ES2364733B1

ES2364733B1 - Metodo para la preparacion de al menos un compuesto a partir de sangre, y dispositivo de extraccion para ser utilizado en la ejecucion de dicho metodo

Info

Publication number: ES2364733B1
Application number: ES201000306A
Authority: ES
Inventors: Eduardo Anitua Aldecoa
Original assignee: BTI Biotechnology Insttitute
Current assignee: BTI Biotechnology Insttitute
Priority date: 2010-03-10
Filing date: 2010-03-10
Publication date: 2012-08-03
Anticipated expiration: 2030-03-10
Also published as: ES2364733A1

Abstract

Método para la preparación de al menos un compuesto de propiedades biológicas a partir de sangre, donde dicho método se ejecuta en tubos cerrados con presión inferior a la presión atmosférica, reduciéndose o impidiéndose la contaminación bacteriana del compuesto por manipulación. El método comprende entre otros la repetición el número de veces que se desee de los pasos siguientes: conectar un segundo contenedor al vacío a un dispositivo de extracción conectado a su vez a un primer contenedor que contiene sangre separada en fracciones, esperar un tiempo a que se transfiera(n) la(s) fracción(es) deseada(s) y retirar dicho segundo contenedor, pudiendo obtenerse diversos segundos contenedores con diferentes compuestos destinados a diferentes aplicaciones médicas incluyendo terapias biológicas. Los pasos pueden ser ejecutados en un sistema cerrado, sin destapar los contenedores, o bien puede abrirse el primer contenedor antes de la introducción del dispositivo de extracción.

Description

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, y dispositivo de extracción para ser utilizado en la ejecución de dicho método.

Sector de la técnica

La invención se reﬁere a un método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, por ejemplo un compuesto rico en señales celulares. La invención también se reﬁere a un dispositivo para ser utilizado en la ejecución del método.

Estado de la técnica

La patente US6569204 describe un método para preparar una composición rica en factores de crecimiento a partir de sangre, que ha demostrado con el paso del tiempo presentar unas propiedades biológicas muy interesantes y beneﬁciosas para diversas aplicaciones médicas. Este método, ejecutable en condiciones ambulatorias (sin necesidad de cirugía o complejas instalaciones), básicamente comprende los siguientes pasos: centrifugar un tubo que contiene sangre y anticoagulante durante un tiempo y a una velocidad y temperatura especíﬁcas, obteniéndose la separación de la sangre en diferentes fracciones; extraer la fracción intermedia, localizada encima de los glóbulos rojos (fracción inferior), donde dicha fracción intermedia es un plasma rico en plaquetas; transferir dicho plasma a un segundo tubo al que puede añadirse cloruro de calcio, que ejerce la función de agente coagulante y agente activador del plasma (agente capaz de iniciar el proceso de liberación de factores de crecimiento por parte de las plaquetas); esperar un determinado tiempo para permitir que el plasma se active y coagule hasta conseguir la consistencia determinada en función de la aplicación. Este plasma viene siendo utilizado con resultados muy favorables en diversos campos médicos como son la regeneración ósea (generalmente en implantología y en traumatología), el tratamiento de dolencias articulares, tratamientos de la piel, etc. Algunos de ellos pueden verse descritos en la propia US6569204 o en la solicitud de patente US2009035382.

El método de la patente US6569204 y muchos otros métodos conocidos para la preparación compuestos sanguíneos con propiedades biológicas deseables son métodos que conllevan un cierto riesgo de infección para el paciente receptor del compuesto ﬁnal, ya que no están libres de sufrir una contaminación bacteriana en alguna de sus fases. Dicha contaminación bacteriana puede producirse por diversos motivos: por una septicemia que arroje gérmenes al torrente vascular, por una desinfección insuﬁciente de la piel en el momento de la punción venosa o por la manipulación de la sangre y posteriores compuestos durante la ejecución del método. En lo que se reﬁere a la manipulación, un factor de riesgo de contaminación bacteriana es el hecho de que el método de US6569204 y otros métodos se ejecutan en tubos abiertos, sin estanqueidad o vacío, de manera que el plasma centrifugado y los compuestos que se van obteniendo entran en contacto con el aire circundante (esto es lo que se conoce como circuito abierto).

La presente invención tiene como objetivo presentar un procedimiento mejorado de preparación de un compuesto de propiedades biológicas interesantes obtenido a partir de sangre, donde entre otros avances con respecto a los procedimientos conocidos se consiga reducir el riesgo de contaminación bacteriana del compuesto ﬁnal asociado a la manipulación de la sangre y demás sustancias sucesivas durante la ejecución del procedimiento, y se consiga que el producto ﬁnal quede almacenado en un contenedor cerrado y estéril.

Descripción breve de la invención

Es objeto de la invención un método para la preparación de al menos un compuesto de propiedades biológicas deseables a partir de sangre, donde en dicho método se utilizan tubos cerrados al vacío (con presión inferior a la presión atmosférica). En la mayoría del tiempo de ejecución del método, y preferentemente en todo momento, se impide el contacto del plasma o de cualquier otro compuesto involucrado en el método con el aire circundante. El método de acuerdo con la invención permite en mayor medida garantizar la no contaminación del compuesto o los compuestos ﬁnales y sus óptimas condiciones médicas y biológicas.

