ES2243254T3

ES2243254T3 - Composicion que contiene carnitina e inositol fosfato util como complemento dietetico o farmaco.

Info

Publication number: ES2243254T3
Application number: ES00922866T
Authority: ES
Inventors: Claudio Cavazza
Original assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Current assignee: Sigma Tau Industrie Farmaceutiche Riunite SpA
Priority date: 1999-04-22
Filing date: 2000-04-19
Publication date: 2005-12-01
Anticipated expiration: 2020-04-19
Also published as: HUP0102926A3; TNSN00083A1; CA2335015A1; EP1119363A2; EE200000742A; ITRM990248A1; EP1119363B1; HU227357B1; BR0006076A; DE60021247D1; KR20010053023A; US6565876B1; IT1306133B1; JP2002542282A; TR200003737T1; CN1359295A; AR023391A1; DE60021247T2; WO2000064426A2; ATE299370T1

Abstract

Una composición en combinación que comprende: (a) propionil L-carnitina o una sal farmacológicamente aceptable de la misma; y (b) un inositol fosfato.

Description

Composición que contiene carnitina e inositol fosfato útil como complemento dietético o fármaco.

La presente invención se relaciona con una composición para la prevención y/o tratamiento de trastornos cardiovasculares y neurocerebrales, formas variadas de anoxia tisular, deficiencias musculares energéticas, anomalías de tipo inflamatorio, alteraciones de la coagulación sanguínea tales como trombosis y formas de proliferación tisu-
lar.

Por consiguiente, la composición puede tomar la forma y ejercer la acción de un suplemento dietético o de un medicamento real, dependiendo del soporte y la acción preventiva, o de la acción estrictamente terapéutica, que se intenta ejercer en relación con los individuos en los que será usada.

Más especialmente la presente invención se relaciona con una composición que se puede administrar por vía oral, parenteral, rectal o transdérmica, que comprende como ingredientes característicos, en combinación:

(a) propionil L-carnitina o una sal farmacológicamente aceptable de la misma, opcionalmente en combinación con otra "carnitina", donde por "carnitina" nos referimos a L-carnitina o una alcanoil L-carnitina seleccionada del grupo que comprende acetil L-carnitina, butiril L-carnitina, valeril L-carnitina e isovaleril L-carnitina o sus sales farmacológicamente aceptables; y

(b) un inositol fosfato seleccionado del grupo que comprende inositol monofosfato, inositol tetrafosfato, inositol pentafosfato, particularmente inositol hexafosfato (IP6).

Tanto la carnitina como el inositol hexafosfato son bien conocidos por sus importantes efectos farmacológicos y metabólicos que han conducido a numerosos hallazgos clínicos y farmacológicos favorables.

Con respecto a las carnitinas, es bien conocido el papel que desempeñan en los procedimientos de \beta-oxidación de ácidos grasos y síntesis de ATP.

Están también dotadas de actividad antioxidante importante, como queda demostrado por su efecto protector contra la lipoperoxidación de la membrana celular fosfolipídica y contra el estrés oxidativo inducido a nivel de células miocárdicas y endoteliales. Los efectos bioquímicos de las carnitinas se reflejan en los resultados favorables obtenidos en la práctica clínica cuando se las usa en el tratamiento de formas variadas de aterosclerosis, isquemia miocárdica, vasculopatía periférica o diabetes.

Además con respecto al inositol hexafosfato (IP6), se han publicado numerosos estudios tanto de naturaleza clínica como bioquímica, los que focalizan sus actividades y usos en la prevención y tratamiento de cambios patológicos varios. A pesar de que el interés en este compuesto data de muchos años atrás, cuando se atribuyó a la acción antioxidante de IP6 la capacidad de ciertas semillas de plantas, que contienen un alto porcentaje de IP6, de mantener su capacidad germinativa intacta durante largos periodos de tiempo, solo recientemente los investigadores comenzaron a detectar sus propiedades antitrombóticas y antiateroscleróticas y su capacidad cardioprotectora contra el daño causado por el infarto así como la capacidad de proporcionar protección contra la aparición de procesos tumorales. Estas propiedades pueden estar relacionadas en parte con su alta capacidad antioxidante y en parte con su capacidad para interferir en la liberación de citoquinas y otros productos inducidos por la inactivación de receptores que regulan sistemas de transducción celular.

