CN112136034A - 用于流式细胞术分选样品的收集系统及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供用于流式细胞术分选样品的收集系统。所述收集系统的方面包括：收集容器，其具有被配置成与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器(例如，真空接收容器)的配合连接件可操作地耦合。本发明还提供所述收集系统的使用方法，以及组装件和套件(包括所述系统的组件)。

Description

用于流式细胞术分选样品的收集系统及其使用方法

相关专利申请的交叉引用

根据《美国法典》第35章第119节(e)项的规定，本专利申请案主张于2018年4月27日提交的编号为62/663,792的美国临时专利申请案提交日期的优先权；该专利中的内容以引用方式并入本文中。

背景技术

许多研究和治疗应用需要基于某些细胞特征对样品中的活细胞进行无菌纯化处理。例如，通常基于细胞大小、形状和表面蛋白表达使细胞与样品分离。所述已分离细胞构成同质群体，并且可以在实验室对其进行研究或在各种下游(包括临床)应用中将其施用于患者。在临床应用中，可以采集活细胞以用于细胞疗法中，在所述疗法中，将所述细胞引入患者体内以治疗某种疾病。当前根据细胞类型从样品中分选出细胞并进行纯化的方法包括：单细胞分选法、荧光激活细胞分选法、磁性细胞分选法和浮力激活细胞分选法。

在这些应用中，维持细胞活力和无菌性至关重要。在分选过程中，细胞活力和无菌性都可能受到影响，因为分选过程中的各种细胞制备和质量控制步骤可能会使细胞承受高应力和/或暴露于受污染的环境中。在分选过程中可能影响细胞活力的因素包括细胞类型、分选之前的细胞状况、细胞分选时承受的压力和细胞喷射速度以及细胞分选后进入的缓冲液或培养基。可能影响已分选细胞的无菌性的因素包括细胞分选仪、鞘液以及处理细胞样品的整个系统的无菌性。

发明内容

本发明提供用于流式细胞术分选样品的收集系统。所述收集系统的方面包括：收集容器，其具有被配置成与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器(例如，真空接收容器)的配合连接件可操作地耦合。本发明还提供所述收集系统的使用方法，以及组装件和套件(包括所述系统的组件)。

附图说明

结合附图阅读以下详细说明，可获得对本发明最全面的理解。附图中包括以下图示：

图1提供了根据本发明的实施例所述的收集系统的示意图。

图2提供了根据本发明的实施例所述的收集系统的某一实施例的示意图。

图3提供了根据本发明的实施例所述的收集系统的示意图。图4提供了根据本发明的实施例所述的收集系统的示意图。

图5提供了根据本发明的实施例所述的收集系统的示意图。

图6提供了根据本发明的实施例所述的收集系统的示意图。

具体实施方式

本发明提供用于流式细胞术分选样品的收集系统。所述收集系统的方面包括：收集容器，其具有被配置成与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器(例如，真空接收容器)的配合连接件可操作地耦合。本发明还提供所述收集系统的使用方法，以及组装件和套件(包括所述系统的组件)。

在更加详细地描述本发明之前，应当理解，本发明不限于所描述的特定实施例，因为在实际实施中一定会存在差异。还应当理解，本文中使用的术语仅用于描述特定实施例，而无意限制本发明构思，本发明的范围将仅由所附权利要求书限定。

在提供数值范围的情况下，应当理解，该范围的上限和下限之间的每个中间值以及在该范围内的任何其他规定值或中间值都包含在本发明的范围内。除非上下文另有明确规定，否则每个中间值应低至下限单位的十分之一。这些较小范围的上限和下限可独立地包括在较小范围内，并且也包括在本发明内，需遵守所述范围内任何特别排除的限值的要求。在所述范围包括一个或两个限值的条件下，排除了那些所包括限值中的任一个或两个的范围也包括在本发明内。

本文中提出的某些范围在数值前带有术语“大约”。本文中使用术语“大约”的目的是为其后的精确数字以及与该术语之后数字接近或近似的数字提供文字支持。在确定某一数字是否接近或近似于具体列举的数字时，接近或近似的未列举数字在其出现的上下文中可以是基本上等同于所具体列举数字的数字。

除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。尽管与本文所描述的方法和材料类似或等同的方法和材料也可用于本发明的实施或测试中，但下文描述了具有代表性的示例性方法和材料。

在本说明书中引用的所有出版物和专利通过引用方式并入本文中，犹如每一单独出版物或专利被具体地和单独地表明通过引用方式并入，且通过引用并入本文的目的是公开和描述与引用的出版物相关的方法和/或材料。任何出版物的引用均是针对其在申请日之前公开的内容，并且不应将其解释为承认由于之前的发明使得本发明无权早于此类出版物。此外，所提供的出版日期可能与实际出版日期不同，可能需要单独确认。

需要注意的是，如本文和所附权利要求书中所使用的，单数形式的“一”、“一个”和“所述/该”包括复数指代对象，除非上下文另有明确说明。还应注意，可以起草权利要求以排除任何可选要素。因此，该陈述旨在作为使用诸如“单独”、“仅”等与陈述权利要求要素有关的专用术语或使用“否定”限制的前置基础。

在阅读本发明后，以下内容对所属领域的技术人员来说是显而易见的，本文所描述和列出的每个单独的实施例都具有分层的组分和特征，这些组分和特征可在不脱离本发明的范围和精神的情况下与其他几个实施例中任一实施例的特征进行快速分解或合并。可按陈述的事件顺序或逻辑上可能的任何其他顺序实施任何陈述的方法。

尽管为了语法的流畅性已经或将要描述该设备和方法，并进行功能上的说明，但应明确理解，除非《美国法典》第35章有明确规定，否则任何情况下都不得将权利要求解释为必须受“方式”或“步骤”的限制，而应按照等效物的司法原则与权利要求中所述定义的含义和等效物的完整范围相符，当明确按照《美国法典》第35章第112节的规定编写权利要求时，权利要求应与《美国法典》第35章第112节中的法定等效物完全相符。

收集系统

如上所述，本发明的方面包括用于接收来自流式细胞仪的流式细胞术分选样品的收集系统。“流式细胞术分选样品”是指由一个或更多个细胞组成的组合物，所述细胞是流式细胞仪支持的分选过程的产物，即，采用流式细胞仪对样品中的细胞进行分选的方案。因此，可以利用本文所述的收集系统收集的流式细胞术分选样品是由一颗或多颗流式细胞术分选颗粒(例如，流式细胞术分选细胞)组成的组合物。除已分选颗粒外，为其配置本文所述的收集系统的流式细胞术分选样品还可以包括一种以上的其他组分，例如液体培养基等。

本文所述的收集系统可以包括一根或更多根管或类似容器，其被配置成接收来自流式细胞仪的流体，例如流式细胞术分选样品或废液。在一些情况下，所述收集系统的一根或更多根管被配置成接收来自流式细胞仪分选块的流体。在一些情况下，所述收集系统的一根或更多根管可与所述分选块的一个或更多个出口以流体连通方式耦合，其中，每根管可与单独的出口耦合。在一些情况下，所述一根或更多根管可以是分选管、废物管或加盖管，例如，下文更为详细地描述的管。本发明的收集系统可以具有分选管，其被配置成接收来自流式细胞仪的流式细胞术分选样品。在一些情况下，所述收集系统的分选管被配置成接收来自流式细胞仪分选块的流式细胞术分选样品。所述分选管可以接收来自流式细胞仪(例如，流式细胞仪的分选块)的样品，并将所接收的样品引导至收集容器中。在一些情况下，所述分选管以最大限度地减少流式细胞术分选样品与所述收集容器各种内表面(例如，壁)之间的接触的方式，将所述流式细胞术分选样品引导至收集容器中。在使用过程中，所述分选管可被配置成减少(如无法消除)分选流与所述分选管内表面的接触，例如，使所述分选管的纵向轴线与所述分选流的纵向轴线对齐。所述分选管可以与所述收集容器耦合(例如，连接)，或者可以是所述收集容器的组成部分。所述分选管可以相对于所述收集容器的表面安置于任何合适的位置；例如，所述分选管可以安置于所述收集容器的顶面、所述收集容器的侧表面或所述收集容器的底面。所述分选管可以具有任何合适的形状或结构；例如，所述分选管可以是管、圆锥体、漏斗等。所述分选管可以具有任何合适的尺寸。在一些情况下，所述分选管的长度范围为5cm至25cm；例如，所述分选管的长度范围可以是5cm至20cm、5cm至15cm或5cm至10cm。在一些情况下，所述分选管的内径范围为1mm至25mm；例如，所述分选管的直径范围可以是1mm至20mm、1cm至15cm或1cm至10cm。所述分选管在远离所述分选块的一端可以包括引导件。所述引导件可以是任何合适的形状；例如，所述引导件可以是圆锥形或圆柱形。在一些情况下，所述引导件被配置为膨胀式圆锥体；例如，所述引导件可以是圆锥体，其具有从所述圆锥体中心向外扩展的壁。在一些情况下，所述引导件的长度范围为5cm至25cm；例如，所述引导件的长度范围可以是5cm至20cm、5cm至15cm或5cm至10cm。

在一些情况下，本文所述的收集系统包括废物管，其被配置成接收来自所述流式细胞仪的废液。在一些情况下，所述收集系统的废物管被配置成接收来自流式细胞仪分选块的废液。所述废物管可以接收来自流式细胞仪(例如，流式细胞仪的分选块)的废液，并将所接收的废液引导至废物接收位置(例如，废物容器)中。所述废物管可以具有任何合适的形状或结构；例如，所述废物管可以是管、圆锥体、漏斗等。所述废物管可以具有任何合适的尺寸。在一些情况下，所述废物管的长度范围为5cm至25cm；例如，所述分选管的长度范围可以是5cm至20cm、5cm至15cm或5cm至10cm。在一些情况下，所述废物管的内径范围为1mm至25mm；例如，所述废物管的直径范围可以是1mm至20mm、1cm至15cm或1cm至10cm。

