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CN111867575B - 用于改善认知功能的组合物、用于改善焦虑样症状的组合物和用于抑制脑萎缩的组合物 - Google Patents

用于改善认知功能的组合物、用于改善焦虑样症状的组合物和用于抑制脑萎缩的组合物 Download PDF

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Abstract

本发明提供了用于改善认知功能的组合物、用于改善焦虑样症状的组合物和用于抑制脑萎缩的组合物，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上，所述组合物安全性高且可以连续摄入或施用。

Description

用于改善认知功能的组合物、用于改善焦虑样症状的组合物 和用于抑制脑萎缩的组合物
技术领域
本发明涉及用于改善认知功能的组合物、用于改善焦虑样症状的组合物和用于抑制脑萎缩的组合物。
背景技术
随着近来老年人口的迅速增加，痴呆症患者的数量迅速增加，据报道，2015年痴呆症人群的比例达到65岁以上人群的8.4％。
根据日本厚生劳动省的定义，痴呆症的定义是“这样一种状态，即出生后正常发育的各种心理功能慢性地下降并消失，达到无法管理日常生活和社会生活的程度”。
痴呆症包括由多种疾病引起的痴呆症，所述疾病例如阿尔茨海默型痴呆症、额颞叶痴呆症(皮克病等)、路易体痴呆症和脑血管性痴呆症。虽然年龄增长是最大的危险因素，但其原因通常不清楚。
然而，在任何类型的痴呆症中，观察到诸如记忆障碍、定向障碍等认知功能障碍作为核心症状，并且还通常观察到诸如行为异常、精神症状等行为和心理症状，上述症状的发展不仅对患者而且对其家庭都有严重的影响，例如增加护理负担等。
目前，乙酰胆碱酯酶抑制剂如盐酸多奈哌齐和NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体拮抗剂如美金刚已被批准作为用于痴呆症的治疗药物。然而，这些用于痴呆症的治疗药物基本上是针对阿尔茨海默型痴呆症的，是对症治疗药物，并且仅能在某种程度上抑制症状的进展。
关于痴呆症的预防，已知膳食和运动对预防和改善认知功能下降的重要性。
关于膳食，已经报道了抗氧化剂(如维生素C、维生素E、β-胡萝卜素)和ω-3长链不饱和脂肪酸的有效性，并且已经研究了摄入ω-3长链不饱和脂肪酸、褪黑激素和色氨酸对老年人的轻度认知障碍的效果(非专利文献1)。此外，发现有报道指出赖氨酸可以改善健康人的认知功能(专利文献1)，有报道指出L-精氨酸和赖氨酸对阿尔茨海默型痴呆症和焦虑样症状的效果(非专利文献2至5)，以及有报道指出酪氨酸改善了工作记忆的下降和认知功能的下降(非专利文献6)。
关于运动，已发现由于运动而增加脑血流量可以改善身体活动并预防阿尔茨海默病。
然而，膳食中摄入的上述成分中的一些对认知功能下降没有足够的预防或改善效果，并且许多成分需要有效性的未来验证。
此外，一些认知功能下降的风险增加的中老年人通常由于疾病等而难以运动，或者由于身体功能下降而可能难以继续运动。
因此，很难说已经发现了对认知功能下降具有有效预防或改善效果、高度安全并且可以连续摄入的成分。
众所周知，老年人中诸如精神不振、冷漠、焦虑、抑郁等焦虑样症状的比例增加，并且这种焦虑样症状在痴呆症发作之前被视为痴呆症的危险因素。
此外，还已知上述焦虑样症状被视为痴呆症的行为和心理症状。
文献列表
专利文献
专利文献1：EP2367547(A1)
非专利文献
非专利文献1：Angro Food Industry Hi-Tech 22(4)23-24(2011)
非专利文献2：The American Journal of Medicine 108(5)439(2000 Apr 1)
非专利文献3：Neuropsychiatric Disease and Treatment 6 707-710(2010)
非专利文献4：Biomedical Research 28(2)85-90(2007)
非专利文献5：The Journal of Nutrition 132(12)3744-3746(2002)
非专利文献6：Amino Acids 45(5)1035-1045(2013)
发明内容
发明所要解决的问题
因此，本发明旨在提供一种用于改善认知功能的组合物，其对认知功能下降具有有效的预防或改善效果，是高度安全的，并且能够连续摄入或施用。
另外，本发明旨在提供一种用于改善上述焦虑样症状的组合物。
解决问题的技术方案
为了解决上述问题，本发明人进行了深入研究，发现了一种相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上的组合物具有认知功能的改善作用和焦虑样症状的改善作用，并且发现了所述组合物具有抑制在诸如阿尔茨海默型痴呆症等神经退行性疾病中特征性观察到的脑萎缩的效果，由此完成了本发明。
即，本发明涉及以下内容。
[1]一种用于改善认知功能的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
[2]根据[1]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物还包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
[3]根据[1]或[2]所述的组合物，其中，所述组合物还包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
[4]根据[3]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸中的一种以上。
[5]根据[3]或[4]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25mol％至45mol％，
苯丙氨酸20mol％至40mol％，
赖氨酸10mol％至30mol％，
缬氨酸2mol％至7mol％，
异亮氨酸5mol％至15mol％，
组氨酸2mol％至10mol％，和
色氨酸0.1mol％至2mol％。
[6]根据[1]至[5]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物为医药品。
[7]根据[1]至[5]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物为食品。
[8]一种用于改善需要改善认知功能的对象动物的认知功能的方法，包括使所述动物摄入对改善对象动物的认知功能是有效的量的组合物，或将所述量的组合物施用于对象动物，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
[9]根据[8]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物还包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
[10]根据[8]或[9]所述的方法，其中，所述组合物还包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
[11]根据[10]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸中的一种以上。
[12]根据[10]或[11]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25mol％至45mol％，
苯丙氨酸20mol％至40mol％，
赖氨酸10mol％至30mol％，
缬氨酸2mol％至7mol％，
异亮氨酸5mol％至15mol％，
组氨酸2mol％至10mol％，和
色氨酸0.1mol％至2mol％。
[13]一种用于改善焦虑样症状的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
[14]根据[13]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物还包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
[15]根据[13]或[14]所述的组合物，其中，所述组合物还包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
[16]根据[15]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸中的一种以上。
[17]根据[15]或[16]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25mol％至45mol％，
苯丙氨酸20mol％至40mol％，
赖氨酸10mol％至30mol％，
缬氨酸2mol％至7mol％，
异亮氨酸5mol％至15mol％，
组氨酸2mol％至10mol％，和
色氨酸0.1mol％至2mol％。
[18]根据[13]至[17]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物为医药品。
