CN111944726A - 一种土壤微生物群调节剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于土壤微生物调节技术领域，具体涉及一种土壤微生物群调节剂及其制备方法和应用。本发明通过将酿酒酵母和黏红酵母采用特定的培养基进行培养，所得酵母共培养液经分离纯化得到简单粗蛋白，然后加入胃蛋白酶进行酶解产生酵母多肽，再与改性高岭土复合得到土壤微生物调节剂，可以刺激放线菌、固氮菌群、氨氧化、硝化细菌、溶磷菌、乳酸菌群的生长，还具有抑制病原菌的繁殖，平衡土壤微生物群数量的作用。
Description
技术领域
本发明属于土壤微生物调节技术领域，具体涉及一种土壤微生物群调节剂及其制备方法和应用。
背景技术
农业是我国的重要的支柱产业，而其中种植业是最重要的组成部分，为提高作物的生长与产量，传统农业采用大量使用农药与化肥的耕作模式，在促进作物的增产的同时，对环境造成了污染，大量没有被作物吸收的营养元素进入自然界加快了水体的富营养化。粗放农业发展模式，不但导致大量氮、磷资源浪费，还造成水体富营养化、土壤板结等问题。土壤结构改变、恶化与土壤土著微生物群的失衡，是导致土壤肥力下降，植物生长减缓的主要原因。土壤是农业生产的根本与保障，在目前，环保意识与市场竞争的双重压力下，种植业必须选择绿色、环保与节能的生产方式。其中，调节土壤微生物群的协调从而促进土壤的生产力是可以采用的较佳方式之一。
激活土壤微生物群，首先需要提高土壤微生物群的多样性，其次要增加有益微生物群的比例，如放线菌、固氮菌群、氨氧化、硝化细菌、溶磷菌、乳酸菌群等的相对丰度，平衡菌群的比例。激活土壤微生物群，就还能改善土壤结构，减缓土壤生产力退化的程度，尽可能减少化肥使用过程对土壤结构的影响，加速土壤中碳、氮、磷元素的活化，从而刺激植物的生长。在大量使用化肥与除草剂等化学品后，土壤微生物群会容易失衡(有益微生物与土著微生物大量减少)；单一化(相对丰度下降)氮、磷循环失调(通路受阻或者逆转)等，通过激活土壤微生物群，有望解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种土壤微生物群调节剂及其制备方法和应用，旨在解决现有土壤微生物群存在的容易失衡、单一化等问题。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
第一方面，本发明提供了一种土壤微生物群调节剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备酵母多肽：将酿酒酵母接种于S0培养基中进行培养，当氨氮去除率达到60％、总氮去除率达到50％、总磷去除率达到50％，且OD值大于1或细胞密度大于等于1.5×108个/mL时，将菌体离心过滤，然后接种于S1培养基中进行培养，当酵母蛋白含量增幅超过180％-200％时，将菌体离心过滤，得到多肽累积的酿酒酵母；
将黏红酵母接种于S0培养基中进行培养，当氨氮去除率达到70％、总氮去除率达到60％、总磷去除率达到50％，且OD值大于1或细胞密度大于等于1.5×108个/mL时，将菌体离心过滤，然后接种于S2培养基中进行培养，当酵母蛋白含量增幅超过180％-200％时，将菌体离心过滤，得到多肽累积的黏红酵母；
将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养，得到酵母共培养液；
所述酵母共培养液经离心洗涤去除培养基，得到酵母混合物；
将所述酵母混合物与水混合加热至47℃，再加入氢氧化钠至浓度为3％-4％，进行超声-碱液破壁处理，然后调节pH至中性，经离心处理，所得上清液为酵母上清液，所得沉淀经离心、干燥处理，得到酵母改性材料；
将所述酵母上清液在4℃下与95％乙醇混合，静置5h后离心，所得沉淀为酵母粗蛋白；
所述酵母粗蛋白与胃蛋白酶进行混合酶解处理，得到所述酵母多肽；