El método de acuerdo con la invención comprende los pasos de: disponer de una determinada cantidad de sangre en un primer contenedor cerrado al vacío (con presión menor que la presión atmosférica), con o sin anticoagulante; separar la sangre en una serie de fracciones, una de ellas una fracción de plasma con un gradiente de concentración de plaquetas; introducir un dispositivo de extracción hasta sustancialmente el nivel superior de la fracción más superior contenida en el primer contenedor; conectar un segundo contenedor cerrado al vacío (con presión menor que la presión atmosférica y menor que la del primer contenedor) al primer contenedor y esperar un determinado tiempo hasta que se haya transferido por diferencia de presiones una cantidad deseada de plasma y/o otras fracciones del primer contenedor al segundo contenedor; retirar el segundo contenedor. Los pasos de conectar el segundo contenedor, esperar un tiempo y retirar el segundo contenedor pueden ser repetidos, es decir, realizados más de una vez con el ﬁn de obtener más de un segundo contenedor (siempre ajustando adecuadamente la profundidad de introducción del dispositivo de extracción), cada uno albergando una composición con una concentración plaquetaria u otras características biológicas especíﬁcas para la determinada aplicación médica para la que vaya a ser utilizado.

En un modo de realización, todos los pasos son ejecutados en un sistema cerrado, sin destapar los contenedores o realizar cualquier otra acción que ponga en contacto el interior de los contenedores con el aire circundante. En este caso, puede introducirse opcionalmente un sistema de venteo (sistema que permite la entrada de pequeñas cantidades de aire ﬁltrado) en el primer contenedor antes de conectar el segundo contenedor al primer contenedor.

En otro modo de realización, el primer contenedor puede abrirse después de realizar la separación de la sangre en fracciones y antes de introducir el dispositivo de extracción. De esta manera se simpliﬁca la conexión del segundo contenedor y la transferencia de plasma y/o otras fracciones, al no tener que perforar un tapón con septum. Este método puede ser igualmente seguro desde el punto de vista de la posible contaminación bacteriana que pueda sufrir el compuesto cuando se abre el primer contenedor, antes de la transferencia al segundo contenedor, si por ejemplo se realiza en una cámara de ﬂujo laminar, en un ambiente estéril, en quirófano. Sin embargo, en muchos casos la aplicación del compuesto ﬁnal va a realizarse en ambiente abierto (por ejemplo en cirugía oral o tratamiento de úlceras cutáneas), con lo que no es necesario ejecutar el método en un ambiente estéril.

El procedimiento según la invención presenta numerosos aspectos interesantes o ventajosos frente a los procedimientos convencionales.

Por una parte, con el método de la invención no se produce la extracción automática y obligatoria de la fracción de plasma completa o de varias fracciones completas, sino que el método de la invención permite extraer, en condiciones estériles, la cantidad de plasma y/o otra fracción que se desee del primer contenedor, en función de la aplicación. En otras palabras, es posible extraer plasma a medida en función de las características del producto ﬁnal que se pretenda obtener; incluso, como se ha mencionado, a partir de una única muestra de sangre (un único primer contenedor) es posible obtener varios segundos contenedores con diferentes compuestos para diferentes aplicaciones médicas. Es decir, el método permite la personalización de la dosis de plaquetas u otras características biológicas de la fracción o las fracciones extraídas que interesen, de forma que es posible adecuar el o los compuestos ﬁnales a las aplicaciones médicas para las cuales está o están destinados.

Por otra parte, el producto que queda en el segundo contenedor queda almacenado en un contenedor cerrado y estéril de manera que está preparado para recibir tratamientos posteriores: sucesivas manipulaciones (por ejemplo añadiendo un agente activador, esperando un tiempo, sometiéndolo a una determinada temperatura, otras centrifugaciones, etc.), inﬁltraciones de otras sustancias o productos, almacenaje, congelación, etc.

El compuesto fabricado de acuerdo con el método de la presente invención puede ser utilizado para diversas aplicaciones, por ejemplo la regeneración ósea y el tratamiento de dolencias o enfermedades articulares degenerativas.

Descripción breve de las ﬁguras

Los detalles de la invención se aprecian en las ﬁguras que se acompañan, no pretendiendo éstas ser limitativas del alcance de la invención:

-: Las Figuras 1 y 2 muestran una vista esquemática de un modo de realización de dicho dispositivo de extracción según la invención, en situación de montaje y despiece respectivamente.

-: Las Figuras 3 y 4 muestran respectivamente una perspectiva completa y parcial de la carcasa comprendida en el modo de realización de la Figura 1.

Descripción detallada de la invención

De acuerdo con la invención, se deﬁne un método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, que se caracteriza por que comprende los pasos de:

i) disponer de una determinada cantidad de sangre en un primer contenedor cerrado al vacío, es decir, con una presión menor que la presión atmosférica;

ii) separar la sangre en al menos las fracciones siguientes: una fracción de glóbulos rojos en la parte inferior del primer contenedor, una pequeña fracción que contiene glóbulos blancos y plaquetas por encima de la anterior y una fracción de plasma con un gradiente de concentración de plaquetas por encima de la anterior, siendo dicho gradiente decreciente hacia la parte superior del primer contenedor (e incluso pudiendo comprender el plasma, dependiendo de las condiciones de centrifugado, una parte superior sin plaquetas);

iii) introducir un dispositivo de extracción (catéter, aguja o similar) hasta sustancialmente el nivel superior de la fracción más superior contenida en el primer contenedor;

iv) realizar al menos una vez los pasos de conectar al dispositivo de extracción un segundo contenedor cerrado al vacío con una presión menor que la del primer contenedor, esperar un determinado tiempo hasta que se transﬁera, por diferencia de presiones, una cantidad deseada de la fracción de plasma, la fracción de glóbulos blancos y plaquetas y/o la fracción de glóbulos rojos al segundo contenedor, retirar el segundo contenedor y, en caso de que vayan a realizarse más extracciones, ajustar el grado de introducción del dispositivo de extracción para que nuevamente alcance el nivel superior de las fracciones remanentes.