[19]根据[13]至[17]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物为食品。
[20]一种用于改善需要改善焦虑样症状的对象动物的焦虑样症状的方法，包括使所述动物摄入对改善对象动物的焦虑样症状是有效的量的组合物，或将所述量的组合物施用于对象动物，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
[21]根据[20]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物还包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
[22]根据[20]或[21]所述的方法，其中，所述组合物还包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
[23]根据[22]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸中的一种以上。
[24]根据[22]或[23]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25mol％至45mol％，
苯丙氨酸20mol％至40mol％，
赖氨酸10mol％至30mol％，
缬氨酸2mol％至7mol％，
异亮氨酸5mol％至15mol％，
组氨酸2mol％至10mol％，和
色氨酸0.1mol％至2mol％。
[25]一种用于抑制脑萎缩的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
[26]根据[25]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物还包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
[27]根据[25]或[26]所述的组合物，其中，所述组合物还包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
[28]根据[27]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸中的一种以上。
[29]根据[27]或[28]所述的组合物，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25mol％至45mol％，
苯丙氨酸20mol％至40mol％，
赖氨酸10mol％至30mol％，
缬氨酸2mol％至7mol％，
异亮氨酸5mol％至15mol％，
组氨酸2mol％至10mol％，和
色氨酸0.1mol％至2mol％。
[30]根据[25]至[29]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物为医药品。
[31]根据[25]至[29]中任一项所述的组合物，其中，所述组合物为食品。
[32]一种用于抑制需要抑制脑萎缩的对象动物的脑萎缩的方法，包括使所述动物摄入对抑制对象动物的脑萎缩是有效的量的组合物，或将所述量的组合物施用于对象动物，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
[33]根据[32]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物还包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
[34]根据[32]或[33]所述的方法，其中，所述组合物还包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
[35]根据[34]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物包含选自2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸中的一种以上。
[36]根据[34]或[35]所述的方法，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25mol％至45mol％，
苯丙氨酸20mol％至40mol％，
赖氨酸10mol％至30mol％，
缬氨酸2mol％至7mol％，
异亮氨酸5mol％至15mol％，
组氨酸2mol％至10mol％，和
色氨酸0.1mol％至2mol％。
发明效果
本发明可以提供一种用于改善认知功能的组合物，其可以有效预防或改善认知功能下降。
另外，本发明可以提供一种用于改善焦虑样症状的组合物。本发明的用于改善焦虑样症状的组合物对于改善伴随认知功能下降或认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状特别有效。
此外，本发明可以提供一种用于抑制脑萎缩的组合物。本发明的用于抑制脑萎缩的组合物可以抑制在阿尔茨海默型痴呆症等神经退行性疾病中观察到的脑萎缩以及随着年龄增长而出现和发展的生理性脑萎缩，并且可以改善由脑萎缩引起的认知功能下降。
特别地，本发明的用于改善认知功能的组合物、用于改善焦虑样症状的组合物和用于抑制脑萎缩的组合物是高度安全的并且适合于连续摄入或施用。
附图说明
图1示出了在实验例1中的被动回避试验中，本发明实施例1的组合物对转移延迟时间(transfer latency time)和第一次ES获得的成果(第一次电刺激获得的成果；achievement by 1st ES)的效果。在图中，“N.S.”表示在风险率(critical rate)(p)＝5％下无显著性差异(significant difference)。
图2示出了在实验例2的被动回避试验(再现性试验)中，本发明实施例1的组合物对转移延迟时间和第一次ES获得的成果的效果。在图中，“n.s.”表示在风险率(p)＝5％下无显著性差异。
图3示出了在实验例3的高架十字迷宫试验中，本发明实施例1的组合物对开放臂进入次数(其为焦虑和躁动(agitation)症状的指标)和总移动距离(其为多动(hyperactivity)的指标)的效果。在图中，“N.S.”表示在风险率(p)＝5％下无显著性差异。
图4示出了在实验例4的高架十字迷宫试验(再现性试验)中，本发明实施例1的组合物对开放臂进入次数(其为焦虑和躁动症状的指标)的效果。
图5示出了在实验例5中，本发明实施例1的组合物对脑内神经递质浓度的效果。在图中，“n.s.”表示在风险率(p)＝5％下无显著性差异。
图6示出了在实验例6中，本发明实施例1的组合物对脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的效果。在图中，“n.s.”表示在风险率(p)＝0.05下无显著性差异。
图7示出了在实验例7中，本发明实施例1的组合物对大脑皮质体积的效果。在图中，“n.s.”表示在风险率(p)＝5％下无显著性差异，“*”表示在p<0.05下存在显著性差异，“**”表示在p<0.01下存在显著性差异。
图8示出了在实验例8中，摄入实施例2的组合物对完成TMT-B试验中的任务的时间的效果。在图中，误差线示出了95％的置信区间。
具体实施方式
本发明的用于改善认知功能的组合物(以下在本说明书中也称为“本发明的组合物”)，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸(以下在本说明书中也称为“七种氨基酸”)的总含量，包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上，即，相对于七种氨基酸的总含量，包含25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种或两种。
如本文所用，本说明书中的“认知功能”是指脑的高级功能，例如记忆、判断、计算、理解、学习、思考、语言、遂行、注意、定向、实行、延迟回忆等，“认知功能的改善”是指预防或改善这种认知功能的下降。
可以通过本发明的组合物改善的认知功能的下降包括：由于阿尔茨海默型痴呆症以及由诸如额颞叶变性(皮克病等)、路易体疾病、脑血管疾病等各种疾病和病变引起的痴呆症而引起的认知功能下降；由于年龄增长引起的认知功能下降；在健康人中观察到的认知功能下降，例如，记忆力下降、注意力下降、思维能力下降等。
所使用的“亮氨酸”和“苯丙氨酸”可以是L型、D型和DL型中的任何一种。优选使用L型和DL型，并且更优选使用L型。
“亮氨酸”和“苯丙氨酸”不仅可以以游离形式使用，而且可以以盐形式使用。本说明书中的术语“亮氨酸”和“苯丙氨酸”是各自甚至包含盐的概念。盐形式只要其是药理学可接受的盐就没有特别限定，可以列举酸加成盐、与碱形成的盐等。
具体实例包括：与无机碱形成的盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与氨基酸形成的盐等。
与无机碱形成的盐的实例包括与碱金属如锂、钠、钾等形成的盐；与碱土金属如镁、钙等形成的盐；铵盐等。
与有机碱形成的盐的实例包括与链烷醇胺如单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺等形成的盐；与杂环胺如吗啉、哌啶等形成的盐等。
