CN120837375A - 一种多效仿生脂质体透皮修护载体及其制备和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种多效仿生脂质体透皮修护载体及其制备方法和应用，该多效仿生脂质体透皮修护载体包括活性成分和纳米载体，其中活性成分包括质量比为(1‑10)：(2‑8)：(0.1‑1)：(0.5‑4)燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液、精氨酸/赖氨酸多肽、维生素E，所述的纳米载体原料包括磷脂、乳化剂、多元醇和水。与现有技术相比，本发明具有增强皮肤补水保湿及抗氧化效果、促进胶原合成，抑制酪氨酸酶达到显著的抗衰、美白、保湿效果等优点。

Description

一种多效仿生脂质体透皮修护载体及其制备和应用

技术领域

本发明涉及护肤品领域，尤其是涉及一种多效仿生脂质体透皮修护载体及其制备和应用。

背景技术

目前，化妆品抗衰、美白成分主要依赖以下几类物质：维生素类(如视黄醇、维生素C)：视黄醇虽能促进胶原蛋白生成，但存在光敏性、刺激性高的问题，部分消费者使用后会出现皮肤泛红、脱皮等不良反应。维生素C(抗坏血酸)抗氧化效果显著，但稳定性差，易氧化失活，需依赖特殊配方技术(如微囊化或衍生物形式)维持活性。肽类成分(如棕榈酰五肽、乙酰基六肽)：可刺激胶原蛋白合成或抑制神经递质释放(如类肉毒杆菌效应)，但部分多肽渗透性差，且长期效果有限。天然提取物(如积雪草、白藜芦醇)：虽然安全性较高，但部分成分起效慢，且高浓度添加可能影响产品稳定性。现有技术多采用单一活性成分或简单复配，难以同时兼顾抗皱、保湿、修复屏障等多重功效，且部分成分(如视黄醇)适用人群受限。

目前存在着的许多化妆品品质参差不齐，含有功效成分的化妆存在以下问题：活性成分稳定性差、易降解失活，市面上较多的抗衰老、美白护肤品中的有效成分一般为多酚类、维生素或者多肽类，它们对酶、光、热、PH值等敏感，若不经过纳米化包裹处理直接添加到配方中，易导致不稳定活性成份失活；由于皮肤的角质层具有较强的角质细胞屏障功能，许多活性分子，如活性肽等在角质层中难以渗透，从而影响了其在靶向部位的护肤效果，抗衰、美白和保湿修护作用甚微。护肤机制单一：由于皮肤衰老、美白机制的复杂性，需要多种作用机制活性物的协同作用才能有效发挥皮肤抗衰功效，然而目前市场上抗衰、美白护肤品作用机制单一，最终导致抗衰、美白效果并不理想。

发明内容

本发明的目的就是为了提供一种具有抗衰老美白保湿及修复功效的多效仿生脂质体透皮修护载体及其制备和应用，增强皮肤补水保湿及抗氧化效果、促进胶原合成，抑制酪氨酸酶达到显著的抗衰、美白、保湿效果。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种多效仿生脂质体透皮修护载体，该多效仿生脂质体透皮修护载体包括活性成分和纳米载体，其中活性成分包括质量比为(1-10)：(2-8)：(0.1-1)：(0.5-4)燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液、精氨酸/赖氨酸多肽、维生素E。进一步优选地，所述的组合物中燕窝酸与维生素E的质量比为2～4:1。

进一步地，所述的纳米载体的原料包括磷脂、乳化剂、多元醇和水。

进一步地，以多效仿生脂质体透皮修护载体总质量为100％计，包括燕窝酸1-10％、酵母菌/大米发酵产物滤液2-8％、精氨酸/赖氨酸多肽0.1-1％、维生素E0.5-4％，磷脂0.1-2％、乳化剂5-30％、多元醇10-40％、水余量。

进一步优选，以多效仿生脂质体透皮修护载体总质量为100％计，包括燕窝酸3-9％、酵母菌/大米发酵产物滤液5-8％、精氨酸/赖氨酸多肽0.5-1％、维生素E1-4％，磷脂0.1-2％、乳化剂5-30％、多元醇10-40％、水余量。

进一步地，所述磷脂包括大豆卵磷脂、氢化卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂中的一种或多种；

所述的乳化剂包括聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油类乳化剂、聚氧乙烯氢化蓖麻油类乳化剂、PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、聚甘油类乳化剂、泊洛沙姆、椰油基葡糖苷、甘油三酯类、吡咯烷酮类、聚甘油酸酯、PEG-30二聚羟基硬脂酸脂和鲸蜡硬脂醇聚醚类、吐温80、吐温20、吐温60、PEG-20氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油中的一种或多种；

所述的多元醇包括甘油、丙二醇、1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、乙氧基二甘醇、1,2-己二醇、二丙二醇、异丙醇、聚乙二醇-200、PPG-10山梨醇、辛基十二醇、双丙甘醇中的一种或多种。

进一步地，所述的纳米载体的原料还包括质量百分含量1-2％的pH调节剂。

进一步地，所述的pH调节剂包括氨丁三醇。

本发明还提供一种多效仿生脂质体透皮修护载体的制备方法，包括以下步骤：

(1)将维生素E与乳化剂、多元醇、磷脂混匀，得到混合液A；

(2)将燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液、精氨酸/赖氨酸多肽、pH调节剂、多元醇与水混匀，得到混合液B；

