ES2209197T3

ES2209197T3 - Utilizacion del ginsenosido rb1 para estimular la sintesis de la elastina.

Info

Publication number: ES2209197T3
Application number: ES98941569T
Authority: ES
Inventors: Alain Meybeck; Marc Dumas; Catherine Gondran; Frederic Bonte
Original assignee: LVMH Recherche GIE
Current assignee: LVMH Recherche GIE
Priority date: 1997-08-08
Filing date: 1998-08-07
Publication date: 2004-06-16
Anticipated expiration: 2018-08-07
Also published as: FR2767057B1; EP1001740A1; DE69819006D1; FR2767057A1; US20020015743A1; WO1999007338A1; DE69819006T2; EP1001740B1; JP2001513491A

Abstract

La invención se refiere a las nuevas utilizaciones del ginsenósido Rb1 (G-Rb1) y extractos vegetales que lo contienen, en cosméticos o fármacos, en particular en el ámbito de la dermatología, para estimular la síntesis de elastina mediante fibroblastos dérmicos. La invención se refiere también a composiciones cosméticas o farmacéuticas, en particular dermatológicas, que contienen dicho ginsenósido o extractos vegetales para estimular la síntesis de elastina mediante fibroblastos dérmicos. Dichas composiciones ventajosamente contienen un extracto de ginseng asiático o ginseng americano.

Description

Utilización del ginsenosido Rb_{1} para estimular la síntesis de la elastina.

La invención se refiere a nuevas utilizaciones del ginsenosido Rb_{1} como agente destinado a estimular la síntesis de la elastina.

Esta invención encuentra aplicaciones esencialmente en el campo de la cosmética y de la farmacia, principalmente de la dermatología.

De una manera general, cuando se busca luchar eficazmente contra el envejecimiento cutáneo, se ensaya tratar la piel con productos que presentan una actividad anti-radical, susceptibles en particular de atrapar los radicales libres responsables, por parte, efectos nefastos que producen un envejecimiento de la piel.

Es conocido que en la dermis, las fibras elásticas forman una red que contribuye a la elasticidad de la piel y, por consiguiente, a su tonicidad y a su firmeza. La elastina es el componente principal de estas fibras. Se sintetiza inicialmente por los fibroblastos en la forma de un polipéptido soluble de 70 kDa, la tropoelastina. La formación de las microfibrillas se realiza a continuación por enlaces intramoleculares denominadas desmosinas entre los residuos lisina de las cadenas polipeptídicas. Estos enlaces confieren a la elastina una gran insolubilidad.

Por otro lado, se conoce que el contenido en elastina se reduce en el organismo humano a partir de la edad de 25 años. Existen buenas razones para pensar que la aparición de las arrugas puede estar ligada, entre otras cosas, a la desaparición progresiva de la elastina dérmica. Éste es el motivo por el que algunos cosmetólogos han propuesto tratar la piel por preparaciones de productos derivados de elastina. Se han propuesto así utilizar composiciones que contienen la elastina hidrolizada para volverla soluble. Sin embargo, el inconveniente de tales productos está unido al peso molecular demasiado elevado de la elastina hidrolizada que penetra difícilmente a través de la piel.

Otra solución mucho más interesante, y que constituye un progreso claro, consiste en favorecer la síntesis de elastina directamente por las células de la piel. Se conocen actualmente dos tipos de productos que tiene un efecto de este tipo. Se trata, por una parte, del etocino, cuya actividad se ha descrito por L.C. FORD y col., (IFSCC Congres, Barcelona, 1986, Vol. II, pág. 987-989) y, por otra parte, del ácido ascórbico y sus derivados, cuya actividad se describe en la solicitud internacional WO 96/19099.

La familia de los Panax comprende numerosas especies y variedades de las que las más conocidas son:

- Panax ginseng (C.A. Meyer) que es el más frecuentemente utilizado para sus propiedades medicinales,

- Panax notoginseng,

- Panax pseudo-ginseng (subsp. himalaicus),

- Panax japonicus (var. mayor: var. angustifolius),

- Panax quinquefolium,

- Panax trifolius,

- Panax zingiberensis,

- Panax stipuleanatus,

Los Panax provienen esencialmente de tres países:

- Japón

- China

- Corea.

Las especies y variedades cultivadas en estos países son diferentes y experimentan condiciones geo-climáticas variadas.

Se constatan contenidos en saponinas muy diferentes en las diversas partes de la planta. La parte de la raíz es la más frecuentemente utilizada y generalmente considerada la más activa.