De hecho, es bien sabido que el inositol hexafosfato IP6 o fitina, está presente en porcentajes elevados en todas las células y tejidos. IP6 constituye 1-5% en peso de muchos cereales y legumbres, como por ej. arroz, trigo y soja, en los que constituye aproximadamente el 50% de la reserva de fósforo. En la práctica clínica, las áreas principales en las que ha sido exitoso el uso de IP6 se relacionan sobre todo con el tratamiento de hipercolesterolemia y aterosclerosis, así como hipercalcemia y en la resolución de cálculos renales. Resultados del mismo modo prometedores se han obtenido experimentalmente con su uso en la inhibición de la agregación plaquetaria inducida por ADP o en la reperfusión de órganos dañados como el corazón.

Por otra parte, su incorporación en eritrocitos conduce a una mayor disponibilidad de oxígeno utilizable en aquellas situaciones en las que la capacidad de utilización de oxígeno parece estar reducida, como en órganos isquémicos, anemia hemolítica, insuficiencia pulmonar y eritrocitosis.

Se debería recordar que el factor más importante en el que se fundamenta esta actividad de IP6 es su potente acción antioxidante relacionada sobre todo con su capacidad quelante de hierro.

Con respecto a los efectos vasculoprotectores, neuroprotectores y antianóxicos del IP6, su incorporación en eritrocitos aumenta su estabilidad con los iones de hierro, los que pueden ser liberados dentro de los eritrocitos ellos mismos y además, al incrementar su afinidad por el oxígeno, se obtienen mayores cantidades de oxígeno disponible a nivel de los tejidos que han sufrido anoxia.

Si bien el efecto antioxidante de IP6 puede explicar su actividad favorable a nivel metabólico y cardiovascular, otros mecanismos resaltados en estudios recientes deben ser tenidos en consideración con respecto a sus propiedades antiinflamatorias, inmunoestimulantes y anticáncer.

El IP6 y el inositol pentafosfato, IP5, se encuentran entre los principales inositol fosfatos presentes en las células. Además de modificar la afinidad de la hemoglobina por el oxígeno y actuar como neurotransmisores, llevan a cabo una importante función en la transducción de señales desde la superficie de la célula hacia su interior, en la activación de genes y en la formación de citoquinas y factores que regulan el crecimiento celular.

En el caso de la actividad anticáncer del IP6, se postulan la defosforilación de IP6 a IP5 e IP3 y una disminución del pool de inositol fosfatos caracterizada por una menor fosforilación, cuya prevalencia regula o inhibe el crecimiento celular. El IP6 es además capaz de bloquear la actividad de la fosfatidil inositol-3-quinasa (PI-3-quinasa) y así bloquear al Factor de Crecimiento Epidérmico y la transducción de señales extracelulares reguladas por activación de proteína quinasa.

Otro factor con relación a la actividad anticáncer de IP6 es que se considera que su defosforilación a IP3 está relacionada con la apertura de los canales de calcio relacionados, cuyo incremento no solo es un elemento crítico en la proliferación celular, sino también un factor importante en la inducción de la apoptosis celular. Se ha encontrado, además, que IP6 compite con los receptores del Factor de Crecimiento tipo insulina (IGF-II), y como resultado de esto se ha demostrado que su sobreexpresión genética lleva a diferentes líneas tumorales. En cualquier caso, se ha visto que los receptores IGF son importantes en el inicio de hiperplasia celular.

Pueden ser considerados dos mecanismos diferentes en referencia con la acción antiinflamatoria, inmunoestimulante y anticáncer del IP6. Uno es propio de los agentes antioxidantes, los que, como el ácido salicílico, inhiben la activación de la transmisión genética por medio del sistema NK-kb.IkB, y el otro, por medio del pool de inositol fosfato, regula los factores de crecimiento. Desde un punto de vista práctico, en el campo anticáncer, el uso de IP6 ha probado ser eficaz en la inhibición de cáncer de colon inducido en animales por azoximetano con una actividad dependiente de la dosis.

