ES2355718T3

ES2355718T3 - Compuestos de pirrolopiridazina y procedimientos de uso de los mismos para el tratamiento de trastornos proliferativos.

Info

Publication number: ES2355718T3
Application number: ES03719500T
Authority: ES
Inventors: Mark E. Salvati; Stephanie A. Barbosa; Zhong Chen; John T. Hunt
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2002-03-28
Filing date: 2003-03-26
Publication date: 2011-03-30
Anticipated expiration: 2023-03-26

Abstract

Un compuesto de fórmula (I): **(Ver fórmula)** incluidos sus enantiómeros, diastereómeros, sales y solvatos farmacéuticamente aceptables, en la que:R1 se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, aralquilo, halógeno, OR1', OC(O)R1', OC(O)OR1', OC(O)NR1'R1'', OS(O)2R1''' y OS(O)2NR1'R1''; en las que R1' y R1'' se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en grupos H, alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo y cicloalquilo; R1' y R1'' pueden también tomarse juntos de uno de un cicloalquilo, un arilo y un grupo heterocíclico; R1''' se selecciona del grupo que consiste en alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo y cicloalquilo; R2 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R1'OC(O), R1'C(O), R1''R1'NC(O), R1'''O(O)2S, R1'R1''N(O)2S y R1'''(O)nS, en el que n es el número entero seleccionado de 1 o 2; R1 y R2 pueden tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico; X se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR2'; y R2' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, C(O)R1, C(O)OR1, SO2NR1'R1'', C(O)NR1'R1'' y SO2R1'''; con la condición de que cuando X es S, R2 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; R3 se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, carbalcoxi, carboxamido, halógeno, amina, amina sustituida, OR3', CH2OR3', CH2NR3'R3'', CH2SR3', OC(O)R3', OC(O)OR3'', OC(O)NR3'R3'', OS(O)2R3' y OS(O)2NR3'R3''; en los que R3' y R3'' se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo y arilo; R3' y R3'' pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico; cuando R3 es un grupo carbalcoxi, acilo o carboxamido, estos grupos están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, dichos grupos sustituyentes se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo y arilo; dichos grupos sustituyentes pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocícliclo; R2 y R3 pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico; R4 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R1'OC(O), R1'C(O), R1''R1'NC(O), R1''O(O)2S, R1'R1''N(O)2S y R1'''(O)nS, en el que n es el número entero seleccionado de 1 o 2; Y se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR4'; R4' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, un heterociclo, C(O)R1, C(O)OR1, S(O2)NR1'R1'', C(O)NR1'R1'' y S(O2)R1; con la condición de que cuando Y es S, R4 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; cuando Y es NR4', R4' puede tomarse junto con R3 para formar un sistema de anillo heterocíclico; R5 se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, ciano, alquilo, cicloalquilo, un grupo heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, alquileno sustituido, R1'OC(O), R1'C(O), R1''R1'NC(O), R1'''O(O)2S, R1'R1''N(O)2S y R1'''(O)nS; en el que n es el número entero 1 o 2; Z se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR5'; R5' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo y un heterociclo; con la condición de que cuando Z es un enlace de valencia, R5 se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, un grupo alquileno sustituido y un grupo ciano; y, con la otra condición de que cuando Z es S, R5 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; y R6 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, aralquilo, un heterociclo, acilo, carbalcoxi y carboxamido; dichos grupos carbalcoxi, acilo y carboxamido están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, cada uno de los cuales se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo y un heterociclo, en la que, "alquilo" o "alq" en referencia a R1, R1', R1'', R1''', R2, R2', R3, R3', R3'', R4, R4', R5, R5' y R6, se refiere a radicales hidrocarburo de cadena lineal o ramificada, opcionalmente sustituidos con 1 a 4 sustituyentes que pueden incluir alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, halógeno, heterociclo, hidroxi, ciano, nitro, amino, monoalquilamino, dialquilamino, hidroxilamina, sulfonato, sulfamida, ciano-guanidina, oxo, carbalcoxi, carboxamido, SOn, en el que n es 0, 1 o 2, y/o grupos acilo.

Description

Compuestos de pirrolopiridazina y procedimientos de uso de los mismos para el tratamiento de trastornos proliferativos.

Solicitudes relacionadas

La presente solicitud reivindica el beneficio de prioridad de las solicitudes provisionales de Estados Unidos Nº 60/368.249, presentada el 28 de marzo de 2002 y 60/402.118, presentada el 8 de agosto de 2002.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de pirrolopiridazina, a procedimientos de preparación de estos compuestos y a su uso para el tratamiento de trastornos proliferativos y otros trastornos.

Antecedentes de la invención

Las proteína cinasas son una clase de enzimas que catalizan la transferencia de un grupo fosfato del ATP a un residuo tirosina, serina, treonina o histidina ubicado en un sustrato de proteína. Las proteína cinasas claramente desempeñan una función en el crecimiento celular normal. Muchas de las proteínas de los receptores de factores de crecimiento tienen dominios intracelulares que funcionan como proteína cinasas, y es a través de esta función que tienen efecto de señalización. La interacción de los factores de crecimiento con sus receptores es un evento necesario en la normal regulación del crecimiento celular, y el estado de fosforilación de las proteínas sustrato a menudo está relacionado con la modulación del crecimiento celular.

La familia de receptores del factor de crecimiento epidérmico humano (HER) consiste en cuatro distintos receptores tirosina cinasa que se denominan HER1, HER2, HER3 y HER4. Estas cinasas también se conocen como erbB1, erbB2, etc. HER1 se conoce comúnmente como el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFr). Con la excepción de HER3, estos receptores tienen actividad de proteína cinasa intrínseca específica para los residuos de tirosina de proteínas aceptoras de fósforo. Las cinasas HER se expresan en la mayoría de las células epiteliales, así como en las células de tumores de origen epitelial. A menudo se expresan en células de tumores de origen mesenquimal tales como sarcomas o rabdomiosarcomas. Los receptores tirosina cinasa (RTK) tales como HER1 y HER2 están involucrados en la proliferación celular y están asociados con enfermedades tales como la psoriasis y el cáncer. Se sabe que la interrupción de la transducción de las señales por inhibición de estas cinasas en las células diana tiene un efecto antiproliferativo y terapéutico.

La actividad enzimática de los receptores tirosina cinasa puede ser estimulada por sobreexpresión o por dimerización mediada por ligando. Se ha demostrado la formación de homodímeros, así como heterodímeros para la familia de receptores HER. Un ejemplo de homodimerización es la dimerización de HER1 (receptor del EGF) por uno de los ligandos de la familia de EGF (que incluye el EGF, factor de crecimiento transformante alfa, betacelulina, EGF de unión a heparina y epiregulina). La heterodimerización entre los cuatro receptores cinasa HER se puede promover por unión a miembros de la familia de ligandos de heregulina (llamada también neuregulina). Tal heterodimerización, que implica HER2 y HER3 o una combinación de HER3/HER4, da como resultado una estimulación significativa de la actividad de tirosina cinasa de los dímeros receptores incluso aunque uno de los receptores (HER3) es enzimáticamente inerte. Se ha mostrado que la actividad de cinasa de HER2 se activa también en virtud de la sobreexpresión del receptor solo en una diversidad de tipos celulares. La activación de los homodímeros y heterodímeros receptores da como resultado la fosforilación de residuos tirosina en los receptores y en otras proteínas intracelulares. A esto le sigue la activación de las vías de señalización intracelulares tales como las que implican la proteína cinasa asociada a microtúbulos (cinasa MAP) y la fosfatidilinositol 3-cinasa (cinasa PI3). Se ha mostrado que la activación de estas vías da lugar a la proliferación celular y a la inhibición de la apoptosis. Se ha mostrado que la inhibición de la señalización de la cinasa HER inhibe la proliferación y la supervivencia celular.

La desregulación de los receptores del EGF desempeña una función en el crecimiento aberrante de quistes epiteliales en la enfermedad descrita como enfermedad de riñón poliquístico [Du, J., Wilson, P. D., Amer. J. Physio., 269 (2 Pt 1), 487 (1995); Nauta, J., y col., Pediatric Research, 37 (6), 755 (1995); Gattone, V. H. y col., Developmental Biology, 169 (2), 504 (1995); Wilson, P. D. y col., Eur. J. Cell Biol., 61 (1), 131, (1993)]. Los compuestos de la presente invención, que inhiben la función catalítica de los receptores del EGF, son, por consiguiente, útiles para el tratamiento de esta enfermedad.

La vía de la proteína cinasa activada por mitógenos (MAPK) es una vía importante en la cascada de transducción de señales celulares de los factores de crecimiento al núcleo de la célula. La vía implica cinasas en dos niveles: cinasas de cinasa MAP (MAPKK) y sus sustratos cinasas MAP (proteína activada por mitógenos) (MAPK). Hay diferentes isoformas en la familia de cinasas MAP. [Para una revisión, véase Seger, R.; Krebs, E. G. FASEB, 9, 726, (1995)]. Los compuestos de la presente invención pueden inhibir la acción de una o ambas de estas cinasas: MEK, una cinasa de cinasa MAP y su sustrato ERK, una cinasa de MAP. Se ha encontrado que ERK (cinasas reguladas extracelulares), una p42 MAPK, es esencial para la diferenciación y la proliferación celular. Se ha encontrado que la sobreexpresión y/o la sobreactivación de MEK o ERK están asociadas con varios tipos de cáncer humanos [Por ejemplo, Sivaraman, V. S. y col., C. C. J. Clin. Invest., 99, 1478 (1997)]. Se ha demostrado que la inhibición de MEK que impide la activación de ERK y la posterior activación de los sustratos ERK en las células, dando como resultado la inhibición de la estimulación del crecimiento celular y reversión del fenotipo de las células transformadas con ras [Dudley, D. T. y col., Proc. Nat. Acad. Sci., 92, 7686 (1995)].

Los miembros de la familia de cinasas raf fosforilan residuos de serina en MEK. Hay tres miembros serina/treonina cinasa de la familia de raf conocidos como a-raf, b-raf y c-raf. Aunque las mutaciones en los genes de raf son raras en los cánceres humanos, c-raf se activa mediante el oncogén ras, que está mutado en un gran número de tumores humanos. Por lo tanto, la inhibición de la actividad de cinasa de c-raf puede proporcionar una manera de prevenir el crecimiento de los tumores mediado por ras [Campbell, S. L., Oncogene, 17, 1395 (1998)].

La familia de proteínas tirosina cinasas citoplasmáticas Src consiste en al menos ocho miembros (Src, Fyn, Lyn, Yes, Lck, Fgr, Hck y Blk) que participan en una diversidad de vías de señalización [Schwartzberg, P. L., Oncogene, 17, 1463 (1998)]. El miembro prototipo de esta familia de tirosina cinasas es p60^{src} (Src). Src está implicado en la proliferación y en las respuestas de migración en muchos tipos de células. En estudios limitados, se ha demostrado que la actividad de Src es elevada en tumores de mama, de colon (aproximadamente el 90%), pancreáticos (> 90%) y de hígado (> 90%). Un gran aumento de actividad de Src también se asocia con metástasis (> 90%) y mal pronóstico. El mensaje antisentido de Src impide el crecimiento de las células tumorales de colon en ratones atímicos [Staley y col., Cell Growtlz & Differentation, 8, 269 (1997)], lo que sugiere que los inhibidores de Src deben desacelerar el crecimiento tumoral. Además de su papel en la proliferación celular, Src también actúa en las vías de respuesta al estrés, incluyendo la respuesta a la hipoxia. Estudios anteriores han mostrado que las células de tumores de colon producidas por ingeniería genética para que expresen el mensaje antisentido de Src forman tumores que demuestran vascularización reducida en modelos de ratón atímico [Ellis, y col., J. Biol. Chem., 273,1052 (1998)], lo que sugiere que los inhibidores de Src podrían ser antiangiogénicos, así como antiproliferativos.

Aparte de su papel en el cáncer, Src también parece desempeñar un papel en la osteoporosis. Se ha encontrado que los ratones producidos por ingeniería genética para que tengan deficiente producción de src presentan osteopetrosis, resorción ósea insuficiente [Soriano, P., Cell, 64, 693 (1991); Boyce, B. F., J. Clin. Invest., 90, 1622 (1992)]. Este defecto se caracterizó por la falta de actividad de los osteoclastos. Puesto que los osteoclastos expresan normalmente altos niveles de Src, la inhibición de la actividad de cinasa de Src puede ser útil en el tratamiento de la osteoporosis [Missbach, M., Bone, 24, 437 (1999)].

Además del EGFr, hay varios otros RTK incluyendo el FGFr, el receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF); flk-1, también conocido como KDR y flt-1, los receptores para el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF); y PDGFr, el receptor para el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF). La formación de nuevos vasos sanguíneos, un proceso conocido como angiogénesis, es esencial para el crecimiento tumoral. Los dos inhibidores naturales de la angiogénesis, la angiostatina y la endostatina, inhibieron drásticamente el crecimiento de una diversidad de tumores sólidos. [O'Reilly, M. S., Cell, 79, 315 (1994); O'Reilly, M. S., Nature Medicine, 2, 689 (1996); O'Reilly, M. S., Cell, 88, 277 (1997)]. Mientras que se sabe que FGF y VEGF estimulan la angiogénesis, la inhibición de la actividad de cinasa de sus receptores debería bloquear los efectos angiogénicos de estos factores de crecimiento. Además, los receptores tirosina cinasa tie-1 y tie-2 también desempeñan un papel fundamental en la angiogénesis [Sato, T. N., Nature, 376, 70 (1995)]. Los compuestos que inhiben la actividad de cinasa de FGFr, flk-1, flt-1, tie-1 o tie-2 pueden inhibir el crecimiento de los tumores por su efecto sobre la angiogénesis.

PDGF es un potente factor de crecimiento y quimioatrayente para las células de músculo liso (SMC), y el estrechamiento de las arterias coronarias después de la angioplastia se debe en parte a la proliferación aumentada de las SMC en respuesta a los niveles elevados de PDGF. Por consiguiente, los compuestos que inhiben la actividad de cinasa de PDGFr pueden ser útiles en el tratamiento de la reestenosis. Además, ya que PDGF y PDGFr se sobreexpresan en varios tipos de gliomas humanos, moléculas pequeñas capaces de suprimir la actividad de PDGFr tienen potencial utilidad como terapia contra el cáncer [Nister, M., J. Biol. Chem., 266, 16755 (1991); Strawn, L. M., J. Biol. Chem. 269, 21215 (1994)].

Además, un gran número de citocinas participan en la respuesta inflamatoria, incluyendo IL-1, IL-6, IL-8 y TNF-\alpha. La sobreproducción de citocinas, tales como IL-1 y TNF-\alpha está implicada en una gran diversidad de enfermedades, incluidas la enfermedad intestinal inflamatoria, la artritis reumatoide, la psoriasis, la esclerosis múltiple, el choque por endotoxinas, la osteoporosis, la enfermedad de Alzheimer y la insuficiencia cardiaca congestiva, entre otras [Henry y col., Drugs Fut., 24: 1345-1354 (1999); Salituro y col., Curr. Med. Chem., 6: 807-823 (1999)]. Pruebas en pacientes humanos indican que los antagonistas proteicos de las citoquinas son eficaces en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas, tales como el anticuerpo monoclonal contra TNF-\alpha (Enbrel) [Rankin y col., Br. J. Rheumatol., 34: 334-342 (1995) ], y la proteína de fusión receptor soluble de TNF-\alpha-Fc (Etanercept) [Moreland y col. , Ann. Intern. Med., 130: 478-486 (1999)].

La biosíntesis de TNF-\alpha se produce en muchos tipos de células en respuesta a un estímulo externo, como un mitógeno, un organismo infeccioso o un trauma. Importantes mediadores de la producción de TNF-\alpha son las proteína cinasas activadas por mitógenos (MAP) y en particular, la p38 cinasa. Estas cinasas se activan en respuesta a diversos estímulos de estrés, incluidos, pero no limitados a, citocinas proinflamatorias, endotoxinas, luz ultravioleta y choque osmótico. La activación de p38 requiere la fosforilación dual por cinasas de cinasa MAP aguas arriba (MKK3 y MKK6) en treonina y tirosina dentro de un motivo Thr-Gly-Tyr característico de las isoenzimas de p38.

Hay cuatro isoformas conocidas de p38, es decir, p38-\alpha, p38\beta, p38\gamma y p38\delta. Las isoformas \alpha y \beta se expresan en las células inflamatorias y son mediadores clave de la producción de TNF-\alpha. La inhibición de las enzimas p38\alpha y \beta en las células da como resultado la reducción de los niveles de expresión de TNF-\alpha. También, la administración de inhibidores de p38\alpha y \beta en modelos animales de enfermedad inflamatoria ha demostrado que estos inhibidores son eficaces en el tratamiento de esas enfermedades. Por consiguiente, las enzimas p38 cumplen una función importante en procesos inflamatorios mediados por IL-1 y TNF-\alpha. Los compuestos que al parecer inhiben la p38 cinasa y las citocinas, tales como IL-1 y TNF-\alpha para su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias se dan a conocer en las siguientes solicitudes de patentes internacionales publicadas: WO 00/12497 (derivados de quinazolina como inhibidores de p38 cinasa); WO 00/56738 (derivados de piridina y pirimidina para la misma finalidad); WO 00/12497 (analiza la relación entre los inhibidores de p38 cinasa); y WO 00/12074 (compuestos de piperazina y piperidina útiles como inhibidores de p38).

En resumen, la estricta regulación de la transducción de señales que normalmente ejerce la matriz de enzimas cinasa a menudo se pierde en las células neoplásicas. Los compuestos que modulan estas cinasas son por consiguiente muy deseables para el tratamiento de trastornos asociados con la proliferación celular aberrante. Además, los compuestos que modulan las citocinas asociadas con la respuesta inflamatoria son muy deseables para el tratamiento de trastornos inflamatorios.