(2)制备改性高岭土：将偏高岭土、氧化钙、硅酸钠、所述酵母改性材料按照质量比为(80-85):(6-8):(2-4):(5-10)进行混合，然后加入10％的水粘合，经干燥、煅烧、过筛，得到所述改性高岭土；
(3)制备土壤微生物群调节剂：将步骤(1)所得酵母多肽与水按照1:10的质量比混合制成溶液，再加入步骤(2)所得改性高岭土混合吸附，且所述改性高岭土与所述溶液的质量比为1:25，得到所述土壤微生物群调节剂；
其中，所述S0培养基包括葡萄糖3g/L，Na2HPO428.73mg/L、NH4Cl30mg/L、K2HPO4100mg/L、KCl50mg/L、MgSO47H2O40mg/L，pH为7.0；
所述S1培养基是将小米、糙米、藜麦按照5:(2-3):(2-3)的质量比混合后过筛得到的第一混合物与所述S0培养基混合得到，且所述第一混合物与所述S0培养基的质量比为1:9；
所述S2培养基是将大米、大豆、玉米按照(4-5):(2-3):(2-4)的质量比混合后过筛得到的第二混合物与所述S0培养基混合得到，且所述第二混合物与所述S0培养基的质量比为1:8。
作为本发明的一种优选技术方案，将酿酒酵母接种于S1培养基中进行培养，或将黏红酵母接种于S2培养基中进行培养时，培养的条件是DO2-3mg/L，温度25℃，转速150rpm。
作为本发明的一种优选技术方案，将菌体离心过滤的步骤中，所述离心的转速为1000rpm。
作为本发明的一种优选技术方案，将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养的步骤中，所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母的加入量之比为1:2。
作为本发明的一种优选技术方案，将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养的步骤中，所述共生培养的条件是在25℃、150rpm下培养1d。
作为本发明的一种优选技术方案，所述酵母共培养液经离心洗涤去除培养基的步骤中，所述离心的条件是在10000rpm下离心10min。
作为本发明的一种优选技术方案，将所述酵母混合物与水混合加热至47℃，再加入氢氧化钠至浓度为3％-4％，进行超声-碱液破壁处理，然后调节pH至中性，经离心处理，所得上清液为酵母上清液，所得沉淀经离心、干燥处理，得到酵母改性材料的步骤中，所述超声-碱液破壁处理的时间为20min-25min；所述经离心处理的离心条件是在2000rom下离心20min；所述所得沉淀经离心的离心转速为10000rpm；所述干燥处理的温度为80℃。
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(2)中，所述煅烧的条件是在500℃下煅烧2h。
第二方面，本发明提供了一种土壤微生物群调节剂，该土壤微生物群调节剂是通过上述制备方法制备得到。
第三方面，本发明提供了土壤微生物调节剂在提高土壤微生物种群数量中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
首先，酵母在生长过程中能分泌不同的蛋白，本发明通过将酿酒酵母和黏红酵母采用特定的培养基进行培养，所得酵母共培养液经分离纯化得到简单粗蛋白，然后加入胃蛋白酶进行酶解产生酵母多肽，可以刺激放线菌、固氮菌群、氨氧化、硝化细菌、溶磷菌、乳酸菌群的生长，还具有抑制病原菌的繁殖，平衡土壤微生物群数量的作用。
其次，本发明通过将酵母多肽吸附于改性高岭土上进行保存，不仅有利于农业中的使用，而且通过高岭土的缓释功能，可以通过吸附酵母多肽和氮磷营养物，实现土壤的局部改善和营养缓释的效果，并且可以保持酵母多肽的稳定性。
再次，本发明采用特定的培养基对酿酒酵母和黏红酵母进行培养，这些特定培养基中都利用了谷物碎料作为原料对酿酒酵母和黏红酵母提供营养，具有绿色生产的优点。同时，考虑到粮食存储一段时间后会产生陈化的问题，通过将这些谷物碎料制成培养基，可以将陈化的粮食利用起来，进一步加工成农业生产所需的产品，使所得土壤微生物调节剂为绿色产品，实现绿色生产。