(3)将混合液A倒入混合液B中混匀，得到混合液C；

(4)将混合液C进行纳米化处理得到具有抗衰老、美白、保湿及修复功效的脂质体组合物。

进一步地，步骤(1)中，所述的混匀的条件为在30-65℃，搅拌均匀；

步骤(2)中，所述的混匀的条件为在30-65℃，搅拌均匀；

步骤(3)中，所述的混匀的条件为在30-65℃，搅拌均匀；

步骤(4)中，所述的纳米化处理为用高压均质机均质，压力为500-1200bar。

本发明还提供一种护肤品，含有所述的多效仿生脂质体透皮修护载体。护肤品包括乳液、面霜、冻干粉、护肤水等。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明选用四种特定配比的功效成分：燕窝酸(N-乙酰神经氨酸)、酵母菌/大米发酵产物滤液、芋螺肽(精氨酸/赖氨酸多肽)和维生素E(生育酚)进行多靶点协同作用，其中燕窝酸使皮肤白皙靓丽；酵母菌/大米发酵产物滤液减少紫外线和环境污染引起的氧化应激，保护皮肤免受自由基的伤害，促进皮肤水化和屏障功能，软化角质并补充水分，使皮肤保持滋润、晶莹柔滑；芋螺肽(精氨酸/赖氨酸多肽)调节皮肤神经信号，减少皱纹的形成，促进胶原蛋白的生成，延缓细胞老化。通过维生素E(生育酚)清除自由基，防止脂质过氧化，延缓光老化，最终实现了抗衰老、美白、保湿及修复功效。

(2)本发明合理搭配多种功效成分，结合纳米载体技术，形成一种作用于抗衰、美白、保湿修护的脂质体。本发明通过新型纳米技术将科学搭配的燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种功效成分采用纳米载体进行包裹递送。基于纳米载体结构以及特性，经过纳米化包裹得到的组合物，具有良好的稳定性和水分散性，增大了功效成分的溶解度，同时也改善了功效成分的刺激性，使得功效成分在产品中可以达到足够的浓度从而发挥相应的功能效果。在有效提高各功效成分溶解性的同时为其提供稳定储存空间，避免功效成分存储与使用前发生非必要降解或失活，有利于提高抗衰、美白产品中功效物质浓度。

附图说明

图1为皮肤累积透过量和皮肤储留量；图中，与游离成分相比，&&P<0.01；

图2为激光共聚焦显微镜观察皮肤渗透；

图3为HaCaT和HDF细胞摄取行为；其中，与游离RhoB相比，&P＜0.05，&&P＜0.01，图3A和3C为HDF细胞，图3B和3D为HaCaT细胞；

图4为细胞增殖实验结果；其中：与正常组相比，#P<0.05，##P<0.01；与游离成分相比，&P<0.05，&&P<0.01；

各图中，与模型组相比，**P<0.01；与对比例1,2,3,4相比，##P<0.01；与对比例5相比，％％P<0.01；与对比例6相比，@@P<0.01；与实施例4和实施例5相比，&&P<0.01。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。本实施例以本发明技术方案为前提进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

本发明选用特定比例的燕窝酸(N-乙酰神经氨酸)、酵母菌/大米发酵产物滤液、芋螺肽(精氨酸/赖氨酸多肽)和维生素E(生育酚)进行多靶点协同作用，通过多种护肤机制，增强皮肤补水保湿及抗氧化效果、促进胶原合成，抑制酪氨酸酶达到显著的抗衰、美白、保湿效果。具体说明如下：

燕窝酸(N-乙酰神经氨酸)作用表皮屏障相关蛋白，促进角质形成细胞分化，增强皮肤屏障功能，调节表皮水分运输，提高皮肤水合能力，缓解敏感肌泛红，还可以能有效抑制酪氨酸酶,减少黑色素的生成,调整皮肤的黑色素新陈代谢平衡,从而达到使皮肤白皙靓丽的效果；

本发明采用的燕窝酸为市售产品。

酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)；作为麦吉丽品牌的核心原料，具有抗炎和抗氧化的特性，它能够减少紫外线和环境污染引起的氧化应激，保护皮肤免受自由基的伤害。麦肤因的关键成分Alpha-KG能够激活细胞增殖，促进皮肤水化和屏障功能，能够软化角质并补充水分，使皮肤保持滋润、晶莹柔滑；

本发明酵母菌/大米发酵产物滤液采用麦吉丽已公开文献报道的方法获得，如下面实施例中采用酵母菌/大米发酵产物滤液通过以下方法制得：

(1)大米粉末加水加热，搅拌，成为30％米浆，在米浆中加入β-葡聚糖酶，酶的添加量为米浆质量的0.005％，酶活为200U/g，进行酶解，获得米浆酶解液；

(2)将酵母菌种saccharomyces veronae接种米浆酶解液中，发酵的条件为：发酵温度35℃，发酵时间36小时，发酵过程pH控制为6-6.5之间，发酵后获得米发酵液；

(3)发酵后的米发酵液通过反渗透技术浓缩10倍，高效富集活性物质，经过加温杀菌，冷却过滤得到浓缩后的米发酵液，即酵母菌/大米发酵产物滤液。

芋螺肽(精氨酸/赖氨酸多肽)能够特异性地作用于神经递质受体，如乙酰胆碱受体，调节皮肤神经信号，可能有助于减少肌肉收缩，从而减少皱纹的形成。可以通过阻断特定的离子通道，芋螺肽可能影响皮肤细胞的功能，包括细胞增殖和细胞凋亡，促进胶原蛋白的生成，延缓细胞老化。