El documento EP 1 085 021 describe compuestos de pirrolo-piridazina para el tratamiento del choque séptico, del síndrome de insuficiencia respiratoria del adulto, del asma, de la psoriasis, etc. que tienen un sustituyente que contiene ácido (o éster) en posición 4 y un sustituyente que contiene amida (o hidrazida) en posición 5 del anillo pirrolo-piridazina, y en particular los compuestos con la siguiente estructura:

1

Resumen de la invención

De manera ventajosa, la presente invención proporciona composiciones y procedimientos para el tratamiento de trastornos proliferativos, que incluyen el cáncer y enfermedades inflamatorias. Los procedimientos comprenden la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de cinasas de fórmula I, a continuación, o una de sus sales, solvatos, o estereoisómeros y, opcionalmente, al menos un agente terapéutico adicional. El tratamiento se administra de preferencia a una especie de mamífero, de más preferencia a un ser humano, que lo necesite.

Más concretamente, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I:

2

incluidos sus enantiómeros, diastereómeros, sales y solvatos farmacéuticamente aceptables, en la que:

R_{1} se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, aralquilo, halógeno, OR_{1}', OC(O)R_{1}', OC(O)OR_{1}', OC(O)NR_{1}'R_{1}'', OS(O)_{2}R_{1}''' y OS(O)_{2}NR_{1}'R_{1}''; en la que R_{1}' y R_{1}'' se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en grupos H, alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo y cicloalquilo; R_{1}' y R_{1}'' pueden también tomarse juntos para formar uno de un cicloalquilo, un arilo y un grupo heterocíclico; R_{1}''' se selecciona del grupo que consiste en alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo y cicloalquilo;

R_{2} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R_{1}'OC(O),
R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}'''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S; en el que n es el número entero seleccionado de 1 o 2;

R_{1} y R_{2} pueden tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico;

X se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{2}'; y R_{2}' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, C(O)R_{1}, C(O)OR_{1}, SO_{2}NR_{1}'R_{1}'', C(O)NR_{1}'R_{1}'' y SO_{2}R_{1}'''; con la condición de que cuando X es S, R_{2} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo;

R_{3} se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, carbalcoxi, carboxamido, halógeno, amina, amina sustituida, OR_{3}', CH_{2}OR_{3}', CH_{2}NR_{3}'R_{3}'', CH_{2}SR_{3}', OC(O)R_{3}',
OC(O)OR_{3}'', OC(O)NR_{3}'R_{3}'', OS(O)_{2}R_{3}' y OS(O)_{2}NR_{3}'R_{3}''; en los que R_{3}' y R_{3}'' se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo y arilo; R_{3}' y R_{3}'' pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico; cuando R_{3} es un grupo carbalcoxi, acilo o carboxamido, estos grupos están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, dichos grupos sustituyentes se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo y arilo; dichos grupos sustituyentes pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocícliclo;

R_{2} y R_{3} pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico;

R_{4} se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S, en el que n es el número entero seleccionado de 1 o 2;

Y se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{4}'; R_{4}' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, un heterociclo, C(O)R_{1}, C(O)OR_{1}, S(O2)NR_{1}'R_{1}'', C(O)NR_{1}'R_{1}'' y S(O2)R_{1}; con la condición de que cuando Y es S, R_{4} se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; cuando Y es NR_{4}', R_{4}' puede tomarse junto con R_{3} para formar un sistema de anillo heterocíclico;

R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, ciano, alquilo, cicloalquilo, un grupo heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, alquileno sustituido, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}'''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S; en el que n es 1 o 2;

Z se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{5}'; R_{5}' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo y un heterociclo; con la condición de que cuando Z es un enlace de valencia, R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, un grupo alquileno sustituido y un grupo ciano; y, con la otra condición de que cuando Z es S, R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; y

R_{6} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, aralquilo, un heterociclo, acilo, carbalcoxi y carboxamido; dichos grupos carbalcoxi, acilo y carboxamido están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, cada uno de los cuales se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo y un heterociclo.

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Además se proporcionan composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula I, anterior, o una de sus sales, solvatos o estereoisómeros, y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable. De manera opcional, la composición farmacéutica puede también comprender al menos un agente terapéutico adicional.

También se proporcionan usos en la fabricación de medicamentos para tratar las enfermedades proliferativas o inflamatorias, en pacientes que lo necesiten, de un compuesto de fórmula I, anterior, o una de sus sales, solvatos o estereoisómeros, y, opcionalmente, al menos un agente terapéutico adicional.

Descripción detallada de la invención Definiciones

Se aplicarán las siguientes definiciones para los términos que se utilizan a lo largo de esta memoria descriptiva, a menos que estén limitados de otra manera en casos específicos.

A menos que se indique de otra manera, los términos "alquilo inferior", "alquilo" o "alq" según se utilizan en el presente documento, solos o en forma combinada, por ejemplo, aralquilo o haloalquilo, incluyen tanto hidrocarburos de cadena lineal como ramificada, que contienen de preferencia 1 a 12 átomos de carbono en el caso de alquilo o alq, en la cadena normal, y de preferencia 1 a 4 átomos de carbono en el caso de alquilo inferior. Ejemplos de grupos alquilo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo o isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4-dimetilpentilo, octilo, 2,2, 4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, y similares. Cada grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido con 1 a 4 sustituyentes que pueden incluir alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, halógeno, heterociclo, hidroxi, ciano, nitro, amino, monoalquilamino, dialquilamino, hidroxilamina, sulfonato, sulfamida, ciano-guanidina, oxo, carbalcoxi, carboxamido, SO_{n} donde n es 0, 1 o 2, y/o grupos acilo.

A menos que se indique de otra manera, el término "cicloalquilo" según se utiliza en el presente documento, solo o en forma combinada incluye grupos hidrocarburo clíclicos saturados o parcialmente insaturados (que contienen 1 o 2 enlaces dobles), grupos hidrocarburo cíclicos, que contienen al menos un anillo y un total de 3 a 7 átomos de carbono, de preferencia de 3 a 6 átomos de carbono, formando el anillo. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, y similares. Los grupos cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos de la misma manera que se describió anteriormente para los grupos alquilo.

El término "arilo" según se utiliza en el presente documento, solo o en forma combinada, por ejemplo, ariloxi, se refiere a grupos aromáticos monocíclicos y bicíclicos que contienen de 6 a 10 átomos de carbono en la parte del anillo, tales como fenilo, indenilo, indanilo o naftilo, incluidos 1-naftilo y 2-naftilo, y similares. Los grupos arilo pueden estar opcionalmente sustituidos a través de los átomos de carbono disponibles con 1, 2 o 3 grupos seleccionados de hidrógeno, halo, alquilo, cicloalquilo, aralquilo, heterociclo, haloalquilo, alcoxi, ariloxi, haloalcoxi, alquenilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquinilo, hidroxi, amino, nitro, ciano, carbalcoxi, acilo, hidroxilamina, sulfonato, sulfamida, ciano-guanidina, SO_{n} donde n es 0, 1 o 2, grupos carboxamido, o amino monosustituido, o amino disustituido, en los que los sustituyentes de amino son independientemente grupos alquilo, aralquilo, arilo, acilo o carbalcoxi.

El término "aralquilo" según se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo arilo, como se definió anteriormente, unido directamente a través de un resto alquilo, tal como un grupo bencilo, por ejemplo. Un grupo aralquilo puede estar opcionalmente sustituido con cualquier grupo descrito en el presente documento como un sustituyente arilo o alquilo.

A menos que se indique de otra manera, el término "alquenilo inferior" o "alquenilo" según se utiliza en el presente documento en sí mismo o en forma combinada, se refiere a radicales de cadena lineal o ramificada de 2 a 12 átomos de carbono, de preferencia de 2 a 5 átomos de carbono, en la cadena normal, que incluyen de uno a seis enlaces dobles en la cadena normal, tales como vinilo, 2-propenilo, 3-butenilo, 2-butenilo, 4-pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 2-heptenilo, 3-heptenilo, 4-heptenilo, 3-octenilo, 3-nonenilo, 4-decenilo, 3-undecenilo, 4-dodecenilo, y similares, que pueden estar opcionalmente sustituidos de la misma manera que se describió para los grupos alquilo.

A menos que se indique de otra manera, el término "alquinilo inferior" o "alquinilo" según se utiliza en el presente documento en sí mismo o en forma combinada, se refiere a radicales de cadena lineal o ramificada de 2 a 12 átomos de carbono, de preferencia de 2 a 8 átomos de carbono, en la cadena normal; que incluyen un enlace triple en la cadena normal, tales como 2-propinilo, 3-butinilo, 2-butinilo, 4-pentinilo, 3-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, 2-heptinilo, 3-heptinilo, 4-heptinilo, 3-octinilo, 3-noninilo, 4-decinilo, 3-undecinilo, 4-dodecinilo y similares, que pueden estar opcionalmente sustituidos de la misma manera que se describió para los grupos alquilo.

La cadena de carbonos normal de cualquier grupo alquilo, alquenilo, alquinilo o aralquilo puede estar opcionalmente interrumpida por uno o más heteroátomos.

Según se utiliza en el presente documento, el término "acilo" se refiere a un grupo de la fórmula C(O)R, en el que R representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo arilo, un heterociclo o un grupo aralquilo.

Según se utiliza en el presente documento, el término "carbalcoxi" se refiere a un grupo de la fórmula C(O)OR, en el que R representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo arilo, un heterociclo o un grupo aralquilo.

Según se utiliza en el presente documento, el término "carboxamido" se refiere a un grupo de la fórmula C(O)NR_{2}, en el que los grupos R, que pueden ser iguales o diferentes, representan un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo arilo, un heterociclo o un grupo aralquilo. Como alternativa, los dos grupos R, cuando se toman juntos con el átomo de nitrógeno, pueden formar un grupo heterocíclico.

Los términos "heterociclo" y "heterocíclico" según se utilizan en el presente documento, se refieren a un grupo clíclico aromático o no aromático, opcionalmente sustituido, que, por ejemplo, es un sistema de anillos monocíclico de 4 a 7 miembros, bicíclico de 7 a 11 miembros o tricíclico de 10 a 15 miembros, que tiene al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene átomos de carbono. Cada anillo del grupo heterocíclico que contiene un heteroátomo puede tener 1, 2, 3 o 4 heteroátomos seleccionados de átomos de nitrógeno, de átomos de oxígeno y de átomos de azufre, donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre también pueden estar opcionalmente oxidados y los heteroátomos de nitrógeno también pueden estar opcionalmente cuaternizados. El grupo heterocíclico puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono.

Ejemplos de grupos heterocíclicos monocíclicos adecuados incluyen pirrolidinilo, pirrolilo, pirazolilo, oxetanilo, pirazolinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolinilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, furilo, tetrahidrofurilo, tienilo, oxadiazolilo, piperidinilo, piperazinilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, 2-oxazepinilo, azepinilo, 4-piperidonilo, piridilo, N-oxo-piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, tetrahidrotiopiranilo, tetrahidropiranilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, sulfóxido de tiamorfolinilo, tetrahidrotiopiranilsulfona, tiamorfolinil sulfona, 1,3-dioxolano y tetrahidro-1,1-dioxotienilo, dioxanilo, isotiazolidinilo, tietanilo, tiiranilo, triazinilo, triazolilo, y similares.

Ejemplos de grupos heterocíclicos bicíclicos adecuados incluyen indolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, benzotienilo, quinuclidinilo, quinolinilo, quinolinil-N-óxido, tetrahidroisoquinolinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, benzopiranilo, indolizinilo, benzofurilo, cromonilo, coumarinilo, cinnolinilo, quinoxalinilo, indazolilo, pirrolopiridilo, furopiridinilo (tal como furo[2,3-c]piridinilo, furo[3,1-b]piridinilo] o furo[2,3-b]piridinilo), dihidroisoindolilo, dihidroquinazolinilo (tal como 3,4-dihidro-4-oxo-quinazolinilo), bencisotiazolilo, bencisoxazolilo, benzodiazinilo, benzofurazanilo, benzotiopiranilo, benzotriazolilo, benzpirazolilo, dihidrobenzofurilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzotiopiranilo, dihidrobenzotiopiranil sulfona, dihidrobenzopiranilo, indolinilo, isocromanilo, isoindolinilo, nafthiridinilo, ftalazinilo, piperonilo, purinilo, piridopiridilo, quinazolinilo, tetrahidroquinolinilo, tienofurilo, tienopiridilo, tienotienilo, benzoxodiazol, benzotiodiazol, y similares.

En formas de realización de preferencia, al menos uno de los heteroátomos en el heterociclo es un átomo de nitrógeno.

Ejemplos de sustituyentes adecuados para grupos heterocíclicos incluyen uno o más grupos alquilo como se describió anteriormente o uno o más grupos descritos anteriormente como sustituyentes de alquilo o arilo. También son adecuados los grupos arilo y heterociclos más pequeños, tales como epóxidos y aziridinas.

El término "heteroátomo" según se utiliza en el presente documento, incluye oxígeno, azufre y nitrógeno, donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden también opcionalmente estar oxidados y los heteroátomos de nitrógeno pueden también opcionalmente estar cuaternizados.

El término "halógeno" o "halo" según se utiliza en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo.

Según se utiliza en el presente documento, la expresión "opcionalmente sustituido", como en "alquilo inferior opcionalmente sustituido", "arilo opcionalmente sustituido" o similares, se refiere un alquilo, arilo y a otros grupos que pueden estar insustituidos o sustituidos con los sustituyentes mencionados anteriormente. Además, cuando en el presente documento se describe un resto como opcionalmente sustituido con más de un sustituyente, se entiende que cada uno de los múltiples sustituyentes puede elegirse independientemente entre los sustituyentes mencionados anteriormente.

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Compuestos de la invención

De acuerdo con la presente invención, se proporcionan compuestos que tienen la fórmula I, siguiente.

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3

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En los compuestos de fórmula I, R_{1} se selecciona de H, hidroxilo, alquilo, aralquilo, halógeno, OR_{1}', OC(O)R_{1}', OC(O)OR_{1}', OC(O)NR_{1}'R_{1}'', OS(O)_{2}R_{1}''' y OS(O)_{2}NR_{1}'R_{1}''. Los grupos R_{1}' y R_{1}'' pueden ser cada uno independientemente H, alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo o grupos cicloalquilo, o pueden tomarse juntos para formar un cicloalquilo, arilo o un grupo heterocíclico, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

El grupo R_{1}''' es H, alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo o un grupo cicloalquilo.

El R_{2} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R_{1}'OC(O),
R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}'''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S donde n es un número entero seleccionado de 1 o 2.

R_{1} y R_{2}, cuando se toman juntos pueden formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

El grupo X representa un enlace de valencia, O, S y NR_{2}, y R_{2}' es H, alquilo o aralquilo, C(O)R_{1}, C(O)OR_{1}, SO_{2}NR_{1}'R_{1}'', C(O)NR_{1}'R_{1}'', SO_{2}R_{1}'''. Con la limitación de que cuando X es S, entonces R_{2} sólo puede seleccionarse de H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo.

R_{3} se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, un heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, carbalcoxi, carboxamido, halógeno, amina, amina sustituida, OR_{3}', CH_{2}OR_{3}', CH_{2}NR_{3}'R_{3}'', CH_{2}SR_{3}', OC(O)R_{3}', OC(O)OR_{3}'', OC(O)NR_{3}'R_{3}'', OS(O)_{2}R_{3}' y OS(O)_{2}NR_{3}'R_{3}''. Los grupos R_{3}' y R_{3}'' son cada uno independientemente H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo o arilo. R_{3}' y R_{3}'', cuando se toman juntos, pueden formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

Cuando R_{3} es un grupo carbalcoxi, acilo o carboxamido, estos grupos están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, cada uno de los cuales es independientemente H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo o arilo. Los grupos sustituyentes, cuando se toman juntos, pueden formar un grupo un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

Los grupos R_{2} y R_{3} pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico, cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido.

El grupo R_{4} se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}'''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S donde n es un número entero seleccionado de 1 o 2.

Y se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{4}', R_{4}' se selecciona de H, alquilo, aralquilo, un heterociclo, C(O)R_{1}, C(O)OR_{1}, S(O_{2})NR_{1}'R_{1}'', C(O)NR_{1}'R_{1}'' y S(O_{2})R_{1}. Con la limitación de que cuando Y es S, entonces R_{4} puede seleccionarse sólo de alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo.

Además, cuando Y es una amina primaria o secundaria, puede tomarse junto con R_{3} para formar un sistema de anillos heterocíclico que puede estar opcionalmente sustituido.

R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, ciano, alquilo, cicloalquilo, un grupo heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, alquileno sustituido, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S donde n es un número entero seleccionado de 1 o 2.

Z se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{5}', con las condiciones de que cuando Z es un enlace de valencia, entonces R_{5} puede seleccionarse sólo de H, halógeno, un grupo alquileno sustituido o un grupo ciano y cuando Z es S, entonces R_{5} puede seleccionarse sólo de H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo. El grupo R_{5}' es H, alquilo, aralquilo o un heterociclo.

Finalmente, R_{6} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, aralquilo, un heterociclo, acilo, carbalcoxi y carboxamido. Los grupos carbalcoxi, acilo y carboxamido están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, cada uno de los cuales es independientemente H, alquilo, aralquilo o un heterociclo.

También están incluidos en la invención las sales, los solvatos y los estereoisómeros, enantiómeros y diastereoisómeros de los compuestos de fórmula I.

Están contemplados todos los estereoisómeros de los compuestos de fórmula I, ya sea en forma de mezcla o puros, o sustancialmente puros. Un compuesto de fórmula I puede tener centros de asimetría en cualquiera de sus átomos de nitrógeno o de carbono no aromáticos, incluidos los átomos de carbono en cualquiera de sus sustituyentes. Por consiguiente, los compuestos de fórmula I pueden existir en formas enantioméricas o diastereoméricas o en mezclas de las mismas. Los procedimientos para la preparación pueden utilizar racematos, enantiómeros o diastereómeros como materiales de partida. Cuando se preparan productos diastereoméricos o enantioméricos, pueden separarse por medio de procedimientos convencionales, por ejemplo, cromatográficos o de cristalización fraccionada.

Los compuestos de preferencia de la invención son compuestos de fórmula I en los que Z es un enlace de valencia y R_{5} es ciano.

En algunas formas de realización de preferencia, R_{3} es un alquilo, arilo o heteroarilo, y es de preferencia metilo.

