CN120987877A - 芳基哌嗪衍生物、制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及有化合物制备技术领域，具体涉及一种芳基哌嗪衍生物、制备方法及应用。与现有技术相比，本发明制备芳基哌嗪衍生物，与现有已知抑制剂不同，避免了现有化合物的耐药性问题，经初步药理学研究，表明能够显著抑制肺癌细胞的侵袭能力，可研制开发为新型抗肿瘤药物，这一发现将为肺癌治疗提供了新的作用机制，并有临床实用价值。

Description

芳基哌嗪衍生物、制备方法及应用

技术领域

本发明涉及有化合物制备技术领域，具体涉及一种芳基哌嗪衍生物、制备方法及应用。

背景技术

肺癌是全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。根据世界卫生组织统计，肺癌每年导致数百万患者死亡，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占据约85%的病例。肺癌的高死亡率与其侵袭性和转移能力密切相关。现有的治疗手段包括手术、放疗、化疗及靶向治疗，但由于耐药性和毒副作用等问题，临床上仍迫切需要开发新型有效的治疗药物。

目前，已知的一些小分子抑制剂（如EGFR抑制剂、ALK抑制剂）在一定程度上能够延缓肺癌进展，但对抑制癌细胞侵袭和转移的效果有限，且存在耐药性问题。因此，开发具有全新作用机制和结构的化合物，以抑制肺癌细胞的侵袭能力，具有重要的临床意义和应用前景。

发明内容

为了克服上述技术缺陷，本发明提供一种芳基哌嗪衍生物、制备方法及应用以抑制肺癌细胞的侵袭性和转移能力。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

第一方面，式I或式II所示的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，

式I 、

式II

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R₁代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基、羟基；

R₂选自酯基、C1-C5烷氧基。

进一步地，所述Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环；

R₁可独立选自H、单取代F、单取代C1-C3卤烷基；

R₂可独立选自羧酸酯基、磺酸酯基、C1-C3烷氧基。

进一步地，式I所示的芳基哌嗪衍生物具体为：

、、、、。

进一步地，式II所示的芳基哌嗪衍生物具体为：

、、。

第二方面，提供上述芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的应用。

以下应用也在本发明的保护范围之内：

进一步地，所述肿瘤的相关抗原或细胞表面受体选自MSG783、STEAP2、TrpM4、CRIPTO、CD21、HER2、EphB2R、BAFF-R中的一种。

进一步地，所述肿瘤为乳腺癌、 肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、直肠癌、鼻咽癌、胰腺癌、甲状腺癌、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、肾脏肿瘤、肉瘤或母细胞瘤；更优选地，所述肿瘤为非小细胞肺癌。

进一步地，所述药物以上述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐为活性组分，用药学上可以接受的辅料制成药学上可以接受的剂型。

第三方面，提供芳基哌嗪衍生物的制备方法，反应路线如下：

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R₁代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基、羟基。

第四方面，提供用于肿瘤靶向治疗的药物组合物，含有上述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐和可药用辅料。

进一步地，所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂以及药物载体中的一种或多种。

本领域技术人员充分了解的是，所述药学上可接受的载体通常被认可用于这一目的且作为药剂的非活性成分。

所述辅体包括溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、以及释放阻滞剂。

其中，稀释剂可以是甘露醇、蔗糖、乳糖、山梨醇、木糖醇、聚乙二醇、丙二醇、植物油、矿物油中的一种或几种；崩解剂可以是交联羧甲基纤维素钠、胶态二氧化硅、柠檬酸中的一种或几种；黏合剂可以是淀粉浆、乙醇、水、聚维酮醇溶液中的一种或几种；防腐剂可以是对羟苯甲酸乙酯、羟苯甲酸丙酯、山梨酸、山梨酸钾、丙酸钙、脱氢乙酸钠、双乙酸钠、乳酸钠中的一种或几种；抗氧剂可以是乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠盐、二丁基羟基甲苯、甘氨酸、肌醇、抗坏血酸、抗坏血酸钠、卵磷脂、苹果酸、氢醌、枸橼酸、琥珀酸、焦亚硫酸钠中的一种或几种；调味剂可以是阿斯巴甜、蔗糖、木糖醇、甜菊糖苷、甜蜜素、山梨醇、可可、纯香草、香兰素、乙基香兰素、巧克力、麦芽、薄荷中的一种或几种；助悬剂可以是黄原胶、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸钠、硬脂酸铝、氢化植物油中的一种或多种；乳化剂可以是烷基硫酸盐、肥皂、十二烷基苯磺酸盐、乳酸酯、磺基琥珀酸酯、单酸甘油酯磺酸盐、磷酸酯、硅氧烷、牛磺酸盐中的一种或几种。

