CN1875941A - 一种利福平纳米乳剂抗生素药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种利福平纳米乳剂抗生素药物，该药物由质量百分比为利福平0.05％～0.20％、液体石蜡1.99％～19.98％、吐温－803.98％～26.64％、司盘－80 1.99％～13.32％、蒸馏水50.00％～90.00％组成。制备方法：在常温常压下，将利福平、液体石蜡、吐温－80和司盘－80按一定比例混合，均质30min，然后向混合物中缓慢滴加蒸馏水，边加边搅拌，直到形成利福平纳米乳剂。本发明制备方法简单，贮存稳定，适合过滤除菌，对机体刺激性小，可用于多种给药途径。

Description

一种利福平纳米乳剂抗生素药物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种抗生素药物的新剂型，具体涉及一种利福平纳米乳剂抗生素药物及其制备方法。

背景技术

利福平是一类广谱的抗生素药物，由于其对结核杆菌的抗菌作用强，临床上广泛用于结核病的治疗。近年来，人们发现该药在非结核疾病的治疗中也取得了较好的效果，例如细菌性痢疾、难治性腹泻、慢性化脓性中耳炎、口腔溃疡、银屑病、脓疱疮等疾病。利福平是一种难溶于水的药物，所以临床上利福平主要为片剂和胶囊剂。该药虽然对人体的穿透力强，通过口服吸收率较好，但必须经过肝脏才能到达病变部位，所以定向性释放作用差。目前，利福平的外用制剂主要有滴眼液、滴耳液，但是由于利福平在水中容易氧化变质，所以其稳定性较差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种适宜于临床应用的利福平纳米乳剂抗生素药物。该药物是将活性成份利福平和载体纳米乳剂有机结合制备而成，解决了利福平难溶于水的特性，提高了其药物效果，具有稳定性好，吸收迅速，对机体刺激性小的优点。

实现上述发明的目的是方案是一种利福平纳米乳剂抗生素药物，

各组分用量为在下述重量百分比范围都具有较好的效果：

利福平                            0.05％～0.20％

液体石蜡                          1.99％～19.98％

吐温-80                           3.98％～26.64％

司盘-80                           1.99％～13.32％

蒸馏水                            50.00％～90.00％

制备本发明药物的配方优选重量百分比范围是：

利福平                            0.05％～0.15％

液体石蜡                          3.97％～19.94％

吐温-80                           7.94％～26.59％

司盘-80                           3.97％～13.29％

蒸馏水                            50.00％～80.00％

本发明药物的最佳重量百比是：

利福平                            0.10％

液体石蜡                          8.97％

吐温-80                           13.95％

司盘-80                           6.98％

蒸馏水                            70.00％

本发明的另一目的提供利福平纳米乳剂抗生素药物的制备方法，包括以下步骤：

1)称取各药物组分利福平、液体石蜡、吐温-80、司盘-80、蒸馏水备用；

2)在常温常压下，将所述重量的利福平、液体石蜡、吐温-80和司盘-80混合后，置恒温磁力搅拌器上搅拌均质30min，然后缓慢向混合物中滴加蒸馏水，边加边搅拌，开始时体系黏度较小，随着水的加入，体系会变黏稠，继续滴加并不断搅拌，当水的量达到一定值之后，体系又会变稀，此时即可形成利福平纳米乳剂，然后将水加到足够量，即得本发明。

本发明还有一目的提供利福平纳米乳剂抗生素药物的另一种制备方法，包括以下步骤：

1)称取各药物组分利福平、液体石蜡、吐温-80、司盘-80、蒸馏水备用；

2)在常温常压下，将所述重量的液体石蜡、吐温-80和司盘-80按一定比例混合均匀，然后向该混合物中缓慢滴加蒸馏水，边加边搅拌，开始时体系黏度较小，随着水的加入，体系会变黏稠，继续滴加并不断搅拌，当水的量达到一定值之后，体系又会变稀，此时即可形成O/W型(水包油型)空白乳剂。当水加到足够量后，向该空白乳剂中加入所述重量的利福平，置恒温磁力搅拌器上搅拌均质30min，使利福平充分溶解，此时即可形成利福平纳米乳剂。

本发明所包含的利福平纳米乳剂由利福平、液体石蜡、吐温-80、司盘-80和蒸馏水组成，外观为暗红色透明液体，黏度较小，稳定性好，经高速离心不分层，经透射电子显微镜检测，其液滴直径大小在10～100nm之间。

本发明主要用作皮肤和粘膜给药，具体用途如下：

1)低浓度的利福平纳米乳剂可制成利福平滴眼液，用于治疗沙眼、麦粒肿、结膜炎、角膜炎等疾病。

2)中浓度的利福平纳米乳剂可制成利福平擦剂、喷剂，用于治疗多种皮肤病，如银屑病、脓疱疮等。

3)高浓度的利福平纳米乳剂加入促渗剂可制成透皮吸收给药，治疗内科疾病，如细菌性痢疾、难治性腹泻、肠炎等。

本发明的创新之处在于将难溶于水的抗生素药物利福平增溶于乳剂体系中，制成了利福平纳米乳剂。该利福平纳米乳剂具有稳定性好，抗菌作用强，吸收迅速，对机体刺激性小等优点。

具体实施方式

以下通过试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些试验例包括了本发明药物稳定性试验、药效学试验和临床疗效观察试验。

试验例1利福平纳米乳剂抗生素药物稳定性实验

1、试验材料

本发明利福平纳米乳剂抗生素药物

2、试验方法

(1)离心加速试验

取制得的本发明利福平纳米乳剂适量于离心管中，密封管口，置高速离心机中，以10000rpm离心20min。观察本发明外观是否发生变化，以及在离心管底有无药物沉淀。

(2)光稳定性试验

将本发明利福平纳米乳剂抗生素药物装入玻璃瓶中，密封置于日光下，室温光照10d，于1d、3d、5d、10d取样。观察本发明外观是否发生变化，测定利福平药物含量。

(3)温度稳定性试验

将本发明福平纳米乳剂抗生素药物分装于几个玻璃瓶中，密封之后置于4℃、25℃、37℃条件下放置留样考察3个月，每10d取样观察。观察本发明外观是否发生变化，测定利福平药物含量。

3、试验结果

本发明利福平纳米乳剂抗生素药物的离心稳定性试验结果显示：本发明经10000rpm离心20min，外观仍然透明，未见分层、絮结等物理变化，在离心管底未见有药物沉淀。

本发明利福平纳米乳剂抗生素药物的光稳定性试验结果显示：本发明在室温光照条件下，外观仍然透明，未见分层、絮结等物理变化，利福平药物含量稍有下降趋势。

本发明利福平纳米乳剂抗生素药物的温度稳定性试验结果显示：本发明于4℃、25℃、37℃条件下放置3个月，外观仍然透明，未见分层、絮结等物理变化，利福平药物含量稍有下降趋势。

试验例2利福平纳米乳剂抗生素药物体外抑菌试验

1、试验材料

受试药物：本发明利福平纳米乳剂抗生素药物、1mg/mL的利福平甲醇溶液。

试验菌种及培养基：普通琼脂培养板(自制)、普通营养肉汤(自制)、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌(均由本校微生物实验室提供)。

2、试验方法：

(1)药敏片的制备

选用定性滤纸，用打孔器制成直径为8mm的圆形滤纸片，然后进行高压蒸汽灭菌121℃30min，再用恒温干燥箱进行干燥备用。

分别取5个灭菌平皿，分别在5个平皿中加入2mg/mL、1.5mg/mL、1mg/mL、0.5mg/mL4个不同浓度的利福平纳米乳剂和1mg/mL的利福平甲醇溶液，然后用眼科镊子将灭菌干燥过的滤纸片一张一张的浸入各个平皿中，以免滤纸片叠在一起，使药液难以完全浸入。置4℃冰箱中24h后，小心将滤纸片移入另外的灭菌平皿中，置60℃恒温干燥箱中干燥备用。

(2)体外抑菌试验

取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和链球菌，分别接种于普通营养肉汤中，置37℃恒温培养箱中进行24h培养。分别取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和链球菌的24h肉汤培养物，用灭菌棉签均匀涂布于普通琼脂平板上，各涂5张平板，然后将由2mg/mL、1.5mg/mL、1mg/mL、0.5mg/mL利福平纳米乳剂及1mg/mL的利福平甲醇溶液制备的药敏片贴在不同的平板上，每个平板贴4张相同的药敏片，置37℃恒温培养箱中培养24h。观察抑菌情况并测定抑菌圈的大小。

3、试验结果

结果表明：由本发明利福平纳米乳剂抗生素药物制备的药敏片比由利福平甲醇溶液制备的药敏片具有更高的抑菌作用。见表1

                                表1体外抑菌试验结果

细菌类型	抑菌直径(mm)
						2mg/mL	1.5mg/mL	1mg/mL	0.5mg/mL	1mg/mL(甲醇溶液)
	金黄色葡萄球菌大肠杆菌链球菌	251820	201417	161013	1178						12910

试验例3利福平纳米乳剂抗生素药物透皮吸收试验

1、试验材料

受试药物：本发明利福平纳米乳剂抗生素药物、本发明加入5％的氮酮(促渗剂)、复方利福平擦剂(批号：981026，齐鲁动物保健品厂生产)。

试验动物：昆明种健康小白鼠10只，体重20.0±2.0g。

2、试验方法

用20％的硫化钠溶液对小白鼠的腹部进行脱毛，15min后用棉球轻轻擦去毛，观察脱毛情况及充血程度，2h后观察，以脱毛干净、充血少、无损伤的皮肤为佳。

将小白鼠断颈处死，剥离腹部皮肤，去净皮下脂肪，用生理盐水洗净，置生理盐水中并放入冰箱冷藏保存，一周内使用，试验前鼠皮不得有任何损伤。

用滤纸吸干皮肤表面水分，将皮肤置于Franz扩散池上，角质层朝上，固定扩散池与接收池。在接收池中灌满pH 7.0的磷酸盐缓冲液，使皮肤与接收液接触，电磁搅拌，32℃恒温水浴，预热20min。

吸取1mL的受试药物，均匀涂在离体皮肤上。于加样品后2、4、6、8、10、12、14、16、18h分别从Franz扩散池取样口精密吸取接收液5mL(随后补加pH7.0的磷酸盐缓冲液5mL)，pH7.0的磷酸盐缓冲液为空白，于(474±2)nm波长处测定吸收度，代入标准曲线方程计算利福平浓度。

由于接收池中连续取样并每次补加新的磷酸盐缓冲液，测的数值较真实值小，所以使用校正公式计算利福平累积透皮释药量 $M=18\mathrm{Cn}+5\underset{i=1}{\overset{n-1}{\∑}}\mathrm{Ci}$ (18为接收液体积，5为每次取样体积)。

3、试验结果

结果显示：所制备的本发明利福平纳米乳剂抗生素药物与复方利福平擦剂相比，其透皮率明显高于复方利福平擦剂，在利福平纳米乳剂中加入促渗剂，利福平纳米乳剂的透皮率又能得到大幅度的提高。

见表2

                        表2透皮吸收试验结果

药物	透皮率
					2h	4h	8h	16h
	利福平纳米乳加入5％氮酮的利福平纳米乳复方利福平擦剂	7.45％10.12％2.30％	13.69％23.20％6.94％	40.25％57.83％19.67％					86.94％94.28％72.10％

试验例4利福平纳米乳剂抗生素药物对家兔刺激性试验

1、试验材料

受试药物：本发明利福平纳米乳剂抗生素药物、复方利福平擦剂(批号：981026，齐鲁动物保健品厂生产)、利福平滴眼液(按药典处方自制)。

试验动物：家兔18只、雌雄各半、体重(2.0±0.2)Kg、由本校试验动物中心提供。

2、试验方法

取家兔18只，随机分为6组。第1组给复方利福平擦剂，第2组给2mg/mL的利福平纳米乳剂，第3组给1.5mg/mL的利福平纳米乳剂，第4组给1mg/mL的利福平纳米乳剂，第5组给0.5mg/mL的利福平纳米乳剂，第6组给利福平滴眼液。

(1)皮肤刺激试验

对于各组家兔，给药前24h，在家兔背部两侧用硫化钠各脱毛各5cm×10cm。采用同体自身左右对比，左侧脱毛区涂利福平纳米乳剂，右侧脱毛区不涂药，给药24h后，用温水去除残留药物，分别于去除后1h、24h、48h、72h肉眼观察，并记录涂抹处有无红斑和水肿等情况。

(3)眼刺激试验

各组家兔放在固定箱中，将眼睑拉成环形，并用手指压住鼻泪管，以防药液流入鼻泪管中。采用同体自身左右对比，左侧眼睛滴利福平纳米乳剂，右侧眼睛不滴药。各组家兔在滴加不同浓度的药液时，每次滴加0.1ml，1min后放手任药液自然流出。在给药30min内，每隔5min检查1次眼泪分泌，在给药30min后，每隔1h轻轻翻开眼皮，观察结膜的反应，以及有无明显的充血、流汨、羞明、水肿等刺激性症状。

3、试验结果

结果显示：所制备的本发明利福平纳米乳剂抗生素药物对家兔的皮肤和粘膜刺激性均小于复方利福平擦剂，浓度为1mg/mL和0.5mg/mL的利福平纳米乳剂对家兔眼刺激性均小于利福平滴眼液。

见表3

                        表3家兔刺激性试验结果

部位	刺激性
							复方利福平擦剂	2mg/mL	1.5mg/mL	1mg/mL	0.5mg/mL	利福平滴眼液
	皮肤眼	+++++	+++	-+	--	--							-+

(+++强刺激 ++中等刺激 +弱刺激 -无刺激)

下面结合具体实施例子来进一步说明本发明的产品的制备方法。

实施例1第一种制备方法

1)称取各药物组分利福平0.20g，液体石蜡14.94g，吐温-8023.24g，司盘-80 11.62g，备用；

2)在常温常压下，将所述重量的利福平、液体石蜡、吐温-80和司盘-80混合后，置恒温磁力搅拌器上搅拌均质30min，然后缓慢向混合物中滴加蒸馏水，边加边搅拌，开始时体系黏度较小，随着水的加入，体系会变黏稠，继续滴加并不断搅拌，将水的量加到50g的时候，即可形成利福平纳米乳剂，此时体系黏度较小。

该配方制备的利福平纳米乳剂浓度为2mg/mL，含水量为50％，黏度相对较高，对皮肤无刺激性，可加入促渗剂制成透皮贴剂，治疗细菌性痢疾，难治性腹泻、肠炎等疾病。

实施例2第二种制备方法

在常温常压下，按照实施例1配方称取液体石蜡14.94g，吐温-8023.24g，司盘-8011.62g，将其混合均匀，然后向该混合物中缓慢滴加蒸馏水，边加边搅拌，开始时体系黏度较小，随着水的加入，体系会变黏稠，继续滴加并不断搅拌，将水加到50.00g，此时可形成O/W型(水包油型)空白乳剂，然后按实施例1配方称取利福平0.20g，将其加入到空白乳剂基质中，置恒温磁力搅拌器上搅拌均质30min，使利福平充分溶解，此时即可形成利福平纳米乳剂。

实施例3

组分                                单位/g

利福平                              0.20g

液体石蜡                            11.92g

吐温-80                             11.92g

司盘-80                             5.96g

蒸馏水                              70.00g

用第一种制备方法，该配方所制备利福平纳米乳剂浓度也为2mg/mL，含水量为70％，黏度相对较小，对皮肤无刺激性，可制成擦剂、喷剂，治疗银屑病、脓疱疮、痤疮、疖肿等疾病。

实施例4

组分                                单位/g

利福平                              0.10g

液体石蜡                            8.97g

吐温-80                            13.95g

司盘-80                            6.98g

蒸馏水                             70.00g

用第一种制备方法，该配方制备的利福平纳米乳剂浓度为1mg/mL，含水量为70％，黏度相对较小，对皮肤和粘膜均无刺激性，可制成擦剂、喷剂、滴耳液等，治疗皮炎、口腔溃疡、咽炎、化脓性中耳炎、外耳湿疹等疾病。

实施例5

组分                               单位/g

利福平                             0.05g

液体石蜡                           8.98g

吐温-80                            13.98g

司盘-80                            6.99g

蒸馏水                             70.00g

用第一种制备方法，该配方制备的利福平纳米乳剂浓度为0.5mg/mL，含水量为70％，黏度相对较小，对皮肤、粘膜和眼均无刺激性，可制成滴眼液，治疗沙眼、麦粒肿、结膜炎、角膜炎等疾病。

实施例6

组分                               单位/g

利福平                             0.05g

液体石蜡                           3.98g

吐温-80                                    3.98g

司盘-80                                    1.99g

蒸馏水                                     90.00g

用第一种制备方法，该配方制备的利福平纳米乳剂浓度为0.5mg/mL，含水量为90％，黏度接近于水，对皮肤、粘膜和眼均无刺激性，可制成滴眼液，治疗沙眼、麦粒肿、结膜炎、角膜炎等疾病。

Claims (6)

1.一种利福平纳米乳抗生素药物，其特征在于，是由下述重量百分比的原料制成的纳米乳剂：

利福平0.05％～0.20％、液体石蜡1.99％～19.98％、吐温-803.98％～26.64％、司盘-801.99％～13.32％、蒸馏水50.00％～90.00％。

2.根据权利求要1所述的利福平纳米乳剂抗生素药物，其中各原料的重量百分比为：

利福平0.05％～0.15％、液体石蜡3.97％～19.94％、吐温-807.94％～26.59％、司盘-80 3.97％～13.29％、蒸馏水50.00％～80.00％。

3.根据权利求要1所述的利福平纳米乳剂抗生素药物，其中各原料的重量百分比为：

利福平0.10％、液体石蜡8.97％、吐温-80 13.95％、司盘-806.98％、蒸馏水70.00％。

4.根据权利要求1所述利福平纳米乳剂抗生素药物，其特征在于，所述的药物液滴直径大小在10～100nm之间。

5.一种权利要求1所述药物的制备方法，其特征在于，它包括下列步骤：

1)称取各药物组分利福平、液体石蜡、吐温-80、司盘-80、蒸馏水备用；

2)将所述重量的利福平、液体石蜡、吐温-80和司盘-80按配方比例混合，均质30min，然后缓慢向混合物中滴加蒸馏水，边加边搅拌，该过程中体系会出现由稀变黏稠，最后又有黏稠变稀的一系列变化，直至形成利福平纳米乳剂。

6.一种权利要求1所述药物的制备方法，其特征在于，它包括下列步骤：

1)称取各药物组分利福平、液体石蜡、吐温-80、司盘-80、蒸馏水备用；

2)将所述重量的液体石蜡、吐温-80和司盘-80混合均匀，然后缓慢向混合物中滴加蒸馏水，边加边搅拌，直至形成空白乳剂基质，然后将所述重量的利福平加入到该空白乳剂基质中，搅拌均质30min，使利福平充分溶解，即可形成利福平纳米乳剂。