[go: up one dir, main page]

EA037057B1 - Способ лечения рака мозга с использованием соединения с двойной функциональностью алкилирования-ингибирования hdac - Google Patents

Способ лечения рака мозга с использованием соединения с двойной функциональностью алкилирования-ингибирования hdac Download PDF

Info

Publication number
EA037057B1
EA037057B1 EA201692472A EA201692472A EA037057B1 EA 037057 B1 EA037057 B1 EA 037057B1 EA 201692472 A EA201692472 A EA 201692472A EA 201692472 A EA201692472 A EA 201692472A EA 037057 B1 EA037057 B1 EA 037057B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
patient
compound
formula
acceptable salt
pharmacologically acceptable
Prior art date
Application number
EA201692472A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201692472A1 (ru
Inventor
Томас Мерлинг
Клаудио Фестучча
Original Assignee
Эро-Селтик С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эро-Селтик С.А. filed Critical Эро-Селтик С.А.
Publication of EA201692472A1 publication Critical patent/EA201692472A1/ru
Publication of EA037057B1 publication Critical patent/EA037057B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/502—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. cinnoline, phthalazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/69—Boron compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

В изобретении предложены способы лечения рака головного мозга, выбранного из MGMT-позитивной астроцитарной опухоли головного мозга, метастатического рака головного мозга и первичной лимфомы ЦНС, а также MGMT-позитивной мультиформной глиобластомы, у нуждающегося в этом больного, включающие введение указанному больному соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым способам лечения рака головного мозга, который особенно устойчив к лечению, применяемому в прошлом, а именно к способам лечения MGMT-позитивных астроцитарных опухолей головного мозга, типов рака мозга, которые представляют собой типы метастатического рака и типы первичной лимфомы ЦНС, а также MGMT-позитивной мультиформной глиобластомы.
Уровень техники
Рак является одним из самых опасных для жизни заболеваний. Рак представляет собой состояние, при котором в определенной части тела происходит неконтролируемый рост клеток. Согласно последним данным Американского общества рака в США в 2014 г. выявлено 1,67 млн новых случаев рака. Рак является второй ведущей причиной смерти в Соединенных Штатах (второй только относительно заболеваний сердца), и, как подсчитано, унес более 585000 жизней в 2014 г. Фактически подсчитано, что у 50% всех мужчин и 33% всех женщин, живущих в Соединенных Штатах, будет развиваться какой-то тип рака в течение их жизни. Поэтому рак является серьезным бременем для общественного здравоохранения и связан со значительными расходами в Соединенных Штатах. Эти данные отражают ситуацию в большинстве остальных стран по всему миру, хотя типы рака и относительные соотношения людей, у которых развиваются разные типы рака, варьируются в зависимости от множества различных факторов, например, включая генетику и рацион питания.
Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) классифицирует первичные опухоли головного мозга в виде четырех категорий. Класс I и II ВОЗ представляют собой высокодифференцированные глиомы, в то время как астроцитомы и олигодендроглиомы (класс III ВОЗ), а также глиобластомы (GBMs) (класс IV ВОЗ) в совокупности обозначаются как злокачественные глиомы. Прогноз большинства первичных и вторичных опухолей головного мозга неблагоприятный из-за недостатка эффективных терапевтических агентов. Они являются основной причиной смерти от солидных опухолей у детей и третьей ведущей причиной смерти от рака у подростков и взрослых в возрасте 15-34 лет (Jemal et al., CA Cancer J Clin, 59, 2009, 225-249).
Среди злокачественных глиом GBMs являются наиболее распространенными и фатальными новообразованиями, составляя приблизительно 50% всех глиом. GBM имеет неутешительный прогноз, что свидетельствует о необходимости новых стратегий лечения. Хирургическое вмешательство с последующим сочетанным лечением алкилирующим агентом темозоломидом (TMZ) и лучевой терапией является стандартным лечением больных, страдающих GBM. Основной механизм действия TMZ инициируется аномальным метилированием оснований ДНК, особенно О6-метилгуанина в ДНК (Verbeek et al., Br Med Bul, 85, 2008, 17-33). Однако многие больные устойчивы или дают только слабую реакцию на TMZ. Это, как показано, возникает в результате ошибочной репарации (MMR), опосредуемой O6-метилгуанинДНК-метилтрансферазой (MGMT) (смотри Weller et al., Nat Rev Neurol, 6, 2010, 39-51). Больные, имеющие такую систему репарации, страдают MGMT-позитивными GBMs. Активация путей mTOR/DNAPKC так же, как полагают, играет определенную роль. До настоящего времени не разработаны химиотерапевтические агенты, которые являются активными против MGMT-позитивных GBMs. Активность MGMT также имеет большое значение при других астроцитарных опухолях головного мозга, а именно диффузных астроцитомах (класс III ВОЗ) и анапластических астроцитомах (класс III ВОЗ). Прогрессия их до GBMs опосредуется главным образом путем метилирования с помощью MGMT. Таким образом, можно видеть, что терапевтический агент, который активен против MGMT-позитивных астроцитом, будет желательным для предотвращения прогрессии этих диффузных и анапластических астроцитом до GBMs.
Поэтому крайне важно срочно разработать новый терапевтический агент с отличной противоопухолевой активностью не только в отношении MGMT-негативных GBMs, но ив отношении MGMTпозитивных GBMs (а также других астроцитарных опухолей головного мозга), который характеризуется превосходным проникновением в ЦНС и имеет допустимый профиль токсичности.
Метастатическая опухоль мозга начинается как рак в других местах организма и распространяется в мозг. Рак молочной железы, легких, меланома, рак толстой кишки и почек обычно метастазирует. Часто метастатическая опухоль головного мозга обнаруживается до первичной опухоли. Метастатические опухоли головного мозга являются наиболее распространенными среди всех опухолей головного мозга у взрослых. Подсчитано, что они могут достигать до 170000 новых случаев каждый год. Хотя прогноз немного лучше, чем у GBMs, прогноз метастатического рака головного мозга обычно является плохим. Вновь применяется сочетание хирургического вмешательства, терапии и химиотерапии с точным сочетанием в пределах этих вариантов в зависимости от природы метастатического рака и стадии развития (а также от состояния здоровья больного). Хирургическое вмешательство (когда это возможно) и лучевая терапия представляют собой стандартное применяемое лечение. Иногда используется химиотерапия. К сожалению, ничего из этого на сегодняшний день не было особенно успешным. Частично это происходит из-за потребности в химиотерапевтическом агенте, характеризующимся превосходным проникновением в ЦНС (а также, конечно, и превосходной противоопухолевой активностью и профилем переносимой токсичности). Многие существующие химиотерапевтические агенты демонстрируют плохое про- 1 037057 никновение через гематоэнцефалический барьер. Существует острая потребность в новом терапевтическом агенте для решения этих проблем.
Первичная лимфома центральной нервной системы (ЦНС) берет начало из лимфоцитов, но должна рассматриваться как опухоль головного мозга из-за ее локализации исключительно в мозге и терапевтических проблем, сходных с проблемами для других опухолей головного мозга. В частности, доставка лекарственных средств нарушается из-за гематоэнцефалического барьера, и токсичность для головного мозга ограничивает использование современных методов лечения. Большинство первичных лимфом ЦНС представляет собой диффузные В-клеточные лимфомы (приблизительно 90%). Несмотря на то что они относительно редки, их частота и распространенность увеличивается. В настоящее время медиана показателя выживаемости при существующих схемах лечения составляет 44 месяца. Для этого состояния до сих пор не существует никакой особенно эффективной схемы лечения. В настоящее время предпочтительный химиотерапевтический агент представляет собой метотрексат. Однако его проникновение через гематоэнцефалический барьер является неудовлетворительным, и он должен быть введен в очень высоких дозах. Совместное с лучевой терапией лечение может улучшить результаты, но побочные эффекты могут быть очень серьезными. Существует, следовательно, потребность в улучшенном химиотерапевтическом агенте, который обладает большей способностью проникать через гематоэнцефалический барьер, а также показывает превосходную противоопухолевую активность против первичных лимфом ЦНС.
В патенте WO-A-2010/085377 раскрывается соединение формулы I, представленное ниже. Это первая в своем классе гибридная молекула с двойной функциональностью алкилирования-HDACi, которая существенно ингибирует путь HDAC.
Биологические испытания показали, что соединение формулы I эффективно ингибирует ферменты HDAC класса 1 и класса 2 (например, HDAC 1 с IC50 9 нМ), и, как показано, обладает превосходной активностью in vitro в отношении многих клеточных линий миеломы. Кроме того, оно подавляет репарацию ДНК с помощью значительной негативной регуляции FANCD2, BRCA1, BRCA2 и TS (тимидилатсинтетазы), что возможно связано с ингибированием HDAC6 и HDAC8. Анализ на цитотоксичность в клеточных линиях NCI-60 показал, что оно обладает очень сильным противоопухолевым действием с медианой величины IC50 2,2 мкМ по сравнению с 72 мкМ для бендамустина. В патент WO-A2013/113838 включены данные, которые демонстрирует активность соединения формулы I (обозначаемого в описании как NL-101) против ряда клеточных линий, включая некоторые клеточные линии глиобластомы. Однако неясно, является ли каждая из этих клеточных линий MGMT-негативной клеточной линией опухоли GBM.
Сущность изобретения
В соответствии с первым аспектом настоящего изобретения предложен способ лечения рака головного мозга, выбранного из MGMT-позитивной астроцитарной опухоли головного мозга, метастатического рака головного мозга и первичной лимфомы ЦНС, у нуждающегося в этом больного, включающий введение указанному больному соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли
В доклинических исследованиях in vitro и in vivo было показано, что соединение формулы I активно не только в отношении MGMT-негативных опухолей GBM, но и в отношении MGMT-позитивных опухолей GBM. Исходя из этого, можно также ожидать, что оно будет активно в отношении других MGMT-позитивных астроцитарных опухолей. Кроме того, было обнаружено, что соединение формулы I способно очень хорошо проникать через гематоэнцефалический барьер, что делает его идеальным для терапевтического применения не только против MGMT-позитивных астроцитарных опухолей, но и против других опухолей мозга. В частности, дополнительно было обнаружено, что оно обладает очень хорошей активностью в отношении метастатического рака головного мозга, а также первичной лимфомы ЦНС.
Во втором аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения MGMT-позитивной мультиформной глиобластомы у нуждающегося в этом больного, включающий введение указанному больному соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли.
- 2 037057
Описание чертежей
Фиг. 1 представляет собой график зависимости концентрации EDO-S101 (мкМ) от времени в спинномозговой жидкости и от времени в крови;
фиг. 2 представляет собой диаграмму IC50 для двенадцати тестируемых клеточных линий GBM после введения темозоломида;
фиг. 3 представляет собой диаграмму IC50 для двенадцати тестируемых клеточных линий GBM после введения темозоломида и вориностата;
фиг. 4 представляет собой диаграмму IC50 для двенадцати тестируемых клеточных линий GBM после введения бендамустина;
фиг. 5 представляет собой диаграмму IC50 для двенадцати тестируемых клеточных линий GBM после введения бендамустина и вориностата;
на фиг. 6 представлена диаграмма процента выживаемости клеток в зависимости от концентрации EDO-S101 (мкМ) для каждой из двенадцати тестируемых клеточных линий;
на фиг. 7a представлен график зависимости люминесценции от времени в качестве меры роста клеток GBM12 после введения;
на фиг. 7b представлен график зависимости процента выживаемости от времени, демонстрирующий пролонгирование выживаемости в случае EDO-S101 по сравнению с бендамустином и контролем;