Su uso ha sido igualmente eficaz en el carcinoma de mama inducido por 7,12-dimetilbenzantraceno (DMBA) o por metilnitrosourea. Se han obtenido resultados favorables también en cánceres de pulmón, próstata e hígado con el uso de IP6. Las pruebas llevadas a cabo en sujetos humanos, principalmente en adenocarcinomas y células leucémicas, han verificado la eficacia anticáncer del IP6.

Ahora se ha encontrado sorprendentemente que una composición en combinación que contiene como componentes característicos:

(a) propionil L-carnitina o una de sus sales farmacológicamente aceptables; y

(b) un inositol fosfato, seleccionado del grupo constituido por inositol monofosfato, inositol tetrafosfato, inositol pentafosfato y, particularmente, inositol hexafosfato (IP6)

es extremadamente eficaz en la prevención y/o tratamiento de trastornos vasculares y neuromusculares y de las formas variadas de anoxia tisular, anomalías de tipo inflamatorio, deficiencias musculares energéticas y formas de proliferación tisular, como resultado del potente e inesperado efecto sinérgico ejercido por sus componentes.

También se ha encontrado que, de manera ventajosa, el componente (a) puede además comprender otra "carnitina", seleccionada del grupo constituido por L-carnitina, acetil L-carnitina, butiril L-carnitina, valeril L-carnitina e isovaleril L-carnitina o sus sales farmacológicamente aceptables o mezclas de las mismas, y que el componente (b) puede además contener inositol.

La razón de pesos entre el componente (a) y el componente (b) de preferencia puede variar desde 1:10 hasta 1:1.

El componente (b) puede estar presente en la composición en la forma de un producto vegetal o un extracto de productos vegetales que contienen altos porcentajes de inositol fosfatos. Son productos vegetales adecuados, por ejemplo, el salvado y el arroz integral.

La composición de acuerdo con la invención puede ser usada como suplemento dietético o como suplemento nutricional con una acción principalmente preventiva, y como un medicamento para el tratamiento de condiciones patológicas francas.

El sorprendente efecto sinérgico que se logra con la combinación de "carnitinas" e inositol fosfatos, y particularmente propionil L-carnitina e IP6, ha sido confirmado por varias pruebas farmacológicas (algunas de ellas son descritas en este documento) seleccionadas de manera tal de brindar indicaciones altamente predictivas en vista del uso práctico de esta composición tanto en el campo preventivo/nutricional como también en su uso como un agente estrictamente terapéutico.

Pruebas Toxicológicas

Se sabe que tanto la L-carnitina y la propionil L-carnitina como el inositol hexafosfato (IP6) se caracterizan por su baja toxicidad y su buena tolerabilidad. Estas características favorables se confirmaron mediante una única administración oral a ratas y ratones de dosis de L-carnitina e IP6 de 1 g/kg y 750 mg/kg, respectivamente, y dosis de propionil L-carnitina e IP6 de 750 mg/kg y 500 mg/kg, respectivamente, sin que fueran detectadas reacciones tóxicas o de intolerancia. La administración intraperitoneal de 500 mg de propionil L-carnitina y 300 mg de inositol hexafosfato en ratas fue también bien tolerada y no se detectaron efectos tóxicos. Estas características favorables de baja toxicidad se confirmaron también con los resultados de las pruebas que involucraron la administración oral diaria de 300 mg/kg de propionil L-carnitina junto con 200 mg/kg de IP6 a ratas durante treinta días consecutivos. Al final de estas pruebas no se detectó reducción en el crecimiento de los animales tratados y tampoco se detectaron cambios en los valores del hematocrito ni en las otras variables químicas sanguíneas, particularmente glucosa sérica, BUN y colesterol.

Además, en la autopsia no se detectaron anomalías histológicas ni en los parénquimas tisulares de los órganos principales examinados.

Actividad antiinflamatoria evaluada con la prueba de edema con carragenina

Para evaluar el efecto antiinflamatorio de la composición nueva se usó la prueba de edema con carragenina, en la que se inyectó carragenina en las patas de las ratas.

La inyección de 0,1 ml de solución de carragenina 1% (Sigma Chemical, St. Louis, MO, USA) en el área subplantar de la pata derecha de la rata indujo edema marcado en la pata, que llegó a una intensidad máxima 4-5 horas después de la inyección. El edema fue medido por medio de pletismografía por anillos de mercurio en varios intervalos de tiempo diferentes hasta la cuarta hora tras la inyección de carragenina.

