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ES2288040T3 - Medicamentos antagonistas del receptor de la vitronectina. - Google Patents

Medicamentos antagonistas del receptor de la vitronectina. Download PDF

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ES2288040T3
ES2288040T3 ES99967442T ES99967442T ES2288040T3 ES 2288040 T3 ES2288040 T3 ES 2288040T3 ES 99967442 T ES99967442 T ES 99967442T ES 99967442 T ES99967442 T ES 99967442T ES 2288040 T3 ES2288040 T3 ES 2288040T3
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aryl
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ES99967442T
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English (en)
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Milind Rajopadhye
Thomas David Harris
Edward H. Cheesman
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Bristol Myers Squibb Pharma Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Pharma Co
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Abstract

Un compuesto que comprende: un resto que apunta a la diana y un agente quelatente, en el que el resto que apunta a la diana está unido al agente quelatante, es un indazol no peptídico, y se une a un receptor que está regulado por incremento durante la angiogénesis, y el compuesto tiene 0-1 grupos de unión entre el resto que apunta a la diana y el agente quelatante, en el que el receptor es una integrina y el compueto tiene la fórmula: (Q)d-Ln-Ch o (Q)d-Ln-(Ch)d'' en la que Q es, independientemente, un compuesto de fórmula (Ia) o (Ib): incluidas sus formas estereoisómeras, o mezclas de sus formas estereoisómeras, o sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptables, en las que : X1d es N, CH, C-Wd-Xd-Yd o C-Ln; X2d es N, CH o C-Wd-Xd-Yd; X3d es N, CR11d o C-Wd-Xd-Yd; X4d es N o CR11d, siempre que, cuando R1d es R1de, uno de X1d y X2d sea C-Wd-Xd-Yd, y cuando R10d es R1de, X3d sea C-Wd-Xd-Yd; R1d se selecciona entre: R1de, alquilo C1-6 sustituido con 0-1 R15d o 0-1 R21d, alquenilo C3-6 sustituido con 0-1 R15d o 0-1 R21d, cicloalquilo C3-7 sustituido con 0-1 R15d o 0-1 R21d, cicloalquilalquilo C4-11 sustituido con 0-1 R15d o 0-1 R21d, arilo sustituido con 0-1 R15d o 0-2 R11d o 0-1 R21d y aril(alquilo C1-6) sustituido con 0-1 R15d o 0-2 R11d o 0-1 R21d

Description

Medicamentos antagonistas del receptor de la vitronectina.
Campo de la invención
La presente invención proporciona nuevos medicamentos útiles para la diagnosis y el tratamiento del cáncer, procedimientos para registrar tumores en un paciente y procedimientos para tratar el cáncer en un paciente. Los medicamentos comprenden un resto que apunta a la diana que se une al receptor de la vitronectina que se expresa en la vasculatura del tumor, un grupo opcional de unión, y un resto de radioisótopo terapéuticamente eficaz o que puede obtener imágenes diagnósticamente eficaz. El resto terapéuticamente eficaz emite una radiación gamma o una partícula alfa suficiente para ser citotóxica. El resto que puede obtener imágenes es un radioisótopo que emite radiación gamma o positrones, un agente de contraste para las imágenes por resonancia magnética y un agente de contraste de rayos X, o un agente de contraste para ultrasonidos.
Antecedentes de la invención
El cáncer es una importante preocupación de la salud pública en los EEUU y en el mundo entero. Se estima que más de 1 millón de nuevos casos de cáncer invasivo se diagnosticarán en los EEUU en 1998. Las formas más predominantes de la enfermedad son tumores sólidos de pulmón, mama, próstata, colon y recto. Típicamente, el cáncer se diagnostica por una combinación de ensayos in vitro y procedimientos de obtención de imágenes. Entre los procedimientos de obtención de imágenes están incluidos la tomografía computerizada de rayos X, la resonancia magnética nuclear, las imágenes obtenidas por ultrasonidos y la centellografía con radionúclidos. Frecuentemente, al paciente se administra un agente de contraste para reforzar una imagen obtenida por TC con rayos X, MRI y ultrasonidos, y para la centellografía con radionúclidos se requiere la administración de un producto radiofarmacéutico que localice los tumores.
Típicamente, el tratamiento del cáncer implica el uso de terapia por irradiación con un haz externo y quimioterapia, bien solas o en combinación dependiendo del tipo y la extensión de la enfermedad. Hay disponibles varias agentes quimioterapéuticos, pero, por lo general, todos ellos adolecen de una falta de especifidad para los tumores frente a tejidos normales, lo que da por resultado efectos secundarios considerables. La eficacia de estas modalidades de tratamiento también es limitada, como lo evidencia el alto grado de mortalidad para varios tipos de cáncer, en especial, las enfermedades más extendidas de tumores sólidos. Siguen siendo necesarios medios de tratamiento más eficaces y específicos.
A pesar de la variedad de procedimientos de obtención de imágenes disponibles para la diagnosis del cáncer, siguen siendo necesarios procedimientos mejorados. En particular, se necesitan procedimientos que puedan diferenciar mejor entre cánceres y otras afecciones patológicas o que sean anomalías fisiológicas. Un medio de conseguir la mejora deseada sería administrar al paciente un producto metalofarmacéutico que localizara específicamente el tumor por unirse a un receptor expresado sólo en tumores o expresado en cuantía significativamente mayor en tumores que en otros tejidos. Luego podría detectarse la situación del compuesto externamente por la emisión de su imagen en el caso de ciertos radiomedicamentos o por su efecto sobre el grado de relajación en la vecindad inmediata en el caso de agentes de contraste para imágenes obtenidas por resonancia magnética.
Este enfoque con compuestos metalofarmacéuticos específicos para tumores se puede usar también para el tratamiento del cáncer cuando el compuesto metalofarmacéutico comprende un radioisótopo que emite partículas. El decaimiento radiactivo del isótopo en el sitio del tumor da por resultado una radiación ionizante que sea suficiente para ser tóxica para las células tumorales. La especifidad de este enfoque para los tumores minimiza la cantidad de tejido normal que se expone al agente citotóxico y, por tanto, puede proporcionar un tratamiento más eficaz con menos efectos secundarios.
Los esfuerzos anteriores para conseguir estas mejoras en la obtención de imágenes y el tratamiento del cáncer se han centrado en el uso de anticuerpos monoclonales marcados con radionúclidos, fragmentos de anticuerpos y otras proteínas o polipéptidos que se unen a receptores de superficie de células tumorales. La especifidad de estos radiomedicamentos frecuentemente es muy alta, pero tienen varias desventajas. Primero, porque a causa de su alto peso molecular, generalmente se eliminan de la corriente sanguínea muy lentamente, lo que da por resultado un fondo prolongado de sangre en las imágenes. También, debido a su peso molecular, no se extravasan fácilmente al sitio del tumor y luego se difunden lentamente a través del espacio extravascular a la superficie de las células tumorales. Esto da por resultado que una cantidad muy limitada del radiomedicamento llega a los receptores y, por tanto, una intensidad de imagen muy baja y un efecto citotóxico insuficiente para el tratamiento.
Los enfoques alternativos para obtención de imágenes y la terapia del cáncer han implicado el uso de moléculas pequeñas, tales como péptidos, que se unen a los receptores de superficie ed células tumorales. Un péptido que se une al receptor de somoatostatina marcada con In-111, en 111-DTPA-D-Phe^{1}-octeído, está en uso clínico en muchos países para obtener imágenes de tumores que expresan el receptor de somatostatina (Baker y otros, Life Sci., 1991, 49, 1583-92; y Krenning y otros, Eur. J. Nucl. Med., 1993, 20, 716-32). Se han investigado dosis más altas de este radiomedicamento para potencial tratamiento de estos tipos de cáncer (Krenning y otros, Digestión, 1996, 57, 57-61). Varios grupos están investigando el uso de análogos marcados con Tc-99m de In-111-DTPA-D-Ph^{1}-octeótido para obtener imágenes y análogos marcados con Re-186 para terapia (Flanagan y otros, patente U.S. nº. 5.556.939; Lyle y otros, patente U.S. nº. 5.382.654, y Albert y otros, patente U.S. nº. 5.650.134).
La angiogénesis es un proceso por el que se forman nuevos vasos sanguíneos a partir de capilares preexistentes o vénulas poscapilares; es un componente importante de una variedad de procesos fisiológicos entre los que está incluido ovulación, desarrollo embriónico, reparación de heridas y generación vascular colateral en el miocardio. Es también clave en varias afecciones patológicas tales como crecimiento tumoral y metástasis, retinopatía diabética y degeneración macular. El proceso comienza con la activación de células endoteliales vaculares en respuesta a una variedad de citoquinas y factores de crecimiento. Citoquinas liberadas de tumores o factores angiogénicos estimulan las células vasculares endoteliales por interacción con receptores de superficie de células específicos para los factores. Las células endoteliales activadas secretan enzimas que degradan las membrana de la base de los vasos. Las células endoteliales proliferan luego e invaden el tejido del tumor. Las células endoteliales se diferencian para formar lumens, haciendo nuevos retoños de vasos preexistentes. Los nuevos vasos sanguíneos proporcionan luego nutrientes al tumor, lo que permite el crecimiento ulterior y una ruta para la metástasis.
En condiciones normales, la proliferación de células endoteliales es un proceso muy lento, pero aumenta en un período de tiempo corto durante la embriogénesis, la ovulación y la curación de heridas. Este aumento temporal de la generación de células está gibernado por varios factores estimulantes del crecimiento y factores de supresión del crecimientos. En la angiogénesis patológica, este equilibrio normal se interrumpe, dando por resultado un aumento continuo de la proliferación de células endoteliales. Entre algunos de los factores proangiogénicos que se han identificado están incluidos el factor de crecimientos de fibroblastos básico (bFGF), la angiogenina, TGF-alfa, TGF-beta y el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF). Mientras que el interferón-alfa, el interferón-beta y la trombospondina son ejemplos de supresores de la angiogénesis.
La proliferación y migración de células endoteliales en la matriz extracelular está mediada por la interacción de una variedad de moléculas de adherencia celular (Folkman, J. Nature Medicine, 1995, 1, 27-31). Las integrinas son una familia diversa de receptores de superficie de células heterodiméricas por los que las células endoteliales se unen a la matriz extracelular, entre sí y a otras células. La integrina \alpha_{\nu}\beta_{3} es un receptor de una amplia variedad de proteínas de matriz extracelular con un resto tripéptido Arg-Gly-Asp expuesto y media la adherencia celular a su ligando: vitronectina, fibronectina y fibrinégeno entre otros. La integrina \alpha_{\nu}\beta_{3} se expresa mínimamente en vasos sanguíneos normales, pero está significativamente regulada por incremento en células vasculares dentro de una variedad de tumores. El papel de los receptores \alpha_{\nu}\beta_{3} es mediar la interacción de las células endoteliales y la matriz extracelular y facilitar la migración de las células en la dirección de la señal angigénica la población de células tumorales. La angiogénesis inducida por bFGF o TNF-alfa depende de la gestión de la integrina \alpha_{\nu}\beta_{3}, mientras que la angiogénesis inducida por VEGF depende de la integrina \alpha_{\nu}\beta_{3} (Cheresh y otros, Science, 1955, 270, 1500-2). La inducción de expresión de las integrinas \alpha_{1}\beta_{1} y \alpha_{2}\beta_{1} sobre la superficie de células endoteliales es otro mecanismo importante por el que VEGF promueve la angiogénesis (Senger y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, 84, 13612-7).
Los factores angiogénicos interactúan con receptores de la superficie de células endoteliales tales como los receptores tirosina quinasas EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, tie, neurofilina-1, endoglina, endpsialina y Axl. Los receptores Flk-1/KDR, neurofilina-1 y Flt-1 reconocen VEGF y estas interacciones juegan papeles importantes en la angiogénesis inducida por VEGF. La subfamilia Tire de receptores tirosina quinasas se expresan también predominantemente durante la formación de vasos sanguíneos.
A causa de la importancia de la angiogénesis para el crecimiento tumoral y la metástasis, se están desarrollando varios enfoques quimioterapéuticos para interferir con este proceso o para su prevención. Uno de estos enfoques implica el uso de proteínas antiangiogénicas tales como angioestatina y endoestatina. La angioestatina es un fragmento de 38 kDa de un plasminógeno que ha revelado en modelos animales ser un potente inhibidor de la proliferación de células endoteliales. (O'Reilly y otros, Cell, 1994, 79, 315-328). La endoestatina es un fragmento C-terminal de 20 kDa de colágeno XVIII que ha demostrado ser un potente inhibidor. (O'Reilly y otros, Cell, 1997, 88, 277-285). La terapia sistémica con endoestatina ha demostrado que da una fuerte actividad antitumoral en animales. Sin embargo, los ensayos clínicos en seres humanos con estos dos agentes quimioterapéuticos de origen biológico se han complicado por falta de disponibilidad.
Otro enfoque para la terapia antiangiogénica es el uso de restos de que identifican objetivos que interactúan con receptores de superficie de células endoteliales expresadas en la vasculatura angiogénica a la que están unidos agentes quimioterapéuticos. Burrows y Thorpe (Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 193390, 8996-9000) describen el uso de un conjugado de anticuerpo-inmunotoxina para erradicar tumores en un modelo de ratón por destrucción de la vasculatura del tumor. El anticuerpo se dirigió contra un antígeno de clase II de célula endoltelial del principal complejo biocompatible y se conjugó luego con el agente citotóxico, cadena A de ricino desglicosilado. El mismo grupo (Clin. Can. Res. 1995, 1, 1623-1634) investigó el uso de anticuerpos dirigidos contra el receptor de superficie de células endoteliales, endoglina, conjugada a la cadena A de ricino desglicosilado. Ambos de setos conjugados presentaban una potente actividad antitumoral en modelos de ratón. Sin embargo, ambos tienen inconvenientes para uso rutinario humano. Como con la mayoría de anticuerpos de otras proteínas grandes, foráneas, hay un riesgo considerable de toxicidad inmunológica que podría limitar o excluir la administración a seres humanos. Además, si bien el dirigirse a la vasculatura puede mejorar la concentración de los agentes quimioterapéuticos fijados deben escindirse del vehículo del anticuerpo y ser transportados o difundidos a las células para que sean citotóxicas.
Así, es deseable proporcionar medicamentos antiangiogénicos y agentes para obtener imágenes de tumores o nueva vasculatura que no adolezcan de mala difusión o transporte, posible toxicidad inmunológica, limitada disponibilidad y/o falta de especifidad.
Otra aplicación de la terapia antiangiogénica es el tratamiento de la artritis reumatoide (RA). En la RA, el crecimiento hacia dentro de un pannus muy vascularizado está causado por la excesiva producción de de factores angiogénicos por macrófagos de infiltración, células inmunes o células inflamatorias. Por tanto es deseable tener nuevos medicamentos para destruir el pannus altamente vascularizado que resulta y tratar así la enfermedad.
Hay también un interés creciente en la angiogénesis terapéutica para mejorar la circulación sanguínea en regiones del cuerpo que se han hecho esquémicas o mal prefundidas. Varios investigadores están usando factores de crecimiento administrados localmente para causar que se forme nueva vasculatura en las extremidades o el corazón. Los factores de crecimiento VEGF y bFGF son los más comunes para esta aplicación. Entre las publicaciones recientes figuran: Takeshita, s. Y otros, J. Clin. Invest., 1994, 93, 662-670; y Schaper, W. y Schaper, J., Collateral Circulation:Heart, Brain, Kidney, Limbs, Kluwer Academic Publishers, Boston, 1993. Las aplicaciones principales que se están investigando en varios laboratorios son para mejorar la circulación sanguínea y para mejorar la circulación sanguínea en vasos periféricos. Por ejemplo, Henry, T. y otros (J. AMER. College Cardiology, 1998, 31, 65A), describen el uso combinado de VEGF recombinante humano para mejorar la perfusión miocárdica por angiogénesis terapéutica. Los pacientes recibían infusiones de rhVEGF y se controlaron por imágenes de perfusión nuclear 30 y 60 días después de tratamiento para determinar mejoras de la perfusión miocárdica. Aproximadamente 50% de los pacientes presentaban mejoras mediante obtención de imágenes de la perfusión nuclear, mientras que 5/7 presentaban nueva colateralización por angiografía. Así, es deseable descubrir un procedimiento de controlar una circulación sanguínea cardíaca mejorada que está dirigida a los propios vasos colaterales y no, como acaece en la obtención de imágenes de perfusión nuclear, una consecuencia regional de nuevos vasos colatorales.
No es necesario mejorar la detección, obtención de imágenes y la diagnosis de varias enfermedades cardiovasculares, entre ellas reestenosis, ateroesclerosis, lesión de reperfusión miocárdica e isquemia miocárdica, aturdimiento o infarto. Recientemente se ha determinado que en todas estas enfermedades, el receptor de integrina \alpha_{\nu}\beta3 juega un papel importante.
Por ejemplo, en la complicación de la reestenosis que se presenta en 30-50% de los pacientes que han sido sometidos a angioplastia o colocación de una endoprótesis vascular, la células de músculo liso vasculares que proliferan agresivamente, que expresan \alpha_{\nu}\beta_{3} causan hiperplasia neoíntimal y reoclusión última (Cardiovascular Res., 1997, 36, 408-428; DDT, 1927, 2, 187-199; Current Pharm. Design, 1997, 3, 545-584).
La ateroesclerosis transcurre desde una lesión endotelial inicial que da por resultado el reclutamiento y la migración subíntimal de monocitos en el sitio de la lesión. Se liberan factores de crecimiento que inducen a las células mediales de músculo liso a proliferar y migrar a la capa intimal. Las células de músculo liso que migran expresan \alpha_{\nu}\beta_{3}.
En la lesión de reperfusión, la transmigración de neutrófilos es integrina-dependiente y las integrinas moderan la infiltración inicial a la zona limítrofe viable. La infiltración de \alpha_{5}\beta_{1}, \alpha_{4}\beta_{1} y \alpha_{\nu}\beta_{5} en los neutrófilos que se infiltran ocurre dentro de 3-5 horas después de reperfusión a medida que los neutrófilos se mueven desde la zona limítrofe a la zona de necrosis. (Circulation,1999, 100, 1-275).
Se conoce que la oclusión aguda o crónica de una arteria coronaria da por resultado angiogénesis en el corazón a medida que se reclutan vasos nativos colaterales para tratar de atenuar la isquemia. Sin embargo, incluso una oclusión gradual usualmente se produce en zonas de infarto puesto que la angiogénesis resultante no es suficiente para prevenir la lesión. La angiogénesis cardíaca ha sido asociada con una expresión intensificada de los factores de crecimiento VEGF y FGF y la regulación por incremento de los factores de crecimiento flt-1 y flk-/KDR. (Drugs, 1999, 58, 391-396).
El documento WO 98/16256 se refiere a agentes para obtener imágenes de resonancia magnética que comprende un agente quelatante y un péptido capaz de unirse a un integrina. El documento WO 98/14220 se refiere a compuestos peptídicos cíclicos que contienen agentes quelatantes que actúan como antagonistas del complejo II/IIIa de glicoproteina de plaquetas. Los documentos WO 97/23480, WO 99/06049 y WO 97/08145 describen antagonistas de receptores de integrina. El documento WO 96/41803 describe inhibidores de la agregación de plaquetas de sangre fibrinógeno-dependientes. El documento WO 96/00574 describe antagonistas de receptores de la vitronectina.
Sumario de la invención
Es un objetivo de la presente invención proporcionar medicamentos antiangiogénicos mejorados, que comprenden un resto que apunta a la diana que se une al receptor de la vitronectina que se expresa en neovasculatura del tumor, un grupo opcional de unión, y un radioisótopo. Los compuestos de unión al receptor de la vitronectina dirigen el radioisótopo a la neovasculatura tumoral. El radioisótopo que emite partículas beta o alfa emite una cantidad citotóxica de radiación ionizante que da por resultado la muerte de la célula. La capacidad de penetración de la radiación obvia el requerimiento de que el agente citotóxico se difunda o sea transportado a la célula para ser
citotóxico.
Es otro objetivo de la presente invención proporcionar medicamentos para tratar la artritis reumatoide. Estos medicamentos tienen un resto que apunta a la diana que se une a un receptor que está regulado por incremento durante la angiogénesis, un grupo opcional de unión y un radioisótopo que emite radiación citotóxica (esto es, partículas beta, partículas alfa y electrones de Auger o Coster-Kronig). En la artritis reumatoide, el crecimiento hacia dentro del pannus altamente vascularizado está causado por la excesiva producción de factores angiogénicos por macrófagos que se infiltran, células inmunes o células inflamatorias. Por tanto, los medicamentos de la presente invención que emiten radiación citotóxica podrían usarse para destruir la nueva vasculatura angiogénica resultante y tratar así la
enfermedad.
Es otro objetivo de la invención proporcionar agentes para obtener imágenes, que comprenden un receptor de la vitronectina que une compuestos conjugados a un resto que puede obtener imágenes, tal como un radioisótopo que emite radiación gamma o positrones, un agente de contraste de imágenes de resonancia magnética, un agente de contraste para rayos X o un agente de contraste para ultrasonidos. Estos agentes para obtenert imágenes son útiles para obtener imágenes de neovaculatura tumoral, intervenciones de angiogénesis terapéutica en el corazón, procesos angiogénicos naturales en respuesta a oclusión vascular coronaria aguda o crónica, reestenosis posangioplastia, ateroesclerosis y formación de placa y lesión de reperfusión.
Es otro objetivo de la presente invención proporcionar compuestos útiles para preparar los medicamentos de la presente invención. Estos compuestos comprenden un indazol no peptídico que contiene un resto que apunta a la diana que se une a un receptor que está regulado por incremento durante la angiogénesis o durante las enfermedades cardiovasculares, Q, un opcional grupo conector funcional, L_{n}, y un agente quelatante de metales o resto de unión, C_{h}. Los compuestos pueden tener uno o más grupos protectores unidos al agente quelatante de metales o resto de unión. Los grupos protectores proporcionan una estabilidad mejorada a los reactivos para almacenamiento a largo plazo y se eliminan inmediatamente antes de, o concurrentemente con, la síntesis de los radiomedicamentos. Alternativamente, los compuestos de la presente invención comprenden un péptido o peptido mimético del resto que apunta la diana y que se une a un receptor que está regulado por incremento durante la angiogénesis o durante las enfermedades radiovasculares, Q, un grupo opcional de unión, L_{n}, y un tensioactivo, S_{f}.
Los medicamentos de la presente invención se pueden usar a fines diagnósticos y/o terapéuticos. Los radiomedicamentos diagnósticos de la presente invención son medicamentos que comprenden un radionúclido diagnósticamente útil (esto es, un ión de metal radiactivo que tiene emisiones gamma o de positrones para obtener imágenes). Los radiomedicamentos terapéuticos de la presente invención son medicamentos que comprenden un radionúclido terapéuticamente útil, un ion de un metal radiactivo que emite radiación ionizante tal como partículas beta, partículas alfa o electrones de Auger o de Coster-Kronig.
Los medicamentos que comprenden un ion de un metal radiactivo que emite radiación gamma o positrones son útiles para obtener imágenes de tumores y por centelleo gamma o tomografía por emisión de positrones. Los medicamentos que comprenden un ion de un metal radiactivo que emite radiación gamma o positrones son también útiles para obtener imágenes de angiogénesis terapéutica, procesos angiogénicos naturales en respuesta a una oclusión vascular coronaria aguda o crónica, reestenosis posangioplastia, ateroesclerosis y formación de placa y lesión de reperfusión mediante centelleo gamma o tomografía de emisión de positrones. Los medicamentos que comprenden un ion de un metal radiactivo que emite partículas son también útiles para tratar el cáncer por suministrar una dosis citotóxica de radiación a los tumores. Los medicamentos que comprenden un ion de un metal radiactivo que emite partículas son también útiles para tratar la artritis reumatoide por destruir la formación de vasculatura angiogénica. Los medicamentos que comprenden un ion de un metal paramagnético son útiles como agentes de contraste para la obtención de imágenes de resonancia magnética. Los medicamentos que comprenden uno o más átomos "pesados" que absorben rayos X, de número atómico 20 o más, son útiles como agentes de contraste de rayos X. Los medicamentos que comprenden una microburbuja de un gas biocompatible, un vehículo líquido y una microesfera tensioactiva son útiles como agentes de contraste de ultrasonidos.
\vskip1.000000\baselineskip
Descripción detallada de la invención
[1] Así, en una primera realización, la presente invención proporciona un compuesto nuevo que comprende: un resto que apunta a la diana y un agente quelatente, en el que el resto que apunta a la diana está unido al agente quelatante, es un indazol no peptídico, y se une a un receptor que está regulado por incremento durante la angiogénesis, y el compuesto tiene 0-1 grupos de unión entre el resto que apunta a la diana y el agente quelatante,
en el que el receptor es una integrina \alpha_{\nu}\beta_{3} o \alpha_{\nu}\beta_{5} y el compuesto tiene la fórmula:
(Q)_{d}-L_{n}-C_{h} 
\hskip0.3cm
o 
\hskip0.3cm
(Q)_{d}-L_{n}-(C_{h})_{d'} 
\newpage
en la que Q es, independientemente, un compuesto de fórmula (Ia) o (Ib):
1 
\vskip1.000000\baselineskip
2
incluidas sus formas estereoisómeras, o mezclas de sus formas estereoisómeras, o sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptables,
en las que:
X^{1d}
es N, CH, C-W^{d}-X^{d}-Y^{d} o C-L_{n};
X^{2d}
es N, CH o C-W^{d}-X^{d}-Y^{d};
X^{3d}
es N, CR^{11d} o C-W^{d}-X^{d}-Y^{d};
X^{4d}
es N o CR^{11d},
siempre que, cuando R^{1d} es R^{1de}, uno de X^{1d} y X^{2d} sea C-W^{d}-X^{d}-Y^{d}, y cuando R^{10d} es R^{1de}, X^{3d} sea C-W^{d}-X^{d}-Y^{d};
R^{1d}
se selecciona entre: R^{1de}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6}) sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
R^{1de}
se selecciona entre
3
4 
\vskip1.000000\baselineskip
5 
\vskip1.000000\baselineskip
6 
\vskip1.000000\baselineskip
7
A^{d} y B^{d} son, independientemente, -CH_{2}-, -O-, -N(R^{2d}) o -C(=)-;
A^{1d} y B^{1d} son, independientemente, -CH_{2}- o -N(R^{3d}).;
D^{d}
es -N(R^{2d})-, -O-, -S-, -C(=O)- o -SO_{2}-;
E^{d}-F^{d} es -C(R^{4d})=C(R^{5d})-, -N=C(R^{4d})-, -C(R^{4d})=N- o -C(R^{4d})_{2}C(R^{5d})_{2}-;
J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} se seleccionan independientemente entre -C(R^{4d})-, C(R^{5d})- y -N-, siempre que al menos uno de J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} no sea -N-;
R^{2d}
se selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, (alquilo C_{1-6})carbonilo, (alcoxi C_{1-6})carbonilo, (alquilo C_{1-6})aminocarbonilo, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo. heteroaril(alquilo C_{1-6})carbonilo, heteroarilcarbonilo, aril(alquilo C_{1-6})-, (alquil C_{1-6})carbonilo, arilcarbonilo, alquil C_{1-6} sulfonilo, arilsulfonilo, aril(alquil C_{1-6})sulfonilo, heteroarilsulfonilo, heteroaril(alquil C_{1-6})sulfonilo, ariloxicarbonilo y aril(alcoxi C_{1-6})carbonilo, en los que los mencionados grupos arilo están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados entre el grupo: alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, CF_{3} y nitro;
R^{3d}
se selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6}), y heteroaril(alquilo C_{1-6})-;
\global\parskip0.970000\baselineskip
R^{4d} y R^{5d} se seleccionan independientemente entre: H, alcoxi C_{1-4}, NR^{2d}R^{3d}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, (alquil C_{1-6})carbonilo, (alcoxi C_{1-6})carbonilo y arilcarbonilo; o,
\quad
alternativamente, cuando son sustituyentes sobre átomos adyacentes, R^{4d} y R^{5d} se pueden conjuntar con los átomos de carbono a los que están unidos para formar un sistema de anillos carbocíclicos o heterocíclicos, aromáticos o no aromáticos, de 5-7 miembros, estando los mencionados anillos carbocíclicos o heterocíclicos sustituidos opcionalmente con 0-2 grupos seleccionados entre alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, ciano, amino, CF_{3} y NO_{2};
U^{d}
se selecciona entre
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}(CR^{7d}=CR^{8d})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}(C\equivC)(CH_{2})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{t}^{d}Q(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}O(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}N(R^{6d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}C(=O)(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}C(=O)N(R^{6d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}N(R^{6d})(C=O)(CH_{2})_{m}^{d} y,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}S(O)_{p}^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-;
\quad
en los que uno o varios de los grupos metileno de U^{d} está opcionalmente sustituido con R^{7d};
Q^{d}
se selecciona entre 1,2-cicloalquileno, 1,2-fenileno, 1,3-fenileno, 1,4-fenileno, 2,3-piridinileno, 3,4-piridinileno. 2,4-pridinileno y 3,4-piridazinileno;
R^{6d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-4} y bencilo;
R^{7d} y R^{8d} se seleccionan independientemente entre H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})- y heteroaril(alquilo C_{0-6});
R^{10d}
se selecciona entre H, R^{1de}, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, N(R^{6d})_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, -SO_{2}R^{17d}, -SO_{2}NR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6}) sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
R^{10de}
se selecciona entre H,alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, N(R^{6d})_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, -SO_{2}R^{17d}, -SO_{2}NR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6})- sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o R^{21d};
R^{11d}
se selecciona entre H, halógeno, CF_{3}, CN, NO_{2}, hidroxi, NR^{2d}R^{3d}, alquilo C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{21d}, aril(alquilo C_{1-6}) sustituido con 0-1 R^{21d}, (alcoxi C_{1-4})carbonilo sustituido con 0-1 R^{21d}, (alquilo C_{1-4})-carbonilo sustituido con 0-1 R^{21d}, alquil C_{1-4} sulfonilo sustituido con 0-1 R^{21d} y alquil C_{1-4} aminosulfonilo sustituido con 0-1 R^{21d};
W^{d}
se selecciona entre -(C(R^{12d})_{2})_{q}^{d}C(=O)N(R^{13d})- y -C(=O)-N(R^{13d})-C(R^{12d})_{2})_{q}^{d};
X^{d}
es -C(R^{12d})(R^{14d})-C(R^{12d})(R^{15d})- o, alternativamente, W^{d} y X^{d} se pueden conjuntar para formar
9
R^{12d}
se selecciona entre H, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-10}, (alquil C_{1-4})carbonilo, arilo y aril(alquilo C_{1-6})-;
R^{13d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-6}, cicloalquil C_{3-7} metilo y aril(alquilo C_{1-6});
R^{14d}
se selecciona entre H, alquil C_{1-6} tio(alquilo C_{1-6})-, aril(alquiltioalquilo C_{1-10})-, aril(alcoxialquilo C_{1-10})-, alquilo C_{1-10}, alcoxialquilo C_{1-10}, hidroxialquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-10}, alquinilo C_{2-10}, cicloalquilo C_{3-10}, cicloalquilalquilo C_{3-10}, aril(alquil C_{1-6})-, heteroaril(alquilo C_{1-6})-, arilo, heteroarilo, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d} y CONR^{17d}R^{20d}, siempre que cualquiera de los anteriores grupos alquilo, cicloalquilo, arilo o heteroarilo puedan ser no sustituidos o sustituidos independientemente con 0-1 R^{16d} o 0-2 R^{11d};
R^{15d}
se selecciona entre H, R^{16d}, alquilo C_{1-10}, alcoxialquilo C_{1-10}, alquilaminoalquilo C_{1-10}, dialquilaminoalquilo C_{1-10}, (alquil C_{1-10})carbonilo, aril(alquil C_{1-6})carbonilo, alquenilo C_{1-10}, alquinilo C_{1-10}, cicloalquilo C_{3-10}, cicloalquilalquilo C_{3-10}, aril(alquilo C_{1-6})-, heteroaril(alquilo C_{1-6})-, arilo, heteroarilo, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, SO_{2}R^{17d} y SO_{2}NR^{17d}R^{20d}, siempre que cualquiera de los anteriores grupos alquilo, cicloalquilo, arilo o heteroarilo puedan ser no sustituidos sustituidos independientemente con 0-2 R^{11d};
Y^{d}
se selecciona entre -COR^{19d}, -SO_{3}H, -PO_{3}H, -tetrazolilo, -CONHNHSO_{2}CF_{3}, -CONHSO_{2}R^{17d}, -CONHSO_{2} NHR^{17d}, -NHCOCF_{3}, -NHCONHSO_{2}R^{17d}, -NHSO_{2}R^{17d}, -OPO_{3}H_{2}, -OSO_{3}H, -PO_{3}H_{2}, -SO_{3}H, -SO_{2}NHCOR^{17d}, -SO_{2}NHCO_{2}R^{17d},
\vskip1.000000\baselineskip
8 
\vskip1.000000\baselineskip
R^{16d}
se selecciona entre
\quad
-N(R^{20d})-C(=O)-O-R^{17d},
\quad
-N(R^{20d})-C(=O)-R^{17d},
\quad
-N(R^{20d})-C(=O)-NH-R^{17d},
\quad
-N(R^{20d})-SO_{2}-R^{17d} y
\quad
-N(R^{20d})-SO_{2}-NR^{20d}R^{17d};
R^{17d}
se selecciona entre:
\quad
alquilo C_{1-10} opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, cicloalquilo C_{3-11} opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, aril(alquil C_{1-6})- opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, (alquil C_{1-6})arilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, heteroaril(alquilo C_{1-6})- opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, (alquil C_{1-6})heteroarilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, ariloopconalmente sustituido con un enlace a L_{n}, biaril (alquilo C_{1-6})- opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, heteroarilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, arilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, biarilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n} y un enlace a L_{n}, en los que los mencionados grupos arilo, biarilo o heteroarilo opcionalmente también están sustituidos con 0-3 sustituyentes seleccionados entre el grupo constituido por alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, arilo, heteroarilo, halo, ciano, amino, CF_{3} y NO_{2},
R^{18d}
se selecciona entre
\quad
-H,
\quad
-C(=O)-O-R^{17d},
\quad
-C(=O)-R^{17d},
\quad
-C(=O)-NH-R^{17d},
\quad
-SO_{2}-R^{17d} y
\quad
-SO_{2}-NR^{20d}R^{17d};
\global\parskip1.000000\baselineskip
R^{19d}
se selecciona entre: hidroxi, alquil C_{1-10} oxi, cicloalquil C_{3-11} oxi, ariloxi, aril(alcoxi C_{1-6})-, alquilcarboniloxialquiloxi C_{3-10}, alcoxi carboniloxialquiloxi C_{3-10}, alcoxicarbonilalquiloxi C_{2-10}, cicloalquil-carboniloxialquiloxi C_{5-10}, cicloalcoxicarboniloxialquiloxi C_{5-10}, ciclo-alcoxicarbonilcarbonilalquiloxi C_{5-10}, ariloxicarbonilalquiloxi C_{7-11}, aril-oxicarboniloxialquiloxi C_{8-12}, arilcarboniloxialquiloxi C_{8-12}, alcoxi-alquilcarboniloxialquiloxi C_{5-10}, (5-aril-1,3-dioxa-ciclopenten-2-ona-il)metiloxi C_{5-10} y (R^{11d})(R^{12d})N-(alcoxi C_{1-10})-;
R^{20d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})- y heteroaril(alquilo C_{1-6})-;
R^{21d}
se selecciona entre COOH y NR^{6d}_{2};
m^{d}
es 0-4;
n^{d}
es 0-4;
t^{d}
es 0-4;
p^{d}
es 0-2;
q^{d}
es 0-2, y
r^{d}
es 0-2;
con las siguientes condiciones:
(1)
t^{d}, n^{d}, m^{d y} q^{d} se escogen de manera que el número de átomos que conectan R^{1d} e Y^{d} esté en el intervalo de 10-14; y
(2)
n^{d} y m^{d} se escogen de manera que el valor de n^{d} más m^{d} sea mayor que uno a no ser que U^{d} sea -(CH_{2})_{t}^{d} Q^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-;
\quad
o Q sea un péptido seleccionado entre el grupo
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
10 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
en las que:
R^{1}
es L-valina, D-valina o L-lisina, opcionalmente sustituida sobre el grupo \varepsilon amino con un enlace a L_{n};
R^{2}
es L-fenilalanina, D-fenilalanina, D-1-naftilalanina, ácido 2-aminotiazol-4-acético o tirosina, estando la tirosina opcionalmente sustituida sobre el grupo hidroxi con un enlace a L_{n};
R^{3}
es D-valina;
R^{4}
es D-tirosina sustituida sobre el grupo hidroxi con un enlace a L_{n};
siempre que uno de R^{1} y R^{2} de cada Q esté sustituido con un enlace a L_{n} y, además, siempre que, cuando R^{2} es ácido 2-aminotiazol-4-acético, K sea N-metilarigina;
siempre que al menos un Q sea un compuesto de fórmula (Ia) o (Ib);
d
se selecciona entre 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
d'
es 1-100;
\newpage
L_{n}
es un grupo conector que tiene la fórmula
((W)_{h}-(CR^{6}R^{7}{}_{g})_{x}-(Z)_{k}-((CR^{6a}R^{7a})_{g}-(W)_{h'})_{x};
W
es selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, NR^{8}C(=O), C(=O)NR^{8}, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO_{2}, SO_{2}NH, (OCH_{2}CH_{2})_{S}, (CH_{2}CH_{2}O)_{S'}, (OCH_{2}CH_{2}CH_{2})_{S''}, (CH_{2}CH_{2}CH_{2}O)_{t} y (aa)_{t'};
aa
es, independientemente en cada aparición, un aminoácido;
Z
se selecciona entre el grupo: arillo sustituido con 0-3 R^{10}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{10}, y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O sustituido con 0-3 R^{10};
R^{6}, R^{6a}, R^{7}, R^{7a} y R^{8} se seleccionan independientemente en cada aparición entre el grupo H, =O, COOH, SO_{3}H, PO_{3}H, alquilo C_{1-5} sustituido con 0-3 R^{10}, arilo sustituido con 0-3 R^{10}, bencilo sustituido con 0-3 R^{10} y alcoxi C_{1-5} sustituido con 0-3 R^{10}, NHC(=O)R^{11}, C(=O)NHR^{11}, NHC(=O)NHR^{11}, NHR^{11}, R^{11} y un enlace a C_{h};
R^{10}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo de: un enlace a C_{h}, COOR^{11}, C(=O)NHR^{11}, NHC(=O)R^{11}, OH, NHR^{11}, SO_{3}H, PO_{3}H, -OPO_{3}H_{2}, -OSO_{3}H, arilo sustituido con 0-3 R^{11}, alquilo C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{12}, alcoxi C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{12} y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos independientemente seleccionados entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{11};
R^{11}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo de: H, alquilo sustituido con 0-1 R^{12}, arilo sustituido con 0-1 R^{12}, un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-1 R^{12}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-1 R^{12}, polialquilenglicol sustituido con 0-1 R^{12}, carbohidrato sustituido con 0-1 R^{12}, ciclodextrina sustituida con 0-1 R^{12}, aminoácido sustituido con 0-1 R^{12}, policarboxialquilo sustituido con 0-1 R^{12}, poliazaalquilo sustituido con 0-1 R^{12} y péptido sustituido con 0-1 R^{12}, péptido que comprende 2-10 aminoácidos, 3,6-O-disulfo-B-D-galactopiranosilo, bis(fosfonometil)glicina, y un enlace a C_{h};
R^{12}
es un enlace a C_{h};
k
se selecciona entre 0, 1 y 2;
h
se selecciona entre 0, 1 y 2;
h'
se selecciona entre 0, 1 y 2;
g
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
g'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
s
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
s'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
s''
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
t
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
t'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
x
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
x'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
C_{h}
es una unidad de unión de un metal que tiene una fórmula seleccionada entre el grupo
\vskip1.000000\baselineskip
3000
300 
\vskip1.000000\baselineskip
A^{1}, A^{2}, A^{3}, A^{4}, A^{5}, A^{6}, A^{7} y A^{8} se seleccionan independientemente en cada aparición entre el grupo: NR^{13}, NR^{13}R^{14}, S, SH, S(Pg), O, OH, PR^{13}, PR^{13}R^{14}, P(O)R^{15}R^{16} y un enlace a L_{n};
E
es un enlace, CH, un grupo espaciador seleccionado independientemente en cada aparición entre el grupo: alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{17}, heterociclo-alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, en el que el grupo heterociclo es un sistema de anilo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O, aril C_{6-10} alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, alquil C_{1-10} arilo C_{6-10} sustituido con 0-3 R^{17} y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17};
R^{13} y R^{14} cada uno de ellos, se seleccionan independientemente entre el grupo: una unión a L_{n}, hidrógeno, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, heterocicloalquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, en el que el grupo heterociclo es un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O, aril C_{6-10} alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, alquil C_{1-10} arilo C_{6-10} sustituido con 0-3 R^{17}, un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17}; y un electrón, siempre que, cuando uno de R^{13} y/o R^{14} es un electrón, el otro sea también un
electrón;
\quad
alternativamente, R^{13} y R^{14} se combinan para formar =C(R^{20})(R^{21}),
R^{15} y R^{16} se seleccionan, cada uno independientemente, entre el grupo: una unión a L_{n}, -OH, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{17}, heterociclo-alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, en el que el grupo heterociclo es un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O, aril C_{6-10} alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, alquil C_{1-10} arilo C_{6-10} sustituido con 0-3 R^{17} y un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con
0-3 R^{17};
R^{17}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: un enlace a Ln, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{18}, -C(=O)R^{18}, -C(=O)N(R^{18})_{2}, -CHO, -CH_{2}-OR^{18}, -OC(=O)R^{18}, -OC(=O)OR^{18a}, -OR^{18}, -OC(=O)N(R^{18})_{2}, -NR^{19}C(=O)R^{18}, -NR^{19}C(=O)OR^{18a}, -NR^{19}C(=O)N-(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}N(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}R^{18a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{18a}, -SR^{18}, -S(=O)R^{18a}, -SO_{2}N(R^{18})_{2}, -N(R^{18})_{2}, -NHC(=S)NHR^{18}, =NOR^{18}, NO_{2}, -C(=O)NHOR^{18}, -C(=O)NHNR^{18}R^{18a}, -OCH_{2}CO_{2}H, 2-(1-morfolino)-etoxi, alquilo C_{1-5}, alquenilo C_{2-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquilmetilo C_{3-5}, alcoxialquilo C_{2-6}, arilo sustituido con 0-2 R^{18}, y un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O;
R^{18}, R^{18a} y R^{19} se seleccionan independientemente entre el grupo: un enlace a L_{n}, H, alquilo C_{1-6}, fenilo, bencilo, alcoxi C_{1-6}, haluro, nitro, ciano y trifluorometilo;
Pg
es un grupo protector de tiol;
R^{20} y R^{21} se seleccionan independientemente entre el grupo: H, alquilo C_{1-10}, -CN, -CO_{2}R^{25}, -C(=O)R^{25}, -C(=O)N
(R^{25})_{2}, 1-alqueno C_{2-10}sustituido con 0-3 R^{23}, 1-alquino C_{2-10}sustituido con 0-3 R^{23}, arilo sustituido con 0-3 R^{23}, un sistema anular heterocíclico insaturado de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados ente S, N y O y sustituido con 0-3 R^{23}, y un carbociclo C_{3-10} insaturado sustituido con 0-3 R^{23};
\newpage
\quad
alternativamente, R^{20} y R^{21} pueden conjuntarse con el radical divalente de carbono al que están unidos para formar:
11
R^{22} y R^{23} se seleccionan independientemente entre el grupo: H, R^{24}, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{24}, alquenilo C_{2-10} sustituido con 0-3 R^{24}, alquinilo C_{2-10} sustituido con 0-3 R^{24}, arilo sustituido con 0-3 R^{24}, un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O y sustituidos con 0-3 R^{24}, y un carbociclo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{24};
\quad
alternativamente, R^{22}, R^{23} conjuntamente forman un sistema de anillos condensados aromáticos o heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O;
a y b indican las posiciones de los dobles enlaces opcionales y n es 0 o 1;
R^{24}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{25}, -C(=O)R^{25}, -C(=O)N(R^{25})_{2}, -N(R^{25})_{3}^{+}, -CH_{2}OR^{25}, -OC(=O)R^{25}, -OC(=O)R^{25a}, -OR^{25}, -OC(=O)N(R^{25})_{2}, -NR^{26}C(=O)R^{25}, -NR^{26}C(=O)=R^{25a}, -NR^{26}C(=O)N(R^{25})_{2}, -NR^{26}SO_{2}N(R^{25})_{2}, -NR^{26}SO_{2}R^{25a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{25a}, -SR^{25}, -S(=O)R^{25a}, -SO_{2}N(R^{25})_{2}, -N(R^{25})_{2}, =NOR^{25}, -C(=O)NHOR^{25}, -OCH_{2}CO_{2}H y 2-(1-morfolino)etoxi; y
R^{25}, R^{25a} y R^{25b} se seleccionan, cada uno independientemente, en cada aparición entre el grupo: H y alquilo C_{1-6}.