De esta manera, mediante el método de la invención se puede obtener un fraccionamiento selectivo de las diferentes fracciones del plasma obtenidas con el gradiente de concentración ya mencionado anteriormente, o de otras fracciones del primer contenedor.

En lo que se reﬁere al primer paso del método, y en particular al primer contenedor en el cual se dispone de una determinada cantidad de sangre como punto de partida del método, dicho primer contenedor puede presentar una serie de particularidades.

En un modo de realización, el primer contenedor está cerrado y no se abre en ningún momento, para conseguir un sistema o circuito cerrado en el cual la sangre y demás compuestos obtenidos posteriormente no entren en contacto con el aire ambiental o circundante sin ﬁltrar, reduciéndose el riesgo de contaminación bacteriana por manipulación, asegurándose la esterilidad y no alterándose la bioestabilidad y la bioseguridad del producto ﬁnal resultante. En este modo de realización se puede introducir opcionalmente un sistema de venteo en el primer contenedor, que permitirá la entrada de aire ﬁltrado en el mismo. Además, el dispositivo de extracción está preferentemente provisto de un Septum para mantener el circuito cerrado.

En otro modo de realización, el primer contenedor se abre una vez realizada la separación de sangre en fracciones y antes de introducir el dispositivo de extracción.

El primer contenedor está generalmente fabricado en plástico o vidrio, cerrado o taponado con un tapón roscado

o a presión. Este tapón es perforable para permitir la conexión en cerrado del dispositivo de extracción. Además, el primer contenedor es preferentemente un tubo cilíndrico de entre4y50mlde capacidad.

Dicho primer contenedor puede contener o no al menos un agente anticoagulante, dependiendo del uso posterior que desee darse a los compuestos obtenidos mediante el procedimiento. Generalmente se utiliza como agente anticoagulante el citrato sódico debido a que es un componente natural que puede encontrarse en el torrente sanguíneo y que actúa como quelante del catión divalente de Calcio (Ca 2+). Sin embargo, también se contemplan otros anticoagulantes, como por ejemplo el EDTA, que es un anticoagulante artiﬁcial, aunque menos especíﬁco para el catión divalente de Calcio (Ca 2+).

Ejemplos de primer contenedor

Dos ejemplos de primer contenedor válido para la presente invención son los tubos denominados TE5 o TE9 PRGF® Collection Tube comercializados por el propio solicitante. Se trata de dos tubos estériles de plástico que comprenden un cuerpo principal y un tapón perforable. Los tubos tienen un volumen, respectivamente, de5y9ml; se utilizará un volumen u otro en función de las necesidades de la aplicación médica concreta. Ambos tubos están etiquetados, comprendiendo dichas etiquetas una regla con indicaciones de volumen en sentido ascendente hacia la parte inferior del tubo. Los tubos contienen citrato sódico al 3.8% en su interior como agente anticoagulante, en cuyo caso presentan las siguientes características:

TUBO TE5

Capacidad:: 5ml

Volumen de vacío (presión):: 4,5 ml

Volumen de citrato sódico:: 0,5 ml

Dimensiones:: 13x75mm

TUBO TE9 Capacidad: 9ml Volumen de vacío (presión): 8,1 ml Volumen de citrato sódico: 0,9 ml Dimensiones: 16 x 100 mm

En lo que se reﬁere al segundo paso del método, relativo a la separación de la sangre en diferentes fracciones, esta separación se realiza preferentemente centrifugando el primer contenedor (a una velocidad de centrifugado y durante un tiempo determinado) o colocando el tubo en una gradilla y esperando a que las fracciones se separen por sedimentación.

En caso de que se realice un centrifugado del primer contenedor, dicho centrifugado puede presentar una serie de particularidades. Preferentemente, el primer contenedor se centrifuga a una velocidad de entre 100 y 900 G durante 3 a 12 minutos y a temperatura ambiente o no (es decir, a cualquier temperatura). Dentro de estos rangos y de una forma especialmente ventajosa, el centrifugado se realiza a una velocidad de entre 300 y 800 G y durante un tiempo de entre 5 y 9 minutos. Estos rangos de parámetros de centrifugado permiten obtener una separación más deﬁnida de las diferentes fracciones (plasma con diferentes concentraciones plaquetarias, glóbulos blancos con plaquetas, glóbulos rojos y otras, si las hubiera).

En lo que se reﬁere al paso de introducir un sistema de venteo en el primer contenedor, éste se realiza opcionalmente. En caso de no introducirse, la transferencia de plasma y/o otra fracción se realiza hasta que el personal clínico retira el segundo contenedor o hasta que se igualan las presiones en el primer y segundo contenedor (lo cual depende de la presión del segundo contenedor). En cambio, en caso de introducirse, el sistema de venteo deja entrar aire ﬁltrado en el primer contenedor cerrado por lo que la presión del primer contenedor siempre es mayor que la presión del segundo contenedor; en consecuencia, la extracción únicamente termina cuando el personal clínico retira el segundo contenedor, cuando desplaza el dispositivo de extracción por encima del nivel más superior, o cuando, por supuesto, se ha transferido todo el contenido del primer contenedor al segundo contenedor.