En algunas formas de realización de preferencia, Y es N. En otras formas de realización más, X es un enlace de valencia, O o NR_{2}'. R_{2}' es de preferencia R_{1}'C(O) o -C(O)NR_{1}'R_{2}' o -C(O)OR_{1}'.

De acuerdo con algunas formas de realización de la presente invención, R_{1}' y R_{1}'' son independientemente alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo.

Otros compuestos de preferencia son los compuestos de fórmula I en los que R_{4} es fenoxianilina. También son de preferencia los compuestos de fórmula I en los que Y es NR_{4}' en el que R_{4}' es como se definió anteriormente, o en los que Y es O y R_{4} es un grupo arilo o heteroarilo.

Otros compuestos de preferencia de la invención son los compuestos de fórmula I en los que Z es un enlace de valencia, R_{5} es ciano y R_{3} es metilo. De preferencia, estos compuestos tienen uno o más de los siguientes sustituyentes: Y es N; R_{1}' y R_{1}'' son independientemente alquilo, cicloalquilo o heterocicloalquilo; R_{4} es alquilo, arilo o heteroarilo; X es un enlace de valencia, O o NR_{2}'; y R_{2} es R_{1}'C(O), -(C(O)NR_{1}'R_{2}', o -C(O)OR_{1}'.

Otros compuestos de preferencia de fórmula I incluyen aquellos en los que Z es un enlace de valencia, R_{5} es ciano, Y es NR_{4}' en el que R_{4}' es como se definió anteriormente y R_{4} es un grupo fenilo o un grupo heteroarilo con una o más sustituciones.

Otros compuestos de preferencia se ilustran en los ejemplos a continuación.

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Procedimientos para producir los compuestos

En general, los compuestos de fórmula I pueden producirse haciendo reaccionar un pirrol de fórmula II:

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en la que X, R_{1}, R_{2} y R_{3} son como se definieron anteriormente, con un agente de aminación en presencia de una base para producir el pirrol aminado de fórmula III:

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en la que X, R_{1}, R_{2} y R_{3} son como se definieron anteriormente.

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El compuesto de fórmula III se hace reaccionar con un carbonilo de fórmula R_{6}C(O)CH_{2}ZR_{5} o un acetal de la fórmula (RO)_{2}CR_{6}CH_{2}ZR_{5}, en la que R es un grupo alquilo y Z, R_{5} y R_{6} son como se definieron anteriormente, bajo condiciones de cierre del anillo para producir un compuesto de fórmula IV.

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Las 4-oxo-pirrolopiridazinas de fórmula IV pueden hacerse reaccionar con un reactivo que proporciona un grupo saliente, tal como POCl_{3} o POCl_{5}, para dar un compuesto de fórmula V

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en la que L es un grupo saliente.

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El compuesto de fórmula V puede hacerse reaccionar con un compuesto de la fórmula HYR_{4}, en la que Y y R_{4} son como se definieron anteriormente, para producir un compuesto de fórmula I, anterior.

Los compuestos de fórmula I pueden prepararse mediante los procedimientos que se describen en los siguientes esquemas de reacciones. Ejemplos de reactivos y procedimientos adecuados para llevar a cabo estas reacciones aparecen en lo sucesivo y en los ejemplos de trabajo. La protección y desprotección en los esquemas en el presente documento podrán realizarse por medio de procedimientos generalmente conocidos en la técnica. (Véase, por ejemplo, T. W. Greene & P. G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, 3ª Edición, Wiley, (1999)). En los esquemas A a D, a menos que se indique de otro modo, X, Y, Z, R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son como se definieron anteriormente. Las variables L y L' representan grupos salientes. Las variables designadas con el sufijo "a" o "b" tienen el mismo alcance que, pero se eligen independientemente de, su variable original. Por ejemplo, R_{2a}, R_{2a}' y R_{2a}'' tienen el mismo alcance, pero no son necesariamente idénticas a, R_{2}, R_{2}' y R_{2}'', respectivamente.

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Esquema A

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Los pirroles de fórmula II pueden obtenerse por medio de los procedimientos descritos en el Tratado de cooperación en materia de patentes (PCT) número de publicación WO 00/71129, Solicitud de patente de Estados Unidos (EEUU) en trámite número de serie US 09/573829, Solicitud de publicación PCT en trámite número US 01/49982 y la Solicitud de patente de EEUU en trámite número de serie US 10/036293.

El tratamiento de un pirrol de fórmula II con una base en un medio de reacción adecuado seguido por la adición de un reactivo de aminación genera un aminopirrol de fórmula III. Las bases adecuadas incluyen hidruro de sodio (NaH), n-BuLi, t-BuLi, NaOH, diisopropilamida de litio (LDA) y hexametildisilazida de litio (LiHMDS). Los medios de reacción adecuados incluyen tetrahidrofurano (THF), CH_{2}Cl_{2}, dimetilformamida (DMF), CH_{3}CN y tolueno. Los reactivos de aminación adecuados incluyen 2,4-dinitroaminofenol, NH_{2}OSO_{3}H y ClNCH_{2}. De preferencia, el reactivo de aminación es ClNH_{2} o 2,4-dinitroaminofenol. De preferencia, la base es NaH o LDA, el medio de reacción es DMF o THF. De más preferencia, la base es NaH, el medio de reacción es DMF y el reactivo de aminación es 2, 4-dinitroaminofenol.

La condensación del compuesto de fórmula III con un acetal seguida por la ciclación inducida por bases en un medio de reacción adecuado proporciona una pirrolopiridazina de fórmula IV. Las bases adecuadas incluyen NaOH, LDA, diisopropiletilamina (DIPEA), 1,8-diazobiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) y K_{2}CO_{3}. Los medios de reacción adecuados incluyen THF, CH_{2}Cl_{2}, DMF y tolueno. De preferencia, la base es DBU, DIPEA o LDA y el medio de reacción es tolueno o DMF. De más preferencia, la base es DBU o DIPEA, y el medio de reacción es tolueno. Como alternativa, los compuestos de fórmula IV pueden obtenerse mediante las reacciones de los siguientes Esquemas H, J y K.

La conversión del grupo oxo en la posición 4 del compuesto de fórmula IV a un grupo saliente L, como en los compuestos de fórmula V, se puede lograr, a continuación, utilizando un reactivo de halogenación adecuado, tal como SOCl_{2}, POCl_{3} o POCl_{5}. De más preferencia, el reactivo es POCl_{3}.

El tratamiento de un compuesto de fórmula V con un reactivo de fórmula HY-R_{4} en presencia de una base en un medio de reacción proporciona a continuación compuestos de fórmula VI, que son compuestos de fórmula I en la que R_{6} es H. Las bases adecuadas incluyen NaH, Et_{3}N, DIPEA, K_{2}CO_{3} o Na_{2}CO_{3} y los medios de reacción adecuados incluyen THF, DMF, CH_{2}Cl_{2} o CH_{3}CN. De preferencia, la base es NaH, Et_{3}N o K_{2}CO_{3} y el disolvente es CH_{3}CN o DMF. De más preferencia, la base es trietilamina y el medio de reacción es acetonitrilo.

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Esquema B

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Los compuestos de fórmula VIa, que son compuestos de fórmula VI en la que X es un enlace de valencia, R_{2} representa CO_{2}R_{2}', ZR_{5} representa CN y R_{6} representa hidrógeno, pueden saponificarse con una base para preparar ácidos carboxílicos de fórmula VII como se muestra anteriormente en el Esquema B. Las bases adecuadas son NaOH, KOH, LiOH y Ba(OH)_{2}. De preferencia, la base es un hidróxido de metal alcalino. De más preferencia, la base es NaOH.

Los compuestos de fórmula VIII, que son compuestos de fórmula VI en la que R_{2}X es R_{2a}'R_{2a}''NC(O), ZR_{5} representa CN y R_{6} representa hidrógeno, pueden prepararse a través del tratamiento de compuestos de fórmula VII con un reactivo de acoplamiento y una amina de fórmula NH_{2}R_{2a}'R_{2a}'' en un medio de reacción. Los agentes de acoplamiento adecuados incluyen PyBOP [hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirrolidino-fosfonio], BOP [hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino) fosfonio], CDI (N,N'-carbonildiimidazol), DCC (N,N'-diciclohexilcarbodiimida), HBTU [hexafluorofosfato de O-benzotriazol-1-il-N,N,N',N'-tetrametiluronio], HOAt (1-hidroxi-7-azabenzotriazol) y HOBt (1-hidroxibenzotriazol) y EDC [1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida]. De preferencia, el reactivo de acoplamiento es HOBt, PyBOP o EDC. De más preferencia, el reactivo de acoplamiento es HOBt o PyBOP.

Los compuestos de fórmula IX, que son compuestos de fórmula VI en la que XR_{2} es R_{2a}'OC(O), ZR_{5} representa CN y R_{6} representa hidrógeno, pueden prepararse a través del tratamiento de un compuesto de fórmula VII con un ácido o una base y un alcohol de la fórmula R_{2a}'OH. Los ácidos adecuados incluyen HCl, H_{2}SO_{4}, TsOH, ácido 10-canforsulfónico (CSA) y p-toluenosulfonatos de piridinio (PPTs). De más preferencia, el ácido es ácido clorhídrico.

Los compuestos de fórmula X, que son compuestos de fórmula VI en la que XR_{2} es R_{2a}'OC(O)NR_{2a}'', ZR_{5} representa CN y R_{6} representa hidrógeno, pueden prepararse a través del tratamiento de compuestos de fórmula VII con un reactivo de azidación, es decir, una fuente de N_{3}, seguido por la adición de un alcohol de fórmula R_{2a}'OH. Los reactivos de azidación adecuados incluyen difenilfosforilazida (DPPA) y NaN_{3}. De preferencia, el reactivo es DPPA.

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Esquema C

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Como se muestra en el Esquema C, los compuestos de fórmula XII, que son compuestos de fórmula I en la que XR_{2} es NH(R_{2a}')_{2}, pueden prepararse a través de compuestos de fórmula X en los que el resto carbalcoxi del compuesto de fórmula X funciona como un grupo protector eliminable. El compuesto intermedio de fórmula XI puede prepararse eliminando el resto carbalcoxi del compuesto de fórmula X. De preferencia, el grupo carbalcoxi será un t-butoxicarbonilo (BOC) o benciloxicarbonilo (Cbz o Z). Las condiciones adecuadas para eliminar estos y otros grupos protectores se dan a conocer en Green and Wuts, supra. De preferencia, la reacción de desprotección es una reacción de escisión con ácido o una reacción de hidrogenación.

Los compuestos de fórmula XII son el resultado de la aminación reductora de compuestos de fórmula XI usando un aldehído de fórmula R_{2a}'CHO y un agente reductor en un medio de reacción adecuado. Los agentes reductores adecuados incluyen NaBH_{4}, LiBH_{4}, hidruro de diisobutilaluminio (DIBAL-H), hidruro de litio y aluminio (LAH) y NaBH(OAc)_{3}. De preferencia, el agente reductor es NaBH(OAc)_{3} o NaBH_{4}. De más preferencia, el agente reductor es NaBH(OAc)_{3}. Los medios de reacción adecuados incluyen 1,2-dicloroetano, CH_{2}Cl_{2}, THF y CH_{3}CN. Los medios de reacción de preferencia incluyen 1,2-dicloroetano y CH_{2}CI2 y de más preferencia, la reducción se lleva a cabo en 1,2-dicloroetano.

Como alternativa, la preparación de compuestos de fórmula XII puede llevarse a cabo mediante el tratamiento de compuestos de fórmula XI con una base y un reactivo de fórmula R_{2a}'L. Las bases adecuadas incluyen K_{2}CO_{3}, NaHCO_{3}, Et_{3}N, DIPEA, Cs_{2}CO_{3}, DBU y piridina. De preferencia, la base se selecciona del grupo que consiste en K_{2}CO_{3}, NaHCO_{3} y Et_{3}N. De más preferencia, la base es bicarbonato de sodio.

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Esquema D

11

Los compuestos de fórmula XV pueden prepararse a través del procedimiento mostrado en el Esquema D. La reducción neta de compuestos de fórmula VI en la que XR_{2} es R_{2}'OC(O) proporciona aldehídos de fórmula XIII. Los medios adecuados para realizar una reducción neta de incluyen la reacción con un agente reductor o la reacción secuencial con un agente reductor más fuerte y un agente oxidante más débil. Los agentes reductores adecuados son generalmente conocidos por los expertos en la técnica y pueden encontrarse en referencias tales como Advanced Organic Chemistry III ed. Part B: Reactions and Synthesis, Francis A. Carey, Richard J. Sundberg, Plenum Publishing Corp., NY (1993) y en March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, 5th ed., Wiley-InterScience, John Wiley & Sons, Inc., NY (2001).

Las combinaciones adecuadas de agentes oxidantes y agentes reductores incluyen hidruro de diisobutilaluminio (DIBAL-H) con MnO_{2}. De preferencia, la reducción neta se lleva a cabo por reducción secuencial y oxidación con un agente reductor tal como DIBAL-H, LAH, NaBH_{4} o LiBH_{4} y un agente oxidante tal como MnO_{2}SO_{3}-piridina, TEMPO (2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi, radical libre), peryodinano de Dess-Martin, o TPAP (perrutenato de tetrapropilamonio) y NMO (N-óxido de N-metilmorfolina) en combinación. De más preferencia, la reducción se lleva a cabo primero con DIBAL-H para producir un compuesto intermedio, que a continuación se oxida con MnO_{2} dando el compuesto de fórmula XIII.

El tratamiento posterior con un agente oxidante en un medio de reacción adecuado seguido por la eterificación utilizando una base en un medio de reacción adecuado y un reactivo de fórmula R_{2a}'L da los compuestos de fórmula XV, que son compuestos de fórmula VI en la que XR_{2} es OR_{2a}'. Los agentes oxidantes adecuados incluyen el ácido m-cloroperbenzoico (m-CPBA) y H_{2}O_{2}. Las bases adecuadas incluyen NaH, Et_{3}N, DIPEA y K_{2}CO_{3}. Los medios de reacción adecuados incluyen THF, DMF, CH_{2}Cl_{2} y CH_{3}CN. De más preferencia, el agente oxidante es ácido m-cloro perbenzoico (mCPBA), la base es NaH y el medio de reacción es tetrahidrofurano (THF) o DMF.

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Esquema E

12

La halogenación del grupo 5-metilo de un compuesto de fórmula V puede realizarse mediante el tratamiento con un agente de halogenación. Los agentes de halogenación adecuados incluyen, pero no se limitan a cloruro de sulfurilo, N-yodosuccinimida, N-bromosuccinimida, N-clorosuccinimida, cloruro de oxalilo. De preferencia, el agente de halogenación es N-bromosuccinimida o cloruro de sulfurilo. La halogenación puede realizarse en una atmósfera inerte, tal como N_{2}, en presencia de un catalizador, para producir un pirrol halogenado intermedio de fórmula XVI. De preferencia, el catalizador es peróxido de dibenzoílo o 2,2'-azobisisobutironitrilo, o irradiación.

El tratamiento de un pirrol de fórmula XVI con un tiol de fórmula HSR_{3a}', un alcohol intermedio de fórmula HOR_{3a}', o una amina primaria o secundaria de fórmula HNR_{3a}'R_{3a}'' en presencia de una base da un pirrol de fórmula XVII. Las bases adecuadas incluyen NaHCO_{3}, diisopropil etilamina DBU, KHCO_{2} y trimetilamina. De preferencia, la base es NaHCO_{3} o trietilamina. El acetonitrilo es un medio de reacción adecuado para esta reacción.

El tratamiento de un pirrol de fórmula XVII con un reactivo de fórmula HYR_{4}, a temperatura ambiente en presencia de una base, da el compuesto de fórmula XVIII. De preferencia, la base es NaHCO_{3} o trietilamina. El acetonitrilo es un medio de reacción adecuado para esta reacción. El calentamiento del pirrol de fórmula XVII con un reactivo de fórmula HYR_{4} en ausencia de bases también da el compuesto de fórmula XVIII.

Esquema F

13

El compuesto XIX, que es un compuesto de fórmula VI, en la que R_{3} es -CH_{2}SR_{3a}' (véase Esquema A, anterior), puede ser oxidado al sulfóxido del compuesto XX, en el que n = 1, o a la sulfona del compuesto XX, en la que n = 2. Los agentes oxidantes adecuados incluyen ácido m-cloroperbenzoico (MCPDA), tBu-OOH, H_{2}O2 NaIO_{4} y dimetildioxirano. De preferencia, el agente oxidante es MCPDA. El número de equivalentes de agente oxidante que se añade a la mezcla de reacción determina el estado de oxidación final del átomo de azufre. Un compuesto de fórmula XX, en la que n = 1 o 2, puede calentarse con un exceso de un alcohol de fórmula HOR_{3b}' o una amina primaria o secundaria de fórmula HNR_{3b}'R_{3b}'' para dar un compuesto de fórmula XXI.

Esquema G

14

Los compuestos de fórmula VII, del esquema B, se someten a una reacción de Wittig con un fosfonato en presencia de una base para dar un compuesto de fórmula XXII. Pueden usarse fosfonatos adecuados conocidos por los expertos en la técnica. De preferencia, el fosfonato es dietilfosfonoacetato de metilo. El dicloroetano y similares son medios de reacción orgánica adecuados para las reacciones de Wittig. Las bases adecuadas incluyen KH, K_{2}CO_{3}, N-butillitio, sec-butillitio, terc-butillitio, NaH, de preferencia NaH.

El doble enlace en el grupo R_{2} del compuesto de fórmula XXII puede hidrogenarse en presencia de un catalizador para dar un compuesto de fórmula XXIII. Los catalizadores adecuados incluyen PtO_{2}, paladio sobre carbono (Pd/C), Pd(OH)_{2} y Ni Raney. De preferencia, el catalizador es Pd/C.