在一些情况下，本文所述的收集系统包括加盖管。可以给所述管加盖，使流过所述管的流体流动受阻。可以给所述管加盖，以维持所述系统的无菌性，并促使流体流过与所述分选块耦合的其他管，例如，分选管和废物管。所述加盖管的第一端可与分选块的出口耦合，且可以密封其第二端。所述管的第二端可以用任何合适的盖帽或盖密封。或者，在这种情况下，可以采用任何密封盖来盖住所述分选块的出口，例如，以维持其无菌性，其中替代性密封盖包括盖帽、盖等。

所述分选管和引导组件(例如，如上所述的分选管和引导组件)可以由任何合适的材料制成，包括以下详述的材料。

本文所述的收集系统可以进一步包括收集容器。所述收集容器可以接收和收集来自流式细胞仪的流式细胞术分选样品。如上所述，所述收集容器可以具有与流式细胞仪(例如，流式细胞仪的分选块)存在液滴接收关系的分选管。在一些情况下，所述收集容器可与所述流式细胞仪分选块的出口直接耦合；例如，无分选管的容器可与流式细胞仪分选块的出口直接连接。所述收集容器可以提供用于收集流式细胞术分选细胞产物的无菌环境。无菌环境是指无或基本上无活菌或其他微生物的环境。所述系统的收集容器可以具有任何适于收集流式细胞术分选样品的合适配置。在一些情况下，所述容器的容积范围为1mL至100mL；例如，所述容器的容积范围可以是1mL至90mL、1mL至80mL、1mL至70mL、1mL至60mL、1mL至50mL、1mL至40mL、1mL至30mL、1mL至20mL或1mL至10mL。在一些情况下，所述容器的容积为200mL或以下，例如，150mL或以下、100mL或以下、80mL或以下、70mL或以下、60mL或以下、50mL或以下、40mL或以下、30mL或以下、20mL或以下或10mL或以下。

根据需要，所述收集容器可以具有刚性或柔性壁。在一些情况下，所述收集容器包括一个或更多个刚性组件(例如，壁)，其中，所述一个或更多个刚性组件构成了所述容器。“刚性”是指组件(例如，壁)无法弯曲，也不会在作用力下发生形变，其不具有柔性。在这种情况下，所述容器可以具有任何合适的配置。在此等实施例的一些情况下，所述收集容器被配置为管。虽然在此等情况下所述管的尺寸可能发生变化，但是在一些情况下，所述管的最大内径范围为10至100mm，例如，25至75mm。在所述容器包括刚性组件的情况下，所述容器可以由任何合适的材料制成。可以采用任何与流体样品(例如，生物样品)相容的合适材料，包括金属、玻璃(例如，派热克斯玻璃、硼硅酸盐玻璃)、陶瓷或塑料。在某些实施例中，所述容器由塑料制成，例如，硬质塑料、聚合材料或热塑性材料。例如，合适的塑料可以包括但不限于聚碳酸酯、聚氯乙烯(PVC)、聚氨酯、聚醚、聚酰胺、聚酰亚胺或所述热塑性塑料的共聚物，例如，PETG(经乙二醇改性的聚对苯二甲酸乙二醇酯)及其他聚合塑性材料。在某些实施例中，所述颗粒分选模块壳体由聚酯制成，其中目的聚酯可以包括但不限于聚(对苯二甲酸亚烷基酯)，例如，聚(对苯二甲酸乙二醇酯)(PET)、瓶级PET(基于单乙二醇、对苯二甲酸和其他共聚单体(例如间苯二甲酸、环己烯二甲醇等)制成的共聚物)、聚(对苯二甲酸丁二醇酯)(PBT)和聚(对苯二甲酸己二醇酯)；聚(己二酸亚烷基酯)，例如，聚(己二酸乙二醇酯)、聚(1,4-己二酸丁二醇酯)和聚(己二酸己二醇酯)；聚(辛二酸亚烷基酯)，例如，聚(辛二酸乙二醇酯)；聚(癸二酸亚烷基酯)，例如，聚(癸二酸乙二醇酯)；聚(ε-己内酯)和聚(β-丙内酯)；聚(间苯二甲酸亚烷基酯)，例如，聚(间苯二甲酸乙二醇酯)；聚(2,6-萘-二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(2,6-萘-二羧酸乙二醇酯)；聚(磺酰基-4,4'-二苯甲酸亚烷基酯)，例如，聚(磺酰基-4,4'-二苯甲酸乙二醇酯)；聚(对亚苯基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(对亚苯基二羧酸乙二醇酯)；聚(反式-1,4-环己烷二基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(反式-1,4-环己烷二基二羧酸乙二醇酯)；聚(1,4-环己烷-二亚甲基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(1,4-环己烷-二亚甲基二羧酸乙二醇酯)；聚([2.2.2]-二环辛烷-1,4-二亚甲基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚([2.2.2]-二环辛烷-1,4-二亚甲基二羧酸乙二醇酯)；乳酸聚合物和共聚物，例如，(S)-聚丙交酯、(R,S)-聚丙交酯、聚(四甲基乙交酯)和聚(丙交酯-共-乙交酯)；以及双酚A、3,3'-二甲基双酚A、3,3',5,5'-四氯双酚A、3,3',5,5'-四甲基双酚A的聚碳酸酯；聚酰胺，例如，聚(对亚苯基对苯二甲酰胺)；聚酯，例如，聚对苯二甲酸乙二醇酯，例如，Mylar^TM聚对苯二甲酸乙二醇酯等。

在一些情况下，所述收集容器是柔性容器，例如，袋子。“柔性”是指使所述收集容器相较于其原始形状发生弯曲或屈曲且无任何明显的结构变化，例如，撕裂、破裂、穿孔等。例如，柔性样品容器可以相较于其原始形状发生屈曲和/或变形，同时仍保持密封层状态，防止所述样品容器内的流体与周围环境接触。在一些情况下，所述柔性容器由杨氏模量不超过1GPa的柔性材料制成，例如，0.7GPa或以下，包括0.5GPa或以下，例如，0.3GPa或以下、0.1GPa或以下、0.05GPa或以下、0.01GPa或以下。在一些情况下，所述收集容器被配置为袋子。在这些情况下，所述柔性收集容器可以由任何合适的材料制成。目的容器包括基于乙烯-醋酸乙烯酯(EVA)的容器，例如，EVA冻存袋、CRYOCTYTETM冻存袋(Baxter HealthcareCorporation，伊利诺伊州迪尔菲尔德)、

低温冻存袋(CharterMedical，北卡罗来纳州温斯顿-塞勒姆)、ORIGEN CRYOSTORETM冻存袋(OriGenBioMedical，得克萨斯州奥斯汀)。

如有需要，所述收集容器可以具有细胞收集位置。“细胞收集位置”是指所述收集容器内用于接收、收集和/或储存流式细胞术分选样品的位置。所述细胞收集位置可以位于所述收集容器内的任何合适位置。例如，在所述收集容器是管(例如，如上所述的管)的情况下，所述管可以包括限定所述细胞收集位置的底部。所述管的底部可以是适于从诸如所述流式细胞仪的分选块中收集流式细胞术分选样品液滴的任何形状。在一些情况下，所述管具有平底或圆底。在一些情况下，所述管的底部包括限定所述细胞收集位置的圆锥形底部。在一些情况下，所述管的底部包括限定所述细胞收集位置的圆柱形底部。所述细胞收集位置可以容纳任何合适体积的样品。在一些情况下，所述细胞收集位置可以容纳的样品体积范围为1mL至50mL、1mL至25mL、1mL至15mL或1mL至10mL。如上所述，所述细胞收集位置可以具有任何适于收集流式细胞术分选细胞产物的合适形状；例如，所述细胞收集位置可以是圆锥形、圆柱形、扁平的、圆形等。

在某些实施例中，所述系统的收集容器可以包括样品输出端。所述样品输出端可使所述收集容器的细胞收集位置与真空接收容器的配合连接件(例如，下文进一步详细描述的配合连接件)可操作地耦合。在一些情况下，所述样品输出端包括流体管线，例如，用于将流式细胞术分选细胞产物从所述收集容器的细胞收集位置输送至真空接收容器中的管线。如有需要，所述输出端可以用于样品的无菌输送。所述流体管线可以具有任何合适的配置；例如，所述流体管线可以是管状流体管线。在一些情况下，所述流体管线是刚性流体管线。在某些实施例中，所述流体管线是柔性(即，挠性)流体管线。所述样品输出流体管线可以由任何合适的材料制成，其中所述材料包括但不限于上文所述的容器相关材料。所述样品输出流体管线可以具有任何合适的长度。在一些情况下，所述样品输出流体管线的长度范围为5cm至50cm，例如，5cm至40cm、5cm至30cm、5cm至20cm或5cm至10cm。所述样品输出流体管线可以具有任何合适的直径。在一些情况下，所述样品输出流体管线的内径范围为1mm至20mm，例如，1mm至15mm、1mm至10mm、1mm至5mm或1mm至2mm。