Se administraron tanto la propionil L-carnitina (250 mg/kg) como el IP6 (250 mg/kg) media hora antes de la inyección de carragenina. Los resultados de esta prueba (Ver Tabla 1) muestran que ambos, propionil L-carnitina e inositol fosfato, ejercen una acción inhibitoria leve en la reacción inflamatoria inducida por carragenina, mientras que su uso combinado fue capaz de inhibir prácticamente por completo el edema inducido por carragenina, demostrando de esta manera un efecto sinérgico sorprendente e inesperado de propionil L-carnitina e inositol hexafosfato.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 1 Actividad antiinflamatoria evaluada con la prueba de edema con carragenina

	% de inhibición después de
	1h	2h	4h
Propionil L-carnitina 250 mg/kg	---	15 \pm0,3	8 \pm 0,9
IP6 250 mg/kg	5 \pm1,1	20 \pm2,1	15 \pm0,6
Propionil L-carnitina 250 mg/kg + IP6 250 mg/kg	00 \pm4,8	80 \pm7,1	50 \pm3,9

Actividad antiinflamatoria evaluada con la prueba de artritis inducida con colágeno

Se obtuvo la confirmación de los efectos antiinflamatorios de la composición de acuerdo con la invención usando como prueba la inducción con colágeno de artritis tipo II de acuerdo con la técnica descrita por Trentham (Trentham D.R., J. Exp. Med., 146:857, 1977). En esta prueba, se inmunizó un grupo de ratones por inyección intradérmica en la base de la cola de 100 mcg de colágeno natural emulsionado en adyuvante de Freund completo (Difco Labs. Detroit, USA).

Después de tres semanas, se inyectó nuevamente a los animales tratados con la misma dosis de colágeno emulsionado por vía intraperitoneal. El tratamiento con propionil L-carnitina (200 mg/kg) o con inositol hexafosfato (200 mg/kg) o con los dos compuestos en combinación se administró oralmente desde el día de la inyección de colágeno hasta el final de la sexta semana.

Un grupo de animales no recibió tratamiento y sirvió como grupo control. Se evaluó la intensidad del edema con puntuaciones desde 1 hasta 4. El resultado de esta prueba también demostró un sinergismo potente entre propionil L-carnitina e inositol hexafosfato. De hecho, mientras la propionil L-carnitina sola no mostró efecto inhibitorio en el edema inducido por colágeno y el IP6 indujo solo una leve reducción (aproximadamente 20%), cuando los dos compuestos fueron combinados, la inhibición del edema fue mayor al 80%.

Actividad antiagregación plaquetaria

La actividad antiagregación plaquetaria de la composición de acuerdo con la invención se evaluó en muestras de sangre de voluntarios sanos. Las muestras se trataron con citrato de sodio y se centrifugaron (145 x g durante 5 min. a 22ºC) y se contó el número de plaquetas (CA 580=4 Platelet Counter - DelCon). Se llevó el número de plaquetas a 300.000 por ml agregando la cantidad necesaria de PPP (Plasma Pobre en Plaquetas), obtenido por centrifugación de sangre a 1.600 x g durante 10 minutos a 22ºC.

El agente agregante usado fue colágeno (2,5 ng/ml, 5 ng/ml) y la agregación inducida se midió por fotometría de acuerdo con el procedimiento descrito por Born (Born G.V., Nature, 194:927, 1962). La agregación plaquetaria se midió en condiciones basales y tras 10 min. de incubación con propionil L-carnitina e IP6 solos o en combinación.

Las dosis usadas de propionil L-carnitina fueron de 10 ng y 20 ng/ml, mientras que las dosis de IP6 fueron de 4 ng y 8 ng/ml.

Los resultados de las pruebas indican que mientras la propionil L-carnitina sola no inhibe la acción agregante del colágeno, IP6 solo la reduce hasta el 40%. La combinación de los dos compuestos, sin embargo, muestra inhibición completa de la actividad agregante (100%), lo que es un indicador de la acción sinérgica eficaz que se produce entre propionil L-carnitina e IP6.