\vskip1.000000\baselineskip
[2] En una realización más preferente, la presente invención proporciona un compuesto en el que
R^{1de}
se selecciona entre:
12 
\vskip1.000000\baselineskip
13 
\vskip1.000000\baselineskip
14
15 
\vskip1.000000\baselineskip
en las que:
A^{d} y B^{d} son, independientemente, -CH_{2}-, -O-, -N(R^{2d})- o -C(=O)-;
A^{1d} y B^{1d} son, independientemente, -CH_{2}- o -N(R^{3d})-;
D^{d}
es -N(R^{2d})-, -O-, -S-, -C(=O)- o -SO_{2}-;
E^{d}-F^{d} es -C(R^{4d})=C(R^{5d})-, -N=C(R^{4d}), -C(R^{4d})=N-, o -C(R^{4d})_{2}C(R^{5d})_{2}-;
J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} se seleccionan independientemente entre: C(R^{4d})-, -C(R^{5d})- y -N-, siempre que al menos uno de J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} no sea -N-;
R^{2d}
es selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, (alquil C_{1-6})carbonilo, (alcoxi C_{1-6})carbonilo, alquilaminocarbonilo C_{1-6}, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, heteroaril (alquil C_{1-6})carbonilo, hetero-arilcarbonilo, aril(alquilo C_{1-6})-, (alquil C_{1-6})carbonilo, arilcarbonilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, aril(alquil C_{1-6})sulfonilo, heteroaril-sulfonilo, heteroaril(alquil C_{1-6})sulfonilo, ariloxicarbonilo y aril(alcoxi C_{1-6})carbonilo, en los que los mencionados grupos arilo están sustituidos con 0-2 sustituyentres seleccionados entre el grupo constituido por alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, CF_{3} y nitro;
R^{3d}
se selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, cicloalquio C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, y heteroaril(alquilo C_{1-6})-;
R^{4d} y R^{5d} se seleccionan independientemente entre: H, alcoxi C_{1-4}, NR^{2d}R^{3d}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, alquilcarbonilo C_{2-7} y arilcarbonilo;
\quad
alternativamente, cuando los sustituyentes están sobre átomos adyacentes, R^{4d} y R^{5d} se pueden conjuntar con los átomos de carbono a los que están unidos para formar un sistema carbocíclico de 5-7 miembros o heterocíclico aromático o no aromático de 5-7 miembros, anillo carbocíclico o heterocíclico que opcionalmente está sustituido con 0-2 grupos seleccionados entre: alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, ciano, amino, CF_{3} o NO_{2};
U^{d}
se selecciona entre:
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}(CR^{7d}=CR^{8d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{t}^{d}Q^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}O(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})^{d}N(R^{6d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})^{d}C(=O)(CH_{2})_{m}^{d}- y
\quad
-(CH_{2})^{d}S(O)_{p}^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-
\quad
en el que uno o más de los grupos metileno de U^{d} opcionalmente está sustituido con R^{7d};
Q^{d}
se selecciona entre 1,2-fenileno, 1,3-fenileno, 2,3-piridinileno, 3,4-piridinileno y 2,4-piridinileno;
R^{6d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-4} y bencilo;
R^{7d} y R^{8d} se seleccionan independientemente entre H, alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, y heteroaril(alquilo C_{0-6});
W^{d}
es -C(=O)-N(R^{13d})-C(R^{12d})_{2})_{q}^{d}-;
X^{d}
es -C(R^{12d})(R^{14d})-C(R^{12d})_{2})_{q}(^{R15d})-,
\quad
alternativamente, W^{d} y X^{d} pueden conjuntarse para que se forme
16 
\vskip1.000000\baselineskip
R^{12d}
es H o alquilo C_{1-6};
Y^{d}
se selecciona entre -COR^{19} y -SO_{3}H,
17 
\vskip1.000000\baselineskip
d
se selecciona entre 1, 2, 3, 4 y 5;
d'
es 1-50;
W
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: O, NH, NHC(=O), C(=O)NH, NR^{8}C(=O), C(=O)N R^{8}, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO_{2}, (OCH_{2}CH_{2})_{s}, (CH_{2}CH_{2}O)_{s'}, (OCH_{2}CH_{2}CH_{2})_{s''}, (CH_{2}CH_{2}CH_{2}O)_{t} y (aa)_{t'};
aa
es independientemente en cada aparición un aminoácido;
Z
se selecciona entre el grupo: arilo sustituido con 0-1 R^{10}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-1 R^{10}, y un sistema de anillo heterocíclcico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-1 R^{10};
R^{6}, R^{6a}, R^{7}, R^{7a} y R^{8} se seleccionan independientemente en cada aparición entre el grupo de: H, =O, COOH, SO_{3}H, alquilo C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{10}, arilo sustituido con 0-1 R^{10}, bencilo sustituido con 0-1 R^{10} y alcoxi C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{10}, NHC(=O)R^{11}, C(=O)NHR^{11}, NHC(=O)NHR^{11}, NHR^{11}, R^{11} y un enlace a C_{h}-;
k
es 0 o 1;
s
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
s'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
s''
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
t
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
A^{1}, A^{2}, A^{3}, A^{4}, A^{5}, A^{6}, A^{7} y A^{8} se seleccionan independientemente entre el grupo: NR^{13}, NR^{13}R^{14}, S, SH, S(Pg), OH y un enlace a L_{n}-;
E
es un enlace, CH o un grupo espaciador seleccionado independientemente en cada aparición entre el grupo: alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{17} y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17};
R^{13} y R^{14} se seleccionan, cada uno independientemente, entre el grupo: una unión a L_{n}, hidrógeno, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O y sustituido con 0-3 R^{17}, y un electrón, siempre que, cuando uno de R^{13} y R^{14} es un electrón, el otro sea también un electrón;
\quad
alternativamente, R^{13} y R^{14} se combinan para formar =C(R^{20})(R^{21}),
R^{17}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: un enlace a L_{n}, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{18}, -C(O)R^{18}, -C(=O)N(R^{18})_{2}, -CH_{2}-OR^{18}, -OC(=O)R^{18}, -OC(=O)OR^{18a}, -OR^{18}, -OC(=O)N(R^{18})_{2}, -NR^{19}C(=O)R^{18}, -NR^{19}C(=O)OR^{18a}, -NR^{19}C(=O)N-(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}N(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}R^{18a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{18a}, -S(=O)R^{18a}, -SO_{2}N(R^{18})_{2}, -N(R^{18})_{2}, -NHC(=S)NHR^{18}, =NOR^{18}, -C(=O)NHNR^{18}R^{18a}, -OCH_{2}CO_{2}H y 2-(1-morfolino)-etoxi;
R^{18}, R^{18a} y R^{19} se seleccionan independientemente entre el grupo: un enlace para L_{n}, H y alquilo C_{1-6};
R^{20} y R^{21} se seleccionan independientemente entre el grupo: H, alquilo C_{1-10}, -CO_{2}R^{25}, 1-alqueno C_{2-5}sustituido con 0-3 R^{23}, 1-alquino C_{2-5}sustituido con 0-3 R^{23}, arilo sustituido con 0-3 R^{23}, un sistema anular heterocíclico insaturado de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados ente S, N y O y sustituido con 0-3 R^{23};
\quad
alternativamente, R^{20} y R^{21} conjuntados con el radical divalente de carbono al que están unidos forman:
18
R^{22} y R^{23} se seleccionan independientemente entre el grupo: H y R^{24};
\quad
alternativamente, R^{22}, R^{23} conjuntamente forman un sistema de anillos condensados aromáticos o un sistema anular heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O;
R^{24}
se selecciona independientemente en cada caso entre el grupo: -CO_{2}R^{25}, -C(=O)N(R^{25})_{2}, -CH_{2}OR^{25}, -OC(=O)OR^{25}, -OR^{25}, -SO_{3}H, -N(R^{25})_{2} y -OCH_{2}CO_{2}H; y
R^{25}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: H y alquilo C_{1-3}.
\vskip1.000000\baselineskip
[3]. En una realización aún más preferente, la presente invención proporciona un compuesto en el que
R^{1de}
se selecciona entre
19 
\vskip1.000000\baselineskip
20
21 
\vskip1.000000\baselineskip
22 
\vskip1.000000\baselineskip
23 
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24 
\vskip1.000000\baselineskip
25 
\vskip1.000000\baselineskip
26 
\vskip1.000000\baselineskip
\quad
en los que los anteriores heterociclos opcionalmente están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados entre el grupo: NH_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alcoxi C_{1-4}, alquilo C_{1-6} y cicloalquilo C_{3-7};
U^{d}
es -(CH_{2})_{n}-, -(CH_{2})_{t}^{d}Q^{d}(CH_{2})_{m}^{d}- o -C(=O)(CH_{2})_{n-1}^{d}, en los que uno de los grupos metileno opcionalmente está sustituido con R^{7d};
R^{7d}
es selecciona entre alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6}), heteroarilo y heteroaril(alquilo C_{1-6});
R^{10d}
se selecciona entre: H, R^{1de}, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, halógeno, CO_{2}R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6})- sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
R^{10de}
se selecciona entre: H, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, halógeno, CO_{2}R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6})- sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
W^{d}
es -C(=O)-N(R^{13d})-;
X^{d}
es -CH(R^{14d})-CH(R^{15d})-;
R^{13d}
es H o CH_{3};
R^{14d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-10}, arilo o heteroarilo, en los que los grupos arilo o heteroarilo opcionalmente están sustituidos con 0-3 sustituyentes seleccionados entre el grupo constituido por: alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, arilo, halo, ciano, amino, CF_{3} y NO_{2};
R^{15d}
es H o R^{16d};
Y^{d}
es -COR^{19d};
R^{19d}
se selecciona entre: hidroxi, alcoxi C_{1-10}, metilcarboniloximetoxi-, etilcarboniloximetoxi-, t-butilcarbonil oximetoxi-, ciclohexilcarboniloxi-metoxi-, 1-(metilcarboniloxi)etoxi-, 1-(etilcarboniloxi)etoxi-, 1-(t-butil carboniloxi)etoxi-, (1-(ciclohexilcarboniloxi)etoxi)-, i-propiloxicarboniloxi)metoxi-, t-butiloxicarboniloxi- metoxi-, 1-(i-propiloxicarboniloxi)-etoxi-, 1-(ciclohexiloxicarboniloxi)etoxi-, 1-(butiloxicarboniloxi)etoxi-, dimetilaminoetoxi-, dietilaminoetoxi-, (5-metil-1,3-dioxaciclopenten-2-on-4-il)metoxi-, (5-(t-butil)-1,3-dioxaciclopenten-2-on-4-il)metoxi-, (1,3-dioxa-5-fenil-ciclopenten-2-on-4il)metoxi- y 1-(2-(2-metoxipropil)-carboniloxi)etoxi;
R^{20d}
es H o CH_{3};
m^{d}
es 0 o 1;
n^{d}
es 1-4;
t^{d}
es 0 o 1;
C_{h}
es
\vskip1.000000\baselineskip
27 
\vskip1.000000\baselineskip
A^{1}
se selecciona entre el grupo: OH y un enlace a L_{n};
A^{2}, A^{4} y A^{6} son, cada uno, N;
A^{3}, A^{5} y A^{8} son, cada uno, OH;
A^{7}
es un enlace a L_{n} o un enlace NH a L_{n};
E
es un alquilo C_{2} sustituido con 0-1 R^{17};
R^{17}
es =O;
\newpage
alternativamente
C_{h}
es
28
A^{1}, A^{2}, A^{3} y A^{4} son, cada uno, N;
A^{5}, A^{6} y A^{8} son, cada uno, OH;
A^{7}
es un enlace a L_{n};
E
es un alquilo C_{2} sustituido con 0-1 R^{17};
R^{17}
es =O;
\vskip1.000000\baselineskip
alternativamente,
C_{h}
es
29
A^{1}
es NH_{2} o N-C(R^{20})(R^{21});
E
es un enlace;
A^{2}
es NHR^{13};
R^{13}
es un heterociclo sustituido con R^{17}, heterociclo que se selecciona entre piridina y pirimidina;
R^{17}
se selecciona entre un enlace a L_{n}, C(=O)NHR^{18} y C(=O)R^{18};
R^{18}
es un enlace a L_{n};
R^{24}
se selecciona entre el grupo: -CO_{2}R^{25}, -OR^{25}, -SO_{3}H y -N(R^{25})_{2}, y
R^{25}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: hidrógeno y metilo.
\vskip1.000000\baselineskip
[4]. En otra realización aún más preferente, la presente invención proporciona un compuesto en el que
R^{1de}
se selecciona entre
30
31
32
33
34
35
36
en el que los heterociclos anteriores opcionalmente están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados entre el grupo: NH_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alcoxi C_{1-4}, alquilo C_{1-6} y cicloalquilo C_{3-7}.
\vskip1.000000\baselineskip
[5]. En otra realización preferente, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado entre el grupo:
\quad
ácido 2-(((-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)amino)sulfonil)-fenil)-fenil)sulfonil)amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico;
\quad
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1,3-bis(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)etil)-amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
\quad
ácido 2-((6-((1-aza-2-(sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-4-(N-(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-(((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-etil)amino)sulfonil)fenil)fenil)-sulfonil)-amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)carbamoil)butanoico;
\quad
ácido 3((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)-ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)amino)-sulfonil)fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico;
\quad
ácido 2-(6((6-((1-aza-2-(2-sulfonil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonil-amino)-hexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)-propanoico;
\quad
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))(carbonil-amino)-hexanoilamino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino propanoico;
\quad
[ácido 2-[[[5-[carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencenosulfónico]-Glu (ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico) (ácido (2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico);
\quad
[ácido 2-[[[5-(carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]bencenosulfónico]-Glu-bis-[Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico) (ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)]
\quad
2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)-acetil-{ácido (2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)-(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico):
\quad
2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)-acetil-Glu{ácido-2-(6-aminohexilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)-{1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico}{ácido-2-(6-amino-hexanoil-amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil){1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico}
37 
\vskip1.000000\baselineskip
38 
\vskip1.000000\baselineskip
39
40
41
42
43
44
\quad
sal del ácido 2-(((4-(3-N-(3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecilacetilamino)-6-aminohexanoilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil-carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propiónico,
45
46
\quad
ácido 2-({[4-(3-{N-(2-(2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}-propil)etil]carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico}
47
\quad
ácido 2-[({4-[4-({[2-((2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}-propil)etil]amino}sulfonil)fenil]fenil-1)sulfonil}amino)(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil]-(1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico}
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(2-piridil-amino)propil](1H-indazol-5-il)} carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetil-amino}butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)} carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetil-amino}butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-[(1S)-1-(N-(1,3-bis[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil] (1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil} carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil)-4-(6-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}hexanoilamino)butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetil-amino)butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-metil-3-3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-6-il)}carbonil-amino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)-carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]aceti-amino)butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{(1S)-1-N-(2-{4-[4-(((1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-(1,9,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetilamino]butanoico;
\quad
ácido (2S)-2-{[(2,6-dimetil-4-{3-[N-(2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}etil)carbamoil]propoxi}fenil)-sulfonil]amino}-3-({2-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](2-hidro-1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico;
\quad
ácido (4S)-4-N-[(1S)-1-(N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil] (1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxi-propil]carbamoil}-4-{2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-ciclododecil]acetilamino}butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-{N-[(1S)-1-(N-{2-[({4-[4-(({(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)etil]amino}sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil]-4-{2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetilamino)butanoico;
\quad
ácido (2S)-3-({3-[(imidazol-2-ilamino)metil]-1-metil(1H)-indazol-6-il)}carbonilamino)-2-({[4-(4-{[(2-(2-[1,4,7,10-tetraaza-9,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino)etil)amino]sulfonil}fenil)fenil]-sulfonil}amino)propanoico;
\quad
ácido 3-((7-(3-[(6-{[(1E)-1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil]amino)(3-piridil)-carbonilamino]propoxi)-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il))-carbonilamino](2S)-2-{(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino}-propanoico, y
\quad
ácido 3-{[1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil]-7-(3-{2-[1,4,7,10-tetraaza-9,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]-acetilamino)propoxi)(1H)-indazol-5-il)carbonilamino}-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino}-propanoico;
o una forma de sus sales farmacéuticamente aceptable.
Los compuestos de la presente invención son útiles en kits de diagnóstico para la preparación de radiomedicamentos útiles como agentes para obtener imágenes de cánceres o agentes para obtener imágenes de nuevos vasos sanguíneos. Los kits diagnósticos comprenden uno o varios viales que contienen la formulación estéril no pirogénica que comprende una cantidad predeterminada de un reactivo de la presente invención y, opcionalmente, otros componentes tales como uno o dos ligandos auxiliares, agentes reductores, ligandos de transferencia, tampones, coadyuvantes de liofilización y coadyuvantes de estabilización, coadyuvantes de solubilización y bacteriostatos. La inclusión de un componente o varios en la formulación frecuentemente mejorará la facilidad de síntesis del radiomedicamento por el médico usuario final, la facilidad de fabricar el kit, la vida hasta caducidad del kit o la estabilidad durante la vida hasta caducidad de los radiomedicamentos. Se requiere la inclusión de uno o varios ligandos auxiliares para kits diagnósticos que comprenden un reactivo que comprende una hidrazina o resto que fija hidrazina. El vial o los varios viales que contienen la totalidad o parte de la formulación pueden estar independientemente en forma de una solución estéril o un sólido liofilizado.
Otro aspecto es el de los kits de diagnóstico para la preparación de radiomedicamentos útiles como agentes para obtener imágenes del cáncer. Los kits diagnósticos comprenden uno o varios viales que contienen la formulación estéril no pirogénica que comprende una cantidad predeterminada de un reactivo de la presente invención y, opcionalmente, otros componentes tales como uno o dos ligandos auxiliares, agentes reductores, ligandos de transferencia, tampones, coadyuvantes de liofilización y coadyuvantes de estabilización, coadyuvantes de solubilización y bacteriostatos. La inclusión de un componente o varios en la formulación frecuentemente mejorará la facilidad de síntesis del radiomedicamento por el médico usuario final, la facilidad de fabricar el kit, la vida hasta caducidad del kit o la estabilidad durante la vida hasta caducidad de los radiomedicamentos. Se requiere la inclusión de uno o varios ligandos auxiliares para kits diagnósticos que comprenden un reactivo que comprende una hidrazina o resto que fija hidrazina. El vial o los varios viales que contienen la totalidad o parte de la formulación pueden estar independientemente en forma de una solución estéril o un sólido liofilizado.
Los compuestos de la presente invención también son útiles en un procedimiento de obtención de imágenes de cáncer en un paciente, que implica: (1) sintetizar un radiomedicamento diagnóstico de la presente invención usando un reactivo de la presente invención capaz de localizarse en tumores; (2) administrar a un paciente por inyección o infusión el mencionado radiomedicamento; (3) obtener imágenes del paciente usando centelleografía gamma planar o SPECT, o tomografía de emisión de positrones.
Otro aspecto contempla un procedimiento de obtención de imágenes de cánceres en un paciente, que implica: (1) administrar a un paciente por inyección o infusión un radiomedicamento paramagnético de la presente invención capaz de localizarse en tumores y (2) obtener imágenes del paciente usando resonancia magnética.
Otro aspecto contempla un procedimiento de obtención de imágenes de cánceres en un paciente, que implica: (1) administrar a un paciente por inyección o infusión un agente de contraste de rayos X de la presente invención capaz de localizarse en tumores y (2) obtener imágenes del paciente usando tomografía computerizada de rayos X.
Otro aspecto contempla un procedimiento de obtención de imágenes de cánceres en un paciente, que implica: (1) administrar a un paciente por inyección o infusión un agente de contraste para ultrasonidos de la presente invención capaz de localizarse en tumores y (2) obtener imágenes del paciente usando sonografía.
Otro aspecto contempla un procedimiento para tratar el cáncer en un paciente, que implica: (1) administrar a un paciente por inyección o infusión un radiomedicamento terapéutico de la presente invención capaz de localizarse en tumores.
Definiciones
Los compuestos descritos en esta memoria pueden tener centros asimétricos. A no se que se indique lo contrario, en la presente invención se incluyen todas las formas quirales, diastereómeras y racémicas. También pueden estar presentes en los compuestos descritos muchas formas geométricamente isómeras de olefinas, dobles enlaces C=N, etc., y en la invención se contemplan todos esos isómeros estables. Se apreciará que compuestos de la presente invención contienen átomos de carbono sustituidos asimétricamente y se pueden aislar en formas ópticamente activas o racémicas. Es bien conocido en la técnica cómo preparar formas ópticamente activas, tales como mediante resolución de formas racémicas o mediante síntesis a partir de materiales ópticamente activos. Se sabe que se presentan dos isómeros conocidos (cis y trans) del enlace peptídico; ambas pueden estar también presentes en los compuestos descritos en esta memoria y en la presente invención se contemplan todos esos isómeros estables. Los isómeros D y L de un aminoácido particular se designan en esta memoria usando la abreviatura convencional de la 3ª letra del aminoácido, como se indica en los ejemplos siguientes: D-Leu o L-Leu.
Cuando cualquier variable se presenta más de una vez en cualquier sustituyente o en cualquier fórmula, su definición en cada aparición es independiente de su definición para cualquier otro caso. Así por ejemplo, si un grupo está sustituido con 0-2 R^{52}, tal grupo puede estar opcionalmente sustituido con hasta dos R^{52}, y R^{52} se selecciona independientemente en cada aparición entre la lista definida de posibles R^{52}. También, a modo de ejemplo, para el grupo -N(R^{53})_{2}, cada uno de los dos sustituyentes R^{53} sobre N se selecciona independientemente entre la lista definida de posibles R^{53}. Las combinaciones de sustituyentes y/u otras variables son sólo permisibles si tales combinaciones dan por resultado compuestos estables. Cuando se ve que un enlace con un sustituyente cruza el enlace que conecta dos átomos de un anillo, el sustituyente se puede unir a cualquier átomo sobre el anillo.
El término "no peptídico" significa preferiblemente menos de tres enlaces amida en el núcleo del espinazo del resto que apunta a la diana o, preferiblemente, menos de tres aminoácidos o miméticos de aminoácidos en el resto que apunta a la diana.
El término "metalomedicamento" significa un medicamento que comprende un metal. El metal es la causa de la señal que se puede registrar en aplicaciones diagnósticas y la fuente de radiación citotóxica en aplicaciones terapéuticas. Los radiomedicamentos son metalomedicamentos en los que el metal es un isótopo radiactivo.
Por "reactivo" se entiende un compuesto de la presente invención capaz de transformarse directamente en un metalomedicamento de esta invención. Los reactivos se pueden usar directamente para la preparación de los metalomedicamentos de esta invención o pueden ser un componente en un kit de esta invención:
El término "agente de unión" significa un metalomedicamento de esta invención que tiene afinidad a un receptor de la vitronectina y que es capaz de unirse a él. Los agentes de unión de esta invención tienen una Ki < 1000 nM.
Por "compuesto estable" o "estructura estable" se entiende aquí un compuesto que es suficientemente robusto para sobrevivir durante el aislamiento en un grado de pureza útil de la mezcla de reacción y la formulación para obtener un agente farmacéutico eficaz.
El término "sustituido", tal como se usa en este documento, significa que uno o más hidrógenos sobre el átomo o grupo designado se ha reemplazado con una selección del grupo indicado, siempre que no se exceda la valencia normal del (los) átomos(s) o grupo(s) designado(s) y de que la sustitución de por resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es ceto (esto es, =O), se reemplazan 2 hidrógenos sobre el átomo.
El término "enlace", tal como se usa aquí, significa un enlace simple o doble.
El término "sal", tal como se usa en esta memoria, significa lo definido en el CRC Handbook of Chemistry and Physics, 65ª edición, CRC Press, Boca Raton, Fla., 1984, una sustancia que da iones diferentes de iones hidrógeno o hidroxilo. Tal como se usa en esta memoria, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos modificados haciendolos sales de ácido o base. Ente los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables están incluidas, no limitativamente, sales de ácidos minerales u orgánicos de restos básicos tales como aminas; sales de álcalis u orgánicas de restos ácidos tales como ácidos carboxílicos, etc.
El término "farmacéuticamente aceptable" se emplea en esta memoria para referirse a compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que, en el ámbito de un criterio médico seguro, son adecuados para uso en contacto con los tejidos de seres humenos y de animales sin una excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, con una relación razonable de beneficio/riesgo.
El término "sales farmacéuticamente aceptables", tal como se usa aquí, se refiere a derivados de los compuestos descritos en los que el compuesto madre se modifica haciendo sales de ácido o base de él. Ente los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables están incluidas, no limitativamente, sales de ácidos minerales u orgánicos de restos básicos tales como aminas; sales de álcalis u orgánicas de restos ácidos tales como ácidos carboxílicos, etc. El grupo de sales farmacéuticamente aceptables incluye las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto madre formadas, por ejemplo, a partir de ácidos no tóxicos inorgánicos u orgánicos. Por ejemplo, el grupo de tales sales no tóxicas convencionales incluye las sales derivadas de ácidos inorgánicos tales como los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico, nítrico, etc.; y el de sales preparadas de ácidos orgánicos incluye las de los ácidos acético, propiónico, succíniuco, glicólico, esteárico, láctico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluenosulfónico, metanosulfónico, etanodisulfónico, oxálico, isetiónico, etc.
Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar a partir del correspondiente compuesto madre que contiene un resto básico o ácido por procedimientos convencionales. Por lo general, tales sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente se prefieren medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se encuentran listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª edición, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, pág. 1418.
Tal como se usa aquí, "alquilo" se emplea de manera que incluye grupos de hidrocarburo alifático saturado tanto de cadena lineal como ramificada, que tienen el número especificado de átomos de carbono, siendo ejemplos, metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo y otros; "cicloalquilo" o "carbociclo" incluye grupos de anillo saturados y parcialmente insaturados, que incluyen sistemas de anillo monocíclico, bicíclico o policíclico tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo y adamantilo; "cicicloalquilo" o "bicíclico" incluye grupos de anillo bicíclico saturado tales como [3.3.0]biciclooctano, [4.3.0]biciclononano, [4.4.0]biciclodecano (decalina), [2.2.2]biciclooctano, etc.
Tal como se usa aquí, el término "alqueno" o "alquenilo" incluye cadenas de hidrocarburo que tienen el número especificado de átomos de carbono de configuración lineal o ramificada y uno o varios enlaces carbono-carbono insaturados que se pueden presentar en cualquier punto estable a lo largo de la cadena, tales como etenilo, propenilo, etc.
Tal como se usa aquí, el término "alquino" o "alquinilo" incluye cadenas de hidrocarburo que tienen el número especificado de átomos de carbono de configuración lineal o ramificada y uno o varios enlaces triples carbono-carbono insaturados que se pueden presentar en cualquier punto estable a lo largo de la cadena, tales com propargilo, etenilo, etc.
Tal como se usa aquí, el término "arilo" o "resto aromático" significa fenilo o naftilo que, cuando están sustituidos, la sustitución puede estar en cualquier posición.
Tal como se usa aquí, el término "heterociclo" o"sistema heterocíclico" significa un anillo herocíclico monocíclico o bicíclico de 5 a 7 miembros o un anillo heterocíclico bicíclico de 7 a 10 miembros que está saturado, parcialmente insaturado o insaturado (aromático) que está constituido por átomos de carbono y de 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre el grupo constituido por N, O y S, y que incluye cualquier grupo bicíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos antes mencionados está condensado a un anillo de benceno. Opcionalmente, los heteroátomos de nitrógeno o azufre pueden opcionalmente estar oxidados. El anillo heterocíclico puede estar unido a su grupo pendiente en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que de por resultado una estructura estable. Los anillos heterocíclicos descritos aquí pueden estar sustituidos sobre un átomo de carbono o nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Si se indica específicamente, opcionalmente, un átomo de nitrógeno del heterociclo puede estar cuaternizado. Se prefiere que, cuando el número total de átomos de S y O del heterociclo es de más de 1, estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que el número total de átomos de S y O del heterociclo no sea superior a 1. Tal como se usa aquí, el término "sistema heterocíclico aromático" significa un sistema estable de anillo aromático heteroclico monocíclico de 5 a 7 miembros o bicíclico de 7 a 10 miembros que está constituido por átomos de carbono y por 1 a 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre el grupo constituido por N, O y S. Se prefiere que el número total de átomos de S y O del heterociclo aromático no sea superior a 1.
Entre los ejemplos de heterociclos están incluidos, no limitativamente, 1H-indazol, 2-pirrolidonilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, 2H-pirrolilo, 3H-indolilo, 4-piperidonilo, 4aH-carbazol, 4H-quinozinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzotetrazolilo, benzoisixazolilo, benzoisotiazolilo, benzoimidazolinilo, carbazolilo, 4aH-cabazolilo, \beta-carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofurano, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolilo, 1H-indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilperimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenarsazinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatiinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, pteridinilo, piperidonilo, 4-piperodinilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pìrazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridopiridotiazol, piridinilo, piridilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinozinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, carbolinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahifdroquinolinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 1,2,3-tiadi-azolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tienotiazolilo,, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo, xantenilo. Entre los heterociclos preferidos están incluidos no limitativamente, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, indolilo, benzoimidazolilo, 1H-indazolilo, oxazolidinilo, benzotriazolilo, benzoisoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo. También están incluidos compurstos de anillo condensado y espiro que contienen, por ejemplo, los heterociclos anteriores.
Tal como se usa aquí, el término "alquilarilo" significa un grupo arilo que soporta un grupo alquilo de 1 a 10 átomos de carbono; el término "arilalquilo" significa un grupo alquilo que soporta un grupo arilo de 1 a 10 átomos de carbono; el término "arilalquilarilo" significa un grupo arilo que soporta un grupo alquilo de 1 a 10 átomos de carbono que soporta un grupo arilo; y el término "heterocicloalquilo" significa un grupo alquilo de 1 a 10 átomos de carbono que presenta un heteriociclo.
Un "polialquilenglicol" es un polietilenglicol, polipropilenglicol o polibutilenglicol que tiene un peso molecular inferior a aproximadamente 5000, que termina en un resto hidroxi o alquil éter.
Un "carbohidrato" es un aldehído, cetona, alcohol o ácido polihidroxílico, o derivados de él, incluidos polímeros suyos que tienen enlaces polímeros del tipo acetal.
Una "ciclodextrina" es un oligosacárido cíclico. Entre los ejemplos de ciclodextrinas están, aunque no únicamente, \alpha-ciclodextrina, hidroxietil-\alpha-ciclodextrina, hidroxipropil-\alpha-ciclodextrina, \beta-ciclodextrina, hidroxipropil-\beta-ciclodextrina, carboxipropil-\beta-ciclodextrina, dihidroxipropil-\beta-ciclodextrina, hidroxietil-\beta-ciclodextrina, 2,6-di-O-metil-\beta-ciclodextrina, \beta-ciclodextrina sulfatada, \gamma-ciclodextrina, hidroxipropil-\gamma-ciclodextrina, dihidroxipropil-\gamma-ciclodextrina, hidroxietil-\gamma-ciclodextrina y \gamma-ciclodextrina sulfatada.
Tal como se usa en esta memoria, el término "policarboxialquilo" significa un grupo alquilo que tiene entre 2 y aproximadamente 100 átomos de carbono y una pluralidad de sustituyentes carboxilo; y el término "poliazaalquilo" significa un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene entre 2 y aproximadamente 100 átomos de carbono interrumpido o sustituido por una pluralidad de grupos amina.
Un "agente reductor" es un compuesto que reacciona con un radionúclido, que típicamente se obtiene como un compuesto relativamente no reactivo, de alto estado de oxidación, para rebajar su estado de oxidación por paso de electron(es) al radionúclido, lo que hace que sea más reactivo. Entre los ejemplos de agentes reductores útiles en la preparación de radiomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de los mencionados radiomedicamentos están incluidos, no limitativamente, cloruro estannoso, fluoruro estannoso, ácido formamidina-sulfínico, ácido ascórbico, cisteína, fosfinas y sales cuprosas o ferrosas. Brodack y otros describen otros agentes reductores en la solicitud de PCT 94/22496, que se incorpora a esta memoria por referencia.
Un "ligando de transferencia" es un ligando que forma un complejo intermedio con un ión metálico que es lo suficientemente estable para prevenir reacciones secundarias no deseadas pero lo suficientemente lábil para convertirse en un metalomedicamento. La formación del complejo intermedio está favorecida cinéticamente, mientras que la formación del metalomedicamento está favorecida termodinánicamente. Entre los ligandos de transferencia útiles en la preparación de metalomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de radiomedicamentos diagnósticos están incluidos, aunque no limitativamente, gluconato, glucoheptonato, manitol, glucarato, ácido N,N,N',N'-etilen-diaminatetraacético, pirofosfato y metilendifosfonato. En general, los ligandos de transferencia comprenden átomos dadores de oxígeno o nitrógeno.
El término "átomo dador" se refiere al átomo directamente unido a un metal por un enlace químico.
"Ligandos auxiliares" o "coligandos" son ligandos que se incorporan en un radiomedicamento durante su síntesis. Sirven para completar la esfera de coordinación del radionúclido junto con el agente quelatante o la unidad de unión del radionúclido del reactivo. Para radiomedicamentos que comprenden un sistema binario de ligando, la esfera de coordinación del radionúclido está compuesta por quelatantes o unidades de unión de uno o más reactivos y uno o más ligandos auxiliares o coligandos, siempre que haya un total de dos tipos de ligandos, quelatantes o uniones de unión. Por ejemplo, un radiomedicamento que comprende un agente quelatante o unidad de unión de un reactivo y dos de los mismos ligandos auxiliares o coligandos y un radiomedicamento que comprende dos agentes quelatantes o unidades de unión de uno o dos reactivos y un ligando auxiliar o coligando se considera que ambos comprenden un sistema binario de ligandos. Para radiomedicamentos que comprenden un sistema ternario de ligandos, la esfera de coordinación del radionúclido está compuesta por uno o más agentes quelatantes o unidades de unión de uno o más reactivos o unidades de unión de uno o más reactivos y uno o más tipos diferentes de ligandos auxiliares o coligandos, siempre que haya un total de tres tipos de ligandos quelatantes o unidades de unión. Por ejemplo, un radiomedicamento que comprende un agente quelatante o unidad de unión de un reactivo y dos ligandos auxiliares o coligandos diferentes se considera que comprende un sistema ternario de ligandos.
Los ligandos auxiliares o coligandos útiles en la preparación de radiomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de los mencionados radiomedicamentos comprenden uno o más átomos dadores de oxígeno, nitrógeno, carbono, azufre, fósforo, arsénico, selenio y teluro. Un ligando puede ser un ligando de transferencia en la síntesis de un radiomedicamento y servir también como ligando auxiliar o coligando en otro radiomedicamento. El que se denomine un ligando de transferencia o ligando auxiliar o coligando depende de si el ligando permanece en la esfera de coordinación del radionúclido del radiomedicamento, lo que está determinado por la química de coordinación del radionúclido y el agente quelatante o la unidad de unión del reactivo o los reactivos.
Un "quelatante" o "unidad de unión" es el resto o grupo de un reactivo que se une a un ion metálico mediante la formación de enlaces químicos con uno o más átomos dadores.
El término "sitio de unión" significa el sitio in vivo o in vitro que se une a una molécula biológicamente activa.
Un "kit diagnóstico" o "kit" comprende un conjunto de componentes, denominado formulación, en uno o más viales que usa el usuario médico final en un montaje clínico o farmacéutico para sintetizar radiomedicamentos diagnósticos. El kit proporciona todos los componentes requeridos para sintetizar y usar el radiomedicamento, excepto los que comúnmente son asequibles para el usuario médico final, como puede ser agua o solución salina para inyección, una solución del radionúclido, equipo para calentar el kit durante la síntesis del radiomediamento, si se requiere, equipo necesario para administrar el radiomedicamento al paciente, como pueden ser jeringas y protección, y equipo para obtener imágenes.
Los radiomedicamentos terapéuticos, medicamentos agentes de contraste para rayos X, medicamentos agentes de contraste para ultrasonidos y metalomedicamentos para imágenes de resonancia magnética se proporcionan al usuario final en su forma final en una formulación contenida en un vial, como un sólido liofilizado o una solución acuosa. El usuario final reconstituye con agua o solución salina el liofilizado y extrae la dosis del paciente, o bien extrae la dosis de la formulación suministrada en solución acuosa.
Un "coadyuvante de liofilización" es un componente que tiene propiedades físicas favorables para liofilización tales como la temperatura de transición vítrea, y se añade a la formulación para mejorar las propiedades físicas de la combinación de todos los componentes de la formulación para liofilización.
Un "coadyuvante de estabilización" es un componente que se añade al metalomedicamento o el kit diagnóstico para estabilizar el metalomedicamento o para prolongar la vida hasta caducidad del kit antes de su uso. Los coadyuvantes de estabilización pueden ser agentes reductores o secuestradores de radicales y pueden proporcionar una estabilidad mejorada por reaccionar preferentemente con especies que degradan otros componentes o el metalomedicamento.
Un "coadyuvante de solubilización" es un componente que mejora la solubilidad de uno o varios otros componentes en el medio requerido para la formulación.
Un "bacteriostato" es un componente que inhibe el crecimiento de bacterias en una formulación durante su almacenamiento antes del uso o después del uso de un kit para sintetizar un radiomedicamento.
Se usan en la memoria las siguientes abreviaturas:
Acm
acetamidometilo
b-Ala, beta-Ala o bAla
ácido 3-aminopropiónico
ATA
ácido 2-aminotiazol-5-acético o grupo 2-aminotiazol-5-acetilo
Boc
t-butoxicarbobenciloxi
CBZ, Cbz o Z
carbobenciloxi
Cit
citrulina
Dap
ácido 2,3-diaminopropiónico
DCC
diciclohexilcarbodiimida
DIEA
diisopropiletilamina
DMAP
4-dimetilaminopiridina
EOE
etoxietilo
HBTU
hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,3,3,3-tetrametiluronio
hycnic
grupo boc-hidrazinonicotinilo o ácido 2-[[[5-(carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]bencenosulfónico
NMeArg o MeArg
a-N-metilarginina
NMeAsp
ácido a-N-metilaspártico
NMM
n-metilmorfolina
OcHex
O-ciclohexilo
OBzl
O-bencilo
oSu
O-succinimidilo
TBTU
tetrafluoroborato de 2-(1-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio
THF
tetrahidrofuranilo
THP
tetrahidropiranilo
Tos
tosilo
Tr
tritilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Se usan en esta memoria las siguientes abreviaturas de tres letras de aminoácidos; no se usan las abreviaturas convencionales de una letra.
Ala
alanina
Arg
arginina
Asn
asparagina
Asp
ácido aspártico
Cys
cisteína
Gln
glutamina
Glu
ácido glutámico
Gly
glicina
His
histidina
Ile
isloleucina
Leu
leucina
Lys
lisina
Met
metionina
Nle
norleucina
Orn
ornitina
Phe
fenilalanina
Phg
fenilglicina
Pro
prolina
Sar
sarcosina
Ser
serina
Thr
treonina
Trp
triptófano
Tyr
tirosina
Val
valina
Tal como se usa enesta memoria, el término "burbujas" se refiere a vesículas que generalmente se caracterizan por la presencia de una o varias membranas o paredes que rodean un hueco interno que está lleno de gas o un precursor suyo. Son ejemplos de burbujas, liposomas, micelas, etc.
Tal como se usa en esta memoria, el término "lípido" se refiere a un compuesto anfipático sintético o natural que comprende un componente hidrófilo y un componente hidrófobo. Entre los lípidos están incluidos, por ejemplo, ácidos grasos, grasas neutras, fosfátidos, glicolípidos, alcoholes alifáticos y ceras, terpenos y esteroides.
Tal como se usa en esta memoria, el término "composición lipídica" se refiere a una composición que comprende un compuesto lípido. Entre los ejemplos de composiciones lipídicas están incluidas suspensiones, emulsiones y composiciones vesiculares.
Tal como se usa en esta memoria, "formulación lipídica" se refiere a una composición que comprende un compuesto lípido y un agente bioactivo.
Tal como se usa en esta memoria, el término "vesícula" se refiere a una entidad esférica que se caracteriza por la presencia de un hueco interno. Las vesículas preferidas se formulan a partir de lípidos, incluidos los varios lípidos descritos antes. En cualquier vesícula dada, los lípidos pueden estar en forma de monocapas o bicapas. En el caso de más de una monocapa o bicapa, por lo general, las monocapas o bicapas son concéntricas. Entre las vesículas que se describen en esta memoria están incluidas entidades generalmente denominadas liposomas, micelas, burbujas, microburbujas, microesferas, etc. Así, los lípidos se pueden usar en forma de vesícula monolaminar (que comprende una monocapa o bicapa), una vesícula oligolaminar (que comprende aproximadamente dos o tres monocapas o bicapas) o una vesícula multilaminar (que comprende más de aproximadamente tres monocapas o bicapas). El hueco interno de las vesículas puede llenarse con un líquido, por ejemplo, un líquido acuoso, un gas, un precursor de gas y/o un material sólido disuelto, incluido, por ejemplo, un agente bioactivo si se desea.
Tal como se usa en esta memoria, el término "composición vesicular" se refiere a una composición que se formula a partir de lípidos y que comprende vesículas.
Tal como se usa en esta memoria, el término "formulación de vesículas" se refiere a una composición que comprende vesículas y un agente bioactivo.
Tal como se usa en esta memoria, "liposomas" se refiere a un conjunto o agregado generalmente esférico de compuestos anfipáticos, incluidos compuestos lipídicos, típicamente en forma de una o más capas concéntricas, por ejemplo, bicapas. También se denominan en esta memoria vesículas lipídicas.
La angiogénesis es el proceso de formación de nuevos vasos sanguíneos capilares a partir de la vasculatura existente. Es un componente importante de una variedad de procesos fisiológicos, que incluyen la ovulación, desarrollo embriónico, curación de heridas y generación vascular secundaria en el miocardio. También es clave para varias afecciones patológicas tales como crecimiento de tumores y metástasis, retinopatía diabética y degeneración macular. El proceso comienza con la activación de células endoteliales vasculares existentes en respuesta a una variedad de citoquinas y factores de crecimiento. Las células endoteliales activadas secretan enzimas que degradan la membrana de base de los vasos. Las células endoteliales proliferan luego y migran a la matriz extracelular formando primeramente túbulos y posteriormente nuevos vasos sanguíneos.