最后，从整体而言，本发明采用谷物制成的特定培养基培养酿酒酵母和黏红酵母，从而得到土壤微生物调节剂，从发酵生产开始所采用的步骤和参数即为了尽量保留生物肥料的营养，然后通过改性高岭土实现逐步释放营养物质的效果，所得土壤微生物调节剂综合利用了谷物与酵母发酵过程产生的多肽，配合营养元素，可以改善土壤根系微环境，有效调节土壤微生物群的数量、种类、比例和平衡性。
附图说明
图1为本发明实施例1使用土壤微生物调节剂前后土壤微生物的对比；
图2为本发明实施例1使用土壤微生物调节剂前后土壤酶活的对比；
图3为本发明实施例1使用土壤微生物调节剂前后土壤酶活的对比；
图4为本发明实施例2使用土壤微生物调节剂前后土壤微生物的对比；
图5为本发明实施例2使用土壤微生物调节剂前后土壤微生物数量的对比；
图6为本发明实施例2使用土壤微生物调节剂前后土壤酶活的对比；
图7为本发明实施例2使用土壤微生物调节剂前后土壤酶活的对比。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和技术效果更加清楚，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以下所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件进行；所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
本实施例提供了一种土壤微生物群调节剂的制备方法，步骤如下：
1.谷物原料的预处理与配制培养基
首先对谷物进行预处理，配方如下：
M1：其中谷物原料为小米、糙米、藜麦各组分的重量份为每100g五谷原料添加小米50g、糙米20g、小麦30g。混合后粉碎过100目筛后备用。
M2：其中谷物原料为大米、大豆、玉米各组分的重量份为每100g五谷原料添加大米50g、大豆30g、玉米20g。混合后粉碎过100目筛后备用。
S0液体培养基：葡萄糖3g/L、Na2HPO428.73mg/L、NH4Cl30mg/L、K2HPO4100mg/L、KCl50mg/L、MgSO47H2O40mg/L，并用1mMNaOH调整pH至7.0。
S1液体培养基：将M1按重量比例1：9加入S0，充分混合后配成悬浊液即为S1液体培养基(M1+S0)。
S2液体培养基：将M2按重量比例1：8加入S0，充分混合后配成悬浊液即为S2液体培养基(M2+S0)。
2.酵母的培养与蛋白、多肽的获得：
通过购买获得酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)与黏红酵母(Rhodotorulaglutinis)。
2.1酿酒酵母的扩大培养：
将经过灭菌的接种环从酿酒酵母种中挑选，放入1000mlYM液体培养基中，在25度摇床转速150rpm条件下好氧培养2天，2-3mg/L以上。然后10000rpm离心下离心，获得菌体。再转入1000ml液体培养基S0中进行培养。每隔3-4天，离心菌体，按1：1更换S0营养液。第三次开始隔天测定氨氮、总氮与总磷的去除率，当去除率分别达到70％、50％和50％，或细胞密度1.5*108个/ml，后1000rpm离心/过滤菌体，更换新等体积的S1液体培养基后进入第二阶段。
黏红酵母菌扩大培养：将经过灭菌的接种环从黏红酵母种中挑选，放入1000mlYM液体培养基中，在25度摇床转速150rpm条件下好氧培养2天，溶解氧控制在2-3mg/L以上。然后10000rpm离心下离心，获得菌体。再转入1000ml液体培养基S0中进行培养。每隔3-4天，离心菌体，按1：1更换S0营养液。从第三次开始隔天测定氨氮、总氮与总磷的去除率，当去除率分别达到70％、60％和50％为细胞密度1.5*108个/ml后1000rpm离心/过滤菌体，更换新等体积的S2液体培养基后进入第二阶段。
2.2两种酵母产多肽阶段培养：