在一些情况下，所述样品输出流体管线包括被配置成与收集容器的细胞收集位置可操作地耦合的第一端；以及包括用于真空接收容器的配合连接件的第二端，这使得流式细胞术分选样品可以从所述细胞收集位置经由所述样品输出端流入真空接收容器。所述流式细胞术分选样品可以于所述样品输出端的第一端(即，近端)进入所述样品输出端，其中所述近端可与所述细胞收集位置耦合。所述流式细胞术分选样品可以于所述样品输出端的第二端(即，远端)从所述样品输出端中流出。所述第二端(即，所述样品输出端的远端)可以包括配合连接件。在一些情况下，所述样品输出端包括与另一组件(例如，容器、配合连接件等)密封或焊接在一起的一端或多端。在一些情况下，所述样品输出端的第一端具有适用于所述收集容器的焊接接头，例如，所述第一端可以与所述收集容器焊接在一起。在一些情况下，所述样品输出端的第二端具有适用于配合连接件的焊接接头，例如，所述第二端可以与所述配合连接件焊接在一起。在一些情况下，所述样品输出端的第二端包括多个配合连接件。

所述配合连接件是被配置成使所述样品输出端的远端与真空接收容器可操作地(例如，以流体连通方式)耦合的连接件。在某些实施例中，所述配合连接件是所述样品输出端的组成部分；例如，所述配合连接件具有适用于所述样品输出端的焊接接头，例如，所述配合连接件与所述样品输出端的一端(例如，远端)焊接在一起。所述配合连接件可以使所述样品输出端与真空接收容器耦合。所述配合连接件可以在所述样品输出端的一端与所述真空接收容器之间提供无菌连接件。在一些情况下，所述配合连接件包括与所述样品输出端(例如，样品输出流体管线)可操作地连接的穿刺构件。在一些情况下，所述穿刺构件是从所述样品输出端的一端开始延伸的刚性结构件，例如，与样品输出流体管线的一端连接的空心针。所述穿刺构件可以通过诸如刺穿真空接收容器的表面(例如，真空接收容器的隔膜)，使所述配合连接件附接于所述真空接收容器上。在一些情况下，所述穿刺构件可以在其刺穿所述真空接收容器的表面之后，插入所述真空接收容器中。在一些情况下，流式细胞术分选细胞产物可以从所述收集容器的细胞收集位置，经由样品输出流体管线和穿刺构件流入真空接收容器。所述配合连接件可以包括单端穿刺构件或具有单个暴露端的穿刺构件，例如，用于刺穿所述真空接收容器的表面的穿刺构件。在一些情况下，用于使所述样品输出端与真空接收容器耦合的所述配合连接件包括与所述样品输出端可操作地连接的管状构件。所述管状构件可以连接至或接纳注射器针头，具体如下文所述。在一些情况下，所述管状构件被配置成在所述注射器针头插入所述管状构件时，确保实现气密连接。流式细胞术分选细胞产物可以从所述收集容器的细胞收集位置，经由样品输出流体管线和管状构件流入所述注射器。在一些情况下，所述样品输出端包括使所述样品输出端与一个或更多个真空接收容器耦合的多个配合连接件。所述样品输出端可以包括至少具有如上所述的穿刺构件的配合连接件，以及至少具有如上所述的管状构件的配合连接件。在一些情况下，所述样品输出包括具有至少两个配合连接件的接头(例如，Y型接头)，其中每个配合连接件可与真空接收容器单独耦合。在一些情况下，所述至少两个配合连接件包括用于附接于真空接收容器(例如，真空管)的穿刺构件。在一些情况下，所述至少两个配合连接件包括用于连接或接纳真空接收容器(例如，注射器)的针头的管状构件。在一些情况下，所述接头的至少一个配合连接件包括穿刺构件，并且所述接头的至少另一个配合连接件包括管状构件。

如上所述，所述系统可以包括真空接收容器。在某些实施例中，所述真空接收容器在使用过程中通过诸如穿刺构件等与所述配合连接件可操作地耦合。所述真空接收容器可被配置成经由样本输出端和配合连接件，接收来自所述收集容器的细胞收集位置的流式细胞术分选细胞产物。“真空接收容器”是指包括真空内部空间的容器。在一些情况下，所述真空接收容器是包括真空内部空间以及由隔膜密封的开口的容器。在一些情况下，所述真空接收容器是用于接收样品的空气抽空式气密管状容器。所述真空接收容器可以是任何合适的空气抽空式无菌容器，例如，真空采血管或真空管。在一些情况下，所述真空接收容器是包括真空内部空间以及由柱塞密封的开口的容器。在一些情况下，所述真空接收容器是具有用于接收样品的针头以及容纳可推拉柱塞的针筒的注射器。所述真空接收容器可以由任何合适的材料制成，例如，但不限于聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚苯乙烯、抗冲改性聚苯乙烯、玻璃等。所述真空接收容器可以具有任何合适的容积，所述容积范围为，例如，1ml至15ml、1ml至10ml、1ml至5ml或1ml至2ml。在某些情况下，目的真空接收容器包括BD

采血管。合适的真空接收容器请参阅以下出版物，例如，编号如下的美国专利：5,344,611；5,326,535；5,320,812；5,257,633；以及5,246,666，这些专利中的内容以引用方式并入本文。在某些实施例中，目的真空接收容器包括_____________注射器。合适的真空接收容器请参阅诸如第_2,756,748号美国专利，所述专利中的内容以引用方式并入本文。在一些情况下，所述系统包括多个真空接收容器。所述真空接收容器可与多个样品输出端耦合，每个样品输出端具有至少一个可与各真空接收容器耦合的配合连接件。

所述系统可以进一步包括通过诸如焊接接头(例如，如上所述的接头)与所述收集容器以流体连通方式耦合的培养基输入端，例如，用于将培养基传输至所述收集容器或传输来自所述容器的培养基的培养基输入端。所述培养基输入端可以将一定量的液体培养基输送至所述收集容器中。在一些情况下，所述培养基输出端包括流体管线。所述流体管线可以具有任何合适的配置；例如，所述流体管线可以是管状流体管线。在一些情况下，所述流体管线是刚性流体管线。在某些实施例中，所述流体管线是柔性流体管线。在一些情况下，所述培养基输入端包括可密封或可焊接的一端或多端；例如，所述培养基输入端的第一端具有适用于所述收集容器的焊接接头，例如，所述第一端可以与所述收集容器焊接在一起。所述培养基输入流体管线可以具有任何合适的长度。在一些情况下，所述培养基输入流体管线的长度范围为5cm至50cm，例如，5cm至40cm、5cm至30cm、5cm至20cm或5cm至10cm。所述培养基输入流体管线可以具有任何合适的直径。在一些情况下，所述培养基输入流体管线的直径范围为1mm至20mm，例如，1mm至15mm、1mm至10mm、1mm至5mm或1mm至2mm。在一些情况下，所述系统包括多个培养基输入端。在某些实施例中，所述培养基输入端具有与培养基源(例如，培养基供应容器)耦合的第二端。在此等情况下，所述培养基供应容器包括液体培养基，其中所述液体培养基的性质可能有所不同。所述培养基供应容器中可能存在的液体培养基的示例包括但不限于：细胞营养培养基、细胞保存培养基等。

如上所述，有关所述收集系统的任何流体连接件(例如，在所述收集系统内和/或在所述收集系统与其他组件(例如，培养基供应容器等)之间)可以根据需要通过无菌管焊接制成。可以采用任何合适的无菌管焊接系统和材料。

对于上文大致描述的收集系统，现结合相应附图更为详细地审查六个具体实施例。在图1-6所示的实施例中，收集系统包括一个与

采血管(BectonDickinson，新泽西州富兰克林湖)和/或一支注射器集成的收集容器。所述方法利用所述

采血管和/或注射器的真空度，通过对所述收集容器中的样品提供适当的真空度来减少细胞回收损失。可以采用多根/支

采血管和/或注射器来从所述分选容器中完全取出整个样品，同时使所述系统中的流体损失较小。

图1示出了根据本发明的实施例所述的无菌收集系统的示意图。细胞分选仪的分选块100将已分选细胞作为已分选颗粒流输送至收集容器(即，收集管130)中。分选管120可与所述分选块的出口耦合，并将所述已分选颗粒流引导至收集管130中。与收集管130连接的直型分选管120可最大限度地减少细胞在分选时与收集管130的壁接触的几率。此外，所述分选管的纵向轴线与所述已分选颗粒流的纵向轴线对齐，以最大限度地减少颗粒(例如，所述已分选颗粒流中的细胞)与所述分选管内表面的接触。通过在已分选颗粒落入位于所述分选收集管底部的培养基中之前，最大限度地减少所述已分选颗粒与分选管和/或收集管130的壁的接触，从而减少细胞损失，提高细胞活力。直型分选管120可在样品落入位于分选收集管130底部的培养基中之前，最大限度地减少样品在分选收集管130中聚集的可能性，这有助于提高细胞活力，减少细胞回收损失。将所述已分选细胞收集在分选收集管130的圆锥形底部。培养基输入管160与分选收集管130耦合。培养基输入管160可以通过焊接接头与分选收集管130连接。PEEK管140插入分选收集管130内部。PEEK管140的第一端安置于收集已分选细胞的分选收集管130的圆锥形底部。PEEK管140的第二端与样品输出管150的第一端连接。样品输出管150的第二端包括配合元件170，所述配合元件被配置成使输出管150的内部与