En lo que se reﬁere a los siguientes pasos del método, relativos a la introducción de un dispositivo de extracción, a la conexión de un segundo contenedor, a la extracción de una parte del plasma u otra fracción al segundo contenedor y a la retirada de dicho segundo contenedor, estos pasos y el segundo contenedor pueden presentar una serie de particularidades.

En cuanto a la introducción del dispositivo de extracción, ésta se hará sustancialmente hasta el nivel superior de la fracción más superior contenida en el primer contenedor. Si se realiza una extracción sucesiva o secuenciada de diferentes fracciones a una serie de segundos contenedores, la extracción se realiza siempre aspirando la parte superior del líquido remanente. Es decir, el dispositivo de extracción se ajusta siempre al nivel superior de líquido a medida que su nivel va bajando durante la aspiración. Entonces, si para una determinada aplicación médica es necesario por ejemplo extraer la parte inferior del plasma (parte con mayor concentración de plaquetas), se realiza primero la extracción en uno o varios pasos del plasma situado por encima de la parte deseada (pudiendo desechar este plasma con menor concentración de plaquetas o utilizarlo para otras aplicaciones médicas).

En cuanto a qué fracciones o combinaciones de fracciones pueden extraerse, la invención contempla un sinfín de posibilidades: puede extraerse únicamente plasma (toda o parte de la fracción, conteniendo una concentración variable de plaquetas e incluso sin plaquetas si el centrifugado se ha realizado a altas velocidades), únicamente glóbulos blancos con plaquetas (toda o parte de la fracción), únicamente glóbulos rojos (toda o parte de la fracción), plasma (toda o parte de la fracción) junto con glóbulos blancos (toda o parte de la fracción), plasma (toda o parte de la fracción) junto con toda la fracción de glóbulos blancos y parte o toda la fracción de glóbulos rojos, o parte o toda la fracción de glóbulos blancos junto con parte o toda la fracción de glóbulos rojos.

Por otro lado, en lo que se reﬁere al segundo contenedor, éste está cerrado y no se abre al menos hasta la ﬁnalización del procedimiento, para conseguir un sistema o circuito cerrado en el cual el plasma y demás compuestos no entren en contacto con el aire (al igual que el primer contenedor). Generalmente está cerrado o taponado con un tapón roscado

o a presión. Este tapón es perforable. Preferentemente, el segundo contenedor es un tubo cilíndrico de entre4y50ml de capacidad.

El segundo contenedor puede o no contener al menos un agente coagulante, procoagulante o activador plaquetario, en función de las necesidades de la aplicación médica concreta para la cual esté destinado el compuesto ﬁnal. Generalmente se utiliza como agente coagulante el cloruro cálcico al 10%, aunque se contemplan otros agentes coagulantes, por ejemplo la trombina bovina, la trombina humana, etc. También se contempla la utilización en el segundo contenedor de agentes acelerantes de la coagulación, como son algunos aditivos especiales inertes favorecedores de la coagulación (sílice, etc.) o como es el hecho de realizar el segundo contenedor en un material acelerante de la coagulación (vidrio). Asimismo se contempla que el segundo contenedor pueda contener cualquier otro biomaterial o agente, si ello es necesario para la aplicación médica para la que deba estar destinado el compuesto contenido en dicho segundo contenedor.

El agente coagulante, agente procoagulante, agente activador o cualquier otro biomaterial o agente, puede ser añadido al segundo contenedor bien de forma previa a la transferencia desde el primer contenedor (por ejemplo durante la propia fabricación del segundo contenedor), o bien una vez efectuada la transferencia.

El segundo contenedor generalmente está fabricado de plástico o vidrio. El plástico puede ser interesante para determinadas aplicaciones por su capacidad de retardar el proceso de coagulación, hecho que se acentuará más aún si se utiliza un segundo contenedor de plástico sin agente coagulante.

Ejemplos de segundo contenedor

Dos ejemplos de segundo contenedor válido para la presente invención son los tubos denominados TF5-EST o TF9-EST PRGF ® Plasma Fractionation Tube comercializados por el propio solicitante. Se trata de dos tubos estériles de plástico formados por un cuerpo principal y un tapón perforable. Los tubos tienen un volumen, respectivamente, de 5 y 9 ml; se utilizará un volumen u otro en función de las necesidades de la aplicación médica concreta. Ambos tubos están etiquetados, comprendiendo dichas etiquetas una regla con indicaciones de volumen en sentido ascendente hacia la parte superior del tubo. Estos tubos tienen una presión negativa diferente entre sí, y pueden fabricarse con diferentes presiones en función de las necesidades de la técnica.

Por otro lado, en cuanto a la extracción, la invención contempla que pueda realizarse una única vez, para separar una cantidad deseada de al menos una fracción en un segundo contenedor, para una determinada aplicación. La invención también contempla que pueda repetirse este paso más de una vez para separar distintas partes del plasma (con diferente concentración de plaquetas o incluso sin plaquetas) u otras fracciones en distintos segundos contenedores, para diferentes aplicaciones. Por ejemplo, puede extraerse una parte de plasma con menor concentración de plaquetas

o sin plaquetas (parte superior de la fracción superior del tubo) para una aplicación y puede extraerse posteriormente una parte de plasma con más concentración de plaquetas (situada más abajo, más próxima a la fracción de glóbulos blancos) para otra determinada aplicación que requiera de un producto ﬁnal más rico en señales celulares, aprovechando el gradiente de concentración de la fracción de plasma. A continuación se presentan diversos ejemplos de procedimientos que permiten comprender este concepto de extracción de acuerdo con la invención.

