DE2736064A1

DE2736064A1 - Antimalaria-mittel

Info

Publication number: DE2736064A1
Application number: DE19772736064
Authority: DE
Inventors: Friedrich Dipl Chem Bossert; Axel Dr Haberkorn
Original assignee: Bayer AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 1977-08-10
Filing date: 1977-08-10
Publication date: 1979-02-22

Description

Antimalaria-Mittel
Die vorliegende Erfindung betrifft neuen synergistische Wirkstoffkombinationen mit einer stark ausgeprägten Antimalaria-Wirkung aus teilweise bekannten Guanylhydrazonen mit an sich bekannnten Folsäure-Antagonisten bzw. Glucostransportinhibitoren.
Die Malaria ist heute noch eine der am weitesten verbreiteten Infektionskrankheiten des Menschen. Nach Schätzungen der Weltgesundheitsorganisation WHO erkranken jährlich mehr als 200 Millionen Menschen an Malaria. Etwa 1 Million Menschen sterben an Malaria in jedem Jahr (siehe z.B. WHO Chronicle, 30, 486-493 (1976)). Erreger der menschlichen Malaria sind vier Protozoen-Spezies der Gattung Plasmodium. Die größte Bedeutung kommt den Arten P.falciparum und P.vivax zu. Zur Behandlung und Prophylaxe stehen zwar wirksame Mittel zur Verfügung, doch sind in den letzten 15 Jahren in zunehmendem Maße und in verschiedenen Teilen der Erde Erregerstämme aufgetreten, die nicht mehr auf die handelsüblichen bewährten Mittel ansprechen. Das Auftreten solcher Pyrimethamin-, Chloroquin- und mehrfach Therapie-resistenter Stämme insbesondere von P.falciparum ist in verschiedenen Teilen der Erde schon zu einem ernsthaften Problem geworden. Es muß damit gerechnet werden, daß sich die Therapie-resistenten Stämme noch weiter ausbreiten (WHO Technicle Reports No. 296 (1965), WHO Technicle Reports No. 529 (1973), WHO Chronicle 30, 492 (1976)). Die Entwicklung neuer Wirkstoffe zur Behandlung und Prophylaxe der Malaria ist daher heute ein dringendes Problem. Wesentlich erscheint dabei, daß Wirkstoffe aus chemischen Körperklassen gefunden werden, die bisher noch nicht zur Herstellung von Malariamitteln dienten, um die Gefahr einer Kreuzresistenz gegen bereits vorhandene Mittel möglichst gering zu halten. Eine weitere Möglichkeit, dem Resistenzproblem zu begegnen, ist die Kombination neuer Wirkstoffe mit bereits bekannten Malariamitteln, besonders dann, wenn sich dabei eine Potenzierung der Wirksamkeit erzielen läßt.
Es wurde nun gefunden, daß neue Wirkstoffkombinationen aus (1) Guanylhydrazonen der Formel in welcher die Substituenten R, R1 und R2 gleich oder verschieden sein können und für Wasserstoff, Alkoxy (C1-C6), Halogen, Alkyl (C1-C6) oder Nitro stehen und X für ein Sauerstoff oder ein Schwefelatom steht und (2) Folsäure-Antagonisten oder Glucosetransportinhibitoren eine besonders hohe Antimalaria-Wirkung aufweisen.
Überraschenderweise ist die Antimalaria-Wirkung der erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen wesentlich höher als die Summe der Wirkungen der einzelnen Inhaltsstoffe.
Es liegt also ein echter synergistischer Effekt vor. Die erfindungsgemäßen Guanylhydrazone der Formel (I) zeigen für sich allein und in verstärktem Maße in Form der erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen mit Folsäure-Antagonisten oder Glucosetransportinhibitoren eine sehr stark ausgeprägte Wirksamkeit gegenüber parasitischen Protozoen insbesondere Malariaerregern, auch wenn diese resistent gegenüber handelsüblichen Wirkstoffen sind. Die Wirkstoffkombinationen stellen eine echte Bereicherung der Pharmazie dar.
Die Guanylhydrazon-Komponenten der Wirkstoffkombinationen werden durch die allgemeine Formel (I) eindeutig definiert: Alkoxy (C1-C6) steht hierin vorzugsweise für Alkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und insbesondere für Methoxy und Äthoxy.
Alkyl (C1-C6) steht hierin vorzugsweise für Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, beispielhaft seien genannt: Methyl, äthyl, n-Propyl, i-Propyl, n-Butyl, sec.-Butyl, tert.-Butyl.
Halogen steht hierin vorzugsweise für Fluor, Chlor und Brom, insbesondere für Chlor.
