}-alquiltio, R_{5}-heterociclilcarbonilo, aralquilamino sustituido, arilcarboxialcoxicarbonilo sustituido, arilsulfonil-aminoalquilamino sustituido, heteroarilsulfonilamino sustituido, heterociclilo sustituido, heterociclil-aminoalquilamino sustituido, heterociclilsulfonilamino sustituido, sulfoxiacilamino, tiocarbamoilo, trifluormetilo;
\vskip1.000000\baselineskip
R_{4} se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo de C_{1-4}, alquil de C_{1-4}-CO_{2}H y fenilo, en los que los grupos alquilo de C_{1-4}, alquil de C_{1-4}-CO_{2}H y fenilo están o no sustituidos o funcionalizados con uno hasta tres sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OMe, -NH_{2}, -NO_{2}, bencilo y bencilo funcionalizado con uno hasta tres sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OMe, -NH_{2} y -NO_{2};
R_{5} se selecciona del grupo que consiste en -(CR_{1}R_{2})_{n}COOH, -C(CF_{3})_{2}OH, -CONHNHSO_{2}CF_{3}, -CONHOR_{4},
-CONHSO_{2}R_{4}, -CONHSO_{2}NHR_{4}, -C(OH)R_{4}PO_{3}H_{2}, -NHCOCF_{3}, -NHCONHSO_{2}R_{4}, -NHPO_{3}H_{2}, -NHSO_{2}R_{4}, -NH
SO_{2}NHCOR_{4}, -OPO_{3}H_{2}, -OSO_{3}H, -PO(OH)R_{4}, -PO_{3}H_{2}, -SO_{3}H, -SO_{2}NHR_{4}, -SO_{3}NHCOR_{4}, -SO_{3}NHCONHCO_{2}R_{4}, y los siguientes:
8
n= 0, 1, 2 ó 3;
A se selecciona del grupo que consiste en -CH=CH, -(CH_{2})_{m}-(CH_{2})_{m}, -CH=CH-CH_{2} y -CH_{2}-CH=CH;
m = 1 ó 2;
X es O ó S;
Z se selecciona del grupo que consiste en un enlace sencillo, -O-, -(CH_{2})_{n}-, -O(CH_{2})_{1-2}-, -CH_{2}OCH_{2}-, -(CH_{2})_{1-2}O-, -CH=CHCH_{2}, -CH=CH- y -CH_{2}CH=CH-; y
R_{6} se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo, acilo, alquilsulfonilo, aralquilo, aralquilo sustituido, alquilo sustituido y heterociclilo; y
R_{7} se selecciona del grupo que consiste en:
a) hidrógeno;
b) alquilo, alquenilo de no menos de 3 carbonos, o alquinilo de no menos de 3 carbonos; en los que dicho alquilo, alquenilo o alquinilo está o no sustituido o funcionalizado con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, heterociclilo, acilamino, alquilsulfonilamino y heterociclilcarbonilamino; y
c) arilo o arilo sustituido;
d) alquilarilo o arilo sustituido con alquilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de Fórmula I o II pueden estar opcionalmente en formas tales como un compuesto quiral, un racemato, un compuesto ópticamente activo, un diastereómero puro, una mezcla de diastereómeros o una sal de adición farmacológicamente aceptable. En ciertos compuestos preferidos de Fórmula I o II ninguno de R_{1} y R_{2} son hidrógeno, es decir, cada uno de R_{1} y R_{2} se selecciona independientemente del grupo que consiste en
a) alquilo, alquenilo o alquinilo, en los que dicho alquilo, alquenilo o alquinilo está o no sustituido o funcionalizado con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, heterociclilo, acilamino, alquilsulfonilamino y heterociclilcarbonilamino; y
b) arilo o arilo sustituido.
\vskip1.000000\baselineskip
Más preferentemente, al menos uno de R_{1} y R_{2} es alquilo. En aún otros compuestos preferidos de Fórmula I o II, A es -(CH_{2})_{m}-(CH_{2})_{m}, R_{7 }es alquilo en otros compuestos preferidos, y Z es preferentemente un enlace sencillo.
En cuanto al primer aspecto de la invención, los compuestos preferidos son:
\vskip1.000000\baselineskip
2-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-7-isopropil-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-5-ona
(compuesto 1);
7-Etil-2-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-5-ona (compuesto 2);
Ácido 3-[4-(7-etil-5-oxo-4-propil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-2-il)biciclo[2.2.2]oct-1-
il]-propiónico (compuesto 3);
2-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-7-metil-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-5-ona
(compuesto 4); y
Ácido 3-[4-(7-isopropil-5-oxo-4-propil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-2-il)biciclo-[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (compuesto 5).
\vskip1.000000\baselineskip
Los compuestos de esta invención se pueden modificar para potenciar las propiedades deseadas. Tales modificaciones son conocidas en la técnica e incluyen aquellas que aumentan la penetración biológica en un sistema biológico dado (p. ej., sangre, sistema linfático, sistema nervioso central), aumentan la disponibilidad oral, aumentan la solubilidad para permitir la administración por inyección, alteran el metabolismo y/o alteran la velocidad de excreción. Ejemplos de estas modificaciones incluyen, pero no se limitan a, esterificación con polietilenglicoles, derivatización con pivalatos o sustituyentes de ácidos grasos, conversión a carbamatos, hidroxilación de anillos aromáticos y sustitución con heteroátomos en los anillos aromáticos.
La invención también presenta una composición farmacéutica que incluye cualquiera de los compuestos del primer aspecto de la invención, solos o en combinación, junto con un excipiente apropiado.
La invención también presenta el uso de un compuesto del primer aspecto de la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un paciente que muestre signos o síntomas de una enfermedad o trastorno en el que la activación de los receptores de la adenosina A_{1} juegue un papel causante en la enfermedad o el trastorno. El tratamiento incluye administrar al paciente una cantidad eficaz de cualquiera de los anteriores compuestos. La enfermedad o el trastorno pueden ser, por ejemplo, hipertensión sistémica, fallo renal, diabetes, asma, y estado edematoso, insuficiencia cardiaca congestiva o disfunción renal (p. ej., disfunción renal que se produce como efecto secundario de un diurético usado para tratar la insuficiencia cardiaca congestiva, o toxicidad renal que se produce como efecto secundario de tratamiento con agentes quimioterapéuticos).
Los compuestos de la invención ofrecen ventajas, incluyendo las siguientes. Por ejemplo, (1) se pueden usar en dosis bajas para minimizar la probabilidad de efectos secundarios y (2) se pueden incorporar en numerosas formas de dosificación incluyendo, pero no limitadas a, píldoras, comprimidos, cápsulas, aerosoles, supositorios, formulaciones líquidas para ingestión o inyección, suplementos dietéticos, o preparaciones tópicas. Además de aplicaciones médicas humanas, los compuestos de la invención se pueden usar en el tratamiento veterinario de animales. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica se formula para administración oral, intravenosa, intramuscular o subcutánea.
Esta invención también presenta un procedimiento para preparar los compuestos de la invención, que comprende las etapas de: a) alquilar una tiocetona para producir un tioéter; b) hacer reaccionar el tioéter con un aminoalcohol sustituido para producir un compuesto intermedio alcohol; y c) ciclar el compuesto intermedio alcohol para producir un producto ciclado.
