CZ2003793A3

CZ2003793A3 - Derivát imidazolu jako inhibitor RAF kinázy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Info

Publication number: CZ2003793A3
Application number: CZ2003793A
Authority: CZ
Inventors: David Kenneth Dean; Andrew Kenneth Takle; David Matthew Wilson
Original assignee: Smithkline Beecham P. L. C.
Priority date: 2000-09-21
Filing date: 2001-09-19
Publication date: 2004-04-14
Also published as: US20070135433A1; AU2001287901A1; PT1318992E; PL361397A1; ES2242767T3; CA2423154A1; HUP0301181A2; ATE300529T1; IL154949A0; MXPA03002449A; NO20031270L; KR20030030027A; NO20031270D0; DK1318992T3; DE60112312T2; CY1105251T1; EP1318992B1; DE60112312D1; US20040038964A1; US7199137B2

Description

(57) Anotace:

Derivát imidazolu obecného vzorce I, kde znamená X atom O nebo S, skupinu CH₂ nebo NH nebo X-R¹ znamená atom H; Yi a Y2 na sobě nezávisle N nebo CH; R¹ atomH, Cj^alkyl, C3_7cykloalkyl, aryl, arylC^alkyl, heterocyklyl, heterocyklylC_b6a]kyl, heteroaryl, nebo heteroarylC₁.₆alkyl, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituovaná, nebo pokud znamená X CH₂, může znamenat R¹ OH nebo Cj. 6alkoxy, která je popřípadě substituovaná; R² atom H, Ci 6alkyl, C₂_₆alkenyl, C₃_7cykloalkyl, C₅.₇cykloalkenyl, heterocyklyl, aryl nebo heteroaryl, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituovaná; Ar skupinu vzorce a) nebo b), kde znamená A kondenzovaný 5- až 7-členný cyklus popřípadě s až 2 heteroatomy ze souboru O, S a skupinu NR⁵, kde znamená R⁵ atom H nebo skupinu C₁₆alkyl, a cyklus je popřípadě substituován až 2 substituenty, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl jako inhibitor Raf kinázy, je vhodný pro výrobu farmaceutických prostředků pro profylaktické nebo terapeutické ošetřování nemocí, vyvolaných nebo způsobovaných neurotraumatickou příhodou, rakoviny, chromické neurodegenerace, bolesti, migrény a kardiatické hypertrofie.

O » · · · · · ► · · ·

I · · · · • · · · λοοτ - W3

Ol-ďAÍ-03-Če

Derivát imidazolu jako inhibitor Raf kinázy, jeho použití a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Oblast techniky

Vynález se týká nových sloučenin a jejich použití jako léčiv, zvláště jako inhibitorfl Raf kinázy, k ošetřování neurotraumatických nemocí, rakoviny, chronické neurodegenerace, bolesti, migrény a srdeční hypertrofie.

Dosavadní stav techniky

Raf proteinkinázy jsou klíčovými složkami signálních transdukčních cest, kterými specifické extrabuněčné stimuly vyvolávají přesné buněčné odezvy v savčích buňkách. Aktivované buněčné povrchové receptory aktivují proteiny ras/rap na vnitřku plasmové membrány, která v zápětí dává vznik a aktivuje Raf proteiny. Aktivované Raf proteiny fosforylují a aktivují intrabuněčné proteinkinázy MEK1 a MEK2. Aktivované MEKy v zápětí katalyžuj i fosforyláci a aktivaci p42/p44 mitogenem aktivované proteinkinázy (MAPK). Jsou známy variety cytoplasmických a nukleových substrátů aktivované MAPK, které přímo nebo nepřímo přispívají k buněčné odezvě na okolní změny. U savců byly identifikovány tři různé geny, které kódují proteiny Raf: A-Raf, B-Raf a C-Raf (také známý jako Raf-1) a jsou známé isomorfní varianty pocházející z rozdílného sestřihu mRNA.

Inhibitory Raf kináz byly navrhovány k použití v narušování růstu nádorových buněk a tedy k léčení rakoviny, například histiocytického lymphomu, plicního adenokarcinomu, rakoviny malých plicních buněk a karcinomu pankreatu a prsu; také k léčení a/nebo k profylaxi poruch souvisejících s nervovou degenerací pocházející z isehemických příhod, včetně mozkové ischemie, po zástavě srdce, mrtvici a multiinfarktní demence a také po mozkových ischemických příhodách, jako jsou příhody pocházející z poranění hlavy, z chirurgie a/nebo během porodu; také v chronické neurodegeneraci jako je ftlzheimerova a Parkinsonova nemoc, také ošetřování bolesti. migrény a srdeční hypertrof i e.

Nyní byla vyvinuta skupina nových sloučenin, které jsou Inhibitory Raf kináz, obzvláště inhibitory B-Raf kinázy.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je derivát imidazolu obecného vzorce I

kde znamená

X atom kyslíku, skupinu CH2 , CO, atom síry nebo skupinu

NH nebo X-R¹ znamená atom- vodíku,

Yi a Y2 na sobě nezávisle atom dusíku nebo skupinu CH,

R¹ atom vodíku, skupinu Ci-6alkylovou, C3-ycykloalkylovou, arylovou, arylCi-salkýlovou, heterocyklylovou, heterocyklylCi-6alkylovou, heteroarylovou, nebo heteroaryl Ci-6a1ky1ovou, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituovaná, nebo pokud znamená X skupinu CH2 , může znamenat R¹ skupinu hydroxylovou nebo Ci-s~ alkoxyskupinu, která je popřípadě substituovaná,

R² atom vodíku, skupinu Ci-ealkylovou. C2-6alkenylovou,

C3-7cykloalkýlovou, C5-7cykloalkenylovou, heterocyklylovou, arylovou nebo heteroarylovou, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituovaná,

A kondenzovaný pětičlenný až semičlenný kruh popřípadě obsahující až dva heteroatomy volené ze souboru zahrnuj ícícho atom kyslíku, atom síry a skupinu NR⁵, kde znamená R⁵ atom vodíku nebo skupinu Ci-6alkylovou, a kruh je popřípadě substituován až dvěma substituenty ze souboru zahrnujícího atom halogenu, skupinu Ci-ealky lovou, hydroxylovou, Ci-6alkoxyskupinu nebo ketoskupinu.

R³ a R*⁴ na sobě nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupinu Ci-ealkylovou, arylovou, arylCi-©alkylovou, Ci-6alkoxyskupinu, skupinu Ci-6alkoxyCi-6alkylovou, halogenCi-6alkylovou, aryICi-6alkoxyskupinu, skupinu hydroxylovou, nitroskupinu, kyanoskupinu, azidoskupinu, aminoskupinu, mono-N-Ci-6alkylaminoskupinu a di-N-Ci-6alkylaminoskupinu, acylaminoskupinu, ary1karbonylaminoskupinu, acyloxyskupinu, karboxyskupinu, skupinu soli karboxyskupiny, ester karboxyskupiny, skupinu karbamoylovou, mono-N-Ci-6 alkylkarbamoylovou a di-N-Ci-6alky1karbamoy1ovou, Ci-ealkoxykarbonylovou, aryloxykar4

bonylovou, ureidoskupinu, guanidinoskupinu, Ci—6alkylguanidinoskupinu, amidinoskupinu, Ci-galkylamidinoskupinu, sulfonylaminoskupinu, skupinu aminosulfonylovou, Ci-ealkylthioskupinu, skupinu Ci-6alkylsulfinylovou nebo Ci_6alkylsulfonylovou,

R¹⁵ atom kyslíku nebo skupinu N-OH,

Xi a X2 jeden ze symbol znamená atom dusíku a druhý skupinu NR⁶, kde znamená R⁶ atom vodíku nebo skupinu Ci-ealkylovou nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

Tečkovaně vyznačená dvojná vazba ve obecném vzorci I znamená možnou formu tautomerního kruhu sloučenin podle vynálezu. Je zřejmé, že dvojnou vazbu má nesubstituovaný atom dusíku.

Oximový podíl může být na kterémkoli atomu uhlíku nearomatického kruhu skupiny a) nebo b).

ftlkylové nebo alkenylové skupiny nebo podíly větších skupin, například alkoxyskupiny, mají přímý nebo rozvětvený řetězec a až 6 atomů uhlíku.

Cykloalkylové a cykloalkenylová skupiny mají 3 až 7 nebo 5 až 7 atomů v kruhu.

Jakožto případné substituenty skupiny alkylové, alkenylové, cykloalkylové a cykloalkenylová se uvádějí skupina arylová, heteroarylová, heterocyklylová, Ci-ealkoxyskupina, Ci-ealkyl thioskupina, arylCi-ealkoxyskupina, arylCi-6alkylthioskupina, aminoskupina, mono-N-Ci-6alky1aminoskupina a di-N-Ci-ealkylaminoskupina, skupina aminosulfonylová, cykloalkylová, cykloalkenylová, karboxyskupina a její estery, amidoskupina, ure• · · · idoskupina, guanidinoskupina, Ci-ealkylguanidinoskupina, amidinoskupina, Ci-ealkylamidinoskupina, Ci-6acyloxyskupina, hydroxyskupina a atom halogenu nebo jakékoli jejich kombinace. Dalším substituentem může být kyanoskupina.

S výhodou obsahuje případný substituent skupinu způsobující rozpustnost ve vodě; vhodné skupiny způsobující rozpustnost ve vodě jsou pracovníkům v oboru známy a příkladně se uvádějí skupina hydroxylová a aminoskupina. Jako ještě výhodnější substituenty se uvádějí aminoskupina, mono-N-Ci-ealkylaminoskupina a di-N-Ci-6alkylaminoskupina, aminoskupina obsahující skupinu heterocyklylovou nebo hydroxylovou a jejich jakékoliv komb i nace.

Výrazem aryl se vždy míní samotné nebo kondenzované kruhy vhodně se 4 až 7, s výhodou se 5 nebo 6 atomy v každém kruhu, přičemž každý kruh je popřípadě substituován, například až třemi substituenty. Kondenzovaný kruhový systém může obsahovat alifatické kruhy a nutně obshuje pouze jeden aromatický kruh. Jako vhodná arylová skupina se uvádějí skupina fenylová a naftylová například 1-naftylová nebo 2-naftylová skupina.

Vvýrazem “heterocykly! se míní, pokud není uvedeno jinak, nearomatické, popřípadě nasycené, jednotlivé nebo kondenzované kruhy vhodně s až 4 heteroatomy ze souboru zahrnujícího atom kyslíku, dusíku a síry, bud' v jednom nebo v obou kruzích, popřípadě substituované například až 3 substituenty. Každý heterocyklický kruh obsahuje vhodně 4 až 7, s výhodou 5 nebo 6 atomů v kruhu. Kondenzované heterocykl1cké systémy mohou obsahovat karboxylové kruhy a nutně obsahují pouze jeden heterocyklický kruh. Jako příklady heterocyklylových skupin se uvádějí skupina pyrrolidinová, piperidinová, piperazinová, morfolinová, thiomorfolinová, imidazolidinová a pyrazolidinová- Výhodnými příklady heterocyklických skupin jsou skupina pyrrolidinová, piperidinová, piperazinová, morfolinová, imidazolidi6 nová a pyrazolidinová.

Výrazem heteroaryl“ se zde míní, pokud není uvedeno jinak, monocyklický a bicyklický heteroaromatický kruhový systém s až 4, s výhodou s 1 nebo se 2 heteroatomy volenými ze souboru zahrnujícího atom kyslíku, dusíku a síry. Každý kruh může mít 4 až 7, s výhodou 5 nebo 6 atomů v kruhu. Bicyklický heteroaromatický kruhový systém může zahrnovat karbocyklický kruh. JakoŽto příklady heteroarylových skupin se uvádějí skupina pyrrolová, chinolinová, isochinolinová, pyrridinová, pyrimidinová, oxazolová, thiazolová, thiadiazolová, triazolová, imidazolová a benzimidazolová skupína.

Vhodně jsou arylové, heterocyklické a heteroary1ové skupiny popřípadě substituovány s výhodou až třemi substituenty. Jakožto vhodné substituenty se uvádějí atom halogenu, skupina hydroxylová, Ci-6alkylová, arylová, arylCi-ealkylová, Ci-6alkoxyskupina, skupina Ci-6alkoxyCi-6alkylová, halogenCi-6alkylová, arylCi-ealkoxyskupina, nitroskupina, kyanoskupina, azidoskupina, aminoskupina, mono-N-Ci-6alkylaminoskupina a di-N—Ci-6alkylaminoskupina, acylaminoskupina, arylkarbonylaminoskupina, acyloxyskupina, skupina karboxylová a skupina její soli nebo esteru, skupina karbamoylová, mono-N-Ci-ea1kylkarbamoy lová a di-N-Ci-ealkylkarbamoylová, Ci-6alkoxykarbonylová, aryloxykarbonylová, ureidoskupina, guanidinoskupina, Ci-ealkylguanidinoskupina, amidinoskupina, Ci-ealkylamidinoskupina, skupina močovinová, karbamátová, acylová, sulfonylaminoskupina, skupina aminosulfonylová, Ci-ealkylthioskupina, skupina Ci-ealkylsulfinylová nebo Ci-6alkylsulfonylová, heterocyklylová, heteroarylová, heterocyklylCi-ealkylová, heteroarylCi-6alkylová, nebo jakákoli jejich kombinace. Dva kruhové uhlíkové atomy mohou být vázány k vytvoření bicyklického systému.

Atomem halogenu se vždy míní atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

• · · ·

Ve sloučeninách obecného vzorce I znamená:

X s výhodou atom kyslíku, skupinu ΟΪ2 , atom síry nebo skupinu NH nebo znamená X-R¹ atom vodíku; výhodněji znamená X skupinu CH2 nebo NH nebo X-R^-znamená atom vodíku; mejvýhodněji znamená X skupinu NH nebo X-R¹ znamená atom vodíku;

Yl s výhodou skupinu CH a Y2 znamená atom dusíku nebo skupinu CH;

Ri5 _s výhodou skupinu N-OH;

R¹ alternativně atom vodíku, skupinu Ci-6alkylovou, arylovou, arylCi-ealkylovou, heterocyklylovou, heterocyklylCi-6alkylovou, heteroarylovou nebo heteroarylCi-ealkylovou, které jsou popřípadě substituovány; přídavně jestliže znamená X skupinu CH2, pak R¹ může znamenat skupinu hydroxylovou nebo Ci-6alkoxyskupinu, která je popřípadě substituována;

R² skupinu Ci-6alkylovou, C2-6 a1keny1ovou, C3-7cykloa1kýlovou, C5-7cykloalkenylovou nebo heterocyklylovou, z nichž každá je popřípadě substituovaná;

R² alternativně skupinu arylovou nebo hetaroary1ovou, z nichž každá je popřípadě substituovaná.

Ar s výhodou skupinu obecného vzorce a) nebo b)

(a)

kde R⁴ má význam uvedený u sloučeniny obecného vzorce I, n znamená 1, 2 nebo 3 a R¹⁵ atom kyslíku nebo skupinu N-OH; výhodněji znamená Ar skupinu obecného vzorce a) nebo b) .

(a) , (b) kde R⁴ má význam uvedený u sloučeniny obecného vzorce I, n znamená 1, 2 nebo 3; s výhodou znamená η 1; Ar s výhodou znamená indonovou skupinu.

Jakožto vhodné připadené substituenty skupiny R² se uvádějí jedna nebo několik skupin volených ze souboru zahrnujícího skupinu arylovou, heteroarylovou, heterocyklylovou, Ci-ealkoxyskupinu, Ci—ealkylthioskupinu, arylCi-6alkoxyskupinu, arylCi-6alkylthioskupinu, aminoskupinu, raonoCi-ealkylaminoskupinu a di-Ci-ealkylaminoskupinu, skupinu aminosufonylovou, cykloalkylovou, cykloakenylovou, karboxyskupinu a její estery, amidoskupinu, ureidoskupinu, guanidinoskupinu, Ci-6alkylguanidinoskupinu, amidinoskupinu, Ci-6alkylamidinoskupinu, Ci-eacyloxyskupinu, hydroxyskupinu a atom halogenu nebo jsoukoli jejich kombinaci. Alternativně mflže být substituentem Ci-salkylarylskupina.

S výhodou znamená R² skupinu, která obsahuje podíl způsobující rozpustnost, známou pracovníkům v oboru, a zásadité podíly. Jakožto podíl způsobující rozpustnost se uvádějí aminoskupina a hydroxylová skupina: například aminoskupina, monoCi-ealkylaminoskupina nebo di-Ci-6alkylaminoskupina, aminopodíl obsahující heterocyklylová skupina nebo hydroxyskupina ne9

bo jakákoli jejich kombinace.

Jakožto R² se zvláště uvádějí skupina -CR⁷R⁸-CH2-Z, -CH2-Z a skupina heterocyklylová, kde znamená R⁷ a R⁸ nezávisle popřípadě substituovanou skupinu Ci-6alkylovou, nebo R⁷ a R⁸tvoří spolu s atomem uhlíku, ke kterému jsou vázány, popřípadě substituovaný C3-7cykloalkýlový nebo C5-7cykloalkenylový kruh; a Z znamená skupinu NR⁹R¹⁰, NR⁹CCQ)NR⁹R¹°, NR⁹COOR¹⁰, NR⁹S02R^lť>, NR⁹C(Q)R¹⁰ nebo heterocyklylovou skupinu, kde znamená R⁹ a R¹⁰ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu Ci-ealkylovou, C3-7cykloalkýlovou, heterocyklylovou, heterocyklylCi-6alkylovou, arylovou, arylCi-6alkylovou, heteroarylovou a heteroarylCi-6alkylovou, z nichž každá je popřípadě substituovaná nebo popřípadě spolu dohromady tvoří heterocyklickou skupinu jako skupinu NR⁹R¹⁰, Q znamená atom kyslíku nebo síry, s výhodou atom kyslíku; a jestliže R² nebo Z znamená heterocykly lovou skupinu, například piperidylovou, piperazinovou nebo morfolinovou skupinu, je heterocyklylová skupina popřípadě substituovaná.

Jako specifické skupiny R² se příkladně uvádějí popřípadě substituovaná skupina fenylová, pyridylová, pyrimidylová a fuvany1ováJako další specifické skupiny R² se příkladně uvádí skupina fenylová popřípadě substituovaná skupinou -O-(CH2>m-NR¹⁸R¹⁹nebo -(CH2)_m-NR¹⁸R¹⁹, kde znamená m číslo 1 až 6, například 2 nebo 3 a R¹⁸a R¹⁹ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu Ci-ealkýlovou, nebo R¹⁸ a R¹⁹ spolu s atomem dusíku, ke kterému jsou vázány, tvoří popřípadě substituovaný 5- až 7-členný kruh popřípadě obsahující přídavný heteroatom volený ze souboru zahrnujícího NR²° a atom kyslíku, přičemž znamená R²° atom vodíku nebo skupinu Ci-6alkylovou, například morfolinylovou.

Alternativně může znamenat R⁷ a R⁸ atom vodíku,

R³ s výhodou atom vodíku, R⁴ s výhodou atom vodíku, R⁶ s výhodou atom vodíku.

Sloučeniny obecného vzorce (I) mají s výhodou molekulovou hmotnost nižší než 800.

Vynález se rovněž týká farmaceuticky přijatelných derivátů sloučenin obecného vzorce I a zahrnuje je.

Výrazem farmaceuticky přijatelné deriváty se míní jakákoli farmaceuticky přijatelná sůl, ester nebo sůl takového esteru sloučeniny obecného vzorce I, které po podání jedinci poskytují (přímo nebo nepřímo) sloučeninu obecného vzorce I nebo její účinný metabolit nebo zbytek. Výhodným derivátem je sůl.

Jednotlivé sloučeniny podle vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelné soli jsou objasněny v příkladech praktického provedení.

Pro použití v medicine se používá solí sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu, které jsou farmaceuticky přijatelné. Vhodné farmaceuticky přijatelné soli jsou známy pracovníkům v oboru a jsou popsány v literatuře (J. Pharm. Sci. 66, str. 1 až 19, 1977) jako adiční soli s kyselinami vytvořené s anorganickými kyselinami, například s kyselinou chlorovodíkovou, bromovodíkovou, sírovou, dusičnou nebo fosforečnou a s organickými kyselinami, například s kyselinou jantarovou, maleinovou, octovou, filmařovou, citrónovou, vinnou, benzoovou, p-toluensulfonovou, methansulfonovou nebo naftalensulfonovou. Použít lze i jiných solí, například oxalátů, například k isolaci sloučenin obecného vzorce I: i takové soli proto spadají do rozsahu vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být v krystalické nebo v nekrystalické formě a pokud jsou v krystalické formě, mohou to být popřípadě hydráty nebo solváty. Vynález zahrnuje stechiometrické hydráty stejně jako sloučeniny obsahující proměnlivá množství vody.

Vynález zahrnuje všechny ísomerní formy včetně stereoisomerfl a geometrických isomerů sloučenin obecného vzorce I, včetně enantiomerů a jejich směsí například racemátů- Různé isomerní formy mohou být navzájem oddělovány nebo štěpeny o sobě známými způsoby, nebo může být jakýkoli daný isomer již získán běžným způsobem přípravy nebo způsobem stereospecifické nebo asymetrické přípravy.

Jelikož jsou sloučeniny obecného vzorce I určeny k použití ve farmaceutických prostředcích musejí být v podstatě v čisté formě, například nejméně o čistoě 60%, výhodněji nejméně 75% a zvláště 85% především však o čistotě alespoň o 98% (procenta jsou míněna hmotnostně). Nečistých preparátů sloučenin je možno použít pro přípravu čistších forem použitelných ve farmaceutických prostředcích.

Sloučeniny obecného vzorece I jsou deriváty imidazolu, které lze snadno připravit způsoby dobře známými pracovníkům v oboru a popsanými v literatuře Cnapříklad v publikaci Comprehensive Heterocyclic Chemistry, vydavatelé Katritzky a Rees, Prgamon Press 5, str. 457 až 497, 1984) z výchozích látek, které jsou buď obchodně dostupné nebo se mohou připravovat obdobně jako dostupné látky dobře známými způsoby.

Příklady způsobů přípravy sloučenin podle vynálezu jsou na schématech 1 a 2. Tato schémata objasňují způsoby přípravy sloučenin, ve kterých znamená -X-R¹, R³ a R⁴ atom vodíku, Xi skupinu NH, Yi a Y2 skupinu CH a Ar skupinu obecného vzorce a), kde znamená η 1, způsoby jsou však použitelné pro přípravu

všech sloučenin obecného vzorce I. V prvním z těchto způsobů Cschéma 1) se připraví ct-diketon reakcí aniontu derivátu 4-pyridinmethanolu, jehož atom kyslíku je chráněný, s vhodně chráněným konjugovaným bicykl ickým ary1aldehydem, kde znamená PG oxim chránící skupinu, například skupinu -N-OR¹¹, kde znamená R¹¹ popřípadě substituovou Ci-ealkylovou skupinu, například methylovou skupinu, popřípadě substituovanou skupinu arylovou nebo skupinu silylovou, nebo PG znamená keton chrániči skupinu. Po odstranění skupiny chránící atom kyslíku se provádí oxidace diolu, vzniklého jako meziprodukt, čímž se získají shora zmíněné oc-diketony. Reakcí diketonu s vhodným aldehydem a octanem amonným v rozpouštědle, jako je například kyselina octová, methoxy-terc-butylether nebo methanol, se získá imidazolové jádro. Pak se mfiže skupina R² převedádět na jinou skupinu R² o sobě známými způsoby interkonverze funkční skupiny a skupina PG se převede na oximinoskupinu C=N-OH5.

ScheBia 1

O:

(lil) • « • ·

Druhý z těchto způsobů (schéma 21 je obdobný způsobu, který popsal Liverton a kol. (J. Med. Chem. 42, str. 2180, 1999). Při tomto způsobu se nechá reagovat 2-brom-l-pyridin-4-ylethanon se vhodným amidinem k vytvoření centrálního imidazolového jádra. Chránění labilního imidazolového vodíku (zpravidla chrániči skupinou, PG’, jsou skupina 2-trimethylsilylethoxymethylová, SEM, a methoxymethylová, MOM) umožní metalizaci imidazolového kruhu. Začlenění zbývajícího substituentu se může provádět přechodovým kovem katalyzovanou cros-kopulací metalizovaného imidazolu se vhodně chráněným konjugovaným bicykllekým aromatickým systémem substituovaným atomem halogenu nebo sulfonátesterem, kde znamená PG atom kyslíku nebo chránící skupinu definovanou při způsobu podle schéma 1. Takové způsoby kopulace v přítomnosti přechodového kovu jsou dobře známy pracovníkům v oboru a jsou popsány v literatuře, (například D.W. Knight, Comprehensive Organic Synthesis, sv. 4. str. 481, vydavatelé B.M. Trošt a I.Fleming, Pergamon Press 1991). Následně se může skupina R² převádět na jinou skupinu R² o sobě známými způsoby interkonverze funkční skupiny, chránící skupina PG' se odstraní a skupina PG se převede na oximinoskupinu (=N-OH). Cross-kopulace se může také obrátit tak, že se kopuluje halogenovaný imidazol se vhodně chráněným, metalizovaným konjugovaným bicyklickým aromatickým systémem.

_ ·

Schéma 2

Sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu Ci-ealkylovou, se mohou připravovat alkylaci sloučeniny obecného vzorce II a odstraněním chránící skupiny PG podobným způsobem, jaký popsal Liverton a kol. (J. Med. Chem. 42, str. 2180, 1999). Výsledné isomery se mohou oddělit chromatograficky.

V průběhu přípravy sloučenin obecného vzorce I se mohou labilní funkční skupiny v meziproduktech, například hydroxyskupina, karboxyskupina a aminoskupina chránit. Podrobný popis způsobů, kterými se mohou chránit různé labilní funkční skupiny, a způsoby uvolňování výsledných sloučenin ze chráněných derivátů, jsou popsaány v literatuře (například Protective Groups in Organic Chemistry, T.V. Greene a P.G.M. Vuts, Viley-Interscience, New York, 2. vydání, 1991).

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou připravovat jednotlivě nebo v podobě knihoven sloučenin obsahujících alespoň 2, například 5 až 1000 sloučenin a výhodně 10 až 100 sloučenin obecného vzorce I. Knihovny sloučenin obecného vzorce I se mohou připravovat, kombinačním způsobem split and mix“ nebo několikanásobnou paralelní syntézou s použitím chemie buď roztokové nebo pevné fáze, způsoby známými pracovníkům v oboru.

Vynález se také týká knihoven sloučenin obsahujících alespoň dvě sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Farmaceuticky přijatelné soli se mohou připravovat o sobě známými způsoby reakcí se vhodnou kyselinou nebo s derivátem kyseliny.

Různé meziprodukty, použité při přípravě sloučenin obecného vzporce I, jsou nové a proto se vynález týká také sloučenin vzorce II, III nebo IV, kde znamená PG atom kyslíku nebo chránící skupinu a PG chrániči skupinu. Vhodnými chránícími skupinami jsou shora popsané skupiny.

Sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné deriváty jsou užitečné při ošetřování a/nebo profylaxi poruch, na kterých se podílí Raf kinázy, obzvláště B-Raf kináza.

Vynález se dále týká použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných derivátů jako inhibitorů B-Raf kinázy.

Jak je shora uvedeno, jsou sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceutiocky přijatelné deriváty vhodné pro ošetřování a/nebo profylaxi chorob spojených s neuronální degenerací pocházející z ischemických příhod, stejně jako z chronické

9 • · «

♦ «99 neurodegenerace, k ošetřování a/nebo profylaxe bolesti, migrény a srdeční hypertrofie.

Vynález se týká způsobu ošetřování nebo profylaxe neurotraumatické nemoci savců, při kterém se podává savcům účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu.

Dále se vynález týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu k výrobě léku k profylaktickému nebo terapeutickérau ošetřování jakékoli poruchy u lidí nebo jiných savců, která je vyvolána nebo způsobena neurotraumatickou příhodou.

Zde definované neurotraumatické nemoci/příhody zahrnují jak otevřené nebo penetrační trauma hlavy, například způsobené chirurgií, tak trauma poranění uzavřené hlavy, například způsobené poraněním hlavové oblasti. Zahrnuty jsou také ischemická mrtvice obzvláště mozkové oblasti, přechodné ischemické záchvaty následované po koronárním bypasu a odchylky vědomí následující po ostatních přechodových ischemických stavech.

Ischemická mrtvice může být definována jako ohnisková neurologická porucha, která je důsledkem nedostatečného přívodu krve do příslušné oblasti mozku, obvykle jako důsledek embolie, trombu nebo místního ateromatozního zablokování krevní cévy. Význam mají stresové stimuly (jako je anoxie), poranění s oxidační redukcí, nadměrná stimulace nervové excitace a zánět li vé cytokiny a vynález se týká prostředků pro potenciální léčbu těchto poranění. Postačí poměrně malé ošetření pro tato akutn í poraněn í.

Sloučenin podle vynálezu je možno použít také k ošetřování nebo profylaxi rakoviny.

• · · ·

Vynález se proto dále týká způsobu ošetřování nebo profylaxe rakoviny savců potřebujících takové ošetření, při kterém se podává účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu.

Vynález se dále týká použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných derivátů k výrobě léčiva k profylaktickému nebo terapeutickému ošetřování rakovinný.

Vynález se dále týká způsobu ošetřování nebo profylaxe chronické neurodegenerace, bolesti, migrény a srdeční hypertrofie savců, při kterém se podává účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu .

Vynález se dále týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu k výrobě léčiva k profylaktickému nebo terapeutickému ošetřování chronické neurodegenerace, bolesti, migrény a srdečné hypertrofie.

K použití v terapii se sloučeniny obecného vzorce I formulují zpravidla do farmaceutického prostředku o sobě známou farmaceutickou praxí.

Vynález se dále týká farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné deriváty a farmaceuticky přijatelný nosič.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou být vhodně podávány některou z obvyklých cest pro podání drog, například parenterálně, orálně, topleky nebo inhalačně. Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat v obvyklých dávkovačích formách připravovaných kombinováním se standardními farmaceutickými nosiči o sobě známými způsoby. Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat také v obvyklých dávkách v kombinaci se známýmou další • · · · terapeuticky účinnou látkou. Při výrobě farmaceutických prostředků se používá míšení, granulace a lisování nebo rozpouštění složek podle připravované formy podávání. Forma a charakter farmaceuticky přijatelného nosiče jsou dány množstvím sloučeniny obecného vzorce I, se kterou má být kombinován, cestou podání a jinými dobře známými faktory. Nosiče musejí být přijatelné’' v tom smyslu, že musejí být kompatibilní s ostatními složkami prostředku a neškodné pro ošetřovaného jedince.

Použité farmaceutické nosiče mohou být pevné nebo kapalné. Příklady pevných nosičů jsou laktóza, terra alba, sacharóza, mastek, želatina, agar, pektin, akácie, stearát hořečnatý a kyselina stearová. Příklady kapalných nosičů jsou sirupy, podzemnicový olej, olivový olej, voda a podobné nosiče- Podobně může nosič nebo ředidlo obsahovat v oboru dobře známé materiály s časovou prodlevou, jako je glycerylmonostearát nebo glyceryldistearát samotný nebo s voskem.

Použít je možno rozmanitých farmaceutických forem. Je-li použito pevného nosiče, může se prostředek tabletovat nebo může být ve formě tvrdé želatinové kapsle, prášku nebo pelety nebo ve formě pilulek nebo pastilek. Množství pevného nosiče se mění v širokých mezích a je v rozmezí přibližně 25 mg až přibližně 1 g. Je-li použito kapalného nosiče, je prostředek ve formě sirupu, emulze, měkké želatinové kapsle, sterilní injektovatelné kapaliny jako je ampule nebo nevodná tekutá suspenze .

Sloučeniny obecného vzorce I se s výhodou podávají parenterálně, tedy intravenózně, intramuskulárně, subkutánně, sublinguálně, intranasálně, intrarektá1ně, intrvaginálně nebo intraperitoneálně. Přednost se dává intravenózní formě parenterálního podávání- Sloučeniny se mohou podávat jako bolus nebo kontinuální infuze, například po dobu 6 hodin až 3 dní. Vhodné • · · · · · · • · · · · · dávkovači formy pro takové podání se mohou připravovat obvyk1ým i způsoby.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat také orálně. Vhodné dávkovači formy pro takové podání se mohou připravovat obvyklými způsoby.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat také inhalací intranasální a orální- Vhodné dávkovači formy pro takové podání, jako jsou aerosolové formulace, se mohou připravovat obvyklými způsoby.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou podávat také topicky, tedy nesystemickým podáním. To zahrnuje aplikaci inhibitorů vně epidermu nebo bukálni dutiny a vkapávání takových sloučenin do ucha, oka a nosu, takže se sloučenina nedostane významně do krevního řečiště.

U všech způsobů podávání podle vynálezu je denní režim orální dávky s výhodou v rozmezí přibližně 0,1 až přibližně 200 mg/kg celkové tělesné hmotnosti, s výhodou v rozmezí přibližně 0,2 až 30 mg/kg, výhodněji v rozmezí přibližně 0,5 až 15 mg/kg. Denní parenterální režim dávkování je v rozmezí přibližně 0,1 až přibližně 200 mg/kg celkové tělesné hmotnosti, s výhodou v rozmezí přibližně 0,2 až přibližně 30 mg/kg a výhodněji v rozmezí přibližně 0,5 až 15 mg/kg. Denní topický dávkovači režim je s výhodou skupinu přibližně 0,1 mg až 150 mg podávaný 1 až 4 x denně, s výhodou 2 nebo 3x denně. Denní inhalační dávkovači režim je s výhodou skupinu přibližně 0,01 až přibližně 1 mg/kg za den. Pracovníkům v oboru je zřejmé, že optimální množství a volba jednotlivých dávek inhibitorů jsou dány povahou a rozsahem léčeného stavu, formou, cestou a místem podání a jednotlivým léčeným pacientem, přočemž se a že optimum může stanovit konvenčními způsoby. Pracovníci v oboru také nahlédnou, že optimální průběh léčby, tedy počet dávek

inhibitorů za den po definovaný počet dní, může být určen pracovníkem v oboru pomocí běžného průběhu testů stanovení léčby.

V případě farmaceuticky přijatelných solí se uvedená množství přepočtou podle mateřské sloučeniny obecného vzorce I.

Je-li sloučenina obecného vzorce I podávámna ve shora uvedených dávkovačích mezích, nejsou pozorovány ani očekávány žádné toxikologické jevy.

Všechny uvedené publikace včetně přihlášek vynálezů jsou zde uvedeny jako odkazy.

Vynález blíže objasňují, nijak však neomezují, následující příklady objasňující způsob přípravy farmakologicky aktivních sloučenin podle vynálezu.

Uvedené následující zkratky mají tento význam—

THF tetrahydrofuran DMF N,N-dimethylformamid TBAF tetrabutylammoniumfluorid DMSO dimethylsulfoxid LDA 1ithiumdiisopropylamid

Příklady provedení

Příklad 1

5-[2-(2-Amino-l,1-dimethylethy1)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol4-yl]indan-l-onoxim

HO—I

		• ··· · · ·· ···
Stupeň 1
5-Brom i ndan-1-on-0-methy1ox i m
Do roztoku 5-bromindanonu (100 (650 ml) se v prostředí argonu přidá (198 g, 2,38 mol) a pyridin (125 ml)	g, 0,474 mol) v ethanolu methoxy1am i nhydroch1or i d Směs se udržuje 2,5 ho-

din na teplotě zpětného toku, ochladí se na teplotu místnosti a vlije se do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Směs se extrahuje ethylaeetátem a organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se ve vakuu. Surový produkt se překrystaluje z isopropanolu, čímž se získá 5-bromindan-l-on-O-methyloxim (110 g, 97¾ výtěžek) v podobě hnědé pevné látky *H NMR (CDCI3) 7,52 (lH.d, J 8,3 Hz), 7,43 (lH.d, J 1Hz), 7,35 (lH.dd, J 8,3, 1Hz), 3,97 (3H,s), 2,99 (2H,m), 2,85 (2H,m).

Stupeň 2

1-Methoxy im i no i ndan-5-karba1dehyd

Do roztoku produktu ze stupně 1 (112 g, 0,46 mol) v THF o

(1500 ml) se při teplotě -60 C přidá v prostředí argonu n-butyllithium (325 ml, 0,52 mol) během jedné hodiny. Po jednohodinovém míchání při teplotě -60 C se během jedné hodiny přikape roztok DMF (39,7 ml) v THF (50 ml). Reakční směs se míchá o

jednu hodinu při teplotě -60 C, když se před tím nechala ohřát na teplotu místnosti. Po jedné hodině se reakce ukončí přidáním nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a směs se extrahuje ethylaeetátem. Organická fáze se vysuší síranem sodným, zkoncentruje se ve vakuu a zbytek se čistí chromatografii na silikagelu, čímž se získá 1-raethoxyiminoindan-5-karba1dehyd (57 g, 65¾ výtěžek) v podobě žluté pevné látky *H NMR (CDCI3) 10,0 (lH.s,), 7,83 až 7,73 (3H,m,), 4,02 (3H,s,), 3,10 (2H, m), 2,92 (2H,m).

Stupeň 3

5-(1,2-Dihydroxy-2-pyridin-4-ylethyl)indan-l-on-O-methyloxim

Do roztoku 4-(terc-butyldimethylsilanyloxymethy1^pyridinu [T.F. Gallagher a kol., Bloorg. Med. Chem. 5, str. 49, 1997] (71,5 g, 0,32 mol) v THF (800 ml) se přidá během jedné hodiny o

při teplotě -50 C v prostředí argonu LDA (162 ml, 2M v systému heptan/THF/ethylbenzen, 0,324 mol). Směs se míchá další o

jednu hodinu při teplotě -40 C před přidáním roztoku sloučeniny ze stupně 2 (55 g, 0,29 mol) v THF (600 ml) během jedné hodiny. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti, reakce se ukončí přísadou nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a směs se extrahuje ethylacetátem. Organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se ve vakuu, čímž se získá hnědý olej (125 g). Olej se rozpustí v THF (1500 ml), zpracuje se TBAF (356 ml, 0,356 mol) a míchá se jednu hodinu. Reakční směs se odpaří a zbytek se rozdělí mezí vodu a ethylacetát- Organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se ve vakuu, čímž se získá 5-(1,2-dihydroxy-2-pyridin-4-ylethy1)indan-l-on-O-methyloxim (57 g, 64¾ výtěžek) v podobě bledě žluté pevné látky, která se použije bez dalšího čištění.¹H NMR (CDC1₃) 8,38 (2H,m), 7,57 (lH,m,), 7,12 až 6,99 (4H,m), 4,88 (lH,m), 4,66 (lH,m) 3,96 (3 H,s), 2,93 (2H,m), 2,85 (2H,m).

Stupeň 4

1-(l-Methoxyiminoindan-5-y1)-2-pyridin-4-ylethan-l,2-dion

Do směsi DMSO (43 ml, 0,56 mol) a dichlormethanu (800 ml) o

se při teplotě -70 C v prostředí argonu přidá oxalylchlorid (71,4 g) a pak roztok produktu ze stupně 3 (55 g, 0,185 mol) ve směsi dichlormethan/DMSO (1000 ml/60 ml) během dvou hodin o

při teplotě -60 C. Po dvouhodinovém míchání při teplotě -60 o

C se přikape triethylamin (154 ml) a směs se nechá ohřát na teplotu místnosti přes noc. Reakční směs se ochladí vodou, organická fáze se oddělí, promyje se vodou, vysuší se síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá l-CL-mthoxyiminoindan-5-yl)-2-pyridin-4-ylethan-1,2-dion (51 g, 94¾ výtěžek) v podobě žluté pevné látky. *H NMR (CDC1₃) 8,87 (2H,d), 7,89 až 7,77 (5H,m,), 4,03 (3H,s), 3,09 (2H,m), 2,93 (2H,m).

Stupeň 5 terc-Butylester (2-[4-(1-methoxyiminoindan-5-y1)-2-pyridin-4-yl-lH-imidazol-2-yl]-2-methy1propyl)karbamové kyseliny

Směs produktu ze stupně 4 (1,02 g, 3,47 mmol), terc-butylesteru (2,2-dimethyl-3-oxopropyl)karbaminové kyeliny (0,84 g, 4,16 mmol) [Y. Guindon a kol., J. Am. Chem. Soc. 119, str. 9289, 1997] a octanu amonného (1,34 g, 17,4 mmol) v methanolu (15 ml) a terč-butylmethyletheru (30 ml) se míchá dvě hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs se vlije do vody a extrahuje se ethylacetátem. Organický extrakt se vysuší síranem horečnatým, zkoncentruje se ve vakuu a surový produkt se čistí chromatografií na silikagelu za eluování ethylacetátem, čímž se získá terc-butylester (2-[4-(1-methoxylminoindan-5-y1)-2-pyridin-4-y1-1H-imidazol-2-yl]-2-methy1propy1)karbamové kyseliny (0,450 g, 27¾ výtěžek) v podobě bezbarvé pevné látky.

MS (AP+)m/e 477 [M+H3⁺Stupeň 6

5-C2-(2-Amino-l,1-dimethy1ethy1)-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-4-yl]indan-l-on

Směs produktu ze stupně 5 (0,400 g, 0,839 mmol) a 5M kyseliny chlorovodíkové (2 ml) v dioxanu (4 ml) se udržuje jednu hodinu na teplotě 100 C. Přikape se aceton (10 kapek) a ohřev pokračuje další jednu hodinu před ochlazením na teplotu míst24 nosti a zkoncent.ruje se ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu za eluování 2=18=80 směsí 0,88 roztok amoniaku = methanol = ethylacetát, čímž se získá 5-[2-(2-amino-l,1-dimethy1ethy1)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl]indan-l-on

CO,18 g, 62% výtěžek) v podobě žluté pevné látky,

MS(AP+)m/e 348 [M+H]-*-.

Stupeň 7

5-[2-(2-Amino-l,1-dimethylethy1)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl]indan-l-onoxim

Do roztoku produktu ze stupně 6 CO,12 g, 0,350 mmol) v eto hanolu C5 ml) se při teplotě 80 C přidá vodný hydroxylamin <0,07 g, 1,04 mmol, 50% ve vodě). Po 30 minutách se směs ochladí na teplotu místnosti a zkoncentruje se ve vakuu, čímž se získá 5-[2-C2-Amino-l,l-dimethylethyl)-5-pyridin-4-yl-lH-imiriazol-4-yl]indan-l-onoxim (0,124 g, 100% výtěžek) v podobě žluté pevné látky. MS(AP+)m/e 362 [M+H]⁺.

Příklad 2

N-<2-[5-(1-Hydroxyiminoindan-5-y1)-4-pyridin-4-yl-lH-imidazol-2-yl]-2-methylpropyl)methansulfonamid

Stupeň 1

N-<2-Methy1-2-[5-(l-oxoindan-5-y1)-4-pyridin-4-yl-1H-imidazol-2-y 1.3 propyllmethansulfonamid

Směs produktu z příkladu 1 stupně 6 (0,1 g, 0,29 mmol) a methansulfonalchloridu ¢0,023 ml, 0,3 mmol) v dichlormethanu ¢3 ml) se míchá dvě hodiny při teplotě místnosti- Reakční směs se vlije do ethylacetátu, promyje se vodou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje se ve vakuu. Surový zbytek se čistí chromatografií na silikagelu za eluování 1=9=90 směsí 0,88 roztk amoniaku=methanolu=dichlormethanu, čímž se získá N-<2-raethyl-2-[5-Cl-oxoindan-5-yl)-4-pyrldin-4-yl-lH-imidažol-2-yl3propyl>methansulfonamid ¢0,075 g, 61% výtěžek) v podobě žluté pevné látky. MSCAP+)m/e 425 ΓΜ+Η]*.

Stupeň 2

N-<2-C5-¢1-Hydroxyiminoindan-5-y1)-4-pyridin-4-y1-1H-imidazol2-y1]-2-methy1propyDmethansu 1fonam i d

Tento produkt ¢0,06 g, 90% výtěžek) se připravuje z produktu stupně 1 podle popisu stupně 7 příkladu 1.

MSCAP+)m/e 440 CM+H]⁺.

Příklad 3 ¢2-[5-¢1-Hydroxyiminoindan-5-yl)-4-pyridin-4-yl-lH-imidazol-2-yl]-2-methy1propyDamid 1-C2-Methoxyethy1)piperidin-4-karboxylové kyseliny

Stupeň 1 í2-methy1-2-[5-Cl-oxoindan-5-y1)-4-pyridin-4-yl-lH-imidazol-

2-yl]propy1}amid 1-<2-methoxyethy1)piperidin-4-karboxylové kyseliny

Směs sloučeniny podle příkladu 1, stupeň 6 <0,1 g, 0,29 mmol), 1-hydroxybenzotriazolu <0,06 g, 0,44 mmol) a na polymer vázaného 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu <0,4 g, 0,6 mmol, 1,52 mmol/g) ve směsi 1^;1 1,3-dichlormethanu a DMF <4 ml) se míchá 30 minut při teplotě místnosti. Přidá se roztok hydrochloridu l-<2-methoxyethyl)piperidin-4-karboxylové kyseliny [světový patentový spis číslo W0 97/253091 <0,098 g, 0,44 mmol) v DMF <2 ml) a směs se míchá přes noc při teplotě místnosti- Reakční směs se zfiltruje, rozpouštědlo se odstraní ve vkuu a surový zbytek se čistí chromatografii na silikagelu za eluování 1=9= 90 směsí 0,88 roztok amoniaku^:methanoldichlormethan, čímž se získá <2-methy1-2-[5-<l-oxoindan-5-y1)-4-pyríodin-4-y1-1H-i midazol-2-yllpropyllamid l-<2-methoxyethyl)piperidin-4-karboxylové kyseliny <0,12 g, 80% výtěžek) v podobě žlutého oleje. MSCAP+)m/e 516 [M+H]-*-.

Stupeň 2:

í2-[5-Cl-Hydroxyiminoindan-5-yl)-4-pyridin-4-y1-1H-imidazol-2-y11-2-methy1propy1)am i d 1-<2-Methoxyethyl)pi per i d i n-4-karboxylové kyseliny

Tento produkt CO,07 g, 70% výtěžek) se připravuje z produktu stupně 1 podle popisu v příkladu 1, stupeň 7.

MS<ftP+)m/e 531 [M+H1⁺.

Příklad 4

5-<2-Piperidin-4-y1-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y1)indan-1-on oxim

Stupeň 1

Terč-butylester 4-[4-(l-Methoxyiminoindan-5-yl)-5-pyridin-4y1-1H-imidazol-2-yl]piperidin-1-karboxylové kyseliny

Tento produkt (0,765 g, 79¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 1 stupeň 4 a z terč-butylesteru 4-forraylpiperidin-1-karboxylové kyseliny (S.I. Klein a kol., J- Med. Chem. 41, str. 2492, 1998) způsobem popsaným v příkladu 1 stupeň 5.

MS(AP+)m/e 488 [M+H1+.

Stupeň 2

5-(2-Piperidin-4-yl-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on

Tento produkt (0,55 g, 90¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 způsobem popsaným v příkladu 1, stupeň 6.

MS(AP+)m/e 359 [M+H]⁺.

Stupeň 3

5-(2-Piperidin-4-y1-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim

Tento produkt (0,35 g, 90¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 2 způsobem popsaným v příkladu 1 stupeň 7 a následným čištěním chromatografií na silikagelu za eluování směsí 0,88 roztokamoniakirmethanol-dichrormethan. MS(AP+)m/e 374 [M+H]⁺.

Příklad 5

5-[2-(1-(1-1l-(2-Methoxyethyl)-piperIdin-4-yl)-methanoy1ípiperidin 4-yl)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl]indan-l-on oxim

Tento produkt (0,028 g, 28% výtěžek) se připraví z produktu příkladu 4a z hydrochlorídu l-(2-methoxy-ethyl)piperidln-4-karboxylové kyseliny (světový patentový spis číslo WO 97/ 25309) způsobeni popsaným v příkladu 3, stupeň 1.

MS(ftP+)m/e 543 [M+H]-*-.

Příklad 6

5-[2-(l-Furan-3-ylmethylpiperidin-4-yl)-5-pyridin-4-yl-lHimldazol-4-yl1indan-l-on oxim

Směs produku z příkladu 4 (0,093 g, 0,25 mmol), 3-furaldehydu (0,024 g, 0,25 mmol) a polymerem vázaného trimethylamoniumkyanoborhydrldu (0,125 g, 0,5 mmol, 4 mmol/g) v methanolu (3 ml) obsahujícím kyselinu octovou (0,1 ml) se míchá 24 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se nalije na sloupec SCX za eluování směsí 0,880 roztok amoniaku-methanol (0 až 10 %), produkt se čistí chromatografií na silikagelu za eluování 1-9: 90 směsí 0,880 roztok amoniaku=ethanol:dichlormethan, čímž se získá 5-E2-(1-furan-3-ylmethylpiperldin-4-yl)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl]indan-l-on oxim (0,070 g, 62% výtěžek) v podobě pevné látky. MS(AP+)m/e 454

Příklad 7

5-Í2-1l-(2-Methoxyethyl)piperidin-4-yl]-5-pyridin-4-yl-lHimidazol-4-yl>lndan-1-on oxim

Stupeň 1

1-(2-Methoxyethyl)pi per i d i n-4-karba1dehyd

Do roztoku ethylesteru l-(2-methoxyethyl)piperidin-4-karboxylové kyseliny [světový patentový spis číslo WO 97/25309] (2,CT g, 9,3 mmol) v toluenu (40 ml) se při teplotě -78 C přidá během jedné hodiny dlisobutylamoniumhydrid (10,2 ml, IM roztok v tetrahydrofuranu, 10,2 mmol). Po jedné hodině se reakce ukončí přidáním methanolu (5 ml) a nasyceného roztoku octanu amonného (5 ml). Směs se míchá jednu hodinu při teplotě místnosti a zfiltruje se. Filtrát se zkoncentruje, čímž se získá 5-(2-(l-Methoxyethyl)piperidin-4-yl)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim v podobě žlutého oleje (1,1 g, 69 % výtěžek). MS(AP+)m/e 172 [M+H]⁺.

Stupeň 2

5-Í2-11-C2-Methoxyethyl)plperldin-4-yl]-5-pyridín-4-y1-1Himldazol-4-yl)indan-l-on-O-methyl oxim

Tento produkt (0,27 g, 32¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 a z produktu z příkladu 1 stupeň 4 způsobem popsaným v příkladu 1, stupeň 5- MS(AP+)m/e 446 [M+H]⁺.

Stupen 3

5-(2-[1-(2-Methoxyethy1)piperidin-4-yll-5-pyridin-4-yl-1Himidazol-4-yl)indan-l-on

Tento produkt (0,193 g, 93% výtěžek) se připraví z produktu ze stupně 2 způsobem popsaným v příkladu 1, stupen 6.

MS(AP+)m/e 417 EM+H3⁺.

Stupeň 4

5-(2-Cl-(2-Methoxyethy1)piperidin-4-yl1-5-pyridin-4-yl-lHimidazol-4-yl)indan-l-on oxim

Tento produkt (0,105 g, 68% výtěžek) se připraví z produktu stupně 3 způsobem popsaným v příkladu 4, stupeň 3.

MS(AP+)m/e 432 EM+H]⁺.

Příklad 8

5-(2-Aminomethy1-5-pyridin-4-yl-1H-imidazol-4-yl)indan-l-onoxim

Stupeň 1

Terc-Butylester [4-(1-methoxyiminoindan-5-y1)-5-pyridin-4-y1lH-imidazol-2-ylmethyl]karbamové kyseliny

Tento produkt (1,04 g, 70% výtěžek) se připraví z produktu příkladu 1 stupeň 4 a z terc-butylesteru (2-oxoethy1)karbamové

kyseliny popsaného v příkladu 1 stupen 5.

MS(AP+)m/e 434 [M+H]⁺.

Stupeň 2

5-(2-Aminomethy1-5-pyridin-4-yl-1H-imidazol-4-yl)indan-1-on

Tento produkt (0,21 g, 30% výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 způsobem popsaným v příkladu 1, stupeň 6MS(AP+)m/e 305 [M+H]

Stupeň 3

5-(2-Aminomethyl-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-onoxim

Tento produkt (0,064, 80% výtěžek) se připraví z produktu stupně 2, způsobem popsaným v příkladu 4, stupeň 3.

MS(AP+)m/e 320 EM+H]⁺.

Příklad 9 [4-(l-Hydroxyiminoindan-5-yl)-5-pyridin-4-yl)-1H-imidazol-2ylmethyl]amid l-(2-methoxyethy1)piperidin-4-karboxylové kyseliny

Stupeň 1

C4-(l-0xoíndan-5-y1)-5-pyridin-4-y1)-lH-imidazol-2-ylraethy11amid l-(2-methoxyethyl)piperidin-4-karboxylové kyseliny

Tento produkt CO,095 g, 67% výtěžek) se připraví z produktu příkladu 8 stupen 2 a z hydrochyloridu l-C2-methoxyethyl)piperidin-4-karboxylové kyseliny Csvětový patentový spis číslo WO 97/25309] způsobem popsaným v příkladu 3 stupeň 1.

MSCftP+)m/e 474 [M+H]-*-.

Stupeň 2 [4-Cl-hydroxyiminoindan-5-y1)-5-pyridin-4-yl)-lH-imidazol-2-ylmethy1]amid l-C2-methoxyethy1)piperidin-4-karboxylové kysel iny

Tento produkt CO,041 g, 42% výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 způsobem popsaným v příkladu 4, stupeň 3.

MSCftP+)m/e 531 [M+H]-*-.

Příklad 10

5-C2-Piperidin-l-ylmethal-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim

Stupeň 1

5-[2-Cl,1-Dimethoxymethyl)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y1]indan-l-on-O-methyloxim

Tento produkt Cl,05 g, 79% výtěžek) se připraví z produktu příkladu 1 stupeň 4 a z dimethyoxyacetaldehydu C45% roztok v terc-butylmethyletheru) způsobem popsaným v příkladu 1 stu33 • · · to · · · • · · * · · ··· ·· · * ··· · » · · * to · · · ··· ·· ··· peň 5. MSCAP+)m/e 379 [M+H]*Stupeň 2

4- <l-oxo-indan-5-yl)-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-2-karbaldehyd

Tento produkt <0,92 g, 90% výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 způsobem popsaným v příkladu 1 stupeň 6.

MS<AP+)m/e 303 [M+H1+.

Stupeň 3

5- <2-Piperidin-1-yImethyl-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-on

Tento produkt <0,11 g, 44% výtěžek) se připraví z produktu stupně 2 způsobem popsaným v příkladu 6.

MS<AP+)ra/e 373 [M+H3*.

Stupeň 4

5-<2-Piperidin-l-yImethy1-5-pyridin-4-y1-1H-Imidazol-4-yl)indan-l-on oxim

Tento produkt <0,55 g, 53%výtěžek) se připraví z produktu stupně 3 způsobem popsaným v příkladu 4 stupeň 3.

MS<AP+)m/e 387 CM+H]*.

Příklad 11

5-<2-Morfolin-4-yImethy1-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim

• · · · • · • · · · « · ·

Tento produkt (0,034 g, 13¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 10 stupně 2 a z morfolinu způsobem popsaným v příkladu 10 stupeň 3 a 4. MS(AP+)m/e 390 EM+H3⁺Příklad 12

5-(5-Pyri d i n-4-y1-2-(2,3,5,6-tetrahydro-[1,2 3bipyrazin-4ylmethyl)-lH-imidazol-4-yl3 indan-l-on oxim

Tento produkt (0,038 g, 17¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 10, stupeň 2a z 3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2 Ibipyrazinylu způsobem popsaným v příkladu 10, stupeň 3 a 4MS(AP+)m/e 467 [M+H3⁺Příklad 13

5-(2-Piperazin-l-yImethy1-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y13 indan-l-on oxim

Stupeň 1 terc-Butylester 4-[4-(l-oxolndan-5-y13-5-pyridin-4-y1-1H-iraidazol-2-methyl3 piperazin-1-karboxylové kyseliny ·*«» ·* • · · • · 0 · · • * * ·

Tento produkt ¢0,35 g, 74¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 10, stupeň 2 a z terč-butylesteru piperazin-l-karboxylové kyseliny způsobem popsaným v příkladu 6.

MSCAP+)m/e 474

Stupeň 2

5-C2-Piperazin-l-ylmethyl-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on

Roztok produktu ze stupně 1 ¢0,350 g, 0,74 mmol) v dichlormethanu ¢10 ml) a v kyselině trifluoroctové ¢5 ml) se míchá tři hodiny při teplotě místnosti- Roztok se zkoncentruje a zbytek se odpaří společně s dichlormethanem. Zbytek se rozpustí ve vodě ¢10 ml) a roztok se neutralizuje roztokem uhličitanu sodného. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a získaná pevná látka se vysuší oxidem fosforečným, čímž se získá 5^2-piperazin-l-ylmethyl-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-on a použije se v následujícím stupni. ^ÍS¢ftP+)m/e 374

Stupeň 3

5^2-Piperazin-l-ylmethyl-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-on-oxim

Tento produkt ¢0,105 g, 37¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 2 způsobem popsaným v příkladu 4, stupeň 3.

MS^P+)m/e 389 [M+H1⁺.

Příklad 14

5-í2-[4^3-Dimethylaminopropyloxy)fenyll-5-pyridin-4-yl-lHimidazol-4-yl)indan-l-on

• ··«· ·· * ·· · ·· · · · ·· · * “ ···· ·· · · *• · · · · · · · <*··« • ···· · » * ··· ··· ·· ··· ·· ·

Stupeň 1

5-Brom-indan-l-on O-methyloxim

Do roztoku 5-bromindanonu (100 g, 0,474 mol) v ethanolu (650 ml) se v prostředí argonu přidá methoxylaminhydrochlorid (198 g, 2,38 mol) a pyridin (125 ml). Směs se udržuje 2,5 hodin na teplotě zpětného toku, ochladí se na teplotu místnosti a vlije se do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného- Směs se extrahuje ethylacetátem, organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se ve vakuu. Surový produkt se překrystaluje z isopropanolu, čímž se získá 5-brom-indan-l-on 0-methyloxim (110 g, 97¾ výtěžek) v podobě hnědé pevné látky. ¹H NMR (CDC1₃) 7,52 (lH.d, J 8,3 Hz), 7,43 (lH,d, J 1Hz), 7,35 (lH,dd,J 8,3, 1Hz), 3,97 (3H,s), 2,99 (2H,m), 2,85 (2H,m).

Stupeň 2

1-Methoxy im i no i ndan-5-karba1dehyd

Do roztoku produktu stupně 1 (112 g, 0,46 mol) v THF (1500 o

ml) se při teplotě -60 C přidá v prostředí argonu n-butyllithium (325 ml, 0,52 mol) během jedné hodiny. Po jednohodinovém o

míchání při teplotě -60 C se během jedné hodiny přikape roztok DMF (39,7 ml) v THF (50 ml). Reakční směs se míchá jednu hodinu při teplotě -60 C a nechá se ohřát na teplotu místnosti. Po jedné hodině se reakce ukončí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se ethylacetátem. Organická fáze se vysuší síranem sodným, zkoncentruje se ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu, čímž se zíká 1-methoxyiminoindan-5-karbaldehyd v podobě žluté pevné látky (57 g, 65¾ výtěžek). *H NMR (CDCI3) 10,0 (lH,s), 7,83 až 7,73 (3H,m), 4,02 (3H,s), 3,10 (2H,m), 2,92 (2H,m).

• ·

Stupen 3

5-(1,2-Dihydroxy-2-pyridin-4-ylethy1)indan-l-on-O-methyloxim

Do roztoku 4-(terč-butyldimethylsi lanyloxymethyl)pyridinu [T.F. Gallagher a kol-, Bioorg. Med. Chem. 5, str. 49, 19973 (71,5 g, 0,32 mol) v THF (800 ml) se při teplotě -50 C přidá během jedné hodiny v prostředí argonu LDA (162 nl, 2M v systému heptan/THF/ethy1benzen, (0,324 mol). Směs se míchá další jednu hodinu při teplotě -40 C před přidáním produktu stupně 2 (55 g, 0,29 mol) v THF (600 ml) během jedné hodiny- Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti pres noc, načež se reakce ukončí přidáním vodného nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se do ethylacetátu. Organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se ve vakuuu, čímž se získá hnědý olej (125 g). Olej se rozpustí v THF (1500 ml), zpracuje se TBAF (356 ml, 0,356 mol) a míchá se jednu hodinu. Reakční směs se odpaří a zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Organická fáze se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá 5-(l,2-dihydroxy-2-pyridin-4-ylethyl)indan-l-on-0-methyloxim (57 g, 64¾ výtěžek) v podobě světle žluté pevné látky, která se použije bez dalšího čištění. ⁴H NMR (CDC1₃) 8,38 (2H,m), 7,57 (lH,m), 7,12 až 6,99 (4H,m), 4,88 (lH,m), 4,66 (lH,m), 3,96 (3H,s), 2,93 (2H,m), 2,85 (2H,m).

Stupeň 4

1-(1-Methoxyiminoindan-5-yl)-2-pyridin-4-ylethan-1,2-dion

Do směsi DMSO (43 ml, 0,56 mol) a dichlormethanu (800 ml) o

se při teplotě -70 C v prostředí argonu přidá oxalylchlorid (43,2 g) a pak roztok produktu stupně 3 (55 g, 0,185 mol) ve směsi dichlormethan/DMSO (1000 ml/60 ml) během dvou hodin při o o teplotě -60 C.. Po dvpihodinovém míchání při teplotě -60 C se přikape triethylamin (154 ml) a směs se nechá ohřát na tep38 lotu místnosti přes noc. Do reakční směsi se přidá voda, organická fáze se promyje vodou, vysuší se síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá l-Cl-methoxyiminoindan-5-yl)-2-pyridin-4-yl-ethan-l,2-dion (51 g, 94¾ výtěžek) v podobě žluté pevné látky. *11 NMRCCDCI3) 8,87 (2H,d), 7,89-7,77 (5H,m), 4,03 C3H,s), 3,09 C2H,m), 2,93 (2H,m).

Stupeň 5

5-<2-[4-(3-Dimethylaminopropyloxy)fenyl]-5-feny1-lH-imidazol4- y1> indan-l-on-O-methyloxim

Směs produktu stupně 4 CO,3 g, 1,02 mmol), 4-C3-dimetylaminopropyloxy)benzaldehydu CO,27 ml, 1,33 mmol) a octanu amonného ¢0,785 g, 10,2 mmol) v kyselině octové CIO ml) se udržuje jednu hodinu na teplotě 100 C. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti, vlije se do roztoku led/0,880 amoniak a extrahuje se ethy1acetátem. Organický extrakt se suší síranem hořečnatým, zkoncentruje se ve vakuu a surový produkt se čistí chromatografií na silikagelu za eluování 1=9=90 směsí 0,88 roztok amoniaku=methano1=ethylacetát, čímž se získá 5-<2-[4-C3-dimethylaminopropyloxy)feny11-5-feny1-lH-imidazol-4-y1>indan-l-on 0-methyloxim CO,08 g, 16¾ výtěžek) v podobě žluté pevné látky. MS(ftP+)m/e 483 1M+H]⁺.

Stupeň 6

5- C2-14-C3-Dimethylaminopropyloxy)feny13-5-pyridin-4-yl-lHimidazol-4-yl)indan-l-on

Směs produktu stupně 5 CO,07 g, 0,146 mmol) a 5M kyseliny chlorovodíkové C4 ml) v dioxanu (3 ml) se udržuje jednu hoo dinu na teplotě 100 C. Přidá se aceton C3 ml) a v ohřevu se pokračuje dalších 1,5 hodiny, směs se ochladí na teplotu místnosti, neutralizuje se 1M roztokem hydroxidu sodného a extra39 • ·

huje se ethylacetátem. Organický extrakt se promyje vodou, vysuší se síranem horečnatým, odpaří se ve vakuu a surový produkt se čistí chromatografií na silikagelu za eluování 2=18:80 směsí 0,88 roztok amoniaku^:methanol-ethy1acetát, čímž se získá 5-<2-[4-(3-dimethylaminopropyloxy)fenyl]-5-fenyl-1H-imidazo1 -4-yl>indan-l-on (0,035 g, 53% výtěžek) v podobě žluté pevné látky. MS(AP+)m/e 453 [M+H]-*-.

Příklad 15

5-Í2-[4-(3-Dimethylaminopropyloxy)feny11-5-pyridin-4-yl-1H-imidazol-4-yl)indan-l-onoxim

Do roztoku produktu podle příkladu 14, stupeň 6 (0,07 g, o

0,155 mmol) v ethanolu (3 ml) se při teplotě 80 C přidá vodný hydroxylamin (1,5 ml, 50 % ve vodě). Po 30 minutách se směs ochladí na teplotuu místnosti a zkoncentruje se ve vakuu, čímž se získá 5-<2-E4-(3-Dimethylaminopropyloxy)fenyll-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim (0,072 g, 100 %) v podobě žluté pevné látky. MS(AP+)m/e 468

Příklad 16

5-(2-[4-(2-Dimethylaminoethoxy)feny11-5-pyridin-4-yl-lH-imidazo 1-4-yD-l-i ndanon

,0

HN· • · · · • · ·

Stupeň 1

5-<2-[4-<2-Dimethylaminoethoxy)feny13-5-pyridin-4-yl-lHimidazol-4-yl)indan-l-on-O-methyloxim

Tento produkt <0,19 g, 30¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 14, stupeň 4 a ze 4-(2-dimethylaminoethoxy)benzaldehydu [světový patentový spis číslo VO 99/19293] zpflsobem popsaným v příkladu 14, stupeň 5. MS(AP+)m/e 468 [M-*-H] ⁺ .

Stupeň 2

5-í 2-[4-C2-Dimethylaminoethoxy)fenyl]-5-pyridin-4-y1-lH-imidazol-4-yl)-l-i ndanon

Tento produkt <0,313 g, 56¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 zpflsobem popsaným v příkladu 14, stupeň 6.

MS(AP+)m/e 439 [M+H]⁺.

Příklad 17

5-<2-[4-(2-Dimethylaminoethoxy)feny1]-5-pyridin-4-yl-1H- imidazol-4-yl) indan-l-onoxim

Tento produkt (0,321 g, 100¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 16, stupeň 2 zpflsobem popsaným v příkladu 15, stupeň

1. MS(AP+)m/e 454 [Μ+Η]⁺.

Příklad 18

5-(2-[4-(2-Morfolin-4-ylethoxy)feny11-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-on

Stupeň 1

5-(2-14-(2-Morfolin-4-ylethoxy)feny11-5-pyridin-4-yl-lH-imidazo1-4-y1> indan-1-on-O-methyloxim

Tento produkt (0,15 g, 20¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 14, stupeň 4 a ze 4-(2-morfolin-4-ylethoxy)benzaldehydu (světový patentový spis číslo VO 96/28448) způsobem popsaným v příkladu 14, stupeň 5. MS(AP+)m/e 510 [M+H]*.

Stupeň 2

5-(2-[4-(2-Morfolin-4-ylethoxy)fenyl]-5-pyridin-4-yl-lH-ImIdazol -4-yl>indan-1-on

Tento produkt ((0,048 g, 36¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 1 způsobem popsaným v příkladu 14, stupeň 6.

MS(AP+)m/e 481 [M+H]*Příklad 19

5-(2-[4-(2-Morfolin-4-ylethoxy)feny1]-5-pyridin-4-y1-1H-imidazol -4-yl)indan-l-on-oxim

Tento produkt (0,048 g, 97 výtěžek) se připraví z produktu příkladu 18, stupeň 2 způsobem popsaným v příkladu 15, stupeň 1. MS(AP+)m/e 496 CM+H1+.

Příklad 20

5-(5-Pyridin-4-yl-2-pyridin-3-yl-1H-imidazol-4-yl)indan-l-on

Stupeň 1

5-(5-Pyridin-4-yl-2-pyridin-3-yl-lH-imidazol-4-y1)indan-l-on-0-methyloxim

Tento produkt (0,11 g, 28¾ výtěžek) se připraví z produktu příkladu 14, stupeň 4 a z pyridin-3-karbaldehydu způsobem popsaným v příkladu 14, stupeň 5. MS(AP+)m/e 382

Stupeň 2

5-(5-Pyridin-4-y1-2-pyridin-3-yl-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on

Tento produkt (0,025 g, 25¾ výtěžek) se připraví z produktu stupně 1, způsobem popsaným v příkladu 14 stupeň 6.

MS(AP+)m/e 353 CM+H]·*·.

Příklad 21

5-(5-Pyridin-4-yl-2-pyridin-3-y1-1H-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim

Tento produkt <0,075 g, 76% výtěžek) se připraví z produktu příkladu 20, stupeň 2zpflsobem popsaným v příkladu 15, stupeň 1. MS(ftP+)m/e 368

Příklad 22

5-(2-Feny1-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-on

Stupeň 1

4-C2-Feny1-1-C2-trimethylsi lanylethoxymethy1)-lH-imidazol-4-yl]pyridin

V DMF (150 ml) se rozpustí 4-<2-fenyl-lH-imidazol-4-yl)pyridin [N.J.Liverton a kol., J. Med. Chem. 42, str. 2180, 1999] o

(17,8 g, 80,5 mmol) a ochladí se na teplotu O C. Roztok se zpracuje hydridem sodným (3,54 g, 60% disperse, 88,6 mmol) a o

míchá se 25 minut při uchování teploty O C. Během pěti minut se přikape 2-(trimethylsilyl)ethoxymethylchlorid (14,77 g, 88,6 mmol) a směs se nechá ohřát na teplotu místnosti přes noc. Reakční směs se vlije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhlIčitanu sodného a extrahuje se několikrát diethyletherem. Spojeně etherové extrakty se vysuší síranem sodným, zkoncentrují se ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu za eluování ethylacetátem, čímž se získá 4-C2-feny1-1-(2-trimethylsi lanylethoxymethy1)-lH-imidazol-4-yl]pyridin v podobě bledě žluté pevné látky (16,8 g, 59% výtěžek). MS(ftP+)m/e 353 [M+H]-*-.

Stupeň 2

4-[5-Brom-2-feny1-1-(2-trimethylsilanylethoxymethy1)-lH-imidazol-4-yl]pyridin

Do roztoku sloučeniny ze stupně 1 (15 g, 42,6 mmol) v dichlormethanu (300 ml) se při teplotě místnosti přidá brom (6,81 g, 2,38 ml, 46,5 mmol) a následně nasycený roztok uhličitanu sodného (150 ml). Směs se míchá 40 minut před rozdělením a organická vrstva se promyje postupně vodou a solankou. Organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje se ve vakuu, čímž se získá 4-[5-brom-2-fenyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-4-yl]pyridin (18,1 g, 99% výtěžek) v podobě hnědého viskosního oleje, kterého se použije bez dalšího čištění. MS(ftP+)m/e 431/433 [M+H3⁺.

Stupeň 3

4-[2-Feny1-5-tr i buty1stannany1-1-(2-tr imethy1s i 1any1ethoxymethyl)-lH-imidazol-4-yl]pyridin

Do roztoku sloučeniny ze stupně 2 (13,4 g, 31,2 mmol) v THF o

(200 ml) se při teplotě -78 C přikape terc-buty11 ithium (22 ml, 1,7 M, 38 mmol). Po 25 minutách se přikape tributyÍcínchlorid (12,37 g, 10,3 ml, 38 mmol) a směs se nechá ohřát na teplotu místnosti přes noc. Reakční směs se vlije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a promyje se několikrát diethyletherem. Spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým, zkoncentrují se ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na silikagelu za eluování 0,5=4,5:45=50 směsí 0,88 roztok amoniaku=methano1=hexan/diethylether. čímž se získá 4-[2-feny1-5-tributylstannay1-1-(2-trimethylsi lanylethoxymet hyl)-lH-imidazol-4-yl3pyridin (18,5 g, 93% výtěžek) v podobě hnědého viskózního oleje. MS(AP+)m/e 641/643/644 [M+H]⁺.

Stupeň 4

5-[2-Feny1-5-pyridin-4-y1-3-C2-trimethy1si 1any1ethoxymethy1)lH-lmidazol-4-yllindan-l-on

V toluenu Cl ml) se suspenduje palladiumacetát CO,025 g, 0,11 mmol) a trifenylfosfin CO,06 g, 0,22 mmol). Přidá se 5-bromindanon C240 mg, 1,1 mmol) a směs se udržuje pět minut na teplotě 1OO C. Roztok se zpracuje roztokem produktu ze stupně 3 CO,6 g, 0,94 mmol) v toluenu Cl ml) a míchá se 18 hodin při teplotě 100 C. Po vychladnutí se rozpouštědlo odstraní ve vakuu a zbytek se čistí chromatografii na silikagelu za eluování ethylacetátem, čímž se získá 4-[2-fenyl-5-pyridin-4-yl-3-C2-trimethylsilany1ethoxymethy1)-lH-imidazol-4-yl]indan-l-on CO,25 g, 55% výtěžek) v podobě žluté pevné látky.

MSCftP+)m/e 482 [M+H3⁺.

Stupeň 5

5-C2-Fenyl-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y1)indan-l-on

Produkt ze stupně 4 CO,32 g, 0,66 mmol) se rozpustí v ethanolu C4 ml), přidá se vodný roztok 5M kyseliny chlorovodíkové C3 ml) a směs se udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po vychladnutí se rozpouštědlo odstraní ve vakuu, čímž se získá 5-C2-fenyl-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yl)indan-l-on v podobě žluté pevné látky CO,27 g, 96% výtěžek). MSCAP+)m/e 352

Příklad 23

5-C2-Feny1-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-y1)indan-l-on oxim

Roztok produktu z příkladu 22, stupen 5 <0,06 g, 0,17 mmol) a hydroxylaminhydrochlorid <0,035 g, 0,5 mmol) ve 40% vodném roztoku hydroxidu sodného <2 ml) a v ethanolu <3 ml) se udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po vychladnutí se směs neutralizuje vodnou 2M kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se ethylacetátem- Organická vrstva se promyje solankou, vysuší se síranem hořečnatým a zkomncentruje se ve vakuu- Zbytek se čistí chromatografii na silikagelu za eluování 1=9=90 směsí 0,88 roztok amoniaku=methanol=dichlormethan, čímž se získá 5-<2-feny1-5-pyridin-4-yl-1H-imidazo1-4-yl)indan-l-on oxim <0,05 g, 80% výtěžek) v podobě žluté pevné látky.

MS<AP-»-)m/e 367

Biologické testy

Aktivita sloučenin obecného vzorce I jako inhibitoru B-Raf se může zjištovat následujícími testy in vitro=

Test vazby kinázy fluorescenční anisotropií

Enzym kináza, fluorescenční ligand a proměnlivá koncentrace testované sloučeniny se inkubují společně k dosažení termodynamické rovnováhy za takových podmínek, že v nepřítomnosti testované sloučeniny je fluorescenční ligand významně 050 %) vázán enzymem a v přítomnosti postačující koncentrace OlOxKi) potentního inhibitoru je anisotropie nevázaného fluorescenčního ligandu měřitelně odlišná od hodnoty vázaného ligandu.

Koncentrace enzymu kináza má být s výhodou >lxKf. Potřebná koncentrace fluorescenčního ligandu závisí na použité instrumentaci a na flkuorescenčních a fyzikálně chemických vlastnostech. Použitá koncentrace musí být nižší než koncentrace enzymu kináza a s výhodou menší než polovina koncentrace enzymu kináza. Typický protokol testu je následující:

Všechny složky 1’ozpuštěné v pufru kompozice 50 mM HEPES, hodnota pH 7,5, lmM CHAPS, 10 mM chloridu horečnatého.

Koncentrace B-Raf enzymu: 1 nMKoncentrace fluorescenčního ligandu: 0,5 nM.

Koncentrace testované sloučeniny: 0,1 nM až 1OO uM.

Složky inkubované v 10 ul konečného objemu v LJL HE384 typu B černě mikrotitrační destičky do dosažení rovnováhy (přes 3 hodiny až 30 hodin).

Čtení fluorescenční anisotropie v LJL Acquest.

Definice: Ki = disociační konstanta pro vazbu inhibitoru

Kí = disociační konstanta pro vazbu fluorescenčního

1igandu

Fluorescenčním ligandera je sloučenina vzorce

která je odvozena z 5-[2-(4-aminomethylfenyl)-5-pyridin-4-yl-lH-imidazol-4-yll-2-chlorofenolu a z rhodaminové zeleně.

Test Raf kinázy

Aktivita lidského rekombinantního proteinu B-Raf se testuje in vitro testem začlenění radioznačeného fosfátu do rekombinantní MAP kinázy (MEK), známého fyziologického substrátu B-Raf. Katalytická aktivita lidského rekombinantního B-Raf proteinu se získá vyčištěním z sf9 hmyzích buněk infikovaných lidským B-Raf rekombinantním baculovirovým expresním vektorem. K potvrzení, že všechen fosforylační substrát pochází z aktivity B-Raf, se použije katalyticky neaktivní forma MEK. Tento protein se vyčistí z exprese bakteriálních buněk mutantu neak48 tivní MEK jako fúzní proteinu s glutation-S-transferázou (GST-kdMEK).

Zpflsob: Standardní podmínky testu B-Raf katalytické aktivity používají 3 ug GST-kdMEK, 10 uM ATP a 2u Ci³³P-ATP, 50 mM MOPS, 0,lmM EDTA, O,1M sacharózy, 10 mM chloridu horečnatého plus 0,1 % dimethy1sulfoxidu (obsahujícího pořípadě sloučeninu) v celkovém reakčním objemu 30 ul. Reakční směs se inkubuje 90 minut při teplotě 25 Ca reakce se ukončí přísadou EDTA do konečné koncentrace 50 uM. Nakape se 10 ul reagencie na P30 fosfocelulózový papír a usuší se na vzduchu. Po čtyřnásobném promytí v ledové 10¾ kyselině trichloroctové, 0,5¾ kyselině fosforečné se papír usuší na vzduchu před přidáním tekutého scintilantu a měří se radioaktivita sciti lačním čítačem.

