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ES2230433T3 - Procedimientos para la preparacion de derivados de indolopirrolocarbazol. - Google Patents

Procedimientos para la preparacion de derivados de indolopirrolocarbazol.

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ES2230433T3
ES2230433T3 ES02018235T ES02018235T ES2230433T3 ES 2230433 T3 ES2230433 T3 ES 2230433T3 ES 02018235 T ES02018235 T ES 02018235T ES 02018235 T ES02018235 T ES 02018235T ES 2230433 T3 ES2230433 T3 ES 2230433T3
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ES
Spain
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compound
formula
group
baselineskip
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Prior art date
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ES02018235T
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English (en)
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Katsuhisa C/O Banyu Pharmaceutical Co Ltd Kojiri
Hisao C/O Banyu Pharmaceutical Co Ltd Kondo
Hiroharu Banyu Pharma Co. Ltd Arakawa
Mitsuru Banyu Pharmaceutical Co Ltd Ohkubo
Hiroyuki Banyu Pharmaceutical Co Ltd Suda
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MSD KK
Original Assignee
Banyu Phamaceutical Co Ltd
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Publication date
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Abstract

Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula [XVIII] **(Fórmula)** en la que R4 representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C1-C6, un grupo benciloximetilo o un grupo aralquilo; R5 y R6 representan cada uno un grupo OH protegido, y R5 y R6 están situados en las posiciones 1 y 11, respectivamente, o están situados en las posiciones 2 y 10, respectivamente; R7, R8, R9 y R10 pueden ser iguales o diferentes y cada uno representa un grupo protector para un grupo hidroxilo, que comprende: hacer reaccionar un compuesto de fórmula [XXI] **(Fórmula)** en la que R4 y R5 tienen los mismos significados que los descritos anteriormente y X representa un grupo lábil, con un compuesto de fórmula [XV] **(Fórmula)**

Description

Procedimientos para la preparación de derivados de indolopirrolocarbazol.
Ámbito técnico
Esta invención se refiere a nuevos procedimientos para preparar derivados de indolopirrolocarbazol que son útiles en el campo de la medicina y, más específicamente, inhiben el crecimiento de células tumorales y por ello exhiben un efecto antitumoral.
Técnica antecedente
En el ámbito de la quimioterapia del cáncer, se ha puesto ya en uso práctico un gran número de compuestos como agentes antitumorales. No obstante, sus actividades contra diversos tipos de tumores no son necesariamente satisfactorias y el problema de la tolerancia de las células tumorales a estos agentes antitumorales complica su uso para fines clínicos [véanse los Proceedings de la 47ª Reunión General de la Sociedad Japonesa del Cáncer, páginas 12-15, (1988)].
Bajo estas circunstancias, es invariablemente deseado el desarrollo de nuevas sustancias cancericidas en el campo de la terapia del cáncer. Entre otros, hay necesidad de sustancias que superen el problema de la tolerancia a las sustancias cancericidas existentes y exhiban eficacia contra los tipos de cánceres tales que no puedan ser controlados eficazmente por las sustancias cancericidas existentes.
A la vista del estado de la técnica anteriormente descrito, los presentes inventores seleccionaron una amplia variedad de metabolitos microbianos, encontraron un nuevo compuesto BE-13793C que tenía actividad antitumoral (12,13-dihidro-1,11-dihidroxi-5H-indolo[2,3-a]pirrolo[3,4-c]-carbazol-5,7(6H)-diona) y lo describieron [véase la patente japonesa abierta a consulta por el público nº 20277/'91 y el Journal of Antibiotics, vol. 44, páginas 723-728
(1991)].
Después, crearon un compuesto de indolopirrolocarbazol que tenía excelente actividad antitumoral mediante una modificación química del BE-13793C, y lo describieron (véase la publicación internacional nº WO91/18003 y la patente europea abierta a consulta por el público nº EP0545195 A1).
Un problema para ser resuelto por la presente invención es crear procedimientos para preparar un compuesto que tenga actividad antitumoral más excelente que las sustancias antitumorales derivadas del indolopirrolocarbazol descritas en la anterior solicitud de patente (publicación internacional nº WO91/18003 y patente europea abierta a consulta por el público nº EP0545195 A1).
Descripción de la invención
Los presentes inventores han sintetizado un gran número de derivados de indolopirrolocarbazol y han examinado sus actividades antitumorales con vistas a crear un compuesto que tenga actividad antitumoral más excelente que los compuestos antitumorales derivados del indolopirrolocarbazol que fueron previamente descritos. Como resultado, se ha encontrado ahora que los compuestos representados por la siguiente fórmula general [I] son nuevos compuestos que tienen muy excelente actividad antitumoral, estabilidad y seguridad.
A este respecto, la presente invención crea los procedimientos definidos en las reivindicaciones 1 a 3 para preparar el compuesto intermedio de fórmula general [XVIII] que se da más adelante. Todos los procedimientos descritos más adelante, que no entran dentro del alcance de las reivindicaciones, están descritos sólo con fines de referencia y/o comparación.
Por lo tanto, la presente invención se refiere a procedimientos para preparar compuestos intermedios para los compuestos de la fórmula general
1
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en la que R^{1} y R^{2} representan cada uno un grupo OH, R^{1} está situado en la posición 1 o 2, R^{2} está situado en la posición 10 u 11, R^{2} está situado en la posición 11 cuando R^{1} está situado en la posición 1, y R^{2} está situado en la posición 10 cuando R^{1} está situado en la posición 2, o sus sales farmacéuticamente aceptables.
Los compuestos intermedios se pueden preparar según los procedimientos representados por los siguientes procedimientos A a E.
Procedimiento A
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2
3
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Procedimiento B
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4
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Procedimiento C
5
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Procedimiento D
6
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Procedimiento E
7
Las definiciones de los símbolos y expresiones usados en los procedimientos A a E y en las reivindicaciones dadas más adelante son las siguientes.
En las fórmulas generales, R^{1} y R^{2} representan cada uno un grupo OH, con tal que R^{1} esté situado en la posición 1 o 2 en el anillo, R^{2} esté situado en la posición 10 u 11 en el anillo, R^{2} esté situado en la posición 11 cuando R^{1} esté situado en la posición 1, y R^{2} esté situado en la posición 10 cuando R^{1} esté situado en la posición 2.
R^{3} representa un grupo alquilo inferior, un grupo benciloximetilo o un grupo aralquilo. La expresión "grupo alquilo inferior" significa grupos alquilo de cadena lineal o ramificada de 1 hasta 6 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, propilo, sec-propilo, butilo, pentilo y hexilo. La expresión "grupo aralquilo" significa grupos aralquilo de 7 hasta 12 átomos de carbono, tales como bencilo, fenetilo y fenilpropilo.
R^{4} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo inferior, un grupo benciloximetilo o un grupo aralquilo. Las expresiones "grupo alquilo inferior" y "grupo aralquilo" tienen los mismos significados que los descritos para R^{3}.
R^{5} y R^{6} representan cada uno un grupo OH protegido, con tal que R^{5} esté situado en la posición 1 o 2 en el anillo, R^{6} esté situado en la posición 10 u 11 en el anillo, R^{6} esté situado en la posición 11 cuando R^{5} esté situado en la posición 1, y R^{6} esté situado en la posición 10 cuando R^{5} esté situado en la posición 2.
Los grupos protectores usables incluyen, por ejemplo, grupos bencilo, tolilo, p-metoxibencilo y bencil-oximetilo.
R^{7} a R^{10} pueden ser iguales o diferentes y cada uno representa un grupo protector para un grupo OH. Los grupos protectores usables incluyen, por ejemplo, grupos bencilo, tolilo, p-metoxibencilo y benciloximetilo.
R^{11} representa un átomo de hidrógeno o un grupo protector para el grupo amino de un esqueleto de indol. Los grupos protectores usables incluyen, por ejemplo, alcoxi inferior-carbonilo (tales como grupos terc-butoxicarbonilo y metiloxicarbonilo), bencilo, benciloximetilo, triisopropilsililo, 2-trimetilsililetiloximetilo, mesilo y tosilo.
R^{12} representa un grupo protector para el grupo amino de un esqueleto de indol. Ejemplos de los grupos protectores son los mismos que los descritos anteriormente.
X representa un grupo lábil. Ejemplos de los mismos incluyen átomos de cloro, bromo y yodo.
X^{1} representa un grupo lábil. Ejemplos de los mismos incluyen átomos de halógeno tales como átomos de cloro, bromo y yodo; y grupos sulfoniloxi orgánicos tales como mesilo y tosilo.
El compuesto organometálico que se usa para preparar un compuesto de fórmula general [XI] o similar haciendo reaccionar un compuesto de maleimida de fórmula general [IX] o similar con un compuesto de indol de fórmula general [X] o similar puede ser, por ejemplo, un alquil-litio tal como butil-litio; diisopropilamida de litio; una hexaalquildisilazida de metal alcalino, tal como hexametildisilazida de litio, hexametildisilazida de sodio o hexametildisilazida de potasio; o un reactivo de Grignard tal como bromuro de etilmagnesio o cloruro de metilmagnesio.
