EA008007B1

EA008007B1 - Новые липазы и их применение

Info

Publication number: EA008007B1
Application number: EA200500391A
Authority: EA
Inventors: Рихард Альбанг; Ульрике Фолькерс; Андреас Фритц; Беатрикс Герхард; Оливер Хайнрих; Хильмар Ильгенфритц; Дитер Майер; Фабио Спреафико; Кристиан Вагнер; Де Лекс Бур; Рульф Бернхард Мейма
Original assignee: ДСМ Ай Пи ЭССЕТС Б.В.
Priority date: 2002-08-19
Filing date: 2003-08-15
Publication date: 2007-02-27
Also published as: CA2495198A1; MXPA05001978A; US20090232936A1; US8216586B2; CN1675355A; EP2338986A1; EP2338986B1; JP2005535352A; WO2004018660A2; DK2338986T3; EA200601823A1; PL214792B1; EA200500391A1; ES2527924T3; AU2003270088A1; PL375355A1; CA2495198C; US20060281080A1; AR042417A1; US7550280B2

Abstract

Изобретение относится к новой идентифицированной полинуклеотидной последовательности, содержащей ген, который кодирует новый липолитический фермент из Aspergillus niger. Отличительными особенностями настоящего изобретения являются нуклеотидная последовательность полной длины нового гена, последовательность кДНК, содержащая последовательность полной длины, кодирующую новый липолитический фермент, а также аминокислотная последовательность функционального белка полной длины и их функциональные эквиваленты. Настоящее изобретение также относится к способам применения таких ферментов в промышленных процессах и способах диагностирования грибковых инфекций. Также в настоящее изобретение включены клетки, трансформированные полинуклеотидом согласно настоящему изобретению и клетки, в которых липолитический фермент согласно настоящему изобретению генетически модифицирован для усиления своей активности и/или уровня экспрессии.

Description

Изобретение относится к недавно идентифицированной полинуклеотидной последовательности, содержащей ген, кодирующий новый липолитический фермент из АкретдШик шдет. Признаками настоящего изобретения являются нуклеотидная последовательность нового гена полной длины, кДНК последовательность, содержащая полную длину последовательности, кодирующей новый липолитический фермент, а также аминокислотная последовательность липолитического фермента полной длины и его функциональные эквиваленты. Настоящее изобретение также относится к способам использования этих ферментов в промышленных процессах и способах диагностики грибковых инфекций. В настоящее изобретение также включены клетки, трансформированные полинуклеотидом согласно настоящему изобретению, и клетки, в которых липолитический фермент согласно настоящему изобретению является генетически модифицированным для усиления активности и/или уровня экспрессии.

Сущность изобретения

Печеные изделия, такие как хлеб, готовят из теста, которое обычно изготавливают из основных ингредиентов (пшеничной) муки, воды и необязательно соли. В зависимости от печеных изделий другими добавленными ингредиентами могут быть сахар и прочие вкусовые добавки. Для продуктов с применением разрыхлителей, в основном используют хлебопекарные дрожжи наряду с химическими разрыхляющими системами, такими как комбинация кислот (генерирующее соединение) и бикарбонатов.

Для улучшения свойств разделки теста и/или конечных свойств печеных изделий осуществляют непрерывные попытки развития вспомогательных веществ обработки с улучшенными свойствами. Вспомогательные вещества обработки в настоящем описании определены как соединения, которые улучшают свойства разделки теста и/или конечные свойства печеных изделий. Свойства теста, которые могут быть улучшены, включают способность механической обработки, способность аккумулировать газ, уменьшенную липкость, эластичность, растяжимость, пластичность и т.д. Свойства печеных изделий, которые могут быть улучшены, включают объем батона, жесткость корочки, текстуру и мягкость хлебного мякиша, привкус, связанный с несвежестью и сроком хранения. Такие вспомогательные вещества, улучшающие обработку теста и/или печеных изделий, можно подразделить на две группы: химические добавки и ферменты (также упоминаемые как хлебопекарные ферменты).

Дрожжи, ферменты и химические добавки обычно добавляют в тесто отдельно. Дрожжи могут быть добавлены в виде жидкой суспензии, в прессованном виде или в виде сухих активных (ΑΌΥ) или сухих неактивных дрожжей (ΙΌΥ). Различием между такими составами дрожжей является содержание воды и сухого вещества дрожжей. Жидкие дрожжи имеют содержание сухого вещества дрожжей менее чем 25% (веса к объему). Дрожжи в виде пасты имеют содержание сухого вещества дрожжей от 17 до 23% (веса к объему). Прессованные дрожжи имеют содержание сухого вещества дрожжей между 25-35% (веса к объему), в то время как составы сухих дрожжей имеют содержание сухого вещества дрожжей между 92-98% (веса к объему).

Ферменты могут быть добавлены в сухом, например гранулированном, виде или в жидком виде. Химические добавки в большинстве случаев добавляют в виде порошка. Также композиции вспомогательных веществ, которые разработаны для специфических применений выпечки, могут быть составлены из специально предназначенных смесей химических добавок и ферментов.

Приготовление теста из ингредиентов и вспомогательных веществ, описанных выше, хорошо известно специалистам в данной области техники и содержит смешивание упомянутых ингредиентов и вспомогательных веществ и один или несколько этапов формования и ферментации.

Приготовление печеных изделий из такого теста также хорошо известно специалистам в данной области техники и может содержать формование и придание формы и дополнительное брожение теста, с последующей выпечкой при необходимых температурах и времени выпечки.

Химические добавки с улучшенными свойствами содержат окисляющие агенты, такие как аскорбиновую кислоту, броматы и азодикарбонаты, восстанавливающие агенты, такие как Ь-цистеин и глутатион, эмульгаторы, действующие как улучшители свойств теста, такие как эфиры моно- и диглицеридов диацетилвинной кислоты (ΌΑΤΕΜ), стеароиллактилат натрия (88Ь) или стеароиллактилат калия (С8Ь), или действующие как размягчители хлебного мякиша, такие как моностеарат глицерина (ΟΜ8) и т.д., жирные вещества, такие как триглицериды (жир) или лецитин и др.

В результате из-за диктуемой потребителем необходимости замещения химических добавок более натуральными продуктами, разработаны некоторые хлебопекарные ферменты со свойствами, улучшающими тесто и/или печеные изделия, и, которые могут быть использованы во всевозможных комбинациях, в зависимости от специфических условий применения выпечки. Подходящие ферменты включают ферменты, разрушающие крахмал, ферменты, разрушающие арабиноксилан и другую гемицеллюлозу, ферменты, разрушающие целлюлозу, ферменты окисления, ферменты, расщепляющие жирные вещества, ферменты, разрушающие, модифицирующие или сшивающие белки.

Ферментами, разрушающими крахмал, являются, например, ферменты, действующие внутри, такие как альфа-амилаза, мальтогенная амилаза, пуллуланаза, или другие ферменты расщепления разветвленной структуры, и ферменты, действующие снаружи, которые расщепляют до глюкозы (амилоглюкозидаза), мальтозы (бета-амилаза), мальтотриозы, мальтотетрозы и более высокие олигосахариды.

- 1 008007

Ферментами, разрушающими арабиноксилан- и другую гемицеллюлозу, являются, например, ксиланазы, пентозаназы, гемицеллюлаза, арабинофуранозидаза, глюконаза и др.

Ферментами, разрушающими целлюлозу, являются, например, целлюлаза, целлобиогидролаза и бета-глюкозидаза.

Ферментами окисления являются, например, глюкозооксидаза, гексозооксидаза, пиранозоксидаза, сульфгидрил-оксидаза, липоксигеназа, лакказа, полифенолоксидаза и др.

Ферментами, расщепляющими жирные вещества, являются, например, липолитические ферменты, такие как триацилглицероллипазы, фосфолипазы (такие как А_ь А₂, В, С и Ό) и галактолипазы.

Ферментами, разрушающими, модифицирующими или сшивающими белки, являются, например, эндопротеазы (серинпротеазы, металлопротеазы, аспартилпротеазы, тиолпротеазы), экзопептидазы, которые расщепляют до одной аминокислоты или дипептида, трипептида и т.д. с Ν-терминального (аминопептидазы) или С-терминального (карбоксипептидазы) концов полипептидной цепи, ферменты, разрушающие глутамин или аспарагины, такие как деамидаза и пептидоглутаминаза, или сшивающие ферменты, такие как трансглютаминаза.

Хлебопекарные ферменты как правило могут производиться микроорганизмами. Микробные хлебопекарные ферменты являются доступными из различных источников; ВасШик крес. являются обычным источником ферментов бактерий, несмотря на то, что ферменты грибов обычно производят АкретдШик крес.

Хлебопекарные ферменты могут быть использованы в многообразии хлебопекарных изделий. Термин хлебопекарные изделия в настоящем описании определен как содержащий хлебные изделия, такие как хлеб, батоны хлеба, французский батон, а также булочки, пирожные, пирожки, горячая сдоба, пончики из дрожжевого и недрожжевого теста и т. п.

В процессах, упомянутых выше, существует преимущество использования хлебопекарных ферментов, которые получены при помощи ДНК-рекомбинантных технологий. Такие рекомбинантные ферменты имеют некоторые преимущества перед традиционно очищенными аналогами. Рекомбинантные ферменты могут быть созданы по низкой себестоимости, с высоким выходом, свободными от загрязняющих агентов, подобных бактериям или вирусам, а также свободными от бактериальных токсинов или других загрязняющих ферментативных активностей.

Задача изобретения

Задачей настоящего изобретения является предоставление новых полинуклеотидов, кодирующих новые липолитические ферменты с улучшенными свойствами. Дополнительной задачей является предоставление липолитических ферментов, продуцируемых естественным путем и рекомбинантным способом, а также рекомбинантных штаммов, их продуцирующих. Также частью настоящего изобретения являются слитые полипептиды, а также способы создания и использования полинуклеотидов и полипептидов согласно настоящему изобретению.

Задачей настоящего изобретения также является предоставление новых липолитических ферментов, которые решают по меньшей мере одну из вышеупомянутых проблем или предоставляют новые липолитические ферменты, которые имеют одно или несколько улучшенных свойств при использовании в тесте и/или печеных изделиях, выбранных из группы увеличенной прочности теста, увеличенной эластичности теста, увеличенной стабильности теста, уменьшенной черствости теста, улучшенной растяжимости теста, улучшенной способности теста к механической обработке, увеличенного объема печеного изделия, улучшенной структуры хлебного мякиша печеного изделия, улучшенной мягкости печеного изделия, улучшенного вкуса печеного изделия, улучшенной устойчивости к черствлению печеного изделия, улучшенного цвета печеного изделия, улучшенной корки печеного изделия или которые имеют особенность хлебного субстрата.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение предоставляет новые полинуклеотиды, кодирующие новые липолитические ферменты. Более конкретно, настоящее изобретение предоставляет полинуклеотиды, имеющие нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется предпочтительно при условиях высокой жесткости с последовательностью, выбранной из группы, состоящую из БЕЦ ΙΌ N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38. Следовательно, изобретение предоставляет нуклеиновые кислоты, которые являются более чем на 40%, такие как примерно 60%, предпочтительно 65%, более предпочтительно 70%, даже более предпочтительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% гомологичными последовательностям, выбранным из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38.

В более предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет такие выделенные полинуклеотиды, получаемые из мицельных грибов, в частности АкретдШик шдет является предпочтительным.

В одном из вариантов осуществления настоящее изобретение предоставляет выделенный полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов.

- 2 008007

В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет выделенный полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере один функциональный домен полинуклеотида, выбранного из группы, состоящей из 8ЕО ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов.

В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет ген липолитического фермента, выбранный из группы, состоящей из 8ЕО ΙΌ N0: 1, 4, 7, 10, 13, 16, 19, 22, 25, 28, 31, 34 и 37. В другом аспекте настоящее изобретение предоставляет полинуклеотид, предпочтительно кДНК, кодирующую липолитический фермент АкретдШик шдет, чью аминокислотную последовательность выбирают из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или варианты или фрагменты такого полипептида. В предпочтительном варианте осуществления кДНК имеет последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 2, 5, 8, 11, 14, 17, 20, 23, 26, 29, 32, 35 и 38 или их функциональных эквивалентов.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет полинуклеотид, содержащий кодирующую последовательность полинуклеотидов согласно настоящему изобретению, причем предпочтительной является полинуклеотидная последовательность, выбранная из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 2, 5, 8, 11, 14, 17, 20, 23, 26, 29, 32, 35 и 38.

Настоящее изобретение также относится к векторам, содержащим полинуклеотидную последовательность согласно настоящему изобретению, и праймерам, зондам и фрагментам, которые могут быть использованы для амплификации или обнаружения ДНК согласно настоящему изобретению.

В дополнительном предпочтительном варианте осуществления предоставляют вектор, в котором полинуклеотидная последовательность согласно настоящему изобретению является функционально связанной с регуляторными последовательностями, подходящими для экспрессии кодируемой аминокислотной последовательности в подходящей клетке хозяина, такой как ЛкретдШик шдет или ЛкретдШик огухае. Настоящее изобретение также предоставляет способы приготовления полинуклеотидов и векторов согласно настоящему изобретению.

Настоящее изобретение также относится к рекомбинантно продуцируемым клеткам хозяина, которые содержат гетерологичные или гомологичные полинуклеотиды согласно настоящему изобретению.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет рекомбинантные клетки хозяина, в которых экспрессия липолитического фермента согласно настоящему изобретению существенно увеличена или в которых увеличена активность липолитического фермента.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет клетку хозяина продуцируемую рекомбинантным способом, которая содержит гетерологичный или гомологичный полинуклеотид согласно настоящему изобретению и, где клетка способна продуцировать функциональный липолитический фермент согласно настоящему изобретению, предпочтительно клетка способна к чрезмерной экспрессии липолитического фермента согласно настоящему изобретению, например штамм АкретдШик, содержащий увеличенное количество копий гена или кДНК в настоящем изобретении.

В еще одном аспекте настоящего изобретения предоставлен очищенный полипептид. Полипептиды согласно настоящему изобретению включают полипептиды, кодируемые полинуклеотидами согласно настоящему изобретению. Особенно предпочтительным является полипептид, выбранный из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов.

Следовательно, в одном из аспектов настоящее изобретение предоставляет композицию липолитического фермента, содержащую в качестве активного ингредиента фермент, выбранный из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов.

В другом аспекте настоящее изобретение предоставляет способ получения печеных изделий, в котором в тесто включены используемые для изготовления печеных изделий один или несколько ферментов, выбранных из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов.

Слитые белки, содержащие полипепти, согласно настоящему изобретению также находятся в объеме настоящего изобретения. Настоящее изобретение также предоставляет способы получения полипептидов согласно настоящему изобретению.

Настоящее изобретение также относится к использованию липолитического фермента согласно настоящему изобретению в любом промышленном процессе как изложено в настоящем описании.

Осуществление изобретения

Липолитический фермент определен в настоящем описании как фермент, проявляющий себя, по меньшей мере, как один, а предпочтительно два, или три, или четыре, или более из следующих липолитических активностей: триацилглицерол липазы, фосфолипазы А₁, фосфолипазы А₂, фосфолипазы В, фосфолипазы С, фосфолипазы Ό, лизофосфолипазы и галактолипазы.

Полинуклеотиды

Настоящее изобретение представляет нуклеотиды, кодирующие липолитические ферменты, имеющие аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12,

- 3 008007

15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов. Последовательности семи генов, кодирующих липолитические ферменты ΝΒΕ028, ΝΒΕ029, ΝΒΕ030, ΝΒΕ031, ΝΒΕ032, ΝΒΕ033, ΝΒΕ034, ΝΒΕ036, ΝΒΕ038, ΝΒΕ039, ΝΒΕ043, ΝΒΕ045 и ΝΒΕ042 соответственно были определены путем секвенирования геномных клонов, полученных из ЛзрегдШиз шдег. Настоящее изобретение представляет полинуклеотидные последовательности, содержащие гены, кодирующие липолитические ферменты ΝΒΕ028, ΝΒΕ029, ΝΒΕ030, ΝΒΕ031, ΝΒΕ032, ΝΒΕ033, ΝΒΕ034, ΝΒΕ036, ΝΒΕ038, ΝΒΕ039, ΝΒΕ043, ΝΒΕ045 и ΝΒΕ042, а также их полные последовательности кДНК и их кодирующие последовательности (табл. 1). Следовательно, настоящее изобретение относится к выделенным полинуклеотидам, содержащим нуклеотидные последовательности, выбранные из группы, состоящей из 8Ε0 ΙΟ ΝΟ: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 или их функциональных эквивалентов.

Таблица 1

Липолитический фермент	Последовательность (ЗЕО Ю N0)
ΝΒΕχχχ	геномная	кДНК	аминокислотная
ΝΒΕ028	1	2	3
ΝΒΕ029	4	5	6
ΝΒΕ030	7	8	9
ΝΒΕ031	10	11	12
ΝΒΕ032	13	14	15
ΝΒΕ033	16	17	18
ΝΒΕ034	19	20	21
ΝΒΕ036	22	23	24
ΝΒΕ038	25	26	27
ΝΒΕ039	28	29	30
ΝΒΕ043	31	32	33
ΝΒΕ045	34	35	36
ΝΒΕ042	37	38	39

Более конкретно, настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, гибридизуемому в жестких условиях, предпочтительно в условиях высокой жесткости, в полинуклеотиды, выбранные из группы, состоящей из 8Ш Ш ΝΟ: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38. Преимущественно, такие полинуклеотиды могут быть получены из мицельных грибов, в частности из ЛзрегдШиз шдег. Более конкретно, настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, имеющему нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8ΕΌ Ю ΝΟ: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38.

Настоящее изобретение также относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему по меньшей мере один функциональный домен полинуклеотида, имеющего аминокислотные последовательности, выбранные из группы, состоящей из 8ЕО ΙΟ ΝΟ: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или их функциональных эквивалентов.

Как используется в настоящем описании, термины ген и рекомбинантный ген относятся к молекулам нуклеиновой кислоты, которые могут быть выделены из хромосомной ДНК, которая включает открытую рамку считывания, кодирующую белок, например, липолитический фермент ЛзрегдШиз шдег. Ген может включать в себя кодирующие последовательности, некодирующие последовательности, интроны и регуляторные последовательности. Более того, ген относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, как определено в настоящем описании.

Молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения, такая как молекула нуклеиновой кислоты, имеющая нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8Ε0 ΙΟ ΝΟ: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 или их функциональных эквивалентов, может быть выделена с использованием стандартных техник молекулярной биологии и информации последовательностей, предоставленной настоящим описанием. Например, используя всю или часть последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из 8Ε0 ΙΟ ΝΟ: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 в качестве гибридизационного зонда, молекулы нуклеиновых кислот согласно настоящему изобретению могут быть выделены

- 4 008007 с использованием стандартных техник гибридизации и клонирования (например, как описано у 8атЬгоок, ί.. ЕтйкЬ, Е.Е. и МапаШ, Т. Мо1еси1аг С1ошид: А ЬаЬога1огу Мапиа1. 2'¹. еб., Со1б 8ртшд НагЬог ЬаЬога1огу, Со1б 8ртшд НагЬог ЬаЬота1огу Рге55. Со1б 8ртшд НагЬог, ΝΥ, 1989).

Более того, молекула нуклеиновой кислоты, охватывающая всю или часть последовательности нуклеиновой кислоты из группы, состоящей из 8Ер ГО N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38, может быть выделена полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с использованием синтетических олигонуклеотидных праймеров, разработанных на основании информации о последовательности, содержащейся в последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из 8ЕР ГО N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38.

Нуклеиновая кислота настоящего изобретения может быть амплифицирована с использованием кДНК, мРНК или, в качестве альтернативы, геномной ДНК, в качестве матрицы и подходящих олигонуклеотидных праймеров согласно стандартным техникам ПЦР амплификации. Нуклеиновая кислота, амплифицированная таким образом, может быть клонирована в подходящий вектор и охарактеризована при помощи анализа последовательности ДНК.

Более того, олигонуклеотиды, соответствующие или гибридизуемые с нуклеотидными последовательностями согласно настоящему изобретению, могут быть приготовлены при помощи стандартных техник синтеза, например, используя автоматизированный ДНК синтезатор.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8ЕР ГО N0:2. Последовательность 8ЕР ГО N0:2 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, представленного в 8ЕР ГО N0:1. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ028 АкретдШик шдет, как показано в 8ЕР ГО N0:3.

Во втором предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8 Ер ГО N0:5. Последовательность 8ЕР ГО N0:5 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8ЕР ГО N0:4. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ029 АкретдШик шдет, как показано в 8ЕР ГО N0:6.

В третьем предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:8. Последовательность 8Ер ГО N0:8 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8Ер ГО N0:7. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ030 АкретдШик шдет, как показано в 8Ер ГО N0:9.

В четвертом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:11. Последовательность 8Ер ГО N0:11 соответствует области кодирования гена АкретдШик пре г, предоставленного в 8Ер ГО N0:10. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ031 АкретдШик шдет, как показано в 8Ер ГО N0:12.

В пятом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:14. Последовательность 8Ер ГО N0:14 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8Ер ГО N0:13. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ032 АкретдШик шдет, как показано в 8Ер ГО N0:15.

В шестом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:17. Последовательность 8Ер ГО N0:17 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8Ер ГО N0:16. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ033, АкретдШик шдет, как показано в 8Ер ГО N0:18.

В седьмом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:20. Последовательность 8Ер ГО N0:20 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8Ер ГО N0:19. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ034 АкретдШик шдет, как показано в 8Ер ГО N0:21.

В восьмом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:23. Последовательность 8Ер ГО N0:23 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8Ер ГО N0:22. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ034 АкретдШик шдет, как показано в 8Ер ГО N0:24.

В девятом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов, представленную в 8Ер ГО N0:265. Последовательность 8Ер ГО N0:26 соответствует области кодирования гена АкретдШик шдет, предоставленного в 8Ер ГО N0:25. Такая кДНК содержит последовательность, кодирующую полипептид NΒЕ034

- 5 008007

ЛзрегдШиз шдег. как показано в 8ЕЦ Ш N0:27.

В десятом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов. представленную в 8ЕО Ш N0:29. Последовательность 8Е0 Ш N0:29 соответствует области кодирования гена ЛзрегдШиз шдег. предоставленного в 8Е0 Ш N0:28. Такая кДНК содержит последовательность. кодирующую полипептид ΝΒΕ034 ЛзрегдШиз шдег. как показано в 8ЕЦ Ш N0:30.

В одиннадцатом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов. представленную в 8Е0 Ш N0:32. Последовательность 8Е0 Ш N0:32 соответствует области кодирования гена ЛзрегдШиз шдег. предоставленного в 8Е0 Ш N0:31. Такая кДНК содержит последовательность. кодирующую полипептид ПВЕ034 ЛзрегдШиз шдег. как показано в 8ЕЦ Ш N0:33.

В двенадцатом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов. представленную в 8Е0 Ш N0:35. Последовательность 8Е0 Ш N0:35 соответствует области кодирования гена ЛзрегдШиз шдег. предоставленного в 8Е0 Ш N0:34. Такая кДНК содержит последовательность. кодирующую полипептид NΒЕ034 ЛзрегдШиз шдег. как показано в 8ЕЦ Ш N0:36.

В тринадцатом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит последовательность нуклеотидов. представленную в 8Е0 Ш N0:38. Последовательность 8Е0 Ш N0:38 соответствует области кодирования гена ЛзрегдШиз шдег. предоставленного в 8Е0 Ш N0:37. Такая кДНК содержит последовательность. кодирующую полипептид NΒЕ034 ЛзрегдШиз шдег. как показано в 8ЕЦ Ш N0:39.

В другом предпочтительном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты настоящего изобретения содержит молекулу нуклеиновой кислоты. которая комплементарна нуклеотидной последовательности. выбранной из группы. состоящей из 8Е0 Ш N0: 1. 2. 4. 5. 7. 8. 10. 11. 13. 14. 16. 17. 19. 20. 22. 23. 25. 26. 28. 29. 31. 32. 34. 35. 37 и 38 или функциональных эквивалентов таких нуклеотидных последовательностей. Молекула нуклеиновой кислоты. которая комплементарна другой нуклеотидной последовательности. является молекулой. которая достаточно комплементарна другой нуклеотидной последовательности так. что она может гибридизоваться с другой нуклеотидной последовательностью. таким образом. образуя стабильный дуплекс.

Один из аспектов настоящего изобретения имеет отношение к выделенным молекулам нуклеиновых кислот. которые кодируют полипептид настоящего изобретения или его функциональный эквивалент. такой как биологически активный фрагмент или домен. а также к молекулам нуклеиновых кислот. достаточным для использования в качестве гибридизационных зондов для идентификации молекул нуклеиновых кислот. кодирующих полипептид настоящего изобретения. и к фрагментам таких молекул нуклеиновых кислот. подходящих для использования в качестве праймеров ПЦР для амплификации или мутации молекул нуклеиновых кислот. Выделенный полинуклеотид или выделенная нуклеиновая кислота представляет собой ДНК или РНК. которая не является непосредственно граничащей с обеими кодирующими последовательностями. с которыми она непосредственно граничит (одна на 5' и одна на 3' концах) в природном геноме организма. из которого получена. Таким образом. в одном из вариантов осуществления выделенная нуклеиновая кислота включает в себя несколько или все 5' некодирующие (например. промотор) последовательности. которые непосредственно примыкают к кодирующей последовательности. Следовательно. термин включает в себя. например. рекомбинантную ДНК. которая включена в вектор. в автономно реплицирующуюся плазмиду или вирус. или в геномную ДНК прокариота или эукариота. или которая существует как отдельная молекула (например. кДНК или фрагмент геномной ДНК. полученной при помощи ПЦР или обработкой рестрикционными эндонуклеазами) независимо от других последовательностей. Она также включает в себя рекомбинантную ДНК. которая является частью гибридного гена. кодирующего дополнительный полипептид. который является по существу свободным от клеточного вещества. вирусного вещества или культуральной среды (при продуцировании ДНК при помощи ДНК-рекомбинантных техник). или химических предшественников. или других химических веществ (при химическом синтезе). Более того. выделенный фрагмент нуклеиновой кислоты является фрагментом нуклеиновой кислоты. который не является природным. как фрагмент. и не может быть найден в природном состоянии.

Как используются в настоящем описании. термины полинуклеотид или молекула нуклеиновой кислоты включают в себя молекулы ДНК (например. кДНК или геномной ДНК) и молекулы РНК (например. мРНК) и аналоги ДНК или РНК. созданные с использованием нуклеотидных аналогов. Молекула нуклеиновой кислоты может быть одноцепочечной или двухцепочечной. но предпочтительно. является двухцепочечной ДНК. Нуклеиновая кислота может быть синтезирована с использованием аналогов олигонуклеотидов или производных (например. нуклеотидов инозина или фосфоротиоата). Такие олигонуклеотиды могут быть использованы. например. для приготовления нуклеиновых кислот. которые имеют измененные способности спаривания оснований. или увеличенную устойчивость к нуклеазам.

Другой вариант осуществления настоящего изобретения предоставляет выделенную молекулу нуклеиновой кислоты. которая является антисмысловой к молекуле нуклеиновой кислоты согласно настоя

- 6 008007 щему изобретению. Также включенными в объем настоящего изобретения являются комплементарные нити молекул нуклеиновых кислот, изложенные в настоящем описании.

Ошибки секвенирования

Информацию о последовательности, представленную в настоящем описании, не следует толковать настолько узко, чтобы не требовать включения ошибочно идентифицированных оснований. Определенные последовательности, раскрытые в настоящем описании, могут быть легко использованы для выделения полного гена из мицельных грибов, в частности ЛкретдШик гиде г, который, в свою очередь, может быть легко подвергнут дополнительному анализу последовательности, таким образом, идентифицируя ошибки секвенирования.

Если не оговорено иное, все нуклеотидные последовательности, определенные путем секвенирования молекулы ДНК, в настоящем описании определены с использованием автоматизированного ДНК секвенатора, и все аминокислотные последовательности полипептидов, кодированные молекулами ДНК, определенными в настоящем описании, были предсказаны при помощи трансляции последовательности ДНК, определенной как упомянуто выше. Следовательно, как известно в данной области техники, для любой последовательности ДНК, определенной при помощи такого автоматизированного способа, любая нуклеотидная последовательность, определенная в настоящем описании, может содержать некоторые ошибки. Нуклеотидные последовательности, определенные при помощи автоматов, обычно являются по меньшей мере на примерно 90% идентичными, более обычно по меньшей мере от примерно 95% до по меньшей мере примерно 99,9% идентичными реальной нуклеотидной последовательности молекулы секвенированной ДНК. Реальная последовательность может быть более точно определена при помощи других способов, включающих в себя способы секвенирования ДНК вручную, хорошо известные в данной области техники. Как известно в данной области техники, единичная вставка или делеция в определенной нуклеотидной последовательности по сравнению с реальной последовательностью может вызвать сдвиг рамки при трансляции нуклеотидной последовательности таким образом, что предсказанная аминокислотная последовательность, кодированная определенной нуклеотидной последовательностью, может полностью отличаться от аминокислотной последовательности, действительно кодируемой молекулой секвенированной ДНК, начиная с точки такой вставки или делеции.

Специалист в данной области техники способен идентифицировать такие ошибочно идентифицированные основания и знает, как откорректировать такие ошибки.

Фрагменты нуклеиновых кислот, зонды и праймеры

Молекула нуклеиновой кислоты согласно настоящему изобретению может содержать только часть или фрагмент последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из 8ЕО ΙΌ N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38, например фрагмент, который может быть использован в качестве зонда или праймера, или фрагмент, кодирующий часть белка, согласно настоящему изобретению. Нуклеотидная последовательность, определенная из клонирования гена липолитического фермента и кДНК, позволяет создавать зонды и праймеры, разработанные для использования при идентификации и/или клонировании других членов семейства липолитических ферментов, а также гомологов липолитического фермента из других видов. Зонд/праймер обычно содержит по существу очищенный олигонуклеотид, который обычно содержит область нуклеотидной последовательности, которая гибридизуется предпочтительно в условиях высокой жесткости до, по меньшей мере, примерно 12 или 15, предпочтительно примерно 18 или 20, предпочтительно примерно 22 или 25, более предпочтительно примерно 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65 или 75, или более следующих друг за другом нуклеотидов нуклеиновой последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕО ΙΌ N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 или их функциональных эквивалентов.

Зонды, основанные на нуклеотидных последовательностях, предоставленных в настоящем описании, могут быть использованы для обнаружения транскриптов или геномных последовательностей, кодирующих одни и те же или гомологичные белки, например, в других организмах. В предпочтительных вариантах осуществления зонд дополнительно содержит группу-метку, прикрепленную к нему, например, группа-метка может быть радиоизотопом, флуоресцентным соединением, ферментом или кофактором фермента. Такие зонды также могут быть использованы в качестве части набора диагностического теста для идентификации клеток, которые экспрессируют липолитический ферментативный белок.

Идентичность и гомология

Термины гомология или процент идентичности в настоящем описании используются взаимозаменяемо. Для цели настоящего изобретения в настоящем описании определено, что для определения процента идентичности двух аминокислотных последовательностей или двух последовательностей нуклеиновых кислот, последовательности совмещают с целью оптимального сравнения (например, могут быть введены пробелы в последовательность первой аминокислоты или последовательность нуклеиновой кислоты для оптимального совмещения со второй последовательностью амино- или нуклеиновой кислоты). Затем сравнивают остатки аминокислоты или нуклеотиды в соответствующих позициях аминокислоты или позициях нуклеотидов. Если позиция в первой последовательности занята таким же остатком аминокислоты или нуклеотида, как соответствующая позиция второй последовательности, то мо

- 7 008007 лекулы являются идентичными в этой позиции. Процент идентичности между двумя последовательностями является функцией количества идентичных позиций, присутствующих в двух последовательностях (т.е. % идентичности=количество идентичных позиций/общее количество позиций (т.е. перекрывающихся позиций) х100). Предпочтительно, две последовательности имеют одинаковую длину.

Специалисту в данной области техники известен факт, что некоторые различные компьютерные программы являются пригодными для определения гомологии между двумя последовательностями. Например, сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями может сопровождаться использованием математического алгоритма. В предпочтительном варианте осуществления процент идентичности между двумя аминокислотными последовательностями определяют, используя алгоритм №еб1етап апб ХУипксй (1. Μοί. ΒίοΙ. (48): 444-453 (1970)), который встроен в программу САР в пакете программного обеспечения ССС (доступного на 1Шр://\\л\л\7дсд.со1п). используя либо матрикс В1о8§от 62, либо матрикс РАМ250, и вес пробела 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4 и вес длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Специалисту в данной области техники очевидно, что все указанные различные параметры могут приводить к незначительно различающимся результатам, но что общий процент идентичности двух последовательностей значимо не изменяется при использовании разных алгоритмов.

В другом варианте осуществления процент идентичности между двумя нуклеотидными последовательностями определяют с использованием САР программы в пакете программного обеспечения ССС (доступного на 1Шр://\\л\л\7дсд.со1п) , используя матрикс Ы^8дарбпа.СМР и вес пробела 40, 50, 60, 70 или 80 и вес длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В другом варианте осуществления процент идентичности двух аминокислотных последовательностей или последовательностей нуклеотидов определяют с использованием алгоритма Е. Меуега апб ХУ.МШег (САВЮ8, 4: 11-17 (1989)), который встроен в АЫСЫ программу (версия 2,0) (доступный на: Ьбр://уедаддб.спгк.1г/Ь1п/а11дп-диекк.сд1), используя таблицу весов остатков РАМ120, штраф длины пробела 12 и штраф пробела 4.

Последовательности нуклеиновых кислот и белков настоящего изобретения дополнительно могут быть использованы в качестве последовательности-запроса для выполнения поиска в общедоступных базах данных, например, для идентификации других членов семейства или родственных последовательностей. Такие типы поиска могут быть выполнены с использованием программ Β6Α8ΤΝ и ВЬА8ТХ (версия 2,0) АбксЬи1 и др. (1990) I. Μοί. Βίοί. 215: 403-10. ВЬА8Т поиски нуклеотидов могут быть выполнены программой ΒΕ-Λ8ΤΝ, объем=100, длина слова=12 для получения нуклеотидных последовательностей, гомологичных молекулам РЬР03 нуклеиновых кислот настоящего изобретения. ВЬА8Т поиски белков могут быть выполнены ВЬА8ТХ программой, объем=50, длина слова=3 для получения аминокислотных последовательностей, гомологичных белковым молекулам РЬР03 настоящего изобретения. Для получения совмещений, содержащих пробелы, с целью сравнения, может быть использована Сарреб ВЬА8Т, описанная АЙксби1 и др. (1997) №с1ею АДбк Век. 25(17):3389-3402. При использовании программ ВЬА8Т и Сарреб ВЬА8Т могут быть применены параметры по умолчанию соответствующих программ (например, Β^Λ8ΤN и ВЬА8ТХ). См. Ьбр://^^^.ηсЬ^.η^т.η^Ь.дον.

Гибридизация

Как используется в настоящем описании, термин гибридизация предназначен для описания условий гибридизации и промывки, при которых нуклеотидные последовательности по меньшей мере примерно на 50%, по меньшей мере примерно на 60%, по меньшей мере примерно на 70%, более предпочтительно по меньшей мере примерно на 80%, даже более предпочтительно по меньшей мере примерно от 85 до 90%, более предпочтительно по меньшей мере на 95% гомологичные друг другу обычно остаются гибридизованными друг с другом.

Предпочтительным, не ограничивающим примером таких условий гибридизации является гибридизация в 6х растворе хлорида натрия/цитрата натрия (88С) при примерно 45°С, с последующей одной или двумя промывками в 1-кратном 88С, 0,1% 8Ό8 при 50°С, предпочтительно при 55°С, предпочтительно при 60°С, даже более предпочтительно при 65°С.

Условия высокой жесткости включают в себя, например, гибридизацию при 68°С в 5-кратном 88С/5-кратном растворе Денхарда/1,0% 8Ό8 и промывкой в 0,2-кратном 88С/0,1% 8Ό8 при комнатной температуре. В качестве альтернативы промывка может быть выполнена при 42°С.

Специалисту в данной области техники известно, какие условия применяются в жестких и условиях высокой жесткости гибридизации. Дополнительным руководством относительно таких условий является легко доступное в данной области техники, например, в ЗатЬгсюк и др., 1989, ΜοΕαιΕίΓ Οοηίη§, А ΕηόοгаЮгу Мапиа1, Со1б 8рппд ΗπιΓογ Ргекк, Ν.Υ.; и АикиЬе1 и др. (ебк.), 1995, Ситтеп! Р^οΐοсο1κ ίη ΜοΕαιΕίΓ ВюЕду, (.^кп \УПеу & δο^, Ν.Υ.).

Конечно, полинуклеотид, который гибридизуется только с поли(А) последовательностью (такой как 3' терминальный поли(А) участок мРНК), или с комплементарным фрагментом Т (И) остатков, не может быть включен в полинуклеотид настоящего изобретения, используемый для специфической гибридизации с частью нуклеиновой кислоты настоящего изобретения, поскольку такой нуклеотид будет гибридизоваться с любой молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей фрагмент поли(А) или комплементарный ему (например, практически любой клон двухцепочечной ДНК).

- 8 008007

Получение ДНК полной длины из других организмов

В обычном подходе кДНК библиотеки конструируют из других организмов, например, мицельных грибов, в частности может быть проведен скрининг из видов АкрегдШик.

Например, штаммы АкретдШик могут быть скринированы для гомологичных полинуклеотидов Нозерн-блот анализом. При обнаружении транскриптов, гомологичных полинуклеотидам согласно настоящему изобретению, кДНК библиотеки могут быть сконструированы из РНК, выделенной из подходящего штамма с использованием стандартных техник, хорошо известных специалистам в данной области техники. В качестве альтернативы может быть скринирована полная библиотека геномной ДНК с использованием зонда, гибридизуемого с полинуклеотидом согласно настоящему изобретению.

Гомологичные последовательности генов могут быть выделены, например, путем выполнения ПЦР с использованием двух пулов праймеров вырожденных олигонуклеотидов, разработанных на основе нуклеотидных последовательностей в качестве примера настоящего описания.

Матрицей для реакции может быть кДНК, полученная при помощи обратной транскрипции мРНК, приготовленной из штаммов известных или предполагаемых как экспрессирующие полинуклеотид согласно настоящему изобретению. Продукт ПЦР может быть субклонирован и секвенирован для гарантии, что амплифицированные последовательности представляют собой последовательности новой РЬР03 последовательности нуклеиновой кислоты или ее функциональный эквивалент.

Затем может быть использован ПЦР фрагмент для выделения кДНК клона полной длины при помощи множества известных способов. Например, амплифицированный фрагмент может быть помечен и использован для скрининга бактериофага или космидной кДНК библиотеки. В качестве альтернативы, может быть использован меченый фрагмент для скрининга геномной библиотеки.

Технология ПЦР может быть использована для выделения последовательностей кДНК полной длины из других организмов. Например, РНК может быть выделена следующими ниже стандартными процедурами из подходящего клеточного или тканевого источника. Реакция обратной транскрипции может быть выполнена на РНК с использованием олигонуклеотидного праймера, специфичного для наибольшего 5' конца амплифицированного фрагмента для праймирования первого стандартного синтеза.

Полученный в результате гибрид РНК/ДНК затем может быть терминирован (например, гуанинами) с использованием стандартной реакции терминальной трансферазы, гибрид может быть расщеплен РНКазой Н, и затем может быть праймирован вторым стандартным синтезом (например, поли-С праймером). Таким образом, последовательности кДНК выше амплифицированного фрагмента могут быть легко выделены. Для обзора пригодных стратегий клонирования см., например, 8ашЬтоок и др., указаного выше; и Лн5нЬе1 и др., указанного выше.

Векторы

Другой аспект настоящего изобретения имеет отношение к векторам, предпочтительно векторам экспрессии, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую белок согласно настоящему изобретению или его функциональный эквивалент. Как используется в настоящем описании, термин вектор относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной транспортировать другую нуклеиновую кислоту, к которой она присоединена. Один тип вектора является плазмидой, которая относится к петле кольцевой двухцепочечной ДНК, в которую могут быть вшиты дополнительные ДНК сегменты. Другой тип вектора является вирусным вектором, в котором дополнительные сегменты ДНК могут быть вшиты в вирусный геном. Некоторые векторы способны автономно реплицироваться в клетке хозяина, в которую они введены (например, бактериальные векторы, имеющие бактериальный источник репликации и эписомальные векторы млекопитающих). Другие векторы (например, неэписомальные векторы млекопитающих) интегрируют в геном клетки хозяина при введении в клетку хозяина, и таким образом, реплицируют в направлении генома хозяина. Более того, некоторые векторы способны к направленной экспрессии генов, к которым они оперативно присоединены. Такие векторы относятся в настоящем описании к векторам экспрессии. В общем случае, векторы экспрессии, полезные в рекомбинантных техниках ДНК, часто находятся в виде плазмид. Термины плазмида и вектор могут быть использованы взаимозаменяемо в настоящем описании, поскольку плазмида является наиболее обычно используемой формой вектора. Однако настоящее изобретение включает в себя другие формы векторов экспрессии, такие как вирусные векторы (например, ретровирусы с поврежденной репликацией, аденовирусы и аденоассоциированные вирусы), которые служат эквивалентным функциям.

Рекомбинантные векторы экспрессии настоящего изобретения содержат нуклеиновую кислоту настоящего изобретения в форме, подходящей для экспрессии нуклеиновой кислоты в клетке хозяина, что означает, что рекомбинантный вектор экспрессии включает в себя одну или несколько регуляторных последовательностей, выбранных из оснований клеток хозяина, предназначенных для экспрессии, которые оперативно связываются с нуклеиновой последовательностью, предназначенной для экспрессии. В пределах рекомбинантного вектора экспрессии эффективно связанный предназначен для обозначения, что интересующая нуклеотидная последовательность связана с регуляторной последовательностью(последовательностями) способом, который позволяет экспрессию нуклеотидной последовательности (например, в ίη νίίτο системе транскрипции/трансляции или в клетке хозяина, если вектор введен в клетку хозяина). Термин регуляторная последовательность включает в себя промоторы, энхансеры и

- 9 008007 другие элементы управления экспрессией (например, сигнал полиаденилирования). Такие регуляторные последовательности описаны, например, в Соеббе1; Сепе Ехргекк1оп ТесЬпокду: МеШобк ίη Епхутокду 185, Асабетк Ргекк, 8аи О|едо. СА (1990). Регуляторные последовательности включают в себя такие, которые управляют конститутивной или индуцируемой экспрессией нуклеотидной последовательности во многих типах клеток хозяина, и такими, которые управляют экспрессией нуклеотидной последовательности только в некоторых клетках хозяина (например, тканеспецифические регуляторные последовательности).

Специалистам в данной области техники будет очевидно, что разработка вектора экспрессии может зависеть от таких факторов, как выбор клетки хозяина, предназначенной для трансформации, уровня экспрессии желаемого белка и т.п. Векторы экспрессии настоящего изобретения могут быть введены в клетку хозяина, таким образом, для продуцирования белков или пептидов, кодируемых нуклеиновыми кислотами, как изложено в настоящем описании (например, липолитических ферментов, мутированных липолитических ферментов, их фрагментов, вариантов или их функциональных эквивалентов, слитых белков и т.п.).

Рекомбинантные векторы экспрессии настоящего изобретения могут быть разработаны для экспрессии липолитических ферментов в прокариотических или эукариотических клетках. Например, белок согласно настоящему изобретению может быть экспрессирован в бактериальных клетках, таких как Е. сой и ВасШик крескк, клетках насекомых (с использованием векторов экспрессии бакуловируса), дрожжевых клетках или клетках млекопитающих. Соответствующие клетки хозяина дополнительно обсуждены в Соеббе1, Сепе Ехргекккп Тес1по1оду: Мебюбк ίη Епхуто1оду 185, Асабетк Ргекк, 8ап Экдо, СА (1990). В качестве альтернативы рекомбинантный вектор экспрессии может быть транскрибирован и транслирован ίη νίϋΌ, например, с использованием Т7 регуляторных последовательностей промотора и Т7 полимеразы.

Векторы экспрессии, пригодные в настоящем изобретении, включают хромосомные, эписомные и вирусные векторы, например, векторы, полученные из бактериальных плазмид, бактериофага, эписомы дрожжей, хромосомных элементов дрожжей, вирусов, таких как бакуловирусы, паповавирусы, вирусы коровьей оспы, аденовирусы, вирусы оспы птиц, вирусы псевдобешенства и ретровирусы, и векторы, полученные из их комбинаций, таких как полученные из плазмиды и генетических элементов бактериофага, таких как космиды и фагемиды.

Вставка ДНК должна быть оперативно связана с подходящим промотором, таким как РЬ промотор лямбда фага, 1ас Е.сой, промоторы 1гр и 1ас, 8У40 ранний и поздний промоторы и промоторы ЬТК ретровируса, что приведено в качестве некоторых примеров. Специалисту в данной области техники хорошо известны другие подходящие промоторы. В определенном варианте осуществления промоторы предпочтительно являются такими, которые способны управлять высоким уровнем экспрессии липолитических ферментов в мицельных грибах. Такие промоторы известны в данной области техники. Конструкции экспрессии могут содержать сайты инициации транскрипции, терминации, а в транскрибируемых областях - сайт связывания с рибосомой для трансляции. Часть кодирования зрелых транскриптов, экспрессируемых при помощи конструкции, включает в себя АИС, инициирующий трансляцию, в начале и кодон терминации, расположенный соответственно в конце полипептида, предназначенного для трансляции.

Вектор ДНК может быть введен в прокариотические или эукариотические клетки посредством обычных техник трансформации или трансфекции. Как использовано в настоящем описании, термины трансформация и трансфекция предназначены для обозначения различных техник, известных в данной области техники, для введения чужой нуклеиновой кислоты (например, ДНК) в клетку хозяина, включающую в себя преципитацию фосфатом кальция или хлоридом кальция, ЭЕАЕ-декстранопосредованную трансфекцию, трансдукцию, инфекцию, липофекцию, трансфекцию с катионными липидами, или электропорацию. Подходящие способы для трансформации или трансфекции клеток хозяина могут быть найдены в 8атЬгоок и др. (Мо1еси1аг С1ошпд: А ЬаЬогаГогу Мапиа1, 2^пб, еб. Со1б 8рппд НагЬог ЬаЬогакгу, Со1б 8ргшд НагЬог ЬаЬогакгу Ргекк, Со1б 8рппд НагЬог, ΝΥ, 1989), ΟπνΕ и др., Вакк Мебюбк ίη Мо1еси1аг Вю1оду (1986) и в других лабораторных руководствах.

Для стабильной трансфекции клеток млекопитающих известно, что в зависимости от используемых вектора экспрессии и техники трансфекции, только небольшая фракция клеток может интегрировать чужую ДНК в свой геном. Для идентификации и отбора таких интегрантов, обычно в клетки хозяина вместе с интересующим геном вводят ген, кодирующий селектируемый маркер (например, устойчивый к антибиотикам). Предпочтительные селектируемые маркеры включают такие, которые предоставляют устойчивость к лекарственным веществам, таким как С418, гигромицин и метатриксат. Нуклеиновую кислоту, кодирующую селектируемый маркер, предпочтительно вводят в клетку хозяина на тот же самый вектор, который кодирует белок согласно настоящему изобретению или могут ввести на отдельный вектор. Клетки, стабильно трансфецируемые введенной нуклеиновой кислотой, могут быть идентифицированы при помощи отбора лекарственным препаратом (например, клетки, которые имеют встроенный ген селектируемого маркера, будут выживать, в то время как другие клетки вымрут).

Экспрессию белков в прокариотах часто осуществляют в векторах Е. сой, содержащих конститутивные или индуцируемые промоторы, управляющие экспрессией либо слитых, либо неслитых белков.

- 10 008007

Слитые векторы добавляют некоторое количество аминокислот в белок, кодируемый ими, например, к амино концу рекомбинантного белка. Такие слитые векторы обычно служат для трех целей: 1) для увеличения экспрессии рекомбинантного белка; 2) для увеличения растворимости рекомбинантного белка; и 3) с целью очистки рекомбинантного белка путем воздействия в качестве лиганда при аффинной очистке. Часто, в слитых векторах экспрессии сайт протеолитического расщепления вводят в место соединения слитой группы и рекомбинантного белка для возможного отделения рекомбинантного белка от слитой группы после очистки слитого белка. Такие ферменты, и их родственные узнаваемые последовательности, включают в себя фактор Ха, тромбин и энтерокиназу.

Как указано, векторы экспрессии предпочтительно могут содержать селектируемые маркеры. Такие маркеры включают дигидрофолат редуктазу или устойчивость к неомицину для культуры эукариотических клеток и устойчивость к тетрацилину или ампициллину для культивирования в Е. сой и других бактериях. Представленные примеры подходящих хозяев включают в себя бактериальные клетки, такие как Е. сой, 8!гер!отусек и 8а1топе11а !урй1тигшт; клетки грибов, таких как дрожжи; клетки насекомых, таких как Эгокорййа 82 и 8робор!ега 8Г9; клетки животных, такие как СНО, С08 и меланомы Вотек; и клетки растений. Подходящие культуральные среды и условия для выше описанных клеток хозяина известны специалистам в данной области техники.

Среди векторов предпочтительными для использования в бактериях являются рЦЕ70, рЦЕ60 и РОЕ-9, доступные от Ц1адеп; рВ8 векторы, Рйадекспр! векторы, В1иекспр! векторы, рNΗ8А, рNΗ16А, рNΗ18А, рNΗ46А, доступные от 8!га!адепе; и р!гс99а рКК223-3, рКК233-3, рЭЯ540, рЯГГ5, доступные от РНагтааа. Среди предпочтительных эукариотических векторов - Р\\'ЪКР0 р8У2САТ р0044 р2Т1 и р8О, доступные от 8!га!адепе; и р8УК3, рВРУ, рМ8О и р8УЪ, доступные от Рйагташа. Другие подходящие векторы могут быть легко очевидными для специалистов в данной области техники.

Известные бактериальные промоторы для использования в настоящем изобретения включают в себя 1ас1 и 1ас2 промоторы Е.сой, Т3 и Т7 промоторы, др! промотор, лямбда РЯ, РЬ промоторы и !рг промотор, промотор тимидин киназы Η8ν, 8У40 ранние и поздние промоторы, ЬТЯ промоторы ретровируса, такого как вируса саркомы Рауса ('Έ8ν), промоторы металлотионина, такие как промотор металлотионина-Ι мыши.

Вставка энхансерной последовательности в вектор может увеличить транскрипцию ДНК, кодирующую полипептиды настоящего изобретения у высших эукариот. Энхансеры являются цисдействующими элементами ДНК, обычно примерно от 10 до 300 п.н., которые действуют для увеличения транскрипционной активности промотора в данном типе клетки хозяина. Примеры энхансеров включают 8ν40 энхансер, который расположен на дальней по отношению к началу репликации стороне на от п. н. 100 до 270, энхансер раннего промотора цитомегаловируса, энхансер полиомы на дальней по отношению к началу репликации стороне и энхансеры аденовирусов.

Для секреции транслированного белка в просвет эндоплазматического ретикулума, в пространство периплазмы или в окружающую среду вне клетки, в эспрессируемый полипептид может быть вставлен подходящий сигнал секреции. Сигналы могут быть эндогенными для полипептида или они могут быть гетерологичными сигналами.

Полипептид может быть экспрессирован в модифицированном виде, таком как слитый белок, и может включать в себя не только сигналы секреции, а также дополнительные гетерологичные функциональные области. Таким образом, например, область дополнительных аминокислот, частично измененных аминокислот, может быть добавлена к Ν-концу полипептида для улучшения стабильности и персистенции в клетке хозяина, во время очистки или во время последующей обработки и хранения. Также для облегчения очистки к полипептиду могут быть добавлены пептидные группы.

Полипептиды согласно настоящему изобретению

Настоящее изобретение представляет выделенные полипептиды, имеющие аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8ЕО ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, аминокислотную последовательность, получаемую путем экспрессии полинуклеотида, выбранного из группы, состоящей из 8ЕО ΙΌ N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 34, 35, 37 и 38 в подходящем хозяине. Также пептид или полипептид, содержащий функциональный эквивалент выше указанных полипептидо, включен в настоящее изобретение. Выше указанные полипептиды совместно включены в термин полипептиды согласно настоящему изобретению.