第二阶段，酿酒酵母在S1液体培养基进行累积酵母蛋白的培养，培养条件为：DO2-3mg/L，温度25度，摇床转速150rpm条件下震荡培养3天，隔天测定氨氮、总氮与总磷的去除率，当去除率分别达到60％、50％和50％以上。更换等体积S1液体培养基，并从第二阶段测定蛋白含量，当蛋白含量增幅超过180％-200％时培养完成，离心/过滤后收集待用，菌体可以在25摄氏度保存24小时。
第二阶段，粘红酵母在S2液体培养基进行累积酵母蛋白的培养，培养条件为：DO2-3mg/L，温度25度，摇床转速150rpm条件下震荡培养3天，隔天测定氨氮、总氮与总磷的去除率，当去除率分别达到60％、50％和50％以上。更换等体积S2液体培养基，并从第二阶段测定蛋白含量，当蛋白含量增幅超过180％-200％时培养完成，离心/过滤后收集待用，菌体可以在25摄氏度保存24小时。
2.3酵母的蛋白多肽与沉淀物的获取：
经过培养的两种酵母重溶于S0液体培养基，按1：2的体积比混合，并在的方式在25℃，150r/min下进行共生培养1天。
然后将酵母共培养液10000rpm离心15min，除去培养基，用蒸馏水对经过离心酵母混合物洗涤三次，向1.5g的酵母混合物中加入15mL蒸馏水，并加热至47℃；再向酵母混合物溶液中缓慢加入NaOH粉末至NaOH的浓度达到3-4％，并不断搅拌防止过热。在47℃环境中，超声-碱液破壁20-25min，中间间歇停止30s；调节pH至7，2000rpm离心20min，取上清液，4℃冷却后制备多肽。沉淀物为酵母提取剩余物质，主要为结构多糖、纤维与细胞残体。剩余物通过10000rpm离心后，烘箱80摄氏度以下晾干，作为酵母改性材料备用。
酵母上清液于4℃环境中，加入3-4倍体积于上清液的冰镇95％乙醇，持续搅拌1min，静置5h，2000rpm离心20min，去上清液，所得沉淀用少量水轻轻洗去表面酒精，收集沉淀，即为酵母粗蛋白。按粗蛋白每25g加入0.5％-1％的质量比例的胃蛋白酶进行酶解，所得的肽分子量分布在二肽～十肽之间，大部分集中在三肽～七肽与10％以下少量氨基酸，获得酵母多肽。
3.土壤微生物群调节剂的制备与合成：
为保持酵母多肽的活性与便于使用，设计了特殊的制备方法。所得土壤微生物群调节剂由两部分组成，A酵母多肽，B改性高岭土。原理是利用改性高岭土，组成土壤微生物群调节剂的主要成分与吸附剂；然后将吸附剂与酵母多肽组分混合，将酵母多肽吸附于吸附剂上，得到土壤微生物群调节剂。
3.1改性高岭土制备：
改性高岭土分两步制作，第一步：获得偏高岭土，第二步：获得生物改性高岭土。偏高岭土可直接购买偏高岭土，或者采用高岭土经800℃煅烧2h后获得偏高岭土。
改性高岭土的组分为偏高岭土、氧化钙、硅酸钠、酵母改性材料。配方按质量比配制，偏高岭土占80％，氧化钙占6％，硅酸钠占4％，酵母改性材料占10％。所有组分均匀混合后按粉末与水的质量比加入10：1的水粘合后，烘干，再进行500℃煅烧2h，冷却后过100目，得到改性高岭土。
3.2制备土壤微生物激活剂：
纯水与酵母多肽按的质量比例为10：1进行溶解制成溶液，再将改性高岭土按高岭土与溶液质量比1：25的比例震荡混合吸附4h，获得土壤微生物群调节剂，不烘干直接使用或低温烘干后备用。
实施例2
本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于改性高岭土的配制是：偏高岭土占80％，氧化钙占5％，硅酸钠占4％，酵母改性材料占11％，。所有组分均匀混合后按粉末与水的质量比加入9：1的水粘合后，烘干，再进行500℃煅烧2h，冷却后过100目，得到改性高岭土。纯水与酵母多肽按的质量比例为10：1进行溶解制成溶液，再将改性高岭土按高岭土与溶液质量比1：25的比例震荡混合吸附4h，离心/过滤获取沉淀后，获得土壤微生物群调节剂，在50摄氏度以下低温烘干备用，可以半年内长期放置。
实验例1
