ES2348559T3

ES2348559T3 - ELASTOMERO DEVICE FOR SEEDING CELLS IN THE BACKGROUND OF A FILTER.

Info

Publication number: ES2348559T3
Application number: ES07108446T
Authority: ES
Inventors: Xiaoxi Chen; Charles L. Crespi
Original assignee: Becton Dickinson and Co
Current assignee: Becton Dickinson and Co
Priority date: 2006-05-19
Filing date: 2007-05-18
Publication date: 2010-12-09
Anticipated expiration: 2027-05-18

Abstract

Un artículo para su uso en la siembra de células en al menos un filtro (22) que se extiende a través de al menos un pocillo (34) de un dispositivo de ensayo (32), comprendiendo el citado artículo: un cuerpo de elastómero (24) que tiene superficies primera y segunda separadas (26, 28), y al menos un canal (30) que se extiende entre y a través de las citadas superficies primera y segunda (26, 28), estando formado el citado canal (30) para aplicarse de manera estanca y de manera desmontable a una superficie exterior (50) del pocillo (34) en una localización separada del filtro (22), estando rodeado el filtro (22, al menos parcialmente, por el citado canal (30)An article for use in planting cells in at least one filter (22) that extends through at least one well (34) of a test device (32), said article comprising: an elastomer body ( 24) which has separate first and second surfaces (26, 28), and at least one channel (30) extending between and through said first and second surfaces (26, 28), said channel (30) being formed to be applied tightly and detachably to an outer surface (50) of the well (34) in a separate location of the filter (22), the filter (22, at least partially, being surrounded by said channel (30)

Description

FIELD OF THE INVENTION

La invención objeto se refiere a artículos y métodos para la utilización en la siembra de células en filtros de dispositivos de ensayo. The subject invention relates to articles and methods for use in cell seeding in filters of test devices.

BACKGROUND OF THE INVENTION

Los ensayos de determinación de permeabilidad de fármacos son conocidos en la técnica anterior. Con referencia a la figura 1, se muestra una disposición típica para realizar tales ensayos. Se muestra una placa de inserción 10 de pocillos múltiples que tiene una pluralidad de pocillos abiertos 12 con una membrana porosa o filtro 14 que se extiende a través de un extremo inferior de cada uno de los pocillos 12. El filtro 14 típicamente es un material de difluoruro de polivinilideno (PVDF), tereftalato de polietileno (PET) o policarbonato (PC). También se muestra una placa de recepción correspondiente 16 que tiene pocillos receptores 18 cerrados por la parte inferior. En uso, las soluciones tampón que contienen compuestos que se van a analizar se disponen en los pocillos receptores 18. Las soluciones tampón sin los compuestos de interés se disponen en los pocillos 12 de la placa de inserción 10, y la placa de inserción 10 se coloca encima de la placa de recepción 16 entrando en contacto los filtros 14 con las soluciones tampón de los compuestos que están contenidos en los pocillos receptores 18. Las concentraciones de los compuestos en las soluciones, tanto en la placa de inserción 10 como en la placa de recepción 16, se analizan para observar la difusión de los compuestos a través de los filtros 14 y para determinar las permeabilidades de los compuestos. Drug permeability determination assays are known in the prior art. With reference to Figure 1, a typical arrangement for performing such tests is shown. A multi-well insert plate 10 is shown having a plurality of open wells 12 with a porous membrane or filter 14 extending through a lower end of each of the wells 12. The filter 14 is typically a material of polyvinylidene difluoride (PVDF), polyethylene terephthalate (PET) or polycarbonate (PC). A corresponding receiving plate 16 is also shown having receiver wells 18 closed at the bottom. In use, the buffer solutions containing compounds to be analyzed are arranged in the receiving wells 18. The buffer solutions without the compounds of interest are arranged in the wells 12 of the insert plate 10, and the insert plate 10 is Place the filters 14 on the receiving plate 16 with the buffer solutions of the compounds that are contained in the receiving wells 18. The concentrations of the compounds in the solutions, both in the insert plate 10 and in the plate of reception 16, are analyzed to observe the diffusion of the compounds through the filters 14 and to determine the permeabilities of the compounds.

