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DE2047952C3 - Process for the photometric evaluation of the zones resulting from the separation of substance mixtures in thin layers of light-scattering material - Google Patents

Process for the photometric evaluation of the zones resulting from the separation of substance mixtures in thin layers of light-scattering material

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DE2047952C3
DE2047952C3 DE2047952A DE2047952A DE2047952C3 DE 2047952 C3 DE2047952 C3 DE 2047952C3 DE 2047952 A DE2047952 A DE 2047952A DE 2047952 A DE2047952 A DE 2047952A DE 2047952 C3 DE2047952 C3 DE 2047952C3
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light
thin
substance
layer
radiation
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DE2047952A
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Sven Prof. Dr. Goeteborg Lindstedt
Laszlo Dr. Vastra Froelonda Treiber
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Carl Zeiss AG
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Carl Zeiss AG
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Description

047 S52047 S52

auszuwertenden Kurse ergeben, welche es in manchen Fällen schwierig oder sogar unmöglich macht, eindeutig /u entscheiden, ob es sich um einen :".; niessenden oder einen Stör-Effekt handelt.to be evaluated result in which there are in some Makes cases difficult or even impossible, clearly / u decide whether it is a: ".; sneezing or a disturbing effect.

Es ist schon vorgeschlagen worden, zur Erhöhung der Meßempfindlichkeit vor dem Aufbringen der zu untersuchenden Substanz die Basislinie der Absorptions-Orts-Kur\e aufzunehmen und bei der eigentlichen Auswertung die so ermittelten Werte von der Meßkurse abzuziehen. Dies ist möglich, da di>% Struktur der Trennschicht bei vorsichtigem Arbeiten erhalten bleibt.It has already been proposed to increase the measurement sensitivity before applying the substance to be examined to record the baseline of the absorption location curve and to subtract the values thus determined from the measurement curve during the actual evaluation. This is possible because the> % structure of the separating layer is retained if you work carefully.

Die Ausführung dieses Vorschlages ist jedoch umständlich und ertordert ein seh- genaues Arbeiten.However, the implementation of this suggestion is cumbersome and requires precise work.

Hs ist nun die Aufgabi: uer vorliegenden Erlindung, ein Verfahren zur photometrischen Auswertung der sich bei der Aultrennung von Substanzaemischen in dünnen Schichten aus lichisireuendern Material ergebenden Zonen zu schaffen, das ueeenüber den üblichen Verfahren die Meßgenauigkeit und die Nachweisgrenze wesentlich verbessert and das trotzdem eine schnelle Auswertung ermöglicht.Hs is now the task: for the present invention, a method for the photometric evaluation of the separation of substances in thin layers of lightening material to create resulting zones, the measurement accuracy and the Significantly improved detection limit and still enables rapid evaluation.

Das Verfahren nach der Erfindung zeichnet sich dadurch aus. daß an der gleichen Stelle des auszuwertenden Objektes simultan die diffus reflektierte und die durchgelassene Strahlung gemessen werden und daß zur Auswertung die so erhaltenen beiden Signale addiert werden. Das Summensignal wird dann /weckmäßig mittels eines Schreibers registriert.The method according to the invention is characterized by this. that at the same point of the to be evaluated Object, the diffusely reflected and the transmitted radiation can be measured simultaneously and that the two signals thus obtained are added for evaluation. The sum signal is then / registered wake-up by means of a scribe.

Wie im Zusammenhang mit der Erfindung dr.rchgeführte Untersuchungen zeigen, besteht zwischen der Transmissions- und der Remissions-Basislinie auf substanzfreiem lichtstreuendem Untergrund ein enger Zusammenhang. Eine streuungsbedingte Änderung des Remissionsgrades hat eine ebenfalls streuunesbcdingte Änderung des Transmissionsgrades zur Folge, und beide Effekte sind in guter Näherung spiegelbildlich zueinander. Bei der erfindungsgemäßen Addition des Remissions- und des Transmissionssignals kompensieren sich daher die streuungsbedingten Signalkomponenten. d. h. die Basislinie der Meßkurvc wird begradigt.As studies carried out in connection with the invention show, there is between the transmission and remission baseline on a substance-free, light-scattering background Context. A change in the degree of remission due to variation is also due to variation The result is a change in the degree of transmission, and both effects are mirror images to a good approximation to each other. With the addition of the reflectance and transmission signals according to the invention The signal components caused by the scattering therefore compensate each other. d. H. the baseline of the measurement curve is straightened out.