на фиг. 8 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей, несущих имплантированные опухоли U251, которых лечили EDO-S101;
на фиг. 9 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей, несущих имплантированные опухоли U87, которых лечили EDO-S101;
на фиг. 10 представлен график зависимости доли выживающих от дозы лучевой терапии (Гр) для клеток U251, U87 и T98G, подвергавшихся только лучевой терапии, лучевой терапии и 2,5 мкМ EDOS101 (показано на чертеже как NL-101) и 5 мкМ EDO-S101 EDO-S101;
на фиг. 11 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей, несущих имплантированные опухоли U251, которых лечили контрольным воздействием, лучевой терапией и EDO-S101;
на фиг. 12 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей, несущих имплантированные опухоли U251, которых лечили контрольным воздействием, лучевой терапией и темозоломидом, EDO-S101 и лучевой терапией, и EDO-S101;
на фиг. 13 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей, несущих имплантированные опухоли U87, которых лечили контрольным воздействием, лучевой терапией и EDO-S101;
на фиг. 14 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей, несущих имплантированные опухоли U87, которых лечили контрольным воздействием, лучевой терапией и темозоломидом, EDO-S101 и лучевой терапией, и EDO-S101;
фиг. 15 и 16 представляют собой биолюминесцентные изображения мышей с ортотопической трансплантацией линии U251 GBM с трансфецированной люциферазой после лечения носителем, EDOS101, темозоломидом и лучевой терапией, и темозоломидом;
на фиг. 17 представлен график зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени для мышей с ортотопической трансплантацией линии U251 с трансфецированной люциферазой после лечения носителем, EDO-S101, темозоломидом и лучевой терапией, и темозоломидом;
на фиг. 18 представлен график зависимости процента выживаемости от времени для мышей, несущих имплантированные лимфомы ЦНС OCI-LY10, которых лечили контрольным воздействием, бендамустином и EDO-S101;
на фиг. 19 представлен график зависимости процента выживаемости от времени для мышей, несущих тройной негативный рак молочной железы с метастазами в мозг после трансфекции клеток МВ-468 рака молочной железы, которых лечили контрольным воздействием, бендамустином и EDO-S101.
Подробное описание изобретения
В настоящем изобретении используется ряд общих терминов и выражений, которые следует интерпретировать следующим образом.
Астроцитарная опухоль головного мозга представляет собой опухоль, происходящую из звездчатых клеток глии (астроцитов) в головном мозге. Они делятся на высокодифференцированные (класс I и II) и низкодифференцированные (класс III и IV). Астроцитарные опухоли класса II известны как диффузные астроцитомы. Хотя они растут сравнительно медленно, они могут переродиться в злокачественные первичные опухоли. Астроцитарные опухоли класса III известны как анапластические астроцитомы. Они представляют собой злокачественные опухоли; они растут более быстрыми темпами и стремятся к инвазии в близлежащие здоровые ткани. Астроцитарные опухоли класса IV известны как мультиформные глиобластомы (GBM). Они являются крайне злокачественными, быстро растут, легко распространяются в близлежащие ткани и очень трудно поддаются лечению традиционными методами.
Текущим стандартом химиотерапевтического лечения является темозоломид (TMZ). Однако многие больные резистентны или лишь слабо реагируют на него. Это, как показано, возникает в результате оши- 3 037057 бочной репарации (MMR), опосредуемой 06-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазой (MGMT) (смотри Weller et al., Nat Rev Neurol, 6, 2010, 39-51). Больные, имеющие такую систему репарации, страдают MGMT-позитивными GBMs. GBMs, таким образом, делятся на MGMT-негативные GBMs и MGMTпозитивные GBMs в зависимости от того, экспрессируют ли они ген MGMT. Соединения формулы I по настоящему изобретению или их фармакологически приемлемая соль, как показано, активны не только против MGMT-негативных GBMs, но и против MGMT-позитивных GBMs.
Активность MGMT также важна при других астроцитарных опухолях головного мозга, а именно диффузных астроцитомах (класс II ВОЗ) и анапластических астроцитомах (класс III ВОЗ). Их прогрессия до GBMs опосредуется главным образом путем метилирования с помощью MGMT. Таким образом, можно отметить, что, так как соединение формулы I и его фармакологически приемлемые соли активны против MGMT-позитивных астроцитом, они также будут способны предотвращать прогрессию этих диффузных и анапластических астроцитом до GBMs.
Метастатическая опухоль головного мозга представляет собой опухоль головного мозга, которая начинается как рак в любых других частях тела и распространяется на мозг. Рак молочной железы, легких, меланома, системная лимфома, саркома, рак толстой кишки, желудочно-кишечного тракта и почек обычно метастазирует.
Первичная лимфома ЦНС в контексте настоящего изобретения представляет собой лимфому, которая возникает в головном мозге из лимфоцитов, причем злокачественные клетки образуются из указанных лимфоцитов. Она, следовательно, рассматривается как опухоль головного мозга, поскольку ее локализация и терапевтические проблемы сходны с другими опухолями головного мозга.
Термин фармацевтически приемлемые соли означает соли соединений по настоящему изобретению, которые являются фармацевтически приемлемыми, как определено выше, и которые обладают желаемой фармакологической активностью. Такие соли включают аддитивные соли кислот, образованные с неорганическими кислотами или с органическими кислотами. Фармацевтически приемлемые соли также включают аддитивные соли оснований, которые могут быть образованы, когда присутствующие протоны кислоты способны взаимодействовать с неорганическими или органическими основаниями. Как правило, такие соли получают, например, взаимодействием форм свободной кислоты или основания этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе или в смеси их двух. Обычно предпочтительными являются неводные среды, такие как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Примеры аддитивных солей кислоты включают аддитивные соли неорганических кислот, такие как, например, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, бисульфат, сульфамат, нитрат, фосфат, и аддитивные соли органических кислот, такие как, например, ацетат, трифторацетат, малеат, фумарат, цитрат, оксалат, сукцинат, тартрат, салицилат, тозилат, лактат, нафталинсульфонат, малат, манделат, метансульфонат и п-толуолсульфонат. Примеры аддитивных солей основания включают неорганические соли, такие как, например, соли натрия, калия, кальция и аммония, а также соли органических оснований, такие как, например, этилендиамин, этаноламин, N,N-диалкиленэтаноламин, триэтаноламин и соли основных аминокислот.
В настоящем изобретении фармакологически приемлемая соль соединения формулы I может предпочтительно представлять собой гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, бисульфат, сульфамат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, глутамат, глюкуронат, глутарат, малат, малеат, сукцинат, фумарат, тартрат, тозилат, салицилат, лактат, нафталинсульфонат или ацетат и более предпочтительно ацетат.
В настоящем изобретении, когда соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль применяется в способе лечения MGMT-позитивной астроцитарной опухоли головного мозга, ее предпочтительно выбирают из MGMT-позитивной мультиформной глиобластомы, диффузной астроцитомы (класс II ВОЗ) и анапластической астроцитомы (класс III ВОЗ), и наиболее предпочтительно из MGMT-позитивной мультиформной глиобластомы.
В настоящем изобретении, когда соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль применяется в способе лечения метастатического рака головного мозга, его предпочтительно выбирают из метастатического рака молочной железы, метастатической системной лимфомы, метастатического рака легкого, метастатической меланомы, метастатической саркомы и метастатического рака желудочно-кишечного тракта, и наиболее предпочтительно из метастатического рака молочной железы.
Терапевтически эффективное количество соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли, вводимое больному в соответствии с первым и вторым аспектами настоящего изобретения, представляет собой количество, которое дает терапевтический эффект в соответствии с настоящим изобретением у получающего лечение индивидуума при разумном соотношении пользы/риска, пригодном при любом медикаментозном лечении. Терапевтический эффект может быть объективным (т.е. измеряемым неким тестом или маркером) или субъективным (т.е. индивидуум свидетельствует о симптоме или чувствует эффект). Эффективное количество соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли по настоящему изобретению, как считается, представляет собой количество, в котором соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль входит в диапазон дозирования от 0,1 до 70 мг/кг массы тела больного (например, от 0,5 до 50 мг/кг массы тела, например 1, 5, 10, 20, 30, 40
- 4 037057 или 50 мг/кг массы тела).
Конкретный терапевтически эффективный уровень дозы для любого конкретного больного будет зависеть от множества факторов, включая нарушение, подлежащее лечению, и тяжесть заболевания; активность конкретного используемого соединения; конкретную используемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и режим питания больного; время введения, путь введения и скорость выведения конкретного используемого соединения; продолжительность лечения; лекарственные средства, используемые в сочетании или одновременно с конкретным используемым соединением; и подобные факторы, хорошо известные в области медицины.
Подходящие примеры формы введения соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли в соответствии с первым и вторым аспектами настоящего изобретения, включают без ограничений пероральный, местный, парентеральный, сублингвальный, ректальный, вагинальный, окулярный и интраназальный путь. Парентеральное введение включает методы подкожной инъекции, внутривенной, внутримышечной, интрастернальной инъекции или инфузии. Предпочтительно соединение формулы (I) или его фармакологически приемлемую соль вводят парентерально и наиболее предпочтительно внутривенно.
Предпочтительно соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль вводят нуждающемуся в этом больному внутривенно при уровне дозы для нуждающегося в этом больного от 0,1 до 70 мг/кг массы тела больного и наиболее предпочтительно внутривенно нуждающемуся в этом больному при уровне дозы от 0,5 до 50 мг/кг массы тела больного.
Было обнаружено, что в первом и втором аспектах настоящего изобретения соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль может быть предпочтительно введено в организм нуждающегося в этом больного на 1, 8 и 15 день цикла лечения, на 1 и 8 день цикла лечения или только на 1 день цикла лечения.
В другом предпочтительном варианте осуществления первого и второго аспектов настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что соединение формулы I и его фармакологически приемлемые соли являются значительно более эффективными при введении в сочетании с лучевой терапией, и действительно, как представляется, действуют синергически с лучевой терапией в исследованиях как in vitro, так и in vivo. Как следствие, в первом и втором аспектах настоящего изобретения соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль может быть использовано при лечении нуждающегося в этом больного, где нуждающийся в этом больной также получает лучевую терапию либо до, либо после лечения рака головного мозга с помощью соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли. Предпочтительно, чтобы больной получал лечение лучевой терапией перед лечением с помощью соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли. Лучевая терапия может быть дана в дозе от 1 до 5 Гр в течение 5 последовательных дней, и предпочтительно 2 Гр в течение 5 последовательных дней.
В еще одном предпочтительном варианте осуществления первого и второго аспектов настоящего изобретения лечение дополнительно включает введение нуждающемуся в этом больному ингибитора фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли, и ингибитор фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) можно вводить одновременно, последовательно или раздельно, и предпочтительно одновременно. Предпочтительно ингибитор фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) представляет собой бевацизумаб.
