CZ20033466A3 - Vakcína pro léčení nebo prevenci choroby nebo poruchy u zvířete, která je vyvolána infekcí Mycoplasma hyopneumoniae - Google Patents
Vakcína pro léčení nebo prevenci choroby nebo poruchy u zvířete, která je vyvolána infekcí Mycoplasma hyopneumoniae Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20033466A3 CZ20033466A3 CZ20033466A CZ20033466A CZ20033466A3 CZ 20033466 A3 CZ20033466 A3 CZ 20033466A3 CZ 20033466 A CZ20033466 A CZ 20033466A CZ 20033466 A CZ20033466 A CZ 20033466A CZ 20033466 A3 CZ20033466 A3 CZ 20033466A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- vaccine
- hyopneumoniae
- mycoplasma hyopneumoniae
- proteins
- polypeptides
- Prior art date
Links
- 241000204045 Mycoplasma hyopneumoniae Species 0.000 title claims abstract description 124
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 99
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 title claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 18
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 88
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 61
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 46
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 46
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 44
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 34
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 24
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 19
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 15
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 15
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 13
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 6
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 claims description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 2
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000012153 swine disease Diseases 0.000 claims description 2
- 241000204003 Mycoplasmatales Species 0.000 claims 6
- 241000725681 Swine influenza virus Species 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 40
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 abstract description 4
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 abstract description 3
- 108700001237 Nucleic Acid-Based Vaccines Proteins 0.000 abstract 1
- 229940023146 nucleic acid vaccine Drugs 0.000 abstract 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 61
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 22
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 15
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 15
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 14
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 7
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 7
- 206010011906 Death Diseases 0.000 description 6
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 102100036698 Golgi reassembly-stacking protein 1 Human genes 0.000 description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 5
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 4
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 4
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 4
- -1 heat Chemical compound 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 4
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 4
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- WJAXXWSZNSFVNG-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethanamine;hydron;bromide Chemical compound [Br-].[NH3+]CCBr WJAXXWSZNSFVNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010060938 Anaesthetic complication Diseases 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 238000011886 postmortem examination Methods 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 2
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 2
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDRAOGVAQOVDEB-KTKRTIGZSA-N (3-hydroxy-2,3,3a,5,6,6a-hexahydrofuro[3,2-b]furan-6-yl) (z)-octadec-9-enoate Chemical compound OC1COC2C(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)COC21 JDRAOGVAQOVDEB-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N (4R)-4-[[(2S,3R)-2-[acetyl-[(3R,4R,5S,6R)-3-amino-4-[(1R)-1-carboxyethoxy]-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound C(C)(=O)N([C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](CCC(=O)O)C(N)=O)C1[C@H](N)[C@@H](O[C@@H](C(=O)O)C)[C@H](O)[C@H](O1)CO YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- MIJDSYMOBYNHOT-UHFFFAOYSA-N 2-(ethylamino)ethanol Chemical compound CCNCCO MIJDSYMOBYNHOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- FBUKMFOXMZRGRB-UHFFFAOYSA-N Coronaric acid Natural products CCCCCC=CCC1OC1CCCCCCCC(O)=O FBUKMFOXMZRGRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001692 EU approved anti-caking agent Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101100321817 Human parvovirus B19 (strain HV) 7.5K gene Proteins 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 101710170970 Leukotoxin Proteins 0.000 description 1
- 208000032376 Lung infection Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 1
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 1
- 206010028470 Mycoplasma infections Diseases 0.000 description 1
- 108700015872 N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108700020354 N-acetylmuramyl-threonyl-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 241001391926 Neea Species 0.000 description 1
- 208000005228 Pericardial Effusion Diseases 0.000 description 1
- 206010034476 Pericardial haemorrhage Diseases 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 102100036546 Salivary acidic proline-rich phosphoprotein 1/2 Human genes 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004133 Sodium thiosulphate Substances 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 208000010399 Wasting Syndrome Diseases 0.000 description 1
- NKVLDFAVEWLOCX-GUSKIFEASA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl] (4ar,5r,6as,6br,9s,10s,12ar)-10-[(2r,3r,4s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)CO[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1OC(=O)[C@]12CCC(C)(C)CC1C1=CCC3[C@@]([C@@]1(C[C@H]2O)C)(C)CCC1[C@]3(C)CC[C@@H]([C@@]1(C)C=O)O[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO2)O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)C(=O)NCCCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@](O)(CO)[C@H]1O NKVLDFAVEWLOCX-GUSKIFEASA-N 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N almurtide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CO[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000578 anorexic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N avridine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(CCCN(CCO)CCO)CCCCCCCCCCCCCCCCCC WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010555 avridine Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 150000001793 charged compounds Polymers 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 210000004081 cilia Anatomy 0.000 description 1
- 238000007596 consolidation process Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 108010037896 heparin-binding hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 101150111411 p46 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 210000004912 pericardial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- VMXUWOKSQNHOCA-UKTHLTGXSA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)\C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-UKTHLTGXSA-N 0.000 description 1
- 201000010727 rectal prolapse Diseases 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000036435 stunted growth Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 239000001973 thioglycolate broth Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/0241—Mollicutes, e.g. Mycoplasma, Erysipelothrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/87—Mycoplasma
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká vakcína pro léčení nebo prevenci choroby nebo poruchy u zvířete, která je vyvolána infekcí Mycoplasma hyopneumoniae
Dosavadní stav techniky
M. hyopneumoniae je bakteriální patogen, který vyvolává enzootickou pneumonii u prasat. Enzootická pneumonie je chronická choroba, která vede ke špatné konverzi krmivá, zakrnělému růstu a predispozici ke druhotným plicním infekcím. M. hyopneumoniae se snadno přenáší sekrety respiračního traktu a z prasnic na selata, a v chovech prasat má vysokou prevalenci. V USA je infikováno přibližně 99 % chovů prasat, což v odvětví produkce vepřového vyvolává roční náklady asi 300 milionů dolarů.
Většina známých vakcín proti M. hyopneumoniae je založena na přípravcích obsahujících inaktivované celé buňky M. hyopneumoniae a adjuvant. Kromě toho lze synteticky nebo klonováním a rekombinantní expresí genů M. hyopneumoniae připravit vakcíny založené na imunogenních polypeptidech nebo proteinech. Jako vakcín lze také použít geny M. hyopneumoniae, které jsou chopny exprimovat takové polypeptidy nebo proteiny in vivo.
hyopneumoniae lze uvést RESPISURE a STELLAMUNE, které jsou dostupné na trhu od firmy Pfizer lne., USA.
Kromě toho bylo popsáno několik rekombinantně získaných imunogenních polypeptidů a proteinů M. hyopneumoniae, které mohou být užitečné jako podjednotkové vakcíny. V mezinárodní patentové přihlášce zveřejněné jako WO 96/28472 je popsáno šest proteinových antigenů proti M. hyopneumoniae o molekulárních hmotnostech 46 až 48, 52 až 54, 60 až 64, 72 až 75, 90 až 94 a 110 až 114 kilodaltonů a dále částečná proteinová sekvence antigenů o molekulové hmotnosti 52 až 54, 60 až 64 a 72 až 75 kilodaltonů a celá nukleotidová a aminokyselinová sekvence antigenů o molekulové hmotnosti 46 až 48 kilodaltonů.
V publikaci Futo et al. (1995; J. Bacteriol 177: 1915 až 1917) také bylo popsáno klonování genu pro protein M. hyopneumoniae P46, tj. p46. Stejná skupina autorů prokázala, že tento in vitro exprimovaný genový produkt je užitečný při stanovování protilátkových odpovědí na infekce M. hyopneumoniae bez zkřížené reaktivity s jinými druhy Mycoplasma (Futo et al. , 1995, J. Clin. Microbiol. 33: 680 až 683) . Sekvence a diagnostické použití genu p46 popsané v publikaci Futo et al. je dále popsáno v evropské patentové přihlášce č. 0 475 185 Al.
V publikaci Wise a Kim (1987, J. Bacteriol., 169: 5546 až 5555) se uvádí, že v M. hyopneumoniae se vyskytují čtyři integrální membránové proteiny označené jako p70, p65 (výše uvedený P46), p50 a P44 a že tři posledně uvedené proteiny jsou modifikovány kovalentními lipidovými vazbami a indukují silnou humorální imunitní odezvu. Ochranné účinky této imunitní odpovědi nebyly zkoumány. Gen pro protein P65 byl • · · · • · · · · · · • · · · · ·
klonován a jeho sekvence a použití ve vakcínách a diagnostice jsou popsány v US patentu č. 5 788 962.
V mezinárodní patentové přihlášce zveřejněné jako WO 91/15593 je popsáno pět proteinů M. hyopneumoniae o zdánlivé molekulové hmotnosti 105, 90, 85, 70 a 43 kilodalton. V této publikaci je uvedena úplná sekvence genu pro 85kDa protein (protein C), jakož i částečné nukleotidové sekvence pro zbývající čtyři proteiny.
V US patentu č. 5 252 328 (Faulds) jsou popsány aminoterminální sekvence imunoreaktivních proteinů M. hyopneumoníae, jejichž molekulární hmotnost je 34, 41, 44, 48, 64, 68, 74,5, 79, 88,5, 96 a 121 kDa. V tomto patentu jsou také popsány jiné proteiny identifikované na základě elektroforetické pohyblivosti o zdánlivé molekulární hmotnosti 22,5, 34 a 52 kDa; v jejich případě není uvedena proteinová sekvence. Ačkoliv se v US patentu 5 252 328 uvažuje o použití těchto proteinů ve vakcínových formulacích, nejsou v něm uvedeny žádné vakcinační pokusy.
V mezinárodní patentové přihlášce zveřejněné jako WO 95/09870 jsou popsány biochemické způsoby purifikace adhesinů M. hyopneumoniae, mykoplasmových integrálních membránových proteinů, které jsou zodpovědné za adhezi k řasinkám epithelu horních cest dýchacích hostitele. Ve WO 95/09870 jsou také navržena stanovení a použití těchto proteinů například ve vakcínách a diagnostických přípravcích.
Ve výzkumné zprávě King et al. (1997; Vaccine 15: 25 až
35) je popsán Mhpl, 124kDa adhesin, který je kmenovou variantou P97.
·* 4444 • · • »44 ·» 4444
4444 44 · 4 · · 9 · • * · » · 9 ·
Ί 994499 4949 4
4444444444 4
4· 94 44 44 44 444
96kDa varianta Ρ97 byla identifikována skupinou Wilton et al. (1998, Microbiology 144: 1931 až 1943) . Kromě toho se ukázalo, že gen p97 je součástí operonu, který také kóduje druhý protein označený jako P102 o předpokládané molekulární hmotnosti asi 102 kDa (Hsu et al., 1998, Gene 214: 13 až 23).
V mezinárodní patentové přihlášce zveřejněné jako WO 99/26664 Minion a Hsu navrhují použití P102 ve vakcínách, ale neuvádějí žádné vakcinační zkoušky.
žádné z popsaných vakcín M. hyopneumoniae se neuvádí, že by byla účinná při jednorázovém ošetření prasat o stáří asi 3 až 10 dnů. Taková vakcína by umožňovala vyloučit potřebu vícenásobné aplikace, a tudíž by výrazně snižovala náklady a pracnost související s masivní vakcinací chovů prasat na celém světě. Existuje tudíž potřeba vyvinout účinnou vakcínu M. hyopneumoniae, kterou by prasatům bylo možno podávat jednorázovou vakcinací ve věku asi 3 až asi 10 dnů za účelem ochrany před chorobami nebo poruchami vyvolanými M. hyopneumoniae a jejich prevence.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je použití Mycoplasma hyopneumoniae pro výrobu vakcíny pro léčení nebo prevenci choroby nebo poruchy u zvířete, která je vyvolána infekcí Mycoplasma hyopneumoniae, přičemž vakcína se podává zvířeti jednorázově. Vakcína se zpravidla podává zvířeti o stáří asi 3 až asi 10 dnů.
Vakcína podle vynálezu eliminuje nutnost podávat další dávky, aby se vytvořila a/nebo udržela imunita proti M. hyopneumoniae. Způsobem jednorázové vakcinace za použití vakcíny vyrobené podle vynálezu se dosáhne ochrany séronegativních i séropozitivních prasat proti infekci virulentní M. hyopneumoniae. Vakcinace je účinná při léčení nebo prevenci ·♦«·
9999 >9
9 9 9 9 · φ
9 9 9 9 9 9 • · 999 9 999 9 9 ••99 9 · 9 9 «< 9
99 99 99 *« symptomů vyvolaných infekcí M. hyopneumoniae, jako je například prevence a zmenšování plicních lézí u prasat.
Vakcína M. hyopneumoniae může obsahovat přípravek z celých buněk M. hyopneumoniae nebo jejich částí, jako bakterin, nebo modifikovaný živý přípravek, podjednotkovou vakcínu, jako podjednotkovou vakcínu, která obsahuje jeden nebo více polypeptidů nebo proteinů pocházejících z M. hyopneumoniae nebo imunogenních fragmentů takových proteinů nebo polypeptidů nebo jeden nebo více genů pro takové proteiny, polypeptidy nebo imunogenní fragmenty, přičemž tyto geny nebo nukleové kyseliny jsou schopné exprese in vivo. Polypeptidy a proteiny pocházející z M. hyopneumoniae a imunogenní fragmenty takových polypeptidů a proteinů nebo geny nebo nukleové kyseliny M. hyopneumoniae, které lze použít ve vakcíně, je možno syntetizovat nebo získat metodami genového inženýrství, které jsou známy.
Vakcína M. hyopneumoniae může obsahovat další složky, jako adjuvant. Lze použít různých adjuvantů, jako jsou adjuvanty popsané v tomto textu a známé v tomto oboru.
Následuje podrobnější popis vynálezu.
Za účelem zpřehlednění je popis dále členěm na podkapitoly, ve kterých jsou popsány nebo ilustrovány některé znaky, provedení nebo použití tohoto vynálezu, na něž se však vynález neomezuj e.
V některých provedeních vakcína, které se používá při způsobu podle tohoto vynálezu, obsahuje inaktivovaný přípravek z celých buněk M. hyopneumoniae nebo jejich částí (bakterin),
9999
9 9 999 φφφφ ΦΦ • φ ··«·
ΦΦ ΦΦΦ» • φ φ • φ ΦΦΦ
ΦΦΦ φ φ φ φ φ φ ΦΦΦ nebo modifikovanou živou vakcínu a farmaceuticky vhodný nosič nebo inaktivovaný přípravek z celých buněk M. hyopneumoniae nebo jejich částí (bakterin) a adjuvant.
V jiných konkrétních provedeních vakcína, které se používá při způsobu podle vynálezu obsahuje imunogenní protein nebo polypeptid nebo jejich fragment a farmaceuticky vhodný nosič, nebo imunogenní protein nebo polypeptid nebo jejich fragment a adj uvant.
Definice a zkratky
Pod pojmem léčení nebo prevence se v tomto textu v souvislosti s infekcí Mycoplasma hyopneumoniae rozumí inhibice replikace baktérie Mycoplasma hyopneumoniae, inhibice přenosu Mycoplasma hyopneumoniae, nebo zabránění Mycoplasma hyopneumoniae v kolonizaci hostitele, a zmírnění symptomů choroby nebo poruchy vyvolané infekcí Mycoplasma hyopneumoniae. Léčení je považováno za terapeutické, pokud dochází ke snížení bakteriální nálože, poklesu bakteriálních infekcí a/nebo vzestupu hmotnosti a/nebo růstu. Způsob podle vynálezu je například účinný při prevenci nebo redukci plicních lézí.
Pod pojmem vakcína M. hyopneumoniae se v tomto textu rozumí vakcína, která je užitečná při prevenci nebo léčení poruchy nebo choroby vyvolané infekcí M. hyopneumoniae. Do rozsahu tohoto pojmu spadá jakákoliv vakcína, která je účinná při léčení nebo prevenci M. hyopneumoniae u prasat. Jako vakcínu M. hyopneumoniae, kterou je možno použít, lze například uvést přípravky z celých buněk M. hyopneumoniae nebo jejich částí, inaktivované nebo modifikované živé vakcíny, podjednotkové vakcíny obsahující jeden nebo více polypeptidů nebo proteinů pocházejících z M. hyopneumoniae nebo imunogenních fragmentů takových proteinů nebo polypeptidů nebo jeden • 4 4 4
4 4 4 · 4 • 44
4 4 ·
nebo více genů nebo nukleových kyselin pro jeden nebo více polypeptidů nebo proteinů pocházejících z M. hyopneumoniae nebo jejich imumogenních fragmentů, přičemž tyto geny nebo nukleové kyseliny mohou být u prasat exprimovány in vivo. Polypeptidy a proteiny pocházející z M. hyopneumoniae, imunogenní fragmenty takových polypeptidů a proteinů, nebo geny nebo nukleové kyseliny M. hyopneumoniae je možno syntetizovat nebo získat metodami genového inženýrství, které jsou známé. Při způsobu podle tohoto vynálezu se jako vakcíny M. hyopneumoniae přednostně používá bakterinu.
Pod pojmem zvíře se rozumí živočich, jako savec, přednostně prase, nikoliv však člověk.
Pod pojmem prase se rozumí selata, vepři, prasnice, mladé prasnice, kastrovaní kanci, kanci a příslušníci čeledi Suidae.
• 4 4 4 4
44
44
4 4 4 ·
4 4 4 4
4 4 4 4 4 · ·· 4 4
Pod pojmem bakterin se rozumí přípravek z inaktivovaných buněk M. hyopneumoniae nebo jejich částí vhodný pro použití jako vakcína.
Pod pojmem účinné množství se rozumí takové množství vacíny M. hyopneumoniae, které je dostatečné pro vyvolání imunitní odezvy u subjektu, kterému je podáno. Jako neomezující příklady imunitní odezvy lze uvést vyvolání přirozené buněčné a/nebo humorální imunity.
Vakcína obsahující inaktivované buňky (celé buňky nebo jejich části) a modifikovaná živá vakcína
Způsoby výroby obvyklých inaktivovaných nebo živých vakcín pro použití při způsobu podle tohoto vynálezu jsou známé.
Bakteriny, kterých lze použít při způsobu jednorázové vakcinace podle vynálezu, lze získat z veřejně dostupných zdrojů. Například bakteriny M. hyopneumoniae lze připravovat z izolátů M. hyopneumoniae. Odborníkům v tomto oboru je známa řada izolátů M. hyopneumoniae, které jsou například dostupné ze sbírky American Type Culture Collection, 1801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA. Jako příklady takových izolátů lze uvést ATCC č. 25095, 25617, 25934, 27714 a 27715.
Izoláty M. hyopneumoniae je také možno známými způsoby získat přímo z přirozeně nebo experimentálně infikovaných prasečích plic.
Izoláty M. hyopneumoniae lze inaktivovat různými známými způsoby, například tak, že se na bakteriální izolát působí binárním ethyleniminem (BEI), jak je popsáno v US patentu č.
565 205, nebo například vodným roztokem formaldehydu, teplem, BPL, zářením nebo glutaraldehydem.
Bakteriny M. hyopneumoniae vhodné pro použití při způsobu podle tohoto vynálezu je také možno získat z různých zdrojů na trhu. Jako neomezující příklady takových zdrojů lze uvést RESPIFEND (Fort Dodge, American Home Products), HYORESP (Merial Ltd.), M + PAC (Shering Plough), PROSYSTEM M (Intervet), INGLEVAC M (Boehringer), RESPISURE (Pfizer lne.) a STELLAMUNE MYCOPLASMA (Pfizer lne.).
Jako zdroji bakterinu M. hyopneumoniae pro použití při způsobu podle tohoto vynálezu se dává přednost přípravkům RESPISURE a STELLAMUNE MYCOPLASMA.
Zvláště přednostním zdrojem bakterinu M. hyopneumoniae pro použití při způsobu podle vynálezu je RESPISURE-1 (Pfizer lne.), který obsahuje kmen P-5722-3 (NL1042), získaný od
Purdue University, USA.
V přednostním provedení se kmen P-5722-3 inaktivuje působením BEI a smísí s adjuvantem dostupným na trhu, přednostně látkou AMPHIGEN (Hydronics, USA). Přednostní dávka je asi 2,0 ml. Jako obvyklou konzervační přísadu lze uvést merthiolát/ EDTA. Je možno přidat nosič, přednostně PBS. Příprava modifikovaných živých vakcín, jako příprava atenuací virulentních kmenů pasážováním v kultuře, je v tomto oboru známa.
Podjednotkové vakcíny
Způsob podle vynálezu je také možno provádět za použití podjednotkových vakcín, které obsahují purifikované imunogenní proteiny a polypeptidy M. hyopneumoniae a imunogenní fragmenty takových proteinů a polypeptidů. Takové proteiny a polypeptidy
·· ·· • · · · • · · · • ··· · · • · · je možno připravovat za použití známých způsobů. Způsobů, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy, se dále může použít při stanovování čistoty nebo homogenity proteinů, jako je elektroforéza vzorku na polyakrylamidovém gelu a následná vizualizace jediného pásu polypeptidu na barvicím gelu. Vysoké rozlišení je možno stanovit za použití HPLC nebo jiných podobných způsobů, které jsou odborníkům v tomto oboru známy.
V konkrétním provedení vakcína, které se používá podle tohoto vynálezu, obsahuje alespoň jeden protein M. hyopneumoniae, jehož neomezujícím příkladem je P46, P65, P97, P102, P70, P50 a P44.
V jiných provedeních vakcína, které se používá při způsobu podle tohoto vynálezu, obsahuje bakterin M. hyopneumoniae (inaktivované buňky nebo jejich části nebo modifikované živé buňky) nebo protein nebo polypeptid M. hyopneumoniae nebo fragment takového proteinu nebo polypeptidu a alespoň jeden další imunogen (z inaktivovaných buněk nebo jejich částí nebo modifikovaných živých buněk) nebo imunogenní nebo antigenní protein nebo polypeptid nebo imunogenní fragment takového proteinu nebo polypeptidu, přednostně virový, bakteriální nebo parazitární polypeptid. Jako neomezující příklady takových dalších patogenů a proteinů a polypeptidů a jejich fragmentů je možno uvést virus prasečí chřipky (SIV), virus reprodukční a respirační choroby prasat (PRRS či záhadné choroby prasat), diareu po odstavení (PWD) a proliferační enteritis u prasat (PPE). Takové kompozice jsou užitečné jako kombinované vakcíny.
V dalším konkrétním provedení imunogenní fragmenty takových proteinů nebo polypeptidů mají sekvenci, která obsahuje alespoň 10, alespoň 20, alespoň 30, alespoň 40, alespoň 50 nebo alespoň 100 po sobě jdoucích aminokyselin
44*9 imunogenních proteinů a polypeptidů, kterých se používá při způsobu podle vynálezu, jejichž neomezujícími příklady jsou P46, P65, P97, P102, P70, P50 a P44.
Proteiny M. hyopneumoniae k použití ve vakcínách jsou v podstatě čisté nebo homogenní. Při způsobu podle vynálezu se používá proteinů nebo polypeptidů, které jsou typicky purifikací zbaveny hostitelských buněk, které exprimují rekombinantní nukleotidové sekvence kódující tyto proteiny. Takovou purifikaci proteinů je možno provádět řadou dobře známých způsobů (například viz Methods In Enzymology; 1990, Academie Press, lne., San Diego, Protein Purification: Principles and practice, 1982, Springer-Verlag, New York, USA).
Purifikované polypeptidy a proteiny M. hyopneumoniae a jejich imunogenní fragmenty lze také připravovat známými syntetickými způsoby.
Vakcínové přípravky
Jako vhodné přípravky vakcín podle vynálezu je možno uvést přípravky pro injekční podávání, jako kapalné roztoky nebo suspenze; také lze připravovat pevné formy vhodné pro přípravu kapalného roztoku nebo kapalné suspenze před aplikací.
Přípravek také může být emulgován. Aktivní imunogenní složky se často mísí s adjuvanty, které jsou farmaceuticky vhodné a kompatibilní s aktivní složkou.
Polypeptidy lze formulovat na vakcíny v neutrálních nebo solných formách. Jako farmaceuticky vhodné soli lze uvést adiční soli s kyselinami (vznikající na volných aminoskupinách peptidů) a soli s anorganickými kyselinami, jako kyselinou chlorovodíkovou nebo fosforečnou, nebo organickými kyselinami, jako kyselinou octovou, šťavelovou, vinnou, maleinovou apod.
φφφ φ φ
Φφφ φ φ φ φφφ φ φφφφ • φ φ
Soli vznikající na volných karboxyskupinách mohou být odvozeny od anorganických bází, jako jsou například hydroxidy draselný, amonný, vápenatý a železitý, a takových organických bází, jako je isopropylamin, trimethylamin, 2-ethylaminoethanol, histidin, prokain apod.
Vakcínové přípravky, kterých se používá při způsobu podle tohoto vynálezu, obsahují účinné imunizační množství imunogenu M. hyopneumoniae a farmaceuticky vhodný nosič. Vakcínové přípravky obsahují účinné imunizační množství jednoho nebo více antigenů a farmaceuticky vhodný nosič. Farmaceuticky vhodné nosiče jsou v tomto oboru dobře známy a jako jejich neomezující příklady lze uvést solný roztok, pufrovaný solný roztok, dextrosu, vodu, glycerol, sterilní isotonický vodný pufr a jejich směsi. Jako příklad takového vhodného nosiče je možno jmenovat fyziologicky vyvážené kultivační médium, které obsahuje jedno nebo více stabilizačních činidel, jako jsou stabilizované, hydrolyzované, proteiny, laktosa atd. Nosič je přednostně sterilní. Formulace by měla být přizpůsobena způsobu podávání.
Použití purifikovaných antigenů jako vacínových přípravků se provádí standardními způsoby. Purifikovaný protein (nebo proteiny) by například měl být upraven na vhodnou koncentraci, formulován s jakýmkoliv adjuvantem vhodným pro vakcíny a balen pro použití. Jako neomezující příklady vhodných adjuvantů lze uvést minerální gely, například hydroxid hlinitý; povrchově aktivní látky, jako lysolecithin; glykosidy, například saponin a deriváty saponinu, jako Quil A nebo GPI-0100; kationtové povrchově aktivní látky, například DDA (kvarterní hydrokarbylamoniumhalonigenidy, polyoly typu Pluronic; polyanionty a víceatomové ionty; polyakrylové kyseliny, neiontové blokové polymery, například Pluronic F-125 (B.A.S.F., USA); Avridine a Rantidine; peptidy; rekombinantní mutantní labilní toxiny, φ φ φ • φ · • φφφ φ φ φ φ φ · φφ φ například leukotoxin (rmLT) nebo cholerový toxin (CT);
chemicky vázané nebo close proximity molekulární přenašeče; minerální oleje, například Montanide ISA-50 (Seppic, Paříž, Francie), karbopol, Amphigen (Hydronics, USA, Omaha, NE, USA), Alhydrogel (Superfos Biosector, Frederikssund, Dánsko), olejové emulze, například emulze minerálních olejů, jako BayolF/Arlacel A, a vody, nebo emulze rostlinných olejů, vody a emulgátoru, jako lecithinu; kamenec, MDP, N-acetylmuramyl-L-threonyl-D-isoglutamin (thr-MDP), N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamin, N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanin-2-(11,2'-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyfosforyloxy)ethylamin; cholesterol cytokiny a kombinace adjuvantů. Víceatomové ionty také mohou fungovat jako dispergační, zahušřovací a protispékavá činidla, které umožňují vakcínu resuspendovat po delší době usazování jako monodispersní suspenzi. Kombinace adjuvantů mohou být ve vodné, zapouzdřené (řízené nebo odložené uvolňování) nebo mikrozapouzdřené formě.
Imunogen také může být začleněm do liposomů nebo konjugován s polysacharidy a/nebo jinými polymery k použití v očkovací formulaci. V případě, že je rekombinantním antigenem hapten, tj. molekula, jejíž antigenicita spočívá v tom, že může selektivně reagovat s rozpoznávanými protilátkami, ale není imunogenní, jelikož nevyvolává imunitní odezvu, hapten může být kovalentně vázán k nosiči nebo imunogenní molekule; například velký protein, jako sérový albumin, haptenu, který je k němu kopulován, dodá imunogenicitu. Haptenové nosiče mohou být formulovány pro použití jako vakcína.
Genové vakcíny a NA vakcíny
Způsob podle vynálezu lze také provádět za použití genů nebo nukleových kyselin M. hyopneumoniae , které kódují imunogenní proteiny, polypeptidy a imunogenní fragmenty • ···· ·· · • ··· • · · · · · · • · · · · ··· • · · · ··· · · · ·«·· * · · · · · · • · 4 · · < e takových proteinů a polypeptidů. Takové geny a nukleové kyseliny mohou být exprimovány in vivo a lze je připravovat známými způsoby.
V konkrétním provedení vakcína, které se používá při tomto vynálezu, obsahuje alespoň jeden gen nebo nukleovou kyselinu kódující protein M. hyopneumoniae , jehož neomezujícími příklady jsou P46, P65, P997, P102, P70, P50 a P44.
V dalším konkrétním provedení geny nebo nukleové kyseliny, kterých se používá při způsobu podle vynálezu, kódují imunogenní fragmenty proteinů nebo polypeptidů M. hyopneumoniae a mají sekvenci, která obsahuje alespoň 10, alespoň 20, alespoň 30, alespoň 40, alespoň 50 nebo alespoň 100 po sobě jdoucích aminokyselin imunogenních proteinů a polypeptidů, kterých se používá při způsobu podle vynálezu, jejichž neomezujícími příklady jsou P46, P65, P997, P102, P70, P50 a P44.
V jiných provedeních způsobu podle tohoto vynálezu se použité geny nebo nukleové kyseliny podávají známými způsoby, jako je například technika vstřelování gene gun.
V ještě dalších provedeních způsobu podle tohoto vynálezu je genovou nebo NA vakcínou DNA vakcína. Nukleová kyselina nebo geny mohou být přítomny spolu s liposomy nebo jinými činidly usnadňujícími transfekci, která jsou v tomto oboru známa.
Způsoby přípravy a dodávky DNA vakcín jsou známé (viz například Krishnan, B. R., Current Status of DNA vaccines in veterinary medicine, Advanced Drug Delivery Reviews, Elsevier Science (2000)) .
Expresní systémy
Při expresi antigenových proteinových sekvencí podle vynálezu je možno použít různých systémů hostitel-expresní vektor. Takové hostitelské expresní systémy představují vektory, jejichž prostřednictvím je možno produkovat a následně čistit kódující sekvence, které jsou předmětem zájmu, ale také buňky, které po transformaci nebo transfekci vhodnými nukleotidovými kódujícími sekvencemi, vykazují genové produkty M. hyopneumoniae, kterých se používá při způsobu podle vynálezu, in sítu. Jako neomezující příklady takových mikroorganismů je možno uvést bakterie (například E. coli, B. subtilis) transformované rekombinantní bakteriofágovou DNA, plasmidovými DNA nebo kosmidovými DNA expresními vektory, které obsahují kódující sekvence mhp3; kvasinky (například Saccharomyces, Pichia) transformované rekombinantními kvasinkovými expresními vektory, které obsahují sekvence kódující genové produkty M. hyopneumoniae; systémy založené na hmyzích buňkách infikovaných rekombinantními virovými expresními vektory (například baculovirovými) obsahujícími kódující sekvence M. hyopneumoniae; systémy založené na rostlinných buňkách infikovaných rekombinantními virovými expresními vektory (jako je například virus mozaiky květáku, CaMV; virus tabákové mozaiky, TMV) nebo transformované rekombinantními plasmidovými expresními vektory (jako je například Ti plasmid) obsahujícími kódující sekvence M. hyopneumoniae; nebo systémy založené na savčích buňkách (například buňkách COS, CHO, BHK, 293, 3T3), které obsahují rekombinantní expresní konstrukty s promotory odvozenými od genomu savčích buněk (jako je například metalothioneinový promotor) nebo savčích virů (jako je například adenovirový pozdní promotor; vakciniový virový 7,5K promotor). V přednostním provedení je expresním systémem bakteriální systém.
• · · · * · · • · · · · • · · ·
Polypeptidy a proteiny M. hyopneumoniae a jejich imunogenní fragmenty je také možno exprimovat a dodávat za použití živých rekombinantních a bakteriálních vektorů, jako je adenovirus nebo Salmonella. Příslušné vektory jsou v tomto oboru také známy a jsou dostupné, nebo je lze připravit známými způsoby.
Dávkování, způsoby podávání a léčení
Podle tohoto vynálezu jednorázová dávka účinného množství vakcíny M. hyopneumoniae podaná praseti o stáří asi 3 až 10 dnů poskytuje efektivní imunitu vůči pozdější expozici M. hyopneumoniae. Vakcína M. hyopneumoniae se přednostně podává ve věku asi 6 až asi 8 dnů, nejvýhodněji ve věku asi 7 dnů.
Množství bakterinové vakcíny M. hyopneumoniae, které je účinné při jednorázovém podání obsahuje asi lxlO6 až asi 5xlO10 jednotek měnících barvu (CCU) na dávku. V přednostním provedení bakterinová vakcína, která poskytuje efektivní imunitu při jednorázovém podání, obsahuje asi lxlO8 až asi 5xlO10 CCU na dávku, výhodněji asi 5xl08 až asi 5xlO10 CCU na dávku.
Podle tohoto vynálezu, v případě, že se podává bakterínový produkt RESPISURE-1, je množství RESPISURE-1 na jednorázové podání dávky asi 0,5 až asi 3,0 ml, přednostně asi 1,5 ml až asi 2,5 ml, výhodněji asi 2 ml.
Množství vakcíny M. hyopneumoniae, která je podjednotkovou vakcínou obsahující jeden nebo více proteinů nebo polypeptidů nebo imunogenních fragmentů takových proteinů nebo polypeptidů, účinné při způsobu podle vynálezu je asi 0,01 /zg až asi 2 00 /zg.
Množství vakcíny M. hyopneumoniae, která je vakcínou obsahující jeden nebo více genů nebo nukleových kyselin (přednostně DNA) kódujících imunogenní proteiny nebo polypeptidy nebo imunogenní fragmenty takových proteinů nebo polypeptidů M. hyopneumoniae, které je účinné při způsobu podle vynálezu je asi 0,1 Mg až asi 200 mg.
Podle tohoto vynálezu je podávání možno provádět známými způsoby, jako je podávání perorální, intranasální, mukosální, topické, transdermální a parenterální (například intravenosní, intraperitoneální, intradermální, subkutánní nebo intramuskulární). Podávání lze také provádět za použití bezjehlových aplikačních zařízení. Možné je také kombinované podávání, při němž se například použije nejprve parenterálního způsobu a poté mukosálního způsobu. Přednost se dává podávání intramuskulárnímu.
Účinné dávky (imunizační množství) vakcín podle vynálezu lze také extrapolovat z křivek závislosti odpovědi na dávce odvozených z modelových zkušebních systémů.
Způsoby podle tohoto vynálezu se dosahuje ochranné imunity u prasat, která jsou séropozitivní i u prasat, která jsou séronegativní na M. hyopneumoniae. Přívlastek séropozitivní se vztahuje k prasatům, v jejichž séru jsou přítomny protilátky proti M. hyopneumoniae. Přívlastek séronegativní se vztahuje k prasatům, v jejichž séru nejsou dekovatelné hladiny protilátek proti M. hyopneumoniae.
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.
Příklady provedení vynálezu
Příklad
Příprava bakterinu M. hyopneumoniae
Kmen M. hyopneumoniae NL1042 se inaktivuje binárním ethyleniminem (BEI).
Na konci kultivačního období se pH kultury zvýší na hodnotu 7,8+2,0, která se v tomto rozmezí udržuje po dobu alespoň jedné hodiny. Poté se přidá vodný roztok hydrobromidu 2-bromethylaminu (BEA) sterilizovaný filtrací (konečná koncentrace asi 4,0mM). Při zvýšeném pH se BEA chemicky změní na BEI. Kultura se alespoň 24 hodin za konstantního míchání inkubuje při teplotě 37 + 2°C.
Po inaktivaci, ale před neutralizací thiosíranem sodným se odeberou reprezentativní vzorky, které se zkoušejí na úplnost inaktivace. Čerstvé médium obsahující 0,0026% fenolovou červeň se zaočkuje 5 až 20% inokulem a alespoň jeden týden inkubuje při teplotě 37 + 2°C. Poté se hodnotí změna barvy, která je indikátorem neúspěšné inaktivace. Volné vzorky se zkoušejí na sterilitu v thioglykolátové půdě při teplotě 37 + 2°C a tryptikázové sojové půdě při teplotě místnosti. Inaktivovaná kultura se přemístí do sterilních zásobníků a až do stanovení uchovává pri 2 až 8°C.
Síla účinku (potency) se stanoví in vitro sérologickým stanovením za účelem kvantifikace antigenu v konečném obalu.
Síla účinku vakcín použitých při hodnoceních účinnosti předurčuje minimální sílu účinku, která musí být přítomna ve vakcíně k datu exspirace.
• · · · · • · · · · · · • 4 4 · 4 4 4 4 •· · 4 4 4 4 4 4*444 • · 4 4 · 4
44 44 ·
Vzorky volného produktu nebo produktu v konečném obalu z každé série nebo první podsérie se zkouší na M. hyopneumoniae za použití následujícího postupu.
Bakterin se skladuje ve lOOml lahvičkách při -50°C. Obsah lahviček se nechá roztát a 15ml subalikvoty se až do použití skladují při teplotě 5 + 2°C.
Za účelem hodnocení síly účinku sestavené série se vzorek série porovná s referenčním vzorkem a stanoví se RP jednotky pro sérii. Série nebo podsérie by přednostně měla obsahovat 6,33 RP na počátku a alespoň 5,06 RP v průběhu stárnutí.
RP označuje relativní sílu účinku. RP je možno stanovit relativní kvantifikací antigenu ve srovnání s referenční vakcínou. V tomto případě má referenční vakcína RP definovanou jako 1. Jednorázový produkt podle vynálezu má RP přednostně 6,33, což je 6,33násobek hodnoty referenčního produktu.
Jako konzervační činidlo se přidá merthiolát (konečná hustotní koncentrace není vyšší než 0,01 % (hmotnost/objem)).
Jako konzervační činidlo se přidá roztok ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA, dvoj sodné nebo čtyřsodné soli) v konečné hustotní koncentraci asi 0,07 % (hmotnost/objem).
Příklad 2
Zvířata
Pro vakcinací se vyberou prasata o stáři asi jednoho týdne. Sérolotický status z hlediska M. hyopneumoniae se stanoví pomocí ELISA. Prasata, která mají hodnotu ELISA s 0,50 jsou považována za negativní na M. hyopneumoniae. Prasata s hodnotou ELISA vyšší než 0,50 jsou považována na sérologicky pozitivní na M. hyopneumoniae .
Vakcíny
Prasata se vakcinují bakterinem M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer lne.). Před použitím se stanoví síla účinku vakcíny relativní kvantifikaci antigenu ve srovnání s referenčním bakterinem M. hyopneumoniae. Referenční vakcína (RP = 1,0) obsahuje asi 8000 jednotek antigenu (asi 1 až 2 x 108 CCU viditelných buněk sklizených před inaktivací) na dávku, podle imunostanovení v pevné fázi, kterým se měří množství antigenu proti M. hyopneumoniae ve vakcíně.
Stejný kapalný adjuvant (AMPHIGEN), kterého se používá při formulaci přípravku RESPISURE-1, slouží jako placebo (tj. bez bakteriálních buněk).
Expoziční inokulum
Expoziční vehikulum se připraví jako lOml alikvoty plicního homogenátu, zmrazí a označí jako derivát kmene M. hyopneumoniae 11 (LI 36). Inokulum se nechá roztát a zředí půdou Friis Mycoplasma tak, aby se dosáhlo zředění 1:25 a až do podání uchovává na ledu. Každému praseti se ve dnech konkrétně uvedených v následujících příkladech podá 5ml intranasální dávka (2,5 ml na nozdru) suspenze 1:25. Každý den expozice se provádí kultivace alikvotu plicního inokula, aby se potvrdila nepřítomnost bakteriální kontaminace. Druhý alikvot se zpětně titruje každé tři dny; výsledky ukazují, že inokulum obsahuje asi 106 až 107 jednotek měnících barvu (CCU) M. hyopneumoniae/ml.
Zkušební postup • · φφ φ • · · · φ φφ φ φ «φφ φ φ·φ·φ·φφφφφφφ 1 « φ««φ«φ« φφφφφφ φφ φφ φφ «
Prasata se označí ušními známkami ještě u prasnice [den (-1)]. Prasata se na základě generalizovaného blokového randomizačního schématu přidělí do ohrad a ošetřovaných skupin. Bloky se tvoří na základě vrhu a odstavovací ohrady.
V den 0 se prasata vakcinují 2ml intramuskulární dávkou bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer lne.) nebo 2ml intramuskulární dávkou placeba. Každému praseti se ve dnech uvedených v následujících příkladech podá 5ml intranasální dávka suspenze 1:25 expozičního inokula. Všechna prasata se sledují a denně se kontrolují příznaky klinického onemocnění.
Po uplynutí příslušné doby od prvního dne expozice se prasata ohleduplně usmrtí a podrobí pitvě. Plíce se vyjmou a hodnotí. Zkoumání post-mortem zahrnuje odhad rozsahu patologických změn, k nimž došlo v souvislosti s mykoplasmovou respirační chorobou. Zkoumá se každý plicní lalok a léze se zaznamenají, aby bylo možno odhadnout procentuální postižení každého laloku. Zaznamená se stupeň makroskopických lézí.
Analýza dat
Účinnost se hodnotí na základě procenta plicních lézí, které je typické pro infekci M. hyopneumoniae. Stanoví se, že prasata v ošetřovaných skupinách (vakcinovaná) mají procentuální podíl celých plic s lézemi, který je významně (Ps0,05) menší než u prasat ze skupiny ošetřené placebem.
Procentuální podíl celých plic s lézemi
Procentní podíl makroskopického postižení se váží za použití následujících podílů jednotlivých plicních laloků na celkové hmotnosti plic: levý kraniální - 10 %, levý střední • · %, levý kaudální - 25 %, pravý kraniální - 10 %, pravý střední - 10 %, pravý kaudální - 25 % a přídatný 10 %. Vážené hodnoty plidních laloků se sečtou za celá plíce, čímž se získá procentuální podíl celých plic s lézemi (Pointon et al.,
1992) .
Příklad 3
Ochrana proti infekci virulentní M. hyopneumoniae se hodnotí u prasat sérologicky pozitivních na M. hyopneumoniae za použití jednorázové dávky bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer lne.) podané prasatům o stáří 3 až 8 dnů.
V době vakcinace nebo v době jí blízké se provede pět opakovaných hodnocení RESPISURE-1. Relativní síla účinku (RP) se stanoví relativní kvantifikací antigenu ve srovnání s referenční vakcínou. Referenční vakcína s RP = 1,0 obsahuje asi 8000 jednotek antigenu M. hyopneumoniae. Hodnoty RP z těchto stanovení byly 5,42, 3,96, 4,71, 5,49 a 4,36.
V den 0 se prasata v ošetřované skupině T02 (viz tabulka 1 dále) vakcinují 2ml intramuskulární dávkou bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer lne.). Prasata ve skupině T01 se vakcinují intramuskulárně 2 ml placeba. Každému praseti se ve dnech 178, 179 a 180 podá 5ml intranasální dávka suspenze 1 : 25 expozičního inokula. Každé tři dny se v době inokulace kultivuje alikvot expozičního materiálu, aby se potvrdila nepřítomnost bakteriální kontaminace. Druhý alikvot se zpětně titruje každé tři dny, aby se potvrdilo, že inokulum obsahuje asi 107 CCU M. hyopneumoniae/ml. Všechna prasata se sleduji a denně kontrolují z hlediska příznaků klinického onemocnění.
• 4 ···· • 44 4··4 4 4 4
4444 4 44 4 4 444
4444 444 44 4 4444
444 4444
444444 44 44 44 4
Třicet dní po prvním dni expozice se všechna prasata ohleduplně usmrtí a podrobí pitvě. Plíce se vyjmou a hodnotí. Zkoumání post-mortem zahrnuje odhad rozsahu patologických změn, k nimž došlo v souvislosti s mykoplasmovou respirační chorobou. Zkoumá se každý plicní lalok a léze se zaznamenají, aby bylo možno odhadnout procentuální postižení každého laloku. Zaznamená se stupeň makroskopických lézí.
Tabulka 1
| Ošetřovaná skupina | T01 | T02 |
| Vakcinace | placebo | vakcína |
| Počet | 26 | 26 |
| Vakcinovaná Den 0 | 26 | 26 |
| Expozice Den 1781 | 26 | 242 |
| Expozice Den 1791 | 26 | 223 |
| Expozice Den 1801 | 26 | 223 |
1 Virulentní inokulum M. hyo 2 Prasata 71 a 73 byla ze studie vyřazena před exozicí, jelikož obě ztratila všechny ušní známky, a nebylo možno je identifikovat.
3 Prase 36 bylo v den 178 nalezeno mrtvé kvůli anestetickým komplikacím. Prase 31 bylo v den 179 nalezeno mrtvé kvůli anestetickým komplikacím.
Výsledky hodnocení plicních lézí jsou souhrnně uvedeny v tabulce 2. Výsledky ukazují, že vakcinovaná prasata (T02) mají významně (P = 0,0385) nižší střední procentní podíl, stanoveno metodou nej menších čtverců, pneumonických plicních lézí než prasata, kterým bylo podáno placebo (T01) (2,0 proti 4,5 %).
Tabulka 2
Souhrnný přehled procenta celkových plicních lézí
| Ošetřovaná skupina | Ošetření | Počet prasat | Střední hodnota LS | Rozmezí |
| T01 | placebo | 26 | 4,5a | 0 až 36,75 |
| T02 | vakcína | 22 | 2,0b | 0 až 13,75 |
LS stanovená pomocí nejmenších čtverců a,b Hodnoty označené různými indexy se statisticky liší (P = 0,0385).
Výsledky této studie ukazují, že jednorázová vakcinace prasat ve stáří asi 1 týdne bakterinem M. hyopneumoniae RESPISURE - 1 vyvolává ochranu při následné expozici virulentní M. hyopneumoniae.
Příklad 4
Ochrana proti infekci virulentní M. hyopneumoniae se hodnotí u prasat sérologicky negativních na M. hyopneumoniae za použití jednorázové dávky bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer lne.) podané prasatům o stáří 3 až 8 dnů.
V době vakcinace nebo v době jí blízké se provede pět opakovaných hodnocení RESPISURE-1. Relativní síla účinku (RP) se stanoví relativní kvantifikací antigenu ve srovnání s referenční vakcínou. Referenční vakcína s RP = 1,0 obsahuje asi 8000 jednotek antigenu M. hyopneumoniae. Hodnoty RP z těchto stanovení byly 5,42, 3,96, 4,71, 5,49 a 4,36.
V den O se prasata v ošetřované skupině T02 vakcinují 2ml intramuskulární dávkou bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1. Prasata ve skupině T01 se vakcinují intramuskulárně 2 ml placeba. Každému praseti se ve dnech 173, 174 a 175 podá 5ml intranasální dávka suspenze 1 : 25 expozičního inokula. Každé tři dny se v době inokulace kultivuje alikvot expozičního materiálu, aby se potvrdila nepřítomnost bakteriální kontaminace. Druhý alikvot se zpětně titruje každé tři dny, aby se potvrdilo, že inokulum obsahuje asi 108 CCU M. hyopneumoniae/ml. Všechna prasata se sledují a denně kontrolují z hlediska příznaků klinického onemocnění.
Dvacet devět dní po prvním dni expozice se všechna prasata ohleduplně usmrtí a podrobí pitvě. Plíce se vyjmou a hodnotí. Zkoumání post-mortem zahrnuje odhad rozsahu patologických změn, k nimž došlo v souvislosti s mykoplasmovou respirační chorobou. Zkoumá se každý plicní lalok a léze se zaznamenají, aby bylo možno odhadnout procentuální postižení každého laloku. Zaznamená se stupeň makroskopických lézí.
Schéma zkoušky souhrnně vyjadřuje tabulka 3.
Tabulka 3
| Ošetřovaná skupina | T01 | T02 |
| Vakcinace | placebo | vakcína |
| Počet | 26 | 26 |
| Vakcinovaná Den 0 | 26 | 26 |
| Expozice Den 1731 | 252 | 233 |
• · • · »· • · • · ♦··· · · · · • · · · · ··· · · ····· • · ·· ···· ···· ···· ·· ·· ·· ·
| Expozice Den 1741 | 244 | 205 |
| Expozice Den 1751 | 24 | 20 |
1 Virulentní M. hyo
2 Prase 123 bylo v den 19 ohleduplně usmrceno vzhledem k chronické septické polyarthritis.
3Prase 222 bylo v den 40 nalezeno mrtvé. Při pitvě bylo zjištěné velké množství perikardiální kapaliny a hemoragie na epikardiu. Prase 102 bylo ohleduplně usmrceno v den 95 kvůli prolapsu rekta. Prase 204 bylo v den 145 nalezeno mrtvé. Pitva nebyla provedena vzhledem k pokročilému rozkladu zdechliny. 4Prase 244 bylo v den 174, po prvním dnu po expozici, nalezeno mrtvé kvůli anestetickým komplikacím.
5NEEA počítáno na 3 prasata
Výsledky hodnoceni plicních lézí jsou souhrnně uvedeny v tabulce 4. Celková analýza ukazuje, že vakcinovaná prasata (T02) mají významně (P = 0,0001) nižší střední procentní podíl, stanoveno metodou nejmenších čtverců, pneumonických plicních lézí než prasata, kterým bylo podáno placebo (T01) (0,3 proti 5,9 %) .
Tabulka 4
Souhrnný přehled procenta celkových plicních lézí
| Ošetřovaná skupina | Ošetření | Počet prasat | Střední hodnota LS | Rozmezí |
| T01 | placebo | 24 | 5, 9a | 0 až 36 |
| T02 | vakcína | 20 | 0,3b | 0 až 6 |
LS stanovená pomocí nejmenších čtverců a,b Hodnoty označené různými indexy se statisticky liší (P =
0,0001).
Výsledky této studie ukazují, že jednorázová vakcinace prasat bakterinem M. hyopneumoniae RESIPURE ONE vyvolává ochranu proti následné experimentální expozici virulentní M. hyopneumoniae.
Příklad 5
Ochrana proti infekci virulentní M. hyopneumoniae se hodnotí u prasat sérologicky negativních na M. hyopneumoniae za použití jednorázové dávky bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 podané prasatům o stáří 3 až 8 dnů.
V době vakcinace nebo v době jí blízké se provede pět opakovaných hodnocení RESPISURE-1. Relativní síla účinku (RP) se stanoví relativní kvantifikací antigenu ve srovnání s referenční vakcínou. Referenční vakcína s RP = 1,0 obsahuje asi 8000 jednotek antigenu M. hyopneumoniae. Hodnoty RP z těchto stanovení byly 5,42, 3,96, 4,71, 5,49 a 4,36.
V den 0 se prasata v ošetřované skupině T02 vakcinují 2ml intramuskulární dávkou bakterinu M. hyopneumoniae. Prasata ve skupině T01 se vakcinují intramuskulárně 2 ml placeba. Každému praseti se ve dnech 76, 77 a 78 podá 5ml (2,5 ml na nozdru) intranasální dávka suspenze 1 : 25 expozičního inokula. Každé tři dny se v době inokulace kultivuje alikvot expozičního materiálu, aby se potvrdila nepřítomnost bakteriální kontaminace. Druhý alikvot se zpětně titruje každé tři dny, aby se potvrdilo, že inokulum obsahuje asi 106 CCU M. hyopneumoniae /ml. Všechna prasata se sledují a denně kontrolují z hlediska příznaků klinického onemocnění.
Dvacet devět dní po prvním dni expozice se všechna prasata ohleduplně usmrtí a podrobí pitvě. Plíce se vyjmou a hodnotí.
• · • 4 4
44 ► 4 9 «
Zkoumání post-mortem zahrnuje odhad rozsahu patologických změn, k nimž došlo v souvislosti s respirační chorobou vyvolanou M. hyopneumoniae. Zkoumá se každý plicní lalok a leze se zaznamenají, aby bylo možno odhadnout procentuální postižení každého laloku. Zaznamená se stupeň konsolidace.
Schéma zkoušky souhrnně vyjadřuje tabulka 5.
Tabulka 5
| Ošetřovaná skupina | T01 | T02 |
| Vakcinace | placebo | vakcína |
| Počet | 26 | 26 |
| Vakcinovaná Den 0 | 26 | 26 |
| Expozice Den 1761 | 232 | 213 |
| Expozice Den 1771 | 23 | 21 |
| Expozice Den 1781 | 23 | 21 |
1 Virulentní inokulum M. hyo 2 Prasata 237 a 239 byla v den -1 určena jako pozitivní na pneumonii vyvolanou M. hyopneumoniae. Tato selata byla ze studie vyřazena v den 14 a ohleduplně usmrcena. Prase 220 bylo v den 3 nalezeno mrtvé, zalehnuto prasnicí.
3Prasata 238, 240 a 277 byla v den -1 stanovena jako pozitivní na pneumonii vyvolanou M. hyopneumoniae. Tato selata byla v den 14 vyřazena ze studie a ohleduplně usmrcena. Prase 280 bylo v den 7 ohleduplně usmrceno, jelikož bylo anorektické a neduživé. Prase 177 bylo v den 40 ohleduplně usmrceno kvůli chronickému syndromu chřadnutí.
Výsledky hodnocení plicních lézí jsou souhrnně uvedeny v tabulce 6. Celková analýza ukazuje, že vakcinovaná prasata (T02) mají významně (P = 0,0001) nižší střední procentní podíl, stanoveno metodou nejmenších čtverců, pneumonických plicních lézí než prasata, kterým bylo podáno placebo (T01) (0,5 proti 9,9 %).
Tabulka 6
Souhrnný přehled procenta celkových plicních lézí
| Ošetřovaná skupina | Ošetření | Počet prasat | Střední hodnota LS | Rozmezí |
| T01 | placebo | 23 | 9,9a | 0 až 40,5 |
| T02 | vakcína | 21 | 0,5b | 0 až 5 |
LS stanovená pomocí nejmenších čtverců a,b Hodnoty označené různými indexy se statisticky liší (P =
0,0001).
ΦΦ φφφφ φφ φφφφ • φ • φφφ φφφφ Φ· • « Φ Φ Φ W «ι ·Φ· φφ· φ
ΦΦ φφφ φ φφφ * « • ΦΦΦ φφφφ φ φ φ φφφφ φφ ΦΦ φφ φφφ
Claims (15)
- PATENTOVÉ NÁROKY ?(/ , ýíů1. Použití Mycoplasma hyopneumoniae pro výrobu vakcíny pro léčení nebo prevenci choroby nebo poruchy u zvířete, která je vyvolána infekcí Mycoplasma hyopneumoniae, přičemž vakcína se podává zvířeti jednorázově.
- 2. Použití podle nároku 1, kde vakcinová formulace Mycoplasma hyopneumoniae je inaktivovaným přípravkem, který obsahuje celé buňky Mycoplasma hyopneumoniae nebo jejich části.
- 3. Použití podle nároku 2, kde jednorázová dávka vakcíny Mycoplasma hyopneumoniae obsahuje asi lxlO6 až asi 5xlO10 jednotek měnících barvu (CCU) na dávku.
- 4. Použití podle nároku 2, kde množství podané vakcíny je asi 0,5 až asi 3,0 ml.
- 5. Použití podle nároku 2, kde přípravkem, který obsahuje buňky Mycoplasma hyopneumoniae je RESPISURE-1.
- 6. Použití podle nároku 2, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae dále obsahuje virový nebo bakteriální antigen odlišný od Mycoplasma hyopneumoniae.
- 7. Použití podle nároku 6, kde virové nebo bakteriální antigeny se volí z viru prasečí chřipky (SIV), viru reprodukční a respirační choroby prasat (PRRS či záhadné choroby prasat), diarey po odstavení (PWD) a proliferační enteritis u prasat (PPE). 8 *
- 8. Použití podle nároku 2, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae se podává intramuskulárně.·»·4 444 4 4 4 » • 4 4 4 44 4 4 4 4 4 • 444 44 • 4 4« 44 • 4 4···44 4444 • · 4 44 4 4 44»4 4 4 4 44 4 4 4 4 • 4 44 ·44
- 9. Použití podle nároku 1, kde prase je chráněno až 25 týdnů po vakcinací.
- 10. Použití podle nároku 1, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae dále obsahuje adjuvant.
- 11. Použití podle nároku 1, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae je podjednotkovou vakcínou.
- 12. Použití podle nároku 12, kde podjednotková vakcína obsahuje jeden nebo více imunogenních polypeptidů nebo proteinů nebo imunogenních fragmentů takových polypeptidů nebo proteinů.
- 13. Použití podle nároku 13, kde polypeptidy a proteiny se zvolí ze skupiny sestávající z P46, P65, P97, P102, P70, P50 a P44 .
- 14. Použití podle nároku 1, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae obsahuje jeden nebo více genů nebo nukleových kyselin, které kódují jeden nebo více imunogenních polypeptidů nebo proteinů nebo imunogenních fragmentů takových polypeptidů nebo proteinů, přičemž tyto geny nebo nukleové kyseliny mohou být exprimovány in vivo.
- 15. Použití podle nároku 15, kde geny nebo nukleové kyseliny jsou zvoleny ze souboru sestávajícího z p46, p65, p97, pl02, p70, p50 a p44.01-2744-03-Ma
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US30263601P | 2001-07-02 | 2001-07-02 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20033466A3 true CZ20033466A3 (cs) | 2005-06-15 |
| CZ305781B6 CZ305781B6 (cs) | 2016-03-16 |
Family
ID=23168589
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2003-3466A CZ305781B6 (cs) | 2001-07-02 | 2002-06-07 | Výroba vakcíny Mycoplasma hyopneumoniae |
Country Status (42)
Families Citing this family (52)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MY129765A (en) | 2000-12-19 | 2007-04-30 | Wyeth Corp | Improved mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine |
| WO2006056841A1 (en) * | 2004-11-24 | 2006-06-01 | Pharmacia & Upjohn Company Llc | Multiple-strain mycoplasma hyopneumoniae vaccines |
| US7833707B2 (en) | 2004-12-30 | 2010-11-16 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2 |
| US7700285B1 (en) | 2005-12-29 | 2010-04-20 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | PCV2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
| UA95602C2 (ru) | 2004-12-30 | 2011-08-25 | Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. | Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции |
| US8834891B2 (en) | 2005-03-14 | 2014-09-16 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis |
| HUE054868T2 (hu) * | 2005-12-29 | 2021-10-28 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Multivalens PVC2 immunogén készítmények és eljárások ezek elõállítására |
| EP1976558B1 (en) | 2005-12-29 | 2017-03-15 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Pcv2 immunogenic composition for lessening clinical symptoms in pigs |
| CA2644195A1 (en) * | 2006-03-03 | 2007-09-13 | Merial Limited | Mycoplasma hyopneumoniae vaccine |
| US20100136060A1 (en) * | 2006-11-22 | 2010-06-03 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks |
| EP2101815A4 (en) | 2006-12-11 | 2010-10-06 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Effective method of treatment of porcine circovirus and lawsonia intracellularis infections |
| ES2726777T3 (es) | 2006-12-15 | 2019-10-09 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Vacuna porcina anti-PCV2 en dosis única |
| EP1941903A1 (en) | 2007-01-03 | 2008-07-09 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Prophylaxis and treatment of PRDC |
| EP1958644A1 (en) | 2007-02-13 | 2008-08-20 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Prevention and treatment of sub-clinical pcvd |
| US7829274B2 (en) | 2007-09-04 | 2010-11-09 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen |
| ME01000B (me) * | 2007-11-06 | 2012-10-20 | Zoetis Services Llc | Živa vakcina avirulentne mycoplasma hyopneumoniae sa adjuvansom |
| EP2231182A4 (en) * | 2007-12-31 | 2012-08-22 | Boehringer Ingelheim Vetmed | PCV2 ORF2 VIRUS TYPE WITH FOREIGN AMINO ACID INSERTION |
| CN101236206B (zh) * | 2008-01-17 | 2014-10-15 | 中国兽医药品监察所 | 一种猪肺炎支原体重组抗原elisa检测试剂盒 |
| WO2009126356A2 (en) * | 2008-01-23 | 2009-10-15 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Pcv2 mycoplasma hyopneumoniae immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
| US8444989B1 (en) * | 2008-04-18 | 2013-05-21 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | One dose vaccination against mycoplasma infections of pigs |
| LT3056214T (lt) * | 2008-06-27 | 2019-06-10 | Zoetis Services Llc | Naujos adjuvantų kompozicijos |
| JP5968622B2 (ja) | 2009-06-04 | 2016-08-10 | 国立感染症研究所長 | マイコプラズマ感染症用ワクチン |
| TWI627281B (zh) | 2009-09-02 | 2018-06-21 | 百靈佳殷格翰家畜藥品公司 | 降低ｐｃｖ－２組合物殺病毒活性之方法及具有改良免疫原性之ｐｃｖ－２組合物 |
| EP2550362B1 (en) | 2010-03-25 | 2017-01-04 | Oregon Health&Science University | Cmv glycoproteins and recombinant vectors |
| PL2569007T3 (pl) | 2010-05-11 | 2016-04-29 | Intervet Int Bv | Szczepionka przeciwko Mycoplasma Hyopneumoniae, odpowiednia do podawania w obecności przeciwciał pochodzących od matki |
| SG10201604175XA (en) * | 2010-07-26 | 2016-07-28 | Qu Biolog Inc | Immunogenic anti-inflammatory compositions |
| CA2808285C (en) * | 2010-08-27 | 2016-09-06 | Intervet International B.V. | Potency test for vaccine formulations |
| US8546149B2 (en) | 2010-08-27 | 2013-10-01 | Intervet Inc. | Potency test for vaccine formulations |
| PL2691530T3 (pl) | 2011-06-10 | 2019-02-28 | Oregon Health & Science University | Glikoproteiny i rekombinowane wektory CMV |
| UA115053C2 (uk) | 2012-03-07 | 2017-09-11 | Сева Санте Анімаль | Композиція, що містить антиген і ліпополісахарид у формі масло-в-воді, та спосіб її використання (варіанти) |
| US9120859B2 (en) | 2012-04-04 | 2015-09-01 | Zoetis Services Llc | Mycoplasma hyopneumoniae vaccine |
| UA114503C2 (uk) | 2012-04-04 | 2017-06-26 | Зоетіс Сервісіз Ллс | Комбінована вакцина pcv та mycoplasma hyopneumoniae |
| UA114504C2 (uk) | 2012-04-04 | 2017-06-26 | Зоетіс Сервісіз Ллс | Комбінована вакцина pcv, mycoplasma hyopneumoniae та prrs |
| UA121193C2 (uk) | 2012-12-28 | 2020-04-27 | Бьорінгер Інгельхайм Ветмедіка Гмбх | Спосіб одержання імуногенної композиції проти мікоплазми |
| JP6195630B2 (ja) | 2012-12-28 | 2017-09-13 | ベーリンガー インゲルハイム フェトメディカ ゲーエムベーハーＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｖｅｔｍｅｄｉｃａ ＧｍｂＨ | マイコプラズマ抗原を含む免疫原性組成物 |
| JP6113306B2 (ja) * | 2013-02-05 | 2017-04-12 | アグリカルチュラル テクノロジー リサーチ インスティテュート | 抗マイコプラズマ属菌種サブユニットワクチン |
| CN104338125A (zh) * | 2013-07-29 | 2015-02-11 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 一种猪肺炎支原体抗原在预防和治疗猪呼吸道疾病综合征方面的应用 |
| WO2015042369A2 (en) | 2013-09-19 | 2015-03-26 | Zoetis Llc | Oil-based adjuvants |
| EP3052516B1 (en) | 2013-10-02 | 2020-01-01 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Pcv2 orf2 protein variant and virus like particles composed thereof |
| CN105792841B (zh) * | 2013-11-21 | 2019-07-26 | 财团法人农业科技研究院 | 防治霉浆菌感染的组合物 |
| CN105012948B (zh) * | 2014-04-18 | 2019-07-30 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 一种疫苗组合物及其应用 |
| CN104248753B (zh) * | 2014-05-15 | 2017-07-28 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 一种疫苗组合物及其应用 |
| BR102014014727B1 (pt) * | 2014-06-16 | 2018-04-03 | Ouro Fino Saúde Animal Ltda | COMPLEXO DE POLIPROTEÍNAS IMUNOGÊNICAS DE M. hyopneumoniae, GENE SINTÉTICO CODIFICANTE DO COMPLEXO DE POLIPROTEÍNAS IMUNOGÊNICAS DE M. hyopneumoniae, COMPOSIÇÃO ANTIGÊNICA, PROCESSO DE OBTENÇÃO DE UM COMPLEXO DE POLIPROTEÍNAS IMUNOGÊNICAS DE M. hyopneumoniae |
| US9814769B2 (en) | 2014-09-30 | 2017-11-14 | Qatar University | Vaccines against pathogenic Escherichia coli and methods of using the same |
| DK3244920T5 (da) | 2015-01-16 | 2024-10-07 | Zoetis Services Llc | Mund- og klovsyge-vaccine |
| KR20160099223A (ko) * | 2015-02-12 | 2016-08-22 | 강원대학교산학협력단 | 마이코플라스마 하이오뉴모니애 박테린 백신 및 이의 제조방법 |
| US10519199B2 (en) * | 2016-08-12 | 2019-12-31 | Innovac | Vaccine composition comprising recombinant protein for preventing swine Mycoplasma infection |
| RU2668799C1 (ru) * | 2017-09-08 | 2018-10-02 | Эгрикалчурал Текнолоджи Рисерч Инститьют | Субъединичная вакцина против mycoplasma spp. |
| CN108101969A (zh) * | 2017-11-13 | 2018-06-01 | 南京大爻网络科技有限公司 | 一种与猪支原体肺炎相关的抗原及其应用 |
| RU2695679C1 (ru) * | 2018-09-11 | 2019-07-25 | Эгрикалчурал Текнолоджи Рисерч Инститьют | Субъединичная вакцина против mycoplasma spp. |
| RU2759427C2 (ru) * | 2019-07-08 | 2021-11-12 | Эгрикалчурал Текнолоджи Рисерч Инститьют | Субъединичная вакцина против mycoplasma spp |
| CN117305192A (zh) * | 2023-12-01 | 2023-12-29 | 北京瑞阳瑞泰生物科技有限公司 | 一种猪肺炎支原体rt02株、疫苗组合物及其应用 |
Family Cites Families (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5252328A (en) * | 1987-03-26 | 1993-10-12 | Martin Marietta Energy Systems, Inc. | Mycoplasma hyopneumoniae antigen and uses therefor |
| EP0283840A3 (en) * | 1987-03-26 | 1989-08-09 | Ml Technology Ventures, L.P. | Mycoplasma hyopneumoniae antigen and uses therefor |
| EP0307976B1 (en) | 1987-09-18 | 1993-06-23 | Akzo Nobel N.V. | Mycoplasma vaccine |
| EP0527771A4 (en) | 1990-04-02 | 1993-05-05 | Synergen, Inc. | Polypeptides useful in diagnosis of and treatment against mycoplasma infections in animals |
| US6113916A (en) * | 1990-05-29 | 2000-09-05 | American Cyanamid Company | Method of enhancing cell mediated immune responses |
| WO1991018627A1 (en) | 1990-05-29 | 1991-12-12 | Smithkline Beecham Corporation | Swine pneumonia vaccine and method for the preparation thereof |
| US5565205A (en) * | 1990-08-16 | 1996-10-15 | Solvay Animal Health, Inc. | Inactivated Mycoplasma hypopneumoniae bacterin and method of use thereof |
| EP0475185A1 (en) | 1990-08-27 | 1992-03-18 | Nippon Flour Mills Co., Ltd. | DNA's encoding surface antigen of mycoplasma hyopneumoniae, DNA fragments for primer, recombinant antigenic peptides and diagnostic method of mycoplasmal pneumoniae of swine using same |
| US5338543A (en) * | 1992-02-27 | 1994-08-16 | Ambico, Inc. | Thimerosal inactivated mycoplasma hyopneumoniae vaccine |
| AU687750B2 (en) * | 1992-09-28 | 1998-03-05 | Wyeth Holdings Corporation | Method of enhancing cell mediated immune responses |
| US5530874A (en) | 1993-02-02 | 1996-06-25 | 3Com Corporation | Network adapter with an indication signal mask and an interrupt signal mask |
| WO1995009870A1 (en) | 1993-10-07 | 1995-04-13 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Characterization of mycoplasma hyopneumoniae adhesins |
| PT1820512E (pt) | 1994-05-10 | 2013-10-09 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Vacina viva modificada melhorada contra brsv |
| US5788962A (en) | 1995-01-17 | 1998-08-04 | The Curators Of The University Of Missouri | DNA sequences coding for mycoplasma hyopneumoniae surface antigens, corresponding proteins and use in vaccines and diagnostic procedures |
| AUPN178995A0 (en) | 1995-03-16 | 1995-04-13 | University Of Melbourne, The | Antigen composition |
| ATE272409T1 (de) | 1996-09-30 | 2004-08-15 | Univ Arkansas | Verfahren zur erzeugung aktiver immunität durch vakzinkonjugate |
| EP0846468B1 (en) | 1996-12-05 | 2004-06-09 | Akzo Nobel N.V. | Non-virulent mycoplasma synoviae and vaccine thereof |
| CA2311759A1 (en) | 1997-11-26 | 1999-06-03 | Tsungdas Hsu | Recombinant mycoplasma hyopneumoniae vaccine |
| AU6128900A (en) * | 1999-09-29 | 2001-04-05 | Pfizer Products Inc. | Nucleic acids and proteins of the mycoplasma hyopneumoniae mph3 gene and uses thereof |
| US6585981B1 (en) * | 2000-07-27 | 2003-07-01 | Regents Of The University Of Minnesota | Temperature-sensitive live vaccine for Mycoplasma hyopneumoniae |
| UA114504C2 (uk) | 2012-04-04 | 2017-06-26 | Зоетіс Сервісіз Ллс | Комбінована вакцина pcv, mycoplasma hyopneumoniae та prrs |
-
2002
- 2002-06-07 CN CN200810186079.6A patent/CN101524532B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 PT PT81677619T patent/PT2027873E/pt unknown
- 2002-06-07 HU HU0400434A patent/HU230246B1/hu unknown
- 2002-06-07 AP APAP/P/2003/002937A patent/AP2003002937A0/en unknown
- 2002-06-07 PT PT14182639T patent/PT2842569T/pt unknown
- 2002-06-07 EA EA200301323A patent/EA009901B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-06-07 PL PL373367A patent/PL209773B1/pl unknown
- 2002-06-07 SK SK1579-2003A patent/SK288010B6/sk unknown
- 2002-06-07 ES ES14182639T patent/ES2729579T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 OA OA1200300344A patent/OA12638A/en unknown
- 2002-06-07 IL IL15934902A patent/IL159349A0/xx unknown
- 2002-06-07 DE DE60229666T patent/DE60229666D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 HR HR20031079A patent/HRP20031079A2/hr not_active Application Discontinuation
- 2002-06-07 DK DK14182639.6T patent/DK2842569T3/da active
- 2002-06-07 ES ES08167761.9T patent/ES2550458T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 YU YU102203A patent/YU102203A/sh unknown
- 2002-06-07 DK DK02735755.7T patent/DK1474067T4/en active
- 2002-06-07 AU AU2002309109A patent/AU2002309109B2/en not_active Expired
- 2002-06-07 WO PCT/IB2002/002121 patent/WO2003003941A2/en not_active Ceased
- 2002-06-07 EP EP02735755.7A patent/EP1474067B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 NZ NZ530106A patent/NZ530106A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-06-07 ES ES02735755.7T patent/ES2312580T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 CA CA2451626A patent/CA2451626C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 KR KR10-2004-7000044A patent/KR20040030785A/ko not_active Ceased
- 2002-06-07 TN TNPCT/IB2002/002121A patent/TNSN03155A1/fr unknown
- 2002-06-07 AT AT02735755T patent/ATE412426T2/de active
- 2002-06-07 CN CN201210389058.0A patent/CN102872456B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 CZ CZ2003-3466A patent/CZ305781B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2002-06-07 EP EP08167761.9A patent/EP2027873B8/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 PT PT02735755T patent/PT1474067E/pt unknown
- 2002-06-07 DK DK08167761.9T patent/DK2027873T3/en active
- 2002-06-07 JP JP2003509957A patent/JP2005515162A/ja active Pending
- 2002-06-07 EP EP14182639.6A patent/EP2842569B1/en not_active Revoked
- 2002-06-07 CN CN028133447A patent/CN1551781B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-07 MX MXPA03011599A patent/MXPA03011599A/es active IP Right Grant
- 2002-06-07 BR BR0210804-6A patent/BR0210804A/pt not_active Application Discontinuation
- 2002-06-19 US US10/174,701 patent/US6846477B2/en not_active Ceased
- 2002-06-26 TW TW091114057A patent/TWI329514B/zh not_active IP Right Cessation
- 2002-06-26 DO DO2002000431A patent/DOP2002000431A/es unknown
- 2002-07-01 PE PE2002000593A patent/PE20030285A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-07-01 UY UY27366A patent/UY27366A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-07-01 AR ARP020102479A patent/AR034678A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-07-02 PA PA20028549701A patent/PA8549701A1/es unknown
- 2002-07-02 GT GT200200138A patent/GT200200138A/es unknown
- 2002-07-06 UA UA20031213200A patent/UA78707C2/uk unknown
-
2003
- 2003-12-12 ZA ZA2003/09698A patent/ZA200309698B/en unknown
- 2003-12-15 IS IS7076A patent/IS7076A/is unknown
- 2003-12-22 NO NO20035762A patent/NO342654B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-12-31 MA MA27468A patent/MA27047A1/fr unknown
-
2004
- 2004-01-26 BG BG108546A patent/BG66481B1/bg unknown
- 2004-08-12 US US10/917,130 patent/US20050013823A1/en not_active Abandoned
-
2009
- 2009-01-16 CY CY20091100059T patent/CY1108749T1/el unknown
-
2012
- 2012-03-02 US US13/411,232 patent/USRE44399E1/en not_active Expired - Lifetime
-
2015
- 2015-08-27 HK HK15108334.1A patent/HK1207584A1/en unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ20033466A3 (cs) | Vakcína pro léčení nebo prevenci choroby nebo poruchy u zvířete, která je vyvolána infekcí Mycoplasma hyopneumoniae | |
| AU2002309109A1 (en) | One dose vaccination with mycoplasma hyopneumoniae | |
| JP2004536106A (ja) | マイコプラズマ・ボビスワクチンおよび動物の肺炎を減少させる方法 | |
| HUP0401077A2 (hu) | Mycoplasma bovis fertőzési modell, valamint eljárások M. bovis bejuttatására és tüdőgyulladásos tüdőléziók indukálására | |
| WO2006056841A1 (en) | Multiple-strain mycoplasma hyopneumoniae vaccines | |
| HK1134900B (en) | One dose vaccination with (1) mycoplasma hyopneumoniae (/1) | |
| HK1068250B (zh) | 单剂量猪肺炎支原体疫苗 | |
| HK1180224B (en) | One dose vaccination with mycoplasma hyopneumoniae |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20220607 |