Die in den erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen enthaltenden Folsäureantagonisten sind Antimetaboliten, welche die Umwandlung von Peroylglutaminsäure (Folsäure im engeren Sinne) in den Citrovorum-Faktor und damit die zur Transformylierung notwendigen Coenzyme hemmen und dadurch die Purinsythese stören.
Als für die neuen Wirkstoffkombinationen in Betracht kommende Folsäureantagonisten seien beispielhaft die folgenden Verbindungen aufgeführt: 1) N¹-(p-Chlorphenyl)-N5-isopropyldiguanid; 2) N1-(3,4-Dichlorphenyl)-N5-isopropyldiguanid; 3) Gemisch aus 4,6-Diamino-1-(p-chlorphenyl)-1,2-dthydro-2,2-dimethyl-s-triazin mit 4,4'-Methylen-bis-(3-hydroxy-2-naphthalincarbonsäure (2:1); 4) 2, 4-Diamino-5-p-chlorphenyl-6-äthylpyrimidin; 5) 2,4-Diamino-5-(3',4',5'-trimethyloxybenzyl)-pyrimidin; 6) 4,4'-Diaminodiphenylsulfon; 7) 4,9'-Diacetyldiaminodiphenylsulfon; 8) N'-2-Pyrimidinylsulfanilamid; 9) N'- (3,4-Dimethyl-5-isoxazolyl)-sulfanilamid 10) N1- (2,6-Dimethoxy-4-pyrimidinyl) -sulfanilamid 11) N'-(6-Methoxy-3-pyridazinyl)-sulfanilamid 12) N'-(5,6-Dimethoxy-4-pyrimidinyl)-sulfanilamid 13) N'-(3-Methoxy-2-pyrazinyl)-sulfanilamid 14) 1-(4-Chlorphenyl)-2,2-dimethyl-4,6-diamino-dihydro-1,3,5-triazin Als für die neuen Wirkstoffkombinationen in Betracht kommende Glucosetransportinhibitoren sei beispielhaft genannt: 2,6-Dihydroxy-2-(ß-D-glucosido)-ß-(4-hydroxyphenyl)-propiophenon und sein Dihydrat. (F. Alvarado u. R.K. Crane Bichemica et Biophysica Acta 56, 170-172 (1962).
Einzelne Wirkstoffe der Gruppe (1) sind neu, sie können jedoch nach bekannten Verfahren in einfacher Weise hergestellt werden. Man erhält sie z.B., wenn man Ketone der allgemeinen Formel in welcher X, R, R1 und R2 die oben angegebene Bedeutung besitzen in Gegenwart von Verdünnungsmitteln, vorzugsweise in Gegenwart katalytischer Mengen Säure bei Temperaturen zwischen 0 und 1500C, vorzugsweise zwischen 40 und 1200C mit Aminoguanidin der Formel vorzugsweise in Form eines Säureadditionssalzes umsetzt.
Die Reaktionsprodukte fallen im allgemeinen aus, werden abgesaugt und mit niederen Alkoholen vorzugsweise mit Äthanol gewaschen.
Bei der Umsetzung von Verbindungen der Formel (II) mit Aminoguanidin der Formel (III) vorzugsweise in Form ihrer Salze setzt man vorzugsweise inerte,polare, organische Lösungsmittel ein, in welchen sich die Komponenten II und III gut lösen und das Reaktionsprodukt in schwer löslicher Form ausfällt. Als für die Umsetzung brauchbare Lösungsmittel seien beispielhaft genannt: Niedere Alkanole wie Methanol, Äthanol und i-Propanol, insbesondere Äthanol. Ketone wie Aceton, Methyläthylketon. Säurenitrile wie z.B. Acetonitril und Propionitril. Äther wie Dioxan, Tetrahyrofuran.
Die neuen synergistisch wirkenden Kombinationen aus Guanylhydrazonen der Formel (I) und Folsäure-Antagonisten bzw. Glucosetransportinhibitoren - und deren Salze - weisen eine sehr starke Wirksamkeit gegenüber Malariaerregern auf. Als wichtigste humanphatogene Plasmodien, welche mit den erfindungsgemäßen synergistischen Kombinationen bekämpft werden können,seien genannt: Plasmodium vivax Plasmodium ovale Plasmodium malariae Plasmodium falciparum Im Tierversuch sind die erfindungsgemäßen synergistischen Kombinationen hoch wirksam gegenüber Plasmodium berghei (Maus, Ratte, Goldhamster), Plasmodium cathemerium, Plasmodium praecox (Kanarienvogel), Plasmocium gallinaceum (Hühnerküken).
Aufgrund der bei den eingesetzten Wirkstoffen der Formel (I), den Folsäureantagonisten und den Glucosetransport-Inhibitoren auftretenden individuellen Dosierungsbereiche können die Gewichtsverhältnisse der Wirkstoffgruppen in den Wirkstoffkombinationen in relativ großen Bereichen schwanken. Die Festlegung der jeweils erforderlichen Gewichtsverhältnisse der Wirkstoffe in den Wirkstoffkombinationen kann von jedem Fachmann aufgrund der individuellen Dosierungsbereiche erfolgen.
Zur vorliegenden Erfindung gehört auch die Verwendung der erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen sowie von pharmazeutischen Zubereitungen, welche die Wirkstoffkombinationen enthalten, in der Human- und Veterinärmedizin zur Prophylaxe, Besserung und/oder Heilung der Malaria.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen oder die pharmazeutischen Zubereitungen können oral, parenteral, intraperitoneal und/oder rectal, vorzugsweise oral, rektal und parenteral appliziert werden.