El contenido más fuerte en saponinas es observado en la extremidad de la raíz (ninjin, en japonés) y en las raicillas (hairy roots: keninjin, en japonés).

El Panax más conocido es el Panax ginseng o ginseng.

Hay una composición en saponinas (denominadas ginsenosidos) bien particular.

Cada especie o variedad de Panax tiene una composición en ginsenosidos particular, lo que confiere a los extractos que provienen de ella propiedades diferentes de las de los extractos de otros Panax.

Los Panax notoginseng (Sanchi en chino) y los Panax quinquefolium (American ginseng) se diferencian mucho del Panax ginseng. Son particularmente ricos en ginsenosido Rb_{1}, incluso designado por G-Rb_{1} que responde a la fórmula:

\vskip1.000000\baselineskip

1

\vskip1.000000\baselineskip

en la que:

R_{1} = Glc(2-1)Glc,

R_{2} = Glc(6-1)Glc,

R_{3} = H

donde Glc designa un grupo \beta-D glucopiranosilo.

Se ha descrito en la solicitud internacional PCT WO 94/06402 una actividad de este ginsenosido Rb_{1} y, más particularmente, de los extractos de Panax notoginseng o San-chi particularmente rico en este ginsenosido para el tratamiento de los cabellos, en particular para evitar su caída.

Se conoce, por otro lado, la acción inhibidora de este mismo ginsenosido sobre la proliferación de los queratinocitos (Nack-in-Kim y col., J. Invest. Dermatol., 101 (3), 491, 1993).

Este mismo ginsenosido Rb_{1} es, por otro lado, particularmente abundante en los extractos de Panax quinquefolium.

El Panax quinquefolium es sobre todo utilizado como tónico (ver artículo referenciado Hort. Technology 5 (1), 27-34, 1995).

Otro ginsenosido, el ginsenosido Rb_{2} se ha encontrado eficaz para estimular la síntesis de los glicosaminoglicanos (GAG) por los fibrocitos (Tanaka H. y col., Nippon Koshohin Kagakkaishi, 15 (3), 132-5, 1991 y Tanaka H. y col. Fragance J., 19 (8), 90-2, 1991).

Por otro lado, estudios han mostrado que los ginsenosidos de ginseng tienen un efecto positivo sobre la elasticidad de la piel de las mujeres menopáusicas (A.Gezzi y col. Fitoterapia, 57 (1), 15-28, 1986, S.B. Curri y col., Fitoterapia, 57, 4, 217-222, 1986). Paralelamente, estos autores han mostrado un efecto positivo de un extracto de ginseng con 14% de ginsenosidos sobre la hidratación de la capa córnea de la piel de las mujeres. En el caso del extracto de ginseng utilizado que contiene otros ginsenosidos como saponinas mayores y en el que el ginsenosido Rb_{1} está en baja concentración, el efecto principal parece ser un efecto de hidratación que se traduce por una mayor
elasticidad.

Por otro lado, la patente rusa SU 839542 describe una crema cosmética que contiene, entre otros, un extracto de ginseng. Esta crema está destinada a prevenir el ajamiento de la piel. Esta crema mejora la circulación sanguínea, el metabolismo de las proteínas y de las grasas, la estructura morfológica de la piel y su elasticidad.

Los inventores de la presente solicitud han puesto en evidencia ahora el efecto específico del ginsenosido Rb_{1}, incluso denominado G-Rb_{1} para estimular la biosíntesis de la elastina por los fibroblastos de la dermis, en particular los fibroblastos de la dermis humana.

Así, la presente invención tiene por objeto resolver el nuevo problema técnico que consiste en el suministro de una solución que permite mejorar la elasticidad cutánea favoreciendo la síntesis de elastina, según una solución de concepción simple, fácilmente utilizable en la escala industrial permitiendo un uso cosmético o farmacéutico, principalmente dermatológico.

Según una de sus características esenciales, la invención se refiere a la utilización cosmética del ginsenosido Rb_{1} (a continuación denominado igualmente G-Rb_{1}) o de extractos vegetales que lo contienen como agente activo una composición destinada a estimular la síntesis de elastina por los fibroblastos de la dermis.

Según otra característica esencial, la invención se refiere a la utilización del mismo ginsenosido Rb_{1} o de extractos vegetales que lo contienen para la fabricación de una composición farmacéutica, principalmente dermatológica, destinada al tratamiento de los problemas ligados a una insuficiencia de la síntesis de la elastina por los fibroblastos de la dermis.

En estos dos tipos de utilización, la estimulación de la síntesis de la elastina tiene por resultado mejorar la elasticidad y la tonicidad cutánea o de favorecer el endurecimiento de la piel.