采血管180的内部以流体连通方式耦合。配合元件170可与样品输出管150的第二端焊接或密封在一起。配合元件170包括用于刺穿

采血管180的隔膜的针。在

采血管180与配合元件170连接后，将已分选细胞的等分试样抽吸入

采血管180中。

图2示出了根据本发明的另一实施例所述的无菌收集系统的示意图。细胞分选仪的分选块200将已分选细胞输送至收集容器(即，收集袋220)中。分选管210可与所述分选块的出口耦合，并将所述已分选细胞引导至收集袋220中。所述分选管具有膨胀式圆锥体270，所述圆锥体位于所述分选管中远离分选块200的一端。与收集袋220连接的直型分选管210和膨胀式圆锥体270可最大限度地减少细胞在分选时与收集袋220的壁接触的几率。此外，所述分选管的纵向轴线与所述已分选颗粒流的纵向轴线对齐，以最大限度地减少颗粒(例如，所述已分选颗粒流中的细胞)与所述分选管内表面的接触。通过在已分选颗粒落入位于所述收集袋底部的培养基中之前，最大限度地减少所述已分选颗粒与分选管和/或收集袋220的壁的接触，从而减少细胞损失，提高细胞活力。直型分选管210和膨胀式圆锥体270可在样品落入位于收集袋220底部的培养基中之前，最大限度地减少样品在收集袋220中聚集的可能性，这有助于提高细胞活力，减少细胞回收损失。可以将所述细胞收集在收集袋220的底部。收集袋220含有集成圆锥体设计，这有助于使所述细胞落入所述袋的底部，以最大限度地减少细胞损失。培养基输入管230可与收集袋220耦合。培养基输入管230可以通过焊接接头与收集袋220连接。样品输出管240可与收集袋220连接。培养输出管240的第一端可以通过焊接接头与收集袋220连接。样品输出管240的第二端包括配合元件250，所述配合元件被配置成使输出管240的内部与

采血管260的内部以流体连通方式耦合。配合元件250可与样品输出管240的第二端焊接或密封在一起。配合元件240包括用于刺穿

采血管260的隔膜的针。在

采血管260与配合元件250连接后，将已分选细胞的等分试样抽吸入

采血管260中。

图3示出了根据本发明的实施例所述的无菌收集系统的示意图。细胞分选仪的分选块300将已分选细胞作为已分选颗粒流输送至收集容器(即，收集管304)中。分选管303可与所述分选块的出口耦合，并将所述已分选颗粒流引导至收集管304中。废物管线302与所述分选块的第二出口耦合，而分选块300将废液输送至废物管线302。加盖管301与分选块300的第三出口耦合。可以用一个简单的盖帽或盖盖住开口，而无需采用加盖管。与收集管304连接的直型分选管303可最大限度地减少细胞在分选时与收集管304的壁接触的几率。此外，所述分选管的纵向轴线与所述已分选颗粒流的纵向轴线对齐，以最大限度地减少颗粒(例如，所述已分选颗粒流中的细胞)与所述分选管内表面的接触。通过在已分选颗粒落入位于所述分选收集管底部的培养基中之前，最大限度地减少所述已分选颗粒与分选管303和/或收集管304的壁的接触，从而减少细胞损失，提高细胞活力。直型分选管303可在样品落入位于分选收集管304底部的培养基中之前，最大限度地减少样品在分选收集管304中聚集的可能性，这有助于提高细胞活力，减少细胞回收损失。将所述已分选细胞收集在分选收集管304的圆锥形底部。PEEK管310插入分选收集管304内部。PEEK管310的第一端安置于收集已分选细胞的分选收集管304的圆锥形底部。PEEK管310的第二端与样品输出管305的第一端连接。样品输出管305的第二端包括两个配合元件306和308中的一个元件或两个元件。配合元件306被配置成使输出管305的内部与

采血管307的内部以流体连通方式耦合。配合元件306可与样品输出管305的第二端焊接或密封在一起。配合元件306包括用于刺穿

采血管307的隔膜的针。在

采血管307与配合元件306连接后，将已分选细胞的等分试样抽吸入

采血管307中。配合元件308被配置成使输出管305的内部与注射器309的内部以流体连通方式耦合。配合元件308可与样品输出管305的第二端焊接或密封在一起。配合元件308包括用于连接或接纳注射器309的针头的管。在注射器309与配合元件308连接后，将已分选细胞的等分试样抽吸入注射器309中。如有需要，可以密封配合元件308的任一出口(如闲置)，例如，以维持所述系统的无菌性。

图4示出了根据本发明的另一实施例所述的无菌收集系统的示意图。细胞分选仪的分选块400将已分选细胞作为已分选颗粒流输送至两个收集容器(即，收集管403和410)中，其中每根管分别接收来自所述分选块的单独出口(例如，第一出口和第二出口)的已分选颗粒流中的已分选细胞。分选管401和409可分别与所述分选块的出口(例如，第一出口和第二出口)耦合，并将所述已分选颗粒流分别引导至收集管403和410中。废物管线402与所述分选块400的出口(例如，第三出口)耦合，而分选块400将废液输送至废物管线402。分别与收集管403和410连接的直型分选管401和409可最大限度地减少细胞在分选时与收集管403和410的壁接触的几率。此外，每根分选管的纵向轴线与所述已分选颗粒流的纵向轴线对齐，以最大限度地减少颗粒(例如，所述已分选颗粒流中的细胞)与所述分选管内表面的接触。通过在已分选颗粒落入位于所述分选收集管底部的培养基中之前，最大限度地减少所述已分选颗粒与分选管401和409和/或收集管403和410的壁的接触，从而减少细胞损失，提高细胞活力。直型分选管401和409可在样品落入位于所述分选收集管底部的培养基中之前，最大限度地减少样品在分选收集管403和410中聚集的可能性，这有助于提高细胞活力，减少细胞回收损失。将所述已分选细胞收集在分选收集管403和410的圆锥形底部。PEEK管415和416分别插入分选收集管403和410内部。PEEK管415和416的第一端分别安置于收集已分选细胞的分选收集管403和410的圆锥形底部。PEEK管415和416的第二端分别与样品输出管404和411的第一端连接。样品输出管404的第二端包括两个配合元件405和407中的一个元件或两个元件。样品输出管411的第二端包括两个配合元件412和417中的一个元件或两个元件。配合元件405和412被配置成使输出管404和411的内部与

采血管406和413的内部以流体连通方式耦合。配合元件405和412可与样品输出管404和411的第二端分别焊接或密封在一起。配合元件405和412分别包括用于刺穿

采血管406和413的隔膜的针。在

采血管406和413分别与配合元件405和412连接后，将已分选细胞的等分试样分别抽吸入

采血管406和413中。配合元件407和417被配置成使输出管404和411的内部与注射器408和414的内部以流体连通方式耦合。配合元件407和417可与样品输出管404和411的第二端分别焊接或密封在一起。配合元件407和417各自包括用于连接或接纳注射器408和414的针头的管。在注射器408和414分别与配合元件407和414连接后，将已分选细胞的等分试样分别抽吸入注射器408和414中。如有需要，可以密封配合元件407和414的任一出口(如闲置)，例如，以维持所述系统的无菌性。

图5示出了根据本发明的另一实施例所述的无菌收集系统的示意图。细胞分选仪的分选块500将已分选细胞作为已分选颗粒流输送至两个收集容器(即，收集管503和509)中，其中每根管分别接收来自所述分选块的单独出口(例如，第一出口和第二出口)的已分选颗粒流中的已分选细胞。收集管503和509可分别与所述分选块的出口(例如，第一出口和第二出口)耦合，并将所述已分选颗粒流引导至所述收集管底部。收集管503和509与所述分选块直接连接。废物管线501与所述分选块500的出口(例如，第三出口)耦合，而分选块500将废液输送至废物管线501。将所述已分选细胞收集在分选收集管503和509的圆锥形底部。PEEK管502和510分别插入分选收集管503和509内部。PEEK管502和510的第一端分别安置于收集已分选细胞的分选收集管503和509的圆锥形底部。PEEK管502和510的第二端分别与样品输出管504和511的第一端连接。样品输出管504的第二端包括两个配合元件505和507中的一个元件或两个元件。样品输出管511的第二端包括两个配合元件512和514中的一个元件或两个元件。配合元件505和512被配置成使输出管504和511的内部与

采血管506和513的内部以流体连通方式耦合。配合元件507和514可与样品输出管504和511的第二端分别焊接或密封在一起。配合元件505和512分别包括用于刺穿

采血管506和513的隔膜的针。在

采血管506和513分别与配合元件505和512连接后，将已分选细胞的等分试样分别抽吸入

采血管506和513中。配合元件507和514被配置成使输出管504和511的内部与注射器508和515的内部以流体连通方式耦合。配合元件507和514可与样品输出管504和511的第二端分别焊接或密封在一起。配合元件507和514各自包括用于连接或接纳注射器508和515的针头的管。在注射器508和515分别与配合元件507和514连接后，将已分选细胞的等分试样分别抽吸入注射器508和515中。如有需要，可以密封配合元件507和514的任一出口(如闲置)，例如，以维持所述系统的无菌性。

图6示出了根据本发明的另一实施例所述的无菌收集系统的示意图。细胞分选仪的分选块600将已分选细胞输送至收集容器(即，收集袋604)中。分选管603可与所述分选块的出口耦合，并将所述已分选细胞引导至收集袋604中。废物管线602与所述分选块的第二出口耦合，而分选块600将废液输送至废物管线602。加盖管601与分选块600的第三出口耦合。与收集袋604连接的直型分选管603可最大限度地减少细胞在分选时与收集袋604的壁接触的几率。此外，所述分选管的纵向轴线与所述已分选颗粒流的纵向轴线对齐，以最大限度地减少颗粒(例如，所述已分选颗粒流中的细胞)与所述分选管内表面的接触。通过在已分选颗粒落入位于所述收集袋底部的培养基中之前，最大限度地减少所述已分选颗粒与分选管603和/或收集袋604的壁的接触，从而减少细胞损失，提高细胞活力。直型分选管603可在样品落入位于收集袋604底部的培养基中之前，最大限度地减少样品在收集袋604中聚集的可能性，这有助于提高细胞活力，减少细胞回收损失。可以将所述细胞收集在收集袋604的底部。收集袋604含有集成圆锥体设计，这有助于使所述细胞落入所述袋的底部，以最大限度地减少细胞损失。培养基输入管606可与收集袋604耦合。培养基输入管606可以通过焊接接头与收集袋604连接。样品输出管605可与收集袋604连接。培养输出管605的第一端可以通过焊接接头与收集袋604连接。样品输出管605的第二端包括两个配合元件607和608中的一个元件或两个元件。配合元件607被配置成使输出管605的内部与