Im allgemeinen hat es sich sowohl in der Human- als auch in der Veterinärmedizin als vorteilhaft erwiesen, den oder die Wirkstoffe in Mengen von etwa 5 bis 50, vorzugsweise 10 bis 30 mg/kg Körpergewicht je 24 Stunden, gegebenenfalls in Form mehrerer Einzelgaben zur Erzielung der gewünschten Ergebnisse zu verabreichen.
Es kann jedoch erforderlich sein, von den genannten Dosierungen abzuweichen und zwar in Abhängigkeit von der Art und dem Körpergewicht des zu behandelnden Objekts der Art und der Schwere der Erkrankung, der Art der Zubereitung und der Applikation des Arzneimittels sowie dem Zeitraum bzw. Intervall, innerhalb welchem die Verabreichung erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der obengenannten Menge Wirkstoff auszukommen, während in anderen Fällen die oben angeführte Wirkstoffmenge überschritten werden muß.
Die Festlegung der jeweils erfordexlichen optimalen Dosieurng und Applikationsart der Wirkstoffe kann durch jeden Fachmann aufgrund seines Fachwissens leicht erfolgen.
Die therapeutisch wirksamen Wirkstoffkombinationen sollen in den oben aufgeführten pharmazeutischen Zubereitungen vorzugsweise in einer Konzentration von etwa 0,1 bis 99,5 insbesondere etwa 0,5 bis 95 Gewichtsprozent der Gesamtmischung vorhanden sein.
Die Herstellung der oben aufgeführten pharmazeutischen Zubereitungen erfolgt in üblicher Weise nach bekannten Methoden, z.B. durch Mischen des oder der erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen mit dem oder den Trägerstoffen.
Zur vorliegenden Erfindung gehören pharmazeutische Zubereitungen, die neben nichttoxischen, inerten pharmazeutisch geeigneten Trägerstoffen die erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen enthalten oder die aus den erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen bestehen sowie Verfahren zur Herstellung dieser Zubereitungen.
Zur vorliegenden Erfindung gehören auch pharmazeutische Zubereitungen in Dosierungseinheiten. Dies bedeutet, daß die Zubereitungen in Form einzelner Teile, z.B.
Tabletten, Dragees, Kapseln, Pillen, Suppositorien und Ampullen vorliegen, deren Wirkstoffgehalt einem Bruchteil oder einem Vielfachen einer Einzeldosis entsprechen. Die Dosierungseinheiten können z.B. 1, 2, 3 oder 4 Einzeldosen oder 1/2, 1/3 oder 1/4 einer Einzeldosis enthalten. Eine Einzeldosis enthält vorzugsweise die Menge Wirkstoff, die bei einer Applikation verabreicht wird und die gewöhnlich einer ganzen, einer halben oder einem Drittel oder einem Vierteil einer Tagesdosis entspricht.
Unter nichttoxischen, inerten pharmazeutisch geeigneten Trägerstoffen sind feste, halbfeste oder flüssige Verdünnungsmittel, Füllstoffe und Formulierungshilfsmittel jeder Art zu verstehen.
Als bevorzugte pharmazeutische Zubereitungen seien Tabletten, Dragees, Kapseln, Pillen, Granulate, Suppositorien, Lösungen, Suspensionen und Emulsionen genannt.
Tabletten, Dragees, Kapseln, Pillen und Granulate können den oder die Wirkstoffe neben den üblichen Trägerstoffen enthalten wie (a) Füll- und Streckmittel, z.B.
Stärke, Milchzucker, Rohrzucker, Glucose, Mannit und Kieselsäure, (b) Bindemittel, z.B. Carboxymethylcellulose, Alginate, Gelatine, Polyvinylpyrrolidon, (c) Feuchthaltemittel, z.B. Glycerin, (d) Sprengmittel, z.B.
Agar-Agar, Calciumcarbonat und Natriumbicarbonat, (e) Lösungsverzögerer, z.B. Paraffin und (f) Resorptionsbeschleuniger, z.B. quarternäre Ammoniumverbindungen, (g) Netzmittel, z.B. Cetylalkohol, Glycerinmonostearat, (h) Adsorptionsmittel, z.B. Kaolin und Bentonit und (i) Gleitmittel, z.B. Talkum, Calcium- und Magnesiumstearat und feste Polyäthylenglykole oder Gemische der und (a) -(i) aufgeführten Stoffe.
Die Tabletten, Dragees, Kapseln, Pillen und Granulate können mit den üblichen gegebenenfalls Opakisierungsmittel enthaltenden Überzügen und Hüllen versehen sein und auch so zusammengesetzt sein, daß sie den oder die Wirkstoffe nur oder bevorzugt in einem bestimmten Teil des Intestinaltraktes, gegebenenfalls verzögert abgeben, wobei als Einbettungsmassen z.B. Polymerisubstanzen und Wachse verwendet werden können.