与无机酸形成的盐的实例包括与氢卤酸(盐酸、氢溴酸、氢碘酸等)、硫酸、硝酸、磷酸等形成的盐等。
与有机酸形成的盐的实例包括与一元羧酸如甲酸、乙酸、丙酸等形成的盐；与饱和二元羧酸如草酸、丙二酸、苹果酸、琥珀酸等形成的盐；与不饱和二元羧酸如马来酸、富马酸等形成的盐；与三元羧酸如柠檬酸等形成的盐；与酮酸如α-酮戊二酸等形成的盐。
与氨基酸形成的盐的实例包括与脂肪族氨基酸如甘氨酸、丙氨酸等形成的盐；与芳香族氨基酸如酪氨酸等形成的盐；与碱性氨基酸如精氨酸等形成的盐；与酸性氨基酸如天冬氨酸、谷氨酸等形成的盐；与形成内酰胺的氨基酸如焦谷氨酸等形成的盐。
上述盐可各自是水合物(水合盐)，并且水合物的实例包括1水合物至6水合物等。
在本发明中，可以单独使用上述游离形式或盐形式的“亮氨酸”和“苯丙氨酸”中的各自一种，或者可以组合使用其两种以上。
为了本发明的目的，优选“亮氨酸”和“苯丙氨酸”各自的游离形式、盐酸盐等。
在本发明的组合物中，相对于七种氨基酸的总含量，亮氨酸的含量为25mol％至45mol％，优选为30mol％至40mol％，更优选为35mol％至40mol％。
另外，苯丙氨酸的含量为20mol％至40mol％，优选为20mol％至35mol％，更优选为25mol％至30mol％。
从认知功能的改善效果来看，本发明的组合物优选包含25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸。
本发明的组合物除了相对于七种氨基酸的总含量包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上，还可相对于七种氨基酸的总含量包含10mol％至30mol％的赖氨酸。
如上述亮氨酸等的情况，“赖氨酸”可以是L型、D型和DL型中的任何一种。优选使用L型和DL型，并且更优选使用L型。
“赖氨酸”不仅可以以游离形式使用，还可以以盐形式使用，并且其是甚至包含盐的概念。盐形式的实例包括如上所述的与无机碱形成的盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与氨基酸形成的盐等。
为了本发明的目的，优选“赖氨酸”的游离形式、盐酸盐等。
在本发明的组合物中，相对于七种氨基酸的总含量，赖氨酸的含量为10mol％至30mol％，优选为15mol％至25mol％，更优选为15mol％至20mol％。
从认知功能的改善效果来看，相对于七种氨基酸的总含量，本发明的组合物更优选包含25mol％至45mol％的亮氨酸、20mol％至40mol％的苯丙氨酸和10mol％至30mol％的赖氨酸。
除了以上述摩尔组成比包含选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上，或以上述摩尔组成比包含选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上和赖氨酸之外，本发明的组合物还可进一步包含选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
如上述亮氨酸等的情况，“缬氨酸”、“异亮氨酸”、“组氨酸”和“色氨酸”可以是L型、D型和DL型中的任何一种。优选使用L型和DL型，并且更优选使用L型。
“缬氨酸”、“异亮氨酸”、“组氨酸”和“色氨酸”中的各自不仅可以以游离形式使用，还可以盐形式使用，并且各自为甚至包含盐的概念。盐形式的实例包括如上所述的与无机碱形成的盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与氨基酸形成的盐等。
为了本发明的目的，优选“缬氨酸”、“异亮氨酸”、“组氨酸”和“色氨酸”各自的游离形式、盐酸盐等。
相对于七种氨基酸的总含量，本发明的组合物优选包含2mol％至7mol％的缬氨酸，更优选包含4mol％至6mol％的缬氨酸。
相对于七种氨基酸的总含量，异亮氨酸的含量优选为5mol％至15mol％，更优选为7mol％至13mol％。
相对于七种氨基酸的总含量，组氨酸的含量优选为2mol％至10mol％，更优选为2.5mol％至8mol％。
相对于七种氨基酸的总含量，色氨酸的含量优选为0.1mol％至2mol％，更优选为0.3mol％至1mol％。
从认知功能的改善效果来看，相对于七种氨基酸的总含量，本发明的组合物更优选包含25mol％至45mol％的亮氨酸、20mol％至40mol％的苯丙氨酸和10mol％至30mol％的赖氨酸、以及2mol％至7mol％的缬氨酸、5mol％至15mol％的异亮氨酸、2mol％至10mol％的组氨酸和0.1mol％至2mol％的色氨酸。
在本发明中，要使用的游离形式或盐形式的上述每种氨基酸可以从天然存在的动物、植物等中提取并纯化，或通过化学合成方法、发酵方法、酶方法或基因重组方法等获得。也可以利用每个公司提供的市售产品。
除了上述氨基酸之外，本发明的组合物还可进一步包含其他营养成分，例如碳水化合物、脂质、蛋白质、除了上述氨基酸之外的必需氨基酸(蛋氨酸、苏氨酸)、非必需氨基酸、维生素、矿物质等。
本发明的组合物可以根据制剂领域中众所周知的配制方法(例如，日本药典XVII制剂总则[3]制剂各条中描述的方法等)，根据需要向相对于七种氨基酸的总含量选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％苯丙氨酸中的一种以上中添加10mol％至30mol％的赖氨酸，或者进一步地添加选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上、其他营养成分、药学上可接受的添加剂等，从而被配制成各种形态，例如液状(如溶液、悬浮液、乳液等)；半固体状(如凝胶、乳霜等)；固体状(如粉末、颗粒、片剂、胶囊等)等。
上述药学上可接受的添加剂可以根据本发明组合物的形态适当选择，例如，可以列举赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、涂布剂(coating agent)、基剂(base)、溶剂、加溶剂、增溶剂、乳化剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、增稠剂、舒缓剂、等渗剂、pH调节剂、抗氧化剂、防腐剂、保存剂、矫味剂、甜味剂、香料、着色剂等。
具体而言，赋形剂的实例包括碳酸镁、糖类(葡萄糖、乳糖、玉米淀粉等)、糖醇(山梨糖醇、甘露糖醇等)等。
粘合剂的实例包括明胶、预胶化淀粉、部分预胶化淀粉、纤维素及其衍生物(结晶纤维素、羟丙基纤维素等)等。
崩解剂的实例包括交聚维酮、聚维酮、结晶纤维素等。
润滑剂的实例包括滑石、硬脂酸镁等。
涂布剂的实例包括甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物、甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸丁酯-甲基丙烯酸二甲氨基乙酯共聚物、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酰氧基乙基三甲基氯化铵(trimethylammonioethylmethacrylate chloride)共聚物等。
基剂的实例包括动植物油脂(橄榄油、可可脂、牛脂、芝麻油、氢化油、蓖麻油等)、蜡(巴西棕榈蜡、蜂蜡等)、聚乙二醇等。
溶剂的实例包括纯净水、注射用水、一价醇(乙醇等)、多元醇(甘油等)等。
加溶剂的实例包括丙二醇、中链甘油三酸酯等。
增溶剂、乳化剂、分散剂和悬浮剂的实例包括表面活性剂等，例如山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯(聚山梨酯20、聚山梨酯80等)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、蔗糖脂肪酸酯等。
稳定剂的实例包括己二酸、β-环糊精、乙二胺、依地酸钠等。
增稠剂的实例包括水溶性聚合物(聚丙烯酸钠、聚羧乙烯等)、多糖(藻酸钠、黄原胶、黄芪胶等)等。
舒缓剂的实例包括氨基苯甲酸乙酯、氯丁醇、丙二醇、苯甲醇等。
等渗剂的实例包括氯化钾、氯化钠、山梨糖醇、盐水等。
pH调节剂的实例包括盐酸、硫酸、乙酸、柠檬酸、乳酸、氢氧化钠、氢氧化钾等。
抗氧化剂的实例包括二丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)、dl-α-生育酚、异抗坏血酸等。
防腐剂和保存剂的实例包括尼泊金酯(对羟基苯甲酸酯)(对羟基苯甲酸甲酯等)、苯甲醇、脱氢乙酸钠、山梨酸等。
矫味剂的实例包括抗坏血酸、赤藓糖醇、L-谷氨酸钠等。
甜味剂的实例包括阿斯巴甜、甘草提取物、糖精等。
香料的实例包括l-薄荷醇、d-樟脑、香草醛等。
着色剂的实例包括焦油色素(食用红色2号、食用蓝色1号、食用黄色4号等)、无机颜料(氧化铁红、氧化铁黄、氧化铁黑等)、天然色素(姜黄提取物、β-胡萝卜素、叶绿素铜钠等)等。
在本发明中，可以使用一种或多种上述添加剂。
