DE1300817B

DE1300817B - Verfahren zur Herstellung von carotinoidhaltigen Futterzusatzmitteln, insbesondere fuer Gefluegelfuttermittel

Info

Publication number: DE1300817B
Application number: DES89876A
Authority: DE
Inventors: Prieto Augustin; Dipl-Landw Celestini; Marnati; Dipl-Landw Maria Pia; Spalla
Original assignee: Farmaceutici Italia SpA
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1963-03-11
Filing date: 1964-03-06
Publication date: 1969-08-07
Also published as: ES297462A1; CH469090A; BR6457397D0; US3330737A; DK117815B; BE644957A; AT244133B; SE321138B; NL6402201A; GB1014589A

Description

Die Erfindung bezieht sich auf mikrobiologisches Verfahren zur Herstellung eines carotinoidhaltigen pigmentierungs- und wachstumsfördernden Futtermittelzusatzes durch Verwendung eines neuen Mutanten des Stammes Streptomyces chrestomyceticus, der von dem Erfinder Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus benannt wird. Das durch das mikrobiologische Verfahren gewonnene carotinoidhaltige Mycel wird alsdann von der Aminosydin enthaltenden Gärungsbrühe abgetrennt sowie nach Trocknen und Vermählen üblichen Futtermitteln zugesetzt.

Die aus Carotin und Xanthophyll bestehenden Carotinoide sind bekannte Verbindungen, die durch eine Vitamin A ähnliche Aktivität, durch eine hohe pigmentierende Kraft und durch die Eigenschaft, die Körpergewichtszunahme insbesondere bei Geflügel zu beschleunigen, gekennzeichnet sind. Es sind in der Literatur einige Methoden zur Herstellung von Carotinoiden (Carotene und Xanthophyll) auf fermentativem Wege bekannt: Die USA.-Patentschrift 2 974 044 beschreibt die Fermentierung eines der Familie der Dacrymycetaee angehörigen Pilzes unter Lichtbestrahlung; die britische Patentschrift 854419 beschreibt die Fermentierung von Pilzen, die der Mucorales angehören, und die USA.-Patentschrift 2 949 700 die Kultivierung von Chlorophyta-Algen.

In der USA.-Patentschrift 2 841 495 wird ein Futtermittel beschrieben, das vorzugsweise aus Xantophyllen bestehende Carotinoid-Pigmente enthält, die in ein entfettetes Pflanzenöl übergeführt werden.

Hingegen besteht das Futterzusatzmittel nach dem Verfahren der Erfindung aus dem trockenen Mycel des Mikroorganismus Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus (Stamm 1131 der Farmitalia-Sammlung), dem geeignete Substanzen zugesetzt sind.

Das trockene Mycel enthält nicht nur Xantophylle, sondern Carotinoidstoffe, die aus Xantophyllen und Carotenen in festgesetztem Durchschnittsverhältnis bestehen. Man hat nun gefunden, daß der neue Mikroorganismus Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus Carotinoide nach einem Verfahren zu erzeugen vermag, das im Vergleich zu dem bekannten wesentliche Vorteile besitzt, höhere Ausbeuten ergibt und keine besonderen Maßnahmen, wie die Lichtbestrahlung, benötigt.

Der neue Mikroorganismus Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus wird durch eine mutagene Behandlung des bekannten Stammes Streptomyces chrestomyceticus erhalten. Dieser Stamm Streptomyces chrestomyceticus, der das Antibiotikum Aminosydin herzustellen vermag (USA.-Patentschrift 3 065 147) ist das Synonym von Streptomyces chrestomyceticus (G. Canevazzi und Mitarbeiter, Giornale di microbiologia, 7, 1959, S. 242 bis 250).

Als mutagenes Mittel wird eine der Literatur (G. Z e 11 e r b e r g, Exp. Cell Res., 20, 1960, S. 659)

ίο bekannte Pufferphosphaltlösung von N-Nitroso-N-methyl-urethan angewandt. Von dem nach der besagten Behandlung erhaltenen Mycel werden die überdauernden. Mikroorganismen auf einem geeigneten Nährboden nach den bekannten Techniken getrennt und die Stämme, die fähig sind, Carotinoide zu produzieren, ausgewählt.

Der neue Mikroorganismus Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus besitzt folgende morphologischen und biochemischen Eigenschaften:

Mikroskopisches Aussehen

Auf den gewöhnlichen Kulturnährböden zeigt das vegetative Mycel dünne (0,5 bis 1 μ Dicke), mehr oder weniger lange verzweigte Hyphen. Die Hyphen sind gewöhnlich gerade, aber manchmal werden auch Haken und Spiralen beobachtet. Die Konidien sind entweder zylindrisch oder oval geformt, mit veränderlichen Dimensionen: 0,3—0,4 μ, bis 0,6—0,8 μ.

Makroskopisches Aussehen

In der Tabelle sind die auf den angezeigten Nährböden bemerkten Kultureigenschaften eingetragen, wobei man den Mikroorganismus bei 28 ⁰C wachsen ließ und die Beobachtungen 3, 8,15, 21, 30 Tage nach der Impfung durchführte.

Biochemische Eigenschaften

Er hydrolysiert sowohl Gelatine als auch Stärke. Nitrate werden nicht reduziert. Schwefelwasserstoff wird nicht gebildet. Folgende Kohlenhydrate werden unter Säurebildung verwertet: Trehalose, d-Lävulose, d-Sorbit, d-Mannose, Galaktose, Lactose, Adonit, d-Mannit, Maltose, Glyzerin, Dextrose, Dextrin, Stärke. Rhamnose, 1-Arabinose, d-Xylose und Saccharose werden nicht verwertet. Tyrosin wird zerstört. Milch wird ohne Koagulation peptonisiert. Carotinoide werden in flüssiger Submerskultur gebildet.

Nährböden	Wachstum	Luftmycel	Vegetatives Mycel	Lösliche Pigmente
Kartoffel-	dünn gefaltete Patina	karg, weiß-gelblich	orangegelb	keine
Glucose — Agar²)
Bennet-Agar¹)	körnige Patina mit	abwesend	dunkel	—
	Falten am Boden		orangefarbig
Enerson-Agar¹)	reichliche likenoidi-	abwesend	dunkel-	—
	sche Patina		orangegelb
Ozapek-Agar¹)	schleierförmig	abwesend	gelb	—
Asparagin-Agar¹)	reichliche Patina	karg, schmutzigweiß	orangegelb	—
Agar — Glyzerin	reichlich mit dichten	karg, schmutzigweiß	braun	—
Glycin¹)	Falten		orangefarbig
Pridhams-Stärke und	dünne körnige Patina	karg, schmutzigweiß	stark	—
Salze³)			orangefarbig
Hafermehl-Agar^s)	glatte, matte körnige	karg, weißgelblich	dunkel	—
	Patina		orangefarbig
Agar — Glyzerin	Patina	karg, weißgelblich	stark	—
Asparagin			orangefarbig

^x)Hergestellt nach Waksman, »The Actinomycetes — Vol.II, 1961, S. 328 bis 333«. ²)Hergestellt nach Baldacci und Mitarbeiter, »Giornale di microbiologia, 9, 1961, S.39«. *) Hergestellt nach P r i d h a m und Mitarbeiter, »Antibiotics manual, 1956—1957, S. 947 bis 953«.

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Identifizierung des Stammes Die Gärung kann in Laboratoriumskolben oder in

Der Stamm 1131 unterscheidet sich von Strepto- Laboratoriumsfermentern oder in industriellen Gefäßen myces chrestomycestieus insofern, als er Nitrate nicht verschiedener Kapazität durchgeführt werden,

reduziert, Milch peptonisiert, ein spärliches Luftmycel Im besonderen hat man gefunden, daß die Carosowie ein vegetatives, intensiv pigmentiertes, orange- 5 tinoidproduktion angeregt wird, wenn man als Koh-

gelbfarbiges Mycel hat und Carotinoide produziert. lenstoffquelle Glucose, Dextrin, Lactose oder Mannit Sowohl nach seiner Herkunft als auch nach seinen verwendet.

Eigenschaften, die nicht sehr unterschiedlich von denen Gute Ausbeuten erzielt man, wenn man als Kohlendes Streptomyces chrestomyceticus sind, kann ange- stoffquelle Sojabohnenöl und Baumwollsamenöl vernommen werden, daß der geprüfte Mikroorganismus io wendet. Im allgemeinen fördert eine starke Belüftung als Art des S.chrestomyceticus betrachtet werden muß; die Produktion der Carotinoide,
er wird deshalb als S.chrestomyceticus var. aurantioi- Es wurde gefunden, daß der entsprechend der vordeus bezeichnet. liegenden Erfindung hergestellte und aus dem Mycel

Auf Grund dessen, was aus der Literatur bekannt des Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus

ist, kann man annehmen, daß S.chrestomyceticus var. 15 bestehende Futtermittelzusatz das Wachstum der be-

aurantioideus sich von den anderen bekannten Mikro- handelten Tiere bedeutend fördert und außerdem,

Organismen, und zwar insbesondere von den folgen- wenn er dem Geflügel verabreicht wird, eine bedeutende

den, die einige gemeinsame Eigenschaften aufweisen, pigmentierende Kraft besitzt,

unterscheidet: Besonders gute Resultate wurden bei Hühnern,

Der Stamm 1131 unterscheidet sich von Strepto- 20 Truthähnen, Enten, Schweinen und Rindern erzielt,
myces rimosus forma, paromomycinus (belgische Pa- Zur Herstellung des Futtermittelzusatzes, entspretentschrift 547 976) dadurch, daß er keine Spiralen chend der vorliegenden Erfindung, wird zweckmäßig formt und durch die Farbe des vegetativen Mycels, das carotinoidhaltige Mycel direkt verwendet. Zu diedie beim Stamm 1131 intensiv orange gegenüber färb- sem Zweck wird das bei der Gärung gebildete Mycel los bis hellgelb beim Zweiterwähnten ist. Der Stamm 25 von der Kulturbrühe nach bekannten Verfahren, vor-1131 unterscheidet sich von Streptomyces catenulae zugsweise durch Filtrieren oder Zentrifugieren, ge-(USA.-Patentschrift 2 895 876) dadurch, daß letzterer trennt, wobei es dann nach bekannten Verfahren mit ein vegetatives Mycel von mehr oder weniger starker Warmluft und im Vakuum getrocknet wird,
brauner Farbe mit grünlichen Umrissen sowie ein Im Durchschnitt werden 20 bis 60 g trockener Rückgraues Luftmycel als auch ein im Substrat lösbares 3° stand aus 11 Kulturbrühe erhalten. Der trockene Pigment aufweist. Außerdem unterscheidet sich der Rückstand enthält 0,2 bis 1 %■ Carotinoide, wovon 10 Stamm 1131 von Streptomyces pulveraceus (franzö- bis 60 % aus Carotin und 40 bis 90 % aus Xanthophyll sische Patentschrift 1294 212), weil letzterer Spiralen bestehen.

formt sowie größere Sporen und graues Luftmycel Das trockene Mycel wird dann in gewöhnlichen

aufweist. 35 Mühlen oder auf andere, hierfür geeignete Art ge-

Das Verfahren der vorliegenden Erfindung besteht mahlen, worauf das so erhaltene Pulver üblichen einerseits in der Züchtung des Streptomyces chresto- Futtermittelmischungen einverleibt wird,
myceticus in an sich bekannter Weise durch Submers- Solche Mischungen enthalten im allgemeinen Kohlegärung unter aeroben Bedingungen in Kohlenstoff- hydrate, Proteine, Vitamine und Mineralsalze,
und Stickstoffverbindungen sowie Mineralsalze und 40 Beispiele von Futtermittelkomponenten sind Weizen Spurenelemente enthaltenden wäßrigen Gärmedien bei und andere Getreideprodukte; Fleisch- und Fisch-Temperaturen zwischen 24 und 32°C, vorzugsweise rückstände als Tierproteinquelle; Sojabohnen als bei28°C, während einer Zeit zwischen 1 und 8 Tagen, Pflanzenproteinquelle; Vitaminkomplexe, die hauptvorzugsweise während 6 Tagen, bei einem pH-Wert sächlich Vitamin D, Vitamin PP und Vitamin Bj₂ entzwischen 5 und 8, Worauf das carotinoidhaltige Mycel 45 halten; Calciumcarbonat, Phosphate und Knochenvon der Gärungsbrühe durch Filtrieren und Zentrifu- mehl als Mineralsalze.

gieren in bekannter Weise abgetrennt wird, sowie in Um eine gleichförmige Verteilung des Mycels in der Beimischung getrockneten und gemahlenen Mycels dem Futtermittel zu erhalten, wird vorzugsweise das zu üblichen, ernährungsmäßig ausgeglichenen Futter- gemahlene Mycel mit einer der üblicherweise verwenmitteln in Mengen von etwa 150 bis 250 g je 100 kg 50 deten Futtermittelkomponenten, wie Calciumcarbonat Futtermittel. Als Kohlenstoffquelle können Stärke, oder Knochenmehl, vermischt.
Dextrin, Glukose, Lactose, Sorbit Destillationsrück- Für diesen Zweck kann ein beliebiger Mischer verstände, Maltose, Mannit, Glyzerin, Getreidequell- wendet werden. Die so erhaltene Mischung wird den flüssigkeit, Sojabohnenmehl, Baumwollsaatmehl od. anderen Futtermittelbestandteilen zugemischt,
dgl. verwendet werden. 55 . . . ..

Als Stickstoffquelle können außer den oben ange- Beispiel i

gebenen, Stickstoff enthaltende Substanzen und auch Nach der vorliegenden Erfindung wurde Strepto-

Trockenhefe, Fleischpepton, Kasein, Kaseinhydroly- myces chrestomyceticus var. aurantioideus folgender-

sat, Sojamehl, Malz, Lysin, Leucin, Tryptophan, maßen erhalten:

Asparagin, Alanin, Glutaminsäure od. dgl. verwendet 60 Eine stark verdünnte Suspension des Mycels von

werden. Gute Resultate werden auch erhalten, wenn Streptomyces chrestomyceticus wurde abgeschleudert

Ammoniumsalze verwendet werden, wie z. B. Am- und dem so erhaltenen Mycel eine Lösung eines

moniumnitrat, -sulfat oder -phosphat. mutagenen Mittels zugesetzt, die durch Lösen von

Die bei dem erfindungsgemäßen Verfahren verwen- 13 mg N-Nitroso-N-methylurethan in 1000 ml m/15

deten Mineralsalze können Natrium- oder Kalium- 65 Phosphatpuffer bei einem pH-Wert von 7,2 hergestellt

phosphate, Eisensulfat, Zink-, Magnesium-, Kupfer-, worden war. Die resultierende Mischung wurde

Calciumcarbonat oder andere, gewöhnlich für diesen 30 Minuten bei 24° C stehengelassen, wobei das Mycel

Zweck verwendete Salze sein. dann von der Lösung abzentrifugiert wurde. Die über-

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lebenden Mikroorganismen wurden auf Platten eines ZnSO₄ · 7H₂O 0,010 g

Nährbodens mit folgender Zusammensetzung isoliert: CuSO₄ · 5H₂O 0,001 g

Enzymatisches Casein-Hydrolysat ... 10 g f¹^¹ nicht eingestellt.

Glucose .. 10 g Stenlisierung: 20 Minuten bei 120⁰C.

Fleischextrakt 3 g ⁵ „,,... _n , .. , . „ - . , _Λ

Natriumchlorid 5 g ^{Nach 5ta}g^12er Bebrutung unter den im Beispiel 1

A_gar 20 g beschriebenen Bedingungen erhält man eine Ausbeute,

Leitungswasser 1000 e ^^{e e}i^{ner um} 500 y/ml höheren Menge an Carotinoiden

pH-Wert nicht eingestellt. entspricht.

Die überlebenden Kolonien wurden auf ihre Fähig-

keit, Aminosydin und Carotinoide zu bilden, geprüft. Die Gärung wird wie im Beispiel 1 durchgeführt,

Eine durch die Fähigkeit, große Mengen an Caro- jedoch mit dem Unterschied, daß in dem Produktions-

tinoiden und Aminosydin zu erzeugen, gekennzeich- nährboden die Glucose durch Dextrin ersetzt wird,

nete Kolonie wurde auf diese Weise ausgewählt und 15 In 144 Gärungsstunden werden 240 y/ml Carotinoide

mit der Nummer 1131 bezeichnet. erhalten.

Mit einer 8 Tage alten Kultur des Stammes 1131 B e i s ο i e 1 4 werden nun zur Herstellung einer Vorkultur 60 ml

des folgenden Nährbodens in einem 300-ml-Erlen- Die Gärung wird wie im Beispiel 2 durchgeführt, meyerkolben angeimpft: 20 jedoch mit dem Unterschied, daß in dem Produktions-Dextrin 30 g nährboden die Glucose durch eine 2°/„ige Baumwoll-

ICasein 5 g saatöl- und Sojabohnenölmischung ersetzt wird. Am

Caco 4 g ^" Gärungstag werden 200 y/ml Carotinoide erhalten.

(NH₄)IsO₄ Ig Beispiel 5

Getreideweichflüssigkeit 3 g ^Z5 . . „..,<., , ,...._.

K HPO 01g -^^ie Garung wird wie im Beispiel 2 durchgeführt,

Wasser * 1000 ml jedoch mit dem Unterschied, daß der Produktions-

Sterilisierung: 20 Minuten bei'i20^oc!'' nährboden folgende Zusammensetzung hat:

T^ c 1 <. j· τ> u ■■<. ,· . «„op ..< -, Destillationsrückstände 50g

Dann erfolgt die Bebrutung bei 28 C wahrend 30 «stärke 10 e

48 Stunden auf einem Drehschüttelwerk bei 220 UpM Glucose 40 2

mit einer Exzentrizität von 6 cm, worauf dann 1 ml Hefeextrakt Ie

der so erhaltenen Kulturbrühe zur Beimpfung von Leitungswasser 1000 e

mehreren 300-ml-Kolben verwendet wird, die je 70 ml pH-Wert6 2 bis 6 5

des folgenden Produktionsnährbodens enthalten: 35 ' '

Stärke 40 ε ^^m ^^- Gärungstag werden 280 y/ml Carotinoide

15g erhalten.

MgSO₄ · 7H₂O 0,5 g B e i s ρ i e 1 6

FeSO Λϋ O " !' " ! !! o'oiO g ⁴° *^{n e}i^nem 10-1-Fermentationsgefäß werden 61 des

ZnSO* · 7ηΌ o'oiO g folgenden Nährbodens durch 40 Minuten langes Er-

CuSO₄ · 5H₂O !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 0^001 _g ^{ωίζεΐ1 auf 120}°^c sterilisiert:

Leitungswasser 1000 ml Destillationsrückstände 50,6 g

Sterilisierung: 20 Minuten bei 12O⁰C. Trockenhefe 5 g

Nach 6 Bebrütungstagen bei 28°C auf einer ahn- MeSO 0 5e

liehen Schüttelapparatur, wie oben angegeben, ent- ^ HPO θ'2 ε

halten die Kulturbrühen eine 1200 y/ml entsprechende efer» %xi A 1 n_mrr

-. j. · OIiI j reöU₄ · /ri₂U IU mg

Menge an Aminosydin und eine 60 y/ml entsprechende 7n<jn mn in

Menge an Carotinoiden. 50 CuSO · 5HO 1 mg

Zur Herstellung des Futtermittelzusatzes wird das Leitungswasser !"!"!!'! 1000 ml

carotinoidhaltige Mycel von der Kulturbrühe durch nH-Wert 6 5

Filtrieren und Zentrifugieren abgetrennt, getrocknet ^p '

und gemahlen. Das dadurch gewonnene Pulver wird 600 ml einer, wie im Beispiel 1 beschrieben, herge-

üblichen Futtermischungen, deren Zusammensetzung 55 stellten Vorkultur werden zum Beimpfen des oben

in den Beispielen 7 und 8 erläutert werden, zugefügt. angeführten Mediums verwendet. Die Kultur wird

. bei 28⁰C unter einem Luftstrom von 5 l/min und

ß e 1 s ρ 1 e 1 2 _{unter Rühren} jnit _{350 UpM} bebrütet

Eine nach Beispiel 1 erhaltene vegetative Vorkultur Nach 6 Tagen wird eine Produktion von 280 y/ml wird verwendet, um mehrere 300-ml-Kolben zu be- 60 Carotinoiden erhalten, impfen, die je 30 ml des folgenden Produktionsnähr- . .

bodens enthalten: Beispiel?

Ein Futtermittel für Hühner mit folgender Zusam-

Glukose 80 g mensetzung wurde hergestellt (die Werte drücken

Trockenhefe 30 g 65 Gewichtsprozente aus):

MgSO₄ 0,5g

K₂HPO₄ 0,2 g Fischmehl 6,00

FeSO₄ · 7H₂O 0,010 g Sojaextraktionsschrot 25,75

10

20

Bierhefe 1,00

Getrocknete Luzerne 1,00

Mais 60,20

Calciumphosphat 1,40

Calciumcarbonat 0,80

Natriumchlorid 0,30

Stabilisiertes Fett 1,55

Mischung von Vitaminen und Spurenelementen 2,00

Die Mischung von Vitaminen und Spurenelementen hat die folgende Zusammensetzung (die Gewichte beziehen sich auf 2 kg Mischung):

VitaminDa 100000I.E.