En algunas realizaciones, el anterior procedimiento comprende además la etapa de: a) convertir el producto ciclado en un derivado de ácido carboxílico. En algunas realizaciones, el procedimiento comprende las etapas de: a) copular un diaminouracilo con éster monometílico del ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico para producir un ácido; b) reducir el ácido al correspondiente alcohol; c) oxidar el alcohol a un aldehído; d) copular el aldehído con (trifenilfosforoanilideno)acetato de metilo para producir un producto copulado; e) convertir el producto copulado en una tiocetona; f) alquilar la tiocetona para producir un tioéter; g) hacer reaccionar el tioéter con un aminoalcohol sustituido para producir un compuesto intermedio alcohol; h) ciclar el compuesto intermedio alcohol para producir un producto ciclado; e i) convertir el producto ciclado en un derivado de ácido carboxílico.
En algunas realizaciones, el procedimiento comprende las etapas de: a) copular un diaminouracilo con éster monometílico del ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico para producir un ácido; b)esterificar el ácido al correspondiente éster; c) convertir el éster para producir una tiocetona; d) alquilar la tiocetona para producir un tioéter; e) hacer reaccionar el tioéter con un aminoalcohol sustituido para producir un compuesto intermedio alcohol; f) ciclar el compuesto intermedio alcohol para producir un producto ciclado, y g) convertir el producto ciclado en un derivado de ácido carboxílico.
En algunas realizaciones, el procedimiento comprende las etapas de: a) nitrosar 6-amino-1-propil-1H-pirimidina-2,4-diona para producir un compuesto intermedio nitroso; b) reducir el compuesto intermedio nitroso para producir el correspondiente diaminouracilo; c) convertir el diaminouracilo en una sal de amina; d) copular la sal de amina a ácido 4-hidroxi-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico para producir un producto copulado; e) convertir el producto copulado en una tiocetona; f) alquilar la tiocetona para producir un tioéter; g) hacer reaccionar el tioéter con un aminoalcohol sustituido para producir un compuesto intermedio alcohol; y h) ciclar el compuesto intermedio alcohol para producir un producto ciclado.
Otras características y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada y de las reivindicaciones.
Descripción detallada de la invención
A menos que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos usados en esta memoria descriptiva tienen el mismo significado que el que se entiende comúnmente por alguien de experiencia ordinaria en la técnica a la que pertenece esta invención. Aunque en la práctica o ensayo de la presente invención se puedan usar métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en esta memoria descriptiva, métodos y materiales apropiados se describen a continuación. Todas las publicaciones, solicitudes de patente, patentes y otras referencias mencionadas en esta memoria descriptiva se incorporan por referencia en su totalidad. Además, los materiales, métodos y ejemplos son sólo ilustrativos y no pretenden ser limitativos.
A lo largo de toda esta memoria descriptiva, la palabra "comprenden" o variaciones tales como "comprende" o "que comprende" se entenderá que implican la inclusión de un número entero o grupos de números enteros expresado, pero no la exclusión de cualquier otro número entero o grupo de números enteros.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "alquenilo" es un grupo de carbono alifático que tiene al menos un doble enlace. Un grupo alquenilo puede ser lineal o ramificado y puede tener, por ejemplo, desde 3 hasta 6 átomos en la cadena y 1 ó 2 dobles enlaces. Ejemplos de grupos alquenilo incluyen, pero no se limitan a, alilo e isoprenilo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "alquinilo" es un grupo de carbono alifático que tiene al menos un triple enlace. Un grupo alquinilo puede ser lineal o ramificado y puede tener, por ejemplo, desde 3 hasta 6 átomos en una cadena y 1 hasta 2 triples enlaces. Ejemplos de grupos alquinilo incluyen, pero no se limitan a, propargilo y butinilo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "arilo" es un grupo fenilo o naftilo, o un derivado de los mismos. Un grupo "arilo sustituido" es un grupo arilo que está sustituido con uno o más sustituyentes tales como alquilo, alcoxi, amino, nitro, carboxi, carboalcoxi, ciano, alquilamino, dialquilamino, halo, hidroxi, hidroxialquilo, mercaptilo, alquilmercaptilo, trihaloalquilo, carboxialquilo, sulfoxi o carbamoilo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "aralquilo" es un grupo alquilo que está sustituido con un grupo arilo. Un ejemplo de un grupo aralquilo es bencilo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "cicloalquilo" es un anillo alifático de, por ejemplo, 3 hasta 8 átomos de carbono. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen ciclopropilo y ciclohexilo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "acilo" es un grupo alquilo-C(=O)- lineal o ramificado o un grupo formilo. Ejemplos de grupos acilo incluyen grupos alcanoilo (p. ej., que tienen desde 1 hasta 6 átomos de carbono en el grupo alquilo). Acetilo y pivaloilo son ejemplos de grupos acilo. Los grupos acilo pueden estar sustituidos o no sustituidos.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "carbamoilo" es un grupo que tiene la estructura H_{2}N-CO_{2}-. "Alquilcarbamoilo" y "dialquilcarbamoilo" se refieren a grupos carbamoilo en los que el nitrógeno tiene uno o dos grupos alquilo unidos en lugar de los hidrógenos, respectivamente. Por analogía, los grupos "arilcarbamoilo" y "aril-alquilcarbamoilo" incluyen un grupo arilo en lugar de uno de los hidrógenos, y, en el último caso, un grupo alquilo en lugar del segundo hidrógeno.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "carboxilo" es un grupo -COOH.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "alcoxi" es un grupo alquil-O- en el que "alquilo" es como se describe previamente.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "alcoxialquilo" es un grupo alquilo como se describe previamente con un hidrógeno sustituido por un grupo alcoxi, como se describe previamente.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "halógeno" o "halo" es flúor, cloro, bromo o yodo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "heterociclilo" es una estructura de anillo de 5 hasta alrededor de 10 miembros, en la que uno o más de los átomos en el anillo es un elemento distinto de carbono, p. ej. N, O, S. Un grupo heterociclilo puede ser aromático o no aromático, es decir, puede estar saturado o puede estar parcial o totalmente insaturado. Ejemplos de grupos heterociclilo incluyen piridilo, imidazolilo, furanilo, tienilo, tiazolilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, indolilo, indolinilo, isoindolinilo, piperidinilo, pirimidinilo, piperazinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, tatrazolilo y bencimidazolilo.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "heterociclilo sustituido" es un grupo heterociclilo en el que uno o más hidrógenos están sustituidos por sustituyentes tales como alcoxi, alquilamino, dialquilamino, carbalcoxi, carbamoilo, ciano, halo, trihalometilo, hidroxi, carbonilo, tiocarbonilo, hidroxialquilo o nitro.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "hidroxialquilo" significa un grupo alquilo sustituido con un grupo hidroxi.
Como se usa en esta memoria descriptiva, grupo "sulfamoilo" tiene la estructura -S(O)_{2}NH_{2}. "Alquilsulfamoilo" y "dialquilsulfamoilo" se refieren a grupos sulfamoilo en los que el nitrógeno tiene uno o dos grupos alquilo unidos en lugar de los hidrógenos, respectivamente. Por analogía, los grupos "arilsulfamoilo" y "arilalquilsulfamoilo" incluyen un grupo arilo en lugar de uno de los hidrógenos, y, en el último caso, un grupo alquilo en lugar del segundo hidrógeno.
Como se usa en esta memoria descriptiva, un "antagonista" es una molécula que se une a un receptor sin activar el receptor. Compite con el ligando endógeno por este sitio de unión y, por lo tanto, reduce la capacidad del ligando endógeno para estimular el receptor.