Los ésteres de fórmula XXIII pueden hidrolizarse por técnicas bien conocidas en la técnica, por ejemplo las que se enseñan en Green and Wuts, supra, la preferencia es para la hidrólisis alcalina con NaOH. El posterior acoplamiento del ácido resultante con una amina en presencia de un agente de acoplamiento da la amida de fórmula XXIV. Los agentes de acoplamiento adecuados son conocidos por los expertos en la técnica e incluyen los descritos en The Practice of Peptide Synthesis, 2ª Ed., por Bodanszy, Miklos, Springer-Velag (1993). De preferencia, el agente de acoplamiento es N,N'-diciclohexilcarbodiimida (DCC).

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Esquema H

15

El esquema H representa una ruta alternativa para la síntesis de compuestos de fórmula IV (véase Esquema A, anterior). La condensación de un pirrol de fórmula III con un reactivo de fórmula R_{6}C(O)CH_{2}ZR_{5}, seguida por la ciclación inducida por bases en un medio de reacción adecuado, da el intermedio de fórmula IV. Las bases adecuadas incluyen DBU, NaH, BuLi, Et_{3}N y DIPEA. Los medios de reacción adecuados incluyen tolueno, THF, CH_{2}Cl_{2}, DMF, tolueno y CH_{3}CN. De preferencia, la base es NaH, DBU o DIPEA y el medio de reacción es DMF, tolueno o THF. Los reactivos de fórmula R_{6}C(O)CH_{2}ZR_{5}, particularmente aquellos en los que R_{6} es un oxígeno sustituido, nitrógeno o un grupo alquilo y ZR_{5} es un grupo nitrilo, pueden adquirirse de fuentes comerciales o bien pueden ser sintetizados fácilmente por los expertos en la técnica.

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Esquema I

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Como se muestra en el esquema I, un compuesto de fórmula XXV, que es un compuesto de fórmula VI en la que ZR_{5} es un grupo nitrilo (véase Esquema A, anterior), puede reducirse en presencia de hidrógeno y un catalizador para dar un compuesto de fórmula XXVI. Los catalizadores adecuados incluyen PtO_{2}, Pd/C, Pd(OH)_{2} y Ni Raney. De preferencia, el catalizador es paladio sobre carbono (Pd/C).

Los compuestos de fórmula XXVI, cuando se combinan con un reactivo de fórmula R_{5a}L, en la que L es un grupo saliente, por ejemplo, un halógeno, en presencia de una base, dan compuestos de fórmula XXVII. Las bases adecuadas son KH, K_{2}CO_{3}, N-butillitio, sec-butillitio, terc-butillitio y NaH. De preferencia, la base es NaH. Los reactivos de fórmula R_{5a}L están fácilmente disponibles de fuentes comerciales.

Además, un compuesto de fórmula XXVI puede tratarse con un reactivo de fórmula (R_{5b}-Z_{b}-C(O))_{2}O o R_{5b}-Z_{b}-C(O)-L', en el que L' es un grupo saliente, por ejemplo, un halógeno, en presencia de una base para dar un compuesto de fórmula XXVII. Las bases adecuadas incluyen NaHCO_{3}, diisopropiletilamina, DBU, KHCO_{3}, trimetilamina. De preferencia, la base es trietilamina. Los reactivos de fórmula R_{5b}-Z_{b}-C(O)-L' o (R_{5b}-Z_{b}-C(O))_{2}O están fácilmente disponibles de fuentes comerciales, o puede ser sintetizados por los expertos en la técnica.

Esquema J

17

El Esquema J representa la síntesis de un compuesto de fórmula XXX, que es un compuesto de fórmula IV (véase Esquema A, anterior) en la que R_{6} es hidrógeno y ZR_{5} es un grupo nitrilo. El tratamiento de un pirrol de fórmula III con un intermedio reactivo en un disolvente prótico de punto de ebullición alto da como resultado un intermedio de fórmula XXIX. De preferencia, se utilizan dimetilformamida (DMF) y dimetilacetamida.

El tratamiento del intermedio de fórmula XXIX con acetonitrilo en presencia de una base da como resultado la ciclación para producir el compuesto de fórmula XXX. Las bases adecuadas incluyen, pero no se limitan a KH, NaH, sec-butillitio y de preferencia N-butillitio. Como se muestra en el esquema A, anterior, los compuestos de fórmula XXX son intermedios en la síntesis de compuestos de fórmula I en la que R_{6} es hidrógeno y ZR_{5} es un grupo nitrilo.

Esquema K

18

La síntesis de compuestos de fórmula XXXIV y XXXV se muestra en el Esquema K. Los compuestos de fórmula XXXIV y XXXV son intermedios de fórmula IV (véase esquema A, anterior) en la que R_{6} es hidrógeno y ZR_{5} es un grupo nitrilo. El tratamiento de un pirrol de fórmula XXXI con un intermedio reactivo de fórmula XXXII en un disolvente de punto de ebullición alto da como resultado un intermedio de fórmula XXXIII. Los disolventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, xileno, nitrobenceno y tolueno, de preferencia tolueno.

Además el calentamiento de un intermedio de fórmula XXXIII en un disolvente de punto de ebullición alto da como resultado la ciclación para dar productos intermedios de fórmula XXXIV y XXXV. Los disolventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, DMF, DMA, N-metilpirolidinona, de preferencia Dowtherm^{TM} o tolueno en un aparato de alta presión.

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Esquema L

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La síntesis de compuestos de fórmula XXXVI se muestra en el Esquema L. El tratamiento de un compuesto de fórmula XXI, del Esquema F, con un intermedio reactivo de fórmula X'C(O)X' o X'C(O)OC(O)X', como se describe en el Esquema L, en presencia de una base como diisopropiletilamina o trietilamina, con o sin calentamiento, da un compuesto de fórmula XXXVI. Los disolventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, cloruro de metileno, cloroformo, tetrahidrofurano o acetato de etilo.

Como se muestra en el Esquema K, anterior, los compuestos de fórmula XXXIV y XXXV son intermedios en la síntesis de compuestos de fórmula I, en la que R_{6} es hidrógeno y ZR_{5} es un grupo nitrilo. El reactivo intermedio de fórmula XXXII y reactivos relacionados de esta estructura están fácilmente disponibles de fuentes comerciales, o pueden ser sintetizados por los expertos en la técnica.

Los Esquemas 1 a 5, a continuación, resumen varios procedimientos de preferencia para producir algunos de los compuestos de la invención. En los esquemas 1 a 5, a menos que se indique de otro manera, X, Y, Z, R_{1}, R_{2}, R_{2}, R_{3}, R_{4}, R_{5} y R_{6} son como se definieron anteriormente y L representa un grupo saliente. Las variables designadas con el subíndice "a" o "b" tienen el mismo alcance que, pero se eligen independientemente de, la variable original.

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Esquema 1

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Las 3-cianopirrolopiridazinas de fórmula VI pueden prepararse de acuerdo con el Esquema 1. Los pirroles de fórmula II pueden obtenerse por medio de los procesos descritos en el Tratado de cooperación en materia de patentes (PCT) número de publicación WO 00/71129, Solicitud de patente de Estados Unidos (EEUU) en trámite número de serie US 09/573829, Solicitud de publicación PCT en trámite número US 01/49982 y la Solicitud de patente de EEUU en trámite número de serie US 10/036293.

El tratamiento de un pirrol de fórmula II con una base como hidruro de sodio en un medio de reacción tal como DMF, seguido por la adición de un reactivo de aminación tal como 2,4-dinitroaminofenol genera un aminopirrol de fórmula III. La condensación con un acetal tal como 1,1-dietoxipropionitrilo, seguida por la ciclación inducida con bases utilizando una base tal como DBU o diisopropiletilamina, en un medio de reacción tal como tolueno, proporciona la 3-cianopirrolopiridazina de fórmula IV. La conversión a los compuestos 4-cloro de fórmula V puede llevarse a cabo a continuación mediante un reactivo de cloración tal como POCl_{3} o POCl_{5}. El tratamiento de un compuesto de fórmula V con un reactivo de fórmula HY-R_{4} en presencia de una base tal como trietilamina en un medio de reacción como acetonitrilo proporciona compuestos de fórmula VI, que son compuestos de fórmula I, en la que es XR_{2} es C(O)OEt, Z es un enlace de valencia, R_{5} es CN y R_{6} es H.

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Esquema 2

21

Los compuestos de fórmula VI pueden saponificarse con una base tal como NaOH para preparar ácidos carboxílicos de fórmula VII como se mostró anteriormente en el Esquema 2. Los compuestos de fórmula VIII, que son compuestos de fórmula I, en la que XR_{2} es C(O)NHR_{2}', Z es un enlace de valencia, R_{5} es CN y R_{6} es H, pueden prepararse a través del tratamiento de compuestos de fórmula VII con un agente de acoplamiento tal como EDC y una amina tal como NHR_{2a}'R_{2a}'', en un medio de reacción tal como diclorometano. Los compuestos de fórmula IX, que son compuestos de fórmula I en la que XR_{2} es C(O)OR_{2}', Z es un enlace de valencia, R_{5} es CN y R_{6} es H, pueden prepararse a través del tratamiento de un compuesto VII con un ácido tal como ácido clorhídrico y un alcohol fórmula R_{2}'OH. Los compuestos de fórmula X, que son compuestos de fórmula I en la que XR_{2} es NHC(O)OR_{2}', Z es un enlace de valencia, R_{5} es CN y R_{6} es H, pueden prepararse a través del tratamiento de compuestos de fórmula VII con un reactivo tal como DPPA seguido por la adición de un alcohol de la fórmula R_{2}'OH.

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Esquema 3

22

Como se muestra en el Esquema 3, los compuestos de fórmula XII, que son compuestos de fórmula I, en la que XR_{2} es NHR_{2a}', Z es un enlace de valencia, R_{5} es CN y R_{6} es H, pueden prepararse a partir de compuestos de fórmula X en la que el carbalcoxi del compuesto de fórmula X es un grupo protector eliminable (por ejemplo, R_{2}' es t-butilo o bencilo). El compuesto de fórmula XI puede prepararse por medio de la desprotección, es decir, por escisión con ácido o hidrogenación, respectivamente. Los compuestos de fórmula XII pueden prepararse también por medio de aminación reductora de compuestos de fórmula XI usando un aldehído de fórmula R_{2a}'CHO y un agente reductor tal como NaBH(OAc)_{3} en un medio de reacción tal como 1,2-dicloroetano. Como alternativa, la preparación de compuestos de fórmula XII puede llevarse a cabo por medio del tratamiento de compuestos de fórmula XI con una base tal como NaHCO_{3} y un reactivo de fórmula R_{2a}'L.

Esquema 4

23

Los compuestos de fórmula XV pueden prepararse a través del procedimiento mostrado en el Esquema 4. La reducción de compuestos de fórmula VI con un agente reductor tal como DIBAL-H en medios de reacción tales como diclorometano o tolueno, seguida por la oxidación con un agente oxidante tal como MnO_{2}, proporciona aldehídos de de fórmula XIII. El tratamiento de compuestos de fórmula XIII con un perácido tal como m-CPBA en un medio de reacción tal como diclorometano, seguido por la eterificación usando una base tal como hidruro de sodio en medios de reacción tales como tetrahidrofurano o DMF y un reactivo de fórmula R_{2a}'L da compuestos de fórmula XV, que son compuestos de fórmula I, en la que XR_{2} es OR_{2a}', Z es un enlace de valencia, R_{5} es CN y R_{6} es H.

Esquema 5

24

Como se muestra en el Esquema 5, un intermedio de fórmula XXV, que es un compuesto de fórmula I, en la que R_{6} es H y ZR_{5} es un grupo nitrilo, puede reducirse en presencia de hidrógeno, ácido trifluoroacético (TFA) y un catalizador tal como Pd/C para dar un compuesto de fórmula XXVI. El compuesto de fórmula XXVI puede tratarse con productos intermedios de fórmula R_{5b}-Z_{b}-C(O)-Cl o (R_{5b}-Z_{b}-C(O))_{2}O en presencia de una base tal como trietilamina para dar el compuesto de fórmula XXVII. Los intermedios de fórmula R_{5b}-Z_{b}-C(O)-2O-Cl y (R_{5b}-Z_{b}-C(O))_{2}O están fácilmente disponibles en fuentes comerciales, o pueden ser sintetizados por los expertos en la técnica.

Los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de fórmula I también están dentro del alcance de la presente invención. Los procedimientos de solvatación son conocidos generalmente en la técnica. Por consiguiente, los compuestos de la presente invención pueden estar en forma libre o de solvatada.

Los compuestos de fórmula I pueden estar presentes como sales, en particular sales farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula I que tienen, por ejemplo, al menos un centro básico puede formar sales de adición de ácidos. Estas se forman, por ejemplo, con ácidos inorgánicos fuertes, tales como ácidos minerales, por ejemplo ácido sulfúrico, ácido fosfórico o un ácido halhídrico, con ácidos carboxílicos orgánicos fuertes, tales como los ácidos alcanocarboxílicos de 1 a 4 átomos de carbono, que están insustituidos o sustituidos, por ejemplo, por halógeno, por ejemplo ácido acético, tales como ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados, por ejemplo ácido oxálico, malónico, succínico, maleico, fumárico, ftálico o tereftálico, tales como ácidos hidroxicarboxílicos, por ejemplo ácido ascórbico, glicólico, láctico, málico, tartárico o cítrico, tales como aminoácidos, (por ejemplo ácido aspártico o ácido glutámico o lisina o arginina), o ácido benzoico, o con ácidos sulfónicos orgánicos, tales como ácidos alquil (C_{1}-C_{4}) o aril sulfónicos que están insustituidos o sustituidos, por ejemplo por halógeno, por ejemplo ácido metanosulfónico o ácido p-toluenosulfónico. También pueden formarse sales de adición de ácidos correspondientes con, si se desea, un centro básico adicional.

Los compuestos de fórmula I que tienen al menos un grupo ácido (por ejemplo, COOH) pueden también formar sales con bases. Las sales adecuadas con bases son, por ejemplo, sales de metales, tales como las sales de metales alcalinos o metales alcalinotérreos, por ejemplo sales de sodio, potasio o magnesio o sales con amoniaco o una amina orgánica, tales como morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, una mono-, di- o tri-alquilamina inferior, por ejemplo etil, t-butil, dietil, diisopropil, trietil, tributil o dimetil-propilamina, o una mono, di o trihidroxi alquilamina inferior, por ejemplo mono, di o trietanolamina.

Además, pueden formarse las sales internas correspondientes. Las sales que no son aptas para usos farmacéuticos pero que pueden utilizarse, por ejemplo, para el aislamiento o purificación de compuestos de fórmula I libres o sus sales farmacéuticamente aceptables, también están incluidos en el ámbito de la presente invención.

Las sales de preferencia de los compuestos de fórmula I, que incluye un grupo básico incluyen monoclorhidrato, hidrógeno sulfato, metanosulfonato, fosfato o nitrato.

Las sales de preferencia de los compuestos de fórmula I, que incluyen un grupo ácido incluyen sales de sodio, potasio y magnesio y las aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables.

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Usos de los compuestos

Se ha descubierto que las pirrolopiridazinas de la invención son inhibidores de proteína cinasas. Más concretamente, ciertas pirrolopiridazinas inhiben los efectos de receptores tirosina cinasa y serina/treonina cinasa, una propiedad de valor en el tratamiento de los estados de enfermedad asociados con hiperproliferación, angiogénesis, aumento de la permeabilidad vascular e inflamación, tales como el cáncer y las enfermedades inflamatorias. En particular, se espera que los compuestos de fórmula I y sus sales, solvatos y estereoisómeros inhiban el crecimiento de tumores sólidos primarios y recurrentes por mecanismos antiproliferativos y/o antiangiogénicos. Los tumores sólidos incluyen, por ejemplo, los cánceres de vejiga, de células escamosas, de cabeza, colorrectal, de esófago, ginecológicos (tales como de ovario), de páncreas, de mama, de próstata, de pulmón, de vulva, de piel, de cerebro, del tracto genitourinario, del sistema linfático (tales como de la tiroides), de estómago, de laringe y de pulmón.

En algunas formas de realización de la presente invención, se proporcionan usos, en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades proliferativas o inflamatorias en un paciente que los necesita, de un compuesto que tiene fórmula I, según se describió anteriormente.

Los usos opcionalmente comprenden el uso de al menos otro agente terapéutico, tal como los inhibidores de la angiogénesis, antiestrógenos, progestágenos, los inhibidores de aromatasas, antihormonas, antiprogestágenos, antiandrógenos, agonistas y antagonistas de LHRH, inhibidores de la testosterona 5\alpha-dihidrorreductasa, inhibidores de la farnesil transferasa, agentes anti-invasión, inhibidores del factor de crecimiento, antimetabolitos, antibióticos intercaladores antitumorales, derivados de platino, agentes alquilantes, agentes antimitóticos, inhibidores de la topoisomerasa, inhibidores del ciclo celular y modificadores de respuesta biológica, linomida, inhibidores de la función integrina \alphav\beta3, angiostatina, razoxina, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, acetato de megestrol, anastrozol, letrazol, borazol, exemestano, flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona, acetato de goserelina, luprolida, finasteride, inhibidores de metaloproteinasa, inhibidores de la función del receptor urocinasa activator del plasminógeno, anticuerpos contra el factor de crecimiento, anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento, inhibidores de tirosina cinasa, inhibidores de serina/treonina cinasa, metotrexato, 5-fluorouracilo, análogos de purina y adenosina, arabinósido de citosina, doxorubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina, cisplatino, carboplatino, mostaza de nitrógeno, melfalán, clorambucilo, busulfan, ciclofosfamida, nitrosoureas de ifosfamida, tiotefan, vincristina, taxol, taxotere, análogos de epotilona, análogos discodermolida, análogos de eleuterobin, etopósido, tenipósido, amsacrine, topotecan, flavopiridoles y modificadores de la respuesta biológica. En algunas formas de realización de preferencia, el agente terapéutico adicional se selecciona de Erbitux^{TM}, taxol, paraplatin e Ifex.