En condiciones normales, la proliferación de células endoteliales es un proceso muy lento, pero su velocidad aumenta durante un corto período de tiempo durante la embriogénesis, la ovulación y la curación de heridas. Este aumento temporal de la proliferación de células está gobernado por una combinación de varios factores estimulantes del crecimiento y varios factores supresores del crecimiento. En la angiogénesis patológica, este equilibrio normal se interrumpe, lo que da por resultado un aumento continuado de la proliferación de células endoteliales. Entre los factores proangiogénicos que se han identificado están incluidos el factor básico de crecimiento de fibroblastos (bFGF), la angiogenina, TGF-alfa, TGF-beta y el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF), mientras que el interferón-alfa, el interferón-beta y la tromboespondina son ejemplos de supresores de la angiogénesis.
Los factores angiogénicos interaccionan con receptores de superficie de células endoteliales tales como los receptores tirosinaquinasas EGFR, FGFR, PDGFR, Flk-1/KDR, Flt-1, Tek, Tie, naurofilina-1, endoglina, endosialina y Axl. Los receptores Flk-1/KDR, neuropilina-1 y Flt-1 reconocen VEGF y estas interacciones desempeñan papeles clave en la angiogénesis inducida por VEGF. La subfamilia Tie de receptores tirosinaquinasasse expresan también predominantemente durante la formación de vasos sanguíneos.
La proliferación y migración de células endoteliales en la matiz extracelular está mediada por interacción con una variedad de moléculas de adhesión de células. Las integrinas son una familia diversa de receptores de superficie de células heterodímeras por las que las células endoteliales se unen a a matriz extracelular entre sí y a otras células. La angiogénesis inducida por bFGF o TNF-alfa depende de la agencia de la integrina avb3, mientras que la angiogénesis inducida por VEGF depende de la integrina avb5 (Cheresh y otros, Science, 1995, 270, 1500-2). La inducción de la expresión de las integrinas a1b1 y a2bl sobre la superficie de células endoteliales es otro mecanismo importante por el que VEGF promueve la angiogénesis (Senger y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, 94, 13612-7).
Los medicamentos de la presente invención comprenden un resto no peptídico que apunta a la diana para el receptor de la vitronectina que se expresa o regula por incremento en la vasculatura tumoral angiogénica.
Los agentes de contraste de ultrasonidos de la presente invención comprenden una pluralidad de restos que apuntan a la diana de receptor de la nitrovectina unido o incorporado en una microburbuja de un gas biocompatible, un vehículo líquido y una microesfera de tensiactivo, que además comprende un opcional resto de unión, L_{n}, entre los restos que apuntan a la diana y la microburbuja. En este contexto, el término vehículo líquido significa solución acuosa y el término tensioactivo significa cualquier material anfífilo que produce una reducción de la tensión interfacial en una solución. En el documento EP0727225A2, que se incorpora aquí por referencia, se describe una lista de tensioactivos adecuados para formar microesferas. El término microesfera de tensioactivo incluye nanoesferas, liposomas, vesículas, etc. El gas biocompatible puede ser aire o un fluorocarburo tal como perfluoroalcano C_{3-5}, que proporcione la diferencia de ecogenia y, así, el contraste en la imagen de ultrasonidos. El gas está encapsulado o contenido en la microesfera a la que está unido el grupo que dirige la sangre, opcionalmente mediante un grupo conector. La unión puede ser covalente o por fuerzas de van der Waals. Entre los ejemplos específicos de tales agentes de contraste están incluidos perfluorocarburos encapsulados por lípidos con una pluralidad de péptidos, polipéptidos o miméticos de péptidos que se unen a receptores de neovasculatura tumoral.
Los agentes de contraste para rayos X de la presente invención comprenden uno o varios restos que apuntan como diana al receptor de la vitronectina unidos a uno o más átomos que absorben rayos X o "pesados" de número atómico 20 o mayor, que además comprenden un resto de unión opcional, L_{n}, entre los restos que apuntan a la diana y los átomos que absorben rayos X. El átomo pesado frecuentemente usado en los agentes de contraste de rayos X es yodo. Recientemente se han descrito agentes de contraste de rayos X que comprenden quelatos y poliquelatos de metales (Wallace, R., patente U.S. nº. 5.417.959) que comprenden una pluralidad de iones de metales (Love, D., patente U.S. nº. 5.679.810). Más recientemente se han descrito complejos multinucleares como agentes de contraste de rayos X (patente U.S. nº. 5.804.161, documento de PCT WO 91/14460 y WO 92/17215).
Los agentes de contraste para MRI de la presente invención comprenden uno o varios restos que apuntan como diana a los receptores de la vitronectina unidos a uno o varios iones metálicos paramagnéticos que además comprenden un resto opcional de unión, L_{n}, entre los restos que apuntan a la diana y los iones metálicos paramagnéticos. Los iones metálicos paramagnéticos están presentes en forma de complejos de metales o partículas de óxidos de metales. Las patentes U.S. nº. 5.412.148 y 5.760.191 describen ejemplos de quelatantes para iones metálicos paramagnéticos para uso en agentes de contraste de MRI. Las patentes U.S. nº. 5.801.228, nº. 5.567.411 y nº. 5.281.704 describen ejemplos de agentes poliquelatantes útiles para complejar más de un ion metálico paramagnético para uso en agentes de contraste para MRI. La patente U.S. nº. 5.520.904 describe composiciones en partículas que comprenden iones metálicos paramagnéticos para uso como agentes de contrate para MRI.
Los medicamentos de la presente invención tienen las fórmulas
(Q)_{d}-L_{n}-(C_{h}-X), (Q)_{d}-L_{n}-(C_{h}-X^{1})_{d'}, (Q)_{d}-L_{n}-(X^{2})_{d''}, 
\hskip0.3cm
y 
\hskip0.3cm
(Q)_{d}-L_{n}-(X^{3}),
en las que Q representa un no péptido que se une a un receptor expresado en la vasculatura tumoral angiogénica, d es 1-10, L_{n} representa un opcional grupo conector, C_{h} representa un agente quelatante de metales o resto de unión, X representa un radioisótopo, X^{1} representa un ion metálico paramagnético, X^{2} representa un ion metálico paramagnético o un átomo pesado que contiene partículas sólidas insolubles, d'' es 1-100 y X^{3} representa una microesfera de tensioactivo de un gas ecogénico. La interacción de las secuencias de reconocimiento no peptídicas de la porción de unión del receptor de la vitronectina de los medicamentos con el receptor av\beta3 da por resultado la localización de los medicamentos en la vasculatura tumoral angiogénica que expresa el receptor av\beta3.
Los medicamentos de la presente invención se pueden sintetizar según varios enfoques. Un enfoque implica la síntesis del resto no peptídico que apunta a la diana, Q, y la unión directa a uno o más restos Q a uno o más agentes quelatantes, C_{h}, o a un ion metálico paramagnético o un átomo pesado que contiene partículas sólidas, o a una microburbuja de gas ecogénico. Otro enfoque implica la unión de uno o más restos Q al grupo conector, L_{n}, que luego se une a uno o varios agentes quelatantes de metales o restos de unión, C_{h}, o a un ion metálico paramagnético o un átomo pesado que contiene partículas sólidas, o a una microburbuja de gas ecogénico. Otro enfoque implica la síntesis de un no péptido, Q, que presenta un fragmento del grupo conector, L_{n}, uno o más de los cuales están unidos al fragmento restante del grupo conector y luego a uno o varios quelatantes de metales o restos de unión, C_{h}, o a un ion metálico paramagnético o un átomo pesado que contiene partículas sólidas, o a una microburbuja que contiene un gas ecogénico.
Se pueden sintetizar restos no peptídicos de unión a la vitronectina, Q, que opcionalmente presentan un grupo de unión, Q, o un fragmento del grupo conector, usando procedimientos de síntesis conocidos por los expertos en la técnica. Entre los ejemplos preferidos están, aunque no únicamente, los que se describen seguidamente.
La unión de grupos de unión, L_{n}, a los no péptidos, Q; los agentes quelatantes o unidades de unión C_{h}, a los no péptidos, Q, o a los grupos de unión, L_{n}; y los no péptidos, que presentan un fragmento del grupo conector a la porción restante del grupo conector, en combinación formando el resto (Q)_{d}-L_{n} y luego al resto Ch, se pueden realizar por procedimientos estándar. Entre éstos están incluidos, aunque no únicamente, amidación, esterificación, alquilación y la formación de ureas o tioureas. Se pueden encontrar procedimientos para realizar estas uniones en Bioconjugate Chemistry, 1992, 3(1), por Brinkley, M.
Para unir los no péptidos, Q, a iones metálicos paramagnéticos o átomos pesados que contienen partículas sólidas, X^{2}, un experto en la técnica de la modificación de la superficie de partículas sólidas puede usar varios procedimientos. En general, el resto Q que apunta a la diana o la combinación (Q)_{d}L_{n} se fija al grupo de acoplamiento que reacciona con un constituyente de la superficie de la partícula sólida. Los grupos de acoplamiento pueden ser cualesquiera de varios silanos que reaccionan con grupos hidroxilo sobre la superficie de la partícula sólida, como se describe en la solicitud de patente de EEUU nº serial 09/356.178, en tramitación con la presente, y también pueden incluir polifosfonatos, policarboxilatos, polifosfatos o mezclas de ellos que se acoplan con la superficie de las partículas sólidas, como se describe en la patente U.S. nº. 5.520.904.
Para fijar los no péptidos, Q, a la microesfera de tensioactivo, X^{3}, se pueden usar varios esquemas de reacción. Éstos se ilustran en los esquemas de reacción siguientes, en los que S_{f} representa un resto de tensioactivo que forma la microesfera de tensioactivo.
\vskip1.000000\baselineskip
Reacción de acilación
S_{f}-C(=O)-Y + Q-NH_{2} o 
\hskip0.3cm
\rightvector
\hskip0.3cm
S_{f}-C(=O)-NH-Q
Q-OH o S_{f}-C(=O)-O-Q
Y es un grupo pendiente o éster activo
\vskip1.000000\baselineskip
Acoplamiento como disulfuro
S_{f}-SH + Q-SH 
\hskip0.3cm
\rightvector
\hskip0.3cm
S_{f}-S-S-Q
\vskip1.000000\baselineskip
Acoplamiento como sulfonamida
S_{f}-S(=O)_{2}-Y + Q-NH_{2} 
\hskip0.3cm
\rightvector
\hskip0.3cm
S_{f}-S(=O)_{2}-NH-Q
\vskip1.000000\baselineskip
Amidación reductora
S_{f}-CHO + Q-NH_{2} 
\hskip0.3cm
\rightvector
\hskip0.3cm
S_{f}-NH-Q.
En estos esquemas de reacción, los sustituyentes S_{f} y Q también puede invertirse.
El grupo conector L_{n} puede desempeñar varios papeles. Primero, proporciona un grupo espaciador entre el agente quelatante de metales o el resto de unión, C_{h}, el ion metálico paramagnético o el átomo pesado que contiene partícula sólida, X^{2}, y la microesfera de tensioactivo, X^{3}, y uno o más de los no péptidos, Q, para minimizar la posibilidad de que los restos C_{h}-X, C_{h}-X^{1}, X^{2} y X^{3} interfieran con la interacción de las secuencias de reconocimiento de Q con los receptores de la vasculatura tumoral angiogénica. La necesidad de incorporar un grupo conector en un reactivo depende de la indentidad de Q, C_{h}-X, C_{h}-X^{1}, X^{2} y X^{3}. Si Q, C_{h}-X, C_{h}-X^{1}, X^{2} y X^{3} no se pueden unir a Q sin disminuir sustancialmente su afinidad para los receptores, se usa un grupo conector. Un grupo conector también proporciona un medio para unir independientemente múltiples no péptidos, Q, a un grupo que está fijado a C_{h}-X, C_{h}-X^{1}, X^{2} o X^{3}.
El grupo conector proporciona también un medio para incorporar un modificador farmacocinético en los medicamentos de la presente invención. El modificador farmacocinético sirve para dirigir la biodistribución de medicamentos inyectados de otra manera a la de la interacción de los rsetos que apuntan a la diana, Q, con los receptores de la vitronectina expresados en la vasculatura de un tumor. Como modificadores farmacocinéticos pueden actuar una amplia variedad de grupos funcionales, incluidos, entre otros, carbohidratos, polialquilenglicoles, péptidos u otros poliaminoácidos, y ciclodextrinas. Los modificadores se pueden usar para aumentar o disminuir la hidrofilia y para aumentar o disminuir la velocidad de depuración de la sangre. Los modificadores también se pueden usar para dirigir la vía de eliminación de los medicamentos. Los modificadores farmacocinéticos preferidos son los conducen a una purificación de moderada o rápida de la sangre y a una excreción renal intensificada.
El agente quelatante de metales o resto de unión, C_{h}, se selecciona para formar complejos estables con el ion metálico escogido para la aplicación particular. Los agentes quelatantes o restos de unión para radiomedicamentos diagnósticos se seleccionan para formar complejos estables con los radiosótopos que tienen emisiones de rayos gamma o positrones que pueden obtener imágenes, tales como ^{99m}Tc, ^{95}Tc, ^{111}In, ^{62}Cu, ^{60}Cu, ^{64}Cu, ^{67}Ga, ^{68}Ga, ^{86}Y.
Los agentes telatantes para isótopos de tecnecio, cobre y galio se seleccionan entre diaminaditioles, monoamina-monoamidatioles, triamida-monotioles, monoamina-diamida-monotioles, diaminadioximas e hidrazinas. Generalmente, los agentes quelatantes son tetradentados con átomos dadores seleccionados entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Los reactivos preferidos comprenden quelatantes que tienen nitrógeno de amina y átomos dadores azufre de tiol y unidades de unión de hidrazina. Los átomos de azufre de tiol y las hidrazinas pueden presentar un grupo protector que se puede desplazar antes de usar el reactivo para sintetizar un radiomedicamento o, preferiblemente, in situ durante la síntesis del radiomedicamento.
Entre los ejemplos de grupos protectores de tiol están incluidos los que figuran en Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York (1991), cuya descripción se incorpora a este documento por referencia. Se puede usar cualquier grupo protector de tiol conocido en la técnica. Entre los ejemplos de tales grupos protectores están incluidos, no limitativamente, los siguientes: acetamidometilo, benzoamidometilo, 1-etoxietilo, benzoílo y trifenilmetilo.
Son ejemplos de grupos protectores de unidades de unión de hidrazina, hidrazonas que pueden ser hidrazonas aldehídicas o cetónicas que tienen sustituyentes seleccionados entre hidrógeno, alquilo, arilo y heterociclo. Se describen hidrazonas particularmente preferidas en la patente U.S. nº. 5.750.088.
La unidad de unión de hidrazina cuando se une a un radionúclido metálico se denomina grupo hidrazido o diazenido y actúa como punto de unión del radionúclido al resto del radiomedicamento. Un grupo diazenido puede ser terminal (sólo un átomo del grupo está unido al radionúclido) o quelatante. Con el fin de tener un grupo diazenido quelatante, al menos otro átomo del grupo debe estar también unido al radionúclido. Los átomos unidos al metal se denominan átomos dadores.
Los agentes quelatantes para ^{111}In y ^{86}Y se seleccionan entre poliaminocarboxilatos cíclicos y acíclicos tales como DTPA, DOTA, DO3A, 2-bencil-DOTA, ácido alfa-(2-feniletil)1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1-acético-4,7,10-tris(metilacético, ácido 2-bencilciclohexildietilentriaminapentaacético, 2-bencil-6-metil-DTPA y 6,6''-bis[N,N,N'',N''-tetra(carboximetil)aminometil)-4'-(3-amino-4-metoxifenil)-2,2':6',2''-terpiridina. Los procedimientos para sintetizar estos agentes quelatantes que no están disponibles comercialmente se pueden encontrar en las publicaciones de Brechbiel, M. y Gansow, O., J. Chem. Soc. Perkin Trans.1992, 1, 1175; Brechbiel, M y Gansow, O., Bioconjugate Chem., 1991, 2, 187; Deshpande, S. y otros, J. Nucl. Med., 1990, 31, 473; Kruper, J., patente U.S. nº. 5.064.956, y Toner, J., patente U.S. nº. 4.859.777.
La esfera de coordinación del ion metálico incluye todos .los ligandos o grupos unidos al metal. Para que un radionúclido de un metal de transición sea estable, típicamente, el número de coordinación es mayor que 4 o igual a 4 e inferior o igual a 8; esto es, que haya de 4 a 8 átomos unidos al metal y se dice que tiene una esfera de coordinación completa. El número de coordinación requerido para un complejo de radionúclido estable está determinado por la identidad del radionúclido, su estado de oxidación y el tipo de átomos dadores. Si el agente quelatante o la unidad de unión no proporcionan la totalidad de los átomos necesarios para estabilizar el radionúclido metal por completar su esfera de coordinación, la esfera de coordinación se completa con átomos dadores de otros ligandos, denominados ligandos auxiliares o coligandos, que también pueden ser terminales o quelatantes.
Como ligandos auxiliares o coligandos pueden servir un gran número de ligandos, cuya elección está determinada por una variedad de consideraciones tales como la facilidad de síntesis del radiomedicamento, las propiedades químicas y físicas del ligando auxiliar, la velocidad de formación, el rendimiento y el número de formas isómeras de los radiomedicamentos resultantes, la aptitud para administrar al paciente el mecionado ligando auxiliar o coligando sin consecuencias fisiológicas adversas para el paciente y la compatibilidad del ligando en una formulación de kit liofilizada. La carga y lipofilia del ligando auxiliar afectará a la carga y lipofilia de los medicamentos. Por ejemplo, el uso de 4,5-dihidroxi-1,3-bencenodisulfonato da por resultado radiomedicamentos con dos grupos adicionales aniónicos porque los grupos sulfonato serán aniónicos en condiciones fisiológicas. El uso 3,4-hidroxipiridinonas sustituidas con N-alquilo da por resultado radiomedicamentos con grados variables de lipofilia dependiendo del tamaño de los sustituyentes alquilo.
Los radiomedicamentos de tecnecio preferidos de la presente invención comprenden una unidad de unión hidrazido o diazenido y un ligando auxiliar, A_{L1}, o una unidad de unión y dos tipos de ligandos auxiliares, A_{L1} y A_{L2}, o un quelatante tetradentado qure comprende dos átomos de nitrógeno y dos átomos de azufre. Los ligandos auxiliares A_{L1} comprenden dos o más átomos dadores fuertes tales como oxígeno y nitrógeno de amina (sp^{3} hibridizado). Los átomos dadores ocupan al menos dos de los sitios de la esfera de coordinación del metal radionúclido; el ligando auxiliar A_{L1} actúa como uno de los tres ligandos del sistema de ligando ternario. El grupo de ejemplos de ligandos auxiliares A_{L1} incluye, aunque no únicamente, ligandos dioxígeno y aminocarboxilatos funcionalizados, Son asequibles de fuentes comerciales un gran número de tales ligandos.
Los ligandos auxiliares de dioxígeno incluyen los ligandos que coordinan el ion metálico a través de como mínimo dos átomos de oxígeno dadores. Entre los ejemplos están incluidos, aunque no limitativamente: glucoheptonato, gluconato, 2-hidroxiisobutirato, lactato, tartrato, manitol, glucarato, maltol, ácido kójico, ácido 2,2-bis(hidroximetil)propiónico, 4,5-dihidroxi-1,3-bencenodisulfonato o 1,2- o 3,4-hidroxipiridinonas sustituidas o no sustituidas. (Los nombres de estos ligandos en estos ejemplos se refieren a formas protonadas o no protonadas de los ligandos).
Los aminocarboxilatos funcionalizados incluyen ligandos que tienen una combinación de átomos dadores de nitrógeno y oxígeno. Entre los ejemplos están incluidos, no limitativamente: ácido iminodiacético, ácido 2,3-diaminopropiónico, ácido nitrilotriacético, ácido N,N'-etilendiaminadiacético, ácido N,N,N''-etilendiaminatriacético, ácido hidroxietiletilendiaminatriacético y N,N'-etilendiamina bis-hidroxifenilglicina. (Los nombres de estos ligandos en estos ejemplos se refieren a formas protonadas o no protonadas de los ligandos).
Bridger y otros describen en la patente U.S. nº- 5.350.837 una serie de aminocarboxilatos funcionalizados que dan unas velocidades mejoradas de formación de proteínas modificadas hidrazino marcadas con tecnecio. Los autores de esta invención han determinado que algunos de estos aminocarboxilatos dan por resultado unos rendimientos mejorados de los radiomedicamentos de la presente invención. Los aminocarboxilatos funcionalizados preferidos como ligandos auxiliares A_{L1} son los derivados de glicina; el más preferido es tricina (tris(hidroximetil)metilglicina).
Los radiomedicamentos de tecnecio de la presente invención más preferidos comprenden una unidad de unió hidrazido o diazenido y dos tipos de ligandos auxiliares designados A_{L1} y A_{L2} o un quelatante diaminoditiol. El segundo tipo de Ligandos, A_{L2}, comprende uno o más átomos dadores blandos seleccionados entre el grupo: fósforo de fosfina, arsénico de arsina, nitrógeno de imina (sp2 hibridizado) y carbono (sp hibridizado); átomos que tienen carácter p-ácido. Los ligandos A_{L2} pueden ser monodentados, bidentados o tridentados; la denticidad se define como el número de átomos dadores en el ligando. Uno de los dos átomos dadores de un ligando bidentado y uno de los tres átomos dadores de un ligando tridentado deben ser un átomo dador blando. Los autores de la invención han descrito en la patente U.S. nº. 5.744.120 y en la solicitud de patente europea EP-A-0888130 que los radiomedicamentos que comprenden uno o más ligandos auxiliares o coligandos A_{L2} son comparativamente más estables que los radiomedicamentos que no comprenden uno o varios ligandos A_{L2}; esto es, que tienen un número mínimo de formas isómeras, cuyas proporciones relativas no cambian significativamente con el tiempo y que permanecen sustancialmente intactos después de dilución.
Los ligando A_{L2} que comprenden átomos dadores de fosfina y arsina son fosfinas trisustituidas, arsinas trisustituidas, difosfinas tetrasustituidas y diarsinas tetrasustituidas. Los ligandos A_{L2} que comprenden nitrógeno de imina son heterociclos de 5 o 6 miembros, insaturados o aromáticos, que contienen nitrógeno. Los ligandos que comprenden átomos dadores de azufre (sp^{2} hibridizado) son tiocarbonilos que comprenden el resto C=S. Los ligandos que comprenden átomos dadores de carbono (sp hibridizado) son nitrilos que comprenden el resto CNR, en el que R es un radical orgánico. Son asequibles de fuentes comerciales un gran número de tales ligandos. Los isonitrilos se pueden sintetizar como se describe en la patente europea 0107734 y en la patente U.S. nº. 4.988.827, que se incorporan en esta memoria por referencia.
Los ligandos A_{L2} preferidos son fosfinas trisustituidas y heterociclos de 5 o 6 miembros, insaturados o aromáticos. Los ligandos A_{L2} muy preferidos son fosfinas trisustituidas y heterociclos insaturados de 5 miembros.
Los ligandos auxiliares A_{L2} se pueden sustituir con grupos alquilo, arilo, alcoxi, heterociclo, arilalquilo, alquilarilo y arilalquilarilo y pueden presentar o no presentar grupos funcionales que comprenden heteroátomos tales como oxígeno, nitrógeno, fósforo o azufre. Entre los ejemplos de tales grupos funcionales están incluidos, pero no exclusivamente: hidroxilo, carboxilo, carboxamido, nitro, éter, cetona, amino, sulfonato, sulfonamida, fosfonato y fosfonamida. Los grupos funcionales se pueden escoger para alterar la lipofilia y la solubilidad en agua de los ligandos que pueden afectar a las propiedades biológicas de los radiomedicamentos, como puede ser la alteración de la distribución en tejidos no diana, células o fluidos y el mecanismo y la velocidad de eliminación del cuerpo.
Los agentes quelatantes o restos de unión para radiomedicamentos terapéuticos se seleccionan para formar complejos estables con los isótopos radiactivos que tienen emisión de partículas alfa, partículas beta, electrones de Auger o Coster-Kronig, tales como ^{186}Re, ^{188}Re, ^{153}Sm, ^{166}Ho, ^{177}Lu, ^{149}Pm, ^{90}Y, ^{212}Bi, ^{103}Pd, ^{109}Pd, ^{159}Gd, ^{140}La, ^{198}Au, ^{199}Au, ^{169}Yb, ^{175}Yb, ^{165}Dy, ^{166}Dy, ^{67}Cu, ^{105}Rh, ^{111}Ag y ^{192}Ir. Los agentes quelatantes para isótopos de renio, cobre, paladio, platino, iridio, rodio, plata y oro se seleccionan entre diaminaditioles, monoamina-monoamidaditioles, triamida-monotioles, monoamina-diamida-monotioles, diaminadioximas e hidrazonas. Los agentes quelatantes para los isótopos de itrio, bismuto y lantánidos se seleccionan entre poliaminocarboxilatos cíclicos y acíclicos tales como DTPA, DOTA, DO3A, ácido 2-bencil-DOTA, alfa-(2-fenetil)1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1-acético-4,7,10-tris(metilacético, ácido 2-bencilciclohexildietilentriaminapentaacético, 2-bencil-6-metil-DTPA y 6,6''-bis-[N,N,N'',N''-tetra(carboximetil)aminometil)-4'-(3-amino-4-metoxifenil)-2,2':6',2''-terpiridina.
Los quelatantes para agentes de contraste para obtener imágenes por resonancia magnética se seleccionan para formar complejos estables con iones metálicos paramagnéticos tales como Gd(III), Dy(III), Fe(III) y Mn(II) entre poliaminocarboxilatos cíclicos y acíclicos tales como DTPA, DOTA, DO3A, 2-bencil-DOTA, ácido alfa-(2-fenetil)1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1-acético-4,7,10-tris(metilacético), ácido 2-bencilciclohexildietilentriaminapentaacético, 2-bencil-6-metil-DTPA y 6,6''-bis-[N,N,N'',N''-tetra(carboximetil)aminometil)-4'-(3-amino-4-metoxifenil)-2,2':6',2''-terpiridina.
Los radiomedicamentos de tecnecio y renio de la presente invención que comprenden una unidad de unión hidrazido o diazenido se pueden preparar fácilmente mezclando una sal de un radionúclido, un reactivo de la presente invención, un ligando auxiliar A_{L1}, un ligando auxiliar A_{L2} y un agente reductor en una solución acuosa a temperaturas de 0 a 100ºC. Los radiomedicamentos de tecnecio y renio de la presente invención que comprenden un quelatante tetradentado que tiene dos átomos de nitrógeno y dos átomos de azufre se pueden preparar fácilmente mezclando una sal de un radionúclido, un reactivo de la presente invención y un agente reductor en una solución acuosa a temperaturas de 0 a 100ºC.
Cuando la unidad de unión del reactivo de la presente invención está presente como grupo hidrazona, debe convertirse primeramente en hidrazina, que puede ser protonada o no protonada, antes de formar el complejo con el radionúclido metálico. La conversión del grupo hidrazona en hidrazina se puede realizar o bien antes de la reacción con el radionúclido, en cuyo caso el radionúclido y el ligando auxiliar o coligando o los ligandos auxiliares o coligandos no se combinan con el reactivo sino con una forma hidrolizada del reactivo que porta el quelatante o unidad de unión, o bien en presencia del radionúclido, en cuyo caso el propio reactivo se combina con el radionúclido y el ligando auxiliar o coligando, o los ligandos auxiliares o coligandos: en el último caso, el pH de la mezcla de reacción debe ser neutro o ácido.
Alternativamente, los radiomedicamentos de la presente invención que comprenden una unidad de unión hidrazido o diazenido se pueden preparar mezclando primeramente una sal de un radionúclido, un ligando auxiliar A_{L1} y un agente reductor en una solución acuosa a temperaturas de 0 a 100ºC para formar un complejo intermedio de radionúclido con el ligando auxiliar A_{L1} y añadiendo luego un reactivo de la presente invención y un ligando auxilar A_{L2} y haciendo que la mezcla reaccione a temperaturas de 0 a 100ºC.
Alternativamente, los radiomedicamentos de la presente invención que comprenden una unidad de unión hidrazido o diazenido se pueden preparar mezclando primeramente una sal de un radionúclido, un ligando auxiliar A_{L1}, un reactivo de la presente invención y un agente reductor en una solución acuosa a temperaturas de 0 a 100ºC para formar un intermedio complejo de radionúclido y añadiendo luego un ligando auxiliar A_{L2} y haciendo reaccionar la mezcla a temperaturas de 0 a 100ºC.
Preferiblemente, los radionúclidos de tecnecio y renio están en la forma química de pertecnetato o perrenato y un catión farmacéuticamente aceptable. La forma de sal pertecnetato preferiblemente es pertecnetato sódico, tal como la obtenida de generadores comerciales de Tc-99m. La cantidad de pernectetato usada para preparar los radiomedicamentos de la presente invención puede variar de 0,1 mCi a 1 Ci o, más preferiblemente, de 1 a 200 mCi.
La cantidad de reactivo de la presente invención usada para preparar los radiomedicamentos de tecnecio y renio puede variar de 0,01 \mug a 10 mg, más preferiblemente, de 0,5 \mug a 200 \mug. La cantidad a usar estará dictada por las cantidades de otros reactivo y la identidad de los radiomedicamentos de la presente invención.a preparar.
Las cantidades de los ligandos auxiliares A_{L1} usadas pueden variar de 0,1 mg a 1g o, más preferiblemente, de 1 mg a 100 mg. La cantidad exacta para un radiomedicamento particular es función de la identidad de los radiomedicamentos de la presente invención a preparar, el procedimiento usado y las cantidades e identidades de los otros reactivos. Una cantidad demasiado alta de A_{L1} dará por resultado la formación de subproductos que comprenden A_{L1} marcado con tecnecio sin una molécula biológicamente activa o subproductos que comprenden moléculas marcadas con tecnecio con el ligando auxiliar A_{L1} pero sin el ligando auxiliar A_{L2}. Una cantidad demasiado baja de A_{L1} dará por resultado otros subproductos tales como moléculas biológicamente activas marcadas con tecnecio con el ligando auxiliar A_{L2} pero sin el ligando auxiliar A_{L1}, o tecnecio hidrolizado o coloide de tecnecio.
Las cantidades de los ligandos auxiliares A_{L2} usadas pueden variar de 0,001 mg a 1 g o, más preferiblemente, de 0,01 mg a 10 mg. La cantidad exacta para un radiomedicamento particular es función de la identidad de los radiomedicamentos de la presente invención a preparar, el procedimiento utilizado y las cantidades e identidades de los otros reactivos. Una cantidad demasiado alta de A_{L2} dará por resultado la formación de subproductos que comprenden A_{L2} marcado con tecnecio sin una molécula biológicamente activa o subproductos que contienen moléculas biológicamente activas marcadas con tecnecio con el ligando auxiliar A_{L2} pero sin el ligando auxiliar A_{L1}. Si el reactivo presenta uno o más sustituyentes que comprenden un átomo dador blando, según lo definido antes, se requiere al menos un exceso molar de 10 veces del ligando auxiliar A_{L2} respecto al reactivo de fórmula 2 para prevenir que el sustituyente interfiera con la coordinación del ligando auxiliar A_{L2} al radionúclido metálico.
Entre los agentes reductores adecuados para la síntesis de los readiomedicamentos de la presente invención están incluidos sales estannosas, sales ditionito o bisulfito, sales borohidruro, y ácido formamidinsulfínico, estando las sales en cualquier forma farmacéuticamente aceptable. El agente reductor preferido es una sal estannosa. La cantidad usada de un agente reductor puede ser de 0,001 mg a 10 mg, más preferiblemente de 0,005 mg a 1 mg.
La estructura específica de un radiomedicamento de la presente invención que comprende una unidad de unión hidrazido o diazenido dependerá de la identidad de cualquier ligando auxiliar A_{L1}, la identidad de cualquier ligando auxilioar A_{L2} y la identidad del radionúclido. Los radiomedicamentos que comprenden una unidad de unión hidrazido o diazenido sintetizados usando concentraciones de reactivos <100 \mug/ml comprenderán un grupo hidrazido o diazenido. Los sintetizados usando concentraciones >1 mg/ml comprenderán dos grupos hidrazido o diazenido de dos moléculas de reactivo. Para la mayoría de las aplicaciones, sólo se puede inyectar una cantidad limitada de la molécula biológicamente activa y no resultarán efectos secundarios no deseados tales como toxicidad química, interferencia con un proceso biológico o una biodistribución alterada del radiomedicamento. Por tanto, los radiomedicamentos que requieren concentraciones más altas de los reactivos que comprenden en parte la molécula biológicamente activa, se habrán de diluir o purificar después de la síntesis para evitar tales efectos secundarios.
Las identidades y cantidades de los ligendos auxiliares A_{L1} y A_{L2} usadas determinarán los valores de las variables y y z. Los valores de y y z pueden ser, independientemente, un número entero de 1 a 2. En combinación, los valores de y y z darán por resultado una esfera de coordinación de tecnecio que está hecha de como mínimo 5 o y no más de 7 átomos dadores. Para ligandos auxiliares monodentados A_{L2}, z puede ser un número entero de 1 a 2; para ligandos auxiliares bidentados o tridentados A_{L2}, z es 1. La combinación preferida de ligandos monodentados A_{L2} es y igual a 1 o 2 y z igual a 1. La combinación preferida de ligandos bidentados o tridentados A_{Lz} es y igual a 1 y z igual a 1.
Los radiomedicamentos de indio, cobre, galio, plata, paladio, rodio, oro, platino, bismuto, itrio y lantánidos de la presente invención se pueden preparar fácilmente mezclando una sal de un radionúclido y un reactivo de la presente invención en una solución acuosa a temperaturas de 0 a 100ºC. Típicamente, estos radionúclidos se obtienen como solución acuosa diluida en un ácido mineral tal como ácido clorhídrico, nítrico o sulfúrico. Los radionúclidos se combinan con de uno a aproximadamente mil equivalentes de los reactivos de la presente invención en solución acuosa. Típicamente se usa un tampón para mantener el pH de la mezcla de reacción entre 3 y 10.
Los metalomedicamentos de gadolinio, disprosio, hierro y manganeso de la presente invención se pueden preparar fácilmente mezclando una sal del ion metálico paramagnético y un reactivo de la presente invención en una solución acuosa a entre 0 y 100ºC. Estos iones metálicos paramagnéticos típicamente se obtienen como solución acuosa diluida en un ácido mineral tal como ácido clorhídrico, nítrico o sulfúrico. Los iones metálicos paramagnéticos se combinan con de uno a aproximadamente mil equivalentes de los reactivos de la presente invención disueltos en solución acuosa. Típicamente se usa un tampón para mantener el pH de la mezcla de reacción entre 3 y 10.
El tiempo total de preparación variará dependiendo de la identidad del ion metálico, las identidades y cantidades de los reactivos y el procedimiento seguido para la preparación. Las preparaciones pueden realizarse, con rendimientos del radiomedicamento superiores a 80%, en 1 minuto, o su realización puede requerir más tiempo. Si se necesitan o desean metalomedicamentos de mayor pureza, los productos se pueden purificar por cualquiera de las numerosas técnicas bien conocidas por los expertos en la técnica, tales como cromatografía de líquidos, extracción en fase sólida, extracción con disolventes, diálisis o ultrafiltración.
Entre los tampones útiles en la preparación de metalomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de los radiomedicamentos mencionados están incluidos, no limitativamente, los de fosfato, citrato, sulfosalicilato y acetato. Se puede encontrar una lista más completa en la United States Pharmacopeia.
Los coadyuvantes de liofilización útiles en la preparación de kits diagnósticos útiles en las preparación de radiomedicamentos incluyen, no limitativamente, mentol, lactosa, sorbitol, dextrano, Ficoli y polivinilpirrolidona (PVP).
Entre los coadyuvantes de estabilización útiles en la preparación de metalomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de radiomedicamentos están incluidos, no limitativamente, ácido ascórbico, cisteína, monotioglicerol, bisulfito sódico, metabisulfito sódico, ácido gentísico e inositol.
Entre los coadyuvantes de solubilización útiles en la preparación de metalomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de radiomedicamentos están incluidos, no limitativamente, etanol, glicerina, poletilenglicol, propilenglicol, monoestearato de polioxietilensorbitano, monooleato de sorbitano, polisorbatos, copolímeros de bloque poli(oxietilen)poli(oxipropilen)poli(oxietileno) (Pluronics) y lecitina. Los coadyuvantes de solubilización preferidos son polietilenglicol y Pluronics.
El grupo de bacteriostatos útiles en la preparación de metalomedicamentos y en kits diagnósticos útiles para la preparación de radiomedicamentos incluye, no limitativamente, alcohol bencílico, cloruro de benzalconio, clorbutanol y metil, propil o butil parabeno.
Un componente de un kit diagnóstico puede desempeñar más de una función. Un agente reductor puede actuar también como coadyuvante de estabilización; un tampón puede actuar también como ligando de transferencia; un coadyuvante de estabilización puede actuar también como ligando de transferencia, ligando auxiliar o coligando, etc.
Los radiomedicamentos diagnósticos se administran por inyección intravenosa, usualmente en solución salina, a una dosis de 1 a 100 mCi por 70 kg de peso corporal o, preferiblemente, a una dosis de 5 a 50 mCi. La obtención de imágenes se realiza usando procedimientos conocidos.
Los radiomedicamentos terapéuticos se administran por inyección intravenosa, usualmente en solución salina, a una dosis de 0,1 a 100 mCi por 70 kg de peso corporal o, preferiblemente, a una dosis de 0,5 a 5 mCi por 70 kg de peso corporal.
Los agentes de contraste de la presente invención para obtener imágenes por resonancia magnética se pueden jusar de forma similar a otros agentes de MRI según lo descrito en las patentes U.S. nº. 5.155.215 y nº. 5.087.440; y por Margerstadt y otros, Magn. Reson. Med., 1986, 3, 808; Runge y otros, Radiology, 1988, 166, 835; y Bousquet y otros, Radiology, 1988, 166, 663. Generalmente se administran al paciente intravenosamente soluciones acuosas estériles de los agentes de contraste a dosis que varían de 0,01 a 1,0 mmol por kg de peso corporal.
Para uso como agentes de contraste para rayos X, las composiciones de la presente invención generalmente deben tener una concentración del átomo pesado de 1 mM a 5 mM, preferiblemente de 0,1 M a 2 M. Típicamente, las dosis administradas por inyección intravenosa varían de 0,5 mmol/kg a 1,5 mmol/kg, preferiblemente de 0,8 mmol/kg a 1,2 mmol/kg. La obtención de imágenes se realiza usando técnicas conocidas, preferiblemente por tomografía computerizada con rayos X.
Los agentes de contraste de esta invención para ultrasonidos se administran por inyección intravenosa en una cantidad de 10 a 30 \mul del gas ecogénico por kg de peso corporal, o por infusión a una velocidad de aproximadamente 3 \mul/kg/min. La obtención de imágenes se realiza usando técnicas de sonografía conocidas.
Otros rasgos de la invención se pondrán de manifiesto en el transcurso de las descripciones siguientes de realizaciones ejemplares que se dan para ilustrar la invención y que no tienen la finalidad de limitarla.
Ejemplos
Los materiales y procedimientos representativos que se pueden usar en la preparación de los compuestos de la invención se describen seguidamente.
El ácido 1-(3-((1-trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)-1H-indazol-5-carboxílico se sintetizó como se describe en la patente U.S. nº. 5.760.028. Todos los productos químicos y disolventes (calidad reactivo) se usaron como los suministró el vendedor citado sin purificarlos posteriormente. Los 1-butiloxicarbonil (Boc) aminoácidos y otros aminoácidos de partida se pueden obtener comercialmente de Bachem Inc., Bachem Biosciences Inc. (Philadelphia, PA), Advanced Chem Tech (Lousville, KY), Peninsula Laboratories (Belmont, CA) o Sigma (St. Louis). El ácido Boc-L-cisteico, el éster de N-hidroxifenilo del ácido Boc-L-cisteico y el éster de p-nitrofenilo del ácido Boc-L-cisteico se prepararon según se describe en Liebigs Ann. Chem. 1979, 776-783. El hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HBTU) y el TBTU se compraron de Advanced Chem Tech. N-metil-morfolina (NMM), m-cresol, ácido D-2-aminobutírico (Abu), cloruro de trimetilacetilo, diisopropiletilamina (DIEA), 1,2,4-triazol, cloruro estannoso dihidratado, hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC), trietilsilano (Et_{3}SiH) y la sal sódica de tris(3-sulfonatofenil)fosfina (TPPTS) se compraron de Aldrich Chemical Company. La sal disódica de bis(3-sulfonatofenil)fenilfosfina (TPPDS) se preparó por el procedimiento publicado (Kuntz, E., patente U.S. nº. 4.248.802). La sal monosódica de bis(3-sulfonatofenil)fenilfosfina (TPPMS) se compró de TCI Amerivca, Inc. La tricina se obtuvo de Research Organics, Inc.. El pertecnetato de Tecnecio-99m (^{99m}TcO_{4}^{-}) se obtuvo de un generador Technelite® de ^{99}Mo/^{99m}Tc de DuPont Pharma. El cloruro de In-111 (Indichlor®) se obtuvo de Amersham Medi-Physics, Inc. El cloruro de Sm-153 y el cloruro de Lutecio-177 se obtuvieron de University Missouri Research Reactor (MURR). El cloruro de itrio-90 se obtuvo de Pacific Northwest Research Laboratories. Dimetilformamida (DMF), acetato de etilo, cloroformo (CHCl_{3}), metanol (MeOH), piridina y ácido clorhídrico se obtuvieron de Baker. Se adquirieron de fuentes comerciales acetonitrilo, diclorometano (DCM), ácido acético (HOAC), ácido trifluoroacético (TFA), etil éter, trietilamina, acetona y sulfato magnésico. El etanol absoluto se obtuvo de Quantum Chemiocal Corporation. Se preparó DOTA(OtBu)_{3}-OH como se describe o se compró de Macrocyclics, Inc (Texas).
Síntesis de Boc-Glu-(OTFP)-OTFP 
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48 
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A una solución de Boc-Glu-OH (28,9 g, 117 mmol) en DMF (500 ml) a temperatura ambiente y bajo nitrógeno, se añadió una solución de 2,3,5,6-tetrafluorofenol (48,2 g, 290 mmol) en DMF (50 ml). Después de agitar durante 10 min, se añadió EDC (55,6 g, 290 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 96 h. Se eliminaron los volátiles en vacío y el residuo se trituró en HCl 0,1 N (750 ml). A esta mezcla se añadió acetato de etilo (600 ml) y se separaron las capas. La capa acuosa se sometió a extracción con acetato de etilo (3 x 500 ml) y se combinaron todas las fracciones de acetato de etilo, la combinación se lavó con agua (300 ml) y salmuera (300 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose un sólido pardo (62 g). El sólido pardo se lavó con acetonitrilo, obteniéndose el compuesto del título (45,5 g, 73%) en forma purificada.
ESMS: calculado para C_{22}H_{17}F_{8}NO_{6} 543,09; hallado 566,0 [M+Na]^{+1}.