La reacción de Mitsunobu es una reacción para formar una unión glicósido usando una fosfina orgánica, tal como trifenilfosfina o tributilfosfina, y un derivado del ácido azodicarboxílico, tal como el éster dietílico del ácido azodicarboxílico, éster di-terc-butílico del ácido azodicarboxílico, éster diisopropílico del ácido azodicarboxílico, di-N,N-dimetilamida del ácido azodicarboxílico o di-N-metilpiperazinamida del ácido azodicarboxílico (véase Synthesis, I, 1981, páginas 1-28).
El agente oxidante que se usa para hacer reaccionar un compuesto de fórmula general [XVII] o similar, que tiene dos esqueletos de indol, con un agente oxidante y, mediante ello, convertirlo en un compuesto de indolopirrolocarbazol de fórmula general [XVIII] o similar, puede ser 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (en lo sucesivo abreviado como DDQ), CuCl_{2}, Cu(OAc)_{2}, Cu(NO_{2})_{2}, PdCl_{2}, Pd(OAc)_{2}, Pd(CF_{3}COO)_{2} o los similares.
Explicación del procedimiento A
Como se describe anteriormente, la reacción de un compuesto de maleimida de fórmula general [IX] con un compuesto de indol de fórmula general [X] se puede llevar a cabo con la ayuda de una hexaalquildisilazida de metal alcalino, tal como hexametildisilazida de litio, o un reactivo de Grignard, tal como bromuro de etilmagnesio. Los disolventes que se pueden usar en esta reacción incluyen tolueno, benceno, tetrahidrofurano (THF), dioxano, éter dietílico y los similares.
La temperatura de reacción puede variar normalmente desde -78ºC hasta 130ºC, y preferiblemente desde -20ºC hasta 110ºC.
Se puede preparar un compuesto de fórmula general [XII] introduciendo un grupo protector para el grupo amino del esqueleto de indol en un compuesto de fórmula general [XI]. El agente protector usado para este fin puede ser un haluro o anhídrido de ácido correspondiente al grupo protector anteriormente dicho. Los ejemplos preferidos del mismo incluyen dicarbonato de di-terc-butilo y cloruro de terc-butiloxicarbonilo.
Esta reacción se lleva a cabo preferiblemente en presencia de una base tal como 4-N,N-dimetilaminopiridina. Los disolventes que se pueden usar en esta reacción incluyen tolueno, benceno, THF, dioxano, éter y los similares. La temperatura de reacción puede variar normalmente desde -78ºC hasta 100ºC, y preferiblemente desde -25ºC hasta 25ºC.
La preparación de un compuesto de fórmula general [XIV] haciendo reaccionar el compuesto de fórmula general [XII] con un compuesto de fórmula general [XIII] se puede llevar a cabo de la misma manera que la descrita anteriormente para la reacción del compuesto de fórmula general [IX] con el compuesto de fórmula general [XI].
La reacción del compuesto de fórmula general [XIV] con un compuesto de fórmula general [XV] se puede llevar a cabo según la llamada reacción de Mitsunobu. En esta reacción se pueden usar fosfinas orgánicas y derivados del ácido azodicarboxílico como se describe anteriormente. Los ejemplos preferidos de las fosfinas orgánicas incluyen tributilfosfina y trifenilfosfina, y los ejemplos preferidos de los derivados del ácido azodicarboxílico incluyen éster dietílico del ácido azodicarboxílico y éster diisopropílico del ácido azodicarboxílico.
Como disolvente de reacción se puede usar preferiblemente THF, dioxano, éter y los similares. La temperatura de reacción puede variar normalmente desde -78ºC hasta 50ºC, y preferiblemente desde -40ºC hasta 20ºC.
La desprotección del grupo amino de un esqueleto de indol en un compuesto de fórmula general [XVI] se lleva a cabo preferiblemente bajo condiciones que permitan la desprotección selectiva. Por ejemplo, es preferible emplear condiciones ácidas o básicas que permitan que el grupo terc-butoxicarbonilo, 2-trimetilsililetoximetilo u otro en el grupo amino sea eliminado selectivamente mientras que se mantienen los otros grupos protectores.
Por ejemplo, se pueden usar preferiblemente ácidos tales como ácido trifluoracético y HF, y bases tales como metilamina, terc-butoxipotasio y fluoruro de tetra-n-butilamonio.
Un compuesto de fórmula general [XVIII] se puede preparar ciclando oxidativamente un compuesto de fórmula general [XVII]. Los agentes oxidantes que se pueden usar en esta reacción incluyen, por ejemplo, DDQ, CuCl_{2}, Cu(OAc)_{2}, Cu(NO_{2})_{2}, PdCl_{2}, Pd(OAc)_{2} y Pd(CF_{3}COO)_{2} como se describe anteriormente. Como disolvente de reacción se puede usar tolueno, cloruro de metileno, dimetilformamida, dioxano, éter y los similares. La temperatura de reacción puede variar normalmente desde 0ºC hasta 100ºC.
La eliminación de los grupos protectores para los grupos hidroxilos fenólicos y el grupo glicosilo en el compuesto de fórmula general [XVIII] se puede llevar a cabo bajo condiciones ácidas o mediante la reacción de hidrogenación común muy conocida o las similares.
Un compuesto de fórmula general [XX] se puede preparar haciendo reaccionar un compuesto de fórmula general [XIX] con una base. Las bases que se pueden usar en esta reacción incluyen NaOH, KOH, K_{2}CO_{3}, Na_{2}CO_{3}, NaHCO_{3} y las similares. Los disolventes que se pueden usar en ella incluyen agua, metanol, etanol, dimetilformamida, y los similares. La temperatura de reacción puede variar normalmente desde 0ºC hasta el punto de ebullición del
disolvente.
Un compuesto de fórmula general [I] se puede preparar haciendo reaccionar el compuesto de fórmula general [XX] con H_{2}NNHCH(CH_{2}OH)_{2}. Los disolventes que se pueden usar en esta reacción incluyen metanol, etanol, THF, dimetilformamida, y los similares. La temperatura de reacción puede variar normalmente desde 0ºC hasta el punto de ebullición del disolvente.
La cantidad de H_{2}NNHCH(CH_{2}OH)_{2} usada está normalmente en el intervalo de 1 hasta 3 equivalentes molares basados en el compuesto [XX]. Si fuera necesario, este compuesto se puede usar en cantidades menores o
mayores.
Explicación de los procedimientos B a E
La reacción de un compuesto de fórmula general [XXIII] con un compuesto de fórmula general [XXIV] en el procedimiento C, y la reacción de un compuesto de fórmula general [XXIII] con un compuesto de fórmula general [XXV] en el procedimiento E se puede llevar a cabo en presencia de una base tal como KOH, terc-BuOK, NaH, K_{2}CO_{3} o hexametildisilazida de litio, en un disolvente tal como dimetilformamida, THF, tolueno, cloruro de metileno o acetonitrilo.
La temperatura de reacción puede variar normalmente desde 0ºC hasta el punto de ebullición del disolvente.
Las demás reacciones en los procedimientos B a E se pueden llevar a cabo bajo las mismas condiciones que las empleadas para los mismos tipos de reacciones en el procedimiento A.
Un compuesto de fórmula general [II] se puede preparar, por ejemplo, desprotegiendo un compuesto de fórmula general [XXIV]. También se puede preparar un compuesto de fórmula general [XIX] incubando un compuesto de fórmula general [II] o el compuesto (28) junto con un organismo capaz de glicosilarlos (véanse los ejemplos de referencia 1 y 2).
Después de la compleción de cada reacción, el producto deseado se puede aislar y purificar según técnicas ampliamente conocidas en el ámbito de la química orgánica (por ejemplo, precipitación, extracción con disolventes, recristalización y cromatografía). Además, el H_{2}NNHCH(CH_{2}OH)_{2} se puede preparar, por ejemplo, según el procedimiento descrito en el ejemplo 18.
La presente invención se explica más específicamente con referencia a los siguientes ejemplos.
\newpage
Ejemplo 1
Preparación del compuesto representado por la fórmula
8
Este compuesto se preparó según un método que comprende las siguientes etapas 1) a 9).
1) Preparación del compuesto representado por la fórmula
9
en la que Bn representa un grupo bencilo, y lo mismo se aplicará en lo sucesivo.
Se disolvieron 15 g de 7-benciloxiindol en 150 ml de THF, y se añadieron a ellos 161,3 ml de hexametildisilazida de litio (como solución 1M en THF). Después de que esta mezcla se agitara bajo atmósfera de nitrógeno a 0ºC durante 30 minutos, se añadieron goteando a ella 180 ml de una solución en THF que contenían 18,1 g de 2,3-dibromo-N-metilmaleimida en un periodo de 10 minutos.
Después de la compleción de la adición, se agitó la mezcla resultante a 0ºC durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se vertió en 1 litro de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 2 litros de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y después con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se recristalizó en acetato de etilo-hexano para obtener 26,9 g del compuesto (1) deseado (con un rendimiento del 97%).
HRMS (m/z): encontrado 410,0273, calculado 410,0248 [como C_{20}H_{15}N_{2}O_{3}Br].
IR (KBr, cm^{-1}): 1705, 1628, 1576, 1433, 1383, 1259, 1247, 1076, 762 y 739.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 9,03 (1H, brs), 7,94 (1H, d, J=3,0 Hz), 7,64 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,30-7,53 (5H, m), 7,15 (1H, t, J=8,0 Hz), 6,82 (1H, d, J=8,0 Hz), 5,22 (2H, s) y 3,16 (3H, s).