Die erfindungsgemäßen Wirkstoffkombinationen können gegebenenfalls mit einem oder mehreren der oben angegebenen Trägerstoffen auch in mikroverkapselter Form vorliegen.
Suppositorien können neben dem oder den Wirkstoffen die üblichen wasserlöslichen oder wasserunlöslichen Trägerstoffe enthalten, z.B. Polyäthylenglykole, Fette z.B. Kakaofett und höhere Ester (z.B. C14-Alkohol mit C16-Fettsäure) oder Gemische dieser Stoffe.
Lösungen und Emulsionen können neben dem oder den Wirkstoffen die üblichen Trägerstoffe, wie Lösungsmittel, Lösungsvermittler und Emulgatoren, z.B. Wasser, Äthylalkohol, Isopropylalkohol, AthylcarLonat, Äthylacetat, Benzylalkohol, Benzylbenzoat, Propsrlenglykol, 1,3-Butylenglykol, Dimethylformamid, Öle, insbesondere Baumwollsaatöl, Erdnußöl, Maiskeimöl, Olivenöl, Ricinusöl und Sesamöl, Glycerin, Glycerinformal, Tetrahydrofurfurylalkohol, Polyäthylenglykole und Fettsäureester des Sorbitans oder Gemische dieser Stoffe enthalten.
Zur parenteralen Applikation können die Lösungen und Emulsionen auch in steriler und blutisotonischer Form vorliegen.
Suspensionen können neben dem oder den Wirkstoffen die üblichen Trägerstoffe, wie flüssige Verdünnungsmittel, z.B. Wasser, Äthylalkohol, Propylenglykol, Suspendiermittel, z.B. äthoxylierte Isostearylalkohole, Polyoxyäthylensorbit- und sorbitanester, mikrokristalline Cellulose, Aluminiumethahydroxid, Bentonit, Agar-Agar und Tragant oder Gemische dieser Stoffe enthalten.
Die genannten Formulierungsformen können auch Färbemittel, Konservierungsstoffe sowie geruchs- und geschmacksverbessernde Zusätze, z.B. Pfefferminzöl und Eukalyptusöl und Süßmittel z.B. Sacharin enthalten.
Die Malaria-Wirksamkeit einiger erfindungsgemäßer Verbindungen ist exemplarisch in den Tabellen 1, 2 und 3 wiedergegeben. Als Beispiele für die Wirksamkeit dienen die Tiermodelle P. berghei (Maus), P.cathemerium und P.praecox (Kanarienvogel).
Beschreibung des Versuchsmodells (Tiermodell) Werden z.B. 18 - 20 g schwere NMRI-Mäuse intraperitoneal mit ca. 107 p.berghei infizierten Erythrozyten inokuliert, so sind ab 3. Tag nach der Infektion zwischen 2 % und 80 % der roten Blutkörperchen befallen. Unbehandelte Tiere sterben zwischen dem 7. und 11. Tag nach der Infektion. Zur Prüfung auf Wirksamkeit werden die erfindungsgemäßen Substanzen in Wasser gelöst oder - gegebenenfalls unter Verwendung eines Emulgators - suspendiert und den Versuchstieren subcutan oder oral mit Hilfe der Schlundsondere an 4 aufeinanderfolgenden Tagen verabreicht; die 1. Behandlung erfolgt 2 Stunden post infectionem. Die Präparate werden in Wasser so gelöst bzw. suspendiert, daß pro 20 g Maus 0,5 ml Lösung bzw. Suspension zu applizieren sind; ab 3. Tag post infectionem wird aus der Schwanzvene 1 Tropfen Blut entnommen, ein Ausstrich angefertigt und dieser nach Giemsa gefärbt. Bei 950-facher Vergrößerung werden 25, bei sehr schwachem Befall 50 Gesichtsfelder durchgesehen. Die Zahl parasitierter Erythrozyten je Gesichtsfeld wird bestimmt. Die Blutentnahme wird an 5 Tagen in der Woche vorgenommen. Lassen sich mikroskopisch bis 4 Wochen nach der Infektion keine Parasiten im Blut nachweisen, so werden die Tiere reinfiziert. Ein normales Angehen der Reinfektion wiest darauf hin, daß keine Prämunität vorliegt, die Tiere also als geheilt gelten können. Führt die Reinfektion zu einem verzögerten Infektionsablauf oder werden bei den behandelten Tieren weniger Parasiten als bei den unbehandelten Kontrollen oder die Parasiten erst zu einem späteren Zeitpunkt nachgewesen, so liegt eine suppressive Wirkung vor. In diesen Fällen ist die Überlebenszeit gewöhnlich verlängert.
In weiteren Versuchen konnte gezeigt werden, daß die beanspruchten Guanylhydrazone alleine wie auch in Kombination z.B. mit Folsäureantagonisten hoch wirksam sind gegenüber Plasmodium berghei-Stämmen, die gegenüber den herkömmlichen Malariamitteln resistent sind. Dies wird beispielhaft durch die Tabelle 3 belegt.
Tabelle 1 Wirksamkeit von erfindungsgemäßen Guanylhydrazonen Malariaerreger: Plasmodium cathemerium (Kanarienvogel), Plasmodium berghei (Maus) Verbindungen der allgemeinen Formel (I)