采血管609的内部以流体连通方式耦合。配合元件607可与样品输出管605的第二端焊接或密封在一起。配合元件607包括用于刺穿

采血管609的隔膜的针。在

采血管609与配合元件607连接后，将已分选细胞的等分试样抽吸入

采血管609中。配合元件608被配置成使输出管605的内部与注射器610的内部以流体连通方式耦合。配合元件608可与样品输出管605的第二端焊接或密封在一起。配合元件608包括用于连接或接纳注射器610的针头的管。在注射器610与配合元件608连接后，将已分选细胞的等分试样抽吸入注射器610中。如有需要，可以密封配合元件608的任一出口(如闲置)，例如，以维持所述系统的无菌性。

流式细胞仪系统

本发明的各方面进一步包括流式细胞仪系统，其中所述流式细胞仪系统包括与收集系统(例如，如上所述的收集系统)可操作地耦合的分选型流式细胞仪。流式颗粒分选系统(例如，分选流式细胞仪)用于基于所述颗粒的至少一种被测特征对流体样品中的颗粒进行分选。在流式颗粒分选系统中，流体悬浮液中的颗粒(例如分子、与分析物结合的微珠或个别细胞)以流的形式穿过检测区域，在所述检测区域内，传感器检测流中含有的所述类型的待分选颗粒。传感器在检测所述类型的待分选颗粒时，触发一种分选机制，所述机制选择性地分离出目的颗粒。

通常通过使流体介质穿过检测区域来进行颗粒感测，在所述检测区域内，所述颗粒暴露于来自一台或更多台激光器的辐照光下，并且测定所述颗粒的光散射和荧光特性。颗粒或其组分用荧光染料标记以便进行检测，且各种不同的颗粒或组分可以通过用光谱特性不同的荧光染料标记来同时加以检测。采用一台或更多台光电传感器进行检测，以便对每种不同的荧光染料发出的荧光进行独立测定。

流式颗粒分选系统的一种类型是静电分选类型。在静电分选仪中，流体悬浮液从喷嘴中喷射而出，使其振动，从而使所述流破碎成均匀的离散液滴。所述分选机制包括与所述流连通的液滴充电装置，以在液滴与喷射流脱离时，对含有所述类型的待分选颗粒的液滴进行充电。所述液滴流穿过由两块带相反电荷的偏转板建立的横向静电场。含有所述类型的待分选颗粒的带电液滴的偏转方向和数量与所述液滴电荷的极性和大小有关，而且所述带电液滴会被收集在不同的收集容器中。不带电的液滴穿过静电场时不会发生偏转，且会被收集在中央容器中。

分选型流式细胞仪的各方面请参阅编号如下的美国专利：3,960,449；4,347,935；4,667,830；4,704,891；4,770,992；5,030,002；5,040,890；5,047,321；5,245,318；5,317,162；5,464,581；5,483,469；5,602,039；5,620,842；5,627,040；5,643,796；5,700,692；6,372,506；6,809,804；6,813,017；6,821,740；7,129,505；7,201,875；7,544,326；8,140,300；8,233,146；8,753,573；8,975,595；9,092,034；9,095,494和9,097,640；这些专利中的内容以引用方式全文并入本文。在一些情况下，所述分选型流式细胞仪是BectonDickinson细胞分选仪，例如，BD Biosciences InfluxTM细胞分选仪、BD BiosciencesFACSAriaTMIII和BD FACSAriaTMFusion细胞分选仪、BD Biosciences FACSJazzTM细胞分选仪、BD Biosciences FACSMelodyTM细胞分选仪等。

在一些情况下，所述流式细胞仪包括分选块。所述分选块可被配置成将已分选样品输送至收集容器(例如，如上所述的收集容器)中。如上所述，所述收集容器可以具有与所述分选块存在液滴接收关系的分选管；例如，所述分选管可以接收来自所述分选块的流式细胞术分选细胞产物(例如，液滴形式的产物)，并将所述流式细胞术分选细胞产物引导至所述收集容器中。在一些情况下，所述分选块将已分选样品输送至分选管中，所述分选管具有与所述分选块的开口耦合的第一端以及与所述收集容器耦合的第二端。所述分选块可以是本领域已知的任何分选块，例如，第6,880,414号美国专利中所述的分选块，所述专利的内容以引用方式全文并入本文。

在某些实施例中，受关注的是具有无菌、一次性颗粒分选模块的无菌细胞分选仪。在此等情况下，所述颗粒分选模块包括封闭式壳体，其具有用于使所述壳体与颗粒分选系统耦合的对准件；位于所述壳体近端的流动池喷嘴；与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域；液滴偏转器以及分选块。术语“封闭的”是指所述颗粒分选模块的每个组件完全包含在所述壳体内，而且所述组件已密封或与所述周围环境隔离。换言之，所述封闭式壳体内的组件未暴露于所述外部环境中，也不与所述外部环境接触。在一些实施例中，所述壳体所包含的所述组件与所述周围环境的气体环境隔离(即，未暴露于所述壳体外的气体中)。在其他实施例中，所述壳体所包含的所述组件与所述周围环境的流体环境隔离(即，未暴露于所述壳体外的任何流体中)。在其他实施例中，所述壳体所包含的所述组件是无菌的，且与所述周围环境中存在的活菌或其他微生物隔离(即，是无菌的)。关于所述分选型流式细胞仪的更多详细信息请参阅公开号为WO2017/180325、编号为PCT/US2017/024609的PCT专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。

给定流式细胞仪系统可与单个收集系统或多个收集系统可操作地耦合。因此，给定系统可以具有多根与所述流式细胞仪的分选块耦合的分选管；例如，系统可以包括至少1根、至少2根、至少3根、至少4根或至少5根分选管。在某些实施例中，所述系统包括多根分选管，每根分选管在远离所述分选块的一端具有引导件。在一些情况下，本发明的系统包括多个收集容器；例如，所述系统可以包括至少1个收集容器、至少2个收集容器、至少3个收集容器、至少4个收集容器或至少5个收集容器。所述多个收集容器中的每个容器均可以包括分选管，所述分选管用于接收来自流式细胞仪的分选块的流式细胞术分选细胞产物。

方法

本发明的各方面还包括用于对初始样品中的颗粒(例如，生物样品中的细胞)进行分选的方法。根据某些实施例的方法包括辐照含有流动池(例如，颗粒分选模块的流动池)询问区域内流体介质中的颗粒的初始样品；检测来自所述样品的光(例如，荧光)；以及将所述样品中的颗粒分选至收集容器(例如，如上所述的收集容器)中。在某些实施例中，所述样品是生物样品，并且方法包括分选和收集至少一种细胞。

在一些实施例中，所述初始样品是一种生物样品。依据常规含义，术语“生物样品”是指整个生物体、植物、真菌或动物组织的子集、细胞或组成部分，在某些情况下，可能见于血液、粘液、淋巴液、滑液、脑脊液、唾液、支气管肺泡灌洗液、羊水、羊膜脐带血、尿液、阴道液和精液中。因此，“生物样品”既指天然生物体或其组织的子集，也指利用所述生物体或其组织的子集制备的匀浆、裂解物或提取物，包括但不限于：血浆；血清；脊髓液；淋巴液；皮肤、呼吸道、胃肠道、心血管和泌尿生殖道切片；眼泪；唾液；乳汁；血细胞；肿瘤；器官等。生物样品可以是任何类型的生物组织，包括健康组织和病理组织(例如，癌组织、恶性组织、坏死组织等)。在某些实施例中，所述生物样品是一种液体样品，例如，血液或其衍生物(例如，血浆、眼泪、尿液、精液等)，其中，在某些情况下，样品是一种血液样品，包括全血样品，例如，血液通过静脉穿刺或手指针刺获取的血液(其中，血液在分析之前可能会也可能不会与任何试剂(例如防腐剂、抗凝剂等)混合)。

在某些实施例中，所述样品来源为“哺乳动物”，此术语被广泛地用于描述属于哺乳动物类的生物体，包括食肉动物(例如狗和猫)、啮齿类动物(例如小鼠、豚鼠和大鼠)以及灵长类动物(例如人、黑猩猩和猴子)。在某些情况下，受试者是人类。方法可适用于从任何发育阶段(即新生儿、婴儿、少年、青少年、成人)的男性和女性受试者中获取的样品，在其中某些实施例中，所述人类受试者是少年、青少年或成人。尽管本发明适用于取自人类受试者的样品，但应当理解，所述方法也可对取自其他动物受试者(即在“非人类受试者”中)的血液实施，这些受试者包括但不限于鸟类、小鼠、大鼠、狗、猫、家畜和马。