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Ejemplo 1
Síntesis de ácido 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)-amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-propanoico 
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49 
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Parte A
Preparación de N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)-(fenilmetoxi)formamida 
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50
Una solución de 4,7,10-trioxa-1,13-tridecanodiamina (158 ml, 0,72 mmol), TEA (16,7 ml, 0,12 mmol) y MeOH (300 ml) en THF exento de peróxido (1.000 ml) se cargó en un matraz de 3 litros de tres bocas provisto de agitador mecánico, termómetro y un embudo de adición con tubo para nitrógeno. El embudo de adición se cargó con una solución de cloroformiato de bencilo (17,1 ml, 0,12 mol) en THF exento de peróxido (1.000 ml). El contenido del matraz se enfrió por debajo de 5ºC. El contenido del embudo de adición se añadió al matraz agitando rápidamente durante 4 h mientras que la temperatura se mantenía por debajo de 5ºC. La solución se agitó durante 30 min más y se concentró, obteniéndose un líquido espeso. Este líquido se recogió en solución saturada de NaCl (1800 ml) y solución acuosa al 10% de Na_{2}CO_{3} (200 ml) y se sometió a extracción con éter (3 x 1000 ml). La combinación de los extractos etéreos se lavó con solución saturada de NaCl (500 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose un aceite amarillo pálido (36,74 g). La cromatografía rápida sobre una columna de 7 x 29 cm de gel de sílice (DCM/MeOH/TEA 20/15/0,5) dio el compuesto del título como un líquido espeso incoloro (19,14 g, 45%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,33-7,25 (m, 5H), 5,59 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 3,62-3,45 (m, 12H), 3,32-3,25 (m, 2H), 2,74 (t, J = 6,7 Hz), 1,75 (pent., J = 6,0 Hz, 2H), 1,67 (pent, J = 6,4 Hz, 2H), 1,33 (s, 2H). MS: m/e 355,4 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{18}H_{31}N_{2}O_{5} [M+H]: 355,2233; hallado: 355, 2222.
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Parte B
Preparación de 3-((t-butoxi)-carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-2-(2-(3-((fenilmetoxi)-carbonilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil-amino)sulfonil)fenil)fenil)-sulfonil)amino)propanoato de metilo 
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51 
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Se cargaron cloruro de bifenil-4,4'-disulfonilo (2,64 g, 7,5 mmol, recristalizado recientemente en CHCl_{3}) y DCM (200 ml) en un matraz de 500 ml de tres bocas equipado con termómetro, embudo de adición y tubo para nitrógeno. El embudo de adición se cargó con una solución de N-(3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)-(fenilmetoxi)formamida (1,77 g, 5,0 mmol) y DIEA (0,87 ml, 5,0 mmol) en DCM 40 ml). El contenido del matraz se enfrió por debajo de 5ºC. El contenido del embudo de adición se añadió al matraz agitando rápidamente durante 3 h mientras que la temperatura se mantenía por debajo de 5ºC. El embudo de adición se cargó con una solución de éster metílico del ácido N-\beta-Boc-L-\alpha,\beta-diaminopropiónico (2,55 g, 10 mmol) y DIEA (3,8 ml, 22 mmol) en DCM (25 ml). Esta solución se añadió al matraz agitando a 5ºC durante 15 min, y se agitó luego a temperatura ambiente durante 20 h. La solución de reacción se lavó consecutivamente con HCl 0,1 N (100 ml) y agua (2 x 100 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, resultando un aceite viscoso (5,79 g). La cromatografía rápida en columna de 5 x 21 cm sobre gel de sílice (EtOAc/hexanos 85/15) y seguidamente con EtOAc al 100%) dio un sólido amorfo incoloro. La recristalización en tolueno (85 ml) dio el compuesto del título como un sólido incoloro (2,52 g, 59%). p.f. 104,5-106,5ºC. RMN ^{1}H (CDCl_{3}): 8,00-7,90 (m, 4H), 7,72-7,64 (m, 4H), 7,46-7,24 (m, 5H), 5,96-5,88 (m, 1H), 5,86-5,73 (m, 1H), 5,41 (s, 1H), 5,16-5,00 (m, 3H), 4,15-4,02 (m, 1H), 3,68-3,39 (m, 17H), 3,34-3,22 (m, 2H), 3,13-3,03 (m, 2H), 1,80-1,62 (m, 4H), 1,39 (s, 9H). RMN ^{13}C (CDCl_{3}): 170,2, 156,5, 156,1, 143,9, 143,0, 140,4, 139,4, 136,7, 128,0, 127,9, 127,8, 127,3, 80,1, 70,6, 70,5, 70,2, 70,1, 70,0, 69,6, 66,5, 56,1, 52,9, 43,2, 42,4, 39,3, 29,4, 28,5, 28,2. MS: m/e 868,3 [M+NH_{4}]. MS de alta resolución: calc. para C_{39}H_{55}N_{4}O_{13}S_{2} [M+H]: 851,3207; hallado: 851,3226.
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Parte C
Preparación de 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((fenilmetoxi)-carbonilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil-amino)sulfonil)fenil)fenil)sulfonil)amino)-3((1-(3-((1-tri-fenilmetil)imidazol-2-il)aminopropil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-propanoato de metilo 
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52 
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El producto de la parte B (141 mg, 0,166 mmol) se disolvió en TFA/DCM 25/75 (5 ml) y se dejó que reaccionara a temperatura ambiente durante 15 min. Se concentró la solución, obteniéndose un aceite viscoso de color ámbar. Este aceite se disolvió en DMF anhidra (3 ml) y se trató con TEA hasta neutralidad según papel medidor del pH. En un matraz separado, se disolvió en DMF anhidro (3 ml) ácido 1-(3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)-1H-indazol-5-carboxílico (76 mg, 0,141 mmol), TEA (0,059 ml, 0,422 mmol) y HBTU (63,9 mg, 0,169 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5 min, y se combinó con solución en DMF de la desprotección de TFA. La solución se concentró después de 2 h y se obtuvo un aceite viscoso de color ámbar. El aceite se disolvió en EtOAc (175 ml) y se lavó consecutivamente con agua (50 ml), solución saturada de NaHCO_{3} (25 ml) y solución saturada de NaCl (50 ml). Los lavados acuosos combinados se sometieron a retroextracción con EtOAc (50 ml). Las capas de EtOAc combinadas se secaron (MgSO_{4}) y la combinación seca se concentró, obteniéndose un aceite viscoso de color ámbar. La purificación por cromatografía rápida sobre columna de sílice de 2 x 16 cm, usando gradiente en etapas de EtOAc/MeOH (95/5, 93/7, 85/15) dio el compuesto del título como un sólido amarillo pálido de aspecto de espuma (86 mg, 48%). MS: m/e 1273,4 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{66}H_{73}N_{8}O_{13}S_{2} [M+H]: 1273,4738; hallado: 1273,4730.
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Parte D
Preparación de ácido 2-(((4-(4-(((3-(2-2-(3-((fenilmetoxi)-carbonil-amino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-amino)sulfonil)fenil)fenil)sulfonil)amino-3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico 
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53 
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El producto de la parte C (200 mg, 0,159 mmol) se hidrolizó en una mezcla de THF exento de peróxido (8,0 ml), LiOH 3 N (0,80 ml) y agua (1,20 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 3 h. Se eliminó el THF a presión reducida y la solución amarilla resultante se diluyó con agua (15 ml). El pH de la solución se ajustó a 5,0 y se sometió a extracción con DCM (4 x 25 ml). Se combinaron los extractos en DCM y la combinación se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose el compuesto del título como un sólido amarillo (174 mg, 88%). MS: m/e 1246,4 [M+H]. MS de alta resolución. Calculado para C_{66}H_{72}N_{9}O_{12}S_{2} [M+H]: 1246,4741; hallado: 1246,4730.
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Parte E
Preparación de ácido 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-aminopropoxi)etoxi)etoxi)propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino-3-((1-(3-(imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico 
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El producto de la parte D anterior (154 mg, 0,124 mmol) se disolvió en TFA desgaseado (15 ml) y trietilsilano (0,10 ml, 0,626 mmol) y se calentó a 70ºC bajo atmósfera de nitrógeno durante 1,5 h. La solución se concentró y el sólido oleoso resultante se disolvió en agua (75 ml) y se lavó con éter (2 x 20 ml). Los lavados etéreos combinados se sometieron a retroextracción con agua (10 ml). Se combinaron las dos soluciones acuosas y se liofilizó la combinación, obteniéndose el compuesto del título como un sólido blancuzco higroscópico, (140 mg). MS: m/e 870,3 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{39}H_{52}N_{9}O_{10}S_{2} [M+H]: 870,3278; hallado: 870,3301.
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Parte F
Preparación de ácido 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)-amino)-sulfonil)fenil)fenil)-sulfonil)amino-3-((1-(3-(imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico
El producto de la parte E (15 mg, 0,0137 mmol) se disolvió en DMF anhidra (2,5 ml) y se trató con TEA hasta basicidad según papel de pH. La solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))amino)vinil)-bencenosulfónico La DMF se eliminó en vacío y el aceite resultante se disolvió en ACN al 50% y se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 2,52%/min de 0 a 63% de ACN que contenía 1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se recogió el producto del pico principal que eluía a 21,9 min, obteniéndose un polvo incoloro (9,0 mg, 51%). MS: m/e 1173,4 [M+H]. MS de alta resolución; calc para C_{52}H_{61}N_{12}O_{14}S_{3} [M+H]: 1173,3592; hallado: 1173,360.
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Ejemplo 2
Síntesis del ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1,3-bis(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)etil)amino)sulfonil)fenil)-fenil)sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propil)carbamoil)(2-piridil)amino)vinil)bencenosulfónico
55
Parte A
Preparación de N,N'-bis(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((i-carboxi-2-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)etil)amino)sulfonil)fenil)fenilsulfonil)-amino)propoxi)etoxi)etoxi)propil-2-((t-butoxi)carbonilamino)pentano-1,5-diamida
56
El producto del Ejemplo 1, parte D (44 mg, 0,04 mmol) se disolvió en DMF anhidra y se basificó con TEA. La solución se trató con éster de bis-N-hidroxisuccinimda de Boc-Glu-OH (7,9 mg, 0,018 mmol) y se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 18 h. La DMF se eliminó en vacío y el aceite resultante se disolvió en ACN al 50% y se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 2,1%/min de 0 a 63% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se recogió el pico que eluía a 21,1 ml y se liofilizó, resultando el monómero ácido 2-((t-butoxi)carbonilamino)-4-(N-(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)etil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil-amino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)butanoico como un sólido incoloro de una pureza de 82%. Una segunda purificación por HPLC usando el procedimiento anterior dio monómero 100% puro (3,4 mg, 7,0%). MS: m/e 1099,5 [M+H], 550,5 [M+2H].
57
Se recogió el pico principal que eluía a 22,4 min y se liofilió, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (11 mg, 25%). MS: m/e 1952,1 [M+H], 976,9 [M+2H], 651,6 [M+3H]. MS de alta resolución: calc para C_{88}H_{116}N_{19}O_{24}S_{4}: 1950,7323; hallado: 1950,7340.
Parte B
Preparación de ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1,3-bis(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)etil)-amino)sulfonil)fenil)-fenil)sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-propil)carbamoil)(2-piridil)amino)vinil)bencenosulfónico
El producto dímero de la Parte A anterior (11 mg, 0,0050 mmol) se disolvió en TFA desgaseado (2 ml) y se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 15 min y se concentró, resultando un aceite viscoso de color ámbar. Este aceite se disolvió en DMF anhidra (2 ml) y se basificó con TEA. La solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil)-amino)vinil-bencenosulfónico (0,024 mmol) y se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 56 h. La DMF ser eliminó en vacío y el aceite resultante se disolvió en ACN al 50% y se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente a 2,1%/min de 0 a 63% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se recogió el pico principal que eluía a 2'.7 min y se liofilizó, obteniéndose el compuesto del título como un polvo incoloro (5 mg, 42%). MS: m/e 1077,6 [M+2H], 719,0 [M+3H]. MS de alta resolución: calc para C_{96}H_{117}N_{22}O_{26}S_{5}: 2153,7112; hallado: 2153,7140.
Ejemplo 3
Síntesis de ácido 2-((6-((1-aza-2-(sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)-4-(N-3-(2-(2-(3-(((4-4-(((-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)etil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)-amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)carbamoil)butanoico
58
El producto monómero del Ejemplo 2, parte A (3,4 mg, 0,0031 mmol) se disolvió en TFA (1,5 ml) y se dejó que reaccionara a temperatura ambiente durante 15, luego se concentró, resultando un aceite viscoso de color ámbar. Este aceite se disolvió en DMF anhidra (2 ml) y se basificó con TEA. Esta solución se trató con ácido 2-(2-aza-2-((5-((2,5-dioxopirrolidinil)carbonil)(2-piridil))-amino)-vinil)bencenosulfónico (5,3 mg, 0,012 mmol) y se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 7 días. La DMF se eliminó en vacío y el aceite resultante se disolvió en ACN al 50% y se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 cm) usando un gradiente de 2,1%/min de 0 a 63% de ACN que contenía 01% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se recogió el pico principal del producto que eluía a 18,1 min y se liofilizó, obteniéndose el compuesto del título como un polvo incoloro (1,8 mg, 41%). MS:m/e 1302,5 [M+H], 651,9 [M+2H]. MS de alta resolución: calc. para C_{57}H_{68}N_{13}O_{17}S_{3} [M+H] 1302,4018; hallado: 1302,4030.
Ejemplo 4
Síntesis de la sal bis(trifluoroacetato) del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
59
Parte A
2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(((t-butil)oxicarbonil)metil)ciclododecil-acetato de fenilmetilo
Una solución de (1,4,7,10-tetraaza-4,7-bis(((t-butil)oxicarbonil)metil)-ciclododecil)acetato de t-butilo (0,922 g, 1,79 mmol), TEA (1,8 ml) y bromoacetato de bencilo (0,86 ml, 5,37 mmol) en DMF anhidra (24 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 24 h. Se eliminó la DMF en vacío y el aceite resultante se disolvió en EtOAc (300 ml). Esta solución se lavó consecutivamente con agua (2 x 50 ml) y solución saturada de NaCl (50 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose el compuesto del título como un sólido amorfo (1,26 g). MS: m/e 663,5 [M+H].
60
Parte B
Ácido 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(((t-butil)oxicarbonil)metil)-ciclododecil)acético
El producto de la parte A (165 mg, 0,25 mmol) se hidrógeno sobre Pd al 10% sobre carbón (50 mg) en EtOH (15 ml) a 413 kPa durante 24 h. Se eliminó el catalizador por filtración y se lavó con EtOH. Se concentró el filtrado, obteniéndose el compuesto del título como un sólido amorfo (134 mg, 94%). MS: m/e 573,5 [M+H].
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Parte C
Preparación del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)-ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)amino)sulfonil)fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
62
Una solución de ácido (2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(((tbutil)-oxicarbonil)metil)ciclododecil)acético (55 mg, 0,06 mmol), DIEA (0,063 ml, 0,36 mmol) y HBTU (17 mg, 0,045 mmol) en DMF anhidra (3 ml) se agitó bajo nitrógeno a temperatura ambiente durante 15 min y se trató con el producto del Ejemplo 1, parte E. Se continuó agitando durante 1 h y la DMF se eliminó en vacío. El aceite de color ámbar resultante se disolvió en ACN al 10% y se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 2,1%/min de 0 a 63% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se recogió el pico principal de producto que eluía a 23,0 min y se liofilizó, obteniéndose el compuesto del título como un sólido higroscópico incoloro (22 mg, 37%). MS: m/e 1424,8 [M+H], 713,2 [M+2H].
Parte D
Preparación de la sal bis(trifluoroacetato) del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
El producto de la parte C (10 mg, 0,005 mmol) y trietilsilano (0,10 ml) se disolvieron en TFA desgaseado (2,0 ml) y se calentó a 50ºC bajo nitrógeno durante 1 h. La solución se concentró en vacío y el sólido resultante se disolvió en ACN al 7% y se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 1,5%/min de 0 a 45% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se recogió el pico principal del producto que eluía a 19,3 min y se liofilizó, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (3,0 mg, 40%). MS: m/e 1256,5 [M+H], 629,0 [M+2H], 419,9 [M+3H].
\newpage
Seguidamente se describen los procedimientos de HPLC utilizados en los Ejemplos 5 y 6:
Instrumento:
HP1050
Columna:
C-18 (Vydac (4,6 x 250 mm)
Detector:
Detector de conjunto de diodo
Caudal:
1,0 ml/min
Temp. de la columna:
50ºC
Tamaño de la muestra.
15 ul
Fase móvil:
A: 0,1% de TFA en agua
\quad
B: 0,1% de TFA en ACN/agua (9:1)
\vskip1.000000\baselineskip
\quad
Procedimiento A
\hskip0.15cm
63 
\vskip1.000000\baselineskip
\quad
Procedimiento B
\hskip0.15cm
64 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 5
Síntesis del ácido 2-(6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)hexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)(1H-indazol-5-il)-carbonilamino)-propanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
65 
\newpage
Parte A
Preparación de 2-((fenilmetoxi)-carbonilamino-3-((1-(3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
66 
\vskip1.000000\baselineskip
Se disolvió en N,N-dimetilformamida (10 ml) 1-[3-[N-(-trifenilmetilimidazo-2-il)amino]propil]-5-carboindazol (0,950 g, 1,80 mmol), HBTU (0,751 g, 1,98 mmol) y 3-amino-2(S)-(benciloxicarbonilamino)propionato de metilo (0,624 g, 2,16 mmol). Se añadió diisopropiletilamina (94,1 \mul, 5,40 mmol) y la mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró luego en alto vacío, resultando un aceite. El aceite se recogió en agua. La capa acuosa se sometió a extracción con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato magnésico, se filtró y se concentró a pequeño volumen. El producto precipitó al añadir hexano. El producto se filtró, se lavó con hexano y se secó en alto vacío, obteniéndose 1,6128 g (117%) de producto. ESMS: HPLC analítica, procedimiento A: Rt = 17,00 min, pureza = 90%.
\vskip1.000000\baselineskip
Parte B
Preparación de ácido 2-((fenilmetoxi)carbonilamino-3-((1-(3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
67 
\vskip1.000000\baselineskip
Se disolvió 2-((fenilmetoxi)-carbonilamino-3-((1-(3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoato de metilo (1,55 g, 2,03 mmol) en tetrahidrofurano (20 ml). Se disolvió en agua hidróxido de litio monohidratado (1,71 g, 40,6 mmol) y se añadió a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó durante la noche bajo nitrógeno durante 18 h. El tetrahidrofurano se eliminó en alto vacío. El pH de la capa acuosa remanente se ajustó a 5 con HCl 1N. La capa acuosa se sometió a extracción con cloruro de metileno. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato magnésico y se concentró en alto vacío, resultando un aceite. El aceite se recristalizó en hexano:acetato de etilo, obteniéndose 800,9 mg (53%) de producto. ESMS: calc. para C_{44}H_{41}N_{7}O_{5}, 747,32; hallado, 748,3 [M+H]+1
HPLC analítica, Proced. A, Rt = 15,66 min, pureza 94%.
\newpage
Parte C
Preparación de ácido 2-amino-3-((1-(3-((1-trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico
68
Se añadió ácido 2-((fenilmetoxi)-carbonilamino-3-((1-(3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico (0,750 g, 1,00 mmol) a Pd/C (1,00 g) en etanol (20 ml). La mezcla de reacción se evacuó y se purgó dos veces con nitrógeno. La mezcla de reacción se evacuó luego y se purgó dos veces con hidrógeno, y luego se mantuvo en atmósfera de hidrógeno durante 24 h. La mezcla de reación se filtró a través de celita. Se concentró el filtrado, resultando un aceite. El aceite se recristalizó en hexano:acetato de etilo, obteniéndose 215,3 mg (35%) de producto. ESMS: calc para C_{36}H_{35}N_{7}O_{3}, 613,28; hallado, 614,2 [M+H]+1. HPLC analítica: Proced. A, Rt = 12,26 min, pureza = 90%.
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Parte D
Preparación del ácido 2-amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico
69
Se disolvió en ácido trifluoroacético (3 ml) ácido 2-amino-3-((1-(3-((1-trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico (0,203 g, 0,331 mmol) y la mezcla de reacción se mantuvo a reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró en alto vacío, resultando un aceite. El aceite se trituró con éter. El producto se filtró, se lavó con éter, se disolvió en acetonitilo/agua 50/50 y se liofilizó, obteniéndose 171,0 mg (106%) de producto. ESMS: calc. para C_{17}H_{21}N_{7}O_{3}, 371,17; hallado, 372,0 [M+H]+1.
HPLC analítica, proced. B, Rt = 9,48 min, pureza = 95%.
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Parte E
Preparación de ácido 2-(6-((t-butoxi)carbonilamino)hexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)(1H-indazol-5-il)-carbonilamino)-propanoico
70
Se disolvió ácido 2-amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)-(1H-indazol-5-il)(carbonilamino)propanoico (0,050 g, 0,103 mmol) en N,N-dimerilformamida (2 ml). Se añadió trietilamina (43,1 \mul, 0,309 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5 min. Se formó un precipitado, por lo que se añadió metilsulfóxido (1 ml). Se añadió N-Boc-6-aminohexanoato de succinilo (0,0406 g, 0,124 mmol) y la mezcla de reacción se agitó bajo N_{2} durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró luego en alto vacío, resultando un aceite. El aceite se purificó por el procedimiento siguiente (HPLC, proced. A), obteniéndose 39,9 mg (66%) de producto. HPLC preparativa, proced. B Rt = 18,72 min; pureza = 98%). HPLC preparativa, proced. A:
Instrumento:
Rainin Rabbit, sofware Dynamax
Columna:
C-18 Vydac (21,2 mm x 25 cm)
Detector:
Knauer VWM
Caudal:
15 ml/min
Temperatura de columna:
temperatura ambiente
Fase móvil:
A: 0,1% de TFA en agua
\quad
B: 0,1% de TFA en ACN/H_{2}O (9:1)
71 
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Parte F
Preparación de ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico 
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72 
\vskip1.000000\baselineskip
Se disolvió en cloruro de metileno (1 ml) ácido 2-(6-((t-butoxi)carbonilamino)hexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)(1H-indazol-5-il)-carbonilamino)-propanoico (0,0322 g, 0,0551 mmol). Se añadió ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h. Se concentró en alto vacío la mezcla de reacción, obteniéndose un aceite. El aceite se trituró con éter. El producto se filtró, se lavó con éter, se disolvió en acetonitrilo/agua 50/50 y se liofilizó, obteniéndose 29,8 mg (91%) de producto. ESMS: calc. para C_{23}H_{32}N_{8}O_{4}, 464,25; hallado, 485,2 [M+H]+1, HPLC analítica, proced. B, Rt =111,02 min, pureza = 97%.
\newpage
Parte G
Preparación de ácido 2-(6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)hexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)(1H-indazol-5-il)-carbonilamino)-propanoico 
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73 
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Se disolvió en N,N-dimetilformamida (2 ml) el ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)-propil)(1H-indazol-5-il)-carbonil-amino)propanoico (0,0265 g, 0,0443 mmol). Se añadió trietilamina (18,5 \mul, 0,133 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5 min. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]-metil]-bencenosulfónico (0,0234 g, 0,0532 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 4 días. La mezcla de reacción se concentró en alto vacío y se obtuvo un aceite. El aceite se purificó por HPLC preparativa, procedimiento A, obteniéndose 33,7 mg (97%) de producto. HRMS: calc. para C_{36}H_{41}N_{11}O_{8}S+H: 788,2938; hallado: 788,2955. HPLC preparativas, procedimiento B, Rt = 14,06 min, pureza
= 90%.
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Ejemplo 6
Síntesis de ácido 2-(6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)-carbonil-amino)-propanoico 
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74 
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Se disolvió en N,N-dimetilformamida (2 ml) ácido 2-amino-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)-carbonil-amino)propanoico (0,025 g, 0,0515 mmol). Se añadió trietilamina (21,5 \mul, 0,154 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5 min. Se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]-metil]-bencenosulfónico (0,0272 g, 0,0515 mmol) y la mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró a alto vacío, resultando un aceite. El aceite se purificó por HPLC preparativa usando el procedimiento A, obteniéndose 14,6 mg (42%) del producto deseado. ESMS: calc. para C_{30}H_{30}N_{10}O_{7}S, 674,20; hallado: 697,1 [M+Na]+1. HPLC, proced. B, Rt = 13,48, pureza =95%.
\newpage
Ejemplo 7
Síntesis de [ácido 2-[[[5-[carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]benceno sulfónico]-Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico)(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-aminopropanoico) 
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75 
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Parte A
Preparación de Boc-Glu(Osu)-Osu 
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76 
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A una solución de Boc-Glu-OH (8,0 g, 32,25 mmol), N-hidroxisuccinimida (8,94 g, 77,69 mmol) y DMF (120 ml) se añadió 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (14,88 g, 77,64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. La mezcla se concentró en alto vacío y el residuo se recogió en HCl 0,1 N y se sometió a extracción con acetato de etilo (3 x). La combinación de los extractos orgánicos se lavó con agua, solución saturada de bicarbonato sódico, y luego con solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4} y se filtró. El filtrado se concentró en vacío y se purificó por HPLC en fase inversa (columna C-18 Vydac, gradiente de 18 a 90% de acetonitrilo que contenía 0,1% de TFA, Rt = 9,413 min), obteniéndose 8,5 g (60%) del producto deseado como un polvo blanco. RMN ^{1}H (CDCl_{3}): 2,98-2,70 (m, 11H), 2,65-2,25 (m, 2H), 1,55-1,40 (s, 9H). ESMS: calc. Para C_{18}H_{23}N_{3}O_{10}: 441,1383; hallado: 459,2 [M+NH_{4}]+1.
\newpage
Parte B
Preparación de Glu-{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)) carbonilamino)propanoico}{ácido 2-(6-aminohexa-noillamino)-3-((1-3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico] 
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77 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)
(carbonilamino)propanoico (1 mmol), diisopropiletil-amina (3 mmol) y Boc-Glu(OSu)OSu (0,5 mmol) se disolvió en DMF (50 ml). La mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno y a temperatura ambiente durante 18 h. Los disolventes se eliminaron en vacío y el material en bruto se trituró con acetato de etilo, se filtró y se lavó con acetato de etilo. El producto en bruto así obtenido se disolvió en 50 ml de TFA/DCM al 50% y la mezcla de reacción se agitó durante 3 h a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se eliminaron TFA y DCM en vacío y el compuesto del título se aisló y purificó por RP-HPLC preparativa.
\vskip1.000000\baselineskip
Parte C
Preparación de [ácido 2-[[[5-[carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]benceno sulfónico]-Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico)(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico)
Se disolvió en DMF (2 ml) Glu-(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico){ácido 2-(6-amino-hexanoillamino)-3-((1-3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))-carbonilamino)-propanoico) (0,0481 mmol). Se añadió trietilamina (20,1 \mul, 0,144 mmol) y, después de 5 min de agitación, se añadió las sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]-metil]-benceno-sulfónico (0,0254 g, 0,0577 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 20 h y luego se concentró en alto vacío, resultando un aceite. El aceite se purificó por RP-HPLC, obteniéndose el compuesto
deseado.
\newpage
Ejemplo 8
Síntesis de [ácido 2-[[[5-[carbonil]-2-piridinil]-hidrazono]metil]bencenosulfónico]-Glu-bis[Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico)(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)-carbonil-amino)propanoico) 
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78 
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Parte A
Preparación de Glu-bis[Glu{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico}{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico 
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79 
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Una solución de Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico)(ácido 2-(6-amino-hexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico (1 mmol), diisopropiletilamina (3 mmol) y Boc-Glu(OSu)OSu (0,5 mmol) se disolvió en DMF (50 ml). La mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno a temperatura ambiente durante 18 h. Los disolventes se eliminaron en vacío y el material en bruto se trituró en acetato de etilo, se filtró y se lavó con acetato de etilo. El producto en bruto así obtenido se disolvió en 50 ml de TFA/DCM 50/50 y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h bajo nitrógeno. TFA y DCM se eliminaron en vacío y el compuesto del título se aisló y purificó por RP-HPLC preparativa.
\newpage
Parte B
Preparación de [ácido 2-[[[5-[carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencenosulfónico]-Glu-bis-[Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)(2-(6-amino-hexanoil-amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico]
Se disolvió en DMF (2 ml) Glu-bis-[Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico}(2-(6-aminohexanoil-amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)-(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico}] (0,0481 mmol). Se añadió trietilanmina (20,1 \mul, 0,144 mmol) y, después de agitar durante 5 min, se añadió la sal monosódica del ácido 2-[[[5-[[(2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]bencenosulfónico (0,0254 g, 0,0577 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 20 h y luego se concentró en alto vacío, obteniéndose un aceite. El aceite se purificó por RP-HPLC preparativa para obtener el producto deseado.
Ejemplo 9
Síntesis de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetiil)-1-ciclododecil)acetil-(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)-(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico)
80
Parte A
Preparación de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(t-butoxicarbonilmetil)-1-ciclododecil)acetil-{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)-(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico}
81
A una solución de ácido tris(t-butil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7,10-tetraacético (28 mg, 0,049 mmol) y base de Hunig (14 \mul) en DMF (2 ml) se añade HBTU (17 \mul, 0,0456 mmol) y la mezcla se agita durante 5 min. A esta mezcla se añade una solución de ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazo-5-il)carbonil-amino)propanoico (0,0326 mmol) en DMF (1 ml) y la mezcla se deja en agitación a temperatura ambiente durante 4 h. Se elimina el disolvente en vacío y el residuo se purifica por RP-HPLC preparativa, obteniéndose el producto como un sólido liofilizado.
Parte B
Preparación de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)acetil-({ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)-(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)
Una solución de ácido 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(t-butoxicarbonilmetil)-1-ciclododecil)acetil-2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)-(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico (8,71 mmol) en TFA (3 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 5 h. La solución se concentró en vacío y el residuo se purificó por RP-HPLC preparativa para obtener el producto deseado liofilizado.
\newpage
Ejemplo 10
Síntesis de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)acetil-Glu{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3((1-(3-(imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico}{ácido 2-(6-aminohexanoil amino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico
82
Parte A
Preparación de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(butoxicarbonilmetil)-1-ciclododecil)acetil-Glu{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3((1-(3-(imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico}{ácido 2-(6-amino-hexano-il-amino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propanoico
83
A una solución de ácido tris(t-butil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7,10 tetraacético (28 mg, 0,049 mmol) y base de Hunig (14 \mul) en DMF (2 ml) se añade HBTU (17 mg, 0,0456 mmol) y la mezcla se agita durante 5 min. A esta solución se añade una solución de Glu{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico}[ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-aminopropanoico} (0,0326 mmol) en DMF (1 ml) y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 4 h. Se elimina el disolvente en vacío y el residuo se purifica por RP-HPLC preparativa para obtener el producto como sólido liofilizado.
Parte B
Preparación de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)acetil-Glu{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico}{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico
Una solución de 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(butoxicarbonilmetil)-1-ciclododecil)acetil-Glu{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico}{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico (8,71 mml) en TFA (3 ml) se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 5 h. La solución se concentra en vacío y el residuo se purifica por RPHPLC preparativa para obtener el producto deseado como un sólido liofilizado.
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Ejemplo 11
Síntesis de DOTA/sal conjugada tris(trifluoroacetato de N,N'-bis(3-(2-(2-(3-(((9-4-(((1-carboxi-2-((1-3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))-carbonilamino)etil)amino)sulfonil)fenil)fenil)-sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)-propil)-2-(amino)pentano-1,5-diamida 
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84 
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Parte A
Preparación de DOTA éster de tris-t-butilo/sal conjugada hexaquis(trifluoroacetato) de N,N'-bis(3-(2-(2-(3-(((4-4-(((1-carboxi-2-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))-carbonil-amino)etil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)-sulfonil)amino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)-2-(amino)pentano-1,5-diamida
Una solución del producto del Ejemplo 2, Parte A, en TFA desgaseado se deja en reposo a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 15 min. Se concentra la solución y el aceite resultante se disuelve en ACN al 50%. La sal de TFA se convierte en base libre por tratamiento con una resina de intercambio iónico tal como Bio-Rad AG-3X4A, en forma de hidróxido, hasta que el pH de la solución suba a 6,5. La resina se elimina por filtración y se liofiliza el filtrado, obteniéndose la base libre del dímero desprotegido.
Una solución de éster de tris-t-butilo de DOTA y DIEA en DMF anhidra se trata con HBTU y se deja que reaccione durante 15 min a temperatura ambiente bajo nitrógeno. El dímero desprotegido anterior se añade a esta solución y se continúa la agitación durante 18 h a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se elimina en vacío la DMF y el aceite resultante se purifica por HPLC preparativa sobre una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. Se liofiliza la fracción de producto, obteniéndose el compuesto del título.
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Parte B
Preparación de DOTA/sal conjugada tris(trifluoroacetato) de N,N'-bis(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))-carbonilamino)etil)amino)sulfonil)fenil)fenil)sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)-propil)-2-(amino)pentano-1,5-diamida
Se disuelven en TFA desgaseado el producto de la Parte A y Et_{3}SiH y se calienta a 50ºC bajo nitrógeno durante 1 h. Se concentra la solución y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. Se liofiliza la fracción de producto para obtener el compuesto del título.
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Ejemplo 12
Síntesis de DOTA/sal bis(trifluoroacetato del ácido 2-amino-4-(N-(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-1-carboxi-3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)etil)amino)sulfonil)fenil)fenil)-sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)carbamoil)butanoico
85
El compuesto del título se prepara por el procedimiento descrito en el Ejemplo 11 sustituyendo el producto monómero del Ejemplo 2, Parte A por el producto dímero del Ejemplo 2, Parte A.
Ejemplo 13
Síntesis de DOTA/sal conjugada bis(trifluoroacetato del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-amino-3-sulfopropil)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino)-3-((1-3-(imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico
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Parte A
4-(3,5-dimetilfenoxi)butanoato de etilo
Se añadió sodio metal (17,12 g, 0,744 mmol) a EtOH anhidro (350 ml) y se agitó hasta que se disolvió. Se añadió 3,5-dimetilfenol y la solución se agitó durante 15 min a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 28 h. El EtOH se eliminó en vacío y el sólido oleoso se repartió entre agua (1 l) y EtOAc (500 ml). La capa acuosa se sometió a extracción con más EtOAc (500 ml). Se combinaron los extractos en EtOAc y la combinación se lavó consecutivamente con solución saturada de NaHCO_{3} (300 ml) y solución saturada de NaCl (300 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, resultando un líquido de color ámbar. Este líquido se sometió a destilación fraccionada en vacío en una columna Vigreux de 15 cm. Se recogió la fracción principal de 91-117ºC/6 mm de Hg, obteniéndose el compuesto del título como un líquido incoloro (77,77 g, 89%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): 6,59 (s, 1H), 6,52 (s, 2H), 4,16 (q, J = 7,16 Hz, 2H), 3,98 (t, J = 6,14, 2H), 2,49 (t, J = 7,34 Hz, 2H), 2,28 (s, 6H), 2,11-2,07 (m, 2H), 1,26 (t, J = 7,16 Hz). Análisis calc. para C_{14}H_{20}O_{3}: C 71,16; H 8,53; hallado: C 71,35; H 8,59.
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Parte B
Ácido 4-(3,5-dimetilfenoxi)butanoico
El producto de la anterior Parte A (75,52 g, 0,320 mol) y pellas de KOH (38,5 g, 0,584 mol) se disolvieron en EtOH absoluto (1,50 l) y la solución se mantuvo a reflujo durante 3 h. La solución se concentró a un sólido incoloro, que se recogió en agua (2,0 l) y se lavó con éter (2 x 750 ml). El pH de la capa acuosa se ajustó a 1 con HCl conc. (55 ml) y el precipitado oleoso resultante se sometió a extracción con EtOAc (2 x 500 ml). La combinación de los extractos en EtOAc se lavó consecutivamente con agua (300 ml) y solución saturada de NaCl, se secó (MgSO_{4}) y se concentró, resultando un sólido incoloro (64,13 g). La recristalización en hexanos (500 ml) dio el compuesto del título como un sólido incoloro (59,51 g, 89%). p.f. 66-68,5ºC. RMN ^{1}H (CDCl_{3}): 11,70 (s anc, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,52 (s, 2H), 3,99 (t, J = 6,06 Hz, 2H), 2,57 (t, J = 7,29 Hxz, 2H), 2,28 (s, 6H), 2,12-2,08 (m, 2H). Análisis calc. para C_{12}H_{16}O_{3}: C 69,21; H 7,74; hallado: C 69,23; H 7,40.
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Parte C
Ácido 4-(4-clorosulfonil)-3,5-dimetilfenoxi)butanoico
Una solución del producto de la Parte B (20,8 g, 0,100 mol) en CHCl_{3} (100 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido clorosulfónico (36 ml, 0,54 mol) a gotas y con una fuerte agitación mientras que la temperatura de la mezcla de reacción se mantenía a 0ºC. La mezcla gelatinosa resultante se agitó durante 10 min más y se vertió en una mezcla hielo/agua (600 ml). El precipitado sólido resultante se recogió por filtración, se lavó con agua (3 x 75 ml) y se secó en vacío, obteniéndose un sólido incoloro (12,52 g). p.f. 114-115ºC (con descomposición). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): 13,84 (s anc, 1H), 6,50 (s, 2H), 3,91 (t, J = 6,48 Hz, 2H), 2,48 (s, 6H), 2,32 (t, J = 7,32 Hz), 1,89-1,84 (m, 2H). IR (KBr cm^{-1}): 1705 (s), 1370 (s), 1175 (s). MS: m/e 305,1 [M+H].
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Parte D
Ácido 4-(4-(((2-(((t-butoxi)carbonilamino)-1-(metoxicarbonil)etil)amino)-sulfonil-3,5-dimretilfenoxi)butanoico
Una solución de hidrocloruro del éster metílico del ácido N-\beta-Boc-L-\alpha,\beta-diaminopropiónico (568 mg, 2,10 mmol) y DIEA (0.73 ml, 4,2 mmol) en DCM (5 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con una suspensión del producto de la Parte C (656 mg, 2,10 mmol) en DCM en porciones durante un período de 15 min. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (100 ml) y se lavó con agua (3 x 75 ml). La fase orgánica se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (50 x 250 mm) usando un gradiente de 0,96%/min de 18 a 58% de ACN que contenía 0,1% de TFA y a un caudal de 80 ml/min. Se recogió la fracción de producto principal que eluía a 23,8 min, se ajustó el pH a 3, se concentró parcialmente para eliminar ACN y se sometió a extracción con DCM (2 x 100 ml). Los extractos de DCM se secaron (MgSO_{4}) y concentraron, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (297 mg, 29%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 6,61 (s, 2H), 5,66 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,03 (s anc, 2H), 3,86 (s anc, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,49 (s anc, 2H), 2,62 (s, 6H), 2,58-2,51 (m, 2H), 2,18-2,07 (m, 2H), 1,41 (s, 9H). MS: m/e 489,4 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{21}H_{33}N_{2}O_{9}S [M+Na]: 511,1726; hallado: 511,1747. Análisis calc. para C_{21}H_{32}N_{2}O_{9}S: C 51,62; H 6,61; N 5,74; hallado: C 51,47; H 6,27; N 5,48.
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Parte E
3-((t-butoxi)carbonilamino)-2-(((2,6-dimetil-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((fenil-metoxi)carbonilamino)propoxi)etoxi-etoxi)propil)carbamoil)propoxi)fenil)-sulfonil)-amino)propanoato de metilo
Una solución del producto de la Parte D (233 mg, 0,477 mmol), el producto del Ejemplo 1, Parte A (190 mg, 0,536 mmol), TEA (0,2 ml, 1,43 mmol) y HBTU (226 mg, 0,701 mmol) en DMF anhidra (8 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno durante 1 h. La DMF se eliminó en vacío y el residuo oleoso se recogió en EtOAc (50 ml) y se lavó consecutivamente con HCl 0,1 N (35 ml), agua (35 ml) y solución saturada de NaCl (35 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, resultando un aceite amarillo viscoso. La cromatografía rápida sobre una columna de 3 x 18 cm de gel de sílice (EtOAc/MeOH, 95/5) dio el compuesto del título como un aceite incoloro viscoso (393 mg, 100%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,34-7,28 (m, 5H), 6,60 (s, 2H), 6,26 (s anc, 1H), 5,67 (s anc, 1H), 5,29 (s anc, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,88 (s anc, 1H), 3,99 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,88-3,84 (m, 1H), 3,62-3,40 (m, 17H), 3,37-3,26 (m, 4H), 2,62 (s, 6H), 2,32 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,08 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 1,79-1,70 (m, 4H), 1,41 (s, 9H). MS: m/e 825,5 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{39}H_{61}N_{4}O_{13}S [M+H]: 825,3955; hallado: 825,3940.
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Parte F
3-amino-2-(((2,6-dimetil-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((fenilmetoxi)carbonilamino)-propoxi)etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)propoxi)fenil)-sulfonil)amino)propanoato de metilo
El producto de la Parte E (750 mg, 0,91 mmol) se disolvió en HCl 4 M/dioxano (25 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La solución se diluyó con éter (500 ml) y el precipitado gomoso resultante se trituró con éter fresco (2 x 250 ml). El sólido gomoso se disolvió en agua (100 ml) y el pH se ajustó a 9 con NaHCO_{3}, lo que causó que se formara un precipitado oleoso. Este precipitado se sometió a extracción con DCM (2 x 75 ml). Los extractos en DCM se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron, obteniéndose el compuesto del título como un aceite incoloro (386 mg, 56%). MS: m/e 725,5 [M+H].
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Parte G
Preparación de 2-(((2,6-dimetil-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((fenilmetoxi)-carbonilamino)propoxi)etoxi)-etoxi)propil) carbamoil)propoxi)fenil)sulfonil)amino-3-((1-3-((1-(trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-propionato de metilo 
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Una solución de ácido 1-(3-((1-trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)-1H-indazol-5-carboxílico, 3-amino-2-(((2,6-dimetil-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((fenilmetoxi)-carbonilamino)-propoxi)etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)propoxi)fenil)-sulfonil)amino)-propanoato de metilo, DIEA y HBTU en DMF anhidra se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 4 h. La DMF se eliminó en vacío y el residuo resultante se disolvió en EtOAc y se lavó con agua, solución saturada de NaHCO_{3} y solución saturada de NaCl. La capa de EtOAc se secó (MgSO_{4}) y se concentró a sequedad. El producto en bruto se purificó por cromatografía rápida sobre gel de sílice usando EtOAc/MeOH.
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Parte H
Preparación de la sal trifluoroacetato del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-((t-butoxi)carbonilamino)-3-sulfopropil)propoxi)etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)-propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)amino)-3-((1-3-((1-(3-(imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico 
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El producto de la Parte G se hidrolizó en una mezcla de THF exento de peróxido, agua y LiOH 3 N a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 6 h. El THF se eliminó en vacío y la mezcla resultante se diluyó con agua y el pH se ajustó a 3 usando HCl 1 N. La mezcla se sometió a extracción con EtOAc y la combinación de los extractos se secó (MgSO_{4}) y se concentró.
Una solución del producto de hidrólisis del producto anterior y Et_{3}SiH en TFA desgaseado se calentó a 70ºC bajo nitrógeno durante 1 h. Se concentró la solución y el residuo resultante se disolvió en ACN al 50%. La sal de TFA se convierte en la base libre por tratamiento con una resina de intercambio iónico tal como BioRad AG-3XA, forma de hidróxido, hasta que el pH de la solución se aumenta a 6,5. La resina se elimina por filtración y el filtrado se liofiliza, obteniéndose la base libre.
El material anterior se disuelve en DMF anhidra y se trata con éster de N-hidroxisuccinimida del ácido Boc-cisteico (como se describe en Liebigs Ann. Chem., 1979, 776-783) y DIEA. La solución se agita a temparatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h y la DMF se elimina en vacío. El residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. La fracción producto se liofiliza para obtener el compuesto del título.