Según una variante particularmente ventajosa de la invención, las composiciones tanto cosméticas como farmacéuticas, principalmente dermatológicas de la invención podrán comprender además el ginsenosido Rb_{1} al menos otra saponina de tipo ginsenosido.

Así, según una variante particularmente ventajosa de la invención, el ginsenosido Rb_{1} podrá ser introducido en la composición en la forma de un extracto de una planta de tipo Panax.

A título de ejemplo de extracto particularmente útil para el empleo de la invención, se citarán los extractos que contienen:

- de 2 a 60% en peso de saponina G-Rb_{1},

- de 2 a 60% en peso de saponina G-Rg1,

- de 0 a 15% en peso de saponina G-Rd,

- de 0 a 15% en peso de saponina N-R_{1},

- de 1 a 10% en peso de saponina G-Re,

Se elegirá preferentemente incluso un extracto que contiene:

- de 10 a 60% en peso de saponina G-Rb_{1},

- de 10 a 60% en peso de saponina G-Rg1,

- de 0 a 15% en peso de saponina G-Rd,

- de 0 a 15% en peso de saponina N-R_{1},

- de 1 a 10% en peso de saponina G-Re,

con relación al peso total de dicho extracto.

Según otra variante incluso, se elegirá un extracto en el que el ginsenosido G-Rb_{1} es la saponina contenida mayoritariamente.

Como se ha visto anteriormente, las plantas de tipo Panax notoginseng y Panax quinquefolium son dos plantas de tipo Panax particularmente ricas en ginsenosido Rb_{1}. Es por lo que se recurrirá a estas dos plantas particulares preferentemente para la preparación de las composiciones cosméticas o farmacéuticas, principalmente dermatológicas de la invención.

De estos dos tipos de plantas, se utilizarán preferentemente sus partes subterráneas para la preparación del extracto.

El extracto es objetivo de una manera ventajosa por extracción de la materia vegetal con un disolvente polar o una mezcla de disolventes polares.

En este marco, se pueden utilizar los procedimientos de extracción clásicos bien conocidos por el técnico en la materia. En particular, la extracción puede realizarse sobre la materia vegetal triturada.

Ventajosamente, la extracción se realiza a partir de los rizomas.

La extracción puede realizarse igualmente sobre tejidos vegetales en cultivo (cultivo in vitro de raíces o de callos).

La materia vegetal triturada es introducida en el disolvente de extracción, preferentemente constituido por el disolvente o la mezcla de disolventes polares citados previamente.

La extracción puede renovarse varias veces hasta el agotamiento de la materia, conforme a los procedimientos bien conocidos del técnico en la materia. La extracción puede realizarse a la temperatura ambiente, o en caliente y principalmente a reflujo del disolvente. La proporción en peso entre la materia a extraer y el disolvente se puede variar en grandes límites. Más precisamente, puede estar comprendida entre 1:5 y 1:100, y, preferentemente, entre 1:10 y 1:20.

Según un modo particular de realización de la invención, el extracto vegetal que contiene las saponinas citadas anteriormente se obtiene según el procedimiento descrito a continuación a título indicativo, pero de ningún modo limitativo. Se extrae la materia seca por medio de un disolvente elegido en el grupo constituido por agua, los alcoholes que comprenden preferentemente de 1 a 4 átomos de carbono, y los disolventes mixtos a base de mezclas cualquiera de los disolventes citados previamente.

Preferentemente, se utilizará un alcohol tal como el metanol, el etanol, el propanol, el isopropanol, el propilenoglicol o el butilenoglicol o una mezcla de estos alcoholes o incluso una mezcla hidro-alcohólica.

Se elegirá ventajosamente como disolvente para realizar esta extracción un disolvente elegido en el grupo constituido por el metanol, el etanol, el 1,3-butilenoglicol y las mezclas de estos disolventes entre ellos o con agua.

Preferentemente, una primera extracción denominada extracción primaria es efectuada al reflujo bajo presión atmosférica durante una duración de 30 minutos aproximadamente. Al final de la extracción, se deja refrigerar la fase del disolvente que contiene el extracto luego se filtra. Ventajosamente, el residuo es extraído incluso una o dos veces según el mismo protocolo, los filtrados son reunidos luego concentrados y, o evaporados en seco bajo presión reducida. Se obtiene así un primer extracto según la invención rico en saponinas. Este extracto puede igualmente ser
liofilizado.

De acuerdo con una variante particular, se prepara una mezcla de saponinas según la invención a partir del primer extracto concentrado o seco precipitado que se realiza como se indica a continuación. El primer extracto citado anteriormente, que se ha obtenido preferentemente con un disolvente primario fácilmente eliminable por evaporación, tal como el metanol o el etanol o incluso una mezcla metanol-agua o etanol-agua, se introduce luego agitado en un disolvente apolar preferentemente miscible con el disolvente de extracción primaria, tal como un éter o una cetona de bajo peso molecular, en particular el eter etílico o isopropílico, la acetona o la metil-etil-cetona. La cantidad de disolvente apolar es, en peso, generalmente de 5 a 100 partes para una parte de extracto primario. El insoluble y/o el precipitado formado contienen principalmente una mezcla de saponinas utilizable según la invención.

Si se desea, la mezcla de saponinas obtenida anteriormente puede purificarse una nueva vez por un procedimiento cualquiera al alcance del técnico en la materia.

En particular, el insoluble y/o el precipitado es puesto de nuevo en solución en 20 veces aproximadamente su peso de agua. La solución acuosa es extraía a continuación 3 a 4 veces por un alcohol poco soluble en el agua, tal como el butanol saturado en agua, por ejemplo en proporción 1/1 en volumen a cada operación de extracción. Las fases alcohólicas son reunidas y evaporadas bajo presión reducida. El residuo es disuelto en 10 veces aproximadamente su peso de agua, la solución es dializada a continuación contra el agua pura durante 4 a 5 días. El contenido de la célula de diálisis es liofilizado. Eventualmente para mejorar la purificación de la mezcla de saponinas obtenidas, el liofilizado es disuelto en metanol, luego echado en éter etílico. Se recoge el precipitado formado.

Según otro modo de realización ventajoso, el ginsenosido Rb_{1} o los extractos citados anteriormente son utilizados preferentemente por vía tópica en una concentración comprendida entre 0,001% y 5% con relación al peso total de una composición que contiene en un excipiente, vehículo o soporte apropiado, preferentemente cosmética o farmacéutica, principalmente dermatológicamente aceptable. Una concentración preferida está comprendida entre 0,01 y 1% en peso con relación al peso total de la composición que lo contienen.

Según un modo de realización ventajoso de la invención, la composición cosmética o farmacéutica, principalmente dermatológica de la invención contiene, además del ácido ascórbico, en particular del ácido L-ascórbico o vitamina C o su isómero, el ácido eritórbico o una de sus sales o ésteres, designados bajo el nombre genérico de derivados ascórbicos.

Según un modo de realización ventajoso de la invención, el ginsenosido Rb_{1} o los extractos según la invención son utilizados en combinación con una cantidad eficaz de un principio activo que estimula la síntesis de compuestos de la matriz extracelular de la dermis, entre los que se citará el colágeno, en particular el colágeno I y el colágeno III, y los glicosaminoglicanos, en particular el ácido hialurónico.

Se utilizará ventajosamente, a título de principio activo que estimula la síntesis del colágeno, en particular colágeno I y colágeno III, el madecasosido, un extracto de Centella asiática, o un extracto de ginseng, en particular un extracto que contiene el ginsenosido R_{0}, estando dicho principio activo en una concentración comprendida entre 0,01% y 5% en peso con relación al peso total de la composición final.

Se utilizará, a título de ejemplo de principio activo que estimula la síntesis de los glicosaminoglicanos, un extracto vegetal tal como un extracto de Filicio decipiens, en particular un extracto de corteza de raíz de esta planta, descrito en la solicitud de patente francesa 95 07708, o un extracto de Eryobotria japonica descrito en la solicitud de patente francesa 96.00018, o un factor de crecimiento, en particular el PDGF (platelet derived growth factor), factor de crecimiento derivado de las plaquetas sanguíneas.

Según otro modo de realización ventajoso, el ginsenosido Rb_{1} o los extractos citados anteriormente son utilizados en combinación con una vitamina, en particular la vitamina A, su éster palmítico, propiónico acético o la vitamina E y sus derivados, en particular en una concentración comprendida entre 0,0001 y 5% en peso con relación al peso total de la composición.

Según un tercer aspecto, la presente invención cubre también un método de tratamiento, cosmético o terapéutico, de la piel, destinado a prevenir o a corregir una pérdida de elasticidad, de tonicidad o de firmeza cutánea, caracterizada porque comprende la aplicación sobre las zonas de la piel a tratar de una cantidad eficaz del ginsenosido Rb_{1} o de un extracto que lo contiene, para estimular la síntesis de elastina por los fibroblastos, estando incorporado dicho producto en un excipiente cosméticamente o farmacéuticamente aceptable.

Para el empleo de un procedimiento de este tipo, se elegirá ventajosamente un extracto de partes subterráneas de Panax notoginseng o de Panax quinquefolium.

Las variantes de realización de este método resultan igualmente claramente de las variantes de realización de la utilización citada anteriormente.

Resulta de lo que precede que el ginsenosido Rb_{1} o el extracto que lo contiene son preciosos para la fabricación de una composición cosmética o farmacéutica, principalmente dermatológica, donde se busca una mejora de la elasticidad cutánea por estimulación de la síntesis de la elastina.

El técnico en la materia comprende así el interés mayor de la invención que favorece la síntesis de elastina y su facilidad de empleo gracias a una aplicación tópica sobre la piel.

Otros objetos, características y ventajas de la invención aparecerán claramente a la luz de la descripción explicativa que va a seguir hecha con referencia a los ejemplos dados a continuación simplemente a títulos de ilustración y que no deberían por lo tanto de ninguna manera limitar el alcance de la invención.

En los ejemplos, todos los porcentajes son dados en peso, salvo indicación contraria.

Ejemplos Ejemplo 1 Preparación de un extracto de Panax notoginseng

Se trituraron 200 g de raíces secas de Panax notoginseng (San-Chi), luego fueron extraídos por 2 litros de metanol a reflujo durante 30 minutos. Se dejó refrigerar la fase metanólica hasta temperatura ambiente, luego se filtró. El residuo sólido fue extraído una nueva vez, de la misma manera, con 2 litros de metanol.

Se reunieron los dos filtrados metanólicos y se evaporó el disolvente a vacío hasta la obtención de un residuo sólido.

Este sólido fue tratado a continuación por 100 ml de acetona. La parte insoluble en la acetona fue recuperada y puesta en solución en 50 ml de metanol. Se añadió entonces a esta solución éter etílico hasta la obtención de un precipitado.

Este precipitado se filtró. Constituyó una mezcla de saponinas de Panax notoginseng según la invención, que contenía en particular el ginsenosido G-Rb_{1}. Esta mezcla, designada extracto E_{1}, será empleada en los ensayos relacionados en el ejemplo 3 a continuación (ver tabla 2).

Ejemplo 2 Preparación de extractos de Panax quinquefolium a) Preparación de un extracto metanólico

Se trituraron 200 g de raíces secas de Panax quinquefolium (Ginseng americano), luego extraídas por 2 litros de metanol a reflujo durante 30 minutos.

Como en el ejemplo precedente, se dejó refrigerar la fase metanólica, luego se empezó de nuevo dos veces la operación de extracción.

Se reunieron a continuación los diferentes filtrados y se evaporó en seco a vacío en un matraz giratorio.

Se obtuvo así un extracto metanólico de Panax quinquefolium rico en saponinas, que contenía en particular el ginsenosido G-Rb_{1}. Este extracto, denominado extracto E_{2}, será empleado en los ensayos relacionados en el ejemplo 3 a continuación (ver tabla 3).

b) Preparación de una mezcla de saponinas extraídas del Panax quinquefolium

El extracto E_{2} obtenido anteriormente fue tratado por 100 ml de acetona. La parte insoluble se filtró y disolvió en 50 ml de metanol. Se añadió a la solución obtenida éter etílico hasta la formación de un precipitado que se filtró y se secó.

El residuo sólido (denominado E_{3}) obtenido estaba constituido esencialmente por una mezcla de saponinas del Panax quinquefolium, que contenían en particular el ginsenosido G-Rb_{1}. Este extracto es empleado también en los ensayos relacionados en el ejemplo 3 (ver tabla 3).

c) Preparación de una fracción de extracto de Panax quinquefolium, rica en ginsenosido G-Rb_{1}

La mezcla de saponinas obtenida en la etapa precedente se disolvió en 10 ml de agua. Esta solución se adsorbió sobre 10 g de Célite que se dejó secar bajo una campana. Cuando el polvo se secó, se colocó por encima de una columna de sílice. Se realizó entonces una cromatografía siguiendo las técnicas habituales bien conocidas por el técnico en la materia. Se eluyeron así sucesivamente las saponinas con una mezcla cloroformo-metanol-agua 50/50/3. Se recogieron diferentes fracciones, y se eligió la fracción más rica en ginsenosido G-Rb_{1} realizando cromatografías sobre capa fina en comparación con un testigo del comercio.

Esta fracción denominada E_{4}, rica en ginsenosido G-Rb_{1} se emplea en los ensayos relacionados en el ejemplo 3 a continuación (ver tabla 3).

Ejemplo 3

Ejemplo de ensayo que demuestra la actividad del ginsenosido G-Rb_{1} y de extractos que la contienen sobre la estimulación de la síntesis de la elastina por fibroblastos cutáneos humanos.

Material y métodos Procedencia de las células

Se utilizó en este estudio una cepa de fibroblastos humanos normales (FHN) que provienen de piel quirúrgica de la cara de una mujer de 50 años (FHN-50 años) y de una mujer de 47 años (FHN-47 años). Las células habían sido obtenidas por el método de los explantes, tal como se describe por Dumas M. y col. en el artículo que tiene por título "in vitro biosynthesis of type I and III collagens by human dermal fibroblasts from donors of increasing ages" en Mech. Ageing Dev. 73 (1994), páginas 179-187.

Empleo de los cultivos de células

Estos fibroblastos cutáneos humanos normales así obtenidos fueron sembrados en los pocillos de una caja de cultivo multipocillos, en un medio de cultivo E 199, en el que se añadieron 2 milimoles por litro de L-glutamina.

Además, para un cierto número de ensayos, el medio de cultivo contiene ascorbato de sodio a las concentraciones de 15 ó 25 micromoles por litro.

24 horas después de la siembra, algunos pocillos reciben el ginsenosido Rb_{1} o un extracto de Panax de 1 a 10 \mug/ml por medio de una solución en el DMSO de manera que la concentración final de DMSO sea de 0,1%.

\newpage

Se utiliza cada vez seis pocillos por producto y por concentración, así como seis pocillos que no reciben ningún producto a ensayar para los cultivos testigos. Estos cultivos testigos reciben DMSO en una concentración final de 0,1% en peso.

El cultivo es proseguido durante 48 h.

Después de 48 h de cultivo como se indica anteriormente, se dosificó sobre los sobrenadantes del cultivo la elastina segregada por un método ELISA derivado de la utilizada para la dosificación del colágeno, como se describe por Dumas M. y col. en la publicación citada anteriormente, excepto que se utilizó un anticuerpo policlonal anti-elastina humana del comercio en lugar del anticuerpo policlonal anti-colágeno I y III humano.

Esta dosificación se realizó naturalmente también sobre cultivos testigos, que no reciben producto a ensayar.

Una gama patrón realizada a partir de elastina soluble del comercio permitió convertir en nanogramos de elastina los valores de densidad óptica (DO) obtenidos a partir de los sobrenadantes de cultivo.

Dosificación de las proteínas

Paralelamente a la dosificación de la elastina, una dosificación de proteínas celulares se efectúa sobre los cultivos de fibroblastos, después de la eliminación del sobrenadante, con el fin de llevar de nuevo la cantidad de elastina dosificada a una cantidad fija de proteínas celulares. La dosificación es efectuada utilizando el kit BCA-1 (Bicinchoninic acid kit, comercializado por Sigma, France) después de disolución del tapiz celular por la sosa 0,1 N.

Expresión de los resultados y estadísticas

Los resultados están expresados en nanogramos de elastina segregada por microgramo de proteínas celulares. La actividad A de estimulación, expresada en porcentaje se calcula según la fórmula siguiente:

A = \frac{q-q_{0}}{q_{0}} \ x \ 100

en la que: q representa la cantidad de elastina segregada por los FHN tratados,

q_{0} representa la cantidad de elastina segregada por los FHN testigos.

Los resultados obtenidos sobre los cultivos tratados (n = 6) y testigos (n = 6) se compararon con la ayuda del ensayo t de Student para series no aparecidas. Todo valor de p<0,05 indicará que una diferencia significativa existe en la secreción de elastina de los FHN testigos y aquellos tratados con los productos de la invención.

Las tablas 1A, 1B, 2 y 3 citadas anteriormente se refieren a los resultados obtenidos con el ginsenosido RB1 y los diferentes extractos E_{1}, E_{2}, E_{3} y E_{4} obtenidos según los ejemplos 1 y 2.

Más precisamente:

- la tabla 1A da los resultados obtenidos con un ginsenosido Rb_{1} comercial introducido en cultivos de fibroblastos de la cara de una mujer de 47 años (FHN-47 años),

- la tabla 1B da los resultados obtenidos con el mismo ginsenosido comercial introducido en cultivos de fibroblastos de la cara de una mujer de 50 años (FHN-50 años),

- la tabla 2 da los resultados obtenidos con los extractos de saponinas de Panax notoginseng obtenidos según el ejemplo 1 (E_{1}), introducidos en cultivos de fibroblastos de la cara de una mujer de 50 años (FHN-50 años).