根据各种参数，例如，通过使特定荧光标记物附着在目的细胞上而确定的表型特征，可以将目的细胞从所述流体介质中分离出来。在一些实施例中，所述系统被配置成使确定包括靶细胞的受分析液滴发生偏转。可以采用标的方法对各种细胞进行分选。目的靶细胞包括但不限于干细胞、T细胞、树突细胞、B细胞、粒细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞、病毒细胞(例如，HIV细胞)、NK细胞、巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞和类红细胞。目的靶细胞包括具有合适的细胞表面标记物或抗原的细胞，其可以被合适的亲和剂或其共轭物捕获或标记。例如，所述靶细胞可以包括细胞表面抗原，例如CD11b、CD123、CD14、CD15、CD16、CD19、CD193、CD2、CD25、CD27、CD3、CD335、CD36、CD4、CD43、CD45RO、CD56、CD61、CD7、CD8、CD34、CD1c、CD23、CD304、CD235a、T细胞受体α/β、T细胞受体γ/δ、CD253、CD95、CD20、CD105、CD117、CD120b、Notch4、Lgr5(N-末端)、SSEA-3、TRA-1-60抗原、双唾液酸神经节苷脂GD2和CD71。在一些实施例中，所述靶细胞选自含有HIV的细胞、Treg细胞、抗原特异性T细胞群体、肿瘤细胞或来自全血、骨髓或脐带血的造血祖细胞(CD34+)。

在实施标的方法时，将一定量的初始流体样品注入流式细胞仪中。注入所述颗粒分选模块的样品量可能发生变化，例如，所述样品量的范围为0.001mL至1000mL，例如，0.005mL至900mL、0.01mL至800mL、0.05mL至700mL、0.1mL至600mL、0.5mL至500mL、1mL至400mL、2mL至300mL，包括5mL至100mL样品。

根据本发明的实施例的方法包括对样品中已标记的颗粒(例如，靶细胞)进行计数和分选。在实施标的方法时，先将包括所述颗粒的流体样品引入所述系统的流体喷嘴中。从所述流体喷嘴中流出后，所述颗粒基本上以每次一颗的方式穿过所述样品询问区域，在所述区域内，每颗颗粒受光源辐照；在一些情况下，根据需要分别记录每颗颗粒的光散射参数和荧光发射测量值(例如，两个或多个光散射参数以及一个或更多个荧光发射测量值)。所述流体介质中的颗粒基本上以每次一颗的方式经流路穿过所述颗粒分选模块中的样品询问区域，在所述区域内，每颗颗粒受光源照射。根据所询问的流体介质的性质，可以用光辐照0.001mm或以上的流体介质，例如，0.005mm或以上、0.01mm或以上、0.05mm或以上、0.1mm或以上、0.5mm或以上，包括用光辐照1mm或以上的流体介质。在某些实施例中，方法包括在所述样品询问区域内辐照所述流体介质的平面横截面，例如，用激光(如上所述)辐照。在其他实施例中，方法包括在所述样品询问区域内辐照预定长度的流体介质，例如，对应于扩散激光束或灯的辐照轮廓。

在某些实施例中，方法包括在流动池喷嘴孔口处或附近辐照所述流体介质。例如，方法可以包括在与所述喷嘴孔口相距约0.001mm或以上的位置辐照所述流体介质，例如，0.005mm或以上、0.01mm或以上、0.05mm或以上、0.1mm或以上、0.5mm或以上，包括与所述喷嘴孔口相距1mm或以上。在某些实施例中，方法包括辐照紧邻所述流动池喷嘴孔口的所述流体介质。

穿过感测区域时，采用检测器(例如，光电倍增管(或“PMT”))记录穿过每颗颗粒的光(在某些情况下，称之为前向光散射)；反射方向正交于穿过所述感测区域的颗粒流向的光(在某些情况下，称之为正交或侧向光散射)；以及在所述颗粒穿过所述感测区域且用所述能源照射时，用荧光标记物标记的颗粒发出的荧光。前向光散射(或FSC)、正交光散射(SSC)和荧光发射(FL1、FL2等)中的每一项都包括每颗颗粒(或每个“事件”)的单独参数。因此，例如，可以收集(记录)用两种不同的荧光标记物标记的颗粒的两个、三个或四个参数。

合适的光检测方案包括但不限于光学传感器或光电检测器，例如，有源像素传感器(APS)、雪崩光电二极管、图像传感器、电荷耦合装置(CCD)、增强型电荷耦合装置(ICCD)、发光二极管、光子计数器、辐射热测定器、热电检测器、光敏电阻、光伏电池、光电二极管、光电倍增管、光电晶体管、量子点光电导体或光电二极管及其组合以及其他光电检测器。在某些实施例中，采用电荷耦合装置(CCD)、半导体电荷耦合装置(CCD)、有源像素传感器(APS)、互补金属氧化物半导体(CMOS)、图像传感器或N型金属氧化物半导体(NMOS)图像传感器测定来自所述颗粒分选模块样品询问区域内受辐照的流体介质的光。在某些实施例中，用电荷耦合装置(CCD)测定光。在用CCD测定来自所述颗粒分选模块样品询问区域内受辐照的流体介质的所述光时，所述CCD的有效检测表面积可能发生变化，例如，所述表面积的范围为0.01cm2至10cm2、0.05cm2至9cm2、0.1cm2至8cm2、0.5cm2至7cm2，包括1cm2至5cm2。

对每颗颗粒的记录数据进行实时分析，或者根据需要将所述数据存储于数据存储器和分析工具(例如，计算机)中。第4,284,412号美国专利描述了配备有单个光源的目的流式细胞仪的配置及其用途，而第4,727,020号美国专利描述了配备有两个光源的流式细胞仪的配置及其用途。

在某些实施例中，根据需要，将所述颗粒暴露于激发光并在一个或更多个检测通道中测定每颗颗粒的荧光，从而对所述颗粒进行检测和唯一识别。检测通道中所发射的用于识别颗粒及与其相关的结合复合物的荧光可以在用单个光源激发后测定，或者可以在用不同光源激发后单独测定。如果采用单独的激发光源来激发所述颗粒标记物，则可以选择所述标记物，使得所有标记物对于所采用的每个激发光源而言都是可激发的。

某些实施例中的方法还包括诸如使用计算机等进行数据采集、分析和记录，其中多个数据通道记录来自每个检测器的数据，所述数据是有关在每颗颗粒穿过所述颗粒分选模块的样品询问区域时所发出的光散射和荧光的数据。在这些实施例中，分析包括对颗粒进行分类和计数，使得各颗粒以一组数字化参数值的形式存在。可以将标的系统设置为在选定参数下触发，以便将目的颗粒与背景和噪点区分开来。“触发”是指用于检测参数的预设阈值，并且可用作检测颗粒穿过所述光源的手段。检测到超出所选参数阈值的事件会触发所述颗粒的光散射和荧光数据采集。未采集所述介质中待分析的导致响应低于所述阈值的颗粒或其他组分的数据。所述触发参数可以是检测由于颗粒穿过所述光束而引起的前向散射光。而后，所述流式细胞仪检测并收集所述颗粒的光散射和荧光数据。

然后，基于针对整个群体收集的数据，通过“设门”来进一步分析特定目的子群体。为了选择合适的门，将所述数据绘制成图，以实现潜在子群体的最佳分离。可以通过在二维点阵图上绘制前向光散射(FSC)与侧向(即正交)光散射(SSC)的关系来执行此步骤。然后，选择颗粒的子群体(即，所述门内的细胞)，排除不在所述门内的颗粒。如有需要，可以利用计算机界面上的光标在所需子群体周围画一条线来选择所述门。然后，通过将所述颗粒的其他参数(例如荧光)绘制成图来进一步分析所述门内的颗粒。如有需要，可以将上述分析配置成给出所述样品中目的颗粒的计数。

在某些实施例中，运行所述系统以确定一个时间段，在所述时间段内，一个或更多个收集系统与已偏转液滴接收位置对准，例如，所述流式细胞仪分选块的输出端。在一些情况下，所述偏转信号包括初始偏转子信号和最终偏转子信号；并且运行所述系统，通过在所述时间段开始时发送初始偏转子信号来产生所述偏转信号，所述偏转信号将所述偏转器配置成使受分析液滴(如有)发生偏转。在某些情况下，方法包括在所述时间段结束时将最终偏转子信号发送至所述颗粒分选模块，所述偏转子信号将所述偏转器配置成避免使受分析液滴发生偏转。在一些实施例中，方法包括在所述时间段内，在单个受分析液滴发生偏转之后，将最终偏转子信号发送至所述颗粒分选模块，其中所述最终偏转子信号将所述偏转器配置成避免使受分析液滴发生偏转。

采用收集系统(例如，如上所述的收集系统)收集目的分选颗粒，例如，细胞。因此，所述方法的各方面可以包括使收集系统与流式细胞仪可操作地耦合，例如，以与所述流式细胞仪的输出端(例如分选块)存在接收关系。

在某些实施例中，所述方法包括使真空接收容器与收集系统的配合连接件可操作地耦合。所述真空接收容器可以在样品输出端的配合连接件的穿刺构件刺穿真空接收容器的表面之后，与所述配合连接件耦合；例如，所述配合连接件的穿刺构件可以刺穿所述接收容器的盖或盖帽，使得所述穿刺构件插入所述真空接收容器中。将所述真空接收容器与所述配合连接件耦合之后，可以依据所述真空接收容器中的真空度，将所述流式细胞术分选样品从所述收集容器的细胞收集位置拉出或抽出，而后经由所述样品输出端输送至所述真空接收容器中。在一些情况下，所述真空接收容器是一支注射器，而且所述注射器可以在其针头插入所述配合连接件的管状构件之后，与所述配合连接件耦合。在一些情况下，可以依据所述真空接收容器中的真空度(例如，通过拉动所述注射器的柱塞而产生的真空度)，将所述流式细胞术分选样品从所述收集容器的细胞收集位置拉出或抽出，而后经由所述样品输出端输送至所述真空接收容器中。给定方法可以包括根据需要仅将单个真空容器与所述配合连接件耦合，或者将两个或更多个真空容器依次与所述配合端耦合。