Más en general, los compuestos de fórmula I son útiles en el tratamiento de una diversidad de tipos de cáncer, incluidos, pero no limitados a, los siguientes:

: carcinoma, incluyendo el de vejiga, mama, colon, riñón, hígado, pulmón, incluido el cáncer pulmonar microcítico, esófago, vesícula biliar, ovarios, páncreas, estómago, cuello uterino, tiroides, próstata y piel, incluyendo el carcinoma de células escamosas;

: tumores hematopoyéticos de linaje linfoide, incluyendo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma no-Hodgkin, linfoma de células vellosas y linfoma de Burkett;

: tumores hematopoyéticos de linaje mieloide, incluyendo leucemias mielógenas agudas y crónicas, síndrome mielodisplásico y leucemia promielocítica;

: tumores de origen mesenquémico, incluyendo fibrosarcoma y rabdomiosarcoma;

: tumores del sistema nervioso central y periférico, incluyendo astrocitoma, neuroblastoma, glioma y schwannomas; y

: otros tumores, incluyendo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xeroderoma pigmento, queratocantoma, cáncer folicular de tiroides y sarcoma de Kaposi.

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Los compuestos de fórmula I son especialmente útiles en el tratamiento de los tumores que tienen una elevada incidencia de actividad de proteína cinasa, tales como los tumores de colon, pulmón, próstata, mama y pancreáticos. Por medio de la administración de una composición que comprende un compuesto de la invención, o una combinación de estos compuestos, se reduce el desarrollo de tumores en un huésped mamífero.

Los compuestos de fórmula I pueden también ser útiles en el tratamiento de enfermedades diferentes del cáncer que puedan que estén asociadas con vías de transducción de señales que actúen a través de receptores de factores de crecimiento. Por ejemplo, debido a la función principal de las cinasas en la regulación de la proliferación celular en general, los inhibidores de cinasas podrían actuar como agentes citostáticos reversibles que pueden ser útiles en el tratamiento de cualquier proceso patológico que se caracterice por la proliferación celular anómala, por ejemplo, la hiperplasia prostática benigna, la poliposis adenomatosa familiar, la neurofibromatosis, la aterosclerosis, la fibrosis pulmonar, la artritis, la psoriasis, la glomerulonefritis, la reestenosis después de angioplastia o cirugía vascular, la formación de cicatriz hipertrófica, la enfermedad inflamatoria del intestino, el rechazo de transplantes, el choque endotóxico e infecciones fúngicas.

Además, los compuestos de fórmula I pueden inducir o inhibir la apoptosis. La respuesta apoptótica es aberrante en una diversidad de enfermedades humanas. Los compuestos de fórmula I, como moduladores de la apoptosis, serán útiles en el tratamiento del cáncer (incluyendo, pero no limitado a, los tipos mencionados anteriormente en el presente documento), infecciones víricas (incluyendo, pero no limitadas a, herpesvirus, poxvirus, virus Epstein-Barr, virus Sindbis y adenovirus), prevención del desarrollo del SIDA en los individuos infectados por el VIH, enfermedades autoinmunes (incluyendo, pero no limitadas a, lupus eritematoso sistémico, glomerulonefritis mediada por enfermedad autoinmune, artritis reumatoide, psoriasis, enfermedad inflamatoria del intestino y diabetes mellitus autoinmune), trastornos neurodegenerativos (incluyendo, pero no limitados a, la enfermedad de Alzheimer, la demencia relacionada con el SIDA, la enfermedad de Parkinson, la esclerosis lateral amiotrófica, la retinitis pigmentosa, la atrofia muscular espinal y la degeneración cerebelar), síndromes mielodisplásicos, anemia aplásica, lesión isquémica asociada con infartos de miocardio, apoplejía y lesión por reperfusión, arritmia, aterosclerosis, enfermedades hepáticas inducidas por toxinas o relacionadas con el alcohol, enfermedades hematológicas (incluyendo, pero no limitadas a, la anemia crónica y la anemia aplásica), enfermedades degenerativas del sistema musculoesquelético (incluyendo, pero no limitadas a, osteoporosis y artritis), rinosinusitis con sensibilidad a aspirina, fibrosis quística, esclerosis múltiple, enfermedades renales y dolor del cáncer.

Como inhibidores de proteína cinasas, los compuestos de la presente invención tienen utilidad en el tratamiento de las afecciones asociadas con la actividad cinasa inadecuada. Tales afecciones incluyen también enfermedades en las que los niveles de citocinas están modulados como consecuencia de la señalización intracelular, y en particular, las enfermedades que están asociadas con una sobreproducción de citocinas tales como IL-1, IL-4, IL-8 y FNT-\alpha. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento y la prevención de:

: enfermedades mediadas por IL-1 tales como, por ejemplo, la artritis reumatoide, la osteoartritis, la apoplejía, la endotoxemia y/o el síndrome del choque tóxico, la reacción inflamatoria inducida por endotoxinas, la enfermedad inflamatoria del intestino, la tuberculosis, la ateroesclerosis, la degeneración muscular, la caquexia, la artritis psoriásica, el síndrome de Reiter, la gota, la artritis traumática, la artritis de la rubéola, la sinovitis aguda, la diabetes, la enfermedad de células \beta pancreática y la enfermedad de Alzheimer;

: enfermedades o afecciones mediadas por IL-4 tales como, por ejemplo, los procesos inflamatorios alérgicos, incluidos los que se producen en el asma,

: enfermedades o afecciones mediadas por IL-8 tales como, por ejemplo, las caracterizadas por la infiltración masiva de neutrófilos, tales como la psoriasis, la enfermedad inflamatoria del intestino, del asma, la herida por reperfusión cardiaca y renal, el síndrome de insuficiencia respiratoria del adulto, la trombosis y la glomerulonefritis; y

: enfermedades o afecciones mediadas por TNF tales como la artritis reumatoide, la espondilitis reumatoide, la osteoartritis, la artritis gotosa y otras afecciones artríticas, la sepsis, el síndrome del choque séptico, el síndrome de insuficiencia respiratoria del adulto, el paludismo cerebral, la enfermedad pulmonar inflamatoria crónica, la silicosis, la sarcoidosis pulmonar, la enfermedad de resorción ósea, la herida por reperfusión, la reacción de injerto frente al receptor, los rechazos de aloinjertos, la fiebre y mialgias debidas a infección, la caquexia secundaria a infección, el SIDA, ARC o neoplasias, formación meloide, formación de tejido cicatrizal, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa, la piresis, infecciones virales, tales como el VIH, CMV, gripe y herpes; e infecciones virales veterinarias, tales como las infecciones por lentivirus, incluyendo, pero no limitadas al virus de la anemia infecciosa equina; o infecciones por retrovirus, incluyendo el virus de la inmunodeficiencia felina, el virus de la inmunodeficiencia bovina o el virus de la inmunodeficiencia canina.

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Las enfermedades mediadas por p38 incluyen la artritis reumatoide (AR), la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), el asma, la enfermedad de Crohn, enfermedades neurológicas tales como la enfermedad de Alzheimer y la apoplejía y enfermedades inflamatorias óseas. Otro análisis sobre las enfermedades mediadas por p38 puede encontrarse en el documento PCT en trámite Número de solicitud US01/49982 y en la Solicitud de Patente de EEUU en trámite Número de serie US 10/036293.

Los inhibidores de la actividad proteína cinasa, tales como los compuestos de la presente invención, son útiles en el tratamiento y la prevención de otras afecciones y clases de afecciones, incluyendo, pero no limitadas a, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos óseos destructivos, trastornos proliferativos, trastornos angiogénicos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, enfermedades víricas, alergias, isquemia del miocardio, reperfusión/isquemia en ataques cardiacos con ictus, hipoxia orgánica, hiperplasia vascular, hipertrofia cardiaca, agregación plaquetaria inducida por la trombina y afecciones asociadas con la prostaglandina endoperoxidasa sintasa-2.

Las enfermedades inflamatorias que pueden ser tratadas o prevenidas incluyen, pero no se limitan a, la pancreatitis aguda, la pancreatitis crónica, el asma, las alergias y el síndrome de insuficiencia respiratoria del adulto.

Las enfermedades autoinmunes que pueden ser tratadas o prevenidas incluyen, pero no se limitan a, la glomerulonefritis, la artritis reumatoide, el lupus eritematoso sistémico, la esclerodermia, la tiroiditis crónica, la enfermedad de Graves, la gastritis autoinmune, la diabetes, la anemia hemolítica autoinmune, la neutropenia autoinmune, la trombocitopenia, la dermatitis atópica, la hepatitis crónica activa, la miastenia gravis, la esclerosis múltiple, la enfermedad inflamatoria del intestino, la colitis ulcerosa, la enfermedad de Crohn, la psoriasis o la enfermedad del injerto frente al receptor.

Los trastornos óseos destructivos que pueden ser tratados o prevenidos incluyen, pero no se limitan a, la osteoporosis, la artrosis y el trastorno óseo relacionado con el mieloma múltiple.

Las enfermedades proliferativas que pueden ser tratadas o prevenidas incluyen, pero no se limitan a, la leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, el melanoma metastásico, el sarcoma de Kaposi y el mieloma múltiple.

Los trastornos angiogénicos que pueden ser tratados o prevenidos incluyen los hemangiomas, la psoriasis, el sarcoma de Kaposi, la neovascularización ocular, la retinopatía del prematuro, la degeneración macular, la retinopatía diabética, la nefropatía diabética, la artritis reumatoide, la endometriosis, la ateroesclerosis, el crecimiento y la metástasis tumoral, la isquemia del miocardio, isquemia periférica, isquemia cerebral, los trastornos en la cicatrización de heridas, ciertos trastornos reproductivos femeninos, la hipoxia orgánica y los trastornos en la cicatrización de úlceras.

Las enfermedades infecciosas que pueden ser tratadas o prevenidas incluyen, pero no se limitan a, la sepsis, el choque séptico y la shigellosis.

Las enfermedades neurodegenerativas pueden ser tratadas o prevenidas por medio de los compuestos de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, las isquemias cerebrales o enfermedades neurodegenerativas causada por lesiones traumáticas.

Las enfermedades víricas que pueden ser tratadas o prevenidas incluyen, pero no se limitan a, la infección de hepatitis aguda (incluyendo la hepatitis A, hepatitis B y hepatitis C), la infección por el VIH y la retinitis por
CMV.

Los compuestos de fórmula I pueden también impedir la implantación de blastocitos y, por consiguiente, pueden usarse como anticonceptivos en mamíferos.

Además, los inhibidores de proteína cinasas de la presente invención también muestran inhibición de la expresión de proteínas inducibles proinflamatorias tales como la prostaglandina endoperóxido sintasa-2 (PGHS-2), también conocida como ciclooxigenasa-2 (COX-2). Por consiguiente, otras afecciones que pueden ser tratadas o prevenidas por la administración adecuada de los compuestos de la invención incluyen el edema, la analgesia, la fiebre y el dolor, tales como el dolor neuromuscular, el dolor de cabeza, el dolor causado por el cáncer, el dolor dental y el dolor de la artritis.

En el campo de la oncología médica, es una práctica normal la combinación de diferentes agentes para el tratamiento de los pacientes con cáncer. Por consiguiente, un compuesto de fórmula I puede combinarse opcionalmente con otros componentes, tales como agentes antiproliferativos, antiangiogénicos y/o reductores de la permeabilidad vascular. Además, la cirugía, la radioterapia o la quimioterapia pueden utilizarse en combinación con la administración de compuestos de fórmula I. Por consiguiente, el compuesto de fórmula I puede ser administrado solo o combinado con la administración de otro u otros agentes, sustancias y/o tratamientos terapéuticos.

Tal tratamiento conjunto puede lograrse por medio de la administración simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. Cuando no se administran al mismo tiempo, las terapias componentes pueden ser administradas en cualquier orden. Si se formulan como una dosis fija, tales productos de combinación utilizan los compuestos de la presente invención dentro del intervalo de dosis que se describe a continuación y el otro agente farmacéuticamente activo se administra dentro de su intervalo de dosis autorizado. Los intervalos de dosis de muchos agentes farmacéuticamente activos pueden encontrarse en la Physician's Desk Reference, 55ª Edición, Medical Economics Company (2001). Los compuestos de fórmula I también pueden usarse de manera secuencial con agentes anticancerosos o citotóxicos y tratamientos conocidos, incluyendo la radiación, cuando una formulación combinada resulta inadecuada.

En general, existen tres categorías principales de agentes de quimioterapia:

(i): agentes antiangiogénicos, por ejemplo, linomida, inhibidores de integrina \alpha (función 33, angiostatina y razoxina;

(ii): agentes citostáticos tales como antiestrógenos (por ejemplo tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno), progestágenos (por ejemplo acetato de megestrol), inhibidores de aromatasa (por ejemplo anastrozol, letrazol, borazol, exemestano), antihormonas, antiprogestágenos, antiandrógenos (por ejemplo, flutamida; nilutamida; bicalutamida; acetato de ciproterona; sal mesilato de (R)-2,3,4,5-tetrahidro-1-(1H-imidazol-4-ilmetil)-3-(fenilmetil)-4-(2-teienilsufonil)-1H-1,4-benzodiazepin-7-carbonitrilo; N-[5-[[[5-(1,1-dimetiletil)-2-oxazolil]metil]tio]-2-tiazolil]-4-piperidincarboxamida, sal del ácido hemi L-tartárico; cetuximab; moléculas dadas a conocer en la Solicitud de Patente de EEUU Número de Serir 10/025.116, agonistas y antagonistas de LHRH (por ejemplo acetato de goserelina, luprolida), inhibidores de testosterona 5\alpha-dihidrorreductasa (por ejemplo finasteride), inhibidores de la farnesil transferasa, agentes anti-invasión (por ejemplo inhibidores de metaloproteinasas como marimastat e inhibidores de la función del receptor urocinasa activador del plasminógeno) e inhibidores de la función del factor de crecimiento, (tales factores de crecimiento incluyen por ejemplo EGF, FGF, factor de crecimiento derivado de plaquetas y factor de crecimiento de hepatocitos, tales inhibidores incluyen anticuerpos contra factores de crecimiento, anticuerpos contra receptores de factores de crecimiento, inhibidores de tirosina cinasa e inhibidores de serina/treonina cinasa); y

(iii): fármacos antiproliferativos/antineoplásicos y sus combinaciones, según se usan en oncología médica, tales como los antimetabolitos (por ejemplo antifolatos como el metotrexato, fluoropirimidinas como 5-fluorouracilo, análogos de purinas y adenosina, arabinósido de citosina); antibióticos intercaladores antitumorales (por ejemplo antraciclinas como doxorubicina, daunomicina, epirubicina e idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina); derivados de platino (por ejemplo cisplatino, carboplatino); agentes alquilantes (por ejemplo mostaza nitrogenada, melfalan, clorambucilo, busulfan, ciclofosfamida, nitrosoureas de ifosfamida, tiotefan); agentes antimitóticos (por ejemplo los alcaloides de la vinca como vincristina y taxoides como el taxol, taxotere y nuevos agentes estabilizadores de microtúbulos tales como los análogos de epotilona, análogos de discodermolida y análogos de eleuterobina); inhibidores de la topoisomerasa (por ejemplo epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecan); inhibidores del ciclo celular (por ejemplo flavopiridoles); y modificadores de la respuesta biológica. Compuestos particulares pueden incluir N-[5-[[[5-(1,1-dimetiletil)-2-oxazolil]metil]tio]-2-tiazolil]-4-piperidincarboxamida, sal del ácido hemi L-tartárico.

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Los compuestos de fórmula I y las composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de fórmula I pueden administrarse por cualquier medio adecuado para la afección a tratar, que puede depender de la necesidad de tratamiento específico del sitio o de la cantidad de fármaco a administrar. Los compuestos pueden administrarse en un intervalo de dosis de aproximadamente 0,05 a 200 mg/kg/día, de preferencia inferior a 100 mg/kg/día, en una sola dosis o en 2 a 4 dosis separadas.

La administración tópica es generalmente de preferencia para las enfermedades relacionadas con la piel y el tratamiento sistemático es el preferido para afecciones cancerosas o precancerosas, aunque se contemplan otros modos de administración. Por ejemplo, los compuestos y las composiciones pueden administrarse por vía oral, tal como en forma de comprimidos, cápsulas, gránulos, polvos o formulaciones líquidas, incluidos los jarabes; por vía tópica, tal como en forma de disoluciones, suspensiones, geles o pomadas; por vía sublingual; por vía bucal; por vía parenteral, tal como por vía subcutánea, intravenosa, intramuscular o por inyección intraesternal o por técnicas de infusión (por ejemplo, como disoluciones o suspensiones acuosas o no acuosas inyectables estériles); por vía nasal tal como por aerosol de inhalación; por aplicación tópica, tal como en forma de crema o pomada; por vía rectal tal como en forma de supositorios; o por medio de liposomas.

Pueden administrarse formulaciones farmacéuticas que contienen vehículos o diluyentes no tóxicos, farmacéuticamente aceptables. Los compuestos y composiciones pueden administrarse en una forma adecuada para liberación inmediata o liberación prolongada. La liberación inmediata o liberación prolongada puede lograrse con composiciones farmacéuticas adecuadas o, en particular en el caso de la liberación prolongada, con dispositivos tales como implantes subcutáneos o bombas osmóticas. Otras técnicas para la formulación y administración de los compuestos y composiciones de la presente solicitud pueden encontrarse en "Remington's Pharmaceutical Sciences", 18ª Ed. (1990, Mack Publishing Co., Easton, PA).