В еще одном предпочтительном варианте осуществления первого и второго вариантов осуществления настоящего изобретения лечение дополнительно включает введение нуждающемуся в этом больному ингибитора поли-(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP) и соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли, и ингибитор поли-(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP) можно вводить одновременно, последовательно или раздельно, и предпочтительно одновременно. Предпочтительно ингибитор поли(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP) выбран из рукапариба, олапариба и велипариба.
В еще одном предпочтительном варианте осуществления первого и второго вариантов осуществления настоящего изобретения лечение дополнительно включает введение нуждающемуся в этом больному ингибитора PD-1/PDL-1 (иммунной контрольной точки) и соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли, и ингибитор PD-1/PDL-1 (иммунной контрольной точки) можно вводить одновременно, последовательно или раздельно, и предпочтительно одновременно. Предпочтительно ингибитор PD-1/PDL-1 (иммунной контрольной точки) представляет собой ипилимумаб.
При использовании для перорального введения соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения могут быть в твердой или жидкой форме, где полутвердая, полужидкая суспензии и гелевые формы включены в пределы форм, рассматриваемых в данном документе в качестве твердых или жидких.
Соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения могут быть получены для введения с использованием метода, хорошо известного в области фармацевтики. Примеры подходящих фармацевтических композиций и носителей описаны Е.W. Martin в Remington's Pharmaceutical Sciences.
В качестве твердой композиции для перорального введения соединение формулы I или его фарма
- 5 037057 кологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения могут быть составлены в виде порошка, гранул, прессованных таблеток, драже, капсул, жевательной резинки, пластинки или тому подобных форм. Такая твердая композиция обычно содержит один или более инертных разбавителей, либо в виде единой таблетки, содержащей все активные агенты, либо в виде ряда отдельных твердых композиций, причем каждая из которых включает один активный агент из сочетания по настоящему изобретению (в случае набора).
Кроме того, может присутствовать одно или более из следующего: связующие агенты, такие как карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза или желатин; наполнители, такие как крахмал, лактоза или декстрины, разрыхлители, такие как альгиновая кислота, альгинат натрия, кукурузный крахмал и тому подобное; смазывающие агенты, такие как стеарат магния; глиданты, такие как коллоидный диоксид кремния; подсластители, такие как сахароза или сахарин; ароматизирующий агент, такой как мята перечная, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор и окрашивающий агент.
Когда соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения находятся в форме капсулы (например, желатиновой капсулы), она может содержать, в дополнение к веществам указанного выше типа, жидкий носитель, такой как полиэтиленгликоль, циклодекстрин или жирное масло.
Соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения могут быть в виде жидкости, например в виде эликсира, сиропа, раствора, эмульсии или суспензии. Жидкость может быть полезна для перорального введения или для доставки путем инъекции. При использовании для перорального введения соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения может включать одно или более из подсластителя, консервантов, красителя/окрашивающего агента и усилителя вкусоароматических свойств. В соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль согласно первому т второму аспектам настоящего изобретения для введения путем инъекции может быть также включено одно или более из поверхностно-активного вещества, консерванта, смачивающего агента, диспергирующего агента, суспендирующего агента, буфера, стабилизатора и изотонического агента.
Предпочтительным путем введения является парентеральное введение, включая, но, не ограничиваясь этим, внутрикожное, внутримышечное, внутрибрюшинное, внутривенное, подкожное, интраназальное, эпидуральное, интраназальное, внутрицеребральное, внутрижелудочковое, интратекальное, интравагинальное или трансдермальное введение. Предпочтительный путь введения остается на усмотрение практикующего врача, и должен частично зависеть от локализации патологического нарушения (например, локализации рака). В более предпочтительном варианте осуществления соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения вводят внутривенно.
Жидкое соединение формулы I или его фармакологически приемлемая соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения, является ли оно раствором, суспензией или другой аналогичной формой, также может включать одно или более из следующего: стерильные разбавители, такие как вода для инъекций, солевой раствор, предпочтительно физиологический солевой раствор, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия, нелетучие масла, такие как синтетические моно- или диглицериды, полиэтиленгликоли, глицерин или другие растворители; антибактериальные агенты, такие как бензиловый спирт или метилпарабен; и агенты для доведения тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. Парентеральные сочетания или композиции могут быть заключены в ампулу, одноразовый шприц или флакон для множественных доз, сделанный из стекла, пластика или другого материала. Физиологический солевой раствор является предпочтительным адъювантом.
Соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль согласно первому и второму аспектам настоящего изобретения можно вводить любым удобным способом, например путем инфузии или болюсной инъекции, путем абсорбции через эпителиальную или кожно-слизистую выстилки и предпочтительно путем болюсного введения.
Примеры
В следующих примерах соединение, имеющее следующую формулу I, обозначается как
EDO-S101.
EDO-S101 получали, как описано в примере 6 патента WO-A-2010/085377. EDO-S101 растворяли в ДМСО (100х маточного раствора) и хранили при 4°C до суспендирования в среде в день использования.
Пример 1. Фармакокинетический анализ поступления EDO-S101 в ЦНС у крыс Sprague-Dawley.
Фармакокинетику в ЦНС определяли у крыс после инъекции EDO-S101 в дозе 40 мг/кг в хвостовую
- 6 037057 вену. Образцы микродиализатов собирали из крови и желудочка головного мозга путем микродиализа проб через 18 временных интервалов. Концентрации лекарственного средства в этих образцах определяли с помощью капиллярного электрофореза с УФ-детектированием (CE-UV) с последующими расчетами для различных фармакокинетических параметров.
Шесть крыс анестезировали газообразным изофлураном (1% изофлуран в смеси газообразных 20% кислорода и 80% азота) и иммобилизовывали в стереотаксической раме (KOPF Instruments, Tujunga, CA). Анестезию поддерживали в течение всей процедуры. Каждую направляющую канюлю (СМА Microdialysis Inc., Acton, MA) стереотаксически имплантировали в боковой желудочек (АР -0,9, L 1,6, V 3,4, по отношению к темени и черепу) и затем крепили к черепу при помощи винтов и зубного цемента. После операции каждую крысу размещали индивидуально с предоставлением пищи и воды без ограничений в течение 3 дней для восстановления после хирургической катетеризации. Эксперименты по микродиализу проводили на находящейся в сознании свободно передвигающейся крысе. В день эксперимента мандрен направляющей канюли заменяли зондом для микродиализа (СМА/11 с 4 мм мембраной, СМА Microdialysis Inc., Acton, MA), и зонд для микродиализа в сосудах (СМА/20 с 4 мм мембраной, СМА Microdialysis Inc, Acton, MA) имплантировали в яремную вену. Зонды имели впускные трубочки, связанные со шприцами для доставки искусственной спинномозговой жидкости (146 мМ NaCl, 1,2 мМ CaCl2, 3 мМ KCl, 1 мМ MgCl2, 1,9 мМ Na2HPO4, 0,1 мМ NaH2PO4, pH 7,4) в желудочек и забуференного фосфатом физиологического раствора Дульбекко (D-PBS) в кровь со скоростью потока 0,5 мкл/мин. Выпускные трубочки соединяли с коллектором для микрофракционирования для сбора микродиализатов при 4°C. Крысам давали восстановиться в течение по меньшей мере 24 ч перед введением доз. Восемнадцать образцов собирали в течение 3 ч после введения EDO-S101 (внутривенно). Все образцы подвергали капиллярному электрофорезу с УФ-детектированием (CE-UV) для определения концентрации EDO-S101 в цереброспинальной жидкости (CSF) и крови. Крыс забивали с помощью ингаляции CO2 после эксперимента. Положение зонда подтверждали путем визуального осмотра в конце каждого эксперимента.
EDO-S101 в микродиализате измеряли с помощью CE-UV (Agilent 3D СЕ). Вкратце, капилляры прекондиционировали 1 М гидроксидом натрия в течение 2 мин, водой в течение 2 мин и подвижным буфером [100 ммоль/л раствор ацетата аммония (с доведением рН до 3,1 с помощью уксусной кислоты) ацетонитрил (50:50, об./об.)] в течение 3 мин. Образцы вводили под давлением 4826,5 Па в течение 5 с, и инъекционный объем составлял приблизительно 5 нл. После инъекции EDO-S101 отделяли в объединенном кварцевом капилляре с внутр. диам. 50 мкм и длиной 50/65 см (эффективная длина/общая длина) при 15 кВ и 25°C. Оптическую плотность EDO-S101 определяли в УФ при 300 нм. Эмиссию улавливали на фотоумножителе (РМТ).
Для осуществления статистического анализа данных использовали двухсторонний критерий ANOVA с повторными измерениями с последующим тестом Тьюки. Р<0,05 рассматривали как значимый. Проникновение в ЦНС определяли как отношение области CSF и крови под кривой (AUC).
При анализе результатов обнаружено, что EDO-S101 хорошо пересекает гематоэнцефалический барьер с проникновением в ЦНС 16,5% (см. фиг. 1). Он может достичь высокой концентрации в ЦНС с Смакс 11,2 мкМ. Таким образом, EDO-S101 идеально подходит для терапевтического применения при опухолях головного мозга. Было также показано, что он имеет очень короткий период полужизни приблизительно 6 мин в крови и приблизительно 9 мин в головном мозге. Так как концентрации лекарственного средства определяли на основе поглощающей способности EDO-S101 при длине волны УФ 300 нм, все измерения касаются неметаболизированного EDO-S101. Результаты суммированы в табл. 1 следующим образом.
Таблица 1
Параметры РК Кровь Мозг
Стах (мкМ) 184,0+61,8 11,2+6,5
Тмакс (мин) 2,33+0,82 5,67+1,97
Т1/2 (мин) 5,6+1,07 8,8+1,43
AUC (0-12) (мкМ.час) 824,3+110,8 136,2+74,7
Отношение AUC (Мозг:кровь) 16,5%+0,09
Пример 2. Тесты на активность in vitro для EDO-S101 и известных соединений против различных MGMT-позитивных и негативных клеточных линий.
Разработаны эксперименты in vitro, в которых использованы серии клеточных линий GBM, репрезентативных в отношении MGMT-негативных и MGTM-позитивных опухолевых клеток.
Соединения: 1-100 мкМ EDO-S101, 1-50 мкМ темозоломид (TMZ), 1-50 мкМ темозоломид+500 нМ вориностат, 1-40 мкМ бендамустин, 1-40 мкМ бендамустин и 500 нМ вориностат.
Клеточные линии: А172, LN229, SNB19, SW1783, U251, U373 и U87: MGMT-негативные клеточные
- 7 037057 линии; LN18, Mz54, T98G, U138, U118: MGMT-позитивные клеточные линии.
Использовали двенадцать клеточных линий глиобластомы, представляющих классы III и IV глиом с различной экспрессией MGMT, чувствительностью к лекарственной и лучевой терапии, и пять стволовых клеток глиобластом от больных (смотри выше). Стволовые клетки четырех глиобластом, полученных от больных, любезно предоставленные J. Gregory Cairncross и Samuel Weiss из Hotchkiss Brain Institute, Faculty of Medicine, University of Calgary, Calgary, Alberta, Canada, и клетки, трансфецированные люциферазой, РТС#8, от Prof Angelo Vescovi, University la Bicocca, Milan, культивировали в бессывороточной культуральной среде определенного состава (SFM) и в культуре неприлипающих сфер. Клетки ресуспендировали в бессывороточной среде DMEM/F12 с 20 нг/мл эпидермального фактора роста (SigmaAldrich), 20 нг/мл основного фактора роста фибробластов (Sigma-Aldrich), добавкой В-27 1х (Gibco, Life Technologies) и антибиотиками. Лечение добавлением EDO-S101 проводили сразу после посева 3х103 клеток в 96-луночные планшеты со средой для стволовых клеток. Сферы подсчитывали через 5 дней после обработки под инвертированным микроскопом при увеличении х4. Сферы подсчитывали, если они имели по меньшей мере 15 клеток.