Vitamin PP 1,5 g

Vitamin B₁₂ 1 mg

Riboflavin 300 mg

Calciumpantothenat 1,5 g

Cholinchlorid 75 g

DL-Methionin 20 g

Chlortetracyclin Ig

Penicillin-G-Procain 5 g

Kobalt 25 mg

Eisen 1,5 g

Jod 50 mg

Mangan 7,5 g

Zink 4 g

Kupfer 125 mg

Träger q. s.

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Zu 100 kg Futtermittel der obengenannten Zusammensetzung werden 150 g trockenes, gepulvertes Mycel zugefügt. Wenn man Hühnern das obengenannte carotinoidhaltige Futtermittel verabreicht, erzielt man nach einer Zeit von 60 Tagen eine Zunahme des Gewichtes gleich dem, daß man mit einem Futtermittel der obengenannten Zusammensetzung erhält, wobei aber das Mycel durch 1000 0001. E. Vitamin A ersetzt ist. Außerdem wurde festgestellt, daß die mit der obengenannten Futtermischung gefütterten Hühner eine Pigmentierung von Haut und Eiern zeigen, die bedeutend tiefer ist als jene, die man mit normalen Vitamin A enthaltenden Futtermitteln erhält.

Beispiele

Es wurde ein Futtermittel für Schweine aus den folgenden Bestandteilen hergestellt:

Gewichtsprozent

Fischmehl 4,0

Sojaextraktionsschrot 16,0

Mais 61,3

Weizenkleie 12,0

Luzernemehl 3,0

Tricalciumphosphat 1,5

Calciumcarbonat 0,7

Natriumchlorid 0,5

Mischung von Vitaminen und Spurenelementen 1,0

Die Mischung von Vitaminen und Spurenelementen hat die folgende Zusammensetzung (die Gewichte beziehen sich auf 1 kg Mischung):

Vitamin D₃ 200 000 I.E.

Vitamin B₁₂ 2 mg

Vitamin PP 2 g

Riboflavin 300 mg

Calciumpantothenat Ig

Cholinchlorid 50 g

DL-Methionin 25 g

Chlortetrazyklin 1,5 g

Penicillin-G-Procain 500 mg

Zink 2,5 g

Eisen 2,8 g

Kupfer 500 mg

Kobalt 25 mg

Jod 50 mg

Mangan 2 g

Träger q. s.

Zu 100 kg Futtermittel der obengenannten Zusammensetzung werden 250 g trockenes Mycel des Streptomyces chrestonyceticus var. aurantioideus zugefügt.

Wenn man das obengenannte carotinoidhaltige Futtermittel Schweinen mit 20 kg Gewicht verabreicht, wird nach 60 Tagen eine Gewichtszunahme festgestellt, die jener entspricht, die durch Verabreichung des obengenannten Futtermittelgemisches, worin aber das Mycel durch 1000 0001. E. Vitamin A ersetzt ist, erzielt wird.

Claims

Patentansprüche:

1. Verfahren zur Herstellung von carotinoidhaltigen, pigmentierungs- und wachstumsfördernden Futterzusatzmittel, insbesondere für Geflügelfuttermittel, dadurch gekennzeichnet, daß der Mikroorganismus Streptomyces chrestomyceticus var. aurantioideus, Stamm Nr. 1131 (Hinterlegungs-Nr. 722 des Istituto di Patologia Vegetale-Universität Mailand) in an sich bekannter Weise durch Submersgärung unter aeroben Bedingungen in Kohlenstoff- und Stickstoffverbindungen sowie Mineralsalze und Spurenelemente enthaltenden wäßrigen Gärmedien bei Temperaturen zwischen 24 und 32° C während 1 bis 8 Tagen bei pH-Werten von 5 bis 8 gezüchtet und das carotinoidhaltige Mycel von der Gärungsbrühe durch Filtrieren und Zentrifugieren in bekannter Weise getrennt, getrocknet, gemahlen und üblichen ernährungsmäßig ausgeglichenen Futtermitteln in Mengen von etwa 150 bis 250 g je 100 kg Futtermittel beigemischt wird.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Gärung in Gegenwart von Glucose, Dextrin, Lactose oder Mannit als Kohlenstoffquelle und/oder unter starker Belüftung durchgeführt und dadurch die Ausbeute an carotinoidhaltigem Mycel erhöht wird.

909532/157