2) Preparación del compuesto representado por la fórmula
10
en la que Boc representa un grupo terc-butoxicarbonilo y lo mismo se aplicará en lo sucesivo.
Se disolvieron 29 g del compuesto (1) obtenido en el ejemplo 1-1), 169 g de dicarbonato de di-terc-butilo y 136 mg de 4-N,N-dimetilaminopiridina en 200 ml de THF, y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de que se concentrara la mezcla de reacción, el residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (cloroformo) y después se recristalizó en cloroformo-acetato de etilo-hexano para obtener 32,9 g del compuesto (2) deseado (con un rendimiento del 92%).
IR (KBr, cm^{-1}): 1765, 1712, 1438, 1369, 1261, 1228, 1149 y 739.
HRMS (m/z): encontrado 510,0815, calculado 510,0790 [como C_{25}H_{23}N_{2}O_{5}Br].
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,04 (1H, s), 7,20-7,62 (7H, m), 6,95 (1H, d, J=7,9 Hz), 5,23 (2H, s), 3,18 (3H, s) y 1,53 (9H, s).
3) Preparación del compuesto representado por la fórmula
11
Se disolvieron 107,2 mg de 7-benciloxiindol en 3 ml de THF y se añadieron a ellos 0,48 ml de hexametildisilazida de litio (como solución 1M en THF). Después de que esta mezcla se agitara bajo atmósfera de nitrógeno a 0ºC durante 15 minutos, se añadieron goteando a ella 2 ml de una solución en THF que contenían 102,2 mg del compuesto (2) obtenido en el ejemplo 1-2), durante un periodo de 20 minutos. Después de la compleción de la adición, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se vertió en 10 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 30 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1) para obtener 112,7 mg del compuesto (3) deseado (con un rendimiento del 86%).
HRMS (m/z): encontrado 653,2529, calculado 653,2526 [como C_{40}H_{35}N_{3}O_{6}].
IR (KBr, cm^{-1}): 1759, 1734, 1579, 1498, 1430, 1261, 1217, 1149, 752 y 733.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,78 (1H, brs), 7,90 (1H, s), 7,75 (1H, s), 7,29-7,52 (10H, m), 6,58-6,82 (6H, m), 5,17 (2H, s), 5,15 (2H, s), 3,19 (3H, s) y 1,53 (9H, s).
4) Preparación del compuesto representado por la fórmula
12
Se disolvieron 300 mg del compuesto (3) obtenido en el ejemplo 1-3), 746,2 mg de 2,3,4,6-O-tetrabencil-D-glucopiranosa y 543 mg de trifenilfosfina en 15 ml de THF y se añadieron a ellos 0,419 ml de éster diisopropílico del ácido azodicarboxílico a -78ºC. Esta mezcla se agitó durante 3 horas, tiempo durante el cual se elevó gradualmente su temperatura hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se repartió entre 40 ml de acetato de etilo y 20 ml de ácido clorhídrico 2N. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (tolueno-acetato de etilo = 50:1) para obtener 459,3 mg del compuesto (4) deseado (con un rendimiento del 85%).
HRMS (m/z): encontrado 1175,4950 calculado 1175,4932 [como C_{74}H_{69}N_{3}O_{11}].
IR (KBr, cm^{-1}): 1759, 1701, 1579, 1454, 1440, 1384, 1358, 1259, 1232, 1149, 1087, 752, 735 y 662.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,19 (1H, s), 7,91 (1H, s), 7,45 (2H, d, J=6,6 Hz), 6,96-7,39 (25H, m), 6,54-6,71 (7H, m), 6,48 (2H, dd, J=1,6, 8,5 Hz), 6,43 (1H, d, J=8,9 Hz), 5,13 (2H, s), 5,02 (1H, d, J=11,4 Hz), 4,90 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,84 (1H, d, J=10,8 Hz), 4,83 (1H, d, J=11,4 Hz), 4,80 (1H, d, J=10,8 Hz), 4,60 (1H, d, J=12,7 Hz), 4,59 (1H, d, J=10,8 Hz), 4,53 (1H, d, J=11,4 Hz), 4,39 (1H, d, J=9,9 Hz), 3,80 (1H, t, J=8,9 Hz), 3,64-3,76 (4H, m), 3,56 (1H, t, J=9,1 Hz), 3,38-3,46 (1H, m), 3,19 (3H, s) y 1,53 (9H, s).
5) Preparación del compuesto representado por la fórmula
13
Se disolvieron 459,3 mg del compuesto (4) obtenido en el ejemplo 1-4) en 20 ml de metilamina (como solución al 40% en metanol), y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de que la mezcla de reacción se concentrara, el residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1) para obtener 395,2 mg del compuesto (5) deseado (con un rendimiento del 94%).
HRMS (m/z): encontrado 1075,4445 calculado 1075,4408 [como C_{69}H_{61}N_{3}O_{9}].
IR (KBr, cm^{-1}): 1697, 1577, 1569, 1497, 1454, 1436, 1257, 1083, 752, 753 y 696.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,61 (1H, brs), 8,07 (1H, s), 7,56 (1H, d, J=2,7 Hz), 6,95-7,50 (27H, m), 6,85 (1H, d, J=7,2 Hz), 6,40-6,70 (9H, m), 5,13 (2H, s), 5,06 (1H, d, J=11,1 Hz), 4,91 (1H, d, J=11,1 Hz), 4,90 (1H, d, J=11,1 Hz), 4,84 (1H, d, J=9,6 Hz), 4,80 (1H, d, J=11,1 Hz), 4,48-4,62 (3H, m), 4,41 (1H, d, J=10,3 Hz), 3,64-3,83 (4H, m), 3,57 (2H, t, J=8,97 Hz), 3,40-3,48 (1H, m) y 3,18 (3H, m).
6) Preparación del compuesto representado por la fórmula
14
Se disolvieron 52 mg del compuesto (5) obtenido en el ejemplo 1-5) en 2,5 ml de DMF y se añadieron a ellos 49,9 mg de trifluoroacetato de paladio. Esta mezcla se agitó a 90ºC durante 3 horas. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y ácido clorhídrico 2N. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y, después, una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1) para obtener 26 mg del compuesto (6) deseado (con un rendimiento del 50%).
HRMS (m/z): encontrado 1073,4269 calculado 1073,4251 [como C_{69}H_{59}N_{3}O_{9}].
IR (KBr, cm^{-1}): 2617, 1699, 1581, 1377, 1257, 1097, 1072, 754 y 696.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 10,55 (1H, s), 9,08 (1H, d, J=7,3 Hz), 8,87 (1H, d, J=8,3 Hz), 6,90-7,51 (31H, m), 6,86 (2H, t, J=7,6 Hz), 6,17 (2H, d, J=6,9 Hz), 5,30 (1H, d, J=11,5 Hz), 5,20 (2H, d, J=11,5 Hz), 5,14 (1H, d, J=11,5 Hz), 4,73 (1H, d, J=10,9 Hz), 4,64 (1H, d, J=10,9 Hz), 4,59 (1H, d, J=11,0 Hz), 4,57 (1H, d, J=13,1 Hz), 4,52 (1H, d, J=13,1 Hz), 4,10 (1H, d, J=11,0 Hz), 4,00 (1H, t, J=9,1 Hz), 3,83 (1H, d, J=9,6 Hz), 3,52-3,76 (5H, m), 3,49 (3H, s) y 2,95 (1H, d, J=9,6 Hz).
7) Preparación del compuesto representado por la fórmula
15
Se disolvieron 270 mg del compuesto (6) obtenido en el ejemplo 1-6) en 15 ml de cloroformo-metanol (1:1), y se añadió a ello una cantidad catalítica de negro de paladio. Esta mezcla se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 4 horas. Después de que el catalizador se separara por filtración, se concentró el filtrado. El residuo resultante se recristalizó en metanol-cloroformo-hexano para obtener 130 mg del compuesto (7) deseado (con un rendimiento del 98%).
HRMS (m/z): encontrado 533,1419 calculado 533,1434 [como C_{27}H_{23}N_{3}O_{9}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3371, 1714, 1638, 1587, 1577, 1387, 1321, 1261, 1238, 1081 y 754.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 10,89 (1H, s), 10,34 (1H, s), 9,95 (1H, s), 8,71 (1H, d, J=7,7 Hz), 8,53 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,18 (2H, t, J=7,7 Hz), 7,05 (1H, d, J=9,1 Hz), 7,01 (1H, d, J=7,7 Hz), 6,99 (1H, d, J=7,7 Hz), 4,50-5,80 (4H, br), 3,95-4,08 (2H, m), 3,58-3,80 (3H, m), 3,39 (1H, dd, J=8,6, 9,1 Hz) y 3,18 (3H, s).
8) Preparación del compuesto representado por la fórmula
16
Se disolvieron 70 mg del compuesto (7) obtenido en el ejemplo 1-7) en 2 ml de una solución acuosa al 10% de hidróxido potásico y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se neutralizó por la adición de 1 ml de ácido clorhídrico 2N, y después se extrajo con metiletilcetona-acetato de etilo (1:1). La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se lavó con diclorometano para obtener 65 mg del compuesto del título (8) (con un rendimiento del 95%).