Клетки высевали при плотности 2х104 клеток/мл в 24-луночные планшеты. Клетки оставляли для прикрепления и роста в 5% FCS DMEM в течение 24 ч. По истечении этого времени клетки поддерживали в соответствующих условиях культивирования. Морфологический контроль проводили каждый день с помощью инвертированного фазово-контрастного фотомикроскопа (Nikon Diaphot, Tokyo, Japan) перед трипсинизацией клеток и подсчетом. Трипсинизированные и ресуспендированные в 1,0 мл физиологического солевого раствора клетки подсчитывали с использованием NucleoCounterTM NC-100 (систем автоматического подсчета клеток, Chemotec, Cydevang, DK) для оценки жизнеспособности клеток. Все эксперименты проводили в трех параллелях. Величины IC50 вычисляли по методу GraFit (Erithacus Software Limited, Staines, UK). Жизнеспособность клеток оценивали с помощью анализа с использованием бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия (МТТ, Sigma-Aldrich).
Были также определены величины IC50 и IC20 для всех двенадцати клеточных линий под действием бендамустина и вориностата, как описано выше. Затем были выполнены сочетанные анализы с фиксированной дозой вориностата (величина IC20) и изменяющейся дозой бендамустина. Новые величины IC50 рассчитывали для бендамустина в сочетании с вориностатом.
Как можно видеть на фиг. 2, клеточные линии GBM U251, U373, SW1783, А172 и U87 высокочувствительны к TMZ, в то время как LN229, SNB19 и U138 умеренно чувствительны. MGMT-позитивные клеточные линии GBM LN18, Mz54, T98G и U118, однако, были устойчивы к TMZ.
В отдельном эксперименте TMZ использовали в сочетании с 500 нМ вориностата. Известно, что вориностат действует синергично с TMZ в клеточных линиях GBM. Как можно видеть на фиг. 3, в то время как MGMT-позитивные клеточные линии GBM LN18 и U118 чувствительны к этому сочетанию, T98G и Mz54 все еще остаются очень устойчивыми. IC50 T98G была снижена, но не находилась в диапазоне достижимых доз в организме человека.
На фиг. 4 продемонстрировано, что ни одна из клеточных линий GBM не была высокочувствительной к бендамустину, при этом клеточные линии GBM LN18, LN229, SNB19, U138, U251, U373, SW1783 и U87 были умеренно чувствительны к бендамустину, тогда как A172, Mz54, T98G и U118 были устойчивы к бендамустину. Как можно видеть на фиг. 5, когда бендамустин сочетался с 500 нМ вориностата, были достигнуты результаты, очень похожие на результаты с TMZ и вориностатом, т.е. все клеточные линии были высокочувствительны за исключением Mz54 и T98G и при этом IC50 T98G была снижена, но не находилась в диапазоне достижимых доз в организме человека.
По сравнению с другими отдельными соединениями и их сочетаниями, кривые IC50 для двенадцати протестированных клеточных линий на фиг. 6 показывают, что все двенадцать клеточных линий, включая все MGMT-позитивные клеточные линии, были высокочувствительны к EDO-S101. Это свидетельствует о том, что EDO-S101 является весьма перспективным терапевтическим агентом против как MGMTнегативных, так и MGMT-позитивных GBMs.
Сводка величин IC50 для различных клеточных линий представлена в последующей табл. 2.
- 8 037057
Таблица 2
Клеточная линия Происхождение Характеристика Бендаму с тин EDO- S101 Темозо -ломид
U251MG Sigma-Aldrich (09063001) MGMTнегативн. 30, 0 6, 60 20, 0
U8 7MG АТСС (НТВ-14) MGMTнегативн. 50, 0 1,36 20, 0
T98G АТСС CRL-1690 MGMTпозитивн. 52,0 7,70 >100
U118MG НТВ-15 MGMTпозитивн. 35, 0 6, 61 >100
U373MG (Uppsala) SigmaAldrich (08061901) MGMTнегативн. 35, 0 2,26 80, 0
Mz-54 Goethe- University Frankfurt MGMTпозитивн. 60, 0 12,73 >100
А172 CRL-1620 MGMTнегативн. 55, 0 6, 45 □ 100
U138MG АТСС (НТВ-16) MGMTпозитивн. 30, 0 4,27 >100
LN22 8 АТСС (CRL- 2611) MGMTнегативн. 35, 0 1,55 >100
SW1783 АТСС (НТВ-13) MGMTнегативн. 38,0 8,24 80, 0
LN18 АТСС (CRL- 2610) MGMTпозитивн. 25, 0 1,87 >100
SNB19 NCI MGMTнегативн. 32, 0 2, 17 >100
Пример 3. Оценка EDO-S101 in vivo в мышиных моделях мультиформной глиобластомы.
Терапевтическую активность EDO-S101 против GBM определяли в мышиных моделях опухолей головного мозга, основываясь на росте опухоли, определенном по визуализации биолюминесценции, и на анализе выживаемости, определенной с помощью метода Каплана-Мейера.
Мышиные модели опухолей головного мозга создавали с помощью внутримозговой инъекции 3х105 клеток GBM12, трансфецированных люциферазой, бестимусным мышам под анестезией с использованием стереотаксической платформы. GBM12 представляет собой MGMT-негативную опухолевую клеточную линию. Бестимусным мышам в возрасте восемь недель давали акклиматизироваться/быть на карантине минимум 7 дней перед хирургическим вмешательством. Операцию выполняли в ламинарном боксе в стерильных условиях. Тайленол 300 мг/кг перорально давали для аналгезии за 24 ч до начала операции, продолжая давать в течение 48 ч после операции. Анестезия достигалась путем ингаляции 12% изофлурана. После хорошей наркотизации мышь помещали в стереотаксический прибор Kopf. Небольшим количеством мази с антибиотиками BNP (смесь бацитрацина, неомицина и полимиксина) смазывали ее глаза, чтобы предотвратить инфекцию и повреждение роговицы во время операции. Полосу из мягкой ткани помещали над телом и хвостом мыши для предотвращения чрезмерной потери тепла во время операции. Область кожи головы очищали 2% раствором бетадина и высушивали с помощью ватной палочки. Делали сагиттальный надрез в коже головы по средней линии.
Небольшое трепанационное отверстие просверливали в левой части черепа с помощью хирургического сверла (Kopf) или сверла Dremel в соответствии с координатами (АР: 0,5 мм, LM: 2,5 мм), определенными по ссылке на атлас мозга мыши Franklin и Paxinos. Твердую мозговую оболочку экспонировали хирургически, и гамильтоновский шприц на 10 мкл со скошенной иглой калибра 26S погружали в левое полушарие мозга на глубину до 3 мм и медленно (0,5 мкл/мин) инфузировали 5 мкл 3х105 опухолевых клеток GBM12, трансфецированных люциферазой. Иглу оставляли на месте в течение 5 мин, чтобы предотвратить рефлюкс, а затем медленно вынимали.
Кожу смыкали скобками для ран. После операции мыши приходили в себя в теплой окружающей среде, и их возвращали в их клетки при возобновлении двигательной активности. Клетки помещали на
- 9 037057 верхнюю часть электрической грелки для сведения к минимуму потери тепла тела во время восстановления. За мышами наблюдали после операции по меньшей мере два раза в день в течение 5 дней или до завершения восстановления. EDO-S101 (60 мг/кг массы тела) или бендамустин (50 мг/кг массы тела) вводили через хвостовую вену, начиная с +4 дня после внутримозговой имплантации опухолевых клеток, и затем в последующие +11 день и +18 день. Паралич конечностей рассматривался в качестве конечной точки при анализе выживаемости.
После внутримозговой инъекции клеток GBM всех мышей подвергали биолюминесцентной визуализации (BLI) два раза в неделю, начиная с 4 дня после внутримозговой инъекции, для мониторинга в режиме реального времени роста опухоли in vivo. BLI проводили с использованием оптической системы формирования изображений Xenogen Lumina (Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA). Мышей анестезировали изофлураном перед внутрибрюшинными инъекциями люциферина в дозе 150 мг/кг, что обеспечивает насыщающую концентрацию субстрата для фермента люциферазы. Пиковые люминесцентные сигналы регистрировались через 10 мин после инъекции люциферина. Интересующие области, охватывающие внутричерепную область сигнала, определяли с использованием программного обеспечения Living Image (Xenogen, Alameda, CA), и регистрировали общее количество фотонов/с/стерадиан/см2.
Дисперсионный анализ ANOVA использовали для определения статистической значимости различий между экспериментальными группами в каждой временной точке. Кривые выживаемости КапланаМейера получали с использованием программного обеспечения Prism4 (GraphPad Software, LaJolla CA), и статистические различия между кривыми определяли с помощью лог-рангового теста. Различия с Р<0,05 рассматривали как значимые.
В модели ксенотрансплантата GBM (GBM12), полученного от больного, EDO-S101 вводили в./в. в дозе 60 мг/кг еженедельно на +4, +11, +18 дни после внутримозговой имплантации опухолевых клеток (доза MTD). Бендамустин давали в./в. в дозе 50 мг/кг еженедельно на +4, +11, +18 дни (доза MTD). EDOS101, как установлено, обладал существенной терапевтической активностью с подавлением роста опухоли и продлением выживаемости с медианой выживаемости 66 дней по сравнению с 58 днями с бендамустином и 52 днями у контроля без лечения (смотри фиг. 7а и 7b). EDO-S101 обладает отличной терапевтической активностью против этой MGMT-негативной глиобластомы.
Аналогичным образом следовали представленной выше процедуре с использованием клеточных линий U87G и U251G. Опять EDO-S101 (60 мг/кг) вводили внутривенно через хвостовую вену, но в этих экспериментах его вводили на 1, 8 и 15 день. Вместо бендамустина для сравнения вводили TMZ в дозе 16 мг/кг в течение 5 последовательных дней, перорально. Мышей забивали через 28 дней.
График зависимости вероятного времени до прогрессии (ТТР) (%) от времени на фиг. 8 для мышей, несущих имплантированные опухоли U251, демонстрирует, что ТТР у мышей, которых лечили EDOS101, было значительно длиннее, чем наблюдаемое как у контрольных мышей, так и у мышей, получавших TMZ. Аналогичное значительное увеличение ТТР наблюдалось у мышей, несущих имплантированные опухоли U87, причем в случае EDO-S101 они имели значительно более длинное ТТР, чем и у контроля, и с введением TMZ (фиг. 9).
Пример 4. Оценка EDO-S101 in vivo (одного или в сочетании с лучевой терапией) в мышиных моделях мультиформной глиобластомы в сравнении с лучевой терапией и темозоломидом (одного или в сочетании).
В первом эксперименте клеточные линии U251, U87 и T98G обрабатывали только облучением или облучением и EDO-S101.
Для клоногенного выживания экспоненциально растущие клетки (70% конфлуентности) культивировали в обычных средах и обрабатывали EDO-S101 в соответствующих концентрациях или носителем (конечная концентрация ДМСО 0,1%) в течение 24 ч. Облучение опухолевых клеток проводили с использованием 6 мВ линейного ускорителя Elekta Synergy с использованием клинически калиброванного поля облучения 30x30 см. Пластины плексигласа толщиной 2 см располагали выше и ниже матрасов с клеточной культурой, полностью заполненных средой для компенсации эффекта наращивания. Необлученные контроли обрабатывали идентично облученным клеткам за исключением радиационного воздействия. После обработки клетки разводили в соответствующей концентрации (1000 клеток) и вновь высевали в новую 100 мм чашку Петри (в трех параллелях) и инкубировали в течение 14 дней. На 14 день среду удаляли, и колонии фиксировали смесью метанол:уксусная кислота (10:1, об./об.) и окрашивали кристаллическим фиолетовым. Колонии, содержащие более 50 клеток, подсчитывали. Эффективность посева (РЕ) рассчитывали как число наблюдаемых колоний/число посеянных клеток. Фракцию выживших рассчитывали как количество образованных колоний в обработанных чашках по сравнению с количеством образованных колоний в контроле. Кривые выживаемости анализировали с помощью статистического программного обеспечения SPSS (Chicago, IL) путем аппроксимации данных с помощью взвешенной, стратифицированной, линейной регрессии в соответствии с линейно-квадратичной формулой: S(D)/S(О)=ехр-(aD+bD2).
Для MGMT-негативной клеточной линии глиобластомы U251 измеренная IC50 составляла 6,60 мкМ для EDO-S101 (по сравнению с 30 мкМ для бендамустина и 2 0 мкМ для темозоломида).
Для MGMT-негативной клеточной линии глиобластомы U87G измеренная IC50 составляла 1,36 мкМ
- 10 037057 для EDO-S101 (по сравнению с 50 мкМ для бендамустина и 20 мкМ для темозоломида).
Для MGMT-позитивной клеточной линии глиобластомы T98G измеренная IC50 составляла 7,70 мкМ для EDO-S101 (по сравнению с 52 мкМ для бендамустина и >100 мкМ для темозоломида).
Как можно видеть из фиг. 10, % уровня выживаемости клеток глиобластомы был значительно снижен, когда лучевую терапию использовали в сочетании с дозой EDO-S101 (2,5 мкМ или 5 мкМ), по сравнению только с лучевой терапией, во всех 3 -х клеточных линиях GBM.