Ejemplo de procedimiento 1

Se dispone de sangre en un primer contenedor de plástico sin anticoagulante (al no usar anticoagulante, se elimina la necesidad de usar un coagulante y activador posteriormente). Tras el centrifugado, se extrae toda la fracción de plasma a un segundo contenedor de vidrio, o a un segundo contenedor de plástico con un acelerante de la coagulación, para la obtención de un coágulo retraído. El compuesto ﬁnal presenta una consistencia semisólida, con lo que es utilizable como tapón o membrana de ﬁbrina en aplicaciones como la estabilización de un injerto óseo particulado antes de la sutura de cierre en cirugía oral o máxilofacial, para el tratamiento de un alveolo post-extracción, etc.

Ejemplo de procedimiento 2

Se dispone de sangre en un primer contenedor plástico sin anticoagulante (al no usar anticoagulante, se elimina la necesidad de usar un coagulante y activador posteriormente). Tras el centrifugado, se extrae toda la fracción de plasma a un segundo contenedor de plástico sin acelerante de la coagulación, por lo cual se retarda la coagulación del plasma. El compuesto ﬁnal presenta por lo tanto una consistencia líquida, útil para aplicaciones como inﬁltración en regeneración de tejido articular o en inyección intradérmica o intramuscular, o para ser añadido a un biomaterial y obtener un coágulo de dicho biomaterial, etc.

Ejemplo de procedimiento 3

Se dispone de sangre en un primer contenedor plástico con anticoagulante (por lo cual se retarda o detiene la coagulación). Tras el centrifugado:

-: Se realiza una primera extracción de una determinada cantidad de la parte superior del plasma (es decir, un plasma con menor concentración de plaquetas o sin plaquetas) a un segundo contenedor de vidrio con cloruro de calcio (agente coagulante y activador). Se forma un compuesto semisólido, utilizable como tapón de ﬁbrina en aplicaciones como las citadas en el ejemplo de procedimiento 1.

-: Se realiza una segunda extracción de la parte superior de plasma que queda en el primer contenedor (es decir, un plasma con mayor concentración de plaquetas con respecto al plasma extraído anteriormente) a otro segundo contenedor de plástico con cloruro de calcio (agente coagulante y activador). El cloruro de calcio también se podría añadir posteriormente. Se forma un compuesto líquido, útil para aplicaciones como la de ser mezclado con hueso particulado autólogo del paciente (del mismo del cual puede provenir la sangre utilizada en el método) en una zona del mismo en la que se vaya a regenerar hueso, para inﬁltración en piel, articular o cualquier otro uso.

Ejemplo de procedimiento 4

Se dispone de sangre en un primer contenedor plástico con anticoagulante. Tras el centrifugado, se extrae la totalidad de la fracción de plasma a un segundo contenedor de plástico con agente coagulante y activador. Este agente también se podría añadir posteriormente. El compuesto ﬁnal presenta una consistencia líquida, útil para aplicaciones como inﬁltración de tejido articular, inﬁltraciones intradérmicas o intramusculares, etc.

Ejemplo de procedimiento 5

Se dispone de sangre en un primer contenedor de plástico sin anticoagulante (al no usar anticoagulante, se elimina la necesidad de usar un coagulante y activador posteriormente). Tras el centrifugado, se abre el primer contenedor y se extrae toda la fracción de plasma a un segundo contenedor de vidrio, o a un segundo contenedor de plástico con un acelerante de la coagulación, para la obtención de un coágulo retraído. El compuesto ﬁnal presenta una consistencia semisólida, con lo que es utilizable como tapón o membrana de ﬁbrina en aplicaciones como la estabilización de un injerto óseo particulado antes de la sutura de cierre en cirugía oral o máxilofacial, para el tratamiento de un alveolo post-extracción, etc.

Es objeto de la invención asimismo un dispositivo de extracción para extraer materia del primer contenedor al segundo contenedor. Las Figuras 1 y 2 muestran una vista esquemática de un modo de realización de dicho dispositivo de extracción según la invención, en situación de montaje y despiece respectivamente. El dispositivo de extracción comprende, principalmente, una primera aguja (2) para ser insertada en el primer contenedor de acuerdo con el método, una segunda aguja (4) para ser insertada en el segundo contenedor de acuerdo con el método, y un medio accionable por un usuario para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja (2) hacia la segunda aguja (4). La primera aguja (2) generalmente está dotada de una punta biselada en caso de que el método vaya a ejecutarse en cerrado, es decir, con el primer contenedor cerrado (permitiendo dicha punta biselada perforar el tapón del primer contenedor); en cambio, si el método va a ejecutarse en abierto (abriendo el primer contenedor una vez centrifugado) no es necesario que la primera aguja (2) termine en una punta biselada. Preferentemente, el medio para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja (2) hacia la segunda aguja (4) es un conjunto-pulsador (3) provisto de un botón (3a), como se ha representado en las ﬁguras, permitiendo un cómodo y eﬁcaz accionamiento del dispositivo.

En el modo de realización representado, el sistema comprende un conector (6) para adaptar la conexión macho de la segunda aguja (4) a la conexión macho del conjunto-pulsador (3). Lógicamente este conector (6) no siempre es necesario.