HRMS (m/z): encontrado 520,1117 calculado 520,1118 [como C_{26}H_{20}N_{2}O_{10}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3353, 1816, 1743, 1587, 1388, 1249, 1072, 800, 748 y 609.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,11 (1H, s), 10,52 (1H, s), 10,13 (1H, s), 8,51 (1H, d, J=7,6 Hz), 8,36 (1H, d, J=7,6 Hz), 7,40 (1H, d, J=7,8 Hz), 7,20 (1H, d, J=7,8 Hz), 7,09 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,06 (2H, dd, J=7,6, 7,8 Hz), 5,32 (1H, dd, J=4,9, 5,1 Hz), 5,24 (1H, d, J=5,4 Hz), 4,95 (1H, d, J=4,6 Hz), 3,95-4,10 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,56-3,70 (2H, m) y 3,42 (1H, m).
9) Se disolvieron 100 mg del compuesto (8) obtenido en el ejemplo 1-8) en 10 ml de DMF y se añadieron a ellos 61 mg de 2-hidrazino-1,3-propanodiol. Esta mezcla se agitó a 80ºC durante 1 hora. Después de que se concentrara la mezcla de reacción, se desarrolló el residuo resultante con Sephadex LH-20 y se eluyó con metanol para obtener 89 mg del compuesto del título [I-A] (con un rendimiento del 77%).
HRMS (m/z): encontrado 609,1826 calculado 609,1833 [como C_{29}H_{28}N_{4}O_{11}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3309, 1695, 1567, 1540, 1521, 1456, 1417, 1398, 1087 y 609.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 10,91 (1H, brs), 10,30 (1H, brs), 9,90 (1H, s), 8,70 (1H, d, J=8,0 Hz), 8,52 (1H, d, J=7,9 Hz), 7,16-7,21 (2H, m), 6,98-7,05 (3H, m), 5,59 (1H, d, J=2,3 Hz), 5,41 (1H, d, J=5,7 Hz), 5,20-5,40 (2H, m), 5,20 (1H, d, J=5,3 Hz), 4,90 (1H, br), 4,50-4,60 (3H, m), 3,98-4,15 (2H, m) y 3,35-3,80 (7H, m).
Ejemplo 2
Preparación del compuesto representado por la fórmula
17
Se disolvieron 69 mg del compuesto (3) obtenido en el ejemplo 1-3) en 1 ml de metilamina (como solución al 40% en metanol) y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Después de que se concentrara la mezcla de reacción, el residuo resultante se recristalizó en acetato de etilo-hexano para obtener 55,2 mg del compuesto (9) deseado (con un 95% de rendimiento).
HRMS (m/z): encontrado 553,1982, calculado 553,2002 [como C_{35}H_{27}N_{3}O_{4}].
IR (KBr, cm^{-1}): 1691, 1577, 1531, 1423, 1384, 1259, 1083, 752, 715 y 694.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,73 (2H, brs), 7,69 (2H, d, J=2,1 Hz), 7,30-7,49 (10H, m), 6,60-6,75 (6H, m), 5,16 (4H, s), y 3,17 (3H, s).
Ejemplo 3
Preparación del compuesto representado por la fórmula
18
Se añadieron 30 mg del compuesto (9) obtenido en el ejemplo 2 y 49,9 mg de trifluoroacetato de paladio, y esta mezcla se agitó a 90ºC durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y ácido clorhídrico 2N. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se desarrolló con Sephadex LH-20 y se eluyó con metanol para obtener 14,6 mg del compuesto (10) deseado (con un 49% de rendimiento).
HRMS (m/z): encontrado 551,1839, calculado 551,1845 [como C_{35}H_{25}N_{3}O_{4}].
IR (KBr, cm^{-1}): 1742, 1695, 1684, 1577, 1406, 1377, 1251, 1103, 776, 737 y 696.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,67 (2H, s), 8,52-8,55 (2H, m), 7,62 (4H, d, J=7,1 Hz), 7,46 (4H, t, J=7,1 Hz), 7,40 (2H, d, J=7,1 Hz), 7,23-7,28 (4H, m), 5,37 (4H, s), y 3,30 (3H, s).
Ejemplo 4
Preparación del compuesto representado por la fórmula
19
Se suspendieron 360 mg de hidróxido potásico y 2,2 g de sulfato sódico en 40 ml de acetonitrilo y se añadieron a ellos 483 mg del compuesto (10) obtenido en el ejemplo 3. Después de que esta mezcla se agitara a temperatura ambiente durante 0,5 horas, se añadieron goteando a ella 12 ml de una solución en acetonitrilo que contenían 1,06 g de 1-cloro-2,3,4,6-tetra-O-bencil-D-glucopiranosido. Después de que la mezcla resultante se agitara a temperatura ambiente por la noche, se vertió la mezcla de reacción en 50 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 200 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y, después, una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 10:1, tolueno-acetato de etilo = 90:1) para obtener 840 mg del compuesto (6) deseado (con un rendimiento del 90%).
Sus datos de propiedades concuerdan con los obtenidos en el ejemplo 1-6).
Ejemplo 5
Preparación del compuesto representado por la fórmula
20
Se disolvieron 2,24 ml de bromuro de etilmagnesio (como solución 1M en THF) en 2,2 ml de tolueno y se añadieron a ellos 500 mg de 7-benciloxiindol a 45ºC. Después de que se calentara esta mezcla hasta 130ºC, se añadieron a ella 2,8 ml de una solución de tolueno que contenían 201,7 mg de 2,3-dibromo-N-metilmaleimida, seguido por agitación a 130ºC durante 4 horas. La mezcla de reacción se vertió en 5 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 20 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1 hasta 2:1) para obtener 156 mg del compuesto (9) deseado (con un rendimiento del 38%).
Sus datos de propiedades concuerdan con los obtenidos en el ejemplo 2.
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Ejemplo 6
Preparación del compuesto [I-B] representado por la fórmula
21
Este compuesto se preparó según un método que comprende las siguientes etapas 1) a 9).
1) Preparación del compuesto representado por la fórmula
22
Se disolvieron 284 g de 6-benciloxiindol en 3 litros de THF, y se añadieron a ellos 2,7 litros de hexametildisilazida de litio (como solución 1M en THF). Después de que esta mezcla se agitara bajo atmósfera de nitrógeno a -10ºC durante 45 minutos, se añadieron goteando a ella 3 litros de una solución en THF que contenían 340 g de 2,3-dibromo-N-metilmaleimida en un periodo de 1 hora.
Después de la compleción de la adición, se agitó la mezcla resultante a 0ºC durante 15 minutos. La mezcla de reacción se vertió en 10 litros de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 30 litros de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y después con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se recristalizó en metanol para obtener 482 g del compuesto (11) deseado (con un rendimiento del 93%).
HRMS (m/z): encontrado 410,0292, calculado 410,0266 [como C_{20}H_{15}N_{2}O_{3}Br].
IR (KBr, cm^{-1}): 3330, 3318, 1762, 1701, 1606, 1511, 1450, 1165, 1135, 1041 y 794.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,60 (1H, brs), 7,96 (1H, d, J=8,1 Hz), 7,94 (1H, d, J=2,5 Hz), 7,33-7,47 (5H, m), 7,00 (1H, dd, J=2,5, 8,8 Hz), 6,97 (1H, d, J=2,5 Hz), 5,13 (2H, s) y 3,16 (3H, s).
2) Preparación del compuesto representado por la fórmula
23
Se disolvieron 1,00 g del compuesto (11) obtenido en el ejemplo 6-1), 637 mg de dicarbonato de di-terc-butilo y 3 mg de 4-N,N-dimetilaminopiridina en 200 ml de THF, y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de que se concentrara la mezcla de reacción, el residuo resultante se recristalizó en acetato de etilo-hexano para obtener 1,18 g del compuesto (12) deseado (con un rendimiento del 96%).
IR (KBr, cm^{-1}): 1740, 1714, 1614, 1527, 1487, 1443, 1373, 1227 y 1153.
HRMS (m/z): encontrado 510,0771, calculado 510,0791 [como C_{25}H_{23}N_{2}O_{5}Br].
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,10 (1H, s), 7,91 (1H, d, J=2,3 Hz), 7,73 (1H, d, J=8,9 Hz), 7,34-7,50 (5H, m), 7,03 (1H, dd, J=2,3, 8,5 Hz), 5,16 (2H, s), 3,18 (3H, s) y 1,68 (9H, s).
3) Preparación del compuesto representado por la fórmula
24
Se disolvieron 218,4 mg de 6-benciloxiindol en 20 ml de THF y a ellos se añadieron 2,35 ml de hexametildisilazida de litio (como solución 1M en THF). Después de que esta mezcla se agitara bajo atmósfera de nitrógeno a 0ºC durante 15 minutos, se añadieron goteando a ella 10 ml de una solución en THF que contenían 500 mg del compuesto (12) obtenido en el ejemplo 6-2), durante un periodo de 10 minutos. Después de la compleción de la adición, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se vertió en 100 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 400 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y después con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se recristalizó en tolueno-hexano para obtener 580 mg del compuesto (13) deseado (con un rendimiento del 91%).
HRMS (m/z): encontrado 653,2556, calculado 653,2526 [como C_{40}H_{35}N_{3}O_{6}].
