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ES2139879T5 - Adyuvante de la mucosa no toxico. - Google Patents

Adyuvante de la mucosa no toxico. Download PDF

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ES2139879T5
ES2139879T5 ES95903889T ES95903889T ES2139879T5 ES 2139879 T5 ES2139879 T5 ES 2139879T5 ES 95903889 T ES95903889 T ES 95903889T ES 95903889 T ES95903889 T ES 95903889T ES 2139879 T5 ES2139879 T5 ES 2139879T5
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Novartis Vaccines and Diagnostics SRL
Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
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Abstract

SE PROPORCIONA UN AYUDANTE MUCOSAL NO TOXICO QUE PUEDE SER MEZCLADO CON OTROS ANTIGENOS PARA PROPORCIONAR UNA VACUNA ADMINISTRABLE A SUPERFICIES MUCOSALES EN ORGANISMOS INCLUIDO EL HOMBRE. PREFERIBLEMENTE, EL AYUDANTE MUCOSAL NO TOXICO ES UN MUTANTE DETOXIFICADO DE UNA TOXINA DE RIBOSILACION ADP BACTERIANA, QUE COMPRENDE OPCIONALMENTE UNA O MAS ADICIONES, SUPRESIONES O SUSTITUCIONES DE AMINOACIDO.

Description

Adyuvante de la mucosa no tóxico.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a un adyuvante útil para la administración de vacunas a organismos. En particular, el adyuvante de la invención permite suministrar vacunas en superficies mucosas para producir una respuesta inmune secretora y sistémica.
Antecedentes de la invención
La tecnología actual de la vacunación se basa casi exclusivamente en técnicas de vacunación sistémica en las que la vacuna se inyecta al sujeto a vacunar. Solo ciertas vacunas vivas/atenuadas, tales como la vacuna de la polio de Sabin, pueden tomarse por vía oral.
Las ventajas de las técnicas de inmunización oral son diversas. Por ejemplo, es evidente que una vacuna que puede administrarse por vía oral a los sujetos es mas fácil de administrar a gran escala en ausencia de un equipo especializado, especialmente a sujetos que pueden ser difíciles de manejar o incluso de localizar, tales como ganado y animales silvestres. De esta forma, se evitaría la extensión de la infección mediante la reutilización de agujas en los países en desarrollo. Además, una vacuna oral puede proporcionarse en forma de un sólido comestible, que es más fácil de manipular bajo condiciones extremas y es más estable que las suspensiones liquidas usadas actualmente.
Además, la administración de inmunógenos en una membrana mucosa, tal como mediante la vacunación oral o intranasal, permitiría la producción de una respuesta inmune secretora.
La respuesta inmune secretora, principalmente mediada por IgA, parece estar substancialmente separada de la respuesta inmune sistémica. La vacunación sistémica es poco eficaz para producir una respuesta inmune secretora. Esto es un inconveniente considerable cuando se considera la inmunización contra patógenos, que a menudo entran en el sujeto a través de una superficie mucosa tal como la del intestino o el pulmón.
Desafortunadamente, no es posible producir una respuesta inmune secretora contra la inmensa mayoría de antígenos simplemente exponiendo las superficies mucosas a tales antígenos. Además, actualmente no se dispone de ningún adyuvante capaz de producir una respuesta inmune secretora a un antígeno dado.
La dificultad aparente se debe en gran medida a un fenómeno conocido como tolerancia oral. Los revestimientos del intestino y de los pulmones son tolerantes de forma natural a los antígenos extraños, e impiden la creación de una respuesta inmune contra sustancias ingeridas o inhaladas, tales como los alimentos y la materia particulada transportada por el aire.
Las toxinas bacterianas que ribosilan el ADP, particularmente la toxina diftérica, la toxina pertúsica (PT), la toxina colérica (CT), las toxinas termolábiles de E. coli (LT1 y LT2), la endotoxina A de Pseudomonas, las toxinas C2 y C3 de C. botulinum, así como toxinas de C. perfringens, C. spiriforma y C. difficile, son potentes toxinas en el ser humano. Estas toxinas se componen de una subunidad A monomérica, activa enzimáticamente, que es responsable de la ribosilacion del ADP de las proteínas que se unen a GTP, y una subunidad B no toxica que se une a receptores presentes sobre la superficie de la célula diana y libera la subunidad A a través de la membrana celular. En el caso de CT y LT, se sabe que la subunidad A aumenta los niveles de AMPc intracelular en células diana, mientras que la subunidad B es pentamérica y se une a receptores de gangliósidos GM1.
En 1975 y 1978 se hicieron observaciones que demostraron que la CT es capaz de inducir inmunidad en la mucosa y sistémica contra si misma cuando se administra por vía intraduodenal (es decir, en una superficie de la mucosa). Se demostró que la función de unión a la membrana de la CT era esencial para la inmunogenicidad de la mucosa, pero el toxoide colérico, también conocido como la subunidad B de CT (CTB) era inactivo tras el aislamiento (Pierce y Gowans, J. Exp. Med 1975; 142: 1550; Pierce, J. Exp Med 1978; 148: 195-206).
Posteriormente, se demostró que la CT induce una inmunidad sistémica y de la mucosa contra antígenos coadministrados, en otras palabras, funciona como adyuvante de la mucosa (Elson, Curr. Top. Microbiol. Immunal, 1989; 146: 29; Elson y Ealding, J. Immunol. 1984; 133: 2892-2897; Elson y Ealding, Ibid. 1984; 132: 2736-2741; Elson y col., J. Immunol. Methods 1984; 67: 101-118; Lycke y Homgren, Immunology 1986; 59: 301-338).
Los experimentos mencionados anteriormente se realizaron en ratones, que son comparativamente resistentes a los efectos tóxicos de la CT. Por el contrario, la CT de tipo silvestre es extremadamente toxica para los seres humanos, lo que imposibilita totalmente el uso de una CT que tenga cualquier toxicidad residual como adyuvante de la mucosa en los seres humanos.
En la técnica anterior se han tomado dos enfoques para tratar el problema de la toxicidad de la CT. El primer procedimiento ha implicado el uso de CTB como adyuvante de la mucosa. La CTB es totalmente no toxica.
En una serie de experimentos, se acoplo covalentemente CTB a peroxidasa de rábano picante (HRP) y se administro a ratones por vía intraduodenal. Esto produjo una respuesta inmune poderosa de la mucosa contra la HRP (McKenzie y Halsey, J. Immunol 1984; 133: 1818-1824).
Posteriormente, este resultado se ha confirmado parcialmente con otros antígenos (Liang y col., J. Immunol 1988; 141: 1495-1501; Czerkinsky y col., Infect. Immun. 1989; 57: 1072-1077). También se ha establecido que el mismo principio es eficaz cuando se han ensayado antígenos quiméricos producidos por fusión de genes con secuencias que codifican CTB (Dertzbaugh y Elson, Infect. Immun. 1993; 61 : 384-390; Dertzbaugh y Elson, Ibid. 1993; 61: 48-55; Sánchez y col., Res. Microbiol 1990; 141: 971-979; Holmgren y col., Vaccine 1993; 11: 1179-1184).
Sin embargo, la producción de antígenos quiméricos o acoplados introduce otra etapa en la preparación de vacunas adecuadas, que esencialmente requiere que los antígenos se preparen en una forma conjugada con CTB, especialmente para uso oral. Sería más sencillo y más económico que el adyuvante se administrara en una mezcla simple con el antígeno.
En varias publicaciones se ha afirmado la existencia de un efecto adyuvante para el CTB coadministrado (Tamura y col., J. Immunol 1992; 149: 981-988; Hirabayashi y col., Immunology 1992; 75: 493-498; Gizurarson y col., Vaccine 1991; 9: 825-832; Kikuta y col., Vaccine 1970; 8: 595-599; Hirabayashi y col. Ibid. 1990; 8; 243-248; Tamura y col., Ibid. 1989; 7: 314-32-; Tamura y col., Ibid. 1989; 7: 257-262; Tamura y col., Ibid 1988; 6: 409-413; Hirabayashi y col., Immunology 1991; 72: 329-335 Tamura y col., Vaccine 1989; 7: 503-505).