En determinadas circunstancias (por ejemplo, en ciertos ensayos), puede ser deseable disponer una o más monocapas de células formadas en los filtros. Con referencia a la figura 2, se conoce en la técnica disponer soluciones de medios celulares en los pocillos 12 de la placa de inserción para incubar las células en las superficies interiores respectivas de los filtros 14 y formar monocapas de células sobre las mismas. Sin embargo, existe una mayor dificultad en la formación de monocapas de células en las superficies exteriores de los filtros. Como se muestra en la figura 3, se ha desarrollado una técnica mediante la cual la placa de inserción 10 se invierte y una gota de la solución del medio celular se dispone sobre cada uno de los filtros 14. Debido a que se puede disponer un volumen limitado del medio celular sobre cada uno de los filtros14, es difícil conseguir de una manera consistente una monocapa de células compactas, lo cual requiere una alta densidad celular y un largo tiempo de incubación. El fallo en la formación de una monocapa de células compactas puede conducir a que se formen "agujeros" en la monocapa de células y el posible fallo en los ensayos de determinación de permeabilidad del fármaco. In certain circumstances (for example, in certain assays), it may be desirable to arrange one or more monolayers of cells formed in the filters. With reference to Figure 2, it is known in the art to arrange cell media solutions in the wells 12 of the insert plate to incubate the cells on the respective inner surfaces of the filters 14 and form cell monolayers thereon. However, there is a greater difficulty in the formation of cell monolayers on the outer surfaces of the filters. As shown in Figure 3, a technique has been developed whereby the insert plate 10 is inverted and a drop of the solution of the cellular medium is disposed on each of the filters 14. Because a volume can be arranged Limited of the cellular medium on each of the filters14, it is difficult to consistently achieve a monolayer of compact cells, which requires a high cell density and a long incubation time. Failure to form a monolayer of compact cells can lead to "holes" forming in the cell monolayer and the possible failure in drug permeability determination tests.

Un ensayo de determinación de este tipo se describe, por ejemplo, en el documento en EP 0757 097 del solicitante. Such a determination test is described, for example, in the document in EP 0757 097 of the applicant.

La formación de monocapas de células en las superficies exteriores de las membranas del filtro es deseada por varias razones. En primer lugar, con monocapas de células en ambos lados de las membranas de filtro, en particular con tipos de células diferentes, se pueden estudiar las comunicaciones celulares. En segundo lugar, las monocapas de la superficie exterior permiten a los investigadores realizar estudios de transporte de fármacos polarizados de una manera que permita el uso de configuraciones idénticas de soluciones tampón en cada dirección del transporte del fármaco (apical a basolateral y basolateral a apical). The formation of cell monolayers on the outer surfaces of the filter membranes is desired for several reasons. First, with cell monolayers on both sides of the filter membranes, in particular with different cell types, cell communications can be studied. Second, the outer surface monolayers allow researchers to conduct polarized drug transport studies in a way that allows the use of identical configurations of buffer solutions in each direction of drug transport (apical to basolateral and basolateral to apical) .

SUMMARY OF THE INVENTION

Se proporciona un artículo en la presente memoria descriptiva para su uso en la siembra de células sobre al menos un filtro que se extiende a través de al menos un pocillo de un dispositivo de ensayo. El artículo incluye un cuerpo de elastómero que tiene superficies primera y segunda separadas, y al menos un canal que se extiende entre y a través de las superficies primera y segunda. El canal está formado para aplicarse de manera estanca y de manera desmontable, a una superficie exterior del pocillo en una posición separada del filtro, estando el filtro rodeado, al menos parcialmente, por el canal. De manera ventajosa con la invención objeto, la monocapa de células se pueden formar sobre la superficie exterior del filtro. El dispositivo de ensayo puede ser una placa de pocillos múltiples, una placa de inserción, una columna, un tubo de ensayo, o una pipeta. An article is provided herein for use in planting cells on at least one filter that extends through at least one well of a test device. The article includes an elastomer body having separate first and second surfaces, and at least one channel that extends between and through the first and second surfaces. The channel is formed to be applied tightly and detachably, to an outer surface of the well in a position separated from the filter, the filter being surrounded, at least partially, by the channel. Advantageously with the subject invention, the cell monolayer can be formed on the outer surface of the filter. The test device may be a multi-well plate, an insert plate, a column, a test tube, or a pipette.