在一些情况下，所述方法进一步包括通过诸如以流体连通方式耦合的培养基输入端，将液体培养基引入所述收集容器。可以在任何时间将所述液体培养基引入收集容器，例如，在对所述液体细胞样品进行分选之前或之后；在将所述流式细胞术分选细胞产物输送至所述收集容器的细胞收集位置之前或之后；在将所述流式细胞术分选细胞产物从所述细胞收集位置取出之前或之后等。用于引入所述收集容器的合适液体培养基包括但不限于细胞营养培养基、细胞保存培养基等，例如，如上所述的培养基。所引入的液体培养基的体积可以是50mL或以下、40mL或以下、30mL或以下、20mL或以下或10mL或以下。

所述方法的方面可以进一步包括生产内部空间封闭的容器，其包含流式细胞术分选样品。在一些情况下，所述方法包括生产内部空间封闭的容器，其包含流式细胞术分选样品，且包括由隔膜密封的开口，例如，其中有一定量的流式细胞术分选细胞的

采血管。在某些实施例中，所述方法包括生一支注射器，其中具有一定量的流式细胞术分选细胞。所述容器可以提供适用于流式细胞术分选样品的无菌环境。所述容器可以是真空接收容器，所述容器已从诸如所述收集容器中接收了一定体积的流式细胞术分选样品。在一些情况下，所述流式细胞术分选样品是一种无菌分选样品，例如，由细胞分选仪(例如，如上所述的分选仪)产生的已分选样品。所述容器可以含有任何体积的流式细胞术分选样品。所述流式细胞术分选样品的体积可以是10mL或以下、5mL或以下、2mL或以下或1mL或以下。所述细胞术分选样品可以含有1011或以下个细胞、1010或以下个细胞、109或以下个细胞、108或以下个细胞、107或以下个细胞、106或以下个细胞、105或以下个细胞、104或以下个细胞、103或以下个细胞、500或以下个细胞、100或以下个细胞、10或以下个细胞或每毫升一个细胞。由于所述容器中的样品是流式细胞术分选样品，因此，除了所述一个或更多个目的分选细胞外，所述样品还可以包括通过所述分选过程引入的其他组分，例如，细胞标记物(例如荧光标记物)、鞘液组分、细胞营养培养基组分、细胞保存剂组分等。

效用

本文所述的系统和方法可用于各种应用中，在这些应用中，需要分析和分选流体介质内的样品(例如，生物样品)中的颗粒组分，然后储存已分选产物，例如，以供日后使用，例如用于治疗用途。本发明的实施例可以用于提高颗粒分选系统的无菌性，这有助于收集纯度更高的样品，减少受分析样品之间交叉污染的发生率，例如，在研究和高通量实验室测试中。

本发明的实施例可以用于可能需要将利用生物样品制备的细胞用于研究、实验室测试或用于治疗的应用中。在一些实施例中，标的方法和设备有助于获得利用目标流体或组织生物样品制备的单种细胞。例如，标的方法和系统有助于从流体或组织样品中获得细胞，以用作诸如癌症等疾病的研究或诊断试样。同样，标的方法和系统有助于从流体或组织样品中获得用于治疗的细胞。与传统的流式细胞术系统相比，本发明的方法和设备能够以更高的效率和更低的成本从生物样品(例如，器官、组织、组织碎片、流体)中分离和收集细胞。

本发明的实施例提供了封闭式分选设备和方法，这可以降低(如无法消除)以下一项或多项：待处理样品受污染的风险；操作员暴露于样品组分的风险，这在处理具有生物危害性的样品时至关重要；等等。

采用本文所述的系统和方法得到的流式细胞术分选样品可以在细胞治疗方案中或需要将无菌活细胞输注入受试者体内的任何应用中施用于受试者。可以通过施用流式细胞术分选样品进行治疗的病症包括但不限于血液疾病、免疫系统疾病、器官损伤等。

因此，本文所述的系统和方法可用于细胞治疗方案。细胞治疗方案是可能需要制备活细胞材料(包括，例如细胞和组织)并将其作为治疗剂引入受试者体内的方案。典型的细胞治疗方案可以包括以下步骤：样品采集、细胞分离、基因修饰、体外培养和扩增、细胞收获、减少样品体积和洗涤、生物保存、储存以及将细胞引入受试者体内。所述方案可以始于从受试者的源组织中采集活细胞和组织，以产生细胞和/或组织样品。所述样品可以通过任何合适的步骤来采集，所述步骤包括，例如，对受试者施用细胞动员剂；抽取受试者的血液；抽取受试者的骨髓等。采集样品之后，可以通过若干种方法进行细胞富集，所述方法包括，例如，基于离心的方法、基于过滤器的方法、淘析、磁性分选法、荧光激活细胞分选法(FACS)等。在一些情况下，可以通过任何合适的方法(例如，核酸酶介导的基因编辑)对所富集的细胞进行基因修饰。所述经基因修饰的细胞可以在体外进行培养、活化和扩增。在一些情况下，保存(例如低温保存)和储存所述细胞，以供日后使用，日后使用时，使所述细胞解冻，然后施用于患者体内，例如，可将所述细胞注入患者体内。

套件

本发明的各方面还包括套件，所述套件包括系统组件和组装件的任何组合，例如，如上所述的组件和组装件。在一些情况下，所述套件包括a)组装件，其包含：1)收集容器，其具有被配置成安置以与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及2)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与真空接收容器的配合连接件可操作地耦合；以及b)真空接收容器，例如，

采血管或注射器。在一些情况下，所述套件包括至少一个收集容器，所述容器可与流式细胞仪分选块的出口直接耦合。在一些情况下，所述套件包括用于与分选块的出口耦合的废物管。在某些实施例中，所述套件包括用于盖住与分选块耦合的管开口的管帽或盖。上文详细描述了合适的收集容器、分选管、样品输出端、配合连接件和真空接收容器。所述套件可以包括多个以下任一组件：上述容器、管、输出端、配合连接件和组件。如有需要，所述套件可以进一步包括一种或多种在应用中使用的其他组分，例如，试剂、缓冲液等。根据需要，任何或所有套件组成部分均可以装于无菌包装中。

除上述组成部分外，标的套件可以进一步包括说明书，其适用于采用所述套件的组成部分以实施标的方法等。所述说明书可以记录在合适的记录媒体上。例如，所述说明书可以印在基材上，例如，纸或塑料等。因此，所述套件中的说明书可以包装说明书、所述套件或其组成部分的容器(即，与包装或分包装有关)上的标签等的形式存在。在其他实施例中，所述说明书可以作为载于合适的计算机可读存储介质(例如，便携式闪存驱动器、CD-ROM、磁盘、硬盘驱动器(HDD)等)上的电子存储数据文件存在。在其他实施例中，所述套件中无纸质说明书，但提供了从远程源(例如，通过互联网)获取所述说明书的手段。所述实施例的一个示例是一个包括网址的套件，在所述网址中，可以查看和/或可以从中下载所述说明书。与所述说明书一样，用于获得所述说明书的手段也记录在合适的基材上。

虽然本文附有权利要求书，但本发明的范围还受以下条款限定：

1.一种流式细胞仪系统，所述系统包含：

a)分选型流式细胞仪；

b)收集容器，其具有与所述分选型流式细胞仪存在液滴接收关系的分选管；以及

c)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器的配合连接件可操作地耦合。

2.根据条款1所述的系统，其中所述收集容器包含刚性壁。

3.根据条款2所述的系统，其中所述收集容器被配置为管。

4.根据条款3所述的系统，其中所述管包含限定所述细胞收集位置的圆锥形底部。

5.根据条款1所述的系统，其中所述收集容器包含柔性壁。

6.根据条款5所述的系统，其中所述收集容器被配置为袋子。

7.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述分选管包含引导件。

8.根据条款7所述的系统，其中所述引导件被配置为膨胀式圆锥体。

9.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述样品输出端包含流体管线。

10.根据条款9所述的系统，其中所述流体管线包含管状流体管线。

11.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述配合连接件包含与所述样品输出端可操作地连接的穿刺构件或管状构件。

12.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述系统进一步包含与所述配合连接件可操作地耦合的真空接收容器。

13.根据条款12所述的系统，其中所述真空接收容器的真空度足以经由所述样品输出端通过在所述收集位置进行抽吸实现。

14.根据条款12或13中任一项所述的系统，其中所述真空接收容器是

采血管。

15.根据条款12或13中任一项所述的系统，其中所述真空接收容器是一支注射器。

16.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述系统进一步包含与所述收集容器以流体连通方式耦合的培养基输入端。

17.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述系统是无菌的。

18.根据前述条款中任一项所述的系统，其中所述系统包含焊接接头。

19.一种方法，其包含：

利用流式细胞仪系统对样品进行流式细胞术处理，所述系统包含：

a)具有分选块的流式细胞仪；

b)收集容器，其具有与所述分选块存在液滴接收关系的分选管；以及

c)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器的配合连接件可操作地耦合。

20.根据条款19所述的方法，其中所述收集容器包含刚性壁。

21.根据条款20所述的方法，其中所述收集容器被配置为管。

22.根据条款21所述的方法，其中所述管包含限定所述细胞收集位置的圆锥形底部。

23.根据条款19所述的方法，其中所述收集容器包含柔性壁。

24.根据条款23所述的方法，其中所述收集容器被配置为袋子。

25.根据条款19至24中任一项所述的方法，其中所述分选管包含位于远离所述分选块的一端的引导件。

26.根据条款25所述的方法，其中所述引导件被配置为膨胀式圆锥体。

27.根据条款19至26中任一项所述的方法，其中所述样品输出端包含流体管线。

28.根据条款27所述的方法，其中所述流体管线包含管状流体管线。

29.根据条款19至28中任一项所述的方法，其中所述配合连接件包含与所述样品输出端可操作地连接的穿刺构件或管状构件。

30.根据条款19至29中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包含使真空接收容器与所述配合连接件可操作地耦合。