Термины пептид и олигопептид считаются синонимами (что является общепризнанным) и каждый термин может быть использован взаимозаменяемо, как требуется по контексту, для указания цепи, по меньшей мере, из двух аминокислот, связанных пептидными связями. Слово полипептид используется в настоящем описании для цепей, содержащих более семи аминокислотных остатков. Все формулы или последовательности олигопептидов и пептидов в настоящем описании написаны слева направо и в направлении от аминоконца к карбоксильному концу. Однобуквенный код аминокислот, используемый в настоящем описании, обычно известен специалистам в данной области техники и может быть найден в 8атЬгоок и др. (Мо1еси1аг С1ошпд: А ЬаЬога!огу Мапиа1, 2^пб, еб. Со1б 8ргшд НагЬог ЬаЬога!огу, Со1б 8ргшд НагЬог ЬаЬога!огу Ргекк, Со1б 8ргшд НагЬог, NΥ, 1989).

Под выделенным полипептидом или белком подразумевается полипептид или белок, удаленный

- 11 008007 из его естественного окружения. Например, рекомбинантно продуцируемые полипептиды и белки, экспрессируемые в клетках хозяина, считаются выделенными для цели настоящего изобретения, поскольку являются природными или рекомбинантными полипептидами, которые были по существу очищены любым подходящим способом, таким как, например, способ одноэтапной очистки, описанный в διηίΐΐι и 1ойп8оп, Сепе 67:31-40 (1988) .

Липолитический фермент согласно настоящему изобретению может быть восстановлен и очищен из рекомбинантных клеточных культур при помощи хорошо известных способов, включающих в себя преципитацию сульфатом аммония или спиртом, экстракцию кислотой, анион- или катион-обменную хроматографию, хроматографию на фосфоцеллюлозе, хроматографию гидрофобных взаимодействий, афинную хроматографию, хроматографию с гидроксиапатитом и хроматографию на лектине. Наиболее предпочтительно для очистки используют метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Полипептиды настоящего изобретения включают очищенные естественным путем продукты, продукты способов химического синтеза и продукты, полученные рекомбинантными техниками от прокариотического или эукариотического хозяина, включающего, например, бактериальные дрожжевые клетки, клетки высших растений, насекомых и млекопитающих. В зависимости от используемого хозяина в способе получения рекомбинанта полипептиды настоящего изобретения могут быть гликозилированными или могут быть негликозилированными. Дополнительно, полипептиды настоящего изобретения могут также включать исходно модифицированный остаток метионина, в некоторых случаях, как результат процессов опосредованных хозяином.

Липолитический фермент согласно настоящему изобретению может быть преимущественно использован в хлебопекарных процессах. Количество фермента, которое должно быть добавлено в тесто, определяют эмпирически. Это может зависеть от качества используемой муки, степени улучшения, которая требуется, вида хлеба или печеных изделий, способа приготовления теста, пропорции других ингредиентов и т. д.

Фрагменты белков

Отличительными особенностями настоящего изобретения являются биологически активные фрагменты полипептидов согласно настоящему изобретению.

Биологически активные фрагменты полипептида согласно настоящему изобретению включают полипептиды, содержащие аминокислотные последовательности, в достаточной степени идентичные или полученные из аминокислотной последовательности липолитического фермента (например, аминокислотная последовательность, выбранная из группы, состоящей из 8ЕО ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39), которая включает в себя меньше аминокислот, чем белок полной длины, и проявляет по меньшей мере одну биологическую активность соответствующего белка полной длины. Обычно биологически активные фрагменты содержат домен или основу по меньшей мере одной с активностью соответствующего белка полной длины.

Биологически активный фрагмент белка согласно настоящему изобретению может быть полипептидом, который, например, представляет собой в длину 10, 25, 50, 100 или более аминокислот. Более того, другие биологически активные части, в которых удалены другие области белка, могут быть приготовлены при помощи рекомбинантных техник и оценены для одной или более биологических активностей природной формы полипептида настоящего изобретения.

Отличительными особенностями настоящего изобретения также являются фрагменты нуклеиновых кислот, которые кодируют выше описанные биологически активные фрагменты липолетического ферментативного белка.

Слитые белки

Белки настоящего изобретения или их функциональные эквиваленты, например, их биологически активные части, могут быть эффективно присоединены к нелиполитическому ферментативному полипептиду (например, гетерологичные аминокислотные последовательности) для образования слитых белков. Как используется в настоящем описании, химерный белок или слитый белок липолитического фермента содержит липолитический ферментативный белок, оперативно связанный с нелиполитическим ферментативным белком. Липолитический ферментативный полипептид относится к полипептиду, имеющему аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8ЕО ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, тогда как нелиполитический ферментативный полипептид относится к полипептиду, имеющему аминокислотную последовательность, соответствующую белку, который не является по существу гомологичным липолитическому ферменту, например, белку, который отличается от липолитического фермента и который получен из того же самого или другого организма. В липолитическом ферментативном слитом белке липолитический ферментативный полипептид может соответствовать всему или части липолитического ферментативного белка. В предпочтительном варианте осуществления липолитический ферментативный слитый белок содержит по меньшей мере один биологически активный фрагмент липолитического ферментативного белка. В другом предпочтительном варианте осуществления липолитический ферментативный слитый белок содержит по меньшей мере две биологически активные части липолитического ферментативного белка. В слитом белке термин эффек

- 12 008007 тивно связанный предназначен для обозначения того, что липолитический ферментативный полипептид и нелиполитический ферментативный полипептид соединены друг с другом с сохранением рамки считывания. Нелиполитический ферментативный полипептид может быть присоединен к Ν-концу или С-концу липолитического ферментативного полипептида.

Например, в одном из вариантов осуществления слитый белок является С8Т липолитическим ферментативным слитым белком, в котором липолитическая ферментативная последовательность присоединена к С-концу С8Т последовательности. Такие слитые белки могут облегчить очистку рекомбинантного липолитического фермента(ферментов). В другом варианте осуществления слитый белок является липолитическим ферментативным белком, содержащим гетерологичную сигнальную последовательность на Ν-конце. В некоторых клетках хозяина (например, клетках хозяина млекопитающих и дрожжей) экспрессия и/или секреция липолитического фермента может быть увеличена путем использования гетерологичной сигнальной последовательности.

В другом примере др67 секреторная последовательность белка оболочки бакуловируса может быть использована в качестве гетерологичной сигнальной последовательности (Ситгеи! Рто1оео18 ίη Мо1еси1аг Βίοίοβν. Ли8иЬе1 и др., 1о1ш \Убеу & 8оп5. 1992). Другие примеры гетерологичной сигнальной последовательности эукариот включают в себя секреторные последовательности мелиттина и плацентарной алкалин фосфатазы человека (81та1адепе; Ьа 1о11а, Калифорния). В еще одном примере пригодные гетерологичные сигнальные последовательности прокариот включают в себя р1юА секреторный сигнал (8ашЬтоок и др., указанный выше) и секреторный сигнал протеина А (Рйатшаша Вю1ес11; Р18са1а^ау, Νο\ν 1ет§еу).

Сигнальная последовательность может быть использована для облегчения секреции и выделения белка или полипептида настоящего изобретения. Сигнальная последовательность обычно характеризуется кором гидрофобных аминокислот, которые обычно отрезаются от белка во время секреции за одно или несколько отрезаний. Такие сигнальные пептиды содержат сайты процессинга, которые позволяют отрезать сигнальную последовательность от созревших белков, пока они проходят путь секреции. Сигнальная последовательность управляет секрецией белка, такого как из эукариотической клетки хозяина, в которую трансформируют вектор экспрессии, и сигнальная последовательность последовательно или одновременно отрезается. Затем белок может быть быстро очищен от внеклеточной среды при помощи известных в данной области техники способов. В качестве альтернативы, сигнальная последовательность может быть присоединена к интересующему белку с использованием последовательности, которая легко очищается, к такой как с С8Т доменом. Таким образом, например, последовательность, кодирующая полипептид, может быть слита с последовательностью маркера, такой как последовательность, кодирующая пептид, который облегчает очистку слитого полипептида. В некоторых вариантах осуществления такого аспекта настоящего изобретения последовательность маркера является пептидом гексагистидина, таким как 1ад, предоставляемый в рЦЕ векторе (Ц1адеп, 1пс), который является одним из многих, которые коммерчески доступны. Как описано в Сеп1х и др., Ргос. №И. Асаб. 8с1 И8А 86:821-824 (1989), например, гексагистидин предоставлен для обычной очистки слитого белка. Например, НА метка является другим пептидом, пригодным для очистки, который соответствует эпитопу полученного белка гриппа гемаглютинина, который описан ^йкоп и др., Се11 37:767 (1984).

Предпочтительно химерный или слитый белок настоящего изобретения получают при помощи стандартных ДНК-рекомбинантных техник. Например, ДНК фрагменты, кодирующие различные полипептидные последовательности, соединены вместе с сохранением рамки считывания согласно обычным техникам, например, путем использования тупых или выступающих концов для сшивки, расщепления рестриктазами для обеспечения подходящих концов, соответственно заполнения липких концов, обработки алкалин фосфатазой для исключения нежелательных соединений и ферментативной сшивки. В другом варианте осуществления слитый белок может быть синтезирован обычными способами, включающими в себя автоматизированные ДНК синтезаторы. В качестве альтернативы, ПЦР амплификация генных фрагментов может быть осуществлена с использованием праймеров якорей, которые повышают комплементарность выступов между двумя последовательными генными фрагментами, которые затем могут быть гибридизованы и снова амплифицированы для создания химерной генной последовательности (см., например, Сштеп! РтоФсок ίη Мо1еси1аг Вю1оду, еб§. Аи8иЬе1 и др. 1о1ш \Убеу & 8оп§: 1992). Более того, многие векторы экспрессии являются коммерчески доступными, которые уже кодируют слитые компоненты (например, С8Т полипептид). Липолитические нуклеиновые кислоты, кодирующие фермент, могут быть клонированы в такие векторы экспрессии из условия, чтобы слитый компонент являлся связанным с сохранением рамки считывания с липолитическим ферментативным белком.

Функциональные эквиваленты

Термины функциональные эквиваленты и функциональные варианты используются в настоящем описании взаимозаменяемо. Функциональные эквиваленты ДНК, кодирующей липолитический фермент, являются выделенными фрагментами ДНК, которые кодируют полипептид, проявляющий конкретную функцию липолитического фермента АхрегдШих шдет, как изложено в настоящем описании. Функциональный эквивалент липолитического ферментативного полипептида согласно настоящему изобретению является полипептидом, который проявляет по меньшей мере одну функцию липолитического фермента АкретщПик шдет, как изложено в настоящем описании. Следовательно, функциональные экви

- 13 008007 валенты также охватывают активные фрагменты.

Функциональные эквиваленты белка или полипептида могут содержать только консервативные замены одной или нескольких аминокислот в аминокислотных последовательностях, выбранных из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 или замен, вставок или делеций несущественных аминокислот. Следовательно, несущественная аминокислота является остатком, который может быть замещен в аминокислотных последовательностях, выбранных из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 без существенных изменений биологической функции. Например, считается, что аминокислотные остатки, которые сохранены среди липолитических ферментативных белков настоящего изобретения, являются особенно устойчивыми к изменениям. Помимо этого, аминокислоты, сохраненные среди липолитических ферментативных белков согласно настоящему изобретению и других липолитических ферментов, не являются легко подверженными изменению.

Термин защитная замена предназначен для обозначения такой замены, при которой аминокислотный остаток замещается аминокислотным остатком, имеющим такую же боковую цепь. Такие семейства известны в данной области техники и включают в себя аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин и гистидин), кислыми боковыми цепями (например, аспартановая кислота, глутаминовая кислота), боковыми цепями с неизмененной полярностью (например, глицин, аспарагины, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-ответвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).

Функциональные эквиваленты нуклеиновых кислот обычно могут содержать молчащие мутации или мутации, которые не изменяют биологическую функцию кодируемого полипептида. Следовательно, настоящее изобретение предоставляет молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие липолитические ферментативные белки, которые содержат изменения в аминокислотных остатках, которые не являются существенными для конкретной биологической активности. Такие липолитические ферментативные белки различаются в аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 все еще сохраняя по меньшей мере одну биологическую активность. В одном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, причем белок содержит по существу гомологичную аминокислотную последовательность по меньшей мере на 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39.

Например, руководство, относительно того, как создавать фенотипически молчащие аминокислотные замены, предоставлено в Всшае, ТИ. и др., 8с1епсе 247:1306-1310 (1990), в котором авторы указывают, что существует два основных подхода для изучения толерантности аминокислотной последовательности к изменению. Первый способ относится к процессу эволюции, в котором мутации являются либо допускаемыми, либо отбракованными естественным отбором. Второй подход использует генетическую инженерию для введения аминокислотных изменений в определенных позициях клонированного гена и отбирает или проводит скрининг для идентификации последовательностей, которые поддерживают функциональность. Как утверждают авторы, такие исследования установили, что белки являются удивительно толерантными аминокислотными веществами. Дополнительно авторы указали, какие изменения являются возможными, чтобы быть разрешенными в некоторых позициях белка. Например, для большинства внутренних аминокислотных остатков требуются неполярные боковые цепи, тогда как некоторые признаки поверхностных боковых цепей, как правило, сохраняются. Другие такие фенотипически молчащие замены описаны в Во\\зе и др., указанный выше, и ссылках упомянутых в настоящем описании.

Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая белок, гомологичный белку, выбранному из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39 может быть создана путем введения одной или более нуклеотидных замен, вставок или делеций в соответствующие кодирующие нуклеотидные последовательности (табл. 1) таким образом, что одну или несколько аминокислотных замен, делеций или вставок вводят в кодируемый белок. Такие мутации могут быть введены стандартными техниками, такими как сайт-направленный мутагенез и мутагенез при помощи ПЦР.

Термин функциональные эквиваленты также охватывает ортологи липолитических ферментов АкрегдШик шдег, предоставленных в настоящем описании. Ортологи липолитических ферментов АкрегдШик шдег являются белками, которые могут быть выделены из других штаммов или видов и обладают похожей или идентичной биологической активностью. Такие ортологи могут быть легко идентифицированы, как содержащие аминокислотную последовательность, которая по существу гомологична аминокислотным последовательностям, выбранным из группы, состоящей из 8ЕЦ ΙΌ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39.

Как определено в настоящем описании, термин по существу гомологичный относится к первой аминокислотной или нуклеотидной последовательности, которая содержит достаточное или минималь

- 14 008007 ное количество идентичных или эквивалентных (например, с такой же боковой цепью) аминокислот или нуклеотидов второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности таким образом, что первая и вторая аминокислотная или нуклеотидная последовательности имеют общий домен. Например, аминокислотные или нуклеотидные последовательности, которые содержат общий домен, имеющий примерно 60%, предпочтительно 65%, более предпочтительно 70, даже более предпочтительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичность или более, определены в настоящем описании как достаточно идентичные.

Также, нуклеиновые кислоты, кодирующие другие члены семейства липолитических ферментов, которые, таким образом, имеют нуклеотидную последовательность, отличающуюся от нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 находятся в объеме настоящего изобретения. Более того, нуклеиновые кислоты, кодирующие липолитические ферментативные белки из других видов, которые, таким образом, имеют нуклеотидную последовательность, которая отличается от нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 находятся в объеме настоящего изобретения.

Молекулы нуклеиновых кислот, соответствующие вариантам (например, природные аллельные варианты), и гомология полинуклеотидов настоящего изобретения могут быть выделены, основываясь на их гомологии с нуклеиновыми кислотами, раскрытыми в настоящем описании, с использованием кДНК, раскрытой в настоящем описании, или ее подходящего фрагмента, в качестве гибридизационного зонда согласно стандартным гибридизационным техникам предпочтительно в условиях высокой жесткости гибридизации.

Дополнительно к природным аллельным вариантам последовательностей АкрегдШик шдет, предоставленным в настоящем описании, специалистам в данной области техники будет очевидно, что изменения могут быть введены при помощи мутации в нуклеотидных последовательностях, выбранных из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38, таким образом, приводя к изменениям в аминокислотной последовательности липолитического ферментативного белка без существенных изменений функции этого белка.

В другом аспекте настоящего изобретения представляют улучшенные липолитические ферменты. Улучшенные липолитичекие ферменты являются белками, в которых по меньшей мере одна биологическая активность является улучшенной. Такие белки могут быть получены путем случайного введения мутаций во всей или части последовательности, кодирующей липолитический фермент, таким как мутагенез, и полученные в результате мутации могут быть рекомбинантно экспрессированы, и скринированы для биологической активности. Например, в существующем уровне техники имеются способы стандартного анализа для измерения ферментативной активности биологических ферментов и, таким образом, с легкостью могут быть выбраны улучшенные белки.

В предпочтительном варианте осуществления липолитический фермент имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39. В другом варианте осуществления липолитический фермент является по существу гомологичным аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, и сохраняет по меньшей мере одну биологическую активность полипептида, выбранного из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, еще отличается аминокислотной последовательностью вследствие естественного изменения или мутагенеза, как описано выше.

В дополнительном варианте осуществления липолитический фермент имеет аминокислотную последовательность, кодируемую при помощи выделенного фрагмента нуклеиновой кислоты, способного к гибридизации с нуклеиновой кислотой, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11, 13, 14, 16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38 предпочтительно при условиях высокой жесткости гибридизации.

Следовательно, липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере, примерно на 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, и сохраняет по меньшей мере одну функциональную активность полипептида, выбранного из группы, состоящей из 8ЕС ГО N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39.

Более конкретно, липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере, примерно на 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕС ГО N0: 3, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере, примерно на 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕС ГО N0: 6, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере, примерно на 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕС

- 15 008007

ΙΌ N0: 9, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 12, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 15, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 18, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 21, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 24, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 27, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 30, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 33, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 36, или липолитический фермент является белком, который содержит аминокислотную последовательность по меньшей мере примерно на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичную аминокислотной последовательности, показанной в 8ЕЦ ГО N0: 39.

Функциональные эквиваленты белка согласно настоящему изобретению также могут быть идентифицированы, например, при помощи комбинаторных библиотек скрининга мутантов, например мутантов процессинга, белка настоящего изобретения для активности липолитического фермента. В одном из вариантов настоящего изобретения создают смешанную библиотеку вариантов путем комбинаторного мутагенеза на уровне нуклеиновых кислот. Смешанная библиотека вариантов может быть получена, например, ферментативной сшивкой смеси синтетических олигонуклеотидов в последовательностях генов таким образом, что вырожденный набор потенциальных белковых последовательностей экспрессируют как отдельные полипептиды, или в качестве альтернативы, как набор больших слитых белков (например, для обнаружения фага). Существуют различные способы, которые могут быть использованы для получения библиотек потенциальных вариантов полипептидов настоящего изобретения из вырожденной олигонуклеотидной последовательности. Способы синтеза вырожденных олигонуклеотидов известны специалистам в данной области техники (см., например, №1гап§ (1983) Тейайебгои 39:3; Йакига и др. (1984) Апп. Неу. Вюсйега. 53:323; Йакига и др. (1984) 8с1еисе 198:1056; П<е и др. (1983) №.1с1е1с АсИ Нез. 11:477).

Дополнительно, библиотеки фрагментов кодирующих последовательностей полипептидов настоящего изобретения могут быть использованы для создания смешанной популяции полипептидов для скрининга последовательностей вариантов. Например, библиотека фрагментов кодирующих последовательностей может быть создана путем обработки двухнитевого ПЦР фрагмента интересующей кодирующей последовательности нуклеазой в условиях, при которых происходит однонитевой разрыв только примерно один раз на молекулу, денатурируя двухнитевую ДНК, ренатурируя ДНК для образования двунитевой ДНК, которая может включать в себя смысловые/антисмысловые пары из различных продуктов с однонитевым разрывом, удаляя однонитевые части из снова образованных дуплексов путем обработки 81 нуклеазой, и сшивая полученную в результате библиотеку фрагментов в вектор экспрессии. При помощи такого способа может быть получена библиотека экспрессии, которая кодирует №концевые и внутренние фрагменты разных размеров белка настоящего изобретения.

В данной области техники известны некоторые способы для скрининга генных продуктов комбинаторных библиотек, созданных при помощи точечных мутаций процессинга, и для скрининга кДНК библиотек для генных продуктов, имеющих выбранное свойство. Наиболее широко используемые способы, которые обеспечивают высокую производительность анализа, для скрининга больших генных библиотек обычно включают в себя клонирование генной библиотеки в реплицируемые векторы экспрессии, трансформацию подходящих клеток полученной в результате библиотекой векторов и экспрессию комбинаторных генов в условиях, при которых обнаружение желаемой активности облегчает выделение вектора, кодирующего ген, продукт которого был обнаружен. Мутагенез рекурентного множества (НЕМ), техника, которая усиливает частоту функциональных мутаций в библиотеках, может быть использован в сочетании с анализом скрининга для идентификации разновидностей белка настоящего изобретения

- 16 008007 (Аткт и Уоигуап (1992) Ргос. №11. Асаб. 8с1. И8А 89:7811-7815; Эе1дгауе и др. (1993) Рго1еш Бпдшеегтд 6(3):327-331).

Специалистам в данной области техники очевидно, что полиморфизм последовательности ДНК, который может приводить к изменениям в аминокислотной последовательности липолитического фермента, может существовать внутри данной популяции. Такой генетический полиморфизм может существовать в клетках из разных популяций или внутри популяции вследствие природного аллельного варианта. Аллельные варианты также могут включать функциональные эквиваленты.

Фрагменты полинуклеотидов согласно настоящему изобретению также могут содержать полинуклеотиды, не кодирующие функциональные полипептиды. Такие полинуклеотиды могут работать как зонды или праймеры для ПЦР реакции.

Нуклеиновые кислоты согласно настоящему изобретению безотносительно, кодируют ли они функциональные или нефункциональные полипептиды, могут быть использованы в качестве гибридизационных зондов или праймеров полимеразной цепной реакции (ПЦР). Применение молекул нуклеиновых кислот настоящего изобретения, которые не кодируют полипептиды, имеющие липолитическую ферментативную активность, включают, между прочим, (1) выделение гена, кодирующего липолитический ферментативный белок, или его аллельные варианты из библиотеки кДНК, например, из других организмов, а не из АкрегдШш шдег; (2) гибридизацию ίη Ши (например, ΕΙ8Η) для митофазных хромосомных препаратов для обеспечения точного хромосомного положения гена липолитического фермента, как описано в Уегта и др., Нитап Сйтотокотек: а Мапиа1 οί Ба51с Тес11пк.|ие5. Регдатоп Рге§8, Нью Йорк (1988); (3) Нозерн-блот анализ для обнаружения экспрессии мРНК липолитического фермента в определенных тканях и/или клетках и (4) зонды или праймеры, которые могут быть использованы в качестве диагностического инструмента для анализа наличия нуклеиновой последовательности, гибридизуемой с зондом липолитического фермента в данном биологическом (например, ткани) образце.

Также охваченным настоящим изобретением является способ получения функционального эквивалента гена или кДНК, кодирующих липолитический фермент. Такой способ определяет порядок получения меченного зонда, который включает в себя выделенную нуклеиновую кислоту, которая кодирует всю или часть последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, или их варианты; проведение скрининга библиотеки фрагментов нуклеиновой кислоты меченным зондом в условиях, которые позволяют гибридизацию настоящего зонда с фрагментами нуклеиновой кислоты в библиотеке, таким образом образуя дуплексы нуклеиновых кислот, и приготовление последовательности гена полной длины из фрагментов нуклеиновой кислоты в любом меченном дуплексе для получения гена, имеющего отношение к липолитическому ферменту.

В одном из вариантов настоящего изобретения нуклеиновая кислота настоящего изобретения является, по меньшей мере, на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичной последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из 8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 1, 2, 4, 5, 7, 8, 10, 11,13, 14,16, 17, 19, 20, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 31, 32, 34, 35, 37 и 38, или их дополнения.

В другом предпочтительном варианте настоящего изобретения полипептид настоящего изобретения является по меньшей мере на 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% или более гомологичным аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8ΕΟ ΙΌ ΝΟ: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39.

Клетки хозяина

Отличительной особенностью в другом варианте настоящего изобретения являются клетки, например, трансформированные клетки хозяина или рекомбинантные клетки хозяина, которые содержат нуклеиновые кислоты, охваченные настоящим изобретением. Трансформированная клетка или рекомбинантная клетка является клеткой, в которую (или в предшественника которой) введена, при помощи ДНК-рекомбинантных техник, нуклеиновая кислота настоящего изобретения. Включены как прокариотические, так и эукариотические клетки, например бактериальные, грибные, дрожжевые и т. п., особенно предпочтительными являются клетки из мицельных грибов, более конкретно АкрегдШик шдег.

Клетка хозяина может быть выбрана таким образом, чтобы модулировать экспрессию интересующих последовательностей, или модификации и процессы генного продукта в определенной, желаемой форме. Такие модификации (например, гликозилирование) и процессинг (например, разрезание) белковых продуктов можно облегчить оптимальным функционированием белка.

Различные клетки хозяина имеют характерные и определенные механизмы для посттрансляционного процессинга и модификации белков и генных продуктов. Подходящие клеточные линии или системы хозяина, хорошо знакомые специалистам в данной области молекулярной биологиии/или микробиологии, могут быть выбраны с гарантией желательной и правильной модификации и процессинга экспрессии чужеродного белка. С этой целью могут быть использованы эукариотические клетки хозяина, которые обладают клеточным механизмом подходящего процессинга первичной транскрипции, гликолизирования и фосфорилирования генного продукта. Такие клетки хозяина хорошо известны в данной области техники.

Клетки хозяина также включают, но не ограничивают, линии клеток млекопитающих, такие как СНО, ΥΕΡΌ, ΒΗΚ, НеЬа, ОД8, МОСК, 293, 3Т3, ^138 и линии клеток хориоидного сплетения.

- 17 008007

При желании полипептиды согласно настоящему изобретению могут быть продуцированы при помощи стабильно трансфецируемой клеточной линии. Некоторые векторы, подходящие для стабильной трансфекции клеток млекопитающих, являются доступными, способы для конструирования клеточных линий также являются хорошо известными, например в Ли8иЬе1 и др. (указанный выше).

Антитела

Дополнительной особенностью настоящего изобретения являются антитела, такие как моноклональные или поликлональные антитела, которые специфически связывают липолитические ферментативные белки согласно настоящему изобретению.

Как используется в настоящем описании, термин антитело (АЬ) или моноклональное антитело (МаЬ) включает в себя интактные молекулы, а также фрагменты антител (таких как, например, фрагменты ЕаЬ и Е(аЬ')₂), которые способны специфически связываться с липолитическим ферментативным белком. Фрагменты ЕаЬ и Е(аЬ')₂ не имеют Ес фрагмента интактного антитела, более быстро выводятся из кровообращения и могут иметь меньшее неспецифично-тканевое связывание интактного антитела (\Уа111 и др., 1. Ыис1. Мед., 24:316-325 (1983)). Таким образом, такие фрагменты являются предпочтительными.

Антитела настоящего изобретения могут быть приготовлены любым из множества способов. Например, клетки, экспрессирующие липолитический ферментативный белок или его антигенный фрагмент, могут быть введены в животное, чтобы вызвать продуцирование сыворотки, содержащей поликлональные антитела. В предпочтительном способе препарат липолитического ферментативного белка готовят и очищают, чтобы предоставить его по существу свободным от природных загрязнений. Такой препарат затем вводят в животное для продуцирования поликлональных антисывороток более высокой специфичной активности.

В наиболее предпочтительном способе антитела настоящего изобретения являются моноклональными антителами настоящего изобретения (или их фрагментами, связывающимися с липолитическим ферментативным белком). Такие моноклональные антитела могут быть приготовлены с использованием технологии гибридомы (КоЫег и др., Ыа1иге 256:495 (1975); КоЫег и др., Еиг. 1. 1ттипо1. 6: 511 (1976); Наттег1шд и др., в: Мопос1опа1 АпдЬоФек апд Т-Се11 НуЬпдотак, ЕЫеуег.НУ.. стр. 563-681 (1981)). В общем случае, такие процедуры включают в себя иммунизацию животного (предпочтительно мышь) антигеном липолитического ферментативного белка или клеткой, экспрессирующей липолитический ферментативный белок. Спленоциты таких мышей экстрагируют и сливают с подходящей клеточной линией миеломы. Может быть использована любая подходящая линия клеток миеломы согласно настоящему изобретению; однако предпочтительна для использования родительская линия клеток миеломы (8Р₂О), доступная из американской коллекции типов культур, ВоскуШе, Мэрилэнд. После слияния полученные в результате клетки гибридомы избирательно поддерживают в среде НАТ и затем клонируют путем предельного разбавления, как описано \Уапд5 и др. (6а81то-еп1его1оду 80: 225-232 (1981)). Клетки гибридомы, полученные путем такого отбора, затем анализируют для идентификации клонов, которые секретируют антитела, способные к связыванию антигена липолитического ферментативного белка. В общем случае, полипептиды могут быть соединены с белком носителем, таким как КЕН, как описано в Аи8иЬе1 и др., указанный выше, смешены с адъювантом и инъецированы в млекопитающее хозяина.

Более конкретно, различные животные хозяева могут быть иммунизированы путем инъекции интересующего полипептида. Примеры подходящих животных хозяев включают кроликов, мышей, морских свинок и крыс. Могут быть использованы различные адьюванты для увеличения иммунологического ответа, в зависимости от вида хозяина включающие в себя, без ограничений, адъювант Фрейнда (полный и неполный), адьювантные минеральные гели, такие как гидроксид алюминия, поверхностно-активные вещества, такие как лизолецитин, поверхностно-активные полиолы, полианионы, пептиды, масляные имульсии, гемоцианин лимфы улитки, динитрофенол, ВСС (бацилла Калметта-Герена) и СотупеЬас1етшт ратуит.

Поликлональные антитела являются гетерогенными популяциями молекул антител, полученных из сывороток иммунизированных животных.

Такие антитела могут быть любым классом иммуноглобулина, включая 1дС, 1дМ, 1дЕ, 1дА, 1дЭ и любым его подклассом. Гибридомы, продуцирующие тАЬ§ настоящего изобретения, могут быть культивированы 1п У11то или 1п У1Уо.

После продуцирования поликлональные или моноклональные антитела тестируют для специфического определения белка согласно настоящему изобретению или его функционального эквивалента иммуноанализом, таким как Вестерн-блот или анализ иммунопреципитации с использованием стандартных техник, например, как описано в Аи8иЬе1 и др., указанный выше. Антитела, которые специфически связываются с белком согласно настоящему изобретению или его функциональным эквивалентом, являются пригодными в настоящем изобретении. Например, такие антитела могут быть использованы в иммуноанализе для обнаружения белка согласно настоящему изобретению в патогенных или непатогенных штаммах АкретдШик (например, в АкретдШик ех1тас18).

Предпочтительно, антитела настоящего изобретения продуцируют, используя фрагменты белка согласно настоящему изобретению, который проявляет себя как антигенный, при помощи критерия, такого как высокая частота измененных остатков. Например, такие фрагменты могут быть созданы при помощи

- 18 008007 стандартных техник ПЦР и затем клонированы в рСЕХ вектор экспрессии (АикиЬе1 и др., указанный выше). Затем слитые белки могут быть экспрессированы в Е. сой и очищены с использованием матрикса сродства с глутатион агарозой, как описано в ЛикиЬе1 и др., указанный выше. При желании некоторые (например, два или три) слияния могут быть созданы для каждого белка, и каждое слияние может быть инъецировано по меньшей мере в двух крыс. Антисыворотка может быть увеличена путем серий инъекций, обычно включающих в себя по меньшей мере три бустер-инъекции. Обычно антисыворотки исследуют на их способность к иммунопреципитации белка согласно настоящему изобретению или его функциональных эквивалентов, тогда как неродственные белки могут быть полезными в качестве контроля на специфичность иммунной реакции.

В качестве альтернативы, техники, описанные для продуцирования одноцепочечных антител (патенты США 4946778 и 4704692), могут быть адаптированы для продуцирования одноцепочечных антител к белку согласно настоящему изобретению или его функциональных эквивалентов. Наборы для создания и скрининга библиотек обнаружения фага являются коммерчески доступными, например, от Рйатшае1а.

Дополнительно, примеры способов и реагентов, особенно пригодных для использования при создании и скрининге библиотеки обнаружения антител, могут быть найдены, например, в патенте США 5223409; заявке РСТ №092/18619; заявке РСТ №091/17271, заявке РСТ №020791; заявке РСТ №092/20791; заявке РСТ №092/15679; заявке РСТ №093/01288; заявке РСТ №092/01047; заявке РСТ №092/09690; заявке РСТ №090/02809; Еиейк и др. (1991) Вю/Теейпо1оду 9:370-1372; Нау и др. (1992) Нит. ЛпИЬоб. НуЬпботак 3:81-85; Нике и др. (1989) 8е1епее 246: 1275-1281; Οτίίϊϊΐκ и др. (1993) ЕМВ0 1. 12: 725-734.

Поликлональные и моноклональные антитела, которые специфично связываются с белком настоящего изобретения или его функциональными эквивалентами, например, могут быть использованы для обнаружения экспрессии гена, кодирующего белок согласно настоящему изобретению или его функциональные эквиваленты, например, в другом штамме АкретдШик. Например, белок согласно настоящему изобретению может быть быстро обнаружен при обычном иммуноанализе клеток АкретдШик или экстрактах. Примеры подходящего анализа включают в себя, без ограничений, Вестерн-блоттинг, ЕЙ18А, радиоиммунный анализ и т. п.

Под специфически связывает имеется в виду, что антитело узнает и связывает конкретный антиген, например, белок согласно настоящему изобретению, но не предназначен по существу для узнавания и связывания других неродственных молекул в образце.

Антитела могут быть очищены, например, при помощи способов аффинной хроматографии, в которых антиген полипептида иммобилизуют на смоле.

Антитело, направленное против полипептида настоящего изобретения (например, моноклональное антитело), может быть использовано для выделения полипептида стандартными техниками, такими как аффинная хроматография или иммунопреципитация. Помимо этого, такое антитело может быть использовано для обнаружения белка (например, в клеточном лизате или супернатанте клеток) для оценки большого количества и образца экспрессии полипептида. Антитела также могут быть использованы диагностически для контролирования уровней белка в клетках или ткани в качестве части процедуры клинического тестирования, например, для, к примеру, определения эффективности данного режима обработки или при диагностике АкретдШоДк.

Обнаружение может быть облегчено путем присоединения антитела к обнаружимому веществу. Примеры обнаружимых веществ включают в себя различные ферменты, простетические группы, флуоресцентные вещества, люминесцентные вещества, биолюминесцентные вещества и радиоактивные вещества. Примеры подходящих ферментов включают в себя пероксидазу хрена, алкалин фосфатазу, βгалактозидазу или ацетилхолинэстеразу; примеры подходящих флуоресцентных веществ включают в себя умбеллиферон, флуоресцеин, изотиоционат флуоресцеина, родамин, дихлортриазиниламин флуоресцеин, хлорид дансила или фикоэритрин; пример подходящего люминесцентного вещества включает в себя люминол; примеры подходящих биолюминесцентных веществ включают в себя луциферазу, луциферин и акворин, примеры подходящих радиоактивных веществ включают в себя ¹²⁵1, ¹³¹1, ³⁵8 или ³Н.

Предпочтительные эпитопы, охваченные антигенными пептидами, являются областями, которые размещены на поверхности белка, например, гидрофильные области. Точки гидрофобности белка настоящего изобретения могут быть использованы для идентификации гидрофильных областей.

Антигенный пептид белка настоящего изобретения содержит 7 (предпочтительно 10, 15, 20 или 30) следующих друг за другом аминокислотных остатков аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из 8Е0 Ш N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39, и охватывает эпитоп белка таким образом, что антитело против белка образовывало специфический иммунный комплекс с белком.

Предпочтительные эпитопы, охваченные антигенным белком, являются областями белка настоящего изобретения, которые расположены на поверхности белка, например, гидрофильные области, гидрофобные области, альфа области, бета области, кольцевые области, измененные области и гибкие области.

- 19 008007

Иммуноанализ

Качественное или количественное определение полипептида согласно настоящему изобретению в биологическом образце можно проводить с использованием любого хорошо известного в данной области техники способа. Техники, основанные на антителах, обеспечивают ряд преимуществ для анализа уровней определенного полипептида в биологическом образце.

В связи с этим, специфическое узнавание обеспечивают при помощи первичного антитела (поликлонального или моноклонального), но система вторичного обнаружения может использовать флуоресцентные, ферментативные или другие связанные вторичные антитела. В результате получают иммунокомплекс.

Следовательно, изобретение представляет способ для диагностирования, инфицирован ли определенный организм ЛкрегдШик, содержащий этапы, на которых выделяют биологический образец из упомянутого организма, подозреваемого в том, что он инфецирован ЛкрегдШш;

проводят реакцию упомянутого образца с антителом согласно настоящему изобретению; определяют, образовался ли иммунокомплекс.

Ткани также могут быть экстрагированы, например мочевиной и нейтральным детергентом, для выделения белка для Вестерн-блоттинга или дот/слот блотов. Такая техника также может быть применима для жидкостей тела.

Другие способы, основанные на антителах, пригодные для определения белка согласно настоящему изобретению, включают в себя иммуноанализ, такой как связанный с ферментом иммуносорбент (ЕЬ18Л) и радиоиммуноанализ (ИЛ). Например, моноклональные антитела к белку согласно настоящему изобретению могут быть использованы как в качестве иммуносорбента, так и в качестве зонда, меченного ферментом, для обнаружения и качественного определения белка согласно настоящему изобретению. Количество белка, присутствующего в образце, может быть вычислено по количеству, присутствующему в стандартном препарате, используя компьютерный алгоритм линейной регрессии. В другом анализе ЕЫ8Л могут быть использованы два вида разных специфических моноклональных антител для обнаружения в биологической жидкости белка согласно настоящему изобретению. В таком анализе одно из антител используют в качестве иммуно-абсорбента, а другое в качестве зонда, меченого ферментом.

Выше описанные техники могут быть проведены как одноэтапное или двухэтапное исследование. Одноэтапное исследование включает контактирование белка согласно настоящему изобретению с иммобилизованным антителом и, без промывки, контактирование смеси с меченым антителом. Двухэтапное исследование включает промывку перед контактированием смеси с меченым антителом. Другие обычные способы могут быть использованы, соответственно. Обычно желательно иммобилизовать один компонент системы анализа на подложке, таким образом, позволяя другим компонентам системы войти в контакт с компонентом и быть легко извлеченными из образца.

Подходящие ферментативные метки включают, например, метки из группы оксидаз, которые катализируют продуцирование перекиси водорода путем реакции с субстратом. Активность оксидазной метки может быть проанализирована путем измерения концентрации перекиси водорода, образованного реакцией антитело, меченное ферментом/субстрат.

По сравнению с ферментами, другие подходящие метки включают в себя радиоизотопы, такие как йод (¹²⁶Ι, ¹²⁵Ι), углерод (¹⁴С), серу (³⁵8), тритий (³Н), индий (¹¹²Ιη) и технеций (^99тТс) и флуоресцентные метки, такие как флуоресцин, родамин и биотин.

Специфическое связывание вещества теста с белком согласно настоящему изобретению может быть обнаружено, например, ίη νίίτο путем обратимой и необратимой иммобилизации белка согласно настоящему изобретению на субстрате, например, поверхности лунки 96-луночного микротитровального планшета из полистирола. Способы иммобилизации полипептидов и других небольших молекул хорошо известны в данной области техники. Например, микротитровальные планшеты могут быть покрыты белком согласно настоящему изобретению путем добавления белка в раствор (обычно, концентрацией от 0,05 до 1 мг/мл в объеме 1-100 мкл) в каждую лунку, и инкубирования планшетов при комнатной температуре до 37°С в течение от 0,1 до 36 ч. Белки, которые не связались с планшетом при комнатной температуре, могут быть удалены путем встряхивания избытка раствора из планшета, и затем промывкой планшета (один раз или неоднократно) водой или буфером. Обычно белок содержат в воде или буфере. Затем планшет промывают буфером, который не имеет связанного белка. Для блокирования на планшете свободных участков, связывающих белок, планшеты блокируют белком, который не является родственным связанному белку. Например, являются подходящими 300 мкл альбумина бычьей сыворотки (В8А) при концентрации 2 мг/мл в Трис-НС1. Подходящие субстраты включают такие субстраты, которые содержат определенные химические соединения с поперечными сшивками (например, пластиковые субстраты, такие как полистироловые, стироловые или полипропиленовые субстраты из Сотшпд СоЧаг Согр. (СашЬпбде. МА), например). При желании в качестве субстрата могут быть использованы частицы в виде шариков, например шарообразная агароза или шарообразная сефароза.

Связывание вещества теста с полипептидами согласно настоящему изобретению может быть обнаружено любым из множества способов, известных в данной области техники. Например, в иммуноанали

- 20 008007 зе может быть использовано специфическое антитело. При желании, антитело может быть меченым (например, флуоресцентно или радиоизотопом) и сразу обнаружено (см., например, \Уе51 и МсМакоп, 1. Се11 Βίο1. 74:264, 1977). В качестве альтернативы, для обнаружения может быть использовано второе антитело (например, меченое антитело, которое связывает Ес часть анти-А№97 антитела). При альтернативном способе обнаружения метят белок согласно настоящему изобретению, и обнаруживают метку (например, при помощи мечения белка согласно настоящему изобретению радиоизотопом, флуорофором, хромофором или т.п.). В еще одном способе белок согласно настоящему изобретению продуцируют как слитый белок с белком, который может быть визуально обнаружен, например, зеленым флуоресцентным белком (который может быть обнаружен под УФ светом). В альтернативном способе белок согласно настоящему изобретению может быть ковалентно связан с ферментом, имеющим обнаружимую ферментативную активность, или слит с ним, таким как пероксидаза хрена, алкалин фосфатаза, альфа-галактозидаза или глюкозооксидаза. Гены, кодирующие все эти ферменты, клонированы и легко доступны для использования специалистами в данной области техники. При желании, слитый белок может включать в себя антиген, и такой антиген может быть обнаружен и измерен поликлональным или моноклональным антителом, используя обычные способы. Подходящие антигены включают в себя ферменты (например, пероксидазу хрена, алкалин фосфатазу и альфа-галактозидазу) и неферментативные полипептиды (например, белки сыворотки, такие как В8А и глобины, и молочные белки, такие как казеины).

Эпитопы, антигены и иммуногены

В другом аспекте настоящее изобретение представляет пептид или полипептид, содержащий часть, несущую эпитоп, полипептида настоящего изобретения. Эпитоп такой части полипептида является иммуногенным или антигенным эпитопом полипептида настоящего изобретения. Иммуногенный эпитоп определен как часть белка, которая вызывает ответ антитела, если весь белок является иммуногеном. Предполагается, что такие иммуногенные эпитопы должны быть ограничены некоторыми локусами на молекуле. С другой стороны, область белковой молекулы, к которой может присоединиться антитело, определен как антигенный эпитоп. Количество иммуногенных эпитопов белка обычно меньше, чем количество антигенных эпитопов. См., например, Сеуъеп. Н.М. и др. Ргос. №111. Асаб. 8с1. США 81:39984002 (1984).

В отношении выбора пептидов или полипептидов, несущих антигенный эпитоп (т.е. такое содержание области молекулы белка, с которой может связаться антитело), специалистам в данной области техники хорошо известно, что относительно короткие синтетические пептиды, которые имитируют часть последовательности белка, способны обычным способом активировать антисыворотку, которая реагирует с частично имитированным белком. См., например, 8и1с11ГГе, 1.6. и др. 8с1епсе 219:660-666 (1984). Пептиды, способные активировать сыворотки, реагирующие с белком, зачастую представлены в первичной последовательности белка, могут быть охарактеризованы при помощи набора правил химических образцов, и не ограничены ни иммунодоминантными областями интактных белков (т.е. иммуногенными эпитопами), ни аминными или карбоксильными концами. Пептиды, которые являются чрезвычайно гидрофобными, и пептиды шести или менее остатков обычно являются неэффективными при индуцировании антител, которые связываются с имитированным белком; более длинные растворимые пептиды, особенно такие, которые содержат остатки пролина, обычно являются эффективными. 8н1с11ГГе и др., указанный выше, на 661. Например, 18 из 20 пептидов, разработанных согласно таким рекомендациям, содержащие 8-39 остатков, покрывающих 75% цепи полипептида гемагглютинина НА1 вируса гриппа, стимулировали антитела, которые прореагировали с НА1 белком или интактным вирусом; и 12/12 пептидов из МиЬУ полимеразы и 18/18 из гликопротеина вируса бешенства стимулировали антитела, которые преципитировали соответствующие белки.

Следовательно, пептиды и полипептиды, несущие антигенный эпитоп, настоящего изобретения пригодны для индуцирования антител, включающих в себя моноклональные антитела, которые связываются специфически с полипептидом настоящего изобретения. Таким образом, высокое соотношение гибридов, полученных слиянием клеток селезенки от донора, иммунизированного пептидом, несущим эпитоп антигена, как правило, секретируют антитело, реагирующее с природным белком. 8и1с11ГГе и др., указанный выше, на 663. Антитела, индуцированные пептидами, несущими антигенный эпитоп, или полипептиды являются пригодными для обнаружения имитированного белка, а антитела к различным пептидам могут быть использованы для отслеживания судьбы различных областей предшественника белка, который подвергнут процессингу после трансляции. Пептиды и антитела к пептидам могут быть использованы во множестве количественных или качественных исследований имитированного белка, например, в сравнительном анализе, так как показано, что даже короткие пептиды (например, около 9 аминокислот) могут связываться и замещать большие пептиды в анализе иммунопреципитации. См., например, ^Шоп, 1.А. и др. Се11 37:767-778 на 777 (1984). Антитела к пептидам настоящего изобретения также являются пригодными для очистки имитированного белка, например, путем адсорбционной хроматографии, используя способы, хорошо известные в данной области техники.

Пептиды и полипептиды, несущие антигенный эпитоп, настоящего изобретения, разработанные согласно выше описанным рекомендациям, предпочтительно содержат последовательность по меньшей мере семь, более предпочтительно по меньшей мере девять и наиболее предпочтительно по меньшей

- 21 008007 мере от примерно 15 до примерно 30 аминокислот, находящихся внутри аминокислотной последовательности полипептида настоящего изобретения. Однако пептиды или полипептиды, содержащие большую часть аминокислотной последовательности полипептида настоящего изобретения, содержащие от примерно 30 до примерно 50 аминокислот, или любую длину до, включая всю аминокислотную последовательность полипептида настоящего изобретения, также считаются пептидами или полипептидами настоящего изобретения, несущими эпитоп, и также являются пригодными для стимулирования антител, которые реагируют с имитированным белком. Предпочтительно аминокислотную последовательность пептида, несущего эпитоп, выбирают для обеспечения существенной растворимости в водных растворителях (т.е. последовательность включает в себя относительно гидрофильные остатки, а высоко гидрофобные последовательности предпочтительно устраняют); и последовательности, содержащие остатки пролина, являются особенно предпочтительными.

Пептиды и полипептиды настоящего изобретения, несущие эпитоп, могут быть продуцированы при помощи любого обычного способа создания пептидов или полипептидов, включая рекомбинантные способы, использующие молекулы нуклеиновых кислот настоящего изобретения. Например, короткая аминокислотная последовательность, несущая эпитоп, может быть слита с более большим полипептидом, который действует в качестве носителя во время продуцирования и очистки рекомбинанта, а также во время иммунизации для продуцирования антител к пептиду.

Пептиды, несущие эпитоп, также могут быть синтезированы с использованием известных способов химического синтеза. Например, НоидЫеп описал простой способ синтеза большого количества пептидов, таких как 10-20 мг 248 различных пептидов из 13 остатков, представляющих собой единичные варианты аминокислот сегмента НА1 полипептида, который приготовили и охарактеризовали (при помощи исследований, связывающих ЕЫ8А тип) менее чем за четыре недели. НоидЫеп. К.А., Ргос. №111. Асаб. 8с1. США 82:5131-5135 (1985). Такой процесс одновременного синтеза множества пептидов (8МР8) дополнительно описан в патенте США 4631211 НоидЫеп и др. (1986). В этой процедуре отдельные смолы для синтеза в твердой фазе различных пептидов содержат в отдельных пакетах, проницаемых для растворителя, способствующих оптимальному использованию многих идентичных повторяющихся этапов, включенных в твердофазные способы.

Полностью ручная процедура позволяет проводить одновременно 500-1000 или более синтезов. НоидЫеп и др., указанный выше, на 5134.

Пептиды и полипептиды настоящего изобретения, несущие эпитоп, используют для индуцирования антител согласно способам, хорошо известным в данной области техники. См., например, 8и1с11йе и др., указанный выше; ^бкоп и др., указанный выше; Сйоте, М. и др., Ргос. №111. Асаб. США 82:910-914; и ВИПе, Р.1. и др. 1. Сеп. У1го1. 66:2347-2354 (1985).

Обычно животные могут быть иммунизированы свободными пептидами; однако может быть усилен титр антител к белку путем присоединения пептида к носителю-макромолекуле, такому как гемоцианин лимфы улитки (КЬН) или столбнячный анатоксин. Например, пептиды, содержащие цистеин, могут быть соединены с носителем с использованием линкера, такого как малеимидобензоил-№гидроксисукцинимидовый эфир (МВ8), в то время как другие пептиды могут быть соединены с носителем с использованием более обычного связывающего агента, такого как глутаральдегид.

Животных, таких как кролики, крысы и мыши, иммунизируют либо свободными, либо связанными с носителем пептидами, например при помощи интраперитонеального и/или интрадермального введения инъекции эмульсии, содержащей примерно 100 мкг пептида или белка-носителя и адъюванта Фрейнда. Для некоторых инъекций может потребоваться повторная иммунизация, например, с интервалом в две недели, для обеспечения пригодного титра антитела к белку, который может быть обнаружен, например, при помощи ЕЫ8А анализа с использованием свободного белка, адсорбированного на твердой поверхности. Титр антител к белку в сыворотке из иммунизированного животного может быть увеличен путем отбора антител к пептиду, например, путем адсорбции пептида на твердой подложке и элюции отобранных антител согласно способам, хорошо известным в данной области техники.

Иммуногенные пептиды настоящего изобретения, несущие эпитоп, т.е. такие части белка, которые вызывают ответ антитела, когда весь белок является иммуногеном, идентифицируют согласно способам, хорошо известным в данной области техники. Например, у Сеукеп и др., 1984, указанный выше, раскрыта процедура быстрого конкурентного синтеза на твердых подложках сотен пептидов достаточной очистки для реакции в исследовании иммуносорбента, подобного ферменту. Взаимодействие синтезированных пептидов с антителами затем легко обнаруживают без удаления их с подложки. В таком способе пептиды, несущие иммуногенный эпитоп желаемого белка, могут быть просто идентифицированы специалистом в данной области техники. Например, иммунологически важный эпитоп в белке оболочки вируса ящура был локализован Сеукеп и др. анализом нескольких аминокислот при помощи синтеза покрывающего набора всех 208 возможных гексапептидов, покрывающих полностью 213 аминокислотную последовательность белка. Затем был синтезирован полный набор замещений пептидов, в котором все 20 аминокислот были заменены, в свою очередь, в каждой позиции эпитопа и были определены конкретные аминокислоты, представляющие специфичность для реакции с антителом. Таким образом, пептиды, аналоги пептидов, несущих эпитоп, настоящего изобретения могут быть без затруднения созданы таким

- 22 008007 способом. Патент США 4708781 Сеукеп (1987) дополнительно раскрывает способ идентификации пептида, несущего иммунологический эпитоп желаемого белка.

Более того, патент США 5194392 Сеукеп (1990) раскрыл обычный способ обнаружения или определения последовательности мономеров (аминокислот или других соединений), которая является топологическим эквивалентом пептида (т.е. имитирующим эпитопом), который комплементарен конкретному паратопу (сайту, связывающему антиген) интересующего антитела. В более общих выражениях, патент США 4433092 Сеукеп (1989) раскрыл способ обнаружения или определения последовательности мономеров, которая является топографическим эквивалентом лиганда, который является комплементарным лиганду, связывающему сайт конкретного интересующего рецептора. Подобным способом, патент США 5480971 НоидЫеп и др. (1996) на смесях пералкилированных аминопептидов раскрыл линию С1-С7алкил пералкилированных олигопептидов и наборы, и библиотеки таких пептидов, а также способы для использования таких наборов и библиотек пептидов для определения последовательности пералкилированного олигопептида, который предпочтительно связывается с интересующей молекулой акцептора. Таким образом, непептиды, аналоги пептидов, несущих эпитоп, настоящего изобретения также могут быть без затруднения изготовлены такими способами.