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Abreviaturas

Las siguientes abreviaturas se encuentran entre las usadas en el presente documento:

\Delta: = calor

Ac: = acetilo

AcOH: = ácido acético

ac.: = acuoso

ATP: = trifosfato de adenosina

BOP: = benzotriazol-1l-iloxitris(dimetilamino)-fosfonio

BSA: = albúmina sérica de bovino

DBU: = 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno

DCC: = diciclohexilcarbodiimida

DCE: = dicloroetano

DEAD: = azodicarboxilato de dietilo

DIBAL-H: = hidruro de diisobutilaluminio

DIPEA: = N,N-diisopropiletilamina

DMA: = dimetilacetamida

DME: = 1,2-dimetoxietano

DMF: = dimetilformamida

DMSO: = dimetilsulfóxido

DPPA: = difenilfosforil azida

DTT: = ditiotreitol

EDC: = clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida

EDTA: = ácido etilendiaminotetraacético

Et: = etilo

Et_{2}O: = éter dietílico

EtOAc: = acetato de etilo

EtOH: = etanol

GST: = glutationa S-transferasa

h: = horas

Hexafluorofosfato

HOAt: = 1-hidroxi-7-azabenzotriazol

HOBt: = 1-hidroxibenzotriazol

Base de Hünig: = N,N-diisopropiletilamina

KOtBu: = terc-butóxido de potasio

CL: = cromatografía líquida

LDA: = diisopropilamida de litio

MBP: = proteína básica de mielina

mCPBA: = ácido m-cloroperoxibenzoico

Me: = metilo

MeI: = yoduro de metilo

MeOH: = metanol

EM (EV): = espectrometría de masas con electro vaporización

n-BuLi: = n-butillitio

Pd/C: = paladio sobre carbono activado

Ph: = fenilo

PhCH_{3}: = tolueno

pTSA: = ácido para-toluensulfonico

TR: = tiempo de retención

ta: = temperatura ambiente

sat.: = saturada

t-Bu: = terc-butilo

TCA: = ácido tricloroacético

TEA: = trietilamina

TFA: = ácido trifluoroacético

THF: = tetrahidrofurano

TLC: = cromatografía en capa fina

Tris-HCl: = Tris [hidroximetil]aminometano clorhidrato

Ts: = tosilo

TsCl: = cloruro de tosilo

TsOH: = ácido tósico

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Los ejemplos siguientes se proporcionan para describir la invención en más detalle. Estos ejemplos pretenden ilustrar y no limitar la invención. Todas las temperaturas se dan en grados centígrados (ºC) a menos que se indique de otra manera. YMC Co., Ltd., es un proveedor de columnas para HPLC, con sede en Kyoto, Japón, y puede contactarse a través de Waters Co. en Milford, MA.

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Ejemplo 1 Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-4-(ciclohexilamino)-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (1E)

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A. Preparación de dietiléster del ácido 3-metil-1H-pirrol-2,4-dicarboxílico (1A)

26

A una disolución de isocianoacetato de etilo (38,1 ml, 0,34 mol) y DBU (50,8 ml, 0,34 mol) en THF (400 ml) a 50ºC se le añadió una disolución de acetaldehído (9,5 ml, 0,17 mol) en THF (100 ml) durante 25 min. La mezcla de reacción se agitó a 55ºC durante 17 h, se enfrió hasta 25ºC y se le añadió lentamente ácido acético (20 ml). La mezcla resultante se concentró en vacío y el residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (800 ml) y se lavó con HCl (1 N, 3 x 300 ml). Los lavados acuosos combinados se extrajeron con acetato de etilo (3 x 200 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO_{3} (ac. sat., 3 x 200 ml), agua (100 ml) y salmuera (100 ml) y a continuación se concentró en vacío dando un aceite marrón oscuro. La elución de este aceite a través de una almohadilla de sílice usando acetato de etilo/hexanos (1:1) y la concentración en vacío proporcionó el compuesto 1A (16 g, rendimiento del 42%) como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 3,536 minutos (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 226,0 [M+H]^{+}.

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B. Preparación de dietiléster del ácido 1-amino-3-metil-1H-pirrol-2,4-dicarboxílico (1B)

27

A una suspensión de NaH (suspensión al 60% en aceite mineral, 213 mg, 5,33 mmol) en DMF (15 ml) a 0ºC se le añadió el compuesto 1A (1,0 g, 4,44 mmol), en porciones. La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 5 min y a continuación se calentó hasta 25ºC y se agitó otra hora más. A continuación la mezcla de reacción se enfrió hasta 10ºC y se añadió 2,4-dinitro-aminofenol (972 mg, 4,88 mmol) en dos porciones. La mezcla resultante se calentó hasta 25ºC, se agitó durante 12 h, se vertió sobre agua (40 ml) y diclorometano (50 ml), y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 20 ml) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaOH (1N, 3 x 20 ml), agua (20 ml) y salmuera (20 ml) y a continuación se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentraron en vacío. El residuo resultante de color marrón rojizo se concentró nuevamente durante 12 h bajo alto vacío dando 800 mg (rendimiento del 75%) del compuesto 2B, que se usó sin otra purificación. HPLC: 100% a 3,488 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 241,17 [M+H]^{+}.

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C. Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-1,4-dihidro-5-metil-4-oxopirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (1C)

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A una disolución de dietiléster del ácido 1-amino-3-metil-1H-pirrol-2, 4-dicarboxílico (1,08 g, 4,50 mmol) en tolueno (15 ml) se le añadió 1,1-dietoxipropionitrilo (2,02 ml, 1,93 g, 13,5 mmol) y TsOH-H_{2}O (171 mg, 0,90 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 12 h y a continuación se enfrió hasta 25ºC. Se añadió DBU (0,81 ml, 0,822 g, 5,40 mmol) y la mezcla resultante de color marrón oscuro se calentó a 80ºC durante 1 h y a continuación se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió sobre diclorometano (50 ml) y NH_{4}Cl (ac. sat., 50 ml) y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 30 ml) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (30 ml), se secó sobre MgSO_{4} y se concentraron en vacío. El producto bruto se purificó por medio de cromatografía en columna en gel de sílice (metanol al 10-30% /diclorometano) dando 441 mg (40%) del compuesto 1C como un sólido marrón. HPLC: 100% a 3,383 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 246,09 [M+H]^{+}.

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D. Preparación de etiléster del ácido 4-cloro-3-ciano-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (1D)

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Se cargó un matraz de base redonda de 15 ml que contenía el compuesto 1C (370 mg, 1,51 mmol) con POCl_{3} (1 ml) y se calentó a 75ºC durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró en vacío y el residuo amarillo resultante se disolvió en diclorometano (10 ml) y se añadió, por medio de una pipeta, a una disolución acuosa saturada de NaHCO_{3} con agitación a 0ºC. La mezcla heterogénea se agitó durante 10 min a 0ºC a continuación se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante otra hora. La mezcla se vertió en un embudo de separación y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 20 ml) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO_{3} (ac. sat., 1 x 20 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró en vacío. El residuo resultante se disolvió en EtOAc (20 ml) y se filtró a través de una almohadilla de sílice usando EtOAc (100 ml) para lavar la almohadilla de sílice. El filtrado se concentró en vacío dando el compuesto 1D como un sólido amarillo, que se usó sin otra purificación. HPLC: 100% a 4,160 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm).

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E. Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-4-(ciclohexilamino)-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (1E)

A una disolución del compuesto 1D (20 mg, 0,076 mmol) en acetonitrilo (1 ml) se le añadió Et_{3}N (32 \mul, 0,228 mmol) y ciclohexilamina (10 \mul, 0,084 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC. Tras 24 h, se añadieron otros 10 \mul de ciclohexilamina y la mezcla de reacción se agitó durante otras 1,5 horas tras lo que se vertió sobre NaHCO_{3} (ac. sat., 20 ml) y diclorometano. Se separaron las fases y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (20 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró en vacío dando 18 mg (75%) del compuesto 1E como un sólido amarillo, que se usó sin otra purificación. HPLC: 100% a 4,60 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 327,2 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 2 Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-5-metil-4-fenoxipirrolo [1,2-b]piridazin-6-carboxílico

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A una disolución del compuesto 1D (18 mg, 0,068 mmol) en acetonitrilo (0,5 ml) a temperatura ambiente se le añadió Et_{3}N (21 ul, 0,205 mmol) y fenol (7 mg, 0,075 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 24 h y a continuación se vertió sobre diclorometano (10 ml) y NaHCO_{3} (ac. sat., 10 ml). Se separaron las fases, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 5 ml) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró en vacío dando el compuesto 2 (15 mg, 68%) como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 4,35 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a EM (EV): m/z 340,0 [M+NH_{4}]^{+}.

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Ejemplo 3 Preparación de 6-(metoximetil)-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo (3C)

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A. Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (3A)

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A una disolución del compuesto 1D (26 mg, 0,10 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió K_{2}CO_{3} (138 mg, 1,00 mmol) y p-fenoxianilina (20 mg, 0,11 mmol) a 25ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 12 h y a continuación se diluyó con diclorometano (15 ml) y se lavó con agua (10 ml) y salmuera (10 ml). La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró y el residuo resultante se trituró con metanol dando 31 mg (rendimiento del 76%) del compuesto deseado como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 4,62 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 413,12 [M+H]^{+}.

El compuesto 3A también puede prepararse de la siguiente manera: a una disolución de 1D (1,00 g, 3,79 mmol) en THF (10 ml) se le añadió 4-fenoxianilina (0,84 g, 4,53 mmol) y trietilamina (1,06 ml, 7,58 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 3 días, tras lo que se enfrió hasta temperatura ambiente y se diluyó con MeOH (50 ml). Los sólidos resultantes se filtraron, se lavaron con MeOH y se secaron dando 1,50 g (rendimiento del 96%) de 3A como un polvo amarillo.

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B. Preparación de 6-(hidroximetil)-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo (3B)

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A una disolución del compuesto 3A (41 mg, 0,10 mmol) en THF (2 ml) a -78ºC se le añadió DIBAL-H (1,5 M en tolueno, 0,13 ml, 0,20 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 6 h a -78ºC, se calentó hasta 0ºC y se agitó durante otras 2 h. La mezcla de reacción se extinguió por la adición de metanol (3 ml) y Na_{2}CO_{3} ac. sat. (3 ml) y a continuación se vertió sobre diclorometano (20 ml). Se separaron las fases, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 15 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró en vacío. La purificación por medio de HPLC preparativa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluyendo con metanol acuoso al 30-100% durante 15 min que contenía TFA al 0,1%, 20 ml/min) dio 33 mg (rendimiento del 90%) del compuesto 3B como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 3,98 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 371,19 [M+H]^{+}.

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C. Preparación de 6-(metoximetil)-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo (3C)

A una disolución del compuesto 3B (9,0 mg, 0,025 mmol) en DMF: THF (1:1, 1 ml) a 0ºC se le añadió KOtBu (1,5 M en THF, 0,025 ml, 0,038 mmol). Tras agitar durante 45 min a 0ºC, se añadió yoduro de metilo (2 \mul, 0,025 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante otra hora, se calentó hasta 25ºC y se agitó durante 3 h. Durante este tiempo, no se observó ninguna reacción. La mezcla de reacción se enfrió una vez más hasta 0ºC, se añadió más KOtBu (1,5 M en THF, 0,25 ml, 0,38 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min, tras lo que se añadió más yoduro de metilo (20 \mul, 0,25 mmol). Tras agitar durante otras 2 h a 0ºC, la reacción se extinguió por la adición de NH_{4}Cl acuoso saturado (10 ml) y diclorometano (10 ml). Se separaron las fases, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 10 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO_{4}, se filtró, se concentró y se purificó por medio de HPLC preparativa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluyendo con metanol acuoso al 30-100% que contenía TFA al 0,1% durante 15 min, 20 ml/min) dando el producto deseado como un semi-sólido amarillo. HPLC: 100% a 4,27 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 385,21 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 4 Preparación de ácido 4-[(2-cloro-4-yodofenil)amino]-3-ciano-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

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34

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A una disolución de etiléster del ácido 4-[(2-cloro-4-yodofenil)amino]-3-ciano-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (59 mg, 0,123 mmol, preparado como se describió en el Ejemplo 1) en THF (1 ml) se le añadió NaOH (1N, 1 ml). La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 72 h y a continuación se vertió sobre NaHCO_{3} (30 ml) y EtOAc (30 ml). Se separaron las fases y la fase acuosa se acidificó a pH = 2 y se extrajo con diclorometano (2 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró en vacío dando 20 mg (rendimiento del 36%) del compuesto 4, que se usó sin otra purificación. RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 8,99 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,03 (s, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,75 (d, 1 H), 7,29 (d, 1H), 2,78 (s, 3 H). HPLC: 100% a 4,04 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm).

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Ejemplo 5 Preparación de 4-[(2-cloro-4-yodofenil)amino]-3-ciano-5-metil-N-(2-metilpropoxi)pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxamida

35

A una disolución del compuesto 4 (20 mg, 0,442 mmol) en THF:diclorometano (1:1, 1 ml) se le añadió isopropilhidroxilamina HCl (7 mg, 0,053 mmol), base de Hüning (18 \mul, 0,106 mmol) y PyBOP (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il oxitripirrolidinofosfonio) (28 mg, 0,0531 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h, se concentró en vacío y se diluyó con HCl al 10% (15 ml) y Et_{2}O (15 ml). Se separaron las fases y la fase orgánica se lavó con NaOH 1N (15 ml) y salmuera (15 ml), se secó sobre MgSO_{4}, se filtró y se concentró en vacío. La fase acuosa se alcalinizó por medio de la adición de NaOH 1N y se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO_{4}, se filtró, se concentró en vacío y se añadió a las fases orgánicas combinadas de las primeras extracciones. La HPLC preparativa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluyendo con metanol acuoso al 30-100% que contenía TFA al 0,1% durante 15 min, 20 ml/min) dio 1,1 mg del compuesto 5. HPLC: 100% a 3,68 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 524,02 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 6 Preparación del ácido 3-ciano-4-[[5-[(metoxiamino)carbonil]-2-metilfenil]amino]-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

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A una disolución de etiléster del ácido 3-ciano-4-[[5-[(metoxiamino)carbonil]-2-metilfenil]amino]-5-metilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (160 mg, 0,393 mmol, preparado como se describió en el Ejemplo 1) en THF (2 ml) se le añadió NaOH 1N (4 ml). La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 2 días y a continuación se neutralizó con ácido cítrico 1M y se vertió sobre diclorometano. La fase orgánica se separó y se extrajo con diclorometano y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró en vacío. El residuo resultante se purificó por medio de HPLC preparativa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluyendo con metanol acuoso al 30-100% que contenía TFA al 0,1% durante 15 min, 20 ml/min) dando 36 mg (rendimiento del 39%) del compuesto 6. HPLC: 100% a 3,33 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 380,24 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 7 Preparación de 3-ciano-4-[[5-[(metoxiamino)carbonil]-2-metilfenil]amino]-5-metil-N-[(1S)-1-feniletil]pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxamida

37

A una disolución del compuesto 6 (19 mg, 0,05 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió EDC (14,4 mg, 0,075 mmol), HOBt (10,1 mg, 0,075 mmol) y DIPEA (12,9 mg, 0,10 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a 25ºC. A continuación se añadió (S)-metilbencilamina (7,3 mg, 0,06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante otras 16 h a 25ºC. A continuación la reacción se diluyó con diclorometano y se vertió en agua. Se separaron las fases y la fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró en vacío. El residuo se purificó por medio de HPLC preparativa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluyendo con metanol acuoso al 30-100% durante 15 min que contenía TFA al 0,1%, 20 ml/min) dio 21 mg (rendimiento del 87%) del compuesto 7 como un semi-sólido amarillo. HPLC: 100% a 3,79 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 483,36 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 8 Preparación de 6-formil-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo

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38

A una disolución del compuesto 3B (266 mg, 0,72 mmol) en dicloroetano (30 ml) se le añadió MnO_{2} (200 mg, 2,0 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 3 h, se enfrió hasta 25ºC, se diluyó con diclorometano y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró en vacío y se purificó por medio de cromatografía en columna en gel de sílice (MeOH al 0,5%/CH_{2}CI_{2}) dando 238 mg (rendimiento del 90%) del compuesto 8 como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 3,37 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 min, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 369,08 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 9 Preparación del ácido 3-ciano-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

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A una disolución del compuesto 3A (1,50 g, 3,64 mmol) en THF (50 ml) se le añadió NaOH (1 M, 20,0 ml) y EtOH (25 ml). La reacción se calentó a 80ºC, evaporando el THF de manera eficaz, y, tras 1 h, la mezcla de reacción se volvió homogénea. Se continuó calentando durante otras 6 h, tras lo que la reacción se enfrió hasta ta y se neutralizó con HCl (1 M, 20,0 ml). Los sólidos resultantes se filtraron, se lavaron con agua y se secaron dando el compuesto 9 (1,33 g, rendimiento del 95%) como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 1,84 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 489,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 10 Preparación de una biblioteca de amidas Preparación de 3-ciano-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]-N-fenilpirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxamida

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40

A una disolución del compuesto 9 (11,5 mg, 0,030 mmol) y HOAt (6,1 mg, 0,045 mmol) en THF (0,60 ml) se le añadió una disolución de anilina (14 mg, 0,15 mmol) en THF (0,15 ml) seguida por una disolución de EDC (11,5 mg, 0,06 mmol) en cloroformo (0,30 ml). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante la noche y a continuación se enfrió hasta ta y se diluyó con MeOH (0,4 ml). La mezcla resultante se purificó mediante elución a través de un cartucho SCX/SAX (500 mg/500 mg) cartuchos de intercambio iónico SCX SAX de unión a sílice, suministrados por United Chemical Technologies, Inc., Bristol, PA, con MeOH, seguido por la concentración del disolvente en vacío, dando 13,2 mg (rendimiento del 96%) del compuesto 10 como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 2,05 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 minutos, 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 460,0 [M+H]^{+}.

El procedimiento anterior se utilizó para preparar una biblioteca de 68 compuestos amida por medio de la sustitución del reactivo anilina por otras aminas. Los compuestos se purificaron usando el procedimiento anterior o por medio de HPLC preparativa (Shimadzu VP-ODS 20,0 x 50,0 mm eluyendo con MeOH al 25-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 7 minutos, 10 ml/min, con control a 220 nm).

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Ejemplo 11 Preparación de 6-amino-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo (11B)

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A. Preparación de fenilmetiléster del ácido [3-ciano-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1, 2-b]piridazin-6-il]carbámico, (11A)

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42

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A una disolución del compuesto 9 (192 mg, 0,50 mmol) en dioxano (anhidro, 4 ml) bajo una atmósfera de N_{2} se le añadió trietilamina (0,140 ml, 1,00 mmol) y DPPA (0,216 ml, 1,00 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche. A continuación se añadió alcohol bencílico (0,310 ml, 3,00 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 75ºC durante 4 h, se concentró en vacío y se purificó por medio de cromatografía en columna en gel de sílice. (EtOAc al 20 a 30%/hexanos) dando compuesto 11A como un aceite amarillo (172 mg, 70%). HPLC: 100% a 4,01 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 4 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 490,0 [M+H]^{+}.