Preferentemente, el dispositivo comprende además una carcasa (1) de la cual sobresale la primera aguja (2). La carcasa (1) es tal que permite accionar el medio para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja (2) hacia la segunda aguja (4); en el modo de realización representado, por ejemplo, el botón (3a) del conjunto-pulsador (3) sobresale de la carcasa (1) y permite ser accionado fácilmente por el usuario del dispositivo.

Preferentemente también, la carcasa (1) comprende una zona de alojamiento (5) destinada a recibir (total o parcialmente) el segundo contenedor de acuerdo con el método. Dicha zona de alojamiento (5) puede observarse asimismo en la Figura 4, que muestra una perspectiva parcial de la carcasa (1) representada en la Figura 1. La Figura 3 muestra una perspectiva de la carcasa (1) completa, donde se observa el oriﬁcio (7) por el cual sobresale el botón (3a) del conjuntopulsador (3) y el oriﬁcio (8) por el cual sobresale la primera aguja (2).

La carcasa (1) puede comprender además oriﬁcios para permitir la inserción de un sistema de venteo así como medios de guiado del sistema de venteo hacia el primer contenedor. El sistema de venteo, que permite la entrada de pequeñas cantidades de aire ﬁltrado, es interesante cuando se ejecuta el procedimiento según la invención con el primer contenedor cerrado, en los casos en los que se desee que el paso de materia no se vea interrumpido por igualamiento de presiones entre el primer contenedor y el segundo contenedor.

El sistema representado se utiliza de la forma siguiente. El segundo contenedor se introduce en la zona de alojamiento (5); presionando lo suﬁciente, se consigue que la segunda aguja (4) perfore el tapón de dicho segundo contenedor. A su vez, la primera aguja (2) se introduce en el primer contenedor (abierto o cerrado). Entonces, se pulsa el botón (3a) del conjunto pulsador (3), activándose la transferencia de materia (según el procedimiento de la invención) del primer contenedor al segundo contenedor por diferencia de presiones.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, que se caracteriza por que comprende los pasos de:

i) disponer de sangre en un primer contenedor cerrado con una presión menor que la presión atmosférica;

ii) separar la sangre en al menos las fracciones siguientes: una fracción de glóbulos rojos en la parte inferior del primer contenedor, una fracción de glóbulos blancos y plaquetas por encima de la anterior y una fracción de plasma con un gradiente de concentración de plaquetas por encima de la anterior, siendo dicho gradiente decreciente hacia la parte superior del primer contenedor;

iii) introducir un dispositivo de extracción hasta sustancialmente el nivel superior de la fracción más superior contenida en el primer contenedor;

iv) realizar al menos una vez los pasos de conectar al dispositivo de extracción un segundo contenedor cerrado al vacío con una presión menor que la del primer contenedor, esperar un determinado tiempo hasta que se transﬁera, por diferencia de presiones, una cantidad deseada de plasma, glóbulos blancos con plaquetas y/o glóbulos rojos al segundo contenedor, retirar el segundo contenedor y, en caso de que vayan a realizarse más extracciones, ajustar el grado de introducción del dispositivo de extracción para que nuevamente alcance el nivel superior de las fracciones remanentes.
2.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que el primer contenedor se abre después de separar la sangre en fracciones y antes de introducir el dispositivo de extracción.
3.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que todos los pasos se ejecutan de acuerdo con un sistema cerrado.
4.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 3, que se caracteriza por que junto con el dispositivo de extracción se introduce en el primer contenedor un sistema de venteo para permitir la entrada de aire ﬁltrado en el mismo y asegurar que la presión del primer contenedor se mantiene mayor que la del segundo contenedor.
5.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 3, que se caracteriza por que el dispositivo de extracción comprende un Septum para garantizar el circuito cerrado.
6.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que el primer contenedor contiene al menos un agente anticoagulante.
7.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que el primer contenedor no contiene un agente anticoagulante.
8.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que el segundo contenedor contiene al menos un agente coagulante, agente procoagulante, agente activador o cualquier otro biomaterial o agente, bien de forma previa a la transferencia desde el primer contenedor, o bien añadido posteriormente.
9.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que el segundo contenedor contiene al menos un agente acelerante de la coagulación.
10.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que la separación de la sangre en fracciones se realiza por sedimentación.
11.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 1, que se caracteriza por que la separación de la sangre en fracciones se realiza centrifugando el primer contenedor.
12.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 11, que se caracteriza por que el primer contenedor se centrifuga a una velocidad de centrifugado de entre 100 y 900 G durante 3 a 12 minutos.
13.

Método para la preparación de al menos un compuesto a partir de sangre, según la reivindicación 12, que se caracteriza por que el primer contenedor se centrifuga a una velocidad de centrifugado de entre 300 y 800 G, durante un tiempo de entre5y9 minutos.
14.

Dispositivo de extracción, para la ejecución de un método de acuerdo con las reivindicaciones anteriores, que se caracteriza por que comprende una primera aguja (2) para ser insertada en el primer contenedor de acuerdo con el método, una segunda aguja (4) para ser insertada en el segundo contenedor de acuerdo con el método, y un medio accionable por un usuario para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja (2) hacia la segunda aguja (4).
15.

Dispositivo, según la reivindicación 14, que se caracteriza por que el medio para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja (2) hacia la segunda aguja (4) es un conjunto-pulsador (3) provisto de un botón (3a).
16.

Dispositivo, según la reivindicación 14, que se caracteriza por que comprende una carcasa (1) de la cual sobresale la primera aguja (2) y que permite accionar el medio para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja (2) hacia la segunda aguja (4).
17.