进一步地，所述药物组合物的剂型为悬浮剂、可分散油悬浮剂、干悬浮剂、可湿性粉剂、乳油或水分散粒剂。

其中，所述药物是通过胃肠道给药和非胃肠道给药途径给药。

特别地，所述的非胃肠道给药途径选自注射给药、呼吸道给药、皮肤给药、粘膜给药或腔道给药。

其中，非胃肠道给药制剂选自注射剂、喷雾剂、气雾剂、贴剂等。

特别地，所述胃肠道给药制剂选自片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、丸剂、溶液剂、乳剂或糖浆剂等。

本发明的药物组合物含有0.1－90wt％的有效成分。

药物组合物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将有效成分与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。

本发明的药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如患者或动物的性别、年龄、体重及个体反应，给药途径及给药次数等。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。剂量水平须根据具体的给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史等来选定。但是，本领域的做法是，给药剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

但应认识到，本发明的药物组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，给药的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

一般说来，本发明的药物组合物以有效成分计算用于哺乳动物特别是人的剂量可以介于1－1000mg/kg体重/天，例如介于1－500mg/kg体重/天，例如介于50-500mg/kg体重/天，或者100-500mg/kg，或者150-500mg/kg，或者200-500mg/kg，或者250-500mg/kg。

本发明所述芳基哌嗪衍生物的盐主要包括氢溴酸盐、氢碘酸盐、盐酸盐、高氯酸盐、硫酸盐、马来酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、杏仁酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、草酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、墟泊酸盐、乳酸盐中的一种。

本发明所述的芳基哌嗪衍生物可药用盐采用如下方法制得：将芳基哌嗪衍生物溶于有机溶剂中，然后加入酸，常温下搅拌，析出的固体为芳基哌嗪衍生物的无机酸盐或有机酸盐。

与现有技术相比，本发明制备芳基哌嗪衍生物，与现有已知抑制剂不同，避免了现有化合物的耐药性问题，经初步药理学研究，表明能够显著抑制肺癌细胞的侵袭能力，可研制开发为新型抗肿瘤药物，这一发现将为肺癌治疗提供了新的作用机制，并有临床实用价值。

附图说明

图1为实施例1所得产物的¹H NMR图；

图2为实施例1所得产物的¹³C NMR图；

图3为实施例2所得产物的¹H NMR图；

图4为实施例2所得产物的¹³C NMR图；

图5为实施例3所得产物的¹H NMR图；

图6为实施例3所得产物的¹³C NMR图；

图7为实施例4所得产物的¹H NMR图；

图8为实施例4所得产物的¹³C NMR图；

图9为实施例5所得产物的¹H NMR图；

图10为实施例5所得产物的¹³C NMR图；。

图11为芳基哌嗪衍生物的细胞迁移能力检测结果；

图12为芳基哌嗪衍生物对小鼠体内抗肿瘤活性；

其中，图12a为小鼠体重变化图；图12b为小鼠肿瘤体积变化图；

图13为芳基哌嗪衍生物对小鼠器官肿瘤转移的影响；

图14为芳基哌嗪衍生物对小鼠生存时间的影响；

图15为芳基哌嗪衍生物对小鼠血清生化指标的影响；

图16为芳基哌嗪衍生物对小鼠脏器组织的影响。

具体实施方式

为使本领域技术人员更好的理解本发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明作详细说明。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。

基于肿瘤转移通过破坏关键器官功能、诱发全身性代谢紊乱及免疫崩溃，成为癌症死亡的核心机制，故发明人对收集患者样本进行了多组学测序，发现一个重要靶点steap2，并对steap2进行了大量的功能验证，发现抑制steap2能够抑制肿瘤转移，因此基于靶点steap2，开发了新型小分子抑制剂芳基哌嗪衍生物，以抑制肺癌细胞的侵袭能力。

一些具体的实施例中，提供芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，其结构式如式I所示：

式I ；

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R₁代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基；

一些具体的实施例中，所述Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环；

R₁可独立选自H、单取代F、单取代C1-C3卤烷基；

一些优选的实施例中，式I所示的芳基哌嗪衍生物具体为：

、、、、。

一些具体的实施例中，提供芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，其结构式如式II所示：

式II

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R₁代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基；