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Parte I
Preparación del conjugado de éster de tri-t-butilo DOTA/conjugado de sal pentaquis (trifluoroacetato) del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-amino-3-sulfopropil)-propoxi)etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)amino)-3-((1-3-(3-(imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)-propiónico 
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El producto de la Parte H se disolvió en TFA desgaseado y se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La solución se concentró en vacío y el residuo resultante se disolvió en ACN al 50% y se liofilizó para eliminar los últimos rastros de TFA.
En un matraz separado se trató con HBTU una solución de éster de tris-t-butilo de DOTA y DIEA en DMF anhidra y se dejó que reaccionaran durante 15 min a temperatura ambiente bajo nitrógeno. El producto de la reacción anterior desprotegido se añade a esta solución y se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. La DMF se elimina en vacío y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. El producto se liofiliza para obtener el compuesto del título.
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Parte J
Preparación de DOTA/sal conjugada bis(trifluoroacetato del ácido 2-(((4-(3-(N-3-(2-(2-(3-(2-amino-3-sulfopropil)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino)-3-((1-3-(imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico
Se disuelven el producto de la Parte I y Et_{3}SiH en TFA desgaseado y se calienta la solución a 50ºC bajo nitrógeno durante 1 h. Se concentra la solución y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. El producto se liofiliza para obtener el compuesto del título.
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Ejemplo 14
Síntesis de DOTA/sal conjugada trifluoroacetato del ácido 2-(((4-(3-(N-3-(2-(2-(3-(2-amino-3-(4-fosfonooxi)fenil)propanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi))-propil)carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino)-3-((1-3-(imidazol-2-il)-amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico 
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El compuesto del título se prepara por el procedimiento descrito en el Ejemplo 13 sustituyendo con Boc-Tyr(PO_{3}H_{2})-OSu el Boc-Cys(O_{3}H)-OSu.
Ejemplo 15
Síntesis de conjugado de DOTA/sal trifluoroacetato del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-amino-3-(4-(sulfooxi)fenil)propanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)carbamoil)-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino)-3-((1-3-(imidazol-2-il)-amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico
El compuesto del título se prepara por el procedimiento descrito en el Ejemplo 13 utilizando Boc-Tyr(SO3H)-OSu en vez de Boc-Cys(O_{3}H)OSu
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Ejemplo 16
Síntesis de conjugado de DOTA/ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-amino-4-(N-(etil-3,6-O-disulfo-\beta-D-galactopiranosil)carbamoil)-butanoilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino)-3-((1-3-(imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico
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Parte A
Preparación de Boc-Glu(aminoetil-3,6-O-disulfo-\beta-D-galactopiranosil)-OSu
Una solución de Boc-Glu-Ome, aminoetil-3,6-O-disulfo-D-galactopiranósido (según se describe en Tet. Lett. 1997, 53, 11937-11952), DIEA y HBTU en DMF anhidra se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. Se eliminó en vacío la DMF y el residuo resultante se hidrolizó usando NaOH acuoso. La solución de reacción se ajusto a pH 7 y se purificó por cromatografía de intercambio preparativa usando una resina tal como DEAE Cellulose y un gradiente de Et_{3}NH_{2}CO_{3}. La fracción producto se trató con una resina de intercambio catiónico, forma sódica, para obtener el intermedio ácido carboxílico como sal sódica.
Se disuelve el compuesto anterior, junto con N-hidroxisuccinimida y DCC, en DMF anhidra y se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 horas. La DMF se elimina en vacío y el residuo resultante se purifica por cromatografía preparativa de intercambio aniónico, obteniéndose el compuesto del título como la sal de trietilamonio.
Parte B
Preparación de conjugado de DOTA/ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-amino-4-(N-(etil-3,6-O-disulfo-\beta-D-galactopiranosil)carbamoil)-butanoilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)propoxi-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino)-3-((1-(3-(imidazol-2-il)amino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propiónico
El compuesto del título se prepara por el procedimiento descrito en el Ejemplo 13 empleando Boc-Glu(aminoetil-3,6-O-disulfo-\beta-D-galactopiranosil)-OSu en vez de Boc-Cys-(O_{3}H)-OSu.
Ejemplo 17
Síntesis de conjugado de DOTA/bis(trifluoroacetato) del ácido 2-(((4-(3-(N-3-(2-(2-amino-4-(N-(6-desoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)butanoilamino)propoxi)etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propiónico 
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Parte A
Preparación de Boc-Glu(6-amino-6-desoxi-\beta-ciclodextril)-OMe
Una solución de Boc-Glu-Ome, 6-amino-6-desoxi-\beta-ciclodextrina (según se describe en J. Org. Chem. 1996, 61, 903-908), DIEA y HBTU en DMF anhidra se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. La DMF se elimina en vacío y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. La fracción de producto se liofiliza para obtener el compuesto del título.
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Parte B
Preparación de Boc-Glu(6-amino-6-desoxi-\beta-ciclodextril)-OSu
El producto de la Parte A se hidroliza en una mezcla de LiOH, THF y agua a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 4 h. Se elimina el THF en vacío y la mezcla resultante se diluye con agua y se ajusta su pH a 3 usando HCl 0,1 N. La mezcla se somete a extracción con EtOAc, se combinan los extractos y la combinación se seca (MgSO_{4}) y se concentra. El material resultante se disuelve en DMF anhidra junto con N-hidroxisuccinimida y DCC, y se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. Se elimina la DMF en vacío y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. Se liofiliza la fracción de producto, obteniéndose el compuesto del título.
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Parte C
Preparación conjugado de DOTA/bis(trifluoroacetato) del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-2-(2-amino-4-(N-(6-desoxi-\beta-ciclodextril)carbamoil)butanoilamino)propoxi)-etoxi)-etoxi)propil)carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propiónico
El compuesto del título se prepara por el procedimiento descrito en el Ejemplo 13 empleando Boc-Glu(6-amino-6-desoxi-\beta-ciclodextril)-Osu por Boc-Cys(O_{3}H)-OSu.
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Ejemplo 18
Síntesis de conjugado de DOTA/bis(trifluoroacetato) del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-2-(2-amino-4-(N-(\omega-metoxipolietilen(5.000)glicoxietil)carbamoil)butanoil-amino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propiónico 
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100 
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Parte A
Preparación de Boc-Glu(amino-\omega-metoxipolietilenglicol)-OMe
Se agita a temperatura ambiente bajo N_{2} durante 18 h una solución de Boc-Glu-OMe, amino-\omega-metoxipolietilenglicol (PM = 5.000), DIEA y HBTU en DMF anhidra. La DMF se elimina en vacío y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN.1% de TFA. La fracción del producto se liofiliza para obtener el compuesto del título.
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Parte B
Preparación de Boc-Glu(amino-\omega-metoxipolietilenglicol)-OSu
El producto de la Parte A anterior se hidroliza agitando en una mezcla de LiOH, THF y agua a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 4 h. Se elimina el THF en vacío y la mezcla resultante se diluye con agua y se ajusta su pH a 7 usando HCl 0,1 N. La solución se desala usando una columna de desalación Sephadex PD-10 y se liofiliza el producto que eluye. El material resultante se disuelve en DMF anhidra junto con N-hidroxisuccinimida y DCC y se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. Se elimina la DMF en vacío y el residuo resultante se purifica por HPLC preparativa en una columna C-18 usando un gradiente de agua:ACN:0,1% de TFA. Se liofiliza la fracción de producto, obteniéndose el compuesto del título.
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Parte C
Preparación de conjugado de DOTA/sal bis(trifluoroacetato) del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-amino-4-(N-(\omega-metoxipolietilen(5.000)glicoxietil)carbamoil)butanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)-amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-propiónico
El compuesto del título se prepara por el procedimiento descrito en el Ejemplo 13 empleando Boc-Glu(6-amino-\omega-metoxipoiletilenglicol)-Osu por Boc-Cys(O_{3}H)-OSu.
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Ejemplo 19
Síntesis de sal tris(trifluoroacetato) del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecilacetilamino)-6-amino-hexanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)amino-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)-propiónico 
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101 
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El compuesto del título se preparó por el procedimiento descrito en el Ejemplo 13 empleando Boc-Lys(Cbz)-OSu en vez de Boc-Cys(O_{3}H)-OSu.
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Ejemplo 20
Síntesis de DOTA/sal conjugada trifluoroacetato del ácido 2-(((4-(3-(N-(3-2-(2-amino-6-(2-(bis(fosfonometil)amino)acetilamino)hexanoilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil)amino-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propiónico 
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102 
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Una solución de bis(fosfonometil)glicina, DIEA y HBTU en DMF anhidra se agita a temperatura ambiente durante 15 min bajo N_{2} y se trata con el producto del Ejemplo 19. Se continúa agitando durante 18 h y se elimina la DMF en vacío. El residuo resultante se purifica por cromatografía de intercambio iónico.
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Ejemplo 21
Síntesis de aducto de DTPA del ácido de 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)(2H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico 
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103 
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A una solución de dianhídrido de DTPA (3 mmol), trietilamina (3 mmol) en DMF (20 ml), se añade a gotas una solución de ácido 2-(6aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico (1 mmol) en 5 ml de DMF. La mezcla de reacción se agita durante 18 h a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se eliminan los volátiles y se obtiene el compuesto del título después de purificación y aislamiento usando RP-HPLC preparativa.
Los procedimientos siguientes describen la síntesis de radiomedicamentos de la presente invención de la fórmula ^{99m}Tc(VnA)(tricina()fosfina), en la que (VnA) representa un compuesto antagonista del receptor de vitronectina de la presente invención unido al Tc a través de un resto de diazénido (-N=N) o hidrazido (=N-NH-). El resto de diazénido o hidrazido es resultado de la reacción del grupo hidrazinonicotinamido, presente como hidracina libre o protegida como hidrazona, con el Tc-99m. Los otros dos ligandos de la esfera de coordinación de Tc son tricina y una fosfina.
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Ejemplos 22-26
Síntesis de complejos [^{99m}Tc(HYNIC-VnA)(tricina)(TPPTS)]
A un vial liofilizado que contenía 4,84 mg de TPPTS, 6,3 mg de tricina, 40 mg de manitol, tampón de ácido succínico, pH 4,8, y 0,1% de tensioactivo Pluronic F-64, se añadió 1,1 ml de agua estéril para inyección, 0,2 ml (20 \mug) del apropiado antagonista de vitronectina (VnA) conjugado de HYNIC en agua desionizada, o etanol acuoso al 50%, y 0,2 ml de ^{99m}TcO_{4-} (50\pm5 mCi) en solución salina. El kit reconstituido se calentó en un baño de agua a 100ºC durante 15 min y se dejó enfriar a temperatura ambiente en 10 min. Se analizó por HPLC una muestra de la mezcla de reacción. Los resultados de RPC se dan en la Tabla 1.
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(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA 1 Datos analíticos y de rendimiento de complejos de ^{99m}Tc(VnA)(TPPTS)
104
Ejemplo 27
Síntesis del complejo de ^{177}Lu del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil).-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
A un vial cerrado limpio de 5 ml se añadieron 0,5 ml de una solución del conjugado del Ejemplo 4 (200 \mug/ml en tampón de acetato amónico 0,5 mM, pH 6,9) y seguidamente 0,05 ml de una solución de ácido gentísico (sal sódica, 10 mg/ml en tampón de acetato amónico 0,5 M, pH 6,9), 0,3 ml de tampón de acetato amónico 0,25 M (pH 7,0) y 0,010 ml de solución de 177 LuC13 (1000 mCi/ml) en HCl 0,05 N. La mezcla resultante se calentó a 100ºC durante 30 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, se analizó por radio-HPLC e ITLC (cromatografía instantánea en capa delgada) una muestra de la solución resultante. El rendimiento del radiomarcado fue de 80% y el tiempo de retención fue de 18,0 min.
Procedimiento de HPLC
Columna: Zorbax C-18, 25 cm x 4,6 mm
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: tampón de fosfato sódico 25 mM, pH 6.0
Disolvente B: 100% de CH_{3}CN
105
En el procedimiento de cromatografía instantánea en capa delgada (ITLC) se usaron tiras de gel de sílice de Gelman Sciences y una mezcla 1:1 de acetona y solución salina como eluyente.
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Ejemplo 28
Síntesis del complejo de ^{90}Y del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
A un vial cerrado limpio de 5 ml se añadieron 0,5 ml de una solución del conjugado del Ejemplo 4 (200 \mug/ml en tampón de acetato amónico 0,5 mM, pH 6,9) y seguidamente 0,05 ml de una solución de ácido gentísico (sal sódica, 10 mg/ml en tampón de acetato amónico 0,5 M, pH 6,9), 0,3 ml de tampón de acetato amónico 0,25 M (pH 7,0) y 0,010 ml de solución de ^{90}YCI3 (1000 mCi/ml) en HCl 0,05 N. La mezcla resultante se calentó a 100ºC durante 30 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, se analizó por radio-HPLC e ITLC (cromatografía instantánea en capa delgada) una muestra de la solución resultante. El rendimiento del radiomarcado fue de 85% y el tiempo de retención fue de 18,2 min.
Procedimiento de HPLC
Columna: Zorbax C-18, 25 cm x 4,6 mm
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: tampón de fosfato sódico 25 mM, pH 6.0
Disolvente B: 100% de CH_{3}CN
106
En el procedimiento de cromatografía instantánea en capa delgada (ITLC) se usaron tiras de gel de sílice de Gelman Sciences y una mezcla 1:1 de acetona y solución salina como eluyente.
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Ejemplo 29
Síntesis del complejo de ^{111}In del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)-propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
A un vial de automuestra cerrado y protegido con plomo limpio, de 5 ml, se añadieron 80 \mug del conjugado del Ejemplo 4 disuelto en 160 \mul de acetato amónico 0,4 mM a pH 4,7 y 3 mCi de cloruro de In-111 en 12,5 \mul de HCl 0,05 N. La solución se calentó a 100ºC durante 35-40 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, se analizó por radio-HPLC e ITLC una muestra de la solución resultante. El rendimiento del radiomarcado fue de 95% y el tiempo de retención fue de 9,5 min.
Procedimiento de HPLC
Columna: Zorbax C-18, 25 cm x 4,6 mm
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: tampón de fosfato sódico 25 mM, pH 6.0
Disolvente B: 100% de CH_{3}CN
107
En el procedimiento de cromatografía instantánea en capa delgada (ITLC) se usaron tiras de gel de sílice de Gelman Sciences y una mezcla 1:1 de acetona y solución salina como eluyente.
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Ejemplo 30
Síntesis del complejo de Gd del ácido 3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxietoxi)-propil)amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico
El complejo de gadolinio del conjugado del Ejemplo 4 se prepara de acuerdo con el procedimiento siguiente: 3-3,5 mg del conjugado se disuelven en 2 ml de tampón de acetato amónico 1 M (pH 7,0) y se añade a esta solución un equivalente de solución de Gd(NO_{3})_{3} (0,02 M en agua). La mezcla de reacción se calienta a 100ºC durante 30 min y el producto se aísla por HPLC preparativa. Se liofiliza la fracción que contiene el complejo. La identidad del complejo se confirma por espectroscopia de masas.
Los ejemplos siguientes describen la síntesis de agentes de contraste para ultrasonidos de la presente invención.
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Ejemplo 31
Parte A
Síntesis de 1-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamino)-12-(2-(6-aminohexanoilamino)-3-((ácido 1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)-carbonilamino)propanoico)-dodecano-1,12-diona 
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Una solución de dodecano-1,12-dioato de disuccinimidilo (0,424 g, 1 mmol), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosofoetanolamina (1,489 g, 1 mmol) y sal de TFA del ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))-carbonil-amino)propanoico (1 mmol) en 25 ml de cloroformo se agita durante 5 min. Se añade carbonato sódico (1 mmol) y sulfato sódico (1 mmol) y la solución se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. Se elimina en vacío la DMF y el producto en bruto se purifica para obtener el compuesto del título.
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Parte B
Preparación de la composición del agente de contraste
La 1-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamino)-12-(2-(6-aminohexanoil-amino)-3-((ácido 1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)-carbonilamino)propanoico)-dodecano-1,12-diona se mezcla con otros tres lípidos, ácido 1,2-dipalmitoil-sn-glicerofosfotídico, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina y N-(metoxipolietilenglicol(5000)carbamoil)-1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidiletanol-amina en las proporciones relativas de 1% en peso:6%: en peso:54% en peso:41% en peso. Se prepara luego en un vial de vidrio de 2 c.c. una solución acuosa de esta mezcla de lípidos (1 mg/ml), cloruro sódico (7 mg/ml), glicerina (0,1 ml), propilenglicol (0,1 ml/ml) a pH 6-7. Se evacúa el aire del vial, se reemplaza con perfluoropropano y se cierra el vial. La composición del agente de contraste para ultrasonidos se completa agitando el vial cerrado en un amalgamador dental durante 30-45 s para formar una solución blanca lechosa.
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Ejemplo 32
Parte A
Preparación de la Preparación del ácido (\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil)-2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico 
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Se añade trietilamina (3 mmol) a una solución del éster N-Boc-\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carboxilato de succinimidilo (1 mmol) y ácido 2-(6-amino-hexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)-propanoico (1 mmol) en DMF (25 ml). La mezcla de reacción se agita bajo nitrógeno a temperatura ambiente durante la noche y el disolvente se elimina en vacío. El producto en bruto es disuelve en ácido trifluoroacético/diclorometano 50/50 y se agita durante 4 h. Se eliminan los volátiles y el compuesto del título se aisla como la sal de TFA mediante trituración en dietil éter.
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Parte B
Preparación de 1-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamino)-12-((\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil))-2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico))-dodecano-1,12-diona
Una solución de dodecano-1,12-dioato de disuccinimidilo (1 mmol), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (1 mmol) y sal de TFA de (\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil)ciclo(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) (1 mmol) en 25 ml de cloroformo se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. Se elimina la DMF en vacío y se purifica el producto en bruto, obteniéndose el compuesto del título.
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Parte C
Preparación de la composición de agente de contraste
La 1-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamio)-12-((\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil))-2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico))-dodecano-1,12-diona se mezcla con otros tres lípidos, ácido 1,2-dipalmitoil-sn-glicerofosfotídico, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina y N-(metoxipolietilenglicol(5000)carbamoil)-1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidiletanol-amina en las proporciones relativas de 1% en peso:6% en peso:54% en peso:41% en peso. Se prepara luego una solución acuosa de esta mezcla de lípidos (1 mg/ml), cloruro sódico (7 mg/ml), glicerina (0,1 ml/ml), propilenglicol (0,1 ml/ml), a pH 6-7, en un vial de vidrio de 2 cc. Se evacúa el aire del vial y se reemplaza con perfluoropropano y se cierra el vial. La composición de agente de contraste se completa agitando el vial cerrado en un amalgamador dental durante 30-45 min para formar una solución blanca lechosa.
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Ejemplo 33
Parte A
Preparación de (\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil)-Glu-(ácido 2-(6-amino-hexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)-propanoico)_{2}
110
A una solución del éster N-Boc-\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carboxilato de succinimidilo (1 mmol) y Glu-(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico)_{2} (1 mmol) en DMF se añade trietilamina (3 mmol). La mezcla de reacción se agita durante la noche bajo nitrógeno a temperatura ambiente y se elimina el disolvente en vacío. El producto en bruto se disuelve en ácido trifluoroacético/diclorometano 50/50 y se agita durante 4 h. Se eliminan los volátiles y se aisla el compuesto del título como sal de TFA mediante trituración en dietil éter.
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Parte B
Preparación de 1-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamino)-12-((\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil)-Glu-2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)_{2}))-dodecano-1,12-diona
Una solución de dodecano-1,12-dioato de disuccinimidilo (1 mmol), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosofoetanolaminma o DPPE 1 mmol) y sal deTFA del á(\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil)-Glu-2-(ácido 6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)_{2} (1 mmol) en 25 ml de cloroformo se agita durante 5 min. Se añade carbonato sódico (1 mmol) y sulfato sódico (1 mmol) y la solución se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. La DMF se elimina en vacío y se purifica el producto en bruto para obtener el compuesto del título.
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Parte C
Preparación de la composición del agente de contraste
La 1-(1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamino)-12-((\omega-amino-PEG_{3400}-\alpha-carbonil)-Glu-2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)_{2}))-dodecano-1,12-diona se mezcla con otros tres lípidos, ácido 1,2-dipalmitoil-sn-glicerofosfotídico, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina y N-(metoxipolietilenglicol(5000)carbamoil)-1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidiletanol-amina en las proporciones relativas de 1% en peso:6% en peso:54% en peso:41% en peso. Se prepara luego una solución acuosa de esta mezcla de lípidos (1 mg/ml), cloruro sódico (7 mg/ml), glicerina (0,1 ml/ml), propilenglicol (0,1 ml/ml), a pH 6-7, en un vial de vidrio de 2 cc. Se evacúa el aire del vial y se reemplaza con perfluoropropano y se cierra el vial. La composición de agente de contraste se completa agitando el vial cerrado en un amalgamador dental durante 30-45 min para formar una solución blanca lechosa.
Ejemplo 34
Síntesis de la sal bis(trifluoroacetato) de 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}-propil)etil]-carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil]-sulfonil}amino](2S)-3-(ácido{1-[3-imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
111
Parte A
Preparación de (2S)-3-[(t-butoxi)-carbonilamino]-2-[((2,6-dimetil-4-[3-(N-(2-fenilmetoxi)carbonilamino]etil}carbamoil)-propoxi]fenil}sulfonil)amino]-propanoato de metilo
112
Una solución del producto del Ejemplo 13, Parte D (369 mg, 0,756 mmol), DIEA (0,52 ml, 3,0 mmol) y HBTU (315 mg, 0,832 mmol) en DMF anhidra (14 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 5 min, se trató con hidrocloruro de N-(2-aminoetil)carbamato de bencilo (192 mg, 0,832 mmol) y se agitó durante 1 h más. La DMF se eliminó en vacío y el residuo oleoso se recibió en EtOAc (150 ml), se lavó consecutivamente con HCl 0,1 N (40 ml), agua (40 ml) y solución saturada de NaCl (40 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, resultando un aceite viscoso incoloro. La cromatografía rápida en columna de gel de sílice de 3 x 16 cm (EtOAc) dio el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (450 mg, 89,6%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}): \delta: 7,34-7,27 (m, 5H), 6,58 (s, 2H), 6,31 (s anc, 1H), 5,86 (s anc, 1H), 5,36 (s anc, 1H), 5,14-5,03 (m, 3H), 3,96 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,88-3,83 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,47-3,25 (m, 6H), 2,59 (s, 6H), 2,31 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,05 (p, J = 6,6 Hz, 2H), 1,39 (s, 9H). RMN ^{13}C (CDCl_{3}): \delta 172,9, 170,5, 160,6, 157,3, 155,9, 141,8, 136,3, 128,5, 128,0, 116,6, 79,9, 66,9, 55,5, 52,8, 43,1, 40,9, 40,3, 32,4, 28,2, 24,9, 23,3. MS: m/e 665,4 [M+H]; 687,3 [M+Na]. MS de alta resolución: calc. para C_{31}H_{45}N_{4}O_{10}S [M+H]: 665,2856; hallado: 665,2883.
Parte B
Preparación de la sal trifluoroacetato de (2S)-3-amino-2-[({2,6-dimetil-4-[3-(N-(2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]etil}carbamoil)propoxi]fenil}sulfonil)amino]-propanoato de metilo
113
El producto de la Parte A (420 mg, 0,632 mmol) se disolvió en DCM/TFA 25/75 (20 ml) y se dejó en reposo a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 10 min. Se concentró la solución y el aceite viscoso resultante se disolvió en ACN al 50% y se liofilizó, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro. MS: m/e 565,3 [M+H].
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Parte C
Preparación de (2S)-2-[{(2,6-dimetil-4-[3-(N-{2-[(fenilmetoxi)carbonil-amino]etil}carbamoil)propoxi]fenil} sulfonil)amino]-3-{[1-(3-{[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]amino}propil)(1H-indazol-5-il)]carbonilamino}propanoato de metilo
114
Una solución de ácido 1-(3-((1-trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)-1H-indazol-5-carboxílico (100 mg, 0,190 mmol, DIEA (0,099 ml, 0,57 mmol) y HBTU (91 mg, 0,24 mmol) en DFM anhidra (2,0 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 5 min, se trató con el producto de la etapa B (142 mg, 0,21 mmol) y más DIEA (0,033 ml, 0,19 mmol) y se agitó durante 1 h más. La DMF se eliminó en vacío y el aceite de color ámbar se purificó por HPLC preparativa en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 1,65%/min de 18 a 67,5% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 23,2 min, obteniéndose el compuesto del título como un polvo incoloro (194 mg, 95,1%). RMN ^{1}H (CDCl_{3}+D20): \delta 8,11 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,75 Hz, 1H), 7,42-7,24 (m, 16H), 7,17-7,13 (m, 6H), 6,93 (d, J = 2,81 Hz, 1H), 6,52-6,47 (m, 2H), 5,04 (s, 2H), 4,07-4,00 (m, 3H), 3,93-3,78 (m, 3H), 3,69-3,64 (m, 4H), 3,37-3,27 (m, 4H), 3,14 (t, J = 6,88 Hz, 2H), 2,57 (s, 6H), 2,29 (t, J = 7,18), 2,01 (pent, J = 6,66, 2H), 1,73 (pent, J = 6,59, 2H). MS: m/e 1074,4 [M+H], 537,9 [M+2H]. MS de alta resolución: calc para C_{59}H_{64}N_{9}O_{9}S [M+H]: 1074,4548; hallado: 1074,452.
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Parte D
Preparación de ácido (2S)-2-{[(4-(3-[N-(2-aminoetil)-carbamoil]propoxi}-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}-carbonilamino)propanoico
115
El producto de la Parte C (194 mg, 0,180 mmol) se disolvió en THF exento de peróxido (8,0 ml) y agua (1,2 ml) y se trató con LiOH 3 N (0,80 ml). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 2 h. El THF se eliminó en vacío y la mezcla resultante se repartió entre agua (25 ml) y CHCl_{3} (25 ml). El pH de la capa acuosa se ajustó a 3 con HCl 1 N (22 ml) y se sometió a extracción con más CHCl_{3} (2 x 25 ml). Se combinaron los extractos de CHCl_{3} y la combinación se lavó con solución saturada de NaCl (25 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose el intermedio ácido carboxílico como un sólido amorfo incoloro (171 mg). MS: m/e. 1064,4 [M+H], 531,0 [M+2H].
El sólido se disolvió en una solución de TFA (8,0 ml) y Et_{3}SiH (0,40 ml) y se calentó a 70ºC bajo nitrógeno durante 2 h. Se concentró la solución en vacío y el sólido oleoso resultante se repartió entre éter (20 ml) y agua (20 ml). La capa acuosa se lavó con una segunda porción de éter (20 ml). Los lavados con éter combinados se sometieron a retroextracción con agua (20 ml). La combinación de capas acuosas se liofilizó, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (139 mg, 84,8%). MS: m/e 684,3 [M+H], 343,0 [M+2H].
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Parte E
Preparación del ácido 2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(t-butoxi)carbonilamino]-3-sulfopropil}etil)carbamoil]-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}{2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)]carbonilamino)propanoico 
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116 
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Una solución del producto de la Parte D (91 mg, 0,10 mmol), el éster de N-hidroxisuccinimida del ácido Boc-L-cisteico (103 mg, 0,25 mmol) y DIEA (0,104 ml, 0,60 mmol) en DMF anhidra (5,0 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 19 h. Se eliminó la DMF en vacío y el aceite de color ámbar resultante se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 0,72%/min de 0 a 36% de ACN que contenía 0,15% de TFA, a un caudal de 80 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 40,0 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (69 mg, 74%). MS: m/e 935,3 [M+H].
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Parte F
Preparación de la sal trifluoroacetato del ácido 2-({[4-{3-[N-(2-{(2R)-2-amino-3-sulfopropil}etil)carbamoil]-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}{2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)]carbonilamino)-propanoico 
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118 
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Una solución del producto de la Parte E (130 mg, 0,139 mmol) en TFA/DCM 50/50 (16,0 ml)se dejó en reposo a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 10 min. La solución se concentró en vacío y el sólido oleoso resultante se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (50 x 250 mm) usando un gradiente de 0,90%/min de 0 a 27% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 80 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 22,6 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (117 mg, 88,8%). RMN^{1}H (D_{2}O): \delta 8,09 (s, 1H), 7,75 (s (porción X no resuelta del sistema ABX), 1H), 7,39 (porción B del sistema ABX, Jab = 8,9 Hz, Jbx = 1,6 Hz, 1H), 7,34 (porción A del sistema ABX, Jab = 8,9 Hz, 1H), 6,50 (s, 2H), 6,02 (s, 1H), 4,46 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 4,31 (porción X' del sistema A'B'X', Ja'x' = 7,8 Hz, J'x' = 4,9 Hz, 1H), 4,16 (porción X del sistema AMX, Jax = 10,9 Hz, Jmx = 3,8 Hz, 1H), 3,70 (porción M del sistema AMX, Jam = 14,1 Hz, Jmx = 3,8 Hz), 3,39-3,15 (m, 9H), 3,03 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,34 (s, 6H), 2,14 (pent, J = 8,3 Hz, 2H), 2,07 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,58 (pent, J = 7,4 Hz, 2H). MS: m/e 835,2 [M+H]; 857,3 [M+Na]. MS de alta resolución: calc pàra C_{34}H_{47}N_{10}O_{11}S_{2} [M+H]: 835,2867; hallado:
835,2888.
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Parte G
Preparación de la sal bis(trifluoroacetato) del ácido 2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-3-sulfo-2-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]-metil}ciclododecil)-acetilamino]propil}etil)carbamoil]-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}{2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)]carbonilamino)-propanoico 
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119 
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Una solución del producto del Ejemplo 4, Parte B (73,1 mg, 0,080 mmol), DIEA (0,083 ml, 0,480 mmol) y HBTU (22,7 mg, 0,060 mmol) en DMF anhidra (4,0 ml) se agitó bajo nitrógeno a temperatura ambiente durante 15 min y se trató con el producto de la Parte F anterior (37,9 mg, 0,040 mmol). Se eliminó la DMF en vacío después de 4,5 h y el aceite de color ámbar resultante se purificó por HPLC en dos etapas. Una purificación inicial por HPLC se realizó en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 0,9%/min de 0 a 45% de ACN que contenía 01% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico principal de producto que eluía a 26,4 min, obteniéndose un sólido incoloro. La purificación final se realizó en una columna C-18 Zorbax (21,2 x 250 mm) en condiciones isocráticas usando ACN al 33% que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 5,2 min, obteniéndose el compuesto principal como un sólido esponjoso incoloro (34,0 mg, 20,5%). MS:m/e: calc. para C_{62}H_{97}N_{14}O_{18}S_{2} [M+H]: 1389,6547; hallado: 1389,655.
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Parte H
Preparación de la sal bis(trifluoroacetato) de 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-3-sulfo-2-12-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}-propil)-etil]carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil]-sulfonil}amino](2S)-3-(ácido{1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
El producto de la anterior etapa G (32,0 mg, 0,0174 mmol) se disolvió en una solución de TFA (4,0 ml) y Et_{3}SiH (0,20 ml) y se calentó a 50ºC bajo nitrógeno durante 30 min. Se concentró la solución y el residuo se purificó por HPLC en una columna C-18 Zorbax (21,2 x 250 mm) usando un gradiente de 0,90%/min de 0 a 27% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 23,5 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (22,2 mg, 88,1%). MS: m/e 1221,4 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{50}H_{73}N_{14}O_{18}S_{2} [M+H]: 1221,4689; hallado: 1221,469.
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Ejemplo 35
Síntesis de conjugado de DOTA/bis(trifluoroacetato del ácido 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-2-[4-(N-((1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino)sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino)etil)-carbamoil]-2-sulfoetil]carbamoil)(4S)-4-amino-butanoilamino]-3-sulfopropil}etil)carbamoil]propoxi}-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico 
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120 
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Parte A
Preparación de (2S)-2-[(t-butoxi)carbonilamino]pentano-1,5-dioato de di-2,3,5,6-tetrafluorofenilo 
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121 
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A una solución de Boc-L-Glu-OH (28,9 g, 117 mmol) en DMF (500 ml) a temperatura ambiente y bajo nitrógeno se añadió una solución de 2,3,5,6-tetrafluorofenol (48,2 g, 290 mmol) en DMF (50 ml). Después de agitar durante 10 min, se añadió EDC (55,6 g, 290 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 96 h. Se eliminaron los volátiles en vacío y el residuo se trituró con HCl 0,1 N (750 ml). A esta mezcla se añadió EtOAc (600 ml) y se separaron las capas. La capa acuosa se sometió a extracción con EtOAc (3 x 500 ml) y se combinaron todos los extractos de EtOAC, la combinación se lavó consecutivamente con agua (300 ml) y solución saturada de NaCl (300 ml), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose un sólido pardo (62 g). Este sólido se lavó con ACN, obteniéndose el compuesto del título (45,5 g, 73,0%) en forma purificada. MS: m/e 566,0 [M+Na].
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Parte B
Preparación del ácido 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-2-[4-(N-((1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)-etil]-amino)sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino)etil-carbamoil]-2-sulfoetil]carbamoil)(4S)-4-[(t-butoxi)carbonilamino]butanoilamino-3-sulfopropil}etil)carbamoil]propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
122
Se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 23 h una solución del producto del Ejemplo 34, Parte F (43,5 mg, 0,0459 mmol), el producto de la Parte A anterior (10,8 mg, 0,020 mmol) y DIEA (0,015 ml, 0,084 mmol) en DMF anhidra (1,0 ml). Se eliminó la DMF en vacío y el aceite de color ámbar resultante se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 0,90%/min de 9 a 45% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 20,9 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (22,0 mg, 55,7%). MS: m/e 1880,7 [M+H], 941,4 [M+2H]. MS de alta resolución: calc. para C_{78}H_{106}N_{21}O_{26}S_{4} [M+H] 1880,6501; hallado: hallado: 1880,6530.
Parte C
Preparación de ácido 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-2-[4-(N-((1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)-etil]-amino)sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil-carbamoil]-2-sulfoetil]carbamoil)(4S)-4-amino-butanoilamino]-3-sulfopropil}etil)carbamoil]-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
123
Una solución del producto de la Parte B anterior (22,0 mg, 0,0117 mmol) en TFA/DCM 50/50 (8,0 ml) se dejó que reaccionara a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 10 min y se concentró, resultando un aceite de color ámbar pálido (21,2 mg, 95,6%). MS: m/e 1781,7 [M+H], 891,0 [M+2H], 594,4 [M+3H]. MS de alta resolución: calc. para C_{73}H_{98}N_{21}O_{24}S_{4} [M+H]: 1780,5976; hallado: 1780,598.
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Parte D
Preparación de conjugado de éster de tris-t-butilo de DOTA/sal bis(trifluoroacetato del ácido 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-2-[4-(N-((1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)-etil]-amino)sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino)etil-carbamoil]-2-sulfoetil]carbamoil)(4S)-4-aminobutanoilamino]-3-sulfopropil}etil)carbamoil]-propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico 
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124 
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Una solución del producto del Ejemplo 4. Parte B (21,4 mg, 0,0234 mmol), DIEA (0,024 ml, 0,14 mmol) y HBTU (6,6 mg, 0,0176 mmol) en DMF anhidra (1,0 ml) se agitó bajo nitrógeno a temperatura ambiente durante 15 min y se trató con el producto de la anterior Parte C (21,0 mg, 0,0111 mmol). Después de 23 h, se diluyó la solución con EtOH (5,0 ml) y agua (3,0 ml) y se trató con NOH 0,5 N (0,30 ml). Después de 30 min, el pH de la solución se ajustó a 3 con HCl 1 N (0,20 ml). La solución se diluyó con agua (135 ml) y la solución resultante se purificó directamente por HPLC en una columna C-18 Vydac ((22 x 250 mm) usando un gradiente de 0,90%/min de 9 a 45% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 27,0 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (11,5 mg, 37,1%). MS: m/e 1168,1 [M+2H], 779,3 [M+3H]. MS de alta resolución: calc. para C_{101}H_{148}N_{25}O_{31}S_{4} [M+H]: 2334,9656; hallado: 2334,967.
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Parte E
Preparación de conjugado de DOTA/bis(trifluoroacetato del ácido 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-2-[4-(N-((1R-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)etil]-amino)sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino)etil-carbamoil]-2-sulfoetil]carbamoil)(4S)-4-amino-butanoilamino]-3-sulfopropil}etil)carbamoil]propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
El producto de la etapa D anterior (11,5 mg, o,00449 mmol) se disolvió en una solución de TFA (4,0 ml) y Et_{3}DsiH (0,20 ml) y se calentó a 50ºC bajo nitrógeno durante 30 min. La solución se concentró en vacío y el residuo se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 0,90%/min de 0 a 36% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 27,5 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (9,3 mg, 86,5%). MS: m/e 1084,1 [M+2H], 723,1 [M+3H]. MS de alta resolución: calc. para C_{89}H_{124}N_{25}O_{31}S_{4} [M+H]: 2166,7778; hallado:
2166,778.
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Ejemplo 36
Síntesis de sal bis(trifluoroacetato) del ácido 2-({[4-(3-(N-[2-((2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]-acetilamino}-propil)etil]amino}sulfoni)fenil]fenil}-sulfonil)amino](2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)-propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico 
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125 
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Parte A
Preparación de (2S)-3-[(t-butoxi)carbonilamino]-2-{[(4-{4-[({2-[(fenilmetoxi)-carbonilamino]etil}amino)sulfonil]fenil}fenil)sulfonil]amino}propanoato de metilo 
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Se cargó un matraz de 100 ml de tres bocas, equipado con termómetro, embudo de adición y conducto para nitrógeno, cloruro de bifenil-4,4'-disulfonilo (5,30 g, 15,0 mmol, preparado recientemente en CHCl_{3}) y DCM (400 ml). El embudo de adición se cargó con una solución de hidrocloruro de N-(2-amionoetil)carbamato de bencilo (2,30 g, 10,0 mmol) y DIEA (1,80 ml, 10,0 mmol) en DCM (40 ml). El contenido del matraz se enfrió por debajo de 5ºC y el contenido del embudo de adición se añadió al matraz con una agitación rápida a lo largo de 30 min mientras que la temperatura del matraz se mantenía por debajo de 5ºC. El embudo de adición se cargó luego con una solución de hidrocloruro del éster metílico del ácido N-\beta-Boc-L-\alpha,\beta-diaminopropiónico (5,10 g, 20,0 mmol) y DIEA (7,60 ml, 44,0 mmol) en DCM (40 ml). Esta solución se añadió al matraz con agitación a 5ºC a lo largo de 15 min, y se agitó a temperatura ambiente durante 4 h adicionales. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se repartió entre EtOAc (6 l) y HCl 0,1 N (600 ml). La solución orgánica se lavó consecutivamente con agua (3 l) y solución saturada de NaCl (2 l), se secó (MgSO_{4}) y se concentró, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (9,60 g). MS: m/e 591,2.
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Parte B
Preparación de la sal trifluoroacetato de (2S)-3-amino-2-{[(4-{4-[({2-[(fenilmetoxi)carbonil-amino]etil}amino)sulfonil]fenil}fenil)sulfonil]amino}propanoato de metilo 
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127 
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El producto de la Parte A anterior (8,80 g) se disolvió en TFA/DCM 50/50 (200 ml) y se dejó que reaccionara a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 1 h. La solución se concentró en vacío y el aceite viscoso de color naranja resultante se purificó por HPLC en una columna C-19 Vydac (50 x 250 mm) usando un gradiente de 1,58%/min de 0 a 63% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 80 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 22,7 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (3,54 g, 54,9% para dos etapas a partir de hidrocloruro de N-(2-aminoetil)carbamato de bencilo). MS: m/e 591,2 [M+H]. MS de alta resolución: calc. para C_{26}H_{31}N_{4}O_{8}S_{2} [M+H]. 591,1583; hallado: 591,1585.
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Parte C
Preparación de (2S)-2-{[(4-{4-[({2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]-etil}amino)sulfonil]fenil}fenil)sulfonil]amino}-3-{[1-(3-{[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]-amino}propil)(1H-indazol-5-il)]carbonilamino}propanoato de metilo
128
Una solución del ácido 1-(3-((1-trifenilmetil)imidazol-2-il)amino)propil)-1H-indazol-5-carboxílico (265 mg, 0,503 mmol), DIEA (0,099 ml, 0,42 mmol) y HBTU (158 mg, 0,417 mmol) en DMF anhidra (10,2 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 5 min, se trató con el producto de la etapa B anterior (246 mg, 0,417 mmol) y se agitó durante 1 h más. La DMF es eliminó en vacío y el aceite de color ámbar se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (50 x 250 mm) usando un gradiente de 1,8%/min de 18 a 72% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 80 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 24,8 min, obteniéndose un polvo incoloro. Este polvo se purificó nuevamente por HPLC usando la misma columna y las mismas condiciones de gradiente. Se liofilizaron las fracciones del producto, obteniéndose el compuesto del título como un polvo esponjoso incoloro (245 mg, 53,5%). MS: m/e 1100,3 [M+H]. MS de alta resolución: calc para C_{59}H_{57}N_{9}O_{9}S_{2} [M+H]: 1100,3799; hallado: 1100,380
Parte D
Preparación de (2S)-2-{[(4-{4-[({2-aminoetil)amino]sulfonil}-fenil)fenil]sulfonil}amino)-3-{[1-(3-{[1-(trifenil- metil)imidazol-2-il]amino}propil)(1H-indazol-5-il)]carbonilamino}propanoato de metilo
129
Una solución del producto de la Parte C anterior (240 mg, 0,218 mmol) en MeOH (22 ml) se hidrógeno sobre Pd al 10%/C a 377 kPa durante 3 h. El catalizador se eliminó por filtración a través de Celite® y se concentró el filtrado, obteniéndose el compuesto del título como un aceite viscoso incoloro (240 mg). MS: m/e 966,3 [M+H], 724,2 [M+H-tritilo]
Parte E
Preparación del ácido (2R)-N-[2-({[4-(4-{[((1S)-1-(metoxicarbonil)-2-{[1-(3-{[trifenilmetil)imidazol-2-il]amino}propil)(1H-indazol-5-il)]carbonilamino}etil)-amino)-sulfonil}fenil)fenil]sulfonil}amino)etil]-2-[(t-butoxi)carbonilamino]propanosulfónico
130
Una solución del producto de la Parte D anterior (240 mg) y DIEA (0,106 ml, 0,950 mmol) en DMF anhidra (4,0 ml) se trató con éster de p-nitrofenilo del ácido Boc-L-cisteico (149 mg, 0,362 mmol) y se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h. Se añadió más éster de p-nitrofenilo del ácido Boc-L-cisteico (50,0 mg, 0,121 mmol) y se continuó agitando durante 24 h más. La DMF se eliminó en vacío y el residuo sólido oleoso se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 1,12%/min de 18 a 63% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. El pico del producto principal se centró a 32,1 min. Las fracciones primeras de elución del producto contenían una impureza que se eliminó mediante purificación por HPLC con la misma columna y las mismas condiciones de caudal pero usando un gradiente de 1,0%/min de 18 a 58% de ACN que contenía 0,1% de TFA. El pico del producto principal eluía a 32,1 min. Se combinaron las fracciones que contenían productos de estas dos tandas y la combinación se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido incoloro (174 mg, 65,6% a partir del producto de la Parte C). MS: m/e 1217,3 [M+H], 1117,3 [M+H-Boc].
Parte F
Preparación de sal trifluoroacetato del ácido 2-({[4-(4-{[(-2-((2R)-2-amino-3-sulfopropil)etil]amino}sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]-(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico 
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131 
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Una mezcla del producto de la Parte E anterior (21,4 mg, 0,0176 mmol), THF exento de peróxido (0,70 ml), agua (0,063 ml) y LiOH 3 N (0,043 ml, 0,129 mmol) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 3 h y se concentró en vacío, resultando un sólido incoloro.