En el contexto de la presente invención, un "antagonista selectivo" es un antagonista que se une a un subtipo específico de receptor de adenosina con mayor afinidad que a otros subtipos de receptores de adenosina. Los antagonistas de la invención pueden, por ejemplo, tener mayor afinidad por los receptores A_{1} y son selectivos, teniendo (a) afinidad de unión nanomolar por el receptor A_{1} y (b) al menos 10 veces, más preferentemente 50 veces, y lo más preferentemente al menos 100 veces, mayor afinidad por el subtipo de receptor A_{1 }que por cualquier otro subtipo de receptor.
Como se usa en esta memoria descriptiva, "cantidad farmacéuticamente eficaz" significa una cantidad eficaz para tratar o prevenir un estado caracterizado por una elevada concentración de adenosina y/o sensibilidad aumentada a la adenosina. Como se usa en esta memoria descriptiva, el término "paciente" significa un mamífero, incluyendo un ser humano.
Como se usa en esta memoria descriptiva, "soporte o coadyuvante farmacéuticamente aceptable" significa un soporte o coadyuvante no tóxico que se puede administrar a un animal, junto con un compuesto de esta invención, y que no destruye la actividad farmacológica del mismo.
En general, la invención se refiere a potentes y selectivos antagonistas del receptor A_{1} de la adenosina. Compuestos ejemplares de la invención están descritos en la tabla 1. Los compuestos enseñados en esta memoria descriptiva exhiben IC_{50}s frente al receptor A_{1} de rata en el intervalo desde alrededor de 7 hasta alrededor de 1095.
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Síntesis de los compuestos antagonistas de la adenosina
Los compuestos de la invención se pueden preparar mediante varios métodos conocidos. Por ejemplo, estos compuestos se pueden preparar por métodos enseñados en el trabajo de Suzuki, F. et al., J. Med. Chem. 1992, 35, 3581-3583, y/o en el de Shimada, J.; Suzuki, F. Tetrahedron Lett. 1992, 33, 3151-3154.
A continuación se describen tres esquemas de síntesis generales para producir los compuestos de esta invención.
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Esquema general para el Método 1
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Esquema general para el Método 2
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Esquema general para el Método 3
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Como puede ser apreciado por el artista experto, los anteriores esquemas de síntesis no pretenden comprender una lista comprehensiva de todos los medios por los que los compuestos descritos y reivindicados en esta memoria descriptiva se pueden sintetizar. Otros métodos serán evidentes para aquellos con experiencia ordinaria en la técnica.
Usos para los compuestos antagonistas de la adenosina
La activación de de los receptores de la adenosina de subtipo A_{1} provoca muchas respuestas fisiológicas, incluyendo reducciones en el flujo sanguíneo renal, reducciones en la velocidad de filtración glomerular y aumentos en la reabsorción del sodio en el riñón. La activación de los receptores de la adenosina A_{1} también reduce el ritmo cardiaco, reduce la velocidad de conducción y reduce la contractilidad. Éstos y otros efectos de la activación de los receptores de la adenosina A_{1} en otros órganos son procesos reguladores normales. No obstante, estos efectos se vuelven patológicos en muchos estados de enfermedad. Por tanto, los antagonistas del receptor de la adenosina A_{1} tienen extensa aplicación tanto en prevención como en tratamiento de la enfermedad. Las enfermedades que se pueden prevenir y/o tratar con antagonistas del receptor de la adenosina A_{1} incluyen enfermedades y trastornos en los que la activación de los receptores de la adenosina A_{1} juega un papel en patofisiología. Ejemplos de tales enfermedades y trastornos incluyen, pero no se limitan a, insuficiencia cardiaca congestiva, trastornos respiratorios (por ejemplo, asma bronquial, enfermedades pulmonares alérgicas), y muchas enfermedades para las que está indicado el tratamiento diurético (p. ej., fallo renal agudo y crónico, insuficiencia renal, hipertensión).
Adicionalmente, la invención crea la administración de altamente selectivos y potentes antagonistas del receptor A_{1} de la adenosina, por ejemplo, para provocar una respuesta diurética cuando se administran solos y para potenciar la respuesta diurética a diuréticos tradicionales. Además, la administración de antagonistas del receptor de la adenosina A_{1} con diuréticos tradicionales atenúa la reducción de la velocidad de filtración glomerular inducida por los diuréticos tradicionales. Esto es útil, por ejemplo, para tratar los estados edematosos, tales como insuficiencia cardiaca congestiva y ascitis.
Administración de los compuestos antagonistas de la adenosina
Los compuestos se pueden administrar a un animal (p. ej., un mamífero tal como un ser humano, primate no humano, caballo, perro, vaca, cerdo, oveja, cabra, gato, ratón, rata, cobaya, conejo, hámster, gerbo, hurón, lagarto, reptil o pájaro). Los compuestos se pueden administrar de cualquier manera apropiada para la administración de compuestos farmacéuticos, incluyendo, pero no limitado a, píldoras, comprimidos, cápsulas, aerosoles, supositorios, formulaciones líquidas para ingestión o inyección o para uso como gotas para los ojos u oído, suplementos dietéticos y preparaciones tópicas. Los compuestos se pueden administrar oralmente, intranasalmente, transdérmicamente, intradérmicamente, vaginalmente, intraauricularmente, intraocularmente, bucalmente, rectalmente, transmucosamente, o por vía de inhalación, implantación (p. ej., quirúrgicamente) o administración intravenosa.
Opcionalmente, los compuestos se pueden administrar junto con una composición farmacéutica que no modifique la adenosina (p. ej., en combinación con un diurético que no modifique la adenosina como se describe, por ejemplo, en la solicitud en tramitación PCT/US99/08879 presentada el 23 de abril de 1999).
Composiciones farmacéuticas
Los antagonistas del receptor de la adenosina A_{1} se pueden formular en composiciones farmacéuticas para administración a animales, incluyendo seres humanos. Estas composiciones farmacéuticas incluyen preferentemente una cantidad de antagonista del receptor de la adenosina A_{1} eficaz para reducir la vasoconstricción o aumentar la hemodinámica pulmonar y un soporte farmacéuticamente aceptable.
Los soportes farmacéuticamente aceptables útiles en estas composiciones farmacéuticas incluyen, p. ej., intercambiadores de iones, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas de suero, tales como albúmina de suero humano, sustancias tampón tales como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato potásico, mezclas de glicérido parciales de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrólitos, tales como sulfato de protamina, hidrogenofosfato disódico, hidrogenofosfato potásico, cloruro sódico, sales de cinc, sílice coloidal, trisilicato magnésico, polivinilpirrolidona, sustancias basadas en celulosa, polietilenglicol, carboximetilcelulosa sódica, poliacrilatos, ceras, polímeros de bloques de polietileno-polioxipropileno y grasa de lana.
Las composiciones de la presente invención se pueden administrar parenteralmente, oralmente, mediante pulverización para inhalación, tópicamente, rectalmente, nasalmente, bucalmente, vaginalmente o vía un reservorio implantado. El término "parenteral", como se usa en esta memoria descriptiva, incluye inyección o técnicas de infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intrahepática, intralesional e intracraneal. Preferentemente, las composiciones se administran oralmente, intraperitonealmente o intravenosamente.
Formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser suspensión acuosa u oleaginosa. Estas suspensiones se pueden formular según técnicas conocidas en la técnica usando agentes dispersantes o humectantes y agentes suspendedores apropiados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico y parenteralmente aceptable, por ejemplo, una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear están el agua, solución de Ringer y solución de cloruro sódico isotónica. Además, se emplean convencionalmente aceites fijados y estériles como disolvente o medio suspendedor. Para este fin, se puede emplear cualquier aceite fijado suave, incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Los ácidos grasos tales como ácido oleico y sus derivados de glicérido son útiles en la preparación de inyectables, como son los aceites farmacéuticamente aceptables naturales, tales como aceite de oliva o aceite de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas. Estas soluciones o suspensiones en aceite también pueden contener un diluyente o dispersante de alcohol de cadena larga, tal como agentes dispersantes de carboximetilcelulosa o similares que se usan comúnmente en la formulación de formas de dosificación farmacéuticamente aceptables, incluyendo emulsiones y suspensiones. Otros tensioactivos usados comúnmente, tales como Tweens, Spans y otros agentes emulsionantes o potenciadores de la biodisponibilidad que se usan comúnmente en la fabricación de formas de dosificación sólidas, líquidas u otras farmacéuticamente aceptables también se pueden usar para los fines de la formulación.
Las formulaciones parenterales pueden ser una dosis de un solo bolo, una infusión o una dosis de bolo de carga seguida de una dosis de mantenimiento. Estas composiciones se pueden administrar una vez al día o en una base "según se necesite".
Las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden administrar oralmente en cualquier forma de dosificación oralmente aceptable incluyendo cápsulas, comprimidos o suspensiones o soluciones acuosas. En el caso de comprimidos para uso oral, los soportes comúnmente usados incluyen lactosa y almidón de maíz. También se añaden típicamente agentes lubricantes tales como estearato magnésico. Para administración oral en forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando se requieran suspensiones acuosas para uso oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsionantes y suspendedores. Si se desea, también se pueden añadir ciertos agentes edulcorantes, aromatizantes o colorantes.
Por otra parte, las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden administrar en forma de supositorios para administración rectal. Éstos se pueden preparar mezclando el agente con un excipiente no irritante apropiado que sea sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y por lo tanto se fundirá en el recto para liberar el medicamento. Tales materiales incluyen manteca de cacao, cera de abejas y polietilenglicoles.
Las composiciones farmacéuticas de esta invención también se pueden administrar tópicamente. La aplicación tópica se puede efectuar en una formulación de supositorio rectal (véase lo anterior) o en una formulación de enema apropiada. También se pueden usar parches tópicamente transdérmicos.
Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticas se pueden formular en una pomada apropiada que contenga el componente activo suspendido o disuelto en uno o más soportes. Los soportes para administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Por otra parte, las composiciones farmacéuticas se pueden formular en una loción o crema apropiadas que contenga los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más soportes farmacéuticamente aceptables. Los soportes aceptables incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, cera de ésteres de cetilo, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.
Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticas se pueden formular como suspensiones micronizadas en solución salina estéril, de pH ajustado e isotónica, o, preferentemente, como soluciones en solución salina estéril, de pH ajustado e isotónica, tanto con como sin un conservante tal como cloruro de benzalconio. Por otra parte, para usos oftálmicos, las composiciones farmacéuticas se pueden formular en una pomada tal como vaselina.
Las composiciones farmacéuticas de esta invención también se pueden administrar por aerosol o inhalación nasal. Tales composiciones se preparan según técnicas muy conocidas en la técnica de la formulación farmacéutica y se pueden preparar como soluciones en solución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservantes apropiados, promotores de la absorción para aumentar la biodisponibilidad, fluocarburos y/u otros o agentes solubilizadores o dispersantes convencionales.
La cantidad de antagonista del receptor de la adenosina A_{1} que se puede combinar con los materiales de soporte para producir una forma de dosificación única variará dependiendo del anfitrión tratado y del modo de administración particular. Las composiciones se pueden formular de forma que se administre a un paciente que recibe estas composiciones una dosificación de entre 0,01-100 mg/kg de peso corporal del antagonista del receptor de la adenosina A_{1}. En algunas realizaciones de la invención, la dosificación es 0,1-10 mg/kg de peso corporal. La composición se puede administrar en una única dosis, múltiples dosis o durante un periodo de tiempo establecido en una infusión.
Una dosificación y régimen de tratamiento específicos para cualquier paciente particular dependerá de varios factores, incluyendo el antagonista del receptor de la adenosina A_{1} particular, la edad del paciente, el peso corporal, la salud general, el sexo, y la dieta y el tiempo de administración, velocidad de excreción, combinación de medicamentos y la gravedad de la enfermedad particular que se vaya a tratar. La apreciación de tales factores por quienes dan cuidados médicos está dentro de la experiencia ordinaria en la técnica. La cantidad de antagonista también dependerá del paciente individual que se vaya a tratar, la vía de administración, el tipo de formulación, las características del compuesto usado, la gravedad de la enfermedad y el efecto deseado. Las cantidades de antagonistas se pueden determinar por principios farmacológicos y farmacocinéticos muy conocidos en la técnica.
Con el fin de que la invención descrita en esta memoria descriptiva se pueda comprender más completamente, se exponen los siguientes ejemplos. Debería entenderse que estos ejemplos son sólo con fines ilustrativos y no deben interpretarse como que limitan esta invención en manera alguna.
Ejemplos Ejemplo 1
Los compuestos 1, 2, 4, 8, 9, 11, 12-21, 24, 27, 28, 31 y 32 se prepararon según el siguiente método usando el aminoalcohol apropiado en la etapa 5. Los aminoalcoholes usados para preparar los compuestos fueron: (R)-2-amino-3-metil-1-butanol (compuesto 1); (R)-2-amino-1-butanol (compuesto 2); (R)-2-amino-1-propanol (compuesto 4); (R)-isoleucinol (compuesto 8); (R)-2-amino-1-butanol (compuesto 9); (R)-2-amino-1-pentanol (compuesto 11); (S)-1-amino-2-propanol (compuesto 12); (R)-2-amino-2-fenetanol (compuesto 13); (R)-1-amino-2-propanol (compuesto 14); (S)-isoleucinol (compuesto 15); (R)-2-amino-2,3-dimetil-butan-1-ol (compuesto 16); (R)-2-amino-4-metil-pentan-1-ol (compuesto 17); (R)-2-amino-3-fenil-propan-1-ol (compuesto 18); (R)-2-amino-hexan-1-ol (compuesto 19); 3-aminopropanol (compuesto 20); 2-aminoetanol (compuesto 21); (S)-2-amino-1-butanol (compuesto 24); 4-aminobutanol (compuesto 27); (R)-4-(2-amino-3-hidroxipropil)-fenol (compuesto 28); (R)-3-amino-butan-1-ol (compuesto 31); y (R)-3-amino-pentan-1-ol (compuesto 32).
La tabla 1 representa las estructuras de los compuestos que fueron sintetizados, el método usado para sintetizar los compuestos y los datos de espectrometría de masas para los compuestos.
Etapa 1
Sal de hidrocloruro de 5,6-diamino-1-propil-1H-pirimidina-2,4-diona
El material de partida, 6-amino-1-propil-1H-pirimidina-2,4-diona, se preparó según un conocido procedimiento de la bibliografía (J. Med. Chem. 1989, p. 1231). Este material (8,5 g, 50 mmol) se disolvió en 250 ml de ácido acético acuoso y después se enfrió en un baño de hielo. Se añadió nitrito sódico (4,14 g, 1,2 eq.) como una solución en 10 ml de agua en un periodo de alrededor de 15 min. Después de alrededor de 10 min, empezó a separarse por precipitación de la mezcla de reacción un sólido rojo claro. Los sólidos se recogieron por filtración y se secaron bajo vacío por la noche para dar 8,0 g del compuesto intermedio nitroso.