IR (KBr, cm^{-1}): 1740, 1701, 1646, 1623, 1543, 1455 y 1155.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,41 (1H, brs), 7,97 (1H, s), 7,84 (1H, brs), 7,68 (1H, brs), 7,16-7,43 (10H, m), 6,98 (1H, d, J=9,2 Hz), 6,85 (1H, brs), 6,74 (1H, d, J=9,2 Hz), 6,58 (1H, d, J=9,2 Hz), 6,52 (1H, d, J=9,2 Hz), 5,05 (2H, s), 5,02 (2H, s), 3,19 (3H, s) y 1,67 (9H, s).
4) Preparación del compuesto representado por la fórmula
25
Se disolvieron 50 mg del compuesto (13) obtenido en el ejemplo 6-3), 186 mg de 2,3,4,6-O-tetrabencil-D-glucopiranosa y 90 mg de trifenilfosfina en 3 ml de THF y se añadieron a ellos 0,054 ml de éster dietílico del ácido azodicarboxílico a 0ºC. Esta mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió entre 40 ml de acetato de etilo y 20 ml de ácido clorhídrico 2N. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1) para obtener 36,4 mg del compuesto (14) deseado (con un rendimiento del 62%).
HRMS (m/z): encontrado 1175,4955 calculado 1175,4932 [como C_{74}H_{69}N_{3}O_{11}].
IR (KBr, cm^{-1}): 2360, 1736, 1701, 1616, 1543, 1489, 1454, 1363, 1219 y 1153.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,03 (1H, s), 7,95 (1H, s), 7,78-7,82 (1H, m), 7,04-7,38 (30H, m), 6,84 (1H, d, J=8,7 Hz), 6,76-6,84 (1H, m), 6,79 (1H, d, J=8,9 Hz), 6,32 (1H, dd, J=2,2, 8,9 Hz), 6,28 (1H, dd, J=2,4, 8,7 Hz), 5,33 (1H, d, J=8,7 Hz), 4,82-4,94 (7H, m), 4,67 (1H, d, J=10,6 Hz), 4,63 (1H, d, J=12,1 Hz), 4,55 (1H, d, J=12,1 Hz), 4,10 (1H, d, J=10,2 Hz), 3,69-3,95 (6H, m), 3,40 (1H, d, J=10,2 Hz), 3,20 (3H, s) y 1,66 (9H, s).
5) Preparación del compuesto representado por la fórmula
26
Se disolvieron 14,1 mg del compuesto (14) obtenido en el ejemplo 6-4) en 5 ml de metilamina (como solución al 40% en metanol), y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de que se concentrara la mezcla de reacción, el residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 7:3) para obtener 12,3 mg del compuesto (15) deseado (con un rendimiento del 96%).
HRMS (m/z): encontrado 1075,4392 calculado 1075,4408 [como C_{69}H_{61}N_{3}O_{9}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3311, 3030, 2927, 1697, 1621, 1533, 1454, 1385, 1159 y 1093.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,29 (1H, d, J=2,7 Hz), 7,96 (1H, s), 7,52 (1H, d, J=2,7 Hz), 7,19-7,40 (25H, m), 7,03-7,19 (5H, m), 6,78-6,84 (3H, m), 6,67 (1H, d, J=8,8 Hz), 6,45 (1H, dd, J=2,2, 8,8 Hz), 6,34 (1H, dd, J=2,2, 8,8 Hz), 5,34 (1H, d, J=8,7 Hz), 4,82-4,94 (7H, m), 4,67 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,62 (1H, d, J=12,2 Hz), 4,53 (1H, d, J=12,2 Hz), 4,12 (1H, d, J=10,2 Hz), 3,67-3,98 (7H, m) y 3,18 (3H, m).
6) Preparación del compuesto representado por la fórmula
27
Se disolvieron 52 mg del compuesto (15) obtenido en el ejemplo 6-5), 26,8 mg de cloruro de cobre (II) y 50 mg de tamiz molecular en 1 ml de metiletilcetona y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de que la mezcla de reacción se filtrara a través de Celite, se concentró el filtrado. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (diclorometano) para obtener 42 mg del compuesto (16) deseado (con un rendimiento del 84%).
HRMS (m/z): encontrado 1073,4237 calculado 1073,4251 [como C_{69}H_{59}N_{3}O_{9}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3311, 3030, 2927, 1697, 1621, 1533, 1454, 1385, 1159 y 1093.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 10,6 (1H, s), 9,24 (1H, d, J=9,5 Hz), 9,13 (1H, d, J=9,5 Hz), 7,07-7,50 (29H, m), 6,98-7,03 (1H, m), 6,83-6,91 (2H, m), 6,18-6,22 (2H, m), 5,84 (1H, d, J=8,9 Hz), 5,12-5,22 (2H, m), 5,18 (1H, d, J=11,5 Hz), 5,08 (1H, d, J=11,5 Hz), 4,97 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,89 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,84 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,74 (1H, d, J=13,0 Hz), 4,67 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,56 (1H, d, J=13,0 Hz), 4,32 (1H, dd, J=9,6, 9,6 Hz), 3,98-4,07 (2H, m), 3,82-3,97 (3H, m), 3,79 (1H, dd, J=2,7, 10,2 Hz), 3,33 (3H, s) y 3,00 (1H, d, J=9,7 Hz).
7) Preparación del compuesto representado por la fórmula
28
Se disolvieron 100 mg del compuesto (16) obtenido en el ejemplo 6-6) en 6 ml de cloroformo-metanol (2:1), y se añadió a ello una cantidad catalítica de negro de paladio. Esta mezcla se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 2 horas. Después de que el catalizador fuese separado por filtración, se concentró el filtrado. El residuo resultante se recristalizó en metanol-acetona-acetato de etilo-hexano, se desarrolló con Sephadex LH-20, se eluyó con cloroformo-metanol-etanol-tetrahidrofurano (5:2:2:1) y se recristalizó en acetona-metanol-hexano para obtener 43,8 mg del compuesto (17) deseado (con un rendimiento del 88%).
HRMS (m/z): encontrado 533,1429 calculado 533,1434 [como C_{27}H_{23}N_{3}O_{9}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3328, 1733, 1683, 1678, 1540, 1417, 1126, 1081 y 611.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,20 (1H, s), 9,76 (1H, s), 9,74 (1H, s), 8,88 (1H, d, J=8,6 Hz), 8,80 (1H, d, J=8,6 Hz), 7,18 (1H, d, J=2,1 Hz), 6,99 (1H, d, J=2,1 Hz), 6,82 (1H, dd, J=2,1, 8,6 Hz), 6,80 (1H, dd, J=2,1, 8,6 Hz), 5,97 (1H, d, J=8,9 Hz), 5,86 (1H, t, J=4,0 Hz), 5,33 (1H, d, J=4,9 Hz), 5,12 (1H, d, J=4,3 Hz), 4,94 (1H, d, J=5,2 Hz), 4,02 (1H, dd, J=3,0, 10,7 Hz), 3,94 (1H, m), 3,78 (1H, m), 3,52 (2H, m) y 3,16 (3H, s).
8) Preparación del compuesto representado por la fórmula
29
Se disolvieron 1,2 g del compuesto (17) obtenido en el ejemplo 6-7) en 40 ml de una solución acuosa al 10% de hidróxido potásico y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se neutralizó por la adición de 40 ml de ácido clorhídrico 2N, y después se extrajo con 1 litro de metiletilcetona. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se recristalizó en acetona-heptano para obtener 1,2 g del compuesto (18) deseado (con un rendimiento del 100%).
HRMS (m/z): encontrado 520,1147 calculado 520,1118 [como C_{26}H_{20}N_{2}O_{10}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3311, 1810, 1739, 1652, 1626, 1558, 1405, 1091 y 611.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,4 (1H, s), 9,95 (1H, s), 9,92 (1H, s), 8,69 (1H, d, J=7,7 Hz), 8,63 (1H, d, J=7,7 Hz), 7,25 (1H, d, J=1,5 Hz), 7,03 (1H, d, J=1,5 Hz), 6,90 (1H, dd, J=1,5, 7,7 Hz), 6,87 (1H, d, J=1,5, 7,7 Hz), 6,06 (1H, d, J=8,0 Hz), 5,95 (1H, t, J=4,6 Hz), 5,38 (1H, d, J=5,1 Hz), 5,16 (1H, d, J=5,2 Hz), 4,99 (1H, d, J=5,2 Hz) y 3,30-4,10 (6H, m).
9) Se disolvieron 500 mg del compuesto (18) obtenido en el ejemplo 6-8) en 50 ml de DMF y se añadieron a ellos 152 mg de 2-hidrazino-1,3-propanodiol. Esta mezcla se agitó a 80ºC durante 1 hora. Después de que se concentrara la mezcla de reacción, se purificó el residuo resultante con Sephadex LH-20 (cloroformo-metanol-etanol-agua = 5:2:2:1) para obtener 418 mg del compuesto del título [I-B] (con un rendimiento del 77%).
HRMS (m/z): encontrado 609,1816 calculado 609,1833 [como C_{29}H_{28}N_{4}O_{11}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3415, 3353, 1749, 1652, 1575, 1540, 1375, 1197 y 609.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,20 (1H, s), 9,78 (1H, s), 9,75 (1H, s), 8,87 (1H, d, J=8,6 Hz), 8,79 (1H, d, J=8,6 Hz), 7,18 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,98 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,82 (1H, dd, J=2,0, 8,6 Hz), 6,80 (1H, dd, J=2,0, 8,6 Hz), 5,97 (1H, d, J=8,3 Hz), 5,86 (1H, d, J=3,8 Hz), 5,55 (1H, d, J=2,6 Hz), 5,32 (1H, d, J=4,6 Hz), 5,11 (1H, d, J=5,3 Hz), 4,91 (1H, d, J=5,1 Hz), 4,53 (2H, t, J=5,4 Hz), 4,02 (1H, m), 3,85-3,95 (2H, m), 3,78 (1H, m), 3,40-3,60 (6H, m) y 3,20-3,30 (1H, m).