R₂选自酯基、C1-C5烷氧基。

一些具体的实施例中，所述Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环；

R₁可独立选自H、单取代F、单取代C1-C3卤烷基；

R₂可独立选自羧酸酯基、磺酸酯基、C1-C3烷氧基。

一些优选的实施例中，式II所示的芳基哌嗪衍生物具体为：

、、。

另一具体的实施例中，提供芳基哌嗪衍生物的制备方法，反应路线如下：

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R1代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基。

该实施方式的一些实施例中，采用如下路线制得：

该实施方式的一些实施例中，所述Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环；

R1可独立选自H、单取代F、单取代C1-C3卤烷基。

以下结合具体实施例和附图对本发明的技术方案作进一步详细说明，应当理解，以下实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例 1芳基哌嗪衍生物的合成

（1）在干燥的圆底烧瓶中加入1 eq 的 4-三氟甲基苯甲酸，1–2 滴无水DMF，冷却至 0℃，缓慢加入1.2–1.5 eq 的氯化亚砜；缓慢升温至 70–80℃，搅拌反应 1–2 h；原料消失后，减压蒸去过量 SOCl₂，减压浓缩得4-三氟甲基苯甲酰氯；

（2）将 4-氨基-N-哌嗪基硝基苯 (3 mmol)溶于 15 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内，加入三乙胺，在冰水浴下冷却至0℃，持续搅拌10min。另将1 eq的4-三氟甲基苯甲酰氯溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中，保持 0℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌30分钟，然后回温至室温，继续搅拌 6–12 小时；反应完全后，用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl 分别洗涤有机层，有机层干燥，过滤、浓缩；粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯= 3:1纯化，得硝化产物；

（3）将硝基化物（2 mmol）加入到反应瓶中，用二氯甲烷/甲醇（1：1）30ml溶解，加入催化量的钯碳，氢气下常温搅拌过夜，过滤，得当量产物；

（4）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 1-萘甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至0°C，缓慢加入 1.2–1.5 eq 的氯化亚砜。缓慢升温至 70–80°C，搅拌反应 1–2 小时；原料消失后，减压蒸去过量SOCl₂，减压浓缩得1-萘甲酰氯；

（5）将胺（2 mmol）溶于10 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA,2 eq），在冰水浴下冷却至0℃，持续搅拌 10 分钟。另将1 eq的 1-萘甲酰氯溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持0°C 滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌 30 分钟，然后回温至室温，继续搅拌6–12小时。TLC检测反应完全后，加入 10 mL冰水终止反应。分液漏斗中用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl 分别洗涤有机层，有机层干燥，过滤、浓缩，得ZD94，粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯 = 2:1纯化，产率79%，将其进行纯度及质谱分析（图1-2）；

。

实施例 2 芳基哌嗪衍生物的合成

（1）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 4-氟苯甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至 0℃，缓慢加入 1.2–1.5 eq 的氯化亚砜，缓慢升温至 70–80℃，搅拌反应 1–2 小时，原料消失后，减压蒸去过量 SOCl₂，减压浓缩得4-氟苯甲酰氯；

（2）将4-氨基-N-哌嗪基硝基苯（3 mmol）溶于 15 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA, 2 eq），在 冰水浴下冷却至0℃，持续搅拌 10 分钟，另将1 eq的4-氟苯甲酰氯 溶于少量DCM中，保持 0℃ 缓慢滴加到上述溶液中，滴加后继续于冰浴下搅拌 30 分钟，然后回温至室温，继续搅拌 6–12h，反应完全后，用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl分别洗涤有机层，并干燥，过滤、浓缩。粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯 = 3:1纯化，得硝化产物；

（3）将硝基化物（2 mmol）加入到反应瓶中，用二氯甲烷/甲醇（1：1）30ml溶解，加入催化量的钯碳，氢气下常温搅拌过夜，过滤，得当量产物；

（4）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 1-萘甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至0℃，缓慢加入 1.2–1.5 eq 的氯化亚砜。缓慢升温至 70–80℃ ，搅拌反应 1–2 小时；原料消失后，减压蒸去过量SOCl₂，减压浓缩得 1-萘甲酰氯；