Ist auf der lichtstreuenden Unterlage eine absorbierende Substanz aufgetragen, so wird dadurch sowohl der P.cmissions- als auch der Transmissionsgrad vermindert. Die substanzspezifische Absorption beeinflußt also Remissions- und Transmissionssignal im gleichen Sinne, so daß durch Addition dieser Signale Her zu messend; Effekt verstärkt wird.If an absorbing substance is applied to the light-scattering base, both the P.cmission and the transmittance decreased. The substance-specific absorption thus affects the remission and transmission signal in the same sense, so that by adding these signals Her to be measured; Effect is reinforced.

Wie ohne weiteres zu sehen ist. bringt das neue Verfahren bei der Auswertung von Dünnschieht-Chromatogrammen den Vorteil mit sich, daß die streuungsbedingte, d. h. substanzunspezifische Abhängigkeit der Lichtstreuung vom Ort auf der Trennschicht automatisch während der Messung beseitigt wird, während das eigentliche substanzspezifische Meßsignal gleichzeitig verstärkt wird.As can be seen without further ado. brings the new method to the evaluation of thin sheet chromatograms with the advantage that the scattering-related, d. H. substance-unspecific dependence the light scattering from the location on the interface is automatically eliminated during the measurement while the actual substance-specific measurement signal is amplified at the same time.

Um zu erreichen, daß die streuungsbedingten Remissions- und Transmissionssignale sich bei der Addition möglichst vollständig kompensieren, ist es notwendig, die Amplituden beider Signale vor der Addition auf gleiche Höhe zu bringen. Dies geschieht vorteilhaft dadurch, daß man die Empfindlichkeit eines Empfängers gegenüber der des anderen herabsetzt. Im allgemeinen wird die Empfindlichkeit des Transmissionscmpfängers herabgesetzt, da dieser die vom Objekt durchgelasscne Meßstrahlung nahezu vollständig erfaßt, während der Remissionsempfänger das diffus reflektierte Meßlicht nur in einem begrenzten Raumwinkel erfaßt.In order to ensure that the scattering-related remission and transmission signals compensate each other as completely as possible during the addition, it is necessary to to bring the amplitudes of both signals to the same level before the addition. This is done advantageously by reducing the sensitivity of one receiver to that of the other. in the In general, the sensitivity of the transmission receiver is reduced, since this is the from the object durchgelasscne measurement radiation almost completely recorded, while the remission receiver diffuse reflected measuring light detected only in a limited solid angle.

Durch diese Maßnahmen erreicht man. daß sichThrough these measures one achieves. that himself

die von der Trennschicht herrührenden Schwankungen der Basislinie nur noch in Größenordnungen der eigenen elektronischen Instabilität des gewinnen Systems bewegen.the fluctuations in the baseline caused by the separating layer are only orders of magnitude the win's own electronic instability Move the system.

Die Vorrichtung zur Durchführung des neuen \ erfahrens ist vorteilhaft so ausgebildet, daß die Meß- -o strahlung senkrecht ; ■ 11 f die Oberfläche des auszuwertenden Objekts aufiiittt. daß oberha'b dieser Oberfläche ein erster und unterhalb des Objekts ein /weiter photoolektiischer Empfänger angeordnet ist und daß beide Empfänger mit einer Anordnung zur Addition der Signale verbunden sind. Diese Anordnung steht ihrerseits zweckmäßig mit einem Schreiber in Verbindung, welcher die resultierende Absorptions-Orts-Kurve aufzeichnet.The device for performing the new \ experience is advantageously designed so that the measuring -o radiation perpendicular; ■ 11 f the surface of the to be evaluated Object. that above this surface a first and below the object a / further photoolektiischer receiver is arranged and that both receivers are connected to an arrangement for adding the signals. This arrangement is in turn conveniently connected to a recorder, who draws the resulting absorption-location curve records.