Использование липолитических ферментов в промышленных процессах

Настоящее изобретение также относится к использованию липолитического фермента согласно настоящему изобретению в определенных промышленных процессах. Несмотря на длительный опыт, приобретенный в таких процессах, липолитический фермент согласно настоящему изобретению имеет несколько отличительных существенных преимуществ по сравнению с ныне используемыми ферментами. В зависимости от конкретного применения такие преимущества могут включать в себя аспекты, подобно более низкой цене производства, более высокой специфичности в отношении субстрата, меньшей аллергенности, меньшего количества нежелательных побочных активностей, более высокое получение при продуцировании в подходящем микроорганизме, более подходящий рН и температурные режимы, улучшенный вкус и конечное изделие, а также аспекты качества пищи и чистоты продукта.

Настоящее изобретение также относится к способам приготовления теста или печеного изделия, содержащего включенное в тесто эффективное количество липолитического фермента настоящего изобретения, которое улучшает одно или несколько свойств теста или печеного изделия, полученного из этого теста относительно теста или печеного изделия, в которые не включен полипептид.

Фраза включен в тесто определена в настоящем описании как добавка липолитического фермента согласно настоящему изобретению в тесто, любой ингредиент, из которого может быть сделано тесто, и/или любую смесь ингредиентов теста, из которых может быть сделано тесто. Другими словами, липолитический фермент согласно настоящему изобретению может быть добавлен на любом этапе приготовления теста и может быть добавлен в один, два или несколько этапов. Липолитический фермент согласно настоящему изобретению добавляют в ингредиенты теста, которые замешивают и пекут для изготовления печеного изделия с использованием способов, хорошо известных в данной области техники. См., например, патент США 4567046, ЕР-А-426,211, ДР-А-60-78529, ХР-А-62-111629 и ДР-А-63-258528.

Термин эффективное количество определен в настоящем описании как количество липолитического фермента согласно настоящему изобретению, которое достаточно для обеспечения измеряемого эффекта, по меньшей мере, интересующего свойства теста и/или печеного изделия.

Термин улучшенное свойство определен в настоящем описании как любое свойство теста и/или изделия, полученного из теста, особенно печеного изделия, которое улучшено действием липолитического фермента согласно настоящему изобретению относительно теста или продукта, в которые не включен липолитический фермент согласно настоящему изобретению. Улучшенное свойство может включать, без ограничений, увеличенную прочность теста, увеличенную эластичность теста, увеличенную стабильность теста, уменьшенную липкость теста, улучшенную растяжимость теста, улучшенный вкус печеного изделия, улучшенное античерствление печеного изделия.

Улучшенное свойство может быть определено путем сравнения теста и/или печеного изделия, приготовленного с добавлением полипептида настоящего изобретения согласно способам настоящего изобретения, описанным ниже в примерах, или без добавления. Органолептические качества могут быть оценены с использованием процедур, хорошо отработанных в хлебопекарной промышленности, и могут включать, например, использование группы квалифицированных экспертов-дегустаторов.

Термин увеличенная прочность теста определен в настоящем описании как свойство теста, которое обычно имеет эластичные свойства и/или требует большего вклада работы в формование и придание формы.

Термин увеличенная эластичность теста определен в настоящем описании как свойство теста, которое обычно имеет большую тенденцию к восстановлению своей первоначальной формы после того, как оно было подвергнуто некоторому физическому растяжению.

Термин увеличенная стабильность теста определен в настоящем описании как свойство теста, которое менее восприимчиво к механическим воздействиям, таким образом, лучше поддерживающее свою форму и объем.

Термин уменьшенная липкость теста определен в настоящем описании как свойство теста, кото

- 23 008007 рое имеет уменьшенную тенденцию прилипания к поверхности, например, при механическом производстве теста, и является легко оцениваемым эмпирически пекарем-лаборантом или измеряемым с использованием анализатора текстуры (например, ТАХТ2), известными в данной области техники.

Термин улучшенная растяжимость теста определен в настоящем описании как свойство теста, которое может быть подвергнуто увеличенному натяжению или растяжению без разрыва.

Термин улучшенная способность теста к механической обработке определен в настоящем описании как свойство теста, которое является обычно менее тягучим, и/или более плотным, и/или более эластичным.

Термин увеличенный объем печеного изделия измеряется как определенный объем данного батона хлеба (объем/вес), обычно определяемый традиционным способом определения с использованием рапсового семени.

Термин улучшенная структура хлебного мякиша печеного изделия определен в настоящем описании как свойство печеного изделия с более удлиненными и/или тонкими стенками ячеек в хлебном мякише и/или более однородным и/или гомогенным распределением ячеек в хлебном мякише и обычно оценивается эмпирически пекарем-лаборантом.

Термин улучшенная мягкость печеного изделия противопоставлен твердости и определен в настоящем описании как свойство печеного изделия, которое является более легко сжимаемым и легко оценивается эмпирически пекарем-лаборантом или измеряется с использованием анализатора (например, ТАХТ2), известным в данной области техники.

Термин улучшенный вкус печеного изделия оценивают при помощи группы квалифицированных дегустаторов.

Термин улучшенное античерствление печеного изделия определен в настоящем описании как свойства печеного изделия, которые имеют уменьшенную скорость ухудшения параметров качества, например, мягкости и/или эластичности, во время хранения.

Термин тесто определен в настоящем описании как смесь муки и других ингредиентов, достаточно плотных для замешивания или раскатывания. Тесто может быть свежим, замороженным, предварительно раскатанным или подвергнутым предварительной термообработке. Приготовление замороженного теста описано Ки1р и йогеп/ в Егохеп апб РеГпдеШеб ЭоидН апб Вайегк.

Термин печеное изделие определен в настоящем описании как любой продукт, приготовленный из теста, либо мягкого, либо хрустящего типа. Примеры печеных изделий, любых белого, серого или черного типа, которые могут быть преимущественно изготовлены при помощи настоящего изобретения, являются хлебом (более конкретно белым хлебом, хлебом из ржаной муки или ржаного шрота) обычно в виде батонов или бубликов, длинного французского хлеба, макаронных изделий, лаваша, тортильи, тако, тортов, блинов, бисквитов, булочек, хлебной крошки, парового хлеба и хрустящего хлеба или т.п.

Липолитический фермент настоящего изобретения и/или дополнительные ферменты, предназначенные для использования в способах настоящего изобретения, могут быть в любом виде, подходящем для рассматриваемого использования, например, в виде сухого порошка, быстрорастворимого порошка, или гранулята, более конкретно, непорошкообразного гранулята, жидкости, более конкретно, стабилизированной жидкости или защищенного фермента, такого как описано в А001/11974 и А002/26044. Гранулы и быстрорастворимые порошки могут быть приготовлены обычными способами, например путем распыления липолитического фермента согласно настоящему изобретению на носитель в гранулятор с псевдоожиженным слоем. Носитель может состоять из отдельных ядер, имеющих подходящие размеры частиц. Носитель может быть растворимым и нерастворимым, например солью (такой как №С1 или сульфат натрия), сахаром (таким как сахароза или лактоза), сахарным спиртом (таким как сорбитол), крахмалом, рисом, измельченным зерном или соей. Липолитический фермент согласно настоящему изобретению и/или дополнительные ферменты могут содержаться в препаратах замедленного освобождения. Способы приготовления препаратов замедленного освобождения хорошо известны в данной области техники. Добавление пригодных для пищи стабилизаторов, таких как сахар, сахарный спирт или других полиолей и/или молочной кислоты или другой органической кислоты согласно установленным способам могут, например, стабилизировать жидкие ферментативные препараты.

Липолитический фермент согласно настоящему изобретению также может быть включен в дрожжи, содержащие композиции, такие как раскрытые в ЕР-А-0619947, ЕР-А-0659344 и А002/49441.

Преимуществом является то, что для добавления в заранее приготовленные смеси муки полипептиды согласно настоящему изобретению находятся в виде сухого продукта, например непорошкообразно гранулированного, в то время как для добавления вместе с жидкостью он находится преимущественно в жидком виде.

Один или несколько дополнительных ферментов также могут быть добавлены в тесто. Дополнительный фермент может быть любого происхождения, включая животное или растительное, и предпочтительно микробное (бактериальное, дрожжевое или грибковое) происхождение и может быть получен при помощи техник, обычно используемых в данной области техники.

В предпочтительном варианте осуществления дополнительный фермент может быть амилазой, такой как альфа-амилаза (пригодная для обеспечения сахара, способного к брожению при помощи дрож

- 24 008007 жей и замедляющая черствление) или бета-амилаза. циклодекстрин глюканотрансфераза. пептидаза. более конкретно. экзопептидаза (пригодная для усиления вкуса). трансглутаминаза. липаза (пригодная для модификации липидов. присутствующих в тесте или компонентах теста для размягчения теста). фосфолипаза. целлюлаза. гемицеллюлаза. более конкретно. пентозаназа. такая как ксиланаза (пригодная для частичного гидролиза пентозанов. которые увеличивают растяжимость теста). протеаза (пригодная для ослабления клейковины. более конкретно. при использовании муки из твердой пшеницы). изомераза дисульфидных белков. например. изомераза дисульфидных белков. как раскрыто в \У095/00636. гликозилтрансфераза. пероксидаза (пригодная для улучшения консистенции теста). лакказа или оксидаза. например глюкозооксидаза. гексозооксидаза. альдозооксидаза. пиранозооксидаза. липоксигеназа или оксидаза Ь-аминокислот (пригодная для улучшения консистенции теста).

Если одна или несколько активностей дополнительных ферментов добавлены по способам настоящего изобретения. такие активности могут быть добавлены отдельно или вместе с полипептидом согласно настоящему изобретению. необязательно в качестве компонента(компонентов) композиции. улучшающей хлеб и/или улучшающей муку. Другие ферментативные активности могут быть любыми ферментами. описанными выше и могут быть дозированы согласно установленной практике хлебопечения.

Настоящее изобретение также относится к способам приготовления печеных изделий. включающих выпекание теста. полученного способом настоящего изобретения для производства печеного изделия. Выпекание теста для производства печеного изделия может быть выполнено с использованием способов. хорошо известных в данной области техники.

Настоящее изобретение также относится к тесту и печеным изделиям. соответственно. произведенным способами настоящего изобретения.

Настоящее изобретение дополнительно относится к предварительной смеси. например. в виде композиции муки. для теста и/или печеных изделий. приготовленных из теста. причем предварительная смесь содержит полипептид настоящего изобретения. Термин предварительная смесь определен в настоящем описании для понимания ее в обычном значении. т.е. как смесь агентов печения. обычно включающих в себя муку. которая может быть использована не только в установках/оборудовании промышленного хлебопечения. но также в пекарнях розничной продажи. Предварительная смесь может быть приготовлена путем смешивания полипептида или композиции. улучшающей хлеб и/или улучшающей тесто настоящего изобретения. содержащей полипептид. с подходящим носителем. таким как мука. крахмал. сахар или соль. Предварительная смесь может содержать другие добавки. улучшающие тесто и/или улучшающие хлеб. например. любые добавки. включающие ферменты. упомянутые выше.

Настоящее изобретение дополнительно относится к хлебопекарным добавкам в виде гранулированного или быстрорастворимого порошка. который содержит полипептид настоящего изобретения. Дополнительная хлебопекарная добавка предпочтительно имеет узкое распределение размера частиц с более чем 95% (по весу) частиц в области от 25 до 500 мкм.

Для теста и хлеба производство настоящего изобретения может быть использовано в комбинации со вспомогательными веществами обработки. определенными ранее в настоящем описании. такими как вспомогательные вещества химической обработки. таким как оксиданты (например аскорбиновая кислота). восстанавливающие агенты (например Ь-цистеин). оксидоредуктазы (например. глюкозооксидаза) и/или другие ферменты. такие как ферменты. модифицирующие полисахариды (например. α-амилаза. гемицеллюлаза. ферменты для печения и т.д.). и/или ферменты. модифицирующие белки (эндопротеаза. экзопротеаза. ферменты для печения и т.д.).

Пример 1. Ферментация АзретдШиз шдет

Липолитические ферменты. кодируемые нуклеотидной последовательностью. как предусмотрено в настоящем описании. получили путем конструирования плазмид экспрессии. содержащих последовательности ДНК. трансформации штамма А. шдет такой плазмидой и культивирования штаммов А. шдет следующим ниже способом.

Свежие споры (10⁶-10⁷) штаммов А. шдет инокулировали в 20 мл С8Ь среды (100 мл флакон. перегородка) и культивировали в течение 20-24 ч при 34°С и 170 об./мин. После инокуляции 5-10 мл С8Ь перед культивированием в 100 мл С8М среде (500 мл флакон. перегородка) штаммы ферментировали при 34°С и 170 об./мин в течение 3-5 дней.

Бесклеточные супернатанты получили центрифугированием в 50 мл флаконах Стешет (30 мин. 5000 об./мин). Супернатанты предварительно отфильтровали микроволокнистым фильтром СЕ/А \УНа1тап С1азз (150 мм Е) для удаления более больших частиц. до рН 5 доводили 4 н КОН (по необходимости) и стерильно отфильтровали 0.2 мкм (с бутылочным верхом) фильтром со всасыванием для удаления грибкового материала. Супернатанты хранили при 4°С (или -20°С).

Среда С8Ь состояла из (в количестве на 1 л): 100 г Сот 81еер 8о11бз (ИоциеПе). 1 г NаΗ₂Ρ0₄Ή₂0. 0.5 г Мд80₄-7Н₂0. 10 г глюкоза-Н₂0 и 0.25 г Вазйбоп (пеногаситель). Ингредиенты растворили в половине объема воды и рН довели до рН 5.8 при помощи №10Н или Н₂80₄; 100 мл флакон с перегородкой и шариком для вспенивания заполнили 20 мл бульона ферментации и стерилизовали в течение 20 мин при 120°С. после чего 200 мкл раствора. содержащего 5000 ΐυ/мл пенициллина и 5 мг/мл стрептомицина. добавили в каждый флакон после охлаждения до комнатной температуры.

- 25 008007

С8М среда состояла из (в количестве на литр): 150 г мальтоза-Н₂0, 60 г 8оу1опе (пептон), 1 г №Н₂Р0₄-Н₂0, 15 г Мд80₄-7Н₂0, 0,08 Твин 80, 0,02 г Вазййоп (пеногаситель), 20 г МЕ8, 1 г Ь-аргинина. Ингредиенты растворили в половине объема воды и рН довели до рН 6,2 при помощи №0Н или Н₂80₄; 100 мл флакон с перегородкой и шариком для вспенивания заполнили 100 мл бульона ферментации и стерилизовали в течение 120 мин при 120°С, после чего 1 мл раствора, содержащего 5000 ГО/мл пенициллина и 5 мг/мл стрептомицина, добавили в каждый флакон после охлаждения до комнатной температуры.

Пример 2. Очистка липолитических ферментов настоящего изобретения

Этап 1 - Приготовление ультрафильтратов

Выполнили ультрафильтрацию супернатантов культур, которые получены в примере 1, для удаления низкомолекулярных загрязнений, которые могут мешать при определении ферментативной активности и тестах при выпечке. Ультрафильтрацию 30 мл супернатанта проводили системой МйНроге ЕаЬзса1е ТЕЕ, оборудованной фильтром с 10 кОа границей пропускания.

В зависимости от цвета образцы промывали 3-5 раз 40 мл объемами 100 мМ холодного фосфатного буфера рН 6,0, включающего в себя 0,5 мМ СаС1₂. Конечный объем раствора фермента составил 30 мл и далее он упоминается как ультрафильтрат.

Этап 2 - Определение концентрации липолитических ферментов при помощи А280 и НР8ЕС.

Концентрацию липолитических ферментов в ультрафильтрате вычислили из экстинкции при 280 нм (А280), свойственной липолитическим ферментам, и вычислили коэффициент молекулярной экстинкции липолитических ферментов. Измерение А280 выполнили спектрометром Иу1коп ХБ 8есошаш (Веип 4е Копйе, АЬсоийе, Нидерланды).

Коэффициент молекулярной экстинкции фермента может быть вычислен из количества остатков тирозина, триптофана и цистеина на молекулу (8.С. С111 Р.Н. уоп Н1рре1, Апа1.Вюсйеш. 182, 319-326 (1989)). Коэффициент молекулярной экстинкции этих аминокислот составляет 1280, 5690 и 120 М¹-см^-1, соответственно. Количество остатков тирозина, триптофана и цистеина в липолитических ферментах настоящего изобретения может быть выведено из последовательностей 8ЕЦ ΙΏ N0: 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36 и 39. Вычисленные коэффициенты ослабления липолитических ферментов настоящего изобретения суммированы в табл. 2.

Таблица 2

Липолитиче ский фермент	ЗЕ<2 10 ΝΟ:	# аминокислоты	Вычисленное М.И. (Оа)	Вычисленный коэффициент экстинкции при 280 нм
Тгр	Туг	Суз	мУсм ¹	1 (мг/мл^{1 γ}·	см ¹
ΝΒΕ028	3	13	26	6	64141	107970	1,7
ΝΒΕ029	6	14	27	6	63250	114940	1,8
ΝΒΕ030	9	17	26	6	59952	130730	2,2
ΝΒΕ031	12	9	27	4	61173	86250	1,4
ΝΒΕ032	15	3	13	6	29683	34430	1,2
ΝΒΕ033	18	7	24	2	44890	70790	1,6
ΝΒΕ034	21	11	19	7	53796	87750	1,6
ΝΒΕ036	24	10	23	7	64945	87180	1,3
ΝΒΕ038	27	13	29	4	55161	111570	2,2
ΝΒΕ039	30	11	26	6	59298	96590	1,6
ΝΒΕ043	33	16	35	8	62564	136800	2,2
ΝΒΕ045	36	0	6	6	26688	8400	0,31
ΝΒΕ042	39	14	30	7	61593	118900	1,9

Экстинкция ультрафильтрата при 280 нм (А280), которая является свойством липолитических ферментов, зависит от чистоты образца фермента. Чистота, определенная с использованием НР8ЕС (высокоразрешающей хроматографией по размеру молекул) с Т8К 8\¥-Х1. колонкой (300-7,8 мм; область М^ 10-300 кОа). Буфер для элюции состоял из 25 мМ натрий фосфатного буфера рН 6,0 и был использован поток 1 мл/мин. Инъецировали 5-100 мкл образцы. Измерили поглощение при 280 нм.

А280 в ультрафильтратах, свойственное липолитическому ферменту настоящего изобретения, получили из отношения поверхности пика к пику соответствующего липолитического фермента в хроматограмме и общей поверхности пиков поглощения при 280 нм. Затем для каждого липолитического фермента вычислили концентрацию липолитического фермента в ультрафильтрате путем умножения А280 ультрафильтрата на отношение, описанное выше, и разделили на вычисленный коэффициент экстинкции

- 26 008007 (1 мг/мл раствора - табл. 2 - самая большая правая колонка). Пример 3. Измерения активностей

Бесклеточные супернатанты, полученные в примере 1, исследовали при помощи липазы, фосфолипазы и галактолипазы, что показано в табл. 3.

Таблица 3. Активности липолитических ферментов в бесклеточных супернатантах, как приготовлено в примере 1

Липолитический фермент	липаза	фосфолипаза А	лизофосфолипаза	галактолипаза
ΝΒΕ028	+	+	+	0
ΝΒΕ029	+	+	+	0
ΝΒΕ031	+++	+	+	+
ΝΒΕ032	++	+	+	0
ΝΒΕ033	+	++	+	+
ΝΒΕ034	0	+	0	0
ΝΒΕ036	0	+	4-	0
ΝΒΕ038	0	+	0	0
ΝΒΕ039	+	0	0	0
ΝΒΕ043	+	0	0	0

= нет отличия от контроля;

+/++/+++ =выше, чем контроль.

Активность липазы определили спектрофотометрически с использованием 2,3-меркапто-1пропанолтрибутирата (ТВОИ?) в качестве субстрата. Липаза гидролизует сульфидные связи ТВОИР, таким образом, освобождая тиобутановую кислоту, которая в последующей реакции с 4,4дитиодипиридином (ЭТЭР) образует 4-тиопиридон. Последний находится в таутомерном равновесии с 4-меркаптопиридином, который поглощается при 334 нм. Реакция протекает в 0,1М ацетатном буфере рН 5,0, содержащем 0,2% Тритон Х-100, 0,65 мМ ТВО1ЛР и 0,2 мМ ЭТЭР, при 37°С. Одна единица липазы определена, как количество фермента, которое высвобождает 1 мкмоль 4 тиобутановой кислоты в 1 мин в установившихся условиях реакции.

Фосфолипазу А определили спектрофотометрически с использованием 1,2-дитиодиоктаноилфосфатдихолина в качестве субстрата. Фосфолипаза А гидролизует сульфидную связь в 1 положении (РЬА1) или 2 положении (РЬА2), таким образом освобождая 4 тиооктановую кислоту, которая в последующей реакции реагирует с 4,4' -дитиопиридином для образования 4-тиопиридона. Последний находится в таутомерном равновесии с 4-меркаптопиридином, который поглощается при 334 нм. Реакция протекает в 0,1 М ацетатном буфере рН 4,0, содержащем 0,2% Тритон Х-100, 0,65 мМ субстрата и 0,2 мМ □ТОР, при 37°С. Одна единица фосфолипазы А (РЬА) определена как количество фермента, которое высвобождает 1 мкмоль 4 тиооктановой кислоты в 1 мин в установившихся условиях реакции.

Активность лизофосфолипазы определили ³¹Р-ЯМР спектроскопией с использованием лизофосфатидилхолина в качестве субстрата. Лизофосфолипаза гидролизует эфирную связь, таким образом освобождая жирную кислоту из группы глицерина. Образованный таким образом глицеринфосфохолин количественно определили, используя ЯМР. Реакция протекала в 50 мМ ацетатном буфере рН 4,5, дополнительно содержащем 1 мг/мл лизофосфатидилхолин и 5мМ СаС1₂, в течение 30 мин при 55°С. Одна единица лизофосфолипазы (ЬРС) определена как количество фермента, которое образует 1 мкмоль 4 глицеринфосфохолина кислоты в 1 мин в установившихся условиях реакции.

Активность галактолипазы определили ЯМР спектроскопией с использованием дигалактозилдиглицерида в качестве субстрата согласно способу, описанному ИЛауата и Μаί8иба (1972) Ацпс. Вю1. С1ет. 36, 1831. Галактолипаза гидролизует эфирную связь между жирными кислотами и глицериновой основой, таким образом, освобождая одну или две жирные кислоты. Реакция протекает в 50 мМ ацетатном буфере рН 4,5, дополнительно содержащем 5мМ СаС1₂, 0,2% Тритон Х-100 и 1 мг/мл дигалактозилдиглицерида (липидные продукты), в течение 30 мин при 30°С. Одна единица галактолипазы определена как количество фермента, которое образует 1 мкмоль жирной кислоты в 1 мин в установившихся условиях реакции.

Ультрафильтраты, полученные в примере 2, подвергли РАИ измерению активности фермента. Активность грибковой альфа-амилазы измерили с использованием тестовых таблеток Р1абеЬак Ату1аке (РБагтаыа). Таблетки РБабеЬаз содержат субстрат водонерастворимого крахмала и голубой краситель, связанный поперечными связями с субстратом. Субстрат гидролизовали грибковой амилазой, освобождая окрашенные растворимые мальтодекстрины, которые перешли в раствор. Кривую калибровки приго

- 27 008007 товили при помощи раствора, содержащего упомянутую активность грибковой альфа-амилазы. Из стандарта и неизвестных образцов в 50 мМ буфере малеиновой кислоты рН 5,5 приготовили соответствующие разбавления. Образцы по 5 мл инкубировали при 30°С в течение 5 мин, добавили РйабеЬак таблетку и после 15 мин реакцию остановили путем добавления 1,0 мл 0,5 н гидроксида натрия. Смеси оставили остывать до комнатной температуры в течение 5 мин, после чего добавили 4,0 мл воды, после встряхивания руками в течение 15 мин образцы центрифугировали при 4700 об./мин в течение 10 мин. Экстинкцию верхних слоев измерили при 620 нм. ΟΏ 620 нм является единицей измерения для активности грибковой альфа-амилазы. Одна единица грибковой альфа-амилазы (РАИ) определена в настоящем описании как количество фермента, которое превращает 1 г крахмала (100% сухого вещества) за 1 ч в продукт, обладающий прозрачностью при 620 нм после реакции с йодным раствором известной концентрации в установившихся условиях реакции.

Таблица 4. Аи и белок в ультрафильтратах, приготовленных в примере 2

Липолитический фермент	Белок (мг/мл) из анализа 280 нм	Грибковая амилаза (ΕΑϋ/мл)
ΝΒΕ028	2,3	4,5
ΝΒΕ029	1,3	3,0
ΝΒΕ030	0,4	2,6
ΝΒΕ031	0,1	2,5
ΝΒΕ032	1,0	0,3
ΝΒΕ033	Νϋ	0,3
ΝΒΕ034	Νϋ	2,7
ΝΒΕ036	Νϋ	3,4
ΝΒΕ038	2,0	3,7
ΝΒΕ039	2,2	0,6

ΝΒΕ043	0,1	0,2
ΝΒΕ045	Νϋ	4,0
ΝΒΕ042	1,6	1,5

Дополнительно к активностям, приведенным в табл. 4, также присутствуют незначительные активности глюкоамилазы, однако в таких низких количествах, что эти ферменты не мешают в экспериментах хлебопечения, описанных в примере 4.

Пример 4. Эксперименты 1 хлебопечения - батоны хлеба

Батоны хлеба выпекли из 150-граммовых кусков теста, полученного путем смешивания 200 г муки (Ко11Ьп™/1Ык™ в соотношении 80/20), 1,4 г сухих хлебопекарных дрожжей (Регт1рап®), 4 г соли, 3 г сахара, 10 мг аскорбиновой кислоты, 116 г воды и 2 г жира. После перемешивания в течение 6 мин и 15 с в стержневом миксере, тесто разделили на куски по 150 г и поставили для брожения в течение 45 мин при 30°С, обмяли и поставили для брожения в течение еще 25 мин, отформовали и приготовили. Брожение проводили при относительной влажности 90-100%. После финального брожения в течение 70 мин при 30°С тесто пекли в течение 20 мин при 225°С.

Различное воздействие (табл. 5 и 6) липолитических ферментов в экспериментах хлебопечения сравнили с контролем, содержащим такое же количество грибковой амилазы, которую добавили иным способом при помощи дозировки ультрафильтрата (для активности грибковой амилазы в ультрафильтратах см. табл. 4). Это было необходимо, так как количество грибковой амилазы, добавленной с липолитическими ферментами, особенно повлияло на объем хлеба, а не на другие параметры. Объем батонов хлеба с добавленным контрольным количеством грибковой амилазы приняли за 100%.

- 28 008007

Таблица 5

Эффект	Оценка
1	2	3	4	5
	липкость	очень	липкое	Контрольный	Значите-	Прекрасно
	теста	липкое		хлеб	льно	сухое
естс					лучше
Ен	Растворимость	Очень	Меньше, чем	Контрольный	хорошо	Очень
	теста	короткая	контроль	хлеб		длинная
	Структура	плохая	неоднород-	Контрольный	хорошая	отличная
	хлебного		ная	хлеб
ю	мякиша
е И	ТТтаогп т/’/'Угэтгтл·	ГТгчтдъ АО ТА ХД ΧΧ^^Αν^ΙΧΟ	Очень	троль. НЬМ	о т личный	Очень
		белый	светлый	хлеб		темный
О) Р¹	Цвет хлебного	Слишком	Очень	Контрольный	отличный	Абсолютно
ф с	мякиша	желтая	желтый	хлеб		белый
	черствение	Слишком	Очень	Контрольный	мягче	отличный
		твердый	твердый	хлеб

Объем батона определили при помощи измерителя объема хлеба БУМ-3 (ΚΙ Сагдз 1п81гитеп18 АБ, У1кеп, 8\\'е4еп). Принцип такого измерения основан на отражении ультразвука, измеренного при помощи датчика вокруг вращающегося хлеба. Время измерения составляло 45 с.

Липкость теста и растяжимость оценили при помощи квалифицированного пекаря, используя шкалу, изображенную в табл. 5. Измеряли среднее значение 2 батонов на один объект.

После таких тестов куски теста округлили и первое брожение проводили в течение 45 мин при 30°С и после этого тесто обмяли, отформовали, приготовили и поставили для брожения в течение 75 мин при 30°С. Относительная влажность во время брожения составляла 85%.

Затем оценили стабильность теста после брожения при помощи наличия пузырьков, корочки с оборванными краями и нерегулярных кривых поверхностей корочки. Куски теста выпекали в течение 20 мин при 225°С. Объемы батонов определили способом ΒνΜ-3: в таблице представлены средние значения 2 хлебов, которые выпекали как один объект.

Структуру хлебного мякиша оценили при помощи профессионального пекаря, используя шкалу, изображенную в табл. 5. После хранения батонов в течение 3 дней в полиэтиленовых сумках при комнатной температуре измерили твердость хлебного мякиша, используя 81еуепз анализатор текстуры. Два ломтика толщиной 2 см из центра каждого батона проанализировали анализатором текстуры, используя пробу диаметром 1,5 дюйма, глубиной давления 5 мм (25%) и скоростью давления 0,5 мм/с. В таблице показано среднее значение двух измерений.

Цвет корочки оценивали при помощи профессионального пекаря согласно шкале, изображенной в табл. 5. В качестве контроля использовали стандартный рецепт хлеба с датской формой для выпечки.

Цвет хлебного мякиша оценивали при помощи профессионального пекаря согласно оценке, изображенной в табл. 5. Цвет хлебного мякиша контрольного хлеба оценили как норму (3). В качестве положительного контроля батоны 2 объектов использовали с одной и той же композицией как контроль плюс 0,5% соевая мука. Процедуры брожения и выпечки такие же как и для контроля без соевой муки. Последний оценили как отличный.

Нависающую верхушку хлеба оценивали путем нависания верхушки относительно формы для выпечки, более нижние кромки верхушки - более низкая оценка. Меньше нависания, более лучшая оценка.

Черствление хлеба оценили путем ощущения твердости хлебного мякиша ломтиков хлеба. Перед нарезкой ломтиков хлеб хранили в пластиковой сумке при комнатной температуре в течение 4 дней. Более мягкий хлебный мякиш ломтиков имеет более лучшую оценку.

- 29 008007

Таблица 6

Липолитический

Параметр

фермент	Объем (%)	Липкость теста	Растяжимость теста	Устойчивость теста	Структура хлебного мякиша	Цвет корочки	Цвет хлебного мякиша	Нависание верхушки	черствление
ΝΒΕ028	100	3	3	4	2	3	3	3	4
ΝΒΕ029	104	3	3	4	3	4	4	4	3
ΝΒΕ030	107	3	2	4	4	4	4	3	3
ΝΒΕ031	102	3	2	4	5	4	4	4	4
ΝΒΕ032	98	3	3	4	2	3	3	3	3
ΝΒΕ033	105	3	2	4	2	4	3	3	3
ΝΒΕ034	104	3	3	4	4	4	4	4	3
ΝΒΕ036	100	3	3	4	3	4	4	4	3
ΝΒΕ038	109	3	3	4	5	4	4	3	3
ΝΒΕ039	109	3	3	4	4	3	4	3	3
ΝΒΕ043	106	3	3	4	3	4	4	3	3
ΝΒΕ045	110	3	3	4	4	3	4	4	4
ΝΒΕ042	110	3	4	4	4	3	4	3	3

Пример 5. Эксперименты 2 хлебопечения - батард

Хлебопекарные качества липолитических ферментов согласно настоящему изобретению протестировали с французским типом хлеба, называемым батард. Приготовление батардов в стандартном процессе хлебопечения было осуществлено путем смешивания 3000 г белой муки при примерно 20°С. 70 г прессованных дрожжей, 60 г соли, 68 ч./млн аскорбиновой кислоты, 30 ч./млн Ваке7уте® Н8₂₀₀₀ (грибковая гемицеллюлоза), 7 ч./млн Ваке7уте® Р500 (грибковая α-амилаза) и 1680 мл воды (8-10°С) в спиральном миксере (Оюкпа:2 мин со скоростью 1; 100 Вт-ч подавали при скорости 2). Температура теста составляла 27°С. Механически обработанное тесто проанализировали вручную при помощи профессионального пекаря. Тесто подвергли 15-минутной проверке на увеличение объема в герметичном шкафу при 32°С и 90% влажности. Позже тесто разделили на 6 кусков по 350 г, раскатали и поставили для брожения в течение 15 мин при 32°С и 90% влажности. В конце этого периода куски теста отформовали, придали форму и последний раз поставили тесто для брожения на 90 мин при 32°С и 90% влажности. Полностью подошедшее тесто разрезали по длине кусков теста и выпекали в печи при 240°С в течение 30 мин в присутствии пара. После остывания до комнатной температуры объемы батонов определили ВVМ способом (см. пример 4).

Разламывание, разрезание и форму батонов проанализировали сразу после остывания до комнатной температуры при помощи профессионального пекаря, используя оценку в табл. 7. После 16 ч (всю ночь) хранения в закрытом ящике при комнатной температуре проанализировали качество хлебного мякиша при помощи профессионального пекаря. Оценку батонов (табл. 8) получали от 1 объекта.

- 30 008007

Таблица 7

Эффект	Оценка
1	2	3	4	5
Разламывание, разрезание	Очень рыхлый и мягкий	Рыхлый и мягкий	Контрольный хлеб	Тонкая и хрустящая корочка Устойчиво идущий разрез	Корочка слишком тонкая, слишком твердая
Структура хлебного мякиша	бедная	Не однородная	Контрольный хлеб	хорошая	отличная
форма	высота	плоская	средняя	Контрольный хлеб	Выше, чем (3)	Гораздо выше, чем (3)
бороздка	бороздка закрыта	бороздка закрыта	Контрольный хлеб	Полностью открыта	Полностью открыта; рваная

Таблица 8. Выполнение хлебопечения липолитическими ферментами настоящего изобретения

Липолитиче ский

Параметр

фермент	Дозирование*	Объем батона (%)	Разламывание& разрезание	Форма	Структура хлебного мякиша
нет	0	100	3	3	3
ΝΒΕ028	0,75	3	4	4	4
ΝΒΕ030	3	103	4	4	3
ΝΒΕ031	2,5	95	4	4	3
ΝΒΕ036	Νϋ	88	3	3	3
ΝΒΕ038	30	100	4	4	3
ΝΒΕ039	64	126	3	4 '	3
ΝΒΕ045	Νϋ	89	4	4	3
ΝΒΕ042	12	98	3	4	4

* в ч./млн, основанном на весе муки и весе фермента, определенном А280 способом.

Claims

1. Выделенный полинуклеотид, гибридизуемый с полинуклеотидом, выбранным из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0:10, 11.

2. Выделенный полинуклеотид по п.1, гибридизуемый в жестких условиях с полинуклеотидом, выбранным из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0:10, 11.

3. Выделенный полинуклеотид по п.1 или 2, получаемый из мицельного гриба.

4. Выделенный полинуклеотид по п.3, получаемый из АзрегдШиз шдег.

5. Выделенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий аминокислотную последовательность 8Е0 ГО N0: 12 или ее функциональный эквивалент.

6. Выделенный полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере один функциональный домен полипептида 8Е0 ГО N0:12 или его функционального эквивалента.

7. Выделенный полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из 8Е0 ГО N0:10, 11 или их функциональных эквивалентов.

- 31 008007

8. Выделенный полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из 8Е0 ΙΌ N0:10, 11.

9. Вектор, содержащий полинуклеотидную последовательность по пп.1-8.

10. Вектор по п.9, в котором упомянутая полинуклеотидная последовательность по пп.1-8 оперативно связана с регуляторными последовательностями, подходящими для экспрессии упомянутой полинуклеотидной последовательности в подходящей клетке-хозяине.

11. Вектор по п.10, в котором упомянутая подходящая клетка-хозяин является мицельным грибом.

12. Способ получения полинуклеотида по пп.1-8 или вектора по пп.9-11, включающий этапы культивирования клетки-хозяина, трансформированной указанным полинуклеотидом или упомянутым вектором, выделения указанного полинуклеотида или указанного вектора из клетки-хозяина.

13. Выделенный липолитический фермент с последовательностью 8Е0 ΙΌ N0:12 или ее функциональный эквивалент.

14. Выделенный липолитический фермент по п.13, полученный из АкрегдШик шдег.

15. Выделенный липолитический фермент, полученный путем экспрессии полинуклеотида по пп.18 или вектора по пп.9-11 в подходящей клетке-хозяине, например АкрегдШик шдег.

16. Рекомбинантный липолитический фермент, содержащий функциональный домен любого из липолитических ферментов по пп.13-15.

17. Способ получения липолитического фермента по пп.13-16, включающий этапы трансформации подходящей клетки-хозяина выделенным полинуклеотидом по пп.1-8 или вектором по пп.9-11, культивирования указанной клетки в условиях, позволяющих экспрессию указанного полинуклеотида, и необязательно очищения кодируемого полипептида из упомянутой клетки или культуральной среды.

18. Рекомбинантная клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по пп.1-8 или вектор по пп.9-11.

19. Рекомбинантная клетка-хозяин, экспрессирующая липолитический фермент по пп.13-16.

20. Очищенные антитела, реагирующие с липолитическим ферментом по пп.13-16.

21. Слитый белок, содержащий последовательность липолитического фермента по пп.13-16.

22. Способ получения теста, содержащего добавление липолитического фермента по любому из пп.13-16.

23. Способ получения печеного изделия из теста, приготовленного способом по п.22.

24. Применение липолитического фермента по любому из пп.13-16 для получения теста и/или печеного изделия из этого теста.

- 32 008007

Список последовательностей <110> ϋ3Μ ΙΡ АззеЪз Β.ν.

<120> НОВЫЕ ЛИПАЗЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ <130> 2Ю78ИО <160> 39 <170> РаЕепЫп уегзхоп 3.1 <210> 1 <211> 3728 <212> ДНК <213> АзрегдШив птдег <400> 1

сдддсаа-Ы:а сдаЕссдадс дсдсЕаксЕа сдЕдсассдд аадсЬЕдс!с сЕЕдаЕБЕдЬ 60 ЕдЬЕЕсаЪаа ЬасЕЕаЕЕЕд Едс'ЬсЕБ'Ьад сссдасЕдса дЪддЕддсЕд саБд'ЬЕдддс 120 аддЕаГЕТаа сЕЕЕдддсда ЕассаасЕас дсдЬдсасЕЬ ЕдаадсаЕад сасддсдсдс 180 сддддаЕдсд ЕдЕсд'ЬсЕЕа ЕдасЕаЕааЕ ЕдаЕдЕддсс дасЕдасЕдс ЕЕддБд-ЬЕад 240 ддаЬсЕЬдЕд СЬЕаБсГГдд ЕЕЕЕсЕдЕас ЬЬадаадада дЕдссддЕдд саЕддЬддЕс 300 даЕакаасЕа дадсааЕдсд ЕдЕсЕссаЕс сЬсаЕссЕса ЕсддссаЕсс сЕЬаБасссЕ 360 даЕддсдссд аадддЕдада аЕддсдаЕдд дсдадааБаа ЬаБасЕдЕдЕ а'ЬадЕсЕд'Ес 420 сЬаЕссБссЬ ЕдЕдсасГдс ааад+сад№ даЕсаЕсаЕс сссасЕсааЕ сдЕссасЕса 480 Ьдс-Сс-ЬаЕаЕ ссдадасааа ссасаасЫа БЕсаа-Ь-ЬЕаа дсссдадЬсс аТааЕсаЕсс 540 асаассассс сасадссадд дЕасаЕссад ддЕсЕсЕСЕс ссдссддада аасЬаадссс 600 С^здсСссСс асСаддасс*! П Г. Г. СТ С С7 СТ П Ст1 ------ -у — с С С д д с С. с с Ъ с а е с а с с а а с ϊιΙςΙςοοηοοΙςα 660 ЬааасЕдсаЬ сааэсаЕдсЪ дсааадссас дасЕдсЕдсЕ дсаЕдсассс саасаЕсаЕс 720 сссдсаБааБ асаЬссаЕсс сЬдаадсаа! саадсЕЕдас ЕсЕд'ЬЕдЕЕЕ сЕЕсддадаЬ 780 дЕБаасса+Е сдБасБЕЕсс аааЕдасаЕс ааЕссаасЕд аЬадасаЕсд ссаЬссБссЪ 840 сааЕассаЕд дасдссссас дЕссаБдЕса ааадЕаадас БадсБсадсБ сддсдЕБааЕ 900 сааБЕаБдаБ ЬдсдадЬ сЕс ааЕсссЕдад ЬсаЕд-ЬдЕЕс ЕсЕдЕдЕсдд адааЕЕадас 960 ЕдааЕЕсадс ЬдсЕсдЫдс сасЕссБадс ЬсссЕдаЕаа аддЕссЕсас ЬЕсд-ЬсБсдЬ 1020 адсЕддсЕдд сЕдсаЬаЕЪс ЬссддЕдасЬ аадЕ-Ьаасад аассадсаас ЬЬадЕадсса 1080 Еддсдадсдс асЕссЕс+дд сЕсЬсссЕдс ЕдддЕддсад сасссЕадсс ЕсаасЕс'Ьад 1140 асассадЕаа ЕассссЪасс аТсаададад садасдсадд ааасаасасс ЕссЕсааЕсс 1200 саасадссас ссЕсаасаас ассдЕсгиса СсддссдЕЕс ссЕдсссдад ЕЬсдадсадд 1260 адЬЕдЕХссЕ дддЕа'Ьсаад ЕЕЕдсЕдаЕд адсссдЕдсд аЬЕсассссд ЕсдасдЕБда 1320 ааассдЕсЕа Есдсдссаа! дасадсдаса асддддЬдЕа ЕсаЕдсЕЕсс асадсаЕссд 1380 дасЕдсадас Е-ЬссЕсдддд ассдЕдсЕсЕ асаасдссас ададЕаЬддд Еа-ЬдаЕЕдсс 1440

- 33 008007

ссдддкакдд акссдакдад асддадскдд сддаддаадд акакдсдсдд кксдакдада 1500 аскдкакдаа сскдаакака акксддссса ададададаа ададдакдад ккдккдсскд 1560 кдакдакккд дакскккддк ддкддккддд кдсадддкдс даскдскдак ссдаддкадд 1620 акаскакадк кккдкдскдк дскдкдкддд дккдакдскд асдакдкдса аддкасаака 1680 кдадскакак кдкксдссад ддкдсдккда акдакаадсс кдксккдддк дксксдакса 1740 аккассдкдк ддскдсдккк ддаккссккд аскскдксда ддккакддкд сдкккскксс 1800 кксассдкса адкакакддд ккксадскда сакдасакск дкаддааксс ддсаасасда 1860 асскаддаск ксдкдаксад сдсдксдсса кдсаккдддк сааасаааас аксааддсдк 1920 ккддкддкда сссддасаад аксассакск ддддадаакс адсдкдадак какассскаа 1980 кадсакксда какасадсдс скдасакддс асадкддкдс скасадсдкс ддадсссасс 2040 кддксассаа сдасддкдас аасдадддкс какксададс сддкакдсас ассасксссс 2100 аакксксдкс кссксакскд скаассадса кадссаксак ддаакссддс аасдсадксд 2160 дасссссска саасддсасд даскддкасс адссдакдка сдассадакс дкдаасдсаа 2220 ссаадкакдк ссксассккс сссаааадас аакасксааа кдаскадкак акакаскаас 2280 касакдааад скдсассасс ксаадсааса ссскксаакд сскссдсдаа дкссссккск 2340 саасдакска сассдссдса дасаксддсс кддаакддкк сдссассакс дасддсасск 2400 ксаксааада акакссссаа аксадсакка сддадддссд скксдссаад дкссссаксс 2460 кссакддсас саасассдас дадддсдкда дккксддкас дасдддсдкд аасаскдакд 2520 ссдаадсдак ссадсадккд акдддкдадс сссссссссс сссссккссс ассааксссс 2580 аадакакака какадкасда дакаскаадд кдааакдааа акдакадсак ссааасдскд 2640 ддксскааас дааасссаад ссасдассск сскаксдсас каксссааса кскссдссск 2700 аддскукссс касдуакддд дсаасасдас скууссдаад С и у у у у с 3 и у аакакаадсд О 7 /Г ζ. / ии скасдадксд акддсдддсд акскдкдсак ддккдскссд аддаддккдс ксадксадаа 2820 дакдааддад какдаддадс аадкдкккдс дкаксддкдд дакдксдскд сдккдаакда 2880 кксдадкасд аккддддкдд сдсаккккдс кдаддкаакд ссакссаксс аксссскакк 2940 аккддккккс сскдсддкак дакакккддк акдскаакда кдкдккаскд сдкдсакдса 3000 кадаксссдк ккдкккксдс саассскдкд садаасакса скссдккддд аадкдакссс 3060 дсаадаскдд адккдддкаа кскддссдсд аддакдкдда сддсккккдк дасддакккд 3120 дакссдаакд ддсакддкдд касдкксскс ккскссакск каккадаакк дкдааакдаа 3180 дсдкдкддкк скаакдаддд кдасадкскс кддкаксссс саскддссда аакасаасск 3240 саскдакссд адддаскккд кдккссддск ассдадддак ддаадккакд кддадаадда 3300 касккккадд асддддддда ккдаккакак каакасаакк дкдсддкаад ккдскдскаа 3360 дкадкаскас какакдкака каддадддкд кдддкдаааа дкадакадка дкаскакакс 3420 ааддакддкк адакаскака каскакккас каскаскдка акдккаскак ааксаадаск 3480 адаадааадк скаскдаккд аккаскксда скдаксдакк дкаккдакск адккадкака 3540 ксаааксдас ааададссдс сдкккккакк сакксакакк ксссдссаск аадссадкак 3600 аскакассак адкадкакад скддкккадк кдакдссдад садсксаасс ксдскааккд 3660 акаксадсак кссаакссак ккккксаскд дсааадаака ккадаададд ааддаддадд 3720 аддакаас 3728

<210> 2 <211> 1749

- 34 008007 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пхдег <220>

<221> СДЗ <222> (1)..(1749) <400> 2

акд дед аде дса скс скс кдд скс ксс скд скд ддк ддс аде асе ска 48 Мек А1а Зег А1а Ьеи Ьеи Тгр Ьеи Зег Ьеи Ьеи С1у С1у Зег ТЬг Ьеи 1 5 10 15 дсс кса аск ска дас асе адк аак асе сск асе акс аад ада дса дас 96 А1а Зег ТЬг Ьеи Азр ТЬг Зег Азп ТЬг Рго ТЬг 11е Ьуз Агд А1а Азр 20 25 30 дса дда аас аас асе ксс кса акс сса аса дсс асе скс аас аас асе 144 А1а С1у Азп Азп ТЬг Зег Зег 11е Рго ТЬг А1а ТЬг Ьеи Азп Азп ТЬг 35 40 45 дкс ккс акс ддс едк ксс скд ссс дад ккс дад сад дад ккд ккс скд 192 Уа1 РНе 11е С1у Агд Зег Ьеи Рго 61и РЬе С1и С1п С1и Ьеи РЬе Ьеи 50 55 60 ддк акс аад ккк дек дак дад ссс дкд еда ккс асе ссд кед асд ккд 240 С1у Не Ьуз РЬе А1а Азр С1и Рго Уа1 Агд РЬе ТЬг Рго Зег ТЬг Ьеи 65 70 75 80 ааа асе дкс как сдс дсс аак дас аде дас аас ддд дкд как сак дек 288 Ьуз ТЬг Уа1 Туг Агд А1а Азп Азр Зег Азр Азп С1у Уа1 Туг Нхз А1а 85 90 95 ксс аса дса ксс дда скд сад аск ксс кед ддд асе дкд скс кас аас 336 Зег ТЬг А1а Зег С1у Ьеи С1п ТЬг Зег Зег С1у ТЬг Уа1 Ьеи Туг Азп 100 105 НО дсс аса дад как ддд как дак кде ссс ддд как дда ксс дак дад асд 384 А1а ТЬг С1и Туг С1у Туг Азр Суз Рго С1у Туг С1у Зег Азр С1и ТЬг 115 120 125 дад скд дед дад даа дда как дед сдд ккс дак дад аас кдк акд аас 432 С1и Ьеи А1а С1и С1и 61у Туг А1а Агд РЬе Азр С1и Азп Суз Мек Азп 130 135 140 скд аак ака акк сдд ссс аад ада дад ааа дад дак дад ккд ккд сск 480 Ьеи Азп 11е Не Агд Рго Ьуз Агд С1и Ьуз С1и Азр С1и Ьеи Ьеи Рго 145 150 155 160 дкд акд акк кдд акс ккк ддк ддк ддк кдд дкд сад ддк дед аск дек 528 Уа1 Мек Не Тгр 11е РЬе С1у С1у С1у Тгр Уа1 С1п С1у А1а ТЬг А1а 165 170 175 дак ссд адд кас аак акд аде 1:а1: акк дкк сдс сад ддк дед ккд аак 576 Азр Рго Агд Туг Азп Мек Зег Туг 11е Уа1 Агд С1п С1у А1а Ьеи Азп

- 35 008007

180 185 190

даб аад ссЕ дЕс ккд ддк дЕс Есд аЕс ааЕ Еас сдЕ дкд дсЕ дед ЕЕЕ 624 Азр Ьуз Рго Уа1 Ьеи С1у Уа1 Зег Не Азп Туг Агд Уа1 А1а А1а РЬе 195 200 205 дда ЕЕс сП дас ЕсЕ дЕс дад дкк аЕд даа Есс ддс аас асд аас ска 672 С1у РЬе Ьеи Азр Зег Уа1 С1и Уа1 МеЕ С1и Зег С1у Азп ТЬг Азп Ьеи 210 215 220 дда сЕЕ сдЕ дак сад сдс дЕс дсс аЕд саЕ кдд дЕс ааа саа аас аЕс 720 С1у Ьеи Агд Азр 61п Агд Уа1 А1а МеЕ Низ Тгр Уа1 Ьуз С1п Азп Не 225 230 235 240 аад дед ЕЕЕ ддк ддк дас ссд дас аад аЕс асс аЕс кдд дда даа Еса 768 Ьуз А1а РЬе С1у С1у Азр Рго Азр Ьуз Не ТЬг Не Тгр С1у С1и Зег 245 250 255 дсЕ ддк дсс бас аде дЕс дда дсс сас сЕд дЕс асс аас дас ддк дас 816 А1а С1у А1а Туг Зег Уа1 С1у А1а НЬз Ьеи Уа1 ТЬг Азп Азр С1у Азр 260 265 270 аас дад ддс ска :1с ада дсс дсс аЕс аЕд даа Есс ддс аас дса дЕс 864 Азп С1и С1у Ьеи РЬе Агд А1а А1а Не МеЕ С1и Зег С1у Азп А1а Уа1 275 280 285 дда ссс ссс бас аас ддс асд дас кдд Еас сад ссд аЕд Еас дас сад 912 С1у Рго Рго Туг Азп С1у ТЬг Азр Тгр Туг ΘΙη Рго МеЕ Туг Азр С1п 290 295 300 акс дкд аас дса асс аас Еде асс асс Еса аде аас асс сЕЕ саа Еде 960 Не Уа1 Азп А1а ТЬг Азп Суз ТЬг ТЬг Зег Зег Азп ТЬг Ьеи С1п Суз 305 310 315 320 сЕс сдс даа дЕс ссс Нс Еса асд аЕс Еас асс дсс дса дас аЕс ддс 1008 Ьеи Агд С1и Уа1 Рго РЬе Зег ТЬг Не Туг ТЬг А1а А1а Азр Не С1у 325 330 335 скд даа кдд ЕЕс дсс асс аЕс дас ддс асс ЕЕс аЕс ааа даа ЕаЕ ссс 1056 Ьеи С1и Тгр РЬе А1а ТЬг Не Азр С1у ТЬг РЬе Не Ьуз 61и Туг Рго 340 345 350 саа акс аде аЕЕ асд дад ддс сдс ЕЕс дсс аад дЕс ссс аЕс сЕс саЕ 1104 С1п Не Зег Не ТЬг С1и С1у Агд РЬе А1а Ьуз Уа1 Рго Не Ьеи Н13 355 360 365 ддс асс аас асс дас дад ддс дкд адЕ ЕЕс ддк асд асд ддс дкд аас 1152 61у ТЬг Азп ТЬг Азр 61и С1у Уа1 Зег РЬе С1у ТЬг ТЬг С1у Уа1 Азп 370 375 380 асЕ дак дсс даа дед акс сад сад ккд аЕд дса Есс ааа сдс кдд дЕс 1200 ТЬг Азр А1а С1и А1а Не С1п С1п Ьеи МеЕ А1а Зег Ьуз Агд Тгр Уа1 385 390 395 400 сЕа аас даа асс саа дсс асд асс сЕс сЕа Есд сас ЕаЕ ссс аас аЕс 1248 Ьеи Азп С1и ТЬг С1п А1а ТЬг Тпг Ьеи Ьеи Зег ΗΪ3 Туг Рго Азп Не