Výsledky: Zjistilo se, že sloučeniny podle příkladů jsou účinnými inhibitory B-Raf zprostředkované fosforylace substrátu GST-kdMEK při hodnotách ICso <3 juM.

Aktivita sloučenin jako inhibitorů B-Raf se může zjištovat také dalšími testy popsanými v literatuře (světový patentový spis číslo W0 99/10325; McDonald O.B., Chen W.J., Ellis Β., Hoffman C., Overton L., Rink M, Smith A., Marshall C.J. a Wood E.R., A scinti1lation proximity assay for the Raf/MEK/ERK kinase Cascade: high throughput screening and identification of selective enzyme inhibitors, Anal. Biochem. 268, str. 318 až 329, 1999; a AACR meeting New Orleans 1998, Poster 3793).

Neuroprotektivní vlastnosti B-Raf inhibitorů se mohou stanovit následujícím testem in vitro:

Neuroprotektivní vlastnosti B-Raf inhibitorů v kulturách krysích hippocampálních plátků

Organotypické kultury představují přechod mezi disociova-

nými neronovými buněčnými kulturami a in vivo modely kyslíkové a glukózové deprivace (oxygen and glucose deprivation, OGD). Většina glial-neuronálních interakcí a neuronálního okruhu je zachovávána v kultivovaných hippocampálních plátcích, čímž je usnadněno zkoumání vzorců uhynutí mezi různými typy buněk v modelu, který se podobá situaci in vivo. Tyto kultury umožňují studovat opožděné poškození buněk a smrt za 24 nebo více hodin po napadení a umožňují posoudit následky dlouhodobých alterací v podmínkách kultury. Existují zprávy z četných laboratoří týkající se opožděného neuronálního poškození v odezvě na OGD v organotypických kulturách hippocampu (Vornov a kol - , Stroke 25, str. 57 až 465, 1994; Newell a kol., Brain Res.676, str. 38 až 44, 1996). Chránící působení v tomto modelu prokázalo několik tříd sloučenin, včetně antagonistů EAA (Strasser a kol., Brain Res. 687, str. 167 až 174, 1995), blokátorů sodíkových kanálů CTasker a kol., J. Neurosci. 12, str. 98 až 4308, 1992) a blokátorů vápníkových kanálů (Pringle a kol., Stroke 7, str. 2124 až 2130, 1996). Dosud je poměrně nálo poznatků o úloze mezibuněčnou kinázou zprostředkovaných signálních drahách v neuronálním hynutí buněk v tomto modelu.

Způsob: Organotypické kultury hyppocampálních plátků se připraví způsobem, který popsal Stoppini a kol. CJ- Neurosci. Methods 37, str. 173 až 182, 1995). Na poloporézních membránách se 9 až 12 dní kultivují plátky o tloušťce 400 pm, připravené z hippocampu krys Sprague Dawley 7 až 8 dní po narození. Pak se zavede OGD inkubací v prostředí séra a prostého glukózy v anaerobní komůrce po dobu 45 minut. Kultury se vrátí do inkubátoru s prostředím vzduch/oxid uhličitý na 23 hodiny před anfalýzou- Jako indikátoru smrti buněk se použije propidiumjodidu CPI). Pl není toxický vůči neuronům a bylo ho použito v mnohých studiích k určení životnosti buněk. Do poškozených neuronů Pl proniká a váže se na nukleové kyseliny. Vázaný Pl vykazuje zvýšenou emisi při 635 nm, když je excitován při 540 nm. Sejme se jeden obrazec fluorescence Pl a jeden obrazec

bílého světla a analyzuje se podíl mrtvých buněk. Plocha CA1 je definována od obrazce bílého světla a superponuje se na obrazec Pl- Signál Pl je prahový a poškození Pl je vyjádřeno jako procento plochy CA1. Korelace mezi fluorescencí Pl a histologicky potvrzená smrt buněk byla dříve vyhodnocena Nlssl-vybarvením s použitím violetě cresyl fast violet (Newell a kol., J. Neurosci. 15, str. 7702 až 7711, 1995).

V popisu a v následujících patentových nárocích, pokud kontext nevyžaduje jinak, výraz zahrnuje a varianty jako zahrnují a zahrnující se rozumí zařazení celku nebo stupně nebo skupiny celku, ale nikoli jako vyloučení jiného celku nebo stupně nebo skupiny celku nebo stupňů.

Způsobu podle vynálezu může být použito jako základ pro jakékoli další účely. Takové následné aplikace mohou být zaměřeny na jakýkoli význak nebo kombinaci zde popsaných význaků vynálezu. Mohou mít formu prostředku, procesu nebo použí a vycházet z příkladů a z následujících nároky.

Průmyslová využitelnost

Derivátu imidazolu pro výrobu léčiva pro profylaktícké nebo terapeutické ošetřování nemocí lidí nebo jiných savců, které jsou vyvolány nebo způsobovány neurotraumatickou příhodou, pro profylaktícké nebo terapeutické ošetřování rakoviny a pro profylakt i cké nebo terapeutické ošetřování chromické neurodegenerace, bolesti, migrény a kardiatické hypertrofie.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Derivát imidazolu obecného vzorce I kde znamená

X atom kyslíku, skupinu CHz, CO,atom síry nebo skupinu NH nebo X-R¹ znamená atom vodíku,

Yl a Y2 na sobě nezávisle atom dusíku nebo skupinu CH,

R¹ ’ atom vodíku, skupinu Ci-6alkylovou, C3-7cykloalkylovou, arylovou, arylCi-6alkylovou, heterocyklylovou, heterocyklylCi-ealkylovou, heteroarylovou, nebo heteroary lCi-6alkylovou, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituovaná, nebo pokud znamená X skupinu CH2, může znamenat R¹ skupinu hydroxylovou nebo Ci-&alkoxyskupinu, která je popřípadě substituovaná,

R² atom vodíku, skupinu Ci-ealkylovou, C2-6a1keny1ovou,

C3-7cykloalkýlovou, C5-7cykloalkenylovou, heterocyklylovou, arylovou nebo heteroarylovou, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituovaná,

Ar skupinu vzorce a) nebo b)

a)

b)

R³ a

RlS

Xl a kde znamená kondenzovaný pětičlenný až semičlenný cyklus popřípadě obsahující až dva heteroatomy volené ze souboru zahrnuj ícícho atom kyslíku, atom síry a skupinu NR^5,, kde znamená R^s atom vodíku nebo skupinu Ci-ealkylovou, a cyklus je popřípadě substituován až dvěma substituenty ze souboru zahrnujícího atom halogenu, skupinu Ci-ealkylovou, hydroxylovou, Ci-6alkoxyskupinu nebo ketoskupinu,

R'¹ na sobě nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupinu Ci-ealkylovou, arylovou, arylCi-ealkylovou, Ci-ealkoxyskuplnu, skupinu Ci-6alkoxyCi-6alkylovou, halogenCi-ealkylovou, arylCi-6alkoxyskupinu, skupinu hydroxylovou, nitroskupinu, kyanoskupinu, azidoskupinu, aminoskupinu, mono-N-Ci-6alkylaminoskupinu a di-N-Ci-ealkylaminoskupinu, acylaminoskupinu, ary1karbonylaminoskupinu, acyloxyskupinu, karboxyskupinu, skupinu soli karboxyskupiny, esteru karboxyskupiny, skupinu karbamoylovou, mono-N-Ci-ealkylkarbamoylovou a di-N-Ci-6alky1karbamoylovou, Ci-6alkoxykarbonylovou, aryloxykarbonylovou, ureidoskupinu, guanidinoskupinu, Ci-6alkylguanidinoskupinu, amidinoskupinu, Ci-6alkylamidinoskupinu, sulfonylamínoskupinu, skupinu aminosulfonylovou, Ci-ealkylt-hioskupinu, skupinu Ci-ealkylsulf inylovou nebo Ci—6 alky1sulfonylovou, atom kyslíku nebo skupinu N-OH,

X2 jeden ze symbolů znamená atom dusíku a druhý skupinu NR⁶, kde znamená R⁶ atom vodíku nebo skupinu Ci-6alkylovou nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl53
2. Derivát imidazolu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená X skupinu NH nebo X-R¹ znamená atom vodíku.
3. Derivát imidazolu podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, kde znamená R^lb skupinu N-OH.
4- Derivát imidazolu podle nároku 1 až 3 obecného vzorce I, kde znamená R²

i) skupinu -CR⁷R⁸-CH2-Z, -CH2-Z a skupina heterocyklylovou, kde znamená R⁷ a R⁸ na sobě nezávisle atom vodíku nebo popřípadě substituovanou skupinu Ci-6alkylovou, nebo R⁷ a R⁸tvoří spolu s atomem uhlíku, ke kterému jsou vázány, popřípadě substituovaný C3-7cyk1oa1ky1ový nebo Cs-ycykloalkenylový cyklus a Z znamená skupinu NR⁹R^to, NR⁹C(Q)NR⁹ R¹⁰, NR⁹C00R¹°, NR⁹S02R¹⁰, NR⁹C(Q)R^to nebo heterocykly lovou skupinu, kde znamená R⁹ a R¹⁰ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu Ci-ealkylovou, C3-7cykloalkýlovou, heterocykly lovou, heterocykly1Ci-ealkylovou, arylovou, arylCi-ealkyl ovou, heteroarylovou a heteroarylCi-6alkylovou, z nichž každá je popřípadě substituovaná nebo popřípadě spolu dohromady tvoří heterocyklickou skupinu jako skupinu NR⁹R¹°, Q znamená atom kyslíku nebo síry, s výhodou atom kyslíku a jestliže R² nebo Z znamená heterocyklylovou skupinu, například skupinu piperidylovou, piperazinovou nebo morfolinovou, je heterocyklylová skupina popřípadě substituovaná, ii) popřípadě substituovanou skupinu fenylovou, pyridylovou, pyrimidylovou nebo furanylovou.
5. Derivát imidazolu podle nároku 1 až 4 obecného vzorce I, kde znamená R³ atom vodíku.
6- Derivát imidazolu podle nároku 1 až 5 obecného vzorce I, kde znamená R⁴ atom vodíku.
7. Derivát imidazolu podle nároku 1 až 6 obecného vzorce I, kde znamená R^b atom vodíku.
8. Derivát imidazolu podle příkladu 1 až 23 obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl
9. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t i m , že obsahuje derivát imidazolu obecného vzorce I podle nároku 1 až 8 nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl a farmaceuticky přijatelný nosič.
10. Použití derivátu imidazolu obecného vzorce I podle nároku 1 až 8 pro výrobu léčiva pro profylaktické nebo terapeutické ošetřování nemocí lidí nebo jiných savců, které jsou vyvolány nebo způsobovány neurotraumatickou příhodou.
11. Použití derivátu imidazolu obecného vzorce I podle nároku 1 až 8 pro výrobu léčiva pro profylaktické nebo terapeutické ošetřování rakoviny.
12. Použití derivátu imidazolu obecného vzorce I podle nároku 1 až 8 pro výrobu léčiva pro profylaktické nebo terapeutické ošetřování chromické neurodegenerace, bolesti, migrény a kardiatické hypertrofie.