本发明采用的芋螺肽为市售产品。

维生素E(生育酚)经典脂溶性抗氧化剂，可清除自由基，防止脂质过氧化，延缓光老化。

本发明采用的维生素E为市售产品。

纳米脂质体一般指粒径为100nm以下的小单室脂质体，可以包载水溶性或脂溶性活性物，具有缓释、可生物降解、无免疫原性和毒性等优点。纳米级别的尺寸和良好的变形性使其具有较强的穿透生理组织屏障的能力。纳米载体用于化妆品/药品，能显著提高活性成分的皮肤渗透能力。将不同机制的功效成分同时包载于同一纳米脂质体中，经皮肤输送，可达到缓释、长效，同时实现多效多靶点成分的协同作用，显著提升功效。

本发明通过纳米包裹技术，将四种活性物制成脂质体。

下面通过具体实施例进行详细说明。本发明涉及的原料和检测手段，如无特殊说明均为本领域的常用原料和检测手段。

实施例1

一种多效仿生脂质体透皮修护载体的制备：

(1)将维生素E 2％份、卵磷脂2％、1,2戊二醇10％、泊洛沙姆5％、吐温-6025％，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体A。

(2)将燕窝酸8％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)6％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1％、甘油10％、1,3-丙二醇20％、氨丁三醇2％、水余量，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体B。

(3)将液体A倒入液体B中混合，在45℃搅拌形成均一的液体C。

(4)将液体C以1200bar在高压均质机均质后，得到多效仿生脂质体透皮修护载体。

实施例2

一种多效仿生脂质体透皮修护载体的制备：

(1)将维生素E1％份、卵磷脂1％、1,2己二醇10％、椰油基葡糖苷5％、PEG-20氢化蓖麻油10％，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体A。

(2)将燕窝酸3％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)5％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0.5％、甘油10％、1,2-丙二醇5％、氨丁三醇1.4％、水余量，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体B。

(3)将液体A倒入液体B中混合，在45℃搅拌形成均一的液体C。

(4)将液体C以1200bar在高压均质机均质后，得到多效仿生脂质体透皮修护载体。

实施例3

一种多效仿生脂质体透皮修护载体的制备：

(1)将维生素E 0.5％份、卵磷脂0.1％、乙氧基二甘醇2％、双丙甘醇3％、聚甘油酸酯5％，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体A。

(2)将燕窝酸1％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)2％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0.1％、1,2-丙二醇5％、氨丁三醇1％、水余量，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体B。

(3)将液体A倒入液体B中混合，在45℃搅拌形成均一的液体C。

(4)将液体C以1200bar在高压均质机均质后，得到多效仿生脂质体透皮修护载体。

以实施例1为对照，设置燕窝酸和维生素E不同比例的实施例。

实施例4

一种多效仿生脂质体透皮修护载体的制备：

(1)将维生素E1.6％份、卵磷脂2％、1,2戊二醇10％、泊洛沙姆5％、吐温-60 25％，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体A。

(2)将燕窝酸8.4％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)8％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1％、甘油10％、1,3-丙二醇20％、氨丁三醇2％、水余量，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体B。

(3)将液体A倒入液体B中混合，在45℃搅拌形成均一的液体C。

(4)将液体C以1200bar在高压均质机均质后，得到一种多效仿生脂质体透皮修护载体。

实施例5

一种多效仿生脂质体透皮修护载体的制备

(1)将维生素E 4％份、卵磷脂2％、1,2戊二醇10％、泊洛沙姆5％、吐温-6025％，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体A。

(2)将燕窝酸6％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)8％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1％、甘油10％、1,3-丙二醇20％、氨丁三醇2％、水余量％，在45℃，搅拌形成均一澄清的液体B。

(3)将液体A倒入液体B中混合，在45℃搅拌形成均一的液体C。

(4)将液体C以1200bar在高压均质机均质后，得到一种多效仿生脂质体透皮修护载体。

对比例

以实施例1为对照，将其中的活性成分组合物换成等量的活性成分，使用相同的方法制备得到含不同一种或几种活性成分的纳米组合物。

对比例1

只含有活性成分燕窝酸17％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例2

只含有活性成分酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)17％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例3

只含有活性成分精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)17％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例4

只含有活性成分维生素E17％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例5

含有燕窝酸8％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)6％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)3％、维生素E 0％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例6

含有燕窝酸8％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)6％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0％、维生素E 3％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例7

含有燕窝酸14％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)0％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1％、维生素E 2％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例8

含有燕窝酸0％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)14％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1％、维生素E 2％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例9

含有燕窝酸11％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)6％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0％、维生素E 0％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例10

含有燕窝酸15％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)0％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0％、维生素E 2％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例11

含有燕窝酸0％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)15％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0％、维生素E 2％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例12

含有燕窝酸0％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)0％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)15％、维生素E 2％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例13

含有燕窝酸11％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)0％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)0％、维生素E 6％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例14

含有燕窝酸11％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)4％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1.5％、维生素E 0.5％，其他成分和制备方法实施例1相同。

对比例15

燕窝酸8％、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)6％、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)1％、维生素E(生育酚)2％，加入溶剂中混合，溶剂为二甲基亚砜(DMSO)：水(体积比为8:2)，得到含量与实施例1相同的游离组合物。

上述实施例1-5、对比例1-14所得产品的平均粒径为100nm以内，PDI为0.05-0.4。将各实施例和对比例所得产品置于密闭容器中，分别在-20℃、常温、4℃、45℃条件下各放置3个月，均未出现分层、析出现象，且粒径也没有显著变化，表明各实施例和对比例所得产品的稳定性良好。