El compuesto intermedio nitroso (6,0 g, 30 mmol) se suspendió en 100 ml de agua y se calentó hasta 80-85ºC. Se añadió ditionito sódico (15,8 g, 3,0 eq) bastante rápidamente en un periodo de alrededor de 5 min. Después de alrededor de 5 min, se retiró la fuente de calentamiento y se enfrió la mezcla de reacción verde claro hasta temperatura ambiente y después en un baño de hielo. Los sólidos se recogieron por filtración y se secaron bajo vacío para dar el diaminouracilo. Éste se convirtió después en la sal de hidrocloruro disolviendo en 10 ml de H_{2}O que contenían 1,5 eq de HCl y después se liofilizó.
Etapa 2
8-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-3-propil-3,7-dihidro-purina-2,6-diona
La sal de hidrocloruro de 5,6-diamino-1-propil-1H-pirimidina-2,4-diona (3,4 g) se disolvió en 80 ml de DMF junto con ácido 4-hidroxi-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (2,5 g, 15 mmol). Se añadió HATU (5,9 g, 1,05 eq) seguido por Et_{3}N (8,30 ml, 4,05 eq). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente por la noche. La mezcla de reacción se filtró para separar algo del precipitado. El filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en 60 ml de H_{2}O que contenían 10 eq de NaOH (5,9 g). La mezcla de reacción se agitó bajo reflujo durante 1 h, se enfrió hasta temperatura ambiente y se acidificó hasta pH 2 con HCl concentrado. El precipitado resultante se recogió por filtración y se secó para dar 1,85 g del derivado de xantina.
Etapa 3
8-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-3-propil-6-tioxo-1,3,6,7-tetrahidro-purin-2-ona
Se disolvió 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-3-propil-3,7-dihidro-purina-2,6-diona (500 mg, 1,57 mmol) en 10 ml de piridina. Se añadió P_{4}S_{10} (1,05 g, 1,5 eq) y la mezcla de reacción se agitó bajo reflujo durante 6 h. Después se enfrió la mezcla de reacción hasta temperatura ambiente y se apagó lentamente con 5 ml de H_{2}O. La mezcla se acidificó después a 0ºC hasta pH 5 con HCl 6N. La capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró bajo presión reducida. La purificación por HPLC preparativa dio 100 mg del compuesto del título.
Etapa 4
8-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-6-metil-sulfanil-3-propil-3,7-dihidro-purin-2-ona
Se suspendió 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-3-propil-6-tioxo-1,3,6,7-tetrahidro-purin-2-ona (120 mg, 0,36 mmol) en 3 ml de H_{2}O y 1,5 ml de EtOH. Se añadió NaOH como una solución en 0,4 ml de H_{2}O seguido por MeI. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Después se neutralizó con HCl 0,1N y se extrajo con CHCl_{3}. Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron bajo presión reducid para dar una cantidad esencialmente cuantitativa del compuesto del título.
Etapa 5
8-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-6-(1-hidroximetil-propilamino)-3-propil-3,7-dihidro-purin-2-ona
Se disolvió 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-6-metilsulfanil-3-propil-3,7-dihidro-purin-2-ona (125 mg, 0,36
mmol) en 3 ml de DMSO junto con un exceso de un aminoalcohol apropiado (p. ej., (R)-(-)-2-amino-1-butanol (0,24 ml, 7 eq) para el compuesto 2). La mezcla de reacción resultante se agitó a 150ºC durante 3 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se purificó por HPLC preparativa para dar 110 mg del compuesto del título.
Etapa 6
7-Etil-2-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a-8-pentaaza-as-indacen-5-ona (Compuesto 2)
Se disolvió 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-6-(1-hidroximetil-propilamino)-3-propil-3,7-dihidro-purin-2-ona (110 mg) en 3 ml de SOCl_{2} y se agitó bajo reflujo durante 20 min. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró. El residuo se apagó con NaHCO_{3} acuoso saturado y se extrajo con CHCl_{3}. Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por HPLC preparativa dio 50 mg del compuesto del título como la sal de TFA.
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Ejemplo 2
Se prepararon los compuestos 3, 5 y 7 según el siguiente método usando el aminoalcohol apropiado en la etapa 8. Los aminoalcoholes usados para preparar los compuestos fueron: (R)-2-amino-1-butanol (compuesto 3); (R)-2-amino-3-metil-1-butanol (compuesto 5); y (R)-2-amino-1-propanol (compuesto 7).
La tabla 1 representa las estructuras de los compuestos que fueron sintetizados, el método usado para sintetizar los compuestos y los datos de espectrometría de masas para los compuestos.
Etapa 1
Ácido 4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico
La sal de hidrocloruro de 5,6-diamino-1-propil-1H-pirimidina-2,4-diona (570 mg) se disolvió en 20 ml de DMF junto con éster monometílico del ácido biciclo[2.2.2]-octano-1,4-dicarboxílico (520 mg, 2,45 mmol). Se añadió HATU (980 mg, 1,05 eq) seguido por Et_{3}N (1,40 ml, 4,05 eq). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente por la noche. A la mañana siguiente, la mezcla de reacción se filtró para separar algo del precipitado. El filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en 10 ml de H_{2}O que contenían 10 eq de NaOH (980 mg). La mezcla de reacción se agitó bajo reflujo durante 2 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se acidificó hasta pH 2 con HCl concentrado. El precipitado resultante se recogió por filtración y se secó para dar 680 mg del derivado ácido.
Etapa 2
8-(4-Hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-3-propil-3,7-dihidro-purina-2,6-diona
Se disolvió ácido 4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (3,2 g, 9,25 mmol) en 100 ml de THF anhidro y se enfrió hasta 0ºC. Se añadió borano-THF (1,0 M en THF, 18,5 ml, 2 eq) y la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 10 min, después se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 48 h. La mezcla de reacción resultante se apagó después cuidadosamente con 10 ml de MeOH y después se concentro bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en 20 ml de MeOH y se concentró bajo presión reducida. Este tratamiento se repitió cuatro veces más para dar el alcohol deseado.
Etapa 3
4-(2,6-Dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carbaldehído
Se disolvió 8-(4-hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-3-propil-3,7-dihidro-purina-2,6-diona (2,70 g, 8,13 mmol) en 40 ml de DMSO. Se añadió piridina-SO_{3} (3,88 g, 3 eq), seguido por Et_{3}N (7,4 ml, 7 eq) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Después se diluyó con EtOAc y se lavó con ácido cítrico acuoso al 5%, H_{2}O, salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró bajo presión reducida para dar 900 mg del aldehído deseado.
\newpage
Etapa 4
Éster metílico del ácido 3-[4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-acrílico
Se disolvió 4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carbaldehído (900 mg, 2,73 mmol) en 25 ml de THF y se añadió (trifenilfosforanilideno)acetato de metilo (1,83 g, 2 eq). La mezcla de reacción resultante se agitó bajo reflujo durante 18 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se purificó por HPLC preparativa usando una mezcla de acetonitrilo acuoso para dar 300 mg del producto deseado.
Etapa 5
Éster metílico del ácido 3-[4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico
Se disolvió éster metílico del ácido 3-[4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-acrílico (300 mg) en 20 ml de THF. Se añadió Pd al 10% sobre C (25 mg) y la mezcla de reacción resultante se hidrogenó bajo 344,8 kPa de H_{2} a temperatura ambiente durante 6 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 280 mg del producto deseado.