Este sólido se disolvió en TFA/Et_{3}SiH 95/5 (1,20 ml) y se calentó a reflujo bajo nitrógeno durante 1 h. La solución se concentró en vacío y el sólido oleoso de purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 2650 mm) usando un gradiente de 1-2%/min de 0 a 36% de ACN que contenía 0,1% de TFA. Se liofilizó el pico de producto principal que eluía a 19,6 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido incoloro (11,0 mg, 64,2%). MS: m/e 861,2 [M+H]. MS de alta resolución: calc para C_{34}H_{41}N_{10}O_{11}S_{3} [M+H]: 861,21181; hallado: 861,2132.
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Parte G
Preparación de sal bis(trifluoroacetato) del ácido 2-({[4-(4-{[(-2-((2R)-3-sulfo-2-(2-{1,4,7,10tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]-metil}ciclododecil}-acetil)propil]etil}amino)sulfonil]fenil)fenil)sulfonil]amino}(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)]carbonilamino)propanoico 
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132 
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Una solución del producto del Ejemplo 4, Parte B (15,9 mg), 0,0174 mmol), DIEA (0,012 ml, 0,057 mmol) y HBTU (5,3 mg, 0,014 mmol) en DMF anhidra (1,5 ml) se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 10 min y se añadió a una solución del producto de la Parte F anterior (10,0 mg, 0,0116 mmol) y DIEA (0,012 ml, 0,070 mmol) en DMF anhidra (1,0 ml). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 18 h y se concentró en vacío. El aceite de color ámbar pálido resultante se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 1,0%/min de 9 a 49% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 30,0 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (10,5 mg, 555,1%). MS: m/e 1415,4 [M+H].
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Parte H
Preparación de la sal bis(trifluoroacetato) del ácido 2-({[4-[4-({[2-((2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]-acetilamino}-propil)etil]amino}sulfoni)fenil]fenil}-sulfonil)amino](2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)-propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
Una solución del producto de la Parte G anterior (10,5 mg, 0,00639 mmol) en TFA/Et_{3}SiH 95/5 (1,0 ml) se calentó a reflujo bajo nitrógeno durante 3 h. Se concentró la solución en vacío y el sólido oleoso resultante se purificó por HPLC en una columna C-18 Vydac (22 x 250 mm) usando un gradiente de 0,90%/min de 0 a 27% de ACN que contenía 0,1% de TFA a un caudal de 20 ml/min. Se liofilizó el pico del producto principal que eluía a 28,0 min, obteniéndose el compuesto del título como un sólido esponjoso incoloro (2,3 mg, 24,4%). MS: m/e 1247,3 [M+H]. MS de alta resolución: calc para C_{50}H_{67}N_{14}O_{18}S_{3} [M+H: 1247,3919; hallado: 1247,390.
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Ejemplo 37
Síntesis de ácido (4S)-4-(N-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-{(1-(3-(2-piridilamino)propil](1H-indazol-5-il)} carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetil-fenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetra-aza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico
133
Etapa A
Síntesis de
134
Se añadió ácido N-Boc-(1-[3-(2-piridilamino)propil]-1H-indazol)-5-carboxílico (preparado como describen
Jadhav y otros, patente U.S. nº. 5.760.028) (217 mg, 0,548 mmol) a una solución de (2S)-3-amino-2-[({2,6-dimetil-4-[3-(N-(2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]etil}carbamoil)-propoxi]fenil}sulfonil)amino]-propanoato de metilo (preparado como en el Ejemplo 34, Parte B) y HBTU (250 mg, 0,658 mmol) en DMF (10 ml). Se añadió a gotas diisopropiletilamina (334 \mul, 1,12 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 45 min, se concentraron los disolventes y el residuo se purificó por cromatografía rápida (EtOAc/MeOH, de 0% a 6% de MeOH). Se combinaron las fracciones del producto y la combinación se concentró, resultando 526 mg (102%) del producto como un aceite de color oro. LRMS (ES): 943,5 [M+H]^{+}, 843,4 [M-Boc+H]^{+}.
Etapa B
Síntesis de
135
El producto de la Etapa A (3 ml) se añadió a paladio al 10% sobre carbón (200 mg) en metanol (7 ml) bajo nitrógeno en una botella de Parr. Se hidrógeno a 345 kPa durante 90 min, se filtró a través de celita, se enjuagó con metanol y se concentró, obteniéndose un aceite viscoso. Éste se volvió a disolver en agua/acetonitrilo 1:1 que contenía 0,1% de TFA y se liofilizó (acetonitrilo/agua 1:1/0,1% de TFA), resultando el producto como un polvo blanco (380 mg, rend. de 74%).
LRMS (ES): 809,3m ([M+H]^{+}, 45%) 355,2 (100%). RMNH (600,1343 MHz, CDCl_{3}): 8,49 (t, 1H), 8,29 (m, 1H), 8,18 (d, 2H), 7,87 (t, 1H), 7,74 (m, 2H), 7,64 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,11 (t, 1H), 6,66 (d, 1H), 6,64 (s, 2H), 4,45 (t, 2H), 4,04 (t, 1H), 3,91 (t, 2H), 3,83 (t, 2H), 3,55 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,16 (m, bajo el pico de H_{2}O, 2H), 2,71 (m, 2H), 2,52 (s, 3H), 2,50 (s, 3H), 2,21 (t, 2H), 2,15 (t, 2H), 1,88 (t, 2H), 1,33 (s, 9H).
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Etapa C
Síntesis de 
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136 
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Se disolvió el éster de succinimida del ácido \gamma-t-butoxi-Z-glutámico (2,0 g, 4,75 mmol) en dimetilformamida y se añadió ácido \gamma-t-butoxiglutámico (0,98 g, 4,8 mmol) y seguidamente diisopropiletilamina (1,75 ml, 10,1 mmol). La solución se agitó durante 18 h, se concentró y el residuo se repartió entre acetato de etilo/ácido cítrico al 10%. La fracción acuosa se sometió a extracción con acetato de etilo y la combinación de las capas orgánicas se lavó con agua, hidrogenosulfato potásico al 10% y salmuera, luego se concentró. El aceite residual se purificó por cromatografía rápida sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/EtOAc/EtOH 1:1:0,5%), se combinaron las fracciones de producto y se evaporó la combinación, obteniéndose el producto (1,3 g, 53%) como un sólido gomoso. LRMS (ES): 523,4 [M+H]^{+}, 467,4. RMN ^{1}H (600,1330 MHz, CDCl_{3}) 7,30 (m, 6H), 5,80 (d, 1H), 5,09 (m, 2H), 4,53 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 2,36 (m, 4H), 1,88-2,16 (m, 4H), 1,42 (s, 9H), 1,41 (s, 9H).
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Etapa D
Síntesis de 
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137 
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Se cargó un matraz bajo nitrógeno con diisopropiletilamina (28 \mul, 160 \mumol), el producto XIC (62 mg, 120 \mumol) y HBTU (130 \mumol, 49 mg). La mezcla se sometió a agitación durante 10 min y luego se añadió el producto de la Etapa B 8100 mg, 108 umol) y seguidamente diisopropiletilamina (50 \mul, 288 \mumol). La mezcla de reacción se agitó durante 60 min y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-75% de B a lo largo de 40 min). Se combinaron las fracciones de producto y se liofilizó la combinación, obteniéndose 135 mg (88%) del producto como un sólido blanco. El producto estaba contaminado con 1-15% del producto de Boc después de la liofilización, pero no se purificó. LRMS (EI); 313,5 ([M+H]^{+}, 80%), 1213,5 ([M-Boc+H]^{+}, 45%) 551,3 (100%).
\newpage
Etapa E
Síntesis de 
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138 
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El producto de la Etapa D (118 mg) se hidrógeno y aisló como en la Etapa B. El sólido liofilizado no se purificó y se usó directamente en la etapa siguiente. LRMS (I): 1179,6 ([M+H]^{+}, 20%), 1079,5 ([M-Boc+H]^{+}, 25%) 540,3 (100%).
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Etapa F
Síntesis de 
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139 
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En un recipiente de vidrio seco se mezclaron bajo nitrógeno HBTU (35 mg, 90 \mul, 200 \mumol), DOTA (OtBu)_{3}-OH (49 mg, 85 \mumol) y diisopropiletilamina (35 \mul, 200 \mumol) en DMF seca (7 ml).Esta mezcla se agitó durante 10 min y luego se añadió el producto de la Etapa E (100 mg, 77 \mumol) junto con más diisopropiletilamina (45 \mul, 250 \mumol) para que el pH de la solución fuera >9. Después de agitar durante 30 min, se concentró la mezcla de reacción y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, acetonitrilo al 90%/agua/0,1% de TFA; 20-70% de B a lo largo de 50 min). Después de purificación se obtuvieron cuatro productos: un par de isómeros de ácido glutámico (60 mg) y los correspondiente productos de Boc desprotegidos (29 mg) para un rendimiento total de 66%.
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Etapa G
Síntesis del ácido 4-(N-{(1R)-1-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-{(1-(3-(2-piridilamino)propil](1H-indazol-5-il)} carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetil-fenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-(4S)-4{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico 
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140 
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Los produtos isómeros de ácido D-glutámico de Boc y Boc-desprotegidos combinados de la Etapa F (45 mg, 23 \mumol) se disolvieron en THF/metanol (1:1, 4 ml) y se añadió dióxido de litio (3 N, en agua, 75 \mul, 225 \mumol) mientras que se agitaba. La solución se agitó durante 4 h, se concentró en vacío y el residuo se trató con diclorometano (3 ml), ácido trifluoroacético (3 ml) y trietilsilano (300 ul) bajo nitrógeno. La solución se agitó durante la noche, se concentró y se purificó por HPLC preparativa (C8 Zorbax, 21,2 mm x 25 cm, 50% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido fórmico; 15-30% de B en 50 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congelaron y liofilizaron, obteniéndose el producto como un sólido blanco (17,6 mg, 57%). LRMS (EI); 1339,5 ([M+H]^{+}, 15%), 670,4 ([M+2H]^{+2}, 100%). HPLC (2 x (4,6 x 21,2 mm, CN Zorbax) agua/90% de acetonitrilo/0,1% de ácido fórmico, 10-20% de B en 180 min) R_{t} = 100,4 min.
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Etapa H
Síntesis del ácido (4S)-4-(N-{(1S)-1-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-(3-(2-piridilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico 
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141 
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Los productos isómeros del ácido L-glutámico de la Etapa F (48 mg, 23 umol) se combinaron con el correspondiente análogo desprotegido de Boc y se trataron similarmente a la Etapa G para obtener el producto como un sólido blanco (15,5 mg, 50%). LRMS (EI); 1339,5 ([M+H]^{+}, 15%), 670,4 ([M+2H]^{2+}, 100%). HPLC (2 x (4,6 x 21,2 mm, CN Zorbax) agua/90% de acetonitrilo/0,1% de ácido fórmico, 10-20% de B en 180 min). R_{t} = 101,3 min.
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Ejemplo 38
Síntesis del ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxibutanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico
142
Etapa A
Síntesis de (2S)-2-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)-carbonilamino]butanoilamino}pentano-1,5-dioato de t-butil-2,3,5,6-tetrafuorofenilo
143
El producto del Ejemplo 37, Etapa C (640 mg, 1,23 mmol) se disolvió en DMF (5 ml) con 2,3,5,6-tetrafluorofenol (286 mg, 1,7 mmol). A esta solución se añadió hidrocloruro de (3-dimetilaminociclopropil)etilcarbodiimida (282 mg, 1,47 mmol) y la solución se agitó durante 18 h. Se concentró la mezcla de reacción y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se sometió dos veces a extracción con acetato de etilo y la capa orgánica combinada se lavó con HCl 0,1 N, solución de NaHCO_{3} al 10%, agua y salmuera. Se secó sobre sulfato sódico, se filtró, se concentró y se purificó por cromatografía rápida (hexano/acetato de etilo 5:1). El producto se obtuvo como un aceite transparente (385 mg, 48%). LRMS (EI); 693,1 ([M+Na]^{+}, 35%), 671,3 ([M+H]^{+}, 100%), 615,2 ([(M-tBu)+H]^{+}, 20%).
Etapa B
Síntesis del ácido (2S)-2-({[4-(3-(N[2-(2-((2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]butanoilamino-4-[(t-butil)oxicarbonil]butanoilamino)-etil]carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil]sulfonil}amino)-3-({1-[3-imidazol-2-ilamino)-propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
144
El producto del Ejemplo 34, Etapa D (45 mg, 50 \mumol) se disolvió en DMF (1,5 ml) con el producto de la Etapa A (44 mg, 65 \mumol) y diisopropilamina (30,5 \mul, 175 \mumol) bajo nitrógeno. La solución se agitó durante 45 min, se concentró en vacío y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-70% de B en 25 min). Las fracciones de producto se congelaron y liofilizaron, obteniéndose el producto como un polvo blanco (49 mg, 83%). LRMS (EI); 693,1 ([M+Na]^{+}, 35%), 1188,4 ([M+H]^{+}, 45%). 593,3 ([M+2H]^{2+}, 100%).
Etapa C
Síntesis de ácido (2S)-2-({[4-(3-(N[2-(2-{(2S)-4-[(t-butil)-oxicarbonil]butanoilamino}-4-[(t-butil)oxicarbonil]butanoilamino)-etil]carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil]sulfonil}amino)-3-({1-[3-imidazol-2-ilamino)-propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
145
El producto de la Etapa B (25 mg, 24 \mumol) en metanol (3 ml) se añadió a paladio al 10%sobre carbón (14 mg) en metanol (3 ml) bajo nitrógeno en una botella de Parr. Se hidrógeno a 345 kPa durante 180 min, se filtró a través de celita, se enjuagó con metanol y se concentró, resultando un aceite viscoso. Éste se volvió a disolver en agua acetonitrilo 1:1 que contenía 0,1% de TFA (ml) y se liofilizó (acetonitrilo/agua 1:1/0,1% de TFA), obteniéndose el producto como un polvo blanco (29 mg, rend. de 100%), que en análisis por HPLC (4,6 x 150 mm, C-18 Zorbax, 1 ml/min; agua/90% de acetonitrilo/0,1% de ácido trifluoroacético, 2-100% de B a lo largo de 14 min) presenta dos picos iguales. LRMS (ES): 1054,5 ([M+H]^{+}, 10%), 527,8 ([M+2H]^{2+}, 100%),; idénticos para cada pico. Este producto no se purificó más, sino que se usó en la etapa siguiente como mezcla de dos diastereómeros.
Etapa D
Síntesis de ácido (2S)-2-({[4-(3-(N-[2-(2-{(2S)-4-[(t-butil)-oxicarbonil]-2-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil](metil}ciclododecil)acetilamino]butanoilamino}-4-[(t-butil)oxicarbonil]-butanoilamino)etil]carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil]sulfonil}amino)-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico
146
En un recipiente de vidrio seco bajo nitrógeno se mezclaron HBTU (16,4 mg, 43 \mumol), DOTA (OtBu)_{3}-OH (36 mg, 52 \mumol) y diisopropiletilamina (26 \mul 85 \mumol) en DMF seca (0,6 ml). La mezcla se agitó durante 10 min y luego se añadió el producto de la Etapa C (29 mg, 2,5 \mumol) en DMF (0,8 ml) junto con más diisopropiletilamina (20 \mul, 65 \mumol) para llevar a solución a pH >9. Después de agitarla durante 60 min, se concentró la solución de reacción y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua 0,1% de TFA; 20-70% de B en 50 min). Después de purificación se obtuvieron dos productos, un par de estereoisómeros del ácido glutámico, que se congelaron y liofilizaron, obteniéndose los productos como polvos blancos (8 mg cada uno, 40%) con configuraciones de fragmantación idénticas. LRMS (ES): 1609,0 ([M+H]^{+}, 5%), 805,0 ([M+2H]^{2+}, 30%), 537 ([M+3H]^{3+}, 100%). Usando el procedimiento de HPLC en le Etapa X2C, R_{t} = 11,54 min y 11,78 min.
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Etapa E
Síntesis del ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxibutanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico 
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147 
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Los productos de la Etapa D se disolvieron individualmente en una mezcla de diclorometano (1 ml), ácido trifloroacético (1 ml) y trietilsilano (0,2 ml) bajo nitrógeno y se agitó durante 16 h. Se concentraron las soluciones y los residuos se purificaron por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrlo/agua/0,1% de TFA; 0-45% de B en 45 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose los productos como sólidos blancos (3,5 mg de cada uno, aprox. 50%) con idénticas configuraciones de fragmentación. LRMS (ES): 1328,5 ([M+H]^{+}, 5%), 664,8 ([M+2H]^{2+}, 100%), 372,2 (100%); usando el procedimiento de HPLC en la Etapa C. R_{t} = 8,08 min y 8,09 min.
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Ejemplo 39
Síntesis del ácido (4S)-4-(N-[(1S)-1-(N-(1,3-bis[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil} carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil)-4-(6-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclo-dodecil]acetilamino)hexanoilamino)butanoico 
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148 
\newpage
Etapa A
Síntesis del ácido (2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-(4-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil}carbamoil)-4-[(t-butoxi)-carbonilamino]butanoilamino}etil)carbamoil]propoxi}-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}-3-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-propanoico 
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149 
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El producto del Ejemplo 34, Etapa D (45 mg, 49,4 \mumol) se añadió junto con Boc-Glu-(OTFP)-OTFP (13 mg, 24 \mumol) a DMF (1,5 ml) que contenía diisopropilamina (31 \mul, 180 \mumol) y se agitó durante 18 h. La solución se concentró y se purificó por HPLC preparativa (C-18, Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 5-55% de B en 25 min). Las fracciones de producto se congelaron y liofiilizaron para obtener el producto como un polvo blanco (31 mg, 82%). LRMS (ES): 1578,5 ([M+H]^{+}, 5%), 790,1 ([M+2H]^{2+}, 100%), 527,3 ([M+3H]^{3+}, 50%).
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Etapa B
Síntesis de (4S)-4-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)-carbonilamino]butanoilamino)-4-(N-(1,3-bis[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil}carbamoil)butanoato de t-butilo 
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150 
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El producto de la Etapa A (30 mg, 19 \mumol) se añadió a una solución de ácido trifluoroacético (250 \mul) en diclorometano (500 \mul) y se agitó durante 30 min en atmosfera de nitrógeno. La solución se concentró y se dejó en vacío durante 1 h. El residuo se disolvió en DMF (800 \mul) bajo nitrógeno y se añadió el producto del Ejemplo 38, Etapa A (16 mg, 24 \mumol) y seguidamente diisopropilamina (75 \mul, 730 \mumol) para ajustar el pH a más de 9. La solución se agitó durante 60 min, se concentró y se purificó por HPLS preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm; 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-60% de B a lo largo de 40 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto como un polvo blanco (30 mg, 81%). LRMS (ES): 1983,6 ([M+H]^{+}, 10%), 992,0 ([M+2B]^{2+}, 100%). 661,8 ([M+3H]^{3+}, 80%), 643,2 ([(M-tBu)+3H]^{3+}, 40%), 624,4 ([(M-2tBu)+3H]^{3+}, 30%). HRMS: calc para C_{93}H_{124}N_{21}O_{24}S_{2}: 1982,857; hallado: 1982,55.
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Etapa C
Síntesis de ácido (4S)-4-{(2S)-2-{6-[(t-butoxi)-carbonilamino]hexanoilamino}-4-carboxibutanoilamino)-4-(N-(1,3-bis[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]-butanoilamino)etil)carbamoil]propil}-carbamoil)butanoico 
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151 
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El producto de la Etapa B (29 mg, 14,6 \mumol) se disolvió en ácido trifluoroacético neto (2 ml) y se añadió trietilamina (250 \mul). La mezcla de reacción se calentó a 70ºC durante 3 h bajo nitrógeno mientras que se agitaba, se concentró, se reconcentró con tolueno (5 ml), se disolvió en agua/acetonitrilo 1:1, se congeló y liofilizó. El polvo resultante (27 mg) se disolvió en DMF (0,8 ml) con 6-[(t-butoxi)carbonilamino]hexanoato de 2,3,5,7-tetrafluorofenilo (10 mg, 52 \mumol) y se agitó durante 45 min. Se concentró la mezcla de reacción, que contenía el producto de tris-hexanoílo; el residuo se disolvió en etanol (2 ml) y se añadió hidróxido sódico (solución 5 N, 200 \mul). La solución se agitó durante 25 min, se neutralizó a pH <5 con HCl 1 N (aprox. 1,1 ml) y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de3 TFA; 15-55% de B a lo largo de 50 min). La fracción de producto se congeló y liofilizó, obteniéndose el producto como un polvo blanco (21 mg, 65%). LRMS (ES): 1951,3 ([M+H]^{+}, 5%), 975,5 ([M+2H]^{2+}, 90%), 617,5 ([(M-Boc)+3H]^{3+}, 100%).
\newpage
Etapa D
Síntesis de ácido (4S)-4-[(2S)-2-(6-aminohexanoilamino)-4-carboxibutanoilamino]-4-(N-(1,3-bis[N-2-(4-{4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetil-fenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil}carbamoil)butanoico 
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152 
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El producto de C (19 mg, 9,7 \mumol) se añadió a ácido trifluoroacético (200 \mul) y diclorometano (600 \mul) y la mezcla se agitó bajo nitrógeno durante 30 min, se concentró y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 5-35% de B en 40 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto como un polvo blanco (13 mg, 70%). LRMS (ES): 1850,3 ([M+H]^{+}, 5%), 925,6 ([M+2H]^{2+}, 25%), 617,7 ([M+3H]^{3+}, 100%).
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Etapa E
Síntesis de 2(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris([(t-butil)oxicarbonil]-metil)ciclododecil)acetato de 2,3,5,6-tetrafluorofenilo 
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153 
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Se añadió DOTA(Ot(Bu)_{3}-OH (95 mg, 138 \mumol) a DMF seca (1 ml) junto con HBTU (90 mg, 210 \mumol), diisopropiletilamina (103 \mul, 740 \mumol) y 2,3,5,6-tetrafluorofenol (32 mg, 270 \mumol). La solución se agitó bajo nitrógeno durante 18 h, se concentró y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-80% de B durante 30 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto como un polvo blanco (81 mg, 70%). LRMS (ES): 721,5 ([M+H]^{+}, 100%), 665,5 (([(M-tBu)+H]^{+}, 70%).
\newpage
Etapa F
Síntesis de ácido (4S)-4-[(2S)-4-carboxi-2-{6-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]metil} ciclododecil)acetilamino]hexanoilamino}-butanoilamino)-4-(N-(1,3-bis[N-2-(4-{4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimeti-fenoxi]-butanoilamino}etil)carbamoil]propil}carbamoil)butanoico
154
El producto de la Etapa D (12 mg, 6,1 \mumol) y el producto de de la Etapa E (7,2 mg, 7,6 \mumol) se mezclaron en DMF seca (600 \mul) con diisopropiletilamina (13,2 \mul, 76 \mumol) y la mezcla se agitó bajo nitrógeno. Después de 5 h, se concentró la mezcla de reacción, se disolvió en etanol (2 ml) y se trató con hidróxido sódico (540 \mul de una solución 1 N). Después de 45 min, se acidificó la solución con HCl 1 N (aprox. 600 \mul), se concentró y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 10-55% de B en 50 min). Se congeló la fracción de producto, que según el análisis por HPLC contenía varias impurezas, y se liofilizó, obteniéndose el producto como un polvo blanco (10,5 mg, 72%). LRMS (ES): 802,2 ([M+3H]^{3+}, 100%), 604,1 ([M+4H]^{4+}, 90%).
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Etapa G
Síntesis del ácido (4S)-4-(N-[(1S)-1-(N-(1,3-bis[N-(2-{4-[4-[({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil}carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil)-4-(6-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclo-dodecil]acetilamino)hexanoilamino)butanoico
155
Se añadió el producto de F (10 mg) a diclorometano (1 ml) que contenía ácido trifluoroacético (1 ml) y trietilsilano (200 \mul) y se agitó bajo nitrógeno durante 72 h. Se concentró la mezcla de reacción y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 15-55% de B en 50 min). Se congeló la fracción de producto y se liofilizó, obteniéndose el producto como un polvo blanco (1 mg, 50%). LRMS (ES): 1118,7 ([M+2H]^{2+}, 10%), 746,3 ([M+3H]^{3+}, 40%), 560,0 ([M+4H]^{4+}, 100%).
Ejemplo 40
Síntesis de ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3.-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}-carbamoil)-4-(6-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetil-amino)butanoico
156
Etapa A
Síntesis de 1-[3-(pirimidin-2-ilamino)propil]-1H-indazol-5-carboxilato de etilo
157
Se disolvió en tolueno (15 ml) 1-(3-oxopropil)-1H-indazol-5-carboxilato de etilo ((1,04 g, 4,06 mmol, preparado como describen Jadhav y otros en la patente U.S. nº. 5.760.028) y se añadió 2-aminopirimidina (463 mg, 4,9 mmol) junto con sulfato magnésico anhidro (2,44 g, 20 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla se agitó vigorosamente durante 6 h, se filtró bajo nitrógeno, se lavaron los sólidos (10 ml de tolueno) y el filtrado se trató con triacetoxiborohidruro sódico (8,6 g, 40 mmol). La mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno durante 18 h, se diluyó con tolueno (25 ml) y se vertió en agua (100 ml). Se añadió solución saturada de bicarbonato sódico (80 ml) para ajustar el pH a más de 8. Se separaron las capas y la capa acuosa se sometió a extracción con tres porciones de acetato de etilo. Se combinaron las capas orgánicas y la combinación se lavó con solución saturada de bicarbonato sódico, agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró en vacío, obteniéndose un aceite de color oro (1,3 g). Éste se purificó por cromatografía HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 10-70% de B a lo largo de 30 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (520 mg, 40%). LRMS (ES): 326,2 [M+H]^{+}. HRMS: calc para C_{17}H_{20}N_{5}O_{2}: 326,1617; hallado: 326,1605. RMN ^{1}H (600,1343 MHz, CDCl_{3}): 9,68 (s anc, 1H), 8,58 (m, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,08 (m, 1H), 8,03 (t, 1H), 7,50 (d, 1H), 6,73 (t, 1H), 4,55 (m, 2H), 4,39 (q, 2H), 3,36 (m, 2H), 2,35 (m, 2H), 1,41 (t, 3H).
Etapa B
Síntesis de ácido 1-[3-(pirimidin-2-ilamino)propil]-1H-indazol-5-carboxílico
158
El producto de la Etapa A (510 mg, 1,16 mmol) se disolvió en etanol (50 ml) y se añadió hidróxido sódico (6,5 ml de una solución 1 N, 6,5 mmol). La solución se calentó a reflujo durante 1,5 h, se diluyó con agua (45 ml) y el etanol se eliminó en vacío. La solución se acidificó a pH 3 con HCl 1N (aprox. 7 ml) mientras que se agitaba. Se separaron por filtración los sólidos resultantes, se lavaron con agua y se secaron en vacío, obteniéndose el producto (308 mg, 89%). LRMS (ES): 298,1 [M+H]^{+}. HRMS: calc para C_{15}H_{16}N_{5}O_{2}: 298,1304; hallado: 298,1320. RMN ^{1}H (600,1343 MHz, CDCl_{3}): 12,5 (b, H), 8,42 (s, 1H), 8,26 (d, 2H), 8,19 (s, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,45 (m, 1H), 6,58 (s, 1H), 4,50 (t, 2H), 3,29 (m, 2H), 2,13 (t, 2H).
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Etapa C
Síntesis de (2S)-2-[((2,6-dimetil-4-[3-(N-{2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]etil}carbamoil)propoxi]fenil}sulfonil)amino]-3-({1-[3-(pirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il}carbonilamino)propanoato de metilo
159
El producto de la Etapa B (292 mg, 0,98 mmol) se trató como en el Ejemplo 37, Etapa A, para obtener el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm; 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 10-70% de B a lo largo de 30 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (825 mg, 88%). LRMS (ES): 844,3 [M+H]^{+}.
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Etapa D
Síntesis de (2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-aminoetil)carbamoil)propoxi}-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}-3-({1-[3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoato de metilo
160
El producto de la Etapa C (250 mg, 260 \mumol) se trató como en el Ejemplo 37, Etapa B, para obtener el producto como un polvo blanco (220 mg, 89%). LRMS (ES): 714,3 ([M+H]^{+}, 25%), 402,2 (30%), 357,1 ([M+2H]^{2+}, 100%). HRMS calc para C_{33}H_{48}N_{7}O_{7}S: 714,3397; hallado: 714,3374
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Etapa E
Síntesis de (4S)-4-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil] (1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino)etil)carbamoil]-4-[(fenilmetoxi)carbonil-amino]butanoato de t-butilo
161
El producto de la Etapa D (219 mg, 234 \mumol) se disolvió en DMF (2 ml) y se añadió 2,5-dioxopirrolidinil (2S)-2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]pentano-1,5-dioato de t-butilo (108 mg, 250 \mumol) junto con diisopropilamina (130 \mul, 750 \mumol). La solución se agitó bajo nitrógeno durante 90 min, se concentró y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac. 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-75% de B a lo largo de 40 min). Se congelaron yliofilizaron las fracciones de producto, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (242 mg, 81%). LRMS (ES): 1033,4 ([M+H]^{+}, 100%), 489,2 ([(M-tBu)+2H]^{2+}, 80%).
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Etapa F
Síntesis de 4-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-4-aminobutanoato de t-butilo 
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El producto de C (228 mg, 198 \mumol) se trató como en la Etapa D para obtener el producto como un polvo blanco (176 mg, 79%). LRMS (ES): 899,5 ([M+H]^{+}, 50%), 450,2 ([M+2H]^{2+}, 65%), 422,4 ([(M-tBu) + 2H]^{2+}, 100%).
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Etapa G
Síntesis de 4-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)-carbonilamino]butanoilamino}-4-(N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino)etil)carbamoil]butanoato de t-butilo 
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163 
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El producto de la Etapa F (85 mg, 76 \mumol) se trató como en la Etapa E para obtener el producto después de liofilización (87 mg, 87%). LRMS (ES): 1218,6 ([M+H]^{+}, 100%), 610,0 ([M+2H]^{2+}, 20%), 581,8 ({(M-tBu) + 2H]^{2+}, 30%), 553,8 ([(-M-tBu) + 2H]^{2+}, 85%).
\newpage
Etapa H
Síntesis de (4S)-4-[N-{1-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-((1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-[(t-butil)oxi-carbonil]propil}carbamoil)-4-aminobutanoato de t-butilo 
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El producto de la Etapa G (75 mg, 56 \mumol) se trató como en la Etapa F para obtener el producto como un sólido blanco (72 mg, 97%). LRMS (ES): 1084,6 ([M+H]^{+}, 20%), 542,8 ([M+2H]^{2+}, 100%), 514,8 ([(M-tBu) + 2H]^{2+}, 30%), 486,9 ([(M-2tBu) + 2H]^{2+}, 20%).
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Etapa I
Síntesis de (4S)-4-[N-{1-[N-(2-(4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-[(t-butil)oxi-carbonil]propil}carbamoil)-4-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]-metil}ciclododecil)acetilamino]butanoato de t-butilo 
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El producto de la Etapa H (60 mg, 46 \mumol) se trató como en el Ejemplo 37, Etapa G, para obtener el producto como un compuesto individual puro (40 mg, 54%) después de liofilización. LRMS (ES): 1638,7 ([M+H]^{+}, 10%), 820,1 ([M+2H]^{2+}, 30%), 528,5 ([(M-tBu) + 3H]^{3+}, 30%), 509,8 ([(M-tBu]^{3+}, 100), 491,1 ([(M-tBu] + 3H]^{3+}, 50%).
\newpage
Etapa J
Síntesis de ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3.-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2ilamiono)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil}carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclo-dodecil]acetilamino)hexanoilamino)butanoico 
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166 
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El producto de la Etapa I (25 mg, 14,3 \mumol) se disolvió en THF (600 \mul/agua(100 \mul) y se añadió hidróxido de litio (3 N en agua, 60 \mul, 180 \mumol) con agitación. La solución se agitó durante 100 min, se acidificó a pH 2 con ácido trifluoroacético (14 \mul) y se concentró en vacío. El residuo se trató con diclorometano (1 ml), ácido trifluoroacético (1 ml) y trietilsilano (100 \mul) bajo nitrógeno. La solución se agitó durante la noche, se concentró y se purificó por HPLC preparativa (CN Zorbax, 21,2 mm x 25 cm, 50% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido fórmico; 20-30% de B a lo largo de 50 min). La combinación de fracciones de producto, después de congelación y liofilización, dio el producto como un sólido blanco (13 mg, 57%). LRMS (EI); 1345,5 ([M+H]^{+}, 15%), 672.9 ([M+2H]^{2+}, 100%), 449,9 ([M+3H]^{3+}, 50%).
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Ejemplo 41
Síntesis de ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-metil-3-[3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino)butanoico 
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167 
\newpage
Etapa A
Síntesis de (2S)-2-[({2,6-dimetil-4-[3-(N-{2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]etil}carbamoil)propoxi]fenil}sulfonil)amino]-3-({1-metil-3-[3-(2-piridilamino)propil](1H-indazol-6-il)}carbonilamino)propanoato de metilo
168
Se trató el ácido 1-metil-3-[3-(2-piridilamino)propil]-1H-indazol-6-carboxílico (79 mg, 256 \mumol, preparado como se describe por Jadhav y otros en la patente U.S. nº. 5.760.028), con el producto del Ejemplo 34, Etapa B (223 mg, 282 \mumol) como en el Ejemplo 37, Etapa A, para obtener el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 10-60% de B en 30 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (122 mg, 49%). LRMS (ES): 857,3 ([M+H]^{+}, 100%). HRMS: calc. para C_{43}H_{53}N_{8}O_{9}: 857,3656; hallado: 857,3676.
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Etapa B
Síntesis de (2S)-2-{[(4-[3-[N-{2-aminoetil)carbamoil]propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}-3-({1-metil-3-[3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil]-(1H-indazol-6-il)}carbonilamino)propanoato de metilo
169
Una botella de Parr se cargó con Pd al 10%/C (50 mg) y metanol (5 ml) bajo nitrógeno. Se añadió el producto de la Etapa A (113 mg, 116 mmol) en metanol (5 ml) junto con 20 \mul de ácido trifluoroacético. La mezcla se hidrógeno a 345 kPa durante 7,5 h con sacudidas, se filtró a través de celita, se enjuagó con metanol y se concentró la combinación de filtrados. El residuo se redisolvió en acetonitrilo/agua 1:1/0,1% de TFA, se congeló y se liofilizó, obteniéndose el producto como un polvo blanco (98 mg, 88%). LRMS (ES): 727,3 ([M+H]^{+}, 25%), 364,2 ([M+ 2H]^{2+}, 100%). HRMS: calc para C_{35}H_{51}N_{8}O_{7}S: 727,3601; hallado: 727,3613.
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Etapa C
Síntesis de (4S)-4-(N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-metil-3-[3-(2,3,9,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-6-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-4-[(fenilmetoxi)carbonil-amino]butanoato de t-butilo
170
El producto de la Etapa B (98 mg, 102 \mumol) se hace reaccionar como en el Ejemplo 40, Etapa E, (90% de acrilonitrilo/agua/0,1% de TFA; 10-70% de B en 25 min). Las fracciones de producto se congelaron y liofilizaron, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (103 mg, 96%). LRMS (ES): 1046,5 ([M+H]^{+}, 100%), 495,9 ([M-t(BU) + 2H]^{2+}, 60%).
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Etapa D
Síntesis de (4S)-4-{[2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil)-2-[(fenilmetoxi)-carbonilamino]butanoilamino)-4-(N-(2-{4-[4- ({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-metil-3-[3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-6-il)}carbonil- amino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]butanoato de t-butilo
171
El producto de la Etapa C 897 mg, 83 \mumol) se trató como en el Ejemplo 37, Etapa B, para obtener la amina desprotegida en bruto (87 mg). Ésta se hizo reaccionar como en el Ejemplo 40, Etapa E, y se purificó por HPLC preparativa (C-(Zorbax, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-28% de B en 20 min). las fracciones de producto se congelaron y liofilizaron, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (77 mg, 76%). LRMS (ES): 1231,6 ([M+H]^{+}, 90%), 616,4 ([M + 2H]^{2+}, 40%). 588,4 ([M-tBu) + 2H]^{2+}, 50%), 495,9 ([(M-2tBu) + 2H]^{2+}, 100%).
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Etapa E
Síntesis de (4S)-4-(N-((1S)-1-[N-2-{4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-metil-3-[3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-6-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-[(t-butil)oxi-carbonil]propil}carbamoil)-4-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]metil}ciclododecil)acetilamino]butanoato de t-butilo
172
El producto de la Etapa D (71 mg, 53 \mumol) se trató como en el Ejemplo 37, Etapa B, para obtener la amina desprotegida en bruto (64 mg). Ésta se hizo reaccionar con DOTA(OtBu)_{3}-OH (29,5 mg, 52 \mumol) como en el Ejemplo 40, Etapa I, y el producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de TFA; 20-75% de B en 45 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el compuesto deseado como un polvo blanco (62 mg, 75%). LRMS (ES): 1651,9 ([M+H]^{+}, 5%), 826,7 ([M+2H]^{2+}, 30%), 532,8 ([(M-tBu + 3H]^{3+}, 25%), 514,9 ([(M-2tBu) + 3H]^{3+}, 100%), 495,4 ([(M-3tBu) + 3H]^{3+}, 60%).
\newpage
Etapa F
Síntesis del ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-metil-3-[3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]-amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil]carbamoil)-4-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino)butanoico
173
El producto de la Etapa E (42 mg, 25 \mumol) se trató como en el Ejemplo 40, Etapa J, y el producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (CN Zorbax, 21,2 mm x 25 cm, 50% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido fórmico; 20-35% de B en 60 min). Se combinaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto como un sólido blanco (11 mg, 48%). LRMS (EI); 1357,6 ([M+H]^{+}, 15%), 679,5 ([M+2H]^{2+}, 100%), 453,3 ([M+3H]^{3+},40%).
Ejemplo 42
Síntesis del ácido (4S)-4-{(1S)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico
174
Etapa A
Síntesis de 1-[2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil]-1H-indazol-5 carboxilato de etilo y 2-[2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil]-1H-indazol-5 carboxilato de etilo
175
Se añadió 1H-indazol-5-carboxilato de etilo (1,5 g, 7,9 mmol) y 18-corona-6 (45 mg) a THF seco (45 ml) en un recipiente de vidrio secado a la llama bajo nitrógeno. Mediante una jeringa, se añadió bis(trimetilsilil)amida sódica (8,7 mg de una solución 1 M en THF, 8,7 mmol) y seguidamente N-(2-bromoetil)ftalimida (2,5 g, 9,8 mmol). La mezcla de reacción se calentó a la temperatura de reflujo durante 22 h, se enfrió y se concentró en vacío. El residuo se repartió entre tolueno y agua, se separó y la capa acuosa se sometió a extracción con acetato de etilo. Se combinaron las fases orgánicas y la combinación se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró, obteniéndose 3,5 g de un aceite. Éste se purificó por cromatografía rápida (gradiente de tolueno/acetato de etilo), recogiendo dos productos separados que se concentraron, resultando los productos como aceites que solidificaron en reposo. El indazol 1-sustituido eluyó primero (980 mg) y seguidamente eluyó el análogo 2-sustituido (600 mg) con un rendimiento combinado de 55%. Sus espectros de masa eran idénticos. LRMS (ES): 364,1 ([M+H]^{+}, 100%), 386,1 ([M+Na]^{+}, 15%).
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Etapa B
Síntesis de 1-(2-aminoetil)-1H-indazol-5-carboxilato de etilo 
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176 
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Se disolvió 1-[2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)etil]1H-indazol-5-carboxilato de etilo (Etapa A, 980 mg, 2,7 mmol) en etanol/THF (1:1, 35 ml) bajo nitrógeno. Se añadió hidrazina (365 \mul) y la mezcla de reacción se agitó durante 17 h. Se añadió THF (75 ml) y se eliminaron por filtración los sólidos resultantes. Se concentró el filtrado para obtener un sólido de color naranja que se purificó por cromatografía rápida (diclorometano/5% de metanol/5% de trietilamina). Se combinaron las fracciones de producto y se concentró la combinación, obteniéndose un sólido de color naranja (404 mg, 66%). LRMS (ES): 234,1 ([M+H]^{+}, 100%).
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Etapa C
Síntesis de 1-{2-[(1-hidroxi-2-piridil)amino]etil}-1H-indazol-5-carboxilato de etilo 
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177 
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Se añadió 1-(2-aminoetil)-1H-indazol-5-carboxilato de etilo (584 mg, 2,5 mmol, preparado como en la Etapa B) a n-butanol seco junto con hidrocloruro de 2-cloropiridina-N-óxido (847 mg, 5,1 mmol) y bicarbonato sódico anhidro (850 mg, 10,1 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente y se calentó a 100ºC durante 21 h. Se añadieron partes alícuotas adicionales de hidrocloruro de 2-cloropiridina-N-óxido (847 mg, 5,1 mmol) y bicarbonato sódico anhidro (850 mg, 10,1 mmol) y se continuó calentando durante 24 h. Se enfrió la mezcla de reacción y se filtró; se concentró el filtrado. El residuo se purificó por cromatografía rápida (5% de metanol/diclorometano) y se concentraron las fracciones de producto, obteniéndose el producto como un sólido de color naranja (358 mg, 44%). LRMS (ES): 327,1 ([M+H]^{+}, 100%), 653,3 ([2M + H]^{+}, 40%). RMN ^{1}H (600,1343 MHz, CDCl_{3}): 8,44 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,97 (d de t, 2H), 7,56 (s anc, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,06 (m, 1H), 6,45 (m, 1H), 6,35 (t, 1H), 4,68 (t, 2H), 4,37 (q, 2H), 3,90 (q, 2H), 1,39 (t, 3H).
\newpage
Etapa D
Síntesis de ácido 1-{2-[(1-oxi-2-piridil)amino]etil}-1H-indazol-5-carboxílico 
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178 
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El producto de la Etapa C (349 mg, 1,07 mmol) se disolvió en etanol (35 ml) y se añadió solución 1 N de hidróxido sódico (6,0 ml, 6 mmol). La solución se calentó a reflujo durante 73 h, se redujo el volumen a la mitad y se añadió agua (30 ml). Se añadió ácido clorhídrico 1 N hasta pH 3 y el etanol remanente se concentró en vacío. Los sólidos resultantes se filtraron y se secaron en vacío, obteniéndose el producto como un sólido blancuzco (163 mg, 51%). LRMS (ES): 299,2 ([M+H]^{+}, 100%).