Далее, адаптируя метод, описанный в примере 3, получали подкожные модели ксенотрансплантатов GBMs у мышей с использованием клеточных линий GBM U251 и U87.
Мышей U251, полученных, как описано выше, подвергали либо лучевой терапии (2 Гр в течение 5 последовательных дней), либо лечению EDO-S101 (60 мг/кг внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения), либо только контрольным процедурам. Перед любым облучением мышей анестезировали смесью кетамина (25 мг/мл)/ксилазина (5 мг/мл). Анестезированные мыши-опухоленосители получали фокальное облучение в дозе 2 Гр в течение 5 последовательных дней. Облучение осуществлялось с помощью линейного ускорителя рентгеновских лучей с мощностью дозы 200 сГр/мин при комнатной температуре. Все мыши были защищены специально разработанным свинцовым аппаратом, позволяющим облучать правую заднюю конечность. Мышей содержали в этих условиях до окончания облучения.
Исследовали прогрессию GBM в соответствии с методом, описанным в примере 3. График зависимости вероятного времени до прогрессии (%) от времени показан на фиг. 11. Исходя из него, очевидно, что время до прогрессии у мышей, которых лечили EDO-S101, значительно длиннее, чем наблюдаемое при лечении опухолей лучевой терапией.
В дополнительном эксперименте мышей U251, полученных таким же способом, подвергали либо имеющимся в настоящее время золотым стандартом лечения - лучевой терапией и темозоломидом (2 Гр в течение 5 последовательных дней и 16 мг/кг в течение 5 последовательных дней, перорально), либо лечением EDO-S101 (60 мг/кг, внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения), либо лечением EDO-S101 и лучевой терапией (2 Гр в течение 5 последовательных дней и 60 мг/кг, внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения), либо контрольным воздействием. График зависимости вероятного времени до прогрессии (%) от времени показан на фиг. 12. Исходя из этого, очевидно, что время до прогрессии у мышей, которых лечили EDO-S101 и лучевой терапией, значительно длиннее, чем наблюдаемое для опухолей, обработанных только EDO-S101. Кроме того, время до прогрессии для сочетания лучевой терапии и EDOS101 было значительно длиннее, чем наблюдаемое для опухолей, обработанных лучевой терапией и темозоломидом, текущим золотым стандартом лечения.
Следовали той же последовательности экспериментов, но на этот раз на мышиной модели подкожного ксенотрансплантата GBM, полученного с использованием клеточной линии GBM U87. В первом эксперименте мышей U87, полученных, как описано выше, подвергали либо лучевой терапии (2 Гр в течение 5 последовательных дней), либо лечению EDO-S101 (60 мг/кг внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения), либо только контрольному воздействию. Проводили исследование прогрессии GBM. График зависимости вероятного времени до прогрессии (%) от времени показан на фиг. 13. Исходя из этого, очевидно, что время до прогрессии у мышей, которых лечили EDO-S101 (обозначено на фиг. 13 как NL101), значительно длиннее, чем наблюдаемое для опухолей, на которые воздействовали лучевой терапией.
В дополнительном эксперименте, сходном с экспериментом на мышах U251, мышей U87, полученных таким же способом, подвергали либо лечению, имеющимся в настоящее время золотым стандартом лучевой терапией и темозоломидом (2 Гр в течение 5 последовательных дней и 16 мг/кг в течение 5 последовательных дней, перорально), либо лечению EDO-S101 (60 мг/кг, внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения), либо лечению EDO-S101 и лучевой терапией (2 Гр в течение 5 последовательных дней и 60 мг/кг, внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения), либо контрольному воздействию. График зависимости вероятного времени до прогрессии (%) от времени показан на фиг. 14. Исходя из этого, очевидно, что время до прогрессии у мышей, которых лечили EDO-S101 и лучевой терапией, значительно длиннее, чем наблюдаемое для опухолей, обработанных только EDO-S101. Кроме того, время до прогрессии для сочетания лучевой терапии и EDO-S101 было значительно длиннее, чем наблюдаемое для опухолей, обработанных лучевой терапией и темозоломидом, текущим золотым стандартом лечения. Следует также отметить, что время до прогрессии, выявленное у мышей U87, получавших только EDO-S101, было действительно выше, чем достигаемое совместным лечением лучевой терапией и темозоломидом.
Время до прогрессии опухолей росло от приблизительно 17-18 дней для контроля у мышиной модели ксенотрансплантата U251G, до 42 дней для сочетания лучевой терапии и темозоломида, до более 50 дней для одного EDO-S101 (значимость различий Р=0,924), до значительно более 50 дней для сочетания EDO-S101 и лучевой терапии (значимость различий Р=0,0359).
Установлено, что время до прогрессии опухолей росло от приблизительно 15 дней для контроля в мышиной модели ксенотрансплантата U87G, до 35 дней для сочетания лучевой терапии и темозоломида, до 40 дней для одного EDO-S101 (значимость различий Р=2372), до существенно более 50 дней для сочетания EDO-S101 и лучевой терапии (значимость различий Р=0,0001).
- 11 037057
Пример 5. Гистологическая оценка опухолей: ортотопическая модель клеток U251, трансфецированных люциферазой.
Мышей, изотопно трансфецированных U251-люциферазой в соответствии с методом, описанным в примере 3, лечили лучевой терапией (2 Гр в течение 5 последовательных дней), темозоломидом (16 мг/кг в течение 5 последовательных дней, перорально), лучевой терапией и темозоломидом (2 Гр в течение 5 последовательных дней и 16 мг/кг в течение 5 последовательных дней, перорально), EDO-S101 (60 мг/кг, внутривенно на 1, 8 и 15 дни цикла лечения) или контрольным носителем.
Рост внутричерепной опухоли прослеживали с помощью системы визуализации Hamamatsu (Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA, USA). Мышей анестезировали от 2 до 4% изофлуораном (Baxter, Deerfield, IL, USA) с последующими внутрибрюшинными инъекциями 150 мг/кг d-люциферина (In Vivo Imaging Solutions). В одно и то же время измеряли пять животных, и люминесцентная камера была установлена на 1-минутной экспозиции, среднем биннинге, 1 f/стоп, блокированном фильтре возбуждения и открытом фильтре испускания. Фотографическая камера была установлена на 2 с экспозиции, среднем биннинге и 8 f/стоп. Поле обзора было установлено на 22 см, чтобы захватить пять мышей сразу. Серийные изображения делали еженедельно, используя одинаковые настройки. Интенсивность биолюминесценции оценивали количественно с помощью программного обеспечения Living Image (Caliper Life Sciences).
Перед любым облучением мышей анестезировали смесью кетамина (25 мг/мл)/ксилазина (5 мг/мл). Анестезированные мыши-опухоленосители получали фокальное облучение в дозе 2 Гр в течение 5 последовательных дней. Облучение осуществлялось с помощью линейного ускорителя рентгеновских лучей с мощностью дозы 200 сГр/мин при комнатной температуре. Все мыши были защищены специально разработанным свинцовым аппаратом, позволяющим облучать правую заднюю конечность. Мышей содержали в этих условиях до окончания облучения.
Все изображения были получены в поперечной плоскости, используя следующие последовательности: поперечная Т2-взвешенная турбо спин-эхо (TSE) последовательность (время повторения [TR] мсек/эхо время [ТЕ] мс) 6766/120, количество полученных сигналов 4, матрица 192x192), примененная с толщиной сечения 0,9 мм, томографический шаг 0,0 мм и зеркальный угол 160°. Поле зрения составляло 36x60 мм2, которое полностью включало опухоль с результирующим размером воксела 0,3x0,3x1,0 мм3.
Непрерывные переменные были обобщены в виде среднего значения и стандартного отклонения (SD) или в виде медианы и 95% довер. инт. для медианы. Для непрерывных переменных, не имеющих нормального распределения, статистические сравнения между контрольными и опытными группами проводили путем использования критериев Крускала-Уоллиса. Для непрерывных переменных, имеющих нормальное распределение, статистические сравнения между контрольными и опытными группами проводили путем использования критерия ANOVA или t-теста Стьюдента для непарных данных (для двух сравнений).
Через 50 дней после начала различных схем лечения мышей забивали, и конечные внутричерепные поражения визуализировали у мышей, получавших лечение контрольным воздействием, EDO-S101, темозоломидом и лучевой терапией и темозоломидом. Результаты показаны на фиг. 15 и 16. Сходные результаты были достигнуты при исследовании как EDO-S101, так и темозоломида, в случае обоих 5 из 13 мышей были с опухолями определенной стадии (38,5%) по сравнению с 8 из 11 (72,7%) в контроле. Однако только 1 из 13 мышей, получавших EDO-S101, демонстрировала большое поражение, в то время как 2 из 13 мышей, получавших темозоломид, демонстрировали большие поражения. При исследовании лучевой терапии и темозоломида только 2 из 11 мышей (18,2%) демонстрировали поражения в конце исследования, хотя у обеих из них поражения были большими. Из этого можно заключить, что EDO-S101 является высокоэффективным в отношении предотвращения распространения GBMs.
Эффективность EDO-S101 в предотвращении распространения GBMs дополнительно подчеркивается на фиг. 17, представляющей график зависимости вероятности выживания (%) от времени (дни). Вероятность выживания мышей, которых лечили EDO-S101, была значительно больше, чем мышей, получавших либо лучевую терапию, либо темозоломид. Только мыши, получавшие сочетание лучевой терапии и темозоломида, показали более высокую общую вероятность выживания, чем один EDO-S101.
Пример 6. Оценка EDO-S101 in vivo в мышиных моделях первичной лимфомы ЦНС.
Повторяли методику примера 3 за исключением того, что мышиные модели были созданы с 1x105 клетками лимфомы OCI-LY10B, трансфецированными люциферазой, для создания модели первичной лимфомы ЦНС. EDO-S101 (60 мг/кг массы тела), бендамустин (50 мг/кг массы тела) и контроль вводили внутривенно через хвостовую вену отдельным группам испытуемых мышей на +4, +11 и +18 дни после внутримозговой имплантации клеток лимфомы OCI-LY10B. Как EDO-S101, так и бендамустин значительно подавляли рост опухоли и пролонгировали выживаемость с медианой выживаемости 62 и 54 дня соответственно по сравнению с 48 днями в контролях без лечения (смотри фиг. 18а и 18b). EDO-S101, следовательно, как представляется, является перспективным для лечения первичной лимфомы ЦНС.
Пример 7. Оценка EDO-S101 in vivo в мышиных моделях тройного метастатического рака молочной железы с метастазами в головной мозг.
Повторяли метод примера 3, за исключением того, что мышиные модели были созданы с 1x105
- 12 037057 клетками МВ-468 рака молочной железы, трансфецированными люциферазой, для создания модели первичной лимфомы ЦНС. EDO-S101 (60 мг/кг массы тела), бендамустин (50 мг/кг массы тела) и контроль вводили внутривенно через хвостовую вену отдельным группам испытуемых мышей в единственной дозе на +4 день после внутримозговой имплантации клеток МВ-4 68 рака молочной железы. EDO-S101 показал значительную терапевтическую активность с подавлением роста опухоли и пролонгированием выживаемости с медианой выживаемости 71 день по сравнению с 62 днями для бендамустина и 55 днями в контролях без лечения (смотри фиг. 19а и 19b). EDO-S101, следовательно, как представляется, является особенно перспективным для лечения метастатического рака мозга.
В заключение эксперименты показывают, что способность EDO-S101 проходить через гематоэнцефалический барьер является очень хорошей. Это делает его перспективным кандидатом для лечения злокачественных опухолей головного мозга. Экспериментальные данные, кроме того, показывают, что он активен не только против MGMT-негативных GBMs, но также и против MGMT-позитивных GBMs, что делает его весьма перспективным в качестве терапевтического агента для лечения MGMT-позитивных GBMs и других MGMT-позитивных астроцитарных опухолей головного мозга, так как для них до сих пор не было разработано никакого лечения. Продемонстрировано также, что он значительно пролонгирует медиану выживаемости в случаях как первичной лимфомы ЦНС, так и метастатического рака головного мозга, что снова делает его весьма перспективным терапевтическим кандидатом для обоих состояний. Данные также показывают, что когда EDO-S101 вводят в сочетании с лучевой терапией, то он проявляет существенно улучшенную активность при лечении глиобластомы по сравнению только с одним EDO-S101.