相对于组合物的总量，“选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上”、“选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上以及赖氨酸”、“选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上以及选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上”或“选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上、赖氨酸以及选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上”在本发明的组合物中的含量通常为30重量％至100重量％，优选为50重量％至100重量％。
当以盐形式包含任何氨基酸时，“选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上”等的上述含量以换算为游离形式的氨基酸的含量来计算。
本发明的组合物除了具有改善认知功能的作用之外，还具有改善焦虑样症状的作用，并且还可以作为用于改善这种焦虑样症状的组合物提供。
如本文所用，“焦虑样症状”是指诸如精神不振、冷漠、抑郁症状(焦虑，抑郁等)、躁动不安、由于焦虑引起的睡眠障碍、兴奋性症状(躁动、注意力缺陷、多动、异常行为等)等症状。
“焦虑样症状的改善”是指防止上述焦虑样症状的表现或减轻该症状。
本发明的组合物对于改善上述伴随认知功能下降或认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状(即，在痴呆症发作之前出现且已知为痴呆症的危险因素的焦虑样症状，以及作为痴呆症的行为和心理症状被观察到的焦虑样症状)有效。
另外，本发明的组合物具有抑制脑萎缩的作用，并且还可以作为用于抑制脑萎缩的组合物提供。
如本文所用，“脑萎缩”是指在患有神经退行性疾病如阿尔茨海默型痴呆症、额颞叶痴呆症等的患者中特征性观察到的脑萎缩，以及随着年龄增长而观察到的生理性脑萎缩。
“脑萎缩的抑制”是指抑制由于上述神经退行性疾病发展的脑萎缩和随年龄增长而观察到的生理性脑萎缩。
本发明的组合物可以抑制在上述神经退行性疾病中由神经细胞的损失引起的脑萎缩，并且可以改善由这种脑萎缩引起的认知功能下降。此外，该组合物还可以抑制随着年龄增长而出现和发展的生理性脑萎缩，并且可以改善由于这种生理性脑萎缩引起的认知功能下降，例如，在健康人中随着年龄的增长而观察到的记忆力下降、注意力下降、思维能力下降等。
本发明的组合物的日摄入量或剂量(施用量)是根据适用的对象(以下在本说明书中也称为“适用对象”)的性别、年龄、在适用对象中观察到的状态(如认知功能下降、脑内病变等)或焦虑样症状的状况及它们的程度、本发明组合物的形态、施用方法等而适当确定的。当适用对象是成人时，作为选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上(即，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者)的总量(换算为游离形式的量的总量)、亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与赖氨酸的总量(换算为游离形式的量的总量)、亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)、或者亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者、赖氨酸与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)，通常为0.5g至22g，优选1g至20g，更优选2.5g至16g，进一步优选3g至16g，还更优选5g至16g。
可以一次性或一天分几次(例如2-4次)摄入或施用上述量。
从有效增加适用对象的血液浓度以增强认知功能改善效果的角度来看，当适用对象为成人时，作为选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上(即，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者)的总量(换算为游离形式的量的总量)、亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与赖氨酸的总量(换算为游离形式的量的总量)、亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)、或者亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者、赖氨酸与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)，组合物的单次摄入量或剂量通常为0.3g至10g，优选0.5g至10g，更优选1g至8g，进一步优选2g至6g，还更优选2.5g至6g。
另外，本发明的组合物的摄入时间或施用时间也根据适用对象的状态和症状等适当确定。考虑到认知功能的下降与年龄增长和各种疾病、脑内病变(如脑萎缩等)等一起发生并且慢性地发展，或者考虑到焦虑样症状伴随着认知功能下降或在认知功能下降之前或之后出现，并且持续很长时间，因此优选长时间连续摄入或施用以改善认知功能或焦虑样症状。
本发明的组合物可以配制成单位包装形态。在本说明书中，“单位包装形态”是指一单位或2单位以上被填充在一个容器中或被包装在包装体中的形态，其中，以特定量(例如，每1次的摄入量或剂量等)作为一单位。例如，将以每1次的摄入量或剂量作为一单位的单位包装形态称为“每1次的摄入量或剂量的单位包装形态”。用于单位包装形态的容器或包装体可以根据本发明的组合物的形态等适当选择。例如，可以列举纸制容器或袋、塑料容器或袋、小袋、铝罐、钢罐、玻璃瓶、PET瓶、PTP(泡罩包装；press through pack)包装片材等。
本发明组合物的适用对象包括，例如，哺乳动物(例如人、猴、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、猫、狗、牛、马、驴、猪、绵羊等)、鸟类(例如鸭、鸡、鹅、火鸡等)等。
当将本发明的组合物施用于除人以外的适用对象动物(以下也简称为“对象动物”)时，本发明的组合物的摄入量或剂量可以根据对象动物的种类、性别、体重等适当设定。
本发明的组合物具有改善认知功能的作用，并且对于预防或改善由认知功能下降(如学习能力和记忆力下降、学习和记忆障碍等)引起的各种症状或病症是有效的。
另外，本发明的组合物对焦虑样症状具有改善的作用，并且对于预防焦虑样症状(如焦虑、躁动等)的表现或减轻上述症状是有效的。
特别地，其对于防止伴随认知功能下降或认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状的表现或减轻上述症状是有效的。
此外，本发明的组合物具有抑制脑萎缩(在神经退行性疾病如阿尔茨海默型痴呆症等中观察到的脑萎缩、随年龄增长而出现和发展的脑萎缩等)的作用，并且对于改善由这些引起的认知功能下降有效。
特别地，由于本发明的组合物包含食品中包含的并具有丰富食用经验的氨基酸作为有效成分，所以其是高度安全的，适合于连续摄入或施用，因此适于预防或改善随着年龄增长等而慢性地长期发展的认知功能下降、改善长期持续的焦虑样症状或抑制脑萎缩的出现和发展。
因此，优选地，本发明的组合物可以由那些由于认知功能下降而表现出症状或病症的人、需要改善认知功能的老年人和中年人或中老年人等摄入或向其施用。
另外，优选地，本发明的组合物可以由那些表现出上述焦虑样症状的人以及可能出现上述焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等摄入或向其施用。
此外，优选地，本发明的组合物可以由患有神经退行性疾病(在该疾病中观察到脑萎缩的出现和发展)例如阿尔茨海默型痴呆症等的患者、极有可能显示脑萎缩出现和发展的老年人等摄入或向其施用。
本发明的组合物可以直接作为医药品(以下在本说明书中也称为“本发明的医药品”)提供或通过进一步添加上述药学上可接受的添加剂作为医药品来提供。
本发明的医药品可以具有口服制剂如片剂、包衣片剂、咀嚼片剂、丸剂、(微)胶囊剂、颗粒剂、细颗粒剂、粉剂、酏剂、柠檬水剂(lemonade)、糖浆剂、悬浮剂(suspension)、乳剂、口服凝胶剂等；注射剂如溶液剂、悬浮液剂、乳液剂等；通过在使用中溶解或悬浮而使用的固体注射剂；注射用制剂如输液剂、持续性注射剂等；经管液剂(tubal liquid)等的剂型。
只要不损害本发明的特性，本发明的医药品可包含抗痴呆症药物。
抗痴呆症药物的实例包括：乙酰胆碱酯酶抑制剂，例如盐酸多奈哌齐、加兰他敏、利斯的明(rivastigmine)等；NMDA受体拮抗剂如美金刚等，它们可以根据一般剂量和施用方式使用。
优选地，本发明的医药品可以施用于由于认知功能下降而表现出症状或病症的患者、可能发展出上述症状或病症的患者、表现出认知功能下降的老年人和中年人或中老年人等。
另外，优选地，本发明的医药品可以施用于表现出伴随认知功能下降或在认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状的患者、表现出上述焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等。
另外，优选地，本发明的组合物可以由患有神经退行性疾病(在该疾病中观察到脑萎缩的出现和发展)例如阿尔茨海默型痴呆症等的患者、可能患有上述神经退行性疾病的老年人和中年人或中老年人、极有可能显示脑萎缩出现和发展的老年人等摄入或向其施用。
