DE3853219T2

DE3853219T2 - Methode zur Entfernung von Serum-Amyloid-Protein.

Info

Publication number: DE3853219T2
Application number: DE3853219T
Authority: DE
Inventors: Fumiyasu Hirai; Nobutaka Tani
Original assignee: Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1987-11-20
Filing date: 1988-11-19
Publication date: 1995-06-29
Anticipated expiration: 2008-11-20
Also published as: EP0476721A3; EP0321703A1; DE3880647T2; DE3880647D1; EP0476721A2; DE3853219D1; EP0476721B1; US6037458A; EP0321703B1

Description

Dies ist eine Ausscheidungsanmeldung aus der europäischen Patentanmeldung 88 119 263.7 (0 321 703), in der ein bestimmtes Ver fahren zur Entfernung von Serum-Amyloid (nachstehend als "SA" bezeichnet)-Protein aus Körperflüssigkeit beansprucht wird.
In der vorliegenden Ausscheidungsanmeldung wird ein anderes Verfahren zur Entfernung von Serum-Amyloid-Protein aus Körperflüssigkeit beansprucht. Serum-Amyloid-A wird abgekürzt als "SAA" bezeichnet und Serum-Amyloid-P wird abgekürzt als "SAP" bezeichnet.
Es gibt eine Amyloidose genannte Krankheit, die von schweren Störungen begleitet wird, z.B. Insuffizienzen von Organen wie Herz und Niere, Beeinträchtigung des Reizleitungssystems, fortschreitende Dementia, zerebrovaskuläre Leiden, Nervenleiden usw.. Amyloidose wird durch eine Ablagerung von β-fibrillen-ähnlichem Amvloid in einem Blutgefäß, einem bestimmten Organ usw. verursacht. Es ist bekannt, daß es mehrere Arten von Amyloidose gibt, d.h. primäre Amyloidose, sekundäre Amyloidose, familiär auftretende Amyloidose und senile bzw. altersbedingte Amyloidose, und daß die Zusammensetzung von Proteinen, die Amyloidose verursachen, je nach der Art der Amyloidose verschieden ist.
Die sekundäre Amyloidose folgt Erkrankungen, wie z.B. rheumatoider Arthritis, juveniler rheumatoider Arthritis, suppurativen (eitrigen) Erkrankungen der Lunge und der Lungentuberkulose. Beispiele für die bevorzugte Lokalisierung der sekundären Amyloidose sind die Niere, die Schilddrüse, der Pankreas, die Leber, die Milz und dgl.
Bei der sekundären Amyloidose werden abgelagerte Amyloide gebildet aus Amyloid A (nachstehend als "AA" bezeichnet)- Protein, bei dem es sich um ein Protein mit einem Molekulargewicht von 8500 handelt und das aus 76 Aminosäuren besteht.
Es wird allmählich klar, daß in der Körperflüssigkeit eines Patienten ein Vorläufer existiert, der jedem abgelagerten Amyloid entspricht, das bei jedem Typ von Amyloidose abgelagert wird.
Es wird angenommen, daß das SAA-Protein, das eines der Apolipoproteine der Lipoproteine mit hoher Dichte ist (nachstehend als "HDL" bezeichnet), der Vorläufer ist, der dem AA-Protein entspricht, bei dem es sich um das bei der sekundären Amyloidose abgelagerte Amyloid handelt. Das SAA-Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 12000 und es wird angenommen, daß das Protein in Leberzellen gebildet wird, im Blut das Apolipoprotein von HDL bildet, durch den Körper zirkuliert und von dem HDL abgetrennt wird, das hydrolysiert werden soll, unter Bildung von AA-Protein, und daß dann das AA-Protein in den Geweben abgelagert wird. Es wird außerdem angenommen, daß SAA-Protein als ein Apolipoprotein von HDL&sub3; vorliegt, das eine hohe Dichte aufweist, verglichen mit einem anderen HDL, und das ein Molekulargewicht von 1,75 x 10&sup5; hat.
In den Sechziger Jahren wurde durch Untersuchung mit dem Elektronenmikroskop nachgewiesen, daß es zwei Arten von Amyloiden gibt. Das heißt, bei der einen Art handelt es sich um ein Amyloid, das eine den Amyloiden eigene faserförmige Gestalt hat (Amyloid-Fibrillen), und bei dem anderen handelt es sich um ein pentagonales stabförmiges Amyloid (P-Komponente, AP).
Bei jeder Art von Amyloidose, mit Ausnahme in der Macula des Gehirns bei der Alzheimer'schen Krankheit oder bei Presbyophrenie Dementia senilis, kann eine Substanz, die als Amyloid-P-Prot ein (im folgenden als "AP"-Protein bezeichnet) bezeichnet wird, in einem Zustand aufgefundeh werden, in dem sie mit einem β- fibrillen-ähnlichen Protein verknüpft ist.
Über die Struktur von AP-Protein wird berichtet, daß die Einheit als ein aus fünf Einheiten gebildetes Fünfeck ausgebildet ist, wobei die Untereinheit ein Molekulargewicht von 23 000 bis 25 000 aufweist und wobei die Struktur des AP-Proteins durch ein Paar der Einheit gebildet wird, das eine parallele Form ausbildet.
Durch verschiedene Verfahren wird bestätigt daß das AP- Protein dasselbe ist wie SAP-Protein, das ein normales Serum- Protein ist. Demgemäß wird angenommen, daß AP-Protein SAP-Protein ist, das während der Zirkulation (Durchblutung) im Gewebe abgelagert wird, d.h., SAP-Protein ist ein dem AP-Protein entsprechender Vorläufer, obwohl die Funktion von AP-Protein im Körper und die Beziehung des Proteins zu anderen Amyloiden noch nicht vollständig geklärt ist. Es wird jedoch berichtet, daß AP-Protein ein unentbehrliches Protein für eine Amyloid-Fibrille ist. Es wird daher angenommen, daß die Ablagerung von SAP-Protein bei dem Entstehen von Amyloidose beteiligt ist.
Therapien für Amyloidose sind intensiv untersucht worden, da, wie zuvor beschrieben, Amyloidose eine schwere Erkrankung mit einer hohen Sterblichkeitsrate ist. Es wurde jedoch bislang keine wirksame Therapie, insbesondere keine wirksame Arzneimittelbehandlung, gefunden.
Andererseits wurde zur Behandlung von Amyloidose die Reinigung des Blutes durch extrakorporale Kreislaufbehandlung versucht, insbesondere durch Plasmapherese, und es gibt einige Berichte darüber, daß durch den Austausch von Blutplasma, das die zuvor erwähnten Vorläufer enthält, mit einer großen Menge normalen Plasmas, die Symptome abnehmen und das Fortschreiten der Schädigung aufgehalten wird.
Blutreinigung, insbesondere die Wiederzuführung von Blut nach Waschung in physiologischer Kochsalzlösung unter Ausscheiden des Blutplasmas, ist derzeit die wirksamste Therapie. Die zuvor genannte Blutreinigung hat jedoch den Nachteil, daß teures und wertvolles normales Plasma oder daß Plasma-Präparationen notwendig sind und daß beim Ausführen der Blutreinigung außer den Vorläufern, die im Plasma eines Patienten enthalten sind, gleichzeitig auch nützliche Komponenten entfernt werden. Es besteht daher ein starkes Bedürfnis, ein Verfahren zur selektiveren Entfernung von Vorläuf ern wie SAA-Protein und SAP-Protein zu entwickeln.
Aus EP-A-0 232 575 sind Adsorbentien zur Entfernung von Lipoproteinen mit einem Molekulargewicht in der Größenordnung von Millionen aus einer sie enthaltenden Flüssigkeit, insbesondere aus Körperflüssigkeit, bekannt, Serum-Amyloid-Proteine haben jedoch ein Molekulargewicht von etwa 25 000 und völlig andere Eigenschaften.
Ein Ziel der vorliegenden Erfindung ist es, die obengenannten Probleme zu lösen und ein preisgünstiges Verfahren zur selektiven Entfernung von SA-Proteinen bereitzustellen. Ziel der Erfindung ist insbesondere die Verwendung eines preisgünstigen SAA-Protein-Adsorbens, das SAA-Proteine selektiv entfernen kann, ohne HDL zu entfernen, sowie eines preisgünstigen SAP-Protein-Adsorbens, das SAP- Proteine selektiv entfernen kann.
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Entfernung von Serum-Amyloid-Protein aus Körperflüssigkeit, das die folgenden Stufen umfaßt:
1) das Kombinieren von Körperflüssigkeit, die Serum- Amyloid-Protein enthält, mit einem Adsorbens für ein Serum-Amyloid-Protein, das aufweist einen wasserunlöslichen Träger und eine an den genannten Träger gebundene Gruppe der Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder Ethylgruppe und R² für eine Gruppe stehen, die der Bedingung genügt, daß der Wert von log P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P den Verteilungskoeffizienten einer Verbindung der Formel R²H, in einem Wasser-Octanol-System darstellt, wobei -NR¹R² nicht von Anilin oder einem Anilinderivat abgeleitet ist; 2) das Hindurchlaufenlassen der Körperflüssigkeit durch einen Filter, den das Adsorbens nicht passieren kann; und 3) die Rückgewinnung (Abtrennung) der von Serum-Amyloid- Protein im wesentlichen freien Körperflüssigkeit.
Bei dem erfindungsgemäß entfernten Serum-Amyloid-Protein handelt es sich vorzugsweise um Serum-Amyloid-A-Protein und Serum-Amyloid-P-Protein.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist das verwendete Adsorbens eine wasserunlösliche Matrix, die auf mindestens einem Teil ihrer Oberfläche eine Gruppe der Formel -NR¹R² aufweist, worin R¹ und R² wie oben definiert sind.
Gemäß einem zweiten Aspekt bezieht sich die vorliegende Erfindung auf die Verwendung eines wie oben definierten Adsorbens zur Entfernung von Serum-Amyloid-Protein aus Körperflüssigkeit.
Das erfindungsgemäß verwendete Adsorbens ist besonders geeignet für die Entfernung oder Abtrennung (Rückgewinnung) von Serum-Amyloid-A-Protein und Serum-Amyloid-P-Protein.
Fig. 1 ist eine graphische Darstellung, die die Beziehung zwischen der Strömungsgeschwindigkeit und dem Druckabfall Δ P, die in dem später beschriebenen Bezugsbeispiel erhalten wird, zeigt.
In der vorliegenden Erfindung steht der Ausdruck "Körperflüssigkeit" für Blut, Plasma, Serum, Bauchwasser (Ascites), Lymphflüssigkeit, Synovia in Gelenkhöhlen, Fraktionen davon oder jede beliebige flüssige Bestandteile, die in einem lebenden Körper entstehen.
Der erfindungsgemäß verwendete wasserunlösliche Träger kann ein anorganischer Träger, ein organischer Träger, der aus einer synthetischen hochmolekularen Verbindung oder einem Polysaccharid besteht, und ein komplexer Träger, der aus einem organischen Träger und/oder einem anorganischen Träger besteht, seinl und zwar vom Standpunkt der Umgebung der SAA-Proteine aus gesehen, die in Blut vorhanden sind. Es ist bevorzugt, daß der Träger hydrophile Eigenschaften aufweist und außer für die gewünschten Stoffe nur geringe Adsorption, sog. nichtspezifische Adsorption, gegenüber Stoffen aufweist. Noch bevorzugter ist es, daß eine funktionelle Gruppe vorhanden ist, die auf dem Träger immobilisiert werden oder die auf einfache Weise aktiviert werden kann.
Typische Beispiele für die zuvor genannten funktionellen Gruppen sind eine Amino-Gruppe, eine Carboxyl-Gruppe, eine Hydroxyl-Gruppe, eine Thiol-Gruppe, eine Aldehyd-Gruppe, eine Halogen-Gruppe wie Chlor, eine Säureanhvdrid-Gruppe, eine Amid- Gruppe, eine Ester-Gruppe, eine Epoxy-Gruppe, eine Silanol-Gruppe und eine Succinylimid-Gruppe.
In dem zuvor genannten Fall sind typische Vertreter von wasserunlöslichen Trägern, die in der vorliegenden Erfindung bevorzugt verwendet werden, beispielsweise anorganische Träger wie Glasbeads und Silica-Gel, organische Träger bestehend aus einer synthetischen hochpolymeren Verbindung wie quervernetztem Polyvinylalkohol, quervernetztem Polyacrylat oder quervernetztem Polyamid oder bestehend aus einem Polysaccharid wie quervernetzter Zellulose, kristalliner Zellulose, quervernetzter Agarose, quervernetztem Dextran, quervernetztem Chitin oder quervernetztem Chitosan, organisch-anorganisch komplexe Träger, wobei die Oberfläche des anorganischen Trägers, wie Glasbeads, mit einem Polysaccharid oder einer hochmolekularen Verbindung beschichtet ist, und organisch-organisch komplexe Träger, wobei die Oberfläche des organischen Trägers, der aus einer synthetischen hochmolekularen Verbindung besteht, mit Polysacchariden beschichtet sind.
Von diesen Trägern sind wasserunlösliche Träger, die aus einer Verbindung bestehen, die eine Hydroxy- Gruppe enthält, aus der Sicht bevorzugt, daß sie eine gute Biokompatibilität und außer für die gewünschten Stoffe nur geringe Adsorption für andere Stoffe, sog. nichtspezifische Adsorption, aufweisen.
Obwohl der erfindungsgemäß verwendete wasserunlösliche Träger aus der Sicht der Umgebung der SAP-Proteine, die in der Körperflüssigkeit vorhanden sind, ein anorganischer Träger oder ein organischer Träger sein kann, ist es bevorzugt, daß der Träger geringe nichtspezifische Adsorption aufweist. Ein hydrophiler wasserunlöslicher Träger ist mehr bevorzugt als ein hydrophober, da ein hydrophiler Träger geringere nichtspezifische Adsorption aufweist, und ein wasserunlöslicher Träger, der aus einer Verbindung mit einer Hydroxy-Gruppe in ihrem Molekül besteht, ist noch mehr bevorzugt.
In dem zuvor genannten Fall sind typische Beispiele für wasserunlösliche Träger, die in der vorliegenden Erfindung verwendet werden, weiche Träger wie Agarose, Dextran und Polyacrylamid, anorganische Träger wie poröses Glas und poröses Silica-Gel, poröse polymere harte Gele, die aus synthetischen hochmolekularen Verbindungen hergestellt sind wie Polymethylmethacrylat, Polyvinylalkohol und Styrol- Divinylbenzol-Copolymer und/oder einer natürlichen hochmolekularen Verbindung wie Zellulose.
Bezüglich der Entfernung oder Wiedergewinnung von SAA- Proteinen kann das erfindungsgemäß verwendete Sorbentmittel zum Entfernen von SAA-Proteinen aus einer Flüssigkeit verwendet werden, die verschiedene SAA-Proteine enthält, z.B. Blut, Blut- Serum, Blutplasma, verdünntes Blut, verdünntes Blut-Serum, verdünntes Blutplasma und eine Flüssigkeit wie die zuvor genannte Flüssigkeit, die einer Vorbehandlung wie der Entfernung von Blutzellen oder der Entfernung von Serum-Proteinen unterzogen wurden. Das Sorbentmittel kann auch als ein Sorbentmittel für extrakorporale Kreislaufbehandlung bei Patienten mit sekundärer Amyloidose verwendet werden. Wenn beispielsweise das erfindungsgemäß verwendete Sorbentmittel als ein Sorbentmittel für die extrakorporale Behandlung des Blutkreislaufes verwendet wird, ist das Sorbentmittel vorzugsweise ein Sorbentmittel, das eine ausreichende mechanische Festigkeit aufweist, um eine Verdichtung zu verhindern. D.h., das Sorbentmittel ist vorzugsweise ein hartes Sorbentmittel. Darüberhinaus ist es, obwohl die Mikrostruktur des erfindungsgemäß verwendeten Sorbentmittels porös oder nichtporös sein kann, bevorzugt, daß das Sorbentmittel einen großen spezifischen Oberflächenbereich aufweist, d.h. daß es eine poröse Struktur aufweist, insbesondere eine Struktur, die in allen Teilen gleichförmige Poren aufweist.
Wie in den folgenden Bezugsbeispielen angegeben ist, bedeutet in der vorliegenden Erfindung bedeutet der Ausdruck "hart", daß die Beziehung zwischen dem Druckabfall und der Strömungsgeschwindigkeit, die bestimmt wird, indem man ein wäßriges Fiuid durch eine zylindrische Säule leitet, die gleichförmig mit dem Sorbentniittel gefüllt ist, eine lineare Beziehung bleibt, bis der Druckabfall auf 0,03 MPa (0,3 kg/cm²) steigt. Der Ausdruck "porös" bedeutet in der vorliegenden Erfindung, daß das Porenvolumen nicht geringer ist als das scheinbare Volumen des Sorbentmittels und daß der spezifische Oberflächenbereich nicht weniger als 3 m²/g beträgt. Sorbentmittel, die den zuvor genannten Bedingungen nicht genügen, weisen eine zu geringe Adsorptionskapazität auf, um für die praktische Anwendung geeignet zu sein. Beispiele für Träger, die für das zuvor genannte erfindungsgemäße Sorbentmittel verwendet werden, sind z.B. poröse Vinylmaterialien wie poröses Zellulose-Gel, poröses Chitosan-Gel, Styrol-Divinylbenzol-Copolymer, quervernetzte Acrylate und quervernetzter Polyvinylalkohol; anorganische poröse Materialien, die aus Glas, Siliziumdioxid und Aluminiumoxid hergestellt sind.
Darüberhinaus ist es in dem Fall, daß das erfindungsgemäß verwendete Sorbentmittel eine poröse Struktur aufweist, erforderlich, daß die Poren eine Größe aufweisen, die ausreicht, daß SAA-Proteine mit einem Molekulargewicht von 12 000 leicht in die Poren eindringen können. Es ist daher wichtig, daß das Molekulargewicht der Ausschlußgrenze, die mit einem kugelförmigen Protein gemessen wird, nicht weniger als 12 000 beträgt. Sorbentmittel, die ein Molekulargewicht einer Ausschlußgrenze von weniger als 12 000 aufweisen, weisen gewöhnlich eine zu geringe Adsorptionskapazität auf und können für die praktische Anwendung nicht geeignet sein. Darüberhinaus ist es bevorzugt, daß das Sorbentmittel ein Molekulargewicht mit einer Ausschlußgrenze von nicht weniger als 3 x 10&sup5; aufweist, da SAA-Proteine leicht in solch ein Sorbentmittel eindiffundieren.
Andererseits ist ein Sorbentmittel mit einem Molekulargewicht mit einer Ausschlußgrenze von größer als 1 x 10&sup8; gewöhnlich für eine praktische Anwendung nicht geeignet, und zwar aus dem Grund, daß seine mechanische Festigkeit zu gering oder daß sein Feststoffgehalt zu niedrig ist, um eine ausreichende Adsorptionskapazität zu erreichen. Die Ausschlußgrenze des Molekulargewichts beträgt daher vorzugsweise nicht mehr als 1 x 10&sup8; bevorzugter nicht mehr als 5 x 10&sup7;.
Der Ausdruck "das Molekulargewicht einer Ausschlußgrenze" bedeutet beispielsweise, wie in der Literatur, beispielsweise bei "Jikken Kosoku Ekitai chromatography (Experimentelle Hochleistungs-Flüssigkeits-Chromatographie)" von Hiroyuki Hatano und Toshihiko Hanai, veröffentlicht von Kabushiki Kaisha Kagaku Dojin, beschrieben, das minimale Molekulargewicht eines Moleküls, bei dem es bei einer Gel-Permeations-Chromatographie eine Pore nicht mehr durchdringen kann, d.h. bei dem es ausgeschlossen wird. Daher ist ein Molekulargewicht mit einer Ausschlußgrenze von 1,2 x 10&sup4; bis 1 x 10&sup8; bevorzugt.
Auch was das Entfernen und Wiedergewinnen von SAP-Proteinen betrifft, weisen erfindungsgemäß verwendete wasserunlösliche Träger vorzugsweise poröse Strukturen auf, bevorzugter weisen sie kontinuierlich kleine Poren mit einem großen Durchmesser auf. D.h., es ist notwendig, daß SAP-Proteine leicht in den Träger eindringen, um wirksam SAP-Proteine zu adsorbieren, die aus zehn Untereinheiten gebildet sind und ein Molekulargewicht von 230 000 bis 250 000 aufweisen.
Als ein Standard für Porendurchmesser in porösen Trägern wird üblicherweise ein Molekulargewicht mit einer Ausschlußgrenze verwendet, ähnlich dem zuvor beschriebenen.
Daher weisen die hier verwendeten wasserunlöslichen porösen Träger vorzugsweise ein Molekulargewicht mit einer Ausschlußgrenzen von nicht weniger als 230 000 auf, die mit einem kugelförmigen Protein gemessen wurde. Darüberhinaus beträgt das Molekulargewicht der Ausschlußgrenze vorzugsweise nicht mehr als 1 x 10&sup8;, und bevorzugter nicht mehr als 5 x 10&sup7;, und zwar aus demselben Grunde wie zuvor erläutert.
Bezüglich einer porösen Struktur eines wasserunlöslichen Trägers ist eine Struktur, die gleichförmig in jedem Teil bzw. Bereich des Materials Poren aufweist, bevorzugter als eine Struktur, die nur auf der Oberfläche des Materials Poren aufweist. Und es ist bevorzugt. daß die Porosität des erfindungsgemäß verwendeten Materials nicht weniger als 20 % bezüglich der Adsorptionskapazität beträgt.
Wenn das Sorbentmittel, das in der vorliegenden Erfindung verwendet wird, zur extrakorporalen Behandlung des Blutkreislaufes übernommen wird, ist es notwendig, eine Flüssigkeit mit einer hohen Viskosität, wie Blut oder Plasma, mit einer hohen Strömungsgeschwindigkeit fließen zu lassen. Es ist daher wünschenswert, einen harten, wasserunlöslichen Träger zu verwenden, der eine ausreichende mechanische Festigkeit aufweist, um die Verdichtung der Sorbentmittel in einer Säule zu verhindern.
D.h., der Ausdruck "hart" bedeutet, wie im folgenden Bezugsbeispiel gezeigt, ähnlich der vorherigen Beschreibung, daß die Beziehung zwischen Druckabfall und Strömungsgeschwindigkeit, die dadurch bestimmt wird, daß man ein wäßriges Fluid durch eine zvlindrische Säule laufen läßt die gleichförmig mit dem wasserunlöslichen Träger gefüllt ist, eine lineare Beziehung beibehält, bis der Druckabfall auf mindestens 0,03 MPa (0,3 kg/cm²) erhöht wird.
Die Form eines wasserunlöslichen Trägers kann beliebig ausgewählt werden aus Formen wie Teilchen, Kugeln, Fasern, Plättchen und Hohlfasern. Wenn ein wasserunlöslicher Träger in Teilchenform verwendet wird, beträgt die Teilchengröße vorzugsweise von 1 bis 5 000 um. Wenn die Teilchengröße weniger als 1 um beträgt, wird der Druckabfall groß, und wenn die Teilchengröße über 5 000 um beträgt, wird die Kapazität gering.
Das erfindungsgemäß verwendete Adsorbens umfaßt ein Adsorbens für SAA-Proteine, das einen wasserunlöslichen Träger und eine Gruppe der Formel -NR¹R² aufweist, worin R¹ steht für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder Ethylgruppe und R² steht für eine Atomgruppe, die der Bedingung genügt, daß der Wert von 1og P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindung der Formel R²H in einem Wasser-Octanol-System ist, wobei die genannte Gruppe an den genannten Träger gebunden ist. Dieses Adsorbens ist eine wasserunlösliche Matrix, die auf mindestens einem Teil ihrer Oberfläche eine Gruppe der Formel -NR¹R² aufweist, worin R¹ steht für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder Ethylgruppe und R² steht für eine Atomgruppe, die der Bedingung genügt, daß der Wert von log P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindung der Formel R²H in einem Wasser- Octanol-System darstellt.
Der Logarithmus des Verteilungskoeffizienten in einem Wasser-Octanol-System, d.h. log P, ist ein hydrophober Parameter einer Verbindung. Der Verteilungskoeffizient P wird nach dem folgenden typischen Verfahren erhalten:
zuerst wird eine Verbindung in einem Octanol (oder in Wasser) gelöst und es wird ein gleicher Volumenanteil Wasser (oder eines Octanols) zugegeben. Nach 30-minütigem Schütteln in einem Griffin-Kolben-Schüttler (hergestellt von der Firma Griff in und Georg Ltd.) wird 1 bis 2 h lang bei 2000 UpM zentrifugiert. Dann werden die Konzentrationen der Verbindung sowohl in der Octanolschicht als auch in der Wasserschicht nach verschiedenen Verfahren bestimmt, beispielsweise nach einem spektroskopischen Verfahren und durch GLC, und der Wert von P wird nach der folgenden Formel errechnet:
P = Coct/Cw
worin bedeuten:
Coct die Konzentration der Verbindung in der Octanolschicht und
Cw die Konzentration der Verbindung in der Wasserschicht.
Bis heute haben viele Forscher den log P von verschiedenen Verbindungen bestimmt und die gefundenen Werte wurden von c. Hansch et al. tabellarisch angeordnet ["PARTITION COEFFICIENTS AND THEIR USES", Chemical Reviews, 71, 525 (1971)). Was die Verbindungen angeht, deren gefundene Werte unbekannt sind, können die errechneten Werte, bei denen eine hydrophobe Fragment-Konstante f verwendet wird (dieser Wert wird nachstehend als "Σf " bezeichnet), wie in "THE HYDROPHOBIC FRAGMENTAL CONSTANT" von R.F. Rekker (E1sevier Sci. Pub. Com., Amsterdam, 1977) beschrieben, als gute Richtlinie dienen.
Eine hydrophobe Fragment-Konstante gibt die Hydrophobizität verschiedener Fragmente an, die durch eine statistische Anordnung vieler gefundener Werte für log P bestimmt werden und der Gesamtwert von f jedes Fragments, das ein Bestandteil einer Verbindung ist, entspricht nahezu dem log P.
Die hydrophoben Eigenschaften der Atomgruppe R² der Gruppe -NR¹R², die in dem erfindungsgemäßen Adsorbens vorliegt, spielt eine wichtige Rolle bei der Adsorption von SAA-Proteinen. Für den Fall, daß der Wert von log P für R²H weniger als 0 beträgt, ist die hydrophobe Wechselwirkung mit SAA-Proteinen so gering, daß das Adsorptionsvermögen für SAA-Proteine gering ist. Dagegen besteht für den Fall, daß der Wert von log P mehr als 3,2 beträgt, ein Problem in bezug auf die Selektivität, weil nicht nur SAA-Proteine, sondern auch HDL und beliebige andere Proteine adsorbiert werden. Das heißt, zur Erzielung eines guten Adsorptionsvermögens und einer guten Selektivität beträgt der Wert für log P einer Verbindung der Formel R²H, worin R² eine Atomgruppe in dem erfindungsgemäßen Adsorbens darstellt, 0 bis 3,2.
Außerdem kann, was die Gruppe -NR¹R² angeht, die an mindestens einem Teil der Oberfläche der wasserunlöslichen Matrix erfindungsgemäß vorliegt, irgendeine beliebige Gruppe -NR¹-R² ohne jede Beschränkung verwendet werden, so lange die Gruppe der Bedingung genügt, daß der Wert von log P der Verbindung R²H, worin R² für eine Atomgruppe in -NR¹R² steht, 0 bis 3,2 beträgt.
Darüber hinaus können, was die Gruppe -NR¹R² angeht, die an dem erfindungsgemäßen Adsorbens vorliegt, eine oder mehr Arten derselben verwendet werden.
Außerdem ist das erfindungsgemäße Adsorbens, das einen wasserunlöslichen Träger und eine an den Träger gebundene Gruppe -NR¹R² aufweist, durch das nachstehend beschriebene Herstellungsverfahren charakterisiert. Beide sind auf die vorliegende Erfindung anwendbar:
1) das Adsorbens, das erhalten wird durch Einführen der Gruppe -NR¹R² in einen wasserunlöslichen Träger;
2) das Adsorbens, das erhalten wird durch Einführen der Gruppe -NR¹R² in eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung und anschließende Durchführung einer Behandlung, beispielsweise einer Vernetzung, wobei man eine wasserunlösliche Matrix erhält.
Als wasserunlöslicher Träger, der in dem obengenannten Verfahren (1) verwendet wird, können die oben angegebenen wasserunlöslichen Träger verwendet werden.
Typische Beispiele für die zur Herstellung des Adsorbens in dem obengenannten Verfahren (2) verwendete wasserlösliche hochmolekulare Verbindung sind Polysaccharide, wie Dextran und Stärke, eine hochmolekulare Verbindung wie Polyvinylalkohol und ein Verseifungsprodukt eines Ethylen/Vinylacetat-Copolymers mit einem geringen Gehalt an Ethylen.
Während des Verfahrens zur Herstellung beider Adsorbentien nach den obengenannten Verfahren (1) und (2) wird die Gruppe -NR¹R² in einen wasserunlöslichen Träger oder in eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung eingeführt. Erfindungsgemäß ist es bevorzugt, daß die Gruppe -NR¹R² an einen wasserunlöslichen Träger oder eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung über eine kovalente Bindung gebunden ist wegen der geringen Möglichkeit der Freisetzung von Liganden.
Das in der Gruppe -NR¹R² in dem erfindungsgemäßen Agens vorliegende Stickstoffatom kann entweder von einem wasserunlöslichen Träger, einer wasserlöslichen hochmolekularen Verbindung oder einem Liganden stammen.
Das heißt mit anderen Worten, es gibt einige Verfahren zur Einführung einer -NR¹R²-Gruppe entweder in einen wasserunlöslichen Träger oder in eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung; eines besteht darin, daß die Gruppe -NR¹R² eine Gruppe ist, die von einer Verbindung der Formel HNR¹R² abgeleitet ist, worin R¹ und R² wie oben definiert sind, und an einen wasserunlöslichen Träger oder an eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung gebunden wird durch Umsetzung der Verbindung HNR¹R² mit einem wasserunlöslichen Träger oder einer wasserlöslichen hochmolekularen Verbindung, um das Stickstoffatom der obengenannten Verbindung mit dem wasserunlöslichen Träger oder der wasserlöslichen hochmolekularen Verbindung zu kombinieren; und ein anderes besteht darin, daß die Gruppe -NR¹R² in einen wasserunlöslichen Träger oder in eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung eingeführt wird durch Umsetzung eines wasserunlöslichen Trägers oder einer wasserlöslichen hochmolekularen Verbindung mit einer Gruppe der Formel - NHR¹, worin R¹ wie oben definiert ist, mit einer Verbindung der Formel R²X, worin R² wie oben definiert ist und X eine funktionelle Gruppe darstellt, die mit einer Aminogruppe oder einem Teil der funktionellen Gruppe reagieren kann. Beide sind erfindungsgemäß verfügbar.
Der oben verwendete Ausdruck "wasserunlösliche Träger mit der Gruppe -NHR¹" steht für einen wasserunlöslichen Träger, der besteht aus einem Material, das ursprünglich eine -NHR¹-Gruppe aufweist, wie Chitin und Chitosan, oder einen wasserunlöslichen Träger, der hergestellt worden ist durch Einführung der Gruppe -NHR¹ in einen wasserunlöslichen Träger, der ursprünglich keine Aminogruppe aufwies, durch Aktivieren des Trägers mit Bromcyan, Epichlorhydrin, 1,4- Butandioldiglycidyläther und dgl. und anschließende Umsetzung des Trägers mit der Verbindung entweder der Formel H&sub2;NR¹, worin R¹ wie oben definiert ist, oder der Formel HNR¹R³, worin R¹ wie oben definiert ist und R³ für eine Atomgruppe steht, die eine funktionelle Gruppe aufweist, die sich an einen Träger binden kann.
Beispiele für die Verbindung der Formel HNR¹R² sind Monoalkylamine, wie n-Propylamin, n-Butylamin und n-Pentylamin, Dialkylamine und eine Mischung davon.
Für den Fall, daß die Gruppe -NR¹R² an einen wasserunlöslichen Träger oder an eine wasserlösliche hochmolekulare Verbindung gebunden wird durch Umsetzung eines wasserunlöslichen Trägers oder einer wasserlöslichen hochmolekularen Verbindung mit einer Verbindung R²X sind Beispiele für die Verbindung R²X, Carbonsäuren, wie n-Butansäure, n- Pentansäure, Benzoesäure und Phthalsäure.
Außerdem ist ein SAA-Protein-Adscbens, das umfaßt einen wasserunlöslichen Träger und eine Gruppe der Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder Ethylgruppe und R² für eine Atomgruppe stehen, die der Bedingung genügt, daß der Wert von log P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindung der Formel R²H in einem Wasser-Octanol-System ist, wobei diese Gruppe an den genannten Träger gebunden ist, für die Entfernung oder Abtrennung (Rückgewinnung) von SAA-Proteinen besonders geeignet.
Die Gestalt des erfindungsgemäßen Adsorbens kann aus beliebigen Gestalten ausgewählt werden, beispielsweise einem Teilchen, einer Faser, einer Folie und einer Hohlfaser. Die Mikrostruktur des Adsorbens kann porös oder nicht-porös sein. Das erfindungsgemäße Adsorbens hat vorzugsweise jedoch eine große spezifische Oberfläche, d.h. es weist eine poröse Struktur auf, um ein hohes Adsorptionsvermögen pro Einheit zu erzielen.
Es gibt verschiedene Verfahren zum Entfernen von SA- Proteinen, insbesondere SAA-Proteinen und SAP-Proteinen aus Körperflüssigkeit, und jedes Verfahren kann verwendet werden.
Ein Verfahren zum Entfernen eines Serum-Amyloid-Proteins, das das Leiten von Körperflüssigkeit, die ein Serum-Amyloid- Protein enthält, durch eine Entfernungsvorrichtung umfaßt, wobei diese Vorrichtung einen Behälter umfaßt, der einen Flüssigkeitseinlaß und einen Flüssigkeitsauslaß, mindestens einen Filter, durch den eine Flüssigkeit und in der Flüssigkeit enthaltene Komponenten hindurchgelien können, während das Sorbentmittel der vorliegenden Erfindung an der Seite des Flüssigkeitsauslaßes nicht hindurchgehen kann, aufweist, und das Sorbentmittel in diesen Behälter gepackt ist, ist bevorzugt, weil dieses Verfahren bequem ist.
Gemäß der vorliegenden Erfindung können SA-Proteine, insbesondere SAA-Proteine und SAP-Proteine selektiv aus Körperflüssigkeit entfernt werden, ohne die HDL (Lipoproteine hoher Dichte) stark herabzusetzen. Außerdem kann das Sorbentmittel zu einem niedrigen Preis bereitgestellt werden.
Die vorliegende Erfindung wird durch das folgende Bezugsbeispiel, die Herstellungsbeispiele, Beispiele und Vergleichsbeispiele, in denen alle Prozentangaben Gew.% bedeuten, wenn nicht anders angegeben, näher beschrieben und erläutert.

Bezugsbeispiel

Es wurde eine Beziehung zwischen der Strömungsgeschwindigkeit und dem Druckabfall Δ P bestimmt, indem Wasser mittels einer peristaltischen Pumpe durch zylindrische Glassäulen geleitet wurde, die an beiden Enden mit Filtern ausgestattet waren, die eine Porengröße von 15 um (innerer Durchmesser: 9 mm, Säulenlänge: 150 mm) aufwiesen, die mit einem Agarose-Gel (Biogel A5m, hergestellt von Biorado Co., Teilchengröße 0,30 bis 0,15 mm (50 bis 100 Mesh)), einem polymeren Hart-Gel (Toyopearl HW 65, hergestellt bei TOSOH CO., LTD., Teilchengröße: 50 bis 100 um) bzw. einem porösen Zellulose-Gel (Cellulofine GC 700, hergestellt bei Chisso Corporation, Teilchengröße: 45 bis 105 um) gepackt waren. Die Ergebnisse sind in Fig. 1 gezeigt.
Wie in Fig. 1 gezeigt ist, ist die Steigerung der Strömungsgeschwindigkeit nahezu proportional zu derjenigen des Druckabfalls im Falle von Hart-Gelen, z.B. Toyopearl und Cellulofine, wogegen im Falle von Weich-Gelen, d.h. dem Agarose-Gel, Verfestigung stattfindet und die Strömungsgeschwindigkeit auch nicht ansteigt, wenn der Druckabfall ansteigt.

Herstellungsbeispiel 1

Zu 100 ul eines porösen Zellulose-Gels (erhältlich unter dem Handelsnamen "CK-Gel A3", hergestellt von Chisso Corporation, Ausschlußgrenze für kugelförmige Proteine: 5 x 10&sup7;, Teilchengröße: 63 bis 125 um) wurden 100 ml Wasser, 53 ml 2N wäßrige Natriumhydroxidlösung und 18 ml Epichlorhydrin gegeben, und die Nischung wurde 2 Stunden lang bei 40 ºC gerührt. Nachdem die Reaktion beendet war, wurde das Gel von dem Reaktionsgemisch abfiltriert und mit Wasser gewaschen, wobei ein epoxydiertes CK-Gel A3 erhalten wurde.
Es wurde eine Suspension aus 40 ml CK-Gel A3 in Heptan mit einem Gesamtvolumen von 70 ml hergestellt. Zu der Suspension wurden 10 ml 20 % NaOH und 40 Tropfen (2,0 ml) des nichtionischen Surfactants TWEEN 20 (ein handelsübliches Polyoxyethylensorbitmonolaurat, hergestellt von Bio-Rad Laboratories) gegeben, und das Gemisch wurde 30 Minuten lang bei 40 ºC geschüttelt. Dann wurden 10 ml Epichlorhydrin zugegeben und das Gemisch 6 Stunden lang bei 40 ºC geschüttelt. Nachdem die Reaktion beendet war, wurde das Gel von dem Reaktionsgemisch abfiltriert und zunächst mit Ethanol und dann mit Wasser gewaschen, wobei ein epoxydiertes Gel erhalten wurde.

Beispiel 1

Nachdem 8 ml Wasser und 120 mg Anilin zu 10 ml des erhaltenen epoxydierten Gels zugegeben worden waren, wurde die Mischung gründlich durchgemischt und die Mischung wurde 6 h lang bei 50ºC reagieren gelassen, während sie stehen gelassen wurde. Nachdem die Reaktion beendet war, wurde das Gel aus der Reaktionsmischung abfiltriert und mit Wasser gewaschen, wobei man ein Gel mit immobilisiertem Anilin erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für die Phenylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² für die Phenylgruppe steht, ist in der Tabelle 1 angegeben.
0,4 ml des Gels mit dem immobilisierten Anilin wurden in ein Reagensglas gegeben, dem 2,4 ml Human-Serum, das SAA- Protein enthielt, zugesetzt wurden. Nach 2-stündigem Schütteln der Mischung bei 37ºC wurden die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin in der überstehenden Flüssigkeit bestimmt.

Messung der Konzentration an SAA-Protein

Die Konzentration an SAA-Protein in der überstehenden Flüssigkeit wird bestimmt nach dem Enzym-gebundenen Immunosorbens-Assay (ELISA-Verfahren). Dabei wird, kurz zusammengefaßt, ein verdünnter Antikörper gegenüber SAA (erhältlich von der Firma Hoechst Corporation) auf eine Platte aufgetropft und der Antikörper wird an der Platte fixiert, indem man die Platte 12 h lang bei 4ºC stehen läßt.
Eine verdünnte Probe und ein Standardserum werden jeweils auf Platten aufgetropft und es wird eine Antigen-Antikörper-Reaktion durchgeführt, indem man die Platten 3 h lang bei Raumtemperatur stehen läßt. Dann wird ein an Peroxidase gebundener Anti-SAA-Antikörper den Platten zugesetzt, um 3 h lang eine Antigen-Antikörper-Reaktion bei Raumtemperatur durchzuführen. Nach dem Waschen der Platte wird die Enzymreaktion durchgeführt und es wird die Extinktion bei einer Wellenlänge von 492 um unter Verwendung eines Chromatoscanners ("CS-930", hergestellt von der Firma Shimatsu Corporation) bestimmt. Die Konzentration an SAA- Protein in der Probe wird gefunden aus den Ergebnissen der Messungen in bezug auf die Probe und das Standard-Serum, wobei der Wert der Konzentration an SAA in dem Standard- Serum als 1 angenommen wird.
Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Beispiel 2

Zu 10 ml des im Herstellungsbeispiel 1 erhaltenen epoxidierten Gels wurden 10 ml Wasser und 57 mg Hexamethylendiamin zugegeben und die Mischung wurde gründlich durchmischt. Die Mischung wurde reagieren gelassen, während sie 2 Tage lang bei 40ºC stehen gelassen wurde. Nachdem die Reaktion beendet war, wurde das Gel aus der Reaktionsmischung abfiltriert und mit Wasser gewaschen, wobei man ein aminiertes Gel erhielt (nachstehend als "N-Gel" bezeichnet).
Nachdem 10 ml des erhaltenen N-Gels auf einem Glasfilter gewaschen worden waren, zuerst mit 50 ml einer 10 vol.- %igen Lösung von Triethylamin in Dioxan und danach mit 100 ml Dioxan, wurde das Gel in ein Reaktionsgefäß eingeführt. Es wurden 90 mg Benzoesäure in 25 ml Dioxan zu dem Reaktionsgefäß zugegeben, dem 100 mg Dicyclohexylcarbodiimid in 2 ml Dioxan unter Rühren zugesetzt wurden. Nachdem die Mischung 3 h lang unter Rühren reagieren gelassen worden war, wurden 100 mg Dicyclohexylcarbodiimid in 2 ml Dioxan zugegeben, dann wurde die Reaktion 3 h lang unter Rühren fortgesetzt. Nachdem die Reaktion beendet war, wurde das Gel aus der Reaktionsmischung abfiltriert und in der genannten Reihenfolge mit Dioxan, Methanol, Dioxan und Wasser gewaschen, wobei man ein N-Gel mit immobilisierter Benzoesäure erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für eine 1-Phenylhexylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² für die 1-Phenylhexylgruppe steht, ist in der Tabelle 1 angegeben.
Das erhaltene Gel wurde auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 behandelt und die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin wurden auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Beispiel 3

Zu 10 ml des in dem Herstellungsbeispiel 1 erhaltenen epoxidierten Gels wurden 155 mg n-Butylamin zugegeben, das in einer 50 vol.-%igen wäßrigen Ethanollösung 6 Tage lang bei Raumtemperatur unter Stehenlassen reagieren gelassen wurde. Nachdem die Reaktion beendet war, wurde das Gel aus der Reaktionsmischung abfiltriert und mit einer 50 vol.- %igen wäßrigen Ethanollösung gründlich gewaschen und dann mit Wasser gewaschen, wobei man ein Gel mit immobilisiertem n-Butylamin erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für eine n-Butylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² die n- Butylgruppe ist, ist in der Tabelle 1 angegeben.
Das erhaltene Gel wurde auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 behandelt und die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin wurden auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Beispiel 4

Das Verfahren des Beispiels 3 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß 227 mg Benzylamin anstelle von 155 mg n- Butylamin verwendet wurden, wobei man ein Gel mit immobilisiertem Benzylamin erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für die Benzylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² die Benzylgruppe ist, ist in der Tabelle 1 angegeben.
Das erhaltene Gel wurde auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 behandelt und die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin wurden auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Vergleichsbeispiel 1

Das Verfahren des Beispiels 3 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß 273 mg n-Octylamin anstelle von 155 mg n-Butylamin verwendet wurden, wobei man ein Gel mit immobilisiertem n-Octylamin erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für die n-Octylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² die n- Octylgruppe ist, ist in der Tabelle 1 angegeben.
Das erhaltene Gel wurde auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 behandelt und die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin wurden auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Vergleichsbeispiel 2

Das Verfahren des Beispiels 3 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß 510 mg Cetylamin anstelle von 155 mg n- Butylamin verwendet wurden, wobei man ein Gel mit immobilisiertem Cetylamin erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für die Cetylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² die Cetylgruppe ist, ist in der Tabelle 1 angegeben.
Das erhaltene Gel wurde auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 behandelt und die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin wurden auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Vergleichsbeispiel 3

Das Verfahren des Beispiels 3 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß 384 mg L-Tyrosin anstelle von 155 mg n- Butylamin verwendet wurden, wobei man ein Gel mit immobilisiertem L-Tyrosin erhielt.
Die an dem CK-Gel A3 immobilisierte Gruppe wird dargestellt durch die Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom und R² für die 1-Carboxy-2-(p-hydroxyphenyl)ethylgruppe stehen. Der Wert von log P der Verbindung der Formel R²H, worin R² die 1-Carboxy-2-(p-hydroxyphenyl)ethylgruppe ist, ist in der Tabelle 1 angegeben.
Das erhaltene Gel wurde auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 behandelt und die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin wurden auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben.

Vergleichsbeispiel 4

Auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 wurde eine überstehende Flüssigkeit erhalten, jedoch mit der Ausnahme, daß 0,24 ml physiologischer Kochsalzlösung anstelle des im Beispiel 1 erhaltenen Gels mit immobilisiertem Anilin verwendet wurden. In der erhaltenen überstehenden Flüssigkeit wurden die Konzentrationen an SAA-Protein und HDL-Cholesterin auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 1 angegeben. Tabelle 1 Beispiel Nr. log P in R²H Konzentration an SAA-Protein (bezogen auf die SAA-Konzentration in dem Standardserum = 1) Konzentration an HDL-Cholesterin (mg/dl) Vergleichsbeispiel Nr.
Durch die Ergebnisse der Tabelle 1 wird bestätigt, daß dann, wenn das erfindungsgemäße Adsorbens verwendet wird, HDL kaum adsorbiert wird, während SAA-Proteinh adsorbiert wird.

Claims

1. Verfahren zur Entfernung von Serum-Amyloid-Protein aus Körperflüssigkeit, das die folgenden Stufen umfaßt:

1) Kombinieren der ein Serum-Amyloid-Protein enthaltenden Körperflüssigkeit mit einem Adsorbens für ein Serum-Amyloid-Protein, das umfaßt einen wasserunlöslichen Träger und eine an den Träger gebundene Gruppe der Formel -NR¹R², worin R¹ für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder Ethylgruppe und R² für eine Gruppe stehen, die der Bedingung genügt, daß der Wert von log P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindung der Formel R²H in einem Wasser-Octanol-System ist, wobei -NR¹R² nicht von Anilin oder einem Anilinderivat stammt;

2) Hindurchlaufenlassen der Körperflüssigkeit durch einen Filter, den das Adsorbens nicht passieren kann; und

3) Rückgewinnung (Abtrennung) der von Serum-Amyloid-Protein im wesentlichen freien Körperflüssigkeit.

2. Verfahren nach Anspruch 1, worin das Serum-Amyloid- Protein ein Serum-Amyloid A-Protein ist.

3. Verfahren nach Anspruch 1, worin das Serum-Amyloid- Protein ein Serum-Amyloid P-Protein ist.

4. Verfahren nach Anspruch 2, worin das Adsorbens eine wasserunlösliche Matrix ist, die auf mindestens einem Teil ihrer Oberfläche aufweist eine Gruppe der Formel -NR¹R², worin R¹ steht für ein Wasserstoffatom, eine Methylgrupe oder eine Etyhlgruppe und R² steht für eine Atomgruppe, die der Bedingung genügt, daß der Wert von log P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindung der Formel R²H in einem Wasser-Octanol-System ist.

5. Verwendung eines Adsorbens für ein Serum-Amyloid-Protein, das umfaßt einen wasserunlöslichen Träger und eine an den Träger gebundene Gruppe der Formel -NR¹R², worin R¹ steht für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder eine Ethylgruppe und R² steht für eine Gruppe, die der Bedingung genügt, daß der Wert von log P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindung der Formel R²H in einem Wasser-Octanol-System ist, wobei -NR¹R² nicht von Anilin oder einem Anilinderivat abgeleitet ist, zur Entfernung von Serum-Amyloid-Protein aus Körperflüssigkeit.

6. Verwendung eines wasserunlöslichen Trägers, der eine an den Träger gebundene Gruppe der Formel -NR¹R² aufweist, worin R¹ steht für ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder eine Ethylgruppe und R² steht für eine Gruppe, die der Bedingung genügt, daß der Wert von 1og P 0 bis 3,2 beträgt, wobei P der Verteilungskoeffizient einer Verbindungder Formel R H in einem Wasser-Octanol-System ist, wobei -NR¹R² nicht von Anilin oder einem Anilinderivat abgeleitet ist, zur Herstellung eines Adsorbens für die Entfernung von Serum-Amyloid-Protein aus Körperflüssigkeit.