在广州地区菜心种植过程中，按每周使用实施例1所得土壤微生物群调节剂1次，每平方米使用100g的比例施用。作物为大白菜种植30组，不施加土壤微生物群调节剂组做对比，生长期间一个月内使用4次，肥料使用照常，在使用土壤微生物群调节剂第一次后与第四周后分别取植物周边土壤进行分析。使用后测定土壤微生物与作物的变化，
土壤环境中，放线菌发挥着保障土壤健康的重要作用，不仅能加速土壤氮磷钾等养分的转化、循环，而且可通过营养抗性来抵御和抑制有害生物(土传病害)的生长繁殖，是评估土壤健康与安全的重要指示菌；而真菌是土壤微生物的重要组成部分，能够加快土壤物质循环，抑制土传病害等的发生，维护土壤安全与健康，是评价土壤安全与肥力的重要指标。具体结果如下：
在两次使用中，对土壤的含水率并没有明显的改变。但使用土壤微生物群调节剂后细菌总数、真菌总数与放线菌总数均比对照组要高，显示土壤微生物群调节剂能提高三大微生物种群的数目，其中随着时间推移，可以维持较好的效果(图1)。
然后对土壤酶活进行分析，分别跟踪碳(蔗糖酶)、氮(脲酶)、磷(碱性磷酸酶)、脱氢酶(呼吸)进行分析，尤其是土壤脱氢酶是一种胞内酶，在细胞外无活性，与土壤微生物活性正相关,，其活性可以表征土壤微生物活性和功能多样性。结果显示：土壤微生物群调节剂能提高四种酶活的活性，其中随着时间推移，可以维持比对照组较好的效果，显示通过促进微生物的活性的同时，也加快了了土壤的碳、氮、磷与呼吸活性的过程，对改善土壤微生物活性与促进植物生长有作用(图2-3)。
实验例2
在增城地区番茄幼苗种植过程中，按每周使用实施例2所得土壤微生物群调节剂1次，每平方米使用100g的比例施用。作物为大白菜种植30组，不施加土壤微生物群调节剂组作对比，生长期间一个月内使用4次，肥料使用照常，在使用土壤微生物群调节剂第一次后与第四周后分别取植物周边土壤进行分析。使用后测定土壤微生物与作物的变化，
结果如下：在两次使用中，对土壤的含水率与pH并没有明显的改变。显示土壤微生物群调节剂在1个月的连续使用中，没有明显改变土壤的结构，维持比较平稳的土壤水份、pH的变化。但使用土壤微生物群调节剂后细菌总数、真菌总数与放线菌总数均比对照组要高，显示在番茄幼苗的种植过程中，土壤微生物群调节剂能提高三大微生物种群的数目，其中随着时间推移，可以维持较好的效果。细菌是碳氮磷循环的主力，数量的提升反应土壤潜在活度的增加，真菌与放线菌对土壤难降解物的分解有重要的作用，使用土壤微生物群调节剂后，也看到明显得到加强，而且效果维持1个月以上(图4-5)。
然后对土壤酶活进行分析，分别跟踪碳(蔗糖酶)、氮(脲酶)、磷(碱性磷酸酶)、脱氢酶(呼吸)进行分析，尤其是土壤脱氢酶是一种胞内酶，在细胞外无活性，与土壤微生物活性正相关，其活性可以表征土壤微生物活性和功能多样性。结果显示：土壤微生物群调节剂能提高四种酶活的活性，其中随着时间推移，可以维持比对照组较好的效果，显示通过促进微生物的活性的同时，也加快了了土壤的碳、氮、磷与呼吸活性的过程，对改善土壤微生物活性与促进植物生长有作用(图6-7)。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备酵母多肽：将酿酒酵母接种于S0培养基中进行培养，当氨氮去除率达到60％、总氮去除率达到50％、总磷去除率达到50％，且OD值大于1或细胞密度大于等于1.5×108个/mL时，将菌体离心过滤，然后接种于S1培养基中进行培养，当酵母蛋白含量增幅超过180％-200％时，将菌体离心过滤，得到多肽累积的酿酒酵母；
将黏红酵母接种于S0培养基中进行培养，当氨氮去除率达到70％、总氮去除率达到60％、总磷去除率达到50％，且OD值大于1或细胞密度大于等于1.5×108个/mL时，将菌体离心过滤，然后接种于S2培养基中进行培养，当酵母蛋白含量增幅超过180％-200％时，将菌体离心过滤，得到多肽累积的黏红酵母；
将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养，得到酵母共培养液；
所述酵母共培养液经离心洗涤去除培养基，得到酵母混合物；