En otro aspecto adicional de la invención objeto, se proporciona un método para la siembra de células en al menos un filtro que se extiende a través de al menos un pocillo de un dispositivo de ensayo. El método incluye proporcionar un cuerpo que tenga superficies primera y segunda separadas, y al menos un canal que se extiende entre y a través de las superficies primera y segunda; y disponer el cuerpo sobre el pocillo aplicándose el canal de manera estanca al pocillo en una posición separada del filtro y estando rodeado el filtro, al menos parcialmente, por el canal. In a further aspect of the subject invention, there is provided a method for planting cells in at least one filter that extends through at least one well of a test device. The method includes providing a body having separate first and second surfaces, and at least one channel extending between and through the first and second surfaces; and disposing the body on the well by applying the channel in a sealed manner to the well in a position separated from the filter and the filter being surrounded, at least partially, by the channel.

Estas y otras características de la invención objeto se entenderán mejor por medio del estudio de la descripción detallada que sigue y de los dibujos que se acompañan. These and other features of the subject invention will be better understood by studying the detailed description that follows and the accompanying drawings.

BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES

La figura 1 muestra una disposición de una placa de inserción y de una placa Figure 1 shows an arrangement of an insert plate and a plate

de recepción; of reception;

la figura 2 muestra esquemáticamente una monocapa de células formada Figure 2 schematically shows a cell monolayer formed

sobre una superficie interior del filtro; on an inner surface of the filter;

la figura 3 muestra el método de la técnica anterior para la siembra de células Figure 3 shows the prior art method for cell seeding

sobre las superficies exteriores de los filtros; on the outer surfaces of the filters;

la figura 4 muestra un artículo formado de acuerdo con la invención objeto en Figure 4 shows an article formed in accordance with the invention object in

uso con un dispositivo de ensayo en forma de una placa de inserción; use with a test device in the form of an insert plate;

la figura 5 muestra esquemáticamente una monocapa de células formada en Figure 5 schematically shows a cell monolayer formed in

una superficie exterior del filtro, y, an outer surface of the filter, and,

la figura 6 muestra esquemáticamente monocapas de células formadas en las Figure 6 schematically shows monolayers of cells formed in the

superficies interior y exterior del filtro. interior and exterior filter surfaces.

DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Con referencia a la figura 4, se proporciona un artículo 20 para su uso en la siembra de células sobre una o más membranas o filtros 22. El artículo 20 incluye un cuerpo 24, que es preferentemente unitario, y superficies primera y segunda separadas 26 y 28, que se forman preferentemente para que sean paralelas una a la otra. Se forman uno o más canales 30 para que se extiendan entre y a través de las superficies primera y segunda 26, 28. El cuerpo 24 puede estar formado con dimensiones variables con diversas cantidades de canales 30 que se proporcionan y se disponen en diversas agrupaciones. With reference to Figure 4, an article 20 is provided for use in planting cells on one or more membranes or filters 22. Article 20 includes a body 24, which is preferably unitary, and separate first and second surfaces 26 and 28, which are preferably formed to be parallel to each other. One or more channels 30 are formed to extend between and through the first and second surfaces 26, 28. The body 24 may be formed with varying dimensions with varying amounts of channels 30 that are provided and arranged in various groupings.

Las secciones transversales de los canales 30 pueden ser constantes o pueden ser variables a lo largo de toda la longitud de los mismos. Preferentemente, como se muestra en la figura 4, los canales 30 se forman con configuraciones estrechadas progresivamente que convergen hacia la segunda superficie 28. Las secciones transversales de los canales 30 se formarán para definir obturaciones impermeables a los fluidos con los pocillos correspondientes de un dispositivo de ensayo, como se describe a continuación. The cross sections of the channels 30 can be constant or they can be variable along their entire length. Preferably, as shown in Figure 4, the channels 30 are formed with progressively narrowed configurations that converge towards the second surface 28. The cross sections of the channels 30 will be formed to define fluid impervious seals with the corresponding wells of a device test, as described below.

Es preferido que el cuerpo 24 se forme de un material de elastómero. Más preferiblemente, el cuerpo 24 está formado de polidimetilsiloxano (PDMS). El PDMS permite la obturación ajustada y la retirada fácil y no destructiva después de su uso. It is preferred that the body 24 be formed of an elastomer material. More preferably, body 24 is formed of polydimethylsiloxane (PDMS). The PDMS allows tight shutter and easy and non-destructive removal after use.

Los filtros 22 pueden estar formados de cualquier material conocido, incluyendo material de PVDF, PET o policarbonato (PC). Además, los filtros 22 pueden ser de distintos espesores e incluir poros de diferentes dimensiones y configuraciones. The filters 22 may be formed of any known material, including PVDF, PET or polycarbonate (PC) material. In addition, the filters 22 can be of different thicknesses and include pores of different dimensions and configurations.