Etapa 6
Éster metílico del ácido 3-[4-(2-oxo-3-propil-6-tioxo-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-oct-1-il]-propiónico
Se disolvió éster metílico del ácido 3-[4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (250 mg, 0,64 mmol) en 8 ml de piridina. Se añadió P_{4}S_{10} (430 mg, 1,5 eq) y la mezcla de reacción se agitó bajo reflujo durante 3 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se apagó con 3 ml de H_{2}O y después con suficiente HCl 6N para llevar el pH hasta 3. La mezcla de reacción resultante se extrajo con CHCl_{3}. La capa orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por HPLC preparativa para dar 100 mg del producto deseado.
Etapa 7
Éster metílico del ácido 3-[4-(6-metilsulfanil-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico
Se disolvió éster metílico del ácido 3-[4-(2-oxo-3-propil-6-tioxo-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (100 mg) en 2 ml de EtOH y 1 ml de H_{2}O. Se añadió NaOH (20 mg) como solución en 1 ml de H_{2}O seguida por MeI (23 \mul, 1,5 eq). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró bajo presión reducida para dar 105 mg del compuesto del título.
Etapa 8
Éster metílico del ácido 3-{4-[6-(1-hidroximetil-propilamino)-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]oct-1-il}-propiónico
Se disolvió éster metílico del ácido 3-[4-(6-metilsulfanil-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (105 mg) en 2 ml de DMSO junto con un aminoalcohol apropiado (p. ej., 160 \mul de (R)-2-amino-1-butanol para el compuesto 3). La mezcla de reacción se agitó a 150ºC durante 3 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se purificó por HPLC preparativa para dar 50 mg del compuesto del título.
Etapa 9
Ácido 3-[4-(7-etil-5-oxo-4-propil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3,4,5a-8-pentaaza-as-indacen-2-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (Compuesto 3)
Se disolvió éster metílico del ácido 3-{4-[6-(1-hidroximetil-propilamino)-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]oct-1-il}-propiónico (30 mg) en 1 ml de SOCl_{2} y se agitó bajo reflujo durante 15 min. La mezcla de reacción se enfrió después hasta temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en una solución que contenía 1 ml de agua, 0,5 ml de MeOH y 0,1 ml de NaOH acuosa al 10%. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después se acidificó hasta pH 2 con HCl 1N diluido y se concentró. El producto crudo resultante se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto del título.
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Ejemplo 3
Se prepararon los compuestos 6, 10, 22, 23, 25, 26, 29 y 30 según el siguiente método usando el aminoalcohol apropiado en la etapa 3. Los aminoalcoholes usados para preparar los compuestos fueron: 2-aminoetanol (compuesto 6); (R)-2-amino-1-butanol (compuesto 10); (R)-2-amino-1-propanol (compuesto 22); (R)-2-amino-1-pentanol (compuesto 23); (R)-isoleucinol (compuesto 25); (S)-2-amino-1-butanol (compuesto 26); 3-aminopropanol (compuesto 29); y 4-aminobutanol (compuesto 30).
La tabla 1 representa las estructuras de los compuestos que fueron sintetizados, el método usado para sintetizar los compuestos y los datos de espectrometría de masas para los compuestos.
Etapa 1
Éster metílico del ácido 4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico
Se preparó ácido 4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico según el procedimiento esbozado anteriormente. Este material (1,4 g) se suspendió en 50 ml de MeOH y se añadieron 5 gotas de ácido sulfúrico concentrado. La mezcla de reacción se agitó bajo reflujo durante 18 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y se lavó con NaHCO_{3} acuoso, salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró para dar 1,2 g del compuesto del título.
Etapa 2
Éster metílico del ácido 4-(6-metilsulfanil-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico
Se disolvió éster metílico del ácido 4-(2,6-dioxo-3-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (1,2 g, 3,33 mmol) en 20 ml de piridina. Se añadió P_{4}S_{10} (2,22 g, 1,5 eq) y la mezcla de reacción se agitó bajo reflujo durante 3 h. Después se enfrió hasta 0ºC y se apagó cuidadosamente con agua. Después se añadió suficiente HCl 6N para llevar el pH hasta 5 y la mezcla de reacción se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró para dar 860 mg del derivado tioéster. Este material (860 mg, 2,29 mmol) se disolvió en 5 ml de EtOH y 5 ml de H_{2}O. Se añadió NaOH (183 mg, 2 eq) como una solución en 2 ml de H_{2}O, seguido por MeI (213 \mul, 1,5 eq). La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después se extrajo con EtOAc.
La capa orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se concentró bajo presión reducida para dar 800 mg del compuesto del título.
Etapa 3
Éster metílico del ácido 4-[6-(2-hidroxi-etilamino)-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico
Se disolvió éster metílico del ácido 4-(6-metilsulfanil-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (50 mg) en 1 ml de 2 ml de DMSO junto con un aminoalcohol apropiado (p. ej., 7 eq de 2-aminoetanol para el compuesto 6). La mezcla de reacción se agitó a 150ºC durante 3 h. Después se enfrió hasta temperatura ambiente y se purificó por HPLC preparativa para dar 30 mg del compuesto del título.
Etapa 4
Ácido 4-(5-oxo-4-propil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3,4,5a-8-pentaaza-as-indacen-2-il)biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico
Se disolvió éster metílico del ácido 4-[6-(2-hidroxi-etilamino)-2-oxo-3-propil-3,7-dihidro-2H-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (30 mg) en 1 ml de SOCl_{2} y se agitó bajo reflujo durante 15 min. La mezcla de reacción se enfrió después hasta temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en una solución que contenía 1 ml de agua, 0,5 ml de MeOH y 0,1 ml de NaOH acuosa al 10%. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Después se acidificó hasta pH 2 con HCl 1N diluido y se concentró. El producto crudo resultante se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto del título.
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Ejemplo 4 Metodología de ensayo
Se prepararon numerosos derivados de xantina que tenían las estructuras indicadas en la tabla 1. Para algunos de estos compuestos, los valores de K_{i} para receptores A_{1} de adenosina en rata y seres humanos se determinaron según el siguiente protocolo de ensayo de unión.
Materiales
Se compraron adenosina desaminasa y HEPES de Sigma (St. Louis, MO). Se compraron medio de cultivo de células F-12 de Ham y suero de feto bovino de GIBCO Life Technologies (Gaithersburg, MD). Se compraron placas de cultivo Antibiotic G-418, Falcon 150 mM y placas de cultivo de 12 pocillos Costar de Fisher (Pittsburgh, PA). Se compró [^{3}H]CPX de DuPont-New England Nuclear Research Products (Boston, MA). Se compró mezcla de antibióticos penicilina/ estreptomicina de Mediatech (Washington, DC). La composición de la solución de Hank tamponada con HEPES fue: NaCl 130 mM, Cl 5,0 mM, CaCl_{2} 1,5 mM, MgSO_{4} 0,41 mM, Na_{2}HPO_{4} 0,49 mM, KH_{2}PO_{4} 0,44 mM, dextrosa 5,6 mM y HEPES 5 mM (pH 7,4).
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Preparación de la membrana
Receptor A_{1} de rata: Se prepararon membranas a partir de corteza cerebral de rata aislada de ratas recién aplicadas la eutanasia. Los tejidos se homogeneizaron en tampón A (EDTA 10 mM, Na-HEPES 10 mM, pH 7,4) suplementado con inhibidores de proteasa (10 \mug/ml de benzamidina, PMSF 100 \muM y 2 \mug/ml de cada una de aprotinina, pepstatina y leupeptina) y se centrifugaron a 20.000 x g durante 20 min. Los pelets se resuspendieron y se lavaron dos veces con tampón HE (Na-HEPES 10 mM, EDTA 1 mM, pH 7,4, más inhibidores de proteasa). Los pelets finales se resuspendieron en tampón HE, suplementado con 10% (p/v) de inhibidores de sacarosa y proteasa, y se congelaron en partes alícuotas a -80ºC. Las concentraciones de proteína se midieron usando un kit de ensayo de proteína BCA (Pierce).