Therapeutischer Index

X R R1 R P.cathemerium P.berghei

S H 1 6-OCH3 H 100 20

S H 6-CH3 H 10 10

O 6-C1 6-OCH3 H 10 10

O H 6-OCH3 H 40 2

zum Vergleich:

Chinin 20 2

Angegeben wird hier der therapeutische Index, d. h.
das Verhältnis von dosis tolerata maxima zur dosis effectiva minima.

Tabelle 2 Potenzierung der Wirksamkeit durch Kombination der Guanylhydrazone (I) mit Folsäureantagonisten und Glucosetransportinhibitoren. Plasmodium berghei/Maus; normal empfindlicher Stamm.

Mittlere Dauer in Tagen bis zum

Erreichen einer min- infektionsbeding-

mg/kg destens 2 % der Ery- ten Tod

throzyten erfassen-

den Parasitaemie bei

der Maus nach der In-

fektion

unbehandelte

Kontrolle - 3 10,5

A 5 3,0 11,5

25 5,5 10,5

50 7,0 14,5

B 0,05 8,0 15

0,1 9,75 15

0,25 13,75 15

C 1000 3 7

+ 25+

B U,1 15,8 20,5

+ 5+

B 0,25 14 21

A+ 50,+

B 0,25 >28(Heilung) 28

50+

B 0,1 17 21

A+ 50+

B 0,05 13 22,5

25+ 18,75->28 >28

0,25 (50% d. Tiere Heilung)

A+ 25+ 7 17

C 1000

A = 6-Methoxythioflavin-Guanylhydrazon-Hydrochlorid B = Pyrimethamin (2,6-Diamino-4-äthyl-5-(4-chlorphenyl)-pyrimidin) als Folsäure-Antagonist C = Phlorizin-Dihydrat (2,4,6-Trihydroxy-2-(ß-D-glucosido)-ß-(4 hydroxyphenyl)-propionphenon-Dihydrat als Glucosetransportinhibitor Tabelle 3 Wirksamkeit gegenüber Therapie-resistenten P .berghei-Stämmen

P.berghei-Stamm Behandlung berlebenszeit Befund

resistent gegen Behandlung in Tagen

sowohl dem Salz unbehandelt 11,5

des Cycloguanils

nit Embonsäure D 25 mg/kg 11,5 unwirksam

als auch gegen-

über Chloroquin

E 25 mg/kg 11,5 unwirksam

B 0,25 mg/kg 12 unwirksam

A 50 mg/kg 15 Wirkung

A 50 mg/kg + 28 Heilung

B 0,25 mg/kg

A 50 mg/kg + 23,5 Wirkung

D 25 mg/kg

A = 6-Methoxythioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid B = Pyrimethamin D = Salz des Cycloguanils mit Embonsäure E = Chloroquin-Diphosphat In den Tabellen 1 und 2 bedeutet unwirksam, daß nach Infektion ein normaler Infektionablauf wie bei der unbehandelten Kontrolle erfolgt, Wirkung, daß wenigstens 7 Tage nach Infektion keine Parasiten im Blut zu finden sind und Heilung, daß bis 28 Tage nach Infektion keine Parasiten im Blut zu finden sind und eine Reinfektion zu einem normalen Infektionsablauf führt.