Dispositivo, según la reivindicación 16, que se caracteriza por que la carcasa (1) comprende una zona de alojamiento (5) destinada a recibir el segundo contenedor de acuerdo con el método.
18.

Dispositivo, según la reivindicación 14, que se caracteriza por que comprende oriﬁcios para permitir la inserción de un sistema de venteo y medios de guiado del sistema de venteo hacia el primer contenedor.

OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS

N.º solicitud:201000306

ESPAÑA

Fecha de presentación de la solicitud: 10.03.2010

Fecha de prioridad:

INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA

51 Int. Cl. : Ver Hoja Adicional

DOCUMENTOS RELEVANTES

Categoría

Documentos citados Reivindicaciones afectadas

X

GB 2461076 A (LOVE JAMES) 23.12.2009, páginas 1-9; figuras 1-12. 1-13

X

WO 9948425 A1 (TRINITY COLLEGE DUBLIN; SWEENEY EAMONN C) 30.09.1999, 14-18

páginas 1-15; figuras 1-10.

X

ES 2009332 A6 (BRODEN BENGT INGE) 16.09.1989, descripción; figuras. 14-18

X

ES 265372 U 16.12.1982, descripción; figuras. 14-18

A

EP 0875202 A2 (BECTON DICKINSON CO) 04.11.1998, descripción; figuras. 1-18

A

US 2006074394 A1 (BERETTA et al.) 06.04.2006, descripción; figuras. 1-18

A

US 4886071 A (MEHL et al.) 12.12.1989, descripción; figuras. 1-18

A

US 3837376 A (BROWN et al.) 24.09.1974, descripción; figuras. 1-18

A

US 4861477 A (KIMURA et al.) 29.08.1989, descripción; figuras. 11-13

Categoría de los documentos citados X: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro/s de la misma categoría A: refleja el estado de la técnica O: referido a divulgación no escrita P: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior, pero publicado después de la fecha de presentación de la solicitud

El presente informe ha sido realizado • para todas las reivindicaciones • para las reivindicaciones nº: TODAS

Fecha de realización del informe 02.11.2010

Examinador I. Rodríguez Goñi Página 1/5

INFORME DEL ESTADO DE LA TÉCNICA

Nº de solicitud:201000306

CLASIFICACIÓN OBJETO DE LA SOLICITUD

A61B5/15(2006.01) B01L3/14(2006.01) G01N33/49(2006.01) B01D21/26(2006.01) A61K35/14(2006.01)

Documentación mínima buscada (sistema de clasificación seguido de los símbolos de clasificación)

A61B, A61K, B01D, B01L, G01N

Bases de datos electrónicas consultadas durante la búsqueda (nombre de la base de datos y, si es posible, términos de búsqueda utilizados)

INVENES, EPODOC, WPI

Informe del Estado de la Técnica Página 2/5

OPINIÓN ESCRITA

Nº de solicitud:201000306

Fecha de Realización de la Opinión Escrita:

Declaración

Novedad (Art. 6.1 LP 11/1986)

Reivindicaciones Reivindicaciones 1-13, 18 14-17 SI NO

Actividad inventiva (Art. 8.1 LP11/1986)

Reivindicaciones Reivindicaciones 1-18 SI NO

Se considera que la solicitud cumple con el requisito de aplicación industrial. Este requisito fue evaluado durante la fase de examen formal y técnico de la solicitud (Artículo 31.2 Ley 11/1986).

Base de la Opinión.-

La presente opinión se ha realizado sobre la base de la solicitud de patente tal y como se publica.

Informe del Estado de la Técnica Página 3/5

OPINIÓN ESCRITA

Nº de solicitud:201000306

1. Documentos considerados.-

A continuación se relacionan los documentos pertenecientes al estado de la técnica tomados en consideración para la realización de esta opinión.

Documento

Número Publicación o Identificación Fecha Publicación

D01

GB 2461076 A (LOVE JAMES) 23.12.2009

D02

WO 9948425 A1 (TRINITY COLLEGE DUBLIN ; SWEENEY EAMONN C) 30.09.1999

D03

US 4861477 A (KIMURA ET AL.) 29.08.1989
2. Declaración motivada según los artículos 29.6 y 29.7 del Reglamento de ejecución de la Ley 11/1986, de 20 de marzo, de Patentes sobre la novedad y la actividad inventiva; citas y explicaciones en apoyo de esta declaración

Para la reivindicación 1, el documento D01 es considerado el estado de la técnica más cercano. D01 divulga un método para la separación de la sangre en sus distintos componentes y la extracción de los mismos, que comprende los siguientes pasos:

-

disponer la sangre en un primer contenedor, que entre otras posibilidades, puede tener una presión menor que la atmosférica -separar la sangre en sus diferentes componentes o constituyentes -introducir un dispositivo de extracción hasta el nivel superior de la fracción más superior contenida en el primer contenedor -realizar al menos una vez los pasos de conectar al dispositivo de extracción un segundo contenedor cerrado al vacío con una presión menor que la del primer contenedor, esperar un determinado tiempo hasta que se transfiera, por diferencia de presiones, una cantidad deseada de un componente, y retirar el segundo contenedor

Las diferencias entre la reivindicación 1 y D01 son:

-

en la reivindicación 1 se dice que el método es para la preparación de al menos un compuesto de sangre. Sin embargo, las características técnicas reivindicadas corresponden a un método para la separación de la sangre en sus distintos componentes y la extracción de los mismos, al igual que el método divulgado en D01 -en la reivindicación 1 se dice que se separa la sangre en al menos las fracciones siguientes; glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas, y una fracción de plasma con un gradiente decreciente de concentración de plaquetas. No se da ninguna característica técnica respecto a cómo se consigue dicha separación. En D01 se dice que se separa la sangre en sus distintos componentes mediante centrifugación. Aunque se mencionan glóbulos rojos, blancos y sérum o plasma como componentes de la sangre, se busca principalmente una separación de la sangre entre las fracciones de glóbulos rojos y sérum o plasma. En el estado de la técnica es conocido que centrifugando un contenedor con sangre, separamos ésta en sus diferentes componentes, que quedan distribuidos, a lo largo de dicho contenedor, en función de su peso o densidad (como también se reconoce en D01). Por tanto, sería evidente para el experto en la materia que centrifugando el contenedor podríamos obtener una separación de la sangre en sus diferentes fracciones, según un gradiente de concentración decreciente hacia la parte superior del contenedor. En definitiva, la separación pretendida en la reivindicación sería evidente para el experto en la materia. -en la reivindicación 1 se dice que una vez realizada la extracción deseada de la fracción superior, puede volver a repetirse el proceso para realizar una extracción de otra fracción, ajustando el grado de introducción del dispositivo de extracción. En D01 se divulga que para proceder a realizar la extracción hay que introducir el dispositivo, ajustando el grado de introducción del mismo, a una cierta profundidad dentro de una fracción. El mero hecho de una vez realizado el proceso para una fracción, volver a repetirlo para la siguiente, no es sino una repetición evidente.

Por todo lo expuesto, la reivindicación 1 sería nueva (Art. 6.1 LP 11/1986) pero carecería de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

La reivindicación dependiente 2 carece de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986); el mero hecho de abrir el primer contenedor no implica ningún efecto técnico inesperado.

La reivindicación dependiente 3 es evidente a la luz del documento D01 y por tanto carece de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

La reivindicación dependiente 4 incorpora un sistema de venteo para permitir la entrada de aire filtrado. Los sistemas de venteo son conocidos; el mero hecho de incorporar uno, sin más, carece de actividad inventiva. Es evidente que si se quiere evitar el riesgo de contaminación bacteriana una de las opciones es que el aire sea filtrado. Por tanto, dicha reivindicación carece de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

La reivindicación dependiente 5 incorpora un septum; el mero hecho de incorporar algo a un dispositivo, sin más, y sin que se produzca ningún efecto técnico inesperado carece de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

Informe del Estado de la Técnica Página 4/5

OPINIÓN ESCRITA

Nº de solicitud:201000306

Las reivindicaciones dependientes 6 a 9 incorporan o excluyen diversos agentes que son ampliamente conocidos y de cuya utilización o no utilización no se deduce ningún efecto técnico inesperado. Por tanto, dichas reivindicaciones carecen de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

Las reivindicaciones 10 y 11 son evidentes del estado de la técnica. La sedimentación y la centrifugación para realizar la separación son ampliamente conocidas. Por tanto, dichas reivindicaciones carecen de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

Las reivindicaciones dependientes 12 y 13 incorporan selecciones de rangos de tiempo y velocidad de centrifugado. Valores comprendidos en dichos rangos son conocidos en el estado de la técnica. En el documento D02 que divulga un recipiente que es sometido a centrifugado para separar componentes de la sangre, se eligen los valores de velocidad de centrifugado de 300 G durante un tiempo de entre 5 a 10 minutos. Una velocidad de 300 G estaría dentro de los rangos de ambas reivindicaciones, y un rango de tiempo de entre 5 a 10 minutos, incluye valores que así mismo estarían dentro de los rangos de ambas reivindicaciones. Por tanto, dichas reivindicaciones carecen de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

Para la reivindicación 14, el documento D03 es considerado el estado de la técnica más cercano. D03 divulga un dispositivo de extracción que comprende: -una primera aguja para ser insertada en el cuerpo de un paciente -una segunda aguja para ser insertada en un contenedor -un medio accionable por un usuario para abrir y cerrar el paso de materia desde la primera aguja hacia la segunda aguja En la reivindicación 14, la primera aguja del dispositivo se inserta en un contenedor en vez de en el cuerpo de un paciente y dicho dispositivo se utiliza para la ejecución de un método según reivindicaciones anteriores. El dispositivo divulgado en D03, no obstante, es susceptible de ser utilizado para ejecutar el método aludido, su primera aguja se puede insertar en un contenedor y sus características estructurales son las mismas que las reivindicadas. Por todo lo expuesto, la reivindicación 14 carece de novedad (Art. 6.1 LP 11/1986).

Las reivindicaciones dependientes 15, 16 y 17 están también anticipadas por D03 por lo que carecen así mismo de novedad (Art. 6.1 LP 11/1986).

La reivindicación dependiente 18 incorpora al dispositivo orificios. La finalidad de dichos orificios es permitir la inserción de un sistema de venteo y medios de guiado del sistema de venteo hacia el primer contenedor. No se define el sistema de venteo ni los medios de guiado ni se dan características técnicas al respecto. El mero hecho de dotar a un dispositivo de un orificio para insertar algo en él carece de actividad inventiva. Por tanto aunque dicha reivindicación sería nueva (Art. 6.1 LP 11/1986) carecería de actividad inventiva (Art. 8.1 LP 11/1986).

Informe del Estado de la Técnica Página 5/5