El artículo 20 puede ser utilizado en diversas aplicaciones, pero es especialmente adecuado para su uso en combinación con un dispositivo de ensayo Article 20 can be used in various applications, but is especially suitable for use in combination with a test device.

32. El dispositivo de ensayo 32 puede ser cualquier dispositivo que se utiliza en procedimientos de ensayo o prueba (por ejemplo, ensayos de determinación de permeabilidad de fármacos), incluyendo pero sin limitación, placas de pocillos múltiples, placas de inserción, columnas, tubos de ensayo, y pipetas. Con propósitos ilustrativos, el dispositivo de ensayo 32 se muestra y se describe como una placa de inserción, pero son posibles otras configuraciones. El dispositivo de ensayo 32 incluye al menos un pocillo 34 a través del cual se extiende el filtro 22. Preferiblemente, el pocillo 34 termina en un extremo abierto 36 a través del cual se extiende el filtro 22. El filtro 22 se puede fijar al pocillo 34 utilizando diversas técnicas, incluyendo, a título de ejemplos no limitativos, fijación por unión, por fusión y mecánica. Una superficie interior 38 del filtro 22 está orientada a un interior 40 del pocillo 34, mientras que la superficie exterior 42 del filtro 22 da la espalda al interior 40. El dispositivo de ensayo 32 puede incluir una pluralidad de pocillos 34, teniendo cada uno de ellos uno o más de filtros 22. Preferentemente, cada uno de los pocillos 34 incluye un extremo de recepción abierto 44 opuesto al extremo abierto 36, formado para recibir soluciones de ensayo (por ejemplo, solución o soluciones tampón en el pocillo respectivo 34. 32. The test device 32 may be any device that is used in test or test procedures (eg, drug permeability determination tests), including but not limited to, multi-well plates, insert plates, columns, tubes of test, and pipettes. For illustrative purposes, test device 32 is shown and described as an insert plate, but other configurations are possible. The test device 32 includes at least one well 34 through which the filter 22 extends. Preferably, the well 34 ends at an open end 36 through which the filter 22 extends. The filter 22 can be fixed to the well 34 using various techniques, including, by way of non-limiting examples, binding, fusion and mechanical fixation. An inner surface 38 of the filter 22 is oriented to an inside 40 of the well 34, while the outer surface 42 of the filter 22 turns its back on the inside 40. The test device 32 may include a plurality of wells 34, each having they one or more of filters 22. Preferably, each of the wells 34 includes an open receiving end 44 opposite to the open end 36, formed to receive test solutions (eg, solution or buffer solutions in the respective well 34.

Es preferido que el artículo 20 esté provisto de un número y localizaciones de canales 30 que se corresponden al número y localizaciones de los pocillos 34 en el dispositivo de ensayo 32. De esta manera, el artículo 20 se puede utilizar para sembrar células simultáneamente en la pluralidad de los filtros 22. Además, cada uno de los canales 30, en particular en la segunda superficie 28, está formado para definir una obturación estanca a los fluidos en los pocillos 34, estando siendo rodeados los filtros 22, al menos parcialmente, por los canales 30. Específicamente, al menos las superficies exteriores 42 de los filtros 22 deben ser rodeados por los canales 30; sin embargo, es preferido que los filtros 22 sean rodeados completamente por los canales It is preferred that article 20 is provided with a number and locations of channels 30 corresponding to the number and locations of wells 34 in the test device 32. Thus, article 20 can be used to plant cells simultaneously in the plurality of filters 22. In addition, each of the channels 30, in particular on the second surface 28, is formed to define a fluid-tight seal in the wells 34, the filters 22 being surrounded, at least partially, by the channels 30. Specifically, at least the outer surfaces 42 of the filters 22 must be surrounded by the channels 30; however, it is preferred that the filters 22 be completely surrounded by the channels