405 410 415

- 36 008007

Ьсс дсс сЬа ддс Ьд1 ссс Ьас дда Ьдд ддс аас асд асе Ьдд ссд аад 1296 Зег А1а Ьеи С1у Суз Рго Туг С1у Тгр <31у Азп ТЬг ТЬг Тгр Рго Ьуз 420 425 430 сЬд ддд ЬаЬ даа ЬаЬ аад сдс Ьас дад Ьсд аЬд дед ддс даЬ сЬд Ьдс 1344 Ьеи С1у Туг С1и Туг Ьуз Агд Туг С1и Зег МеЬ А1а С1у Азр Ьеи Суз 435 440 445 аЬд д« дс! ссд адд адд 11д сЬс адЬ сад аад а!д аад дад ЬаС дад 1392 Ме! Уа1 А1а Рго Агд Агд Ьеи Ьеи Зег С1п Ьуз Μβΐ Ьуз С1и Туг С1и 450 455 460 дад саа дкд ΐΐΐ дед ЬаЬ едд Ьдд да! дЬс дсЬ дед ΐΐ₅ ааЬ даЬ Ьсд 1440 С1и С1п Уа1 РЬе А1а Туг Агд Тгр Азр Уа1 А1а А1а Ьеи Азп Азр Зег 465 470 475 480 адЬ асд аЬЬ ддд дЬд дед саЬ ΐΐΐ дсЬ дад аЬс ссд ΐΐΐ ρΐΐ ΐΐο дсс 1488 Зег ТЬг 11е С1у Уа1 А1а Ηιβ РЬе А1а С1и 11е Рго РЬе Уа1 РЬе А1а 485 490 495 аас сс! дкд сад аас аЬс асЬ ссд ЬЬд дда адЬ да! ссс дса ада сЬд 1536 Азп Рго Уа1 С1п Азп 11е ТЬг Рго Ьеи С1у Зег Азр Рго А1а Агд Ьеи 500 505 510 дад Ид дд! ааЬ сЬд дсс дед адд аЬд Ьдд асд дсЬ ΐΐΐ дЬд асд да! 1584 С1и Ьеи С1у Азп Ьеи А1а А1а Агд Μθΐ Тгр ТЬг А1а РЬе Уа1 ТЬг Азр 515 520 525 ЬЬд даЬ ссд ааЬ ддд саЬ ддЬ дЬс ΐοΐ ддЬ аЬс ссс сас Ьдд ссд ааа 1632 Ьеи Азр Рго Азп С1у ΗΪ3 С1у Уа1 Зег С1у 11е Рго Ηιβ Тгр Рго Ьуз 530 535 540 Рас аас сЬс асЬ даЬ ссд адд дас ΐΐΐ дЬд ΐΐο едд сЬа ссд адд даЬ 1680 Туг Азп Ьеи ТЬг Азр Рго Агд Азр РЬе Уа1 РЬе Агд Ьеи Рго Агд Азр 545 550 555 560 дда адЬ ЬаЬ дЬд дад аад даЬ асЬ ΐΐΐ адд асд ддд ддд аЬЬ даЬ ЬаЬ 1728 С1у Зег Туг Уа1 С1и Ьуз Азр ТЬг РЬе Агд ТЬг С1у С1у 11е Азр Туг 565 570 575 аЬЬ ааЬ аса βΐΐ дЬд едд Ьаа 1749 Не Азп ТЬг 11е Уа1 Агд

580 <210> 3 <211> 582 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пЬдег <400> 3

Мек А1а Бег А1а Ьеи Ьеи Тгр Ьеи Зег Ьеи Ьеи С1у 61у Зег ТЬг Ьеи

15 10 15

37 008007

А1а Зег ТЬг Ьеи 20 Азр ТЬг Зег Азп ТЬг 25 Рго ТЬг 11е Ьуз Агд 30 А1а Азр А1а С1у Азп Азп ТЬг Зег Зег 11е Рго ТЬг А1а ТЬг Ьеи Азп Азп ТЬг 35 40 45 Уа1 РЬе 11е С1у Агд Зег Ьеи Рго С1и РЬе С1и С1п С1и Ьеи РЬе Ьеи 50 55 60 С1у 11е Ьуз РЬе А1а Азр С1и Рго Уа1 Агд РЬе ТЬг Рго Зег ТЬг Ьеи 65 70 75 80 Ьуз ТЬг Уа1 Туг Агд А1а Азп Азр Зег Азр Азп С1у Уа1 Туг Н13 А1а 85 90 95 Зег ТЬг А1а Зег С1у Ьеи С1п ТЬг Зег Зег С1у ТЬг Уа1 Ьеи Туг Азп 100 105 110 А1а ТЬг С1и Туг С1у Туг Азр Суз Рго С1у Туг С1у Зег Азр С1и ТЬг 115 120 125 С1и Ьеи А1а С1и С1и С1у Туг А1а Агд РЬе Азр С1и Азп Суз Мек Азп 130 135 140 Ьеи Азп 11е Не Агд Рго Ьуз Агд С1и Ьуз С1и Азр С1и Ьеи Ьеи Рго 145 150 155 160 Уа1 Мек Не Тгр Не РЬе С1у С1у С1у Тгр 7а1 С1п С1у А1а ТЬг А1а 165 170 175 Азр Рго Агд Туг Азп Мек Зег Туг 11е Уа1 Агд С1п С1у А1а Ьеи Азп 180 185 190 Азр Ьуз Рго Уа1 Ьеи С1у Уа1 Зег 11е Азп Туг Агд νθΐ А1а А1а РЬе 195 200 205 С1у РЬе Ьеи Азр Зег Уа1 С1и Уа1 Мек С1и Зег С1у Азп ТЬг Азп Ьеи 210 215 220 С1у Ьеи Агд Азр С1п Агд Уа1 А1а Мек ΗΪ3 Тгр Уа1 Ьуз С1п Азп 11е 225 230 235 240 Ьуз А1а РЬе С1у С1у Азр Рго Азр Ьуз 11е ТЬг 11е Тгр С1у С1и Зег 245 250 255 А1а С1у А1а Туг Зег Уа1 С1у А1а Н13 Ьеи Уа1 ТЬг Азп Азр С1у Азр 260 265 270 Азп С1и С1у Ьеи РЬе Агд А1а А1а Не Мек С1и Зег С1у Азп А1а Уа1 275 280 285 С1у Рго Рго Туг Азп С1у ТЬг Азр Тгр Туг С1п Рго Мек Туг Азр С1п 290 295 300 Не Уа1 Азп А1а ТЬг Азп Суз ТЬг ТЬг Зег Зег Азп ТЬг Ьеи С1п Суз 305 310 315 320 Ьеи Агд С1и Уа1 Рго РЬе Зег ТЬг 11е Туг ТЬг А1а А1а Азр Не С1у 325 330 335 Ьеи С1и Тгр РЬе А1а ТЬг Не Азр С1у ТЬг РЬе Не Ьуз С1и Туг Рго 340 345 350 С1п 11е Зег Не ТЬг С1и С1у Агд РЬе А1а Ьуз Уа1 Рго 11е Ьеи ΗΪ3

- 38 008007

355 360 365 С1у ТЬг Азп ТЬг Азр С1и С1у Уа1 Зег РЬе С1у ТЬг ТЬг С1у Уа1 Азп 370 375 380 ТЬг Азр А1а С1и А1а 11е С1п С1п Ьеи МеЕ А1а Зег Ьуз Агд Тгр Уа1 385 390 395 400 Ьеи Азп С1и ТЬг С1п А1а ТЬг ТЬг Ьеи Ьеи Зег ΗΪ3 Туг Рго Азп Не 405 410 415 Зег А1а Ьеи С1у Суз Рго Туг С1у Тгр С1у Азп ТЬг ТЬг Тгр Рго Ьуз 420 425 430 Ьеи С1у Туг С1и Туг Ьуз Агд Туг С1и Зег МеЕ А1а 61у Азр Ьеи Суз 435 440 445 МеЕ Уа1 А1а Рго Агд Агд Ьеи Ьеи Зег С1п Ьуз МеЕ Ьуз С1и Туг С1и 450 455 460 61и С1п Уа1 РЬе А1а Туг Агд Тгр Азр Уа1 А1а А1а Ьеи Азп Азр Зег 465 470 475 480 Зег ТЬг 11е С1у Уа1 А1а Н13 РЬе А1а С1и Не Рго РЬе Уа1 РЬе А1а 485 490 495 Азп Рго Уа1 С1п Азп Не ТЬг Рго Ьеи С1у Зег Азр Рго А1а Агд Ьеи 500 505 510 С1и Ьеи С1у Азп Ьеи А1а А1а Агд МеЕ Тгр ТЬг А1а РЬе Уа1 ТЬг Азр 515 520 525 Ьеи Азр Рго Азп С1у Н1з С1у Уа1 Зег С1у Не Рго ΗΪ3 Тгр Рго Ьуз 530 535 540 Туг Азп Ьеи ТЬг Азр Рго Агд Азр РЬе Уа1 РЬе Агд Ьеи Рго Агд Азр 545 550 555 560 С1у Зег Туг Уа1 С1и Ьуз Азр ТЬг РЬе Агд ТЬг С1у С1у Не Азр Туг 565 570 575

Не Азп ТЬг 11е Уа1 Агд

580 <210> 4 <211> 3853 <212> ДНК <213> АзрегдШиз п!дег

<400> 4 сЕЕЕссЕдЕЕ дсссддЕсЕЕ ЕдЕЕдЕЕдЕс аЕаддаЕаса аЕЕасссада саасдЕЕсдд 60 ЕЕЕдЕсдаЕс адЕЕЕЕаадЕ дЕдсдЕддас Едасадссаа ддссасЕддд дссссЕдссЕ 120 сЕаЕсаЕЕЕа аЕЕссасасд сЕсдссЕсЕд садсЕсЕддс ассадсдЕЕд саааЕЕссад 180 дддЕсадссЕ асдЕддсаЕЕ аддсЕсЕаад адааЕсЕдад ддаааддаЕЕ ЕсасЕЕадаа 240 аааЕЕЕаЕсд дЕссддсЕЕд ЕссдаЕсддЕ аддааддсаЕ ЕдсЕЕссссЕ саЕаЕдсддс 300 сссддЕЕссс аадсадсЕда ЕЕсдддасдЕ ЕЕЕссддсЕЕ даЕсдсЕаЕа сЕсЕсаЕааЕ 360

- 39 008007

сЬскссЬдса ададсЕдда! ааасЫддЬ! ЬсЬЬаЬсЬЬс едЬддддаЬд ссаЬадЬсса 420 дкадасдскд ЬсЕсдааа!Г дадСадсасс асЬаЬЬЬасд ддсаадЬкаа Еддсасайд! 480 аНадсШд ЬасЬдасддЕ ЕдаааЬд'Ьдд адсааШос ддсйаЕдкас сдда!с!д!1 540 ссддаЬаксЬ 'Ьса'Ьсдсаа'Ь ЬадЕЕадЬас акаааасЬсс скадЬсасдс аадаасддЕЬ 600 сдаасайаас даа'Ь'Сааааа ЬЬсЬсаЕЕсЬ сЕддсааддс Ь'Ссдааа'ЕдЕ !1д!!!ссгс 660 дсЬЬдсЬсЬа РЬадсасЬЬа ЫдсЬссЬЫ да! сдсааМ деддйааааа Ьадаасадсс 720 аддааЬааа! ссааакссса садсЕасЬдЕ асдаааЕддс ассЕас'ЬаЬд дЕсЬссакаа 780 ссадсасЬаЬ ааксаадасс 1сШс£сдд РаЕйссаЕа! дсасадсаас с^аЬЬддйда 840 ссЕГсдс!!д сддассссас даЕсаакдаа сассЬссЬдд ссадйассаа дааакдсаас 900 адааЕаПса сссдсаЕдкд ЬЕддаЬЬЬаа Ьсадасадад ддЕдсЪ!сед аадссЕдсс! 960 Ьас-ЬсйсааЬ дЬсдЕссдсс сддсаадсак сдсЬсЬЬЬсЬ дааадЕсЬ-Ьс ссдЬЬдсЬдд 1020 ЕсадЕаЬаЕа ссссаааЕсЕ даксадаадд дссадаасЬд асЬЬ-ЬдсдсЬ сддссссад! 1080 сЬддаЕЕсак ддсдддддаЕ ЕсассЕссдд сЬсЫасаЬса дадааасаа·! асаа1сЬд1с 1140 сЫ саксдЫ даЕсадЬсад Ьссааа-Ьдда ааадсссд!! аксдсадЬса дЬсЬаааЬЬа 1200 ЕсдЕсИсаа ЪдскддддЫ ЬЬаЬдйддад сааддадаЬд ааддаадссд дадкадддаа 1260 сс'Ьдддас'ЬЕ ададассаас даЫадсЕс! дсаЫддаЕа саадааад1аа ддЕаЕс-Ьсда 1320 ЬадЕдаадсЕ сЫссаадга сддаЕсЕдас сакдасЫаад асаЬЬдсйдс д-ЫайддЕдда 1380 дасссЕдсЕс аддЕЕасааЕ ЬЬддддЪдаа адЕдссддсд сЬаа-ЬадйдЕ ЬддсасасаЬ 1440 сЕддЕЕдсЕί асддадддсд сдакдаЕддЕ аЬаЕЬссдйд садсЕаксад Едааад-ЬддЕ 1500 дссссаадкд ЕЫассаасд ЬЬакссааса ссЕдсЕдаа! ддсадссска ЕйаЕдаЕдд! 1560 аЕ'ЕдГдаа'Ьд саксаддсЕд садЕЕсадса асддайасЫ ЕддсЕЕдЬс! ссдаасааЬ! 1620 Ц -> 4- Ζ-Ζ ζ-Ч Ч Ζ⁴^ ζ-г ζ-ч —ν 4— 4— 4— 4“ <—г —ч /-, —Ч —» 7“Ч —Ч Ζ-ч 7—Г 4— 7Ч -ч 4- 4— 7*Ζ 4“ —ч Ζ-ч ζ-Ч Ζ—» —Ч Ή ζ-ζ Ζ“4 —Ч Ζ-Ч 7-Г Ζ4 4— -4¼¼ 1 соп ССайСГааСа υαι_ иуцаиуу υαι_υι_ и сует ааца^у ι_ι_ и а ι_ иу и си—ι_ у иаку^иа и. и ιυυυ ЬсаддссЕса дсддадсааа аЕЕсаЬ-ЕссЬ дкеаЬадаЬд асдас-ЬЕсаЕ Еааададад! 1740 дссасддЬЬс адскссадаа дддсаас!1с дгсааад!1с сскасЕЬдаЬ ЕддадсЕаас 1800 дссдасдаад ддасЬдсаЬЬ ЬдсйдЬддад ддадксааса садакдсЬда дЬЬЬсдсдад 1860 сЬадйсааад дЬ-ЬддддссЬ саасаасдсй ассасддайа !с!!ддаддс сскаЬассса 1920 дасаЪЕссйс адакаддааЬ ссссдссаЬа айддЫаддаа ддссассдЬс еддакаЪдда 1980 ааЕсаайаса адсдЬдкддс сдсаЬЫсад ддЬдаЬдЬЬа асайссаЬдс сдсасдЕадд 2040 ЫдассадЕс адаксЬддЬс аЬсссдсаак аксЬсадГа! айадсйаса! дЬЬЬдасд!! 2100 аксадсссйд даЬакддссс сЬсЬдсЬддЕ ЬссЬаЬдсЬд дддсЬасйса ЪддЬасЬда! 2160 аЬЬссдЬасд ЬЬЕЬсЕаЕаа ЕсЕддаЕддс сйддддЕаЬд асЬсдаасаа саадЬсса'Ьа 2220 дааадсаЕас сЕаасадИа Ысссдса! д адсааааНа ЕдЬсаадаа! дрдддйсад! 2280 ЫЕдЕдасаа саПддассс аазЕсаГЕс! ддаддйаЪдд Есссасайсс саМасс-Ьа! д 2340 аЕЕдсдсааЬ дйсадасссд адс-ЬдааЬса ас!а!с±Ьс1 ЬаддаасЬаа !д!!сад!дд 2400 ссдссакаса акаТсдакаа ЕссддадаЕа а!с!11!!сд а'ЬассдаЪд'Ь сасдаассЕс 2460 асакакдЕда дЬЬсЬдасдЬ НассдЕдсд дадддсакаа ааЬасаксад !да!сасс!! 2520 дсаадЕдаЫ: ЕсдддсасСд адаЕсасаЕа СсЬЬсЬсддЬ сЕааЕЕЕЕад ааЕдасЕдЕд 2580 дЬсЕсакска ассадасЬЕд дсссдсаддЕ сЕЬЕасдссс асЕддЕддЕа аЕЬдаЬдсаа 2640 сссссаадсЕ аЬаЬадГдкс ЬддддсЕЕЕд аасйасЬдЬс аайдадсдаа ааЫадаска! 2700 ЫСССЕМа! дасЬсаЬдЬа дЬадсаЬЬЬд ЬдсЬддсасЬ дйдаЬсаада !а!д!!1!!с 2760 дадаЫассд дЬадсададй адЕсда-Ьд-Ьс дссааЬаЬЬа аЬдааЬадЬа 2820 аЬаасЬЬадд адЕсаИсад ЬаЕадЬсда! аскдасакаа дЕа-ЬсЬЬЬЬс ЫдЬдаЬаЫ 2880 ЬаЬаайа'Ьд'Ь сссдШддс с'ЬЕд'Ь'Ь'Ьд'Ьа дйаасЕсЕса Еадсс'Едс'Ьд с!!дадаас! 2940

- 40 008007

сакскдккса аксакадада кассааккак ддааддакад дккддсаксд дкдкк кд ккк 3000 саксаадаск аскасскаак аадксаскда адааддскдк адаскдааад сдсдасаккд 3060 акдаккадаа ккссаасккк ддксаасака кдсаккадас какааааддд асакдккада 3120 адааскаадк асакасдасс акадддкдкд даааасаддд сЕЕсссдксс дсксадссдк 3180 асккаадсса сасдссддда ддккадкадк кдддкдддкд ассассадсд ааксссккск 3240 дккдкакдкк кккдЬЬЬскс какааааскк ккддксдддс аксксдадак дксккссадд 3300 акдскаааас скксдддккс сксасадсдд адакддкдкс ааскддсккк кккаакдсак 3360 ксккддскаа адкдсксдкд аасасддсаа какадкасда кдакакскда адкккдкддк 3420 дксаадасак акдсккаккд кдассассад ассакааакс ддадкаккса садсккакак 3480 сакссксааа саккдаккдс акадкададк дЬскаасЕсЬ кдасксаадд даккдаааак 3540 даккакккда ааакакаддк адккккдаак аасаккскдд сасасдадск ккадскддак 3600 кадкаадакд кдасдссдак кккдддкккд аккакдксак сакккддсад кксссссада 3660 ддасадсссд дккаадаасд аассккккск дадсссдкак асааакдсдд ддаасадада 3720 кдаддадакд ссдаадсакд сЕЕкддсааа садаадссас кдкдааааас сакксасада 3780 каксккдкда кадккддакк дсаскдаскд кссдсдааад сдадсакакс каксссдкак 3840 аскдадааск адк 3853

<210> 5 <211> 1743 <212> ДНК <213> Азрегд±11из пхдег <220>

<221> СДЗ <222> (1)..(1743) <400> 5

акд ккк дкк ксс кед екк дек ска кка дса екк акк дек сек ккд акс 48 Мек РЬе Уа1 Зег Зег Ьеи А1а Ьеи Ьеи А1а Ьеи 11е А1а Рго Ьеи 11е 1 5 10 15 дса акк дед дка ааа ака даа сад сса дда ака аак сса аак ссс аса 96 А1а Не А1а Уа1 Ьуз 11е С1и С1п Рго С1у 11е Азп Рго Азп Рго ТЬг 20 25 30 дек аск дка еда аак ддс асе кас как ддк скс сак аас сад сас как 144 А1а ТЬг Уа1 Агд Азп С1у ТЬг Туг Туг С1у Ьеи НЬз Азп С1п Нхз Туг 35 40 45 аак саа дас скс ккк скс ддк акк сса как дса сад саа сек акк ддк 192 Азп С1п Азр Ьеи РНе Ьеи С1у Не Рго Туг А1а С1п С1п Рго 11е С1у 50 55 60 дас екк сдс ккд сдд асе сса еда кеа акд аас асе ксс кдд сса дка 240 Азр Ьеи Агд Ьеи Агд ТЬг Рго Агд Зег Мек Азп ТЬг Зег Тгр Рго Уа1 65 70 75 80

- 41 008007

сса ада ааЕ дса аса даа ЕаЕ Еса ссс дса ЕдЕ дЕЕ дда ЕЕЕ ааЕ сад 288 Рго Агд Азп А1а ТЬг С1и Туг Зег Рго А1а Суз Уа1 С1у РЬе Азп С1п 85 90 95 аса дад ддк дсЕ Есс даа дсс Еде сЕЕ асЕ сЕс ааЕ дЕс дЕс сдс ссд 336 ТЬг С1и С1у А1а Зег С1и А1а Суз Ьеи ТЬг Ьеи Азп Уа1 Уа1 Агд Рго 100 105 110 дса аде акс дсЕ сЕЕ ЕсЕ даа адЕ сЕЕ ссс дЕЕ дсЕ дЕс Едд аЕЕ саЕ 384 А1а Зег Не А1а Ьеи Зег С1и Зег Ьеи Рго Уа1 А1а УаЬ Тгр Не Нйз 115 120 125 ддс ддд дда ЕЕс асе Есс ддс ЕсЕ Еса Еса дад ааа саа Еас ааЕ сЕд 432 С1у С1у С1у РЬе ТЬг Зег С1у Зег Зег Зег С1и Ьуз С1п Туг Азп Ьеи 130 135 140 Есс ЕЕс акс дЕЕ даЕ сад Еса дЕс саа аЕд даа аад ссс дЕЕ аЕс дса 480 Зег РЬе 11е Уа1 Азр С1п Зег Уа1 С1п МеЕ С1и Ьуз Рго Уа1 11е А1а 145 150 155 160 дЕс адЕ сЕа ааЕ ЕаЬ сдЕ сЕЕ саа Еде Едд ддЕ ЕЕЕ аЕд Едд аде аад 528 Уа1 Зег Ьеи Азп Туг Агд Ьеи С1п Суз Тгр С1у РЬе МеЕ Тгр Зег Ьуз 165 170 175 дад аЕд аад даа дсс дда дЕа ддд аас сЕд дда сЕЕ ада дас саа еда 576 С1и Мек Ьуз С1и А1а С1у Уа1 С1у Азп Ьеи С1у Ьеи Агд Азр С1п Агд 180 185 190 ЕЕа дсЕ сЕд сак Едд аЕа саа даа аас аЕЕ дсЕ дед ЕЕЕ ддЕ дда дас 624 Ьеи А1а Ьеи Низ Тгр 11е С1п С1и Азп Не А1а А1а РЬе С1у С1у Азр 195 200 205 ссЕ дсЕ сад дЬЕ аса аЕЕ Едд ддЕ даа адЕ дсс ддс дсЕ ааЕ адЕ дЕЕ 672 Рго А1а С1п Уа1 ТЬг Не Тгр С1у С1и Зег А1а С1у А1а Азп Зег Уа1 210 215 220 ддс аса сак скд дЕЕ дсЕ Еас дда ддд сдс даЕ даЕ ддЕ аЕа ЕЕс сдЕ 720 С1у ТЬг Низ Ьеи Уа1 А1а Туг С1у С1у Агд Азр Азр С1у 11е РЬе Агд 225 230 235 240 дса дсЕ аЕс адЕ даа адЕ ддЕ дсс сса адЕ дЕЕ Еас саа сдЕ ЕаЕ сса 768 А1а А1а 11е Зег С1и Зег С1у А1а Рго Зег Уа1 Туг С1п Агд Туг Рго 245 250 255 аса ссЕ дсЕ даа Едд сад ссс ЕаЕ ЕаЕ даЕ ддЕ аЕЕ дЕд ааЕ дса Еса 816 ТЬг Рго А1а С1и Тгр С1п Рго Туг Туг Азр С1у 11е Уа1 Азп А1а Зег 260 265 270 ддс Еде адЕ Еса дса асд даЕ асЕ ЕЕд дсЕ ЕдЕ сЕс еда аса аЕЕ сса 864 С1у Суз Зег Зег А1а ТЬг Азр ТЬг Ьеи А1а Суз Ьеи Агд ТЬг Не Рго 275 280 285 асЕ аас аЕа ЕЕд саЕ ддс аЕс ЕЕЕ дас аас асд ЕсЕ аЕЕ дЕа ссс аЕд 912 ТЬг Азп 11е Ьеи Низ С1у Не РЬе Азр Азп ТЬг Зег Не Уа1 Рго МеЕ 290 295 300 сас дсЕ аЕЕ Еса ддс сЕс аде дда дса ааа ЕЕс аЕЕ ссЕ дЕс аЕа даЕ 960

- 42 008007

ΗΪ5 А1а 11е Зег С1у Ьеи Зег С1у А1а Ьуз РЬе Не Рго Уа1 Не Азр 305 310 315 320 дас дас ЕЕс аЕЕ ааа дад адЕ дсс асд дЕЕ сад сЕс сад аад ддс аас 1008 Азр Азр РЬе Не Ьуз С1и Зег А1а ТЬг Уа1 С1п Ьеи С1п Ьуз С1у Азп 325 330 335 ЕЕс дЕс ааа дЕЕ ССС Еас ЕЕд аЕЕ дда дсЕ аас дсс дас даа ддд асЕ 1056 РЬе Уа1 Ьуз Уа1 Рго Туг Ьеи Не С1у А1а Азп А1а Азр С1и С1у ТЬг 340 345 350 дса ЕЕЕ дсЕ дЕд дад дда дЕс аас аса даЕ дсЕ дад ЕЕЕ сдс дад сЕа 1104 А1а РЬе А1а Уа1 С1и С1у Уа1 Азп ТЬг Азр А1а С1и РЬе Агд С1и Ьеи 355 360 365 дЕс ааа ддЕ Едд ддс сЕс аас аас дсЕ асе асд даЕ аЕс ЕЕд дад дсс 1152 Уа1 Ьуз С1у Тгр С1у Ьеи Азп Азп А1а ТЬг ТЬг Азр Не Ьеи С1и А1а 370 375 380 сЕа Еас сса дас аЕЕ ссЕ сад аЕа дда аЕс ССС дсс аЕа аЕд дЕЕ дда 1200 Ьеи Туг Рго Азр Не Рго С1п 11е С1у Не Рго А1а Не МеЕ Уа1 С1у 385 390 395 400 адд сса ссд Есс дда ЕаЕ дда ааЕ саа Еас аад сдЕ дЕд дсс дса ЕЕЕ 1248 Агд Рго Рго Зег С1у Туг С1у Азп С1п Туг Ьуз Агд Уа1 А1а А1а РЬе 405 410 415 сад ддЕ даЕ дЕЕ аас аЕс саЕ дсс дса сдЕ адд ЕЕд асе адЕ сад аЕс 1296 С1п С1у Азр Уа1 Азп Не Н.2-3 А1а А1а, Агд Аггт Ьеи ТЬг Зег С1п 11е 420 425 430 Едд Еса Есс сдс ааЕ аЕс Еса дЕа аде Еас аЕд ЕЕЕ дас дЕЕ аЕс 1344 Тгр Зег Зег Агд Азп Не Зег Уа1 Туг Зег Туг МеЕ РЬе Азр Уа1 Не 435 440 445 аде ссЕ дда ЕаЕ ддс ССС ЕсЕ дсЕ ддЕ Есс ЕаЕ дсЕ ддд дсЕ асЕ саЕ 1392 Зег Рго С1у Туг С1у Рго Зег А1а С1у Зег Туг А1а С1у А1а ТЬг Нтз 450 455 460 ддЕ асЕ даЕ аЕЕ ссд Еас дЕЕ ЕЕс ЕаЕ ааЕ сЕд даЕ ддс сЕд ддд ЕаЕ 1440 С1у ТЬг Азр Не Рго Туг Уа1 РЬе Туг Азп Ьеи Азр С1у Ьеи С1у Туг 4 65 470 475 480 дас Есд аас аас аад Есс аЕа даа аде аЕа ссЕ аас адЕ ЕаЕ Есс сдс 1488 Азр Зег Азп Азп Ьуз Зег 11е С1и Зег Не Рго Азп Зег Туг Зег Агд 485 490 495 аЕд аде ааа аЕЕ аЕд Еса ада аЕд Едд дЕс адЕ ЕЕЕ дЕд аса аса ЕЕд 1536 МеЕ Зег Ьуз 11е МеЕ Зег Агд МеЕ Тгр Уа1 Зег РЬе Уа1 ТЬг ТЬг Ьеи 500 505 510 дас сса ааЕ саЕ ЕсЕ дда ддЕ аЕд дЕс сса саЕ ССС аЕЕ ссЕ аЕд аЕЕ 1584 Азр Рго Азп ΗΪ3 Зег С1у С1у МеЕ Уа1 Рго Н13 Рго Не Рго МеЕ Не 515 520 525 дед саа ЕдЕ сад асе еда дсЕ даа Еса асЕ аЕс ЕЕс ЕЕа дда асЕ ааЕ 1632 А1а С1п Суз С1п ТЬг Агд А1а С1и Зег ТЬг Не РЬе Ьеи С1у ТЬг Азп

- 43 008007

530 535 540

дкк сад кдд сед сса кас аак акс дак аак сед дад ака акс ккк ккс Уа1 С1п Тгр Рго Рго Туг Азп Не Азр Азп Рго С1и 11е 11е РЬе РЬе 545 550 555 560 дак асе дак дке асд аас еке аса как аск кдд ссс дса ддк екк кас Азр ТЬг Азр ν₃ι ТЬг Азп Ьеи ТЬг Туг ТЬг Тгр Рго А1а С1у Ьеи Туг 565 570 575 дсс сас кдд кдд каа А1а ΗΪ3 Тгр Тгр 580

1680

1728

1743

<210> 6 <211> 580 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пЬдег

<400> 6

Мек РЬе Уа1 Бег Бег Ьеи А1а Ьеи Ьеи А1а Ьеи 11е А1а Рго Ьеи Не 1 5 10 15 А1а 11е А1а Уа1 Ьуз 11е С1и С1п Рго С1у 11е Азп Рго Азп Рго ТЬг 20 25 30 А1а ТЬг Уа1 Агд Азп С1у ТЬг Туг Туг <31у Ьеи ΗΪ3 Азп С1п ΗΪΞ Туг 35 40 45 Азп С1п Азр Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Рго Туг А1а С1п С1п Рго Не С1у 50 55 60 Азр Ьеи Агд Ьеи Агд ТЬг Рго Агд Бег Мек Азп ТЬг Бег Тгр Рго Уа1 65 70 75 80 Рго Агд Азп А1а ТЬг С1и Туг Бег Рго А1а Суз Уа1 С1у РЬе Азп С1п 85 90 95 ТЬг С1и С1у А1а Бег С1и А1а Суз Ьеи ТЬг Ьеи Азп Уа1 Уа1 Агд Рго 100 105 но А1а Бег 11е А1а Ьеи Бег С1и Бег Ьеи Рго Уа1 А1а Уа1 Тгр Не Низ 115 120 125 С1у С1у С1у РЬе ТЬг Бег С1у Зег Бег Зег С1и Ьуз С1п Туг Азп Ьеи 130 135 140 Бег РЬе 11е Уа1 Азр С1п Бег Уа1 С1п Мек С1и Ьуз Рго Уа1 Не А1а 145 150 155 160 Уа1 Бег Ьеи Азп Туг Агд Ьеи С1п Суз Тгр С1у РЬе Мек Тгр Бег Ьуз 165 170 175 С1и Мек Ьуз С1и А1а С1у Уа1 С1у Азп Ьеи С1у Ьеи Агд Азр С1п Агд 180 185 190 Ьеи А1а Ьеи ΗΪ5 Тгр 11е С1п С1и Азп Не А1а А1а РЬе С1у С1у Азр

- 44 008007

195 200 205 Рго А1а ΘΙη Уа1 ТЬг Не Тгр С1у С1и Зег А1а С1у А1а Азп Зег Уа1 210 215 220 С1у ТЬг Нхз Ьеи Уа1 А1а Туг С1у С1у Агд Азр Азр С1у Не РЬе Агд 225 230 235 240 А1а А1а Не Зег С1и Зег С1у А1а Рго Зег Уа1 Туг ΘΙη Агд Туг Рго 245 250 255 ТЬг Рго А1а С1и Тгр С1п Рго Туг Туг Азр С1у Не Уа1 Азп А1а Зег 260 265 270 С1у Суз Зег Зег А1а ТЬг Азр ТЬг Ьеи А1а Суз Ьеи Агд ТЬг 11е Рго 275 280 285 ТЬг Азп 11е Ьеи Нхз С1у 11е РЬе Азр Азп ТЬг Зег Не Уа1 Рго Мек 290 295 300 Нхз А1а 11е Зег С1у Ьеи Зег 61у А1а Ьуз РЬе Не Рго Уа1 Не Азр 305 310 315 320 Азр Азр РЬе 11е Ьуз С1и Зег А1а ТЬг Уа1 ΘΙη Ьеи ΘΙη Ьуз С1у Азп 325 330 335 РЬе Уа1 Ьуз Уа1 Рго Туг Ьеи 11е С1у А1а Азп А1а Азр С1и С1у ТЬг 340 345 350 А1а РЬе А1а Уа1 С1и С1у Уа1 Азп ТЬг Азр А1а С1и РЬе Агд С1и Ьеи 355 360 365 Уа1 Ьуз С1у Тгр С1у Ьеи Азп Азп А1а ТЬг ТЬг Азр Не Ьеи С1и А1а 370 375 380 Ьеи Туг Рго Азр Не Рго С1п 11е С1у 11е Рго А1а Не МеЬ Уа1 С1у 385 390 395 400 Агд Рго Рго Зег С1у Туг С1у Азп С1п Туг Ьуз Агд Уа1 А1а А1 а РЬе 405 410 415 С1п С1у Азр Уа1 Азп 11е Нхз А1а А1а Агд Агд Ьеи ТЬг Зег ΘΙη 11е 420 425 430 Тгр Зег Зег Агд Азп Не Зег Уа1 Туг Зег Туг МеЕ РЬе Азр Уа1 11е 435 440 445 Зег Рго С1у Туг С1у Рго Зег А1а С1у Зег Туг А1а С1у А1а ТЬг НХЗ 450 455 460 С1у ТЬг Азр 11е Рго Туг Уа1 РЬе Туг Азп Ьеи Азр С1у Ьеи С1у Туг 465 470 475 480 Азр Зег Азп Азп Ьуз Зег 11е С1и Зег 11е Рго Азп Зег Туг Зег Агд 485 490 4 95 МеЬ Зег Ьуз 11е Мек Зег Агд Мек Тгр Уа1 Зег РЬе Уа1 ТЬг ТЬг Ьеи 500 505 510 Азр Рго Азп Н15 Зег С1у С1у МеЬ Уа1 Рго Нхз Рго Не Рго Мек 11е 515 520 525 А1а С1п Суз С1п ТЬг Агд А1а С1и Зег ТЬг 11е РЬе Ьеи С1у ТЬг Азп

530 535 540

- 45 008007

Ча1 С1п Тгр Рго Рго Туг Азп Не Азр Азп Рго С1и 11е 11е РЬе РЬе 545 550 555 560 Азр ТЬг Азр Ча1 ТЬг Азп Ьеи ТЬг Туг ТЬг Тгр Рго А! а С1у Ьеи Туг

565 570 575

А1а Ηί3 Тгр Тгр

580 <210> 7 <211> 2769 <212> ДНК <213> АзрегдШиз птдег <400> 7

дрдаасаард аЬЬадасЬЬд дадаасдрдд ЬсЬссдаЬРд даадкддасЬ аЬсЬаЬЬЬаа 60 РадЬаЬЬдсс ааддсЬЬРсР даксддсааа саЬаРРдЬсс ЬсссдЬддЬд асЬддЬЫюЬ 120 сдссрдардр дааЬадЬдаЬ ЬаЬсааЬЬЬа ЬасссЬЬсдР садсасЬдаЬ ЬдааЬаадаа 180 сЬЬассЬсас аЬЬдсссЬса ШсЬаЬдсЬ ддаассаЬдс ассЬаЬЬРЬЬ аадссаЬссд 240 дссдаЬсЬРа сРсасддРаЬ дддсЬдасЬЬ ЬдЬаЬсасаа сссакассЬд ЬсдассдЬсЬ 300 ааадЬддддР садЬдасаад саЬдаЬдссд дЬсадсаЬса ЬсадсЬсаас аааЬЬсЬадс 360 саасаасдда даЬсадЬддЬ ссдасаЬЬРд аЬдЬадааЬЬ ааасссдсас асдЬсддааЬ 420 ддсЬЬсаЬЬс РсддЬсЬРад ЬЬЬсссааЬс даадсЬддЬЬ садсдсссад асдсддадсд 480 Ьдддддрддд ассссддаЬЬ ЬЬсссссаса ассЬЬддсЬд ЬддЫддсас ЬЬРЬЬсаЬЬа 540 дссЬссаЬсс ЬдЬдсдсада ЬасЬададаа сЬсЬасаЬса РдссаЬсдад дЬЬЬдЬЬадЬ 600 ЬадаЬЬЬдрр аасРадсЬда дсддРдРадд ЬдсаЬдссдЬ асддРдадЬЬ ЬдрсЬаЬсЬЬ 660 РЬдЬаЬадсс ддаадссдаа ддЬассссдс дЬсаЬддсЬа ЬаЬааддсЬЬ дРаРаЬссса 720 ЬдсЬсЬддЬа даЬдддасаа саадаасддс дакссдаЬад ааЬсаЬддРд садддрдрдд 780 сЬЬЬЬддасР дсЬсдддсЬд дсЬдссЬсЬд сЬЬЬдддсас ЬЬаЬдсдссс ЬасРасдсда 840 аЬЬЬдасаРд ддадсаасса сддасЬсЬдР ссаасЬддЬс саассЬЬасс дЬсдадасас 900 ддасадддас дЬЬсаЬЬддР аЬдсЬсааЬд асасЫассс адасдЫсда садЬЬЬсЬдс 960 дадЬЬссЬЬа ЬдссааддЬа а'Ь'ЬсЕсЬсдс ЬдЬасасаЬд ЬсаРасЬдЬд ЬсЬдасаЬда 1020 ссадссЬссР аЬЬддддаЫ ЬаадаЬддсЬ ЬссЬссЬсаЬ сддсЬЬдаса асЬсаадсад 1080 аасаЬаЬдас ЬссассЬЬсЬ аЬддсссадд ЬаадЬадЬсЬ ЬссаЬасаас ЬаЬдадсадР 1140 ЬссааЬЬаас ссдадРРсад ссРдЬссдса дЬаРдЬЬсса дсадададсд аЬРЬЬЬддаа 1200 ЬдааЬаЬдаа ссддадаа'Ь'Ь ЬдсЬдсРсаа ЬдЬсддсдаа аддсРсаасс адддсЬсЬас 1260 ддсаЬддЬсс ЬсдЬсададд аРЬдссРдЬс ссЬадсддЬа ЬддасЬссаЬ сдЬаЬдсЬаа 1320 ЬдадасаРсс аадсЬдссад ЬЬдсдсЬдЬЬ ЬдЬсасддда ддрддрддса Ьсасаддддд 1380 ЬаЬсаасаЬР ссдЬсссадс ЬдсссЬсЬдс ЬЬдддЬаЬсЬ сдсЬсЬсадд адсаЬаЬсдЬ 1440 ЬдЬЬассаЬс ааЬЬассдсд ЬсааРаРЫР ЬддсадРаад ЬаРРЬдсРсР аРаРЬЬдсаа 1500 аРаЬЬадссЬ дасаЬдЬаРа даЬсссаааЬ сдсдРдсдЬЬ дааЬдаЬасд ЬсдсЬЬасдс 1560 ЬдаЬддасдР дсдсдскдсР дрддадрддд ЬаЬаЬдадаа саРЬдаадсд ЬЬсддЬддЬа 1620 аРсссдаааа ЬаЬРаРддЬс адасЬасаад ЬЬЬссЬсРса саЬдаскада дсЬаасадЬа 1680 адсадсЬаЬд дддасадЬса сааддЬдсЬЬ ЬдсЬдасдса ЬсРдЬасасс сЬсдсарддс 1740

- 46 008007

садаададсс ЕсЕЕдссдсс аадЕЕсддсд ЕсаЕсЕссса аддадсаЕсЕ дссасасЕса 1800 ассЕсЕсЕас сасдсссдаЕ дЕдЕассаад асЕЕЕдасаЕ сдЕддссаад ддасЕаддсЕ 1860 дсааЕЕаЕдд ЕдаЕдаЕдсс даддссдадс ЕддадЕдсаЕ дсдЕдддаЕЕ ЕссЕдддЕдс 1920 адаЕсдадда дЕаЕаЕсаас сдсЕасааЕа дсЕсЕссЕЕс ЕаЕЕдсЕЕЕс асдаасЕаЕа 1980 ЕЕсдЕаЕдЕа сссаЕсЕЕдс ЕсЕЕЕЕаасЕ дссссЕасЕа асааЕаЕсад ссдаЕдадаа 2040 аЕасаЕсЕЕс Ессдасдааа дасадсдЕЕа ссЕЕдадсдд ааддЕЕдссс даддсссдЕс 2100 ааЕЕсдаЕсЕ дасасддсдс дадааЕЕссс Еадсасааас асдассЕсад ЕаааЕаЕЕда 2160 адааддсдаа ЕсадасЕдЕс ЕддсадЕдас ЕдассЕЕдсд сЕасдЕдсдЕ ссаЕЕдддсЕ 2220 сдадассЕаЕ сдсЕасЕасЕ дддсЕддЕаЕ дЕссааЕдас ЕЕЕссаЕасЕ даадаЕадЕд 2280 сЕаасаЕааа саддсаасЕЕ сЕссааЕаЕс адЕсссдЕас сдЕддсЕадд адсаЕЕссас 2340 Еддассдасс ЕдсЕдаЕдаЕ сЕЕсддЕасд ЕаЕааЕсЕдд асдЕсддсда даЕсЕсдсад 2400 ЕЕддаадЕсд асассЕсЕдс сасдаЕдсаа даЕЕаЕсЕас ЕсдссЕЕЕсЕ дааддасЕса 2460 ЕсаассдЕса дсдадасддЕ сддаЕддссд ЕЕаЕаЕсЕдд дсаасдадас саасддадда 2520 сЕсаЕссЕдд адЕЕсддЕаа сддсасадса дЕдсддасса ЕсасаддЕда сЕддсЕсдас 2580 дсдддаЕдЕЕ ЕсааЕЕсаЕс ЕаЕсссаЕЕс адааЕсЕддд ддЕадссЕаЕ асасассаЕс 2640 аЕсададЕад ЕаЕаЕасаЕс аЕаЕссасаа аЕссаЕсЕсс ассЕаЕаЕас аЕааасссса 2700 асЕдааЕсЕа саасадсдсс ЕддЕссЕЕсЕ ЕссссЕсссс сЕсЕЕЕааЕЕ ЕсссЕсдссЕ 2760 ЕсЕссссаЕ 2769

<210> 8

Ο Ί 1 ч. 1 СОО + 4.11+ ± υζ. -э <212> ДНК <213> АзрегдШиз птдег <220>

<221> СДЗ <222> (1)..(1623) <400> 8

аЕд дЕд сад ддЕ дЕд дсЕ ЕЕЕ дда сЕд сЕс ддд сЕд дсЕ дсс ЕсЕ дсЕ 48 МеЕ Уа1 С1п С1у Уа1 А1а РЬе С1у Ьеи Ьеи С1у Ьеи А1а А1а Зег А1а 1 5 10 15 ЕЕд ддс асЕ ЕаЕ дед ссс Еас Еас дед ааЕ ЕЕд аса Едд дад саа сса 96 Ьеи С1у ТЬг Туг А1а Рго Туг Туг А1а Азп Ьеи ТЬг Тгр С1и С1п Рго 20 25 30 сдд асЕ сЕд Есс аас Едд Есс аас сЕЕ асе дЕс дад аса сдд аса ддд 144 Агд ТЬг Ьеи Зег Азп Тгр Зег Азп Ьеи ТЬг Уа1 С1и ТЬг Агд ТЬг С1у 35 40 45 асд ЕЕс аЕЕ ддЕ аЕд сЕс ааЕ дас асЕ Еас сса дас дЕЕ еда сад ЕЕЕ 192 ТЬг РЬе Не С1у МеЕ Ьеи Азп Азр ТЬг Туг Рго Азр Уа1 Агд С1п РЬе 50 55 60 сЕд еда дЕЕ ссЕ ЕаЕ дсс аад ссЕ ссЕ аЕЕ ддд даЕ ЕЕа ада Едд сЕЕ 240

- 47 008007

Ьеи Агд Уа1 Рго Туг А1а Ьуз Рго Рго 11е С1у Азр Ьеи Агд Тгр Ьеи 65 70 75 80 сск сск сак сдд екк дас аас кса аде ада аса как дас ксс асе ккс 288 Рго Рго Н13 Агд Ьеи Азр Азп Зег Зег Агд ТЬг Туг Азр Зег ТЬг РЬе 85 90 95 как ддс сса дсс кдк ссд сад как дкк сса дса дад аде дак ккк кдд 336 Туг С1у Рго А1а Суз Рго С1п Туг Уа1 Рго А1а С1и Зег Азр РЬе Тгр 100 105 110 аак даа как даа ссд дад аак ккд скд скс аак дкс ддс даа адд скс 384 Азп С1и Туг С1и Рго С1и Азп Ьеи Ьеи Ьеи Азп Уа1 С1у С1и Агд Ьеи 115 120 125 аас сад ддс кек асд дса кдд ксс кед кса дад дак кде скд ксс ска 432 Азп С1п С1у Зег ТЬг А1а Тгр Зег Зег Зег С1и Азр Суз Ьеи Зег Ьеи 130 135 140 дед дка кдд аск сса кед как дек аак дад аса ксс аад скд сса дкк 480 А1а Уа1 Тгр ТЬг Рго Зег Туг А1а Азп С1и ТЬг Зег Ьуз Ьеи Рго Уа1 145 150 155 160 дед скд ккк дкс асд дда ддк ддк ддс акс аса ддд ддк акс аас акк 528 А1а Ьеи РЬе Уа1 ТЬг С1у С1у С1у С1у 11е ТЬг С1у С1у Не Азп 11е 165 170 175 ссд ксс сад скд ссс кек дек кдд дка кек сдс кек сад дад сак акс 576 Рго Зег С1п Ьеи Рго Зег А1а Тгр \7а1 Зег Агд Зег С1п С1и Ηί3 Не 180 185 190 д« дкк асе акс аак кас сдс дкс аак акк ккк ддс аак ссс ааа кед 624 Уа1 Уа1 ТЬг 11е Азп Туг Агд Уа1 Азп 11е РЬе С1у Азп Рго Ьуз Зег 195 200 205 едк дед ккд аак дак асд кед екк асд скд акд дас дкд сдс дек дек 672 Агд А1а Ьеи Азп Азр ТЬг Зег Ьеи ТЬг Ьеи Мек Азр Уа1 Агд А1а А1а 210 215 220 дкд дад кдд дка как дад аас акк даа дед ккс ддк ддк аак ссс даа 720 Уа1 С1и Тгр Уа1 Туг С1и Азп Не С1и А1а РЬе С1у С1у Азп Рго С1и 225 230 235 240 аак акк акд дкс ада ска саа дкк ксс кек сас акд аск ада дек аас 768 Азп 11е Мек Уа1 Агд Ьеи С1п Уа1 Зег Зег ΗΪ3 Мек ТЬг Агд А1а Азп 245 250 255 адк аад сад ска кдд дда сад кса саа ддк дек ккд скд асд сак скд 816 Зег Ьуз С1п Ьеи Тгр С1у С1п Зег С1п С1у А1а Ьеи Ьеи ТЬг Н13 Ьеи 260 265 270 кас асе скс дса кдд сса даа дад сск екк дсс дсс аад ккс ддс дкс 864 Туг ТЬг Ьеи А1а Тгр Рго С1и С1и Рго Ьеи А1а А1а Ьуз РЬе С1у Уа1 275 280 285 акс ксс саа дда дса кек дсс аса скс аас скс кек асе асд ссс дак 912 11е Зег С1п С1у А1а Зег А1а ТЬг Ьеи Азп Ьеи Зег ТЬг ТЬг Рго Азр

- 48 008007

290 295 300

дкд кас саа дас ккк дас акс дкд дсс аад дда ска ддс кде аак как 960 Уа1 Туг 61п Азр РЬе Азр Не Уа1 А1а Ьуз С1у Ьеи 61у Суз Азп Туг 305 310 315 320 ддк дак дак дсс дад дсс дад скд дад кде акд едк ддд акк ксс кдд 1008 61у Азр Азр А1а С1и А1а С1и Ьеи С1и Суз Мек Агд С1у Не Зег Тгр 325 330 335 дкд сад акс дад дад как акс аас сдс кас аак аде кек сск кек акк 1056 Уа1 С1п Не С1и С1и Туг 11е Азп Агд Туг Азп Зег Зег Рго Зег Не 340 345 350 дек ккс асд аас как акк ссс дак дад ааа кас акс ккс ксс дас даа 1104 А1а РНе ТЬг Азп Туг Не Рго Азр С1и Ьуз Туг Не РЬе Зег Азр С1и 355 360 365 ада сад едк кас екк дад едд аад дкк дсс еда ддс ссд кса акк еда 1152 Агд 61п Агд Туг Ьеи С1и Агд Ьуз Уа1 А1а Агд С1у Рго Зег Не Агд 370 375 380 кек дас асд дед еда даа ккс сск аде аса аас асд асе кса дка аак 1200 Зег Азр ТЬг А1а Агд С1и РЬе Рго Зег ТНг Азп ТЬг ТЬг Зег Уа1 Азп 385 390 395 400 акк даа даа ддс даа кса дас кдк скд дса дкд аск дас екк дед ска 1248 Не 61и С1и С1у С1и Зег Азр Суз Ьеи А1а Уа1 ТЬг Азр Ьеи А1а Ьеи 405 410 415 едк дед ксс акк ддд скс дад асе как сдс кас кас кдд дек ддс аас 1296 Агд А1а Зег Не С1у Ьеи С1и ТЬг Туг Агд Туг Туг Тгр А1а С1у Азп 420 425 430 ккс ксс аак акс адк ссс дка ссд кдд ска дда дса ккс сас кдд асе 1344 РЬе Зег Азп Не Зег Рго Уа1 Рго Тгр Ьеи С1у А1а РЬе НЬз Тгр ТЬг 435 440 445 дас скд скд акд акс ккс ддк асд как аак скд дас дке ддс дад акс 1392 Азр Ьеи Ьеи Мек 11е РЬе С1у ТЬг Туг Азп Ьеи Азр Уа1 <31 у С1и 11е 450 455 460 кед сад ккд даа дке дас асе кек дсс асд акд саа дак как ска скс 1440 Зег 61п Ьеи 61и Уа1 Азр ТЬг Зег А1а ТЬг Мек С1п Азр Туг Ьеи Ьеи 465 470 475 480 дсс ккк скд аад дас кса кса асе дке аде дад асд дке дда кдд ссд 1488 А1а РЬе Ьеи Ьуз Азр Зег Зег ТЬг Уа1 Зег С1и ТЬг Уа1 С1у Тгр Рго 485 490 495 кка как скд ддс аас дад асе аас дда дда скс акс скд дад ккс ддк 1536 Ьеи Туг Ьеи 61у Азп С1и ТЬг Азп С1у 61у Ьеи Не Ьеи С1и РЬе С1у 500 505 510 аас ддс аса дса дкд едд асе акс аса ддк дас кдд скс дас дед дда 1584 Азп С1у ТЬг А1а Уа1 Агд ТЬг Не ТНг С1у Азр Тгр Ьеи Азр А1а С1у 515 520 525

- 49 008007

ЕдЕ ЕЕс ааЕ Еса ХсХ аЕс сса ЕЕс ада аЕс Едд ддд Еад 1623 Суз РЬе Азп Зег Зег 11е Рго РЬе Агд Не Тгр С1у 530 535 540