每天向上述适用对象施用本发明的医药品，使得以下总量为上述每1日的剂量：选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上(即，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者)的总量(换算为游离形式的量的总量)；亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与赖氨酸的总量(换算为游离形式的量的总量)；亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)；或者，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者、赖氨酸与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)。
此外，本发明的组合物可以通过添加到各种食品中来摄取。添加本发明的组合物的食品没有特别限制，只要是通常用于膳食或甜点的形式的食品就可以。
例如，将本发明的组合物添加到诸如饮料水等的饮品中，并且在需要时添加适当的风味剂，从而可以提供饮料。
更具体地，本发明的组合物可以添加到例如饮料水(例如，果汁饮料、运动饮料等)；乳制品(例如，牛奶、酸奶等)；糕点糖果(例如，果冻、巧克力、糖果、饼干等)中。
优选地，将本发明的组合物添加到每1日待摄入的量的上述各种食品中，使得以下总量为上述每1日的摄入量：选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上(即，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者)的总量(换算为游离形式的量的总量)；亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与赖氨酸的总量(换算为游离形式的量的总量)；亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)；或者，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者、赖氨酸与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)。
本发明的组合物可以直接作为食品(以下在本说明书中也称为“本发明的食品”)提供，或者根据需要通过添加一般食品添加剂并根据通用食品生产技术作为食品提供。
本发明的食品可以制备成各种形式，例如液体(例如溶液、悬浮液、乳液等)；半固体(例如凝胶、乳霜等)；固体(例如粉末、颗粒、层剂(sheet)、胶囊、片剂(tablet)等)等。
此外，通过将本发明的组合物添加到各种食品原料中，并根据需要添加一般食品添加剂，可以将本发明的食品制备成各种食品形式，例如饮料水(果汁饮料、运动饮料、咖啡饮料、茶饮料等)、乳制品(乳酸发酵饮料、发酵乳、黄油、奶酪、酸奶、加工牛奶、脱脂牛奶等)、肉类产品(火腿、香肠、汉堡等)、鱼肉加工的海鲜酱产品(鱼饼、竹轮(管状鱼香肠)、炸鱼丸等)、蛋制品(日式上汤煎蛋卷、蒸蛋羹等)、糕点糖果(饼干、果冻、口香糖、糖果、休闲食品、冷冻甜点等)、面包、面条、腌渍品、鱼干、酱油煮的食品、汤、调味料等。它也可以是瓶装食品、罐头食品或蒸煮袋装食品。
作为上述食品添加剂，可以列举制造用剂(碱水、粘合剂等)、增稠稳定剂(黄原胶、羧甲基纤维素钠等)、胶凝剂(明胶、琼脂、角叉菜胶等)、胶基(gum base)(醋酸乙烯酯树脂、节路顿胶(jelutong)、糖胶树胶(chicle)等)、乳化剂(甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、皂素、卵磷脂等)、保存剂(苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、ε-聚赖氨酸等)、抗氧化剂(抗坏血酸、异抗坏血酸、儿茶素等)、上光剂(虫胶、石蜡、蜂蜡等)、杀真菌剂(噻苯咪唑、咯菌腈等)、发酵剂(碳酸氢钠、葡萄糖酸-δ-内酯、明矾等)、甜味剂(阿斯巴甜、乙酰舒泛钾、甘草提取物等)、苦味剂(咖啡因、柚皮苷、艾草提取物等)、酸化剂(柠檬酸、酒石酸、乳酸等)、调味料(L-谷氨酸钠、5’-肌苷酸二钠等)、着色剂(胭脂红染料、姜黄染料、栀子花染料等)、香料(合成香料如乙酰乙酸乙酯、茴香醛等、天然香料如橙、薰衣草等)等。
在本发明中，上述食品添加剂可以使用一种或两种以上。
优选地，本发明的食品可以由表现出认知功能下降的老年人和中年人或中老年人等摄入，可以由可能表现出认知功能下降的老年人和中年人或中老年人等摄入，进一步地为了防止认知功能下降可以由宽范围的各种对象摄入。
另外，本发明的食品可以由表现出伴随着认知功能下降或在认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等摄入，可以由可能表现出上述焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等摄入，进一步地为了防止上述焦虑样症状的表现可以由宽范围的各种对象摄入。
另外，本发明的食品可以由患有神经退行性疾病(在该疾病中观察到脑萎缩的出现和发展)例如阿尔茨海默型痴呆症等的患者广泛摄取，可以由可能患有上述神经退行性疾病的老年人和中年人或中老年人广泛摄入，为了抑制脑萎缩的发生和发展，可以由极有可能表现出脑萎缩的出现和发展的老年人等广泛摄入。
因此，本发明的食品还可以作为以下的用于改善认知功能或焦虑样症状的食品或用于抑制脑萎缩的食品提供：保健功能食品，例如特定保健用食品、营养功能食品、功能性显示食品等；用于特殊饮食用途的食品，例如病人用食品、老年人用食品等；健康辅助食品等。
优选地，上述适用对象每天摄入本发明的食品，使得以下总量为上述每1日的摄入量：选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上(即，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者)的总量(换算为游离形式的量的总量)；亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与赖氨酸的总量(换算为游离形式的量的总量)；亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)；或者，亮氨酸和苯丙氨酸中的任一种或两者、赖氨酸与选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上的总量(换算为游离形式的量的总量)。
此外，本发明还提供一种用于改善需要改善认知功能的对象动物的认知功能的方法(以下在本说明书中也称为“本发明的方法”)。
本发明的方法包括使需要改善认知功能的对象动物摄入对改善对象动物的认知功能是有效的量的组合物，或将所述量的组合物施用于所述动物，相对于七种氨基酸的总含量，所述组合物包含选自25mol％至45mol％的亮氨酸和20mol％至40mol％的苯丙氨酸中的一种以上。
在本发明的方法中，优选摄入或施用以上述组成比含有亮氨酸和苯丙氨酸两者的组合物；更优选摄入或施用如下组合物：除了以上述组成比含有选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上之外，所述组合物还含有10mol％至30mol％的赖氨酸(相对于七种氨基酸的总含量)；进一步优选摄入或施用以上述组成比含有亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸的组合物。
在本发明的方法中，优选摄入或施用如下组合物：除了以上述组成比含有选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上之外，或者除了以上述组成比含有选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上以及赖氨酸之外，所述组合物还含有选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上。
从认知功能的改善效果来看，在本发明的方法中，更优选摄入或施用如下组合物：所述组合物含有亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸(以上述组成比)，以及含有选自缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸中的一种以上；特别优选摄入或施用如下组合物：所述组合物含有亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸(以上述组成比)，以及含有缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸和色氨酸。
在本发明的方法中，在待对象动物摄入或施用的组合物中，相对于七种氨基酸的总含量，缬氨酸的含量优选为2mol％至7mol％，更优选为4mol％至6mol％。
在待对象动物摄入或施用的组合物中，相对于七种氨基酸的总含量，异亮氨酸的含量优选为5mol％至15mol％，更优选为7mol％在13mol％。