Es ist vorteilhaft, die phi- ..elektrischen Hmplänger über unabhängig voneinander regelbare Verstärker mit der Additions-Anordnung zu verbinden.It is advantageous to use the phi- ..electric Hmplänger to be connected to the addition arrangement via independently controllable amplifiers.

Zweckmäßig ist es zur F.rfassung des remittierten und des transmittierten Lichtes. Photometerkugeln der faseroptische Einrichtungen vorzusehen. Die Erfindung wird im folgenden an Hand der F i g. 1 bis ft der Zeichnun« näher erläutert. Im einzelnen zeigtIt is useful for capturing the reflected and transmitted light. Photometer spheres of fiber optic facilities. The invention is hereinafter based on the F i g. 1 to ft of the drawing «explained in more detail. In detail indicates

F- i g. 1 eine durch Messung der remittierten Strahlung aufgenommene Absorptions-Orts-Kurve eines Dünnschicht-Chromatogramms sowie die zugehörige Basislinie,F- i g. 1 shows an absorption-location curve of a recorded by measuring the remitted radiation Thin-layer chromatogram and the associated baseline,

F i g. 2 die durch Messung der transmittierten Strahlung aufgenommene Absorptions-Orts-Kurve desselben Dünnschicht-Chromatogramms sowie die zugehörige Basislinie.F i g. 2 the absorption-location curve recorded by measuring the transmitted radiation of the same thin-layer chromatogram and the associated baseline.

F i g. 3 eine mit Hilfe des neuen Verfahrens aufgenommene Absorptions-Orts-Kurve sowie die zugehörige Basislinie,F i g. 3 shows an absorption-location curve recorded with the aid of the new method and the associated one Baseline,

F i g. 4 den schematischen Aufbau einer Vorrichtiing zur Durchführung des neuen Verfahrens.F i g. 4 shows the schematic structure of a device to carry out the new procedure.

F i g. 5 ein Ausführungsbcispiel einer Vorrichtung, bei welchem zur integralen Erfassung der Strahlung Photometerkugeln vorgesehen sind.F i g. 5 shows an exemplary embodiment of a device in which for the integral detection of the radiation Photometer spheres are provided.

F i g. Ο ein weiteres Alisführungsbeispiel der Vorrichtung, bei welchem faseroptische Einrichtungen zur Zuführung des Meßlichtes sowie zur Erfassung der remittierten und der transmittierten Strahlung vorgesehen und.F i g. Ο Another example of the implementation of the device, in which fiber-optic devices are provided for supplying the measuring light and for detecting the reflected and transmitted radiation.

In Fig.! ist mit 1 eine Absorptions-Orts-Kurve bezeichnet, die durch Registrierung der remittierten Strahlung bei der Auswertung eines Dünnschicht-Chromatogramms erhalten wurde. Wie man erkennt, ist dem zu messenden Effekt eine in Abhängigkeit vom Ort an der Trennschicht unterschiedliche Lichtstreuung überlagert.In Fig.! is an absorption-location curve with 1 referred to by registering the remitted radiation when evaluating a thin-layer chromatogram was obtained. As you can see, the effect to be measured is dependent on superimposed different light scattering from the location at the separating layer.

Die zur Kurve ! gehörende Basislinie isl mit 2 bezeichnet. Diese Basislinie ist sehr ungleichmäßig, und es macht bei der Auswertung große Schwierigkeiten, die schraffiert eingezeichnete Fläche mit genügender So Genauigkeit zu bestimmen. The one to the curve! corresponding baseline is labeled 2. This baseline is very uneven, and it makes great difficulties in the evaluation to determine the hatched area with sufficient accuracy.

Wertet man dasselbe Dünnschicht-Chromaio- gramm dessen durch Remissionsmessung gewonnene Absorptions-Orts-Kurve in F i g. 1 dargestellt ist in Transmission aus, so erhält man die in F i g. 2 mit 1' bezeichnete Absorptions-Orts-Kurve. Die zugehörige Basislinie ist mit 2' bezeichnet. If one evaluates the same thin-film Chromaio- program whose local absorption curve obtained by reflectance measurement in F i g. 1 is shown in transmission from, one obtains the in FIG. 2 absorption-location curve labeled 1 '. The associated baseline is denoted by 2 '.

Wie eine vergleichende Betrachung der F i g. I und 2 zeigt, sind die auf nichtsubstanzbedingtc EffekteAs a comparative consideration of the F i g. I and 2 show the non-substance related effects

zurückgehenden Basislinicn 2 und 2' in etwa spiegelbildlich zueinander. Die substanzspezifische Absorption dagegen beeinflußt die Kurven 1 und 1' im gleichen Sinne.decreasing base lines 2 and 2 'roughly mirror images of each other. The substance-specific absorption however, affects the curves 1 and 1 'in the same sense.

Gemäß der Erfindung wird nun zur Bestimmung der Absorptions-Orts-Kurve eine Vorrichtung verwendet, wie sie schematisch in F i g. 4 dargestellt ist. Das von einer Lichtquelle 3 ausgehende Licht wird im Monochromator 4 monochromatisiert und fällt über den Umlenkspiegel 5 auf das mit 6 bezeichnete Dünnschicht-Chromatogramm. Das Meßlicht trifft unter einem Winkel von 0" zur Flächennormale auf die Trennschicht des Chromatogramms 6 auf. Mittels des photoelektrischen Empfängers 7 wird die diffus remittierte Strahlung gemessen, während gleichzeitig der Empfänger 8 die transmittierte Strahlung mißt. Das vom Empfänger? erzeugte Signal wird im Verstärker 9 verstärkt und einer Addierstufe 11 zugeführt. Dieser wird auch das Signal des Empfängers 8 nach Verstärkung im Verstärker 10 zugeführt. Die beiden Verstärker 9 und 10 sind vorzugsweise unabhängig voneinander regelbar, so daß die Amplituden der substanzunspezifischcn Signale auf gleiche Höhe gebracht werden können. Das in der Anordnung 11 erzeugte Additionssignal gelangt zum Schreiber 12.According to the invention, a device is now used to determine the absorption-location curve, as shown schematically in FIG. 4 is shown. The light emanating from a light source 3 is monochromatized in the monochromator 4 and falls over the deflecting mirror 5 onto the one labeled 6 Thin-layer chromatogram. The measuring light strikes at an angle of 0 "to the surface normal the separating layer of the chromatogram 6. By means of the photoelectric receiver 7, the becomes diffuse remitted radiation measured while the receiver 8 measures the transmitted radiation at the same time. That from the recipient? The generated signal is amplified in the amplifier 9 and fed to an adder 11. This is also fed the signal from the receiver 8 after amplification in the amplifier 10. the both amplifiers 9 and 10 can preferably be regulated independently of one another, so that the amplitudes the substance-unspecific signals can be brought to the same level. In the arrangement 11 The addition signal generated is sent to the recorder 12.

Die vom Schreiber 12 registrierte Absorptions-Orts-Kurve 13 ist in Fig.3 dargestellt. Die zu dieser Kurve gehörende Basislinie ist ebenfalls in F i g. 3 dargestellt und ist dort mit 14 bezeichnet. Wie man erkennt, ist jetzt die Basislinie so weit eingeebnet, daß die von Ungleichmäßigkeiten der Trennschicht herrührenden Schwankungen nur noch in der Größenordnung der eigenen elektronischen Instabilität des gesamten Systems liegen. Die Auswertung der Kurve 13 ist jetzt verhältnismäßig einfach und kann vor allem mit großer Genauigkeit vorgenommen werden. The absorption location curve 13 registered by the recorder 12 is shown in FIG. The to this The baseline belonging to the curve is also shown in FIG. 3 and is denoted by 14 there. How one recognizes, the baseline is now leveled so far that that of irregularities in the separating layer resulting fluctuations only in the order of magnitude of one's own electronic instability of the entire system. The evaluation of curve 13 is now relatively simple and can above all, be made with great accuracy.

Wie ohne weiteres einzusehen ist, läßt sich mit dem neuen Verfahren auch die Nachweisgrenze verbessern, da die Ausschläge der Meßkurve, soweit sie für eine Auswertung in Betracht kommen, nur noch auf substanzspezifische Effekte zurückzuführen sind.As can be seen without further ado, the detection limit can also be improved with the new method, because the deflections of the measurement curve, insofar as they come into consideration for an evaluation, only can be attributed to substance-specific effects.

Bei dem in F i g. 5 dargestellten Ausführungsbeispiel ist oberhalb der Chromatogrammplatte 6 eine Photometerkugcl 15 angeordnet, welche eine öffnung 16 zum Durchtritt der Meßstrahlung 17 enthält. Die von der Trennschicht der Platte 6 diffus reflektierte Strahlung gelangt gegebenenfalls nach mehrfacher Reflexion an der Photometerkugel 15 zum photoelektrischen Empfänger 18. Unterhalb der Platte 6 ist eine weitere Photometerkugel 19 angeordnet, welche den photoelektrischen Empfänger 20 enthält. Die durch die Trennschicht der Chroniatogrammplattc 6 tretende Strahlung gelangt gegebenenfallsIn the case of the FIG. 5 shown embodiment is above the chromatogram plate 6 a Photometerkugcl 15 arranged, which has an opening 16 for the passage of the measuring radiation 17 contains. The diffusely reflected from the separating layer of the plate 6 If necessary, after multiple reflections at the photometer sphere 15, radiation arrives at the photoelectric Receiver 18. Below the plate 6, another photometer sphere 19 is arranged, which contains the photoelectric receiver 20. The through the separating layer of the Chroniatogrammplattc 6 penetrating radiation may get there

ίο nach mehrfacher Reflexion an der Photometerkugel 19 zum Empfänger 20.ίο after multiple reflections on the photometer sphere 19 to recipient 20.

Bei dem in F i g. 5 gezeigten Ausführungsbeispiel gelingt es sowohl die remittierte als auch die transmittierte Strahlung weitgehend integral zu erfassen.In the case of the FIG. The embodiment shown in FIG. 5 succeeds in both the remitted and the transmitted To capture radiation largely integrally.

Dadurch wird die Meßgenauigkeit gegenüber einer einfachen Vorrichtung noch erhöht.This increases the accuracy of measurement compared to a simple device.

In F i g. 6 ist mit 6 wiederum eine Chromatogrammplatte bezeichnet. Die Meßstrahlung 17 wird über ein Glasfaserbündel 21 zu der auszuwertendenIn Fig. 6 is again a chromatogram plate with 6 designated. The measuring radiation 17 is to be evaluated via a glass fiber bundle 21

ao Stelle der Platte 6 geleitet. Das Bündel 21 ist an dieser Stelle geteilt, und das Teilbündel 21' leitet das diffus remittierte Licht zu der mit 22 bezeichneten photoelektrischen Zelle. Unterhalb der Auftreffstelle des Meßlichtes 17 ist ein weiteres Glasfaserbündel 23 angeordnet, \ elches die transmittierte Strahlung erfaßt und zum photoelektrischen Empfänger 24 leitet. Es ist auch möglich, die hier dargestellte Vorrichtung so abzuwandeln, daß nur meßseitig Glasfaserbündel zur Lichtleitung vorgesehen sind.ao point of the plate 6 passed. The bundle 21 is divided at this point, and the partial bundle 21 'conducts this diffusely remitted light to the photoelectric cell labeled 22. Below the point of impact of the Measuring light 17, a further glass fiber bundle 23 is arranged, which detects the transmitted radiation and to the photoelectric receiver 24. It is also possible to use the device shown here to modify that only on the measuring side glass fiber bundles are provided for light guidance.

Bei dem in Fig.4 dargestellten Ausführungsbeispiel ist es auch möglich, auf die beiden Verstärker 9 und 10 zu verzichten. In diesem Fall wird die Empfindlichkeit des Transmissionsempfängers 8 so weit herabgesetzt, daß die von den beiden Empfängern 7 und 8 gelieferten substanzunspezifischen Signale gleiche Amplituden aufweisen. Die Verstärkung der Signale kann in diesem Fall nach erfolgter Addition vorgenommen werden.In the embodiment shown in Figure 4 it is also possible to do without the two amplifiers 9 and 10. In this case, the sensitivity of the transmission receiver 8 reduced so far that the two receivers 7 and 8 non-substance-specific signals supplied have the same amplitudes. The reinforcement of the In this case, signals can be made after addition.

Bei dem neuen Verfahren ergeben sich Eichkurven, die zumindest im Bereich geringer Substanzmengen nahezu linear sind. Das neue Verfahren findet deshalb besonders zweckmäßig Anwendung zur Auswertung von Dünnschicht-Chromatogrammen, bei denen nur sehr geringe Substanzmengen zur Verfügung stehen.The new method results in calibration curves that are at least in the range of small amounts of substance are almost linear. The new method is therefore particularly expediently used for evaluation of thin-layer chromatograms in which only very small amounts of substance are available stand.

Hierzu 1 Blatt Zeichnungen1 sheet of drawings

Claims (7)

1 2 zeichnet wird. Das zu trennende und in Lösung be- I'atentansprüche: findhche Substanzgemisch wird an einer beshmmten Stelle punkt- oder bandförmig auf die Trennschicht1 2 is drawn. The mixture of substances to be separated and in solution is applied to the separating layer at a specific point in the form of a point or band 1. Verlahren zur photonietrischen Auswertung aufgetragen. Danach wird die Platte in eine Kammer der sich bei der Auftrennung win Substanzgemi- 5 gestellt, die ein geeignetes Fließmittel enthält. Bei der sehen in dünnen Schichten aus lichtstreuendem jetzt einsetzenden Entwicklung wandert das Fließ-Material ergebenden Zonen, dadurch ge- mittel durch Kapillarkräfte über die Trennschicht, kennzeichnet, daß an der gleichen Stelle wobei das Substanzüemisch aufgetrennt wir·]. Nach des auszuwertenden Objektes simultan die diffns beendeter Entwicklung befinden sich die verschiedereflektierle und die durchgelassene Strahlung ge- ;o nen Substanzen des Gemisches an verschiedenen messen und die so erhaltenen beiden Signale ad- Stellen der Trennschicht, d. h. es haben sich Subdiert werden. stanzzonen gebildet.1. Procedure for photometric evaluation applied. After that, the plate is placed in a chamber which arises during the separation of a substance mixture which contains a suitable superplasticizer. In the The flow material migrates in thin layers of light-scattering development that is now beginning resulting zones, by means of capillary forces across the separating layer, indicates that the substance mixture is separated at the same point where we ·]. To of the object to be evaluated simultaneously the diffns finished development are the different reflective and the transmitted radiation from different substances of the mixture measure and the two signals thus obtained ad sites of the separating layer, d. H. there have been subdued will. punching zones formed. 2. Verfahren nach Anspruch!, dadurch ge- Die eigentliche Aufgabe besteht nun üarin. das kennzeichnet, daß die Amplituden beider Signale entwickelte Dünnschiehi-Chromatoeramni qualitativ vor der Addition auf gleiche Höhe gebracht wer- 15 und quantitativ auszuwerten. Zur Auswertung von den. Dünnschicht-Chromatogrammen ist es bekannt, die2. The method according to claim !, thereby- The actual task is now üarin. that indicates that the amplitudes of both signals developed thin-slide chromatoeramni qualitatively be brought to the same level before the addition and evaluated quantitatively. To evaluate the. Thin-layer chromatograms are known to have 3. Verfahren nach Anspruch 2. dadurch ge- Substanzflecken zunächst nachzuweisen, danach die kennzeiehnel. daß die Empfindlichkeit eines Si- Trennschicht im Bereich der einzelnen Substanztlekgnalemptängi. . gegenüber der des anderen her ken abzukratzen, die Substanzen aus dem Sorptionsabgesetzt wird. 20 mittel zu eluieren und dann qualitativ oder quantita-3. The method according to claim 2. thereby initially detecting substance stains, then the mark. that the sensitivity of a Si separating layer in the area of the individual substances is small . to scrape off the substances from the sorption will. 20 to elute and then qualitatively or quantitatively 4. Wirrichtung zur Durchführung des Verfah- tiv zu bestimmen. Dieses Auswerteverfahren ist recht rens nach Anspruch 1. dadurch gekennzeichnet, umständlich und nicht immer zu verwenden, da ein daß die Meßstrahlung senkrecht auf die Ober- Rückgew innungsverlust nicht zu vermeiden ist.
fläche des auszuwertenden Objektes (6) auftrifft. Fs ist auch bekannt. Dünnschicht-Chromatodaß oberhalb dieser Oberfläche ein erster (7) und 25 gramme direkt auszuwerten. Dazu mißt man die bei unterhalb des Objektes ein zweiter photoelektri- Abtastung des Chromatogramms mit einem Lichtscher Empfänger (8) angeordnet ist und daß bündel konstanter Intensität auftretende unterschiedbeide Empfänger mit einer Anordnung (H) zur liehe Absorption des Lichtes oder bei fluoreszieren-Addition der Signale verbunden sind. den Substanzen die Emission der Substanzzone.
4. We determine the direction of implementation of the procedure. This evaluation method is quite rens according to claim 1, characterized in that it is cumbersome and not always to be used, as a that the measurement radiation perpendicular to the upper recovery loss cannot be avoided.
surface of the object (6) to be evaluated. Fs is also known. Thin-layer chromatography that a first (7) and 25 grams can be evaluated directly above this surface. To do this, one measures the under the object a second photoelectri- scanning of the chromatogram with a light shear receiver (8) and that bundles of constant intensity occurring different two receivers with an arrangement (H) for the absorption of the light or fluorescent addition of the signals are connected. the substances the emission of the substance zone.
5. Vorrichtung nach Anspruch 4. dadurch ge- 30 Die Messung der Absorption geschieht bei Objekkennzeichnet. daß die photoelt' irischen Empfän- ten. die keine oder nur eine geringe Lichtstreuung ger (7. 8) über unabhängig voneinander regelbare hervorrufen, durch Messung der Transmission. Bei Verstärker (9. 10) mit der Addi ons-Anordnung lichtstreuenden Objekten, z. B. bei Dünnschicht-(11) verbunden sind. Chromatogrammen. ist es vor einer Transmissions-5. The device according to claim 4, characterized in that the absorption is measured when the object is identified. that the photoelt 'Irish recipients. the little or no light scattering ger (7. 8) via independently controllable cause by measuring the transmission. at Amplifier (9. 10) with the Addi ons arrangement of light-diffusing objects such. B. with thin-film (11) are connected. Chromatograms. is it in front of a transmission 6. Vorrichtung nach Anspruch 4. dadurch ge- ?5 messung erforderlich, das Objekt mit Hilfe einer kennzeichnet, daß beide Oberflächen des aus- Flüssigkeit mit geeignetem Brechungsindex transzuwertenden Objektes (6) mit Photometcrkugeln parent zu machen. Wegen dabei auftretender EIu-(15. 19) in Kontakt stehen, welche die photoelek- tionseffekte ist ein solches Verfahren zur Auswertung irischen Empfänger (18. 20) enthalten. von Dünnschicht-Chromatogrammen kaum zu emp-6. The device according to claim 4. thereby? 5 measurement is required, the object with the help of a characterizes that both surfaces of the object (6) to be evaluated from liquid with a suitable refractive index must be rendered parent with photometer spheres. Such a method for evaluating Irish receivers (18.20) is included because EIu- (15. 19) are in contact with them, which cause the photoelection effects. hardly to be received by thin-layer chromatograms 7. Vorrichtung nach Anspruch 4. dadurch ge- 40 fehlen.7. Device according to claim 4, thereby missing. kennzeichnet, daß faseroptische Einrichtungen In den letzten Jahren ist man dazu übergegangen,indicates that fiber optic equipment has been used in recent years (21. 2Γ. 23) zur Zufuhr des Meßlichtes (17) und' die Auswertung von Dünnschicht-Chromatogram-(21. 2Γ. 23) for supplying the measuring light (17) and 'the evaluation of thin-layer chromatogram oder zur Erfassung der transmittierten und/oder men in Remission vorzunehmen. Dazu wird dasor to record the transmitted and / or men in remission. This will be the der remittierten Strahlung vorgesehen sind. Chromatogramm von einem monochromatischenthe remitted radiation are provided. Chromatogram of a monochromatic 45 Lichtbündel in Trennnchtung abgetastet, und die Intensität der diffus reflektierten Meßstrahlung wird45 light bundles scanned in Trennnchtung, and the intensity the diffusely reflected measurement radiation mit einem photoelektrischen Empfänger gemessenmeasured with a photoelectric receiver und beispielsweise in Abhängigkeit vom Ort mit einem Schreiber aufgezeichnet. Befinden sich auf derand recorded with a recorder, for example, depending on the location. Located on the Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren 50 Trennschicht lichtabsorbierende Substanz-Flecke, so zur photometrischen Auswertung der sich bei der wird die Remissionsstrahlung in den Wellenlängen-Auftrennung von Substanzgemische!·, in dünnen bereichen geschwächt, wo auch bei Transmissions-Schichten aus lichtstreuendem Material ergebenden messungen entsprechender Lösungen Absorptions-Zonen. Diese Aufgabe stellt sich beispielsweise bei banden auftreten wurden. Die Intensität der diffus tier Auswertung von Pherogrammen oder Chromato- 55 reflektierten Meßstrahlung ist deshalb ein Maß für grammen. die durch die Substanz verursachte Absorption. Die Das Verfahren nach der Erfindung und seine Wir- bei der Abtastung erhaltene Absorptions-Orts-Kurve kungsweise wird im folgenden am Beispiel der Aus- kann mit Hilfe der Kubelka-Munk-Funktion quantiwertung von Dünnschicht-Chromatogrammen be- tativ ausgewertet werden.The present invention relates to a method 50 separating layer light absorbing substance stains, see above for the photometric evaluation of which is the reflection radiation in the wavelength separation by substance mixtures! ·, weakened in thin areas, where also in the case of transmission layers Measurements of corresponding solutions resulting from light-scattering material absorption zones. This task arises, for example, in the case of gangs. The intensity of the diffuse The evaluation of pherograms or chromato- 55 reflected measurement radiation is therefore a measure for gram. the absorption caused by the substance. The absorption-location curve obtained during the scanning. The method according to the invention and its effects The following example uses the Kubelka-Munk function to quantify the evaluation evaluated by thin-layer chromatograms. schrieben, ohne daß dadurch der Anwendungsbe- 60 Bei der geschilderten Auswertung durch Messungwritten without thereby affecting the application reich dieses Verfahrens eingeschränkt werden soll. der diffus reflektierten Meßstrahlung ist dem zu mes-rich of this procedure should be restricted. the diffusely reflected measuring radiation is to be measured Die Dünnschicht-Chromatographie ist ein moder- senden Effekt stets eine in Abhängigkeit vom Ort aufThin-layer chromatography is a modern effect that always depends on the location nes analytisches Trennverfahren für organische und der Trennschicht unterschiedliche Lichtstreuungnes analytical separation process for organic and the separation layer different light scattering anorganische Substanzgemische. überlagert, welche sich vor allem bei geringen Sub-inorganic substance mixtures. superimposed, which is particularly evident in the case of low sub- Auf einer meist aus Glas bestehenden Trägerplatte 65 stanzmengen sehr nachteilig bemerkbar macht undOn a mostly made of glass support plate 65 makes punching quantities very disadvantageous and noticeable ist eine dünne, aus feinkörnigem lichtstreuendem die Nachweisgrenze verschlechtert. Diese substanz-is a thin, made of fine-grained light-scattering the limit of detection worsened. This substance Material bestehende C'-hicht des Sorptionsmittels. unspezifische Abhängigkeit der Lichtstreuung vomMaterial consisting of C'-layer of the sorbent. unspecific dependence of the light scattering on z. B. Kieselgel, aufgetragen, üi? als Trennschicht be- ' Ort kann eine sehr ungleichmäßige Basislinie derz. B. silica gel, applied, üi? Be 'site as a separating layer can have a very uneven baseline
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