Sin embargo, varios aspectos de las observaciones presentadas anteriormente no eran completamente convincentes. Por ejemplo, se indicó que el efecto adyuvante atribuido a la CTB no estaba restringido a H-2. Sin embargo, se sabe que la respuesta inmune a CTB esta restringida a H-2 (Elson y Ealding, Eur. J. Immunol. 1987; IT. 425-428). Además, se observo el efecto adyuvante afirmado incluso en individuos ya inmunes a CTB.
Otros grupos no pudieron observar ningún efecto adyuvante de la mucosa atribuible a CTB (Lycke y Holmgren, Immunology 1986; 59: 301-308; Lycke y col., Eur. J. Immunol. 1992; 22: 2277-2281). Los experimentos con CTB recombinante (Holmgren y col., Vaccine 1993; IT: 1179-1183) confirmaron que el efecto afirmado es atribuible en gran medida, si no exclusivamente, a los bajos niveles de contaminación de las preparaciones de CTB con CT.
Así pues, actualmente se acepta que la CTB no es útil como adyuvante de la mucosa.
Un segundo enfoque para eliminar la toxicidad de la CT ha sido mutar la holotoxina de CT para reducir o eliminar su toxicidad. La toxicidad de CT reside en la subunidad A, y en la técnica se conocen varios mutantes de CT y su homologo, LT, que comprenden mutaciones puntuales en la subunidad A. Véase, por ejemplo, la Solicitud de Patente Internacional W092/19265 (Amgen). En la técnica se acepta que CT y LT son generalmente intercambiables, mostrando una homología considerable.
Sin embargo, se observo que el único mutante ensayado hasta la fecha con respecto al efecto de ayuda a la mucosa, un mutante LT que tenia una mutación Glu --> Lys en la posición 112, era inactivo como adyuvante de la mucosa (Lycke y col; Eur. J. Immunol. 1992; 22: 2277-2251; Holmgren y col., Vaccine 1993; IT: 1179-1183). Los autores de estas publicaciones concluyen que hay una asociación entre la actividad de ribosilacion del ADP de la CT y/o LT y la actividad adyuvante. Por lo tanto, por estas publicaciones parece ser que la CTB o un mutante no tóxico de CT o LT no sería activo como adyuvante de la mucosa.
El documento WO95/09649 (Medeva Holdings BV) describe el uso de una forma mutante doble no toxica de toxina pertúsica para la fabricación de una composición adyuvante para estimular o potenciar una respuesta inmune protectora de un antígeno coadministrado con la misma.
Sumario de la invención
Por lo tanto, sigue existiendo la necesidad de un adyuvante de la mucosa activo que pueda usarse para aumentar la inmunogenicidad de un antígeno cuando se administra en una superficie de la mucosa, tal como por vía oral o intranasal.
Ahora se ha descubierto que, en contradicción completa con los resultados y conclusiones presentados en la técnica anterior, se pueden separar las actividades toxicas y adyuvantes de las toxinas de ribosilacion del ADP. Se ha demostrado que un mutante completamente no tóxico de tal toxina es activo como adyuvante de la mucosa.
Se ha demostrado que un mutante de LT que carece completamente de toxicidad es activo como adyuvante de la mucosa y protege a los sujetos contra la exposición posterior a una dosis letal del inmunógeno. Aunque los Solicitantes no desean limitarse por ninguna teoría particular, se postula que los resultados de Lycke y col. y Holmgren y col. indicados anteriormente pueden contradecirse, al menos en parte, ya que no tuvieron en cuenta la estabilidad del mutante que se estaba fabricando. Entre otras cosas, asegurando que el mutante no tóxico de la invención es estable en el sitio de liberación, se ha demostrado que el efecto adyuvante de CT y/o LT puede mantenerse mientras que se eliminan sus efectos tóxicos.
La invención proporciona:
Una composición farmacéutica que comprende un adyuvante de la mucosa no tóxico en mezcla con un segundo antígeno, caracterizado porque (a) dicho adyuvante de la mucosa no tóxico es una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante, en la que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina lábil (LT) al calor de E. coli, y (b) dicho segundo antígeno es un antígeno viral o bacteriano derivado de un organismo patógeno.
Uso de una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante como una en el que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina de cólera (CT) o toxina lábil al calor de E. coli (LT).
El uso de un adyuvante de la mucosa para la fabricación de una vacuna, en el que dicho adyuvante de la mucosa es una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante, y en el que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina de cólera (CT) o toxina lábil al calor de E. coli (LT).
La toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP preferiblemente comprende preferiblemente una o mas adiciones, deleciones o sustituciones de aminoácidos.
Un mutante de LT de acuerdo con la invención puede poseer una sustitución Arg7 a Lys7 en la posición 7 de la subunidad A, el denominado mutante LTK7.
Los especialistas en la técnica conocen mutantes alternativos y se prefieren moléculas para uso en la presente invención.
El mutante usado en la invención puede ser además un mutante en el que la mutación se ha realizado en una parte de la molécula que da como resultado la prevención de la escisión proteolítica de la subunidad A de la toxina, de tal forma que no se produzca actividad enzimática. Tales mutantes se describen en Grant y col., Inf. and Immunity (1994) 62(10) 4270-4278. Por ejemplo, el mutante puede comprender una mutación Arg 192 --> Gly en LT o una mutación correspondiente en otra toxina de ribosilacion de ADP.
El mutante de la invención esta preferiblemente en forma de una holotoxina, que comprende la subunidad A mutada y la subunidad B, que puede ser oligomérica, como en la holotoxina de tipo silvestre. La subunidad B preferiblemente no esta mutada. Sin embargo, se prevé el uso de una subunidad A mutada en el aislamiento de la subunidad B, en una forma esencialmente pura o complejada con otros agentes, que puede reemplazar a la subunidad B y/o a su contribución funcional.
En la técnica se conocen procedimientos para el diseño y producción de mutantes de CT y/o LT. Se describen procedimientos adecuados en la Solicitud de Patente International W093/13202 (Biocine Sclavo), así como en el documento W092/19265 (Amgen).
El adyuvante de la invención se administra preferiblemente en mezcla con un antígeno adecuado contra el cual se desea producir una respuesta inmune. Si el antígeno y el adyuvante no están mezclados, se prefiere que se administren dentro de un periodo de tiempo relativamente corto entre si, en el mismo sitio de administración. Se ha observado que el efecto adyuvante proporcionado por la CT de tipo silvestre tiene una corta duración (véase Lycke y Homgren, Immunology 1986; 59: 301-308). En una realización alternativa, el adyuvante de la mucosa de la invención puede administrarse, opcionalmente tras el aislamiento de otros antígenos, como un refuerzo posterior a la administración sistémica o en la mucosa de una vacuna.
La formulación precisa de la vacuna puede variar de acuerdo con la naturaleza del inmunógeno. Por ejemplo, si el antígeno se encierra en microesferas de liberación lenta o liposomas, el adyuvante de la mucosa puede encerrarse similarmente de forma que el antígeno y el adyuvante puedan interaccionar simultáneamente con el sistema inmune de la mucosa. Alternativamente, puede usarse la administración separada en la mucosa del adyuvante de la invención para aumentar la respuesta de la mucosa a las vacunas administradas por vía parenteral.
Preferiblemente, la composición es una vacuna y es útil para la inmunización de un sujeto contra una enfermedad o el tratamiento de un sujeto que sufre una enfermedad.
Preferiblemente, el mutante comprende una o mas adiciones, sustituciones o deleciones de aminoácidos en la secuencia de aminoácidos de la subunidad A de CT o LT, que es o son eficaces para anular la toxicidad de la toxina.
La superficie de la mucosa puede ser cualquier superficie adecuada de la mucosa del sujeto. Por ejemplo, la administración puede realizarse por inhalación, por medio de un supositorio rectal o vaginal, o un pesario, mediante la alimentación u otra administración bucal, por medio de un aerosol, mediante liberación intranasal o mediante la aplicación directa a las superficies de la mucosa. Se prefieren especialmente la administración oral e intranasal.
El sujeto puede ser cualquier organismo susceptible de inmunización. Están indicados especialmente los seres humanos y otros mamíferos tales como el ganado, mascotas y vida silvestre.