（5）将胺（2 mmol）溶于10 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA,2 eq），在冰水浴下冷却至0℃ ，持续搅拌 10 分钟。另将1 eq的 1-萘甲酰氯 溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持0 ℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌 30 分钟，然后回温至室温，继续搅拌6–12小时。TLC检测反应完全后，加入冰水终止反应，用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl分别洗涤有机层，有机层干燥，过滤、浓缩，得ZD95；粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯 = 2:1纯化，产率75%，将其进行纯度及质谱分析（图3-4）；

。

实施例 3 芳基哌嗪衍生物的合成

（1）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 4-吡啶甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至 0 ℃ ，缓慢加入 1.2–1.5 eq 的氯化亚砜。缓慢升温至 70–80 ℃ ，搅拌反应 1–2 小时，原料消失后，减压蒸去过量 SOCl₂，减压浓缩得 4-吡啶甲酰氯；

（2）将 4-氨基-N-哌嗪基硝基苯 (3 mmol)溶于 15 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内，加入三乙胺（TEA, 2 eq），在冰水浴下冷却至0℃ ，持续搅拌 10 分钟。另将1 eq的4-吡啶甲酰氯溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持 0℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌 30 分钟，然后回温至室温，继续搅拌 6–12 小时；检测反应完全后，用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl 分别洗涤有机层。有机层干燥，过滤、浓缩；粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯 = 3:1纯化，得硝化产物；

（3）将硝基化物（2 mmol）加入到反应瓶中，用二氯甲烷/甲醇（1：1）30ml溶解，加入催化量的钯碳，氢气下常温搅拌过夜。过滤，除去钯碳，得当量产物；

（4）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 1-萘甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至0℃ ，缓慢加入 1.2–1.5 eq 的氯化亚砜，缓慢升温至 70–80℃ ，搅拌反应1–2小时，原料消失后，减压蒸去过量 SOCl₂，减压浓缩得 1-萘甲酰氯；

（5）将胺（2 mmol）溶于10 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA,2 eq），在冰水浴下冷却至0℃ ，持续搅拌 10 分钟。另将1 eq的 1-萘甲酰氯 溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持0 ℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌30分钟，然后回温至室温，继续搅拌6–12小时。TLC检测反应完全后，加入10 mL冰水终止反应。分液漏斗中用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl 分别洗涤有机层。有机层干燥，过滤、浓缩，得ZD96，粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯 = 2:1纯化，产率73%，将其进行纯度及质谱分析（图5-6）；

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实施例 4 芳基哌嗪衍生物的合成

（1）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 3-噻吩甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至0℃ ，缓慢加入1.2–1.5 eq的氯化亚砜。缓慢升温至70–80℃ ，搅拌反应 1–2 小时。原料消失后，减压蒸去过量 SOCl₂，减压浓缩得 3-噻吩甲酰氯；

（2）将 4-氨基-N-哌嗪基硝基苯 (3 mmol)溶于 15 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA, 2 eq），在 冰水浴下冷却至0℃ ，持续搅拌 10 分钟。另将1 eq的 3-噻吩甲酰氯 溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持 0℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌 30 分钟，然后回温至室温，继续搅拌 6–12 小时。TLC检测反应完全后，加入 10 mL 冰水终止反应。分液漏斗中用 饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl 分别洗涤有机层。有机层干燥（Na₂SO₄），过滤、浓缩。粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯 = 3:1纯化，得产物723 mg（产率76%）；

（3）将硝基化物（2 mmol）加入到反应瓶中，用二氯甲烷/甲醇（1：1）30ml溶解，加入催化量的钯碳，氢气下常温搅拌过夜。过滤，除去钯碳，得当量产物；

（4）在干燥的圆底烧瓶中加入：1 eq 的 1-萘甲酸，1–2 滴无水DMF（催化），冷却至0℃ ，缓慢加入1.2–1.5 eq 的氯化亚砜，缓慢升温至70–80℃ ，搅拌反应 1–2 小时，原料消失后，减压蒸去过量SOCl₂，减压浓缩得 1-萘甲酰氯；

（5）将胺（2 mmol）溶于10 mL无水DCM 中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA,2 eq），在冰水浴下冷却至0℃ ，持续搅拌10分钟。另将1eq的1-萘甲酰氯溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持0℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌30分钟，然后回温至室温，继续搅拌6–12小时。TLC检测反应完全后，加入10mL冰水终止反应。分液漏斗中用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl分别洗涤有机层。有机层干燥，过滤、浓缩，得ZD97，粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯=2:1纯化，将其进行纯度及质谱分析（图7-8）；