性能检测：

性能检测1鸡胚尿囊膜刺激性评价

鸡胚：购入鸡种，在孵蛋箱孵育9d，孵育过程中注意气室朝上。

实验方法：取第9d龄鸡胚，将0.2ml(或g)的受试物均匀涂布鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上与CAM接触30s，然后再用生理盐水轻柔冲洗约30s，以冲洗去除受试物至CAM表面干净。每种受试物平行做3枚鸡胚，同时设阴性和阳性对照，以生理盐水作为阴性对照物，以NaOH作为阳性对照物。

指标的观察：观察5min内CAM血管变化并记录CAM血管出现充血、出血和凝血的初始时间。

将实施例1-5所得多效仿生脂质体透皮修护载体稀释10倍，吸取0.2mL样品，滴加在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)表面，观察5min内CAM血管变化并记录CAM血管出现充血、出血和凝血的初始时间，计算刺激分值IS。

IS＝[(301-secH)×5+(301-secL)×7+(301-secC)×9]/300

式中，secH为表充血初始时间，s；secL为表出血初始时间，s；secC为表凝血初始时间，s。

计算重复试验的均值，根据均值的大小对受试物进行刺激性分级，其中0～0.9、1.0～4.9、5.0～8.9和9～21.0分别归类为无刺激、轻微刺激、中等刺激、严重刺激。

测试结果表明，当稀释10倍后的脂质体组合物与鸡胚尿囊膜接触300s后，毛细血管无出血、无血管融解、凝血现象，反应积分为0.07、0.06、0.08、0.07、0.06，说明稀释10倍后的实施例1-5所述的多效仿生脂质体透皮修护载体安全性较好，无刺激性。

性能检测2斑贴试验

测试方法：采用人体皮肤斑贴试验评估产品安全性。

受试物：实施例1～5所述组合物。

受试对象：共50人，男性25人，女性25人，年龄25～35岁，符合受试者志愿入选标准，分成5组，每组10人；

斑试方法：选用合格的斑试器，以封闭式班贴试验方法，将实施例1-5所得脂质体组合物稀释10倍和空白对照(即不含任何物质)，约0.02～0.025g涂于斑试器内，外用专用胶带贴于受试者的前臂曲侧(空白对照贴在实验组的旁边)持续24h，去除斑试器后间隔30min，待压痕消失后观察皮肤反应，按照《化妆品安全技术法规2015》中皮肤反应分级标准进行评级。在除去斑试器24h、48h后再观察皮肤反应。

结果显示，50例受试者均未出现淡红斑、红斑、水肿性红斑、显著红肿、浸润或丘疹和伴丘疹或疱等，说明实施例1-5所述一种多效仿生脂质体透皮修护载体对人体皮肤无刺激性。

性能检测3体外皮肤渗透实验

对比例15(游离RhoB)、实施例1制备载体(RhoB纳米载体)：将实施例1制备的多效仿生脂质体透皮修护载体(RhoB纳米载体)含有的燕窝酸作为荧光标记，并配置等浓度的游离RhoB溶液作为对照样品(游离RhoB)。

采用垂直式Franz扩散池法进行离体猪皮的皮肤渗透实验。将皮肤固定于接收室和供给室之间，试验分为2组，即游离RhoB组和RhoB纳米载体组。取含有5％RhoB纳米载体复配精华(即将实施例1制备产品作为RhoB纳米载体加入接收液中，RhoB纳米载体的添加量为5wt％)和游离RhoB复配精华(与RhoB纳米载体中游离RhoB浓度一致)各0.5g于供给室中，以PBS为接收液，37℃下搅拌扩散。于2h和4h后轻轻擦去皮肤上的残留样品，取下目标区域内的皮肤，再次冲洗皮肤，彻底清洁后擦干残余水分。将样品冷冻切片，通过激光共聚焦显微镜观察切片，挑选有代表性的区域拍照。

由图1和可以看出，游离RhoB组中燕窝酸、RhoB纳米载体组中燕窝酸24h单位面积皮肤累积透过量分别为5.36μg/cm²和18.23μg/cm²，皮肤储留量分别为35.29μg/cm²和87.16μg/cm²。经载体皮肤递送，与游离RhoB组中燕窝酸比较，RhoB纳米载体组多效仿生脂质体透皮修护载体中燕窝酸的皮肤累积透过量可提高240.1％，皮肤储留量可提高147.0％。说明经纳米载体包裹后能有效促进功效成分的皮肤渗透和在皮肤中的储留量，提高其皮肤生物利用率。

由图2和可以看出，游离RhoB组在2h多集中于角质层，未能透过角质层屏障。RhoB纳米载体组在2h已经透过角质层屏障。随着时间的延长，6h时RhoB纳米载体组皮肤的荧光渗透深度增加，可达430.2μm的皮肤深度。结果表明，在相同时间内，RhoB纳米载体组在皮肤中荧光强度和渗透进入皮肤深度明显强于游离RhoB组，说明实施例1所得多效仿生脂质体透皮修护载体采用的纳米载体技术能够促进包载功效成分快速有效递送至皮肤深层组织到达真皮层。

性能检测4激光共聚焦显微镜观察细胞摄取行为

将处于对数生长期的HDF和HaCaT细胞以每皿3.0×10⁵个细胞，分别接种于35mm共聚焦皿中培养24h后，加入含有游离RhoB(对比例15所得产品)、RhoB纳米载体(实施例1所得产品)的DMEM培养基分别孵育2h、4h。孵育后弃去培养基并用PBS溶液洗涤细胞3次，4％多聚甲醛固定和DAPI溶液染色各15min，使用激光共聚焦显微镜在60倍物镜下观察拍照。