Ejemplo 7
Preparación del compuesto representado por la fórmula
30
Se disolvieron 1,00 g del compuesto (11) obtenido en el ejemplo 6-1), 6,57 g de 2,3,4,6-O-tetrabencil-D-glucopiranosa y 3,19 g de trifenilfosfina en 40 ml de THF y se añadieron a ellos 1,91 ml del éster dietílico del ácido azodicarboxílico a 0ºC. La mezcla se agitó durante 1 hora, tiempo durante el cual la temperatura se elevó gradualmente hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se repartió entre 200 ml de acetato de etilo y 100 ml de cloruro amónico acuoso. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 8:1 hasta 4:1) para obtener 3,07 g del compuesto (19) deseado (con un rendimiento del 91%).
HRMS (m/z): encontrado 932,2694, calculado 932,2627 [como C_{54}H_{49}N_{2}O_{8}Br].
IR (KBr, cm^{-1}): 1767, 1707, 1603, 1454, 1379, 1090 y 1026.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 7,96 (1H, d, J=8,9 Hz), 7,93 (1H, s), 7,17-7,41 (20H, m), 6,97-7,17 (5H, m), 6,71 (2H, dd, J=1,3, 8,9 Hz), 5,29 (1H, d, J=8,4 Hz), 5,00 (1H, d, J=7,8 Hz), 4,97 (1H, d, J=7,8 Hz), 4,93 (1H, d, J=11,9 Hz), 4,92 (1H, d, J=10,8 Hz), 4,90 (1H, d, J=11,9 Hz), 4,68 (1H, d, J=10,8 Hz), 4,61 (1H, d, J=11,9 Hz), 4,52 (1H, d, J=11,9 Hz), 4,17 (1H, d, J=10,0 Hz), 3,75-3,96 (5H, m), 3,71 (1H, brd, J=9,6 Hz), 3,56 (1H, d, J=10,0 Hz), y 3,16 (3H, s).
Ejemplo 8
Preparación del compuesto representado por la fórmula
31
Se disolvieron 350,6 mg de 6-benciloxiindol en 5 ml de THF y se añadieron a ellos 3,45 ml de hexametildisilazida de litio (como solución 1M en THF). Después de que esta mezcla se agitara bajo atmósfera de nitrógeno a 0ºC durante 15 minutos, se añadieron goteando a ella 15 ml de una solución en THF que contenían 1.470 mg del compuesto (19) durante un periodo de 10 minutos. Después de la compleción de la adición, se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se vertió en 100 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 200 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1 hasta 1:1) para obtener 1.234 mg del compuesto (15) deseado (con un rendimiento del 73%).
Sus datos de propiedades concuerdan con los obtenidos en el ejemplo 6-5).
Ejemplo 9
Preparación del compuesto representado por la fórmula
32
Se disolvieron 100 mg del compuesto (13) obtenido en el ejemplo 6-3) en 10 ml de metilamina (como solución al 40% en metanol), y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de que la mezcla de reacción se concentrara, el residuo resultante se recristalizó en diclorometano-acetona-hexano para obtener 68,6 mg del compuesto (20) deseado (con un rendimiento del 84%).
HRMS (m/z): encontrado 553,1982 calculado 553,2002 [como C_{35}H_{27}N_{3}O_{4}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3419, 3350, 1759, 1697, 1620, 1533, 1454, 1383, 1292 y 1167.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,48 (2H, s), 7,62 (2H, s), 7,28-7,45 (10H, m), 6,95 (2H, d, J=1,2 Hz), 6,70 (2H, d, J=8,7 Hz), 6,39 (2H, dd, J=1,2, 8,7 Hz), 5,04 (4H, s) y 3,03 (3H, s).
Ejemplo 10
Preparación del compuesto representado por la fórmula
33
Se disolvieron 1,01 g del compuesto (20) obtenido en el ejemplo 9 y 456,1 mg de 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona en 50 ml de tolueno, y esta solución se agitó a 110ºC durante 40 minutos. Después de que la mezcla de reacción se retornara a temperatura ambiente, la materia insoluble se separó por filtración y se lavó con 30 ml de metanol. El residuo se recristalizó en dimetilsulfóxido-diclorometano-metanol para obtener 981 mg del compuesto (21) deseado (con un rendimiento del 98%).
HRMS (m/z): encontrado 551,1829 calculado 551,1845 [como C_{35}H_{25}N_{3}O_{4}].
IR (KBr, cm^{-1}): 3257, 1740, 1675, 1620, 1571, 1402, 1246 y 1178.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,46 (2H, s), 8,79 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,53 (4H, d, J=8,5 Hz), 7,35-7,44 (8H, m), 7,02 (2H, dd, J=8,5, 0,8 Hz), 5,25 (4H, s) y 3,13 (3H, s).
Ejemplo 11
Preparación del compuesto representado por la fórmula
34
Se suspendieron 5,7 g de hidróxido potásico y 22 g de sulfato sódico en 380 ml de acetonitrilo y se añadieron a ellos 5,51 g del compuesto (21) obtenido en el ejemplo 10. Después de que esta mezcla se agitara a temperatura ambiente durante 1 hora, se añadieron goteando a ella 170 ml de una solución en acetonitrilo que contenían 11,5 g de 1-cloro-2,3,4,6-tetra-O-bencil-D-glucopiranósido. Después de que la mezcla resultante se agitara a temperatura ambiente durante 7 horas, se vertió la mezcla de reacción en 360 ml de ácido clorhídrico 1N y se extrajo con 360 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (tolueno-acetato de etilo = 30:1) para obtener 7,8 g del compuesto (16) deseado (con un rendimiento del 73%).
Sus datos de propiedades concordaban con los obtenidos en el ejemplo 6-6).
Ejemplo 12
Preparación del compuesto representado por la fórmula
35
Se disolvieron 50 ml de bromuro de etilmagnesio (como solución 0,9M en THF) en 50 ml de tolueno y se añadieron a ellos 10 g de 6-benciloxiindol a 45ºC. Después de que esta mezcla se agitara durante 1 hora, se añadieron a ella 50 ml de una solución en tolueno que contenían 4,02 g de 2,3-dibromo-N-metilmaleimida, seguido por agitación a 110ºC durante la noche. La mezcla de reacción se vertió en 500 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 900 ml de metiletilcetona. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (diclorometano) y después se recristalizó en diclorometano-acetona-hexano para obtener 5,65 g del compuesto (20) deseado (con un rendimiento del 69%).
Sus datos de propiedades concordaban con los obtenidos en el ejemplo 9.
Ejemplo 13
Preparación del compuesto representado por la fórmula
36
en la que SEM representa un grupo 2-trimetilsilil-etoximetilo, y lo mismo se aplicará en lo sucesivo.
Se disolvieron 2,00 g del compuesto (11) obtenido en el ejemplo 6-1), 1 g de cloruro de 2-trimetilsilil-etoximetilo y 300 mg de hidruro sódico en 30 ml de THF, y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. La mezcla de reacción se vertió en 200 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 300 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1) para obtener 1,96 g del compuesto (22) deseado (con un rendimiento del 77%).
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 7,96 (1H, d, J=8,9 Hz), 7,89 (1H, s), 7,33-7,50 (5H, m), 7,10 (1H, d, J=2,2 Hz), 7,01 (1H, dd, J=2,2, 8,9 Hz), 5,48 (2H, s), 5,15 (2H, s), 3,52 (2H, t, J=8,1 Hz), 3,16 (3H, s), 0,90 (2H, t, J=8,1 Hz), y -0,04 (9H, s).
Ejemplo 14
Preparación del compuesto representado por la fórmula
37
Se disolvieron 1,25 mg de 6-benciloxiindol en 20 ml de THF y se añadieron a ellos 2,35 ml de hexametildisilazida de litio (como solución 1M en THF). Después de que esta mezcla se agitara bajo atmósfera de nitrógeno a 0ºC durante 30 minutos, se añadieron goteando a ella 20 ml de una solución en THF que contenían 1,96 g del compuesto (22) obtenido en el ejemplo 13, seguido por agitación durante 2 horas. La mezcla de reacción se vertió en 100 ml de ácido clorhídrico 2N y se extrajo con 200 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 4:1) y después se recristalizó en acetato de etilo-acetona-hexano para obtener 2,21 g del compuesto (23) deseado (con un rendimiento del 91%).
IR (KBr, cm^{-1}): 3369, 1697, 1621, 1533, 1456, 1385, 1246, 1164, 1091, 1025, 837, 737 y 696.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 8,55 (1H, d, J=2,0 Hz), 7,67 (1H, s), 7,57 (1H, d, J=2,0 Hz), 7,27-7,46 (10H, m), 7,00 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,89 (1H, d, J=8,9 Hz), 6,80 (2H, d, J=8,9 Hz), 6,49 (2H, dd, J=2,0, 8,9 Hz), 5,41 (2H, s), 5,01 (2H, s), 4,96 (2H, s), 3,50 (2H, t, J=8,9 Hz), 3,17 (3H, s), 0,90 (2H, t, J=8,9 Hz), y -0,02 (9H, s).