Las enfermedades contra las cuales el sujeto puede inmunizarse incluyen todas las enfermedades que pueden tratarse o prevenirse por inmunización, incluyendo enfermedades víricas, manifestaciones alérgicas, enfermedades causadas por patógenos bacterianos u otros patógenos que entran a través o que colonizan las superficies mucosas, SIDA, enfermedades autoinmunes tales como lupus sistémico eritema-toso, enfermedad de Alzheimer y canceres. Los ejemplos de infecciones víricas que pueden tratarse o prevenirse usando la invención incluyen la infección por virus de ADN, tales como EBV y VZV y, en particular, herpesvirus, por ejemplo, HSV y HCMV, adenovirus, papovavirus tales como HPV, hepadnavirus tales como HBV, infección por virus de ARN tales como picorvavirus, especialmente polivirus y HAV, rinovirus y FMDV, togavirus, flavivirus, coronavirus, paramixovirus tales como RSV, ortomixovirus tales como el virus de la influenza, y retrovirus, especialmente HIV. También se prevé la vacunación contra HCV y HDV.
Los ejemplos de infecciones bacterianas adecuadas para el tratamiento o profilaxis mediante la invención incluyen la infección con Helicobacter pylori, estreptococos, meningococos A, B y C, Bordetella pertussis, clamidia y trachomatis.
La formulación de vacuna adecuada para la liberación en las superficies de la mucosa puede prepararse como se indica más adelante, aunque otras formulaciones serán evidentes para los especialistas en la técnica. Análogamente, a continuación se indican regímenes de administración adecuados, aunque serán evidentes para los especialistas en la técnica modificaciones de los valores ejemplificados.
Se prefiere particularmente la administración simultánea del adyuvante y el segundo antígeno cuando se combinan en un solo vehículo, excipiente o partícula, como se ejemplifica mas adelante.
El segundo antígeno puede ser cualquier antígeno contra el que se desea producir una respuesta inmune en el sujeto. Los antígenos adecuados comprenden antígenos bacterianos, víricos y protozoarios derivados de organismos patógenos, así como alergenos, alogenos y antígenos derivados de tumores y auto-antígenos. Típicamente, el antígeno será un antígeno proteico, polipeptídico o peptídico, pero no se excluyen estructuras antigénicas alternativas tales como antígenos de ácidos nucleicos, antígenos de carbohidratos y organismos enteros atenuados o inactivados tales como bacterias, virus o protozoos. La invención proporciona además un procedimiento para la fabricación de una vacuna con adyuvante que comprende las etapas de:
a)
realizar una mutagénesis dirigida especifica de sitio sobre la subunidad A de una toxina bacteriana de ribosilacion de ADP para destoxificar la toxina; y
b)
asociar la toxina destoxificada con un segundo antígeno, de tal forma que funcione como un adyuvante de la mucosa.
Los ejemplos específicos de antígenos útiles en la presente invención incluyen gD, gB y otras glicoproteínas de HSV; gpl20 y otras proteínas de HIV; gB o gH de CMV; antígenos de HCV; antígeno delta de HDV; antígenos de HAV; antígenos de EBV y VZV; antígenos de B. pertussis y antígenos de H. pylori.
En general, el segundo antígeno puede ser el componente inmunogénico de la vacuna destinada al uso mediante inyección. Tales vacunas, y sus componentes inmunogénicos, pueden ser vacunas de subunidades, organismos inactivados o atenuados enteros o vacunas de polinucleótidos.
Las vacunas de acuerdo con la invención pueden ser profilácticas (para prevenir una infección) o terapéuticas (para tratar la enfermedad después de la infección).
Tales vacunas comprenden uno o mas antígenos, normalmente en combinación con "vehículos farmacéuticamente aceptables", que incluyen cualquier vehículo que no induzca por si mismo la producción de anticuerpos perjudiciales para el individuo que recibe la composición.
Los vehículos adecuados son macromoléculas típicamente grandes, que se metabolizan lentamente, tales como proteínas, polisacáridos, ácidos polilácticos, ácidos poliglicólicos, aminoácidos poliméricos, copolímeros de aminoácidos, agregados de lípidos (tales como emulsiones de gotitas de aceite o liposomas) y partículas víricas inactivas. Tales vehículos son bien conocidos para los especialistas habituales en la técnica. En aspectos preferidos de la invención, estos vehículos pueden funcionar como agentes inmunoestimuladores ("adyuvantes"). Además, el antígeno puede conjugarse con un toxoide bacteriano, tal como un toxoide de difteria, o con patógenos de tétanos, cólera, H. pylori, etc.
Los adyuvantes preferidos para mejorar la eficacia de la composición incluyen, pero sin limitación: (1) sales de aluminio (alumbre), tales como hidróxido de aluminio, fosfato de aluminio, sulfato de aluminio, etc.; (2) formulaciones de emulsión de agua en aceite (con o sin otros agentes inmunoestimuladores específicos tales como muramil péptidos (véase mas adelante) o componentes de la pared celular bacteriana), tales como, por ejemplo (a) MF59^{TM} (Publ. PCT No. WO 90/14837), que contiene un 5% de Squaleno, un 0,5% de Tween^{TM} 80 y un 0,5% de Span 85 (que contiene opcionalmente diversas cantidades de MTP-PE (véase mas adelante), aunque no es necesario) formulada en partículas submicrónicas usando un microfluidizador tal como un microfluidizador Modelo HOY (Microfluidics, Newton, MA), (b) SAF, que contiene un 10% de Squalano, un 0,4% de Tween^{TM} 80, un 5% de polímero L121 bloqueado con pluronic, y thr-MDP (véase mas adelante), microfluidizado en una emulsión submicrónica o moldeado en un aparato Vortex para generar una emulsión con partículas grandes, y (c) sistema adyuvante RibiTM (RAS), (Ribi Immunochem, Hamilton, MT) que contiene un 2% de Squaleno, un 0,2% de Tween^{TM} 80 y uno o mas componentes de la pared de células bacterianas del grupo compuesto por monofosforil-lipido A (MPL), dimicolato de trehalosa (TDM) y esqueleto de la pared celular (CWS), preferiblemente MPL + CWS (Detox^{TM}); (3) pueden usarse adyuvantes de saponina, tales como Stimulon^{TM} (Cambridge Bioscience, Worcester, MA) o partículas generadas a partir de los mismos tales como ISCOM (complejos inmunoestimuladores); (4) Adyuvante Completo de Freund (CEA) y Adyuvante Incompleto de Freund (IFA); (5) citocinas tales como interleucinas (por ejemplo, IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12, etc.), interferones (por ejemplo, interferón gamma), factor estimulador de colonias de macrófagos (M-CSF), factor de necrosis tumoral (TNF), etc.; y (6) otras sustancias que actúan como agentes inmunoestimuladores para mejorar la eficacia de la composición. Se prefiere el alumbre y el MF59.
Como se ha mencionado anteriormente, los muramil péptidos incluyen, pero sin limitación, N-acetil-muramil-L-treonil-D-isoglutamina(thr - MDP), N-acetil-normuramil-1-alanil-d-isoglutamina(nor - MDP), N-acetilmuramil-1-alanil-d-isoglutaminil-1-alanina-2-(1',2'-dipalmitoil-sn-glicero-3-hidroxifosforiloxi)-etilamina(MTP - PE), etc.
Las composiciones inmunogénicas (por ejemplo, el antígeno, el vehículo farmacéuticamente aceptable y el adyuvante) típicamente contendrán diluyentes tales como agua, solución salina, glicerol, etanol, etc.
De manera adicional, en tales vehículos pueden estar presentes sustancias auxiliares tales como agentes hidratantes o emulsionantes, sustancias tamponadoras del pH y similares.
La preparación puede emulsionarse o encapsularse en liposomas para conseguir un mejor efecto adyuvante, como se ha descrito anteriormente para los vehículos farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones inmunogénicas usadas como vacunas comprenden una cantidad inmunológicamente eficaz de los polipéptidos antigénicos, así como cualquier otro de los componentes mencionados anteriormente, cuando sea necesario. Por "cantidad inmunológicamente eficaz" se entiende que la administración de esa cantidad en un individuo, bien en una sola dosis o como parte de una serie, es eficaz para el tratamiento o la prevención. Esta cantidad varia dependiendo de la salud y condición física del individuo a tratar, del grupo taxonómico del individuo a tratar (por ejemplo, primate no humano, primate, etc.), de la capacidad del sistema inmune del individuo de sintetizar anticuerpos, del grado de protección deseado, de la formulación de la vacuna, de la evaluación del medico correspondiente de la situación medica y de otros factores relevantes. Es de esperar que la cantidad caiga en un intervalo relativamente amplio que puede determinarse mediante ensayos rutinarios.