<210> 9 <211> 540 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пидег

<400> 9 МеЕ Уа1 61п 61у Уа1 А1а РЬе 61у Ьеи Ьеи С1у Ьеи А1а А1а Зег А1а 1 5 10 15 Ьеи С1у ТЬг Туг А1а Рго Туг Туг А1а Азп Ьеи ТЬг Тгр 61и С1п Рго 20 25 30 Агд ТЬг Ьеи Зег Азп Тгр Зег Азп Ьеи ТЬг Уа1 С1и ТЬг Агд ТЬг 61у 35 40 45 ТЬг РЬе 11е С1у МеЕ Ьеи Азп Азр ТЬг Туг Рго Азр Уа1 Агд 61п РЬе 50 55 60 Ьеи Агд Уа1 Рго Туг А1а Ьуз Рго Рго 11е 61у Азр Ьеи Агд Тгр Ьеи 65 70 75 80 Рго Рго Н13 Агд Ьеи Азр Азп Зег Зег Агд ТЬг Туг Азр Зег ТЬг РЬе 85 90 95 Туг 61у Рго А1а Суз Рго С1п Туг Уа1 Рго А1а 61и Зег Азр РЬе Тгр 100 105 110 Азп 61и Туг С1и Рго 61и Азп Ьеи Ьеи Ьеи Азп Уа1 61у 61и Агд Ьеи 115 120 125 Азп С1п 61у Зег ТЬг А1а Тгр Зег Зег Зег С1и Азр Суз Ьеи Зег Ьеи 130 135 140 А1а Уа1 Тгр ТЬг Рго Зег Туг А1а Азп С1и ТЬг Зег Ьуз Ьеи Рго Уа1 145 150 155 160 А1а Ьеи РЬе Уа1 ТЬг 61у 61у 61у 61у Не ТЬг 61у 61у 11е Азп 11е 165 170 175 Рго Зег С1п Ьеи Рго Зег А1а Тгр Уа1 Зег Агд Зег 61п 61 и ΗΪ3 11е 180 185 190 Уа1 Уа1 ТЬг 11е Азп Туг Агд Уа1 Азп 11е РЬе 61у Азп Рго Ьуз Зег 195 200 205 Агд А1а Ьеи Азп Азр ТЬг Зег Ьеи ТЬг Ьеи МеЕ Азр Уа1 Агд А1а А1а 210 215 220 Уа1 С1и Тгр Уа1 Туг С1и Азп 11е 61и А1а РЬе 61у С1у Азп Рго С1и 225 230 235 240 Азп 11е МеЕ Уа1 Агд Ьеи 61п Уа1 Зег Зег Н13 МеЕ ТЬг Агд А1а Азп 245 250 255

50 008007

Зег Ьуз С1п Ьеи 260 Тгр С1у С1п Зег С1п С1у 265 А1а Ьеи Ьеи ТЬг 270 Ηί3 Ьеи Туг ТЬг Ьеи А1а Тгр Рго С1и С1и Рго Ьеи А1а А1а Ьуз РЬе С1у Уа1 275 280 285 Не Зег С1п С1у А1а Зег А1а ТЬг Ьеи Азп Ьеи Зег ТЬг ТЬг Рго Азр 290 295 300 Уа1 Туг С1п Азр РЬе Азр Не Уа1 А1а Ьуз С1у Ьеи С1у Суз Азп Туг 305 310 315 320 С1у Азр Азр А1а С1и А1а С1и Ьеи С1и Суз МеЬ Агд С1у Не Зег Тгр 325 330 335 Уа1 С1п Не С1и С1и Туг Не Азп Агд Туг Азп Зег Зег Рго Зег Не 340 345 350 А1а РЬе ТЬг Азп Туг Не Рго Азр С1и Ьуз Туг Не РЬе Зег Азр С1и 355 360 365 Агд С1п Агд Туг Ьеи С1и Агд Ьуз Уа1 А1а Агд С1у Рго Зег Не Агд 370 375 380 Зег Азр ТЬг А1а Агд С1и РЬе Рго Зег ТЬг Азп ТЬг ТЬг Зег Уа1 Азп 385 390 395 400 Не С1и 61и С1у С1и Зег Азр Суз Ьеи А1а Уа1 ТЬг Азр Ьеи А1а Ьеи 405 410 415 Агд А1а Зег 11е С1у Ьеи С1и ТЬг Туг Агд Туг Туг Тгр А1а С1у Азп 420 425 430 РЬе Зег Азп 11е Зег Рго Уа1 Рго Тгр Ьеи С1у А1а РЬе Н13 Тгр ТЬг 435 440 445 Азр Ьеи Ьеи МеЬ 11е РЬе С1у ТЬг Туг Азп Ьеи Азр Уа1 С1у С1и 11е 450 455 460 Зег С1п Ьеи С1и Уа1 Азр ТЬг Зег А1а ТЬг МеЬ С1п Азр Туг Ьеи Ьеи 465 470 475 480 А1а РЬе Ьеи Ьуз Азр Зег Зег ТЬг Уа1 Зег С1и ТЬг Уа1 С1у Тгр Рго 485 490 495 Ьеи Туг Ьеи С1у Азп С1и ТЬг Азп 61у С1у Ьеи Не Ьеи С1и РЬе С1у 500 505 510 Азп С1у ТЬг А1а Уа1 Агд ТЬг Не ТЬг С1у Азр Тгр Ьеи Азр А1а С1у 515 520 525 Суз РЬе Азп Зег Зег Не Рго РЬе Агд Не Тгр 61у

530 535 540 <210> 10 <211> 3235 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пЬдег

- 51 008007 <400> 10

дЕЕЕЕсааЕЕ ЕддасЕдааЕ ЕЕЕддсддса ЕЕЕсЕЕдЕаЕ ааааЕЕаааа ддддсдЕЕда 60 сЕддаЕЕЕЕд дЕасЕЕддда ЕЕЕаЕЕсЕЕа дсЕЕЕдасЕд ЕасаЕадЕЕЕ дддсдЕддЕЕ 120 ЕдаЕадссда сдаЕсддссд асссасдаас садаЕЕЕдса ЕаЕдаЕЕаса ЕЕссЕЕсааЕ 180 ЕЕЕддЕссда дЕсссаассс дссЕЕЕсаас сссаасаасЕ асаадсасдЕ ЕдЕдЕЕЕдсЕ 240 асаЕЕдасЕс асЕсдаЕаЕЕ дсЕдаассаЕ дсаддссдсс саасЕдадЕЕ аЕЕасассаа 300 дсаЕдсдааЕ сддааадЕЕс дасааадсдд дЕдаааЕдЕс сдадЕЕддсд аассааадсд 360 саасддЕсда ддсЕссЕЕЕс сссдсададд садссаЕЕсЕ дсадссЕЕЕд аасЕдсдддд 420 дааасддсаЕ ЕЕдаЕсаасЕ сддсасЕдаЕ дсадЕдасса асаддаЕдЕЕ адсааЕдЕЕд 480 дссЕааЕаЕа ЕЕсЕЕасЕда ЕсЕдсЕдаЕа сдЕсссЕссс ЕЕдсаЕсадс сЕсддЕЕЕдс 540 дсаЕдадаас дддЕЕсдаас дЕЕссЕдддс сасссддЕЕд дсдЕдаЕаЕЕ сЕссдсссас 600 дсЕдЕсЕдЕс ссссЕдаЕдд дааассЕЕсд даЕсадсдаЕ саЕсаддсса дЕЕддсЕаЕд 660 адааЕадддд сЕЕЕдсЕдЕс ЕЕдаЕдссЕа аааЕдсаддЕ сЕсаЕадсаа даЕссасадс 720 сдаддаддса саЕддсдаЕд Есдааассса ЕдддадсЕда ЕЕЕЕЕсддЕЕ сЕсддаЕсдЕ 780 дсЕссаадас аЕадааддаЕ аЕЕдадсасЕ Едааасдаад дддЕдааааа ЕддаасЕдЕа 840 ЕаЕададЕЕа сЕсссадссс даЕссдадад ссЕаЕдассс аЕадсддЕас адаЕсаЕддс 900 саЕсаЕдаад дсссЕссЕЕЕ ддсЕсЕсссЕ ЕЕсссЕсдсс дЕсЕдддсда сЕссадЕЕса 960 асдддаЕдса дсЕссЕасЕд ЕсасЕаЕЕдс дсаЕссаЕсд дссассдЕса ЕЕддааааЕс 1020 ЕддсааЕдЕс дададсЕЕса асааЕаЕЕсс сЕЕЕдсдсад дсссссасад дсЕсдсЕдсд 1080 ЕсЕдаадссс ссасаасссЕ ЕддааасЕдс ссЕсддсасЕ дЕЕсаддсса саддадссЕс 1140 дсааЕсдЕдЕ ссдсадаЕдЕ асЕЕсассас ддаЕдададс дааЕЕсссда саЕсддЕсаЕ 1200 иууССиССиС у С и. у а и С сСС сЕЕЕддЕаса дЕсддсЕасс α а и у С с. С с Су аууа.ииуССе Ί О СГ\ даасаЕЕдас аЕЕсддсдЕс сддссдддас сассдсддас ЕсдаадсЕдс сЕдЕдсЕддЕ 1320 сЕддаЕсЕЕЕ ддсддаддсЕ ЕЕдаасЕЕдд ЕЕсаааддсд аЕдЕаЕдаЕд дЕасаасдаЕ 1380 ддЕаЕсаЕсд ЕсдаЕадаса адаасаЕдсс ЕаЕсдЕдЕЕЕ дЕадсааЕда аЕЕаЕсдсдЕ 1440 дддаддЕЕЕс дддЕЕсЕЕдс ссддааадда даЕссЕддад дасдддЕссд сдаассЕадд 1500 дсЕссЕддас саасдссЕЕд сссЕдсадЕд ддЕЕдссдас аасаЕсдадд ссЕЕЕддЕдд 1560 адасссддас ааддЕдасда ЕЕЕддддада аЕсадсадда дссаЕЕЕссд ЕЕЕЕЕдаЕса 1620 даЕдаЕсЕЕд Еасдасддаа асаЕсасЕЕа сааддаЕаад сссЕЕдЕЕсс ддддддссаЕ 1680 саЕддасЕсс ддЕадЕдЕЕд ЕЕсссдсада ссссдЕсдаЕ ддддЕсаадд дасадсаадЕ 1740 аЕаЕдаЕдсд дЕадЕддааЕ сЕдсаддсЕд ЕЕссЕсЕЕсЕ аасдасассс ЕадсЕЕдЕсЕ 1800 дсдЕдаасЕа дасЕасассд асЕЕссЕсаа Едсддсааас ЕссдЕдссад дсаЕЕЕЕаад 1860 сЕассаЕЕсЕ дЕддсдЕЕаЕ саЕаЕдЕдсс Есдассддас дддасддсдЕ ЕдЕсддсаЕс 1920 ассддасдЕЕ ЕЕдддсааад садддаааЕа ЕдсЕсдддЕс ссдЕЕсаЕсд Едддсдасса 1980 ададдаЕдад дддассЕЕаЕ ЕсдссЕЕдЕЕ ЕсадЕссаас аЕЕасдасда ЕсдасдаддЕ 2040 ддЕсдасЕас сЕддссЕсаЕ асЕЕсЕЕсЕа ЕдасдсЕадс сдададсадс ЕЕдаадаасЕ 2100 адЕддсссЕд Еасссадаса ссассасдЕа сдддЕсЕссд ЕЕсаддасад дсдсддссаа 2160 саасЕддЕаЕ ссдсааЕЕЕа адсдаЕЕддс сдссаЕЕсЕс ддсдасЕЕдд ЕсЕЕсассаЕ 2220 Еасссддсдд дсаЕЕссЕсЕ сдЕаЕдсада ддаааЕсЕсс ссЕдаЕсЕЕс сдаасЕддЕс 2280 дЕассЕддсд ассЕаЕдасЕ аЕддсасссс адЕЕсЕдддд ассЕЕссасд даадЕдассЕ 2340 дсЕдсаддЕд ЕЕсЕаЕддда Есаадссааа сЕаЕдсадсЕ адЕЕсЕадсс асасдЕасЕа 2400 ЕсЕдадсЕЕЕ дЕдЕаЕасдс ЕддаЕссдаа сЕссаассдд ддддадЕаса ЕЕдадЕддсс 2460 дсадЕддаад дааЕсдсддс адЕЕдаЕдаа ЕЕЕсддадсд аасдасдсса дЕсЕссЕЕас 2520

- 52 008007

ддаЕдаЕЕЕс сдсаасддда саЕаЕдадЕЕ саЕссЕдсад ааЕассдсдд сдЕЕссасаЕ 2580 сЕдаЕдссаЕ ^ддсддаддд дЕссддасдд ЕсаддаасЕЕ адссЕЕаЕда даЕдааЕдаЕ 2640 ддасдЕдЕсЕ ддссЕсддаа ааддаЕаЕаЕ ддддаЕсаЕд аЕадЕасЕад ссаЕаЕЕааЕ 2700 даадддсаЕа ЕассасдсдЕ ЕддассЕдсд ЕЕаЕадсЕЕс ссдЕЕадЕЕа ЕадЕассаЕс 2760 дЕЕаЕассад ссааЕсаадЕ сассасдсас дассддддас ддсдааЕссс сдддааЕЕда 2820 аадаааЕЕдс аЕсссаддсс адЕдаддсса дсдаЕЕддсс ассЕсЕссаа ддсасадддс 2880 саЕЕсЕдсад сдсЕддЕдда ЕЕсаЕсдсаа ЕЕЕсссссдд сссддсссда сассдсЕаЕа 2940 ддсЕддЕЕсЕ сссасассаЕ сддадаЕЕсд ЕсдссЕааЕд ЕсЕсдЕссдЕ ЕсасаадсЕд 3000 аададсЕЕда адЕддсдада ЕдЕсЕсЕдса ддааЕЕсаад сЕадаЕдсЕа адсдаЕаЕЕд 3060 сакддсааЕа ЕдЕдЕЕдаЕд саЕдЕдсЕЕс ЕЕссЕЕсадс ЕЕссссЕсдЕ дсадаЕдадд 3120 ЕЕЕддсЕаЕа ааЕЕдаадЕд дЕЕддЕсддд дЕЕссдЕдад дддсЕдаадЕ дсЕЕссЕссс 3180 ЕЕЕЕадасдс аасЕдададс сЕдадсЕЕса ЕссссадсаЕ саЕЕасассЕ садса 3235

<210> 11 <211> 1689 <212> ДНК <213> АзрегдШиз п!дег

<220>

<221> СЬЗ <222> (1)..(1689) <400> 11

аЕд дсс аЕс аЕд аад дсс сЕс сЕЕ Едд сЕс Есс СЕЕ Есс сЕс дсс дЕс 48 МеЕ А1а 11е МеЕ Ьуз А1а Ьеи Ьеи Тгр Ьеи Зег Ьеи Зег Ьеи А1а Уа1 1 5 10 15 Едд дед асЕ сса дЕЕ саа сдд даЕ дса дсЕ ссЕ асЕ дЕс асЕ аЕЕ дед 96 Тгр А1а ТЬг Рго Уа1 С1п Агд Азр А1а А1а Рго ТЬг Уа1 ТЬг 11е А1а 20 25 30 саЕ сса Есд дсс асе дЕс аЕЕ дда ааа ЕсЕ ддс ааЕ дЕс дад аде ЕЕс 144 ΗΪ3 Рго Зег А1а ТЬг Уа1 11е С1у Ьуз Зег С1у Азп Уа1 С1и Зег РЬе 35 40 45 аас ааЕ аЕЕ ссс ЕЕЕ дед сад дсс ссс аса ддс Есд сЕд сдЕ сЕд аад 192 Азп Азп 11е Рго РЬе А1а С1п А1а Рго ТЬг С1у Зег Ьеи Агд Ьеи Ьуз 50 55 60 ссс сса саа ссс ЕЕд даа асЕ дсс сЕс ддс асЕ дЕЕ сад дсс аса дда 240 Рго Рго С1п Рго Ьеи С1и ТЬг А1а Ьеи С1у ТЬг Уа1 С1п А1а ТЬг С1у 65 70 75 80 дсс Есд саа Есд ЕдЕ ссд сад аЕд Еас ЕЕс асе асд даЕ дад аде даа 288 А1а Зег С1п Зег Суз Рго С1п МеЕ Туг РЬе ТЬг ТЬг Азр С1и Зег С1и 85 90 95 ЕЕс ссд аса Есд дЕс аЕЕ ддс сЕс сЕс дсЕ даЕ сЕс ссЕ ЕЕд дЕа сад 336

- 53 008007

РЬе Рго ТЬг Зег 7а1 100 Не С1у Ьеи Ьеи 105 А1а Азр Ьеи Рго Ьеи 110 Уа1 С1п Есд дсЕ асе ааЕ дсЕ сЕс дад даЕ Еде сЕд аас аЕЕ дас аЕЕ сдд сдЕ 384 Зег А1а ТЬг Азп А1а Ьеи С1и Азр Суз Ьеи Азп Не Азр 11е Агд Агд 115 120 125 ссд дсс ддд асе асе дед дас Есд аад сЕд ссЕ дЕд сЕд дЕс Едд аЕс 432 Рго А1а С1у ТЬг ТЬг А1а Азр Зег Ьуз Ьеи Рго Уа1 Ьеи νβΐ Тгр 11е 130 135 140 ЕЕЕ ддс дда ддс СЕР даа сЕЕ ддЕ Еса аад дед аЕд ЕаЕ даЕ ддЕ аса 480 РЬе С1у С1у С1у РЬе С1и Ьеи С1у Зег Ьуз А1а МеЕ Туг Азр С1у ТЬг 145 150 155 160 асд аЕд дЕа Еса Есд Есд аЕа дас аад аас аЕд ссЕ аЕс дЕд ЕЕЕ дЕа 528 ТЬг МеЕ Уа1 Зег Зег Зег Не Азр Ьуз Азп МеЕ Рго Не Уа1 РЬе Уа1 165 170 175 дса аЕд ааЕ Тар еде дЕд дда ддЕ ЕЕс ддд ЕЕс ЕЕд ссс дда аад дад 576 А1а МеЕ Азп Туг Агд Уа1 С1у С1у РЬе С1у РЬе Ьеи Рго С1у Ьуз С1и 180 185 190 аЕс сЕд дад дас ддд Есе дед аас сЕа ддд сЕс сЕд дас саа еде сЕЕ 624 Не Ьеи С1и Азр С1у Зег А1а Азп Ьеи С1у Ьеи Ьеи Азр С1п Агд Ьеи 195 200 205 дсс сЕд сад Едд дН дсс дас аас аЕс дад дсс ЕЕЕ ддЕ дда дас ссд 672 А1а Ьеи С1п Тгр Уа1 А1а Азр Азп Не С1и А1а РЬе С1у С1у Азр Рго 210 215 220 дас аад дкд асд аЕЕ Едд дда даа Еса дса дда дсс аЕЕ Есс дЕЕ ЕЕЕ 720 Азр Ьуз Уа1 ТЬг Не Тгр С1у С1и Зег А1а <31у А1а Не Зег Уа1 РЬе 225 230 235 240 дай сад аЕд аЕс Нд Еас дас дда аас аЕс асЕ Еас аад даЕ аад ссс 768 Азр С1п МеЕ Не Ьеи Туг Азр С1у Азп Не ТЬг Туг Ьуз Азр Ьуз Рго 245 250 255 Пд №с сдд ддд дес аЕс аЕд дас Есс ддЕ адЕ дЕЕ дЕЕ ССС дса дас 816 Ьеи РЬе Агд С1у А1а Не МеЕ Азр Зег С1у Зег Уа1 Уа1 Рго А1а Азр 260 265 270 ссс дЕс да/ ддд дЕс аад дда сад саа дЕа ЕаЕ даЕ дед дЕа дЕд даа 864 Рго νβΐ Азр 61у Уа1 Ьуз С1у С1п С1п Уа1 Туг Азр А1а νβΐ Уа1 С1и 275 280 285 ЕсЕ дса ддс Едь Ссс ЕсЕ ЕсЕ аас дас асе сЕа дсЕ ЕдЕ сЕд сдЕ даа 912 Зег А1а С1у Суз Зег Зег Зег Азп Азр ТЬг Ьеи А1а Суз Ьеи Агд 61и 290 295 300 сЕа дас Гас асе дас ίΐο сЕс ааЕ дед дса аас Есс дЕд сса ддс аЕЕ 960 Ьеи Азр Туг ТЬг Азр РЬе Ьеи Азп А1а А1а Азп Зег 57а1 Рго С1у Не 305 310 315 320 ЕЕа аде Еас саЕ ЕсЕ дЕд дед ЕЕа Еса ЕаЕ дЕд ссЕ еда ссд дас ддд 1008 Ьеи Зег Туг Н1з Зег νβΐ А1а Ьеи Зег Туг Уа1 Рго Агд Рго Азр С1у

- 54 008007

325 330 335

асд дед ккд кед дса кеа сед дас дкк ккд ддс ааа дса ддд ааа как 1056 ТНг А1а Ьеи Зег А1а Зег Рго Азр Уа1 Ьеи С1у Ьуз А1а С1у Ьуз Туг 340 345 350 дек сдд дке сед ккс акс дкд ддс дас саа дад дак дад ддд асе кка 1104 А1а Агд Уа1 Рго РЬе 11е Уа1 С1у Азр С1п С1и Азр С1и С1у ТЬг Ьеи 355 360 365 Икс дсс ккд ккк сад ксс аас акк асд асд акс дас дад дкд дке дас 1152 РЬе А1а Ьеи РЬе С1п Зег Азп 11е ТЬг ТЬг 11е Азр О1и Уа1 Уа1 Азр 370 375 380 Нас скд дсс кеа Нас ккс ккс как дас дек аде еда дад сад екк даа 1200 Туг Ьеи А1а Зег Туг РЬе РЬе Туг Азр А1а Зег Агд 61и С1п Ьеи С1и 385 390 395 400 даа ска дкд дсс скд кас сса дас асе асе асд кас ддд кек сед ккс 1248 С1и Ьеи Уа1 А1а Ьеи Туг Рго Азр ТЬг ТЬг ТЬг Туг С1у Зег Рго РЬе 405 410 415 адд аса ддс дед дсс аас аас кдд как сед саа ккк аад еда ккд дсс 1296 Агд ТЬг С1у А1а А1а Азп Азп Тгр Туг Рго 01п РЬе Ьуз Агд Ьеи А1а 420 425 430 дсс акк еке ддс дас ккд дке ккс асе акк асе сдд сдд дса ккс еке 1344 А1а Не Ьеи 61у Азр Ьеи νβΐ РЬе ТЬг 11е ТЬг Агд Агд А1а РЬе Ьеи 435 4 4 0 Л л с υ кед как дса дад даа акс ксс сек дак екк сед аас кдд кед кас скд 1392 Зег Туг А1а С1и С1и Не Зег Рго Азр Ьеи Рго Азп Тгр Зег Туг Ьеи 450 455 460 дед асе как дас как ддс асе сса дкк скд ддд асе ккс сас дда адк 1440 А1а ТЬг Туг Азр Туг С1у ТЬг Рго Уа1 Ьеи С1у ТЬг РЬе Низ О1у Зег 465 470 475 480 дас скд скд сад дкд ккс как ддд акс аад сса аас как дса дек адк 1488 Аар Ьеи Ьеи С1п Уа1 РЬе Туг С1 у 11е Ьуз Рго Азп Туг А1а А1а Зег 485 490 495 кек аде сас асд кас как скд аде ккк дкд как асд скд дак сед аас 1536 Зег Зег ΗΪ3 ТЬг Туг Туг Ьеи Зег РЬе Уа1 Туг ТЬг Ьеи Азр Рго Азп 500 505 510 ксс аас сдд ддд дад кас акк дад кдд сед сад кдд аад даа кед сдд 1584 Зег Азп Агд С1у 61и Туг Не С1и Тгр Рго 61п Тгр Ьуз С1и Зег Агд 515 520 525 сад ккд акд аак ккс дда дед аас дас дсс адк еке екк асд дак дак 1632 С1п Ьеи Мек Азп РЬе С1у А1а Азп Азр А1а Зег Ьеи Ьеи ТЬг Азр Азр 530 535 540 ккс еде аас ддд аса как дад ккс акс скд сад аак асе дед дед ккс 1680 РЬе Агд Азп 61у ТЬг Туг С1и РЬе 11е Ьеи С1п Азп ТЬг А1а А1а РЬе 545 550 555 560

- 55 008007 сас аЬс Еда

Нхз 11е

1689 <210> 12 <211> 562 <212> БЕЛОК <213> АзрегдхНиз пхдег <400> 12

Мек А1а Не МеЬ Ьуз А1а Ьеи Ьеи Тгр Ьеи Зег Ьеи Зег Ьеи А1а Уа1 1 5 10 15 Тгр А1а ТЬг Рго Уа1 С1п Агд Азр А1а А1а Рго ТЬг Уа1 ТЬг Не А1а 20 25 30 Нхз Рго Зег А1а ТЬг Уа1 11е 01 у Ьуз Зег С1у Азп Уа1 С1и Зег РЬе 35 40 45 Азп Азп Не Рго РЬе А1а С1п А1а Рго ТЬг С1у Зег Ьеи Агд Ьеи Ьуз 50 55 60 Рго Рго С1п Рго Ьеи С1и ТЬг А1а Ьеи С1у ТЬг Уа1 О1п А1а ТЬг С1у 65 70 75 80 А1а Зег С1п Зег Суз Рго С1п Мек Туг РЬе ТЬг ТЬг Азр О1и Зег С1и 85 90 95 РЬе Рго ТЬг Зег Уа1 11е С1у Ьеи Ьеи А1а Азр Ьеи Рго Ьеи Уа1 С1п 100 105 110 Зег А1а ТЬг Азп А1а Ьеи С1и Азр Суз Ьеи Азп 11е Азр 11е Агд Агд 115 120 125 Рго А1а С1у ТЬг ТЬг А1а Азр Зег Ьуз Ьеи Рго Уа1 Ьеи Уа1 Тгр Не 130 135 140 РЬе С1у С1у С1у РЬе С1и Ьеи С1у Зег Ьуз А1а Мек Туг Азр О1у ТЬг 145 150 155 160 ТЬг МеЬ Уа1 Зег Зег Зег 11е Азр Ьуз Азп Мек Рго 11е Уа1 РЬе Уа1 165 170 175 А1а МеЬ Азп Туг Агд Уа1 С1у С1у РЬе С1у РЬе Ьеи Рго С1у Ьуз С1и 180 185 190 Не Ьеи С1и Азр С1у Зег А1а Азп Ьеи С1у Ьеи Ьеи Азр С1п Агд Ьеи 195 200 205 А1а Ьеи С1п Тгр Уа1 А1а Азр Азп Не С1и А1а РЬе О1у С1у Азр Рго 210 215 220 Азр Ьуз Уа1 ТЬг 11е Тгр С1у С1и Зег А1а С1у А1а Не Зег Уа1 РЬе 225 230 235 240 Азр С1п Мер Не Ьеи Туг Азр С1у Азп Не ТЬг Туг Ьуз Азр Ьуз Рго 245 250 255 Ьеи РЬе Агд С1у А1а 11е Мек Азр Зег С1у Зег Уа1 Уа1 Рго А1а Азр

- 56 008007

260 265 270 Рго Уа1 Азр С1у Уа1 Ьуз С1у С1п С1п Уа1 Туг Азр А1а Уа1 Уа1 С1и 275 280 285 Зег А1а С1у Суз Зег Зег Зег Азп Азр ТНг Ьеи А1а Суз Ьеи Агд (Ни 290 295 300 Ьеи Азр Туг ТНг Азр РНе Ьеи Азп А1а А1а Азп Зег Уа1 Рго С1у 11е 305 310 315 320 Ьеи Зег Туг Низ Зег Уа1 А1а Ьеи Зег Туг Уа1 Рго Агд Рго Азр (Ну 325 330 335 ТЬг А1а Ьеи Зег А1а Зег Рго Азр Уа1 Ьеи С1у Ьуз А1а С1у Ьуз Туг 340 345 350 А1а Агд Уа1 Рго РНе Не Уа1 С1у Азр С1п 61и Азр С1и С1у ТНг Ьеи 355 360 365 РНе А1а Ьеи РНе С1п Зег Азп Не ТНг ТНг Не Азр С1и Уа1 Уа1 Азр 370 375 380 Туг Ьеи А1а Зег Туг РНе РНе Туг Азр А1а Зег Агд С1и С1п Ьеи С1и 385 390 395 400 С1и Ьеи Уа1 А1а Ьеи Туг Рго Азр ТНг ТНг ТНг Туг С1у Зег Рго РНе 405 410 415 Агд ТНг С1у А1а А1а Азп Азп Тгр Туг Рго С1п РНе Ьуз Агд Ьеи А1а 420 425 430 А1а Не Ьеи С1у Азр Ьеи Уа1 РНе ТНг Не ТНг Агд Агд А1а РНе Ьеи 435 440 445 Зег Туг А1а С1и С1и Не Зег Рго Азр Ьеи Рго Азп Тгр Зег Туг Ьеи 450 455 460 А1а ТНг Туг Азр Туг С1у ТНг Рго Уа1 Ьеи С1у ТНг РНе Низ С1у Зег 465 470 475 480 Азр Ьеи Ьеи С1п Уа1 РНе Туг С1у Не Ьуз Рго Азп Туг А1а А1а Зег 485 490 495 Зег Зег Низ ТНг Туг Туг Ьеи Зег РНе Уа1 Туг ТНг Ьеи Азр Рго Азп 500 505 510 Зег Азп Агд С1у С1и Туг Не С1и Тгр Рго С1п Тгр Ьуз С1и Зег Агд 515 520 525 С1п Ьеи Мек Азп РНе С1у А1а Азп Азр А1а Зег Ьеи Ьеи ТНг Азр Азр 530 535 540 РНе Агд Азп С1у ТНг Туг С1и РНе Не Ьеи С1п Азп ТНг А1а А1а РНе 545 550 555 560

ΗΪ3 Не <210> 13 <211> 2097 <212> ДНК

- 57 008007 <213> АзрегдШиз пБдег <400> 13

ссЕддсЕдас дсЕаЕассда адасдаЕдЕс даЕдЕсдЕсЕ ЕЕдсЕсадад дссссдадЕс 60 дЕЕЕддддса сдЕсаадааа дЕадЕсЕЕсд сЕдсЕдсЕЕд аадасаЕдаЕ саддасасдс 120 ддЕЕсдассЕ ЕсдадЕдЕас аЕдаЕаЕссд ЕадааЕЕЕдс ЕЕдЕдасЕас сааддсаЕаЕ 180 дЕЕадЕЕсдЕ дсадЕддЕаа аадсддсЕЕс ЕсЕЕсЕЕсаа ЕсЕдсдаддЕ ддадаЕдссЕ 240 асЕаЕдаЕсд ЕсаЕссаасЕ ЕддЕдЕсЕас аадасдааса саадсЕЕадЕ Ессдасдаас 300 садЕдаааас ЕсЕдЕаадаЕ аЕаЕаададс аЕсаададЕс ддасЕЕдсЕЕ аддададЕдд 360 аЕадЕЕдЕЕд аЕдсЕсдсдд аадсЕсЕсаЕ аЕадЕаЕада ЕаЕдаадЕаЕ сддЕдадЕсд 420 ЕадЕадЕсЕЕ ЕдЕаЕЕаЕаЕ адддададдс ЕдааЕддЕдЕ дддЕсаЕдаЕ ааЕЕЕссаса 480 ЕааЕадсдаЕ ЕааадсссЕа даЕсдадддЕ аЕсЕЕдаддс аЕаааЕдаЕа дЕаЕсадЕдд 540 асаЕаЕссЕд адаЕдаддаЕ даЕаЕдадаЕ даЕададаЕд аддаадааад аддааадада 600 даддсаадаа сададаЕЕЕЕ ЕаЕассЕЕЕд сададсадсс саЕссдЕсас ЕдааЕЕсадд 660 саЕсЕЕсасЕ ссаЕасЕаЕс асдадЕсаас дЕдаадЕЕдЕ аЕаадсдЕад Едасаддссд 720 садЕдасдаЕ даЕссдЕсас ЕдсддЕддсЕ аЕссдсдасЕ даЕсЕЕдсЕа ЕссдЕдасЕд 780 сдЕЕдасЕсЕ ддЕдаассаа дЕдЕЕсддда аддддЕдааа аЕдаадсЕда адсдддЕсад 840 ддаасаЕЕсс аадсаасасЕ адасдадЕса дсдасдадЕс адсдаЕссас ЕсддЕсЕсас 900 асдсЕсссаа ЕадЕсЕсааЕ ЕЕддЕдссаа ЕддсаасЕаа дЕаЕЕссаЕс сасЕЕЕЕааЕ 960 ЕааадЕдаЕс адсддЕдсас дааЕЕсасаЕ дсЕддаЕсЕд дЕасадаЕса даЕЕааЕаЕс 1020 ЕссЕддааЕа сдаЕдааддс ссассЕсадд аЕЕсасдаЕа ааЕЕЕсЕддЕ дасЕдссадс 1080 ЕсдааЕддса ЕЕсЕссдЕса сЕсЕасассЕ дссдЕЕддЕЕ ааЕЕсЕссда ассЕсЕааЕЕ 1140 дЕсааЕЕЕсЕ дссааааЕдс дЕсЕаЕсаЕс дсЕддсссЕд дсаЕссадсд ссаЕссЕасс 1200 сдссЕЕаддс ЕасадсаЕса асдасЕЕсЕс сЕдсааЕадс ассдаасасс сдааЕссадЕ 1260 ЕдЕдсЕссЕа саЕдддсЕад дсдссассЕа сЕасдаадас ЕЕдааЕЕасс ЕдсааддЕЕд 1320 дсЕасадасс сааддсЕаЕЕ дсасЕЕасдс саааассЕас ддЕдсаЕаЕд ааддсЕЕссс 1380 сЕЕЕдЕсддс ддссЕсаадд ссаЕсдссда аЕсддссасд даааЕсдссд сдЕасаЕссд 1440 сдаддЕдааа даааадасдд дсдссдасаа даЕЕдассЕЕ дЕсддЕсасЕ ссдааддсдс 1500 сЕЕссадасс сЕсЕасдЕсс сЕаадЕЕсда ддаЕддЕаЕс ЕсддадаЕдс ЕддаЕаадсЕ 1560 ддЕддссаЕЕ дсассЕссса ссададдсас саасЕЕддсд дддаЕсЕаЕд асаЕсдсаЕа 1620 ЕдЕЕсЕддда ааЕсЕаЕсдс дсдаЕсЕдаЕ аддсдасдЕс сЕддаЕассд ЕдддсЕдсдс 1680 сдссЕдЕдаЕ даЕсЕдддЕс сддаЕддадс адсдаЕЕдас сдсЕЕдаасд аЕддсдадсс 1740 ЕаЕсдЕдсад ссдддаааЕа аЕсЕаасддЕ даЕЕдсаЕсд сддЕссдасд ааЕЕддЕсас 1800 сссаассасс ассЕссЕЕсд ЕдсаЕдаада ЕддддЕдасс ааЕдааЕддд Едсаадасас 1860 ЕЕдЕссЕсЕа дасссЕдЕсд дЕсаЕаЕсдд ЕдаддсаЕас даЕсЕдаасд ЕсЕддааЕЕЕ 1920 ддЕсааааас дссЕЕддасЕ сЕасдссдаа дсдЕдадЕЕс дЕсЕдсЕсдс ЕдддаЕсЕсс 1980 сддсаддЕда дасЕаЕсаЕс ЕЕсЕдааааЕ ЕЕдЕаЕаЕаа дсаЕЕЕаЕаЕ ЕЕддаЕассс 2040 ддЕЕассадЕ саЕЕадЕдЕс аЕааЕдЕаЕа аЕааЕаЕсас сасаасЕЕсс Ессаадс 2097

<210> 14 <211> 834 <212> ДНК

- 58 008007 <213> АзрегдШиз пЬдег <220>

<221> СОЗ <222> (1)..(834) <400> 14

аЕд сдЕ сЕа Еса Есд сЕд дсс сЕд дса Есс аде дсс аЕс сЕа ССС дсс 48 МеЕ Агд Ьеи Зег Зег Ьеи А1а Ьеи А1а Зег Зег А1а Не Ьеи Рго А1а 1 5 10 15 ЕЕа ддс Еас аде аЕс аас дас ЕЕс Есс Еде ааЕ аде асе даа сас ссд 96 Ьеи С1у Туг Зег 11е Азп Азр РЬе Зег Суз Азп Зег ТЬг С1и ΗΪ5 Рго 20 25 30 ааЕ сса дЕЕ дЕд сЕс сЕа саЕ ддд сЕа ддс дсс асе Еас Еас даа дас 144 Азп Рго Уа1 Уа1 Ьеи Ьеи Н1з С1у Ьеи С1у А1а ТЬг Туг Туг С1и Азр 35 40 45 ЕЕд ааЕ Еас сЕд саа ддЕ Едд сЕа сад асе саа ддс ЕаЕ Еде асЕ Еас 192 Ьеи Азп Туг Ьеи С1п С1у Тгр Ьеи С1п ТЬг С1п С1у Туг Суз ТЬг Туг 50 55 60 дсс ааа асе Еас ддЕ дса ЕаЕ даа ддс ЕЕс ССС ЕЕЕ дЕс ддс ддс сЕс 240 А1а Ьуз ТЬг Туг С1у А1а Туг С1и С1у РЬе Рго РЬе Уа1 С1у С1у Ьеи 65 70 75 80 аад дсс аЕс дсс даа Есд дсс асд даа аЕс дсс дед Еас аЕс сдс дад 288 Ьуз А1а 11е А1а С1и Зег А1а ТЬг С1и 11е А1а А1а Туг Не Агд С1и 85 90 95 дЕд ааа даа аад асд ддс дсс дас аад аЕЕ дас сЕЕ дЕс ддЕ сас Есс 336 Уа1 Ьуз С1и Ьуз ТЬг С1у А1а Азр Ьуз 11е Азр Ьеи Уа1 С1у НЬз Зег 100 105 110 даа ддс дсс ЕЕс сад асе сЕс Еас дЕс ссЕ аад ЕЕс дад даЕ ддЕ аЕс 384 С1и С1у А1а РЬе С1п ТЬг Ьеи Туг Уа1 Рго Ьуз РЬе <31и Азр С1у Не 115 120 125 Есд дад аЕд сЕд даЕ аад сЕд дЕд дсс аЕЕ дса ссЕ ССС асе ада ддс 432 Зег С1и МеЕ Ьеи Азр Ьуз Ьеи Уа1 А1а 11е А1а Рго Рго ТЬг Агд С1у 130 135 140 асе аас ЕЕд дед ддд аЕс ЕаЕ дас аЕс дса ЕаЕ дЕЕ сЕд дда ааЕ сЕа 480 ТЬг Азп Ьеи А1а С1у 11е Туг Азр 11е А1а Туг Уа1 Ьеи С1у Азп Ьеи 145 150 155 160 Есд сдс даЕ сЕд аЕа ддс дас дЕс сЕд даЕ асе дЕд ддс Еде дсс дсс 528 Зег Агд Азр Ьеи Не С1у Азр Уа1 Ьеи Азр ТЬг Уа1 С1у Суз А1а А1а 165 170 175 ЕдЕ даЕ даЕ сЕд ддЕ ссд даЕ дда дса дед аЕЕ дас сдс ЕЕд аас даЕ 576 Суз Азр Азр Ьеи С1у Рго Азр С1у А1а А1а 11е Азр Агд Ьеи Азп Азр 180 185 190

- 59 008007

ддс дад сск акс дкд сад ссд дда аак аак ска асд дкд акк дса кед 624 С1у С1и Рго 11е Уа1 С1п Рго С1у Азп Азп Ьеи ТЬг Уа1 Не А1а Зег 195 200 205 сдд ксс дас даа ккд дкс асе сса асе асе асе ксс ккс дкд сак даа 672 Агд Зег Азр С1и Ьеи Уа1 ТЬг Рго ТЬг ТЬг ТЬг Зег РЬе Уа1 Ηί3 С1и 210 215 220 дак ддд дкд асе аак даа кдд дкд саа дас аск кдк сск ска дас сск 720 Азр 61у Уа1 ТЬг Азп С1и Тгр Уа1 <31п Азр ТЬг Суз Рго Ьеи Азр Рго 225 230 235 240 дкс ддк сак акс ддк дад дса кас дак скд аас дкс кдд аак ккд дкс 768 Уа1 С1у Н13 11е 61у С1и А1а Туг Азр Ьеи Азп Уа1 Тгр Азп Ьеи Уа1 245 250 255 ааа аас дсс ккд дас кек асд ссд аад едк дад ккс дкс кде кед скд 816 Ьуз Азп А1а Ьеи Азр Зег ТЬг Рго Ьуз Агд С1и РЬе Уа1 Суз Зег Ьеи 260 265 270 дда кек ссс ддс адд кда 834 С1у Зег Рго С1у Агд

275 <210> 15 <211> 277 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пддег <400> 15

Мек Агд Ьеи Зег Зег Ьеи А1а Ьеи А1а Зег Зег А1а 11е Ьеи Рго А1а 1 5 10 15 Чог ΤΊ Чог ТЬг п Рт-п Д' _г ·*- '''Л — 20 25 30 Азп Рго Уа1 Уа1 Ьеи Ьеи НЬз С1у Ьеи С1у А1а ТЬг Туг Туг С1и Азр 35 40 45 Ьеи Азп Туг Ьеи С1п С1у Тгр Ьеи С1п ТЬг С1п С1у Туг Суз ТЬг Туг 50 55 60 А1а Ьуз ТЬг Туг С1у А1а Туг С1и С1у РЬе Рго РЬе Уа1 С1у С1у Ьеи 65 70 75 80 Ьуз А1а 11е А1а С1и Зег А1а ТЬг С1и 11е А1а А1а Туг 11е Агд С1и 85 90 95 Уа1 Ьуз С1и Ьуз ТЬг С1у А1а Азр Ьуз 11е Азр Ьеи Уа1 С1у Ηί3 Зег 100 105 но С1и С1у А1а РЬе С1п ТЬг Ьеи Туг Уа1 Рго Ьуз РЬе С1и Азр С1у 11е 115 120 125 Зег С1и Мек Ьеи Азр Ьуз Ьеи Уа1 А1а 11е А1а Рго Рго ТЬг Агд С1у

- 60 008007

130 135 140 ТЬг Азп Ьеи А1а С1у Не Туг Азр Не А1а Туг Уа1 Ьеи С1у Азп Ьеи 145 150 155 160 Зег Агд Азр Ьеи 11е С1у Азр Уа1 Ьеи Азр ТЬг Уа1 С1у Суз А1а А1а 165 170 175 Суз Азр Азр Ьеи С1у Рго Азр С1у А1а А1а Не Азр Агд Ьеи Азп Азр 180 185 190 С1у С1и Рго Не Уа1 С1п Рго С1у Азп Азп Ьеи ТЬг Уа1 11е А1а Зег 195 200 205 Агд Зег Азр С1и Ьеи Уа1 ТЬг Рго ТЬг ТЬг ТЬг Зег РЬе Уа1 ΗΪ3 С1и 210 215 220 Азр С1у Уа1 ТЬг Азп С1и Тгр Уа1 ΘΙη Азр ТЬг Суз Рго Ьеи Азр Рго 225 230 235 240 Уа1 С1у Н13 Не С1у С1и А1а Туг Азр Ьеи Азп Уа1 Тгр Азп Ьеи Уа1 245 250 255 Ьуз Азп А1а Ьеи Азр Зег ТЬг Рго Ьуз Агд С1и РЬе Уа1 Суз Зег Ьеи 260 265 270

С1у Зег Рго 61у Агд

275 <210> 16 <211> 1881 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пгдег <400> 16

ссдадЬдаЬс сдсдасЬЬсЬ дддЬсадсЬЬ ЬдПсЬдсдд дсЬссассад ЬдссдЬсаЬс 60 дсасдсдада сссдссссдд аЬдсЬЬадсЬ даадссддса ЬадЬссаЬсс ссдсЬсдддс 120 дГдаГдссса асддЬсасЬд даддададдГ дсадддадда ЬдссдИдса ЬдааЬсаадс 180 ссддддЬЬЬд асЬЬЬсаЬсс дсЬсдЬ'Ь'Ьсс ЬасЬддсддд ЬЬсдсссЬсЬ ссаЬсдаадс 240 сасддаЬссЬ ЬссаЬссдда ЬссЬддсада асадЬдадда адсададсЬЬ ддЫааЬадЬа 300 даааЬ'ЬаЬ'Ьа аЬассдадсЬ ддЬсЬдссса ШИсссаа ассПсссЬс Εΐΐοοβΐοοο 360 ЬсЬсдссЬсд сасссссЬН зЬссЬсссЬс ссдсса'ЬдЬа ЬаЬсссс-Ьсд дЬдсЬдсЫас 420 Ьддссдсдад ссЬдЬ'Ьсса'Ь ддсдсаасдд сдсЬдсссас дсссддсЬсс асдсссаЬсс 480 сдсссадсса дда-ЬсссЬдд ЬасадЬдсдс ссдадддсЬЬ сдаддаддсЬ да-ЬсссддЬд 540 сса'ЬссЬдсд сдЬдсддссс дсдсссддса асПдассдЬ ддЬадЬдддс ааЬдсдЬсдд 600 сддссЬасаа саЬссЬсЬас сдсасЬасад асадЬсадЬа саадсссЬсс ЬдддсЬдЬда 660 ссасссЬдск ддЬдсссссс дЬддссдсс1: ссдссдссдЬ саассададЬ дЬссЬдсЬсЬ 720 сссассада! сдсс^асдаЬ ЬсдЬЬсдасд ЬсааЬдссад ЬсссадсЬас дссаЬдЬаса 780 ссадсссдсс сЬссдаЬаЕг аЬссЬсдссс Ьдсадсдсдд сЬддЬЬсдЬЬ аасдЬссссд 840 аЬЬасдаддд ссссааЬдсс ЬсЫИсассд ссддЬдЬдса дЬссддссаЬ дссасссЬсд 900 асЬсддЬссд садсдЬдсЬс дссЬссддаЬ Ьсддсс'Ьдаа сдаддасдсс сад'ЬасдсЬс 960

- 61 008007

ЕдЕддддЕЕа сЕсЕддсддЕ дссЕЕддсса дсдааЕдддс ЕдсЕдаасЕд садаЕдсааЕ 1020 асдсЕсссда дЕЕдаасаЕЕ дссддЕсЕдд ссдЕдддЕдд ЕсЕсасЕссс ааЕдЕЕасса 1080 дсдЕсаЕдда сасддЕдасс ЕсдассаЕса дЕдсдддасЕ саЕссссдсс дссдсссЕдд 1140 дЕсЕдЕсдад ссадсасссс дадассЕасд адЕЕсаЕссЕ садссадсЕс аадасдасдд 1200 дасссЕасаа ссдсасадда ЕЕссЕадссд ссааддассЕ дасссЕдЕсс даддсддадд 1260 ЕсЕЕсЕасдс сЕЕссадаас аЕсЕЕсдаЕЕ асЕЕЕдЕсаа сддаЕсддсс асдЕЕссадд 1320 сддаддЕддЕ дсадааддсд сЕдаассадд асддаЕасаЕ дддсЕассаЕ дддЕЕсссдс 1380 адаЕдссддЕ дсЕсдсдЕас ааддсЕаЕЕс асдаЕдадаЕ садЕсссаЕс саддаЕасдд 1440 аЕсдсдЕдаЕ саадсдсЕас ЕдЕддЕсЕдд даЕЕдаасаЕ сЕЕдЕаЕдад сддаасасса 1500 ЕсддЕддсса сЕсддсадад саддЕдааЕд дсаасдссад ддсдЕддаас ЕддЕЕдасда 1560 дсаЕЕЕЕсда сддаасдЕаЕ дсдсадсадЕ асаадассда ддддЕдсасд аЕссдсааЕд 1620 ЕсасЕсЕдаа сасдасЕЕсс ЕссдЕЕЕаЕЕ адададдддд сЕдЕЕдЕЕаЕ дЕдааЕааЕд 1680 сЕдаадаЕдд сЕдЕдЕаЕдд асддЕссдсЕ сЕссЕдЕаЕа дЕааЕдддсЕ ааЕдсаЕдсд 1740 дсЕЕсаЕдаа саЕддЕасда аадаЕЕадаЕ ЕаЕдЕаЕаЕа дЕдЕддаадЕ ддЕааЕдаЕд 1800 аЕаЕааЕаЕс ЕдЕсЕаЕдаЕ сЕаЕдЕЕссЕ дсЕаЕЕсЕаЕ асааасдсда ссаЕЕсасад 1860 ааЕдасЕасЕ ддсасаЕсЕд с , 1881

<210> 17 <211> 1257 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег

<220>

<221> СР5 <222> (1) . . (1257) <400> 17

аЕд ЕаЕ аЕс ссс Есд дЕд сЕд сЕЕ сЕд дсс дед аде сЕд ЕЕс саЕ ддс 48 МеЕ Туг 11е Рго Зег Уа1 Ьеи Ьеи Ьеи АЛ а АЛ а Зег Ьеи РЬе НЛз 6Лу 1 5 10 15 дса асд дед сЕд ссс асд ссс ддс Есс асд ссс аЕс ссд ссс аде сад 96 А1а ТЬг А1а Ьеи Рго ТЬг Рго 6Лу Зег ТНг Рго 1Ле Рго Рго Зег бЛп 20 25 30 даЕ ссс Едд Еас адЕ дед ссс дад ддс ЕЕс дад дад дсЕ даЕ ссс ддЕ 144 Азр Рго Тгр Туг Зег АЛ а Рго 6Ли 61 у РЬе бЛи 6Ли АЛ а Азр Рго бЛу 35 40 45 дсс аЕс сЕд сдс дЕд сдд ссс дед ссс ддс аас ЕЕд асе дЕд дЕа дЕд 192 А1а 11е Ьеи Агд Уа1 Агд Рго АЛ а Рго 6Лу Азп Ьеи ТЬг УаЛ УаЛ УаЛ 50 55 60 ддс ааЕ дед Есд дед дсс Еас аас аЕс сЕс Еас сдс асЕ аса дас адЕ 240 61у Азп А1а Зег А1а АЛ а Туг Азп 1Ле Ьеи Туг Агд ТЬг ТЬг Азр Зег 65 70 75 80

- 62 008007

сад кас аад ссс ксс кдд дек дкд асе асе скд скд дкд ссс ссс дкд 288 ΘΙη Туг Ьуз Рго Зег Тгр А1а Уа1 ТЬг ТНг Ьеи Ьеи Уа1 Рго Рго УаЬ 85 90 95 дсс дсс ксс дсс дсс дке аас сад адк дке скд скс ксс сас сад акс 336 А1а А1а Зег А1а А1а Уа1 Азп ΘΙη Зег Уа1 Ьеи Ьеи Зег НЬз ΘΙη 11е 100 105 110 дсс кас дак кед ккс дас дке аак дсс адк ссс аде кас дсс акд кас 384 А1а Туг Азр Зег РНе Азр Уа1 Азп А1а Зег Рго Зег Туг А1а Мек Туг 115 120 125 асе аде ссд ссс ксс дак акк акс скс дсс скд сад сдс ддс кдд ккс 432 ТЬг Зег Рго Рго Зег Азр Не 11е Ьеи А1а Ьеи ΘΙη Агд С1у Тгр РЬе 130 135 140 дкк аас дке ссс дак кас дад ддс ссс аак дсс кек ккс асе дсс ддк 480 Уа1 Азп Уа1 Рго Азр Туг С1и С1у Рго Азп А1а Зег РЬе ТЬг А1а С1у 145 150 155 160 дкд сад ксс ддс сак дсс асе скс дас кед дке сдс аде дкд скс дсс 528 Уа1 ΘΙη Зег С1у НЬз А1а ТНг Ьеи Азр Зег Уа1 Агд Зег Уа1 Ьеи А1а 165 170 175 Нее дда ккс ддс скд аас дад дас дсс сад кас дек скд кдд ддк кас 576 Зег С1у РЬе С1у Ьеи Азп С1и Азр А1а С1п Туг А1а Ьеи Тгр С1у Туг 180 185 190 гее ддс ддк дсс ккд дсс аде даа кдд дек дек даа скд сад акд саа 624 Зег С1у С1у А1а Ьеи А1а Зег С1и Тгр А1а А1а С1и Ьеи С1п Мек ΘΙη 195 200 205 Нас дек ссс дад ккд аас акк дсс ддк скд дсс дкд ддк ддк скс аск 672 Туг А1а Рго С1и Ьеи Азп 11е А1а С1у Ьеи А1а Уа1 С1у С1у Ьеи ТЬг 210 215 220 ссс аак дкк асе аде дке акд дас асд дкд асе кед асе акс адк дед 720 Рго Азп Уа1 ТЬг Зег Уа1 Мек Азр ТНг Уа1 ТЬг Зег ТНг 11е Зег А1а 225 230 235 240 дда скс акс ссс дсс дсс дсс скд ддк скд кед аде сад сас ссс дад 768 С1у Ьеи 11е Рго А1а А1а А1а Ьеи С1у Ьеи Зег Зег ΘΙη НЬз Рго 61и 245 250 255 асе кас дад ккс акс скс аде сад скс аад асд асд дда ссс кас аас 816 ТЬг Туг С1и РЬе 11е Ьеи Зег С1п Ьеи Ьуз ТЬг ТЬг С1у Рго Туг Азп 260 265 270 сдс аса дда ккс ска дсс дсс аад дас скд асе скд ксс дад дед дад 864 Агд ТЬг С1у РЬе Ьеи А1а А1а Ьуз Азр Ьеи ТНг Ьеи Зег С1и А1а С1и 275 280 285 дке ккс кас дсс ккс сад аас акс ккс дак кас ккк дке аас дда кед 912 Уа1 РНе Туг А1а РНе С1п Азп 11е РНе Азр Туг РНе Уа1 Азп С1у Зег 290 295 300 дсс асд ккс сад дед дад дкд дкд сад аад дед скд аас сад дас дда 960