Actividad antiaterosclerótica

La actividad antiaterosclerótica de la composición nueva se evaluó en varios grupos de ratas (machos de ratas Wistar) a los que se les administró una dieta aterogénica durante seis semanas consecutivas, constituida por caseína 24%, colesterol 1%, aceite de algodón 15%, azúcar 60% y vitamina D_{2} 200 mUst/g de acuerdo con el régimen propuesto por Melinow (Melinow M.R., Atherosclerosis, 48:105, 1983). Al final de la sexta semana de tratamiento, se formaron lesiones ateroscleróticas vasculares marcadas, las que eran particularmente pronunciadas a nivel de la aorta abdominal. La severidad de estas lesiones se evaluó con un procedimiento morfométrico, midiendo el espesor de la aorta abdominal y la intensidad de la tinción inducida por Sudan IV con un sistema de puntuación progresiva desde 1 hasta 5. En estas pruebas, las ratas recibieron diariamente la administración de 150 mg/kg de propionil carnitina y 100 mg/kg de IP6, junto a la dieta aterogénica. Los resultados de los exámenes realizados sobre las ratas tratadas mostraron que, mientras la propionil L-carnitina y el IP6 solos producen solo un efecto protector leve, la administración de los dos compuestos en combinación inhibe prácticamente por completo la aparición de lesiones ateroscleróticas como se indica por medio de los exámenes morfométricos y la tinción con Sudan IV, demostrando de este modo, también en este caso, el potente efecto sinérgico de la combinación de propionil L-carnitina con
IP6.

Efectos en el ejercicio muscular

Puesto que IP6, que es rico en grupos fosfato, es útil como reserva de energía, se llevaron a cabo pruebas para establecer si su administración puede aumentar el tiempo de resistencia a la natación en ratones sometidos a natación forzada en un tanque rectangular lleno de agua, de acuerdo con la técnica descrita por Zheng (Zheng R.L., Acta Pharmacol. Sinica, 14:47, 1993) y si su efecto puede aumentarse usándolo en combinación con una carnitina, como por ejemplo, propionil L-carnitina. Las pruebas se llevaron a cabo en varios grupos de animales tratados con propionil L-carnitina (200 mg/kg) o con IP6 (100 mg/kg) solos o con ambos compuestos en combinación.

Los compuestos se administraron por vía oral en los tres días previos a la prueba. En los animales así tratados, se midió el tiempo de resistencia a la natación comparado con animales control. El tiempo medio de resistencia a la natación aumentó ligeramente tanto en las ratas tratadas con propionil L-carnitina como en las tratadas con IP6 solo, mientras que se obtuvo un aumento marcado en el tiempo de natación en los animales tratados con la combinación de propionil L-carnitina e IP6, demostrando de esta manera un efecto sinérgico evidente (véase Tabla 2).

En otra serie de pruebas se evaluó el efecto de la combinación de propionil L-carnitina e IP6 en ejercicio muscular forzado, el que, se sabe puede generar especies reactivas de oxígeno (ROS), inflamación y daño en estructuras musculares.

Se evaluó el ejercicio muscular forzado en varios grupos de ratas haciéndolas correr en una cinta móvil con velocidad y ángulo de inclinación controlados, como describen Li (Li J.K., Acta Pharmacologica Sinica, 20:126, 1999) y Husain (Husain K., Pathophysiology, 4:69, 1997). Se forzó a los animales a correr en una pendiente de aproximadamente 5º y a una velocidad de la cinta de 28 m/min. La resistencia de los animales alcanzó el punto en el que quedaron exhaustos tras aproximadamente 85 minutos de ejercicio.

La prueba fue llevada a cabo en grupos de animales, a los que se les administraron 200 mg/kg de propionil L-carnitina o 100 mg/kg de IP6 solo o en combinación durante los tres días previos al ejercicio. Se obtuvieron muestras del músculo gastrocnemius (gemelos) de los animales sacrificados, 5 y 30 minutos después del final del ejercicio, y se las usó para medir el contenido de malondialdehído (MDA) como marcador del nivel de lipoperoxidación por medio de la reacción con ácido tiobarbitúrico de acuerdo con el procedimiento descrito por Okhawa (Okhawa H., Anal. Biochem., 95:351, 1979).