在待对象动物摄入或施用的组合物中，相对于七种氨基酸的总含量，组氨酸的含量优选为2mol％至10mol％，更优选为2.5mol％至8mol％。
在待对象动物摄入或施用的组合物中，相对于七种氨基酸的总含量，色氨酸的含量优选为0.1mol％至2mol％，更优选为0.3mol％至1mol％。
本发明方法中的对象动物包括哺乳动物(例如人、猴、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔子、猫、狗、牛、马、驴、猪、绵羊等)、鸟类(例如鸭、鸡、鹅、火鸡等)等。
本发明的方法对于预防或改善由认知功能下降如学习能力和记忆力下降、学习和记忆障碍等引起的各种症状或病症是有效的。
另外，本发明的方法对于改善焦虑样症状是有效的，即，对于预防焦虑样症状如焦虑、躁动等的表现或减轻上述焦虑样症状是有效的。它对于防止伴随认知功能下降或认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状的呈现，或对于减轻上述焦虑样症状是特别有效的。
此外，本发明的方法对于抑制在神经退行性疾病如阿尔茨海默型痴呆症等中观察到的脑萎缩、随年龄增长而出现和发展的脑萎缩等是有效的，因此对于改善由这些引起的认知功能下降是有效的。
特别地，由于本发明的方法使用食品中包含的并且具有丰富食用经验的氨基酸作为有效成分，因此具有很高的安全性并且可以连续使用。
在人类的情况下，本发明的方法优选应用于表现出由于认知功能下降而产生的症状和病症的患者，以及需要预防认知功能下降的老年人和中年人或中老年人(例如可能表现出认知功能下降的老年人和中年人或中老年人等)等。
另外，本发明的方法优选应用于表现出焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等，以及可能表现出焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等，并且特别优选应用于表现出伴随认知功能下降或认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等，以及可能表现出上述焦虑样症状的老年人和中年人或中老年人等。
此外，本发明的方法优选应用于患有已知表现出脑萎缩的神经退行性疾病(例如阿尔茨海默型痴呆症等)的患者，可能患有上述神经退行性疾病的老年人和中年人或中老年人，可能显示脑萎缩的老年人等。
根据对象动物的种类、年龄、性别、认知功能下降或脑内病变等或焦虑样症状的状况或程度等，适当地确定在本发明的方法中的以上述组成比含有选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上的组合物等的有效量。对于人或除人以外的对象动物，可以以上述频率和时间段摄入或施用与上述摄入量或剂量相似或相同的量的本发明组合物。
作为本发明方法中的组合物(其以上述组成比含有选自亮氨酸和苯丙氨酸中的一种以上)等的摄入或施用方法，可以列举口服摄入或口服给药、肠管给药、输注给药等。优选口服摄入或口服给药，因为无需在医疗机构的医生的指导和监督下进行即可进行方便的摄入。
实施例
下面参考实施例更详细地解释本发明。
[实施例1]用于改善认知功能的组合物
称量给定量的各成分并混合，使得提供表1所示的组成，制备实施例1的用于改善认知功能的组合物(以下称为“实施例1的组合物”)。类似地，制备具有表1所示的组成比的组合物，并将其用作比较例1。
[表1]
[实验例1]对学习功能和记忆功能的作用的研究
使用C57Bl/6j高龄小鼠(58周龄至61周龄，雄性)(购自日本查尔斯河实验室)，研究实施例1和比较例1的组合物对学习功能和记忆功能的作用。
如表2所示，将C57Bl/6j高龄小鼠分为4组(n＝12/组)。向自由摄入通常蛋白质饲料(含有20wt％酪蛋白)的组仅施用媒介物(vehicle)(NPD+Veh.)。使其他3个组自由摄入低蛋白质饲料(含5wt％酪蛋白)，并且将这3个组分别用作仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)、施用实施例1的组合物的组(LPD+E1)和施用比较例1的组合物的组(LPD+C1)。在LPD+E1和LPD+C1中，将1g/kg体重的实施例1的组合物(E1)和比较例1的组合物(C1)各自溶解在0.5重量％的甲基纤维素水溶液中，并每天两次(早上和晚上)通过口服强饲法(连续施用5天后休停2天的循环)连续施用2个月。类似地，将0.5重量％的甲基纤维素水溶液(Vehicle)施用于(NPD+Veh.)和(LPD+Veh.)。
[表2]
组 饲料 施用的样品
NPD+Veh. 含有20wt％酪蛋白的饲料 媒介物(0.5wt％甲基纤维素水溶液)
LPD+Veh. 含有5wt％酪蛋白的饲料 媒介物(0.5wt％甲基纤维素水溶液)
LPD+C1 含有5wt％酪蛋白的饲料 包含比较例1的组合物的样品
LPD+E1 含有5wt％酪蛋白的饲料 包含实施例1的组合物的样品
在媒介物或实施例1和比较例1的各组合物施用1个月和2个月后，如下对表2所示的各组的小鼠进行被动回避试验(passive avoidance test)。
(i)使用由明室/暗室组成的装置，在暗室中具有电刺激装置，将小鼠置于明室中。当小鼠进入暗室时，在进入的同时关闭门，并施加电刺激(1mA，1秒)。进入暗室的定义是尾巴根部进入暗室时的时间点。
(ii)试行一次(i)，然后在24小时后，将小鼠置于明室中，并测量直到小鼠进入暗室的时间(转移延迟时间(transfer latency time))。另外，求出在明室中停留了480秒的最大评价时间的个体的比例，即，通过一次电刺激而记忆暗室恐惧的个体的比例(第一次ES获得的成果(第一次电刺激获得的成果；achievement by 1st ES))。
将媒介物或实施例1或比较例1的组合物施用一个月，然后进行被动回避试验，并且测量每组中的小鼠直到进入暗室所需的时间(转移延迟时间)。结果按照各12只小鼠的平均值+平均值的标准误差显示在图1中。
此外，图1还显示了通过一次电刺激而记忆暗室恐惧的个体的比例(第一次ES获得的成果)。图中的数值显示了第一次试行的24小时后，每组中留在明室内300秒的小鼠数量。
关于进入暗室所需的时间(转移延迟时间)，该时间是在第一次试行的24小时后测得的，针对用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物(NPD+Veh.)的组进行单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验。关于通过一次电刺激而记忆暗室恐惧的个体的比例(第一次ES获得的成果)，针对NPD+Veh.进行卡方检验。
如图1所示，与用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)相比，第一次试行的24小时后直到进入暗室所需的时间(转移延迟时间)在用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)中急剧减少(p<0.05)。
在除了低蛋白质饲料以外还口服施用本发明实施例1的组合物的组(LPD+E1)中，观察到转移延迟时间恢复到在LPD+E1和NPD+Veh.之间没有观察到显著性差异的程度。
另一方面，在除了低蛋白质饲料以外还口服施用比较例1的组合物的组(LPD+C1)中，转移延迟时间未恢复。
关于通过一次电刺激而记忆暗室恐惧的个体的比例(第一次ES获得的成果)，与NPD+Veh.相比，其在LPD+Veh.中降低，并在LPD+E1中恢复到与NPD+Veh.相同的水平。LPD+C1没有显示这种恢复。
[实验例2]对学习功能和记忆功能的作用的研究(再现性试验)
使用C57Bl/6j成熟小鼠(19周龄，雄性)(购自日本查尔斯河实验室)，研究实施例1的组合物对学习功能和记忆功能的作用。
将C57Bl/6j成熟小鼠分为如表3所示的4组(n＝12/组)。对用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)、用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)、用低蛋白质饲料饲养且每天施用一次实施例1的组合物(每次施用1g/kg体重)的组(LPD+E1×1)以及用低蛋白质饲料饲养且每天施用两次实施例1的组合物(每次施用1g/kg体重)的组(LPD+E1×2)，施用媒介物或实施例1的组合物1个月至1.5个月，然后以与实验例1相同的方式进行被动回避试验，测定第一次试行的24小时后直到进入暗室所需的时间(转移延迟时间)，以及测定通过一次电刺激而记忆暗室恐惧的个体的比例(第一次ES获得的成果)。施用1个月后进行的被动回避试验中的转移延迟时间和第一次ES获得的成果按照各12只小鼠的平均值+平均值的标准误差显示在图2中。关于转移延迟时间，针对用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)进行单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验。关于第一次ES获得的成果，针对NPD+Veh.进行卡方检验。
[表3]
组 饲料 施用的样品
NPD+Veh. 含有20wt％酪蛋白的饲料 媒介物(0.5wt％甲基纤维素水溶液)