- 63 008007

А1а ТЬг РЬе С1п А1а С1и Уа1 Уа1 С1п Ьуз А1а Ьеи Азп С1п Азр С1у 305 310 315 320 Рас аЬд ддс Рас саЬ ддд ЬЬс ссд сад аЬд ссд дкд сЬс дед Рас аад 1008 Туг Мер С1у Туг Юз С1у РЬе Рго С1п Мек Рго Уа1 Ьеи А1а Туг Ьуз 325 330 335 дсЬ аЬЬ сас даЬ дад акс адк ссс аЬс сад дар асд даЬ сдс дрд аЬс 1056 А1а 11е Ηίδ Азр С1и 11е Зег Рго 11е С1п Азр ТЬг Азр Агд Уа1 11е 340 345 350 аад сдс Рас ддЬ сЬд дда ЬЬд аас аЬс ЬЬд Рак дад едд аас асе 1104 Ьуз Агд Туг Суз С1у Ьеи С1у Ьеи Азп 11е Ьеи Туг С1и Агд Азп ТЬг 355 360 365 акс ддр ддс сас Ьсд дса дад сад дЬд ааЬ ддс аас дсс адд дед Ьдд 1152 Не С1у 61у Ηίδ Зег А1а С1и С1п Уа1 Азп 61у Азп А1а Агд А1а Тгр 370 375 380 аас Ьдд ЬЬд асд аде аЬЬ ЬЬс дас дда асд ЬаЬ дед сад сад Рас аад 1200 Азп Тгр Ьеи ТЬг Зег 11е РЬе Азр С1у ТЬг Туг А1а С1п С1п Туг Ьуз 385 390 395 400 асе дад ддд Ьдс асд акс сдс ааЬ дЬс асЬ сЬд аас асд асЕ Ьсс Ьсс 1248 ТЬг С1и С1у Суз ТЬг 11е Агд Азп Уа1 ТЬг Ьеи Азп ТЬг ТЬг Зег Зег 405 410 415

1257 дЬЬ ЬаЬ Гад

Уа1 Туг <210> 18 <211> 418 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пЬдег <400> 18

Мек Туг 11е Рго Зег Уа1 Ьеи Ьеи Ьеи А1а А1а Зег Ьеи РЬе Ηίδ С1у 1 5 10 15 А1а ТЬг А1а Ьеи Рго ТЬг Рго С1у Зег ТЬг Рго 11е Рго Рго Зег С1п 20 25 30 Азр Рго Тгр Туг Зег А1а Рго С1и С1у РЬе С1и С1и А1а Азр Рго С1у 35 40 45 А1а 11е Ьеи Агд Уа1 Агд Рго А1а Рго С1у Азп Ьеи ТЬг Уа1 Уа1 Уа1 50 55 60 С1у Азп А1а Зег А1а А1а Туг Азп 11е Ьеи Туг Агд ТЬг ТЬг Азр Зег 65 70 75 80 С1п Туг Ьуз Рго Зег Тгр А1а Уа1 ТЬг ТЬг Ьеи Ьеи Уа1 Рго Рго Уа1 85 90 95 А1а А1а Зег А1а А1а Уа1 Азп 61п Зег Уа1 Ьеи Ьеи Зег Ηίδ С1п 11е

- 64 008007

100 105 110 А1а Туг Азр Зег РЬе Азр Уа1 Азп А1а Зег Рго Зег Туг А1а МеЕ Туг 115 120 125 ТЬг Зег Рго Рго Зег Азр 11е 11е Ьеи А1а Ьеи С1п Агд С1у Тгр РЬе 130 135 140 Уа1 Азп Уа1 Рго Азр Туг С1и С1у Рго Азп А1а Зег РЬе ТЬг А1а С1у 145 150 155 160 Уа1 С1п Зег С1у Нхз А1а ТЬг Ьеи Азр Зег Уа1 Агд Зег Уа1 Ьеи А1а 165 170 175 Зег С1у РЬе С1у Ьеи Азп С1и Азр А1а С1п Туг А1а Ьеи Тгр С1у Туг 180 185 190 Зег С1у С1у А1а Ьеи А1а Зег С1и Тгр А1а А1а С1и Ьеи С1п МеЕ С1п 195 200 205 Туг А1а Рго С1и Ьеи Азп 11е А1а С1у Ьеи А1а Уа1 С1у С1у Ьеи ТЬг 210 215 220 Рго Азп Уа1 ТЬг Зег Уа1 МеЕ Азр ТЬг Уа1 ТЬг Зег ТЬг 11е Зег А1а 225 230 235 240 С1у Ьеи 11е Рго А1а А1а А1а Ьеи С1у Ьеи Зег Зег С1п Н1з Рго С1и 245 250 255 ТЬг Туг С1и РЬе 11е Ьеи Зег С1п Ьеи Ьуз ТЬг ТЬг С1у Рго Туг Азп 260 265 270 Агд ТЬг С1у РЬе Ьеи А1а А1а Ьуз Азр Ьеи ТЬг Ьеи Зег С1и А1а С1и 275 280 285 Уа1 РЬе Туг А1а РЬе С1п Азп 11е РЬе Азр Туг РЬе Уа1 Азп С1у Зег 290 295 300 А1а ТЬг РЬе С1п А1а С1и Уа1 Уа1 С1п Ьуз А1а Ьеи Азп С1п Азр С1у 305 310 315 320 Туг МеЕ С1у Туг Н13 С1у РЬе Рго С1п МеЕ Рго Уа1 Ьеи А1а Туг Ьуз 325 330 335 А1а 11е ΗΪ3 Азр С1и 11е Зег Рго 11е С1п Азр ТЬг Азр Агд Уа1 11е 340 345 350 Ьуз Агд Туг Суз С1у Ьеи С1у Ьеи Азп 11е Ьеи Туг С1и Агд Азп ТЬг 355 360 365 11е С1у С1у Н13 Зег А1а С1и С1п Уа1 Азп С1у Азп А1а Агд А1а Тгр 370 375 380 Азп Тгр Ьеи ТЬг Зег 11е РЬе Азр С1у ТЬг Туг А1а С1п С1п Туг Ьуз 385 390 395 400 ТЬг С1и С1у Суз ТЬг 11е Агд Азп Уа1 ТЬг Ьеи Азп ТЬг ТЬг Зег Зег 405 410 415

Уа1 Туг <210> 19

- 65 008007 <211> 2809 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пЬдег <400> 19

адРааРдРаР саРРРдааад аРсадРаааР даааРсРдсР дсасааРдса сдсРРРдада 60 асдасдаРдс дааРсдРада аРдсссаадР садРсРдсдР ддрсадасда дасссаРаса 120 РРдсаРаРдР асааРсРадР адРаРааРаР ддРдРаааРс сссаРаассР даРасРсаРа 180 сасасРаРса дддсРРдддР асаРдадсда адРадРссса асааРсааас ааРсаРссаа 240 асРссаадсс аааРдссадс даааасааса ааадсасаас аРдаРдРРас адрдсасрад 300 ддааассааР сРдРдРсасс аРсасРсадд асассадаРа Раасдаассс сссРсасада 360 ссасдадРсР РсРссддаРс саРсРдсасс РсаРсассдс РааРРРссРР дассдРсРса 420 аасдссддсР РдсссдсаРа РадсРдсРдд дасдадсРдд адссдссдсс РРссдРсдРс 480 даРассдада РдддсРддРР Рссдсддаас сдсРРдсдса РаРсдаРсад дссдсдРсРа 540 Радааддаса аасадррадр аасссрдард асРРддсддР даРРдсдРРР Расаадаадд 600 РадсддсРсР РРасРсасРР дсасРсдсРд ааРсссРРсс дсааРРдсРд дсаРсдсаРд 660 ддаадсРсдР сдасдрасдд сРсасРсада саРРсдсддд дсдадсдссд РРдсассаРд 720 аРдсадРсРд аРРсРРддад асаРРдддсс ададсаРРРс сРдРРсаРсс аддРдадаРР 780 даРРададад РдРддадсРд аадсРдаадР РддддасааР даддРддРда РсРссдЕРсд 840 дддаРасдРс дадРаРссаа дссдсааРРР аададРаРдд РаааддаРаР аадддРсааа 900 сдРасРдаРс РсРРддсадд аасРсддсаР РРРддсдаас аасааРддсс дааРРдсРса 960 —\ -л *> »-» 1—г <~е+- 1^П2^Г' дссаасидас аауСаууааС α а иассуу и идсддсддсд дасаиСидда д θ 4~ гз Η Έ у ΐ; сРдаРсддаа аасааасРса ассаасдддс сРРдссссдд аРРаддРаад ссаРсасаРд 1080 аадааддссс ссаРдасдРс РддддддааР ссРдасРРдс РдсРРдРРсс дсРРдаРРРа 1140 РссРсРРссс сРадРсаРдс ддРсРРдддР сРРРдаадса РРдсРРсддс дсаРРаРддР 1200 РсасРасРас РасРдсаддР даРаадРаРР РРадРРддРР даРРРдсааа РРдРссаРсс 1260 сРРРРсдаРа аРаддаддРР РддРсРРааР сдРсаРддсд сдсдРРссдд РсаРРддасд 1320 дсРдРРРРдд РРсдадРаРР РддсссРРРР РдддРсдсРд аРРРРддРаР РдсРддааРд 1380 ддРРаРасаР аРРаРсасаР РсРдРсРдсд РаадРадРдР дРРсаРРсРс РддааРРдРд 1440 дРсРаРдРсд аддддсаада дсРаасРдас дсадсрдаас сРдРРаРРаа дРРсРдРРас 1500 даРсдаРсса адасРаРсРР саасдссРРс аРРссРсссд аРдасссддс РаадсдсддР 1560 ааадаадада аааРРдсРдс дРсддРРдсР сРддсдРсдд асРРсасдда РаРаРдсдсд 1620 сРдРРсддаР аРдаддсдда ддаасаРаРс дрссадасад дддаРддсРа РсРдсРРддР 1680 срдсассдас РдсссРаРсд даааддадад даддддадда адаРсаасса дддсдааддд 1740 адсаРсаада адааддРсдР сРаРсРссас саРддРсРса РдаРдРдсад РдаадРсРдд 1800 аРсРдРсРдР сададдадса дсдаРдссРР ссдРРРсааР РадРсдааад дддсРаРдас 1860 дрдрддррдд ддаасааРад аддааасаад РасРсдаада адРссдРсаа дсаРРсдссс 1920 сРдРсдаасд адРРсРддда сРРРРсдаРс даРсадРРсР сдРРссаРда РаРсссадас 1980 адсарсаадр аРаРссРдда адРдасаддд садсссРссс РдРсаРасдР ддддРРсРсд 2040 садддаасад сдсаддсаРР РдсдасдсРд РссаРРсаРс сРРРдРРдаа РсадаадаРс 2100 даРдРсРРРд РддсРсРсдс дссддсааРд дсРссдасад дРсРРссааа РсаРсРсдРд 2160 дасРсдсРса РдааддсРРс дссдаасРРс сРдРРРсРдс РдРРРддсад асдсадсаРс 2220 сРРадсРсаа сдасдаРдРд дсадасааРР сРсРасссдс сРаРсРРРдР РРддаРсаРс 2280

- 66 008007

дасасдЕсас ЕЕсдсддссЕ дЕЕсааЕЕдд аддЕдсаада асаЕсадссд сЕддсадаад 2340 сЕддсадддЕ ассЕдсаЕсЕ дЕЕЕЕссЕЕс асЕадсасса адЕсддЕсдЕ ссаЕЕддЕЕс 2400 садаЕЕаЕЕс ддсассддаа ЕЕЕссадЕЕс ЕасдаЕдасд аааЕссаЕдс сссдсЕсадЕ 2460 аЕЕдЕддсса дЕдадсдаЕЕ ЕЕасаадссд дЕсаадЕасс сдасЕаадаа саЕЕаадасд 2520 сссаЕЕдЕсс ЕдЕЕдЕаЕдд сддЕадсдаЕ адЕсЕсдЕЕд аЕаЕсаасдЕ даЕдЕЕдЕсс 2580 дадсЕсссЕс дсдддассдЕ ддсдааддаа аЕсссдсадЕ аЕдадсаЕЕЕ адаЕЕЕсЕЕд 2640 ЕдддсдсдЕд аЕдЕддасса аЕЕддЕаЕЕс аассаЕдЕсЕ ЕсдаадсдсЕ ддадсддЕас 2700 адсЕсддада аЕсадааадд дасаЕЕдаЕд дадааддЕЕа аЕддЕдссдс дддсасаЕаЕ 2760 дЕассдасаЕ ааадЕасдад дЕссЕдсасс ааЕдаадаса сдсаЕааЕс 2809

<210> 20 <211> 1413 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <220>

<221> СЬЗ <222> (1)..(1413) <400> 20

аЕд дед сдс дкк ссд дЕс аЕЕ дда едд сЕд ЕЕЕ кдд ЕЕс дад ЕаЕ ЕЕд 48 МеЕ А1а Агд Уа1 Рго Уа1 11е С1у Агд Ьеи РЬе Тгр РЬе С1и Туг Ьеи 1 5 10 15 дсс сЕЕ ЕЕЕ ддд Есд сЕд аЕЕ ккд дЕа кЕд сЕд даа Едд дкЕ аЕа саЕ 96 А1а Ьеи РЬе С1у Зег Ьеи 11е Ьеи Уа1 Ьеи Ьеи С1и Тгр Уа1 11е ΗΪ3 20 25 30 аЕЕ аЕс аса ЕЕс ЕдЕ сЕд ссЕ даа ссЕ дкЕ аЕЕ аад ЕЕс Едк Еас даЕ 144 11е 11е ТЬг РЬе Суз Ьеи Рго С1и Рго Уа1 11е Ьуз РЬе Суз Туг Азр 35 40 45 еда Есс аад асЕ аЕс ЕЕс аас дсс ЕЕс аЕЕ ссЕ ссс даЕ дас ссд дсЕ 192 Агд Зег Ьуз ТЬг 11е РЬе Азп А1а РЬе 11е Рго Рго Азр Азр Рго А1а 50 55 60 аад сдс ддк ааа даа дад ааа аЕЕ дсЕ дед Есд дкк дсЕ сЕд дед Есд 240 Ьуз Агд С1у Ьуз С1и С1и Ьуз 11е А1а А1а Зег Уа1 А1а Ьеи А1а Зег 65 70 75 80 дас ЕЕс асд даЕ аЕа Еде дед сЕд ЕЕс дда ЕаЕ дад дед дад даа саЕ 288 Азр РЬе ТЬг Азр Не Суз А1а Ьеи РЬе С1у Туг С1и А1а С1и С1и Низ 85 90 95 аЕс дке сад аса ддд дак ддс ЕаЕ сЕд СЕЕ ддк сЕд сас еда сЕд ССС 336 11е Уа1 С1п ТЬг С1у Азр С1у Туг Ьеи Ьеи С1у Ьеи Низ Агд Ьеи Рго 100 105 110 ЕаЕ едд ааа дда дад дад ддд адд аад аЕс аас сад ддс даа ддд аде 384

- 67 008007

Туг Агд Ьуз 115 С1у С1и С1и С1у Агд 120 Ьуз Не Азп С1п С1у 125 С1и С1у Зег акс аад аад аад дке дке как еке сас сак ддк еке акд акд Еде адк 432 11е Ьуз Ьуз Ьуз ба1 Уа1 Туг Ьеи Низ Низ О1у Ьеи Мек Мек Суз Зег 130 135 140 даа дке кдд акс кдк скд Еса дад дад сад еда кде екк сед Екк саа 480 С1и Уа1 Тгр 11е Суз Ьеи Зег С1и С1и С1п Агд Суз Ьеи Рго РЬе С1п 145 150 155 160 кка дке даа адд ддс как дас дкд кдд ккд ддд аас аак ада дда аас 528 Ьеи ба1 С1и Агд С1у Туг Азр Уа1 Тгр Ьеи С1у Азп Азп Агд С1у Азп 165 170 175 аад кас кед аад аад ксс дке аад сак кед ссс скд кед аас дад Еке 576 Ьуз Туг Зег Ьуз Ьуз Зег Уа1 Ьуз Низ Зег Рго Ьеи Зег Азп С1и РЬе 180 185 190 кдд дас ккк кед акс дак сад ккс кед ккс сак дак акс сса дас аде 624 Тгр Азр РЬе Зег 11е Азр С1п РЬе Зег РЬе Низ Азр Пе Рго Азр Зег 195 200 205 акс аад как акс скд даа дкд аса ддд сад ссс ксс скд Еса кас дкд 672 11е Ьуз Туг 11е Ьеи С1и Уа1 ТЬг С1у С1п Рго Зег Ьеи Зег Туг Уа1 210 215 220 ддд ккс кед сад дда аса дед сад дса ккк дед асд скд ксс акк сак 720 С1у РЬе Зег С1п С1у ТЬг А1а С1п А1а РЬе А1а ТЬг Ьеи Зег 11е Низ 225 230 235 240 сск ккд ккд аак сад аад акс дак дке ккк дкд дек еке дед сед дса 768 Рго Ьеи Ьеи Азп С1п Ьуз 11е Азр Уа1 РЬе 17а1 А1а Ьеи А1а Рго А1а 245 250 255 акд дек сед аса ддк екк сса аак сак еке дкд дас кед еке акд аад 816 Мек А1а Рго ТЬг С1у Ьеи Рго Азп Низ Ьеи Уа1 Азр Зег Ьеи Мек Ьуз 260 265 270 дек кед сед аас ккс скд Екк скд скд ккк ддс ада еде аде акс екк 864 А1а Зег Рго Азп РЬе Ьеи РЬе Ьеи Ьеи РЬе С1у Агд Агд Зег 11е Ьеи 275 280 285 аде кеа асд асд акд кдд сад аса акк еке кас сед сск акс Екк дкк 912 Зег Зег ТЬг ТЬг Мек Тгр С1п ТЬг 11е Ьеи Туг Рго Рго 11е РЬе Уа1 290 295 300 кдд акс акс дас асд кеа екк еде ддс скд ккс аак кдд адд Еде аад 960 Тгр 11е 11е Азр ТЬг Зег Ьеи Агд С1у Ьеи РЬе Азп Тгр Агд Суз Ьуз 305 310 315 320 аас акс аде еде кдд сад аад скд дса ддд кас скд сак скд Екк ксс 1008 Азп 11е Зег Агд Тгр С1п Ьуз Ьеи А1а С1у Туг Ьеи Низ Ьеи РЬе Зег 325 330 335 ккс аск аде асе аад кед дке дке сак кдд ккс сад акк акк сдд сас 1056 РЬе ТЬг Зег ТЬг Ьуз- Зег Уа1 Уа1 Низ Тгр РЬе С1п 11е Не Агд Низ

- 68 008007

340 345 350 едд ааЕ ЕЕс сад ЕЕс Еас даЕ дас даа аЕс саЕ дсс ссд сЕс адЕ аЕЕ 1104 Агд Азп РЬе С1п РЬе Туг Азр Азр С1и 11е Низ А1а Рго Ьеи Зег 11е 355 360 365 дЕд дсс адЕ дад еда ЕЕЕ Еас аад ссд дЕс аад Еас ссд асЕ аад аас 1152 Уа1 А1а Зег 61и Агд РЬе Туг Ьуз Рго 7а1 Ьуз Туг Рго ТЬг Ьуз Азп 370 375 380 аЕЕ аад асд ссс аЕЕ дЕс сЕд ЕЕд ЕаЕ ддс ддЕ аде даЕ адЕ сЕс дЕЕ 1200 Не Ьуз ТЬг Рго 11е Уа1 Ьеи Ьеи Туг С1у С1у Зег Азр Зег Ьеи Уа1 385 390 395 400 даЕ аЕс аас дЕд аЕд ЕЕд Есс дад сЕс ссЕ сдс ддд асе дЕд дед аад 1248 Азр Не Азп Уа1 МеЕ Ьеи Зег С1и Ьеи Рго Агд С1у ТЬг Уа1 А1а Ьуз 405 410 415 даа аЕс ссд сад ЕаЕ дад саЕ ЕЕа даЕ ЕЕс ЕЕд Едд дед сдЕ даЕ дЕд 1296 С1и Не Рго С1п Туг С1и Низ Ьеи Азр РЬе Ьеи Тгр А1а Агд Азр Уа1 420 425 430 дас саа ЕЕд дЕа ЕЕс аас саЕ дЕс ЕЕс даа дед сЕд дад едд Еас аде 1344 Азр С1п Ьеи Уа1 РЬе Азп Низ Уа1 РЬе С1и А1а Ьеи С1и Агд Туг Зег 435 440 445 Есд дад ааЕ сад ааа ддд аса ЕЕд аЕд дад аад дЕЕ ааЕ ддЕ дсс дед 1392 Зег С1и Азп С1п Ьуз С1у ТЬг Ьеи МеЕ С1и Ьуз Уа1 Азп С1у А1а А1а 450 455 460 ддс аса ЕаЕ дЕа ссд аса Еаа 1413 С1у ТЬг Туг Уа1 Рго ТЬг 465 470

<210> 21 <211> 470 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пидег

<400> 21

МеЕ А1а Агд Уа1 Рго Уа1 11е С1у Агд Ьеи РЬе Тгр РЬе С1и Туг Ьеи 1 5 10 15 А1а Ьеи РЬе С1у Зег Ьеи Не Ьеи Уа1 Ьеи Ьеи С1и Тгр Уа1 Не Низ 20 25 30 11е 11е ТЬг РЬе Суз Ьеи Рго С1и Рго Уа1 Не Ьуз РЬе Суз Туг Азр 35 40 45 Агд Зег Ьуз ТЬг 11е РЬе Азп А1а РЬе Не Рго Рго Азр Азр Рго А1а 50 55 60 Ьуз Агд С1у Ьуз С1и С1и Ьуз Не А1а А1а Зег Уа1 А1а Ьеи А1а Зег 65 70 75 80

69 008007

Азр РЬе ТЬг Азр Не 85 Суз А1а Ьеи РЬе С1у 90 Туг С1и А1а С1и С1и 95 Нхз 11е Уа1 С1п ТЬг С1у Азр С1у Туг Ьеи Ьеи С1у Ьеи Нхз Агд Ьеи Рго 100 105 110 Туг Агд Ьуз С1у С1и С1и С1у Агд Ьуз Не Азп С1п С1у С1и С1у Зег 115 120 125 11е Ьуз Ьуз Ьуз Уа1 Ча1 Туг Ьеи Нхз Нхз С1у Ьеи Мек Мек Суз Зег 130 135 140 С1и Уа1 Тгр Не Суз Ьеи Зег С1и С1и С1п Агд Суз Ьеи Рго РЬе С1п 145 150 155 160 Ьеи Уа1 С1и Агд С1у Туг Азр Уа1 Тгр Ьеи С1у Азп Азп Агд С1у Азп 165 170 175 Ьуз Туг Зег Ьуз Ьуз Зег Уа1 Ьуз Нхз Зег Рго Ьеи Зег Азп С1и РЬе 180 185 190 Тгр Азр РЬе Зег 11е Азр С1п РЬе Зег РЬе Нхз Азр 11е Рго Азр Зег 195 200 205 Не Ьуз Туг 11е Ьеи С1и Уа1 ТЬг С1у С1п Рго Зег Ьеи Зег Туг Уа1 210 215 220 С1у РЬе Зег С1п С1у ТЬг А1а С1п А1а РЬе А1а ТЬг Ьеи Зег Не Нхз 225 230 235 240 Рго Ьеи Ьеи Азп С1п Ьуз 11е Азр 57а1 РЬе Уа1 А1а Ьеи А1а Рго А1а 245 250 255 Мек А1а Рго ТЬг С1у Ьеи Рго Азп Нхз Ьеи Уа1 Азр Зег Ьеи МеЬ Ьуз 260 265 270 А1а Зег Рго Азп РЬе Ьеи РЬе Ьеи Ьеи РЬе С1у Агд Агд Зег Не Ьеи 275 280 285 Зег Зег ТЬг ТЬг Мек Тгр С1п ТЬг Не Ьеи Туг Рго Рго 11е РЬе Уа1 290 295 300 Тгр Не Не Азр ТЬг Зег Ьеи Агд С1у Ьеи РЬе Азп Тгр Агд Суз Ьуз 305 310 315 320 Азп Не Зег Агд Тгр С1п Ьуз Ьеи А1а С1у Туг Ьеи Нхз Ьеи РЬе Зег 325 330 335 РЬе ТЬг Зег ТЬг Ьуз Зег Уа1 Уа1 Нхз Тгр РЬе ΘΙη Не 11е Агд Нхз 340 345 350 Агд Азп РЬе С1п РЬе Туг Азр Азр С1и Не Нхз А1а Рго Ьеи Зег 11е 355 360 365 Уа1 А1а Зег С1и Агд РЬе Туг Ьуз Рго Уа1 Ьуз Туг Рго ТЬг Ьуз Азп 370 375 380 Не Ьуз ТЬг Рго 11е Уа1 Ьеи Ьеи Туг С1у С1у Зег Азр Зег Ьеи Уа1 385 390 395 400 Азр 11е Азп Уа1 Мек Ьеи Зег С1и Ьеи Рго Агд С1у ТЬг Уа1 А1а Ьуз 405 410 415 С1и Не Рго С1п Туг С1и НХЗ Ьеи Азр РЬе Ьеи Тгр А1а Агд Азр Уа1

- 70 008007

420 425 430 Азр С1п Ьеи Уа1 РНе Азп Низ Уа1 РНе С1и А1а Ьеи С1и Агд Туг Зег 435 440 445 Зег 31и Азп С1п Ьуз С1у ТНг Ьеи Мек С1и Ьуз Уа1 Азп С1у А1а А1а 450 455 460 С1у ТНг Туг Уа1 Рго ТНг 465 470

<210> 22 <211> 3328 <212> ДНК <213> АзрегдЬНиз пЬдег <400> 22

дакккакдаа дасаддддад сксксадкад акдакскксд сасааккдса скксскдддд 60 адсскдккка дкскскадкд ааккаккдак адасаддкса кскдссксда дддддккска 120 скаасаасдк дакакскакд ккдскссккк аскккадаад аааддккскд сккддкадск 180 ддаасссадк акакадккда кдкдадкака кдаадакксс аакдскккдд аакаккссдс 240 сдкддскдаа кдакдддаск сксаскдсса адссааддда ккссксссда аакккккдса 300 сакакдккдк кдакдсскка кссскскддс акксасксдк кдскдссксд ддкдддассс 360 дасадксскс ааасдакдаа аксккаккдд скскдскадк кдадсксддк кксассаккк 420 скаккддсдс ккксксаскс каскссакак касадскксс дскккдсаак дсддддскдк 480 дскдсдаскк кдааккдскс дсакадсаад адасаскдас садсааксса дсксккскдс 540 ссасакакдк кдсскккдсс ккадкакскс акаакккакд кдкссадкда дасадкккдк 600 ккдкаскдка дсккдадккд ддааксдкдк сскдкдасса кддааакака каккскддак 660 сксадаасак скскассдкк кдкааккккк дакакасккс ссаддакддд асаакдддда 720 сдакдадкак кдддакдсса каксасккда аадсскскка дасадаскдс асскаккккк 780 аккакдскаа аккскккасд адасаскккс кксаадкккс кддссскккд кдаддсадад 840 кдааасасда дсдкксааас ккдкдккдка дакдкккакд акакккакск садасадкск 900 ккссасаксс кдкааксссс аасадааааа дакасасадк акаксаскад аадсксскаа 960 кадккаксак дскдсассск аасадсаакд садксассск дскдсдксад сдассссдак 1020 кссддадаад какссдадак адсдакаадд акдсддадак аадаккддса адкддадакд 1080 адааадакак ссксддсскс адаадкаддс ссдакдакаа акааскадкд аасаадкссс 1140 ссдсссккск ссдадсааас касаскксаа сакдскдаак дсасдсксса ккдскскддс 1200 сксдккдсса дккскксксс каскакксдс ссадсааскк дссксксасс саассдадса 1260 дакксаадсс аккскддскс сдкдддкссс ддссдсаска саадакдксд кдскскакаа 1320 ксдассксдс дксакааксс сссадддсас кдксдксддс асдассккда садасасдск 1380 саадкссссд дкадакдскк кссдаддаак кссакасдса ккдсскссаа ккддддакад 1440 асддккксдс сдкдсддадд скдкссакдс дасддасдад аккаксдакд скадкдаакк 1500 сддсссаадд какдсккскк акасдасакк садаксакак скдасскккс аддкдссскд 1560 дааадсадск сккдааксса аакдасакад дкддкдакда адаскдкскс асадксаакд 1620 ксккссддсс ксакддсдск садддаааас кссскдксдс кдкакасдкд сасддсддад 1680

- 71 008007

ссЕасааЕсд сддсасЕддЕ аддЕдЕаЕса сссЕсадЕсс ЕсЕаЕаЕасс сасадсЕааа 1740 ЕаЕссадссЕ ссддасасаа сасддссЕсд аЕддЕсддсЕ ддЕсддасда дсссЕЕсдЕЕ 1800 дсадЕсадсЕ ЕсаасЕассд дЕасдЕссЕс ааассЕдЕсс ЕссдааЕсаа сЕсаасЕаас 1860 аасссаЕсад саЕсддсдсс сЕсддсЕЕсс ЕсссаЕссас ссЕаассдсс ааадааддаа 1920 ЕссЕсаассЕ аддссЕссаЕ дассадаЕсс ЕссЕдсЕдса аЕдддЕссаа даааасаЕсд 1980 сасаЕЕЕсаа сддсдассса асссаадЕса сЕсЕааЕсдд ссЕсЕссдсс ддсдсдсасЕ 2040 ссдЕаЕдссс ссЕЕсЕаада ЕасаааЕада асЕсадЕссс сЕасссссаа асЕаасдсса 2100 сасадаЕадс ссассасаЕс аЕдаасЕаса асссассааа сассссссЕс ЕЕЕсассдсд 2160 ссаЕсаЕсда аЕссддсдсс дссассЕссс дсдссдЕсса ссссЕасаас дссЕсссЕсс 2220 асдааЕссса аЕЕсасадас ЕЕссЕсасЕд ааасдддсЕд сасЕаассЕс сссдасасЕд 2280 ссаШкдсс сЕдЕсЕссдс дсссЕсссаЕ ссЕсадссаЕ Еассассдсс ЕссаЕсЕссд 2340 ЕсЕЕсдасаа аЕасаасссс ЕссаЕссдсЕ дддссЕЕсса асссдЕсаЕс дассасдада 2400 ЕсаЕссассд ссддсссаЕс дасдссЕддс дсЕсаддааа дЕддааЕадд аЕдсссаЕсс 2460 ЕаасдддсЕЕ саасЕсдаас даддддасаЕ асЕасдЕссс ЕсдсаассЕс ЕсЕсЕсЕссд 2520 аддаЕЕЕсас ЕЕсдЕЕсЕЕс сдаасссЕсс ЕссссдсдЕа ссссдададс дасаЕссада 2580 ссаЕсдаЕда даЕсЕасссс даЕссдааЕд ЕаЕаЕдсЕас ддсдЕсдсса ЕассЕсдада 2640 сааддссдаЕ сссдадЕсЕа ддааддсадЕ ЕЕаадсддсЕ ддаддсддсд ЕаЕдддсаЕЕ 2700 аЕдсдЕаЕдс дЕдЕссадЕа сддсадасдд сддддЕЕЕдЕ ЕдсЕааЕдаЕ даЕддЕЕдЕд 2760 дЕдадссддЕ дЕЕЕЕЕдЕаЕ сдсЕдддсдЕ ЕдааЕаадас ЕдЕЕаЕЕдда ддсдсдаасс 2820 аЕддЕдаЕса даЕддадЕаЕ дадасдЕЕЕа аЕссЕдсддЕ ЕадддаЕаЕЕ ЕсддаддсЕс 2880 ададддаддЕ ЕдсддддЕЕд ЕЕЕсаЕдсдЕ аЕдЕдасЕЕс дЕЕЕдЕддЕд саЕддддаЕс 2940 сдааЕдЕЕсЕ ддддддЕадд ЕаЕдадддда дддаддЕЕЕд ддададдЕаЕ адЕддддадд 3000 даддддаддЕ даЕддЕдЕЕЕ ддддадддда аЕдаЕдаасд ЕдсЕдддддд даЕддадЕЕд 3060 дддЕЕдсддс даддЕЕдаад адддаЕдадЕ ддддддЕдаа ддадЕдЕдда ЕЕЕЕддЕсЕд 3120 ддаддадЕдд даЕЕЕссдад ЕдаЕддЕЕЕд ЕЕЕаЕаЕаЕа дЕсЕадЕдда аддддаЕдЕа 3180 ЕаЕасЕдЕад ЕсасЕаЕсЕд ЕадаасЕЕЕа сЕЕддЕдЕдЕ адаЕадЕааа ЕасЕасаасЕ 3240 дсЕдаадасс ЕЕдддаЕада асдасаЕдсЕ дЕЕЕааЕссЕ саасссЕдас ЕадаЕаЕаЕЕ 3300 дЕдсаЕЕасЕ ЕдсаЕссасд ссЕаасаЕ 3328

<210> 23 <211> 1779 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пхдег <220>

<221> СОЗ <222> (1)..(1779) <400> 23

аЕд сЕд ааЕ дса сдс Есс аи дсЕ сЕд дсс Есд ЕЕд сса дЕЕ сЕЕ сЕс 48 МеЕ Ьеи Азп А1а Агд Зег Не А1а Ьеи А1а Зег Ьеи Рго Уа1 Ьеи Ьеи 1 5 10 15

- 72 008007

сЕа сЕа ЕЕс дсс сад саа СЕЕ дсс ЕсЕ сас сса асе дад сад аЕЕ саа 96 Ьеи Ьеи РЬе А1а С1п 61п Ьеи А1а Зег Низ Рго ТЬг С1и С1п 11е 61п 20 25 30 дсс аЕЕ сЕд дсЕ ссд Едд дЕс ссд дсс дса сЕа саа даЕ дЕс дЕд сЕс 144 А1а 11е Ьеи А1а Рго Тгр Уа1 Рго А1а А1а Ьеи С1п Азр Уа1 Уа1 Ьеи 35 40 45 ЕаЕ ааЕ еда ссЕ сдс дЕс аЕа аЕс ССС сад ддс асЕ дЕс дЕс ддс асд 192 Туг Азп Агд Рго Агд Уа1 11е 11е Рго С1п С1у ТЬг Уа1 Уа1 С1у ТЬг 50 55 60 асе ЕЕд аса дас асд сЕс аад Есс ссд дЕа даЕ дсЕ ЕЕс еда дда аЕЕ 240 ТЬг Ьеи ТЬг Азр ТЬг Ьеи Ьуз Зег Рго Уа1 Азр А1а РЬе Агд С1у 11е 65 70 75 80 сса Еас дса ЕЕд ссЕ сса аЕЕ ддд даЕ ада едд ЕЕЕ сдс сдЕ дед дад 288 Рго Туг А1а Ьеи Рго Рго 11е С1у Азр Агд Агд РЬе Агд Агд А1а С1и 85 90 95 дсЕ дЕс саЕ дед асд дас дад. аЕЕ аЕс даЕ дсЕ адЕ даа ЕЕс ддс сса 336 А1а Уа1 Н13 А1а ТЬг Азр С1и 11е 11е Азр А1а Зег С1и РЬе С1у Рго 100 105 110 адд Еде ссЕ дда аад сад сЕс ЕЕд ааЕ сса ааЕ дас аЕа ддЕ ддЕ даЕ 384 Агд Суз Рго С1у Ьуз С1п Ьеи Ьеи Азп Рго Азп Азр 11е С1у С1у Азр 115 120 125 даа дас ЕдЕ сЕс аса дЕс ааЕ дЕс ЕЕс едд ссЕ саЕ ддс дсЕ сад дда 432 С1и Азр Суз Ьеи ТЬг Уа1 Азп Уа1 РЬе Агд Рго Низ С1у А1а С1п С1у 130 135 140 ааа сЕс ссЕ дЕс дсЕ дЕа Еас дЕд сас ддс дда дсс Еас ааЕ сдс ддс 480 Ьуз Ьеи Рго Уа1 А1а Уа1 Туг Уа1 ΗΪ5 С1у С1у А1а Туг Азп Агд С1у 145 150 155 160 асЕ дсЕ ааа ЕаЕ сса дсс Есс дда сас аас асд дсс Есд аЕд дЕс ддс 528 ТЬг А1а Ьуз Туг Рго А1а Зег С1у Низ Азп ТЬг А1а Зег МеЕ Уа1 С1у 165 170 175 Едд Есд дас дад ССС ЕЕс дЕЕ дса дЕс аде ЕЕс аас Еас сдс аЕс ддс 576 Тгр Зег Азр С1и Рго РЬе Уа1 А1а Уа1 Зег РЬе Азп Туг Агд 11е С1у 180 185 190 дсс сЕс ддс ЕЕс сЕс сса Есс асе сЕа асе дсс ааа даа дда аЕс сЕс 624 А1а Ьеи С1у РЬе Ьеи Рго Зег ТЬг Ьеи ТЬг А1а Ьуз С1и С1у 11е Ьеи 195 200 205 аас сЕа ддс сЕс саЕ дас сад аЕс сЕс сЕд сЕд саа Едд дЕс саа даа 672 Азп Ьеи С1у Ьеи Низ Азр С1п 11е Ьеи Ьеи Ьеи С1п Тгр Уа1 С1п С1и 210 215 220 аас аЕс дса саЕ ЕЕс аас ддс дас сса асе саа дЕс асЕ сЕа аЕс ддс 720 Азп 11е А1а Низ РЬе Азп С1у Азр Рго ТЬг С1п Уа1 ТЬг Ьеи Не С1у 225 230 235 240 сЕс Есс дсс ддс дед сас Есс аЕа дсс сас сас аЕс аЕд аас Еас аас 768

- 73 008007

Ьеи Зег А1а С1у А1а 245 НЛз Зег 11е А1а НЛз 250 НЛз ЛЛе МеЕ Азп Туг 255 Азп сса сса аас асе ссс сЕс ЕЕЕ сас сдс дсс аЕс аЕс даа Есс ддс дсс 816 Рго Рго Азп ТЬг Рго Ьеи РЬе НЛз Агд АЛ а 11е ЛЛе СЛи Зег СЛу АЛа 260 265 270 дсс асе Есс сдс дсс дЕс сас ссс Еас аас дсс Есс сЕс сас даа Есс 864 А1а ТЬг Зег Агд А1а УаЛ НЛз Рго Туг Азп АЛ а Зег Ьеи НЛз СЛи Зег 275 280 285 саа ЕЕс аса дас ЕЕс сЕс асЕ даа асд ддс Еде асЕ аас сЕс ссс дас 912 С1п РЬе ТЬг Азр РЬе Ьеи ТЬг СЛи ТЬг СЛу Суз ТЬг Азп Ьеи Рго Азр 290 295 300 асЕ дсс аЕЕ ЕЕд ссс ЕдЕ сЕс сдс дсс сЕс сса Есс Еса дсс аЕЕ асе 960 ТЬг А1а 11е Ьеи Рго Суз Ьеи Агд АЛ а Ьеи Рго Зег Зег АЛ а ЛЛе ТЬг 305 310 315 320 асе дсс Есс аЕс Есс дЕс ЕЕс дас ааа Еас аас ссс Есс аЕс сдс Едд 1008 ТЬг А1а Зег 11е Зег УаЛ РЬе Азр Ьуз Туг Азп Рго Зег 11е Агд Тгр 325 330 335 дсс ЕЕс саа ссс дЕс аЕс дас сас дад аЕс аЕс сас сдс сдд ссс аЕс 1056 А1а РЬе С1п Рго Уа1 1Ле Азр ΗΪ3 СЛи 1Ле 11е НЛз Агд Агд Рго ЛЛе 340 345 350 дас дсс Едд сдс Еса дда аад Едд ааЕ адд аЕд ссс аЕс сЕа асд ддс 1104 Азр А1а Тгр Агд Зег СЛу Ьуз Тгр Азп Агд МеЕ Рго ЛЛе Ьеи ТЬг СЛу 355 360 365 ЕЕс аас Есд аас дад ддд аса Еас Еас дЕс ссЕ сдс аас сЕс ЕсЕ сЕс 1152 РЬе Азп Зег Азп С1и СЛу ТЬг Туг Туг УаЛ Рго Агд Азп Ьеи Зег Ьеи 370 375 380 Есс дад даЕ ЕЕс асЕ Есд ЕЕс ЕЕс еда асе сЕс сЕс ссс дед Еас ссс 1200 Зег С1и Азр РЬе ТЬг Зег РЬе РЬе Агд ТЬг Ьеи Ьеи Рго А1а Туг Рго 385 390 395 400 дад аде дас аЕс сад асе аЕс даЕ дад аЕс Еас ссс даЕ ссд ааЕ дЕа 1248 С1и Зег Азр 11е С1п ТЬг 11е Азр СЛи 11е Туг Рго Азр Рго Азп УаЛ 405 410 415 ЕаЕ дсЕ асд дед Есд сса Еас сЕс дад аса адд ссд аЕс ссд адЕ сЕа 1296 Туг А1а ТЬг А1а Зег Рго Туг Ьеи СЛи ТЬг Агд Рго ЛЛе Рго Зег Ьеи 420 425 430 дда адд сад ЕЕЕ аад сдд сЕд дад дед дед ЕаЕ ддд саЕ ЕаЕ дед ЕаЕ 1344 С1у Агд С1п РЬе Ьуз Агд Ьеи СЛи А1а АЛ а Туг СЛу НЛз Туг АЛ а Туг 435 440 445 дед ЕдЕ сса дЕа сдд сад асд дед ддд ЕЕЕ дЕЕ дсЕ ааЕ даЕ даЕ ддЕ 1392 А1а Суз Рго Уа1 Агд СЛп ТЬг АЛ а СЛу РЬе УаЛ АЛ а Азп Азр Азр СЛу 450 455 460 ЕдЕ ддЕ дад ссд дЕд ЕЕЕ ЕЕд ЕаЕ сдс Едд дед ЕЕд ааЕ аад асЕ дЕЕ 1440 Суз С1у С1и Рго Уа1 РЬе Ьеи Туг Агд Тгр АЛ а Ьеи Азп Ьуз ТЬг УаЛ

- 74 008007

465 470 475 480

акк дда ддс дед аас сак ддк дак сад акд дад как дад асд ккк аак 1488 Не С1у С1у А1а Азп ΗΪ3 61у Азр С1п Мек С1и Туг С1и ТЬг РЬе Азп 485 490 495 сск дед дкк адд дак акк кед дад дек сад адд дад дкк дед ддд ккд 1536 Рго А1а Уа1 Агд Азр Не Бег С1и А1а СЯп Агд С1и Уа1 А1а С1у Ьеи 500 505 510 ккк сак дед как дкд аск кед ккк дкд дкд сак ддд дак ссд аак дкк 1584 РЬе ΗΪ3 А1а Туг Уа1 ТЬг Бег РЬе Уа1 Уа1 Н13 С1у Азр Рго Азп Уа1 515 520 525 скд ддд ддк адд как дад ддд адд дад дкк кдд дад адд как адк ддд 1632 Ьеи 51у С1у Агд Туг С1и С1у Агд С1и Уа1 Тгр СЯи Агд Туг Бег С1у 530 535 540 дад дда ддд дад дкд акд дкд ккк ддд дад ддд аак дак даа едк дек 1680 С1и С1у С1у С1и Уа1 Мек Уа1 РЬе С1у С1и С1у Азп Азр СЯи Агд А1а 545 550 555 560 ддд ддд дак дда дкк ддд дкк дед дед адд ккд аад адд дак дад кдд 1728 С1у С1у Азр С1у Уа1 С1у Уа1 А1а А1а Агд Ьеи Ьуз Агд Азр СЯи Тгр 565 570 575 ддд дкд аад дад кдк дда ккк кдд кек ддд адд адк ддд акк ксс дад 1776 С1у Уа1 Ьуз С1и Суз С1у РЬе Тгр Бег С1у Агд Бег СЯу Не Бег С1и

580 5В5 590 кда

1779 <210> 24 <211> 592 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз птдег <400> 24

Мек Ьеи Азп А1а Агд Бег 11е А1а Ьеи А1а Бег Ьеи Рго Уа1 Ьеи Ьеи 1 5 10 15 Ьеи Ьеи РЬе А1а С1п С1п Ьеи А1а Бег Н13 Рго ТЬг С1и СЯп 11е С1п 20 25 30 А1а Не Ьеи А1а Рго Тгр Уа1 Рго А1а А1а Ьеи С1п Азр Уа1 Уа1 Ьеи 35 40 45 Туг Азп Агд Рго Агд Уа1 Не Не Рго С1п СЯу ТЬг Уа1 Уа1 С1у ТЬг 50 55 60 ТЬг Ьеи ТЬг Азр ТЬг Ьеи Ьуз Бег Рго Уа1 Азр А1а РЬе Агд СЯу 11е 65 70 75 80 Рго Туг А1а Ьеи Рго Рго 11е С1у Азр Агд Агд РЬе Агд Агд А1а СЯи 85 90 95

- 75 008007

АЬа Уа1 НЬз АЬа 100 ТЬг Азр СЬи 11е 11е 105 Азр АЬа Зег СЬи РЬе 110 СЬу Рго Агд Суз Рго С1у Ьуз СЬп Ьеи Ьеи Азп Рго Азп Азр 11е СЬу СЬу Азр 115 120 125 СЬи Азр Суз Ьеи ТЬг УаЬ Азп УаЬ РЬе Агд Рго НЬз СЬу АЬа ΘΙη СЬу 130 135 140 Ьуз Ьеи Рго УаЬ АЬа УаЬ Туг УаЬ НЬз СЬу СЬу АЬа Туг Азп Агд СЬу 145 150 155 160 ТЬг АЬа Ьуз Туг Рго АЬа Зег СЬу НЬз Азп ТНг А1а Зег Мек УаЬ СЬу 165 170 175 Тгр Зег Азр С1и Рго РЬе УаЬ АЬа УаЬ Зег РЬе Азп Туг Агд 11е СЬу 180 185 190 АЬа Ьеи СЬу РЬе Ьеи Рго Зег ТЬг Ьеи ТЬг АЬа Ьуз СЬи СЬу 11е Ьеи 195 200 205 Азп Ьеи СЬу Ьеи НЬз Азр СЬп 11е Ьеи Ьеи Ьеи С1п Тгр УаЬ СЬп СЬи 210 215 220 Азп 11е АЬа НЬз РЬе Азп СЬу Азр Рго ТЬг СЬп УаЬ ТЬг Ьеи 1Ье СЬу 225 230 235 240 Ьеи Зег АЬа СЬу АЬа НЬз Зег 1Ье АЬа НЬз НЬз 11е Мек Азп Туг Азп 245 250 255 Рго Рго Азп ТЬг Рго Ьеи РЬе НЬз Агд АЬа 11е 11е СЬи Зег СЬу АЬа 260 265 270 АЬа ТЬг Зег Агд АЬа УаЬ НЬз Рго Туг Азп АЬа Зег Ьеи НЬз С1и Зег 275 280 285 С1п РЬе ТЬг Азр РЬе Ьеи ТЬг СЬи ТЬг СЬу Суз ТНг Азп Ьеи Рго Азр 290 295 300 ТЬг АЬа 11е Ьеи Рго Суз Ьеи Агд АЬа Ьеи Рго Зег Зег АЬа 11е ТЬг 305 310 315 320 ТЬг АЬа Зег 11е Зег УаЬ РЬе Азр Ьуз Туг Азп Рго Зег 11е Агд Тгр 325 330 335 АЬа РЬе СЬп Рго УаЬ 11е Азр НЬз СЬи 11е 11е НЬз Агд Агд Рго 1Ье 340 345 350 Азр АЬа Тгр Агд Зег СЬу Ьуз Тгр Азп Агд Мек Рго 11е Ьеи ТЬг СЬу 355 360 365 РЬе Азп Зег Азп СЬи СЬу ТЬг Туг Туг УаЬ Рго Агд Азп Ьеи Зег Ьеи 370 375 380 Зег СЬи Азр РЬе ТЬг Зег РЬе РЬе Агд ТЬг Ьеи Ьеи Рго АЬа Туг Рго 385 390 395 400 СЬи Зег Азр 11е ΘΙη ТЬг 11е Азр СЬи 11е Туг Рго Азр Рго Азп УаЬ 405 410 415 Туг А1а ТЬг АЬа Зег Рго Туг Ьеи СЬи ТЬг Агд Рго 11е Рго Зег Ьеи 420 425 430 СЬу Агд СЬп РЬе Ьуз Агд Ьеи СЬи АЬа АЬа Туг СЬу НЬз Туг АЬа Туг

- 76 008007

435 440 445 А1а Суз Рго Уа1 Агд С1п ТЬг А1а С1у РЬе Уа1 А1а Азп Азр Азр С1у 450 455 460 Суз С1у С1и Рго Уа1 РЬе Ьеи Туг Агд Тгр А1а Ьеи Азп Ьуз ТЬг Уа1 465 470 475 480 11е С1у С1у А1а Азп Низ С1у Азр ΘΙη МеЕ С1и Туг С1и ТЬг РЬе Азп 485 490 495 Рго А1а Уа1 Агд Азр 11е Зег С1и А1а ΘΙη Агд С1и Уа1 А1а С1у Ьеи 500 505 510 РЬе Низ А1а Туг Уа1 ТЬг Зег РЬе Уа1 Уа1 Низ С1у Азр Рго Азп Уа1 515 520 525 Ьеи С1у С1у Агд Туг С1и С1у Агд С1и Уа1 Тгр С1и Агд Туг Зег С1у 530 535 540 С1и С1у С1у С1и Уа1 МеЕ Уа1 РЬе С1у С1и С1у Азп Азр С1и Агд А1а 545 550 555 5 60 С1у С1у Азр С1у Уа1 С1у Уа1 А1а А1а Агд Ьеи Ьуз Агд Азр С1и Тгр 565 570 575 С1у Уа1 Ьуз С1и Суз С1у РЬе Тгр Зег С1у Агд Зег С1у 11е Зег С1и

580 585 590 <210> 25 <211> 3932 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <400> 25