。

实施例5芳基哌嗪衍生物的合成

（1）在干燥的圆底烧瓶中加入：1eq的2-氟苯甲酸，1–2滴无水DMF（催化），冷却至0℃，缓慢加入1.2–1.5eq的氯化亚砜，缓慢升温至70–80℃，搅拌反应1–2小时。原料消失后，减压蒸去过量SOCl₂，减压浓缩得2-氟苯甲酰氯；

（2）将4-氨基-N-哌嗪基硝基苯（3mmol）溶于15mL无水DCM中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA,2eq），在冰水浴下冷却至0℃，持续搅拌10分钟。另将1eq的2-氟苯甲酰氯溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持0℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌30分钟，然后回温至室温，继续搅拌6–12小时。TLC检测反应完全后，加入10mL冰水终止反应。分液漏斗中用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl分别洗涤有机层。有机层干燥，过滤、浓缩。粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯=3:1纯化，得产物720mg（产率73%）；

（3）将硝基化物（2mmol）加入到反应瓶中，用二氯甲烷/甲醇（1：1）30ml溶解，加入催化量的钯碳，氢气下常温搅拌过夜，过滤，除去钯碳，得当量产物；

（4）在干燥的圆底烧瓶中加入：1eq的1-萘甲酸，1–2滴无水DMF，冷却至0℃，缓慢加入1.2–1.5eq的氯化亚砜；缓慢升温至70–80℃，搅拌反应1–2小时。原料消失后，减压蒸去过量SOCl₂，减压浓缩得1-萘甲酰氯；

（5）将胺（2mmol）溶于10mL无水DCM中，置于干燥三口烧瓶内。加入三乙胺（TEA,2eq），在冰水浴下冷却至0℃，持续搅拌10分钟。另将1eq的1-萘甲酰氯溶于少量DCM中，缓慢滴加到上述溶液中。保持0℃滴加，防止副反应。滴加后继续于冰浴下搅拌30分钟，然后回温至室温，继续搅拌6–12小时。TLC检测反应完全后，加入10mL冰水终止反应。分液漏斗中用饱和NaHCO₃、水、饱和NaCl分别洗涤有机层。有机层干燥，过滤、浓缩，得ZD93粗产物通过硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯=2:1纯化，产率74%，将其进行纯度及质谱分析（图1-2）；

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实施例6 考察芳基哌嗪衍生物对肿瘤细胞迁移能力的影响

本发明的化合物对肿瘤细胞迁移能力的影响。将A549细胞接种于6孔板中，待细胞生长至90–100%融合后，使用无菌200 μL枪头在孔中心沿直线轻轻划一道“伤口”，随后用PBS缓慢冲洗3次以去除脱落细胞。实验分为6组：DMSO对照组、实施例1（ZD94组）、实施例2（ZD95组）、实施例3（ZD96组）、实施例4（ZD97组）、实施例5（ZD93组），各化合物设置多个浓度梯度。更换为含0.5% FBS的无血清培养基，并分别加入相应浓度的化合物。细胞于37°C、5%CO₂条件下继续培养24小时。分别于0小时和24小时拍摄划痕区域的相同视野图像，使用ImageJ软件测量并计算划痕闭合面积，表征细胞迁移能力。每组实验重复至少3次，数据以平均值±标准差（mean±SD）表示。

从图11可以看到，与DMSO对照组相比，各实施例的化合物在24小时内均不同程度地抑制了细胞向划痕区域的迁移。其中ZD93表现最好，40nm左右能够达到DMSO 50%的迁移率。其他化合物基本在80nm左右达到DMSO 50%的迁移率。

实施例7 考察芳基哌嗪衍生物的体内抗肿瘤活性

实验动物：6–8周龄的BALB/c裸鼠。

动物分组及给药：实验前小鼠适应性喂养1周，使用胰酶消化对数生长期A549细胞，PBS重悬后计数，每只小鼠右侧腋下皮下注射1 × 10⁶个A549细胞，接种体积为100 μL。细胞接种后第5天开始进行药物干预，小鼠随机分为5组，Veh组（载体对照，DMSO）、ZD93_1组（ZD93，10 mg/kg）、ZD93_2组（ZD93，20 mg/kg）、PTX组（紫杉醇，5 mg/kg）、PTX + ZD93组（紫杉醇5 mg/kg + ZD93 10 mg/kg），每组6只或8只。所有药物均采用腹腔注射给药，给药频率为隔日一次。观察时间最长持续至第30天。

（1）给药对小鼠体重及瘤体的影响

从药物处理开始，每2–3天测量小鼠体重和肿瘤体积，结果如图12所示。

从图12a可以看到，在连续给药过程中，各组小鼠体重变化整体稳定，无显著下降趋势，说明ZD93单药及联合紫杉醇（PTX）处理均未引起明显的全身毒性。与PTX组相比，ZD93组体重更为平稳，提示其耐受性良好。从图12b可以看到，与Veh对照组相比，ZD93处理没有显著抑制肿瘤生长。PTX组显示一定抑瘤效果，而PTX + ZD93联合组抑瘤效果最显著，提示ZD93不能够抑制肿瘤生长。

（2）给药对小鼠器官转移的影响

试验结束后，各组小鼠解剖，剖取肺、肝、脾等主要脏器，肉眼观察是否存在远端转移灶，并进行统计。每只小鼠的器官状态用红色（有转移）或灰色（无转移）标记记录。

从图13可以看到，Veh组、ZD93_1组和PTX组均检测到远端转移病例，而ZD93_2组及PTX + ZD93组中未发现转移，表明ZD93在一定剂量下可有效抑制肿瘤转移。

（3）给药对小鼠生存时间的影响

给药结束后，用于生存观察，监测其自然存活时间至实验终点。通过Kaplan–Meier生存曲线进行统计分析，组间差异使用log-rank检验评估。

从图14可以看到，与对照组相比，ZD93_1组、PTX + ZD93组均能延长小鼠生存时间，且PTX + ZD93组生存期最久，表明ZD93可改善肺癌预后。

（4）给药对小鼠脏器的影响

采集末次用药后小鼠的眼眶血，离心获取血清，测定ALT、AST、BUN、CREA、GLU、ALB等常规生化指标，评价肝肾毒性及代谢影响。

从图15可以看到，Veh组与ZD93_1组小鼠的ALT、AST指标均无明显升高，说明ZD93未造成肝功能损伤；两组小鼠的总蛋白（TP）水平无异常；Veh组与ZD93_1组小鼠的CREA、BUN指标亦未见升高，表明肾毒性可忽略。整体表明ZD93在有效剂量下未引起明显的肝肾毒性，系统安全性较好。

收集小鼠心、肝、脾、肺、肾等主要器官，固定于4%多聚甲醛中，常规石蜡包埋、切片并进行苏木精-伊红（H&E）染色。使用 Olympus CX43 显微镜和 CellSens Entry 软件捕获图像（见图16）。

HE染色结果显示，ZD93-1处理组小鼠的心、肝、脾、肺、肾等主要脏器组织结构完整，无明显炎症、坏死或结构紊乱，与Veh组相当。

最后需要说明，上述描述仅为本发明的优选实施例，本领域的技术人员在本发明的启示下，在不违背本发明宗旨及权利要求的前提下，可以做出多种类似的表示，这样的变换均落入本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.式I或式II所示的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，

式I 、

式II

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R₁代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基、羟基；

R₂选自酯基、C1-C5烷氧基。

2.根据权利要求所述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，其特征在于，所述Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环；

R₁可独立选自H、单取代F、单取代C1-C3卤烷基；

R₂可独立选自羧酸酯基、磺酸酯基、C1-C3烷氧基。

3.根据权利要求所述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，其特征在于，式I所示的芳基哌嗪衍生物具体为：

、、、、。

4.根据权利要求1所述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐，其特征在于，式II所示的芳基哌嗪衍生物具体为：

、、。

5.权利要求1所述的芳基哌嗪衍生物的制备方法，其特征在于，反应路线如下：

其中，Ar选自苯环、噻吩环、呋喃环、吡咯、吡啶、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并吡咯、苯并吡啶、萘环、蒽环、非那烯、并四苯、芘、线性或者有角度的并五苯、并六苯、茚或芴；

R1代表1～2个取代基，所述取代基可独立选自氢原子、卤原子、C1-C5卤烷基、羟基。

6.如权利要求1-4所述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述肿瘤的相关抗原或细胞表面受体选自MSG783、STEAP2、TrpM4、CRIPTO、CD21、HER2、EphB2R、BAFF-R中的一种。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物以权利要求1-4所述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐为活性组分，用药学上可以接受的辅料制成药学上可以接受的剂型。

9.用于肿瘤靶向治疗的药物组合物，含有权利要求1-4任一项所述的芳基哌嗪衍生物或其药学可接受的盐和可药用辅料。

10.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂以及药物载体中的一种或多种。