结果如图3所示，其中，图3A和3C为HDF细胞，图3B和3D为HaCaT细胞，由图3可知，细胞共孵育2h时，游离RhoB组中细胞内荧光强度微弱，而包载RhoB的纳米载体荧光已进入细胞中，荧光强度明显强于游离RhoB。孵育4h时，RhoB纳米载体荧光强度进一步增强。实验结果表明，与游离RhoB比较，RhoB纳米载体能够更多的被HaCaT和HDF细胞摄取，将包载的活性物有效递送进入皮肤靶细胞发挥作用，增强功效成分的入胞效率和胞内积蓄。

性能检测5细胞增殖实验

将对数生长期的HDF和HaCaT细胞，分别以4×10³个/孔、8×10³个/孔的密度接种于96孔板中，每孔100μL，于5％CO₂、37℃条件下培养24h。每孔分别加入100μL含有实施例1制得的多效仿生脂质体透皮修护载体的DMEM完全培养基(多效仿生脂质体透皮修护载体的添加量为使其燕窝酸在培养基中的浓度为20、40和80μg/mL，即脂质体组)和含有对比例15所得组合物的DMEM完全培养基(其中游离燕窝酸在培养基中的浓度与脂质体组一致，即游离组分)，对照组加100μL DMEM完全培养基(即图4中的正常组)，每组3个复孔。继续培养48h，CCK-8法测细胞增殖率。

由图4可知，与正常组相比，一定浓度的游离成分及实施例1多效仿生脂质体透皮修护载体可促HaCaT和HDF细胞的增殖(P＜0.05或P＜0.01)，与游离成分比较，其中多效仿生脂质体透皮修护载体能显著促进HDF细胞的增殖(P＜0.05或P＜0.01)。

性能检测6ROS荧光强度检测

将HDF细胞以4×10⁴个/孔的密度，接种到24孔板，每孔500μL。培养24h后，弃上清。模型组加入含有0.6mmol/L H₂O₂ DMEM培养基，实验组分别加入0.6mmol/L H₂O₂与浓度为400mg/L的对比例1、对比例2、对比例3、对比例4、对比例5、对比例6、对比例7、对比例8、对比例9、对比例10、对比例11、对比例12、对比例13、对比例14、对比例15、实施例4、实施例5和实施例1所得多效仿生脂质体透皮修护载体的DMEM培养基，另设不加H₂O₂的空白对照组，继续培养24h后，加入含有20μM DCFH-DA的DMEM继续孵育20min，PBS清洗3次，荧光显微镜观察荧光强度，收集细胞后用流式细胞仪检测荧光强度。以燕窝酸浓度为40μg/mL作为实验浓度，进行同浓度游离燕窝酸配制。

由表1可知，与模型组相比，对比例1-15、实施例4、实施例5与实施例1均能显著降低ROS荧光强度(P<0.01)。

与对比例1-4相比，实施例1能显著抑制ROS荧光强度(P<0.01)，说明纳米载体包裹燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种成分的抗氧化效果优于纳米载体包裹单一成分的燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)。

与对比例5-13相比，实施例1能显著抑制ROS荧光强度(P<0.01)，说明实施例1将燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种活性成分组合复配制备的多效仿生脂质体透皮修护载体的抑制ROS荧光强度优于三种或者两种活性物任意组合(p<0.01)，说明活性成分联合使用，有协同增效的作用。

实施例1与对比例14相比，燕窝酸、维生素E(生育酚)、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)四者的重量配比不在本发明的范围内，导致ROS抑制率下降，无法发挥最佳的效果。

实施例1与实施例4和实施例5相比，当燕窝酸与维生素E的质量比为(2-4):1时，细胞胞内ROS抑制的效果优于燕窝酸与维生素E其他质量比制备的脂质体。

与游离组合物(对比例15)相比，游离成分ROS的抑制率为13.74％(即(模型组AU-游离组合物AU)/模型组AU*100％)，实施例1的多效仿生脂质体透皮修护载体ROS的抑制率为36.76％；与游离成分比较，实施例1的多效仿生脂质体透皮修护载体可显著降低HDF细胞胞内ROS水平(P＜0.01)，抵抗氧化应激造成的损伤，效果明显优于同剂量游离成分。实施例1能显著降低ROS荧光强度(P<0.01)。

表1平均荧光强度(AU)

注：**表示与模型组比较，p<0.01；##表示与对比例1-4比较，p<0.01；％％表示与对比例5-13比较，p<0.01；&&表示与对比例14比较，p<0.01；@@表示与对比例15比较，p<0.01；^^表示与实施例4和实施例5比较，p<0.01。

性能检测7保湿修复因子检测

将HaCaT细胞以2×10⁴个/孔的密度接种到多个24孔细胞培养板内，每孔500μL，于5％CO₂、37℃条件下培养24h。每孔分别加入100μL含有各实施例的多效仿生脂质体透皮修护载体的DMEM完全培养基(多效仿生脂质体透皮修护载体的添加量使其燕窝酸在培养基中的浓度为40μg/mL)和含有各对比例成分溶液的DMEM完全培养基(其中对比例在培养基中的浓度与实施例制备的多效仿生脂质体透皮修护载体中功效成分浓度一致)，空白对照组仅加100μL DMEM完全培养基，阳性组加入100μL含有维生素C的DMEM完全培养基(维生素C浓度为40μg/mL)，每组3个复孔，置于CO₂培养箱中孵育24h，取上清液，用Elisa试剂盒测试AQP3、FLG、HA和Claudin1含量。