садаЕаасдЕ ЕЕЕдадЕЕЕд дддаЕсЕЕда ЕЕаЕсЕсддс Ессааасада сЕсдссЕаЕс 60 сдададаЕса адЕасаЕааЕ дсаасЕадсЕ аЕЕадЕсааа ЕаЕаасдссд дсадаадЕсЕ 120 аЕЕЕЕдЕссЕ ЕЕЕсЕсЕЕЕс ЕЕЕссЕсдаа даааасссдЕ ддаЕЕаасЕЕ дадссддЕсд 180 дссЕсааадЕ сддсЕсаасс ддсдсдЕЕдс саасЕЕЕааа Едсадасаас саЕсдЕЕЕсс 240 ддссдЕЕдЕд ддддсдаЕдЕ адаЕсадаЕс саааЕЕссса ааасаЕссаЕ ддддЕаааЕс 300 аадааЕЕдад дЕЕасаЕсда ссдаЕадддс ЕсЕЕааЕсса асссЕсЕЕса сддддаааас 360 сЕЕсЕаЕаЕд аЕасаЕддЕЕ ЕасЕссЕсЕд ЕЕЕсЕсЕЕсс Ессссддадд ЕдссаааЕсс 420 дддсдсаЕсд ЕдЕсЕаЕЕсЕ Еадсаассад сдааЕЕЕдас аааЕЕдаЕсс ааЕсссаЕад 480 ааЕсададЕа асЕсЕасаас ссааЕсадЕс дссЕааЕасд сасадсаааа даадаЕдсаЕ 540 Есддасадсс аасдсаадаа аададаЕЕаа аааааааааа аааааааааа аааааааааа 600 ааааддссЕс сссЕсаЕсас сЕсассааад ЕсдсааЕсаа Есадсдасса сЕадсЕасаЕ 660 сдсдасЕдаа сдаЕадсаЕЕ ссдсаЕддЕд ЕЕааадЕЕса адасадЕЕдс ЕаЕдсЕЕдсс 720 сдаассЕЕЕа сасаЕЕсЕЕд сссЕЕЕссдЕ адааЕЕссаа дсЕсаЕсдда садададЕад 780 ЕдЕЕЕсЕдЕд ааЕдЕддЕдд ЕЕЕассассд ЕЕассЕсЕдс ЕдЕсЕаЕсас ЕЕдсЕссЕас 840 сссЕдадсас аддсассаЕа дЕЕасаасас ссссасдддд ссаЕЕдЕсЕд ЕЕЕЕсадсЕЕ 900 садсЕЕсдЕс дасааЕддас ЕдЕсаЕаЕсс ссЕсаЕсЕса ааадаакдЕс ддааасасЕд 960 ЕаЕддсаЕдд сдЕдЕдддаа ссдаЕсааЕЕ ЕдЕаЕааЕаЕ сЕЕаддссса ссЕсЕЕсссс 1020

- 77 008007

РссдададдР РРдасаРсад ддддРРРсад адаРадРссд ЕсдаЕаЕЕЕа ЕддсЕЕссЕс 1080 РдРсРРсРРд ссдсРасРЕд сддссРсаРР асРдсссаса сРсдсРРсРа сасадааРдс 1140 сдаРасассд асаЕссдсРс срасрдрдса адРссдсааР ддсасаРасд адддРсРсРа 1200 РааЕсссасд ЕасааРсадд асРРдЕРссР сддсаРассд РаРдсдсадс сЕссддЕЕдд 1260 РдадсРасда РРссдРссас сасаассдсР саасасдасд РддасРддса сРсдаааРдс 1320 аасадссРаЕ РасааРдааР дРаРсддРРа РддРадсдас дасРддРаРР ддассдасдр 1380 адРсРссдаа даРРдРсРсд сРсРсадРдР даРЕсдассР сасддсаРсд асЕсаадсдс 1440 даадсРдссс дРсдРсРРсР ддаРдсаРдд ЕддадааЕЕс дсадааддад дсасРсдсда 1500 сРсссдРРас аассРсРссР асаРсдРсса асааРсссад дадаРдсааР сРсссаРсаР 1560 РддсдРдасР дРсаасЕасс дссЕЕЕсддд аРддддаРРс сЕсЕаЕадсс аддаадРсдс 1620 сдасдааддс РссдссаасР РаддасРссд сдассаасдд сасдсРсРдР асРддсРсса 1680 ададааРаРс дсРРссРРсд дсддсдассс дРсдсддсРс ассаРсРддд дссааадРдс 1740 сддрдссаас адсдРсддРс РссаРРРадР ддсаРасдас ддссадааРд аРддсаРсРР 1800 ссдрдссддд аРсдссдада дсддсРссдР асссРсссРс дсадсараса Рдадсдссда 1860 адаРдсасаа ссаРасРаРд аРдссдРсдР саасдсаасс аасРдсассд дсРсРРссаа 1920 сасссРРасР РдРсРссдРд аадРРсссас сдасдРссРс адсРссаРсР РсаасадсРс 1980 ссЕсдРсдсЕ ддддсаддаР аРсаРсссдР саРРдасддс даЕЕЕссЕса дадссРсддд 2040 даРадРРааР сРссадасРд дссааРРсдс саааассссд сРРсРРаРсд дсассаасРР 2100 сдасдааддд ассаадРаРд ссссрсардд сРаРааРасс ассдассаар РРдРсРсссР 2160 сдРссаадсс аасддаасса аРРаРассад сдсРсРсасс аРРдсаРссс РдРасссада 2220 Рдасссадсс дРРддРаРРс сдддаасссР РсааддРсдР сссссассдр саРасддРРа 2280 ссадРддаад сдсдрддсрд ссРРссРсдд сдаРсРдсРс аРдсасдсдс сРсдссдсдР 2340 дасаасссад РддсРддсас асРддааРдР ассРдссРас дРдРаРсасР ддаасдЕдаЕ 2400 дасасРаддд ссаРРадаРд дадссдсдса РддсРаРдаа дРссссРРса дЕЕЕссаЕаа 2460 РРаРдаРддР РРдддсдаРд аасддддааа сдасадсдрд ассРддссас аасРаРсдас 2520 РаРдаРдРса сддардрддд РдадсРРРаР РааРсаРРРд даРссдааРР аРадРааРад 2580 РдадРдаРРР дссссассра ссРсРддаса сРдсРРРадд адсРРдаддд Рааддаадда 2640 РдсРдасасд сРдсРсРдсР адРдасддаР аРссасРддс сРдРсРасас аасадааасс 2700 ссдсааааРа РддРсРРРда РдРсааРдРд асРддасРдд сРРаРдРРда ассадаРасс 2760 РаРададсдд адддааРРдс дРаРаРсасР адсаРРсРдс ададРдссРР РааРсддРад 2820 ддРадасРад аддсРРсааР аРсааРадаР аЕсасасаЕа саддададса дсссаРдРЕЕ 2880 сссРссадаР саададсРаР РссдРРаааа ддрадрдсар ссссдсассд дддддааддс 2940 сддддадрдс РРассРсРдР дрдааасрад ааРРссадса асдаРддРРР Радаааддсс 3000 адаРсРдРРд асРсаРРдРР РдаРссРссд аРдРРдсаРс сдадааадсР РсРдсРРддЕ 3060 сдрдссаадд аРдРРаасад сРдсРдРРда ддсаасРсРа дааассссаР адассРРРас 3120 РаРсРсдсРд асРададддР асадРаддРс сРасРРРдаа ЕЕссЕЕддсд дЕРдддаРРЕ 3180 сдсддааддр РдРсРсаасс сРсааРдсРР дРсасдасад асддсРРддс ааРдадасда 3240 дассасдддс даРРдасаРд РдРсаадсад РадсРаРсдд дааРсРдааа аадсаРддсЕ 3300 дРсаРддасР РРдсаддсаа аддсРдРсРд РРсРадасса РсддсРадад сдсддрдадс 3360 аРасРаддсд адсРдаааад ссРадаадсд дррдссддрр аРссдсРРРд РРРдРдсссР 3420 РРссдРРРсс дддсдРаддс ааРсасаРРР аддсаардсс дРдРдддссР РддадаРсРс 3480 ассРаассЕР аРРдсаРРРР ассРсасддР даРасаассР дадРдасРаР садддааасР 3540 дадссРаРРд аРсаРсасаЕ аРРадсасса сасааадсРд ссааддааса аРадРааРдР 3600

- 78 008007

дадсдссаад дадаСаСсСС СдаасСССд сСссадаСсС СдСасСасаС асссадссад 3660 асаддддССс дСаСсдаСдд сСссасадсд ддаСаСсаСд ааСсССсаСд СсдСсасдас 3720 СсаСассСсд адсдаСаддд ссдддСаССа сСссаСсСдд аааССдСсаС дасСдСадад 3780 сСсадсСдСс сдддаСасда дсаССаСссд СсадСССаСа ааССссаддд ссаСссСдсС 3840 сааСсСсаас аСдСдддсСс ССасдсСдСс аСсаСаССад ССадддСсса ададааСсас 3900 адааСсаССд дсаССдССсС СсаСсдССсс аа 3932

<210> 26 <211> 1518 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пхдег <220>

<221> СЭЗ <222> (1)..(1518) <400> 26

аСд дсС Ссс СсС дСс ССс СЬд ссд сСа сСС дед дсс Сса ССа сСд ссс 48 Ме! А1а Зег Зег Уа1 РЬе Ьеи Рго Ьеи Ьеи А1а А1а Зег Ьеи Ьеи Рго 1 5 10 15 аса сСс дсС СсС аса сад ааС дсс даС аса ссд аса Ссс дсС ссС асС 96 ТЬг Ьеи А1а Зег ТЬг С1п Азп А1а Азр ТЬг Рго ТЬг Зег А1а Рго ТЬг 20 25 30 дЬд саа дСс сдс ааС ддс аса Сас дад ддЬ сСс СаС ааС ссс асд Сас 144 Уа1 С1п Уа1 Агд Азп С1у ТЬг Туг С1и С1у Ьеи Туг Азп Рго ТЬг Туг 35 40 45 ааС сад дас ССд ССс сСс ддс аСа ссд СаС дед сад ссС ссд дСС ддС 192 Азп С1п Азр Ьеи РЬе Ьеи С1у Не Рго Туг А1а С1п Рго Рго Уа1 С1у 50 55 60 дад сСа еда ССс сдС сса сса саа ссд сСс аас асд асд Сдд асС ддс 240 61и Ьеи Агд РЬе Агд Рго Рго С1п Рго Ьеи Азп ТЬг ТЬг Тгр ТЬг С1у 65 70 75 80 ас! еда ааС дса аса дсс СаС Сас ааС даа СдС аСс ддС СаС ддС аде 288 ТЬг Агд Азп А1а ТЬг А1а Туг Туг Азп С1и Суз Не С1у Туг С1у Зег 85 90 95 дас дас Ьдд СаС Ьдд асе дас дСа дСс Ссс даа даС СдС сСс дсС сСс 336 Азр Азр Тгр Туг Тгр ТЬг Азр Уа1 Уа1 Зег С1и Азр Суз Ьеи А1а Ьеи 100 105 110 адС дЬд аСС еда ссС сас ддс аСс дас Сса аде дед аад сСд ссс дСс 384 Зег Уа1 Не Агд Рго Низ С1у Не Азр Зег Зег А1а Ьуз Ьеи Рго Уа1 115 120 125 дСс ссс Ьдд аСд саС дд! дда даа ССс дса даа дда ддс асС сдс дас 432

- 79 008007

Уа1 РНе 130 Тгр Мек ΗΪ3 С1у С1у 135 С1и РНе А1а С1и С1у 140 С1у ТНг Агд Азр ксс едк кас аас скс ксс Нас акс дке саа саа ксс сад дад акд саа 480 Зег Агд Туг Азп Ьеи Зег Туг Не Уа1 С1п С1п Зег С1п 61и Мек С1п 145 150 155 160 кек ссс акс акк ддс дкд аск дке аас кас сдс екк кед дда кдд дда 528 Зег Рго Не 11е С1у Уа1 ТНг Уа1 Азп Туг Агд Ьеи Зег С1у Тгр С1у 165 170 175 ккс скс как аде сад даа дке дсс дас даа ддс ксс дсс аас кка дда 576 РНе Ьеи Туг Зег С1п С1и Уа1 А1а Азр С1и С1у Зег А1а Азп Ьеи С1у 180 185 190 скс сдс дас саа сдд сас дек скд кас кдд скс саа дад аак акс дек 624 Ьеи Агд Азр С1п Агд ΗΪ3 А1а Ьеи Туг Тгр Ьеи С1п С1и Азп Не А1а 195 200 205 ксс ккс ддс ддс дас сед кед сдд скс асе акс кдд ддс саа адк дсс 672 Зег РНе 61у С1у Азр Рго Зег Агд Ьеи ТНг Не Тгр С1у О1п Зег А1а 210 215 220 ддк дсс аас аде дке ддк скс сак кка дкд дса кас дас ддс сад аак 720 С1у А1а Азп Зег Уа1 С1у Ьеи ΗΪ3 Ьеи Уа1 А1а Туг Азр С1у С1п Азп 225 230 235 240 дак ддс акс ккс едк дсс ддд акс дсс дад аде ддс ксс дка ссс ксс 768 Азр С1у 11е РНе Агд А1а С1у Не А1а С1и Зег С1у Зег Уа1 Рго Зег 245 250 255 скс дса дса кас акд аде дсс даа дак дса саа сса кас как дак дсс 816 Ьеи А1а А1а Туг Мек Зег А1а С1и Азр А1а С1п Рго Туг Туг Азр А1а 260 265 270 дке дке аас дса асе аас кде асе ддс кек ксс аас асе екк аск Идк 864 Уа1 Уа1 Азп А1а ТНг Азп Суз ТНг С1у Зег Зег Азп ТНг Ьеи ТНг Суз 275 280 285 скс едк даа дкк ссс асе дас дке скс аде ксс акс ккс аас аде ксс 912 Ьеи Агд С1и Уа1 Рго ТНг Азр Уа1 Ьеи Зег Зег Не РНе Азп Зег Зег 290 295 300 скс дке дек ддд дса дда как сак ссс дке акк дас ддс дак ккс скс 960 Ьеи Уа1 А1а С1у А1а С1у Туг Нхз Рго Уа1 Не Азр С1у Азр РНе Ьеи 305 310 315 320 ада дсс кед ддд ака дкк аак скс сад аск ддс саа ккс дсс ааа асе 1008 Агд А1а Зег С1у Не Уа1 Азп Ьеи С1п ТНг С1у С1п РНе А1а Ьуз ТНг 325 330 335 ссд екк екк акс ддс асе аас ккс дас даа ддд асе аад как дсс сек 1056 Рго Ьеи Ьеи Не С1у ТНг Азп РНе Азр 01и С1у ТНг Ьуз Туг А1а Рго 340 345 350 сак ддс как аак асе асе дас саа ккк дке ксс скс дке саа дсс аас 1104 Ηίβ С1у Туг Азп ТНг ТНг Азр С1п РНе Уа1 Зег Ьеи Уа1 С1п А1а Азп

- 80 008007

355 360 365

дда асе ааР РаР асе аде дсР сРс асе аРР дса Рсс сРд Рас сса даР 1152 С1у ТЬг Азп Туг ТЬг Бег А1а Ьеи ТЬг 11е А1а Бег Ьеи Туг Рго Азр 370 375 380 дас сса дсс дРР ддр аРР ссд дда асе сРР саа ддр сдр ссс сса ссд 1200 Азр Рго А1а Уа1 С1у 11е Рго С1у ТЬг Ьеи С1п С1у Агд Рго Рго Рго 385 390 395 400 Рса Рас ддр Рас сад Рдд аад сдс дрд дсР дсс РРс ср с ддс дар сРд 1248 Бег Туг С1у Туг С1п Тгр Ьуз Агд Уа1 А1а А1а РЬе Ьеи С1у Азр Ьеи 405 410 415 сРс аРд сас дед ССР сдс сдс дрд аса асе сад Рдд сРд дса сас Рдд 1296 Ьеи Мер НЬз А1а Рго Агд Агд Уа1 ТЬг ТЬг С1п Тгр Ьеи А1а ΗΪ3 Тгр 420 425 430 ааР др а ССР дсс Рас дрд РаР сас Рдд аас д^д аРд аса сРа ддд сса 1344 Азп Уа1 Рго А1а Туг Уа1 Туг Н13 Тгр Азп Уа1 МеР ТЬг Ьеи С1у Рго 435 440 445 РРа дар дда дсс дед саР ддс РаР даа дрс ссс РРс адр РРс саР ааР 1392 Ьеи Азр С1у А1а А1а Низ С1у Туг С1и Уа1 Рго РЬе Бег РЬе Низ Азп 450 455 460 РаР даР ддр РРд ддс даР даа едд дда аас дас аде дрд асе рдд сса 1440 Туг Азр С1у Ьеи С1у Азр С1и Агд С1у Азп Азр Бег Уа1 ТЬг Тгр Рго 465 470 475 480 саа сРа Ред асР аРд аРд Рса едд аРд Рдд дрд аде РРР аРР ааР саР 1488 С1п Ьеи Бег ТЬг Мер Мер Бег Агд Мер Тгр Уа1 Бег РЬе 11е Азп ΗΪ3 485 4 90 495 ЬЬд даР ссд ааР РаР адр ааР адР дад Рда 1518 Ьеи Азр Рго Азп Туг Бег Азп Бег С1и

500 505 <210> 27 <211> 505 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пЬдег <400> 27

МеР А1а Бег Бег Уа1 РЬе Ьеи Рго Ьеи Ьеи А1а А1а Бег Ьеи Ьеи Рго 1 5 10 15 ТЬг Ьеи А1а Бег ТЬг С1п Азп А1а Азр ТЬг Рго ТЬг Бег А1а Рго ТЬг 20 25 30 Уа1 С1п Уа1 Агд Азп С1у ТЬг Туг С1и С1у Ьеи Туг Азп Рго ТЬг Туг 35 40 45 Азп С1п Азр Ьеи РЬе Ьеи С1у 11е Рго Туг А1а С1п Рго Рго Уа1 С1у

81 008007

50 55 60

С1и Ьеи Агд РЬе Агд Рго Рго С1п Рго Ьеи Азп ТЬг ТЬг Тгр ТЬг С1у 65 70 75 80 ТЬг Агд Азп А1а ТЬг А1а Туг Туг Азп 61и Суз 11е С1у Туг <31 у Зег 85 90 95 Азр Азр Тгр Туг Тгр ТЬг Азр Уа1 Уа1 Зег С1и Азр Суз Ьеи А1а Ьеи 100 105 110 Зег Уа1 11е Агд Рго Ηί3 С1у 11е Азр Зег Зег А1а Ьуз Ьеи Рго Уа1 115 120 125 Уа1 РЬе Тгр МеЕ Н13 С1у С1у С1и РЬе А1а С1и С1у С1у ТЬг Агд Азр 130 135 140 Зег Агд Туг Азп Ьеи Зег Туг 11е Уа1 С1п С1п Зег С1п С1и МеЕ 61п 145 150 155 160 Зег Рго 11е 11е С1у Х7а1 ТЬг Уа1 Азп Туг Агд Ьеи Зег С1у Тгр <31у 165 170 175 РЬе Ьеи Туг Зег С1п С1и Уа1 А1а Азр С1и С1у Зег А1а Азп Ьеи С1у 180 185 190 Ьеи Агд Азр С1П Агд ΗΪ3 А1а Ьеи Туг Тгр Ьеи С1п С1и Азп 11е А1а 195 200 205 Зег РЬе С1у С1у Азр Рго Зег Агд Ьеи ТЬг 11е Тгр С1у С1п Зег А1а 210 215 220 С1у А1а Азп Зег Уа1 С1у Ьеи ΗΪ3 Ьеи Уа1 А1а Туг Азр С1у С1п Азп 225 230 235 240 Азр С1у Не РЬе Агд А1а С1у 11е А1а С1и Зег С1у Зег Уа1 Рго Зег 245 250 255 Ьеи А1а А1а Туг МеЕ Зег А1а С1и Азр А1а С1п Рго Туг Туг Азр А1а 260 265 270 Уа1 Уа1 Азп А1а ТЬг Азп Суз ТЬг С1у Зег Зег Азп ТЬг Ьеи ТЬг Суз 275 280 285 Ьеи Агд С1и Уа1 Рго ТЬг Азр Уа1 Ьеи Зег Зег 11е РЬе Азп Зег Зег 290 295 300 Ьеи Уа1 А1а С1у А1а С1у Туг Н1з Рго Уа1 11е Азр С1у Азр РЬе Ьеи 305 310 315 320 Агд А1а Зег С1у 11е Уа1 Азп Ьеи С1п ТЬг С1у С1п РЬе А1а Ьуз ТЬг 325 330 335 Рго Ьеи Ьеи 11е С1у ТЬг Азп РЬе Азр С1и С1у ТЬг Ьуз Туг А1а Рго 340 345 350 Н13 С1у Туг Азп ТЬг ТЬг Азр С1п РЬе Уа1 Зег Ьеи Уа1 С1п А1а Азп 355 360 365 С1у ТЬг Азп Туг ТЬг Зег А1а Ьеи ТЬг 11е А1а Зег Ьеи Туг Рго Азр 370 375 380 Азр Рго А1а Уа1 С1у 11е Рго С1у ТЬг Ьеи С1п С1у Агд Рго Рго Рго 385 390 395 400

- 82 008007

5ег Туг С1у Туг <31п Тгр Ьуз Агд Уа1 А1а А1а РЬе Ьеи С1у Азр 415 Ьеи 405 410 Ьеи МеЕ Низ А1а Рго Агд Агд Уа1 ТЬг ТЬг С1п Тгр Ьеи А1а Низ Тгр 420 425 430 Азп Уа1 Рго А1а Туг Уа1 Туг Низ Тгр Азп Уа1 МеЕ ТЬг Ьеи С1у Рго 435 440 445 Ьеи Азр С1у А1а А1а Низ С1у Туг С1и Уа1 Рго РЬе Зег РЬе Низ Азп 450 455 460 Туг Азр С1у Ьеи С1у Азр С1и Агд С1у Азп Азр Зег Уа1 ТЬг Тгр Рго 465 470 475 480 С1п Ьеи Зег ТЬг МеЕ МеЕ Зег Агд МеЕ Тгр Уа1 Зег РЬе 11е Азп Низ 485 490 495 Ьеи Азр Рго Азп Туг Зег Азп Зег С1и 500 505

<210> 28 <211> 3091 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <400> 28

ддсдаасддд ссЕдадсдЕд сдЕсддаддс адаадЕадад ссдддасЕаЕ ддаЕаЕЕддс 60 даддааЕаЕа ЕЕаЕадЕада ЕЕаЕадддад ЕсдааЕдсад сЕсддаЕЕдд дЕЕдЕЕасЕЕ 120 ЕдадЕсадаЕ ддасаЕЕдЕЕ ддаааадаЕд аасдсдасдд даааааааса ЕдаддаЕЕЕд 180 сддддаЕЕЕс дЕсасаЕдсд даддсдсдда ЕЕЕЕссссЕс сддаЕЕЕасЕ ЕссЕсаасЕс 240 ЕссЕЕЕсЕсЕ ЕЕсаЕЕЕсса ЕссдаЕЕЕда дЕссаасЕса ЕсЕсасЕсда адааЕсЕсаЕ 300 ЕааЕЕЕсадд дЕссЕдсЕса дсссадЕсаа ддЕЕссЕЕад ЕЕЕсдаЕссЕ ЕсадЕЕддсс 360 сдЕсаЕдЕсс аЕЕдассадд ааЕддадсаа дссссдаЕда ддаЕсддсса дсддадасаа 420 сЕдссааЕсс ЕЕддЕаЕсса ЕасссЕЕаас адсдсааЕдд сассадсЕсЕ сЕдссдаЕЕс 480 асдЕсаЕсЕд сасадссЕад сЕдссдаЕЕа ддсЕЕдассс сЕЕсЕсасЕЕ дсддсаЕсад 540 ЕдссдсЕдаЕ асЕадссссс асададЕдЕЕ ЕсЕсссЕЕсд асЕдЕддсЕс ддаасдЕддд 600 ддсдддЕЕсс аадЕЕсЕЕаЕ дсссададЕЕ ддЕЕддсЕад ссЕЕдсЕсаЕ сЕдддЕддсс 660 адсасассЕс ссаЕасааЕа ддаЕссдЕдд ЕдЕЕддсадд аЕЕсЕЕдЕса ЕЕЕсдссаЕд 720 ЕсдааЕсасс дсаЕдсддаа ддаддасдсс ЕЕдссЕЕдса аЕдЕЕЕЕсЕс сасаЕсЕдсд 780 асссЕаЕЕдЕ ЕсадасссЕд дадссдаЕЕс сдсдадаЕдЕ аЕЕссЕдссд ддссасЕдаа 840 адЕдсЕЕЕаЕ аасдЕсЕддд дЕдЕссЕЕЕЕ аЕЕдаЕдада дсаЕдаЕсЕЕ ЕсдсдЕЕаса 900 дЕЕсЕсасаа ЕсддЕЕааад саЕЕсдЕддс сссдаддсЕс дЕЕдсасаас асааЕаЕдаЕ 960 ЕЕЕсЕЕЕсаЕ сЕддсассдЕ ЕсЕЕсЕЕЕсЕ сЕЕЕддЕсЕа дЕадЕаЕсЕЕ сЕсадаассс 1020 ЕасддЕддас сЕЕддсЕаса саадаЕаЕаа аддсаааЕсЕ сЕдсссааЕд дЕаЕсадЕса 1080 дЕддсЕдддд аЕасдсЕасд сддсЕдсасс ЕассдддЕсЕ сЕдсддЕЕсЕ сЕдсдссаса 1140 ддаЕссЕдас асддЕадаЕд дсдЕЕсаада адсаЕЕсаад дЕаЕддЕЕЕЕ ЕЕсЕасааЕа 1200 ааЕааааада ЕаЕаЕЕдсда дЕсЕдЕдсЕЕ ЕдсЕааЕасс садддсасад саЕддЕсссс 1260

- 83 008007

ддкдкдкксс сассадссаа каксссаскс ссдсаддсас дкссдаддак кдкскскксс 1320 ксдакдкака сдсксссадс ксддкддаад скаскасдад дскдсссдкк кксдкккдда 1380 кксааддадд сддскксаак дссаасксса дссссааска саакддааса ддаккдаксд 1440 аадсддссаа какдкссакд дкддкддкса сскксааска садддксддк ссдкасдддк 1500 ксскскскдд акссдаддкд скддадддад даадсдкдаа саакддсскд ааддассааа 1560 ксааддксск даадкдддкд саададсака ксадсааддк акдсддасас ксассаассс 1620 асадсааакс ассдскаакк дсадссдсад кккддаддсд аксссадкса сдккдккакс 1680 ддсддсдаса дсдсаддсдс адсдкскакс аскскссакс ккксадссса сддкддсада 1740 дасдасдаас каккссасдс кдссдссдса дадксссааа дскккдсксс какдккдасс 1800 дксааксааа дссаакксдс скакаасаас скддксаксс дсдссддскд сдсаадсдак 1860 ксадасассс ксдсскдскк асдссдаска аасассасад ааскдсадсд саксаасакс 1920 аасасассск касссассдс ссаасаадса сскскскасс кдкасддксс сдксдксдас 1980 ддскссскса ксссадаска сасакассдд сккккссадс ааддсааакк саксааадкс 2040 сссдкаакск ксддсдасда сассаасдаа ддаасаакск ксдкссссаа аасдассксс 2100 ассдксддсд аадссдасас скксакссаа дассаакксс ссаасаксаа скксасссас 2160 скаассаадс кдаасдаскд дкаксксааа даааассааа сксдсдадкк ссссаакксс 2220 кссссскаск ддсдксссдс кадсассдсд касддкдааа ксадакакак скдкссдддд 2280 акскасакдк сскскдкдкк кдскадкдсс ддкдксааса дскддааска ксаккакдск 2340 дкдсаддасс ссдссдсдда адссксаддс ададдкдкса дксакаскдк ддаадаааак 2400 дссакккддд дсссдсадка кдкдадкддс асассдссдд сдксдкакск саскдадаак 2460 дсдссааккд кдссддкдак дсадддскас кддасдадкк ксаккададк дкккдакссд 2520 аакссдскда ддкакссддд дадкссддад кддаадасдк ддадкдакдд асакддддад 2580 даккаксддс ддакакккдк ссдсасдаак дадасдадда кддадасддк дксддаддсд 2640 сададддааа ддкдсдаака ккддадкадк дккдддссдд асккдксдса дкдаккдсас 2700 ккаккакскк кдкксддкдд кааддкакак акакадакад какаакаккд каадскакад 2760 адкдакддка сдкдааккда акакакддад ааадакддкс ккдкакааак саааасаккс 2820 ккккккддск дссаккссас даксаксакк сссаакдакс ааассаадка аскакаассд 2880 аакакакаса кскакаксаа сскдсккскс аксадаакка ссаааадасд ддкссддсас 2940 асасааскаа ассстаасааа касаксааса кааасссааа коакааааса каакасааса 3000 ааадааадад аааадааддс аааасаадкд адаадсаска скдскссаса кададсадка 3060 аасдаасдак даакдаддда каксаксакс а 3091

<210> 29 <211> 1617 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <220>

<221> СОЗ <222> (1) . . (1617) <400> 29

- 84 008007

аЕд аЕЕ ЕЕс ЕЕЕ саЕ сЕд дса ссд ЕЕс ЕЕс ЕЕЕ сЕс ЕЕЕ ддЕ сЕа дЕа 48 МеЕ 11е РЬе РЬе Низ Ьеи А1а Рго РЬе РЬе РЬе Ьеи РЬе С1у Ьеи Уа1 1 5 10 15 дЕа ЕсЕ ЕсЕ сад аас ссЕ асд дЕд дас сЕЕ ддс Еас аса ада ЕаЕ ааа 96 Уа1 Зег Зег С1п Азп Рго ТЬг Уа1 Азр Ьеи С1у Туг ТЬг Агд Туг Ьуз 20 25 30 ддс ааа ЕсЕ сЕд ссс ааЕ ддЕ аЕс адЕ сад Едд сЕд ддд аЕа сдс Еас 144 С1у Ьуз Зег Ьеи Рго Азп С1у 11е Зег С1п Тгр Ьеи С1у 11е Агд Туг 35 40 45 дед дсЕ дса ссЕ асе ддд ЕсЕ сЕд едд ЕЕс ЕсЕ дед сса сад даЕ ссЕ 192 А1а А1а А1а Рго ТЬг С1у Зег Ьеи Агд РЬе Зег А1а Рго 61п Азр Рго 50 55 60 дас асд дЕа даЕ ддс дЕЕ саа даа дса ЕЕс аад саЕ ддЕ ссс едд ЕдЕ 240 Азр ТЬг Уа1 Азр С1у Уа1 С1п С1и А1а РЬе Ьуз Низ С1у Рго Агд Суз 65 70 75 80 дЕЕ ссс асе аде саа ЕаЕ ссс асЕ ссс дса ддс асд Есс дад даЕ ЕдЕ 288 Уа1 Рго ТЬг Зег С1п Туг Рго ТЬг Рго А1а С1у ТЬг Зег С1и Азр Суз 85 90 95 сЕс ЕЕс сЕс даЕ дЕа Еас дсЕ ссс аде Есд дЕд даа дсЕ асЕ асд адд 336 Ьеи РЬе Ьеи Азр Уа1 Туг А1а Рго Зег Зег Уа1 С1и А1а ТЬг ТЬг Агд 100 105 110 сЕд ссс дЕЕ ЕЕс дЕЕ Едд аЕЕ саа дда ддс ддс ЕЕс ааЕ дсс аас Есс 384 Ьеи Рго Уа1 РЬе Уа1 Тгр Не С1п С1у С1у С1у РЬе Азп А1а Азп Зег 115 120 125 аде ссс аас Еас ааЕ дда аса дда ЕЕд аЕс даа дед дсс ааЕ аЕд Есс 432 Зег Рго Азп Туг Азп С1у ТЬг С1у Ьеи 11е С1и А1а А1а Азп МеЕ Зег 130 135 140 аЕд дЕд дЕд дЕс асе ЕЕс аас Еас адд дЕс ддЕ ссд Еас ддд ЕЕс сЕс 480 МеЕ Уа1 Уа1 Уа1 ТЬг РЬе Азп Туг Агд Уа1 С1у Рго Туг С1у РЬе Ьеи 145 150 155 160 ЕсЕ дда Есс дад дЕд сЕд дад дда дда аде дЕд аас ааЕ ддс сЕд аад 528 Зег С1у Зег С1и Уа1 Ьеи С1и С1у С1у Зег Уа1 Азп Азп С1у Ьеи Ьуз 165 170 175 дас саа аЕс аад дЕс сЕд аад Едд дЕд саа дад саЕ аЕс аде аад ЕЕЕ 576 Азр С1п 11е Ьуз Уа1 Ьеи Ьуз Тгр Уа1 С1п С1и Низ 11е Зег Ьуз РЬе 180 185 190 дда ддс даЕ ссс адЕ сас дЕЕ дЕЕ аЕс ддс ддс дас аде дса ддс дса 624 С1у С1у Азр Рго Зег Низ Уа1 Уа1 11е С1у С1у Азр Зег А1а С1у А1а 195 200 205 дед ЕсЕ аЕс асЕ сЕс саЕ сЕЕ Еса дсс сас ддЕ ддс ада дас дас даа 672 А1а Зег 11е ТЬг Ьеи Низ Ьеи Зег А1а Низ С1у С1у Агд Азр Азр С1и 210 215 220 сЕа ΐΐ с сас дсЕ дсс дсс дса дад Есс саа аде ЕЕЕ дсЕ ссЕ аЕд ЕЕд 720

- 85 008007

Ьеи РЬе НЛз АЛа АЛа АЛа АЛа СЛи Зег СЛп Зег РЬе АЛа Рго МеЕ Ьеи 225 230 235 240 асе дЕс ааЕ саа аде саа ЕЕс дсс ЕаЕ аас аас сЕд дЕс аЕс сдс дсс 768 ТЬг УаЛ Азп СЛп Зег СЛп РЬе АЛа Туг Азп Азп Ьеи УаЛ Не Агд АЛа 245 250 255 ддс Еде дса аде даЕ Еса дас асе сЕс дсс Еде ЕЕа сдс еда сЕа аас 816 СЛу Суз АЛа Зег Азр Зег Азр ТЬг Ьеи АЛа Суз Ьеи Агд Агд Ьеи Азп 260 265 270 асе аса даа сЕд сад сдс аЕс аас аЕс аас аса ссс ЕЕа ссс асе дсс 864 ТЬг ТЬг СЛи Ьеи СЛп Агд 11е Азп Не Азп ТЬг Рго Ьеи Рго ТЬг АЛа 275 280 285 саа саа дса ссЕ сЕс Еас сЕд Еас ддЕ ссс дЕс дЕс дас ддс Есс сЕс 912 СЛп СЛп АЛа Рго Ьеи Туг Ьеи Туг С1у Рго УаЛ УаЛ Азр СЛу Зег Ьеи 290 295 300 аЕс сса дас Еас аса Еас сдд сЕЕ ЕЕс сад саа ддс ааа ЕЕс аЕс ааа 960 Не Рго Азр Туг ТЬг Туг Агд Ьеи РЬе СЛп СЛп СЛу Ьуз РЬе ЛЛе Ьуз 305 310 ЗЛ5 320 дЕс ссс дЕа аЕс ЕЕс ддс дас дас асе аас даа дда аса аЕс ЕЕс дЕс 1008 УаЛ Рго УаЛ ЛЛе РЬе СЛу Азр Азр ТЬг Азп СЛи СЛу ТЬг ЛЛе РЬе УаЛ 325 330 335 ссс ааа асд асе Есс асе дЕс ддс даа дсс дас асе ЕЕс аЕс саа дас 1056 Рго Ьуз ТЬг ТЬг Зег ТЬг УаЛ СЛу СЛи АЛа Азр ТЬг РЬе 11е СЛп Азр 340 345 350 саа ЕЕс ссс аас аЕс аас ЕЕс асе сас сЕа асе аад сЕд аас дас Едд 1104 С1п РЬе Рго Азп ЛЛе Азп РЬе ТЬг НЛз Ьеи ТЬг Ьуз Ьеи Азп Азр Тгр 355 360 365 ЕаЕ сЕс ааа даа аас саа асЕ сдс дад ЕЕс ссс ааЕ Есс Есс ссс Еас 1152 Туг Ьеи Ьуз СЛи Азп СЛп ТЬг Агд СЛи РЬе Рго Азп Зег Зег Рго Туг 370 375 380 Едд сдЕ ссс дсЕ аде асе дед Еас ддЕ даа аЕс ада ЕаЕ аЕс ЕдЕ ссд 1200 Тгр Агд Рго АЛа Зег ТЬг АЛа Туг СЛу СЛи 11е Агд Туг ЛЛе Суз Рго 385 390 395 400 ддд аЕс Еас аЕд Есс ЕсЕ дЕд ЕЕЕ дсЕ адЕ дсс ддЕ дЕс аас аде Едд 1248 СЛу ЛЛе Туг МеЕ Зег Зег УаЛ РЬе АЛа Зег АЛа СЛу УаЛ Азп Зег Тгр 405 410 415 аас ЕаЕ саЕ ЕаЕ дсЕ дЕд сад дас ссс дсс дед даа дсс Еса ддс ада 1296 Азп Туг НЛз Туг АЛа Уа1 С1п Азр Рго АЛа АЛа СЛи АЛа Зег СЛу Агд 420 425 430 ддЕ дЕс адЕ саЕ асЕ дЕд даа даа ааЕ дсс аЕЕ Едд ддс ссд сад ЕаЕ 1344 СЛу УаЛ Зег НЛз ТЬг УаЛ СЛи СЛи Азп АЛа 11е Тгр СЛу Рго СЛп Туг 435 440 445 дЕд адЕ ддс аса ссд ссд дед Есд ЕаЕ сЕс асЕ дад ааЕ дед сса аЕЕ 1392 УаЛ Зег СЛу ТЬг Рго Рго АЛа Зег Туг Ьеи ТЬг СЛи Азп АЛа Рго Не

- 86 008007

дЬд ссд дкд аЕд сад ддс Бас Едд асд адЕ ЕЕс аЕЕ ада дЕд ЕЕЕ даЕ 1440 Уа1 Рго Уа1 МеЕ С1п С1у Туг Тгр ТЬг Зег РЬе Не Агд Уа1 РЬе Азр 465 470 475 480 ссд ааЕ ссд сЕд адд ЕаЕ ссд ддд адЕ ссд дад Едд аад асд Едд адЕ 1488 Рго Азп Рго Ьеи Агд Туг Рго С1у Зег Рго С1и Тгр Ьуз ТЬг Тгр Зег 485 490 495 дар дда саЕ ддд дад да! ЕаЕ едд едд аЕа ЕЕЕ дЕс сдс асд ааЕ дад 1536 Азр С1у Нхз С1у С1и Азр Туг Агд Агд 11е РЬе Уа1 Агд ТЬг Азп С1и 500 505 510 асд адд аЕд дад асд дкд Еед дад дед сад адд даа адд Еде даа ЕаЕ 1584 ТЬг Агд Мер С1и ТЬг Уа1 Зег С1и А1а С1п Агд С1и Агд Суз С1и Туг 515 520 525 Едд адЕ адЕ дЕЕ ддд ссд дас ЕЕд Еед сад Еда 1617 Тгр Зег Зег Уа1 С1у Рго Азр Ьеи Зег С1п 530 535

<210> 30 <211> 538 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пЬдег

<400> 30

МеЕ 11е РЬе РЬе Нхз Ьеи А1а Рго РЬе РЬе РЬе Ьеи РЬе С1у Ьеи ν₃ι 1 5 10 15 Уа1 Зег Зег С1п Азп Рго ТЬг Уа1 Азр Ьеи С1у Туг ТЬг Агд Туг Ьуз 20 25 30 С1у Ьуз Зег Ьеи Рго Азп С1у 11е Зег С1п Тгр Ьеи С1у 11е Агд Туг 35 40 45 А1а А1а А1а Рго ТЬг С1у Зег Ьеи Агд РЬе Зег А1а Рго С1п Азр Рго 50 55 60 Азр ТЬг Уа1 Азр С1у Уа1 С1п С1и А1а РЬе Ьуз Нхз С1у Рго Агд Суз 65 70 75 80 7а1 Рго ТЬг Зег С1п Туг Рго ТЬг Рго А1а С1у ТЬг Зег С1и Азр Суз 85 90 95 Ьеи РЬе Ьеи Азр Уа1 Туг А1а Рго Зег Зег Уа1 61и А1а ТЬг ТЬг Агд 100 105 110 Ьеи Рго Уа1 РЬе Уа1 Тгр Не С1п 61у С1у С1у РЬе Азп А1а Азп Зег 115 120 125 Зег Рго Азп Туг Азп С1у ТЬг С1у Ьеи 11е С1и А1а А1а Азп МеЕ Зег 130 135 140 МеЕ Уа1 Уа1 Уа1 ТЬг РЬе Азп Туг Агд Уа1 С1у Рго Туг С1у РЬе Ьеи

- 87 008007

145 150 155 160

Зег СЬу Зег СЬи УаЬ 165 Ьеи СЬи СЬу СЬу Зег 170 УаЬ Азп Азп СЬу Ьеи 175 Ьуз Азр СЬп Не Ьуз УаЬ Ьеи Ьуз Тгр УаЬ СЬп СЬи НЬз 1Ье Зег Ьуз РЬе 180 185 Ь90 СЬу СЬу Азр Рго Зег НЬз 7аЬ νβΤ Не СЬу СЬу Азр Зег АЬа СЬу АЬа 195 200 205 АЬа Зег Не ТНг Ьеи НЬз Ьеи Зег АЬа НЬз СЬу СЬу Агд Азр Азр СЬи 210 215 220 Ьеи РЬе НЬз АЬа АЬа АЬа АЬа СЬи Зег СЬп Зег РЬе АЬа Рго Мек Ьеи 225 230 235 240 ТЬг УаЬ Азп СЬп Зег СЬп РЬе АЬа Туг Азп Азп Ьеи УаЬ 1Ье Агд АЬа 245 250 255 СЬу Суз АЬа Зег Азр Зег Азр ТЬг Ьеи АЬа Суз Ьеи Агд Агд Ьеи Азп 260 265 270 ТЬг ТЬг СЬи Ьеи СЬп Агд 1Ье Азп 1Ье Азп ТЬг Рго Ьеи Рго ТЬг АЬа 275 280 285 СЬп СЬп АЬа Рго Ьеи Туг Ьеи Туг СЬу Рго УаЬ УаЬ Азр СЬу Зег Ьеи 290 295 300 Не Рго Азр Туг ТЬг Туг Агд Ьеи РЬе СЬп СЬп СЬу Ьуз РНе 1Ье Ьуз 305 310 315 320 УаЬ Рго УаЬ 1Ье РЬе СЬу Азр Азр ТНг Азп СЬи СЬу ТНг 1Ье РЬе УаЬ 325 330 335 Рго Ьуз ТЬг ТЬг Зег ТЬг УаЬ СЬу СЬи АЬа Азр ТНг РЬе 1Ье СЬп Азр 340 345 350 СЬп РЬе Рго Азп Не Азп РЬе ТЬг НЬз Ьеи ТНг Ьуз Ьеи Азп Азр Тгр 355 360 365 Туг Ьеи Ьуз СЬи Азп СЬп ТЬг Агд СЬи РЬе Рго Азп Зег Зег Рго Туг 370 375 380 Тгр Агд Рго АЬа Зег ТЬг АЬа Туг СЬу СЬи 1Ье Агд Туг 1Ье Суз Рго 385 390 395 400 СЬу 1Ье Туг Мек Зег Зег УаЬ РЬе АЬа Зег АЬа СЬу УаЬ Азп Зег Тгр 405 410 415 Азп Туг НЬз Туг АЬа УаЬ СЬп Азр Рго АЬа АЬа СЬи АЬа Зег СЬу Агд 420 425 430 СЬу УаЬ Зег НЬз ТЬг УаЬ СЬи СЬи Азп АЬа 1Ье Тгр СЬу Рго СЬп Туг 435 440 445 УаЬ Зег СЬу ТНг Рго Рго АЬа Зег Туг Ьеи ТЬг СЬи Азп АЬа Рго Не 450 455 460 УаЬ Рго УаЬ Мек СЬп СЬу Туг Тгр ТЬг Зег РЬе 1Ье Агд УаЬ РЬе Азр 465 470 475 480 Рго Азп Рго Ьеи Агд Туг Рго СЬу Зег Рго СЬи Тгр Ьуз ТЬг Тгр Зег 485 490 495

- 88 008007

Азр С1у ΗΪ8 С1у С1и Азр Туг Агд Агд 11е РЬе Уа1 Агд ТЬг 510 Азп С1и 500 505 ТЬг Агд МеЕ С1и ТЬг Уа1 Зег С1и А1а С1п Агд С1и Агд Суз С1и Туг 515 520 525 Тгр Зег Зег Уа1 С1у Рго Азр Ьеи Зег С1п 530 535

<210> 31 <211> 4575 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <400> 31

даЕдсаасЕЕ садЕдаааЕЕ дадасдаЕЕд ЕаасЕсаЕса ЕсдсаЕсЕса саЕддааадд 60 ЕЕдЕасассс аасааЕЕада ссЕсаасаЕа ЕЕЕсасддаЕ аЕЕссЕдсаа даЕаЕаЕааЕ 120 ааадссаЕса сЕссасЕЕЕд дЕадаЕаЕдЕ Еадссаассд ддЕЕЕдадсд адЕЕЕсЕЕда 180 аЕддасЕсаЕ ЕаадддЕадд аЕсааЕЕсЕд аЕдЕссасаа ЕЕддЕсссЕа ЕЕЕдссадаЕ 240 дЕаддсссад адааЕЕсддЕ аЕсЕЕдсада ЕЕЕдсдаЕдс ЕаЕсссддЕЕ ЕссадЕааас 300 ЕаЕЕаддЕЕс ддсЕсддЕса сассадасад асасдасЕда сссаЕдсдсЕ дссаддааЕс 360 сЕдаЕаддсс ЕадсадЕссс дсдЕдсасаЕ аЕсддсЕЕдд Еадаааадда ЕадссдЕдаа 420 ЕдЕаЕааЕсЕ ЕЕсадаЕдас ддЕЕаааЕдс дЕЕЕсЕдЕаЕ ддЕдадаадс ЕдЕдЕадаЕд 480 ддадаЕдадс ЕдЕаааЕддс ЕЕсдсадЕдд саассЕсЕад дсЕдсЕдсад дссддааЕас 540 ЕдсаЕддсдЕ даЕЕЕЕсдЕс дЕдааЕсЕЕд ЕЕсаЕаЕаса ддЕдЕаааас асасдЕаадд 600 ааааЕсЕЕдЕ ЕаЕадсаддд ЕЕдаааасад ЕЕдсЕадааЕ ЕддсадЕдас ЕдЕЕдсддЕЕ 660 дсаадддЕЕЕ аЕЕЕЕдсасс сЕЕдаадЕас асЕдсдсЕЕд дЕсаааддса ааЕсасссса 720 ЕсаадЕааЕа ааЕаЕаЕаЕс ЕсЕдЕЕаЕса адЕсддсЕсс ЕсЕадЕадЕд садссЕсадЕ 780 асадасааса дддасЕааса дсасЕсЕЕдс ЕдЕЕдадсЕЕ дадсдсассЕ сассЕЕЕсЕс 840 ЕссддссЕсЕ ЕЕсдЕаЕЕЕд дсаЕЕЕсааЕ ддссЕдЕЕаЕ дддасЕЕсЕд адссЕдсЕЕд 900 аЕЕдадЕдаЕ аЕддЕадЕдс дадсдсаааа ааддЕдаЕЕЕ Есааасасса ЕдаЕдсааад 960 ЕсададдЕаа дЕдсдададд дадаЕсадда ддаддададс ЕЕЕаЕаЕаад дссдсдЕадд 1020 сддсададас ддсаадасаЕ сЕддЕдаадЕ ассадсаЕЕс адЕдааЕЕЕЕ аЕаасадЕаЕ 1080 ЕаЕЕЕдЕсаЕ сасдасЕсЕд саЕЕдссЕЕЕ ааЕаадсЕсд дсдЕааЕЕЕд дЕадддассс 1140 ЕаддЕЕЕдда Еадссссадд ддддсЕЕддЕ дЕсддЕЕдЕд дадсЕЕдсЕд сссдадаЕЕс 1200 аЕЕЕЕасасс ЕадЕсаддда Ессдддсддд ЕЕЕЕаЕассЕ сссЕддаддс ддааЕдЕасс 1260 ЕЕЕдЕЕаЕса сЕдааааЕЕс сддссаЕЕЕЕ дЕЕсЕаЕЕЕЕ асЕддсЕаЕд дддЕЕЕдсса 1320 сЕаЕсдсЕса саЕссЕсдса аддсассЕсс сдаЕасЕдса дЕсааасдЕд ддадЕЕдссд 1380 аЕадааасЕа саадаЕсааа ЕсЕсдЕЕссс ЕдддЕЕддас ддЕсасаЕЕс ддЕдааадад 1440 дЕЕЕаЕсЕЕс дсЕссаасса дссЕЕЕсаЕд ЕсдддсдсЕс адЕдсаЕаад аЕссаадсаа 1500 ЕЕЕЕаадсас ЕдЕасЕссас ЕадЕсасасЕ дЕЕЕЕадсад ЕдсаЕдсЕЕс ЕдааЕсадда 1560 сЕааасЕссд аЕЕЕЕЕсЕса дЕдааЕасЕд сЕааадасаа ЕЕаЕдаЕссЕ асадасЕаЕс 1620 ЕсЕдЕдаааа адсдсадЕЕа асЕЕсЕсдЕс ааЕсаЕдаад ссаЕЕЕЕдад ссЕЕЕсЕссд 1680 ЕсааЕсаЕЕс ассссЕасЕд ЕЕдасЕаЕаЕ садсссЕаад ддааЕаааас аЕЕЕдссдЕа 1740

- 89 008007

даддкдааск акаасксаак саакдаскда аадсккаасд каксксасаа кксаксксас 1800 сдкдаададк сакккасакк касдакссад ссаддссдсд скдасаксад саддсдкдад 1860 адсдсаксса кдсккдсксд дасакаадсс даакссаккд сакдакдсда сскксссдаа 1920 ададкакддд кдкссдааск дассакдкса дкддссссак акддскскса аскасасдаа 1980 сасадасскк каксадкссс ддкссссаса асккаааксс ддадакдсдд дддкдсадда 2040 акддаасасд дакасакдкд кддаакдкад дассааасаа аккддскдкс дкддасаккс 2100 дасксдаскк дассссксаа кдсдскддсс ддаддаскда дссакадддк акаадаасас 2160 сдкдаксаск сакдссксдк каксдскккк скаксаккак дксксдакак саддаадаса 2220 кадсакдасс дкдаасасда кдаадддаак дсксссдасд сккадккддк кддсаскддд 2280 сакддссадс скддсаасск дсассаассс адкадсссад асааадаасд даадккакка 2340 кддкдкскас акдссксадк акаакдадда ккаккккскк ддааккссак ккдскаадсс 2400 сссдккддса сасккдсдкк дддссаассс сдададкскк аакдадкскк ддксдддакк 2460 дсдссскдск ассддскакд сдакддкаад кадсскдаас адаскдскаа асдассакдк 2520 асккаскаас адсдсдкдкд акаддаакдк акаддккасд дсадкдакса ааааддккак 2580 скдсаддкда ддакккдасд ссаскккскк касдскдккс кскаскаасс адсаааакад 2640 адсдаддаск дкскскасск ааасдкддкс сдксссдскд аакасдасаа кдссадкскк 2700 ссадкссккд какддаккса кддкакдкад кдааакскас сксаасдаса адккаскссс 2760 дасдскдаак даасааааса ддсддкддск ксдсасаадд сддсаскссс дасскксдак 2820 асааксккас акккаккдкк даасасксдд ксаакаксдд ссадссаакк аксдсадкда 2880 дсдккдсска ксдксксддк ссккддддкк кскксаакдд ддксдадскс дссаакдадд 2940 даксдккааа ксксдддскд ааддассадс дсккддссск дсаккдддкд ааададааса 3000 ккдсаддккк сддкддкддд кккссакааа дскаккааас дкасасадкс сааааккаск 3060 аакдасадкс асксскакас аддсдассск адкааадксд кдакккасдд асааадкдсс 3120 ддскссдааа дсдкдддака ссааакссдс дсдкасаасд дссдадакда сдддсксккс 3180 сдсддаддса кдакддадкс сддсдсддкд ккасскддса дкдссккдаа ссксасскдд 3240 асакакдадс сккддкксса дсааакадса дасдаддсад дакдккссса дассасссдс 3300 аааскддаск дкскасдссд сасдсссккс асадксскаа асаасаккск даасассасс 3360 дссаасдаса сдасдсскка сааскддадд сссасадкдд асддкдаскк сдкадсдсда 3420 каксссадсд адсаасксда сасаддадас кксдксааад кассааксак ааксддскас 3480 ассасддасд ааддаасаас ададкдссса даассадкда асассассдс сдааккаааа 3540 даакасскса дскдкасдка сскссккссс кксскссскк акссссссак ссссакссса 3600 акаасассаа сссадсааса асаасскасд дскдддссск сдасксасад дкадкаксск 3660 сдсксскдда сскскасссс аасассасск сскксддсак сссаксаксс даадаасксд 3720 дсддсаасдк сассккссса садссскасд дсдссдсакк ссдссадасд дсадсакаск 3780 асддсдасдс ссадкксака дссдсдасдс дскасасскд кдадскакдд дсддсасака 3840 асскдасадс акаккдскас сдакксааса ссаадасада сдаккасаас адддаадаад 3900 дсдкддсдса ккксксддас дкдаксккса кскксаасаа ссккаакддк какдддккса 3960 дкссдаассс дкксассаак дскссадада дскакаскда дсккадскас сксакдкссд 4020 дсксдкддак садскксаск аакадкскдд аксскаакаа дкддаскддк сдсддаадда 4080 асдскасдаа дасддадаак кддсссдкдк акдакскдда дааксссккд адкакдакск 4140 дддакдсдаа кдксаскксд какдсддсдс сддакасккд дсдкааддад ддкаккдсдк 4200 кдаккаакдс кааксддадд дсдкаксада ддкдаакдкд дкдкадсккд садссдккдс 4260 скасккдккс дасккксааа сксааааскк кскаккдада дадааааккд кдсдаддааа 4320