Las composiciones inmunogénicas se administran por la vía mucosal. Formulaciones adicionales incluyen las formulaciones orales y pulmonares. El tratamiento de dosificación puede ser un solo programa de dosificación o un programa de múltiples dosis. La vacuna puede administrarse junto con otros agentes inmunorreguladores.
Los ejemplos de agentes inmunoestimuladores adecuados incluyen interleucinas, tales como las interleucinas 1,2, 4-7 y 12, e interferones, especialmente el interferón \gamma.
La invención se describe en lo sucesivo solo a modo de ejemplo, haciendo referencia a las siguientes Figuras:
Descripción de las figuras
La Figura 1a muestra la concentración de anticuerpos totales específicos de ovoalbúmina en ratones BALB/c inmunizados i/n o s/c con ovoalbúmina sola o con ovoalbúmina junto con derivados de toxinas;
La Figura 1b muestra la concentración de anticuerpos totales específicos para la toxina en los ratones de la Figura 1a;
La Figura 2 muestra una medición de la IgA especifica de ovoalbúmina en lavados nasales y pulmonares de ratones inyectados como en la Figura 1; y
La Figura 3 muestra la presencia de anticuerpos específicos para el toxoide tetánico en el suero de ratones BALB/c inmunizados i/n o s/c con el Fragmento C de la toxina tetánica solo o junto con derivados de la toxina.
Descripción detallada de la invención
Se usó mutagénesis dirigida especifica de sitio para reemplazar el resto de arginina en la posición siete de la subunidad A de LT con una lisina, para construir un mutante de LT no tóxico que aún pudiera formar una holotoxina con actividad de unión de células. La proteína mutante, denominada LTK7, se purifico y ensayo con respecto a la actividad ribosiltransferasa del ADP y la actividad toxica en varios ensayos. LTK7 aún podía unir el receptor de gangliósidos GM1, pero mostró una perdida completa de la actividad enzimática, de acuerdo con los datos publicados (Lobet y col., Infect. Immun. 1991; 59: 2870-2879). Además, LTK7 era inactivo en el ensayo de asa de íleon de ratón e in vitro sobre células Y1, incluso cuando se ensayó una dosis equivalente a 10^{7} unidades toxicas de LT de tipo silvestre (Tabla 1).
Propiedades In vivo e in vitro de LT y del mutante LT K-7 
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TABLA 1
1 
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Se ensayó la capacidad de LTK7 para actuar como adyuvante de la mucosa en ratones. Se separaron ratones en grupos y se inmunizaron usando ovoalbúmina como antígeno indicador. Los animales se inmunizaron por vía intranasal (i/n) o subcutánea (s/c) usando 10 \mug de ovoalbúmina sola u ovoalbúmina mezclada con 1 \mug de CT, LT o LTK7. Los ratones se dividieron en cuatro grupos de seis ratones. Cuatro ratones de cada grupo se anestesiaron ligeramente y se inmunizaron con 10 Fig. de ovoalbúmina o 10 \mug de ovoalbúmina con 1 \mug de toxinas, administrados en un volumen total de 30 \mul. Los dos ratones restantes se inmunizaron con la misma cantidad de proteínas s/c en un volumen total de 100 \mul. Las proteínas administradas por vía subcutánea se adsorbieron primero en un 2% de
\hbox{Al(OH) _{3} .}
Los animales se inmunizaron en los días 1, 22, 36 y 61. Se recogieron muestras de sangre de 100 \mul en los días 0, 21, 35 y 56 y, en el día 76, los animales se sacrificaron mediante punción cardiaca.
La cuantificación de los anticuerpos se estimo mediante un ELISA. Para la estimación de los anticuerpos específicos de ovoalbúmina, se recubrieron placas EIA de 96 pocillos (costar) durante una noche con 60 \mug/ml de ovoalbúmina. La medición de los anticuerpos específicos de la toxina se realizo usando un ELISA de captura de GM1. Los anticuerpos específicos de la toxina se midieron contra el antígeno usado en las inmunizaciones. No se uso ninguna toxina individual en las mediciones de los anticuerpos específicos de las toxinas de cada grupo y, por lo tanto, las concentraciones entre estos grupos no pueden compararse directamente.
Se reunieron los sueros de cada grupo de cuatro y dos ratones respectivamente. Se prepararon muestras por duplicado a partir de una dilución de 1:50. Las absorbancias se leyeron a 450 nm usando el programa kineticalc versión 2.13 (Biotek instruments). Este programa calcula la velocidad de cambio del sustrato sobre treinta puntos de tiempo separados entre si diez segundos.
Las concentraciones ELISA de los anticuerpos se midieron arbitrariamente como la dilución de suero que dio la mitad de la absorbancia máxima a 450 nm. Los sueros que no mostraron una absorbancia a 450 nm 2,5 veces mayor que la observada con el suero preinmune equivalente se consideraron negativos. Los resultados mostrados en la Figura 1a y 1b representan los valores medios de concentración de los pocillos duplicados de un experimento. No se detectaron niveles significativos de anticuerpos contra la ovoalbúmina por encima del nivel de fondo en el suero de ratones inmunizados i/n con ovoalbúmina sola, aunque los ratones inmunizados s/c se mostraron una seroconversión eficaz. Los ratones que recibieron ovoalbúmina junto con CT o LT i/n contenían niveles muy altos de anticuerpos anti-ovoalbúmina en sus sueros. Estos fueron equivalentes a los observados cuando los ratones se inmunizaron s/c. Los ratones que recibieron ovoalbúmina con LTK7 también mostraron niveles muy elevados de anticuerpos contra ovoalbúmina.
Los niveles de respuestas anti-toxoide en los mismos grupos se muestran en la Figura 1b. Todos los ratones, incluyendo los inmunizados con la toxina mutante, desarrollaron altos niveles de anticuerpos contra esta toxina en sus sueros.
Los niveles de anticuerpos secretores locales contra ovoalbúmina se midieron usando lavados de pulmón y nasales (Fig. 2). En resumen, los animales se sacrificaron mediante punción cardiaca y se diseccionaron de forma que se expuso la traquea. Después se inserto una pipeta ultra-Una en un pequeño corte de la traquea. Los lavados pulmonares se recogieron mediante un lavado repetido y aspiración de 1,5 ml de albúmina de suero bovino al 0,1% (Sigma), en PBS, en los pulmones. Los lavados nasales se recogieron mediante lavado con 1 ml de BSA al 0,1% en PBS a través de la cavidad nasal.
Los anticuerpos IgA específicos de ovoalbúmina se midieron mediante un ELISA usando un anticuerpo conjugado especifico de cadena alfa anti-ratón (Serotec). Se prepararon muestras a partir de animales individuales y las columnas de esta figura representan la velocidad media de cambio del sustrato, usando kineticalc, para cuatro y dos ratones inmunizados i/n y s/c respectivamente. Las figuras se construyen usando los datos de absorbancia de partida a una dilución de 1:3 con respecto a los lavados pulmonares. Estos corresponden a concentraciones comprendidas entre 1:2 y 1:6 para los lavados nasales y entre 1:70 y 1:120 para los lavados pulmonares. Estas concentraciones se calcularon usando el procedimiento descrito anteriormente. Los ratones inmunizados s/c o i/n con ovoalbúmina sola no contenían IgA específica de ovoalbúmina detectable en los lavados muestreados. Todos los ratones individuales inmunizados con ovoalbúmina en combinación con CT, LT o LTK7 mostraron niveles detectables de IgA anti-ovoalbúmina. Así pues, en estos animales es detectable una respuesta anti-ovoalbúmina tanto local como sistémica.