由表2可知，对比例1-15、实施例4、实施例5与实施例1与空白对照组和阳性组相比，可显著促进细胞分泌FLG、AQP3、HA和Claudin1(P＜0.05或P＜0.01)。

与对比例1-4相比，各实施例能显著促进细胞分泌FLG、AQP3、HA和Claudin1(P＜0.05或P＜0.01)，说明纳米载体包裹燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种成分的保湿修复效果优于纳米载体包裹单一成分的燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)。

与对比例5-13相比，实施例1能显著促进细胞分泌FLG、AQP3、HA和Claudin1，说明各实施例将燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种活性成分组合复配制备的脂质体的保湿修复能力优于三种或者两种活性物任意组合(p<0.01)，说明活性成分联合使用，有协同增效的作用。

实施例1与对比例14相比，燕窝酸、维生素E(生育酚)、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)四者的重量配比不在本发明的范围内，促进细胞分泌FLG、AQP3、HA、Claudin1效果的下降，无法发挥最佳保湿修护的效果。

实施例1与实施例4和实施例5相比，当燕窝酸与维生素E的质量比为(2-4):1，促进细胞分泌FLG、AQP3、HA、Claudin1的效果优于燕窝酸与维生素E其他质量比制备的脂质体，说明了当燕窝酸与维生素E的质量比为(2-4):1，所制备的脂质体组合物保湿修复效果更显著。

与游离组合物(对比例15)相比，与游离成分相比，实施例可显著增加FLG、AQP3、HA和Claudin1含量(P＜0.01)，说明经包裹后的一种具有抗衰老、保湿及修复功效的脂质体组合物保湿修复效果更显著，明显优于同剂量游离成分。

表2细胞分泌FLG、AQP3、HA、Claudin1的含量

注：**表示与空白对照和阳性组比较，p<0.01；##表示与对比例1-4比较，p<0.01；％％表示与对比例5-11比较，p<0.01；&&表示与对比例12比较，p<0.01；@@表示与对比例13比较，p<0.01；^^表示与实施例4和实施例5比较，p<0.01。

性能检测8抗衰因子的检测

将HDF细胞以4×10⁴个/孔的密度接种到多个24孔细胞培养板内，每孔500μL，于5％CO₂、37℃条件下培养24h。每孔分别加入100μL实施例1、实施例4、实施例5以及对比例1-15所得的产品的DMEM完全培养基(各实施例和对比例所得产品的添加量使其功效成分在培养基中的浓度为40μg/mL)，空白对照组仅加100μL DMEM完全培养基，每组3个复孔，模型组为加入100μL含有维生素C的DMEM完全培养基(维生素C浓度为40μg/mL)，置于CO₂培养箱中孵育24h，取上清液，用Elisa试剂盒测试MMP-1、MMP-3、ColⅠ和ColⅢ含量。

由表3可知，与模型组相比，对比例1-15、实施例4、实施例5和实施例1可显著降低细胞分泌的MMP-1和MMP-3含量以及显著促进细胞分泌的COL I、COL III含量。

与对比例1-4相比，实施例1能显著降低细胞分泌的MMP-1和MMP-3含量，显著促进细胞分泌的COL I、COL III含量，说明纳米载体包裹燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种成分的抗氧化效果优于纳米载体包裹单一成分的燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)。

与对比例5-13相比，实施例1能显著抑制细胞分泌的MMP-1和MMP-3，以及促进细胞分泌的COL I、COL III，说明实施例1将燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种活性成分组合复配制备的脂质体的促进胶原蛋白合成、抗衰效果优于三种或者两种活性物任意组合(p<0.01)，说明活性成分联合使用，有协同增效的作用。

实施例1与对比例14相比，燕窝酸、维生素E(生育酚)、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)四者的重量配比不在本发明的范围内，抑制细胞分泌MMP-1、MMP-3效果和促进细胞分泌COL I、COL III效果不如实施例1。

实施例1与实施例4和实施例5相比，当燕窝酸与维生素E的质量比为(2-4):1时，抑制细胞分泌MMP-1、MMP-3,和促进细胞分泌COL I、COL III效果的效果优于燕窝酸与维生素E其他质量比制备的脂质体。

与游离成分(对比例15)相比，实施例1可显著增加COLⅠ和COLⅢ含量及降低MMP-1和MMP-3含量。说明经包裹后一种多效仿生脂质体透皮修护载体的抗衰效果更显著，明显优于同剂量游离成分。

表3细胞分泌MMP-1、MMP-3、COL I、COL III的含量

注：**表示与模型组比较，p<0.01；##表示与对比例1-4比较，p<0.01；％％表示与对比例5-11比较，p<0.01；&&表示与对比例12比较，p<0.01；@@表示与对比例13比较，p<0.01；^^表示与实施例4和实施例5比较，p<0.01。

性能检测9酪氨酸酶活性和黑素生成含量研究

取处于对数生长期的B16F10细胞，以每孔5×10⁴个细胞的密度接种于多个24孔板，培养24h后，将细胞分为空白对照组、模型组和实验组，每组设3个复孔。模型组为仅加含有100nmol/Lα-MSH的DMEM完全培养基，实验组为分别加入含有100nmol/Lα-MSH和各对比例所得产物以及各实施例所得产物的DMEM完全培养基(各对比例和实施例的加入量为使功效成分在培养基中的为40μg/mL)，空白对照组仅加100μL DMEM完全培养基。继续培养48h后，每孔添加200μL含有1％(V％)TritonX-100的细胞裂解液，－80℃冷冻裂解30min，收集细胞裂解液离心，取100μL上清液于96孔板，并加入100μL 0.1％(W/V)L-多巴溶液，37℃孵育2h，用酶标仪于495nm波长下测量各孔的吸光度(A)。