- la tabla 3 da los resultados obtenidos con los extractos de Panax quinquefolium (indicados: E_{2}, E_{3} y E_{4}) obtenidos según el ejemplo 2.

TABLA 1A

2

\hskip0.5cm

T. = Testigo; Asc. = Ascorbato

(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA IB

3

\hskip0.5cm

T. = Testigo; Asc. = Ascorbato

(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 2

4

\hskip0.5cm

T. = Testigo

\hskip0.5cm

Asc. = Ascorbato

(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 3

5

\hskip0.5cm

T. = Testigo; Asc. = Ascorbato Conclusión

Como resulta a partir de las tablas 1 a 3, el ginsenosido Rb_{1}, los extractos de Panax notoginseng así como los extractos de Panax quinquefolium estimularon fuertemente la síntesis de elastina por los fibroblastos. Esta estimulación aumentó con la concentración del producto sometido a ensayo.

Se demostró, por lo tanto, que la utilización de ginsenosido Rb_{1}, de un extracto de Panax notoginseng o de un extracto de Panax quinquefolium, permitió estimular la síntesis de elastina por los fibroblastos de manera significativa, y particularmente inesperada.

Ejemplos de aplicaciones

Las composiciones se expresaron a continuación en porcentajes en peso.

Ejemplo 4 Gel para el tratamiento de la cara

Ginsenosido Rb_{1}		0,2
Lecitina hidrogenada		1
Ácido hialurónico		1
Carbopol 941®		1,25
Agua - conservante + trietanolamina	csp	100.

En aplicación local 2 veces al día bajo la cara y el cuello, este producto de cuidado mejora y mantiene la elasticidad de la piel de la cara y atenúa las arrugas y arrugas pequeñas.

Ejemplo 5 Crema reafirmante para la cara

Propilenoglicol		1
Glicerilestearato PEG 100		2
Glicerilestearato sodio lauril sulfato		4
Gliceril estearato		3
Alcohol cetílico		1
Triglicérido caprílico/cáprico		3
Octil estearato		2

Aceite de aguacate		1
Aceite de camelia		1
Palmitato de ascorbilo		0,5
Palmitato de vitamina A		0,01
Glicoceramidas de trigo		0,1
Ácido láctico		0,5
Carbopol 940®		0,5
Saponinas de Panax notoginseng (E_{1})		0,5
Agua + conservante + perfumes	csp	100.

Esta crema se aplicó mañana y tarde y devolvió la elasticidad a la piel de la cara que presentó entonces un mejor aspecto.

Ejemplo 6 Leche de cuidado corporal

Aceite vegetal		2
Triglicérido caprílico/cáprico		5
Acetato de vitamina E		0,56
Carbomero		0,5
Goma xantano		0,20

Acido hialurónico		0,15
Extracto de Panax quinquefolium (E_{2})		0,5
Extracto de centella asiática		0,1
Extracto de té verde		0,05
Agua + conservante - agente refrigerante + perfume	csp	100.

En aplicación sobre el busto por la noche por cura de 20 días, con masaje para permitir a los tejidos del busto conservar su elasticidad.

Ejemplo 7 Loción para mejorar la elasticidad de la piel de la cara

Saponinas de Panax quinquefolium (E_{3})		0,3
Solución acuosa con 1% de ácido hialurónico		1
Glicerol		2
Agua + conservante	csp	100.

Esta loción, para mejorar la elasticidad de la piel, puede utilizarse después del desmaquillaje para las mujeres o después del afeitado para los hombres.

La invención cubre igualmente todos los equivalentes técnicos de los medios descritos así como sus diversas combinaciones.

Claims

1. Utilización cosmética del ginsenosido Rb_{1} (G-Rb_{1}) o de extractos vegetales que lo contienen como agente activo que estimula la síntesis de la elastina por los fibroblastos de la dermis, estando incorporado dicho agente activo en una composición cosmética que comprende un vehículo cosméticamente aceptable.

2. Utilización del ginsenosido Rb_{1} (G-Rb_{1}) o de extractos vegetales que lo contienen para la fabricación de una composición farmacéutica, principalmente dermatológica, destinada al tratamiento de los problemas ligados a una insuficiencia de la síntesis de la elastina por los fibroblastos de la dermis.

3. Utilización según una de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizada porque dicha composición contiene de 0,001 a 5% en peso de dicho ginsenosido o de dicho extracto.

4. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque dicha composición contiene, además del ginsenosido Rb_{1}, al menos otra saponina de tipo ginsenosido.

5. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque dicho ginsenosido G-Rb_{1} es introducido en dicha composición bajo la forma de un extracto de una planta de tipo Panax.

6. Utilización según la reivindicación 5, caracterizada porque dicho extracto contiene:

- de 2 a 60% en peso de saponina G-Rb_{1},

- de 2 a 60% en peso de saponina G-Rg1,

- de 0 a 15% en peso de saponina G-Rd,

- de 0 a 15% en peso de saponina N-R_{1},

- de 1 a 10% en peso de saponina G-Re,

con relación al peso total de dicho extracto.

7. Utilización según una de las reivindicaciones 5 ó 6, caracterizada porque dicho extracto contiene:

- de 10 a 60% en peso de saponina G-Rb_{1},

- de 10 a 60% en peso de saponina G-Rg1,

- de 0 a 15% en peso de saponina G-Rd,

- de 0 a 15% en peso de saponina N-R_{1},

- de 1 a 10% en peso de saponina G-Re,

con relación al peso total del extracto.

8. Utilización según una de las reivindicaciones 5 a 7, caracterizada porque dicho ginsenosido G-Rb_{1} es la saponina contenida mayoritariamente en dicho extracto.

9. Utilización según una de las reivindicaciones 5 a 8, caracterizada porque dicha planta de tipo Panax y el Panax notoginseng o el Panax quinquefolium.

10. Utilización según una de las reivindicaciones 5 a 9, caracterizada porque dicho extracto es un extracto de Panax notoginseng, preferentemente de partes subterráneas de la planta.

11. Utilización según una de las reivindicaciones 5 a 9, caracterizada porque dicho extracto es un extracto de Panax quinquefolium, preferentemente un extracto de una parte subterránea de esta planta.

12. Utilización según una de las reivindicaciones 5 a 11, caracterizada porque dicho extracto se obtiene por extracción por medio de un disolvente polar o de una mezcla de disolventes polares.

13. Utilización según una de las reivindicaciones 5 a 12, caracterizada porque dicho extracto se obtiene por extracción por medio de un disolvente o de una mezcla de disolventes elegidos en el grupo constituido por agua, los alcoholes que comprenden preferentemente de 1 a 4 átomos de carbono, en particular el metanol, el etanol, el propanol, el isopropanol, el propilenoglicol y el butilenoglicol.

14. Utilización según la reivindicación 13, caracterizada porque el disolvente o mezcla de disolventes está elegido en el grupo constituido por el metanol, el etanol, el 1,3-butilenoglicol y las mezclas de estos disolventes entre ellos o con agua.

15. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizada porque dicha composición contiene, además, del ácido ascórbico, en particular del ácido L-ascórbico o vitamina C o su isómero el ácido eritórbico o una de sus sales o ésteres, designados bajo el nombre genérico de derivados ascórbicos.

16. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizada porque dicha composición contiene, además, una cantidad eficaz de un principio activo que estimula la síntesis de los componentes de la matriz extracelular de la dermis, en particular del colágeno, en particular del colágeno I y del colágeno III, y de los glicosaaminoglicanos.

17. Utilización según la reivindicación 16, caracterizada porque dicha composición contiene un principio activo que estimula la síntesis del colágeno, en particular del colágeno I y del colágeno III, elegido en el grupo constituido por el madecasosido, un extracto de centella asiática y un extracto de ginseng, en particular ginsenosido Ro, en una concentración en peso de 0,01% a 5%.

18. Utilización según la reivindicación 16, caracterizada porque la composición contiene un principio que estimula la síntesis de los glicosaaminoglicanos, elegido en el grupo constituido por un extracto de Filicium decipiens, en particular un extracto de corteza de raíz de esta planta, un extracto de Eribotria japonica y el PDGF.

19. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 18, caracterizada porque dicha composición contiene, además, vitaminas, en particular vitamina A, su éster palmítico, propiónico o acético o la vitamina E y sus derivados, en una concentración en peso de 0,0001 a 5% con relación al peso total de dicha composición.

20. Método de tratamiento cosmético destinado a prevenir o a corregir una pérdida de elasticidad, de tonicidad o de firmeza cutánea, caracterizado porque comprende la aplicación sobre las zonas de la piel a tratar de una cantidad eficaz del ginsenosido Rb_{1} o de un extracto vegetal que contiene para estimular la síntesis elastina por los fibroblastos de la dermis, estando incorporado dicho ginsenosido en un excipiente cosméticamente aceptable.