En vista de estos experimentos estimuladores con ovoalbúmina, la inmunización se repitió usando el Fragmento C, una porción no toxica de 50.000 daltons de la toxina tetánica que se había expresado y purificado a partir de la levadura Pichia pastoris. Los ratones se inmunizaron s/c o i/n con el Fragmento C solo o mezclado con muestras individuales de LT o LTK7. Los ratones se separaron en cuatro grupos de diez ratones y cuatro grupos de cinco ratones. Diez ratones se inmunizaron i/n con a) 10 \mug de Fragmento C solo; b) 10 \mug. de Fragmento C + 1 \mug de LT; c) 10 \mug de Fragmento C + 1 \mug de LTK7 y d) solo PBS, todos en un volumen final de 30 \mul. Cinco ratones se inmunizaron i/n con a) 1 \mug de LT y b) 1 \mug de LTK7. Los dos grupos restantes de ratones se inmunizaron s/c con ninguna proteína o con 10 \mug del Fragmento C en un volumen de dosificación de 100 \mul. Estas vacunas se prepararon como se describe en la Figura 1. Los animales se inmunizaron en el día 1 y 22. Se recogieron muestras de sangre de 100 \mul en los días 0, 21 y 35. Los anticuerpos específicos del Fragmento C se midieron mediante un ELISA usando el toxoide tetánico (10 \mug/ml) como antígeno de recubrimiento. Se reunieron los sueros de cada grupo. Se prepararon muestras por duplicado a partir de una dilución de 1:50. Las concentraciones ELISA se calcularon como se ha descrito anteriormente. Los ratones inmunizados s/c con el Fragmento C mostraron una seroconversión eficaz produciendo altos niveles de anticuerpos anti-Fragmento C (Fig. 3). Los ratones inmunizados i/n con el Fragmento C solo no mostraron ninguna seroconversión significativa. Sin embargo, los ratones inmunizados con el Fragmento C combinado con LT o LTK7 mostraron altos niveles de anticuerpos contra el Fragmento C en sus sueros (Fig. 3). Como los ratones que mostraron seroconversión contra el Fragmento C pueden protegerse contra la exposición a la toxina, los grupos se expusieron a la toxina tetánica activa. Todos los ratones inmunizados s/c con el Fragmento C solo se protegieron, mientras que todos los ratones inmunizados i/n fueron muy susceptibles. Todos los ratones inmunizados i/n con el Fragmento C combinado con LT o LTK7 sobrevivieron a la exposición (Tabla 2).
TABLA 2
2
Estos experimentos muestran que puede conseguirse inmunidad protectora contra el tétanos usando el mutante LT no tóxico como adyuvante, y que la inmunización de la mucosa con esta molécula puede generar una respuesta inmune secretora local y sistémica contra la toxina y los antígenos transitorios coadministrados.

Claims (12)

1. Una composición farmacéutica que comprende un adyuvante de la mucosa no tóxico en mezcla con un segundo antígeno, caracterizado porque (a) dicho adyuvante de la mucosa no tóxico es una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante, en la que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina lábil (LT) al calor de E. coli, y (b) dicho segundo antígeno es un antígeno viral o bacteriano derivado de un organismo patógeno.
2. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el adyuvante no tóxico de la mucosa comprende una o mas adiciones, deleciones o sustituciones de aminoácidos en la subunidad A de la holotoxina.
3. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 2, en la que el adyuvante no tóxico de la mucosa es LT-K7.
4. Uso de una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante como adyuvante de la mucosa en la preparación de una composición para la administración en la mucosa, en el que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina de cólera (CT) o toxina lábil al calor de E. coli (LT).
5. Uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la composición es una vacuna.
6. Uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el que la vacuna es para uso en aplicaciones profilácticas o terapéuticas.
7. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 6, en el que la composición además comprende un segundo antígeno.
8. El uso de un adyuvante de la mucosa para la fabricación de una vacuna, en el que dicho adyuvante de la mucosa es una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante, y en el que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina de cólera (CT) o toxina lábil al calor de E. coli (LT).
9. El uso de la reivindicación 8, en el que la vacuna es para la administración oral o intranasal.
10. Una composición farmacéutica que comprende un adyuvante no tóxico de la mucosa y un segundo antígeno para la administración simultanea cuando se combinan en un solo vehículo, excipiente o partícula, caracterizado porque (a) dicho adyuvante de la mucosa no tóxico es una toxina bacteriana destoxificada de ribosilacion de ADP que tiene una subunidad A mutante, en la que dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es toxina lábil (LT) al calor de E. coli, y (b) dicho segundo antígeno es un antígeno viral o bacteriano derivado de un organismo patógeno.
11. Un procedimiento para la fabricación de una vacuna con adyuvante, que comprende las etapas de:
(a) realizar una mutagénesis dirigida especifica de sitio en la subunidad A de una toxina bacteriana de ribosilacion de ADP para destoxificar la toxina; y
(b) asociar la toxina destoxificada con un segundo antígeno, de tal forma que funcione como adyuvante de la mucosa,
caracterizado porque (a) dicha toxina bacteriana de ribosilacion de ADP es una toxina lábil (LT) al calor de E. coli, y (b) dicho segundo antígeno es un antígeno viral o bacteriano derivado de un organismo patógeno.
12. Una composición farmacéutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, o 10 en la que el antígeno se encierra en microesferas de liberación lenta.
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Families Citing this family (158)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9513371D0 (en) * 1995-06-30 1995-09-06 Biocine Spa Immunogenic detoxified mutant toxins
DE69434000T3 (de) 1993-10-05 2008-11-06 UCB Pharma Ltd., Slough Impfstoffzusammensetzungen
GB9326174D0 (en) 1993-12-22 1994-02-23 Biocine Sclavo Mucosal adjuvant
JP5148577B2 (ja) * 1993-12-22 2013-02-20 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 非毒性の粘膜アジュバント
US6436407B1 (en) 1994-08-26 2002-08-20 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Mutant enterotoxin effective as a non-toxic adjuvant
US6019982A (en) * 1994-08-26 2000-02-01 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Mutant enterotoxin effective as a non-toxic oral adjuvant
GB9603314D0 (en) * 1996-02-16 1996-04-17 Biocine Spa Immunogenic detoxified mutant toxins
US20070043215A1 (en) * 1996-08-27 2007-02-22 Heath David G Recombinant f1-v plague vaccine
GB9622660D0 (en) 1996-10-31 1997-01-08 Biocine Spa Immunogenic detoxified mutant toxin
CN101002727A (zh) * 1996-11-14 2007-07-25 (由国防部长代表的)美利坚合众国政府 经皮免疫之佐剂
US6797276B1 (en) 1996-11-14 2004-09-28 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Use of penetration enhancers and barrier disruption agents to enhance the transcutaneous immune response
US20060002949A1 (en) 1996-11-14 2006-01-05 Army Govt. Of The Usa, As Rep. By Secretary Of The Office Of The Command Judge Advocate, Hq Usamrmc. Transcutaneous immunization without heterologous adjuvant