Como resulta evidente con los resultados expuestos en la Tabla 3, tanto la propionil L-carnitina como el IP6 solos fueron capaces de reducir los niveles de lipoperoxidación muscular en el homogenado muscular como se detectó por el menor incremento de MDA, que, en contraste, fue muy marcado en las ratas control 5 minutos después del final del ejercicio. La combinación de propionil L-carnitina e IP6, por otra parte, proporciona una protección prácticamente total contra la lipoperoxidación en los músculos de animales tratados, demostrando así, también en este caso, el efecto sinérgico de propionil L-carnitina e IP6.

TABLA 2 Prueba de resistencia a la natación

Tratamiento	Tiempo de natación (min)
Controles	98 \pm 15
Propionil L-carnitina	116 \pm 19
IP6	136 \pm 16
Propionil L-carnitina + IP6	184 \pm 22

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 3 Pruebas de fatiga muscular

Tratamiento	Contenido de MDA en el músculo [(nmol\cdotg^{-1} (p/p)]
	Después de 5 min	Después de 30 min
Controles	234 \pm 9	225 \pm 11
Propionil L-carnitina	210 \pm 10	212 \pm 14
IP6	200 \pm 16	205 \pm 8
Propionil L-carnitina + IP6	175 \pm 12	181 \pm 12

Efectos en hipoxia neuronal

Para lograr la actividad protectora de la composición de acuerdo con la invención en el daño inducido por hipoxia a nivel neuronal, se realizaron pruebas en cultivos de neuronas cerebrales de pollo en las que se indujo una disminución de la respiración celular introduciendo NaCN en los cultivos. El metabolismo energético de los cultivos neuronales fue evaluado midiendo las concentraciones de ATP presente en los cultivos sin tratamiento o en cultivos a los que se agregó propionil L-carnitina o IP6 en dosis de 100 y 50 mg/l, respectivamente. Los cultivos de neuronas cerebrales de pollo se prepararon de acuerdo con la técnica descrita por Pettman (Pettman B., Nature, 281:378, 1976). Se indujo hipoxia citotóxica agregando NaCN al medio de cultivo hasta una concentración final de 1 mmol/l. Tras 120 minutos se reemplazó el medio por un medio libre de NaCN y se bloqueó el metabolismo celular lavando con solución tamponadora helada. Se realizó el ensayo de ATP de acuerdo con el procedimiento descrito por Werner (Werner A. J., Chrogratogr. Biomed. Appl., 421:257, 1987).

Los resultados de estas pruebas se muestran en la Tabla 4. La medición de ATP muestra que los niveles de ATP se reducen sustancialmente por anoxia y permanecen bajos aún después de treinta minutos de reoxigenación, mientras que, cuando están presentes propionil L-carnitina o IP6 solos o en combinación, se observa una menor reducción de los niveles de ATP como así también una recuperación más rápida de los niveles de ATP.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 4 Efecto en hipoxia neuronal

Tratamiento	ATP nmol g proteína después de tiempo de reoxigenación
	0	30 min
Controles	9,2 \pm 0,9	14,4 \pm 1,2
Propionil L-carnitina	11,1 \pm 1,6	16,3 \pm 2,2
IP6	12,4 \pm 2,1	16,9 \pm 1,9
Propionil L-carnitina + IP6	15,8 \pm 2,4	23,7 \pm 2,3

Actividad antiproliferativa

En vista de los numerosos estudios de investigación con respecto a la actividad preventiva anticáncer quimioterapéutica demostrada experimentalmente por IP6, especialmente contra cáncer de colon y mama, se evaluó la actividad antiproliferativa de la composición de acuerdo con la invención en ratones mediante inyección subcutánea de teleocidina que, como los forbolmiristatos, es capaz de causar anomalías proliferativas símil cáncer en la piel (Fujiki A., Biochem. Biophys. Res. Comm., 90:976, 1979).

Dado que las reacciones en la piel inducidas por teleocidina están acompañadas por un aumento en la actividad de la ornitina decarboxilasa, esta enzima puede usarse como marcador para la reacción proliferativa y sus diferentes grados de severidad.

Para estas pruebas, se inyectó teleocidina por vía subcutánea en el lomo depilado de ratones en dosis de 5 mcg/ratón.