再采用NaOH裂解法测定细胞内黑色的含量。取B16F10细胞以5×10⁴个/mL接种于多个6孔板中，每孔2mL，培养24h。按照实验分组加入100nMα-MSH进行诱导(除空白对照组)，构建α-MSH诱导的黑色素高表达模型，再加入含有100nmol/Lα-MSH和各对比例所得产物以及各实施例所得产物的DMEM完全培养基(各对比例和实施例的加入量为使功效成分在培养基中的为40μg/mL)，空白对照组仅加100μL DMEM完全培养基，模型组组加入100μL含有维生素C的DMEM完全培养基(维生素C浓度为40μg/mL)，每组设3个复孔。培养48h后，弃去上清液，用PBS清洗3次后，每孔加入300μL的1.0mmol/L NaOH溶液(含10％DMSO)，在80℃充分裂解细胞1h，于405nm波长处测各孔吸光度(A)。

由表4可知，与模型组比较，对比例1-15、实施例4、实施例5及实施例1可显著降低黑素细胞中酪氨酸酶活性和黑素含量。

与对比例1-4相比，实施例1能显著降低黑素细胞中酪氨酸酶活性和黑素含量，说明纳米载体包裹燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种成分的美白效果优于纳米载体包裹单一成分的燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)。

与对比例5-13相比，实施例1能显著降低黑素细胞中酪氨酸酶活性和黑素含量，说明实施例1将燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种活性成分组合复配制备的脂质体的美白效果优于三种或者两种活性物任意组合(p<0.01)，说明活性成分联合使用，有协同增效的作用。

实施例1与对比例14相比，燕窝酸、维生素E(生育酚)、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)四者的重量配比不在本发明的范围内，导致黑素细胞中酪氨酸酶活性和黑素含量的抑制效果下降，无法发挥最佳的效果。

实施例1与实施例4和实施例5相比，当燕窝酸与维生素E的质量比为(2-4):1时，黑素细胞中酪氨酸酶活性和黑素含量的抑制效果的效果优于燕窝酸与维生素E其他质量比制备的脂质体，进一步说明了，当燕窝酸与维生素E的质量比为(2-4):1时，可以显著抑制黑素细胞中酪氨酸酶活性和黑素含量的含量，有着更好的美白效果。

与游离成分(对比例15)比较。说明经包裹后的一种多效仿生脂质体透皮修护载体的美白效果更显著，明显优于同剂量游离成分。

表4酪氨酸酶活性和黑色素生成含量

组别	酪氨酸酶活性(％)	黑色素生成含量(％)
			空白对照组	47.55±3.21	67.82±3.21
模型组	99.90±4.23	100.00±4.23
			实施例1	80.62±2.66**##％％&&@@^^	87.09±2.26**##％％&&@@^^
实施例4	86.62±5.21**	90.02±1.93**
			实施例5	86.03±3.46**	90.21±1.96**
对比例1	92.79±3.54**	93.12±1.56**
			对比例2	92.15±2.18**	93.23±1.37**
对比例3	93.29±4.52**	93.78±2.08**
			对比例4	91.53±2.08**	93.56±1.84**
对比例5	91.02±2.54**	92.28±1.59**
			对比例6	90.98±4.13**	92.17±1.55**
对比例7	91.12±3.62**	92.32±1.82**
			对比例8	91.54±3.11**	92.08±2.05**
对比例9	92.03±2.05**	93.02±2.54**
			对比例10	92.12±4.07**	92.98±1.77**
对比例11	91.73±2.29**	92.65±2.13**
			对比例12	91.82±1.56**	92.39±1.82**
对比例13	91.08±2.05**	92.84±1.63**
			对比例14	89.94±1.65**	91.68±1.02**
对比例15	95.45±1.53**	98.06±2.93**

注：**表示与模型组比较，p<0.01；##表示与对比例1-4比较，p<0.01；％％表示与对比例5-11比较，p<0.01；&&表示与对比例12比较，p<0.01；@@表示与对比例13比较，p<0.01；^^表示与实施例4和实施例5比较，p<0.01。

性能检测10抗衰去皱效果评估

测试方法：选取200名健康女性(45～55岁)，分为20组，每组10人，分别使用实施例1～5和对比例1～15所得产品。参与者每天早晚两次使用样品，持续56天。在研究期间参与者不允许使用其他产品，使用样品56天后评估测试结果。试验开始前，测定参与者皮肤皱纹及皮肤弹性状况；使用产品7天、14天，28天和56天后，再分别测定参与者皮肤皱纹及皮肤弹性状况。其中，面部皮肤皱纹情况采用皮肤图像分析系统(Skin Visiometer SV600)测定；皮肤弹性采用皮肤弹性检测仪dual MPA580测定，并计算每组10人的平均值。

皱纹变化率(％)＝(使用实施例/对比例产品后各组皱纹平均值-使用前各组皱纹平均值)/使用前各组皱纹平均值*100％，表5中皱纹改善率为由公式计算出改变化率后取正值，结果如表5所示。

表5实施例1～5和对比例1～15产品使用不同时间后皱纹改善率

从表5可知，实施例1～5的产品使用后均有明显皱效果，使用时间越长，去皱效果越好。实施例1的去皱抗衰性能均明显优于对比例1～14，表明本发明所述纳米载体包裹燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种成分协同，才能最好发挥活性成分的去皱抗衰效果。与游离成分(对比例15)比较。说明经包裹后的一种多效仿生脂质体透皮修护载体的去皱抗衰性能，明显优于同剂量游离成分。