将所述酵母混合物与水混合加热至47℃，再加入氢氧化钠至质量浓度为3％-4％，进行超声-碱液破壁处理，然后调节pH至中性，经离心处理，所得上清液为酵母上清液，所得沉淀经离心、干燥处理，得到酵母改性材料；
将所述酵母上清液在4℃下与95％乙醇混合，静置5h后离心，所得沉淀为酵母粗蛋白；
所述酵母粗蛋白与胃蛋白酶进行混合酶解处理，得到所述酵母多肽；
(2)制备改性高岭土：将偏高岭土、氧化钙、硅酸钠、所述酵母改性材料按照质量比为(80-85):(6-8):(2-4):(5-10)进行混合，然后加入10wt％的水粘合，经干燥、煅烧、过筛，得到所述改性高岭土；
(3)制备土壤微生物群调节剂：将步骤(1)所得酵母多肽与水按照1:10的质量比混合制成溶液，再加入步骤(2)所得改性高岭土混合吸附，且所述改性高岭土与所述溶液的质量比为1:25，得到所述土壤微生物群调节剂；
其中，所述S0培养基包括葡萄糖3g/L，Na2HPO428.73mg/L、NH4Cl 30mg/L、K2HPO4 100mg/L、KCl50mg/L、MgSO4 7H2O 40mg/L，pH为7.0；
所述S1培养基是将小米、糙米、藜麦按照5:(2-3):(2-3)的质量比混合后过筛得到的第一混合物与所述S0培养基混合得到，且所述第一混合物与所述S0培养基的质量比为1:9；
所述S2培养基是将大米、大豆、玉米按照(4-5):(2-3):(2-4)的质量比混合后过筛得到的第二混合物与所述S0培养基混合得到，且所述第二混合物与所述S0培养基的质量比为1:8。
2.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，所述接种于S1培养基中进行培养，以及所述接种于S2中进行培养的步骤中，所述培养的条件是：DO2-3mg/L，温度25℃，转速150rpm。
3.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，所述将菌体离心过滤的步骤中，所述离心的转速为1000rpm。
4.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养的步骤中，所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母的加入量之比为1:2。
5.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，将所述多肽累积的酿酒酵母与所述多肽累积的黏红酵母置于S0培养基中进行共生培养的步骤中，所述共生培养的条件是在25℃、150rpm下培养1d。
6.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，所述酵母共培养液经离心洗涤去除培养基的步骤中，所述离心的条件是在10000rpm下离心10min。
7.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，将所述酵母混合物与水混合加热至47℃，再加入氢氧化钠至浓度为3％-4％，进行超声-碱液破壁处理，然后调节pH至中性，经离心处理，所得上清液为酵母上清液，所得沉淀经离心、干燥处理，得到酵母改性材料的步骤中，所述超声-碱液破壁处理的时间为20min-25min；所述经离心处理的离心条件是在2000rom下离心20min；所述所得沉淀经离心的离心转速为10000rpm；所述干燥处理的温度为80℃。
8.根据权利要求1所述土壤微生物群调节剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述煅烧的条件是在500℃下煅烧2h。
9.权利要求1-8任一项所述土壤微生物群调节剂的制备方法制备得到的土壤微生物群调节剂。
10.权利要求9所述土壤微生物群调节剂在提高土壤微生物种群数量中的应用。
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