Una semana antes de la inyección, los grupos de animales recibieron administración oral de propionil L-carnitina (200 mg/kg) o IP6 (100 mg/kg) o ambos compuestos en combinación. Cinco horas tras la inyección de teleocidina, se realizaron los ensayos de ornitina de carboxilasa en epidermis homogeneizada de los animales tratados, de acuerdo con el procedimiento descrito por O'Brien (O'Brien T. G., Res. 42:2841, 1982).

La evaluación de la concentración de ornitina de carboxilasa en proteína del extracto epidérmico se realizó de acuerdo con la técnica descrita por Lowry (Lowry O. H., J. Biol. Chem., 193:265, 1951). Como resulta evidente por los resultados expuestos en la Tabla 5, el aumento de la actividad de ornitina decarboxilasa inducida por teleocidina se redujo significativamente por la administración previa de propionil L-carnitina o IP6 solos. Sin embargo, cuando los dos compuestos se usaron en combinación, la reducción en la actividad de ornitina decarboxilasa fue marcada y significativamente mayor.

TABLA 5 Actividad antiproliferativa

Tratamiento	Actividad de ornitina decarboxilasa nmol de
	CO_{2}/60 min/mg proteína
Controles	0,055 \pm 0,004
Teleocidina	2,6 \pm 0,4
Propionil L-carnitina	2,1 \pm 0,2
IP6	1,95 \pm 0,2
Propionil L-carnitina + IP6	0,58 \pm 0,9

Se quiere significar por sal farmacológicamente aceptable de L-carnitina o alcanoil L-carnitina a cualquier sal de estos ingredientes activos con un ácido que no da como resultado efectos tóxicos o secundarios no deseados. Estos ácidos son bien conocidos por expertos en farmacia.

Los siguientes son ejemplos, no limitantes, de sales adecuadas: cloruro; bromuro; yoduro; aspartato, aspartato ácido; citrato, citrato ácido; tartrato; fosfato, fosfato ácido; fumarato, fumarato ácido; glicerofosfato; glucosa fosfato; lactato; maleato, maleato ácido; orotato; oxalato, oxalato ácido; sulfato, sulfato ácido; tricloroacetato, trifluoroacetato y metansulfonato.

En la publicación Int. J. of Pharm. 33, (1986), 201-217 se detalla una lista de sales farmacológicamente aceptables aprobadas por FDA; esta publicación es incorporada aquí por referencia.

La composición de acuerdo con la invención puede también comprender vitaminas, coenzimas, sustancias minerales y antioxidantes.

Los excipientes apropiados para la preparación de las composiciones teniendo en cuenta la vía de administración específica, serán evidentes para los expertos en farmacia y en la industria alimenticia.

Los siguientes son ejemplos ilustrativos, no limitantes, de composiciones de acuerdo con la invención.

1)	Propionil L-carnitina	250 mg
	Inositol hexafosfato	250 mg

2)	L-carnitina	150 mg
	Propionil L-carnitina	150 mg
	Inositol hexafosfato	300 mg

3)	Mezcla de carnitina	300 mg
	(L-carnitina 75 mg, acetil L-carnitina 75 mg,
	propionil L-carnitina 75 mg, isovaleril L-carnitina 75 mg)
	Inositol hexafosfato	300 mg

4)	Popionil L-carnitina	200 mg
	Inositol hexafosfato	200 mg
	Inosina	100 mg

5)	Mezcla de carnitina	200 mg
	(L-carnitina 50 mg, acetil L-carnitina 50 mg, propionil
	L-carnitina 50 mg, isovaleril L-carnitina 50 mg)
	Complejo inositol fosfato	200 mg
	(inositol hexafosfato 100 mg, inositol pentafosfato 50 mg, inositol tetrafosfato 50 mg)
	Inosina	100 mg

6)	Acetil L-carnitina	200 mg
	Propionil L-carnitina	200 mg
	Inositol hexafosfato	400 mg
	Inosina	200 mg

7)	Propionil L-carnitina	200 mg
	Inositol hexafosfato	200 mg
	Inosina	100 mg
	Coenzima Q_{10}	20 mg
	Vit. E	5 mg
	\beta-caroteno	10 mg
	Bioflavonoides	25 mg
	Vit. C	25 mg
	Selenio	50 mg
	Fibras de plantas	50 mcg
	Estearato de magnesio	5 mg