Claims (19)

1. Способ лечения рака головного мозга, выбранного из MGMT-позитивной астроцитарной опухоли головного мозга, метастатического рака головного мозга и первичной лимфомы ЦНС, у больного, нуждающегося в этом, включающий введение указанному больному соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли
2. Способ лечения MGMT-позитивной мультиформной глиобластомы у больного, нуждающегося в этом, включающий введение указанному больному соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли
3. Способ по п.1, где MGMT-позитивная астроцитарная опухоль головного мозга выбрана из диффузной астроцитомы (класса II ВОЗ) и анапластической астроцитомы (класса III ВОЗ).
4. Способ по п.1, где метастатический рак головного мозга выбран из метастатического рака молочной железы, метастатической системной лимфомы, метастатического рака легкого, метастатической меланомы, метастатической саркомы и метастатического рака желудочно-кишечного тракта.
5. Способ по п.1, где метастатический рак головного мозга представляет собой метастатический рак молочной железы.
6. Способ по любому из пп.1-5, где фармакологически приемлемая соль соединения формулы I представляет собой гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, бисульфат, сульфамат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, глутамат, глюкуронат, глутарат, малат, малеат, сукцинат, фумарат, тартрат, тозилат, салицилат, лактат, нафталинсульфонат или ацетат.
7. Способ по любому из пп.1-6, где соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль вводят внутривенно нуждающемуся в этом больному на уровне дозировки от 0,1 до 70 мг/кг массы тела больного.
8. Способ по п.7, где соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль вводят внутривенно нуждающемуся в этом больному на уровне дозировки от 0,5 до 50 мг/кг массы тела больного.
9. Способ по п.7 или 8, где соединение формулы I или его фармакологически приемлемую соль
- 13 037057 вводят внутривенно нуждающемуся в этом больному на 1, 8 и 15 дни цикла лечения, на 1 и 8 дни цикла лечения или только на 1 день цикла лечения.
10. Способ по любому из пп.1-9, где нуждающийся в этом больной получает лучевую терапию либо до, либо после лечения опухоли головного мозга соединением формулы I или его фармакологически приемлемой солью.
11. Способ по п.10, где нуждающийся в этом больной получает лучевую терапию до лечения рака головного мозга соединением формулы I или его фармакологически приемлемой солью.
12. Способ по любому из пп.1-9, где нуждающийся в этом больной получает лечение соединением формулы I или его фармакологически приемлемой солью и лучевую терапию.
13. Способ по любому из пп.10-12, где указанное лечение облучением дается нуждающемуся в этом больному в дозе от 1 до 5 Гр в течение 5 последовательных дней и предпочтительно 2 Гр в течение 5 последовательных дней.
14. Способ по любому из пп.1-13, где указанный способ дополнительно включает одновременное, последовательное или раздельное введение нуждающемуся в этом больному ингибитора фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и указанного соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли.
15. Способ по п.14, где указанный ингибитор фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) представляет собой бевацизумаб.
16. Способ по любому из пп.1-13, где указанный способ дополнительно включает одновременное, последовательное или раздельное введение нуждающемуся в этом больному ингибитора поли-(АДФрибоза)полимеразы (PARP) и указанного соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли.
17. Способ по п.16, где указанный ингибитор поли-(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP) выбран из рукапариба, олапариба и велипариба.
18. Способ по любому из пп.1-13, где указанный способ дополнительно включает одновременное, последовательное или раздельное введение нуждающемуся в этом больному ингибитора PD-1/PDL-1 (иммунной контрольной точки) и указанного соединения формулы I или его фармакологически приемлемой соли.
19. Способ по п.18, где указанный ингибитор PD-1/PDL-1 (иммунной контрольной точки) представляет собой ипилимумаб.
EA201692472A 2014-05-28 2015-03-26 Способ лечения рака мозга с использованием соединения с двойной функциональностью алкилирования-ингибирования hdac EA037057B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1409471.8A GB201409471D0 (en) 2014-05-28 2014-05-28 Pharmaceutical composition
PCT/EP2015/056667 WO2015180865A1 (en) 2014-05-28 2015-03-26 Compounds for treating brain cancer