LPD+Veh. 含有5wt％酪蛋白的饲料 媒介物(0.5wt％甲基纤维素水溶液)
LPD+E1×1 含有5wt％酪蛋白的饲料 包含实施例1的组合物的样品，每天施用一次
LPD+E1×2 含有5wt％酪蛋白的饲料 包含实施例1的组合物的样品，每天施用两次
如图2所示，与用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)相比，用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)中，同样地在成熟小鼠中，转移延迟时间和第一次ES获得的成果也显示出显著性(p<0.05和p<0.1)降低。用低蛋白质饲料饲养且施用实施例1的组合物的组(LPD+E1×1和LPD+E1×2)中，发现通过用低蛋白质饲料饲养而降低的转移延迟时间和第一次ES获得的成果两者都恢复到与用通常蛋白质饲料饲养时相比未观察到显著性差异的程度。
包含本发明实施例1的组合物的样品，即使每天施用一次，也表现出与每天施用两次时所达到的效果相同的效果。
根据上述实验例1和2的结果，表明本发明的实施例1的组合物抑制并改善了因摄入低蛋白质饲料而引起的学习功能和记忆功能的下降。
[实验例3]对焦虑、躁动和多动症状的作用的研究
使用C57Bl/6j高龄小鼠(58周龄至61周龄，雄性)(购自日本查尔斯河实验室)，通过高架十字迷宫试验评估本发明的实施例1的组合物和比较例1的组合物对焦虑、躁动和多动症状的作用。
C57Bl/6j高龄小鼠如表2所示地分组(n＝12/组)，媒介物或实施例1和比较例1的各组合物施用1个月和2个月后，如下对各组进行高架十字迷宫试验。
即，将每组的小鼠置于高架十字迷宫的中间区(neutral zone)，并观察小鼠的行为8分钟。使用视频跟踪行为分析软件Smart3.0(Panlab公司)，分析小鼠进入没有墙壁的跑道(开放臂)的次数以及在轨道内的移动距离，计算出开放臂进入次数(开放臂进入率)和总移动距离。开放臂进入率成为焦虑和躁动症状的指标，总移动距离是多动症状的指标。在给药2个月后的开放臂进入率和在给药1个月后的总移动距离在按照平均值+平均值的标准误差显示在图3中。关于开放臂进入次数，在用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)与其他组之间进行了单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验。对于总移动距离，在NPD+Veh.与用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)之间进行单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验，并且在LPD+Veh.与用低蛋白质饲料饲养且施用本发明实施例1的组合物的组(LPD+E1)以及用低蛋白质饲料饲养且施用比较例1的组合物的组(LPD+C1)中的各组之间进行单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验。
如图3所示，与用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)相比，在用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)中，开放臂进入次数和总移动距离均显示出显著性(p<0.05)增加。
另一方面，在用低蛋白质饲料饲养且施用本发明实施例1的组合物的组(LPD+E1)中，开放臂进入次数显示出与NPD+Veh.没有显著性差异的增加，并且总移动距离与LPD+Veh.相比显著性(p<0.05)降低。
在用低蛋白质饲料饲养且施用比较例1的组合物的组(LPD+C1)中也获得了与LPD+E1相同的结果。
[实验例4]对焦虑、躁动和多动症状的作用的研究(再现性试验)
使用C57Bl/6j成熟小鼠(19周龄，雄性)(购自日本查尔斯河实验室)，通过高架十字迷宫试验评估实施例1的组合物对焦虑、躁动和多动症状的作用。
C57Bl/6j高龄小鼠如表3所示地分组(n＝12/组)。在分别施用实施例1的组合物和媒介物1个月至1.5个月后，将每组中的小鼠置于高架十字迷宫的中间区，并观察小鼠的行为8分钟。与实验例3的情况类似地，测定开放臂进入次数和总移动距离，在给药1个月后的开放臂进入次数的评价结果按照平均值+平均值的标准误差显示在图4中。
关于总移动距离，用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)显示出与用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)相同水平的增加，不能评价实施例1的组合物的效果。
关于图4所示的结果，在NPD+Veh.与LPD+Veh.之间、以及在LPD+Veh.与用低蛋白质饲料饲养且每天施用一次(每次施用1g/kg体重)实施例1的组合物的组(LPD+E1×1)和用低蛋白质饲料饲养且每天施用两次(每次施用1g/kg体重)实施例1的组合物的组(LPD+E1×2)中的各组之间进行单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验。
如图4所示，与NPD+Veh.相比，在LPD+Veh.中作为焦虑和躁动指标的开放臂进入次数显著性(p<0.05)增加。
另一方面，发现在用低蛋白质饲料饲养且每天施用一次实施例1的组合物的组(LPD+E1×1)中，开放臂进入次数减少，并且在用低蛋白质饲料饲养且每天施用两次实施例1的组合物的组(LPD+E1×2)中，开放臂进入次数显著性(p＜0.05)减少。即，表明由于施用实施例1的组合物而导致的开放臂进入次数的减少依赖于实施例1组合物的剂量。
实验例3的结果表明，本发明实施例1的组合物抑制了焦虑和躁动症状以及多动，实验例4的结果表明，本发明实施例1的组合物以剂量依赖的方式抑制焦虑和躁动症状。
[实验例5]对脑内神经递质浓度的效果的研究
在实验例1和实验例3中，通过被动回避试验和高架十字迷宫试验进行各自的评估，然后将各组的小鼠解剖，用高效液相色谱(HPLC)法和液相色谱质谱(LC/MS)法测量前额叶皮质中神经递质(多巴胺、去甲肾上腺素、谷氨酸)的浓度。关于多巴胺和谷氨酸的各浓度的测量结果，在以下各组之间进行了单因素方差分析和Tukey的多重比较检验：在用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)与用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)之间；在LPD+Veh.与用低蛋白质饲料饲养且施用实施例1的组合物的组(LPD+E1)和用低蛋白质饲料饲养且施用比较例1的组合物的组(LPD+C1)中的各组之间。另外，关于去甲肾上腺素浓度的测量结果，在NPD+Veh.与LPD+Veh.之间以及在NPD+Veh.与LPD+E1和LPD+C1中的各组之间进行了单因素方差分析和Tukey的多重比较检验。结果按照平均值+平均值的标准误差显示在图5中。
如图5所示，发现与用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)相比，在用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)中，脑内多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸的各浓度降低(分别为在p<0.05下显著、在p<0.01下显著和在p＝0.21下显著倾向)。
另一方面，发现与LPD+Veh.组相比，在用低蛋白质饲料饲养且施用实施例1的组合物的组(LPD+E1)中，脑内多巴胺浓度和谷氨酸浓度显著性增加(分别为在p<0.001下和在p<0.05下显著)。并且，发现脑内去甲肾上腺素浓度升高至与NPD+Veh.组无显著性差异的水平。
在实验例5中在用低蛋白质饲料饲养的组中减少的多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸是已知在痴呆症患者中减少的脑内神经递质。
根据实验例5的结果，表明本发明的组合物可改善脑内神经递质的减少并改善认知功能。
[实验例6]对脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响的研究
脑源性神经营养因子(BDNF)是属于神经营养因子家族的蛋白质之一，在脑神经系统中具有多种功能，例如神经细胞的存活、神经网络的形成以及高级脑功能的表达(例如记忆固化等)。此外，在包括痴呆症的各种神经退行性疾病和精神病的中观察到BDNF表达水平的降低，预期诱导BDNF表达的药物或包含其的组合物表现出改善被神经退行性疾病或精神疾病减损的脑功能的作用。
因此，研究了上述本发明实施例1的组合物对BDNF基因表达的影响。
在上述实验例1和实验例3中，通过被动回避试验和高架十字迷宫试验进行了各自的评估，然后将每组的小鼠解剖以获得大脑皮质组织，通过RT-qPCR方法检测mRNA表达水平的变化，研究BDNF基因在大脑皮质组织中的表达水平。