A) Beispiele für die Herstellung von Tabletten enthaltend die erfindungsgemäße Wirkstoffkombination.
a) Wirkstoffkombination bestehend aus 9,5 Teilen 6-Methoxythioflavon-guanylhydrazon, 10 mg Rydrochlorid und 0,5 Teilen Pyr imethamin Milchzucker 119 mg Maisstärke 60 mg (davon 15 mg als Kleister) Talkum 10 mg Magnesiumstearat 1 mg 200 mg Wirkstoffgemisch, Milchzucker und die halbe Menge Maisstärke mischen, mit einem Kleister aus einem Viertel der Maisstärkemenge ankneten, durch ein Sieb mit 3 - 5 mm Maschenweite drücken und in einem geeigneten Trockner bei 60 - 800C trocknen.
Das trockene Granulat durch ein Sieb mit 0,8 mm Maschenweite schlagen, das restliche Viertel Maisstärke, Talk und Magnesiumstearat zumischen und mit Hilfe einer üblichen Tablettenpresse zu runden Tabletten mit 8 mm Durchmesser und einem Gesamtgewicht von 200 mg verpressen.
b) Wirkstoffkombination bestehend aus 2 Teilen 6-Methoxythioflavon-guanylhydrazon-Hydrochlorid 10 mg und 80 Teilen Phlorizin-Dihydrat Calciumphosphat (sekundär) 117 mg Gelatine 2 mg Weizenstärke 20 mg Magnesiumstearat 150 mg Wirkstoffgemisch und sekundäres Calciumphosphat mischen, mit einem wäßrigen Gelatinelösung ankneten, sieben (3 - 5 mm) und trocknen (60 - 800C). Das trokkene Granulat sieben (0,8 mm), anschließend Weizenstärke und Magnesiumstearat zumischen und auf bekannte Weise tablettieren, (runde Tabletten, Durchmesser 7 mm, Bruttotablettengewicht 150 mg).
B) Beispiele für die Herstellung von Kapseln, enthaltend die erfindungsgemäßen Wirkstoffkombination a) Wirkstoffkombination aus 8 Teilen 6-Methoxythioflavon-guanylhydrazon 10 mg Hydrochlorid und 0,75 Teilen Pyrimethamin Calciumphosphat sek. 136 mg Magnesiumstearat 3 mg Kieselsäure kolloidal 1 mg 150 mg Die Ingredienien werden gemischt und mit einer geeigneten Kapselfüll- und verschließmaschine in Hartgelatinekapseln abgefüllt.
b) Wirkstoffkombination aus 1 Teil 6-Methoxythioflavonguanylhydrazon-Hydrochlorid 10 mg und 35 Teilen Phlorizin-Dihydrat Milchzucker 85 mg Polyvinylpyrrolidon 3 mg Stearinsäure 1 mg Kieselsäure kolloidal 1 mg Talkum 5 mg 100 mg Wirkstoffkombination und Milchzucker mischen, mit einer Lösung von Polyvinylpyrrolidon und Stearinsäure in Methylenchlorid ankneten, sieben (3 - 5 mm) und trocknen (50 - 600C).
Das trockene Granulat durch ein Sieb mit 0,5 - 0,6 mm Maschenweite schlagen, Kieselsäure kolloidal und Talkum zumischen und mit einem geeigneten Apparatur in Hartgelatinekapseln abfüllen.
Herstellungsbeispiele Herstellung der Guanylhydrazone Beispiel 1 6-Methoxythioflavon-guanylhydrazon-Hydrochlorid Man erhitzt 26 g 6-Methoxyfhioflavon und 14 mg Aminoguanidinhydrochlorid in 500 ml Äthanol nach Zusatz von wenigen Tropfen konz. Salzsäure 4 - 5 Stunden unter Rückfluß, saugt das Reaktionsprodukt heiß ab und erhält nach dem Umkristallisieren das Umsetzungsprodukt in Kristallen vom Fp. >2700C Ausbeute: 90 % d. Th.
In Analogie zu Beispiel 1 wurden die folgenden Guanylhydrazon-Verbindungen erhalten: Beispiel 2 7-Methoxythioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 13 g 7-Methoxythioflavon und 7 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 400 ml Äthanol gelbe Kristalle Fp. 200 - 2020C Ausbeute: 80 % d. Th.