Receptor A_{1} de ser humano: Se obtuvo cDNA de receptor de adenosina A_{1} de ser humano por RT-PCR y se subclonó en pcDNA3.1 (Invitrogen). Se llevó a cabo la transfección estable de células CHO-K1 usando LIPOFECTAMINE-PLUS (GIBCO-BRL) y se seleccionaron colonias en G418 a 1 mg/ml, y se rastrearon usando ensayos de unión de radioligando. Para las preparaciones de membrana, las células CHO-K1 que crecen como monocapas en medio completo (F12+FCS al 10%+ G418 a 1 mg/ml) se lavaron en PBS y se recolectaron en tampón A suplementado con inhibidores de proteasa. Las células se homogeneizaron, centrifugaron y lavaron dos veces con tampón HE como se describe anteriormente. Los pelets finales se almacenaron en partes alícuotas a -80ºC.
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Ensayos de unión de radioligando
Membranas (50 \mug de proteína de membrana para A1ARs de rata y 25 \mug de proteína de membrana de CHO-K1 para A1ARs de ser humano), radioligandos y concentraciones variables de ligandos competidores se incubaron por triplicado en 0,1 ml de tampón de HE más 2 unidades/ml de adenosina desaminasa durante 2,5 h a 21ºC. Se usó el radioligando [^{3}H]DPCPX (112 Ci/mmol de NEN, concentración final: 1 nM) para ensayos de unión de competición sobre A_{1}ARs. La unión no específica se midió en presencia de BG9719 10 \muM. Los ensayos de unión se terminaron por filtración sobre filtros de fibra de vidrio Whatman GF/C usando un recolector de células BRANDEL. Los filtros se enjuagaron tres veces con 3-4 ml de Tris-HCl 10 mM helado, pH 7,4, y MgCl_{2} 5 mM a 4ºC. El papel de filtro se transfirió a un vial y se añadieron 3 ml de cóctel de centelleo ScintiVerseII (Fisher). La radiactividad se contó en un contador \beta Wallac.
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Análisis de los datos de unión
Para determinaciones de K_{I}: Los datos de unión de competición se ajustaron a un modelo de unión de sitio único y se representaron usando Prizm GraphPad. Se usó la ecuación de Cheng-Prusoff K_{I} = IC_{50}/(1+[I]/K_{D}) para calcular los valores de K_{I} a partir de los valores de IC_{50}, donde K_{I} es la constante de afinidad para el ligando competidor, [I] es la concentración del radioligando libre y K_{D} es la constante de afinidad para el radioligando.
Para el % de unión: Para ensayos de unión en un punto, se presentaron los datos como % de unión específica total a 1 \muM de compuesto competidor: % de total = 100 * (unión específica con 1 \muM de compuesto competidor/unión específica total). El % de unión representa la cantidad de radioligando unido que permanece en presencia de 1 \muM de antagonista competidor.
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Resultados
Todos los compuestos ensayados exhibieron valores de K_{i} de A_{1 }de rata entre alrededor de 4 y alrededor de 80 nM. En la tabla 2 están representados el valor de K_{i} del receptor de adenosina A_{1} de rata y el % de unión para los compuestos.
Ejemplo 5 Metodología de ensayo alternativa Materiales
Véase el ejemplo 4.
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Cultivo de células
Se prepararon células de CHO que expresan el A_{1}AdoR recombinante humano (células CHO:A_{1}AdoR) como está descrito (Kollias-Barker et al., J. Pharma. Exp. Ther., 281(2), 761, 1997) y se cultivaron como para células de CHO:Wild. Las células de CHO se cultivaron como monocapas en placas de plástico en medio F-12 de Ham suplementado con 10% de suero de feto bovino, 100 U de penicilina G y 100 \mug de estreptomicina en una atmósfera humidificada de 5% de CO_{2}/95% de aire a 37ºC. La densidad de los sitios de unión [^{3}H]CPX en las células de CHO fue de 26\pm2 (n=4) fmol/mg de proteína. Las células se subcultivaron dos veces a la semana después de la separación usando EDTA 1 mM en solución de Hank tamponada con HEPES libre de Ca^{2+}-Mg^{2+}. Para los experimentos se usaron tres clones diferentes de células CHO:A_{1}AdoR, y todos los resultados se confirmaron con células de dos o tres clones. La densidad de A_{1}AdoRs en estas células fue de 4000-8000 fmol/mg de proteína, determinada por ensayo de unión específica de [^{3}H]CPX.
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Unión de radioligando
Las células de CHO cultivadas en placas de cultivo de 150 mm se enjuagaron con solución de Hank tamponada con HEPES, después se extrajeron con un rascador de células y se homogeneizaron en Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, helado. Las membranas de las células se peletizaron por centrifugación del homogeneizado de células a 48.000 x g durante 15 minutos. El pelet de membrana se lavó dos veces por resuspensión en tampón reciente y centrifugación. El pelet final se resuspendió en un pequeño volumen de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4 y se almacenó en partes alícuotas de 1 ml a -80ºC hasta que se usó para los ensayos.
Para determinar la densidad de A_{1}AdoRs en la membrana de células de CHO, se incubaron partes alícuotas de 100 \mul de membranas (5 \mug de proteína) durante 2 horas a 25ºC con [^{3}H]CPX 0,15-20 nM y adenosina desaminasa (2 U/ml) en 100 \mul de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4. Las incubaciones se terminaron por dilución con 4 ml de tampón de Tris-HCl 50 mM helado y recolección inmediata de membranas sobre filtros de fibra de vidrio (Schleicher and Schuell, Keene, NH) por filtración a vacío (Brandel, Gaithersburg, MD). Los filtros se lavaron rápidamente tres veces con tampón helado para eliminar el radioligando no unido. Los discos de filtro que contenían radioligando unido a membranas atrapado se colocaron en 4 ml de Scintiverse BD (Fisher) y se cuantificó la radiactividad usando un contador de centelleo líquido. Para determinar la unión no específica de [^{3}H]CPX, se incubaron membranas como se describe anteriormente y se añadió CPT 10 \muM al tampón de incubación. La unión no específica se definió como [^{3}H]CPX unido en presencia de CPT 10 \muM. La unión específica del radioligando al A_{1}AdoR se determinó restando la unión no específica de la unión total. Se encontró que la unión no específica aumentaba linealmente con un aumento de la concentración de [^{3}H]CPX. Se hicieron ensayos triplicados a cada concentración de [^{3}H]CPX ensayada.
Para determinar las afinidades de antagonistas de A_{1}AdoRs para el A_{1}AdoR recombinante humano expresado en células de CHO, se midió la unión de [^{3}H]CPX 2 nM en presencia de concentraciones crecientes de antagonista. Se incubaron partes alícuotas de membranas de células de CHO (100 \mul:5 \mug de proteína), [^{3}H]CPX, antagonista (0,1 nM -
100 \muM) y adenosina desaminasa (2 U/ml) durante 3 horas a 25ºC en 200 \mul de tampón de Tris-HCl 50 mM (pH 7,4). Los ensayos se terminaron como se describe anteriormente.