在完成实验例1和实验例3中的各个评估后，使用RNA提取试剂盒(“RNeasy MiniKit”(QUIAGEN公司))从表4所示的每组小鼠(n＝6/组)的大脑皮质组织中提取RNA，使用逆转录反应预混合试剂(“Prime Script(商标)RT Master Mix”(Takara Bio Inc.))进行逆转录反应。然后，使用实时PCR试剂盒(“SYBR(注册商标)Select Master Mix”(AppliedBiosystems公司))，分析获得的DNA产物的BDNF mRNA表达水平的变化。
关于测量结果，在用通常蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(NPD+Veh.)与用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)以及用低蛋白质饲料饲养且施用实施例1的组合物的组(LPD+E1)之间比较BDNF表达水平，并且测定相对于NPD+Veh.的比率，并按照每组6只小鼠的平均值+平均值的标准误差示于图6中。通过单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验对3组之间的比较进行统计分析。
[表4]
如图6所示，与用低蛋白质饲料饲养且仅施用媒介物的组(LPD+Veh.)相比，在用低蛋白质饲料饲养且施用实施例1的组合物的组(LPD+E1)中，BDNF基因的表达水平显著性(p<0.05)高。
实验例6的上述结果表明，本发明的实施例1的组合物可诱导BDNF基因表达并改善降低的认知功能。
[实验例7]对阿尔茨海默型痴呆症模型小鼠的脑萎缩的影响的研究
在许多患有神经退行性疾病(包括阿尔茨海默型痴呆症)的患者中，在神经细胞和神经胶质细胞中观察到纤维化tau蛋白的聚集体。rTg4510转基因小鼠是转化为在神经细胞中特异性表达这种tau蛋白的小鼠，并且已知随着年龄的增长会出现脑萎缩。因此，它被用作阿尔茨海默型痴呆症的模型小鼠。
因此，使用rTg4510小鼠及其同窝对照小鼠研究了实施例1的组合物对脑萎缩的影响。
如表5所示，将3个月龄的雄性rTg4510小鼠和同窝对照小鼠分成3组(n＝3-4/组)，并使之自由摄入通常蛋白质饲料(含20wt％酪蛋白)进行饲养。通过口服强饲法向一组rTg4510小鼠每天两次施用(每次施用1g/kg体重)溶于0.5wt％甲基纤维素水溶液中的实施例1的组合物(rTg4510+E1)，向另一组rTg4510小鼠和同窝对照组小鼠组仅施用媒介物(0.5wt％甲基纤维素水溶液)(rTg4510+Veh.和Ctrl+Veh.)。
在试验开始时和在施用媒介物或实施例1的组合物3.5个月后，使用小动物用7.0特斯拉MRI(Bruker公司)获得每只小鼠的脑磁共振成像数据，用图像分析软件“Pmod 3.7”(Pmod Technologies Ltd.)计算大脑皮质的体积。在每组中，测定在施用媒介物或实施例1的组合物3.5个月后的大脑皮质体积相对于试验开始时(3个月龄)的大脑皮质体积的变化量，并且按照3至4只小鼠的平均值±平均值的标准误差显示在图7中。统计分析是通过三组之间比较的单因素方差分析和Tukey的多重比较检验进行的。
[表5]
如图7所示，与仅施用媒介物的同窝对照小鼠组(Ctrl+Veh.)相比，在仅施用媒介物的rTg4510小鼠组(rTg4510+Veh.)中发现大脑皮质体积显著性(p<0.01)减少。
另一方面，施用实施例1的组合物的rTg4510小鼠组(rTg4510+E1)，其与仅施用媒介物的rTg4510小鼠组(rTg4510+Veh.)相比显示出大脑皮层体积减少的显著性(p<0.05)改善，并且其与仅施用媒介物的同窝对照小鼠组(Ctrl+Veh.)相比未显示出大脑皮质体积的显著性差异。
实验例7的上述结果表明，本发明的实施例1的组合物可抑制在阿尔茨海默型痴呆症患者等中观察到的脑萎缩。
[实施例2]用于改善认知功能的组合物
称量给定量的各成分并混合，使得提供表6中所示的组成，制备实施例2的用于改善认知功能的组合物(以下有时称为“实施例2的组合物”)。
[表6]
成分 相对于氨基酸总含量的组成比(mol％)
L-亮氨酸 36.05
L-赖氨酸盐酸盐 18.43
L-缬氨酸 5.06
L-异亮氨酸 9.97
L-苯丙氨酸 26.05
L-组氨酸盐酸盐 3.92
L-色氨酸 0.52
总量 100
[实验例8]实施例2的组合物对人的认知功能的效果的研究
如下进行人体临床试验，研究实施例2的组合物对人的认知功能的效果。
(1)制备试验食品
如表7所示，根据常规方法制备含有实施例2的组合物(3.0g)的颗粒(Active 1)、含有实施例2的组合物(1.5g)的颗粒(Active 2)、以及上述颗粒中含有糊精、玉米淀粉和乳糖来代替实施例2的组合物且不含氨基酸或蛋白质的颗粒(Placebo 1)。
[表7]
(2)试验对象
试验对象为105位年龄在55岁以上的男女(男性54位，女性51位，平均年龄＝64.3±5.0岁)，他们具有正常的认知功能，即未观察到诸如痴呆症之类的病理异常，但他们在基于日文版的简易精神状态检查表(Mini Mental State Examination)(MMSE-J)的认知功能检查中为26分以上，且在基于日文版的蒙特利尔认知评估量表(Montreal CognitiveAssessment)(MoCA-J)的检查中不到30分，他们意识到健忘、或被别人指出健忘。
(3)临床试验
将试验对象随机分为3组(摄入Active 1的试验食品中等剂量组、摄入Active 2的试验食品低剂量组以及摄入Placebo 1的对照食品组)，在摄取每种试验食品之前进行认知功能检查(追踪试验B(Trail Making Test B；TMT-B))，并测量完成任务的时间，并将其用作基线值。此后，在双盲试验下，当试验对象饥饿时，摄入表7所示的试验食品(每天2包，早晨1包，下午1包)。摄入12周后以相同的方式进行TMT-B，并测量完成任务的时间。
在上述临床试验的各组的试验对象中，如表8所示，在这3个组之间在性别、年龄、受教育年限以及与认知功能有关的日语版WHO-5身心健康指标(WHO-5-J)的得分以及东京都老年医学研究所的能力指标(Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology Indexof Competence)的各得分方面没有发现显著性差异。
[表8]
*；表中的括号中的数值表示标准偏差值。
(4)结果
计算每组中TMT-B的变化量，即从12周后的值中减去基线值而获得的值，显示在图8中。
TMT-B被开发为评估额叶功能障碍的试验，试验中测试画线连接数字1到13和平假名字母(日语音节字母)“あ”到“し”(以升序排列在数字和平假名字母之间交替)的时间。该试验能够特别评估注意力功能、执行功能(灵活性)等。因此，该试验的结果可以解释为人们是否可以在日常生活中有效地进行工作等的评价结果。因此，随着TMT-B的变化量变为更大的负值，这意味着注意力功能、执行功能(灵活性)等得到了进一步的改善。
在图8中，对照食品组(Placebo 1)中的TMT-B变化量(秒)的平均值为-2.44，标准偏差为25.77；试验食品低剂量组(Active 2)的平均值为-0.44，标准偏差为23.49；试验食品中等剂量组(Active 1)的平均值为-17.00，标准偏差为33.20。在Placebo 1与Active 1和Active 2中的各组之间进行了非配对t检验。
结果，在Placebo 1和Active 2之间没有发现显著性差异，但是在Placebo 1和Active 1之间发现了显著性差异(P＝0.049)。
根据实验例8的上述结果，认知功能之中TMT-B试验结果成为指标的注意力功能、执行功能等中，显示了摄取试验食品中等剂量的介入效果。
因此，表明本发明的组合物可以有效地改善认知功能下降，例如注意力下降、思维能力下降、工作记忆(临时存储和管理信息的功能)下降等，该认知功能下降不会导致诸如痴呆症之类的病理性认知功能障碍，但是在健康的人类中被观察到，。
[工业实用性]
如上详述，根据本发明可以提供用于改善认知功能的组合物。
本发明的用于改善认知功能的组合物有效地改善了认知功能，并且对于预防或改善由认知功能下降引起的各种症状或病症有效。
另外，本发明的用于改善认知功能的组合物还起到用于改善焦虑样症状的组合物的作用，并且对于防止或减轻伴随认知功能下降或在认知功能下降之前或之后出现的焦虑样症状的表现是有效的。
此外，本发明的用于改善认知功能的组合物还起到用于抑制脑萎缩的组合物的作用，并且对于抑制在神经退行性疾病如阿尔茨海默型痴呆症等中观察到的脑萎缩以及随着年龄增长而出现和发展的生理性脑萎缩以及改善由这种脑萎缩引起的认知功能下降是有效的。
特别地，本发明的用于改善认知功能的组合物是高度安全的并且适合于连续摄取或施用。
本申请基于在日本提交的专利申请第2018-038950号，其内容通过引用整体并入本文。

Claims (1)

1.包含以下组分的组合物在制备用于改善认知功能的组合物中的应用，其中，相对于亮氨酸、赖氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸和色氨酸的总含量，所述组合物以以下含量包含以下氨基酸：
亮氨酸25～45mol％，
苯丙氨酸20～40mol％，
赖氨酸10～30mol％，
缬氨酸2～7mol％，
异亮氨酸5～15mol％，
组氨酸2～10mol％，和
色氨酸0.1～2mol％。
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