Beispiel 3 6-Methoxy-4'-nitrothioflavon-Guanylhydra aus 15 mg 6 Methoxy-4'-nitrothioflavon und 6 g Aminoguanidin in 350 ml Äthanol braune Kristalle Fp. 285°C Ausbeute: 80 % d. Th.
Beispiel 4 6-Chlorthioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 10 g 6-Chlorthioflavon und 5 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 250 ml Äthanol Kristalle vom Fp. 295°C Ausbeute: 90 % d. Th.
Beispiel 5 6-Methoxyflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 12 g 6-Methoxyflavon und 6 g Guanylhydrazon-Hydrochlorid in 300 ml Ethanol gelbe Kristalle vom Fp. 2850C Ausbeute: 95 % d. Th.
Beispiel 6 6-Methoxy-4'-chlorflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 14 g 6-Methoxy-4'-chlorflavon und 6 g Aminoguanidinhydrochlorid in 400 ml Ethanol orange Kristalle Fp. 3000C Ausbeute: 90 %. d. Th.
Beispiel 7 8-Methoxythioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 13 g 8-Methoxythioflavon und 7 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 400 ml Äthanol grüngelbe Kristalle Ausbeute 80 8 d. Th. Fp. >2500C Beispiel 8 5-Chlor-8-methoxy-4'-methoxythioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 11 g 5-Chlor-8-methoxy-4'-methoxythioflavon und 5 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 350 ml Äthanol grünbraune Kristalle Ausbeute 85 % d. Th. Fp.>275°C Beispiel 9 7-Methoxy-4'-chlorflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 12 g 7-Methoxy-4'-chlorflavon und 5 g Aminoguanidinhydrochlorid in 250 ml Äthanol kanariengelbe Kristalle Ausbeute 85 % d. Th. Fp. >2500C Beispiel 10 6-Methylthioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 10 g 6-Methylthioflavon und 5 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 250 ml Äthanol gbldgelbe Kristalle Ausbeute 90 % d. Th. Fp. 5250C Beispiel 11 3' -Nitrothioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 28 g 3'-Nitrothioflavon und 12 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 1,2 1 Äthanol gelbe Kristalle Ausbeute 80 % d. Th. Fp. >260°C Beispiel 12 4'-Nitrothioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 14 g 4'-Nitrothioflavon und 6 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 400 ml Äthanol orange Kristalle Ausbeute 85 % d. Th. Fp. >260°C Beispiel 13 6-Chlor-4' -methoxythioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 15 g 6-Chlor-4'-methoxythioflavon und 6 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 400 ml Äthanol graugrüne Kristalle Ausbeute 90 % d. Th. Fp. >260°C Beispiel 14 6<Chlor-4'-nitrothioflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 16 g 6-Chlor-4'-nitrothioflavon und 7 g Aminoguahidin-Hydrochlorid in 400 ml Äthanol rote Kristalle Ausbeute 90 % d. Th. Fp. >26O0C Beispiel 15 6-Äthoxythiofiavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 10 g 6-Äthoxythioflavon und 4 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 150 ml Äthanol grüngelbe Kristalle Ausbeute 95 % d. Th. Fp. 7 27 50C Beispiel 16 6-Methoxy-3'-chlorflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 14 g 6-Methoxy-3'-chlorflavon und 6 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 400 ml Äthanol grüngelbe Kristalle 0 Ausbeute 90 % d. Th. Fp. 273° Beispiel 17 6,4' -Dimethoxyflavon-Guanylhydrazon-Hydrochlorid aus 14 g 6,4'-Dimethoxyflavon und 6 g Aminoguanidin-Hydrochlorid in 500 ml Äthanol grüngelbe Kristalle vom Fp. 2750C Ausbeute 90 % d. Th.