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201692472A1 EA201692472A1 (ru) 2017-05-31
EA037057B1 true EA037057B1 (ru) 2021-01-29

Family

ID=51177574

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201692472A EA037057B1 (ru) 2014-05-28 2015-03-26 Способ лечения рака мозга с использованием соединения с двойной функциональностью алкилирования-ингибирования hdac
EA201692480A EA035658B1 (ru) 2014-05-28 2015-05-26 Фармацевтические комбинации для лечения злокачественной опухоли

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201692480A EA035658B1 (ru) 2014-05-28 2015-05-26 Фармацевтические комбинации для лечения злокачественной опухоли

Country Status (22)

Country Link
US (8) US11419853B2 (ru)
EP (4) EP3148529B1 (ru)
JP (3) JP6553092B2 (ru)
KR (2) KR102383794B1 (ru)
CN (3) CN111467339A (ru)
AU (2) AU2015266342B2 (ru)
BR (2) BR112016027048B1 (ru)
CA (2) CA2950374C (ru)
DK (1) DK3148529T3 (ru)
EA (2) EA037057B1 (ru)
ES (2) ES2897727T3 (ru)
GB (1) GB201409471D0 (ru)
IL (2) IL249231B (ru)
MX (2) MX376193B (ru)
NZ (1) NZ725595A (ru)
PH (2) PH12016502355B1 (ru)
PT (1) PT3148529T (ru)
SG (4) SG10201810397SA (ru)
TW (1) TWI724990B (ru)
UA (2) UA121311C2 (ru)
WO (2) WO2015180865A1 (ru)
ZA (2) ZA201607384B (ru)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI573792B (zh) 2012-02-01 2017-03-11 歐陸斯迪公司 新穎治療劑
GB201409488D0 (en) 2014-05-28 2014-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
GB201409485D0 (en) 2014-05-28 2014-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
GB201409471D0 (en) 2014-05-28 2014-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
GB201601773D0 (en) 2016-02-01 2016-03-16 Renishaw Plc Method
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
US11266631B2 (en) 2016-10-11 2022-03-08 Purdue Pharmaceutical Products L.P. Hodgkin lymphoma therapy
TWI651088B (zh) 2017-03-23 2019-02-21 國立東華大學 用於治療癌症的Scalarane二倍半萜類、醫藥組合物及拓樸異構酶II與 Hsp90抑制劑及其用途與製備方法
GB201709406D0 (en) 2017-06-13 2017-07-26 Euro-Cletique S A Compounds for treating TNBC
GB201709403D0 (en) * 2017-06-13 2017-07-26 Euro Celtique Sa Compounds for treating sarcoma
GB201709402D0 (en) * 2017-06-13 2017-07-26 Euro Celtique Sa Compounds for treating t-pll
GB201709405D0 (en) * 2017-06-13 2017-07-26 Euro Celtique Sa Compounds for treating ovarian cancer
EP3694878A1 (en) * 2017-09-14 2020-08-19 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Combination treatment for cancer
WO2020128912A1 (en) * 2018-12-18 2020-06-25 Mundipharma International Corporation Limited Compounds for treating lymphoma or a t-cell malignant disease
CN112023022A (zh) * 2020-10-20 2020-12-04 澳门大学 卡非佐米在制备治疗抗药肿瘤的药物中的新的应用
JP7600020B2 (ja) 2021-03-31 2024-12-16 株式会社小糸製作所 画像投影装置

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010085377A2 (en) * 2009-01-23 2010-07-29 Crystal Biopharmaceutical Llc Hydroxamic acid derivatives
WO2013040286A2 (en) * 2011-09-18 2013-03-21 Euro-Celtique S.A. Pharmaceutical compositions
WO2013113838A1 (en) * 2012-02-01 2013-08-08 Euro-Celtique Novel therapeutic agents

Family Cites Families (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE34727C (de) Ch. H. TH. HAVEMANN in Paris, 16 rue Bleue Verfahren zur direkten Gewinnung metallischen Bleis
DD34727A1 (de) 1963-12-21 1964-12-28 Dietrich Krebs Verfahren zur Herstellung von 1-Stellung substituierten [5-Bis-(chloräthyl)-amino-benzimidazolyl-(2)]-alkancarbonsäuren
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US6407079B1 (en) 1985-07-03 2002-06-18 Janssen Pharmaceutica N.V. Pharmaceutical compositions containing drugs which are instable or sparingly soluble in water and methods for their preparation
GB8926612D0 (en) 1989-11-24 1990-01-17 Erba Farmitalia Pharmaceutical compositions
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
US5376645A (en) 1990-01-23 1994-12-27 University Of Kansas Derivatives of cyclodextrins exhibiting enhanced aqueous solubility and the use thereof
US5369108A (en) 1991-10-04 1994-11-29 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Potent inducers of terminal differentiation and methods of use thereof
GB9126209D0 (en) 1991-12-10 1992-02-12 Orion Yhtymae Oy Drug formulations for parenteral use
US5602112A (en) 1992-06-19 1997-02-11 Supergen, Inc. Pharmaceutical formulation
US5882941A (en) 1994-05-04 1999-03-16 Massachusette Institute Of Technology Programmable genotoxic agents and uses therefor
US5874418A (en) 1997-05-05 1999-02-23 Cydex, Inc. Sulfoalkyl ether cyclodextrin based solid pharmaceutical formulations and their use
US6046177A (en) 1997-05-05 2000-04-04 Cydex, Inc. Sulfoalkyl ether cyclodextrin based controlled release solid pharmaceutical formulations
DE69819721T2 (de) 1997-06-13 2004-09-23 Cydex Inc., Overland Park Zusammensetzung mit erhöhter lagerstabilität enthaltend cyclodextrin und wirkstoffe oder wirkstoff-vorstufen, die in wasserunlösliche komponenten zersetzt werden
US6040321A (en) * 1997-11-12 2000-03-21 Bristol-Myers Squibb Company Aminothiazole inhibitors of cyclin dependent kinases
US6214852B1 (en) 1998-10-21 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Company N-[5-[[[5-alkyl-2-oxazolyl]methyl]thio]-2-thiazolyl]-carboxamide inhibitors of cyclin dependent kinases
US6392053B2 (en) 1999-12-15 2002-05-21 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing arylacetylaminothiazoles
US20020076409A1 (en) 2000-07-12 2002-06-20 March Carl J. Method for treating cancer
PE20020354A1 (es) 2000-09-01 2002-06-12 Novartis Ag Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda)
EP2083005A1 (en) 2000-09-29 2009-07-29 TopoTarget UK Limited Carbamic acid compounds comprising an amide linkage as HDAC inhibitors
AU2002243231A1 (en) 2000-11-21 2002-07-24 Wake Forest University Method of treating autoimmune diseases
CN1764648A (zh) 2003-01-13 2006-04-26 安斯泰来制药有限公司 作为组蛋白脱乙酰酶(hdac)抑制剂的异羟肟酸衍生物
AU2004215624B2 (en) 2003-02-25 2011-06-02 Topotarget Uk Limited Hydroxamic acid compounds comprising a bicyclic heteroaryl group as HDAC inhibitors
JP2007501775A (ja) 2003-08-07 2007-02-01 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト 免疫抑制剤としてのヒストンデアセチラーゼ阻害剤
US7223745B2 (en) 2003-08-14 2007-05-29 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US8227636B2 (en) 2004-04-05 2012-07-24 Merck Hdac Research, Llc Histone deacetylase inhibitor prodrugs
WO2007134169A2 (en) 2006-05-10 2007-11-22 Nuada, Llc Indole, benzimidazole, and benzolactam boronic acid compounds, analogs thereof and methods of use thereof
US8436190B2 (en) 2005-01-14 2013-05-07 Cephalon, Inc. Bendamustine pharmaceutical compositions
ES2380887T3 (es) 2005-05-13 2012-05-21 Topotarget Uk Limited Formulaciones farmacéuticas de inhibidores de la HDAC
US7399956B2 (en) 2005-11-28 2008-07-15 Avago Technologies Ecbuip Pte Ltd Optical encoder with sinusoidal photodetector output signal
EA200900571A1 (ru) 2006-10-20 2009-12-30 Айкос Корпорейшн Композиции chk1 ингибиторов
GB0621160D0 (en) 2006-10-24 2006-12-06 Imp College Innovations Ltd Compounds and uses thereof
EP2086525B1 (en) 2006-11-20 2010-10-06 Cephalon, Inc. Method of radio-sensitizing tumors using a radio-sensitizing agent
MX2009006202A (es) * 2006-12-11 2009-06-22 Genentech Inc Composiciones y metodos para el tratamiento de neoplasma.
CN101084876A (zh) 2007-07-11 2007-12-12 济南康泉医药科技有限公司 一种含苯达莫司汀的抗癌组合物
TW200922564A (en) 2007-09-10 2009-06-01 Curis Inc CDK inhibitors containing a zinc binding moiety
WO2009067453A1 (en) 2007-11-19 2009-05-28 Syndax Pharmaceuticals, Inc. Combinations of hdac inhibitors and proteasome inhibitors
WO2009100045A1 (en) 2008-02-04 2009-08-13 Translational Genomics Research Institute Compounds, pharmaceutical compositions and methods of use of hydroxamic acid derivatives
JP5670335B2 (ja) 2008-09-25 2015-02-18 セファロン、インク． ベンダムスチン液体製剤
JP5773874B2 (ja) 2008-10-08 2015-09-02 セファロン、インク． ベンダムスチンの調製方法
WO2010075542A1 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Curis, Inc. Cdk inhibitors
AU2010217297A1 (en) 2009-02-25 2011-10-20 Supratek Pharma, Inc. Bendamustine cyclopolysaccharide compositions
US8603521B2 (en) 2009-04-17 2013-12-10 Pharmacyclics, Inc. Formulations of histone deacetylase inhibitor and uses thereof
WO2011017448A1 (en) 2009-08-05 2011-02-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Use of histone deacetylase inhibitors for treatment of autoimmune diseases
CN101928234B (zh) 2010-01-15 2012-12-12 北京欧凯纳斯科技有限公司 6/7-（杂）芳基-n-羟基己/庚酰胺化合物及其制备方法
US20130030237A1 (en) 2010-04-15 2013-01-31 Charles Theuer Potentiation of anti-cancer activity through combination therapy with ber pathway inhibitors
JP5727000B2 (ja) 2010-04-16 2015-06-03 ツェルアクト ファーマ ゲーエムベーハー 腫瘍の処置のためのエポトシドのアナログ
JO3659B1 (ar) 2010-06-02 2020-08-27 Astellas Deutschland Gmbh أشكال جرعات بينداموستين عن طريق الفم وإستخداماته العلاجية
US8748470B2 (en) 2011-03-17 2014-06-10 The University Of Chicago Methods for treating ovarian cancer by inhibiting fatty acid binding proteins
EP2755648B1 (en) 2011-09-13 2017-03-08 Pharmacyclics LLC Formulations of histone deacetylase inhibitor in combination with bendamustine and uses thereof
CN102993102B (zh) 2011-09-16 2016-08-24 杭州民生药业有限公司 [1-甲基-2-(7’-庚异羟肟酸基)-5-n，n-二(2’-氯乙基)]-1h-苯并咪唑的合成方法
SI2760860T1 (sl) 2011-09-28 2017-04-26 Euro-Celtique S.A. Derivati dušikove gorčice
US10335494B2 (en) 2013-12-06 2019-07-02 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Combination of aurora kinase inhibitors and anti-CD30 antibodies
NZ630314A (en) 2014-02-18 2016-03-31 Celgene Corp Combination therapy for hematological malignancies
GB201409471D0 (en) 2014-05-28 2014-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
GB201409488D0 (en) 2014-05-28 2014-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
GB201409485D0 (en) 2014-05-28 2014-07-09 Euro Celtique Sa Pharmaceutical composition
AU2015356779A1 (en) 2014-12-05 2017-07-13 University of Modena and Reggio Emilia Combinations of histone deacetylase inhibitors and bendamustine for use in the treatment of lymphoma
JP2016109634A (ja) 2014-12-09 2016-06-20 株式会社安川電機 エンコーダ及びエンコーダ付きモータ
CN106580971B (zh) 2015-10-20 2019-11-12 杭州梯诺医药科技有限公司 一种药物组合物及其制备方法
US20180098969A1 (en) 2016-10-11 2018-04-12 Purdue Pharmaceutical Products L.P. Hodgkin lymphoma therapy
US11266631B2 (en) 2016-10-11 2022-03-08 Purdue Pharmaceutical Products L.P. Hodgkin lymphoma therapy
GB201709402D0 (en) 2017-06-13 2017-07-26 Euro Celtique Sa Compounds for treating t-pll
GB201709405D0 (en) 2017-06-13 2017-07-26 Euro Celtique Sa Compounds for treating ovarian cancer
GB201709406D0 (en) 2017-06-13 2017-07-26 Euro-Cletique S A Compounds for treating TNBC
GB201709403D0 (en) 2017-06-13 2017-07-26 Euro Celtique Sa Compounds for treating sarcoma
WO2020128912A1 (en) 2018-12-18 2020-06-25 Mundipharma International Corporation Limited Compounds for treating lymphoma or a t-cell malignant disease
US20240252472A1 (en) 2023-01-25 2024-08-01 Purdue Pharma L.P. Combinations for treating cancer