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B. Preparación de 6-amino-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo (11B)

A una disolución del compuesto 11A (40 mg, 0,082 mmol) en MeOH (4ml) se le añadió Pd/C (12 mg) y la mezcla de reacción se agitó bajo hidrógeno(1 atm) durante 30 minutos, tras lo que se añadió HCl (4M en dioxano, 0,1 ml). La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró en vacío dando 32 mg del compuesto 11B como un sólido naranja (rendimiento cuantitativo como sal HCl). HPLC: 100% a 2,90 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 4 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 356,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 12 Preparación de N-[3-ciano-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)aminolpirrolo[1,2-b]piridazin-6-il]acetamida

43

A una disolución del compuesto 11B (sal HCl, 32 mg, 0,082 mmol) en THF (2 ml) se le añadió anhídrido acético (11 mg, 0,11 mmol) seguido por trietilamina (33 mg, 0,33 mmol) y la reacción se agitó a ta durante 30 min. Tras extinguir con MeOH, la mezcla de reacción se agitó durante otros 30 min, se concentró en vacío y se purificó por medio de cromatografía de resolución rápida en gel de sílice (EtOAc al 40 a 50%/diclorometano) dando el compuesto 12 como un aceite amarillo (30 mg, rendimiento del 92%). HPLC: 100% a 3,46 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 398,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 13 Preparación del ácido 3-(aminometil)-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

44

A una disolución del compuesto 9 (27 mg, 0,070 mmol) en MeOH:THF (2:1 v/v, 6 ml) se le añadió TFA (30 mg) seguido por Pd/C (10 mg). La mezcla de reacción se agitó bajo hidrógeno (1 atm) durante la noche y a continuación se filtró a través de una almohadilla de Celite. El filtrado se concentró en vacío y el residuo se purificó por medio de varias destilaciones azeotrópicas con MeOH para eliminar el exceso de TFA. Este procedimiento dio el compuesto 13 como un sólido amarillo (35 mg, cuantitativo). HPLC: 100% a 2,96 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 4 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 389. 0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 14 Preparación del ácido 3-[(acetilamino)metil]-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

45

A una disolución del compuesto 13 (10 mg, 0,02 mmol) en THF se le añadió trietilamina (1 gota, aproximadamente 10 mg) seguido por anhídrido acético (1 gota, aproximadamente 10 mg). La reacción se agitó a ta durante 10 min y a continuación se concentró en vacío. El residuo se volvió a disolver en THF y se añadió NaOH (1M, 2 gotas). La mezcla resultante se agitó a ta durante 2 horas, se neutralizó con HCl (1M) y se purificó por medio de HPLC preparativa (Shimadzu VP-ODS 20,0 x 50,0 mm eluyendo con MeOH al 25-90% /H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 7 minutos, 10 ml/min, con control a 220 nm) dando el compuesto 14 como un sólido amarillo (7 mg, rendimiento del 81%). HPLC: 100% a 3,46 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 4 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 431,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 15 Preparación de N-[3-ciano-5-metil-4-[(4-fenoxifenil)amino]pirrolo[1,2-b]piridazin-6-il]-N'-metilurea

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Se agitó una disolución del compuesto 9 (19 mg, 0,05 mmol), trietilamina (0,014 ml, 0,10 mmol) y DPPA (0,022 ml, 0,10 mmol) en dioxano seco (1 ml) bajo N_{2} durante 12 h. La reacción se calentó a continuación hasta 80ºC durante 1 h y posteriormente se dejó enfriar hasta 25ºC en reposo. Se añadió metilamina (disolución en THF 2,0 M, 0,30 ml, 0,60 mmol) y la reacción se agitó a 25ºC durante 1 h, se concentró en vacío y se purificó por medio de cromatografía de resolución rápida en columna de gel de sílice (EtOAc al 50 hasta 70%/diclorometano) dando el compuesto 15 (15 mg, 73%) como un sólido amarillo. HPLC: 100% a 3,44 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 4 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 413,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 16 Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-5-hidroximetil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (16C)

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A. Etiléster del ácido 5-bromometil-4-cloro-3-ciano-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (16A)

48

Se calentó una suspensión del compuesto 1D (79 mg, 0,30 mmol), NBS (59 mg, 0,33 mmol) y peróxido de benzoílo (5 mg, 0,02 mmol) en CCl_{4} (2 ml) a 77ºC durante 3 horas. Tras enfriar hasta temperatura ambiente, la reacción se purificó por medio de una columna corta de gel de sílice (eluida con CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 16A como un sólido amarillo (102 mg, 99%).

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B. 4-Etiléster del ácido cloro-3-ciano-5-hidroximetil-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (16B)

49

A una disolución del compuesto 16A (102 mg, 0,30 mmol) en THF (12 ml) se le añadió agua (3 ml) gota a gota. La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 3 días y a continuación se calentó a 50ºC durante 3 horas. Una vez enfriada hasta temperatura ambiente, se añadió NaHCO_{3} (70 mg) a la mezcla de reacción. La reacción se concentró hasta sequedad, se volvió a disolver en CH_{2}Cl_{2} y se filtró. El filtrado se concentró dando el compuesto 16B como un sólido amarillo (84 mg, 100%). Este compuesto se usó en las siguientes etapas sin otra purificación.

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C. Etiléster del ácido 3-ciano-5-hidroximetil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (16C)

Se calentó una disolución del compuesto 16B (84 mg, 0,30 mmol), 4-fenoxianilina (72 mg, 0,39 mmol) y trietilamina (0,083 ml, 0,60 mmol) en THF (2,5 ml) a 70ºC durante 30 min. Tras enfriar hasta temperatura ambiente, la reacción se concentró hasta aproximadamente 0,5 ml, se diluyó con MeOH (2 ml) y se filtró. El sólido se lavó con MeOH y se secó dando el compuesto 16C como un sólido amarillo (118 mg, 92%). HPLC: 92% a 2,12 min (tiempo de retención) (columna 5u C18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 429,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 17 Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-5-metoximetil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (17B)

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A. Etiléster del ácido 4-cloro-3-ciano-5-metoximetil-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (17A)

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A una disolución del compuesto 16A (31 mg, 0,09 mmol) en 1:1 MeOH:CH_{2}Cl_{2} (2 ml) se le añadió NaHCO_{3} (30 mg, 0,36 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 3 h, se calentó a 70ºC durante 1 h, se enfrió hasta temperatura ambiente, se concentró hasta sequedad, se volvió a disolver en CH_{2}Cl_{2} y se filtró. El filtrado se concentró dando el compuesto 17A como un sólido amarillo (26 mg, 98%).

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B. Etiléster del ácido 3-ciano-5-metoximetil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (17B)

El compuesto 17B se preparó según el procedimiento descrito en el Ejemplo 16C. HPLC: 96% a 2,24 min (tiempo de retención) (columna 5u C18-HC PrimeSphere, 4,6 x 30 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 443,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 18 Preparación de etiléster del ácido 3-ciano-5-formil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico (18)

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52

A una disolución del compuesto 16C (21,4 mg, 0,05 mmol) en cloroformo (1 ml) se le añadió MnO_{2} (< 5 micrómetros, activado, 17 mg, 0,20 mmol). La reacción se calentó a 55ºC durante la noche, se enfrió hasta temperatura ambiente y se purificó por medio de cromatografía de resolución rápida en una columna de gel de sílice (EtOAc al 0-2%/CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 18 como un sólido amarillo (20 mg, 94%). HPLC: 94% a 2,20 min (tiempo de retención) (Columna 5uC18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 427,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 19 Preparación de 1-[3-ciano-5-metil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-il]-3-(2-morfolin-4-il-etil)-urea (19-1) y 5-metil-6-(5-oxo-4,5-dihidro-tetrazol-1-il)-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo [1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo (19-2)

53

Se agitó una disolución del compuesto 9 (115 mg, 0,30 mmol), trietilamina (0,063 ml, 0,45 mmol) y DPPA (0,097 ml, 0,45 mmol) en dioxano (5 ml) durante la noche. Al día siguiente se añadió TMS-azida (0,080 ml, 0,60 mmol) y la temperatura de reacción se llevó a 80ºC. La reacción se calentó a 80ºC durante 2 horas, se enfrió hasta temperatura ambiente y se añadió 4-(2-aminoetil)morfolina (0,079 ml, 0,60 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, se concentró y se purificó por medio de cromatografía de resolución rápida en una columna de gel de sílice (MeOH al 3-6%/CH_{2}Cl_{2}) dando una mezcla de los compuestos 19-1 y 19-2 como un aceite amarillo. Este aceite se volvió a cristalizar desde MeOH dando el compuesto 19-1 como un sólido amarillo (116 mg, 76%). 19-1: HPLC: 97% a 3,11 min (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 4 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 512,0 [M+H]^{+}.

El licor madre de la recristalización anterior se hizo pasar a través de un cartucho SCX (500 mg) y se eluyó con MeOH (5 ml). El eluyente se concentró dando el compuesto 19-2 como un sólido amarillo (9 mg, 7%). 19-2: HPLC: 94% a 1,93 min (tiempo de retención) (columna 5u C18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 424,0 [M+H]^{+}.

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Ejemplos 20 A 144

Otros compuestos de la presente invención se prepararon por medio de procedimientos análogos a los descritos anteriormente. La Tabla 1 proporciona el nombre y la estructura de los compuestos representativos y sus tiempos de retención, así como el número de Ejemplo del procedimiento en el que se basó la preparación del compuesto. Las técnicas de cromatografía utilizadas para determinar el tiempo de retención de los compuestos que se presentan en la Tabla 1 son las siguientes:

CLEM =: Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O durante 4 minutos que contenía al TFA 0,1%; 4 ml/min, con control a 220 nm.

CLEM* =: Columna YMC S5 ODS, 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 4 ml/min, con control a 220 nm.

CLEM-1 =: Columna 5u C18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H_{2}O que contenía TFA al 0,1% durante 2 minutos; 5 ml/min, con control a 220 nm.

CL =: Columna YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 minutos, 4 ml/min, con control a 220 nm.

CL* =: Columna YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H_{2}O que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 minutos, 4 ml/min, con control a 220 nm.

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La masa molecular de los compuestos que se presentan en la Tabla 1 se determinó mediante EM (EV) por medio de la fórmula m/z.

TABLA 1

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TABLA 1 (continuación)

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Ejemplo 145 6-(1-Hidroxi-1-metil-etil)-5-metil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo

73

A una disolución del compuesto 3A (124 mg, 0,30 mmol) en THF (5 ml) a 0ºC se le añadió lentamente una disolución de MeMgBr 3,0 M en éter (0,40 ml, 1,20 mmol). La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y a continuación se calentó a 50ºC durante 1 h. Tras enfriar hasta temperatura ambiente, la reacción se extinguió con EtOAc (20 ml) y se añadió NH_{4}Cl acuoso saturado (20 ml). Las dos fases resultantes se separaron y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró hasta obtener un aceite naranja. Este aceite bruto se purificó por medio de cromatografía rápida en gel de sílice (se eluyó con EtOAc al 14-17%/CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 145 como un sólido amarillo (76 mg, 64%). HPLC: 97% a 1,97 min (tiempo de retención) (columna S5 C18 Phenom-Prime, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 399 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 146 6-Hidroxi-5-metil-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo

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74

A una mezcla de H_{2}O_{2} (al 50% en peso en H_{2}O, 0,0115 ml, 0,20 mmol) y CH_{2}Cl_{2} (2 ml) a -5ºC se le añadió BF_{3}\cdotOEt_{2}. La reacción se agitó a -5ºC durante 40 min antes de añadir una disolución del compuesto 145 (56 mg, 0,14 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (3 ml). La reacción se mantuvo a -5ºC durante 10 min y se extinguió con una disolución acuosa de Na_{2}SO_{3} (2 g, 10 ml). La reacción se diluyó con CH_{2}Cl_{2} y las dos fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2x10 ml). Las fases de CH_{2}Cl_{2} se combinaron y se concentraron en vacío dando un aceite marrón. Este producto bruto se purificó por medio de cromatografía rápida en gel de sílice (se eluyó con EtOAc al 10%/CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 146 como un sólido amarillo (32 mg, 64%). HPLC: 90% a 1,89 min (tiempo de retención) (columna C18 Phenom-Prime S5, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 357 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 147 5-Metil-6-(2-morfolin-4-il-etoxi)-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-3-carbonitrilo

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75

A una disolución del compuesto 146 (8,9 mg, 0,025 mmol), PPh_{3} (13,1 mg, 0,05 mmol) y 4-(2-hidroxietil)-morfolin (6,6 mg, 0,05 mmol) en THF seco (0,3 ml) bajo N_{2} a 0ºC se le añadió DEAD (8,7 mg, 0,05 mmol). La reacción se agitó a 0ºC durante 5 min, se calentó hasta temperatura ambiente durante 2 h, se concentró hasta sequedad y se purificó por medio de cromatografía rápida en gel de sílice (se eluyó con MeOH al 1-5%/CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 147 como un aceite amarillo (10 mg, 85%). HPLC: 96% a 1,69 min (tiempo de retención) (Columna C10 S5 Phenom-Prime, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 470 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 148 Etiléster del ácido 5-ciano-7-oxo-6-(4-fenoxi-fenil)-6,7-dihidro-9H-8-oxa-2a,3,6-triaza-benzo[cd]azulen-1-carboxílico

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76

A una disolución del compuesto 16C (26 mg, 0,061 mmol) y DIPEA (63 mg, 0,485 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (6 ml) a -50ºC se le añadió trifosgeno (30 mg, 0. 101 mmol). La reacción se calentó lentamente hasta 10ºC durante 1 h, se extinguió con MeOH (1 ml), se concentró hasta sequedad en vacío y se purificó por medio de cromatografía rápida en gel de sílice (se eluyó con EtOAc al 1-2%/CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 148 como un sólido amarillo (16 mg, 58%). HPLC: 91% a 2,09 min (tiempo de retención) (columna C10 S5 Phenom-Prime, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1%, 5 ml/min durante 2 min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 455 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 149 Etiléster del ácido 5-azidometil-3-ciano-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

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A una disolución del compuesto 148 (21 mg, 0,05 mmol) en THF (0,6 ml) se le añadió DPPA (22 mg, 0,08 mmol) seguido por DBU (9 mg, 0,06 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, se concentró y se purificó por medio de cromatografía de resolución rápida en una columna de gel de sílice (EtOAc al 0,5-1%/CH_{2}Cl_{2}) dando el compuesto 149 como un aceite amarillo (14 mg, 63%). HPLC: 99% a 2,16 min (tiempo de retención) (columna 5u C18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 454 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 150 Etiléster del ácido 5-aminometil-3-ciano-4-(4-fenoxi-fenilamino)-pirrolo[1,2-b]piridazin-6-carboxílico

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A una disolución del compuesto 149 (12 mg, 0,026 mmol) en una mezcla de THF:MeOH 1:2 (3 ml) se le añadió Pd/C (5 mg). La reacción se hidrogenó bajo un balón de hidrógeno a temperatura ambiente durante 30 min y se filtró. El filtrado se concentró dando 8 como un sólido amarillo (9 mg, 80%). No se requirieron más purificaciones. HPLC: 92% a 1,71 min (tiempo de retención) (columna 5u C18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 428 [M+H]^{+}.

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Ejemplo 151 Etiléster del ácido 5-ciano-7-oxo-6-(4-fenoxi-fenil)-6,7,8,9-tetrahidro-2a,3,6,8-tetraaza-benzo[cd]azulen-1-carboxílico

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A una disolución del compuesto 150 (7 mg, 0,016 mmol) y DIPEA (17 mg, 0,13 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (1,5 ml) a -70ºC se le añadió trifosgeno (9,5 mg, 0,032 mmol). La reacción se calentó lentamente hasta -5ºC durante 1 h, se extinguió con MeOH (0,5 ml), se concentró hasta sequedad y se purificó por medio de cromatografía rápida en gel de sílice (se eluyó con EtOAc al 6-8%/CH_{2}Cl_{2}) dando 9 como un sólido amarillo (6 mg, 81%). HPLC: 98% a 1,97 min (tiempo de retención) (Columna 5u C18-HC de PrimeSphere, 4,6 x 30 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm). EM (EV): m/z 454 [M+H]^{+}.

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Ejemplos 152 A 367

Otros compuestos de la presente invención se prepararon por medio de procedimientos análogos a los descritos anteriormente. La Tabla 2 proporciona el nombre y la estructura de los compuestos representativos y sus tiempos de retención, así como el número de Ejemplo del procedimiento en el que se basa la preparación del compuesto. Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos presentados en la Tabla 2 son los siguientes:

CL =: Columna YMC S5 ODS, 3,6 x 50 mm, eluyendo con metanol acuoso al 10-90% que contenía TFA al 0,1% durante 2 min, 5 ml/min, con control a 220 nm

CL* =: Columna YMC S5 ODS 4,6 x 50 mm eluyendo con MeOH al 10-90%/H_{2}O que contenía ácido fosfórico al 0,2% durante 4 minutos, 4 ml/min, con control a 220 nm.

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La masa molecular de los compuestos presentados en la Tabla 2 se determinó mediante EM (EV) por medio de la fórmula m/z.

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Ejemplo 368 Ensayos de VEGFR-2 y FGFR-1 cinasas

148

Las mezclas de incubación usadas para el ensayo de VEGFR-2 o FGFR-1 contenían el sustrato sintético poli-Glu:Tyr (4:1), ATP, ATP-\gamma-^{33}P y tampón que contiene Mn^{++} y/o Mg^{++}, ditiotreitol (DTT), albúmina de suero bovino (BSA) y tampón Tris. La reacción se inició por medio de la adición de enzima y después de 60 minutos se terminó por adición de ácido tricloroacético (TCA) a una concentración del 30% en porcentaje en volumen. Los inhibidores según la invención se llevaron a una concentración de 10 mM en DMSO. Los ensayos se prepararon en un formato de 96 pocillos. Los compuestos se diluyeron 1:500 en DMSO y a continuación 1:10 en agua para una concentración final en DMSO del 10%. Se añadieron alícuotas de 10 \mul a las filas B-H en un formato de 96 pocillos de DMSO al 10%. Se añadieron alícuotas de 20 \mul de solución de inhibidor a la fila A con una concentración 5 veces mayor que las condiciones del experimento. Se transfirieron alícuotas de 10 \mul a cada fila con 10 fases de pipeta para mezclar, y se descartaron 10 \mul en la fila F. La fila G era un control sin compuesto y la fila H era un control sin compuesto y sin enzima. La enzima y el sustrato se suministraron usando un equipo Tomtec Quadra.