US5980898A (en) * 1996-11-14 1999-11-09 The United States Of America As Represented By The U.S. Army Medical Research & Material Command Adjuvant for transcutaneous immunization
US6818222B1 (en) 1997-03-21 2004-11-16 Chiron Corporation Detoxified mutants of bacterial ADP-ribosylating toxins as parenteral adjuvants
US6824793B1 (en) 1998-06-01 2004-11-30 Chiron Corporation Use of hyaluronic acid polymers for mucosal delivery of vaccine antigens and adjuvants
JP4610735B2 (ja) * 1998-06-01 2011-01-12 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド ワクチン抗原およびアジュバントの粘膜送達のためのヒアルロン酸ポリマーの使用
US6576244B1 (en) 1998-06-19 2003-06-10 Acambis, Inc. LT and CT in parenteral immunization methods against helicobacter infection
US6686339B1 (en) 1998-08-20 2004-02-03 Aventis Pasteur Limited Nucleic acid molecules encoding inclusion membrane protein C of Chlamydia
US6693087B1 (en) 1998-08-20 2004-02-17 Aventis Pasteur Limited Nucleic acid molecules encoding POMP91A protein of Chlamydia
WO2000011181A1 (en) 1998-08-20 2000-03-02 Connaught Laboratories Limited NUCLEIC ACID MOLECULES ENCODING INCLUSION MEMBRANE PROTEIN C OF $i(CHLAMYDIA)
AU774649B2 (en) * 1998-10-21 2004-07-01 Kitasato Daiichi Sankyo Vaccine Co.,Ltd. Vaccine preparations containing attenuated toxin
AU4673099A (en) * 1999-02-26 2000-09-14 Chiron Corporation Use of bioadhesives and adjuvants for the mucosal delivery of antigens
US7115730B1 (en) 1999-04-27 2006-10-03 Chiron Srl Immunogenic detoxified mutant E. coli LT-A-toxin
US7384640B1 (en) 1999-09-30 2008-06-10 Wyeth Holdings Corporation Mutant cholera holotoxin as an adjuvant
JP4540033B2 (ja) 1999-10-22 2010-09-08 サノフィ パストゥール リミテッド 腫瘍抗原に対する免疫応答を誘発および／または増強する方法
JP2003171291A (ja) * 1999-10-29 2003-06-17 Takeda Schering-Plough Animal Health Kk 乳房炎用粘膜予防剤
AU2658801A (en) * 2000-01-05 2001-07-16 Aventis Pasteur Limited Enhancing the immune response to an antigen by presensitizing with an inducing agent prior to immunizing with the inducing agent and the antigen
EP1792995A3 (en) 2000-05-08 2007-06-13 Sanofi Pasteur Limited Chlamydia secretory locus orf and uses thereof
EP1741782B1 (en) 2000-05-10 2011-06-22 Sanofi Pasteur Limited Immunogenic polypeptides encoded by MAGE minigenes and uses thereof
WO2001089456A2 (en) 2000-05-19 2001-11-29 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Hybrid lt-a/ct-b holotoxin for use as an adjuvant
CA2420477A1 (en) 2000-08-25 2002-02-28 Richard Moxon Haemophilus influenzae lipopolysaccharide inner-core oligosaccharide epitopes as vaccines for the prevention of haemophilus influenzae infections
WO2002080982A2 (en) 2001-01-12 2002-10-17 Chiron Corporation Nucleic acid mucosal immunization
EP1372708B1 (en) 2001-02-13 2008-06-18 GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY OF THE ARMY Vaccine for transcutaneous immunization against travellers' diarrhoea
GB0108024D0 (en) 2001-03-30 2001-05-23 Chiron Spa Bacterial toxins
EP2292802B1 (en) 2001-05-22 2015-01-14 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES Development of mutations useful for attenuating dengue viruses and chimeric dengue viruses
CN1977971A (zh) 2001-06-07 2007-06-13 惠氏控股有限公司 作为佐剂的霍乱全毒素的突变体形式
BR0210216A (pt) 2001-06-07 2004-06-08 Wyeth Corp Holotoxina do cólera imunogênica, mutante (ct-crm), composição imunogênica, métodos para aumentar a resposta imune de um hospedeiro vertebrado a um antìgeno, e para produzir uma holotoxina do cólera imunogênica, mutante, sequência ou molécula de ácido nucleico isolado e purificado, célula hospedeira, e, uso de uma holotoxina do cólera mutante
EP1506007B1 (en) * 2002-05-14 2011-06-22 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Mucosal combination vaccines for bacterial meningitis
GB0220205D0 (en) 2002-08-30 2002-10-09 Chiron Spa Neisseria toxin
US20050031587A1 (en) * 2002-10-04 2005-02-10 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Immune response induction method
AU2003268688A1 (en) * 2002-09-30 2004-04-19 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Method of inducing immune responses
HUE047780T2 (hu) 2002-10-11 2020-05-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Polipeptid vakcinák hipervirulens meningokokkusz vonalak elleni széles-spektrumú védelemre
ES2411080T3 (es) 2003-01-30 2013-07-04 Novartis Ag Vacunas inyectables contra múltiples serogrupos de meningococos
GB0308198D0 (en) 2003-04-09 2003-05-14 Chiron Srl ADP-ribosylating bacterial toxin
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
EP1961426B1 (en) 2003-10-02 2011-04-27 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Combined meningitis vaccines
EP1722815A1 (en) 2004-03-09 2006-11-22 Chiron Corporation Influenza virus vaccines
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
EP2272531A3 (en) 2004-04-30 2011-04-13 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
CA2567446C (en) 2004-05-21 2018-01-02 Chiron Corporation Alphavirus vectors for respiratory pathogen vaccines
EP2612679A1 (en) 2004-07-29 2013-07-10 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
DK1858919T3 (da) 2005-02-18 2012-07-16 Novartis Vaccines & Diagnostic Immunogener fra uropathogen Escherichia coli
SI2351772T1 (sl) 2005-02-18 2016-11-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Proteini in nukleinske kisline iz Escherichia coli povezane z meningitisom/sepso
EP2357000A1 (en) 2005-10-18 2011-08-17 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles
JP2009514840A (ja) * 2005-11-04 2009-04-09 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル インフルエンザワクチンによってプライム（ｐｒｉｍｉｎｇ）／ブースト（ｂｏｏｓｔｉｎｇ）するための投与経路
EP1945252B1 (en) 2005-11-04 2013-05-29 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Vaccines comprising purified surface antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture, adjuvanted with squalene
CA2630220C (en) 2005-11-22 2020-10-13 Doris Coit Norovirus and sapovirus antigens
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
JP6087041B2 (ja) 2006-01-27 2017-03-08 ノバルティス アーゲー 血球凝集素およびマトリックスタンパク質を含むインフルエンザウイルスワクチン
DK2495327T3 (da) 2006-03-03 2017-01-02 Promis Neurosciences Inc Fremgangsmåder og sammensætninger til at behandle og opdage sygdomme fremkaldt af fejlfoldet SOD1
ATE539079T1 (de) 2006-03-23 2012-01-15 Novartis Ag Imidazochinoxalinverbindungen als immunmodulatoren
US20100068223A1 (en) 2006-03-24 2010-03-18 Hanno Scheffczik Storage of Influenza Vaccines Without Refrigeration
WO2007126825A2 (en) 2006-03-31 2007-11-08 Novartis Ag Combined mucosal and parenteral immunization against hiv
DK2054431T3 (da) 2006-06-09 2012-01-02 Novartis Ag Konformere af bakterielle adhæsiner
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
US20100166788A1 (en) 2006-08-16 2010-07-01 Novartis Vaccines And Diagnostics Immunogens from uropathogenic escherichia coli
CA3016948A1 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Seqirus UK Limited Making influenza virus vaccines without using eggs
ES2480491T3 (es) 2006-12-06 2014-07-28 Novartis Ag Vacunas incluyendo antígeno de cuatro cepas de virus de la gripe
GB0700562D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Modified Saccharides
MX2009012676A (es) 2007-05-23 2010-02-12 Uab Research Foundation Neuraminidasa neumococica no toxica y sus usos.