31.根据条款30所述的方法，其中所述真空接收容器的真空度足以经由所述样品输出端通过在所述收集位置进行抽吸实现。

32.根据条款30至31中任一项所述的方法，其中所述真空接收容器是

采血管。

33.根据条款30或31中任一项所述的方法，其中所述真空接收容器是一支注射器。

34.根据条款30至33中任一项所述的方法，进一步包含使所述真空接收容器与所述配合连接件分离，并使第二真空接收容器与所述配合连接件耦合。

35.根据条款19至34中任一项所述的方法，其中所述系统进一步包含与所述收集容器以流体连通方式耦合的培养基输入端。

36.根据条款35所述的方法，其中所述方法进一步包含通过以流体连通方式耦合的培养基输入端，将液体培养基引入所述收集容器。

37.根据条款19至36中任一项所述的方法，其中所述系统是无菌的。

38.根据条款19至37中任一项所述的方法，其中所述样品包含一种血样。

39.根据条款38所述的方法，其中所述血样包含全血。

40.根据条款38所述的方法，其中所述血样包含一种非全血产品。

41.根据条款19至40中任一项所述的方法，其中所述流式细胞术处理包含分选所述样品中的一种或多种细胞。

42.根据条款41所述的方法，其中所述一种或多种细胞包含可用于细胞治疗应用的细胞。

43.一种组装件，其包含：

a)收集容器，其具有被配置成安置以与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及

b)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器的配合连接件可操作地耦合。

44.根据条款43所述的组装件，其中所述收集容器包含刚性壁。

45.根据条款44所述的组装件，其中所述收集容器被配置为管。

46.根据条款45所述的组装件，其中所述管包含限定所述细胞收集位置的圆锥形底部。

47.根据条款44所述的组装件，其中所述收集容器包含柔性壁。

48.根据条款47所述的组装件，其中所述收集容器被配置为袋子。

49.根据条款43至48中任一项所述的组装件，其中所述分选管包含位于远离所述分选块的一端的引导件。

50.根据条款49所述的组装件，其中所述引导件被配置为膨胀式圆锥体。

51.根据条款43至50中任一项所述的组装件，其中所述样品输出端包含流体管线。

52.根据条款51所述的组装件，其中所述流体管线包含管状流体管线。

53.根据条款43至52中任一项所述的组装件，其中所述配合连接件包含与所述样品输出端可操作地连接的穿刺构件。

54.根据条款43至53中任一项所述的组装件，其中所述组装件进一步包含与所述收集容器以流体连通方式耦合的培养基输入端。

55.根据条款43至54中任一项所述的组装件，其中所述组装件是无菌的。

56.根据条款43至55中任一项所述的组装件，其中所述组装件包含焊接接头。

57.一种内部空间封闭的容器，其包含流式细胞术分选细胞产物以及由隔膜或柱塞密封的开口。

58.根据条款57所述的容器，其中所述流式细胞术分选细胞产物包含血细胞。

59.根据条款57至58所述的容器，其中所述流式细胞术分选细胞产物包含已标记的细胞。

60.根据条款57至59中任一项所述的容器，其中所述容器由一种聚合材料制成。

61.根据条款60所述的容器，其中所述聚合材料选自由聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚苯乙烯和抗冲改性聚苯乙烯组成的组。

62.根据条款57至59中任一项所述的方法，其中所述容器由一种玻璃制成。

63.根据条款57至62中任一项所述的容器，其中所述容器是

采血管。

64.根据条款57或62中任一项所述的系统，其中所述容器是一支注射器。

65.一种样品输出流体管线，其包含被配置成与收集容器的细胞收集位置可操作地耦合的第一端；以及包含用于接收容器的配合连接件的第二端。

66.根据条款65所述的样品输出流体管线，其中所述流体管线是管状流体管线。

67.根据条款65或66所述的样品输出流体管线，其中所述配合连接件包含与所述样品输出流体管线可操作地连接的穿刺构件或管状构件。

68.根据条款66至67中任一项所述的样品出口流体管线，其中所述容器是真空接收容器。

69.根据条款68所述的样品出口流体管线，其中所述真空接收容器是

采血管。

70.根据条款68所述的样品出口流体管线，其中所述真空接收容器是一支注射器。

71.一种套件，其包含：

a)组装件，其包含：

1)收集容器，其具有被配置成安置以与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及

2)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与真空接收容器的配合连接件可操作地耦合；以及

b)接收容器。

72.根据条款71所述的套件，其中所述收集容器包含刚性壁。

73.根据条款72所述的套件，其中所述收集容器被配置为管。

74.根据条款73所述的套件，其中所述管包含限定所述细胞收集位置的圆锥形底部。

75.根据条款71所述的套件，其中所述收集容器包含柔性壁。

76.根据条款75所述的套件，其中所述收集容器被配置为袋子。

77.根据条款71至76中任一项所述的套件，其中所述分选管包含位于远离所述分选块的一端的引导件。

78.根据条款77所述的套件，其中所述引导件被配置为膨胀式圆锥体。

79.根据条款71至78中任一项所述的套件，其中所述样品输出端包含流体管线。

80.根据条款79所述的套件，其中所述流体管线包含管状流体管线。

81.根据条款71至80中任一项所述的套件，其中所述配合连接件包含与所述样品输出端可操作地连接的穿刺构件或管状构件。

82.根据条款71至81中任一项所述的套件，其中所述组装件进一步包含与所述收集容器以流体连通方式耦合的培养基输入端。

83.根据条款71至82中任一项所述的套件，其中所述真空接收容器包含真空内部空间以及由隔膜密封的开口。

84.根据条款83所述的套件，其中所述真空接收容器是

采血管。

85.根据条款71至83中任一项所述的套件，其中所述真空接收容器是一支注射器。

86.根据条款71至85中任一项所述的套件，其中所述套件是无菌的。

尽管为了达到清晰理解的目的采用图示和示例的方式详细描述了前述发明，但是鉴于本发明的教学意义，对于本领域普通技术人员显而易见的是，在不脱离所附权利要求书的精神或范围的情况下，可对其进行特定的变更和修改。

因此，前述内容仅说明了本发明的原理。应当理解，本领域技术人员将能够设计出各种结构，尽管这里没有明确表述或示出，但这些设计反应了本发明的原理，未超出本发明的精神和范围。此外，本文列举的所有示例和条件语言主要为了帮助读者理解本发明的原理和发明人为进一步拓展本领域所提供的构想，并且应解释为不受这些具体列举的示例和条件的限制。而且，本文中引用本发明的原理、方面和实施例及其特定示例的所有陈述旨在涵盖其在结构和功能上的等同物。此外，所述等同物拟包括目前已知的等同物和日后待开发的等同物，即，开发出的任何功能相同的原件且与结构无关。而且，无论在权利要求书中是否明确叙述了本发明的公开内容，都不会向公众披露其中的任何内容。

因此，本发明的范围并不限于本文中显示和描述的示例性实施例。相反，本发明的范围和精神通过所附权利要求书体现。在权利要求书中，只有当权利要求书的限制内容开头明确使用短语“用于……的手段”或“用于……的步骤”时，《美国法典》第35章第112节(f)或《美国法典》第35章第112节(6)明确定义为被援引；如果权利要求书的限制内容中未使用所述短语，则《美国法典》第35章第112节(f)或《美国法典》第35章第112节(6)未被援引。

Claims (15)

1.一种流式细胞仪系统，所述系统包含：

a)分选型流式细胞仪；

b)收集容器，其具有与所述分选型流式细胞仪存在液滴接收关系的分选管；以及

c)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器的配合连接件可操作地耦合。

2.根据权利要求1所述的系统，其中所述收集容器包含刚性或柔性壁。

3.根据前述权利要求中任一项所述的系统，其中所述分选管包含引导件。

4.根据前述权利要求中任一项所述的系统，其中所述样品输出端包含流体管线。

5.根据前述权利要求中任一项所述的系统，其中所述配合连接件包含与所述样品输出端可操作地连接的穿刺构件或管状构件。

6.根据前述权利要求中任一项所述的系统，其中所述系统进一步包含与所述配合连接件可操作地耦合的真空接收容器。

7.根据权利要求6所述的系统，其中所述真空接收容器的真空度足以经由所述样品输出端通过在所述收集位置进行抽吸实现。

8.根据权利要求6或7中任一项所述的系统，其中所述真空接收容器是

采血管。

9.根据权利要求6或7中任一项所述的系统，其中所述真空接收容器是一支注射器。

10.根据前述权利要求中任一项所述的系统，其中所述系统进一步包含与所述收集容器以流体连通方式耦合的培养基输入端。

11.根据前述权利要求中任一项所述的系统，其中所述系统是无菌的。

12.一种方法，其包含：

利用根据权利要求1至11中任一项所述的流式细胞仪系统对样品进行流式细胞术处理。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述样品包含一种血样。

14.一种组装件，其包含：

a)收集容器，其具有被配置成安置以与流式细胞仪的分选块存在液滴接收关系的分选管；以及

b)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与接收容器的配合连接件可操作地耦合。

15.一种内部空间封闭的容器，其包含流式细胞术分选细胞产物以及由隔膜或柱塞密封的开口。

Images