Las placas se cubrieron con tapas de placa adhesivas, se incubaron a 27ºC durante 60 minutos, y a continuación se hicieron precipitar con ácido con TCA durante 20 minutos en hielo. El precipitado se transfirió a microplacas GF/C UniFilter-96 usando un recolector FilterMate Packard o Tomtec. La actividad se determinó mediante cuantificación de la radiactividad incorporada usando un contador de centelleo de microplacas TopCount de Packard, después de la adición del cóctel Microscint-20 en cada pocillo seco de las microplacas UniFilter.

Los compuestos de fórmula I probados inhibieron las VEGFR-2 y FGFR-1 cinasas con valores de CI_{50} \leq 80 \muM.

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Ejemplo 369 Ensayos de HER1, HER2 o HER4 cinasas

Se probaron los compuestos de interés en un tampón de cinasa que contenía Tris.HCl 20 mM, pH 7,5, MnCl_{2} 10 mM, ditiotreitol 0,5 mM, albúmina de suero bovino 0,1 mg/ml, poli(glu/tyr, 4:1), 0,1 mg/ml, ATP 1 \muM y [\gamma-^{33}P]-ATP 4 \muCi/ml. Poli(glu/tyr, 4:1) es un polímero sintético que sirve como aceptor de fosforilo y se adquirió de Sigma Chemicals. La reacción de cinasa se inició por medio de la adición de enzima y las mezclas de reacción se incubaron a 26ºC durante 1 hora. La reacción se terminó por la adición de EDTA 50 mM y las proteínas se hicieron precipitar por adición de ácido tricloroacético al 5%. Las proteínas precipitadas se recuperaron por filtración en placas Packard Unifilter y se midió la cantidad de radiactividad incorporada en un contador de centelleo TopCount.

Para preparar HER1 y HER4 recombinantes, se expresaron las secuencias citoplasmáticas de los receptores en células de insecto como proteínas de fusión con GST, que se purificaron por cromatografía de afinidad. La secuencia citoplasmática del HER_{2} se subclonó en el vector de expresión de baculovirus pBluBac4 (Invitrogen) y se expresó como una proteína sin marcar en las células de insecto. La proteína recombinante se purificó parcialmente por cromatografía de intercambio iónico.

Los presentes compuestos inhiben HER-1, HER-2 y HER4 cinasas con valores de CI_{50} entre 0,001 y 25 \muM. Los compuestos de preferencia tienen valores de CI_{50} entre 0,001 y 5,0 \muM. Los compuestos de mayor preferencia tienen valores de CI_{50} entre 0,001 y 1,0 \muM. Los compuestos de mayor preferencia tienen valores de CI_{50} entre 0,001 y
0,1 \muM.

Para seleccionar los compuestos según su actividad HERG puede usarse un ensayo de canales de potasio HERG (véase Caballero R, y col., "Direct Effects of Candesartan and Eprosartan on Human Cloned Potassium Channels Involved in Cardiac Repolarization", Molecular Pharmacology, 59 (4), 825-836, (2001)). Por consiguiente, los compuestos de preferencia tienen actividad inferior en el ensayo de canales HERG.

Para preparar HER1 recombinante, se expresó la secuencia citoplasmática del receptor en células de insecto como una proteína de fusión con GST, que se purificó por cromatografía de afinidad. La secuencia citoplasmática del HER2 se subclonó en el vector de expresión de baculovirus pBluBac4 (Invitrogen) y se expresó como una proteína sin marcar en las células de insecto. La proteína recombinante se purificó parcialmente por cromatografía de intercambio iónico.

Los compuestos de fórmula I probados inhibieron HER-1 y HER-2 cinasas con valores de CI_{50} \leq 100 \muM.

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Ejemplo 370 Ensayo de la cascada de cinasas MEK-ERK

Se adoptó un ensayo in vitro en placa de 96 pocillos que se describe en el Ejemplo 388, anterior, con varias modificaciones. Cada pocillo contenía tampón de ensayo 30 \mul (Tris-HCl, pH 7,5, MgCl_{2}, DTT, BSA, proteína básica de mielina (MBP), ATP y [\gamma-^{33}P]ATP), diluciones de inhibidor 10 \mul o disolvente DMSO vacío y mezcla de enzimas 10 \mul (MEK-EE 5-10 ng y ERK 100-200 ng). Las concentraciones finales en el ensayo eran Tris-HCl 20 mM, pH 7,5, MgCl_{2} 10 mM, DTT 0,3 mM, BSA 50 \mug, proteína básica de mielina (MBP) 50 \mug, ATP 10 \muM y [\gamma-^{33}P]ATP 200 nCi. Las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 60 minutos y las reacciones se terminaron por la adición de mezcla de parada 10 \mul que contenía EDTA 300 mM y BSA 25 \mug. Las muestras se sometieron a precipitación con TCA que contenía ATP (concentraciones finales: TCA, 3,2% y ATP, 2,3 mM). Las muestras se transfirieron a placas Unifilter GF/C de 96 pocillos de Packard utilizando un recolector Packard Filter Mate 196. Tras secar bajo la luz, se realizó el conteo de radiactividad de los residuos en los pocillos con un contador de microplacas Packard
Top Count.

Dado que este ensayo es un ensayo en cascada, se espera que se identifiquen los inhibidores de MEK y ERK. Se requirió otro análisis in vitro para determinar si los "éxitos" eran atribuibles a la inhibición de MEK (usando MEK y ERK deficiente de actividad cinasa) o inhibidores de ERK (usando ERK activado y MBP). No obstante, los compuestos de fórmula I probados inhibieron MEK y/o ERK con valores de CI_{50} \leq 10 \muM.

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Ejemplo 371 Generación de p38 cinasas

Se clonaron los cADN de las isoenzimas p38\alpha, \beta y \gamma humanas mediante PCR. Estos cADN fueron subclonados en el vector de expresión pGEX (Pharmacia). La proteína de fusión GST-p38 se expresé en E. coli y se purificó de sedimentos bacterianos por cromatografía de afinidad usando agarosa de glutationa. La proteína de fusión de p38 se activó incubando con MKK6 constitutivamente activa. La p38 activa se separó de MKK6 por cromatografía de afinidad. La MKK6 constitutivamente activa se generó según Raingeaud y col. [Mol. Cell. Biol., 1247-1255
(1996)].

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Ejemplo 372 Producción de TNF-\alpha por PBMC estimuladas con LPS

Se obtuvo sangre humana heparinizada de voluntarios sanos. Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se purificaron de la sangre humana por centrifugación en gradiente de densidad con Ficol-Hypaque y se resuspendieron en una concentración de 5 x 10^{6}/ml en medio de ensayo (medio RPMI que contenía suero fetal de ternera al 10%). Se incubaron 50 \mul de suspensión celular con 50 \mul de compuesto de prueba (concentración 4X en medio de ensayo que contenía DMSO al 0,2%) en placas de cultivo de tejidos de 96 pocillos durante 5 minutos a TA. A continuación se añadieron 100 ul de LPS (solución madre 200 ng/ml) a la suspensión celular y la placa se incubó durante 6 horas a 37ºC. Tras la incubación, se recogió el medio de cultivo y se almacenó a -20ºC. Se cuantificó la concentración de TNF-\alpha en el medio mediante un kit de ELISA convencional (Pharmingen - San Diego, CA). Las concentraciones de TNF-\alpha y los valores de CI_{50} para los compuestos de prueba (concentración del compuesto que inhibe la producción de TNF-\alpha estimulada por LPS en un 50%) se calcularon por medio de análisis de regresión lineal.

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Ejemplo 373 Ensayo de p38

Los ensayos se realizaron en placas de 96 pocillos de fondo en V. El volumen final del ensayo fue de 60 \mul preparado a partir de tres adiciones de 20 \mul de enzima, sustratos (MBP y ATP) y compuestos de prueba en el tampón de ensayo (Tris 50 mM, pH 7, 5, MgCl_{2} 10 mM, NaCl 50 mM y DTT 1 mM). La p38 activada, expresada en bacterias, se preincubó con los compuestos de prueba durante 10 minutos antes del inicio de la reacción con los sustratos. La reacción se incubó a 25ºC durante 45 minutos y se terminó añadiendo 5 \mul de EDTA 0,5 M a cada muestra. La mezcla de reacción se aspiró en un filtro prehumedecido utilizando un recolector de células Micro96 de Skatron (Skatron, Inc.), a continuación se lavó con PBS. Posteriormente se secó el filtro en un horno de microondas durante 1 minuto, se trató con cera de centelleo MeltilLex A (Wallac) y se realizó el conteo con un contador de centelleo Microbeta modelo 1450 (Wallac). Se analizaron datos de inhibición por regresión de mínimos cuadrados no lineal utilizando Prizm (GraphPadSoftware). La concentración final de los reactivos en los ensayos fue: ATP, 1, \muM; [\gamma-^{33}P] ATP, 3 nM, MBP (Sigma, número de catálogo M1891), 2 \mug/pocillo; p38, 10 nM; y DMSO, 0,3%.

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Ejemplo 374 Producción de TNF-\alpha por ratones estimulados con LPS

Se inyectaron ratones (hembras Balb/c, de 6-8 semanas de edad, Harlan Labs; n = 8/grupo de tratamiento) por vía intraperitoneal con lipopolisacárido 50 ug/kg (LPS; cepa 0111 de E. coli: B4, Sigma) suspendido en disolución salina estéril. Noventa minutos después, los ratones se sedaron por medio de inhalación de CO_{2}:O_{2} y se obtuvieron muestras de sangre. Se preparó el suero y se analizó para determinar las concentraciones de TNF-\alpha por medio de un ensayo ELISA comercial según las instrucciones del fabricante (R&D Systems, Minneapolis, MN).

Los compuestos de prueba se administraron por vía oral en diversos momentos antes de la inyección de LPS. Los compuestos se administraron como suspensiones o como disoluciones en diversos vehículos o agentes solubilizantes.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I):

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: R_{1} se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, aralquilo, halógeno, OR_{1}', OC(O)R_{1}', OC(O)OR_{1}', OC(O)NR_{1}'R_{1}'', OS(O)_{2}R_{1}''' y OS(O)_{2}NR_{1}'R_{1}''; en las que R_{1}' y R_{1}'' se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en grupos H, alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo y cicloalquilo; R_{1}' y R_{1}'' pueden también tomarse juntos de uno de un cicloalquilo, un arilo y un grupo heterocíclico; R_{1}''' se selecciona del grupo que consiste en alquilo, arilo, aralquilo, heterociclo y cicloalquilo;

: R_{2} se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}'''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S, en el que n es el número entero seleccionado de 1 o 2;

: R_{1} y R_{2} pueden tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico;

: X se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{2}'; y R_{2}' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, C(O)R_{1}, C(O)OR_{1}, SO_{2}NR_{1}'R_{1}'', C(O)NR_{1}'R_{1}'' y SO_{2}R_{1}'''; con la condición de que cuando X es S, R_{2} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo;

: R_{3} se selecciona del grupo que consiste en H, hidroxilo, alquilo, cicloalquilo, heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, carbalcoxi, carboxamido, halógeno, amina, amina sustituida, OR_{3}', CH_{2}OR_{3}', CH_{2}NR_{3}'R_{3}'', CH_{2}SR_{3}', OC(O)R_{3}', OC(O)OR_{3}'', OC(O)NR_{3}'R_{3}'', OS(O)_{2}R_{3}' y OS(O)_{2}NR_{3}'R_{3}''; en los que R_{3}' y R_{3}'' se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo y arilo; R_{3}' y R_{3}'' pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico; cuando R_{3} es un grupo carbalcoxi, acilo o carboxamido, estos grupos están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, dichos grupos sustituyentes se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, heterociclo, cicloalquilo y arilo; dichos grupos sustituyentes pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocícliclo;

: R_{2} y R_{3} pueden también tomarse juntos para formar un grupo cicloalquilo, arilo o heterocíclico;

: R_{4} se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo, aralquilo, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S, en el que n es el número entero seleccionado de 1 o 2;

: Y se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{4}'; R_{4}' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo, un heterociclo, C(O)R_{1}, C(O)OR_{1}, S(O_{2})NR_{1}'R_{1}'', C(O)NR_{1}'R_{1}'' y S(O_{2})R_{1}; con la condición de que cuando Y es S, R_{4} se selecciona del grupo que consiste en alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; cuando Y es NR_{4}', R_{4}' puede tomarse junto con R_{3} para formar un sistema de anillo heterocíclico;

: R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, ciano, alquilo, cicloalquilo, un grupo heterociclo, arilo, aralquilo, acilo, alquileno sustituido, R_{1}'OC(O), R_{1}'C(O), R_{1}''R_{1}'NC(O), R_{1}'''O(O)_{2}S, R_{1}'R_{1}''N(O)_{2}S y R_{1}'''(O)_{n}S; en el que n es el número entero 1 o 2;

: Z se selecciona del grupo que consiste en un enlace de valencia, O, S y NR_{5}'; R_{5}' se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo y un heterociclo; con la condición de que cuando Z es un enlace de valencia, R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, halógeno, un grupo alquileno sustituido y un grupo ciano; y, con la otra condición de que cuando Z es S, R_{5} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, heterociclo y aralquilo; y

: R_{6} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo, cicloalquilo, arilo, aralquilo, un heterociclo, acilo, carbalcoxi y carboxamido; dichos grupos carbalcoxi, acilo y carboxamido están opcionalmente sustituidos con uno o dos grupos sustituyentes, cada uno de los cuales se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, alquilo, aralquilo y un heterociclo,

: en la que, "alquilo" o "alq" en referencia a R_{1}, R_{1}', R_{1}'', R_{1}''', R_{2}, R_{2}', R_{3}, R_{3}', R_{3}'', R_{4}, R_{4}', R_{5}, R_{5}' y R_{6}, se refiere a radicales hidrocarburo de cadena lineal o ramificada, opcionalmente sustituidos con 1 a 4 sustituyentes que pueden incluir alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, cicloalquilo, halógeno, heterociclo, hidroxi, ciano, nitro, amino, monoalquilamino, dialquilamino, hidroxilamina, sulfonato, sulfamida, ciano-guanidina, oxo, carbalcoxi, carboxamido, SO_{n}, en el que n es 0, 1 o 2, y/o grupos acilo.

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2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que Z es un enlace de valencia y R_{5} es ciano.

3. El compuesto de la reivindicación 2, en el que R_{3} es metilo.

4. El compuesto de la reivindicación 3, en el que Y es N.

5. El compuesto de la reivindicación 4, en el que R_{4} es alquilo, arilo o heterociclo.

6. El compuesto de la reivindicación 5, en el que X es un enlace de valencia, O o NR_{2}'.

7. El compuesto de la reivindicación 6, en el que R_{2} es R_{1}'C(O).

8. El compuesto de la reivindicación 6, en el que R_{2}' es -C(O)NR_{1}'R_{2}' o -C(O)OR_{1}'.

9. El compuesto de la reivindicación 8, en el que R_{1}' y R_{1}'' son independientemente alquilo, cicloalquilo o heterociclo.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, que además comprende al menos un agente terapéutico adicional.

12. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en la que el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en inhibidores de la angiogénesis, antiestrógenos, progestágenos, inhibidores de aromatasas, antihormonas, antiprogestágenos, antiandrógenos, agonistas y antagonistas de LHRH, inhibidores de la testosterona 5\alpha-dihidrorreductasa, inhibidores de la farnesil transferasa, agentes anti-invasión, inhibidores del factor de crecimiento, antimetabolitos, antibióticos intercaladores antitumorales, derivados de platino, agentes alquilantes, agentes antimitóticos, inhibidores de la topoisomerasa, inhibidores del ciclo celular y modificadores de la respuesta biológica.

13. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en la que el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en linomida, inhibidores de la función integrina \alphav\beta3, angiostatina, razoxina, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, yodoxifeno, acetato de megestrol, anastrozol, letrazol, borazol, exemestano, flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona, acetato de goserelina, luprolida, finasteride, inhibidores de metaloproteinasa, inhibidores de la función del receptor urocinasa activador del plasminógeno, anticuerpos contra el factor de crecimiento, anticuerpos contra el receptor del factor de crecimiento, inhibidores de tirosina cinasa, inhibidores de serina/treonina cinasa, metotrexato, 5-fluorouracilo, análogos de purina y adenosina, arabinósido de citosina, doxorubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina, mitramicina, cisplatino, carboplatino, mostaza de nitrógeno, melfalán, clorambucilo, busulfan, ciclofosfamida, nitrosoureas de ifosfamida, tiotefan, vincristina, taxol, taxotere, análogos de epotilona, análogos de discodermolida, análogos de eleuterobin, etopósido, tenipósido, amsacrine, topotecan y flavopiridoles.

14. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en la que el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en taxol, Erbitux^{TM}, paraplatino e Ifex.

15. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 como agente activo para el tratamiento de una enfermedad proliferativa o inflamatoria.

16. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad proliferativa o inflamatoria.

17. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en combinación con al menos otro agente terapéutico adicional en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad proliferativa o inflamatoria.

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18. Uso según la reivindicación 17, en el que el agente terapéutico adicional se selecciona del grupo que consiste en inhibidores de la angiogénesis, antiestrógenos, progestágenos, inhibidores de aromatasas, antihormonas, antiprogestágenos, antiandrógenos, agonistas y antagonistas de LHRH, inhibidores de la testosterona 5\alpha-dihidrorreductasa, inhibidores de la farnesil transferasa, agentes anti-invasión, inhibidores del factor de crecimiento, antimetabolitos, antibióticos intercaladores antitumorales, derivados de platino, agentes alquilantes, agentes antimitóticos, inhibidores de la topoisomerasa, inhibidores del ciclo celular y modificadores de la respuesta biológica.