TABLA 1
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TABLA 2
17

Claims (13)

1. Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:
18
19
20 
\newpage
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
\cr}
21 
\newpage
2. El compuesto según la reivindicación 1, en la que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:
\vskip1.000000\baselineskip
2-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-7-isopropil-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-5-ona
(compuesto 1);
7-Etil-2-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-5-ona (compuesto 2);
Ácido 3-[4-(7-etil-5-oxo-4-propil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-2-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (compuesto 3);
2-(4-Hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-1-il)-7-metil-4-propil-1,4,6,7-tetrahidro-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-5-ona
(compuesto 4); y
Ácido 3-[4-(7-isopropil-5-oxo-4-propil-4,5,6,7-tetrahidro-1H-1,3,4,5a,8-pentaaza-as-indacen-2-il)-biciclo-[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (compuesto 5).
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3. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad farmacéuticamente eficaz de un compuesto según la reivindicación 1 y un soporte, coadyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable.
4. La composición farmacéutica según la reivindicación 3, que comprende además un agente que no modifica la adenosina.
5. La composición farmacéutica según la reivindicación 3, en la que la composición se formula para administración oral, intravenosa, intramuscular o subcutánea.
6. Un compuesto según la reivindicación 1 para uso para bloquear los receptores de adenosina A_{1} en un paciente.
7. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir en un paciente una enfermedad o trastorno en los que la activación de los receptores de adenosina A_{1} juega un papel causante en la enfermedad o el trastorno.
8. El uso según la reivindicación 7, en el que la enfermedad o trastorno se selecciona del grupo que consiste en hipertensión sistémica, fallo renal, diabetes, asma, un estado edematoso, insuficiencia cardiaca congestiva y disfunción renal.
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9. Un procedimiento para preparar un compuesto según la reivindicación 1, que comprende las etapas de:
a) alquilar una tiocetona para producir una tiocetona alquilada;
b) hacer reaccionar la tiocetona alquilada con un aminoalcohol sustituido para producir un compuesto intermedio alcohol; y
c) ciclar el compuesto intermedio alcohol para producir un producto ciclado.
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10. El procedimiento según la reivindicación 9, que comprende además la etapa de:
a) convertir el producto ciclado en un derivado de ácido carboxílico.
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11. El procedimiento según la reivindicación 10, que comprende además las etapas de:
a) copular un diaminouracilo con éster monometílico del ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico para producir un ácido;
b) reducir el ácido al correspondiente alcohol;
c) oxidar el alcohol a un aldehído;
d) copular el aldehído con (trifenilfosforoanilideno)acetato de metilo para producir un producto copulado;
e) convertir el producto copulado en la tiocetona.
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12. El procedimiento según la reivindicación 10, que comprende además las etapas de:
a) copular un diaminouracilo con éster monometílico del ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico para producir un ácido;
b) esterificar el ácido a un éster correspondiente;
c) convertir el éster para producir la tiocetona.
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13. El procedimiento según la reivindicación 9, que comprende además las etapas de:
a) nitrosar 6-amino-1-propil-1H-pirimidina-2,4-diona para producir un compuesto intermedio nitroso;
b) reducir el compuesto intermedio nitroso para producir el correspondiente diaminouracilo;
c) convertir el diaminouracilo en una sal de amina;
d) copular la sal de amina a ácido 4-hidroxi-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico para producir un producto copulado; y
e) convertir el producto copulado en la tiocetona.
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Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2238335T3 (es) * 1999-12-24 2005-09-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Derivados de purina condensados.
UA75625C2 (en) * 2000-12-01 2006-05-15 Biogen Inc Condensed purine derivatives as a1 adenosine receptor antagonists
JP2006518390A (ja) * 2003-02-19 2006-08-10 エンダシア，インコーポレイテッド Ａ１アデノシンレセプターアンタゴニスト
US20040229901A1 (en) * 2003-02-24 2004-11-18 Lauren Otsuki Method of treatment of disease using an adenosine A1 receptor antagonist
EP1637532A1 (en) * 2003-04-25 2006-03-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Fused pyrimidine derivative
BRPI0409699A (pt) 2003-04-25 2006-04-18 Novacardia Inc métodos de indução do efeito diurético, de indução, manutenção ou restauração do efeito diurético de diurético não modificador de adenosina, de manutenção, restauração ou melhoria da função renal em paciente, de indução de diurese, de prevenção do inìcio de deficiência renal em paciente com sobrecarga de fluidos ou chf, de tratamento de paciente que sofre de chf e de melhoria dos resultados globais da saúde, composição farmacêutica e seus usos
CA2528385C (en) * 2003-06-06 2011-03-15 Endacea, Inc. A1 adenosine receptor antogonists
US20080161327A1 (en) * 2005-03-11 2008-07-03 Aderis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 9-Alkyladenines and the Use Thereof
WO2007095161A2 (en) * 2006-02-14 2007-08-23 New York University Methods and compositions for treating disorders associated with increased bone turnover and osteopenia
AU2007235372A1 (en) * 2006-04-06 2007-10-18 Novacardia, Inc. Co-administration of adenosine A1 receptor antagonists and anticonvulsants
HRP20110917T1 (hr) 2006-05-19 2012-03-31 Abbott Laboratories Derivati azabicikličkih alkana supstituirani fuzioniranim bicikloheterociklima aktivni u središnjem živčanom sustavu
CN101466383A (zh) * 2006-06-16 2009-06-24 美国诺华卡迪亚公司 包含低频率投与aa1ra的肾功能延长改善
CA2656002A1 (en) 2006-06-23 2007-12-27 Incyte Corporation Purinone derivatives as hm74a agonists
CA2656039A1 (en) 2006-06-23 2007-12-27 Incyte Corporation Purinone derivatives as hm74a agonists
US20090197900A1 (en) * 2007-03-29 2009-08-06 Howard Dittrich Methods of treating heart failure and renal dysfunction in individuals with an adenosine a1 receptor antagonist
WO2008121882A1 (en) * 2007-03-29 2008-10-09 Novacardia, Inc. Improved methods of administration of adenosine a1 receptor antagonists
WO2011063268A2 (en) * 2009-11-19 2011-05-26 Biogen Idec Ma Inc Novel synthetic methods
US20130109645A1 (en) 2010-03-31 2013-05-02 The united States of America,as represented by Secretary,Dept.,of Health and Human Services Adenosine receptor agonists for the treatment and prevention of vascular or joint capsule calcification disorders
EP3735413B1 (en) 2018-01-04 2022-07-06 Impetis Biosciences Ltd. Tricyclic compounds, compositions and medicinal applications thereof

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06102662B2 (ja) 1989-09-01 1994-12-14 協和醗酵工業株式会社 キサンチン誘導体
ATE195739T1 (de) * 1989-10-20 2000-09-15 Kyowa Hakko Kogyo Kk Kondensierte purinderivate
KR100252493B1 (ko) 1991-09-23 2000-05-01 플로리다 금속알콕시드 및 베타-락탐을 사용한 치환된 이소세린 에스테르의 제조방법
AU4471297A (en) * 1996-10-07 1998-05-05 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Fused purine derivatives
WO1998057651A1 (en) * 1997-06-18 1998-12-23 Discovery Therapeutics, Inc. Compositions and methods for preventing restenosis following revascularization procedures
US6489331B1 (en) 1998-07-02 2002-12-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Remedies for diabetes
ES2238335T3 (es) * 1999-12-24 2005-09-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Derivados de purina condensados.
UA75625C2 (en) * 2000-12-01 2006-05-15 Biogen Inc Condensed purine derivatives as a1 adenosine receptor antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
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CA2430508A1 (en) 2002-06-06

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