EA201070066A1 (ru) 2007-06-27 2010-06-30 Новартис Аг Вакцины против гриппа с низким содержанием добавок
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
CA2698157C (en) 2007-09-11 2016-10-11 University Of Guelph Novel polysaccharide immunogens from clostridium difficile
JP5653215B2 (ja) 2007-09-12 2015-01-14 ノバルティス アーゲー Ｇａｓ５７変異体抗原およびｇａｓ５７抗体
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
DK2235046T3 (da) 2007-12-21 2012-10-29 Novartis Ag Mutante former af streptolysin-O
RU2475496C2 (ru) 2008-02-21 2013-02-20 Новартис Аг МЕНИНГОКОККОВЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ fHBP
EP2268309B1 (en) 2008-03-18 2015-01-21 Novartis AG Improvements in preparation of influenza virus vaccine antigens
WO2010057197A1 (en) 2008-11-17 2010-05-20 The Regents Of The University Of Michigan Cancer vaccine compositions and methods of using the same
CN106008679A (zh) 2008-12-24 2016-10-12 荷兰王国卫生福利和运动部国家公共卫生和环境研究所 修饰的肺炎链球菌溶血素(ply)多肽
EP2384120B1 (en) 2009-01-05 2019-12-11 Epitogenesis Inc. Adjuvant compositions and methods of use
CN102481349B (zh) 2009-01-12 2014-10-15 诺华股份有限公司 抗革兰氏阳性细菌疫苗中的Cna_B结构域
JP2012519482A (ja) 2009-03-06 2012-08-30 ノバルティス アーゲー クラミジア抗原
WO2010119343A2 (en) 2009-04-14 2010-10-21 Novartis Ag Compositions for immunising against staphylococcus aureus
DK2442826T3 (en) 2009-06-15 2015-09-21 Univ Singapore Influenza vaccine, composition and methods of using
SG177533A1 (en) 2009-07-07 2012-02-28 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
ES2563730T3 (es) 2009-07-15 2016-03-16 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Composiciones de proteína RSV F y procedimientos de fabricación de las mismas
PT2464658E (pt) 2009-07-16 2015-01-14 Novartis Ag Imunogénios de escherichia coli desintoxicados
BR112012004275A2 (pt) 2009-08-27 2016-11-16 Novartis Ag polipeptídios híbridos incluindo sequências meningocócicas de fhbp
WO2011030218A1 (en) 2009-09-10 2011-03-17 Novartis Ag Combination vaccines against respiratory tract diseases
GB0917002D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Improved shigella blebs
GB0917003D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Purification of bacterial vesicles
BR112012009014B8 (pt) 2009-09-30 2022-10-04 Novartis Ag Processo para preparar conjugado de polissacarídeo capsular de s. aureus tipo 5 ou tipo 8 e molécula de transporte crm197, conjugado e composição imunogênica
EP2483390A2 (en) 2009-09-30 2012-08-08 Novartis AG Expression of meningococcal fhbp polypeptides
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
CA2779816A1 (en) 2009-10-27 2011-05-05 Novartis Ag Modified meningococcal fhbp polypeptides
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
JP5781542B2 (ja) 2009-12-30 2015-09-24 ノバルティス アーゲー Ｅ．ｃｏｌｉキャリアタンパク質に結合体化した多糖免疫原
GB201003333D0 (en) 2010-02-26 2010-04-14 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
EP2550362B1 (en) 2010-03-25 2017-01-04 Oregon Health&Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
GB201005625D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Novartis Ag Immunogenic proteins and compositions
JP2013529894A (ja) 2010-04-07 2013-07-25 ノバルティス アーゲー パルボウイルスｂ１９のウイルス様粒子を生成するための方法
US9597326B2 (en) 2010-04-13 2017-03-21 Glaxosmithkline Biologicals Sa Benzonapthyridine compositions and uses thereof
KR20130121699A (ko) 2010-05-28 2013-11-06 테트리스 온라인, 인코포레이티드 상호작용 혼성 비동기 컴퓨터 게임 기반구조
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
WO2012006293A1 (en) 2010-07-06 2012-01-12 Novartis Ag Norovirus derived immunogenic compositions and methods
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
GB201017519D0 (en) 2010-10-15 2010-12-01 Novartis Vaccines Inst For Global Health S R L Vaccines
WO2012072769A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Novartis Ag Pneumococcal rrgb epitopes and clade combinations
EP2655389A2 (en) 2010-12-24 2013-10-30 Novartis AG Compounds
WO2012103361A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novartis Ag Rsv immunization regimen
EP2668201A2 (en) 2011-01-28 2013-12-04 Sanofi Pasteur SA Immunological compositions comprising hiv gp41 polypeptide derivatives
SI2707385T1 (en) 2011-05-13 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Pregnant RSV F antigens
PL2691530T3 (pl) 2011-06-10 2019-02-28 Oregon Health & Science University Glikoproteiny i rekombinowane wektory CMV
WO2012178118A1 (en) 2011-06-24 2012-12-27 Epitogenesis Inc. Pharmaceutical compositions, comprising a combination of select carriers, vitamins, tannins and flavonoids as antigen-specific immuno-modulators
EP2729165B1 (en) 2011-07-06 2017-11-08 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic combination compositions and uses thereof
WO2013006842A2 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic compositions and uses thereof
US9149541B2 (en) 2011-07-08 2015-10-06 Novartis Ag Tyrosine ligation process
WO2013016460A1 (en) 2011-07-25 2013-01-31 Novartis Ag Compositions and methods for assessing functional immunogenicity of parvovirus vaccines
EP2568289A3 (en) 2011-09-12 2013-04-03 International AIDS Vaccine Initiative Immunoselection of recombinant vesicular stomatitis virus expressing hiv-1 proteins by broadly neutralizing antibodies
US9358284B2 (en) 2011-09-14 2016-06-07 Glaxosmithkline Biologicals Sa Methods for making saccharide-protein glycoconjugates
WO2013038385A2 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Novartis Ag Escherichia coli vaccine combination
EP2586461A1 (en) 2011-10-27 2013-05-01 Christopher L. Parks Viral particles derived from an enveloped virus
AU2012335208B2 (en) 2011-11-07 2017-08-31 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
WO2013108272A2 (en) 2012-01-20 2013-07-25 International Centre For Genetic Engineering And Biotechnology Blood stage malaria vaccine
ES2820898T3 (es) 2012-05-22 2021-04-22 Glaxosmithkline Biologicals Sa Conjugado del serogrupo X de meningococos
EP2679596B1 (en) 2012-06-27 2017-04-12 International Aids Vaccine Initiative HIV-1 env glycoprotein variant
EP2869842A1 (en) 2012-07-06 2015-05-13 Novartis AG Immunogenic compositions and uses thereof
EP3400960A1 (en) 2012-09-18 2018-11-14 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Outer membrane vesicles
BR112015007126A2 (pt) 2012-10-02 2017-08-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa composição, método para induzir uma resposta imune, e, uso de uma composição
KR20150073943A (ko) 2012-10-03 2015-07-01 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 면역원성 조성물
HRP20180039T1 (hr) 2012-11-30 2018-04-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Antigeni pseudomonasa i kombinacije antigena
ES2670863T3 (es) 2013-02-01 2018-06-01 Glaxosmithkline Biologicals Sa Administración intradérmica de composiciones inmunológicas que comprenden agonistas del receptor de tipo Toll
WO2014140938A2 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois Immunological methods
EP2848937A1 (en) 2013-09-05 2015-03-18 International Aids Vaccine Initiative Methods of identifying novel HIV-1 immunogens
US10058604B2 (en) 2013-10-07 2018-08-28 International Aids Vaccine Initiative Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers
EP2870974A1 (en) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella conjugate vaccines
ES2769647T3 (es) 2014-03-26 2020-06-26 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antígenos estafilocócicos mutantes
CA2988165C (en) 2014-06-20 2023-08-01 University Of Saskatchewan Exotoxin/thermolysin compositions and methods and uses for treating or preventing laminitis
EP3069730A3 (en) 2015-03-20 2017-03-15 International Aids Vaccine Initiative Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers
US9931394B2 (en) 2015-03-23 2018-04-03 International Aids Vaccine Initiative Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers
EP3374381A4 (en) 2015-11-09 2019-05-15 The University Of British Columbia EPITOPES IN THE AMYLOID-BETA MEDIUM REGION AND CONFORMITY-SELECTIVE ANTIBODIES THEREOF
WO2017079835A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 The University Of British Columbia Amyloid beta epitopes and antibodies thereto
EP3374379A4 (en) 2015-11-09 2019-05-15 The University Of British Columbia N-TERMINAL EPITOPES IN AMYLOID BETA AND CONFORMATION-SELECTIVE ANTIBODIES
CN109476729A (zh) 2016-07-18 2019-03-15 英属哥伦比亚大学 淀粉样蛋白β的抗体
US20180125920A1 (en) 2016-11-09 2018-05-10 The University Of British Columbia Methods for preventing and treating A-beta oligomer-associated and/or -induced diseases and conditions
US12286469B2 (en) 2017-07-18 2025-04-29 The University Of British Columbia Humanized antibodies binding to amyloid-beta (A-beta)
CN113166733B (zh) 2018-11-16 2024-12-31 港大科桥有限公司 活减毒流感b病毒组合物及其制备和使用方法
IT201900007060A1 (it) 2019-05-21 2020-11-21 St Superiore Di Sanita Cellule tumorali ingegnerizzate e loro usi
IT201900012540A1 (it) 2019-07-22 2021-01-22 Humanitas Mirasole Spa Inibitori di CHI3L1 e loro usi
EP4114848A4 (en) 2020-02-26 2024-04-03 Versitech Limited PD-1-BASED VACCINES AGAINST CORONAVIRUS INFECTION

Family Cites Families (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4328209A (en) * 1979-04-11 1982-05-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Cholera vaccine
US4428931A (en) * 1982-03-15 1984-01-31 Merck & Co., Inc. Bacterial toxoids and gram-negative immune globulin therefrom
US4666837A (en) * 1982-05-24 1987-05-19 Smithkline-Rit DNA sequences, recombinant DNA molecules and processes for producing the A and B subunits of cholera toxin and preparations containing so-obtained subunit or subunits
CH660375A5 (it) * 1983-02-08 1987-04-15 Sclavo Spa Procedimento per la produzione di proteine correlate alla tossina difterica.