- 90 008007

дЕасЕассдс дддсадааса сЕсЕдсдсас аддЕссаЕаЕ сЕасааасЕс асЕдаасада 4380 дЕсЕаЕадса даЕЕаддЕад аЕЕдЕсаадс ЕЕасаЕасад асаЕаасссс ассасааЕаЕ 4440 сдЕддЕаада ЕадсасаЕЕЕ сЕЕЕааадаа дааааааааа даЕдааЕаса ЕаЕааЕсддс 4500 ЕасдЕсааЕа аЕЕсааааса дааЕаЕдЕса дсЕдЕдсаса саЕссдасса ЕЕасасЕадЕ 4560 ааадЕдадсд дсддс 4575

<210> 32 <211> 1695 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <220>

<221> СЬЗ <222> (1)..(1695) <400> 32

аЕд аад дда аЕд сЕс ссд асд сЕЕ адЕ Едд ЕЕд дса сЕд ддс аЕд дсс 48 МеЕ Ьуз С1у МеЕ Ьеи Рго ТЬг Ьеи Зег Тгр Ьеи А1а Ьеи С1у МеЕ А1а 1 5 10 15 аде сЕд дса асе Еде асе аас сса дЕа дсс сад аса аад аас дда адЕ 96 Зег Ьеи А1а ТЬг Суз ТЬг Азп Рго Уа1 А1а С1п ТЬг Ьуз Азп С1у Зег 20 25 30 ЕаЕ ЕаЕ ддЕ дЕс Еас аЕд ССЕ сад ЕаЕ ааЕ дад даЕ ЕаЕ ЕЕЕ СЕЕ дда 144 Туг Туг С1у Ча1 Туг МеЕ Рго С1п Туг Азп С1и Азр Туг РЬе Ьеи О1у 35 40 45 аЕЕ сса ЕЕЕ дсЕ аад ССС ссд ЕЕд дса сас ЕЕд сдЕ Едд дсс аас ССС 192 Не Рго РЬе А1а Ьуз Рго Рго Ьеи А1а НЬз Ьеи Агд Тгр А1а Азп Рго 50 55 60 дад адЕ сЕЕ ааЕ дад ЕсЕ Едд Есд дда ЕЕд сдс ссЕ дсЕ асе ддс ЕаЕ 240 С1и Зег Ьеи Азп С1и Зег Тгр Зег С1у Ьеи Агд Рго А1а ТЬг С1у Туг 65 70 75 80 дед аЕд даа ЕдЕ аЕа ддЕ Еас ддс адЕ даЕ саа ааа ддЕ ЕаЕ сЕд сад 288 А1а МеЕ С1и Суз 11е С1у Туг С1у Зег Азр С1п Ьуз С1у Туг Ьеи С1п 85 90 95 аде дад дас ЕдЕ сЕс Еас сЕа аас дЕд дЕс сдЕ ССС дсЕ даа Еас дас 336 Зег С1и Азр Суз Ьеи Туг Ьеи Азп Ча1 Ча1 Агд Рго А1а С1и Туг Азр 100 105 110 ааЕ дсс адЕ сЕЕ сса дЕс сЕЕ дЕа Едд аЕЕ саЕ ддс ддЕ ддс ЕЕс дса 384 Азп А1а Зег Ьеи Рго Ча1 Ьеи Ча1 Тгр 11е Н15 С1у С1у С1у РЬе А1а 115 120 125 саа ддс ддс асЕ ССС дас сЕЕ еда Еас ааЕ сЕЕ аса ЕЕЕ аЕЕ дЕЕ даа 432 С1п С1у С1у ТЬг Рго Азр Ьеи Агд Туг Азп Ьеи ТЬг РЬе 11е Уа1 С1и

- 91 008007

130 135 140

сас Есд дЕс ааЕ аЕс ддс сад сса аЕЕ аЕс дса дкд аде дЕЕ дсс ЕаЕ 480 Низ Зег Уа1 Азп Не С1у ΘΙη Рго Не Не А1а Уа1 Зег Уа1 А1а Туг 145 150 155 160 сдЕ сЕс ддк ссЕ кдд ддк ЕЕс ЕЕс ааЕ ддд дЕс дад сЕс дсс ааЕ дад 528 Агд Ьеи С1у Рго Тгр С1у РЬе РЬе Азп С1у Уа1 С1и Ьеи А1а Азп С1и 165 170 175 дда Есд ЕЕа ааЕ сЕс ддд сЕд аад дас сад сдс ккд дсс сЕд саЕ кдд 576 С1у Зег Ьеи Азп Ьеи С1у Ьеи Ьуз Азр ΘΙη Агд Ьеи А1а Ьеи Низ Тгр 180 185 190 дкд ааа дад аас аЕЕ дса ддк ЕЕс ддк ддс дас ссЕ адЕ ааа дЕс дкд 624 Уа1 Ьуз С1и Азп Не А1а С1у РЬе С1у С1у Азр Рго Зег Ьуз Уа1 Уа1 195 200 205 аЕЕ Еас дда саа адЕ дсс ддс Есс даа аде дкд дда Еас саа аЕс сдс 672 Не Туг С1у ΘΙη Зег А1а С1у Зег С1и Зег Уа1 С1у Туг ΘΙη Не Агд 210 215 220 дед Еас аас ддс еда даЕ дас ддд сЕс ЕЕс сдс дда ддс аЕд аЕд дад 720 А1а Туг Азп С1у Агд Азр Азр С1у Ьеи РЬе Агд С1у С1у МеЕ МеЕ 61и 225 230 235 240 Есс ддс дед дкд ЕЕа ССЕ ддс адЕ дсс ЕЕд аас сЕс асс кдд аса ЕаЕ 768 Зег С1у А1а Х7а1 Ьеи Рго С1у Зег А1а Ьеи Азп Ьеи ТЬг Тгр ТЬг Туг 245 250 255 дад ссЕ кдд ЕЕс сад саа аЕа дса дас дад дса дда ЕдЕ Есс сад асс 816 С1и Рго Тгр РЬе С1п ΘΙη Не А1а Азр 61и А1а С1у Суз Зег ΘΙη ТЬг 260 265 270 асс сдс ааа сЕд дас кдЕ сЕа сдс сдс асд ссс ЕЕс аса дЕс сЕа аас 864 ТЬг Агд Ьуз Ьеи Азр Суз Ьеи Агд Агд ТЬг Рго РЬе ТЬг Уа1 Ьеи Азп 275 280 285 аас аЕЕ сЕд аас асс асс дсс аас дас асд асд ссЕ Еас аас кдд адд 912 Азп Не Ьеи Азп ТЬг ТЬг А1а Азп Азр ТЬг ТЬг Рго Туг Азп Тгр Агд 290 295 300 ссс аса дкд дас ддк дас ЕЕс дЕа дед еда ЕаЕ ссс аде дад саа сЕс 960 Рго ТЬг Уа1 Азр С1у Азр РЬе Уа1 А1а Агд Туг Рго Зег С1и ΘΙη Ьеи 305 310 315 320 дас аса дда дас ЕЕс дЕс ааа дЕа сса аЕс аЕа аЕс ддс Еас асс асд 1008 Азр ТЬг С1у Азр РЬе Уа1 Ьуз Уа1 Рго Не Не Не С1у Туг ТЬг ТЬг 325 330 335 дас даа дда аса аса дад Еде сса даа сса дкд аас асс асс дсс даа 1056 Азр С1и С1у ТЬг ТЬг С1и Суз Рго С1и Рго Уа1 Азп ТЬг ТЬг А1а С1и 340 345 350 ЕЕа ааа даа Еас сЕс аде Еса аса аса асс Еас ддс кдд дсс сЕс дас 1104 Ьеи Ьуз С1и Туг Ьеи Зег Зег ТЬг ТЬг ТЬг Туг С1у Тгр А1а Ьеи Азр 355 360 365

- 92 008007

кеа сад дка дка ксс кед скс скд дас скс кас ссс аас асе асе ксс 1152 Бег С1п Уа1 \7а1 Зег Зег Ьеи Ьеи Азр Ьеи Туг Рго Азп ТЬг ТЬг Зег 370 375 380 ккс ддс акс сса кса ксс даа даа скс ддс ддс аас дке асе ккс сса 1200 РЬе С1у Не Рго Зег Зег 31и С1и Ьеи С1у С1у Азп Уа1 ТЬг РЬе Рго 385 390 395 400 сад ссс кас ддс дсс дса ккс сдс сад асд дса дса кас кас ддс дас 1248 С1п Рго Туг С1у А1а А1а РЬе Агд С1п ТЬг А1а А1а Туг Туг С1у Азр 405 410 415 дсс сад ккс ака дсс дед асд сдс кас асе кдк дад ска кдд дед дса 1296 А1а С1п РЬе 11е А1а А1а ТЬг Агд Туг ТЬг Суз С1и Ьеи Тгр А1а А1а 420 425 430 сак аас скд аса дса как кде кас еда ккс аас асе аад аса дас дак 1344 Низ Азп Ьеи ТЬг А1а Туг Суз Туг Агд РЬе Азп ТЬг Ьуз ТЬг Азр Азр 435 440 445 кас аас адд даа даа ддс дкд дед сак ккс кед дас дкд акс ккс акс 1392 Туг Азп Агд С1и С1и С1у Уа1 А1а ΗΪ3 РЬе Зег Азр Уа1 Не РЬе Не 450 455 460 ккс аас аас екк аак ддк как ддд ккс адк ссд аас ссд ккс асе аак 1440 РЬе Азп Азп Ьеи Азп С1у Туг С1у РЬе Зег Рго Азп Рго РЬе ТЬг Азп 465 470 475 480 дек сса дад аде как аск дад екк аде кас скс акд ксс ддс кед кдд 1488 А1а Рго С1и Зег Туг ТЬг С1и Ьеи Зег Туг Ьеи Мек Зег С1у Зег Тгр 485 490 495 акс аде ккс аск аак адк скд дак сск аак аад кдд аск ддк сдс дда 1536 Не Бег РЬе ТЬг Азп Зег Ьеи Азр Рго Азп Ьуз Тгр ТЬг С1у Агд 61у 500 505 510 адд аас дек асд аад асд дад аак кдд ссс дкд как дак скд дад аак 1584 А.З п А1а ТЬг Т ,70 ТЬг С1и Аз п Ттг, Рго Уа1 Т,7Т~ Δ сп Ьеи СЬи А.зп 7 _ 7. _у Ζ- 515 520 525 ссс ккд адк акд акс кдд дак дед аак дке аск ксд как дед дед ссд 1632 Рго Ьеи Зег Мек 11е Тгр Азр А1а Азп Уа1 ТЬг Зег Туг А1а А1а Рго 530 535 540 дак аск кдд едк аад дад ддк акк дед ккд акк аак дек аак сдд адд 1680 Азр ТЬг Тгр Агд Ьуз С1и С1у Не А1а Ьеи Не Азп А1а Азп Агд Агд 545 550 555 560 дед как сад адд кда 1695

А1а Туг С1п Агд <210> 33 <211> 564 <212> БЕЛОК

- 93 008007 <213> АзрегдШиз пидег <400> 33

МеЕ Ьуз С1у МеЕ Ьеи Рго ТЬг Ьеи Зег Тгр Ьеи А1а Ьеи С1у МеЕ А1а 1 5 10 15 Зег Ьеи А1а ТЬг Суз ТЬг Азп Рго Уа1 А1а С1п ТЬг Ьуз Азп С1у Зег 20 25 30 Туг Туг С1у Уа1 Туг МеЕ Рго С1п Туг Азп С1и Азр Туг РЬе Ьеи С1у 35 40 45 11е Рго РЬе А1а Ьуз Рго Рго Ьеи А1а Низ Ьеи Агд Тгр А1а Азп Рго 50 55 60 С1и Зег Ьеи Азп С1и Зег Тгр Зег С1у Ьеи Агд Рго А1а ТЬг С1у Туг 65 70 75 80 А1а МеЕ С1и Суз 11е С1у Туг С1у Зег Азр С1п Ьуз С1у Туг Ьеи С1п 85 90 95 Зег С1и Азр Суз Ьеи Туг Ьеи Азп Уа1 Уа1 Агд Рго А1а С1и Туг Азр 100 105 но Азп А1а Зег Ьеи Рго Уа1 Ьеи Уа1 Тгр 11е Низ С1у С1у С1у РЬе А1а 115 120 125 61п С1у С1у ТЬг Рго Азр Ьеи Агд Туг Азп Ьеи ТЬг РЬе Не Уа1 С1и 130 135 140 Низ Зег Уа1 Азп 11е С1у С1п Рго Не Не А1а Уа1 Зег Уа1 А1а Туг 145 150 155 160 Агд Ьеи С1у Рго Тгр С1у РЬе РЬе Азп С1у Уа1 С1и Ьеи А1а Азп С1и 165 170 175 С1у Зег Ьеи Азп Ьеи С1у Ьеи Ьуз Азр С1п Агд Ьеи А1а Ьеи Низ Тгр 180 185 190 Уа1 Ьуз С1и Азп 11е А1а С1у РЬе С1у С1у Азр Рго Зег Ьуз Уа1 Уа1 195 200 205 11е Туг С1у С1п Зег А1а С1у Зег С1и Зег Уа1 С1у Туг Θΐη 11е Агд 210 215 220 А1а Туг Азп С1у Агд Азр Азр С1у Ьеи РЬе Агд С1у С1у МеЕ МеЕ С1и 225 230 235 240 Зег С1у А1а Уа1 Ьеи Рго С1у Зег А1а Ьеи Азп Ьеи ТЬг Тгр ТЬг Туг 245 250 255 С1и Рго Тгр РЬе С1п С1п 11е А1а Азр С1и А1а С1у Суз Зег С1п ТЬг 260 265 270 ТЬг Агд Ьуз Ьеи Азр Суз Ьеи Агд Агд ТЬг Рго РЬе ТЬг Уа1 Ьеи Азп 275 280 285 Азп 11е Ьеи Азп ТЬг ТЬг А1а Азп Азр ТЬг ТЬг Рго Туг Азп Тгр Агд 290 295 300 Рго ТЬг Уа1 Азр С1у Азр РЬе Уа1 А1а Агд Туг Рго Зег 61и С1п Ьеи 305 310 315 320

- 94 008007

Азр ТЬг С1у Азр РЬе 325 Уа1 Ьуз Да1 Рго 11е 330 Не 11е С1у Туг ТЬг 335 ТЬг Азр С1и С1у ТЬг ТЬг С1и Суз Рго С1и Рго Да1 Азп ТЬг ТЬг А1а С1и 340 345 350 Ьеи Ьуз С1и Туг Ьеи Зег Зег ТЬг ТЬг ТЬг Туг С1у Тгр А1а Ьеи Азр 355 360 365 Зег С1п Да1 Да1 Зег Зег Ьеи Ьеи Азр Ьеи Туг Рго Азп ТЬг ТЬг Зег 370 375 380 РЬе С1у 11е Рго Зег Зег С1и 61и Ьеи С1у С1у Азп Уа1 ТЬг РЬе Рго 385 390 395 400 С1п Рго Туг С1у А1а А1а РЬе Агд С1п ТЬг А1а А1а Туг Туг С1у Азр 405 410 415 А1а С1п РЬе 11е А1а А1а ТЬг Агд Туг ТЬг Суз С1и Ьеи Тгр А1а А1а 420 425 430 Η13 Азп Ьеи ТЬг А1а Туг Суз Туг Агд РЬе Азп ТЬг Ьуз ТЬг Азр Азр 435 440 445 Туг Азп Агд С1и С1и С1у Уа1 А1а Низ РЬе Зег Азр Да1 11е РЬе 11е 450 455 460 РЬе Азп Азп Ьеи Азп С1у Туг С1у РЬе Зег Рго Азп Рго РЬе ТЬг Азп 465 470 475 480 А1а Рго С1и Зег Туг ТЬг С1и Ьеи Зег Туг Ьеи Ме! Зег С1у Зег Тгр 485 490 4 95 Не Зег РЬе ТЬг Азп Зег Ьеи Азр Рго Азп Ьуз Тгр ТЬг С1у Агд С1у 500 505 510 Агд Азп А1а ТЬг Ьуз ТЬг 61и Азп Тгр Рго Уа1 Туг Азр Ьеи С1и Азп 515 520 525 Рго Ьеи Зег Ме! 11е Тгр Азр А1а Азп Уа1 ТЬг Зег Туг А1а А1а Рго 530 535 540 Азр ТЬг Тгр Агд Ьуз С1и С1у 11е А1а Ьеи 11е Азп А1а Азп Агд Агд 545 550 555 560

А1а Туг ΘΙη Агд <210> 34 <211> 2371 <212> ДНК <213> АзрегдШиз птдег <400> 34 дсссРдаса! ддасдд!д!с адаРададас сдррддаадд сРдаассаса дддсасасдд60 сасдррдадд асссРдсаРд ссддРдРаРс сддаРааРдд садаРааРсс сддсРааРРд120 ддддсдасдд садсРасддс РсасаааРРд РдаРддааРа дасасддса! даРдРРРсаа180

РдаадсРсса аас!!!асад РдсРаддсРд РааасдРда! РаРааРсасд аРдРааРРда240

- 95 008007

РРаРсаРсРа саасРсаасс сссдсассаа даааРдааРс сРсРсдРсдд аадааааада 300 сддсаРРсса даадаасРРР РРссРадаРа асааасадра аРсадРссаР ссдРсссРда 360 сдаРсссссс аРсдаассРс ддраадасдс Рсдасссааа аассадассд асаадсРРРР 420 саассРсссР ааасдаааса асддсрдрдр РдаРсдРдаа сдрддррдсс РаРассааРа 480 сдадаассаР аРаддаРада ааРРдадРРР ассдрддааа адссасссдс РасадРРРаа 540 РРаассаасс сасссасаРд сссааддсас сРдРаасадд дасРасРдРс садададрдд 600 аРадРддсРа дрдддсадас дРсддаРдаа сРссддаада сссРаасРда РасдРадаас 660 саРсдРдаас ссРддРРРдР сссРадРРсд дддсдсРаРР сссадсдРад аааадсддсс 720 даРссРсРда аасадРРРРс ссссддддРа РасРРдсРад РРадРсасРа РсаРасаааа 780 драдрдрадр ддасаадасс адддРсРасР асРаРРадРР адРРсРдРРР сарсссдаср 840 сааРРРРдсд Рсссаадасс сРдддРРдРс сдддссРдРс РРдсссааса сдадаРдРаР 900 ддадРаадРа Рддадддада сРаассРсдд ааРаРРсРРд РсРсРРРРРа дРасРаРсРа 960 дсссРРадРд адасРаРадс адРадРдаас садададада дададаРдРс РаРаРаадРа 1020 садРсдРада РсссРаааса РдассадсРР садасРсада сРсдадсадс садРдсадРс 1080 садРссасРс РРРсаРРсРс ассссРРсРР РасРаРсРРа сааРааРРРс РаРРсааРаа 1140 дРсРдсадРд садсасссас асасаРРсаР РсРсРдадад аРааааааРа асааааРддс 1200 сссссРсааа РсссРссРсс РсддсдссРс ссРддссасс сРсдсссРРР ссассссасР 1260 ддсаассдас дссдаааасс РсРасдсасд РсааРРсддс асдддсРсРа садссаасда 1320 асРсдадсад ддаадсРдса аддардрдас РсРсаРсРРР дсдадддддр саасРдадсР 1380 РдддааРаРд дРаРдсРРдР РдссРдссРР РасссдРасР аРасРаРссс адаасаРасс 1440 аадсасааса Рсасааааса РдРддадсса ддадсраарс адрддрддрд аРдаРаРдаР 1500 драдддсасс дРааРсддсс ссссРсРсРд сдасаассРд аааРссааас РсддаРссда 1560 сааадРсдсс РдссадддРд Рсддсддсса аРасадсдсс ддасРсдРдс адааРдсссР 1620 дссссадаас ассдаРссдд ддадРаРсРс сдссдсдаад садаРдРРсд аддаддсдаа 1680 РРсдаадРдР сссааРасРа адаРРдРРдс дддРддРРаР аддРаРаРаР сссРРРсссс 1740 РРРассРРсс сссаРаРсаа РдсРададдс аааддааРаР саРдсРааРд РадаРдРРдд 1800 ддааасадРс ааддаадсдс РдРдаРРдас аасдссдрдс аадаасРсад сассассдрд 1860 ааадассаад РдаадддРдР сдРдсРсРРс дддРРсасда дааасдрдса ддаРсасддд 1920 садаРсссРа аРРасссРаа ддаРдасдРд ааддРРРаРР дрдссдрддд сдаРсРддРс 1980 РдРдаРдаРа сдРРддРРдР РасддсдаРд саРсРдасдР аРддсаРдда РдсдддРдаР 2040 дсддсдадсР РРРРддссда дааддрдсад РсРРссадРа дРРсдасРас РадсРссадс 2100 РсддаРдссд сдадРадРРс аРсРдсРдсд дддасдРсдР сдРсддддРР дРсдддасРд 2160 РсРРсРРРРР РРддаддРсР сРаааРадаа РРадаРдада РдадРддРсс дддрдддддр 2220 РРаддддаРР дРРдРРсдРР РсРсРРддаР даРРРадРРР ссдРРаРРРа сРРадсРддд 2280 аРаадаРаРа РддРасаРад РаРадаРдРд РРдРдаРдРР аРРсРддсРа РРРРдРасас 2340 РРРдасаРда РсРдсдаРаР дддадсдРсР а 2371

<210> 35 <211> 789 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег

- 96 008007 <220>

<221> СБЗ <222> (1)..(789) <400> 35

акд дсс ссс скс ааа ксс скс скс скс ддс дсс ксс скд дсс асе скс 48 Мек АЬа Рго Ьеи Ьуз Зег Ьеи Ьеи Ьеи СЬу АЬа Зег Ьеи АЬа ТНг Ьеи 1 5 10 15 дсс екк ксс асе сса скд дса асе дас дсс даа аас скс кас дса едк 96 АЬа Ьеи Зег ТНг Рго Ьеи АЬа ТНг Азр АЬа СЬи Азп Ьеи Туг АЬа Агд 20 25 30 саа ккс ддс асд ддс кек аса дсс аас даа скс дад сад дда аде кде 144 СЬп РНе СЬу ТНг СЬу Зег ТНг АЬа Азп СЬи Ьеи СЬи СЬп СЬу Зег Суз 35 40 45 ... 1 по аад у а ц у иу ас и СьС а и с сии усд адд ддд ьСа Э.С и дад Сьь ддд ешь X с. Ьуз Азр УаЬ ТНг Ьеи 11е РНе АЬа Агд СЬу Зег ТНг СЬи Ьеи СЬу Азп 50 55 60 акд ддс асе дка акс ддс ссс сск скс кде дас аас скд ааа ксс ааа 240 Мек СЬу ТНг УаЬ Не СЬу Рго Рго Ьеи Суз Азр Азп Ьеи Ьуз Зег Ьуз 65 70 75 80 скс дда ксс дас ааа дке дсс кде сад ддк дке ддс ддс саа кас аде 288 Ьеи СЬу Зег Азр Ьуз УаЬ АЬа Суз СЬп СЬу УаЬ СЬу СЬу СЬп Туг Зег 85 90 95 дсс дда скс дкд сад аак дсс скд ссс сад аас асе дак ссд ддд адк 336 АЬа СЬу Ьеи 7аЬ СЬп Азп АЬа Ьеи Рго СЬп Азп ТНг Азр Рго СЬу Зег 100 105 110 акс ксс дсс дед аад сад акд ккс дад дад дед аак кед аад кдк ссс 384 Не Зег АЬа АЬа Ьуз СЬп Мек РНе СЬи СЬи АЬа Азп Зег Ьуз Суз Рго 115 120 125 аак аск аад акк дкк дед ддк ддк как адк саа дда аде дек дкд акк 432 Азп ТНг Ьуз 11е УаЬ АЬа СЬу СЬу Туг Зег СЬп СЬу Зег АЬа УаЬ Не 130 135 140 дас аас дсс дкд саа даа скс аде асе асе дкд ааа дас саа дкд аад 480 Азр Азп АЬа УаЬ СЬп СЬи Ьеи Зег ТЬг ТНг УаЬ Ьуз Азр СЬп УаЬ Ьуз 145 150 155 160 ддк дке дкд скс ккс ддд ккс асд ада аас дкд сад дак сас ддд сад 528 СЬу Уа1 УаЬ Ьеи РНе СЬу РНе ТНг Агд Азп УаЬ СЬп Азр НЬз СЬу СЬп 165 170 175 акс сск аак кас сск аад дак дас дкд аад дкк как кдк дсс дкд ддс 576 Не Рго Азп Туг Рго Ьуз Азр Азр УаЬ Ьуз УаЬ Туг Суз АЬа УаЬ СЬу 180 185 190 дак скд дке кдк дак дак асд ккд дкк дкк асд дед акд сак скд асд 624 Азр Ьеи УаЬ Суз Азр Азр ТНг Ьеи УаЬ УаЬ ТНг АЬа Мек НЬз Ьеи ТНг

97 008007

195 200 205

как ддс акд дак дед ддк дак дед дед аде ккк ккд дсс дад аад дЬд 672 Туг С1у Мек Азр А1а С1у Азр А1а А1а Зег РЬе Ьеи А1а С1и Ьуз Уа1 210 215 220 сад кек ксс адк адк кед аск аск аде ксс аде кед дак дсс дед адк 720 С1п Зег Зег Зег Зег Зег ТЬг ТЬг Зег Зег Зег Зег Азр А1а А1а Зег 225 230 235 240 адк кса кек дек дед ддд асд кед кед кед ддд ккд кед дда скд кек 768 Зег Зег Зег А1а А1а С1у ТЬг Зег Зег Зег С1у Ьеи Зег С1у Ьеи Зег 245 250 255 кек ккк ккк дда ддк скс каа 789 Зег РЬе РЬе С1у С1у Ьеи

260

<210> 36 <211> 262 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пддег

<400> 36

Мек А1а Рго Ьеи Ьуз Зег Ьеи Ьеи Ьеи С1у А1а Зег Ьеи А1а ТЬг Ьеи 1 5 10 15 А1а Ьеи Зег ТЬг Рго Ьеи А1а ТЬг Азр А1а С1и Азп Ьеи Туг А1а Агд 20 25 30 С1п РЬе С1у ТЬг С1у Зег ТЬг А1а Азп С1и Ьеи С1и С1п С1у Зег Суз 35 40 45 Ьуз Азр Уа1 ТЬг Ьеи 11е РЬе А1а Агд С1у Зег ТЬг С1и Ьеи С1у Азп 50 55 60 Мек С1у ТЬг Уа1 11е С1у Рго Рго Ьеи Суз Азр Азп Ьеи Ьуз Зег Ьуз 65 70 75 80 Ьеи С1у Зег Азр Ьуз Уа1 А1а Суз С1п С1у Уа1 С1у С1у С1п Туг Зег 85 90 95 А1а С1у Ьеи Уа1 С1п Азп А1а Ьеи Рго 61п Азп ТЬг Азр Рго С1у Зег 100 105 110 11е Зег А1а А1а Ьуз С1п Мек РЬе С1и С1и А1а Азп Зег Ьуз Суз Рго 115 120 125 Азп ТЬг Ьуз 11е Уа1 А1а С1у 61у Туг Зег С1п С1у Зег А1а Уа1 11е 130 135 140 Азр Азп А1а Уа1 61п С1и Ьеи Зег ТЬг ТЬг Уа1 Ьуз Азр С1п Уа1 Ьуз 145 150 155 160 С1у Уа1 Уа1 Ьеи РЬе С1у РЬе ТЬг Агд Азп Уа1 С1п Азр Н13 С1у С1п 165 170 175

- 98 008007

11е Рго Азп Туг 180 Рго Ьуз Азр Азр Уа1 185 Ьуз Уа1 Туг Суз А1а 190 Уа1 С1у Азр Ьеи Уа1 Суз Азр Азр ТЬг Ьеи Уа1 Уа1 ТЬг А1а МеЬ Низ Ьеи ТЬг 195 200 205 Туг С1у МеС Азр А1а С1у Азр А1а А1а Зег РЬе Ьеи А1а С1и Ьуз Уа1 210 215 220 С1п Зег Зег Зег Зег Зег ТЬг ТЬг Зег Зег Зег Зег Азр А1а А1а Зег 225 230 235 240 Зег Зег Зег А1а А1а С1у ТЬг Зег Зег Зег С1у Ьеи Зег С1у Ьеи Зег 245 250 255

5ег РЬе РЬе С1у С1у Ьеи

260 <210> 37 <211> 2981 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пидег <400> 37

ЬссЬсаЬссс аЬдсЬсЬссс ддсадаассс сддадасаас ссасасЬааЬ дсасссааад 60 сааааЬдаса СддаСЬдааЬ ЬаЬссддддЬ дсаЬссаЬсЬ ЬдЬСссссса сасаЬЬддас 120 ссЬЬЬссЬЬа ЬааЬддсЬдс сссддсааас ссссааЬСдс ЬдЬЬЬаддсс адсдсадаЬа 180 дсаааЬсЬсЬ сдЬсЬдаЬЬа асдаЬдсЬаа адсЬсдсЬдЬ ЬдсСсСЬССЬ ЬсдЬЬасЬЬд 240 ссдЬдддсаа Ьдсадсдсса ассааадЬдд сссдЬСссас ддссадЬссЬ асддссаадд 300 ЬСсдсаасдд СасаЬаЬдЬс ддадЬдасаа аЬдсдсаЬЬа ссадсаадаЬ •СЬсЬЬЬЬЬдд 360 дааЬдссдЬа Сдсссадсад ссЬЬЬаддЬд асЬЬдсдсЬЬ сасддЬдссЬ садЬсссСда 420 асдааадсЬд дадЬддсдад сдсдасдсда аддааЬаЬЬс сааСаЬсСдЬ дЬаддаЬасд 480 дЬдЬдадЬдс дсааэСсСЬс ЬЬсдададсс аддсссЬасЬ адсЬдсаЬсс ЬддсасЬаЬд 540 ааЬаЬааЬсЬ ааСдддЬада СсСдЬСадас сдасСсдаЬЬ СддЬасссас адЬссдаадс 600 ЬЬдЬсЬаасс СЬдааСдСса ЬссдсдаЬЬс ЬЬсЬдсаааЬ дадаасЬсда адсЬссссдЬ 660 дддсдЬсЬдд аЬасаЬддад дЬддсЬСсСЬ СдадддаЬсЬ адСдсЬдасс адсдсСасаа 720 саЬдЬссдсд аЬЬдЬСдсса асЬссЬаЬаа даЬсддЬаЬд ЬсдасдЬаЬд сддЬЬдЬада 780 аССадасСда сЬсддсЬСдс ЬсдсаЬЬдЬа ддааадссдЬ ЬсаЬЬдсЬдЬ садсЬСааас 840 ЬаЬсдссЬЬЬ сддсаЬдддд сЬЬсЬЬдадЬ ЬссадСсаад Ьс'Ьддддсас СддсааСасс 900 ааСсЬаддЬа СсадддаЕса ааддЬЬадса сСссаССдда Ссааддадаа ЬаЬсдсддса 960 ЬЬсддаддад асссадаЬаа даЬсасЬаЬс ЬддддсдааЬ сЬдссддадс даЬдЬссдЬд 1020 ддЬСаСсасс ЬЬдсадсаЬа сддсддЬадд дасдаЬддас ЬсЬЬссдЬдд аддааЬЬаЬд 1080 дадСсаддад ддасЬаЬЬдс адсСадСсса дссаасЬаЬа ссдддЬасса адсдсасЬаС 1140 даЬдадсЬсд сдддЬсаадЬ сддЬЬдсЬсс дасдСадЬад аЬЬсдЬЬдса дЬдссЬдсдс 1200 даадЬЬссдЬ ЬсдадаааЬЬ даасдсЬдсЬ сЬсаасасса ссадЬддЬаа сЬсддаССЬс 1260 ааЬЬЬсдддс ссдЬсаЬЬда СддадаЬаЬа аЬсадддасЬ ддддсадссЬ ссадсЬадас 1320 аадсаЬдааЬ ЬсдЬсааадС сссЬаЬЬсЬЬ дсаддЬасса аЬассдасда адддасадсс 1380

- 99 008007

ЕЕЕдддссса саддЕаЕсаа сасдасадад дадЕЕсЕаЕд саЕаЕсЕсас аддЕаЕдЕдЕ 1440 даЕааЕдадЕ ЕаасаЕссЕд ааадаасссс ададсадсаа аасдддсЕаа ЕсЕсасЕддс 1500 адаЕддсдаа ЕсЕддаЕЕсс адсЕассссс сасдаЕсдсс саддаааЕсс ЕдсадсЕсЕа 1560 сссЕдаЕдаЕ ссадсасЕдд дсаЕссссда аЕЕЕсЕсддЕ дасасЕадад ЕсссдЕссаа 1620 аддсЕассаа Еддсддсдса ссЕдЕдсаЕа сдсаддддас ЕаЕдЕааЕдс аЕдссаассд 1680 Есдссдасаа ЕдЕдаддсдЕ ддасададас сЕсдасдасд дсдЕасЕдЕЕ аЕсдаЕЕсаа 1740 ЕаЕдсдЕдсд дссдаЕдЕсс ссаЕссЕдЕс Еддсдссасс саЕЕЕЕдаад аадЕЕдсЕЕЕ 1800 ЕдЕаЕЕсаас аасаЕЕдсад дасЕсдддЕа ссаЕЕасдда аадссдЕЕсд садддаЕдсс 1860 сдадЕссЕас дЕасадсЕаа дсаасЕЕдаЕ дассадсаЕд ЕдддсаЕссЕ ЕсаЕссасда 1920 ЕЕЕадасссЕ ааЕЕсдддса ЕсааддасЕс адсЕдЕасад ЕддсаассдЕ асдддаадда 1980 ЕсадссддЕЕ даЕсЕадЕдЕ ЕЕдаЕдсдаа ЕдЕсасдадс ЕасадсЕаса Еддадссада 2040 сасдЕддсдд ааддадддда ЕсдасЕаЕаЕ сааЕЕссдЕд дссаасдсдЕ асЕддсдаЕа 2100 адсЕЕсаЕдс ЕаЕсдаааас асаЕдЕдаЕд адсдЕдадад ЕЕЕЕЕдссЕЕ ссдсЕЕдаЕд 2160 ЕЕдссЕдсда даддаааадд ЕЕааддсааа сааддаЕддЕ адддддЕдсд адсдсаЕсЕа 2220 адЕсддссас ддЕадЕЕдаЕ ЕдаЕддЕЕсс сЕсдЕЕадаа дсаааЕасад аЕдссаЕасЕ 2280 ЕссЕдсааса аасссадаас ЕЕдЕЕдЕааЕ саадЕЕЕЕЕЕ сааасддаЕд дЕадаЕсддЕ 2340 ЕссдаЕЕЕдЕ ааааадсаад аЕссЕадсдЕ Еасдадддаа ссаадасасс сасасададд 2400 адсаЕЕасда аЕЕссаааЕЕ ассааадссЕ дЕаЕаасааа аассадсада дассдссЕаа 2460 ЕЕадЕсаасЕ асадсаЕЕдд ЕЕсааЕдЕас сЕдсааддас сЕЕЕасасдс дЕддЕсассс 2520 аЕдЕассаад ссаадссаас ддссаадаса сддаааЕаас саададдааа ссасЕсссЕс 2580 саадааЕсаа даасссаддд ддЕсаадада аЕсЕддаадс даЕааадддд ЕсЕЕсЕЕЕЕЕ 2640 ЕЕЕсЕЕЕдсЕ ЕассЕадада дддаддадЕс ддсдЕЕсаЕс дЕсааЕсадЕ ададЕдЕЕсЕ 2700 ссдсссЕдад ЕддЕдЕадЕс ЕаЕаЕссдда ссаЕсдддда саЕдаЕЕаЕс аЕасдаЕсса 2760 ЕаассаадЕс сссдаЕЕдЕа сЕасддсЕас саааасЕада аЕдаЕдаааа ЕаЕЕддадЕа 2820 сдаааддаас ЕааассааЕа сЕаадааааа ааааааадад Еааадааааа ададЕааааа 2880 ассаадсЕсд дааадЕаааа аЕЕЕссссЕд дЕсЕЕдЕЕдЕ саЕЕссссЕа ссЕаЕЕдада 2940 ассдддЕЕса ссааЕдасад сддаЕссссд аЕЕЕдасаЕс д 2981

<210> 38 <211> 1686 <212> ДНК <213> АзрегдШиз пЛдег <220>

<221> СЬЗ <222> (1)..(1686) <400> 38

аЕд сЕа аад сЕс дсЕ дЕЕ дсЕ сЕЕ ЕЕЕ Есд ЕЕа сЕЕ дсс дЕд ддс ааЕ 48 МеЕ Ьеи Ьуз Ьеи АЛа УаЛ АЛа Ьеи РЬе Зег Ьеи Ьеи АЛа УаЛ СЛу Азп 1' 5 10 15 дса дед сса асе ааа дЕд дсс сдЕ Есс асд дсс адЕ ссЕ асд дсс аад 96

- 100 008007

А1а А1а Рго ТНг 20 Ьуз Уа1 А1а Агд Зег 25 ТНг А1а Зег Рго ТНг 30 А1а Ьуз дкк сдс аас ддк аса как дке дда дкд аса аак дед сак кас сад саа 144 Уа1 Агд Азп С1у ТНг Туг Уа1 С1у Уа1 ТНг Азп А1а Нхз Туг 61п С1п 35 40 45 дак ккс ккк ккд дда акд ссд как дсс сад сад сек кка ддк дас ккд 192 Азр РНе РНе Ьеи С1у Мек Рго Туг А1а С1п С1п Рго Ьеи С1у Азр Ьеи 50 55 60 сдс ккс асд дкд сек сад ксс скд аас даа аде кдд адк ддс дад сдс 240 Агд РНе ТНг Уа1 Рго С1п Зег Ьеи Азп С1и Зег Тгр Зег С1у С1и Агд 65 70 75 80 дас дед аад даа как ксс аак акс кдк дка дда кас ддк асе дас кед 288 Азр А1а Ьуз С1и Туг Зег Азп 11е Суз Уа1 С1у Туг С1у ТНг Азр Зег 85 90 95 акк кдд кас сса сад ксс даа дек кдк ска асе ккд аак дке акс еде 336 11е Тгр Туг Рго С1п Зег С1и А1а Суз Ьеи ТНг Ьеи Азп Уа1 11е Агд 100 105 110 дак кек кек дса аак дад аас кед аад скс ссс дкд ддс дке кдд ака 384 Азр Зег Зег А1а Азп 61и Азп Зег Ьуз Ьеи Рго Уа1 С1у Уа1 Тгр 11е 115 120 125 сак дда ддк ддс ккс ккк дад дда кек адк дек дас сад сдс кас аас 432 Нкз С1у С1у С1у РНе РНе С1и С1у Зег Зег А1а Азр С1п Агд Туг Азп 130 135 140 акд ксс дед акк дкк дсс аас ксс как аад акс дда аад сед ккс акк 480 Мек Зег А1а 11е Уа1 А1а Азп Зег Туг Ьуз 11е С1у Ьуз Рго РНе 11е 145 150 155 160 дек дке аде кка аас как сдс екк кед дса кдд ддс ккс ккд адк ксс 528 А1а Уа1 Зег Ьеи Азп Туг Агд Ьеи Зег А1а Тгр С1у РНе Ьеи Зег Зег 165 170 175 адк саа дке кдд ддс аск ддс аак асе аак ска ддк акс адд дак саа 576 Зег С1п Уа1 Тгр С1у ТНг С1у Азп ТНг Азп Ьеи С1у 11е Агд Азр С1п 180 185 190 адд кка дса скс сак кдд акс аад дад аак акс дед дса ккс дда дда 624 Агд Ьеи А1а Ьеи ΗΪ3 Тгр 11е Ьуз С1и Азп 11е А1а А1а РНе С1у С1у 195 200 205 дас сса дак аад акс аск акс кдд ддс даа кек дсс дда дед акд ксс 672 Азр Рго Азр Ьуз 11е ТНг 11е Тгр С1у С1и Зег А1а С1у А1а Мек Зег 210 215 220 дкд ддк как сас екк дса дса Нас ддс ддк адд дас дак дда скс ккс 720 Уа1 01у Туг ΗΪ3 Ьеи А1а А1а Туг С1у С1у Агд Азр Азр С1у Ьеи РНе 225 230 235 240 едк дда дда акк акд дад кса дда ддд аск акк дса дек адк сса дсс 768 Агд С1у С1у 11е Мек С1и Зег С1у С1у ТНг 11е А1а А1а Зег Рго А1а

- 101 008007

245 250 255

аас ЕаЕ асе ддд Еас саа дед сас ЕаЕ даЕ дад СЕс дед ддк саа дЕс 816 Азп Туг ТЬг С1у Туг С1п А1а ΗΪ3 Туг Азр С1и Ьеи А1а С1у С1п Уа1 260 265 270 ддЕ Еде Есс дас дЕа дЕа даЕ Есд ЕЕд сад Еде сЕд сдс даа дЕЕ ссд 864 С1у Суз Зег Азр Уа1 Уа1 Азр Зег Ьеи С1п Суз Ьеи Агд С1и Уа1 Рго 275 280 285 ЕЕс дад ааа ЕЕд аас дсЕ дсЕ сЕс аас асе асе адЕ ддЕ аас Есд даЕ 912 РЬе (Ни Ьуз Ьеи Азп А1а А1а Ьеи Азп ТЬг ТЬг Зег (Ну Азп Зег Азр 290 295 300 ЕЕс ааЕ ЕЕс ддд ссс дЕс аЕЕ даЕ дда даЕ аЕа аЕс адд дас Едд ддс 960 РЬе Азп РЬе С1у Рго Уа1 Не Азр С1у Азр Не Не Агд Азр Тгр С1у 305 310 315 320 аде сЕс сад сЕа дас аад саЕ даа ЕЕс дЕс ааа дЕс ссЕ аЕЕ сЕЕ дса 1008 Зег Ьеи С1п Ьеи Азр Ьуз Ηίε С1и РЬе Уа1 Ьуз Уа1 Рго Не Ьеи А1а 325 330 335 ддЕ асе ааЕ асе дас даа ддд аса дсс ЕЕЕ ддд ссс аса ддЕ аЕс аас 1056 (Ну ТЬг Азп ТЬг Азр С1и С1у ТЬг А1а РЬе С1у Рго ТЬг (Ну Не Азп 340 345 350 асд аса дад дад ЕЕс ЕаЕ дса ЕаЕ сЕс аса даЕ ддс даа ЕсЕ дда ЕЕс 1104 ТЬг ТЬг С1и С1и РЬе Туг А1а Туг Ьеи ТЬг Азр 61у (Ии Зег С1у РЬе 355 360 365 сад сЕа ссс ссс асд аЕс дсс сад даа аЕс сЕд сад сЕс Еас ссЕ даЕ 1152 С1п Ьеи Рго Рго ТЬг Не А1а С1п 61и Не Ьеи С1п Ьеи Туг Рго Азр 370 375 380 даЕ сса дса сЕд ддс аЕс ссс даа ЕЕЕ сЕс ддЕ дас асЕ ада дЕс ссд 1200 Азр Рго А1а Ьеи С1у Не Рго С1и РЬе Ьеи С1у Азр ТЬг Агд Уа1 Рго 385 390 395 400 Есс ааа ддс Еас саа Едд сдд сдс асе ЕдЕ дса Еас дса ддд дас ЕаЕ 1248 Зег Ьуз С1у Туг С1п Тгр Агд Агд ТЬг Суз А1а Туг А1а 61у Азр Туг 405 410 415 дЕа аЕд саЕ дсс аас сдЕ сдс еда саа ЕдЕ дад дед Едд аса дад асе 1296 Уа1 МеЕ Н15 А1а Азп Агд Агд Агд С1п Суз С1и А1а Тгр ТЬг (Ии ТЬг 420 425 430 Есд асд асд дед Еас ЕдЕ ЕаЕ еда ЕЕс ааЕ аЕд сдЕ дед дсс даЕ дЕс 1344 Зег ТЬг ТЬг А1а Туг Суз Туг Агд РЬе Азп МеЕ Агд А1а А1а Азр Уа1 435 440 445 ссс аЕс сЕд ЕсЕ ддс дсс асе саЕ ЕЕЕ даа даа дЕЕ дсЕ ЕЕЕ дЕа ЕЕс 1392 Рго 11е Ьеи Зег С1у А1а ТЬг ΗΪ3 РЬе С1и (Ни Уа1 А1а РЬе Уа1 РЬе 450 455 460 аас аас аЕЕ дса дда сЕс ддд Еас саЕ Еас дда аад ссд ЕЕс дса ддд 1440 Азп Азп 11е А1а (Ну Ьеи С1у Туг ΗΪ3 Туг С1у Ьуз Рго РЬе А1а (Ну 465 470 475 480

- 102 008007

аЕд ССС дад Есс Еас дЕа сад сЕа аде аас ЕЕд аЕд асе аде аЕд Едд 1488 МеЕ Рго С1и Зег Туг Уа1 С1п Ьеи Зег Азп Ьеи МеЕ ТЬг Зег МеЕ Тгр 485 490 495 дса Есс ЕЕс аЕс сас даЕ ЕЕа дас ссЕ ааЕ Есд ддс аЕс аад дас Еса 1536 А1а Зег РЬе 11е Низ Азр Ьеи Азр Рго Азп Зег С1у 11е Ьуз Азр Зег 500 505 510 дсЕ дЕа сад Едд саа ссд Еас ддд аад даЕ сад ссд дЕЕ даЕ сЕа дЕд 1584 А1а Уа1 С1п Тгр С1п Рго Туг С1у Ьуз Азр С1п Рго Уа1 Азр Ьеи Уа1 515 520 525 ЕЕЕ даЕ дед ааЕ дЕс асд аде Еас аде Еас аЕд дад сса дас асд Едд 1632 РЬе Азр А1а Азп Уа1 ТЬг Зег Туг Зег Туг МеЕ С1и Рго Азр ТЬг Тгр 530 535 540 едд аад дад ддд аЕс дас ЕаЕ аЕс ааЕ Есс дЕд дсс аас дед Еас Едд 1680 Агд Ьуз С1и С1у 11е Азр Туг 11е Азп Зег Уа1 А1а Азп А1а Туг Тгр 545 550 555 560

еда Еаа 1686 Агд

<210> 39 <211> 561 <212> БЕЛОК <213> АзрегдШиз пидег

<400> 39

МеЕ Ьеи Ьуз Ьеи А1а Уа1 А1а Ьеи РЬе Зег Ьеи Ьеи А1а Уа1 С1у Азп 1 5 10 15 А1а А1а Рго ТЬг Ьуз Уа1 А1а Агд Зег ТЬг А1а Зег Рго ТЬг А1а Ьуз 20 25 30 Уа1 Агд Азп С1у ТЬг Туг Уа1 С1у Уа1 ТЬг Азп А1а Низ Туг С1п С1п 35 40 45 Азр РЬе РЬе Ьеи С1у МеЕ Рго Туг А1а С1п С1п Рго Ьеи С1у Азр Ьеи 50 55 60 Агд РЬе ТЬг Уа1 Рго С1п Зег Ьеи Азп С1и Зег Тгр Зег С1у С1и Агд 65 70 75 80 Азр А1а Ьуз 01 и Туг Зег Азп 11е Суз Уа1 С1у Туг С1у ТЬг Азр Зег 85 90 95 11е Тгр Туг Рго С1п Зег С1и А1а Суз Ьеи ТЬг Ьеи Азп Уа1 11е Агд 100 105 110 Азр Зег Зег А1а Азп 61и Азп Зег Ьуз Ьеи Рго Уа1 С1у Уа1 Тгр Не 115 120 125 Низ С1у С1у С1у РЬе РЬе С1и С1у Зег Зег А1а Азр С1п Агд Туг Азп 130 135 140

- 103 008007

МеЕ Зег А1а Не Уа1 А1а Азп Зег Туг Ьуз Не О1у Ьуз Рго РЬе 11е 145 150 155 160 А1а Ча1 Зег Ьеи Азп Туг Агд Ьеи Зег А1а Тгр О1у РЬе Ьеи Зег Зег 165 170 175 Зег С1п Ча1 Тгр С1у ТЬг С1у Азп ТЬг Азп Ьеи С1у Не Агд Азр С1п 180 185 190 Агд Ьеи А1а Ьеи Низ Тгр 11е Ьуз С1и Азп 11е А1а А1а РЬе О1у С1у 195 200 205 Азр Рго Азр Ьуз Не ТЬг Не Тгр 01у 01и Зег А1а С1у А1а МеЕ Зег 210 215 220 Ча1 С1у Туг Низ Ьеи А1а А1а Туг 31у 01у Агд Азр Азр С1у Ьеи РЬе 225 230 235 240 Агд С1у 01 у Не МеЕ О1и Зег С1у О1у ТЬг Не А1а А1а Зег Рго А1а 245 250 255 Азп Туг ТЬг С1у Туг С1п А1а Нйз Туг Азр С1и Ьеи А1а С1у О1п Уа1 260 265 270 С1у Суз Зег Азр Ча1 Ча1 Азр Зег Ьеи С1п Суз Ьеи Агд С1и Уа1 Рго 275 280 285 РЬе С1и Ьуз Ьеи Азп А1а А1а Ьеи Азп ТЬг ТЬг Зег С1у Азп Зег Азр 290 295 300 РЬе Азп РЬе О1у Рго Ча1 Не Азр С1у Азр 11е Не Агд Азр Тгр О1у 305 310 315 320 Зег Ьеи С1п Ьеи Азр Ьуз Низ 01и РЬе Уа1 Ьуз Ча1 Рго Не Ьеи А1а 325 330 335 С1у ТЬг Азп ТЬг Азр С1и С1у ТЬг А1а РЬе С1у Рго ТЬг С1у Не Азп 340 345 350 ТЬг ТЬг С1и С1и РЬе Туг А1а Туг Ьеи ТЬг Азр С1у 01и Зег С1у РЬе 355 360 365 С1п Ьеи Рго Рго ТЬг 11е А1а О1п С1и Не Ьеи С1п Ьеи Туг Рго Азр 370 375 380 Азр Рго А1а Ьеи С1у Не Рго Е1и РЬе Ьеи 01у Азр ТЬг Агд Уа1 Рго 385 390 395 400 Зег Ьуз С1у Туг О1п Тгр Агд Агд ТЬг Суз А1а Туг А1а С1у Азр Туг 405 410 415 Ча1 МеЕ Н1з А1а Азп Агд Агд Агд С1п Суз С1и А1а Тгр ТЬг О1и ТЬг 420 425 430 Зег ТЬг ТЬг А1а Туг Суз Туг Агд РЬе Азп МеЕ Агд А1а А1а Азр Ча1 435 440 445 Рго 11е Ьеи Зег 01у А1а ТЬг Н13 РЬе О1и С1и Уа1 А1а РЬе Ча1 РЬе 450 455 460 Азп Азп Не А1а С1у Ьеи 01у Туг Низ Туг С1у Ьуз Рго РЬе А1а С1у 465 470 475 480 МеЕ Рго С1и Зег Туг Уа1 С1п Ьеи Зег Азп Ьеи МеЕ ТЬг Зег МеЕ Тгр

- 104 008007

485 490 495 А1а Зег РЬе 11е Нхз Азр Ьеи Азр Рго Азп Зег С1у 11е Ьуз Азр Зег 500 505 510 А1а Уа1 ΘΙη Тгр ΘΙη Рго Туг С1у Ьуз Азр ΘΙη Рго Уа1 Азр Ьеи Уа1 515 520 525 РЬе Азр А1а Азп Уа1 ТЬг Зег Туг Зег Туг МеЕ С1и Рго Азр ТЬг Тгр 530 535 540 Агд Ьуз С1и С1у 11е Азр Туг 11е Азп Зег Уа1 А1а Азп А1а Туг Тгр 545 550 555 560

Агд