CZ298098A3

CZ298098A3 - Tetrahydro-beta-karbolinové sloučeniny

Info

Publication number: CZ298098A3
Application number: CZ982980A
Authority: CZ
Inventors: James Edmund Audia; David Lloyd Garver Nelson
Original assignee: Eli Lilly And Company
Priority date: 1996-03-25
Filing date: 1997-03-24
Publication date: 1999-02-17
Also published as: ATE267012T1; NO984445L; US5886004A; EP0942722B1; JP2001509130A; WO1997035578A1; EA199800867A1; ES2221049T3; CA2248874A1; YU41998A; DE69729211T2; NO984445D0; TR199801910T2; AU2536197A; BR9708347A; CN1225584A; EP0942722A1; PL329212A1; DE69729211D1; KR20000004963A

Description

(57) Anotace:

Řešení se týká nových tetrahydrokarbolinových sloučenin obecného vzorce I, které mají užitečnou aktivitu na centrální nervový systém. Řešení podává přípravky a způsoby použití nových tetrahyďrokarbolinových sloučenin a souvisejících sloučenin. Takové sloučeniny jsou obzvláště užitečné pro modulaci receptoru 5ΗΪ2Β s překvapivou selektivitou a účinností.

CZ 2980-98 A3 » · * v* * 4 · · · 4 »444 « · 4 » · «44» *

Tetrahydrobetakarbolinové sloučeniny

Oblast techniky

Tento vynález se týká nových tetrahydrobetakarbolinových sloučenin š obzvláštní selektivitou a účinností na 5HT_2Breceptor.

Dosavadní stav techniky

Specifická receptorová místa 5-HT zahrnují místa 5-HTi_A, 5HTib, 5-HTid, 5-HT_2a, 5-HT_2b, 5-HT_2c, 5-HT₃ a 5-HT₄. Každý z těchto receptorů zprostředkovává jisté fyziologické účinky. Viz Leonard, B.E., International Clinical Psychopharmacoloqy, 7:13-21, (1992). Je obzvláště žádoucí získat sloučeniny, které selektivně ovlivňují jistá místa receptorů 5-HT. Předložený vynález přináší nové sloučeniny, které jsou obzvláště užitečné pro modulaci receptorů 5-HT_2B s překvapivou selektivitou a účinností.

Podstata vynálezu

Tento vynález se týká nových tetrahydrobetakarbolinových sloučenin a přináší skupinu nových sloučenin s účinkem na receptor 5-HT_2B. Navíc jsou popisované sloučeniny .užitečnými nástroji pro charakterizací účinku receptorů 5-HT_2b a pro vývoj terapeutických činidel, založených na modulaci receptorů 5-HT_2B.

»44 4 • 4

Podstatou vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I

ve kterém

R¹ je atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

R³ je atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

R⁶ je zvolen ze souboru, obsahujícího atom vodíku, Cj-Cg alkyl, C₂-C₆ alkenyl, atom halogenu, halo (Ci-Cg) alkyl, halo(C₂C₆) alkenyl, COR5, Ch-Cio alkanoyl, CO2R5·, (Ci-C₆ alkyl)_mamino, N0₂, -SR₅ a OR5;

j R⁷ a R⁸ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom , vodíku, Ci-Cg alkyl, C₂-C₆ alkenyl, N0₂, atom halogenu, »1 halo (Ci-C_s) alkyl, halo (C₂-Cg) alkenyl, COR₅, Ci-C₁₀ alkanoyl, C₇Cis arylalkyl, CO₂Rs'z (Ci-C₆ alkyl)_mamino, -SR₅ a 0R₅; n je 1, 2 nebo 3;

n’ je 1, 2 nebo 3; m je 1 nebo 2;

R₅ je nezávisle atom vodíku nebo C1-C4 alkyl;

R₅- je C1-C4 alkyl;

, - « «· 44 4 4 4 4 » 4 4 4 *4·· • 44 4 444444 4

4*4 4 4 444

444 44 444 4*4 44 4»

--- je případně vazba;

jejich farmaceuticky přijatelné soli nebo solváty.

Výraz „léčení, jak j.e zde používán, zahrnuje profylaxi určeného fyzikálního a/nebo mentálního stavu nebo zlepšení nebo odstranění vzniklého fyzikálního a/nebo mentálního stavu, pokud k němu došlo.

Výrazy „Ci~C_n alkyl, ve kterých n = 2-10, jak jsou zde používány, představují rozvětvenou nebo lineární alkylovou skupinu, která má od jednoho do specifikovaného počtu uhlíkových atomů. Typické Ci-Cg alkylové skupiny zahrnují methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, butyl, iso-butyl, sek.butyl, terč.-butyl, pentyl, hexyl a· podobně.

Výrazy „C₂-C_n alkenyl ve kterých n = 3-10, jak jsou zde používány, představují olefinicky nenasycenou rozvětvenou nebo lineární skupinu, která má od 2 do 10 uhlíkových atomů a alespoň jednu dvojnou vazbu. Skupiny mohou mít rozvětvený nebo přímý řetězec. Příklady takových skupin zahrnují 1propenyl, 2-propenyl (-CH₂-CH=CH₂) , 1,3-butadienyl (CH=CHCH=CH₂) , 1-butenyl (-CH=CHCH₂CH₃) , hexenyl, pentenyl a podobně.

Výrazy „haliči, „halogen a „halo zahrnují fluor, chlór, bróm a jód. Výhodný halogen je chlór.

Výrazy „halo (Ci~C₆) alkyl a „halo (C₂-C₆) alkenyl se vztahují na alkylové nebo alkenylové substituenty, které mají

• · · · • · ·· ·♦♦ · · • · ·

Φ· *· jeden nebo více nezávisle zvolených halogenových atomů připojených k jednomu nebo více dostupných uhlíkových atomů. Tyto výrazy zahrnují chloromethyl, bromoethyl, trifluoroethyl, trifluoromethyl, trifluoroethylenyl, 3bromopropyl, 3-bromo-l-propenyl, 2- bromopropyl, 2-bromo-lpropenyl, 3-chlorobutyl, 3-chloro-2-butenyl, 2,3dichlorobutyl, chloroethylenyl, 5-fluoro-3-pentenyl, 3chloro-2-bromo-5-hexenyl, 3-chloro-2-bromobutyl, trichloromethyl, dichloroethyl, 1,4-dichlorobutyl, 3bromopentyl, 1,3-dichlorobutyl, 1,1-dichloropropyl a podobně. Výhodnější halo-(Ci-Cě)alkylové skupiny jsou trichloromethyl, trichloroethyl a trifluoromethyl. Nej výhodnější halo-(Ci~ C₆)alkyl je trifluoromethyl.

Výraz „Ci~Ci₀ alkanoyl představuje skupinu obecného vzorce C(0) (Ci-Cg)alkyl. Typické Ci-C₁₀ alkanoylové skupiny zahrnují acetyl, propanoyl, butanoyl a podobně.

Výraz „ (Ci-Cg alkyl)_ra amíno, ve kterém m=l-2, představuje buď mono- nebo dialkylamino skupinu, ve které alkylové část skupiny může být přímá nebo rozvětvená. Příklady takových skupin jsou methylamino, dimethylamino, ethylamino, diethylamino, 2-propylamino, 1-propylamino, di(npropyl)amino, di(iso-propyl)amino, methyl-n-propylamino, tbutylamino a podobně.

Výraz „C₃-C_n cykloalkyl, ve kterém n=4-8, představuje cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl a cyklooktyl.

• · • φ · * φ φ φφ • « φ · · fffft « φ φφφ •ff φφ «φφ φφφ φφ φφ

Výraz „substituovaný (C₅-C_n) cykloalkyl představuje cykloalkylovou skupinu, jak byla popsána výše, ve které cykloalkylová skupina může být substituována jedním až čtyřmi substituenty, nezávisle zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ch-Cg alkyl, N0₂, atom halogenu, halo (C1-C1) alkyl, halo (C₂-C₆) alkenyl, C₂-Cg alkenyl, CO2R5, (Ci-C₆ alkyl)_m amino, -SR₅ a 0R₅.

Výraz „C3-C8 cykloalkyl- (C1-C3) alkyl alkylovou skupinu, atomu C₃-Ca cykloalkylalkýlové představuje lineární substituovanou na terminálním uhlíkovém cykloalkylovou skupinou. Typické skupiny zahrnují cyklohexylethyl, cyklohexylmethyl, 3-cyklopentylpropyl a podobně.

Výraz „C₅-C₈ cykloalkenyl představuje olefinicky nenasycený kruh, mající pět až osm uhlíkových atomů, například fenyl, cyklohexadienyl, cyklohexenyl, cyklopentenyl, cykloheptenyl, cyklooktenyl, cyklohexadienyl, cykloheptadienyl, cyklooktatrienyl a podobně.

Výraz „substituovaný (Cs-Cg) cykloalkenyl představuje cykloalkenylovou skupinu, jak byla popsána výše, ve které cykloaikenylová skupina může být substituována jedním až čtyřmi substituenty, nezávisle zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, N0₂, atom halogenu, halo{Ci~C₆) alkyl, halo (C₂-C₆) alkenyl, C₂-Cg alkenyl, COR₅, CiCi₀ alkanoyl, C₇-Cig arylalkyl, CO2R5, (Ci-C₆ alkyl)_m amino, -SR₅a OR5.

Výraz „C₅-C₈ cykloalkenyl-{C1-C3) alkyl představuje lineární ·· · · t « • · · ·♦ • · ··· · · •. i · * •·« ·· ·«

C1-C3 alkylovou skupinu, substituovanou na terminálnim uhlíkovém atomu C5-C8 cykloalkenylovou skupinou.

Výraz „aryl představuje fenyl nebo naftyl. Arylová skupina může být nesubstituovaná nebo může mít jeden nebo dva substituenty, nezávisle zvolené ze souboru, zahrnujícího Ci~C₆alkyl, C₃-Cg cycloalkyl, substituovaný C₃-C₈ cykloalkyl, C₂-C₆alkenyl, C₃-C_g cykloalkyl-{C1-C3) alkyl, fenyl, Cs-Cg cycloalkenyl, substituovaný Cs-Cg cykloalkenyl, Cs-Cg cykloalkenyl-(C1-C3) alkyl, COR5, C1-C10 alkanoyl, OR5 a C7-C16 arylalkyl. Substituenty mohou být připojeny v libovolné dostupné poloze na arylovém kruhu.

Výraz „C7-Cie arylalkyl představuje aryl (C1-C10) alkylový substituent, ve kterém alkylová skupina je lineární, jako je benzyl, fenethyl, 3-fenylpropyl nebo fenyl-t-butyl nebo rozvětvená. Alkylová část je vázána v místě připojení k nadřazené molekule.

Výraz „selektivní vazba 5-HT₂e receptoru se týká způsobu vazby receptoru 5-HT_2b ve větším rozsahu, než je vazba k receptorům 5-HT_2a a/nebo 5-HT₂c.

Výraz „protická kyselina se vztahuje ke kyselině, která má kyselý atom vodíku. Výhodné protické kyseliny zahrnují kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu mravenčí, kyselinu perchlorovou, kyselinu sírovou a kyselinu fosforečnou ve vodném prostředí. Nejvýhodnější protické kyseliny jsou kyselina chlorovodíková, kyselina sírová a kyselina mravenčí.

• · *♦· • 4

4 44 * 4 4 ·

4 44

4444 4

4 4 • 4 4«

Výraz „organické,. rozpouštědlo zahrnuje rozpouštědla obsahující uhlík, jako jsou halogenované uhlovodíky, ether, toluen, xylen, benzen a tetrahydrofuran.

Výraz „míchat zahrnuje takové techniky jako je míchání, centrifugace, míšení a další podobné způsoby.

Výraz „aprotické rozpouštědlo se vztahuje k polárním rozpouštědlům se středně vysokou dielektrickou konstantou, která neobsahují kyselý vodík. Příklady běžných aprotických rozpouštědel jsou dimethylsulfoxid (DMSO), dimethylformamid, sulfolan, tetrahydrofuran, diethylether, methyl-t-butylether nebo 1,2-dimethoxyethan.

Výraz „protické rozpouštědlo se vztahuje k rozpouštědlu, obsahujícímu vodík, který je vázán ke kyslíku a je tudíž znatelně kyselý. Běžná protická rozpouštědla zahrnují taková rozpouštědla jako je voda, methanol, ethanol, 2-propanoi a 1butanol.

Výraz „inertní atmosféra se.vztahuje k reakčním podmínkám, ve kterých je reakční směs zakryta vrstvou inertního plynu, jako je dusík nebo argon.

Zkratky zde použité mají jejich běžný význam, pokud není řečeno jinak. Například „Me a „Et se vztahují k methylu, respektive ethylu a „t-Bu se vztahuje k terč.-butylu. Zkratka „RT znamená pokojovou teplotu {teplota okolí), pokud není řečeno jinak.

_ _ « v « · • « o » β · »» · «···«* « • · · · · * ··« ♦♦· »· ·♦

Výraz „ligand se vztahuje ke sloučeninám, které jsou vázány receptorem 5-HT_2B. Sloučeniny použitelné jako 5-HT₂b selektivní ligandy mohou selektivně zaujímat místo receptoru 5-HT_2b nebo mohou působit jako selektivní agonista v místě receptoru 5-HT_2B.

Výraz „v zásadě čistý je myšlen tak, že znamená, že je přítomno alespoň asi 90 molárních procent, výhodněji alespoň asi 95 molárních procent a nejvýhodněji asi 98 molárních procent požadovaného enantiomeru nebo stereoisomeru ve srovnání s ostatními možnými konfiguracemi.

Výraz „funkční střevní porucha, jak je zde používán, se vztahuje k funkční gastrointestinální poruše, manifestované (1) abdominální bolestí.a/nebo (2) symptomy narušené defekace (urgentnost, - napětí, pocit neúplného vyprázdnění, změněná forma stolice [konzistence] a změněná střevní frekvence/načasování) a/nebo (3) nadýmání (distenze). Výraz „funkční střevní porucha zahrnuje, aniž by tím byl omezen, syndrom střevního podráždění, hypermotilu, ichlasii, hypertonický nižší esofogeální sfinktor (svěrač), tachygastríi, zácpu, hypermotilitu spojenou se syndromem střevního podráždění.

Bylo zjištěno, že receptor 5-HT_2B obsahují krysí plíce, fundus žaludku, .děloha, měchýř a tlusté střevo. Zajímavé oblasti lokalizace receptoru 5-HT₂b u člověka zahrnují, aniž by tím byly omezeny, mozek a krevní cévy. Stavy, které proto mohou být léčeny použitím sloučeniny, která působí na receptor 5HT_2b zahrnují například psychózu, deprese, poruchy spojené s ·

444 44 *44 *·4 « e «44 4 4 • 4 4

4 4* úzkostí, děložní onemocnění jako je endometrióza, fibróza a další abnormální děložní kontraktivita, záchvaty děsu, migrénu, poruchy přijmu potravy, sezónní poruchy, poruchy příjmu potravy, kardiovaskulární ' stavy jako je trombóza, hypertenze, angína, vazospasmus a další vaskulární okluzívní onemocnění, inkontinenci, dysfunkci měchýře, poruchy dýchání a dýchacích cest v to počítaje astma, funkční střevní poruchy a podobně.

Sloučeniny obecného vzorce (I), kterých se týká tato přihláška, mohou vytvářet kyselé adiční soli se širokou škálou anorganických a organických kyselin. Typické kyseliny, které mohou být použity, zahrnují kyselinu sírovou, kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkou, kyselinu fosforečnou, kyselinu fosforičitou, kyselinu jodovodíkovou, ' kyselinu sulfamovou, kyselinu citrónovou, kyselinu octovou, kyselinu maleinovou, kyselinu jablečnou, kyselinu jantarovou, kyselinu vinnou, kyselinu skořicovou, kyselinu benzoovou, kyselinu askorbovou, kyselinu mandlovou, kyselinu p-toluensulfonovou, kyselinu benzenesulfonovou, kyselinu methanesulfonovou, kyselinu trifluoroctovou, kyselinu hippurovou a podobně. Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli sloučenin obecného vzorce (I) jsou obzvláště výhodné.

Dále je používán, obzvláště při popisu výhodných provedení vynálezu, která jsou uvedena v níže podaných tabulkách, následující systém číslování:

• ·

- 10 * · 1 • * * · • ♦ · ·* · · · « ·· *

'Syř

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou použitelné pro modulaci nebo blokování receptoru 5-HT₂b· Pro toto použití jsou výhodné některé z popisovaných sloučenin. Následující provedení vynálezu a vlastnosti sloučenin, podané v tabelární formě mohou být vybrány nezávisle na sobě, čímž je možné vytvořit množství výhodných sloučenin a provedení předloženého vynálezu. Následující seznam provedení předloženého vynálezu není v žádném případě zamýšlen tak, že by omezoval jakýmkoli způsobem rozsah předmětu předloženého vynálezu.

A) R¹ je atom vodíku;

B) spiro skupina je analog naftylu;

C) R³ je atom vodíku nebo methyl;

D) R³ je atom vodíku.

E) njelan' je 2;

F) --- jsou dvojné vazby, vytvářející aromatický kruh;

G) n je 1 a n' je 1;

- 11 • 44 * 4 4

444 44

Η)

Ί) η je 1 nebo 2 a η' jel;

R⁶ se nachází v poloze 5 fenylového kruhu;

J) R⁶ je atom vodíku, methyl, chloro nebo bromo;

K) n je 3 a n’ je 2;

L) R⁶ je atom vodíku, methyl, chloro nebo bromo; R⁷ a R⁸jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího methoxy a ethoxy;

M) R⁷ a R⁸ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom halogenu a Ci~C₄ alkyl;

N) R⁷ a R⁸ jsou v polohách 3 a 4;

O) R⁷ a R⁸ jsou každý methoxy nebo- ethoxy;

P) sloučenina, která má výhodné vlastnosti, popsané výše;

Q) způsob selektivní vazby 5-HT_2B receptoru použitím jedné nebo více sloučenin obecného vzorce I;

R) způsob vazby 5-HT₂b receptoru použitím jedné nebo více sloučenin obecného vzorce I;

S) způsob použití jedné nebo více sloučenin obecného vzorce I pro léčení funkční střevní porucha;

T) farmaceutický přípravek, zahrnující sloučeninu obecného vzorce I a jeden nebo více farmaceuticky přijatelných excipientů.

U) obzvláště výhodným provedením je sloučenina podle Příkladu 1 podaného níže.

Příklady sloučeniny obecného vzorce I zahrnují, aniž by tím byly omezeny:

spiro-9,9[2-(3,4-dichloro)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5-

- 12 methoxy-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoindol, spiro-9,9[2-(3,4-dimethoxy)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5methyl-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoindol, spiro-9,9[2-(3,4-diethoxy)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5methyl-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoindol, spiro-9,9[2-(3,5-dichloro)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5dimethylamino-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoindol, spiro-9,9[2-(3-fluoro,4-chloro)-1,2,3, 4-tetrahydronaftyl]-5ethyl-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoíndol, spiro-9,9[2-(3,4-dimethoxy)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5chloro-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoindol, spiro-9,9[2-(3,4-dimethoxy)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5bromo-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoíndol, spiro-9,9[2-(3,4-dimethoxy)-1,2,3,4-tetrahydronaftyl]-5chloro-1,2,3,9-tetrahydro-8H-pyridoindol.

Předložený vynález se týká racemických směsí stejně tak jako v podstatě čistých stereoisomerů sloučenin obecného vzorce I. Výraz „enantiomer je zde používán způsobem obecně uznávaným v organické chemii pro označení sloučeniny, která stáčí rovinu polarizace. Proto enantiomer stáčí rovinu polarizace nalevo a je používán k označení levotočivých sloučenin obecného vzorce I. Enantiomery + a - mohou být izolovány použitím dobře známých klasických oddělovacích technik. Obzvláště užitečné reference, které popisují takovéto metody, jsou Jacques a kol., Enantíomers, Racemates, and Resolution (John Wiley and Sons 1981) .

Vhodné oddělovací metody zahrnují přímou krystalizaci, odlučování a krystalizaci v opticky aktivních rozpouštědlech.

- 13 • · · ··· »·· • 9

Chrisey, L.A. Heterocycles, 267:30 (1990). Výhodné opticky aktivní kyseliny zahrnují kyselinu kafrsulfonovou a deriváty kyseliny vinné.

Předložený vynález zahrnuje jak konfigurace R tak i konfigurace S. Výrazy „R a „S jsou používány tak, jak jsou běžně užívány v organické chemii pro označení specifických konfigurací chirálního centra. Viz R.T. Morrison a R.N. Boyd, Organic Chemistry, str. 138-139 (4th Ed. Allyn & Bacon, Inc., Boston) a Orchin a kol. The Vocabulary of Organic Chemistry, str. 126, (John Wiley and Sons, Inc.). Předložený vynález tedy zahrnuje jak cis tak i trans konformace každé konkrétní sloučeniny.

Je známo, že sloučeniny podle předloženého vynálezu vytvářejí hydráty a solváty s vhodnými rozpouštědly. Výhodná rozpouštědla pro přípravu solvátových forem zahrnují vodu, alkoholy, tetrahydrofuran, DMF a DMSO. Výhodné alkoholy jsou methanol a ethanol. Další vhodná rozpouštědla mohou být zvolena na základě velikosti molekuly rozpouštědla. Rozpouštědla s malými molekulami jsou výhodná, neboť usnadňují vytváření odpovídajícího solvátu. Solvát nebo hydrát je typicky vytvořen v průběhu rekrystalizace nebo v průběhu vytváření soli. Užitečná reference týkající se solvátů je Sykes, Peter, A Guidebook to Mechanism in Organic Chemistry, 6:56 (1986, John Wiley & Sons, New York). Výraz „solvát”, jak je zde používán, zahrnuje hydrátové formy jako je monohydrát a dihydráty.

- 14 Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být připraveny použitím chemických způsobů, které jsou známy ze stavu techniky; nicméně nej výhodnější způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I je ilustrován Schématem I

4.HCI

Jak jsou použity ve Schématu I, substituenty n, n', R⁶, R⁷ a R⁸ jsou takové, jaké byly definovány výše.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady dále ilustrují přípravu jistých sloučenin obecného vzorce I. Příklady jsou pouze ilustrativní

- 15 ♦ ·♦ « a nejsou zamýšleny tak aby jakýmkoliv způsobem omezovaly rozsah předmětu vynálezu.

Sloupcové chromatografické procedury používají standardní mžikové chromatografické techniky. Velmi dobře známá reference popisující vhodné mžikové chromatografické techniky je Still, W.C. Kahn a Mitra, J. Org. Cheia., 43, 2932, (1978)·. Frakce obsahující produkt byly obecně odpařovány za sníženého tlaku, aby se získal produkt.

Optické rotace byly získány použitím methanolu, pyridinu nebo jiného vhodného rozpouštědla.

Sůl hydrochloridu konkrétní sloučeniny byla získána umístěním volné báze do diethyletheru, obsahujícího alkohol jako je methanol nebo jinou vhodnou směs rozpouštědel. Během míchání tohoto etherového roztoku byl přidáván po kapkách roztok HC1 diethyletheru, dokud roztok nezačal být kyselý. Alternativně bylo na etherový roztok působeno suchým plynným HC1.

Maleinanová sůl konkrétní sloučeniny byla získána umístěním »

volné báze v ethylacetatu nebo jiném vhodném rozpouštědle a působení kyselinou maleinové. Vytvořený precipitát filtrován a sušen, čímž se získala odpovídající hydrochlorídová nebo maleinanová sůl volné báze.

V následujících příkladech, pokud je to aplikovatelné, byl diethylether destilován z benzofenonketylu sodného před jeho použitím. Všechny reakce byly prováděny za přetlaku argonu. ¹H-NMR a ¹³C-NMR data byla získána na přístroji Bruker AC-200P

- 16 ··« ·· (200 MHz) . IR spektra byla získána na Nicolet 510 P-FT (film a KBr). Teploty tání byly určovány na Buchiho zařízení a nebyly korigovány. Analytická TLC byla prováděna na skleněných deskách Merck TLC předem pokrytých F254 silikagelem 60 (UV, 254 nm a jód). Chromatografické separace byly prováděny použitím silikagelu 230-400 mesh (Merck). NBOC-aziridiny (2a-d) byly připraveny z odpovídajících alkenů použitím standardních procedur.

Příprava 1

Indolové výchozí materiály

Indolové výchozí materiály (la, lb a lc) uvedené dále byly zakoupeny (la), připraveny postupem podle Bartoliho (lb) [Bartoli, G. a kol. Tetrahedron Lett., 1989, 30, 2129] nebo (lc) syntesizovány z 2-jodo-4,6-dimethylanilinu (5'''}. Způsob přípravy je znázorněn následujícím Schématem IV:

Schéma 4

SIMe,

Syntéza 2-jodo-4,6-dimethylanilinu (5''') může být provedena následujícím způsobem: Do suspense 5''' (24 mmolu), Cul (0,05 ekviv.) a (PPh3)₂PdCl2 (0,05 ekviv.) v 30 ml bezvodého

- 17 triethylaminu byl pod argonovou atmosférou . přidán trimethylsilylacetylen (1,1 ekviv.) a výsledná směs byla míchána po dobu 3 hodin. Potom bylo rozpouštědlo odstraněno za vakua a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií s použitím směsi hexan/ethylacetát (3:1) jako vymývacího rozpouštědla, což dalo látku 6'' s kvantitativním výtěžkem. Suspense 6''' (23 mmolu) a Cul (2 ekviv.) v 50 ml bezvodého dimethylformamidu byla zahřívána po 2,5 hodiny pod argonovou atmosférou při teplotě 100°C. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs odfiltrována a pevná látka byla dvakrát promývána etherem (20 ml) . Organická fáze byla promývána vodou (3 x 50 ml), sušena nad NasSO^ a rozpouštědlo bylo odpařeno do sucha. Surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografií použitím směsi hexan/ethylacetát (3:1) jako vymývacího rozpouštědla, což dalo produkt lc (1,5 g, 45%).

Příklad 1

Me

NH-HC1

I OMe Med

Suspense odpovídajícího hydrochloridu tryptaminu (3a) (1 g) a

- 18 4 *

444 ·· »»>

• · 444* · · odpovídajícího dimethoxytetralonu (3b) (1 g) v ethanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 128 hodin. Po uplynutí této doby byla reakční směs ponechána ochladnout na teplotu okolí a odfiltrována. Surová pevná látka byla promývána a sušena.

Teplota	tání: 261°C
i	Teorie	Nalezeno
c	69,25	69,34
H	6,82	6, 97
N	7,02	6, 98
Příklad	2

Suspense odpovídajícího hydrochloridu tryptaminu (2a) (575 mg) a odpovídajícího ketonu (2b) (464 mg) v ethanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 128 hodin. Po uplynutí této doby byla reakční směs ponechána ochladit se na f teplotu okolí a odfiltrována. Surová pevná látka byla promývána a sušena.

»· »·· « 4

- 19 Výtěžek: 525 mg

	Teorie	Nalez
c	74,43	74,36
H .	6,84	6,84
N	8,27	8,25
Hmotové	spektrum:	301
Příklad	3

Suspense odpovídajícího hydrochloridu tryptaminu (2a) (500 mg) a odpovídajícího ketonu (2b) (396 mg) v ethanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 72 hodin. Po uplynutí této doby byla reakční směs ochlazena na asi 0°C a odfiltrována. Surová pevná látka byla promývána a sušena.

Výtěžek: 262 mg • ·

Hmotové spektrum: 274

Příklad 4

Suspense odpovídajícího hydrochloridu tryptaminu (4a) (500 mg) a odpovídajícího ketonu (4b) (396 mg) v ethanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 72 hodin. Po uplynutí této doby byla reakční směs ochlazena na asi 0°C po dobu asi 24 hodin a odfiltrována. Surová pevná látka byla promývána a sušena.

Látka byla podrobena hmotové spektrální analýze a byla určena hodnota 274.

* ··,

444 4 4

4 * · ♦

- 21 444 444

4. 4

444 '··

Příklad 5

Suspense odpovídajícího hydrochloridu tryptaminu (5a) (500 mg) a odpovídajícího ketonu (5b) (397' μΐ) v ethanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 72 hodin. Po uplynutí této doby byla reakční směs ochlazena na asi 0°C na dobu asi 14 hodin a odfiltrována. Surová pevná látka byla promývána a sušena.

Výtěžek: 630 mg

	Teorie	Nalezeno
c	73,95	73,32
H	6,52	6,73
N	8,62	8,59

Hmotové spektrum: 288

Suspense odpovídajícího hydrochloridu tryptaminu (4a) (1 g) a odpovídajícího ketonu (4b) (800 mg) v. ethanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 7 2 hodin. Po uplynutí této doby byla reakční směs ochlazena na asi 0°C na dobu asi 24 hodin a odfiltrována. Surová pevná látka byla promývána a sušena.

Výtěžek:	550 mg
	Teorie	Nalezeno
C	70,67	70,88
H	7,06	7,16
N	7,85	7,88
Ják bylo	uvedeno	výše, sloučeniny podle předloženého vynálezu

jsou užitečné pro blokování účinku serotoninu nebo dalších agonistů receptorů 5-HT_2B. Předložený vynález tedy také

- 23 • · ·»· ·♦ *1 * · · · • »*· • ··· « · • · · ·» *· poskytuje způsob blokování receptoru 5-HT_2B u savců, který zahrnuje podávání dávky sloučeniny podle vynálezu o velikosti dostatečné pro blokaci receptoru savci, který potřebuje blokaci receptoru 5-HT_2B.

Výraz „dávka o velikosti dostatečné pro blokaci receptoru, znamená množství sloučeniny, nutné pro blokování cílového receptoru u savce. Aktivní sloučeniny jsou účinné v širokém rozmezí dávek. Například denní dávky jsou normálně v rozmezí od asi 0,05 do asi 250 mg/kg tělesné hmotnosti. Při léčení dospělých lidí je výhodná dávka v rozmezí od asi 0,5 do 100 mg/kg, podávaná jako jednotlivá dávka nebo rozdělené dávky. Výhodné je rozmezí od asi 5 mg/kg do asi 60 mg/kg a obzvláště výhodné je rozmezí od asi 10 mg/kg do asi 50 mg/kg. Je nicméně zřejmé, že skutečně podávaná dávka sloučeniny bude určena ošetřujícím lékařem v závislosti na relevantních okolnostech, které zahrnují stav, který má být léčen, volbu sloučeniny, která má být podávána, věk, hmotnost a odezvu konkrétního pacienta, závažnost pacientových symptomů a zvolenou cestu podávání a proto není výše uvedené rozmezí denních dávek zamýšleno tak, aby jakýmkoli způsobem omezovalo rozsah předmětu vynálezu. Sloučeniny mohou být podávány řadou různých způsobů, jako je cesta orální, transdermální, subkutánní, intranasální, intrámuskulární a intravenózní.'

Jedno obzvláště výhodné provedení předloženého vynálezu je provedení, které podává selektivní ligandy pro receptory 5HT₂b· Sloučeniny s vysokou afinitou pro receptor 5-HT_2B jsou obvykle křížově reaktivní také s receptorem 5-HT_2C. Nyní mohou být receptory 5-HT_2B selektivně modulovány použitím sloučeniny • ·· ·♦· · · ·» ··

- 24 ·· ft ·· • »· »·· podle předloženého vynálezu v dávkách uvedených výše pro blokování účinků agonistů receptorů 5-HT_2B. Selektivní afinita může poskytnout léčení s méně vedlejšími účinky a usnadní vývoj dodatečných léků.

Testovací procedury.

Radioligandové vazebné testy pro receptory 5-HT2B byly prováděny známými způsoby. Kursar, Jonathan a kol. MOLECULAR PHARMACOLOGY, 42:549-557 (1992), Wainscott, David a kol.' MOLECULAR PHARMACOLOGY, 43:419-426 (1992), Wainscott, David a kol. THE AMERICAN SOCIETY FOR PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS, 276:720-727 (1996).

Jisté sloučeniny a meziprodukty podle předloženého vynálezu jsou užitečné pro modulaci receptorů 5-HT₂b· Sloučeniny které jsou nejužitečnější pro vazbu receptorů 5-HT₂b mohou být identifikovány použitím následujících procedur. V dalším je také podán užitečný in vivo model pro prokázání aktivity 5HT_2B.

Radioligandové vazebné studie pro receptor 5-HT_2b:

Příprava membrán z transformovaných buněk.

Suspendované buňky exprimující klonovaný krysí receptor 5-HT₂b receptor byly odebrány centrifugací při 2200 g po dobu 15 minut při teplotě 4°C. Kursar, J. D., D. L. Nelson, D. B. Wainscott, M. L. Cohen, a M. Baez, Mol. Pharmacol., 42: 549557 (1992). Membrány pro vazebné testy byly připraveny

4 44

4·* 4 4

4 · ·4

- 25 • · ·· 44 ««4 4·4 zamícháním peletu v 50 mM Tris-HCl, pH 7,4 (0,5 x 10⁹ buněk/30 ml) . Tkáňová suspense potom byla centrifugována při 39800 g po dobu 10 minut při teplotě 4°C. Tato procedura byla opakována celkově pro tři promývání s inkubací po dobu 10 minut při teplotě 37 °C mezi prvním a druhým promýváním. Konečný pelet byl homogenizován v 67 mM Tris-HCl, pH 7,4 (s 20 - 40 a 12,5 miliony buněk/ml, což je počáteční počet buněk pro buňky exprimující nízké, respektive relativně vysoké úrovně receptoru 5-HT₂e) s použitím přístroje Tissumizer (Tekmar, Cincinnati, OH), nastaveného na hodnotu 65 po 15 vteřin..

[³HJ5-HT vazebné studie.

Vazebné studie byly prováděny automaticky použitím přístroje Biomek 1000 (Beckman Instruments, Fullerton, CA) a byly prováděny ztrojeně v celkovém objemu 0,8 ml. Membránová suspense, 200 μΐ, (0,04-0,27 mg proteinu) a 200 μΐ látky zředěné ve vodě byly přidány do 400 μΐ 67 mM Tris-HCl, pH 7,4, obsahujícího [³H]5-HT, pargylin, CaCl₂ a L-ascorbovou kyselinu. Finální koncentrace pargylinu, CaCl₂ a L-ascorbové kyseliny byly 10 μΜ, 3 mM, respektive 0,1%. Zkumavky byly inkubovány při teplotě 37°C po dobu 15 minut nebo při teplotě 0°C po dobu 2 hodin (vazebné rovnováhy byly ověřovány za obou těchto podmínek) a potom byly rychle filtrovány použitím přístroje Brandel cell harvester (Model MB-48R; Brandel, Gaithersburg, MD) přes filtry Whatman GF/B, které byly předem navlhčeny v 0,5% polyethyleniminu a ochlazeny ledově studeným 50 mM Tris-HCl, pH 7,4. Filtry byly potom rychle promývány čtyřikrát jedním ml ledově studeného 50 mM Tris-HCl, pH 7,4.

• 4

Η» ·»♦

4 *·

444 « ·

4 · • 4 44

Množství [^JH]5-HT zachyceného na filtrech bylo určeno kapalinovou scintilační spektrometrií (Ready Protein a Beckman LS 60001C, Beckman Instruments, Fullerton, CA)·. Pro saturační experimenty byly určeny okamžité koncentrace volných radioligandů vzorkováním supernatantu ze souběžných saturačních experimentů ve kterých byla vázaná radioaktivita separována centrifugaci. Koncentrace [³H]5-HT byla v rozmezí od 0,02 do 5 nM a od 0,6 do 63 nM pro saturační experimenty inkubované při teplotě 0°C respektive 37 °C. 5-HT, 10 μΜ nebo 1-naftylpiperazine (1-NP), 10 μΜ definovalo nespecifickou vazbu. Pro kompetiční experimenty bylo použito šest až. dvanáct koncentrací látek, které se nacházely v šesti logaritmických úrovních a konečná koncentrace [³H]5-HT byla 2 nM. Protein byl určen metodou podle Bradforda, užívajíce hovězí sérový albumin jako standard. Bradford, Μ. M., Anal. Biochem. 72: 248-254 (1976).

[³H] rauwolscinové vazebné studie

Kromě měření receptoru, 5-HT_2B agonist.ou [³H]5-HT byl také použit antagonista [³H] rauwolscin (Nelson, D.L. a kol. Soc. Neurosci. Abstr. 21, Part 2:1124 (1995). Membrány z AV-12 buněk (ATCC č. CRL 1573) stabilně transfektované lidským receptorem 5-HT_2B byly připraveny výše popsaným způsobem. Vazebné pokusy byly prováděny trojmo v celkovém objemu 0,8 ml. 200 μΐ suspense membrán a 200 μΐ látky zředěné ve vodě byly přidány do 400 μΐ 67 mM Tris-HCl, pH 7,4 s efaroxanem pro maskování alfa-adrenergických receptorů. Konečné koncentrace efaroxanu a Tris byly 500 nM respektive 50 mM.

- 27 • ·

Zkumavky byly inkubovány při teplotě 37°C po dobu 2 0 minut (rovnováha byla ověřována pro tyto podmínky) a potom rychle filtrovány přes filtry Watman GF/B (navlhčené v 0,5% polyethyleneiminu). Filtry byly potom promývány čtyřikrát jedním ml ledově studeného 50mM Tris-HCl, pH 7,4. Množství [³H] rauwolscinu, zachyceného na filtrech bylo určeno kapalinovou scintilační spektrometrií.

Nespecifická vazba byla definována pomocí 1-naftylpiperazinu, 10 μΜ. Okamžité koncentrace volného radioligandu byly určeny vzorkováním supernatantu z identických zkumavek, ve kterých byl vázaný radioligand oddělen od volného radioligandu centrifugací. Konečná koncentrace [³H] rauwolscinu pro kompetiční experimenty byla 2 nM.

Statistická analýza:

Hodnoty K_d a Bn,_ax ze saturačních testů byly určeny pro nejlepší přizpůsobení vazebného modelu s jedním nebo dvěma místy použitím částečného F-testu. De Lean, A., A. A. Hancock a R. J. Lefkowitz, Mol. Pharmacol. 21: 5-16 (1981). Pro model s jedním vazebným místem byla použita následující rovnice

Bmax [ L ]

Bound - - ,

Kd + [L] kde

Bound = množství specificky vázaného [³H]5-HT,

- 28 • · ♦ · « * « · ·

Bmax = maximální počet vazebných míst,

K_d = rovnovážná disociační konstanta a [L] = volná koncentrace [³H]5-HT a pro model se dvěma vazebnými místy byla použita rovnice, následujíc!

Bound

Bmaxl [L] - +

K_dl + [L]

Bmax2 X [ L ]

K_d2 + [L] kde

Bound = množství specificky vázaného [³H]5-HT, B_maxi = maximální počet vazebných míst s vysokou afinitou,

Bmax2 = maximální počet vazebných míst s nízkou afinitou,

K_di ⁼ rovnovážná disociační konstanta pro místo s vysokou afinitou,

K_d2 = rovnovážná disociační konstanta pro místo s nízkou afinitou, [L] = volná koncentrace [³H]5-HT.

Hodnoty IC50 z kompetičních .testů, vazebné parametry pro standardní křivky IP₃ a hodnoty EC50 a E_raax z IP₃ testů byly určeny nelineární regresní analýzou čtyřparametrových logistických rovnic (Systat, Systat lne, Evanston, IL) . De Lean, A., A. A. Hancock a R. J. Lefkowitz, Mol. Pharmacól., • 4 4 ·

4 4 4 4

4 4

4 44

- 29 4 4

4

44 4* • 44 444

21: 5-16 (1981). Hodnoty IC₅₀ byly přepočítány na hodnoty Ki použitím Cheng-Prusoffovy rovnice. Cheng, Y. a W. H. Prusoff, Biochem. Pharmacol., 22: 3099-3108 (1973).

Jako příklad následující buněčné testy používají lidských buněk

Sloučenina Buňky 5HT_2a Buňky 5HT_2A Buňky 5HT₂c

Příklad 1 5,97 1892,68 914,17

III. Testovací metody 5-HT_2B in vitro:

Krysí samci Wistar (150-375 g; Laboratory Supply, Indianapolis, IN) byly usmrceny cervikální dislokací a žaludeční fundus byl longitudinální sekci připraven pro in vitro pokusy. Jeden krysí fundus byl použit pro získání čtyř příprav. Kruhové přípravy z extrahované jugulární (hrdelní) cévy byly vytvořeny způsobem, který popsal Hooker; Blood Vessels 14:1 (1977) a Cohen, M.L. J. Pharamcol. Exp. Ther. 227:327 (1983). Tkáně byly umístěny v orgánové lázni obsahující 10 ml modifikovaného Krebsova roztoku o následujícím.složení (milimolární koncentrace): NaCl, 118,2, KC1, 4,6; CaCl₂.H₂0, 1,6; KH2PO4, 1,2; MgSO4, 1,2; dextróza, 10,0; NaHCCh, 24,8. Roztoky tkáňové lázně byly udržovány při teplotě 37 °C a ekvilibrovány 95% O₂ a 5% CO₂. Tkáně byly umístěny pod působení optimální klidové síly (4 g) a byly ponechány, aby dosáhly rovnováhy po přibližně 1 hodinu před jejich vystavením testovaným sloučeninám. Byly zaznamenávány isometrické kontrakce jako změny síly v gramech na dynografu Beckman Dynograph s převodníky Statham UC-3.

• ·

- 30 ·« · ·**

Určení zjevné antagonistické disociační konstanty:

Křivky nekumulativní kontrakční odezvy na koncentrace pro serotonin, který obsahuje fundus a křivky kumulativní.odezvy na koncentrace v jugulární cévě byly získány růstem koncentrace po krocích po vymytí předcházejících koncentrací každých 15-20 minut. Každá koncentrace agonisty zůstala v kontaktu s tkání po přibližně 2 minuty a byla měřena maximální odezva na každou koncentraci sloučeniny. Hodnoty ED₅o byly vzaty jako koncentrace agonisty, která produkovala polovinu maximální kontrakce. Po získání kontrolních odezev byly tkáně inkubovány s vhodnou koncentrací pufru nebo antagonisty po' dobu 1 hodiny. Odezvy na serotonin byly potom opakovány v přítomnosti antagonisty. Koncentrační odezvy používaly pouze jednu koncentraci agonisty a jednu koncentraci antagonisty na tkáň. Obecně byly postupné odezvy agonisty za přítomnosti ošetření pufrem nezměněny (střední dávkový poměr byl 1,28 ± 0,21).

Zjevné antagonistické disociační konstanty (K_B) byly určeny pro každou koncentraci antagonisty pomocí následující rovnice:

K_B = [B]/(dávkový poměr-1) kde [B], je koncentrace antagonisty a dávkový poměr je ED₅₀agonisty v přítomnosti antagonisty, dělený kontrolním ED₅₀· Obecně v přítomnosti antagonisty došlo k paralelním zdvihům křivek odezvy na koncentraci. Výsledky byly vyjádřeny jako

- 31 4 4 4 4 » · *4 » 4 4 4 4444*44

444 4 4 44«

444 44 444 4 4 4 44 *4 záporný logaritmus Kb (t.j. -log Kb). Výpočty byly provedeny použitím známých metod. Zaborowsky, B.R. J. Pharmacol. Methods 4:4165 (1980).

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly testovány a vykázaly aktivitu na receptor 5-HT_2b pomocí této popsané metody in vitro.

Studie in vivo:

Krysy Sprague-Dawley (250-300 g) byly ponechány přes noc hladovět. Krysy byly podrobeny anesthesii uretanem (250 mg) podaným intraperitoneálně. Byla otevřena abdominální dutina a na antimesenterícký okraj tlustého střeva byly přišity kalibrované převodníky napětí. Převodníky byly orientovány tak, aby zaznamenávaly kontrakce kruhových svalů. Tělesná teplota zvířat byla udržována zahřívaným polštářkem. Do jugulární cévy byl vložen intravenózní kateter pro podávání látky. Byl také monitorován krevní tlak v krční tepně. Výstup z převodníků byl znázorňován na Beckmanově dynografu. Základní pohyblivost byla monitorována po dobu 30 minut. Na konci této doby 30 minut byla podána kontrolní dávka vehikula a pohyblivost byla zaznamenávána po dalších 15 minut. Došlo k odezvě na dávku serotoninu. V 15 minutových intervalech byly podávány postupně se zvyšující dávky serotoninu. Byla vypočtena dávka ED₅₀, což byla dávka, která produkovala polovinu maximální kontrakce. V pokusech s antagonisty byla podána známá dávka ED_S0, aby bylo ověřeno nastavení experimentu. Poté byla podána dávka antagonisty. Pohyblivost byla monitorována po 15 minut. Po 15 minutách monitorování ff ft « • · · • · ff · · • ff ·

Φ Φ ·

- 32 byla podána dávka ED50. Pohyblivost byla určena měřením počtu kontrakci a jejich násobením amplitudou kontrakcí po určenou dobu, aby byl získán Motility Index (index pohyblivosti). Bylo vypočteno procento inhibice na základě skupiny ošetřené pouze vehikulem (bez antagonisty). Minima pro tři krysy byly použity pro každou koncentraci a data od různých zvířat byla shromážděna pro určení hodnot ED₅₀.

Sloučeniny vykazující aktivitu na receptor 5-HT_2B jsou užitečné pro léčení poruch vztahujících se k modulaci receptoru 5-HT₂b- Například sloučeniny, které mají antagonistickou aktivitu na 5-HT_2B redukují spasticitu tlustého střeva. Proto jsou tedy tyto sloučeniny použitelné pro léčení funkčních střevních poruch zahrnujících syndrom střevního podráždění a symptomy, vztahující se k syndromu střevního podráždění. Antispasmodický účinek takových· sloučeniny může snížit abdominální bolest spojenou s funkčními střevními poruchami. Navíc je receptor 5-HT_2Blokalizován v dalších orgánech jako je mozek, měchýř, krevní cévy, žaludek a děloha, což ukazuje, že existují další stavy, které jsou zprostředkovány pomocí 5-HT_2B.

I když je možno podávat sloučeniny podle předloženého vynálezu přímo bez další úpravy, jsou sloučeniny výhodně používány ve formě farmaceutických přípravků, obsahujících farmaceuticky přijatelný excipient a alespoň jednu sloučeninu podle vynálezu. Takové kompozice obsahují od asi 0,1 procent hmotnostních do asi 90,0 procent hmotnostních sloučeniny podle vynálezu. Takto tedy předložený vynález také přináší farmaceutické přípravky, obsahující sloučeninu podle ·· a a a a a a a a a

- 33 a· ·«· *

• a

a a předloženého vynálezu a farmaceuticky přijatelný excipient této sloučeniny.

Při vytváření kompozic podle předloženého vynálezu je účinná složka obvykle míšena s excipientem, kterým může být nosič nebo ředidlo nebo může být zředěna nosičem nebo uzavřena v nosiči, který může mít formu kapsle, váčku, papíru nebo dalšího typu obalu. Pokud nosič slouží jako ředidlo, může jím být pevný, polotuhý nebo kapalný materiál, který působí jako vehikulum, excipient nebo médium pro účinnou složku. Kompozice může být ve formě tablet, pilulek, prášků, pastilek, váčků, oplatek, elixírů, emulzí, roztoků, sirupů, suspensí, aerosolů (v pevném nebo kapalném médiu) a měkkých a tvrdých želatinových kapslí. Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány, pokud je to požadováno, transdermálně. Látky zvyšující transdermální prostupnost a systémy pro podávání, zahrnující náplasti a podobně jsou dobře známy odborníkům ve farmacii.

Příklady vhodných nosičů, excipientů a ředidel zahrnují laktózu, dextrózu, sacharózu, sorbitol, mannitol, škroby, arabskou gumu, fosforečnan vápenatý, algináty, křemičitan vápenatý, mikrokrystalickou celulózu, polyvinylpyrrolidon, celulózu, tragakant, želatinu, sirup, methylcelulózu, methyla propylhydroxy- benzoáty, talek, stearan horečnatý, vodu a minerální olej. Obecné přípravky mohou také obsahovat smáčedla, emulsifikační a suspenzní činidla, konzervační činidla, sladidla nebo ochucovadla. Obecné přípravky podle vynálezu mohou být vytvořeny tak, aby poskytovaly rychlé, trvalé nebo zpožděné uvolňování účinné složky po podání

- 34 • «

pacientovi použitím způsobů známých ze stavu techniky.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být podávány transdermálně použitím známých systémů pro transdermální podávání excípientů. Nejvýhodněji je sloučenina podle předloženého vynálezu smíchána s činidlem, zvyšujícím průstup pokožkou, které zahrnují, aniž by tím byly omezeny, propylenglykol, polyethylenglykol monolauran a azacykloalkan2-ony a je nanesena na náplast nebo podobný systém pro podávání. Další excipienty zahrnují gelová činidla, emulsifikátory a pufry, které mohou být přidány, je-li to požadováno, do transdermálního přípravku.

Pro orální podávání může být sloučenina podle předloženého vynálezu ideálně smíchána s nosiči a ředidly a lisována do tablet nebo uzavřena v želatinových kapslích.

Kompozice jsou výhodně připravovány v jednotkové dávkové formě, kdy každá jednotková dávka obsahuje od asi 1 do asi 500 mg, obvykleji od asi 5 do asi 300 mg účinné složky. Výraz „jednotková dávková forma se vztahuje k fyzicky diskrétním jednotkám, vhodným jako jednotkové dávky pro lidské subjekty a další savce a každá jednotka obsahuje předem určené vypočtené tak, áby produkovalo účinek a množství účinné látky, požadovaný terapeutický farmaceutický nosič.

dále zahrnuje vhodný

Aby bylo podrobněji ilustrováno použití předloženého vynálezu, jsou podány následující příklady farmaceutických přípravků. Tyto příklady jsou pouze ilustrativní a nejsou » ·

- 35 ·** 4 • · zamýšleny tak, aby jakýmkoli způsobem omezovaly rozsah předmětu vynálezu. Obecné přípravky mohou jako účinné sloučeniny používat kteroukoli ze sloučenin podle předloženého vynálezu.

Přípravek 1

Tvrdé želatinové kapsle byly následujících složek:

připraveny použitím

Množství na kapsli

Hmotnostní koncentrace (procent) hydrochlorid spiro-9,9[2-(3,5-dimethoxy)1,2,3,4-tetrahydronaftyl]5-methy1-1,2,3,9-

tetrahydro-8H-pyrido indolu	250 mg	55,0
sušený škrob	200 mg	43,0
stearan horečnatý	10 mg	2,0
	4 60 mg	100,0

Výše uvedené složky byly smíchány a plněny do želatinových kapslí v množství 460 mg.

». * » · · a a 4 aa * · ··· a a a · a a « ·

- 36 • · ·

a. « a ««· **

Přípravek 2

Kapsle obsahující každá 20 mg léku byly vyrobeny následujícím způsobem:

	Množství na kapsli	Hmotnostní koncentrace (procent)
hydrochloríd spiro-9,9[2-(3,4-dimethoxy)- 1,2,3,4-tetrahydronaftyl]- 5-methyl-l,2,3,9- tetrahydro-8H-pyrido indolu	20 mg	10,0
škrob	89 mg	44,5
mikrokrystalická celulóza	8 9 mg	44,5
stearan hořečnatý	2 mg	1,0
	200 mg	100,0

Účinná složka, celulóza, škrob a stearan hořečnatý jsou smíchány, protlačeny přes síto U.S. kalibru č. 45 a plněny do tvrdých želatinových kapslí.

Přípravek 3

Kapsle obsahující každá 100 mg léku byly vyrobeny následujícím způsobem:

• ·

- 37 ♦ * * * • · · «·· ···

Množství na Hmotnostní kapsli koncentrace (procent) hydrochlorid spiro-9,9[2-(3-methoxy-4-chlor)1,2,3,4-tetrahydronaftyl]5-ethyl-l,2,3,9tetrahydro-8H-pyrído indolu monoleát polyoxyethylen sorbitanu škrobový prášek

100	mg	30,0
50	mg	0,02
250	mg	69,98
350	mg	100,0

Výše uvedené složky byly pečlivě smíchány a vloženy do prázdné želatinové kapsle.

Přípravek 4

Tablety obsahující 10 mg účinné složky byly vyrobeny následujícím způsobem:

.· · ·* ·· · · ·! · • · ·;·'·. · ·ν « ·' · 4' ·>···/·: ♦' « 4 4 ,· · ·♦ ·' «»··« ··· 4·* ·· ·*^Ί

	Množství na Hmotnostní
tabletu	koncentrace
	(procent)
vínan spiro-9,9[2- (3,4-dichlor)- 1,2,3,4-tetrahydronaftyl]- 5-methoxy-l,2,3,9- tetrahydro-8H-pyrido indolu	10 mg	10,0
škrob	45 mg	45,0
mikrokrystalická celulóza polyvinylpyrrolidon	35 mg	35,0
(10% roztok ve vodě)	4 mg	4,0
sodný karboxymethyl škrob	4,5 mg	4,5
stearan horečnatý	0,5 mg	0,5
talek	1 mg	1,0
	100 mg	100,0
Účinná složka, škrob a celulóza byly	protlačeny přes síto
U.S. kalibru č. 45 a	pečlivě	promíchány. Roztok

polyvinylpyrrolidonu byl smíchán se vzniklými prášky, které potom byly protlačeny přes síto U.S.. kalibru č. 14. Takto vzniklé granule byly sušeny při teplotě 50-60°C a protlačeny přes síto U.S. kalibru č. 18. Sodný karboxymethyl škrob, stearan horečnatý a talek, které byly před tím protlačeny přes síto U.S. kalibru č. 60 byly potom přidány ke granulím které byly po míšení lisovány na tabletovacím stroji, což dalo tablety o hmotností 100 mg.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina obecného vzorce I ve kterém

R¹ je atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

R³ je atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

R⁶ je zvolen ze souboru, obsahujícího atom vodíku, Ci-Cg alkyl, C₂-Ce alkenyl, atom halogenu, halo (Ci-C₆) alkyl, halo(C₂C₆)alkenyl, COR₅, C1-C10 alkanoyl, CO₂R₅-, (Ci-Ce alkyl) _raamino, NO₂, -SR5 a OR5;

R³ a R⁸ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, Ci-Cg alkyl, C₂-Ce alkenyl, NO₂, atom halogenu, halo (Ci-C₆) alkyl, halo (C₂-C₆) alkenyl, COR₅, Ci-C₁₀ alkanoyl, C7Cie arylalkyl, CO₂R₅', (Ci-C₆ alkyl)_marnino, -SR₅ a OR₅;

n je 1,
2 nebo
3;

n’ je 1, 2 nebo 3;

m je 1 nebo 2;

* 4
4 94 4 ;

4*4 44 4

4 44

4 4 4 | 4

4 '4, ·

44 44'

444 |i·' • ·

Rs je nezávisle atom vodíku nebo Ci~C₄ alkyl; R
5- je C1-C4 alkyl;

--- je případně vazba;

její farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát.

2. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ je vodík. 3. Sloučenina podle nároku 2, ve které R³ je vodík. 4. Sloučenina podle je analog naftylu. nároku 3, ve které spiro substituent 5. Sloučenina podle nároku 3/ ve které spiro substituent

má obecný vzorec
6. Sloučenina podle nároku 4, ve které spiro substituent má obecný vzorec ♦ # * * » · • ·' ·- «V • · »*· ♦ r « · *. «:

··· ·· ··'
7, Sloučenina podle nároku 3, ve které spiro substituent má obecný vzorec
8. Sloučenina podle nároku 1, ve které --- představuje dvojnou vazbu, vytvářející aromatický kruh.
9. Sloučenina podle nároku 3, ve které n je 1 a n' je 1.
10. Sloučenina podle nároku 3, ve které n je 2 a n' je

1.
11. Sloučenina podle nároku 3, ve které n je 1 nebo 2 a n' je 2.

4 * 4 4 44 • 4 4 4 4 4 4 4 4 « 4 4 4 4 4 4 4,4 4 4

4 4 4 · • · 44 '·* · 9‘ < 4' 4'

44' 44
12. Sloučenina podle nároku 3, ve které R⁶ se nachází v poloze 5 fenylového kruhu.
13. Sloučenina podle nároku 12, ve které R⁶ je zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, methyl, atom chloru a atom bromu.
14. Sloučenina podle nároku 13, ve které R⁷ a R⁸ jsou nezávisle na sobě zvoleny ze souboru obsahujícího methoxy a ethoxy.
15. Sloučenina podle nároku 4, ve které R⁷ a R⁸ jsou v polohách 3 a 4.
16. Sloučenina podle nároku 4, ve které R⁷ a R⁸ jsou každý zvoleny ze souboru obsahujícího methoxy a ethoxy.
17. Sloučenina podle nároku 1, zvolená ze souboru, zahrnuj ícího

I · * 9

I. · «· • · ♦ » · • *: « ί·: ♦.♦· ♦ ··

/=ιΛ .Γη.

OMe ί

• 4

4' • 4 *

4 «4 • 4.4' 4 4 • 4 4

4 4. 4 4
18. Farmaceutický přípravek, obsahující sloučeninu podle nároku 1 a jeden nebo více jejích farmaceuticky přijatelných excipientů.
19. Způsob léčení savce, trpícího stavem, spojeným s modulací 5HT₂b nebo náchylného k tomuto stavu, který zahrnuje podávání účinného . množství sloučeniny podle nároku 1 ^?? uvedenému savci.
20. Způsob podle nároku 19 pro léčení savce trpícího funkční střevní poruchou nebo náchylného k této poruše.
21. Způsob podle nároku 19 pro selektivní vazbu receptorů 5HT_2B savce, zahrnující podávání receptor vážící dávky, ve které sloučenina selektivně váže receptory 5HT_2B, savci, který potřebuje selektivní vazbu receptoru 5HT_2B.
22. Způsob léčby savce, trpícího stavem souvisejícím s modulací 5HT₂b nebo náchylného k tomuto stavu, zahrnující podávání receptor vážící dávky sloučeniny podle nároku 1, která váže 5HT_2b.

4.

«
23. Použití sloučeniny podle nároku 1 pro léčení savce trpícího stavem souvisejícím s modulací 5HT_2B nebo náchylného k tomuto stavu.
24. Použití sloučeniny podle nároku 1 pro selektivní vazbu receptoru 5HT_2B.