Ejemplo 15
Preparación del compuesto representado por la fórmula
38
Se disolvieron 1,0 g del compuesto (23) obtenido en el ejemplo 14 y 2,0 g de carbonato cálcico en 50 ml de DMF, y se añadieron a ellos 1,09 g de cloruro de paladio. Esta mezcla se agitó a 80ºC durante 0,5 horas. Después de que la mezcla se filtrara a través de Celite, se repartió el filtrado entre 200 ml de acetato de etilo y 100 ml de ácido clorhídrico 2N. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 6:1 hasta 3:1) y después se recristalizó en acetona-hexano para obtener 689 mg del compuesto (24) deseado (con un rendimiento del 69%).
IR (KBr, cm^{-1}): 1747, 1697, 1621, 1581, 1454, 1429, 1376, 1338, 1282, 1251, 1214, 1187, 1132 y 1066.
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 9,66 (1H, brs), 9,00 (2H, t, J=8,7 Hz), 7,35-7,53 (10H, m), 7,08 (2H, dd, J=2,2, 8,7 Hz), 7,06 (1H, d, J=2,2 Hz), 7,03 (1H, d, J=2,2 Hz), 5,72 (2H, s), 5,22 (2H, s), 5,21 (2H, s), 3,70 (2H, t, J=8,1 Hz), 3,09 (3H, s), 0,96 (2H, t, J=8,1 Hz), y -0,05 (9H, s).
Ejemplo 16
Preparación del compuesto representado por la fórmula
39
Se suspendieron 30 mg de terc-butóxido potásico y 200 g de sulfato sódico en 2 ml de tolueno y se añadieron a ellos 50 mg del compuesto (24) obtenido en el ejemplo 15. Después de que esta mezcla se agitara a temperatura ambiente durante 0,5 horas, se añadió goteando a ella 1 ml de una solución en tolueno que contenía 130 mg de 1-cloro-2,3,4,6-tetra-O-bencil-D-glucopiranósido. Después de que la mezcla resultante se agitara a 50ºC por la noche, se vertió la mezcla de reacción en 50 ml de ácido clorhídrico 1N y se extrajo con 100 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 8:1 hasta 6:1) para obtener 58,6 mg del compuesto (25) deseado (con un rendimiento del 65%).
^{1}H-NMR (300 MHz, CDCl_{3}, \delta ppm): 9,03 (1H, d, J=9,5 Hz), 8,99 (1H, d, J=9,5 Hz), 6,77-7,57 (32H, m), 6,07 (2H, d, J=7,5 Hz), 5,30 (1H, d, J=8,9 Hz), 5,26 (2H, s), 5,13 (2H, s), 3,47-5,02 (15H, m), 3,42 (2H, t, J=8,9 Hz), 3,12 (3H, s), 2,61 (1H, d, J=9,5 Hz), 0,93 (2H, t, J=8,9 Hz), y -0,07 (9H, s).
Ejemplo 17
Preparación del compuesto representado por la fórmula
40
Se disolvieron 45 mg del compuesto (25) obtenido en el ejemplo 16, 50 ml de tamiz molecular y 0,9 ml de fluoruro de tetrabutilamonio (como solución 1M en THF) en 1 ml de tetrahidrofurano, y esta mezcla se agitó a 50ºC durante 2 horas. Después de que la mezcla de reacción se filtrada a través de Celite, el filtrado se vertió en 50 ml de ácido clorhídrico 1N y se extrajo con 100 ml de acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico, agua y después una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (hexano-acetato de etilo = 10:1) para obtener 26,7 mg del compuesto (16) deseado (con un rendimiento del 85%).
Sus datos de propiedades concordaban con los obtenidos en el ejemplo 6-6).
Ejemplo 18
Preparación del compuesto representado por la fórmula
(26)H_{2}NNHCH(CH_{2}OH)_{2}
1) Se disolvieron 10,0 g del dímero de dihidroxiacetona y 14,7 g de carbazinato de terc-butilo en 500 ml de etanol, y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 15 horas. Después de que la mezcla de reacción se concentrara bajo presión reducida, el residuo resultante se recristalizó en acetato de etilo para obtener 18,67 g de 2-(terc-butiloxicarbonil)-hidrazono-1,3-propano-diol como un sólido incoloro.
^{1}H-NMR (300 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 1,49 (9H, s), 3,92 (2H, d, J= 5,2 Hz), 4,24 (2H, d, J=5,0 Hz), 4,88 (1H, t, J=5,8 Hz), 5,61 (1H, t, J=5,1 Hz) y 9,98 (1H, brs).
2) Se añadieron 50 ml de un complejo de borano-tetrahidrofurano a 5,00 g de 2-(terc-butiloxicarbonil)-hidrazono-1,3-propanodiol a 0ºC, y esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. Se añadieron a la mezcla de reacción 25 ml de ácido clorhídrico 6N y la mezcla resultante se calentó bajo reflujo durante 1,5 horas. Después de que la mezcla de reacción se concentrara bajo presión reducida, el residuo resultante se adsorbió en Dowex 50Wx4 del tipo H^{+}, se lavó con agua y se eluyó con amoniaco acuoso 0,5 N. Después de que las fracciones que contenían el producto deseado se recogieran y concentraran bajo presión reducida, el material oleoso resultante se adsorbió en IRC-50 del tipo NH_{4}^{+} y se eluyó con agua. Las fracciones que contenían el producto deseado se recogieron y concentraron bajo presión reducida para obtener 2,26 g de 2-hidrazino-1,3-propanodiol como un sólido incoloro.
FAB-MS (m/z): 107 (M+H)^{+}
^{1}H-NMR (200 MHz, CD_{3}OD, \delta ppm): 2,78 (1H, m), 3,50-3,75 (4H, m).
Ejemplo de referencia 1
Preparación del compuesto representado por la fórmula
41
La cepa Microtetraspora sp. A34549 [número de Acceso: FERM BP-4206 (un microorganismo trasferido de Nº P-13292 depositado con el Research Institute of Microbiological Techonology el 17 de noviembre de 1992), que había sido cultivado en un medio de agar inclinado, se inoculó en un matraz de cultivo cónico de 500 ml que contenía 110 ml de un medio de cultivo (pH 7,2 antes de la esterilización) compuesto de 0,2% de glucosa, 2,0% de dextrina, 0,5% de harina de avena, 0,5% de salvado de maíz desgrasado, 0,2% de harina de carne y hueso desgrasada, 0,1% de levadura seca, 0,05% de sulfato magnésico heptahidratado, 0,05% de bromuro sódico, 0,5% de cloruro sódico y 0,1% de hidrogenofosfato potásico, y se incubó a 28ºC en un aparato de sacudidas rotativo (180 revoluciones por minuto) durante 8 días. 2 ml de cada uno de los cultivos se inocularon en veinte matraces de cultivo cónicos de 500 ml que contenían 110 ml de un medio de cultivo que tenía la composición anteriormente mencionada, y se incubaron a 28ºC en un aparato de sacudidas rotativo (180 revoluciones por minuto). Después de una incubación de 9 días, se añadieron a cada matraz 0,5 ml de una solución de 20 mg/ml de 12,13-dihidro-1,11-dihidroxi-5H-indolo[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(6H)-diona [compuesto (28); véase la patente japonesa abierta a consulta por el público nº 2077/'91] en dimetilsulfóxido, y se continuó la incubación bajo las condiciones anteriormente mencionadas durante 15 días adicionales.
El cultivo así obtenido se extrajo con 3 litros de metiletilcetona (MEK). Después de que el extracto en MEK se concentrara bajo presión reducida, el concentrado resultante se extrajo con acetato de etilo. El extracto en acetato de etilo (850 ml) se deshidrató con sulfato sódico anhidro y después se concentró hasta sequedad. Éste se sometió a cromatografía en columna de gel de sílice (1,5 cm de diámetro interno y 30 cm de longitud; gel de sílice BW-350; fabricada por Fuji-Davison Chemical Co., Ltd.), se lavó con cloroformo-metanol-tetrahidrofurano-amoniaco acuoso al 28% (2:1:3:0,2) y se eluyó con cloroformo-metanol-tetrahidrofurano (3:1:1). Las fracciones que contenían el producto deseado se recogieron y concentraron hasta sequedad. El residuo resultante se disolvió en una pequeña cantidad de tetrahidrofurano-etanol (1:3), se sometió a cromatografía en columna Sephadex LH-20 (1,5 cm de diámetro interno y 87 cm de longitud), y se eluyó con etanol. Las fracciones que contenían el producto deseado se recogieron y concentraron hasta sequedad para obtener 53,9 mg del compuesto del título (27), es decir, 12,13-dihidro-1,11-dihidroxi-13-(\beta-D-glucopiranosil)-5H-indolo[2,3-a]pirrolo-[3,4-c]carbazol-5,7(6H)-diona.