8)	Propionil L-carnitina	200 mg
	Inositol hexafosfato	200 mg
	Inosina	100 mg
	Creatina	100 mg
	Vit. B1	1 mg
	Vit. B2	3 mg
	Vit. B6	5 mg
	Nicotinamida	5 mg
	Vit. E	5 mg
	\beta-caroteno	10 mg
	Vit. B12	2 mcg
	Ácido fólico	700 mcg

Claims

1. Una composición en combinación que comprende:

(a) propionil L-carnitina o una sal farmacológicamente aceptable de la misma; y

(b) un inositol fosfato.

2. La composición de la reivindicación 1 en la que el inositol fosfato es seleccionado del grupo constituido por inositol monofosfato, inositol tetrafosfato, inositol pentafosfato e inositol hexafosfato (IP6).

3. La composición de las reivindicaciones 1 ó 2, en la que el ingrediente (a) además comprende una "carnitina" seleccionada del grupo que comprende L-carnitina, acetil L-carnitina, butiril L-carnitina, valeril L-carnitina, isovaleril L-carnitina o sus sales farmacológicamente aceptables o mezclas de las mismas.

4. La composición de las reivindicaciones 1-3, en la que el ingrediente (b) además comprende inositol.

5. La composición de las reivindicaciones 1-4, en la que la razón de pesos (a):(b) es desde 1:10 hasta 1:1.

6. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el ingrediente (b) se encuentra como un producto vegetal o extracto de productos vegetales que lo contienen.

7. La composición de la reivindicación 6, en la que el producto vegetal es salvado, arroz integral y/o sus extractos.

8. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la sal farmacológicamente aceptable de L-carnitina o alcanoil L-carnitina es seleccionada del grupo que comprende: cloruro; bromuro; yoduro; aspartato, aspartato ácido; citrato, citrato ácido; tartrato; fosfato, fosfato ácido; fumarato, fumarato ácido; glicerofosfato; glucosa fosfato; lactato; maleato, maleato ácido; orotato; oxalato, oxalato ácido; sulfato, sulfato ácido; tricloroacetato, trifluoroacetato y metansulfonato.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que además comprende vitaminas, sustancias minerales y antioxidantes.

10. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, administrable por vía oral, en la forma de un suplemento dietético.

11. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes 1-9, administrable por vía oral, parenteral, rectal o transdérmica en la forma de un medicamento.

12. El suplemento dietético de la reivindicación 10, para la prevención de formas anóxicas tisulares, trastornos cardíacos o neurales, deficiencias energéticas musculares, astenia y fatiga, anomalías de tipo inflamatorio y formas de proliferación tisular.

13. El medicamento de la reivindicación 11 para el tratamiento terapéutico de patologías inducidas por radicales libres, para el tratamiento de trastornos cardiovasculares o cerebrales debidos a anoxia tisular o envejecimiento, alteraciones de la coagulación sanguínea tal como trombosis, anomalías de tipo inflamatorio, deficiencias energéticas musculares acompañadas de astenia y fatiga y como adyuvante en el tratamiento de formas de proliferación tisular.

14. El suplemento dietético de la reivindicación 12, en la forma de comprimidos, píldoras, cápsulas, granulados o jarabes.

15. El medicamento de la reivindicación 13, en la forma de comprimidos, píldoras, cápsulas, granulados, jarabes, supositorios, viales o gotas.

16. El uso de una composición en combinación que comprende como ingredientes activos característicos:

(a) propionil L-carnitina o una de sus sales farmacológicamente aceptables; y

para preparar un suplemento dietético o medicamento útil para la prevención y/o tratamiento de trastornos cardiovasculares o neurocerebrales debidos a anoxia tisular aguda o crónica, deficiencias energéticas, anomalías de tipo inflamatorio, astenia nerviosa y muscular y formas de proliferación tisular.

17. El uso de la reivindicación 16, en el que el ingrediente (a) además comprende una "carnitina" seleccionada del grupo constituido por L-carnitina, acetil L-carnitina, butiril L-carnitina, valeril L-carnitina, isovaleril L-carnitina o sus sales farmacológicamente aceptables o mezclas de las mismas y el ingrediente (b) además comprende inositol.