性能检测11保湿功效测试

测试样品：实施例1～5和对比例1～15所得产品

测试对象：选取200名健康女性(45～55岁)，分为20组，每组10人。每次测试之前，让受试者在温度21±1℃，相对湿度50±5％RH的环境中实验室休息30分钟。

受试者用干面巾纸擦拭前臂，实验员在受试者双手前臂内侧标注1个面积为3cm×3cm的测试区域，作为测试样品使用区域；实验员测量前臂内侧皮肤经表皮失水率。实验员在测试区域贴上普通透明胶带，后撕下胶带，重复该操作15次，之后涂抹样品。

测试方法：用Tewameter TM 300(德国Courage&Khazak)测量胶带剥离操作之后的经皮失水，用以测量皮肤屏障功能的恢复情况，以评估测试样品的舒缓修护效果。

分别在以下4个时间段测试结果：在胶带剥离操作之后立即测量经皮失水(t＝0)、在胶带剥离操作之后10min、第1天和第3天再次测量经皮失水率。

测试结果：皮肤经皮失水变化率

表6皮肤角质层经皮失水变化率(％)

皮肤角质层经皮失水变化率＝(使用后经皮失水率测量值-使用前经皮失水率测量值)÷使用前经皮失水率测量值×100％，

使用前经皮失水测量值是指剥离后立即(t＝0)测量的经皮失水率。

此公式中的“测量值”是指Tewameter TM 210测得皮肤角质层经皮失水TEWL值，TEWL值越高，表明经皮肤散失的水分越多，角质层的屏障功能较差。所以TEWL值下降得幅度越大(即TEWL变化率的绝对值越大)说明对皮肤的保湿作用越强。

从上表6的结果可以看出，实施例1的TEWL变化率的变化率大于对比例1-14，证明本发明所述纳米载体包裹燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液(麦肤因)、精氨酸/赖氨酸多肽(芋螺肽)、维生素E(生育酚)四种成分均添加时，比仅添加其中一种或两种时更低，起到的修复皮肤屏障，锁水保湿效果更好。与游离成分(对比例15)比较。说明经包裹后的一种多效仿生脂质体透皮修护载体的修复皮肤屏障，锁水保湿效果，明显优于同剂量游离成分。

综上，可以看出，本发明通过四种功效成分的合理搭配，结合纳米载体技术，形成具有良好抗衰、美白、保湿修护的多效仿生脂质体透皮修护载体。

Claims (10)

1.一种多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，该多效仿生脂质体透皮修护载体包括活性成分和纳米载体，其中活性成分包括质量比为(1-10)：(2-8)：(0.1-1)：(0.5-4)燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液、精氨酸/赖氨酸多肽、维生素E。

2.根据权利要求1所述的多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，所述的纳米载体的原料包括磷脂、乳化剂、多元醇和水。

3.根据权利要求2所述的多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，以多效仿生脂质体透皮修护载体总质量为100％计，包括燕窝酸1-10％、酵母菌/大米发酵产物滤液2-8％、精氨酸/赖氨酸多肽0.1-1％、维生素E0.5-4％，磷脂0.1-2％、乳化剂5-30％、多元醇10-40％、水余量。

4.根据权利要求2所述的多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，所述磷脂包括大豆卵磷脂、氢化卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂中的一种或多种；

所述的乳化剂包括聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油类乳化剂、聚氧乙烯氢化蓖麻油类乳化剂、PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、聚甘油类乳化剂、泊洛沙姆、椰油基葡糖苷、甘油三酯类、吡咯烷酮类、聚甘油酸酯、PEG-30二聚羟基硬脂酸脂和鲸蜡硬脂醇聚醚类、吐温80、吐温20、吐温60、PEG-20氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油中的一种或多种。

5.根据权利要求2所述的多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，所述的多元醇包括甘油、丙二醇、1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-戊二醇、乙氧基二甘醇、1,2-己二醇、二丙二醇、异丙醇、聚乙二醇-200、PPG-10山梨醇、辛基十二醇、双丙甘醇中的一种或多种。

6.根据权利要求3所述的多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，所述的纳米载体的原料还包括质量百分含量1-2％的pH调节剂。

7.根据权利要求6所述的多效仿生脂质体透皮修护载体，其特征在于，所述的pH调节剂包括氨丁三醇。

8.一种如权利要求1所述多效仿生脂质体透皮修护载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将维生素E与乳化剂、多元醇、磷脂混匀，得到混合液A；

(2)将燕窝酸、酵母菌/大米发酵产物滤液、精氨酸/赖氨酸多肽、pH调节剂、多元醇与水混匀，得到混合液B；

(3)将混合液A倒入混合液B中混匀，得到混合液C；

(4)将混合液C进行纳米化处理得到多效仿生脂质体透皮修护载体。

9.根据权利要求8所述多效仿生脂质体透皮修护载体的制备方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述的混匀的条件为在30-65℃，搅拌均匀；

步骤(2)中，所述的混匀的条件为在30-65℃，搅拌均匀；

步骤(3)中，所述的混匀的条件为在30-65℃，搅拌均匀；

步骤(4)中，所述的纳米化处理为用高压均质机均质，压力为500-1200bar。

10.一种护肤品，其特征在于，含有如权利要求1-7中任一所述的多效仿生脂质体透皮修护载体。