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Etapa E
Síntesis de (2S)-2-[({2,6-dimetil-4-[3-(N-{2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]-etil}carbamoil)propoxi]fenil}sulfonil)amino]-3-[(1-{2-[(1-{2-[(1-oxi(2-piridil)amino]-etil}(1H-indazol-5-il))carbonilamino]propanoato de metilo 
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179 
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El producto de la Etapa D (137 mg, 460 \mumol) se disolvió en DMF con el producto del Ejemplo 34, Etapa B (312 mg, 460 \mumol) y HBTU (209 mg, 552 \mumol) bajo nitrógeno. Se añadió diisopropiletilamina (240 \mul, 1,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 50 min. Se concentró la solución y se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 18,5 cm x 25 cm, 80 ml/min; 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético; 20-55% de B a lo largo de 40 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (238 mg, 54%). LRMS (EI): 845,3 ([M+H]^{+}, 100%), 1690 ([2M + H]^{+}, 10%), 711,3 ([(M-Z)+H]^{+}, 30%)
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Etapa F
Síntesis de ácido (2S)-2-{[(4-(3-[N-(2-aminoetil)carbamoil]propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino)-3-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico 
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180 
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Se cargó una botella de Parr bajo nitrógeno con paladio al 10% sobre carbón (100 mg) y seguidamente con metanol (10 ml). Se añadió el producto de la Etapa E (230 mg, 240 \mumol) disuelto en metanol (30 ml) y la reacción de hidrogenación se realizó durante 20 h a 379 kPa. Se añadió más catalizador (50 mg) y ácido trifluoroacético (60 \mul) y se continuó la hidrogenación durante 34 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celita, se enjuago y se concentraron los filtrados, obteniéndose 205 mg de un aceite que contenía algo de N-óxido desprotegido. Este aceite se disolvió en agua/THF (1:1, 1,5 ml) y se añadió solución 3 N de hidróxido de litio (720 \mul, 2,1 mmol). La solución se agitó durante 1 h, se acidificó a pH 2 con ácido trifluoroacético y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético; 5-30% de B a lo largo de 50 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congelaron y liofilizaron, obteniéndose el producto como un sólido blanco (38 mg, 26%). LRMS (EI): 685,3 ([M+H]^{+}, 100%).
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Etapa G
Síntesis de ácido (2S)-2-{[(4-(3-[N-(2-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]butanoilamino}etil)carbamoil]propoxi}-2,6-dimetilfenil)-sulfonil]amino)-3-({1-[2-(2,3,9,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}-carbonilamino)propanoico 
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181 
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El producto de la Etapa F (125 mg, 183 \mumol) se trata como en el Ejemplo 40, Etapa E. El producto se obtiene como un sólido blanco después de liofilización.
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Etapa H
Síntesis de ácido (2S)-2-{[(4-(3-[N-(2-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]butanoilamino}-4-[(t-butil)oxicarbonil]butanoilamino)-etil)carbamoil]propoxi)-2,6-dimetilfenil)sulfonil}amino)-3-({1-[2-(2,3,9,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}-carbonilamino)propanoico 
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182 
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El producto de la Etapa G se trata como en el Ejemplo 40, Etapa F. El residuo no se purifica sino que se trata directamente como en el Ejemplo 40, Etapa G. El producto se obtiene como un sólido blanco después de liofilización
\newpage
Etapa I
Síntesis de (4S)-4-(N-((1S)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[2-(2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-[(t-butil)oxicarbonil]propil} carbamoil)-4-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]metil}ciclododecil)acetilamino]butanoato de t-butilo 
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183 
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El producto de la Etapa H se trata como en el Ejemplo 40, Etapa H. El residuo no se purifica sino que se trata directamente como en el Ejemplo 40, Etapa I. El residuo no se purifica sino que se acopla directamente con DOTA(OtBu)3-OH como en el Ejemplo 40, Etapa I. El producto se obtiene como un sólido blanco después de liofilización.
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Etapa J
Síntesis del ácido (4S)-4-{(1S)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico 
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184 
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El producto de la Etapa I se trata como en el Ejemplo 40, Etapa J. El producto en bruto se purifica por HPLC preparativa (CN Zorbax, 21,2 mm x 25 cm, 50% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido fórmico; 20-35% de B a lo largo de 60 min). Las fracciones de producto se combinan, congelan y liofilizan, obteniéndose el producto como un sólido blanco.
\newpage
Ejemplo 43
Síntesis de ácido (2S)-2-{[(2,6-dimetil-4-{3-[N-(2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}etil)carbamoil]propoxi}fenil]-sulfonil]amino}-3-({2-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil]2-hidro-1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico
185 
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Etapa A
Síntesis de 2-(2-aminoetil)-2-hidro-1H-indazol-5-carboxilato de etilo
186
El producto que eluía más lentamente del Ejemplo 42, Etapa A (600 mg, 1,65 mmol) se trató como en el Ejemplo 42, Etapa B, para obtener el producto como un compuesto individual puro (164 mg, 43%). RLMS (ES): 234,2
([M+H]^{+}, 100%)
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Etapa B
Síntesis de 2-{2-[(1-hidroxi-2-piridil)amino]etil]-2-hidro-1H-indazol-5-carboxilato de etilo
187
El producto de la Etapa A (249 mg, 1,07 mmol) se trató como en el Ejemplo 42, Etapa C, para obtener el producto con una pureza de 80% según cromatografía rápida. Este producto se purificó por HPLC preparativa (C-18, Vydac, 21,2 mm x 25 cm, acetonitrilo 90%/agua/0,1% de TFA; 10-55% de B durante 25 min). Se congelaron las fracciones de producto y se liofilizaron, obteniéndose el producto deseado como un polvo blanco (204 mg, 43%). LRMS (ES): 327,2 ([M+H]^{+}, 100%), 653,3 ([2M+H]^{+}, 40%).
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Etapa C
Síntesis del ácido 2-{2-[(1-hidroxi-2-piridil)amino]etil]-2-hidro-1H-indazol-5-carboxílico
188
El producto de la Etapa B (202 mg, 481 \mumol) se trató como en el Ejemplo 42, Etapa D, para obtener después de filtración el producto como un polvo blanco (138 mg, 100%). LRMS (ES): 299,2 ([M+H]^{+}, 100%).
\newpage
Etapa D
Síntesis de (2S)-2-[({2,6-dimetil-4-[3-(N-{2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]-etil}carbamoil)propoxi]fenil}sulfonil)amino]-3-[(2-(2-[(1-{2-[(1-oxi(2-piridil)amino]-etil}(2-hidro-1H-indazol-5-il))carbonilamino]propanoato de metilo
189
El producto de la Etapa C (35 mg, 116 \mumol) se trató como en el Ejemplo 42, Etapa E, para obtener el producto como un polvo blanco después de liofilización (64 mg, 58%). LRMS (ES): 845,3 ([M+H]^{+}, 100%). HRMS: calc. para C_{41}H_{49}N_{8}O_{10}S_{:} 845,3292; hallado: 845,3264.
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Etapa E
Síntesis de (2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-aminoetil)carbamoil]propoxi}-2,6-dimetilfenil)sulfonil]amino}-3-({2-[2-(2,3,4, 5,6-tetrahidropiridilamino)etil](2-hidro-1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoato de metilo
190
El producto de la Etapa D (25 mg, 26 \mumol) se trató como en el Ejemplo 42, etapa F, obteniéndose el producto como un polvo blanco después de liofilización (11 mg, 52%). LRMS (ES): 685,3 ([M+H]^{+}, 100%).
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa F
Síntesis de (2S)-2-[({2,6-dimetil-4-[3-[N-{2-[2-(1,4,7,10 tetraaza-4,7,10 tris{[(t-butil)oxicarbonil]metil}ciclo- dodecil)acetilamino]etil}carbamoil}propoxi]fenil}sulfonil)-amino]-3-({2-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](2-hidro-1H-indazol-5-il)}-carbonilamino)-propanoato de metilo
191
El producto de la Etapa E (11 mg, 15 \mumol) se hace reaccionar con DOTA(OBu)_{3}-OH (10 mg, 17 \mumol) como en el Ejemplo 37, Etapa F, para obtener el producto como compuesto puro después de purificación y liofilización.
\newpage
Etapa G
Síntesis de ácido (2S)-2-{[(2,6-dimetil-4-(3-[N-(2-{2-]1,4,7,10 tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}etil)carbamoil]propoxi}fenil)-sulfonil)amino]-3-({2-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](2-hidro-1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
192 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa F (12 mg, 9,7 \mumol) se desprotegió como en el Ejemplo 40, Etapa J, para que resultara el producto como compuesto puro después de purificación por HPLC preparativa y liofilización de las fraccione sde producto.
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Ejemplo 44
Síntesis del ácido (4S)-4{N-[(1S)-1-(N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil)-4{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
193 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
Síntesis de (2S)-3-amino-2-{[(4-{4-[({2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]etil}amino)sulfonil]fenil}fenil)sulfonil]amino}propanoato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
194
Se hizo reaccionar cloruro de 4,4'disulfonilo (5,3 g, 15 mmol) con N-(2-aminoetil)(fenilmetoxi)carboxamida (2,3 g, 10 mmol) y (2S)-2-amino-3-[(t-butoxi)carbonilamino]propanoato de metilo (5,1 g, 20 mmol) secuencialmente, de la misma manera que en la Etapa 1B, para obtener 10,2 g del producto protegido con Boc en bruto después de concentración de los extractos orgánicos. Este producto se disolvió directamente en diclorometano (100 ml) y se añadió bajo nitrógeno ácido trifluoroacético (100 ml). La solución se agitó durante 1 h, se concentró y se disolvió en acetonitrilo. La adición de ácido trifluoroacético al 0,1% dio por resultado la precipitación de un sólido, que se filtró y luego se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 5,5 cm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de acetonitrilo, 80 ml/min, 0-70% de BB en 40 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (3,6 g, 50% para dos etapas). LRMS (ES): 591,1 ([M+H]^{+}, 100%). RMN ^{1}H (600,1342 MHz, DMSO-d6): 8,1 (m, 3H), 7,97 (m, 4H), 7,91 (m, 4H), 7,83 (t, 1H), 7,30 (m, 5H), 4,98 (s, 2H), 4,25 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,15 (dd, 1H), 3,06 (m, 2H), 2,95 (dd, 1H), 2,83 (m, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
Síntesis de (2S)-3-[(1-{2-[(1-oxi(2-piridil))amino]etil}(1H-indazol-5-il))carbonilamino]-2-([(4-(4-[({2-[fenil- metoxi)carbonilamino]etil}amino)sulfonil]fenil}-fenil)sulfonil]amino}propanoato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
195 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto del Ejemplo 42, Etapa D (46 mg, 154 \mumol) se disolvió en DMF seca (2,5 ml) con el producto de la Etapa A (114 mg, 162 \mumol), HBTU (76 mg, 200 \mumol) y diisopropilamina (81 \mul, 462 \mumol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h, se concentró y el residuo se purificó por HPLC preparativa (C-8 Zorbax, 21,2 mm x 25 cm; 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético, 20-60% de B durante 40 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (102 mg, 67%). LRMS (ES): 871,3 ([M+H]^{+}, 100%). HRMS: calc. para C_{41}H_{43}N_{a}O_{10}S_{2}: 871,2544; hallado: 871,2540.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa C
Síntesis de (2S)-2-({[4-(4-{[(2-aminoetil)amino]sulfonil}fenil)fenil]-sulfonil}amino)-3-(]1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}propanoato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
196 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa B se trató como en el Ejemplo 41, Etapa B, y se purificó por HPLC preparativa (C-8, Zorbax, 21,2 mm x 25 cm; 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético, 15-25% de B durante 40 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (56 mg, 86%). LRMS (ES): 725,2 ([M+H]^{+}, 20%), 363,2 ([M+2H]^{2+}, 100%).
\newpage
Etapa D
Síntesis de (4S)-4-(N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]etil}carbamoil)-4-[(fenilmetoxi)carbonilamino]-butanoato de t-butilo
197
El producto de la Etapa C se hizo reaccionar como en el Ejemplo 40, Etapa E, para obtener el producto como un sólido blanco después de liofilización.
Etapa E
Síntesis de (4S)-4-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]butanoilamino}-(N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]etil}carbamoil)butanoato de t-butilo
198
El producto de la Etapa D se trata como en el Ejemplo 40, Etapa F, para obtener el producto como un sólido blanco después de liofilización.
Etapa F
Síntesis de (4S)-4-{N-[(1S)-1-N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-[(t-butil)oxicarboni]propil]-carbamoil}-4-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]metil}ciclododecil)acetilamino]butanoato de t-butilo
199
El producto de la Etapa E se trata como en el Ejemplo 40, Etapa G, para obtener el producto como un sólido blanco después de liofilización.
\newpage
Etapa G
Síntesis de ácido (4S)-4-{N-[(1S)-1-N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2-3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil}-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico
200 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa F se trata como en el Ejemplo 40, Etapa G, para obtener el producto como un sólido blanco después de liofilización.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 45
Síntesis del ácido (4S)-4-{N-[(1S)-1-N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxipropil]-carbamoil}-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino)butanoico
201 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
Síntesis de (2S)-2-([(4-{4-[({2-[(fenilmetoxi)carbonilamino]etil}-amino)sulfonil]fenil}fenil)sulfonil]amino}-3-({1-[3-(pirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoato de metilo
202 
\newpage
El producto del Ejemplo 40, Etapa B (58 mg, 195 \mumol) se hizo reaccionar con el producto del Ejemplo 42, Etapa A (144 mg, 205 \mumol) como en el Ejemplo 44, Etapa B, y el residuo se purificó por HPLC preparativa (C-18, Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético; 10-70% de B a lo largo de 30 min). Se combinaron las fracciones de producto se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (102 mg, 54%). LRMS (ES): 870,3 ([M+H]^{+}, 100%). RMN ^{1}H (600,1343 MHz, DMSO.d6): 8,52 (d, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,29 (d, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,82 (m, 9H), 7,74 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,49 (anc, 1H), 7,31 (m, 6H), 6,61 (t, 1H), 4,98 (s, 2H), 4,19 (dd, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,41 (s, 3H), 3,26 (t, 2H), 3,06 (t, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,09 (m, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
Síntesis de (4S)-4(N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}-sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-4-[(fenilmetoxi)carbonilamino]-butanoato de t-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
203 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa A (100 mg, 102 \mumol) se trató como en el Ejemplo 41, Etapa B, y el sólido resultante (79 mg) se hizo que reaccionara directamente como en el Ejemplo 40, Etapa E, para obtener el producto en bruto como un aceite, que se purificó por HPLC preparativa (C-18 Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético; 10-70% de B a lo largo de 40 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (98 mg, 80%). LRMS (ES): 1059,3 ([M+H]^{+}, 100%).
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa C
Síntesis de (4S)-4-{(2S)-4-[(t-butil)oxicarbonil]-2-[(fenil-metoxi)carbonilamino]butanoilamino}-4-(N-{2-[({4- [4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil- amino)-etil]amino}sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)butanoato de t-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
204 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa B (96 mg, 82 \mumol) se trató como en el Ejemplo 41, Etapa D, para obtener el producto como un sólido blanco (48 mg, 42%) después de liofilización. LRMS (ES): 1244,4 ([M+H]^{+}, 100%), 566,8 ([(M-2tBu) + 2H]^{2+}, 45%).
\newpage
Etapa D
Síntesis de (4S)-4-{N-[(1S)-1-(N-(2[({-[4-({[(1S)-1-(metoxicarbonil)-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}-carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-[(t-butil)oxicarbonil]propil]carbamoil}-4-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[(t-butil)oxicarbonil]metil}ciclododecil)acetilamino]butanoato de t-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
205 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa C (47 mg, 35 \mumol) se trató como en el Ejemplo 41, Etapa E, para obtener el producto como un sólido blanco (36 mg, 62%) después de liofilización. LRMS (ES): 1664,6 ([M+H]^{+}, 5%), 833,2 ([M+2H]^{2}, 60%), 518,4 [(M-2tBu) + 3H]^{3}, 45%).
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa E
Síntesis del ácido (4S)-4-{N-[(1S)-1-(N-(2-[({4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}-carbonilamino)-etila]amino}sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxipropil]-carbamoil}-4-[2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}butanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
206 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa D (29 mg, 15 \mumol) se trató como en el Ejemplo 40, etapa J, para obtener el producto en bruto que se purificó por HPLC preparativa (C-189, Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo(agua/0,1% de ácido trifluoroacético; 5-35% de B a lo largo de 35 min). Se combinaron las fracciones de producto, se congeló la combinación y se liofilizó, obteniéndose el producto como un sólido blanco (11 mg, 46%) después de liofilización. LRMS (ES): 1370,4 ([M+H]^{+}, 10%), 685,8 ([M+2H]^{2+}, 90%), 457,6 ([M+3H]^{3+}, 100%)
\newpage
Ejemplo 46
Síntesis del ácido (2S)-3-({3-[(imidazol-2-ilamino)metil]-1-metil(1H-indazol-6-il)carbonilamino)-2-({[4-(4-{[(2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}etil)amino]sulfonil}fenil)fenil]sulfonil}amino)-propanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
207 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa A
Síntesis de 3-formil-1-metil-1H-indazol-6-carboxilato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
208 
\vskip1.000000\baselineskip
En un matraz bajo nitrógeno se añade DMF seca (1,6 ml) y la solución se enfría a -5ºC en baño de hielo/etanol. Se añade con una jeringa oxicloruro fosforoso (530 \mul, 5,7 mmol) y la solución se deja en el baño sometida a agitación durante 30 min. A la solución fría se añade lentamente 1-metil-1H-indazol-6-carboxilato de metilo (500 mg, 2,84 mmol, preparado como indican Jadhav y otros, patente U.S. nº. 5.760.028) disuelto en DMF (3 ml). La suspensión resultante se neutraliza con NaOH 1 N a pH 7, se calienta rápidamente a ebullición durante 1 min, se enfría rápidamente a temperatura ambiente y luego se vierte sobre hielo machacado; la solución se somete a extracción con acetato de etilo. La combinación de los extractos orgánicos se lava con agua y salmuera, se seca, se filtra y se concentra. El aceite puro resultante se purifica por cromatografía rápida para obtener el producto.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa B
Síntesis de 1-metil-3-({[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]amino}metil)-1H-indazol-6-carboxilato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
209 
\vskip1.000000\baselineskip
El producto de la Etapa A (204 mg, 1 mmol) se disolvió en tolueno (10 ml) con N-tritil-2-aminoimidazol (357 mg, 1,1 mmol) y se calentó a reflujo con una trampa Dean-Stark. Por destilación se eliminaron cuatro partes alícuotas de tolueno (3 ml) a intervalos de 1,5 horas, que se reemplazaron con tolueno seco cada vez, y luego se dejó la solución a reflujo durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadió en una porción triacetoxiborohidruro sódico (1 g, 5 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 24 h, se vertió en agua y se separaron las capas. La capa acuosa se sometió a extracción con acetato de etilo, se combinaron las capas orgánicas y la combinación se lavó con agua y solución saturada de bicarbonato, agua y salmuera, se secó sobre sulfato magnésico, se concentró y se purificó por cromatografía rápida, obteniéndose el producto.
\newpage
Etapa C
Síntesis de ácido 1-({[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]amino}metil)-1H-indazol-5-carboxílico
210
El producto de la Etapa B (250 mg, 474 mmol) se añadió a THF/agua (1:1, 15 ml) junto con hidróxido de litio (3N, 0,8 ml, 2,4 mmol) y se agitó la solución hasta que, según la TLC, desapareció el material de partida, eliminándose seguidamente el THF en vacío. La mezcla de reacción se acidificó a pH 2 con HCl 1 N y los sólidos resultantes se filtraron, lavaron y secaron en vacío, obteniéndose el producto.
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Etapa D
Síntesis de
211
El producto de la Etapa C (190 mg, 370 \mumol) se hace reaccionar con el producto del Ejemplo 44, Etapa A (285 mg, 4,07 \mumol) como en el Ejemplo 44, Etapa B, y el residuo se purifica por HPLC preparativa (C-18, Vydac, 21,2 mm x 25 cm, 90% de acetonitrilo/agua/0,1% de ácido trifluoroacético; 10-70% de B a lo largo de 30 min). Se combinan las fracciones de producto, se congela la combinación y se liofiliza, obteniéndose el producto.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa E
Síntesis de (2S)-2-({[4-(4-{[(2-aminoetil)amino]sulfonil}fenil)-fenil]sulfonil}amino-3-{[1-metil-3-({[1-(trifenil- metil)imidazol-2-il]amino}metil)(1H-indazol-6-il)]carbonilamino}propanoato de metilo
212
El producto de la Etapa D (100 mg) en metanol (10 ml) se añade a una suspensión de 10% de Pd sobre carbón (50 mg) en metanol (8 ml) en una botella de Parr bajo nitrógeno. Se hidrogena la solución a 345 kpA durante 1,5 h, se filtra a través de celita, se lava con metanol y se concentra la combinación de filtrados. El aceite resultante no se purifica, sino que se lleva directamente a la etapa siguiente.
\newpage
Etapa F
Síntesis de (2S)-3-{[1-metil-3-({[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]amino}metil-(1H-indazol-6-il)]carbonilamino}-2-([(4-{4-[((2-[2-(1,9,7,10-tetraaza-4,7,10-tris{[t-butil)oxicarbonil]metil}ciclododecil)acetilamino]etil}amino)sulfonil]fenil}fenil)sulfonil]amino}propanoato de metilo
213
Se hace reaccionar el producto de la Etapa E (73 mg, 77 mmol) con DOTA(OtBu)_{3}-OH (49 mg, 85 \mumol) como en el Ejemplo 37, Etapa F, obteniéndose el producto como compuesto puro después de purificación y liofilización.
Etapa G
Síntesis del ácido (2S)-3-({3-[(imidazol-2-ilamino)metil]-1-metil(1H-indazol-6-il)}carbonilamino)-2-({[4-(4-{[(2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetilamino}etil)amino]sulfonil}fenil)fenil]sulfonil}amino)-propanoico
214
Se desprotege el producto de la Etapa F (73 mg, 77 \mumol) como en el Ejemplo 40, Etapa J, para obtener el producto como compuesto puro después de purificación por HPLC preparativa y liofilización de las fracciones de producto.
Ejemplo 47
Síntesis del ácido 3-[(7-(3-[(6-{[(1E)-1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil]-amino}(3-piridil))carbonilamino]propoxi}-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il))-carbonilamino](2S)-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]-amino}propanoico
215
Parte A
Preparación de 7-{3-[(t-butoxi)-carbonilamino]propoxi}-1-bencil-1H-indazol-5-carboxilato de etilo
216
Una solución de 7-hidroxi-1-bencil-1H-indazol-5-carboxilato de etilo (P. Baraldi y otros, II. Farmaco, 52(12), 717 (1997)) en etanol se trata con etóxido sódico y seguidamente con bromuro de Boc-3-aminopropilo, disponible comercialmente, y se mantiene a reflujo durante 2-5 h. Se eliminan los volátiles y el residuo en bruto se somete a extracción con acetato de etilo. El residuo en bruto se obtiene después de eliminar el acetato de etilo y se purifica por cromatografía, obteniéndose el compuesto del título.
Parte B
Preparación de ácido 7-{3-[(t-butoxi)carbonilamino]-propoxi}-1-(3-{[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]amino} propil)-1H-indazol-5-carboxílico
217
Se somete a hidrogenolisis 7-{3-[(t-butoxi)-carbonilamino]propoxi}-1-bencil-1H-indazol-5-carboxilato de etilo para obtener el derivado desbencilado. Usando el procedimiento descrito en la patente U.S. nº. 5.760.028, Ejemplo 1050e, partes D, E, J y K, el 7-{3-[(t-butoxi)-carbonilamino]propoxi}-1-bencil-1H-indazol-5-carboxilato de etilo se convierte en cuatro etapas en el compuesto del título.
Parte C
Preparación de ácido (2S)-3-({7-(3-aminopropoxi)-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino}propanoico
218
Una solución de ácido 7-{3-[(t-butoxi)carbonilamino]-propoxi}-1-(3-{[1-(trifenilmetil)imidazol-2-il]amino}propil)-1H-indazol-5-carboxílico se trata con base de Hunig y HBTU, luego se agita durante aprox. 10 min. La mezcla de reacción se trata con 3-amino-2(S)-(2,4,6-trimetil-bencenosulfonil)aminopropionato de metilo. El producto se aísla luego por cromatografía. El éster metílico se saponifica usando LiOH en THF y los grupo protectores tritilo y boc se eliminan por tratamiento con ácido trifluoroacético, obteniéndose el compuesto del título. Se purifica por HPLC preparativa en fase inversa.
\newpage
Parte D
Preparación del ácido 3-[(7-(3-[(6-{[(1E)-1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil]-amino}(3-piridil))carbonilamino]propoxi}-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il))-carbonilamino](2S)-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino}propanoico
Se disuelve en N,N-dimetilformamida el ácido (2S)-3-({7-(3-aminopropoxi)-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-2-{[(2,4,6-trimetil-fenil)sulfonil]amino}propanoico. Se añade trietilamina (3 equiv) y la mezcla de reacción se agita durante 5 min. Se añade la sal monosódica del ácido 2-[[[5-2,5-dioxo-1-pirrolidinil)oxi]carbonil]-2-piridinil]hidrazono]-metil]-bencenosulfónico (1,1 equiv) y la mezcla de reacción se agita durante la noche. La mezcla de reacción se concentra en alto vacío y el producto en bruto se purifica por HPLC preparativa en fase inversa, obteniéndose el compuesto del título.
Ejemplo 48
Síntesis del ácido 3-([1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil]-7-(3-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]-acetilamino)propoxi)(1H-indazol-5-il)]carbonilamino)-2-([(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino)propanoico
219
A una solución del ácido tris(t-butil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecano-1,4,7,10-tetraacético (1 equv) y base de Hunig (3 equiv) en DMF se añade HBTU (0,8 equiv) y la mezcla se agita durante 5 min. A ésta se añade una solución de ácido (2S)-3-({7-(3-aminopropoxi)-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)-carbonilamino)-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino}propanoico (0,75 equiv) en DMF y la mezcla de reacción se deja en agitación bajo nitrógeno durante 4 h a temperatura ambiente. Se elimina el disolvente en vacío y el residuo se purifica por RP-HPLC preparativa para obtener el conjugado. Se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 5 h una solución del conjugado en TFA. La solución se concentra en vacío y el residuo se purifica por RP-HPLC preparativa para obtener el compuesto del título como sólido liofilizado.
Ejemplo 49-55
Síntesis de complejo de In 111 del conjugado del Ejemplo 34
A un vial de automuestra de 1 cc, protegido y engatillado con plomo, se añadieron 40-50 \mug del conjugado del Ejemplo 34 disuelto en 100 \mul de tampón de citrato amónico (0,4 M, pH 4,7) y seguidamente se añadieron 2 mCi (5 \mul) de In-111 en HCl 0,05 N (actividad específica: 25 \mug/mCi). La mezcla de reacción se calentó a 90-100ºC durante 30 min y se analizó por HPLC. Rendimiento: 97,3%. Tiempo de retención: 8,1 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: tampón de fosfato sódico 25 mM, pH 6
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: sonda radiométrica de yoduro sódico (NaI) y UV a una longitud de onda de 220 nm
220
Ejemplo 50
Síntesis del complejo de In-111 del conjugado del Ejemplo 35
A un vial de automuestra de 2 cc, protegido y engatillado con plomo, se añadieron 100 \mug del conjugado del Ejemplo 35 disuelto en 200 \mul de tampón de citrato amónico (0,4 M, pH 4,8) y seguidamente se añadieron 2,5 mCi (7,5 \mul) de In-111 (NEN) en HCl 0,05 N (actividad específica: 40 \mug/mCi). La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 30 min y se analizó por HPLC. Rendimiento: 74,7%. Tiempo de retención: 13,2 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: tampón de fosfato sódico 25 mm, pH 6
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: sonda radiométrica de yoduro sódico (NaI) y UV a una longitud de onda de 220 nm
1000
Ejemplo 51
Síntesis del complejo de In-111 del conjugado del Ejemplo 36
A un vial de automuestra de 2 cc, protegido y engatillado con plomo, se añadieron 70 \mug del conjugado del Ejemplo 36 disuelto en 140 \mul de tampón de acetato amónico (0,5 M, pH 4,7) y seguidamente se añadió 1 mg de ácido gentísico (sal sódica) disuelto en 10 \mul de H_{2}O y 1,7 mCi (9 \mul) de In-111 (NEN) en HCl 0,05 N (actividad específica: 41 \mug/mCi). La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 20 min y se analizó por HPLC. Rendimiento: 87%. Tiempo de retención: 17-18 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: acetato amónico 10 mM
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: IN-US \beta-ram y UV a una longitud de onda de 220 nm
222
Ejemplo 52
Síntesis del complejo de In-111 del conjugado del Ejemplo 37
A un vial de automuestra de 2 cc, protegido y engatillado se añadieron 40-60 \mug del conjugado del Ejemplo 37 disuelto en 80-120 \mul de tampón de acetato amónico 0,5 M (pH 4,8) y seguidamente se añadió 1 mg de la sal sódica del ácido gentísico y 1-1,3 mCi (6 \mul) de In-111 en HCl 0,05 M. La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 15 min y se analizó por HPLC. Rendimiento: 75,3%. Tiempo de retención: 16,8 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: acetato amónico 10 mM
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: IN-US \beta-ram y UV a una longitud de onda de 220 nm
223 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 53
Síntesis del complejo de In-111 del conjugado del Ejemplo 38
A un vial de automuestra de 2 cc, protegido con plomo y engatillado se añadieron 40-50 \mug del conjugado del Ejemplo 38 disuelto en 100 \mul de tampón de citrato amónico 0,4 M (pH 4,7) y seguidamente 2 mCi (5 \mul) de In-111 en HCl 0,05 N (actividad específica: 25 \mug/mCi). La mezcla de reacción se calentó a 90-100ºC durante 30 min y se analizó por HPLC. Cada uno de los dos diastereómeros del conjugado del Ejemplo 38 forma un complejo con In-111. Rendimiento: 92,5 y 95,6%. Tiempo de retención: 13 y 14,7 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: tampón de fosfato sódico 25 mm a pH 6
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: sonda radiométrica de yoduro sódico (NaI) y UV a una longitud de onda de 220 nm
224 
\newpage
\global\parskip0.950000\baselineskip
Ejemplo 54
Síntesis del complejo de In-111 del conjugado del Ejemplo 40
A un vial de automuestra de 2 cc, protegido y engatillado se añadieron 40-60 \mug del conjugado del Ejemplo 40 disuelto en 80-120 \mul de tampón de acetato amónico 0,5 M (pH 4,8) y seguidamente 1 mg de sal sódica del ácido gentísico y 1-1,3 mCi (6 \mul) de In-111 en HCl 0,05 M. La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 15 min y se analizó por HPLC. Rendimiento: 82%. Tiempo de retención: 11 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: acetato amónico 10 mM
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: IN-US \beta-ram, y UV a una longitud de onda de 220 nm
225
Ejemplo 55
Síntesis del complejo de In-111 del conjugado del Ejemplo 41
A un vial de automuestra de 2 cc, protegido y engatillado se añadieron 40-60 \mug del conjugado del Ejemplo 41 disuelto en 80-120 \mul de tampón de acetato amónico 0,5 M (pH 4,8) y seguidamente 1 mg de sal sódica del ácido gentísico y 1-1,3 mCi (6 \mul) de In-111 en HCl 0,05 M. La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 15 min y se analizó por HPLC. Rendimiento: 71,2%. Tiempo de retención: 12,2 min
Procedimiento de HPLC
Columna: Rx C-18 Zorbax, 25 cm x 4,6 mm
Temperatura de la columna: ambiente
Caudal: 1,0 ml/min
Disolvente A: acetato amónico 10 mM
Disolvente B: acetonitrilo
Detector: IN-US \beta-ram, y UV a una longitud de onda de 220 nm
226
Ejemplos 56-58
Síntesis de complejos de Y-90 de los conjugados de los Ejemplos 34, 36 y 38 
\global\parskip1.000000\baselineskip
A un vial de 5 ml limpio, cerrado, se añadieron 0,5-1,0 ml de solución del conjugado apropiado (200 \mug/ml en tampón de acetato amónico 0,5 M, pH 7,0-8,0) y seguidamente 0,05 ml de solución de gentisato sódico (10 mg/ml en tampón de acetato amónico 0,5 M, pH 7,0-8,0) y 10-40 \mul de ^{90}YCl_{3} en HCl 0,05 N. La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 5-10 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, se analizó por HPLC y por ITLC una muestra de la solución resultante.
227
Procedimiento B de HPLC: Se usa una columna C-18 de Zorbax (4,6 mm x 25 cm, tamaño de poro 80 \ring{A}) en fase inversa a un caudal de 1,0 ml/min con un gradiente de fase móvil de 90% de A (tampón de fosfato 25 mM, pH 6,0) y 10% de B (acetonitrilo) a 80% de A y 20% de B en 20 min.
Procedimiento C de HPLC: Se usa una columna C-18 de Zorbax (4,6 mm x 25 cm, tamaño de poro 80 \ring{A}) en fase inversa a un caudal de 1,0 ml/min con un gradiente de fase móvil de 92% de A (tampón de fosfato 25 mM, pH 6,0) y 8% de B (acetonitrilo) a 85% de A y 15% de B en 20 min.
Procedimiento E de HPLC: Se usa una columna C-18 de Zorbax (4,6 mm x 25 cm, tamaño de poro 80 \ring{A}) en fase inversa a un caudal de 1,0 ml/min con un gradiente de fase móvil de 90% de A (tampón de acetato amónico 25 mM, pH 6,8) y 10% de B (acetonitrilo) a 85% de A y 15% de B en 20 min.
Utilidad
Los medicamentos de la presente invención són útiles para obtener imágenes de la vasculatura angiogénica tumoral, para angiogénesis cardiovascular terapéutica y patologías cardíacas asociadas con la expresión de receptores de la vitronectina en un paciente o para tratar el cáncer en un paciente. Los radiomedicamentos de la presente invención que comprenden un isótopo emisor de rayos \gamma o positrones son útiles para obtener imágenes de procesos patológicos que afectan a la neovasculatura angiogénica, incluidos cáncer, retinopatía diabética, degeneración macular, reestenosis de vasos sanguíneos después de angioplastia y curación de heridas, así como placas ateroescleróticas, lesión por reperfusión miocárdica e isquemia miocárdica, colapso o infarto. Los radiomedicamentos de esta invención que comprenden un isótopo emisor de partículas \beta, \alpha o electrones de Auger son útiles para el tratamiento de procesos patológicos que afectan a neovasculatura angiogénica por suministrar una dosis citotóxica de radiación al lugar de la neovasculatura angiogénica. El tratamiento del cáncer es afectado por la administración sistémica de los radiomedicamentos, lo que da por resultado un suministro de una dosis de radiación citotóxica a los tumores.
Los compuestos de la presente invención que comprenden uno o varios iones metálicos paramagnéticos seleccionados entre gadolinio, disprosio, hierro y manganeso son útiles como agentes de contraste para obtención de imágenes por resonancia magnética (MRI) de procesos patológicos que afectan a la neovasculatura angiogénica, así como de la placa ateroesclerótica, lesión miocárdica por reperfusión, e isquemia miocárdica, colapso o infarto.
Los compuestos de la presente invención que comprenden uno o más átomos pesados con un número atómico de 20 o más son útiles como agentes de contraste de rayos X para obtener imágenes por rayos X de procesos patológicos que afectan a neovasculatura angiogénica, así como de la placa ateroesclerótica, lesión miocárdica por reperfusión e isquemia miocárdica, colapso o infarto.
Los compuestos de la presente invención que comprenden un gas ecogénico que contiene microesferas tensioactivas son útiles como agentes de contraste de ultrasonidos para sonografía de procesos patológicos que afectan a la neovasculatura angiogénica así como de la placa ateroesclerótica, lesión miocárdica por reperfusión e isquemia miocárdica, colapso o infarto.
Se ensayaron compuestos representativos de la presente invención en los ensayos siguientes y en modelo in vivo y se encontró que eran activos.
Ensayo del receptor \alpha_{\nu}\beta_{3} placental humano inmovilizado
Las condiciones de ensayo se desarrollaron y validaron usando [I-125]-vitronectina. La validación del ensayo incluyó análisis de formato de Scatchard (n=3) en el que se determinaron el número de receptores (B_{max}) y Kd (afinidad). El formato de ensayo es tal que los compuestos se exploran primeramente a concentraciones finales de 10 y 100 nM antes de la determinación de IC_{50}. Para la evaluación de IC_{50} se han evaluado tres patrones (vitronectina, anticuerpo anti-\alpha_{\nu}\beta_{3}, LM609 y anti-avB5, P1F6.) y cinco péptidos de referencia. En resumen, el procedimiento implica inmovilizar receptores previamente aislados en placas de 96 pocillos e incubar durante la noche. Los receptores se aislaron de placentas humanas normales, recientes, no infecciosas (HIV, hepatitis B y C, sífilis y exentas de HTLV). Se lisó el tejido y las briznas de desecho de tejido se eliminaron por centrifugación. Se filtró el lisado. Los receptores se aislaron por cromatografía de afinidad usando el anticuerpo \alpha_{\nu}\beta_{3} inmovilizado. Las placas se lavaron luego 3 x con tampón de lavado. Se añadió tampón de bloqueo y las placas se incubaron durante 120 min a temperatura ambiente. Durante este tiempo, los compuestos a ensayar se premezclaron con [I-125]vitronectina en una placa de depósito. Se eliminó el tampón de bloqueo y se pipeteó la mezcla de compuesto. La competición se realizó durante 60 min a temperatura ambiente. Luego se eliminó el material no unido, se separaron los pocillos y se sometieron a recuento mediante
centelleo \gamma.
Obtención de imágenes de Oncomouse®
El estudio implica el uso de simultáneo de Oncomouse® c-Neu y ratones FVB como controles. Los ratones se anestesian con pentobarbital sódico y se les inyecta aproximadamente 0,5 mCi de radiomedicamento. Antes de la inyección, se registran las localizaciones de tumores en cada Oncomouse® y se mide el tamaño del tumor usando calibres. Los animales se sitúan en la cabecera de la cámara de manera que se tengan imágenes de la parte anterior o posteror de los animales. Se obtienen imágenes dinámicas de 5 min en serie cada 2 horas usando una matriz de 256x256 y un zoom de 2x. Terminado el estudio, se evalúan las imágenes circunscribiendo el tumor como la región diana de interés (ROI) y un sitio de fondo en la zona del cuello por debajo de las glándulas salivales de la carótida.
El modelo se puede usar también para estimar la eficacia de los radiomedicamentos de la presente invención que comprenden un isótopo emisor de partículas \beta, \alpha o electrones de Auger. Los radiomedicamentos se administran en cantidades apropiadas y la incorporación al tumor se puede cuantificar no invasivamente obteniendo imágenes para esos isótopos con una emisión coincidente de \gamma que puede tomar imágenes, o por excisión de los tumores y recuento de la cantidad de radiactividad presente por técnicas estándar. El efecto terapéutico de los radiomedicamentos se puede estimar controlando la velocidad de crecimiento de los tumores en ratones de control frente a la de ratones a los que se han administrado los radiomedicamentos de la presente invención.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden metales paramagnéticos como agentes de contraste de MRI. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos paramagnéticos, el animal entero se puede poner en una jaula comercialmente disponible para obtener por resonancia magnética imágenes de los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación con imágenes obtenidas de animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden átomos pesados como agentes de contraste para rayos X. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos que absorben los Rayos X, el animal entero se puede poner en una jaula comercialmente disponible para obtener imágenes de los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación con imágenes obtenidas de animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden un gas ecogénico que contiene una microesfera tensioactiva. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos ecogénicos, se pueden obtener imágenes de los tumores del animal usando una sonda de ultrasonidos mantenida próxima a los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación con imágenes obtenidas de animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Modelo de Matrigel para conejos
Este modelo se adaptó de un modelo de matrigel establecido para el estudio de la angiogénesis en ratones. Matrigel (Becton & Dickinson, USA) es una membrana de base rica en laminina, colágeno IV, entactina, HSPG y otros factores de crecimiento. Cuando factores de crecimiento combinados tales como bFGF [500 ng/ml] o VEGF [2 \mug/ml] se inyectan subcutáneamente en la región abdominal media del ratón, solidifican a gel y estimulan la angiogénesis en el sitio de la inyección a los 4-8 días. En el modelo de conejo, a conejos New Zeland White (2,5-3,0 kg) se inyectan 2,0 ml de matrigel más 1 \mug de bFGF y 4 \mug de VEGF. Después de 7 días se inyecta el radiomedicamento y se obtienen las imágenes.
Este modelo se puede usar también para estimar la eficacia de los radiomedicamentos de la presente invención que comprenden un isótopo emisor de partículas \beta, \alpha o electrones de Auger. Los radiomedicamentos se administran en cantidades apropiadas y la incorporación en los sitios angiogénicos se puede cuantificar no invasivamente tomando imágenes de esos isótopos con una emisión \gamma coincidente, o por excisión de los sitios angiogénicos y recuento de la radiactividad presente por técnicas estándar. El efecto terapéutico de los radiomedicamentos se puede estimar por control de la velocidad de crecimiento de los sitios angiogénicos en conejos de control frente a la de conejos a los que se han administrado los radiomedicamentos de la presente invención.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden metales paramagnéticos como agentes de contraste de MRI. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos paramagnéticos, el animal entero se puede poner en una jaula disponible comercialmente para obtener imágenes por resonancia magnética de los sitios angiogénicos. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación de las imágenes obtenidas en animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden átomos pesados como agentes de contraste para rayos X. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos absorbentes de rayos X, el animal entero se puede poner en una jaula disponible comercialmente para obtener imágenes de rayos X de los sitios angiogénicos. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación con las imágenes obtenidas en animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden una microesfera de tensioactivo que comprende un gas ecogénico como agente de contraste para ultrasonidos. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos ecogénicos, el animal entero se puede poner en una jaula disponible comercialmente y se pueden obtener imágenes de los sitios angiogénicos del animal usando una microsonda de ultrasonidos próxima a los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación con las imágenes obtenidas en animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Modelo de tumor canino espontáneo
Se sedaron con xilazina (20 mg/kg)/atropina (1 ml/kg) perros adultos con tumores mamarios espontáneos. Después de la sedación, los animales se intubaron usando cetamina (5 mg/kg)/diazepan (0,25 mg/kg) para anestesia total. Se continuó la restricción química con cetamina (3 mg/kg)/xilazina (6 mg/kg) según fuera necesario. Si era necesario, los animales se ventilaron con aire del ambiente mediante un tubo endotraqueal (12 impulsos/min, 25 ml/kg). Se cateterizaron venas periféricas usando catéteres 20G.I.V., uno para usarlo como puerto de infusión del compuesto, mientras que el otro servía para exfusión de muestras de sangre. Se controló el ritmo cardíaco y la EKG usando un cardiotacómetro (Biotech, Grass Quincy, MA) disparado por un electrocardiograma II de guía generado por guías vástago. Generalmente, las muestras de sangre se tomaron a -10 min (control), el final de infusión, (1 min), 15 min, 30 min, 60 min, 90 min y 120 min para el número de células de sangre entera y recuento. La dosis de radiomedicamento era de 300 \muCi/kg administrada como bolus i.v. con solución salina. Los parámetros se controlaron continuamente en un registro de polígrafo (modelo 7E Grass) a una velocidad del papel de 10 m/min o 10 mm/s.
La toma de imágenes se hizo cada 2 h con una matriz de 256x256, sin zoom, imágenes dinámicas durante 5 min. En el campo de toma de imagen se puso una fuente conocida (20-90 \muCi) para evaluar la incorporación en la región de interés (ROI). Se tomaron imágenes también 24 horas después de inyección para determinar la retención del compuesto en el tumor. La incorporación se determina tomando la fracción de los recuentos totales en la zona inscrita para ROI/fuente y multiplicando los \muCi conocidos. El resultado es \muCi para la ROI.
Este modelo puede usarse también para estimar la eficacia de los radiomedicamentos de la presente invención que comprenden un isótopo emisor de partículas \alpha, \beta o electrones de Auger. Los radiomedicamentos se administran en cantidades apropiadas y la incoporación al tumos se puede cuantificar no invasivamente obteniendo imágenes para esos isótops con una emisión \gamma coincidente que puede obtener imágenes, o por excisión de los tumores y recuento de la cantidad de radiactividad presente por técnicas estándar. El efecto terapéutico de los radiomedicamentos se puede estimar controlando el tamaño de los tumores en función del tiempo.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden metales paramagnéticos como agentes de contraste de MRI. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos paramagnéticos, el animal entero se puede poner en una jaula disponible comercialmente para obtener imágenes de los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación de las imágenes obtenidas en animales con las de los animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden metales pesados como agentes de contraste de rayos X. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos absorbentes de rayos X, el animal entero se puede poner en una jaula disponible comercialmente para obtener imágenes de los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación de las imágenes con las de animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Este modelo se puede usar también para evaluar los compuestos de la presente invención que comprenden una microesfera de tensioactivo que comprende un gas ecogénico como agente de contraste para ultrasonidos. Después de administrar la cantidad apropiada de los compuestos ecogénicos, se pueden obtener imágenes de los sitios angiogénicos del animal usando una microsonda de ultrasonidos situada próxima a los tumores. La eficacia de los agentes de contraste se puede ver fácilmente por comparación de las imágenes obtenidas con las obtenidas en animales a los que no se ha administrado un agente de contraste.