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010085377A2 (en) * 2009-01-23 2010-07-29 Crystal Biopharmaceutical Llc Hydroxamic acid derivatives
WO2013040286A2 (en) * 2011-09-18 2013-03-21 Euro-Celtique S.A. Pharmaceutical compositions
WO2013113838A1 (en) * 2012-02-01 2013-08-08 Euro-Celtique Novel therapeutic agents

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHAMBERLAIN MARC C: "Salvage therapy with bendamustine for methotrexate refractory recurrent primary CNS lymphoma: a retrospective case series.", JOURNAL OF NEURO-ONCOLOGY, KLUWER ACADEMIC PUBLISHERS, BO, vol. 118, no. 1, 1 May 2014 (2014-05-01), Bo, pages 155 - 162, XP002740557, ISSN: 1573-7373, DOI: 10.1007/s11060-014-1411-8 *
DATABASE MEDLINE [online] US NATIONAL LIBRARY OF MEDICINE (NLM), BETHESDA, MD, US; 1 May 2014 (2014-05-01), WANG XIAO-RONG; ZHANG XIA-YAN; XU DONG-MIN; YU SHU-YING; FANG SAN-HUA; LU YUN-BI; ZHANG WEI-PING; WEI ER-QING: "[Effect of histone deacetylase inhibitor NL101 on rat neurons].", XP002740556 *
ZULKOWSKI K, ET AL.: "Regression of Brain Metastases from Breast Carcinoma after Chemotherapy with Bendamustine", JOURNAL OF CANCER RESEARCH AND CLINICAL ONCOLOGY., SPRINGER INTERNATIONAL, BERLIN., DE, vol. 128, 1 January 2002 (2002-01-01), DE, pages 111 - 113, XP003005594, ISSN: 0171-5216, DOI: 10.1007/s00432-001-0303-4 *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2950338A1 (en) 2015-12-03
US12048688B2 (en) 2024-07-30
US20170189382A1 (en) 2017-07-06
BR112016027048B1 (pt) 2023-01-03
BR112016027041A8 (pt) 2021-07-20
AU2015266052B2 (en) 2020-07-09
MX2016015436A (es) 2017-07-04
PH12016502355B1 (en) 2022-04-01
NZ725595A (en) 2023-03-31
AU2015266342A1 (en) 2016-11-10
AU2015266342B2 (en) 2020-07-02
US12370177B2 (en) 2025-07-29
WO2015181156A1 (en) 2015-12-03
MX376193B (es) 2025-03-07
EA201692472A1 (ru) 2017-05-31
US20230049350A1 (en) 2023-02-16
AU2015266052A1 (en) 2016-11-10
ZA201607488B (en) 2025-05-28
ES2897727T3 (es) 2022-03-02
BR112016027041B1 (pt) 2023-03-21
DK3148529T3 (da) 2021-12-13
SG10201810401RA (en) 2018-12-28
US11559516B2 (en) 2023-01-24
TWI724990B (zh) 2021-04-21
JP2017518291A (ja) 2017-07-06
EP3148529A1 (en) 2017-04-05
EP3998068A1 (en) 2022-05-18
BR112016027048A8 (pt) 2021-07-20
MX2016015434A (es) 2017-06-23
US12403130B2 (en) 2025-09-02
US20210346351A1 (en) 2021-11-11
US20250009715A1 (en) 2025-01-09
US10406138B2 (en) 2019-09-10
KR20170012372A (ko) 2017-02-02
US20190343807A1 (en) 2019-11-14
WO2015180865A1 (en) 2015-12-03
IL249229B (en) 2020-07-30
US20180369204A1 (en) 2018-12-27
IL249229A0 (en) 2017-02-28
ES2949222T3 (es) 2023-09-26
UA122207C2 (uk) 2020-10-12
BR112016027041A2 (pt) 2017-08-15
EP3148536B1 (en) 2023-06-28
EP3148536A1 (en) 2017-04-05
ZA201607384B (en) 2021-06-30
TW201625240A (zh) 2016-07-16
CA2950374A1 (en) 2015-12-03
EA035658B1 (ru) 2020-07-23
CN106470696A (zh) 2017-03-01
PH12016502355A1 (en) 2017-02-13
KR102383794B1 (ko) 2022-04-06
CN106659712A (zh) 2017-05-10
CA2950338C (en) 2024-01-16
PH12016502354A1 (en) 2017-02-13
JP2017516781A (ja) 2017-06-22
SG11201609360WA (en) 2016-12-29
PT3148529T (pt) 2021-11-17
JP6553092B2 (ja) 2019-07-31
KR102451701B1 (ko) 2022-10-06
CA2950374C (en) 2023-10-03
KR20170005106A (ko) 2017-01-11
US11419853B2 (en) 2022-08-23
MX382162B (es) 2025-03-11
CN111467339A (zh) 2020-07-31
EP3957307A1 (en) 2022-02-23
EA201692480A1 (ru) 2017-04-28
JP2021059579A (ja) 2021-04-15
EP3148536C0 (en) 2023-06-28
BR112016027048A2 (pt) 2017-08-15
IL249231A0 (en) 2017-02-28
US20170151218A1 (en) 2017-06-01
US20230241033A1 (en) 2023-08-03
UA121311C2 (uk) 2020-05-12
SG10201810397SA (en) 2018-12-28
EP3148529B1 (en) 2021-10-20
IL249231B (en) 2022-09-01
JP7274450B2 (ja) 2023-05-16
CN106470696B (zh) 2021-04-27
GB201409471D0 (en) 2014-07-09
SG11201609365UA (en) 2016-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12370177B2 (en) Compounds for treating brain cancer
AU2014299699B2 (en) Use of eribulin and lenvatinib as combination therapy for treatment of cancer
JP2021046446A (ja) グルココルチコイド及びｅｄｏ−ｓ１０１を含む組合せ
CN101742910A (zh) 治疗脑癌的方法
US6498181B1 (en) Synergistic tumorcidal response induced by histamine
HK1236099B (en) Compounds for treating brain cancer
TW202517275A (zh) 藥物組合物及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM