DE2921974A1

DE2921974A1 - Selektiv geschuetzte 1-n-(omega-aminoalkyloxycarbonyl)-sisomicin-derivate

Info

Publication number: DE2921974A1
Application number: DE19792921974
Authority: DE
Inventors: Uwe Dipl Chem Dr Petersen; Peter Dipl Chem Dr Stadler; Eckart Dipl Chem Dr Voss
Original assignee: Bayer AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 1979-05-30
Filing date: 1979-05-30
Publication date: 1980-12-11
Also published as: US4336369A

Description

Selektiv geschützte l-N-(«»i-Aminoalkyloxycarbonyl)-sisomicin-Derivate

Die Erfindung betrifft neue, selektiv geschützte 1-N-(oj-Aminoalkyloxycarbonyl)-sisomicin-Derivate, die als Zwischenprodukte zur Herstellung hochwirksamer .Antibiotika dienen, sowie ein Verfahren zur Herstellung der selektiv geschützten Verbindungen.

Die neuen Verbindungen lassen sich durch die Formel (I)

CO-O-X-NH-R

wiedergeben, in welcher

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X für einen geradkettigen, verzweigten oder cyclischen gesättigten oder ungesättigten aliphatischen Rest mit 2 bis 10 C-Atomen,

R₁ für Wasserstoff, C^-C^-Alkyl oder Benzyl, R₂ für CO-R^ oder S-R₅ und

R-z für S-R^ stehen,

R, einen Rest der Formeln

-CHaI₃, -OA,

(CH₂L -B (CH₂) -B

-0-C-(CH₀) -H oder -0-C-CHaI_x _{x 2}n_{2 χ} 3

A gegebenenfalls substituiertes Phenyl, B Wasserstoff oder gegebenenfalls substituiertes Phenyl,

n^, rip, τι-χ eine Zahl von 0-5,
Hai Fluor, Chlor oder Brom und
R5 gegebenenfalls substituiertes Phenyl, Di- oder Tripheny!methyl bedeuten.

Insbesondere steht X für einen C₂-Cg-Alkylenrest und R₁ für Wasserstoff.

Geeignete Substituenten der gegebenenfalls substituierten Phenyl-, Di- oder Tr ipheny lme thy Ir es te R,- sind z. B. 1 bis 3 Substituenten aus der Reihe Trifluormethyl, Nitro, C₁-C^-Alkyl, C₁-C^-AIkOXy, C₁-C^-AIkOXycarbonyl oder Phenyl oder 1 bis 5 Halogenatome, vorzugsweise Chloratome. Als Beispiele für -SRc-Gruppen seien o-Nitrophenylsulpheny1 und 2,4,5-Trichlorphenylsulphenyl genannt.

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Geeignete Substituenten der gegebenenfalls substituierten Phenylreste A und B sind 1 oder 2 Substituenten aus der Reihe Nitro, Halogen, vorzugsweise Chlor, C₁-C^- Alkyl, C₁-C^-AIkOXy und Phenyl.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I werden erhalten, indem man selektiv geschützte Sisomicinderivate der Formel II

H₂-NH-R₂

NH-R₂

(ID

in welcher

R₂ und R, die oben angegebene Bedeutung haben, mit einem Acylierungsmittel der Formel (III)

G-CO-O-X-N-R₁ (III)

X und R-, die oben angegebene Bedeutung haben und G für eine Abgangsgruppe, vorzugsweise für Halogen wie Chlor oder Brom, Azido, gegebenenfalls substituiertes Phenoxy wie 4-Nitrophenoxy oder 2,4,5-Trichlorphenoxy oder-einen Rest der Formel

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und
Rg für CO-R^ oder S-R-, wobei R^ und Rc die oben

angegebene Bedeutung haben,

stehen, mit der Bedingung, daß Rg für COR^ steht, wenn R₂ SR₅ bedeutet und Rg für SR,- steht, wenn R₂ COR^ bedeutet,

gegebenenfalls in Gegenwart einer Base zu Verbindungen der Formel (TV)

I
CO-O-X-N-R₁

R₅ (IV)

umsetzt, in welcher

R-,, R₂, R^, Rg und X die oben angegebene Bedeutung haben und anschließend die Schutzgruppe Rg selektiv in Gegenwart der Schutzgruppen R₂ und der R, abspaltet.

Verwendet man 2¹, 3, 3% e'-Tetra-H-Co-nitrophenylsulfenyl)-sisomicin und (4-Nitrophenyl)-(2-trifluoracetylaminoethyl)-carbonat als Ausgangsstoffe, so kann der Reaktionsablauf durch das folgende Formelschema wiedergegeben werden.
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CH₃-N
NPS

NPS

CH₂-NH-NPS

NH-NPS

in Pyridin

NPS

CH₂-NH-IIPS

HN Λ ^--^~W _ M-KPS I
CO-O-CH₂CH₂-Mi-COCF₃

KOH

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NPS

-NH-NPS

CO-O-CH₂CH₂-NH₂

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NPS=-S

Als Ausgangsstoffe der Formel (II) dienen bevorzugt 2'j 3,3",6'-Tetra-N-(o-nitropheny!sulfenyl)-sisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulfenyl)-2',3,6'-tris-N-trichloracetyl-sisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulfenyl)-2',3,6'-tris-N-trifluoracetyl-sisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulf enyl)-2',3,6'-tris-N-(2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-sisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulfenyl)-2',3,6'-tris-N-(1,1-dimethy1-2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-sisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulfenyl)-2',3,6'-tris-N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-sisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulfenyl)-2',3,6'-tris-N-phenoxycarbonylsisomicin, 3"-N-(o-Nitrophenylsulf enyl)-2·,3,6'-tris-N-(tert.-butoxycarbonyl)-sisomicin, deren Herstellung nach dem in DE-OS 27 2β beschriebenen Verfahren beziehungsweise über die folgenden Stufen erfolgt:

1) Umsetzung von Penta-N-(o-nitrophenylsulfenyl)-sisomicin (Deutsche Offenlegungsschrift 27 26 197) mit Dimethyl-(l,2-dimethylpropyl)-silylchlorid zum Penta-N-(onitropheny!sulfenyl)-2"-O-/~dimethyl-(1,2-dimethylpropyl)-silyl7-sisomicin;

2) Abspaltung der o-Nitrophenylsulfenylgruppen von 2',3,6'-N mit 2-Mercaptobenzthiazol;

3) Acylierung der 2·,3»6'-N-Positionen mit einem Acylierungsmittel °,

4) Abspaltung der 2"-0-Schutzgruppe und

5) Abspaltung der 1-Ν-(ο-Nitropheny!sulfenyl)-Gruppe.

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Die als Acylierungsmittel verwendeten Ausgangsstoffe der Formel (III) lassen sich nach prinzipiell bekannten Verfahren durch Verknüpfung eines Aminoalkohole mit der Schutzgruppe Rg an der Aminogruppe und Überführung der alkoholischen Funktion in ein reaktives Carbonat herstellen. Als Beispiele seien genannt:

(4-Nitrophenyl)-(2-trif luoracetylaminoe bhyl)-carbonat., (2,4,5-Trichlorphenyl)-(3-trifluoracetylaminopropyl-l)-

carbonat, ' _

(4-Nitrophenyl)-£~2-(2-nitrophenylsulfenylamino)-ethyl/-carbonat,

(4-Nitrophenyl)-(6-trifluoracetylaminohexyl-l)-carbonat, (4-Nitrophenyl)-(2-trichloracetylaminoethyl)-carbonat,(2,4,5-Trichlorphenyl)-(4-trichloracetylaminobutyl-l)-carbonat, (4-Nitrophenyl)-(2-trichloracetylaminopropyl-l)-carbonat, (4-Nitrophenyl)-(2-trifluoracetyl-methylamino-ethyl)-carbonat,

(4-Nitrophenyl)-(2-trichloracetyl-benzylamino-ethyl)-carbonat,

Chlorameisensäure-(2-trichloracetylaminoethyl)-ester.

Als Verdünnungsmittel kommen alle inerten organischen Lösungsmittel in Frage. Hierzu gehören vorzugsweise Toluol, Chloroform, Metfcylenchlorid, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Diraethylsulfoxid, Äther wie Diäthyläther, Dioxan und Tetrahydrofuran, Pyridin, Alkohole wie Methanol und Äthanol sowie deren Gemische.

Geeignete Basen zur Umsetzung von II mit III sind alle üblichen organischen und anorganischen .Basen, Hierzu gehören vorzugsweise Alkali- und Erdalkalihydroxide wie Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid oder Calziumhydroxid, Alkali- und Erdalkalicarbonate und -hydrogencarbonate wie Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat, Natriumhydrogencarbonat

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und Calciumcarbonat, Calciumoxid, tertiäre aliphatische und aromatische Amine wie Triäthylamin und N,N-DImethylanilin sowie heterocyclische Basen wie Pyridin und Chinolin.

Die Reaktionstemperaturen der Umsetzung von II mit III können in einem großen Bereich variiert werden. Im allgemeinen arbeitet man bei Temperaturen von etwa -30⁰C bis +8O⁰C, vorzugsweise etwa O⁰C und etwa +40⁰C.

Die Umsetzung kann bei Normaldruck₅ aber auch bei erhöhtem Druck durchgeführt werden« Im allgemeinen arbeitet man bei Normaldruck.

Bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens setzt man 1 Mol der Verbindung der Formel II mit etwa 1 bis 3 Mol, vorzugsweise mit 1,1 bis 1,5 Mol einer Verbindung der Formel III um. Man arbeitet bevorzugt in Pyridin als Verdünnungsmittel bei Raumtemperatur.

Die Abspaltung der Schutzgruppe Rg, sofern es sich um einen -SRc-Rest handelt, erfolgt im allgemeinen durch Reaktion mit Nukleophilen, vorzugsweise mit HS-Gruppen enthaltenden Nukleophilen wie H-S, Thiophenol oder 2-Hercaptobenzthiazol bei 0 - 40⁰C in einem geeigneten Lösungsmittel wie Halogenalkanen, z. B. Dichlormethan, niederen Alkanolen, z. B. Methanol oder Äthanol oder in Gemischen solcher Lösungsmittel.

Die Abspaltung der Schutzgruppe Rg, sofern es sich um einen -COR^-Rest handelt, erfolgt im allgemeinen alkalisch, z. B. beim CF^CO-Rest, mit den auf Seite 7/8

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angegebenen Basen bei Temperaturen von O - 40°C in polaren Lösungsmitteln wie Wasser, niederen Alkanolen wie Methanol oder Äthanol, oder deren Gemische, oder sauer, z. B. beim tert.-Butoxycarbonyl-Rest, mit starken Säuren wie Salzsäure, Schwefelsäure oder Trifluoressigsäure unter sonst gleichen Bedingungen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) dienen als Zwischenprodukte zur Herstellung von hochwirksamen l-N-(.w--Aminoalkyloxycarbonyl)-sisomicin-Derivaten, die erhalten werden, wenn man die freie Aminoqruppe dor Seitenkette mit geeigneten Reaqentien alkyJiert und anschließend die Schutzgruppen Ro und FU abspaltet.

Solche geeigneten Reagentien sind bniEpi2li;ueiae hydraxylierte Aldehyde oder Ketone, dir? nach reduktiv alkyliere;nder Verknüpfung mit Verbindungen der Formel I und anschließender Abspaltung sämtlicher Schutzgruppen 1-N-(Hydroxyalkyl-. aminoalkyloxycarbonyl)-sisomicine liefern. Diese Antibiotika besitzen im Vergleich zu anderen Aminoglykosidantibiotika wie Sisomicin, Netilmicin oder Gentamicin den Vorteil geringerer Toxizität bei hoher Wirksamkeit auch gegenüber resistenten Bakterien.

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Beispiel 1

Penta-N-(o-nitrophenylsulfenyl)-2"-0-/dimethy1- (1 .2-dimethylpropyl) -'silyl/-sisomicin

60,6 g rohes Penta-N-(o-nitrophenylsulfenyl)-sisomicin (DE-OS 27 26 197) und 8,75 g Imidazol werden in 250 ml absolutem Dichlormethan gelöst. Bei 0°C werden unter Feuchtigkeitsausschluß 22,5 ml Dimethyl-(1,2-dimethyl-propyl)-silylchlorid zugetropft. Der Ansatz wird im Vakuum auf ca. 170 ml eingedampft und bei Raumtemperatur 48 Stunden stehen gelassen. Nach Zugabe von 130 ml absolutem Dichlormethan wird der Niederschlag abgesaugt, daß Filtrat mit 350 ml Petroläther kräftig durchgeschüttelt und die Petrolätherphase abdekantiert und verworfen. Das ausgefallene öl wird in 100 ml Dichlormethan gelöst, mit 250 ml Petroläther erneut ausgefällt und schließlich im Hochvakuum getrocknet. Ausbaute 60 g (89 S) Rohprodukt, das ohne weitere Reinigung für die weiteren Umsetzungen eingesetzt wird. Ein reines Präparat wird durch Chromatographie an Kieselgel mit CH₂Cl₂ZCH₃OH = 99/1 erhalten.

13 - C - NMR (CDCI3)
ζΓ = 124-138 (arom. C)

147.54 (C-5¹); 102,26 (C-1"); 97,81 (C-4¹); 99,09 (C-1¹); -2,9 bis -3,0 (Si-CH₃);

22,77 (Si-CH-); 30,60 (Si-CH-CH) ppm ti ti

Als Nebenprodukt wird das Penta-N-(o-nitrophenylsulfenyl) 2",5- bis -0-/_dimethyl-(1 ,2-dimethyl-propyl)-silyl7-sisomicin isoliert.

13-C-NMR (CDCl₃)

cf= 124-146 (arom. C),

148,OO (C-5¹)» 96,13 (C-4¹) ppm

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Beispiel 2

1 ,3"-3Js-N-(o-nitrophenylsulfenyl)-2"-O-/dimethyl-(1,2- dir.athyl-propyl) -sily ^-sisomicin

56 g rches Penta-N- (o-nitrophenylsulf enyl) -2"-0-/_dimethy 1-(1,2-dinethyl-propyl)-silyl7-sisomicin in 36 ml Dichlornethan/70 ml Methanol werden mit 16 g 2-Mercapto-benzthiazol versetzt, geschüttelt, bis klare Lösung erfolgt und bei 5°C 2 Stunden stehen gelassen. Der sich dabei abscheidende Niederschlag wird abfiltriert und die Lösung ohne Isolierung des gewünschten Produktes für die weiteren Umsetzungen verwendet. Die Ausbeute beträgt etwa 80 % der Theorie. Zur Darstellung eines reinen Präparats wird das Filtrat rasch im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit a) Di chlorine than/ b) Di chlorine than/

CH₃OH (8:2) und c) mit CH₂C1₂/CH₃OH/ 20 % wäßrigem Ammoniak (7:2,7:0,3), an Kieselgel chromatographiert. Die Ausbeute an reinem Produkt beträgt 25,3 g (69 %)

13 - C - NMR (CD₃OD)
Cf= 1,5 (Si-CK₃); 122-146 (arom. C); 147,14 (C-5¹); 103,31 (C-I") j 100,16 (C-T) 99,30 (C-4·) ppm

Als Nebenprodukt werden bei der Säulenchromatographie 3 g (10 %) 3^tl-N-(o-Nitrophenylsulfenyl)-2"-0-/.dimethyl-(1_/2-dimethyl-propyl) -sily^-sisomicin isoliert.

- C - NMR (CD₃OD):

^ 76,66 (C-2-); 21,70 (C-6^M); 30,40 (N-CH₃);

53,13 (C-1), 52,18 (C-3); 44,06 (C-6¹) 49,41 (C-2¹) ppm

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Beispiel 5

\ ,3"-BiS-N-(o-nitrophenylsulfenyl)^',3,6'-tris-N-tri chloracetyl-2"-0-/dimethyl-(1 ,2-diiP.ethyl-propyl) -silyl?- sisomicin

8,8 g 1, 3"-BiS-N-(o-nitrophenylsulfenyl)--2"-0--_i/dinTethy ΙΟ , 2-dimethyl-propyl)-silyiy-sisomicin in 20 ml Dichlormethan/20 ml Pyridin werden bei -15°C tropfenweise mit 7,5 ml Trichloressigsäureanhydrid versetzt und noch IO Minuten bei Raumtemperatur weitergerührt. Nach Zugabe
von 20 ml Dichlorine than wird der Ansatz zweimal rr.it je 20 ml H₂O ausgeschüttelt, die organische Phase eingedampft und der Rückstand·als Rohprodukt weiterverarbeitet. Rp (CH₂C1₂/CH₃OH = 97,5/2,5) = 0,72

Beispiel4

1,3"-BiS-N-(o-nitropheny!sulfenyl)-2'„3,6'-tris-N-tri chloracetyI-sisomicin

Das rohe öl von Beispiel 3 wird in 20 ml Dimethylsulfoxid gelöst, mit 2 ml einer 50 proz. KF-Lösung versetzt und 3 Stunden kräftig gerührt. Das Produkt wird mit Wasser ausgefällt, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das
Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung weiterverarbeitet.

13 - C - NMR (CDCl₃):
cT= 103,60. (C-I") » 66,48 (C-3¹¹); 55,15 (C-1)?

50,60 (C-3); 79,86 (C-4); 76,18 (C-5);

69,16 (C-6); 97,74 (C-1¹); 96,84 (C-4¹)»

149,80 (C-5); 92,78(CCl₃); 162,29 und

162,11 (CO) ppm.

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Beispiel 5

3"-N- (o-nitrophenylsulfenyl)-2',3,6'-tris-N-trlchloracetyl sisomicin

Das Produkt von Beispiel 4 wird in 13 ml Dichlormethan gelöst, mit 26 ml Methanol und 5 g 2-Mercc.ptcbenzthiazcl bis zur klarer. Lösung geschüttelt und 3 Tage bei 5"^C stehen gelassen. Der Niederschlag wird abfiltriert, das Filtrat eingedampft und an Kieselgel chro.-r.atographiert (Laufmittel a: CH₂Cl₂ZCH₃OH = 95/5,· b: (CH₂₁Cl₂ZCH₃OK/ 20 % wäßriges N^-93/6,5/0, 5) .

-J3 „ Q _ _NMR (CDCl₃)

= 103,43 (C-I¹¹); 67,46 (C-3¹¹); 50,85 (C-I);

50.28 (C-3),· 79,44 (C-4); 76,51 (C-5);

89.29 (C-6); 97,51 (C-T)? 96,62 (C-4¹)} 149,50 (C-S"5? 92„46 und 92,38 (C~4'); 162,01 and 161,76 (CO) ppm.

Beispiel 6

(2"t_rj^luoracet3rlaminoetiiyl) -carbonat

30p5 g 2-Aminoethanol x^rerden. in 200 El Acetonitril unter Eiskühlung mit 52,5 g Trifluoressigsäureanhydrid versetzts xfobei die Temperatur zwischen 5 - 20°C gehalten wird. Nach Abklingen der Reaktion wird eingeengt und fraktioniert. Ausbeute:

37s5 S 2-{Trifluoracetylamino)-ethanol vom Siedepunkt 130 - 131°C / 11 mm (kristallisiert langsam durch).

17 g (Os 108 mol) 2-(Trifluoracetylamino)-ethanol löst man in 210 ml Fyridinj versetzt mit 21 g Chlorameisensäure-4-nitrophenylester und läßt bei Raumtemperatur über Nacht stehen. Danach wird eingeengt, der Rückstand in Methylenchlorid aufgenommen, mit Eiswasser gewaschen und mit Na₂SO^ getrocknet. Nach Abdampfen des Lösungsmittels

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-ι/- ti-

erhält man 33 g eines hellen Öls.

IR: 1720, 1770/cm. Das Produkt enthält ca. 30 % 4-Nitrophenol.

Beispiel 7
(4-Nitrophenyl)-(3-trifluoracetylaminopropyl)-carbonat

Man stellt analog Beispiel 6 aus dem 3-(Trifluoracetylamino)-propan-1-ol (Siedepunkt 120⁰C / 3 mm; IR:1710/cm) das aktivierte Carbonat her; IR: 1710, 1765/cm.

Beispiel 8

(4-Nitrophenyl)-(6-trifluoracetylaminohexyl-1)-carbonat

Analog Beispiel 6 erhält man aus dem 6-(Trifluoracetylamino)-hexan-l-ol (Siedepunkt 150 - 154⁰C /3,5 mm; IR: 1710/cm) das aktivierte Carbonat als Rohprodukt; IR: 1720, 1770/cm.

Beispiel 9

(4~Nitrophenyl)-/~2-(2-nitrophenylsulfenyl-methyl-amino)-e thy17-c arb onat

Man legt eine Lösung von 1,4 g 2-Methylamino-ethanol in 30 ml Dioxan vor und tropft gleichzeitig unter Aufrechterhaltung von pH 8 eine Lösung von 3,8 g o-Nitrophenylsulfensäurechlorid in 10 ml Dioxan und 8,5 ml 2n-Natronlauge zu. Nach mehrstündigem Rühren bei Raumtemperatur wird im Vakuum eingeengt, der Rückstand in Essigester aufgenommen und zweimal mit Wasser gewaschen, mit Na^₁SO, getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das zurückbleibende Öl wird mit Toluol / Essigester (2:1) über 100 g Kieselgel

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chromatographiert und die Hauptkomponente (R_f: 0,29) abgetrennt. Ausbeute: 2,9 g N-(2-Hydroxyethyl)-N-methyl-onitrosulfensäureamid; Schmelzpunkt: 53 - 56 C.

456 mg dieser Verbindung und 60C mg Chlorameisensäurep-nitrophenylester werden in 5 ml Acetonitril gelöst und unter Eiskühlung mit 300 mg Triäthylamin in 5 ml Acetonitril versetzt. Nach 1 Stunde bei Raumtemperatur wird im Vakuum eingeengt, in 30 ml Methylenchlorid aufgenommen, zweimal mit Wasser gewaschen, mit Na₂SO^ getrocknet, im Vakuum eingeengt und das erhaltene orange Öl mit Toluol/Essigester (2:1) über 100 g Kieselgel chromatographiert und die Hauptfraktion abgetrennt. Ausbeute: 250 mg oranges Öl, das langsam durchkristallisiert.
IR (KBr): 1770 cm"¹. R_f-Wert (Toluol/Essigester 2:1): 0,84.

Beispiel 10

(4-Nitrophenyl)-/~2-(2-nitrophenylsulfenylamino)-ethyl7-carbonat

Man verfährt analog Beispiel 9; IR: 1770 cm" ; R_f-Wert (Toluol/Essigester 2:1): 0,77.

Beispiel 11

l-N-(2-Aminoethyloxycarbonyl)-3,2',6',3"-tetra-N-(onitrophenylsulfenyl)-s is omic in

3,3 g 3»2',6',3"-Tetra-N-(o-nitrophenylsulfenyl)-sisomicin (DE-OS 27 26 197) werden in 15 ml Pyridin gelöst, nit 3,5 g des Produktes aus Beispiel 6 versetzt, bei Raumtemperatur gerührt und der Verlauf der Reaktion dünnschichtchromatographisch (Kieselgel-Fertigplatten; Laufmittel:

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Methylenchlorid / Methanol = 95/5) verfolgt. Nach Stehen über Nacht wird im Hochvakuum eingeengt, der Rückstand in 140 ml Methylenchlorid / 60 ml Methanol aufgenommen und 6 ml 4n-NaOH unter Rühren eingetropft. Nach 1 Stunde bei Raumtemperatur ist die Abspaltung beendet. Man trennt die NaOH-Phase ab und wäscht die organische Phase solange mit Wasser bis es nicht mehr basisch reagiert. Nach dem Trocknen mit NapSO^ wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand zur Abtrennung einiger unpolarer Verunreinigungen an 200 g Kieselgel chromatographiert, wobei zuerst mit Methylenchlorid, anschließend mit Methylenchlorid/Methanol (5;l) eluiert wird» Ausbeuten 2,2 g oranges Festprodukt; R^-Wert (Methylenchlorid/Methanol 5:1) : 0,4,

Beispiel 12

l-N-(3-Aminopropyloxycarbonyl)~3₉2¹ _S6^J ,,3"~tetra-N-(onitrophenylsulfenyl)-sisomicin

Man verfährt entsprechend Beispiel 11 unter Verwendung des aktivierten Carbonats aus Beispiel 7 und erhält das Reaktionsprdoukt in 55 % Ausbeute„ R^-Wert (Methylenchlorid / Methanol 5:1): 0₉42_o

Beispiel 13

l-N-(6~Aminohe3cyloxycarbonyl)-3i,2ⁱ ,,6' ₉3"=tetra=N-(o=· nitrophenylsulfenyl)-sis omic in

Man verfährt entsprechend Beispiel 11 unter Verwendung des Carbonats aus Beispiel 8 und erhält das Sisomicinderivat in 52 % Ausbeute«.
R_f-Wert (Methylenchlorid / Methanol 5 si) ί 0,5■

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Beispiel 14

1-Ν- (2-Aminoethyloxycart)onyl) -3"-N- (o-nitropheny !sulfenyl) -3,2',6'-tris-N-(trichloracetyl)-sisomicin

Zu einer Lösung von 1,04 g des Produktes aus Beispiel 5 in 5 ml Pyridin werden 500 mg des Produktes aus Beispiel 10 gefügt und bei Raumtemperatur gerührt. Nach 2 Stunden ist dünnschichtchromatographisch (Kieselgel-Fertigplatten, Laufmittel = Methylenchlorid/Methanol/20 % aq. NH, =^: 930/65/5) keine Ausgangsverbindung mehr nnchweinbar. Man dampft im Hochvakuum ein, nimmt in Me"chylenchlorid auf, wäscht mit Wasser, trocknet mit Na^SO, und engt erneut ein. Zur Abspaltung der NPS-Gruppe von der primären Aminogruppe nimmt man den Rückstand in 3 ial Methanol/2 ml Methylenchlorid auf, versetzt mit 170 mg 2-Mercaptobenzthiazol und läßt 1 Tag bei Raumtemperatur stehen. Danach wird eingeengt und das polare Spaltprodukt von einigen unpolaren Komponenten durch Chromatographie an 70 g Kieselgel (Laufmittel wie oben) gereinigt. Ausbeute: 577 mg oranges Festprodukt. R_f-Wert (Laufmittel wie oben): 0,15.

Beispiel 15

l-N-(2-Methylaminoethyloxycarbonyl)-3"-N-(o-nitrophenylsulfenyl)-3,2',6'-tris-N-(trichloracetyl)-sisomicin

Man verfährt analog Beispiel 14 und erhält das Sisomicinderivat in 45 % Ausbeute. R^-Wert (Methylenchlorid/ Methanol/20 % NH₃ = 930/65/5): 0,17.

Beispiel 16

I-N-/72-(1,3-Dihydroxypropyl-2-amino )-ethyloxycarbonyjj-sisomiein

115 icg des Produktes aus Beispiel 11 werden in 2,5 ml Methanol/ 0,4 ml Müthylencfilorid/ 0,5 ml Uncsor (jnlönt, mil Γίϋϊΐtjüriuri? auf" pH

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eingestellt und mit 20 mg Dihydroxyaceton versetzt. Man rührt 15 Minuten bei Raumtemperatur und gibt dann 15 mg NaBCNH^ zu. Nach weiteren 30 Minuten läßt sich dünnschichtchromatographisch ein neues Produkt nachweisen (DC: Kieselgel; Methylenchlorid / Methanol = 5:1» R ,-Wert S= 0,53), das durch Versetzen mit 5 ml Essigester, Waschen mit 2 χ 5 ml Wasser, Trocknen mit Na^SO^ und Einengen des Filtrats im Vakuum isoliert wird ο Die Abspaltung der o-Nitrophenylsulfenyl-Schutzgruppen erfolgt durch Lösen des Rückstandes in 0,6 ml Methylenchlorid, Versetzen mit 1,6 ml einer Lösung von 8,5 g 2-Mercaptobenzthiazol In 30 ml Methanol/50 ml Methylenchlorid und Ansäuern mit verdünnter Salzsäure bis zur Färbaufhellung» Aus der Spaltlösung wird das Sisomicinderivat mit 1 ml Wasser extrahiert, die wäßrige Phase mit 2 χ 0,5 ml Methylenchlorid gewaschen und mit dem basischen Ionenaustauscher Lewatit MP 500 (0H~) basisch gestellt«, Man dampft ein und chromatographiert zur Entfernung weniger Verunreinigungen über 5 g Kieselgel mit Methylenchlorid/Methanol/20 % NH₃ (2s4si) als Laufrnittel)5 Ausbeute = 29 mg

R «-Wert (Kieselgel, Methylenchlorid/Methanol/konz» 2:2:1): 0,44.

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Claims

Eatentansprüche

Verbindungen der Formel I

CO-0-X-.NH-R

in welcher

X für einen geradkettigen, verzweigten oder cyclischen gesättigten oder ungesättigten aliphatischen Rest mit 2 bis 10 C-Atomen,

R-] für Wasserstoff, C^-C^-Alkyl oder Benzyl, R₂ für CG-R^ oder S-R₅ und R₃ für S-R₅ stehen, wobei

R/ einen Rest der Formeln

-CEaI₃, -OA,

(CH₂) -B (^CH?)„ -^B

C)^ -H oder -O-C-CHal, ) (

A gegebenenfalls substituiertes Phenyl, B Wasserstoff oder gegebenenfalls substituiertes Phenyl,

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n^, n_?, η, eine Zahl von 0-5,
Hai Fluor, Chlor oder Brom und

Rr- gegebenenfalls substituiertes Phenyl, Di- oder Triphenylmethyl bedeuten.
2. Verbindungen nach Anspruch 1, worin X C₂-Cg-Alkylen und

R^ Wasserstoff bedeuten.
3. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der Formel

^CH_n-NH-R,

worin R₂ und R, die in Anspruch 1 genannte Bedeutung besitzen,

mit einem Acylierungsmittel der Formel

G-CO-O-X-N-R-,

worin X unr R-, die in Anspruch 1 genannte Bedeutung besitzen,

G für eine Abgangsgruppe und

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Rg für -COR^ oder -SR₅ steht, wobei R^ und Rc die in Anspruch 1 genannte Bedeutung haben, mit der Bedingung, daß Rg für COR^ steht, wenn R2 SR₅ bedeutet und Rg für SR₅ steht, wenn R₂ COR^ bedeutet,

umsetzt, und anschließend die Schutzgruppe R^ selektiv in Gegenwart der Schutzgruppen R₂ und R, abspaltet.

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