30. 30

Con referencia a la Figura 4, se representa la utilización del artículo 20. Es preferido que en una primera etapa 46, el dispositivo de ensayo 32 sea situado para que tenga las superficies exteriores 42 de los filtros 22 orientadas hacia arriba por la gravedad (por ejemplo, invirtiendo el dispositivo de ensayo 32). En una segunda etapa 48, el cuerpo 24 se dispone sobre el dispositivo de ensayo 32, aplicándose de manera estanca los canales 30 a los pocillos 34, estando rodeados los filtros 22, al menos parcialmente, por los canales 30. Los canales 30 forman obturaciones impermeables en las superficies exteriores 50 de los pocillos 34. Cuando los canales 30 tienen una configuración estrechada progresivamente, es preferido que los pocillos 34 se inserten en los canales 30 a través de la segunda superficie 28, que define aberturas más estrechas en los canales 30 de la primera superficie 26. With reference to Figure 4, the use of article 20 is depicted. It is preferred that in a first step 46, the test device 32 be positioned so that it has the outer surfaces 42 of the filters 22 oriented upwards by gravity (by example, inverting the test device 32). In a second stage 48, the body 24 is disposed on the test device 32, the channels 30 being tightly applied to the wells 34, the filters 22 being surrounded, at least partially, by the channels 30. The channels 30 form seals impervious to the outer surfaces 50 of the wells 34. When the channels 30 have a progressively narrowed configuration, it is preferred that the wells 34 are inserted into the channels 30 through the second surface 28, which defines narrower openings in the channels 30 of the first surface 26.

En una tercera etapa 52, una o más soluciones de medio celular 54 se disponen en cada uno de los canales 30 por encima de los filtros 22. Con las obturaciones estancas a los fluidos definidas por los canales 30, y estando rodeados los filtros 22, al menos parcialmente, por los canales 30, las soluciones de medio celular 54 se mantienen retenidas dentro de los canales 30 en comunicación con los filtros 22. Es preferido que se permita la incubación de las células con el fin de facilitar la formación del crecimiento celular en las superficies exteriores 42 de los filtros 22. Una vez preparadas, las soluciones de medio celular 54 se retiran y se suelta el artículo 20, dejando el dispositivo de ensayo 32 listo para su utilización In a third stage 52, one or more cell media solutions 54 are arranged in each of the channels 30 above the filters 22. With the fluid-tight seals defined by the channels 30, and the filters 22 being surrounded, at least partially, through channels 30, cell media solutions 54 are held within channels 30 in communication with filters 22. It is preferred that incubation of cells is allowed in order to facilitate cell growth formation. on the outer surfaces 42 of the filters 22. Once prepared, the cell media solutions 54 are removed and the article 20 is released, leaving the test device 32 ready for use

Como se muestra en la figura 5, se pueden desarrollar una monocapa celular 56 en la superficie exterior 42 de uno o más de los filtros 22 utilizando la presente invención. Para cada uno de los filtros 22, la monocapa celular 56 puede estar formada ajustadamente debido a la capacidad de mantener las soluciones de medio celular 54 en cantidades suficientemente grandes a través de la superficie exterior 42 de la extensión completa del filtro 22. As shown in Figure 5, a cell monolayer 56 can be developed on the outer surface 42 of one or more of the filters 22 using the present invention. For each of the filters 22, the cell monolayer 56 may be tightly formed due to the ability to maintain the cell media solutions 54 in sufficiently large quantities through the outer surface 42 of the full extent of the filter 22.

La invención objeto se puede utilizar con metodología convencional. Por ejemplo, en relación con la figura 6, las técnicas conocidas para la siembra de células pueden ser utilizadas para desarrollar la monocapa celular 56 en la superficie interior 38 de uno o más de los filtros 22. Además, la invención objeto puede ser utilizada para desarrollar la monocapa celular 56 en la superficie exterior 42 del uno o más filtros 22 para tener el o los filtro(s) 22 emparedado(s) por las monocapas de células 56. Las monocapas de células 56 se pueden formar del mismo o de diferentes tipos de células para permitir el estudio de las comunicaciones celulares. The subject invention can be used with conventional methodology. For example, in relation to Figure 6, known techniques for cell seeding can be used to develop the cell monolayer 56 on the inner surface 38 of one or more of the filters 22. In addition, the subject invention can be used to developing the cell monolayer 56 on the outer surface 42 of the one or more filters 22 to have the filter (s) 22 sandwiched by cell monolayers 56. Cell monolayers 56 can be formed of the same or different cell types to allow the study of cellular communications.

Claims

1. one.: Un artículo para su uso en la siembra de células en al menos un filtro (22) que se extiende a través de al menos un pocillo (34) de un dispositivo de ensayo (32), comprendiendo el citado artículo: An article for use in planting cells in at least one filter (22) that extends through at least one well (34) of an assay device (32), said article comprising:

an elastomer body (24) having separate first and second surfaces (26, 28), and at least one channel (30) extending between and through said first and second surfaces (26, 28), the said channel (30) to be applied tightly and detachably to an outer surface (50) of the well (34) in a separate location of the filter (22), the filter (22, at least partially, being surrounded by the said channel (30)

2. 2.: Un artículo como en la reivindicación 1, en el que el citado cuerpo de elastómero (24) está formado por polidimetilsiloxano. An article as in claim 1, wherein said elastomer body (24) is formed by polydimethylsiloxane.