Los modelos de enfermedades cardiovasculares que se pueden usar para evaluar los radiomedicamentos, agentes de contraste para resonancia nuclear, rayos X y ultrasonidos han sido objeto de revisión en J. Nucl. Cardiol., 1998, 5, 167-83. Hay varios modelos de conejos, bien establecidos, de ateroesclerosis; un modelo produce células de músculo liso que proliferan predominantemente por desendotelización de la aorta abdominal infradiafragmática para estimular lesiones reestenóticas; otro modelo produce placa ateroesclerótica humana avanzada simulada por desentoleización seguida de dieta alta en colesterol.
En Am. J. Physiol., 1998, 274, H1516-23 se describe un modelo de fallo cardíaco congestivo. En general, cerdos Yorkshire se asignan al azar para experimentar 3 semanas de ritmo atrial rápido a 240 latidos/min o para ser controles de ficción. Los cerdos se instrumentan crónicamente para medir la función del ventrículo izquierdo en estado consciente. Se anestesian los cerdos. Se sutura un electrodo estimulador protegido en el atrio izquierdo, conectado a un marcador de pasos modificado programable y escondido en una bolsa subcutánea. Se cierre el pericardio holgadamente, se cierra la toracotomía y se evacúa el aire del espacio pleural. Después de un período de recuperación de 7-10 días, se activan los marcadores de pasos de los animales seleccionados para que tengan un ritmo crónico rápido. Los animales se sedan, se desactiva el marcador de pasos (sólo grupos de ritmo). Después de un período de estabilización de 30 min, se determinan los índices de función LV y la geometría (por ecocardiografía como control) inyectando el compuesto radiomarcado. Para la biodistribución, se anestesian los animales, se extirpa el corazón y se evalúan el ápice de LV y las regiones ventriculares medias.
McNulty y otros, J. Am. Physiol., 1996, H2283-9 describen un modelo de oclusión coronaria reversible y reperfusión.
Obviamente, a la luz de las enseñanzas anteriores, son posibles numerosas modificaciones y variaciones de la presente invención. Ha de entenderse, por tanto, que dentro del ámbito de las reivindicaciones anexas, se puede practicar la invención de manera diferente a la que se describe específicamente en esta memoria.

Claims (5)

1. Un compuesto que comprende: un resto que apunta a la diana y un agente quelatente, en el que el resto que apunta a la diana está unido al agente quelatante, es un indazol no peptídico, y se une a un receptor que está regulado por incremento durante la angiogénesis, y el compuesto tiene 0-1 grupos de unión entre el resto que apunta a la diana y el agente quelatante,
en el que el receptor es una integrina \alpha_{\nu}\beta_{3} o \alpha_{\nu}\beta_{5} y el compuesto tiene la fórmula:
(Q)_{d}-L_{n}-C_{h} 
\hskip0.3cm
o 
\hskip0.3cm
(Q)_{d}-L_{n}-(C_{h})_{d'}
en la que Q es, independientemente, un compuesto de fórmula (Ia) o (Ib):
228
229
incluidas sus formas estereoisómeras, o mezclas de sus formas estereoisómeras, o sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptables,
en las que:
X^{1d}
es N, CH, C-W^{d}-X^{d}-Y^{d} o C-L_{n};
X^{2d}
es N, CH o C-W^{d}-X^{d}-Y^{d};
X^{3d}
es N, CR^{11d} o C-W^{d}-X^{d}-Y^{d};
X^{4d}
es N o CR^{11d},
siempre que, cuando R^{1d} es R^{1de}, uno de X^{1d} y X^{2d} sea C-W^{d}-X^{d}-Y^{d}, y cuando
R^{10d}
es R^{1de}, X^{3d} sea C-W^{d}-X^{d}-Y^{d};
R^{1d}
se selecciona entre: R^{1de}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6}) sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
R^{1de}
se selecciona entre
230 
\vskip1.000000\baselineskip
231 
\vskip1.000000\baselineskip
232 
\vskip1.000000\baselineskip
233 
\vskip1.000000\baselineskip
234
A^{d} y B^{d} son, independientemente, -CH_{2}-, -O-, -N(R^{2d}) o -C(=)-;
A^{1d} y B^{1d} son, independientemente, -CH_{2}- o -N(R^{3d}).;
D^{d}
es -N(R^{2d})-, -O-, -S-, -C(=O)- o -SO_{2}-;
E^{d}-F^{d} es -C(R^{4d})=C(R^{5d})-, -N=C(R^{4d})-, -C(R^{4d})=N- o -C(R^{4d})_{2}C(R^{5d})_{2}-;
J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} se seleccionan independientemente entre -C(R^{4d})-, C(R^{5d})- y -N-, siempre que al menos uno de J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} no sea -N-;
R^{2d}
se selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, (alquilo C_{1-6})carbonilo, (alcoxi C_{1-6})carbonilo, (alquilo C_{1-6})aminocarbonilo, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo. heteroaril(alquilo C_{1-6})carbonilo, heteroarilcarbonilo, aril(alquilo C_{1-6})-, (alquil C_{1-6})carbonilo, arilcarbonilo, alquil C_{1-6} sulfonilo, arilsulfonilo, aril(alquil C_{1-6})sulfonilo, heteroarilsulfonilo, heteroaril(alquil C_{1-6})sulfonilo, ariloxicarbonilo y aril(alcoxi C_{1-6})carbonilo, en los que los mencionados grupos arilo están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados del grupo: alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, CF_{3} y;
R^{3d}
se selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6}), y heteroaril(alquilo C_{1-6})-;
R^{4d} y R^{5d} se seleccionan independientemente entre: H, alcoxi C_{1-4}, NR^{2d}R^{3d}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, (alquil C_{1-6})carbonilo, (alcoxi C_{1-6})carbonilo y arilcarbonilo; o,
\quad
alternativamente, cuando son sustituyentes sobre átomos adyacentes, R^{4d} y R^{5d} se pueden conjuntar con los átomos de carbono a los que están unidos para formar un sistema de anillos carbocíclicos o heterocíclicos, aromáticos o no aromáticos, de 5-7 miembros, estando los mencionados anillos carbocíclicos o heterocíclicos sustituidos opcionalmente con 0-2 grupos seleccionados entre alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, ciano, amino, CF_{3} y NO_{2};
U^{d}
se selecciona entre
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}(CR^{7d}=CR^{8d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}(C\equivC)(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{t}^{d}Q(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}O(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}N(R^{6d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}C(=O)(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}C(=O)N(R^{6d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}N(R^{6d})(C=O)(CH_{2})_{m}^{d} y,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}S(O)_{p}^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-;
\quad
en los que uno o varios de los grupos metileno de U^{d} está opcionalmente sustituido con R^{7d};
Q^{d}
se selecciona entre 1,2-cicloalquileno, 1,2-fenileno, 1,3-fenileno, 1,4-fenileno, 2,3-piridinileno, 3,4-piridinileno, 2,4-piridinileno y 3,4-piridazinileno;
R^{6d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-4} y bencilo;
R^{7d} y R^{8d} se seleccionan independientemente entre H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})- y heteroaril(alquilo C_{0-6});
R^{10d}
se selecciona entre H, R^{1de}, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, N(R^{6d})_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, -SO_{2}R^{17d}, -SO_{2}NR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6}) sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
R^{10de}
se selecciona entre H,alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, N(R^{6d})_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, -SO_{2}R^{17d}, -SO_{2}NR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, alquenilo C_{3-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6})- sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o R^{21d};
R^{11d}
se selecciona entre H, halógeno, CF_{3}, CN, NO_{2}, hidroxi, NR^{2d}R^{3d}, alquilo C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, arilo sustituido con 0-1 R^{21d}, aril(alquilo C_{1-6}) sustituido con 0-1 R^{21d}, (alcoxi C_{1-4})carbonilo sustituido con 0-1 R^{21d}, (alquil C_{1-4})-carbonilo sustituido con 0-1 R^{21d}, alquil C_{1-4} sulfonilo sustituido con 0-1 R^{21d} y alquil C_{1-4} aminosulfonilo sustituido con 0-1 R^{21d};
W^{d}
se selecciona entre -(C(R^{12d})_{2})_{q}^{d}C(=O)N(R^{13d})- y -C(=O)-N(R^{13d})-C(R^{12d})_{2})_{q}^{d};
X^{d}
es -C(R^{12d})(R^{14d})-C(R^{12d})(R^{15d})- o, alternativamente, W^{d} y X^{d} se pueden conjuntar para formar
235
R^{12d}
se selecciona entre H, halógeno, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-6}, alquinilo C_{2-6}-, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-10}, (alquil C_{1-4})carbonilo, arilo y aril(alquilo C_{1-6})-;
R^{13d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-6}, cicloalquil C_{3-7} metilo y aril(alquilo C_{1-6});
R^{14d}
se selecciona entre H, alquil C_{1-6} tio(alquilo C_{1-6})-, aril(alquiltioalquilo C_{1-10}), aril(alcoxialquilo C_{1-10})-, alquilo C_{1-10}, alcoxialquilo C_{1-10}, hidroxialquilo C_{1-6}, alquenilo C_{2-10}, alquinilo C_{2-10}, cicloalquilo C_{3-10}, cicloalquilalquilo C_{3-10}, aril(alquil C_{1-6})-, heteroaril(alquilo C_{1-6})-, arilo, heteroarilo, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d} y CONR^{17d}R^{20d}, siempre que cualquiera de los anteriores grupos alquilo, cicloalquilo, arilo o heteroarilo puedan ser no sustituidos o sustituidos independientemente con 0-1 R^{16d} o 0-2 R^{11d};
R^{15d}
se selecciona entre H, R^{16d}, alquilo C_{1-10}, alcoxialquilo C_{1-10}, alquilaminoalquilo C_{1-10}, dialquilaminoalquilo C_{1-10}, (alquil C_{1-10})carbonilo, aril(alquil C_{1-6})carbonilo, alquenilo C_{1-10}, alquinilo C_{1-10}, cicloalquilo C_{3-10}, cicloalquilalquilo C_{3-10}, aril(alquilo C_{1-6})-, heteroaril(alquilo C_{1-6})-, arilo, heteroarilo, CO_{2}R^{17d}, C(=O)R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, SO_{2}R^{17d} y SO_{2}NR^{17d}R^{20d}, siempre que cualquiera de los anteriores grupos alquilo, cicloalquilo, arilo o heteroarilo puedan ser no sustituidos sustituidos independientemente con 0-2 R^{11d};
Y^{d}
se selecciona entre -COR^{19d}, -SO_{3}H, -PO_{3}H, -tetrazolilo, -CONHNHSO_{2}CF_{3}, -CONHSO_{2}R^{17d}, -CONHSO_{2}NHR^{17d}, -NHCOCF_{3}, -NHCONHSO_{2}R^{17d}, -NHSO_{2}R^{17d}, -OPO_{3}H_{2}, -OSO_{3}H, -PO_{3}H_{2}, -SO_{3}H, -SO_{2}NHCOR^{17d}, -SO_{2}NHCO_{2}R^{17d},
236
R^{16d}
se selecciona entre
\quad
-N(R^{20d})-C(=O)-O-R^{17d},
\quad
-N(R^{20d})-C(=O)-R^{17d},
\quad
-N(R^{20d})-C(=O)-NH-R^{17d},
\quad
-N(R^{20d})-SO_{2}-R^{17d} y
\quad
-N(R^{20d})-SO_{2}-NR^{20d}R^{17d};
R^{17d}
se selecciona entre:
\quad
alquilo C_{1-10} opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, cicloalquilo C_{3-11} opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, aril(alquil C_{1-6})- opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, (alquil C_{1-6})arilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, heteroaril(alquilo C_{1-6})- opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, (alquil C_{1-6})heteroarilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, arilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, biaril (alquilo C_{1-6})- opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, heteroarilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, arilo opcionalmente sustituido con un enlace a L_{n}, biarilo opcionalmente sustituido con un enlace a Ln y un enlace a L_{n}, en los que los mencionados grupos arilo, biarilo o heteroarilo opcionalmente también están sustituidos con 0-3 sustituyentes seleccionados entre el grupo constituido por alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, arilo, heteroarilo, halo, ciano, amino, CF_{3} y NO_{2},
R^{18d}
se selecciona entre
\quad
-H,
\quad
-C(=O)-O-R^{17d},
\quad
-C(=O)-R^{17d},
\quad
-C(=O)-NH-R^{17d},
\quad
-SO_{2}-R^{17d} y
\quad
-SO_{2}-NR^{20d}R^{17d};
R^{19d}
se selecciona entre: hidroxi, alquil C_{1-10} oxi, cicloalquil C_{3-11} oxi, ariloxi, aril(alcoxi C_{1-6})-, alquilcarboniloxialquiloxi C_{3-10}, alcoxi carboniloxialquiloxi C_{3-10}, alcoxicarbonilalquiloxi C_{2-10}, cicloalquilcarboniloxialquiloxi C_{5-10}, cicloalcoxicarboniloxialquiloxi C_{5-10}, cicloalcoxicarbonilcarbonilalquiloxi C_{5-10}, ariloxicarbonilalquiloxi C_{7-11}, aril-oxicarboniloxialquiloxi C_{8-12}, arilcarboniloxialquiloxi C_{8-12}, alcoxialquilcarboniloxialquiloxi C_{5-10}, (5-aril-1,3-dioxa-ciclopenten-2-ona-il)metiloxi C_{5-10} y (R^{11d})(R^{12d})N-(alcoxi C_{1-10})-;
R^{20d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})- y heteroaril(alquilo C_{1-6})-;
R^{21d}
se selecciona entre COOH y NR^{6d}_{2};
m^{d}
es 0-4;
n^{d}
es 0-4;
t^{d}
es 0-4;
p^{d}
es 0-2;
q^{d}
es 0-2, y
r^{d}
es 0-2;
con las siguientes condiciones:
(1)
t^{d}, n^{d}, m^{d y} q^{d} se escogen de manera que el número de átomos que conectan R^{1d} e Y^{d} esté en el intervalo de 10-14; y
(2)
n^{d} y m^{d} se escogen de manera que el valor de n^{d} más m^{d} sea mayor que uno a no ser que U^{d} sea -(CH_{2})_{t}^{d} Q^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-;
\quad
o Q sea un péptido seleccionado entre el grupo
237
en las que:
R^{1}
es L-valina, D-valina o L-lisina, opcionalmente sustituida sobre el grupo \varepsilon amino con un enlace a L_{n};
R^{2}
es L-fenilalanina, D-fenilalanina, D-1-naftilalanina, ácido 2-aminotiazol-4-acético o tirosina, estando la tirosina opcionalmente sustituida sobre el grupo hidroxi con un enlace a L_{n};
R^{3}
es D-valina;
R^{4}
es D-tirosina sustituida sobre el grupo hidroxi con un enlace a L_{n};
siempre que uno de R^{1} y R^{2} de cada Q esté sustituido con un enlace a L_{n} y, además, siempre que, cuando R^{2} es ácido 2-aminotiazol-4-acético, K sea N-metilarigina;
siempre que al menos un Q sea un compuesto de fórmula (Ia) o (Ib);
d
se selecciona entre 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
d'
es 1-100;
L_{n}
es un grupo conector que tiene la fórmula
((W)_{h}-(CR^{6}R^{7}{}_{g})_{x}-(Z)_{k}-((CR^{6a}R^{7a})_{g}-(W)_{h'})_{x};
W
es selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, NR^{8}C(=O), C(=O)NR^{8}, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO_{2}, SO_{2}NH, (OCH_{2}CH_{2})_{S}, (CH_{2}CH_{2}O)_{S'}, (OCH_{2}CH_{2}CH_{2})_{S''}, (CH_{2}CH_{2}CH_{2}O)_{t} y (aa)_{t'};
aa
es, independientemente en cada aparición, un aminoácido;
Z
se selecciona entre el grupo: arilo sustituido con 0-3 R^{10}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{10}, y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O sustituido con 0-3 R^{10};
R^{6}, R^{6a}, R^{7}, R^{7a} y R^{8} se seleccionan independientemente en cada aparición entre el grupo H, =O, COOH, SO_{3}H, PO_{3}H, alquilo C_{1-5} sustituido con 0-3 R^{10}, arilo sustituido con 0-3 R^{10}, bencilo sustituido con 0-3 R^{10} y alcoxi C_{1-5} sustituido con 0-3 R^{10}, NHC(=O)R^{11}, C(=O)NHR^{11}, NHC(=O)NHR^{11}, NHR^{11}, R^{11} y un enlace a C_{h};
R^{10}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo de: un enlace a C_{h}, COOR^{11}, C(=O)NHR^{11}, NHC(=O)R^{11}, OH, NHR^{11}, SO_{3}H, PO_{3}H, -OPO_{3}H_{2}, -OSO_{3}H, arilo sustituido con 0-3 R^{11}, alquilo C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{12}, alcoxi C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{12} y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos independientemente seleccionados entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{11};
R^{11}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo de: H, alquilo sustituido con 0-1 R^{12}, arilo sustituido con 0-1 R^{12}, un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-1 R^{12}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-1 R^{12}, polialquilenglicol sustituido con 0-1 R^{12}, carbohidrato sustituido con 0-1 R^{12}, ciclodextrina sustituida con 0-1 R^{12}, aminoácido sustituido con 0-1 R^{12}, policarboxialquilo sustituido con 0-1 R^{12}, poliazaalquilo sustituido con 0-1 R^{12} y péptido sustituido con 0-1 R^{12}, péptido que comprende 2-10 aminoácidos, 3,6-O-disulfo-B-D-galactopiranosilo, bis(fosfonometil)glicina, y un enlace a C_{h};
R^{12}
es un enlace a C_{h};
k
se selecciona entre 0, 1 y 2;
h
se selecciona entre 0, 1 y 2;
h'
se selecciona entre 0, 1 y 2;
g
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
g'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
s
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
s'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
s''
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
t
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
t'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10;
\newpage
x
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
x'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
C_{h}
es una unidad de unión de un metal que tiene una fórmula seleccionada entre el grupo
238
239
A^{1}, A^{2}, A^{3}, A^{4}, A^{5}, A^{6}, A^{7} y A^{8} se seleccionan independientemente en cada aparición entre el grupo: NR^{13}, NR^{13}R^{14}, S, SH, S(Pg), O, OH, PR^{13}, PR^{13}R^{14}, P(O)R^{15}R^{16} y un enlace a L_{n};
E
es un enlace, CH, un grupo espaciador seleccionado independientemente en cada aparición entre el grupo: alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{17}, heterociclo-alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, en el que el grupo heterociclo es un sistema de anilo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O, aril C_{6-10} alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, alquil C_{1-10} arilo C_{6-10} sustituido con 0-3 R^{17} y un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17};
R^{13} y R^{14} cada uno de ellos, se seleccionan independientemente entre el grupo: una unión a L_{n}, hidrógeno, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, heterocicloalquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, en el que el grupo heterociclo es un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O, aril C_{6-10} alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, alquil C_{1-10} arilo C_{6-10} sustituido con 0-3 R^{17}, un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17}; y un electrón, siempre que, cuando uno de R^{13} o R^{14} es un electrón, el otro sea también un electrón;
\quad
alternativamente, R^{13} y R^{14} se combinan para formar =C(R^{20})(R^{21}),
R^{15} y R^{16} cada uno independientemente, se seleccionan entre el grupo: una unión a L_{n}, -OH, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{17}, heterociclo-alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, en el que el grupo heterociclo es un sistema de anillo heterocíclico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O, aril C_{6-10} alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, alquil C_{1-10} arilo C_{6-10} sustituido con 0-3 R^{17} y un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17};
R^{17}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: un enlace a Ln, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{18}, -C(=O)R^{18}, -C(=O)N(R^{18})_{2}, -CHO, -CH_{2}-OR^{18}, -OC(=O)R^{18}, -OC(=O)OR^{18a}, -OR^{18}, -OC(=O)N(R^{18})_{2}, -NR^{19}C(=O)R^{18}, -NR^{19}C(=O)OR^{18a}, -NR^{19}C(=O)N-(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}N(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}R^{18a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{18a}, -SR^{18}, -S(=O)R^{18a}, -SO_{2}N(R^{18})_{2}, -N(R^{18})_{2}, -NHC(=S)NHR^{18}, =NOR^{18}, NO_{2}, -C(=O)NHOR^{18}, -C(=O)NHNR^{18}R^{18a}, -OCH_{2}CO_{2}H, 2-(1-morfolino)-etoxi, alquilo C_{1-5}, alquenilo C_{2-4}, cicloalquilo C_{3-6}, cicloalquilmetilo C_{3-5}, alcoxialquilo C_{2-6}, arilo sustituido con 0-2 R^{18}, y un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O;
R^{18}, R^{18a} y R^{19} se seleccionan independientemente en cada presencia entre el grupo: un enlace a L_{n}, H, alquilo C_{1-6}, fenilo, bencilo, alcoxi C_{1-6}, haluro, nitro, ciano y trifluorometilo;
Pg
es un grupo protector de tiol;
R^{20} y R^{21} se seleccionan independientemente entre el grupo: H, alquilo C_{1-10}, -CN, -CO_{2}R^{25}, -C(=O)R^{25}, -C(=O)N
(R^{25})_{2}, 1-alqueno C_{2-10}sustituido con 0-3 R^{23}, 1-alquino C_{2-10}sustituido con 0-3 R^{23}, arilo sustituido con 0-3 R^{23}, un sistema anular heterocíclico insaturado de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados ente S, N y O y sustituido con 0-3 R^{23}, y un carbociclo C_{3-10} insaturado sustituido con 0-3 R^{23};
\quad
alternativamente, R^{20} y R^{21} pueden conjuntarse con el radical divalente de carbono al que están unidos para formar:
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240 
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R^{22} y R^{23} se seleccionan independientemente entre el grupo:H, R^{24}, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{24}, alquenilo C_{2-10} sustituido con 0-3 R^{24}, alquinilo C_{2-10} sustituido con 0-3 R^{24}, arilo sustituido con 0-3 R^{24}, un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O y sustituidos con 0-3 R^{24}, y un carbociclo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{24};
\quad
alternativamente, R^{22}, R^{23} conjuntamente forman un sistema de anillos condensados aromáticos o heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O;
a y b indican las posiciones de los dobles enlaces opcionales y n es 0 o 1;
R^{24}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{25}, -C(=O)R^{25}, -C(=O)N(R^{25})_{2}, -N(R^{25})_{3}^{+}, -CH_{2}OR^{25}, -OC(=O)R^{25}, -OC(=O)R^{25a}, -OR^{25}, -OC(=O)N(R^{25})_{2}, -NR^{26}C(=O)R^{25}, -NR^{26}C(=O)=R^{25a}, -NR^{26}C(=O)N(R^{25})_{2}, -NR^{26}SO_{2}N(R^{25})_{2}, -NR^{26}SO_{2}R^{25a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{25a}, -SR^{25}, -S(=O)R^{25a}, -SO_{2}N(R^{25})_{2}, -N(R^{25})_{2}, =NOR^{25}, -C(=O)NHOR^{25}, -OCH_{2}CO_{2}H y 2-(1-morfolino)etoxi; y
R^{25}, R^{25a} y R^{25b}, se seleccionan, cada uno independientemente, en cada aparición entre el grupo: H y alquilo C_{1-6}.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que
R^{1de}
se selecciona entre
\vskip1.000000\baselineskip
241 
\vskip1.000000\baselineskip
242
243
244
en las que:
A^{d} y B^{d} son, independientemente, -CH_{2}-, -O-, -N(R^{2d})- o -C(=O)-;
A^{1d} y B^{1d} son, independientemente, -CH_{2}- o -N(R^{3d})-;
D^{d}
es -N(R^{2d})-, -O-, -S-, -C(=O)- o -SO_{2}-;
E^{d}-F^{d} es -C(R^{4d})=C(R^{5d})-, -N=C(R^{4d}), -C(R^{4d})=N-, o -C(R^{4d})_{2}C(R^{5d})_{2}-;
J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} se seleccionan independientemente entre: C(R^{4d})-, -C(R^{5d})- y -N-, siempre que al menos uno de J^{d}, K^{d}, L^{d} y M^{d} no sea -N-;
R^{2d}
es selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, (alquil C_{1-6})carbonilo, (alcoxi C_{1-6})carbonilo, alquilaminocarbonilo C_{1-6}, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, heteroaril (alquil C_{1-6})carbonilo, hetero-arilcarbonilo, aril(alquilo C_{1-6})-, (alquil C_{1-6})carbonilo, arilcarbonilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, aril(alquil C_{1-6})sulfonilo, heteroaril-sulfonilo, heteroaril(alquil C_{1-6})sulfonilo, ariloxicarbonilo y aril(alcoxi C_{1-6})carbonilo, en los que los mencionados grupos arilo están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados entre el grupo constituido por alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, CF_{3} y nitro;
R^{3d}
se selecciona entre: H, alquilo C_{1-6}, cicloalquio C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, y heteroaril(alquilo C_{1-6})-;
R^{4d} y R^{5d} se seleccionan independientemente entre: H, alcoxi C_{1-4}, NR^{2d}R^{3d}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alquilo C_{1-6}, alquenilo C_{3-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, alquilcarbonilo C_{2-7} y arilcarbonilo;
\quad
alternativamente, cuando los sustituyentes están sobre átomos adyacentes, R^{4d} y R^{5d} se pueden conjuntar con los átomos de carbono a los que están unidos para formar un sistema carbocíclico de 5-7 miembros o heterocíclico aromático o no aromático de 5-7 miembros, anillo carbocíclico o heterocíclico que opcionalmente está sustituido con 0-2 grupos seleccionados entre: alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, ciano, amino, CF_{3} o NO_{2};
U^{d}
se selecciona entre:
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}(CR^{7d}=CR^{8d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{t}^{d}Q^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})_{n}^{d}O(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})^{d}N(R^{6d})(CH_{2})_{m}^{d}-,
\quad
-(CH_{2})^{d}C(=O)(CH_{2})_{m}^{d}- y
\quad
-(CH_{2})^{d}S(O)_{p}^{d}(CH_{2})_{m}^{d}-
\quad
en el que uno o más de los grupos metileno de U^{d} opcionalmente está sustituido con R^{7d};
Q^{d}
se selecciona entre 1,2-fenileno, 1,3-fenileno, 2,3-piridinileno, 3,4-piridinileno y 2,4-piridinileno;
R^{6d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-4} y bencilo;
R^{7d} y R^{8d} se seleccionan independientemente entre H, alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6})-, y heteroaril(alquilo C_{0-6});
W^{d}
es -C(=O)-N(R^{13d})-C(R^{12d})_{2})_{q}^{d}-;
X^{d}
es -C(R^{12d})(R^{14d})-C(R^{12d})_{2})_{q}(^{R15d})-,
\quad
alternativamente, W^{d} y X^{d} pueden conjuntarse para que se forme
245
R^{12d}
es H o alquilo C_{1-6};
Y^{d}
se selecciona entre -COR^{19} y -SO_{3}H,
246
d
se selecciona entre 1, 2, 3, 4 y 5;
d'
es 1-50;
W
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: H, NH, NHC(=O), C(=O)NH, NR^{8}C(=O), C(=O)N R^{8}, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO_{2}, (OCH_{2}CH_{2})_{s}, (CH_{2}CH_{2}O)_{s'}, (OCH_{2}CH_{2}CH_{2})_{s''}, (CH_{2}CH_{2}CH_{2}O)_{t} y (aa)_{t'};
aa
es independientemente en cada aparición un aminoácido;
Z
se selecciona entre el grupo: arilo sustituido con 0-1 R^{10}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-1 R^{10}, y un sistema de anillo heterocíclcico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-1 R^{10};
R^{6}, R^{6a}, R^{7}, R^{7a} y R^{8} se seleccionan independientemente en cada aparición entre el grupo de: H, =O, COOH, SO_{3}H, alquilo C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{10}, arilo sustituido con 0-1 R^{10}, bencilo sustituido con 0-1 R^{10} y alcoxi C_{1-5} sustituido con 0-1 R^{10}, NHC(=O)R^{11}, C(=O)NHR^{11}, NHC(=O)-NHR^{11}, NHR^{11}, R^{11} y un enlace a C_{h}-;
k
es 0 o 1;
s
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
s'
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
s''
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
t
se selecciona entre 0, 1, 2, 3, 4 y 5;
A^{1}, A^{2}, A^{3}, A^{4}, A^{5}, A^{6}, A^{7} y A^{8} se seleccionan independientemente entre el grupo: NR^{13}, NR^{13}R^{14}, S, SH, S(Pg), OH y un enlace a L_{n}-;
E
es un enlace, CH o un grupo espaciador seleccionado independientemente en cada aparición entre el grupo: alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, cicloalquilo C_{3-10} sustituido con 0-3 R^{17} y un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O y sustituido con 0-3 R^{17};
R^{13} y R^{14} se seleccionan, cada uno independientemente, entre el grupo: una unión a L_{n}, hidrógeno, alquilo C_{1-10} sustituido con 0-3 R^{17}, arilo sustituido con 0-3 R^{17}, un sistema de anillos heterocíclicos de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre S, N y O y sustituido con 0-3 R^{17}, y un electrón, siempre que, cuando uno de R^{13} y R^{14} es un electrón, el otro sea también un electrón;
\quad
alternativamente, R^{13} y R^{14} se combinan para formar =C(R^{20})(R^{21}),
R^{17}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: un enlace a L_{n}, =O, F, Cl, Br, I, -CF_{3}, -CN, -CO_{2}R^{18}, -C(O)R^{18}, -C(=O)N(R^{18})_{2}, -CH_{2}-OR^{18}, -OC(=O)R^{18}, -OC(=O)OR^{18a}, -OR^{18}, -OC(=O)N(R^{18})_{2}, -NR^{19}C(=O)R^{18}, -NR^{19}C(=O)OR^{18a}, -NR^{19}C(=O)N-(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}N(R^{18})_{2}, -NR^{19}SO_{2}R^{18a}, -SO_{3}H, -SO_{2}R^{18a}, -S(=O)R^{18a}, -SO_{2}N(R^{18})_{2}, -N(R^{18})_{2}, -NHC(=S)NHR^{18}, =NOR^{18}, -C(=O)NHNR^{18}R^{18a}, -OCH_{2}CO_{2}H y 2-(1-morfolino)-etoxi;
R^{18}, R^{18a} y R^{19} se seleccionan independientemente entre el grupo: un enlace para L_{n}, H y alquilo C_{1-6};
R^{20} y R^{21} se seleccionan independientemente entre el grupo: H, alquilo C_{1-10}, -CO_{2}R^{25}, 1-alqueno C_{2-5}sustituido con 0-3 R^{23}, 1-alquino C_{2-5}sustituido con 0-3 R^{23}, arilo sustituido con 0-3 R^{23}, un sistema anular heterocíclico insaturado de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados ente S, N y O y sustituido con 0-3 R^{23};
\quad
alternativamente, R^{20} y R^{21} conjuntados pueden con el radical divalente de carbono al que están unidos forman
247
R^{22} y R^{23} se seleccionan independientemente entre el grupo: H y R^{24};
\quad
alternativamente, R^{22}, R^{23} conjuntamente forman un sistema de anillos condensados aromáticos o un sistema anular heterocílico de 5-10 miembros que contiene 1-4 heteroátomos seleccionados independientemente entre N, S y O;
R^{24}
se selecciona independientemente en cada caso entre el grupo: -CO_{2}R^{25}, -C(=O)N(R^{25})_{2}, -CH_{2}OR^{25}, -OC(=O)OR^{25}, -OR^{25}, -SO_{3}H, -N(R^{25})_{2} y -OCH_{2}CO_{2}H; y
R^{25}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: H y alquilo C_{1-3}.
3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que
R^{1de}
se selecciona entre
248 
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249 
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250 
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252 
\vskip1.000000\baselineskip
253 
\vskip1.000000\baselineskip
254
255
\quad
en los que los anteriores heterociclos opcionalmente están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados entre el grupo: NH_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alcoxi C_{1-4}, alquilo C_{1-6} y cicloalquio C_{3-7};
U^{d}
es -(CH_{2})_{n}-, -(CH_{2})_{t}^{d}Q^{d}(CH_{2})_{m}^{d}- o -C(=O)(CH_{2})_{n-1}^{d}, en los que uno de los grupos metileno opcionalmente está sustituido con R^{7d};
R^{7d}
es selecciona entre alquilo C_{1-6}, cicloalquilo C_{3-7}, cicloalquilalquilo C_{4-11}, arilo, aril(alquilo C_{1-6}), heteroarilo y heteroaril(alquilo C_{1-6});
R^{10d}
se selecciona entre: H, R^{1de}, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, halógeno, CO_{2}R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6})- sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
R^{10de}
se selecciona entre: H, alcoxi C_{1-4} sustituido con 0-1 R^{21d}, halógeno, CO_{2}R^{17d}, CONR^{17d}R^{20d}, alquilo C_{1-6} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilo C_{3-7} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d}, cicloalquilalquilo C_{4-11} sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-1 R^{21d} y aril(alquilo C_{1-6})- sustituido con 0-1 R^{15d} o 0-2 R^{11d} o 0-1 R^{21d};
W^{d}
es -C(=O)-N(R^{13d})-;
X^{d}
es -CH(R^{14d})-CH(R^{15d})-;
R^{13d}
es H o CH_{3};
R^{14d}
se selecciona entre H, alquilo C_{1-10}, arilo o heteroarilo, en los que los grupos arilo o heteroarilo opcionalmente están sustituidos con 0-3 sustituyentes seleccionados entre el grupo constituido por: alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, arilo, halo, ciano, amino, CF_{3} y NO_{2};
R^{15d}
es H o R^{16d};
Y^{d}
es -COR^{19d};
R^{19d}
se selecciona entre: hidroxi, alcoxi C_{1-10}, metilcarboniloximetoxi-, etilcarboniloximetoxi-, t-butilcarbonil- oximetoxi-, ciclohexilcarboniloxi-metoxi-, 1-(metilcarboniloxi)etoxi-, 1-(etilcarboniloxi)etoxi-, 1-(t-butil-carboniloxi)etoxi-, (1-(ciclohexilcarboniloxi)etoxi)-, i-propiloxicarbonil-oximetoxi-, t-butiloxicarboniloxi- metoxi-, 1-(i-propiloxicarboniloxi)-etoxi-, 1-(ciclohexiloxicarboniloxi)etoxi-, 1-(butiloxicarboniloxi)etoxi-, dimetilaminoetoxi-, dietilaminoetoxi-, (5-metil-1,3-dioxaciclopenten-2-on-4-il)metoxi-, (5-(t-butil)-1,3-dioxaciclopenten-2-on-4-il)metoxi-, (1,3-dioxa-5-fenil-ciclopenten-2-on-4il)metoxi- y 1-(2-(2-metoxipropil)-carboniloxi)etoxi;
R^{20d}
es H o CH_{3};
m^{d}
es 0 o 1;
n^{d}
es 1-4;
t^{d}
es 0 o 1;
C_{h}
es
\vskip1.000000\baselineskip
256 
\vskip1.000000\baselineskip
A^{1}
se selecciona entre el grupo: OH y un enlace a L_{n};
A^{2}, A^{4} y A^{6} son, cada uno, N;
A^{3}, A^{5} y A^{8} son, cada uno, OH;
A^{7}
es un enlace a L_{n} o un enlace NH a L_{n};
E
es un alquilo C_{2} sustituido con 0-1 R^{17};
R^{17}
es =O;
\vskip1.000000\baselineskip
\quad
alternativamente
C_{h}
es
\vskip1.000000\baselineskip
257 
\vskip1.000000\baselineskip
A^{1}, A^{2}, A^{3} y A^{4} son, cada uno, N;
A^{5}, A^{6} y A^{8} son, cada uno, OH;
A^{7}
es un enlace a L_{n};
E
es un alquilo C_{2} sustituido con 0-1 R^{17};
R^{17}
es =O;,
\vskip1.000000\baselineskip
\quad
alternativamente,
C_{h}
es
\vskip1.000000\baselineskip
258 
\vskip1.000000\baselineskip
A^{1}
es NH_{2} o N-C(R^{20})(R^{21});
E
es un enlace;
A^{2}
es NHR^{13};
R^{13}
es un heterociclo sustituido con R^{17}, heterociclo que se selecciona entre piridina y pirimidina;
R^{17}
se selecciona entre un enlace a L_{n}, C(=O)NHR^{18} y C(=O)R^{16};
R^{18}
es un enlace a L_{n};
R^{24}
se selecciona entre el grupo: -CO_{2}R^{25}, -OR^{25}, -SO_{3}H y -N(R^{25})_{2}, y
R^{25}
se selecciona independientemente en cada aparición entre el grupo: hidrógeno y metilo.
\newpage
4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que
R^{1de}
se selecciona entre
259 
\vskip1.000000\baselineskip
260 
\vskip1.000000\baselineskip
261 
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262 
\vskip1.000000\baselineskip
263 
\vskip1.000000\baselineskip
264
265
en el que los heterociclos anteriores opcionalmente están sustituidos con 0-2 sustituyentes seleccionados entre el grupo: NH_{2}, halógeno, NO_{2}, CN, CF_{3}, alcoxi C_{1-4}, alquilo C_{1-6} y cicloalquilo C_{3-7}.
5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto se selecciona entre el grupo:
\quad
ácido 2-(((-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil)carbonilamino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)amino)sulfonil)-fenil)-fenil)sulfonil)amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico;
\quad
ácido 2-(2-aza-2-((5-(N-(1,3-bis(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)etil)-amino)sulfonil)-fenil)fenil)sulfonil)amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)-carbamoil)propil)carbamoil)(2-piridil))amino)vinil)bencenosulfónico;
\quad
ácido 2-((6-((1-aza-2-(sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))carbonilamino)-4-(N-(3-(2-(2-(3-(((4-(4-(((1-carboxi-2-(((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)-etil)amino)sulfonil)fenil)fenil)-sulfonil)-amino)propoxi)-etoxi)etoxi)propil)carbamoil)butanoico;
\quad
ácido 3((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)-ciclododecil)-acetilamino)propoxi)etoxi)etoxi)propil)amino)-sulfonil)fenil)fenil)sulfonil)amino)propanoico;
\quad
ácido 2-(6-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)-amino)(3-piridil)carbonil-amino)hexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)-propanoico;
\quad
ácido 2-((6-((1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil)amino)(3-piridil))(carbonil-amino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino propanoico;
\quad
[ácido 2-[[[5-[carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]-bencenosulfónico]-Glu (ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)-propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)(ácido (2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonilamino)propanoico);
\quad
[ácido 2-[[[5-(carbonil]-2-piridinil]hidrazono]metil]bencenosulfónico]-Glu-bis-[Glu(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-il-amino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonilamino)propanoico)(ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il)carbonil-amino)propanoico)]
\quad
ácido 2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)-acetil-{ácido 2-(6-aminohexanoilamino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)-propil)-(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico}:
\quad
2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-1-ciclododecil)-acetil-Glu{ácido-2-(6-aminohexilamino)-3-((1-(3-(imidazol-2-ilamino)propil)-{1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico}{ácido-2-(6-amino-hexanoil-amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil){1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propanoico}
266
267 
\vskip1.000000\baselineskip
268 
\vskip1.000000\baselineskip
269 
\vskip1.000000\baselineskip
270 
\vskip1.000000\baselineskip
271
272 
\vskip1.000000\baselineskip
273
\quad
sal del ácido 2-(((4-(3-N-(3-(2-(2-(3-(2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecilacetilamino)-6-aminohexanoilamino)-propoxi)etoxi)etoxi)propil-carbamoil)propoxi)-2,6-dimetilfenil)-sulfonil)amino)-3-((1-(3-imidazol-2-ilamino)propil)(1H-indazol-5-il))carbonil-amino)propiónico;
274 
\vskip1.000000\baselineskip
275
\quad
ácido 2-({[4-(3-(N-[2-(2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}-propil)etil]carbamoil}propoxi)-2,6-dimetilfenil]-sulfonil)amino}(2S)-3-({1-(3-((1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico}
276
\quad
ácido 2-[({4-[4-({[2-((2R)-3-sulfo-2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}-propil)etil]amino}sulfonil)fenil]fenil 1)sulfonil}amino)(2S)-3-({1-[3-(imidazol-2-il-amino)propil]-(1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico}
\quad
ácido (4S)-4-(N-(1-[N-(2-{4-[4-({(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(2-piridil-amino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetil-amino}butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetil-amino}butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-{N-[(1S)-1-(N-{1,3-bis[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)etil]-amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]propil} carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil)-4-(6-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}hexanoilamino)butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetilamino)butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-metil-3-[3-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)propil](1H-indazol-`6-il)}carbonil-amino)etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)-carbamoil]-3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]aceti-amino)butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-(N-{(1S)-1-N-(2-{4-[4-(((1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)-3,5-dimetilfenoxi]butanoilamino}etil)carbamoil]-`3-carboxipropil}carbamoil)-4-{2-(1,9,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetilamino]butanoico;
\quad
ácido (2S)-2-{[(2,6-dimetil-4-{3-[N-(2-{2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino}etil)carbamoil]propoxi}fenil)-sulfonil]amino}-3-({2-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](2-hidro-1H-indazol-5-il)}carbonilamino)propanoico;
\quad
ácido (4S)-4-N-[(1S)-1-(N-{2-[({4-[4-({[(1S)-1-carboxi-2-({1-[2-(2,3,4,5,6-tetrahidropiridilamino)etil](1H-indazol-5-il)}carbonilamino)-etil]amino}sulfonil)fenil]fenil)sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxi-propil]carbamoil}-4-{2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboximetil)-ciclododecil]acetilamino}butanoico;
\quad
ácido (4S)-4-{N-[(1S)-1-(N-{2-[({4-[4-(({(1S)-1-carboxi-2-({1-[3-(3,4,5,6-tetrahidropirimidin-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il)}carbonil-amino)etil]amino}sulfonil)fenil]fenil}sulfonil)amino]etil}carbamoil)-3-carboxipropil]carbamoil]-4-{2-(1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris(carboxi-metil)ciclododecil]acetilamino)butanoico;
\quad
ácido (2S)-3-((3-[(imidazol-2-ilamino)metil]-1-metil(1H)-indazol-6-il)}carbonilamino)-2-({[4-(4-{[(2-(2-[1,4,7,10-tetraaza-4,7,10-tris-(carboximetil)ciclododecil]acetilamino)etil)amino]sulfonil}fenil)fenil]-sulfonil}amino)propanoico;
\quad
ácido 3-((7-(3-[(6-{[(E)-1-aza-2-(2-sulfofenil)vinil]amino)(3-piridil)-carbonilamino]propoxi)-1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil](1H-indazol-5-il))-carbonilamino](2S)-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]-amino}-propanoico, y
\quad
ácido 3-{[1-[3-(imidazol-2-ilamino)propil]-7-(3-{2-[1,4,7,10-tetraaza-9,7,10-tris(carboximetil)ciclododecil]-acetilamino)propoxi)(1H)-indazol-5-il)carbonilamino}-2-{[(2,4,6-trimetilfenil)sulfonil]amino}-propanoico;
o una forma de sus sales farmacéuticamente aceptable.
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