HR FAB-MS (m/z): 519,1313
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 11,0 (1H, s), 10,9 (1H, s), 10,3 (1H, brs), 9,93 (1H, brs), 8,69 (1H, d, J=7,8 Hz), 8,51 (1H, d, J=7,8 Hz), 7,17 (2H, t, J=7,8 Hz), 7,05 (1H, d, J=9,3 Hz), 7,01 (1H, d, J=7,8 Hz), 6,99 (1H, d, J=7,8 Hz), 5,41 (1H, d, J=5,9 Hz), 5,34 (1H, brs), 5,20 (1H, d, J=5,4 Hz), 4,89 (1H, brs), 4,02 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,63 (2H, m) y 3,41 (1H, m).
Ejemplo de referencia 2
Preparación del compuesto representado por la fórmula
42
La cepa Saccharothrix aerocolonigenes ATCC 39243, que había sido cultivada en un medio de agar inclinado, se inoculó en siete matraces de cultivo cónicos de 500 ml que contenían 110 ml de un medio de cultivo (pH 7,2 antes de la esterilización) compuesto de 3,0% de glucosa, 1,0% de harina de soja, 1,0% de torta de semillas de algodón y 0,3% de carbonato cálcico y se incubaron a 28ºC en un aparato de sacudidas rotativo (180 revoluciones por minuto) durante 48 horas. 4 ml de cada uno de los cultivos resultantes se inocularon en ciento cincuenta matraces de cultivo cónicos de 500 ml que contenían 110 ml de un medio de cultivo (pH 7,2 antes de la esterilización) compuesto de 1,0% de glucosa, 6,0% de dextrina, 1,5% de torta de linaza, 0,5% de levadura en polvo, 0,1% de sulfato ferroso heptahidratado, 0,1% de dihidrogenofosfato amónico, 0,1% de sulfato amónico y 1,0% de carbonato cálcico, y se incubaron a 28ºC en un aparato de sacudidas rotativo (180 revoluciones por minuto). Después de 120 horas de incubación, se añadieron a cada matraz 0,5 ml de una solución de 20 mg/ml de 12,13-dihidro-1,11-dihidroxi-5H-indolo[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(6H)-diona [véase la patente japonesa abierta a consulta por el público nº 2077/'91] en dimetilsulfóxido (DMSO), y se continuó la incubación bajo las condiciones anteriormente mencionadas durante 120 horas
adicionales.
Separadas las células microbianas filtrando el cultivo así obtenido, se extrajo dos veces con metanol (5,1 litros y 5,6 litros) y dos veces con tetrahidrofurano (2,2 litros y 2,3 litros). Los extractos en metanol y tetrahidrofurano se combinaron y concentraron hasta alrededor de 1600 ml. La solución acuosa obtenida por concentración se extrajo con hexano (780 ml) para separar cualquier impureza, y la capa acuosa se extrajo con 3,3 litros de acetato de etilo. Después de que el extracto en acetato de etilo se concentrara hasta sequedad, el residuo resultante se lavó con alrededor de 90 ml de acetato de etilo y después se extrajo con alrededor de 90 ml de metanol. El extracto en metanol se concentró hasta sequedad para obtener 694 mg de un sólido amarillo-naranja. Éste se disolvió en 40 ml de metanol y se sometió a cromatografía en columna Sephadex LH-20 (3,0 x 53 cm; fabricada por Pharmacia Co.), usando metanol como eluyente. Las fracciones que contenían el compuesto deseado se recogieron y concentraron hasta sequedad. El residuo resultante se sometió a cromatografía en columna de gel de sílice (1,5 x 46 cm; Kieselgel 60; fabricada por Merck Co.), se lavó con cloroformo y después con cloroformo-metanol (10:1) y se eluyó con acetato de etilo-metanol (10:1). El eluato se concentró hasta sequedad para obtener 169 mg del compuesto del título (27) deseado, es decir, 12,13-dihidro-1,11-dihidroxi-13-(\beta-D-glucopiranosil)-5H-indolo[2,3-a]pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(6H)-diona.
Los datos de propiedad del compuesto del título así obtenido fueron idénticos a los del compuesto obtenido en el ejemplo de referencia 1.
\newpage
Ejemplo de referencia 2
Preparación del compuesto representado por la fórmula
43
Se disolvieron 3,4 g de la 12,13-dihidro-1,11-dihidroxi-13-(\beta-D-glucopiranosil)-5H-indolo[2,3-a]-pirrolo[3,4-c]carbazol-5,7(6H)-diona preparada en el ejemplo de referencia 1 o 2 en 120 ml de una solución acuosa al 10% de hidróxido potásico, y esta solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de que la mezcla de reacción se neutralizara mediante la adición de 120 ml de ácido clorhídrico 2N, los cristales rojos precipitados se separaron por filtración, se lavaron con agua y se secaron para obtener 3,0 g del compuesto del título (8).
FAB-MS (m/z): 520 (M)^{+}, 521 (M+H)^{+}
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}, \delta ppm): 3,42 (1H, m), 3,56-3,70 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,95-4,10 (2H, m), 4,95 (1H, d, J=4,6 Hz), 5,24 (1H, d, J=5,4 Hz), 5,32 (1H, dd, J=4,9, 5,1 Hz), 7,06 (2H, dd, J=7,6, 7,8 Hz), 7,09 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,20 (1H, d, J=7,8 Hz), 7,40 (1H, d, J=7,8 Hz), 8,36 (1H, d, J=7,6 Hz), 8,51 (1H, d, J=7,6 Hz), 10,13 (1H, s), 10,52 (1H, s) y 11,11 (1H, s).

Claims (3)

1. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula [XVIII]
\vskip1.000000\baselineskip
44
en la que R^{4} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}, un grupo benciloximetilo o un grupo aralquilo;
R^{5} y R^{6} representan cada uno un grupo OH protegido, y R^{5} y R^{6} están situados en las posiciones 1 y 11, respectivamente, o están situados en las posiciones 2 y 10, respectivamente;
R^{7}, R^{8}, R^{9} y R^{10} pueden ser iguales o diferentes y cada uno representa un grupo protector para un grupo hidroxilo, que comprende:
hacer reaccionar un compuesto de fórmula [XXI],
45
en la que R^{4} y R^{5} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente y X representa un grupo lábil,
con un compuesto de fórmula [XV]
\vskip1.000000\baselineskip
46
en la que R^{7} a R^{10} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente, mediante reacción de Mitsunobu, para formar un compuesto de fórmula [V]
47
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{4} a R^{5}, R^{7} a R^{10} y X tienen los mismos significados que los descritos anteriormente;
hacer reaccionar el compuesto de fórmula [V] con un compuesto de fórmula [X]
\vskip1.000000\baselineskip
48
en la que R^{6} tiene el mismo significado que el descrito anteriormente, en presencia de un compuesto organometálico, para formar un compuesto de fórmula [XVII]
\vskip1.000000\baselineskip
49
en la que R^{4} a R^{10} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente; y
ciclar el compuesto de fórmula [XVII] con la ayuda de un agente oxidante.
\newpage
2. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula [XVIII]
50
en la que R^{4} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}, un grupo benciloximetilo o un grupo aralquilo;
R^{5} y R^{6} representan un grupo OH protegido, y R^{5} y R^{6} están situados en las posiciones 1 y 11, respectivamente, o están situados en las posiciones 2 y 10, respectivamente;
R^{7}, R^{8}, R^{9} y R^{10} pueden ser iguales o diferentes y cada uno representa un grupo protector para un grupo hidroxilo, que comprende:
eliminar el grupo protector para el grupo amino de un esqueleto de indol de un compuesto de fórmula [XIV]
51
en la que R^{4} a R^{6} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente, y R^{12} es un grupo protector para el grupo amino del esqueleto de indol, para formar un compuesto de fórmula [XXII],
52
en la que R^{4} a R^{6} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente;
ciclar el compuesto de fórmula [XXII] por reacción con un agente oxidante para formar un compuesto de fórmula [XXIV]
53
en la que R^{4} a R^{6} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente; y
hacer reaccionar el compuesto de fórmula [XXIV] con un compuesto de fórmula [XXIII]
54
en la que X^{1} representa un grupo lábil y R^{7} a R^{10} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente, en presencia de una base.
3. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula [XVIII]
\vskip1.000000\baselineskip
55
en la que R^{4} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}, un grupo benciloximetilo o un grupo aralquilo;
R^{5} y R^{6} representan un grupo OH protegido, y R^{5} y R^{6} están situados en las posiciones 1 y 11, respectivamente, o están situados en las posiciones 2 y 10, respectivamente;
R^{7}, R^{8}, R^{9} y R^{10} pueden ser iguales o diferentes y cada uno representa un grupo protector para un grupo hidroxilo, que comprende:
hacer reaccionar un compuesto de fórmula [XIV]
\vskip1.000000\baselineskip
56
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{4} a R^{6} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente, y R^{12} es un grupo protector para el grupo amino del esqueleto de indol, con un agente oxidante para formar un compuesto de fórmula [XXV],
\vskip1.000000\baselineskip
57
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R^{4} a R^{6} y R^{12} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente,
hacer reaccionar el compuesto de fórmula [XXV] con un compuesto de fórmula [XXIII]
\vskip1.000000\baselineskip
58
\vskip1.000000\baselineskip
en la que X^{1} representa un grupo lábil, y R^{7} a R^{10} tienen los mismos significados que los descritos anteriormente, en presencia de una base, para formar un compuesto de fórmula [XXVI]; y
59
eliminar el grupo protector para el grupo amino de un esqueleto de indol.
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