3. 3.: Un artículo como en la reivindicación 1, en el que el citado canal (30) tiene una forma estrechada progresivamente. An article as in claim 1, wherein said channel (30) has a progressively narrowed shape.

4. Four.: Un método para la siembra de células en al menos un filtro (22) que se extiende a través de al menos un pocillo (34) de un dispositivo de ensayo (32), comprendiendo el citado método: A method for planting cells in at least one filter (22) that extends through at least one well (34) of an assay device (32), said method comprising:

providing a body (24) having separate first and second surfaces (26, 28) and at least one channel (30) extending between and through said first and second surfaces (26, 28), and, arranging said body (24) on said well (34) the said channel (30) being applied tightly to said well (34) in a separate location of said filter (22) and said filter (22) being surrounded, at least partially , in said channel (30).

5. 5.: Un método como en la reivindicación 4, en el que el citado filtro (22) incluye una superficie interior orientada hacia el interior del citado pocillo (34) y una superficie A method as in claim 4, wherein said filter (22) includes an interior surface oriented towards the interior of said well (34) and a surface

outer back to the inside of said well (34), said outer surface of said filter (22) being surrounded by said channel (30).

6. 6.: Un método como en la reivindicación 5, que comprende, además, la etapa de dirigir la citada superficie exterior del citado filtro (22) para que se oriente por gravedad hacia arriba antes de la etapa de disponer el citado cuerpo (24) sobre el citado pocillo. A method as in claim 5, further comprising the step of directing said outer surface of said filter (22) so that it is oriented by gravity upwards before the stage of arranging said body (24) on said cited well.

7. 7.: Un método como en la reivindicación 5 ó 6, que comprende, además, la etapa de sembrar células sobre la citada superficie interior del citado filtro (22). A method as in claim 5 or 6, further comprising the step of sowing cells on said inner surface of said filter (22).

8. 8.: Un método como en la reivindicación 4, en el que el citado cuerpo (24) es de elastómero. A method as in claim 4, wherein said body (24) is made of elastomer.

9. 9.: Un método como en la reivindicación 4, en el que el citado cuerpo (24) está formado por polidimetilsiloxano. A method as in claim 4, wherein said body (24) is formed by polydimethylsiloxane.

10. 10.: Un método como en la reivindicación 4, en el que el citado canal (30) tiene una forma estrechada progresivamente. A method as in claim 4, wherein said channel (30) has a progressively narrowed shape.

11. eleven.: Un método como en la reivindicación 10, en el que el citado canal (30) converge desde la citada primera superficie (26) a la citada segunda superficie (28), y el citado pocillo (34) se extiende dentro del citado canal (30) a través de la citada segunda superficie (28) estando dispuesto el citado cuerpo (24) sobre el citado pocillo (34). A method as in claim 10, wherein said channel (30) converges from said first surface (26) to said second surface (28), and said well (34) extends into said channel (30) ) through said second surface (28) said body (24) being arranged on said well (34).

12. 12.: Un método como en la reivindicación 4, que comprende, además, la etapa de disponer al menos una solución de medio celular en el citado canal (30) después de la etapa de disponer el citado cuerpo (24) en el citado pocillo (34). A method as in claim 4, further comprising the step of arranging at least one solution of cellular medium in said channel (30) after the step of arranging said body (24) in said well (34) .

13. 13.: Un método como en la reivindicación 12, que comprende, además, la etapa de permitir la incubación de células después de la etapa de disponer al menos una solución de medio celular en el citado canal (30). A method as in claim 12, further comprising the step of allowing the incubation of cells after the step of arranging at least one solution of cellular medium in said channel (30).

14. 14.: Un método como en la reivindicación 13, que comprende, además, la etapa de separar el citado cuerpo (24) del citado pocillo (34) después de la etapa de permitir la incubación de células. A method as in claim 13, further comprising the step of separating said body (24) from said well (34) after the step of allowing cell incubation.

A method as in claim 12, further comprising the step of separating said body (24) from said well (34) after the step of arranging at least one solution of cellular medium in said channel ( 30).

16. A method as in claim 4, wherein said device of

10 assays are selected from the group consisting of multiwell plates, insert plates, columns, test tubes and pipettes.