Claims

Patentansprüche 1. Antimalaria-Mittel, gekenzeichnet durch einen Gehalt an einer Wirkstoffkombination bestehend aus (1) Guanylhydrazonen der Formel in welcher die Substituenten R, R1 und R2 gleich oder verschieden sein können und für Wasserstoff, Alkoxy (C1-C6) oder Nitro stehen und X für ein Sauerstoff- oder Schwefelstoffatom steht und (2) eine Verbindung aus der Gruppe der Folsäure-Antagonisten oder Glucosetransportinhibitoren.
2. Antimalaria-Mittel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es die Wirkstoffkombination bestehend aus einem Guanylhydrazon der Formel (I) und einem Folsäure-Antagonisten enthält.
3. Antimalaria-Mittel gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es die Wirkstoffkombination bestehend aus einem Guanylhydrazon der Formel (I) und einem Glucosetransportinhibitor enthält.
4. Antimalaria-Mittel gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß es eine Wirkstoffkombination bestehend aus 6-Methoxythioflavonguanylhydrazon und 2,6-Diamino-4-äthyl-5-(4-chlorphenyl)-pyrimidin enthält.
5. Antimalaria-Mittel gemäß Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß es eine Wirkstoffkombination bestehend aus 6-Methoxythioflavonguanylhydrazon und 2,6-Dihydroxy-2-(ß-D-glucosido)-ß-(4-hydroxyphenyl)-propiophenon-Dihydrat enthält.
6. Verfahren zur Herstellung von Antimalaria-Mitteln, dadurch gekennzeichnet, daß man Guanylhydrazone der Formel (I) gemäß Anspruch 1, Folsäure-Antagonisten oder Glucosetransportinhibitoren gemäß Anspruch 1 und inerte, nichttoxische, pharmazeutisch geeignete Trägerstoffe miteinander vermischt.
7. Verfahren zur Herstellung von Antimalaria-Mitteln gemäß Anspruch 6), dadurch gekennzeichnet, daß man Guanylhydrazone der Formel (I) gemäß Anspruch 1, Folsäure-Antagonisten und inerte, nichttoxische, pharmazeutisch geeignete Trägerstoffe miteinander vermischt.
8. Verfahren zur Herstellung von Antimalaria-Mitteln gemäß Anspruch 6), dadurch gekennzeichnet, daß man Guanylhydrazone der Formel (I) gemäß Anspruch 1, Glucosetransportinhibitoren und inerte, nichttoxische, pharmazeutisch geeignete Trägerstoffe miteinander vermischt.
9. Verfahren zur Behandlung von Malaria, dadurch gekennzeichnet, daß man Wirkstoffkombinationen gemäß Anspruch 1 Menschen oder Tieren appliziert, die an Malaria erkrankt sind.