US5882653A (en) * 1983-03-04 1999-03-16 The University Of Maryland System Vibrio cholerae 01 (CVD111) and non-01 (CVD112 and CVD112RM) serogroup vaccine strains, methods of making same and products thereof
US5668255A (en) * 1984-06-07 1997-09-16 Seragen, Inc. Hybrid molecules having translocation region and cell-binding region
CA1340373C (en) * 1986-01-28 1999-02-02 Rino Rappuoli Cloning and sequencing of the dna fragment which codes for the five subunits of the pertussis toxin, a hybrid plasmid containing the dna fragment and micro-organisms transformed by the hybrid plasmid and capable of expressing all or some of the subunits of the pertussis toxin
US5032398A (en) * 1986-08-01 1991-07-16 Kaslow Harvey R Selective modification of the catalytic subunit of pertussis toxin
US4892827A (en) * 1986-09-24 1990-01-09 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Recombinant pseudomonas exotoxins: construction of an active immunotoxin with low side effects
JP2918895B2 (ja) * 1987-09-04 1999-07-12 アムジエン・インコーポレーテツド 組換え型ｄｎａ由来ボルデテラ毒素サブユニット類似体
US5925546A (en) * 1987-11-02 1999-07-20 Chiron S.P.A. Immunologically active polypeptides with altered toxicity useful for the preparation of an antipertussis vaccine
US6713072B1 (en) * 1987-11-02 2004-03-30 Chiron S.R.L. Immunologically active polypeptides with altered toxicity useful for the preparation of an antipertussis vaccine
US5221618A (en) * 1987-11-24 1993-06-22 Connaught Laboratories Limited Genetic detoxification of pertussis toxin
US5244657A (en) * 1987-11-24 1993-09-14 Connaught Laboratories Limited Genetic detoxification of pertussis toxin
US5358868A (en) * 1987-11-24 1994-10-25 Connaught Laboratories Limited Genetic detoxification of pertussis toxin
US5332583A (en) * 1987-11-24 1994-07-26 Connaught Laboratories Limited Vaccine containing genetically-detoxified pertussis holotoxin
GB8727489D0 (en) 1987-11-24 1987-12-23 Connaught Lab Detoxification of pertussis toxin
JP2849632B2 (ja) * 1988-04-08 1999-01-20 社団法人北里研究所 ワクチン製剤
US5211657A (en) * 1988-11-07 1993-05-18 The United States Government As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Laminin a chain deduced amino acid sequence, expression vectors and active synthetic peptides
PT92511A (pt) * 1988-12-07 1990-06-29 Univ Leicester Processo de preparacao de um hospedeiro transformado e de proteinas de fusao da subunidade b de toxina labil ao calor
ES2078258T3 (es) * 1989-04-28 1995-12-16 Sclavo Spa Mutantes de toxina pertussica, cepas de bordetella capaces de producir tales mutantes y su uso en el desarrollo de vacunas antipertussicas.
US5786189A (en) * 1989-11-29 1998-07-28 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Vaccine
IT1248735B (it) * 1990-06-21 1995-01-26 Sclavo Spa Vaccini acellulari contro la pertosse
US5241053A (en) * 1990-09-05 1993-08-31 Takeda Chemical Industries, Ltd. Fused proteins comprising glycoprotein gD of HSV-1 and LTB
IL101715A (en) * 1991-05-02 2005-06-19 Amgen Inc Recombinant dna-derived cholera toxin subunit analogs
IT1253009B (it) 1991-12-31 1995-07-10 Sclavo Ricerca S R L Mutanti immunogenici detossificati della tossina colerica e della tossina lt, loro preparazione ed uso per la preparazione di vaccini
US20020044939A1 (en) * 1991-12-31 2002-04-18 Chiron S.P.A. Immunogenic detoxified mutants of cholera toxin
GB9513371D0 (en) * 1995-06-30 1995-09-06 Biocine Spa Immunogenic detoxified mutant toxins
US5874088A (en) * 1992-07-06 1999-02-23 President And Fellows Of Harvard College Deletion mutants of cholera vaccines expressing heterologous antigens
ATE359370T1 (de) * 1993-02-22 2007-05-15 Gen Hospital Corp Heterologe antigene in stämmen zur impfung mit lebendzellen
CA2154063C (en) * 1993-07-27 2006-11-21 Christopher Vincent Doidge Treatment of h. pylori associated gastroduodenal disease
US5856122A (en) * 1993-08-24 1999-01-05 University Of Alberta Modification of pertussis toxin
DE69434000T3 (de) * 1993-10-05 2008-11-06 UCB Pharma Ltd., Slough Impfstoffzusammensetzungen
US5961970A (en) * 1993-10-29 1999-10-05 Pharmos Corporation Submicron emulsions as vaccine adjuvants
GB9326174D0 (en) * 1993-12-22 1994-02-23 Biocine Sclavo Mucosal adjuvant
US20030072774A1 (en) * 1994-06-10 2003-04-17 Diane M. Gajewczyk Proteinaceous adjuvants
US6436407B1 (en) * 1994-08-26 2002-08-20 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Mutant enterotoxin effective as a non-toxic adjuvant
US6019982A (en) * 1994-08-26 2000-02-01 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Mutant enterotoxin effective as a non-toxic oral adjuvant
US5932714A (en) * 1995-02-23 1999-08-03 Connaught Laboratories Limited Expression of gene products from genetically manipulated strains of Bordetella
GB9513733D0 (en) * 1995-07-05 1995-09-06 Univ Bristol Therapeutic agents
WO1998006428A1 (en) * 1996-08-16 1998-02-19 The Uab Research Foundation Mucosal immunogens for novel vaccines
GB9622660D0 (en) * 1996-10-31 1997-01-08 Biocine Spa Immunogenic detoxified mutant toxin
US5908825A (en) * 1997-01-09 1999-06-01 University Of Maryland At Baltimore Dosage composition for nasal delivery and method of use of the same
US6818222B1 (en) * 1997-03-21 2004-11-16 Chiron Corporation Detoxified mutants of bacterial ADP-ribosylating toxins as parenteral adjuvants
EP0919243A1 (en) * 1997-11-25 1999-06-02 Duphar International Research B.V Vaccine containing B subunits of heat-labile enterotoxin (LTB) of Escherichia coli as an adjuvant
WO1999036088A1 (en) * 1998-01-16 1999-07-22 Maxim Pharmaceuticals, Inc. RECOMBINANT CtB-BASED VACCINES
US6033673A (en) * 1998-03-18 2000-03-07 The Administrators Of Tulane Educational Fund Double mutant enterotoxin for use as an adjuvant
GB9808932D0 (en) * 1998-04-27 1998-06-24 Chiron Spa Polyepitope carrier protein
DE69922364T2 (de) * 1998-04-30 2005-11-03 Chiron S.R.L. Verfahren zur Immunisierung gegen und zur Behandlung von Infektionen durch H.pylori
WO1999058145A2 (en) * 1998-05-08 1999-11-18 University Of Bristol Immunomodulators for vaccines
PT1117435E (pt) * 1998-09-30 2008-02-21 Us Gov Univ Health Sciences Holotoxina da cólera mutante como adjuvante
CN1191357C (zh) * 1998-12-22 2005-03-02 博伊斯·汤普生植物研究所 口服的免疫原性细菌肠毒素在转基因植物中的表达
US7115730B1 (en) * 1999-04-27 2006-10-03 Chiron Srl Immunogenic detoxified mutant E. coli LT-A-toxin
ATE516046T1 (de) * 1999-05-13 2011-07-15 Wyeth Corp Adjuvans kombinationsformulierungen
GB9923060D0 (en) * 1999-09-29 1999-12-01 Chiron Spa Vaccine
US7384640B1 (en) * 1999-09-30 2008-06-10 Wyeth Holdings Corporation Mutant cholera holotoxin as an adjuvant
US20040109874A1 (en) * 1999-11-10 2004-06-10 Powderject Vaccines, Inc. Induction of mucosal immunity by vaccination via the skin route
JP2004523483A (ja) * 2000-11-10 2004-08-05 ワイス・ホールデイングス・コーポレーシヨン アジュバントの組合せ製剤
GB0108024D0 (en) * 2001-03-30 2001-05-23 Chiron Spa Bacterial toxins
US20030072764A1 (en) * 2001-04-05 2003-04-17 O'hagan Derek Mucosal boosting following parenteral priming
ATE426412T1 (de) * 2003-01-30 2009-04-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Adjuvante influenza-vakzine
EP1675869B1 (en) * 2003-10-23 2012-02-15 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Stabilised compositions
WO2006128296A1 (en) * 2005-06-01 2006-12-07 Sanofi Pasteur Limited Pal-based chlamydia vaccine

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